[go: up one dir, main page]

RS58100B1 - Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera - Google Patents

Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera

Info

Publication number
RS58100B1
RS58100B1 RS20181573A RSP20181573A RS58100B1 RS 58100 B1 RS58100 B1 RS 58100B1 RS 20181573 A RS20181573 A RS 20181573A RS P20181573 A RSP20181573 A RS P20181573A RS 58100 B1 RS58100 B1 RS 58100B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
cell
cells
car
months
patient
Prior art date
Application number
RS20181573A
Other languages
English (en)
Inventor
Carl H June
Bruce L Levine
David L Porter
Michael D Kalos
Michael C Milone
Original Assignee
Univ Pennsylvania
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46207528&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS58100(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Univ Pennsylvania filed Critical Univ Pennsylvania
Publication of RS58100B1 publication Critical patent/RS58100B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K40/00—Cellular immunotherapy
    • A61K40/10—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K40/11—T-cells, e.g. tumour infiltrating lymphocytes [TIL] or regulatory T [Treg] cells; Lymphokine-activated killer [LAK] cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K40/00—Cellular immunotherapy
    • A61K40/30—Cellular immunotherapy characterised by the recombinant expression of specific molecules in the cells of the immune system
    • A61K40/31—Chimeric antigen receptors [CAR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K40/00—Cellular immunotherapy
    • A61K40/40—Cellular immunotherapy characterised by antigens that are targeted or presented by cells of the immune system
    • A61K40/41—Vertebrate antigens
    • A61K40/42—Cancer antigens
    • A61K40/4202—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K40/421—Immunoglobulin superfamily
    • A61K40/4211—CD19 or B4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C07K14/01—DNA viruses
    • C07K14/075—Adenoviridae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/525—Tumour necrosis factor [TNF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70507—CD2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70517—CD8
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70521—CD28, CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2815—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD8
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C12N15/861—Adenoviral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/58—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation
    • A61K2039/585—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation wherein the target is cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
    • A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterized by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
    • A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
    • A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterised by the cancer treated
    • A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/80—Immunoglobulins specific features remaining in the (producing) cell, i.e. intracellular antibodies or intrabodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
    • C07K2319/74—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
    • C12N2501/51—B7 molecules, e.g. CD80, CD86, CD28 (ligand), CD152 (ligand)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
    • C12N2501/515—CD3, T-cell receptor complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2740/15043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15071—Demonstrated in vivo effect

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Opis
OSNOVA PRONALASKA
[0001] Velika većina pacijenata koji imaju B-ćelijske malignitete, uključujući hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), će umreti od te bolesti. Jedan pristup u lečenju ovih pacijenata je genetsko modifikovanje T ćelija tako da ciljno deluju na antigene eksprimirane na tumorskim ćelijama putem ekspresije himernih receptora za antigen (CAR). Receptori CAR su receptori za antigen koji su dizajnirani da prepoznaju antigene ćelijske površine na način nezavisan od humanog leukocitnog antigena. Pokušaji upotrebe genetski modifikovanih ćelija koje eksprimiraju receptore CAR u lečenju ovih vrsta pacijenata imali su veoma ograničen uspeh. Videti na primer, Brentjens et al., 2010, Molecular Therapy, 18:4, 666-668; Morgan et al., 2010, Molecular Therapy, objavljene na internetu 23. februara 2010, stranice 1-9; i, Till et al., 2008, Blood, 112:2261-2271.
[0002] Kod većine kancera, tumor-specifični antigeni još uvek nisu dobro definisani, ali kod B-ćelijskih maligniteta, CD 19 je privlačan tumorski ciljni molekul. Ekspresija CD 19 je ograničena na normalne i maligne B ćelije (Uckun, et al. Blood, 1988, 71:13-29), tako da je CD 19 široko prihvaćen ciljni molekul za bezbedno ispitivanje receptora CAR. Dok receptori CAR mogu da pokrenu aktivaciju T-ćelija na način sličan endogenom T-ćelijskom receptoru, ogromna prepreka kliničkoj primeni ove tehnologije do danas je ograničena in vivo ekspanzija CAR+ T ćelija, brzi nestanak ćelija nakon infuzije, i razočaravajuća klinička aktivnost (Jena, et al., Blood, 2010, 116:1035-1044; Uckun, et al. Blood, 1988, 71:13-29).
[0003] Objava SAD patentne prijave br. 20040043401 opisuje himerne T-ćelijske receptore koji kombinuju u jednoj himernoj vrsti, unutarćelijski domen CD3 zeta-lanca, signalni region iz kostimulatornog proteina kao što je CD28, i vezujući element. Milone et al., 2009, Molecular Therapy, 17:8, 1453-1464 opisuje T ćelije sa himernim receptorima za antigen koji sadrže CD137 domene za prenos signala.
[0004] Prema tome, postoji hitna potreba u stanju tehnike za kompozicijama i postupcima za lečenje kancera upotrebom receptora CAR koji mogu da se umnože in vivo. Predmetni pronalazak se bavi ovom potrebom.
REZIME PRONALASKA
[0005] Predmetni pronalazak obezbeđuje izolovanu sekvencu nukleinske kiseline koja kodira himerni receptor za antigen (CAR), gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, transmembranski domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen, gde CD3 zeta signalni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0006] Aspekti pronalaska za koje se traži zaštita su kao što su definisani u patentnim zahtevima.
[0007] U prvom aspektu pronalaska obezbeđena je T ćelija genetski modifikovana da eksprimira CAR gde CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji je anti-CD 19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) CD3 zeta signalni domen za upotrebu u postupku za lečenje kancera kod čoveka, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 i/ili CD3 zeta signalni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24, i pri čemu je čovek otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
Kancer može da obuhvata nesolidni tumor kao što je hematološki tumor. Kancer može da bude leukemija ili limfom.
Leukemija može da bude:
(i) akutna leukemija ili hronična leukemija; ili
(ii) akutna limfocitna leukemija.
Alternativno, kancer može da bude:
(i) akutna limfocitna leukemija pre-B ćelija (pedijatrijska indikacija), adultna akutna limfocitna leukemija, limfom mantle ćelija ili difuzni limfom krupnih B-ćelija;
(ii) ne-Hodgkinov limfom;
(iii) multipli mijelom; ili
(iv) Hodgkinova bolest.
[0008] U jednom primeru izvođenja ovog aspekta pronalaska kancer je hronična limfocitna leukemija.
[0009] U drugom aspektu pronalaska obezbeđena je T ćelija koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR gde CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji predstavlja anti-CD 19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) signalni domen CD3 zeta za upotrebu u postupku za lečenje kancera koji sadrži primenu navedene T ćelije na čoveka kome je dijagnostifikovan kancer, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 ili signalni domen CD3 zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24, i pri čemu navedeni postupak stvara populaciju genetski konstruisanih T ćelija koje perzistiraju u čoveku najmanje osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine ili tri godine posle primene, i gde je čovek rezistentan na najmanje jedno hemoterapeutsko sredstvo.
[0010] Perzistentna populacija genetski modifikovanih T ćelija može da sadrži najmanje jednu ćeliju odabranu iz grupe koja se sastoji od T ćelije koja je primenjena kod čoveka, potomstva T ćelije koja je primenjena kod čoveka, i njihove kombinacije. Perzistentna populacija genetski modifikovanih T ćelija može da sadrži memorijsku T ćeliju.
[0011] U trećem aspektu pronalaska obezbeđena je T ćelija koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR gde CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji predstavlja anti-CD 19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) CD3 zeta signalni domen za upotrebu u postupku za lečenje kancera koji obuhvata primenu pomenute T ćelije kod čoveka kome je dijagnostikovan kancer, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 ili CD3 zeta signalni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24, i pri čemu pomenuti postupak umnožava populaciju genetski modifikovanih T ćelija kod čoveka, i gde je čovek otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
[0012] Potomstvo T ćelija u čoveku može da obuhvata memorijsku T ćeliju. Populacija potomstva T ćelija može da opstaje u čoveku najmanje tri meseca, četiri meseca, pet meseci, šest meseci, sedam meseci, osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine, ili tri godine nakon primene.
[0013] U aspektima pronalaska koji se odnose na T ćeliju za upotrebu kao što je prethodno definisano, kancer može da bude kao što je definisano u prvom aspektu ili kancer može da bude hronična limfocitna leukemija.
[0014] U aspektima pronalaska koji se odnose na T ćeliju za upotrebu kao što je prethodno definisano, čovek može da ima hroničnu limfocitnu leukemiju koja je refraktorna CD19+ leukemija i limfom.
[0015] U bilo kom aspektu pronalaska T ćelija može da bude autologna ili alogena ćelija. Ćelija može da se primeni nakon B-ćelijske ablativne terapije kao što je terapija sredstvima koja reaguju sa CD20, npr. Rituxan.
[0016] U aspektima pronalaska koji se odnose na T ćeliju za upotrebu kao što je prethodno definisano, ćelija može da se primeni u farmaceutskoj kompoziciji u dozi od 10<4>do 10<9>ćelija/kg telesne težine ili 10<5>do 10<6>ćelija/kg telesne težine.
[0017] Prema jednom primeru izvođenja pronalaska, T ćelija za upotrebu može da bude kao što je prethodno definisano, u kojoj:
(i) kostimulatorni signalni region 4-1BB može da sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 23;
(ii) CAR može da sadrži aminokiselinsku sekvencu navedenu u sekvenci SEQ ID NO:12;
(iii) anti-CD19 scFv može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO: 14;
(iv) signalni region 4-1BB može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO: 17 i CD3 zeta signalni domen može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO:18;
(v) anti-CD 19 scFv može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO: 14, signalni region 4-1BB može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO: 17, i CD3 zeta signalni domen može da bude kodiran sekvencom SEQ ID NO:18; ili
(vi) CAR može da bude kodiran sekvencom nukleinske kiseline navedenom u SEQ ID NO:8.
[0018] Ovde je takođe opisana sekvenca nukleinske kiseline koja kodira CAR koji sadrži sekvencu nukleinske kiseline SEQ ID NO: 8.
[0019] Ovde je takođe opisan CD3 zeta signalni domen u CAR kodiran sekvencom nukleinske kiseline SEQ ID NO: 18.
[0020] Ovde je takođe opisan izolovani CAR koji sadrži antigen-vezujući domen, transmembranski domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen, pri čemu CD3 zeta signalni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0021] Ovde je takođe opisana ćelija koja sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira CAR, gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, transmembranski domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0022] Kao što je ovde opisano, ćelija koja sadrži CAR ispoljava anti-tumorski imunitet kada se antigen-vezujući domen CAR veže za svoj odgovarajući antigen.
[0023] Ovde je takođe opisan vektor koji sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira CAR, gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen, gde CD3 zeta signalni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0024] Ovde je takođe opisan postupak za stimulaciju imunskog odgovora posredovanog T ćelijama na ciljnu ćelijsku populaciju ili tkivo kod sisara. Takođe je opisan postupak koji obuhvata primenu kod sisara efikasne količine ćelija koje su genetski modifikovane tako da eksprimiraju CAR gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24, pri čemu je antigen-vezujući domen odabran tako da specifično prepoznaje ciljnu ćelijsku populaciju ili tkivo.
[0025] Takođe je opisan postupak za obezbeđivanje anti-tumorskog imuniteta kod sisara. Takođe je opisan postupak koji obuhvata primena kod sisara efikasne količine ćelija koje su genetski modifikovane tako da eksprimiraju CAR gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24, obezbeđujući na taj način anti-tumorski imunitet kod sisara.
[0026] Takođe je opisan postupak za lečenje sisara koji ima bolest, poremećaj ili stanje povezano sa povišenom ekspresijom tumorskog antigena. Takođe je opisan postupak koji obuhvata primenu kod sisara efikasne količine ćelije koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24, lečeći na taj način sisara.
[0027] Kao što je ovde opisano, ćelija je autologna T ćelija.
[0028] Kao što je ovde opisano, tumorski antigeni uključuju CD19, CD20, CD22, ROR1, mezotelin, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, Glikolipid F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, i bilo koju njihovu kombinaciju.
[0029] Ovde je takođe opisan postupak za lečenje čoveka sa hroničnom limfocitnom leukemijom. U jednom primeru izvođenja, postupak obuhvata primenu kod čoveka T ćelije koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0030] Kao što je ovde opisano, čovek je otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
[0031] Kao što je ovde opisano, hronična limfocitna leukemija je refraktorna CD19+ leukemija i limfom.
[0032] Ovde je takođe opisan postupak za proizvodnju postojane populacije genetski modifikovanih T ćelija kod čoveka kome je dijagnostikovan kancer. Ovde je takođe opisan postupak koji obuhvata primenu kod čoveka T ćelije koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR, gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24, gde postojana populacija genetski modifikovanih T ćelija opstaje u čoveku najmanje jedan mesec nakon primene.
[0033] Kao što je ovde opisano, postojana populacija genetski modifikovanih T ćelija sadrži najmanje jednu ćeliju odabranu iz grupe koja se sastoji od T ćelije koja je primenjna kod čoveka, potomstva T ćelije koja je primenjna kod čoveka, i njihove kombinacije.
[0034] Kao što je ovde opisano, postojana populacija genetski modifikovanih T ćelija sadrži memorijsku T ćeliju.
[0035] Kao što je ovde opisano, postojana populacija genetski modifikovanih T ćelija opstaje u čoveku najmanje tri meseca nakon primene. Kao što je ovde opisano, postojana populacija genetski modifikovanih T ćelija opstaje u čoveku najmanje četiri meseca, pet meseci, šest meseci, sedam meseci, osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine, ili tri godine nakon primene.
[0036] Kao što je ovde opisano, leči se hronična limfocitna leukemija.
[0037] Ovde je takođe opisan postupak za ekspanziju populacije genetski modifikovanih T ćelija kod čoveka kome je dijagnostikovan kancer. Ovde je takođe opisan postupak koji obuhvata primenu kod čoveka T ćelije koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR gde CAR sadrži antigen-vezujući domen, kostimulatorni signalni region, i CD3 zeta signalni domen koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24, gde primenjena genetski modifikovana T ćelija proizvodi populaciju potomstva T ćelija u čoveku.
[0038] Kao što je ovde opisano, potomstvo T ćelija u čoveku sadrži memorijsku T ćeliju.
[0039] Kao što je ovde opisano, T ćelija je autologna T ćelija.
[0040] Kao što je ovde opisano, čovek je otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
[0041] Kao što je ovde opisano, kancer je hronična limfocitna leukemija. U drugom primeru izvođenja, hronična limfocitna leukemija je refraktorna CD19+ leukemija i limfom.
[0042] Kao što je ovde opisano, populacija potomstva T ćelija opstaje u čoveku najmanje tri meseca nakon primene. Kao što je ovde opisano, populacija potomstva T ćelija opstaje u čoveku najmanje četiri meseca, pet meseci, šest meseci, sedam meseci, osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine, ili tri godine nakon primene.
[0043] Kao što je ovde opisano, leči se kancer.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0044] Detaljan opis poželjnih primera izvođenja pronalaska koji sledi će se bolje razumeti kada se čita u sprezi sa priloženim crtežima. U svrhu ilustrovanja pronalaska, na crtežima su prikazani primeri izvođenja koji su ovde poželjni. Treba razumeti, međutim, da pronalazak nije ograničen na precizne aranžmane i instrumente primera izvođenja prikazanih na crtežima.
Slika 1, koja obuhvata slike 1A do 1C, je niz prikaza šematski predstavljenih vektora za prenos gena i transgena, proizvodnje genski modifikovane T ćelije i dizajna kliničkog protokola. Slika 1A prikazuje lentiviralne vektore i transgen koji pokazuje glavne funkcionalne elemente. Proizveden je lentiviralni vektor kliničkog stepena (označen kao pELPs 19BBz) pseudotipiziran proteinom G virusa vezikularnog stomatitisa, koji upravlja ekspresijom anti-CD19 scFv izvedenog iz FMC63 mišjeg monoklonskog antitela, regiona zgloba i transmembranskog domena humanog CD8α, i humanih signalnih domena 4-1BB i CD3zeta. Konstitutivna ekspresija transgena je bila usmerena ubacivanjem EF-1α (promotor elongacionog faktora-1α); LTR, dugog terminalnog ponovka; RRE, elementa koji odgovara na Rev, (cPPT) i centralne terminacione sekvence (CTS). Slika nije u razmeri. Slika 1B prikazuje proizvodnju T ćelije. Autologne ćelije su dobijene putem afereze, i T ćelije su bile obogaćene elutrijacijom mononuklearnih ćelija, oprane i preostale ćelije leukemije osiromašene dodatkom paramagnetnih perli obloženih sa anti-CD3/CD28 za pozitivnu selekciju i aktivaciju T ćelija. Lentiviralni vektor je dodat u vreme ćelijske aktivacije i ispran 3. dana nakon započinjanja gajenja ćelija. Ćelije su umnožavane na uređaju sa platformom koja se ljulja (WAVE Bioreactor System) tokom 8-12 dana. Poslednjeg dana gajenja, perle su uklonjene propuštanjem kroz magnetno polje i CART19 T ćelije su sakupljene i konzervisane zamrzavanjem u infuzibilnom medijumu. Slika 1C prikazuje dizajn kliničkog protokola. Pacijenti su primili hemoterapiju za smanjenje broja limfocita kao što je opisano, nakon čega su primili infuziju #1 CART19 i.v. putem, gravitacionom infuzijom tokom perioda od 15-20 minuta. Infuzija je data upotrebom pristupa podeljene doze tokom 3 dana (10%, 30%, 60%) počevši 1 do 5 dana po završetku hemoterapije. Procene ciljeva su izvedene u 4. nedelji ispitivanja. Na završetku aktivnog praćenja, ispitanici su prebačeni na destinacijski protokol za dugoročno praćenje prema smernicama FDA.
Slika 2, koja obuhvata slike 2A do 2F, predstavlja niz slika koje prikazuju neprekidnu in vivo ekspanziju i opstajanje CART19 ćelija u krvi i kosnoj srži. DNK izolovana iz pune krvi kao što je prikazano na slikama 2A do 2C ili kosne srži kao što je prikazano na slikama 2D do 2F, uzorci dobijeni od pacijenta UPN 01, kao što je prikazano na slikama 2A i 2D, UPN 02, kao što je prikazano na slikama 2B i 2E i UPN 03, kao što je prikazano na slikama 2C i 2F, podvrgnuti su u balku Q-PCR analizi upotrebom kvalifikovanog testa da bi se detektovale i kvantifikovale CART19 sekvence. Svaka uneta vrednost predstavlja prosek merenja u triplikatu u 100-200 ng genomske DNK, sa maksimalnim % CV manjim od 1.56%. Parametri zadovoljava/ne zadovoljava za test uključivali su unapred određene opsege za nagib i efikasnost amplifikacije, i amplifikaciju referentnog uzorka. Donja granica kvantifikacije za test ustanovljena opsegom standardne krive bila je 2 kopije transgena/mikrogramu genomske DNK; vrednosti za uzorke manje od tog broja smatraju se procenama predstavljaju se ako je najmanje 2/3 replikata dalo Ct vrednost sa % CV za vrednosti od 15%. CART19 ćelije su primenjene infuzijom na dane 0, 1, i 2 kod UPN 01 i UPN 03, na dane 0, 1, 2 i 11 kod UPN 02.
Slika 3, koja obuhvata slike 3A do 3D, predstavlja niz slika koje prikazuju citokine u serumu i kosnoj srži pre i posle infuzije CAR T ćelija; longitudinalna merenja promena citokina seruma, hemokina i citokinskih receptora kod pacijenta UPN 01, kao što je prikazano na slici 3A, UPN 02, kao što je prikazano na slici 3B i UPN 03, kao što je prikazano na slici 3C, naznačenog dana nakon infuzije CAR T ćelija i niz procena istih analita u kosnoj srži kod pacijenta UPN 03 kao što je prikazano na slici 3D. Uzorci su podvrgnuti multipleksnom ispitivanju upotrebom tehnologije sa nizovima mikro-perli Luminex i unapred sastavljenih i validiranih multipleks kitova. Analiti sa promenom >=3-ostrukoj promeni su naznačeni, i postavljeni na grafik kao relativna promena u odnosu na polaznu vrednost kao što je prikazano na slici 3A do 3C, ili kao apsolutne vrednosti kao što je prikazano na slici 3D. Apsolutne vrednosti za svaki analit u svakoj vremenskoj tački izvedene su iz standardne krive bazirane na rekombinantnom proteinu preko serija trostrukih razblaženja u 8 tačaka, sa gornjim i donjim granicama kvantifikacije (ULOQ, LLOQ) određenim pomoću 80-120% primećenih/očekivanih graničnih vrednosti od za standardne krive. Svaki uzorak je ocenjen u duplikatu sa izračunatim prosečnim vrednostima i % CV u većini slučajeva manjim od 10%. Da bi se prilagodili jedinstvenom prikazu podataka u smislu širokog opsega apsolutnih vrednosti, podaci se prikazuju kao umnožak promene u odnosu na polaznu vrednost za svaki analit. U slučajevima kada polazne vrednosti nisu mogle da se detektuju, polovina najniže vrednosti standardne krive korišćena je kao polazna vrednost. Opsezi standardne krive za ispitivanja i polazne (nulti dan) vrednosti (navedene u zagradama redom za UPN01, 02 i 03), sve u pg/ml: IL1-Rα: 35.5-29,318 (689, 301, 287); IL-6: 2.7-4,572 (7, 10.1, 8.7); IFN-γ: 11.2-23,972 (2.8, ND, 4.2); CXCL10: 2.1-5,319 (481, 115, 287); MIP-1β: 3.3-7,233 (99.7, 371, 174); MCP-1: 4.8-3,600 (403, 560, 828); CXCL9: 48.2-3,700 (1,412, 126, 177); IL2-Rα: 13.4-34,210 (4,319, 9,477, 610); IL-8: 2.4-5,278 (15.3, 14.5, 14.6); IL-10: 6.7-13,874 (8.5, 5.4, 0.7); MIP-1α: 7.1-13,778 (57.6, 57.3, 48.1).
Slika 4, koja obuhvata slike 4A do 4D, predstavlja niz slika koje prikazuju produženu površinsku ekspresiju CART19 i uspostavljanje funkcionalnih memorijskih receptora CAR in vivo. Slika 4A prikazuje detekciju CD3+ limfocita koji eksprimiraju CAR i odsustvo B ćelija u perifernoj krvi i kosnoj srži. Kod sveže obrađenih mononuklearnih ćelija periferne krvi ili kosne srži dobijenih od pacijenta UPN 03 na dan 169 nakon infuzije CART19 ćelija, procenjena je pomoću protočne citometrije, površinska ekspresija CAR19 (gore) ili prisustvo B ćelija (dole); kao kontrola, obojene su PBMC dobijene od zdravog davaoca ND365. Strategija odabiranja za populacije CD3+ i B ćelija predstavljena je na slici 9. Za procenu ekspresije CAR19 u CD3+ limfocitima, uzorci su istovremeno obojeni antitelima na CD14-PE-Cy7 i CD16-PE-Cy7 (kanal za odbacivanje) i CD3-FITC, pozitivno odabrani od CD3+, i ekspresija CAR19 u CD8+ i CD8-limfocitnim odeljcima je procenjena istovremenim bojenjem sa CD8a-PE i anti-CAR19 idiotipskim antitelom konjugovanim sa Alexa-647. Podaci na grafikonima su odabrani od ćelijske populacije koja je negativna na kanalu za odbacivanje/CD3-pozitivna. Za procenu prisustva B ćelija, uzorci su istovremeno obojeni antitelima na CD14-APC i CD3-FITC (kanali za odbacivanje) i procenjeno je prisustvo B ćelija u frakciji negativnoj na kanalu za odbacivanje istovremenim bojenjem sa antitelima na CD20-PE i CD19-PE-Cy-7. U svim slučajevima, negativno odabrani kvadranti su uspostavljeni na kontrolama koje nisu obojene kao što je prikazano na slikama 4B i 4C. Prikazana je T ćelijska imunofenotipizacija CD4+ (slika 4B) i CD8+ (slika 4C) T-ćelijskih podsetova. Zamrznuti uzorci periferne krvi pacijenta UPN 03 dobijeni aferezom na dan 56 i 169 nakon infuzije T ćelija ostavljeni su preko noći u medijumu za kulturu bez dodatih faktora, oprani, i podvrgnuti multi-parametarskoj imunofenotipizaciji za ekspresiju markera T ćelijske memorije, aktivaciji, i iscrpljivanju. Strategija odabiranja, kao što je prikazano na slici 8, uključivala je početno odabiranje od ćelija koje su negativne na kanalu za odbacivanje (CD14, CD16, Live/Dead Aqua) i CD3-pozitivne, praćeno pozitivnim odabiranjem od CD4+ i CD8+ ćelija. Okviri i kvadranti su uspostavljeni upotrebom FMO kontrola (CAR, CD45RA, PD-1, CD25, CD127, CCR7) ili odabirom od pozitivnih ćelijskih populacija
1
(CD3, CD4, CD8) i jasno razdvojenih podsetova (CD27, CD28, CD57); podaci su prikazani nakon bieksponencijalne transformacije za objektivnu visuelizaciju događaja. Slika 4D prikazuje funkcionalnu kompetentnost postojanih CAR ćelija. Zamrznuti uzorci periferne krvi pacijenta UPN 03 dobijeni aferezom na dan 56 i 169 nakon infuzije T ćelija ostavljeni su preko noći u medijumu za kulturu bez dodatih faktora, oprani, i procenjena je direktno ex-vivo njihova sposobnost prepoznavanja ciljnih ćelija koje eksprimiraju CD19 upotrebom CD107 testova degranulacije. Nakon inkubacije od 2 časa, u prisustvu anti-CD28, anti-CD49d, i CD107-FITC, mešavine ćelija su sakupljene, oprane, i podvrgnute testu multi-parametarske protočne citometrije za procenu sposobnosti CART19 ćelija da se degranulišu kao odgovor na ciljne ćelije koje eksprimiraju CD19. Strategija odabira je uključivala početni odabir od ćelija koje su negativne na kanalima za odbacivanje (CD14-PE-Cy7, CD16-PE-Cy7, Live/Dead Aqua) i pozitivne na CD3-PE, praćen odabirom od CD8-PE-Texas Red-pozitivnih ćelija; predstavljeni podaci su za populaciju odabranu prema CD8+. U svim slučajevima, negativno odabrani kvadranti su uspostavljeni na neobojenim kontrolama.
Slika 5, koja obuhvata slike 5A do 5C, predstavlja niz slika koje prikazuju rezultate eksperimenata procene kliničkih odgovora nakon infuzije CART19 ćelija. Slika 5A prikazuje da je pacijent UPN 02 bio lečen u dva ciklusa rituksimabom i bendamustinom sa minimalnim odgovorom (R/B, strelica). CART19 T ćelije su primenjene infuzijom počevši od 4 dana nakon samog bendamustina (B, strelica). Leukemija otporna na rituksimab i bendamustin je brzo uklonjena iz krvi, kao što je pokazano smanjenjem apsolutnog broja limfocita (ALC) sa 60 600/µl na 200/µl u okviru 18 dana od infuzije. Lečenje kortikosteroidima je započeto 18. dana nakon infuzije zbog slabosti i neinfektivnog febrilnog sindroma. Referentna linija (tačkasta) označava gornju granicu normale za ALC. Slika 5B prikazuje rezultate primera eksperimenata sekvencijalnog bojenja biopsije kosne srži ili uzoraka tkiva od pacijenta UPN 01 i 03 za CD20. Infiltracija leukemijom prisutna kod oba pacijenta pre lečenja, bila je odsutna u uzorcima nakon lečenja praćena normalizacijom celularnosti i trolinijske hematopoeze. Pacijent UPN 01 nije imao nikakve CLL ćelije detektovane protočnom citometrijom, citogenetskim ispitivanjima i fluorescentnom in-situ hibridizacijom ili normalne B ćelije detektovane protočnom citometrijom u kosnoj srži ili krvi. Pacijent UPN 03 je imao 5% preostalih normalnih CD5-negativnih B ćelija potvrđenih protočnom citometrijom na dan 23, koje su se takođe pokazale kao poliklonalne; normalne B ćelije nisu detektovane na dan 176. Slika 5C prikazuje rezultate eksperimenata upotrebom sekvencijalne CT vizuelizacije za brzu procenu generalizovane limfadenopatije otporne na hemoterapiju. Bilateralne aksilarne mase su se povukle za 83 (UPN 01) i 31 (UPN 03) dan od infuzije, kao što je označeno strelicama i krugom.
Slika 6, koja obuhvata slike 6A do 6C, predstavlja niz slika koje prikazuju apsolutni broj limfocita i ukupan broj CART19+ ćelija u cirkulaciji za UPN 01, 02, 03. Ukupan broj limfocita (zbir normalih i CLL ćelija) nasuprot ukupnom broju CART19+ ćelija u cirkulaciji je grafički prikazan za sva 3 subjekta upotrebom apsolutnog broja limfocita iz CBC vrednosti, i pod pretpostavkom da je zapremina krvi 5.0 L. Ukupan broj CART19 ćelija u cirkulaciji je izračunat upotrebom tandem CBC vrednosti sa apsolutnim brojem limfocita i vrednostima markera za Q-PCR kao što je prikazano na slici 2, pretvaranjem kopija/µg DNK u srednju % vrednost markera, kako je ovde opisano na drugim mestima. Nađeno je da je % vrednosti markera za Q-PCR u bliskoj korelaciji (<2-struke varijacije) sa karakterizacijom proizvoda infuzije pomoću protočne citometrije, i sa podacima iz uzoraka tamo gde su istovremeni podaci protočne citometrije bili dostupni za direktno određivanje broja CART19 ćelija bojenjem.
Slika 7, koja obuhvata slike 7A do 7D predstavlja niz slika koje prikazuju eksperimente koji uključuju direktnu ex vivo detekciju CART19-pozitivnih ćelija u PBMC pacijenta UPN-0171 dan nakon T-ćelijske infuzije. PBMC pacijenta UPN-01 sakupljeni ili sveži posle afereze, 71 dan nakon infuzije, ili zamrznuti u vreme afereze za proizvodnju T-ćelijskog proizvoda (polazna vrednost), i odmrznuti pre bojenja uz očuvanje vijabilnosti, podvrgnuti su protočnoj citometriji za detektovanje prisustva CART19 ćelija koje eksprimiraju fragment CAR 19 na površini. Za procenu ekspresije CAR19 u limfocitu, uzorci su istovremeno obojeni sa CD3-PE i anti-CAR19 idiotipskim antitelom konjugovanim sa Alexa-647, ili istovremeno obojeni samo sa CD3-PE (FMO za CAR19). Slika 7A pokazuje da je početni odabir limfocita uspostavljen na osnovu rasipanja unapred i bočno (FSC nasuprot SSC), praćeno odabirom od CD3+ ćelija. Slika 7B prikazuje okvir za CD3+ limfocite; slika 7C prikazuje CAR idiotipsko bojenje; slika 7D prikazuje CAR idiotipski FMO. CAR19-pozitivni odabir je uspostavljen na CAR19 FMO uzorcima.
Slika 8, koja obuhvata slike 8A do 8C, predstavlja niz slika koje prikazuju strategiju odabira za identifikaciju CART19 ekspresije upotrebom polihromatske protočne citometrije u uzorcima krvi pacijenta UPN 03. Strategiju odabira za sliku 8C je prikazana za uzorak UPN 03, dan 56 i predstavlja strategiju korišćenu za uzorak UPN 03, dan 169. Slika 8A prikazuje primarni odabir: negativno na kanalu za odbacivanje (CD14, CD16, LIVE/dead Aqua), CD3-pozitivno. Slika 8B prikazuje sekundarne odabire: CD4-pozitivno, CD8-pozitivno. Slika 8C prikazuje tercijarne odabire: CAR19-pozitivno i CAR19-negativno, uspostavljene na uzorcima CAR FMO (paneli krajnje desno).
Slika 9 prikazuje strategiju odabira za direktno identifikovanje CART19 ekspresije i B ćelija u uzorcima krvi i kosne srži. Strategiju odabira za sliku 4A, koja prikazuje detekciju CD3+ limfocita koji eksprimiraju CAR i odsustvo B ćelija u perifernoj krvi i kosnoj srži: levi grafik: ćelijski okvir; gornji panel: pozitivni okvir za CD3+ ćelije, donji panel: negativni okvir (CD14-negativno, CD3-negativno) za B ćelije. NC365, kontrolne ćelije periferne krvi zdravog davaoca.
Slika 10 je slika koja rezimira demograske podatke pacijenta i odgovor na lečenje.
Slika 11 prikazuje postupak za proizvodnju CART-19 ćelija.
Slika 12, koja obuhvata slike 12A do 12D, predstavlja niz slika koje prikazuju klinički odgovor kod pacijenta. Slika 12A prikazuje lentiviralni vektor korišćen za infekciju T ćelija pacijenta. Proizveden je lentiviralni vektor kliničkog stepena pseudotipiziran proteinom G virusa vezikularnog stomatitisa (pELPs 19-BB-z) koji upravlja ekspresijom anti-CD19 scFv izvedenog iz mišjeg monoklonskog antitela FMC63, zglobnog i transmembranskog domena humanog CD8α, i humanih signalnih domena 4-1BB i CD3ζ. Detalji CAR19 transgena, na dnu slike 12A, prikazuju glavne funkcionalne elemente. Slika nije u razmeri. 3’LTR označava 3’ dugi terminalni ponovak; 5’LTR, 5’ dugi terminalni ponovak; Amp R, gen za otpornost na ampicilin; Bovine GH Poly A, goveđi hormon rasta sa poliadenilacionim nizom; cPPT/CTS, centralni polipurinski trakt sa centralnom terminacionom sekvencom; EF-1α, elongacioni faktor 1-alfa; env, omotač; gag, antigen specifičan za grupu; pol, HTV gen koji kodira polimerazu i reverznu transkriptazu; R, ponovak; RRE, element koji odgovara na rev; scFv, jednolančani varijabilni fragment; TM, transmembranski; i WPRE, post-transkripcioni regulatorni element hepatitis virusa mrmota. Slika 12B prikazuje serumske nivoe kreatinina, mokraćne kiseline, i laktat dehidrogenaze (LDH) od dana 1 do dana 28 nakon prve infuzije CART19 ćelija. Vršni nivoi su se podudarali sa hospitalizacijom zbog sindroma lize tumora. Slika 12C prikazuje uzorke biopsije kosne srži dobijene 3 dana nakon hemoterapije (dan -1, pre infuzije CART19 ćelija) i
1
23 dana i 6 meseci nakon infuzije CART19 ćelija (hematoksilin i eozin). Polazni uzorak pokazuje hipercelularnu kosnu srž (60%) sa trolinearnom hematopoezom, infiltriranu pretežno intersticijalnim agregatima malih, zrelih limfocita koji čine 40% ukupne celularnosti. Uzorak dobijen 23. dana pokazuje preostale limfoidne agregate (10%) koji su bili negativni na hroničnu limfoidnu leukemiju (CLL), sa mešavinom T ćelija i CD5-negativnih B ćelija. Uzorak dobijen 6 meseci nakon infuzije pokazuje trolinearnu hematopoezu, bez limfoidnih agregata i produženo odsustvo CLL. Slika 12D prikazuje CT skenove sa pojačanim kontrastom dobijene pre nego što je pacijent bio uključen u ispitivanje i 31 dan i 104 dana posle prve infuzije. CT sken pre infuzije otkriva bilateralne mase veličine od 1 do 3 cm. Povlačenje aksilarne limfadenopatije se dogodilo u okviru 1 meseca posle infuzije i bilo je dugotrajno. Strelice označavaju različite uvećane limfne čvorove pre terapije i odgovore limfnih čvorova na uporednim CT skenovima nakon terapije.
Slika 13, koja obuhvata slike 13A do 13E, predstavlja niz slika koje prikazuju citokine u serumu i kosnoj srži pre i posle infuzija T-ćelija sa himernim receptorom za antigen. Niz merenja citokina interferona-γ (slika 13A), hemokina stimulisanih interferonom-γ, CXC hemokina 10 (CXCL10) (slika 13B) i CXC liganda 9 (CXCL9) (slika 13C), i interleukina-6 (slika 13D) jeizveden u naznačenim vremenskim tačkama. Povećanja nivoa ovih zapaljenskih citokina i hemokina su koincidirala sa početkom sindroma lize tumora. Niski nivoi interleukina-6 su detektovani na polaznoj tački, dok su interferonγ, CXCL9, i CXCL10 bili ispod granica detekcije na polaznoj tački. Opsezi standardne krive za analite i polazne vrednosti kod pacijenta, date u zagradama, bile su kao što sledi: interferon-γ, 11.2 do 23,972 pg po mililitru (1.4 pg po mililitru); CXCL10, 2.1 do 5319 pg po mililitru (274 pg po mililitru); CXCL9, 48.2 do 3700 pg po mililitru (177 pg po mililitru); interleukin-6, 2.7 do 4572 pg po mililitru (8.3 pg po mililitru); faktor nekroze tumora α (TNF-α), 1.9 do 4005 pg po mililitru (nije detektabilan); i rastvorni oblik receptora za interleukin-2, 13.4 to 34,210 pg po mililitru (644 pg po mililitru). Slika 13E prikazuje indukciju imunskog odgovora u kosnoj srži. Citokini TNF-α, interleukin-6, interferon-γ, hemokin CXCL9, i rastvorni oblik receptora za interleukin-2 su mereni u supernatantu fluida dobijenih iz aspirata kosne srži naznačenih dana pre i posle infuzije CART19 ćelija. Povećanja nivoa interleukina-6, interferona-γ, CXCL9, i rastvornog oblika receptora za interleukin-2, koincidirala su sa sindromom lize tumora, vršnom vrednosti infiltracije T-ćelija sa himernim receptorom za antigen, i iskorenjivanjem leukemijskog infiltrata.
Slika 14, koja obuhvata slike 14A do 14C, predstavlja niz slika koje prikazuju ekspanziju i opstanak T ćelija sa himernim receptorom za antigen in vivo. Genomska DNK (gDNK) je izolovana iz uzoraka pacijentove pune krvi (slika 14A) i aspirata kosne srži (slika 14B) sakupljenih u nizu vremenskih tačaka pre i posle infuzije T-ćelija sa himernim receptorom za antigen i korišćena za ispitivanje pomoću kvantitativne lančane reakcije polimeraze u realnom vremenu (PCR). Kako je procenjeno na osnovu transgene DNK i procenta limfocita koji eksprimiraju CAR19, T ćelije sa himernim receptorom za antigen su se umnožile do nivoa koji su bili više od 1000 puta viši od polaznih nivoa pri presađivanju u perifernoj krvi i kosnoj srži. Vršni nivoi T ćelija sa himernim receptorom za antigen su vremenski korelisani sa sindromom lize tumora. Uzorak krvi dobijen nultog dana i uzorak kosne srži dobijen 1. dana nisu imali PCR signal na polaznom nivou. Ispitivanje aspirata kosne srži protočnom citometrijom u polaznoj tački (slika 14C) pokazalo je pretežnu infiltraciju CD19+CD5+ ćelija koje su bile klonalne, što je procenjeno bojenjem imunoglobulinskog kapa lakog lanca, sa nedostatkom T ćelija. Na dan 31 posle infuzije, CD5+ T ćelije su bile prisutne, i ni normalne ni maligne B ćelije nisu detektovane. Brojevi označavaju relativnu učestalost ćelija u svakom kvadrantu. Obe ose, i x i y osa imaju log10 skalu. Strategija odabira je uključivala početni odabir od CD19+ i CD5+ ćelija u kvadratima sa leve strane, i nakon toga, identifikaciju ekspresije kapa i lambda imunoglobulina na podsetu CD19+CD5+ (kvadrati sa desne strane).
DETALJAN OPIS
[0045] Pronalazak se odnosi na kompozicije za lečenje kancera uključujući, ali bez ograničenja, hematološke malignitete i solidne tumore. Predmetni pronalazak se odnosi na strategiju adoptivnog ćelijskog transfera T ćelija transdukovanih tako da eksprimiraju himerni receptor za antigen (CAR). Receptori CAR su molekuli koji kombinuju specifičnost na bazi antitela za željeni antigen (npr., tumor antigen) sa unutarćelijskim domenom koji aktivira T-ćelijski receptor da bi nastao himerni protein koji ispoljava specifičnu antitumorsku ćelijsku imunsku aktivnost.
[0046] Predmetni pronalazak se odnosi uopšteno na upotrebu genetski modifikovanih T ćelija za stabilno eksprimiranje željenog CAR, kao što je dafinisano u patentnim zahtevima. T ćelije koje eksprimiraju CAR su ovde označene kao CAR T ćelije ili CAR modifikovane T ćelije. Poželjno, ćelija može da bude genetski modifikovana tako da stabilno eksprimira vezujući
1
domen antitela na svojoj površini, stvarajući novu antigenu specifičnost koja je nezavisna od MHC. T ćelija je genetski modifikovana tako da stabilno eksprimira CAR koji kombinuje domen za prepoznavanje antigena specifičnog antitela sa unutarćelijskim domenom proteina CD3-zeta lanca u jedinstveni himerni protein.
[0047] Kao što je ovde opisano, ovde opisani CAR sadrži vanćelijski domen koji ima domen za prepoznavanje antigena, transmembranski domen, i citoplazmatski domen. Kao što je ovde opisano, koristi se transmembranski domen koji je prirodno povezan sa jednim od domena u CAR. Takođe kao što je ovde opisano, transmembranski domen može da bude odabran ili modifikovan aminokiselinskom supstitucijom da bi se izbeglo vezivanje takvih domena za transmembranske domene istih ili različitih površinskih membranskih proteina, da bi se smanjile interakcije sa drugim članovima receptorskog kompleksa. Poželjno, transmembranski domen je domen zgloba CD8α.
[0048] Kada je u pitanju citoplazmatski domen, ovde opisani CAR sadrži signalni domen 4-1BB. Citoplazmatski domen CAR može da bude dizajniran da dodatno sadrži signalni domen CD3-zeta. Citoplazmatski domen CAR uključuje signalne module CD3-zeta i 4-1BB. Prema tome, pronalazak obezbeđuje CAR T ćelije i njihovu upotrebu za adoptivnu terapiju.
[0049] Kao što je ovde opisano, ovde opisane CAR T ćelije mogu da budu proizvedene uvođenjem u ćelije lentiviralnog vektora koji sadrži željeni CAR, na primer CAR koji sadrži anti-CD19, CD8α zglobni i transmembranski domen, i humane signalne domene 4-1BB i CD3zeta. CAR T ćelije pronalaska su sposobne da se replikuju in vivo što rezultuje u dugotrajnom opstanku koji može da vodi neprekidnoj kontroli tumora.
[0050] Ovde je takođe opisana primena genetski modifikovane T ćelije koja eksprimira CAR za lečenje pacijenta koji ima kancer, ili postoji rizik da ima kancer, upotrebom limfocitne infuzije. Poželjno, u lečenju se koristi autologna limfocitna infuzija. Autologne ćelije PBMC se sakupljaju od pacijenta kome je potrebno lečenje, i T ćelije se aktiviraju i umnožavaju upotrebom postupaka koji su ovde opisani i poznati u stanju tehnike, i zatim se vraćaju natrag pacijentu infuzijom.
[0051] Ovde je takođe opisano lečenje pacijenta koji ima rizik od razvoja CLL. Ovde je takođe opisano lečenje maligniteta ili autoimunske bolesti kod koje hemoterapija i/ili imunoterapija kod pacijenta rezultuju u značajnoj imunosupresiji kod pacijenta, povećavajući na taj način rizik da pacijent razvije CLL.
[0052] Ovde su obezbeđeni postupci koji koriste T ćelije koje eksprimiraju anti-CD19 CAR uključujući i CD3-zeta i 4-1 BB kostimulatorni domen (takođe označene kao CART19 T ćelije). Ovde opisane CART19 T ćelije mogu da podlegnu snažnoj in vivo T ćelijskoj
1
ekspanziji i mogu da uspostave CD19-specifične memorijske ćelije koje opstaju u velikom broju tokom produženog vremena u krvi i kosnoj srži. U nekim slučajevia, CART19 T ćelije koje su primenjene kod pacijenta infuzijim mogu da eliminišu ćelije leukemije in vivo kod pacijenata sa uznapredovalom CLL otpornom na hemoterapiju.
Definicije
[0053] Osim ako nije dugačije definisano, svi ovde korišćeni tehnički i naučni termini imaju isto značenje kao što obično podrazumeva stručnjak u oblasti na koju se pronalazak odnosi. Iako bilo koji postupci i materijali slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani mogu da se koriste u praktičnom ispitivanju predmetnog pronalaska, poželjni materijali i postupci su ovde opisani. U opisu i traženju zaštite za predmetni pronalazak, sledeća terminologija će biti korišćena.
[0054] Treba takođe razumeti da ovde korišćena terminologija služi samo opisivanju određenih primera izvođenja, i nije namenjena da bude ograničavajuća.
[0055] Članovi "a" i "an" su ovde korišćeni da označe jedan ili više od jedan (tj., najmanje jedan) od gramatičkih objekata člana. Na primer, "element" označava jedan element ili više od jednog elementa.
[0056] "Oko", kako se ovde koristi, kada se odnosi na merljivu vrednost kao što je količina, vremensko trajanje, i slično, predviđeno je da obuhvata varijacije od ±20% ili ±10%, poželjnije ±5%, čak poželjnije ±1%, i još poželjnije ±0.1% od specifikovane vrednosti, budući da su takve varijacije odgovarajuće za izvođenje opisanih postupaka.
[0057] "Aktivacija", kako se ovde koristi, odnosi se na stanje T ćelija koje su uspešno stimulisane da indukuju detektabilnu ćelijsku proliferaciju. Aktivacija može takođe da bude povezana sa indukovanom proizvodnjom citokina, i detektablnim efektorskim funkcijama. Termin "aktivirane T ćelije" se odnosi, između ostalog, na T ćelije koje prolaze kroz ćelijsku podelu.
[0058] Termin "antitelo," kako se ovde koristi, odnosi se na molekul imunoglobulina koji se specifično vezuje za antigen. Antitela mogu da budu intaktni imunoglobulini dobijeni iz prirodnih izvora ili iz rekombinantnih izvora i mogu da budu imunoreaktivni delovi intaktnih imunoglobulina. Antitela su obično tetrameri imunoglobulinskih molekula. Antitela u predmetnom pronalasku mogu da postoje u različitim oblicima uključujući, na primer, poliklonska antitela, monoklonska antitela, Fv, Fab i F(ab)2, kao i jednolančana antitela i humanizovana antitela (Harlow et al., 1999, In: Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY; Harlow et al., 1989, In: Antibodies: A Laboratory
1
Manual, Cold Spring Harbor, New York; Houston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; Bird et al., 1988, Science 242:423-426).
[0059] Termin "fragment antitela" odnosi se na deo intaktnog antitela i odnosi se na varijabilne regione koji određuju antigenost intaktnog antitela. Primeri fragmenata antitela uključuju, ali nisu ograničeni na, Fab, Fab’, F(ab’)2, i Fv fragmente, linearna antitela, scFv antitela, i multispecifična antitela obrazovana od fragmenata antitela.
[0060] "Teški lanac antitela", kako se ovde koristi, odnosi se na veći od dva tipa polipeptidnih lanaca prisutnih u svakom molekulu antitela u njihovim prirodnim konformacijama.
[0061] "Laki lanac antitela", kako se ovde koristi, odnosi se na manji od dva tipa polipeptidnih lanaca prisutnih u svakom molekulu antitela u njihovim prirodnim konformacijama, κ i λ laki lanci se odnosi na dva glavna izotipa lakog lanca antitela.
[0062] Pod terminom "sintetsko antitelo" kako se ovde koristi, podrazumeva se antitelo koje je napravljeno upotrebom tehnologije rekombinantne DNK, kao što je, na primer, antitelo eksprimirano na bakteriofagu kao što je ovde opisano. Termin treba razumeti tako da označava antitelo koje je napravljeno sintezom DNK molekula koji kodira antitelo i DNK molekul eksprimira protein antitela, ili aminokiselinsku sekvencu koja određuje antitelo, gde je DNK ili aminokiselinska sekvenca dobijena upotrebom tehnologije sintetske DNK ili aminokiselinske sekvence koja je odstupna i dobro poznata u stanju tehnike.
[0063] Termin "antigen" ili "Ag", kako se ovde koristi, je definisan kao molekul koji izaziva imunski odgovor. Ovaj imunski odgovor može da uključuje ili proizvodnju antitela, ili aktivaciju specifičnih imunološki-kompetentnih ćelija, ili oba. Stručnjak u oblasti će razumeti da bilo koji makromolekul, uključujući praktično sve proteine ili peptide, može da bude antigen. Osim toga, antigeni mogu da budu izvedeni iz rekombinantne ili genomske DNK. Stručnjak u oblasti će razumeti da bilo koja DNK, koja sadrži nukleotidne sekvence ili deo nukleotidne sekvence koja kodira protein koji izaziva imunski odgovr na taj način kodira "antigen" u smislu u kome se termin ovde koristi. Dalje, stručnjak u oblasti će razumeti da antigen ne mora da bude kodiran samo punom dužinom nukleotidne sekvence gena. Očigledno je da predmetni pronalazak uključuje, ali bez ograničenja, upotrebu dela nukleotidne sekvence više od jednog gena i da su ove nukleotidne sekvence uređene na različite načine da bi izazvale željeni imunski odgovor. Osim toga, stručnjak u oblasti će razumeti da antigen uopšte ne mora da bude kodiran "genom". Očigledno je da antigen može da bude proizveden sintezom ili može da bude izveden iz biološkog uzorka. Takav biološki uzorak može da uključuje, ali bez ograničenja, uzorak tkiva, uzorak tumora, ćeliju ili biološki fluid.
1
[0064] Termin "antitumorsko dejstvo" kako se ovde koristi, odnosi se na biološko dejstvo koje može da se ogleda u smanjenju zapremine tumora, smanjenju brija tumorskih ćelija, smanjenju broja metastaza, povećanju očekivane dužine života, ili poboljšanju različitih fizioloških simptoma povezanih sa kanceroznim stanjem. "Antitumorsko dejstvo" može takođe da se ispoljava kroz sposobnost peptida, polinukleotida, ćelija i antitela pronalaska da spreče pojavu tumora na prvom mestu.
[0065] Termin "autoantigen" označava, u skladu sa predmetnim pronalaskom, bilo koji sopstveni antigen koji imunski sistem greškom prepoznaje kao strani. Autoantigeni sadrže, ali nisu ograničeni na, ćelijske proteine, fosfoproteine, ćelijske površinske proteine, ćelijske lipide, nukleinske kiseline, glikoproteine, uključujući receptore ćelijske površine.
[0066] Termin "autoimuna bolest", kako se ovde koristi, definiše se kao poremećaj koji rezultuje iz autoimunskog odgovora. Autoimuna bolest je rezultat neprimerenog i prekomernog odgovora na sopstveni antigen. Primeri autoimunih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, Adisionovu bolest, alopeciju greata, ankilozni spondilitis, autoimuni hepatitis, autoimuni parotitis, Kronovu bolest, dijabetes (tipa I), distrofičnu buloznu epidermolizu, epididimitis, glomerulonefritis, Graves-ovu bolest, Gijen-Bareov sindrom, Hašimotovu bolest, hemolitičku anemiju, sistemski lupus eritematosus, multiple sklerozu, mijasteniju gravis, pemfigus vulgaris, psorijazu, reumatsku groznicu, reumatoidni artritis, sarkoidozu, sklerodermu, Sjogren-ov sindrom, spondiloartropatije, tiroiditis, vaskulitis, vitiligo, miksedem, pernicioznu anemiju, ulcerozni kolitis, između ostalih.
[0067] Kako se ovde koristi, termin "autologno" se odnosi na bilo kakav materijal koji potiče od istog pojedinca kome kasnije treba da bude ponovo vraćen.
[0068] "Alogeno" se odnosi na graft koji potiče od druge životinje iste vrste.
[0069] "Ksenogeno" se odnosi na graft koji potiče od životinje različite vrste.
[0070] Termin "kancer", kako se ovde koristi, se definiše kao bolest okarakterisana brzim i nekontrolisnim rastom aberantnih ćelija. Kancerske ćelije mogu da se šire lokalno ili kroz krvotok i limfni sistem u druge delove tela. Primeri različitih kancera uključuju, ali nisu ograničeni na, kancer dojke, kancer prostate, kancer jajnika, kancer grlića materice, kancer kože, kancer pankreasa, kolorektalni kancer, kancer bubrega, kancer jetre, kancer mozga, limfom, leukemiju, kancer pluća, i slično.
[0071] "Kostimulatorni ligand," kako se termin ovde koristi, uključuje molekul na antigen prezentujućoj ćeliji (npr., aAPC, dendritska ćelija, B ćelija, i slično) koji se specifično vezuje za srodni kostimulatorni molekul na T ćeliji, obezbeđujući tako signal koji, uz primarni signal obezbeđen, na primer, vezivanjem TCR/CD3 kompleksa sa MHC molekulom opterećenim
1
peptidom, posreduje u T ćelijskom odgovoru, uključujući, ali bez ograničenja, proliferaciju, aktivaciju, diferencijaciju, i slično. Kostimulatorni ligand može da uključuje, ali bez ograničenja, CD7, B7-1 (CD80), B7-2 (CD86), PD-L1, PD-L2, 4-1BBL, OX40L, inducibilni kostimulatorni ligand (ICOS-L), intercelularni adhezioni molekul (ICAM), CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, limfotoksinski beta receptor, 3/TR6, ILT3, ILT4, HVEM, agonist ili antitelo koje se vezuje za Toll ligand receptor i ligand koji se specifično vezuje za B7-H3. Kostimulatorni ligand takođe obuhvata, između ostalog, antitelo koje se specifično vezuje za kostimulatorni molekul prisutan na T ćeliji, kao što je, ali bez ograničenja, CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, antigen-1 povezan sa funkcijom limfocita (LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, i ligand koji se specifično vezuje za CD83.
[0072] "Kostimulatorni molekul" se odnosi na srodni vezujući partnerski mlekul na T ćeliji koji se specifično vezuje za kostimulatorni ligand, posredujući tako u kostimulatornom odgovoru pomoću T ćelija, kao što je, ali bez ograničenja, proliferacija. Kostimulatorni molekuli uključuju, ali nisu ograničeni na MHC molekul klase I, BTLA i Toll ligand receptor.
[0073] "Kostimulatorni signal", kako se ovde koristi, odnosi se na signal, koji u kombinaciji sa primarnim signalom, kao što je ligacija TCR/CD3, vodi T ćelijskoj proliferaciji i/ili ushodnoj ili nishodnoj regulaciji ključnih molekula.
[0074] "Bolest" je zdravstveno stanje životinje gde životinja ne može da održi homeostazu, i gde, ako se bolest ne poboljša, tada zdravlje životinje nastavlja da se narušava. Suprotno, "poremećaj" kod životinje je zdravstveno stanje životinje u kome životinja može da održi homeostazu, ali u kome je zdravstveno stanje životinje manje poželjno nego što bi bilo u odsustvu poremećaja. Ostavljen nelečen, poremećaj ne bi nužno izazvao dalje pogoršanje zdravstvenog stanja životinje.
[0075] "Efikasna količina" kako se ovde koristi, označava količinu koja obezbeđuje terapeutsku ili profilaktičku korist.
[0076] Izraz "kodirajući" se odnosi se na karakteristično svojstvo specifične sekvence nukleotida u polinukleotidu, kao što je gen, cDNK, ili iRNK, da služi kao obrazac za sintezu drugih polimera i makromolekula u biološkim procesima koja imaju ili definisanu sekvencu nukleotida (tj., rRNK, tRNK i iRNK) ili definisanu sekvencu aminokiselina i biološka svojstva koja iz njih proizilaze. Prema tome, gen kodira protein ako transkripcija i translacija iRNK koja odgovara tom genu proizvodi protein u ćeliji ili drugom biološkom sistemu. I kodirajući lanac, čija je nukleotidna sekvenca identična sa sekvencom iRNK i koja je obično prikazana u listama sekvenci, i nekodirajući lanac, koji se koristi kao obrazac za transkripciju
2
gena ili cDNK, mogu da se označe kao kodirajući za protein ili drugi proizvod tog gena ili cDNK.
[0077] Kako se ovde koristi "endogeno" odnosi se na bilo koji materijal iz, ili proizveden u organizmu, ćeliji, tkivu ili sistemu.
[0078] Kako se ovde koristi, termin "egzogeno" odnosi se na bilo koji materijal uveden iz, ili proizveden izvan organizma, ćelije, tkiva ili sistema.
[0079] Termin "ekspresija", kako se ovde koristi, definiše se kao transkripcija i/ili translacija određene nukleotidne sekvence pokrenuta njenim promotorom.
[0080] "Ekspresioni vektor" se odnosi na vektor koji sadrži rekombinantni polinukleotid koji sadrži sekvencu za kontrolu ekspresije operativno povezanu sa nukleotidnom sekvencom koja treba da se eksprimira. Ekspresioni vektor sadrži dovoljno elemenata koji deluju u cis položaju za ekspresiju; druge elemente za ekspresiju može da obezbeđuje ćelija-domaćin ili in vitro ekspresioni sistem. Ekspresioni vektori uključuju sve one poznate u stanju tehnike, kao što su kozmidi, plazmidi (npr., goli ili sadržani u lipozomima) i virusi (npr., lentivirusi, retrovirusi, adenovirusi, i virusi povezani sa adenovirusima) koji obuhvataju rekombinantni polinukleotid.
[0081] "Homologno" se odnosi na sličnost sekvence ili identičnost sekvence između dva polipeptida ili između dva molekula nukleinske kiseline. Kada je na poziciji u obe od dve upoređene sekvence ista baza ili aminokiselinska monomerna subjedinica, npr., ako je na poziciji u svakom od dva molekula DNK adenin, tada su molekuli homologni na toj poziciji. Procenat homologije između dve sekvence je funkcija broja odgovarajućih ili homolognih pozicija koje dele dve sekvence, podeljena brojem upoređenih pozicija X 100. Na primer, ako se 6 od 10 pozicija u dve sekvence podudaraju ili su homologne, tada su dve sekvence 60% homologne. Na primer, DNK sekvence ATTGCC i TATGGC dele 50% homologije. Uopšteno, poređenje se radi kada su dve sekvence poravnate tako da se dobije maksimum homologije.
[0082] Termin "imunoglobulin" ili "Ig", kako se ovde koristi, definiše se kao klasa proteina, koji funkcionišu kao antitela. Antitela koja eksprimiraju B ćelije se ponekad označavaju kao BCR (B ćelijski receptor) ili receptor za antigen. Pet članova, uključenih u ovu klasu proteina su IgA, IgG, IgM, IgD, i IgE. IgA je primarno antitelo prisutno u telesnim sekretima, kao što je saliva, suze, majčino mleko, gastrointestinalni sekreti i mukozni sekreti respiratornog i urogenitalnog trakta. IgG je najčešće antitelo u cirkulaciji. IgM je glavni imunoglobulin proizveden u primarnom imunskom odgovru kod većine subjekata. To je najefikasniji imunoglobulin u aglutinaciji, fiksaciji komplementa, i drugim odgovorima antitela, i značajno je u odbrani od bakterija i virusa. IgD je imunoglobulin koji nema poznatu ulogu antitela, ali može da bude receptor za antigen. IgE je imunoglobulin koji posreduje u neposrednoj preosjetljivosti izazivanjem oslobađanja medijatora iz mast ćelija i bazofila nakon izlaganja alergenu.
[0083] Kako se ovde koristi, "uputstvo" uključuje publikacije, zapise, dijagrame, ili bilo koje druge medijume za izražavanje koji mogu da se koriste za saopštavanje korisnosti kompozicija i postupaka pronalaska. Uputstvo u kitu pronalaska može, na primer, da bude pričvršćeno za kontejner koji sadrži nukleinsku kiselinu, peptid, i/ili kompoziciju pronalaska ili da se isporučuje zajedno sa kontejnerom koji sadrži nukleinsku kiselinu, peptid, i/ili kompoziciju. Alternativno, uputstvo može da se isporučuje odvojeno od kontejnera sa namerom da primalac zajedno koristi uputstvo i jedinjenje.
[0084] "Izolovano" označava izmenjeno ili uklonjeno iz prirodnog okruženja. Na primer, nukleinska kiselina ili peptid prirodno prisutan u živoj životinji nije "izolovan," ali ista nukleinska kiselina ili peptid delimično ili potpuno odvojen od istovremeno postojećeg materijala njegovog prirodnog okruženja je "izolovan." Izolovana nukleinska kiselina ili protein može da postoji u suštinski prečišćenom obliku, ili može da postoji u ne-nativnom okruženju kao što je, na primer, ćelija-domaćin.
[0085] U kontekstu predmetnog pronalaska, koriste se sledeće skraćenice za uobičajene baze nukleinske kiseline. "A" se odnosi na adenozin, "C" se odnosi na citozin, "G" se odnosi na guanozin, "T" se odnosi na timidin, i "U" se odnosi na uridin.
[0086] Osim ako nije drugačije naznačeno, "nukleotidna sekvenca koja kodira aminokiselinsku sekvencu" uključuje sve nukleotidne sekvence koje su degenerisane verzije jedne drugih i koje kodiraju istu aminokiselinsku sekvencu. izraz nukleotidna sekvenca koja kodira protein ili RNK može takođe da uključuje introne do stepena u kome nukleotidna sekvenca koja kodira protein može u nekoj verziji sa sadrži intron(e).
[0087] "Lentivirus", kako se ovde koristi, odnosi se na rod familije Retroviridae. Lentivirusi su jedinstveni među retrovirusima po tome što mogu da inficiraju ćelije koje se ne dele; oni mogu da dostave značajnu količinu genetske informacije u DNK ćelije-domaćina, tako da oni predstavljaju jedan od najefikasnijih vektora za dostavu gena. HIV, SIV, i FIV su sve primeri lentivirusa. Vektori izvedeni iz lentivirusa obezbeđuju način za postizanje značajnih nivoa transfera gena in vivo.
[0088] Pod terminom "modulacija", kako se ovde koristi, misli se na posredovanje u detektabilnom povećanju ili smanjenju nivoa odgovora kod subjekta, u poređenju sa nivoom odgovora kod subjekta u odsustvu lečenja ili jedinjenja, i/ili u poređenju sa nivoom odgovora kod inače identičnog, ali nelečenog subjekta. Termin obuhvata ometanje i/ili uticanje na nativni signal ili odgovor, posredujući tako u pozitivnom terapijskom odgovoru kod subjekta, poželjno, čoveka.
[0089] Osim ako nije drugačije naznačeno, "nukleotidna sekvenca koja kodira aminokiselinsku sekvencu" uključuje sve nukleotidne sekvence koje su degenerisane verzije jedna druge i koje kodiraju istu aminokiselinsku sekvencu. Nukleotidne sekvence koje kodiraju proteine i RNK mogu da uključuju introne.
[0090] Termin "operativno vezano" odnosi se na funkcionalnu vezu između regulatorne sekvence i heterologne sekvence nukleinske kiseline koja rezultuje u ekspresiji ove druge. Na primer, prva sekvenca nukleinske kiseline je operativno vezana za drugu sekvencu nukleinske kiseline kada je prva sekvenca nukleinske kiseline pozicionirana u funkcionalnom odnosu prema drugoj sekvenci nukleinske kiseline. Na primer, promotor je operativno vezan za kodirajuću sekvencu ako promotor deluje na transkripciju ili ekspresiju kodirajuće sekvence. Uopšteno, operativno vezane DNK sekvence su susedne i, tamo gde je neophodno da se spoje dva regiona koja kodiraju protein, u istom okviru čitanja.
[0091] Izraz "prekomerno eksprimiran" tumor antigen ili "prekomerna ekspresija" tumor antigena je namenjen da označi abnormalni nivo ekspresije tumor antigena u ćeliji iz oblasti zahvaćene bolešću kao što je solidni tumor u specifičnom tkivu ili organu pacijenta, u odnosu na nivo ekspresije u normalnoj ćeliji iz tog tkiva ili organa. Pacijenti koji imaju solidne tumore ili hematološki malignitet koji karakteriše prekomerna ekspresija tumor antigena mogu da se odrede standardnim ispitivanjima poznatim u stanju tehnike.
[0092] "Parenteralna" primena imunogene kompozicije uključuje, npr., subkutanu (s.c.), intravensku (i.v.), intramuskularnu (i.m.), ili intrasternalnu injekciju, ili tehnike infuzije.
[0093] Termini "pacijent," "subjekat," "pojedinac", i slično, ovde se koriste međusobno zamenljivo, i odnose se na bilo koju životinju, ili njihove ćelije bilo in vitro ili in situ, dostupne za ovde opisane postupke. U određenim neograničavajućim primerima izvođenja, pacijent, subjekat ili pojedinac je čovek.
[0094] Termin "polinukleotid", kako se ovde koristi, definiše se kao lanac nukleotida. Osim toga, nukleinske kiseline su polimeri nukleotida. Tako, nukleinske kiseline i polinukleotid, kako se ovde koristi, su međusobno zamenljivi termini. Stručnjak u oblasti zna da su nukleinske kiseline polinukleotidi, koji mogu da hidrolizuju na monomerne "nukleotide." Monomerni nukleotidi mogu da hidrolizuju na nukleozide. Kako se ovde koristi, polinukleotidi uključuju, ali nisu ograničeni na sve sekvence nukleinskih kiselina koje se dobijaju na bilo koji način dostupan u stanju tehnike, uključujući, bez ograničenja,
2
rekombinantne načine, tj., kloniranje sekvence nukleinskih kiselina iz rekombinantne biblioteke ili ćelijskog genoma, upotrebom uobičajenih tehnologija kloniranja i PCR™, i slično, i postupcima sinteze.
[0095] Kako se ovde koristi, termini "peptid," "polipeptid" i "protein" su međusobno zamenljivi, i odnose se na jedinjenje sačinjeno od aminokiselinskih ostataka kovalentno vezanih peptidnim vezama. Protein ili peptid mora da sadrži najmanje dve aminokiseline, i maksimalan broj aminokiselina koji može da sadrži proteinska ili peptidna sekvenca nije ograničen. Polipeptidi uključuju bilo koji peptid ili protein koji sadrži dve ili više aminokiselina koje su jedna sa drugom spojene peptidnim vezama. Kako se ovde koristi, termin se odnosi i na kratke lance, koji se takođe često nazivaju u stanju tehnike peptidima, oligopeptidima i oligomerima, na primer, i na duže lance, koji se uopšteno nazivaju u stanju tehnike proteinima, kojih ima mnogo vrsta. "Polipeptidi" uključuju, na primer, biološki aktivne fragmente, suštinski homologne polipeptide, oligopeptide, homodimere, heterodimere, varijante polipeptida, modifikovane polipeptide, derivate, analoge, fuzione proteine, između ostalih. Polipeptidi uključuju prirodne peptide, rekombinantne peptide, sintetske peptide, ili njihovu kombinaciju.
[0096] Termin "promotor", kako se ovde koristi, definiše se kao DNK sekvenca koju prepoznaju komponente sintetskog aparata ćelije, ili komponente uvedenog sintetskog aparata, potrebna za započinjanje specifične transkripcije polinukleotidne sekvence.
[0097] Kako se ovde koristi, termin "promotor/regulatorna sekvenca" označava sekvencu nukleinske kiseline koja je potrebna za ekspresiju genskog proizvoda koji je operativno vezan za promotorsku/regulatornu sekvencu. U nekim slučajevima, ova sekvenca može da bude osnovna promotorska sekvenca, a u drugim slučajevima, ova sekvenca može takođe da uključuje sekvencu za pojačavanje i druge regulatorne elemente koji su potrebni za ekspresiju genskog proizvoda. Promotor/regulatorna sekvenca može, na primer, da bude ona koja eksprimira genski proizvod na tkivno specifičan način.
[0098] "Konstitutivni" promotor je nukleotidna sekvenca koja, kada je operativno vezana za polinukleotid koji kodira ili određuje genski proizvod, izaziva proizvodnju genskog proizvoda u ćeliji u većini ili svim fiziološkim stanjima ćelije.
[0099] "Inducibilan" promotor je nukleotidna sekvenca koja, kada je operativno vezana za polinukleotid koji kodira ili određuje genski proizvod, izaziva proizvodnju genskog proizvoda u ćeliji suštinski samo kada je induktor koji odgovara promotoru prisutan u ćeliji.
[0100] "Tkivno-specifični" promotor je nukleotidna sekvenca koja, kada je operativno vezana za polinukleotid koji kodira ili određuje genski proizvod, izaziva proizvodnju genskog proizvoda u ćeliji suštinski samo ako ćelija pripada onom tipu tkiva koji je odgovarajući za promotor.
[0101] Pod terminom "specifično vezuje", kako se ovde koristi, kada se govori o antitelu, misli se na antitelo koje prepoznaje specifični antigen, ali suštinski ne prepoznaje niti se vezuje za druge molekule u uzorku. Na primer, antitelo koje se specifično vezuje za antigen jedne vrste može takođe da se veže za antigen jedne ili više vrsta. Ali, takva ukrštena reaktivnost između vrsta sama po sebi ne menja klasifikaciju antitela kao specifičnog. U drugom primeru, antitelo koje se specifično vezuje za antigen može takođe da se veže za različite alelne oblike antigena. Međutim, takva ukrštena reaktivnost sama po sebi ne menja klasifikaciju antitela kao specifičnog. U nekim slučajevima, termini "specifično vezivanje" ili "specifično vezuje", mogu da se koriste u odnosu na interakciju antitela, proteina, ili peptida sa drugim hemijskim vrstama, kako bi se naznačilo da je interakcija zavisna od prisustva određene strukture (npr., antigene determinante ili epitopa) na hemijskoj vrsti; na primer, antitelo prepoznaje i vezuje se za specifičnu proteinsku strukturu pre nego za proteine uopšteno. Ako je antitelo specifično za epitop "A", prisustvo molekula koji sadrži epitop A (ili slobodni, neobeleženi A), u reakciji koja sadrži obeleženi "A" i antitelo, smanjiće količinu obeleženog A vezanog za antitelo.
[0102] Pod terminom "stimulacija," misli se na primarni odgovor indukovan vezivanjem stimulatornog molekula (npr., kompleksa TCR/CD3) sa njemu srodnim ligandom, koji tako posreduje u događaju prenosa signala, kao što je, ali bez ograničenja, prenos signala preko TCR/CD3 kompleksa. Stimulacija može da posreduje u izmenjenoj ekspresiji određenih molekula, kao što je nishodna regulacija TGF-β, i/ili reorganizaciji citoskeletnih struktura, i slično.
[0103] "Stimulatorni molekul," kako se termin ovde koristi, označava molekul na T ćeliji koji se specifično vezuje sa srodnim stimulatornim ligandom prisutnim na antigen prezentujućoj ćeliji.
[0104] "Stimulatorni ligand," kako se ovde koristi, označava ligand koji, kada je prisutan na antigen prezentujućoj ćeliji (npr., aAPC, dendritska ćelija, B-ćelija, i slično), može specifično da se veže sa srodnim partnerom u vezivanju (ovde označenim kao "stimulatorni molekul") na T ćeliji, posredujući tako u primarnom odgovoru T ćelije, uključujući, ali bez ograničenja, aktivaciju, započinjanje imunskog odgovora, proliferaciju, i slično. Stimulatorni ligandi su dobro poznati u stanju tehnike i obuhvataju, između ostalog, MHC molekul klase I opterećen peptidom, anti-CD3 antitelo, superagonist anti-CD28 antitela, i superagonist anti-CD2 antitela.
2
[0105] Termin "subjekat" je namenjen da uključuje žive organizme kod kojih može da se izazove imunski odgovor (npr., sisare). Primeri subjekata uključuju ljude, pse, mačke, miševe, pacove, i njihove transgene vrste.
[0106] Kako se ovde koristi, "suštinski prečišćena" ćelija je ćelija koja je suštinski oslobođena drugih vrsta ćelija. Suštinski prečišćena ćelija se takođe odnosi na ćeliju koja je bila odvojena od drugih vrsta ćelija sa kojima je normalno povezana u svom normalnom stanju. U nekim slučajevima, populacija suštinski prečišćenih ćelija se odnosi na homogenu populaciju ćelija. U drugim slučajevima, ovaj termin se jednostavno odnosi na ćeliju koja je odvojena od ćelija sa kojima je normalno povezana u svom prirodnom stanju. U nekim primerima izvođenja, ćelije se gaje in vitro. U drugim primerima izvođenja, ćelije se ne gaje in vitro.
[0107] Termin "terapeutski" kako se ovde koristi, označava lečenje i/ili profilaksu. Terapeutsko dejstvo se dobija supresijom, remisijom, ili iskorenjavanjem stanja bolesti.
[0108] Termin "terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu predmetnog jedinjenja koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema, ili subjekta koji je primetio istraživač, veterinar, lekar ili drugi kliničar. Termin "terapeutski efikasna količina" uključuje količinu jedinjenja koja je, kada se primeni, dovoljna da spreči razvoj, ili olakša do određenog stepena, jedan ili više znakova ili simptoma poremećaja ili bolesti koja se leči. terapeutski efikasna količina će varirati u zavisnosti od jedinjenja, bolesti i njene ozbiljnosti, i starosti, težine, itd., subjekta koji treba da se leči.
[0109] "Lečiti" bolest kako se termin ovde koristi, znači smanjiti učestalost ili ozbiljnost najmanje jednog znaka ili simptoma bolesti ili poremećaja koje subjekat doživljava.
[0110] Termin "transfekovana" ili "transformisana" ili "transdukovana", kako se ovde koristi odnosi se na postupak kojim se egzogena nukleinska kiselina prenosi ili uvodi u ćeliju domaćina. "Transfekovana" ili "transformisana" ili "transdukovana" ćelija je ćelija koja je transfekovana, transformisana ili transdukovana egzogenom nukleinskom kiselinom. Ćelija uključuje primarnu predmetnu ćeliju i njeno potomstvo.
[0111] Izraz "pod transkripcionom kontrolom" ili "operativno vezan", kako se ovde koristi, znači da se promotor nalazi u odgovarajućem položaju i orijentaciji u odnosu na polinukleotid da bi kontrolisao započinjanje transkripcije RNK polimerazom i ekspresiju polinukleotida.
[0112] "Vektor" je kompozicija od interesa koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu i koja može da se koristi za dostavljanje izolovane nukleinske kiseline u unutrašnjost ćelije. Brojni vektori su poznati u stanju tehnike uključujući, ali bez ograničenja, linearne polinukleotide, polinukleotide udružene sa jonskim ili amfifilnim jedinjenjim, plazmide i viruse. Prema tome, termin "vektor" uključuje plazmid koji se samostalno replikuje ili virus. Termin treba takođe
2
razumeti tako da uključuje jedinjenja koja nisu plazmid ili virus, koja olakšavaju prebacivanje nukleinske kiseline u ćelije, kao što su, na primer, polilizinska jedinjenja, lipozomi, i slično. Primeri viralnih vektora uključuju, ali nisu ograničeni na adenovirusne vektore, vektore koji potiču od virusa povezanih sa adenovirusima, retrovirusne vektore, i slično.
[0113] Opsezi: u ovom pronalasku, različiti aspekti pronalaska mogu da budu predstavljeni u formatu opsega. Treba razumeti da je opis u formatu opsega dat samo u cilju pogodnosti i sažetosti i ne treba ga tumačiti kao nefleksibilno ograničenje oblasti pronalaska. Prema tome, treba razumeti da opis opsega obuhvata specifično opisane sve moguće pod-opsege kao i pojedinačne brojčane vrednosti u tom opsegu. Na primer, opis opsega kao što je od 1 do 6, treba razumeti tako da obuhvata specifično opisane pod-opsege kao što je od 1 do 3, od 1 do 4, od 1 do 5, od 2 do 4, od 2 do 6, od 3 do 6 itd., kao i pojedinačne brojeve u tom opsegu, na primer, 1, 2, 2.7, 3, 4, 5, 5.3, i 6. Ovo važi bez obzira na širinu opsega.
Opis
[0114] Predmetni pronalazak obezbeđuje kompozicije za lečenje kancera. Kancer može da bude hematološki malignitet, solidni tumor, primarni ili metastazirajući tumor. Poželjno, kancer je hematološki malignitet, i poželjnije, kancer je hronična limfocitna leukemija (CLL).
[0115] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje T ćeliju modifikovanu tako da eksprimira CAR gde CAR T ćelija ispoljava antitumorsko svojstvo kao što je ovde definisano. CAR može da bude konstruisan tako da sadrži vanćelijski domen koji ima CD 19 antigenvezujući domen spojen sa CD3 zeta unutarćelijskim signalnim domenom zeta lanca kompleksa T ćelijskog antigenog receptora. Kada je eksprimiran u T ćeliji, CAR može da preusmeri prepoznavanje antigena zasnovano na antigen-vezujućoj specifičnosti. CD19 se eksprimira na malignim B ćelijama. Antigen-vezujući fragment je spojen sa unutarćelijskim domenom iz kostimulatornog molekula i zeta lancem koji predstavljaju CD137 (4-1BB) signalni domen i CD3zeta signalni domen.
[0116] Kao što je ovde opisano, CAR sadrži CD137 (4-1BB) signalni domen. Ovo je zbog toga što se predmetni pronalazak delimično zasniva na otkriću da T-ćelijski odgovori u kojima posreduje CAR mogu dodatno da se pojačaju dodavanjem kostimulatornih domena. Na primer, uključivanje CD137 (4-1BB) signalnog domena je značajno povećalo antitumorsku aktivnost i opstajanje CAR T ćelija in vivo u poređenju sa inače identičnom CAR T ćelijom koja nije konstruisana tako da eksprimira CD137 (4-1BB).
Kompozicija
2
[0117] Predmetni pronalazak obezbeđuje upotrebe T ćelija koje su genetski modifikovane tako da eksprimiraju himerni receptor za antigen (CAR) koji sadrži vanćelijski i unutarćelijski domen kao što je ovde definisano. Vanćelijski domen sadrži vezujući element specifičan za ciljni molekul drugačije nazvan antigen-vezujući fragment. Unutarćelijski domen, ili drugačije citoplazmatski domen, sadrži kostimulatorni signalni region i deo zeta lanca. Kostimulatorni signalni region se odnosi na deo CAR koji sadrži unutarćelijski domen kostimulatornog molekula. Kostimulatorni molekuli su molekuli površine ćelije koji nisu antigeni receptori ili njihovi ligandi, koji su potrebni za efikasan odgovor limfocita na antigen.
[0118] Između vanćelijskog domena i transmembranskog domena CAR, ili između citoplazmatskog domena i transmembranskog domena CAR, može da bude umetnut spejser domen. Kako se ovde koristi, termin "spejser domen" uopšteno označava bilo koji oligo- ili polipeptid čija je uloga da poveže transmembranski domen ili sa vanćelijskim domenom, ili sa citoplazmatskim domenomom u polipeptidnom lancu. Spejser domen može da sadrži do 300 aminokiselina, poželjno 10 do 100 aminokiselina i najpoželjnije 25 do 50 aminokiselina.
Antigen-vezujući fragment
[0119] CAR koji je ovde opisan sadrži vezujući element specifičan za ciljni molekul drugačije nazvan antigen-vezujući fragment.
[0120] U kontekstu predmetnog pronalaska, "tumorski antigen" ili "antigen hiperporoliferativnog poremećaja" ili "antigen povezan sa hiperporoliferativnim poremećajem", odnosi se na antigene koji su zajednički za specifične hiperporoliferativne poremećaje kao što je kancer. Antigeni koji su ovde razmatrani su uključeni samo u smislu primera. Spisak nije predviđen da bude isključiv i dodatni primeri će biti očigledni stručnjaku u oblasti.
[0121] Tumorski antigeni su proteini koje proizvode tumorske ćelije, koji izazivaju imunski odgovor, naročito imunske odgovore posredovane T-ćelijama. Tumorski antigeni su dobro poznati u stanju tehnike i uključuju, na primer, antigen povezan sa gliomom, karcinoembrionski antigen (CEA), β-humani horionski gonadotropin, alfafetoprotein (AFP), lectinreaktivni AFP, tiroglobulin, RAGE-1, MN-CA IX, humanu telomerazu reverznu transkriptazu, RU1, RU2 (AS), intestinalnu karboksil esterazu, mut hsp70-2, M-CSF, prostazu, antigen specifičan za prostatu (PSA), PAP, NY-ESO-1, LAGE-1a, p53, prostein, PSMA, Her2/neu, survivin i telomerazu, tumorski antigen-1 karcinoma prostate (PCTA-1), MAGE, ELF2M, neutrofilnu elastazu, efrinB2, CD22, insulinski faktor rasta (IGF)-I, IGF-II, IGF-I receptor i mezotelin.
2
[0122] Maligni tumori eksprimiraju brojne proteine koji mogu da budu ciljni antigeni za napad imunog sistema. Ovi molekuli uključuju, ali nisu ograničeni na tkivno-specifične antigene kao što je MART-1, tirozinaza i GP 100 kod melanoma, i kisela fosfataza prostate (PAP) i antigen specifičan za prostatu (PSA) kod kancera prostate. Drugi ciljni molekuli pripadaju grupi molekula povezanih sa transformacijom kao što je onkogen HER-2/Neu/ErbB-2. Još jedna grupa ciljnih antigena su onko-fetalni antigeni kao što je karcinoembrionski antigen (CEA). U limfomu B-ćelija tumor-specifični idiotipski imunoglobulin sačinjava istinski tumor-specifični imunoglobulinski antigen koji je jedinstven za pojedinačni tumor. Antigeni B-ćelijske diferencijacije kao što su CD19, CD20 i CD37 su drugi kandidati za ciljne antigene u B-ćelijskom limfomu. Neki od ovuh antigena (CEA, HER-2, CD19, CD20, idiotip) su korišćeni kao ciljni molekuli za pasivnu imunoterapiju monoklonskim antitelima sa ograničenim uspehom.
[0123] Vrsta tumorskog antigena o kojoj se govori u opisu može takođe da bude tumorspecifični antigen (TSA) ili antigen povezan sa tumorom (TAA). TSA je jedinstven za tumorske ćelije i ne javlja se u drugim ćelijama u telu. Antigen povezan sa tumorom nije jedinstven za tumorsku ćeliju i umesto toga se eksprimira i na normalnoj ćeliji pod uslovima koji ne indukuju stanje imunološke tolerancije na antigen. Ekspresija antigena na tumoru može da se dogodi pod uslovima koji omogućavaju imunom sistemu da odgovori na antigen. Antigeni TAA mogu da budu antigeni koji se eksprimiraju na normalnim ćelijama tokom fetalnog razvoja kada je imuni sistem nezreo i nesposoban da odgovori, ili mogu da budu antigeni koji su normalno prisutni na izuzetno niskim nivoima na normalnim ćelijama, ali koji se eksprimiraju na mnogo višim nivoima na tumorskim ćelijama.
[0124] Neograničavajući primeri TSA ili TAA antigena uključuju sledeće: diferencijacione antigene kao što su: MART- 1/MelanA (MART-1), gp100 (Pmel 17), tirozinaza, TRP-1, TRP-2 i tumor-specifične multilinijske antigene kao što su MAGE-1, MAGE-3, BAGE, GAGE-1, GAGE-2, p15; prekomerno eksprimirane embrionske antigene kao što su CEA; prekomerno eksprimirane onkogene i mutirane tumor-supresorske gene kao što su p53, Ras, HER-2/neu; jedinstvene tumorske antigene koji rezultuju iz hromozomskih translokacija; kao što su BCR-ABL, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR; i viralne antigene, kao što su antigeni Epštajn-Bar virusa EBVA i antigeni E6 i E7 humanog papilomavirusa (HPV). Drugi veliki antigeni na bazi proteina uključuju TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, RAGE, NY-ESO, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, nm- 23H1, PSA, TAG-72, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, beta-katenin, CDK4, Mum-1, p 15, p 16, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, alfa-fetoprotein, beta-HCG, BCA225, BTAA, CA 125, CA 15-3\CA 27.29\BCAA, CA 195,
2
CA 242, CA-50, CAM43, CD68\P1, CO-029, FGF-5, G250, Ga733\EpCAM, HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB/70K, NYCO-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90\Mac-2-vezujući protein\ciklofilin C-povezani protein, TAAL6, TAG72, TLP, i TPS.
[0125] Kao što je ovde opisano, drugi antigeni uključuju CD20, CD22, ROR1, Mezotelin, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, Glikolipid F77, EGFRvIII, GD-2, MY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, i slično.
[0126] Kao što je ovde opisano, deo CAR prema pronalasku koji čini antigen-vezujući fragment ciljno deluje na CD19. Poželjno, deo CAR prema pronalasku koji čini antigenvezujući fragment je anti-CD19 scFv, gde sekvenca nukleinske kiseline anti-CD19 scFv sadrži sekvencu naznačenu u SEQ ID: 14. Alternativno, anti-CD19 scFv sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 20. U drugom primeru izvođenja, anti-CD19 scFv deo CAR prema pronalasku sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO: 20.
Transmembranski domen
[0127] U odnosu na transmembranski domen, CAR može da bude dizajniran tako da sadrži transmembranski domen koji je spojen sa vanćelijskim domenom CAR. U jednom primeru izvođenja, koristi se transmembranski domen koji je prirodno pvezan sa jednim od domena CAR. U nekim slučajevima, transmembranski domen može da bude odabran ili modifikovan aminokiselinskom supstitucijom da bi se izbeglo vezivanje takvih domena za transmembranske domene istih ili različitih površinskih membranskih proteina, da bi se smanjile interakcije sa drugim članovima receptorskog kompleksa.
[0128] Transmembranski domen može da bude dobijen ili iz prirodnog, ili iz sintetskog izvora. Kada je izvor prirodan, domen može da se dobije od bilo kog proteina vezanog za membranu ili transmembranskog proteina. Transmembranski regioni koji su naročito korisni u ovom pronalasku mogu da budu dobijeni od (tj. da sadrže najmanje transmembranski region(e)) alfa, beta ili zeta lanca T-ćelijskog receptora, CD28, CD3 epsilon, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154. Alternativno transmembranski domen može da bude sintetski, u kom slučaju će pretežno da sadrži hidrofobne rezidue kao što su leucin i valin. Poželjno će se na svakom kraju sintetskog transmembranskog domena naći triplet fenilalanina, triptofana i valina. Izborno, kratki oligoili polipeptidni linker, poželjno dužine između 2 i 10 aminokiselina može da obrazuje sponu između transmembranskog domena i citoplazmatskog signalnog domena CAR. Dublet glicinserin obezbeđuje naročito pogodan linker.
[0129] Poželjno, transmembranski domen u CAR prema pronalasku je CD8 transmembranski domen. U jednom primeru izvođenja, CD8 transmembranski domen sadrži sekvencu nukleinske kiseline označenu kao SEQ ID NO: 16. U jednom primeru izvođenja, CD8 transmembranski domen sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 22, U drugom primeru izvođenja, CD8 transmembranski domen sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 22.
[0130] U nekim slučajevima, transmembranski domen CAR prema pronalasku sadrži domen zgloba CD8α. U jednom primeru izvođenja, domen zgloba CD8α sadrži sekvencu nukleinske kiseline označenu kao SEQ ID NO: 15. U jednom primeru izvođenja, domen zgloba CD8α sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 21. U drugom primeru izvođenja, domen zgloba CD8α sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 21.
Citoplazmatski domen
[0131] Citoplazmatski domen ili drugačije unutarćelijski signalni domen CAR prema pronalasku je odgovoran za aktivaciju najmanje jedne od normalnih efektorskih funkcija imunske ćelije u koju je ubačen CAR. Termin "efektorska funkcija" se odnosi na specijalizovanu funkciju ćelije. Efektorska funkcija T ćelija, na primer, može da bude citolitička aktivnost ili aktivnost ćelije-pomoćnika uključujući sekreciju citokina. Prema tome, termin "unutarćelijski signalni domen" se odnosi na deo proteina koji prenosi signal za efektorsku funkciju i usmerava ćeliju da ostvari specijalizovanu funkciju. Dok obično ceo unutarćelijski signalni domen može da bude uključen, u mnogim slučajevima nije neophodno koristiti ceo lanac. Do stepena u kome se koristi skraćeni deo unutarćelijskog signalnog domena, takav skraćeni deo može da se koristi umesto intaktnog lanca sve dok prenosi signal za efektorsku funkciju. Termin unutarćelijski signalni domen je prema tome predviđen da uključuje bilo koji skraćeni deo unutarćelijskog signalnog domena dovoljan da prenese signal za efektorsku funkciju.
[0132] Unutarćelijski signalni domeni za upotrebu u CAR pronalaska uključuju citoplazmatske sekvence T-ćelijskog receptora (TCR) i koreceptore koji deluju u saglasnosti da pokrenu prenos signala nakon angažovanja receptora za antigen, kao i bilo koji derivat ili varijantu ovih sekvenci i bilo koju sintetsku sekvencu koja ima istu funkcionalnu sposobnost kao što je ovde definisano.
[0133] Poznato je da signali koje stvaraju sami TCR nisu dovoljni za potpunu aktivaciju T ćelije i da je sekundarni ili kostimulatorni signal takođe potreban. Prema tome, za aktivaciju T
1
ćelije se može reći da je posredovana sa dve odvojene klase citoplazmatskih signalnih sekvenci: onih koje pokreću antigen-zavisnu primarnu aktivaciju preko TCR (primarne citoplazmatske signalne sekvence) i onih koje deluju na način nezavisan od antigena da bi obezbedile sekundarni ili kostimulatorni signal (sekundarne citoplazmatske signalne sekvence).
[0134] Primarne citoplazmatske signalne sekvence regulišu primarnu aktivaciju TCR kompleksa ili stimulatornim putem, ili inhibitornim putem. Primarne citoplazmatske signalne sekvence koje deluju na stimulatorni način mogu da sadrže signalne motive poznate kao imunoreceptorski aktivacioni motivi bazirani na tirozinu ili ITAM.
[0135] Primeri ITAM koji sadrže primarne citoplazmatske signalne sekvence koji su naročito korisni uključuju one izvedene iz TCR zeta, FcR gama, FcR beta, CD3 gama, CD3 delta, CD3 epsilon, CD5, CD22, CD79a, CD79b, i CD66d. Prema pronalasku, citoplazmatski signalni molekul u CAR pronalaska sadrži citoplazmatsku signalnu sekvencu izvedenu iz CD3 zeta.
[0136] Citoplazmatski domen CAR sadrži CD3-zeta signalni domen kombinovan sa kostimulatornim signalnim regionom koji se odnosi na deo CAR koji sadrži unutarćelijski domen 4-1BB kostimulatornog molekula. Kostimulatorni molekul je molekul ćelijske površine koji nije receptor za antigen ili njegovi ligandi koji je potreban za efikasan odgovor limfocita na antigen. Primeri drugih takvih molekula uključuju CD27, CD28, (CD137), OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, antigen 1 povezan sa limfocitnom funkcijom (LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, i ligand koji se specifično vezuje za CD83, i slično.
[0137] Citoplazmatske signalne sekvence u citoplazmatskom signalnom delu CAR prema pronalasku mogu da budu vezane jedna sa drugom slučajnim ili specifičnim redom. Izborno, kratki oligo- ili polipeptidni linker, poželjno dužine između 2 i 10 aminokiselina može da obrazuje sponu. Dublet glicin-serin obezbeđuje naročito pogodan linker.
[0138] Citoplazmatski domen je dizajniran tako da sadrži signalni domen CD3-zeta i signalni domen 4-1BB.
[0139] U jednom primeru izvođenja, citoplazmatski domen u CAR prema pronalasku je dizajniran tako da sadrži signalni domen 4-1BB i signalni domen CD3-zeta, gde signalni domen 4-1BB sadrži sekvencu nukleinske kiseline naznačenu u SEQ ID NO: 17 i signalni domen CD3-zeta sadrži sekvencu nukleinske kiseline naznačenu u SEQ ID NO: 18.
[0140] U jednom primeru izvođenja, citoplazmatski domen u CAR pronalaska je dizajniran tako da sadrži signalni domen 4-1BB i signalni domen CD3-zeta, gde signalni domen 4-1BB sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 23 i
2
signalni domen CD3-zeta sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0141] U jednom primeru izvođenja, citoplazmatski domen u CAR pronalaska je dizajniran tako da sadrži signalni domen 4-1BB i signalni domen of CD3-zeta, gde signalni domen 4-1BB sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO: 23 i signalni domen CD3-zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO: 24.
Vektori
[0142] Predmetni pronalazak obuhvata DNK konstrukt koji sadrži sekvencu CAR, gde sekvenca sadrži sekvencu nukleinske kiseline antigen-vezujućeg fragmenta operativno vezanu za sekvencu nukleinske kiseline unutarćelijskog domena, tj. unutarćelijske domene CD3-zeta i 4-1BB.
[0143] U jednom primeru izvođenja, CAR pronalaska sadrži anti-CD19 scFv, region zgloba i transmembranski domen humanog CD8, i humane 4-1BB i CD3zeta signalne domene. U jednom primeru izvođenja, CAR pronalaska sadrži sekvencu nukleinske kiseline naznačenu u SEQ ID NO: 8. U drugom primeru izvođenja, CAR pronalaska sadrži sekvencu nukleinske kiseline koja kodira aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 12. U drugom primeru izvođenja, CAR pronalaska sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO: 12.
[0144] Sekvenca nukleinskih kiselina koja kodira željene molekule može da se dobije upotrebom rekombinantnih postupaka poznatih u stanju tehnike, kao što je, na primer skriningom biblioteka iz ćelija koje eksprimiraju gen, dobijanjem gena iz vektora za koji se zna da uključuje taj gen, ili direktno izolovanjem iz ćelija i tkiva koja sadrže taj gen, upotrebom standardnih tehnika. Alternativno, gen od interesa može da se proizvede sintetski, umesto da se klonira.
[0145] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje vektore u koje je umetnuta DNK predmetnog pronalaska. Vektori izvedeni iz retrovirusa kao što je lentivirus su pogodan instrument za postizanje dugoročnog prenosa gena s obzirom da omogućavaju dugotrajnu, stablnu ugradnju transgena i njegovo umnožavanje u ćerkama-ćelijama. Lentiviralni vektori imaju dodatnu prednost nad vektorima izvedenim iz onko-retrovirusa, kao što su mišji virusi leukemije, koja se sastoji u tome što mogu da transdukuju ćelije koje se ne dele, kao što su hepatociti. Takođe imaju dodatnu prednost niske imunogenosti.
[0146] Ukratko, ekspresija prirodne ili sintetske nukleinske kiseline koja kodira receptore CAR se obično postiže operativnim povezivanjem nukleinske kiseline koja kodira polipeptid CAR ili njegov deo za promotor, i ugradnjom konstrukta u ekspresioni vektor. Vektori mogu da budu pogodni za replikaciju i integraciju u eukariote. Tipični vektori za kloniranje sadrže terminatore transkripcije i translacije, inicijacione sekvence, i promotore korisne za regulaciju ekspresije željene sekvence nukleinske kiseline.
[0147] Ekspresioni konstrukti koji su ovde opisani, mogu takođe da se koriste za imunizaciju nukleinskom kiselinom i gensku terapiju, upotrebom standardnih protokola za dostavu gena. Postupci za dostavu gena su poznati u stanju tehnike. Videti, npr., SAD pat. br. 5,399,346, 5,580,859, 5,589,466. U drugom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje vektor za gensku terapiju.
[0148] Nukleinska kiselina može da se klonira u brojne vrste vektora. Na primer, nukleinska kiselina može da se klonira u vektor uključujući, ali bez ograničenja, plazmid, fagemid, derivat faga, životinjski virus, i kozmid. Vektori od posebnog interesa uključuju ekspresione vektore, replikacione vektore, vektore za stvaranje proba, i vektore za sekvenciranje.
[0149] Dalje, ekspresioni vektor može da se obezbedi ćeliji u obliku virusnog vektora. Tehnologija virusnog vektora je dobro poznata u stanju tehnike i opisana je, na primer, kod Sambrook et al. (2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York), i u drugim virusološkim i molekularno-biološkim priručnicima. Virusi, koji su korisni kao vektori uključuju, ali nisu ograničeni na, retroviruse, adenoviruse, viruse povezane sa adenovirusima, herpes viruse, i lentiviruse. Uopšteno, pogodan vektor sadrži oridžin replikacije koji je funkcionalan u najmanje jednom organizmu, promotorsku sekvencu, pogodna mesta za delovanje restrikcione endonukleaze, i jedan ili više selektabilnih markera, (npr., WO 01/96584; WO 01/29058; i SAD pat. br.6,326,193).
[0150] Brojni sistemi bazirani na virusu su razvijeni za prenos gena u sisarske ćelije. Na primer, retrovirusi obezbeđuju pogodnu platformu za sistem za dostavu gena. Odabrani gen može da se umetne u vektor i spakuje u retrovirusne čestice upotrebom postupaka poznatih u stanju tehnike. Rekombinantni virus može zatim da bude izolovan i dostavljen u ćelije subjekta ili in vivo ili ex vivo. Brojni retrovirusni sistemi su poznati u stanju tehnike. Na primer, koriste se adenovirusni vektori. Brojni adenovirusni vektori su poznati u stanju tehnike. U jednom primeru izvođenja, koriste se lentivirusni vektori.
[0151] Dodatni promotorski elementi, npr., pojačivači, regulišu učestalost započinjanja transkripcije. Tipično, oni su smešteni u regionu 30-110 bp ushodno od mesta početka transkripcije, mada se za brojne promotore nedavno pokazalo da takođe sadrže funkcionalne elemente nishodno od mesta početka transkripcije. Rastojanje između promotorskih elemenata često je fleksibilno, tako da je funkcija promotora očuvana kada se elementi obrnu ili promene položaj jedni u odnosu na druge. U promotoru timidin kinaze (tk), rastojanje
4
između promotorskih elemenata može da se poveća do 50 bp razdvojenosti pre nego što aktivnost počne da opada. U zavisnosti od promotora, izgleda da pojedinačni elementi mogu da deluju na aktivaciju transkripcije ili u saradnji, ili nezavisno.
[0152] Jedan primer pogodnog promotora je neposredno-rana promotorska sekvenca citomegalovirusa (CMV). Ova promotorska sekvenca je jaka konstitutivna promotorska sekvenca sposobna da dovede do visokih nivoa ekspresije bilo koje polinukleotidne sekvence koja je za nju operativno vezana. Još jedan primer pogodnog promotora je elongacioni faktor rasta -1α (EF-1α). Međutim, druge konstitutivne promotorske sekvence mogu takođe da se koriste, uključujući, ali bez ograničenja, rani promotor simian virusa 40 (SV40), virusa mišjeg tumora mlečne žlezde (MMTV), promotor dugog terminalnog ponovka (LTR) humanog virusa imunodeficijencije (HIV), MoMuLV promotor, promotor virusa ptičje leukemije, neposredno-rani promotor Epštajn-Bar virusa, promotor Rouz sarkoma virusa, kao i promotori humanih gena kao što su, ali bez ograničenja, aktinski promotor, miozinski promotor, hemoglobinski promotor, i promotor kreatin kinaze. Dalje, pronalazak ne treba da bude ograničen na upotrebu konstitutivnih promotora. Inducibilni promotori su takođe razmatrani kao deo pronalaska. Upotreba inducibilnog promotora obezbeđuje molekularni prekidač sposoban da pokrene ekspresiju polinukleotidne sekvence koja je operativno vezana, kada je takva ekspresija poželjna, ili da prekine ekspresiju kada ekspresija nije poželjna. Primeri inducibilnih promotora uključuju, ali nisu ograničeni na metalotioninski promotor, glukokortikoidni promotor, progesteronski promotor, i tetraciklinski promotor.
[0153] U cilju procene ekspresije CAR polipeptida ili njegovog dela, ekspresioni vektor koji treba da se uvede u ćeliju može takođe da sadrži ili selektabilni marker gen, ili reporter gen, ili oba kako bi se olakšala identifikacija i odabir ćelija koje ih eksprimiraju iz populacije ćelija koje su transfekovane ili inficirane viralnim vektorima. U drugim aspektima, selektabilni marker može da se nalazi na odvojenom delu DNK i koristi u kotransfekcionom postupku. I selektabilni markeri i reporter geni mogu da budu oivičeni pogodnim regulatornim sekvencama da bi se omogućila njihova ekspresija u ćelijama-domaćinima. Korisni selektabilni markeri uključuju, na primer, gene za otpornost na antibiotike, kao što je neo i slično.
[0154] Reporter geni se koriste za identifikaciju potencijalno transfekovanih ćelija i za procenu funkcionalnosti regulatornih sekvenci. Uopšteno, reporter gen je gen koji nije prisutan ili eksprimiran u recipijentnom organizmu ili tkivu, i koji kodira polipeptid čija ekspresija se iskazuje nekim lako detektabilnim svojstvom, npr., enzimskom aktivnošću. Ekspresija reporter gena se ispituje u pogodnom trenutku nakon uvođenja DNK u recipijentne ćelije. Pogodni reporter geni mogu da uključuju gene koji kodiraju luciferazu, betagalaktozidazu, hloramfenikol acetil transferazu, sekretovanu alkalnu fosfatazu, ili gen za zeleni fluorescentni protein (npr., Ui-Tei et al., 2000 FEBS Letters 479: 79-82). Pogodni ekspresioni sistemi su dobro poznati i mogu da se pripreme upotrebom poznatih tehnika ili nabave iz komercijalnih izvora. Uopšteno, konstrukt sa minimalnim 5’ uokvirujućim regionom koji pokazuje najviši nivo ekspresije reporter gena se identifikuje kao promotor. Takvi promotorski regioni mogu da budu vezani za reporter gen i korišćeni za procenu sposobnosti sredstava da moduliraju transkripciju pokrenutu promotorom.
[0155] Postupci za uvođenje i eksprimiranje gena u ćeliji su poznati u stanju tehnike. U kontekstu ekspresionog vektora, vektor može lako da se uvede u ćeliju-domaćina, npr., sisarsku, bakterijsku, ćeliju kvasca, ili insekatsku ćeliju bilo kojim postupkom u stanju tehnike. Na primer, ekspresioni vektor može da se prebaci u ćeliju-domaćina fizičkim, hemijskim, ili biološkim sredstvima.
[0156] Fizički postupci za uvođenje polinukleotida u ćeliju-domaćina uključuju kalcijum fosfatnu precipitaciju, lipofekciju, bombardovanje česticama, mikroinjekciju, elektroporaciju, i slično. Postupci za proizvodnju ćelija koje sadrže vektore i/ili egzogene nukleinske kiseline su dobro poznati u stanju tehnike. Videti, na primer, Sambrook et al. (2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York). Poželjni postupak za uvođenje polinukleotida u ćeliju-domaćina je transfekcija kalcijum fosfatom.
[0157] Biološki postupci za uvođenje polinukleotida od interesa u ćeliju-domaćina uključuju upotrebu DNK i RNK vektora. Viralni vektori, i posebno retroviralni vektori, postali su najšire korišćen postupak za umetanje gena u sisarske, npr., humane ćelije. Drugi virusni vektori mogu da budu izvedeni iz lentivirusa, poksvirusa, herpes simpleks virusa I, adenovirusa i virusa povezanih sa adenovirusima, i slično. Videti, na primer, SAD pat. br.
5,350,674 i 5,585,362.
[0158] Hemijski načini za uvođenje polinukleotida u ćeliju-domaćina uključuju koloidne disperzione sisteme, kao što su makromolekulski kompleksi, nanokapsule, mikrosfere, perle, i sisteme na bazi lipida uključujući emulzije ulje-u-vodi, micele, mešane micele, i lipozome. Primer koloidnih sistema za upotrebu kao vehikuluma za dostavu in vitro i in vivo je lipozom (npr., veštačka membranska vezikula).
[0159] U slučaju kada se koristi sistem za dostavu koji ne potiče od virusa, primer vehikuluma za dostavu je lipozom. Upotreba lipidnih formulacija se razmatra za uvođenje nukleinske kiseline u ćeliju-domaćina (in vitro, ex vivo ili in vivo). U drugom aspektu, nukleinska kiselina može da bude povezana sa lipidom. Nukleinska kiselina povezana sa lipidom može da bude inkapsulirana u vodenoj unutrašnjosti lipozoma, razasuta u lipidnom dvosloju lipozoma, vezana za lipozom preko povezujućeg molekula koji je povezan sa lipozomom i oligonukleotidom, obuhvaćena lipozomom, u kompleksu sa lipozomom, raspršena u rastvoru koji sadrži lipid, pomešana sa lipidom, kombinovana sa lipidom, sadržana kao suspenzija u lipidu, sadržana u ili obrazuje kompleks sa micelom, ili drugačije povezana sa lipidom. Kompozicije udružene sa lipidom, lipidom/DNK ili lipid/ekspresionim vektorom nisu ograničene na bilo koju određenu strukturu u rastvoru. Na primer, mogu da budu prisutne u dvoslojnoj strukturi, kao micele, ili sa "spljoštenom" strukturom. Takođe mogu da budu jednostavno razasute u rastvoru, po mogućstvu obrazujući agregate koji nisu ujednačene veličine ili oblika. Lipidi su masne supstance koje mogu da budu prirodni ili sintetski lipidi. Na primer, lipidi uključuju masne kapljice koje se prirodno javljaju u citoplazmi, kao i klasu jedinjenja koja sadrže alifatične ugljovodonike dugog-lanca i njihove derivate, kao što su masne kiseline, alkoholi, amini, amino alkoholi, i aldehidi.
[0160] Lipidi pogodni za upotrebu mogu da se nabave iz komercijalnih izvora. Na primer, dimiristil fosfatidilholin ("DMPC") može da se nabavi kod Sigma, St. Louis, MO; dicetil fosfat ("DCP") može da se nabavi kod K & K Laboratories (Plainview, NY); holesterol ("Choi") može da se nabavi kod Calbiochem-Behring; dimiristil fosfatidilglicerol ("DMPG") i drugi lipidi mogu da se nabave kod Avanti Polar Lipids, Inc. (Birmingham, AL). Stok rastvri lipida u hloroformu ili smeši hloroform/metanol mogu da se skladište na oko -20°C. Hloroform se koristi kao jedini rastvarač budući da lakše isparava nego metanol. "Lipozom" je generički termin koji obuhvata različite jednostruke i multilamelarne lipidne vehikulume obrazovane stvaranjem zatvorenih lipidnih dvosloja ili agregata. Lipozomi mogu da se karakterišu time što imaju vezikularne strukture sa fosfolipidnom dvoslojnom membranom i unutrašnji vodeni medijum. Multilamelarni lipozomi imaju više lipidnih slojeva odvojenih vodenim medijumom. Oni se obrazuju spontano kada se fosfolipidi suspenduju u višku vodenog rastvora. Lipidne komponente podležu samo-rearanžmanu pre obrazovanja zatvorenih struktura i zarobljavanja vode i rastvorenih supstanci između lipidnih dvosloja (Ghosh et al., 1991 Glycobiology 5: 505-10). Međutim, kompozicije koje imaju drugačije strukture u rastvoru nego što je normalna vezikularna struktura su takođe obuhvaćene. Na primer, lipidi mogu da zadobiju micelarnu strukturu, ili samo da postoje kao neujednačeni agregati lipidnih molekula. Takođe su obuhvaćeni kompleksi lipofektamin-nukleinska kiselina.
[0161] Bez obzira na postupak koji se koristi za uvođenje egzogene nukleinske kiseline u ćeliju-domaćina, ili za drugačije izlaganje ćelije inhibitoru predmetnog pronalaska, u cilju potvrđivanja prisustva rekombinantne DNK sekvence u ćeliji-domaćinu, različita ispitivanja mogu da se sprovedu. Takva ispitivanja uključuju, na primer, "molekularno-biološke" testove dobro poznate stručnjacima u oblasti, kao što su Southern i Northern blotting, RT-PCR i PCR; "biohemijske" testove, kao što je detekcija prisustva ili odsustva određenog peptida, npr., imunološkim sredstvima (ELISAs i Western blots) ili testovima koji su ovde opisani za identifikovanje sredstava koja pripadaju oblasti pronalaska.
Izvori T ćelija
[0162] Pre ekspanzije i genetske modifikacije T ćelija kao što je ovde opisano, izvor T ćelija se dobija iz subjekta. T ćelije mogu da se dobiju iz brojnih izvora, uključujući mononuklearne ćelije periferne krvi, kosnu srž, tkivo limfnog čvora, krv iz pupčane vrpce, tkivo timusa, tkivo sa mesta infekcije, ascite, pleuralni izliv, tkivo slezine, i tumore. Kao što je ovde opisano, bilo koji broj T-ćelijskih linija dostupnih u stanju tehnike, može da se koristi. T ćelije mogu da se dobiju iz jedinice krvi sakupljene od subjekta upotrebom bilo kog broja tehnika poznatih stručnjaku u oblasti, kao što je razdvajane pomoću Ficoll™. Ćelije iz cirkulišuće krvi pojedinca se dobijaju aferezom. Proizvod afereze tipično sadrži limfocite, uključujući T ćelije, monocite, granulocite, B ćelije, druge bele krvne ćelije sa jedrom, crvene krvne ćelije, i trombocite. Ćelije sakupljene aferezom mogu da se operu da bi se uklonila frakcija plazme i ćelije smeste u pogodan pufer ili medijum za korake obrade koji slede. Ćelije se peru fosfatno puferisanim fiziološkim rastvorom (PBS). Alternativno, rastvor za pranje je bez kalcijuma i može da bude bez magnezijuma ili može da bude bez mnogih, ako ne svih divalentnih katjona. Ponovo, iznenađujuće, početni koraci aktivacije u odsustvu kalcijuma vode pojačanoj aktivaciji. Kao što će oni sa uobičajenim znanjem u oblasti lako zaključiti, korak pranja može da se postigne postupcima poznatim stručnjacima u oblasti, kao što je upotrebom poluautomatske "protočne" centrifuge (na primer, Cobe 2991 cell processor, Baxter CytoMate, ili Haemonetics Cell Saver 5) prema uputstvima proizvođača. Nakon pranja, ćelije mogu da se resuspenduju u različitim biokompatibilnim puferima, kao što je, na primer, PBS bez Ca<2+>, PBS bez Mg<2+>, PlasmaLyte A, ili drugi rastvori soli sa ili bez pufera. Alternativno, nepoželjne komponente uzorka afereze mogu da se uklone i ćelije direktno resuspenduju u medijumu za kulturu.
[0163] Kao što je ovde opisano, T ćelije se izoluju iz limfocita periferne krvi liziranjem crvenih krvnih ćelija i smanjenjem broja monocita, na primer, centrifugiranjem kroz gradijent PERCOLL™ ili elutrijacijom centrifugiranjem sa suprotnim protokom. Specifična subpopulacija T ćelija, kao što je CD3<+>, CD28<+>, CD4<+>, CD8<+>, CD45RA<+>, i CD45RO<+>T ćelija, može dalje da se izoluje tehnikama pozitivne ili negativne selekcije. Na primer, T ćelije se izoluju inkubacijom sa anti-CD3/anti-CD28 (tj., 3x28)-konjugovanim perlama, kao što je DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T, tokom vremena dovoljnog za pozitivnu selekciju željenih T ćelija, npr. vremenski period je oko 30 minuta, vremenski period je u opsegu od 30 minuta do 36 sati ili duži uključujući sve vrednosti celih brojeva između, vremenski period je najmanje 1, 2, 3, 4, 5, ili 6 časova, vremenski period je 10 do 24 časova, ili je vremenski period inkubacije 24 časa. Kod izolacije T ćelija pacijenata sa leukemijom, upotreba dužih vremena inkubacije, kao što je 24 časa, može da poveća ćelijski prinos. Duža vremena inkubacije mogu da se koriste za izolovanje T ćelija u bilo kojoj situaciji kada ima malo T ćelija u odnosu na druge vrste ćelija, kao kod izolovanja tumor-infiltrirajućih limfocita (TIL) iz tumorskog tkiva, ili kod imuno-kompromitovanih pojedinaca. Dalje, upotreba dužih vremena incubacije može da poveća efikasnost izdvajanja CD8+ T ćelija. Tako, jednostavnim skraćivanjem ili produžavanjem vremena tokom koga su T ćelije ostavljene da se vežu za CD3/CD28 perle i/ili povećanjm ili smanjenjem odnosa perli prema T ćelijama (kao što je ovde kasnije opisano), subpopulacije T ćelija mogu da se selektuju u pozitivnom ili negativnom smeru na početku gajenja, ili u drugim vremenskim tačkama tokom postupka. Dodatno, povećanjem ili smanjenjem odnosa anti-CD3 i/ili anti-CD28 antitela na perlama ili drugoj površini, subpopulacije T ćelija mogu da se selektuju u pozitivnom ili negativnom smeru na početku gajenja, ili u drugim vremenskim tačkama tokom postupka. Stručnjak u oblasti će prepoznati da mogu da se koriste i ponovljeni ciklusi selekcije. Može da bude poželjno izvođenje postupka selekcije i upotreba "neselektovanih" ćelija u postupku aktivacije i ekspanzije. "Neselektovane" ćelije mogu takođe da se podvrgnu dodatnim ciklusima selekcije.
[0164] Obogaćivanje T-ćelijske populacije negativnom selekcijom može da se postigne kombinacijom antitela usmerenih na površinske markere jedinstvene za negativno odabrane ćelije. Jedan postupak je ćelijsko sortiranje i/ili selekcija putem negativne magnetne imunoadherencije ili protočne citometrije koja koristi koktel monoklonskih antitela usmerenih na markere ćelijske površine prisutne na negativno selektovanim ćelijama. Na primer, za obogaćivanje CD4<+>ćelija negativnom selekcijom, koktel monoklonskih antitela tipično uključuje antitela na CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR, i CD8. Može da bude poželjno obogaćivanje ili pozitivna selekcija regulatornih T ćelija koje tipično eksprimiraju CD4<+>, CD25+ , CD62Lhi , GITR+ , i FoxP3+ . Alternativno, zastupljenost T regulatornih ćelija se smanjuje perlama konjugovanim sa anti-C25 ili drugim sličnim postupkom za selekciju.
[0165] Za izdvajanje željene populacije ćelija pozitivnom ili negativnom selekcijom, koncentracija ćelija i veličina površine (npr., čestica kao što su perle) može da se varira. Može da bude poželjno da se značajno smanji zapremina u kojoj se perle i ćelije mešaju (tj., da se poveća koncentracija ćelija), da bi se osigurao maksimalni kontakt ćelija i perli. Na primer, koristi se koncentracija od 2 milijarde ćelija/ml, koristi se koncentracija od 1 milijardu ćelija /ml, koristi se više od 100 miliona ćelija /ml, koristi se koncentracija ćelija od 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, ili 50 miliona ćelija /ml, koristi se koncentracija ćelija od 75, 80, 85, 90, 95, ili 100 miliona ćelija /ml, ili mogu da se koriste koncentracije od 125 ili 150 miliona ćelija /ml. Upotreba visokih koncentracija može da rezultuje u povećanom ćelijskom prinosu, ćelijskoj aktivaciji, i ćelijskoj ekspanziji. Dalje, upotreba visokih koncentracija ćelija omogućava efikasnije izdvajanje ćelija koje mogu slabo da eksprimiraju ciljne antigene od interesa, kao što su CD28-negativne T ćelije, ili iz uzoraka u kojima je prisutno mnogo tumorskih ćelija (tj., leukemična krv, tumorsko tkivo, itd.). Takve populacije ćelija mogu da imaju terapeutsku vrednost i bilo bi ih poželjno dobiti. Na primer, upotreba visoke koncentracije ćelija omogućava efikasniju selekciju CD8<+>T ćelija koje normalno imaju slabiju ekspresiju CD28.
[0166] Može da bude poželjno korišćenje nižih koncentracija ćelija. Značajnim razblaživanjem smeše T ćelija i veličine površina (npr., čestica kao što su perle), interakcije između čestica i ćelija se umanjuju. Ovo selektuje ćelije koje eksprimiraju velike količine željenih antigena za vezivanje za čestice. Na primer, CD4<+>T ćelije ispoljavaju više nivoe CD28 i i efikasnije se izdvajaju nego CD8+ T ćelije u razblaženim koncentracijama, npr. korišćena koncentracija ćelija je 5 X 10<6>/ml, ili korišćena koncentracija ćelija može da bude od oko 1 X 105/ml do 1 X 10<6>/ml, i bilo koji ceo broj između.
[0167] U drugim primerima izvođenja, ćelije mogu da se inkubiraju na rotatoru tokom različitih vremenskih perioda, na različitim brzinama, na 2-10°C ili na sobnoj temperaturi.
[0168] T ćelije za stimulaciju mogu i da se zamrznu posle koraka pranja. Bez pozivanja na teoriju, korak zamrzavanja i odmrzavanja nakon toga obezbeđuje ujednačeniji proizvod uklanjanjem granulocita i u izvesnom stepenu monocita u ćelijskoj populaciji. Nakon koraka pranja koji uklanja plazmu i trombocite, ćelije mogu da se suspenduju u rastvoru za zamrzavanje. Dok su mnogi rastvori za zamrzavanje i parametri poznati u stanju tehnike i biće korisni u ovom kontekstu, jedan postupak uključuje upotrebu PBS koji sadrži 20% DMSO i 8% humanog serum albumina, ili medijuma za kulturu koji sadrži 10% dekstrana 40 i 5% dekstroze, 20% humanog serum albumina i 7.5% DMSO, ili 31.25% PlasmaLyte-A, 31.25% dekstroze 5%, 0.45% NaCl, 10% dekstrana 40 i 5% dekstroze, 20% humanog serum albumina, i 7.5% DMSO ili drugog pogodnog medijuma za zamrzavanje ćelija koji sadrži na
4
primer, Hespan i PlasmaLyte A, ćelije se zatim zamrzavaju do -80°C brzinom od 1° po minutu i skladište u fazi pare tanka za skladištenje sa tečnim azotom. Drugi postupci kontrolisanog zamrzavanja mogu da se koriste kao i nekontrolisano zamrzavanje odmah na -20°C ili u tečnom azotu.
[0169] Kriokonzervisane ćelije se odmrzavaju i peru kao što je ovde opisano i ostavljaju da odstoje na sobnoj temperaturi pre aktivacije upotrebom postupaka predmetnog pronalaska. Kao što je ovde opisano, T ćelije mogu da budu umnožene, zamrznute, i kasnije korišćene. Kao što je ovde opisano, uzorci se sakupljaju od pacijenta kratko nakon dijagnoze određene bolesti kao što je ovde opisano, ali pre bilo kakvih lečenja. Ćelije se izoluju iz uzorka krvi ili afereze subjekta pre bilo kakvih relevantnih modaliteta lečenja, uključujući, ali bez ograničenja, lečenje sredstvima kao što je natalizumab, efalizumab, antivirusna sredstva, hemoterapija, zračenje, imunosupresivna sredstva, kao što je ciklosporin, azatioprin, metotreksat, mikofenolat, i FK506, antitela, ili druga imunoablativna sredstva kao što je CAMPATH, anti-CD3 antitela, citoksan, fludarabin, ciklosporin, FK506, rapamicin, mikofenolna kiselina, steroidi, FR901228, i zračenje. Ovi lekovi inhibiraju ili fosfatazu kalcineurin zavisnu od kalcijuma (ciklosporin i FK506) ili inhibiraju p70S6 kinazu koja je značajna za signalizaciju indukovanu faktorom rasta (rapamicin) (Liu et al., Ćelija 66:807-815, 1991; Henderson et al., Immun. 73:316-321, 1991; Bierer et al., Curr. Opin. Immun.
5:763-773, 1993). Ćelije se izoluju iz pacijenta i zamrzavaju za kasniju upotrebu zajedno sa (npr., pre, istovremeno ili nakon) transplantacijom kosne srži ili stem ćelija, ablativnom terapijom T ćelija upotrebom hemoterapijskih sredstava kao što je fludarabin, radijacione terapije spoljnim zrakom (XRT), ciklofosfamida, ili antitela kao što je OKT3 ili CAMPATH. Kao što je ovde opisano, ćelije se izoluju pre, i mogu da se zamrznu za kasniju upotrebu za lečenje nakon ablativne terapije B-ćelija kao što terapija sredstvima koja reaguju sa CD20, npr., Rituxan.
[0170] Kao što je takođe ovde opisano, T ćelije se dobijaju od pacijenta odmah nakon lečenja. U tom pogledu, primećeno je da nakon određenih lečenja kancera, posebno lečenja lekovima koji oštećuju imunski sistem, kratko nakon lečenja tokom perioda kada bi se pacijenti normalno oporavljali od lečenja, kvalitet dobijenih T ćelija može da bude optimalan ili poboljšan u smislu njihove sposobnosti da se umnožavaju ex vivo. Slično, nakon ex vivo manipulacije upotrebom postupaka koji su ovde opisani, ove ćelije mogu da budu u poželjnom stanju za pojačano usađivanje i in vivo ekspanziju. Tako, u kontekstu predmetnog pronalaska je razmatrano sakupljanje ćelija krvi, uključujući T ćelije, dendritske ćelije, ili druge ćelije hematopoezne linije, tokom faze oporavka. Dalje, mobilizacija (na primer, mobilizacija sa GM-CSF) i kondicioni režimi mogu da se koriste da bi se stvorilo stanje subjekta u kome je repopulacija, recirkulacija, regeneracija, i/ili ekspanzija određenih ćelijskih vrsta favorizovana, posebno tokom definisanog perioda vremena nakon terapije. Ilustrativne ćelijske vrste uključuju T ćelije, B ćelije, dendritske ćelije, i druge ćelije imunskog sistema.
Aktivacija i ekspanzija T ćelija
[0171] Pre ili nakon što se T ćelije genetski modifikuju tako da eksprimiraju željeni CAR, T ćelije mogu da se aktiviraju i umnože uopšteno upotrebom postupaka opisanih, na primer, u SAD patentima 6,352,694; 6,534,055; 6,905,680; 6,692,964; 5,858,358; 6,887,466; 6,905,681; 7,144,575; 7,067,318; 7,172,869; 7,232,566; 7,175,843; 5,883,223; 6,905,874; 6,797,514; 6,867,041; i objavi SAD patentne prijave br..20060121005.
[0172] Uopšteno, ovde opisane T ćelije se umnožavaju dovođenjem u kontakt sa površinom za koju je vezano sredstvo koje stimuliše signal povezan sa kompleksom CD3/TCR i ligand koji stimuliše kostimulatorni molekul na površini T ćelija. Naročito, populacije T ćelija mogu da budu stimulisane kao što je ovde opisano, kao što je dovođenjem u kontakt sa anti-CD3 antitelom, ili njegovim antigen-vezujućim fragmentom, anti-CD2 antitelom imobilisanim na površini, ili dovođenjem u kontakt sa aktivatorom protein kinaze C (npr., briostatinom) zajedno sa kalcijumskim jonoforom. Za kostimulaciju dodatnog molekula na površini T ćelija, koristi se ligand koji se vezuje za dodatni molekul. Na primer, populacija T ćelija može da se dovede u kontakt sa anti-CD3 antitelom i anti-CD28 antitelom, pod odgovarajućim uslovima za stimulaciju proliferacije T ćelija. Da bi se stimulisala proliferacija CD4<+>T ćelija ili CD8+ T ćelija, može da se upotrebi anti- CD3 antitelo i anti-CD28 antitelo. Primeri anti-CD28 antitela koja mogu da se koriste uključuju 9.3, B-T3, XR-CD28 (Diaclone, Besançon, France), kao što mogu da se koriste i drugi postupci uobičajeno poznati u stanju tehnike (Berg et al., Transplant Proc.30(8):3975-3977, 1998; Haanen et al., J. Exp. Med.190(9):13191328, 1999; Garland et al., J. Immunol Meth.227(1-2):53-63, 1999).
[0173] Primarni stimulatorni signal i kostimulatorni signal za T ćeliju može da se obezbedi različitim postupcima. Na primer, sredstvo koje obezbeđuje svaki signal može da bude u rastvoru ili kuplovano sa površinom. Kada su kuplovana sa površinom, sredstva mogu da budu kuplovana sa istom površinom (tj., u "cis" formaciji) ili sa različitim površinama (tj., u "trans" formaciji). Alternativno, jedno sredstvo može da bude kuplovano sa površinom, a drugo sredstvo može da bude u rastvoru. Na primer, sredstvo koje obezbeđuje kostimulatorni signal je vezano za ćelijsku površinu, a sredstvo koje obezbeđuje primarni aktivacioni signal je u rastvoru, ili kuplovano sa površinom, ili oba sredstva mogu da budu u rastvoru. Alternativno, sredstva mogu da budu u rastvornom obliku, i zatim unakrsno vezana za površinu, kao što je ćelija koja eksprimira Fc receptore, ili antitelo, ili drugo vezujuće sredstvo koje će vezati ta sredstva. U tom smislu, videti na primer, objavu SAD patentne prijave br.20040101519 i 20060034810 za veštačke antigen prezentujuće ćelije (aAPCs) koje se razmatraju za upotrebu u aktivaciji i umnožavanju T ćelija.
[0174] Kao što je ovde opisano, dva sredstva se imobilišu na perlama, ili na istim perlama, tj., "cis," ili na odvojenim perlama, tj., "trans." Na primer, sredstvo koje obezbeđuje primarni aktivacioni signal je anti-CD3 antitelo ili njegov antigen-vezujući fragment, a sredstvo koje obezbeđuje kostimulatorni signal je anti-CD28 antitelo ili njegov antigen-vezujući fragment; i oba sredstva su ko-imobilisana na istim perlama u ekvivalentnim molekularnim količinama. Na primer, koristi se odnos od 1:1 svakog antitela vezanog za perle za umnožavanje CD4<+>T ćelija i rast T ćelija. U određenim slučajevima, koristi se odnos antitela CD3:CD28 vezanih za perle pri kome je primetno povećanje ekspanzije T ćelija u poređenju sa ekspanzijom primećenom pri upotrebi odnosa od 1:1. Primećuje se povećanje od oko 1 do oko 3 puta, u poređenju sa ekspanzijom primećenom pri upotrebi odnosa od 1:1. Odnos antitela CD3:CD28 vezanih za perle nalazi se u opsegu 100:1 do 1:100 i obuhvata sve cele brojeve između. U jednom slučaju, više anti-CD28 antitela je vezano za čestice nego anti-CD3 antitela, tj., odnos CD3:CD28 je manji od jedan. U određenim slučajevima, odnos CD28 antitela prema anti CD3 antitelu vezanom za perle je veći od 2:1. Na primer, koristi se odnos od 1:100 antitela CD3:CD28 vezanih za perle, koristi se odnos od 1:75 CD3:CD28 vezanih za perle, koristi se odnos od 1:50 CD3:CD28 vezanih za perle, koristi se odnos od 1:30 CD3:CD28 vezanih za perle, koristi se odnos od 1:10 CD3 :CD28 vezanih za perle, ili se koristi odnos od 1:3 CD3:CD28 vezanih za perle. Alternativno, koristi se odnos od 3:1 CD3:CD28 vezanih za perle.
[0175] Odnosi čestica prema ćelijama od 1:500 do 500:1, uključujući bilo koje cele brojeve između ovih vrednosti, mogu da se koriste za stimulaciju T ćelija ili drugih ciljnih ćelija. Kao što će stručnjaci sa uobičajenim znanjem u oblasti lako shvatiti, odnos čestica prema ćelijama može da zavisi od veličine čestice u odnosu na ciljnu ćeliju. Na primer, male perle moglu da vežu samo nekoliko ćelija, dok veće mogu da vežu mnogo njih. Odnos ćelija prema česticama se nalazi u opsegu 1:100 do 100:1, uključujući bilo koje cele brojeve između ovih vrednosti, i u dodatnim primerima izvođenja odnos koji obuhvata 1:9 do 9:1, uključujući bilo koje cele brojeve između ovih vrednosti, može takođe da se koristi za stimulaciju T ćelija. Odnos čestica kuplovanih sa anti-CD3 i anti-CD28 prema T ćelijama koji rezultuje u stimulaciji T
4
ćelija može da varira kao što je prethodno navedeno, međutim određene poželjne vrednosti uključuju 1:100, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:10, 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, i 15:1, sa jednim poželjnim odnosom koji je najmanje 1:1 čestica po T ćeliji. Alternativno, koristi se odnos čestica prema ćelijama od 1:1 ili manje. Poželjni odnos čestica:ćelija je 1:5. Odnos čestica prema ćelijama može da se varira u zavisnosti od dana stimulacije. Na primer, odnos čestica prema ćelijama je od 1:1 do 10:1 prvog dana, i dodatne čestice se dodaju ćelijama svakog dana ili svakog drugog dana nakon toga, sve do 10 dana, i finalni odnosi iznose od 1:1 do 1:10 (na osnovu broja ćelija na dan dodavanja). Alternativno, odnos čestica prema ćelijama je 1:1 prvog dana stimulacije i podešava se na 1:5 trećeg i petog dana stimulacije. U drugom slučaju, čestice se dodaju na dnevnoj bazi ili svakog drugog dana do finalnog odnosa od 1:1 prvog dana, i 1:5 trećeg i petog dana stimulacije. U drugom slučaju, odnos čestica prema ćelijama je 2:1 prvog dana stimulacije i podešava se na 1:10 trećeg i petog dana stimulacije. U drugom slučaju, čestice se dodaju na dnevnoj bazi ili svakog drugog dana do finalnog odnosa od 1:1 prvog dana, i 1:10 trećeg i petog dana stimulacije. Stručnjak u stanju tehnike će shvatiti da različiti drugi odnosi mogu da budu pogodni za upotrebu u predmetnom pronalasku. Naročito, odnosi će varirati u zavisnosti od veličine čestice i veličine i vrste ćelije.
[0176] Kao što je ovde takođe opisano, ćelije, kao što su T ćelije, kombinuju se sa perlama obloženim sredstvom, perle i ćelije se zatim razdvajaju, i ćelije se zatim gaje. Druga mogućnost je da se perle obložene sredstvom i ćelije ne razdvoje pre kultivacije, već da se gaje zajedno. U sledećem slučaju, perle i ćelije se prvo koncentruju pod dejstvom sile, kao što je magnetna sila, što rezultuje u povećanom ligaciji markera ćelijske površine, čime se indukuje ćelijska stimulacija.
[0177] Na primer, proteini ćelijske površine mogu da se ligiraju omogućavajući paramagnetskim perlama za koje su vezana anti-CD3 i anti-CD28 antitela (3x28 perli) da dođu u kontakt sa T ćelijama. U jednom primeru izvođenja ćelije (na primer, 10<4>do 10<9>T ćelija) i perle (na primer, DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T paramagnetske perle u odnosu 1:1) kombinuju se u puferu, poželjno PBS (bez dvovalentnih katjona kao što su kalcijum i magnezijum). Ponovo, oni sa uobičajenim znanjem u oblasti će lako zaključiti da bilo koja ćelijska koncentracija može da se koristi. Na primer, ciljna ćelija može da bude vrlo retka u uzorku i da sačinjava samo 0.01% uzorka ili ceo uzorak (tj., 100%) može da sadrži ciljnu ćeliju od interesa. Prema tome, bilo koji broj ćelija je obuhvaćen kontekstom predmetnog pronalaska. Može da bude poželjno da se značajno smanji zapremina u kojoj su čestice i ćelije pomešane (tj., da se poveća koncentracija ćelija), da bi se osigurao najveći kontakt između ćelija i čestica. Na primer, koristi se koncentracija od oko 2 milijarde ćelija/ml. U drugom slučaju, koristi se više od 100 miliona ćelija/ml. U sledećem slučaju, koristi se koncentracija ćelija od 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, ili 50 miliona ćelija/ml. U još jednom slučaju, koristi se koncentracija ćelija od 75, 80, 85, 90, 95, ili 100 miliona ćelija/ml. U sledećim slučajevima, mogu da se koriste koncentracije od 125 ili 150 miliona ćelija/ml. Upotreba visokih koncentracija može da rezultuje u povećanim ćelijskom prinosu, ćelijskoj aktivaciji, i ćelijskoj ekspanziji. Dalje, upotreba visokih koncentracija omogućava efikasnije izdvajanje ćelija koje mogu slabo da ispoljavaju antigene od interesa, kao što su CD28-negativne T ćelije. Takve populacije ćelija mogu da imaju terapeutsku vrednost i bilo bi ih poželjno dobiti. Na primer, upotreba visoke koncentracije ćelija omogućava efikasniju selekciju CD8+ T ćelija koje normalno imaju slabiju ekspresiju CD28.
[0178] Smeša može da se gaji nekoliko časova (oko 3 časa) do oko 14 dana ili tokom svake cele vrednosti sata između ovih vrednosti. Smeša može da se gaji 21 dan. U jednom slučaju perle i T ćelije se gaje zajedno oko osam dana. U drugom slučaju, perle i T ćelije se gaje zajedno 2-3 dana. Može takođe da bude poželjno izvođenje nekoliko ciklusa stimulacije tako da vreme gajenja T ćelija može da bude 60 dana ili više. Uslovi pogodni za T-ćelijsku kulturu uključuju pogodan medijum (npr., minimalni esencijalni medijum ili RPMI medijum 1640 ili, X-vivo 15, (Lonza)) koji može da sadrži neophodne faktore za proliferaciju i vijabilnost, uključujući serum (npr., fetalni goveđi ili humani serum), interleukin-2 (IL-2), insulin, IFN-γ, IL-4, IL-7, GM-CSF, IL-10, IL-12, IL-15, TGFβ, i TNF-α ili bilo koje druge dodatke za rast ćelija poznate stručnjaku. Drugi dodaci za rast ćelija uključuju, ali nisu ograničeni na surfaktant, plazmanat i redukujuća sredstva kao što su N-acetil-cistein i 2-merkaptoetanol. Medijum može da uključuje RPMI 1640, AIM-V, DMEM, MEM, α-MEM, F-12, X-Vivo 15, i X-Vivo 20, Optimizer, sa dodatim aminokiselinama, natrijum piruvatom i vitaminima, ili bez seruma ili obogaćen odgovarajućom količinom seruma (ili plazme) ili definisanim setom hormona, i/ili količinom citokina dovoljnom za rast i umnožavanje T ćelija. Antibiotici, npr., penicilin i streptomicin, su uključeni samo u eksperimentalne kulture, ne i u kulture ćelija koje treba da budu primenjene infuzijom kod subjekta. Ciljne ćelije se održavaju pod uslovima neophodnim da podrže rast, na primer, na odgovarajućoj temperaturi (npr., 37°C) i atmosferi (npr., vazduh sa 5% CO2).
[0179] T ćelije koje su bile izložene različitim vremenima stimulacije ispoljavaju različita svojstva. Na primer, proizvodi tipične mononuklearne ćelije periferne krvi dobijene iz krvi ili aferezom, imaju populaciju helper T ćelija (TH, CD4<+>) koja je veća od populacije citotoksičnih ili supresorskih T ćelija (TC, CD8+). Ex vivo ekspanzija T ćelija stimulacijom
4
CD3 i CD28 receptora proizvodi populaciju T ćelija koja se pre oko 8-9. dana sastoji pretežno od THćelija, dok posle 8-9. dana, populacija T ćelija sadrži sve veću populaciju TC ćelija. Prema tome, u zavisnosti od svrhe lečenja, davanje infuzije populacije T ćelija koja sadrži pretežno THćelije subjektu može da bude pogodno. Slično, ako je antigen-specifični podset TCćelija bio izolovan može da bude korisno da se taj podset umnoži u većem stepenu.
[0180] Dalje, pored CD4 i CD8 markera, drugi fenotipski markeri značajno variraju, ali velikim delom ponovljivo, tokom procesa ćelijske ekspanzije. Prema tome, takva ponovljivost omogućava da se proizvod koji predstavljaju aktivirane T ćelije prilagodi specifičnim namenama.
Terapeutska primena
[0181] Ovde je opisana ćelija (npr., T ćelija) transdukovana lentiviralnim vektorom (LV). Na primer, LV kodira CAR koji kombinuje domen za prepoznavanje antigena specifičnog antitela sa unutarćelijskim domenom CD3-zeta i 4-1BB. Zbog toga, u nekim slučajevima, transdukovana T ćelija može da izazove T-ćelijski odgovor posredovan sa CAR.
[0182] Pronalazak obezbeđuje upotrebu CAR, kao što je definisano u patentnim zahtevima, u preusmeravanju specifičnosti primarne T ćelije na tumorski antigen. Tako, ovde je takođe opisan postupak za stimulaciju imunskog odgovora posredovanog T ćelijom na ciljnu populaciju ćelija ili tkivo kod sisara koji obuhvata korak primene kod sisara T ćelije koja eksprimira CAR, gde CAR sadrži vezujući fragment koji specifično interaguje sa unapred određenim ciljem, deo zeta lanca koji sadrži na primer unutarćelijski domen humanog CD3zeta, i kostimulatorni signalni region.
[0183] Ovde je opisana vrsta ćelijske terapije u kojoj su T ćelije genetski modifikovane tako da eksprimiraju CAR i CAR T ćelija se primenjuje infuzijom kod primaoca kome je to potrebno. Ćelija data infuzijom je sposobna da ubije tumorske ćelije kod primaoca. Za razliku od terapija antitelom, ćelije CAR T su sposobne da se umnožavaju in vivo što rezultuje u njihovom dugotrajnom opstanku koje može da vodi neprekidnoj kontroli tumora.
[0184] Ćelije CAR T koje su ovde opisane, mogu da podlegnu snažnoj T ćelijskoj ekspanziji in vivo i mogu da opstanu tokom produženog perioda vremena. U drugom primeru izvođenja, ćelije CAR T koje su ovde opisane, evoluiraju u specifične memorijske T ćelije koje mogu ponovo da se aktiviraju u smislu inhibicije bilo kakvog dodatnog obrazovanja ili rasta tumora. Na primer, bilo je neočekivano da ćelije CAR T koje su ovde opisane mogu da podlegnu snažnoj T ćelijskoj ekspanziji in vivo i mogu da opstanu na visokim nivoima tokom produženog perioda vremena u krvi i kosnoj srži i obrazuju specifične memorijske T ćelije.
4
Bez želje da se vezuje za neku posebnu teoriju, CAR T ćelije mogu da diferenciraju in vivo u stanje slično centralnoj memoriji nakon susreta sa ciljnim ćelijama koje eksprimiraju zamenski antigen i njihove naknadne eliminacije.
[0185] Bez želje da se vezuje za neku posebnu teoriju, anti-tumorski imuni odgovor izazvan T ćelijama koje su modifikovane pomoću CAR može da bude aktivan ili pasivan imunski odgovor. Pored toga, imunski odgovor modifikovan pomoću CAR može da bude deo pristupa adoptivne imunoterapije u kojoj T ćelije modifikovane pomoću CAR indukuju imunski odgovor specifičan za antigen-vezujući fragment u CAR. Na primer, CART19 ćelije pokreću imunski odgovor specifičan za ćelije koje eksprimiraju CD19.
[0186] Dok ovde opisani podaci specifično opisuju lentiviralni vektor koji sadrži anti-CD19 scFv izveden iz mišjeg monoklonalnog antitela FMC63, domen zgloba i transmembranski domen humanog CD8α, i humane signalne domene4-1BB i CD3zeta, pronalazak treba interpretirati tako da uključuje bilo koji broj varijacija za svaku od komponenti konstrukta kako je ovde opisano na drugim mestima.
[0187] Kanceri koji mogu da se leče uključuju tumore koji nisu vaskularizovani, ili još nisu suštinski vaskularizovani, kao i vaskularizovane tumore. Kanceri mogu da sadrže nesolidne tumore (kao što su hematološki tumori, na primer, leukemije i limfomi) ili mogu da sadrže solidne tumore. Vrste kancera koji treba da se leče receptorima CAR prema pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na karcinom, blastom i sarkom, i određene leukemje ili limfoidne malignitete, benigne i maligne tumore, i malignanitete npr., sarkom, karcinom i melanom. Tumori/kanceri odraslih, i pedijatrijski tumori/kanceri su takođe uključeni.
[0188] Hematološki kanceri su kanceri krvi ili kosne srži. Primeri hematoloških (ili hematogenih) kancera uključuju leukemije, uključujući akutne leukemije (kao što je akutna limfocitna leukemija, akutna mijelocitna leukemija, akutna mijelogena leukemija i mijeloblastna, promijelocitna, mijelomonocitna, monocitna i eritroleukemija), hronične leukemije (kao što je hronična mijelocitna (granulocitna) leukemija, hronična mijelogena leukemija i hronična limfocitna leukemija), policitemija vera, limfom, Hodgkinovu bolest, ne-Hodgkinov limfom (indolentni i oblici visokog stepena), multipli mijelom, Waldenstrom-ovu makroglobulinemiju, bolest teškog lanca, mijelodisplastični sindrom, leukemiju vlasastih ćelija i mijelodisplaziju.
[0189] Solidni tumori su abnormalne mase tkiva koje obično ne sadrže ciste ili oblasti sa tečnošću. Solidni tumori mogu da budu benigni ili maligni. Različiti tipovi solidnih tumora se imenuji prema tipu ćelija koje ih obrazuju (kao što su sarkomi, karcinomi i limfomi). Primeri solidnih tumora, kao što su sarkomi i karcinomi, uključuju fibrosarkom, miksosarkom,
4
liposarkom, hondrosarkom, osteosarkom, i druge sarkome, sinoviom, mezoteliom, Ewing-ov tumor, leiomiosarkom, rabdomiosarkom, karcinom debelog creva, limfoidni malignitet, kancer pankreasa, kancer dojke, kancere pluća, kancer jajnika, kancer prostate, hepatocelularni karcinom, karcinom skvamoznih ćelija, karcinom bazalnih ćelija, adenokarcinom, karcinom znojne žlezde, medularni tiroidni karcinom, papilarni tiroidni karcinom, feohromocitom karcinom lojne žlezde, papilarni karcinom, papilarne adenokarcinome, medularni karcinom, bronhogeni karcinom, karcinom renalnih ćelija, hepatom, karcinom žučnog kanala, horiokarcinom, Wilms-ov tumor, kancer grlića materice, tumor testisa, seminom, karcinom mokraćne bešike, melanom, i tumore CNS-a (kao što je gliom (kao što je gliom moždanog stabla i mešoviti gliomi), glioblastom (takođe poznat kao multiformni glioblastom) astrocitom, limfom CNS-a, germinom, meduloblastom, Švanom kraniofaringiom, ependimom, pinealom, hemangioblastom, akustični neurom, oligodendrogliom, menangiom, neuroblastom, retinoblastom i metastaze mozga).
[0190] CAR koji je dizajniran da ciljno deluje na CD 19 može da se koristi za lečenje kancera i poremećaja uključujući, ali bez ograničenja pre-B ALL (pedijatrijska indikacija), adultnu ALL, limfom mantle ćelija, difuzni limfom krupnih B-ćelija, poboljšano preživljavanje nakon alogene transplantacije kosne srži, i slično.
[0191] T ćelije modifikovane pomoću CAR koje su ovde opisane mogu takođe da služe kao vrsta vakcine za ex vivo imunizaciju i/ili in vivo terapiju kod sisara. Poželjno, sisar je čovek.
[0192] Kada je u pitanju ex vivo imunizacija, najmanje jedno od sledećeg se događa in vitro pre primene ćelije kod sisara: i) ekspanzija ćelija, ii) uvođenje nukleinske kiseline koja kodira CAR u ćelije, i/ili iii) kriokonzervacija ćelija.
[0193] Ex vivo postupci su dobro poznati u stanju tehnike i potpunije razmatrani u nastavku teksta. Ukratko, ćelije se izoluju iz sisara (poželjno čoveka) i genetski modifikuju (tj., transdukuju ili transfekuju in vitro) vektorom koje eksprimira ovde opisani CAR. Ćelija modifikovana pomoću CAR može da se primeni kod primaoca koji je sisar da bi obezbedila terapeutski efekat. Primalac koji je sisar može da bude čovek i ćelija modifikovana pomoću CAR može da bude autologna u odnosu na primaoca. Alternativno, ćelije mogu da budu alogene, singene ili ksenogene u odnosu na primaoca.
[0194] Postupak za ex vivo ekspanziju hematopoeznih stem i progenitorskih ćelija opisan u SAD pat. br.5,199,942, može da se primeni na ćelije predmetnog pronalaska. Drugi pogodni postupci su poznati u stanju tehnike, prema tome predmetni pronalazak nije ograničen ni na jedan određeni postupak za ex vivo ekspanziju ćelija. Ukratko, ex vivo gajenje i ekspanzija T ćelija obuhvata: (1) sakupljanje CD34+ hematopoeznih stem i progenitorskih ćelija sisara iz
4
sakupljene periferne krvi ili eksplanata kosne srži; i (2) umnožavanje takvih ćelija ex vivo. Pored faktora rasta ćelija opisanih u SAD pat. br. 5,199,942, drugi faktori kao što su flt3-L, IL-1, IL-3 i c-kit ligand, mogu da se koriste za gajenje i umnožavanje ćelija.
[0195] Pored upotrebe vakcine na bazi ćelija u smislu ex vivo imunizacije, predmetni pronalazak takođe obezbeđuje kompozicije i postupke za in vivo imunizaciju u cilju izazvanja imunskog odgovora usmerenog protiv antigena kod pacijenta.
[0196] Uopšteno, ćelije koje se aktiviraju i umnožavaju kao što je ovde opisano mogu da se koriste u lečenju i prevenciji bolesti koje nastaju kod pojedinaca koji su imunokompromitovani. Naročito, u lečenju CCL se koriste T ćelije modifikovane pomoću CAR koje su ovde opisane. U određenim primerima izvođenja, ćelije koje su ovde opisane se koriste u lečenju pacijenata koji imaju rizik od razvoja CCL. Na taj način, predmetni pronalazak obezbeđuje lečenje ili prevenciju CCL koje obuhvata primenu kod subjekta kome je to potrebno, terapeutski efikasne količine T ćelija modifikovanih pomoću CAR prema pronalasku.
[0197] T ćelije modifikovane pomoću CAR koje su ovde opisane mogu da se primene ili same, ili kao farmaceutska kompozicija u kombinaciji sa diluentima i/ili sa drugim komponentama kao što je IL-2 ili drugi citokini ili ćelijske populacije. Ukratko, farmaceutske kompozicije koje su ovde opisane mogu da sadrže ciljnu ćelijsku populaciju kao što je ovde opisano, u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski ili fiziološki prihvatljivih nosača, diluenata ili ekscipijenasa. Takve kompozicije mogu da sadrže pufere kao što je neutralni puferisani rastvor soli, fosfatno puferisani rastvor soli i slično; ugljovodonike kao što je glukoza, manoza, saharoza ili dekstrani, manitol; proteine; polipeptide ili aminokiseline kao što je glicin; antioksidanse; sredstva za heliranje kao što je EDTA ili glutation; adjuvanse (npr., aluminijum hidroksid); i konzervanse. Kompozicije koje su ovde opisane su poželjno formulisane za intravensku primenu.
[0198] Farmaceutske kompozicije koje su ovde opisane mogu da se primene na način koji je pogodan za bolest koja treba da se leči (ili spreči). Količina i učestalost primene će biti određene faktorima kao što su stanje pacijenta, i vrsta i ozbiljnost pacijentove bolesti, mada odgovarajuće doze mogu da se odrede u kliničkim ispitivanjima.
[0199] Kada je "imunološki efikasna količina", "anti-tumorski efikasna količina", "količina efikasna u inhibiciji tumora", ili "terapeutska količina" naznačena, preciznu količinu kompozicija predmetnog pronalaska koja treba da se primeni može da odredi lekar uzimajući u obzir individualne razlike u godinama, težini, veličini tumora, stepenu infekcije ili metastaze, i stanje pacijenta (subjekta). Uopšteno se može navesti da farmaceutska
4
kompozicija koja sadrži T ćelije koje su ovde opisane može da se primeni u dozi od 10<4>do 109 ćelija/kg telesne težine, poželjno 10<5>do 10<6>ćelija/kg telesne težine, uključujući sve cele brojeve unutar ovih opsega. T ćelijske kompozicije mogu tkođe da se primene više puta u ovim dozama. Ćelije mogu da se primene upotrebom tehnika infuzije koje su opšte poznate u imunoterapiji (videti, npr., Rosenberg et al., New Eng. J. of Med.319:1676, 1988). Optimalni režim doziranja i lečenja za određenog pacijenta može lako da odredi stručnjak u medicinskoj oblasti praćenjem znakova bolesti kod pacijenta i prilagođavanjem lečenja tome.
[0200] Može da bude poželjno primeniti aktivirane T ćelije kod subjekta i zatim naknadno ponovo izvaditi krv (ili izvesti aferezu), aktivirati T ćelije iz nje u skladu sa predmetnim pronalaskom, i infuzijom dati pacijentu ove aktivirane i umnožene T ćelije. Ovaj postupak može da se izvede više puta svakih nekoliko nedelja. T ćelije mogu da se aktiviraju iz izvađene krvi od oko 10 cm<3>do 400 cm<3>, na primer, T ćelije se aktiviraju iz izvađene krvi od 20 cm3, 30 cm3, 40 cm3, 50 cm3, 60 cm3, 70 cm3, 80 cm3, 90 cm3, ili 100 cm3. Bez pozivanja na teoriju, upotreba ovog protokola višestrukih vađenja krvi/višestrukih ponavljanja infuzije može da posluži za selekciju određenih populacija T ćelija.
[0201] Primena predmetnih kompozicija može da se izvede na bilo koji pogodan način, uključujući inhalaciju aerosola, injekciju, ingestiju, transfuziju, implantaciju ili transplantaciju. Kompozicije koje su ovde opisane mogu da se primene kod pacijenta subkutano, intradermalno, intratumoralno, intranodalno, intramedularno, intramuskularno, intravenskom (i.v.) injekcijom, ili intraperitonealno. Na primer, T-ćelijske kompozicije koje su ovde opisane se primenjuju kod pacijenta intradermalnom ili subkutanom injekcijom. U drugom primeru, T-ćelijske kompozicije koje su ovde opisane se poželjno primenjuju i.v. injekcijom. Kompozicije T ćelija mogu da se injektuju direktno u tumor, limfni čvor, ili mesto infekcije.
[0202] U određenim slučajevima, ćelije koje su aktivirane i umnožene upotrebom postupaka koji su ovde opisani, ili drugih postupaka poznatih u stanju tehnike u kojima su T ćelije umnožene do terapeutskih nivoa, primenjuju se kod pacijenta zajedno sa (npr., pre, istovremeno ili nakon) bilo kog broja relevantnih modaliteta lečenja, uključujući ali bez ograničenja, lečenje sredstvima kao što je antiviralna terapija, cidofovir i interleukin-2, citarabin (takođe poznat kao ARA-C) ili lečenje natalizumabom za MS pacijente ili lečenje efalizumabom za pacijente sa psorijazom ili druga lečenja za PML pacijente. Kako je ovde takođe opisano, T ćelije pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa hemoterapijom, zračenjem, imunosupresivnim sredstvima, kao što su ciklosporin, azatioprin, metotreksat, mikofenolat, i FK506, antitela, ili drugim imunoablativnim sredstvima kao što su CAM PATH, anti-CD3 antitela ili terapije drugim antitelom, citoksin, fludaribin, ciklosporin, FK506, rapamicin, mikofenolna kiselina, steroidi, FR901228, citokini, i zračenje. Ovi lekovi inhibiraju ili fosfatazu kalcineurin zavisnu od kalcijuma (ciklosporin i FK506) ili inhibiraju p70S6 kinazu koja je značajna za signalizaciju indukovanu faktorom rasta (rapamicin) (Liu et al., Cell 66:807-815, 1991; Henderson et al., Immun. 73:316-321, 1991; Bierer et al., Curr. Opin. Immun. 5:763-773, 1993). Kako je ovde takođe opisano, ćelijske kompozicije predmetnog pronalaska se primenjuju kod pacijenta zajedno sa (npr., pre, istovremeno ili nakon) transplantacijom kosne srži, T ćelijskom ablativnom terapijom upotrebom hemoterapijskih sredstava kao što su fludarabin, radijacionom terapijom spoljnim zrakom (XRT), ciklofosfamidom, ili antitelima kao što su OKT3 ili CAMPATH. Kako je ovde takođe opisano, ćelijske kompozicije predmetnog pronalaska se primenjuju nakon B-ćelijske ablativne terapije kao što je terapija sredstvima koja reaguju sa CD20, npr., Rituxan. Na primer, subjekti mogu da se podvrgnu standardnom lečenju visoko-doznom hemoterapijom praćenom transplantacijom stem ćelija periferne krvi. U određenim slučajevima, nakon transplanta, subjekti primaju infuziju umnoženih imunskih ćelija predmetnog pronalaska, ili se umnožene ćelije primenjuju pre ili nakon hirurške intervencije.
[0203] Doziranje prethodno navedenih lečenja koja treba da se primene kod pacijenta će varirati sa tačnom prirodom stanja koje se leči i primaocem lečenja. Skaliranje doziranja za primenu kod čoveka može da se izvede prema praksi uobičajenoj u ovoj oblasti. Doza za CAMPATH, na primer, će uopšteno biti u opsegu 1 do oko 100 mg za odraslog pacijenta, obično primenjena dnevno u periodu između 1 i 30 dana. Poželjna dnevna doza je 1 do 10 mg dnevno mada u nekim slučajevima veće doze sve do 40 mg dnevno mogu da se koriste (opisano u SAD patentu br.6,120,766).
EKSPERIMENTALNI PRIMERI
[0204] Pronalazak je u nastavku detaljno opisan po referenci na eksperimentalne primere koji slede. Ovi primeri su obezbeđeni samo u ilustrativne svrhe, i nisu namenjeni da budu ograničavajući osim ako nije drugačije naznačeno. Tako, pronalazak ne treba ni na koji način tumačiti kao ograničen na sledeće primere, već pre treba tumačiti tako da obuhvata bilo koje, i sve varijacije koje će biti očigledne kao rezultat ovde navedenog opisa.
[0205] Bez daljeg opisivanja, smatra se da će stručnjak u oblasti moći, upotrebom prethodnog opisa i ilustrativnih primera koji slede, da napravi i koristi jedinjenja predmetnog pronalaska i praktikuje postupke za koje se traži zaštita. Prema tome radni primeri koji slede, posebno
1
ističu poželjne primere izvođenja predmetnog pronalaska, i ne treba ih smatrati ograničavajućim ni na koji način za ostatak opisa.
Primer 1: T ćelije koje eksprimiraju himerne receptore uspostavljaju memoriju i snažna antitumorska dejstva kod pacijenata sa uznapredovalom leukemijom
[0206] Limfociti modifikovani tako da eksprimiraju himerne receptore za antigen (CAR) su pokazali minimalnu in vivo ekspanziju i antitumorska dejstva u prethodnim kliničkim ispitivanjima. Ovde prikazani rezultati pokazuju da CAR T ćelije koje sadrže CD137 imaju snažnu kliničku aktivnost bez unakrsne rezistencije nakon infuzije kod tri od tri pacijenta lečena od uznapredovale hronične limfocitne leukemije (CLL). Modifikovane T ćelije su se umnožile više od hiljdu puta in vivo, premestile u kosnu srž i nastavile da eksprimiraju funkcionalne CAR na visokim nivoima tokom najmanje 6 meseci. U proseku, svaka CAR+ T ćelija primenjena infuzijom iskorenila je najmanje 1000 CLL ćelija. Imunski odgovor specifičan za CD19 je pokazan u krvi i kosnoj srži, praćen potpunom remisijom kod dva od tri pacijenta. Deo ćelija opstaje kao memorijske CAR+ T ćelije, ukazujući na potencijal ovog pristupa koji nije ograničen na MHC za efikasno lečenje B-ćelijskih maligniteta.
[0207] U nastavku teksta su opisani materijali i postupci korišćeni u ovim eksperimentima.
Materijali i postupci
Opšti laboratorijski izveštaj
[0208] Obrada uzoraka za istraživanje, zamrzavanje, i laboratorijska ispitivanja su izvedena u laboratoriji Translational and Correlative Studies Laboratory Univerziteta Pensilvanije koja radi u skladu sa principima dobre laboratorijske prakse sa uspostavljenim SOP i/ili protokolima za prijem uzoraka, obradu, zamrzavanje, i ispitivanje. Izvođenje testova i prikazivanje podataka su usklađeni sa smernicama MIATA (Janetzki et al., 2009, Immunity 31:527-528).
Dizajn protokola
[0209] Kliničko ispitivanje (NCT01029366) je sprovedeno kao što je prikazano dijagramom na slici 1. Pacijenti sa hematološkim malignitetom pozitivnim na CD19 sa perzistentnom bolešću nakon najmanje dva prethodna režima lečenja i koji nisu bili kvalifikovani za transplantaciju alogenih stem ćelija bili su kvalifikovani za ispitivanje. Nakon ponovnog određivanja stadijuma tumora, T ćelije periferne krvi za proizvodnju CART19 su sakupljene aferezom i subjektima je jednokratno data hemoterapija kao što je naznačeno na slici 10
2
tokom nedelje pre infuzije. CART19 ćelije su primenjene intravenskom infuzijom upotrebom režima doziranja podeljenog na tri dana (10%, 30% i 60%) u dozi naznačenoj na slici 10 i ako je moguće, druga doza je primenjena 10. dana; samo pacijent UPN 02 je imao dovoljno ćelija za drugu infuziju. Procenjena je toksičnost kod subjekata i odgovor u čestim intervalima tokom najmanje 6 meseci. Protokol je odobren od strane Administracije za hranu i lekove SAD, Savetodavnog komiteta za rekombinantnu DNK i Nadzornog odbora Univerziteta Pensilvanije. Prvi dan infuzije je označen kao nulti dan ispitivanja.
Subjekti: sažetak kliničkih podataka
[0210] Sažetak kliničkih podataka dat je na slici 10 i detaljne istorije su obezbeđene na drugom mestu. Pacijentu UPN 01 je prvo dijagnostikovan stadijum II B-ćelijske CLL sa 55 godina starosti. Pacijent nije imao simptome i posmatran je otprilike 1 - 1/2 godine do pojave potrebe za terapijom za progresivnu limfocitozu, trombocitopeniju, adenopatiju i splenomegaliju. Tokom vremena, pacijent je primio terapiju prve linije. Najskorija terapija je bila 2 ciklusa pentostatina, ciklofosfamida i rituksimaba, 2 meseca pre infuzije CART19 ćelija, sa minimalnim odgovorom. Pacijent je primio jedan ciklus bendamustina kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita pre infuzije CART-19 ćelija.
[0211] Pacijentu UPN 02 je prvo dijagnostikovana CLL sa 68 godina, kada je pacijent pokazao zamor i leukocitozu. Pacijent je bio relativno stabilan 4 godine, kada je razvio progresivnu leukocitozu (195 000/µl), anemiju i trombocitopeniju koje su zahtevale terapiju. Kariotypsko ispitivanje je pokazalo da ćelije CLL imaju deleciju hromozoma 17p. Zbog progresivne bolesti, pacijent je lečen alemtuzumabom sa delimičnim odgovorom ali u okviru jedne ipo godine pacijent je imao progresivnu bolest. Pacijent je ponovo lečen alemtuzumabom tokom 18 nedelja sa delimičnim odgovorom i interval bez progresije bolesti od 1 godine. Pacijent je tada primio 2 ciklusa bendamustina sa rituksimabom bez značajnog odgovora (slika 5A). Pacijent je primio samo sredstvo bendamustin kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita pre infuzije CART-19 ćelija.
[0212] Kod pacijenta UPN 03 je u uzrastu od 50 godina otkrivena asimptomatska CLL u stadijumu I i praćen je godinama. Pacijent je imao progresivnu leukocitozu (bela krvna slika 92 000/µl) i progresivnu adenopatiju koja zahteva terapiju. Pacijent je primio 2 ciklusa rituksimaba sa fludarabinom što je rezultovalo normalizacijom krvne slike i značajnim poboljšanjem mada ne i potpunim povlačenjem adenopatije. Pacijent je imao približno 3 godine dug period bez progresije. Kariotipsko ispitivanje je pokazalo da ćelije sadrže deleciju hromozoma 17p, pomoću FISH pokazana je delecija TP53 u 170 od 200 ćelija. Tokom narednih godina pacijentu su bile potrebne 3 različite linije terapije (slika 10) za progresivnu leukocitozu i adenopatiju, poslednje primanje alemtuzumaba sa delimičnim odgovorom 6 meseci pre infuzije CART19 ćelija. Pacijent je primio pentostatin i ciklofosfamid kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita pre infuzije CART-19 ćelija.
Proizvodnja vektora
[0213] Transgen CD19-BB-z (GeMCRIS 0607-793) je dizajniran i konstruisan kao što je opisano u (Milone et al., 2009, Mol Ther.17:1453-1464). Lentiviralni vektor je proizveden u skladu sa aktuelnom dobrom proizvođačkom praksom upotrebom proizvodnog pristupa sa tri plazmida u Lentigen Corporation kao što je opisano (Zufferey et al., 1997, Nature biotechnol 15:871-875).
Priprema CART19-ćelijskog proizvoda
[0214] Postupci pripreme T ćelija upotrebom paramagnetskih polistirenskih perli obloženih anti-CD3 i anti-CD28 monoklonskim antitelima su opisani (Laport et al., 2003, Blood 102: 2004-2013). Lentiviralna transdukcija je izvedena kao što je opisano (Levine et al., 2006, Proc Natl Acad Sci U S A 103:17372-17377).
Postupci za izračunavanje tumorskog opterećenja
[0215] Polazna vrednost CLL opterećenja je procenjena kao što je prikazano na slici 10. Količina CLL ćelija je izračunata u kosnoj srži, krvi, i sekundarnim limfnim tkivima kao što je dole opisano.
[0216] Kosna srž: Kod odraslih zdravih osoba, kosna srž predstavlja približno 5% ukupne telesne težine (Woodard et al., 1960, Phys Med Biol, 5:57-59; Bigler et al., 1976, Health Phys 31:213-218). Uzorci kosne srži u ilijačnoj kresti pokazuju rastući procenat neaktivne (masne) kosne srži sa starenjem, koji raste od 20% ukupne kosne srži u dobu od 5 godina do oko 50% do doba od 35 godina, kada ostaje stabilan do 65 godina, i tada raste do oko 67% neaktivne kosne srži do doba od 75 godina (Hartsock et al., 1965, Am J Clin Path 43:326-331). Međunarodna referentna vrednost ukupne težine u skeletu aktivne (crvene) i neaktivne (masne) kosne srži za muškarce od 35 godina je trenutno 1170g i 2480g, redom (Basic anatomical and physiological data for use in radiological protection: The Skeleton in Annals of the ICRP, Vol. 25 (ed. Smith, H.) 58-68 (A report of a Task Group of Committee 2 of the International Commission on Radiological Protection, Oxford, 1995)). Odrasli muškarci starosti između 35 i 65 godina imaju kosnu srž koja predstavlja 5.0% ukupne telesne težine, sastavljenu od 1.6% aktivne (crvene) kosne srži i 3.4% neaktivne (masne) kosne srži (Basic
4
anatomical and physiological data for use in radiological protection: The Skeleton in Annals of the TCRP, Vol.25 (ed. Smith, H.) 58-68 (A report of a Task Group of Committee 2 of the International Commission on Radiological Protection, Oxford, 1995)). Na osnovu uzoraka biopsije kosne srži i aspirata, polazna vrednost težine ćelija CLL za tri pacijenta izračunata je kao što je prikazano u tabli 1. Ove procenjene ukupne mase CLL kosne srži su zatim pretvorene u ukupan broj CLL ćelija u kosnoj srži upotrebom jednakosti 1Kg = 10<12>ćelija, i rezultujući brojevi su prikazani na slici 10. Ovi proračuni se zasnivaju na pretpostavci da CLL ima ravnomernu raspodelu u kosnoj srži. Za pacijenta UPN 01, proračuni su prikazani za biopsiju kosne srži dobijenu pre hemoterapije bendamustinom, i za aspirat dobijen nakon bendamustina i pre CART19 infuzije. Brojevi su manje precizni za aspirat na dan-1 u poređenju sa uzorkom biopsije na dan-14 zbog tehničkih ograničenja aspirata na dan-1. Pacijent UPN 02 je imao jedan uzorak biopsije pre lečenja koji pokazuje potpunu zamenu kosne srži sa CLL. Ovaj pacijent je imao neizmenjen uzorak na dan 30 nakon CART19. Opterećenje kosne srži za pacijenta UPN 03 je izračunato na osnovu biopsije posle hemoterapije i pre CART19.
[0217] Krv: Samo pacijent UPN 02 je imao značajno tumorsko opterećenje CLL u krvi pre CART19 infuzije. Protočna citometrija je pokazala da ćelije imaju tipičan fenotip klonalne populacije kapa-ograničene CD5+ CD10- CD19+ CD20(dim)+ CD23(promenljivo)+ IgM-B ćelijske populacije sa dim površinom. Približno 35% CLL ćelija koeksprimira CD38. Opterećenje CLL nije nestalo posle 3 ciklusa hemoterapije bendamustinom i bilo je prisutno u vreme CART19 infuzija. U vreme CART 19 infuzije, broj CLL u krvi je bio 55000 ćelija/µL.
Predpostavljajući da je zapremina krvi 5.0 L, pacijent UPN 02 je imao 2.75x10<11>CLL ćelija u krvi nultog dana. S obzirom na normalni ukupni broj belih krvnih ćelija kod pacijenata UPN 01 i 03, opterećenje bolesti u cirkulatornom sistemu kod ovih pacijenata nije računato, što bi vodilo blagom podcenjivanju ukupnog opterećenja u telu.
[0218] Sekundarna limfna tkiva: Volumen limfadenopatije i splenomegalije je kvantifikovan na aksijalnim CT skenovima upotrebom kompjuterskog programa koji je odobrila FDA. Volumeni su samo za grudni koš, abdomen i pelvis. Mase od nivoa T1 kičmenog pršljena do nivoa račvanja opšte femoralne arterije su merene kod svih pacijenata, i kod nekih, čvorovi u preponskoj oblasti su takođe bili uključeni. Čvorovi u glavi/vratu i ekstremitetima su bili isključeni iz ispitivanja i isključeni iz polaznog broja ciljnih ćelija CLL, što bi takođe vodilo blagom podcenjivanju ukupnog opterećenja u telu. Pacijenti UPN 01 i 03 su održali kompletnu remisiju duže od 6 meseci, i stoga, za određivanje smanjenja tumorskog opterećenja u odnosu na polaznu vrednost korišćena je formula (polazni volumen – volumen kroz 3 meseca); pacijent UPN 02 je imao stabilnu adenopatiju, i stoga je polazna masa tumora procenjena oduzimanjem referentne vrednosti za volumen slezine zdravih muškaraca istih godina (Harris et al., 2010, Eur J Radiol 75:e97-e101). Polazna masa tumora je pretvorena u broj CLL ćelija upotrebom gustine (1 Kg/L gustine, i 1 Kg = 10<12>ćelija) ili volumena (CLL ćelije imaju prečnik od 10 µM ili 600 fL, pretpostavljajući loptsati oblik), i obe vrednosti su predstavljene na slici 10. Volumeni tumora u sekundarnim limfoidnim tkivima kod tri pacijenta su prikazani dole u tabeli 2, kako je izračunato iz dostupnih CT skenova.
[0219] Polazni CT sken za pacijenta UPN 01 je izveden 8 dana nakon 2 ciklusa pentostatina/ ciklofosfamida/rituksimaba, i nije pokazao odgovor na ovaj hemoterapijski režim u poređenju sa prethodnim CT skenom. Pacijent je imao jedan ciklus bendamustina pre CART 19, i stoga, promena u volumenu tumora od dana - 37 do dana 31 za UPN 01 ne može da isključi mogući doprinos bendamustina kao i CART19. Slično, promena u volumenu tumora za UPN 03 odražava kombinovano dejstvo 1 ciklusa pentastatin/ ciklofosfamida i CART19.
Postupak za procenjivanje efektivnog odnosa E:T in vivo kod pacijenata
[0220] Odnos E:T CAR T ćelija primenjenih infuzijom prema broju ubijenih tumorskih ćelija je izračunat upotrebom broja tumorskih ćelija prisutnih u vreme injektovanja CAR T ćelija i broja injektovanih CAR T ćelija (Carpenito et al., 2009, Proc. Natl Acad Sci U S A 106:3360-3365). Za predmetni pronalazak korišćen je broj injektovanih CART19+ T ćelija kao što je prikazano na slici 10, jer nije moguće odrediti apsolutni broj CART19+ T ćelija prisutnih in vivo sa dovoljnom tačnošću ili preciznošću. Dostupni podaci o ekspanziji CART19 u krvi i kosnoj srži pokazuju da je snažna kao što je prikazano na slici 2 i slici 6. Međutim, nije moguće odrediti migraciju CART19 na druga mesta kao što su sekundarna limfoidna tkiva, što stvara značajnu nesigurnost u određivanju ukupnog broja CART19 ćelija dostupnih in vivo u vreme maksimalnog smanjena tumora. Izračunate vrednosti iz tabele 3 korišćene su za dobijanje efektivnih odnosa E:T.
Obrada uzoraka i zamrzavanje
[0221] Uzorci (periferna krv, kosna srž) su sakupljeni u vakutajner epruvete (Becton Dickinson) sa poklopcem boje lavande (K2EDTA) ili crvenim poklopcem (bez dodataka) i dostavljene u TCSL unutar 2 časa od uzimanja. Uzorci su obrađeni u okviru 30 minuta od prijema prema uspostavljenom laboratorijskom SOP-u. Mononuklearne ćelije periferne krvi i kosne srži su prečišćene putem centrifugiranja u gradijentu gustine Ficoll, upotrebom Ficoll-Paque (GE Health care, 17-1440-03) i zamrznute u RPMI (Gibco 11875-135) obogaćenom sa 4% humanim serum albuminom (Gemini Bio-Products, 800-120), 2% Hetastarch (Novaplus, NDC0409-7248-49), i 10% DMSO (Sigma, D2650) upotrebom kontejnera za zamrzavanje 5100 Cryo 1°; nakon 24-72 časa na -80°C, ćelije su premeštene u tečni azot za dugotrajno skladištenje. Uzorci afereze su dobijeni preko Banke krvi bolnice Univerziteta Pensilvanje i obrađeni u CVPF prečišćavanjem u gradijentu Ficoll i zamrzavanjem kao što je prethodno opisano. Vijabilnost odmah nakon odmrzavanja bila je veća od 85% kada je procenjena. Za izdvajanje seruma, uzorci su ostavljeni da koagulišu 1.5-2 časa na sobnoj temperaturi; serum je izdvojen centrifugiranjem, i alikvoti za pojedinačnu upotrebu od 100 ml zamrznuti na -80°C.
Ćelijske linije
[0222] Ćelijska linija K562 (CML, CD19-negativna) je dobijena iz ATCC (CCL-243). K562/CD19, kao poklon Carmine Carpenito, i K562 je lentiviralno transdukovana pri učestalosti od 100% tako da eksprimira molekul CD19. NALM-6, CD19-pozitivna ne-T, ne-B ALL prekursorska B ćelijska linija (Hurwitz et al., 1979, Int J Cancer 23:174-180), za koju je potvrđeno da eksprimira CD19 antigen bila je poklon Laurence Cooper. Gore pomenute ćelijske linije su održavane u medijumu R10 (RPMI 1640 (Gibco, 11875) obogaćenom sa 10% fetalnog goveđeg seruma (Hyclone), i 1% Pen-Strep (Gibco, 15140-122). Periferne mononuklearne ćelije (ND365) zdravog davaoca su dobijene aferezom u Human Immunology Core na Univerzitetu Pensilvanije, obrađene i zamrznute kao što je gore opisano.
Izdvajanje DNK i analiza pomoću Q-PCR
[0223] Uzorci pune krvi ili kosne srži su sakupljeni u vakutajner epruvete (Becton Dickinson) sa poklopcem boje lavande (K2EDTA). Genomska DNK je izolovana direktno iz pune krvi upotrebom QIAamp DNK midi kitova za krv (Qiagen) i uspostavljenog laboratorijskog SOP-a, kvantifikovana spektrofotometrom, i čuvana na -80°C. Q-PCR analize na uzorcima genomske DNK su izvedene u balku upotrebom 123-200 ng genomske DNK/vremenskoj tački, ABI Taqman tehnologijom i validiranim testom za detektovanje integrisane CD19 CAR transgene sekvence. Opsezi parametra zadovoljava/ne zadovoljava, uključujući nagib standardne krive i ponovne procene, sposobnost preciznog kvantifikovanja referentnog uzorka (dodavanje 1000 kopija/plazmidu) i odsustvo amplifikacije u uzorku DNK zdravog davaoca, izračunati su na osnovu kvalifikovanih ispitivanja i unapred određenih opsega prihvatljivosti. Prajmer/probe za CD19 CAR transgen su opisane (Milone et al., 2009, Mol Ther 17:1453-1464). Za određivanje broja kopija/jedinici DNK izrađena je standardna kriva sa 8 tačaka koja se sastoji od 106-5 kopija lentivirusnog plazmida dodatog u 100 ng netransdukovane kontrolne genomske DNK. Svaki podatak (uzorci, standardna kriva, referentni uzorci) je procenjen u triplikatu sa prikazanim srednjim vrednostima. Za pacijenta UPN 01, sve prijavljene vrednosti su dobijene iz pozitivne Ct vrednosti u 3/3 ponavljanja sa % CV manjim od 0.46%. Za pacijenta UPN 02, sa izuzetkom uzorka za dan 177 (2/3 ponavljanja pozitivna, visok % CV), sve prijavljene vrednosti su dobijene iz pozitivne Ct vrednosti u 3/3 ponavljanja sa % CV manjim od 0.72%. Za pacijenta UPN 03, sa izuzetkom uzorka za dan 1 (2/3 ponavljanja pozitivna, 0.8% CV) i uzorka za dan 3 (2/3 ponavljanja pozitivna, 0.67% CV), sve prijavljene vrednosti su dobijene iz pozitivne Ct vrednosti u 3/3 ponavljanja sa % CV manjim od 1.56%. Donja granica kvantifikacije (LLOQ) za test je određena iz standardne krive sa 2 kopije/mikrogramu DNK (10 kopija/200 ng ulazne DNK); srednje vrednosti ispod LLOQ (tj. prijavljene, ali ne podležu kvantifikaciji) smatraju se približnim. Paralelna reakcija amplifikacije za kontrolu kvaliteta ispitivane DNK je izvedena upotrebom 12-20 ng ulazne genomske DNK, sa kombinacijom prajmer/proba specifičnom za netranskribujuću genomsku sekvencu ushodno od gena CDKN1A (GENEBANK: Z85996) (sens prajmer: GAAAGCTGACTGCCCCTATTTG; SEQ ID NO. 25, antisens prajmer: GAGAGGAAGTGCTGGGAACAAT; SEQ ID NO. 26, proba: VIC- CTC CCC AGT CTC TTT; SEQ ID NO. 27), i standardne krive sa 8 tačaka dobijene razblaživanjem kontrolne genomske DNK; ove reakcija amplifikacije su proizvele faktor korekcije (CF) (ng detektovano/ng ulazno). Kopije transgen /mikrogramu DNK su izračunate prema formuli: kopije izračunate iz CD19 standardne krive/ulazna DNK (ng) x CF x 1000 ng. Tačnost ovog testa je određena prema sposobnosti da se kvantifikuje marker ćelijskog prizvoda datog infuzijom pomoću Q-PCR prema formuli: Srednji marker = detektovane kopije/ulazna DNK x 6.3 pg DNK/odgovarajućoj somatskoj ćeliji x CF u odnosu na pozitivni rezultat na transgen dobijen pomoću protočne citometrije upotrebom CAR-specifičnih reagenasa za detekciju. „Slepa“ određivanja su dala 22.68% markera za proizvod infuzije UPN01 (22.6% pomoću protočne citometrije), 32.33% markera za proizvod infuzije UPN 02 (23% pomoću protočne citometrije), i 4.3% markera za proizvod infuzije UPN03 (4.7% markera pomoću protočne citometrije).
Ispitivanja citokina
[0224] Kvantifikacija rastvornih faktora citokina sprovedena je upotrebom tehnologije nizova mikroperli Luminex i kitova nabavljenih od Life technologies (Invitrogen). Testovi su izvedeni prema protokolu proizvođača sa standardnom krivom u 8 tačaka dobijenom upotrebom serije trostrukih razređenja. Svaka standardna tačka i uzorak su procenjivani u duplikatu pri razblaženju 1:3; izračunati % CV za merenja u duplikatu bio je manji od 15%. Podaci su dobijeni na Bioplex 200 i analizirani pomoću programa Bioplex Manager verzije 5.0 upotrebom 5-parameterske logističke regresione analize. Opsezi kvantifikacije standardne krive su određeni opsegom 80-120% (primećena/očekivana vrednost). Opsezi kvantifikacije pojedinačnih analita su prikazani na legendama slika.
Ćelijski test za detekciju funkcije CAR
[0225] Funkcionalnost ćelija je procenjena nakon odmrzavanja i odmaranja preko noći u TCM merenjem degranulacije CD107 kao odgovor na ciljne ćelije. Testovi degranulacije su izvedeni upotrebom 1 x 106 PBMC i 0.25 x 106 ciljnih ćelija u finalnoj zapremini od 500 µl u pločama sa 48 bunarčića tokom 2 časa na 37°C u prisustvu CD49d (Becton Dickinson), anti-CD28, monenzin (e-Bioscience) i CD107a-FITC antitela (eBiosciences) suštinski kao što je opisano (Betts et al., 2003, J Immunol Methods 281:6578).
Antitela- reagensi
[0226] Sledeća antitela su korišćena u ovim ispitivanjima: MDA-CAR, mišje anti CD 19 CAR antitelo konjugovano sa Alexa647 je bilo poklon Drs. Bipulendu Jena i Laurence Cooper (MD Anderson Cancer Center). Za multiparametarsku imunofenotipizaciju i testove funkcionalnosti: anti-CD3-A700, anti-CD8-PE-Cy7, anti-PD-1-FITC anti-CD25-AF488, anti-CD28-PercP-Cy5.5, anti-CD57-eF450, anti-CD27-APC-eF780, anti-CD17-APC-eF780, anti-CD45RAeF605NC, CD107a-FITC (sve od e-Bioscience), anti-CD4-PE-Texas Red i Live/Dead Aqua (Life Technologies) i anti-CD14-V500, anti-CD16-V500 (Becton Dickinson). Za opštu imunofenotipizaciju: CD3-PE, CD14-APC, CD14-PE-Cy7, CD16-FITC, CD16PE-Cy7, CD19-PE-Cy7, CD20-PE, sve od Becton Dickinson.
Multi-parametarska protočna citometrija
[0227] Ćelije su procenjene pomoću protočne citometrije ili sveže nakon obrade sa Ficoll-Paque ili, ako su bile zamrznute, nakon odmaranja preko noći pri gustini od 2 x 10<6>ćelija/ml u T-ćelijskom medijumu (TCM) (X-vivo 15 (Lonza, 04-418Q) obogaćenom sa 5% humanog AB seruma (GemCall, 100-512), 1% Hepes (Gibco, 15630-080), 1% Pen-Strep (Gibco, 15140-122), 1% Glutamax (Gibco, 35050-061), i 0.2% N-acetil cisteina (American Regent, NDC0517-7610-03). Multiparametarska imunofenotipizacija je izvedena na 4 x 106 ukupnih ćelija/uslovu, upotrebom FMO boja kao što je opisano u tekstu. Ćelije su obojene pri gustini od 1 x 106 ćelija/100 µl PBS, 30 minuta na ledu upotrebom antitela i koncentracije reagensa preporučene od strane proizvođača, oprane, resuspendovane u 0.5% paraformaldehida i opredeljene upotrebom modifikovanog LSRII (BD Immunocytometry systems) opremljenog plavim (488 nm), ljubičastim (405 nm), zelenim (532), i crvenim (633 nm) laserom i odgovarajućim setom filtera za detekciju i razdvajanje gore pomenutih kombinacija antitela. Minimum od 100 000 CD3+ ćelija je opredeljen) za svako bojenje. Za ispitivanja funkcionalnosti, ćelije su oprane, obojene za površinske markere, resuspendovane u 0.5% paraformaldehida i opredeljene kao gore; minimum od 50000 CD3+ događaja je sakupljeno za svaki uslov bojenja. Kompenzacione vrednosti su uspostavljene upotrebom pojedinačnog bojenja antitela i BD kompenzacionih perli (Becton Dickinson) i izračunate i automatski primenjene pomoću instrumenta. Podaci su analizirani upotrebom programa FlowJo (verzija 8.8.4, Treestar). Za opštu imunofenotipizaciju ćelije su opredeljene upotrebom citometra Accuri C6 opremljenog plavim (488) i crvenim (633 nm) laserom. Kompenzacione vrednosti su uspostavljene upotrebom pojedinačnog bojenja antitela i BD kompenzacionih perli (Becton Dickinson) i izračunate ručno. Podaci su analizirani upotrebom programskog paketa C-Flow (verzija 1.0,264.9, Accuri citometri).
Medicinska istorija pacijenta i odgovor na terapiju
[0228] Rezimei kliničkog lečenja su prikazani na slici 10. Pacijentu UPN 01 je prvo dijagnostikovan stadijum II B-ćelijske CLL u dobu od 55 godina. Pacijent nije imao simptome i posmatran je otprilike 1 - 1/2 godinu do pojave potrebe za terapijom za progresivnu limfocitozu, trombocitopeniju, adenopatiju i splenomegaliju. Nakon 4 ciklusa fludarabina pacijent je postigao normalizaciju krvne slike i postigao odgovor prema CT skenovima. Progresija je primećena u okviru 5 meseci sa asimptomatskom limfocitozom, trombocitopenijom, i rastućom adenopatijom. Pacijent je posmatran bez simptoma približno 3 godine, i kasnije mu je bilo potrebno lečenje rituksimabom i fludarabinom zbog progresivne leukocitoze, anemije, i trombocitopenije. Pacijent je lečen sa 4 ciklusa rituksimaba sa fludarabinom sa delimičnim poboljšanjem krvne slike. Pacijent je ponovo pokazao progresiju koja zahteva terapiju u okviru jedne godine, koja se manifestuje leukocitozom (bele krvne ćelije 150 000/µl) i trombocitopenijom (trombociti 30 000/µl) i lečen alemtuzumabom sa normalizacijom krvne slike. Progresija je primećena u okviru 13 meseci. Pacijent je zatim
1
primio pojedinačno sredstvo rituksimab bez značajnog odgovora i nakon toga rituksimab, ciklofosfamid, vinkristin, i prednizon (R-CVP), u 2 ciklusa sa minimalnim odgovorom i nakon toga lenalidomid. Primena lenalidomida je prekinuta zbog toksičnosti. Pacijent je primio 2 ciklusa pentostatina, ciklofosfamida i rituksimaba sa minimalnim odgovorom.
[0229] Kasnije, pacijent je primio bendamustin kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita 4 dana pre infuzije CART-19 ćelija. Pre terapije, belih krvnih ćelija je bilo 14 200/µl, hemoglobina 11.4 gm/dl, broj trombocita je bio 78000/µl i ALC je bilo 8000/µl. CT sken je pokazao difuznu adenopatiju i kosna srž je bila ekstenzivno infiltrirana sa CLL (67% ćelija). Pacijent je primio 1.6 x 107 CART-19 ćelija/kg (1.13 x 10<9>ukupno CART19 ćelija procenjeno pomoću FACS). Nije bilo toksičnosti povezanih sa infuzijom, pacijent je postao neutropeničan približno 10 dana nakon bendamustina i 6 dana nakon infuzije CART19 ćelija, i počevši od 10 dana nakon prve infuzije CART19, kod pacijenta se razvila groznica, rigor i prolazna hipotenzija. U isto vreme, snimanje grudnog koša X-zracima i CT sken su pokazali pneumoniju gornjeg levog lobusa lečenu antibioticima. Povišena temperatura je opstala približno 2 nedelje i povukla sa kada je došlo do oporavka neutrofila. Pacijent više nije imao infekcije ili konstitucionalne simptome.
[0230] Pacijent je postigao brz i kompletan odgovor kao što je prikazano na slici 5. Između 1 i 6 meseci nakon infuzije cirkulišuće CLL ćelije nisu detektovane u krvi pomoću protočne citometrije. Kosna srž je na 1, 3 i 6 meseci nakon infuzija CART-19 ćelija pokazala trajno odsustvo limfocitne infiltracije prema ispitivanju morfologije i protočnoj citometriji. CT skenovi na 1 i 3 meseca nakon infuzije pokazali su potpuno povlačenje abnormalne adenopatije. Pacijent je imao perzistentnu leukopeniju (bele krvne ćelije 1000-3900/ul) i trombocitopeniju (trombociti ~100 000/ul), i blagu hipogamaglobuliniju (IgG 525 mg/dL, normalno 650-2000 mg/dL) ali bez komplikacija infekcije.
[0231] Pacijent UPN 02 je lečen CART19 ćelijama u dobu od 77 godina. Pacijent je imao relevantnu istoriju bolesti koronarne arterije i prvi put mu je dijagnostikovana CLL 2000. godine u dobu od 68 godina kada je pacijent pokazao zamor i leukocitozu. Pacijent je bio relativno stabilan 4 godine kada se kod pacijenta razvila progresivna leukocitoza (195 000/µl), anemija i trombocitopenija koja zahteva terapiju. Genetsko ispitivanje u isto vreme je pokazalo da CLL ćelije imaju deleciju hromozoma 17p. Zbog progresivne bolesti, pacijent je lečen 12-nedeljnim kursom alemtuzumaba sa delimičnim odgovorom i poboljšanjem krvne slike. U okviru jedne ipo godine, pacijent je imao progresivnu leukocitozu, anemiju, trombocitopeniju, i splenomegaliju. Kariotipska ispitivanja su potvrdila deleciju hromozoma 17p sada sa delecijom hromozoma 13q. Pacijent je lečen alemtuzumabom 18 nedelja sa
2
poboljšanjem leukocitoze i stabilizacijom anemije i splenomegalije. Pacijent je imao dokaz progresivne leukocitoze, anemije, i trombocitopenije u okviru jedne godine. Lečenje je uključivalo 2 ciklusa bendamustina sa rituksimabom i rezultovalo u stablnoj bolesti, ali bez značajnog poboljšanja, kao što je prikazano na slici 5A.
[0232] Pacijent je primio samo bendamustin kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita pre infuzije CART-19 ćelija. Pacijent je primio 4.3 x 10<6>CART 19 ćelija/kg (4.1 x 10<8>ćelija ukupno) u 3 odvojene infuzije komplikovane prolaznom povišenom temperaturom od 38,9°C tokom 24 časa. 11. dana nakon prve infuzije, pacijent je primio ponovljenu infuziju od 4.1x108 (4.3x10<6>/kg) CART19 ćelija i ova infuzija je bila komplikovana groznicom, rigorom i kratkim dahom bez hipoksije što je zahtevalo hospitalizaciju na 24 časa. Nije bilo dokaza srčane ishemije, i simptomi su se povukli. 15. dana nakon prve infuzije CART-19 i 4. dana nakon ponovljene infuzije CART19 ćelija, pacijent je primljen u bolnicu sa visokom temperaturom (do 40°C), drhtavicom i rigorom. Ekstenzivno ispitivanje sa kulturama krvi i urina i CXR nije identifikovao izvor infekcije. Pacijent se žalio na kratak dah ali nije imao hipoksiju. Ehokardiogram je pokazao ozbiljnu hipokinezu. Frakcija odbacivanja je bila 20%, pacijent je primio prednizon 1 mg po kilogramu jednog dana i 0.3 mg po kilogramu tokom približno jedne nedelje. Ovo je dovelo do brzog povlačenja groznice i srčane disfunkcije.
[0233] Istovremeno sa pojavom visoke temperature, pacijent je imao nagli pad limfocita periferne krvi kao što je prikazano na slici 5A. Iako je pacijent ima normalizaciju bele krvne slike, pacijent je imao perzistentnu cirkulišuću CLL, stabilnu umerenu anemiju i trombocitopeniju. Kosna srž je pokazala perzistentnu ekstenzivnu infiltraciju CLL mesec dana nakon terapije uprkos dramatičnom smanjenju broja ćelija periferne krvi, i CT skenovi su pokazali delimično smanjenje adenopatije i splenomegalije. Pet meseci nakon infuzije CART19 ćelija pacijent je razvio progresivnu limfocitozu. Devet meseci nakon infuzija pacijent je imao limfocitozu (16 500/µl) sa stabilnom umerenom anemijom i trombocitopenijom sa stabilnom adenopatijom. Pacijent ne pokazuje simptome i nije imao dodatnu terapiju.
[0234] Pacijentu UPN 03 je dijagnostikovana asimptomatska CLL stadijum I u dobu od 50 godina i njegovo praćenje je nastavljeno 6 godina. Kasnije, pacijent je imao progresivnu leukocitozu (bela krvna slika 92 000/µl) i progresivnu adenopatiju koja zahteva terapiju. Pacijent je primio 2 ciklusa rituksimaba sa fludarabinom što je dovelo do normalizacije krvne slike i značajnog poboljšanja, mada ne i potpunog povlačenja adenopatije. Pacijent je imao period od približno 3 godine bez progresije, praćen tokom narednih 6 meseci naglom progresijom leukocitoze (bele krvne ćelije 165 000/µl) i progresivne adenopatije koja zahteva terapiju. Pacijent je primio jedan ciklus fludarabina i 3 ciklusa rituksimaba sa fludarabinom sa normalizacijom krvne slike i povlačenjem palpabilne adenopatije. Pacijent je imao period od približno 20 meseci bez progresije dok nije ponovo naglo razvio progresivnu leukocitozu i adenopatiju. U to vreme, kosna srž je bila ekstenzivno infiltrirana sa CLL i kariotipsko ispitivanje je pokazalo da ćelije sadrže deleciju hromozoma 17p sa FISH koja pokazuje TP53 deleciju u 170/200 ćelija. Pacijent je primio jedan ciklus rituksimaba sa bendamustinom praćen sa 4 ciklusa samog bendamustina (zbog ozbiljne alergijske reakcije na rituksimab). Pacijent je imao početnu normalizaciju krvne slike ali ubrzo nakon prestanka terapije imao je progresivnu leukocitozu i adenopatiju.
[0235] Autologne T ćelije su sakupljene afarezom od pacijenta UPN3 i kriokonzervisane. Pacijent je zatim lečen alemtuzumabom 11 nedelja sa odličnim hematološkim odgovorom. Javilo se poboljšanje, mada ne i potpuno povlačenje adenopatije. Pacijent je imao aktivnu ali stabilnu bolest tokom sledećih 6 meseci. Kasnije, pacijent je primio pentostatin i ciklofosfamid kao hemoterapiju sa smanjenje limfocita pre infuzije CART19 ćelija.
[0236] Tri dana nakon hemoterapije ali pre ćelijske infuzije, kosna srž je bila hipercelularna (60%) sa približno 40% zastupljenosti CLL. Zbog ograničenja u proizvodnji neodvojivih od postupaka prikupljanja ćelija aferezom, od CLL pacijenata, kao što je prikazano u tabeli 3, i (Bonyhadi et al., 2005, J Immunol 174:2366-2375), pacijent je primio infuziju sa ukupno 1.46 x 105 CART19+ ćelija po kg (1.42 x 10<7>CART19+ ćelija ukupno) tokom 3 dana. Nije bilo toksičnosti povezane sa infuzijom. Četrnaest dana nakon prve infuzije, pacijent je počeo da ima drhtavice, groznicu do 38,8°C, rigor, mučninu i dijareju koje su lečene simptomatski. Pacijent nije imao respiratorne ili srčane simptome. Do 22. dana nakon infuzije, dijagnostikovan mu je sindrom lize tumora koji se ispoljava povišenim LDH, mokraćnom kiselinom, i komplikovan je renalnom insuficijencijom. Pacijent je hospitalizovan i lečen zamenom fluida i razburikazom sa brzom normalizacijom mokraćne kiseline i renalne funkcije. Detaljna klinička procena sa CXR, kulturama krvi, urina i stolice je sprovedena i svi rezultati su bili negativni ili normalni.
[0237] U toku 1 meseca od CART-19 infuzija, kod pacijenta je primećeno izlučivanje cirkulišućih CLL iz krvi i kosne srži prema morfološkim ispitivanjima, protočnoj citometriji, citogenetskim ispitivanjima, i FISH analizi, i CT skenovi su pokazali povlačenje abnormalne adenopatije (slika 5C). Remisija je kod pacijenta bila neprekidna preko 8 meseci od početne infuzije CART19 ćelija.
[0238] Rezultati eksperimenata slede.
4
Klinički protokol
[0239] Tri pacijenta sa uznapredovalom CLL, otpornom na hemoterapiju uključena su u pilot kliničko ispitivanje kao što je prikazano na slici 1. Svi pacijenti su ekstenzivno prethodno lečeni različitim hemoterapijama i biološkim režimima kao što je pokazano na slici 10. Dva od pacijenata su imala p53-deficijentnu CLL, deleciju koja dovodi do slabog odgovora na uobičajenu terapiju i brze progresije bolesti (Dohner et al., 1995, Blood, 851580-1589). Svaki od pacijenata je imao velika tumorska opterećenja nakon preparativne hemoterapije, uključujući ekstenzivnu infiltraciju kosne srži (40 do 95%) i limfadenopatiju; pacijent UPN 02 je takođe imao značajnu perifernu limfocitozu. CART19 T ćelije su pripremljene kao što je prikazano na slici 1B i detalji proizvodnje ćelija i karakterizacije proizvoda za svakog pacijenta prikazani su u tabeli 4. Svi pacijenti su prethodno lečeni 1-4 dana pre CART19 T ćelijskih infuzija hemoterapijom za smanjenje broja limfocita. Raspored sa podeljenom dozom ćelijske infuzije je korišćen zbog probnog ispitivanja CAR koji uključuje kostimulatorni signalni domen 4-1BB kao što je prikazano na slici 1A.
T l 4 Kri ri mi z iz n r iz f r z i ART1 r iz
In vivo ekspanzija i održavanje CART19 i migracija u kosnu srž
[0240] Smatra se da su CAR+ T ćelije umnožene upotrebom perli sa CD3/CD28 koje eksprimiraju signalni domen 4-1BB poboljšane u odnosu na receptore CAR kojima nedostaje 4-1BB. Q-PCR test je razvijen da omogući kvantitativno praćenje CART 19 ćelija u krvi i kosnoj srži. Svi pacijenti su imali ekspanziju i opstajanje CART19-ćelija u krvi najmanje 6 meseci kao što je prikazano na slikama 2A i 2C. Primetno, pacijenti UPN 01 i UPN 03 su imali povećanje od 1000 do 10000 puta CAR+ T ćelija u krvi tokom prvog meseca posle infuzije. Vršni nivoi ekspanzije koincidirali su sa nastupanjem kliničkih simptoma posle infuzije kod pacijenta UPN 01 (dan 15) i pacijenta UPN 03 (dan 23). Osim toga, nakon početnog opadanja koje može da se predstavi kinetikom prvog reda, nivoi CART19 T ćelija su se stabilizovali kod sva 3 pacijenta od 90. dana do 180. dana nakon infuzije. Značajno, ćelije CART19 T su takođe migrirale u kosnu srž kod svih pacijenata, iako na 5 do 10 puta nižim nivoima nego što je to primećeno u krvi kao što je prikazano na slikama 2D do 2F. Pacijenti UPN 01 i 03 su imali log-linearni pad u kosnoj srži, sa nestankom T1⁄2 od ~35 dana.
Indukcija specifičnih imunskih odgovora u odeljcima krvi i kosne srži nakon infuzije CART19
[0241] Uzorci seruma svih pacijenata su sakupljeni i ispitivani po serijama da bi se kvantitativno odredili nivoi citokina, procenjujući panel citokina, hemokina, i drugih pogodnih faktora za procenu moguih toksičnosti i da bi se obezbedio dokaz uloge CART19 ćelije kao što je prikazano na slici 3. Od trideset ispitanih analita, jedanaest je imalo 3-struku ili veću promenu u odnosu na polaznu vrednost, uključujući 4 citokina (IL-6, INF-γ, IL-8 i IL-10), 5 hemokina (MIP-1α, MIP-1β, MCP-1, CXCL9, CXCL10) i rastvorne receptore za IL-1Rα i IL-2Rα. Od njih, interferon-γ je imao najveću relativnu promenu u odnosu na polaznu vrednost. Zanimljivo, vreme postizanja vršne vrednosti porasta citokina kod UPN 01 i UPN 03 bilo je u vremenskoj korelaciji sa prethodno opisanim kliničkim simptomima i vršnim vrednostima CART19 ćelija u krvi kod svakog pacijenta. Samo umerene promene su primećene kod pacijenta UPN 02, moguće kao rezultat lečenja kortikosteroidima datim ovom pacijentu. Porast rastvornog IL-2 nije detektovan u serumu pacijenata, iako je jedan od predkliničkih razloga za razvoj CAR+ T ćelija sa 4-1BB signalnim domenima bila smanjena sklonost ka pokretanju sekrecije IL-2 u poređenju sa CD28 signalnim domenima (Milone et al., 2009, Mol Ther. 17:1453-1464). Ovo može da bude značajno za dugoročnu kliničku aktivnost, s obzirom da su prethodna ispitivanja pokazala da CAR+ T ćelije potencijalno podležu supresiji regulatornim T ćelijama (Lee et al., 2011, Cancer Res 71:2871-2881), ćelijama koje bi mogle biti izazvane receptorima CAR da sekretuju značajne količine IL-2, ili obezbeđivanjem egzogenog IL-2 posle infuzije. Konačno, snažna indukcija sekrecije citokina u supernatantima aspirata kosne srži kod UPN 03 primećena je kao što je prikazano na slici 3D koja je takođe koincidirala sa razvojem sindroma lezije tumora i potpune remisije.
Produžena ekspresija i uspostavljanje populacije memorijskih CART19 ćelija u krvi [0242] Centralno pitanje u imunoterapiji kancera posredovanoj sa CAR je da li optimizovana proizvodnja ćelija i kostimulacioni domeni produžavaju opstajanje genetski modifikovanih T ćelija i omogućavaju uspostavljanje CAR+ memorijskih T ćelija kod pacijenata. Prethodna ispitivanja nisu pokazala snažnu ekspanziju, produženo opstajanje i/ili ekspresiju receptora CAR na T ćelijama nakon infuzije (Kershaw et al., 2006, Clin Cancer Res 12:6106-6115; Lamers et al., 2006, J Clin Oncol 24:e20-e22; Till et al., 2008, Blood, 112, 2261-2271; Savoldo et al., 2011, J Clin Invest doi:10.1172/JC146110). Ispitivanja uzoraka i iz krvi i iz kosne srži protočnom citometrijom za 169 dana posle infuzije otkrila su prisustvo CAR19 koje eksprimiraju ćelije kod UPN 03 (slike 4A i 4B), i odsustvo B ćelija kao što je prikazano na slici 4A. Značajno, prema testu QPCR, sva tri pacijenta imaju perzistentne CAR+ ćelije 4 meseca i duže, kao što je prikazano na slici 2 i slici 6. In vivo učestalost CAR+ ćelija određena protočnom citometrijom dobro odgovara vrednostima dobijenim PCR testom za CART19 transgen. Značajno, kod pacijenta UPN 03, samo CD3+ ćelije su eksprimirale CAR19, budući da CAR 19+ ćelije nisu bile detektabilne u podsetovima pozitivnim na CD16 ili CD14 kao što je prikazano na slici 4A. Ekspresija CAR je takođe detektovana na površini 4.2% T ćelija u krvi pacijenta UPN 0171. dana posle infuzije kao što je prikazano na slici 7.
[0243] Dalje, polihromatska protočna citometrija je korišćena za izvođenje detaljnih ispitivanja za dalju karakterizaciju ekspresije, fenotipa, i funkcije CART19 ćelija kod UPN 03 upotrebom anti-CAR idiotipskog antitela (MDA-647) i strategijom odabira prikazanom na slici 8. Značajne razlike u ekspresiji memorijskih i aktivacionih markera kod CD8+ i CD4+ ćelija na osnovu ekspresije CAR 19 su primećene. Na dan 56, CART 19 CD8+ ćelije su prikazivale primarno efektorski memorijski fenotip (CCR7-CD27-CD28-) dosledno sa produženim i intenzivnim izlaganjem antigenu kao što je prikazano na slici 4C. Nasuprot, CAR-negativne CD8+ ćelije su se sastojale od mešavine ćelija sa efektorskom i centralnom memorijom, sa ekspresijom CCR7 u podsetu ćelija, i znatnim brojem u frakcijama CD27+/CD28-i CD27+/CD28+. Dok su i CART19 i CAR-negativne ćelijske populacije značajno ispoljavale CD57, ovaj molekul je bio podjednako koeksprimiran sa PD-1 u CART19 ćelijama, što je mogući odraz ekstenzivne replikativne prošlosti ovih ćelija. Nasuprot CAR-negativnoj ćelijskoj populaciji, kod ukupne CART19 CD8+ populacije nedostajala je ekspresija i CD25 i CD127. Do 169. dana, dok je fenotip CAR-negativne ćelijske populacije ostao sličan uzorku od 56. dana, CART19 populacija je evoluirala tako da sadrži manjinu populacije sa osobinama ćelija sa centralnom memorijom, značajnom ekspresijom CCR7, višim nivoima CD27 i CD28, kao i CAR+ ćelija koje su bile PD-1-negativne, CD57-negativne i CD 127- pozitivne.
[0244] U odeljku CD4+, 56. dana CART 19 ćelije su se karakterisale ravnomernim nedostatkom CCR7 i dominancijom CD27+/CD28+/PD-1+ ćelija raspoređenih u oba odeljka CD57+ i -, i suštinskim odsustvom ekspresije CD25 i CD127 kao što je prikazano na slici 4B. Nasuprot tome, CAR-negativne ćelije u ovom vremenskom trenutku su bile heterogene prema ekspresiji CCR7, CD27 i PD-1, eksprimirale su CD127 i takođe sadržale značajnu populaciju CD25+/CD127-(potencijalno regulatorna T ćelija). Do dana 169, dok je ekspresija CD28 ostala ravnomerno pozitivna kod svih CAR+CD4+ćelija, frakcija CART19 CD4+ ćelija je evoluirala ka fenotipu centralne memorije sa ekspresijom CCR7, višim procentom CD27-ćelija, pojavom PD-1-negativnog podseta, i sticanjem ekspresije CD127. CAR-negativne ćelije su ostale prilično konzistentne sa njihovim odeljcima na dan 56, sa izuzetkom smanjenja ekspresije CD27 i smanjenja procenta CD25+/CD127-ćelija.
CART19 ćelije mogu da zadrže efektorsku funkciju nakon 6 meseci u krvi
[0245] Pored kratkog održavanja i neadekvatne proliferacije in vivo, ograničenja prethodnih ispitivanja sa CAR+ T ćelijama su bila brzi gubitak funkcionalne aktivnosti T ćelija primenjenih infuzijom in vivo. Visok nivo održavanja CART19 ćelija i površinska ekspresija CAR19 molekula kod pacijenta UPN 01 i 03 pružila je mogućnost da se direktno ispitaju anti-CD 19-specifične efektorske funkcije u ćelijama dobijenim iz kriokonzervisanih uzoraka periferne krvi. PBMC pacijenta UPN 03 su gajeni sa ciljnim ćelijama koje su bile ili pozitivne ili negativne za ekspresiju CD 19 (slika 4d). Snažna CD19-specifična efektorska funkcija CART19 T ćelija je pokazana specifičnom degranulacijom protiv CD19-pozitivnih, ali ne i protiv CD19-negativnih ciljnih ćelija, kao što je procenjeno površinskom ekspresijom CD107a. Značajno, izlaganje CART19 populacije CD19-pozitivnim ciljnim ćelijama indukovalo je brzu internalizaciju površinskog CAR-19, kao što je prikazano na slici 8 za površinsku ekspresiju CAR 19 u istim efektorskim ćelijama pomoću standardnog bojenja protočne citometrije. Prisustvo kostimulatornih molekula na ciljnim ćelijama nije bilo potrebno za pokretanje degranulacije CART19 ćelija jer NALM-6 linija ne eksprimira CD80 ili CD86 (Brentjens et al., 2007, Clin Cancer Res 13:5426-5435). Efektorska funkcija je bila očigledna 56. dana posle infuzije i očuvana je u vremenskoj tački 169. dan. Snažna efektorska funkcija CAR+ i CAR-T ćelija takođe može da se pokaže farmakološkom stimulacijom.
Klinička aktivnost CART19 ćelija
[0246] Tokom četiri dana nakon infuzije nije primećena značajna toksičnost ni kod jednog pacijenta, osim prolaznih febrilnih reakcija. Međutim, svi pacijenti su naknadno razvili značajnu kliničku i laboratorijsku toksičnost između 7. i 21. dana nakon prve infuzije. Ove toksičnosti su bile kratkotrajne i reverzibilne. Od tri pacijenta lečena do danas, prema standardnom kriterijumu bilo je 2 CRs i 1 PR za >6 meseci nakon CART19 infuzije (Hallek et al., 2008, Blood 111:5446). Detalji anamneze i odgovora na terapiju za svakog pacijenta opisani su na slici 10.
[0247] Ukratko, pacijent UPN 01 je razvio febrilni sindrom, sa rigorom i prolaznom hipotenzijom počevši od 10 dana nakon infuzije. Groznica je trajala približno 2 nedelje i povukla se; pacijent nije imao dodatne konstitucionalne simptome. Pacijent je postigao brz i potpun odgovor kao što je prikazano na slici 5. Između 1 i 6 meseci nakon infuzije, nisu detektovane cirkulišuće CLL ćelije u krvi pomoću protočne citometrije. Kosna srž 1, 3, i 6 meseci nakon infuzije CART19 ćelija pokazuje produženo odsustvo limfocitne infiltracije prema morfološkom, i prema ispitivanju protočnom citometrijom kao što je prikazano na slici 5B. CT skenovi posle 1 i 3 meseca nakon infuzije pokazuju povlačenje adenopatije kao što je prikazano na slici 5C. Potpuna remisija je bila neprekidna više od 10 meseci u vreme izrade ovog izveštaja.
[0248] Pacijent UPN 02 je lečen sa 2 ciklusa bendamustina sa rituksimabom što je rezultovalo u stabilnoj bolesti kao što je prikazano na slici 5A. Pacijent je primio treću dozu bendamustina kao hemoterapiju za smanjenje broja limfocita pre infuzije CART19 T ćelija. Pacijent je razvio povišenu temperaturu do 40°C, rigor i dispneju koja je zahtevala hospitalizaciju od 24 časa 11. dana nakon prve infuzije i na dan druge infuzije CART19 ćelija. Groznica i konstitucionalni simptomi su postojali i 15. dana, pacijent je imao prolaznu srčanu disfunkciju; svi simptomi su se povukli nakon što je kortikosteroidna terapija započeta 18. dana. Nakon infuzije CART 19, i koincidencije sa početkom jake groznice, kod pacijenta je primećeno brzo izlučivanje p53-deficitarnih CLL ćelija iz periferne krv kao što je prikazano na slici 5A i delimično smanjenje adenopatije, kosna srž je pokazala perzistentnu ekstenzivnu infiltraciju ćelijama CLL mesec dana nakon terapija, uprkos dramatičnom smanjenju broja ćelija periferne krvi. Pacijent i dalje nije ispoljavao simptome.
[0249] Pacijent UPN 03 je primio pentostatin i ciklofosfamid kao hemoterapiju za smanjenje brija limfocita pre infuzije CART19 T ćelija. Tri dana nakon hemoterapije, ali pre infuzije ćelija, kosna srž je bila hipercelularna (60%) sa zastupljenošću CLL od približno 50%. Pacijent je primio nisku dozu CART19 ćelija (1.5x10<5>CAR+ T ćelija/kg podeljenu na 3 dana). Ponovo, nije bilo akutne toksičnosti povezane sa infuzijom. Međutim, 14 dana nakon prve infuzije, pacijent je počeo da ispoljava rigor, groznicu, mučninu i dijareju. Do dana 22 nakon infuzije, sindrom lezije tumora je dijagnostikovan i zahtevao je hospitalizaciju. Kod pacijenta su se povukli konstitucionalni simptomi, i u okviru 1 meseca od infuzija CART19, kod pacijenta je primećeno izlučivanje cirkulišuće CLL iz krvi i kosne srži pomoću morfološkog ispitivanja, protočne citometrije, citogenetske, i FISH analize. CT skenovi su pokazali povlačenje abnormalne adenopatije kao što je prikazano na slikama 5B i 5C. Potpuna remisija se održala više od 8 meseci od početne infuzije CART19 ćelija.
Razmatranja in vivo odnosa CART19 efektorskih ćelija prema CLL ciljnoj ćelijami [0250] Predklinička ispitivanja su pokazala da veliki tumori mogu da se otklone, i da infuzija 2.2x10<7>CARs može da iskoreni tumore sačinjene od 1x10<9>ćelija, pri in vivo E:T odnosu od 1:42 u humanizovanim miševima (Carpenito et al., 2009, Proc Natl Acad Sci U S A 106:3360-3365), mada ova izračunavanja nisu uzela u obzir ekspanziju T ćelija nakon injekcje. Procena CLL tumorskog opterećenja tokom vremena omogućila je izračunavanje smanjenja tumora i procenu odnosa CART19 E:T postignutih in vivo kod tri subjekta na osnovu broja CAR+ T ćelija primenjenih infuzijom. Tumorska opterećenja su izračunata merenjem CLL opterećenja u kosnoj srži, krvi i sekundarnim limfoidnim tkivima. Polazna tumorska opterećenja kao što je pokazano na slici 10 ukazuju na to da je svaki pacijent imao red veličine od 10<12>CLL ćelija (tj.1 kilogram tumorskog opterećenja) pre infuzije CART19. Pacijent UPN 03 je imao procenjeno polazno tumorsko opterećenje 8.8x10<11>CLL ćelija u kosnoj srži na dan -1 (tj. posle hemoterapije i pre infuzije CART19), i izmerenu masu tumora u sekundarnim limfoidnim tkivima od 3.3 -5.5x10<11>CLL ćelija, u zavisnosti od postupka volumetrijske CT sken analize. S obzirom da je kod UPN 03 primenjena infuzija sa samo 1.4x107 CART19 ćelija, upotrebom procene početnog ukupnog tumorskog opterećenja (1.3x1012 CLL ćelija), i toga da CLL ćelije nisu detektabilne posle lečenja, postignut je upečatljiv odnos E:T od 1:93000. Sličnim izračunavanjima, efektivan odnos E:T in vivo od 1:2200 i 1:1000 je izračunat za UPN 01 i UPN 02 kao što je prikazano u tabeli 3). Na kraju, verovatno je serija uništavanja CART19 T ćelijama, kombinovana sa in vivo ekspanzijom CART19 od >1 000 puta, doprinela snažnom anti-leukemijskom dejstvu posredovanom CART19 ćelijama.
T ćelije koje eksprimiraju himerne receptore uspostavljaju memoriju i snažno anti-tumorsko dejstvo kod pacijenata sa uznapredovalom leukemijom
[0251] Ograničena in vivo ekspresija i efektorska funkcija receptora CAR bila je centralno ograničenje u probnim ispitivanjima prve generacije receptora CAR (Kershaw et al., 2006, Clin Cancer Res 12:6106-6115; Lamers et al., 2006, J Clin Oncol 24:e20-e22; Till et al., 2008, Blood, 112, 2261-2271; Park et al., 2007, Mol Ther 15:825833; Pule et al., 2008, Nat Med 14:1264-1270). Zasnovani na predkliničkom modelu koji pokazuje produženo održavanje receptora CAR koji sadrže signalni modul 4-1BB (Milone et al., 2009, Mol Ther.
17:1453-1464; Carpenito et al., 2009, Proc Natl Acad Sci U S A 106:3360-3365), eksperimenti su dizajnirani da razviju drugu generaciju receptora CAR modifikovanih tehnologijom lentiviralnog vektora. Nađeno je da je ova druga generacija receptora CAR bezbedna u okruženju hronične HIV infekcije (Levine et al., 2006, Proc Natl Acad Sci U S A 103:17372-17377). Prikazani rezultati pokazuju da kada je ova druga generacija CAR bila eksprimirana u T ćelijama i gajena pod uslovima dizajniranim da promovišu usađivanje centralne memorije T ćelija (Rapoport et al., 2005, Nat Med 11:1230-1237; Bondanza et al., 2006, Blood 107:1828-1836), primećena je poboljšana ekspanziju CAR T ćelija nakon infuzije u odnosu na prethodne izveštaje. CART 19 ćelije su uspostavile CD19-specifičnu ćelijsku memoriju, i ubile tumorske ćelije pri odnosu E:T in vivo koji ranije nije postignut.
1
[0252] CART 19 je prvi pokušaj ugradnje 4-1BB signalnog domena u CAR i prva upotreba tehnologije lentiviralnog vektora. Prikazani rezultati pokazuju efikasan prelazak receptora CAR na pozicije tumora, sa de facto uspostavljanjem "limfocita koji infiltriraju tumor" koji ispoljavaju specifičnost za CD19. Izražena in vivo ekspanzija omogućila je da se prvi put pokaže da receptori CAR direktno izdvojeni iz organizma pacijenta mogu da zadrže efektorsku funkciju in vivo mesecima. Prethodno ispitivanje je sugerisalo da je uvođenje prve generacije CAR u virus specifične T ćelije poželjnije od uvođenja u primarne T ćelije (Pule et al., 2008, Nat Med 14:1264-1270), međutim rezultati sa drugom generacijom receptora CAR uvedenih u optimalno kostimulisane primarne T ćelije dovode ovaj zaključak u pitanje. Bez želje za vezivanjem za određenu teoriju, pojavljuje se upozorenje da su klinička dejstva bila potpuna i bez presedana sa lizom tumorskih opterećenja težine izražene u kilogramima, kod sva tri pacijenta praćenom odloženim oslobađanjem potencijalno opasno visokih nivoa citokina kod dva pacijenta. Dejstva klasične citokinske oluje nisu primećena. Međutim, predmetno ispitivanje je dizajnirano da ovu mogućnost ublaži promišljenom infuzijom CART19 tokom perioda od tri dana.
[0253] Nađeno je da veoma niske doze receptora CAR mogu da izazovu snažne kliničke odgovore. Pilot ispitivanje je pokazalo bezbednost dizajna CART19 vektora. Zapažanje da doze CART19 ćelija nekoliko redova veličina manje od onih koje su ispitivane u prethodnim ispitivanjima mogu da imaju klinički efekat može da ima značajne implikacije na buduću primenu CAR terapije na široj skali, i na dizajn ispitivanja receptora CAR usmerenih protiv ciljeva koji nisu CD19.
[0254] Predmetna ispitivanja dodatno ukazuju da je CART19 eksprimiran i u T ćelijama sa centralnom memorijom i u efektorskim T ćelijama, i ovo verovatno doprinosi njihovom dugotrajnom preživljavanju u poređenju sa prethodnim izveštajima. Bez želje da se vezuje za neku posebnu teoriju, CAR T ćelije mogu da diferenciraju in vivo u stanje slično centralnoj memoriji nakon susreta i naknadne eliminacije ciljnih ćelija (npr. tumorskih ćelija CLL ili normalnih B ćelija) koje eksprimiraju zamenski antigen. Zaista, objavljeno je da signal koji potiče od 4-1BB promoviše razvoj memorije u kontekstu prenosa signala putem TCR (Sabbagh et al., 2007, Trends Immunol 28:333-339).
[0255] Produžena proliferacija i preživljavanje CART19 otkrilo je aspekte farmakokinetike CAR T ćelija koji nisu ranije bili objavljeni. Primećeno je da je kinetika oslobađanja citokina u serumu i kosnoj srži u korelaciji sa vršnim nivoima CART19, tako da je moguće da je propadanje inicirano kada ciljne ćelije koje eksprimiraju CD19 postanu ograničene. Mehanizam produženog preživljavanja CART19 može da se poveže sa gorepomenutom
2
ugradnjom 4-1BB domena ili sa prenosom signala preko prirodnog TCR i/ili CAR. Zanimljiva mogućnost je to da je produženo preživljavanje povezano sa populacijom CART19 koja je identifikovana u uzorcima kosne srži, stvarajući pretpostavku da CD19 CAR može da se održava posredstvom susreta sa progenitorskim B ćelijama u kosnoj srži. U vezi sa ovim, postavlja se pitanje šta pokreće početnu ekspanziju CART 19 ćelija in vivo? Sa retkim izuzecima (Savoldo et al., 2011, J Clin Invest doi:10.1172/JCI46110; Pule et al., 2008, Nat Med 14:1264-1270), ovo ispitivanje je jedino ispitivanje koje je izostavilo infuzije IL-2, tako da se CART19 ćelije verovatno ili umnožavaju kao odgovor na homeostatičke citokine ili verovatnije, na CD19 eksprimiran na leukemijskim ciljnim ćelijama i/ili normalnim B ćelijama. U drugom slučaju, ovo bi mogla da bude privlačna osobina receptora CAR usmerenih protiv ciljeva na normalnim APCs kao što su CD19 i CD20, budući da je moguće da se samo-obnova CART19 događa na normalnim ćelijama, obezbeđujući mehanizam memorije CAR putem "samo-vakcinacije/pojačavanja" i time, dugotrajan imunološki nadzor nad tumorom. Mehanizmi homeostaze CART19 mogu da zahtevaju dodatno ispitivanje za razjašnjavanje unutrašnjih i spoljašnjih mehanizama održavanja ćelija. Pre ovih rezultata, većina istraživača je videla terapiju upotrebom CAR kao prelazni oblik imunoterapije, međutim receptori CAR sa optimizovanim signalnim domenima mogu da imaju ulogu i u indukciji i obrazovanju remisije, kao i u dugotrajnom imunološkom nadzoru.
[0256] Snažna anti-leukemijska dejstva su primećena kod sva tri pacijenta, uključujući dva pacijenta sa leukemijom u kojoj se javlja nedostatak p53. Prethodna ispitivanja sa CAR receptorima su imala teškoću u razdvajanju antitumorskih dejstava od hemoterapije za smanjenje broja limfocita. Međutim, odloženo oslobađane citokina kombinovano sa kinetikom lize tumora kod pacijenata otpornih na fludarabin koje koincidira, i moguće zavisi od in vivo ekspanzije CAR u predmetnom ispitivanju, ukazuje na to da CART19 posreduje u snažnim antitumorskim dejstvima. Prikazani rezultati ne isključuju ulogu hemoterapije u potenciranju dejstva CAR receptora.
[0257] Temeljno poređenje vektora, transgena i postupaka za proizvodnju ćelija sa rezultatima tekućih ispitivanja u drugim centrima će možda biti potrebno da bi se postiglo potpuno razumevanje ključnih karakteristika potrebnih za dobijanje neprekidne funkcije CAR T ćelija in vivo. Za razliku od terapija antitelom, T ćelije modifikovane pomoću CAR imaju mogućnost da se repliciraju in vivo, i njihov dugotrajni opstanak bi mogao da vodi dugotrajnoj kontroli tumora. Dostupnost gotove terapije sačinjene od T ćelija-ubica bez unakrsne rezistencije ima mogućnost da poboljša izglede pacijenata sa B ćelijskim malignitetima. Ograničenje terapije antitelom, kao na primer, sredstvima kao što je rituksimab i bevicizumab, je to što terapija zahteva ponovljene infuzije antitela, što je neugodno i skupo. Uvođenje produžene terapije antitelom (u ovom slučaju najmanje 6 meseci kod 3 od 3 do danas lečena pacijenta) sa anti-CD19 scFv eksprimiranim na T ćelijama nakon jednokratne infuzije CART19 ćelija ima brojne praktične prednosti, uključujući veću udobnost za pacijenta i manje troškove.
Primer 2: T ćelije modifikovane himernim receptorom za antigen u hroničnoj limfoidnoj leukemiji
[0258] Dizajniran je lentiviralni vektor koji eksprimira himerni receptor za antigen sa specifičnošću za B-ćelijski antigen CD19, kuplovan sa CD137 (kostimulatornim receptorom u T ćelijama [4-1BB]) i signalnim domenima CD3-zeta (komponenta T-ćelijskog receptora za antigen koja prenosi signal). Primećeno je da se niska doza (približno 1.5x10<5>ćelija po kilogramu telesne težine) autolognih T ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen primenjena ponovnom infuzijom kod pacijenta sa refraktornom hroničnom limfocitnom leukemijom (CLL) umnožava in vivo do nivoa koji je više od 1000 viši od polaznog nivoa usađenih ćelija. Takođe je primećeno da pacijent ispoljava odloženi razvoj sindroma lize tumora i potpunu remisiju.
[0259] Pored sindroma lize tumora, jedini drugi toksični efekat stepena 3/4 povezan sa T ćelijama sa himernim receptorom za antigen bio je limfopenija. Modifikovane ćelije su ostajale na visokim nivoima najmanje 6 meseci u krvi i kosnoj srži i nastavljale da eksprimiraju himerni receptor za antigen. Specifični imunski odgovor je detektovan u kosnoj srži, praćen gubitkom normalnih B ćelija i leukemijskih ćelija koje eksprimiraju CD19. Remisija se nastavila u toku 10 meseci nakon lečenja. Hipogamaglobulinemija je bila očekivani hronični toksični efekat.
[0260] Materijali i postupci uključeni u ove eksperimente su opisani u nastavku.
Materijali i postupci
Postupci ispitivanja
[0261] Dizajniran je samoinaktivirajući lentiviralni vektor (GeMCRIS 0607-793), koji je podvrgnut predkliničkom ispitivanju bezbednosti, kao što je prethodno objavljeno (Milone et al., 2009, Mol Ther, 17: 1453-64). Postupci za pripremu T-ćelija su takođe prethodno opisani (Porter et al, 2006, Blood, 107:1325-31). Da bi se detektovale T ćelije sa himernim receptorom za antigen u krvi i kosnoj srži izvedena je kvantitativna reakcija lančane polimeraze (PCR). Donja granica kvantifikacije je određena iz standardne krive; srednje
4
vrednosti ispod donje granice kvantifikacije (tj., određene, ali ne podležu kvantifikaciji) smatrane su približnim. Donja granica kvantifikacije testa bila je 25 kopija po mikrogramu genomiske DNK.
[0262] Ispitivanje rastvornih faktora izvedeno je upotrebom seruma iz pune krvi i kosne srži koja je bila odvojena u alikvote za jednokratnu upotrebu i skladištena na -80°C. Kvantifikacija rastvornih citokinskih faktora izvedena je upotrebom tehnologije i reagenasa Luminex nizova mikroperli (Life Technologies).
Afereza #1
[0263] Postupak za aferezu od 12-15 litara sproveden je u centru za aferezu. Tokom ovog postupka, dobijene su mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) za proizvodnju CART-19 T ćelija. Iz jedne leukafereze, sakupleno je najmanje 50 x 10<9>belih krvnih ćelija za proizvodnju CART-19 T ćelija. Polazni leukociti krvi su takođe dobijeni i kriokonzervisani.
Hemoterapija za smanjenje broja ćelija
[0264] Hemoterapija je započeta približno 5-10 dana pre infuzije tako da CART-19 ćelije mogu da se daju 1-2 dana nakon završetka hemoterapije. Vreme započinjanja hemoterapije stoga zavisi od dužine režima. Svrha hemoterapije je da indukuje limfopeniju u cilju olakšavanja usađivanja i homeostatske ekspanzije CART-19 ćelija. Hemoterapija može takođe da bude izabrana da smanji tumorsko opterećenje bolesti. Hemoterapiju za smanjenje broja ćelija biraju i primenjuju nadležni onkolozi. Izbor hemoterapije zavisi od osnovne bolesti pacijenata i prethodnih terapija koje su primali. Fludarabin (30 mg/m2/dan x 3 dana) i ciklofosfamid (300 mg/m2/dan x 3 dana) su sredstva izbora, s obzirom da u toj oblasti najviše iskustva ima sa korišćenjem ovih sredstava u olakšavanju adoptivne imunoterapije. Nekoliko drugih prihvatljivih režima koji obuhvataju primenu lekova odobrenih od strane FDA su pogodni, uključujući CHOP, HyperCVAD, EPOCH, DHAP, ICE ili druge režime.
Ponovna procena
[0265] Na kraju hemoterapije izvodi se ograničena ponovna procena stadijuma u cilju obezbeđivanja mera polaznog tumorskog opterećenja. Ovo uključuje snimanje, medicinski pregled, i procene minimalne preostale bolesti (MRD). Subjekti prolaze sledeće u cilju ispitivanja pre infuzije: medicinski pregled, dokumentovanje neželjenih događaja i vađenje krvi za hematološko, hemijsko ispitivanje i test za utvrđivanje trudnoće (ako je primenljivo).
Priprema CART-19 T ćelija
[0266] Autologne T ćelije su modifikovane tako da eksprimiraju vanćelijsko jednolančano antitelo (scFv) sa specifičnošću za CD19. Vanćelijski scFv može da preusmeri specifičnost transdukovanih T ćelija prema ćelijama koje eksprimiraju CD19, molekul koji se ograničeno eksprimira na površini malignih ćelija i na normalnim B ćelijama. Pored CD19 scFv, ćelije su transdukovane da eksprimiraju unutarćelijski signalni molekul sačinjen od TCRζ lanca ili tandem signalnog domena sačinjenog od signalnih modula 4-1BB i TCRζ. scFv je izveden iz mišjeg monoklonskog antitela, i stoga sadrži mišje sekvence, a signalni domeni imaju u potpunosti prirodne humane sekvence. CART-19 T ćelije se proizvode izolovanjem T ćelija aferezom, i upotrebom tehnologije lentiviralnog vektora (Dropulic et al., 2006, Human Gene Therapy, 17: 577-88; Naldini et al., 1996, Science, 272: 263-7; Dull et al., 1998, J Virol, 72: 8463-71) za uvođenje scFv:TCRζ:4-1BB u CD4 i CD8 T ćelije. Kod nekih pacijenata, kontrolna scFv:TCRζ: se uvodi u deo ćelija za eksperiment kompetitivne repopulacije. Ovi receptori su "univerzalni" po tome što mogu da vežu antigen na način nezavisan od MHC, stoga, jedan receptorski konstrukt može da se koristi za lečenje populacije pacijenata sa CD19 antigen-pozitivnim tumorima.
[0267] CAR konstrukti su razvijeni na Univerzitetu Pensilvanije i vektor kliničkog stepena je proizveden u Lentigen Corporation. CART-19 ćelije su proizvedene u Clinical Cell and Vaccine Production Facility Univerziteta Pensilvanije prema postupku opisanom na slici 11. Po završetku gajenja ćelija, ćelije su kriokonzervisane u infuzibilnom kriomedijumu. Jedna doza T ćelija transdukovanih sa CART-19 koja sačinjava infuziju od 2.5 x 10<9>do 5 x 10<9>ćelija ukupno, primenjuje se u 1 ili 2 kese. Svaka kesa sadrži alikvot (zapremina zavisi od upotrebe) kriomedijuma koji sadrže sledeće sastojke odgovarajućeg stepena za infuziju (% zapr/zapr): 31.25 plasmalyte-A, 31.25 dekstrozu (5%), 0.45 NaCl, do 7.50 DMSO, 1.00 dekstran 40, 5.00 humani serum albumin sa približno 2.5-5 x 10<9>autolognih T ćelija po kesi. Zbog povećane bezbednosti, prva doza se daje kao podeljena doza nultog, 1. i 2. dana sa ~10% ćelija nultog dana, 30% 1. dana, i 60% 2. dana.
Skladištenje
[0268] Kese (kapaciteta 10 do 100 ml) koje sadrže T ćelije transdukovane sa CART-19 se skladište u uslovima banke krvi u zamrzivaču na -135°C čiji se uslovi prate. Infuzijske kese se skladište u zamrzivaču do upotrebe.
Odmrzavanje ćelija
[0269] Nakon registracije ćelija u istraživačkoj apoteci, zamrznute ćelije se transportuju na suvom ledu do postelje subjekta. Ćelije se odmrzavaju pored postelje jedna po jedna upotrebom vodenog kupatila koje se održava na 36°C do 38°C. Kesa se blago masira dok se ćelije ne odmrznu. U kontejneru ne treba da ostanu smrznute grudvice. Ako proizvod CART-19 ćelija izgleda kao da ima oštećenu kesu ili kesu koja curi, ili izgleda narušeno na drugi način, ne treba da se upotrebi za infuziju.
Premedikacija
[0270] Sporedna dejstva koja prate infuzije T ćelija mogu da uključuju prolaznu groznicu, drhtavice, i/ili mučninu. Preporučljivo je da subjekat dobije premedikaciju acetaminofenom od 650 mg oralno i difenhidramin hidrohloridom od 25-50 mg oralno ili IV, pre infuzije CART-19 ćelija. Ovi lekovi mogu da se ponavljaju svakih šest časova po potrebi. Kura nesteroidnog antiinflamatornog lečenja može da bude prepisana ako pacijent nastavlja da ima groznicu koju ne otklanja acetaminofen. Preporučljivo je da pacijenti ne primaju sistemske kortikosteroide kao što je hidrokortizon, prednizon, prednizolon (Solu-Medrol) ili deksametazon (Decadron) u bilo kom trenutku, osim u slučaju opasnosti po život, jer to može negativno da utiče na T ćelije. Ako su kortikosteroidi potrebni zbog akutne reakcije na infuziju, preporučuje se početna doza hidrokortizona od 100 mg.
Primena/infuzija
[0271] Infuzije počinju 1 do 2 dana nakon završetka hemoterapije. Na dan prvih infuzija, pacijentima se radi kompletna krvna slika sa leukocitarnom formulom, i procena količine CD3, CD4 i CD8 budući da se hemoterapija daje delimično da bi indukovala limfopeniju. Bez želje da se vezuje za neku posebnu teoriju, veruje se da je početna i.v. doza od 2.5-5x10<9>CART-19 ćelija optimalna za ovaj protokol, jer zdrava odrasla osoba ima oko 1 x 10<12>T ćelija, predložena ukupna doza je ekvivalentna oko 0.5% ukupne telesne mase T ćelija (Roedere, 1995, Nat Med, 1: 621-7; Macallan et al., 2003, Eur J Immunol, 33; 2316-26). Prva doza se primenjuje upotrebom podeljene doze nultog (10%), 1. (30%) i 2. (60%) dana. Subjekti primaju infuziju u izolovanoj prostoriji. Ćelije se odmrzavaju pored postelje pacijenta kao što je ovde opisano na drugom mestu. Odmrznute ćelije se daju kroz infuziju onolikom brzinom koliko pacijent podnosi tako da je trajanje infuzije približno 10-15 minuta. Transdukovane T ćelije se primenjuju brzom intravenskom infuzijom brzinom od približno 10 mL do 20 mL po minutu kroz sistem za krv Y-tipa od 18 godža bez lateksa sa trokrakim sigurnosnim ventilom. Trajanje infuzije je približno 15 minuta. Jedna ili dve kese ćelija modifikovanih sa CART-19 se dostavljaju na ledu, i ćelije se primenjuju kod subjekta dok su hladne. Kod subjekata koji primaju mešavine CART-19 ćelija, u cilju olakšanog mešanja, ćelije se primenjuju istovremeno upotrebom Y-adaptera. Subjekti primaju infuziju i premedikaciju kao što je ovde opisano na drugom mestu. Vitalni znaci subjekata se prate i pulsna oksimetrija se radi pre doziranja, na kraju infuzije i svakih 15 minuta nakon nje tokom 1 časa i sve dok ovi parametri ne budu stabilni i zadovoljavajući. Uzorak krvi za određivanje polaznog nivoa CART-19 se dobijaju pre infuzije i 20 minuta posle infuzije. Kod pacijenata kod kojih se javila toksičnost kod prethodnih hemoterapija za smanjenje broja ćelija odlože se raspored infuzija dok se ova toksičnost ne povuče. Konkretni toksični fenomeni zbog kojih se odlaže infuzija T ćelija uključuju: 1) plućni: potreba za dodatnim kiseonikom za održavanje zasićenja većeg od 95% ili prisustvo radiografskih abnormalnosti na snimku grudnog koša xzracima koje su progresivne; 2) srčani: nova srčana aritmija koja nije medicinski kontrolisana, 3) hipotenzija koja zahteva podršku pritiska; 4) aktivna infekcija: pozitivne kulture krvi na bakterje, gljive, ili viruse u okviru 48-časova od T ćelijske infuzije. Uzorak seruma za kalijum i mokraćnu kiselinu se uzima pre prve infuzije kao i dva časa nakon svake sledeće infuzije.
Laboratorijska ispitivanja posle infuzije za procenu usađivanja i perzistentnosti
[0272] Subjekti se vraćaju 4. i 10. dana nakon početne infuzije CART-19 ćelija da bi im se izvadila krv za određivanje nivoa serumskih citokina, i PCR CART-19 u cilju procene prisustva CART-19 ćelija. Subjekti se vraćaju jednom nedeljno tokom tri nedelje da bi prošli sledeće: medicinski pregled, dokumentovanje neželjenih događaja i vađenje krvi za hematološko, hemijsko, i ispitivanje usađivanja i perzistencije CART-19 ćelija, i laboratorijska ispitivanja.
Druga infuzija
[0273] Bez želje da se vezuje za neku posebnu teoriju, smatra se da druga doza CART-19 ćelija može da se da pacijentima11. dana, pod uslovom da nisu ispoljili odgovarajuću toleranciju na prvu dozu i da je proizvedeno dovoljno CART-19 ćelija. Doza je 2-5 x 10<9>ćelija ukupno. Uzorak seruma za kalijum i mokraćnu kiselinu može da se uzme dva časa nakon infuzije.
Druga afereza
[0274] Postupak za aferezu od 2 litara sproveden je u centru za aferezu, PBMC za istraživanje su dobijene i kriokonzervisane. Subjekti prolaze sledeće: medicinski pregled, dokumentovanje neželjenih događaja i vađenje krvi za hematološko, hemijsko, i ispitivanje usađivanja i perzistencije CART-19 ćelija, i laboratorijska ispitivanja. Dodatno se radi ponovna procena stadijuma u cilju obezbeđivanja obima tumorskog opterećenja. Testovi za ponovnu procenu stadijuma se određuju prema vrsti bolesti i uključuju snimanje, procene MRD, aspirat kosne srži i biopsiju i/ili biopsiju limfnog čvora.
Mesečne procene od 2 do 6 meseci nakon infuzije
[0275] Subjekti se vraćaju na mesečnoj bazi od 2 do 6 meseci posle CART-19 ćelijske infuzije. U ovim posetama u okviru ispitivanja, subjekti prolaze sledeće: medicinski pregled, dokumentovanje neželjenih događaja i vađenje krvi za hematološko, hemijsko, i ispitivanje usađivanja i perzistencije CART-19 ćelija, i laboratorijska ispitivanja. DNK test na HIV se izvodi u mesecima 2-6 posle CART-19 ćelijske infuzije da bi se isključilo prisustvo detektabilne RCL.
Tromesečne procene do 2 godine posle infuzije
[0276] Subjekti se procenjuju na tromesečnoj bazi do 2 godine posle infuzije. U ovim posetama u okviru ispitivanja, subjekti prolaze sledeće: medicinski pregled, dokumentovanje neželjenih događaja i vađenje krvi za hematološko, hemijsko, i ispitivanje usađivanja i perzistencije CART-19 ćelija, i laboratorijska ispitivanja. DNK test na HIV se izvodi 3 i 6 meseci posle CART-19 ćelijske infuzije da bi se isključilo prisustvo detektabilne RCL.
[0277] U nastavku su opisani rezultati eksperimenata.
Anamneza pacijenta
[0278] Pacijent je dobio dijagnozu CLL stadijuma I 1996. godine. Prvi put mu je bilo potrebno lečenje nakon 6 godina posmatranja zbog progresivne leukocitoze i adenopatije. Godine 2002, lečen je sa dva ciklusa rituksimaba plus fludarabina; ovo lečenje je rezultovalo u normalizaciji krvne slike i delimičnom povlačenju adenopatije. Godine 2006, primio je četiri ciklusa rituksimaba i fludarabina zbog progresije bolesti, ponovo sa normalizacijom krvne slike i delimičnom regresijom adenopatije. Ovaj odgovor je bio praćen 20-mesečnim intervalom bez progresije i intervalom od 2 godine bez lečenja. U februaru 2009, imao je naglo progresivnu leukocitozu i rekurentnu adenopatiju. Njegova kosna srž je bila ekstenzivno infiltrirana sa CLL. Citogenetska analiza je pokazala da je 3 od 15 ćelija sadržalo deleciju hromozoma 17p, i ispitivanje fluorescentnom in situ hibridizacijom (FISH) je pokazalo da 170 od 200 ćelija ima deleciju uključujući TP53 na hromozomu 17p. Pacijent je primio rituksimab sa bendamustinom u jednom ciklusu i tri dodatna ciklusa bendamastina bez rituksimaba (zbog ozbiljne alergijske reakcije). Ovo lečenje je rezultovalo samo u prolaznom poboljšanju limfocitoze. Progresivna adenopatija je dokumentovana pomoću kompjuterske tomografije (CT) nakon terapije.
[0279] Autologne T ćelije su sakupljene pomoću leukafereze i kriokonzervisane. Pacijent je zatim primao alemtuzumab (anti-CD52, zreli limfociti, površinski antigen) tokom 11 nedelja, sa poboljšanom hematopoezom i delimičnim povlačenjem adenopatije. Tokom sledećih 6 meseci, imao je stabilnu bolest sa perzistentnim, ekstenzivnim učešćem kosne srži i difuznom adenopatijom sa višestrukim limfnim čvorovima veličine 1 do 3 cm. U julu 2010, pacijent je uključen u fazu 1 kliničkog ispitivanja T ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen.
Infuzije ćelija
[0280] Autologne T ćelije dobijene od pacijenta su bile odmrznute i transdukovane lentivirusom tako da eksprimiraju CD19-specifični himerni receptor za antigen (slika 12A); identifikatori sekvence za lentiviralni vektor i relevantne sekvence su prikazane u tabeli 5. Četiri dana pre infuzije ćelija, pacijent je primio hemoterapiju namenjenu smanjenju broja limfocita (pentostatin u dozi od 4 mg po kvadratnom metru površine tela i ciklofosfamid u dozi od 600 mg po kvadratnom metru) bez rituksimaba (Lamanna et al,, 2006, J Clin Oncol, 24: 1575-81). Tri dana nakon hemoterapije ali pre infuzije ćelija, kosna srž je bila hipercelularna sa približno 40% učešća CLL. Leukemijske ćelije su eksprimirale kapa laki lanac i CD5, CD19, CD20, i CD23. Citogenetska analiza je pokazala dva odvojena klona, gde oba rezultuju gubitkom hromozoma 17p i lokusa TP53 (46,XY,del(17)(p12)[5]/46,XY,der(17)t(17;21)(q10;q10)[5]/46,XY[14]). Četiri dana nakon hemoterapije, pacijent je primio ukupno 3x108 T ćelija, od kojih je 5% bilo transdukovano, što je ukupno 1,42x10<7>transdukovanih ćelija (1,46x10<5>ćelija po kilogramu) podeljenu u tri konsekutivne dnevne intravenske infuzije (10% 1. dana, 30% 2. dana, i 60% 3. dana). Citokini nisu primenjeni posle infuzije. Nisu zabeležena nikakva toksična dejstva infuzija.
Klinički odgovor i procena
[0281] Četrnaest dana nakon prve infuzije, pacijent je počeo da ima drhtavice i povišenu temperaturu manjeg stepena udruženu sa zamorom 2. stepena. Tokom sledećih 5 dana, drhtavice su se intenzivirale, i njegova temperatura se povećala do 39.2°C (102.5°F), udružena sa rigorom, preznojavanjem, anoreksijom, mučninom, i dijarejom. Nije imao respiratorne ili srčane simptome. Zbog groznice je urađena radiografija grudnog koša i kulture krvi, urina i stolice, i sve su bile negativne ili normalne. Sindrom lize tumora je dijagnostikovan 22. dana nakon infuzije (slika 12B). Nivo mokraćne kiseline bio je 10.6 mg po decilitru (630.5 µmol po litru), nivo fosfora je bio 4.7 mg po decilitru (1.5 mmol po litru) (normalni opseg, 2.4 do 4.7 mg po decilitru [0.8 do 1.5 mmol po litru]), i nivo laktat dehidrogenaze je bio 1130 U po litru (normalni opseg, 98 do 192). Postojao je dokaz akutnog oštećenja bubrega, sa nivoom kreatinina od 2.60 mg po decilitru (229.8 µmol po litru) (polazni nivo, <1.0 mg po decilitru [<88.4 µmol po litru]). Pacijent je hospitalizovan i lečen zamenom fluida i razburikazom. Nivo mokraćne kiseline se vratio u normalni opseg u okviru
1
24 časa, a nivo kreatinina u okviru 3 dana; otpušten je iz bolnice 4. dana. Nivo laktat dehidrogenaze je postepeno opadao, postajući normalan tokom narednih meseci.
[0282] Do 28 dana nakon infuzije CART19-ćelija, adenopatija više nije bila palpabilna, i 23. dana, nije bilo dokaza CLL u kosnoj srži (slika 12C). Kariotip je sada bio normalan u 15 od 15 ćelija (46,XY), i ispitivanje pomoću FISH metode ja bilo negativno za deleciju TP53 u 198 od 200 ispitanih ćelija; što se smatra nalazom u granicama normale u negativnim kontrolama. Ispitivanje protočnom citometrijom nije pokazalo rezidualnu CLL, i B ćelije nisu bile detektabilne (<1% ćelija unutar prozora za razdvajanje za CD5+CD10-CD19+CD23+ limfocita). CT skeniranje sprovedeno 31. dana nakon infuzije pokazalo je povlačenje adenopatije (slika 12D).
[0283] Tri i šest meseci nakon infuzije CART19 ćelija, medicinski pregled je ostao nepromenjen, bez palpabilne adenopatije, i CT skeniranje izvedeno 3 meseca nakon infuzije CART19 ćelija pokazalo je trajnu remisiju (slika 12D). Ispitivanja kosne srži na 3 i 6 meseci takođe nisu dala dokaze CLL ispitivanjem morfologije, kariotipa (46,XY), ili pomoću protočne citometrije, sa produženim nedostatkom normalnih B ćelija takođe. Remisija je bila neprekinuta tokom najmanje 10 meseci.
Toksičnost CART 19 ćelija
[0284] Infuzije ćelija nisu imale nikakva akutna toksična dejstva. Jedini ozbiljni (stepena 3 ili 4) zabeleženi neželjeni događaj bio je sindrom lize tumora stadijuma 3, opisan gore u tekstu. Pacijent je imao limfopeniju stepena 1 na početku, i limfopeniju stepena 2 ili 3 počevši od 1. dana, koja se nastavila najmanje 10 meseci nakon terapije. Limfopenija stepena 4, sa apsolutnim brojem limfocita od 140 ćelija po kubnom milimetru, zabeležena je 19. dana, ali od 22. dana tokom najmanje 10 meseci, apsolutni broj limfocita je bio u opsegu između 390 i 780 ćelija po kubnom milimetru (stepen 2 ili 3 limfopenije). Pacijent je imao prolaznu trombocitopeniju stepena 1 (broj trombocita, 98000 do 131000 po kubnom milimetru) od 19. dana do 26. dana i stepen 1 ili 2 neutropenije (apsolutni broj neutrofila, 1090 do 1630 po kubnom milimetru) od 17. dana do 33. dana. Drugi znakovi i simptomi koji su možda bili vezani za lečenje u okviru ispitivanja uključuju stepen 1 i 2 porasta nivoa aminotransferaze i alkalne fosfataze, koji su se razvili 17 dana nakon prve infuzije i povukli do 33. dana. stepen 1 i 2 konstitucionalnih simptoma koji su se sastojali od groznice, drhtavice, preznojavanja, mijalgije, glavobolje i zamora. Stepen 2 hipogamaglobulinemije je popravljen infuzijama intravenskog imunoglobulina.
Ispitivanje citokina seruma i kosne srži
2
[0285] Pacijentov klinički odgovor bio je praćen odloženim povećanjem nivoa inflamatornih citokina (slika 13A do slike 13D), sa nivoima interferona-γ, hemokina koji odgovaraju na interferon-γ CXCL9 i CXCL10, i interleukina-6 koji su bili 160 puta viši od polaznih nivoa. Vremenski porast nivoa citokina paralelno je pratio kliničke simptome, sa vršnim vrednostima na 17 do 23 dana nakon prve infuzije CART19 ćelija.
[0286] U supernatantima serije aspirata kosne srži mereni su citokini i pruženi su dokazi imunološke aktivacije (slika 13E). Zabeleženi su značajni porasti interferona-γ, CXCL9, interleukina-6, i rastvornog receptora za interleukin-2, u poređenju sa polaznim nivoima na dan pre T-ćelijske infuzije; vrednosti su postigle vrhunac 23. dana nakon prve infuzije CART19-ćelija. Porast citokina u kosnoj srži koincidirao je sa eliminacijom ćelija leukemije iz kosne srži. Faktor nekroze tumora α u serumu i kosnoj srži ostao je nepromenjen.
Ekspanzija i perzistencija T ćelija sa himernim receptorom za antigen
[0287] Metodom PCR u realnom vremenu detektovana je DNK koja kodira anti-CD 19 himerni receptor za antigen (CAR19) počevši od 1. dana nakon prve infuzije (slika 14A). Ekspanzija veća od 3-log ćelija in vivo primećena je do 21. dana nakon infuzije. Na vršnim nivoima, CART19 ćelije u krvi činile su više od 20% cirkulišućih limfocita; ovi vršni nivoi koincidirali su sa pojavom konstitucionalnih simptoma, sindromom lize tumora (slika 12B), i porastom nivoa citokina u serumu (slika 13A do slike 13D). CART19 ćelije su ostale detektabilne na visokim nivoima 6 meseci nakon infuzija, mada su vrednosti opale za faktor 10 u odnosu na vršne nivoe. Vreme dupliranja T ćelija sa himernim antigenim receptorom u krvi bilo je približno 1.2 dana, sa poluvremenom eliminacije od 31 dan.
T ćelije sa himernim receptorom za antigen u kosnoj srži
[0288] CART 19 ćelije su identifikovane u uzorcima kosne srži počevši od 23. dana nakon prve infuzije (slika 14B) i perzistirale su najmanje 6 meseci, sa poluvremenom propadanja od 34 dana. Najviši nivoi CART19 ćelija u kosnoj srži su identifikovani pri prvoj proceni 23 dana nakon prve infuzije i koincidirali su sa indukcijom imunskog odgovora, na šta ukazuju profili sekrecije citokina (slika 13E). Ispitivanja aspirata kosne srži protočnom citometrijom pokazala su klonalnu ekspanziju CD5+CD19+ ćelija na polaznom nivou koja je bila odsutna 1 mesec nakon infuzije i u uzorku dobijenom 3 meseca nakon infuzije (podaci nisu prikazani). Normalne B ćelije nisu detektovane nakon lečenja (slika 14C).
Lečenje autolognim genetski modifikovanim CART19 ćelijama
[0289] Ovde je opisan odloženi razvoj sindroma lize tumora i potpuni odgovor 3 nedelje nakon lečenja autolognim T ćelijama koje su genetski modifikovane tako da ciljno deluju na CD 19 putem transdukcije lentivirusnim vektorom koji eksprimira anti-CD19 vezan za signalne domene CD3-zeta i CD137 (4-1BB). Genetski modifikovane ćelije su bile prisutne na visokim nivoima u kosnoj srži tokom najmanje 6 meseci nakon infuzije. Stvaranje CD19-specifičnog imunskog odgovora u kosnoj srži je pokazano posredstvom vremenske dinamike oslobađanja citokina i ablacije ćelija leukemije koja je koincidirala sa vršnom infiltracijom T ćelija sa himernim receptorom za antigen. Razvoj sindroma lize tumora nakon ćelijske imunoterapije nije prethodno objavljen (Baeksgaard et al., 2003, Cancer Chemother Pharacol, 51: 187-92).
[0290] Genetska manipulacija autolognim T ćelijama tako da ciljno deluju na specifične tumorske antigene je privlačna strategija za terapiju kancera (Sadelain et al., 2009, Curr Opin Immunol, 21: 215-23; Jena et al., 2010, Blood, 116: 1035-44). Važna karakteristika ovde opisanog pristupa je to što T ćelije sa himernim receptorom za antigen mogu da prepoznaju tumorske ciljeve na način koji nije ograničen na HLA, tako da gotovi himerni receptori za antigen mogu da budu konstruisani za tumore sa različitim histološkim svojstvima. Lentiviralni vektori izvedeni iz HIV-a su korišćeni za terapiju kancera, ovaj pristup može da ima neke prednosti u odnosu na upotrebu retroviralnih vektora (June et al., 2009, Nat Rev Immunol, 9: 704-16).
[0291] U prethodnim ispitivanjima T ćelija sa himernim receptorom za antigen, objektivni tumorski odgovori su bili umereni, i in vivo proliferacija modifikovanih ćelija nije bila neprekidna (Kershaw et al., 2006, Clin Cancer Res, 12: 6106-15; Till et al., 2008, Blood, 112: 2261-71; Pule et al., 2008, Nat Med, 14: 1264-70). Brentjens i kolege su objavili preliminarne rezultate kliničkog ispitivanja himernih receptora za antigen koji ciljno deluju na CD19, vezanih za CD28 signalni domen i našli prolazne tumorske odgovore kod dva od tri pacijenta sa uznapredovalom CLL (Brentjens et al., 2010, Mol Ther, 18: 666-8); međutim, himerni receptori za antigen su brzo nestajali iz cirkulacije.
[0292] Bilo je neočekivano da će veoma niska doza T ćelija sa himernim receptorom za antigen koje su primenjene infuzijom rezultovati u klinički evidentnom antitumorskom odgovoru. Zaista, doza od 1.5x105 T ćelija sa himernim receptorom za antigen po kilogramu primenjena infuzijom bila je nekoliko redova veličine ispod doza korišćenih u prethodnim ispitivanjima T ćelija modifikovanih tako da eksprimiraju himerne receptore za antigen ili transgene T-ćelijske receptore (Kershaw et al., 2006, Clin Cancer Res, 12: 6106-15; Brentjens et al., 2010, Mol Ther, 18: 666-8; Morgan et al., 2010, Mol Ther, 18: 843-51; Johnson et al.,
4
2009, Blood, 114: 535-46). Bez vezivanja za neku određenu teoriju, predpostavlja se da hemoterapija može da pojača dejstva himernog receptora za antigen.
[0293] Produžena perzistencija CART19 ćelija u krvi i kosnoj srži pacijenta rezultat je uključivanja signalnog domena 4-1BB. Verovatno je da je eliminacija normalnih B ćelija posredovana CART19-ćelijama olakšala indukciju imunološke tolerancije na himerni receptor za antigen, budući da CART 19 ćelije koje eksprimiraju jednolančani Fv fragment antitela koji sadrži mišje sekvence nisu odbačene. S obzirom na odsustvo detektabilnihe CD19-pozitivnih leukemijskih ćelija kod pacijenta, i bez vezivanja za neku određenu teoriju, može se predpostaviti da je homeostaza T ćelija sa himernim receptorom za antigen postignuta najmanje delom kao rezultat stimulacije delovanjem ranih progenitora B-ćelija njihovim pojavljivanjem u kosnoj srži. Pronalazak se odnosi na otkriće da može da postoji novi mehanizam za održavanje "memorijskih" T ćelija sa himernim receptorom za antigen.
[0294] Mada je CD19 privlačan tumorski cilj, sa ekspresijom ograničenom na normalne i maligne B ćelije, postoji briga da perzistencija T ćelija sa himernim receptorom za antigen može da posreduje u dugotrajnoj deficijenciji B-ćelija. U stvari, kod pacijenta, B ćelije su bile odsutne iz krvi i kosne srži tokom najmanje 6 meseci nakon infuzije. Ovaj pacijent nije imao rekurentne infekcije. Ciljno delovanje na B ćelije preko CD20 sa rituksimabom je efikasna i relativno bezbedna strategija za pacijente sa B-ćelijskim neoplazmama, i dugotrajna B-ćelijska limfopenija podložna lečenju (Molina, 2008, Ann Rev Med, 59: 237-50). Objavljeno je da kod pacijenata lečenih rituksimabom ponovno pojavljivanje B ćelija tokom meseci nakon prekida terapije. Još uvek nije jasno da li se takav oporavak događa kod pacijenata čije T ćelije usmerene protiv B-ćelija perzistiraju in vivo.
[0295] Pacijenti koji imaju CLL sa delecijama TP53 imaju kratku remisju nakon standardnih terapija (Dohner et al., 1995, Blood, 85: 1580-9). Alogena transplantacija kosne srži bila je jedini pristup koji je indukovao dugotrajnu remisiju kod pacijenata sa uznapredovalom CLL (Gribben et al., 2011, Biol Blood Marrow Transplant, 17: Suppl:S63-S70). Međutim, rezultujući snažno izražen efekat graft-protiv-tumora povezano je sa značajnim morbiditetom zbog visoke učestalosti hronične bolesti graft-protiv-domaćina, koja je često posebno ozbiljna kod starijih pacijenata – onih koji su tipično pogođeni CLL (Gribben et al., 2011, Biol Blood Marrow Transplant, 17: Suppl:S63-S70; Sorror et al., 2008, Blood, 111: 446-52). Ovde prikazani podaci sugerišu da genetski modifikovana autologna T ćelija može da prevaziđe ovo ograničenje.
[0296] Odloženo započinjanje sindroma lize tumora i sekrecije citokina, kombinovano sa snažnom in vivo ekspanzijom T-ćelija sa himernim receptorom za antigen i značajnom antileukemijskom aktivnošću, ukazuje na značajne i neprekidne efektorske funkcije CART19 ćelija. Ovde opisani eksperimenti ističu potencijal ovih terapija i obezbeđuju podrške za detaljno ispitivanje autolognih T ćelija genetski modifikovanih da ciljno deluju na CD 19 (i druge ciljne molekule) putem transdukcije himernog receptora za antigen vezanog za snažne signalne domene. Za razliku od terapije posredovane antitelom, T ćelije modifikovane himernim receptorom za antigen imaju potencijal da se replikuju in vivo, i njihova dugotrajna perzistencija bi mogla da vodi dugoročnoj kontroli tumora. Druga dva pacijenta sa uznapredovalom CLL takođe su primila CART 19 infuzije prema ovom protokolu, i sva tri su pokazala tumorske odgovore. Ovi nalazi garantuju nastavak ispitivanja T ćelija preusmerenih na CD19 za B-ćelijske neoplazme.
�
2
4
1
11
12
1
14
1

Claims (18)

Patentni zahtevi
1. T ćelija koja je genetski modifikovana tako da eksprimira CAR, naznačena time što CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji je anti-CD19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) signalni domen CD3 zeta za upotrebu u postupku za lečenje kancera kod čoveka, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 i/ili signalni domen CD3 zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24, i pri čemu je čovek otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
2. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što kancer sadrži nesolidni tumor kao što je hematološki tumor.
3. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2, naznačena time što je kancer leukemija ili limfom.
4. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 3, naznačena time što je leukemija:
(i) akutna leukemija ili hronična leukemija; ili
(ii) akutna limfocitna leukemija.
5. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što je kancer:
(i) akutna limfocitna leukemija pre-B ćelija (pedijatrijska indikacija), adultna akutna limfocitna leukemija, limfom mantle ćelija ili difuzni limfom krupnih B ćelija;
(ii) ne-Hodgkin-ov limfom;
(iii) multipli mijelom; ili
(iv) Hodgkin-ova bolest.
6. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što je kancer hronična limfocitna leukemija.
7. T ćelija koja je genetski konstruisana tako da eksprimira CAR, naznačena time što CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji je anti-CD19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) signalni domen CD3 zeta za upotrebu u postupku za lečenje kancera koji obuhvata primenu pomenute T ćelije kod čoveka kome je dijagnostikovan kancer, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 ili signalni domen CD3 zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24, i pri čemu pomenuti postupak stvara populaciju genetski konstruisanih T ćelija koje perzistiraju u čoveku najmanje osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine, ili tri godine nakon primene, i pri čemu je čovek otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
8. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, naznačena time što perzistentna populacija genetski konstruisanih T ćelija sadrži najmanje jednu ćeliju odabranu iz grupe koja se sastoji od T ćelije koja je bila primenjena kod čoveka, potomstva T ćelije koja je bila primenjena kod čoveka, i njihove kombinacije.
9. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, naznačena time što perzistentna populacija genetski modifikovanih T ćelija sadrži memorijsku T ćeliju.
10. T ćelija koja je genetski konstruisana tako da eksprimira CAR, naznačena time što CAR sadrži (a) antigen-vezujući domen koji je anti-CD19 scFv, (b) kostimulatorni signalni region 4-1BB, i (c) signalni domen CD3 zeta za upotrebu u postupku za lečenje kancera koji obuhvata primenu pomenute T ćelije kod čoveka kome je dijagnostikovan kancer, pri čemu anti-CD19 scFv sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:20 ili signalni domen CD3 zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu prema SEQ ID NO:24 i pri čemu pomenuti postupak umnožava populaciju genetski konstruisanih T ćelija u čoveku, i pri čemu je čovek otporan na lečenje najmanje jednim hemoterapeutskim sredstvom.
11. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, naznačena time što primenjena genetički konstruisana T ćelija proizvodi potomstvo T ćelija u čoveku koje sadrži sadrži memorijsku T ćeliju.
12. T ćelija za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, naznačena time što primenjena genetički konstruisana T ćelija proizvodi populaciju potomstva T ćelija koja perzistira u čoveku najmanje tri meseca, četiri meseca, pet meseci, šest meseci, sedam meseci, osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, dvanaest meseci, dve godine, ili tri godine nakon primene.
1
13. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 7-12, naznačena time što je kancer kao što je definisan u bilo kom od patentnih zahteva 2-5, ili naznačena time što je kancer hronična limfocitna leukemija.
14. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 6, 7 ili 10, naznačena time što čovek ima hroničnu limfocitnu leukemiju koja je refraktorna CD19+ leukemija i limfom.
15. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-14, naznačena time što je T ćelija autologna ili alogena ćelija.
16. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-15, naznačena time što se pomenuta ćelija primenjuje nakon ablativne terapije B ćelija kao što je terapija sredstvima koja reaguju sa CD20, npr. Rituxan-om.
17. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-16, naznačena time što se pomenuta ćelija primenjuje u farmaceutskoj kompoziciji u dozi od 10<4>do 10<9>ćelija/kg telesne težine ili 10<5>do 10<6>ćelija/kg telesne težine.
18. T ćelija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-17, naznačena time što:
(i) kostimulatorni signalni region 4-1 BB sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO: 23;
(ii) CAR sadrži aminokiselinsku sekvencu naznačenu u SEQ ID NO:12;
(iii) anti-CD19 scFv je kodiran sekvencom SEQ ID NO: 14;
(iv) signalni region 4-1BB je kodiran sekvencom SEQ ID NO: 17 i signalni domen CD3 zeta je kodiran sekvencom SEQ ID NO:18;
(v) anti-CD19 scFv je kodiran sekvencom SEQ ID NO: 14, signalni region 4-1BB je kodiran sekvencom SEQ ID NO: 17 i signalni domen CD3 zeta je kodiran sekvencom SEQ ID NO:18; ili
(vi) CAR je kodiran sekvencom nukleinske kiseline naznačenom u sekvenci SEQ ID NO:8.
1
RS20181573A 2010-12-09 2011-12-09 Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera RS58100B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US42147010P 2010-12-09 2010-12-09
US201161502649P 2011-06-29 2011-06-29
EP17153799.6A EP3214091B1 (en) 2010-12-09 2011-12-09 Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58100B1 true RS58100B1 (sr) 2019-02-28

Family

ID=46207528

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171041A RS56453B1 (sr) 2010-12-09 2011-12-09 Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera
RS20181573A RS58100B1 (sr) 2010-12-09 2011-12-09 Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171041A RS56453B1 (sr) 2010-12-09 2011-12-09 Upotreba t ćelija modifikovanih himernim receptorom za antigen za lečenje kancera

Country Status (43)

Country Link
US (15) US9499629B2 (sr)
EP (4) EP2649086B1 (sr)
JP (7) JP5947311B2 (sr)
KR (6) KR102062407B1 (sr)
CN (5) CN106220739A (sr)
AP (1) AP2013006918A0 (sr)
AU (5) AU2011338200B2 (sr)
BR (3) BR122021026169B1 (sr)
CA (1) CA2820681C (sr)
CL (1) CL2013001645A1 (sr)
CO (1) CO6801633A2 (sr)
CR (1) CR20130269A (sr)
CY (3) CY1119760T1 (sr)
DK (2) DK3214091T3 (sr)
DO (1) DOP2013000128A (sr)
EA (2) EA035484B1 (sr)
EC (1) ECSP13012739A (sr)
ES (2) ES2700966T3 (sr)
FR (1) FR19C1006I2 (sr)
GT (1) GT201300150A (sr)
HK (2) HK1243082B (sr)
HR (2) HRP20171577T1 (sr)
HU (4) HUE042207T2 (sr)
IL (1) IL226694B (sr)
LT (4) LT2649086T (sr)
LU (1) LUC00104I2 (sr)
MA (1) MA34813B1 (sr)
MX (3) MX347078B (sr)
MY (2) MY169644A (sr)
NI (1) NI201300051A (sr)
NL (1) NL300967I2 (sr)
NO (2) NO2019006I1 (sr)
NZ (1) NZ612512A (sr)
PE (1) PE20140178A1 (sr)
PH (1) PH12013501201A1 (sr)
PL (2) PL3214091T3 (sr)
PT (2) PT2649086T (sr)
RS (2) RS56453B1 (sr)
SG (2) SG190997A1 (sr)
SI (2) SI3214091T1 (sr)
TR (1) TR201820015T4 (sr)
WO (1) WO2012079000A1 (sr)
ZA (1) ZA201304470B (sr)

Families Citing this family (1368)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7404950B2 (en) 2003-02-18 2008-07-29 Baylor College Of Medicine Induced activation in dendritic cell
US7435596B2 (en) 2004-11-04 2008-10-14 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Modified cell line and method for expansion of NK cell
US20130266551A1 (en) 2003-11-05 2013-10-10 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Chimeric receptors with 4-1bb stimulatory signaling domain
US8129184B2 (en) 2006-09-26 2012-03-06 Cedars-Sinai Medical Center Cancer stem cell antigen vaccines and methods
WO2008039969A2 (en) 2006-09-28 2008-04-03 Cedars-Sinai Medical Center Cancer vaccines and vaccination methods
US8450112B2 (en) 2008-04-09 2013-05-28 Maxcyte, Inc. Engineering and delivery of therapeutic compositions of freshly isolated cells
PL2328923T3 (pl) 2008-09-02 2016-06-30 Cedars Sinai Medical Center Epitopy CD133
WO2010099205A1 (en) * 2009-02-24 2010-09-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for treating progressive multifocal leukoencephalopathy (pml)
US10426740B1 (en) 2010-08-18 2019-10-01 Avm Biotechnology, Llc Compositions and methods to inhibit stem cell and progenitor cell binding to lymphoid tissue and for regenerating germinal centers in lymphatic tissues
JP2014502258A (ja) 2010-10-22 2014-01-30 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド 免疫反応を抑制するためにプログラムされた制御性ｔ細胞の発見
PH12013501201A1 (en) * 2010-12-09 2013-07-29 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
EP3246416B1 (en) 2011-04-15 2024-06-05 The Johns Hopkins University Safe sequencing system
CN103946242A (zh) 2011-10-20 2014-07-23 美国卫生和人力服务部 抗cd22嵌合抗原受体
WO2013063419A2 (en) * 2011-10-28 2013-05-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania A fully human, anti-mesothelin specific chimeric immune receptor for redirected mesothelin-expressing cell targeting
CN104159909A (zh) 2012-02-22 2014-11-19 宾夕法尼亚大学董事会 产生用于癌症治疗的t细胞持续性群体的组合物和方法
EP2817331B1 (en) 2012-02-22 2023-08-30 The Trustees of the University of Pennsylvania Use of the cd2 signaling domain in second-generation chimeric antigen receptors
EP3093294A1 (en) 2012-02-24 2016-11-16 Stemcentrx, Inc. Dll3 modulators and methods of use
CA3116051C (en) * 2012-03-23 2023-09-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-mesothelin chimeric antigen receptors
AU2013246443B2 (en) 2012-04-11 2017-04-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors targeting B-cell maturation antigen
PL2855667T3 (pl) 2012-05-25 2024-03-25 Cellectis Sposoby uzyskiwania metodami inżynierii allogenicznych i opornych na immunosupresję limfocytów t do immunoterapii
JP6382191B2 (ja) * 2012-07-13 2018-08-29 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア Ｃａｒの抗腫瘍活性のための毒性管理
MX2015000426A (es) 2012-07-13 2015-07-14 Univ Pennsylvania Incremento de actividad de celulas t car mediante cointroduccion de un anticuerpo biespecifico.
KR20210149195A (ko) * 2012-07-13 2021-12-08 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실베니아 형질도입된 ｔ 세포의 투여 적합성을 평가하는 방법
IN2015DN00139A (sr) * 2012-07-13 2015-06-12 Univ Pennsylvania
CN104507537A (zh) * 2012-07-13 2015-04-08 宾夕法尼亚大学董事会 用于调节car t细胞的组合物和方法
US20160235787A1 (en) * 2012-07-13 2016-08-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Epitope Spreading Associated with CAR T-Cells
SI2884999T2 (sl) * 2012-08-20 2026-01-30 Fred Hutchinson Cancer Center Metoda in sestavki za celično imunoterapijo
CN104769103B (zh) * 2012-09-04 2018-06-08 塞勒克提斯公司 多链嵌合抗原受体和其用途
EP2900695B1 (en) * 2012-09-27 2018-01-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Mesothelin antibodies and methods for eliciting potent antitumor activity
WO2014052545A2 (en) 2012-09-28 2014-04-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Targeted expansion of qa-1-peptide-specific regulatory cd8 t cells to ameliorate arthritis
EP2904106A4 (en) * 2012-10-01 2016-05-11 Univ Pennsylvania COMPOSITIONS AND METHOD FOR TARGETING CURRIC ACIDS FOR THE TREATMENT OF CANCER
US9598489B2 (en) 2012-10-05 2017-03-21 The Trustees Of The Univeristy Of Pennsylvania Human alpha-folate receptor chimeric antigen receptor
US10117896B2 (en) 2012-10-05 2018-11-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Use of a trans-signaling approach in chimeric antigen receptors
JP6338252B2 (ja) 2012-10-24 2018-06-06 アメリカ合衆国 Ｍ９７１キメラ抗原受容体
EP2912468B1 (en) 2012-10-29 2018-09-12 The Johns Hopkins University Papanicolaou test for ovarian and endometrial cancers
AU2015210373B2 (en) * 2012-12-20 2017-04-06 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
ES2776698T3 (es) 2012-12-20 2020-07-31 Purdue Research Foundation Células T que expresan un receptor antigénico quimérico como terapia contra el cáncer
AU2013204922B2 (en) * 2012-12-20 2015-05-14 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
KR102417657B1 (ko) * 2013-02-06 2022-07-07 안트로제네시스 코포레이션 개선된 특이성을 갖는 변경된 t 림프구
ES2662333T3 (es) 2013-02-14 2018-04-06 Immunocellular Therapeutics Ltd. Vacunas contra el cáncer y métodos de vacunación
ES2653487T3 (es) 2013-02-15 2018-02-07 The Regents Of The University Of California Receptor de antígeno quimérico y métodos de uso del mismo
HUE046961T2 (hu) 2013-02-20 2020-04-28 Univ Pennsylvania Rák kezelése humanizált EGFRVIII elleni kiméra antigénreceptor alkalmazásával
TW201446794A (zh) 2013-02-20 2014-12-16 Novartis Ag 利用抗－ｃｄ１２３嵌合抗原受體工程化ｔ細胞之初級人類白血病有效靶向
SMT201900339T1 (it) 2013-02-22 2019-07-11 Medimmune Ltd Coniugati anticorpo anti-dll3/pbd e loro usi
SI2961831T1 (sl) 2013-02-26 2020-10-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Sestavki in postopki za imunoterapijo
AU2014225788B2 (en) * 2013-03-05 2018-03-29 Baylor College Of Medicine Engager cells for immunotherapy
EP2970985A1 (en) * 2013-03-14 2016-01-20 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods to modify cells for therapeutic objectives
US9587237B2 (en) 2013-03-14 2017-03-07 Elwha Llc Compositions, methods, and computer systems related to making and administering modified T cells
US9499855B2 (en) * 2013-03-14 2016-11-22 Elwha Llc Compositions, methods, and computer systems related to making and administering modified T cells
US9944690B2 (en) 2013-03-14 2018-04-17 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Methods for controlling T cell proliferation
EP2970426B1 (en) 2013-03-15 2019-08-28 Michael C. Milone Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy
US9657105B2 (en) 2013-03-15 2017-05-23 City Of Hope CD123-specific chimeric antigen receptor redirected T cells and methods of their use
AU2014240083C1 (en) 2013-03-15 2019-10-24 Celgene Corporation Modified T lymphocytes
MX386060B (es) 2013-03-15 2025-03-18 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Composiciones y usos para inmunoterapia.
US20150064153A1 (en) 2013-03-15 2015-03-05 The Trustees Of Princeton University High efficiency microfluidic purification of stem cells to improve transplants
CN113512522A (zh) 2013-03-15 2021-10-19 普林斯顿大学理事会 用于高通量纯化的方法和设备
CN105264127B (zh) 2013-03-15 2019-04-09 Gpb科学有限责任公司 颗粒的片上微流体处理
UY35468A (es) 2013-03-16 2014-10-31 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno anti-cd19
US9790282B2 (en) 2013-03-25 2017-10-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-CD276 polypeptides, proteins, and chimeric antigen receptors
US10358494B2 (en) * 2013-05-03 2019-07-23 Ohio State Innovation Foundation CS1-specific chimeric antigen receptor engineered immune effector cells
US10260038B2 (en) 2013-05-10 2019-04-16 Whitehead Institute For Biomedical Research Protein modification of living cells using sortase
EP4364809A3 (en) * 2013-05-13 2024-07-24 Cellectis Cd19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
US11311575B2 (en) * 2013-05-13 2022-04-26 Cellectis Methods for engineering highly active T cell for immunotherapy
US11077144B2 (en) 2013-05-13 2021-08-03 Cellectis CD19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
AU2014265487B2 (en) 2013-05-14 2020-10-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Human application of engineered chimeric antigen receptor (CAR) T-cells
AU2014268364A1 (en) 2013-05-24 2015-12-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Chimeric antigen receptor-targeting monoclonal antibodies
MX2015016963A (es) 2013-06-10 2016-08-08 Dana Farber Cancer Inst Inc Metodos y composiciones para reducir la inmunosupresion por celulas de tumor.
US10208125B2 (en) 2013-07-15 2019-02-19 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Anti-mucin 1 binding agents and uses thereof
WO2015031698A1 (en) 2013-08-28 2015-03-05 Stem Centrx, Inc. Site-specific antibody conjugation methods and compositions
ES2707711T3 (es) 2013-08-30 2019-04-04 Univ Texas Administración de enzimas reductoras de quinurenina para tratamiento tumoral
US10570204B2 (en) 2013-09-26 2020-02-25 The Medical College Of Wisconsin, Inc. Methods for treating hematologic cancers
AU2014331667B2 (en) 2013-10-11 2019-08-22 Biomed Valley Discoveries, Inc. TEM8 antibodies and their use
AU2014337385B2 (en) * 2013-10-15 2020-04-30 The Scripps Research Institute Chimeric antigen receptor T cell switches and uses thereof
WO2015057834A1 (en) 2013-10-15 2015-04-23 The California Institute For Biomedical Research Peptidic chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof
CN105683214B (zh) * 2013-10-17 2021-03-09 新加坡国立大学 触发针对多种肿瘤的抗体依赖细胞毒性的嵌合受体
US10144770B2 (en) 2013-10-17 2018-12-04 National University Of Singapore Chimeric receptors and uses thereof in immune therapy
CN104561069A (zh) * 2013-10-23 2015-04-29 深圳先进技术研究院 含重组嵌合抗原受体基因表达盒的微环dna重组母质粒、含该表达盒的微环dna及应用
US20160280798A1 (en) 2013-11-06 2016-09-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Service Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
TWI679976B (zh) 2013-11-13 2019-12-21 瑞士商諾華公司 低及免疫增強劑量之ｍｔｏｒ抑制劑及其用途
WO2015077717A1 (en) 2013-11-25 2015-05-28 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer by means of the dna methylation status
US10246505B2 (en) 2013-11-25 2019-04-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors to control HIV infection
WO2015085147A1 (en) 2013-12-05 2015-06-11 The Broad Institute Inc. Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data
RU2701346C1 (ru) * 2013-12-06 2019-09-25 Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез Химерные антигенные рецепторы, специфичные в отношении рецептора тимусного стромального лимфопоэтина, и способы их применения
BR112016013187A2 (pt) * 2013-12-19 2017-09-26 Novartis Ag receptores de antígenos quiméricos de mesotelina humanos e usos dos mesmos
JP2017504601A (ja) * 2013-12-20 2017-02-09 セレクティスＣｅｌｌｅｃｔｉｓ 免疫療法のためにマルチインプットシグナル感受性ｔ細胞を操作する方法
JP6942467B2 (ja) 2013-12-20 2021-10-06 フレッド ハッチンソン キャンサー リサーチ センター タグ化キメラエフェクター分子およびそのレセプター
US10287354B2 (en) 2013-12-20 2019-05-14 Novartis Ag Regulatable chimeric antigen receptor
JP7060324B2 (ja) 2013-12-20 2022-04-26 ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド ネオ抗原ワクチンによる併用療法
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
US20160333108A1 (en) 2014-01-13 2016-11-17 Stephen J. Forman CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS (CARs) HAVING MUTATIONS IN THE FC SPACER REGION AND METHODS FOR THEIR USE
EP3097117B1 (en) 2014-01-21 2023-10-04 Novartis Ag Enhanced antigen presenting ability of car t cells by co-introduction of costimulatory molecules
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
WO2015120363A1 (en) 2014-02-10 2015-08-13 Emory University Expression of chimeric polypeptide with variable lymphocyte receptors on immune cells and uses for treating cancer
EP3104878B1 (en) 2014-02-14 2019-05-22 Immune Design Corp. Immunotherapy of cancer through combination of local and systemic immune stimulation
JP6772063B2 (ja) * 2014-02-14 2020-10-21 ベリカム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 誘導可能なキメラポリペプチドを使用して細胞を活性化するための方法
PL3105317T3 (pl) * 2014-02-14 2019-02-28 Cellectis Komórki do immunoterapii zaprojektowane do celowania antygenu obecnego zarówno na komórkach odpornościowych, jak i komórkach patologicznych
SG10201811816RA (en) * 2014-02-14 2019-02-27 Univ Texas Chimeric antigen receptors and methods of making
KR20170008202A (ko) 2014-02-21 2017-01-23 애브비 스템센트알엑스 엘엘씨 흑색종에 사용하기 위한 항-ｄｌｌ3 항체 및 약물 접합체
CA2939711C (en) * 2014-02-21 2020-09-29 Cellectis Method for in situ inhibition of regulatory t cells
CN106279434B (zh) * 2014-02-24 2020-07-03 西比曼生物科技（上海）有限公司 工程化cd20靶向性的nkt细胞及其制备方法和应用
EP3110429A4 (en) 2014-02-27 2018-02-21 Lycera Corporation Adoptive cellular therapy using an agonist of retinoic acid receptor-related orphan receptor gamma & related therapeutic methods
CN104877028A (zh) * 2014-02-28 2015-09-02 百奥迈科生物技术有限公司 抗dota嵌合抗原受体修饰的t细胞及其抗肿瘤的应用
US11982673B2 (en) 2014-03-05 2024-05-14 Autolus Limited Methods
IL278879B2 (en) * 2014-03-05 2025-12-01 Autolus Ltd Chimeric antigen receptor (car) with antigen binding domains to the t cell receptor beta constant region
US11385233B2 (en) 2015-03-05 2022-07-12 Autolus Limited Methods of depleting malignant T-cells
GB201403972D0 (en) 2014-03-06 2014-04-23 Ucl Business Plc Chimeric antigen receptor
PH12016501545B1 (en) 2014-03-14 2023-12-06 Immutep Sas Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
WO2015142675A2 (en) 2014-03-15 2015-09-24 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
WO2015143224A1 (en) * 2014-03-19 2015-09-24 Ambrx, Inc. Chimeric antigen receptor-modified t-cells
CN106103490B (zh) 2014-03-19 2020-03-03 塞勒克提斯公司 用于癌症免疫疗法的cd123特异性嵌合抗原受体
SG11201607746QA (en) 2014-03-21 2016-10-28 Abbvie Inc Anti-egfr antibodies and antibody drug conjugates
CA2944528C (en) * 2014-04-03 2021-08-10 Cellectis Cd33 specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
MX395149B (es) * 2014-04-07 2025-03-24 Novartis Ag Terapias de combinación que comprenden un receptor quimérico de antígeno cd19 para el cáncer.
CN106414726A (zh) 2014-04-07 2017-02-15 米纳瓦生物技术公司 抗nme抗体
CN106661570B (zh) 2014-04-10 2020-02-07 西雅图儿童医院（Dba西雅图儿童研究所） 通过与氨甲蝶呤选择偶联的睡美人转座子制备工程化t细胞
US10316101B2 (en) 2014-04-14 2019-06-11 Cellectis BCMA (CD269) specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
BR112016024579A2 (pt) 2014-04-23 2017-10-10 Juno Therapeutics Inc métodos para isolamento, cultura e engenharia genética de populações de célula imune para terapia adotiva
JP6817069B2 (ja) * 2014-04-25 2021-01-20 ブルーバード バイオ， インコーポレイテッド 養子細胞療法薬を製造するための改善された方法
US20170049819A1 (en) * 2014-04-25 2017-02-23 Bluebird Bio, Inc. Kappa/lambda chimeric antigen receptors
RS62733B1 (sr) 2014-04-25 2022-01-31 2Seventy Bio Inc Mnd promoter himernih antigenskih receptora
WO2015167766A1 (en) * 2014-04-29 2015-11-05 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Ccr5 disruption of cells expressing anti-hiv chimeric antigen receptor (car) derived from broadly neutralizing antibodies
US10167330B2 (en) 2014-05-02 2019-01-01 Emory University Modified recombinant variable lymphocyte receptors (VLR)
EP4008725A1 (en) 2014-05-02 2022-06-08 The Trustees of the University of Pennsylvania Compositions and methods of chimeric autoantibody receptor t cells
GB201407852D0 (en) 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
WO2015171558A2 (en) 2014-05-05 2015-11-12 Lycera Corporation BENZENESULFONAMIDO AND RELATED COMPOUNDS FOR USE AS AGONISTS OF RORγ AND THE TREATEMENT OF DISEASE
AU2015256190B2 (en) 2014-05-05 2019-08-15 Lycera Corporation Tetrahydroquinoline sulfonamide and related compounds for use as agonists of rory and the treatment of disease
KR102110187B1 (ko) 2014-05-14 2020-05-14 카르스젠 테라퓨틱스 리미티드 키메라 항원 수용체 단백질을 코딩하는 핵산 및 키메라 항원 수용체 단백질을 발현하는 t 림프구
AU2015259877B2 (en) 2014-05-15 2021-02-25 National University Of Singapore Modified natural killer cells and uses thereof
US11041021B2 (en) 2014-05-23 2021-06-22 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Car based immunotherapy
EP3149044B1 (en) 2014-06-02 2020-10-21 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Chimeric antigen receptors targeting cd-19
SG10201810723VA (en) 2014-06-06 2018-12-28 Bluebird Bio Inc Improved t cell compositions
US20180134795A1 (en) * 2014-06-17 2018-05-17 Cellectis Cd123 specific multi-chain chimeric antigen receptor
GB201506423D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Tc Biopharm Ltd Gamma delta T cells and uses thereof
CA2954414A1 (en) 2014-07-15 2016-01-21 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells for adoptive cell therapy
AR101829A1 (es) * 2014-07-21 2017-01-18 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno cll-1
WO2016014553A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
WO2016014530A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Combinations of low, immune enhancing. doses of mtor inhibitors and cars
US9777061B2 (en) 2014-07-21 2017-10-03 Novartis Ag Treatment of cancer using a CD33 chimeric antigen receptor
MX2017001011A (es) 2014-07-21 2018-05-28 Novartis Ag Tratamiento de cancer de usando un receptor quimerico de antigeno anti-bcma.
ES2878449T3 (es) 2014-07-24 2021-11-18 2Seventy Bio Inc Receptores antigénicos quiméricos de BCMA
WO2016016341A1 (en) * 2014-07-29 2016-02-04 Cellectis EGFRvIII SPECIFIC CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS FOR CANCER IMMUNOTHERAPY
DK3174557T3 (en) * 2014-07-29 2019-02-04 Cellectis ROR1 (NTRKR1) -specific Chimeric Antigen Receptors for Cancer Immunotherapy
US20170209492A1 (en) 2014-07-31 2017-07-27 Novartis Ag Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
EP3194432B1 (en) 2014-07-31 2019-04-10 Cellectis Ror1 specific multi-chain chimeric antigen receptor
JP6919118B2 (ja) 2014-08-14 2021-08-18 ノバルティス アーゲー ＧＦＲα−４キメラ抗原受容体を用いる癌の治療
TW202140557A (zh) 2014-08-19 2021-11-01 瑞士商諾華公司 使用cd123嵌合抗原受體治療癌症
WO2016033329A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Intracellular osteopontin regulates the lineage commitment of lymphoid subsets
TWI805109B (zh) 2014-08-28 2023-06-11 美商奇諾治療有限公司 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體
EP3186371B1 (en) 2014-08-29 2024-08-14 Board of Regents, The University of Texas System Administration of kynurenine depleting enzymes for tumor therapy
EP2990416B1 (en) * 2014-08-29 2018-06-20 GEMoaB Monoclonals GmbH Universal chimeric antigen receptor expressing immune cells for targeting of diverse multiple antigens and method of manufacturing the same and use of the same for treatment of cancer, infections and autoimmune disorders
US10888608B2 (en) * 2014-09-02 2021-01-12 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Costimulation of chimeric antigen receptors by MyD88 and CD40 polypeptides
DK3189073T4 (da) 2014-09-04 2025-08-18 Cellectis Trofoblastglykoprotein (5t4, tpbg)-specifikke kimære antigenreceptorer til cancerimmunterapi
SG11201701775VA (en) * 2014-09-09 2017-04-27 Unum Therapeutics Chimeric receptors and uses thereof in immune therapy
CN107206071A (zh) 2014-09-13 2017-09-26 诺华股份有限公司 Alk抑制剂的联合疗法
WO2016044383A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-cd276 antibodies (b7h3)
KR20210149228A (ko) * 2014-09-17 2021-12-08 노파르티스 아게 입양 면역요법을 위한 키메라 수용체에 의한 세포독성 세포의 표적화
JP6657195B2 (ja) 2014-09-19 2020-03-04 シティ・オブ・ホープＣｉｔｙ ｏｆ Ｈｏｐｅ Ｌ１３Ｒα２を標的とする共刺激性キメラ抗原レセプターＴ細胞
EP3200815B1 (en) * 2014-10-02 2021-03-03 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods and compositions for treating cancer
AU2015327868A1 (en) 2014-10-03 2017-04-20 Novartis Ag Combination therapies
CA2963327A1 (en) * 2014-10-07 2016-04-14 Cellectis Method for modulating car-induced immune cells activity
CA2963935A1 (en) 2014-10-08 2016-04-14 Novartis Ag Biomarkers predictive of therapeutic responsiveness to chimeric antigen receptor therapy and uses thereof
SG11201702391RA (en) 2014-10-09 2017-04-27 Univ Yamaguchi Car expression vector and car-expressing t cells
CA2964317C (en) 2014-10-14 2021-10-05 Halozyme, Inc. Compositions of adenosine deaminase-2 (ada2), variants thereof and methods of using same
US10507219B2 (en) 2014-10-20 2019-12-17 Juno Therapeutics, Inc. Methods and compositions for dosing in adoptive cell therapy
RS61853B1 (sr) 2014-10-29 2021-06-30 Bicyclerd Ltd Biciklični peptidni ligandi specifični za mt1-mmp
CN107206024B (zh) 2014-10-31 2021-12-03 宾夕法尼亚大学董事会 改变cart细胞中的基因表达及其用途
WO2016069993A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods of stimulating and expanding t cells
WO2016073748A1 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Biomarkers and targets for cancer immunotherapy
EP3757206B1 (en) 2014-11-05 2024-04-10 Juno Therapeutics, Inc. Methods for transduction and cell processing
WO2016073755A2 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Gene modified immune effector cells and engineered cells for expansion of immune effector cells
EP3215534B1 (en) 2014-11-05 2020-04-15 Board of Regents, The University of Texas System Chimeric antigen receptors (car) to selectively target protein complexes
US9879087B2 (en) 2014-11-12 2018-01-30 Siamab Therapeutics, Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
US20170306046A1 (en) 2014-11-12 2017-10-26 Siamab Therapeutics, Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
CN105601746B (zh) * 2014-11-21 2021-02-19 三生国健药业（上海）股份有限公司 一种嵌合Fc受体的融合蛋白及其制备方法和应用
US20180334490A1 (en) 2014-12-03 2018-11-22 Qilong H. Wu Methods for b cell preconditioning in car therapy
ES2987087T3 (es) 2014-12-03 2024-11-13 Juno Therapeutics Inc Métodos y composiciones para terapia celular adoptiva
AU2015357533B2 (en) 2014-12-05 2021-10-07 Eureka Therapeutics, Inc. Antibodies targeting B-cell maturation antigen and methods of use
SG10201913937QA (en) 2014-12-05 2020-03-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies targeting g-protein coupled receptor and methods of use
BR112017011893A2 (pt) 2014-12-05 2018-07-24 City Of Hope células t modificadas no receptor de antígeno quimérico direcionado para cs1
CA2969870A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen and uses thereof
EP3227339B1 (en) 2014-12-05 2021-11-10 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting g-protein coupled receptor and uses thereof
CN113968913A (zh) * 2014-12-08 2022-01-25 美国卫生和人力服务部 抗cd70嵌合抗原受体
WO2016094783A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the production of scaav
RS62527B1 (sr) 2014-12-12 2021-11-30 2Seventy Bio Inc Bcma receptori himernog antigena
WO2016100233A1 (en) 2014-12-15 2016-06-23 The Regents Of The University Of California Cytotoxic molecules responsive to intracellular ligands for selective t cell mediated killing
WO2016100232A1 (en) 2014-12-15 2016-06-23 The Regents Of The University Of California Bispecific or-gate chimeric antigen receptor responsive to cd19 and cd20
EP3234193B1 (en) 2014-12-19 2020-07-15 Massachusetts Institute of Technology Molecular biomarkers for cancer immunotherapy
ES3049406T3 (en) 2014-12-19 2025-12-16 Broad Inst Inc Methods for profiling the t-cell-receptor repertoire
BR112017013690A2 (pt) * 2014-12-24 2018-03-06 Ucl Business Plc célula
EP4036109A3 (en) 2014-12-29 2022-10-12 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
MA41346A (fr) 2015-01-12 2017-11-21 Juno Therapeutics Inc Eléments régulateurs post-transcriptionnels d'hépatite modifiée
CA2973964A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for ror1
WO2016115482A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Novartis Pharma Ag Phosphoglycerate kinase 1 (pgk) promoters and methods of use for expressing chimeric antigen receptor
AU2016212158B2 (en) 2015-01-26 2021-06-03 Allogene Therapeutics, Inc. mAb-driven chimeric antigen receptor systems for sorting/depleting engineered immune cells
JP6849600B6 (ja) * 2015-01-29 2021-06-30 リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ キメラ抗原受容体、組成物及び方法
WO2016126608A1 (en) 2015-02-02 2016-08-11 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
KR20250022235A (ko) * 2015-02-06 2025-02-14 내셔널 유니버시티 오브 싱가포르 치료적 면역 세포의 효능의 향상 방법
AU2016219511B2 (en) 2015-02-09 2020-11-12 Research Development Foundation Engineered immunoglobulin Fc polypeptides displaying improved complement activation
US20160228544A1 (en) * 2015-02-11 2016-08-11 Ensysce Biosciences, Inc. Single Walled Carbon Nanotube Polynucleotide Complexes and Methods Related Thereto
US11248058B2 (en) * 2015-02-19 2022-02-15 University Of Florida Research Foundation, Inc. Chimeric antigen receptors and uses thereof
EP3258967A4 (en) 2015-02-20 2018-10-03 Ohio State Innovation Foundation Bivalent antibody directed against nkg2d and tumor associated antigens
MA41613A (fr) * 2015-02-23 2018-01-02 Abbvie Stemcentrx Llc Récepteurs antigéniques chimériques anti-dll3 et procédés d'utilisation desdits récepteurs
CA2976126A1 (en) 2015-02-24 2016-09-01 Board Of Regents, The University Of Texas System Selection methods for genetically-modified t cells
JP6784687B2 (ja) 2015-02-24 2020-11-11 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 結合誘発型転写スイッチ及びその使用方法
PL3261651T3 (pl) * 2015-02-27 2022-08-22 Icell Gene Therapeutics Llc Chimeryczne receptory antygenowe (car) ukierunkowane na nowotwory złośliwe układu krwiotwórczego, kompozycje i sposoby ich stosowania
US10195272B2 (en) 2015-03-02 2019-02-05 The Nemours Foundation Adoptive t-cell therapy using FcεRI-based chimeric antigen receptors for treating IgE-mediated allergic diseases
KR102133857B1 (ko) 2015-03-02 2020-07-20 이노베이티브 셀룰러 테라퓨틱스 코퍼레이션 리미티드 Ｐｄ－ｌ１에 의해 유도된 면역관용의 감소
EP3265481B1 (en) 2015-03-05 2024-05-01 Fred Hutchinson Cancer Center Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof
HK1249469A1 (zh) 2015-03-12 2018-11-02 The Regents Of The University Of California 用RORγ抑制剂治疗癌症的方法
WO2016149254A1 (en) * 2015-03-17 2016-09-22 Chimera Bioengineering, Inc. Smart car devices, de car polypeptides, side cars and uses thereof
WO2016149578A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Dual specific anti-cd22-anti-cd19 chimeric antigen receptors
EP3683233A1 (en) 2015-03-20 2020-07-22 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to gp120 and their use
US10800828B2 (en) 2015-03-26 2020-10-13 The Scripps Research Institute Switchable non-scFv chimeric receptors, switches, and methods of use thereof to treat cancer
JP6843062B2 (ja) * 2015-03-27 2021-03-17 ユニバーシティ オブ サザン カリフォルニア Ｃａｒ ｔ細胞免疫療法のための新規標的としてのｈｌａ−ｇ
EP3273994B1 (en) 2015-03-27 2021-12-01 University of Southern California Car t-cell therapy directed to lhr for the treatment of solid tumors
CA2981304C (en) * 2015-04-02 2024-01-02 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Tnfrsf14/hvem proteins and methods of use thereof
CA2979732A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
US10647775B2 (en) 2015-04-06 2020-05-12 Subdomain Llc De novo binding domain containing polypeptides and uses thereof
US11045543B2 (en) 2015-04-06 2021-06-29 Cytoimmune Therapeutics, Inc. EGFR-directed car therapy for glioblastoma
CN119925616A (zh) 2015-04-08 2025-05-06 诺华股份有限公司 Cd20疗法、cd22疗法和与cd19嵌合抗原受体（car）表达细胞的联合疗法
WO2016168773A2 (en) 2015-04-15 2016-10-20 The California Institute For Biomedical Research Optimized pne-based chimeric receptor t cell switches and uses thereof
WO2016166568A1 (en) 2015-04-16 2016-10-20 Juno Therapeutics Gmbh Methods, kits and apparatus for expanding a population of cells
JP2018512856A (ja) 2015-04-17 2018-05-24 アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド 調整可能な親和性を有する免疫調節タンパク質
CA2982996A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 David Maxwell Barrett Methods for improving the efficacy and expansion of chimeric antigen receptor-expressing cells
WO2016172583A1 (en) 2015-04-23 2016-10-27 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
AU2016256367A1 (en) 2015-04-25 2017-12-07 The General Hospital Corporation Anti-fugetactic agent and anti-cancer agent combination therapy and compositions for the treatment of cancer
US11827904B2 (en) 2015-04-29 2023-11-28 Fred Hutchinson Cancer Center Modified stem cells and uses thereof
WO2016176651A2 (en) * 2015-04-29 2016-11-03 Fred Hutchinson Cancer Research Center Modified hematopoietic stem/progenitor and non-t effector cells, and uses thereof
US20190031759A1 (en) 2015-04-30 2019-01-31 Technion Research & Development Foundation Limited Chimeric antigen receptors and methods of their use
EP3288568A4 (en) * 2015-04-30 2019-01-02 University of Southern California Secretory tnt car cell immunotherapy
GB201507368D0 (en) 2015-04-30 2015-06-17 Ucl Business Plc Cell
RU2754661C2 (ru) 2015-05-01 2021-09-06 Дзе Реджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Калифорния Гликанзависимые иммунотерапевтические молекулы
JP2018515491A (ja) 2015-05-05 2018-06-14 リセラ・コーポレイションＬｙｃｅｒａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ＲＯＲγの作動薬及び疾患の療法として使用するジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジンスルホンアミド及び関連化合物
CN114099712A (zh) 2015-05-06 2022-03-01 斯尼普技术有限公司 改变微生物种群和改善微生物群
CA2988854A1 (en) 2015-05-08 2016-11-17 President And Fellows Of Harvard College Universal donor stem cells and related methods
US20200316231A1 (en) * 2015-05-10 2020-10-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions And Methods For Imaging Immune Cells
US11253616B2 (en) 2017-09-06 2022-02-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Small molecules for dual function positron emission tomography (PET) and cell suicide switches
WO2016180467A1 (en) * 2015-05-11 2016-11-17 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh Enhancing the effect of car-engineered t cells by means of nucleic acid vaccination
PT3447075T (pt) 2015-05-15 2023-11-16 Massachusetts Gen Hospital Anticorpos antagonistas anti-superfamília de recetores do fator de necrose tumoral
EP3466967A1 (en) 2015-05-18 2019-04-10 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins
US20180147271A1 (en) * 2015-05-18 2018-05-31 Bluebird Bio, Inc. Anti-ror1 chimeric antigen receptors
CR20230191A (es) 2015-05-20 2023-07-06 Dana Farber Cancer Inst Inc NEOANTIGENOS COMPARTIDOS (Div. exp 2017-584)
AU2016263513A1 (en) 2015-05-20 2017-11-23 Cellectis Anti-GD3 specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
AU2016263176A1 (en) 2015-05-20 2017-12-07 Novartis Ag Pharmaceutical combination of everolimus with dactolisib
US10434153B1 (en) 2015-05-20 2019-10-08 Kim Leslie O'Neill Use of car and bite technology coupled with an scFv from an antibody against human thymidine kinase 1 to specifically target tumors
MX388325B (es) 2015-05-28 2025-03-19 Kite Pharma Inc Metodos de diagnostico para tratamiento con linfocitos t.
US20160361415A1 (en) * 2015-05-28 2016-12-15 Armo Biosciences, Inc. Methods of Using Interleukin-10 for Treating Diseases and Disorders
JP7197979B2 (ja) * 2015-05-28 2022-12-28 カイト ファーマ インコーポレイテッド Ｔ細胞療法のために患者をコンディショニングする方法
WO2016196384A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions for cellular immunotherapy
EP3303586A1 (en) 2015-05-29 2018-04-11 Juno Therapeutics, Inc. Composition and methods for regulating inhibitory interactions in genetically engineered cells
HRP20200640T1 (hr) 2015-05-30 2020-07-10 Molecular Templates, Inc. De-imunizirane, okosnice podjedinice shiga toksina a i molekule koje ciljaju stanice koje ih sadrže
EP3302559B1 (en) * 2015-06-04 2022-01-12 University of Southern California Lym-1 and lym-2 targeted car cell immunotherapy
CA2987069C (en) 2015-06-05 2024-06-18 Novartis Ag Flow-through paramagnetic particle-based cell separation and paramagnetic particle removal
CA2988768A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Memorial Sloan Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibody agents specific for ebv latent membrane protein 2a peptide presented by human hla
KR102526538B1 (ko) 2015-06-10 2023-04-28 이뮤너티바이오, 인크. 암을 치료하기 위한 변형된 nk-92 세포
EP3307738B1 (en) 2015-06-11 2022-04-20 The Regents of the University of Michigan Aryl dihydro-2h-benzo[b][1,4]oxazine sulfonamide and related compounds for use as agonists of rory and the treatment of disease
EP3307282A4 (en) * 2015-06-12 2019-05-01 Immunomedics, Inc. DISEASE THERAPY WITH CONSTRUCTS OF CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR (CAR) AND T-CELL (CAR-T) OR NK-CELL (CAR-NK) EXPRESSIVE CAR CONSTRUCTS
WO2016201394A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Miltenyi Biotec Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered t-cells
CN105177031B (zh) * 2015-06-12 2018-04-24 北京艺妙神州医疗科技有限公司 嵌合抗原受体修饰的t细胞及其用途
AU2016279062A1 (en) 2015-06-18 2019-03-28 Omar O. Abudayyeh Novel CRISPR enzymes and systems
ES2870174T3 (es) 2015-06-19 2021-10-26 Sebastian Kobold Proteínas de fusión PD-1-CD28 y su uso en medicina
TW202444897A (zh) 2015-06-25 2024-11-16 美商生物細胞基因治療有限公司 嵌合抗原受體(car)、組合物及其使用方法
US11173179B2 (en) 2015-06-25 2021-11-16 Icell Gene Therapeutics Llc Chimeric antigen receptor (CAR) targeting multiple antigens, compositions and methods of use thereof
US11059880B2 (en) 2015-06-30 2021-07-13 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Redirected cells with MHC chimeric receptors and methods of use in immunotherapy
MA42902A (fr) * 2015-07-08 2018-05-16 Univ Johns Hopkins Lymphocytes infiltrant la moelle (mil) en tant que source de lymphocytes t pour une thérapie par des récepteurs chimériques d'un antigène (car)
WO2017011316A1 (en) * 2015-07-10 2017-01-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Treatment of a canine cd20 positive disease or condition using a canine cd20-specific chimeric antigen receptor
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
TWI859112B (zh) 2015-07-21 2024-10-21 瑞士商諾華公司 改良免疫細胞之功效及擴展之方法
US10493139B2 (en) 2015-07-24 2019-12-03 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Humanized anti-CD19 antibody and use thereof with chimeric antigen receptor
US11034749B2 (en) 2015-07-28 2021-06-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Modified monocytes/macrophage expressing chimeric antigen receptors and uses thereof
IL295616A (en) 2015-07-31 2022-10-01 Us Health Adapted cells and treatment methods
RU2724738C2 (ru) 2015-08-05 2020-06-25 СеллабМЕД ИНК. Химерный антигенный рецептор и т-клетки, в которых экспрессируется химерный антигенный рецептор
EP3331920A4 (en) 2015-08-07 2019-04-03 Seattle Children's Hospital, dba Seattle Children's Research Institute BIS SPECIFIC CAR T CELLS FOR TARGETING OF SOLID TUMORS
WO2017027392A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric cd3 receptor proteins
WO2017027653A1 (en) 2015-08-11 2017-02-16 The Johns Hopkins University Assaying ovarian cyst fluid
US11352439B2 (en) 2015-08-13 2022-06-07 Kim Leslie O'Neill Macrophage CAR (MOTO-CAR) in immunotherapy
CN106467906B (zh) * 2015-08-20 2019-09-27 北京马力喏生物科技有限公司 构建体、转基因淋巴细胞及其制备方法和用途
US10976232B2 (en) 2015-08-24 2021-04-13 Gpb Scientific, Inc. Methods and devices for multi-step cell purification and concentration
WO2017040380A2 (en) 2015-08-28 2017-03-09 Research Development Foundation Engineered antibody fc variants
HK1257441A1 (zh) 2015-08-28 2019-10-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania 表达嵌合细胞内信号传导分子的细胞的方法和组合物
US11649435B2 (en) * 2015-08-28 2023-05-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and compositions for cells expressing a chimeric intracellular signaling molecule
US11279769B2 (en) 2015-08-31 2022-03-22 Helixmith Co., Ltd Anti-Sialyl Tn chimeric antigen receptors
CN108780084B (zh) 2015-09-03 2022-07-22 诺华股份有限公司 预测细胞因子释放综合征的生物标志物
ES2848478T3 (es) * 2015-09-11 2021-08-09 Biosceptre Uk Ltd Receptores quiméricos para antígenos y usos de estos
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
CN108348606A (zh) 2015-09-18 2018-07-31 综合医院公司以麻省总医院名义经营 用于治疗癌症的抗趋除剂的局部递送
MX2018003317A (es) * 2015-09-18 2018-11-09 The General Hospital Corp Dba Massacsetts General Hospital Celulas t modificadas que tienen propiedades anti-fuctacticas y sus usos.
KR20180050413A (ko) 2015-09-22 2018-05-14 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 Hiv 감염을 치료하기 위해 t 세포를 리디렉션시키는 방법
JP6955487B2 (ja) 2015-09-24 2021-10-27 アブビトロ， エルエルシー Ｈｉｖ抗体組成物および使用方法
US10928392B2 (en) 2015-09-25 2021-02-23 Abvitro Llc High throughput process for T cell receptor target identification of natively-paired T cell receptor sequences
US11365391B2 (en) 2015-09-28 2022-06-21 Trustees Of Dartmouth College Chimeric antigen receptor anti-inflammatory cells and methods of use
HK1258726A1 (zh) 2015-09-28 2019-11-15 Regents Of The University Of Minnesota 嵌合抗原受体(car)t细胞作为获得自体免疫和同种免疫的治疗性干预
EP3359574B1 (en) * 2015-10-06 2020-04-22 City of Hope Chimeric antigen receptors targeted to psca
WO2017062748A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
CN108138148B (zh) 2015-10-08 2021-10-29 上海斯丹赛生物技术有限公司 T细胞的激活和扩增
EP3360961B1 (en) * 2015-10-08 2023-11-22 National University Corporation Tokai National Higher Education and Research System Method for preparing genetically-modified t cells which express chimeric antigen receptor
JP6991134B2 (ja) * 2015-10-09 2022-01-12 ガーダント ヘルス， インコーポレイテッド 無細胞ｄｎａを使用する集団ベースの処置レコメンダ
WO2017062820A1 (en) 2015-10-09 2017-04-13 Miltenyi Biotec Technology, Inc. Chimeric antigen receptors and methods of use
US12241053B2 (en) 2015-10-09 2025-03-04 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of novel immune checkpoint targets
CN105153315B (zh) * 2015-10-09 2019-04-02 重庆精准生物技术有限公司 免疫抑制受体联合肿瘤抗原嵌合受体及其应用
CN105924530B (zh) * 2015-10-13 2019-08-06 中国人民解放军总医院 嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、car20-nkt细胞及其制备方法和应用
CN106755023A (zh) * 2015-10-15 2017-05-31 中国人民解放军军事医学科学院附属医院 带安全开关的嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法与应用
US11723922B2 (en) 2015-10-16 2023-08-15 Ludwig-Maximilians-Universität München CXCR6-transduced T cells for targeted tumor therapy
IL300420B2 (en) 2015-10-16 2024-09-01 Univ Columbia Compositions and methods for inhibition of lineage specific antigens
US11116851B2 (en) 2015-10-19 2021-09-14 University Of Massachusetts Anti-cancer and anti-inflammatory therapeutics and methods thereof
CN113293131A (zh) 2015-10-20 2021-08-24 凯德药业股份有限公司 制备用于t细胞疗法的t细胞的方法
MA45489A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Juno Therapeutics Gmbh Procédés de culture de cellules, kits et appareil associés
MX395154B (es) 2015-10-22 2025-03-25 Juno Therapeutics Gmbh Métodos, kits, agentes y aparatos para transducción.
MA45488A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Juno Therapeutics Gmbh Procédés, kits et appareil de culture de cellules
CN105132445B (zh) * 2015-10-23 2018-10-02 马健颖 一种特异识别肿瘤细胞的受体蛋白、t淋巴细胞及nk细胞
CN108883170A (zh) * 2015-10-23 2018-11-23 索伦托治疗有限公司 可程序化的通用细胞受体及其使用方法
EP3368075B1 (en) 2015-10-27 2020-01-29 Board of Regents, The University of Texas System Chimeric antigen receptor molecules and uses thereof
WO2017075465A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting gata3
EP3368689B1 (en) 2015-10-28 2020-06-17 The Broad Institute, Inc. Composition for modulating immune responses by use of immune cell gene signature
WO2017075451A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting pou2af1
MA44314A (fr) * 2015-11-05 2018-09-12 Juno Therapeutics Inc Récepteurs chimériques contenant des domaines induisant traf, et compositions et méthodes associées
US11020429B2 (en) 2015-11-05 2021-06-01 Juno Therapeutics, Inc. Vectors and genetically engineered immune cells expressing metabolic pathway modulators and uses in adoptive cell therapy
CN108463248B (zh) 2015-11-12 2022-10-21 西雅图基因公司 聚糖相互作用化合物及使用方法
CN105331585A (zh) 2015-11-13 2016-02-17 科济生物医药（上海）有限公司 携带pd-l1阻断剂的嵌合抗原受体修饰的免疫效应细胞
CN105384826A (zh) * 2015-11-19 2016-03-09 广州熙帝生物科技有限公司 表达嵌合抗原受体的脐血有核细胞及其应用
US11001622B2 (en) 2015-11-19 2021-05-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Method of treating autoimmune disease with lymphocyte antigen CD5-like (CD5L) protein
IL296410A (en) * 2015-11-27 2022-11-01 Cartherics Pty Ltd Genetically modified stem cells and uses thereof
CA3007262A1 (en) 2015-12-03 2017-06-08 Lucas James Thompson Modified chimeric receptors and related compositions and methods
WO2017096327A2 (en) 2015-12-03 2017-06-08 Juno Therapeutics, Inc. Compositions and methods for reducing immune responses against cell therapies
HK1257295A1 (zh) 2015-12-04 2019-10-18 Novartis Ag 用於免疫肿瘤学的组合物和方法
EP3384013A4 (en) * 2015-12-04 2019-07-10 The Henry M. Jackson Foundation for the Advancement of Military Medicine, Inc. ANTIGEN-SPECIFIC T CELLS FOR INDUCING IMMUNOTOLERANCE
WO2017096331A1 (en) * 2015-12-04 2017-06-08 Juno Therapeutics, Inc. Methods and compositions related to toxicity associated with cell therapy
WO2017099712A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Bluebird Bio, Inc. Improved t cell compositions
WO2017106332A1 (en) 2015-12-14 2017-06-22 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
US10953003B2 (en) 2015-12-14 2021-03-23 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
EP3393504B1 (en) 2015-12-22 2025-09-24 Novartis AG Mesothelin chimeric antigen receptor (car) and antibody against pd-l1 inhibitor for combined use in anticancer therapy
WO2017112894A1 (en) 2015-12-22 2017-06-29 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating immunodeficiency disease
EP3397755B1 (en) 2015-12-28 2024-11-06 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor -expressing cells
EP3397756B1 (en) 2015-12-30 2023-03-08 Novartis AG Immune effector cell therapies with enhanced efficacy
JP7068169B2 (ja) 2016-01-08 2022-05-16 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 条件付活性ヘテロ二量体ポリペプチド及びその使用方法
GB201600328D0 (en) 2016-01-08 2016-02-24 Univ Oslo Hf Anti-CD37 chimeric antigen receptors and immune cells expressing them
CN105950645A (zh) * 2016-01-11 2016-09-21 灏灵赛奥（天津）生物科技有限公司 Car-cd19抗原受体的人源化融合基因片段、其构建方法及应用
JP7022067B2 (ja) * 2016-01-14 2022-02-17 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター Ｆｏｘｐ３由来のペプチドに特異的なｔ細胞受容体様抗体
WO2017123548A1 (en) * 2016-01-14 2017-07-20 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Tumor-specific ifna secretion by car t-cells to reprogram the solid tumor microenvironment
EP3403099A4 (en) 2016-01-15 2019-09-04 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF CANCER
SG11201805872SA (en) 2016-01-21 2018-08-30 Pfizer Chimeric antigen receptors targeting epidermal growth factor receptor variant iii
DK3405490T3 (da) 2016-01-21 2022-01-10 Pfizer Mono- og bispecifikke antistoffer mod epidermal vækstfaktorreceptor variant iii og cd3 og anvendelser deraf
CN105567640A (zh) * 2016-01-27 2016-05-11 苏州佰通生物科技有限公司 一种嵌合抗原受体脂肪干细胞及其制备方法
JP2019509275A (ja) 2016-02-23 2019-04-04 イミューン デザイン コーポレイション マルチゲノムレトロウイルスベクター調製物ならびにそれらを産生および使用するための方法およびシステム
EP3423483B1 (en) 2016-03-02 2025-09-24 Board Of Regents Of the University Of Texas System Human kynureninase enzyme variants having improved pharmacological properties
KR20180118175A (ko) 2016-03-04 2018-10-30 노파르티스 아게 다중 키메라 항원 수용체 (car) 분자를 발현하는 세포 및 그에 따른 용도
EP3430130B1 (en) * 2016-03-14 2023-01-04 Wisconsin Alumni Research Foundation Methods of t cell expansion and activation
MA43759A (fr) 2016-03-16 2018-11-28 Jason Connor Procédés de conception adaptative d'un régime de traitement et traitements associés
EP3430548A1 (en) 2016-03-16 2019-01-23 Juno Therapeutics, Inc. Methods for determining dosing of a therapeutic agent and related treatments
KR20230017358A (ko) 2016-03-17 2023-02-03 고쿠리츠다이가쿠호우진 야마구치 다이가쿠 면역 기능 제어 인자를 발현하는 면역 담당 세포 및 발현 벡터
CA3015369A1 (en) 2016-03-18 2017-09-21 Oliver Press Compositions and methods for cd20 immunotherapy
US11111505B2 (en) 2016-03-19 2021-09-07 Exuma Biotech, Corp. Methods and compositions for transducing lymphocytes and regulating the activity thereof
US11325948B2 (en) 2016-03-19 2022-05-10 Exuma Biotech Corp. Methods and compositions for genetically modifying lymphocytes to express polypeptides comprising the intracellular domain of MPL
JP7048571B2 (ja) 2016-03-22 2022-04-05 シアトル チルドレンズ ホスピタル （ディービーエイ シアトル チルドレンズ リサーチ インスティテュート） 毒性を予防または改善するための早期介入法
WO2017165683A1 (en) 2016-03-23 2017-09-28 Novartis Ag Cell secreted minibodies and uses thereof
WO2017173256A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen and t cell receptors and methods of use
KR102389096B1 (ko) 2016-04-01 2022-04-25 암젠 인크 Flt3에 대한 키메라 수용체 및 이의 사용 방법
CN109219445B (zh) * 2016-04-01 2022-08-26 上海煦顼技术有限公司 嵌合抗原受体修饰细胞治疗癌症的应用
PE20190120A1 (es) 2016-04-01 2019-01-17 Kite Pharma Inc Moleculas de union a bcma y metodos de uso de las mismas
US10654934B2 (en) 2016-04-01 2020-05-19 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Use of chimeric antigen receptor modified cells to treat cancer
KR102120815B1 (ko) 2016-04-01 2020-06-12 카이트 파마 인코포레이티드 키메라 수용체 및 그의 사용 방법
EP4261277A3 (en) 2016-04-08 2024-01-03 Emory University Methods of treating cancer and infectious diseases using cell based therapies
US11337969B2 (en) 2016-04-08 2022-05-24 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
US12144850B2 (en) 2016-04-08 2024-11-19 Purdue Research Foundation Methods and compositions for car T cell therapy
WO2017180587A2 (en) 2016-04-11 2017-10-19 Obsidian Therapeutics, Inc. Regulated biocircuit systems
CN106399255B (zh) * 2016-04-13 2019-10-18 阿思科力(苏州)生物科技有限公司 Pd-1 car-t细胞及其制备方法和应用
US10188749B2 (en) 2016-04-14 2019-01-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods to program therapeutic cells using targeted nucleic acid nanocarriers
KR102824067B1 (ko) 2016-04-15 2025-06-23 알파인 이뮨 사이언시즈, 인코포레이티드 Icos 리간드 변이체 면역조절 단백질 및 그의 용도
JP7527758B2 (ja) 2016-04-15 2024-08-05 アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド Ｃｄ８０バリアント免疫調節タンパク質およびその使用
JP7497955B6 (ja) 2016-04-15 2024-07-01 ノバルティス アーゲー 選択的タンパク質発現のための組成物および方法
WO2017184590A1 (en) 2016-04-18 2017-10-26 The Broad Institute Inc. Improved hla epitope prediction
CN105907719B (zh) * 2016-04-18 2019-10-18 阿思科力(苏州)生物科技有限公司 Anti ROBO1 CAR-T细胞及其制备和应用
KR20180134419A (ko) * 2016-04-22 2018-12-18 카르스젠 테라퓨틱스 컴퍼니, 리미티드 세포성 면역요법을 위한 조성물 및 방법
WO2017192536A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 University Of Kansas Eliminating mhc restriction from the t cell receptor as a strategy for immunotherapy
MA44869A (fr) 2016-05-06 2019-03-13 Editas Medicine Inc Cellules génétiquement modifiées et leurs procédés de fabrication
US11261223B2 (en) * 2016-05-11 2022-03-01 The University Of Chicago Methods of treating cancers with CT45 targeted therapies
EP3464323B1 (en) 2016-05-27 2021-09-22 Aadigen, LLC Peptides and nanoparticles for intracellular delivery of genome-editing molecules
WO2017205747A1 (en) * 2016-05-27 2017-11-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Flt3-specific chimeric antigen receptors and methods using same
CN105837693A (zh) * 2016-05-30 2016-08-10 李斯文 一种基于bcma的抗原嵌合受体及其制备方法和应用
EP3464375A2 (en) 2016-06-02 2019-04-10 Novartis AG Therapeutic regimens for chimeric antigen receptor (car)- expressing cells
CA3026453A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Adoptive cell therapies as early treatment options
GB201609811D0 (en) 2016-06-05 2016-07-20 Snipr Technologies Ltd Methods, cells, systems, arrays, RNA and kits
MA45341A (fr) 2016-06-06 2019-04-10 Hutchinson Fred Cancer Res Procédés de traitement de malignités de lymphocytes b au moyen d'une thérapie cellulaire adoptive
WO2017213979A1 (en) * 2016-06-06 2017-12-14 St. Jude Children's Research Hospital Anti-cd7 chimeric antigen receptor and method of use thereof
CN109562168A (zh) 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗cd98抗体及抗体药物偶联物
ES2861499T3 (es) 2016-06-08 2021-10-06 Abbvie Inc Anticuerpos anti-B7-H3 y conjugados anticuerpo-fármaco
BR112018075630A2 (pt) 2016-06-08 2019-03-19 Abbvie Inc. anticorpos anti-cd98 e conjugados de fármaco de anticorpo
CA3027044A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
MX2018015268A (es) 2016-06-08 2019-08-12 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
KR102652827B1 (ko) * 2016-06-08 2024-04-01 프레시전 인코포레이티드 Cd33 특이적 키메라 항원 수용체
CN107523545A (zh) * 2016-06-20 2017-12-29 上海细胞治疗研究院 一种高效稳定表达抗体的杀伤性细胞及其用途
CA3027495A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CA3027498A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
WO2017223243A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CA3029197A1 (en) 2016-06-24 2017-12-28 Icell Gene Therapeutics Llc Chimeric antigen receptors (cars), compositions and methods thereof
CN106117367B (zh) * 2016-06-24 2020-02-11 安徽未名细胞治疗有限公司 一种her-3特异性嵌合抗原受体及其应用
CN110291402B (zh) 2016-06-27 2023-09-01 朱诺治疗学股份有限公司 鉴定肽表位的方法、结合此类表位的分子和相关用途
MA45491A (fr) 2016-06-27 2019-05-01 Juno Therapeutics Inc Épitopes à restriction cmh-e, molécules de liaison et procédés et utilisations associés
JP7175769B2 (ja) 2016-06-30 2022-11-21 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 改善された養子ｔ細胞療法
WO2018013563A1 (en) 2016-07-12 2018-01-18 Kite Pharma, Inc. Antigen binding molecules and methods of use thereof
JP2018035137A (ja) 2016-07-13 2018-03-08 マブイミューン ダイアグノスティックス エイジーＭａｂｉｍｍｕｎｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ａｇ 新規な抗線維芽細胞活性化タンパク質（ｆａｐ）結合薬剤およびその使用
AU2017295886C1 (en) 2016-07-15 2024-05-16 Novartis Ag Treatment and prevention of cytokine release syndrome using a chimeric antigen receptor in combination with a kinase inhibitor
JP7373991B2 (ja) 2016-07-15 2023-11-06 ビラクタ セラピューティクス，インク． 免疫療法で使用するためのヒストン脱アセチル化酵素阻害剤
PL240585B1 (pl) * 2016-07-18 2022-05-02 Helix Biopharma Corp Chimeryczny receptor antygenowy (CAR), komórki immunologiczne zawierające CAR oraz kompozycja farmaceutyczna je zawierająca do leczenia nowotworów
WO2018017708A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 University Of Utah Research Foundation Cd229 car t cells and methods of use thereof
US11384156B2 (en) 2016-07-25 2022-07-12 The Nemours Foundation Adoptive T-cell therapy using EMPD-specific chimeric antigen receptors for treating IgE-mediated allergic diseases
US11471488B2 (en) 2016-07-28 2022-10-18 Alpine Immune Sciences, Inc. CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
WO2018022946A1 (en) 2016-07-28 2018-02-01 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US11834490B2 (en) 2016-07-28 2023-12-05 Alpine Immune Sciences, Inc. CD112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
TW202508628A (zh) 2016-07-28 2025-03-01 瑞士商諾華公司 嵌合抗原受體及pd-1抑制劑之組合療法
KR20230107408A (ko) 2016-07-29 2023-07-14 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 항-cd19 항체에 대한 항-이디오타입 항체
ES2926513T3 (es) 2016-07-29 2022-10-26 Juno Therapeutics Inc Métodos para evaluar la presencia o ausencia de virus competente en replicación
CA3031955A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Juno Therapeutics, Inc. Immunomodulatory polypeptides and related compositions and methods
JP2019527696A (ja) 2016-08-01 2019-10-03 ノバルティス アーゲー プロｍ２マクロファージ分子の阻害剤と組み合わせてキメラ抗原受容体を用いる癌の処置
US11242376B2 (en) 2016-08-02 2022-02-08 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins
US11078481B1 (en) 2016-08-03 2021-08-03 KSQ Therapeutics, Inc. Methods for screening for cancer targets
WO2018035364A1 (en) 2016-08-17 2018-02-22 The Broad Institute Inc. Product and methods useful for modulating and evaluating immune responses
JP7045378B2 (ja) 2016-09-01 2022-03-31 キメラ・バイオエンジニアリング，インコーポレーテッド Ｇｏｌｄ最適化ＣＡＲ Ｔ細胞
ES2981703T3 (es) 2016-09-02 2024-10-10 Lentigen Tech Inc Composiciones y métodos para tratar cáncer con DuoCars
US11078483B1 (en) 2016-09-02 2021-08-03 KSQ Therapeutics, Inc. Methods for measuring and improving CRISPR reagent function
KR20190057308A (ko) 2016-09-02 2019-05-28 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 인터류킨-6 수용체 알파-결합 단일 사슬 가변 단편을 포함하는 방법 및 조성물
US20190262399A1 (en) 2016-09-07 2019-08-29 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses
BR112019004662A2 (pt) 2016-09-12 2019-05-28 Juno Therapeutics Inc conjuntos de sacos de biorreator de perfusão
US11077178B2 (en) * 2016-09-21 2021-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptor (CAR) that targets chemokine receptor CCR4 and its use
WO2018057904A1 (en) * 2016-09-23 2018-03-29 University Of Southern California Chimeric antigen receptors and compositions and methods of use thereof
WO2018064208A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 The Broad Institute, Inc. Systematic screening and mapping of regulatory elements in non-coding genomic regions, methods, compositions, and applications thereof
WO2018063985A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Atossa Genetics Inc. Methods of adoptive cell therapy
PL3518972T3 (pl) 2016-09-28 2025-04-07 Kite Pharma, Inc. Cząsteczki wiążące antygen i sposoby ich zastosowania
EP3519433A1 (en) 2016-10-03 2019-08-07 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
GB2564823B8 (en) 2016-10-07 2022-06-29 Tcr2 Therapeutics Inc Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins
WO2018067991A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of novel immune checkpoint targets
CN110225927B (zh) 2016-10-07 2024-01-12 诺华股份有限公司 用于治疗癌症的嵌合抗原受体
CN107151654B (zh) * 2016-10-11 2020-05-05 深圳宾德生物技术有限公司 一种人源t淋巴细胞的培养基及其制备方法和应用
MA50839A (fr) 2016-10-13 2019-08-21 Juno Therapeutics Inc Méthodes et compositions d'immunothérapie impliquant des modulateurs de la voie métabolique du tryptophane
CN107936120B (zh) * 2016-10-13 2021-03-09 上海赛比曼生物科技有限公司 Cd19靶向性的嵌合抗原受体及其制法和应用
EP3529359B1 (en) 2016-10-18 2023-12-13 Regents of the University of Minnesota Tumor infiltrating lymphocytes for use in therapy
CA3040343A1 (en) * 2016-10-19 2018-04-26 California Institute For Biomedical Research Chimeric antigen receptor effector cell switches with humanized targeting moieties and/or optimized chimeric antigen receptor interacting domains and uses thereof
WO2018075820A2 (en) 2016-10-20 2018-04-26 Celgene Corporation Cereblon-based heterodimerizable chimeric antigen receptors
WO2018075978A1 (en) 2016-10-20 2018-04-26 Alpine Immune Sciences, Inc. Secretable variant immunomodulatory proteins and engineered cell therapy
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3040914A1 (en) 2016-11-03 2018-05-24 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a cell based therapy and a microglia inhibitor
CN110139669A (zh) 2016-11-03 2019-08-16 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞疗法和btk抑制剂的组合疗法
CN110022906A (zh) 2016-11-04 2019-07-16 蓝鸟生物公司 抗bcma car t细胞组合物
WO2018089386A1 (en) 2016-11-11 2018-05-17 The Broad Institute, Inc. Modulation of intestinal epithelial cell differentiation, maintenance and/or function through t cell action
US11332713B2 (en) 2016-11-16 2022-05-17 KSQ Therapeutics, Inc. Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy
WO2018094143A1 (en) 2016-11-17 2018-05-24 Siamab Therapeutics, Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
CA3044593A1 (en) 2016-11-22 2018-05-31 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins
US10550183B2 (en) 2016-11-22 2020-02-04 National University Of Singapore Blockade of CD7 expression and chimeric antigen receptors for immunotherapy of T-cell malignancies
CA3044355A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 Novartis Ag Methods of enhancing immune response with everolimus, dactolisib or both
US20190030073A1 (en) * 2016-12-02 2019-01-31 Cartesian Therapeutics, Inc. Cancer immunotherapy with highly enriched cd8+ chimeric antigen receptor t cells
US11590167B2 (en) 2016-12-03 2023-02-28 Juno Therapeutic, Inc. Methods and compositions for use of therapeutic T cells in combination with kinase inhibitors
ES2961666T3 (es) 2016-12-03 2024-03-13 Juno Therapeutics Inc Métodos para determinar la dosificación de células CAR-T
BR112019011025A2 (pt) 2016-12-03 2019-10-08 Juno Therapeutics Inc métodos para modulação de células t car
CA3045338A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Juno Therapeutics, Inc. Production of engineered cells for adoptive cell therapy
CN108165568B (zh) * 2016-12-07 2020-12-08 上海恒润达生生物科技有限公司 一种培养CD19CAR-iNKT细胞方法及用途
CN107058315B (zh) * 2016-12-08 2019-11-08 上海优卡迪生物医药科技有限公司 敲减人PD-1的siRNA、重组表达CAR-T载体及其构建方法和应用
EP3551197B1 (en) 2016-12-12 2023-11-22 Seattle Children's Hospital (DBA Seattle Children's Research Institute) Chimeric transcription factor variants with augmented sensitivity to drug ligand induction of transgene expression in mammalian cells
CN108218994A (zh) * 2016-12-14 2018-06-29 上海恒润达生生物科技有限公司 一种方法培养t记忆干细胞
CA3047313A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 B-Mogen Biotechnologies, Inc. Enhanced hat family transposon-mediated gene transfer and associated compositions, systems, and methods
US11278570B2 (en) 2016-12-16 2022-03-22 B-Mogen Biotechnologies, Inc. Enhanced hAT family transposon-mediated gene transfer and associated compositions, systems, and methods
CN108276493B (zh) * 2016-12-30 2023-11-14 南京传奇生物科技有限公司 一种嵌合抗原受体及其应用
US11447562B2 (en) 2017-01-01 2022-09-20 Chi-Yu Gregory Lee RP215 chimeric antigen receptor construct and methods of making and using same
EP3609536B1 (en) 2017-01-05 2022-03-09 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Humanized anti-cd19 antibody and use thereof with chimeric antigen receptor
CA3049244A1 (en) 2017-01-05 2018-07-12 Fred Hutchinson Cancer Research Center Systems and methods to improve vaccine efficacy
EP3346001A1 (en) * 2017-01-06 2018-07-11 TXCell Monospecific regulatory t cell population with cytotoxicity for b cells
EP3565586B1 (en) 2017-01-06 2025-10-08 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof
WO2018129332A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists
US10624968B2 (en) 2017-01-06 2020-04-21 Bicyclerd Limited Compounds for treating cancer
CN108285920A (zh) * 2017-01-09 2018-07-17 上海恒润达生生物科技有限公司 一种体内检测cart细胞表达的技术及其用途
CN110691792A (zh) 2017-01-10 2020-01-14 朱诺治疗学股份有限公司 细胞疗法的表观遗传学分析及相关方法
GB201700553D0 (en) 2017-01-12 2017-03-01 Genagon Therapeutics Ab Therapeutic agents
EP3568416A4 (en) 2017-01-13 2020-07-08 Celdara Medical, LLC TIM-1 TARGETED CHIMERIC ANTIGENIC RECEPTORS
CN110418802A (zh) 2017-01-20 2019-11-05 朱诺治疗学有限公司 细胞表面缀合物及相关的细胞组合物和方法
EP3574116A1 (en) 2017-01-24 2019-12-04 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide
CN108342363B (zh) * 2017-01-25 2021-02-12 北京马力喏生物科技有限公司 共表达抗msln嵌合抗原受体和免疫检查点抑制分子的转基因淋巴细胞及其用途
EP4043485A1 (en) 2017-01-26 2022-08-17 Novartis AG Cd28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
RU2674894C2 (ru) * 2017-01-30 2018-12-13 Общество с ограниченной ответственностью "ПЛАНТА" Новые люциферазы и способы их использования
JP2020506700A (ja) 2017-01-31 2020-03-05 ノバルティス アーゲー 多重特異性を有するキメラｔ細胞受容体タンパク質を用いた癌の治療
WO2018144597A1 (en) * 2017-01-31 2018-08-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods of sensitizing cancer cells to immune cell killing
CA3051481A1 (en) 2017-02-07 2018-08-16 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Phospholipid ether (ple) car t cell tumor targeting (ctct) agents
SI3580561T1 (sl) 2017-02-12 2024-04-30 Biontech Us Inc. Metode, osnovane na hla, in njihove sestave ter uporabe
EP4008728B1 (en) 2017-02-14 2025-12-17 Kite Pharma, Inc. Cd70 binding molecules and methods of use thereof
IL268349B2 (en) 2017-02-17 2024-08-01 Hutchinson Fred Cancer Res Combination therapies for treatment of bcma-related cancers and autoimmune disorders
EP3585402B1 (en) 2017-02-27 2024-03-06 Juno Therapeutics, Inc. Compositions, articles of manufacture and methods related to dosing in cell therapy
US11597911B2 (en) 2017-02-27 2023-03-07 Life Technologies Corporation Expansion of populations of T cells by the use of modified serum free media
US20200048359A1 (en) 2017-02-28 2020-02-13 Novartis Ag Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
ES3010559T3 (en) 2017-02-28 2025-04-03 Endocyte Inc Compositions and methods for car t cell therapy
CA3054939A1 (en) 2017-03-03 2018-09-07 Seattle Genetics, Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
US11629340B2 (en) 2017-03-03 2023-04-18 Obsidian Therapeutics, Inc. DHFR tunable protein regulation
AU2018226857B2 (en) 2017-03-03 2025-01-02 Obsidian Therapeutics, Inc. Compositions and methods for immunotherapy
JP7341900B2 (ja) 2017-03-03 2023-09-11 オブシディアン セラピューティクス， インコーポレイテッド 免疫療法のためのｃｄ１９組成物及び方法
WO2018169922A2 (en) 2017-03-13 2018-09-20 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen receptors for melanoma and uses thereof
WO2018170188A2 (en) 2017-03-14 2018-09-20 Juno Therapeutics, Inc. Methods for cryogenic storage
CA3053804C (en) 2017-03-16 2025-09-23 Alpine Immune Sciences, Inc. Immunomodulatory Proteins of PD-L1 Variants and Associated Uses
US11732022B2 (en) 2017-03-16 2023-08-22 Alpine Immune Sciences, Inc. PD-L2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
MX2019010887A (es) 2017-03-16 2019-10-15 Alpine Immune Sciences Inc Proteinas inmunomoduladoras de cb80 variante y usos de estas.
WO2018170475A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 Fred Hutchinson Cancer Research Center Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof
CN110832075A (zh) 2017-03-22 2020-02-21 诺华股份有限公司 用于免疫肿瘤学的组合物和方法
US11547694B2 (en) 2017-03-23 2023-01-10 The General Hospital Corporation CXCR4/CXCR7 blockade and treatment of human papilloma virus-associated disease
JP7137896B2 (ja) 2017-03-24 2022-09-15 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ３３免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
BR112019019917A2 (pt) 2017-03-27 2020-04-22 Nat Univ Singapore receptores quiméricos nkg2d truncados e seus usos em imunoterapia de células exterminadoras naturais
RU2019128544A (ru) 2017-03-27 2021-04-28 Нэшнл Юниверсити Оф Сингапур Линии стимулирующих клеток для ex vivo размножения и активации клеток-натуральных киллеров
WO2018183908A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating ovarian tumors
US11938153B2 (en) 2017-03-31 2024-03-26 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods of treating T cell exhaustion by inhibiting or modulating T cell receptor signaling
AU2018243753A1 (en) 2017-04-01 2019-10-10 Avm Biotechnology, Llc Replacement of cytotoxic preconditioning before cellular immunotherapy
US11913075B2 (en) 2017-04-01 2024-02-27 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for detecting and modulating an immunotherapy resistance gene signature in cancer
CA3058807A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Neon Therapeutics, Inc. Protein antigens and uses thereof
US11357796B2 (en) 2017-04-03 2022-06-14 Kite Pharma, Inc. Treatment using chimeric receptor T cells incorporating optimized polyfunctional T cells
EP3607319A1 (en) 2017-04-07 2020-02-12 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells expressing prostate-specific membrane antigen (psma) or a modified form thereof and related methods
WO2018191553A1 (en) 2017-04-12 2018-10-18 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Tumor signature for metastasis, compositions of matter methods of use thereof
WO2018191722A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for transient gene therapy with enhanced stability
AU2018251188A1 (en) 2017-04-14 2019-10-31 Juno Therapeutics, Inc. Methods for assessing cell surface glycosylation
CN108727497A (zh) * 2017-04-17 2018-11-02 沈阳美达博生物科技有限公司 一种cd19抗体及其应用
EP3612629A1 (en) 2017-04-18 2020-02-26 The Broad Institute, Inc. Compositions for detecting secretion and methods of use
EP4083063A3 (en) 2017-04-18 2023-01-04 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Antigen-specific immune effector cells
KR20190142775A (ko) 2017-04-19 2019-12-27 보드 오브 리전츠, 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 조작된 항원 수용체를 발현하는 면역 세포
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
CN110831600B (zh) 2017-04-21 2023-10-17 医肯纳肿瘤学公司 吲哚ahr抑制剂和其用途
JOP20180042A1 (ar) 2017-04-24 2019-01-30 Kite Pharma Inc نطاقات ربط مولد ضد متوافقة مع البشر وطرق الاستخدام
SG11201909931PA (en) 2017-04-27 2019-11-28 Juno Therapeutics Gmbh Oligomeric particle reagents and methods of use thereof
EP3615055A1 (en) 2017-04-28 2020-03-04 Novartis AG Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
EP3618842B1 (en) 2017-05-01 2023-10-18 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a cell therapy and an immunomodulatory compound
CN107226867B (zh) * 2017-07-25 2018-02-06 重庆精准生物技术有限公司 抗人cd19抗原的嵌合抗原受体及其应用
DE112018002302B4 (de) * 2017-05-02 2020-10-22 Chongqing Precision Biotech Company Limited Chimärer Antigenrezeptor von Anti-Human-CD19-Antigen und dessen Anwendung
TW201904578A (zh) * 2017-05-10 2019-02-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 源自液體腫瘤之腫瘤浸潤性淋巴細胞的擴增和該經擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之治療用途
WO2018209324A2 (en) 2017-05-11 2018-11-15 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions of use of cd8+ tumor infiltrating lymphocyte subtypes and gene signatures thereof
US11166985B2 (en) 2017-05-12 2021-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
CN110914289B (zh) 2017-05-12 2024-05-14 克里斯珀医疗股份公司 用于工程化细胞的材料和方法及其在免疫肿瘤学中的用途
CN110650975B (zh) 2017-05-15 2024-04-05 美国卫生和人力服务部 双顺反子嵌合抗原受体及其用途
US10415017B2 (en) 2017-05-17 2019-09-17 Thunder Biotech, Inc. Transgenic macrophages, chimeric antigen receptors, and associated methods
US12297436B2 (en) 2017-05-18 2025-05-13 The Broad Institute, Inc. Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing
EP3406733A1 (en) 2017-05-24 2018-11-28 SIB Swiss Institute of Bioinformatics Kinase mutants and uses thereof
EP3630108A1 (en) 2017-05-24 2020-04-08 Effector Therapeutics Inc. Compositions and methods for an improved antitumor immune response
ES3041991T3 (en) 2017-05-25 2025-11-17 Leidos Inc Pd-1 and ctla-4 dual inhibitor peptides
KR20210118479A (ko) 2017-05-26 2021-09-30 카이트 파마 인코포레이티드 배아 중간엽 전구 세포를 제조하고 사용하는 방법
WO2018219278A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Chimeric antigen receptor cell preparation and uses thereof
US12384830B2 (en) 2017-06-02 2025-08-12 Regents Of The University Of Minnesota Compositions and methods for improving immunotherapy
CN111225675B (zh) 2017-06-02 2024-05-03 朱诺治疗学股份有限公司 使用过继细胞疗法治疗的制品和方法
WO2018222898A1 (en) * 2017-06-02 2018-12-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research System and method for providing clinical outcomes driven expertise for disease treatment
US11740231B2 (en) 2017-06-02 2023-08-29 Juno Therapeutics, Inc. Articles of manufacture and methods related to toxicity associated with cell therapy
US11572541B2 (en) 2017-06-09 2023-02-07 Providence Health & Services—Oregon Utilization of CD39 and CD103 for identification of human tumor reactive T cells for treatment of cancer
WO2018232195A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods targeting complement component 3 for inhibiting tumor growth
DK3538645T3 (da) 2017-06-20 2021-04-19 Inst Curie Immunceller der mangler suv39h1
EP3642344B1 (en) 2017-06-21 2024-12-04 The University of North Carolina at Chapel Hill Methods and compositions for chimeric antigen receptor targeting cancer cells
CN111247242B (zh) 2017-06-21 2024-07-19 美商生物细胞基因治疗有限公司 嵌合抗原受体(CARs)、组合物及其使用方法
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
JP2020525010A (ja) 2017-06-22 2020-08-27 ボード・オブ・リージエンツ，ザ・ユニバーシテイ・オブ・テキサス・システム 制御性免疫細胞を産生するための方法及びその使用
MA49457A (fr) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis Ag Molécules d'anticorps se liant à cd73 et leurs utilisations
EA202090149A1 (ru) 2017-06-28 2020-05-31 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Антигенсвязывающие белки против вируса папилломы человека (hpv) и способы их применения
AU2018291032A1 (en) 2017-06-29 2020-01-16 Juno Therapeutics, Inc. Mouse model for assessing toxicities associated with immunotherapies
WO2019006418A2 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Intima Bioscience, Inc. ADENO-ASSOCIATED VIRAL VECTORS FOR GENE THERAPY
US11235004B2 (en) 2017-06-30 2022-02-01 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Lymphocyte cell lines and uses thereof
AU2018292181B2 (en) 2017-06-30 2025-04-10 Cellectis Cellular immunotherapy for repetitive administration
CN107287164A (zh) * 2017-07-07 2017-10-24 青岛协和华美医学诊断技术有限公司 靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞、制备方法及应用
WO2019010383A1 (en) 2017-07-07 2019-01-10 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. CHIMERIC ANTIGENIC RECEPTORS WITH MUTED CD28 COSTIMULATORY DOMAINS
CN107365798B (zh) * 2017-07-13 2020-07-14 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 一种携带iCasp9自杀基因的CD19-CAR-T细胞及其应用
WO2019014581A1 (en) 2017-07-14 2019-01-17 The Broad Institute, Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR MODULATING THE ACTIVITY OF A CYTOTOXIC LYMPHOCYTE
JP7280238B2 (ja) * 2017-07-17 2023-05-23 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド フィブロネクチンｉｉｉ型ドメインに対する抗原結合領域及びその使用方法
BR112020001719A2 (pt) 2017-07-29 2020-07-21 Juno Therapeutics Inc reagentes para expansão de células que expressam receptores recombinantes
JP7237926B2 (ja) 2017-07-31 2023-03-13 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ１９／ｃｄ２０免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
US12485102B2 (en) 2017-08-02 2025-12-02 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods and compositions for treating cancer
WO2019028417A1 (en) 2017-08-03 2019-02-07 The Scripps Research Institute MODIFICATION OF B-LYMPHOCYTE RECEPTORS IN B-LYMPHOCYTES
CN111183147B (zh) 2017-08-04 2024-07-05 拜斯科技术开发有限公司 Cd137特异性的双环肽配体
CA3072195A1 (en) 2017-08-07 2019-04-04 The Johns Hopkins University Methods and materials for assessing and treating cancer
MA49981A (fr) 2017-08-09 2020-06-17 Juno Therapeutics Inc Procédés et compositions de préparation de cellules génétiquement modifiées
BR112020001605A2 (pt) 2017-08-09 2020-08-11 Juno Therapeutics Inc métodos para produzir composições de células geneticamente modificadas e composições relacionadas
US11648269B2 (en) 2017-08-10 2023-05-16 National University Of Singapore T cell receptor-deficient chimeric antigen receptor T-cells and methods of use thereof
BR112020003116A2 (pt) 2017-08-17 2020-08-04 Ikena Oncology, Inc. inibidores de ahr e usos dos mesmos
US10844353B2 (en) 2017-09-01 2020-11-24 Gpb Scientific, Inc. Methods for preparing therapeutically active cells using microfluidics
EP3676403A1 (en) 2017-09-01 2020-07-08 Juno Therapeutics, Inc. Gene expression and assessment of risk of developing toxicity following cell therapy
EP3679370A1 (en) 2017-09-07 2020-07-15 Juno Therapeutics, Inc. Methods of identifying cellular attributes related to outcomes associated with cell therapy
JP2020533986A (ja) 2017-09-15 2020-11-26 ライフ テクノロジーズ コーポレーション 細胞を培養および増殖させるための組成物および方法
CN111315403A (zh) 2017-09-15 2020-06-19 凯德药业股份有限公司 用于进行具有监管链和身份链生物样品跟踪的患者特异性免疫疗法规程的方法和系统
CN107557337B (zh) * 2017-09-15 2020-06-26 山东兴瑞生物科技有限公司 一种抗ror1安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞及其应用
US20200230221A1 (en) 2017-09-19 2020-07-23 Massachusetts Institute Of Technology Compositions for chimeric antigen receptor t cell therapy and uses thereof
KR102742220B1 (ko) 2017-09-19 2024-12-17 더 유니버시티 오브 브리티쉬 콜롬비아 항-hla-a2 항체 및 그 사용 방법
CN109517820B (zh) 2017-09-20 2021-09-24 北京宇繁生物科技有限公司 一种靶向HPK1的gRNA以及HPK1基因编辑方法
BR112020005519A2 (pt) 2017-09-20 2020-10-27 The University Of British Columbia novos anticorpos anti-hla-a2 e usos dos mesmos
AU2018338318B2 (en) 2017-09-21 2022-12-22 Massachusetts Institute Of Technology Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing
JP7095078B2 (ja) 2017-09-22 2022-07-04 カイト ファーマ インコーポレイテッド キメラポリペプチド及びその使用
IL273432B (en) 2017-09-22 2022-09-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
WO2019060713A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kite Pharma, Inc. ANTIGEN-BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE THEREOF
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
EP3688143A4 (en) * 2017-09-26 2021-09-22 Longwood University CHEMICAL ANTIGEN RECEPTOR SPECIFIC TO PD-1 AS AN IMMUNOTHERAPY
CN109554349B (zh) * 2017-09-27 2022-06-24 亘喜生物科技（上海）有限公司 Pd-1基因表达沉默的工程化免疫细胞
EP3687575A4 (en) * 2017-09-29 2021-06-30 National Health Research Institutes METHODS AND COMPOSITIONS FOR INCREASING SURVIVAL AND FUNCTIONALITY OF ANTITUMOR AND ANTIVIRUS T CELLS
US12043870B2 (en) 2017-10-02 2024-07-23 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for detecting and modulating an immunotherapy resistance gene signature in cancer
EP3692063A1 (en) 2017-10-03 2020-08-12 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
WO2019074892A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Wisconsin Alumni Research Foundation ANTIBODIES TARGETING GLIOBLASTOME STRAIN TYPE CELLS AND METHODS OF USE
KR20250020681A (ko) 2017-10-10 2025-02-11 알파인 이뮨 사이언시즈, 인코포레이티드 Ctla-4 변이체 면역조절 단백질 및 이의 용도
CA3081336A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 Gregory LIZEE T cell receptors for immunotherapy
CN111479613A (zh) 2017-10-18 2020-07-31 凯德药业股份有限公司 施用嵌合抗原受体免疫疗法的方法
US11999802B2 (en) 2017-10-18 2024-06-04 Novartis Ag Compositions and methods for selective protein degradation
TWI899046B (zh) 2017-10-18 2025-10-01 美商艾爾潘免疫科學有限公司 變異型icos 配位體免疫調節蛋白及相關組合物及方法
CN109694854B (zh) * 2017-10-20 2023-11-21 亘喜生物科技（上海）有限公司 通用型嵌合抗原受体t细胞制备技术
US11732257B2 (en) 2017-10-23 2023-08-22 Massachusetts Institute Of Technology Single cell sequencing libraries of genomic transcript regions of interest in proximity to barcodes, and genotyping of said libraries
US12053490B2 (en) 2017-10-26 2024-08-06 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Methods and compositions for treating CD33+ cancers and improving in vivo persistence of chimeric antigen receptor T cells
EP3700932A1 (en) 2017-10-27 2020-09-02 Kite Pharma, Inc. T cell receptor antigen binding molecules and methods of use thereof
WO2019089798A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Novartis Ag Anti-car compositions and methods
JP7447006B2 (ja) 2017-11-01 2024-03-11 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂ細胞成熟抗原（ｂｃｍａ）に特異的なキメラ抗原受容体
US12258580B2 (en) 2017-11-01 2025-03-25 Juno Therapeutics, Inc. Process for generating therapeutic compositions of engineered cells
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
WO2019089848A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods associated with tumor burden for assessing response to a cell therapy
WO2019089982A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Method of assessing activity of recombinant antigen receptors
US12031975B2 (en) 2017-11-01 2024-07-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
EP3704251A2 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Editas Medicine, Inc. Methods, compositions and components for crispr-cas9 editing of tgfbr2 in t cells for immunotherapy
BR112020008565A2 (pt) 2017-11-01 2020-10-20 Juno Therapeutics Inc processo para a produção de uma composição de célula t
AU2018360031B2 (en) * 2017-11-03 2025-08-21 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-ROR1 immunotherapy
EP3703731A4 (en) 2017-11-04 2021-07-21 Aravive Biologics, Inc. METHOD OF TREATMENT OF METASTATIC CANCER USING AXL DECOY RECEPTORS
US20230137729A1 (en) 2017-11-06 2023-05-04 Editas Medicine, Inc. Methods, compositions and components for crispr-cas9 editing of cblb in t cells for immunotherapy
JP7233425B2 (ja) 2017-11-06 2023-03-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞療法とガンマセクレターゼ阻害剤との組み合わせ
US20210179687A1 (en) * 2017-11-07 2021-06-17 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Targeting lilrb4 with car-t or car-nk cells in the treatment of cancer
CN111556789A (zh) 2017-11-10 2020-08-18 朱诺治疗学股份有限公司 封闭系统低温器皿
WO2019094482A1 (en) 2017-11-10 2019-05-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors targeting tumor antigens
EP3710039A4 (en) 2017-11-13 2021-08-04 The Broad Institute, Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF CANCER BY TARGETING THE CLEC2D-KLRB1 PATH
WO2019094955A1 (en) 2017-11-13 2019-05-16 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for targeting developmental and oncogenic programs in h3k27m gliomas
WO2019099440A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Arcellx, Inc. Multifunctional immune cell therapies
WO2019099433A2 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Arcellx, Inc. D-domain containing polypeptides and uses thereof
WO2019099639A1 (en) 2017-11-15 2019-05-23 Navartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, cd19-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapies
EP3710471A1 (en) 2017-11-16 2020-09-23 Kite Pharma, Inc. Modified chimeric antigen receptors and methods of use
EP3714041A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood
CN109837244A (zh) * 2017-11-25 2019-06-04 深圳宾德生物技术有限公司 一种敲除pd1的靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和应用
US20200371091A1 (en) 2017-11-30 2020-11-26 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
EP3716980A1 (en) 2017-12-01 2020-10-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and for modulation of genetically engineered cells
US12084514B2 (en) 2017-12-04 2024-09-10 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Anti-DCLK1 antibodies and chimeric antigen receptors, and compositions and methods of use thereof
MX2020005908A (es) 2017-12-08 2020-10-07 Juno Therapeutics Inc Proceso para producir una composicion de celulas t modificadas.
MA51105A (fr) 2017-12-08 2020-10-14 Juno Therapeutics Inc Formulation de milieux sans sérum pour la culture de cellules et ses procédés d'utilisation
BR112020011223A2 (pt) 2017-12-08 2020-11-17 Juno Therapeutics Inc marcadores fenotípicos para terapia celular e mé-todos relacionados
CN111344402A (zh) 2017-12-14 2020-06-26 Ezy生物科技有限公司 受试者特异性肿瘤抑制细胞及其用途
EP3724885A2 (en) 2017-12-15 2020-10-21 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof
JP2021506260A (ja) 2017-12-15 2021-02-22 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｃｔ５結合分子およびその使用方法
WO2019117976A1 (en) 2017-12-17 2019-06-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Peptide hydrogels and use thereof
US11793867B2 (en) 2017-12-18 2023-10-24 Biontech Us Inc. Neoantigens and uses thereof
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
AU2018392213B2 (en) 2017-12-20 2021-03-04 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
CN108018312B (zh) * 2017-12-20 2019-09-10 上海优卡迪生物医药科技有限公司 一种t淋巴细胞白血病的car-t治疗载体及其构建方法和应用
GB201721833D0 (en) * 2017-12-22 2018-02-07 Cancer Research Tech Ltd Fusion proteins
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
CN109971712B (zh) * 2017-12-28 2023-06-20 上海细胞治疗研究院 特异性靶向cd19抗原且高水平稳定表达pd-1抗体的car-t细胞及用途
CN109970864A (zh) * 2017-12-28 2019-07-05 上海细胞治疗研究院 一种双向激活共刺激分子受体及其用途
CN109970866B (zh) * 2017-12-28 2022-10-04 上海细胞治疗研究院 一种cd28双向激活共刺激分子受体及其用途
CN111867619A (zh) 2018-01-03 2020-10-30 曲生物制品公司 过继性细胞治疗的先天寻靶
SG11202006148UA (en) 2018-01-03 2020-07-29 Alpine Immune Sciences Inc Multi-domain immunomodulatory proteins and methods of use thereof
US11994512B2 (en) 2018-01-04 2024-05-28 Massachusetts Institute Of Technology Single-cell genomic methods to generate ex vivo cell systems that recapitulate in vivo biology with improved fidelity
KR20200118010A (ko) * 2018-01-05 2020-10-14 맥스시티 인코포레이티드 암의 만성 car 치료
WO2019136432A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Novartis Ag Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
WO2019139972A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Board Of Regents, The University Of Texas System T cell receptors for immunotherapy
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
WO2019140100A1 (en) 2018-01-11 2019-07-18 Innovative Cellular Therapeutics Inc. Modified cell expansion and uses thereof
US10561686B2 (en) 2018-01-12 2020-02-18 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expansion and uses thereof
WO2019140380A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
KR20200110356A (ko) 2018-01-15 2020-09-23 화이자 인코포레이티드 키메라 항원 수용체 면역요법을 4-1bb 효능제와 조합하여 투여하는 방법
CA3089051A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Endocyte, Inc. Methods of use for car t cells
SG11202006832YA (en) 2018-01-29 2020-08-28 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
KR20200116481A (ko) 2018-01-29 2020-10-12 메르크 파텐트 게엠베하 Gcn2 억제제 및 이의 용도
KR102115236B1 (ko) * 2018-01-29 2020-05-27 (주)에스엠티바이오 췌장 또는 담관계암 치료를 위한 키메라 항원 수용체
EP3746116A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 Novartis AG Combination therapy using a chimeric antigen receptor
WO2019152747A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Juno Therapeutics, Inc. Methods and reagents for assessing the presence or absence of replication competent virus
JP7383620B2 (ja) 2018-01-31 2023-11-20 セルジーン コーポレイション 養子細胞療法およびチェックポイント阻害剤を使用する併用療法
WO2019152957A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University Dna-chimeric antigen receptor t cells for immunotherapy
AU2019218729B2 (en) 2018-02-06 2025-12-04 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Fluorescein-specific CARs exhibiting optimal T cell function against FL-PLE labelled tumors
CA3090047A1 (en) 2018-02-09 2019-08-15 Global Life Sciences Solutions Usa Llc Bioprocessing methods for cell therapy
US10889792B2 (en) 2018-02-09 2021-01-12 Global Life Sciences Solutions Usa Llc Cell expansion vessel systems and methods
US20210087511A1 (en) * 2018-02-09 2021-03-25 Global Life Sciences Solutions Usa Llc Bioprocessing methods for cell therapy
AU2019219454A1 (en) 2018-02-09 2020-08-27 National University Of Singapore Activating chimeric receptors and uses thereof in natural killer cell immunotherapy
EP3757133A4 (en) * 2018-02-11 2021-12-01 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. ISOLATED ANTIGENIC CHEMICAL RECEPTOR, MODIFIED T LYMPHOCYTE INCLUDING IT AND ASSOCIATED USE
CN110157677A (zh) * 2018-02-12 2019-08-23 深圳宾德生物技术有限公司 一种靶向性t淋巴细胞及其制备方法和应用
US10596165B2 (en) 2018-02-12 2020-03-24 resTORbio, Inc. Combination therapies
KR102586510B1 (ko) 2018-02-13 2023-10-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
WO2019160956A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Novartis Ag Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
EP4253959A3 (en) 2018-02-14 2023-11-22 Kite Pharma, Inc. Anti-idiotypic antibodies directed to the antigen-binding portion of an bcma-binding molecule
SG11202007513PA (en) 2018-02-16 2020-09-29 Kite Pharma Inc Modified pluripotent stem cells and methods of making and use
CN112272706A (zh) 2018-02-17 2021-01-26 旗舰先锋创新V股份有限公司 用于膜蛋白递送的组合物和方法
WO2019165121A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for activation and expansion of natural killer cells and uses therof
CA3091775A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Bicycletx Limited Multimeric bicyclic peptide ligands
US12240870B2 (en) 2018-02-23 2025-03-04 Purdue Research Foundation Sequencing method for CAR T cell therapy
GB201803178D0 (en) 2018-02-27 2018-04-11 Univ Oslo Hf Specific binding molecules for htert
CA3093078A1 (en) 2018-03-06 2019-09-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Prostate-specific membrane antigen cars and methods of use thereof
EP3762012A1 (en) 2018-03-09 2021-01-13 Ospedale San Raffaele S.r.l. Il-1 antagonist and toxicity induced by cell therapy
WO2019175328A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Imba - Institut Für Molekulare Biotechnologie Gmbh Bh4pathwayactivationandusethereoffortreatingcancer
JP7558563B2 (ja) 2018-03-15 2024-10-01 ケーエスキュー セラピューティクス， インコーポレイテッド 免疫療法の改善のための遺伝子調節組成物及び遺伝子調節方法
JP2021518160A (ja) 2018-03-15 2021-08-02 ケーエスキュー セラピューティクス， インコーポレイテッド 免疫療法の改善のための遺伝子調節組成物及び遺伝子調節方法
DE102018108612A1 (de) 2018-03-21 2019-09-26 Immatics US, Inc. Verfahren zur erhöhung der persistenz von adoptiv infundierten t-zellen
US10760075B2 (en) 2018-04-30 2020-09-01 Snipr Biome Aps Treating and preventing microbial infections
US12441787B2 (en) 2018-04-02 2025-10-14 National University Of Singapore Neutralization of human cytokines with membrane-bound anti-cytokine non-signaling binders expressed in immune cells
BR112020020245A2 (pt) 2018-04-05 2021-04-06 Editas Medicine, Inc. Métodos de produzir células expressando um receptor recombinante e composições relacionadas
KR102764123B1 (ko) 2018-04-05 2025-02-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Τ 세포 수용체 및 이를 발현하는 조작된 세포
EP3773633A4 (en) 2018-04-06 2022-01-26 The Regents of The University of California METHODS OF TREATMENT OF GLIOBLASTOMA
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
EP3773632A4 (en) 2018-04-06 2022-05-18 The Regents of The University of California Methods of treating egfrviii expressing glioblastomas
BR112020020857A2 (pt) 2018-04-10 2021-01-19 Amgen Inc. Receptores quiméricos para dll3 e métodos de seu uso
TWI784324B (zh) 2018-04-12 2022-11-21 美商凱特製藥公司 利用腫瘤微環境之特性之嵌合受體t細胞治療
WO2019197678A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 Sangamo Therapeutics France Chimeric antigen receptor specific for interleukin-23 receptor
WO2019200250A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 Velculescu Victor E Non-invasive detection of response to a targeted therapy
US20210155986A1 (en) 2018-04-13 2021-05-27 The Johns Hopkins University Non-invasive detection of response to immunotherapy
CA3096546A1 (en) 2018-04-16 2019-10-24 Arrys Therapeutics, Inc. Ep4 inhibitors and use thereof
KR102862473B1 (ko) 2018-04-16 2025-09-23 더 보드 오브 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 인간 키누레니나제 효소 및 이의 사용법
US10869888B2 (en) * 2018-04-17 2020-12-22 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expansion and uses thereof
US11945878B2 (en) 2018-04-18 2024-04-02 Abclon Inc. Switch molecule and switchable chimeric antigen receptor
WO2019204496A1 (en) * 2018-04-19 2019-10-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for treating melanoma with a chimeric antigen receptor
AU2019255750B2 (en) 2018-04-19 2021-10-21 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
CN112218865B (zh) 2018-04-24 2024-03-12 沃泰克斯药物股份有限公司 喋啶酮化合物及其用途
BR112020020940A2 (pt) 2018-04-24 2021-03-02 Merck Patent Gmbh compostos antiproliferação e uso dos mesmos
US11957695B2 (en) 2018-04-26 2024-04-16 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions targeting glucocorticoid signaling for modulating immune responses
EP3784351A1 (en) 2018-04-27 2021-03-03 Novartis AG Car t cell therapies with enhanced efficacy
US20210396739A1 (en) 2018-05-01 2021-12-23 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
KR102806143B1 (ko) * 2018-05-01 2025-05-14 프레드 허친슨 캔서 센터 유전자 발현을 위한 나노입자 및 이의 용도
AU2019262131A1 (en) * 2018-05-02 2020-11-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods of phospholipase A2 receptor chimeric autoantibody receptor T cells
BR112020022185A2 (pt) 2018-05-03 2021-02-02 Juno Therapeutics Inc terapia de combinação de uma terapia de células t do receptor de antígeno quimérico (car) e um inibidor de quinase
CN108753774B (zh) * 2018-05-03 2021-03-30 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 干扰il-6表达的cd19-car-t细胞及其应用
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
WO2019217512A1 (en) 2018-05-08 2019-11-14 Life Technologies Corporation Compositions and methods for culturing and expanding cells
BR112020022879A2 (pt) 2018-05-11 2021-02-23 Crispr Therapeutics Ag métodos e composições para tratamento de câncer
EP3793565B1 (en) 2018-05-14 2022-01-05 Gilead Sciences, Inc. Mcl-1 inhibitors
WO2019222657A1 (en) 2018-05-18 2019-11-21 The Johns Hopkins University Cell-free dna for assessing and/or treating cancer
EP3784776A4 (en) 2018-05-23 2022-01-26 National University of Singapore Blockade of cd2 surface expression and expression of chimeric antigen receptors for immunotherapy of t-cell malignancies
EP3801769A1 (en) 2018-05-25 2021-04-14 Novartis AG Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CN108715859B (zh) * 2018-05-31 2021-08-03 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 靶向cd22的嵌合抗原受体及其应用
AU2019277660A1 (en) * 2018-06-01 2021-01-21 Mayo Foundation For Medical Education And Research Materials and methods for treating cancer
BR112020024351A2 (pt) 2018-06-01 2021-02-23 Novartis Ag moléculas de ligação contra bcma e usos das mesmas
US20200003758A1 (en) 2018-06-01 2020-01-02 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen receptor t cell therapy
WO2019232542A2 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for detecting and modulating microenvironment gene signatures from the csf of metastasis patients
WO2019237035A1 (en) 2018-06-08 2019-12-12 Intellia Therapeutics, Inc. Compositions and methods for immunooncology
EP3806888B1 (en) 2018-06-12 2024-01-31 Obsidian Therapeutics, Inc. Pde5 derived regulatory constructs and methods of use in immunotherapy
CA3100724A1 (en) 2018-06-13 2019-12-19 Novartis Ag B-cell maturation antigen protein (bcma) chimeric antigen receptors and uses thereof
US12036240B2 (en) 2018-06-14 2024-07-16 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods targeting complement component 3 for inhibiting tumor growth
KR20190141511A (ko) * 2018-06-14 2019-12-24 주식회사 녹십자랩셀 신규 펩티드, 이를 포함하는 키메라 항원 수용체 및 이를 발현하는 면역 세포
WO2019241758A1 (en) 2018-06-15 2019-12-19 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
BR112020025764A2 (pt) 2018-06-19 2021-05-11 Biontech Us Inc. neoantígenos e usos dos mesmos
CN112543808A (zh) 2018-06-21 2021-03-23 比莫根生物科技公司 增强的hAT家族转座子介导的基因转移及相关组合物、系统和方法
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
US20210155941A1 (en) 2018-06-22 2021-05-27 Kite Pharma Eu B.V. Compositions and methods for making engineered t cells
AU2019297451A1 (en) 2018-07-03 2021-01-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
CA3104862A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Sotio, LLC Chimeric receptors in combination with trans metabolism molecules enhancing glucose import and therapeutic uses thereof
EP3817748A4 (en) 2018-07-06 2022-08-24 Kymera Therapeutics, Inc. TRICYCLIC CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
EP3817822A4 (en) 2018-07-06 2022-07-27 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
AU2019301811B2 (en) 2018-07-13 2022-05-26 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
EP3825404A4 (en) 2018-07-17 2022-04-13 Noile-Immune Biotech, Inc. SINGLE-CHAIN ANTI-GPC3 ANTIBODY WITH CAR
EP3823993A1 (en) 2018-07-18 2021-05-26 Amgen Inc. Chimeric receptors to steap1 and methods of use thereof
CN119954969A (zh) 2018-07-19 2025-05-09 瑞泽恩制药公司 具有bcma特异性的嵌合抗原受体及其用途
CN108949759B (zh) * 2018-07-23 2021-06-01 合肥一兮生物科技有限公司 敲减人IL-15的siRNA、CD19 CAR表达载体、CAR-T细胞及构建方法和应用
AU2019311077B2 (en) 2018-07-23 2025-05-29 Heidelberg Pharma Research Gmbh Use of anti-CD5 antibody drug conjugate (ADC) in allogeneic cell therapy
AU2019314452B2 (en) 2018-08-02 2022-12-08 Kite Pharma, Inc Chimeric antigen receptor therapy T cell expansion kinetics and uses thereof
IL280659B2 (en) 2018-08-09 2024-11-01 Juno Therapeutics Inc Processes for generating engineered cells and compositions thereof
BR112021002245A2 (pt) 2018-08-09 2021-05-04 Juno Therapeutics Inc métodos para avaliar ácidos nucleicos integrados
MX2021001672A (es) 2018-08-10 2021-07-15 Eutilex Co Ltd Receptor de antigeno quimerico que se une a hla-dr y linfocito t-car.
WO2020037066A1 (en) 2018-08-14 2020-02-20 Unum Therapeutics Inc. Chimeric antigen receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules modulating krebs cycle and therapeutic uses thereof
US20210324357A1 (en) 2018-08-20 2021-10-21 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Degradation domain modifications for spatio-temporal control of rna-guided nucleases
WO2020041384A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 The Broad Institute, Inc. 3-phenyl-2-cyano-azetidine derivatives, inhibitors of rna-guided nuclease activity
WO2020068304A2 (en) 2018-08-20 2020-04-02 The Broad Institute, Inc. Inhibitors of rna-guided nuclease target binding and uses thereof
CN110856724B (zh) * 2018-08-24 2022-05-27 杭州康万达医药科技有限公司 包含核酸及car修饰的免疫细胞的治疗剂及其应用
WO2020047164A1 (en) 2018-08-28 2020-03-05 Vor Biopharma, Inc Genetically engineered hematopoietic stem cells and uses thereof
CA3110089A1 (en) 2018-08-28 2020-03-05 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods and compositions for adoptive t cell therapy incorporating induced notch signaling
WO2020044239A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 National University Of Singapore A method to specifically stimulate survival and expansion of genetically-modified immune cells
EP3847195B1 (en) 2018-08-30 2025-03-05 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Chimeric antigen receptor cells for treating solid tumor
US12240915B2 (en) 2018-08-30 2025-03-04 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Chimeric antigen receptor cells for treating solid tumor
WO2020047449A2 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
HRP20251135T1 (hr) 2018-08-31 2025-11-21 Novartis Ag Postupci dobivanja kimernih stanica koje eksprimiraju antigenske receptore
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
US11866494B2 (en) * 2018-08-31 2024-01-09 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. CAR T therapy through uses of co-stimulation
US12030875B2 (en) 2018-09-07 2024-07-09 PIC Therapeutics, Inc. EIF4E inhibitors and uses thereof
KR20210081341A (ko) 2018-09-11 2021-07-01 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 조작된 세포 조성물의 질량 분석기 분석을 위한 방법
EP3853247A2 (en) 2018-09-19 2021-07-28 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
EP3856777A1 (en) 2018-09-24 2021-08-04 The Medical College of Wisconsin, Inc. Anti-cd30 antibodies and methods of use
WO2020069405A1 (en) 2018-09-28 2020-04-02 Novartis Ag Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
JP7557882B2 (ja) 2018-09-28 2024-09-30 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー コラーゲンに局在化される免疫調節分子およびその方法
EP3856782A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Novartis AG Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
US20210388100A1 (en) 2018-10-01 2021-12-16 Adicet Bio, Inc. Compositions and methods regarding engineered and non-engineered gamma delta t-cells for treatment of hematological tumors
US20210382068A1 (en) 2018-10-02 2021-12-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hla single allele lines
EP3488851A1 (en) 2018-10-03 2019-05-29 AVM Biotechnology, LLC Immunoablative therapies
WO2020072656A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Gilead Sciences, Inc. Imidozopyrimidine derivatives
US11851663B2 (en) 2018-10-14 2023-12-26 Snipr Biome Aps Single-vector type I vectors
WO2020081730A2 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for modulating microenvironment
CA3117240A1 (en) 2018-10-22 2020-04-30 Shanghai GenBase Biotechnology Co., Ltd. Anti-cldn18.2 antibody and uses thereof
EA202191107A1 (ru) 2018-10-23 2021-09-17 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. T-клеточные рецепторы ny-eso-1 и способы их применения
US20210386788A1 (en) 2018-10-24 2021-12-16 Obsidian Therapeutics, Inc. Er tunable protein regulation
JP7158577B2 (ja) 2018-10-24 2022-10-21 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤
US20210379149A1 (en) * 2018-10-25 2021-12-09 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Increasing or Maintaining T-Cell Subpopulations in Adoptive T-Cell Therapy
US20220170097A1 (en) 2018-10-29 2022-06-02 The Broad Institute, Inc. Car t cell transcriptional atlas
WO2020092057A1 (en) 2018-10-30 2020-05-07 Yale University Compositions and methods for rapid and modular generation of chimeric antigen receptor t cells
SG11202103839UA (en) 2018-10-31 2021-05-28 Gilead Sciences Inc Substituted 6-azabenzimidazole compounds as hpk1 inhibitors
EP3874024A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Juno Therapeutics GmbH Methods for selection and stimulation of cells and apparatus for same
KR102658602B1 (ko) 2018-10-31 2024-04-19 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Hpk1 억제 활성을 갖는 치환된 6-아자벤즈이미다졸 화합물
IL320642A (en) 2018-11-01 2025-07-01 Gracell Biotechnologies Shanghai Co Ltd Preparations and methods for engineering T cells
WO2020092848A2 (en) 2018-11-01 2020-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
KR20210100624A (ko) 2018-11-06 2021-08-17 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 유전적으로 조작된 ｔ 세포를 제조하는 방법
CN109503717A (zh) * 2018-11-07 2019-03-22 南京卡提医学科技有限公司 嵌合抗原受体DAP12-T2A-CD8α-CD19scfv-NKp44及其用途
CN109467604A (zh) * 2018-11-07 2019-03-15 南京卡提医学科技有限公司 嵌合抗原受体DAP12-T2A-CD8α-CD19scFv-TREM1及其用途
US20220054545A1 (en) * 2018-11-07 2022-02-24 Sotio, LLC ANTI-GPC3 CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS (CARs) IN COMBINATION WITH TRANS CO-STIMULATORY MOLECULES AND THERAPEUTIC USES THEREOF
US12263190B2 (en) 2018-11-08 2025-04-01 Juno Therapeutics, Inc. Methods and combinations for treatment and T cell modulation
AU2019378883A1 (en) 2018-11-14 2021-06-03 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Fusosome compositions for T cell delivery
WO2020102578A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Flagship Pioneering Innovations V, Inc Compositions and methods for compartment-specific cargo delivery
EP3880238A1 (en) 2018-11-16 2021-09-22 Juno Therapeutics, Inc. Methods of dosing engineered t cells for the treatment of b cell malignancies
JP7630832B2 (ja) 2018-11-19 2025-02-18 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム Ｃａｒおよびｔｃｒ形質導入用のモジュール式ポリシストロニックベクター
WO2020106843A1 (en) * 2018-11-20 2020-05-28 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Modified cell expressing therapeutic agent and uses thereof
US10918667B2 (en) 2018-11-20 2021-02-16 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expressing therapeutic agent and uses thereof
EP3887518A2 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Board of Regents, The University of Texas System Multiplex genome editing of immune cells to enhance functionality and resistance to suppressive environment
MX2021006393A (es) 2018-11-29 2021-10-13 Univ Texas Metodos para expansion ex vivo de celulas exterminadoras naturales y uso de las mismas.
AU2019389174A1 (en) 2018-11-30 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
IL283298B2 (en) 2018-11-30 2025-03-01 Juno Therapeutics Inc Methods for dosing and treating B-cell malignancies with adoptive cell therapy
MX2021006238A (es) 2018-11-30 2021-10-01 Juno Therapeutics Inc Metodos para tratamiento que usan terapia celular adoptiva.
JP7671248B2 (ja) 2018-12-05 2025-05-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの免疫療法のための診断方法及び診断用組成物
AU2019393243A1 (en) * 2018-12-07 2021-07-01 Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. Compositions and methods for immunotherapy
EP3894549B1 (en) 2018-12-10 2024-07-31 Amgen Inc. Mutated piggybac transposase
US12227551B2 (en) 2018-12-11 2025-02-18 Obsidian Therapeutics, Inc. Membrane bound IL12 compositions and methods for tunable regulation
IL316392A (en) 2018-12-12 2024-12-01 Kite Pharma Inc Chimeric antigen receptors and CAR-T cells and methods of use
GB201820325D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for psma
GB201820295D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for MT1-MMP
GB201820288D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicycle Tx Ltd Bicycle peptide ligaands specific for MT1-MMP
WO2020131586A2 (en) 2018-12-17 2020-06-25 The Broad Institute, Inc. Methods for identifying neoantigens
EP3670530A1 (en) 2018-12-18 2020-06-24 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin in der Helmholtz-Gemeinschaft Cd22-specific t cell receptors and adoptive t cell therapy for treatment of b cell malignancies
AU2019402189B2 (en) 2018-12-20 2023-04-13 Novartis Ag Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
JP7236543B2 (ja) 2018-12-21 2023-03-09 ビオンテック ユーエス インコーポレイテッド Ｈｌａクラスｉｉ特異的エピトープの予測およびｃｄ４＋ ｔ細胞の特徴付けのための方法およびシステム
JP2022514618A (ja) 2018-12-21 2022-02-14 バイスクルテクス・リミテッド Ｐｄ－ｌ１に特異的な二環式ペプチドリガンド
US11739156B2 (en) 2019-01-06 2023-08-29 The Broad Institute, Inc. Massachusetts Institute of Technology Methods and compositions for overcoming immunosuppression
JP2022516710A (ja) * 2019-01-06 2022-03-02 アビタス バイオ インコーポレイティッド Ｃａｒ ｔ細胞の方法及び構築物
PE20212198A1 (es) 2019-01-29 2021-11-16 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores quimericos de antigenos especificos para receptor 1 huerfano tipo receptor tirosina-cinasa (ror1)
CN117264064A (zh) 2019-02-04 2023-12-22 米纳瓦生物技术公司 抗nme抗体及治疗癌症或癌症转移的方法
US12419913B2 (en) 2019-02-08 2025-09-23 Dna Twopointo, Inc. Modification of CAR-T cells
MX2021009744A (es) 2019-02-15 2021-11-12 Univ Southern California Composiciones de anticuerpos lym-1 y lym-2 y constructos car mejorados.
BR112021015672A2 (pt) 2019-02-15 2021-10-05 Novartis Ag Derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona substituída e usos dos mesmos
US20220144807A1 (en) 2019-02-15 2022-05-12 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
SG11202109061YA (en) 2019-02-21 2021-09-29 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof
AU2020224681A1 (en) 2019-02-21 2021-09-16 Marengo Therapeutics, Inc. Antibody molecules that bind to NKp30 and uses thereof
US20220152150A1 (en) 2019-02-25 2022-05-19 Novartis Ag Mesoporous silica particles compositions for viral delivery
TW202045547A (zh) 2019-03-01 2020-12-16 美商艾洛基因醫療公司 靶向ｄｌｌ３的嵌合抗原受體和結合劑
WO2020180733A1 (en) * 2019-03-01 2020-09-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
WO2020178741A1 (en) 2019-03-04 2020-09-10 University Health Network T cell receptors and methods of use thereof
MX2021010542A (es) 2019-03-04 2021-12-15 Univ Health Network Receptores de linfocitos t y metodos de uso de estos.
WO2020180882A1 (en) 2019-03-05 2020-09-10 Nkarta, Inc. Cd19-directed chimeric antigen receptors and uses thereof in immunotherapy
EP3935065A1 (en) 2019-03-07 2022-01-12 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
CA3129022C (en) 2019-03-07 2023-08-01 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
CA3129011C (en) 2019-03-07 2023-12-19 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
AU2020235865A1 (en) 2019-03-08 2021-09-23 Obsidian Therapeutics, Inc. Human carbonic anhydrase 2 compositions and methods for tunable regulation
EP3935151A1 (en) 2019-03-08 2022-01-12 Klinikum der Universität München Ccr8 expressing lymphocytes for targeted tumor therapy
US20220154282A1 (en) 2019-03-12 2022-05-19 The Broad Institute, Inc. Detection means, compositions and methods for modulating synovial sarcoma cells
US20220142948A1 (en) 2019-03-18 2022-05-12 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for modulating metabolic regulators of t cell pathogenicity
AU2020242284A1 (en) 2019-03-19 2021-09-16 Fundació Privada Institut D'investigació Oncològica De Vall Hebron Combination therapy for the treatment of cancer
WO2020191293A1 (en) * 2019-03-20 2020-09-24 Javelin Oncology, Inc. Anti-adam12 antibodies and chimeric antigen receptors, and compositions and methods comprising
EP3942025A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Novartis AG Car-t cell therapies with enhanced efficacy
US20220184222A1 (en) 2019-04-02 2022-06-16 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
CA3135802A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Kymera Therapeutics, Inc. Stat degraders and uses thereof
EP3952885A4 (en) * 2019-04-12 2023-01-18 The Trustees of The University of Pennsylvania Compositions and methods comprising a high affinity chimeric antigen receptor (car) with cross-reactivity to clinically-relevant egfr mutated proteins
US20220168389A1 (en) 2019-04-12 2022-06-02 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
SG11202109024YA (en) 2019-04-12 2021-09-29 C4 Therapeutics Inc Tricyclic degraders of ikaros and aiolos
TW202210480A (zh) 2019-04-17 2022-03-16 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
WO2020214957A1 (en) 2019-04-19 2020-10-22 Tcrcure Biopharma Corp. Anti-pd-1 antibodies and uses thereof
EP3959320A1 (en) 2019-04-24 2022-03-02 Novartis AG Compositions and methods for selective protein degradation
KR20220004028A (ko) 2019-04-26 2022-01-11 알로젠 테라퓨틱스 인코포레이티드 동종 car t 세포를 제조하는 방법
US11896617B2 (en) 2019-04-26 2024-02-13 Allogene Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding rituximab-resistant chimeric antigen receptors
WO2020223445A1 (en) 2019-04-30 2020-11-05 Senti Biosciences, Inc. Chimeric receptors and methods of use thereof
AU2020267057A1 (en) 2019-04-30 2021-11-18 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of B cell malignancies using genetically engineered T cells targeting CD19
MX2021013219A (es) 2019-05-01 2022-02-17 Juno Therapeutics Inc Celulas que expresan un receptor recombinante de un locus de tgfbr2 modificado, polinucleotidos relacionados y metodos.
SG11202111372VA (en) 2019-05-01 2021-11-29 Juno Therapeutics Inc Cells expressing a chimeric receptor from a modified cd247 locus, related polynucleotides and methods
BR112021021996A2 (pt) 2019-05-03 2022-01-11 Kite Pharma Inc Métodos para administração de imunoterapia com receptores de antígeno quimérico
AU2020270298A1 (en) 2019-05-07 2021-12-23 Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. Engineered immune cell targeting BCMA and use thereof
US11162079B2 (en) 2019-05-10 2021-11-02 The Regents Of The University Of California Blood type O Rh-hypo-immunogenic pluripotent cells
US20220235340A1 (en) 2019-05-20 2022-07-28 The Broad Institute, Inc. Novel crispr-cas systems and uses thereof
CN113874398B (zh) 2019-05-21 2025-08-01 诺华股份有限公司 Cd19结合分子及其用途
AU2020279371A1 (en) 2019-05-22 2021-12-23 Leidos, Inc. LAG 3 binding peptides
US11453681B2 (en) 2019-05-23 2022-09-27 Gilead Sciences, Inc. Substituted eneoxindoles and uses thereof
EP3973072A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Vogelsang, Matjaz Method for removal of nucleic acids impurities from liquid composition comprising genetically engineered particles or proteins
WO2020243007A1 (en) * 2019-05-24 2020-12-03 City Of Hope Ccr4 targeted chimeric antigen receptor modified t cells for treatment of ccr4 positive malignancies
US20220226464A1 (en) 2019-05-28 2022-07-21 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for modulating immune responses
EP3976192A1 (en) 2019-05-31 2022-04-06 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
KR20220017430A (ko) * 2019-06-05 2022-02-11 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항체 절단 부위 결합 분자
JP2022535138A (ja) * 2019-06-07 2022-08-04 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア Ｃｄ２８および４－１ｂｂに個々に連結したデュアルｃａｒを発現するｔ細胞
EP3980530A1 (en) 2019-06-07 2022-04-13 Juno Therapeutics, Inc. Automated t cell culture
WO2020251972A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
JP2022537700A (ja) 2019-06-12 2022-08-29 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞媒介細胞傷害性療法と生存促進性ｂｃｌ２ファミリータンパク質の阻害剤との併用療法
WO2020252405A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2 compositions and methods for tunable regulation
EP3983537A1 (en) 2019-06-12 2022-04-20 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2 compositions and methods for tunable regulation
BR112021025735A2 (pt) 2019-06-21 2022-03-08 Kite Pharma Inc Receptores de tgf-ss e métodos de uso
EP3986427A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 Childrens Hospital Los Angeles Bcl11b overexpression to enhance human thymopoiesis and t cell function
CN114245807B (zh) 2019-06-25 2025-05-02 吉利德科学公司 Flt3l-fc融合蛋白和使用方法
WO2020263399A1 (en) 2019-06-26 2020-12-30 Massachusetts Institute Of Technology Immunomodulatory fusion protein-metal hydroxide complexes and methods thereof
CN114502158A (zh) 2019-06-28 2022-05-13 凯麦拉医疗公司 Irak降解剂及其用途
EP3994173A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
US20220257796A1 (en) 2019-07-02 2022-08-18 Fred Hutchinson Cancer Research Center Recombinant ad35 vectors and related gene therapy improvements
GB201909573D0 (en) 2019-07-03 2019-08-14 Cancer Research Tech Ltd Modulation of T cell cytotoxicity and related therapy
JPWO2021010326A1 (sr) 2019-07-12 2021-01-21
WO2021011907A1 (en) 2019-07-18 2021-01-21 Gpb Scientific, Inc. Ordered processing of blood products to produce therapeutically active cells
JP7735249B2 (ja) 2019-07-23 2025-09-08 ムネモ・セラピューティクス Ｓｕｖ３９ｈ１欠損免疫細胞
EP4004049A1 (en) * 2019-07-24 2022-06-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric antigen receptors with mage-a4 specificity and uses thereof
KR20220052942A (ko) 2019-07-30 2022-04-28 유니버시티 헬스 네트워크 Mhc 클래스 ii 분자 및 이의 사용 방법
CN110305849B (zh) * 2019-08-01 2021-03-30 广东万海细胞生物科技有限公司 稳定表达car的t细胞及其制备方法与应用
GB201911066D0 (en) 2019-08-02 2019-09-18 Achilles Therapeutics Ltd T cell therapy
BR112022002465A2 (pt) * 2019-08-09 2022-05-03 A2 Biotherapeutics Inc Receptores de superfície celular responsivos à perda de heterozigosidade
WO2021030627A1 (en) 2019-08-13 2021-02-18 The General Hospital Corporation Methods for predicting outcomes of checkpoint inhibition and treatment thereof
US12421557B2 (en) 2019-08-16 2025-09-23 The Broad Institute, Inc. Methods for predicting outcomes and treating colorectal cancer using a cell atlas
US20220298222A1 (en) 2019-08-22 2022-09-22 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a t cell therapy and an enhancer of zeste homolog 2 (ezh2) inhibitor and related methods
CN114641308A (zh) * 2019-08-28 2022-06-17 伦敦国王学院 B细胞靶向的平行CAR(pCAR)治疗剂
US20230092895A1 (en) 2019-08-30 2023-03-23 Obsidian Therapeutics, Inc. Tandem cd19 car-based compositions and methods for immunotherapy
US20220298501A1 (en) 2019-08-30 2022-09-22 The Broad Institute, Inc. Crispr-associated mu transposase systems
JP7770306B2 (ja) 2019-08-30 2025-11-14 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞を分類するための機械学習方法
CA3158775A1 (en) 2019-09-02 2021-03-11 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor neoantigenic peptides
CA3147441A1 (en) 2019-09-03 2021-03-11 Allogene Therapeutics, Inc. Methods of preparing t cells for t cell therapy
AU2020341454A1 (en) 2019-09-03 2022-03-10 Sana Biotechnology, Inc. CD24-associated particles and related methods and uses thereof
WO2021046451A1 (en) 2019-09-06 2021-03-11 Obsidian Therapeutics, Inc. Compositions and methods for dhfr tunable protein regulation
JP7696335B2 (ja) 2019-09-09 2025-06-20 スクライブ・セラピューティクス・インコーポレイテッド 免疫療法に使用するための組成物および方法
AU2020345943B2 (en) 2019-09-10 2026-02-12 Obsidian Therapeutics, Inc. CA2-IL15 fusion proteins for tunable regulation
US12215105B2 (en) 2019-09-13 2025-02-04 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
WO2021051088A1 (en) * 2019-09-13 2021-03-18 Ohio State Innovation Foundation Nk cell immunotherapy compositions, methods of making and methods of using same
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
WO2021055915A1 (en) * 2019-09-20 2021-03-25 The University Of North Carolina At Chapel Hill Modified t cells and methods of preparing the same
WO2021051390A1 (zh) 2019-09-20 2021-03-25 上海吉倍生物技术有限公司 靶向bcma的抗体及嵌合抗原受体
WO2021061648A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for stimulation of endogenous t cell responses
KR102685211B1 (ko) * 2019-09-26 2024-07-16 주식회사 헬릭스미스 항-c-Met 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체, 및 이의 용도
US12297426B2 (en) 2019-10-01 2025-05-13 The Broad Institute, Inc. DNA damage response signature guided rational design of CRISPR-based systems and therapies
KR102287180B1 (ko) * 2019-10-01 2021-08-09 충북대학교 산학협력단 Cd138에 특이적으로 결합하는 키메릭 항원 수용체, 이를 발현하는 면역세포 및 이의 항암 용도
US12394502B2 (en) 2019-10-02 2025-08-19 The General Hospital Corporation Method for predicting HLA-binding peptides using protein structural features
US12195725B2 (en) 2019-10-03 2025-01-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for modulating and detecting tissue specific TH17 cell pathogenicity
CA3153197A1 (en) 2019-10-03 2021-04-08 Ryan T. Gill Crispr systems with engineered dual guide nucleic acids
US11981922B2 (en) 2019-10-03 2024-05-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods and compositions for the modulation of cell interactions and signaling in the tumor microenvironment
US11793787B2 (en) 2019-10-07 2023-10-24 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for enhancing anti-tumor immunity by targeting steroidogenesis
PH12022550835A1 (en) 2019-10-18 2023-07-03 Forty Seven Inc Combination therapies for treating myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia
EP4048304A1 (en) 2019-10-22 2022-08-31 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor neoantigenic peptides
CN110679588A (zh) * 2019-10-23 2020-01-14 厦门生命互联科技有限公司 一种嵌合抗原受体t细胞冻存介质及用途
WO2021081330A1 (en) 2019-10-23 2021-04-29 Kite Pharma, Inc. Anti-idiotypic antigen binding molecules and methods of use thereof
TWI717880B (zh) 2019-10-24 2021-02-01 中國醫藥大學附設醫院 Hla-g特異性嵌合抗原受體、核酸、hla-g特異性嵌合抗原受體表達質體、表達hla-g特異性嵌合抗原受體細胞、其用途以及用於治療癌症之醫藥組合物
US11844800B2 (en) 2019-10-30 2023-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for predicting and preventing relapse of acute lymphoblastic leukemia
BR112022008023A2 (pt) 2019-10-30 2022-07-12 Juno Therapeutics Gmbh Dispositivos de seleção e/ou estimulação de células e métodos de uso
MY209360A (en) 2019-10-31 2025-07-03 Forty Seven Llc Anti-cd47 and anti-cd20 based treatment of blood cancer
JP7656830B2 (ja) * 2019-11-01 2025-04-04 京都府公立大学法人 Ｂ細胞抗体受容体、及びその利用
EP4054623A1 (en) 2019-11-07 2022-09-14 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and (s)-3-[4-(4-morpholin-4 ylmethyl-benzyloxy)-l-oxo-l,3-dihydro-isoindol-2-yl]- piperidine-2,6-dione
US12195723B2 (en) 2019-11-08 2025-01-14 The Broad Institute, Inc. Engineered antigen presenting cells and uses thereof
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
CN114829585B (zh) 2019-11-20 2024-08-23 吉爱希公司 用于培养t细胞的组合物及使用其来培养t细胞的方法
IL292924A (en) 2019-11-26 2022-07-01 Novartis Ag Chimeric antigen receptors cd19 and cd22 and their uses
CN114761037A (zh) 2019-11-26 2022-07-15 诺华股份有限公司 结合bcma和cd19的嵌合抗原受体及其用途
FI4065582T3 (fi) 2019-11-26 2025-05-25 Ikena Oncology Inc Polymorfisia karbatsolijohdannaisia ja niiden käyttötapoja
KR20220132527A (ko) 2019-12-06 2022-09-30 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｂ 세포 악성 종양을 치료하기 위한 세포 요법과 연관된 독성 및 반응과 관련된 방법
WO2021113780A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
WO2021113776A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to bcma-targeted binding domains and related compositions and methods
US12522651B2 (en) 2019-12-09 2026-01-13 Versiti Blood Research Institute Foundation, Inc. BCG car constructs and methods of their manufacture and use
US11591332B2 (en) 2019-12-17 2023-02-28 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
BR112022011651A2 (pt) 2019-12-17 2022-08-23 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak e usos dos mesmos
EP4076660A1 (en) 2019-12-20 2022-10-26 Novartis AG Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases
CA3162502A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Yi Zhang Smarca degraders and uses thereof
CN117736207A (zh) 2019-12-24 2024-03-22 卡尔那生物科学株式会社 二酰基甘油激酶调节化合物
JP7088902B2 (ja) * 2019-12-27 2022-06-21 クレージュ メディカル カンパニー，リミテッド キメラ抗原受容体タンパク質をコードする核酸およびキメラ抗原受容体タンパク質を発現するｔリンパ球
KR20220129566A (ko) 2019-12-28 2022-09-23 지피비 싸이언티픽, 인크 입자 및 세포를 처리하기 위한 미세 유체 카트리지
EP4084823A4 (en) 2020-01-03 2024-05-15 Marengo Therapeutics, Inc. ANTI-TCR ANTIBODY MOLECULES AND THEIR USES
CN113150167A (zh) * 2020-01-22 2021-07-23 中国人民解放军总医院第五医学中心 一种能够反转pd-1免疫抑制信号的car t细胞结构em1设计
CA3165346A1 (en) 2020-01-23 2021-07-29 George Q. Daley Stroma-free t cell differentiation from human pluripotent stem cells
US12165747B2 (en) 2020-01-23 2024-12-10 The Broad Institute, Inc. Molecular spatial mapping of metastatic tumor microenvironment
CN115427436A (zh) 2020-01-24 2022-12-02 里珍纳龙药品有限公司 黑素瘤优先表达抗原（prame）t细胞受体及其使用方法
IL294724A (en) 2020-01-24 2022-09-01 Juno Therapeutics Inc Methods for dosing and treatment of follicular lymphoma and marginal zone lymphoma in adoptive cell therapy
WO2021154887A1 (en) 2020-01-28 2021-08-05 Juno Therapeutics, Inc. Methods for t cell transduction
EP4100422A1 (en) 2020-02-03 2022-12-14 MVZ Prof. Niendorf Pathologie Hamburg-West GmbH Marker set for the diagnosis and treatment of cancer
CN115768443A (zh) 2020-02-12 2023-03-07 朱诺治疗学股份有限公司 Cd19定向嵌合抗原受体t细胞组合物和方法及其用途
JP2023519099A (ja) 2020-02-12 2023-05-10 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂｃｍａ指向性キメラ抗原受容体ｔ細胞組成物ならびにその方法および使用
AU2021219668B2 (en) 2020-02-14 2025-06-12 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fusion proteins that bind to CCR8 and uses thereof
MX2022010038A (es) 2020-02-14 2022-09-05 Univ Johns Hopkins Metodos y materiales para la evaluacion de acidos nucleicos.
EP4107173A1 (en) 2020-02-17 2022-12-28 Board of Regents, The University of Texas System Methods for expansion of tumor infiltrating lymphocytes and use thereof
US12076343B2 (en) 2020-02-19 2024-09-03 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Engineered safety in cell therapy
IL295878A (en) 2020-02-27 2022-10-01 Novartis Ag Methods for producing cells expressing a chimeric antigen receptor
TW202146441A (zh) 2020-02-27 2021-12-16 瑞士商諾華公司 製備表現嵌合抗原受體的細胞之方法
CN111269326A (zh) * 2020-02-28 2020-06-12 南京北恒生物科技有限公司 新型嵌合抗原受体及其用途
EP4114529A1 (en) 2020-03-03 2023-01-11 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
CA3170369A1 (en) 2020-03-05 2022-04-14 Michal Shahar Methods and compositions for treating cancer with immune cells
US11896619B2 (en) 2020-03-10 2024-02-13 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods for immunotherapy of NPM1c-positive cancer
JP2023517956A (ja) 2020-03-10 2023-04-27 エックス４ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 好中球減少症を処置する方法
EP4117716A2 (en) 2020-03-10 2023-01-18 Massachusetts Institute of Technology Methods for generating engineered memory-like nk cells and compositions thereof
CN113402612A (zh) 2020-03-17 2021-09-17 西比曼生物科技（香港）有限公司 靶向cd19和cd20的联合嵌合抗原受体及其应用
EP4121043A4 (en) 2020-03-19 2024-07-24 Kymera Therapeutics, Inc. Mdm2 degraders and uses thereof
EP4127144A1 (en) 2020-03-31 2023-02-08 Sana Biotechnology, Inc. Targeted lipid particles and compositions and uses thereof
EP3892720A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Presenting cell and use thereof in cell therapy
AU2021251265A1 (en) 2020-04-10 2022-11-03 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting B-cell maturation antigen
US20230340040A1 (en) * 2020-04-14 2023-10-26 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Chimeric myd88 receptors
US12241086B2 (en) * 2020-04-15 2025-03-04 Amgen Inc. Process for generating genetically engineered autologous T cells
US12378521B2 (en) 2020-04-15 2025-08-05 Amgen Inc. Method for enhancing production of genetically engineered autologous T cells
WO2021211776A1 (en) 2020-04-15 2021-10-21 California Institute Of Technology Thermal control of t-cell immunotherapy through molecular and physical actuation
GB202005599D0 (en) 2020-04-17 2020-06-03 Univ London Modulation of t cell cytotoxicity and related therapy
WO2021219990A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Achilles Therapeutics Uk Limited T cell therapy
CN116157125A (zh) 2020-04-28 2023-05-23 朱诺治疗学股份有限公司 针对bcma的t细胞疗法与免疫调节化合物的组合
GB202006254D0 (en) 2020-04-28 2020-06-10 Institute Of Cancer Res Anti-cancer vaccines and related therapy
WO2021221782A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Massachusetts Institute Of Technology Chimeric antigen receptor-targeting ligands and uses thereof
CA3181922A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds
WO2021221783A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Massachusetts Institute Of Technology Methods for identifying chimeric antigen receptor-targeting ligands and uses thereof
US12497623B2 (en) 2020-05-04 2025-12-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Non-signaling HIV fusion inhibitors and methods of use thereof
KR20230025662A (ko) 2020-05-05 2023-02-22 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Cd28 제타 및 cd3 제타를 포함하는 car
WO2021228999A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Institut Curie Neoantigenic epitopes associated with sf3b1 mutations
CN115835873A (zh) 2020-05-13 2023-03-21 朱诺治疗学股份有限公司 用于产生表达重组受体的供体分批细胞的方法
US20230178239A1 (en) 2020-05-13 2023-06-08 Juno Therapeutics, Inc. Methods of identifying features associated with clinical response and uses thereof
US20230190780A1 (en) * 2020-05-15 2023-06-22 Precision Biosciences, Inc. Methods for immunotherapy
EP4153301A2 (en) 2020-05-21 2023-03-29 Board of Regents, The University of Texas System T cell receptors with vgll1 specificity and uses thereof
CA3179599A1 (en) 2020-05-27 2021-12-02 Marco ALESSANDRINI Adapter molecules to re-direct car t cells to an antigen of interest
US12043654B2 (en) 2020-06-02 2024-07-23 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Anti-GCC antibody and CAR thereof for treating digestive system cancer
WO2021247897A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Kymera Therapeutics, Inc. Deuterated irak degraders and uses thereof
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
MX2022015062A (es) 2020-06-04 2023-04-10 Carisma Therapeutics Inc Nuevas construcciones para receptores de antígenos quiméricos.
WO2021244654A1 (en) * 2020-06-05 2021-12-09 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Activation induced cytokine production in immune cells
KR20230021699A (ko) 2020-06-08 2023-02-14 미네르바 바이오테크놀로지 코포레이션 항-nme 항체 및 암 또는 암 전이의 치료 방법
EP4162269A1 (en) 2020-06-08 2023-04-12 Janssen Biotech, Inc. Cell-based assay for determining the in vitro tumor killing activity of chimeric antigen expressing immune cells
KR20230024967A (ko) 2020-06-11 2023-02-21 노파르티스 아게 Zbtb32 억제제 및 이의 용도
US11497770B2 (en) * 2020-06-22 2022-11-15 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with TSLPR-CD19 or TSLPR-CD22 immunotherapy
JP2023531676A (ja) 2020-06-23 2023-07-25 ノバルティス アーゲー ３－（１－オキソイソインドリン－２－イル）ピぺリジン－２，６－ジオン誘導体を含む投与レジメン
WO2021260675A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Yeda Research And Development Co. Ltd. Agents for sensitizing solid tumors to treatment
JP2023531531A (ja) 2020-06-26 2023-07-24 ジュノ セラピューティクス ゲーエムベーハー 組換え受容体を条件付きで発現する操作されたｔ細胞、関連ポリヌクレオチド、および方法
US20230242678A1 (en) 2020-06-26 2023-08-03 Minerva Biotechnologies Corporation Anti-nme antibody and method of treating cancer or cancer metastasis
AU2021308078A1 (en) 2020-07-17 2023-02-09 Children's Hospital Los Angeles Chimeric MyD88 receptors for redirecting immunosuppressive signaling and related compositions and methods
KR102297396B1 (ko) 2020-07-29 2021-09-06 (주)티카로스 면역시냅스를 안정화시키는 키메라 항원 수용체(car) t 세포
EP4188395A1 (en) 2020-07-30 2023-06-07 Institut Curie Immune cells defective for socs1
JP2023536466A (ja) 2020-07-31 2023-08-25 レイドス， インコーポレイテッド Ｌａｇ３結合ペプチド
CN116348476A (zh) 2020-08-03 2023-06-27 拜斯科技术开发有限公司 基于肽的接头
US20230271940A1 (en) 2020-08-03 2023-08-31 Novartis Ag Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
WO2022029660A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to ror1-targeted binding domains and related compositions and methods
AU2021325947A1 (en) 2020-08-13 2023-03-02 Yale University Compositions and methods for engineering and selection of CAR T cells with desired phenotypes
KR20230074718A (ko) 2020-08-13 2023-05-31 사나 바이오테크놀로지, 인크. 저면역원성 세포로 감작된 환자를 치료하는 방법 및 관련 방법 및 조성물
WO2022036041A1 (en) 2020-08-14 2022-02-17 Kite Pharma, Inc Improving immune cell function
AU2021327130A1 (en) 2020-08-17 2023-03-02 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for Nectin-4 and uses thereof
CN116724052A (zh) 2020-08-20 2023-09-08 A2生物治疗股份有限公司 用于治疗ceacam阳性癌症的组合物和方法
KR20250140123A (ko) 2020-08-20 2025-09-24 에이투 바이오쎄라퓨틱스, 인크. 메소텔린 양성 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법
WO2022036458A1 (en) 2020-08-21 2022-02-24 12343096 Canada Inc. Modular assembly receptors and uses thereof
IL300489A (en) 2020-08-21 2023-04-01 Novartis Ag Compositions and methods for in vivo production of CAR expressing cells
EP4501951A3 (en) 2020-08-25 2025-04-30 Kite Pharma, Inc. T cells with improved functionality
WO2022046840A1 (en) * 2020-08-26 2022-03-03 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Hybrid allosteric receptor-engineered stem cells
AU2021361844A1 (en) 2020-10-12 2023-06-15 Leidos, Inc. Immunomodulatory peptides
US20250186472A1 (en) * 2020-10-16 2025-06-12 Neonc Technologies, Inc. Combination of poh and remdesivir for treatment of cns infections
WO2022087458A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Asher Biotherapeutics, Inc. Fusions with cd8 antigen binding molecules for modulating immune cell function
EP4237854A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Kite Pharma, Inc. Flow cytometric method for characterization of t-cell impurities
CN116390933A (zh) 2020-11-06 2023-07-04 诺华股份有限公司 治疗b细胞恶性肿瘤的抗cd19剂和b细胞靶向剂组合疗法
AU2021378316A1 (en) 2020-11-13 2023-06-01 Novartis Ag Combination therapies with chimeric antigen receptor (car)-expressing cells
US20230051406A1 (en) 2020-11-13 2023-02-16 Catamaran Bio, Inc. Genetically modified natural killer cells and methods of use thereof
CN112195250A (zh) * 2020-11-20 2021-01-08 山东省医学科学院附属医院 一种qPCR试剂盒及应用
EP4251742A4 (en) 2020-11-24 2025-01-08 Lyell Immunopharma, Inc. METHODS OF MAKING, COMPOSITIONS COMPRISING, AND METHODS OF USING REGENERATED T CELLS
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
EP4255922A1 (en) 2020-12-03 2023-10-11 Century Therapeutics, Inc. Genetically engineered cells and uses thereof
US11661459B2 (en) 2020-12-03 2023-05-30 Century Therapeutics, Inc. Artificial cell death polypeptide for chimeric antigen receptor and uses thereof
WO2022133030A1 (en) 2020-12-16 2022-06-23 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a cell therapy and a bcl2 inhibitor
WO2022133169A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Century Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptor systems with adaptable receptor specificity
US12037605B2 (en) 2020-12-24 2024-07-16 Kite Pharma, Inc. Prostate cancer chimeric antigen receptors
CA3202360A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Nello Mainolfi Irak degraders and uses thereof
KR20230137340A (ko) 2020-12-30 2023-10-04 알로노스 테라퓨틱스 인코포레이티드 폴리시스트로닉 발현 카세트를 포함하는 재조합 벡터및 이의 사용 방법
JP2024501971A (ja) 2020-12-31 2024-01-17 サナ バイオテクノロジー，インコーポレイテッド Ｃａｒ－ｔ活性を調節するための方法及び組成物
KR20230142832A (ko) 2021-01-08 2023-10-11 셀라노메, 인크. 생물학적 샘플을 분석하기 위한 디바이스 및 방법
KR20230129485A (ko) 2021-01-10 2023-09-08 카이트 파마 인코포레이티드 T 세포 요법
AU2022206324A1 (en) 2021-01-11 2023-07-20 Sana Biotechnology, Inc. Use of cd8-targeted viral vectors
US20250186539A2 (en) 2021-01-11 2025-06-12 Bicycletx Limited Methods for treating cancer
WO2022152862A1 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Institut Curie Her2 single domain antibodies variants and cars thereof
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
CN117062611A (zh) 2021-01-26 2023-11-14 惠和生物技术(上海)有限公司 嵌合抗原受体（car）构建体和表达car构建体的nk细胞
US20240091356A1 (en) * 2021-01-27 2024-03-21 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Bi-specific car t ccells for b cell malignancies
WO2022165133A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Allogene Therapeutics, Inc. Methods for transducing immune cells
HRP20250696T1 (hr) 2021-01-28 2025-08-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sastavi i postupci za liječenje sindroma oslobađanja citokina
EP4288430A1 (en) 2021-02-02 2023-12-13 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
WO2022174253A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
KR20230145446A (ko) 2021-02-15 2023-10-17 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Irak4 분해제 및 이의 용도
CA3207049A1 (en) 2021-02-15 2022-08-18 Jared Gollob Irak4 degraders and uses thereof
KR20230137402A (ko) 2021-02-20 2023-10-04 카이트 파마 인코포레이티드 면역요법 선택을 위한 유전자 마커
EP4298212A1 (en) 2021-02-25 2024-01-03 Artisan Development Labs, Inc. Compositions and methods for targeting, editing, or modifying genes
JP2024509853A (ja) 2021-03-03 2024-03-05 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｔ細胞療法およびｄｇｋ阻害剤の組合せ
EP4301756A4 (en) 2021-03-05 2025-02-26 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 ANTAGONISTS AND THEIR USES
CN116940377A (zh) 2021-03-05 2023-10-24 上海吉倍生物技术有限公司 抗cldn6抗体及其用途
MX2023010640A (es) 2021-03-11 2024-02-07 Inst Curie Péptidos neoantigénicos transmembranales.
AU2022235060A1 (en) 2021-03-11 2023-09-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Tumor neoantigenic peptides and uses thereof
IL305810A (en) 2021-03-11 2023-11-01 Mnemo Therapeutics Tumor neoantigenic peptides
AU2022234333B2 (en) 2021-03-11 2025-05-22 Kite Pharma, Inc. Improving immune cell function
EP4310188A1 (en) 2021-03-17 2024-01-24 Daiichi Sankyo Company, Limited Gene coding for chimeric receptor for anti-acetylcholine receptor autoantibody
KR20230158573A (ko) 2021-03-22 2023-11-20 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 바이러스 벡터 입자의 효력을 평가하는 방법
AU2022241654A1 (en) 2021-03-22 2023-09-28 Juno Therapeutics, Inc. Methods of determining potency of a therapeutic cell composition
EP4596575A3 (en) 2021-03-26 2025-11-12 Arcellx, Inc. Multifunctional immune cell therapies
EP4313989A4 (en) 2021-03-29 2025-03-05 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 ANTAGONISTS AND USES THEREOF
EP4313126A1 (en) 2021-03-29 2024-02-07 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a car t cell therapy and an immunomodulatory compound for treatment of lymphoma
JP2024514245A (ja) 2021-03-29 2024-03-29 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド チェックポイント阻害剤療法とｃａｒ ｔ細胞療法との組合せを用いた投薬および処置のための方法
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
MX2023011933A (es) 2021-04-09 2024-01-05 Nimbus Clio Inc Moduladores del linfoma de linaje b de casitas de ligasa e3 b (cbl-b) y usos de estos.
GB202109886D0 (en) 2021-07-08 2021-08-25 Achilles Therapeutics Uk Ltd Assay
WO2022214835A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 Achilles Therapeutics Uk Limited Batch release assay for pharmaceutical products relating to t cell therapies
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
WO2022221028A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Kite Pharma, Inc. Taci/bcma dual binding molecules
WO2022221126A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Kite Pharma, Inc. Methods and systems for scheduling a patient-specific immunotherapy procedure
JP2024514163A (ja) 2021-04-16 2024-03-28 セルジーン コーポレーション Ｂｃｍａ指向性ｔ細胞療法を用いた併用療法
IL307598A (en) 2021-04-16 2023-12-01 Juno Therapeutics Inc T-cell therapy in patients who have had a previous stem cell transplant
EP4323066A1 (en) 2021-04-16 2024-02-21 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2022226522A1 (en) 2021-04-22 2022-10-27 Baylor College Of Medicine Methods of engineering immune cells having reduced fratricidal activity
EP4326286A4 (en) * 2021-04-23 2025-03-12 Myeloid Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR CONDITIONING PATIENTS FOR CELL THERAPY
EP4330377A2 (en) 2021-04-27 2024-03-06 Takeda Pharmaceutical Company Limited Recombinant antigen presenting cells
AU2022267891A1 (en) 2021-04-27 2023-11-09 Novartis Ag Viral vector production system
US20240226163A1 (en) 2021-05-04 2024-07-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric Antigen Receptors with MAGE-A4 Specificity and Uses Thereof
US20250283037A1 (en) 2021-05-06 2025-09-11 Juno Therapeutics Gmbh Methods for stimulating and transducing t cells
AU2022271290A1 (en) 2021-05-07 2023-11-23 Kymera Therapeutics, Inc. Cdk2 degraders and uses thereof
WO2022241151A2 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen receptor t cell therapy
US20220389394A1 (en) 2021-05-18 2022-12-08 Gilead Sciences, Inc. METHODS OF USING FLT3L-Fc FUSION PROTEINS
US20240252642A1 (en) 2021-05-19 2024-08-01 Sana Biotechnology, Inc. Hypoimmunogenic rhd negative primary t cells
EP4347638A2 (en) 2021-05-24 2024-04-10 Kite Pharma, Inc. Nkg2d-based chimeric antgen receptor
CA3219478A1 (en) * 2021-05-26 2022-12-01 Christina GAVEGNANO Jak inhibitors for managing conditions in patients with down's syndrome or other trisomy
WO2022251367A1 (en) 2021-05-27 2022-12-01 Sana Biotechnology, Inc. Hypoimmunogenic cells comprising engineered hla-e or hla-g
WO2022251712A1 (en) 2021-05-28 2022-12-01 Sana Biotechnology, Inc. Lipid particles containing a truncated baboon endogenous retrovirus (baev) envelope glycoprotein and related methods and uses
EP4419672A2 (en) 2021-06-01 2024-08-28 Artisan Development Labs, Inc. Compositions and methods for targeting, editing, or modifying genes
CA3218590A1 (en) 2021-06-07 2022-12-15 Providence Health & Services - Oregon Cxcr5, pd-1, and icos expressing tumor reactive cd4 t cells and their use
AU2022291365A1 (en) 2021-06-08 2024-01-18 Kite Pharma, Inc. Gpc3 binding molecules
US20250034558A1 (en) 2021-06-18 2025-01-30 Artisan Development Labs, Inc. Compositions and methods for targeting, editing or modifying human genes
CN117580946A (zh) 2021-06-22 2024-02-20 阿基里斯治疗英国有限公司 用于产生抗原特异性t细胞的方法
AU2022298639C1 (en) 2021-06-23 2025-07-17 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
KR20240025616A (ko) 2021-06-23 2024-02-27 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 다이아실글리세롤 키나제 조절 화합물
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
JP7654118B2 (ja) 2021-06-23 2025-03-31 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
JP2024525475A (ja) 2021-06-29 2024-07-12 フラグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ，インコーポレーテッド タノトランスミッションを促進するように操作された免疫細胞及びその使用
EP4363558A1 (en) 2021-07-01 2024-05-08 Kite Pharma, Inc. Closed-system and method for autologous and allogeneic cell therapy manufacturing
KR20240051112A (ko) 2021-07-01 2024-04-19 인답타 세라뷰틱스 인코포레이티드 조작된 자연 살해(nk) 세포 및 관련 방법
US20230103457A1 (en) 2021-07-02 2023-04-06 Kite Pharma, Inc. Method for identifying variants in gene products from gene constructs used in cell therapy applications
WO2023281097A1 (en) 2021-07-09 2023-01-12 Immunic Ag Methods for treating cancer
WO2023287827A2 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Sana Biotechnology, Inc. Altered expression of y chromosome-linked antigens in hypoimmunogenic cells
IL310099A (en) * 2021-07-16 2024-03-01 Sana Biotechnology Inc Polycistronic vectors for cell-based therapies
WO2023004300A2 (en) * 2021-07-19 2023-01-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Chimeric antigen receptor (car)-t signaling optimization for tuning antigen activation threshold
US20230190799A1 (en) * 2021-07-21 2023-06-22 City Of Hope Chimeric antigen receptor t cells targeting cea and anti-cea-il2 immunocytokines for cancer therapy
JP7791305B2 (ja) 2021-07-30 2025-12-23 カイト ファーマ インコーポレイテッド 細胞療法により誘発された毒性の監視及び管理
WO2023014922A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Lat activating chimeric antigen receptor t cells and methods of use thereof
JP2024528981A (ja) 2021-08-04 2024-08-01 サナ バイオテクノロジー，インコーポレイテッド Ｃｄ４標的化ウイルスベクターの使用
EP4384621A4 (en) * 2021-08-09 2025-04-09 The Trustees of The University of Pennsylvania OPTIMIZATION OF T LYMPHOCYTE DIFFERENTIATION STATE WITH MICRORNAS
WO2023019226A1 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells for allogeneic cell therapy
JP2024531234A (ja) 2021-08-11 2024-08-29 サナ バイオテクノロジー，インコーポレイテッド 同種異系細胞療法のための遺伝子改変された初代細胞
EP4384598A1 (en) 2021-08-11 2024-06-19 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells for allogeneic cell therapy to reduce complement-mediated inflammatory reactions
JP2024535677A (ja) 2021-08-11 2024-10-02 サナ バイオテクノロジー，インコーポレイテッド 即時血液媒介性炎症反応を減少させるための同種細胞療法を目的とした遺伝子改変細胞
EP4384188A1 (en) 2021-08-11 2024-06-19 Sana Biotechnology, Inc. Inducible systems for altering gene expression in hypoimmunogenic cells
WO2023021113A1 (en) 2021-08-18 2023-02-23 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Hybrid tumor/cancer therapy based on targeting the resolution of or inducing transcription-replication conflicts (trcs)
CA3229746A1 (en) 2021-08-20 2023-02-23 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
MX2024002436A (es) 2021-08-24 2024-06-03 Ecole Polytechnique Fed Lausanne Epfl Celulas que expresan il-10 para inmunoterapias mejoradas contra el cancer.
US12157732B2 (en) 2021-08-25 2024-12-03 PIC Therapeutics, Inc. eIF4E inhibitors and uses thereof
CN118103368A (zh) 2021-08-25 2024-05-28 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂及其用途
MX2024004009A (es) 2021-09-27 2024-06-19 Sotio Biotech Inc Polipéptidos receptores quiméricos en combinación con moléculas transmetabólicas que redirigen metabolitos de glucosa fuera de la vía de la glucólisis y usos terapéuticos de estos.
PE20241173A1 (es) 2021-10-14 2024-05-28 Arsenal Biosciences Inc Celulas inmunitarias que tienen arnhc coexpresados y sistemas de compuerta logica
JP2024538116A (ja) 2021-10-18 2024-10-18 カイト ファーマ インコーポレイテッド キメラ抗原受容体のシグナル伝達ドメイン
CN118139858A (zh) 2021-10-28 2024-06-04 吉利德科学公司 吡地嗪-3(2h)-酮衍生物
MX2024005138A (es) 2021-10-29 2024-05-13 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de cinasa-4 asociada al receptor de la interleucina-1 (irak-4) y sintesis de los mismos.
WO2023077030A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
JP2024540320A (ja) 2021-11-03 2024-10-31 セルジーン コーポレーション 骨髄腫を処置する際に使用するための、ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体
WO2023081715A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Viracta Therapeutics, Inc. Combination of car t-cell therapy with btk inhibitors and methods of use thereof
CA3237201A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Sotio Biotech Inc. Treatment of myxoid/round cell liposarcoma patients
WO2023092119A2 (en) 2021-11-22 2023-05-25 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Methods for predicting responsiveness to a cancer therapy
US20250354167A1 (en) 2021-12-09 2025-11-20 Zygosity Limited Vector
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
TW202342498A (zh) 2021-12-17 2023-11-01 美商薩那生物科技公司 經修飾副黏液病毒科融合醣蛋白
EP4448775A1 (en) 2021-12-17 2024-10-23 Sana Biotechnology, Inc. Modified paramyxoviridae attachment glycoproteins
KR102809807B1 (ko) * 2021-12-21 2025-05-16 한림대학교 산학협력단 항-cldn18.2를 포함하는 키메릭 항원 수용체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조 방법
EP4452414A2 (en) 2021-12-22 2024-10-30 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
WO2023122615A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
KR20240137574A (ko) 2021-12-23 2024-09-20 사나 바이오테크놀로지, 인크. 자가면역 질환 치료를 위한 키메라 항원 수용체[chimeric antigen receptor, car] t 세포 및 관련 방법
JP2025501272A (ja) 2021-12-28 2025-01-17 ムネモ・セラピューティクス 不活性化されたｓｕｖ３９ｈ１及び改変ｔｃｒを有する免疫細胞
AU2022423984A1 (en) 2021-12-30 2024-08-15 Tr1X, Inc. Cd4+ t cells expressing il-10 and chimeric antigen receptors and uses thereof
WO2023133595A2 (en) 2022-01-10 2023-07-13 Sana Biotechnology, Inc. Methods of ex vivo dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
TW202340474A (zh) 2022-01-11 2023-10-16 大陸商深圳市珈鈺生物科技有限公司 樹突細胞腫瘤疫苗和其用途
CA3247928A1 (en) 2022-01-14 2023-07-20 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems and methods for programming T-lymphocyte phenotypes by targeted gene repression
US20250154503A1 (en) 2022-01-14 2025-05-15 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for programming t cell phenotypes through targeted gene repression
US20230227779A1 (en) 2022-01-19 2023-07-20 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Enhanced Chimeric Antigen Receptor Cells in Hypoxic Tumor Microenvironment
US20250115916A1 (en) 2022-01-21 2025-04-10 Mnemo Therapeutics Modulation of suv39h1 expression by rnas
JP2025504002A (ja) 2022-01-28 2025-02-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞組成物を製造する方法
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
US12091411B2 (en) 2022-01-31 2024-09-17 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
EP4472646A1 (en) 2022-02-01 2024-12-11 Sana Biotechnology, Inc. Cd3-targeted lentiviral vectors and uses thereof
WO2023150181A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating cancer
EP4473097A1 (en) 2022-02-02 2024-12-11 Sana Biotechnology, Inc. Methods of repeat dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
JP2025508371A (ja) * 2022-02-11 2025-03-26 フレッド ハッチンソン キャンサー センター Ｓｔｅａｐ１に結合するキメラ抗原受容体
US20250302953A1 (en) 2022-02-14 2025-10-02 Sana Biotechnology, Inc. Methods of treating patients exhibiting a prior failed therapy with hypoimmunogenic cells
IL314451A (en) 2022-02-15 2024-09-01 Kite Pharma Inc Predicting adverse events from immunotherapy
EP4479416A1 (en) 2022-02-17 2024-12-25 Sana Biotechnology, Inc. Engineered cd47 proteins and uses thereof
AU2023223404A1 (en) 2022-02-22 2024-08-29 Juno Therapeutics, Inc. Proteinase 3 (pr3) chimeric autoantibody receptor t cells and related methods and uses
TW202340457A (zh) 2022-02-28 2023-10-16 美商凱特製藥公司 同種異體治療細胞
US20250388896A1 (en) 2022-03-01 2025-12-25 Celyntra Therapeutics Sa Composition and methods for transgene insertion
US20250243260A1 (en) 2022-03-07 2025-07-31 Alpine Immune Sciences, Inc. Immunomodulatory proteins of variant cd80 polypeptides, cell therapies and related methods and uses
JP2025508076A (ja) 2022-03-08 2025-03-21 アレンティス・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフト Ｔ細胞の利用能を向上させるための抗クローディン－１抗体の使用
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173123A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells and compositions and uses thereof
US20250228940A1 (en) 2022-03-11 2025-07-17 Yale University Compositions and methods for efficient and stable genetic modification of eukaryotic cells
ES2999273T3 (en) 2022-03-17 2025-02-25 Gilead Sciences Inc Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
CA3245554A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Genetically modified T lymphocyte co-receptors and their methods of use
CN119031937A (zh) 2022-03-24 2024-11-26 吉利德科学公司 用于治疗表达Trop-2的癌症的联合疗法
US20250302930A1 (en) 2022-03-24 2025-10-02 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor transposable element derived neoantigenic peptides in glioblastoma
GB202204386D0 (en) 2022-03-28 2022-05-11 Cambridge Entpr Ltd Engineered immune cell platform
US20250222027A1 (en) 2022-04-01 2025-07-10 Sana Biotechnology, Inc. Cytokine receptor agonist and viral vector combination therapies
TWI876305B (zh) 2022-04-05 2025-03-11 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
WO2023196921A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Granzyme expressing t cells and methods of use
US20250304913A1 (en) 2022-04-06 2025-10-02 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Chimeric antigen receptor t cells and methods of use thereof
KR20250004824A (ko) 2022-04-21 2025-01-08 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Kras g12d 조절 화합물
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
JP2025515324A (ja) 2022-04-28 2025-05-14 エムユーエスシー ファウンデーション フォー リサーチ ディベロップメント がんを処置するためのキメラ抗原受容体改変調節性ｔ細胞
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
US20250297282A1 (en) 2022-05-05 2025-09-25 Juno Therapeutics Gmbh Viral-binding protein and related reagents, articles, and methods of use
WO2023220644A1 (en) 2022-05-10 2023-11-16 Yale University Compositions and methods of synthetic ctla-4 tails for reprogramming of car-t cells and enhancement of anti-tumor efficacy
WO2023220641A2 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to t cell therapy and production of same
WO2023220655A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
EP4279085A1 (en) 2022-05-20 2023-11-22 Mnemo Therapeutics Compositions and methods for treating a refractory or relapsed cancer or a chronic infectious disease
US20250345432A1 (en) 2022-05-25 2025-11-13 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
WO2023230205A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
JP2025518111A (ja) 2022-05-27 2025-06-12 カイト ファーマ インコーポレイテッド 細胞療法のための操作されたリンパ球を調製するための組成物及び方法
IL316652A (en) 2022-05-27 2024-12-01 Kite Pharma Inc Non-viral delivery of cell therapy constructs
AU2023282907A1 (en) 2022-06-09 2024-11-14 Kite Pharma, Inc. Methods of preparing lymphocytes for cell therapy
IL317568A (en) 2022-06-10 2025-02-01 Res Found Dev Engineered FCRIIB Selective IgG1 FC Variants, and Their Uses
WO2023242343A1 (en) 2022-06-15 2023-12-21 Immunoscape Pte. Ltd. Human t cell receptors specific for antigenic peptides derived from mitogen-activated protein kinase 8 interacting protein 2 (mapk8ip2), epstein-barr virus or human endogenous retrovirus, and uses thereof
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
EP4547230A1 (en) 2022-06-29 2025-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids
GB202209518D0 (en) 2022-06-29 2022-08-10 Snipr Biome Aps Treating & preventing E coli infections
CN120051297A (zh) 2022-06-30 2025-05-27 因达普塔治疗公司 工程化自然杀伤(nk)细胞与抗体疗法的组合及相关方法
IL317958A (en) 2022-07-01 2025-02-01 Gilead Sciences Inc CD73 compounds
US20260027145A1 (en) 2022-07-27 2026-01-29 Sana Biotechnology, Inc. Methods of transduction using a viral vector and inhibitors of antiviral restriction factors
CN119923410A (zh) 2022-07-28 2025-05-02 莱蒂恩技术公司 用于治疗实体瘤的嵌合抗原受体治疗
JP2025527248A (ja) 2022-08-02 2025-08-20 リミナル・バイオサイエンシーズ・リミテッド 置換ピリドンｇｐｒ８４アンタゴニスト及びその使用
WO2024030441A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 National University Corporation Hokkaido University Methods of improving cellular therapy with organelle complexes
CN120019047A (zh) 2022-08-02 2025-05-16 里米诺生物科学有限公司 杂芳基甲酰胺和相关gpr84拮抗剂及其用途
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
EP4569091A1 (en) 2022-08-10 2025-06-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Hypoimmunogenic modified cells
WO2024040207A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered natural killer (nk) cells with chimeric receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
WO2024040208A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered immune cells with chimeric receptor polypeptides in combination with multiple trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
EP4577234A1 (en) 2022-08-26 2025-07-02 Kite Pharma, Inc. Improving immune cell function
CN120435310A (zh) 2022-08-26 2025-08-05 朱诺治疗学股份有限公司 对δ样配体3（DLL3）具有特异性的抗体和嵌合抗原受体
CN120152717A (zh) 2022-09-08 2025-06-13 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞疗法和连续或间歇dgk抑制剂给药的组合
EP4587047A1 (en) 2022-09-15 2025-07-23 Novartis AG Treatment of autoimmune disorders using chimeric antigen receptor therapy
WO2024064642A2 (en) 2022-09-19 2024-03-28 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for modulating t cell function
CN116063560A (zh) * 2022-09-21 2023-05-05 东莞市东南部中心医院 一种sh Blimp-1 CAR-T细胞的构建及应用
US20240091351A1 (en) 2022-09-21 2024-03-21 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPa DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
WO2024064824A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Yale University Compositions and methods for identification of membrane targets for enhancement of nk cell therapy
WO2024062138A1 (en) 2022-09-23 2024-03-28 Mnemo Therapeutics Immune cells comprising a modified suv39h1 gene
EP4593871A1 (en) 2022-09-30 2025-08-06 Caribou Biosciences, Inc. Anti-ror1 chimeric antigen receptors (cars), car-nk cells and related methods
EP4598949A1 (en) 2022-10-07 2025-08-13 The General Hospital Corporation Methods and compositions for high-throughput discovery of peptide-mhc targeting binding proteins
EP4602174A1 (en) 2022-10-13 2025-08-20 Sana Biotechnology, Inc. Viral particles targeting hematopoietic stem cells
AU2023369684A1 (en) 2022-10-26 2025-04-17 Novartis Ag Lentiviral formulations
KR20250097843A (ko) 2022-10-28 2025-06-30 카이트 파마 인코포레이티드 조작된 림프구의 신속한 투여
AU2023367198A1 (en) 2022-10-28 2025-04-17 Kite Pharma, Inc. Improving efficacy and durable response of immunotherapy
US20240158869A1 (en) 2022-10-28 2024-05-16 Kite Pharma, Inc. Factors for optimizing immunotherapy
WO2024091669A1 (en) 2022-10-28 2024-05-02 Ginkgo Bioworks, Inc. Chimeric antigen receptors comprising an intracellular domain pair
WO2024097313A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Sana Biotechnology, Inc. Methods for producing t cell therapy products
WO2024097905A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Celgene Corporation Methods of treatment with t cell therapy and immunomodulatory agent maintenance therapy
WO2024098024A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
EP4615960A1 (en) 2022-11-09 2025-09-17 C3S2 GmbH Methods for manufacturing engineered immune cells
WO2024102948A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 Celgene Corporation Fc receptor-homolog 5 (fcrh5) specific binding molecules and bispecific t-cell engaging antibodies including same and related methods
IL320012A (en) 2022-11-14 2025-06-01 Caribou Biosciences Inc Anti-cll-1 chimeric antigen receptors, engineered cells and related methods
KR20240088571A (ko) 2022-11-18 2024-06-20 서울대학교산학협력단 Ctla-4 변이체 및 키메라 항원수용체를 이용한 이중 유전자 이입 면역세포 및 이의 용도
US20240208961A1 (en) 2022-11-22 2024-06-27 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
TW202440623A (zh) 2022-11-28 2024-10-16 美商艾洛基因醫療公司 靶向密連蛋白１８﹒２之嵌合抗原受體及結合劑以及其用途
EP4626401A1 (en) 2022-12-01 2025-10-08 Generation Bio Co. Stealth lipid nanoparticle compositions for cell targeting
WO2024124044A1 (en) 2022-12-07 2024-06-13 The Brigham And Women’S Hospital, Inc. Compositions and methods targeting sat1 for enhancing anti¬ tumor immunity during tumor progression
EP4630782A1 (en) 2022-12-09 2025-10-15 Juno Therapeutics, Inc. Machine learning methods for predicting cell phenotype using holographic imaging
KR20250135354A (ko) 2022-12-13 2025-09-12 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Baff-r 및 cd19에 특이적인 키메라 항원 수용체 및 그의 방법 및 용도
US20240254118A1 (en) 2022-12-22 2024-08-01 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2024151541A1 (en) 2023-01-09 2024-07-18 Sana Biotechnology, Inc. Type-1 diabetes autoimmune mouse
WO2024155821A1 (en) 2023-01-18 2024-07-25 Yale University Chimeric antigen receptors (car) with intrinsically disordered regions and methods of use thereof
JP2026504491A (ja) 2023-02-03 2026-02-05 ツェー３エス２ ゲーエムベーハー 操作された免疫細胞の非ウイルス的製造のための方法
WO2024178128A1 (en) * 2023-02-22 2024-08-29 Elysion Therapeutics, Inc. Lysis sensing receptors and uses thereof
WO2024178397A2 (en) 2023-02-24 2024-08-29 Elevatebio Technologies, Inc. Modified immune effector cells and methods of use
WO2024182539A1 (en) 2023-02-28 2024-09-06 Lyell Immunopharma, Inc. Methods of culturing reprogrammed cells
TW202502363A (zh) 2023-02-28 2025-01-16 美商奇諾治療有限公司 用於治療全身性自體免疫疾病之細胞療法
IL322949A (en) 2023-03-03 2025-10-01 Arsenal Biosciences Inc Systems targeting PSMA and CA9
US20240343820A1 (en) 2023-03-09 2024-10-17 Kite Pharma, Inc. Antigen binding molecules and methods of use
TW202436346A (zh) 2023-03-13 2024-09-16 美商亞森諾生物科學公司 合成路徑活化劑
AU2024241240A1 (en) 2023-03-17 2025-10-16 Kite Pharma, Inc. Impact of tumor microenvironment on efficacy of immunotherapy
EP4684210A1 (en) 2023-03-23 2026-01-28 Alentis Therapeutics AG Biomarker for cancer treatment using anti-claudin-1 antibodies
EP4687959A1 (en) 2023-03-24 2026-02-11 Cornell University Utilizing t cells derived from tumor draining lymph nodes for chimeric antigen receptor (car) t cell therapy for the treatment of cancer
EP4626447A4 (en) 2023-03-31 2026-02-18 Abelzeta Inc BISPECIFIC CHIMERIC ANTIGENIC RECEPTORS TARGETING CD20 AND BCMA
WO2024211852A1 (en) * 2023-04-07 2024-10-10 Fate Therapeutics, Inc. Ipsc-derived nk cell for lymphoma treatment
AU2024253044A1 (en) 2023-04-07 2025-10-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer with a lymphotoxin beta receptor agonist
EP4695260A1 (en) 2023-04-11 2026-02-18 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
WO2024215989A1 (en) 2023-04-14 2024-10-17 Sotio Biotech Inc. ENGINEERED IMMUNE CELLS FOR TREATING CANCER IN COMBINATION WITH IL-2/IL-15 RECEPTOR βγ AGONISTS
WO2024215987A1 (en) 2023-04-14 2024-10-17 Sotio Biotech Inc. IMMUNE CELLS FOR TREATING CANCER IN COMBINATION WITH IL-15/IL-15Rα CONJUGATES
WO2024220574A1 (en) 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Universal protein g fusogens and adapter systems thereof and related lipid particles and uses
WO2024220597A2 (en) 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Digital droplet based assay for detecting replication competent lentiviral vector
WO2024220560A1 (en) 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Engineered protein g fusogens and related lipid particles and methods thereof
KR20250169631A (ko) 2023-04-18 2025-12-03 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 치료 세포 조성물의 효력을 평가하기 위한 세포독성 검정
WO2024220598A2 (en) 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Lentiviral vectors with two or more genomes
KR20250175331A (ko) 2023-04-21 2025-12-16 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Prmt5 억제제 및 이의 용도
AU2024257643A1 (en) 2023-04-21 2025-10-16 Kite Pharma, Inc. Allogenic therapeutic cells with reduced risk of immune rejection
CN121038806A (zh) 2023-04-25 2025-11-28 阿森纳生物科学公司 用于转录调控的新颖受体
WO2024226829A2 (en) 2023-04-26 2024-10-31 Yale University Enpp3-binding molecules, compositions formed therefrom, and methods of use thereof for the treatment of cancer
WO2024226858A1 (en) 2023-04-26 2024-10-31 Juno Therapeutics, Inc. Methods for viral vector manufacturing
TW202506996A (zh) 2023-04-27 2025-02-16 日商武田藥品工業股份有限公司 擴增ｃｄ５６＋／ｃｄ３－細胞之方法
AU2024264056A1 (en) 2023-04-28 2025-11-20 Shenzhen Shenxin Biotechnology Co., Ltd. Modified delivery vector and use thereof
AU2024264889A1 (en) 2023-05-03 2025-11-13 Sana Biotechnology, Inc. Methods of dosing and administration of engineered islet cells
AU2024267555A1 (en) 2023-05-11 2025-11-20 Alaya.Bio Inc. Extracellular vesicles for the delivery of payloads to eukaryotic cells
WO2024238656A1 (en) 2023-05-15 2024-11-21 Yale Univeristy Chimeric antigen receptor compositions, car-mast cells formed therefrom, and methods of use thereof
WO2024238903A1 (en) * 2023-05-17 2024-11-21 Mayo Foundation For Medical Education And Research Materials and methods for increasing immune responses within a mammal
WO2024236547A1 (en) 2023-05-18 2024-11-21 Inceptor Bio, Llc Modified phagocytic cells expressing chimeric antigen receptors comprising a herpes virus entry mediator (hvem) co-stimulatory domain and uses thereof
KR20250091231A (ko) 2023-05-19 2025-06-20 서울대학교산학협력단 항cd3 항체의 활성화된 t세포의 선택적 제거 용도
WO2024243236A2 (en) 2023-05-22 2024-11-28 Sana Biotechnology, Inc. Methods of delivery of islet cells and related methods
WO2024243365A2 (en) 2023-05-23 2024-11-28 Juno Therapeutics, Inc. Activation markers of t cells and method for assessing t cell activation
TW202500126A (zh) 2023-05-24 2025-01-01 美商金橘生物科技公司 雜環化合物及其用途
WO2024243514A1 (en) * 2023-05-25 2024-11-28 Trustees Of Dartmouth College Leveraging photothermal heating for surface processing of active agents
AU2024275280A1 (en) 2023-05-25 2026-01-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. T cell receptors that bind presented hpv16-, mart1-, cmv-, ebv-, or influenza- peptides
US12531162B1 (en) * 2023-05-31 2026-01-20 Northeastern University Multi-dimensional phenotypic space for genotype to phenotype mapping and intelligent design of cancer drug therapies using a deep learning net
CN121399270A (zh) 2023-06-14 2026-01-23 阿森纳生物科学公司 非病毒细胞工程化
US20250059164A1 (en) 2023-06-23 2025-02-20 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
AU2024310260A1 (en) 2023-06-29 2025-12-11 Dispatch Biotherapeutics, Inc. Synthetic cytokine receptors
US20250042922A1 (en) 2023-06-30 2025-02-06 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
US12319747B2 (en) 2023-07-03 2025-06-03 Medicovestor, Inc. Methods of using anti-SP17 immunotherapeutics
AU2024296940A1 (en) 2023-07-07 2026-01-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
AU2024297978A1 (en) 2023-07-26 2026-02-05 Gilead Sciences, Inc. Parp7 inhibitors
US20250066328A1 (en) 2023-07-26 2025-02-27 Gilead Sciences, Inc. Parp7 inhibitors
WO2025029840A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Tune Therapeutics, Inc. Compositions and methods for multiplexed activation and repression of t cell gene expression
WO2025029835A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Tune Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating il-2 gene expression
WO2025030010A1 (en) 2023-08-01 2025-02-06 Vor Biopharma Inc. Compositions comprising genetically engineered hematopoietic stem cells and methods of use thereof
WO2025038750A2 (en) 2023-08-14 2025-02-20 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating cancer
WO2025043172A1 (en) 2023-08-23 2025-02-27 Sana Biotechnology, Inc. Modified cd47 proteins and their uses
WO2025054202A1 (en) 2023-09-05 2025-03-13 Sana Biotechnology, Inc. Method of screening a sample comprising a transgene with a unique barcode
WO2025051339A1 (en) 2023-09-05 2025-03-13 Tiber Biotech Srl SINGLE-CHAIN VARIABLE FRAGMENT AND MOLECULES DERIVING THEREFROM THAT BIND FRAGMENT TRVB5-1 OF THE β CHAIN OF HUMAN T-CELL RECEPTOR
EP4520334A1 (en) 2023-09-07 2025-03-12 Mnemo Therapeutics Methods and compositions for improving immune response
WO2025052001A1 (en) 2023-09-07 2025-03-13 Mnemo Therapeutics Methods and compositions for improving immune response
US20250101042A1 (en) 2023-09-08 2025-03-27 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
WO2025059533A1 (en) 2023-09-13 2025-03-20 The Broad Institute, Inc. Crispr enzymes and systems
WO2025059414A1 (en) * 2023-09-15 2025-03-20 Singular Immune, Inc. Composition and method of use recombinant fusion protein to generate car-immune cells
WO2025068803A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Astrazeneca Ab Therapeutic combinations comprising anti-steap2 chimeric antigen receptor t cells
WO2025072571A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Cellanome, Inc. Cell culture within microfluidic structures
US20250127728A1 (en) 2023-10-05 2025-04-24 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained Ionizable Cationic Lipids and Lipid Nanoparticles
WO2025076113A1 (en) 2023-10-05 2025-04-10 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids with conserved spacing and lipid nanoparticles
WO2025083398A1 (en) 2023-10-16 2025-04-24 Cell Therapy Catapult Limited Co-culture
WO2025082603A1 (en) 2023-10-18 2025-04-24 Institut Curie Engineered immune cells overexpressing cd74 molecule
US12364777B2 (en) 2023-10-20 2025-07-22 Medicovestor, Inc. Homodimeric antibodies for use in treating cancers and methods of use
WO2025090985A1 (en) * 2023-10-27 2025-05-01 Duke University Compositions comprising chimeric antigen receptors targeting citrullinated vimentin and methods of use thereof
WO2025096305A1 (en) * 2023-10-30 2025-05-08 The Cleveland Clinic Foundation Chimeric antigen receptors with a tip co-stimulatory domain
WO2025096594A2 (en) 2023-10-30 2025-05-08 Allogene Therapeutics, Inc. Cells expressing anti-cd19 chimeric antigen receptors and methods of use thereof
WO2025096419A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Lyell Immunopharma, Inc. T cells comprising a chimeric antigen receptor targeting transforming growth factor beta and a t cell receptor targeting a tumor antigen, and use thereof
US20250161361A1 (en) 2023-11-01 2025-05-22 Kite Pharma, Inc. Factors for optimizing immunotherapy efficacy
WO2025096975A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions and methods of enhancing immune cell therapies by runx2 modulation
WO2025097055A2 (en) 2023-11-02 2025-05-08 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods of use of t cells in immunotherapy
WO2025096589A1 (en) 2023-11-03 2025-05-08 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2025117544A1 (en) 2023-11-29 2025-06-05 The Broad Institute, Inc. Engineered omega guide molecule and iscb compositions, systems, and methods of use thereof
WO2025128434A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions and methods for the treatment of ven/aza resistant acute myeloid leukemia
WO2025129120A2 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Port Therapeutics, Inc. Use of thermal bioswitches for treating autoimmune diseases
TW202526007A (zh) 2023-12-21 2025-07-01 美商凱特製藥公司 用於上調低密度脂蛋白受體（ｌｄｌ－ｒ）表現之系統及方法
WO2025137640A1 (en) 2023-12-22 2025-06-26 Gilead Sciences, Inc. Azaspiro wrn inhibitors
US12116410B1 (en) 2023-12-26 2024-10-15 Medicovestor, Inc. Methods of manufacturing dimeric antibodies
WO2025147545A1 (en) 2024-01-03 2025-07-10 Juno Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids and related methods and uses
WO2025146286A1 (en) 2024-01-04 2025-07-10 Immunoscape Pte. Ltd. Human t cell receptors and uses thereof
WO2025151838A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Sana Biotechnology, Inc. Safety switches to control in vitro and in vivo proliferation of cell therapy products
WO2025151923A1 (en) * 2024-01-17 2025-07-24 Newsouth Innovations Pty Limited Apparatus for production of engineered cells
WO2025158400A1 (en) 2024-01-24 2025-07-31 Yale University Compositions and methods of natural killer cell hyperboosts for enhancement of nk cell therapy
WO2025163107A1 (en) 2024-02-01 2025-08-07 Institut Gustave Roussy Immune cells defective for znf217 and uses thereof
US12258396B1 (en) 2024-02-02 2025-03-25 Medicovestor, Inc. Methods of using immunotherapeutics that bind folate receptor alpha
US12378314B1 (en) 2024-02-02 2025-08-05 Medicovestor, Inc. Proteins that bind folate receptor alpha including fully-human antibodies
US12240900B1 (en) 2024-02-02 2025-03-04 Medicovestor, Inc. Nucleic acids, vectors, and cells that encode antibodies and other proteins that bind folate receptor alpha
WO2025170991A1 (en) 2024-02-08 2025-08-14 Kite Pharma, Inc. Methods for generating engineered lymphocytes with enriched t memory stem cells
US20250262300A1 (en) 2024-02-16 2025-08-21 Kite Pharma, Inc. Systems, methods, and kits for generating and administering engineered t cells and cd38 targeting compounds as a combination therapy
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025181329A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Immunoscape Pte. Ltd. Human t cell receptors and uses thereof
WO2025188561A1 (en) 2024-03-04 2025-09-12 Kite Pharma, Inc. Predictive markers for immunotherapy
WO2025191300A1 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Novartis Ag Rapcabtagene autoleucel for use in treating systemic lupus erythematosus
US20250361297A1 (en) 2024-03-12 2025-11-27 Adaptam Therapeutics, S.L. Anti- siglec-15 binding molecules and methods of use
WO2025191531A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Cd19 targeting car nk cells in treating systemic lupus erythematosus and lupus nephritis
WO2025199346A1 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Arsenal Biosciences, Inc. Antigen binding proteins that bind tmprss4 and methods of use thereof
WO2025199338A1 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Arsenal Biosciences, Inc. Systems targeting slc34a2 and tmprss4 and methods of use thereof
EP4624494A1 (en) 2024-03-29 2025-10-01 Institut Curie Her2 single domain antibody and uses thereof
WO2025217452A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2025217454A2 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2025231376A1 (en) 2024-05-03 2025-11-06 Kite Pharma, Inc. Chimeric receptors binding to cll-1 and methods of use thereof
WO2025235851A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Juno Therapeutics, Inc. Genetically engineered t cells expressing a cd19 chimeric antigen receptor (car) and uses thereof for allogeneic cell therapy
WO2025245003A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
NL2037811B1 (en) 2024-05-29 2025-12-12 Univ Oslo Treatment for Cancer
US20250382383A1 (en) 2024-05-31 2025-12-18 Kite Pharma, Inc. Tricistronic constructs for anti-gpc3 car
WO2025255030A1 (en) 2024-06-03 2025-12-11 Cornell University Interferon gamma responsive chimeric t cell costimulatory receptor
US20250375480A1 (en) 2024-06-11 2025-12-11 Kite Pharma, Inc. Methods for Generating Engineered Lymphocytes
NL2037929B1 (en) 2024-06-11 2026-01-12 Prinses Maxima Centrum Voor Kinderoncologie B V Brain Organoid
US20260000765A1 (en) 2024-06-27 2026-01-01 Lentigen Technology, Inc. CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR THERAPIES FOR TREATING CANCER WITH IL7Fc ARMORED CAR-T CELLS
WO2026006767A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Dispatch Biotherapeutics, Inc. Tethered il-9/il-9r and related engineered cells and methods
WO2026015450A1 (en) 2024-07-06 2026-01-15 Tr1X, Inc. Cd4+ t cells expressing il-10 and chimeric antigen receptors and uses thereof
US20260009001A1 (en) 2024-07-08 2026-01-08 Kite Pharma, Inc. Systems and methods for applying mechanical force to living cells to generate a phenotypic response
WO2026020055A2 (en) 2024-07-18 2026-01-22 Juno Therapeutics, Inc. Methods for assessing exosomes in a cell composition and related uses
WO2026025092A1 (en) 2024-07-26 2026-01-29 Juno Therapeutics, Inc. Synthetic promoters for t cell expression

Family Cites Families (97)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR901228A (fr) 1943-01-16 1945-07-20 Deutsche Edelstahlwerke Ag Système d'aimant à entrefer annulaire
US4882282A (en) * 1985-08-16 1989-11-21 Immunex Corporation DNA sequences encoding bovine interleukin-2
US5906936A (en) 1988-05-04 1999-05-25 Yeda Research And Development Co. Ltd. Endowing lymphocytes with antibody specificity
US6303121B1 (en) 1992-07-30 2001-10-16 Advanced Research And Technology Method of using human receptor protein 4-1BB
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5399346A (en) 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
US5585362A (en) 1989-08-22 1996-12-17 The Regents Of The University Of Michigan Adenovirus vectors for gene therapy
US6319494B1 (en) 1990-12-14 2001-11-20 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
DK0517895T3 (da) 1990-12-14 1997-04-07 Univ California Kimæriske kæder til receptorforbundne signaltransduktionsveje
US6004811A (en) 1991-03-07 1999-12-21 The Massachussetts General Hospital Redirection of cellular immunity by protein tyrosine kinase chimeras
IL101147A (en) 1991-03-07 2004-06-20 Gen Hospital Corp Redirection of cellular immunity by receptor chimeras
US7049136B2 (en) 1991-03-07 2006-05-23 The General Hospital Corporation Redirection of cellular immunity by receptor chimeras
US5199942A (en) 1991-06-07 1993-04-06 Immunex Corporation Method for improving autologous transplantation
GB9125768D0 (en) 1991-12-04 1992-02-05 Hale Geoffrey Therapeutic method
US8211422B2 (en) 1992-03-18 2012-07-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric receptor genes and cells transformed therewith
IL104570A0 (en) 1992-03-18 1993-05-13 Yeda Res & Dev Chimeric genes and cells transformed therewith
US5350674A (en) 1992-09-04 1994-09-27 Becton, Dickinson And Company Intrinsic factor - horse peroxidase conjugates and a method for increasing the stability thereof
US7211259B1 (en) 1993-05-07 2007-05-01 Immunex Corporation 4-1BB polypeptides and DNA encoding 4-1BB polypeptides
CA2429027C (en) * 1993-09-16 2011-04-05 Indiana University Foundation Antibodies against human receptor h4-1bb
AU694222B2 (en) 1994-05-02 1998-07-16 Bernd Groner Bifunctional protein, preparation and use
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5712149A (en) 1995-02-03 1998-01-27 Cell Genesys, Inc. Chimeric receptor molecules for delivery of co-stimulatory signals
US6103521A (en) 1995-02-06 2000-08-15 Cell Genesys, Inc. Multispecific chimeric receptors
PT871495E (pt) 1995-02-24 2005-10-31 Gen Hospital Corp Redireccionamento de imunidade celular atraves de receptores quimericos
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
GB9526131D0 (en) 1995-12-21 1996-02-21 Celltech Therapeutics Ltd Recombinant chimeric receptors
US5874240A (en) 1996-03-15 1999-02-23 Human Genome Sciences, Inc. Human 4-1BB receptor splicing variant
JP2002512502A (ja) 1996-10-25 2002-04-23 セル・ジェネシス・インコーポレイテッド 癌細胞の標的細胞溶解
GB9713473D0 (en) 1997-06-25 1997-09-03 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
US20030060444A1 (en) 1997-06-25 2003-03-27 Celltech Therapeutics, Ltd. Cell activation process and reagents therefor
PT1047449E (pt) * 1997-10-28 2004-04-30 Univ British Columbia Composicoes imunologicas e metodos de utilizacao para alterar transitoriamente a mielina do sistema nervoso central mamifero para promover a regeneracao neuronal
GB9722779D0 (en) * 1997-10-28 1997-12-24 Isis Innovation Human CD8 as an inhibitor of the cellular immune system
GB9809658D0 (en) 1998-05-06 1998-07-01 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
EP1109921A4 (en) 1998-09-04 2002-08-28 Sloan Kettering Inst Cancer FUSION RECEPTORS SPECIFIC TO MEMBRANE SPECIFIC PROSTATIC ANTIGEN AND USES THEREOF
AU2472400A (en) * 1998-10-20 2000-05-08 City Of Hope CD20-specific redirected T cells and their use in cellular immunotherapy of CD20+ malignancies
WO2000063374A1 (en) 1999-04-16 2000-10-26 Celltech Therapeutics Limited Synthetic transmembrane components
EP1235842A4 (en) 1999-10-15 2003-04-23 Univ Massachusetts Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference
GB9925848D0 (en) 1999-11-01 1999-12-29 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
US6326193B1 (en) 1999-11-05 2001-12-04 Cambria Biosciences, Llc Insect control agent
AU784988B2 (en) * 1999-11-10 2006-08-17 Uab Research Foundation, The Lentiviral vector transduction of hematopoietic stem cells
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
ATE373078T1 (de) 2000-02-24 2007-09-15 Xcyte Therapies Inc Gleichzeitige stimulation und konzentration von zellen
IL136511A0 (en) 2000-06-01 2001-06-14 Gavish Galilee Bio Appl Ltd Genetically engineered mhc molecules
WO2001096584A2 (en) 2000-06-12 2001-12-20 Akkadix Corporation Materials and methods for the control of nematodes
GB0025307D0 (en) 2000-10-16 2000-11-29 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
EP1334188B1 (en) * 2000-11-07 2006-08-30 City of Hope Cd19-specific redirected immune cells
US7070995B2 (en) 2001-04-11 2006-07-04 City Of Hope CE7-specific redirected immune cells
US20090257994A1 (en) * 2001-04-30 2009-10-15 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers
WO2002088334A1 (en) 2001-04-30 2002-11-07 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers
US7514537B2 (en) * 2001-04-30 2009-04-07 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human gliomas
US20030148982A1 (en) 2001-11-13 2003-08-07 Brenner Malcolm K. Bi-spcific chimeric T cells
US7745140B2 (en) 2002-01-03 2010-06-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Activation and expansion of T-cells using an engineered multivalent signaling platform as a research tool
US7446190B2 (en) 2002-05-28 2008-11-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors
JP3878522B2 (ja) 2002-07-18 2007-02-07 株式会社日立製作所 ベンチュリ式燃料供給装置を備えたエンジンの空燃比制御方法及びその方法を備えた燃料制御装置
US20050129671A1 (en) 2003-03-11 2005-06-16 City Of Hope Mammalian antigen-presenting T cells and bi-specific T cells
US7402431B2 (en) * 2004-03-01 2008-07-22 Immunovative Therapies, Ltd. T-cell therapy formulation
US8198020B2 (en) 2003-08-22 2012-06-12 Potentia Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for enhancing phagocytosis or phagocyte activity
US20050113564A1 (en) * 2003-11-05 2005-05-26 St. Jude Children's Research Hospital Chimeric receptors with 4-1BB stimulatory signaling domain
US7435596B2 (en) 2004-11-04 2008-10-14 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Modified cell line and method for expansion of NK cell
AU2005250408B2 (en) 2004-05-27 2010-09-23 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Novel artificial antigen presenting cells and uses therefor
US7994298B2 (en) 2004-09-24 2011-08-09 Trustees Of Dartmouth College Chimeric NK receptor and methods for treating cancer
WO2006060878A1 (en) 2004-12-10 2006-06-15 Peter Maccallum Cancer Institute Methods and compositions for adoptive immunotherapy
US7581948B2 (en) * 2005-12-21 2009-09-01 Johns Manville Burner apparatus and methods for making inorganic fibers
US7551486B2 (en) * 2006-05-15 2009-06-23 Apple Inc. Iterative memory cell charging based on reference cell value
WO2008045437A2 (en) * 2006-10-09 2008-04-17 The General Hospital Corporation Chimeric t-cell receptors and t-cells targeting egfrviii on tumors
EP1916259A1 (en) * 2006-10-26 2008-04-30 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Anti-glycoprotein VI SCFV fragment for treatment of thrombosis
US20080131415A1 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Riddell Stanley R Adoptive transfer of cd8 + t cell clones derived from central memory cells
US20080311098A1 (en) * 2007-02-14 2008-12-18 Lapointe Rejean Compounds and methods for modulating the immune response against antigens
US7448191B2 (en) * 2007-02-14 2008-11-11 Deere & Company Mower deck lift system with transport lock
CA2584494A1 (en) * 2007-03-27 2008-09-27 Jeffrey A. Medin Vector encoding therapeutic polypeptide and safety elements to clear transduced cells
PT2856876T (pt) 2007-03-30 2018-03-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Expressão constitutiva de ligantes co-estimulatórios em linfócitos t adotivamente transferidos
WO2009091826A2 (en) * 2008-01-14 2009-07-23 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Compositions and methods related to a human cd19-specific chimeric antigen receptor (h-car)
WO2009097140A1 (en) 2008-01-30 2009-08-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods for off -the -shelf tumor immunotherapy using allogeneic t-cell precursors
US8450112B2 (en) * 2008-04-09 2013-05-28 Maxcyte, Inc. Engineering and delivery of therapeutic compositions of freshly isolated cells
EP4032552B1 (en) 2008-08-26 2023-10-04 City of Hope Method and compositions for enhanced anti-tumor effector functioning of t cells
CN101348525B (zh) * 2008-08-28 2011-11-16 南京医科大学 抗血吸虫单克隆抗体np11-4单链抗体及其制备方法、应用
WO2010085660A2 (en) * 2009-01-23 2010-07-29 Roger Williams Hospital Viral vectors encoding multiple highly homologous non-viral polypeptides and the use of same
AU2010301042B2 (en) 2009-10-01 2014-03-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 chimeric antigen receptors and use of same for the treatment of cancer
WO2011059836A2 (en) 2009-10-29 2011-05-19 Trustees Of Dartmouth College T cell receptor-deficient t cell compositions
WO2012033885A1 (en) 2010-09-08 2012-03-15 Baylor College Of Medicine Immunotherapy of cancer using genetically engineered gd2-specific t cells
NZ609967A (en) 2010-10-27 2015-04-24 Baylor College Medicine Chimeric cd27 receptors for redirecting t cells to cd70-positive malignancies
PH12013501201A1 (en) * 2010-12-09 2013-07-29 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
US9233125B2 (en) 2010-12-14 2016-01-12 University Of Maryland, Baltimore Universal anti-tag chimeric antigen receptor-expressing T cells and methods of treating cancer
WO2012127464A2 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Gavish-Galilee Bio Applications Ltd Constitutively activated t cells for use in adoptive cell therapy
SG193956A1 (en) 2011-04-01 2013-11-29 Sloan Kettering Inst Cancer T cell receptor-like antibodies specific for a wt1 peptide presented by hla-a2
JP6066991B2 (ja) 2011-04-08 2017-01-25 ベイラー カレッジ オブ メディスンＢａｙｌｏｒ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ キメラサイトカイン受容体を用いて、腫瘍微小環境の影響を逆転する方法
US20130071414A1 (en) 2011-04-27 2013-03-21 Gianpietro Dotti Engineered cd19-specific t lymphocytes that coexpress il-15 and an inducible caspase-9 based suicide gene for the treatment of b-cell malignancies
US9833476B2 (en) 2011-08-31 2017-12-05 The Trustees Of Dartmouth College NKP30 receptor targeted therapeutics
WO2013040371A2 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Baylor College Of Medicine Targeting the tumor microenvironment using manipulated nkt cells
CN103946242A (zh) 2011-10-20 2014-07-23 美国卫生和人力服务部 抗cd22嵌合抗原受体

Also Published As

Publication number Publication date
US20130287748A1 (en) 2013-10-31
BR112013014265B8 (pt) 2023-12-19
AU2017203087A1 (en) 2017-06-08
IL226694B (en) 2020-10-29
US9499629B2 (en) 2016-11-22
JP6293194B2 (ja) 2018-03-14
LUC00104I1 (sr) 2019-02-21
JP2018029594A (ja) 2018-03-01
CN106220739A (zh) 2016-12-14
LTC2649086I2 (lt) 2020-12-28
US8916381B1 (en) 2014-12-23
EP3660029A1 (en) 2020-06-03
ES2641870T3 (es) 2017-11-14
AU2017203087B2 (en) 2019-06-20
US9481728B2 (en) 2016-11-01
US20160130355A1 (en) 2016-05-12
DK2649086T3 (en) 2017-09-18
CN103492406B (zh) 2022-07-26
HUE042207T2 (hu) 2019-06-28
US20170283775A1 (en) 2017-10-05
MX347078B (es) 2017-04-10
US20150099299A1 (en) 2015-04-09
ZA201304470B (en) 2014-08-27
KR20210059762A (ko) 2021-05-25
WO2012079000A1 (en) 2012-06-14
LUC00104I2 (sr) 2019-12-27
CO6801633A2 (es) 2013-11-29
US8906682B2 (en) 2014-12-09
AU2022201895A1 (en) 2022-04-07
JP2016174607A (ja) 2016-10-06
DK3214091T3 (en) 2019-01-07
NL300967I1 (nl) 2019-02-20
US9328156B2 (en) 2016-05-03
US9540445B2 (en) 2017-01-10
AU2011338200A1 (en) 2013-07-04
JP2024056708A (ja) 2024-04-23
US20140106449A1 (en) 2014-04-17
CY1119760T1 (el) 2018-06-27
MA34813B1 (fr) 2014-01-02
US20180258391A1 (en) 2018-09-13
MX2020005143A (es) 2020-08-17
AU2020200767C1 (en) 2025-04-24
NI201300051A (es) 2014-01-07
MY169644A (en) 2019-04-24
LT2649086T (lt) 2017-11-10
LTPA2019503I1 (lt) 2019-03-12
CN110452882A (zh) 2019-11-15
MX2013006570A (es) 2013-08-26
MX385933B (es) 2025-03-18
SI2649086T1 (en) 2018-01-31
BR112013014265A8 (pt) 2018-04-17
PL3214091T3 (pl) 2019-03-29
AU2020200767A1 (en) 2020-02-27
US20150118202A1 (en) 2015-04-30
EP2649086B1 (en) 2017-07-19
US9102760B2 (en) 2015-08-11
AU2017225161C1 (en) 2021-07-29
ES2700966T3 (es) 2019-02-20
LTPA2019502I1 (lt) 2019-03-12
EA201390847A1 (ru) 2013-12-30
CA2820681C (en) 2018-10-23
EP2649086A4 (en) 2014-12-31
JP2014507118A (ja) 2014-03-27
LT3214091T (lt) 2018-12-10
KR20200014343A (ko) 2020-02-10
HUS1900006I1 (hu) 2019-04-29
EA201790175A1 (ru) 2017-09-29
WO2012079000A4 (en) 2012-08-23
NO2019006I1 (no) 2019-02-15
CY2019007I2 (el) 2019-11-27
CN108103085A (zh) 2018-06-01
US9101584B2 (en) 2015-08-11
AU2011338200B2 (en) 2017-02-23
CN103492406A (zh) 2014-01-01
SI3214091T1 (sl) 2019-02-28
US20140370017A1 (en) 2014-12-18
HK1253052A1 (en) 2019-06-06
JP2020022456A (ja) 2020-02-13
BR122021026169B1 (pt) 2023-12-12
US20150093822A1 (en) 2015-04-02
PH12013501201A1 (en) 2013-07-29
KR102417796B1 (ko) 2022-07-07
ECSP13012739A (es) 2013-10-31
KR102243575B9 (ko) 2023-05-24
HK1243082B (en) 2019-09-13
US20160208012A1 (en) 2016-07-21
EA035484B1 (ru) 2020-06-23
CA2820681A1 (en) 2012-06-14
CN108103085B (zh) 2024-10-08
JP6943933B2 (ja) 2021-10-06
NZ612512A (en) 2015-03-27
EP3214091A1 (en) 2017-09-06
RS56453B1 (sr) 2018-01-31
KR102243575B1 (ko) 2021-04-22
KR20130124521A (ko) 2013-11-14
EP2649086A1 (en) 2013-10-16
US20130288368A1 (en) 2013-10-31
AP2013006918A0 (en) 2013-06-30
NO2019007I1 (no) 2019-02-15
PT2649086T (pt) 2017-10-19
TR201820015T4 (tr) 2019-01-21
US20150050729A1 (en) 2015-02-19
EP3214091B1 (en) 2018-10-03
NL300967I2 (nl) 2019-08-20
PL2649086T3 (pl) 2018-03-30
BR112013014265B1 (pt) 2023-05-16
US9464140B2 (en) 2016-10-11
GT201300150A (es) 2014-06-10
KR102062407B1 (ko) 2020-01-03
JP2018029595A (ja) 2018-03-01
PE20140178A1 (es) 2014-02-20
BR122021026173B1 (pt) 2023-12-05
HUS1900007I1 (hu) 2019-04-29
KR20230133410A (ko) 2023-09-19
KR20220101745A (ko) 2022-07-19
KR102417796B9 (ko) 2024-03-06
US20130309258A1 (en) 2013-11-21
JP6588060B2 (ja) 2019-10-09
FR19C1006I1 (sr) 2019-04-05
SG10201510092QA (en) 2016-01-28
US9518123B2 (en) 2016-12-13
US20160194404A1 (en) 2016-07-07
CY2019007I1 (el) 2019-11-27
HRP20182202T1 (hr) 2019-03-08
HUE036872T2 (hu) 2018-08-28
FR19C1006I2 (fr) 2020-03-20
CR20130269A (es) 2013-09-03
MY191313A (en) 2022-06-15
HRP20171577T1 (hr) 2017-12-01
AU2020200767B2 (en) 2021-12-23
DOP2013000128A (es) 2014-03-16
JP2022002516A (ja) 2022-01-11
JP5947311B2 (ja) 2016-07-06
KR20250175001A (ko) 2025-12-15
AU2017225161A1 (en) 2017-11-09
AU2017225161B2 (en) 2019-11-21
JP6588514B2 (ja) 2019-10-09
US20160159907A1 (en) 2016-06-09
PT3214091T (pt) 2019-01-11
CL2013001645A1 (es) 2014-02-14
EA027153B1 (ru) 2017-06-30
JP7426361B2 (ja) 2024-02-01
CN107699585A (zh) 2018-02-16
EP3305798A1 (en) 2018-04-11
US8975071B1 (en) 2015-03-10
US8911993B2 (en) 2014-12-16
SG190997A1 (en) 2013-07-31
CY2019008I1 (el) 2019-11-27
US9102761B2 (en) 2015-08-11
BR112013014265A2 (pt) 2017-12-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9464140B2 (en) Compositions and methods for treatment of cancer
HK1243082A1 (en) Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
HK40025282A (en) Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
HK1185083B (en) Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
HK1185083A (en) Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
OA16447A (en) Use of chimeric antigen receptor-modified Tcells to treat cancer.