RU2018121514A

RU2018121514A - Улучшенная клеточная композиция и способы ее получения

Info

Publication number: RU2018121514A
Application number: RU2018121514A
Authority: RU
Inventors: Энди ЗЕЙТЛИН; Грегори РУССОТТИ; Шуян ХЭ; Аджай ПАЛ; Хун Цз. ЧЭНЬ; Томас БРИВА; Райан ШОРР; Брайан Мерфи
Original assignee: Антродженезис Корпорейшн
Priority date: 2008-08-20
Filing date: 2018-06-13
Publication date: 2019-12-13
Also published as: KR20170023194A; MX2011001990A; ZA201101210B; EP3539380A3; US20190261623A1; IL252119B; IL211272A0; CA2734236A1; IL252119A0; IL267138B2; MX339624B; AU2009283216B2; EP3172963B1; KR20240052847A; DK2330889T3; CN102186338A; KR20230080502A; KR20180049231A; US10104880B2; AU2013203191B2

Claims

1. Способ получения композиции, содержащей клетки, который включает:

(а) контактирование указанных клеток с раствором, включающим декстран и сывороточный альбумин человека (HSA), для получения раствора, содержащего клетки;

(b) фильтрацию раствора, содержащего клетки;

(с) если указанный раствор, содержащий клетки, включает более примерно 10±3・10⁶ клеток на миллилитр, разбавление указанных клеток до содержания не более примерно 10±3・10⁶ клеток на миллилитр раствором первого разбавления, включающим декстран; и

(d) необязательно разбавление раствора, содержащего клетки, раствором второго разбавления, содержащим декстран, но не содержащим HSA, с получением композиции, содержащей клетки.

2. Способ по п.1, где указанные клетки подвергаются криоконсервации после стадии (с) перед стадией (d).

3. Способ по п.1, где указанный декстран в указанном растворе первого разбавления или указанном растворе второго разбавления представляет собой декстран 40.

4. Способ по п.1, где указанный декстран в указанном растворе первого разбавления и указанном растворе второго разбавления представляет собой декстран 40.

5. Способ по п.1, где указанный декстран в указанном растворе первого разбавления представляет собой 5,5% декстрана 40.

6. Способ по п.1, где указанный HSA в указанном растворе, включающем HSA, представляет собой 10% HSA.

7. Способ по п.1, где указанный раствор первого разбавления включает HSA.

8. Способ по п.7, где указанный HSA в указанном растворе первого разбавления представляет собой 10% HSA.

9. Способ по п.1, где указанный раствор первого разбавления включает криопротектор.

10. Способ по п.9, где указанный криопротектор представляет собой ДМСО.

11. Способ по п.1, где указанный декстран 40 в указанном растворе второго разбавления представляет собой 10% декстрана 40.

12. Способ по п.1, где указанный раствор на стадии (а) включает криопротектор.

13. Способ по п.1, где указанная композиция, содержащая клетки, включает от примерно 7,5% до примерно 9% декстрана.

14. Способ по п.1, где указанная композиция, содержащая клетки, включает от примерно 1,0±3・10⁶ клеток на миллилитр до примерно 5,0±1,5・10⁶ клеток на миллилитр.

15. Способ по п.1, где указанные клетки представляют собой плацентарные клетки.

16. Способ по п.15, где указанные стволовые клетки представляют собой изолированные адгезивные плацентарные клетки человека.

17. Способ получения композиции, содержащей клетки, который включает:

суспендирование множества изолированных адгезивных плацентарных клеток человека в растворе, включающем 5,5% декстрана 40, 10% HSA, для получения раствора, содержащего клетки;

фильтрацию раствора, содержащего клетки, через 70 мкм фильтр;

(с) разбавление раствора, содержащего клетки, раствором, содержащим 5,5% декстрана 40, 10% HSA и 5% ДМСО, до содержания не более примерно 10±3・10⁶ клеток/мл;

криоконсервацию клеток;

(е) оттаивание клеток; и

(f) необязательно разбавление раствора, содержащего клетки, в соотношении от 1:1 до 1:11 10% декстраном 40 для получения указанной композиции, включающей клетки.

18. Способ получения композиции, содержащей клетки, который включает:

(а) центрифугирование множества изолированных адгезивных плацентарных клеток человека для сбора клеток;

(b) суспендирование клеток в 5,5% декстране 40;

(с) центрифугирование клеток для сбора клеток;

(d) повторное суспендирование клеток в 5,5% растворе декстрана 40, который включает 10% HSA, для получения раствора, содержащего клетки;

(е) фильтрацию раствора, содержащего клетки, через 70 мкм – 100 мкм фильтр;

(f) разбавление раствора, содержащего клетки, в растворе, включающем 5,5% декстрана 40, 10% HSA и 5% ДМСО, до содержания не более примерно 10±3・10⁶ клеток/мл;

(g) криоконсервацию клеток;

(h) оттаивание клеток;

необязательно разбавление раствора, содержащего клетки, в соотношении от 1:1 до 1:11 10% декстраном 40 для получения композиции, включающей клетки.

19. Способ получения композиции, содержащей изолированные адгезивные плацентарные клетки человека, который включает:

(а) получение множества изолированных адгезивных плацентарных клеток человека в растворе, включающем 5,5% декстрана 40 и 10% сывороточного альбумина человека (HSA), для получения раствора, включающего изолированные адгезивные плацентарные клетки человека;

(b) фильтрацию указанного раствора, включающего изолированные адгезивные плацентарные клетки человека через фильтр, который удаляет различимые невооруженным глазом клеточные скопления, для получения отфильтрованных изолированных адгезивных плацентарных клеток человека;

(с) разбавление указанных отфильтрованных изолированных адгезивных плацентарных клеток человека количеством раствора, включающего 5,5% декстрана 40, 10% HSA и 5% диметилсульфоксида (ДМСО), достаточным для достижения содержания указанных отфильтрованных изолированных адгезивных плацентарных клеток человека примерно 10±3・10⁶ клеток на миллилитр;

(d) разбавление указанных изолированных адгезивных планетарных клеток человека в соотношении от 1:1 до 1:11 изолированные адгезивные плацентарные клетки человека:декстран 40 для получения указанной композиции.

20. Способ по п.1, где указанный фильтр представляет собой 70 мкм фильтр.

21. Способ по п.1, где указанный фильтр представляет собой 100 мкм фильтр.

22. Способ по любому из пп.1, 6, 7 или 8, где указанные клетки представляют собой изолированные адгезивные плацентарные клетки человека.

23. Способ по п.22, где указанные изолированные адгезивные плацентарные клетки человека представляют собой CD10⁺, CD34^- и CD105⁺.

24. Способ по п.23, где указанные CD10⁺, CD34^- и CD105⁺клетки представляют собой CD200⁺.

25. Способ по п.24, где указанные CD10⁺, CD34^-, CD105⁺ и CD200⁺ клетки представляют собой CD45^- или CD90⁺.

26. Способ по п.25, где указанные CD10⁺, CD34^-, CD105⁺, CD200⁺ клетки представляют собой CD45^- и CD90⁺.

27. Композиция, полученная способом по любому из пп.1, 6, 7 или 8.

28. Способ получения композиции, содержащей изолированные адгезивные плацентарные клетки человека, который включает контактирование указанных изолированных адгезивных плацентарных клеток человека с раствором, включающим 5,5% декстрана и 10% HSA; фильтрацию изолированных адгезивных плацентарных клеток человека; и разбавление указанных изолированных адгезивных плацентарных клеток человека до содержания примерно 10±3・10⁶ клеток на миллилитр раствором, включающим 10% декстрана 40 (масс/об).

29. Композиция, содержащая множество изолированных адгезивных плацентарных клеток человека в растворе, включающем 10% декстрана 40, где указанная композиция включает от примерно 1,0±0,3・10⁶ клеток на миллилитр до примерно 5,0±1,5・10⁶клеток на миллилитр, и где указанная композиция не содержит макроскоплений клеток.

30. Композиция по п.29, где указанные плацентарные стволовые клетки представляют собой оттаянные криоконсервированные клетки.

31. Композиция по п.29, где указанная композиция помещена в пакет (мешок).

32. Композиция по п.29, где указанная композиция не включает макроскоплений клеток.

33. Композиция по п.29, где указанная композиция включает менее примерно 200 микроскоплений клеток на 10⁶ клеток.

34. Композиция по п.29, где указанная композиция включает менее примерно 150 микро-скоплений клеток на 10⁶ клеток.

35. Композиция по п.29, где указанная композиция включает менее примерно 100 микро-скоплений клеток на 10⁶ клеток.

36. Композиция по п.29, где указанные изолированные адгезивные плацентарные клетки человека представляют собой СD10⁺, CD34^- и СD105⁺.

37. Композиция по п.36, где указанные CD10⁺, CD34^- и CD105⁺ клетки представляют собой CD200⁺.

38. Композиция по п.37, где указанные CD10⁺, CD34^-, CD105⁺ и CD200⁺ клетки представляют собой CD45^- или CD90⁺.

39. Композиция по п.37, где указанные CD10⁺, CD34^-, CD105⁺ и CD200⁺ представляют собой CD45^- и CD90⁺.

40. Композиция по любому из пп.27, 29-39, где указанная композиция представляет собой фармацевтическую композицию.

41. Способ по п.1 или п.14, дополнительно включающий концентрирование композиции, включающей клетки, до примерно от 5・10⁶ клеток на миллилитр до 1・10⁸ клеток на миллилитр.

42. Способ по п.41, дополнительно включающий подкожное введение пациенту композиции, содержащей клетки.