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TW201836626A - 包含植物萃取物的組成物及其減少脂肪之用途 - Google Patents

包含植物萃取物的組成物及其減少脂肪之用途 Download PDF

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TW201836626A
TW201836626A TW107111688A TW107111688A TW201836626A TW 201836626 A TW201836626 A TW 201836626A TW 107111688 A TW107111688 A TW 107111688A TW 107111688 A TW107111688 A TW 107111688A TW 201836626 A TW201836626 A TW 201836626A
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陳怡卉
甘愷雯
劉復誠
陳巧婷
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大江生醫股份有限公司
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Abstract

本發明係關於一種用於減少脂肪生成細胞內脂肪含量的包含植物萃取物的組成物。該組成物係由紅茶、綠茶、普洱茶、四季春茶、紅酒、青咖啡豆、藍莓、柑橘、菠菜、青花菜苗、紅花苜蓿、蘆薈、迷迭香、大蒜、胡椒、薑黃、枸杞、或人蔘的萃取物組合所組成。該組成物亦由前述植物萃取物與蘋果多酚、β胡蘿蔔素、或茄紅素所組成。該組成物具有降低肥胖相關疾病發生率的潛力。

Description

包含植物萃取物的組成物及其減少脂肪之用途
本發明係關於一種包含植物萃取物的組成物及其用途，特別係關於一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量之組成物及其用途。
高油脂與高糖分的飲食方式及運動量不足使多數現代人面臨肥胖問題，並且因為肥胖有較高機率罹患代謝相關疾病，例如糖尿病、高血脂症、高血壓、心血管疾病、脂肪肝等，最終令身體健康受到嚴重威脅。亦有研究顯示肥胖是重要的致癌因子。此外，肥胖者較容易出現心理問題與遭遇社交障礙。因此，近年來許多醫學研究皆著重於尋求抑制肥胖的方法，試圖以此方式減少前述代謝疾病的發生。
抑制肥胖的方法包括飲食控制、運動、改變生活型態、藥物治療、及手術。除了嚴重肥胖的患者需要手術，一般大眾多採飲食控制與運動的方式減重，因為現代人出於工作繁忙不易改變生活型態，又出於崇尚自然療法而不願意使用非必要的藥物。然而，飲食控制嚴格要求個人的飲食均衡與熱量攝取，不適當的運動方式甚至會造成身體損傷。此外，這二種方法對減重的效果有限，因為它們並非直接針對脂肪細胞，特別是內臟中的脂肪組織。
有鑑於此，開發一種便於大眾使用又能有效減少脂肪細胞內脂肪含量的組成物，以預防肥胖及降低前述多種代謝疾病發生的可能性，實有其必要。
緣此，本發明之一目的在提供一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量的組成物，係由選自由藍莓萃取物與紅茶萃取物、藍莓萃取物與綠茶萃取物、 紅酒萃取物與紅茶萃取物、紅酒萃取物與綠茶萃取物、紅酒萃取物與普洱茶萃取物、紅酒萃取物與四季春茶萃取物、紅酒萃取物與柑橘萃取物、紅酒萃取物與菠菜萃取物、紅酒萃取物與青咖啡豆萃取物、柑橘萃取物與青花菜苗萃取物、柑橘萃取物與紅花苜蓿萃取物、柑橘萃取物與蘆薈萃取物、柑橘萃取物與迷迭香萃取物、柑橘萃取物與大蒜萃取物、柑橘萃取物與胡椒萃取物、柑橘萃取物與薑黃萃取物、柑橘萃取物與枸杞萃取物、柑橘萃取物與人蔘萃取物、柑橘萃取物與蘋果多酚、柑橘萃取物與β胡蘿蔔素、柑橘萃取物與茄紅素、菠菜萃取物與紅花苜蓿萃取物、菠菜萃取物與迷迭香萃取物、菠菜萃取物與大蒜萃取物、菠菜萃取物與薑黃萃取物、菠菜萃取物與枸杞萃取物、菠菜萃取物與人蔘萃取物、菠菜萃取物與蘋果多酚、及菠菜萃取物與β胡蘿蔔素所組成群組中任一組合所組成。
在本發明之一實施例中，該包含藍莓萃取物之組成物係由至少0.0625mg/ml之藍莓萃取物，及至少0.0625mg/ml之紅茶萃取物或綠茶萃取物所組成。
在本發明之一實施例中，該包含紅酒萃取物之組成物係由至少0.0625mg/ml之紅酒萃取物，及至少0.0625mg/ml之紅茶萃取物、綠茶萃取物、普洱茶萃取物、四季春茶萃取物、柑橘萃取物、菠菜萃取物、或青咖啡豆萃取物所組成。
在本發明之一實施例中，該包含柑橘萃取物之組成物係由下列任一組合所組成：至少0.015625mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.015625mg/ml之蘋果多酚或茄紅素；至少0.0625mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.0625mg/ml之迷迭香萃取物；至少0.125mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.125mg/ml之青花菜苗萃取物、薑黃萃取物、或人蔘萃取物；至少0.5mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.5mg/ml之紅花苜蓿萃取物、胡椒萃取物、或β胡蘿蔔素；或至少1mg/ml之柑橘萃取物，及至少1mg/ml之蘆薈萃取物、大蒜萃取物、或枸杞萃取物。
在本發明之一實施例中，該包含菠菜萃取物之組成物係由下列任一組合所組成：至少0.015625mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.015625mg/ml之蘋果多酚；至少0.0625mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.0625mg/ml之迷迭香萃取物；至少0.125mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.125mg/ml之薑黃萃取物或人蔘萃取 物；至少0.5mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.5mg/ml之紅花苜蓿萃取物或β胡蘿蔔素；或至少1mg/ml之菠菜萃取物，及至少1mg/ml之大蒜萃取物或枸杞萃取物。
本發明之另一目的在提供一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量之醫藥組成物，包含前述任一種組成物，及一藥學上可接受之載劑。
在本發明之一實施例中，前述醫藥組成物之劑型可為溶液、粉末、膠囊、或錠劑。
本發明之又一目的在提供前述任一種組成物用於減少脂肪生成細胞內脂肪含量之用途，或者前述任一種組成物用於製備減少脂肪生成細胞內脂肪含量之醫藥組成物。
本發明之組成物藉由混合特定植物萃取物或混合特定植物萃取物與源自植物的化合物，大幅減少脂肪生成細胞內的脂肪含量，因此具備降低體脂肪及預防肥胖相關疾病發生的潛力。換言之，對一個體施予有效量之本發明組成物能減少該個體的脂肪量。故，本發明之組成物可用於製備減少脂肪生成細胞內脂肪含量的醫藥組成物。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明之發明特點及應用，而非以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1顯示本發明一實施例中不同組成物對脂肪細胞之相對脂肪含量的影響。
圖2顯示本發明一實施例中不同組成物對脂肪細胞之相對脂肪含量的影響。
定義
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在20%的範圍內，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。
本文中所謂「脂肪生成細胞」指具有合成及儲存中性脂肪(neutral fat)功能的任何哺乳動物細胞，包括已分化的成熟脂肪細胞及新生的脂肪細胞。
本文中所謂「藥學上可接受之載劑」指一種或多種固態或液態的介質，其對哺乳動物不具毒性且不影響一組成物中活性成分的生物活性。
本發明提供一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量的組成物，係由複數種植物萃取物或植物萃取物與源自植物的化合物所組成。該組成物藉由混合紅茶、綠茶、普洱茶、四季春茶、紅酒、青咖啡豆、藍莓、柑橘、菠菜、青花菜(Brassica oleracea var.italica)苗、紅花苜蓿、蘆薈、迷迭香、大蒜、胡椒、薑黃、枸杞、或人蔘的萃取物，或混合前述植物萃取物與蘋果多酚、β胡蘿蔔素、或茄紅素而製得。以下實施例中揭露該組成物能大幅減少脂肪生成細胞內的脂肪含量。
材料與方法 材料
DMEM培養基(Dulbecco's modified Eagle’s medium)，胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)，青黴素/鏈黴素(penicillin/streptomycin)，及磷酸緩衝鹽溶液(phosphate buffered saline，PBS)係自Gibco購買。油紅O(oil-red O)係自Sigma購買。甲醛(formaldehyde)及異丙醇(isopropanol)係自Echo chemical購買。蘋果多酚(apple polyphenols)係自佶旺有限公司購買。β胡蘿蔔素(beta carotene)係自鉅研貿易有限公司購買。茄紅素(lycopene)係自湖南朗林生物資源股份有限公司購買。
油紅O染色及定量分析
細胞中的中性脂肪含量係以油紅O染色定量。染色前，使用PBS溶液清洗細胞2次，再以10%甲醛於室溫固定細胞30分鐘。該固定的細胞經PBS溶液清洗2次後，以60%異丙醇處理1分鐘。其後，在室溫下以油紅O染劑(1.8mg/ml油紅O溶於60%異丙醇水溶液)對細胞染色1小時，再以60%異丙醇處理細胞5秒以移除多餘染劑。最終，將100%異丙醇添加至染色後細胞並震盪反應10分鐘以溶解細胞內染劑，使用ELISA讀盤機(enzyme-linked immunosorbent assay reader；BioTek)測量該細胞混合物在510nm的吸光值。統計上顯著差異係以Excel軟體之學生t檢定判定。
實施例1 植物萃取物之製備 實施例1-1 紅茶萃取物
本實施例舉例說明紅茶(black tea)萃取物之製備方法。首先，將紅茶茶葉(fermented leaves of Camellia sinensis)洗淨及乾燥，以粉碎機將茶葉粗碎。其次，以水為溶劑對紅茶粗碎物進行萃取，該溶劑與紅茶粗碎物依液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為介於50℃~100℃，較佳為75℃~95℃。萃取時間約為0.5~3小時。經該萃取步驟所得紅茶萃取物冷卻至室溫後，經由400目(mesh)之濾網過濾以移除殘餘固體物。該過濾後的紅茶萃取物可進一步在45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物。
實施例1-2 綠茶萃取物
本實施例舉例說明綠茶(green tea)萃取物之製備方法。首先，將綠茶茶葉(unfermented leaves of Camellia sinensis)洗淨及乾燥，以粉碎機將茶葉粗碎。其次，以水為溶劑對綠茶粗碎物進行萃取，該溶劑與綠茶粗碎物依液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為介於50℃~100℃，較佳為75℃~95℃。萃取時間約為0.5~3小時。經該萃取步驟所得綠茶萃取物冷卻至室溫後，經由400目之濾網過濾以移除殘餘固體物。該過濾後的綠茶萃取物可進一步在45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物。
實施例1-3 普洱茶萃取物
普洱茶(Puerh tea)萃取物係對普洱茶茶葉(post-fermented leaves of Camellia sinensis)進行萃取而獲得，該萃取物可購自南京澤朗生物科技有限公司。
實施例1-4 四季春茶萃取物
本實施例舉例說明四季春茶(Four Seasons Spring tea)萃取物之製備方法。首先，將四季春茶茶葉(leaves of Four Seasons Spring tea plant)洗淨及乾燥，以粉碎機將茶葉粗碎。其次，以水為溶劑對四季春茶粗碎物進行萃取，該溶劑與四季春茶粗碎物依液固比5~20：1~5均勻混合，萃取溫度為介於50℃~100℃，較佳為75℃~95℃。萃取時間約為0.5~3小時。經該萃取步驟所得四季春茶萃取物冷卻至室溫後，經由400目之濾網過濾以移除殘餘固體物。該過濾後的四季春茶萃取物可進一步在45℃~70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物。
實施例1-5 紅酒萃取物
紅酒萃取物係對紅葡萄酒進行萃取而獲得，該萃取物可購自上海博優堂生物技術有限公司。
實施例1-6 青咖啡豆萃取物
青咖啡豆萃取物係對未經烘焙的咖啡屬植物(Coffea spp.)種子進行萃取而獲得，該萃取物可購自ARJUNA NATURAL EXTRACTS有限公司(印度)。
實施例1-7 藍莓萃取物
藍莓萃取物係對北美藍莓(Vaccinium Cyanococcus)果實進行萃取而獲得，該萃取物可購自元弘草本科研有限公司。
實施例1-8 柑橘萃取物
柑橘萃取物係對柑橘(Citrus reticulata)果實進行萃取而獲得，該萃取物可購自羅頓貿易有限公司。
實施例1-9 菠菜萃取物
菠菜萃取物係對菠菜(Spinacia oleracea)進行萃取而獲得，該萃取物可購自弘祥農產加工廠。
實施例1-9 青花菜苗萃取物
青花菜苗萃取物係對青花菜(Brassica oleracea var.italica)幼苗進行萃取而獲得，該萃取物可購自蝶理株式會社。
實施例1-10 紅花苜蓿萃取物
紅花苜蓿萃取物係對紅花苜蓿(Trifolium pretense)進行萃取而獲得，該萃取物可購自茂世興業有限公司。
實施例1-11 蘆薈萃取物
蘆薈萃取物係對蘆薈(Aloe vera)進行萃取而獲得，該萃取物可購自Ambe Phytoextracts私人有限公司(印度)。
實施例1-12 迷迭香萃取物
迷迭香萃取物係對迷迭香(Rosmarinus officinalis)進行萃取而獲得，該萃取物可購自佳景百草股份有限公司。
實施例1-13 大蒜萃取物
大蒜萃取物係對大蒜(Allium sativum)鱗莖進行萃取而獲得，該萃取物可購自長沙市惠瑞生物科技有限公司。
實施例1-14 胡椒萃取物
胡椒萃取物係對胡椒(Piper nigrum)果實進行萃取而獲得，該萃取物可購自茂世興業有限公司。
實施例1-15 薑黃萃取物
薑黃萃取物係對薑黃(Curcuma longa)根莖進行萃取而獲得，該萃取物可購自ARJUNA NATURAL EXTRACTS有限公司(印度)。
實施例1-16 枸杞萃取物
枸杞萃取物係對枸杞(Lycium chinense)果實進行萃取而獲得，該萃取物可購自湖南華康生物科技股份有限公司。
實施例1-17 人蔘萃取物
人蔘萃取物係對人蔘(Panax ginseng)根部進行萃取而獲得，該萃取物可購自湖南華誠生物資源有限公司。
實施例2 含植物萃取物之組成物降低脂肪細胞內的脂肪含量
為檢驗本發明之組成物對脂肪胜成細胞內脂肪儲存量的影響，利用油紅O染色分析由小鼠間質細胞株OP9(ATCC CRL-2749)分化而得的脂肪細胞經植物萃取物或其組合處理後，細胞內脂肪含量的變化。簡言之，將OP9細胞依8×104個細胞/孔接種於含有500μl前脂肪細胞擴充培養基(90% DMEM培養基，20% FBS，1%青黴素/鏈黴素)的24孔培養盤，在37℃下培養7天。細胞培養期間每隔3天更換培養基為脂肪細胞分化培養基(90% DMEM培養基，20% FBS，1%青黴素/鏈黴素)。7天後，以顯微鏡(ZEISS；放大倍率400x)觀察細胞內油滴形成以確認其完全分化為脂肪細胞。其後，將表1所列植物萃取物或含植物萃取物的組成物添加至細胞，於37℃下培養7-10天，期間每隔3天更換脂肪細胞分化培養基。最終，移除培養基並以PBS溶液清洗細胞，以進行油紅O染色及測定各組細胞之相對脂肪含量。該相對脂肪含量係相對於控制組細胞的脂肪含量的比值(以百分比表示)，而控制組的脂肪細胞係依類似方式但以不含植物萃取物的脂肪細胞分化培養基處理。
表1顯示脂肪細胞在不同處理後的相對脂肪含量；圖1及圖2是對應表1所列數值的長條圖。依據表1及圖1，相對於控制組，紅酒萃取物、四季春茶萃取物、柑橘萃取物、菠菜萃取物、青咖啡豆萃取物、藍莓萃取物、人蔘萃取物、枸杞萃取物、大蒜萃取物、蘆薈萃取物、胡椒萃取物、或β胡蘿蔔素之單獨處理無法顯著減少脂肪細胞內的脂肪含量，其中有些處理甚至會顯著提高脂肪含量，例如藍莓萃取物、柑橘萃取物、菠菜萃取物(參見比較組)。此外，紅茶 萃取物、綠茶萃取物、普洱茶萃取物、薑黃萃取物、或蘋果多酚之單獨處理僅能使相對脂肪含量略為下降至約90%以上。
然而，藍莓萃取物與紅茶萃取物或綠茶萃取物的組合明顯降低脂肪細胞的相對脂肪含量至分別為67.50%及70.9%(參見實驗組)。同樣地，紅酒萃取物與紅茶萃取物、綠茶萃取物、普洱茶萃取物、四季春茶萃取物、柑橘萃取物、菠菜萃取物、或青咖啡豆萃取物的組合亦明顯降低脂肪細胞的脂肪含量。此外，柑橘萃取物與薑黃萃取物、青花菜苗萃取物、人蔘萃取物、枸杞萃取物、大蒜萃取物、紅花苜蓿萃取物、蘆薈萃取物、迷迭香萃取物、胡椒萃取物、蘋果多酚、β胡蘿蔔素、或茄紅素的組合亦造成明顯較低的脂肪含量。再者，菠菜萃取物與薑黃萃取物、人蔘萃取物、枸杞萃取物、大蒜萃取物、紅花苜蓿萃取物、迷迭香萃取物、蘋果多酚、或β胡蘿蔔素的組合亦明顯降低脂肪細胞的脂肪含量。具有上列特定組合的組成物皆意外地較單一組分簡單相加表現出更高的降脂能力。
綜上所述，本發明之組成物藉由混合特定植物萃取物或混合特定植物萃取物與源自植物的化合物，大幅減少脂肪生成細胞內的脂肪含量，因此具備降低體脂肪及預防肥胖相關疾病發生的潛力。故，本發明之組成物可連同藥學上可接受之載劑用於製備減少脂肪生成細胞內脂肪含量的醫藥組成物。該醫藥組成物之劑型，可為但不限於溶液、粉末、膠囊、或錠劑。

Claims (9)

  1. 一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量的組成物，係由選自由藍莓萃取物與紅茶萃取物、藍莓萃取物與綠茶萃取物、紅酒萃取物與紅茶萃取物、紅酒萃取物與綠茶萃取物、紅酒萃取物與普洱茶萃取物、紅酒萃取物與四季春茶萃取物、紅酒萃取物與柑橘萃取物、紅酒萃取物與菠菜萃取物、紅酒萃取物與青咖啡豆萃取物、柑橘萃取物與青花菜苗萃取物、柑橘萃取物與紅花苜蓿萃取物、柑橘萃取物與蘆薈萃取物、柑橘萃取物與迷迭香萃取物、柑橘萃取物與大蒜萃取物、柑橘萃取物與胡椒萃取物、柑橘萃取物與薑黃萃取物、柑橘萃取物與枸杞萃取物、柑橘萃取物與人蔘萃取物、柑橘萃取物與蘋果多酚、柑橘萃取物與β胡蘿蔔素、柑橘萃取物與茄紅素、菠菜萃取物與紅花苜蓿萃取物、菠菜萃取物與迷迭香萃取物、菠菜萃取物與大蒜萃取物、菠菜萃取物與薑黃萃取物、菠菜萃取物與枸杞萃取物、菠菜萃取物與人蔘萃取物、菠菜萃取物與蘋果多酚、及菠菜萃取物與β胡蘿蔔素所組成群組中任一組合所組成。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之組成物，係由至少0.0625mg/ml之藍莓萃取物，及至少0.0625mg/ml之紅茶萃取物或綠茶萃取物所組成。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之組成物，係由至少0.0625mg/ml之紅酒萃取物，及至少0.0625mg/ml之紅茶萃取物、綠茶萃取物、普洱茶萃取物、四季春茶萃取物、柑橘萃取物、菠菜萃取物、或青咖啡豆萃取物所組成。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之組成物，係由下列任一組合所組成：至少0.015625mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.015625mg/ml之蘋果多酚或茄紅素；至少0.0625mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.0625mg/ml之迷迭香萃取物；至少0.125mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.125mg/ml之青花菜苗萃取物、薑黃萃取物、或人蔘萃取物；至少0.5mg/ml之柑橘萃取物，及至少0.5mg/ml之紅花苜蓿萃取物、胡椒萃取物、或β胡蘿蔔素；或至少1mg/ml之柑橘萃取物，及至少1mg/ml之蘆薈萃取物、大蒜萃取物、或枸杞萃取物。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之組成物，係由下列任一組合所組成：至少0.015625mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.015625mg/ml之蘋果多酚；至少0.0625mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.0625mg/ml之迷迭香萃取物；至少0.125 mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.125mg/ml之薑黃萃取物或人蔘萃取物；至少0.5mg/ml之菠菜萃取物，及至少0.5mg/ml之紅花苜蓿萃取物或β胡蘿蔔素；或至少1mg/ml之菠菜萃取物，及至少1mg/ml之大蒜萃取物或枸杞萃取物。
  6. 一種減少脂肪生成細胞內脂肪含量之醫藥組成物，包含如申請專利範圍第1項至第5項中任一項所述之組成物，及一藥學上可接受之載劑。
  7. 如申請專利範圍第6項所述之醫藥組成物，其具有溶液、粉末、膠囊、或錠劑之劑型。
  8. 一種如申請專利範圍第1項至第5項中任一項所述之組成物的用途，係用於減少脂肪生成細胞內脂肪含量。
  9. 一種如申請專利範圍第1項至第5項中任一項所述之組成物的用途，係用於製備減少脂肪含量之醫藥組成物。
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