RU2012112550A

RU2012112550A - Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение

Info

Publication number: RU2012112550A
Application number: RU2012112550/10A
Authority: RU
Inventors: Тарик ГХАЮР; Цзюньцзян ЛЮ; Шармила МАНОДЖ; Сьюзан Э. БРОУФИ
Original assignee: Эбботт Лэборетриз
Priority date: 2009-09-01
Filing date: 2010-09-01
Publication date: 2013-10-10
Also published as: IN2012DN02737A; DOP2012000055A; CA2772628A1; US20140134171A1; JP2013503607A; GT201200058A; EP2473524A4; EP2473524A2; WO2011028811A2; SG178602A1; AU2010289527C1; UY32870A; AR078254A1; TW201119673A; NZ598929A; ECSP12011730A; US20110091372A1; CN102612524A; CO6511254A2; KR20120060877A

Abstract

1. Связывающийся белок, способный связывать, по меньшей мере, одну цель, включающийa) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи;С представляет собой константный домен тяжелой цепи;X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1;Х2 представляет собой Fc-область; иn равно 0 или 1;b) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-С-(Х2)n, гдеVD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи;С представляет собой константный домен легкой цепи;X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1;Х2 не содержит Fc-область; иn равно 0 или 1;c) первую и вторую полипептидные цепи, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, гдеVD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи;С представляет собой константный домен тяжелой цепи;X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1; иХ2 представляет собой Fc-область;n равно 0 или 1; игде указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи;С представляет собой константный домен легкой цепи;X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1; иХ2 не содержит Fc-область; иn равно 0 или 1; илиd) четыре полипептидные цепи, где две полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n

Claims

1. Связывающийся белок, способный связывать, по меньшей мере, одну цель, включающий

a) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;

VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи;

С представляет собой константный домен тяжелой цепи;

X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1;

Х2 представляет собой Fc-область; и

n равно 0 или 1;

b) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-С-(Х2)n, где

VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;

VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи;

С представляет собой константный домен легкой цепи;

Х2 не содержит Fc-область; и

n равно 0 или 1;

c) первую и вторую полипептидные цепи, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где

VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;

X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1; и

Х2 представляет собой Fc-область;

n равно 0 или 1; и

где указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;

Х2 не содержит Fc-область; и

n равно 0 или 1; или

d) четыре полипептидные цепи, где две полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;

Х2 представляет собой Fc-область;

n равно 0 или 1; и где две полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;

Х2 не содержит Fc-область;

n равно 0 или 1; и где указанный связывающийся белок связывает

a) МТХ; или

b) МТХ и mCD-3, МТХ и mCD-19, МТХ и CD-3, МТХ и CD-19, МТХ и CD-20, МТХ и EGFR, или МТХ и HER-2.

2. Связывающийся белок по п.1, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и/или где вариабельные домены легкой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

3. Связывающийся белок по п.1, где указанный связывающийся белок имеет

a) константу ассоциации (Kon) по отношению к, по меньшей мере, одной мишени, составляющую: по меньшей мере, примерно 10²М^-1c^-1; по меньшей мере, примерно 10³М^-1с^-1; по меньшей мере, примерно 10⁴М^-1с^-1; по меньшей мере, примерно 10⁵М^-1с^-1; или, по меньшей мере, примерно 10⁶ М^-1с^-1, как измерено методом поверхностного плазменного резонанса;

b) константу диссоциации (Koff) по отношению к, по меньшей мере, одной мишени, составляющую: примерно максимум 10^-3с^-1; примерно максимум 10^-4с^-1; примерно максимум 10^-5c^-1 или примерно максимум 10^-6 с^-1; как измерено методом поверхностного плазменного резонанса; и/или

c) константу диссоциации (K_D) по отношению к, по меньшей мере, одной мишени, составляющую примерно максимум 10^-7 М; примерно максимум 10^-8 М; примерно максимум 10^-9 М; примерно максимум 10^-10 М; примерно максимум 10^-11 М; примерно максимум 10^-12 М; или максимум 10^-13 М; как измерено методом поверхностного плазменного резонанса.

4. Связывающийся белок, способный связывать, по меньшей мере, одну цель, включающий

а) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи;

Х2 представляет собой Fc-область; и

n равно 0 или 1;

b) полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где

Х2 не содержит Fc-область; и

n равно 0 или 1;

c) первую и вторую полипептидные цепи, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где

Х2 представляет собой Fc-область;

n равно 0 или 1; и где указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи;

Х2 не содержит Fc-область; и

n равно 0 или 1; или

d) четыре полипептидные цепи, где две полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где

Х2 представляет собой Fc-область;

n равно 0 или 1; и

где две полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(Х2)n, где:

X1 представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1 ;

Х2 не содержит Fc-область;

n равно 0 или 1; и

где указанный связывающийся белок связывает МТХ, МТХ и mCD-3, МТХ и mCD-19, МТХ и CD-3, МТХ и CD-19, МТХ и CD-20, МТХ и EGFR или МТХ и HER-2, как методом сортировки флуоресцентно-активированных клеток (FACS).

5. Связывающийся белок по п. 4, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и/или где вариабельные домены легкой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

6. Связывающийся белок по п.1 или 4, где

a) (X1)n на тяжелой цепи и/или легкой цепи представляет собой (X1)0 и/или (Х2)n на тяжелой цепи и/или легкой цепи представляет собой (Х2)0;

b) X1 представляет собой, по меньшей мере, одну из SEQ ID NO:1-29 и/или основанную на G/S последовательность;

c) Fc-область представляет собой Fc-область с вариантной последовательностью;

d) Fc-область происходит из IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE или IgD;

e) связывающийся белок содержит две первые полипептидные цепи и две вторые полипептидные цепи;

f) VD1 связывается с первой мишенью с аффинностью и/или силой, отличающимися от аффиности и/или силы, с которыми VD2 связывается со второй мишенью; или

g) связывающийся белок представляет собой кристаллизованный связывающийся белок.

7. Связывающийся белок по п.1 или 4, который связывается с профилактическим или терапевтическим лекарственным средством, доставляемым в определенный участок, ткань или клетки организма.

8. Связывающийся белок по п. 7, где указанный связывающийся белок связывается с метотрексатом.

9. Связывающийся белок по п.1 или 4, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и где вариабельные домены легкой цепи VD1 и VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

10. Связывающийся белок по п.1 или 4, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и/или где вариабельные домены легкой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

11. Связывающийся белок по п.1 или 4, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и VD2, если присутствуют, содержат SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и где вариабельные домены легкой цепи VD1 и VD2, если присутствуют, содержат SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

12. Связывающийся белок по п.1 или 4, где связывающийся белок связывает

МТХ и mCD-3, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на mCD-3, содержит три CDR из SEQ ID NO:100, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на mCD-3, содержит три CDR из SEQ ID NO:101 соответственно;

МТХ и mCD-19, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на mCD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:102, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на mCD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:103 соответственно;

МТХ и CD-3, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на CD-3, содержит три CDR из SEQ ID NO:32 или 68 соответственно, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на CD-3, содержит три CDR из SEQ ID NO:33 или 69 соответственно;

МТХ и CD-19, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на CD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:40, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на CD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:41 соответственно;

МТХ и CD-20, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на CD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:30, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на CD-19, содержит три CDR из SEQ ID NO:31 соответственно;

МТХ и EGFR, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на EGFR, содержит три CDR из SEQ ID NO:34, 62 или 76 соответственно, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на EGFR, содержит три CDR из SEQ ID NO:35, 63 или 77 соответственно; или

МТХ и HER-2, где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:104, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на МТХ, содержит три CDR из SEQ ID NO:105 соответственно; и/или где вариабельный домен тяжелой цепи, нацеленный на HER-2, содержит три CDR из SEQ ID NO:36 или 98 соответственно, и/или вариабельный домен легкой цепи, нацеленный на HER-2, содержит три CDR из SEQ ID NO:37 или 99 соответственно.

13. Связывающийся белок по п.1 или 4, где (XI) между первым и вторым вариабельными доменами легкой цепи не является CL.

14. Связывающийся белок по п.1 или 4, где связывающийся белок представляет собой:

DVD1011 (содержащий SEQ ID NO:110 и 111); DVD1012 (содержащий SEQ ID NO:112 и 113); DVD1013 (содержащий SEQ ID NO:114 и 115); DVD1014 (содержащий SEQ ID NO:116 и 117); DVD1015 (содержащий SEQ ID NO:118 и 119); DVD1016 (содержащий SEQ ID NO:120 и 121); DVD1017 (содержащий SEQ ID NO:122 и 123); DVD1018 (содержащий SEQ ID NO:124 и 125); DVD1019 (содержащий SEQ ID NO:126 и 127); DVD1020 (содержащий SEQ ID NO:128 и 129); DVD1021 (содержащий SEQ ID NO:130 и 131); DVD1022 (содержащий SEQ ID NO:132 и 133); DVD1023 (содержащий SEQ ID NO:134 и 135); DVD1024 (содержащий SEQ ID NO:136 и 137); DVD1025 (содержащий SEQ ID NO:138 и 139); DVD1026 (содержащий SEQ ID NO:140 и 141); DVD1027 (содержащий SEQ ID NO:142 и 143); DVD1028 (содержащий SEQ ID NO:144 и 145); DVD1029 (содержащий SEQ ID NO:146 и 147); DVD1030 (содержащий SEQ ID NO:148 и 149); DVD1031 (содержащий SEQ ID NO:150 и 151); DVD1032 (содержащий SEQ ID NO:152 и 153); DVD1033 (содержащий SEQ ID NO:154 и 155); DVD1034 (содержащий SEQ ID NO:156 и 157); DVD1035 (содержащий SEQ ID NO:158 и 159); DVD1036 (содержащий SEQ ID NO:160 и 161); DVD1037 (содержащий SEQ ID NO:162 и 163); DVD1038 (содержащий SEQ ID NO:164 и 165); DVD1039 (содержащий SEQ ID NO:166 и 167); DVD1040 (содержащий SEQ ID NO:168 и 169); DVD1041 (содержащий SEQ ID NO:170 и 171); DVD1042 (содержащий SEQ ID NO:172 и 173); DVD1208 (содержащий SEQ ID NO:174 и 175); DVD1209 (содержащий SEQ ID NO:176 и 177); DVD1210 (содержащий SEQ ID NO:178 и 179); DVD1211 (содержащий SEQ ID NO:180 и 181); DVD1212 (содержащий SEQ ID NO:182 и 183); DVD1213 (содержащий SEQ ID NO:184 и 185); DVD1216 (содержащий SEQ ID NO:186 и 187); или DVD1217 (содержащий SEQ ID NO:188 и 189).

15. Связывающийся белок по п.1 или 4, где связывающийся белок представляет собой DVD1211, DVD1213 или DVD1217.

16. Связывающийся белок по п.1 или 4, где связывающийся белок нейтрализует МТХ с IC₅₀, составляющей максимум 4,0 нМ.

17. Связывающийся белок по п.1 или 4, где связывающийся белок способен связывать, по меньшей мере, одну мишень и, по меньшей мере, одну малую молекулу.

18. Конъюгат связывающегося белка, включающий связывающийся белок по п.1 или 4, где указанный конъюгат связывающегося белка дополнительно включает иммуноадгезивную молекулу, визуализирующий агент, терапевтическое средство или цитотоксическое средство;

a) где указанный визуализирующий агент представляет собой радиоактивную метку, фермент, флуоресцентную метку, люминесцентную метку, биолюминесцентную метку, магнитную метку или биотин;

где указанная радиоактивная метка представляет собой ³Н, ¹⁴С, ³⁵S, ⁹⁰Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁷⁷Lu, ¹⁶⁶Ho или ¹⁵³Sm;

b) где указанное терапевтическое или цитотоксическое средство представляет собой антиметаболит, алкилирующий агент, антибиотик, фактор роста, цитокин, антиангиогенный агент, антимитотическое средство, антрациклин, токсин или апоптотический агент.

19. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая аминокислотную последовательность связывающегося белка по п.1 или 4.

20. Вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по п.19, где указанный вектор выбран из группы, состоящей из pcDNA, рТТ, рТТЗ, pEFBOS, pBV, pJV, pcDNA3.1 TOPO, pEF6 TOPO, pHybeE и pBJ.

21. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.20, где указанная клетка-хозяин представляет собой прокариотическую клетку или эукариотическую клетку, где

a) указанная прокариотическая клетка представляет собой E.coli; или

b) указанная эукариотическая клетка представляет собой клетку протиста, клетку животного, клетку растения или клетку гриба; где

i) указанная клетка животного представляет собой клетку млекопитающего, клетку птицы или клетку насекомого; где

указанная клетка млекопитающего представляет собой клетку СНО или клетку COS;

указанная клетка насекомого представляет собой клетку Sf9; или

ii) указанная клетка гриба представляет собой дрожжевую клетку; где

указанная дрожжевая клетка представляет собой S.cerevisiae.

22. Способ получения связывающегося белка, включающий культивирование клетки-хозяина по п.21 в культуральной среде в условиях, достаточных для продуцирования связывающегося белка.

23. Белок, полученный способом по п.22.

24. Фармацевтическая композиция, содержащая связывающийся белок по п.1 или 4 и фармацевтически приемлемый носитель, где указанная фармацевтическая композиция дополнительно включает, по меньшей мере, одно дополнительное терапевтическое средство, где указанное дополнительное терапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из терапевтического средства, визуализирующего агента, цитотоксического агента, ингибитора ангиогенеза, ингибиторов киназы, ингибиторов ко-стимулирующей молекулы; ингибиторов адгезивной молекулы; антитела против цитокинов или его функционального фрагмента; метотрексата, циклоспорина, рапамицина, FK506, детектируемой метки или репортера, антагониста TNF, противоревматического средства, мышечного релаксанта, наркотического средства, нестероидного противовоспалительного средства (НСПВС), аналгетика, анестетика, седативного средства, местного анестетика, нейромышечного блокатора, противомикробного средства, средства против псориаза, кортикостероида, анаболического стероида, эритропоэтина, иммунизирующего средства, иммуноглобулина, иммунодепрессанта, гормона роста, лекарственного средства для гормон-заместительной терапии, радиофармацевтического средства, антидепрессанта, антипсихотического средства, стимулятора, противоастматического лекарственного средства, бета-агониста, стероида, вводимого путем ингаляции, эпинефрина или его аналога, цитокина и антагониста цитокина.

25. Применение связывающегося белка по п.1 или 4 в производстве лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства у индивидуума путем введения указанному индивидууму указанного связывающегося белка так, что лечение достигается, где указанное расстройство выбрано из группы, включающей ревматоидный артрит, остеоартрит, юношеский хронический артрит, септический артрит, артрит Лайма, псориатический артрит, реактивный артрит, спондилоартропатию, системную красную волчанку, болезнь Крона, язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника, инсулинзависимый сахарный диабет, тиреоидит, астму, аллергические заболевания, псориаз, склеродермальный дерматит, реакцию «трансплантат против хозяина», отторжение трансплантируемых органов, острое или хроническое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органов, саркоидоз, атеросклероз, диссеминированное внутрисосудистое коагулирование, болезнь Кавазаки, болезнь Грейвса, нефротический синдром, синдром хронической усталости, гранулематоз Вегенера, пурпуру Геноха-Шенлейна, микроскопический васкулит почек, острый и хронический гепатит, увеит, септический шок, синдром токсического шока, септический синдром, кахексию, инфекционные заболевания, заболевания, вызываемые паразитами, синдром приобретенного иммунодефицита, острый поперечный миелит, хорею Гентингтона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, инсульт, первичный билиарный цирроз, гемолитическую анемию, злокачественные заболевания, сердечную недостаточность, инфаркт миокарда, болезнь Аддиссона, спорадический полигландулярный дефицит типа I и полигландулярный дефицит типа II, синдром Шмидта, (острый) респираторный дистресс-синдром взрослых, алопецию, гнездную алопецию, серонегативную артропатию, артропатию, болезно Рейтера, псориатическую артропатию, артропатию, ассоциированную с язвенным колитом, энтеропатический синовит, артропатию, ассоциированную с Chlamydia, Yersinia и Salmonella, спондилоартропатию, атероматозное заболевание/артериосклероз, атопическую аллергию, аутоиммунное буллезное заболевание, вульгарную пузырчатку, листовидную пузырчатку, пемфигоид, болезнь прямых цепей IgA, аутоиммунную гемолитическую анемию, позитивную гемолитическую анемию Кумбса, приобретенную пернициозную анемию, юношескую пернициозную анемию, миалгический энцефалит/британский миалгический энцефаломиелит, хронический кандидоз кожи и слизистой, гигантоклечный артерит, первичный склерозирующий гепатит, криптогенный аутоиммунный гепатит, синдром приобретенного иммунодефицита, заболевания, ассоциированные с приобретенным иммунодефицитом, гепатит В, гепатит С, вариабельный неклассифицированный иммунодефицит (вариабельную неклассифицированную гипогаммаглобулинемию), застойную кардиомиопатию, бесплодие у женщин, дисфункцию яичников, преждевременную дисфункцию яичников, фиброзное заболевание легких, криптогенный фиброзный альвеолит, интерстициальную болезнь легких после воспаления, интерстициальный пневмонит, интерстициальную болезнь легких, ассоциированную с болезнью соединительной ткани, болезнь легких, ассоциированную со смешанным заболеванием соединительных тканей интерстициальную болезнь легких, ассоциированную с системным склерозом, интерстициальную болезнь легких, ассоциированную с ревматоидным артритом, болезнь легких, ассоциированную с системной красной волчанкой, болезнь легких, ассоциированную с дерматомиозитом/полимиозитом, болезнь легких, ассоциированную с синдром Шегрена, болезнь легких, ассоциированную с анкилозирующим спондилитом, васкулярное диффузное заболевание легких, болезнь легких, ассоциированную с гемосидерозом, интерстициальную болезнь легких, индуцируемую лекарственными средствами, фиброз, лучевой фиброз, облитерирующий бронхиолит, хроническую эозинофильную пневмонию, болезнь легких, вызываемую инфильтрацией лимфоцитов, постинфекционную интерстициальную болезнь легких, подагрический артрит, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный гепатит типа-1 (классический аутоиммунный или волчаночный гепатит), аутоиммунный гепатит типа-2 (гепатит, вызываемых анти-LKM антителами), аутоиммунную гипогликемию, инсулинорезистентность типа В, сопровождающуюся черным акантозом, гипопаратиреоидит, острое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органов, хроническое иммунное заболевание, ассоциированное с трансплантацией органов, остеоартроз, первичный склерозирующий холангит, псориаз типа 1, псориаз типа 2, идиопатическую лейкопению, аутоиммунную нейтропению, почечное заболевание без указания диагноза, гломерулонефрит, микроскопический васкулит почек, болезнь Лайма, дисковидную красную волчанку, идиопатическое бесплодие у мужчин или бесплодие у мужчин без указания диагноза, иммунное бесплодие, вызываемое образованием антител к сперматозоидам, рассеянный склероз (всех подтипов), симпатическую офтальмию, легочную гипертензию, вызываемую заболеванием соединительных тканей, синдром Гудпасчера, нодозный полиартерит, проявляющийся поражением легких, острую ревматическую лихорадку, ревматоидный спондилит, болезнь Стилла, системный склероз, синдром Шегрена, болезнь Такаясу/артерит, аутоиммунную тромбоцитопению, идиопатическую тромбоцитопению, аутоиммунное заболевание щитовидной железы, гипертиреоидит, зобный аутоиммунный гипертиреоидит (болезнь Хашимото), атрофический аутоиммунный гипотереоидит, первичную миксоэдему, факогенный увеит, первичный васкулит, острое заболевание печени при витилиго, хронические заболевания печени, алкогольный цирроз, поражение печени, вызываемое алкоголем, холеосататит, идосинкратическое заболевание печени, гепатит, индуцированный лекарственными средствами, неалкогольный стеатогепатит, аллергию и астму, инфекционное заболевание, вызываемое стрептококками группы В (GBS), умственные расстройства (например депрессию и шизофрению), заболевания, опосредуемые лимфоцитами типа Th2 и Th1, острую и хроническую боль (различные формы боли), и раковые заболевания, такие как рак легких, молочной железы, желудка, мочевого пузыря, толстой кишки, поджелудочной железы, яичника, предстательной железы и прямой кишки, и злокачественные заболевания гемопоэтической системы (лейкоз и лимфому), липопротеимию альфа, бета, акроцианоз, острые и хронические паразитарные или инфекционные заболевания, острый лейкоз, острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), острую или хроническую бактериальную инфекцию, острый панкреатит, острую почечную недостаточность, аденокарциномы, эктопические предсердные сокращения, комплекс «СПИД-деменция», алкогольный гепатит, аллергический конъюнктивит, аллергический контактный дерматит, аллергический ринит, отторжение аллотрансплантата, болезнь, вызываемую дефицитом альфа-1-антитрипсина, амиотрофический боковой склероз, анемию, стенокардию, дегенерацию клеток переднего рога, заболевание, вызываемое лечением анти-CD3 антителами, антифосфолипидный синдром, иммунные реакции, ассоциированные с гиперчувствительностью к антителам против рецепторов, аневризмы аорты и периферических органов, отслаивание аорты, артериальную гипертензию, артериосклероз, артериовенозные свищи, атаксию, фибрилляцию предсердий (замедленную или пароксизмальную), трепетания предсердий, атриовентрикулярную блокаду, В-клеточную лимфому, отторжение костного трансплантата, отторжение трансплантата костного мозга (ВМТ), блокаду ножки пучка Гиса, лимфому Беркитта, ожоги, сердечную аритмию, синдром остановки сердца, опухоли сердца, кардиомиопатию, воспалительный ответ, ассоциированный с кардиопульмонарным шунтированием, отторжение хрящевого трансплантата, дегенерацию коркового вещества мозжечка, расстройства мозжечка, хаотическую или мультифокальную предсердную тахикардию, расстройства, ассоциированные с химиотерапией, хронический миелоцитарный лейкоз (ХМЛ) , хронический алкоголизм, хронические воспалительные патологии, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ), хроническую интоксикацию салицилатом, карциному прямой и ободочной кишки, застойную сердечную недостаточность, конъюнктивит, контактный дерматит, легочное сердце, заболевания коронарной артерии, болезнь Крейцфельда-Якоба, сепсис, вызываемый негативной культурой, кистозный фиброз, заболевания, ассоциированные с цитокиновой терапией, деменцию боксеров, димиелинизирующие заболевания, геморрагическую лихорадку денге, дерматит, кожные болезни, диабет, сахарный диабет, диабетическое атеросклеротическое заболевание, болезнь диффузных телец Леви, застойную кардиомиопатию, заболевания базальных ганглиев, синдром Дауна в среднем возрасте, расстройства двигательных функций, индуцированные лекарственными средствами, блокирующими допаминовые рецепторы ЦНС, чувствительность к лекарственным средствам, экзему, энцефалломиелит, эндокардит, эндокринопатию, эпиглотит, инфекционное заболевание, вызываемое вирусом Эпштейна-Барра, эритромелалгию, нарушение функций экстрамирамидного пути и мозжечка, наследственный гематофагоцитарный лимфогистиоцитоз, отторжение имплантата тимуса плода, атаксию Фридриха, заболевание функциональных периферических артерий, сепсис, вызываемый грибами, газовую гангрену, язву желудка, гломерулонефрит, отторжение трансплантата любых органов или тканей, сепсис, вызываемый грамотрицательными бактериями, сепсис, вызываемый грамположительными бактериями, гранулемы, вызываемые внутриклеточными микроорганизмами, ретикулоэндотелиоз, болезнь Халлервордена-Шпатца, тиреоидит Хашимото, сенную лихорадку, отторжение трансплантата сердца, гемахроматоз, гемодиализ, гемолитический уремический синдром/тромболитическую тромбоцитопеническую пурпуру, геморрагию, гепатит (А) , аритмии пучка Гиса, ВИЧ-инфекцию/ВИЧ-невропатию, болезнь Ходжкина, нарушения гиперкинетической двигательной активности, реакции гиперчувствительности, пневмонит, ассоциированный с гиперчувствительностью, гипертензию, нарушения гипокинетической двигательной активности, нарушение функции оси гипоталамуса-гипофиза-коры надпочечника, идиопатическую болезнь Адиссона, идиопатический фиброз легких, цитотоксичность, опосредуемую антителом, астению, атрофию мышц спинного мозга у детей, воспаление аорты, грипп, вызываемый вирусом А, заболевание, вызываемое ионизирующим облучением, иридоциклит/увеит/нейрит зрительного нерва, репефузионное повреждение при ишемии, ишемический инсульт, ювенильный ревматоидный артрит, ювенильную атрофию мышц спинного мозга, саркому Капоши, отторжение почечного трансплантата, болезнь, вызываемую бактерией Legionella, лейшманиоз, лепру, поражение кортикоспинальной системы, жировой отек, отторжение трансплантата печени, лимфедему, малярию, злокачественную лимфому, злокачественный гистиоцитоз, злокачественную меланому, менингит, менингококцемию, метаболические/идиопатические расстройства, головную боль при мигрени, митохондриальное расстройство многих органов, смешанное заболевание соединительной ткани, моноклональную гаммопатию, множественную миелому, дегенерацию многих органов (Менцеля-Дежерина-Томаса-Ши-Драгера и Мачадо-Йозефа), тяжелую миастению, заболевание, вызываемое внутриклеточной бактерией Mycobacterlum avium, туберкулез, вызываемый микобактерией, миелодипластический синдром, инфаркт миокарда, ишемию миокарда, карциному носоглотки, хроническое заболевание легких у новорожденных, нефрит, нефроз, нейродегенеративные заболевания, нейрогенную атрофию мышц I, нейтропеническую лихорадку, не-ходжкинскую лимфому, закупорку брюшной аорты и ее ветвей, окклюзивное артериальное расстройство, заболевание, ассоциированное с терапией okt3, орхит/эпидидимит, орхит/операцию по обратимой вазэктомии, органомегалию, остеопороз, отторжение трансплантата поджелудочной железы, карциному поджелудочной железы, паранеопластический синдром/злокачественную гиперкальцемию, отторжение трансплантата паращитовидной железы, воспалительное заболевание области таза, круглогодичный ринит, перикардит, атеросклеротическое заболевание периферических органов, расстройства периферических сосудов, перитонит, пернициозную анемию, пневмонию, вызываемую пневмоцистой Carinii, пневмонию, синдром POEMS (полинефропатия, органомегалия, эндокринопатия, моноклональная гаммопатия и синдром изменения структуры кожи), постреперфузионный синдром, постгемодиализный синдром, постмиокардиотомический синдром, преэклампсию, прогрессирующий надъядерный паралич, первичную легочную гипертензию, нарушения, ассоциированные с лучевой терапией, феномен и болезнь Рейно, болезнь Рейно, болезнь Рефсума, тахиаритмию, вызываемую сужением комплексов QRS, вазоренальную гипертензию, реперфизионное повреждение, рестриктивную кардиомиопатию, саркому, склеродермию, сенильную хорею, сенильную деменцию, вызываемую тельцами Леви, серонегативные артропатии, инсульт, серповидноклеточную анемию, отторжение кожного трансплантата, синдром изменения структуры кожи, отторжение трансплантата тонкой кишки, солидные опухоли, специфическую аритмию, атаксию спинного мозга, дегенерацию спинного мозга и мозжечка, миозит, вызываемый стрептококками, структурные поражения мозжечка, подострый склерозирующий панэнцефалит, синкопе, сифилис сердечно-сосудистой системы, системный анафилактический шок, синдром системной воспалительной реакции, системный юношеский ревматоидный артрит, Т-клеточный ОЛЛ или ФАБ-ОЛЛ, телеангиэктазию, облитерирующий тромбоангит, тромбоцитопению, токсичность, расстройство, ассоциирование с трансплантацией органов, травму/геморрагию, реакции гиперчувствительности типа III, реакции гиперчувствительности типа IV, нестабильную стенокардию, уремию, уросепсис, крапивницу, заболевание сердечного клапана, варикозное расширение вен, васкулит, заболевания вен, венозный тромбоз, фибрилляцию желудочков, вирусные и грибковые инфекции, летальный энцефалит/асептический менингит, гемафагоцитарный синдром с летальным исходом, синдром Вернике-Корсакова, болезнь Вильсона, отторжение ксенотрансплантата любых органов или тканей, острый коронарный синдром, острый идиопатический полинейрит, острую воспалительную демиелинизирующую полирадикулоневропатию, острую ишемию, болезнь Стилла у взрослых, гнездную алопецию, анафилактический шок, синдром, вызываемый антителами против фосфолипидов, апластическую анемию, атеросклероз, атопическую экзему, атопический дерматит, аутоиммунный дерматит, аутоиммунное расстройство, ассоциированное со стрептококковой инфекцией, аутоиммунную энтеропатию, аутоиммунную потерю слуха, аутоиммунный лимфопролиферативный синдром (АЛПС), аутоиммунный миокардит, аутоиммунное преждевременное угасание функции яичников, блефарит, бронхоэктаз, буллезный пемфигоид, сердечно-сосудистое заболевание, антифосфолипидный синдром с летальным исходом, глютеновую болезнь, шейный спондилез, хроническую ишемию, рубцующийся пемфигоид, клинический синдром, выделенный в особую группу (CIS) с риском развития рассеянного склероза, конъюнктивит, психическое расстройство у детей, хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ), дакриоцистит, дерматомиозит, диабетическую ретинопатию, сахарный диабет, грыжевое выпячивание диска, выпадение диска, иммунную гемолитическую анемию, вызываемую лекарственными средствами, эндокардит, эндометриоз, эндофталамит, эписклерит, полиморфную эритему, объемную полиморфную эритему, пемфигоид беременных, синдром Гийома-Барре (СГБ), сенную лихорадку, синдром Хуга, идиопатическую болезнь Паркинсона, идиопатическую интерстициальную пневмонию, IgE-опосредованную аллергию, иммунную гемолитическую анемию, миозит, вызываемый тельцами включения, инфекционное воспалительное заболевание глаз, воспалительное демиелинизирующее заболевание, воспалительное сердечное заболевание, воспалительное заболевание почек, ИФЛ/ОИП, ирит, кератит, сухой кератоконъюктивит, болезнь Куссмаула или болезнь Куссмаула-Мейера, паралич Лэндри, гистиоцитоз, обусловленный пролиферацией клеток Лангерганса, сетчатую «мраморную кожу», дегенерацию желтого пятна, микроскопический полиангиит, болезнь Бехтерева, расстройства двигательных нейронов, пемфигоид слизистых оболочек - мембранозный пемфигоид, недостаточность многих органов, тяжелую миастению, миелодиспластический синдром, миокардит, заболевание нервных корешков, невропатию, не-А, не-В гепатит, нейрит зрительного нерва, остеолиз, рак яичника, юношеский ревматоидный олигоартрит, заболевание, вызываемое закупоркой периферических артерий (ОЗПА), заболевание периферических сосудов (ЗПС), заболевание периферических артерий (ЗПА), флебит, нодозный полиартерит (или нодозный периартерит), полихондрит, ревматическую полимиалгию, полиоз, юношеский ревматоидный полиартрит, синдром дефицита полиэндокринной системы, полимиозит, ревматическую полимиалгию (РПМ), постгемодиализный синдром, первичный паркинсонизм, рак предстательной железы и прямой кишки, и злокачественные опухоли гемопоэтической системы (лейкоз и лимфому), простатит, истинную эритроцитарную аплазию, первичную недостаточность надпочечников, рецидивирующий нейромиелит зрительного нерва, рестеноз, ревматическое заболевание сердца, SAPHO (синовит, акне, пустулез, гиперостоз и остеит), склеродермию, вторичный амилоидоз, синдром шокового легкого, склерит, воспаление седалищного нерва, вторичную недостаточность коры надпочечников, заболевание соединительных тканей, вызываемое отравлением кремнием, дерматоз Снеддона-Уилкинсона, анкилозирующий спондилит, синдром Стевенса-Джонсона (ССД), синдром системной воспалительной реакции, височный артерит, токсоплазматический ретинит, токсический эпидермальный некролиз, поперечный миелит, TRAPS (заболевание, ассоциированное с рецептором фактора некроза опухоли), аллергическая реакция типа 1, диабет типа II, крапивница, обычная интерстициальная пневмония (ОИП), васкулиты, весенний конъюнктивит, вирусный ретинит, синдром Фогта-Коянаги-Харады (синдром VKH), мокрую дегенерацию желтого пятна, нарушения, ассоциированные с заживлением ран и артропатию, вызываемую бактериями Yersinia и Salmonella,

где указанное введение индивидууму осуществляют способом, выбранным из парентерального введения, подкожного введения, внутримышечного введения, внутривенного введения, внутрисуставного введения, внутрибронхиального введения, внутрибрюшинного введения, интракапсулярного введения, внутрихрящевого введения, внутриполостного введения, внутричревного введения, внутримозжечкового введения, интрацеребровентрикулярного введения, введения в толстую кишку, интрацервикального введения, внутрижелудочного введения, введения в печень, введения в миокард, внутрикостного введения, внутритазового введения, введения в перикард, интраперитониального введения, интраплеврального введения, введения в предстательную железу, интрапульмонарного введения, интраректального введения, внутрипочечного введения, введения в сетчатку глаза, интраспинального введения, введения в синовиальную жидкость, введения в грудную клетку, внутриматочного введения, интравезикулярного введения, введения в виде болюса, вагинального введения, ректального введения, трансбуккального введения, подъязычного введения, интраназального введения и чрезкожного введения.

26. Способ генерирования связывающегося белка, способного связывать, по меньшей мере, одну цель, включающий стадии:

a) получения первого родительского антитела или его связывающей части;

b) получения второго родительского антитела или его связывающей части;

c) конструирования полипептидной цепи или полипептидных цепей по п.1 или 4; и

d) экспрессии указанных полипептидной цепи или цепей/так что генерируется связывающийся белок, способный связывать, по меньшей мере, одну цель.

27. Способ по п.26, где вариабельные домены тяжелой цепи VD1 и/или VD2, если присутствуют, содержат три CDR из SEQ ID NO:30, 32, 34, 36, 40, 62, 68, 76, 98, 100, 102 или 104 соответственно; и/или где вариабельные домены легкой цепи VD1 и/или VD2 содержат три CDR из SEQ ID NO:31, 33, 35, 37, 41, 63, 69, 77, 99, 101, 103 или 105 соответственно.

28. Способ по п.26, где

а) указанное первое родительское антитело или его связывающая часть и указанное второе родительское антитело или его связывающая часть представляют собой человеческое антитело, CDR-привитое антитело и гуманизованное антитело; b) указанные первое родительское антитело или его связывающая часть связывают цель с аффинностью и/или силой, отличными от аффинности и/или силы, с которыми указанные второе родительское антитело или его связывающая часть связывают вторую цель;

c) Fc-область представляет собой Fc-область с вариантной последовательностью; и/или

d) Fc-область происходит из IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE или IgD.

29. Способ по п.26, где

a) X1 между первым и вторым вариабельными доменами легкой цепи не является CL;

b) X1 представляет собой, по меньшей мере, одну из SEQ ID NO:1-29 и/или основанную на G/S последовательность; или

c) (X1)n на тяжелой цепи и/или легкой цепи представляет собой (X1)0 и/или (Х2)n на тяжелой цепи и/или легкой цепи представляет собой (Х2)0;

30. Способ доставки профилактического или терапевтического лекарственного средства в определенный участок, ткань или клетку организма, где указанный способ включает стадии введения индивидууму связывающегося белка по п.1 или 4, где указанный связывающийся белок связывает цель в определенном участке, ткани или типе клеток в организме и профилактическое или терапевтическое средство.

31. Способ доставки малой молекулы в определенный участок, ткань или тип клеток в организме, включающий стадию введения индивидууму связывающегося белка по п.17.