DE18795T1 - Einen monoklonalen antikoerper produzierende hybridzellinie, antikoerper und verfahren zu seiner herstellung, diesen antikoerper enthaltende therapeutische zusammensetzung und deren diagnostische und therapeutische verwendungen. - Google Patents

Claims (1)

1. European Patent Application

   No. 80301357-2
   Publication Ho.. 0018795

   Applicant: Ortho Pharmaceutical Corporation, Earitan, New Jersey (US)

   Translation of Claims as on file: .

   Patentansprüche: .

   Ί. Monoklonaler Komplement-fixierender Haus—Antikörper, welcher (i) mit im wesentlichen allen normalen, humanen peri— pheren T-Zellen reagiert, aber (ii) nicht mit irgendwelchen der normalen humanen peripheren Zellen in der- B-Zellen, NuIl-Zellen und Macrophagen. umfassenden Gruppe reagiert-

   2. Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 1 der Klasse IgG-3-Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 2 der Klasse

   4. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 "bis 3, welcher mit von etwa 5 his etwa 10 % normalen humanen Thymocyten reagiert.

   5- Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 4-, welcher im wesentlichen mit allen kutanen ϊ-LymphoiQ-Zellen reagiert.

   6. Monoklonaler Antikörper nach einem der· Ansprüche 1 bis 5, welcher mit leukämischen Zellen von Menschen mit chronischer T-Zellen-lymphoblastischer Leukämie reagiert, nicht aber mit leukämischen Zellen von Menschen mit akuter T-Zellen-lympho— blastischer Leukämie, akuter Null-Zellen-lymphoblastischer Leukämie oder chronischer B-Zellen—lymphatischer Leukämie.

   7- Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 6, welcher durch ein Hybridom gebildet wird, das durch eine Pusion von Milzzellen einer Maus, die zuvor mit humanen

   T-Zellen immunisiert worden ist, ^ind Zellen aus einer Maus— Myelom-Linie aasgebildet ist.

   8. Monoklonaler Antikörper, welcher von einem Hybridom ATCC CRL 8001 (OKT 3) gebildet wird.

   9- Eine therapeutische Zusammensetzung, enthaltend, im Gemisc] mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger, eine therapeutisch wirksame Menge des Antikörpers nach einem der- Ansprüche 1 bis 8, welche Menge zur Verminderung oder Ausschaltung einer Trans— plantatabstoßung durch einen Organtransplantatempf anger wirk--■Ί0 sam ist.

   10. Ein Hybridom, welches einen monoklonalen Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7 produziert, gebildet durch Fusion von Milzzellen einer zuvor mit humanen T-Zellen immunisierten Maus und Zellen aus einer Maus-Hyelom—Linie.

   11. Das Hybridom ATCC CRL 8001 (OKT 3)-

   12. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 8 ' ·■· zur Anwendung in der Behandlung eines Organ-transplant at eiapf ängers zur Verminderung oder Ausschaltung von Allograft-Abstoßung des genannten transplantierten Organs.

   13· Ein Verfahren zur Bestimmung des Anteiles an zirkulierenden Lymphocyten in einem Individuum, die T—Zellen sind, welches ein Vermischen des monoklonalen Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 8 mit einer zirkulierenden Lymphocyten—Zusammensetzung des genannten Individuums und ein Bestimmen des Anteils der zirkulierenden Lymphocyten umfaßt, welche mit dem genannten Antikörper reagieren und somit T-Zellen sind.

   Ein Verfahren zur Herstellung eines monoklonalen Antikörper gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7, umfassend die Stufen:

   i) Immunisieren von Mäusen mit E—Rosette—positiv gereinigten humanen T-Zellen;

   ii) Entfernen' der Milz aus den genannten Hausen und Bereiten einer Suspension von Milzzellen;

   iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus—Myelom—Zellen in Gegenwart eines Fusionspromotors;

   iv) Verdünnen road 7eimehren der vereinigten Zellen in getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht—vereinigten Myelomzellen nicht erhält; v) Auswerten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein j Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis 7 angegebenen Eigenschaften;

   vi) Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden; und vii) Gewinnen des Antikörpers aus dem Überstand über den genannten Klonen.

   15· Ein Verfahren zur Herstellung eines monoklonalen Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 7> umfassend die Stufen:

   i) Immunisieren von Mäusen mit E-Kosette—positiv gereinigten humanen T-Zellen;

   ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und Bereiten ' einer Suspension von Milzzellen; . i

   iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus-Myelom-Zeilen

   in Gegenwart eines Fusionspromotors; ·

   20" iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht-vereinigten Myelomzellen nicht' erhält; v) Ausv/erten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis 7 angegebenen Eigenschaften;

   yi) .Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden;

   vii) Überführen der genannten Klone auf intraperitonealem Wege in Mäuse; und

   viii) Ernten der malignen Asciten oder von Serum aus den genannten Mäusen.

   16. Ein Verfahren zur Herstellung eines monoklonalen Antikörpers, welches ein Vermehren des Hybridoms A¹TCC CBL 8001 in einem geeigneten Medium und das Gewinnen des Antikörpers aus

   dem Überstand über dem genannten.Hybridom umfaßt. . "

   17· Έχη Verfahren 7ur Herstellung eines monoklonalen
   Antikörpers, welches ein Injizieren des Hybridoms ATCC CRL 8001 in eine Maus und das Gewinnen des Antikörpers aus den malignen Asciten oder dem Serum dieser Maus umfaßt.

   18. Der Antikörper nach Anspruch 5i Anspruch 6 oder

   Anspruch 7> wenn abhängig von Anspruch 5> oder nach Anspruch 8, zur Anwendung in der Bestätigung des Vorliegens von kutanem T-Zellen-Lymphom in einem Individuum.

   19- Der Antikörper nach Anspruch 5» Anspruch 6 oder
   Anspruch 7> wenn abhängig von Anspruch 5* oder nach Anspruch 8, zur Anwendung in der Behandlung von kutanem T— Zellen—Lymphoia in einem Individuum,

   20. Ein Verfahren zur Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung gemäß Anspruch 9> umfassend das Vermischen einer zur Verminderung oder Beseitigung einer Transplantat— abstoßung durch einen Organtransplantatempfänger wirksamen Menge eines Antikörpers gemäß einem der Ansprüche 1 bis 8 mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger.

   DI.Pf /B 1984 02 21//