MXPA97000883A - Derivados sustituidos de la quinazolina - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere:proporciona un compuesto que tiene la fórmula (1) donde:X es fenilo que estáopcionalmente sustituido;R y R1 son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo, alcoxilo, hidroxilo o trifluorometilo;R2 es hidrógeno, alquilo, alcoxilo, hidroxilo, trifluorometilo;Y es un radical que se selecciona del grupo que consiste de (2) R3 es, independientemente, hidrógeno, alquilo, carboxilo, carboalcoxilo, fenilo o carboalquilo;n=2 a 4 o una sal fermacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R3 del radical y pueda ser la misma o diferente, los cuales sonútiles como agentes antineoplásicos.

Description

DERIVADOS SUSTITUIDOS DE LA QUINAZOLINA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona con ciertos compuestos de quinazolina, así como las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos de la presente invención inhiben la acción de ciertas cinasas proteicas de t:\rosina (PTK) del receptor del factor de crecimiento, inhibiendo de esta forma el crecimiento anormal de ciertos tipos de células. Los compuestos de esta invención, por lo tanto, son agentes anticáncer y son útiles para el tratamiento del cáncer en los mamíferos. Además, esta invención se relaciona con la manufactura de estas quinazolinas, su uso para el tratamiento del cáncsr y las preparaciones farmacéuticas que las contienen. Las cinasas proteicas de tirosina son una clase de enzimas que catalizan la transferencia de un grupo fosfato del ATP a un residuo de tirosina localizado en un sustrato de proteína. Las cinasas proteicas de tirosina claramente juegan un papel en el crecimiento normal de las células. Muchas de las proteínas receptoras del factor de crecimiento funcionan como cinasas de tirosina y es mediante este proceso que efectúan la señalización. La interacción de los factores de crecimiento con estos receptores es un evento necesario en la regulación normal del crecimiento celular. Sin embargo, bajo ciertas condiciones, como resultado de una mutación o EF: 23946 - - sobre-expresión, estos receptores pueden volverse no regulados; el resultado de lo cual es una proliferación incontrolada de las células, lo cual puede conducir a un crecimiento del tumor y por último a la enfermedad conocida como cáncer (Wil s A. F. , Adv. Cáncer Res., 60, 43 (1993) y Parsons, J. T. ; Parsons, S. J., Important Advances in Oncology, DeVita V. T. Ed., J. B. Lippincott Co. , Phila., 3 (1993)). Entre las cinasas del receptor del factor de crecimiento y sus proto-oncogenes que se han identificado, y que son blancos de los compuestos de esta invención, están la cinasa del receptor del factor de crecimiento, epidérmico (cinasa EGF-R, producto proteico del oncogene erbB) y el producto producido por el oncogene erbB-2 (al que también se refiere como el oncogene neu o HER2). Debido a que el evento de fosforilación es una señal necesaria para que se efectúe la división celular y debido a que las cinasas sobre-expresadas o mutadas han estado asociadas con el cáncer, un agente inhibidor de este evento, un inhibidor de la cinasa proteica de tirosina, tendrá un valor terapéutico para el tratamiento del cáncer y otras enfermedades caracterizadas por un crecimiento celular no controlado o anormal. Por ejemplo, la sobre-expresión del producto de la cinasa receptora, del oncogene erbB-2, ha estado asociado con los cánceres humanos del pecho y de ovarios (Slamon, D. J., et al., Science, 244, 707 (1989) y Science, 235, 1146 (1987)). La no regulación de la cinasa EGF-R ha sido asociada con los tumores epidermoides (Reiss, M. et. al., Cáncer Res., 51,6254 (1991)), los tumores del pecho (Macias, A., et. al., Anticancer Res., 7,459 (1987)) y los tumores que involucran otros órganos mayores (Gullick, . J., Brit. Med. Bull., 47, 87 (1991)). Debido a la importancia del papel que juegan las cinasas receptoras no reguladas en la patogénesis del cáncer, muchos estudios recientes han tratado acerca de inhibidores específicos de la PTK como agentes terapéuticos anticáncer potenciales (algunas revisiones recientes: Burke. T. R., Drugs Future, 17, 119 (1992) y Chang, C. J., Geahlen, R. L., J. Nat. Prod., 55, 1529 (1992). Los compuestos de esta invención son ciertos compuestos de 4-anilinoquinazolinas. En toda esta solicitud de patente el sistema del anillo de quinazolina será numerado como se indica en la siguiente fórmula: Se ha notado que otras 4-anilinoquinazolinas, que difieren tanto en la naturaleza como en la colocación de los sustituyentes en las posiciones 5 a 8, comparadas con los compuestos de esta invención tienen actividad de inhibición de la PTK. Se sabe, de la solicitud de Patente Europea 520,722 Al, de ciertas 4-anilinoquinazolinas que contienen en las posiciones 5 a 8 sustituyentes de hidrógeno, cloro trifluorometilo o nitro. Ninguno de los compuestos en la solicitud mencionada anteriormente tienen la combinación única de sustituyentes contenidos en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitu de Patente Europea mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer in yivo. Se sabe, por la solicitud de Patente Europea 566,226 Al de ciertas 4-anilinoquinazolinas que opcionalmente contienen en las posiciones 5 a 8 una variedad de sustituyentes. Ninguno de los compuestos en la solicitud mencionada anteriormente tiene la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer iji vivo. La única actividad ¿n vivo descrita en la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente es la inhibición del crecimiento estimulado por TGF-alfa del hepatocito, en las ratas. Se sabe, por la solicitud de Patente Europea 635,498 Al, de ciertas 4-anilinoquinazolinas que tienen opcionalmente, en la posición 6, una variedad de sustituyentes, mientras que en la posición 7 deben tener un halógeno. Ninguno de los compuestos en la solicitud mencionada anteriormente tiene la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que, aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer in vivo. La única actividad _in vivo descrita en la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente es la inhibición del crecimiento estimulado por TGF-alfa del hepatocito en ratas. Además, se conocen ciertos inhibidores de la quinazolina que no tienen un grupo 4-anilino. Se sabe, de la solicitud de Patente Europea 602,851 Al, de ciertas quinazolinas que no tienen un grupo anilino en la posición 4 y que opcionalmente contienen, en las posiciones 5 a 8, una variedad de sustituyentes. Ninguno de los compuestos en la solicitud mencionada anteriormente tiene la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que, aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer ijn vivo. La única actividad iri vivo descrita en la solicitud de Patente Europea mencionada anteriormente es la inhibición del crecimiento estimulado por TGF-alfa del hepatocito en rata. Se sabe, de la solicitud de Patente WO 95/19774, de ciertos heterociclos, que son inhibidores de las PTKs, que tienen un anillo de pirimidina de modo similar a las 4-anilinoquinazolas de la presente invención. Esta solicitud mencionada anteriormente no hace mención de las 4-anilinoquinazolinas , ni por la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que, aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitud mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer Ln vivo. Se sabe, de la solicitud de Patente WO 95/1.57581, de ciertas quinazolinas que contienen opcionalmente en las posiciones 5 a 7 una variedad de sustituyentes. Ninguno de los compuestos en la solicitud mencionada anteriormente tiene la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que, aunque se reclama una utilidad anticáncer para los compuestos de la solicitud de Patente mencionada anteriormente, no se proporciona ninguna demostración de un efecto anticáncer in vivo. Además, de las solicitudes de Patentes mencionadas anteriormente un número de publicaciones describen 4-anilinoquinazolinas: Fry, D. W. , et. al., Science, 265, 1093 (1994), Rewcastle G. W. , et. al., J. Med. Chem., 38, 3482 (1995), y Bridges, A. J., et. al., J. Med. Chem., 39, 267, (1996). Ninguno de los compuestos descritos en estas publicaciones tienen la combinación única de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención. Además, es notable que no se describe ninguna demostración de un efecto anticáncer iji vivo en estos reportes. Una PTK cataliza la transferencia de un grupo fosfato de una molécula de ATP a un residuo de tirosina localizado sobre un sustrato de proteína. Los inhibidores conocidos hasta ahora en la técnica son usualmente competitivos, ya sea con el ATP o con el sustrato de proteína de la cinasa. Algunos de estos inhibidores, los llamados inhibidores competitivos mezclados, pueden ser competitivos tanto con el ATP como con el sustrato, al mismo tiempo; todos estos inhibidores competitivos funcionan como inhibidores reversibles. Las 4-anilinoquinazolinas conocidas en la técnica son inhibidores reversibles que son competitivos con el ATP (Fry, D. W. , et. al., Science, 265, 1093 (1994)). Debido a que la concentración de ATP en una célula es normalmente muy alta (milimolar), los compuestos que son competitivos con el ATP pueden carecer de actividad iri vivo debido a que es poco probable que estos compuestos puedan alcanzar las concentraciones, dentro de la célula, que son necesarias para desplazar el ATP de su sitio de unión. Como se demostró, los inhibidores de la quinazolina, de esta invención, tienen la capacidad única de inhibir estas PTKs de una forma irreversible y, por lo tanto, no son competitivos con el ATP o con el sustrato de proteína. Los compuestos de esta invención pueden funcionar como inhibidores irreversibles en virtud del hecho de que pueden formar enlaces covalentes con los residuos de aminoácido localizados en el sitio activo de la enzima. Como se muestra más adelante, esto da como resultado una utilidad terapéutica reforzada de los compuestos de esta invención, cuando se comparan con el tipo de inhibidor reversible. En particular, se muestra que es la naturaleza y combinación únicas de sustituyentes contenida en los compuestos de la presente invención lo que conduce a la unión irreversible del inhibidor a la enzima. Estas propiedades únicas de los compuestos de esta invención contribuyen a su capacidad para inhibir el crecimiento de tumores humanos en un modelo de cáncer in vivo.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención proporciona un compuesto de la fórmula 1: donde: X es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxilo, carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono, carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono, amino y alcanoílamino de 1 a 6 átomos de carbono; R y R, son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o trifluorometilo; R_ es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical seleccionado del grupo que consiste de: R- es, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; n = 2 a 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R, del radical Y pueda ser la misma o diferente Las sales farmacéuticamente aceptables son aquellas derivadas de estos ácidos orgánicos e inorgánicos, tales como, acético, láctico, cítrico, tartárico, succínico, maléico, malónico, glucónico, idroclórico, hidrobrómico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metanosulfónico y ácidos aceptables similarmente conocidos. La porción alquilo de los sustituyentes alquilo, alcoxilo, carboalcsxilo, carboalquilo y alcanoílamino incluyen tanto cadena recta como cadenas de carbono ramificadas. El carboxilo se define como el radical -CO-H. El carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono se define como el radical -C02R" , donde R" es un radical alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Carboalquilo se define como el radical -COR" donde R" es un radical alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Cuando X está sustituida se prefiere que sea mono-, di- o tri-sustituida, siendo la monosustituida la más preferida. Cuando un compuesto de esta invención contiene un centro asimétrico, esta invención cubre los enantiómeros individuales R y S, así como el racemato, con respecto a este compuesto. De los compuestos de esta invención, los miembros preferidos incluyen aquellos en los cuales R, R, y R_ son hidrógeno; y aquellos en los cuales R, R. y R_ son hidrógeno y X se encuentra no sustituido o monosustituido con un halógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. La preparación de los compuestos de esta invención, agrupados por la Fórmula 9, se describe más adelante en el Diagrama de Flujo A, donde R, R,, R-, R3, X y n están definidos y R. es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono (preferiblemente isobutilo). Y' es un radical seleccionado del grupo que consiste de: donde cada R' es, independientemente hidrogeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono. De acuerdo con la secuencia de reacción delineada en el Diagrama de Flujo A, un 5-nitro-antranilonitrilo, de Fórmula 2, se calienta a aproximadamente 100°C, con o sin solvente, conteniendo un exceso de dimetilformamida dimetil acetal para obtener una amidina de la Fórmula 3. El calentamiento de una solución de amidina 3 y de la anilina 4 en ácido acético, durante 1 a 5 horas, da las 6-nitro-4-anilinoquinazolinas de la Fórmula 5. La reducción del grupo nitro, en el compuesto 5, usando un agente reductor, tal como hierro, en una mezcla ácido acético-alcohol a temperatura elevada, da las 6-amino-4-anilinoquinazolinas de la Fórmula 6. La acilación del compuesto 6, ya sea con un cloruro ácido de la Fórmula 7 o un anhídrido mezclado de la Fórmula 8 (que se prepara a partir del ácido carboxílico correspondiente), en un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano (THF), en presencia de una base orgánica, tal como piridina o trietilamina, da los compuestos de esta invención, representados por la Fórmula 9. En los casos donde los compuestos 7 u 8 tienen un átomo de carbono asimétrico, pueden utilizarse como la mezcla racémica o como los enantiómeros individuales R o S, en cuyo caso los compuestos de esta invención se encontrarán en las formas racémica u ópticamente activas R y S, respectivamente. Los 5-nitro-antranilonitrilos de la Fórmula 2 necesarios para preparar los compuestos de esta invención, son ya sea conocidos por el técnico o pueden prepararse mediante procedimientos conocidos en la técnica, tal como se detalla en las siguientes referencias; Baudet, Recl. Trav. Chim. Holanda, 43, 710 (1924); Hartmans, Recl. Trav. Chim. Holanda, 65, 468, 469 (1946); Taylor et al., J. Amer. Chem. Soc., 82, 6058, 6063 (1960); Taylor et al., J. Amer. Chem. Soc, 82, 3152, 3154 (1960); Deshpande; Seshadri, Indian J. Chem., 11, 538 (1973); Katrizky, Alan R. ; Laurenzo, Kathlenn S., J. Org. Chem., 51 (1986); Nielas, Hans-Joachim; Bohle, Matthias; Rick, Jens-Detlev; Zeuner, Frank; Zoelch, Lothar, Z. Chem., 25(4), 137-138 (1985).

DIAGRAMA DE FLUJO A La preparación de los compuestos de esta invención, agrupados por la Fórmula 12, se decribe más adelante en el Diagrama de Flujo B donde R, R,, R~, X y n se describen anteriormente. Cada Re es, independientemente, hidrógeno, fenilo o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. De acuerdo con la reacción esquematizada en el Diagrama de Flujo B, las 6-amino-4-anilinoquinazolinas de la Fórmula 10 (preparadas como se indica en Diagrama de Flujo A) , son adiadas con un anhídrido cíclico, de la Fórmula 11, en un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, en presencia de un catalizador básico, tal como piridina o trietilamina.

DIAGRAMA DE FLUJO B 12 Los compuestos representativos de esta invención fueron evaluados .en varios procedimientos de prueba farmacológica estándar, mostrando que los compuestos de esta invención poseen una actividad importante como inhibidores de las cinasas proteicas de tirosina y son agentes antiproliferativos. Basados en la actividad que se muestra en los procedimientos de prueba farmacológica estándar, los compuestos de esta invención, por lo tanto, son útiles como agentes antineoplásicos. Los procedimientos de prueba utilizados y los resultados obtenidos se muestran más adelante. La preparación de los compuestos de esta invención, agrupados por la Fórmula 19, se describe más adelante en el Diagrama de Flujo C, donde Y', R. y X se describen anteriormente. De acuerdo con las reacciones esquematizadas en el Diagrama de Flujo C, la 4-cloro-6-nitroquinazolina, 13 (Morley, JS. y Simpson, J. Chem., Soc., 360 (1948)) se reduce a la 6-amino-4-cloroquinazolina, 14, utilizando un agente reductor, tal como hidrosulfito de sodio, en un sistema de dos fases, que consiste de tetrahidrofurano y agua, en presencia de una pequeña cantidad de un catalizador de transferencia de fase. La acilación del compuesto 14, ya sea con un cloruro ácido de la Fórmula 15 o con un anhídrido mezclado de la Fórmula 16 (que se prepara a partir del ácido carboxílico correspondiente), en un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano (THF) , en presencia de una base orgánica, tal como piridina o N-metil morfolina, da los compuestos de la Fórmula 17. En aquellos casos donde los compuestos 15 o 16 tienen un átomo de carbono asimétrico, pueden ser utilizados como la mezcla racémica o como los enantiómeros individuales R o S, en cuyo caso los compuestos de esta invención se encontrarán en las formas racémica u ópticamente activas R y S, respectivamente. El calentamiento de un compuesto de la Fórmula 17 con una anilina de la Fórmula 18 en un solvente inerte, tal como isopropanol, da los compuestos de esta invención, representados por la Fórmula 19.

DIAGRAMA DE FLUJO C 13 14 17 19 La preparación de los compuestos de esta invención,, agrupados por la Fórmula 26, se describe más adelante en el Diagrama de Flujo D, donde Y', R4 y se describieron anteriormente. De acuerdo con las reacciones esquematizadas en el diagrama de Flujo D, el grupo nitro del compuesto 20 (preparado como se indica en el Diagrama de Flujo A) se reduce al correspondiente compuesto amino 21, usando un catalizador de paladio y una fuente de hidrógeno, que puede ser el hidrógeno mismo o ciclohexeno. La acilación del compuesto 21, ya sea con un cloruro ácido de la Fórmula 22 o un anhídrido mezclado de la Fórmula 23 (el cual se prepara a partir del ácido carboxílico correspondiente), en un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano (THF), en presencia de una base orgánica, tal como piridina o N-metil morfolina, da los compuestos de la Fórmula 24. En aquellos casos en donde los compuestos 22 o 23 tienen un átomo de carbono asimétrico, pueden utilizarse como el racemato o los enantiómeros individuales R o 'S , en cuyo caso los compuestos de esta invención se encontrarán en las formas ópticmante activas racémica o R y S, respectivamente. El calentamiento de un compuesto de la Fórmula 24 con una anilina de la Fórmula 25, en un solvente inerte, tal como el ácido acético, da los compuestos de esta invención, representados por la Fórmula 26.

DIAGRAMA DE FLUJO D v 20 21 22 23 'N(CH3)2 I THF, piridina o (C2H5)3N rc 24 Inhibición de la Cinasa del Receptor del Factor de Crecimiento Empidérmico (EGF-R) Los compuestos de prueba se evaluaron para su capacidad de inhibir la fosforilación del residuo de tirosina de un sustrato peptídico, catalizada por la enzima cinasa del receptor del factor de crecimiento epidérmico. El sustrato peptídico (RR-SRC) tiene la secuencia arg-arg-leu-ile-glu-asp-ala-glu-tir-ala-ala-arg-gli. La enzima se obtuvo como un extracto de membrana de las células A431 (American Type Culture Collection, Rockville, MD). Las células A431 crecieron en matraces T175 hasta una confluencia del 80%. Las células se lavaron dos veces con solución salina amortiguada 2+ con fosfatos (PBS), sin Ca . Los matraces se hicieron girar durante 1.5 horas en 20 mL de PBS con ácido etilendiaminotetra-acético (EDTA) 1.0 mM a temperatura ambiente y se centrifugaron a 600 g durante 10 minutos. Las células se solubilizaron en 5x10 células por 1 mL de amortiguador de lisis frío (ácido 4-(2-hidroxietil)-l-piperazin-etanosulfónico 10 mM (HEPES), pH 7.6, NaCl 10 mM, EDTA 2 mM, fluoruro de fenilmetilsulfonilo 1 mM (PMSF), aprotinina 10 mg/mL, leupeptina 10 mg/mL, ortovanadato de sodio 0.1 mM) en un homogenizador Dounce con 10 golpes, en hielo. El usado se centrifugó a 600 g durante 10 minutos, primero para clarificar los restos celulares, y el sobrenadante se centrifugó adicionalmente a 100,000 g, durante 30 minutos a 4 C. El botón de membranas se suspendió en 1.5 mL de amortiguador HNG (HEPES 50 mM, pH 7.6, NaCl 125 mM, glicerol 10%). El extracto de membrana se dividió en alícuotas, se congeló inmediatamente en nitrógeno líquido y 3ß almacenó a -70 C. Los compuestos de prueba se prepararon en soluciones madre de 10 mg/mL en dimetilsulfoxido (DMSO) al 100%. Antes del experimento, las soluciones madre se diluyeron a 500 mM con amortiguador (Hepes 30 mM, pH 7.4) y luego se diluyeron en forma seriada hasta la concentración deseada. Una alícuota del extracto de membrana A431 (10 mg/mL) se diluyó en HEPES 30 mM ( pH 7.4) para dar una concentración de proteína de 50 ug/mL. A 4 microlitros de la preparación de la enzima se adicionó EGF (1 microlitro a 12 ug/mL) y se incubó durante 10 minutos en hielo, seguido por 4 microlitros del compuesto de prueba o amortiguador, esta mezcla se incubó en hielo durante 30 minutos. A ésta se adicionaron el 33P-ATP (10 mCi/mL), diluido 1:10 en el amortiguador de ensayo, junto con el péptido sustrato, a una concentración 0.5 mM (las reacciones de control no tuvieron compuesto de prueba) y se permitió que la reacción procediera durante 30 minutos a 30°C. La reacción se detuvo con TCA 10% y se dejó en hielo durante al menos 10 minutos, después de lo cual los tubos se microcentrifugaron a velocidad máxima durante 15 minutos. Entonces, una porción de los sobrenadantes se depositó en gotas sobre discos de fosfocelulosa P81 y se lavaron dos veces en ácido acético al 1 %, después con agua durante 5 minutos, cada uno seguido por la cuenta de centelleo. Los datos de inhibición para los compuestos representativos de la invención se muestran más adelante en la TABLA 1. El valor IC_0 es la concentración del compuesto de prueba necesaria para reducir la cantidad total de sustrato fosforilado en un 50%. El % de inhibición del compuesto de prueba se determinó para al menos tres concentraciones diferentes y el valor IC-.Q se evaluó a partir de la curva dosis-respuesta. El % de inhibición se evaluó con la siguiente fórmula: %inhibición = 100 - (CPM(medicamento)/CPM(control) ) x 100 donde CPM(medicamento) se encuentra en unidades de cuentas por minuto y es un número que expresa la cantidad de ATP marcado radioactivamente (g-33P) incorporado en el sustrato peptídico RR-SRC por la enzima después de 30 minutos a 30°C, en presencia del compuesto de prueba, tal como se midió por cuenta de centelleo líquido. CPM(control) se encuentra en unidades de cuentas por minuto y es un número que expresa la cantidad de ATP marcado radioactivamente (g-33P) incorporado en el sustrato peptídico RR-SRC por la enzima después de 30 minutos a 30 C, en ausencia del compuesto de prueba, tal como se midió por la cuenta de centelleo líquido. Los valores CPM se corrigieron para las cuentas de fondo producidas por el ATP en ausencia de la reacción enzimática. Los valores IC5Q reportados en la TABLA 1 son promedios del número de pruebas conducidas.

TABLA 1 Inhibición de la Cinasa del Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico. IC50 Número de Compuesto (uM) Pruebas Ejemplo 4 0.012 5 Ejemplo 5 0.198 4 Ejemplo 6 0.5 1 Ejemplo 7 0.05 1 EEjjeemmpplloo 88 00..0044 2 Ejemplo 9 0.002 20 Ejemplo 10 0.11 2 Ejemplo 11 0.056 4 Ejemplo 13 10_ 1 EEjjeemmpplloo 1144 11..00 1 Determinación de la Unión Covalente del Compuesto de Prueba con la Cinasa Receptora del Factor de Crecimiento Epidérmico Una alícuota del extracto enzimático A431 (preparado como se describió anteriormente) se diluyó hasta 50 a 100 ug/mL con amortiguador Hepes 30 mM a pH 7.4, que contenía EGF a una concentración de 12 ug/mL de modo que se efectuara, bajo las condiciones de prueba estándar, aproximadamente el 2% de la reacción y que la concentración final de EGF fuera de 2.4 ug/mL (como en el ensayo estándar descrito anteriormente). Esta mezcla se incubó al menos 10 minutos a 4 C antes de utilizarse. Esta preparación enzimática fue utilizada para los siguientes procedimientos de prueba de diálisis. A 60 microlitros de la preparación enzimática se adicionaron 48 microlitros del compuesto de prueba, disuelto en dimetilsulfóxido al 5% (DMSO) (o solo 48 microlitros de DMSO 5% para el control). Las concentraciones del compuesto de prueba se eligieron de una cantidad 20 a 100 veces mayor que el valor IC5Q' para asegurar de manera ideal una inhbición del 80% al 90%. La solución enzima-inhibidor se incubó durante 45 a 60 minutos a 4 C. Para los procedimientos de prueba control no dializados, un alícuota de 9 microlitros de la solución enzima-inhibidor se evaluó bajo protocolos estándar, tal como se describió anteriormente. Para los procedimientos de prueba de diálisis, una alícuota de 60 microlitros de la solución enzima-inhibidor se colocó en un pozo de un sistema Pierce Microdialyzer System 100 y se dializó a 4°C contra Hepes 30 mM, que contenía 1.25 ug/mL de EGF, durante 24 horas, con dos cambios de amortiguador (mínimo 3 horas de diálisis antes de cada cambio). Se utilizaron los cortes de membranas con un peso molecular de 8000. Una alícuota de 9 microlitros (al menos por duplicado) de la solución diálizada fue evaluada para su actividad mediante el protocolo estándar, tal como se describió anteriormente. La enzima sin compuesto de prueba adicionado retiene del 50 al 90% de su actividad inicial después de la diálisis. Las soluciones sometidas a diálisis del compuesto de prueba sin la enzima adicionada también se evaluaron, para asegurar que los compuestos sean dializables. Si la actividad enzimática no se recupera después de la diálisis, entonces se determina que los compuestos de prueba están unidos de manera covalente (inhibición irreversible). Si la actividad enzimática se recupera en gran medida después de la diálisis, entonces se determina que el compuesto de prueba se une de manera no covalente (inhibición reversible). Las determinaciones de la unión covalente pueden expresarse como el % de Actividad Recuperada, el cual se calcula utilizando la siguiente fórmula que utiliza el % de inhibición antes y después de la diálisis: % de Actividad Recuperada = ((% inhibición(pre-dialisis) - % Inhibición( ost-diálisis) )/% Inhibición(pre-diálisis) ) x 100 Un valor del % de Actividad Recuperada cercano a 100% indica enlace no covalente (Inhibición reversible). Un valor para el % de Actividad Recuperada mucho menor de 100% indica enlace covalente (inhibición irreversible). Los resultados obtenidos para las determinaciones de la unión covalente a la cinasa EGF-R, para los compuestos representativos de esta invención se proporcionan más adelante en la TABLA 2. Para propósitos de comparación, la TABLA 2 también proporciona datos de unión para N- ( 3-bromofenil)-6 , 7-dimetoxi-4-quinazolinamina. Este inhibidor de quinazolina se ha identificado como un inhibidor potente de la cinasa de EGF-R (Fry, D. W. , et. al., Science, 265, 1093 (1994); Rewcastle G. W. , et. al., J. Med. Chem., 38, 3482 (1995), y Bridges, E. J., et. al., J. Med. Chem., 39, 267, (1996)) y se encuentra incluida en la Solicitud de Patente Europea 566,226 Al. Los resultados de las evaluaciones múltiples independientes para cada compuesto evaluado se proporcionan en la TABLA 2: TABLA 2 Determinación del Enlace Covalente a la Cinasa del Receptor el Factor de Crecimiento Epidérmico Compuesto % de Actividad Recuperada Determinación Ejemplo 4 20 11 17 Covalente (enlace (irreversible) Ejemplo 9 9 Covalente (enlace irreversible) N-(3-bromofenil) 102 70 107 No Covalente -6 , 7-dimetoxi-4- (enlace reversiquinazolinamina ble) Los resultados de la TABLA 2 muestran que los compuestos de esta invención inhiben la cinasa de EGF-R de manera irreversible formando un enlace covalente con un residuo de aminoácido localizado sobre la enzima. A este respecto, son diferentes de las 4-anilinoquinazolinas usuales, tal como la N-( 3-bromofenil )-6 ,7-dimetoxi-4-quinazolinamina, la cual se une de una manera reversible.

Como se delineará más adelante, esta diferencia en las capacidades de unión entre los compuestos de esta invención y las quinazolinas y los inhibidores usuales de quinazolina de la técnica previa, conduce a una actividad biológica significativamente mejorada y, por lo tanto, a una mayor utilidad terapéutica.

Inhibición del Crecimiento Celular Según se Midió por la 3 Incorporación de( H)-timidina (Timidina Tritiada) Los compuestos representativos de esta invención fueron evaluados para su capacidad de inhibir el crecimiento de las líneas celulares que se describen más adelante, in vitro. La inhibición se cuantifica midiendo la disminución en la incorporación de la timidina marcada radioactivamente cuando las células crecen en presencia del inhibidor. Las líneas celulares A431 y SKBR3 fueron obtenidas de American Type Culture Collection, Rockville, MD. Las células Neu-3T3 fueron obtenidas transfectando los fibroblastos de ratón NIH 3T3 con un oncogene activado, rat Neu. Las células NHEK se obtienen de Clonetics (San Diego, California). Las células crecieron de manera rutinaria en un incubador humidificado, en aire con 5% de CO„. Estas líneas celulares dependen de los factores de crecimiento, que son ligandos para las cinasas de tirosina del receptor, que son los blancos de los compuestos de esta invención y tienen las siguientes características: A431: Células del carcinoma humano epidermoide, que sobre- expresan EGFR. Neu-3T3: Células NIH 3T3 transfectadas con el oncogene Neu activado. NHEK: Queratinocitos epidérmicos humanos normales, dependientes de EGF. SKBR3: Células de cáncer de pecho humano que sobre- expresan el gene ErbB2.

Las líneas celulares fueron cultivadas en medios apropiados, tal como se describe más adelante: A431: Medios modificados Eagles de Dulbecco, con alto contenido de glucosa, BRL/Gibco (10% de Suero Bovino Fetal (FBS), Glutamina, Penicilina-Streptomicina) Dulbecco, R., Freeman, G. Virology 8, 396 (1959). Neu-3T3: Medios modificados Eagles de Dulbecco, con alta concentración de glucosa (10% de Suero Bovino Fetal, Glutamina, Penicilina-Streptomicina) . SKBR3: Roswell Park Memorial Institute 1640 W/GLU (10% FBS, GLU, PS) Moore, G. E., Gerner , R. E. y Franklin, H. A. A. M. A., 199, 516 (1967). NHEK: Medio De Crecimiento de Queratinocito, Clonetics Boyce, S. T. y Ham, R. G. In Vitro 17, 239 (Abstract No. 159) (1981). Las células se sembraron a una concentración de 10,000 células/pozo, en placas de 96 pozos, en medios completos y se les permitió crecer hasta la fase logarítmica. En esta etapa, el medio completo fue reemplazado con medio que contenía 0.5% de FBS (para las células que crecían en 10% de FBS) o medios que carecían del factor epidérmico de crecimiento (EGF) (para células que crecían en medio libre de suero). Después de una incubación durante toda la noche en medios con bajo contenido de suero (o que carecían de EGF), se adicionaron los compuestos que se evaluaron, y las células permanecieron en presencia de los compuestos durante 48 a 72 horas. Los medios con el compuesto de prueba fueron eliminados y se adicionó otra vez medio completo. Se permitió que las células crecieran durante 18 horas. Esto fue seguido 3 por incubación en ( H) timidina (1 mCi/mL, en medio suero/EGF) durante 4 horas. Las células se lisaron en NaOH 0.5 M durante al menos 30 minutos a 37°C y se analizó la radioactividad. Los datos de inhibición del crecimiento celular se proporcionan más adelante en la TABLA 3. El valor IC-.Q es la concentración del compuesto de prueba necesaria para reducir la cantidad de incorporación de ( 3H)timidina en un 50%. El % de inhibición del compuesto evaluado se determinó para al menos tres concentraciones diferentes y el valor !C,0 evaluado se evalúa a partir de la curva dosis-respuesta. El % de inhibición se evaluó con la siguiente fórmula: % inhibición = 100 - (CPM(medicamento)/CPM(control) x 100 donde CPM(medicamento) se encuentra en unidades de cuentas por minuto y es el número que expresa la cantidad de 3 ( H)timidina incorporada en el DNA cuando las células crecen en presencia del compuesto de prueba, tal como se midió por la cuenta de centelleo líquido. CPM(control) se encuentra en unidades de cuentas por minuto y es un número que expresa la cantidad de ( H)timidina incorporada al DNA cuando las células crecen en ausencia del compuesto de prueba, tal como se midió por la cuenta de centelleo líquido.

TABLA 3 Inhibición del Crecimiento Celular tal como se Midió por la Incorporación de ( H)timidina (IC5Q) Compuest :o A431 SKBR3 NHEK NEU-3T3 (uM) (UM) (uM) (uM) Ejemplo 4 0.07 50 0.17 50 Ejemplo 5 0.825 0.30 0.17 10 Ejemplo 6 27 >50 4.5 so Ejemplo 7 0.45 5.5 0.45 7.5 Ejemplo 8 0.22 7 0.5 0.3 Ejemplo 9 0.011 1.057 0.002 0.002 Ejemplo 10 60 >50 >50 15 Ejemplo 11 0.8 4 0.85 0.4 Inhibición In Vivo del Crecimiento de los Tumores Epidermoides Humanos (A431) Se utilizaron ratones hembra BALB/c nu/nu (Charles River, Wilmington, MA) en los procedimientos de prueba farmacológica estándar iri vivo. Las células del carcinoma epidermoide humano A431 (American Type Culture Collection, Rockville, Maryland # CRL-155) crecieron n vitro tal como se describió anteriormente. Una unidad de 5 x 10 células se inyectó SC en los ratones. Cuando los tumores lograron una masa de entre 100 y 150 mg, los ratones se mezclaron al azar en grupos de tratamiento (día cero). Los ratones se trataron IP una vez al día ya sea en los días 1, 5 y 9 o en los días 1 a 10 después de tratarlos con dosis de, ya sea 80, 40 o 20 mg/Kg/dosis del compuesto a evaluarse, en Klucel al 0.2%. Los animales control no recibieron medicamento. La masa del tumor 2 se determinó cada 7 días (longitud x ancho )/2 durante los 28 días después del tratamiento. El crecimiento relativo del tumor (masa promedio del tumor al día 7, 14, 21 y 28, dividida por la masa promedio del tumor al día cero) se determinó para cada grupo de tratamiento. Se determinó el % de T/C (Tumor/Control) dividiendo el crecimiento relativo del tumor del grupo tratado por el crecimiento relativo del tumor del grupo placebo y multiplicando por 100. Un compuesto se considera que es activo si el % T/C se encuentra que es menor o igual al 42%. Los resultados de inhibición obtenidos para el compuesto del Ejemplo 9 se proporcionan más adelante en la TABLA 4.

TABLA 4 Inhibición In Vivo del Crecimiento de los Tumores Epidepnoides Humanos (A431) en los Ratones por el Compuesto del Ejemplo 9 Dosis RTG %T/CC RTG %T/CC RTGb %T/CC RTG %T/CC S/Td IP Día Día Día Día (mg/Kg/ 7 16 21 28 dosia) *Control 3.68 7.91 11.41 15.04 10/10 *80 0.71 18 0.91 11 1.07 9 1.36 9 5/5 *40 1.48 40 2.23 28 3.05 27 4.04 27 5/5 *20 1.72 47 2.69 34 4.33 38 6.18 41 5/5 **20 0.75 20 1.01 13 1.25 11 2.53 17 5/5 a) Medicamentos administrados IP en los días 1, 5, 9 * o en los días 1 a 10 **. Masa Promedio del Tumor al día 7, 14, 21, 28 b) Crecimiento Relativo del Tumor = Masa Promedio del Tumor al día 0 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Tratado c) %T/C= X 100 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Placebo d) S/T = No de Sobrevivientes/No. Tratado al Día +28 después del Tratamiento del Tumor.

La capacidad del compuesto del Ejemplo 9 y de la N-( 3-bromofenil )-6 , 7-dimetoxi-4-quinazolinamina para inhibir el crecimiento de los tumores epidermoides humanos (A431) in vivo se comparan más adelante, en la TABLA 5. Se eligió la N-( 3-bromofenil)-6 ,7-dimetoxi-4-quinazolinamina como el compuesto de comparación debido a que este inhibidor de quinazolina se ha identificado como un inhibidor potente de la cinasa EGF-R (Fry, D. W. , et al., Science, 265, 1093 (1994); Re castle G. W. , et. al., J. Med. Chem., 38, 3482 (1995); Bridges, A. J., et. al., Med. Chem., 39, 267 (1996)) y porque está agrupada en la solicitud de Patente Europea 566,226 Al.

TABLA 5 Una Comparación de la Inhibición In Vivo por el Compuesto del Ejemplo 9 y la N-(3-Bromofenil)-6,7-dimetoxi-4-quina2?lin-amina, del Crecimiento de los Tumores Epidermoides Humanos (A431) en Ratones. Dosis 20 mg/Kg/dosis IP. Compues- RTGb %T/CC RTGb %T/CC RTGb %T/CC RTGb %T/CC S/Td to Día D a Día Día 7 14 21 28 *Control 3.18 5.65 7.79 10.3 10/10 Ejemplo 9 1.11 35 1.26 22 1.51 19 2.55 22 14/15 NN--((33--bbrroo-- 33..0033 9955 66..5588 1 11166 1100..55 128 14.47 140 15/15 mofenil)- 6 , 7-dime- toxi-4-quinazo- linamina - - a) Los medicamentos administrados IP a los días 1 a 15. Masa Promedio del Tumor al día 7, 14, 21, 28 b) Crecimiento Relativo del Tumor = Masa Promedio del Tumor al día 0 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Tratado c) %T/C= X 100 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Placebo d) S/T = No. de Sobrevivientes/No. Tratado al Día +28 después del Tratamiento del Tumor.

Tal como se muestra en las TABLAS 4 a 5 , los compuestos de esta invención inhiben el crecimiento de los tumores humanos en mamíferos y, por lo tanto, son útiles como agentes antineoplásicos. A este respecto, son muy diferentes de las 4-anilinoquinazolinas usuales, tales como la N-(3-bromofenil)-6 , 7-dimetoxi-4-quinazolinamina, la cual carece de actividad antineoplásica. La capacidad del compuesto del Ejemplo 9 para inhibir el crecimiento de los tumores epidermoides humanos (A431) in vivo fue comparada con dos compuestos estructuralmente similares, N-(4-( (3-metilfenil)amino)-6-quinazolinil)-7-fluoro-2-?ropenamida (a la que se refiere como el Comparador A) y N-(4-( (3-bromofenil)amino)-6-quinazo linil )-butanamida (referida como el Comparador B), los cuales están cubiertos por la Solicitud de Patentes Europeas 635,488A1 y 566,226 Al, respectivamente. Los resultados de estas comparaciones se muestran en las TABLAS 6 y 7.

TABLA 6 Una Comparación de la Inhibición In Vivo por el Compuesto del Ejemplo 9 y la N-( 4-( (3-metilfenil)amino)-6-quinazolinil)-7-fluoro-2-propenamida (Comparador A) del Crecimiento de los Tumores Epidermoides Humanos (A431) en Ratones. Compuesto RTG %t/cc RTG %T/CC RTG %T/CC S/Td Día Día Día 7 14 21 Control 5.52 11.63 7.79 10/10 Ejemplo 9 1.25 18* 2.50 21* 3.77 24* 10/10 (80 mg/Kg) Comparador A 3.39 61 5.60 48 7.68 48 10/10 (80 mg/Kg) Ejemolo 9 0.79 14* 1.39 12* 2.55 16* 10/10 (20 mg/Kg) Comparador A 4.82 87 7.36 63 8.75 56 9/10 (20 (mg/Kg) a) Los medicamentos administrados IP. El control y las dosis de 80 mg/Kg se administraron a los días 1, 5 y 9; las dosis de 20 mg/Kg se administraron a los días 1 a 10. Masa Promedio del Tumor al día 7, 14, 21 b) Crecimiento Relativo del Tumor = Masa Promedio del Tumor al día 0 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Tratado c) %T/C= X 100 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Placebo d) S/T = No. de Sobrevivientes/No. Tratado al Día +21 después del Tratamiento del Tumor. * Indica significancias estadística de p menor a 0.01.

TABLA 7 Una Comparación de la Inhibición In Vivo por el Compuesto del Ejemplo 9 y la N-(4-( (3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-butanamida (Comparador B) del Crecimiento de los Tumores Epidermoides Humanos (A431) en Ratones. CompuesRTG %T/CC RTG %t/cc RTG %T/CC RTG %T/CC S/Td to3 Día Día Día Día 7 14 21 28 Control 3.56 3.55 5.85 7.63 10/10 Ej.9 (80 * * * * mg/kg) 0.89 25 1.50 27 2.44 42 3.45 45 5/5 Comparador B(80 mg/kg) 3.37 95 5.43 98 6.21 106 10.26 142 5/5 Comparador B(20 mg/kg) 2.90 81 4.19 75 5.62 96 8.04 105 5/5 a) Medicamentos administrados IP. El control y las dosis de 80 mg/Kg se administraron a los días 1, 5 y 9; la dosis de 20 mg/Kg se administró a los días 1 a 10. Masa Promedio del Tumor al día 7, 14, 21, 28 b) Crecimiento Relativo del Tumor = »— Masa Promedio del Tumor al día 0 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Tratado c) %T/C= X 100 Crecimiento Relativo del Tumor del Grupo Placebo d) S/T = No. de sobrevivientes/No. tratado al día +28 después del tratamiento del tumor. * Indica significancia estadística de p •<.0.01.

Los resultados obtenidos en las Tablas 6 y 7 muestran que el compuesto del Ejemplo 9, un compuesto representativo de esta invención, inhibió de manera importante (p menor que 0.01) el crecimiento del tumor epidermoide humano jln vivo. Los compuestos estructuralmente más cercanos, de las Solicitudes de Patente Europea 635,488 Al (Comparador A) y 566,226 Al (Comparador B) fueron sustancialmente menos activos que el compuesto del Ejemplo 9 y ambos no pudieron reducir de manera importante el crecimiento del tumor en ambas dosis evaluadas. Basados en los resultados obtenidos para los compuestos representativos de esta invención, los compuestos de esta invención son particularmente útiles para el tratamiento, inhibición del crecimiento o erradicación de los neoplasmas. En particular, los compuestos de esta invención son útiles para el tratamiento, inhibición del crecimiento o erradicación de los neoplasmas que expresan EGFR tales como los del pecho, riñon, la vejiga, la boca, la laringe, el esófago, el estómago, el colon, los ovarios o los pulmones. Los compuestos de esta invención pueden formularse solos o pueden estar combinados con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables para administración. Por ejemplo, solventes, diluyentes y similares y pueden administrarse oralmente en formas, tales como tabletas, cápsulas, polvos que pueden dispersarse, granulos o suspensiones que contienen, por ejemplo, desde aproximadamente 0.05 hasta 5% del agente de suspensión, jarabes que contienen, por ejemplo, desde aproximadamente 10 hasta 50% de azúcar y elíxires que contienen, por ejemplo, desde aproximadamente 20 hasta 50% de etanol y similares; o de manera parenteral, en forma de solución estéril que se puede inyectar o de suspensión que contiene desde aproximadamente 0.05 hasta 5% de agente de suspensión en un medio isotónico. Tales preparaciones farmacéuticas pueden contener, por ejemplo, desde aproximadamente 0.05 hasta aproximadamente 90% del ingrediente activo en combinación con el portador, más usualmente entre aproximadamente 5% y 60% en peso. La dosis efectiva de ingrediente activo empleada puede variar, dependiendo del compuesto particular empleado, el modo de administración y la severidad de la condición que se va a tratar. Sin embargo, en general, se obtienen resultados satisfactorios cuando los compuestos de la invención se administran a una dosis diaria desde aproximadamente 0.5 hasta aproximadamente 1000 mg/Kg de peso corporal del animal, opcionalmente dado en dosis divididas de dos a cuatro veces al día o en forma de liberación sostenida. Para los mamíferos de mayor tamaño la dosis diaria total es desde aproximadamente 1 hasta 1000 mg, preferiblemente, desde aproximadamente 2 a 500 mg. Las formas de dosis adecuadas para uso interno comprenden desde aproximadamente 0.5 hasta 1000 mg del compuesto activo en una mezcla íntima con un portador sólido o líquido farmacéuticamente aceptable. Este régimen de dosis ' puede ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Por ejemplo, varias dosis divididas pueden administrarse diariamente, o la dosis puede reducirse proporcionalmente, según sea indicado por las exigencias de la situación terapéutica.

Estos compuestos activos pueden administrarse oralmente, así como por vías intravenosas, intramusculares o subcutáneas. Los portadores sólidos incluyen almidón, lactosa, fosfato dicálcico, celulosa icrocristalina, sacarosa y kaolín, mientras que los portadores líquidos incluyen agua estéril, polietilen glicoles, surfactantes no iónicos y aceites comestibles, tales como aceite de maíz, aceite de cacahuate y de ajonjolí, según sean adecuados para la naturaleza del ingrediente activo y la forma particular de administración deseada. Los adyuvantes empleados de manera común en la preparación de las composiciones farmacéuticas que pueden incluirse de manera ventajosa, tales como agentes saborizantes, agentes de color, agentes preservativos y antioxidantes, por ejemplo, vitamina E, ácido ascórbico, BHT y BHA. Las composiciones farmacéuticas preferidas, desde el punto de vista de facilidad de preparación y administración, son las composiciones sólidas, particularmente tabletas y las cápsulas de relleno sólido o de relleno líquido. Se prefiere la administración oral de los compuestos. En algunos casos puede ser deseable administrar los compuestos directamente a las vías aereas en forma de un aerosol . Estos compuestos activos también pueden administrarse parenteralmente o intraperitonealmente. Pueden prepararse soluciones o suspensiones de estos compuestos activos como una base libre o una sal farmacológicamente aceptable en agua, mezclado de manera adecuada con un surfactante, como la hidroxipropilcelulosa. También pueden prepararse suspensiones en glicerol, polietilen glicoles líquidos y mezclas de los mismos en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, esta preparación contiene un preservativo para evitar el crecimiento de microorganismos . Las formas farmacéuticamente aceptables para uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas, estériles, y polvos estériles para preparación extemporánea de soluciones o dispersiones estériles inyectables. En todos los casos, la forma debe ser estéril y debe ser fluida al grado de que pueda inyectarse fácilmente. Debe ser estable bajo las condiciones de manufactura y almacenamiento y debe tratarse contra la acción contaminante de microorganismos como las bacterias y los hongos. El portador debe ser un solvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (e.g., glicerol, propilen glicol y polietilen glicol líquido), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales. Para el tratamiento del cáncer, los compuestos de esta invención pueden administrarse en combinación con otras sustancias anti-tumor, o con radiación. Estas otras sustancias o tratamientos de radiación pueden ser - - administrados al mismo tiempo, o en tiempos diferentes, que los compuestos de sta invención. Estas terapias combinadas pueden efectuar sinergia y dar como resultado una eficacia mejorada. Por ejemplo, los compuestos de esta invención pueden utilizarse en combinación con inhibidores mitóticos, tales como el taxol o la vinblastina, los agentes alquilantes tales como la cisplatina o ciclosfosamida, antimetabolitos como el 5-fluoruracilo o la hidroxiurea, intercaladores de ADN tales como la adriamicina o bleomicina, inhibidores de la topoisomerasa tales como la etoposida o camptotecina, y agentes antiestrógenos tal como tamoxifen. En seguida se describe la preparación de los ejemplos representativos de los compuestos de esta invención.

EJEMPLO 1 N' - ( 2-Ciano-4-nitrofenil ) -N,N-dimetilformamidina Una porción de 40.8 g de 5-nitro-antranilonitrilo y 40 mL de N,N-dimetil-formamida dimetil acetal, se calentaron en un baño de vapor durante 2 horas. Los solventes se eliminaron a presión reducida y el residuo se recuperó en cloruro de metileno. Después de pasar esta solución a través de Magnesol, el solvente fue eliminado. Después de lavar con éter, se obtuvieron 50.8 g de N'-(2-ciano-4-nitrofenil)-N,N-dimetilformamidina.

EJEMPLO 2 N-( 3-bromofenil )-6-nitro-4-quinazolinamina Una solución de 23.74 mL de 3-bromo anilina y 40.5 g de N1 -( 2-ciano-4-nitrofenil )-N,N-dimetilformamidina en 100 mL de ácido acético glacial se agitaron y se calentaron en un baño de aceite a 148 C durante 1.5 horas. Después de enfriar, la filtración del sólido resultante da un rendimiento cuantitativo de N-( 3-bromofenil )-6-nitro-4-quinazolinamina: pf = 267-270°C; espectro de masa (m/e): 345.

EJEMPLO 3 N- ( 3-bromofenil )-4 , 6-quinazolindiamina Una mezcla de 34.5 g de N-(3-bromofenil)-6-nitro-4-quinazolinamina y 16.8 g de polvo de hierro en 150 mL de etanol y 150 mL de ácido acético glacial, se calentaron en un baño de aceite a 120 C durante 2 horas. Después de filtración del sólido, se adicionó carbonato de sodio sólido al filtrado, dando un sólido, fisto se filtró y el sólido se extrajo con metanol. Los extractos se trataron con carbón vegetal y se evaporaron hasta obtener un sólido. Después de lavar el sólido con éter, se obtuvieron 27.5 g de N-(3-bromofenil)-4,6-quinazolindiamina: espectro de masa: (m/e): 315.

EJEMPLO 4 Acido 4-( ( 4-( ( 3—bromofenil) amino) -6-quinazolinil) amino)- 4-oxo- ( Z ) -2-butenóico Una porción de 15 mL de piridina se adicionaron a 1.6 g de N- ( 3-bromofenil ) -4 , 6-quinazolindiamina y 0.6 g de anhídrido maléico. Después de agitar durante toda la noche, los solventes se eliminaron en un evaporador rotatorio. El sólido se recuperó en aproximadamente 400 mL de etanol caliente y el material insoluble se filtró para dar 0.33 g de ácido 4-( (4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)amino)-4-oxo-( Z) -2-butenóico: espectro de masa: (m/e): M + H 413, 415.

EJEMPLO 5 Ester etílico del ácido 4-( (4-( ( 3-bromofenil)amino)-6- quinazolinil ) amino) -4-oxo- ( E ) -2-butenóico Una solución de N-( 3-bromofenil) -4 ,6-quinazolin- diamina en 15 mL de piridina se enfrió en un baño de hielo y se adicionó gota a gota una solución de 1.22 g de cloruro de etil fumarilo en 10 mL de cloruro de metileno. Después de agitar durante 1.5 horas, se dejó que la reacción alcanzara la temperatura ambiente. Los solventes se eliminaron a presión rducida y el residuo se trató con agua. El sólido rojo se filtró y se extrajo en acetona caliente. Después de filtrar el material insoluble, el filtrado se concentró para dar 0.45 g del éster etílico del ácido 4-( ( 4-( ( 3-bromofenil)-amino) -6-quinazolinil )amino) -4-oxo- ( E)-2-butenóico: pf = 259-263°C, espectro de masa: (m/e): M + H 441, 443.

EJEMPLO 6 N-(4-( 3-bromofenil)amino )-6-quinazolinil)-3-metil-2- butenamida Una solución de 1.58 g de N-( 3-bromofenil)-4 , 6-quinazolidiamina en 15 L de piridina, se enfrió en un baño de hielo y se adicionó gota a gota una solución de 0.67 mL de cloruro de 3, 3-dimetilacriloílo en 7 mL de éter. Después de agitar y enfriar durante 2 horas, los solventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se trató con agua y el sólido resultante se recristalizó a partir de metil celusolve para dar 0.97 g de N-( 4-( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil )-3-metil-2-butenamida: pf = 300-301 C, espectro de masa (m/e): 396, 398.

EJEMPLO 7 N- ( 4-(bromofenil )amino)-6-quinazolinil )-(E)-2-butenamida Una solución de 1.6 g de N-( 3-bromofenil )-4, 6-quinazolindiamina en 15 mL de piridina, se enfrió en un baño de hielo y se adicionó gota a gota una solución de 0.57 mL de cloruro de trans-crotonoílo en 6 mL de éter. Después de agitar y enfriar durante 2 horas, los solventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se trató con agua y el sólido resultante se recristalizó a partir de n-butanol para dar 0.69 g de N-( 4-(bromofenil )amino)-6-quinazolinil)-(E)-2-butena ida: pf = 153-160°C, espectro de masa (m/e): M+H 383, 385.

EJEMPLO 8 N-( 4-( ( 3-bromofenil) amino )-6-quinazolinil )-2-metil-2- propenamida Una solución de 1.6 g de N-( 3-bromofenil )-4 ,6-quina-zolindiamina en 15 mL de piridina, se enfrió en un baño de hielo y se adicionó gota a gota una solución de 0.59 mL de cloruro de metacrioílo en 6 mL de éter. Después de agitar y enfriar durante 2 horas, los solventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se trató con agua y el sólido resultante se recuperó en n-butanol (calentamiento). La adición e éter a la solución enfriada da 0.44 g de N-(4- ( ( 3-bromofenil )amino) -6-quinazolinil ) -2-metil-2-propenamida: pf = 40-245°C, espectro de masa (m/e): M+H 383, 385.

EJEMPLO 9 N- ( 4- ( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil )-2-butinamida Una solución de 0.50 g de ácido 2-butinóico en 10 mL de tetrahidrofurano se enfrió en un baño de hielo. Se adicionaron una porción de 0.79 mL de cloroformato de isobutilo por una porción de 0.66 mL de N-metil morfonila. Después de aproximadamente 1 minuto, se adicionó una solución de 1.6 g de N-(3-bromofenil)-4,6-quinazolindiamina en 10 mL de piridina. Se dejó que la reacción alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. Los solventes se eliminaron a presión reducida y el sólido se recristalizó a partir de n-butanol para dar 1.07 g de N-( 4-( ( 3-bromofenil )-amino)-6-quinazolinil )-2-butinamida: espectro de masa (m/e): 381, 383.

EJEMPLO 10 Acido 4-( ( 4-( ( 3-bromofenil)amino) -6-quinazolini1)amino)- 4-oxo- ( E ) -2-butenóico Una porción de 2.5 mL de hidróxido de sodio acuoso 10 N, se adicionó a 2.3 g del éster etílico del ácido 4-((4- ( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolini1 )amino)-4-oxo-( E)-2-butenóico (Ejemplo 5) en 25 mL de etanol. Después de agitar durante una hora, se adicionaron 2.1 mL de ácido clorhídrico concentrado, y la reacción se agitó dos horas más. El sólido resultante se recristalizó a partir de n-butanol para dar 0.97 g del ácido 4-( ( 4- ( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil )-amino) -4-oxo-(E)-2-butenóico: espectro de masa (m/e): M+H 413.

EJEMPLO 11 N-( 4-( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil ) -2 , 4-hexadienamida Una solución de 0.67 g de ácido 2,4-hexadienóico en mL de tetrahidrofurano, se enfrió en un baño de hielo. Se adicionaron una porción de 0.79 mL de cloroformato de isobutilo seguidos por una porción de 0.66 mL de N-metil morfolina. Después de aproximadamente 1 minuto, se adicionó una solución de 1.6 g de N-( 3-bromofenil ) -4 , 6-quinazolin-diamina en 10 mL de piridina. Se dejó que la reacción alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. Los solventes se eliminaron a presión rducida y el sólido se recristalizó para dar 1.0 g de N-( 4-( ( 3-bromofenil ) amino)-6-quinazolinil)-2,4-hexadienamida: pf: 258-260°C.

EJEMPLO 12 N-( 4-( (3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2- ciclopentenamida Una solución de 0.43 g de ácido 2-ciclopentenóico en 5 mL de tetrahidrofurano, se enfrió en un baño de hielo. Se adicionaron una porción de 0.49 mL de cloroformato de isobutilo seguidos por una porción de 0.41 mL de N-metil morfolina. Después de aproximadamente 1 minuto, se adicionó una solución de 1.0 g de N-( 3-bromofenil)-4,6-quinazolin-diamina en 10 mL de piridina. Se dejó que la reacción alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. Se adicionaron otros 0.5 equivalentes de anhídrido mezclado. La mezcla se agitó durante 5 horas. Los solventes se eliminaron a presión reducida y el sólido se purificó por cromatografía en gel de sílice para dar 0.30 g de N- ( 4- ( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolini1 )-2-ciclopenten-amida: espectro de masa (m/e): 409 (M+H, El).

- - EJEMPLO 13 N-( 4-( ( 3-bromofenil ) amino) -6-quinazolinil )-2-propenamida Una solución de 2.0 g de N-( 3-bromofenil)-4, 6-quina zolindiamina en 10 mL de piridina, se enfrió en una baño de hielo y se adicionó gota a gota una solución de 0.61 mL de cloruro de acrioílo en 30 mL de éter, a 0 C. Después de agitar a temperatura ambiente durante 3.5 horas, los solventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía para dar 0.2 g de N-(4-( (3-brom-o fenil )amino)-6-quinazol?nil)-2-propenamida: espectro de masa (m/e) : M+H 369.

EJEMPLO 14 N-( 4-( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil )- ( 3-fenil-2- propinamida) Una solución de 0.93 g de ácido 3-fenil-2-propiónico en 10 mL de tetrahidrofurano, se enfrió en un baño de hielo. Se adicionaron una porción de 0.82 mL de cloroformato de isobutilo seguidos por una porción de 0.69 mL de N-metil morfolina. Después de aproximadamente 1 minuto, se adicionó una solución de 1.0 g de N-(3-bromofenil)-4,6-quinazolindiamina en 7 mL de piridina. La reacción se efectuó a 0 C durante 1 hora. Los solventes se eliminaron a presión reducida y el sólido se purificó por cromatografía en gel de sílice para dar 0.01 g de N-(4-( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil)-(3-fenil-2-propinamida) : espectro de masa (m/e): 443.2, 445.2 (M+H, electroaerosol ) .

EJEMPLO 15 6-amino-4-cloroquinazolina Una mezcla que consistía de 3.25 g de 4-cloro-6-nitroquinazolina, 10.8 g de hidrosulfito de sodio, y 0.3 g del catalizador de transferencia de fase (C.8H._) ..NCH.. Cl" en 97 mL de tetrahidrofurano y 32 mL de agua, se agitó rápidamente durante' 2 horas. La mezcla se diluyó con éter y la capa orgánica se separó. La solución orgánica se lavó con con salmuera y luego se secó sobre sulfato de magnesio. La solución se hizo pasar a través de una pequeña columna de gel de sílice. El solvente se eliminó a 30°C, a presión reducida, dando la 6-amino-4-cloroquinazolina, que se utiliza en la siguiente etapa sin purificación adicional.

EJEMPLO 16 ( 4-cloro-6-quinazolinil ) -2-butinamida Una solución de 1.64 g de ácido 2-butinóico en 46 mL de tetrahidrofurano se enfrió en un baño de hielo. Se adicionaron una porción de 2.34 mL de cloroformato de isobutilo seguido por una porción de 4.13 mi de N-metil morfolina. Después de aproximadamente 10 minutos, esto se vació en una solución de 6-amino-4-cloroquinazolina en 46 mL de tetrahidrofurano. Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se vació a una mezcla de salmuera y bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con éter. La solución de éter se secó sobre sulfato de magnesio y se filtró. El solvente se eliminó dando la ( 4-cloro-6-quina-zolinil ) -2-butinamida como un aceite de color, el cual se utilizó en la siguiente etapa, sin purificación adicional.

EJEMPLO 17 N- ( 4- ( ( 3-bromofenil )amino) -6-quinazolinil ) -2-butinamida Una solución que consistía de 1.76 g de (4-cloro-6-quinazolinil)-2-butinamida y 1.23 g de 3-bromo anilina, se sometió a reflujo bajo atmósfera inerte en 23 mL de isopropanol durante 40 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se adicionaron 200 mL de éter, dando 0.4 g de N-( 4- ( ( 3-bromofenil )amino)-6-quinazolinil )-2-butin-amida como la sal de hidrocloruro. La neutralización con una solución de bicarbonato de sodio, extracción con acetato de etilo, eliminación del solvente y recristalización a partir de 1-butanol, da la N-( 4- (( 3-bromofenil ) amino)-6-quinazo-linil)-2-butinamida como la base libre.

EJEMPLO 18 N' - ( 4-amino-2-cianofenil )-N,N-dimetilformamidina Una solución de 6.0 g (27.5 mmol) de N'-(2-ciano-4-nitrofenil)-N,N-dimetilformamidina, 33.9 g (41.8 L, 412.4 mmol) de ciclohexeno, y 0.6 g de Pd/C al 10% en 360 mL de metanol se reflujaron durante 4 horas. La mezcla caliente se filtró a través de celite. El solvente se eliminó y el residuo se recristalizó a partir de cloroformo-tetracloruro de carbono dando 4.9 g (95%) del compuesto del título como un sólido cristalino de color gris claro, espectro de masa (m/e): 188.9 (M+H, electroaerosol ) .

EJEMPLO 19 N-(3-ciano-4-( ( (dimetilamino )metilen)amino)fenil) - 2-butinamida A una solución de 2.01 g (23.9 mmol) de ácido 2-butinóico y 2.9 mL (22.3 mmol) de cloroformato de isobutilo en 30 mL de tetrahidrofurano se agitaron a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno, a medida que se adicionaban 2.42 g (2.63 mL, 22.3 mmol) de N-metil morfolina, durante más de 3 minutos. Después de agitar durante 15 minutos, se adicionó una solución de N' -( 4-amino-2-cianofenil)-N,N-dimetilformamidina y 1.6 g (1.75 mL, 15.9 mmol) de N-metil morfolina en 25 mL de tetrahidrofurano, durante más de 4 minutos. La mezcla se agitó 30 minutos a 0°C y 30 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con 70 mL de acetato de etilo y se vació en una mezcla de salmuera y bicarbonato de sodio saturado. La capa orgánica se secó (MgSO.) y se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice. El solvente se eliminó y el residuo se agitó con 50 mL de éter. El sólido suspendido se recolectó para dar 3.61 g (89%) de un sólido blanquecino. Espectro de masa (m/e): 255.0 (M+H, electroaerosol).

EJEMPLO 20 N-( 4-( ( 3-bromofenil)amino) -6-quinazolinil)-2-butinamida Una solución de 3.0 g (11.8 mmol) de N-( 3-ciano-4-(( (dimetilamino)metilen)amino) fenil )-2-butinamida y 2.23 g (12.98 mmol) de 3-bromo anilina en 18 mL de ácido acético, se reflujo suavemente con agitación bajo nitrógeno, durante 1 hora 15 minutos. La mezcla se enfrió en un baño de hielo y se formó una masa sólida. El sólido se recolectó por medio de filtración y se lavó con éter:acetonitrilo 1:1, para dar un sólido amarillo que se recristalizó a partir de etanol, dando 2.51 g de N-( 4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2-butin-amida: espectro de masa (m/e): 381, 383. Se hace constar que, con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a cabo la presente invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o sustancias a que la misma se refiere. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes.

Claims (23)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula: donde: X es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxilo, carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono, carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono, amino y alcanoilamino de 1 a 6 átomos de carbono; R y R, son, cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o trifluorometilo; R2 es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical que se selecciona del grupo que consiste de: - - R- es, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; n = 2 a 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R.-¡ de Y pueda ser la misma o diferente.

2. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R, R, y R2 son hidrógeno o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque X se encuentra sustituido o no sustituido con halógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

4. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-( 4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2-butinamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

5. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-( 4-( (bromofenil )amino)-6-quinazolinil)-2-metil-2-propenamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

6. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-(4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2,4-hexadienamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

7. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-(4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-(E)-2-butenamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

8. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-(4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-3-metil-2-butenamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

9. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es el ácido 4 -( (4-( (3-bromofenil)- amino)-6-quinazolinil)amino) -4-oxo-( Z)-2-butenóico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

10. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es el ácido 4 - ( ( 4-( ( 3-bromofenil)-a ino) -6-quinazolinil)amino)-4-oxo-( E) -2-butenóico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

11. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es el éster etílico del ácido 4-((4-((3-bromofenil) -amino) -6-quinazolinil)amino) -4-oxo-(E)-2-butenóico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

12. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-(4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2-ciclopentenamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

13. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-( 4-( ( 3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-2-propenamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

14. El compuesto, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es la N-(4-( (3-bromofenil)amino)-6-quinazolinil)-(3-fenil-2-propinamida) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

15. Un método para inhibir los efectos biológicos de una cinasa proteica de tirosina no-regulada en un mamífero, caracterizado porque comprende, la administración al mamífero de una cantidad efectiva de un compuesto que tiene la fórmula: donde: X es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxilo, carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono, carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono, amino y alcanoílamino de 1 a 6 átomos de carbono; R y R. son, cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o trifluorometilo; R- es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical seleccionado del grupo que consiste de R^ es, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; n = 2 a 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R del radical Y pueda ser la misma o diferente.

16. Un método para el tratamiento, inhibición del crecimiento o erradicación de neoplasmas en un mamífero, caracterizado porque comprende la administración al mamífero de una cantidad efectiva de un compuesto que tiene la fórmula: donde : X es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxilo, carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono, carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono, amino y alcanoílamino de 1 a 6 átomos de carbono; R y R, son cada uno', independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o trifluorometilo; R2 es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical seleccionado del grupo que consiste de: R- es independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; - - n = 2 a 4 ; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R., del radical Y pueda ser la misma o diferente.

17. El método, de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque el neoplasma expresa EGFR.

18. El método, de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el neoplasma se selecciona del grupo que consiste del pecho, riñon, vejiga, boca, laringe, esófago, estómago, colon, ovario y pulmón.

19. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto que tiene la fórmula: donde: X es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo, ciano, nitro, carboxilo, carboalcoxilo de 2 a 7 átomos de carbono, carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono, amino y alcanoílamino de 1 a 6 átomos de carbono; R y R, son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o trifluorometilo; R- es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical seleccionado del grupo que consiste de R- es independientemente hidrógeno,alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; n = 2 a 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R-. del radical Y pueda ser la misma o diferente o un portador farmacéuticamente aceptable. - -

20. Un proceso para producir un compuesto de la fórmula: donde R, R., R- y X, se definen de conformidad con la reivindicación 1, Y' es un radical que se selecciona del grupo que consiste de: donde cada R', es, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carboxilo, carboalcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono fenilo o carboalquilo de 2 a 7 átomos de carbono; n es un entero de 2 a 4, donde el proceso está caracterizado porque comprende tratar un antranilonitrilo de la fórmula: con dimetilformamida dimetil acetal, con o sin solvente, para dar un compuesto de la fórmula: l1 calentar el compuesto con una anilina de la fórmula: X-NH2 en un solvente orgánico ácido para dar una 6-nitro-quinazolina de la fórmula: tratar este compuesto con un agente reductor para dar una 6-amino-quinazolina de la fórmula. hacer reaccionar este compuesto con un cloruro ácido o anhídrido mezclado de las fórmulas: donde R. es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

21. Un proceso para producir un compuesto de la fórmula: donde R, R,, R~ y X se definen de conformidad con la reivindicación 1 y (Z) indica la configuración del doble enlace, donde el proceso está caracterizado porque comprende hacer reaccionar compuestos de la fórmula: con un anhídrido cíclico de la fórmula: donde cada R5 es, independientemente, hidrógeno, fenilo o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en un solvente inerte, en presencia de una base orgánica.

22. Un proceso para producir un compuesto de la fórmula; donde X se define de conformidad con la reivindicación 1, Y* se define de conformidad con la reivindicación 20, donde el proceso está caracterizado porque comprende, reducir un compuesto de la fórmula: con hidrosulfito de sodio y un catalizador de transferencia de fase, en una mezcla de solventes, que comprende un solvente orgánico inerte y agua, para dar un compuesto de la fórmula: hacer reaccionar este compuesto con un cloruro ácido o anhídrido mezclado de la fórmula: donde R. es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en presencia de una base de amina, en un solvente inerte, para dar un compuesto de la fórmula: y calentar el compuesto con una anilina de la fórmula: X-NH2 en un solvente inerte.

23. Un proceso para producir un compuesto de la fórmula: donde X se define de conformidad con la reivindicación 1, Y' se define de conformidad con la reivindicación 20, donde el proceso está caracterizado porque comprende reducir el compuesto de la fórmula: con un catalizador de paladio y una fuente de hidrógeno, en un solvente orgánico, para dar un compuesto de la fórmula: H2N N hacer reaccionar este compuesto con un cloruro ácido o anhídrido mezclado de la fórmula: donde R. es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en presencia de una base de amina, en un solvente inerte, para dar un compuesto de la fórmulas y calentar el compuesto con una anilina de la fórmula: X-NH2 en un solvente ácido. RESUMEN DE LA INVENCIÓN Esta invención proporciona un compuesto que tiene la fórmula: donde: X es fenilo que está opcionalmente sustituido; R y R, son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo, alcoxilo, hidroxilo o trifluorometilo; R2 es hidrógeno, alquilo, alcoxilo, hidroxilo, trifluorometilo; Y es un radical que se selecciona del grupo que consiste de - - R3 es, independientemente, hidrógeno, alquilo, carboxilo, carboalcoxilo, fenilo o carboalquilo; n = 2 a 4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que cada R-. del radical Y pueda ser la misma o diferente, los cuales son útiles como agentes antineoplásicos .