TW567226B

TW567226B - Cloning for and use of plant fatty acid synthase factor A and B

Info

Publication number: TW567226B
Application number: TW087105469A
Authority: TW
Inventors: Katayoon Dehesh
Original assignee: Calgene Llc
Priority date: 1997-04-11
Filing date: 1998-04-10
Publication date: 2003-12-21
Also published as: EP1003890B1; JP2002515761A; AR013633A1; US6660849B1; JP2009045074A; DE69840507D1; WO1998046776A9; US20080148434A1; KR20010006274A; WO1998046776A3; ATE421592T1; AU735445B2; EP1003890A2; BR9808528A; KR100515123B1; US7301070B2; AU6961198A; US20040068765A1; CA2284286A1; WO1998046776A2

Description

567226 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

五、發明説明1() 前言發明的領域本發明關於可編碼植物體內脂肪酸合成所需的植物脂肪酸合成酶的基因，和使用此基因結合可編碼植物中度鏈優先硫酯酶蛋白質基因的方法。此使用法提供了一種增加基因轉移植物種子油內的中度鏈脂肪酸含量的方法。背景資料高等植物合成脂肪酸係經由一般的代謝途徑。在發育種子中，脂肪酸係連接至三酸甘油酯，以此型式貯存做爲進一步發芽所需的能量來源。而脂肪酸合成的途徑係位在質體。第一步係利用短鏈優先縮合酵素，Θ-酮醯基-ACP 合成酶（/5 — ketoacyl-ACP synthase，KAS ) II催化乙醯輔助酶A ( acetyl-COA )和ACP，形成乙醯—ACP ( 醯基攜帶蛋白質，acyl carrier protein)。乙醯-ACP經延長作用而形成1 6 —和1 8 -碳脂肪酸係經由下列反應序列的循環作用：二碳單位的丙二醯- A C P縮合成較長的/3 一酮醯基一ACP(0-酮醯基一ACP合成酶），酮基經還原形成醇類-酮醯基一 ACP還原酶），脫水反應形成烯醯基一 ACP (/3 -酮醯基一 ACP去水酶），和最後的烯醯基- A C P還原作用形成延長的飽和醯基-ACP (烯醯基一 ACP還原酶）。石一酮醯基—ACP 合成酶I (KAS I)主要負責延長至棕櫚醯基一 ACP，/3 —酮醯基一ACP 合成酶 I I (KAS II 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公髮） -4- 567226 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明説明（） 3 醯基—A C P硫酯酶的鏈長度決定角色（T· V〇elkei:(1 996) Genetic Engineering,Ed.J.K.Setlow,Vol.18,pgs 111-133) ° 發明的槪要藉由此發明，提供關於Θ —酮醯基一 A C P合成酶（ KA S )的組成物和使用方法。同時有興趣的是關於生物活性植物合成酶的胺基酸和核酸序列的方法和組成物。特別是提供可編碼來自萼距花（cuphea)種的KAS蛋白質因子A和B的基因。KA S基因可應用於多方面，並且可使用於轉形的宿主細胞’包括細菌細胞’如大腸桿菌’ 和植物細胞內，以提供合成酶I和/或合成酶I I活性。合成酶活性對於較長和較短的醯基- A C P有優先的活性，並且對K A S專一抑制劑—淺藍菌素（c e r u 1 e n i η )敏感。對於中鏈長度醯基- ACP s具有優先活性的合成酶蛋白質製劑是合成酶第I型或KAS I 。 KAS I對 1 # m低濃度的淺藍菌素敏感，可被其抑制。對於長鏈長度醯基一 ACPs具有優先活性的合成酶是合成酶第I I 型或KAS II。第II型的KAS酵素也對淺藍菌素敏感，但需較高濃度（50//M)。合成酶第I I I型對短鏈長度醯基- A C P s具有優先活性，對淺藍菌素抑制作用不敏感。可編碼合成酶蛋白質的核酸序列可應用於核酸構築，以調整宿主細胞內合成酶活性含量，特別是當宿主細胞是植物宿主細胞時，它的合成酶第I、 I I和I I I活性的本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

-6- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 567226 Α7 Β7 五、發明説明（） 4 相對含量。此外，核酸構築也可設計爲降低植物細胞內內內生性合成酶的表現。一個實施例是：在這些可製造此酵素的正常植物細胞內，在啓動子的控制下，使用不表現股合成酶序列。在本發明中，特別有興趣的是對等表現合成酶蛋白質和硫酯酶蛋白質。例如，對等表現合成酶因子A和中度鏈硫酯酶，可提供做爲增加基因轉移植種子內中鏈脂肪酸含量的方法。而且，對等表現合成酶因子A基因和植物中度鏈硫酯酶蛋白質，也可提供做爲修飾基因轉移植物中，所產生的各種中度鏈脂肪酸比例的一種方法。例如，藉由合成酶因子A的表現，且由於對C 8和C 1 〇脂肪酸具活性的硫酯酶表現，而可能增加植物種子油內C 1 0 / C 8脂肪酸的比例。發明的詳述本發明植物合成酶因子蛋白質所包括的胺基酸或多胜肽序列是植物宿主細胞中，催化C 2 _ C 1 6鍵長度的釀基一 A C P和丙二醯一 A C P之間縮合反應所必需。特殊的植物合成酶因子蛋白質可能具有催化植物宿主細胞中的合成酶反應（例如做爲一單體或同雙體）或可能是具有催化植物宿主細胞中的合成酶反應的多重胜肽酵素的一個構成份，即異雙體的一個胜肽。合成酶I (KAS I)顯現對短碳鏈C2—C14的醯基一 A C P具有優先活性，並且對1 // Μ濃度的淺藍菌本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（21〇Χ297公釐）

A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 567226 五、發明説明（) 5 素敏感，可被其抑制。合成酶I I ( κ A S I I )顯現對較長度鏈一 C 14 一 C 16的醯基—A C P具有優先活性，並且被5 0//M的淺藍菌素抑制。合成酶I I I (KAS I I I)顯現封非常短碳鍵—C2 — C6的酿基一 ACP旦有優先活性，並且不被淺藍菌素抑制。此描述從製造中度鏈脂肪酸的萼距花屬的植物種中，獲得合成酶因子A和B及合成酶I I I蛋白質。如下列實施例描述，來自硬核榖斗（C.hookeriana)的合成酶A，在天然狀況下’只有在種子內大量表現。硬核縠斗（C. hooker iana )合成酶在所有檢測的組織中，表現量很少。將在大腸桿菌中表現的合成酶A和合成酶B因子純化。並且應用於決定各種合成酶因子的活性。這些分析結果顯示，來自硬核榖斗（C.hookeriana )的合成酶因子A對6 : 〇— ACP 受質有最大活性’而來自布瑞穀斗（Cuphea pullcherrima) 的合成酶因子B對1 4 : 0 — A C P有最大活性。利用從箆蔴（castor )得到的合成酶因子A和B之類似硏究證實，來自萼距花屬和箆蔴的因子B合成酶蛋白質具有相似的活性反應。然而，來自箆蔴的合成酶A則對1 4 : 0 — A C P受質顯現優先性。將硬核榖斗KAS A蛋白質在正常狀況下並不產生中度鏈脂肪酸的基因轉移植物中表現，並不會在該種子中偵測到脂肪酸種類和含量的任何修飾情況。然而，當硬核榖斗KA S A蛋白質與可提供植物種子油中C8和 C 1()脂肪酸製造的中度鏈醯基- A C P硫酯酶接合表現時本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） "" -8-

567226 A7 B7 五、發明説明（） 6 ，所獲得的中度鏈脂肪酸含量將超過只有中度鏈硫酯酶表現時所得到的量。此外，所製造出顯著含量的C 8和C i 0 脂肪酸是由於中度鏈硫酯酶表現的結果，萼距花屬KA S A蛋白質的共同表現，也會造成（：8和<：1()脂肪酸比例的改變。例如，藉由硬核穀斗chFarB2硫酯酶和chKAS A合成酶因子蛋白質的共同表現，可增加C i Q脂肪酸比例。

而且，當硬核穀斗KAS A蛋白質與可提供做爲植物種子油中，製造C : 2脂肪酸的中度鏈醯基一 A C P硫酯酶接合表現時，可增加中度鏈脂肪酸表現程度。其含量超過只利用中度鏈脂肪酸硫酯酶表現時，所觀察得到的量。此外，製造出顯著含量的C i 2和C i 4脂肪酸是由於中度鏈硫酯酶表現的結果，萼距花屬KAS A蛋白的共同表現，也會造成C i 2和C i 4脂肪酸比例的改變。例如，藉由U cFa tBl硫酯酶和chKAS A合成酶因子蛋白的共同表現，可增加C i 2脂肪酸比例。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製然而，當硬核穀斗KAS A蛋白與可提供植物種子油中C18和C18 : 1脂肪酸製造的長鏈醯基一 ACP硫酯酶接合表現時，對於長鏈脂肪酸的製造並無影響。而且，當植物以來自山竹果樹（mangosteen)具優先水解C 1 8 : 0和C18 : 1脂肪醯基- ACPs的表鏈醯基—ACP 硫酯酶（GamFatAl，U.S.專利申請案編號〇 8 / 4 4 0，8 4 5 )轉形後，再與非轉形控制植物交叉反應時，可明顯降低C18:0含量。在轉形表現GamFatAl的植物和表現硬核穀斗KA S A蛋白質的植物交叉反應時本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -9 - 567226 A7 B7 五、發明説明（) 7 ，我們也觀察到在植物種子中C 1 8 : 0含量降低。因此，本發明藉由中度鏈醯基一 A C P硫酯酶和合成酶因子蛋白質的共同表現，而提供增加和/或改變基因轉移植物種子油中，中度鏈脂肪酸組成物的方法。而且，依照所想要的特殊脂肪酸，我們可進行合成酶因子和中度鏈硫酯酶的各種組合。例如，爲了增加C i 4脂肪酸的製造，合成酶蛋白質因子可結合C 14硫酯酶表現，例如可使用來自帕布榖斗（Cuphea palustris)或宣蔑（nutmeg)的合成酶蛋白質因子（W0 96/238 9 2)，此外，硫酯酶也可結合許多不同的合成酶因子蛋白質表現，做爲中度鏈脂肪酸組成物的額外效應。本發明中所使用的合成酶包括修飾的胺基酸序列，如已被突變、截斷、增加和其他相似情形的序列，以及如部分或完全人工合成的序列。此所提供可編碼合成酶蛋白質的序列，也可做爲探針進一步篩選或用於宿主細胞內，特別是植物宿主細胞內轉錄或轉錄和轉譯之手的遺傳工程構築物。熟於本文技藝的人士將相當容易認可可製備抗體，製劑，核酸探針（D N A和R N A )和其他相似物，並用以篩選和從其他來源回收合成酶和/或合成酶核酸序列，箆蔴（R.communis)合成酶和有興趣所給序的植物合成酶之間（排除可能存在的任何刪除），典型的同質相關核酸序列將顯示至少約6 0 %同質性，宜至少約7 0 %同質性。同質性的決定是依照比較核酸或胺基酸序列資訊，或經由雜交反應。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210'〆297公釐）請先閲讀背之注意事項再

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -10- 567226 、Ί \Ί 五、發明説明έ ) 含有可編碼合成酶蛋白質因子的核酸序列或可編碼合成酶蛋白質因子和中度鏈醯基- A C Ρ硫酯酶的核酸序列的重組構築物，可藉由本技藝中已知的方法製備。構築物可設計成在原核或真核細胞中製成合成酶。我們對增加植物細胞中合成酶的表現，特別是接合中鏈硫酯酶表現，或降低所觀察的植物細胞中的內生合成酶含量特別有興趣。合成酶蛋白質因子可單獨或結合或使用，以催化所想要的脂肪酸合成延長縮合反應。例如，速率影響合成酶活性可能存在於合成酶第I、 II、 III型或這些酵素的組合。而且，合成酶活性可能依賴此所描述的各種合成酶因子的組合。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 I含有可在宿主細胞中轉錄和轉譯的有興趣核酸序列元素的構築物是>表現匣"。依照宿主，調節區域將變異相當大，包括的區域如來自病毒、質體或染色體基因或其他相似物的構造基因。爲了在原核或真核微生物，特別是單一細胞宿主表現，可使用許多的組成性或可調節啓動子。源自細菌和酵母宿主，如大腸桿菌、枯草桿菌、啤酒酵母菌的轉起始區域包括的基因如/3 -半乳糖苷酶，T 7聚合酶，trp — loc (toe) ，trpE和其他相似基因。做爲植物細胞內合成酶表現之用的表現匣將包括（轉錄作用的5/至3>方向），在植物細胞內具功能的轉錄和轉譯控制調節區域（已知爲一 >啓動子"），可編碼合成酶的核酸序列和一轉錄終止區域。目前可獲得許多提供 -11 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 567226 A7 B7 五、發明説明（g ) 做爲組成性或可調節的轉錄起始區域，如可誘發轉錄的去飽和酶構造基因。尤其可用於植物的轉錄起始區域是如伴隨花椰菜病毒（caulif lower mosaic viruses;3 5 s，1 9 s )的區域，和做爲諾巴林（nopaline)合成酶或門諾平（ mannopine)合成酶或那平（napin)和ACP啓動子等構造基因。相對應於此構造基因的轉錄/轉譯起始區域是位於各自起始密碼的5 /端上游。因此，依照所想要的用法，需要不同的啓動子。在本發明中特別有興趣的是使用可在種子組織中優先表現合成酶的啓動子，特別是在種子油形成的早期階段。此種子專一啓動子實施例包括那平或如描述於U S P N 5，4 2 0，0 3 4的種子ACP基因，如由Thompson等人的描述去飽和酶基因（Proc.Net.Acad.Sci.(1 991 )88: 2578-2582),或如描述於 USPN 5，5 3 0，1 9 4 的 B c e — 4基因的5 /端上游區域。或者使用伴隨植物合成酶構造基因的5 /端調節區域，即植物合成酶構造基因的5 /端上游區域和/或植物合成酶構造基因的3 >端下游區域。一般來說，將依照啓動子的表現反應性來選擇適當的啓動子。此外，也可選擇做爲轉錄或轉錄和轉譯之用的一或更多個其他有興趣序列，協同合成酶序列的不表現股表現，特別是如描述於USPN 5，512，482的中度鏈植物硫酯酶，以影響植油物中的含量和/或組成物的變化。當我們想要提供一種結合超過一種有興趣的核酸序列 (請先閲讀背面之注意事項再本頁)

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) 12- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 567226 A7 B7五、發明説明彳〇 ) 的轉形植物時，分離的核酸構築可提供於每一轉形植物，或構築物可兩者存在於相同植物轉形作用構築。構築物可藉由相同或不同的方法送入宿主細胞，包括經由傳統的植物培育方法進行基因轉移植物的交叉反應，只要所形成的植物產物中，二種特性都已倂入其染色體。一般來說，DNA構築的將是一種構造基因，具有在宿主內表現所必需的調節區域和篩選轉形細胞所必需的區域。此基因可能對細胞毒性試劑，如抗生素、重金屬、毒素等具抗性，或對營養缺陷體宿主，病毒免疫提供原型體的互補作用。取決於被送入構築物或組成物的不同宿主種類，我們可使用一或更多種標識物，而不同條件是用以篩選不同宿主。本發明對於D NA構築物送入植物宿主的方式並不嚴格限制。任何可提供有效轉形作用的方法都可使用。用於植物細胞轉形作用的各種方法包括使用T i -或R i -質體，微注射，電穿孔、脂質體融合，DNA撞擊或其他相似方法。在許多例子，可能想要在構築物的一邊或二邊的邊際有T 一 DNA，特別是具有左和右邊際的T 一 DNA ，最好是右邊際。特別是當使用根瘤土壤桿菌（A. tumefaciens)和發根土壤桿菌（A.rhizogenes)做爲轉形作用的構築物模式，雖然T-DNA邊際也發現用於其他轉形作用模式。表現構築物可應用於許多植物生活史，特別是涉及植物油製造的植物生命史。這些植物包括（但不限於）油菜 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -13- 567226 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明説明（） 11 籽、花生、向日葵、紅花、棉花、黃豆、玉米和棕櫚油種 ~J^· 〇當使用土壤桿菌做爲植物細胞轉形作用，分離塊可結合並與轉形的土壤桿菌反應足夠時間，以進行轉形作用，將細菌殺，死並把植物細胞培養於適當選擇的培養基。一旦癒傷組織形成，根據已知方法使用適當的荷爾蒙將促進根形成，並且將根轉移至生根培養基使植物再生。然後植物生長至產生種子，種子用以建立重複的世代並做爲分離植物油之用。本發明將藉由下列實施例而更容易了解，它只用於說明本發明，但並不因而限制本發明。實施例實施例1萼距花屬（Cuphea)K A S因子A和B基因之選殖從硬核穀斗和布瑞榖斗的發育種子分離全部RN A，然後在商業1 一基礎選殖載體合成c DNA。爲了選殖每一種類的K A S基因，將大約400,000-500,000未放大的重組噬菌體平舖於培養基上，然後把溶菌斑轉移至硝基纖維素。爲了從硬核榖斗選殖KA S因子B，使用含西洋蕓薹（ Brassicanapus)K A S 因子 B 及箆麻（cast〇r) KAS因子 B 放射線標識的c D N A ’s做爲混合探針。相似地，利用含西洋蕓薹KAS因子A和箆蔴KAS因子A cDNA選殖物的混合探針以獲得硬核穀斗 K A S因子A基因。對於本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

-14- 567226 A7 B7 五、發明説明（） 12 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) KAS III，將獲自 hn Jaworski博士的菠菜 KAS III cDNA選殖物以放射線標識，並做爲探針以從硬核穀斗分離 KAS I I I選殖物，爲了從布瑞穀斗選殖KAS B 和KAS A，將硬核榖斗 KAS B和KAS A基因 chKAS B — 2 和 chKAS A— 2 — 7 (見下面）以放射線標識，並做爲探針。粤距化屬K A S囷落的D N A序列和轉譯的胺基酸序列示於第1 一 9表。硬核榖斗 KAS因子B菌落 chKAS B — 2 和 chKSA B - 31 — 7 顯示於第1和2圖。這些菌落都不是完整長度。 KAS因子A菌落chKAS A-2—7和chK AS A— 1 — 6顯不於第3和4圖。chKAS A — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 - 7含有可編碼KA S因子蛋白質的完整序列。基於與其他植物合成酶蛋白質比較，運輸胜肽被認爲是由1 2 5 - Η 6 6核苷酸所編碼。雖然存在一些可編碼運輸胜肽的序列，c hKAS A - 1 一 6並不是一個完整長度菌落。核苷酸1 - 1 8 0代表可編碼運輸胜肽的序列，並且可編碼成熟蛋白質的序列被認爲是起始於核苷酸1 8 1。布瑞穀斗 KAS因子B菌落cpuKAS B/7-8和cpuKAS B/8—7A顯示於第5和 6圖。二者菌落含有可編碼KA S因子B蛋白質的完整序列。cpuKAS B/7 - 8的前面35個胺基酸被認爲代表運輸胜肽，編成熟蛋白的序列是起始於核苷酸 233。cpuKAS B/8 — 7A的前面39個胺基本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -15- 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 567226 A7 B7_ 五、發明説明彳3 ) 酸被認爲代表運輸胜肽，編碼成熟蛋白質的序列是起始於核苷酸2 0 9。布瑞穀斗KA S因子A菌落 cpuKAS A/p — 6A 和 cpuKAS A - p8 一 9 A顯示於第7和8圖。二者菌落含有可編KA S因子 A蛋白質的完整序列。我們提供c p uKAS A/p 7 - 6 A的轉譯胺基酸序列。成熟蛋白質的起始胺基酸被認爲是由5 9 5 — 5 9 7核苷酸所編碼的離胺酸殘基，前面的1 2 6個胺基酸被認爲代表運輸胜肽。KA S菌落 cpuKAS A—p8-9A的DNA序列是初步的。將要進行進一步分析以決定最終的DNA序列，並且顯示由此基因所編碼的胺基酸序列。硬核榖斗 KASIII菌落 chKAS I I I 27的DNA和轉譯的胺基酸序列顯示於第9圖。 chKAS I I I 27的37 - 144核苷酸序列被認爲可編碼出運輸胜肽，並且推測成熟蛋白質是由核苷酸 1 4 5 — 1 2 3 3序列所編碼。硬核縠斗KA S因子B和KA S因子A c D N A的推測胺基酸序列與去前報導的西洋蕓薹和箆蔴具有非常強的同質性。硬核榖斗KA S因子B菌落與箆蔴屬和蜘蛛菌屬KAS因子B菌落的同質性（分別爲9 4% 和9 1%)高於與箆蔴屬和蜘蛛菌屬KAS因子A菌落的同質性（二者爲60%)。編定爲chKAS B — 2和 chKAS B-31—7的硬核榖斗KAS因子B c DNA與胜肽成熟部分有9 6% —致性。相同地，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210x297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

-16- 567226 A7 B7 五、發明説明（） 14 硬核榖斗KAS因子A菌落c hKAS A— 2 - 7和c h K A S A. — 1 一 6的成熟蛋白質區域的推測胺基酸序列有9 6%—致性。布瑞穀斗KA S菌落與箆蔴和西洋蕓薹。KA S菌落也顥現同質性。在不同萼距花種類的所有 KA S因子A家族成員的成熟蛋白質部分，都有9 5% — 致性。相同地，在萼距花屬的K A S因子B基因的成熟蛋白質部分也與其他家族蛋白質有9 5% — 9 7% —致性。然而，在相同或不同的萼距花種的KA S因子B和KA S 因子A菌落之間，只有約6 0 %序列一致性。實施例2表現的程度和型式爲了檢查硬核榖斗中，K A S表現的組織專一性，從種子、根、葉和花組織分離總R N A進行北方點墨分析。我們發現二個分別但相同的點墨與c h K A S B - 3 1 — 7或chKAS A— 2 - 7編碼區域探針雜交。從R N A點墨分析的資料顯示：K A S B在所有檢驗組織中表現相似的程度，而K A S A的表現只在種子中偵測到。這些結果也顯示每一種合成酶表現不同程度。 KAS A是豐富的信息，而KAS B表現量很低。而且，即使在高嚴格雜交條件（6 5 °C，0 . 1 X S S C，〇.5%SDS)，KAS A 探針與 2·3 和 1.9 K b的二個種子轉錄物相等雜交。較大的雜交帶可能是 KAS A — 2 — 7基因的轉錄物，因爲它的cDNA尺寸是2046bP，從cDNA篩選得到的菌落數目與本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公董） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -17- 567226 A7 B7 五、發明説明（） 15 mRNA的移動相對應，並且在點墨上含量豐富。實施例3大腸桿菌中的植物KA S基因表現利用PCR將可編碼硬核穀斗KAS A c D N A 和布瑞穀斗KAS B cDNA的成熟多胜肽的DNA 片段放大，然後選殖在QIAexpress表現載體（Qingene)。爲了使這些菌落有最局程度的表現，必需決定最適實驗條件。將細胞培養於含1M山梨糖醇和2 . 5mM甜菜苷的 E C L B培養基隔夜，然後以相同培養基以1 : 4稀釋進行次培養。當細胞生長2小時（約〇 . 6 - 0 . 8 〇.D·)，以〇.4mM IPTG誘導，並使細胞繼 Is生長5小時。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製從 chKAS A— 2 - 7 和 cpu KAS B / 8 - 7 A菌落過度表現所得到的親合性純化重組酵素的酵素活性測定，係使用廣泛的醯基一 A C P爲受質（6 : 0 至 16 : 1— ACP) 。cpuKAS B/8 — 7A 的反應活性列於第1 〇圖。此資料顯示：酵素與所有檢測的醯基—A C P受質都具活性，雖然對於6 : 〇至1 4 : 0 —A C P受質的活性大於1 6 : 0和1 6 : 1受質。

硬核榖斗KAS A菌落 ch KAS a - 2 -7和c h K A S A — 1 - 6的活性反應圖顯示於第i i 圖。硬核榖斗KAS A菌落對C:6有最大活性，而對 C : 1 6 : 〇受質有最低活性。然而，此菌落即使對c : 6 : 〇受質有最大活性，其活性仍低於布瑞榖斗κ A S 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -18- 567226 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明説明（） 16 B菌落活性之5 0倍。含有可編碼成熟蛋白質的箆蔴KA S因子A菌落部份的片段也選殖於Q I Aexpress表現載體，於大腸桿菌中表現，並且如上述進行酵素親合性純化。箆蔴K. A S A的活性反應圖顯示於第1 2圖。雖然以C 6 : 0和C 1 6 1爲受質也可觀察到一些活性，但最高活性是以C 1 4 : 0爲受質。使用QI A express表現系統，從純化的箆麻 K A S因子B得到的活性反應圖顯現於第1 3圖。 KAS B菌落顯現比箆蔴KAS A菌落更高的活性（ 10倍和更高），KAS因子B對6:0至14:0— A c p受質有優先性，其結果與先前觀察一致，此蛋白質提供K A S I活性。實施例4基因轉移種子內的K A S和T E表現利用P C R將C p F a t B 1 (硬核榖斗硫酯酶cDNA; Dehesh et a I (1 996)Plant Physiol，1 1 〇 : 2 0 3 — 210)和chKAS A— 2-7放大，定序並選殖於那平表現匣。將那平/ c p Fat B 1和那平/ K A S A - 2 — 7融合物分別連接至二元載體p CGN 1 5 5 8 ( McBride and Summerfelt(PI.Mol.Biol.(1990) 14:269_276)，然後轉形至根瘤土壤桿菌，EHA101。形成的 CpFat B1 二元構築物是 pCGN 54 00, c hKAS A-2 — 7構築物是pCGN 5401。土壤桿菌媒介西洋蕓薹本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐）

-19- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 567226 A7 B7 五、發明説明彳7 ) 卡諾拉（conola)變種的轉形作用。係依照Radke等人的方法實施(Theer.Appl. Genet.(1 988) 75:685-694;Plant Cell Reports(1 992)1 1 :499-505) 〇爲了每一個 pcGN5400和 p C GN 5 4 0 1構築物而製造了許多基因轉移物。將含有那平/cpFa t B1表現構築物結合那平 / c h K A S A — 2 - 7表現構築物的雙重基因構築物組合，連接至二元載體，並且用於卡諾拉蜘蛛菌屬變種的共培養。含有chFat B1和chKAS A— 2 — 7表現構築物的二元構築物是P CGN5 4 1 3。分析含 chKAS A - 2 - 7 (5401 株）的 2 6個基因轉移株的脂肪酸，我們發現其油含量或組成與轉形變種的野生種卡諾拉種子的結果並無明顯差異。分析含chF9 t B1 (5400株）的36個基因轉移株的脂肪酸，我們發現在基因轉移種子內，C : 8 和C : 1 0的含量增加。在種子樣品槽中觀察到C : 8的是最高量4 · 2莫耳％。C : 10含量是C : 8含量的 30 — 35%。分析含 TE/KAS A 卸接（5413 株）的2 5個基因轉移株的脂肪酸，我們發現與只含 5400株的TE基因轉移株相比，其c : 8和C : 10 含量都相對增加。在單獨含c hF a t B 1構築物的植物株中，C : 8的平均量是1 · 5莫耳％，而在含TE/ KAS A卸接的植物株中，其C:8含量是2·37莫耳％。二個族群中，C : 8比C : 1〇的比例仍是恆定，相對於C : 8含量的基因轉移植物的數目是顯示於第1 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -20 - 567226 A7 _竺7 五、發明説明彳8 ) 圖。這些資料顯示：含啣接TE/KAS A構築物的基因轉移物，比只有T E構築物的基因轉移植物產生具有更高含量C:8的植物株。例如，含TE/KAS A P C GN5 4 1 3構築物的許多植物株，含有幾乎7莫耳 %的08，而從只以PCGN5400 TE轉形的植物株得到的最高C8量是4 · 2莫耳％C8。表現chFa t B2 (硬核榖斗硫酯酶；

Dehesh et al(1 996) The Plant Journal 9:167 — 1 7 2 )的基因轉移卡諾拉植物的T 3世代的一半種子分析結果顯示，這些植物可堆積達到22%(重量）（33 莫耳％)的8 : 0和10 : 0脂肪酸（4804-22 — 357)。分離分析顯示這些轉形物含有二個基因座，並且它們現在是純接合體。將從這些一半種子篩選生長的植物移至溫室，然後與事先經硬核榖斗KAS A (540 1)或KAS A/CpFat B1雙重構築物（54 1 3 )轉形的T 1轉形物交叉反應。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 從含 ChFat B2 (4804 — 22 — 357) 和chKAS A-2 — 7 (5401 - 9)的基因轉移植物株交叉反應所形成的許多植物株的脂肪酸分析結果顯示：其增加C : 10/C : 8含量比例（第15圖）。在只含chFa t B 2 TE的幾乎所有基因轉移植物中，其C : 10/C : 8比率是介於3和6，而在含TE和 KAS A—2-7的基因轉移植物的F1世代，其比率高達22。C : 1〇含量的增加是伴隨總C : 8和C : 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -21 - 567226 at B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明纟9 ) 10含量的增加（第16圖）。在雜接合體F1植物株內的C : 8和C : 10脂肪酸總和是與純接合體母株（48 0 4 — 2 2 - 3 5 7)內的含量一樣高，而雜接合體植物株通常比純接合體植物株含有較少量的C:8和C:10 〇相似的結果也可在由4804-22—357( c h F a t B 2 )和5413-17(C p F a t B 1 和 c h K A S A - 2 - 7啣接）之間交叉反應形成的FI 世代種子中觀察到。在5 4 1 3 — 1 7植物株中，C : 8 和C : 10的含量分別爲〇 · 3和2 · 8莫耳％。第17 圖的資料顯示·· 4804 — 22 — 357 (CpFa t B2)與5401-9 (chKAS A-2—7)交叉反應形成的植物株，其內脂肪酸型式轉移至C : 1 〇脂肪酸。而且，第1 8圖顯示雜接合體存在二個分別的族。這些含有幾乎9一11%(重量）C:10+C=8的植物，被認爲代表含有CpFat B1 TE基因單一複本且並無來自5413的CpFa t B1和chKAS A基因複本的後代。含有約1 5 — 20% (重量）C: 10 + C : 8的植物株，被認爲代表含有CpFa t B 1 TE基因和來自5413的CpFat B1和 chKAS A基因的雜接合體。因此，當存在一個複本的chKAS A基因時，c : l〇 + C : 8脂肪酸含量並不會減少至母株內所偵測到的5 〇 %。爲了進一步顯示硬核榖斗KAS A酵素的長鏈度專 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210x297公楚） 22- 567226 A? B7 五、發明説明（） 20 一特性，在含有加州月桂樹（Umbellularia California) 12:0專一硫酯酶，Uc Fat B1(USPN 5，344，771MchKAS A - 2 - 7( 5 4 0 1 - 9 )的基因轉移西洋蕓薹植物株之間進行交叉反應。含Uc Fat B1的基因轉移植物的半種子分析先前已顯示：在純接合雙單倍體植物株（LA 8 6 DH 1 86)的種子油中，可堆積高達5 2莫耳％的（：1 2 : 0°LA86DH186植物和末轉形控制的蜘蛛蘭（Bras sica)的交叉反應顯示出降低C 1 2 : 0含量。然而，在LA86DH186和5401—9半接合體植物交叉反應形成的F 1子代種子油中，可堆積達到 57莫耳％的（：12 : 0 (第19圖）。有趣的是，在 LA86DH186 X未轉形控制株和 LA8 6DH 1 8 6X5 40 1 - 9交叉反應的植物株中，F 1子代種子內的C 1 4 : 0含量降至純接合體 LA86DH186植物株內含量的50% (第20圖）。而且，增加C 1 2 : 0脂肪酸部分造成所有長鏈脂肪酸基（（：16:0，〇18:0，〇18:2和018:3 )含量的下降。這些結果顯示c hKAS A— 2 — 7是一種對C6 : 0至CIO : 〇— ACP受質具專一性的酵素，並且它的過度表現會經極性地降低較長鏈醯基A C P 槽。 5 4 0 1 - 9植物和可表現來自鳳果（Garainia mangostana)的 1 8 : 1/1 8 : 0 TE 的基因轉移植本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填^^頁)

、1T 瓣經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -23- A7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 567226 ______B7 五、發明説明h ) 物株（5266) (Garm Fat A1, US專利申請案編號〇8 /440，845)進行交叉反應所得到的結果支持 c h K A S A — 2 - 7鏈長度專一性。在基因轉移蝴蛛蘭植物株5 2 6 6的純接合體植物株的種子油中，可堆積高達24莫耳％的（：18 ·· 0 (第21圖）。然而，在 5 2 6 6和5 4 0 1 — 9交叉形成的F 1子代的種子油中，其C18:0含量降至約12莫耳％。而且，從這些交叉產生的植物株，其所含的C 1 6 : 0量相似於從未基因轉移控制植物種子油中得到的結果。實施例5植物K A酵素的體外分析依照Slabaugh等人（Plant Jeurna卜1 9 8 8列印中 )和 Leonord等人（Plant Journal，1988，列印中）所描述的方法，從非基因轉移控制組或表現c hKAS A — 2 — 7的基因轉移蜘蛛蘭的發育種子中，製備種子萃取物。體外脂肪酸化驗係根據Post-Beittenmiller所描述的方法（J· Biol_Chem.(1 991 ), 266:1 858-1 865)。藉由硫酯銨沈澱法將萃取物濃縮，並且使用P - 6管柱（Bio-Rad, Hercules, CA)去除鹽類。反應物（65β<)含有0 · 1M Tris /HC 1 (pH8 · 0) ，ImM二硫代蘇糖醇，25 mM重組疲菜 ACPI，ImM N A D Η » 2 m M NADPH，50/z M 丙二硫基一輔酶 a，l〇//M〔l 一 14C〕乙醯一輔酶 A (50mC i/mmo 1 ) ，1 111呈/||1£6 3八和〇*2 5111运/7^種子蛋白質。所選取的種本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29*7公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

-24- 567226 A7 _____B7_ 五、發明説明（） 22 子萃取的事先與淺藍菌素於2 3 °C反應1 0分鐘。反應產以含2·25M尿素的18%丙烯醯胺凝膠分離，利用電點墨法將其移至硝基纖維素，使用Image QiiaNT軟體的磷顯影法（Moleculor Dyhamics，Sunnyvale，CA)定量。真正的醯基- A C P也同時進行電泳，免疫點墨並且最後以抗-A C P血淸偵測，以確認脂肪酸鏈長度。結果（第2 2圖）顯示，藉由在所有檢驗時間點得到的C8 : 0 —和C10 ·· 〇 - ACP相對豐富量，基因轉移蜘蛛蘭（5 4 0 1 - 9 )種子萃取物的脂肪酸合成能力大於非基因轉移控制組。此外，萃取物事先以淺藍菌素處理，明顯降低基因轉移和非基因轉移控制組種子萃取物內的較長鏈脂肪酸合成。然而，從基因轉移植物株得到的種子萃取物，其菠菜一 A C P的延伸作用與非基因轉移控制蜘蛛蘭的種子萃取物內的延伸作用相比，較少被抑制。這些資料進一步支持K AS A — 2 — 7是一種對中度鏈醯基A C P s具縮合活性的酵素，並且此酵素在植物中表現會擴大被中度鏈專一硫酯酶水解的受質槽。而且，這些資料建議：chKAS A-2-7亦是一種能拮抗淺藍菌素之縮合酵素。在本說明中所提及的所有刊物和專利申請案，都是對熟於本發明相關技藝人士的指引。本發明所提及的所有刊物和專刊申請案，都列爲本文之參考資料。雖然前述的發明已藉由說明和實施例淸楚地描述，然而位於附錄申請專利範圍之目的某些改變和修飾也可實行本M·張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ~ ' (請先閲讀背面之注意事項再填3頁) ^丨瓣經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -25- 567226 A7 B7 五、發明説明（23) 圖式簡單說明第1圖係硬核榖斗（Cuphea Hookenana ) KAS因子B 菌落c h K A S B - 2的D N A和轉譯的脂肪酸序列。第2圖係硬核榖斗KAS因子B菌落chKAS B - 3 1 一 7的D N A和轉譯的胺基酸序列。第3圖係硬核榖斗KAS因子A菌落c hKA S A — 2 一 7的D N A和轉譯的脂肪酸序列。第4圖係硬核穀斗KAS因子A菌落chKAS A — 1 一 6的D N A和轉譯的胺基酸序列。第5圖係布瑞榖斗（Cuphea Pullcherrima) KAS因子 B菌落c p u K A S B / 7 - 8的D N A和轉譯的胺基酸序列。第6圖係布瑞縠斗KAS因子B菌落cpuKAS B / 8 — 7 A的D N A和轉譯的胺基酸序列。第7圖係布瑞榖斗KAS因子A菌落cpuKAS A / p 7 - 6 A的D N A和轉譯的胺基酸序列。第8圖係布瑞穀斗KAS因子A菌落cpuKAS A / P 8 — 9 A的初步D N A序列。第9圖係硬核穀斗KAS III菌落chKAS ΙΙΙ·27的D N A和轉譯的胺基酸序列。第1 0圖係使用各種醯基- A C P受質做爲測定純化的c p u K A S B / 8 — 7 A活性反應圖。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -26- 567226 A7 — _ 五、發明説明b ) 第1 1圖係使用各種醯基-A C P受質做爲測定純化的 chKAS A — 2 — 7 和 chKAS A— 1 — 6 活性反應圖。第1 2圖係使用各種醯基- A C P受質做爲測定純化的箆蔴K A S因子A活性反應圖。第1 3圖係使用各種醯基- A C P受質做爲測定純化的箆蔴K A S因子B的活性反應圖。第14圖係根據含有C p F a t B 1的基因轉移植物對含有CpFa tBl + chKAS A— 2 — 7的基因轉移植物體內的c 8 : 0含量排列的植物數目圖。第15圖係顯示含chFa tB2 (4804 - 22 —3 5 7 )的基因轉移植物和4 8 0 4 — 2 2 — 3 5 7和 5 4 0 1 — 9之間交叉形成的植物體內的％C 1 0/% C 8比率圖。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 第16圖係顯示含chFatB2 (4804 — 22 一 3 57)的基因轉移植物和4804 — 2 2 — 3 57和 5401 — 9 (chKAS A— 2 — 7植物）之間交叉形成的植物體內的1 0 + %C 8含量圖。第17圖係顯示含ChFa tB2 (4804 — 22 一 3 5 7)的基因轉移植物和480 4-2 2 — 3 5 7和 5413 - 17 (chKAS A - 2 - 7 + C p F a t B 1植物）之間交叉形成的植物體內的 %Cl〇/%C8比率。第18圖係顯示含ChFatB2(4804—22 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -27- 567226 A7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（25 ) —3 5 7)的基因轉移植物和48 04-2 2 — 3 5 7和 5413-17 (chKAS A - 2 - 7 + C p F a t B 1植物）之間交叉形成的植物體內的 %Cl〇+%C8含量圖。第19圖係顯示含UcFatBl ( LA8 6DH1 8 6)的基因轉移植物和與野生型（ X WT)或表現ChKAS A— 2 — 7植物株交叉形成的植物株內的％ C 1 2 : 0含量圖。第2 ◦圖係顯示含UcFatBl ( LA8 6DH1 8 6 )的基因轉移植物和與野生型（X WT)或表現ChKAS A— 2 - 7植物交株交叉形成的植物種子內的C 1 2 : 0和C 1 4 ·· 0脂肪酸相對比例圖。第2 1圖係顯示含Garm FatB 1 (5266)的基因轉移植物和與野生型（X WT)或表現Ch KAS A - 2 - 7 植物株交叉形成的植物種子內的％ C 1 8 : 0圖。第2 2圖從含c hKAS A— 2 — 7的基因轉移植物蛋白質萃取物中的c h K A S A活性反應圖。萃取物事先以所顯示的淺藍菌素（cerulenin)濃度處理。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 28-

Claims

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A8 B8 C8 D8 修正經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 t、申請專利範圍附件二（A ): 第871 05469號專利申請案中文申請專利範圍替換本民國92年8月/〆日修正 1· 一種DNA分子，其編碼得自於硬核穀斗（Cup/?ea /?oo/cena/7a)或布瑞榖斗（CL/p/?ea pi///c/7e/r//7?a)之酮醯基-ACP合成酶（KAS)因子A蛋白質，該酮醯基-ACP合成酶 (KAS)因子 A 蛋白質對 C6:0-ACP、C8:0-ACP 及 C10:〇-ACP之中度鏈脂肪酸基質具有較佳之活性，該DNA分子包含選自chKAS A-2-7或chKAS A-1-6之核苷酸序列。 (請先閱脅背面之注意事項再填寫本頁)

張紙本

釐公 7 9 2 567226 Α8 Β8 C8 D8 申請專利範圍 ΗΟΗΟϋ<υΗυϋ ΗΗϋ<ϋυ<υϋϋ UHH«oo<uu Ηυϋϋϋυυυυυ 今 ST GTT GOT06 08 · 0/L HVDoHeJVHuv VOVHUHUSUUDUUDOHSDUOUUVUUXUOVO DHUDVWVUV VCJDOVWHUV 09 oLno£ 005OTH 9^003oijT ”QJD)ufcD:Q)uuanbQ)s:5·ν sv^wo d'HJ‘ ，ΙΧΗ SAuQJlld o-ldi 'Hcus el< Tro>2JQ)2 S-ΛυJCL)S ϋϋΗ δν HOHU卜rLuuuPL ouoJJbaLVuDH HUH 09T oLnT ST Η Π3 U rH ο < U U U 二 < Η Ο Ο f〇〇 ι-Η rH 〇 < ijaw OHVVUUH >10山Jcd na^f ,Tas erHv .3Md>l.〔c)usv dsv sq aqaDiav urHs uj〇 CSV VDOUHXUHUUOX bsuJLHvsuvv χνοϋϋϋυΗυυχΗυουννυονυυνν ♦〇9c osc 0«-n οεε οζε S.Auoad asvnOJqw>u uxoQJqal:IqH:las AxoD^avnaq Jfl)s w^uW-HHMcus UOH Huu H<0 UHU UUH «u uu< UUH <uu uuu UHU UUH UOH UUH 十〇TC 00^ G6S Gs 0 卜εaGJs 3CUJ:u{J,D):l<cn,i<0):!<cnJtv ;JG)SDQJJD)J< nQJqcni-fvwAq S-HH aQJsDCUJ 3UX ZXL3 δν ODV 83 3B HDD 3UX 3b 38 83 OW UV3 33X HH3 092 oLnrsI0303orooo :la)sDijIVOJelCLWV CSV dwv;T3s^3s -HqJ, OJa.JJ32 WAufoIVrorHv ΧΓΟΛ naqUUH HB <uu u<0 u« u<u UUH <UH Hu< uuo UH< UUH <υϋ Huo <Ηϋ UHO0T2ooz ocnTH03 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 HP < D U 二 < 門· < Η Ο Ο + 005 06Θ 080 05 09 切 US e.〔v OJd JaH exvrHeA CIV ：一① W τβΛ η,〔0 Αχ〇 aas S-HH 43S ovuvus JbuvvuPLV Jus OJb δο SJ.V 3H0SV0 80UUX H<-UUUJL i oc 唧 03 on D)wv>..〔c)sq PTV sq s-HH>,r--ie)D):lv usv :ssDlbv sa WAq Jraco 08 ouo UHU ou< OHU u<u υϋα U8 H« <UH H8 HHU Huu 0« UUH 00^ 06C 08C 0卜£ dsv ΊωΗ ΠΤΌ ,T3S .aqd sAq sa exvrHeA daj, AfHo dsv hlu hasuvoaLV OOVOVOUUJL UHEHOW vuuuuoaLoooJiuoSJLVovuvuuxEHhH «♦cOSoso卜 9 S9osMas WAq 3ΓΗΙ ηΙΗοΛι-iolexv ΘΤΗΙ ?<blEHsd ⑴ qd UToaawWAudsv as WLPL DWUHVOVOVOOUUO HHV VOV DUVUUU.LHHDVUHUHUOHUVDUHHOSososor-19us< nrHo arHI n-5 Mas aIHI AXoJas 31-iI Ar-Iocasv S^I naq us< CSV αΛχ u« 0<0 <h< ϋ<ϋ HO< uoo <00 u<0 <HU UHU H« u« U<H ♦ 009 ccnLOi oLnOSJ>.L ΤωΛ dsy sd dsv S-HH sq sd bqji Ϊ^Λ Tfo.A Λχ〇 qeH >13 aqx U<H HHO H<0 uuu u<0 H<u U8 <HU Huu Hu< OHU OHO uoo ϋ^< Hoo <u< ♦osLnosornLnos sLn Τ^Λ τπΛD):tvD)MV uxoWAa JqHe，【v 2d WAq WAq usv Jtp Mas τβΛ OJb HJLO<LoV8 oov wuowuuv judchuu.vwow JLW VUVUUHUJLO 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍H a H w < w ◦ > 〇 < HU sAqcnav SA「I us< riaq nToSAqJJaw erHvasv nxowqx 3ΓΗΙ λγηο λγηο ◦vv VSV VW XWυΗυονϋ v<-ve)hvouc)HVD WSHUVUJLV VOOJLOO -* 〇6Δ 08Δ QnL 09Z. 05Δ ϋΓΗν naq erHv sAq sAq ArHolsrHv jrqj, naqJJaH kAJL naqJJaw aqd SA「1 VUOVJLL V8 wvowuoovuo Huv ohuohvuvehjlluohvujlhow •f 0? op ors)卜 0ΤΓ-00卜 2H扣TV SAU efHv tlj. pas arHI —TAX usv οώ Λχο djj, Λτ〇 sq vuv VU0.LDHUU0J.UV VPLVJLVSUX Hvxu豸 HUUUOD DHV Dc)x V80HH ♦ 0CD6o卜cn005osos ds< ϋΛΙ CIV ST 3Xi ϋχν :ras A*t〇 qaw sv aqj, aqj, Mas aqd sd Τ^Λ uvsaLV VUOJLBXHVE-HUOUUXVOUaiv Hv< vuvuuv HUH.LIUL HUUVHO0〔6 026 GT6 006 068 SAU ai!d sd Mas Qyi sAq sAq αΛχ has Jq.L 6；iv n'cuq erHv nrHa axi has JbJ:LLL 333 δν 3¾ 3W SW Hvi vox δν JOO WS Hiv088o/b098 OS dsv 】3S sqd ΐτ?Λ sAq uaH Λχ〇 naq Λχ〇 ;〔as aji naq xmA Λχο H<0 uo< UHH <HO 0« OH< uoo OHH <00 UUH uoo UHU HHO <00 f- i OS OS or-lcoi (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!0X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 exvAIonxo SJ s*H=sd nxoaqx q3ss.HH BXVCLSV WAUJMH① Md HUUVSUWOJUUUVUHUUOVDUUVOHVUVUUV.LUUUUVOUDHHUVUHH OST GTCT οοα 062T 082T MQ)S ArHo>,r-loDQ)「iQ)qa·ηΓΗϋίΰΓΗ< hAJ, aIHI JvlHrDTVAfHucnavsAq SAJroxv Hov DOOHOOVHUJHH W080HVH.LHVUUV vuo δονϋν VVVOW VUD ♦ OKT oVDrslT oLnroTom 03 s,fH ntonaq Π3 Π.3 na门 naq naq ArHD leTHv ΛΓΗ0 nfHs atq uaw τωΛ r-*vuovc)VHHo<c)c)s Jb 卜 LUVHHJJLD VOOHUO<8 WO VOUDHVOHO •it 02ΖΪ sr【 il: 06TT G8TT QJMd Ar-Io ds<σ,1< us<,Tcusa,s<a、-fH o,TdD)JV JasroIVSAq JqH OJdasv卜 IHVOD Hvsr-8J<<Ho<uVDe)aL vuuvovoury VW 3UV xuuuvs οατ 〇9ττ οςττ om οατ CSV us<plv uxoJlQJs naqroTV ^tvwAurorHv ΧΓΟΛ θιΕΛΧΟ ΛΓΗ0 ncuq ΛΓΗ0 hw XW SVOVUVUHDHH HUSVSUOHVUD VJb 3HH HOOVDOOHHH'OO οεττ οτττ οοττ 06s ΓΗίΰΛ oaDJnaq ΤοΛίοΤνroIHvasv JcasATOAXOSAU naq dasXJosasv -B»HV hJb δυνΗΕΗΓ-'ΗϋυυϋδοΗνοδΕΗυο'ϋδϋδΗΕ-'ΗυϋΗνϋΗνυνϋVUD 080T G/LOT 090T osr OST nfHo Λ.〔οιοΛα 3ΓΗΙcu*-iI w-rjll uw<forH<forH<uw<nOJ*lfl)rHI W>UQ)-Cd uwvaQico «0 uoo <« UH< <H< u<u u« δο Huo H« OHU <H< HOH UHH u« H0< ♦ OSTos1‘ ss OOOT066 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 ΧΓ3ΛtoAq naqwAq nto.sAqloAqoad ΑΧοΓΗίΰΛ nQJq naq SAqfdrnv awv Td> uhDSW PLUVW DVc)c)vvow HUUUDOUHOUHUOHUWVVUOJLVD OHO • 今 oLnoT OSTon9T OS! 0T9T A.〔onIc)casv Saasvlv5 naq us<aIHI USV Sds-HH 3XIaJEHAr-jc)aqEH ue)D WSUVD DUUUVD WDc)hrLWHH<H<;<vuuHVuu.L<ooH VDO vuv o〇9T 〇6st ϋ8ςτ ο/.ςτ β,-ιν 3χι ι?χν Ufo -〔G/\ .〔eA exv ηχο Αχο Λ.〔ο Jv AfS Λχο 8V VJ.V vuo DVUHJLOVHD VU3 JLLS vuovvoVHouooJLoSHucivoovoo off οςυΊτ G3T OST οεςτ naq sq S.HH Λ 5 ωπ sw MBS sAq jqj, has CSV TDA β】ν sq ηΰ ss J‘H3 WU.3 UV3 Jbo ：XLV DXV OPL VW 3UV 331 ,LVV SHO V3V DJL3 OVS XSV o【LnTHooLnT odT 083 OZ^T us< UXOAXO allawAus-HH Tex<sq BrHv UXOJTAX nrHoWAq arHI dsv ΑΓΗ0 uv< WUUOOUHJL HaLuvuuuDuHuHuo WUUVH woow υΕΗνΕΗνονοο •f 0 9 s οςπτ 03τ GC2 03τ CT< o-TC3 hlr-Lkas ,TqCHr«TV s.HHroTVnsvatlJ-ίΛΗ us< ΐΓΰΛ as< ηιοσϊαν JLUD JLUUJUVUPL Ju< V3D xvuouo HWVHVUVX J‘yv νΗουνονδ οϋν οΐπτ GGta G6CT, 〇8ετ οζ,ετ ss Α.〔ο J3S UJS r?.tv naq ρχν 3Λ·1 ηχ〇 syL?sq a.〔I Λ-fO ourHuHD <00 UUHovuJLuoc)JLLuuo OW OVOVHV UDH UHUUJLV DHO Hoo o9eTHoLOeT OS oeeTH 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六圍範利專請中 00卜τ 0691 OST 0卜9ΐ 099Τ Jlcus -1CUS us< S-Hll ΛΓΗΟ A.【c)3qd Λ.〔οQ)qd pcuscsvacus ϊδα>η1Η01:ΓΟΛιοΛα uux VPLUW JLVUUODUOSUJJLOOO JLLL VUHHWUUH OHHHOOUHOOW 09卜τ oLnr-τ OS οεζ,τ οοοΔτ OTr-τ ·♦<*♦CSV SAUOJCJroTVQJXCJ nQ)qωΤΗΗ vc)JJLJLuxovovf}uue)v<'Dc)JL OHUHOVOVW vovrHuw UOHUUUUUOHJLL VHUVHV OST OTS oos 06卜T 08ΔΤ OPT VDuJuVWLuoouuvovxvovouuvvvaLuEHuuoHVHHuHHuOVJLOVJLLouvuaLVuHuwo WWW WVWVWW WWVV+WV vuojlvehovuhuehvuvuuwv osoa0S20S20TH02 WDHrHHHVJLVuDHWJLOHXHCXLVoVVHulrHuHHHixLoHV VUHVOOUHVJ, Hf>uJ.HDCHvov 0002 066τ 086Τ 0Ζ.6Τ 096Τ 0S6T ΗννϋυΗΗ1ΗυονουΗΗΗΗνΗουΗονΗοϋνο3υννΗΗΕΗυο<ονοΗΕΗΕ-·ΗυΗεΗυΗΗυΗΗΕΗΗνΗ οπΞ 0C6T 026Τοτ6τ 006.ΤΗ06ΟΟΤ Η 卜 IuuuSHHuPLuVPLVovuvvtMboE-sssuuolHuuHuvxvsw VUUPLV800 * 082 0Δ8Τ 098ΤΗiIHiIHocs (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!0X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 <;au‘ ；【3SCL)qd -Ta's WAq aIHI nrHoAJDfdxvcuTID):l< :lMEHpHD4a)tlaluxc)exv VUVUUJ.uHJi JLUH DVVUJLVOVD VOD HUD JUL< VDV.OUVEHUUJALL WU1LUD or-co9rnoLnrn03ornro <SAuas< alldalr-L nfHD UTI nrHD has 山，〔I Aid -ss bLP AIods< ns sa HSH HVoHJLLuuvo<o <HV0<SH0<vxvuso HDV 0u< VDDHVDHHUOHU it οεε sc οοε Gs G8N <csv CSVMArHaqd Tfo>awv o,Td dwv s-HHArHonQJq o:lcJ JqH τΓσΛΤίοΛΑΧϋ JLW IVVUVALUIH HHO HVDHUUUVD HVUUOOVHUHUUHUV OHO DHOHOD 承oz-rsjsroos -030ΓΊΓΝ3 clawAToblpr-ifIi>r-lrc>xi3>D)uv PTVUToWAqCDII has OJd sAq sAq wsDJLVSO JLUV DJb JJbvxuVDuDousvuwvulv Hsv vuuowow DW0ΓΝΙΖ sroOOCNos <U<UU<HHO< <00<U<UOHU u«UOHUHUO OHOHUOUH« uoo<OOOBU HHUUUUHHUO 02 o 卜T 〇9T οιητ02oeT<OUH<<UHUO 0<00UU<U00 <UOUUU<UU< UOUUH<uuuo 0<UUH<00UH HOHHUUH<uo 咪 οετ οττ got 〇6 08· οδUUHU0<u<HU <HU<0H<UUU HUUU0<8H^ up^uoou^uu <HHUHUU<UH οϋ<υυ<υϋου 09oLnQrn0O30T THfN)6T ΟΊTH: aD)crocr:cuuuanbas:9-l-V sv^wo (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍〈aqd us<:lcus -TqHrorHVSAuroTV^qHPcusωΙΙi-lcus jAjl CSV oMd ΛΓΠΟ qas HHHUVV HDV ouv vuohdehehushuvhuh VHV OUH.UVHUVVOUUUDUPLV QQL 069 089 0 卜9 cdutHArHonao asvJJasforHv naj qasfdTV Mas ArHoJJasuwv aqHJlHfdTV SPL VDoaLHuvooHV vuohjluohvehuo VUEHV8SEHV JLWVUVUUVHUO 099 OS OS 〇e9 OS Aaqd .【fdAloAuaqd o:lCLuwvJJasWAq WAq JtAj, MasωΙΗΗD)J<DQ;口ΓΰΓΗ< u卜 LHUUVHO Jbx 卜rLuuuEHvvoHVOVVDWHVHVUH JLHVODV νχυυυο 0T9os sLnocoLno卜Ln 〈口 IOSTI 扣 Tvasv CSV aJCdΓΗ巾Λ SAqJJasAl-HoAXoJJaH kssATuaxI WOJLE-VUUOHVOHVVUJLL VJLOOWOHV <8 JbooHvvupvuHuooJJLV ^ 09SoLnLnosoroLnos <na「lrHrcs^f-How^uSAqD)JtvwAq asv naq nTowAq qa2Tfo>asv nfHoaqH UJLUEHJLOVOOUDX WV vuv VW HVOVEHUDVOVW OH< OHOHVO WD uuv 卡 sLnooLni §o卜々 <Q)XI ArHoArHDUSV bq.L nQ)q ex< sAq sAq AIHororHvpqH naqJJasJAJ, naq PLV VOOHOD J‘w vu< VHH VUCJ5WV DVVuDSuuoHu-voxuolvOVH JLLU 09ποιηπ03om Aqairlcuxcbϋ)Λ「1 cls<:lcl)s£3;iv sAq kas ncuq WAq OJrdfoIHvrHrdAaJtEHArHoCLsv OH< 0« u<0 OH< 00< 0« UUH UHU ouu uuo OHO OOH Hoo H<0 og 馨03 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、11 Φ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍〈AToJJawAIO ar-iI O.Ta 山 II a.〔IIe> vc)Dc)HVhDe)JLJLV huuvchvujlv VXD 008 Q6L 〈ΙΡΛCLSV er-Hv ns^top,fv arHI 3-〔I PIb JLVDVUDWOUOOVDVUHV VHV OLOZ. of o m O 〇 fO CD (J Ή 卜 O < us<u« a < 10 o < 3S Λΰ Λ.〔ο SAunaJJJas VUEHUPUOODUDEHΗΗυϋΗν OLL 09L foT<folt<cs< πωαωΓΗΙιοΛυ 033 Huupw aLuuJLVEHDHοεΔ ou 〈⑴ Τϊ Τ0Λ A〔o CXVAXOasv PTa S-HH sd nxoJrqJLiH S-HH ,ιΛχ pxvasv JLLVOJLDVOD JLUD VC)D JLVD jluuuvuehuudvouuv 01<U<UU<EHUUD JLVO OST GCQT GST QTS 000T 〈SA3 :iqj, aqj has Λ〔ο AT;〇 naq aqa ηχ〇 ejv PAJ, aji aqx Βχν >TO 迂V ufxLEHuvuHH J.OV vCJSJLDoviLU HJJL WD vuouvehulvjluvouc)hoovc)v 066oso卜crkschoLncr» <sAq sAq efv sdl nrHo naq ηΓΗο nrHs sq na^l naqrHleA ΛΓΗ3 prHv ArHs nrHs WV D<v V33 Jivu OVS VHJ* SVS SVD VJO VXD VJ.3 OLO V3D bo VSS WSososoTHg <>,T3 JawTPA 3LEAr-nodsvCn-Ίν sv J3Sasv PTdcnav Jv sAq D80HV JJLD ΗΗΧ vdohvsehouehw JLOVuvosaL vuuvov VUHHUSWV 006 068 088 05 0900 〈JlIX cadasv e.〔v CSV PTV uxu Mas naq erHv βρν &·Λ3 ρΓΗνΓΗΙΒΛ ssΛχ〇 Hu< ΰυ υ<0 υυυ Η« <0< 0<υ ΟΗΗ Huo <ου UOH <υο ΗΗΗ Ηϋο OS Gs 0C8 OS 0Τ8 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!〇X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 <>,TO TfDAwAqarHI CSV nQ)qcn:lv nf-loSAq: sAq οααΛΓΗοτίοΛ ηωα nQ)q sAq JLOOUJLDDW JLLVUW £}Huvov DVDOWOW ΗυυυοοοδυΗυοΗΕ-·WV 082 turi: 〇9ct . οςετ οπετ <aqj, awv TroA A1H0 nlodwv obd clovnrHonaocwvCLJrHI cw< W-HHQ)TI 33< JLVD DJLSUDD WD Hvovuuuw ννοΟΙα Hvv HHV Hw 8US.UUHV οεετ GST οτα goct 〇6ετ ACLTJ, Λ.5 :πρP1V ar-HI exv urHoΓ-ίΒΛ ΤπΛ ssrHeA erHv ηΓΗο T 扣Λ >T0 DPLODD Jbvoov VHV VUODVUHHOVXOVUJL .LJb-vuD ννοοδδο HUD -K ocoror-lom 09001:οςετ 03T 〈ϋτν erHv ΛΙΟnaq naq S-Hu Αχό axIJJasaas w>q JrlpJas CSV τ 巾>SAq υυϋνυονοϋυΗυυυυνυΗοϋ HHV OJWV vai vwuuv HUH HWDHSWV 0C2 οζετ οοζτ 〇6ττ <naq usv usv ujs ΛΙΟ aqd sA〇 S-HH aji sa mtv CTO αΑχ ήχο sAq VHJL DVDUWUW vvuuSDuHrHHaLuvuuHVHJLuJuo WUUVJLOVOWV 〇8ττ ο卜ττ 〇9ττ οςττ <Q)X1 as< ΑΧΟΓΟχν OJCLv-lqvLbQ)s :UIt-fcT:< s-HHfoxvcsvωΙΙ χΛχ us<ΧΓΟΛ UJLV ΗνϋνοοΕ-·υονυυΗυνυυ1 VUVUUOHVUVUSEHW VHVUVH ΗνννΗϋ οπττ οεττ 宕ττ οτττ · οοττ Λαιον nxocnJV has ΐίΰΛΛΓΗο kas urHorflrHv Da「»—in3rHv WAq nj〇0)X1 WAunaq u<0 WO 8VJOJLUH0 vpovux DVuJuDoJEHHusowovoVJivuoluHu 060T iTH5.0τ 09s OST (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 567226 8 8 88 ABCD 六圍範戀τ ο卜s G9n 利 AcuMd ncuq0)X1i-iasHacnclo< S-HH A-fuAJocuqd>,TOQJJCd has CSV has naj^ UHH UHU <H< UUH u« u<u 000 HHH ouo UHH <UH H« HUH OHH 讀 QGT-!S3 QQS S3 中 OST OS <c cloVJAX OJCUel< WVPLVJLUHV VUJUVJLUHHV voCJJbHoHvuJLLHOuOD OVHUWUVH Huuuuc) OST ornLnT 02 οτϋΊτ + ooLnrn 05T e)Hvuuuo$uSVJPLuHDu<LLuuHuoVHc)c)lJLOHvuDVuuHuvc)o<c)JL HHJbWDJLuo ovc)PI』vu$ PLGHurLPX PHXHOOHUVDUVDVHUVVVV ΗοΗΗΗννννΗ loDDHoHJLHH GST GCGl： GST: S8T ο*ο8τ 06 卜 T uuuDuHVJt J.VPGGS:IULHC)HHHUB OHHHVUUVVX dvhduvusoouxuwehuow 卡 00 卜 T OPT G9/LT S/.T OPT VUWOVDVVD VVDJLOVUHOV OUHVUHHHOUDVDUHHHUVH DJLLOVEHODUV 1HUUHUUUHU ορτ ΞΔτ ΟΟΔΤ G69T iT GiL9T H<<<OHUHHH <HH<UHH<HU <UU<0<HHOH H<<0<HUOHH UUHU<H<H<0 Q99T GST if OST 0Ζ9ΐ 0T9T OVUVUVOCJDDHVUHUVIOVD JJLVS0UVDHVUU<<003H0<HOHUDVOODUHOHOJJLJLLOV 4C 009To6LnT oCDLnT or-LnT . 09LnT oLnLnT (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

訂 p 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 V WVVWVWV VWWWVW 0ε61ΗS6TVWVWWVV νν<ννννννν<νννννννΕ-·ν PLVOJLHVUJLL ΗυυαΙΗΗνΗνυυΟΟΗνχοΗν 006,t GST §2 GGT G98T OST 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ABCD 567226 々、申請專利範圍 2.—種DNA分子，其編碼得自於硬核穀斗（Cup/^a /7〇o/cer/ar?a)或布瑞榖斗（Cuphea pi///c/7e厂厂//7?a)之酮醯基-ACP合成酶（KAS)因子B蛋白質，該酮醯基-ACP合成酶 (KAS)因子 B 蛋白質對 C6:0-ACP、C8:0-ACP 及 C10:0-ACP之中度鏈脂肪酸基質具有較佳之活性，該DNA分子包含選自 chKAS B-2、chKAS B-31-7、cpuKAS B/7-8 或 cpuKAS B/8-7A之核苷酸序歹丨J。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

訂

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -14 - 567226 8 8 8 8 ABCD 六、申請專利範圍 96 ηο6τ cos se 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 s SV^MO Λ.〔ο o,rd OJldawv ιΓΰΛ ΓιωΊ ρύ rarH<forH<roxvrHfo>roTH<JLIH acusucuco 300 8UUUUH<0 OHOVHUVS VHUJODUU080 PLOouoUUVUUHUOV sAq -TQJS 3(1)0D)a<as<foxv Af-Ho nQ)qasvroxvclhv(0!;< has USVDMVWAUOWUUH aluuuuuvCDuuDHSuJuHVouuovouvuD OUH J‘w ouvuaL AIOAxollaw ΑΓ—ιοαιΗΛΓΗοΐίοΛ ηωα τίοΛ^τϋίΰτν DJ< ηΓΗο SAO as<a)rHI JboHuoOHVVB vuv vouuJbuHuOHO vsouuovuv Ονϋow u<ouH< £Γ=Λΰ SA「I nrHo adl sq has Ul-Ho 1;I?> Λΰ dwv kas sqdrHe/v Jtpnaq UVUXOD owovo 3J.VHHUJUH DVUHHO 8DUV01UHUHHUHO Hu< 0H3 ^〔oJaw s< JLH31I JAJ‘ OJd 3Π sqaaqdpld iHall SAqDlJ< SUPLVUW vuv JHvuoolvHuuuPLVUJLJL prL Huuuuv PLV vwoou JcaspAX LISVOJTCUArno dQJH33^)Λ*Ηο 3qcunr-ίοωΧΙ naq naqfoxv MQ)S vurLVJ.u<< vuuuoOOHVuHuJbD JULH WOUHV HUCJUHUOHUUUO HUH ΓΟινΓΰΓΗν dI<w-r-:liQ)qd WAU :ΓΛΗΕ5<,τ0ιο:ΪΜΧΤε1<κιΛυπ31;<:Γχ:Η:Ιο)5OJrHH Huo uuo Huu H<u UHH UOH U<H u« UUH Hu< uuo HUH <uu Hu< UUH Hh< έχ^.το^Ιοβτν ωχι qasrlaq dsv ex<nluAIoDlJVDiMN/ ar-HI sjH cs<JU<U8<8\L8 JiLV ΟΗ<5ΗΗυΗνοΕ-·υϋυ<οΗ8 δυυουυχν h<-ueh<< (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

訂

5 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 ocow CDooLn i}卜Ln ΓΝ3卜 9 02卜經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 i5l.【v SAUel-Hv xfcAGJqd ΑΧοΛ-fo naq ArHoarHI ο,Ηα0)11 arHIrorHvrorHv nrHc) oov UOH J.uoe)JLD JLHVLUOOvoooHlouoJLLV VUUJLHV UHV VUOUUOOVD a'lrxc'TclJDi.lv'HcusroTV^lr'lHCr-io oJ-idCLSV dlov clovD):r< urHoaas forH< οϋΗ uuu 00< HUH uuo Hu< 0<u ouu u<0 ^.<0 u« «u HUH Ηυϋ nQ)q τΓΟΛ^τοίΰΐν^ΐο^χοΛΤΗυ qQ)w fro>Q)Md Λ1-Η0 dsvDipv asv sAq awv PTnL οδ VOOJUD JLDoWOJbooHV DJLO HHHHDO IVOHOUUVOWV JLVO UTI uMsd erHVATo^fv pw erHv syu nrHs naq jas nrHo TlaHrneA HHV HH<8UVUD VDOVOUVDVCDHvboHVuwocpHEHuov OVDOLVSHO •TqH qas snlhAXfor-lv asv SAuusvaT-lIfcTV>,Tc)>1Tona「i hAJL nxordrHv Huv £xlvuvuehvheh30 hvohohuwuhvvudehoo VOOOHXJLVXOVOVUO Jlcus McucoD.〔o(urHM3>,u;ctl)s hcuwfHfo> ArHonaq Ar-loasvforHvDiJVOMdasv υο<ΗονονοΗΗ<υΟΗ PL HUJLUJLD δοΗΗυδοινο HUUDSV vuuehvd fo.〔< USVBrHI ΙΤΛΗus<τίοΛηΓ-Ιο ηΓΗο oad :fQ)sT-Hco>>rHofol-H<ds<nr-io nQ)q HUD Hw vrHvuVHEHwuHo DVD WOEHUUVUH UHDuDfD HUOEHVD WD JJLU (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 aj I i?r-iv CSV a! I ΠΓΗ0 el-Hv naq dsv ArHf} erHv naq Jlpaas bq.L TerHv S-HH 89 Δ UHVUUO H<<VHV ovouuDuJL3rHvooc)c).LUO VJLUJLUV HUHHUV ouOJL<-u sAq ,-lqJ, erHv =s< ar-iI sAq arHIasv sAq :r【r-L us< SA^Ias T^>sAq sAq 9.Ξ ovv J.3V V3D JLVV JLLV WV PLV Hvo OW vuv 3W SW 3UL hHD OW DW an e.〔v nl.0 na「一 Λχ〇 ΛΓ-10 has crHv ΛΙ〇 sq sA3 s-γηη ΛΤΗ3 aIHI Jaw was寸 98 VH<huov<e).LLuHc)D VOSHUH vuo vooJLLuE--DHu<-u V3D UEHV DJLV VUH us<3t—iI Jacosd s,iH naq PTX AXoJqx usv 31HI AXoSAq al-HI aqEHexv rslT6 i<v PJLVUOVOOUHVU JULUSOHUSOUUVUW VXV VS3 OW HHV Huvouo sAq usv e.〔v ΤΟΛ pqj, dsv sqj ηγ〇 T^A P3S sd πχ〇 2d usv US 096 〇WUWOUOIJLDHUVUVOUHX OVOOHODUH vuuovoHuuiwoHHWu aqd ATomld-Tas USV has arHI ϋΓΗν Te> usv τβΛ nr-Hs S-HH UIHO urHo sAq 80 OT HJJL VOOUJJ, VUJ4 HWOUHU.LV ouo JnLouvv JLLOVVOUSWUOVUDW sd WAq aqa 町 TV 4 ①S 3d erHv Τ^Λ TCA 43s CSV S-HH SIHS 9S T <tH』voH<uuowuInL HuusuHuHEHE-'uuoHouHovuluwuvuuDovoo (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 85 9S 9S 9S9τττ W VVVVYVVWV VW.LDJLUHUU<LJJJ.PLJLLH xfuDVDH卜LD<uuPTbHuPLJbJbvlvDoVHrLVuuuvw uuHrLVVJbvovuPLJuviDo <W<WUPLC)UUPL0VV03νονγΕΗνννυΗοϋνννυνΗΗυ WJhLHuuunHWHivEHHV PLEOUJLOJnLO 8V33VXHVH H<HH<OUU<H <<0<0HH<UH (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 VWOPLLVHDhlloehhhhuv JLVHHHHVHHHVJLVHHVWDH oo«HU«« H<<H0H<HUH <U0<0<<00U HOHHHOHSU OHHU<HOU<< U<UHHH<UUU

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 <ηχ〇D0O ιοΛα SA「i ArHofox< xraAQ)rHI SAUJCAH?< naq SAudsvasv WOUJUJUOOW 0ν<·8ϋυυϋυΗ0 χΗνυοΗυνΗυουυΗυυοΗΗνουνϋ oeeosοΤΗΓηoorn05 <nQ)q Dp< alo<us< WAq ArHoaw< axH . ,ΙΛΕΗΑχϋ^ΜΗίοτν uwvalsArHo u.Lu8vc?o<o<e)uwc)wc)oc)uvc)uH<u<x vs ou<ouDuwuHx<8 oooro0 卜CN0VD2oln(N <π)π< arHI u.【0 A\o>1»-iocl)r*ldD):lv -ΤΜΗ oMcbQ)Md wsJ-JQ)sfdTVasvQ)qdD)bv oou US 0<u uoo υϋο UHH 00< uu< uuu UHH 0« UUH Huo u<0 UHH uou 05osorirs)S2oorsl <αϋ3<3τ—:Ι naq JCLJS 3.〔I ΛΓΗ0 JacontoAXc?ll【3s Π3「1 nQJqιοΛα ^ UVDUHV VJHUDV PLVDCJSUOV OVD 3U3UPLUHUUH3 DW wouvhehvh * 06T03 0 卜ΤΗ09T OST <JlQ)sas< xrcA ds< -TasAfHoaqd Tfo>k(us ΤΓΟΛ naoAXOiJas AXOrcTH<D):r< HUH u<0 UHO u<0 UUH uoo UHH <HO UUH UHO UHU uoo OH< uoo uuo <ou ♦ or〔 oeIH0Ο9ΓΗor〔 OS <r?x<wascw< βα<WAUAXoOJd obcuaw<»Hfo> naJnxCJnaJdrHvfdTVfoTV vuo ouHHWSVuDHuooouuuuuHVopTbVHuWD VHUHUOUUOOUO 06os0Γ-s oLn ΛΧΓΰΛΧΧΧ :U1J‘ Jc's'HasCL^Lh^s ws CWV^TO WAq bqHnQ)q JILIH nQ)q ws p^o 020 uu< UUH uo< OOH uu< <5^ u« ouo <« Hu< 0HU uu< <HH «< 〇eorNOOTH 对ΟΔΤ OOJT :Q)D)uroHcuuu3nbCL)s:卜丨 Issv^qo (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐) 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍〈3TI ① TI e〔< erHv nr-iDJUttHAIoAfo exvaPHI JaH naq dsv βΓΗνπτο Λχ〇 J?LVUH< <30 Huoovp Huv VDOVOD HUDHHVOHVUHU υνοΗυοονϋυοϋ 0 卜9 099 Gsos GC9 Λ^,τνσϊ-τνφ.ιιιογΗ ulovfox< erH<rorHvi-lA:JLa)qd SAubAhulovaas hqHer-lv VUUUDUUHV JbHwuuoHuouuD HVHe-*chj‘uc)huvehuwuuehhu<e-«uc) OS cTHg i glnOS <S*AUmx< ,TqH aQJsCLJrHH pas JAHulovohd AfHoJJasncuq ΛΙ—10 naoawvaIHI JLDJL VUD luv VPL HHV ouJ‘EHVHuw VUUUOD OHV OHUJLDOOHH ILVDUHV or-LnslnoLnLno寸Lnoro ΛΓΰΐν PS 【一0qrorHvulcus AXOJJaw cwv :Η1Ηα)ΐΙ el—i<μΛΧ OJdQ)rHIQ)qacuqd 3U0 PH00.LU HuoHuHCDooolvuvv vuv JLLVUUSEH'VJLOUUHHVUHHJLL1 ofNJLnsLnooLn03 <o:lcbJCDSωτ—ιΜw-HHAto sAq nrHoax i naq ulov crHDTfoAAIO ds< OUUUPLUHVOW οϋυυ<-υΗΟ^)ννν·ονουΗνυΗυΗννονυχ100οουνϋ 中 oco吋 0Go芸os i crasGJLE TrcA-一 MHDQq ΛΓ-ίοΛΧΟ Jaw Axot.iqHAXoτΓΰΛ nQ)q χίΰΛΛΓΗΟΕΓΗν HPLUJJLυΗϋυυ'< VHUUOOJLDO PLV HDD Huv VDOHHD VHUOHOVDOHUO ♦ 0 3og 0T 呦 00?ogrn <ί3π< nloSA^!as<3.fl SA-li-las rlQJql.ras ηΤΗοΛΧΟ Λχ〇 nQ)q asv Jrascsv VDV DVUCJW Ηνου,ν DVVUPLUHUUOV VVD JLOOUOOUHUXVD uuhehw 今 ocoe 0 卜ΓΊsrnoLOrn03 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 震·

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 8 8 8 8 ABCD 六、申請專利範圍 Λ Λ < ο έ.Ma)sl.【llh OTVS-HHfcfHv usvarnI αΑχ USVTCOA^TU口 T0o^3bc)srHfd> UVUUHHUVOUD JL6HU0JLW VHVUVHJLWUHOOVOWD HUUVUHUJLD oos 066 086 0 卜6 TordTvawv nfHo ncuJ JrQJs -TQ)S nr-JoaxI WAuMas MasrHdAAIHonaq Λχϋ οοχυϋΗνοννοοΗυΓΗονυϋν DVoJnLVuoEHHUHuUHuHO HDD JLLUOOD 96oso艺02os s<dfvDikv OUJCUdwv w-HHaAHrdxvawv SAuusvrHrdArdTV Axo <;0 JLuooe)v VUUHVOHUV fxLVHVuEHVHJLUD HVoJioHEHwυΗονυοΕΗϋο 0T6 i i io卜cx).〔0 D3J b^rHnrHuro.〔<cprHMωΓ-ΗΜoHcbro.【v ArHocnMV 3 ΊωΣΓβτν S-HHZJrHo OOOJJLHVHWO VUSJJLV JJLVOUUOUD voovfDU .VWOHV vusehvuwo 098os iosos aq :τ3ιοnr-io:lrHm>naqrHeA ΛΤοί?ΓΗνΛΪΟ nloArHuiJaH TO>aqd AIO uo< 0<0 OH< fcb OHH <00 Huo 000 «0 000 OH< OHO HHH poo GT8 §8 G6iL G8/L OL s< f5_【<au}v s'Aqasv a:TJL o,TdcnMvaasfdr-lywqHuxooad awvawvuwv VD JbuuvoowhvoOPL ouuDc)<vpLuue)JLuv DVUJLUUUVOHVOJLW 09/-oLn卜 ofoe 卜 ur-ic)MasDQJJfoTH<D)J<SAudr-lv ΐΓΰΛωΗα AXOAXonaq>1ΓΗϋωΓΗΗohDU ov WUHUJL<JLL HUDOOVUOHUUOHHSUHJLVDO VOO VHHOOO JLLV vuu ZL 0ΪΔ 00L069 089 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） :21,: 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 <sA OV AST u<: <ηχ D< 00 〈AT VS β <-Τ3 VU VU OSTH I OCOT OSTH orH :q(uqj XI?> sAq sAqΦΓΗΙroxvusvQ)TIDTU dxv=3Q)q as< Λχ〇fcrH<DQJrJ Λ/UJLL JJbuw DWUHVUUD HWVHVDVOUUOJLLUHVDOOD hudehhu OOTT 060T OCOOT i 09s H Axoar-HI2JCUHJ-I3S s Λ·ι JtrlH er-l<cwvQ)T I kqHcuTI nrHD WAq aqHus< u <00 UH< OUH 0« Hu< <UO H5^ US <u< 0¾ «0 0« uu< U5^ oLnTT om οατ OOOTT OTHTT 〇 sAq 3χι aqx eK jv Π3 sq Λχο AtD P3S sq sA〇 ϋονν J.HV vuvou〇J,LV3uD ννϋΙηΙυΗΟοοοονυΗνυο VDDJULUHOH fNJT ο6ττ 0ST οατ 09τΤΗ S s-PHll U1—IS U.3 WA「1 sAq USV el-HvΓΗΊ2Λ hqvLdsv 3LEnlorHeA jas sd οΗνυννυϋνυοννοννυννυυοΗδ VUVUVDUHH WOPLD VUH vuu 03τ οεετ GST Ξ2τ oOJd LlwvQJqd ur-!c)Llwv axHjas O-TculoTli DOJJCLJE-'Ar-lo JqH :Tx:HQ)r-lI o uuu u^l· «u a« <H< au< uuu H<0 HHU OOH uoo uu< uu< <H< ocorvoT 05 092 oln S usvsyrΛΙΗΟ>1rHc)Q)qa4ArHocuqd MBS CSVJCQJSCUTIπΰΙΗνΓΗΓΰΛ us<»Hro> IHUVVUVUUS VOOUJUL VSUHHVUH . XW VPH UHV JLusEHho ΗννϋΗο OKT οεΓητ + orslrnT OTerH ooa sd s>iq aqa erHVJas aJrd erHv τβΛ T 巾Λ 0 J<v vuHHoouHu<LHvoH VUODWUHXUUOVOJLUJLL Ηυονδ JLLO (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 9. 9 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 0V8HU<<<V PLLLJLHrLuHJLL PLrLpPLVJ. .LVVuaLuVJ」‘ HouHDJLIbuc) U<UHH<<U<0 VWVWVVW UVHHVJLOLLL UXVVOVPLJLL JLLoHVuov.rL JLVUVJHHHhL phvhoujldvoh VWWVWVH aLaLLHoHVu ovouiuuHu .LVUJLLOVHS <<UU<0<U0H ovjlvehuouou <HHUO<<H<0 hhehsjjllehvo HO<UUH<<HU JbuJJbVJLV JLUWUJLLUUV jhwuuuvehd whhehvudsi «000<00« HHVUUHXHVH OOOUU<H<<H OHO<U<0<UH (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 SUUUOLDBODwuE-iPLHuuu SVWOVJLLVH HVOWSUHW OUO<0<<OOU uohehdj,ullw 3 2

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 oo_/7pqsv^& ΟΐLn1H nao ol(£ aasrc.〔<Di-T< naq ;tQ)s oi-lCJ pcus crHonaq 4ω3 W-HJJJJ32 691 UHU ouu UUH υυϋ oou HHU UUH uuu <UH 0<u UHU UUH UH< uuouuou OCNIT U^UUH<UUUU UHUHHUOUHH UHUHHUHUHH UHUH<UUUU< UUHHUH^UHH 0UH<0UUHU<09υυμρυχουυδυδδυυν DUJLDODUUPL Ηνν8υυΗΟουυνδον8Ηυυουν10ϋχυ /.Trs) LnVDoo oe s QnoLnl; fcxvDi-xv wyll nQ)q OJlcbcnMv tdAJ-lqtHJlas -Tcus w>lq oHoiD)Jrva)tla O^DJaw< VU0VSUUVUUHUUUUU8UHDUUVUUH <UH VVV UUUUDUUHH UUUUVD s οπLne ιοΛα OJIa:rafHVJCaJsr-lrc>:lx:J‘ OJrd hQ)srorH<foJ<D)J<rHro> CWVOJa0)X1 Jcus owuuuHuDuuHuJbuuvuuuuZXL ΗυϋυυϋοϋυUS UWUUUHHV VUH OTTLnOT OSln6 >.I0 dQ)2Has usvQJqd AXOaJVcuTIcXOArHoAIHoaLJdcnavi-lqHOHcucuqcj 卜 s VDOoHVuuHuwuHHuoCJxCJuJLHVovuuoouuouhHoCJvuuvuuuuJLL 06 socx) sAq has·roxv ds<(uLlcicn«.l<dsvQ)rHI ohd ArHo afHI AToJas nrHuAXO .Icus 600 owuUJ‘uuuuvouHLu8uvouHV VUUUODUHVOODUOV DVOUDO vueh LrL 0ΔLO9naq r\aq ws aw< JiAJ』.ΙΛΗΓΟΤν awv .〔ΓΰΛ awv aas>1TU(uJCcuTfo>hQ)s Hfo> TVDe PLUPLUC)WUVDU<LUVH ΗνουδυνουυΗυϋϋυΗΗ HHDUU.LUHS 09υΊιηoLn na「i AluJJCL'w Α〔ϋ-ΤιιΗωΧΙ ΤΓ3Λ. ΤβΛσι-ιν SAO S*A「1 aw< J-CH nfHoDlJV er-ie JbuooaLV <SDUU<UJ<OJbuHDuouswowuuuuvouuv 0V0U8 LnoLn LnrNOT οηίτLn-ττ l-lAJLDlav naq SAuds<ds< naqcnM<cnJV dsvcwv sAq AJOasv0)X1 αΑχ υνΗυδ JbuotHxvo J<u ILHUUUUOOV uvouvv νννυϋϋυνϋ JLHVUV.L (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 贫·

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） ?4 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 rnLnLn 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 on s oeTH raTV Ar-10DQ)r』as<efHvasv nrHoDQ)rl pcucowAq sAq ΛΓΗΟίΰΓΗ<r-lra>OJrHHw>1u uuo Hoo UHU H<0 ouo u<0 0<0 HHU HUH 0« 0« 80 uuo UHO UOH 0卜T S9T 09T naq JQ)S U1H0 .〔ίΰΛ ΛΓΗ0 ds< Masaqd TfdAbMEHDcuJ^rHuArHoJJcusArHo aqH 61^9 JLLUHUJ, vvu HHOcioDuvLDJLuHuHHuHDXUV οΗυΗΟϋΗϋο DHV VDOVUV SSI oLnTLnn Aid TroA PS ΐΓΟΛ AxofoxvcnMV ΠΓΗ0 sAq ds< aTHI sAqMas 口0)^1cnM<asv τ〇9 000 hho ohu oho <00 ouo <u< 0<0 0« 0<u 0¾ 0« UUH UHU uou u<0 卜69 Lnf rn6L i 6C0C0 06THιηοοτ OCOTLn/LT eT< kArHsd ①一：I 21d Id sd :tqtH3rHI WAqcnJV S-HH AlfoSAq nTHoall UUOJLVHUUUUHVUHJLUHH HUUUUVUHV wvoduuvuehosow DVSUHV i ς6Ί· JJaw ηωο ΛΓΗ0 naq ηχϋ3THIfdTHv nQ)q na^lerHv'Tas AtoJJascsv bqHcurHI UHU «0 Hoo UHU OHU uuo HUH 000 u« <u< HH< ooorslLn一 2 SAUν.ίΛΗUSVJCUS ,tr-ULro1Hvu)Aut?rHv:rq.L :13SCUTHhQJw^uwv oaDUΛΓΗ0 UOH uvluvvuuHHuvuuoEHDH V3D JLUVUUH JLHV VUHEHVJLUVV VUUUOD LneroοΓηοοLns JJaH naq au)<fo-〔< ηχοΛΤ-Ηοα)ανβ^νο)ΪΙloJH cUDvrdJVroTVroTV WJHQ)Ma< £XLV HJLUHVOHUOOVOHOOHOUUOUOHV HVUHW HUOHUO HUDH<-UUHH OLOCNLO303 Aid naq Λ.5 sd a*TI ωτι βτν Λν βτν ωτι ue)ovoc)pLH OOOFHHV νυυΗΗνυΗν νυουυϋονϋΕΗυν υοϋνοΟΗυοΗΗν (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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IT CN 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 ΔΓη6 S6 εεοτ r-HcoOT 63 95 π(Ν)(Ν)τ ειΓΝΙτ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 QLZLngroSCNLnLnrv!bu uxoo:ldab-v as< USVPTV cxoJas naj EJVDl^v WAufoTV Tro>Q)Md JLUVOVUHUOUVOE-'VOUVN/ oov wu HUHOHUHUD OOVUOH lludojloehehh LncorslOCOOQLn卜OQ ΠΤΟΛΧϋΊωΝ TcAculKAXOcbwvDl^vdlovloAqawv-a^lEHo^dcnpv hasroTV WOJbDpLV PLSHJLJ.EHOD HVD ΗουανονννΕΗνϋόϋΕΗυυυϋ'ον δΗυυο ooeLogrs)03 PTV WAqJJawfoTVloTU nIHD na^vlias nxonaq ΤίΰΛ naqrHfo>>1l:Dfcr-lv>1rHovouwv OHV vuorHvu VVODHHUOVovooehuohd oehh ΟΗονϋϋ hudehoc) s otcLnoe ds<SAU usvcurHIfiJrHVAr-iD AfHono)^jAj, ηΓΗοΓΟΓΗνο)ΓΗΙ axHOMCiflJTV AfHo JLVDEHotHuvvuHv vuSHoavouoHH HVH 3V3 VUDEHHVEHHV HUUVUOVDO orncInpoeoCNIroaas has τ 巾 AArHosq Axodsv er-lvpw sdasv hqJLJJaw SJH erHv PLuuiuHe)JbDCJluδοΗνοΗυοϋον vuuuvoiuv aL<u<-uHV,L Huo oLnc ςπε o吋 cιηΓΊεTroAZJToDtocad^CDs Tro>>,rHoforHv asv nxorlaq Mashas n-foaxl SAU UHODVOWOHUUVUHυΗουοοΗυϋΗνοννοΕΗΕΗυυον HOVOVD JLLVUOH Ln9e seLOLnro fdTV na)「i asv Ar-iofoIV naq :llqEH:IQ)s -IMHroxv w-HHroTvcwvaIHI jAj, uwv UUDUHUJLVO D〇c)Huo VEHU Huv .LuhEHuv ouDrHvuHuo J.W VHVUVH JLW I!' u① Η »—< < Η η a〇 < ϋ) CO Ο < m . ρεο卜ΓηsAqMqtHusv sAq aqaiΐΓΟΛloAqw>lrjωΗΙfoxvcsvarHHnIHo DW vuv UWSWUEHEHHHOOWOWUHV UUOHW VJLV Ds (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

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R CN 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 567226 8 88 8 ABCD 六、申請專利範圍 οεΓΊτ co9rn,c 9rHM iTH ΓΝΟτϋΊτ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 s 〇6c scoe AIOJSS er-!< ΛΓΗ0 naq SAUSJU ΛΙ-Η3 arHIJJaw ,Tas w>1q aqx jv CSV 3ΓΗΙVSPLuuovoorHHuJbHuvuVDOuHvaLV vuhovv Juv VUD JLW JLLV GT0 OS n3「l da 卜 Λχ〇 ,Τιιχ Lls< arHI Λχ〇 WA「J arHI :up T^xv ①rHI eJHv nrHD sq Λχ〇 EHJLUSDHUDOUUV uvv VHV VDoDVVWLHVrHux/ouovEHv HUOVVD JJLU ILOD u a〇 < U3 ro O < s02对 Q)qd nrHof-id> JT3S OJ-ICMDrHoo:ldt CSVQ)qd uxouwv ΦΤΗΙ bQ)s OJCU PLHovopibuuH vuue)vc)HuuJ‘w UHJL WUHW JLLVUD<UUU <1 ·Η r-1 L) s sLne々ITCUSωΙΗΜfDrH<rHro> cs<THfo>nIe)s-HII Uf—Jo urHOSAq s>lq usvfcrHv ΐΓΟΛ MqH OUH UH< ouo HHO H« HHO «0 u<u «u 0<u 0« 0« u« uuo HHO Hu< 090 s oLn々 jv -ss of ΐοΛ τβΛ 治s CSV s-r-iH Αχό Λχ〇 as Λΰ ① s bas CSV JLUOOUHUHUL luDοΗουΗονυΗυννυνυυοοVDS ZXLL VOSEHHH vuiEHw LnVDe scuWAqQ)qd ou&bH^OOU <HO<0<OHH< UH0HHU<U00 <<U<UHHH<U ua<HH <0H <ou 0« UHH 6CO9T υοοϋ««« HHH<HHH<H< ΗΗ<«ϋΗ«ϋ <ϋΗΗΗϋ<υυΗ UH0HUUH5^H 6οο9τ UJJ,uuuHJULuvuJLVJLLVe)c)v VHC)WVWV< VHDHVHUHEHD HUVHVSOVHJIULVUUUVWUH ετΓ-τ Ηυϋ <<UUH<00<0 <HUHU0UU00 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1T

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本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 Α8 Β8 C8 D8 六、申請專利範圍 sAq asv a.fl SA,i hQJw nQ)q JCL)S urHo Λχοex<naq as<fd.〔<alov ΠΓΗ0 ncuq 0« H<0 0« UUH UHU UUH «u uoo uuo UHU uuu u<0 «0 UHU * oeLnoroLnorsJLnSLnooLn eT-Hv 6·Λ「1 WAq Λΐοer-lv 7>3rHI SAUJAJ, β:ι< naq WAudsvasvna^DlJV HUOOWOWUODUUOUEHD J^VUDHuviLuouuJuuDHHVDuVD aLuoou * 06n 08々 0卜吋 09吋 D)J< asvusv-wAq A-【odsv arHI JAHA【oJqHftiTVUSVQ)qd A1;0D)JVCL)TI DOUUSUWCJWUOUUVDUHV UVHU8 DuvuuDuwuHHuaoHOuuHV OS0303orN匁 om cIe)>nr-»OroT<<Dr-la.DiJIVkf-'r-L o-Hda)HdιοΛα basfdTVCLsvCUJCC3D)av as< 3ΓΗΙ OVUUODUUOUHHOSVUUVUUUUJJL VWUUJ, Huo uvouIaLuouuvuUHV «♦c 00^ G6C G8e op 09C iosos S9 〇〇9 Τ^Λ tlx STArHSAXSJJa^ArHDJqxArHsrHHAnaqleAArHDpfvsv ρδ Huv VJUUOO δϋοΗν HODUUV vootHJb VHUDHD VODUUD DOV 06S ocoLn0 卜LnsLn Ο Ο 3 LO < ΓΗ LH 〇〇 nQJqΓϋ*-Η< hcuco^-r-lc)XJ(L)2:.cw<:rqHQ)rHI lelvVJAJ, owdQ)fHIQJqdQ)qdc4d Jcus Db Bo H31 0¾ OLVU.W V3V HHV 38 Hvx ν·03 HHV 3HX HJLL 033 UUJi 069 io卜vr)i·os aJHWAq βπ< W.H11 ArHD nr-loarHI naq ulovcxoTfo> Axoalov :Ta)co UHVOVVODUUVUHOD VWOVSUHVUHUHWOVUHHD DDCJUVOXUH UHH (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、^1

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 OST οτοτ οοοτ 066086 nloOJasIleA πθαΙβΛΑΓΗο GrHv ΛΙοηΤΟ ΛΰJJ3H τβΛ ①工 d ATSasv &V DVooHVJJoprL VXD νϋαΗυ0ϋ8 WD δϋΟΗν DHD JLLHUOOHVD JLOU -f o卜 6 schos i asv SAqcbsvaJJ, OJdD);iv -TasfdTVJ-lqHcIOOJd awvdwv cwvcnJVUXo u<oDW HVD 〇OH DuuDovvuluus Huv D<UHUUHVD JLVO Hw DDVWU ♦ oe60CN16 S6 ios aQJs 二CL)JίΰΗ<ΡΗ<SAuforHv ΤίΰΛωΜα.ΑΧϋλΓ—ιοηω门 Λγο ΦΤΗΗοΗαQ)rHHrHro> χυχ V卜L JLUDCDDVUOXUUD HSUJUL VDo<c)oVHX Joo HHV VUUHHVUHO * 088 i i Gs Gs exvror-:< nrHD Mr-UL ArHo Λχϋίοχνωτι :lQ)snG)q dsvrdxv ηι-ΗοΛι-ιο 邙：lvD)pv DUOXUODVOHUVVOOVOOHUOHHVOHVOHUUVD HUD Ds H8 SUUC5U OS OS S8 i 06 卜 3ΓΗΙ S-HHcg<fdrH<ro»H<roH<:IAX(l)qcI SAU hAHusvaas h工Hfcr-iVSAuror-lv UH< uuu uuo Ηυϋ SH HHH UOH U<H 0¾ UUH Huo HOH <uo 率 08卜op sr-op03 JlqHJCDS ωΓΗΜ^0)10CSV oulal^rHoJJois naJAfo ηθ^Ι asvarHIfoIHv ncuq JLUV VPLHlv 81HVH3W VU3uooaLVoHulooaLL HVOuJivuoDHHu * op003卜οτ 卜 00 卜 ηχ〇ι?ΓΠ<3ΧΙ a1—!I OJa»rorHv>,r-rocn:rv WAqAJasfoxv J,<L vvovuDIHVJnLVouuDUc)VDUDDUVW D1V VUD <! *Η CJ工 DID naq Jalo DVODIHUUV (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 装·

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 usvaxci uxoUS<Q)XI iQ)s ohculoTH nQ)q dJH ArHo:ulHaqHcl>rHI ΛΓΗ0 sAq Hw HEHJ. wuhw JJLVU0VU.UUJ<UHEHU8JLU8UUVUUV VHV voe)c)w 09〔τ 03τ οεετ οεετarHI :ιΜΕ-·Γ3τνα)τΙroIV ηΐϋnaq At—ioArHD hasfor-lVATD na^lιοΛυ s-Hn:A»Ho JLHVUUVVUDUHVUUOWD ΗΗυΗοϋνοϋ νοΗνυϋνϋϋΗΗυΗΟΗυνυ νοϋ SCT 002 062 082 〇卜 ετ Iar-lIJJasaas WAq JlHleTV us< arHI sAq 3ΓΗΙ nfHo sAq JqHusv sAq aqcu31 UHV OEHV VUH owehuvvuohwuhv WVUHV WO OVVOUVUWOVVUHJI * OST Gm OCZT §rH te>SAq s*Aq aTHI erHv CSV ωΤΙ 口 To巾 I<sq ds<ΛΤο'ρΓΗν naq jqj, has JHO wvow J』vuue)JLW VJ.V DVOUUDehehuehvdosohuohjluhuvjiueh •K οτζτ —τ 〇6ττ ocou Ι9χν s,nl CSV 3TI CSV ΐβΛ n-fO ns PTd has ΐΛ Λχο Jb< OUOS.UJUOJLW νΗνυνΙ, JLWuJiD ovo ννϋ,ιυυνυΙΙοιοοοουυο OS 〇9ττ οϋΊττ οητ οεττ dsvnfHo naq Mas JaconfHD aTHI WAuJfas has Tro>>.tHoD3a ATOCLsvdrHv XVDVVDUHUHDVUOVOVUHHVUUH OOH UUJLUHO hoohhuddohvdehuo ο·ατ 2:ττ GST iT 〇8〇τ cn:i<o:rc3 as<i-iqHJJa2WTHh>,JimrHv as<SAUUWV ΐΓϋΛΓΰΓΗν Αΐο>,ΤΟ3α)Ί OOVVUUHVD Huv OHV J.vu JLVULHuol<e)HDHuv<;uHo<uDJLOD VSODHH i 09s οιηοτ OST οεοτ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ρυνΗ^υϋνυυΗνοονονΕΗυΗυουυοουοοϋνν WVWVWW WVUDVWHV 0§τ 065 08ΔΤ Qr-Ll 09ΔΤ OWHHJLVJLHO HVVUHOHHPL DHHHDHvuHoiHOHHHHVSVV νϋ·Ηννυυνον wovjjlvehseh os 卜 τ off ορτ ορτ S/LT oo 卜 τ VJ,HEHvoHUHuJb<HUHVVVHJ』HVuu3JLLVc)EHvowo3HV VHWHOHuvHiHHOHVDHVD 069τ SCD9TοΓ-9το99τoLn9THOST 0<HHH<UUO< <OUHUUHHO< OUHOO<H<<0 OUU<H<<HOU 0<0<<OOUHO ♦ OST OST S9T009TH06Lnr-loooLnT JLLuuOHWVrHrHHHJLHWuov ovuoHHuvvuHHuoooVHVoKCOHu.bHHuvuuvuvuDHVVV OLLnT sLnrHDLnLnrHQSTHQrnLnrHo2Ln1H = WAq 3LS BIHV Mas ^qd TerHv Te>rHe>】① S us< vuJLEHoaLHuv HUHXV VPL VUUDWUHII HUOVuJiuHH vuoohdhioouehuw «K SSI OST: G6S G8S G/^τ 09 s S-HH Αΰ >το id Ado aqd pas CSV h3s ωτι jv Ι^Λ usv τ6Λ ηχο S-HH UVUOOOVDD J.JLL νοοΗΗΗΗυΗ HWOUHUHV JLUDUHDUWD1D WOHVU oLnn ilHoc々T οε々τ CTO urHo sAq sAq u.LO<foxv TrflAhMHcsvQJr-'lddsv ΤΓΟΛ Mas owa nIHo O-Td W3 Dvuow Ywuw 33SHHS JLOVUWUHHUVDOHODUHvuuovouuu ΟΤβτ _τ 062 obct ορετ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 567226 A8 B8 C8 D8 穴、申請專利範圍 3.如申請專利範圍第1或2項之DNA分子，其係經表現且與偏好中度鏈之醯基-ACP硫酯酶結合或並用時，能用於改良轉殖基因植物之種子中的中度鏈脂肪酸之產製。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）