[go: up one dir, main page]

RS63462B1 - Heterociklični amidi korisni kao modulatori proteina - Google Patents

Heterociklični amidi korisni kao modulatori proteina

Info

Publication number
RS63462B1
RS63462B1 RS20220734A RSP20220734A RS63462B1 RS 63462 B1 RS63462 B1 RS 63462B1 RS 20220734 A RS20220734 A RS 20220734A RS P20220734 A RSP20220734 A RS P20220734A RS 63462 B1 RS63462 B1 RS 63462B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
optionally substituted
c4alkyl
benzo
pyrazole
ethyl
Prior art date
Application number
RS20220734A
Other languages
English (en)
Inventor
Adam Kenneth Charnley
Michael G Darcy
Jason W Dodson
Xiaoyang Dong
Terry V Hughes
Jianxing Kang
Lara Kathryn Leister
Yiqian Lian
Yue Li
John F Mehlmann
Neysa Nevins
Joshi M Ramanjulu
Joseph J Romano
Gren Z Wang
Guosen Ye
Daohua Zhang
Original Assignee
Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Glaxosmithkline Ip Dev Ltd filed Critical Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Publication of RS63462B1 publication Critical patent/RS63462B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/08—Antibacterial agents for leprosy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

Opis
Povezane prijave
[0001] Ova prijava se poziva na prioritet od US Privremene prijave broj 62/319358 podnete 7. aprila, 2016., US privremene prijave broj 62/461301 podnete 21. februara 2017., i US privremene prijave broj 62/461975 podnete 22. februara 2017.
Polje pronalaska
[0002] Ovaj pronalazak se odnosi na heterociklični amid koji je koristan kao modulator transmembranskog proteina 173 (TMEM173), koji je takođe poznat kao STING (stimulator Interferon Gena)) i na postupke za njegovu izradu i upotrebu.
Osnova pronalaska
[0003] Kičmenjaci su konstantno izloženi invaziji mikroorganizama i razvili su mehanizme imune odbrane za eliminaciju infektivnih patogena. Kod sisara, ovaj imuni sistem se sastoji od dve grane: urođenog imuniteta i stečenog imuniteta. Urođeni imuni sistem je prva linija odbrane koja je inicirana Receptorima za prepoznavanje obrasca (PRRi) koji detektuju ligande iz patogena kao i oštećenja povezana sa molekularnim obrascima (Takeuchi O. i saradnici, Cell, 2010: 140, 805-820). Identifikovan je sve veći broj ovih receptora uključujući receptore slične Toll-u (TLRs), receptore lektina C-tipa, receptore slične inducibilnom genu I (RIG-I) retinoatne kiseline i receptore slične NOD (NLRs) i takođe senzore dvolančane DNK. Aktivacija PPRa dovodi do stimulacije gena uključenih u inflamatorni odgovor, uključujući interferone tip 1, pro-inflamatorne citokine i hemokine koji zaustavljaju razmnožavanje patogena i omogućavaju prilagođavanje imuniteta.
[0004] Adaptor proteina STING (Stimulator Interferon Gena), takođe poznat kao TMEM 173, MPYS, MITA i ERIS, je identifikovan kao centralna molekula signalizacije u urođenom imunom odgovoru na citosolne nukleinske kiseline (Ishikawa H and Barber G N, Nature, 2008: 455, 674-678; WO2013/1666000). Aktivacija STING rezultira stimulacijom IRF3 i NFκB puteva što dovodi do indukcije Interferon-β i drugih citokina. STING je kritičan za odgovore na citosolnu DNK patogena ili iz domaćina i neuobičajene nukleinske kiseline pod imenom Ciklični Dinukleotidi (CDNi)
[0005] CDNi su prvo identifikovani kao sekundarni prenosioci bakterija odgovorni za kontrolu brojnih odgovora u prokariotičnim ćelijama. Bakterijski CDNi, kao što je c-di-GMP su simetrične molekule koje karakterišu dve 3’,5’ fosfodiestarske veze.
[0006] Direktna aktivacija STING bakterijskim CDNi je nedavno potvrđena preko kristalografije X-zracima (Burdette D L and Vance R E, Nature Immunology, 2013: 14, 19-26). Bakterijski CDNi i njihovi analozi su zbog toga privukli interesovanje kao potencijalni adjuvansi vakcina (Libanova R. i saradnici, Microbial Biotechnology 2012: 5, 168-176;
WO2007/054279, WO2005/087238).
[0007] Još skorije je razjašnjen odgovor na citosolne DNK i pokazano je da uključuje generisanje, preko enzima pod nazivom ciklična GMP-AMP sintaza (cGAS, prethodno poznat kao C6orf150 ili MB21D1), preko novih molekula signalizacije CDN identifikovanih kao cGAMP, koje nakon toga aktiviraju STING. Za razliku od bakterijskih CDNa, cGAMP je nesimetrična molekula koja se karakteriše svojim izmešanim 2’,5’ i 3’,5’ fosfodiestarskim vezama. (Gao P i saradnici, Cell, 2013: 153, 1094-1107). Interakcija cGAMP (II) sa STING je takođe pokazana pomoću kristalografije X-zracima (Cai X i saradnici, Molecular Cell, 2014: 54, 289-296).
[0008] Interferon je prvo opisan kao supstanca koja može da zaštiti ćelije od virusne infekcije (Isaacs & Lindemann, J. Virus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci.1957: 147, 258-267). Kod ljudi, interferoni tip I su familija povezanih proteina enkodiranih genima na hromozomu 9 a koji enkodiraju najmanje 13 izooblika interferona alfa (IFNα) i jedan izooblik interferona beta (IFNβ). Rekombinantni IFNα je prvo odobreno biološko terapeutsko sredstvo i postao je važna terapija u virusnim infekcijama i kod kancera. Pored direktnog antivirusnog delovanja na ćelije, za interferone se zna da su potentni modulatori imunog odgovora, delujući na ćelije imunog sistema.
[0009] Primena jedinjenja male molekule koja može da modulira urođeni imuni odgovor, uključujući aktivaciju ili inhibiciju produkcije interferona tip I i drugih citokina, može da postane važna strategija za tretman ili prevenciju humanih bolesti, uključujući virusne infekcije i autoimune bolesti. Ovaj tip imunomodulatorne strategije ima potencijal da identifikuje jedinjenja koja mogu da budu korisna ne samo kod urođenog imuniteta za infektivne bolesti već takođe i za kancer. (Zitvogel, L., i saradnici, Nature Reviews Immunology, 2015 15(7), p405-414), alergijske bolesti (Moisan J. i saradnici, Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2006: 290, L987-995), neurodegenerativne bolesti kao što su amiotrofna lateralna skleroza i multiple skleroza (Lemos, H. i saradnici, J. Immunol., 2014: 192(12), 5571-8; Cirulli, E. i saradnici, Science, 2015: 347(6229), 1436-41; Freischmidt, A., i saradnici, Nat. Neurosci., 18(5), 631-6), druga infmalatorna stanja kao što je bolest nadraženih creva (Rakoff-Nahoum S., Cell., 2004, 23, 118(2): 229-41) i kao adjuvansi vakcina (Persing i saradnici Trends Microbiol.2002: 10(10 Suppl), S32-7 and Dubensky i saradnici, Therapeutic Advances in Vaccines, objavljena 5. Septembra 2013.).
[0010] STING je od suštinskog značaja za antimikrobnu odbranu domaćina, uključujući zaštitu od DNK i RNK brojnih virusa i bakterija (objavljeno kod Barber i saradnici Nat. Rev. Immunol. 2015: 15(2): 87-103, Ma and Damania, Cell Host & Microbe, 2016: 19(2) 150-158). Herpesviridae, Flaviviridae, Coronaviridae, Papillomaviridae, Adenoviridae, Hepadnaviridae, orto i paramiksoviridae i rabdoviridae imaju mehanizme uključene u inhibiciju STING posredstvom produkcije interferona tip I i izbegavanja imune kontrole domaćina (Holm i saradnici, Nat Comm.2016: 7:10680; Ma i saradnici, PNAS 2015: 112(31) E4306-E4315; Wu i saradnici, Cell Host Microbe 2015: 18(3) 333-44; Liu i saradnici, J Virol 2016: 90(20) 9406-19; Chen i saradnici, Protein Cell 2014: 5(5) 369-81; Lau i saradnici, Science 2013: 350(6260) 568-71; Ding i saradnici, J Hepatol 2013: 59(1) 52-8; Nitta i saradnici, Hepatology 201357(1) 46-58; Sun i saradnici, PloS One 2012: 7(2) e30802;
Aguirre i saradnici, PloS Pathog 2012: 8(10) e1002934; Ishikawa i saradnici, Nature 2009: 461(7265) 788-92). Prema tome, aktivacija STING malom molekulom može da bude od koristi za tretman ovih infektivnih bolesti.
[0011] Nasuprot tome, povećana i produžena produkcija IFN tip I je povezana sa različitim hroničnim infekcijama, uključujući Mycobacteria (Collins i saradnici, Cell Host Microbe 2015: 17(6) 820-8); Wassermann i saradnici, Cell Host Microbe 2015: 17(6) 799-810;
Watson i saradnici, Cell Host Microbe 2015: 17(6) 811-9), Franciscella (Storek i saradnici, J Immunol. 2015: 194(7) 3236-45; Jin i saradnici, J Immunol. 2011: 187(5) 2595-601), Chlamydia (Prantner i saradnici, J Immunol 2010: 184(5) 2551-60; Plasmodium (Sharma i saradnici, Immunity 2011: 35(2) 194-207. and HIV (Herzner i saradnici, Nat Immunol 2015 16(10) 1025-33; Gao i saradnici, Science 2013: 341(6148) 903-6. Slično tome, višak produkcije interferona tip I je nađen kod pacijenata sa kompleksnim oblicima autoimunih bolesti. Genetska evidencija kod ljudi i potvrda iz studija na životinjskim modelima podržavaju hipoteze da inhibicija STING dovodi do redukcije interferona tip I što vodi ka autoimunoj bolesti (Crow YJ, i saradnici, Nat. Genet.2006; 38(8) 38917-920, Stetson DB, i saradnici, Cell 2008; 134587-598). Prema tome, inhibitori STING obezbeđuju tretman za pacijente sa hroničnom produkcijom interferona tip I i proinflamatornih citokina povezanih sa infekcijama ili kompleksom autoimunih bolesti. Alergijske bolesti su povezane sa Th2-povezanim imunim odgovorm na alergene. Th2 odgovori su povezani sa rastućim vrednostima IgE, koji, svojim delovanjem na mast ćelije, dovode do hipersenzitivnosti na alergene, što za rezultat ima simptome viđene, na primer, kod alergijskog rinitisa i astme. Kod zdravih pojedinaca, imuni odgovor na alergene je u većoj meri izbalansiran sa mešavinom Th2/Th1 i regulatornim odgovorom T ćelija. Pokazano je da indukcija interferona tip I dovodi do redukcije citokina tipa Th2 u lokalnom okruženju i promoviše Th1/Treg odgovore. U ovom kontekstu, intukcija interferona tip I , na primer, aktivacijom STING, može da dovede do koristi u tretmanu alergijskih bolesti kao što su astma i alergijski rinitis (HuberJ.P. i saradnici J Immunol 2010: 185, 813-817).
[0012] Pokazano je da jedinjenja koja se vezuju za STING i koja deluju kao agonisti indukuju interferone tip I i druge citokine na inkubaciju sa humanim PBMCs. Jedinjenja koja indukuju humane interferone mogu da budu korisna u tretmanu različitih poremećaja, na primer u tretmanu alergijskih bolesti i drugih inflamatornih stanja, na primer alergijskog rinitisa i astme, za tretman infektivnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, pre-kancerogenih sindroma i kancera i takođe mogu da budu korisna kao imunogenična kompozicija ili adjuvansi vakcina. Jedinjenja koja se vezuju za STING mogu da deluju kao antagonisti i mogu da budu korisna u tretmanu, na primer autoimunih bolesti. Smatra se da ciljanje STING sa sredstvima za aktivaciju ili inhibiciju može da bude obećavajući pristup za lečenje bolesti i stanja u kojima je korisna modulacija IFN tip I puteva, uključujući inflamatorne, alergijske i autoimune bolesti, infektivne bolesti, kancer, pre-kancerogene sindrome kao i imunogenične kompozicije ili adjuvanse vakcina.
[0013] Kanceri kože i različite virusne infekcije kože uključuju imuno privilegovano okruženje a aktivacija lokalnog imunog odgovora na lezije može da bude topični terapijski pristup. Agonisti STING mogu da se koriste za lečenje virusnih bradavica, superficijalnih kancera kože i premaligne aktinične keratoze. Dvostruki mehanizam delovanja, aktivacija STING (na primer, unošenje nadražaja preko mikroigle ili topična formulacija) može da se koristi za kontrolu HPV direktno preko produkcije antivirusnog interferona tip I a indirektno povećanjem adaptivnog imunog odgovora opadajućom aktivacijom urođenog imuniteta. STING agonist može da aktivira urođeni imuni odgovor u lezijama i iziazove anti-HPV odgovor T ćelija.
[0014] Savremena evidencija je ukazala da spontana aktivacija STING puteva unutar tumora smeštenog u dendričnim ćelijama dovodi do produkcije IFN tip I i adaptivnog imunog odogovra protiv tumora. Pored toga, aktivacija ovog puta u ćelijama koje predstavljaju antigen (APCs) u okviru mikrookruženja tumora stvara osnovu za naknadnim delovanjem T-ćelija protiv antigena povezanih sa tumorom. Corrales and Gajewski, Clin Cancer Res;
21(21); 4774-9, 2015.
[0015] International Patentne Prijave WO2014/093936, WO2014/189805, WO2013/185052, U.S.2014/0341976, WO 2015/077354, PCT/EP2015/062281 (WO2015/185565) and GB 1501462.4 otkrivaju neke ciklične di-nukleotide i njihovu upotrebu u indukciji imunog odgovora preko aktivacije STING.
[0016] WO2012/083053 opisuje jedinjenja formule
protiv virusa hepatitisa C (HCV), kompozicije koje ih uključuju i njihovu upotrebu u lečenju HCV infekcije.
[0017] WO2011/091446 opisuje antivirusna jedinjenja formule:
kompozicije koje ih uključuju i njihovu upotrebu u lečenju virusne infekcije, na primer, HCV infekcije.
[0018] Jedinjenja iz ovog pronalaska moduliraju aktivnost STING i u skladu sa tim mogu da obezbede koristan terapeutski uticaj u tretmanu bolesti, poremećaja i/ili stanja u kojima postoji korist od modulacije STING (Stimulator Interferon Gena), na primer za inflamaciju, alergijskih i autoimunih bolesti, infektivnih bolesti, kancera, pre-kancerogenih sindroma i kao adjuvansa vakcina.
KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA
[0019] Pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid i ima strukturu
ili njegov tautomer,
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat.
[0020] Podrazumeva se da referenca koja se ovde odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid i njegove soli pokriva (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, kao slobodnu bazu ili kao njegove soli, na primer kao njegove farmaceutski prihvatljive soli. Prema tome, u jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid kao slobodnu bazu. U još jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0021] (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, njegovi tautomeri, njegove farmaceutski prihvatljive soli i njegovi hidrati, su modulatori STING. Prema tome, ovaj pronalazak obezbeđuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat, za upotrebu u terapiji. Ovaj pronalazak posebno obezbeđuje za upotrebu (E)-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat, kao aktivne terapeutske supstance u tretmanu bolesti ili poremećaja posredovanih STING-om, posebno, za upotrebu u tretmanu bolesti posredovanih agonizmom ili antagonizmom STING.
[0022] U ovakve bolesti ili poremećaje posredovane STING-om spadaju inflamacija, alergijske i autoimune bolesti, infektivne bolesti, kancer i pre-kancerogeni sindromi. Pored toga, modulatori STING mogu da budu korisni kao imunogenične kompozicije ili adjuvansi vakcina.
[0023] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje (E)-1-(4-(5-karbamoil- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat i farmaceutski prihvatljivu podlogu. Preciznije, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju za tretman bolesti ili poremećaja posredovanih STING-om, pri čemu kompozicija uključuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)- 7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7- metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat i farmaceutski prihvatljivu podlogu.
Detaljan opis aplikacije
[0024] U skladu sa jednim aspektom ovog pronalaska, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je (E)-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid i ima strukturu
ili njegov tautomer,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat.
[0025] Ovde su otkrivena jedinjenja Formule (I-N)
gde:
q je 0 ili 1;
r je 0 ili 1;
1
s je 0 ili 1;
pri čemu je q r s = 1 ili 2;
kada je q = 0, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno H, halogen, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -N(R<e>)(R<f>), -CO2R<f>, -N(R<f>)COR<b>, -N(R<g>)SO2(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -N(R<g>)CO(C1-C4alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisana (C1-C6alkil), opciono supstituisana (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisana (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisana (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupa,
pri čemu je (C1-C6alkil) navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-, -N(R<e>)(R<f>), -CO2(R<f>), -CON(R<e>)(R<f>), opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane heterocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedena opciono supstituisana fenil, 5-6 člana heterocikloalkil ili 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C6alkil)amino-, (C1-C6alkil)(C1-C6alkil)amino-, -(C1-C6alkil)-NH2, halo(C1-C6alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-( C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2,-C1-C4alkil-(C1-C4alkoksi) i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)- grupe;
kada je r = 0, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C6alkil, halo(C1-C6alkil), opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člane heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa,
pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C6alkil, opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člane heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, nitro, -R<c>, -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2N R<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, i -NR<d>SO2R<c>grupe;
kada je s = 0, R<C1>je H, halogen, ili C1-C4alkil grupa i R<C2>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>, -CON- R<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>, i -OCONR<c>R<d>grupe;
kada je q = 1, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno -CH2-, -NR<e>-, ili -O- i A, uzet zajedno sa R<A1>i R<A2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je A -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, i -NR<d>SO2R<c>grupe a C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil- C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogean, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C1-C4alkoksi)-, -(C1-C4alkoksil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkoksil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)- grupe;
kada je r = 1, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a B, uzet zajedno sa R<B1>i R<B2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je B veza ili je B -halo(C1-C10alkil)-, opciono supstituisana -C1C10alkil-, opciono supstituisana -C2-C10alkenil-, opciono supstituisana -C2-C10alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkilfenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C4alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C10alkil-, opciono supstituisane -C2-C10alkenil-, opciono supstituisane -C2-C10alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril-C1-C4alkil)- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CON- R<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, i -NR<d>SO2R<c>grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C4alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)- grupe;
kada je s = 1, R<C1>i R<C2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a C, uzet zajedno sa R<C1>i R<C2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je C -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono
1
supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CON- R<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>S OR<c>, -NR<d>CO2R<c>, i -NR<d>SO2R<c>grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil- C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
R<3>i R<5>su svaki nezavisno -CON(R<d>)(R<f>) grupa, ili je jedan od R<3>i R<5>-CON(R<d>)(R<f>) a drugi od R<3>i R<5>je H, COOH ili -CO2(R<c>) grupa;
R<4>i R<6>su svaki nezavisno izabrani od H, halogena, halo(C1-C6alkil), halo(C1-C6alkoksi)-, hidroksi, -O- P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -COR<c>, -CO2R<c>, -N(R<d>)COR<c>, -N(R<d>)SO2R<c>, -N(R<g>)SO2(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), -N(R<g>)CO(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe,
pri čemu je (C1-C6alkil) deo navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od -OH, -O-P(O)(OH)2, -OP(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -CO2H, -CO2R<c>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, -NR<d>SO2R<c>, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane heterocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedena opciono supstituisana fenil, 5-6 člana heterocikloalkil ili 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>), i -CO2R<d>grupe;
R<14>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>, -CONR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>i -OCONR<c>R<d>grupe;
R<16>je H, halogen, ili C1-C4alkil grupa;
R<15>i R<17>su svaki nezavisno H, ciklopropil, ili C1-C4alkil grupa;
R<a>je H, -R<c>, -COR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, ili -SO2NR<c>R<d>grupa;
svaki R<b>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), ili -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil) grupa; svaki R<c>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil), opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril, opciono supstituisana -C1-C4alkil-C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-9-10 člana
1
heteroaril grupa, pri čemu je C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, 5-6 člani heteroaril ili 9-10 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane 9-10 člane heteroaril opciono supstituisane -C1-C4alkil-C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-5-6 člane heteroaril, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-9-10 člane heteroaril grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, -(C1-C4alkil)NH2, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<d>je nezavisno H ili C1-C4alkil grupa;
svaki R<e>je nezavisno H, (C1-C4alkil), -CO(C1-C4alkil), -OCO(C1-C4alkil), -CO2(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)NH2, -(C1-C4alkil) C1-C4alkoksi, -CO-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril) grupa,
pri čemu je opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil ili opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O- P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi) O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<f>je nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa;
R<g>i R<h>su svaki nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa ili R<g>i R<h>, uzeti zajedno sa atomom ili atomima preko kojih su vezani, formiraju 5-6 člani prsten;
i u svakoj situaciji R<l>i R<ll>su nezavisno (C1-C6alkil)1oksi- grupa;
ili njihov tautomer;
ili so, preciznije, njihovafarmaceutski prihvatljiva so.
[0026] Ovde su takođe otkrivena jedinjenja u skladu sa Formulom (I-P):
1
pri čemu:
q je 0 ili 1;
r je 0 ili 1;
s je 0 ili 1;
gde q r s = 1 ili 2;
kada je q = 0, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno H, halogen, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -N(R<e>)(R<f>), -CO2R<f>, -N(R<f>)COR<b>, -N(R<g>)SO2(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -N(R<g>)CO(C1-C4alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisana (C1-C6alkil), opciono supstituisana (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisana (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisana (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupa,
pri čemu je (C1-C6alkil) deo navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-, -N(R<e>)(R<f>), -CO2(R<f>), -CON(R<e>)(R<f>), opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane heterocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedena
1
opciono supstituisana fenil, 5-6 člana heterocikloalkil ili 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C6alkil)amino-, (C1-C6alkil)(C1-C6alkil)amino-, -(C1-C6alkil)-NH2, halo(C1-C6alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, -(C1-C4alkil)-O- P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, ili C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
kada je r = 0, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C6alkil, halo(C1-C6alkil), opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa,
pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C6alkil, opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, nitro, -R<c>, -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2R<c>grupe;
kada je s = 0, R<C1>je H, halogen, ili C1-C4alkil grupa a R<C2>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>, -CON-R<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>i -OCONR<c>R<d>grupe;
kada je q = 1, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno -CH2-, -NR<e>-, ili -O- i A, uzet zajedno sa R<A1>i R<A2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je A -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil- grupa, pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-
1
C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCON-R<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2R<c>grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C1-C4alkoksi)-, -(C1-C4alkoksil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkoksil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
kada je r = 1, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a B, uzet zajedno sa R<B1>i R<B2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je B veza ili je B -halo(C1-C10alkil)-, opciono supstituisana -C1-C10alkil-, opciono supstituisana -C2-C10alkenil-, opciono supstituisana -C2-C10alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkilfenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C4alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C10alkil-, opciono supstituisane -C2-C10alkenil-, opciono supstituisane -C2-C10alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil- NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono
1
supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril-C1-C4alkil)- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2R<c>grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C3-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisane-C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C4alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi) O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)- grupe;
kada je s = 1, R<C1>i R<C2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a C, uzet zajedno sa R<C1>i R<C2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je C -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CON-R<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>,
2
-NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2R<c>grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil- C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
R<3>i R<5>su svaki nezavisno -CON(R<d>)(R<f>) grupa, ili je jedan od R<3>i R<5>-CON(R<d>)(R<f>) a drugi od R<3>i R<5>je H, COOH ili -CO2(R<c>) grupa;
R<4>i R<6>su svaki nezavisno izabrani od H, halogena, halo(C1-C6alkil), halo(C1-C6alkoksi)-, hidroksi, -O- P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -COR<c>, -CO2R<c>, -N(R<d>)COR<c>, -N(R<d>)SO2R<c>, -N(R<g>)SO2(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), -N(R<g>)CO(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe,
pri čemu je (C1-C6alkil) deo navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki ezavisno izabran od -OH, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -CO2H, -CO2R<c>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, -NR<d>SO2R<c>, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane heterocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedena opciono supstituisana fenil, 5-6 člana heterocikloalkil ili 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
R<14>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>, -CONR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>i -OCONR<c>R<d>grupe;
R<16>je H, halogen, ili C1-C4alkil grupa;
R<15>i R<17>su svaki nezavisno H, ciklopropil, ili C1-C4alkil grupa;
R<a>je H, -R<c>, -COR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, ili -SO2NR<c>R<d>grupa;
svaki R<b>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), ili -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil) grupa; svaki R<c>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(OH)2, -(C1-C4alkil)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil), opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril, opciono supstituisana -C1-C4alkil-C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-9-10 člana heteroaril grupa,
pri čemu je C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, 5-6 člani heteroaril ili 9-10 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane 9-10 membered heteroaril opciono supstituisane -C1-C4alkil-C3-
;
C6cikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-5-6 člane heteroaril, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-9-10 člane heteroaril grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O-P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, -(C1-C4alkil)NH2, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<d>je nezavisno H ili C1-C4alkil grupa;
svaki R<e>je nezavisno H, (C1-C4alkil), -CO(C1-C4alkil), -OCO(C1-C4alkil), -CO2(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)NH2, -(C1-C4alkil) C1-C4alkoksi, -CO-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril) grupa,
pri čemu je opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil ili opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, -O-P(O)(OH)2, -O- P(O)(R<l>R<ll>)2, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, -(C2-C4alkoksi) O-P(O)(OH)2, -(C2-C4alkoksi)-O-P(O)(R<l>R<ll>)2, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<f>je nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa;
R<g>i R<h>su svaki nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa ili R<g>i R<h>, uzeti zajedno sa atomom ili atomima preko kojih su vezani, formiraju 5-6 člani prsten;
a u svakoj situaciji R<l>i R<ll>su nezavisno (C1-C6alkil)oksi- grupa;
ili njihov tautomer;
ili njihova so, preciznije, njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0027] Dalje su otkrivena jedinjenja Formule (I)
2
gde:
q je 0 ili 1;
r je 0 ili 1;
s je 0 ili 1;
pri čemu je q r s = 1 ili 2;
kada je q = 0, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno H, halogen, hidroksi, -N(R<e>)(R<f>), -CO2R<f>, -N(R<f>)COR<b>, -N(R<g>)SO2(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -N(R<g>)CO(C1-C4alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisana (C1-C6alkil), opciono supstituisana (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisana (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisana (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupa,
pri čemu je (C1-C6alkil) deo navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od hidroksi, C1-C4alkoksi-, -N(R<e>)(R<f>), -CO2(R<f>), -CON(R<e>)(R<f>), opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane heterocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedeni opciono supstituisani fenil, 5-6 člani heterocikloalkil ili 5-6 člani heteroaril deo opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C6alkil)amino-, (C1-C6alkil)(C1-C6alkil)amino-, halo(C1-C6alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)- i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
kada je r = 0, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C6alkil, halo(C1-C6alkil), opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa,
pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C6alkil, opciono supstituisana C2-C6alkenil, opciono supstituisana C2-C6alkinil, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, nitro, -R<c>, -OH, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, ; -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2R<c>grupe;
kada je s = 0, R<C1>je H, halogen, ili C1-C4alkil grupa a R<C2>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>, -CONR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>i -OCONR<c>R<d>grupe;
kada je q = 1, R<A1>i R<A2>su svaki nezavisno -CH2-, -NR<e>-, ili -O- a A, uzet zajedno sa R<A1>i R<A2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je A -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-
2
C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -COzH, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2Rc grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil- C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)- i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
kada je r = 1, R<B1>i R<B2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a B, uzet zajedno sa R<B1>i R<B2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je B veza ili je B -halo(C1-C10alkil)-, opciono supstituisana -C1-C10alkil-, opciono supstituisana -C2-C10alkenil-, opciono supstituisana -C2-C10alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkilfenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisana -C1-C4alkil-(4-6 član heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C4alkil- grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C10alkil-, opciono supstituisane -C2-C10alkenil-, opciono supstituisane -C2-C10alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-,
2
opciono supstituisane -C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril-C1-C4alkil)- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2Rc grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C4alkil,- opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil-C1-C4alkil-, opciono supstituisane -C1-C4alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C4alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C4alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, ha- lo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)- i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)- grupe;
kada je s = 1, R<C1>i R<C2>su svaki nezavisno -CH2- grupa a C, uzet zajedno sa R<C1>i R<C2>, formira vezujuću grupu, pri čemu je C -halo(C1-C12alkil)-, opciono supstituisana -C1-C12alkil-, opciono supstituisana -C2-C12alkenil-, opciono supstituisana -C2-C12alkinil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisana -C1-C6alkil-(4-6 člana heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisana -C1-C6alkil-(5-6 člana heteroaril)-C1-C6alkil-grupa,
pri čemu je alkil deo navedene opciono supstituisane -C1-C12alkil-, opciono supstituisane -C2-C12alkenil-, opciono supstituisane -C2-C12alkinil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-O-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-NR<a>-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-fenil-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, halo(C1-C4alkil), -OH, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<d>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2,
2
-SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>i -NR<d>SO2Rc grupe,
a
C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, ili 5-6 člani heteroaril deo navedene opciono supstituisane -C1-C6alkil-(C3-C6cikloalkil)-C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkilfenil- C1-C6alkil-, opciono supstituisane -C1-C6alkil-(4-6 člane heterocikloalkil)-C1-C6alkil-, ili opciono supstituisane -C1-C6alkil-(5-6 člane heteroaril)-C1-C6alkil- grupe je opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)- i C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-grupe;
R<3>i R<5>su svaki nezavisno -CON(R<d>)(R<f>) grupa, ili je jedan od R<3>i R<5>-CON(R<d>)(R<f>) a drugi od R<3>i R<5>je H ili -CO2(R<c>) grupa;
R<4>i R<6>su svaki nezavisno izabrani od H, halogena, halo(C1-C6alkil), halo(C1-C6alkoksi)-, hidroksi, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -COR<c>, -CO2R<c>, -N(R<d>)COR<c>, -N(R<d>)SO2R<c>, -N(R<g>)SO2(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), -N(R9)CO(C1-C2alkil)-N(R<h>)(R<f>), opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino-grupe,
pri čemu je (C1-C6alkil) deo navedene opciono supstituisane (C1-C6alkil), opciono supstituisane (C1-C6alkil)oksi-, opciono supstituisane (C1-C6alkil)amino- i opciono supstituisane (C1-C6alkil)(C1-C4alkil)amino- grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od -OH, -OR<c>, -NH2, -NR<c>R<c>, -NR<c>R<d>, -CO2H, -CO2R<c>, -OCOR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH 2, -SO2NR<c>R<d>, -OCONH2, -OCONR<c>R<d>, -NR<d>COR<c>, -NR<d>SOR<c>, -NR<d>CO2R<c>, -NR<d>SO2R<c>, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 5-6 člane he ;terocikloalkil i opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril grupe, pri čemu je navedena opciono supstituisana fenil, 5-6 člana heterocikloalkil ili 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-,(C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), hidroksi-(C1-C4alkil)-, halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
R<14>je opciono supstituisana C1-C4alkil grupa, pri čemu je navedena opciono supstituisana C1-C4alkil grupa opciono supstituisana sa supstituentom izabranim od -OR<c>, -NR<c>R<d>, -CO2R<c>,
2
-CONR<c>R<d>, -SO2NR<c>R<d>i -OCONR<c>R<d>grupe;
R<16>je H, halogen, ili C1-C4alkilgrupa;
R<15>i R<17>su svaki nezavisno H, ciklopropil, ili C1-C4alkil grupa;
R<a>je H, -R<c>, -COR<c>, -CO2H, -CO2R<c>, -SOR<c>, -SO2R<c>, -CONH2, -CONR<c>R<d>, -SO2NH2, ili -SO2NR<c>R<d>grupa;
svaki R<b>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), ili -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil) grupa;
svaki R<c>je nezavisno C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-OH, -(C1-C4alkil)-O-(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-N(R<e>)(R<f>), -(C1-C4alkil)-O-CO(C1-C4alkil), -(C1-C4alkil)-CO-O-(C1-C4alkil), opciono supstituisana C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana fenil, opciono supstituisana 4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril, opciono supstituisana 9-10 člana heteroaril, a opciono supstituisana -C1-C4alkil-C3-C6cikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-4-6 člana heterocikloalkil, opciono supstituisana -C1-C4alkil-5-6 člana heteroaril, ili opciono supstituisana -C1-C4alkil-9-10 član heteroaril grupa,
pri čemu je C3-C6cikloalkil, fenil, 4-6 člani heterocikloalkil, 5-6 člani heteroaril ili 9-10 člani heteroaril deo navedene supstituisane C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane fenil, opciono supstituisane 4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane 5-6 člane heteroaril, opciono supstituisane 9-10 člane heteroaril opciono supstituisa ;ne -C1-C4alkil-C3-C6cikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-fenil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-4-6 člane heterocikloalkil, opciono supstituisane -C1-C4alkil-5-6 člane heteroaril, ili opciono supstituisane -C1-C4alkil-9-10 člane heteroaril grupe opciono supstituisan sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<d>je nezavisno H ili C1-C4alkil grupa;
svaki R<e>je nezavisno H, (C1-C4alkil), -CO(C1-C4alkil), -OCO(C1-C4alkil), -CO2(C1-C4alkil), -CO-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil), -CO(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril), -CO(C1-C4alkil)-(opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril) grupa,
pri čemu je opciono supstituisana 5-6 člana heterocikloalkil ili opciono supstituisana 5-6 člana heteroaril grupa opciono supstituisana sa 1-4 supstituenta od kojih je svaki nezavisno izabran
2
od halogena, hidroksi, amino, (C1-C4alkil)amino-, (C1-C4alkil)(C1-C4alkil)amino-, C1-C4alkil, halo(C1-C4alkil), halo(C1-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-, hidroksi-(C2-C4alkoksi)-, C1-C4alkoksi-(C1-C4alkoksi)-, -COR<d>, -CON(R<d>)(R<f>) i -CO2R<d>grupe;
svaki R<f>je nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa;
R<g>i R<h>su svaki nezavisno H ili (C1-C4alkil) grupa ili R<g>i R<h>, uzeti zajedno sa atomom ili atomima preko kojih su vezani, formiraju 5-6 člani prsten;
ili njihov tautomer;
ili so, preciznije, njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0028] Alternativne definicije za različite grupe i supstituentske grupe Formule (I-N), (I) ili Formule (I-P) date kroz celu specifikaciju treba da posebno objasne svaku vrstu ovde otkrivenog jedinjenja, pojedinačno, kao i grupe jedne ili više vrsta jedinjenja.
[0029] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će biti jasno da jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da egzistiraju u drugim tautomernim oblicima, uključujući oblike zvicerjona ili izomerne oblike. Svi ovde opisani tautomerni (uključujući oblike zvicerjona) i izomerni oblici jedinjenja iz pronalaska su obuhvaćeni okvirom ovog pronalaska.
[0030] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će takođe biti jasno da jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da egzistiraju u tautomernim oblicima, uključujući, ali bez ograničenja na, oblike Formule (A), Formule (B) i/ili Formule (C) ili oblike zvicerjona, uključujući, ali bez ograničenja, Formulu (D) ili Formulu (E).
[0031] Hemijski nazivi dati za međuproizvode i/ili jedinjenja iz ovog pronalaska koja su ovde opisana, mogu da se odnose na bilo koji od tautomernih predstavnika tih jedinjenja (u nekim slučajevima, ovakvi alternativni nazivi su dati u eksperimentalnom delu). Razumljivo je da bilo koja referenca za imenovano jedinjenja (međuproizvod ili jedinjenje iz pronalaska) ili strukturno opisano jedinjenje (međuproizvod ili jedinjenje iz pronalaska) treba da obuhvati sve tautomerne oblike, uključujući oblike zvicerjona ovih jedinjenja i bilo koje njihove smeše.
[0032] Kako se ovde koristi, naziv "alkil" predstavlja zasićenu, ravnu ili račvastu ugljovodoničnu grupu koja ima navedeni broj atoma ugljenika. Naziv "C1-C4alkil" se odnosi na ravan ili račvasti alkil deo koji sadrži od 1 do 4 atoma ugljenika. U primere alkila spadaju, ali bez ograničenja na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, s-butil, t-butil, pentil i heksil.
[0033] Kada se naziv supstituenta kao što je "alkil" koristi u kombinaciji sa drugim nazivom supstituenta, na primer kao u "hidroksi(C1-C4alkil)", naziv vezujućeg supstituenta (na primer, alkil) treba da obuhvati dvovalentni deo, pri čemu se mesto vezivanja nalazi na vezujućem supstituentu. U primere "hidroksi(C1-C4alkil)" grupa spadaju, ali bez ograničenja na, hidroksimetil, hidroksietil i hidroksiizopropil.
[0034] Kako se ovde koristi, naziv "halo(alkil)" predstavlja zasićenu, ravnu ili račvastu ugljovodoničnu grupu koja ima navedeni broj (n) atoma ugljenika i jedan ili više (do 2n+1) atoma halogena. Na primer, naziv "halo(C1-C4alkil)" predstavlja grupu koja ima jedan ili više atoma halogena, koji mogu da budu isti ili različiti, na jednom ili više atoma ugljenika alkil dela koji sadrži 1 do 4 atoma ugljenika. Primeri "halo(C1-C4alkil)" grupa uključuju, ali nisu ograničeni samo na, -CF3(trifluorometil), -CCl3(trihlorometil), 1,1-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil i heksafluoroizopropil.
[0035] "Alkenil" se odnosi na ravnu ili račvastu ugljovodoničnu grupu koja ima navedeni broj atoma ugljenika i najmanje 1 i do 3 ugljenik-ugljenik dvostruke veze. U primere spadaju etenil i propenil.
[0036] "Alkinil" se odnosi na ravnu ili račvastu ugljovodoničnu grupu koja ima navedeni broj atoma ugljenika i najmanje 1 i do 3 ugljenik-ugljenik trostruke veze. Primeri uključuju etinil i propinil.
[0037] "Alkoksi-" ili "(alkil)oksi-" se odnosi na "alkil-oksi-" grupu, koja sadrži alkil deo, sa navedenim brojem atoma ugljenika vezanih preko vezujućeg atoma kiseonika. Na primer, naziv "C1-C4alkoksi-" predstavlja zasićeni, ravan ili račvast ugljovodonični deo koji ima
1
najmanje 1 i do 4 atoma ugljenika vezanih preko vezujućeg atoma kiseonika. U primere "C1-C4alkoksi-" ili "(C1-C4alkil)oksi-" grupa spadaju, ali bez ograničenja na, metoksi, etoksi, npropoksi, izopropoksi, n-butoksi, s-butoksi i t-butoksi.
[0038] Kako se ovde koristi, naziv "halo(alkoksi)-" predstavlja zasićenu, ravnu ili račvastu ugljovodoničnu grupu koja ima navedeni broj (n) atoma ugljenika i jedan ili više (do 2n+1) atoma halogena, vezanih preko vezujućeg atoma kiseonika. Na primer, naziv "halo(C1-C4alkoksi)-" se odnosi na "haloalkil-oksi-" grupu koja sadrži "halo(C1-C4alkil)" deo vezan preko vezujućeg atoma kiseonika. U primere "halo(C1-C4alkoksi)-" grupa spadaju, ali bez ograničenja na -OCH F2(difluorometoksi), -OCF3(trifluorometoksi), -OCH2CF3(trifluoroetoksi) i -OCH(CF3)2(heksafluoroizopropoksi).
[0039] Karbociklična grupa ili deo je ciklična grupa ili deo u kome su članovi prstena atomi ugljenika, koja može da bude zasićena, delimično nezasićena (ne-aromatična) ili potpuno nezasićena (aromatična).
[0040] "Cikloalkil" se odnosi na ne-aromatičnu, zasićenu grupu ugljovodoničnog prstena koja sadrži navedeni broj atoma ugljenika u prstenu. Na primer, naziv "C3-C6cikloalkil" se odnosi na cikličnu grupu koja ima od tri do šest atoma ugljenika u prstenu. U primere "C3-C6cikloalkil" grupa spadaju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil.
[0041] Heterociklična grupa ili deo je ciklična grupa ili deo koji ima, kao članove prstena, atome od najmanje dva različita elementa, pri čemu ciklična grupa ili deo može da bude zasićen, delimično nezasićen (ne-aromatičan) ili potpuno nezasićen (aromatičan).
[0042] "Heteroatom" se odnosi na atom azota, sumpora ili kiseonika, na primer atom azota ili atom kiseonika.
[0043] "Heterocikloalkil" se odnosi na ne-aromatičnu, monocikličnu ili bicikličnu grupu koja sadrži 3-10 atoma u prstenu i sadrži jedan ili više (generalno jedan ili dva) heteroatoma kao članove prstena nezavisno izabrane od kiseonika, sumpora i azota. Mesto vezivanja heterocikloalkil grupe može da bude bilo koji odgovarajući atom ugljenika ili azota.
[0044] U primere "heterocikloalkil" grupa spadaju, ali bez ograničenja na, aziridinil, tiranil, oksiranil, azetidinil, oksetanil, tietanil, pirolidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, 1,3-dioksolanil, piperidinil, piperazinil, tetrahidropiranil, dihidropiranil, tetrahidrotiopiranil, 1,3-dioksanil, 1,4-dioksanil, 1,3-oksatiolanil, 1,3-oksatianil, 1,3-ditianil, 1,4-oksatiolanil, 1,4-oksatianil, 1,4-ditianil, morfolinil, tiomorfolinil i heksahidro-1H-1,4-diazepinil. Primeri "4-člane heterocikloalkil" grupe uključuju oksetanil, tietanil i azetidinil.
[0045] Naziv "5-6 člani heterocikloalkil" predstavlja zasićenu, monocikličnu grupu koja
2
sadrži 5 ili 6 atoma u prstenu, koja uključuje jedan ili dva heteroatoma nezavisno izabrana od kiseonika, sumpora i azota. U ilustrativne primere 5-6 članih heterocikloalkil grupa spadaju, ali bez ograničenja na, pirolidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, piperidinil, piperazinil, morfolinil i tiomorfolinil.
[0046] "Heteroaril" se odnosi na aromatičnu monocikličnu ili bicikličnu grupu koja sadrži 5 do 10 atoma u prstenu, uključujući 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabrana azota, kiseonika i sumpora, pri čemu je bar deo grupe aromatičan. Na primer, ovaj naziv obuhvata biciklične heterociklične-aril grupe koje sadrže ili fenil prsten kondenzovan sa heterocikličnim delom ili deo heteroaril prstena kondenzovan sa karbocikličnim delom. Mesto vezivanja heteroaril grupe može da bude preko bilo kog pogodnog atoma ugljenika ili azota.
[0047] Naziv "5-6 člani heteroaril" predstavlja aromatičnu monocikličnu grupu koja sadrži 5 ili 6 atoma u prstenu uključujući najmanje jedan atom ugljenika i 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabranih od azota, kiseonika i sumpora. Odabrane 5-člane heteroaril grupe sadrže jedan azot, kiseonik, ili sumpor kao heteroatom u prstenu i opciono sadrže 1, 2, ili 3 dodatna atoma azota u prstenu. Izabrane 6-člane heteroaril grupe sadrže 1, 2, ili 3 azota kao heteroatome u prstenu. U primere 5-članih heteroaril grupa spadaju furil (furanil), tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, tiazolil, izotiazolil, tiadiazolil, oksazolil, izoksazolil i oksadiazolil. Izabrane 6-člane heteroaril grupe uključuju piridinil (piridil), pirazinil, pirimidinil, piridazinil i triazinil.
[0048] Naziv "9-10 člani heteroaril" se odnosi na aromatičnu bicikličnu grupu koja sadrži 9 ili 10 atoma u prstenu, uključujući 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabrana od azota, kiseonika i sumpora. Primeri 9-članih heteroaril (6,5-kondenzovani heteroaril) grupa uključuju benzotienil, benzofuranil, indolil, indolinil (dihidroindolil), izoindolil, izoindolinil, indazolil, izobenzofuril, 2,3-dihidrobenzofuril, benzoksazolil, benzoizoksazolil, benzotiazolil, benzoizotiazolil, benzimidazolil, benzoksadiazolil, benzotiadiazolil, benzotriazolil, purinil, imidazopiridinil, pirazolopiridinil, triazolopiridinil i 1,3-benzodioksolil.
[0049] U primere 10-članih heteroaril (6,6-kondenzovani heteroaril) grupa spadaju hinolinil (hinolil), izohinolil, ftalazinil, naftiridinil (1,5-naftiridinil, 1,6-naftiridinil, 1,7-naftiridinil, 1,8-naftiridinil), hinazolinil, hinoksalinil, 4H-hinolizinil, 1,2,3,4-tetrahidrohinolinil (tetrahidrohinolinil), 1,2,3,4-tetrahidroizohinolinil (tetrahidroizohinolinil), cinolinil, pteridinil i 2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil.
[0050] Nazivi "halogen" i "halo" se odnose na halogen radikal, na primer, fluoro, hloro, bromo, ili jodo substituent.
[0051] "Okso" predstavlja dvostruko vezani kiseonik deo; na primer, ukoliko je vazan direktno za atom ugljenika formira karbonil ostatak (C = O).
[0052] "Hidroksi" ili "hidroksil" treba da označi -OH radikal.
[0053] Kako se ovde koristi, naziv "cijano" se odnosi na nitrilnu grupu, -C=N.
[0054] Kako se ovde koristi, naziv "opciono supstituisan" ukazuje da grupa (kao što su alkil, cikloalkil, alkoksi, heterocikloalkil, aril, ili heteroaril grupe) ili prsten ili deo može da bude nesupstituisan, ili grupa, prsten ili deo može da bude supstituisan sa jednim ili više supstituenata kako je definisano u definicijama supstituenata (A, R<3>, itd,) koje su ovde date. U slučaju kada grupe mogu da budu izabrane od brojnih alternativnih grupa, izabrane grupe mogu da budu iste ili različite.
[0055] Naziv "nezavisno" označava da kada je izabrano više od jednog supstituenta od mogućeg broja supstituenata, ovi supstituenti mogu da budu isti ili različiti.
[0056] Naziv "farmaceutski prihvatljiv" se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i dozne oblike koji su, u okviru zdrave medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez prevelike toksičnosti, iritacije ili drugih problema ili komplikacija srazmerno razumnom odnosu korist/rizik.
[0057] Kako se ovde koristi, nazivi "jedinjenje(a) iz pronalaska" ili "jedinjenje(a) iz ovog pronalaska" označavaju (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, kako je ovde definisano, to jest, u bilo kom tautomernom obliku, bilo kom izomernom obliku ili bilo kom obliku soli ili ne-soli (na primer, kao oblik slobodne kiseline ili baze ili kao so, posebno njegova farmaceutski prihvatljiva so) i bilo koji njegov fizički oblik (uključujući ne-čvrste oblike (na primer, tečne ili polučvrste oblike) i čvrste oblike (na primer, amorfne ili kristalne oblike, specifične polimorfne oblike, solvatne oblike, uključujući hidratne oblike (na primer, , mono-, di- i hemi-hidrate)) i smeše različitih oblika.
[0058] Prema tome, ovim pronalaskom je obuhvaćen (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, u bilo kom obliku soli ili ne-soli i bilo kom njegovom fizičkom obliku i smeše različitih oblika. Iako su obuhvaćeni okvirom ovog pronalaska, treba da se razume da (E)- 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-
4
metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid kako je ovde definisano, u bilo kom obliku soli ili ne-soli i u bilo kom njegovom fizičkom obliku može da ima promenljive nivoe aktivnosti, različite bioraspoloživosti i različite karakteristike potrebne za izradu formulacije.
[0059] Reprezentativna jedinjenja iz ovog pronalaska uključuju jedinjenje iz Primera 14. Referentna jedinjenja iz ovog otkrića uključuju jedinjenja iz primera 1 do 13 i 15 do 197. Jasno je da ovaj pronalazak obuhvata (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid kao slobodnu bazu i kao njegove soli, na primer kao njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3- morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7- metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid u obliku slobodne baze. U još jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid u obliku soli, posebno, farmaceutski prihvatljive soli. Dalje je razumljivo, u jednom ostvarenju, da se pronalazak odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid u obliku slobodne baze. U još jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid u obliku soli, preciznije, farmaceutski prihvatljive soli.
[0060] Referentna ostvarenja jedinjenja iz ovog pronalaska uključuju:
1,1’-((2R,3R)-2,3-dihidroksibutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
1,1’-((metilazanediil)bis(-etan-2,1-diil))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5 karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat;
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid;
8-etil-10,18,30-trimetil-7,20-diokso-7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31,32-tetradekahidro-1H-benzo[4,5]imidazol[2,1-b]benzo[4,5]imidazo[1,2-i]dipirazolo[5,1-m:4’,3’-t][1,3,6,9,11,14]heksaazaciklodokozin-3,24-dikarboksamid; i
1,15-bis(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19a- tetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid;
kao slobodnu bazu,
ili njegov tautomer;
ili njegovu so, preciznije, njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0061] Referentna ostvarenja jedinjenja iz ovog otkrića uključuju:
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-hidroksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
1,1’-(2,2,3,3-tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
di-terc-butil(3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7- metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil) fosfat; 3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat;
(E)-7-bromo-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
etil(E)-3-(5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazoll-7 -il)propionat;
etil(E)-3-(5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazoll-7-il)propanoatnu kiselinu;
metil-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat; metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat; 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilnu kiselinu;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
1,1-(butan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
(E)-8-etil-4,26-bis(3-hidroksipropoksi)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-2,24-dikarboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-metoksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(l-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
(E)-7-(benziloksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(7-butoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol- 5-karboksamid);
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(l-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-izopropoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid);
(E)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1-(4-(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)- 7-(morfolinometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
kao slobodnu bazu,
ili njegov tautomer;
ili njegovu so, preciznije, njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0062] Jedno ostvarenje jedinjenja iz ovog pronalaska uključuje:
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid; (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
ili njegov tautomer;
ili njegovu so, preciznije, njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0063] Referentna jedinjenja iz ovog otkrića uključuju:
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7 -metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid;
(Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid; 3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propildihidrogen fosfat;
(E)-3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7- il)oksi)propil dihidrogen fosfat;
3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat;
ili njegov tautomer;
ili njegovu so, preciznije, njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0064] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
4
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0065] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-l-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((l-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0066] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0067] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0068] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0069] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0070] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
4
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0071] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0072] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0073] U jednom ostvarenju, jedinjenje iz pronalaska je
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0074] U jednom ostvarenju, jedinjenje iz pronalaska je (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
4
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0075] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje
(Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0076] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje 3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((l-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-
4
benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0077] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje (E)-3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0078] Ovde je otkriveno referentno jedinjenje 3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-
4
benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
ili njegov tautomer;
ili njegova so, preciznije, njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0079] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih centara (takođe označeni kao čiralni centri), kao što su asimetrični ugljenik, ili asimetrični -SO- deo. Jedinjenja iz ovog pronalaska koja sadrže jedan ili više asimetričnih centara mogu da budu prisutna kao racematne smeše, diastereomerne smeše, enantiomerno obogaćene smeše, diastereomerno obogaćene smeše ili kao enantiomerno ili diastereomerno čisti pojedinačni stereoizomeri.
[0080] Stereohemija asimetričnog centra prisutnog u jedinjenjima iz ovog pronalaska je generalno predstavljena u nazivima jedinjenja i/ili u ovde ilustrovanim hemijskim strukturama. Ukoliko stereohemija asimetričnog centra prisutnog u jedinjenju iz ovog pronalaska ili u bilo kojoj ovde ilustrovanoj hemijskoj strukturi nije navedena, struktura treba da obuhvati bilo koji stereoizomer i sve njegove smeše. Pojedinačni izomer izdvojen tako da bude skoro potpuno čist od drugih izomera (to jest čist) može da se izoluje tako da je prisutno manje od 10%, preciznije manje od približno 1%, na primer manje od približžno 0.1% drugog izomera.
[0081] Pojedinačni stereoizomeri jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se razdvoje (ili smeše stereoizomera mogu da se obogate) koristeći postupke poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Na primer, ovakvo razdvajanje može da se izvrši (1) formiranjem diastereoizomernih soli, kompleksa ili drugih derivata; (2) selektivnom reakcijom sa stereoizomerno-specifičnim reagensom, na primer enzimatičnom oksidacijom ili redukcijom;
4
ili (3) gasno-tečnom ili tečnom hromatografijom u asimetričnoj sredini, na primer na asimetričnoj podlozi kao što je silika gel sa vezanim asimetričnim ligandom ili u prisustvu asimetričnog rastvarača. Treba razumeti da kada je željeni stereoizomer konvertovan u drugi hemijski entitet jednom od prethodno opisanih procedura razdvajanja, naredna faza zahteva oslobađanje željenog oblika. Alternativno, specifični stereoizomeri mogu da se sintetišu asimetričnim sintezama korišćenjem optički aktivnih reagenasa, supstrata, katalizatora ili rastvarača, ili konverzijom jednog enantiomera u drugi asimetričnom transformacijom.
[0082] Pronalazak takođe obuhvata različite deuterisane oblike jedinjenja iz ovog pronalaska. Svaki raspoloživi atom vodonika vezan za atom ugljenika može nezavisno da se zameni sa atomom deuterijuma. Osoba sa uobičajenim iskustvom u praksi će znati kako da sintetiše deuterisane oblike jedinjenja iz ovog pronalaska. Na primer, a-deuterisane a-amino kiseline su raspoložive na tržištu ili mogu da se izrade uobičajenim tehnikama (videti za primer: Elemes, Y. i Ragnarsson, U. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1996, 6, 537-40). Korišćenje ovih reagenasa može da se odobri za izradu jedinjenja u kojima je atom vodonika na asimetričnom centru zamenjen sa atomom deuterijuma. Drugi komercijalno raspoloživi deuterisani početni materijali mogu da se koriste u izradi deuterisanih analoga jedinjenja iz ovog pronalaska (videti za primer: metil-d3-amin nabavljen od Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI), ili mogu da se sintetišu korišćenjem uobičajenih tehnika upotrebom deuterisanih reagenasa (na primer redukcijom korišćenjem litijum aluminijum deuterida ili natrijum borodeuterida ili metal-halogen izmenom nakon neutralizacije sa D2O ili metanolom-d3).
[0083] Odgovarajuće farmaceutski prihvatljive soli (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida mogu da uključe soli nastale dodatkom kiseline ili soli nastale dodatkom baze. Za pregled pogodnih farmaceutski prihvatljivih soli videti Berge i saradnici, J. Pharm. Sci., 66:1-19, (1977) i P. H. Stahl i C. G. Wermuth, Eds., Handbook of Pharmaceutical Salts:
Properties, Selection i Use, Weinheim/Zürich:Wiley- VCH/VHCA (2002).
[0084] Soli (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida koje sadrže baznu amino ili neku drugu baznu funkcionalnu grupu mogu da se izrade bilo kojim odgovarajućim postupkom poznatim u tehnici, kao što je tretman slobodne baze sa odgovarajućom neorganskom ili organskom kiselinom. Primeri tako formiranih farmaceutski prihvatljivih soli
4
uključuju acetatne, adipatne, askorbatne, aspartatne, benzensulfonatne, benzoatne, kamforatne, kamfor-sulfonatne (kamsilatne), capratne (dekanoatne), caproatne (heksanoatne), kaprilatne (oktanoatne), karbonatne, bikarbonatne, cinamatne, citratne, ciklamatne, dodecilsulfatne (estolatne), etan-1,2-disulfonatne (edisilatne), etansulfonatne (esilatne), formatne, fumaratne (hemi-fumaratne, itd.), galaktaratne (mukat), gentisatne (2,5-dihidroksibenzoat), glukoheptonatne (gluceptatne), glukonatne, glukuronatne, glutamatne, glutaratne, glicerofosforatne, glikolatne, hipuratne, hidrobromidne, hidrohloridne (dihidrohloridne, itd.), hidrojodidne, izobutiratne, laktatne, laktobionatne, lauratne, maleatne, malatne, malonatne, mandelatne, metansulfonatne (mesilatne), naftalen-1,5-disulfonatne (napadisilatne), naftalen-sulfonatne (napsilatne), nikotinatne, nitratne, oleatne, oksalatne, palmitatne, pamoatne, fosfatne (difosfatne, itd.), proprionatne, piroglutamat, ne salicilatne, sebakatne, stearatne, sukcinatne, sulfatne, tartratne, tiocijanatne, p-toluensulfonatne (tosilatne), undecilenatne, 1-hidroksi-2-naftoatne, 2,2-dihloroacetatne, 2-hidroksietansulfonatne (izetionatne), 2-oksoglutaratne, 4-acetamidobenzoatne i 4-aminosalicilatne.
[0085] Soli otkrivenih jedinjenja koje sadrže karboksilnu kiselinu ili drugu kiselu funkcionalnu grupu mogu da se izrade reakcijom sa pogodnom bazom. Ovakva farmaceutski prihvatljiva so može da se izradi sa bazom koja daje farmaceutski prihvatljiv katjon, u koje spadaju soli alkalnih metala (posebno natrijuma i kalijuma), soli zemno alkalnih metala (posebno kalcijuma i magnezijuma), soli aluminijuma i amonijumove soli, kao i soli izrađene sa fiziološki prihvatljivim organskim bazama kao što su trimetilamin, trietilamin, morfolin, piridin, piperidin, pikolin, dicikloheksilamin, N,N’-dibenziletilendiamin, 2-hidroksietilamin, bis-(2-hidroksietil)amin, tri-(2-hidroksietil)amin, prokain, dibenzilpiperidin, dehidroabietilamin, N,N’-bisdehidroabietilamin, glukamin, N-metilglukamin, kolidin, holin, hinin, hinolin i bazne amino kiseline kao što su lizin i arginin.
[0086] U svom okviru, pronalazak obuhvata sve moguće stehiomerne i ne-stehiomerne oblike soli (na primer, hidrobromidne, dihidrobromidne, fumaratne, hemi-fumaratne, itd.) (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida.
[0087] Kada je otkriveno jedinjenje ili njegova so nazvano ili opisano strukturno, jasno je da jedinjenje ili so, uključujući njegove solvate (posebno hidrate) može da egzistira u kristalnim oblicima, ne-kristalnim oblicima ili njihovoj smeši. Jedinjenje ili so ili njegovi solvati (posebno hidrati) mogu takođe da ispoljavaju polimorfizam (to jest kapacitet da se javlja u različitim kristalnim oblicima). Ovi različiti kristalni oblici su obično poznati kao "polimorfi." Jasno je da pronalazak obuhvata sve polimorfe bilo kog jedinjenja iz ovog pronalaska, na primer, sve polimorfne oblike bilo kog jedinjenja koje je ovde imenovano ili strukturno opisano, uključujući bilo koje njegove soli i/ili solvate (posebno hidrate).
[0088] Polimorfi imaju istu hemijsku kompoziciju ali se razlikuju u rasporedu, geometrijskom raspoređivanju i drugim deskriptivnim karakteristikama kristalnog čvrstog stanja. Prema tome, polimorfi mogu da imaju različite fizičke karakteristike kao što su oblik, gustina, čvrstina, deformabilnost, stabilnost i karakteristike rastvorljivosti. Polimorfi obično imaju različite tačke topljenja, IR spektar i modele difrakcije X-zraka praška, što može da se koristi za identifikaciju. Biće razumljivo da različiti polimorfi mogu da se dobiju, na primer, promenom ili podešavanjem uslova korišćenih za kristalizaciju/rekristalizaciju jedinjenja. Polimorfni oblici mogu da se karakterišu i diferenciraju korišćenjem brojnih uobičajenih analitičkih tehnika, uključujući ali bez ograničenja na, modele difrakcije X-zraka praška (XRPD), infracrveni (IR) spektar, Raman spektar, diferencijalnu skenirajuću kalorimetriju (DSC), termogravimetrijske analize (TGA) i nuklearnu magnetnu rezonancu čvrstog stanja (SSNMR).
[0089] Stručnjak sa iskustvom u praksi će razumeti da farmaceutski prihvatljivi solvati (posebno, hidrati) (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida, uključujući farmaceutski prihvatljive solvate farmaceutski prihvatljive soli (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido )-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida, mogu da se formiraju kada se molekule solvata inkorporiraju u kristalnu rešetku u toku kristalizacije. Solvati mogu da uključe nevodene rastvarače kao što je etanol, ili mogu da uključe vodu kao rastvarač koji je inkorporiran u kristalnu rešetku. Solvati u kojima je voda rastvarač koji je inkorporiran u kristalnu rešetku su obično označeni kao "hidrati."
[0090] Ovaj pronalazak u svom okviru obuhvata sve moguće stehiomerne i ne-stehiomerne soli i/ili hidratne oblike.
[0091] Soli i solvati (na primer hidrati i hidratne soli) jedinjenja iz pronalaska koji su pogodni za upotrebi u medicini su one u kojima je kaunterjon ili upotrebljeni rastvarač farmaceutski prihvatljiv. Soli koje imaju ne-farmaceutski prihvatljive kaunterjone su obuhvaćene okvirom
1
ovog pronalaska, na primer, za upotrebu kao međuproizvodi u izradi drugih jedinjenja iz pronalaska.
[0092] Uobičajeno, farmaceutski prihvatljiva so može lako da se izradi korišćenjem poželjne kiseline ili baze, po potrebi. Dobijena so može da kristališe ili precipitira iz rastvora, ili da se formira trituracijom i može da se izdvoji filtracijom, ili evaporacijom rastvarača.
[0093] Zbog toga što su jedinjenja iz ovog pronalaska namenjena za upotrebu u farmaceutskim kompozicijama biće lako razumeti da je svako od njih preferirano dato u suštinski čistom obliku, na primer, najmanje 60% čisto, još poželjnije najmanje 75% čisto, a preferirano najmanje 85%, posebno najmanje 98% čisto (% su težinski ili na bazi težine). Nečisto izrađena jedinjenja mogu da se koriste za izradu čistijih oblika za korišćenje u farmaceutskim kompozicijama.
[0094] Pronalazak obuhvata sve prolekove jedinjenja iz ovog pronalaska, koja su nakon primene na pacijentu sposobna da obezbede (direktno ili indirektno) jedinjenje iz ovog pronalaska, ili aktivni metabolit ili njegov ostatak. Ovakvi derivati su prepoznatljivi za stručnjaka sa iskustvom u tehnici bez nepotrebnog eksperimentisanja. Ipak, referenca upućuje na Burger’s Medicinal Chemistry i Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles i Practice, koji je ovde inkorporiran kao referenca do nivoa znanja o ovom derivatima.
[0095] Dalje treba da se razume da ovaj pronalazak u svom okviru uključuje sve tautomerne ili izomerne oblike bilo kog oblika slobodne baze jedinjenja iz ovog pronalaska kao i sve moguće stehiomerne i ne-stehiomerne oblike soli. Jedinjenja iz pronalaska su korisna u tretmanu ili prevenciji bolesti ili poremećaja u kojima je korisna modulacija STING. U ovakve bolesti i poremećaje posredovane STING-om spadaju inflamacija, alergijske i autoimune bolesti, infektivne bolesti, kancer i pre-kancerogeni sindromi. Jedinjenja iz pronalaska su takođe korisna kao imunogenične kompozicije ili adjuvansi vakcina. U skladu sa tim, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja iz pronalaska za upotrebu u modulaciji STING uključujući dovođenje u kontakt ćelije sa jedinjenjem iz pronalaska.
[0096] Jedan aspekt pronalaska obezbeđuje jedinjenja iz pronalaska za upotrebu u tretmanu ili prevenciji bolesti i poremećaja posredovanih STING-om u kojima je korisna agonizacija STING-a. U primere bolesti/poremećaja, ali bez ograničenja na, spadaju kancer, infektivne bolesti (na primer, HIV, HBV, HCV, HPV i influenca), adjuvansi vakcina.
[0097] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje iz pronalaska za upotrebu u terapiji. Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-
2
(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u terapiji. Ovaj pronalazak posebno obezbeđuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)- 7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7- metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu STING-posredovanih bolesti ili poremećaja.
[0098] Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu kao adjuvansa vakcina. Ovde je takođe obezbeđena imunogenična kompozicija ili adjuvans vakcine koja uključuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat.
[0099] U narednom ostvarenju pronalaska, ovde je obezbeđena kompozicija koja sadrži (E)-1-(4-(5-karbamoil- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat i jedno ili više imunostimulativnih sredstava.
[0100] U još jednom ostvarenju, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje iz pronalaska za upotrebu u tretmanu STING- posredovane bolesti ili poremećaja i/ili za upotrebu kao imunogenične kompozicije ili adjuvansa vakcina. U narednom ostvarenju, ovaj pronalazak obezbeđuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolino- propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u ublažavanju povreda organa ili kontinuiranog oštećenja kao rezultata STING-posredovane bolesti ili poremećaja.
[0101] Otkriće obezbeđuje upotrebu (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)- 7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7- metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata, u proizvodnji vakcine. Otkriće dalje obezbeđuje upotrebu (E)-1-(4-(5-karbamoil- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata za proizvodnju imunogenične kompozicije koja uključuje antigen ili antigenu kompoziciju za tretman ili prevenciju bolesti. Otkriće dalje obezbeđuje upotrebu (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata za proizvodnju kompozicione vakcine koja uključuje antigen ili antigenu kompoziciju, za tretman ili prevenciju bolesti.
[0102] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu inflamacije.
[0103] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu alergijske bolesti.
[0104] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu autoimunih bolesti.
[0105] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu infektivnih bolesti.
[0106] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-
4
en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HIV infekcije kod ljudi. U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HIV infekcije kod ljudi kod kojih postoji rizik od infekcije. U još jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu AIDS infekcije kod ljudi.
[0107] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HBV infekcije kod ljudi. U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HCV infekcije kod ljudi. U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na E)-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HCV infekcije kod ljudi koji imaju ili kod kojih postoji rizik od infekcije.
[0108] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu influence kod ljudi. U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu influence, kod ljudi koji imaju ili kod kojih postoji rizik od infekcije.
[0109] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu infekcije humanim papiloma virusom (HPV) kod ljudi. U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3- morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu HPV infekcije kod ljudi koji imaju ili kod kojih postoji rizik od infekcije.
[0110] Kako se ovde koristi, nazivi "kancer," "neoplazma," i "tumor" se koriste kao međusobno zamenljivi i/ili u jednini ili u množini, odnose na ćelije kod kojih postoji maligna transformacija koja ih čini patološkim za organizam domaćina. Ćelije primarnog kancera mogu dobro utvrđenim tehnikama lako da se razlikuju od ne-kancerogenih ćelija, posebno histološkim ispitivanjem. Definicija kancerogene ćelije, kako se ovde koristi, uključuje ne samo primarne kancerogene ćelije već i bilo koju ćeliju izvedenu od pretka ćelije kancera. Ovo obuhvata metastazne kancerogene ćelije i in vitro kulture i ćelijske linije izvedene od kancerogenih ćelija. Kada se radi o tipu kancera koji se normalno manifestuje kao solidni tumor, "klinički detektabilni" tumor je onaj koji je detaktabilan na osnovu tumorne mase, na primer, procedurama kao što je skeniranje kompjuterizovanom tomografijom (CT), snimanje magnetnom rezonancom (MRI), X-zracima, ultrasondom ili palpacijom pri fizičkom pregledu i/ili koji je detektabilan zbog pojavljivanja jednog ili više kancer-specifičnih antigena u uzorku dobijenom od pacijenta. Tumori mogu da budu hematopoietični (ili hematološki ili hematologični ili povezani sa krvlju) kanceri, na primer, kanceri koji potiču od ćelija krvi ili imunih ćelija, koji mogu da se označe kao "tečni tumori." Specifični primeri kliničkih stanja zasnovanih na hematološkim tumorima uključuju leukemije kao što su hronična mijelocitna leukemija, akutna mijelocitna leukemija, hronična limfocitna leukemija i akutna limfocitna leukemija; maligniteti ćelija plazme kao što su multiple mijeloma, MGUS i Waldenstrom-ova makroglobulinemija; limfomi kao što su ne-Hodgkin-ova limfoma, Hodgkin-ova limfoma; i slično.
[0111] Kancer može da bude bilo koji kancer u kome je prisutan nenormalan broj blast ćelija ili neželjena proliferacija ćelija ili onaj koji je dijagnostikovan kao hematološki kancer, uključujući i limfoidne i mijeloidne malignitete. U mijeloidne malignitete spadaju, ali bez ograničenja na, akutna mijeloidna (ili mijelocitna ili mijelogena ili mijeloblastna) leukemija (nediferencirana ili diferencirana), akutna promijeloidna (ili promijelocitna ili promijelogena ili promijeloblastna) leukemija, akutna mijelomonocitna (ili mijelomonoblastna) leukemija, akutna monocitna (ili monoblastna) leukemija, eritroleukemija ili megakariocitna (ili megakarioblastna) leukemija. Ove leukemije mogu zajedno da budu označene kao akutna mijeloidna (ili mijelocitna ili mijelogena) leukemija (AML). Mijeloidni maligniteti takođe uključuju mijeloproliferativne poremećaje (MPD) koji obuhvataju, ali bez ograničenja na, hroničnu mijelogenu (ili mijeloidnu) leukemiju (CML), hroničnu mijelomonocitnu leukemiju (CMML), esencijalnu trombocitemiju (ili trombocitozu) i policitemiju vera (PCV). Mijeloidni maligniteti takođe uključuju mijelodisplaziju (ili mijelodisplazični sindrom ili MDS), koja može da se označi kao refraktorna anemija (RA), refraktorna anemija sa viškom blasta (RAEB) i refraktorna anemija sa viškom blasta u transformaciji (RAEBT); kao i mijelofibroza (MFS) sa ili bez angiogene mijeloidne metaplazije.
[0112] Hematopoietični kanceri takođe uključuju limfoidne malignitete koji mogu da zahvate limfne žlezde, slezinu, koštanu srž, perifernu krv i/ili ekstranodalna mesta. Limfoidni kanceri uključuju malignitete B-ćelija što obuhvata, ali bez ograničenja na, non-Hodgkin-sove limfome B-ćelija (B-NHLs). B-NHLs može da bude indolentan (niskog stepena), srednjeg stepena (ili agresivan) ili visokog stepena (veoma agresivan). Indolentni limfomi B-ćelija uključuje folikularni limfom (FL); limfom malih limfocita (SLL); limfom marginalne zone (MZL) uključujući nodalni MZL, ekstranodalni MZL, slezinski MZL i slezinski MZL sa vilouznim limfocitima; limfoplazmacitni limfom (LPL); i limfoidno tkivo povezano sa mukozom (MALT ili ekstranodalna marginalna zona) limfom. B-NHLs srednjeg stepena uključuje limfom mantle ćelija (MCL) sa ili bez leukemičnog uključivanja, limfom difuznih velikih ćelija (DLBCL), limfom folikularnih velikih ćelija (ili stepen 3 ili stepen 3B) limfom i primarni mediastinalni limfom (PML). Visoki stepen B-NHLs uključuje Burkitt-ov limfom (BL), imfom sličan Burkitt-u, limfom malih nepodeljenih ćelija (SNCCL) i limfoblastni limfom. U druge B-NHLs spadaju imunoblastni limfom (ili imunocitoma), primarni efuzioni limfom, limifomi povezani sa HIV (ili sa AIDS) i post-transplantni limfoproliferativni poremećaj (PTLD) ili limfom. Maligniteti B-ćelija takođe uključuju, ali bez ograničenja na, hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), prolimfocitnu leukemiju (PLL), Waldenstrom-ovu makroglobulinemiju (WM), leukemiju ćelija dlake (HCL), leukemiju velikih granularnih limfocita (LGL), akutnu limfoidnu (ili limfocitnu ili limfoblastnu) leukemiju i Castleman-ovu bolest. NHL može takođe da uključi non-Hodgkin-ov limfom T-ćelija (T-NHLs), koji uključuje, ali bez ograničenja na, non-Hodgkin-ov limfom T-ćelija koji nije na drugi način specificiran (NOS), limfom perifernih T-ćelija (PTCL), limfom anaplastičnih velikih ćelija (ALCL), angioimunoblastni limfoidni poremećaj (AILD), limfom nosnih ćelija prirodnih ubica (NK)/T-ćelije, gama/delta limfom, limfom kutanoznih T-ćelija, mukozni fungoidi i Sezary sindrom.
[0113] Hematopoietični kanceri takođe uključuju Hodgkin-ov limfom (ili bolest), uključujući klasičan Hodgkin-ov limfom, nodularni sklerotični Hodgkin-ov limfom, mešovitu celularnost Hodgkin-ovog limfoma, limfocitno predominantni (LP) Hodgkin-ov limfom, nodularni (LP) Hodgkin-ov limfom i Hodgkin-ov limfom ispražnjenih limfocita. Hematopoietični kanceri takođe uključuju bolesti ili kancere ćelija plazme kao što su multiple mijeloma MM, uključujući tinjajuću MM, monoklonalnu gamopatiju neodređenog (ili nepoznatog ili nejasnog) značaja (MGUS), plazmocitomu (kostiju, ekstramedularno), limfoplazmacitičnu limfomu (LPL), Waldenstrom-ovu makroglobulinemiju, leukemiju ćelija plazme i primarne amiloidoze (AL). Heatopoietični kanceri mogu takođe da uključe druge kancere dodatnih hematopoietičnih ćelija, uključujući polimorfonuklearne leukocite (ili neutrofile), bazofile, eozinofile, dendritne ćelije, trombocite, eritrocite i ćelije prirodne ubice. Tkiva koja uključuju hematopoietične ćelije su ovde ozonačena kao "tkiva hematopoietičnih ćelija" i uključuju koštanu srž, perifernu krv, timus i periferna limfoidna tkiva, kao što su slezina, limfne žlezde, limfoidna tkiva povezana sa mukozom (kao što su limfoidna tkiva povezana sa crevima), tonzile, Peyer-ove naslage i apendiks i limfoidna tkiva povezana sa drugim mukozama, na primer, bronhijalne obloge.
[0114] U jednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat za upotrebu u tretmanu kancera i pre-kancerogenih sindroma.
[0115] Povezane autoimune bolesti uključuju, ali bez ograničenja na, vaskulitis povezan sa STING sa početkom u detinjstvu (SAVI), Aicardi Goutieres sindrom (AGS), chilblain lupus, ataksiju telanogiektazije (takođe označena kao Louis-Bar sindrom), retinalnu vaskulopatiju sa cerebralnom leukodistrofijom (RCVL), sistemski eritematozni lupus (SLE), kutenozni lupus, neftitični lupus, psorijazu, dijabetes melitus uključujući insulin-zavisni dijabetes melitus (IDDM), dermatomiozitis, humani imunodeficijentni virus (HIV), AIDS, polimiozitis, sistemsku sklerozu (skleroderma) i Sjögren-ov sindrom (SS), reumatoidni artritis, psorijatični artritis, poliartritis, miasteniju gravis, poliarteritis nodozu, vaskulitis, kutenozni vaskulitis, vaskulitis povezan sa anti-neutrofilnim citoplazmatičnim antitelima (ANCA), Henoch-Schonlein purpuru, autoimuni hepatitis, primarni sklerozirajući holangitis, Wegener-ove granulomatoze, mikroskopski poliangitis, Behcet-ovu bolest, spondilitis, arteritis velikih ćelija, reumatičnu polimialgiju, Raynaud-ov fenomen, primarnu bilijarnu cirozu, primarni angiitis mikroskopskog poliangiitisa centralnog nervnog sistema, neuromijelitis optika i mešavinu bolesti vezivnog tkiva.
[0116] Inflamacija predstavlja grupu vaskularnih, celularnih i neuroloških odgovora na traumu. Inflamacija može da se okarakteriše kao kretanje inflamatornih ćelija kao što su monociti, neutrofili i granulociti u tkiva. Ovo je obično povezano sa smanjenom funkcioj endotelijalne barijere i oedema u tkivima. Inflamacija može da se klasifikuje ili kao akutna ili kao hronična. Akutna inflamacija je početni odgovor tela na štetan nadražaj i postiže se povećanim kretanjem plazme i leukocita iz krvi u povređeno tkivo. Kaskada biohemijskih dešavanja propagira i sazreva inflamatorni odgovor, uključujući lokalni vaskularni sistem, imuni sistem i različite ćelije unutar oštećenog tkiva. Produžena inflamacija, poznata kao hronična inflamacija, dovodi do progresivne promene u tipu ćelija koje su prisutne na mestu inflamacije i karakteriše se istovremenom destrukcijom i zarastanjem tkiva od inflamatornog procesa.
[0117] Kada se pojavljuje kao deo imunog odgovora na infekciju ili kao akutni odgovor na traumu, inflamacija može da bude korisna i obično je samoograničavajuća. Međutim, inflamacija može da bude štetna pod različitim uslovima. Ovo obuhvata produkciju pojačane inflamacije u odgovoru na infektivna sredstva, što može da dovede do značajnog oštećenja organa i smrti (na primer, u slučaju sepse). Osim toga, hronična inflamacija je generalno štetna i predstavlja koren brojnih hroničnih bolesti izazivajući teška i nepovratna oštećenja tkiva. U takvim situacijama, imuni odgovor je često usmeren protiv sopstvenog tkiva (autoimunitet), mada hronični odgovori na strane entitete mogu takođe da dovedu do slučajnog oštećenja sopstvenog tkiva.
[0118] Cilj anti-inflamatorne terapije je stoga da smanji ovu inflamaciju, da inhibira autoimunitet kada je prisutan i da omogući fiziološke procese i napredovanje zarastanja i obnove tkiva.
[0119] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje inflamacije bilo kog tkiva i organa u telu, uključujući mišićno skeletnu inflamaciju, vaskularnu inflamaciju, neurološku inflamaciju, inflamaciju digestivnog sistema, okularnu inflamaciju, inflamaciju reproduktivnog sistema i druge inflamacije kako je niže navedeno.
[0120] Mišićno skeletna inflamacija se odnosi na svako inflamatorno stanje mišićno skeletnog sistema, posebno ona stanja koja napadaju skeletne zglobove, uključujući zglobove ruku, ručnog zgloba, lakta, ramena, vilice, kičme, vrata, kuka, kolena, zgloba i stopala i stanja koja pogađaju tkiva koja vezuju mišiće za kosti, kao što su tetive. Primeri mišićno skeletne inflamacije koji mogu da se tretiraju sa jedinjenjima iz pronalaska uključuju artritis, (uključujući, na primer, osteoartritis, reumatoidni artritis, psorijatični artritis, ankilozni spondilitis, akutni i hronični infektivni artritis, artritis povezan sa gihtom i pseudo gihtom i juvenilim idiopatskim artritisom), tendonitis, sinovitis, tenosinovitis, burzitis, fibrozitis (fibromialgija), epikondilitis, miozitis i osteitis (uključujući, na primer, Paget-ovu bolest, osteitis pubis i cističnu osteitis fibrozu).
[0121] Okularna inflamacija se odnosi na inflamaciju bilo koje strukture oka, uključujući očne kapke. U primere okularne inflamacije koja može da se tretira sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju blefaritis, blefarohalaze, konjuktivitis, dakrioadenitis, keratitis, keratokonjuktivitis sika (suve oči), skleritis, trihiaze i uveitis.
[0122] U primere inflamacije nervnog sistema koje mogu da se tretiraju sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju encefalitis, Guillain-Barre sindrom, meningitis, neuromiotonija, narkolepsija, multiple skleroza, mijelitis, CNS vaskulitis i šizofrenija.
[0123] U primere inflamacije vaskulature ili limfatičnog sistema koje mogu da se tretiraju sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju ateroskleroza, artritis, felbitis, vaskulitis i limfangitis.
[0124] U primere inflamatornih stanja digestivnog sistema koja mogu da se tretiraju sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju holangitis, holecistitis, enteritis, enterokolitis, gastritis, gastroenteritis, inflamatorna bolest creva (kao što su Kronova bolest i ulcerativni kolitis), ileitis i proktitis.
[0125] U primere inflamatornih stanja reproduktivnog sistema koja mogu da se tretiraju sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju cervicitis, horioamnionitis, endometritis, epididimitis, omfalitis, oforitis, orhitis, salpingitis, tubo-ovarijalni abcesi, uretritis, vaginitis, vulvitis i vulvodinija.
[0126] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje autoimunih stanja koja imaju inflamatornu komponentu. U ovakva stanja spadaju akutna univerzalna diseminentna alopecija, Behcet-ova bolest, Chagas-ova bolest, vaskulitis povezan sa STING sa početkom u detinjstvu (SAVI), Aicardi Goutieres sindrom (AGS), chilblain lupus, ataksija telangiektazija (takođe označena kao Luis-Bar Syndrome), retinalna vaskulopatija sa cerebralnom leukodistrofijom (RCVL), ANCA-povezani vaskulitis, sindrom hroničnog umora, disautonomija, encefalomijelitis, ankilozni spondilitis, aplastična anemija, hidradenitis supurativa, autoimuni hepatitis, autoimuni oforitis, elijačna bolest, Kronova bolest, dijabetes melitus tip 1, arteritis velikih ćelija, autoimmune oophoritis, celiac bolest, Crohn’s bolest, diabetes mellitus type 1, giant cell arteritis, Goodpastureov sindrom, Grave-ova bolest, Guillain-Barre sindrom, Hashimotova bolest, Henoch-Schonlein purpura, Kawasakijeva lupus eritematoza, mikroskopski kolitis, mikroskopski poliarteritis, mešovita bolest vezivnog tkiva, multiple skleroza, miastenija gravis, opsoklonuno mioklonusni sindrom, optički neuritis, Ord-ov tiroiditis, pemfigus, poliarteritis nodoza, polimialgija, reumatoidni artritis, Reiter-ov sindrom, Sjogren-ov sindrom, temporalni arteritis, Wegener-ova granulomatoza, topla autoimuna hemolitična anemija, intersticijalni cistitis, lajmska bolest, morfea, psorijaza, sarkoidoza, skleroderma, ulcerativni kolitis i vitiligo.
[0127] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenja hipersenzitivnih bolesti posredovanih T-ćelijama koje imaju inflamatornu komponentu. U ovakva stanja spadaju kontaktna hipersenzitivnost, kontaktni dermatitis (uključujući onaj nastao zbog otrovnog bršljana), urtikarije, kožne alergije, respiratorne alergije (polenska groznica, alergijski rinitis) i gluten-senzitivne enteropatije (celijačna bolest).
[0128] U druga inflamatorna stanja koja mogu da se tretiraju sa jedinjima iz ovog pronalaska spadaju, na primer, apendicitis, dermatitis, dermatomiozitis, endokarditis, fibrozitis, gingivitis, glositis, hepatitis, hidradenitis supurativa, iritis, laringitis, mastitis, miokarditis, nefritis, otitis, pankreatitis, parotitis, perkarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, neumonitis, prostatitis, pielonefritis i stomatitis, odbacivanje transplanta (uključujući organe kao što su bubreg, jetra, srce, pluća, pankreas (na primer, ćelije telašca), koštana srž, kornea, tanko crevo, kožni alografti, kožni homografti i ksenografti srčanih zalistaka, serumska bolest i bolest graft protiv domaćina), akutni pankreatitis, hronični pankreatitis, akutni respiratorni distres sindrom, Sezary-ov sindrom, kongenitalna adrenalna hiperplazija, nonsupurativni tiroiditis, kancer povezan sa hiperkalcemijom, pemfigus, bulozni herpetiformni dermatitis, teški multiformni eritem, eksfolijativni dermatitis, seboroični dermatitis, sezonski ili
1
višegodišnji alergijski rinitis, bronhijalna astma, kontaktni dermatitis, atopični dermatitis, hipersenzitivne reakcije na lek, alergijski konjuktivitis, keratitis, herpes zoster oftalmikus, iritis i iridociklitis, horioretinitis, optički neuritis, simptomatične sarkoidoze, hemoterapija fulminirajuće ili diseminovane plućne tuberkuloze, idiopatska trombocitopenična purpura kod odraslih, sekundarna trombocitopenija kod odraslih, stečena (autoimuna) hemolitična anemija, leukemija i limfoni kod odraslih, akutna leukemija kod dece, regionalni enteritis, autoimuni vaskulitis, multiple skleroza, hronična opstruktivna bolest pluća, odbacivanje transplantiranog solidnog organa, sepsa. Preferirani tretmani uključuju tretman odbacivanja transplanta, reumatoidnog artritisa, psorijatičnog artritisa, multiple skleroze, dijabetesa tip 1, astme, inflamatorne bolesti creva, sistemskog eritematoznog lupusa, psorijaze, hronične bolesti pluća i inflamacije praćene infektivnim stanjima (na primer, sepse). U jednom ostvarenju, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje astme.
[0129] U primere kancerogenih bolesti i stanja u kojima jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da imaju potencijalno korisne antitumorne efekte spadaju, ali bez ograničenja na, kanceri pluća, kostiju, pankreasa, kože, glave, vrata, uterusa, jajnika, želuca, kolona, dojke, ezofagusa, tankog creva, creva, endokrinog sistema, tiroidne žlezde, paratiroidne žlezde, nadbubrežne žlezde, uretre, prostate, penisa, testisa, uretera, mokraćne bešike, bubrega ili jetre, rektalnog kancera, kancera analnog regiona, karcinome jajovoda, endometrijuma, cerviksa, vagine, vulve, renalne čašice, renalne ćelije; sarkoma mekog tkiva, miksome, rabdomiome, fibrome, lipome, teratome, holangiokarcinoma, hepatoblastoma, angiosarkoma, hemangioma, hepatoma, fibrosarkoma, hondrosarkoma, mijeloma, hronične ili akutne leukemije, limfocitnih limfoma, primarnog CNS limfoma, neoplazme CNS, tumore kičmene moždine, karcinome skvamoznih ćelija, sinovijalni sarkom, maligne pleuralne mezotelijome, gliome stem ćelija mozga, adenom hipofize, bronhiijalnog adenoma, hondromatoznog hamartoma, mezoteliome, Hočkinsove bolesti ili kombinacije jednog ili više od prethodno navedenih kancera.
[0130] Ovaj pronalazak se odgovarajuće odnosi na jedinjenja iz pronalaska za upotrebu u lečenju ili ublažavanju ozbiljnosti od kancera izabranih iz grupe koja se sastoji od kancera mozga (gliome), gliblastoma, astrocitoma, glioblastome multiforme, Bannayan-Zonana sindroma, Cowden-ove bolesti, Lhermitte-Duclos bolesti, Wilm-ovog tumora, Ewing-ovog sarkoma, rabdomiosarkoma, ependimoma, mdeuloblastoma, glave i vrata, bubrega, jetre, melanoma, jajnika, pankreasa, adenokarcinoma, duktalnog adenokarcinoma, adenoskvamoznog karcinoma, karcinoma acinarnih ćelija, glukagonoma, insulinoma,
2
prostate, sarkoma, osteosarkome, tumora velikih ćelija kostiju, tiroidee, limfoblastične leukemije T ćelija, hronične mijelogene leukemije, hronične limfocitne leukemije, leukemije ćelija dlake. akutne limfoblastne leukemije, akutne mijelogene leukemije, hronične neutrofilne leukemije, akutne limfoblastne leukemije T ćelija, plazmacitome, imunoblastne leukemije velikih ćelija, leukemije ćelija omotača, multiple mijeloma, megakarioblastne leukemije, multiple mijeloma, akutne megakariocitne leukemije, pro mijelocitne leukemije, eritroleukemije, malignog limfoma, Hočkinsovog limfoma, non-Hočkinsovog limfoma, limfoblastnog loimfoma T ćelija, Burkitt-ovog limfoma, folikularnog limfoma, neuroblastoma, kancera mokraćne bešike, urotelijalnog kancera, kanera vulve, cervikalnog kancera, kancera endometrijuma, renalnog kancera, mezoteliome, ezofagijalnog kancera, kancera pljuvačnih žlezda, hepatocelularnog kancera, kancera želuca, nazofarangijalnog kancera, bukalnog kancera, kancera usta, GIST (gastrointestinalni stromalni tumor) i kancera testisa. U nekim ostvarenjima, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje solidnih ili tečnih tumora. U nekim ostvarenjima, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje sarkoma, kancera dojke, kolorektalnog kancera, gastroezofagijalnog kancera, melanoma, kancera ne-malih ćelija pluća (NSCLC), karcinoma bistrih ćelija bubrega (RCC), limfoma, karcinoma skvamoznih ćelija glave i vrata (SCCHN), hepatocelularnog karcinoma (HCC), i/ili non Hočkin limfoma (NHL). Ovaj pronalazak se pogodno odnosi na postupak za lečenje ili ublažavanje ozbiljnosti pre-kancerogenih sindroma kod sisara, uključujući ljude, pri čemu je pre-kancerogeni sindrom izabran od: intraepitelijalne neoplazije grlića materice, monoklonalne gamopatije nepoznatog značaja (MGUS), mijelodisplastičnog sindroma, aplastične anemije, lezija grlića materice, mladeža na koži (pre-melanoma), intraepitelijalne (intraduktalne) neoplazije prostate (PIN), duktalnog karcinoma in situ (DCIS), polipa kolona i teških hepatitisa ili ciroza.
[0131] U jednom aspektu, ljudi imaju solidni tumor. U jednom aspektu, tumor je izdvojen od kancera glave i vrata, kancera želuca, melanoma, karcinoma bubrežnih ćelija (RCC), kancera ezofagusa, karcinoma ne-malih ćelija pluća, kancera prostate, kolorektalnog kancera, kancera jajnika i kancera pankreasa. U jednom aspektu, čovek ima jedan ili više od sledećeg: kolorektalni kancer (CRC), kancer ezofagusa, grlića materice, mokraćne bešike, dojke, glave i vrata, jajnika, melanoma, karcinom bubrežnih ćelija (RCC), EC skvamoznih ćelija, karcinom ne-malih ćelija pluća, kancer mezotelijuma i prostate. U narednom aspektu, čovek ima tečni tumor kao što su difuzna limfoma velikih B ćelija (DLBCL), multiple mijeloma, hronična limfoblastna leukemija (CLL), folikularna limfoma, akutna mijeloidna leukemija i hronična mijelogena leukemija.
[0132] U jednom ostvarenju, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da budu korisna za tretman kancera kože (na primer, ne-melanomni kancer kože, karcinom skvamoznih ćelija, karcinom bazalnih ćelija) ili aktinitnih keratoza. Pored jasnog efekta na raščišćavanje superficijalnih kancera kože, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da spreče razvoj drugih kancera kože i premalignih aktinitnih keratoza kod lečenih pacijenata.
[0133] Jedinjenja iz ovgo pronalaska mogu takođe da budu korisna u tretmanu jedne ili više bolesti koje se javljaju kod sisara a koje se karakterišu ćelijskom proliferacijom u oblasti poremećaja povezanih sa neo-vaskularizacijom i/ili vaskularnim permeabilitetom, uključujući proliferativne poremećaje krvnih sudova u koje spadaju artritis (reumatoidni artritis) i restenoze; fibrotične poremećaje uključujući hepatičnu cirozu i aterosklerozu; proliferativne poremećaje mezangijalnih ćelija koji uključuju glomerulonefritis, dijabetičnu nefropatiju, malignu nefrosklerozu, sindrome trombocitne mikroangipatije, proliferativne retinopatije, odbacivanje transplantiranog organa i glomerulopatije; i metaboličke poremećaje uključujući psorijazu, dijabetes melitus, hronično zarastanje rana, inflamaciju i neurodegenerativne bolesti.
[0134] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje neurodegenerativnih bolesti. U primere neurodegenerativnih bolesti spadaju, ali bez ograničenja na, multiple skleroza, Huntingtonova bolest, Alzheimer-ova bolest, Parkinsonova bolest, amiotrofna lateralna skleroza (ALS).
[0135] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje infektivnih bolesti, gde spada bilo koja bolest nastala ili je u koincidenciji sa infekcijom patogenima. Patogeni su široko definisani kao bilo koja vrsta organizma koja je strana za sredinu humanog tkiva. U uobičajene patogene koji izazivaju bolesti spadaju bakterije (mnoge slične TB), virusi (na primer HBV, HIV, prehlada) i parazitne protozoe (na primer P falciparum koji izaziva malariju). Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje infektivnih bolesti izazvanih bakterijama, kao što su TB infekcija (Mycobacterium tuberculosis), Chlamydia, Tularemia (Francisella tularensis), infekcija plazmodijumom ili infekcije DNK ili RNK virusom. Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenja bolesti izazvanih familijom DNK virusa: Herpesviridae (herpes simplex virus-1, Kaposi-jev sarkom u vezi sa virusom i Epstein-Barr virus), Papillomaviridae (humani papiloma virus), adenovirus i Hepadnaviridae (Hepatitis B virus). Primeri familije RNK virusa uključuju Retroviridae (humani imunodeficijentni virus), Flaviviridae (Dengue virus, Hepatitis C virus),
4
Orthomyxoviridae (influenca) i Coronaviridae (humani koronavirus i SARS koronavirus).
[0136] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se primene sama ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima. Kao modulatori imunog odgovora, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da se koriste u monoterapiji ili da se koriste u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvom u tretmanu bolesti ili stanja u kojima je korisna modulacija STING. Kombinovane terapije u skladu sa ovim pronalaskom prema tome uključuju primenu Co (E)-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata i najmanje još jednog terapeutski aktivnog sredstva. U jednom ostvarenju, kombinovane terapije u skladu sa ovim pronalaskom uključuju primenu najmanje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata i najmanje još jednog terapeutskog sredstva. (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolino- propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid, njegovi tautomer, njegove farmaceutski prihvatljive soli i njegovi hidrati i drugo terapeutsko sredstvo(a) mogu da se primene zajedno u jednoj farmaceutskoj kompoziciji ili odvojeno a, kada se primenjuju odvojeno, to može da bude istovremeno ili po redu u bilo kom redosledu. Količine (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida ili njegovog tautomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog hidrata i drugog terapeutskog sredstva(a) i određeno vreme primene će biti izabrani kako bi se postigao željeni kombinovani terapeutski efekat. Prema tome, u narednom aspektu, ovde je obezbeđena kombinacija koja uključuje (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegov hidrat, zajedno sa jednim ili više drugih terapeutskih sredstava.
[0137] (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapeutskih sredstava koja mogu da budu korisna u prevenciji ili tretmanu alergijskih bolesti, inflamatornih bolesti ili autoimunih bolesti, na primer, sa antigenskom imunoterapijom, anti-histaminima, steroidima, NSAID-ima, bronhodilatatorima (na primer beta 2 agonistima, adrenergičnim agonistima, antiholinergičnim sredstvima, teofilinom), metotreksatom, modulatorima leukotriena i sličnim sredstvima; u terapiji monoklonalnim antitelom, kao što su anti-IgE, anti-TNF, anti-IL-5, anti-IL- 6, anti-IL-12, anti-IL-1 i sličnim sredstvima; terapijama receptora, na primer, etanreceptom i sličnim sredstvima; antigen ne-specifičnim imunoterapijama (na primer, interferonom ili drugim modulatorima citokini/hemokini, citokin/hemokin receptora, agonistima ili antagonistima citokina, TLR agonistima i sličnim sredstvima).
[0138] (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, njegovi tautomeri, njegove farmaceutski prihvatljive soli i njegovi hidrati mogu da se koriste u kombinaciji sa radioterapijom i/ili hirurgijom i/ili najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom koje može da bude korisno u tretmanu kancera i pre-kancerogenih sindroma. U kombinaciji može da se koristi bilo koje anti-neoplastično sredstvo koje ima aktivnost na osetljivost tumora koji se tretira. U tipična korisna anti-neoplastična sredstva spadaju, ali bez ograničenja na, antimikrotubulna sredstva kao što su diterpenoidi i vinka alkaloidi; kompleksi platina koordinacije; alkilujuća sredstva kao što su azotni iperit, oksazafosforini, alkilsulfonati, nitrozouree i triazeni; antibiotična sredstva kao što su antraciklini, aktinomicini i bleomicini; inhibitori topoizomeraze II kao što su epipodofilotoksini; antimetaboliti kao što su purin i analozi pirimidina i anti-folatna jedinjenja; inhibitori topoizomeraze I kao što su kamptotekini; hormoni i analozi hormona; inhibitori puteva transdukcije signala; inhibitori angiogeneze non-receptora tirozina; imunoterapeutska sredstva; proapoptotična sredstva; inhibitori signaliziacije ćelijskog ciklusa; imuno-onkološka sredstva i imunostimulativns sredstva.
[0139] Anti-mikrotubulna ili anti-mitotična sredstva su grupa specifičnih sredstava aktivnih protiv ćelija mikrotubula tumora u toku M ili faze mitoze ćelijskog ciklusa. U primere antimikrotubulnih sredstava spadaju, ali bez ograničenja na, diterpenoidi i vinka alkaloidi.
[0140] Diterpenoidi, koji su izdvojeni iz prirodnih izvora, su grupa specifičnih antikancerogenih sredstava koji deluju na G2/M faze ćelijskog ciklusa. Veruje se da diterpenoidi stabilizuju β-tubulin subjedinicu mikrotubula, vezivajući se za ovaj protein. Čini se da je razgradnja proteina nakon toga inhibirana sa mitozama koje su zatovrene a nakon toga dolazi do smrti ćelija. U primere diterpenoida spadaju, ali nisu ograničeni samo na, paklitaksel i njegov analaog docetaksel.
[0141] Paklitaksel, 5β,20-epoksi-1,2α,4,7β,10β,13α-heksa-hidroksitaks-11-en-9-on 4,10-diacetat 2-benzoat 13-estar sa (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilizoserinom; je prirodni produkt diterpena izdvojen iz drveta pacifičke tise Taxus brevifolia i na tržištu je raspoloživ kao injektabilni rastvor TAXOL®. On je član taksan familije terpena. Paklitaksel je odobren za kliničku upotrebu u terapiji refraktornog kancera jajnika u Sjedinjenim Državama (Markman i saradnici, Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire i saradnici, Ann. Intem, Med., 111:273, 1989) i za tretman kancera dojke (Holmes i saradnici, J. Nat. Cancer Inst., 83:1797, 1991.). Potencijalno je kandidat za tretman neoplazmi u koži (Einzig i saradnici, Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46) i karcinoma glave i vrata (Forastire i saradnici, Sem. Oncol., 20:56, 1990). Jedinjenje takođe pokazuje potencijal za bolest policističnih bubrega (Woo i saradnici, Nature, 368:750.1994), kancera pluća i malarije. Tretman pacijenata sa paklitakselom dovodi do supresije koštane srži (više ćelijskih linija, Ignoff, R.J. i saradnici, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998) što je povezano sa dužinom doziranja iznad granične koncentracije (50nM) (Kearns, C.M. i saradnici, Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995).
[0142] Docetaxel, (2R,3S)-N-karboksi-3-fenilizoserin,N-terc-butil estar, 13-estar sa 5β,20-epoksi-1,2α,4,7β,10β,13α -heksahidroksitaks-11-en-9-on 4-acetat 2-benzoat, trihidrat; je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor TAXOTERE®. Docetaxel je indikovan za tretman kancera dojke. Docetaxel je polusintetički derivat paklitaksela q.v., izrađen upotrebom prirodnog prekursora, 10-deacetil-bakatin III, ekstrahovanog iz iglica drveta evropske tise.
[0143] Vinka alkaloidi su grupa specifičnih anti-neoplastičnih sredstava dobijenih od zimzelene biljke. Vinka alkaloidi deluju u M fazi (mitozi) ćelijskog ciklusa vezivanjem specifično za tubulin. Kao posledica toga, vezana molekula tubulina ne može da polimerizuje u mikrotubule. Veruje se da je mitoza zaustavljena u metafazi povezana sa smrću ćelija koja sledi. U primere vinka alkaloida spadaju, ali nisu ograničeni samo na, vinblastin, vinkristin i vinorelbin.
[0144] Vinblastin, vinkaleukoblastin sulfat, je komercijalno raspoloživ kao VELBAN® kao injektabilan rastvor. Mada, on ima moguću indikaciju kao druga terapijska linija kod različitih solidnih tumora, primarno je indikovan u tretmanu kancera testisa i različitih limfoma, uključujući Hočkinsovu bolest; i limfocitnih i histocitnih limfoma. Mijelosupresija je dozno ograničavajući neželjeni efekat vinblastina.
[0145] Vinkristin, vinkaleukoblastin, 22-okso-, sulfat, je komercijalno raspoloživ kao ONCOVIN® kao injektabilni rastvor. Vinkristin je indikovan za tretman akutnih leukemija i takođe je našao upotrebu u režimima tretmana Hočkinsovih i ne-Hočkinsovih malignih limfoma. Alopecija i neurološki efekti su najčeši neželjeni efekti vinkristina i u manjoj meri dolazi do mijelosupresije i gastrointestinalnog mukozitisa.
[0146] Vinorelbin, 3’,4’-didehidro -4’-deoksi-C’-norvinkaleukoblastin [R-(R*,R*)-2,3-dihidroksibutandioat (1:2)(so)], je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor vinorelbin tartarat (NAVELBINE®), je polusintetički vinka alkaloid. Vinorelbin je indikovan za upotrebu kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima, kao što je cisplatin, u tretmanu različitih solidnih tumora, posebno kancera ne-malih ćelija pluća, uznapredovanog kancera dojke i hormonski refraktornih kancera prostate.
Mijelosupresija je najčešći dozno ograničavajući neželjeni efekat vinorelbina.
[0147] Kompleksi koordinacije platine su ne-fazna specifična anti-kancerogena sredstva koja su interaktivna sa DNK. Kompleksi platine ulaze u ćelije tumora, podležu akticiji i formiraju intra- i međulančano unakrsno vezivanje sa DNK čime izazivaju neželjene biološke efekte na tumoru. U primere kompleksa koordinacije platine spadaju, ali bez ograničenja na, oksaliplatin, cisplatin i karboplatin.
[0148] Cisplatin, cis-diamindihloroplatina, je komercijalno raspoloživ kao PLATINOL® kao injektabilni rastvor. Cisplatin is primarno indikovan u tretmanu metastaznih kancera testisa i jajnika i uznapredovanog kancera mokraćne bešike.
[0149] Karboplatin, platina, diamin [1,1-ciklobutan-dikarboksilat(2-)-O,O’], je komercijalno raspoloživ kao PARAPLATIN® kao injektabilni rastvor. Karboplatin je primarno indikovan u prvoj i drugoj liniji tretmana uznapredovanog karcinoma jajnika.
[0150] Alkilujuća sredstva su ne-fazna anti-kancerogena specifična sredstva i jaki elektrofili. Uobičajeno, alkilujuća sredstva alkilacijom formiraju kovalentne veze sa DNK preko nukleofilnih delova DNK molekule kao što su fosfatna, amino, sulfhidril, hidroksi, karboksilna i imidazol grupa. Ovakva alkilacija ometa funkciju nukleinske kiseline što dovodi do smrti ćelije. U primere alkilujućih sredstava spadaju, ali nisu ograničeni samo na, azotni iperiti kao što su ciklofosfamid, melfalan i hlorambucil; alkil sulfonati kao što je busulfan; nitrozouree kao što je karmustin; i triazeni kao što je dakarbazin.
[0151] Ciklofosfamid, 2-[bis(2-hloroetil)amino]tetrahidro-2H-1,3,2-oksazafosforin 2-oksid monohidrat, je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor ili tablete kao CYTOXAN®. Ciklofosfamid je indikovan za upotrebu kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu malignih limfoma, multiple mijeloma i leukemija.
[0152] Melfalan, 4-[bis(2-hloroetil)amino]-L-fenilalanin, je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor ili tablete kao ALKERAN®. Melfalan je indikovan za palijativni tretman multiple mijeloma i ne-resektabilnih epitelijalnih karcinoma jajnika. Supresija koštane srži je najčešći neželjeni efekat ograničavanja doze melfalana.
[0153] Hlorambucil, 4-[bis(2-hloroetil)amino]benzenbutanoatna kiselina, je komercijalno raspoloživ kao LEUKERAN® tablete. Hlorambucil je indikovan za palijativni tretman hlronične limfocitne leukemije i malignih limfoma kao što su limfosarkom, limfom velikih folikularnih ćelija i Hočkinsova bolest.
[0154] Busulfan, 1,4-butandiol dimetansulfonat, je komercijalno raspoloživ kao MYLERAN® TABLETE. Busulfan je indikovan za palijativni tretman hronične mijelogene leukemije.
[0155] Karmustin, 1,3-[bis(2-hloroetil)-1-nitrozourea, je komercijalno raspoloživ kao pojedinačna bočica liofiliziranog materijala kao BiCNU®. Karmustin je indikovan za palijativni tretman kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim sredstvima za tumore mozga, multiple mijeloma, Hočkinsove bolesti i non-Hočkinsovog limfoma.
[0156] Dakarbazin, 5-(3,3-dimetil-1-triazeno)-imidazol-4-karboksamid, je komercijalno raspoloživ kao pojedinačna bočica materijala kao DTIC-Dome®. Dakarbazin je indikovan za tretman metastaznih malignih melanoma i za upotrebu u kombinaciji sa drugim sredstvimam za drugu liniju tretmana Hočkinsove bolesti.
[0157] Antibiotski anti-neoplastici su ne-fazna specifična sredstva koja se vezuju ili interkaliraju sa DNK. Uobičajeno, ovakvo delovanje dovodi do stabilnih DNK kompleksa ili cepanja lanca, što remeti uobičajenu funkciju nukleinskih kiselina i dalje do smrti ćelija. Primeri antibiotskih anti-neoplastičnih sredstava uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, aktinomicine kao što je daktilomicin, antracikline kao što su daunorubicin i doksorubicin; i bleomicine.
[0158] Daktinomicin, takođe poznat kao Actinomicin D, je komercijalno raspoloživi injektabilni oblik kao COSMEGEN®. Daktinomicin je indikovan za tretman Wilm-ovog tumora i rabdomiosarkoma.
[0159] Daunorubicin, (8S-cis-)-8-acetil-10-[(3-amino-2,3,6-trideoksi-α-L-luksoheksopiranozil)oksi]-7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroksi-1-metoksi-5,12 naftacendion hidrohlorid, je komercijalno raspoloživ kao lipozomalni injektabilni oblik kao DAUNOXOME® ili kao injektabilni rastvor kao CERUBIDINE®. Daunorubicin je indikovan za indukciju remisije u tretmanu akutne nonlimfocitne leukemije i uznapredovanog HIV povezanog sa Kapošijevim sarkomom.
[0160] Doksorubicin, (8S, 10S)-10-[(3-amino-2,3,6-trideoksi-α-L-liksoheksopiranozil)oksi]-8-glikoloil, 7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroksi-1-metoksi-5,12 naftacendion hidrohlorid, je komercijalno raspoloživ kao injektabilni oblik kao RUBEX® ili ADRIAMYCIN RDF®. Doksorubicin je primarno indikovan za tretman akutne limfoblastne leukemije i akutne mijeloblastne leukemije, ali je takođe korisna komponenta u tretmanu nekih solidnih tumora i limfoma.
[0161] Bleomicin, smeša citotoksičnih glikopeptidnih antibiotika izolovanih iz soja Streptomyces verticillus, je komercijalno raspoloživ kao BLENOXANE®. Bleomicin je indikovan za palijativni tretman, kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim sredstvima, kod karcinoma skvamoznih ćelija, limfoma i karcinoma testisa.
[0162] U inhibitore topoizomeraze II spadaju, ali nisu ograničeni samo na, epipodofilotoksini. Epipodofilotoksini su grupa specifičnih anti-neoplastičnih sredstava dobijenih iz biljke mandragora. Epipodofilotoksini obično napadaju ćelije u S i G2 fazama ćelijskog ciklusa formirajući ternarni kompleks sa topoizomerazom II i DNK što dovodi do prekida DNK lanca. Prekinuti lanci se akumuliraju i dolazi do smrti ćelija. U primere epipodofilotoksina spadaju, ali nisu ograničeni samo na, etopozid i tenipozid.
[0163] Etopozid, 4’-demetil-epipodofilotoksin 9[4,6-0-(R)-etiliden-β-D-glukopiranozid], je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor ili kapsule pod nazivom VePESID® i često je poznat kao VP-16. Etopozid je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu kancera testisa i ne-malih ćelija pluća.
[0164] Tenipozid, 4’-demetil-epipodofilotoksin 9[4,6-0-(R)-teniliden-β-D-glukopiranozid], je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor VUMON® i uobičajeno je poznat kao VM-26. Tenipozid je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu akutne leukemije kod dece.
[0165] Antimetabolitna neoplastična sredstva su grupa specifičnih anti-neoplastičnih sredstava koja deluju na S fazu (DNK sinteza) ćelijskog ciklusa inhibirajući sintezu DNK ili inhibirajući sintezu purin ili pirimidin baze i na taj način ograničavaju sintezu DNK. Zbog toga ne dolazi do S faze i sledi smrt ćelija. U primere antimetabolitnih neo-plastičnih sredstava spadaju, ali bez ograničenja na, fluorouracil, metotreksat, citarabin, merkaptopurin, tiogvanin i gemcitabin.
[0166] 5-Fluorouracil, 5-fluoro-2,4- (1H,3H) pirimidindion, je komercijalno raspoloživ kao fluorouracil. Primena 5-fluorouracila dovodi do inhibicije sinteze timidilata i takođe je inkorporiran i u RNK i u DNK. Rezultat je obično smrt ćelije.5-Fluorouracil je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu karcinoma dojke, kolona, rektuma, želuca i panakreasa. U druge analoge fluoropirimidina spadaju 5-fluoro deoksiuridin (floksuridin) i 5-fluorodeoksiuridin monofosfat.
[0167] Citarabin, 4-amino-1-β-D-arabinofuranozil-2 (1H)-pirimidinon, je komercijalno raspoloživ kao CYTOSAR-U® i obično je poznat kao Ara-C. Veruje se da citarabin ispoljava specifičnost ćelijske faze za S-fazu inhibirajući produženje DNK lanca terminalnom inkorporacijom citarabina u rastući DNK lanac. Citarabin je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu akutne leukemije. U druge analoge citidina spadaju 5-azacitidin i 2’,2’-difluorodeoksicitidin (gemcitabin).
[0168] Merkaptopurin, 1,7-dihidro-6H-purin-6-tion monohidrat, je komercijalno raspoloživ kao PURINETHOL®. Merkaptopurin ispoljava specičnost ćelijske faze u S-fazi inhibicijom sinteze DNK preko, do sada, nespecificiranog mehanizma. Merkaptopurin je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu akutne leukemije. Korisni analog merkaptopurina je azatioprin.
[0169] Tiogvanin, 2-amino-1,7-dihidro-6H-purin-6-tion, je komercijalno raspoloživ kao TABLOID®. Tiogvanin ispoljava specifičnost ćelijske faze u S-fazi inhibicijom sinteze DNK preko, do sada, nespecificiranog mehanizma. Tiogvanin je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu akutne leukemije. U druge analoge purina spadaju pentostatin, eritrohidroksinoniladenin (EHNA), fludarabin fosfat i kladribin.
[0170] Gemcitabin, 2’-deoksi-2’, 2’-difluorocitidin monohidrohlorid (β-izomer), je komercijalno raspoloživ kao GEMZAR®. Gemcitabin ispoljava specifičnost ćelijske faze u S-fazi blokiranjem progresije ćelija prolazeći kroz G1/S granicu. Gemcitabin je indikovan u kombinaciji sa cisplatinom u tretmanu lokalno uznapredovanog kancera ne-malih ćelija pluća i pojedinačno u tretmanu lokalno uznapredovanog kancera pankreasa.
[0171] Metotreksat, N-[4[[(2,4-diamino-6-pteridinil) metil]metilamino] benzoil]-L-
1
glutaminska kiselina, je komercijalno raspoloživ kao metotreksat natrijum. Metotreksat ispoljava efekte specifičnosti ćelijske faze u S-fazi inhibicijom sinteze DNK, oporavak i/ili replikaciju inhibicijom reduktaze dihidrofolne kiseline koja je potrebna za sintezu purin nukleotida i timidilata. Metotreksat je indikovan kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima u tretmanu poliokarcinoma, meningealne leukemije, non-Hočkinsovog limfoma i karcinoma dojke, glave, vrata, jajnika i mokraćne bešike.
[0172] Kamptotekini, uključujući, kamptotekin i derivate kamptotekina su raspoloživi ili su u procesu razvoja kao inhibitori Topoizomeraze I. Veruje se da je citotoksična aktivnost kamptotekina povezana sa njihovom inhibicijom topoizomeraze I. Primeri kamptotekina uključuju, ali bez ograničenja samo na, irinotekan, topotekan i različite optičke oblike 7-(4-metilpiperazino-metilen)-10, 11-etilendioksi-20-kamptotekina koji su niže opisani.
[0173] Irinotekan HCl, (4S)-4,11-dietil-4-hidroksi-9-[(4-piperidinopiperidino) karboniloksi]-1H-pirano[3’,4’,6,7]indolizino[1,2-b]hinolin-3,14(4H,12H)-dion hidrohlorid, je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor CAMPTOSAR®. Irinotekan je derivat kamptotekina koji se vezuje, zajedno sa svojim aktivnim metabolitom SN-38, za kompleks topoizomeraze I -DNK. Veruje se da je citotoksičnost rezultat nepopravljivog cepanja dvostrukog lanca izazvanog interakcijom topoizomeraze I: DNK: irinotekan ili SN-38 ternarnog kompleksa sa enzimima replikacije. Irinotekan je indikovan za tretman metastaznog kancera kolona ili rektuma.
[0174] Topotekan HCl, (S)-10-[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-dihidroksi-1H-pirano[3’;4’,6,7]indolizino[1,2- b]hinolin-3,14-(4H,12H)-dion monohidrohlorid, je komercijalno raspoloživ kao injektabilni rastvor HYCAMTIN®. Topotekan je derivat kamptotekina koji se vezuje za kompleks topoizomeraze I - DNK i sprečava potiskivanje cepanja pojedinačnog lanca izazvanog topoizomerazom I kao odgovor na torzioni deo molekule DNK. Topotekan je indikovan kao druga linija tretmana metastaznog karcinoma jajnika i kancera malih ćelija pluća.
[0175] Hormoni i analozi hormona su korisna jedinjenja za lečenje kancera kod kojih postoji veza između hormona i rasta i/ili prekida rasta kancera. Primeri hormona i analoga hormona korisnih u tretmanu kancera uključuju, ali nisu ograničeni samo na, adrenokortikosteroide kao što su prednizon i prednizolon koji su korisni u tretmanu malignih limfoma i akutne leukemije kod dece; aminoglutetimid i drugi inhibitori aromataze kao što su anastrazol, letrozol, vorozol i eksemestan su korisni u tretmanu adrenokortikalnog karcinoma i hormon zavisnog karcinoma dojke koji sadrže receptore estrogena; progestini kao što su megestrol acetat
2
koristan u tretmanu hormon zavisnog kancera dojke i karcinoma endometrijuma; estrogeni i anti-estrogeni kao što su fulvestrant, flutamid, nilutamid, bakalutamid, ciproteron acetat i 5αreduktaze kao što su finasterid i dutasterid, su korisni u tretmanu karcinoma prostate i benigne hipertrofije prostate; anti-estrogeni kao što su tamoksifen, toremifen, raloksifen, droloksifen, jodoksifen, kao i selektivni modulatori estrogen receptora (SERMS) kao što su oni opisani u U.S. Patentima broj 5,681,835, 5,877,219 i 6,207,716, su korisni u tretmanu hormon zavisnog karcinoma dojke i drugih osetljivih kancera; i gonadotropin-oslobađajući hormon (GnRH) i njegovi analozi koji stimulišu oslobađanje leutinizirajućeg hormona (LH) i/ili folikula stimulirajućeg hormona (FSH) za tretman karcinoma prostate, na primer, LHRH agonisti i antagonisti kao što su goserelin acetat i luprolid.
[0176] Inhibitori puteva transdukcije signala su oni inhibitori koji blokiraju ili inhibiraju hemijske procese koji izazivaju unutarćelijsku promenu. Kako se ovde koristi, ova promena je proliferacija ili diferencijacija ćelija. Inhibitori transdukcije signala korisni u ovom pronalasku uključuju inhibitore receptora tirozin kinaza, non-receptore tirozin kinaza, blokere SH2/SH3 domena, serin/treonin kinaze, fosfotidil inozitol-3 kinaze, mioinozitol signalizaciju i Ras onkogene
[0177] Neke protein tirozin kinaze katalizuju fosforilaciju određenih tirozil ostataka u različitim proteinima uključenim u regulaciju rasta ćelija. Ove protein tirozin kinaze mogu široko da se klasifikuju kao receptor ili non-receptor kinaze.
[0178] Receptor tirozin kinaze su proteini transmembrane koji imaju ekstracelularni domen vezujućeg liganda, domen transmembrane i domen tirozin kinaze. Receptori tirozin kinaze su uključeni u regulaciju rasta ćelija i generalno su označeni kao receptori faktora rasta.
Pokazano je da neodgovarajuća ili nekontrolisana aktivacija mnogih od ovih kinaza, to jest nenormalna aktivnost kinaze receptora faktora rasta, na primer prekomernom ekspresijom ili mutacijom, dovodi do nekontrolisanog rasta ćelija. Prema tome, nenormalna aktivnost ovih kinaza je povezana sa rastom malignog tkiva. Shodno tome, inhibitori ovih kinaza bi mogli da obezbede načine tretmana kancera. U receptore faktora rasta spadaju, na primer, receptor epidermalnog faktora rasta (EGFr), receptor faktora rasta izveden iz trombocita (PDGFr), erbB2, erbB4, ret, receptor vaskularnog endotelijalnog faktora rasta (VEGFr), tirozin kinaza sa imunoglobulinu sličnim i homolognim domenima epidermalnog faktora rasta (TIE-2), receptor insulin faktora rasta-I (IGFI), stimulirajući faktor kolonije makrofaga (cfms), BTK, ckit, cmet, receptori faktora rasta fibroblasta (FGF), Trk receptori (TrkA, TrkB i TrkC), efrin (eph) receptori i RET protoonkogeni. Neki inhibitori faktora rasta su u fazi razvoja i uključuju antagoniste liganda, antitela, inhibitore tirozin kinaze i nesmislene oligonukleotide. Receptori faktora rasta i sredstva koja inhibiraju funkciju receptora faktora rasta su opisani, na primer, u Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818; Shawver i saradnici DDT Vol 2, No.2 February 1997; i Lofts, F. J. i saradnici, "Growth factor receptors as targets", New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul i Kerr, David, CRC press 1994, London.
[0179] Tirozin kinaze, koje nisu kinaze receptora faktora rasta su označene kao non-receptor tirozin kinaze. Non- receptor tirozin kinaze korisne u ovom pronalasku, koje su ciljevi ili potencijalni ciljevi anti-kancerogenih lekova, uključuju cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (kinaza fokalne adhezije), Brutonova tirozin kinaza i Bcr-Abl. Ovakve non-receptor kinaze i sredstva koja inhibiraju funkciju non-receptor tirozin kinaze su opisani u Sinh, S. i Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy i Stem Cell Research 8 (5): 465 - 80; i Bolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404.
[0180] Blokeri SH2/SH3 domena su sredstva koja ometaju SH2 ili SH3 domen vezujući se za različite enzime ili adaptore proteina uključujući, PI3-K p85 subjedinicu, kinaze Src familije, adaptor molekule (Shc, Crk, Nck, Grb2) i Ras-GAP. SH2/SH3 domeni kao ciljevi antikancerogenih lekova su razmatrani u Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological i Toksicological Methods. 34(3) 125-32.
[0181] Inhibitori serin/treonin kinaza uključujući blokere kaskade MAP kinaze koji obuhvataju blokere Raf kinaza (rafk), mitogeno ili ekstracelularno regulisane kinaze (MEKs) i ekstracelularno regulisane kinaze (ERKs); a blokeri članova familije protein kinaze C uključujući blokere PKCs (alfa, beta, gama, epsilon, mu, lambda, jota, zeta); familija IkB kinaze (IKKa, IKKb), kinaze PKB familije, članovi familije akt kinaze i kinaza TGF beta receptora. Ovakve serin/treonin kinaze i njihovi inhibitori su opisani u Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry.126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A. i Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60.1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P.A. i Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment i Research. 78: 3-27, Lackey, K. i saradnici Bioorganic i Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; U.S. Patent No.6,268,391; i Martinez-Iacaci, L., i saradnici, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52.
[0182] Inhibitori članova familije fosfotidil inozitol-3 kinaze koji uključuju blokere PI3-kinaze, ATM, DNK-PK i Ku su takođe korisni u ovom pronalasku. Ove kinaze su diskutovane u Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman,
4
C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry i Cell Biology.29 (7):935-8; i Zhong, H. i saradnici, Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545.
[0183] U ovom pronalasku su takođe korisni inhibitori Mio-inozitol signalizacije kao što su blokeri fosfolipaze C i analozi mioinozitola. Ovakvi inhibitori signala su opisani u Powis, G. i Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman i David Kerr, CRC press 1994, London.
[0184] Naredna grupa inhibitora puteva transdukcije signala su inhibitori Ras onkogena. Ovi inhibitori uključuju inhibitore farnesiltransferaze, geranil-geranil transferaze i CAAX proteaza kao i nesmislene oligonukleotide, ribozome i imunoterapiju. Za ove inhibitore je pokazano da blokiraju ras aktivaciju u ćelijama koje sadrže izvorni tip ras mutanta, čime deluju kao antiproliferativna sredstva. Inhibicija ras onkogena je diskutovana u Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science.7(4) 292-8; Ashby, M.N. (1998), Current Opinion in Lipidology.9 (2) 99 - 102; i BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3): 19-30.
[0185] Kako je prethodno pomenuto, antitela antagonisti za vezujući lignad receptora kinaze mogu takođe da služe kao inhibitori transdukcije signala. Ova grupa inhibitora puteva transdukcije signala uključuje upotrebu humanizovanih antitela za domen ekstracelularnog vezujućeg liganda receptora tirozin kinaze. Na primer Imclone C225 EGFR specifično antitelo (videti Green, M.C. i saradnici, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26(4), 269-286); Herceptin ® erbB2 antitelo (videti Tirozin Kinase Signaling in Breast kancer:erbB Family Receptor Tirozin Kinases, Breast kancer Res., 2000, 2(3), 176-183); i 2CB VEGFR2 specifično antitelo (videti Brekken, R.A. i saradnici, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by monoclonal Anti-VEGF antitelo blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124).
[0186] Takođe mogu da budu korisna anti-angiogenična terapeutska sredstva koja uključuju inhibitore angiogeneze non-receptora MEK. Anti-angiogena sredstva kao što su ona koja inhibiraju efekte faktora rasta vaskularnog endotelijuma (na primer bevacizumab [Avastin™] antitelo protiv faktora rasta vaskularnih endotelijalnih ćelija) i jedinjenja koja deluju drugim mehanizmima (na primer linomid, inhibitori integrin αvβ3 funkcije, endostatin i angiostatin).
[0187] Sredstva korišćena u režimu imunoterapije mogu takođe da budu korisna u kombinaciji sa jedinjenjima iz pronalaska. Imunoterapeutski pristupi, uključujući na primer ex-vivo i in-vivo pristupe za uvećanje imunogeničnosti ćelija tumora kod pacijenta, kao što je transfekcija sa citokinima kao što su interleukin 2, interleukin 4 ili faktor stimulacije granulocitomakrofagne kolonije, pristupi da se smanji energija T-ćelija, pristupi koji koriste transfektovane imune ćelije kao što su citokin-transfektovane dendritne ćelije, pristupi koji koriste citokin-transfektovane linije ćelija tumora i pristupi koji koriste anti-idiotipna antitela.
[0188] Teraputska sredstva koja se koriste u proapoptičnim režimima (na primer, bcl-2 nesmisleni oligonukleotidi) mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska.
[0189] Inhibitori signalizacije ćelijskog ciklusa inhbiraju molekule uključene u kontrolu ćelijskog ciklusa. Familija protein kinaza pod imenom ciklin zavisne kinaze (CDKs) i njihova interakcija sa familijom proteina pod nazivom ciklini kontrolišu progresiju preko ciklusa eukariotičnih ćelija. Koordinisana aktivacija i inaktivacija različitih kompleksa ciklin/CDK je neophodna za normalnu progresiju u toku ćelijskog ciklusa. Nekoliko inhibitora signalizacije ćelijskog ciklusa je u fazi razvoja. Na primer, primeri ciklin zavisnih kinaza, uključujući CDK2, CDK4 i CDK6 i njihovi inhibitori su opisani u, na primer, Rosania i saradnici, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230.
[0190] U jednom ostvarenju, kombinacija ovog pronalaska uključuje jedinjenje iz pronalaska i najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo izabrano od anti-mikrotubularnih sredstava, kompleksa koordinacije platine, sredstava za alkilaciju, antibiotskih sredstava, inhibitora topoizomeraze II, antimetabolita, inhibitora topoizomeraze I, hormona i analoga hormona, inhibitora puteva transdukcije signala, inhibitora angiogeneze non-receptor tirozin MEK, imunoterapeutskih sredstava, proapoptičnih sredstava i inhibitora signalizacije ćelijskog ciklusa.
[0191] U jednom ostvarenju, kombinacija ovog pronalaska uključuje jedinjenje iz pronalaska i najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo koje je anti-mikrotubularno sredstvo izabrano od diterpenoida i vinka alkaloida.
[0192] U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je diterpenoid. U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je vinka alkaloid.
[0193] U jednom ostvarenju, kombinacija ovog pronalaska uključuje jedinjenje iz pronalaska i najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo, koje je platina koordinirajući kompleks.
[0194] U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je paklitaksel, karboplatin, ili vinorelbin. U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je karboplatin. U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je vinorelbin. U narednom ostvarenju, najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo je paklitaksel.
U jednom ostvarenju, kombinacija ovog pronalaska uključuje jedinjenje iz pronalaska i najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo koje je inhibitor puteva transdukcije signala.
[0195] U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor kinaze VEGFR2, TIE2, PDGFR, BTK, erbB2, EGFr, IGFR-1, TrkA, TrkB, TrkC, ili c-fms receptora faktora rasta. U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor serin/treonin kinaze rafk, akt, ili PKC-zeta. U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor non-receptor tirozin kinaze izabran od src familije kinaze. U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor c-src. U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor Ras onkogena izabran od inhibotora farnesil transferaze i geranilgeranil transferaze. U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je inhibitor serin/treonin kinaze izabran iz grupe koja se sastoji od PI3K.
[0196] U narednom ostvarenju, inhibitor puteva transdukcije signala je dvostruki EGFr/erbB2 inhibitor, na primer N-{3-hloro-4-[(3-fluorobenzil) oksi]fenil}-6-[5-({[2-(metansulfonil) etil]amino}metil)-2-furil]-4-hinazolinamin.
[0197] U jednom ostvarenju, kombinacija ovog pronalaska uključuje jedinjenje iz pronalaska i najmanje jedno anti-neoplastično sredstvo koje je inhibitor signalizacije ćelijskog ciklusa. U narednom ostvarenju, inhibitor signalizacije ćelijskog ciklusa je inhibitor CDK2, CDK4 ili CDK6.
[0198] Dodatni primeri drugih terapeutskih sredstava (na primer, anti-neoplastično sredstvo) za upotrebu u kmbinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjem iz pronalaska su imuno-modulatori.
[0199] Kako se ovde koristi "imuno-m odulatori" se odnose na bilo koju supstancu koja uključuje monoklonalna antitela koja deluju na imuni sistem. Imuno-modulatori mogu da se koriste kao anti-neoplastična sredstva za tretman kancera. Na primer, imuno-m odulatori uključuju, ali nisu ograničeni samo na, anti-CTLA-4 antitela kao što su ipilimumab (YERVOY) i anti-PD- 1 antitela (Opdivo/nivolumab i Keytruda/pembrolizumab). U druge imuno-modulatore spadaju, ali nisu ograničeni samo na, ICOS antitela, OX-40 antitela, PD-L1 antitela, LAG3 antitela, TIM-3 antitela, 41BB antitela i GITR antitela.
[0200] Dodatni primeri drugih terapeutskih sredstava (anti-neoplastična sredstva) za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjem iz ovog pronalaska su anti-PD-Ll sredstva. Anti-PD-Ll antitela i postupci za njihovu izradu su poznati u tehnici. Ovakva antitela za PD-L1 mogu da budu poliklonalna ili monoklonalna, i/ili rekombinantna i/ili humanizovana. Primeri PD-L1 antitela su otkriveni u US Patentima brojevi 8,217,149, 8,383,796, 8,552,154, 9,212,224 i 8,779,108 i US Patentnim prijavama brojevi 20110280877, 2014/0341902 i 20130045201. Drugi primeri antitela za PD-L1 (takođe označena kao CD274 ili B7-H1) i postupci za upotrebu su otkriveni u US Patentima brojevi 7,943,743, 8,168,179; i 7,595,048 WO2014055897, WO2016007235 i US Patent Appln. Pub. Nos.20130034559, 20130034559 i 20150274835. PD-L1 antitela su u procesu razvoja kao imuno-modulatorna sredstva ili imuno-modulatori za tretman kancera.
[0201] U jednom ostvarenju, antitelo za PD-L1 je antitelo otkriveno u US Patentu broj 8,217,149. U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo uključuje CDRs antitelo otkrivena u US Patentu broj 8,217,149. U još jednom ostvarenju, antitelo za PD-L1 je antitelo otkriveno u US Patentu broj 8,779,108. U još jednom ostvarenju, anti-PD-L1 antitelo uključuje CDRs antitela otkrivenihu US prijavi broj 8,779,108. U još jednom ostvarenju, antitelo za PD-L1 je antitelo otkriveno u US patentna prijava publikacija broj 20130045201. U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo uključuje CDRs antitela otkrivenih u US patentnoj prijavi publikacija broj 20130045201. U jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo je BMS-936559 (MDX-1105), koje je opisano u WO 2007/005874. U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo je MPDL3280A (RG7446). U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo je MEDI4736, koje je anti-PD-L1 monoklonalno antitelo opisano u WO 2011/066389 i US 2013/034559. U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo je TECENTRIQ™ (atezolizumab), koje je anti-PDL1 kancer imunoterapija koja je odobrena u US u Maju 2016., za specifične tipove kancera mokraćne bešike. U još jednom ostvarenju, anti-PD-Ll antitelo je YW243.55.S70 koje je anti-PD-Ll opisano u WO 2010/077634 i U.S. Pat. No.8,217,149. Primeri anti-PD-L1 antitela korisnih za postupke iz ovog pronalaska i postupci za njihovu izradu su opisani u PCT patentnoj prijavi WO 2010/077634, WO 2007/005874, WO 2011/066389, U.S. Pat. No.8,217,149 i US 2013/034559.
[0202] Drugi primeri mAbs koji se vezuju za humani PD-L1 i koji su korisni u postupku tretmana, kao medikamenti i za upotrebu u ovom pronalasku, su opisani u WO2013/019906, WO2010/077634 A1 i US8383796. Specifični anti-humani PD-L1 mAbs, koristan kao PD-1 antagonist u postupku tretmana, kao medikament i za upotrebu u ovom pronalasku, uključuje MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C.
[0203] Dodatni primeri drugih terapeutskih sredstava (anti-neoplastična sredstva) za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjem iz ovog pronalaska su antagonisti PD-1.
[0204] "PD-1 antagonist" označava bilo koje hemijsko jedinjenje ili biološku molekulu koja blokira vezivanje PD-L1 ekspresovanih na ćelijama kancera za PD-1 ekspresovanih na imunim ćelijama (T ćelije, B ćelije ili NKT ćelije) i preferirano takođe blokiraju vezivanje PD-L2 ekspresovanih na ćelijama kancera za PD-1 ekspresovan na imunim ćelijama.
Alternativni nazivi ili sinonimi za PD-1 i njegove ligande uključuju: PDCD1, PD1, CD279 i SLEB2 za PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 i B7-H za PD-L1; i PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc i CD273 za PD-L2. U bilo kojim ostvarenjima aspekata ili ostvarenjima iz ovog pronalaska u kojima se tretira humani pojedinac, PD-1 antagonist blokira vezivanje humanog PD-L1 za humani PD-1 i preferirano blokira vezivanje oba humana PD-L1 i PD-L2 za humani PD-1. Sekvence amino kiselina humanog PD-1 mogu da se nađu u NCBI Locus No.: NP_005009. Sekvence amino kiselina humanih PD-L1 i PD-L2 mogu da se nađu u NCBI Locus No.: NP_054862 i NP_079515, tim redom.
[0205] PD-1 antagonisti korisni u bilo kom od aspekata ovog pronalaska uključuju monoklonalna antitela (mAb), ili njihov fragment koji vezuje antigen, koji se specifično vezuju za PD-1 ili PD-L1 i preferirano se specifično vezuju za humani PD-1 ili humani PD-L1. mAb može da bude humano antitelo, humanizovano antitelo ili himerično antitelo i može da uključi humani konstantni region. U nekim ostvarenjima, humani konstantni region je izabran iz grupe koja se sastoji od IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4 konstantnih regiona, a u preferiranim ostvarenjima, humani konstantni region je IgG1 ili IgG4 konstantni region. U nekim ostvarenjima, fragment koji vezuje antigen je izabran iz grupe koju sačinjavaju Fab, Fab’-SH, F(ab’)2, scFv i Fv fragmenti.
[0206] Primeri Abs koji se vezuju za humani PD-1 i koji su korisni u različitim aspektima i ostvarenjima iz ovog pronalaska su opisani u US7488802, US7521051, US8008449, US8354509, US8168757, WO2004/004771, WO2004/072286, WO2004/056875 i US2011/0271358.
[0207] Specifični anti-humani PD-1 mAbs korisni kao PD-1 antagonisti u bilo kojim od aspekata i ostvarenja ovog pronalaska uključuju: MK-3475, humanizovane IgG4 mAb sa strukturom opisanom u WHO Drug Information, Vol.27, No.2, stranice 161-162 (2013) i koji uključuju sekvence amino kiselina teškog i lakog lanca pokazane na Slici 6; nivolumab, humani IgG4 mAb sa strukturom opisanom u WHO Drug Information, Vol.27, No.1, stranice 68-69 (2013) i koji uključuje sekvence amino kiselina teškog i lakog lanca pokazane na Slici 7; humanizovana antitela h409A11, h409A16 i h409A17, koja su opisana u WO2008/156712 i AMP-514, koje je razvio Medimmune.
[0208] Drugi PD-1 antagonisti korisni u bilo kom od aspekata i ostvarenja iz ovog pronalaska uključuju imunoadheziv koji se specifično vezuje za PD-1 i preferirano se specifično vezuje za humani PD-1, na primer, protein fuzije koji sadrži ekstracelularni ili PD-1 vezujući deo PD-L1 ili PD-L2 spojeni u konstantni region kao što je Fc region molekule imunoglobulina. Primeri molekule imunoadheziva koji se specifično vezuju za PD-1 su opisani u WO2010/027827 i WO2011/066342. Specifični proteini fuzije korisni kao PD-1 antagonisti u postupku tretmana, u medikamentima i za upotrebu u ovom pronalasku uključuju AMP-224 (takođe poznat kao B7-DCIg), koji je PD-L2-FC protein fuzije i vezuje se za humani PD-1.
[0209] KEYTRUDA/pembrolizumab je anti-PD-1 antitelo proizvođača Merck namenjeno za tretman kancera pluća. Sekvenca amino kiselina pembrolizumaba i postupci za upotrebu su otkriveni u US Patentu broj 8,168,757.
[0210] Opdivo/nivolumab je potpuno humano monoklonalno antitelo proizvođača Bristol Myers Squibb namenjeno protiv negativnog imunoregulatornog površinskog receptora PD-1 ljudske ćelije (programirana smrt-1 ili programirana smrt-1 ćelije/PCD-1) sa aktivnošću pojačavanja imuniteta. Nivolumab se vezuje i blokira aktivaciju PD-1, Ig superfamilije transmembranskih proteina, svojim ligandima PD-L1 i PD-L2, što dovodi do aktivacije T-ćelija i ćelija uključenih u imuni odgovor protiv ćelija tumora ili patogena. Aktivirani PD-1 negativno regulišu aktivaciju T-ćelija i funkciju efektora preko supresije aktivacije PI3K/Akt puteva. Drugi nazivi za nivolumab uključuju: BMS-936558, MDX-1106 i ONO-4538.
Sekvenca amino kiseline za nivolumat i postupci za njihovu upotrebu i izradu su otkriveni u US Patentu broj US 8,008,449.
[0211] Naredni primeri drugih terapeutskih sredstava (anti-neoplastično sredstvo) za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjem iz pronalaska su antitela za ICOS.
[0212] ICOS je ko-stimulator receptora T ćelija koji je strukturno i funkcionalno povezan sa CD28/CTLA-4-Ig superfamilijom (Hutloff, i saradnici, "ICOS is an inducible T-cell costimulator structurally i functionally related do CD28", Nature, 397: 263-266 (1999)).
Aktivacija ICOS se dešava vezivanjem sa ICOS-L (B7RP-1/B7-H2). Ni B7-1 niti B7-2 (ligandi za CD28 i CTLA4) se ne vezuju niti aktiviraju ICOS. Međutim, pokazano je da se ICOS-L slabo vezuje za oba CD28 i CTLA- 4 (Yao S i saradnici, "B7-H2 is costimulatory ligand for CD28 in human", Immunity, 34(5); 729-40 (2011)). Izgleda da je ekspresija ICOS ograničena sa T ćelijama. Nivoi ekspresije ICOS variraju između različitih podgrupa T ćelija i statusa aktivacije T ćelije. Ekspresija ICOS je pokazana na ostatku TH17, T folikularnom helperu (TFH) i regulatornim T (Treg)ćelijama; međutim, za razliku od CD28; nije izrazito ekspresovan u populaciji urođenih TH1 i TH2 efektor T ćelija (Paulos CM i saradnici, "The inducible costimulator (ICOS) is critical for development of human Th17 cells", Sci Transl Med, 2(55); 55ra78 (2010)). Ekspresija ICOS je nakon aktivacije snažno indukovana na CD4+ i CD8+ efektor T ćelija angažovanjem TCR (Wakamatsu E, i saradnici, "Convergent i divergent effects of costimulatory molecules in conventional i regulatory CD4+ T cells", Proc Natal Acad Sci USA, 110(3); 1023-8 (2013)).
[0213] CDRs za antitelo pacova na humanim ICOS koji ima delovanje agonista je pokazano u PCT/EP2012/055735 (WO 2012/131004). Antitela za ICOS su takođe otkrivena u WO 2008/137915, WO 2010/056804, EP 1374902, EP1374901 i EP1125585.
[0214] Antitela agonisti za ICOS ili ICOS vezujuće proteine su otkriveni u WO2012/13004, WO 2014/033327, WO2016/120789, US20160215059 i US20160304610. U jednom ostvarenju, antitela agonisti za ICOS uključuju ICOS vezujuće proteine ili njihove delove koji vezuju antigen, uključujući jedan ili više: CDRH1 kako je dato u SEQ ID NO:1; CDRH2 kako je dato u SEQ ID NO:2; CDRH3 kako je dato u SEQ ID NO:3; CDRL1 kako je dato u SEQ ID NO:4; CDRL2 kako je dato u SEQ ID NO:5 i/ili CDRL3 kako je dato u SEQ ID NO:6 ili direktan ekvivalent svakog CDR pri čemu direktan ekvivalent nema više od dve supstitucije amino kiselina u navedenom CDR kako je otkriveno u WO2016/120789, koji je ovde u celosti inkorporiran kao referenca. U jednom ostvarenju, ICOS vezujući protein ili njegov deo koji vezuje antigen je antitelo agonist za ICOS uključujući VH domen koji obuhvata sekvencu amino kiseline najmanje 90% identičnu sa sekvencom amino kiseline datoj u SEQ ID NO:7 i/ili VL domen koji uključuje sekvencu amino kiseline najmanje 90% identičnu sa sekvencom amino kiseline datoj u SEQ ID NO:8 kako je dato u WO2016/120789 pri čemu se navedeni ICOS vezujući protein specifično vezuje za humani ICOS. U jednom ostvarenju, ICOS vezujući protein je antitelo agonist za ICOS uključujući VH domen koji obuhvata sekvencu amino kiseline kako je dato u SEQ ID NO:7 i VL domen koji uključuje sekvencu amino kiseline datu u sEQ ID NO:8 kako je dato u WO2016/120789.
[0215] Yervoy (ipilimumab) je u potpunosti humano CTLA-4 antitelo proizvođača Bristol Myers Squibb. Struktura proteina ipilimumaba i postupci za upotrebu su opisani u US Patentima broj 6,984,720 i 7,605,238.
[0216] CD134, takođe poznat kao OX40, je član TNFR-superfamilije receptora koji se ne ekspresuje konstitutivno na ostalim urođenim T ćelijama, za razliku od CD28. OX40 je sekundarna kosimulativna molekula koja se ekspresuje 24 do 72 sata nakon aktivacije; njen ligand, OX40L, se takođe ne ekspresuje na ostatku antigen prezentujućim ćelijama, ali se pojavljuje nakon njihove aktivacije. Ekspresija OX40 zavisi od potpune aktivacije T ćelija; bez CD28, ekspresija OX40 je odložena i dostiže četvorostuko niže vrednosti. OX-40 antitela,
1
proteini OX-40 fuzije i postupci za njihovu upotrebu su otkriveni u US Patentima broj: US 7,504,101; US 7,758,852; US 7,858,765; US 7,550,140; US 7,960,515; WO2012027328; WO2013028231.
[0217] U jednom ostvarenju, OX40 protein koji vezuje antigen je otkriven u WO2012/027328 (PCT/US2011/048752), internacionalni datum podnošenja 23. August 2011. U još jednom ostvarenju, protein koji vezuje antigen uključuje CDRs antitela otkrivena u WO2012/027328 (PCT/US2011/048752), internacionalni datum podnošenja 23. August 2011, ili CDRs uz 90% identičnosti sa otkrivenim CDR sekvencama. U narednom ostvarenju protein koji vezuje antigen uključuje VH, VL, ili oba od antitela otkrivenih u WO2012/027328 (PCT/US2011/048752), internacionalni datum podnošenja 23. August 2011, ili VH ili VL uz 90% identičnosti sa otkrivenim VH ili VL sekvencama.
[0218] U još jednom ostvarenju, OX40 protein koji vezuje antigen je otkriven u WO2013/028231 (PCT/US2012/024570), internacionalni datum podnošenja 9 Feb.2012, koja je ovde u celosti inkorporirana kao referenca. U još jednom ostvarenju, protein koji vezuje antigen uključuje CDRs antitela otkrivenih u WO2013/028231 (PCT/US2012/024570), internacionalni datum podnošenja 9. Feb.2012, ili CDRs uz 90% identičnosti sa otkrivenim CDR sekvencama. U narednom ostvarenju, protein koji vezuje antigen uključuje VH, VL, ili oba od antitela otkrivenih u WO2013/028231 (PCT/US2012/024570), internacionalni datum podnošenja 9. Feb.2012, ili VH ili VL uz 90% identičnosti sa otkrivenim VH ili VL sekvencama. U jednom ostvarenju, OX40 protein koji vezuje antigen je izolovano antitelo agonist za OX40 koji uključuje promenljivi region lakog lanca sa sekvencom od najmanje 90% identičnosti sa sekvencom amino kiseline SEQ ID NO:10 kako je dato u WO2013/028231 i promenljivi region teškog lanca koji ima sekvencu od najmanje 90% identičnosti sa sekvencom amino kiseline iz SEQ ID NO:4 kako je dato u WO2013/028231. U jednom ostvarenju, OX40 protein koji vezuje antigen je izolovano antitelo koje uključuje promenljivi laki lanac sekvence amino kiseline iz SEQ ID NO:10 kako je dato u WO2013/028231 i promenljivi region teškog lanca koji uključuje sekvencu amino kiseline za SEQ ID NO:4 kako je dato u WO2013/028231.
[0219] Prema tome, u jednom ostvarenju ovde je obezbeđen (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljivaso, ili njegov hidrat sa najmanje jednim imunomodulatorom za tretman ljudi kojima je to potrebno. U jednom
2
ostvarenju, imunomodulator je izabran od antitela agonista ICOS, ili OX-40 antitela ili PD-1 antitela. U jednom ostvarenju, ljudi imaju kancer.
[0220] Dodatni primeri drugih terapeutskih sredstava za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa (E)-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamidom ili njegovim tautomerom, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, ili njegovim hidratom su imunostimulativna sredstva.
[0221] Kako se ovde koristi "imunostimulativno sredstvo" se odnosi na bilo koje sredstvo koje može da stimuliše imuni sistem. Kako se ovde koristi imunostimulativna sredstva uključuju, ali bez ograničenja na, adjuvanse vakcina, kao što su agonisti receptora sličnih Toll-u, blokeri kontrolih tačaka T ćelija kao što su mAbs za PD-1 i CTL4 i agoniste kontrolne tačke T-ćelija, kao što su agonisti mAbs za OX-40 i ICOS. Kako se ovde koristi "imunostimulativno sredstvo" se odnosi na bilo koje sredstvo koje može da stimuliše imuni sistem. Kako se ovde koristi, u imunostimulativna sredstva spadaju, ali nisu ograničeni samo na, adjuvansi vakcina.
[0222] Naziv "receptor sličan Toll-u" (ili "TLR") kako se ovde koristi se odnosi na člana familije receptora sličnih Toll-u, na njihove proteine ili fragmente koji registruju mikrobiološki produkt i/ili iniciraju adaptivni imuni odgovor. U jednom ostvarenju, TLR aktiviraju dendritne ćelije (DC). Receptori slični Toll-u (TLRs) su familija receptora prepoznatljiva po obliku koji su inicijalno identifikovani kao senzori urođenog imunog sistema koji prepoznaje mikrobiološke patogene. TLRs prepoznaje različite strukture u mikrobima, često označene kao "PAMPs" (molekularni obrasci povezani sa patogenom). Ligand koji se vezuje za TLRs izaziva kaskadu intra-celularnih puteva signalizacije koji indukuju produkcije faktora uključenih u inflamaciju i imunitet. Kod ljudi, identifikovano je deset TLR. TLRs koji se ekspresuju na površini ćelija uključuju TLR-1, -2, -4, -5 i -6, dok se TLR-3, -7/8 i -9 ekspresuju sa ER delom. Humane DC podgrupe mogu da se identifikuju na bazi različitih obrazaca TLR ekspresije. Kao primer, mijeloid ili "uobičajeni" deo DC (mDC) ekspresuje TLRs 1-8 kada je stimulisan i produkuje se kaskada markera aktivacije (na primer CD80, CD86, MHC klasa I i II, CCR7), pro-inflammatorni citokini i hemokini. Rezultat ove stimulacije i rezultujuća ekspresija je prajming antigen-specifičnih CD4+ i CD8+ T ćelija. Ove DCs stiču povećani kapacitet da preuzmu antigene i predstave ih u odgovarajućem obliku za T ćelije. Nasuprot tome, plazmacitoidna podgrupa DC (pDC) nakon aktivacije ekspresuje samo TLR7 i TLR9, što za rezultat ima aktivaciju NK ćelija kao i T-ćelija. Kako umiruće ćelije tumora mogu negativno da utiču na funkciju DC, sugerisano je da aktivacija DC sa TLR agonistima može da bude od koristi za prajming anti-tumornog imuniteta u pristupu imunoterapije za tretman kancera. Takođe je sugerisano da uspešan tretman kancera dojke zračenjem i hemoterapijom zahteva aktivaciju TLR4.
[0223] TLR agonisti poznati u tehnici i koji su našli upotrebu u ovom pronalasku uključuju, ali bez ograničenja na sledeće: Pam3Cys, TLR1/2 agonist; CFA, TLR2 agonist; MALP2, TLR2 agonist; Pam2Cys, TLR2 agonist; FSL- I, TLR-2 agonist; Hib-OMPC, TLR-2 agonist; poliinozinitna:policitidilna kiselina (Poly I:C), TLR3 agonist; poliadenozin-poliuridilna kiselina (poli AU), TLR3 agonist; poliinozinitna-policitidilna kiselina stabilizovana sa poli-L-lizinom i karboksimetilcelulozom (Hiltonol), TLR3 agonist; bakterijski flagelin TLR5 agonist; imikvimod, TLR7 agonist; rezikvimod, TLR7/8 agonist; loksoribin, TLR7/8 agonist; i nemetilovani CpG dinukleotid (CpG-ODN), TLR9 agonist.
[0224] Drugi TLR agonisti poznati u tehnici i koji su našli upotrebu u ovom pronalasku dalje ukjučuju, ali bez ograničenja na, aminoalkil glukozaminid fosfate (AGPs) koji se vezuju za TLR4 receptor i poznato je da su korisni kao adjuvansi vakcina i imunostimulativna sredstva za stimulaciju produkcije citokina, aktivaciju makrofaga, unapređivanje urođenog imunog odgovora i povećanje produkcije antitela kod imunizovanih životinja. Primer prirodno dobijenog TLR4 agonista je bakterijski LPS. Primer polusintetskog TLR4 agonista je monofosforil lipid A (MPL). AGPs i njihovi imunomodulirajući efekti preko TLR4 su otkriveni u patentnim prijavima kao što su WO 2006/016997, WO 2001/090129, i/ili U.S. Patentu broj 6,113,918 i objavljeni su u literaturi. Dodatni AGP derivati su otkriveni u U.S. Patentu broj 7,129,219, U.S. Patentu broj 6,525,028 i U.S. Patentu broj 6,911,434. Neki AGPs deluju kao agonisti TLR4, dok su drugi prepoznati kao TLR4 antagonisti.
[0225] U jednom ostvarenju, imunostimulativno sredstvo za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska je TLR4 agonist. U jednom ostvarenju, TLR4 agonisti su označeni kao CRX-601 i CRX-527. Njihova struktura je niže data:
4
[0226] Pored toga, naredno preferirano ostvarenje sadrži TLR4 agonist CRX 547 koji ima pokazanu strukturu.
[0227] Čak druga ostvarenja uključuju AGPs kao što su CRX 602 ili CRX 526 koji obezbeđuju povećanu stabilnost za AGPs tako što imaju kraće sekundarne acil ili alkil lance.
[0228] Prema tome, u jednom ostvarenju, ovde je obezbeđen (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat u kombinaciji sa najmanje jednim imunostimulativnim sredstvom za tretman ljudi kojima je to potrebno. U jednom ostvarenju, imunostimulativno sredstvo je TLR4 agonist. U jednom ostvarenju, imunostimulativno sredstvo je AGP. U čak još jednom ostvarenju, TLR4 agonist je izabran od jedinjenje koje ima formulu CRX-601, CRX-527, CRX-547, CRX-602 ili CRX-526. U jednom ostvarenju, ljudi imaju kancer.
[0229] Pored prethodno opisanih imunostimulativnih sredstava, kompozicije iz ovog pronalaska mogu dalje da uključe druga terapeutska sredstva koja, zbog svoje prirode pojačivača, mogu da deluju tako da stimulišu imuni sistem na odgovor na prisutne antigene kancera kod inaktiviranih ćelija tumora.U ovakve pojačivače spadaju, ali nisu ograničeni samo na, lipidi, lipozomi, inaktivirane bakterije koje indukuju urođeni imunitet (na primer, inaktivirane ili oslabljene Listeriamonocytogenes), kompozicije koje posreduju u aktivaciji urođenog imuniteta, (NODu)-slični receptori (NLRs), retinoatna kiselina koja može da indukuje receptore slične (RIG)-I- na bazi gena (RLRs), i/ili C-tip lektin receptore (CLRs). Primeri PAMPs obuhvataju lipoproteine, lipopolipeptide, peptidoglikane, zimosan, lipopolisaharid, neisserial porine, flagelin, profilin, galaktoceramid, muramil dipeptid.
Peptidoglikani, lipoproteini i lipoteihoinske kiseline su komponente ćelijskog zida grampozitivnih bakterija. Lipopolisaharide ekspresuje većina bakterija, pri čemu je MPL jedan primer. Flagelin se odnosi na strukturnu komponentu bakterijske flagele koju luče patogene i komenzalne bakterije. rt.-Galactosylceramid (rt.-GalCer) je aktivator prirodnih ubica T (NKT) ćelija. Muramil dipeptid je bioaktivni peptidoglikan motif uobičajen kod svih bakterija.
[0230] Zbog svojih adjuvantnih kvaliteta, TLR agonisti se preferirano koriste u kombinaciji sa drugim vakcinama, adjuvansima i/ili imuno modulatorima i mogu da se kombinuju u različitim kombinacijama. Prema tome, u nekim ostvarenjima, (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid ili njegov tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat koji se vezuje za STING i indukuje STING-zavisnu TBKI aktivaciju i koji aktivira ćelije tumora koje ekspresuju i luče jedan ili više citokina što stimuliše indukciju DC stvaranje i/ili sazrevanje, kako je ovde opisano, mogu da se primene zajedno sa jednim ili više TLR agonista u terapeutske svrhe.
[0231] Indoleamin 2,3-dioksigenaze 1 (ID01) je ključni imunosupresivni enzim koji modulira anti-tumorni imuni odgovor promovisanjem generacije regulatornih T ćelija i blokiranjem efektora aktivacije T ćelija, i na taj način utiče na rast tumora omogućavajući ćelijama kancera da izbegnu imuni nadzor. (Lemos H, i saradnici, Cancer Res.2016 Apr 15;76(8):2076-81), (Munn DH, i saradnici, Trends Immunol. 2016 Mar;37(3): 193-207). Naredni aktivni sastojci (anti-neo-plastična sredstva) za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjima iz pronalaska su IDO inhibitori. Epakadostat, ((Z)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroksi-4-[2-(sulfamoilamino)etilamino]-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamidin) je visoko potentni i selektivni oralni inhibitor IDO1 enzima koji preokreće imunu supresiju povezanu sa tumorom i obnavlja efikasne anti-tumorne odgovore. Epakadostat je otkriven u US patentu broj 8,034,953.
[0232] Naredni primeri drugih terapeutskih sredstava (anti-neoplastična sredstva) za upotrebu u kombinaciji ili ko-primeni sa jedinjenjem iz pronalaska su CD73 inhibitori i A2a i A2b adenozin antagonisti.
[0233] U jednom ostvarenju, jedinjenje iz pronalaska može da se primeni uz druge terapeutske postupke u lečenju infektivnih bolesti. Preciznije, predviđena su antivirusna i antibakterijska sredstva.
[0234] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom korisnim u prevenciji ili tretmanu bakterijskih i virusnih infekcija. U primere ovakvih sredstava spadaju, bez ograničenja: inhibitori polimeraze kao što su oni otkriveni u WO 2004/037818-A1, kao i oni otkriveni u WO 2004/037818 i WO 2006/045613; JTK-003, JTK-019, NM-283, HCV-796, R-803, R1728, R1626, kao i oni otkriveni u WO 2006/018725, WO 2004/074270, WO 2003/095441, US2005/0176701, WO 2006/020082, WO 2005/080388, WO 2004/064925, WO 2004/065367, WO 2003/007945, WO 02/04425, WO 2005/014543, WO 2003/000254, EP 1065213, WO 01/47883, WO 2002/057287, WO 2002/057245 i slična sredstva; inhibitori razmnožavanja kao što su aciklovir, famciklovir, ganciklovir, cidofovir, lamivudin i slična sredstva; inhibitori proteaze kao što su inhibitori HIV proteaze sakvinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brekanavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir i inhibitori HCV proteaze BILN2061, VX-950, SCH503034; i slična sredstva; inhibitori nukleozid i nukleotid reverzne transkriptaze kao što su zidovudin, didanozin, lamivudin, zalcitabin, abakavir, stavudin, adefovir, adefovir dipivoksil, fozivudin, todoksil, emtricitabin, alovudin, amdoksovir, elvucitabin, tenofovir disproksil fumarat, tenofovir alafenamid fumarat/hemifumarat i slična sredstva; inhibitori non-nukleozid reverzne transkriptaze (uključuzjući sredstvo koje ima anti-oksidativno delovanje kao što su imunokal, oltipraz itd.) kao što su nevirapin, delavirdin, efavirenz, lovirid, imunokal, oltipraz, kapravirin, TMC-278, TMC-125, etravirin, rilpivirin i slična sredstva; inhibitori ulaza kao što su enfuvirtid (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, 5-Helix i slična sredstva; inhibitori integrase kao što su dolutegravir, elvitegravir, raltegravir L-870,180 i slična sredstva; inhibitori začetaka kao što su PA-344 i PA-457 i slična sredstva; inhibitori hemokin receptora kao što su vikrivorok (Sch-C), Sch-D, TAK779, maravirok (UK-427,857), TAK449, kao i ona otkrivena u WO 02/74769, WO 2004/054974, WO 2004/055012, WO 2004/055010, WO 2004/055016, WO 2004/055011 i WO 2004/054581 i slična sredstva; farmakokinetički pojačivači kao što je kobicistat; inhibitori neuraminidaze kao što su CS-8958, zanamivir, oseltamivir, peramivir i slična sredstva; blokeri jonskih kanala kao što su amantadin ili rimantadin i slična sredstva; i interferirajući RNK i antisens oligonukleotidi kao što su ISIS-14803 i slična sredstva; antivirusna sredstva neodređenog mehanizma delovanja, na primer ona otkrivena u WO 2005/105761, WO 2003/085375, WO 2006/122011, ribavirin i slična sredstva.
[0235] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima koja mogu da budu korisna u tretmanu Kapošijevog sarkoma povezanog sa infekcijama herpesvirusom (KSHV i KSHV-sličan) uključujući, bez ograničenja, hemoterapeutska sredstava kao što su bleomicin, vinblastin, vinkristin, ciklofosfamid, prednizon, alitretinoin i lipozomalni antraciklini kao što su doksorubicin, daunorubicin, imunoterapeutici kao što su Rituximab, Tocilizumab, Siltuximab i drugi kao što su Paklitaksel i Rapamicin.
[0236] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo je antimikobakterijsko sredstvo ili baktericidalni antibiotik. Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom koje može da bude korisno u tretmanu TB infekcije (Mycobacterium tuberculosis) i Tularemia (Francisella tularensis) uključujući bez ograničenja prvu liniju oralnih sredstava izoniazid, Rifampicin, pirazinamid, etambutol, streptomicin, rifabutin; injektabilna sredstva uključujući kanamicin, amikacin, kapreomicin, streptomicin; fluorohinolone uključujući levofloksacin moksifloksacin ofloksacin; oralna bakteriostatična sredstva kao što su para-aminosalicilna kiselina, cikloserin, terizidon, tionamid protionamid; SQ-109 PNU-100480, Rifapentine Linezolid, PA-824 AZD5847, Gatifloksacin Moksifloksacin, Sirturo (bedakvilin) Delamanid (OPC-67683) i sredstva sa neodređenim mehanizmom delovanja u tretmanu TB rezistentne na lekove, uključujući klofazimin, linezolid, amoksicilin/klavulanat tioacetazon imipenem/cilastatin visoke doze izoniazid klaritromicina, ciprofloksacin. Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa antimikobakterijskim sredstvom (kao što su izoniazid (INH), ehambutol (Myambutol®), rifampin (Rifadin®) i pirazinamid (PZA)) baktericidni antibiotik (kao što su rifabutin (Mycobutin®) ili rifapentin (Priftin®)), aminoglikozid (Capreomicin®), fluorhinolon (levofloksacin, moksifloksicin, ofloksacin), tioamid (ehionamid), ciklosporin (Sandimmune®), para-aminosalicilna kiselina (Paser®), cikloserin (Seromicin®), kanamicin (Kantrex®), streptomicin, viomicin, kapreomicin (Capastat®)), bedakvilin fumarat (Sirturo®), oksazolidinon (Sutezolid®), PNU-100480, ili delamanid (OPC-67683).
[0237] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom koje može da bude korisno u tretmanu Chlamydia uključujući, bez opgraničenja Azithromicin, Doksiciklin, Erythromicin, Levofloksacin, Ofloksacin.
[0238] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom koje može da bude korisno u tretmanu plasmodium infekcije, uključujući, bez ograničenja hlorokin, atovakvoneprogvanil, artemeterlumefantrin, meflokvin, hinin, hinidin, doksociklin, cindamicin, artesunat, primakvin.
[0239] U tretmanu amiotrofne lateralne skleroze (ALS), jedinjenje iz pronalaska može da se koristi u kombinaciji sa blokerom glutamata (Riluzole (Rilutek®)), hinidinom (Nuedexta ®), antiholinrgicima (amittriptilin ®, Artane ®, skopolamin flasterima (Transderm Scop ®)), simpatomimeticima (pseudoefedrin), mukoliticima (guaifenesin), ili analgeticima (tramadol (Ultram ®); ketorolakom (Toradol®); morfinom; fentanil flasterom (Duragesic®)).
[0240] U tretmanu multiple skleroze, jedinjenje iz pronalaska može da se koristi u kombinaciji sa kortikosteroidima (prednizon, metilprednizolon), Interferonom Beta-1A (Avonex®, Extavia®, Rebif®, Betaseron®), peginterferonom beta-1A (Plegridy®), Glatiramer acetatom (Copaxone®); glatiramer acetatom (Glatopa®-generički ekvivalent Copaxone); Dimetil fumaratom (Tecfidera®); Fingolimodom (Gilenya®)); teriflunomidom (Aubagio®); dalfampridinom (Ampyra®); daklizumabom (Zinbryta); alemtuzumabom (Lemtrada®); natalizumabom (Tysabri®); ili mitoksantron hidrohloridom (Novantrone®).
[0241] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da se koriste kao adjuvansi da poboljšaju porast imunog odgovora na bilo koji dat antigen i/ili smanje reaktogeničnost/toksičnost kod pacijenta, posebno ljudi, kojima je to potrebno. Kao takva, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa kompozicionim vakcinama da modifikuju, posebno da pojačaju imuni odgovor, na primer povećavanjem nivoa ili trajanja zaštite i/ili da omoguće smanjenje antigenične doze.
[0242] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa jednom ili više vakcina ili imunogeničnih antigena korisnih u prevenciji ili tretmanu virusnih infekcija. U ovakve vakcine ili imunogenične antigene spadaju, bez ograničenja na, delovi ili proteini dobijeni od patogena kao što su oslabljeni virusi, delovi virusa i proteini virusa koji se uobičajeno koriste kao imunogenične supstance. Primeri virusa i virusnih antigena uključuju, bez ograničenja na, poliviruse, Cioronaviridae i koronavirus, Rhinovirus (svi podtipovi), Adenoviruse (svi podtipovi), Hepatitis A, Hepatitis B, Hepatitis C, Hepatitis D, humane papilomaviruse (uključujući svi podtipovi), Rabia virusese, humane limfotropne viruse T-ćelija (svi podtipovi), rubela viruse, Mumps viruse, koksaki virus A (svi podtipovi), koksaki virus B (svi podtipovi), humane enteroviruse, herpesviruse uključujući citomegalovirus, Epstein-Barr viruse, humane herepesviruse (svi podtipovi), herpes simpleks viruse, varičela zoster viruse, human imunodeficijentni virus (HIV) (svi podtipovi), Epstein-Barr virus, Reoviruse (svi podtipovi), Filoviruse uključujući Marburg virus i Ebola virus (svi sojevi), Arenaviruse uključujući limfocitni horiomeningitis virus, Lassa virus, Junin virus i Machupo virus, Arboviruse uključujući virus Zapadnog Nila, Dengue viruse (svi serotipovi), Zika virus, virus krpeljne groznice u Koloradu, Sindbis virus, Togaviraidae, Flaviviridae, Bunyaviridae,
1
Reoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Poxviruse uključujući oortopoksivirus (variola virus, monkypox virus, vaccinia virus, cowpox virus), yatapoxviruse (tanapox virus, Yaba r virus tumora Yaba majmuna), parapoxvirus, molluscipoxvirus, žuta fever, Hantaviruse uključujući Hantaan, Seoul, Dobrava, Sin Nombre, Puumala i Dobrava-like Saaremaa, humane para influenca viruse i influenca viruse (svi tipovi), H1N1 influenca i viruse svinjske viruse, respiratorni sincitijalni virus (sve podgrupe), rotaviruse uključujući humane rotaviruse A-E, rotavirus goveda, rotavirus rezus majmuna, poliomaviruse uključujući simian virus 40, JC virus, BK virus, Coltiviruse, eyach virus, kalciviruses i Parvoviridae uključujući dependovirus, parvovirus i eritrovirus.
[0243] Prema tome, ovaj pronalazak obezbeđuje imunogeničnu kompoziciju koja uključuje antigen ili antigeničnu kompoziciju i jedinjenje iz pronalaska. Ovde je dalje obezbeđena kompoziciona vakcina koja uključuje antigen ili antigeničnu kompoziciju i jedinjenje iz pronalaska.
[0244] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom koje može da bude korisno u prevenciji ili tretmanu virusnih infekcija na primer imuno terapija (na primer interferon ili drugi citokini/hemokini, modulatori citokin/hemokin receptora, agonisti ili antagonisti citokina i slična sredstva); i terapeutskih vakcina, anti-fibrotičnih sredstava, anti-inflamatornih sredstava kao što su kortikosteroidi ili NSAIDs (ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva) i slična sredstva.
[0245] Jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa drugim anti-inflamatornim sredstvima, uključujući oralne ili topične kortikosteroide, anti-TNF sredstva, preparate 5-aminosalicilne kiseline i mezalamina, hidroksihlorokvin, tiopurine, metotreksat, ciklofosfamid, ciklosporin, kalcineurin inhibitore, mikofenolnu kiselinu, mTOR inhibitore, JAK inhibitore, Syk inhibitore, anti-inflamatorna biološka sredstva, uključujući anti-IL6 biološka sredstva, anti-IL1 sredstva, anti-IL17 biološka sredstva, anti-CD22, anti-integrin sredstva, anti-IFNa, anti-CD20 ili CD4 b biološka sredstva i druge inhibitore citokina ili biološka sredstva za receptore T-ćelija ili B-ćelija ili interleukine.
[0246] Na primer, u tretmanu sistemskog eritematoznog lupusa i poremećaja povezanih sa lupusom, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim sredstvom, uključujući, kortikosteroid (kao što je prednizolon (Delatsone®, Orapred, Millipred, Omnipred, Econopred, Flo-Pred), imunosupresivno sredstvo (kao što je metotreksat (Rhuematrex®,
2
Trexall®), deksametazon (Decadron®, Solurex®), Mycofenolat mofetil (Cellcept®), Takrolimus®, Sirolimus®), terapiju B-ćelija (belimumab (Benlysta®), inhibitor B-ćelije (Atacicept®, Apratuzumab® (anti-CD22), SBI-087 (anti-CD20), anti-BAFF antitelo (LY2127399, A623), Velcade®), azatioprin (Azasan®, Imuran®), triamcinolon (Clinacort®, Kenalog-10®), hidroksihlorokin (Plaquenil®), talidomid (Immunoprin®, Contergan®), terapija imunoglobulinom (HyQiva®, Flebogamma®, Gamunex®, Privigen®, Gammagard®), anti-interferon-alfa terapija (Rontalizumab®, Sifalimumab®, AGS-009®, IFN Kinoid), TLR7 i TLR9 blokere (IMO-3100), anti-citokin terapije (anti-IL6 (CNTO-136), anti-interferon-gama (AMG811), imunomodulatorna terapija (Lupuzor™, Abatacept, Orencia®, AMG557, Laquinimod, Paquinimod, Leflunomide, anti-ICOS (Medi-570), anti-CD40 ligand antitelo (CDP7657)), i/ili inhibitor agregacije trombocita (aspirin).
[0247] U tretmanu vaskulitisa i bolesti sa inflamacijom malih ili srednjih krvnih sudova, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa alkilujućim sredstvom (ciklofosfamid, Cytoksan®), anti-reumatskim anti-CD20 antitelom (Rituxan®, Rituximab®) i anti-TNFa inhibitorima (Etanrcept®).
[0248] U tretmanu psorijaze, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa iksekizumabom, tildrakizumabom (MK-3222), ili sekukinumabom (AIN457).
[0249] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo je izabrano od inhalirajućih kortikosteroida, dugo delujućeg beta agonista, kokmbinacije inhalirajućeg kortikosteroida i dugo delujućeg beta agonista, kratko delujućeg beta agonista, modifikatora leukotriena, an anti-IgE, metilksantin bronhodilatora, inhibitora mast ćelija i dugo delujućeg muskarinskog antagonista. Na primer, u tretmanu astme, jedinjenje koje inhibira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa inhalirajućim kortikosteroidom ((ICS) kao što su flutikazon propionat (Flovent®), beklometazon dipropionat (QVAR®), budesonid (Pulmicort), trimcinolon acetonid (Azmacort®), flunizolid (Aerobid®), mometazon fuorat (Asmanex® Twisthaler®), ili Ciklesonide (Alvesco®)), dugo delujući beta agonist ((LABA) kao što su formoterol fumarat (Foradil®), salmeterol ksinafoat (Serevent®)), u kmbinaciji sa ICS i LABA (kao što su flutikazon furoat i vilanterol (Breo Ellipta®), formoterol/budesonid inhalacijom (Symbicort®), beklometazon dipropionat/formoterol (Inuvair®) i flutikazon propionat/salmeterol (Advair®), kratko delujući beta agonist ((SABA) kao što su albuterol sulfat (ProAir®, Proventil HFA®, Ventolin HFA®, AccuNeb® rastvor za inhalaciju), levalbuterol tartarat (Xopenex® HFA), ipratropijum bromid/albuterol (Combivent® Respimat®), ipratropijum bromid (Atrovent® HFA), modifikator leukotriena (kao što su montelukast natrijum (Singulair®), zafirlukast (Accolate®), ili zileuton (Zyflo®) i anti-IgE (kao što je omalizumab (Xolair®)), metilksantin bronhodilatator (kao što su teofilin (Accurbron®, Aerolate®, Aquaphyllin®, Asbron®, Bronkodyl®, Duraphyl®, Elixicon®, Elixomin®, Elixophyllin®, Labid®, Lanophyllin®, Quibron-T®, Slo-Bid®, Slo-Phyllin®, Somophyllin®, Sustaire®, Synophylate®, T-Phyll®, Theo-24®, Theo-Dur®, The- obid®, Theochron®, Theoclear®, Theolair®, Theolixir®, Theophyl®, Theovent®, Uni-dur®, Uniphyl®), inhibitor mast ćelija (kao što su kromilin natrijum (Nasalcrom®) i nedokromil natrijum (Tilade®)), dugo delujući muskariniski antagonist ((LAMA) kao što je mometazon furoat/ formoterol fumarat dihidrat (Dulera®)).
[0250] Druga sredstva koja mogu da budu pogodna za upotrebu kao kombinovana terapija u tretmanu astme uključuju inhibitor protein tirozin kinaze (masitinib), antagonist CRTH2/D-prostanoid receptora (AMG 853), indakaterol (Arcapta®Neohaler®), epinefrin inhalacioni aerosol (E004), flutikazon furoat/flutikazon proprionat, vinanterol inhalation/flutikazon furoat prašak (Relovair™), flutikazon propionat/eformoterol fumarat dehidrat (Flutiform®), reslizumab, salbutamol suvi prašak za inhalaciju, tiotropijum bromid (Spiriva®HandiHaler®), formoterol/budesonid (Symbicort®SMART®), flutikazon furoat (Veramyst®), Vectura’s VR506, lebrikizumab (RG3637), kombinacija inhibitora fosfodiesteraze (PDE)-3 i (PDE)-4 (RPL554).
[0251] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo je izabrano od dugo delujućeg beta agonista, dugo delujućeg inhalacionog antiholinergičnog ili muskarinskog antagonista, inhibitora fosfodiesteraze, kombinacije inhalacionog kortikosteroida, dugo delujućeg kortikosteroida beta agonista, kratko delujućeg beta agonista i inhalacionog kortikosteroida. Na primer, u tretmanu COPD, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa LABA (kao što su salmeterol ksinafoat (Serevent), umeklidinijum/vilanterol (Anuro Ellipta®), umeklidinijum (Incruse Ellipta®), aformoterol tartarat (Brovana®), formoterol fumarat inhalacionim praškom (Foradil®), indakterol maleat (Arcapta® Neohaler®), ili flutikazon propionat/eformoterol fumarat dehidratom (Flutiform®)), dugo delujućim inhalacionim antiholinergikom (ili muskarinskim antagonistom, kao što su tiotropijum bromid (Spiriva®) i aklidinijum bromid (Tudorza® Pressair®), inhibitorom fosfodiesteraze (PDE-r) (kao što je roflumilast, Daliresp®), kombinacijom ICS/LABA (kao što su flutikazon furoat i vilanterol (Breo Ellipta®), flutikazon propionat/salmeterol (Advair®), budesonid/formoterol
4
(Symbicort®), mometazon/formoterol (Dulera®), ipratropijum bromid/albuterol sulfat (Duoneb®, Atrovent®), albuterol/ipratropijum (Combivent Respimat®)), SABA (kao što su ipratropijum bromid (Atrovent®) i albuterol sulfat (ProAir®,Proventil®)) i ICS (kao što je budesonid (Pulmicort®) i flutikazon propionat (Flovent®), beklometazon dipropionat (QVAR®).
[0252] Druga sredstva koja mogu da budu pogodna za upotrebu u kombinovanoj terapiji u tretmanu COPD uključuju SCH527123 (CXCR2 antagonist), glikopronijum bromid ((NVA237) Seebri® Breezhaler®), glikopironijum bromid i indakaterol maleat ((QVA149) Ultibro® Breezhaler®), glikopirolat i formoterol fumarat (PT003), indakaterol maleat (QVA149), olodaterol (Striverdi® Respimat®), tiotropijum (Spiriva®)/olodaterol (Striverdi® Respimat®) i aklidinijum/formoterol inhalation.
[0253] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno terapeutsko sredstvo je izabrano od oralnog kortikosteroida, anti-timocitnog globulina, talidomida, hlorambucila, blokera kalcijumovog kanala, topičnog emolijenta, ACE inhibitora, inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina, inhibitora endotelin receptora, anati-fibrotičnog sredstva, inhibitora protonske pumpe ili imatiniba, ARG201 i tocilizumab. Na primer, u tretmanu sistemske skleroderme, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa oralnim kortikosteroidom (kao što su prednizolon (Delatsone®, Orapred, Millipred, Omnipred, Econopred, Flo-Pred), imunosupresivnim sredstvom (kao što su metotreksat (Rhuematrex®, Trexall®), ciklosporin (Sandimmune®), anti-timocitnim globulinom (Atgam®), mikofenolat mofetilom (CellCept®), ciklofosfamidom (Cytoksan®), FK506 (takrolimus), talidomidom (Thalomid®), hlorambucilom (Leukeran®), azatioprinom (Imuran®, Azasan®)), blokerom kalcijumovog kanala (kao što je nifedipin (Procardia®, Adalat®) ili nikardipinom (Cardene®), topičnim emolijentom (nitroglicerin mast), ACE inhibitorom (kao što su lisinopril (Zestril®, Prinivil®), diltaizem (Cardizem®, Cardizem SR®, Cardizem CD®, Cardia®, Dilacor®, Tiazac®)), inhibitorom ponovnog preuzimanja serotonina (kao što je fluoksetin (Prozac®)), inhibitorom endotelin-1 receptora (kao što su bosentan (Tracleer®) ili epoprostenol (Flolan®, Veletri®, Prostacyclin®)) anti-fibrotičnim sredstvom (kao što su kolhicini (Colcrys®), para-aminobenzoevom kiselinom (PABA), dimetil sulfoksidom (DMSO) i D-penicilaminom (Cuprimine®, Depen®), interferonom alfa i interferonom gama (INF-g)), inhibitorom protonske pumpe (kao što su omeprazol (Prilosec®), metoklopramid (Reglan®), lansoprazol (Prevacid®), esomeprazol (Nexium®), pantoprazol (Protonix®), rabeprazol (Aciphex®)) ili imatinibom (Gleevec®) ARG201 (arGentis Pharmaceutical), belimumabom (Benlysta®), tocilizumabom (Actema®).
[0254] U tretmanu Sjögrenovog sindroma, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa anti-reumatičnim sredstvima (hidroksihlorokin i Plaquenil®, Ridaura®, Kineret®), holinrgičnim agonistima (Salagen®, Evoksac®), JAK inhibitorom (Xelijanz® i anti-TNFa tretmanima(Remicade®, Humira®, Enbrel®, Cimzia®, Simponi®).
[0255] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo je cilijarni neurotrofni faktor rasta ili sredstvo transfera gena. Na primer, u tretmanu retinitis pigmentoze, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa cilijarnim neurotrofnim faktorom rasta (NT-501-CNTF) ili sredstvom za transfer gena, UshStat®.
[0256] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno terapeutsko sredstvo je izabrano od trovalentne (IIV3) inaktivirane influenca vakcine, četvorovalentne (IIV4) inaktivirane influenca vakcine, trovalentne rekombinantne influenca vakcine, četvorovalentne oslabljenje žive influenca vakcine, antivirusnog sredstva ili inaktivirane influenca vakcine.Na primer, u tretmanu influence, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa trovalentnom (IIV3) inaktiviranom influenca vakcinom (kao što su Afluria®, Fluarix®, Flucelvax®, FluLaval®, Fluvirin®, Fluzone®), četvorovalentnom (IIV4) inaktiviranom influenca vakcinom (kao što su Fluarix® Quadrivalent, Flulaval® Quadrivalent, Fluzone® Quadrivalent), trovalentnom rekombinantnom influenca vakcinom (kao što su FluBlok®), četvorovalentnom oslabljenom živom influenca vakcinom (kao što su FluMist® Quadrivalent), antivirusnim sredstvom (kao što su oseltamivir (Tamiflu®), zanamivir (Relenza®), rimantadin (Flumadine®), ili amantadin (Symmetrel®)), ili Fluad®, Fludase, FluNhance®, Preflucel, ili VaxiGrip®
[0257] U tretmanu stafilokokne infekcije, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa antibiotikom (kao što su β-Lactam cefalosporin (Duricef®, Kefzol®, Ancef®, Biocef®, itd), nafcilin (Unipen®), sulfonamidom (sulfametoksazol i trimetoprim (Bacrim®, Septra®,) sulfasalazanom (Azulfidine®), acetil sulfizoksazolom (Gantrisin®), itd), ili vancomicinom (Vancocin®)).
[0258] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, najmanje jedno terapeutsko sredstvo je izabrano od topičnog imunomodulatora ili inhibitora kalcineurina, topičnog kortikosteroida, oralnog kortikosteroida, interferona gama, antihistamina ili antibiotika. Na primer, u tretmanu atopičnog dermatitisa, jedinjenje koje modulira STING, posebno jedinjenje iz pronalaska, može da se primeni u kombinaciji sa topičnim imunomodulatorom ili inhibitorom kalcineurina (kao što su pimekrolimus (Elidel®) ili takrolimus mast (Protopic®)), topičnim kortikosteroiidom (kao što su hidrokortizon (Synacort®, Westcort®), betametazon (Diprolene®), flurandrenolid (Cordan®), flutikazon (Cutivate®), triamcinolon (Kenalog®), fluocinonid (Lidex®) i klobetazol (Temovate®)), oralnim kortikosteroidom (kao što su hidrokortizon (Cortef®), metilprednizolon (Medrol®), ili prednizolon (Pediapred®, Prelone®), imunosupresantom (kao što su ciklosporin (Neoral®) ili interferon gama (Alferon N®, Infergen®, Intron A, Roferon-A®)), antihistaminom (protiv osipa kao što su Atarax®, Vistaril®, Benadryl®), antibiotikom (kao što su, flukloksacilin derivati penicilina (Floksapen®) ili dikloksacilin (Dynapen®), eritromicin (Eryc®, T-Stat®, Erythra-Derm®, itd.)), non-steroidnim imunosupresivnim sredstvom (kao što su azatioprin (Imuran®, Azasan®), metotreksat (Rhuematrex®, Trexall®), ciklosporin (Sandimmune®), ili mikofenolat mofetil (CellCept®)).
[0259] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da budu formulisana sa vakcinama kao adjuvansi koji moduliraju njihovu aktivnost. Ovakve kompozicije mogu da sadrže antitelo(a) ili fragment(e) ili antigeničnu komponentu koja uključuje, ali bez ograničenja na, protein, DNK, žive ili mrtve bakterije i/ili viruse ili delove slične virusu, zajedno sa jednom ili više komponenti koje deluju kao adjuvansi, uključujući ali bez ograničenja na, soli aluminijuma, uljane i vodene emulzije, proteine inaktivirane toplotom, preparate i derivate lipida A, glikolipide, druge TLR agoniste kao što su CpG DNK ili slična sredstva, citokine kao što su GM-CSF ili IL-12 ili slična sredstva.
[0260] U narednom aspektu pronalaska, obezbeđen je adjuvans vakcine koji uključuje jedinjenje iz pronalaska. Dalje je obezbeđena kompoziciona vakcina koja uključuje jedinjenje iz pronalaska i antigen ili kompozicioni antigen.
[0261] Terapeutski "efektivna količina" treba da označi količinu jedinjenja koja je, kada se primeni na pacijentu kome je potreban takav tretman, dovoljna da efikasno leči ili spreči, kako je ovde definisano. Prema tome, na primer, terapeutski efektivna količina jedinjenja iz pronalaska, je količina inventivnog sredstva koja je, kada se primeni na ljudima kojima je to potrebno, dovoljna da modulira aktivnost STING tako da je bolesno stanje koje ova aktivnost modulira redukovano, ublaženo ili sprečeno. Količina datog jedinjenja koja će da odgovara ovakvoj količini će da varira u zavisnosti od faktora kao što su određeno jedinjenje (na primer, potencija (PIC50), efikasnost (EC50) i biološki polu-život određenog jedinjenja), bolesno stanje i njegova ozbiljnost i identitet (na primer, godine starosti, veličina i težina) pacijenta kome je potreban tretman ali to manje-više rutinski određuje stručnjak sa iskustvom u praksi. Isto tako, trajanje tretmana i vremenski period primene (vremenski period između doza i raspored doziranja, na primer, pre/uz/nakon obroka) jedinjenja će da varira u skladu sa vrstom sisara kome je poterbana tretman (na primer, težina), određenog jedinjenja i njegovih osobina (na primer, farmakokinetičke osobine), bolesti ili poremećaja i njegove težine i specifične kompozicije i postupka koji se koristi, ali stručnjak sa iskustvom u praksi može da je odredi.
[0262] "Lečenje" ili "tretman" treba da označi ublažavanje bolesti ili poremećaja kod pacijenta. Postupci tretmana za ublažavanje bolesti ili poremećaja uključuju upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska na bilo koji uobičajeno prihvatljiv način, na primer za usporavanje, terapiju ili lečenje bolesti ili poremećaja posredovanih STING-om, kako je ovde prethodno opisano. U jednom ostvarenju, "lečenje" "tretman" ili "terapija" u odnosu na kancer se odnosi na ublažavanje kancera, eliminaciju ili smanjenje jednog ili više simptoma kancera, usporavanje ili eliminaciju progresije kancera i odlaganje ponovnog javljanja stanja koje je uuočeno ili dijagnostikovano kod pacijenta ili subjekta.
[0263] "Sprečavanje", "preventiranje" ili "prevencija" se odnosi na profilaktičku primenu leka da se umanji verovatnoća od početka ili da se odloži početak bolesti ili njegove biološke manifestacije. Profilaktička terapija je odgovarajuća, na primer, kada kod subjekta postoji veliki rizik za razvoj kancera, kao što je na primer kada subjekt ima jaku porodičnu istoriju kancera, ili kada je subjekt bio izložen karcinogenima.
[0264] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene na bilo koji pogodan način primene, uključujući i sistemsku primenu i topičnu primenu. Sistemska primena obuhvata oralnu primenu, parenteralnu primenu, transdermalnu primenu, rektalnu primenu i primenu inhalacijom. Parenteralna primena se odnosi na način primene koji se razlikuje od enteralne, transdermalne ili inhalacijom i obično je injekcijom ili infuzijom. Parenteralna primena uključuje intravensku, intramuskularnu i subkutanu injekciju ili infuziju. Inhalacija se odnosi na primenu u pluća pacijenta, pri čemu se inhalira preko usta ili preko nazalne pasaže.
Topična primena uključuje aplikaciju na koži.
[0265] Pored prethodno opisanih načina primene pogodnih za tretman u onkologiji, farmaceutske kompozicije mogu da budu prilagođene za primenu intratumoralnim ili peritumoralnim injekcijama. Očekuje se da intratumoralna ili peritumoralna injekcija jedinjenja iz ovog pronalaska direktno u ili pored pojedinačnog solidnog tumora izazove imuni odgovor koji može da napadne i uništi ćelije kancera u organizmu a nakon toga smanji i u nekim slučajevima permanentno eliminiše tumor iz bolesnog subjekta. Aktivacija imunog sistema da se na ovaj način unište tumori na udaljenom mestu je uobičajeno poznata kao abskopalni efekat i pokazan je u životinjama sa višestrukim terapeutskim modalitetima (van derJeught, i saradnici, Oncotarget, 2015, 6(3), 1359-1381). Druga prednost lokalne ili intratumoralne ili peritumoralne primene je sposobnost da se dostigne ekvivalent efikasnosti pri mnogo manjim dozama, i na taj način umanje ili eliminišu neželjena dejstva koja mogu da budu uočena pri mnogo većim sistemskim dozama (Marabelle, A., i saradnici, Clinical Cancer Research, 2014, 20(7), p1747-1756).
[0266] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene jedanput ili u skladu sa režimom doziranja, pri čemu se broj doza primenjuje u različitim vremenskim intervalima u datom periodu vremena. Na primer, doze mogu da se primene jedanput, dva puta, tri ili četiri puta dnevno. Doze mogu da se primenjuju se dok se postiže traženi terapeutski efekat ili trajno da se održava traženi terapeutski efekat. Pogodni režimi doziranja za jedinjenje iz pronalaska zavise od farmakokinetičkih osobina tog jedinjenja, kao što su absorpcija, distribucija i poluživot koje stručnjak sa iskustvom u praki može da odredi. Pored toga, odgovarajući režimi doziranja, uključujući trajanja ovakvog režima primene, za jedinjenje iz ovog pronalaska zavisi od bolesti ili poremećaja koji se tretira, težine bolesti ili poremećaja koji se tretira, godina starosti i fizičkog stanja pacijenta koji se tretira, medicinske istorije pacijenta koji se tretira, prirode prateće terapije, traženog terapeutskog efekta i sličnih faktora u okviru znanja i procene stručnjaka sa iskustvom u praksi. Stručnjak sa iskustvom u praksi će isto tako znati da odgovarajući režim doziranja može da zahteva odgovarajuće prilagođavanje na odgovor pojedinačnog pacijenta na režim doziranja ili u toku vremena kako se menja potreba pojedinačnog pacijenta. Ukupan opseg dnevne doze je od 1 mg do 2000 mg, preferirano, ukupan opseg dnevne doze je od 1 mg do 250 mg.
[0267] Za upotrebu u terapiji, jedinjenja iz pronalaska su uobičajeno, ali ne neophodno, formulisana u farmaceutsku kompoziciju pre primene na pacijentu. U skladu sa tim, pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske kompozicije koje uključuju jedinjenje iz pronalaska i najmanje jednu farmaceutski prihvatljivu podlogu.
[0268] Farmaceutske kompozicije iz pronalaska mogu da se izrade i upakuju na veliko pri čemu efektivna količina jedinjenja iz pronalaska može da se izdvoji a nakon toga da pacijentu, kao što je slučaj sa praškovima, sirupima i rastvorima za injekcije. Alternativno, farmaceutske kompozicije iz pronalaska mogu da se izrade i upakuju u jediničnom doznom obliku. Za oralnu primenu, na primer, mogu da se primene jedna ili više tableta ili kapsula. Doza farmaceutske kompozicije sadrži najmanje terapeutski efektivnu količinu jedinjenja iz pronalaska. Kada je izrađena u jediničnom doznom obliku, farmaceutske kompozicije mogu da sadrže od 1 mg do 1000 mg jedinjenja iz ovog pronalaska.
[0269] Kako je ovde dato, jedinični dozni oblci (farmaceutske kompozicije) koji sadrže od 1 mg do 1000 mg jedinjenja iz pronalaska, mogu da se primene jedan, dva, tri ili četiri puta dnevno, preferirano jedan, dva ili tri puta dnevno a još poželjnije jedan ili dva puta dnevno, za efikasan tretman bolesti ili poremećaja posredovanih STING-om.
[0270] Farmaceutske kompozicije iz pronalaska obično sadrže jedno jedinjenje iz pronalaska. Međutim, u nekim ostvarenjima, farmaceutske kompozicije iz pronalaska sadrže više od jednog jedinjenja iz pronalaska. Pored toga, farmaceutske kompozicije iz pronalaska mogu opciono dalje da uključe jedno ili više dodatnih farmaceutskih sredstava (na primer, farmaceutski aktivna jedinjenja).
[0271] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljiva podloga" se odnosi nafarmaceutski prihvatljiv materijal, kompoziciju ili vehikulum uključen u dati oblik ili konzistenciju za farmaceutske kompozicije. Svaka podloga mora da bude kompatibilna sa drugim sastojcima farmaceutske kompozicije kada se izmešaju tako da se izbegnu interakcije koje bi znatno smanjile efikasnost jedinjenja iz pronalaska kada se primeni na pacijentu i interakcije koje bi dovele do farmaceutski neprihvatljivih farmaceutskih kompozicija. Pored toga, svaka podloga mora naravno da bude dovoljno velike čistoće da bi bilo farmaceutski prihvatljivo.
[0272] Jedinjenja iz pronalaska i farmaceutski prihvatljiva podloga ili podloge su uobičajeno formulisana u dozni oblik prilagođen za primenu na pacijentu traženim načinom primene. Uobičajeni dozni oblici uključuju one koji su prilagođeni za (1) oralnu primenu kao što su tablete, kapsule, kaplete, pilule, troheje, praškovi, sirupi, eliksiri, suspenzije, rastvori, emulzije, sahete i kahete; (2) za parenteralnu primenu kao što su sterilni rastvori, suspenzije i praškovi za rekonstituciju; (3) za transdermalnu primenu kao što su transdermalni flasteri; (4) za rektalnu primenu kao što su supozitorije; (5) za inhalaciju kao što su aerosoli i rastvori; i (6) topičnu primenu kao što su kreme, masti, losioni, rastvori, paste, sprejovi, pene i geli.
[0273] Pogodne farmaceutski prihvatljive podloge će da se razlikuju u zavisnosti od određenog izabranog doznog oblika. Pored toga, pogodne farmaceutski prihvatljive podloge mogu da budu izabrane za određenu funkciju koju mogu da imaju u kompoziciji. Na primer, neke farmaceutski prihvatljive podloge mogu da budu izabrane zbog svoje sposobnosti da omoguće produkciju ujednačenih doznih oblika. Neke farmaceutski prihvatljive podloge mogu da budu izabrane zbog svoje sposobnosti da omoguće održavanje ili prenos jedinjenja
1
ili jedinjenja iz pronalaska kada se primene na pacijentu od jednog organa ili dela organizma do drugog organa ili dela organizma. Neke farmaceutski prihvatljive podloge mogu da budu izabrane zbog svoje sposobnosti da povećaju prihvatljivost od strane pacijenta.
[0274] U pogodne farmaceutski prihvatljive podloge spadaju sledeći tipovi podloga: razblaživači, punioci, vezivna sredstva, sredstva za raspadanje, lubrikansi, glidansi, sredstva za granulaciju, sredstva za oblaganje, sredstva za vlaženje, rastvarači, ko-rastvarači, sredstva za suspendovanje, emulgatori, zaslađivači, sredstva za korigovanje ukusa, sredstva za maskiranje ukusa, sredstva za bojenje, sredstva protiv slepljivanja, humektansi, helatna sredstva, plastifikatori, sredstva za povećanje viskoziteta, antioksidansi, konzervansi, stabilizatori, surfaktanti i sredstva za puferovanje. Stručnjak sa iskustvom će znati da neke farmaceutski prihvatljive podloge mogu da imaju više od jedne funkcije i mogu da imaju alternativne funkcije u zavisnosti od količine podloge prisutne u formulaciji i drugih sastojaka prisutnih u formulaciji.
[0275] Stručnjaci sa iskustvom poseduju znanje i iskustvo u praksi koje im omogućava da izaberu pogodne farmaceutski prihvatljive podloge u odgovarajućim količinama za upotrebu u pronalasku. Pored toga, postoje brojni resursi koji su raspoloživi stručnjaku sa iskustvom u kojima su opisane farmaceutski prihvatljive podloge i mogu da budu korisni u izboru pogodnih farmaceutski prihvatljivih podloga. U primere spadaju Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited) i The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association i Pharmaceutical Press).
[0276] Farmaceutske kompozicije iz pronalaska se izrađuju tehnikama i postupcima poznatim stručnjaku sa iskustvom u praksi. Neki od postupaka koji se uobičajeno koriste u praksi su opisani u Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).
[0277] U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na čvrsti oralni dozni oblik kao što su tablete ili kapsule koji uključuju efektivnu količinu jedinjenja iz pronalaska i razblaživač ili punilac. U pogodne razblaživače i punioce spadaju laktoza, saharoza, dekstroza, manitol, sorbitol, skrob (na primer kukuruzni skrob, krompirov skrob i pre-želatinizirani skrob), celuloza i njeni derivati (na primer mikrokristalna celuloza), kalcijum sulfat i dibazni kalcijum fosfat. Čvrsti oralni dozni oblik može dalje da sadrži vezivno sredstvo. U pogodna veziva spadaju skrob, (na primer kukuruzni skrob, krompirov skrob i pre-želatinizirani skrob), želatin, akacija, natrijum alginat, algininska kiselina, tragakanta, guar guma, povidon i celuloza i njeni derivati (na primer mikrokristalna celuloza). Čvrsti oralni dozni oblik može dalje da sadrži sredstvo za
1 1
raspadanje. U pogodna sredstva za raspadanje spadaju krospovidon, natrijum skrob glikolat, kroskarmeloza, algininska kiselina i natrijum karboksimetil celuloza. Čvrsti oralni dozni oblik može dalje da sadrži lubrikans. U pogodne lubrikanse spadaju stearinska kiselina, magnezijum stearat, kalcijum stearat i talk. Na primer, tablete mogu da se izrade po uobičajenim postupcima i formulisane su na sledeći način: jedinjenje, 5mg; mikrokristalna celuloza, 100mg; laktoza, 100mg; natrijum skrob glikolat, 30mg; magnezijum stearat, 2mg; ukupna mt težina 237mg. Kapsule mogu da se izrade po uobičajenim postupcima i formulisane su na sledeći način: jedinjenje, 15mg; suvi skrob, 178mg; magnezijum stearat, 2mg; ukupna težina 195mg.
[0278] Jasno je da jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da budu formulisana sa vakcinama kao adjuvansi da moduliranju njihovo delovanje. Ovakve kompozicije mogu da sadrže antitelo (antitela) ili fragment(e) antitela ili antigeničnu komponentu koja uključuje, ali bez ograničenja na, protein, DNK, žive ili mrtve bakterije i/ili cele, inaktivirane ili podeljene viruse ili partikule slične virusima, rekombinantne proteine i njihove antigenične fragmente, opciono zajedno sa jednom ili više drugih komponenti koje deluju kao adjuvansi uključujući, ali bez ograničenja na, soli aluminijuma, uljane i vodene emulzije, proteine inaktivirane toplotom, saponine, preparate i derivate lipida A, glikolipide, lipozome, , TLR agoniste kao što su CpG DNK ili slična sredstva, citokine kao što su GM-CSF ili IL-12, ili slična sredstva.
[0279] Neka jedinjenja iz pronalaska mogu da budu potentni imunomodulatori i u skladu sa tim treba voditi pažnju o njihovom rukovanju.
Primeri
[0280] Niže dati primeri ilustruju pronalazak. Ovi primeri nemaju za cilj da ograniče okvir ovog pronalaska, već da omoguće stručnjaku sa iskustvom da izradi i koristi jedinjenja i kompozicije i postupke iz ovog pronalaska. Mada su određena ostvarenja iz ovog pronalaska opisana, stručnjak sa iskustvom će proceniti da su moguće različite izmene i modifikacije bez odstupanja od duha i okvira pronalaska.
[0281] Jasno je da neka jedinjenja iz pronalaska mogu da budu potentni imunomodulatori i u skladu sa tim, treba voditi računa u postupanju sa njima.
[0282] Ovde opisane reakcije su primenljive za izradu jedinjenja iz pronalaska koja imaju veliki broj različitih supstituentnih grupa (na primer, R1, R2, itd.), kako je ovde definisano. Stručnjak sa iskustvom će proceniti ukoliko određeni supstituent nije kompatibilan sa ovde
1 2
opisanim postupcima sinteze, supstituent može da bude zaštićen sa odgovarajućom zaštitnom grupom koja je stabilna u uslovima reakcije. Odgovarajuće zaštitne grupe i postupci za zaštitu i oslobađanje određenih različitih supstituenata korišćenjem ovih zaštitnih grupa su dobro poznati stručnjaku sa iskustvom u tehnici a njihovi primeri mogu da se nađu u T. W. Greene ’Protective Groups in Organic Synthesis’ (4th edition, J. Wiley i Sons, 2006). Ukoliko nije drugačije navedeno, svi početni materijali su nabavljeni od komercijalnih dobavljača i korišćeni bez dodatnog prečišćavanja.
[0283] Neki međuproizvodi koji su ovde opisani formiraju još jedan novi aspekt pronalaska.
Opšti postupci sinteze
[0284] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se izrade po procedurama sinteza ilustrovnaih u niže datim šemama reakcije, koje mogu lako da se prilagode za izradu drugih jedinjenja iz pronalaska oslanjajući se na znanje stručnjaka sa iskustvom u organskoj hemiji. Sinteze date u ovim šemama su primenljive za izradu jedinjenja iz pronalaska koja imaju veliki broj različitih R grupa upotrebom odgovarajućih prekursora, koji su na pogodan način zaštićeni ukoliko je to potrebno, da se obezbedi kompatibilnost sa reakcijama koje su ovde navedene. Naknadnom deprotekcijom, kada je to potrebno, dobijaju se jedinjenja koja su generalno ovde otkrivena. Mada su šeme pokazane samo sa jedinjenjima Formula (I-N), (I-P) ili (I), one predstavljaju ulistrativne procese koji mogu da se koriste za izradu jedinjenja iz pronalaska. Međuproizvodi (jedinjenja korišćena u izradi jedinjenja iz pronalaska) mogu takođe da budu prisutni kao soli.
[0285] Postupak 1: Odgovarajući nitro-halo benzamid (1A) može da se tretira sa aminom (alilamin je korišćen kao primer) pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije anilin (1B). Nakon redukcije nitro grupe, pod odgovarajućim uslovima se dobija dianilin (1C). Reakcijom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol (1D).
Udvajanjem peptida između aminobenzimidazola i pirazolne kiseline (1E) se generiše amidobenzimidazol monomer (1F). Reakcijom unakrsne metateze između dve molekule (1F) dobija se nezasićeni dimer (1G), koji može da se hidrogenizuje da se dobije zasićen dimer 1H.
1
Postupak 1
[0286] Postupak 2: dve molekule odgovarajućeg nitro-halo benzamida (2A) mogu da se tretiraju sa diaminom pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije bisudvojeni anilin (2B). Daljom bis-redukcijom nitro grupa pod odgovarajućim uslovima može da se dobije dianilin (2C). Reakcijom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol dimer (2D). Udvajanje peptida između bis amina (2D) i dve molekule pirazolne kiseline (2E) generiše amidobenzimidazol dimer (2F).
1 4
Postupak 2
[0287] Postupak 3: fluoronitrobenzamid (3A) se tretira sa monozaštićenim diaminom pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije anilin (3B). Nakon toga, redukcijom nitro grupe pod odgovarajućim uslovima može da se dobije dianilin (3C).
Reakcijom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol (3D). Udvajanjem peptida između amina (3D) i pirazolne kiseline (3E) se generiše aminobenzimidazol (31), koji može da se deprotektuje pod odgovarajućim uslovima za amin zaštitnu grupu da se dobije amin (3G). Amin (3G) može da se udvoji sa odgovarajućim halonitrobenzamidom (3H) da se dobije (31); redukcijom nitro grupe može da se dobije dianilin (3J). Tretmanom (3J) sa cijanogen bromidom se generiše aminobenzimidazol (3K), koji može da se tretira sa pirazolnom kiselinom (3E) pod uslovima udvajanja amina da se dobije nesimetrični dimer (3L).
1
Postupak 3
[0288] Postupak 4: odgovarajući nitro-halo benzamid (4A) se tretira sa monozaštićenim diaminom pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije alilanilin (4B). Daljom redukcijom nitro grupe pod odgovarajućim uslovima se dobija dianilin (4C).
1
Reakcijom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol (4D). Udvajanjem peptida između amina (4D) i pirazolne kiseline (4E) generiše se aminobenzimidazol (4F), koji može da se deprotektuje pod odgovarajućim uslovima za amin zaštitnu grupu, da se dobije dobije amin (4G). Amin (4G) može da se udvoji sa fluoronitrobenzamidom (4H) da se dobije (4I) a nakon toga redukcijom nitro grupe se dobija dianilin (4J). Tretmanom (4J) sa cijanogen bromidom se generiše aminobenzimidazol (4K), koji može da se tretira sa pirazolnom kiselinom (4E) pod uslovima udvajanja amida da se dobije nesimetrični dimer (4L).
Postupak
1
[0289] Postupak 5: dve molekule odgovarajućeg fenola (5A) reaguju sa bis-elektrofilom kao što je dibromopropan da se dobije dimer vezanog etra (5B). Dimer (5B) nakon reaguje sa odgovarajućim diaminom da se dobije makrociklus (5C). Redukcijom nitro grupa, a nakon toga tretmanom sa cijanogen bromidom se dobija bisaminobenzimidazol (5D). Udvajanjem amida sa odgovarajućom kiselinom (5E) se dobija bisamidobenzimidazol makrociklus (5F).
Postupak 5
1
[0290] Postupak 6: bispirazolna kiselina 6A (Postupak 8) reaguje sa aminobenzimidazol dimerom (6B) pod uslovima udvajanja amida da se dobije amidobenzimidazol makrociklus (6C), pri čemu svaki R može da bude isti ili različit.
Postupak 6
[0291] Postupak 7: bispirazolna kiselina 7A (Postupak 8) reaguje sa dve molekule aminobenzimidazola (7B) pod uslovima udvajanja amida da se dobije pirazol-vezani dimer (7C). Zatvaranjem prstena reakcijom metateze se dobija nezasićeni makrociklus (7D), koji može da se hidrogenizuje da se dobije zasićeni amidobenzimidazolni makrociklus (7E).
1
Postupak 7
[0292] Postupak 8: supstituisani (pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-karboksilat (8C) može da se formira N-alkilacijom supstituisanog 1H-pirazol-karboksilata (8A) sa (5-hloropent-1-in-1-il)trimetilsilanom a nakon toga de-sililacijom. 4-jod- 1H-pirazol-karboksilat (8F) može da se formira esterifikacijom odgovarajuće 1H-pirazol-karboksilne kiseline (8D), a nakon toga jodinacijom korišćenjem 1-jodopirolidin-2,5-diona. Paladijum katalizatorom se udvaja supstituisani (pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-karboksilat (8C) sa 4-jod-1H-pirazol-karboksilatom (8F) i formira alkinil-vezani bispirazol (8G). Hidrogenacijom alkinil-vezanog bispirazola, a nakon toga hidrolizom se dobija bispirazolna kiselina koristeći prethodno navedene postupke 6 i 7 (6A/7A).
11
Postupak 8
[0293] Postupak 9: odgovarajući nitro-halo benzamid (9A) može da se tretira sa monozaštićenim diaminom (kao što je 9B) pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije udvojeni anilin (9C). Nakon toga se deprotekcijom primarnog amina dobija amin 9D. Drugi nitro-halo benzamid (9E) može da reaguje sa aminom 9D pod uslovima udvajanja posredstvom baze ili metala da se dobije bis-nitro dimerni benzamid (9F). Dvostrukom redukcijom nitro grupa pod odgovarajućim uslovima može da se dobije dianilin (9G). Reakcijom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol dimer (9H).
Udvajanjem peptida između bis amina 9H i dve molekule pirazolne kiseline (9I) generiše se amidobenzimidazol dimer (9J).
Postupak 9
[0294]
[0295] Postupak 10: tetraanilin (10A, izrađen po Postupku 9 ili nekom drugom opštem postupku) može da se tretira sa izotiocijanatom (10B) sve dok reakcija ne bude kompletna. Nakon završene faze 1, dodaju se EDC (ili neki drugi odgovarajući reagens za udvajanje) i trietilamin (ili neka druga pogodna baza) i reakcija meša dok ne bude kompletna da se dobije amidobenzimidazol dimer (10C).
Postupak 10
[0296] Postupak 11: sve promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisani halonitrobenzamid (11A) reaguje sa monozaštićenim diaminom kao što je 11B da se dobije nitroanilin 11C. Deprotekcijom amin zaštitne grupe dobija se amin 11D, koji može da reaguje sa halo-nitrofenil jedinjenjem 11E da se dobije bisnitro 11F. Redukcijom obe nitro grupe se dobija bis-anilin 11G koji se tretira sa cijanogen bromidom da se dobije bisaminobenzimidazol 11H. Udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao što je 11I se dobija supstituisani amidobenzimidazol dimer 11J. Kada su na 11J prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju druga jedinjenja kao što je 11K.
Postupak 11
11
[0297] Postupak 12: U postupku 12, R<C2>=R<14>, R<17>=R<15>i R<16>=R<C1>, sve druge promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Tetraanilin (12A, izrađen po postupku 11, 16 ili nekim drugim opštim postupkom) može da se tretira sa izotiocijanatom kao što je 12B sve dok reakcija ne bude kompletna. Nakon završene faze 1, dodaju se EDC (ili drugi odgovarajući reagens za udvajanje) i trietilamin (ili neka druga pogodna baza) i reakcija meša sve do završetka da se dobije amidobenzimidazol dimer (12C).
Postupak 12
[0298] Postupak 13: u postupku 13, sve promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Ovim postupkom mogu da se dobiju makrociklična jedinjenja sa supstituentima. Supstituisano halonitrofenil jedinjenje (13A) se tretira sa odgovarajućim diaminom (13B) koji sadrži linker grupu (B) između dve amino grupe, da se dobije amin 13C. Redukcijom nitro grupe a nakon toga tretmanom sa cijanogen bromidom može da se dobije aminobenzimidazol 13D. Udvajanjem amida između 13D i bispirazol mono-karboksilne kiseline (kao što je 13E) koja sadrži linker grupu (C) između dva pirazola, dobija se amidobenzimidazol (13F). Deprotekcijom amino grupe se omogućava dodavanje u drugi supstituisani halo-nitro-fenil (13G) da se dobije nitro-estar 13H. Redukcijom nitro grupe u 13H a nakon toga tretmanom sa cijanogen bromidom se dobija aminobenzimidazol 13I.
Hidrolizom pirazol estra se nakon toga omogućava formiranje makrocikličnog amida da se dobije makrociklični amidobenzimidazol 13J. Kada su na 13J prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju druga jedinjenja kao što je 13K.
11
Postupak 13
[0299] Postupak 14: -O-M<1>se definiše kao opciono supstituisana (C1-C6alkil)oksi grupa kako je definisano za R<A1>kada je q = 0 u Formuli (I), Formuli (I-N) ili Formuli (I-P). Sve druge promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Dimerni amidobenzimidazol koji sadrži fenol, kao što je 14A, izrađen po jednom od opštih postupaka sinteze kako je ovde opisano, može da bude alkilovan na fenol grupi upotrebom odgovarajućeg sredstva za alkilaciju kao što je alkil bromid i baze kao što je kalijum karbonat. Kada su na 14B prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dodatna
11
funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju druga jedinjenja.
Postupak 14
[0300] Postupak 15: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstutuisano halo-nitrofenil jedinjenje (15A) reaguje sa diaminom koji sadrži linker grupu (B), kao što je 15B, da se dobije bis-nitro dimer 15C. Redukcijom obe nitro grupe se dobija tetraanilin 15D koji može da se konvertuje u amidobenzimidazol dimer (15E) jednim od dva postupka: 1) treatmanom sa cijanogen bromidom da se dobije bisaminobenzimidazol a nakon toga udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao je 15F; ili 2) tretmanom sa izotiocijanatom (15G) sve do završetka reakcije, a nakon toga dodavanjem EDC (ili drugog pogodnog reagensa za udvajanje) i trietilamina (ili neke druge pogodne baze) i reakcija se meša sve do završetka. Kada su na 15E prisutne druge funkcionalne grupe, daljom funkcionalizacijom ovih grupa moguće je da se dobiju druga jedinjenja.
11
Postupak 15
. ,
[0301] Postupak 16: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisano halo-nitrofenil jedinjenje (16A) reaguje sa monozaštićenim diaminom koji sadrži linker grupu (B) kao što je 16B da se dobije nitroanilin 16C. Deprotekcijom amin zaštitne grupe se dobija amin 16D, koji može da reaguje sa halo-nitrofenil jedinjenjem 16E da se dobije bis-nitro dimer 16F. Redukcijom obe nitro grupe se dobija tetraanilin 16G koji može da se konvertuje u amidobenzimidazol dimer (16H) jednim od dva postupka: 1) tretmanom sa cijanogen bromidom da se dobije bisaminobenzimidazol a nakon toga udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao što je 161; ili 2) tretmanom sa izotiocijanatom (16J) sve do završetka reakcije, a nakon toga dodavanjem EDC (ili drugog pogodnog reagensa za udvajanje) i trietilamina (ili neke druge pogodne baze) i mešanjem reakcije do završetka. Kada su na 16H prisutne druge funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju dodatna jedinjenja.
11
Postupak 16
. , z
[0302] Postupak 17: M<2>je C1-C6alkil grupa ili COOM<2>može da bude bilo koji estar koji je neaktivan za hidrogenolizu benzil estra. Sve druge promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Supstituisani pirazol estar kao što je (pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-karboksilat (17D) može da se formira esterifikacijom supstituisanog 1H-pirazol-karboksilata (17A) da se dobije estar 17B a nakon toga N-alkilacijom pod mitsunogu uslovima. 4-jod-pirazol estar (17G) može da se formira esterifikacijom odgovarajuće pirazolkarboksilne kiseline (17E), a nakon toga jodinacijom pomoću 1-jodopirolidin-2,5-diona (NIS). Udvajanje alkilisanog pirazola kao što je 17D uz paladijum katalizator sa 4-jod-
11
pirazol-estrom (17G) formira se vezani bispirazol (17H). Redukcijom i hidrogenolizom vezanog bispirazola se dobija bispirazol monokiselina (17I).
Postupak 17
[0303] Postupak 18: sve promenljive su kako je definisano u Formuli (A). (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol- 5-karboksamido)-7-(3-hidroksi-propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (18A) može da se tretira sa metansulfonil hloridom i trietilaminom. Nakon završetka faze 1, dobijeni mesilat (18B) se tretira sa aminom (NHR<A>R<B>) i K2CO3i reakcija se zagreva na 50-80 °C sve do završetka, da se dobiju tražena jedinjenja (18C).
12
Postupak 18
[0304] Postupak 19: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisani bis-aminobenzimidazol (19B) koji sadrži linker grupu (B), izrađen po jednom od ovde opisanih postupaka, reaguje sa bispirazolom (19A) u koje je inkorporirana linker grupa (C) i amid udvajajućim reagensima da se dobije makrociklični bisamidobenzimidazol.
Postupak 19
[0305] Postupak 20: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisano halo-nitrofenil jedinjenje (20A) reaguje sa monozaštićenim diaminom koji sadrži linker grupu (B) kao što je 20B da se dobije nitroanilin 20C. Redukcijom nitro grupe pod odgovarajućim uslovima se dobija dianilin 20D, koji može da se konvertuje u amidobenzimidazol 20F jednim od dva postupka: 1) tretmanom sa cijanogen bromidom a nakon toga udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao što je 20E; ili 2) tretmanom sa izotiocijanatom (20L) sve do završetka reakcije, a nakon toga dodavanjem EDC (ili drugog pogodnog reagensa za udvajanje) i trietilamina (ili neke druge pogodne baze) i mešanjem reakcije do završetka. Deprotekcijom amin zaštitne grupe se dobija amin 20G, koji može da reaguje sa halo-nitrofenil jedinjenjem 20H da se dobije dimerni nitro anilin 201. Redukcijom nitro grupe se dobija bis-anilin 20J koji može da se konvertuje u amidobenzimidazol dimer (20K) jednim od dva postupka: 1) tretmanom sa cijanogen bromidom da se dobije bisaminobenzimidazol a nakon toga udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao što je 20M; ili 2) tretmanom sa izotiocijanatom (20N) sve do završetka reakcije, a nakon toga dodavanjem EDC (ili drugog pogodnog reagensa za udvajanje) i trietilamina (ili neke druge pogodne baze) i reakcija se meša do završetka. Kada su na 20K prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju dodatna jedinjenja.
Postupak 20
.
amida
. ,
[0306] Postupak 21: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Dve molekule odgovarajuće funkcionalizovanog nitro-halo-fenila (21A) su
12
dimerizovane da se dobije bis-nitro dimer 21B koji sadrži linker grupu (A).21B nakon toga reaguje sa aminom ili dianilin diaminom 21C. Redukcijom nitro grupa, dobija se tetraanilin 21C koji može da se konvertuje u amidobenzimidazol dimer (21G) jednim od dva postupka: 1) tretmanom sa cijanogen bromidom da se dobije bisaminobenzimidazol a nakon toga udvajanjem amida sa pirazolnom kiselinom kao što je 21E; ili 2) tretmanom sa izotiocijanatom (21F) sve do završetka reakcije, a nakon toga dodavanjem EDC (ili drugog pogodnog reagensa za udvajanje) i trietilamina (ili neke druge pogodne baze) i reakcija se meša sve do završetka. Kada su na 21G prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju dodatna jedinjenja. Opšti primer dimerizacije može da bude reakcija odgovarajućeg nitro-fenola (21H) sa bis-halidom i bazom da se dobije bisfenol dimer 21J.
Postupak 21
2. udvajanje amida
2. EDC, baza
[0307] Postupak 22: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisani aminobenzimidazol (22A), izrađen jednim od postupaka koji su ovde opisani, reaguje sa bispirazolom (22B) u koji je inkorporirana linker grupa (C) i amid udvajajućim reagensima da se dobije dimerni bisamidobenzimidazol. Kada su na 22C prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju dodatna jedinjenja.
Postupak 22
[0308] Postupak 23: sve primenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Odgovarajuće supstituisani aminobenzimidazol (23A), izrađen jednim od ovde opisanih postupaka, reaguje sa bispirazol mono-karboksilnom kiselinom (23B) u koju je inkorporirana linker grupa (C) i amid udvajajućim reagensima da se dobije amidobenzimidazol estar kao što je 23C. Hidrolizom pirazol estra se dobija kiselina 23D, koja može da se udvoji sa drugim aminobenzimidazolom (23E) da se dobije dimerni bisamidobenzimidazol (23F). Kada su na 23F prisutne odgovarajuće funkcionalne grupe, moguća je dalja funkcionalizacija ovih grupa da se dobiju dodatna jedinjenja.
12
Postupak 23
[0309] Postupak 24: M<2>je C1-C6alkil grupa ili COOM<2>može da bude bilo koji estar koji je neaktivan na hidrogenolizu benzil estra. Sve druge promenljive su kako je definisano u Formuli (I-N), Formuli (I-P) ili Formuli (I). Supstituisani pirazol estar kao što je (pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-karboksilat (24D) može da se formira esterifikacijom supstituisanog 1H-pirazol-karboksilata (24A) da se dobije estar 24B a nakon toga N-alkilacijom pod odgovarajućim uslovima kao što su alkil halid i baza. U slučaju upotrebe (5-hloropent-1-in-1-il)trimetilsilana, naknadnom destilacijom se dobija pirazol estar 24D.4-jod-pirazol estar (24G) može da se formira esterifikacijom odgovarajuće pirazol-karboksilne kiseline (24E), a nakon toga jodinacijom sa 1-jodopirolidin-2,5-dionom (NIS). Udvajanjem alkilisanog pirazola kao što je 24D uz paladijum katalizator sa 4-jod-pirazol-estrom (24G) formira se vezani bispirazol (24H). Redukcijom i hidrogenolizom vezanog bispirazola se dobija bispirazol monokiselina (241), koja može dalje da se hidrolizuje da se dobije di bispirazolna kiselina 24J.
12
Postupak 24
[0310] Jasno je da u bilo kojoj od prethodno opisanih ruta precizan redosled faza sinteze kojima se različite grupe i radikali uvode u molekulu može da varira. Stručnjak sa iskukstvom u praki treba osigura da grupe ili radikali uvedeni u jednoj fazi procesa neće uticati na naredne transformacije i reakcije i u skladu sa tim izabere redosled faza sinteze.
[0311] Nazivi međuproizvoda i finalnih jedinjenja koja su ovde opisana su generisani korišćenjem softvera sa programom za imenovanje ChemDraw Pro 12.0.2.1076 Plug-In inside Perkin Elmer E-Notebook ili MarvinSketch 5.11.4_b82 (Chemaxon).
[0312] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će da bude jasno da u nekim slučajevima ovi programi mogu da imenuju strukturno opisano jedinjenje kao tautomer ili izomer tog jedinjenja. Jasno je da je bilo koja referenca za naziv jedinjenja ili strukturni opis jedinjenja treba da obuhvati sve tautomere ili izomere ovih jedinjenja i bilo koje smeše njihovih tautomera i/ili izomera.
[0313] Definicije za LCMS analize navedene u nastavku se primenjuju za sva jedinjenja.
12
LCMS Postupak: LCMS Postupak C Instrumenti
[0314]
12 LC: Shimadzu 10Avp (kontroler, pumpe i UV detektor) UV: Shimadzu 10AVp (214nm)
ELS: Sedere Sedex 75C (45C)
MS: PE Sciex Single Quadrupole 150EX
Polaritet (pozitivan); modalitet (profil); Vreme skeniranja (0.33s); Faza (0.2 m/z)
Kapilarnost V (5500); Kupa V (25-45)
ili Waters ZQ Single Quadrupole
Polaritet (pozitivan); Modalitet (kontinuiran); Vreme skeniranja (0.25s) Kapilarnost V (3500); Kupa V (25-35)
Autosampler: CTC Leap; 3uL petlja; podrazumevana zapremina injekcije = 2uL (podrazumevano)
Kolona: Thermo Hypersil Gold (C18, 20x2.1 mm, 1.9 u promer čestica.) Grejač: Phenomenex 50-55°C
Rastvarač A: H2O, 0.02% TFA
Rastvarač B: MeCN, 0.02% TFA
Gradijent: Vreme (min) Protok (mL/min) Rastvor B
0.02 1.4 4.0
1.90 95.0
1.91 4.0
2.00 Stop
LCMS Postupak: LCMS Postupak D
Instrumenti
[0315]
LC: Waters Acquity Binary solvent Manager, Kolona Manager 55C Autosampler: CTC Leap PAL Autosampler
UV: Waters Acquity PDA (210-360nm)
ELS: Waters Acquity ELSD (50C) ili Sedere Sedex 75C (45C) MS: Waters Acquity QDa Mass detector
12
Polaritet (pozitivan ili negativan); Modalitet (kontinuiran); Vreme skeniranja (0.15s) Kapilarnost V (3500); Kupa V (25-35);
Kolona: Thermo Hypersil Gold (C18, 20x2.1 mm, 1.9 u promer čestica.) Rastvarač A: H2O, 0.02% TFA
Rastvarač B: MeCN, 0.02% TFA
Gradijent: Vreme (min) Protok (mL/min) Rastvor B
0.02 1.6 2.0
1.90 95.0
1.91 stop 4.0
LCMS Postupak: LCMS Postupak E
Instrumenti
[0316]
LC: Waters Acquity I-Class Binary solvent Manager, Column Manager 55C Autosampler: CTC Leap PAL 3 Autosampler
UV: Waters Acquity PDA (210-360nm)
ELS: Waters Acquity ELSD (50C) ili Sedere Sedex 85C (45C)
MS: Waters Acquity QDa Mass Detector
Polaritet (pozitivan ili negativan); Modalitet (kontinuiran); Vreme skeniranja (10Hz) Kapilarnost kV (0.8); Kupa V (12);
Kolona: Thermo Hypersil Gold (C18, 20x2.1 mm, 1.9 u promer čestica.) Rastvarač A: H2O, 0.02% TFA
Rastvarač B: MeCN, 0.02% TFA
Gradijent: Vreme (min) Protok (mL/min) Rastvor B% 0.02 1.6 0.5 1.90 90 do 95 1.91 stop 0.5
LCMS Postupak: LCMS Postupak F
1
Instrumenti
[0317]
LC: Waters Acquity Binary Solvent Manager, Kolona Manager 55C Autosampler: CTC Leap PAL Autosampler
UV: Waters Acquity PDA (210-360nm)
ELS: Waters Acquity ELSD (50C) ili Sedere Sedex 75C (45C) MS: Waters Acquity SQD
Polaritet (pozitivan ili negativan); Modalitet (kontinuiran); Vreme skeniranja (0.15s) Kapilarnost V (3500); Kupa V (25-35);
Kolona: Waters BEH (C18, 30x2.1 mm, 1.7 u promer čestica.) Rastvarač A: H2O, 0.02% TFA
Rastvarač B: MeCN, 0.02% TFA
Gradijent: Vreme (min) Protok (mL/min) Rastvor B%
0.02 1.5 1.0 4.90 85.0 4.91 1.0 5.00 stop 1.0
LCMS Postupak: LCMS Postupak G
[0318] UPLC analize su izvedene na Acquity UPLC CSH C18 koloni (50mm x 2.1mm i.d.
1.7µm promer pakovanja) na 40 stepeni Celzijusa.
[0319] Korišćeni rastvarači su:
A = 0.1% v/v rastvor mravlje kiseline u vodi.
B = 0.1% v/v rastvor mravlje kiseline u acetonitrilu.
[0320] Korišćeni gradijent je:
1 1
Vreme (min) Brzina protoka (mL/min) %A %B
0 1 97 3
1.5 1 5 95
1.9 1 5 95
2.0 1 97 3
[0321] UV detekcija je zbir signala od talasne dužine 210nm do 350nm.
Zapremina injektiranja : 0.5ul
MS Uslovi
[0322]
MS : Waters ZQ
Modalitet jonizacije : Alternativno skeniranje pozitivno i negativno elektrosprej skeniranje
LCMS Postupak: LCMS Postupak H
[0323] UPLC analize su izvedene na Acquity UPLC CSH C18 koloni (50mm x 2.1mm i.d.
1.7µm promer pakovanja) na 40 stepeni Celzijusa.
[0324] Korišćeni rastvarači su:
A = 10 mM amonijum bikarbonata u vodi uz podešavanje pH na 10 sa rastvorom amonijuma. B = Acetonitril.
[0325] Korišćeni gradijent je:
Vreme (min) Brzina protoka (mL/min) %A %B
0 1 97 3
0.05 1 97 3
1.5 1 5 95
1.9 1 5 95
2.0 1 97 3
1 2
[0326] UV detekcija je zbir signala od talasne dužine 210nm do 350nm.
Zapremina injektiranja : 0.3ul
MS Uslovi
[0327]
MS : Waters ZQ
Modalitet jonizacije : Alternativno skeniranje pozitivno i negativno elektrosprej
LCMS Postupak: LCMS Postupak I
[0328] UPLC analize su izvedene na Acquity UPLC CSH C18 koloni (50mm x 2.1mm i.d.
1.7µm promer pakovanja) na 40 stepeni Celzijusa.
[0329] Korišćeni rastvarači su:
A = 10 mM H amonijum bikarbonat u vodi pH podešen na 10 sa 25% rastvorom amonijum hidroksida.
B = Acetonitril
[0330] Korišćeni gradijent je:
Vreme (min) Brzina protoka (mL/min) %A %B
0 1 97 3
0.05 1 97 3
1.5 1 5 95
1.9 1 5 95
2.0 1 97 3
[0331] UV detekcija je zbir signala od talasne dužine 210nm do 350nm.
Zapremina injektiranja: 0.5 uL
1
MS Uslovi
[0332]
MS : Waters Acquity SQD ili QDa mass detector Modalitet jonizacije : Alternativno skeniranje pozitivno i negativno
LCMS Postupak: LCMS Postupak J
[0333] UPLC analize su izvedene na Acquity UPLC CSH C18 koloni (50mm x 2.1mm i.d.
1.7µm promer pakovanja) na 40 stepeni Celzijusa.
[0334] Korišćeni rastvarači su:
A = 0.1% v/v rastvor mravlje kiseline u vodi.
B = 0.1% v/v rastvor mravlje kiseline u acetonitrilu.
[0335] Korišćeni gradijent je:
Vreme (min) Brzina protoka (mL/min) %A %B
0 1 97 3
1.5 1 5 95
1.9 1 5 95
2.0 1 97 3
[0336] UV detekcija je zbir signala od talasne dužine 210nm do 350nm.
Zapremina injektiranja: 0.5 uL
MS Uslovi
[0337]
MS : Waters Acquity SQD ili QDa mass detector Modalitet jonizacije : Alternativno skeniranje pozitivno i negativno
LCMS Postupak: LCMS Postupak K
[0338] UPLC analize su izvedene na Acquity UPLC CSH C18 koloni (50mm x 2.1mm i.d.
1 4
1.7µm promer pakovanja) na 40 stepeni Celzijusa.
[0339] Korišćeni rastvarači su:
A = 0.1% v/v rastvor TFA u vodi.
B = 0.1% v/v rastvor TFA u acetonitrilu.
[0340] Korišćeni gradijent je:
Vreme (min) Brzina protoka (mL/min) %A %B
0 1 97 3
1.5 1 5 95
1.9 1 5 95
2.0 1 97 3
[0341] UV detekcija je zbir signala od talasne dužine 210nm do 350nm.
Zapremina injektiranja: 0.5 uL
MS Uslovi
[0342]
MS: Waters Acquity SQD ili QDa mass detector Modalitet jonizacije: Alternativno skeniranje pozitivno i negativno elektrosprej
LCMS Postupak: LCMS Postupak L
Instrumenti
[0343]
LC: Waters Acquity I-Class Binary Solvent Manager, I-Class Kolona Manager 55C Autosampler: CTC PAL 3 Autosampler
UV: Waters Acquity PDA (210-360nm)
ELS: Sedere Sedex 85C (45C)
1
MS: Waters Acquity QDa Mass Detector
Polaritet (pozitivan ili negativan); Modalitet (kontinuiran); Vreme skeniranja (10Hz)
Kapilarnost kV (0.8); Kupa V (12);
Kolona: Thermo Hypersil Gold (C18, 20x2.1 mm, 1.9 u promer čestica.) Rastvarač A: H2O, 0.02% TFA
Rastvarač B: MeCN, 0.02% TFA
Gradijent: Vreme (min) Protok (mL/min) Rastvor B %
0.02 1.6 0.5
1.90 95
1.91 0.5
2.00 stop
LCMS Postupak: LCMS Postupak M
[0344] LCMS analize su izvedene na Waters Sunfire C18 koloni (50mm 33.0mm i.d. 5 µm dijametar pakovanja) na temperaturi sredine na Agilent 1200 HPLC sa modelom 6140 Quad MS.
Korišćeni rastvarači su:
A = 0.1% v/v rastvor TFA u vodi.
B = 0.1% v/v rastvor TFA u acetonitrilu.
[0345] Korišćeni gradijent je:
[0346] Talasna dužina UV detekcije (propusni opseg 8): 220nm i 254nm.
Zapremina injektiranja: 1ul
MS Uslovi
[0347]
1
MS: Agilent 6140 Quad MS Modalitet jonizacije: Pozitivan
LCMS Postupak: LCMS Postupak N
[0348] LCMS je izvedena na Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 (150mm x 4.6 mm, i.d.5 µm dijametar pakovanja) na temperaturi sredine na Agilent 1200 HPLC sa modelom 6140 Quad MS
[0349] Korišćeni rastvarači su:
A = 0.1% v/v rastvor TFA u vodi.
B = 0.1% v/v rastvor TFA u acetonitrilu.
[0350] Korišćeni gradijent je:
[0351] Talasna dužina UV detekcije (propusni opseg 8): 220nm i 254nm.
Zapremina injektiranja: 1ul
MS Uslovi
[0352]
MS: Agilent 6140 Quad MS
Modalitet jonizacije: pozitivan
[0353] U ovoj specifikaciji mogu da se koriste naredne skraćenice:
1
n l
1 (nastavlja se)
1 n l
Međuproizvod 1
Faza 1: 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzamid [0354]
14
[0355] Metil 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzoat (1000 mg, 4.07 mmol) se meša u NH4OH (10 mL, 77 mmol) na RT u toku 24 h. Temperatura reakcije se nakon toga poveća na 50 °C u toku 2 h. Doda se još 2 mL (~ 3.7 eq) NH4OH u posudu. Nakon dodatnih 2 h mešanja na 50 °C (4 h ukupno) reakcija se ohladi na RT. Čvrsta supstanca se filtrira i ispere sa hladnom vodom. Čvrsta supstanca se suši pod vakuumom i liofilizira da se dobije 4-hloro-3-metoksi- 5-nitrobenzamid (710 mg, 2.99 mmol, 73% prinos) kao čvrsta supstanca žutomrke boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.31 (br. s., 1 H), 8.06 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.81 (br. s., 1 H), 4.02 (s, 3 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.71 min, [M+H]<+>= 230.9.
Faza 2: 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamid
[0356]
[0357] 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzamid (1 g, 4.34 mmol) se suspenduje u bezvodnom DCM (15 mL) i meša na rt. U reakciju se u kapima doda BBr3(17.4 mL, 1M u DCM). Brzo se formira žitka smesa koja se meša u toku noći na rt u atmosferi azota. Reakcija se sipa u vodu sa ledom (300 mL) i meša energično 30 min. Dobijena suspenzija se filtrira i čvrste supstance suše da se dobije naslovljeno jedinjenje (610 mg, 2.82 mmol, 65% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.53 (br. s., 1 H), 8.17 (br. s., 1 H), 7.92 (s, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 7.66 (br. s., 1 H). LC-MS (LCMS Postupak D) Rt = 0.60 min, [M+H]<+>= 217.
Međuproizvod 2
4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0358]
Faza 1:
Etil 3-metil-1-(5-(trimetilsilil)pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilat
[0359]
[0360] Smeša etil 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (22 g, 143 mmol), (5-hloropent-1-in-1-il)trimetilsilana (24.94 g, 143 mmol), K2CO3(39.4 g, 285 mmol) i DMF (4 mL) se meša na 60 °C u toku noći u atmosferi gasa azota. Smeša se nakon toga rastvori u DCM i ispere sa vodom. Organska faza se suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira, koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobije etil 3-metil-1-(5-(trimetilsilil)pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilat (12.5 g, 42.7 mmol, 30% prinos) kao bezbojno ulje. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 2.43 min, [M+H]<+>= 293.
Faza 2:
Etil 3-metil-1-(pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilat
[0361]
[0362] Smeša etil 3-metil-1-(5-(trimetilsilil)pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilata (37.7 g, 129 mmol), K2CO3(44.5 g, 322 mmol) i EtOH (800 mL) se meša na rt u toku noći. Smeša nakon toga filtrira i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u DCM, ispere sa vodom, suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije etil 3-metil-1-(pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilat (20 g, 91 mmol, 70.4% prinos) kao bezbojno ulje. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 2.08 min, [M+H]<+>= 221.
Faza 3:
Benzil 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0363]
14
[0364] Smeša 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (20 g, 130 mmol), (bromometil)benzena (22.2 g, 130 mmol), K2CO3(26.9 g, 195 mmol) i DMF (200 mL) se meša na 60 °C u toku noći. Smeša se nakon toga rastvori u DCM, ispere sa vodom, suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira, koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobije benzil 1-etil-3-metil- pirazol-5-karboksilat (31.4 g, 129 mmol, 99% prinos) kao bezbojno ulje. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 2.09 min, [M+H]<+>= 245.
Faza 4:
Benzil 1-etil-4-jod-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0365]
[0366] Smeša benzil 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (31.6 g, 129 mmol), 1-jodopirolidin-2,5-diona (34.9 g, 155 mmol) i DMF (400 mL) se meša 2 dana na 90 °C. Smeša se nakon toga ostavi da se ohladi na rt, rastvori u DCM i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum tiosulfata. Organski sloj se suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira, koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobije benzil 1-etil-4-jod-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat (42.6 g, 115 mmol, 89% prinos). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 2.31 min, [M+H]<+>= 371.
Faza 5:
Benzil 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-1-in-1-il)-1-etil-3-metil-1Hpirazol-5-karboksilat
[0367]
[0368] Smeša etil 3-metil-1-(pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilata (10.0 g, 45.4 mmol), benzil 1-etil- 4-jod-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (16.8 g, 45.4 mmol), bakar(I) jodida (0.864g, 4.54 mmol), bis(trifenil-fosfin)paladijum(II) hlorida (0.319 g, 0.454 mmol) i Et3N (200 mL) se meša na 60 °C u toku noći u atmosferi gasa azota. Smeša se nakon toga rastvori u DCM i ispere sa vodom. Organska faza se suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira, koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 5:1) da se dobije benzil 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-1-in- 1-il)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat (9.5 g, 20.5 mmol, 45.3% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak B): Rt = 2.66 min, [M+H]<+>= 463.
Faza 6:
4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0369]
[0370] Smeša benzil 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-1-in-1-il)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (19.0 g, 41.10 mmol), 10% Pd/C (0.22 g, 2.05 mmol) i THF
14
(500 mL) se meša 2 dana na rt u atmosferi gasa vodonika (4 atm). Reaktivna smeša se nakon toga filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se rekristališe iz smeše EtOAc/petrol etar (1:5, v/v) da se dobije 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-pirazol-5-karboksilna kiselina (10.5 g, 27.90 mmol, 67.9% prinos).
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ NMR (400 MHz, CDCl, v/v) da se dobije 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-pirazol-5-karboksilna kiselina (10.5 g, 27.90 mmol, 67.9% prinos).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.63 (s, 1H), 4.57-4.48 (m, 4H), 4.38-4.32 (m, 2H), 2.74-2.62 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.91-1.86 (m, 2H), 1.59-1.54 (m, 2H), 1.45-1.37 (m, 8H). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.59 min, [M+H]<+>= 377.
Faza 7:
4-4-(7-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)heptil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0371]
[0372] U suspenziju 4-(5-(5-(etoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol- 5-karboksilne kiseline (9.0 g, 23.9 mmol) u MeOH (120 mL) i vode (120 mL) izmešane na rt se doda 2 M vodeni rastvor NaOH (60 mL, 119.5 mmol). Reaktivna smeša se meša na rt u toku 30 min. Smeša se nakon toga zakiseli do pH 4 dodavanjem 6 M rastvora HCI nakon čega čvrsta supstanca precipitira iz reaktivne smeše. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i suši pod sniženim pritiskom da se dobije 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (6.5 g, 18.7 mmol, 78.1% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6.57 (s, 1H), 4.40-4.34 (m, 4H), 2.53 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.74-1.67 (m, 2H), 1.44-1.37 (m, 2H), 1.27-1.16 (m, 5H). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.40 min, [M+H]<+>= 349.
14
Međuproizvod 3
(3-Bromopropoksi)(terc-butil)dimetilsilan
[0373]
imidazol
[0374] U 1H-imidazol (13.4 g, 197 mmol) u DCM (100 mL) se doda 3-bromopropan-1-ol (13.7 g, 99 mmol) a nakon toga se polako dodaje terc-butilhlorodimetilsilan (17.8 g, 118 mmol) u DCM (20 ml). Nakon 3 h na RT, reakcija se koncentruje do ~100 mL i sipa u EtOAc (800 mL), ispere sa 5% vodenim rastvorom limunske kiseline (23200 mL) i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (10.0 g, 39.5 mmol, 40 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ ppm 3.78 (t, J=5.70 Hz, 2 H), 3.56 (t, J=6.46 Hz, 2 H), 2.07 (t, J=5.83 Hz, 2 H), 0.94 (s, 9 H), 0.11 (s, 6 H).
Međuproizvod 4
2,2,3,3- Tetrafluorobutan-1,4-diamin
[0375]
14
Faza 1: 2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil bis(4-metilbenzensulfonat)
[0376]
[0377] U 2,2,3,3-tetrafluorobutan-1,4-diol (10.0 g, 61.7 mmol) u piridinu (150 mL) se na 0 °C u toku 5 min dodaje 4-metilbenzen-1-sulfonil hlorid (29.4 g, 154 mmol) i nakon toga se reakcija zagreje na 55 °C. Nakon 1 dan, reakcija se neutrališe sa ledenom vodom i dobijena čvrsta supstanca sakupi filtriranjem, rastvori u DCM (200 mL) i ispere sa 5 % vodenim rastvorom H2SO4(100 mL X 3). Organski sloj se suši preko Na2SO4i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (27.3 g, 58.0 mmol, 94 % prinos) kao bela čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.750 min, [M+H]<+>= 470.9
Faza 2: 1,4-Diazido-2,2,3,3-tetrafluorobutan
[0378]
14
[0379] 2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil bis(4-metilbenzensulfonat) (10.0 g, 21.3 mmol) i natrijum azid (5.53 g, 85.0 mmol) u DMF (40 mL) se mešaju na 110 °C u toku noći. Reakcija se neutrališe sa NaClO (aq) i ekstrahuje sa DCM (5 mL X 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa vodom (10 mL), suše preko Na2SO4i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.5 g, 16.5 mmol, 78 % prinos). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.520 min, [M+H]<+>= 213.1
Faza 3: 2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diamin
[0380]
[0381] U rastvor 1,4-diazido-2,2,3,3-tetrafluorobutana (36.0 g, 170 mmol) u MeOH (350 mL) se doda 10 % Pd na ugljeniku (18.1 g, 17.0 mmol). Reaktivna smeša se meša 16 sati na 40 °C u atmosferi vodonika (4 atm). Smeša se filtrira kroz celite ploču, ispere sa MeOH i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (22.0 g, 124 mmol, 73 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ ppm 3.12 - 3.37 (m, 4 H), 1.43 (br. s., 4 H).
Međuproizvod 5
1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil izotiocijanat
[0382]
14
[0383] U bocu okruglog dna zapremine 1L se dodaju 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (25 g, 162 mmol) i DCM (500 mL). U ovaj heterogeni rastvor se doda DMF (0.1 mL, 1.291 mmol) a nakon toga se polako dodaje oksalil hlorid (15.61 mL, 178 mmol). Tokom dodavanja, uočava se pojava mehurića. Nakon 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, isparive supstance se uklone pod vakuumom a sirove se dva puta upare sa dihlormetanom (100 mL each). Pretpostavlja se da je prinos 100% i sirovi (1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil hlorid (28.0 g, 162 mmol, 100 % prinos)) se kao takav direktno koristi u sledećoj reakciji.
[0384] U suvu bocu okruglog dna zapremine 1L se dodaju KSCN (18.92 g, 195 mmol) i aceton (463 ml). Bistar homogeni rastvor se ohladi na 0 °C. Nakon 5 min mešanja na 0 °C doda se 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil hlorid (28 g, 162 mmol) kao rastvor u acetonu (25 mL). Kada je dodavanje završeno, reakcija se ostavi da se meša na 0 °C. Nakon 1 min. doda se još KSCN (~2 g) i reakcija se meša dodatnih 20 min. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda heksan (200 mL) i sirovi heterogeni rastvor se koncentruje pod vakuumom do jedne trećine zapremine. Postupak dodavanja heksana i koncentracije se ponovi dva puta (300 mL heksana svaki put). Nakon poslednje koncentracije, dodaju se heksani (200 mL) i čvrsta supstanca se ukloni filtriranjem i ispere sa heksanima (100 mL). Dobijeni bistar svetlo žuti filtrat se koncentruje i prečisti hromatografijom (330g Gold silika gel kolona; uz eluiranje sa 0-20% EtOAc / heksani). Željeni produkt eluira na ~7% EtOAc / heksani. Željene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobije 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil izotiocijanat (27.5 g, 139 mmol, 86 % prinos) kao bistra bezbojna tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ ppm 6.77 (s, 1 H), 4.54 (q, J=7.10 Hz, 2 H), 2.34 (s, 3 H), 1.44 (t, J=7.22 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.16 min, [M+H]<+>= 196.1.
Acilizotiocijanat produkt degradira vremenom zbog čega se izradi ~0.4 M rastvora 1,4-dioksana i zamrzne da se izbegne spora dekompozicija. Ovaj rastvor se odmrzne i koristi direktno u narednim reakcijama.
Međuproizvod 6
(E)-1-(4-Aminobut-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid hidrohlorid
[0385]
1
Faza 1: (E)-terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat
[0386]
[0387] Smeša 4-fluoro-3-nitrobenzamida (10.0 g, 54.3 mmol), (E)-terc-butil (4-aminobut-2-en-1-il)karbamata (10.62 g, 57.0 mmol) i K2CO3(15.01 g, 109 mmol) u DMSO (200 mL) se meša na RT u toku noći. Reakcija se sipa u vodu (2000 mL) i meša 30 min. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (18.3 g, 52.2 mmol, 96 % prinos). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.38 min, 2M+H]<+>= 700.5
Faza 2: (E)-terc-butil (4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat
1 1
[0389] U (E)-terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat (18.3 g, 52.2 mmol) u DMF (300 mL) se doda kalaj hlorid dihidrat (58.9 g, 261 mmol). Nakon mešanja na RT u toku noći, reakcija se u kapima sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(2000 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (5 X 500 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje (16.5 g, 51.5 mmol, 99 % prinos) kao žuto ulje. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.275 min, [M-BOC+H]<+>= 221.1
Faza 3: (E)-terc-butil (4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)karbamat
[0390]
[0391] Smeša (E)-terc-butil (4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)but-2-en-1-il)karbamata (16.5 g, 51.5 mmol) i cijanogen bromida (8.18 g, 77 mmol) u THF (200 mL) se zagreva na refluksu u toku noći. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(500 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (5 X 300 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se
1 2
prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 50:1 do 20:1 DCM u MeOH (+ 3 % NH4OH) da se dobije naslovljeno jedinjenje (13.7 g, 39.7 mmol, 77 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.150 min, [M+H]<+>= 346.1
Faza 4: (E)-terc-butil (4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but- 2-en-1-il)karbamat
[0392]
[0393] U 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (9.17 g, 59.5 mmol) u DCM (500 mL) se na 0 °C dodaju EDC (20.53 g, 107 mmol) i HOBT (18.22 g, 119 mmol). Nakon 15 min, doda se smeša (E)-terc-butil(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)karbamata (13.7 g, 39.7 mmol) u DMF (50 mL), a nakon toga TEA (27.6 mL, 198 mmol). Reakcija se zagreje na RT, meša u toku noći i koncentruje. Ostatak se razblaži sa vodom (500 mL), ekstrahuje sa etil acetatom (3 X 300 mL) i kombinovane organske faze se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 50:1 do 20:1 DCM: MeOH da se dobije sirovi produkt koji se ispere sa DCM (300 mL) i sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (14.0 g, 29.1 mmol, 73 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (s, 1 H), 8.00 - 7.97 (m, 2 H), 7.80 - 7.78 (m, 1 H), 7.49 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.34 (s, 1 H), 6.95 (t, J=5.5 Hz, 1 H), 6.66 (s, 1 H), 5.73 - 5.65 (m, 2 H), 4.83 (d, J=4.3 Hz, 2 H), 4.62 (q, J=7.0 Hz, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 1.38 - 1.33 (m, 12 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.409 min, [M+H]<+>= 482.0
Faza 5: (E)-1-(4-Aminobut-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid hidrohlorid
1
[0395] U suspenziju (E)-terc-butil (4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)karbamata (3.00 g, 6.23 mmol) u dioksanu (60 mL) se doda 4N rastvor HCl u dioksanu (15.6 mL, 62.3 mmol), a nakon toga se doda MeOH (15 mL) da se rastvore neke preostale čvrste supstance. Nakon 30 min na RT, reaktivna smeša postaje mutna i ostavi se da se meša približno 3 dana. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.0 g, 4.8 mmol, 77 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.97 - 8.09 (br. s., 1 H), 7.82 (d, J=8.11 Hz, 1 H), 7.50 (d, J=8.11 Hz, 1 H), 7.38 (br. s., 1 H), 6.70 (s, 1 H), 5.97 - 6.08 (m, 1 H), 5.68 - 5.80 (m, 1 H), 4.91 (d, J=4.31 Hz, 2 H), 4.60 (q, J=6.67 Hz, 2 H), 3.42 (br. s., 2 H), 2.18 (s, 3 H), 1.36 (t, J=6.97 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.53 min, [M+H]<+>= 382.2
Međuproizvod 7
1-(5-(5-(etoksikarbonil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4-il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0396]
1 4
Faza 1: benzil 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0397]
[0398] Smeša 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (50 mg, 0.396 mmol) i KHCO3(47.6 mg, 0.476 mmol) u DMSO (2 mL) se meša 30 min i doda se (bromometil) benzen (0.045 mL, 0.377 mmol). Smeša se meša 4 h na RT, razblaži sa EtOAc (20 mL), ispere sa vodom i slanim rastvorom i suši preko Na2SO4. Smeša se filtrira i koncentruje i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (Combiflash, 0-50 % EtOAc u heksanima) da se dobije naslovljeno jedinjenje (66 mg, 0.305 mmol, 77 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.19 (br. s., 1 H) 7.34 - 7.48 (m, 5 H) 6.52 (s, 1 H) 5.29 (s, 2 H) 2.27 (s, 3 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.86 min, [M+H]<+>= 216.9.
1
Faza 2: benzil 3-metil-1-(pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilat
[0399]
[0400] Smeša DIAD (25.9 mL, 133 mmol) i trifenilfosfina (34.9 g, 133 mmol) u tetrahidrofuranu (THF) (600 mL) se meša 30 min na 0 °C a nakon toga se doda pent-4-in-1-ol (11.36 mL, 122mmol). Smeša se meša 30 min i doda se benzil 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat (24 g, 111 mmol). Smeša se ostavi da se zagreje na RT i meša u toku noći.
Reakcija se razblaži sa EtOAc (1000 mL), ispere sa zasićenim NaHCO3i slanim rastvorom, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Uljani ostatak se tretira sa 10 % EtOAc u heksanu (500 mL) i formira se beli precipitat. Precipitat se izdvoji filtriranjem i ispere sa 10 % EtOAc u heksanu. Kombinovani filtrati se koncentruju i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (Combiflash, 0-15 % EtOAc u heksanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje (27.5 g, 97 mmol, 88 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.34 -7.47 (m, 5 H) 6.68 (s, 1 H) 5.33 (s, 2 H) 4.63 (t, J=7.03 Hz, 2 H) 2.30 (s, 3 H) 2.19 - 2.26 (m, 2 H) 2.09 (quin, J=7.09 Hz, 2 H) 1.97 (br. s., 1 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.21 min, [M+H]<+>= 283.0.
Faza 3: etil 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0401]
[0402] Oksalil hlorid (5.68 ml, 64.9 mmol) se na RT doda u suspenziju 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (5 g, 32.4 mmol) u DCM (40 mL) u atmosferi N2i dodaju se
1
dve kapi DMF. Smeša se meša 2 sata na RT, koncentruje i suši pod vakuumom. Doda se etanol (50 ml, 856 mmol) i smeša se meša 1 sat na RT. Reakcija se koncentruje i suši pod vakuumom da se dobije svetlo žuto ulje koji se prenese u EtOAc (100 mL), ispere sa zasićenim NaHCO3i slanim rastvorom, suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje i dobijeni ostatak se suši pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (5.5 g, 30.2 mmol, 93 % prinos) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 6.63 (s, 1 H) 4.56 (q, J=7.11 Hz, 2 H) 4.35 (q, J=7.11 Hz, 2 H) 2.30 (s, 3 H) 1.44 (t, J=7.28 Hz, 3 H) 1.39 (t, J=7.28 Hz, 3 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 0.81 min, [M+H]<+>= 183.1.
Faza 4: etil 1-etil-4-jod-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0403]
[0404] Smeša etil 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (5.5 g, 30.2 mmol) i NIS (8.15 g, 36.2 mmol) u DMF (100 mL) se zagreva na 90 °C i meša 3 dana u atmosferi N2. Reakcija se ohladi na RT, razblaži sa EtOAc (200 mL), ispere sa zasićenim Na2S2O3, 5 % LiCl i slanim rastvorom, suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje i dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (Combiflash, 0-7 % EtOAc u heksanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje (9.1 g, 29.5 mmol, 98 % prinos) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.57 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 4.43 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 2.32 (s, 3 H) 1.45 - 1.50 (m, 3 H) 1.39 - 1.45 (m, 3 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.12 min, [M+H]<+>= 308.9.
Faza 5: 1 etil 4-(5-(5-((benziloksi)karbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-1-in-1-il)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0405]
1
[0406] Boca koja se prethodno prečisti sa azotom se napuni sa CS2CO3(23.08 g, 70.8 mmol), 1,10- fenantrolinom (1.915 g, 10.63 mmol), bakar(I) hloridom (0.175 g, 1.771 mmol), benzil 3-metil-1-(pent-4-in-1-il)-1H-pirazol-5-karboksilatom (10 g, 35.4 mmol), etil 1-etil-4-jod-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilatom (13.10 g, 42.5 mmol), Pd[P(o-tollil)3]2(0.760 g, 1.063 mmol) i degasiranim toluenom (100 mL). Smeša se degasira 15 min, zagreje na 100 °C i meša u toku noći (18 hr) u atmosferi N2. Reakcija se ohladi na RT i razblaži sa EtOAc. Neorganske čvrste supstance se izdvoje filtriranjem i isperu sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se koncentruju i ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu (EtOAc/heksani 0-25%) da se dobije naslovljeno jedinjenje (11.38 g, 24.60 mmol, 69.5 % prinos) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.34 - 7.47 (m, 5 H) 6.68 (s, 1 H) 5.31 (s, 2 H) 4.67 (t, J=7.03 Hz, 2 H) 4.51 (q, J=7.19 Hz, 2 H) 4.39 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 2.51 (t, J=7.28 Hz, 2 H) 2.31 (s, 3 H) 2.29 (s, 3 H) 2.17 (t, J=7.15 Hz, 2 H) 1.40 (t, J=7.03 Hz, 6 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.43 min, [M+H]<+>= 463.3.
Faza 6: 1-(5-(5-(etoksikarbonil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4-il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0407]
[0408] U bocu napunjenu sa etil 4-(5-(5-((benziloksi)karbonil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-1-in-1-il)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilatom (11.3 g, 24.43 mmol) i Pd/C (2.60g, 2.443 mmol) se doda etanol (200 mL). Boca se prečisti sa N2, nakon toga sa vodonikom (preko balona) i smeša se meša u atmosferi H2u toku noći (18 hr). Katalizator se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.89 g,
1
23.62 mmol, 97 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.14 (br. s., 1 H) 6.57 (s, 1 H) 4.33 - 4.43 (m, 4 H) 4.28 (m, J=7.09 Hz, 2 H) 2.51 - 2.56 (m, 2 H) 2.16 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 1.72 (m, J=7.34 Hz, 2H) 1.41 (m, J=7.58 Hz, 2 H) 1.25 -1.31 (m, 6 H) 1.16 - 1.24 (m, 2 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.07 min, [M+H]<+>= 377.2.
Referentni Primer 1
1,1’-((2R,3R)-2,3-dihidroksibutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0409]
1
[0411] Smeša ((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen) bis(4-metilbenzensulfonata) (3.874 g, 8.23 mmol) i natrijum azida (1.338 g, 20.58 mmol) u DMF (20 mL) se zagreva 15 h na 80 °C. Reakcija se koncentruje pod vakuumom da se ukloni DMF i ostatak se rastvori u smeši DCM/voda. Dvofazni rastvor se prenese u levak za razdvajanje i slojevi se razdvoje. DCM sloj se dva puta ispere sa vodom i jedanput sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje bledo žuta tečnost (1.564 g; 7.37 mmol, 90% prinos).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.10 (dd, J=2.78, 1.26 Hz, 2 H) 3.55 - 3.66 (m, 2 H) 3.32 - 3.44 (m, 2 H) 1.51 (s, 6 H).
1
LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.89 min, [M+H]<+>= 214.0
Faza 2: ((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)dimetanamin
[0412]
[0413] U rastvor (4R,5R)-4,5-bis(azidometil)-2,2-dimetil-1,3-dioksolana (1.561 g, 7.36 mmol) u bezvodnom THF (30 mL) se na rt u otvorenu RB bocu zapremine 250 mL u kapima u toku 10 min dodaje 2M rastvor LiAlH4u THF (3.68 mL, 7.36 mmol). Reakcija se nakon toga razblaži sa THF (30 mL) i smeša se meša 30 min. Reakcija se neutrališe dodavanjem 1.24 mL zasićenog vodenog rastvora Na2SO4u kapima. Neutralisana žuta reakcija se meša 10 min i nakon toga ostavi da miruje. Dobijena čvrsta supstanca se ukloni filtriranjem i filtrat se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bledo žuto ulje (977 mg, 6.1 mmol, 83% prinos).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 3.72 -3.91 (m, 2 H) 2.71 - 3.11 (m, 4 H) 1.18 - 1.65 (m, 6 H). LCMS (LCMS Postupak C):
Rt.=0.11 min, [M+H]<+>= 161.0
Faza 3: 4,4’-((((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid)
[0414]
1 1
[0415] Smeša 4-fluoro-3-nitrobenzamida (2.233 g, 12.13 mmol), ((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)dimetanamina (0.9713 g, 6.06 mmol) i K2CO3(1.843 g, 13.34 mmol) u DMSO (20 mL) se meša 90 min na 70 °C. Reakcija se malo ohladi i razblaži sa 200 mL vode. Dobijena narandžasta suspenzija se energično meša 60 min, izdvoji filtriranjem i filtrirana čvrsta supstanca se suši u Buchner levku 20 min. Malo vlažna čvrsta supstanca se prenese u menzuru koja sadrži Et2O i čvrsta supstanca se dalje usitni sa špatulom da se ukloni višak vode iz čvrste supstance. Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, prenese u RB bocu zapremine 250 mL i suši 3 dana na 56 °C u vakuumskoj pećnici da se dobije naslovljeni produkt (2.31 g, 4.73 mmol, 78% prinos) kao žuti prašak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.66 (d, J=2.27 Hz, 2 H) 8.50 (t, J=5.56 Hz, 2 H) 7.98 - 8.10 (m, 4 H) 7.34 (br. s., 2 H) 7.19 (d, J=9.09 Hz, 2 H) 4.22 (br. s., 2 H) 3.64 - 3.86 (m, 4 H) 1.38 (s, 6 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt =0.78 min, [M+H]<+>= 489.2
Faza 4: 4,4’-((((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(azanediil))bis(3-aminobenzamid)
[0416]
[0417] Smeša 4,4’-((((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen)) bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamida) (2.293 g, 4.69 mmol) i 10% vlažnog Pd/C (230 mg) u NMP (25 mL) se iz RB boce zapremine 250 mL iznese i stavi 18 h u balon vodonika na rt a nakon toga zagreva 20 h na 80 °C. Reakcija se nakon toga ohladi i filtrira kroz Celite® uz ispiranje sa 4 mL NMP. Filtrat koji sadrži produkt se koristi direktno u sledećoj reakciji kao rastvor u NMP. LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.50 min, [M+H]<+>= 429.2
1 2
Faza 5: 1,1’-(((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 hidrobromid
[0418]
[0419] Rastvor 4,4’-((((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))-bis(azanediil))bis(3-aminobenzamida) (1.0 g, 2.334 mmol) u NMP (16 mL) se tretira sa cijanogen bromidom (0.618 g, 5.83 mmol) i homogena reakcija se meša 3 sata na rt. Doda se još cijanogen bromida (0.618 g) i reakcija se meša 18 sati na rt. Nakon toga se doda još cijanogen bromida (1.236 gm, 5.0 eq.) i reakcija se meša na rt. Nakon 5.5 sati, reakcija se 55 min zagreva na 72 °C, ohladi i razblaži sa 160 mL EtOAc. Dobijena suspenzija se meša 20 min i čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, uz ispiranje sa EtOAc. Dobijena tamno zelena higroskopna čvrsta supstanca se prenese u bočicu i suši u vakuumskoj pećnici 3 dana na 40 °C da se dobije naslovljeni produkt (1.35 g, 2.11 mmol, 90% prinos) kao tamno braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.99 (br. s., 1 H) 8.87 (br. s., 3 H) 8.10 (br. s., 2 H) 7.85 - 7.91 (m, 4 H) 7.68 (d, J=9.09 Hz, 2 H) 7.49 (br. s., 2 H) 4.69 - 4.76 (m, 2 H) 4.55 - 4.63 (m, 2 H) 4.36 (br. s., 2 H) 1.25 (s, 6 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.40 min, [M+H]<+>= 479.2
Faza 6: 1,1’-(((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0420]
1
[0421] Smeša 1,1’-(((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida), 2 hidrobromida (0.6647 g, 1.038 mmol), 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (0.32 g, 2.076 mmol), HATU (0.868 g, 2.284 mmol) i DIPEA (1.088 mL, 6.23 mmol) u NMP (4 mL) se zagreva 30 min na 140 °C u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija se prečisti direktno preko reverzne faze HPLC (Gilson®, 13-43% MeCN/0.1%TFA voda, 15 min gradijent, Luna kolona). Tražene frakcije se kombinuju, koncentruju pod vakuumom i ostave 15 h pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeni produkt (140.0 mg, 0.143 mmol, 13.7% prinos) kao tamno zelena čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.94 (br. s., 2 H) 7.98 (s, 4 H) 7.66 - 7.76 (m, 2 H) 7.47 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 7.38 (br. s., 2 H) 6.86 (s, 2 H) 4.75 (d, J=10.11 Hz, 2 H) 4.55 - 4.69 (m, 6 H) 4.40 (br. s., 2 H) 2.05 (s, 6 H) 1.37 (t, J=7.20 Hz, 6 H) 1.14 (s, 6 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.84 min, [M+H]<+>= 751.6
Faza 7: 1,1’-((2R,3R)-2,3-dihidroksibutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0422]
1 4
[0423] 1,1’-(((4R,5R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4,5-diil)bis(metilen))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline (113.8 mg, 0.116 mmol) se rastvori u mravljoj kiselini (3.0 mL) i vodi (0.3 mL) i meša 4 dana na rt. Reakcija se koncentruje pod vakuumom na rt da se dobije zelena čvrsta supstanca. Sirova čvrtsta supstanca se razblaži sa 1.4 mL DMSO i prečisti pomoću HPLC (Gilson® Autoprep, kisela Luna kolona, 5-35% MeCN: 0.1%TFA voda, 7 min gradijent). Tražene frakcije se koncentruju pod vakuumom i ostave 3 dana pod visokim vakuumom da se dobije 1,1’-((2R,3R)-2,3-dihidroksibutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline (27 mg, 0.029mmol, 24.7% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.89 (br. s., 2 H) 8.00 (s, 4 H) 7.79 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.55 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.35 (br. s., 2 H) 6.59 (s, 2 H) 5.50 (br. s, 2H), 4.51 - 4.67 (m, 4 H) 4.27 - 4.47 (m, 4 H) 4.09 (br. s., 2 H) 2.09 (s, 6 H) 1.32 (t, J=7.07 Hz, 6 H). LCMS (LCMS Postupak C): rt=0.67 min, [M+H]<+>= 711.6.
Referentni Primer 2
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0424]
1
Faza 1: 1-alil-2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromid
[0425]
[0426] U rastvor 4-fluoro-3-nitrobenzamida (10.0 g, 54.3 mmol) u DMF (60 mL) se u kapima na rt doda alilamin (36.6 mL, 489 mmol) i smeša se meša 5 min. Nakon ovog perioda, u jednoj porciji se doda K2CO3(15.01 g, 109 mmol) i smeša se meša 30 min na rt. DMF se nakon toga ukloni pod vakuumom, ostatak se suspenduje u 500 mL vode, a dobijeni narandžasti precipitat se izdvoji filtriranjem, ispere sa vodom i suši pod vakuumom.
[0427] Gore dat precipitat se rastvori u AcOH (600.0 mL), boca se na 20 °C stavi vodeno kupatilo i pažljivo se dodaje cink (10.65 g, 163 mmol) u malim porcijama. Reakcija se prati pomoću LCMS i u malim porcijama se doda nova količina cinka (približno 3 eq) koliko je potrebno dok se reakcija ne završi. Završetak reakcije se proceno pomoću LCMS a čvrste supstance se izdvoje filtriranjem i filtrat koncentruje pod vakuumom. Ostatak evaporacije se
1
prenese u DCM (500 mL) i EtOH (150 mL) i ispere sa 15% aq. K2CO3(100 mL). Organski sloj se izdvoji, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje pod vakuumom.
[0428] Prethodno dat ostatak evaporacije se rastvori u MeOH (200.0 mL), u jednoj porciji se brzo doda 5.0 M rastvor cijanogen bromida u CH3CN (11.95 mL, 59.7 mmol) i smeša se meša 18 hr na rt. Nakon tog period, reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom, a nakon toga ponovo rastvori u MeOH (200.0 mL). Doda se smeša toluena (100 mL) i CH3CN (100 mL) i dobijena smeša se koncentruje do sušenja na 40 °C (0-1 mbar) i suši pod vakuumom 16 h da se dobije 1-alil-2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromid (11.3 g, 38.0 mmol, 70.0% prinos) kao tamnoljubičasti prašak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.83 (s, 2 H), 8.07 (br. s., 1 H), 7.88 (d, J=1.00 Hz, 1 H), 7.82 (dd, J=8.41, 1.38 Hz, 1 H), 7.52 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 7.43 (br. s., 1 H), 5.87 - 6.02 (m, 1 H), 5.25 (dd, J=10.42, 0.88 Hz, 1 H), 5.17 (dd, J=17.32, 1.00 Hz, 1 H), 4.84 (d, J=5.02 Hz, 2 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.38 min, [M+H]<+>= 216.9.
Faza 2: 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0429]
[0430] RB boca zapremine mL 100 se napuni sa 1-alil-2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromidom (2.5 g, 8.41 mmol), HATU (3.52 g, 9.25 mmol), 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnom kiselinom (1.427 g, 9.25 mmol) i NMP (25 mL). Nakon 1 minut mešanja na rt, doda se DIPEA (7.33 mL, 42.1 mmol) i smeša se meša 40 h na rt. Nakon ovog perioda, doda se 2.0 mL vode i smeša se meša 30 min na rt. Smeša se nakon toga sipa u 500 mL ledeno hladne vode i energično meša 1 h. Tamnoljubičasta čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, doda se slani rastvor (100 mL) i sledeći prinos nešto svetlijeg precipitata se izdvoji filtriranjem. Dobijeni bistar ružičasti filtrat se ostavi 4 dana da stoji na rt nakon čega se najsvetliji ružičasti precipitat izdvoji iz rastvora. Ovaj finalni precipitat se izdvoji
1
filtriranjem, ispere sa vodom i suši na vazduhu da se dobije 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (1.88 g, 5.33 mmol, 63.4% prinos) kao bledo ružičast prašak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.96 (br. s., 1 H), 7.78 (dd, J=8.44, 1.59 Hz, 1 H), 7.46 (d, J=8.31 Hz, 1 H), 7.32 (br. s., 1 H), 6.66 (s, 1 H), 5.94 - 6.05 (m, 1 H), 5.21 (dd, J=10.27, 1.22 Hz, 1 H), 5.15 (dd, J=17.12, 1.22 Hz, 1 H), 4.86 (d, J=5.14 Hz, 2 H), 4.61 (q, J=6.93 Hz, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 1.35 (t, J=7.09 Hz, 3 H) LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 0.75 min, [M+H]<+>= 353.2.
Faza 3: (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0431]
[0432] U rastvor 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (70 mg, 0.199 mmol) u DCM (1.0 mL) i MeOH (1.0 mL) se u kapima doda rastvor p-toluensulfonske kiseline monohidratne (37.8 mg, 0.199 mmol) u MeOH (1.0 mL) i dobijeni bistar rastvor se koncentruje pod vakuumom. Staklasti ostatak evaporacije se meša sa DCM (4.0 mL) dok se ne dobije mlečna suspenzija. U 5 mL Biotage® zatvorenu epruvetu se u atmosferi N2doda Hoveyda-Grubbs 2nd gen. katalizator (18.67 mg, 0.030 mmol). Nakon toga se doda navedena mlečna suspenzija i smeša se zagreva 4 h na 80 °C u mikrotalasnom reaktoru. Nakon ovog perioda, doda se 5.0 mL MeOH, a nakon toga 1.0 M rastvor KHMDS u THF (0.25 mL) u MeOH (1.0 mL). Smeša se meša 5 min na rt, koncentruje pod vakuumom i podvrgne normalnoj fazi hromatografije na silika gelu (Biotage® Ultra SNAP 25 g silika gela kertridž; 0-40% gradijent MeOH/DCM) da se dobije zelenkasto bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se nakon toga ispere sa 0.2 mL MeOH da se ukloni tamno zeleni rutenijum ostatak i da se dobije (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-
1
1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (14 mg, 0.02 mmol, 19.8% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.82 (br. s., 2 H), 7.97 (s, 2 H), 7.94 (br. s, 2 H), 7.71 (dd, J=8.34, 1.26 Hz, 2 H), 7.44 (d, J=8.34 Hz, 2 H), 7.34 (br. s., 2 H), 6.55 (s, 2 H), 5.93 (br. s., 2 H), 4.83 (br. s., 4 H), 4.53 (q, J=6.82 Hz, 4 H), 2.12 (s, 6 H), 1.27 (t, J=7.07 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.79 min, [M+H]<+>= 677.5.
[0433] Jedinjenja izrađena po prethodno datom postupku mogu da egzistiraju u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (2E,2’E)- 1,1’-((E)-but-2-en-1,4-diil)bis(2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol- 5-karboksamid)
Referentni Primer 3
1,1’-((Metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), so trifluorosirćetne kiseline
[0434]
1
Faza 1:
4,4’-(((Metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid)
[0435]
[0436] Smeša N1-(2-aminoetil)-N<1>-metiletan-1,2-diamina (0.318 g, 2.72 mmol), K2CO3(1.501 g, 10.86 mmol) i 4-fluoro-3-nitrobenzamida (1 g, 5.43 mmol) u DMSO (20 mL) se meša na rt u toku noći. Doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i suši pod
1
sniženim pritiskom da se dobije 4,4’-(((metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid) (800 mg, 1.62 mmol, 59.6% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.01 min, [M+H]<+>= 446.
Faza 2:
1,1’-((Metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0437]
[0438] 4,4’-(((Metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid) (700 mg, 1.572 mmol) i 10% Pd/C (84 mg, 0.079 mmol) u NMP (20 mL) i MeOH (30 mL) se meša na rt u atmosferi gasa vodonika u toku noći. Katalizator se ukloni filtriranjem i MeOH se ukloni pod sniženim pritiskom. Nakon toga se doda cijanogen bromid (416 mg, 3.93 mmol) i reaktivna smeša se meša 4 h na 60 °C. Doda se Et2O i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i suši pod sniženim pritiskom da se dobije 1,1’-((metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-amino-benzo-1H-[d]imidazol-5-karboksamid) (500 mg, 1.03 mmol, 65.8% prinos) kao crvena čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 0.94 min, [M+H]<+>= 435.8.
Faza 3:
1,1’-((Metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) so trifluorosirćetne kiseline
[0439]
1 1
[0440] U smešu 1,1’-((metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida) (300 mg, 0.689 mmol), 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (212 mg, 1.378 mmol), HOAt (281 mg, 2.067 mmol) i EDC hidrohlorida (396 mg, 2.067 mmol) u DMF (25 mL) se doda DIPEA (267 mg, 2.067 mmol). Reaktivna smeša se meša na rt u toku noći. Reakcija se neutrališe sa vodom (30 mL) i ekstrahuje sa DCM (3 x 50 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC (Gilson®, Gemini® C18 kolona, gradijent 35-95% MeCN:H2O 0.1%TFA) da se dobije 1,1’-((metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol- 5-karboksamid) so trifluorosirćetne kiseline (130 mg, 0.18 mmol, 26% prinos) kao siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 7.98 (s, 4H), 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.37 (s, 2H), 6.59 (s, 2H), 4.56 (d, J = 6.7 Hz, 4H), 4.18 (s, 4H), 3.35 (s, 8H), 2.09 (s, 6H), 1.32 -1.25 (m, 6H). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.14 min, [M+H]<+>= 708.
Referentni Primer 4
Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat
[0441]
1 2
Primer 4 Primer 5
1
Faza 1: terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)karbamat
[0442]
[0443] Smeša terc-butil (4-aminobutil)karbamata (5.00 g, 26.6 mmol), 4-fluoro-3-nitrobenzamida (4.89g, 26.6 mmol) i K2CO3(4.04 g, 29.2 mmol) u DMSO (25mL) se meša 2 h na 70 °C. Reakcija se ohladi na rt i polako razblaži sa 125 mL vode pomoću levka za dodavanje. Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, suši u Buchner levku i ostavi 3 dana u vakuumskoj pećnici na 56 °C da se dobije naslovljeno jedinjenje (9.2 g, 26.1mmol, 98% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.67 (d, J=2.02 Hz, 1 H) 8.40 (t, J=5.43 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=6.82 Hz, 2 H) 7.30 (br. s., 1 H) 7.12 (d, J=9.09 Hz, 1 H) 6.87 (br. s., 1 H) 3.42 (q, J=6.57 Hz, 2 H) 2.91 - 3.01 (m, 2 H) 1.60 (d, J=6.57 Hz, 2 H) 1.43 - 1.54 (m, 2 H) 1.38 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.86 min, [M+H]<+>=353.
Faza 2: terc-butil (4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)butil)karbamat
[0444]
1 4
[0445] RB boca zapremine mL 500 se napuni sa terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)karbamatom (9.2 g, 26.1 mmol), 10% Pd/C (0.920 g, 8.64 mmol) (Degussa vlažni tip), EtOH (100 mL) i MeOH (100 mL). Boca se izdvoji i stavi pod balon vodonika uz mešanje. Na vrh boce se stavi kondenzator i balon vodonika se stavi na vrh kondenzatora. Smeša se meša 20 h na rt, nakon toga se boca izdvoji i suspenzija se filtrira kroz ploču Celite® koristeći EtOH da pomogne ispiranju. Filtrat se koncentruje pod vakuumom i ostavi pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.4 g, 26.1 mmol, 100% prinos) kao crna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.44 (br. s., 1 H) 7.04 - 7.15 (m, 2 H) 6.85 (t, J=5.43 Hz, 1 H) 6.74 (br. s., 1 H) 6.37 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 4.89 (t, J=5.18 Hz, 1 H) 4.60 (br. s., 2 H) 3.07 (q, J=6.48 Hz, 2 H) 2.97 (q, J=6.40 Hz, 2 H) 1.45 - 1.64 (m, 4 H) 1.39 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.68 min, [M+H]<+>= 323.1
Faza 3: terc-butil (4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)karbamat, hidrobromid
[0446]
[0447] terc-butil (4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)butil)karbamat (8.40 g, 26.1 mmol) se rastvori u MeOH (110 mL) i pomoću šprica se doda rastvor 5M cijanogen bromida u CH3CN (5.73 mL, 28.7 mmol). Tamna reakcija se zatvori i meša 15 h na rt. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i ostavi pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (11.17 g, 26.1 mmol, 100% prinos) kao tamna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (br. s., 1 H) 8.74 (br. s., 2 H) 8.08 (br. s., 1 H) 7.80 - 7.90 (m, 2 H) 7.64 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.44 (br. s., 1 H) 6.89 (t, J=5.56 Hz, 1 H) 4.15 (t, J=7.20 Hz, 2 H) 2.96 (q, J=6.32 Hz, 2 H) 1.66 (d, J=7.07 Hz, 2 H) 1.42 - 1.50 (m, 2 H) 1.38 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.62 min, [M+H]<+>= 348.1
1
Faza 4: terc-butil (4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)karbamat
[0448]
[0449] Smeša terc-butil (4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)karbamat, hidrobromida (11.17 g, 26.1 mmol), 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (4.82 g, 31.3 mmol), HATU (11.90 g, 31.3 mmol), DIPEA (18.22 mL, 104 mmol) i HOBt (1.997 g, 13.04 mmol) u DMF (100 mL) se meša 21 h na rt. Reakcija se razblaži sa 300 mL vode i 300 mL EtOAc, prenese u levak za razdvajanje i slojevi se razdvoje a vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 150 mL). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa zasićenim NH4Cl (2 x 200 mL), vodom (1 x 200 mL) i slanim rastvorom (2 x 200 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje pod vakuumom i ostavi pod visokim vakuumom. Čvrsta supstanca se prečisti hromatografijom na silika gelu (Isco® Combiflash, 0-20% MeOH:
DCM, 330 gm kolona, napunjena sa 50 mL DCM). Tražene frakcije se kombinuju, koncentruju pod vakuumom i ostave pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje kao ljubičasta čvrsta supstanca, (9.53 g, 19.71 mmol, 76% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (s, 1 H) 8.01 (br. s., 2 H) 7.81 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.59 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.36 (br. s., 1 H) 6.80 - 6.86 (m, 1 H) 6.68 (s, 1 H) 4.64 (q, J=6.82 Hz, 2 H) 4.23 (t, J=6.44 Hz, 2 H) 2.98 (d, J=5.81 Hz, 2 H) 2.19 (s, 3 H) 1.76 (d, J=6.57 Hz, 2 H) 1.40 -1.48 (m, 2 H) 1.30 - 1.40 (m, 13 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.89 min, [M+H]<+>= 484.3
Faza 5: 1-(4-aminobutil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohlorid
1
[0451] U ledenom kupatilu u RB boci zapremine 500 mL se terc-butil (4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)karbamat (9.53 g, 19.71 mmol) tretira sa 4M rastvorom HCl u 1,4-dioksanu (42.0 mL, 168 mmol). Ledeno kupatilo se ukloni i ljubičasta žitka masa se meša 2.5 h na rt. Reakcija se nakon toga koncentruje pod vakuumom, ostavi pod visokim vakuumom i dobijena čvrsta supstanca se ostavi u vakuumskoj pećnici 15 sati na 50 °C i ohladi pod visokim vakuumom da se dobije nečisto naslovljeno jedinjenje kao siva čvrsta supstanca koja takođe sadrži 1,4-dioksan (11.89 grama, pretpostavljeno 19.7 mmol, 100% prinos). Materijal se koristi kao takav bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.91 (br. s, 1 H) 8.03 (d, J=1.26 Hz, 2 H) 7.77 - 7.87 (m, 4 H) 7.62 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.38 (br. s., 1 H) 6.70 (s, 1 H) 6-5 ppm (br. s, 1H), 4.63 (q, J=7.07 Hz, 2 H) 4.28 (t, J=6.57 Hz, 2 H) 2.77 - 2.87 (m, 2 H) 2.20 (s, 3 H) 1.81 - 1.91 (m, 2 H) 1.52 - 1.60 (m, 2 H) 1.38 (t, J=7.07 Hz, 3 H). LCMS (LCMS Postupak C): Rt.=0.60 min, [M+H]<+>= 384.2
Faza 6: Metil 4-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzoat
[0452]
1
[0453] RB boca sa tri grla zapremine 250 mL opremljena sa kondenzerom, velikom mešalicom i internim termometrom se napuni sa 1-(4-aminobutil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohloridom (9.38 g, 20.55 mmol) i metil 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzoatom (5.048 g, 20.55 mmol). Doda se DMSO (50 mL) a nakon toga se doda DIPEA (17.95 mL, 103 mmol) i tamna suspenzija se zagreva približno 24 h na 100 °C, ohladi i u kapima doda u 500 mL promešane vode. Nakon završenog dodavanja, dobijena narandžasta suspenzija se meša 20 min i filtrira. Izdvojena narandžasto-crvena pasta se ispere sa vodom i heksanima, suši u Buchner levku i nakon toga 20 sati u vakuumskoj pećnici na 56 °C. Crvenkasta čvrsta supstanca se nakon toga triturira sa Et2O (60mL) i izdvoji filtriranjem. Trituracija i filtriranje se ponove. Dobijena čvrsta supstanca se ostavi u vakuumskoj pećnici 3 dana na 56 °C da se dobije naslovljeno jedinjenje (11.17 g, 18.85 mmol, 92% prinos) kao crvenkasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.78 (br. s., 1 H) 8.12 (s, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 7.93 (d, J=7.53 Hz, 2 H) 7.79 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.53 (d, J=7.78 Hz, 1 H) 7.36 (s, 1 H) 7.31 (br. s., 1 H) 6.60 (s, 1 H) 4.60 (d, J=7.03 Hz, 2 H) 4.23 (br. s., 2 H) 3.84 (s, 3 H) 3.80 (s, 3 H) 3.53 (d, J=5.77 Hz, 2 H) 2.15 (s, 3 H) 1.82 (br. s., 2 H) 1.62 (br. s., 2H) 1.35 (t, J=7.03 Hz, 3 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt.=0.67 min, [M+H]<+>= 711.6
Faza 7: Metil 3-amino-4-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)butil)amino )-5-metoksibenzoat
[0454]
1
[0455] Metil 4-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d] imidazol-1- il)butil)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzoat (5.0 g, 8.44 mmol) se najvećim delom rastvori u DMF (50 mL) uz mešanja na rt u RB boci zapremine 250 mL. Doda se Raney nikl (Raney 2800 nikl u vodi, ca.10 mL žitke mase, Aldrich) i na vrh boce se doda kondenzator.
Na vrh kondenzatora se stavi trokraki zaptivni adapter sa prikačenim balonom vodonika i sadržaj se izdvoji, napuni sa vodonikom, izdvoji i na kraju napuni sa vodonikom. Reakcija se zagreva 7 h na 70 °C. Doda se još 8 mL Raney nikl žitke mase i reakcija se zagreva 14 h na 70 °C. Reakcija se ohladi i filtrira kroz Celite® uz ispiranje sa DMF. Filtrat, rastvor ca.100 mL DMF i 20 mL vode iz Raney nikl žitke mase koji sadrži željeni produkt se direktno koristi kao rastvor u sledećoj reakciji. Pretpostavljeni kvantitativni prinos. LCMS (LCMS Postupak D): Rt.=0.73 min, [M+H]<+>= 563.4
Faza 8: Metil 2-amino-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)butil)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat, hidrobromid
[0456]
1
[0457] Metil 3-amino-4-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)butil)amino)-5-metoksibenzoat (rastvor u smeši DMF/voda iz prethodne faze) se tretira sa 5M cijanogen bromida u CH3CN (1.875 mL, 9.37 mmol) i dobijeni rastvor se meša 22 sata na rt. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i ostavi pod visokim vakuumom da se dobije braon polu-čvrsta supstanca. Polu-čvrsta supstanca se triturira sa EtOAc, energično meša 30 min i dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i suši u Buchner levku da se dobije nečisti naslovljeni produkt kao čvrsta supstanca žutomrke boje (5.08 g). Ovaj nečisti materijal se koristi bez prečišćavanja. LCMS (LCMS Postupak D): Rt.=0. 72 min, [M+H]<+>= 588.5.
Referentni Primer 4
Faza 9: Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat
[0458]
[0459] Smeša metil 2-amino-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilata, hidrobromida (5.073 g, 7.59 mmol), 1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (1.287 g, 8.35 mmol), HATU (3.46 g, 9.11 mmol) i DIPEA (3.98 mL, 22.76 mmol) u DMF (30 mL) se meša 17 sati na rt. Reakcija se koncentruje pod vakuumom a nakon toga se dobijeni ostatak triturira sa vodom (100 mL) i meša 30 min. Dobijena suspenzija se filtrira i delimično suši u Buchnerovom levku da se dobije tamno žutomrka čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se većim delom rastvori u 150 mL 10% IPA: hloroform, razblaži sa vodom i filtrira. Filtrat slojevi se nakon toga razdvoje a organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje i ostavi pod visokim vakuumom da se dobije žutomrka čvrsta supstanca. Čvrsta
1
supstanca se triturira sa toplom smešom 10% IPA: hloroform (100 mL) i filtrira. Filtrat slojevi se razdvoje, organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira, doda u originalnu žutomrku čvrstu supstancu, koncentruje pod vakuumom i ostavi pod visokim vakuumom. Čvrsta supstanca se prečisti hromatografijom na silika gelu (Biotage® Isolera, 120 gm Gold kolona, 0-10% MeOH: DCM u toku 30 min, napunjena kao rastvor u DCM/MeOH). Tražene frakcije produkta se kombinuju, koncentruju i ostave pod visokim vakuumom da se dobije svetlo žutomrka čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se triturira sa DCM (50 mL) i izdvoji filtriranjem i ostavi u vakuumskoj pećnici 30 h na 56 °C da se dobije metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat kao bela čvrsta supstanca (1.0 g, 1.4 mmol, 18% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.89 (s, 1 H) 12.82 (s, 1 H) 7.90 - 8.01 (m, 2 H) 7.70 - 7.81 (m, 2 H) 7.53 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.30 -7.40 (m, 2 H) 6.59 (d, J=5.02 Hz, 2 H) 4.50 - 4.64 (m, 4 H) 4.38 (br. s., 2 H) 4.27 (br. s., 2 H) 3.87 (d, J=3.76 Hz, 6 H) 2.10 (s, 6 H) 1.86 (br. s., 4 H) 1.23 - 1.39 (m, 6 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt.=1.00 min, [M+H]<+>= 724.5.
Referentni Primer 5
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid, 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0460]
[0461] Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]
1 1
imidazol-1-il)butil)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat (0.1624 g, 0.224 mmol) se suspenduje u NH4OH (50 mL, 725 mmol) i reakcija se meša 6 dana na rt. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i ostatak se prečisti pomoću HPLC (Gilson® Autoprep, kisela Luna kolona, napunjena kao rastvor u DMSO, 20%-50% MeCN:voda w/0.1% TFA). Tražene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobije bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se ponovo prečisti (Gilson® Autoprep, kisela Luna kolona, napunjena kao rastvor u DMSO, 20-50% MeCN:voda w/0.1% TFA) i tražene frakcije se kombinuju, koncentruju, ostave pod visokim vakuumom i nakon toga suše u vakuumskoj pećnici 15 h na 56 °C da se dobije 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 so trifluorosirćetne kiseline kao bela čvrsta supstanca (76 mg, 0.081 mmol, 36% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.79 (br. s., 1 H) 7.97 (d, J=1.47 Hz, 3 H) 7.76 (dd, J=8.56, 1.47 Hz, 1 H) 7.64 (d, J=1. 22 Hz, 1 H) 7.53 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.27 - 7.39 (m, 3 H) 6.60 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 4.57 (quin, J=7.09 Hz, 4 H) 4.37 (br. s., 2 H) 4.28 (br. s., 2 H) 3.82 (s, 3H) 2.11 (d, J=4.16 Hz, 6 H) 1.86 (br. s., 4 H) 1.31 (td, J=7.03, 4.52 Hz, 6 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt.=0.85 min, [M+H]<+>= 709.5
Referentni Primer 6
(E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0462]
1 2
Faza 1: 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-hloro-5-nitrobenzamid
[0463]
[0464] (3-bromopropoksi)(terc-butil)dimetilsilan (7.3 g, 28.8 mmol) se rastvori u bezvodnom DMF (75 mL), doda se 4-hloro-3- hidroksi-5-nitrobenzamid (4.8 g, 22.16 mmol) a nakon toga se doda K2CO3(6.13 g, 44.3 mmol) i meša 2 h na 100 °C u atmosferi azota. Reakcija se ohladi na rt, sipa u EtOAc (600 mL), ispere sa vodom (600 mL), slanim rastvorom, suši sa MgSO4, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu uz eluiranje sa 20-80% heksani/EtOAc da se dobije naslovljeno jedinjenje (7.43 g, 19.1 mmol, 86% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (br. s., 1 H), 8.05 (d, J=1.71 Hz, 1 H), 7.89 (d, J=1.71 Hz, 1 H), 7.77 (br. s., 1 H), 4.30 (t, J=5.99 Hz, 2 H), 3.80 (t, J=5.99 Hz, 2 H), 1.98 (quin, J=5.99 Hz, 2 H), 0.80 - 0.90 (m, 9 H), 0.02 (s, 6 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.40 min, [M+H]<+>= 389.
Faza 2: 4-(alilamino)-3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-5-nitrobenzamid
[0465]
[0466] 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-hloro-5-nitrobenzamid (2.05 g, 5.27 mmol) se rastvori u bezvodnom NMP (12 mL), doda se alilamin (1.204 g, 21.08 mmol) i reakcija zagreje na 120 °C u mikrotalasnom reaktoru u toku 30 min. U reakciju se doda nova količina alilamina (900 mg, 15.8 mmol) i zagreva na 120 °C još 20 min. Reakcija se sipa u EtOAc (150 mL), ispere sa vodom (150 mL), slanim rastvorom, suši preko MgSO4, filtrira i
1
koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu uz eluiranje sa 20-80% heksani/EtOAc da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.99 g, 4.86 mmol, 92% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19 (s, 1 H), 8.02 (br. s., 1 H), 7.74 (t, J=6.02 Hz, 1 H), 7.57 (s, 1 H), 7.31 (br. s., 1 H), 5.89 (ddt, J=16.53, 10.89, 5.36, 5.36 Hz, 1 H), 5.05 - 5.19 (m, 2 H), 4.09 - 4.22 (m, 4 H), 3.79 (t, J=5.90 Hz, 2 H), 1.99 (t, J=5.77 Hz, 2 H), 0.87 (s, 9 H), 0.04 (s, 6 H). LC- MS (LCMS Postupak D): Rt = 1.41 min, [M H]<+>= 410.
Faza 3: 4-(alilamino)-3-amino-5-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)benzamid
[0467]
[0468] 4-(alilamino)-3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-5-nitrobenzamid (1.91 g, 4.66 mmol) se rastvori u AcOH (13.3 mL), doda se cink prašak (1.220 g, 18.65 mmol) (u jednoj porciji) i reakcija meša na rt u atmosferi azota. Nakon 45 min doda se nova porcija cinka (610 mg, 9.32 mmol) i meša još 2 h na rt. Reakcija se filtrira, filtrat sipa u EtOAc (125 mL), ispere sa 10% aq Na2CO3(125 mL), slanim rastvorom, suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.60 (br. s., 1 H), 6.93 (d, J=8.80 Hz, 1 H), 6.85 (d, J=1.71 Hz, 1 H), 6.78 (d, J=1.96 Hz, 1 H), 5.82 - 5.95 (m, 1 H), 5.14 (dd, J=17.12, 1.96 Hz, 1 H), 4.95 - 5.08 (m, 1 H), 4.68 (br. s., 1 H), 3.97 - 4.07 (m, 2 H), 3.71 - 3.86 (m, 2 H), 3.60 (d, J=5.87 Hz, 1 H), 1.84 - 1.96 (m, 4 H), 0.75 -0.92 (m, 9 H), -0.02 - 0.08 (m, 6 H). LC-MS (LCMS Postupak D): Rt = 1.04 min, [M H]+ = 380.
Faza 4: 1-alil-2-amino-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromid
[0469]
1 4
[0470] 4-(alilamino)-3-amino-5-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)benzamid (1.769 g, 4.66 mmol) se rastvori u bezvodnom MeOH (25 mL), doda se cijanogen bromid (0.543 g, 5.13 mmol) i reakcija meša u toku noći na rt u atmosferi azota. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i ostatak meša 30 min sa EtOAc (20 mL) na rt. Čvrste supstance se izdvoje filtriranjem i suše da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.56 g, 3.21 mmol, 69% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.94 (br. s., 1 H), 8.60 (br. s., 2 H), 8.08 (br. s., 1 H), 7.51 (d, J=0.98 Hz, 1 H), 7.43 (d, J=0.98 Hz, 2 H), 5.92 - 6.08 (m, 1 H), 5.21 (dd, J=10.51, 0.98 Hz, 1 H), 4.98 - 5.08 (m, 1 H), 4.92 (d, J=4.65 Hz, 1 H), 4.16 - 4.29 (m, 2 H), 3.74 - 3.81 (m, 2 H), 1.93 - 2.07 (m, 2 H), 0.81 - 0.91 (m, 9 H), -0.04 - 0.07 (m, 6 H). LC-MS (LCMS Postupak D): Rt = 1.02 min, [M H]<+>= 405.
Faza 5: 1-alil-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid
[0471]
[0472] 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (0.579 g, 3.76 mmol), HATU (1.429 g, 3.76 mmol) i HOBt (0.240 g, 1.565 mmol) se kombinuju sa bezvodnim DMF (12 mL). Doda se Et3N (1.7 mL, 12.52 mmol) i reakcija meša 5 min na rt. U reakciju se doda 1-alil-2-amino-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromid (1.52 g, 3.13 mmol) i meša na rt u toku noći u atmosferi azota. Reakcija se sipa u EtOAc (120 mL), ispere sa vodom (120 mL), slanim rastvorom, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu uz eluiranje sa
1
80-100% EtOAc/heksani da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.07 g, 1.98 mmol, 63% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (br. s., 1 H), 7.91 - 8.05 (m, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.32 (br. s., 1 H), 6.63 (s, 1 H), 5.96 - 6.13 (m, 1 H), 5.14 (d, J=9.29 Hz, 1 H), 4.91 - 5.03 (m, 3 H), 4.61 (q, J=7.01 Hz, 2 H), 4.24 (t, J=5.87 Hz, 2 H), 3.81 (t, J=6.11 Hz, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 1.93 - 2.07 (m, 2 H), 1.34 (t, J=7.09 Hz, 3 H), 0.80 - 0.92 (m, 9 H), 0.04 (s, 6 H). LC-MS (LCMS Postupak D): Rt = 1.40 min, [M H]<+>= 541.
Faza 6: 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0473]
[0474] 1-alil-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (700 mg, 1.30 mmol) se rastvori u bezvodnom THF (6 mL), doda se AcOH (0.15 mL, 2.60 mmol) a nakon toga se doda TBAF (2.6 mL, 1M u THF). Reakcija se meša u toku noći na rt u atmosferi azota, sipa u EtOAc i vodu (40 mL each) i energično mućka. Nerastvorni materijal se filtrira i suši da se dobije 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (460 mg, 1.08 mmol, 83%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 1 H), 7.99 (br. s., 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 7.32 (br. s., 1 H), 6.62 (s, 1 H), 5.98 - 6.12 (m, 1 H), 5.15 (d, J=9.05 Hz, 1 H), 4.92 - 5.04 (m, 3 H), 4.54 - 4.68 (m, 3 H), 4.24 (t, J=6.24 Hz, 2 H), 3.63 (q, J=6.11 Hz, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 1.97 (quin, J=6.17 Hz, 2 H), 1.35 (t, J=7.09 Hz, 3 H). LC-MS (LCMS Postupak D): Rt = 0.79 min, [M H]<+>= 427.
Referentni Primer 6
1
Faza 7: (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0475]
[0476] 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (100 mg, 0.23 mmol) se rastvori u 1:1 smeši DCM:MeOH (5 mL). U rastvor se doda TsOH-H2O (45 mg, 0.23 mmol) kao rastvor u MeOH (1.5 mL) i reakcija se koncentruje pod vakuumom. U ostatak se doda DCM (5 mL) i fina suspenzija prenese u mikrotalasnu posudu koja sadrži (1,3-dimesitilimidazolidin-2-iliden)(2-izopropoksi benziliden)rutenijum(VI) hlorid (22 mg, 0.035 mmol). Boca se degasira i zagreva 3 h na 80 °C u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija se tretira sa MeOH (3 mL) i ispari u atmosferi azota. Ostatak se prečisti sa HPLC (Gilson®, uz eluiranje sa 10-60% ACN/voda/0.1% TFA) i frakcije koje sadrže prdukt se sakupe i liofiliziraju da se dobije (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3- hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline (57 mg, 23% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 2 H) 7.99 (br. s., 2 H) 7.64 (s, 2 H) 7.35 (br. s., 2 H) 7.31 (s, 2 H) 6.52 (s, 2 H) 5.81 (br. s., 2 H) 4.91 (br. s., 4 H) 4.52 (q, J=6.93 Hz, 5 H) 4.02 (t, J=6.36 Hz, 5 H) 3.41 (t, J=5.99 Hz, 4 H) 2.06 - 2.15 (m, 6 H) 1.59 - 1.70 (m, 4 H) 1.27 (t, J=7.09 Hz, 6 H). LC-MS (LCMS Postupak D): Rt = 0.81 min, [M H]<+>= 825.
[0477] Jedinjenje izrađeno po prethodnom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (2E,2’E)-1,1’-((E)-but-2-en-1,4-diil)bis(2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), 2 so trifluorosirćetne kiseline
1
Referentni Primer 7
8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2- a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0478]
Faza 1: 1-alil-2-(1-(5-(5-((1-alil-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4- il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0479]
1
[0480] Biotage® zapečaćena epruveta zapremine 5.0 mL se napuni sa 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksilnom kiselinom (634 mg, 1.820 mmol), 1-alil-2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrobromidom (1352 mg, 4.55 mmol), HATU (1730 mg, 4.55 mmol) i NMP (13 mL). Nakon 1 minut mešanja na rt, doda se DIPEA (3.17 mL, 18.20 mmol) i smeša se meša 5 min na rt, nakon toga zagreva 1 h u mikrotalasnom reaktoru na 140 °C. Nakon ovog perioda, doda se 5.0 mL vode i smeša se meša 5 min na rt. Smeša se nakon toga sipa u 250 mL ledeno hladne vode i energično meša 1 h. Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, ispere sa vodom, odvoji iz filtera pomoću MeOH/DCM, koncentruje pod vakuumom i podvrgne hromatografiji na silika gelu (Biotage® Ultra SNAP 100 g SiO2kolona: 0-40% MeOH/EtOAc) da se dobije 1-alil-2-(1-(5-(5-((1-alil-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4-il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (840 mg, 1.128 mmol, 62% prinos) kao ružičasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.88 (s, 1 H), 12.81 (s, 1 H), 7.99 - 8.02 (m, 2 H), 7.97 (br. s., 2 H), 7.77 (ddd, J=8.34, 3.66, 1.39 Hz, 2 H), 7.41 (dd, J=16.93, 8.34 Hz, 2 H), 7.34 (br. s., 2 H), 6.65 (s, 1 H), 5.87 - 6.02 (m, 2 H), 4.99 - 5.22 (m, 4 H), 4.82 (dd, J=11.62, 4.80 Hz, 4 H), 4.50 - 4.61 (m, 4 H), 2.73 (t, J=7.45 Hz, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.71 - 1.85 (m, 2 H), 1.45 - 1.55 (m, 2 H), 1.27 -1.34 (m, 5 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.93 min, [M+H]<+>= 745.7.
Faza 2: 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2- a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0481]
1
[0482] Četiri Biotage® mikrotalasne zatvorene epruvete zapremine 20 mL se napune sa ukupno 1-alil-2-(1-(5-(5-((1-alil-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4-il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamidom (160 mg, 0.215 mmol), Hoveyda-Grubbs II katalizatorom (26.9 mg, 0.043 mmol) i sveže degasiranim 1,2-dihloroetanom (DCE) (80 mL). Zatvorene epruvete se zagrevaju u mikrotalasnom reaktoru 4 h na 100 °C. Nakon što se smeša ohladi na rt, u svaku epruvetu se doda MeOH (1.0 mL) i dobijeni bistar rastvor se meša 5 min na rt. U svaku epruvetu se doda rastvor kalijum 2-izocijanoacetata (15 mg u 1.5 mL MeOH) i dobijena smeša se meša 5 min na rt. Epruvete se kombinuju, koncentruju pod vakuumom, nakon toga se isparivi ostatak prenese u minimalnu zapreminu DCM/MeOH i prečisti hromatografijom na silika gelu (Biotage® Ultra SNAP 100 g SiO2kolona; 0-40% MeOH/EtOAc) da se dobije traženi produkt (61 mg) kao bledo zelena čvrsta supstanca sa smešom izomera alkena.
Produkt se dalje prečisti (Biotage® Ultra SNAP 25 g SiO2kolona; 0-20% MeOH/DCM gradijent) da se dobije 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid kao 7:1 trans:cis smeša (54 mg, 0.075 mmol, 35% prinos). Karakteristika trans izomera:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.87 (s, 1 H), 12.84 (s, 1 H), 7.98 (br. s., 4 H), 7.77 (dd, J=7.71, 3.16 Hz, 2 H), 7.33 -7.48 (m, 4 H), 6.55 (s, 1 H), 5.89 - 5.98 (m, 1 H), 5.66 - 5.75 (m, 1 H), 4.90 (d, J=7.83 Hz, 4 H), 4.73 (t, J=6.95 Hz, 2 H), 4.47 (q, J=6.99 Hz, 2 H), 2.72 - 2.80 (m, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 2.10 (s, 3 H), 1.72 (br. s., 2 H), 1.44 (br. s., 2 H), 1.30 (t, J=7.07 Hz, 5 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.82 min, [M+H]<+>= 717.6.
Referentni Primer 7
1
Faza 3: 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0483]
[0484] RB boca se napuni sa 10% Pd/C (200 mg, 0.188 mmol) i prečisti sa azotom. Doda se rastvor 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamida (100 mg, 0.140 mmol, 7:1 trans:cis smeša) u smeši MeOH (20.0 mL) i THF (20.0 mL), boca se prečisti sa vodonikom i reaktivna smeša se meša 23 h u atmosferi vodonika (1 atm). Boca se nakon toga otvori da uđe vazduh, meša energično 15 min i filtrira, Pd/C ispere sa MeOH/THF, filtrat koncentruje pod vakuumom i podvrgne hromatografiji na silika gelu (Biotage® Ultra SNAP 25 g SiO2kolona; 0-20% MeOH/DCM) da se dobije 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-1][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid (56 mg, 0.078 mmol, 55.8% prinos) kao bledo ružičasta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.88 (br. s., 2 H), 8.02 (s, 4 H), 7.79 - 7.87 (m, 2 H), 7.67 (d, J=8.34 Hz, 1 H), 7.63 (d, J=8.34 Hz, 1 H), 7.37 (br. s., 2 H), 6.57 (s, 1 H), 4.74 (t, J=6.57 Hz, 2 H), 4.48 (q, J=6.99 Hz, 2 H), 4.19 - 4.31 (m, 4 H), 2.78 - 2.86 (m, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.91 (br. s., 4 H), 1.77 - 1.86 (m, 2 H), 1.44 - 1.54 (m, 2 H), 1.35 - 1.42 (m, 2 H), 1.29 (t, J=7.07 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.81 min, [M+H]<+>= 719.7.
1 1
Referentni Primer 8
8-Etil-10,18,30-trimetil-7,20-diokso-7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31,32-tetradekahidro-1H-benzo[4,5]imidazo[2,1-b]benzo[4,5]imidazo[1,2-i]dipirazolo[5,1-m:4’,3’-t][1,3,6,9,11,14]heksaazaciklodokozin-3,24-dikarboksamid
[0485]
Referentni Primer 8
8-Etil-10,18,30-trimetil-7,20-diokso-7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31,32-tetradekahidro-1H-enzo[4,5]imidazo[2,1-b]benzo[4,5]imidazo[1,2-i]dipirazolo[5,1-m:4’,3’-t][13,6,9,11,4]heksaazaciklodokozin-3,24-dikarboksamid
[0486]
1 2
[0487] U rastvor 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (576 mg, 1.516 mmol), 1,1’-((metilazanediil)bis(etan-2,1-diil))bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida) (300 mg, 0.689 mmol, iz Referentnog Primera 3) i 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (240 mg, 0.689 mmol) u NMP (10 mL) se doda DIPEA (267 mg, 2.067 mmol). Reaktivna smeša se meša 0.5 h na rt i nakon toga se reakcija zagreva 1 h u mikrotalasnom reaktovru na 140 °C (150 W). Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na rt, doda se voda i smeša se ekstrahuje sa DCM. Organska faza se ispere sa vodom (2 x 20 mL), suši preko anhidrovane Na2SO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC (Gilson®, Gemini® C18 kolona, gradijent 2-95% MeCN:H2O 0.1%TFA) da se dobije 8-etil-10,18,30-trimetil-7,20-diokso-7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31,32-tetradekahidro- benzo[4,5]imidazo[2,1-b]benzo[4,5]imidazo[1,2-i]dipirazolo[5,1-m:4’,3’-t][1,3,6,9,11,14]heksaazaciklodokozin-3,24-dikarboksamid (25 mg, 0.03 mmol, 4.56% prinos) kao braon čvrsta supstanca.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.00 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 7.92-7.87 (m, 2H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.76 (s, 1H), 4.79 - 4.77 (m, 2H), 4.70 - 4.67 (m, 2H), 4.57 - 4.51 (m, 4H), 3.98 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.78 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.18 - 2.15 (m, 6H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.39 - 1.33 (m, 6H), 1.17 - 1.07 (s, 2H). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.26 min, [M+H]<+>= 748.
Referentni Primer 9
1,15-bis(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19a- tetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid
1
Faza 1: 5,5’-(propan-1,3-diilbis(oksi))bis(4-hloro-3-nitrobenzamid)
[0489]
1 4
[0490] 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamid (2 g, 9.23 mmol), 1,3-dibromopropan (932 mg, 4.62 mmol) i DIPEA (3.23 mL, 18.47 mmol) se mešaju u NMP (5 mL) u mikrotalasnoj posudi zapremine 20 mL. Reakcija se nakon toga zagreva 15 min u mikrotalasnom reaktoru na 100 °C. U reakciju se doda voda (30 mL) i precipitat se izdvoji filtriranjem i ispere sa vodom. Čvrsta supstanca se nakon toga suši pod vakuumom na 55 °C u toku noći da se dobije naslovljeno jedinjenje (3 g, 5.71 mmol, 61.8% prinos). LCMS (LCMS Postupak D) Rt = 0.99 minuta, [M+H]<+>= 473.1.
Faza 2: 1,13-dinitro-7,8,14,15,16,17,18,19-oktahidro-6H-dibenzo[b,j][1,12,4,9]dioksadiazaciklopentadecin-3,11-dikarboksamid
[0491]
[0492] 5,5’-(propan-1,3-diilbis(oksi))bis(4-hloro-3-nitrobenzamid) (2700 mg, 5.71 mmol), butan-1,4-diamin (503 mg, 5.71 mmol) i DIPEA (2.491 mL, 14.26 mmol), se mešaju u DMSO (8 mL) u mikrotalasnoj posudi zapremine 20 mL. Smeša se nakon toga zagreva mikrotalasima 15 min na 120 °C. Reakcija se razblaži sa vodom i filtrira da se dobije traženi produkt kao narandžasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se nakon toga suši pod vakuumom na 55 °C u toku noći da se dobije narandžasta čvrsta supstanca (približno 2.5 g, 5.12 mmol, 90% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20 - 8.16 (m, 2H), 8.05 - 7.95 (m, 4 H), 7.62 (d, J=1.71 Hz, 2 H), 4.32 (t, J=5.26 Hz, 4 H), 3.56 - 3.42 (m, 4 H), 2.47 - 2.38 (m, 2 H), 1.65 (br. s., 4 H). LCMS (LCMS Postupak D) Rt = 0.93 min, [M+H]<+>= 489.2.
Faza 3: 1,13-diamino-7,8,14,15,16,17,18,19-oktahidro-6H-dibenzo[b,j][1,12,4,9]dioksadiazaciklopentadecin-3,11-di-karboksamid
[0493]
1
[0494] U RB boci zapremine 50mL, 1,13-dinitro-7,8,14,15,16,17,18,19-oktahidro-6H-dibenzo[b,j][1,12,4,9] dioksadiazaciklopentadecin-3,11-dikarboksamid (2.5 g, 5.12 mmol) se meša u AcOH (14.7 mL, 256 mmol). Nakon toga se u jednoj porciji doda cink (1.67 g, 25.6 mmol) i reakcija se meša 1 h na rt. Reaktivna smeša se nakon toga filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom. Materijal se prečisti sa HPLC (Gilson®, Gemini® kolona:
CH3CN, 0.1% NH4OH/voda gradijent 2-20%) da se dobije naslovljeno jedinjenje (90 mg, 0.2 mmol, 3.9% prinos). LCMS (LCMS Postupak D) Rt = 0.39 minuta, [M+H]<+>= 429.3.
Faza 4: 1,15-diamino-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19atetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid
[0495]
[0496] U reaktivnoj bočici zapremine 20 mL, 1,13-diamino-7,8,14,15,16,17,18,19-oktahidro-6H-dibenzo[b,j] [1,12,4,9]dioksadiaza-ciklopentadecin-3,11-dikarboksamid (140 mg, 0.327 mmol) se meša u MeOH (5 mL) i tretira sa cijanogen bromidom (69.2 mg, 0.653 mmol). Reaktivna smeša se meša na rt u toku noći. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda voda (10 mL), čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i suši pod vakuumom u toku noći da se dobije naslovljeno jedinjenje (100 mg, 0.188 mmol, 57.6% prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.04 (d, J=2.01 Hz, 2 H), 6.97 (d, J=1.76 Hz, 2 H), 4.30 (s, 4 H), 3.04 (br. s., 4 H), 2.46 - 2.33 (m, 2 H), 1.45 (br. s., 4 H). LCMS (LCMS Postupak D) Rt = 0.47 minuta, [M+H]<+>= 479.3.
1
Referentni Primer 9
Faza 5: 1,15-bis(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19a-tetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid
[0497]
[0498] U reaktivnu bočicu zapremine 20 mL se dodaju 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (90 mg, 0.581 mmol), 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilizouronijum heksafluorofosfat(V) (221 mg, 0.581 mmol), DIPEA (0.135 mL, 0.775 mmol) i DMF (5 mL), a nakon toga se doda 1,15-diamino-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19a-tetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid (90 mg, 0.194 mmol). Reaktivna bočica se zatvori i zagreva 30 min na 140 °C. U rastvor se doda voda (20 mL) a dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i suši na vazduhu da se dobije braon čvrsta supstanca. Sirovi produkt se nakon toga rastvori u DMSO (6 mL) i doda se voda (20mL). Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i suši pod vakuumom da se dobije 1,15-bis(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-8,9,16,17,18,19-heksahidro-7H-6,10-dioksa-2,14,15a,19a- tetraazaciklopentadeka[1,2,3-cd:11,10,9-c’d’]diinden-4,12-dikarboksamid (50 mg, 0.063 mmol, 32.7% prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 2 H), 8.00 (br. s., 2 H), 7.67 (s, 2 H), 7.46 (s, 2 H), 7.37 (br. s., 2 H), 6.59 (s, 2 H), 4.60 (d, J=6.78 Hz, 4 H), 4.48 (d, J=4.52 Hz, 4 H), 4.38 (br. s., 4 H), 2.55 (s, 6 H), 2.12 (s, 4 H), 2.06 (d, J=6.02 Hz, 2 H), 1.33 (t, J=7.03 Hz, 6 H) LCMS (LCMS Postupak D) Rt = 0.92 minuta, [M+H]<+>= 751.5.
Referentni Primer 10
1
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzodimidazol-5-karboksamid
[0499]
Faza 1: (E)-1-(4-((2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-karbamoil-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
1
[0501] U mikrotalasnoj epruveti se (E)-1-(4-aminobut-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid hidrohlorid (517 mg, 1.24 mmol, u DMSO (10 mL) tretira sa TEA (0.28 mL, 2.0 mmol), a nakon toga sa K2CO3(274 mg, 1.98 mmol) i 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-hloro-5-nitrobenzamidom (385 mg, 0.990 mmol). Reakcija se zagreva na 75 °C. Nakon 7 hr, smeša se koncentruje i ostatak se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 10 - 90 % EtOAc da se uklone nečistoće, zatim sa 0 -10 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (200 mg, 0.273 mmol, 28 % prinos) kao narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.94 - 8.08 (m, 3 H), 7.74 (d, J=8.11 Hz, 2 H), 7.50 (s, 1 H), 7.31 - 7.43 (m, 3 H), 6.62 (s, 1 H), 5.74 - 5.81 (m, 2 H), 4.80 (br. s., 2 H), 4.59 (d, J=6.84 Hz, 2 H), 4.13 (br. s., 2 H), 4.01 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 3.63 (t, J=5.96 Hz, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 1.76 - 1.88 (m, 2 H), 1.33 (t, J=7.10 Hz, 3 H), 0.74 - 0.82 (m, 9 H), -0.06 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.23 min, [M+H]<+>= 734.6
Faza 2: (E)-1-(4-((2-Amino-6-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-karbamoilfenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0502]
1
[0503] (E)-1-(4-((2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-karbamoil-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (1 g, 1.363 mmol) se suspenduje u MeOH (20 mL) i doda se amonijum hidroksid (4.62 mL, 34.1 mmol) i meša 5 min na RT. Nakon toga se doda natrijum hidrosulfit (1.675 g, 8.18 mmol) u vodi (5 mL). Nakon 60 minuta, doda se EtOAc (300 ml) i smeša se ekstrahuje sa vodom (50ml x 3). Organska faza se izdvoji, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (710 mg, 1.009 mmol, 74.0 % prinos) kao svetlo žuta čvrsta supstanca koja se koristi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.80 (br. s., 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.97 (br. s., 1 H), 7.75 (dd, J=8.49,
1.14 Hz, 1 H), 7.63 (br. s., 1 H), 7.28 - 7.41 (m, 2 H), 7.00 (br. s., 1 H), 6.84 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 6.74 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 6.65 (s, 1 H), 5.79 - 5.96 (m, 1 H), 5.64 - 5.78 (m, 1 H), 4.81 (d, J=4.82 Hz, 2 H), 4.68 (br. s., 2 H), 4.61 (d, J=7.10 Hz, 2 H), 3.92 (t, J=5.83 Hz, 2 H), 3.84 (br. s., 1 H), 3.63 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 3.57 (br. s., 2 H), 2.17 (s, 3 H), 1.70 - 1.82 (m, 2 H), 1.34 (t, J=7.10 Hz, 3 H), 0.68 - 0.83 (m, 9 H), -0.06 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak J): Rt = 1.05 min, [M+H]<+>= 704.3
Faza 3: (E)-2-Amino-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0504]
2
[0505] U rastvor (E)-1-(4-((2-amino-6-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-karbamoilfenil)amino)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (120 mg, 0.170 mmol) u MeOH (5 mL) se na RT doda cijanogen bromid (36 mg, 0.34 mmol). Nakon 2 hr, reakcija se koncentruje i doda se EtOAc (10 mL). Nakon 30 min mešanja, čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i ispere sa EtOAc da se dobije naslovljeno jedinjenje (120 mg, 0.165 mmol, 97 % prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca koja se koristi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.00 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J=8.36, 1.77 Hz, 1 H), 7.49 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.39 - 7.45 (m, 1 H), 7.36 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 5.82 - 5.99 (m, 2 H), 4.96 - 5.01 (m, 2 H), 4.56 -4.65 (m, 2 H), 4.12 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.62 - 3.75 (m, 2 H), 2.18 - 2.29 (m, 3 H), 1.79 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 1.24 - 1.54 (m, 5 H), 0.84 - 0.98 (m, 9 H), -0.01 - 0.11 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.97 min, [M+H]<+>= 729.5
Faza 4: (E)-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido )-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0506]
2 1
[0507] U rastvor 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (33 mg, 0.21 mmol) u DMF (3 mL) se dodaju HATU (75 mg, 0.20 mmol) i HOBt (12.6 mg, 0.082 mmol). Nakon 10 min mešanja na RT, doda se trietilamin (0.09 mL, 0.66 mmol), nakon toga se doda (E)-2-amino-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1lH-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (120 mg, 0.165 mmol) i reakcija se nastavi na RT. Nakon 3 dana, čvrsta supstanca se dodavanjem vode u kapima izdvoji precipitiranjem iz reakcije. Čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i ispere sa vodom. Čvrsta supstanca se nakon toga prečisti preko silika gela (12g HP Gold kolona), uz eluiranje sa 0-20 % MeOH u DCM. Tražene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje (29 mg, 0.034 mmol, 20 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, THF<-d4>) δ ppm 12.53 (br. s., 2 H), 8.00 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 7.61 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 7.53 (dd, J=8.36, 1.52 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=6.84 Hz, 2 H), 7.29 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 7.12 (d, J=8.36 Hz, 1 H), 6.83 (br. s., 2 H), 6.66 (d, J=2.28 Hz, 2 H), 6.06 (dt, J=15.46, 5.58 Hz, 1 H), 5.87 (dt, J=15.46, 5.83 Hz, 1 H), 5.09 (d, J=5.32 Hz, 2 H), 4.89 (d, J=5.58 Hz, 2 H), 4.59 - 4.72 (m, 4 H), 3.97 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.69 (t, J=5.96 Hz, 2 H), 2.20 (s, 6 H), 1.73 - 1.78 (m, 2 H), 1.40 (td, J=7.03, 1.14 Hz, 6 H), 0.82 - 0.94 (m, 9 H), -0.03 - 0.09 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.21 min, [M/2+H]<+>= 433.6
Faza 5: (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1- il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0508]
2 2
[0509] U rastvor (E)-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamida (25 mg, 0.029 mmol) i 1M TBAF u THF (0.058 mL, 0.058 mmol) u THF (2 mL) se na RT doda sirćetna kiselina (3.3 mL, 0.058 mmol). Nakon 12 h reakcija se koncentruje, triturira sa dietil etrom i EtOAc i dalje prečisti preko silika gela (12g Gold kolona) uz eluiranje sa 0 - 25% metanola u DCM. Tražene frakcije se koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje (7 mg, 9 mmole, 32 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, THF<-d4>) δ ppm 12.51 (br. s., 2 H), 8.01 (d, J=1.01 Hz, 2 H), 7.55 - 7.65 (m, 3 H), 7.33 (d, J=1.01 Hz, 2 H), 7.14 - 7.20 (m, 2 H), 6.00 -6.15 (m, 2 H), 5.82 - 5.96 (m, 2 H), 5.05 - 5.13 (m, 4 H), 4.04 (t, J=6.59 Hz, 4 H), 3.78 - 3.90 (m, 5 H), 2.19 (d, J=2.03 Hz, 6 H), 1.87 - 2.00 (m, 2 H), 1.36 - 1.44 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.79 min, [M+H]<+>= 751.4.
[0510] Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
2
ili (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol- 1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
Referentni Primer 11
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol- 1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0511]
2 4
Faza 1: (E)-terc-butil (4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat [0512]
2
[0513] U suspenziju 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzamida (1.50 g, 6.50 mmol) u EtOH (25 mL) se dodaju (E)-terc-butil (4-aminobut-2-en-1-il)karbamat (1.454 g, 7.81 mmol) i DIEA (3.4 mL, 20 mmol). Reakcija se meša na 120 °C u zatvorenoj epruveti u toku noći i ostavi da se ohladi na RT. Dobijena narandžasta čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa EtOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.10 g, 5.52 mmol, 85 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 8.03 (br. s., 1 H) 7.76 (t, J=6.08 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.34 (br. s., 1 H) 6.95 (t, J=5.45 Hz, 1 H) 5.53 (br. s., 2 H) 4.09 (br. s., 2 H) 3.88 (s, 3 H) 3.48 (br. s., 2 H) 1.35 (s, 9 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.89 min, [M-t-Bu+H]+ = 325.1
Faza 2: (E)-4-((4-Aminobut-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid, hidrohlorid
[0514]
[0515] U suspenziju terc-butil (E)-(4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamata (20 g, 47.3 mmol) u metanolu (50 mL) se polako dodaje 4M rastvor HCl u dioksanu (100 mL, 400 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 h na RT, zatim se dobijena čvrsta supstanca izdvoji filtriranjem, ispere 3 puta sa Et2O (100ml X 3) i suši na koloni pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (13.90 g, 43.9 mmol, 93 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.22 (d, J=2.03 Hz, 1 H), 7.76 - 8.16 (br. m., 5 H), 7.60 (d,
2
J=2.03 Hz, 1 H), 7.37 (br. s., 1 H), 5.87 (dt, J=15.52, 5.80 Hz, 1 H), 5.62 (dt, J=15.65, 6.37 Hz, 1 H), 4.18 (d, J=5.32 Hz, 2 H), 3.90 (s, 3 H), 3.40 (t, J=5.70 Hz, 2 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.41 min, [M+H]<+>= 281.1
Faza 3: (E)-3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-((4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-nitrobenzamid
[0516]
[0517] U suspenziju (E)-4-((4-aminobut-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid, hidrohlorida (9.77 g, 30.9 mmol) u 1-butanolu (90 mL) se dodaju natrijum bikarbonat (5.18 g, 61.7 mmol) i DIEA (22.45 mL, 129 mmol). Smeša se meša 10 min na RT, nakon toga se doda 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-hloro-5-nitrobenzamid (10 g, 25.7 mmol) i reaktivna smeša se meša na 120 °C u toku noći. Rastvor se ostavi da se ohladi na RT i dobijena tamna narandžasta čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i ispere sa EtOH (15ml). Sirovi materijal se nakon toga meša 10 min u vodi (100mL), filtrira i ponovo ispere sa vodom (100 mL), EtOAc (50mL) i EtOH (20 mL). Materijal se suši u vakuumskoj pećnici da se dobije naslovljeno jedinjenje (10 g, 14.54 mmol, 56.5 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (t, J=1.77 Hz, 2 H), 8.04 (br. s., 2 H), 7.72 (d, J=5.83 Hz, 2 H), 7.53 (s, 2 H), 7.35 (br. s., 2 H), 5.53 - 5.68 (m, 2 H), 3.99 - 4.16 (m, 6 H), 3.74 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 3.43 (br. s., 3 H), 1.92 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 0.74 - 0.88 (m, 9 H), 0.00 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 1.32 min, [M+H]<+>= 633.4
Faza 4: (E)-3-Amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-metoksifenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-(3-((terc-butild- imetilsilil)oksi)propoksi)benzamid
2
[0519] U rastvor (E)-3-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-4-((4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-nitrobenzamida (5 g, 7.90 mmol) u metanolu (120 mL) se na 0 °C dodaju natrijum hidrosulfit (16.19 g, 79 mmol) u vodi (50 mL) i amonijum hidroksid (25.6 mL, 198 mmol). Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na RT. Nakon 10 min na RT, smeša se ekstrahuje sa EtOAc (100 x 3), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na silika gelu (Isco kolona) uz eluiranje sa smešom heksan: (EtOH: EtOAc 3:1) sa 2 % NH4OH dodatka (0-100% gradijent) da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.1 g, 3.34 mmol, 42.2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.63 (br. s., 2 H), 6.99 (d, J=5.58 Hz, 2 H), 6.72 - 6.91 (m, 6 H), 5.62 - 5.73 (m, 2 H), 4.66 (d, J=8.36 Hz, 4 H), 4.00 (t, J=5.96 Hz, 2 H), 3.69 - 3.84 (m, 4 H), 3.40 - 3.49 (m, 2 H), 3.35 (s, 3 H), 1.90 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 0.79 - 0.91 (m, 9 H), -0.03 - 0.07 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.46 min, [M+H]<+>= 573.3
Faza 5: (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0520]
2
[0521] U rastvor (E)-3-amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-metoksifenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-(3-((tertbutildimetilsilil)oksi)propoksi)benzamida (1.02 g, 1.78 mmol) u MeOH (15 mL) se doda cijanogen bromid (943 mg, 8.90 mmol). Nakon 20 min mešanja na sobnoj temperaturi, svetlo žuta čvrsta supstanca precipitira, sakupi se filtriranjem, ispere sa EtOAc i pomoću LCMS se utvrdi da je to smeša ~2/3 TBDMS-zaštićenog jedinjenja (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida i ~1/3 zaštićenog alkohola (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida. Ova smeša (ca. 900mg) se nakon TEA (1.07 mL, 7.7 mmol) doda u rastvor 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (0.89 g, 5.78 mmol), HATU (2.2 g, 5.78 mmol) i HOBt (443 mg, 2.89 mmol) u DMF (10 mL) koji su se izmešali 15 min na RT. Nakon 20 hr, doda se 5N vodeni rastvor NaOH (3 mL). Nakon 30 min na RT, doda se voda (30 mL) i dobijeni beli precipitat se sakupi filtriranjem i prečisti preko silika gela (40 g Isco kolona), uz eluiranje sa 0 - 30 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (545 mg, 0.684 mmol, 38 % prinos u 2 faze).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.83 (br. s., 2 H), 7.99 (br. s., 2 H), 7.64 (d, J=3.04 Hz, 2 H), 7.28 - 7.42 (m, 4 H), 6.52 (s, 2 H), 5.84 (br. s., 2 H), 4.91 (br. s., 4 H), 4.53 (d, J=6.34 Hz, 4 H), 4.06 (t, J=6.34 Hz, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 3.45 (t, J=5.96 Hz, 2 H), 2.10 (d, J=2.53 Hz, 6 H), 1.71 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 1.27 (td, J=7.03, 1.90 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.85 min, [M/2+H]<+>= 391.3833
[0522] Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, as (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
2
ili (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-hidroksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
Referentni Primer 12
(E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0523]
21
Faza 1: 4-Hlor-3-(3-morfolinopropoksi)-5-nitrobenzamid
[0524]
[0525] U suspenziju 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamida (1.00 g, 4.62 mmol), 3-morfolinopropan-1-ola (1.00 g, 6.89 mmol) i trifenilfosfina (1.82 g, 6.93 mmol) u DCM (46 mL) se doda DIAD (1.35 mL, 6.93 mmol). Nakon 1 hr mešanja, doda se nova količina trifenilfosfina (480 mg, 1.83 mmol) i nakon još 30 min doda se DIAD (0.40 mL, 2.1 mmol). Nakon 1 hr, reakcija se podeli između zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida i DCM. Organski sloj je prethodno osušen pa se prečisti na silika gelu (ISCO-Rf 4g kolona), uz eluiranje sa 0 -100 % (3:1 EtOAc:EtOH) u heksanu da se dobije naslovljeno jedinjenje (630 mg, 1.83 mmol, 40 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.30 (s, 1 H), 8.05 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 4.28 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.57 (t, J=4.56 Hz, 4 H), 2.41 - 2.47 (m, 2 H), 2.37 (br. s., 4 H), 1.97 (dd, J=13.94, 7.35 Hz, 2 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.51 min, [M+H]<+>= 344.1
Faza 2: (E)-4,4’-(But-2-en-1,4-diilbis(azanediil))bis(3-(3-morfolinopropoksi)-5-nitrobenzamid)
[0526]
[0527] U suspenziju (E)-but-2-en-1,4-diamin dihidrohlorida (171 mg, 1.07 mmol) i 4-hloro-3-(3-morfolinopropoksi)-5-nitrobenzamida (630 mg, 1.65 mmol) u EtOH (4 mL) se doda DIEA (1.0 mL, 5.8 mmol). Reakcija se zagreva na 120 °C u bloku za zagrevanje i nakon 47 hr, doda se dodatna količina (E)-but-2-en-1,4-diamin dihidrohlorida (30 mg, 0.19 mmol). Zagrevanje se nastavi približno 3 dana na 120 °C, nakon toga se reakcija osuši i prečisti na silika gelu (ISCO-Rf 120 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 40 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (130 mg, 0.186 mmol, 11 % prinos) kao svetlo narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=1.77 Hz, 2 H), 8.04 (br. s., 2 H), 7.76 - 7.85 (m, 2 H), 7.51 (d, J=1.52 Hz, 2 H), 7.35 (br. s., 2 H), 5.63 (br. s., 2 H), 4.13 (br. s., 4 H), 4.01 (t, J=6.34 Hz, 4 H), 3.55 (t, J=4.56 Hz, 8 H), 2.27 - 2.42 (m, 12 H), 1.86 (t, J=6.72 Hz, 4 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.53 min, [M+H]<+>= 701.4623
Faza 3: (E)-4,4’-(But-2-en-1,4-diilbis(azanediil))bis(3-amino-5-(3-morfolinopropoksi)benzamid) dihidrohlorid
[0528]
[0529] U kalaj (II) hlorid (40.6 mg, 0.214 mmol) u koncentrovanom vodenom rastvoru HCl (892 mL, 10.7 mmol) se doda (E)-4,4’-(but-2-en-1,4-diilbis(azanediil))bis(3-(3-morfolinopropoksi)-5-nitrobenzamid) (15 mg, 0.021 mmol). Nakon 20 min, reakcija se ostavi da se ohladi u frižideru i nakon 15 min dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (12 mg, 0.017 mmol, 79 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.07 (br. s., 2 H), 7.99 (br. s., 2 H), 7.41 (br. s., 2 H), 7.05 (s, 2 H), 6.91 (br. s., 2 H), 5.94 (br. s., 2 H), 3.97 - 4.08 (m, 8 H), 3.78 - 3.88 (m, 8 H), 3.48 (d, J=12.17 Hz, 4 H), 3.35 - 3.43 (m, 4 H), 3.05 - 3.19 (m, 4 H), 2.21 (br. s., 4 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.34 min, [M/2+H]<+>= 321.3990
21
Faza 4: (E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) dihidrobromid
[0530]
[0531] U rastvor (E)-4,4’-(but-2-en-1,4-diilbis(azanediil))bis(3-amino-5-(3-morfolinopropoksi)benzamid) dihidrohlorida (102 mg, 0.143 mmol) u vodi (1.4 mL) se doda cijanogen bromid (136 mg, 1.29 mmol). Nakon 2 dana na RT reakcija se u kapima doda u acetonitril (~100 mL) i dobijena bela čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (76 mg, 0.09 mmol, 62 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.21 (br. s., 2 H), 11.16 (br. s., 2 H), 8.88 (br. s., 2 H), 8.13 (br. s., 2 H), 7.55 (s, 2 H), 7.50 (br. s., 2 H), 7.42 (s, 2 H), 5.71 (br. s., 2 H), 4.91 (br. s., 4 H), 4.13 (br. s., 4 H), 3.97 (br. s., 4 H), 3.82 (br. s., 4 H), 3.29 - 3.40 (m, 4 H), 3.17 (br. s., 4 H), 2.99 - 3.09 (m, 4 H) 2.08 (br. s., 4 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.28 min, [M+H]<+>= 691.6058
Faza 5: (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0532]
[0533] U rastvor 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (133 mg, 0.862 mmol), HATU (328 mg, 0.862 mmol) i HOBt (66.0 mg, 0.431 mmol) u N,N-dimetilformamidu (DMF) (1150 µL) se doda suspenzija (E)- 1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), dihidrobromida (209 mg, 0.245 mmol) i TEA (240 µL, 1.724 mmol) u N,N-dimetilformamidu (DMF) (4598 µL). Reakcija se meša na rt u toku noći. Reakcija se koncentruje do sušenja u struji azota. Dobijeni ostatak se rastvori u metanolu i suv prenese u SCO-Rf bočicu za prečišćavanje sa 40g silika gela, 0%-50% metanola, DCM. Tražene frakcije se koncentruju do sušenja da se dobije (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamid)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (112 mg, 0.115 mmol, 47 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 2 H), 7.98 (br. s., 2 H), 7.66 (d, J=1.01 Hz, 2 H), 7.36 (br. s., 2 H), 7.25 (s, 2 H), 6.58 (s, 2 H), 5.82 (br. s., 2 H), 4.92 (br. s., 4 H), 4.57 (q, J=7.10 Hz, 4 H), 3.85 (t, J=5.96 Hz, 4 H), 3.45 (t, J=4.18 Hz, 8 H), 2.09 -2.24 (m, 18 H), 1.54 (t, J=6.72 Hz, 4 H), 1.32 (t, J=7.10 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.65 min, [M+H]<+>= 963.938
Referentni Primer 13
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0534]
21
[0535] Faza 1: U (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksi-propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (17 mg, 0.023 mmol) u THF (3 mL) se doda trietilamin (9.5 mL, 0.068 mmol). Nakon 10 min na RT, doda se metansulfonil hlorid (2.1 mL, 0.027 mmol). Nakon 2 hr, LCMS pokazuje prisustvo (E)-3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)propil metansulfonata i reaktivna smeša se koristi direktno u sledećoj reakciji. LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.80 min, [M+H]<+>= 751.6010.
[0536] Faza 2: U rastvor (E)-3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7- il)oksi)propil metansulfonata (18 mg, 0.022 mmol) u THF (5 mL) se dodaju morfolin (9.5 µL, 0.11 mmol) i K2CO3(9.0 mg, 0.065 mmol). Nakon 5 h na RT, reakcija se zagreva 2 h na 45 °C i nakon toga koncentruje. Ostatak se prečisti preko silika gela uz eluiranje sa 0-20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (7 mg, 9 µmol, 39 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.99 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J=8.36, 1.52 Hz, 1 H), 7.59 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=8.62 Hz, 1 H), 7.28 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 6.64 (s, 1 H), 6.57 (s, 1 H), 5.92 - 6.05 (m, 1 H), 5.73 - 5.88 (m, 1 H), 4.51 - 4.71 (m, 4
21
H), 4.00 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.56 - 3.67 (m, 8 H), 2.27 - 2.46 (m, 6 H), 2.22 (d, J=10.39 Hz, 6 H), 1.83 (dt, J=14.19, 6.84 Hz, 2 H), 1.26 - 1.44 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.73 min, [M/2+H]<+>= 410.9876
[0537] Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
ili (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
Primer 14
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-
21
karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid tris hidrohlorid
[0538]
Faza 1: (E)-4-((4-((4-karbamoil-2-(3-morfolinopropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid
[0539]
21
[0540] (E)-4-((4-aminobut-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid, hidrohlorid (1.7g, 5.37 mmol), 4-hloro-3-(3-morfolinopropoksi)-5-nitrobenzamid (1.655 g, 4.81 mmol) i-PrOH (15 ml) i DIPEA (2.94 ml, 16.85 mmol) se podele u dve bočice zapremine 24 mL, nakon toga se bočice zatvore i 42 sata zagrevaju na 120 °C. Čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, ispere sa i-PrOH (2 x 3 mL) da se dobije (E)-4-((4-((4-karbamoil-2-(3-morfolinopropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid (1.95 g, 2.79 mmol, 51.9 % prinos) kao crvena čvrsta supstanca boje cigle. LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.60 min, [M+H]<+>=588.2
Faza 2: (E)-3-Amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-(3-morfolinopropoksi)fenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-metoksibenzamid
[0541]
[0542] U (E)-4-((4-((4-karbamoil-2-(3-morfolinopropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-
21
il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid (4.6 g, 6.65 mmol) u MeOH (83.0 mL) se na RT doda natrijum hidrosulfit (19.08 g, 93.0 mmol) u vodi (70 mL). Nakon 15 min, doda se čvrsti natrijum bikarbonat (24 grama). Nakon 10 min, reakcija se filtrira i čvrsta supstanca se ispere sa MeOH (4 X 20 mL). Kombinovani filtrati se koncentruju preko celite i prečiste uz prethodno sušenje preko silika gela (80 g Gold kolona), uz eluiranje sa 2-40 % (10:1 MeOH: vodeni rastvor NH4OH) u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.81 g, 3.26 mmol, 49 % prinos) kao tamno žuti film.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.64 (br. s., 2 H), 6.99 (br. s., 2 H), 6.85 (dd, J=5.07, 1.77 Hz, 2 H), 6.78 (dd, J=4.31, 1.77 Hz, 2 H), 5.63 - 5.72 (m, 2 H), 4.66 (d, J=8.11 Hz, 4 H), 3.96 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.74 (s, 3 H), 3.51 - 3.60 (m, 6 H), 3.17 (br. s., 4 H), 2.43 (t, J=7.10 Hz, 2 H), 2.35 (br. s., 4 H), 1.87 (t, J=6.72 Hz, 2 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.37 min, [M+H]<+>= 528.4
Faza 3: (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol- 5-karboksamid tris hidrohlorid
[0543]
[0544] U (E)-3-amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-(3-morfolinopropoksi)fenil)amino)-but-2-en-1-il)amino)-5- metoksibenzamid (368 mg, 0.697 mmol) u DMF (6.97 mL) se na 0 °C doda 0.4 M 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil izotiocijanat u dioksanu (2.0 mL, 0.80 mmol). Nakon ~10 min, doda se nova porcija 0.4 M 1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karbonil izotiocijanata u dioksanu (0.5 mL, 0.20 mmol), a nakon ~15 min doda se konačna porcija (0.5 mL, 0.20 mmol). Nakon 35 min ukupnog vremena reakcije, doda se EDC (334 mg, 1.74
22
mmol) a zatim se doda trietilamin (0.486 mL, 3.49 mmol). Smeša se ostavi da se zagreje na RT i meša u toku noći (~14 sati). Reakcija se neutrališe sa 3:1 smešom voda: zasićen vodeni rastvor NH4Cl (40 mL) i ekstrahuje sa 3:1 smešom hloroform: etanol (2 X 40 mL).
Kombinovane organske faze se isperu sa vodom (20 mL), suše preko MgSO4i koncentruju. Dobijeni ostatak se prečisti preko silika gela (40 g Gold kolona), uz eluiranje sa 2-40 % (10:1 MeOH: aq NH4OH) u DCM da se dobije čist materijal kao slobodna baza. Ovaj produkt se delimično rastvori u MeOH i tretira sa 4M rastvorom HCl u dioksanu (0.35 mL, 1.40 mmol), a nakon toga koncentruje. Ostatak se prenese u smešu MeCN-voda i liofilizira da se dobije naslovljeno jedinjenje (403.6 mg, 0.421 mmol, 60 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, metanol<-d4>) δ 7.70 (dd, J=2.66, 1.14 Hz, 2 H), 7.42 (d, J=1.27 Hz, 2 H), 6.72 (d, J=3.04 Hz, 2 H), 5.79 - 6.12 (m, 2 H), 5.19 (dd, J=11.03, 5.45 Hz, 4 H), 4.61 - 4.81 (m, 4 H), 4.00 - 4.25 (m, 4 H), 3.79 - 3.96 (m, 5 H), 3.45(d, J=12.42 Hz, 2 H), 3.28 - 3.36 (m, 2 H), 3.14 (td, J=12.23, 3.68 Hz, 2 H), 2.28 (s, 6 H), 2.07 - 2.25 (m, 2 H), 1.46 (td, J=7.10, 3.80 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.68 min, [M+H]<+>= 850.6.
Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, as (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3- dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi- 2,3-dihidro-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid tris hidrohlorid
ili (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi- 2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid tris hidrohlorid
Referentni Primer 15
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0545]
Faza 1: 4-hloro-3-((4-metoksibenzil)oksi)-5-nitrobenzamid [0546]
22
[0547] 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamid (942 mg, 4.35 mmol) se rastvori u DMF (7 mL), doda se Cs2CO3(1.559 g, 4.78 mmol) a zatim se doda 4-metoksibenzil hlorid (0.622 mL, 4.57 mmol) i reaktivna smeša se meša 24 sata na RT. Uz energično mešanje, u kapima se doda voda (15 mL) i dobijena čvrsta supstanca se meša 5 minuta, sakupi filtriranjem i ispere sa vodom da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.26 g, 3.74 mmol, 82% prinos) kao svetlo narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (ppm) 7.80 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.76 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.98 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.13 (br. s., 1H), 5.82 (br. s., 1H), 5.25 (s, 2H), 3.87 (s, 3H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.03, [M+H]<+>= 337.1.
Faza 2: (E)-l-(4-((4-karbamoil-2-((4-metoksibenzil)oksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0548]
[0549] Smeša (E)-1-(4-aminobut-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (1.543 g, 3.69 mmol, Međuproizvod 6) i TEA (1.871 mL, 13.42 mmol) se meša 5 minuta u EtOH (7 mL), doda se 4-hloro-3-((4-metoksibenzil)oksi)-5-nitrobenzamid (1.13 g, 3.36 mmol) i smeša se zagreva u zatvorenoj mikrotalasnoj bočici 18 sati na 120 °C. Nakon hlađenja na RT, smeša se razblaži sa DCM (50 mL) i vodom (50 mL) i pojavljuje se tamni ostatak. Slojevi se razdvoje i ostatak se kombinuje sa organskim delom i koncentruje. U sirovu smešu se doda 10% MeOH u DCM i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa DCM. U koncentrovani filtrat se ponovo doda 10% MeOH u DCM i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa DCM. Obe serije čvrste supstance se kombinuju da se dobije naslovljeno jedinjenje (559 mg, 0.82 mmol, 22% prinos) kao narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 12.86 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.93-8.05 (m, 3H), 7.86 (t, J=6.3 Hz, 1H), 7.72 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.29-7.40 (m, 3H), 7.25 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.83 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 5.65-5.75 (m, 1H), 5.49-5.58 (m, 1H), 4.93 (s, 2H), 4.75 (d, J=5.1 Hz, 2H), 4.58 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.05 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.31 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.98, [M+H]<+>= 682.5.
Faza 3: (E)-1-(4-((2-amino-4-karbamoil-6-((4-metoksibenzil)oksi)fenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0550]
[0551] U (E)1-(4-((4-karbamoil-2-((4-metoksibenzil)oksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid (557 mg, 0.817 mmol) u DMF (10 mL) se doda amonijum hidroksid (1.136 mL, 8.17 mmol) a zatim se u kapima doda natrijum hidrosulfit (837 mg, 4.09 mmol) u vodi (5 mL). Nakon 1 sat na RT, reakcija se razblaži sa EtOAc i vodom. Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc, kombinovani organski filtrati se isperu sa zasićenim NH4Cl i slanim rastvorom i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje (335 mg, 0.51 mmol, 57% prinos) kao narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 12.85 (br. s., 1H), 8.00 (s, 2H), 7.75 (dd, J=8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.36 (br. s., 2H), 7.25-7.31 (m, 4H), 7.03 (br. s., 1H), 6.83-6.91 (m, 4H), 6.64 (s, 1H), 5.75-5.84 (m, 1H), 5.64-5.73 (m, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.78 (d, J=5.1 Hz, 2H),
22
4.69 (br. s., 2H), 4.59 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.91 (t, J=7.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.56 (br. m., 2H), 2.17 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.76, [M+H]<+>= 652.5.
Faza 4: (E)-2-amino-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but- 2-en-1-il)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid
[0552]
[0553] U suspenziju (E)-1-(4-((2-amino-4-karbamoil-6-((4-metoksibenzil)oksi)fenil)amino)but-2-en-1-il)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo-[d]imidazol-5-karboksamida (333 mg, 0.460 mmol) u MeOH (3 mL) se doda cijanogen bromid (97 mg, 0.920 mmol) i reakcija se meša 2 sata na RT. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa MeOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (235 mg, 0.28 mmol, 58% prinos) kao svetlo narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 13.07 (br. s., 1H), 12.90 (s, 1H), 8.70 (br. s., 1H), 8.09 (br. s., 1H), 7.98-8.04 (m, 2H), 7.73 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.51 (s, 2H), 7.46 (br. s., 1H), 7.32-7.40 (m, 2H), 7.21 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.77 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.54 (s, 1H), 5.83-5.92 (m, 1H), 5.53-5.62 (m, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.78 (s, 2H), 4.53 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.72, [M+H]<+>= 677.5.
Faza 5: (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1- il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
22
[0555] Rastvor 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (51.4 mg, 0.333 mmol) i CDI (63.1 mg, 0.389 mmol) u DMF (3 mL) se meša 10 minuta na 60 °C, nakon toga se dodaju (E)-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid (233 mg, 0.278 mmol) i DIPEA (0.194 mL, 1.111 mmol). Nakon 4 sata zagrevanja na 90°C, dodaju se nove količine CDI (20 mg) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (20 mg) i zagrevanje se nastavi još 1.5 sat. Nakon hlađenja na RT i dodavanja male količine leda uz mešanje, u kapima se doda voda (5 mL). Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom da se dobije naslovljeno jedinjenje (225 mg, 0.27 mmol, 95% prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 12.88 (br. s., 2H), 8.00 (m, 2H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.46 (br. s., 1H), 7.29-7.42 (m, 3H), 7.20 (d, J=7.9 Hz, 2H), 6.75 (d, J=7.6 Hz, 2H), 6.54 (s, 2H), 5.94 (m, 1H), 5.49 (m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.85 (br. s., 2H), 4.78 (br. s., 2H), 4.53 (br. m., 4H), 3.65 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.22-1.33 (m, 6H); LCMS (LCMS Postupak F): Rt = 2.27 min, [M+H]<+>= 813.9.
Referentni Primer 16
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-hidroksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrohlorid
22
[0557] U (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]-imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-((4-metoksibenzil)oksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (210 mg, 0.258 mmol) u dioksanu (2 mL) se doda 4N rastvor HCl u dioksanu (0.258 mL, 1.03 mmol). Nakon 30 min na RT, reakcija se zagreva 18 sati na 50°C. Doda se nova količina 4N rastvora HCl u dioksanu (0.2 mL) i nakon još 5 hr zagrevanja, reakcija se ohladi i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (168 mg, 0.219 mmol, 81 % prinos) kao žutomrka čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.01 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 7.82 (dd, J=8.5, 1.6 Hz, 1 H), 7.49 - 7.55 (m, 2 H), 7.29 (d, J=1.5 Hz, 1 H), 6.68 (s, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 6.08- 6.18 (m, 1 H), 5.89 - 5.99 (m, 1 H), 5.30 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 4.98-5.04 (m, 2 H), 4.65 (dq, J=14.6, 7.2 Hz, 4 H), 2.23 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 1.37 - 1.46 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak F): Rt = 1.73 min, [M+H]<+>= 693.4.
Referentni Primer 17
1,1’-(2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0558]
22
Faza 1: 4,4’-((2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid)
[0559]
22
[0560] U 2,2,3,3-tetrafluorobutan-1,4-diamin (Međuproizvod 4) (1.25 g, 7.81 mmol) i kalijum karbonat (3.24 g, 23.4 mmol) u DMF (50 mL) se na RT u toku 5 min dodaje se 4-fluoro-3-nitrobenzamid (3.59 g, 19.5 mmol) i reakcija se meša u toku noći. Smeša se neutrališe sa vodom i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i triturira sa MeOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (600 mg, 1.23 mmol, 16 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.367 min, [M+H]<+>= 489.0
Faza 2: 4,4’-((2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(azanediil))bis(3-aminobenzamid)
[0561]
[0562] 4,4’-((2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(azanediil))bis(3-nitrobenzamid) (1.15 g, 2.36 mmol) i Pd na ugljeniku (0.251 g, 2.36 mmol) u MeOH (100 mL) se na 30 °C mešaju u atmosferi H2u toku noći. Reakcija se filtrira i filtrat koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (250 mg, 0.584 mmol, 25 % prinos). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.165 min, [M+H]<+>= 429.1
2
Faza 3: 1,1’-(2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0563]
[0564] U 4,4’-((2,2,3,3-tetrafluorobutan-l,4-diil)bis(azanediil))bis(3-aminobenzamid) (20 mg, 0.047 mmol) u MeOH (1 mL) i vodi (2 mL) se doda cijanogen bromid (29.7 mg, 0.280 mmol) i reakcija se meša na 30 °C u toku noći. MeOH se ukloni pod vakuumom i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (15 mg, 0.031 mmol, 67 % prinos). LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 0.629 min, [M+H]<+>= 479.0
Faza 4: 1,1’-(2,2,3,3-Tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid)
[0565]
[0566] U HATU (763 mg, 2.01 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (227
2 1
mg, 1.47 mmol) u DMF (20 mL) se na RT u jednom punjenju dodaju EDC (385 mg, 2.01mmol), 1,1’-(2,2,3,3-tetrafluorobutan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (320 mg, 0.667 mmol) i DIEA (0.467 mL, 2.68 mmol). Reakcija se zagreva 12 hr na 70 °C, koncentruje i prečisti da se dobije naslovljeno jedinjenje (8 mg, 0.01 mmol, 2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.05 (s, 2 H), 8.01 (d, J=8.6 Hz, 4 H), 7.81 (d, J=8.2 Hz, 2 H), 7.53 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 7.38 (s, 2 H), 6.73 (s, 2 H), 5.32 (t, J=16.0 Hz, 4 H), 4.59 (dd, J=14.0, 6.9 Hz,4 H), 2.06 (s, 6 H), 1.33 (t, J=7.1 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.367 min, [M+H]<+>= 751.1
Referentni Primer 18
Di-terc-butil(3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7- metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil) fosfat
[0567]
2 2
Primer 18Primer 19Di-terc-butil(3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-9(Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7- metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil) fosfat
[0568]
2
[0569] Suspenzija (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (1.00 g, 1.28 mmol) i 0.45 M 2H-tetrazol u acetonitrilu (14.2 mL, 6.40 mmol) u DMF (5 mL) se koncentruje na rotacionom isparivaču da se ukloni acetonitril. Dobijena heterogenena smeša u DMF se ohladi na 0 °C a nakon toga se doda rastvor di-terc-butil diizopropilfosforamidita (1.617 mL, 5.12 mmol) u 5 mL DMF. Ubrzo nakon dodavanja, rastvor postaje homogen ali ponovo postaje heterogen kako se reakcija meša na RT još 2 sata. Temperatura se snizi na 0 °C i doda se H2O2(30 %Wt u vodi, 2.62 mL, 25.6 mmol). Nakon 20 min mešanja, doda se još 10 eq H2O2i reakcija se meša dok ne postane homogena (30 min). U 200 mL vode se doda 2 mL porcija vodenog rastvora NaHCO3i Na2S2O3(0.4M u NaHCO3, 2M u Na2S2O3). Kada se reaktivna smeša sipa u ovaj rastvor, formira se precipitat. Precipitat se nakon toga sakupi na filteru, rastvori u 200 mL THF, suši preko MgSO4i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (1.1 g, 1.13 mmol, 88 % prinos.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.8 (s, 2 H), 10.2 (s, 1H), 7.98 (m, 2H), 7.65 (d, J=2.5 Hz, 2H), 7.34 (m, 4H), 6.51 (d, J=2.5 Hz, 2H), 5.83 (m, 2H), 4.91 (m, 4H), 4.52 (m, 4H), 4.09 (m, 2H), 3.93 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.60 (m, 2H), 2.11 (s, 6H), 1.90 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.4-1.3 (m, 18H, 1.27 (m, 6H); LCMS (LCMS Postupak I): Rt = 1.09 min, [M+H]<+>= 973.3.
Referentni Primer 19
3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-
2 4
metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H- benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
[0570]
[0571] U di-terc-butil (3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbon-il)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbon-il)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)-propil) fosfat (18 mg, 0.018 mmol) suspendovan u dioksanu (1 mL) se na RT doda 4N rastvor HCl u dioksanu (0.028 mL, 0.11 mmol). Odmah se formira nešto precipitata. Reakcija se meša 2 h i doda se nova količina 4N rastvora HCl u dioksanu (0.028 mL, 0.11 mmol). Nakon 2 hr, reakcija se ostavi u zamrzivaču i nakon 16 hr, reakcija se razblaži sa dietil etrom. Smeša se podesi na pH 2~3 sa conc. amonijum hidroksidom. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa etrom da se dobije naslovljeno jedinjenje (15 mg, 0.017 mmol, 92 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (br s, 1H), 8.02 (br, d, J=6.6 Hz, 2 H), 7.65 (d, J=5.7 Hz, 2 H), 7.35 - 7.41 (m, 2 H), 7.34 (br. d, J=10.6 Hz, 2 H), 6.51 (d, J=12.8 Hz, 2 H), 5.74 - 5.89 (m, 2 H), 4.92 (br. dd, J=12.0, 4.9 Hz, 4 H), 4.50 (quin, J=7.0 Hz, 4 H), 4.10 (br. t, J=6.1 Hz, 2 H), 3.91 - 3.94 (m, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 2.10 (d, J=3.1 Hz, 6 H), 1.84 - 1.93 (m, 2 H), 1.22 - 1.28 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak I): Rt = 0.68 min, [M+H]<+>= 861.2
[0572] Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (E)-3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
2
ili 3-(((E)-6-karbamoil-3-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H- benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat
Referentni Primer 20
Faza 8: (E)-7-Bromo-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0573]
2
Faza 1: 4-Hlor-3-(3-metoksipropoksi)-5-nitrobenzamid [0574]
2
[0575] U suspenziju 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamida (1.00 g, 4.62 mmol) u DMF (15 mL) se dodaju 1-bromo-3-metoksipropan (1.06 g, 6.93 mmol) i K2CO3(1.91 mg, 13.9 mmol). Reaktivna smeša se meša na 60 °C u zatvorenoj epruveti. Nakon 3 hr, reakcija se ohladi na RT i sipa u vodu. Dobijena svetlo žuta precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa dietil etrom da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.1 g, 3.8 mmol, 83 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.84 min, [M+H]<+>= 289.0
Faza 2: (E)-terc-butil (4-((4-karbamoil-2-(3-metoksipropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat
[0576]
[0577] U suspenziju 4-hloro-3-metoksi-5-nitrobenzamida (1.50 g, 6.50 mmol) u EtOH (25 mL) se dodaju (E)-terc-butil (4-aminobut-2-en-l-il)karbamat (1.45 g, 7.81 mmol) i DIEA (3.41 mL, 19.5 mmol). Reakcija se zagreva na 120 °C u zatvorenoj epruveti u toku noći i ostavi da se ohladi na RT. Dobijeni narandžasti precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa EtOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.1 g, 5.5 mmol, 85 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.96 min, [M+H]<+>= 439.2
Faza 3: (E)-4-((4-Aminobut-2-en-1-il)amino)-3-(3-metoksipropoksi)-5-nitrobenzamid dihidrohlorid
2
[0579] U (E)-terc-butil (4-((4-karbamoil-2-(3-metoksipropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)karbamat (1.43 g, 3.26 mmol) u dioksanu (10 mL) se doda 4N rastvor HCl u dioksanu (12.2 mL, 48.9 mmol). Nakon 1 h na RT, reakcija se koncentruje i ostatak se triturira sa dietil etrom da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.3 g, 3.1 mmol, 96 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.52 min, [M+H]<+>= 339.2
Faza 4: (E)-3-Bromo-4-((4-((4-karbamoil-2-(3-metoksipropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-nitrobenzamid
[0580]
[0581] U rastvor (E)-4-((4-aminobut-2-en-1-il)amino)-3-(3-metoksipropoksi)-5-nitrobenzamid dihidrohlorida (361 mg, 0.878 mmol) u DMF (5 mL) se dodaju 3-bromo-4-fluoro-5-nitrobenzamid (220 mg, 0.836 mmol) i TEA (0.47 mL, 3.4 mmol). Nakon mešanja na RT u toku noći, doda se voda (20 mL) i dobijena svetlo braon čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (475 mg, 0.719 mmol, 86 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.91 min, [M+H]<+>= 583.2
Faza 5: (E)-3-Amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-(3-metoksipropoksi)phenyI)amino)but-
2
2-en-1-il)amino)-5-bromobenzamid
[0582]
[0583] U rastvor (E)-3-bromo-4-((4-((4-karbamoil-2-(3-metoksipropoksi)-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-nitrobenzamida (400 mg, 0.585 mmol) u koncentrovanom vodenom 12M rastvoru HCl (5 mL, 60 mmol) doda se kalaj (II) hlorid (665 mg, 3.51 mmol). Nakon 5 min na RT, doda se 6N aq NaOH da se neutrališe reakcija i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (150 mg, 0.288 mmol, 49 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.55 min, [M+H]<+>= 521.2
Faza 6: (E)-2-Amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-bro- mo-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0584]
[0585] U rastvor (E)-3-amino-4-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-(3-metoksipropoksi)fenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-bromobenzamida (150 mg, 0.288 mmol)
24
u MeOH (3 mL) i DMSO (1 mL) se doda cijanogen bromid (183 mg, 1.73 mmol). Reaktivna smeša se meša na RT u toku noći, za koje vreme se čvrsta supstanca izdvoji precipitiranjem. Ova čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije sirovo naslovljeno jedinjenje (120 mg, 0.210 mmol, 73 % prinos). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.47 min, [M+H]<+>= 573.2
Faza 8: (E)-7-Bromo-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid
[0586]
[0587] U 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (97 mg, 0.63 mmol) u DMF (2 mL) se dodaju HATU (240 mg, 0.630 mmol) i HOBt (48 mg, 0.32 mmol). Nakon 15 min na RT, doda se TEA (0.18 mL, 1.3 mmol) a nakon toga se doda (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-bromo-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (120 mg, 0.210 mmol). Nakon mešanja u toku noći, doda se voda (5 mL) i dobijeni svetlo žuta precipitat se sakupi filtriranjem. Ovaj sirovi materijal se prečisti preko silika gela (Isco Rf 25 g kolona uz eluiranje sa 0 -20 % MeOH u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje (45 mg, 0.050 mmol, 24 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.06 (br. s., 1 H), 12.83 (br. s., 1 H), 8.07 (br. s., 1 H), 8.00 (d, J=8.62 Hz, 2 H), 7.88 - 7.96 (m, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.47 (br. s., 1 H), 7.28 - 7.39 (m, 2 H), 6.49 - 6.59 (m, 2 H), 5.70 - 5.92 (m, 2 H), 5.09 (br. s., 2 H), 4.93 (br. s., 2 H), 4.44 - 4.60 (m, 4 H), 4.03 (t, J=6.46 Hz, 2 H), 3.23 - 3.30 (m, 2 H), 3.14 (s, 3 H), 2.11 (d, J=12.17 Hz, 6 H), 1.71 - 1.83 (m, 2 H), 1.27 (q, J=7.10 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.96 min, [M/2+H]<+>= 422.1.
[0588] Jedinjenje izrađeno po gore datom postupku može da egzistira u tautomernom ili izomernom obliku, na primer, kao (E)-7- bromo-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-metoksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d] imidazol-5-karboksamid
ili (Z)-7-bromo-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-metoksipropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
Referentni Primer 21
Faza 9: Etil (E)-3-(5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)propionat
[0589]
[0590] Smeša (E)-7-bromo-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (50 mg, 0.059 mmol), Pd(amfos)Cl2(20 mg, 0.028 mmol) i (3-etoksi-3-oksopropil)cink(II) bromid (1.5 ml, 0.750 mmol) se zagreva mikrotalasima na 100°C. Nakon 15 min, reakcija se ohladi, koncentruje i sirovi materijal se prečisti reverzno faznom HPLC (Gilson HPLC (CH3CN/H2O 10 do 60%) da se dobije naslovljeno jedinjenje (20 mg, 0.023 mmol, 38.2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.85 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.59 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 7.54 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.32 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 6.61 (d, J=7.10 Hz, 2 H), 5.92 (d, J=15.72 Hz, 1 H), 5.61 - 5.77 (m, 1 H), 4.99 - 5.23 (m, 4 H), 4.50 - 4.69 (m, 4 H), 4.08 (t, J=6.34 Hz, 2 H), 4.00 (q, J=7.18 Hz, 2 H), 3.41 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.28 (s, 3 H), 3.12 (t, J=7.86 Hz, 2 H), 2.53 - 2.65 (m, 2 H), 2.22 (s, 6 H), 1.85 (quin, J=6.27 Hz, 2 H), 1.24 - 1.47 (m, 9 H), 1.15 (t, J=7.10 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.87 min, [M+H]<+>= 865.2
Referentni Primer 22
Faza 10: Etil (E)-3-(5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksi- propoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)propanoatna kiselina
[0591]
24
[0592] U (E)-etil 3-(5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazoll-7-il)propionat (15 mg, 0.014 mmol, Referentni Primer 21) u THF (0.3 mL) doda se 1M aq LiOH (0.042 mL, 0.042 mmol) u vodi (0.3 mL). Nakon 1 h na RT, THF se ukloni pod vakuumom i doda se 5N aq HCl da neutrališe reakciju. Dobijena bela čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ovaj sirovi materijal se prečisti sa HPLC (Gilson, Sunfire C18 OBD 30 x 100mm kolona sa gradijentom 10-60% acetonitril (0.1%TFA)/voda (0.1%TFA) i brzinom protoka 30 mL/min., vreme gradijenta: 15 min.) da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.4 mg, 3 µmol, 20 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, metanol<-d4>) δ ppm 7.86 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.58 (dd, J=3.55, 1.27 Hz, 2 H), 7.31 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=5.83 Hz, 2 H), 5.92 (d, J=15.46 Hz, 1 H), 5.69 (d, J=15.46 Hz, 1 H), 5.12 (br. s., 2 H), 5.06 (d, J=4.82 Hz, 2 H), 4.60 (dq, 1=14.61, 7.21 Hz, 4 H), 4.09 (t, J=6.46 Hz, 2 H), 3.42 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 3.28 (s, 3 H), 3.09 - 3.18 (m, 2 H), 2.56 - 2.65 (m, 2 H), 2.21 (d, J=4.82 Hz, 6 H), 1.86 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 1.35 (dt, J=12.42, 7.10 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.90 min, [M+H]<+>= 838.0
Referentni Primer 23
Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat, bis so trifluorosirćetne kiseline
[0593]
Faza 1: 4-((4-((terc-Butoksikarbonil)amino)butil)amino)-3-nitrobenzoeva kiselina hidrohlorid [0594]
24
[0595] U terc-butil (4-aminobutil)karbamat (4.00 g, 21.3 mmol) i kalijum karbonat (8.81 g, 63.7 mmol) u DMSO (70.8 ml) se na RT doda 4-fluoro-3-nitrobenzoeva kiselina (3.93 g, 21.3 mmol). Reakcija se zagreva 18 hr na 80 °C, ohladi na RT i razblaži sa EtOAc i vodom. Smeša se meša energično i pažljivo podesi na pH 5 sa HCl. Organski sloj se izdvoji, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije sirovo naslovljeno jedinjenje (11.86 g, 21.3 mmol, kvantitativni prinos) kao žuta amorfna čvrsta supstanca, koji se koristi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.89 (br. s., 1 H), 8.63 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 8.50 - 8.60 (m, 1 H), 7.97 (d, J=9.09 Hz, 1 H), 7.16 (d, J=9.35 Hz, 1 H), 6.88 (br. s., 1 H), 3.44 (q, J=6.57 Hz, 2 H), 3.38 (br. s., 1 H), 2.98 (d, J=6.06 Hz, 2 H), 1.61 (d, J=6.57 Hz, 2 H), 1.43 - 1.54 (m, 2 H), 1.39 (s, 9 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.91 min, [M+H]<+>= 354.1
Faza 2: terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)karbamat
[0596]
[0597] U 4-((4-((terc-butoksikarbonil)amino)butil)amino)-3-nitrobenzoevu kiselinu hidrohlorid (10.7 g, 27.4 mmol) i HATU (12.5 g, 32.9 mmol) u DCM (91 ml) se na RT doda DIEA (10.5 ml, 60.3 mmol) a nakon toga se doda 7 M rastvor amonijaka u MeOH (7.83 ml, 54.8 mmol). Nakon 3 hr, dobijena žuta čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.52 g, 21.8 mmol, 79 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.41 (t, J=5.68 Hz, 1 H), 8.34 (dd, J=4.04, 1.26 Hz, 1 H), 8.13 (dd, J=8.34, 1.26 Hz, 1 H), 7.31 (br. s., 2 H), 7.07 - 7.15 (m, 1 H), 3.39 - 3.46 (m, 2 H), 3.36 (br. s., 1 H), 2.97 (q, J=6.57 Hz, 2 H), 1.55 - 1.67 (m, 2 H), 1.42 - 1.53 (m, 2 H), 1.38 (s, 9 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.84 min, [M+H]<+>= 353.1
24
Faza 3: 4-((4-Aminobutil)amino)-3-nitrobenzamid dihidrohlorid
[0598]
[0599] U terc-butil (4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)karbamat (4.42 g, 12.6 mmol) u dioksanu (126 ml) se na RT doda 4 M rastvor HCl u dioksanu (62.8 ml, 251 mmol). Nakon 24 hr, reakcija se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.08 g, 11.9 mmol, 95 % prinos) kao žuto-narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.78 (dd, J=4.42, 1.39 Hz, 1 H), 8.68 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 8.55 (dd, J=8.34, 1.52 Hz, 1 H), 8.03 (dd, J=9.09, 2.02 Hz, 2 H), 7.90 (br. s., 3 H), 7.09 - 7.17 (m, 2 H), 3.46 (d, J=6.06 Hz, 2 H), 2.78 - 2.91 (m, 2 H), 1.67 (br. s., 4 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.40 min, [M+H]<+>= 253.0
Faza 4: Metil 4-((4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)amino)-3-nitrobenzoat
[0600]
[0601] U suspenziju 4-((4-aminobutil)amino)-3-nitrobenzamid dihidrohlorida (1.84 g, 5.66 mmol) i K2CO3(2.346 g, 16.97 mmol) u DMSO (11.32 ml) se na 23 °C doda metil 4-fluoro-3-nitrobenzoat (1.13 g, 5.66 mmol). Nakon 30 min, formira se svetlo žuti precipitat. Reakcija
24
se razblaži sa vodom (25 mL) i čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i suši pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.1 g, 5.6 mmol, 99 % prinos.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.64 (d, J=2.28 Hz, 1 H), 8.61 (d, J=2.28 Hz, 2 H), 8.42 (t, J=5.70 Hz, 1 H), 7.93 - 8.03 (m, 3 H), 7.30 (br. s., 1 H), 7.17 (d, J=9.38 Hz, 1 H), 7.12 (d, J=9.12 Hz, 1 H), 3.83 (s, 3 H), 3.48 (d, J=6.08 Hz, 4 H), 1.73 (br. s., 4 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.97 min, [M+H]<+>= 432.2
Faza 5: Metil 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat dihidrobromid
[0602]
[0603] U metil 4-((4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)amino)-3-nitrobenzoat (3.18 g, 7.37 mmol) i 10 % Pd/C (1.2 g, 1.128 mmol) na RT se doda NMP (35 ml). Boca se isprazni i napuni sa azotom, nakon toga još jednom isprazni i napuni sa H2pod pritiskom od 1 atm isporučen preko balona. Smeša se meša 18 hr na 70 °C, nakon toga filtrira kroz topli Celite. Filtrat se ohladi na RT i tretira sa cijanogen bromidom (2.95 ml, 14.7 mmol). Nakon 2 hr, reakcija se zagreva 2 hr na 70 °C, ohladi na RT i razblaži sa EtOAc (120 mL) uz energično mešanje. Dobijena siva čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.91 g, 5.90 mmol, 80 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (br. s., 2 H), 8.91 (br. s., 2 H), 8.78 (s, 2 H), 8.08 (br. s., 1 H), 7.82 - 7.99 (m, 4 H), 7.60 - 7.75 (m, 2 H), 7.47 (br. s., 1 H), 4.13 - 4.28 (m, 4 H), 3.89 (s, 3 H), 1.74 - 1.84 (m, 4 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.49 min, [M+H]<+>= 422.2
Referentni Primer 23
24
Faza 6: Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat, bis so trifluorosirćetne kiseline
[0604]
[0605] U mikrotalasnoj bočici se 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (0.502 g, 3.26 mmol), HATU (1.27 g, 3.34 mmol) i DIEA (1.497 ml, 8.57 mmol) u NMP (5.71 ml) ostave 10 min da se mešaju na RT. Doda se poseban rastvor metil 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat dihidrobromida (1.0 g, 1.7 mmol) rastvoren u minimalnoj količini NMP i bočica se zatvori i zagreje mikrotalasima na 140°C. Nakon 30 min, reakcija se ohladi na RT i razblaži sa vodom (~50 mL). Dobijena siva čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem, rastvori u minimalnoj količini DMSO i prečisti reverzno faznom HPLC (C1850x30 mm Luna kolona, 47 mL/min), uz eluiranje sa 10 - 40 % acetonitrila u vodi (0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (400 mg, 0.412 mmol, 24 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.89 (s, 1 H), 12.83 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 7.93 - 8.01 (m, 2 H), 7.84 (d, J=8.59 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=8.08 Hz, 1 H), 7.58 (dd, J=17.68, 8.34 Hz, 2 H), 7.35
(br. s., 1 H), 6.60 (d, J=7.83 Hz, 2 H), 4.58 (q, J=6.74 Hz, 4 H), 4.22 - 4.34 (m,4 H), 3.88 (s, 3 H), 2.11 (s, 6 H), 1.82 - 1.94 (m, 4 H), 1.31 (t, J=6.82 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.86 min, [M+H]<+>= 694.6
Referentni Primer 24
(E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-
24
benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0606]
[0607] Referentni Primer 24 može da se izradi u skladu sa postupkom 1 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: rastvor 1-alil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (20 mg, 0.052 mmol) u 1,2-dihloroetanu (2.1 ml) se degasira 5 min sa N2na 90 °C (toplota je potrebna za rastvaranje), nakon toga se doda Zhan katalizator 1B (CAS 918870-76-5, 5.76 mg, 7.84 mmol). Nakon 18 hr zagrevanja, reakcija se meša 2 dana na RT. Doda se nova količina 10 mg Zhan katalizatora 1B i reakcija se zagreva na 90 °C. Nakon 1 hr, smeša se ohladi i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (4 mg, 5 µmol, 10 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (s, 2 H), 7.91 - 8.24 (m, 2 H), 7.64 (s, 2 H), 7.33 (s, 4 H), 6.53 (s, 2 H), 5.70 - 6.16 (m, 2 H), 4.91 (br. s., 4 H), 4.29 - 4.64 (m, 4 H), 3.77 (s, 6 H), 2.10 (s, 6 H), 1.27 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak L): Rt = 0.85 min, [M+H]<+>= 737.5.
Referentni Primer 25
1,1’-(Butan-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid), dihidrohlorid
[0608]
2
[0609] Referentni Primer 25 može da se izradi u skladu sa postupkom 2 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u 1,1’-(butan-1,4-diil)bis(7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (12 mg, 0.011 mmol) u 1,4-dioksanu (1.5 mL) se doda 4N rastvor HCl u dioksanu (0.011 mL, 0.045 mmol). Nakon 60 min, reakcija se koncentruje i triturira sa EtOAc, nakon toga se čvrsta supstanca izdvoji filtriranjem i suši da se dobije naslovljeno jedinjenje (10 mg, 0.011 mmol, 98% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.77 (br. s., 2 H), 8.02 (br. s., 2 H), 7.57 (s, 2 H), 7.29 - 7.39 (m, 4 H), 6.58 (s, 2 H), 4.56 (d, J=7.10 Hz, 4 H), 4.36 (br. s., 4 H), 4.15 (t, J=6.21 Hz, 4 H), 3.48 - 3.54 (m, 6 H), 2.10 (s, 6 H), 1.86 (br. s., 4 H), 1.74 - 1.83 (m, 4 H), 1.30 (t, J=7.10 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.78 min, [M+H]<+>= 827.4.
Referentni Primer 26
(E)-8-etil-1,26-bis(3-hidroksipropoksi)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,-13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo-[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin- 3,24-dikarboksamid, bis hidrohlorid
[0610]
2 1
[0611] Referentni Primer 26 može da se izradi u skladu sa postupkom 6 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u (E)-4,26-bis(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1- e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-2,24-dikarboksamid (269 mg, 0.246 mmol) u THF (20 mL) se na 0 °C u kapima doda 4N rastvor HCl u dioksanu (0.31mL, 1.23 mmol). Nakon 2 hr, dobijena bela čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa Et2O da se dobije naslovljeno jedinjenje (226 mg, 0.241 mmol, 98 % prinos).<1>H NMR (600 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.71-7.74 (m, 2 H), 7.38 - 7.41 (m, 2 H), 6.82 (s, 1 H), 5.72 (s, 2 H), 5.00 - 5.07 (m, 4 H), 4.77 - 4.83 (m, 2 H), 4.67 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.88 - 3.98 (m, 4 H), 3.39 - 3.44 (m, 4 H), 2.85 -2.92 (m, 2 H), 2.41 (s, 3 H), 2.38 (s, 3 H), 1.93 - 2.02 (m, 2 H), 1.67 (br. t., J = 7.6 Hz, 2 H), 1.49 (t, J = 7.2 Hz, 5 H), 1.34 - 1.44 (m, 4 H); LCMS (LCMS Postupak L): Rt = 0.73 min, [M+H]<+>= 865.7017.
Referentni Primer 27
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, dihidrohlorid
[0612]
2 2
[0613] Referentni Primer 27 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2, 3 i 4 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (216 mg, 1.40 mmol) i CDI (227 mg, 1.40 mmol) se mešaju u DMF (0.7 mL) na 100 °C. Nakon 10 min, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-(3-metoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid (255 mg, 0.350 mmol) i reakcija se zagreva na 110 °C. Nakon 18 hr, doda se 10M rastvor NaOH (350 µL, 3.50 mmol) i reaktivna smeša zagreva 1h na 75 °C da hidrolizuje mala količina sporednog produkta estra (~15%). Smeša se nakon toga sipa u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (10 mL) i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Čvrsta supstanca se suspenduje u vrućem MeOH i filtrira da se dobije bela prašak. Ova čvrsta supstanca se suspenduje u dioksanu (10 mL) i doda se 4N rastvor HCl u dioksanu (74 mL, 0.30 mmol). Nakon 10 min, čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa dietil etrom da se dobije naslovljeno jedinjenje (110 mg, 0.121 mmol, 35 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.66 (dd, J=5.32, 1.01 Hz, 2 H), 7.39 (dd, J=13.18, 1.27 Hz, 2 H), 6.68 (d, J=17.24 Hz, 2 H), 5.93 (br. s., 2 H), 5.17 (br. s., 4 H), 4.61 - 4.75 (m, 4 H), 4.06 - 4.22 (m, 4 H), 3.61 - 3.72 (m, 2 H), 3.45 (t, J=6.08 Hz, 2 H), 3.31 (s, 3 H), 2.28 (d, J=4.06 Hz, 6 H), 1.88 (td, J=6.21, 2.28 Hz, 4 H), 1.35 - 1.50 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak L): Rt = 0.78 min, [M+H]<+>= 839.6204.
Referentni Primer 28
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-metoksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
2
[0615] Referentni Primer 28 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2 i 3 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
smeša HATU (894 mg, 2.35 mmol), DIEA (425 mg, 3.29 mmol), (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-(2-metoksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (450 mg, 0.940 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (362 mg, 2.35 mmol) u DMF (8 mL) se meša na 65 °C. Nakon 12 hr, reakcija se ohladi i tretira sa vodom. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i dalje prečisti sa HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (350 mg, 0.466 mmol, 50 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (s, 2 H), 7.95 - 7.99 (m, 4 H), 7.65 - 7.67 (m, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.45 - 7.48 (m, 1 H), 7.28 - 7.35 (m, 2 H), 6.55 (d, J=4.0 Hz, 2 H), 5.99 (dd, J=13.2, 7.7 Hz, 1 H), 5.85 (dd, J=13.3, 7.5 Hz, 1 H), 4.94 (d, J=5.3 Hz, 2 H), 4.83 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 4.58 - 4.49 (m, 4 H), 4.15 - 4.12 (m, 2 H), 3.58 - 3.49 (m, 2 H), 3.16 (s, 3 H), 2.12 (s, 6 H), 1.26 - 1.35 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.353 min, [M+H]<+>= 751.1.
Referentni Primer 29
(E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0616]
2 4
[0617] Referentni Primer 29 može da se izradi u skladu sa postupkom 2 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (89 mg, 0.58 mmol) i CDI (107 mg, 0.659 mmol) u DMF (2 mL) se mešaju 10 minuta. Dodaju se (E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) dihidrobromid (180 mg, 0.264 mmol) i DIEA (0.18 mL, 1.1 mmol) i reakcija se zagreva na 90 °C. Nakon 3 hr, doda se led i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem, energično meša 3 h u EtOAc i izdvoji.
Pomoću LCMS se konstatuje da čvrsta supstanca sadrži ~ 5 % mono-amida i tretira se sa CDI (14 mg, 0.086 mmol), 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnom kiselinom (12 mg, 0.078 mmol) i DIEA (0.1 mL, 0.6 mmol) u DMF (1.5 mL). Reakcija se zagreva 2 h na 90 °C i doda se nova porcija reagensa. Nakon još 4 hr, reakcija se ohladi na RT, doda se led i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (122 mg, 0.154 mmol, 58 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.80 (s, 2 H), 7.94 (br. s., 2 H), 7.59 (s, 2 H), 7.32 (s, 2 H), 7.28 (s, 2 H), 6.55 (s, 2 H), 5.85 (br. s., 2 H), 4.94 (br. s., 4 H), 4.74 (dt, J=12.0, 5.8 Hz, 2 H), 4.55 (q, J=7.0 Hz, 4 H), 2.14 (s, 6 H), 1.28 (t, J=7.0 Hz, 6 H), 1.10 (d, J=6.1 Hz, 12 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.03 min, [M/2+H]<+>= 397.4557.
Referentni Primer 30
(E)-7-(Benziloksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0618]
2
[0619] Referentni Primer 30 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2, 3 i 4 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (20.2 mg, 0.131 mmol) i CDI (23.1 mg, 0.142 mmol) u DMF (1 mL) se mešaju 10 minuta. Dodaju se (E)-2-Amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1- il)-7-(benziloksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid (40 mg, 0.057 mmol) i DIEA (0.07 mL, 0.4 mmol) i reakcija se zagreva na 90 °C. Nakon 22 hr, doda se led uz energično mešanje i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem, ispere sa vodom i triturira po redu sa etil acetatom i metanolom da se dobije naslovljeno jedinjenje (10 mg, 0.012 mmol, 21 % prinos) kao čvrsta supstanca žutomrke boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (d, J=5.8 Hz, 2 H), 7.99 (br. s., 2 H), 7.67 (d, J=2.3 Hz, 2 H), 7.45 (s, 1 H), 7.37 (br. s., 2 H), 7.19 - 7.30 (m, 6 H), 6.53 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.74 - 5.84 (m, 1 H), 5.53 - 5.62 (m, 1 H), 5.05 (s, 2 H), 4.86 (dd, J=11.8, 4.9 Hz, 4 H), 4.44 - 4.58 (m, 4 H), 3.64 (s, 3 H), 2.12 (s, 3 H), 2.09 (s, 3 H), 1.19 - 1.31 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.02 min, [M/2+H]<+>= 407.4811.
Referentni Primer 31
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0620]
2
[0621] Referentni Primer 31 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2 i 4 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
smeša HATU (568 mg, 1.49 mmol), DIEA (0.31 mL, 1.8 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (203 mg, 1.31 mmol) u NMP (5 mL) se meša na RT. Nakon 1 hr, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (250 mg, 0.597 mmol) i smeša se meša na 60 °C u toku noći. Reakcija se tretira sa vodom i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i dalje prečisti sa HPLC (Gemini-C18, 150x21.2 mm, 5 um, 20-50% CH3CN u H2O, 0.1% TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (3 mg, 4 µmol, 0.7 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.08 - 12.70 (m, 2 H), 7.97 (d, J=10.4 Hz, 2 H), 7.87 (d, J=13.0 Hz, 2 H), 7.73 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.32 (d, J=17.7 Hz, 2 H), 6.54 (d, J=7.9 Hz, 2 H), 5.96 (d, J=15.3 Hz, 1 H), 5.52 (d, J=15.6 Hz, 1 H), 4.99 (s, 2 H), 4.83 (s, 2 H), 4.53 (d, J=4.7 Hz, 4 H), 2.51 (s, 3 H), 2.12 (d, J=2.8 Hz, 6 H), 1.27 (t, J=7.1 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.321 min, [M+H]<+>= 691.3.
Referentni Primer 32
(E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(7-butoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid)
[0622]
2
[0623] Referentni Primer 32 može da se izradi u skladu sa postupkom 2 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (17.4 mg, 0.113 mmol) i CDI (18.3 mg, 0.113 mmol) u DMF (650 uL) sa na 60 °C dodaju (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (25 mg, 0.045 mmol) i TEA (38 mL, 0.27 mmol) i reakcija se zagreva na 120 °C. Nakon 18 hr se u reakciju doda rastvor nove količine CDI (30 mg, 0.19 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (30 mg, 0.19 mmol) (zagreva u DMF 10 min na 60 °C). Reakcija se ohladi, doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i triturira sa toplim MeOH (1 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.9 mg, 8.4 µmol, 13 % prinos) kao čvrsta supstanca žutomrke boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.87 (s, 2 H), 7.96 (br. s., 2 H), 7.65 (s, 2 H), 7.35 (br. s., 2 H), 7.26 (s, 2 H), 6.56 (s, 2 H), 5.81 (br. s., 2 H), 4.91 (br. s., 4 H), 4.49 - 4.62 (m, 4 H), 3.84 (t, J=6.46 Hz, 4 H), 2.14 (s, 6 H), 1.37 - 1.48 (m, 5 H), 1.30 (t, J=6.97 Hz, 6 H), 1.20 (dd, J=14.95, 7.60 Hz, 4 H), 0.74 (t, J=7.48 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak L): Rt = 1.06 min, [M+H]<+>= 821.7039.
Referentni Primer 33
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0624]
2
[0625] Referentni Primer 33 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2 i 4 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
smeša HATU (190 mg, 0.500 mmol), DIEA (0.16 mL, 0.93 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (70 mg, 0.45 mmol) u NMP (3 mL) se meša na RT. Nakon 15 min, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (86 mg, 0.19 mmol) i smeša se meša 16 h na 60 °C. Reakcija se tretira sa vodom i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i dalje u toku15 min prečisti sa HPLC (Gemini-C18, 150x21.2 mm, 5 um, 30-50% CH3CN u H2O, 0.1% TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (23 mg, 0.031 mmol, 17 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.82 (s, 2 H), 7.96 (d, J=14.3 Hz, 3 H), 7.72 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.44 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.31 (d, J=11.6 Hz, 3 H), 6.55 (s, 2 H), 5.96 (dd, J=13.5, 7.7 Hz, 1 H), 5.80 (d, J=15.7 Hz, 1 H), 4.94 (d, J=5.4 Hz, 2 H), 4.84 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 4.73 - 4.79 (m, 1 H), 4.54 (td, J=14.3, 7.1 Hz, 4 H), 2.13 (d, J=5.8 Hz, 6 H), 1.28 (dt, J=12.1, 7.1 Hz, 6 H), 1.14 (d, J=6.0 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.413 min, [M+H]<+>= 735.2.
Referentni Primer 34
(E)-1,1’-(But-2-en-1,4-diil)bis(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-izopropoksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) dihidrohlorid
2
[0627] Referentni Primer 34 može da se izradi u skladu sa postupkom 2 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u rastvor 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (110 mg, 0.711 mmol), HATU (271 mg, 0.711 mmol) i HOBt (54.5 mg, 0.356 mmol) u DMF (0.9 mL) se doda suspenzija (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-(3-izopropoksipropoksi)-1H-benzo[d]-imidazol-5-karboksamida) (151 mg, 0.237 mmol) i TEA (0.20 mL, 1.4 mmol) u DMF (3.8 mL). Nakon mešanja na RT u toku noći, reakcija se razblaži sa vodom, ekstrahuje sa EtOAc (2X) i kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom i koncentruju. Dobijeni ostatak se prečisti preko silika gela (Isco Rf 40 g kolona), uz eluiranje sa 0 -20 % MeOH u DCM da se dobije slobodna baza naslovljenog jedinjenja (105 mg, 0.116 mmol, 49 % prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca. Deo ovog materijala (80 mg, 0.088 mmol) se rastvori u MeOH (2 mL) i DCM (2 mL) i tretira sa 4N rastvorom HCl u dioksanu (0.044 mL, 0.18 mmol). Nakon 5 min, reakcija se doda u MeCN (veoma mala količina čvrste supstance) i smeša se koncentruje. Dobijeni ostatak se triturira sa EtOAc da se dobije naslovljeno jedinjenje (68 mg, 0.069 mmol, 79 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.00 (br. s., 2 H), 7.65 (d, J=1.01 Hz, 2 H), 7.35 (br. s., 2 H), 7.30 (d, J=1.01 Hz, 2 H), 6.55 (s, 2 H), 5.83 (br. s., 2 H), 4.94 (br. s., 4 H), 4.54 (q, J=7.10 Hz, 4 H), 4.00 (t, J=6.21 Hz, 4 H), 3.32 - 3.41 (m, 2 H), 3.21 - 3.31 (m, 4 H), 2.13 (s, 6 H), 1.69 (t, J=6.21 Hz, 4 H), 1.29 (t, J=7.10 Hz, 6 H), 0.98 (d, J=6.08 Hz, 12 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.10 min, [M/2+H]<+>= 455.5857.
Referentni Primer 35
2
(E)-2-(1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1-(4-(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(morfolinometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, so triflurosirćetne kiseline
[0628]
[0629] Referentni Primer 35 može da se izradi u skladu sa kombinovanim postupcima 2 i 3 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
smeša 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (117 mg, 0.760 mmol), HATU (347 mg, 0.912 mmol) i DIEA (0.319 mL, 1.824 mmol) u DMF (6 mL) se meša na RT. Nakon 30 min, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-7-(morpholi- nometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (140 mg, 0.304 mmol) i reakcija se meša na 50 °C u toku noći. Doda se voda i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (10 mg, 12 µmol, 3.9 % prinos) kao siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.98 (br. s., 2 H), 10.59 (br. s., 1 H), 7.91 - 8.01 (m, 2 H), 7.74 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.64 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.42 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.24 - 7.39 (m, 3 H), 6.56 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 5.93 (d, J=16 Hz, 2 H), 5.38 - 5.50 (m, 2 H), 5.10 (br. s., 2 H), 4.79 (br. s., 2 H), 4.48 - 4.55 (m, 4 H), 3.69 - 3.85 (m, 4 H), 3.03 - 3.32 (m, 4 H), 2.13 (s, 6 H), 1.21 - 1.40 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.328 min, [M+H]<+>= 733.2
Referentni Primer 36
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(piperidin-4-il)propoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-
2 1
karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorid
[0630]
Faza 1: terc-butil 4-(3-(5-karbamoil-2-hloro-3-nitrofenoksii)propil)piperidin-1-karboksilat [0631]
2 2
[0632] 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamid (1 g, 4.62 mmol)), terc-butil 4-(3-hidroksipropil) piperidin-1-karboksilat (1.348 g, 5.54 mmol) i trifenilfosfin (2.059 g, 7.85 mmol) se izmešaju u THF (20 mL) na 0 °C i nakon toga se doda diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (1.545 ml, 7.85 mmol). Reakcija se 16 sati održava na RT, nakon toga se žuti rastvor koncentruje i ostatak se podeli između zasićenog vodenog rastvora NaHCO3i EtOAc. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši preko MgSO4i koncentruje do žutog ostatka. Ovaj ostatak se prečisti sa Isco Combiflash (10 %-50 % (3:1 EtOAc/EtOH) / heksan, sa 2% NH4OH; 40 g RediSep kolona). Sakupljene frakcije koje sadrže produkt se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (2.83 g, 61 % čistoće, 3.91 mmol, 85 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (s, 1 H), 8.04 (d, J=1.77 Hz, 1 H,) 7.87 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 4.22 (t, J=6.34 Hz, 2 H), 3.93 (d, J=10.90 Hz, 2 H), 2.68 (br. s., 2 H), 1.77 - 1.88 (m, 2 H), 1.67 (d, J=11.41 Hz, 2 H), 1.47 (br. s., 1 H), 1.34 - 1.42 (m, 11 H), 0.89 - 1.05 (m, 2 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 1.25 min, [M-100]<+>= 342.0.
Faza 2: terc-butil (E)-4-(3-(5-karbamoil-2-((4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-3-nitrofenoksii)propil)piperidin-1-karboksilat
[0633]
[0634] (E)-4-((4-aminobut-2-en-1-il)amino)-3-metoksi-5-nitrobenzamid, so triflurosirćetne kiseline (1g, 2.54 mmol) se na RT suspenduju u n-butanolu (10 mL) i nakon toga se dodaju
2
DIPEA (2.66 ml, 15.22 mmol) i terc-butil 4-(3-(5-karbamoil-2-hloro- 3-nitrofenoksii)propil)piperidin-1-karboksilat (2.021 g, 2.79 mmol). Reaktivna smeša se nakon toga održava 48 sati na 120 °C, a nakon toga se reaktivna smeša ohladi na RT. Braon čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i prečisti sa Isco Combiflash (20% - 80 % (3:1 EtOAc/EtOH) / heksan, sa 2% NH4OH; 40 g RediSep kolona). Frakcije koje sadrže produkt se sakupe, kombinuju i koncentruji da se dobije naslovljeno jedinjenje kao crvena čvrsta supstanca (204 mg, 12% prinos). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 1.25 min, [M-100]<+>= 586.2.
Faza 3: terc-butil (E)-4-(3-(3-amino-2-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-metoksifenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5-karbamoilfenoksii)propil)piperidin-1-karboksilat
[0635]
[0636] Natrijum hidrosulfit (609 mg, 2.97 mmol) se na rt rastvori u H2O (5 mL) i nakon toga se ovaj rastvor doda u izmešani rastvor terc-butil (E)-4-(3-(5-karbamoil-2-((4-((4-karbamoil-2-metoksi-6-nitrofenil)amino)but-2-en-1- il)amino)-3-nitrofenoksii)propil)piperidin-1-karboksilata (204 mg, 0.297 mmol) i amonijum hidroksida (0.799 mL, 5.95 mmol) u 20 ml MeOH. Reaktivna smeša se nakon toga održava 2 sata na RT, smeša se nakon toga filtrira i filtrat se delimično koncentruje da se ukloni MeOH. Dobijena žuta vodena smeša se podeli između sat. NaHCO3(aq) i EtOAc. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši preko MgSO4, koncentruje i prečisti sa Isco Combiflash (2 %-20 % MeOH/CH2Cl2, 10% TEA u MeOH; 40 g RediSep kolona). Sakupljene frakcije koje sadrže produkt se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje (77mg, 42 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 6.94 (t, J=2.15 Hz, 2 H ), 6.89 (dd, J=4.56, 1.77 Hz, 2 H), 5.74 (d, J=4.56 Hz, 2 H), 4.05 (d, J=13.43 Hz, 2 H), 3.96 (t, J=6.34 Hz, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 3.52 - 3.62 (m, 4 H), 2.62 - 2.83 (m, 2 H), 1.77 - 1.88 (m, 2 H), 1.71 (d, J=11.91 Hz, 2 H),
2 4
1.35 - 1.52 (m, 12 H), 0.99 - 1.16 (m, 2 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.64 min, [M+H]<+>= 626.3.
Faza 4: terc-butil (E)-4-(3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7- il)oksi)propil)piperidin-1-karboksilat
[0637]
[0638] terc-butil (E)-4-(3-(3-amino-2-((4-((2-amino-4-karbamoil-6-metoksifenil)amino)but-2-en-1-il)amino)-5- karbamoilfenoksii)propil)piperidin-1-karboksilat (77 mg, 0.123 mmol) se na 0 °C rastvori u DMF (3 mL) i nakon toga se doda 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil izotiocijanat (0.308 ml, 0.123 mmol). Reaktivna smeša se nakon toga 15 min održava na 0 °C a u reaktivnu smešu se nakon toga dodaju EDC (28.3 mg, 0.148 mmol) i TEA (0.043 ml, 0.308 mmol). Reaktivna smeša se nakon toga održava 16 sati na RT. Reaktivna smeša se koncentruje i žuti ostatak se prečisti na silika gelu (20 %-50 % MeOH/CH2Cl2, 10% TEA u MeOH; 40 g RediSep kolona). Frakcije koje sadrže produkt se sakupe, kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (87 mg, 52 % prinos). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 1.11 min, [M+H]<+>= 948.3.
Referentni Primer 36
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(piperidin-4-il)propoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorid
2
[0640] Faza 5: terc-butil (E)-4-(3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)- 7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)propil)piperidin-1-karboksilat (87 mg, 0.092 mmol) se suspenduje u MeOH (40 ml) i doda se HCl (4N rastvor u 1,4-dioksanu) (0.575 ml, 2.30 mmol). Reaktivna smeša se održava 48 sati na RT, nakon toga se smeša koncentruje i ostatak prečisti sa HPLC (XSELECT CSH C18 kolona, 150 mm X 30 mm, i.d.5 um promer pakovanja, 15 % - 85 % 10 mM amonijum bikarbonata u vodi sa acetonitrilom). Tražene frakcije se kombinuju i delimično koncentruju i bela precipitat sakupi da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 37 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 8.57 (s, 1 H), 7.63 (d, J=1.01 Hz, 1 H), 7.57 (s, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 5.85 (br. s., 2 H), 5.03 (br. s., 4 H), 4.54 -4.73 (m, 4 H), 3.81 (t, J=6.46 Hz, 2 H), 3.71 (s, 3 H), 3.23 (d, J=12.93 Hz, 2 H), 2.72 - 2.85 (m, 2 H), 2.24 (d, J=12.17 Hz, 6 H), 1.74 (d, J=13.69 Hz, 2 H), 1.12 - 1.54 (m, 13 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.72 min, [M+H]<+>= 848.6.
Referentni Primer 37
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(piperazin-1-il)propoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0641]
2
Faza 1: terc-butil 4-(3-(5-karbamoil-2-hloro-3-nitrofenoksii)propil)piperazin-1-karboksilat [0642]
2
[0643] Trifenilfosfin (2.059 g, 7.85 mmol), terc-butil 4-(3-hidroksipropil)piperazin-1-karboksilat (1.692 g, 6.93 mmol) i diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (1.587 g, 7.85 mmol) se na 0 °C izmešaju u THF (20 mL) i nakon toga se doda 4-hloro-3-hidroksi-5-nitrobenzamid (1 g, 4.62 mmol). Reativni rastvor se održava 16 sati na RT a nakon toga se braon reaktivni rastvor podeli između sat. NaHCO3(aq) i EtOAc. Organski sloj se
ispere sa slanim rastvorom, suši preko MgSO4, koncentruje i prečisti na silika gelu (20 %-80 % (3:1 EtOAc/EtOH) / heksan, sa 2% NH4OH; 330 g RediSep kolona). Tražene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (970 mg, 47 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.30 (s, 1 H), 8.05 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 4.28 (t, J=6.21 Hz, 2 H), 3.31 (br. s., 4 H), 2.48 (t, J=7.10 Hz, 2 H), 2.33 (t, J=4.94 Hz, 4 H), 1.96 (t, J=6.59 Hz, 2 H), 1.40 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.69 min, [M+H]<+>= 443.4.
Faza 2: terc-butil (E)-4-(3-(5-karbamoil-2-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)amino)-3-nitrofenoksii) propil)piperazin-1-karboksilat
[0644]
[0645] (E)-1-(4-aminobut-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2-hidrohlorid (242 mg, 0.499 mmol) se na RT rastvori
2
u n-butanolu (10 mL), nakon toga se doda DIPEA (0.476 mL, 2.72 mmol), a zatim se doda terc-butil 4-(3-(5-karbamoil-2-hloro-3-nitrofenoksii)propil)piperazin-1-karboksilat (201 mg, 0.454 mmol). Reaktivna smeša se održava 16 sati na 120 °C. Reaktivna smeša se ohladi na RT i crvena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem (296 mg, 73 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 8.00 (br. s., 2 H), 7.84 (t, J=6.46 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 7.44 (s, 1 H), 7.30 - 7.41 (m, 3 H), 6.59 (s, 1 H), 5.61 - 5.87 (m, 2 H), 4.89 (d, J=5.58 Hz, 2 H), 4.58 (q, J=7.35 Hz, 2 H), 4.14 (br. s., 2 H), 3.89 (t, J=6.34 Hz, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.25 (br. s., 4 H), 2.27 (t, J=6.72 Hz, 2 H), 2.21 (br. s., 4 H), 2.16 (s, 3 H), 1.75 (d, J=6.08 Hz, 2 H), 1.39 (s, 9 H) 1.23 - 1.35 (m, 3 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.78 min, [M+H]<+>= 818.4.
Faza 3: terc-butil (E)-4-(3-(3-amino-5-karbamoil-2-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)amino)fenoksi)propil) piperazin-1-karboksilat
[0646]
[0647] Natrijum hidrosulfit (371 mg, 1.81 mmol) se na RT rastvori u H2O (2 mL) i nakon toga se dodaju rastvor terc-butil (E)-4-(3-(5-karbamoil-2-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)amino)-3-nitrofenoksii) propil)piperazin-1-karboksilata (296 mg, 0.362 mmol) i amonijum hidroksida (0.486 mL, 3.62 mmol) u 5mL MeOH. Reaktivna smeša se održava 2 sata na sobnoj temperaturi, nakon toga se reaktivna smeša filtrira i filtrat se delimično koncentruje da se ukloni MeOH. Dobijena žuta vodena smeša se nakon toga 3 puta ekstrahuje sa EtOAc, organski ekstrakti se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (114 mg, 40 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.60 (d,
2
J=1.27 Hz, 1 H), 7.31 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 6.81 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 6.59 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 5.74 - 5.84 (m, 1 H), 5.53 - 5.65 (m, 1 H), 4.12 (q, J=7.18 Hz, 2 H), 3.84 -3.91 (m, 3 H), 3.61 - 3.71 (m, 4 H), 3.38 (br. s., 4 H), 2.31 -2.36 (m, 6 H), 2.26 (s, 3 H), 2.03 (s, 2 H), 1.68 - 1.78 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H), 1.42 (t, J=7.10 Hz, 3 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.65 min, [M+H]<+>= 788.5.
Faza 4: terc-butil (E)-4-(3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7- il)oksi)propil)piperazin-1-karboksilat
[0648]
[0649] Terc-butil (E)-4-(3-(3-amino-5-karbamoil-2-((4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)amino)fenoksi)propil) piperazin-1-karboksilat (114 mg, 0.145 mmol) se na 0 °C rastvori u DMF (10mL) i nakon toga se doda 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil izotiocijanat (0.362 mL, 0.145 mmol). Reaktivna smeša se održava 15 min na 0 °C. Nakon toga se u reaktivnu smešu dodaju TEA (0.050 ml, 0.362 mmol) i EDC (33.3 mg, 0.174 mmol). Reaktivna smeša se održava 16 sati na RT. Reaktivna smeša se nakon toga doda u izmešani zasićeni rastvor NaHCO3(aq). Dobijeni beli precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (103 mg, 75% prinos). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.82 min, [M+H]<+>= 950.5.
Referentni Primer 37
2
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(piperazin-1-il)propoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0650]
[0651] Faza 5: terc-butil (E)-4-(3-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazoll-7-il)oksi)propil)piperazin-1-karboksilat (103 mg, 0.109 mmol) se rastvori u MeOH (2 mL) i DCM (2 mL) i nakon toga se doda HCl (4N rastvor u 1,4-dioksanu) (0.271 mL, 1.085 mmol). Reaktivna smeša se održava 16 sati na RT. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda DMSO (2 mL) i ova smeša se filtrira i filtrat se koncentruje i prečisti sa HPLC (XSELECT CSH C18 kolona, 150 mm X 30 mm, i.d.
5 um promer pakovanja, 30 % - 85 % 10 mM amonijum bikarbonata u vodi sa acetonitrilom). Čiste frakcije se nakon HPLC kombinuju i delimično koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beli precipitat (25 mg, 27 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.57 (d, J=16.48 Hz, 2 H), 7.14 - 7.30 (m, 2 H), 6.50 - 6.70 (m, 2 H), 5.81 (d, J=3.04 Hz, 2 H), 4.99 (br. s., 4 H) 4.50 - 4.69 (m, 4 H) 3.86 (t, J=5.70 Hz, 2 H) 3.69 (s, 3 H) 2.81 (t, J=4.69 Hz, 4 H) 2.32 - 2.36 (m, 6 H) 2.20 (d, J=12.93 Hz, 6 H), 1.70 (br. s., 2 H), 1.25 - 1.45 (m, 6 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.67 min, [M+H]<+>= 849.8.
Referentni Primer 38
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-etoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-
2 1
pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0652]
[0653] Referentni Primer 38 može da se izradi u skladu sa postupkom 20 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: (E)-1-( 4-((2-amino-4-karbamoil-6-(3-morfolinopropoksi)fenil)amino)but-2-en-1-il)-7-etoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (46 mg, 0.065 mmol) se na 0 °C rastvori u DMF (655uL) i nakon toga se doda 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil izotiocijanat (196 µL, 0.079 mmol). Reativni rastvor se održava 15 min na 0 °C, zatim se dodaju EDC (15.06 mg, 0.079 mmol) i TEA (22.81 µL, 0.164 mmol) i reaktivni rastvor se održava na RT. Nakon 16 sati, reakcija se koncentruje i žuti ostatak se prečisti sa HPLC (XSELECT CSH C18 kolona, 150 mm X 30 mm, i.d.5 um promer pakovanja, 15 % -55 % 10 mM amonijum bikarbonata u vodi sa acetonitrilom). Tražene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (19.2 mg, 34% prinos).<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.62 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.58 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.24 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.20 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 6.64 (s, 1 H), 6.62 (s, 1 H), 5.78 (d, J=3.30 Hz, 2 H), 5.01 (d, J=2.79 Hz, 4 H), 4.63 (q, J=7.10 Hz, 4 H), 3.86 - 4.08 (m, 6 H), 3.69 - 3.81 (m, 2 H), 3.37 (br. s., 2 H), 3.16 - 3.23 (m, 2 H), 2.97 - 3.13 (m, 2 H), 2.23 (s, 6 H), 1.96 - 2.04 (m, 2 H), 1.39 (t, J=7.10 Hz, 6 H), 1.15 (t, J=6.97 Hz, 3 H). LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.76 min, [M+H]<+>= 864.5.
Referentni Primer 39
2 2
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-7-(3-(dimetilamino)propoksi)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohlorid
[0654]
[0655] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (150 mg, 0.184 mmol) u DMF (2 mL) se doda TEA (0.20 mL, 1.435 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C. Na ovoj temperaturi se doda metansulfonil hlorid (42.0 mg, 0.367 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 h na ovoj temperaturi a zatim se doda 1 eq. metansulfonil hlorida (21.0 mg, 0.183 mmol) i reakcija se nastavi 1 h na 0 °C. U reaktivnu smešu se zatim doda K2CO3(127 mg, 0.918 mmol) a nakon toga se doda 1 ml dimetil amina (2 M rastvor u THF, 2.0 mmol). Reaktivna smeša se meša 2 sata na 80°C u zatvorenoj epruveti a nakon toga ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i sirovi materijal se prečisti maseno usmerenom HPLC. HPLC analiza se izvede na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=10 mM amonijum bikarbonata u H2O, pH podešen na 10 sa amonijakom, B= MeCN B%: 15-55. Dobiju se traženi MW pikovi. Rastvarač se ukloni i ostatak se rastvori u 1 mL MeOH. Doda se 4N rastvor HCl u dioksanu (1 mL). Rastvor se meša 10 min na sobnoj temperaturi. Rastvarač se ukloni i čvrsti ostatak ispere sa etil etrom (5mlX2) da se dobije naslovljeno jedinjenje (76 mg, 0.082 mmol, 44.7 % prinos).<1>H NMR (DMSO-d6, 600MHz): δ (ppm) 12.89 (br s, 2H), 10.18-10.41 (m, 1H), 7.96-8.04 (m, 2H), 7.66 (d, J=10.0 Hz, 2H), 7.35-7.41 (m, 2H), 7.28-7.35 (m, 2H), 6.53 (d, J=2.8 Hz, 2H), 5.82 (dt, J=15.5, 5.3 Hz, 1H), 5.71 (dt, J=15.4, 5.6 Hz, 1H),
2
4.85-4.98 (m, 4H), 4.52 (quin, J=6.5 Hz, 4H), 3.96-4.04 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.00-3.09 (m, 2H), 2.66 (d, J=4.8 Hz, 6H), 2.11 (d, J=4.4 Hz, 6H), 1.85-2.03 (m, 2H), 1.20-1.32 (m, 6H); LCMS Postupak K: Rt = 0.67 min, [M+H]<+>= 808.5
Referentni Primer 40
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(metilamino)propoksi)-1H-benzo[d]imidazoll-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohlorid
[0656]
[0657] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (100 mg, 0.122 mmol) se doda TEA (0.102 mL, 0.734 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C. Doda se metansulfonil hlorid (28.0 mg, 0.245 mmol). Reaktivna smeša se meša 1hr na 0 °C a nakon toga se doda još 1 eq MsCl i reakcija se nastavi 2 sata na 0°C. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda K2CO3(85 mg, 0.612 mmol) a nakona toga 1 mL metanamina (2 M u THF, 2.0 mmol). Reaktivna smeša se meša 2h na 80°C u zatvorenoj epruveti, nakon toga se reaktivna smeša ostavi da se ohladi na RT i filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC. HPLC analiza se izvodi na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=10 mM amonijum Bikarbonata u H2O pH podešen na 10 sa amonijakom, B = MeCN B%: 15-55. Dobijeni su traženi MW pikovi i rastvarač se ukloni. Materijal se rastvori u 2 mL MeOH i
2 4
doda se 1mL 4N rastvor HCl u dioksanu. Smeša se meša 15min na RT a nakon toga koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (33 mg, 0.037 mmol, 30.2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.90(br, s, 1 H), 8.79 (br. s., 2 H) 8.03 (br. s., 2 H)
7.66 (d, J=7.10 Hz, 2 H) 7.26 - 7.48 (m, 4 H) 6.52 (s, 2 H) 5.68 - 5.90 (m, 2 H) 4.92 (dd, J=17.24, 4.06 Hz, 4 H) 4.52 (q, J=6.76 Hz, 4 H) 4.09 (t, J=5.58 Hz, 2 H) 3.73 (s, 3 H) 2.90 (d, J=5.58 Hz, 2 H) 2.46 (t, J=5.32 Hz, 3 H) 2.11 (s, 6 H) 1.88 - 2.01 (m, 2 H) 1.27 (t, J=6.97 Hz, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.66 min, [M+H]<+>= 794.4.
Referentni Primer 41
(E)-7-(3-aminopropoksi)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0658]
[0659] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohlorida (100 mg, 0.117 mmol) se doda TEA (0.049 mL, 0.351 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C. Doda se metansulfonil hlorid (0.014 mL, 0.176 mmol) i reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na RT i meša 1h na RT. Nakon toga se doda nova količina 0.5 eq MsCl i meša 2 sata na RT, a nakon toga se doda još 0.5 eq MsCl i reakcija meša još 1 h. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda K2CO3(81 mg, 0.586 mmol) a zatim 7M rastvor amonijaka u MeOH (0.167 mL, 1.171
2
mmol). Reaktivna smeša se meša na 50 °C u zatvorenoj epruveti u toku noći. Reakcija se nakon toga filtrira i sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (15.6 mg, 13.2%). HPLC analiza se izvodi na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=H2O (0.1% TFA), B= MeCN (0.1% TFA) B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86(br. s., 1 H), 7.99 (br. s., 2 H), 7.76 (br. s., 2 H), 7.65 (dd, J=6.21, 0.89 Hz, 2 H), 7.40 (br. s., 2 H), 7.28 - 7.36 (m, 2 H), 6.51 (d, J=8.87 Hz, 2 H), 5.72 -5.88 (m, 4 H), 4.91 (dd, J=9.50, 4.44 Hz, 4 H), 4.43 - 4.59 (m, 4 H), 4.10 (t, J=5.96 Hz, 2 H), 3.72 (s, 3 H), 2.83 - 2.97 (m, 2 H), 2.11 (d, J=5.07 Hz, 6 H), 1.90 (quin, J=6.40 Hz, 2 H), 1.26 (td, J=7.10, 4.82 Hz, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.65 min, [M+H]<+>= 780.5
Referentni Primer 42
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-(3-hidroksipirolidin-1-il)propoksi)-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0660]
[0661] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, 2 hidrohlorida (100 mg, 0.117 mmol) u DMF (2 mL) se doda TEA (71.1 mg, 0.703 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C. Na ovoj temperaturi se doda metansulfonil hlorid (26.8 mg, 0.234 mmol). Reaktivna smeša se meša 45min na ovoj temperaturi. Nakon toga se doda još 1 eq MsCl (13.5mg), mešanje se
2
nastavi 2 sata na 0°C. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda K2CO3(97 mg, 0.703 mmol) a zatim pirolidin-3-ol (102mg, 1.17mmol). Reaktivna smeša se meša 1hr na 80°C u zatvorenoj epruveti, nakon toga se reaktivna smeša ostavi da se ohladi na RT i reaktivna smeša se filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (56.6 mg, 0.063 mmol, 54.0 % prinos). HPLC analiza se izvodi na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=10 mM amonijum bikarbonat u H2O, pH podešen na 10 sa amonijakom, B = MeCN B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.84 (br. s., 2 H) 7.92 - 8.06 (m, 2 H) 7.61 - 7.69 (m, 2 H) 7.23 - 7.44 (m, 4 H) 6.46 - 6.61 (m, 2 H) 5.72 - 5.96 (m, 2 H) 4.91 (dd, J=13.05, 4.18 Hz, 4 H) 4.67 (br. s., 1 H) 4.52 (q, J=7.18 Hz, 4 H) 4.12 (br. s., 1 H) 3.97 (t, J=5.96 Hz, 2 H) 3.35 (br. s., 2 H) 2.54 - 2.65 (m, 1 H) 2.33 - 2.47 (m, 4 H) 2.26 (br. s., 2 H) 2.12 (d, J=8.36 Hz, 6 H) 1.81 - 1.96 (m, 1 H) 1.60 - 1.76 (m, 2 H) 1.46 (dd, J=8.24, 4.69 Hz, 1 H) 1.19 - 1.37 (m, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.72 min, [M+H]<+>= 850.9
Referentni Primer 43
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1- il)propoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)- 7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0662]
2
[0663] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (80 mg, 0.098 mmol) u DMF (2 mL) se na RT doda TEA (0.136 mL, 0.979 mmol). Rastvor se meša 15 min na RT. Nakon toga se na ovoj temperaturi doda metansulfonatni anhidrid (51.1 mg, 0.294 mmol). Reaktivna smeša se meša 45 min na ovoj temperaturi. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda K2CO3(200 mg, 1.447 mmol) a zatim 2-(piperazin-1-il)etan-1-ol (127 mg, 0.979 mmol). Reaktivna smeša se meša 1h na 80°C u zatvorenoj epruveti i na 50 °C u toku noći, zatim se reaktivna smeša ostavi da se ohladi na RT i filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC. Dobiju se traženi MW pikovi. Rastvarač se ukloni da se dobije naslovljeno jedinjenje (45.1 mg, 0.051 mmol, 51.6 % prinos). HPLC se izvede na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=10 mM amonijum bikarbonat u H2O, pH podešen na 10 sa amonijakom, B= MeCN B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (br. s., 2 H) 7.98 (br. s., 2 H) 7.61 - 7.71 (m, 2 H) 7.21 - 7.45 (m, 4 H) 6.47 - 6.65 (m, 2 H) 5.75 -5.92 (m, 2 H) 4.85 - 5.01 (m, 4 H) 4.48 - 4.65 (m, 4 H) 4.34 (br. s., 1 H) 3.91 (t, J=5.96 Hz, 2 H) 3.70 (s, 3 H) 3.44 (q, J=6.08 Hz, 2 H) 2.18 - 2.39 (m, 10 H) 2.14 (s, 3 H) 2.11 (s, 3 H) 1.57 - 1.70 (m, 2 H) 1.29 (q, J=7.10 Hz, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.66 min, [M+H]<+>= 893.4
Referentni Primer 44
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-(3-(hidroksimetil)morfolino)propoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-
2
karboksamid, 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0664]
[0665] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (100 mg, 0.122 mmol) u DMF (2 mL) se doda TEA (0.20 mL, 1.435 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C i na ovoj temperaturi se doda metansulfonil hlorid (28.0 mg, 0.245 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 h na ovoj temperaturi. Nakon toga se doda nova količina 1 eq MsCl, mešanje se nastavi još 3 sata na 0°C. U reaktivnu smešu se nakon toga doda K2CO3(85 mg, 0.612 mmol) a zatim se doda morfolin-3-ilmetanol (86 mg, 0.734 mmol). Reaktivna smeša se meša na 50 °C u zatvorenoj epruveti u toku noći, nakon toga se reaktivna smeša ostavi da se ohladi na RT i filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (13.1 mg, 9.66%). HPLC se izvede na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=H2O (0.1% TFA), B= MeCN (0.1% TFA) B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.49 - 13.47 (m, 1 H) 9.64 (br. s., 1 H) 7.99 (d, J=9.89 Hz, 2 H) 7.67 (d, J=7.60 Hz, 2 H) 7.40 (br. s., 2 H) 7.31 (d, J=8.11 Hz, 2 H) 6.54 (d, J=1.77 Hz, 2 H) 5.70 -5.85 (m, 2 H) 4.80 - 5.01 (m, 6 H) 4.54 (dd, J=6.72, 3.68 Hz, 4 H) 3.84 - 4.13 (m, 5 H) 3.73 -3.81 (m, 1 H) 3.54 - 3.66 (m, 2 H) 3.43 (d, J=11.91 Hz, 2 H) 2.91 - 3.32 (m, 5 H) 2.12 (d, J=4.82 Hz, 6 H) 1.89 (br. s., 2 H) 1.21 - 1.33 (m, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.72 min, [M+H]<+>= 880.5.
Referentni Primer 45
2
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-(3-(etil(2-metoksietil)amino)propoksi)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0666]
[0667] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (100 mg, 0.122 mmol) u DMF (2 mL) se na RT doda TEA (0.171 mL, 1.224 mmol). Na ovoj temperaturi se doda metansulfonski anhidrid (42.6 mg, 0.245 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 h na ovoj temperaturi. Nkon toga se doda još 1 eq metansulfonskog anhidrida, mešanje se nastavi 30 min na RT. U reaktivnu smešu se nakon toga doda K2CO3(169 mg, 1.224 mmol) a zatim se doda N-etil-2-metoksietan-1-amin (126 mg, 1.224 mmol). Reaktivna smeša se meša 2 sata na 80°C u zatvorenoj epruveti, nakon toga se reaktivna smeša ostavi da se ohladi na RT i filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC (2 injektiranja). Dobiju se traženi MW pikovi i rastvarač se ukloni da se dobije naslovljeno jedinjenje (21.1 mg, 0.024 mmol, 19.52 % prinos). HPLC se izvede na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=10 mM amonijum bikarbonat u H2O, pH podešen na 10 sa amonijakom, B= MeCN B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.81 (br. s., 2 H) 7.98 (br. s., 2 H) 7.59 - 7.71 (m, 2 H) 7.24 - 7.42 (m, 4 H) 6.46 - 6.61 (m, 2 H) 5.75 - 5.94 (m, 2 H) 4.92 (dd, J=16.73, 4.06 Hz, 4 H) 4.47 - 4.62 (m, 4 H) 3.96 (t, J=5.83 Hz, 2 H) 3.72 (s, 3 H) 3.24 (t, J=6.08 Hz, 2 H) 3.11 (s, 3
2
H) 2.41 (t, J=5.96 Hz, 4 H) 2.34 (q, J=7.10 Hz, 2 H) 2.12 (d, J=10.39 Hz, 6 H) 1.55 - 1.66 (m, 2 H) 1.29 (q, J=7.10 Hz, 6 H) 0.82 (t, J=6.97 Hz, 3 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.69 min, [M+H]<+>= 866.4.
Referentni Primer 46
(E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-(4-(2-metoksietil)piperazin- 1-il)propoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, so 3 triflurosirćetne kiseline
[0668]
[0669] U rastvor (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, hidrohlorida (100 mg, 0.122 mmol) u DMF (2 mL) se doda TEA (0.171 mL, 1.224 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C. Na ovoj temperaturi se doda metansulfonski anhidrid (42.6 mg, 0.245 mmol). Reaktivna smeša se meša na ovoj temperaturi 1 h. Nakon toga se doda nova količina 1 eq. MsCl, mešanje se nastavi 2 sata na 0°C. Nakon toga se doda K2CO3(85 mg, 0.612 mmol) a zatim 1-(2-metoksietil)piperazin (176 mg, 1.224 mmol) i reaktivna smeša se meša na 50 °C u zatvorenoj epruveti u toku noći. Reakcija se nakon toga ostavi da se ohladi na RT i filtrira. Sirovi filtrat se prečisti maseno usmerenom HPLC. Dobiju se traženi MW pikovi i rastvarač se ukloni da
2 1
se dobije naslovljeno jedinjenje (39.6 mg, 0.032 mmol, 25.9 % prinos). HPLC se izvede na XSELECT SCH C18 koloni. Uslovi rastvarača: A=H2O (0.1% TFA), B= MeCN (0.1% TFA) B%: 15-55.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.90 (br, s, 2 H) 8.00 (d, J=9.89 Hz, 2 H) 7.66 (s, 2 H) 7.40 (d, J=4.06 Hz, 2 H) 7.22 - 7.35 (m, 2 H) 6.53 (d, J=4.06 Hz, 2 H) 5.70 -5.89 (m, 2 H) 4.91 (dd, J=9.63, 4.56 Hz, 4 H) 4.53 (dd, J=7.10, 3.55 Hz, 6 H) 3.94
- 4.04 (m, 3 H) 3.70 (s, 3 H) 3.60 (d, J=4.06 Hz, 2 H) 3.31 (s, 3 H) 3.09 - 3.25 (m, 5 H) 2.86 (br. s., 4 H) 2.12 (d, J=5.07 Hz, 6 H) 1.74 - 1.88 (m, 2 H) 1.28 (td, J=7.10, 3.30 Hz, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.66 min, [M+H]<+>= 907.4
Referentni Primer 47
8-etil-23-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamid
[0670]
2 2
Faza 1: 3-fluoro-N-(4-metoksibenzil)-N-metil-2-nitroanilin [0671]
2
[0672] Rastvor 1-(4-metoksifenil)-N-metilmetanamina (5.23 g, 34.6 mmol) u CHCl3(20 ml) se doda u promešani rastvor 1,3-difluoro-2-nitrobenzena (5.5 g, 34.6 mmol) i TEA (5.78 mL, 41.5 mmol) u CHCl3(250 mL) na RT u atmosferi N2. Smeša se meša 30 min na RT i nakon toga zagreje na 50°C u toku noći. Doda se zasićeni rastvor NaHCO3, organski sloj se izdvoji, vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM i kombinovani ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu (0-12 % EtOAc u heksanima) da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.5 g, 29.3 mmol, 85 % prinos) kao narandžasto ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.29 - 7.34 (m, 1H) 7.20 (d, J = 8.28 Hz, 2H) 6.86 - 6.93 (m, 3H) 6.78 (t, J = 8.78 Hz, 1H) 4.29 (s, 2H) 3.82 (s, 3H) 2.80 (s, 3H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.28, [M+H]<+>= 120.5
Faza 2: terc-butil (4-((3-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-2-nitrofenil)amino)-butil)karbamat
[0673]
[0674] U rastvor 3-fluoro-N-(4-metoksibenzil)-N-metil-2-nitroanilina (8.5 g, 29.3 mmol) u N,N-Dimetilformamidu (DMF) (60 mL) se na RT doda terc-butil (4-aminobutil)karbamat (8.27 g, 43.9 mmol) i smeša se meša 10 min; K2CO3(8.09 g, 58.6 mmol) se nakon toga doda i smeša se meša 80 °C u toku noći. Reakcija se ohladi na RT, razblaži sa EtOAc (200mL) i ispere po redu sa vodom (300 mL), 5 % LiCl i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje i dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-30 % EtOAc u heksanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje (10.68 g, 23.29 mmol, 80 % prinos) kao crveno ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.09 - 7.28 (m, 3 H) 6.87 (d, J=7.53 Hz, 2 H) 6.40 (br. s., 1 H) 6.29 (d, J=7.03 Hz, 1 H) 4.57 (br. s., 1 H) 4.32 (br. s., 2 H) 3.81 (s, 3 H) 3.11 -3.30 (m, 4 H) 2.77 (br. s., 3 H) 1.67 - 1.79 (m, 2 H) 1.55 - 1.67 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.37, [M+H]<+>= 459.2.
Faza 3: terc-butil (4-((2-amino-3-((4-metoksibenzil)(metil)amino)fenil)amino)butil)karbamat
2 4
[0676] Cink (4.66 g, 71.3 mmol) se u porcijama doda u promešani rastvor terc-butil (4-((3-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-2-nitrofenil)amino)butil)karbamata (10.9 g, 23.77 mmol) u sirćetnoj kiselini (200 mL). Smeša se meša 3h i doda se nova porcija cinka (4.66 g, 71.3 mmol). Smeša se meša još 30 min. Čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prenese u DCM (200 mL), ispere sa
15% K2CO3i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i nakon toga koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (9.95 g, 23.22 mmol, 98 % prinos) kao braon pena koja se koristi za sledeću fazu bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.24 (d, J=8.53 Hz, 2 H) 6.85 (d, J=8.28 Hz, 2 H) 6.66 - 6.73 (m, 1 H) 6.57 - 6.63 (m, 1 H) 6.47 (d, J=7.78 Hz, 1 H) 3.90 (s, 2 H) 3.78 (s, 3 H) 3.13 (dt, J=13.30, 6.65 Hz, 4 H) 2.53 (s, 3 H) 1.58 - 1.76 (m, 4 H) 1.45 (s, 9 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.00, [M+H]<+>= 429.2
Faza 4: terc-butil (4-(2-amino-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)karbamat, hidrobromid
[0677]
[0678] Terc-butil(4-((2-amino-3-((4-metoksibenzil)(metil)amino)fenil)amino)butil)karbamat (9.95 g, 23.22 mmol) se rastvori u metanolu (80 mL) i doda se cijanogen bromid (4.64 mL, 23.22 mmol). Smeša se meša 18 sati na RT, koncentruje pod vakuumom do ~1/4 originalne zapremine i dodaju se MeCN (50 mL) i toluen (50 mL). Smeša se koncentruje do sušenja i
2
suši pod vakuumom 16 h da se dobije naslovljeno jedinjenje (12.54 g, kvantitativni prinos) kao tamna braon čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.04, [M+H]<+>= 454.2.
Faza 5: etil 4-(5-(5-((1-(4-((terc-butoksikarbonil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0679]
[0680] Smeša 1-(5-(5-(etoksikarbonil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-4-il)pentil)-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (1g, 2.66 mmol), terc-butil (4-(2-amino-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)butil)karbamat, hidrobromida (1.704 g, 3.19 mmol), TEA (1.111 mL, 7.97 mmol), EDC (0.662 g, 3.45 mmol) i HOBt (0.610 g, 3.98 mmol) u NMP (25 mL) se meša u toku noći na RT u atmosferi azota. Reakcija se razblaži sa EtOAc (100 mL), ispere sa zasićenim NaHCO3, 5% LiCl i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira, koncentruje i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-45 % EtOAc u DCM) da se dobije etil naslovljeno jedinjenje (1.3 g, 1.601 mmol, 60.3 % prinos) kao ružičasta čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.56, [M+H]<+>= 812.6.
Faza 6: etil 4-(5-(5-((1-(4-aminobutil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3- metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat, 2 hidrohlorid
[0681]
2
[0682] 4N rastvor HCl (2.232 mL, 8.93 mmol) se doda u promešani rastvor etil 4-(5-(5-((1-(4-((terc-butoksikarbonil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (1.45 g, 1.786 mmol) u metanolu (15 mL). Smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Reakcija se koncentruje pod vakuumom do ~1/5 originalne zapremine i dodaju se MeCN (10 mL) i toluen (10 mL). Smeša se koncentruje do sušenja i suši pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.45 g, 1.792 mmol, 100 % prinos) kao narandžasto-crvena čvrsta supstanca koja se koristi za sledeću fazu bez prečišćavanja.
Pretpostavljeni kvantitativni prinos. LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.19, [M+H]<+>= 712.6
Faza 7: etil 4-(5-(5-((1-(4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il) pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat.
[0683]
[0684] U rastvor etil 4-(5-(5-((1-(4-aminobutil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-
2
benzo[d]imidazol-2- il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat, 2 hidrohlorida (100 mg, 0.124 mmol) u DMSO (1 mL) se doda TEA (0.086 mL, 0.618 mmol) a nakon toga se doda 4-fluoro-3-nitrobenzamid (22.76 mg, 0.124 mmol) i smeša se meša na 70 °C u toku noći. Reakcija se razblaži sa vodom, ekstrahuje tri puta sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti sa flash hromatografijom na silika gelu (EtOH/EtOAc 0-5%) da se dobije naslovljeno jedinjenje (74 mg, 0.084 mmol, 68.3 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 8.69 (s, 1 H) 7.91 (d, J=9.03 Hz, 1 H) 7.18 - 7.31 (m, 3 H) 7.09 (d, J=8.03 Hz, 1 H) 6.96 (d, J=9.04 Hz, 1 H) 6.82 - 6.92 (m, 3 H) 6.66 (s, 1 H) 4.65 (t, J=6.53 Hz, 2 H) 4.20 - 4.43 (m, 8 H) 3.76 (s, 3 H) 3.48 (t, J=6.27 Hz, 2 H) 2.88 (s, 3 H) 2.59 (t, J=7.40 Hz, 2 H) 2.21 (s, 3 H) 2.11 (s, 3 H) 2.03 - 2.08 (m, 2 H) 1.72 - 1.90 (m, 4 H) 1.41 - 1.55 (m, 2 H) 1.22 - 1.35 (m, 9 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.41, [M+H]<+>= 877.5
Faza 8: etil 4-(5-(5-((1-(4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0685]
[0686] Cink (0.240 g, 3.66 mmol) se u porcijama doda u promešani rastvor etil 4-(5-(5-((1-(4-((4-karbamoil-2-nitrofenil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H- pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (1.07 g, 1.221 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL). Smeša se meša 30 min i doda se nova porcija cinka (0.240 g, 3.66 mmol). Smeša se meša još 30 min, čvrsta supstanca se
2
izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prenese u DCM (50 mL) i ispere sa 15 % K2CO3i nakon toga slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i nakon toga koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.16 g, 1.234 mmol) kao braon pena koja se koristi za sledeću fazu bez prečišćavanja. Pretpostavljeni kvantitativni prinos. LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.29, [M+H]<+>= 847.6
Faza 9: etil 4-(5-(5-((1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0687]
[0688] Etil-4-(5-(5-((1-(4-((2-amino-4-karbamoilfenil)amino)butil)-4-((4-metoksibenzil)-(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat (1.03 g, 1.217 mmol) se rastvori u metanolu (5 mL) i doda se cijanogen bromid (0.243 mL, 1.217 mmol). Smeša se meša 18 sati na RT. Reakcija se koncentruje, ostatak se prenese u 10 % MeOH u DCM (100 mL) i ispere sa 10 % K2CO3i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti flash hromatografijom na silika gelu (2M rastvor NH3u smeši MeOH/DCM 0-10 %) da se dobije naslovljeno jedinjenje (870 mg, 0.999 mmol, 82 % prinos) kao svetlo-ljubičasta pena.<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.75 (s, 1 H) 7.55 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.18 -7.29 (m, 3 H) 7.15 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.00 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 6.81 - 6.93 (m, 3 H) 6.65 (s, 1 H) 4.62 (t, J=6.65 Hz, 2 H) 4.19 - 4.41 (m, 8 H) 4.03 - 4.13 (m, 2 H) 3.75 (s, 3 H) 3.37 (s, 1 H) 2.88 (s, 3 H) 2.58 (t, J=7.40 Hz, 2 H) 2.24 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 1.77 - 2.00 (m, 6 H) 1.42 -
2
1.54 (m, 2 H) 1.27 (t, J=7.03 Hz, 9 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.20, [M+H]<+>= 872.5
Faza 10: 4-(5-(5-((1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0689]
[0690] U suspenziju etil 4-(5-(5-((1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksilata (870 mg, 0.999 mmol) u metanolu (8 mL) se doda NaOH (4.99 mL, 4.99 mmol) i dobijeni bistar homogeni rastvor se meša u toku noći na rt. Doda se metanol (8 mL) a nakon toga se u kapima doda 1 M rastvor HCl (5 mL). Smeša se koncentruje da se ukloni najveći deo metanola i doda se voda.
Precipitati se filtriraju, isperu sa vodom, suše na vazduhu i nakon toga suše pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (782 mg, 0.928 mmol, 93 % prinos) kao svetlo ružičasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.83 (br. s., 1 H) 7.71 (s, 1 H) 7.53 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.01 - 7.22 (m, 7 H) 6.84 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 6.67 (br. s., 1 H) 4.42 (br. s., 2 H) 4.34 (q, J=7.09 Hz, 2 H) 4.12 (br. s., 2 H) 3.97 - 4.06 (m, 2 H) 2.85 (s, 3 H) 2.52 - 2.56 (m, 2 H) 2.15 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 1.81 (br. s., 2 H) 1.70 (d, J=6.36 Hz, 4 H) 1.34 - 1.46 (m, 2 H) 1.14 - 1.27 (m, 6 H). LCMS (LCMS Postupak E): Rt = 1.02, [M+H]<+>= 843.5
Referentni Primer 47
2
8-etil-23-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamid
[0691]
[0692] Rastvor 4-(5-(5-((1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-4-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (200 mg, 0.237 mmol) u DMF (5 mL) se na 60 °C u atmosferi azota polako dodaje (8 sati) preko špric pumpe u smešu 1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ola (64.1 mg, 0.475 mmol), DMAP (2.90 mg, 0.024 mmol) i EDC (68.2 mg, 0.356 mmol) u DMF (5 mL). Reakcija se meša dodatnih 24 sata, koncentruje pod vakuumom i ostatak se rastvori u 10% MeOH u DCM. Doda se zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i smeša se ekstrahuje sa 10% MeOH u DCM. Kombinovani ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju, koncentruju, a ostatak se prečisti flash hromatografijom na silika gelu (2M rastvor NH3u MeOH/DCM 0-10 %) da se dobije naslovljeno jedinjenje (40 mg, 0.048 mmol, 20.44 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.88 (s, 2 H) 8.02 (d, J=1.47 Hz, 2 H) 7.82 (d, J=8.56 Hz, 1 H) 7.49 - 7.65 (m, 1 H) 7.38 (br. s., 1 H) 7.20 (br. s., 3 H) 6.85 (br. s., 3 H) 6.50 - 6.64 (m, 1 H) 4.54 - 5.18 (m, 3 H) 4.48 (d, J=7.09 Hz, 2 H) 4.20 (br. s., 5 H) 3.71 (s, 3 H) 2.72 -2.91 (m, 5 H) 2.18 (br. s., 3 H) 2.09 (s, 3 H) 1.77 - 1.97 (m, 6 H) 1.49 (br. s., 2 H) 1.30 (t, J=7.09 Hz, 5 H). LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.18, [M+H]<+>= 825.8.
Referentni Primeri 48 - 50
2 1
Referentni Primer 48
8-etil-10,18-dimetil-23-(metilamino)-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31tetradeka-hidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamid
[0694]
2 2
[0695] Pd-C (0.258 g, 0.242 mmol) se doda u rastvor 8-etil-23-((4-metoksibenzil)(metil)amino)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29, 30,31-tetradekahidrobenzo-[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]-pentaazaciklohenikozin-3-karboksamida (2.0 g, 2.424 mmol) u MeOH (20 mL) i DCM (20 mL). Boca se prečisti sa azotom, nakon toga sa vodonikom i smeša se meša u atmosferi H2. Nakon 8 sati Pd/C se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije bela čvrsta supstanca koja se ispere sa MeOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.25g, 1.773 mmol, 73.2 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (br. s., 1 H) 12.53 (br. s., 1 H) 8.02 (br. s., 1 H) 7.99 (br. s., 1 H) 7.81 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.34 (br. s., 1 H) 7.13 (t, J=7.70 Hz, 1 H) 6.83 (d, J=7.82 Hz, 1 H) 6.72 (d, J=4.16 Hz, 1 H) 6.55 (s, 1 H) 6.41 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 4.75 (br. s., 2 H) 4.48 (d, J=6.85 Hz, 2H) 4.22 (br. s., 4 H) 2.82 (d, J=3.91 Hz, 5 H) 2.16 (br. s., 3 H) 2.09 (br. s., 3 H) 1.90 (br. s., 4 H) 1.81 (br. s., 2 H) 1.49 (br. s., 2 H) 1.38 (br. s., 2 H) 1.30 (t, J=6.85 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.01, [M+H]<+>= 705.5
Referentni Primer 49
2-((3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-23-il)(metil)amino)-2-oksoetil acetat
[0696]
[0697] 2-hloro-2-oksoetil acetat (0.069 mL, 0.638 mmol) se na RT doda u suspenziju 8-etil-10,18-dimetil-23-(metilamino)-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-
2
l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamida (300 mg, 0.426 mmol) u piridinu (5 mL). Smeša se meša u toku noći a nakon toga koncentruje i ostatak se prenese u 10 % MeOH u DCM (100 mL) i ispere sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti flash hromatografijom na silika gelu (2 M rastvor NH3u MeOH/DCM 0-10 %) da se dobije naslovljeno jedinjenje (198 mg, 0.246 mmol, 57.8 % prinos) kao svetlo ružičasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, METANOL<-d4>) δ ppm 7.97 (s, 1 H) 7.86 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.59 (d, J=6.78 Hz, 1 H) 7.38 - 7.53 (m, 2 H) 7.34 (d, J=7.78 Hz, 1 H) 6.60 - 6.75 (m, 1 H) 4.76 (br. s., 2 H) 4.48 - 4.60 (m, 3 H) 4.31 (br. s., 5 H) 3.54 (br. s., 1 H) 3.36 (s, 2 H) 2.89 (br. s., 2 H) 2.26 (br. s., 3 H) 2.18 (s, 3 H) 2.04 (br. s., 6 H) 1.96 (s, 1 H) 1.88 (d, J=6.53 Hz, 2 H) 1.60 (br. s., 2 H) 1.33 - 1.49 (m, 5 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.94, [M+H]<+>= 805.6
Referentni Primer 50
8-etil-23-(2-hidroksi-N-metilacetamido)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31-tetra-dekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamid
[0698]
[0699] U rastvor 2-((3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-23-il)(metil)amino)-2-oksoetil acetata (132 mg, 0.164 mmol) u MeOH (4 mL) se doda litijum hidroksid (1.640 mL, 1.640 mmol) i smeša se meša na RT. Nakon 3 sata u suspenziju se doda 1.64 mL 1M rastvor HCl da
2 4
se dobije bistar rastvor. Veći deo MeOH se ukloni pod vakuumom, doda se voda i čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, ispere sa vodom, suši na vazduhu i nakon toga suši pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (119 mg, 0.156 mmol, 95 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.87 (s, 2 H) 7.93 - 8.06 (m, 2 H) 7.83 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 7.50 - 7.71 (m, 2 H) 7.35 (br. s., 2 H) 7.25 (d, J=7.09 Hz, 1 H) 6.56 (br. s., 1 H) 4.54 - 4.88 (m, 3 H) 4.49 (q, J=7.01 Hz, 2 H) 4.24 (br. s., 5 H) 3.49 - 3.88 (m, 2 H) 3.22 (br. s., 2 H) 2.82 (br. s., 2 H) 2.16 (br. s., 3 H) 2.10 (s, 3 H) 1.69 - 2.02 (m, 6 H) 1.50 (br. s., 2 H) 1.31 (t, J=7.09 Hz, 5 H); LCMS Postupak D: Rt = 0.88 min, [M+H]<+>= 763.6.
Referentni Primer 51
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etoksi)-1H-enzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0700]
[0701] Referentni Primer 51 može da se izradi u skladu sa postupkom 14 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: smeša 4-(2-bromoetil)tetrahidro-2H-pirana (12.54 mg, 0.065 mmol), (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2- en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-hidroksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (45 mg, 0.065 mmol) i kalijum karbonata (22.44 mg, 0.162 mmol) se zagreva 3 hr na 85 °C u DMSO (650 µl) i NMP (650 µl), a nakon toga ohladi. Ostatak se prečisti hromatografijom sa kiselom
2
reverznom fazom (5% do 50% u 0.1% TFA u MeCN do 0.1% TFA u vodi; 50x30mm Phenomenex Eclipse, 5mM C18 kolona, 20 min gradijent). Čiste frakcije se podele između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata, organski sloj se izdvoji, suši preko natrijum sulfata i ispari pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (8mg, 15.3% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (DMSO-d6, 600MHz): δ (ppm) 12.83 (br s, 2 H), 7.97-8.00 (m, 1 H), 7.93 (br s, 2 H), 7.69 (dd, J=8.4, 1.5 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.41 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.33 (br d, J=11.4 Hz, 2 H), 7.29 (s, 1 H), 6.55 (s, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.96-6.02 (m, 1 H), 5.70-5.79 (m, 1 H), 4.93 (br d, J=5.0 Hz, 2 H), 4.82 (br d, J=5.3 Hz, 2 H), 4.49-4.58 (m, 4 H), 3.96 (br t, J=6.7 Hz, 2 H), 3.75 (br dd, J=11.2, 2.9 Hz, 2 H), 3.16-3.23 (m, 2 H), 2.12 (d, J=12.7 Hz, 6 H), 1.50-1.53 (m, 1 H), 1.45-1.49 (m, 2H), 1.43 (br d, J=11.9 Hz, 2 H), 1.28 (m, 6 H), 1.08 (br dd, J=12.0, 3.6 Hz, 2 H); LCMS (LCMS Postupak K): Rt = 0.90 min, [M+H]<+>= 805.5.
Referentni Primer 52
(E)-4-((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)butanoatna kiselina
[0702]
[0703] Referentni Primer 52 može da se izradi u skladu sa kombinacijom postupaka 14 i 16 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: metil (E)-4-((5-karbamoil-1-(4-(5- karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-
2
karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)oksi)butanoat (40 mg, 0.050 mmol) se rastvori u MeOH i THF (1mL svaki), doda se natrijum hidroksid (101 µl, 0.505 mmol, 5N) i smeša meša 18h na 25 °C. Reakcija se nakon toga podeli između EtOAc i 10% vodenog rastvora kalijum hidrogen sulfata. Dobijena gumasta gel smeša se ispari skoro do sušenja, rastvori u 2mL MeOH sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (5N) da se rastvori. Ostatak se prečisti hromatografijom sa baznom reverznom fazom (10% do 55% u 0.1% NH4OH u vodi do MeCN; 50x30mm Phenomenex Gemini, 5µM C18110A kolona, 10min gradijent). Čiste frakcije se sakupe i produkt izdvoji konkcentrovanjem pod vakuumom a nakon toga suši pod visokim vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol<-d4>) δ ppm 8.45 - 8.76 (m, 1 H), 7.85 - 8.12 (m, 1 H), 7.49 - 7.78 (m, 2 H), 6.92 - 7.30 (m, 2 H), 6.31 - 6.58 (m, 2 H), 5.83 - 6.02 (m, 1 H), 5.56 - 5.75 (m, 1 H), 4.45-4.66 (m, 5 H), 3.91 - 4.16 (m, 4 H), 3.6 (q, J= 6.3 Hz, 4 H), 2.31 (m, 2 H), 2.18 (s, 6 H), 1.29 (q, J= 6.1 Hz, 4 H), 1.13 (t, J= 6.1 Hz, 6 H); LCMS Postupak K: Rt = 0.75 min, [M+H]<+>= 779.4.
Referentni Primer 53
3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H- benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazoll-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat, 2 hidrohlorid
[0704]
Faza 1: Di-terc-butil (3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-
2
metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil) fosfat
[0705]
[0706] (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]-imidazol-1-il)but-2-en- 1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-hidroksipropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (100 mg, 0.133 mmol) se suspenduje u DMF (1 mL), doda se 2H-tetrazol u MeCN (1.480 mL, 0.666 mmol) i smeša se koncentruje na rotacionom isparivaču da se ukloni MeCN. Reaktivna smeša se ohladi u vodenom kupatilu sa ledom i nakon toga se doda rastvor di-terc-butil diizopropilfosforamidita (148 mg, 0.533 mmol) u DMF (1 mL). Smeša se meša 1 hr, polako zagreje na RT i ostavi 16 sati u toku noći, nakon toga ohladi u ledenom kupatilu i dodaju se još 2eq 2H-tetrazola MeCN i 2eq. di-tercbutil diizopropilfosforamidita i reakcija meša 2 sata. Nakona toga se dodaju još 2eq 2H-tetrazola u MeCN i 2eq di-terc-butil diizopropilfosforamidita i reakcija meša 2 sata. Reakcija se nakon toga ohladi u ledenom kupatilu, doda se H2O2(0.272 mL, 2.66 mmol, 30%) i mešanje se nastavi 30 min. Reaktivna smeša se sipa u vodu (50 ml) koja sadrži smešu NaHCO3i Na2S2O3(1:1, 2M, 1 ml). Lepljiva pasta se filtrira, ispere sa vodom i suši na filteru 2 dana. Ostatak se rastvori u THF, kombinuje sa ekstraktima iz filtrata koristeći 3:1 smešu CHCl3:EtOH, organski delovi se suše preko MgSO4, koncentruju, suše na silika gelu (12g kolona) i prečiste hromatografijom na silika gelu koristeći 1-10% MeOH u DCM (+1% NH4OH) u toku 5 min nakon toga 10% u toku 15 min do naslovljenog jedinjenja (23 mg, 0.024 mmol, 18.31 % prinos) kao bela čvrsta supstanca. Jedinjenje se koristi za sledeću fazu direktno bez prečišćavanja. LCMS (LCMS Postupak I): Rt = 1.03 min, [M+H]<+>= 943.3
Referentni Primer 53
2
3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazoll-4-il)oksi)propil dihidrogen fosfat, 2 hidrohlorid
[0707]
[0708] Di-terc-butil(3-(((Z)-6-karbamoil-3-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)oksi)propil) fosfat (22 mg, 0.023 mmol) se suspenduje u dioksanu (1 mL), doda se 3M rastvor HCl u CPME (0.156 mL, 0.467 mmol) na RT. Nakon 2 sata, doda se dietil etar (50 ml), precipitat se filtrira u atmosferi N2, ispere sa etrom i suši 2 sata u vakuumskoj pećnici na 40 °C da se dobije naslovljeno jedinjenje (18 mg, 0.020 mmol, 85 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (700 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 12.83 (br s, 2H), 7.92-8.05 (m, 4H), 7.73 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H), 7.64-7.67 (m, 1H), 7.43 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30-7.39 (m, 4H), 6.55 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.02 (dt, J = 15.4, 5.5 Hz, 1H), 5.62-5.77 (m, 1H), 4.95 (br d, J = 4.8 Hz, 3H), 4.83 (br d, J = 5.4 Hz, 3H), 4.44-4.59 (m, 9H), 4.15 (br t, J = 6.1 Hz, 5H), 3.94-3.99 (m, 4H), 2.11 (s, 4H), 2.09 (s, 3H), 1.96 (quin, J = 6.0 Hz, 3H), 1.25 (q, J = 7.3 Hz, 8H); LCMS (LCMS Postupak I): Rt = 0.64 min, [M+H]<+>= 831.2.
Referentni Primer 54
3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-
2
I][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksilna kiselina
[0709]
Faza 1: Metil 3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,-14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo-[4,5]imidazo[1,2a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksilat
[0710]
[0711] Referentni Primer 54 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Ovde su obezbeđene dve poslednje faze izrade:
u suspenziju 24-cijano-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,-14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo-[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamida (900 mg, 1.284 mmol) u MeOH (40 mL) se doda bor trifluorid eterat (0.814 mL, 6.42 mmol).
Reaktivna smeša se meša 48 sati na 80 °C a nakon toga koncentruje pod vakuumom i sipa u vodu sa ledom. Precipitat se sakupi filtriranjem, ispere sa vodom i suši da se dobije naslovljeno jedinjenje (600 mg, 0.818 mmol, 63.7 % prinos) kao siva čvrsta supstanca. LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.406 min, [M+H]<+>= 733.7
Referentni Primer 54
3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksilna kiselina
[0712]
[0713] U suspenziju metil 3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-etradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2a]benzo[4,5]imidazo [2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksilata (420 mg, 0.572 mmol) u MeOH (15 mL) i vodi (15 mL) se doda NaOH (229 mg, 5.72 mmol). Reaktivna smeša se meša 16 sati na 25 °C. Smeša se razblaži sa vodom (20mL), zakiseli do pH=3 sa 2N rastvorom HCl i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije sirovi produkt. Sirovi produkt se prečisti preparativnom HPLC (Gemini Prep C18 OBD kolona, 5µ silika gel, 21.2 mm promer, 150mm dužine), koristeći opadajuće polarne smeše vode (koja sadrži 0.1 % TFA) i MeCN kao eluente. Frakcije koje sadrže traženo jedinjenje se upare do sušenja da se dobije naslovljeno jedinjenje (190 mg, 0.264 mmol, 46.1% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 12.89 (s, 1H), 8.13 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.52 (m, 3H), 7.45 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.51 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 4.36 (t, J
1
= 7.0 Hz, 2H), 4.17 (s, 2H), 4.10 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.65 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.10 (t, J = 9.2 Hz, 6H), 1.87 - 1.61 (m, 6H), 1.46 (s, 2H), 1.28 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.19 (s, 2H); LCMS Postupak A: Rt = 1.295 min, [M+H]<+>= 720.2
Referentni Primer 55
Metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-hidroksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat, 2 so trifluorosirćetne kiseline
[0714]
[0715] Referentni Primer 55 može da se izradi u skladu sa postupkom 11 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u RB boci zapremine 50 mL, metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat (35 mg, 0.048 mmol) se izmeša u DCM. Nakon toga se u porcijama doda bor tribromid (58.0 ml, 0.058 mmol). Reaktivna smeša se meša na RT u toku noći (približno 18 sati), nakon čega se reakcija neutrališe sa MeOH i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt koji sadrži i metoksi i fenol jedinjenja se prečisti reverzno faznom HPLC (Gilson 115 merač tečnosti, Gilson 333 Aquious pumpa, Gilson 334 Organic pump, Gilson UV/VIS-155 detektor, koristi se Trilution v1.4 softver. Lunar kolona: acetonitril, 0.1%TFA / voda eluent, 0-20% gradijent. Tražene frakcije se kombinuju i suše pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (5 mg, 5.07 umol, 10.47% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.62 - 13.04 (m, 2 H) 10.69 (s, 1 H) 7.99 (s, 2 H) 7.72 - 7.82
2
(m, 1 H) 7.65 (s, 1 H) 7.54 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=2.27 Hz, 2 H) 6.59 (s, 2 H) 4.57 (dd, J=6.82, 4.04 Hz, 5 H) 4.44 (br. s., 3 H) 3.80 - 3.90 (m, 3 H) 2.10 (d, J=4.55 Hz, 6 H) 1.89 (br. s., 4 H) 1.31 (t, J=7.07 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.87 min, [M+H]<+>= 710.6
Referentni Primer 56
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-4-fluoro-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0716]
[0717] Referentni Primer 56 može da se izradi u skladu sa postupkom 20 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u suspenziju (E)-2-amino-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (50 mg, 0.073 mmol) u DMF (2 mL) se na RT dodaju rastvor 1-etil-3-fluoro-4-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (31.5 mg, 0.183 mmol), HOBt (16.8 mg, 0.110 mmol), HATU (69.5 mg, 0.183 mmol) i trietilamin (0.04 mL, 0.3 mmol) u DMF (2 mL). Smeša se meša u toku noći, nakon toga zagreva 30 min na 50 °C. Doda se voda i mutni rastvor se ohladi u frižideru dok se ne formira precipitat. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i prečisti preko silika gela (Isco 4 g kolona silika gela), uz eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (4 mg, 4.77 µmol, 6.5 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.81 (br. s., 2 H), 7.99 - 8.03 (m, 2 H), 7.92 - 7.97 (m, 1 H), 7.67 - 7.73 (m, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.30 - 7.44 (m, 4 H), 6.53 (br. s., 1 H), 5.93 - 6.04 (m, 1 H), 5.68 - 5.82 (m, 1 H), 4.90 - 4.97 (m, 2 H), 4.76 - 4.84 (m, 2 H), 4.45 - 4.57 (m, 4 H), 3.98 (br. s., 2 H), 3.44 - 3.49 (m, 4 H), 2.21 - 2.29 (m, 2 H), 2.17 - 2.21 (m, 4 H), 2.07 - 2.15 (m, 6 H), 1.63 - 1.74 (m, 2 H), 1.13 - 1.21 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak J): Rt = 0.65 min, [M+H]<+>= 838.3
Referentni Primer 57
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-hidroksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, so triflurosirćetne kiseline
[0718]
[0719] Referentni Primer 57 može da se izradi u skladu sa postupkom 20 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, bis so trifluorosirćetne kiseline (17 mg, 0.018 mmol) u DCM (2 mL) se na -78 °C doda 1M rastvor BBr3u DCM (50 µL, 0.050 mmol). Nakon 1 hr, reakcija se zagreje na RT i LC/MS analiza pokazuje da nema napretka u reakciji. Reakcija se ohladi na 0 °C i doda se još 100 µL 1M rastvora BBr3u DCM. Reakcija se ostavi da se polako zagreje na RT u toku 72 hr, ohladi se na 0 °C i nakon toga se doda još 100 µL 1M rastvora BBr3u DCM. Nakon još 24 hr, doda se MeOH (~ 2 mL) i reakcija se koncentruje. Ostatak se prečisti reverzno faznom HPLC, uz eluiranje sa 20 - 45 % MeCN u H2O (sa 0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (8 mg, 0.01 mmol, 55 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.80 (br.
4
s, 1H), 10.48 (s, 1 H), 7.98 (d, J=1.27 Hz, 2 H), 7.83 (br. s., 1 H), 7.75 (dd, J=8.36, 1.52 Hz, 1 H), 7.53 (d, J=8.36 Hz, 1 H), 7.43 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 7.34 (br. s., 1 H), 7.14 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.10 (s, 1 H), 6.97 (s, 1 H), 6.58 (d, J=9.63 Hz, 2 H), 4.49 - 4.65 (m, 4 H), 4.43 (t, J=6.40 Hz, 2 H), 4.27 (t, J=7.00 Hz, 2 H), 2.10 (d, J=6.34 Hz, 6 H), 1.82 - 1.95 (m, 4 H), 1.30 (td, J=7.03, 3.68 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.78 min, [M+H]<+>= 695.4
Referentni Primer 58
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-hidroksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0720]
[0721] Referentni Primer 58 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol- 5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-metoksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (300 mg, 0.400 mmol) u DCM (5 mL) se na 0 °C doda BBr3(501 mg, 2.00 mmol). Nakon 3 hr, reakcija se neutrališe sa vodom (5 mL) i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Ova čvrsta supstanca se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (21 mg, 0.029 mmol, 7 % prinos) kao siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.83 (s, 2 H), 7.97 (d, J=12.2 Hz, 3 H), 7.62 - 7.78 (m, 2 H), 7.29 - 7.50 (m, 4 H), 6.54 (d, J=14.1 Hz, 2 H), 5.99 (s, 1 H), 5.86 (s, 1 H), 4.99 (s, 3 H), 4.82 (s, 2 H), 4.53 (d, J=6.8 Hz, 4 H), 4.07 (s, 2 H), 3.63 (s, 2 H), 2.11 (s, 6 H), 1.27 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.333 min, [M+H]<+>= 737.1
Referentni Primer 59
(E)-1-(4-(5-karbamoil- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7- etoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0722]
[0723] Referentni Primer 59 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (58 mg, 0.38 mmol) u NMP (3 ml) se na RT dodaju HATU (171 mg, 0.450 mmol) i DIEA (0.14 mL, 0.77 mmol). Nakon 15 min, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-etoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (65 mg, 0.15 mmol) i smeša se zagreje na 60 °C. Nakon 16 hr, doda se voda i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Ovaj materijal se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (35 mg, 0.047 mmol, 33 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (s, 2 H), 7.97 (d, J=11.7 Hz, 3 H), 7.72 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.43 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.32 (d, J=12.3 Hz, 3 H), 6.55 (s, 2 H), 5.91 - 6.02 (m, 1 H), 5.78 (dd, J=13.3, 7.7 Hz, 1 H), 4.94 (d, J=4.7 Hz, 2 H), 4.83 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 4.50 - 4.57 (m, 4 H), 3.99 - 4.06 (s, 2 H), 2.12 (d, J=3.8 Hz, 6 H), 1.28 (dd, J=12.7, 6.9 Hz, 6 H), 1.18 (t, J=6.9 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.382 min, [M+H]<+>= 721.2
Referentni Primer 60
(E)-7-Bromo-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en- 1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0724]
[0725] Referentni Primer 60 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: 1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina (1.12 g, 7.28 mmol), (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-bromo-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (1.6g, 3.3 mmol), HATU (3.14 g, 8.28 mmol) i trietilamin (1.01 g, 9.93 mmol) se zagreju na 60 °C u DMF (30 mL). Nakon 12 hr, doda se voda (5 mL) i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Ovaj materijal se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (700 mg, 0.926 mmol, 28 % prinos) kao braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.05 (br. s., 1 H), 12.80 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.91 -8.00 (m, 4 H), 7.72 (d, J=8 Hz, 1 H), 7.43 - 7.47 (m, 2 H), 7.33 (s, 1 H), 6.54 (d, J=4 Hz, 2 H), 5.95 - 6.05 (m, 1 H), 5.60 - 5.70 (m, 1 H), 5.06 - 5.13 (m, 2 H), 4.75 - 4.81 (m, 2 H), 4.45 - 4.61 (m, 4 H), 2.12 (d, J=4 Hz, 6 H), 1.18 - 1.35 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.367 min, [M+H]<+>= 755.1
Referentni Primer 61
(E)-7-(Aminometil)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, so trifluorosirćetne kiseline
[0727] Referentni Primer 61 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u (E)-terc-butil ((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)metil)karbamat (410 mg, 0.509 mmol) u MeOH (10 mL) se na RT doda 36.5% HCl (0.5 mL, 0.51 mmol). Reakcija se zagreva na 40 °C i koncentruje nakon 3 h. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (9 mg, 11 µmol, 2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.07 - 12.88 (m, 1 H), 8.34 (s, 3 H), 8.00 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.95 (s, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.43 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.35 (s, 1 H), 6.56 (d, J=15.5 Hz, 2 H), 5.92 (d, J=15.9 Hz, 1 H), 5.58 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 5.23 - 5.29 (m, 2 H), 5.00 (s, 2 H), 4.82 (s, 2 H), 4.53 (dd, J=13.6, 6.6 Hz, 4 H), 4.15 (d, J=4.6 Hz, 2 H), 2.12 (d, J=3.9 Hz, 6 H), 1.28 (d, J=4.2 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.183 min, [M+H]<+>= 706.3
Referentni Primer 62
(E)-8-Etil-1,26-dimetoksi-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazol[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid, bis so trifluorosirćetne kiseline
[0728]
[0729] Referentni Primer 62 može da se izradi u skladu sa postupkom 6 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u rastvor 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (37.5 mg, 0.108 mmol), HATU (101 mg, 0.267 mmol) i TEA (86 µL, 0.62 mmol) u DMF (4.1 ml) se doda (E)-4,4’-(but-2-en-1,4-diilbis(azanediil))bis(3-amino-5-metoksibenzamid) dihidrohlorid (50 mg, 0.10 mmol). Reakcija se zagreva na 100 °C i nakon 3 hr, doda se voda. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i prečisti sa HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (1 mg, 1 µmol, 1 % prinos; nizak prinos je delimično zbog neispravnosti porta za injektiranje tokom HPLC prečišćavanja).<1>H NMR (400 MHz, MeOH-
<d4>) δ ppm 7.68 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.37 (d, J=4.56 Hz, 2 H), 6.63 (s, 1 H), 5.76 (d, J=12.67 Hz, 2 H), 5.05 (d, J=12.93 Hz, 4 H), 4.70 (br. s., 2 H), 4.46 - 4.57 (m, 2 H), 3.72 (d, J=8.36 Hz, 6 H), 2.81 (d, J=6.59 Hz, 2 H), 2.26 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 1.86 (br. s., 2 H), 1.58 (br. s., 2 H), 0.89 - 0.96 (m, 5 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.91 min, [M/2+H]<+>= 389.5
Referentni Primer 63
8-Etil-1,26-bis(3-hidroksipropoksi)-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid dihidrohlorid
[0730]
[0731] Referentni Primer 63 može da se izradi u skladu sa postupkom 6 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1,26-bis(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)propoksi)-8-etil- 10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid (18 mg, 0.016 mmol) u THF (0.5 ml) se na 0 °C doda 4 N rastvor HCl (0.025 mL, 0.099 mmol). Nakon 60 min, dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa EtOAc da se dobije naslovljeno jedinjenje (15 mg, 0.016 mmol, 97 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95 - 8.08 (m, 2 H), 7.64 - 7.70 (m, 2 H), 7.29 - 7.42 (m, 4 H), 6.51 - 6.58 (m, 1 H), 4.63 - 4.72 (m, 2 H), 4.31 - 4.50 (m, 6 H), 4.11 - 4.20 (m, 4 H), 3.42 - 3.48 (m, 4 H), 2.74 - 2.85 (m, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.10 (s, 3 H), 1.78 - 1.91 (m, 6 H), 1.64 - 1.74 (m, 4 H), 1.48 - 1.58 (m, 2 H), 1.37 - 1.47 (m, 2 H), 1.26 - 1.32 (m, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.82 min, [M+H]<+>= 867.5
Referentni Primer 64
(29R,30R)-8-Etil-29,30-dihidroksi-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,-13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin- 3,24-dikarboksamid
[0732]
1
[0733] Referentni Primer 64 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
(28aR,31aR)-8-Etil-10,18,30,30-tetrametil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,-20,21,28,28a,31a,32-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p][1,3]dioksolo[4,5-s]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]-pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid (500 mg, 0.632 mmol), mravlja kiselina (15 mL, 391 mmol) i voda (1.5 mL) se mešaju na 25 °C. Nakon 48 hr, smeša se koncentruje i ostatak se prečisti preparativnom HPLC (Gemini-C18 kolona, 5µ silika gel, 21 mm promer, 150 mm dužine), uz eluiranje sa 10 - 30 % voda u MeCN (sa 0.1 % mravlje kiseline) da se dobije naslovljeno jedinjenje (7.5 mg, 9.5 µmol, 1.5 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.01 (d, J=13.1 Hz, 2 H), 7.81 - 7.93 (m, 2 H), 7.63 - 7.76 (m, 2 H), 6.66 (s, 1 H), 4.83 (s, 1 H), 4.62 - 4.74 (m, 1 H), 4.42 - 4.63 (m, 6 H), 4.12 - 4.33 (m, 2 H), 2.90 - 3.00 (m, 1 H), 2.71 -2.82 (m, 1 H), 2.23 (d, J=18.2 Hz, 6H), 1.84 - 2.00 (m, 2 H), 1.61 - 1.73 (m, 2 H), 1.37 - 1.47 (m, 2 H), 1.38 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.295 min, [M+H]<+>= 751.2
Referentni Primer 65
8-Etil-10,13,13,18-tetrametil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0734]
11
[0735] Referentni Primer 65 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi:
u 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)-3,3-dimetilpentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (192 mg, 0.510 mmol) u NMP (10 mL) se doda HATU (194 mg, 0.510 mmol). Reakcija se zagreva na 40 °C i doda se 1,1’-(propan-1,3-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (200 mg, 0.510 mmol). Nakon zagrevanja u toku noći, reakcija se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (13 mg, 0.017 mmol, 3.4 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.01 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.85 (d, J=8.4 Hz), 7.51 (t, J=8.4 Hz, 2 H), 6.65 (s, 1 H), 4.73 - 4.77 (m, 2 H), 4.45 - 4.53 (m, 2 H), 4.28 - 4.33 (m, 4 H), 2.78 - 2.87 (m, 2 H), 2.29 (d, J=11.6 Hz, 6 H), 1.98 (br. s., 4 H), 1.88 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 1.45 - 1.54 (m, 2 H), 1.27 - 1.39 (m, 5 H), 1.07 (s, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.397 min, [M+H]<+>= 747.3
Referentni Primer 66
8-Etil-12,13-dihidroksi-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-di-karboksamid
[0736]
12
[0737] Referentni Primer 66 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso- 6,7,8,11,14,15,20,21,28,29,30,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1- e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]-pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid (350 mg, 0.488 mmol) i NMO (114 mg, 0.977 mmol) u terc-BuOH (9 mL) i vodi (3 mL) se doda osmijum tetroksid (7.7 mL, 0.024 mmol). Nakon 4 h na 25 °C, reakcija se neutrališe sa Na2SO3i razblaži sa DCM (50 mL). Smeša se ispere sa vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL) i organski sloj se suši preko Na2SO4i koncentruje. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC (Gemini-C18 kolona, 5µ silika gel, 21 mm promer, 150 mm dužine), uz eluiranje sa 20 - 40 % MeCN u vodi (sa 0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (11 mg, 0.015 mmol, 3.0 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.14 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.94 (dd, J=27.0, 8.4 Hz, 2 H), 7.68 (dd, J=37.9, 8.5 Hz, 2 H), 6.68 (s, 1 H), 5.29 - 5.41 (m, 1 H), 4.38 -4.61 (m, 6 H), 4.20 - 4.29 (m, 1 H), 3.74 (t, J=12.4 Hz, 2 H), 3.16 (dd, J=14.1, 10.2 Hz, 1 H), 2.95 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 2.38 - 2.49 (m, 1 H), 2.29 (s, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 2.27 (s, 3 H), 2.04 -2.15 (m, 3 H), 1.92 - 1.99 (m, 1 H), 1.45 (t, J=8 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.270 min, [M+H]<+>= 750.9
Referentni Primer 67
(1r,39r)-14-etil-16,25-dimetil-12,28-diokso-2,9,11,14,15,23,24,29,31,38- dekaazaoktacyclo[37.2.2.02,10.03,8.013,17.023,27.030,38.032,37]tritetrakonta-3,5,7,9,13(17),15,24,26,30,32,34,36-dodekan-6,34-dikarboksamid
[0738]
1
[0739] Referentni Primer 67 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (483 mg, 1.39 mmol) u DMF (10 mL) se na 25 °C dodaju HATU (1.10 g, 2.89 mmol) i DIEA (1.01 mL, 5.78 mmol). Nakon 4 hr, doda se 1,1’-((1R,4R)-cikloheksan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (500 mg, 1.16 mmol) i reakcija se meša 16 h na 80 °C. Doda se voda, pojavljuje se braon čvrsta supstanca koja se sakupi. Čvrsta supstanca se dva puta podvrgne prečišćavanju da se dobije produkt (3 mg, 4 µmol, 0.3 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.04 (s, 2 H), 8.07 (d, J=8.2 Hz, 6 H), 7.88 (d, J=8.2 Hz, 2 H), 7.39 (s, 2 H), 6.58 (s, 1 H), 4.95 (br, s., 2 H), 4.69 (br. s., 2 H), 4.48 (br. s., 2 H), 2.60-2.85 (m, 6 H), 1.99 - 2.24(m, 10 H), 1.80 - 2.01 (m, 3 H), 1.49 - 1.65 (m, 4 H), 1.34 (br. s., 4 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.413 min, [M+H]<+>= 745.3
Referentni Primer 68
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0740]
14
[0741] Referentni Primer 68 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (215 mg, 1.40 mmol) u DMF (5 mL) se na 25 °C dodaju DIEA (0.489 mL, 2.80 mmol) i HATU (638 mg, 1.68 mmol). Nakon 30 min, doda se 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-izopropoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (260 mg, 0.560 mmol). Nakon 16 hr, doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa MeOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (55 mg, 0.075 mmol, 13 % prinos) kao braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.80 (d, J=12.5 Hz, 2 H), 7.88 - 8.01 (m, 3 H), 7.75 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.55 -7.60 (m, 2 H), 7.30 (br. s., 3 H), 6.59 (s, 2 H), 4.74 - 4.84 (m, 1 H), 4.52 - 4.63 (m, 4 H), 4.29 - 4.36 (m, 4 H),2.11 (d, J=6.5 Hz, 6 H), 1.77 - 1.94 (m, 4 H), 0.98 - 1.44 (m, 12 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.428 min, [M+H]<+>= 737.2
Referentni Primer 69
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-etoksi-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0742]
1
[0743] Referentni Primer 69 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (191 mg, 1.24 mmol) u DMF (10 mL) se na 25 °C dodaju DIEA (0.550 mL, 3.15 mmol) i HATU (600 mg, 1.58 mmol). Nakon 30 min, doda se 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-etoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (270 mg, 0.599 mmol). Nakon 16 hr, doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa MeOH da se dobije naslovljeno jedinjenje (28 mg, 0.039 mmol, 6 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.00 (s, 2 H), 7.94 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.35 (s, 2 H), 7.30 (s, 1 H), 6.59 (s, 2 H), 4.50 - 4.64 (m, 4 H), 4.31 (d, J=36.9 Hz, 4 H), 4.12 (d, J=7.0 Hz, 2 H), 2.10 (d, J=1.7 Hz, 6 H), 1.86 (s, 4 H), 1.29 (dd, J=7.7, 6.6 Hz, 6 H), 1.24 (d, J=7.0 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.426 min, [M+H]<+>= 723.2
Referentni Primer 70
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0744]
1
[0745] Referentni Primer 70 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (331 mg, 2.15 mmol) u NMP (10 mL) se na RT dodaju DIEA (0.900 mL, 5.15 mmol) i HATU (979 mg, 2.58 mmol). Nakon 30 min, doda se 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid (500 mg, 0.859 mmol) i reakcija se zagreva na 60 °C u toku noći. Doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (45 mg, 0.065 mmol, 7.6 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (s, 2 H), 7.98 (s, 2 H), 7.91 (s, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.77 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.54 - 7.64 (m, 2 H), 7.32 (d, J=9.9 Hz, 2 H), 6.60 (d, J=15.5 Hz, 2 H), 4.56 (dd, J=10.8, 7.1 Hz, 4 H), 4.39 (s, 2 H), 4.29 (s, 2 H), 2.62 (s, 3 H), 2.09 (d, J=13.4 Hz, 6 H), 1.89 (d, J=22.1 Hz, 4 H), 1.30 (q, J=7.3 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.341 min, [M+H]<+>= 693.3
Referentni Primer 71
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(morfolinometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0746]
1
[0747] Referentni Primer 71 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (302 mg, 1.96 mmol) u NMP (3 mL) se na RT dodaju DIEA (0.777 mL, 4.45 mmol) i HATU (846 mg, 2.23 mmol). Nakon 1 hr, doda se 2-amino-1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-7-(morfolinometil)-1H-benzo[d]-imidazol-5-karboksamid (450 mg, 0.890 mmol) i reakcija se zagreva na 60 °C u toku noći. Doda se voda i dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (70 mg, 0.090 mmol, 10 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.99 (br. s., 2 H), 9.89 (br. s., 2 H), 7.99 - 8.11 (m, 5 H), 7.87 (s, 1 H), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.51 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.35 (s, 1 H), 6.66 (s, 1 H), 6.62 (s, 1 H), 4.53 - 4.61 (m, 5 H), 4.47 (s, 2 H), 4.26 (s, 2 H), 3.92 (br. s., 2 H), 3.60 (br. s., 2 H), 3.36 (br. s., 2 H), 2.10 (s, 3 H), 2.07 (s, 3 H), 1.83 (d, J=22.7 Hz, 4 H), 1.23 - 1.45 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.255 min, [M+H]<+>= 778.3
Referentni Primer 72
4-(2-(Dimetilamino)acetamido)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamid
[0748]
1
[0749] Referentni Primer 72 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-amino-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso- 6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l]-[1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamid (200 mg, 0.290 mmol), 2-(dimetilamino)sirćetnu kiselinu (119 mg, 1.158 mmol), HOBt (44.3 mg, 0.290 mmol), DIEA (0.405 mL, 2.32 mmol) i DMAP (17.7 mg, 0.145 mmol) u DMF (5 mL) se na 60 °C doda HATU (661 mg, 1.74 mmol) u 10 pircija sa intevalima od 30 min. Reakcija se ohladi na RT, razblaži sa vodom i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem, ispere sa vodom i suši na vazduhu. Čvrsta supstanca se nakon toga prečisti preko silika gela (Combiflash Rf 120 g kolona, 85 mL/min), uz eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (205 mg, 0.251 mmol, 87 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.90 (br. s., 1 H), 12.55 (br. s., 1 H), 10.37 (br. s., 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.99 (br. s., 1 H), 7.83 (dd, J=8.6, 1.5 Hz, 1 H), 7.66 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.58 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.35 (d, J=7.6 Hz, 2 H), 7.22 - 7.29 (m, 1 H), 6.57 (s, 1 H), 4.69 - 4.80 (m, 2 H), 4.47 (d, J=7.1 Hz, 2 H), 4.14 - 4.34 (m, 4 H), 3.25 (s, 2 H), 2.81 (br. s., 2 H), 2.33 (s, 6 H), 2.16 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.91 (br. s., 4 H), 1.76 - 1.86 (m, 2 H), 1.48 (d, J=5.9 Hz, 2 H), 1.38 (d, J=5.1 Hz, 2 H), 1.29 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.82 min, [M+H]<+>= 776.7
Referentni Primer 73
7-(Aminometil)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)- 2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-
1
benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0750]
[0751] Referentni Primer 73 može da se izradi u skladu sa postupkom 9 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u terc-butil ((5-karbamoil-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-7-il)metil)karbamat (200 mg, 0.248 mmol) u MeOH (10 mL) se na RT doda 12 M rastvor HCl (0.5 ml, 16.5 mmol). Nakon mešanja u toku noći, smeša se koncentruje i prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (50 mg, 0.071 mmol, 29 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (s, 1 H), 7.89 - 8.01 (m, 5 H), 7.76 (d, J=6.5 Hz, 2 H), 7.56 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.33 (s, 2 H), 6.59 (d, J=12.7 Hz, 2 H), 4.47 - 4.62 (m, 6 H), 4.28 (s, 2 H), 4.07 (s, 2 H), 2.08 (d, J=10.8 Hz, 6 H), 1.89 (d, J=17.6 Hz, 4 H), 1.29 (q, J=6.9 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.176 min, [M+H]<+>= 708.3
Referentni Primer 74
(E)-1,26-Dibromo-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0752]
2
[0753] Referentni Primer 74 može da se izradi u skladu sa postupkom 6 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u (E)-1,1’-(but-2-en-1,4-diil)bis(2-amino-7-bromo-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (500 mg, 0.889 mmol), 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3- metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (310 mg, 0.889 mmol) i HATU (1.01 g, 2.67 mmol) u DMF (15 mL) se doda DIEA (0.466 mL, 2.67 mmol) i reakcija se zagreva na 90 °C. Nakon 1.5 hr, smeša se sipa u vodu i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Sirovi materijal se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 5:1 DCM: MeOH sa 0.1 % aq NH3da se dobije naslovljeno jedinjenje (250 mg, 0.215 mmol, 24 % prinos) kao braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.04 (br. s., 2 H), 8.02 - 8.10 (m, 4 H), 7.92 (s, 2 H), 7.47 (s, 2 H), 6.51 (s, 1 H), 5.72 - 5.78 (m, 2 H), 5.01 - 5.25 (m, 4 H), 4.52 - 4.66 (m, 2 H), 4.39 - 4.50 (m, 2 H), 2.71 - 2.76 (m, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 2.10 (s, 3 H), 1.62 - 1.76 (m, 2 H), 1.45 - 1.54 (m, 2 H), 1.24 -1.40 (m, 5 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.448 min, [M+H]<+>= 873.2
Referentni Primer 75
Referentni Primer 75 je smeša dva izomera 28-etil-17,26-dimetil-14,30-diokso-4,11,13,18,19,27,28,31,33,40-dekaazaoktaciklo[42.3.1.04,12.05,10.015,19.025,29.032,40.034,39]oktatetrakonta-1(48),5,7,9,11,15,17,25(29),26,32,34,36,38,44,46-pentadekan-8,36-dikarboksamida i 16-etil-18,27-dimetil-14,30-diokso-4,11,13,16,17,25,26,31,33,40-dekaazaoktaciklo[42.3.1.04,12.05,10.015,19.025,29.032,40.034,39]oktatetrakonta-1(48),5,7,9,11,15(19),17,26,28,32,34,36,38,44,46-pentadekan-8,36-dikarboksamida
[0754]
21
[0755] Referentni Primer 75 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil- 3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (140 mg, 0.403 mmol) u NMP (10 mL) se na 40 °C dodaju HATU (153 mg, 0.403 mmol) i 2-amino-1-(3-(3-(2-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)etil)fenil)-propil)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (200 mg, 0.403 mmol). Nakon mešanja u toku noći, reakcija se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje kao smeša (2 mg, 2 µmol, 0.6 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.97 (s, 1 H), 7.84 - 7.91 (m, 2 H), 7.73 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.51 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.20 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 6.93 - 6.98 (m, 2 H), 6.81 - 6.89 (m, 2 H), 6.64 (s, 1 H), 4.66 - 4.72 (m, 2 H), 4.49 - 4.57 (m, 2 H), 4.40 - 4.47 (m, 2 H), 4.25 - 4.31 (m, 2 H), 2.96 - 3.02 (m, 2 H), 2.78 - 2.84 (m, 2 H), 2.60 - 2.66 (m, 2 H), 2.28 (s, 3 H), 2.18 (s, 3 H), 1.83 - 1.92 (m, 2 H), 1.56 - 1.64 (m, 2 H), 1.29 - 1.39 (m, 7 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.428 min, [M+H]<+>= 809.3
Referentni Primer 76
4-Amino-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamid
[0756]
22
[0757] Referentni Primer 76 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u čist tercbutil (24-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-4-il)karbamat (2.85 g, 3.60 mmol) se polako dodaje TFA (10 mL, 130 mmol). Nakon 30 min, reakcija se koncentruje. Ostatak se suspenduje u vodi, tretira sa NaHCO3dok ne postane bazna, filtrira i ispere sa vodom. Ovaj materijal se prečisti preko silika gela (120 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.35 g, 3.23 mmol, 90 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.90 (s, 1 H), 12.36 (s, 1 H), 8.02 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.99 (br. s., 1 H), 7.83 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1 H), 7.64 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.34 (br. s., 1 H), 6.91 - 7.03 (m, 1 H), 6.70 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 6.57 (s, 1 H), 6.48 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 5.92 (s, 2 H), 4.74 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 4.48 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 4.26 (br. s., 2 H), 4.14 (br. s., 2 H), 2.74 - 2.88 (m, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.72 - 1.96 (m, 6 H), 1.48 (d, J=5.4 Hz, 2 H), 1.38 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 1.29 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.91 min, [M+H]<+>= 691.5
Referentni Primer 77
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-hidroksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
2
[0759] Referentni Primer 77 može da se izradi u skladu sa postupkom 4 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u suspenziju 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(2-metoksietoksi)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida (100 mg, 0.133 mmol) u DCM (5 mL) se na RT u kapima doda BBr3(0.126 mL, 1.33 mmol). Nakon 2 h reakcija se neutrališe sa MeOH, koncentruje i ostatak se prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (15 mg, 0.020 mmol, 15 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.81 (br. s., 2 H), 7.93 - 8.01 (m, 3 H), 7.75 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.51 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.31 - 7.38 (m, 3 H), 6.59 (d, J=11.6 Hz, 2 H), 4.94 (br. s., 1 H), 4.54 - 4.61 (m, 4 H), 4.40 - 4.49 (m, 2 H), 4.21 - 4.32 (m, 2 H), 4.12 - 4.20 (m, 2 H), 3.70 -3.76 (m, 2 H), 2.08 (d, J=5.6 Hz, 6 H), 1.77 - 1.91 (m, 4 H), 1.22 - 1.35 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.290 min, [M+H]<+>= 739.2
Referentni Primer 78
(E)-2-(1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1-(4-(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid bis so trifluorosirćetne kiseline
[0760]
24
[0761] Referentni Primer 78 može da se izradi u skladu sa postupkom 11 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (250 mg, 0.178 mmol), HATU (203 mg, 0.534 mmol), HOBt (40.9 mg, 0.267 mmol) i 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (82 mg, 0.53 mmol) u DMF (3 mL) se doda TEA (0.149 mL, 1.07 mmol). Nakon mešanja preko vikenda, reakcija se propusti kroz špric filter i prečisti reverzno faznom HPLC (Gilson, Sunfire Prep C18 OBD 5 µm 30x100 mm kolona), uz eluiranje sa 20 - 90 % MeCN u vodi (0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (18 mg, 0.020 mmol, 11 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 7.60 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.33 (d, J=1.27 Hz, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.13 (d, J=8.11 Hz, 1 H), 6.87 (d, J=8.11 Hz, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 6.54 - 6.57 (m, 1 H), 5.85-5.93 (m, 2 H), 5.14 (br. s., 2 H), 5.06 (d, J=3.80 Hz, 2 H), 4.59 (dd, J=13.81, 6.97 Hz, 4 H), 3.79 (s, 6 H), 2.20 (d, J=1.77 Hz, 6 H), 1.36 (td, J=7.16, 2.91 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.02 min, [M+H]<+>= 694.5
Referentni Primer 79
8-4-(2-Aminoacetamido)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamid
[0762]
2
[0763] Referentni Primer 79 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su oznate stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u terc-butil (2-((24-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20- diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-4-il)amino)-2-oksoetil)karbamat (350 mg, 0.413 mmol) se polako dodaje TFA (3.00 mL, 38.9 mmol). Nakon 30 min reakcija se koncentruje. Dobijeni ostatak se suspenduje u vodi i tretira sa NaHCO3dok ne postane bazni. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom. Ovaj materijal se prečisti preko silika gela (80 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 20 % (2N rastvor NH3u MeOH) u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (270 mg, 0.343 mmol, 83 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.03 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.99 (br. s., 1 H), 7.83 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.58 - 7.69 (m, 2 H), 7.34 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.20 - 7.31 (m, 1 H), 6.57 (s, 1 H), 4.74 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 4.47 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 4.14 - 4.34 (m, 4 H), 3.54 (s, 2 H), 2.76 - 2.85 (m, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 2.09 (s, 3 H), 1.91 (br. s., 4 H), 1.82 (d, J=6.6 Hz, 2 H), 1.48 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 1.38 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 1.29 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.78 min, [M+H]<+>= 748.6
Referentni Primer 80
8-Etil-10,17-dimetil-7,19-diokso-7,8,11,12,13,14,19,20,27,28,29,30-dodekahidro-6H-benzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-k][1,3,6,14,16]pentaazacikloikozin-3,23-dikarboksamid
[0764]
2
[0765] Referentni Primer 80 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: smeša 4-(4-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)butil)- 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (165 mg, 0.492 mmol), 1,1’-(butan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida) (200 mg, 0.492 mmol), HATU (561 mg, 1.48 mmol) i DIEA (382 mg, 2.95 mmol) u NMP (8 mL) se meša 18 h na 120 °C. Smeša se koncentruje i ostatak se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 80: 20: 1 DCM: MeOH: NH4OH (aq). Delimično čist produkt se dalje prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (7 mg, 10 µmol, 2 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.83 (br. s., 2 H), 7.90 - 8.01 (m, 4 H), 7.79 (t, J=6 Hz, 2 H), 7.52 - 7.62 (m, 2 H), 7.35 (br. s., 2 H), 6.56 (s, 1 H), 4.80 (br. s., 2 H), 4.46 - 4.54 (m, 2 H), 4.25 (br. s., 4 H), 2.90 - 3.01 (m, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.78 - 1.89 (br. m., 6 H), 1.53 - 1.57 (m, 2 H), 1.30 (t, J=6 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.316 min, [M+H]<+>= 704.7
Referentni Primer 81
8-Etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,14,15,20,21,28,29,30,31-dodekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3,24-dikarboksamid
[0766]
2
[0767] Referentni Primer 81 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-(5-(5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)pent-2-en-1-il)- 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (320 mg, 0.924 mmol), 1,1’-(butan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (488 mg, 1.20 mmol) i DIEA (0.484 mL, 2.77 mmol) u NMP (10 mL) se doda HATU (878 mg, 2.31 mmol). Reakcija se meša 16 hr na 80 °C, nakon toga sipa u Et2O (50 mL). Dobijena precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa Et2O i vodom. Sirovi produkt se prečisti preparativnom HPLC (Gemini- C18 kolona, 5µ silika gel, 21 mm promer, 150 mm dužine), uz eluiranje sa 20 - 40 % MeCN u vodi (sadrži 0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje (11 mg, 15 µmol, 1.7 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 8.00 (s, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 7.81 (t, J=9.7 Hz, 2 H), 7.56 - 7.40 (m, 2 H), 6.66 (s, 1 H), 5.77 (d, J=15.2 Hz, 1 H), 5.42 (d, J=15.5 Hz, 1 H), 4.78 - 4.85 (m, 1 H), 4.68 -4.52 (m, 2 H), 4.37 - 4.22 (m, 4 H), 3.62 (d, J=5.8 Hz, 2 H), 2.82 - 2.49 (m, 2 H), 2.23 (s, 3 H), 2.13 (s, 3 H), 2.09 - 1.93 (m, 5 H), 1.41 (t, J=8.0 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.376 min, [M+H]<+>= 716.9
Referentni Primer 82
35-etil-5,37-dimetil-8,33-diokso-3,4,9,11,18,23,30,32,35,36-dekaazaoktaciklo[38.1.1.03,7.010,18.012,17.023,31.024,29.034,38]dotetrakonta-4,6,10,12,14,16,24,26,28,30,34(38),36-dodekan-14,27-dikarboksamid
[0768]
2
[0769] Referentni Primer 82 može da se izradi u skladu sa postupkom 19 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-((3-((5-karboksi-3-metil-1H-pirazol-1-il)metil)ciklobutil)metil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (175 mg, 0.486 mmol), 1,1’-(butan-1,4-diil)bis(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid) (220 mg, 0.541 mmol) i HATU (559 mg, 1.47 mmol) u NMP (2 mL) se na RT polako dodaje DIEA (0.514 mL, 2.94 mmol). Smeša se zagreva 4 h na 70 °C i sipa u vodu. Sirovi produkt se sakupi filtriranjem i filtrat se koncentruje da se dobije druga serija sirovog produkta koja se ispere sa vodom. Kombinovani sirovi produkt se prečisti preparativnom HPLC (Gemini-C18 kolona, 5µ silika gel, 21 mm promer, 150 mm dužine), uz eluiranje sa 30 - 60 % MeCN u vodi (sadrži 0.1 % TFA) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, MeOH<-d4>) δ ppm 12.87 (s, 2 H), 8.02 (t, J=9.0 Hz, 4 H), 7.83 (dd, J=19.9, 8.4 Hz, 2 H), 7.65 (dd, J=23.0, 8.2 Hz, 2 H), 7.37 (d, J=2.1 Hz, 2 H), 6.52 (s, 1 H), 4.64 (d, J=5.3 Hz, 2 H), 4.44 (m, 2 H), 4.28 (s, 4 H), 2.91 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 2.47 (m, 2 H), 2.14 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.96 (s, 6 H), 1.53 (m, 2 H), 1.28 (t,
J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.351 min, [M+H]<+>= 731.3
Referentni Primer 83
(E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilna kiselina
[0770]
2
[0771] Referentni Primer 83 može da se izradi u skladu sa postupkom 11 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u (E)-metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H- pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat (1.26 g, 1.82 mmol) u MeOH (10 mL), DMF (10 mL) i vodi (10 mL) se na RT doda NaOH (0.729 g, 18.2 mmol). Nakon 3 hr, doda se nova porcija NaOH (0.729 g, 18.2 mmol) i reakcija se meša u toku noći. Smeša se koncentruje i ostatak razblaži sa vodom (100 mL) i zakiseli sa 3N rastvorom HCl do pH = 3. Dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.06 g, 1.56 mmol, 86 % prinos) kao žuto-bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.80-12.87 (m, 2 H), 7.93 - 7.98 (m, 3 H), 7.85 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.71 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 7.55 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.43 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.33 (s, 1 H), 6.54 (d, J=6.6 Hz, 2 H), 5.90 - 5.98 (m, 2 H), 4.86 (d, J=20.0 Hz, 4 H), 4.52 (d, J=6.7 Hz, 4 H), 2.12 (s, 6 H), 1.27 (m, J=6.8, 4.6 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.376 min, [M+H]<+>= 677.9
Referentni Primer 84
23-(Aminometil)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-3-karboksamid
[0772]
[0773] Referentni Primer 84 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u terc-butil ((3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,-28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-23-il)metil)karbamat (410 mg, 0.509 mmol) se polako dodaje TFA (3 mL, 38.9 mmol). Nakon 30 min reakcija se koncentruje. Dobijeni ostatak se suspenduje u vodi i tretira sa NaHCO3dok ne postane bazni. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom. Ovaj materijal se prečisti preko silika gela (80 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 20 % (2N rastvor NH3u MeOH) u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (340 mg, 0.458 mmol, 90 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.02 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.98 (br. s., 1 H), 7.82 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.60 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.34 (br. s., 1 H), 7.24 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 7.14 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 6.55 (s, 1 H), 4.74 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 4.47 (q, J=7.0 Hz, 2 H), 4.18 -4.32 (m, 4 H), 4.12 (s, 2 H), 2.77 - 2.88 (m, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.05 - 2.11 (m, 3 H), 1.91 (br. s., 4 H), 1.77 - 1.86 (m, 2 H), 1.43 - 1.56 (m, 2 H), 1.38 (m, 2 H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.77 min, [M+H]<+>= 705.6
Referentni Primer 85
(E)-2-(1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1-(4-(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-4-metil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0774]
1
[0775] Referentni Primer 85 može da se izradi u skladu sa postupkom 11 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (208 mg, 1.35 mmol) u NMP (8 mL) se dodaju HATU (616 mg, 1.62 mmol) i DIEA (0.57 mL, 3.2 mmol). Nakon 30 min, doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-4-metil-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid dihidrobromid (290 mg, 0.540 mmol) i reakcija se zagreva na 60 °C. Nakon mešanja u toku noći, doda se voda i smeša se ekstrahuje sa EtOAc. Organski sloj se koncentruje i prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (45 mg, 0.069 mmol, 13 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.79 (br. s., 1 H), 12.19 (br. s., 1 H), 7.97 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.72 - 7.75 (m, 1 H), 7.44 -7.47 (m, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.24 - 7.27 (m, 1 H), 7.00 - 7.12 (m, 2 H), 6.56 (s, 2 H), 5.78 - 5.
89 (m, 2 H), 4.75 - 4.85 (m, 4 H), 4.49 - 4.56 (m, 4 H), 2.48 - 2.52 (m, 3 H), 2.13 (s, 6 H), 1.21- 1.29 (m, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.507 min, [M+H]<+>= 648.2
Referentni Primer 86
(E)-2-(1-Etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1-(4-(2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid
[0776]
2
[0777] Referentni Primer 86 može da se izradi u skladu sa postupkom 11 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (295 mg, 1.92 mmol) u NMP (8 mL) se na RT dodaju HATU (874 mg, 2.30 mmol) i DIPEA (0.803 mL, 4.60 mmol). Nakon 30 min doda se (E)-2-amino-1-(4-(2-amino-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid (300 mg, 0.766 mmol) i reakcija se zagreva na 60 °C u toku noći. Doda se voda i dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i prečisti preparativnom HPLC da se dobije naslovljeno jedinjenje (78 mg, 0.12 mmol, 15 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.75 (s, 2 H), 7.95 (d, J=12.1 Hz, 2 H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.40 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.33 (s, 1 H), 7.17 - 7.09 (m, 2 H), 6.80 (dd, J=6.8, 2.4 Hz, 1 H), 6.53 (d, J=17.1 Hz, 2 H), 5.92 - 5.96 (m, 1 H), 5.71 - 5.75 (m, 1 H), 4.91 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 4.81 (d, J=5.4 Hz, 2 H), 4.52 (q, J=7.1 Hz, 4 H), 3.69 (s, 3 H), 2.11 (d, J=4.0 Hz, 6 H), 1.26 (td, J=7.1, 2.0 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak A): Rt = 1.494 min, [M+H]<+>= 664.2
Referentni Primer 87
4-((Dimetilamino)metil)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamid
[0778]
[0779] Referentni Primer 87 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: smeša 4-(aminometil)-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,-15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo-[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-24-karboksamida (100 mg, 0.142 mmol) i formaldehida (37% u vodi) (0.106 mL, 1.42 mmol) u sirćetnoj kiselini (5 mL) se meša 20 min na RT i nakon toga ohladi na 0 °C. Doda se natrijum triacetoksiborohidrid (301 mg, 1.42 mmol), reakcija se meša 1 h na 0 °C i nakon toga na RT u toku noći. Rastvarač se ukloni i ostatak se suspenduje u vodi i tretira sa NaHCO3dok ne postane bazni. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 X) i kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (2 X), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju Ostatak se prečisti preko silika gela (40 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (30 mg, 0.039 mmol, 27 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.89 (br. s., 1 H), 12.24 (br. s., 1 H), 7.96 - 8.09 (m, 2 H), 7.84 (dd, J=8.44, 1.59 Hz, 1 H), 7.65 (d, J=8.31 Hz, 1 H), 7.51 (d, J=7.82 Hz, 1 H), 7.35 (br. s., 1 H), 7.26 (t, J=7.83 Hz, 1 H), 7.14 (d, J=7.58 Hz, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 4.74 (t, J=7.09 Hz, 2 H), 4.47 (q, J=7.01 Hz, 2 H), 4.13 - 4.34 (m, 4 H), 3.73 (s, 2 H), 2.74 - 2.88 (m, 2 H), 2.23 (s, 6 H),2.16 (s, 3 H), 2.09 (s, 3 H), 1.92 (br. s., 4 H), 1.81 (m, 2 H), 1.49 (m, 2 H), 1.39 (m, 2 H), 1.29 (t, J=7.09 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 0.80 min, [M+H]<+>= 733.6
Referentni Primer 88
terc-butil ((3-karbamoil-8-etil-10,18-dimetil-7,20-diokso-6,7,8,11,12,13,14,15,20,21,28,29,30,31-tetradekahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]benzo[4,5]imidazo[2,1-p]dipirazolo[5,1-e:4’,3’-l][1,3,6,15,17]pentaazaciklohenikozin-23-
4
il)metil)karbamat
[0780]
[0781] Referentni Primer 88 može da se izradi u skladu sa postupkom 13 sa modifikacijama koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Data je poslednja faza u izradi: u 4-(5-(5-((1-(4-(2-amino-5-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol- 1-il)butil)-4-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamoil)-3-metil-1H-pirazol-1-il)pentil)-1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilnu kiselinu (1.50 g, 1.82 mmol), HOBt (0.335 g, 2.19 mmol) i EDC (0.524 g, 2.73 mmol) u DMF (100 mL) se dodaju DIEA (1.27 mL, 7.29 mmol) i DMAP (22 mg, 0.18 mmol). Reakcija se zagreva na 60 °C. Nakon 6 hr, smeša se ohladi na RT, razblaži sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc (3 x). Kombinovane organske supstance se isperu sa zasićenim NH4Cl (2 x) i slanim rastvorom (2 x), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ovaj ostatak se prečisti preko silika gela (120 g kolona), uz eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje (860 mg, 1.0 mmol, 56 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.85 (s, 1 H), 12.41 (s, 1 H), 8.02 (d, J=1.5 Hz, 1 H), 7.98 (br. s., 1 H), 7.82 (dd, J=8.6, 1.5 Hz, 1 H), 7.60 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.57 (br. s., 1 H), 7.54 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.34 (br. s., 1 H), 7.27 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 7.15 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 6.55 (s, 1 H), 4.74 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 4.48 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 4.37 (d, J=5.9 Hz, 2 H), 4.25 (m, 4 H), 2.75 - 2.87 (m, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.08
(s, 3 H), 1.91 (br. s., 4 H), 1.75 - 1.86 (m, 2 H), 1.49 (br. s., 2 H), 1.39 (m, 11 H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3 H); LCMS (LCMS Postupak D): Rt = 1.11 min, [M+H]<+>= 805.7
Tabela 1 daje od Referentnog Primera 89 do Referentnog Primera 197. Jedinjenja mogu da se izrade koristeći prethodno opisane sintetičke postupke.
n l
n l
n l
n l
4 n l
41 n l
42 n l
4 n l
44 n l
4 n l
4 n l
4 n l
4 n l
4 n l
n l
1 n l
2 n l
n l
4 n l
n l
n l
n l
n l
n l
n l
1 n l
2 n l
n l
4 n l
n l
n l
n l
n l
n l
n l
1 n l
2 n l
n l
4 n l
n l
n l
n l
n l
n l
n l
1 n l
2 n l
n l
4 n l
n l
n l
n l
n l
n l
n l
1 n l
2 n l
n l
4 n l
n l
AlexaFluor-488 FRET assay ligand 3’,6’-Diamino-5-((2-(1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamido)etil)karbamoil)-3-okso-3H-spiro[izobenzofuran-1,9’-ksanten]-4’,5’-disulfonska kiselina
[0782]
1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilna kiselina dihidrohlorid
[0783]
[0784] U metil 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1Hbenzo[d]imidazol-1- il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilat so bis trifluorosirćetnu kiselinu (400 mg, 0.434 mmol, Referentni Primer 23) u THF (3.47 mL), MeOH (3.47 mL) i vodu (1.74 mL) se na RT doda 8 M kalijum hidroksid (1.09 mL, 8.68 mmol). Nakon mešanja u toku noći, reakcija se koncentruje i doda se voda. Smeša se zakiseli do pH 4-5 sa 7 N vodenim rastvorom HCl i dobijena siva čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (335 mg, 0.423 mmol, 97 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.82 - 12.95 (m, 3 H), 8.08 (s, 1 H), 7.99 (br. s., 2 H), 7.83 (d, J=8.34 Hz, 1 H), 7.78 (d, J=8.34 Hz, 1 H), 7.58 (t, J=7.33 Hz, 2 H), 7.36 (br. s., 1 H), 6.60 (d, J=4.80 Hz, 2 H), 4.58 (d, J=6.57 Hz, 4 H), 4.29 (br. s., 4 H,) 2.10 (s, 6 H), 1.88 (br. s., 4 H), 1.31 (t, J=6.95 Hz, 6 H); LCMS (LCMS Postupak C): Rt = 0.83 min, [M+H]<+>= 680.5
Faza 1: N-(2-Aminoetil)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid so triflurosirćetne kiseline
[0785]
[0786] 1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksilna kiselina (10 mg, 0.015 mmol) se rastvori (uz sonifikaciju) u DMSO (300 mL) na 37 °C. U ovo se doda rastvor (9H-fluoren-9-il)metil (2-aminoetil)karbamat hidrohlorida (6.9 mg, 0.022 mmol) i HATU (7.6 mg, 0.020 mmol) u DMSO (100 mL) a zatim se doda DIEA (10 mL, 0.057 mmol). Nakon mešanja u toku noći, reakcija se razblaži sa DMF (600 mL), doda se 4-metilpiperidin (400 mL) i reakcija se meša na RT 1 h. Smeša se koncentruje i dobijeni ostatak razblaži sa 1:1 smešom DMSO: MeOH (<1 mL) i prečisti reverzno faznom hromatografijom (Jupiter C18 preparativna kolona, 10 mL/min), uz eluiranje sa 30 - 100 % (9:1 ACN: voda) u vodi (0.1 % TFA dodatka) da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.45 mg, 10.1 mmol, 69 % prinos). LCMS (LCMS Postupak G): Rt = 0.62 min, [M+H]<+>= 722.4
Faza 2: 3’,6’-Diamino-5-((2-(1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol- 1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamido)etil)karbamoil)-3- okso-3H-spiro[izobenzofuran-1,9’-ksanten]-4’,5’-disulfonska kiselina
[0787]
[0788] N-(2-Aminoetil)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)butil)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid so triflurosirćetne kiseline (8.45mg, 10.1 µmol) se rastvori u DMF (200 µl) i doda u čvrsti (5,6-) Alexa Fluor 488-ONSu (5.00 mg, 7.92 µmol).
Komercijalni Alexa Fluor 488-ONSu reagens je smeša 5- i 6-pozicionih izomera.
mer
mer
4
Kada se dobije rastvor, doda se DIPEA (2 µL, 0.01 mmol) i smeša se meša (centrifugiranjem) u toku noći zaštićena od svetlosti. Pomoću LCMS se ustanovi formiranje pikova produkta rane i kasne eluacije sa anticipiranom molekulskom težinom ([M+H] 1238.6). Reakcija se koncentruje i ostatak se rastvori u 1:1 DMSO: MeOH (<1 mL) i prečisti reverzno faznom hromatografijom (Jupiter C18 preparativna kolona, 10 mL/min), uz eluiranje sa 15 - 100 % (9:1 ACN: voda) u vodi (0.1 % TFA dodatka). Izomer na poziciji rane eluacije je dobijen sa visokom čistoćom. Nasuprot tome, frakcije kasno eluiranog izomera takođe sadrže neizreagovani početni materijal. Ove frakcije koje sadrže onečišćeni izomer kasne eluacije se izdvoje i koncentruju. Ovaj ostatak se rastvori u 1:1 smeši DMSO: MeOH (<1 mL) i prečisti reverzno faznom hromatografijom (Waters SymmetryPrep preparativna kolona, 10 mL/min), uz eluiranje sa 15 - 100 % (9:1 ACN: voda) u vodi (0.1 % TFA dodatka) da se dobije naslovljeno jedinjenje (izomer kasne eluacije, 1.94 mg, 1.49 µmol, 19 % prinos). LCMS (LCMS Postupak H): Rt = 0.69 min, [M+H]<+>= 1238.6. Treba imati na umu da pretpostavljena struktura naslovljenog jedinjenja (5-izomer) nije zasnovana na rigoroznom strukturnom određivanju već na bazi prethodnih sagledavanja da je 5-pozicioni izomer uobičajeni izomer kasne eluacije postupcima reverzno fazne HPLC.
Biološke analize i podaci
[0789] Kako je prethodno navedeno, jedinjenja iz ovog pronalaska su modulatori STING i korisna su u tretmanu bolesti posredovanih STING-om. Biološke aktivnosti jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se odrede bilo kojom odgovarajućom analizom za određivanje aktivnosti jedinjenja kao modulatora STING, kako u tkivu tako i u in vivo modelima.
[0790] pIC50vrednost za svako jedinjenje je ili zabeležena u najmanje jednom eksperimentu ili je prosek više eksperimenata. Jasno je da ovde opisani podaci mogu da imaju razumne varijacije u zavisnosti od specifičnih uslova i procedura koje koristi osoba koja sprovodi eksperimente.
Analiza vezivanja
(1) SPA
4 1
[0791] Analiza vezivanja radioliganda je razvijena za merenje kvantiteta interakcija jedinjenja Formula (I-N), (I-P) ili (I) i domena karboksi terminala (CTD) STING kompeticijom sa 3H-cGAMP (tricijum-obeleženi ciklični gvanin (2’,5’) monofosfat-adenin (3’,5’) monofosfat). Videti takođe Li i saradnici (Nature Chemical Biology, 10, 1043-1048, (2014)). Protein koji enkodira ostatke sekvenci humanog STING koje se rasprostiru od 149 do 379 (Gene ID 340061) je ekspresovan u bakterijama sa karboksi terminalom Flag® peptida spojenog sa AviTag™ za biotinilaciju i heksahistidin tag za afinitet prečišćavanja. Prečišćeni STING-Flag-AviTag-6Xhis protein je biotinilizovan do kraja koristeći enzim BirA (Beckett D. i saradnici, Protein Science, 1999, 8:921-929). Relativna potencija jedinjenja Formula (IN), (I-P) ili (I) je određena kompeticijom u uravnoteženoj reakciji vezivanja koja sadrži 50 nM biotinilovanog-STING, 50 nM 3H- cGAMP i 1.25 mg/mL streptavidinom obložene perlice za ispitivanje blizine scintilacije (Perkin Elmer) u fiziološkom puferu fosfatnih soli. Reakcije vezivanja se inkubiraju 30 minuta na sobnoj temperaturi i očitavaju korišćenjem čitača luminescencije ploča. Krive odgovora na dozu se usklade sa kontrolom koja reflektuje potpunu inhibiciju vezivanja 3H-cGAMP sa 10 µM neobeleženog cGAMP i bez kontrolnog jedinjenja. Očigledna pIC50je određena pomoću uobičajenog dvo-faznog modela vezivanja. Pod ovim uslovima, konstanta jasne inhibicije za pozitivno kontrolno jedinjenje cGAMP je 40-50 nM što je približno deset puta veće od njegovog stvarnog afiniteta od 4-5 nM (Zhang X. i saradnici, Molecular Cell, 2013, 51:1-10).
(2) FRET analiza
[0792] Potencijal vezivanja molekula za domen C-terminala (CTD) humanog STING se određuje ispitivanjem kompeticije vezivanja. U ovoj analizi, koristi se STING (149-379) rekombinantni protein sa C-terminalnim biotinilovanim Avi-tag. Kada se veže za STING, Alexa488-obeležena sonda na aktivnom mestu (videti stranice 226-229 za sintezu za ligand FRET analize) prima emisiju na 490 nm od Tb-Streptavidin-Avi-STING a povećanje fluorescencije se meri na 520 nm. Molekule koje se takmiče za mesto vezivanja sonde imaće slab signal na 520 nm. Analiza se izvodi u Greiner crnim pločama sa 384 udubljenja (Catalog # 784076) koje sadrže 100nL jedinjenja u čistom DMSO. Rastvor 500pM STING, 500pM Streptavidin-Lumi4-Tb i 100nM Alexa488 sonde u puferu fosfatnih soli koji sadrži 0.02% (m/v) pluronik F127 i 0.02% (m/v) albumin seruma govečeta se doda u ploče koristeći kombinovani uređaj za obradu tečnosti (ThermoFisher). Ploče se centrifugiraju 1 min na 500
4 2
opm, inkubiraju 15min na sobnoj temperaturi a nakon toga se meri emisija fluorescencije na 520 nm a nakon toga se laserom meri ekscitacija na 337nm na Envision čitaču ploče (Perkin-Elmer). pIC50vrednosti se određuju koristeći standardnu četvoroparametarsku krivu sa parametrima unetim u ABASE XE.
[0793] Koristeći prethodno opisanu SPA analizu, jedinjenja iz Referentnih Primera 1-9, 11, 13, 15, 16, 23, 25-30, 33-35, 47, 49, 50, 54, 55, 57-61, 63-66, 68-74, 76-79, 81-83, 85-88, 90, 92, 102, 104, 105, 107-110, 112-114, 117, 118, 120, 122-144, 146-149, 151-160, 163-167, 169, 170, 172-183 i 186-197 ispoljavaju pIC50vrednosti u rasponu od 3.6 do 7.7. Na primer, jedinjenja iz, Referentnog Primera 1 i Referentnog Primera 5, prethodno datih, inhibiraju vezivanje 3H- cGAMP za STING, u prethodno navedenom postupku, sa prosečnom pIC50od 7.5 (#1, n=4; #5, n=2).
[0794] Koristeći prethodno opisanu FRET analizu, Referentni Primeri i Primeri 1-106, 110, 112-125, 129, 131, 133, 134, 138, 142-144, 146-153, 155-186, 188-193 i 196 ispoljavaju pIC50vrednosti u rasponu od 4.1 do iznad gornjeg limita analize od 9.9. Na primer, pIC50FRET analize za sledeće Referentne Primere i Primere su:
Ispitivanje ćelijske funkcionalnosti
[0795] Funkcija jedinjenja Formule (I) može da se odredi u ćelijskim analizama kojima se detektuje STING specifična aktivacija i/ili inhibicija sekrecije IFNβ proteina.
4
(1) Ispitivanje funkcionalnosti I (ispitivanje PBMC antagonista): inhibicija STING sa jedinjenjima Formula (I-N), (I-P) ili (I) može da se odredi merenjem gubitka interferona β koji su izlučili PBMCs stimulisani sa Bacmam virusom, dvolančanim DNK virusom, a nakon toga tretmanom sa različitim dozama jedinjenja Formula (I-N), (I-P) ili (I). Zamrznute PBMC ćelije se otope i razblaže u medijumu (RPMI-1640 sa 1.5 g/L NaHCO3, 4.5 g/L glukoze, 10 mM Hepes i 1 mM Na piruvijata, 10% FBS) do finalne koncentracije od 5x10<5>ćelija/ml a nakon toga se inficiraju sa Bacmam virusom u finalnoj količini MOI od 43. Suspenzija PBMC-Bacmam virusa se nanese u ploču kulture tkiva sa 384 udubljenja (Griener 781073) pri gustini od 25,000 ćelija po udubljenju koje sadrži 250 nL jedinjenja razblaženog u DMSO. Nivo IFNβ proteina izlučenog u medijumu za rast se meri nakon 24 sata inkubacije na 37 °C koristeći kit za humanu IFNβ elektrohemiluminiscenciju (Meso Scale Diagnostics) po uputstvima proizvođača. Procenat inhibicije se određuje u odnosu na kontrole koje nemaju tretman sa jedinjenjem ili infekciju Bacmam virusom i koristi kao funkcija koncentracije jedinjenja za određivanje pIC50koristeći standardni dvo-fazni model inhibicije receptorligand.
(2) Ispitivanje funkcionalnosti II (ispitivanje PBMC agonista): aktivacija STING sa jedinjenjima Formule I se određuje merenjem nivoa IFNβ izlučenog iz mononuklearnih ćelija humane periferne krvi (PBMC) tretiranih sa različitim dozama jedinjenja Formule I.
Zamrznute PBMC ćelije se otope, resuspenduju u medijumu (RPMI-1640 sa 1.5 g/L NaHCO3, 4.5 g/L glukoze, 10 mM Hepes i 1 mM Na piruvijata, 10 % FBS, 10 ng/mL lipopolisaharida) do finalne koncentracije od 5x105 ćelija/mL i nanesu u ploče za kulturu tkiva sa 384 udubljenja (Griener 781073) u gustini od 15,000 ćelija po udubljenju koja sadrže 250 nL jedinjenja razblaženog u DMSO. Nivo IFNβ proteina izlučenog u medijumu za rast se meri nakon tri sata inkubacije na 37 °C koristeći kit za humanu IFNβ elektrohemiluminiscenciju (Meso Scale Diagnostics) po uputstvu proizvođača. Procenat aktivacije se određuje u odnosu na kontrolni DMSO tretman i koristi kao funkcija koncentracije jedinjenja za određivanje pEC50koristeći standardni model aktivacije receptora.
(3) Ispitivanje funkcionalnosti III (ispitivanje HEK WT agonista): aktivacija STING u ćelijama može da se odredi korišćenjem analize reportera luciferaze u humanim embrionim bubrežnim ćelijama (HEK293T) ko-transfektovanih sa plazmidima koji ekspresuju STING i enzima luficeraze svica dobijenog od interferonom stimulisanog promotora elementa
4 4
odgovora (pISRE-Luc) (Agilent Technologies). Cela dužina humanog STING (Gene ID 340061) i cela dužina humane ciklične gvanin adenin sintaze (cGAS) (referentna sekvenca NM_138441.2) su klonirani u vektorima ekspresije ćelija sisara koji sadrže promotor citomegalovirusa. Transfekcija je pripremljena koristeći suspenziju ćelija sa Fugene® 6 po uputstvu proizvođača (3:1 Fugene®:DNA). Pedeset mikrolitara suspenzije za transfekciju se nanese u udubljenja ploče sa 384 udubljenja u kojima se nalazi 250 nL jedinjenja Formula (I-N), (I-P) ili (I). Finalna kompozicija u udubljenju sadrži 20,000 ćelija/udubljenje, 1 ng STING, 20 ng pISRE-Luc i prazan vektor pcDNA3.1(Invitrogen) da se dobije ukupna koncentracija DNK od 125 ng. Očekuje se da kontrolna udubljenja generišu maksimalnu aktivaciju STING kada dođu u kontakt sa plazmidom ekspresije cGAS. Ploče se zatvore i inkubiraju 24 sata na 37 °C. Ekspresija luciferaze svica se izvodi pomoću Steady-Glo® sistema za ispitivanje luciferaze (Promega) i analizira pomoću standardnih laboratorijskih čitača ploča luminescencije. Rezultati usaglašeni sa luminiscentnim odgovorom u prisustvu cGAS su korišćeni kao funkcija koncentracije jedinjenja i uneti koristeći standardni model aktivacije receptora, da se dobije pEC50.
[0796] Koristeći prethodno opisano ispitivanje funkcionalnosti III (ispitivanje HEK WT agonista), Referentni Primeri i Primeri 1-23, 25-42, 44, 47-55, 57-61, 63-94 i 97-197 ispoljavaju pEC50vrednosti u rasponu od 4.4 do iznad gornjeg limita analize od 9.1.
Referentni Primeri 1, 3, 8, 100, 116 i 194 ispoljavaju pEC50niži od 4.3. Na primer, pEC50za naredne primere su:
4

Claims (20)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje, naznačeno time što je to (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H- benzo[d]imidazol-5-karboksamid koji ima strukturu
    ili njegov tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat.
  2. 2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to farmaceutski prihvatljiva so (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida, ili njegov tautomer.
  3. 3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid, ili njegov tautomer.
  4. 4. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3- 4 dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid koji ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat.
  5. 5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, naznačeno time što je to farmaceutski prihvatljiva so (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil- 2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida.
  6. 6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, naznačeno time što je to (E)-1-((E)-4-((E)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid.
  7. 7. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid koji ima strukturu 4
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov hidrat.
  8. 8. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 7, naznačeno time što je to farmaceutski prihvatljiva so (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil- 2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamida.
  9. 9. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 7, naznačeno time što je to (Z)-1-((E)-4-((Z)-5-karbamoil-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5- karbonil)imino)-7-(3-morfolinopropoksi)-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-((1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karbonil)imino)-7-metoksi-2,3-dihidro-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid.
  10. 10. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to (E)-1-(4-(5-karbamoil-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-(3-morfolinopropoksi)-1H-benzo[d]imidazol-1-il)but-2-en-1-il)-2-(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-karboksamido)-7-metoksi-1H-benzo[d]imidazol-5-karboksamid tris hidrohlorid, ili njegov tautomer.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što uključuje jedinjenje, njegov tautomer, njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov hidrat, u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10, i farmaceutski prihvatljivu podlogu.
  12. 12. Jedinjenje, njegov tautomer, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov hidrat u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10, naznačeno time što je za upotrebu u terapiji. 4
  13. 13. Jedinjenje, njegov tautomer, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov hidrat u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu bolesti posredovanih STING-om.
  14. 14. Jedinjenje, njegov tautomer, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov hidrat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 13, naznačeno time što je bolest kancer..
  15. 15. Jedinjenje, njegov tautomer, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov hidrat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 13, naznačeno time što je bolest tumor.
  16. 16. Jedinjenje, njegov tautomer, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov hidrat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 14, naznačeno time što je kancer akutna mijeloidna leukemija (AML).
  17. 17. Kombinacija, naznačena time što uključuje jedinjenje, njegov tautomer, njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov hidrat u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10 i imunomodulator.
  18. 18. Kombinacija u skladu sa patentnim zahtevom 17, naznačena time što je imunomodulator anti-PD-L1 sredstvo.
  19. 19. Kombinacija u skladu sa patentnim zahtevom 17, naznačena time što je imunomodulator PD-1 antagonist.
  20. 20. Kombinacija u skladu sa patentnim zahtevom 19, naznačena time što je PD-1 antagonist anti-PD-1 antitelo koje je pembrolizumab. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20220734A 2016-04-07 2017-04-05 Heterociklični amidi korisni kao modulatori proteina RS63462B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662319358P 2016-04-07 2016-04-07
US201762461301P 2017-02-21 2017-02-21
US201762461975P 2017-02-22 2017-02-22
PCT/IB2017/051945 WO2017175147A1 (en) 2016-04-07 2017-04-05 Heterocyclic amides useful as protein modulators
EP17716312.8A EP3440076B1 (en) 2016-04-07 2017-04-05 Heterocyclic amides useful as protein modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS63462B1 true RS63462B1 (sr) 2022-08-31

Family

ID=58503675

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220734A RS63462B1 (sr) 2016-04-07 2017-04-05 Heterociklični amidi korisni kao modulatori proteina

Country Status (33)

Country Link
US (4) US10981901B1 (sr)
EP (2) EP3440076B1 (sr)
JP (4) JP6746712B2 (sr)
KR (2) KR102527784B1 (sr)
CN (3) CN109608443B (sr)
AU (4) AU2017247798C1 (sr)
CA (1) CA3019630A1 (sr)
CL (3) CL2018002850A1 (sr)
CO (1) CO2018010727A2 (sr)
CR (2) CR20200045A (sr)
DK (1) DK3440076T3 (sr)
DO (3) DOP2018000217A (sr)
ES (1) ES2921855T3 (sr)
HR (1) HRP20220936T1 (sr)
HU (1) HUE058932T2 (sr)
IL (4) IL295649B2 (sr)
JO (1) JOP20170083B1 (sr)
LT (1) LT3440076T (sr)
MX (3) MX387353B (sr)
MY (1) MY189100A (sr)
NZ (1) NZ745957A (sr)
PE (3) PE20181920A1 (sr)
PH (3) PH12018502151B1 (sr)
PL (1) PL3440076T3 (sr)
PT (1) PT3440076T (sr)
RS (1) RS63462B1 (sr)
SG (3) SG10201900628RA (sr)
SI (1) SI3440076T1 (sr)
SM (1) SMT202200339T1 (sr)
TW (3) TWI777014B (sr)
UA (1) UA123407C2 (sr)
UY (1) UY37195A (sr)
WO (1) WO2017175147A1 (sr)

Families Citing this family (128)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG10202010609QA (en) 2015-08-13 2020-11-27 Merck Sharp & Dohme Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
EP3692996A1 (en) 2016-03-18 2020-08-12 Immune Sensor, LLC Cyclic di-nucleotide compounds and methods of use
IL295649B2 (en) * 2016-04-07 2025-12-01 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Heterocyclic amides useful as protein modulators
MA46452B1 (fr) 2016-10-04 2021-10-29 Merck Sharp & Dohme Composés de benzo[b]thiophéne en tant qu'agonistes de sting
JOP20170192A1 (ar) 2016-12-01 2019-01-30 Takeda Pharmaceuticals Co داي نوكليوتيد حلقي
JP7664680B2 (ja) 2017-03-29 2025-04-18 リガケム バイオサイエンシズ， インク． ピロロベンゾジアゼピン二量体前駆体及びそのリガンド－リンカーコンジュゲート化合物
EP3609922A2 (en) 2017-04-13 2020-02-19 Aduro Biotech Holdings, Europe B.V. Anti-sirp alpha antibodies
EP3621624B1 (en) 2017-05-12 2023-08-30 Merck Sharp & Dohme LLC Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
AU2018311965A1 (en) 2017-08-04 2020-02-13 Merck Sharp & Dohme Llc Combinations of PD-1 antagonists and benzo[b]thiophene sting antagonists for cancer treatment
CA3071538A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Benzo[b]thiophene sting agonists for cancer treatment
JP7262451B2 (ja) * 2017-10-05 2023-04-21 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド Ｓｔｉｎｇアゴニストの投与方法
EP3692033A1 (en) * 2017-10-05 2020-08-12 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Modulators of stimulator of interferon genes (sting) useful in treating hiv
JP7291130B2 (ja) * 2017-10-05 2023-06-14 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド インターフェロン遺伝子の刺激物質（ｓｔｉｎｇ）の調節物質
SG11202004113VA (en) 2017-11-10 2020-06-29 Takeda Pharmaceuticals Co Sting modulator compounds, and methods of making and using
AU2018392213B2 (en) 2017-12-20 2021-03-04 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
US11685761B2 (en) 2017-12-20 2023-06-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
CN110016025B (zh) * 2018-01-08 2021-08-06 成都先导药物开发股份有限公司 一种免疫调节剂
CN110016021B (zh) * 2018-01-08 2021-05-07 成都先导药物开发股份有限公司 一种免疫调节剂
RU2020129785A (ru) * 2018-02-16 2022-03-16 Юсб Байофарма Срл Фармацевтические производные 6,5-гетеробициклического кольца
EP3768266A4 (en) * 2018-03-20 2021-12-22 Merck Sharp & Dohme Corp. OXO-TETRAHYDRO-ISOCHINOLINE-CARBOXYLIC ACIDS AS STING INHIBITORS
IL309265A (en) 2018-03-23 2024-02-01 Codiak Biosciences Inc Extracellular vesicles containing agonist-STING
KR102755259B1 (ko) 2018-04-03 2025-01-15 머크 샤프 앤드 돔 엘엘씨 Sting 효능제로서의 벤조티오펜 및 관련 화합물
WO2019195063A1 (en) 2018-04-03 2019-10-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Aza-benzothiophene compounds as sting agonists
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
GB201807924D0 (en) 2018-05-16 2018-06-27 Ctxt Pty Ltd Compounds
MA52754A (fr) * 2018-05-25 2021-04-14 Incyte Corp Composés hétérocycliques tricycliques en tant qu'activateurs de sting
CN112351778B (zh) * 2018-06-28 2023-04-04 江苏恒瑞医药股份有限公司 稠合三环杂环类化合物及其治疗用途
WO2020010451A1 (en) * 2018-07-10 2020-01-16 Trillium Therapeutics Inc. Heteroaromatic-fused imidazolyl amides, compositions and uses thereof as sting agonists
US11008344B2 (en) 2018-07-31 2021-05-18 Incyte Corporation Tricyclic heteroaryl compounds as STING activators
US10875872B2 (en) 2018-07-31 2020-12-29 Incyte Corporation Heteroaryl amide compounds as sting activators
CN112661772B (zh) 2018-08-24 2022-06-10 杭州阿诺生物医药科技有限公司 干扰素基因刺激蛋白化合物及其制备方法
EP3841112A1 (en) 2018-08-24 2021-06-30 Codiak BioSciences, Inc. Extracellular vesicles targeting dendritic cells and uses thereof
US12364702B2 (en) 2018-08-29 2025-07-22 Adlai Nortye Biopharma Co., Ltd. Highly active sting protein agonist compound
IL315138A (en) 2018-09-06 2024-10-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Novel cyclic dinucleotide derivative and antibody-drug conjugate thereof
US11596692B1 (en) 2018-11-21 2023-03-07 Incyte Corporation PD-L1/STING conjugates and methods of use
WO2020115676A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Novel pharmaceutical formulation
CN113195473B (zh) * 2018-12-14 2022-11-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 三环化合物作为sting激动剂及其制备方法和医药用途
WO2020132566A1 (en) * 2018-12-21 2020-06-25 Nimbus Titan, Inc. Sting pyrazole agonists and uses thereof
WO2020132582A1 (en) * 2018-12-21 2020-06-25 Nimbus Titan, Inc. Sting agonists and uses thereof
US12129267B2 (en) 2019-01-07 2024-10-29 Incyte Corporation Heteroaryl amide compounds as sting activators
CN111471056B (zh) * 2019-01-23 2021-07-02 成都先导药物开发股份有限公司 一种大环类免疫调节剂
AU2020214477B2 (en) * 2019-01-31 2022-10-27 Hitgen Inc. Immunomodulator
WO2020165600A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
CA3129011C (en) 2019-03-07 2023-12-19 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
EP3935065A1 (en) 2019-03-07 2022-01-12 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
CA3129022C (en) 2019-03-07 2023-08-01 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
AU2020240135A1 (en) 2019-03-21 2021-10-14 Lonza Sales Ag Extracellular vesicles for vaccine delivery
AU2020241903A1 (en) 2019-03-21 2021-10-14 Lonza Sales Ag Extracellular vesicle conjugates and uses thereof
KR20210146370A (ko) 2019-03-28 2021-12-03 루핀 리미티드 Sting 효능제로서의 매크로사이클릭 화합물
TW202104214A (zh) 2019-04-05 2021-02-01 英商葛蘭素史密斯克藍智慧財產發展有限公司 化合物
WO2021000770A1 (zh) * 2019-07-02 2021-01-07 凯复制药有限公司 可增强免疫活性的杂环化合物、其制备方法及其在医药上的应用
EP3994158A1 (en) 2019-07-03 2022-05-11 Codiak BioSciences, Inc. Extracellular vesicles targeting t cells and uses thereof
US11339159B2 (en) 2019-07-17 2022-05-24 Pfizer Inc. Toll-like receptor agonists
GB201910305D0 (en) * 2019-07-18 2019-09-04 Ctxt Pty Ltd Compounds
GB201910304D0 (en) 2019-07-18 2019-09-04 Ctxt Pty Ltd Compounds
RS66126B1 (sr) 2019-07-22 2024-11-29 Lupin Ltd Makrociklična jedinjenja kao agonisti uboda i njihove metode i upotreba
CN112279835B (zh) * 2019-07-24 2022-07-22 中国医学科学院药物研究所 芳环或芳杂环并咪唑类化合物，其制备方法及制药用途
CN114206898B (zh) 2019-07-25 2024-06-25 百济神州有限公司 作为sting激动剂的环状二核苷酸
US20220267364A1 (en) * 2019-07-25 2022-08-25 Shanghai Jemincare Pharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic amide compound, preparation method therefor and use thereof
JP2022543086A (ja) * 2019-08-02 2022-10-07 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド がんの処置用のＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子刺激因子）アゴニストとしてのビス－［Ｎ－（（５－カルバモイル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）－ピラゾール－５－カルボキサミド］誘導体および関連化合物
CN112521394A (zh) * 2019-09-19 2021-03-19 中国药科大学 杂环酰胺类化合物、其可药用的盐及其制备方法和用途
CN112521371B (zh) * 2019-09-19 2022-11-25 中国药科大学 杂环酰胺类化合物、其可药用的盐及其制备方法和用途
EP4034247A1 (en) 2019-09-25 2022-08-03 Codiak BioSciences, Inc. Sting agonist comprising exosomes for treating neuroimmunological disorders
WO2021062290A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Codiak Biosciences, Inc. Methods of producing extracellular vesicles
CA3152488A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Codiak Biosciences, Inc. Combination therapy using extracellular vesicles
JP2022549328A (ja) 2019-09-25 2022-11-24 コディアック バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 細胞外小胞組成物
TW202115084A (zh) * 2019-10-10 2021-04-16 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 作為sting調節劑之雜環化合物
US11713307B2 (en) 2019-10-16 2023-08-01 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl-biphenyl amides for the treatment of PD-L1 diseases
CN112778336B (zh) * 2019-11-02 2023-05-05 上海凌达生物医药有限公司 一类含氮稠环类sting调节剂类化合物、制备方法和用途
CN112940004B (zh) * 2019-12-11 2022-07-12 中国科学院上海药物研究所 一种杂环化合物及其用途
JP7662644B2 (ja) * 2019-12-18 2025-04-15 シーティーエックスティー・ピーティーワイ・リミテッド 化合物
CN113087668B (zh) * 2019-12-23 2022-11-04 中国科学院上海药物研究所 一类苯并咪唑二聚体、其制备方法及用途
CN113248475B (zh) * 2020-02-11 2023-03-17 中国科学院上海药物研究所 一类杂环取代的苯并咪唑二聚体或其药学上可接受的盐、组合物及其用途
CN115209921B (zh) 2020-03-06 2025-06-24 第一三共株式会社 包含环状二核苷酸衍生物的抗体药物偶联物
US20230114434A1 (en) 2020-03-13 2023-04-13 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicles for treating neurological disorders
EP4121450A2 (en) 2020-03-20 2023-01-25 Codiak BioSciences, Inc. Extracellular vesicles for therapy
JP2023520513A (ja) 2020-04-02 2023-05-17 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド Ｓｔｉｎｇアゴニストを含む抗体薬物コンジュゲート
WO2021206158A1 (ja) 2020-04-10 2021-10-14 小野薬品工業株式会社 がん治療方法
WO2021237100A1 (en) 2020-05-21 2021-11-25 Codiak Biosciences, Inc. Methods of targeting extracellular vesicles to lung
AU2021338438A1 (en) * 2020-09-02 2023-03-23 The Scripps Research Institute Agonists of stimulator of interferon genes sting
CA3191395A1 (en) 2020-09-02 2022-03-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Novel endo-.beta.-n-acetylglucosaminidase
EP4216993A2 (en) 2020-09-23 2023-08-02 Codiak BioSciences, Inc. Methods of producing extracellular vesicles
WO2022066883A1 (en) 2020-09-23 2022-03-31 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicles comprising kras antigens and uses thereof
US20220168330A1 (en) 2020-11-09 2022-06-02 Takeda Pharmaceutical Company Limited Antibody drug conjugates
MX2023008327A (es) 2021-01-15 2023-08-22 Seagen Inc Anticuerpos inmunomoduladores de anticuerpo-farmaco.
CN112920172B (zh) * 2021-02-01 2022-03-22 厦门大学 一种干扰素刺激蛋白靶向化合物、其放射性标记物、及它们的制备方法与应用
KR102881036B1 (ko) * 2021-02-17 2025-11-05 한국화학연구원 벤즈이미다졸 유도체를 유효 성분으로 포함하는 인터페론 유전자 자극제 조성물
WO2022177307A1 (ko) * 2021-02-17 2022-08-25 한국화학연구원 벤즈이미다졸 유도체를 유효 성분으로 포함하는 인터페론 유전자 자극제 조성물
WO2022223619A1 (en) 2021-04-20 2022-10-27 Institut Curie Compositions and methods for use in immunotherapy
US20240285755A1 (en) 2021-05-24 2024-08-29 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adjuvants
WO2022246597A1 (en) * 2021-05-24 2022-12-01 Forever Millets Limited Imidazopyridine derivatives as sting agonists
WO2022272039A1 (en) * 2021-06-25 2022-12-29 Bolt Biotherapeutics, Inc. Bis-benzimidazole sting agonist immunoconjugates, and uses thereof
WO2023020993A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020994A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020992A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023025256A1 (zh) * 2021-08-26 2023-03-02 成都先导药物开发股份有限公司 一种适合作为抗体偶联药物效应分子的sting激动剂
WO2023056468A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle comprising cholesterol tagged sting-agonist
EP4169513A1 (en) 2021-10-19 2023-04-26 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Adjuvant composition comprising sting agonists
AU2023207026A1 (en) * 2022-01-11 2024-06-20 Bisichem Co., Ltd. Fused heteroaryl hydroxamates as sting agonists
EP4472739A1 (en) * 2022-02-02 2024-12-11 F. Hoffmann-La Roche AG Imidazole macrocycles for the treatment of autoimmune disease
CN118742328A (zh) 2022-02-22 2024-10-01 阿拉里斯生物技术股份公司 包含两个或更多个有效载荷的肽接头
EP4488378A1 (en) 2022-03-02 2025-01-08 Daiichi Sankyo Company, Limited Method for producing fc-containing molecule
WO2024003773A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Pfizer Inc. 2,7-naphthyridine compounds as mastl inhibitors
PE20250259A1 (es) 2022-07-05 2025-01-29 Pfizer Compuestos de pirido[4,3-d] pirimidina
KR20250054799A (ko) 2022-08-29 2025-04-23 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 변이 Fc 영역을 포함하는 항체 약물 콘쥬게이트
CN120712250A (zh) * 2022-10-03 2025-09-26 托马斯杰斐逊大学 基于吡咯烷和咪唑烷的DNA聚合酶θ抑制剂及其用途
WO2024074977A1 (en) 2022-10-04 2024-04-11 Pfizer Inc. Substituted 1 h-pyrazolo-pyridine and-pyrimidine compounds
CN120379671A (zh) 2022-10-18 2025-07-25 辉瑞公司 用于治疗癌症的化合物
WO2024105563A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Pfizer Inc. Substituted bicyclic pyridone derivatives
WO2024137619A1 (en) 2022-12-20 2024-06-27 Bolt Biotherapeutics, Inc. Anti-claudin, bis-benzimid azole sting agonist immunoconjugates, and uses thereof
WO2024180103A1 (en) 2023-02-27 2024-09-06 BioNTech SE Sting agonists containing benzylic alcohol and benzylic amine functional groups
EP4673439A1 (en) 2023-02-27 2026-01-07 BioNTech SE Sting agonists containing hydrazide, hydrazine, and hydroxamic acid functional groups
WO2024186626A1 (en) 2023-03-03 2024-09-12 Bolt Biotherapeutics, Inc. Aza-bicyclic sting agonist immunoconjugates, and uses thereof
CR20250413A (es) 2023-04-05 2025-11-06 Pfizer Compuestos de pirido[4,3–d]pirimidina
WO2024213979A1 (en) 2023-04-10 2024-10-17 Pfizer Inc. Pyrido[4,3-d]pyrimidine compounds
AR133199A1 (es) * 2023-07-10 2025-09-03 Hoffmann La Roche Macrociclos bicíclicos para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias
WO2025029832A2 (en) * 2023-07-31 2025-02-06 Sutro Biopharma, Inc. Sting agonist compounds and conjugates
KR20250040871A (ko) * 2023-09-15 2025-03-25 삼진제약주식회사 Sting(인터페론 유전자 자극인자) 활성화제로서의 헤테로 고리 유도체 및 이를 포함하는 약학적 조성물
EP4534147A1 (en) 2023-10-05 2025-04-09 Sulis Therapeutics ApS Sting antagonist compounds
WO2025094035A1 (en) 2023-11-01 2025-05-08 Pfizer Inc. Toll-like receptor agonists and conjugates thereof
EP4663204A1 (en) 2024-06-13 2025-12-17 Sulis Therapeutics ApS Compounds useful for the modulation of the activity of sting
EP4663632A1 (en) * 2024-06-13 2025-12-17 Sulis Therapeutics ApS Compounds useful for the modulation of the activity of sting
WO2026027944A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Sairopa B.V. Anti-sirp alpha antibody formulations and uses thereof

Family Cites Families (105)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5681835A (en) 1994-04-25 1997-10-28 Glaxo Wellcome Inc. Non-steroidal ligands for the estrogen receptor
US6113918A (en) 1997-05-08 2000-09-05 Ribi Immunochem Research, Inc. Aminoalkyl glucosamine phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors
GB9716557D0 (en) 1997-08-06 1997-10-08 Glaxo Group Ltd Benzylidene-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives having anti-cancer activity
US6312700B1 (en) 1998-02-24 2001-11-06 Andrew D. Weinberg Method for enhancing an antigen specific immune response with OX-40L
GB9824310D0 (en) * 1998-11-05 1998-12-30 Univ London Activators of soluble guanylate cyclase
CA2310896A1 (en) 1999-07-02 2001-01-02 Japan Tobacco Inc. Hcv polymerase suitable for crystal structure analysis and method for using the enzyme
US7605238B2 (en) 1999-08-24 2009-10-20 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies and their uses
CA2589418A1 (en) 1999-08-24 2001-03-01 Medarex, Inc. Human ctla-4 antibodies and their uses
JP3871503B2 (ja) 1999-08-30 2007-01-24 日本たばこ産業株式会社 免疫性疾患治療剤
JP4210454B2 (ja) 2001-03-27 2009-01-21 日本たばこ産業株式会社 炎症性腸疾患治療剤
ID30204A (id) 1999-12-27 2001-11-15 Japan Tobacco Inc Senyawa-senyawa cincin terfusi dan penggunaannya sebagai obat
AU2001269695B2 (en) 2000-05-19 2007-02-15 Corixa Corporation Prophylactic and therapeutic treatment of infectious, autoimmune and allergic diseases with mono and disaccharide-based compounds
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
AU2001281001B2 (en) 2000-08-04 2005-11-03 Corixa Corporation New immunoeffector compounds
US6310224B1 (en) 2001-01-19 2001-10-30 Arco Chemical Technology, L.P. Epoxidation catalyst and process
EP1539188B1 (en) 2001-01-22 2015-01-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
JP4212278B2 (ja) 2001-03-01 2009-01-21 日本たばこ産業株式会社 移植片拒絶反応抑制剤
US7285552B2 (en) 2001-03-19 2007-10-23 Ono Pharmaceuticals Co., Ltd. Drugs containing triazaspiro[5.5]undecane derivatives as the active ingredient
AR035543A1 (es) 2001-06-26 2004-06-16 Japan Tobacco Inc Agente terapeutico para la hepatitis c que comprende un compuesto de anillo condensado, compuesto de anillo condensado, composicion farmaceutica que lo comprende, compuestos de benzimidazol, tiazol y bifenilo utiles como intermediarios para producir dichos compuestos, uso del compuesto de anillo con
CA2448737C (en) 2001-07-20 2010-06-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
US6911434B2 (en) 2002-02-04 2005-06-28 Corixa Corporation Prophylactic and therapeutic treatment of infectious and other diseases with immunoeffector compounds
US6525028B1 (en) 2002-02-04 2003-02-25 Corixa Corporation Immunoeffector compounds
IL164376A0 (en) 2002-04-03 2005-12-18 Applied Research Systems Ox4or binding agents, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO2003085375A2 (en) 2002-04-04 2003-10-16 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Hcv antiviral and cytotoxicity drug screening assay
DOP2003000641A (es) 2002-05-10 2003-11-15 Pfizer Inhibidores de las arn polimerasa dependiente de arn del virus de las hepatitis c y composiciones y tratamiento que los usan
ES2295639T3 (es) 2002-06-13 2008-04-16 Crucell Holland B.V. Agonistas del receptor ox40=(=cd134) y uso terapeutico descripcion.
EP2243493A1 (en) 2002-07-03 2010-10-27 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Immunopotentiative composition
TW200418848A (en) 2002-10-24 2004-10-01 Glaxo Group Ltd Compounds
CN1731993A (zh) 2002-11-01 2006-02-08 维洛药品公司 苯并呋喃化合物、组合物以及治疗和预防丙型肝炎病毒感染及相关疾病的方法
WO2004054581A2 (en) 2002-12-13 2004-07-01 Smithkline Beecham Corporation Cyclohexyl compounds as ccr5 antagonists
US7271172B2 (en) 2002-12-13 2007-09-18 Smithkline Beecham Corporation Pyrrolidine and azetidine compounds as CCR5 antagonists
DE60318891T2 (de) 2002-12-13 2009-01-22 Smithkline Beecham Corp. Cyclopropylverbindungen als ccr5 antagonisten
US7531661B2 (en) 2002-12-13 2009-05-12 Smithkline Beecham Corporation Indane compounds as CCR5 antagonists
CA2509711A1 (en) 2002-12-13 2004-07-01 Smithkline Beecham Corporation Piperidine derivatives as ccr5 antagonists
EP1569931B1 (en) 2002-12-13 2008-10-08 Smithkline Beecham Corporation Heterocyclic compounds as ccr5 antagonists
CN1753912B (zh) 2002-12-23 2011-11-02 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
US7960522B2 (en) 2003-01-06 2011-06-14 Corixa Corporation Certain aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use
US7223785B2 (en) 2003-01-22 2007-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US7098231B2 (en) 2003-01-22 2006-08-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
KR20050107399A (ko) 2003-01-23 2005-11-11 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 인간 ｐｄ-1에 대하여 특이성을 갖는 물질
US7148226B2 (en) 2003-02-21 2006-12-12 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase, and compositions and treatments using the same
TW200517381A (en) 2003-08-01 2005-06-01 Genelabs Tech Inc Bicyclic heteroaryl derivatives
WO2005014543A1 (ja) 2003-08-06 2005-02-17 Japan Tobacco Inc. 縮合環化合物及びそのｈｃｖポリメラーゼ阻害剤としての利用
WO2005070420A1 (en) 2004-01-14 2005-08-04 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 1h-benzimidazol-2-yl-benzamide derivatives and related compounds as itk inhibitors (interleukin-2-inducible t cell kinase) for the treatment of inflammation, immunological and allergic disorders
EP1711495A2 (en) 2004-01-23 2006-10-18 Amgen Inc. Quinoline, quinazoline, pyridine and pyrimidine counds and their use in the treatment of inflammation, angiogenesis and cancer
EA200901463A1 (ru) 2004-02-20 2010-08-30 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Ингибиторы вирусной полимеразы
EP1729781B1 (en) 2004-03-15 2012-10-24 Karaolis, David K. R. A method for inhibiting cancer cell proliferation or increasing cancer cell apoptosis
CA2564175A1 (en) 2004-04-28 2005-11-10 Arrow Therapeutics Limited Chemical compounds
TW200600492A (en) 2004-05-18 2006-01-01 Achillion Pharmaceuticals Inc Substituted aryl acylthioureas and related compounds; inhibitors of viral replication
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
AU2005273619B2 (en) 2004-08-18 2009-05-28 Pfizer Inc. Inhibitors of hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase, and compositions and treatments using the same
GB0423673D0 (en) 2004-10-25 2004-11-24 Glaxo Group Ltd Compounds
US20070060589A1 (en) * 2004-12-21 2007-03-15 Purandare Ashok V Inhibitors of protein arginine methyl transferases
CA2607089A1 (en) 2005-05-04 2006-11-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
BRPI0608910A2 (pt) 2005-05-09 2010-02-17 Achillion Pharmaceuticals Inc uso de um composto da fórmula ou um sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável desse, composto ou sal ou hidrato do mesmo, composição farmacêutica e composição farmacêutica embalada
MX2007013978A (es) 2005-05-09 2008-02-22 Ono Pharmaceutical Co Anticuerpos monoclonales humanos a muerte programada 1 (pd-1) y metodos para tratamiento de cancer utilizando anticuerpos anti-pd-1 solos o en combinacion con otros inmunoterapeuticos.
RS54876B1 (sr) 2005-05-10 2016-10-31 Incyte Holdings Corp Modulatori indoleamina 2,3-dioksigenaze i metode za upotrebu istih
CN105330741B (zh) 2005-07-01 2023-01-31 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
EP1782826A1 (en) 2005-11-08 2007-05-09 GBF Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH PQS and c-diGMP and its conjugates as adjuvants and their uses in pharmaceutical compositions
US8017612B2 (en) 2006-04-18 2011-09-13 Japan Tobacco Inc. Piperazine compound and use thereof as a HCV polymerase inhibitor
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20100017514A (ko) 2007-05-07 2010-02-16 메디뮨 엘엘씨 항 ｉｃｏｓ 항체, 및 종양, 이식 및 자가면역성 질환 치료에서의 이의 용도
KR101562580B1 (ko) 2007-06-18 2015-10-22 머크 샤프 앤 도메 비.브이. 사람 프로그램된 사멸 수용체 ｐｄ-1에 대한 항체
DK2242771T3 (da) 2007-12-14 2013-08-26 Pfizer Bindingsmolekyler til den humane ox40-receptor
SG187502A1 (en) 2008-02-01 2013-02-28 Takeda Pharmaceutical Oxim derivatives as hsp90 inhibitors
WO2009114335A2 (en) 2008-03-12 2009-09-17 Merck & Co., Inc. Pd-1 binding proteins
US8148363B2 (en) * 2008-05-19 2012-04-03 Schering Corporation Heterocyclic compounds as factor IXA inhibitors
WO2013166000A1 (en) 2012-04-30 2013-11-07 Barber Glen N Modulating immune responses
WO2010027827A2 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Amplimmune, Inc. Targeted costimulatory polypeptides and methods of use to treat cancer
CN102264762B (zh) 2008-09-26 2018-03-27 达纳-法伯癌症研究公司 人抗pd‑1、pd‑l1和pd‑l2的抗体及其应用
US20110293605A1 (en) 2008-11-12 2011-12-01 Hasige Sathish Antibody formulation
BRPI0917592B1 (pt) 2008-12-09 2021-08-17 Genentech, Inc Anticorpo anti-pd-l1, composição, artigos manufaturados e usos de uma composição
AU2010229795A1 (en) 2009-03-27 2011-10-13 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Fused ring inhibitors of hepatitis C
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
RS60033B1 (sr) 2009-11-24 2020-04-30 Medimmune Ltd Ciljano vezujući agensi usmereni na b7-h1
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2011091446A1 (en) * 2010-01-22 2011-07-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
US8598156B2 (en) * 2010-03-25 2013-12-03 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
UY33288A (es) * 2010-03-25 2011-10-31 Glaxosmithkline Llc Derivados de indolina inhibidores de la proteina quinasa r del reticulo endoplasmatico
US20110280877A1 (en) 2010-05-11 2011-11-17 Koji Tamada Inhibition of B7-H1/CD80 interaction and uses thereof
EA025281B9 (ru) * 2010-05-17 2017-08-31 Инкозен Терапьютикс Пвт. Лтд. СОЕДИНЕНИЯ 3,5-ДИЗАМЕЩЕННОГО-3H-ИМИДАЗО[4,5-b]ПИРИДИНА И 3,5-ДИЗАМЕЩЕННОГО-3H-[1,2,3]ТРИАЗОЛО[4,5-b]ПИРИДИНА КАК МОДУЛЯТОРЫ ПРОТЕИНКИНАЗ
CN101898945B (zh) 2010-07-27 2013-05-08 大连理工大学 盐析萃取发酵液中丙酮和丁醇的方法
WO2013028231A1 (en) 2011-08-23 2013-02-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Anti-ox40 antibodies and methods of using the same
AP2013006771A0 (en) 2010-08-23 2013-03-31 Boards Of Regents The University Of Texas System Anti-OX40 antibodies and methods of using the same
US20140364617A1 (en) * 2010-12-15 2014-12-11 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
SG193428A1 (en) 2011-03-31 2013-10-30 Inst Nat Sante Rech Med Antibodies directed against icos and uses thereof
SG10201606284UA (en) 2011-08-01 2016-09-29 Genentech Inc Methods Of Treating Cancer Using Pd-1 Axis Binding Antagonists And Mek Inhibitors
CA3213528A1 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
SG10201610251PA (en) 2012-06-08 2017-01-27 Aduro Biotech Compositions and methods for cancer immunotherapy
WO2014001464A1 (en) * 2012-06-27 2014-01-03 4Sc Discovery Gmbh Bifluorodioxalane-amino-benzimidazole kinase inhibitors for the treatment of cancer, autoimmuneinflammation and cns disorders
ES2684552T3 (es) 2012-09-03 2018-10-03 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Anticuerpos dirigidos contra ICOS para tratar la enfermedad de injerto contra hospedador
WO2014055897A2 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Human monoclonal anti-pd-l1 antibodies and methods of use
PT2931738T (pt) 2012-12-13 2019-04-10 Aduro Biotech Inc Composições compreendendo nucleótidos cíclicos de purina com estereoquímica definida e métodos para a sua preparação e utilização
PT2996473T (pt) 2013-05-18 2019-11-18 Univ California Composições e métodos para a ativação da sinalização dependente do ''estimulador de genes de interferão''
US9549944B2 (en) 2013-05-18 2017-01-24 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”—dependent signalling
JP2016538344A (ja) 2013-11-19 2016-12-08 ザ・ユニバーシティ・オブ・シカゴＴｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｃｈｉｃａｇｏ 癌処置としてのｓｔｉｎｇアゴニストの使用
US10227638B2 (en) 2014-06-02 2019-03-12 Base4 Innovation Ltd. Nucleotide polymorphism detection method
CR20160564A (es) * 2014-06-04 2017-01-20 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Dinucleótidos cíclicos como moduladores de sting
RU2715038C2 (ru) 2014-07-11 2020-02-21 Дженентек, Инк. Антитела анти-pd-l1 и способы их диагностического применения
MA41414A (fr) 2015-01-28 2017-12-05 Centre Nat Rech Scient Protéines de liaison agonistes d' icos
CN114907481A (zh) 2015-03-23 2022-08-16 震动疗法股份有限公司 Icos的抗体
SG10202010609QA (en) 2015-08-13 2020-11-27 Merck Sharp & Dohme Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
RU2020113165A (ru) 2015-12-03 2020-06-09 Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед Циклические пуриновые динуклеотиды в качестве модуляторов sting
IL295649B2 (en) 2016-04-07 2025-12-01 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Heterocyclic amides useful as protein modulators
WO2017175156A1 (en) 2016-04-07 2017-10-12 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides useful as protein modulators

Also Published As

Publication number Publication date
BR122018070836A8 (pt) 2022-07-19
CR20200045A (es) 2020-03-11
IL285702A (en) 2021-09-30
JP6861307B2 (ja) 2021-04-21
MX2020009947A (es) 2021-10-26
TWI777014B (zh) 2022-09-11
HRP20220936T1 (hr) 2022-10-28
IL261657B (en) 2021-09-30
MY189100A (en) 2022-01-25
DOP2020000018A (es) 2020-03-15
IL261482B (en) 2021-09-30
TWI868471B (zh) 2025-01-01
CN109071514A (zh) 2018-12-21
LT3440076T (lt) 2022-09-26
JP2020100646A (ja) 2020-07-02
IL261482A (en) 2018-10-31
AU2020200692A1 (en) 2020-02-20
ES2921855T3 (es) 2022-09-01
DOP2020000019A (es) 2020-03-15
CL2018003290A1 (es) 2019-02-01
AU2018229498C1 (en) 2020-09-03
CL2018003291A1 (es) 2019-02-01
CN109071514B (zh) 2021-07-06
MX2018012333A (es) 2019-03-07
UA123407C2 (uk) 2021-03-31
NZ745957A (en) 2020-07-31
MX379169B (es) 2025-03-10
PH12018502202A1 (en) 2020-06-22
KR20180132806A (ko) 2018-12-12
PE20181920A1 (es) 2018-12-11
JP2022166060A (ja) 2022-11-01
US11365190B2 (en) 2022-06-21
AU2017247798A1 (en) 2018-09-27
AU2018229497A1 (en) 2018-10-04
DOP2018000217A (es) 2018-10-31
PH12018502151A1 (en) 2019-07-08
AU2018229498B2 (en) 2019-06-27
UY37195A (es) 2017-10-31
US11970480B2 (en) 2024-04-30
JOP20170083B1 (ar) 2022-03-14
AU2020200692C1 (en) 2021-03-04
AU2018229497B2 (en) 2019-06-27
CO2018010727A2 (es) 2018-10-22
CR20200044A (es) 2020-03-11
KR20180124149A (ko) 2018-11-20
US20210139473A1 (en) 2021-05-13
MX387353B (es) 2025-03-18
PH12018502179A1 (en) 2020-06-15
AU2020200692B2 (en) 2020-08-27
CN113549110A (zh) 2021-10-26
AU2017247798B2 (en) 2019-10-31
BR122018070836A2 (pt) 2019-09-10
PE20181919A1 (es) 2018-12-11
SMT202200339T1 (it) 2022-09-14
TW201920161A (zh) 2019-06-01
PT3440076T (pt) 2022-07-29
KR102527786B1 (ko) 2023-04-28
JP7119158B2 (ja) 2022-08-16
JP2019510796A (ja) 2019-04-18
CL2018002850A1 (es) 2018-12-14
SG11201808621TA (en) 2018-10-30
BR122018070838A8 (pt) 2022-07-19
WO2017175147A1 (en) 2017-10-12
TW201738235A (zh) 2017-11-01
CN113549110B (zh) 2024-08-16
JP2021105013A (ja) 2021-07-26
HUE058932T2 (hu) 2022-09-28
AU2017247798C1 (en) 2020-08-27
IL261657A (en) 2018-10-31
JP7466596B2 (ja) 2024-04-12
SG10201900628RA (en) 2019-02-27
IL295649A (en) 2022-10-01
CN109608443B (zh) 2021-09-07
NZ750114A (en) 2025-05-30
BR112018070655A2 (pt) 2019-02-05
TW202246285A (zh) 2022-12-01
CA3019630A1 (en) 2017-10-12
US10189820B2 (en) 2019-01-29
JP6746712B2 (ja) 2020-08-26
IL295649B1 (en) 2025-08-01
EP3440076B1 (en) 2022-06-01
US20180105514A1 (en) 2018-04-19
PE20181884A1 (es) 2018-12-07
TWI776806B (zh) 2022-09-11
MX2020009948A (es) 2021-10-26
AU2018229498A1 (en) 2018-10-04
SI3440076T1 (sl) 2022-09-30
EP3440076A1 (en) 2019-02-13
CN109608443A (zh) 2019-04-12
SG10201900629VA (en) 2019-02-27
AU2018229497C1 (en) 2020-09-03
US20230071675A1 (en) 2023-03-09
PL3440076T3 (pl) 2022-09-05
PH12018502151B1 (en) 2022-01-12
EP4032885A1 (en) 2022-07-27
KR102527784B1 (ko) 2023-04-28
DK3440076T3 (da) 2022-07-11
US10981901B1 (en) 2021-04-20
MX387354B (es) 2025-03-18
IL295649B2 (en) 2025-12-01
BR122018070838A2 (pt) 2019-09-10
IL285702B (en) 2022-09-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11970480B2 (en) Heterocyclic amides useful as protein modulators
CN111417630B (zh) 干扰素基因刺激因子(sting)的调节剂
AU2018344902B2 (en) Modulators of stimulator of interferon genes (STING) useful in treating HIV
EP3440072B1 (en) Heterocyclic amides useful as protein modulators
EA037671B1 (ru) Гетероциклические амиды, пригодные в качестве модуляторов белков
HK40069191A (en) Heterocyclic amides useful as protein modulators
HK1259737B (en) Heterocyclic amides useful as protein modulators
HK1259737A1 (en) Heterocyclic amides useful as protein modulators
BR122018070836B1 (pt) Compostos de amidas heterocíclicas moduladoras de sting, composição contendo ditos compostos e uso dos mesmos para tratar uma doença mediada por sting