HU204815B

HU204815B - Process for producing 2-(1-piperazinyl)-4-phenyl-cycloalkanepyrimidine derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds

Info

Publication number: HU204815B
Application number: HU90861A
Authority: HU
Inventors: Katsuhiko Hino; Naoki Kai; Masato Sakamoto; Tatsuya Kon; Makato Oka; Kiyoshi Furukawa; Yoshiaki Ochi
Original assignee: Dainippon Pharmaceutical Co
Priority date: 1989-02-21
Filing date: 1990-02-20
Publication date: 1992-02-28
Also published as: AU622976B2; US5041443A; HU900861D0; HUT53098A; NO900795D0; NO900795L; EP0484988A1; CA2010477A1; AU4912290A; DD297819A5; FI900833A7; FI900833A0; EP0384228A1; KR910015562A

Description

A találmány tárgya eljárás új 2-(l-piperaziniI)-4-fenil-cildoalkáno-pirimidin-szánnazékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. A gyógyászati készítmények agyi elégtelenségek kezelésére alkalmasak.

Ismeretes néhány 2-(l-piperazin-il)-4-fenil-cildoalkáno-pirimidin-származék és rokon vegyület, melyek farmakológiaí hatást mutatnak. így például az 56-92875 számú japán közzétételi irat 4-fenil-2-(lpiperazinil)-kinazolinokat említ, mint antidepreszsTáns hatású vegyületeket. A 3 305 553 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban 2-(4metií-l-piperazinil)-4-fenil-kinazolinokat említenek, amelyek gyulladásgátló, fájdalomcsillapító és antiallergiás hatást mutatnak, továbbá leírják a kiindulási anyagként használt 2-(4-metil-l-píperazmil)-4-fenil5,6,7,8-tetrahidrokinazolxnokat, de ezek gyógyászati hatásátnem említik.

Ezenkívül a 3 915 976, számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás a 2-(4-(1-4 szénatomos alkil)-l-piperazinil]-4-feniI-(5-8szénatomos)cikIoalkáno-pirimidineket, például a 6,7,8,9-tetrahidro-2(4-metíI-l-piperazinil)-4-feniI-5H-cildohepta[d]piri midint és a 6,7-dihidro-2-(4-metil-i-piperazinil)-4fenil-5H-cildopenta[d]pirimidint írj ák le, mint gyulladásgátlóhatásúvegyületeket.

Ezenkívül a Chem, Pharm. Bull., 31, 2254-2261 (1983) irodalmi helyen leírják, hogy a 4-fenil-2-(l-piperazíniI)-5,6,7,8-tetrahidro-kinazoIin és a 4-feniI-2(4-benzil-l-piperazmil)-5,6,7,8-tetrahidro-kinazolin gyenge hipoglikémiás hatással rendelkezik.

Azonban nem említik ezeknek a 2-(l-piperazinil)~ 4-feniI-cikIoalkáno-pirimidín-származékoknak a központi idegrendszerre gyakorolt hatását.

Azt találtuk, hogy az alábbi 0’) általános képletű új vegyületek és savaddícíós sóik különösen kiváló agyműködést javító hatással rendelkeznek, és ilyen agyműködést javító gyógyászati készítmények hasznos hatóanyagai. Az 0’) általános képletben rí jelentése 3,5 vagy 6,

R^bIehethidrogénatom, 1-6szénatomos alkil-, 3-8 szénatomos cikloalkil- vagy hidroxi-(2-6 szénatomos alkil)-csoport;

R²’ jelentése hidrogénatom vagy fluor atom, azzal a megkötéssel, hogyha R²’ jelentése hidrogénatom, ák- ^tkor R^b jelentése hidrogénatom.

A találmány szerint új gyógyszerkészítményeket állítunk elő elégtelen agyműködéssel kapcsolatos betegségek kezelésére, mely készítmények hatóanyagként az 0’) általános képletű 2-(l-piperazinil)-4-fenil- £ cikloalkáno-pirimidin-származékot tartalmazzák. A találmány szerint továbbá az 0’) általános képletű új 2-(l-piperazinil)-4-fenil-cikloalkáno-pirimidin-szár mazékot is előállíthatjuk, melyek kiválóan alkalmasak agyelégtelenséggel kapcsolatos betegségek kezelésére 5 és ezért az ilyen gyógyászati készítmének hatóanyagai.

A sókhoz tartoznak a szervetlen savakkal képzett sók, például hidroldorid, hidrobromid, hidrojodid, szulfát, foszfát, stb., valamint a szerves savak sói, pél- 6 dául maleát, fumarát, citrát, tartarát, laktát, benzoát, metánszulfonát stb. Ezek a sók ezenkívül adott esetben hidrát formájában is jelen lehetnek, és ezáltal a találmány kiterjed a hidrát vegyületek előállítására is.

Az 0’) általános képletű vegyületek közül különösen előnyösek az alábbi 0”) általános képletű vegyületek, aholn” értéke 3,5 vagy 6, R¹” jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport, 3-8 szénatomos cikloalkilcsoport vagy hidroxi-(2-6 szénatomos alkil)0 csoport, és ezek savaddícíós sóik.

Még előnyösebbek azok az 0”) általános képletű vegyületek, aholR¹” jelentése hidrogénatom, 1-3 szénatomos alkil- vagy hidroxi-etil-csoport, és ezek savaddícióssói.

A legelőnyösebb 0”) általános képletű vegyületek, ahol R^b’ jelentése hidrogénatom és sóik.

Különösen előnyös vegyületek a következők: 2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H

-ciklopenta-pirimidin;

2-(l-piperaziniI)-4-(4-fíuor-fenil)-ó,7,8,9-tetrahidro-5H-ciklopenta-pirimidin;

2-(l-piperazüiil)-4-(4-fluor-feml)-5,6,7,8,9,10hexahidro-ciklooktapirimidin.

Az 0’) általános képletű vegyületeket az alábbi mó5 dón állíthatjuk elő.

Az 0’) általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy (Π) általános képletű vegyületet, ahol X jelentése kilépő csoport vagy atom és R²’ és rí jelentése a fenti, egy 0Π) általános képletű vegyülettel rea3 gáltatunk, ahol R^b jelentése a fenti.

A (Π) általános képletben az X kilépő atom vagy csoport olyan atomot .vagy csoportot jelöl, amely HX formájában távozhat a reakciókörülmények mellett a nitrogénatomhoz az 1-szubsztituált piperazinok 4-es > helyzetében kapcsolódó hidrogénatommal együtt. Az ilyen kilépő atomok vagy csoportok lehetnek halogénatomok, rövidszénláncú alkiltio- például metiltio-, etiltio-, propiltio-, butütio-csoport, arílszulfoníloxicsoportok, például benzolszulfoniloxí-csoport, para• toluolszulfoniloxi- stb. csoportok és alkilszulfoniloxicsoportok, például metánszulfoniloxi-csopor t stb.

A (Π) és 0H) általános képletű vegyületek reakcióját megfelelő oldószerben vagy anélkül végezhetjük. Oldószerként használhatunk aromás szénhidrogéneket, például toluolt, xilolt, továbbá ketonokat, például metil-etil-ketont, vagy étereket, például dioxánt, diglimet vagy alkoholokat, például etanolt, izopropil-alkoholt, butanolt, vagy Ν,Ν-dimetil-formamidot vagy dimetil-szulfoxidot. A reakciót előnyösen bázikus anyag jelenlétében végezzük, ilyen lehet például az alkálifém-karbonát, így például nátrium- vagy káliumkarbonát, alkálifém-hidrogén-karbonát, például nátrium-hidrogén-karbonát, kálium-hidrogén-karbonát, vagy tercier aminok, például trietil-amin, de a 0Π) általános képletű vegyületet feleslegben is használhatjuk a bázikus anyag alkalmazása helyett. Ha a 0Π) általános képletű vegyület hidrát formájú, akkor a hidrátot használhatjuk. A reakció hőmérséklete rendszerint 40-200 ’C között van. A (H) általános képletű kiindulási anyagokat az 1-29. referencia példákban

HU 204 815 Β leírt eljárással vagy hasonló módon állíthatjuk elő.

Az (Γ) általános képletű vegyületeket ismert módon izolálhatjuk és tisztíthatjuk.

Az G’) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk szabad bázis, só vagy hidrát formájában, a kiindulási anyag fajtájától, a reakció fajtájától és a reakciókörülményektől függően. Ha a vegyületeket só formájában kapjuk, akkor átalakíthatjuk szabad bázissá ismert módszerrel, például lúgos kezeléssel, például alkálifém-hidroxiddal. Ha a vegyületeket szabad bázis formájában kapjuk, akkor a megfelelő sókká alakíthatók ismert módon, például különböző savakkal történő kezeléssel.

Az G’) általános képletű vegyületek bizonyos csökkent memóriájú állati modelleken kiváló javító hatást mutatnak, és kifejezett védőhatás tapasztalható állatoknál csökkent oxigéntartalom által előidézett pusztulás esetén. A vegyületek szelektíven kötődnek a szerotonin (5-HT2) receptorhoz, és növelik az agy szerotonin metabolitjának (5-HIAA) koncentrációit, vagy antireszerpin hatást mutatnak. Ennek megfelelően a találmány szerint előállított vegyületeket az agyi elégtelenség különböző szimptómáinak kezelésére lehet használni.

Az G’) általános képletű vegyületek tehát különböző aghyműködési elégtelenségek tüneteinek kezelésére alkalmasak gyógyszerként, ilyenek például az Alzheimer-típusú elmebaj vagy a multi-infarktus elmebaj vagy más agyér eredetű elmebajok és néhány más szervi és működési agy-rendellenességek.

A találmány szerbit előállított vegyületek kiváló viselkedési és/vagy memóriazavar javítási tulajdonságokkal rendelkeznek, mely zavarokat szkopolamin vagy cikloheximid idéz elő. Ilyenek például a következő vegyületek és gyógyászatilag elfogadható sóik:

2-(l-piperazmü)-4-fenil-6,7-dihidro-5H-ciklopen tapirbnidin,

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H

-eiklopentapirimidin,

2-(l-piperazinü)-4-fenü-6,7,8,9-tetrahidro-5Hcikloheptapirimidin,

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-cikloheptapirimidin,

2-(l-piperazinü)-4-fenil-5,6,7,8,9,10-hexahidrociklooktapirimidin,

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-5,6,7,8,9,10hexahidro-ciklooktapirimidin.

A találmány szerint előállított vegyületek közül, melyek hatásosan szelektív kötődnek a szerotonin (5HT2) receptorhoz és növelik az agy szerotonin metabolitjának koncentrációját, a következőket, illetve ezek gyógyászatilag elfogadható sóit említjükmeg:

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H

-eiklopentapirimidin,

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7,8,9-tetrahÍdro-5H-cikloheptapirimidin,

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-5,6,7,8,9,10hexahidro-ciklooktapirimidin.

A találmány szerint előállított néhány reprezentatív vegyület farmakológiai hatását az alábbi kísérletekkel szemléltetjük.

7. Kísérlet

Szkopolaminnal előidézett hipermotilitásra gyakorolt antagonisztikus hatás (R. H. Bauer; Behav. Brain. Rés; 5 261-279/1982/) hímnenű, 22-28 g tömegű Std-ddY törzshöz tartozó egeret használunk a tesztvegyületek szkopolaminnal előidézett hipermotilitásra gyakorolt hatásának vizsgálatára, ahol a kolinergiás néurotranszmiszsziót fokozó vegyület antagonisztikus hatásúnak bizonyult.

Minden egérnek orálisan adagoltuk a tesztvegyületet, és az adagolás után 90 perccel az egyes tesztállatokat egy teszt ketrecbe helyeztük, melynek mérete 25x35x30 cm. 30 perc múlva 1 mg/kg szkopolaminhidrobromidot adagoltunk az egereknek intraperitoneálisan, majd a motilitást animex hatásmérővel mértük 30 percig. A tesztvegyületek hatását antagonizmusban fejeztük ki százalékban (teljes antagonizmus a nem adagolt állatok motilitás szintjére vonatkoztatva= 100%). Az eredményeket a következő 1. táblázat mutatja.

7. Táblázat

Szkopolaminnal előidézett hipermotilitásra gyakorolt antagonisztikus hatás

Vizsgálati vegyület	Dózis (mg/kg)	Gátló hatás (%)	Vizsgálati vegyület	Dózis (mg/kg)	Gátló hatás (%)	Vizsgálati vegyület	Dózis (mg/kg)	Gátló hatás (%)
1*	3	60,7	17	30	72,5	32	30	62,6
2	30	69,2	”18	30	54,4	”33	340	42,3
”3	3	68,0	”19	3	64,4	”34	30	50,2
”4	10	66,0	”20	30	35,2	”37	30	62,9
”5	30	81,4	”21	30	70,5	”28	30	81,6
”6	30	64,5	”23	30	52,4	”39	30	55,6
”7	30	78,2	”24	30	72,5	”40	30	64,5
”8	10	80,0	”25	10	67,2	”41	30	60,8
”9	10	60,4	”26	30	59,6	”42	30	71,0
”10	3	60,5	”27	30	42,0	”43	30	64,2
”12	30	80,9	”28	30	96,4	”45	30	60,4
”13	30	97,6	”29	30	59,1	”46	30	100

HU 204815 Β

1. Táblázat folytatása

Szkopolamínnal előidézett hipermotilitásra gyakorolt antagonisztikus hatás

Vizsgálati	Dózis	Gátló hatás	Vizsgálati	Dózis	Gátló hatás	Vizsgálati	Dózis	Gátló hatás
vegyület	(mg/kg)	(%)	vegyület	(mg/kg)	(%)	vegyület	(mg/kg)	(%)
”14	3	55,2	”30	30	75,7
16	30	54,2	31	10	61,1

*1. példa szerinti vegyület (és így tovább) /1988/)

A tesztvegyűletek antiamnéziás hatását cildoheximiddel kezelt egereken vizsgáltuk; a cikloheximid ismert amnézia előidéző szer.

15-20 hímnemű 27-33 g testtömegű Std-ddY törzsbe tartozó egerekből álló csoportot tréningnek és a passzív kikerülési feladatra kitűzött visszatartási kísérletnek vetettük alá, egy rácsos alapzattal és 4x4x 4 cm-es fapadlózattal ellátott lelépő készülékben a padló közepén. A tréning kísérletben az egyes egereket először a padlóra helyeztük, majd amikor az egér lelépett a rácsos padlóra, akkor a lábára 15 másodpercig elektromos sokkot juttattunk (1 Hz, 1,5 sec, 60 VDC). A tréning kísérlet után azonnal 60 mg/kg cikloheximidet adagoltunk szubkután, és a tesztvegyületet intraperitoneálisan. Avisszatartási kísérletet ezután 24 óra múlva végeztük el, és mértük azt az időt, amely eltelt az egyes egerek padlóra helyezésétől a rácsos padlóra való Ielépéséig (lelépési látencia). A lelépési látenciát (lappangási idő) a visszatartási kísérletben lényegesen sikerült lerövidíteni a, cikloheximides kezeléssel (amnézia). A tesztvegyűletek hatását a javítással fejeztük ki százalékosan (a nem kezelt állatoklappangási szintjéhez viszonyított teljes javítás-100%). Az eredményeket a 3. táblázat mutatja.

3. Táblázat

A passzív kikerülési reakció cildoheximiddel indukált amnéziájára gyakorolt javító hatás 40 _

2. Kísérlet (A. Tőbe és tsai, Japan J. Pharmaeol.33,775/1983/) A spontán váltakozást viselkedés szkopolamínnal előidézett deficitjére gyakorolt javító hatás (A. Tőbe és tsai, Japan J. Pharmaeol. 33, T75/1983/)

15-25 db, 22-28 g testtőmegű Std-ddY törzshöz tartozó hímnemű egerek csoportját használtuk a tesztvegyűletek szkopolamínnal előidézett spontán váltakozási deficitjének vizsgálatára a tesztvegyületekkelT-Iabirintusban, amely egy ismert állati modellje a memóriacsökkenésnek, amely a kolinergiás idegrendszer csökkentműködésénekkövetkezménye.ATlabirintus egy törzsből és két karból áll, melyek 25 cm hosszúak, 5 cm szélesek és 10 cm magasak. A törzs ELSŐ 10 cm-ét és mindegyikkar utolsó 10 cm-étstart és cél boxokra osztjuk csapóajtók segítségével.

A tesztvegyületet és szkopolamín-hidrobromidot adagolunkminden egérnek 1 mg/kg mennyiségben intraperitoneálísan, és 30 perc múlva folyamatosan megismételjük 8 kísérletben a T labirintusban a spontán váltakozási feladatot A naívegerek váltakozva lépnek be a jobb és bal oldali cél dobozokba, de a szkopolaminnal kezelt állatok ismételten ugyanabba a cél dobozba hajlamosak belépni. A tesztvegyűletek hatását százalékosan fejezzük ki, mégpedig a teljes javulás a tesztvegyülettel nem kezelt egerek szintjéhez viszonyítva- 100%, és az eredményeket a 2. táblázat mutatja·

2. Táblázat

Szkopolamínnal előidézett spontán váltakozási viselkedés deficitre gyakorolt javító hatás

Vizsgálati vegyület	Dózis (mg/kg)	Javítás (%)
1.*	0,02	47,8
	0,5	51,9
2.	2,0	39,1
3.	2,0	45,8
7.	10,0	44,0
9.	2,0	36,7
10.	2,0	63,0
14.	1,0	40,7

*Az l.példaszerinti vegyület (és így tovább) 3, Kísérlet

Vizsgálati vegyület	Dózis (mg/kg)	Javítás (%)
I.*	0,5	33,8
	2,0	65,8
2.	0,5	93,7
	2,0	72,8
3.	0,5	34,4
	10,0	52,1
7.	0,5	70,4
9.	0,5	85,8
10.	0,5	67,1
14.	2,0	52,5

A passzív kikerülési reakció cildoheximiddel előidézett amnéziájára gyakorolt javító hatás (T. Nabeshima és tsai; Pharmaeol. Biochem. Behav., 31, 405 *Az l.példaszerinti vegyület (és így tovább)

4. Kísérlet

Nátrium-nitrittel előidézett anémiás oxigénhiányra gyakorolt védőhatás (M. Shimada és tsai, Brain and Nerve, 37,189/1985/)

Ismeretes, hogy a nátrium-nitrit anémiás oxigénhi4

HU 204 815 Β ányt okoz oly módon, hogy a hemoglobint metohemoglobinná alakítja, és ez az agyműködés lényeges csökkenését, végül halált okoz. A fenti tudás ismeretében a nátrium-nitrites kezelés utáni túlélési idő meghosszabbítását használtuk indexként a tesztvegyületek antihipoxiás hatásának megállapítására.

25-30 mg testtömegű Std-ddY törzsbe tartozó 20 hímnemű egérből álló csoportnak intraperitoneálisan 10 mg/kg tesztvegyületet adtunk, és a kezelés után 2 óra múlva intraperitoneálisan 225 mg/kg letális mennyiségű nátrium-nitritet adagoltunk, majd minden egér túlélési idejét mértük. A tesztvegyületek hatását a túlélési idő meghosszabbodási arányában fejeztük ki százalékosan, összevetve a csak nátrium-nitrittel kezelt állatok túlélési idejével. Az 1. példa szerinti vegyület meghosszabbodási aránya 36,7%.

5. Kísérlet

Dopamin (D₂), szerotonin (Sj, S₂) és adrenalin (aj) receptorhoz való kötődés hatása (in vitro receptor kötődési kísérlet)

Dopamin (D₂), szerotonin (Sj, S₂) és adrenalin (aj) receptor kötődési kísérleteket végeztünk I. Creese és társai módszere szerint (Eur. J. Pharmacol., 46, 377 /1977/), S. J. Peroutka és társai (Mól. Pharmacol., 16, 687 /1979/), J. E. Leysen és társai (Mól. Pharmacol.,

21, 301 /1982/) és D. C. U’Prichard és társai (Mól. Pharmacol., 13,454/1977/).

Receptor forrásként patkányok agyrégióiból előállított nyers szinaptoszoma frakciókat használtunk, és (³H) spiperont (D2), (³H) szerotonint (S j), (³H) ketanserint (S2) és (³H) WB-4101 (ctj)-t használtunk jelzett ligandumként. A kötődési kísérletet úgy végeztük, hogy puffer oldatban (véső térfogat: 1 ml), amely a receptor-forrást és a jelzett ligandumot tartalmazta, különböző koncentrációjú tesztvegyület jelenlétében meghatározott ideig inkubáltuk a szinaptoszoma frakció alikvot jait. A kísérletet úgy fejeztük be, hogy gyorsan leszűrtük Whatman GF/B üvegszál szűrő keresztül, amely egy sejt összegyűjtőhöz kapcsolódik (Brandel) és szcintillációs számlálóval számláltuk a szűrőkön felgyülemlett radioaktivitást. A fajlagos kötődést a kísérleti csoport radioaktivitásának mennyisége és a kontrollcsoport radioaktivitásának mennyisége közötti kísérletként számítottuk; a kontrollcsoportot külön mértük feleslegben lévő jelzetlen ligandum [spiperone (D₂), szerotonin (Sj), metiszergid (S^ és prazosin (aj)] jelenlétében a jelzett ligandum fajlagos kötődést 50%-osan gátló koncentráció) probit analízissel határoztuk meg. Az eredményeket a 4. táblázat tartalmazza.

4. Táblázat

Kötődő hatás dopamin (D₂), szerotonin (S₁, S₂) és adrenalin (aj) receptorhoz

Tesztvegyület	Dz	s,	IC₅₀(nM)	S₂	«1
1. példa*	920	750		29	1100
2. példa	750	3000		9,6	3400
7. példa	2000	-		38	-
10. példa	130	1300		19	1200
28. példa	350	-		87	-

*Az 1, példa szerinti vegyület (és így tovább)

6. Kísérlet

Az agy szerotonin metabolit koncentrációjára gyakorolt növelő hatás (K. Furukawa és tsai, Japan J. Pharmacol., 40,149p/1986/) hímnemű, 25-30 g testtömegű Std-ddY törzshöz tartozó egérből álló csoportot használtunk annak vizsgálatára, hogy hogyan hatnak a tesztvegyületek az agy szerotonin metabolitjának az 5-hidroxi-indol-3-ecetsav (5-HIAA) koncentrációjára. Ismeretes, hogy az 5HIAA növelése főleg a szerotonin receptor blokádjának hatása.

Az egereket 2 órával a tesztvegyületes kezelés után lefejezéssel elpusztítottuk, az agyakat gyorsan kivettük, 1 n hangyasav-aceton oldatban homogenizáltuk és hűtött ultracentrifugában centrifugáltuk. A felülúszót nitrogéngáz befúvatásával elpárologtattuk, majd a maradékot ismét feloldottuk, 0,01 n ecetsavban, és ez szolgáti az 5-HIAA koncentráció meghatározására nagynyomású folyadékkromatográfiával, elektrokémiai kimutatással. A tesztvegyületek hatását az 5HIAA koncentrációjára a kontroll százalékában fejeztük ki (a nem kezelt állatok 5-HIAA szintje100%). Az eredményeket az 5. Táblázat mutatja.

5. Táblázat

Az agy szerotonin metabolit koncentrációjára gyakorolt növelő hatás

Tesztvegyület	Dózis (mg/kg)	5-HIAA (%)
1. példa*	100	150
2. példa	100	135
4. példa	100	122
5. példa	100	161
6. példa	100	119
14. példa	100	154
25. példa	100	142
27. példa	100	131
28. példa	100	156
29. példa	100	149
30. példa	100	137

HU 204 815 B *Az 1. péla szerinti vegyűlet (és így tovább)

7. Kísérlet

Antireszerpin hatás (M. Shimizu és tsai; Arzneimittel-Forsch., 25,166/1974/)

22-25 g testtömegű, 5 Std-ddY törzshöz tartozó hímnemű egérből álló csoportot használunk a tesztvegyűletek reszerpinnel előidézett hipotenniájára gyakorolt antagonisztikus hatás vizsgálatára, amely az antidepresszáns szerek ismert screenelő módszere.

5m^kgreszerpintadagoltunkszubkután az egereknek, majd orálisan egy tesztvegyöletet adagoltunk. Az adagolás után4 óramúlvamegmértiikaz egerekrektális hőmérsékletét. A tesztvegyiiletek hatását gátlási százalékban fejeztük ki (teljes hipotermia gátlás reszerpinnel a nem kezelt állatoknál» 100%). Az eredményeket a 6. táblázat mutatja.

6. Táblázat

Anti-reszerpin hatás

Tesztvegyület	Dózis (mg/kg)	Gátlási arány (%)
14,példa*	100	100
25. példa	100	63
26. példa	100	100
27.példa	100	46
28. példa	100	37
30. példa	100	67

*A 14. példa szerinti vegyűlet (és így tovább) 8. Kísérlet Akut toxicitás

25-30 g testtömegő, Std-ddY törzshöz tartozó, 5 hímnemű egérből álló csoportot használtunk. A tesztállatoknak 200 mg/kg tesztvegyületet adagoltunk 0,5%-os tragantmézga oldat vagy szuszpenzió formájában, és a tesztvegyület adagolása után 7 napig figyeltük meg az állatok Ietalitását. A kezelés következményeként a csoportból 1 állat sem pusztult el, amelyeknek az I., 2. és 9. példa szerinti vegyületeket adagoltuk.

A vegyületeket adagolhatjuk orálisan, parenterálisan vagy intrarektálisan, de előnyösen orálisan adagoljuk. A vegyületek dózisa változhat a vegyületek fajtájától, az adagolás módjától, a betegség súlyosságától, a paciens korától függően, de rendszerint 0,0150 mg/kg/nap, előnyösen 0,01-5 mg/kg/nap. A találmány szerint előállított vegyületeket rendszerint ismert gyógyszerkészítmények formájában, ismert, gyógyászatilag elfogadható hordozókkal vagy hígítókkal összekeverve adagoljuk. A gyógyászatilag elfogadható hordozók vagy hígítók az ismertek lehetnek, melyek nem reagálnak a vegyületekkel. Előnyös hordozó vagy hígító lehet a laktóz, glükóz, mannit, szorbit, dextrin, ciklodextrin, keményítő, szacharóz, magnézium-metaszilikát-aluminát, szintetikus alumíniumszilikát, kristályos cellulóz, nátrium-karboxi-metilcellulóz, hidroxi-propil keményítő, kalcium-karboximetil-cellulóz, ioncserélő gyanta, metil-cellulóz, zselatin, gumiarábikum, pullurán, hidroxi-propil-cellulóz, kevéssé szubsztituált hidroxi-propil-cellulóz, hidroxi-propil-metil-cellulőz, polivinil-pirrolidon, polivinil-alkohol, könnyű kovasav-anhidrid, magnéziumsztearát, talkum, tragantmézga, bentonit, V-gumi, karboxivinil-polimer, titán-oxid, szorbitan-zsírsav5 észter, nátrium-lauril-szulfát, glicerin, glicerin-zsírsav-észter, vízmentes lanolin, glicero-zselatin, poliszorbát, makrogol, növényi olaj, viasz, propilén-glikol, víz stb. A gyógyszerkészítményekhez tartoznak a tabletták, kapszulák, granulák, finomgranulák, porok, ) szirupok, szuszpenziók, injekciók, kúpok stb. Ezeket a készítményeket ismert módon állíthatjuk élő. A folyékony készítmények lehetnek feloldva vagy szuszpendálva vízben vagy más ismert közeget is alkalmazhatunk, a tabletták, granulák és finom granulátumok be i lehetnek vonva ismert bevonószerrel, az injekciókat rendszerint úgy készítjük, hogy a vegyületet vízben oldjuk, de adott esetben fiziológiai konyhasó oldatban vagy glükóz oldatban is oldhatjuk, melyben adott esetben puffer vagy konzerválószer is van. A gyógyászati ¹ készítmények más gyógyászatilag hatékony anyagokat is tartalmazhatnak.

A találmány további szemléltetése a referencia példákban, a példákban és a készítmény példákban történik. A vegyületek azonosítása elemanalízissel, tömegspektrummal, IR spektrummal, NMR spektrummal történik.

A referencia példákban és a példákban a kővetkező rövidítéseket használjuk'

Et:etil

Me: metil

Ph: fenil

A: etanol

AGacetonitril

D: NJí-dimetil-formamid

E: dietil-éter

EA: etil-acetát

HX: hexán

IP: izopropil-alkohol

M: metanol

MC: metilén-klorid

PE.'petroléter

A zárójelben feltüntetett oldószer a referencia példákban és a példákban az olvadáspont mellett az átkristályosítási oldószert jelenti.

1. Referencia példa

4-(4-Huor-fenil)-5,6,7,8,-tetrahidro-2(lH)-kinazolinon előállítása g 2-(4-fluor-benzoil)-ciklohexanon, 7,6 g karbamid, 8 ml koncentrált sósav és 40 ml etanol elegyét 8 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. Hűtés után a reakcióelegyet vízzel hígítjuk és metilénkloriddal mossuk A vizes réteget kálium-karbonáttal meglúgosítjuk és a kivált kristályokat leszűrjük, és Ν,Ν-dimetil-formamid-etanol elegyből átkristályosítjuk 9,6 g kívánt vegyületet kapunk

Op.:248-253 °C.

2-14, referencia példák

Az 1. referencia példában leírt módon járunk el, de

HU 204 815 Β a megfelelő kiindulási anyagokat használjuk, és a kö- vetkező 7. táblázatban felsorolt vegyületeket kapjuk.

7. Táblázat (IA) általános képletű vegyületek

Ref. példa száma	n		Olvadáspont (°C)	Atkristályosí- táshoz használt oldószer
2	3	H	210-215	M-EA
3	3	4-F	210-220	A
11	5	H	215-221	M
12	5	4-F	252-253	M
13	6	H	253-254	M
14	6	4-F	257-262	A

75. Referencia példa

4-(4-Fluor-fenil)-6-metil-5,6,7,8-tetrahidro2(lH)-kinazolinon előállítása

Az 1. referencia példa szerint járunk el, de a megfelelő kiindulási anyagokat használjuk, és a kívánt vegyületet kapjuk, amely 240-245 °C hőmérsékleten olvad (etanol).

16. Referencia példa

2-Klór-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H-ciklopen ta-pirimidin előállítása

14,3 g 4-(4-fluor-fenil)-l,5,6,7-tetrahidro-2H-ciklopenta-pirimidin-2-onhoz 60 ml foszforoxi-kloridot adunk, és az elegyet 5 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. Hűtés után a reakcióelegyet 100 ml kloroformmal hígítjuk, és hozzácsepegtetjük 20 perc alatt jeges vízhez, és az elegyet 30 percig keverjük, majd a szerves réteget elkülönítjük, vízzel mossuk és vízmentes'nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot toluolban feloldjuk, és szilikagél oszlopon kromatografáljuk. A frakciókat toluollal eluáljuk, összegyűjtjük, és a kapott terméket etanolból átkristályosítjuk. 13,6 g kívánt vegyületet kapunk, amely 106107 °C hőmérsékleten olvad.

17-28. Referencia példák A 16. referencia példában leírt módon járunk el, megfelelő kiindulási anyagokat használunk, és a 8. táblázatban bemutatott vegyületeket kapjuk.

8. Táblázat (IB) általános képletű vegyületek

Ref. példa száma	n	r₂	Olvadáspont (’C)	Átkristályosításhoz használt oldószer
17	3	H	114-115	MC-HX
25	5	H	118-121	MC-HX
26	5	4-F	88-89	HX
27	6	H	108-110	HX
28	6	4-F	124-125	MX-HX

29. Referencia példa

2-Klór-4-(4-fluor-fenil)-6-metií-5,6,7,8-tetrahidro-kinazolin előállítása

A16. referencia példa szerint járunk el, de a megfelelő kiindulási anyagokat használjuk, és így kapjuk a 50 cím szerinti vegyületet, amely etanolból átkristályosítva 106-108 °C hőmérsékleten olvad.

Az (P) általános képletű vegyületek előállítását a következő példák szemléltetik.

7. Példa

2-(í-Piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5 H-ciklopenta-pirimidin előállítása g 2-klór-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta-pirimidin és 8,6gvízmentespipeazin, 3,3 gkáli- 60 um-jodid és 50 ml toluol elegyét 5 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. Hűtés után a reakcióelegyet vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz etanolt adunk, és az oldhatatlan anyagokat szűréssel eltávolítjuk. A szűrlethez maleinsav metanolos oldatát adjuk, és a kapott maleát terméket metanolból átkristályosítjuk, így kapjuk a cím szerinti vegyület maleátját 4 g mennyiségben. Op.: 185-186 °C. 55

2. Példa

2-(l-Piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-ciklohepta-pirimidin előállítása

1,7 g 2-klór-4-(4-fluor-fenil)-6,7,8,9-tetrahidro5H-ciklohepta-pirimidin, 2,1 g vízmentes píperazin és

HU 204815 Β ml dioxán elegyét 60 ’C hőmérsékleten melegítjük 3 óra hosszat. Az oldószert csökkentett nyomáson IedesztiUáljuk, majd a maradékhoz vizet adunk, és az elegyet kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vázéi mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárít- 5 juk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz izopropil-alkoholt adunk, és az oldhatatlan anyagokat leszűrjük. Aszűrlethezmaleinsav etanolos oldatát adjuk, és a kapott maleát terméket metanol ésizopropil-alkohol elegyéböl átkristályosítjuk. A cím szerinti vegyület maleátját kapjuk 1,4 g mennyiségben. Op.:202-203 ’C.

5-25. Példa

Az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat használjuk, és a 9. táblázat szerinti vegyületeket kapjuk.

9. Táblázhat (EC> általános képletű vegyületek

Pl.	n’	R^25-	R¹’	Q	Op.(’C)	Átkristályosítási oldószer
3	3	H	H	maleát	194-196	A
4	3	F	Me	maleát	186-188	A
5	3	F	Et	-	121-122	IP
6	3 -	F	-CHpCByQS	1/2 fumarát	203-205	M
7	5	H	H	maleát	189-192	M-IP
8	5	F	Et	maleát	156-158	IP-E
9	6	H	H	maleát.3/4H₂O	190-192	M-A
10	6	F	ciklopropil	-	131-132	A
12	3	F	ciklopentil	-	142-143	A

13. Példa

2-(4-propiI-l-piperazinil)-4-(4-fluor-feníl)-6,7-di hidro-5H-cikIopenta-pirxmidm előállítása

1,5 g 2-(l-píperazinil)-4-(4-fIuor-fenil)-6,7-dihIdro-5H-ciIdopenta-pírimídín, 0,93 gpropU-bromid, 1 g kálium-karbonát és 0,83 g kálium-jodid, valamint 30 ml metil-etil-keton elegyét visszafolyató hűtő alatt 5 óra hosszat melegítjük. A reakcióelegyet csökkentettnyomáson bepároljuk, amaradékot etil-acetátban feloldjuk. Az oldatot vízzel mossuk, vízmentes nátríum-szulfátfelett szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Amaradékot toluolban feloldjuk, és szilikagélen oszlopkromatografáljuL A frakciókat etil-acetáttal eluáljuk, majd összegyűjtjük, és ehhez adunk maleinsavat etanolban oldva, és a kapott maleát terméket etanolből átkristályosítva 1 g cím szerinti vegyületet kapunk maleátsó formájában. Op.: 187-188'C.

Az alábbi példákkal illusztráljuk a találmány tárgyához nem tartozó, agyműködést javító gyógyszerként használt (ID) és (EE) általános képletű vegyületek előállítását, melyek mások, mint a találmány szerint előállított (P) általános képletű vegyületek.

14. Példa (referencia)

2-(l-Piperazinil)-4-(4-fluor-feniI)-5,6,7,8-tetrahidro-kinazolín előállítása

2,6g2-kIór-4-(4-fIuor-feniI)-5,6,7,8-tetrahidro-kinazolín, 4,3 g vízmentes piperazín, 1,6 g kálium-jodid és 40 ml toluol elegyét 5 óra hosszatmeiegítjük visszafolyató hűtő alatt. Hűtés után a reakcióelegyet vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. Amaradékhozetanolt adagolunk, és az oldhatatlan anyagokat szűréssel távolítjuk el. Aszűriethezfumársavmetanolos oldatát adjuk, és a kapott fumarát terméket metanolból átkristályosítva a cím szerinti vegyületet maleát 3/4 hidrátját kapjuk 2,4 gmennyiségben. Op.: 115-117 ’C.

15-44. Példa (referencia)

A 14. példa szerint járunk el azzal a különbséggé], hogy a megfelelő Idindulási vegyületeket használjuk, és a 10. és 11. táblázatban szemléltetett vegyületeket kapjuk.

10. Táblázat (ID) általános képletű vegyületek

Pl.	n	R^z	R^l	Q	Op.(’C)	Átkristályosítási oldószer
15	3	H	Et	fumarát	178-183	M-A
16	5	H	Et	fumarát.l/4H₂O	192-195	M-A
17	6	H	Et	fumarát. 1/4 H₂O	189-190	M-A
18	3	H	-CH₂Ph	maleát. 1/4 H₂O	193-196	E
19	3	4-F	-CH₂Ph	maleát	191-193	A

HU 204 815 B

10. Táblázat folytatása (ID) általános képletű vegyületek

Pl.	n	R²	R?	Q	Op.(°C)	Atkristályosítási oldószer
20	3	4-F	Ph		153-155	D-M
21	3	3-F	Me	fumarát	202-207	M-A
22	3	3-F	Et	fumarát	186-188	A-E
23	3	4-OMe Me	maleát	175-177	M-IP
24	3	4-OMe Et	maleát	188-190	M-IP
25	4	H	Me	maleát	173-176	A
26	4	H	Et	maleát	124-127	A
27	4	H	-CH₉CH₉OH	1/2 fumarát	186-188	M
28	4	4-F	Me	maleát	176-177	A
29	4	4-F	Et	maleát	187-189	AC
30	4	4-F	-CHoCHnOH	1/2 fumarát	207-209	M
31	4	4-F	-CH₂Ph	maleát	183-184	A
32	'4	4-C1	Me	maleát	176-178	M-IP
33	4	4-C1	Et	maleát	197-200	M-IP
34	4	4-C1	-CH₉CH₉OH	HC1.1/4H₂O	191-200	IP-E
35	4	4-CE	1 η	maleát	195-197	M-A
36	4	4-CF-	₍ Et	maleát	184-186	M-A
37	5	H	-CH₂Ph	maleát	210-215	E
38	5	4-F	-CH₂Ph	maleát	204-207	M-IP
39	3	4-F	N	-	160-161	A
			11. Táblázat
			(IE) általános képletű vegyületek
Pl.	Rp		Q	Op.(’C)		Atkristályosítási oldószer
40	H		maleát	188-191		A
41	Me		fumarát	190-195		A
42	Et		maleát	172-173		A
43	-CH₂CH₂OH		-	129-131		A
44	-CH₉Ph		maleát	202-204		A-M

45. Példa (referencia)

2-[4-(2-Furoil)-l-plperazinil]-4-(4-fluor-fenil)-6, 7-dihidro-5H-cildopenta-pirimidin előállítása l g 2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro5H-ciklopenta-pirimidin, 0,38 g 2-furánkarbonsav, 0,79 g l-(3-/dimetil-amino/-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid és 40 ml kloroform elegyét szobahőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük. A reakcióelegyet vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot toluolban feloldjuk, és az oldatot szilikagélen oszlopkromatografáljuk. A frakciókat 9:1 arányú toluol/etil-acetát eleggyel eluáljuk, összegyűjtjük, és a terméket etanolból átkristályosítva 0,62 g cím szerinti vegyületet kapunk. (Op.: 124125’C (etanol).

46. Példa (referencia

2-[4-[3-(4-Fluor-benzoil)-propil]-l-píperazinil]-4

-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta-pirimidin előállítása

A13. példa szerint járunk el, de a megfelelő kiindulási anyagokat használjuk, és a kívánt vegyület maleátját kapjuk. Op.: 168-170 ’C (etanol).

A gyógyászati készítmények előállítását az alábbi készítmény előállítási példákkal illusztráljuk.

1. Készítmény Kapszula előállítása

Komponensek Mennyiség

2-( 1 -piperazinil)-4-fenil6,7,8,9--tetrahidro-5H-ciklohepta-pirimidinmaleát 10 g

Kukoricakeményítő 52 g

Laktóz 10 g

Kristályos cellulóz 25 g

Hidroxi-propil-cellulóz 2g

Könnyű kovasavanhidrid 0,5 g

Magnézium-sztearát 0,5 g

A fenti komponenseket ismert módon összekeverjük és granuláljuk, és a granulátumot 1000 kapszulába

HU 204815 Β csomagoljuk, így kapjuk a 100 mg/kapszula tartalmú kapszulákat.

2. Készítmény Tabletta előállítása

Komponensek Mennyiség

2-(l-piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H-cüdopenta-pirimidm-maleát 10 g

Kukoricakeményítő 15g laktóz 30g

Kristályos cellulóz 30 g

Hidroxi-propil-ceUulóz 5g

Kevésbé szubsztituált hidroxi-propil-cellulóz 10 g (amely több mint 5% és kevesebb mint 16% hidroxipropilcsoportot tartalmaz).

Ismert módon összekeverjük a fenti komponenseket és granuláljuk. A granulátumokat könnyű kovasav-anhidriddel és magnézium-sztearáttal összekeverjük, az elegyet tablettázva 10 mg/tabletta hatóanyagtartalmú tablettákat állítunk elő.

3. Készítmény Porok előállítása

Komponensek Mennyiség

2-(l-Piperazmil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-cikIohepta-pirimidin-maleát 10 g

Kukoricakeményítő 168 g

Laktóz 300 g

Hidroxi-propil-cellulóz 20 g

Ismert módon összekeverjük a fenti komponenseket, granuláljuk és átszitáljuk, az így kapott granulátumokat megfelelő mennyiségű könnyű kovasav-anhidriddel összekeverve kapjukaporokat (50 eldörzsölés).

4. Készítmény Injekció előállítása

Komponensek Mennyiség

2-(l-Piperazinil)-4-(4-fluor-fenil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta-pirimidin-maleát 10 g

D-szorbit 45 g n vizes maleinsav-oldat vagynátrium-hidroxid-oldat q.s.

Injekciós minőségű desztilláltvíz q.s.

Összesen: 1000 ml

AfentihatóanyagotésaD-szorbitotinjekciós desztillált vázéi összekeverjük, ehhez adjuk az 1 n vizes maleinsavvagy 1 n nátrium-hidroxid vizes oldatát,így az oldat pH-ját 4-re állítjuk. Az oldatot 0,22 pm pórusméretű membránszűrőn keresztül leszűrjük és 10 ml-es ampullákba töltjük. Az ampullát olvasztással lezárjuk, és nagynyomású gőzzel 121 ’C hőmérsékleten 20 percig sterilizáljuk, így kapjuk az injekciós oldatot.

5. Készítmény

Liofilizált készítmény

Komponensek Mennyiség

2-(l-Piperazinil)-4-(4-fluor-fenű)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-ciklohepta-pirimidin10 -maleát 10 mg

D-mannit 45 g n vizes maleinsavvagy nátrium-hidroxid 1 n vizes oldata q.s.

injekciós desztillált víz q.s.

Összesen: 1000 ml

A fenti hatóanyagot és D-mannitot injekciós desztillált vázéi összekeverjük és hozzáadunk 1 n maleinsav vagy nátrium-hidroxid vizes oldatot, hogy a pH-t

4-re állítsuk. Az oldatot 0,22 pm pórusméretű membránszűrőn keresztül leszűrjük és 10 ml tartalmú fiolákba töltjük. A fiolát gumi dugóval félig lezárjuk és liofilizáljuk, azaz előre fagyasztjuk, majd -50 ’C hőmérsékleten először szárítjuk, másodszor -20 ’C-on és végül 20 ’C hőmérsékleten szárítjuk. Miután a gumidugóval egy kamrán belül teljesen lezártuk, a fiolát egy felpattintható sapkával lefedjük, és így kapjuk a liofilizált készítményt.

Claims

³⁰ SZABADALMIIGÉNYPONTOK

1. Eljárás az (Γ) ál talános képletű vegyületek—ahol n’jelentése 3,5 vagy 6,

R¹’ lehet hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 3-8

35 szénatomos cikloalkil- vagy hidroxi-(2-6 szénatomos alkil)-csoport;

R²’ jelentése hidrogénatom vagy fluoratom, azzal a megkötéssel, hogy ha R²’ jelentése hidrogénatom, akkor R¹ ’ jelentése is hidrogénatom—

40 és savaddíciós sóik előálltására, azzal jellemezve, hogy egy (H) általános képletű vegyületet, ahoIX jelentése kilépő atom vagy csoport, és R²’ és n’ jelentése a fenti — egy (ED) általános képletű vegyülettel—ahol R¹‘jelentése a fenti—reagáltatunk, és kívánt esetben egy kapott (P) általános képletű vegyület szabad formáját savaddíciós sóvá alakítjuk.
2. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1. igénypont szerint előállított (P) általános képletű vegyületet—ahol a szubsztituensek jelentése az 1. igénypontban megadott — vagy savaddíciós sóját gyógyászatilag elfogadható hordozókkal összekeverjük, és gyógyszerkészítménnyé alakítjuk