EA035055B1 - Соединения-коагонисты гип и гпп-1 - Google Patents
Соединения-коагонисты гип и гпп-1 Download PDFInfo
- Publication number
- EA035055B1 EA035055B1 EA201892057A EA201892057A EA035055B1 EA 035055 B1 EA035055 B1 EA 035055B1 EA 201892057 A EA201892057 A EA 201892057A EA 201892057 A EA201892057 A EA 201892057A EA 035055 B1 EA035055 B1 EA 035055B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- compound
- present
- glp
- compounds
- ethoxy
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 192
- 239000000556 agonist Substances 0.000 title abstract description 3
- 101100337060 Caenorhabditis elegans glp-1 gene Proteins 0.000 title description 2
- 108010004460 Gastric Inhibitory Polypeptide Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100039994 Gastric inhibitory polypeptide Human genes 0.000 claims abstract description 4
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 claims abstract description 4
- -1 [2- (2-amino-ethoxy) ethoxy] acetyl Chemical group 0.000 claims description 38
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 33
- 150000003140 primary amides Chemical group 0.000 claims description 33
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 32
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 29
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 28
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 6
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 6
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 21
- 239000000859 incretin Substances 0.000 abstract description 8
- MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N incretin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 description 39
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 38
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 34
- DLSWIYLPEUIQAV-UHFFFAOYSA-N Semaglutide Chemical compound CCC(C)C(NC(=O)C(Cc1ccccc1)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(CCCCNC(=O)COCCOCCNC(=O)COCCOCCNC(=O)CCC(NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O)C(O)=O)NC(=O)C(C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(Cc1ccccc1)NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C)(C)NC(=O)C(N)Cc1cnc[nH]1)C(C)O)C(C)O)C(C)C)C(=O)NC(C)C(=O)NC(Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O DLSWIYLPEUIQAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 29
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 108010060325 semaglutide Proteins 0.000 description 28
- 229950011186 semaglutide Drugs 0.000 description 28
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 27
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 27
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 26
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 24
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 24
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 23
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 19
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 19
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 17
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 14
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 14
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 14
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 12
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 12
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 12
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 12
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 12
- OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N Corticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 10
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 10
- OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N corticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 10
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 10
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 10
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 9
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 229940124213 Dipeptidyl peptidase 4 (DPP IV) inhibitor Drugs 0.000 description 8
- 239000003603 dipeptidyl peptidase IV inhibitor Substances 0.000 description 8
- VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N ethyl (2s,5s)-5-methylpyrrolidine-2-carboxylate;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.CCOC(=O)[C@@H]1CC[C@H](C)N1 VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 7
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 7
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010063919 Glucagon Receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000007446 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Human genes 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 5
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 5
- 108010086246 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Proteins 0.000 description 5
- 108010024044 Glucagon-Like Peptide-2 Receptor Proteins 0.000 description 5
- 102000015626 Glucagon-Like Peptide-2 Receptor Human genes 0.000 description 5
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 5
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-1-(1,4,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NN=C(O1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=C2 AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 4
- 101000676246 Homo sapiens 60S ribosomal protein L29 Proteins 0.000 description 4
- 101001021500 Homo sapiens Hedgehog-interacting protein Proteins 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 4
- 102000046159 human RPL29 Human genes 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 3
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 3
- 101800000221 Glucagon-like peptide 2 Proteins 0.000 description 3
- 102400000326 Glucagon-like peptide 2 Human genes 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 101001040075 Homo sapiens Glucagon receptor Proteins 0.000 description 3
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- 102000000070 Sodium-Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010080361 Sodium-Glucose Transport Proteins Proteins 0.000 description 3
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229940123464 Thiazolidinedione Drugs 0.000 description 3
- 108010046516 Wheat Germ Agglutinins Proteins 0.000 description 3
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- TWSALRJGPBVBQU-PKQQPRCHSA-N glucagon-like peptide 2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 TWSALRJGPBVBQU-PKQQPRCHSA-N 0.000 description 3
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 3
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 3
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 3
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002821 scintillation proximity assay Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 3
- 150000001467 thiazolidinediones Chemical class 0.000 description 3
- ORWNVJDLEMVDLV-SANMLTNESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-naphthalen-1-ylpropanoic acid Chemical group C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC2=CC=CC=C12 ORWNVJDLEMVDLV-SANMLTNESA-N 0.000 description 2
- QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N (2s,3s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylpentanoic acid Chemical group C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100065943 Drosophila melanogaster HIP-R gene Proteins 0.000 description 2
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 2
- 102100039997 Gastric inhibitory polypeptide receptor Human genes 0.000 description 2
- 102100040890 Glucagon receptor Human genes 0.000 description 2
- 101500028775 Homo sapiens Glucagon Proteins 0.000 description 2
- 101500028774 Homo sapiens Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 2
- 101001015549 Homo sapiens Glucagon-like peptide 2 receptor Proteins 0.000 description 2
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 2
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N N-[[(5S)-2-oxo-3-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)-1,3-oxazolidin-5-yl]methyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C1O[C@H](CN1C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 108010058003 Proglucagon Proteins 0.000 description 2
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 2
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 2
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 2
- 108010036598 gastric inhibitory polypeptide receptor Proteins 0.000 description 2
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 2
- 239000003877 glucagon like peptide 1 receptor agonist Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000002868 homogeneous time resolved fluorescence Methods 0.000 description 2
- 239000011539 homogenization buffer Substances 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 235000021057 semi-liquid food Nutrition 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- OJBNDXHENJDCBA-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-(prop-2-enoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OCC=C)C(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 OJBNDXHENJDCBA-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- ZEQLLMOXFVKKCN-AWEZNQCLSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(OC(C)(C)C)C=C1 ZEQLLMOXFVKKCN-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- DDYAPMZTJAYBOF-ZMYDTDHYSA-N (3S)-4-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3S)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical class [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DDYAPMZTJAYBOF-ZMYDTDHYSA-N 0.000 description 1
- NGJOFQZEYQGZMB-KTKZVXAJSA-N (4S)-5-[[2-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[2-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 NGJOFQZEYQGZMB-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)ethoxy]ethoxy]acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCOCCOCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NOC(=N1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001431 2-aminoisobutyric acid group Chemical group [#6]C([#6])(N*)C(*)=O 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100228196 Caenorhabditis elegans gly-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102000016622 Dipeptidyl Peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 239000012594 Earle’s Balanced Salt Solution Substances 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018389 Exopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010091443 Exopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000006419 Glucagon-Like Peptide Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083749 Glucagon-Like Peptide Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010088406 Glucagon-Like Peptides Proteins 0.000 description 1
- 229940089838 Glucagon-like peptide 1 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 101800004295 Glucagon-like peptide 1(7-36) Proteins 0.000 description 1
- 101710164669 Hedgehog-interacting protein Proteins 0.000 description 1
- 108091016366 Histone-lysine N-methyltransferase EHMT1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001015516 Homo sapiens Glucagon-like peptide 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101500028771 Homo sapiens Glucagon-like peptide 2 Proteins 0.000 description 1
- 101500025568 Homo sapiens Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229940099471 Phosphodiesterase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000035554 Proglucagon Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 101100505264 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) GNP1 gene Proteins 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N alpha-amino-isobutyric acid Natural products CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000037118 bone strength Effects 0.000 description 1
- 230000001593 cAMP accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000007707 calorimetry Methods 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 238000007821 culture assay Methods 0.000 description 1
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000081 effect on glucose Effects 0.000 description 1
- 210000003158 enteroendocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 1
- 239000003626 gastrointestinal polypeptide Substances 0.000 description 1
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 1
- 229940093181 glucose injection Drugs 0.000 description 1
- 238000007446 glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 238000001513 hot isostatic pressing Methods 0.000 description 1
- 229940100689 human protein c Drugs 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002473 insulinotropic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- WRLGYAWRGXKSKG-UHFFFAOYSA-M phenobarbital sodium Chemical compound [Na+].C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC([O-])=NC1=O WRLGYAWRGXKSKG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002571 phosphodiesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 230000009894 physiological stress Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000272 reduced body weight Toxicity 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036186 satiety Effects 0.000 description 1
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N sodium;5-ethyl-5-pentan-2-yl-1,3-diazinane-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007473 univariate analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/645—Secretins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к соединениям - двойным миметикам пептида инкретина, которые выступают в роли агонистов рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (ГИП) и глюкагоноподобного пептида-1 (ГПП-1) человека и могут являться пригодными для лечения сахарного диабета 2 типа (СД2Т).
Description
Настоящее изобретение относится к области медицины. Более конкретно настоящее изобретение относится к соединениям - двойным миметикам пептида инкретина, которые выступают в роли агонистов рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (ГИП) и глюкагоноподобного пептида-1 (ГНП-1) человека и могут являться подходящими для лечения сахарного диабета 2 типа (СД2Т).
СД2Т представляет собой наиболее распространенную форму диабета, на которую приходится приблизительно 90% всех случаев диабета. СД2Т характеризуется высокими уровнями глюкозы в крови, вызванными резистентностью к инсулину. На сегодняшний день стандарт лечения СД2Т включает диету и физическую нагрузку в сочетании с доступными пероральными и инъекционными лекарственными средствами, снижающими уровень глюкозы. Тем не менее, в случае многих пациентов, страдающих от СД2Т, обеспечение адекватного контроля все еще не было достигнуто. Присутствующие на сегодняшний день на рынке миметики инкретина или ингибиторы дипептидилпептидазы IV (ДПП-IV) обладают лишь единственным установленным механизмом действия для гликемического контроля. Необходимо соединение для лечения СД2Т, которое обладало бы двойным механизмом действия.
ГИП представляет собой желудочно-кишечный регуляторный пептид длиной 42 аминокислоты, который играет физиологическую роль в гомеостазе глюкозы посредством стимуляции секреции инсулина из бета-клеток поджелудочной железы в присутствии глюкозы и защиты бета-клеток поджелудочной железы. ГНП-1 представляет собой пептид длиной 37 аминокислот, который стимулирует секрецию инсулина, защищает бета-клетки поджелудочной железы и ингибирует секрецию глюкагона, эвакуацию содержимого из желудка и потребление пищи, что приводит к снижению массы тела. ГИП и ГПП-1 известны как инкретины; передача сигналов рецепторами инкретинов оказывает решающее с физиологической точки зрения действие на гомеостаз глюкозы. При нормальной физиологии ГИП и ГПП-1 секретируются в кишечнике после приема пищи, и данные инкретины усиливают физиологический ответ на пищу, включая чувство сытости, секрецию инсулина и утилизацию питательных веществ. У пациентов, страдающих от СД2Т, инкретиновые ответы нарушены.
Было установлено, что введение доз аналогов ГПП-1 ограничено побочными эффектами, такими как тошнота и рвота, и, как следствие, зачастую при введении доз не удается достичь полной эффективности гликемического контроля и снижения массы тела. ГИП сам по себе обладает весьма умеренной способностью снижать уровень глюкозы у людей, страдающих от диабета 2 типа. Нативные ГИП и ГПП1 оба быстро инактивируются повсеместно распространенной протеазой, ДПП-IV, и вследствие этого могут быть использованы исключительно для краткосрочного метаболического контроля.
Глюкагон представляет собой пептид длиной 29 аминокислот, который образуется поджелудочной железой и при связывании с рецептором глюкагона передает в печень сигнал о высвобождении глюкозы, что приводит к увеличению уровня глюкозы в крови. ГПП-2, пептид, подобный ГПП-1, который образуется в результате процессинга проглюкагона, как известно, связан с пролиферацией клеток в кишечнике. Таким образом, стимуляция рецепторов глюкагона и ГПП-2 должна быть минимизирована в процессе хронического лечения пациентов, страдающих СД2Т, с целью максимально увеличивать снижение уровня глюкозы и снизить потенциальные долгосрочные канцерогенные риски.
В международных публикациях WO 2013/164483, WO 2014/192284 и WO 2011/119657 сообщалось, что определенные аналоги ГИП демонстрируют активность как ГИП, так и ГПП-1.
ДПП-IV относится к классу протеолитических ферментов-экзопептидаз. Введение неприродных аминокислот в последовательность может увеличить протеолитическую стабильность любого конкретного пептида. В то время как применение неприродных аминокислот может улучшить стабильность пептидов в отношении протеолиза ДПП-IV и других форм деградации, авторами настоящего изобретения в качестве части настоящего изобретения было установлено, что неприродные аминокислоты могут оказывать неожиданные эффекты на баланс агонистической активности в отношении ГИП и ГПП-1. Неприродные аминокислоты также увеличивают вероятность того, что пептид может быть воспринят как чужеродный и может вызвать нежелательные иммунные реакции, такие как иммуногенность и реакции в месте инъекции у человека.
Жирные кислоты благодаря мотивам, связывающимся с альбумином, могут улучшить фармакокинетику пептида, например посредством увеличения периода полужизни. В то время как использование жирных кислот может улучшить период полужизни пептида, авторами настоящего изобретения в качестве части настоящего изобретения было установлено, что длина, состав и расположение цепи жирной кислоты и линкера между пептидом и цепью жирной кислоты может оказывать неожиданные эффекты на баланс агонистической активности ГИП и ГПП-1.
Было обнаружено, что переносимость определенных аналогов ГПП-1 не позволяет использовать дозу аналога ГПП-1, обеспечивающую лучшую эффективность гликемического контроля и снижения массы тела. Наиболее распространенными побочными эффектами, приписываемыми аналогам ГПП-1, являются тошнота и рвота, но некоторые соединения могут также влиять на частоту сердечных сокращений. Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система является частью ответа на физиологический стресс, и было обнаружено, что ГПП-1 стимулирует гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую систему у крыс, что приводит к увеличению уровней кортикостерона. Данный факт обеспечивает потенциальную связь введения ГПП-1 с побочными явлениями, такими как увеличение частоты сердечных сокращений. В ка- 1 035055 честве части настоящего изобретения авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что соединение согласно настоящему изобретению на модели на крысах не приводит к увеличению уровней кортикостерона, которое наблюдается в случае семаглутида и, следовательно, вероятно, может вводиться до более высоких уровней эффективности, чем средства, селективные в отношении ГПП-1Р (рецептора
ГПП-1).
Сохраняется потребность в получении соединения, которое представляет собой сбалансированный коагонист рецепторов ГИП и ГПП-1, но является селективным против родственных рецепторов глюкагона и ГПП-2. Также сохраняется потребность в получении соединения со сбалансированной коагонистической активностью в отношении рецепторов ГИП и ГПП-1, которое может обеспечить снижение массы тела, учитывая активность, обнаруженную на моделях на животных. Дополнительно сохраняется потребность в получении соединения со сбалансированной коагонистической активностью в отношении рецепторов ГИП и ГПП-1, которое характеризуется надлежащей стабильностью в отношении ДПП-IV и других форм деградации и при этом сохраняет низкий потенциал иммуногенности. Также сохраняется потребность в получении соединения со сбалансированной коагонистической активностью в отношении рецепторов ГИП и ГПП-1, которое потенциально обеспечивает возможность введения доз человеку один раз в неделю.
Соответственно определенные соединения согласно настоящему изобретению обладают более низким потенциалом иммуногенности и реакций в месте инъекции, чем определенные соединениякоагонисты ГИП-ГПП-1 в данной области техники. Определенные соединения согласно настоящему изобретению обладают способностью вызывать снижение массы тела у пациентов на основании данных о расходе энергии у животных. Более того, определенные соединения согласно настоящему изобретению обладают сбалансированной коагонистической активностью в отношении рецепторов ГИП и ГПП-1 и селективностью против рецепторов глюкагона и ГПП-2 низким потенциалом иммуногенности и фармакокинетическими (ФК) характеристиками, которые обеспечивают возможность введения доз человеку один раз в неделю.
Соответственно в варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы I:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS;
где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)а-СО-(СН2)b-СО2Н, где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 20; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме Сконцевого первичного амида (SEQ ID NO: 11), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)а-СО-(СН2)b-СО2Н, где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 18; Х3 представляет собой Phe; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме Сконцевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)a-CO-(CH2)b-СО2Н, где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 18; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме С-концевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)а-СО-(СН2)b-СО2Н, где а равен от 1 до 2 и b равен от 14 до 18; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме С-концевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение, где b равен от 16 до 18. Дополнительно в настоящем изобретении предложено соединение, где b равен 18.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)а-СО-(СН2)b-CO2H, где а равен 1 и b равен от 10 до 18; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме Сконцевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является хими- 2 035055 чески модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(уО1и)а-СО-(СН2)ь-СО2Н, где а равен 2 и b равен от 10 до 18; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме Сконцевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2амино-этокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)a-СО-(СН2)b-СО2Н, где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 18; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме Сконцевого первичного амида, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS;
где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)1-СО-(СН2)18-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 3), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YXiEGTFTSD YSIX2LDKIAQKAX3 VQWLIAGGP S SGAPPPS;
где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)2-СО-(СН2)18-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 4), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS;
где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)1-СО-(СН2)16-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 5), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPS SGAPPPS;
где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)2-СО-(СН2)16-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 6), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)2-СО-(СН2)18-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 7), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)1-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 8), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γG1u)2-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 9), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
- 3 035055
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы:
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уО1и)1-СО-(СН2)18-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 10), или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложена композиция, содержащая соединение согласно настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или вспомогательным веществом.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ лечения сахарного диабета 2 типа, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению. Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ лечения сахарного диабета 2 типа, причем указанный способ также включает одновременное, раздельное или последовательное введение в комбинации с эффективным количеством одного или более средств, которые выбраны из метформина, тиазолидиндионов, сульфонилмочевин, ингибиторов дипептидилпептидазы-4 и натрий-глюкозных котранспортеров.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ улучшения гликемического контроля у взрослых, страдающих от сахарного диабета 2 типа, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком улучшении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению в качестве дополнения к диете и физической нагрузке. Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ хронического контроля массы тела у взрослых с исходным индексом массы тела >27 и сахарным диабетом 2 типа, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком контроле, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению в качестве дополнения к диете с уменьшенным содержанием калорий и увеличенной физической активности.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ лечения метаболического синдрома, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению. Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложен способ лечения дислипидемии, ожирения и/или стеатоза печени, связанного с резистентностью к инсулину и диабетом, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению. Дополнительно в настоящем изобретении предложен способ лечения хрупкости или увеличения прочности кости, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение согласно настоящему изобретению для применения в терапии. Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение согласно настоящему изобретению для применения при лечении сахарного диабета 2 типа. Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение согласно настоящему изобретению в одновременной, раздельной или последовательной комбинации с одним или более средствами, которые выбраны из метформина, тиазолидиндионов, сульфонилмочевин, ингибиторов дипептидилпептидазы-4 и натрий-глюкозных котранспортеров, для применения при лечении сахарного диабета 2 типа.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение согласно настоящему изобретению для применения при гликемическом контроле у взрослых, страдающих от сахарного диабета 2 типа, в качестве дополнения к диете и физической нагрузке. Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено соединение согласно настоящему изобретению для применения при хроническом контроле массы тела у взрослых с исходным индексом массы тела >27 и сахарным диабетом 2 типа в качестве дополнения к диете с уменьшенным содержанием калорий и увеличенной физической активности.
Согласно варианту реализации в настоящем изобретении предложено применение соединения согласно настоящему изобретению для производства лекарственного препарата для лечения сахарного диабета 2 типа. Согласно следующему варианту реализации в настоящем изобретении предложено применение соединения согласно настоящему изобретению в одновременной, раздельной или последовательной комбинации с одним или более средствами, которые выбраны из метформина, тиазолидиндионов, сульфонилмочевин, ингибиторов дипептидилпептидазы-4 и натрий-глюкозных котранспортеров, для производства лекарственного препарата для лечения сахарного диабета 2 типа.
В настоящем изобретении предложены соединения, которые демонстрируют сбалансированную активность ГИП и ГПП-1. Сбалансированная активность в отношении ГИП и ГПП-1 в настоящей заявке означает соединение, которое обладает аффинностью в отношении рецепторов ГИП и рецепторов ГПП-1
- 4 035055 в анализе связывания in vitro в молярном соотношении, которое близко к 1:1, таком как ГНП-1/ГИП 1:1,
ГПП-1/ГИП 2:1, ГПП-1/ГИП 3:2, ГПП-1/ГИП 1:2 или ГПП-1/ГИП 2:3.
В настоящем изобретении предложены соединения, которые демонстрируют селективность в отношении рецепторов ГИП и ГНП-1 по сравнению с рецепторами глюкагона и ГПП-2. Термин селективность или селективный в отношении при использовании в настоящей заявке для обозначения активности ГИП и ГНП-1 по сравнению с активностью глюкагона означает соединение, которое демонстрирует в 1000, 500 или приблизительно в 100 раз большую активность ГИП и ГПП-1 по сравнению с активностью глюкагона при нормировании данных соответствующих анализов связывания in vitro. Термин селективность или селективный в отношении в настоящей заявке в отношении активности ГИП и ГНП-1 по сравнению с активностью ГПП-2 означает соединение, которое демонстрирует в 250, 200, 100 или приблизительно в 50 раз большую активность ГИП и ГНП-1 по сравнению с активностью ГПП-2 при нормировании данных соответствующих функциональных анализов in vitro.
В настоящем изобретении предложен способ лечения диабета 2 типа у пациента, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. В настоящем изобретении также предложен способ лечения диабета 2 типа у пациента, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения, причем указанное введение является подкожным. В настоящем изобретении также предложен способ лечения диабета 2 типа у пациента, причем указанный способ включает введение пациенту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения, и одновременное, раздельное или последовательное введение эффективного количества одного или более других активных компонентов. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения другой активный компонент или компоненты представляют собой доступные на сегодняшний день пероральные лекарственные препараты для снижения уровня глюкозы из класса лекарственных препаратов, которые перед введением считаются стандартом лечения, установленным отраслевыми руководствами, например руководствами Американской ассоциации диабетологов.
В соединениях согласно настоящему изобретению применяется жирная кислота, конъюгированная химическим способом с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина. Жирная кислота конъюгирована с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина посредством линкера. Линкер содержит [2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уО1и)а, где а представляет собой от 1 до 2. Жирная кислота и гаммаглутаминовая кислота в линкере выступают в качестве агентов, связывающих альбумин, и обеспечивают возможность получения соединения длительного действия. Соединения согласно настоящему изобретению содержат лизин в положении 20, который является модифицированным химическим способом посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-амино-этокси)этокси]ацетил)2(yGlu)a-CO-(CH2)b-CO2H, где а представляет собой от 1 до 2 и b представляет собой от 10 до 20. Как показано на химических структурах соединений согласно примерам 1 и 2, первая единица [2-(2-аминоэтокси)-этокси]-ацетила соединена с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина. Затем вторая единица [2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетила присоединена к аминогруппе первой единицы [2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетила. Затем первая единица yGlu присоединена к аминогруппе второй единицы [2-(2амино-этокси)этокси]ацетила посредством y-карбоксильной группы боковой цепи. Когда а=2, вторая единица yGlu присоединена к α-аминогруппе первой единицы yGlu посредством y-карбоксильной группы боковой цепи. Наконец, симметричная жирная кислота присоединена к α-аминогруппе первой (когда а=1) или второй (когда а=2) единицы yGlu.
Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно приготовлены в состав в виде фармацевтических композиций, вводимых парентеральными путями (например, подкожным, внутривенным, интраперитонеальным, внутримышечным или трансдермальным). Такие фармацевтические композиции и процессы их получения хорошо известны в данной области техники. (См., например, руководство Remington: The Science and Practice of Pharmacy (D.B. Troy, Editor, 21st Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2006). Предпочтительным путем введения является подкожный.
Соединения согласно настоящему изобретению могут вступать в реакцию с любой из множества неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты. Фармацевтически приемлемые соли и общепринятая методология их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, руководства P. Stahl, et al. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, 2nd Revised Edition (Wiley-VCH, 2011); S.M. Berge, et al, Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, January 1977. Фармацевтически приемлемые соли согласно настоящему изобретению включают трифторацетатные, гидрохлоридные и ацетатные соли.
В настоящем изобретении термин эффективное количество означает количество или дозу соединения согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения, которые после введения однократной или многократных доз пациенту обеспечивают желаемый эф
- 5 035055 фект для пациента, диагностику или лечение которого проводят. Эффективное количество может легко определить лечащий специалист по установлению диагноза как специалист в данной области техники посредством применения известных методик и посредством изучения результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациента лечащий специалист по установлению диагноза учитывает множество факторов, включая, но не ограничиваясь указанными: вид млекопитающего; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное рассматриваемое заболевание или нарушение; степень или поражение либо тяжесть заболевания или нарушения; ответ конкретного пациента; конкретное вводимое соединение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим введения доз; применение препаратов сопутствующей терапии; и другие соответствующие обстоятельства.
В настоящем изобретении термин лечение или лечить включает ограничение, замедление, остановку или обратное развитие прогрессирования или тяжести существующего симптома или нарушения.
В настоящем изобретении семаглутид означает синтезированный химическим способом аналог ГПП-1, который содержит пептидный скелет и общую структуру соединения, представленного регистрационным номером CAS (Chemical Abstracts Service, Химической реферативной службы) 910463-68-2.
Определенные соединения согласно настоящему изобретению, как правило, являются эффективными в широком диапазоне доз. Например, дозы для введения один раз в неделю могут находиться в диапазоне от приблизительно 0,05 до приблизительно 30 мг на человека в неделю. Определенные соединения согласно настоящему изобретению можно вводить ежедневно. Дополнительно определенные соединения согласно настоящему изобретению можно вводить один раз в неделю.
Аминокислотные последовательности согласно настоящему изобретению содержат стандартный однобуквенный или трехбуквенный код для двадцати существующих в природе аминокислот. Дополнительно Aib представляет собой альфааминоизомасляную кислоту и 1-Nal представляет собой 1нафтилаланин.
Настоящее изобретение также включает новые промежуточные соединения и процессы, пригодные для синтеза соединений согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемых солей указанных соединений. Промежуточные соединения и соединения согласно настоящему изобретению можно получить с применением множества процедур, известных в данной области техники. В частности, процесс на основе синтеза проиллюстрирован в примерах ниже. Конкретные этапы синтеза для каждого из описанных путей можно сочетать различными способами для получения соединений согласно настоящему изобретению или солей указанных соединений. Реактивы и исходные материалы легкодоступны среднему специалисту в данной области техники. Следует понимать, что данные примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения каким-либо способом.
Пример 1.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси^токсиПцетилЕфуОЫф-СОфСНО^-СО^; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 3)
Трифторацетатная соль
Приведенная выше структура содержит стандартный однобуквенный код аминокислот за исключением остатков Aib2, Aib13 и K20, в которых структуры данных остатков аминокислот были дополнены.
Пептид согласно SEQ ID NO: 3 согласно настоящему изобретению получен посредством твердофазного пептидного синтеза с применением стратегии Fmoc/t-Bu, осуществленного на автоматическом синтезаторе пептидов Symphony (PTI Protein Technologies Inc.), с использованием в качестве основы амидной смолы RAPP AM-Rink и сочетаний с применением 6 эквивалентов аминокислоты, активированной диизопропилкарбодиимидом (DIC) и гидроксибензотриазолом (HOBt) (молярное соотношение
- 6 035055
1:1:1), в диметилформамиде (DMF) в течение 90 мин при температуре 25°С.
В случае Pro31, Trp25, Gln24, Val23, Phe22, Lys20, Gly4, Glu3 и Aib2 необходимы длительные сочетания (по 4 ч каждое) для улучшения качества неочищенного пептида. Структурный элемент FmocLys(Alloc)-OH использовали для сочетания Lys20 (ортогональная защитная группа), чтобы впоследствии в процессе синтеза обеспечить возможность сайт-специфичного присоединения группы жирной кислоты. Для сочетания Fmoc-Ile-OH в положении 12 использовали следующие условия: Fmoc-Ile-OH (6 эквив.), РуВОР (6 эквив.) и DIEA (12 эквив.) в DMF в течение 24 ч при температуре 25°С. N-концевой остаток встраивали в виде Boc-Tyr(tBu)-OH с применением протоколов DIC-HOBt, как описано выше.
После окончания элонгации пептид-смолы, описанной выше, защитную группу Alloc, присутствующую в Lys20, удаляли с применением каталитических количеств Pd(PPh3)4 в присутствии PhSiH3 в качестве поглотителя. Дополнительные циклы сочетания/снятия защиты с применением стратегии Fmoc/t-Bu для удлинения боковой цепи Lys20 включали Fmoc-NH-PEG2-CH2COOH (ChemPep, кат. № 280102), Fmoc-Glu(OH)-OtBu (ChemPep, кат. № 100703) и HOOC-(CH2)18-COOtBu. Во всех сочетаниях 3 эквивалента структурного элемента использовали с РуВОР (3 эквив.) и DIEA (6 эквив.) в DMF в течение 4 ч при температуре 25°С.
Параллельное отщепление от смолы и удаление защитной группы боковой цепи проводили в растворе, содержащем трифторуксусную кислоту (TFA):триизопропилсилан:1,2-этандитиол:воду:тиоанизол 90:4:2:2:2 (об./об.) в течение 2 ч при температуре 25°С с последующей преципитацией холодным эфиром. Неочищенный пептид очищали до чистоты >99% (выход очищенного продукта составил 15-20%) методом обращенно-фазовой ВЭЖХ с градиентом воды/ацетонитрила (содержащего 0,05% об./об. TFA) на колонке С18, и целевые фракции объединяли и лиофилизировали.
В синтезе, который проводили, по существу, так же, как описано выше, чистоту соединения согласно примеру 1 оценивали методом аналитической обращенно-фазовой ВЭЖХ, и подлинность соединения подтверждали с применением ЖХ/МС (жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии) (наблюдаемый: М+3Н+/3=1605,2; рассчитанный М+3Н+/3=1605,5; наблюдаемый: М+4Н+/4=1204,3; рассчитанный М+4Н+/4=1204,4).
Пример 2.
YXiEGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)2-СО-(СН2)18-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 4)
Трифторацетатная соль
Приведенная выше структура содержит стандартный однобуквенный код аминокислот за исключе- 7 035055 нием остатков Aib2, Aib13, K20 и 1-Nal22, в которых структуры данных остатков аминокислот были дополнены.
Пептид согласно SEQ ID NO: 4 согласно настоящему изобретению синтезировали аналогично способу, описанному выше в примере 1. Для сочетания Fmoc-1Nal-OH в положении 22 использовали следующие условия: Fmoc-1Nal-OH (6 эквив.), РуВОР (6 эквив.) и DIEA (12 эквив.) в DMF в течение 4 ч при температуре 25°С.
Пример 3.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)1-СО-(СН2)16-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 5).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 5 согласно настоящему изобретению синтезировали аналогично способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Пример 4.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)2-СО-(СН2)16-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 6).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 6 согласно настоящему изобретению синтезируют аналогично способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Пример 5.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)2-СО-(СН2)18-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 7).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 7 согласно настоящему изобретению синтезируют аналогично способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Пример 6.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)1-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 8).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 8 согласно настоящему изобретению синтезируют аналогично способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Пример 7.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)2-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 9).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 9 согласно настоящему изобретению синтезируют аналогично способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Пример 8.
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)1-СО-(СН2)18-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 10).
Трифторацетатная соль.
Соединение согласно SEQ ID NO: 10 согласно настоящему изобретению синтезируют аналогично
- 8 035055 способу, описанному выше для соединения согласно примеру 1.
Анализы
Ниже приведены условия и результаты изучения соединений согласно примерам в нескольких анализах: в анализе активности и селективности in vitro, составлении профиля иммуногенности, фармакокинетики и в анализах на моделях диабета 2 типа in vivo.
Активность и селективность in vitro
Активность связывания с рецепторами ГНН-1 и ГИП человека in vitro
Активность связывания соединений согласно настоящему изобретению с рецепторами ГИП и ГНП1 человека in vitro оценивали посредством определения аффинностей связывания в форме Ki с применением неочищенных клеточных мембран, полученных от клональных линий клеток, сверхэкспрессирующих кДНК ГПП1-Р человека или кДНК ГИП-Р (рецептора ГИП) человека.
В анализе связывания рецептора глюкозозависимого инсулинотропного полипептида человека использовали чГИП-Р (Usdin,T.B., Gruber,C, Modi,W. and Bonner,T.I., GenBank: AAA84418.1), клонированный в плазмиду pcDNA3.1 (Promega)-NeoR. Клетки яичников китайского хомячка, CHO-S, для суспензионных культур трансфицировали плазмидой чГИП-P-pcDNA3.1/Neo и проводили селекцию в присутствии 500 мкг/мл генетицина (Invitrogen).
Неочищенные плазматические мембраны получали из клеток суспензионной культуры. Клетки лизировали на льду в гипотоническом буфере, содержащем 25 мМ Tris HCl, рН 7,5, 1 мМ MgCl2, ДНКазу 1, 20 мк/мл, и ингибиторы Roche Complete™ без EDTA. Суспензию клеток гомогенизировали с применением гомогенизатора Даунса со стеклянными стенками и пестика Teflon® (25 движений). Гомогенат центрифугировали при температуре 4°С при 1800xg в течение 15 мин. Супернатант собирали, осадок ресуспендировали в гипотоническом буфере и повторно гомогенизировали. Смесь центрифугировали при 1800xg в течение 15 мин. Второй супернатант объединяли с первым супернатантом. Объединенные супернатанты повторно центрифугировали при 1800xg в течение 15 мин до прозрачности. Прозрачный супернатант переносили в пробирки для высокоскоростного центрифугирования и центрифугировали при 25000xg в течение 30 мин при температуре 4°С. Осадок мембран ресуспендировали в буфере для гомогенизации и хранили в виде замороженных аликвот при температуре -80°С в морозильной камере до использования.
ГИП метили радиоактивным иодом с применением процедуры на основе I-125-лактопероксидазы (Markalonis, J.J., Biochem. J. 113:299 (1969)) и очищали методом обращенно-фазовой ВЭЖХ (PerkinElmer Life and Analytical Sciences NEX-402). Специфическая активность составила 2200 Ки/моль. Определение KD проводили методом гомологичной конкуренции с применением холодного чГИП вместо насыщающего связывания. Анализ связывания с рецепторами проводили с применением сцинтилляционного анализа сближения (scintillation proximity assay, SPA) с использованием бусин с агглютинином зародышей пшеницы (wheat germ agglutinin, WGA) (Perkin Elmer Life and Analytical Sciences), предварительно заблокированных 1%БСА (бычьим сывороточным альбумином), не содержащим жирных кислот (Gibco, 7,5% БСА). Буфер для связывания содержал 25 мМ HEPES, рН 7,4, 2,5 мМ CaCl2, 1 мМ MgCl2, 0,1% БСА, не содержащий жирных кислот, 0,003% Tween20 и ингибиторы Roche Complete™ без EDTA. чГИП и соединения согласно настоящему изобретению растворяли в 100% DMSO и хранили при температуре -20°С. Готовили серийные разведения соединений в буфере для связывания. Затем 10 мкл разведенного соединения или 100% DMSO переносили в планшет для анализа с прозрачным дном Corning® 3632, содержащий 40 мкл буфера для анализа связывания или холодный ГИП (NSB, конечная концентрация 0,1 мкМ). После этого добавляли 90 мкл мембран (3 мкг/лунку), 50 мкл [125I] ГИП (Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, конечная концентрация в реакции 0,15 нМ) и 50 мкл бусин WGA (150 мкг/лунку), закрывали и перемешивали на шейкере для планшетов в течение 1 мин. Планшеты анализировали через 12 ч (время стабилизации) при комнатной температуре с помощью сцинтилляционного счетчика MicroBeta®.
Результаты рассчитывали в виде процента специфичного связывания I-125-ГИП в присутствии соединения. Абсолютную концентрацию IC50 получали с применением нелинейной регрессии процента специфичного связывания I-125-ГИП по сравнению с добавленной концентрацией соединения. Концентрацию IC50 преобразовывали в Ki с применением уравнения Ченга-Прусоффа.
В анализе связывания рецептора ГНН-1 использовали клонированный рецептор глюкагоноподобного пептида 1 человека (чЛП1-1Р) (Graziano MP, Hey PJ, Borkowski D, Chicchi GG, Strader CD, Biochem Biophys Res Commun. 196(1): 141-6, 1993), выделенный из мембран 293HEK. кДНК чЛИ1-1Р субклонировали в плазмиду экспрессии phD (Trans-activated 15 expression of fully gamma-carboxylated recombinant human protein C, an antithrombotic factor. Grinnell, B.W., Berg, D.T., Walls, J. and Yan, S.B. Bio/Technology 5: 1189-1192, 1987). Клетки 293HEK трансфицировали ДНК плазмиды и проводили селекцию с применением 200 мкг/мл гигромицина.
Неочищенные плазматические мембраны получали из клеток суспензионной культуры. Клетки лизировали на льду в гипотоническом буфере, содержащем 25 мМ Tris HCl, рН 7,5, 1 мМ MgCl2, ДНКазу 1, 20 мк/мл, и ингибиторы Roche Complete™ без EDTA. Суспензию клеток гомогенизировали с применением гомогенизатора Даунса со стеклянными стенками и пестика Teflon® (25 движений). Гомогенат цен
- 9 035055 трифугировали при температуре 4°С при 1800xg в течение 15 мин. Супернатант собирали, осадок ресуспендировали в гипотоническом буфере и повторно гомогенизировали. Смесь центрифугировали при 1800xg в течение 15 мин. Второй супернатант объединяли с первым супернатантом. Объединенные супернатанты повторно центрифугировали при 1800xg в течение 15 мин до прозрачности. Прозрачный супернатант переносили в пробирки для высокоскоростного центрифугирования и центрифугировали при 25000xg в течение 30 мин при температуре 4°С. Осадок мембран ресуспендировали в буфере для гомогенизации и хранили в виде замороженных аликвот при температуре -80°С в морозильной камере до использования.
Глюкагоноподобный пептид 1 (ГПП-1) метили радиоактивным иодом с применением процедуры на основе I-125-лактопероксидазы и очищали методом обращенно-фазовой ВЭЖХ на приборе Perkin-Elmer Life and Analytical Sciences (NEX308). Специфическая активность составила 2200 Ки/моль. Определение KD осуществляли методом гомологичной конкуренции вместо насыщающего связывания в связи с высоким содержанием пропанола в материале I-125 ГПП-1. Расчетная KD составила 0,329 нМ, и данное значение использовали для расчета значений Ki для всех исследованных соединений.
Анализ связывания с рецепторами проводили с применением сцинтилляционного анализа сближения (SPA) и бусин с агглютинином зародышей пшеницы (WGA), предварительно заблокированных 1% БСА, не содержащим жирных кислот (Gibco). Буфер для связывания содержал 25 мМ HEPES, рН 7,4, 2,5 мМ CaCl2, 1 мМ MgCl2, 0,1% БСА, не содержащий жирных кислот, 0,003% Tween20 и ингибиторы Roche Complete™ без EDTA. Глюкагоноподобный пептид 1 растворяли в 100% DMSO в концентрации 1 мг/мл и хранили в замороженном состоянии при температуре -20°С в виде аликвот объемом 30 мкл. Аликвоту глюкагоноподобного пептида 1 разводили и использовали в анализах связывания в течение 1 ч. Аналог пептида растворяли в 100% DMSO и готовили серийные разведения в 100% DMSO. Затем 10 мкл разведенных соединений согласно настоящему изобретению или 100% DMSO переносили в планшет для анализа с прозрачным дном Corning® 3632, содержащий 40 мкл буфера для анализа связывания или холодный глюкагон (NSB, конечная концентрация 1 мкМ). После этого добавляли 90 мкл мембран (0,5 мкг/лунку), 50 мкл I-125 глюкагоноподобного пептида 1 (конечная концентрация в реакции 0,15 нМ) и 50 мкл бусин WGA (150 мкг/лунку), закрывали и перемешивали на шейкере для планшетов в течение 1 мин. Планшеты анализировали через 12 ч (время стабилизации) при комнатной температуре с помощью сцинтилляционного счетчика Trilux MicroBeta® PerkinElmer Life and Analytical Sciences.
Результаты рассчитывали в виде процента специфичного связывания I-125-глюкагоноподобного пептида 1 в присутствии соединений. Абсолютную концентрацию IC50 соединения получали с применением нелинейной регрессии процента специфичного связывания I-125-глюкагоноподобного пептида 1 по сравнению с добавленной концентрацией соединения. Концентрацию IC50 преобразовывали в Ki с применением уравнения Ченга-Прусоффа.
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, определенные соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали соотношение чГПП1Р/чГИП-Р, составляющее приблизительно 0,5-4,0 (табл. 1). Молярное соотношение связывания нормировали к соответствующему молярному соотношению смеси нативных ГИП и ГНН-1. Данный фактор нормирования составил 4,53 на основании данных связывания для ГИП (Ki=0,175 нМ) и ГПП-1 (Ki=0,793 нМ). Значение 1,48 демонстрирует сбалансированную коагонистическую активность соединения согласно примеру 1.
- 10 035055
Таблица 1. Аффинность связывания с рецепторами, Ki, нМ (СОС, n)
| Соединение | ГИП-Р человека | ГПП-1Р человека | Абсолютное соотношение чГППΙΡ/чГИП-Р | Молярное соотношение чГППΙΡ/чГИП-Р |
| Пример 1 | 34,4 (5,0, п=8) | 232 (40, п=8) | 6,7 | 1,48 |
| ГИП, 1-42 | 0,175 (0,022, п=8) | >175(п=14) | >1000 | |
| ГПП-1, 7- 36-NH2 | >100(п=15) | 0,793 (0,099, п=8) | <0,008 | |
| Пример 3 | 26,7 (2,3, п=17) | 427 (33, п=17) | 16 | 3,53 |
| Пример 6 | 44,2 (3,6, п=14) | 365 (28, п=14) | 8,3 | 1,83 |
| Пример 7 | 46,1 (5,9, n=l 1) | 352 (39, n=l 1) | 7,6 | 1,68 |
| Пример 8 | 67,5 (9,9, п=6) | 307 (35, п=6) | 4,5 | 0,99 |
| Пример 4 | 40,7 (5,1, п=7) | 714 (76, п=7) | 17,5 | 3,86 |
| Пример 2 | 63,9(11,8, п=8) | 344 (60, п=8) | 5,4 | 1,19 |
| Пример 5 | 17,8 (3,0, п=5) | 158 (32, п=5) | 8,9 | 1,96 |
Средние значения выражены в виде геометрического среднего со стандартной ошибкой среднего (СОС), количество повторов (n) указано в скобках. Спецификатор (>) отмечает данные, для которых не было достигнуто 50% ингибирование, и Ki рассчитывали с применением наивысшей концентрации, исследованной в анализе.
Функциональные анализы чГИП-Р, чГПП-1Р и чГКГР (рецептора глюкагона человека)
Функциональную активность соединений согласно настоящему изобретению в отношении рецепторов ГИП, ПП1-1 и глюкагона человека in vitro определяли на клональных линиях клеток HEK-293, экспрессирующих данные рецепторы. Каждую линию клеток, сверхэкспрессирующую рецептор, обрабатывали соединениями согласно настоящему изобретению в DMEM (Gibco, кат. № 31053) с добавлением 1X GlutaMAX™ (Gibco, кат. № 35050), 0,25% ЭБС (эмбриональной бычьей сыворотки), 0,05% фракции V БСА, 250 мкМ IBMX и 20 мМ HEPES в объеме анализа 40 мкл. После инкубации в течение 60 мин при комнатной температуре полученное в результате увеличение внутриклеточного цАМФ количественно определяли с применением набора CisBio cAMP Dynamic 2 HTRF Assay Kit (Бедфорд, Массачусетс). Вкратце, уровни цАМФ в клетке определяли посредством добавления конъюгата цАМФ-й2 в буфер для лизиса клеток (20 мкл) с последующим добавлением антитела против цАМФ-Еи3+-криптат также в буфер для лизиса клеток (20 мкл). Полученную в результате смесь для конкурентного анализа инкубировали в течение по меньшей мере 60 мин при комнатной температуре, а затем определяли с применением инструмента PerkinElmer Envision® с возбуждением при длине волны 320 нм и испусканием при длине волны 665 и 620 нм. Единицы Envision (испускание при 665 нм/620 нм *10000), которые являются обратно пропорциональными присутствующему количеству цАМФ, преобразовывали в нМ цАМФ на лунку с применением стандартной кривой цАМФ. Количество образованного цАМФ (нМ) в каждой лунке преобразовывали в процент от максимального ответа, наблюдаемого при контролях ГИП(1-42)ЫН2 человека, ГПП-1(7-36)ЫН2 человека или глюкагона человека. Относительное значение EC50 и максимальный процент (Emax) получали посредством анализа нелинейной регрессии с применением процента максимального ответа по сравнению с концентрацией соединения согласно настоящему изобретению, аппроксимированных в четырехпараметровое логистическое уравнение.
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, определенные соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали активность в отношении рецепторов ГИП и ГПП-1 человека, при этом также демонстрируя селективность против рецептора глюкагона. В табл. 2 показана функциональная активность контролей - нативных чГИП(1-42)ЫН2, чПП1-1(736)NH2 и чГлюкагона, а также определенных соединений согласно настоящему изобретению в отношении рецепторов.
- 11 035055
Таблица 2. Функциональная активность (EC50) в отношении рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона человека
| Соединение | ГИП-Р человека | Г1П1-1Р человека | ГКГР человека | |||
| ЕС5о, нМ±СОС (п) | Emax,0/» | ЕС50, нМ±СОС (п) | Emax, % | ЕС50, нМ±СОС, (п) | Emax, % | |
| Пример 1 | 11,0±0,9 (17) | 97,9±3,0 | 71,2±7,2 (17) | 85,2±4,4 | >1000(13) | НО |
| Пример 3 | 3,15±0,34 (14) | 106±3 | 33,9±3,2 (14) | 96,2±6,2 | >1000(10) | но |
| Пример 6 | 4,40±0,71 (13) | 106±3 | 28,4±4,2 (13) | 104±4 | >1000 (9) | но |
| Пример 7 | 8,07±0,70 (17) | 106±3 | 35,5±2,6 (17) | 97,2±3,4 | >1000(13) | но |
| Пример 8 | 21,1±2,7 (14) | 108±4 | 57,9±6,8 (13) | 88,4±2,3 | >1000(10) | но |
| Пример 4 | 3,76±0,83 (6) | 102±3 | 66,9±14,9 (6) | 100±5 | >1000 (2) | но |
| Пример 2 | 17,5±2,0 (13) | 94,7±2,0 | 75,7±6,0 (13) | 98,2±5,5 | >1000 (9) | но |
| Пример 5 | 8,76±0,86 (Ю) | 105±2 | 70,9±9,7 (Ю) | 105±4 | >1000(10) | но |
| чГПП-1(7- 36)NH2 | 0,176 ±0,015 (17) | 102±2 | ||||
| чГИП(1- 42)NH2 | 0,135 ±0,010 (17) | 100±1 | ||||
| чГ люкагон | 0,0208 ±0,0024 (13) | 115±2 |
Средние значения EC50 выражены в виде геометрического среднего +/- стандартная ошибка среднего (СОС), количество повторов (n) указано в скобках. Средние значения Emax выражены в виде среднего арифметического +/- стандартная ошибка. НО означает, что агонистическая активность не была обнаружена. Спецификатор (>) означает, что EC50 невозможно было определить. Все значения приведены с точностью до трех значимых цифр.
Функциональная активация чГИП-Р клеток для образования внутриклеточного цАМФ на линиях клеток, секретирующих инкретин
Функциональную активность соединений согласно настоящему изобретению в отношении чГИП-Р демонстрировали посредством способности соединений образовывать внутриклеточный цАМФ в клетках GLUTag, стабильной иммортализованной относительно дифференцированной линии энтероэндокринных клеток мышей, которая экспрессирует ген проглюкагона и контролируемым образом секретирует глюкагоноподобные пептиды. Клетки поддерживали при температуре 37°С, содержании CO2 5%,
- 12 035055 влажности 95% в среде DMEM с добавлением 5,5 мМ глюкозы, 10% ЭБС и 2 мМ глутамина. Перед проведением анализа клетки трипсинизировали, осаждали и высевали на 96-луночные аналитические планшеты для культивирования тканей при плотности 20000 клеток/лунку. Клеткам давали возможность присоединиться и инкубировали в течение 48 ч при температуре 37°С и содержании CO2 5%. В день анализа от клеток отбирали среду, и к клеткам добавляли 50 мкл буфера EBSS (Earle's Balanced Salt Solution, сбалансированный солевой раствор Эрла, 0,1% БСА, 2 мМ глюкозы и 0,25 мМ IBMX), содержащего диапазон концентраций соединения (0,001-3 мкМ). Планшет инкубировали при температуре 37°С в течение 1 ч, и уровни цАМФ определяли с применением набора Cisbio Dynamic 2 cAMP HTRF (Бедфорд, Массачусетс). В каждую лунку добавляли 25 мкл антитела против цАМФ-криптат и 25 мкл цАМФ d2, и планшеты инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Планшеты анализировали при длине волны 620 и 665 нм на приборе Tecan Genios Pro. Результаты рассчитывали на основании соотношения 665/620 нм, умноженного на 10000, и преобразовывали в нМ цАМФ на лунку с применением стандартной кривой цАМФ. Данные анализировали с помощью программного обеспечения GraphPad с применением 4параметрового нелинейного логистического алгоритма.
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, определенные соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали дозозависимое увеличение накопления цАМФ в клетках GLUTag (табл. 3). Контроль, нативный ГПП-1, не был способен вызвать какие-либо изменения уровня цАМФ во всех исследованных концентрациях. Полученный результат означает, что данная система клеток экспрессирует исключительно рецептор ГИП; следовательно, можно продемонстрировать, что определенные соединения согласно настоящему изобретению оказывают влияние посредством рецептора ГИП.
Таблица 3. ЕС50 на клетках GLUTag
| Соединение | Среднее ЕС50, нМ (п) |
| Пример 3 | 1610(1) |
| Пример 7 | 2746 (1) |
| Пример 4 | 2186(1) |
| Пример 2 | 2918 (1) |
| Пример 1 | 1494 (2) |
| Нативный ГИП | 11,62 (3) |
Измерение внутриклеточного цАМФ в клетках HEK293, временно экспрессирующих рецептор ГПП-2 человека
Функциональную активность чГПП-2Р (рецептора ГПП-2 человека) в присутствии соединений согласно настоящему изобретению демонстрировали посредством определения внутриклеточного цАМФ в клетках HEK293. Данные клетки перевивали в полной среде, трансфицировали в суспензии с применением реактива Promega Fugene6 и кДНК полноразмерного ГПП-2Р человека в векторе экспрессии pcDNA3.1, и клеткам давали возможность прикрепиться к флаконам для культивирования тканей в увлажненной окружающей среде при температуре 37°С и содержании CO2 5%. После приблизительно 48 ч размножения клетки снимали, окрашивали и криоконсервировали при контролируемой скорости замораживания с использованием 10% DMSO в качестве криопротектора. В последующих анализах оттаивали готовую виалу для одного анализа из одного и того же образца замороженных клеток для минимизации вариаций в серии анализов. В день анализа клеток среду для замораживания заменяли на Invitrogen 31053 DMEM, содержащую 0,5% ЭБС.
Клетки подсчитывали для определения жизнеспособности и уравновешивали в течение приблизительно 1-2 ч при температуре 37°С перед обработкой. Соединения согласно настоящему изобретению солюбилизировали в DMSO и немедленно разводили в среде DMEM, содержащей 0,1% фракции V БСА и неспецифичный ингибитор фосфодиэстеразы, IBMX. Длительность обработки составляла 30 мин при температуре 37°С. Конечная концентрация DMSO не превышала 1,1%, и конечная концентрация IBMX составила 250 мкМ. Циклический АМФ измеряли посредством динамического анализа 2 с применением технологии гомогенной флуоресценции с временным разрешением (Cisbio Bioassays, Бедфорд, Массачусетс). Соответствующие концентрации цАМФ выводили с помощью способа расчета на основе соотношения и внешних стандартов. Сигмовидные кривые доза-ответ исследуемых соединений изучали с применением четырехпараметрового логистического уравнения и сравнивали с нативным С18ацилированным лигандом.
В экспериментах, проведенных, по существу, так же, как описано в данном анализе, контроль, С18ацилированный ГПП-2 человека, характеризовался значением EC50 в отношении активации рецептора, составляющим 1,71 нМ, тогда как определенные соединения согласно настоящему изобретению характеризовались значениями EC50 в приблизительно 100-1000 раз выше. Значения EC50 определенных соеди- 13 035055 нений согласно настоящему изобретению продемонстрировали селективность против рецептора ГПП-2.
Таблица 4. Измерение функциональной активности
Г1111-2Р на клетках HEK293
| Соединение | Относ. ЕС50 (нМ) | η |
| Г11112-С 18-дикислота | 1,857 | 4 |
| Пример 3 | 199,3 | 4 |
| Пример 7 | 1,800 | 4 |
| Пример 4 | 405 | 2 |
| Пример 1 | 238 | 4 |
| Пример 2 | 1612 | 2 |
Секреция инсулина островками грызунов
Для оценки действия соединений согласно настоящему изобретению в системе, представляющей физиологические уровни экспрессии ГИИ-1Р и ГИП-Р и секреции инсулина, исследовали эффекты соединений на секрецию инсулина островками грызунов дикого типа.
После общепринятого канюлирования желчного протока самцов мышей С57В1/6 (22-26 г) или самцов крыс Спрег-Доули (приблизительно 250 г) поджелудочную железу наполняли буфером Хэнкса (3 мл для мышей или 10 мл для крыс), содержащим 2% БСА и 0,75 мг/мл коллагеназы Clzyme (VitaCyte). Затем ткани расщепляли в буфере Хэнкса при температуре 37°С в течение 11-13 мин (мыши) или 14-16 мин в случае поджелудочной железы крыс. Очищенные островки (градиент Histopaque-1100 [Sigma-Aldrich], 18 мин при 750х ускорении силы тяжести) культивировали в течение ночи в среде RPMI-1640 (Invitrogen), содержащей 10% ЭБС, 100 Ед./мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, и прекондиционировали посредством выращивания в минимальном сбалансированном солевом растворе Эрла (EBSS) с добавлением 0,1% БСА и 2,8 мМ глюкозы. Затем островки инкубировали в EBSS (Invitrogen) с добавлением 0,1% БСА, 2,8-11,2 мМ глюкозы и увеличивающихся уровней соединения (6 серий по 4 островка/условие). В качестве положительного контроля использовали Г11-1 (7-36)амид (30 нМ). Инсулин измеряли в течение 90 мин в супернатанте с применением анализа инсулина MSD (Meso Scale, Гейтерсберг, Мериленд).
Определенные соединения согласно настоящему изобретению дозозависимым образом увеличивали секрецию инсулина как островками мышей, так и островками крыс, что отражено в табл. 5.
Таблица 5. Секреция инсулина островками грызунов
| Секреция инсулина островками крыс | ||
| Соединение | Средняя ED50 (нМ) | N |
| Пример 3 | 34,9 | 2 |
| Пример 1 | 15,5 | 3 |
| Секреция инсулина островками мышей | ||
| Соединение | Средняя ED50 (нМ) | N |
| Пример 3 | 58,9 | 2 |
| Пример 6 | 51,4 | 1 |
| Пример 7 | и,з | 1 |
| Пример 4 | 3,5 | 1 |
| Пример 2 | 30,0 | 1 |
| Пример 1 | 47,2 | 2 |
Составление профиля иммуногенности
Риск иммуногенности соединений согласно настоящему изобретению оценивали с применением программ прогнозирования in silico, в частности, анализа in silico Epivax. Риск иммуногенности соединений согласно настоящему изобретению также оценивали посредством способа измерения ответов культивируемых Т клеток ex vivo (поглощение 3Н-тимидина и секреция цитокина ИЛ-2) в присутствии соединений согласно настоящему изобретению.
С применением иммуноинформатических инструментов Epivax проводили оценку соединений согласно настоящему изобретению in silico для прогнозирования иммунного ответа после введения. В анализе использовали вероятность того, что 9-мерная рамка свяжется с конкретным аллелем лейкоцитарного антигена человека (HLA), с последующим определением данных Epi-Bar. Для соединения согласно примеру 1 показатель EpiMatrix, составляющий приблизительно +1,13, свидетельствует о значительно меньшей способности вызывать иммунный ответ по сравнению с нативным пептидным скелетом ГИ1, показатель EpiMatrix которого составил +15,4. 1ример коагониста ГИ1/Г11-1 согласно международной
- 14 035055 публикации WO 2011/119657 характеризовался показателем +29,5.
Также определяли степень прогнозируемой клинической иммуногенности соединений согласно настоящему изобретению посредством характеризации пролиферации CD4+ Т-клеток и секреции цитокина ИЛ-2 на когорте из 50 здоровых доноров, репрезентативных для мировой популяции аллотипов HLA. Определенные соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали степень стимуляции Т-клеток и секреции ИЛ-2 после воздействия, которая не превышала порог, свойственный известным или положительным иммуногенным соединениям, что свидетельствует о низком риске вызова клинической иммуногенности.
Фармакокинетика
Фармакокинетика на яванских макаках.
Фармакокинетические свойства соединений согласно настоящему изобретению in vivo демонстрировали на яванских макаках. Соединения вводили в виде однократной внутривенной или подкожной дозы (0,2 мг/кг) в 20 мМ цитратном буфере (рН 7,0) в объеме 0,21 мл/кг. От каждого животного отбирали кровь в моменты времени 2, 4, 8, 12, 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 204, 240 и 312 ч после введения. Концентрации соединений согласно настоящему изобретению в плазме определяли методом ЖХ/МС. Вкратце, соединение согласно настоящему изобретению экстрагировали из 100% образца плазмы обезьяны (50 мкл), разведенного 1X ФБР, фосфатным буферным раствором (150 мкл), и смешивали с N-бутанолом (400 мкл). Образовывалось три различных слоя жидкости, причем соединение находилось в верхнем слое. Объем 200 мкл переносили в 96-луночный планшет с v-образным дном, лиофилизировали с применением нагретого газообразного азота и восстанавливали в 100 мкл 30% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты. 20 мкл восстановленного образца инжектировали в колонку Supelco Analytical Discovery bio wide C5 3 мкм. Элюат колонки направляли на масс-спектрометр Thermo Q-Exactive для обнаружения и количественного определения.
В экспериментах, проведенных, по существу, так же, как описано в данном анализе, средняя максимальная концентрация соединения согласно примеру 1 в плазме была достигнута приблизительно через 8 ч после подкожного введения дозы. Средний период полужизни составлял 55 ч, и средний клиренс составлял 0,73 мл/ч/кг. Биодоступность составила приблизительно 83%. Полученные данные подтверждают возможность введения доз соединения согласно примеру 1 один раз в неделю. Данные для другого соединения согласно настоящему изобретению обобщены в табл. 6.
Таблица 6. Средние фармакокинетические параметры после введения однократной подкожной дозы 0,2 мг/кг самцам яванских макаков
| Соединение | Средний Т1/2(ч) | Среднее Тшах (ч) | Средняя Стах (мкг/мл) | Средняя AUCo-беск. (ч*мкг/мл) | Среднее CL/F (мл/ч/кг) |
| Пример 3 | 34 | 8 | 3,0 | 153 | 1,3 |
| Пример 7 | 31 | 6 | 2,9 | 136 | 1,5 |
| Пример 6 | 23 | 4 | 2,2 | 72,3 | 2,8 |
| Пример 8 | 23 | 10 | 1,0 | 42,8 | 4,7 |
| Пример 2 | 43 | 24 | 2,1 | 173 | 1,2 |
n=2, AUC0.беск =площадь под кривой (area under the curve) от 0 до бесконечности, Щ/Е=клиренс/биодоступность, Tmax=время до достижения максимальной концентрации, Cmax=максимальная концентрация в плазме, Т 1/2=период полужизни
Прогнозирование активности дозы
Внутривенный тест толерантности глюкозы (ВТТГ) на крысах использовали для определения относительной активности соединений согласно настоящему изобретению по сравнению с семаглутидом. Крысам вводили однократные подкожные (п.к.) дозы 0,1-10 нмоль/кг каждого соединения, и через 16 ч после введения каждой крысе вводили ВТТГ. Во время ВТТГ проводили измерение экспозиции и для моделирования экспозиции-отклика в качестве первичной конечной точки использовали AUC инсулина в ответ на ВТТГ.
Для сравнения профилей экспозиции-отклика соединения согласно примеру 1 и семаглутида использовали модель Emax. В экспериментах, проведенных, по существу, так же, как описано в данном анализе, экспозиция являлась, по существу, такой же для соединения согласно примеру 1 и семаглутида для уровней доз, которые характеризовались уровнями лекарственного препарата выше предела количественного определения анализа. Оба набора данных аппроксимировали одновременно, и значения Е0 и Emax ограничивали, чтобы они являлись одинаковыми для обоих соединений. Лишь значения ED50 соединений аппроксимировали по отдельности. Значение ED50 семаглутида было оценено как 0,6+/-0,2 нмоль/кг. Активность соединения согласно примеру 1, которую оценивали как относительную активность по сравнению с семаглутидом, являлась в 1,7+/ 0,6 раз выше активности семаглутида. При корректировке с учетом различий CL/F (кажущегося клиренса) двух молекул у обезьян, а также различий молекулярной массы прогнозируемая средняя эквивалентная доза соединения согласно примеру 1 к 1 мг семаглутида у человека составляет приблизительно 1,3 мг/неделю.
- 15 035055
Диабет 2 типа
Секреция инсулина после внутривенного введения глюкозы (ВТТГ) у крыс in vivo
Самцов крыс Вистар (Harlan Labs, Индианаполис, Индиана) рандомизировали в зависимости от массы тела и вводили дозы 1,5 мл/кг п.к. за 16 ч до введения глюкозы, после чего содержали натощак. Дозы представляли собой наполнитель, 0,1, 0,3, 1, 3 и 10 нмоль/кг. Животных взвешивали, а затем проводили анестезию с применением фенобарбитала натрия (раствор нембутала натрия; Ovation Pharmaceuticals), который вводили и.п. (интраперитонеально, 65 мг/кг, 30 мг/мл). Образец крови в момент времени ноль отбирали в пробирки с EDTA, после чего вводили глюкозу (0,5 мг/кг, 5 мл/кг). Образцы крови отбирали в моменты времени 2, 4, 6, 10, 20 и 30 мин после введения глюкозы. Уровни глюкозы в плазме определяли с применением анализатора Hitachi (Roche) и инсулин в плазме измеряли посредством анализа инсулина MSD (Meso Scale, Гейтерсберг, Мериленд).
Как показано в табл. 7, определенные соединения согласно настоящему изобретению дозозависимым образом усиливали секрецию инсулина после в.в. (внутривенной) инъекции глюкозы. ED50 для инсулина и максимальное увеличение секреции инсулина (измеренное как площадь под кривой инсулина) приведены в табл. 7.
Таблица 7. Увеличение секреции инсулина в анализе ВТТГ на крысах
| Соединение | ED50 (нмоль/кг) | % максимального увеличения AUC инсулина |
| Пример 3 | 1,00 | 314+/-38% |
| Пример 3 | 1,42 | 219 +/- 19% |
| Пример 6 | 2,58 | 289 +/- 4% |
| Пример 7 | 4,33 | 335 +/- 35% |
| Пример 7 | 1,ю | 278 +/- 26% |
| Пример 8 | 6,13 | 324 +/- 30% |
| Семаглутид | 0,70 | 231 +/- 13% |
| Пример 2 | 1,62 | 233 +/- 19% |
| Пример 1 | 0,87 | 298 +/- 17% |
| Пример 5 | 1,02 | 349 +/- 39% |
Эффект на снижение массы тела, композиционный состав тела и стеатоз печени на мышах с алиментарным ожирением (DIO)
Эффекты соединений согласно настоящему изобретению на снижение массы тела, композиционный состав тела и стеатоз печени на мышах DIO (diet-induced obese, с алиментарным ожирением) оценивали на мышах C57/BL6 DIO. У данных животных, несмотря на то, что они не страдали от диабета, наблюдалась резистентность к инсулину, дислипидемия и стеатоз печени, которые являются характеристиками метаболического синдрома, после перехода на рацион с высоким содержанием жиров (60% ккал от жиров) в течение 12 недель.
В данном исследовании использовали самцов мышей С57/В16 в возрасте 23-24 недель с алиментарным ожирением (DIO), масса тела каждого из которых составляла 41-49 г и исходная масса жира варьировала в диапазоне 10,5-17,5 г. Животных содержали по отдельности в помещении с контролируемой температурой (24°С) и 12-часовым циклом света/темноты (включение света в 22:00); животные имели свободный доступ к пище и воде. Через 2 недели акклиматизации в помещении мышей рандомизировали на группы лечения (п=5/группу) на основании массы тела так, чтобы каждая группа характеризовалась подобной исходной средней массой тела.
Контроль (наполнитель), соединения согласно настоящему изобретению (в дозах, варьирующих от 10 до 100 нмоль/кг) или аналог ГИИ-1 длительного действия семаглутид (30 нмоль/кг), растворенный в наполнителе (20 мМ цитратном буфере, рН 7,0), вводили мышам DIO, которые получали пищу без ограничений, посредством п.к. инъекции за 30-90 мин до начала цикла темноты один раз в три дня в течение 15 дней. Иодкожные инъекции вводили в дни 1, 4, 7, 10 и 13. Ежедневно в течение всего исследования измеряли массу тела и потребление пищи. Абсолютные изменения массы тела рассчитывали посредством вычитания массы тела того же животного перед первой инъекцией соединения. В дни 0 и 14 измеряли общую массу жира методом ядерного магнитного резонанса (ЯМР) с применением инструмента Echo Medical System (Хьюстон, Техас).
В день 15 с применением глюкометра Accu-Chek (Roche) измеряли уровень глюкозы в крови из хвостовой вены, а затем животных умерщвляли и печень отбирали и замораживали. Триглицериды печени определяли в гомогенатах печени, отобранных после умерщвления, и уровень холестерола в плазме измеряли на клиническом анализаторе Hitachi Modular P. Статистические сравнения между группами проводили с применением однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с последующим применением критерия множественного сравнения Даннета. ED50 для снижения массы тела определяли с помощью программного обеспечения GraphPad Prism с применением инструмента для нелинейной подгонки.
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, определенные соединения согласно настоящему изобретению дозозависимым образом уменьшали массу тела и
- 16 035055 массу жира (табл. 8-13); данные соединения могут являться в 3-5 раз более эффективными при снижении массы тела по сравнению с семаглутидом. ED50 соединения согласно примеру 1 для процента снижения массы тела составляет 5,422 нмоль/кг (уровни 95% доверительного интервала [нмоль/кг]=2,2 к 13,6). Было установлено, что уменьшение массы тела в первую очередь являлось следствием уменьшения массы жира.
Таблица 8. Процент изменения массы тела или массы жира у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | % изменения исходной массы тела | % изменения исходной массы жира |
| Контроль | 0 | -3,14 ±0,88 | -4,84 ± 1,79 |
| Семаглутид | 10 | -12,36 ± 1,00**** | -18,21 ±2,24** |
| Семаглутид | 30 | -14,20 ± 1,01**** | -21,90 ± 2,07*** |
| Семаглутид | 100 | -19,30 ± 1,38**** | -33,51 ± 3,30*** |
| Пример 3 | 10 | -13,38 ± 0,88**** | -20,76 ± 2,42*** |
| Пример 3 | 30 | -18,13 ± 1,44**** | -30,90 ± 2,06**** |
| Пример 3 | 100 | -25,84 ± 1,93**** | -45,92 ± 2,15**** |
| Пример 6 | 10 | -15,31 ± 1,25**** | -24,75 ± 1,89**** |
| Пример 6 | 30 | -21,62 ± 0,92**** | -36,30 ± 2,47**** |
| Пример 6 | 100 | -33,95 ± 1,93**** | -64,64 ± 4,04**** |
**р<0,01, ***р<0,001, ****р<0,0001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета). Результаты выражены в виде среднего ± СОС для 5 мышей на группу
Таблица 9. Процент изменения массы тела или массы жира у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | % изменения исходной массы тела | % изменения исходной массы жира |
| Контроль | 0 | -0,74 ± 1,49 | 3,04 ±3,65 |
| Семаглутид | 30 | -17,03 ±0,98**** | .35,94 ±4,09**** |
| Пример 2 | 10 | -23,27 ± 1,72**** | -49,89 ± 5,62**** |
| Пример 2 | 30 | 33,07 ± 1,65**** | -72,80 ± 4,04**** |
| Пример 2 | 100 | -34,66 ± 1,80**** | -76,20 ± 3,78**** |
| Пример 5 | 10 | -23,42 ± 1,43**** | -51,28 ± 1,89**** |
| Пример 5 | 30 | -26,84 ± 3,14**** | -62,77 ± 5,49**** |
| Пример 5 | 100 | -37,86 ±2,25**** | -81,08 ± 1,68**** |
| Пример 1 | 10 | -25,18 ±,1,82**** | -50,98 ±2,87**** |
| Пример 1 | 30 | -26,58 ±2,49**** | -59,98 ± 6,60**** |
| Пример 1 | 100 | -38,14 ± 1,67**** | -79 79 ± 3 10**** |
****р<0,0001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета), результаты выражены в виде среднего ±СОС для 5 мышей на группу
- 17 035055
Таблица 10. Процент изменения массы тела или массы жира у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | % изменения исходной массы тела | % изменения исходной массы жира |
| Контроль | 0 | -2,43 ± 2,06 | -1,49 ±3,69 |
| Пример 6 | 10 | _17 54 ±1 (γ**** | -34,30 ± 1,20**** |
| Пример 6 | 30 | -19,52 ± 1,18**** | -39,52 ± 3,18**** |
| Пример 6 | 100 | -29,36 ±2,62**** | -56,66 ±4,96**** |
| Пример 7 | 10 | -15,08 ± 1,22**** | -26,46 ±2,31*** |
| Пример 7 | 30 | -20,70 ± 1,95**** | _43 49 ± 5 47**** |
| Пример 7 | 100 | -24,36 ±2,06**** | -49,92 ± 3,40**** |
| Пример 8 | 10 | -17,13 ±0,81**** | -34,20 ± 1,62**** |
| Пример 8 | 30 | -25,27 ±0,70**** | -54,24 ± 2,35**** |
| Пример 8 | 100 | -29,91 ± 2,03**** | -65,23 ± 6,69**** |
****р<0,001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета), результаты выражены в виде среднего ± СОС для 5 мышей на группу
Таблица 11. Уровень глюкозы в крови, холестерола в плазме и триглицеридов в плазме у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | Глюкоза в крови (мг/дл) | Холестерол в плазме (мг/дл) | Триглицериды в плазме (мг/дл) |
| Контроль | 0 | 141,6 ±5,59 | 303,2 ± 13,97 | 54,2 ± 11,14 |
| Семаглутид | 10 | 147,6 ±6,13 | 226,8 ± 13,86** | 27,36 ±3,56* |
| Семаглутид | 30 | 146,8 ± 8,43 | 229,8 ± 10,96** | 27,9 ±6,01* |
| Семаглутид | 100 | 134,3 ±9,22 | 218,4 ± 18,70** | 36,46 ± 5,34 |
| Пример 3 | 10 | 109,5 ±2,35*** | 213,2 ± 15,54*** | 30,38 ± 8,23 |
| Пример 3 | 30 | 107,6 ± 1,32*** | 177,4 ± 16,58**** | 21,32 ±2,48** |
| Пример 3 | 100 | 102,00 ±0,50**** | 194,00 ± 14,40*** | 20,55 ±4,60** |
| Пример 6 | 10 | 105,8 ±2,10*** | 198,4 ± 6,76**** | 20,78 ±4,40** |
| Пример 6 | 30 | 100,1 ±3,29**** | 186,4 ± 17,04**** | 26,12 ±6,85* |
| Пример 6 | 100 | 103,6 ±3,20**** | 151,4± 14,32**** | 17,26 ± 1,67*** |
*р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001, ****р<0,0001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета), результаты выражены в виде среднего ±СОС для 5 мышей на группу
- 18 035055
Таблица 12. Уровень глюкозы в крови, холестерола в плазме и триглицеридов в печени у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | Глюкоза в крови (мг/дл) | Холестерол в плазме (мг/дл) | Триглицериды в печени (мг/г ткани) |
| Контроль | 0 | 144,30 + 8,16 | 233,6+ 12,99 | 206,65 ± 29,47 |
| Семаглутид | 30 | 136,3 + 3,81 | 161,0+13,92*** | 67,63 + 23,40**** |
| Пример 2 | 10 | 110,8 + 3,87* ** | 121,8 ± 13 64**** | 60,77+ 13,24**** |
| Пример 2 | 30 | 110,8 + 3,20** | 114,00 ± | 65,78+ 17,07**** |
| Пример 2 | 100 | 113,2 + 4,86** | 109,4 + 8,83**** | 56,74+ 17,76**** |
| Пример 5 | 10 | 111,00 + 6,56** | 126,6 + 9,67**** | 48,30 + 8,14**** |
| Пример 5 | 30 | 104,5 + 5,30*** | 108,2 ± 13 84**** | 39,60 + 4,71**** |
| Пример 5 | 100 | 105,3 + 6,16*** | 108,6 + 4,83**** | 67,96+ 13,53**** |
| Пример 1 | 10 | 102,3 ± 5 52**** | 120,6 + 8,55**** | 60,74 + 5,33**** |
| Пример 1 | 30 | 110,7 + 5,85** | 118,2 ± 10 11 **** | 45,24 + 5,87**** |
| Пример 1 | 100 | 106,7 + 7,33*** | 107,6 ± 10 43**** | 66,98+ 17,29**** |
*р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001, ****р<0,0001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета), результаты выражены в виде среднего ±СОС для 5 мышей на группу
Таблица 13. Уровни глюкозы в крови и холестерола в плазме у мышей DIO
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | Глюкоза в крови (мг/дл) | Холестерол в плазме (мг/дл) |
| Контроль | 0 | 152,4 + 3,63 | 243,6+ 13,12 |
| Пример 6 | 10 | 121,4 + 2,74*** | 167,8 ± 15,59**** |
| Пример 6 | 30 | 121,9 + 6,65** | 159 8 + 9 99**** |
| Пример 6 | 100 | 116,1+4,67**** | 144,2 ± 7,12**** |
| Пример 7 | 10 | 113,6 + 4,16**** | 161,8 + 6,2**** |
| Пример 7 | 30 | 114,7 + 4,70**** | 153,6+ 13,47**** |
| Пример 7 | 100 | 114 + 2,36**** | 145 4 + 9 48**** |
| Пример 8 | 10 | 114,7 + 4,61**** | 158,8 + 7,57**** |
| Пример 8 | 30 | 117,1 ± 8,26*** | 139,4 + 6,83**** |
| Пример 8 | 100 | 125,4 + 6,30** | 127,8 ± 6,34**** |
*р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001, ****р<0,0001 из контрольной группы (однофакторный анализ ANOVA, критерий Даннета), результаты выражены в виде среднего ±СОС для 5 мышей на группу
- 19 035055
Эффект на энергетический метаболизм у мышей DIO
Эффекты соединений согласно настоящему изобретению на энергетический метаболизм мышей DIO оценивали на самцах мышей С57/В16 DIO в возрасте 26 недель массой тела 43-50 г. Мышей содержали по отдельности в помещении с контролируемой температурой (24°С) и 12-часовым циклом света/темноты (включение света в 22:00); животные имели свободный доступ к пище TD95217 (Teklad) и воде. Через 2 недели акклиматизации в помещении мышей рандомизировали на группы лечения (ц=6/группу) на основании массы тела так, чтобы каждая группа характеризовалась сравнимой исходной средней массой тела. Животных помещали в калориметр PhenoMaster/LabMaster (TSE Systems, Честерфилд, Миссури) на 3 дня для акклиматизации. Контроль (наполнитель) (20 мМ цитратный буфер, рН 7,0, 10 мл/кг), соединения согласно настоящему изобретению или аналог ГПП-1 длительного действия семаглутид (30 нмоль/кг) вводили мышам DIO, которые получали пищу без ограничений, подкожно за 3090 мин до начала цикла темноты один раз в три дня в течение 22 дней. Количество тепла и дыхательный коэффициент (RER) измеряли методом непрямой калориметрии, как описано, с применением калориметрической системы открытого цикла. RER представляет собой соотношение объема выделенного CO2 (Vco2) к объему потребленного O2 (Vo2). Количество тепла рассчитывали на основании полной массы тела, учитывая:
VO2= ПотокМЛ*(У1 + V2) N2Homuii. *Масса животного* 100)
VCO2 =ПотокМЛ*с1СО2/Масса животного *100)
Количество тепла= (CV02*V02+CVC02*VC02)/1000;
где CVO2=3,941; CVCO2=l,106
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, у мышей, которые получали соединение согласно примеру 1, значительно увеличивался уровень метаболизма - на 1015% по сравнению с контрольной группой, начиная с недели 2, и данный эффект сохранялся в течение периода лечения. Семаглутид, однако, не оказывал эффекта на уровень метаболизма. Увеличение уровня метаболизма в случае соединения согласно примеру 1 частично объясняется дополнительным снижением массы тела, которое наблюдалось при лечении соединением согласно примеру 1, по сравнению с лечением семаглутидом.
Эффект на эвакуацию содержимого из желудка у мышей DIO
Эффекты соединений согласно настоящему изобретению на эвакуацию содержимого из желудка у мышей DIO оценивали на самцах мышей с алиментарным ожирением (DIO) в возрасте 23 недель (Harlan). Мышей держали натощак в течение 16-17 ч. В начале периода натощак мышам подкожно вводили контроль - наполнитель (20 мМ цитратный буфер, рН 7,0); возрастающие дозы соединений согласно настоящему изобретению (3, 10, 30 и 100 нмоль/кг) или аналог ГПП-1 длительного действия семаглутид (30 нмоль/кг). На следующий день мышам с помощью перорального зонда вводили 0,5 мл (0,5 г) свежеприготовленного полужидкого корма (с интервалом в 2 мин). В данное время воду убирали, чтобы предотвратить разбавление вводимого корма. Через 2 ч после введения корма мышей умерщвляли с интервалом в 2 мин с применением газообразного CO2. Желудок удаляли и зажимали со стороны кардиального и пилорического отверстия, после чего зажимы удаляли, и полный желудок взвешивали на блюдце весов. Затем желудок надрезали и содержимое удаляли. Желудок промывали, высушивали и повторно взвешивали, чтобы оценить содержание пищи в желудке. % эвакуации содержимого из желудка равен 100х (1 - (пища, оставшаяся в желудке/пища, введенная пероральным путем)).
В экспериментах, которые проводили, по существу, так же, как описано в данном анализе, соединение согласно примеру 1 дозозависимым образом замедляло степень эвакуации полужидкого корма из желудка. Максимальное ингибирование эвакуации содержимого из желудка наблюдалось при дозе 10 нмоль/кг +/- доза (табл. 14).
Таблица 14. Эвакуация полужидкого корма из желудка мышей C57/BL6 DIO натощак
| Лечение | Доза (нмоль/кг) | Процент эвакуации содержимого из желудка (среднее ± (/ОС) |
| Наполнитель (п=5) | 0 | 69,50 +/- 6,60 |
| Семаглутид (п=5) | 30 | 30,56+/- 7,53** |
| Пример 1 (п=4) | 3 | 49,11 +/- 8,52 |
| Пример 1 (п=5) | 10 | 9,76+/- 7,69**** |
| Пример 1 (п=5) | 30 | 26,53 +/- 8,14** |
| Пример 1 (п=5) | 100 | 18,45 +/- 6,87*** |
Статистические сравнения между группами проводили с применением однофакторного анализа ANOVA с последующим использованием критерия множественного сравнения
- 20 035055
Даннета, *р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001, ****р<0,0001 из контрольной группы, результаты выражены в виде среднего +/- СОС для 4-5 мышей на группу
Измерение кортикостерона в плазме крыс Спрег-Доули
Как предполагают в определенных опубликованных исследованиях, увеличение уровней кортикостерона в плазме является свидетельством возможной пониженной переносимости аналогов ГИП и ГПП-1. Уровни кортикостерона в плазме оценивали на крысах Спрег-Доули (Harlan, Indianapolis) массой тела приблизительно 220 г. Животных акклиматизировали в течение по меньшей мере 72 ч перед проведением манипуляций. Затем крысам вводили дозы наполнителя (20 мМ цитратный буфер, рН 7), семаглутида (10 нмоль/кг) или соединений согласно настоящему изобретению в концентрациях 3, 10 или 30 нмоль/кг п.к., по 8 крыс на группу дозы. Через 16 ч крысам проводили декапитацию. Кровь отбирали в пробирки с EDTA на льду, а затем центрифугировали в течение 5 мин при 8000 об/мин. на настольной центрифуге Eppendorf 5402. Плазму хранили при температуре -80°С до проведения анализа.
Для анализа кортикостерона получали стандарты кортикостерона (Sigma, 27840) посредством серийного разведения в метаноле степени чистоты для ВЭЖХ, H2O и добавления 5% очищенной на активированном угле сыворотки крысы (Bioreclamation, RATSRM-STRPD-HEV). Образцы плазмы крыс разводили ФБР, преципитировали холодным метанолом, инкубировали в течение 20 мин при температуре -20° С, а затем центрифугировали при 14000 об/мин на центрифуге Eppendorf 5417R при температуре 4°С. Супернатанты экстрагировали, выпаривали в потоке газообразного N2 и восстанавливали в растворе МеОН/Н2О (1:1). Образцы анализировали на приборе ЖХ/МС, оснащенном колонкой для ВЭЖХ XSelect CSH C18, 3,5 мкм (2,1 ммх30 мм) (Waters, №186005254).
В экспериментах, проведенных, по существу, так же, как описано в данном анализе, соединение согласно примеру 1 продемонстрировало отсутствие увеличения уровней кортикостерона в плазме при любых исследованных дозах, тогда как семаглутид характеризовался увеличением приблизительно в 4 раза по сравнению с контролем.
Таблица 15. Анализ кортикостерона в плазме крыс Спрег-Доули
| Кортикостерон (нг/мл) |
| Соединение | Среднее | СОС |
| Наполнитель | 60,78 | 8,41 |
| 10 нмоль/кг семаглутида | 274,57 | 42,06 |
| 3 нмоль/кг соединения согласно примеру 1 | 52,21 | 19,39 |
| 10 нмоль/кг соединения согласно примеру 1 | 32,46 | 9,78 |
| 30 нмоль/кг соединения согласно примеру 1 | 31,35 | 5,86 |
Аминокислотные последовательности
SEQ ID NO: 1 (ГИП человека)
YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKrKKNDWKHNITQ
SEQ ID NO: 2 (ГПП-1 человека)
HAEGTFT SD VS S YLEGQ AAKEFIAWLVKFR
SEQ ID NO: 3
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтоксиитокси^цетилД-ЦОДгСОДСНД^-СОзН; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 4 YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтоксиитокси^цетилДуОЫД-СОДСНД^-СОзН; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 5 YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтоксиитокси^цетилД-ЦОДгСОДСНД^-СОзН; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 6
- 21 035055
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(γGlu)2-СО-(СН2)16-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 7
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уС1и)2-СО-(СН2)18-СО2Н; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 8
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уС1и)1-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 9
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уС1и)2-СО-(СН2)16-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 10 YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уС1и)1-СО-(СН2)18-СО2Н; Х3 представляет собой 1-Nal; и С-концевая аминокислота является амидированной в форме С-концевого первичного амида.
SEQ ID NO: 11
YX1EGTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIAGGPSSGAPPPS, где X1 представляет собой Aib; X2 представляет собой Aib; K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилон-аминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-аминоэтокси)это1<си|а11ет1 li)2-( уС11и)а-СО-(С1 12)ь-СО21 1 где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 20; Х3 представляет собой Phe или 1-Nal; и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме Сконцевого первичного амида.
Claims (2)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Применение соединения, представляющего собой коагонист рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (ГИП) и глюкагоноподобного пептида-1 (ГПП-1), формулыYX1ECTFTSDYSIX2LDKIAQKAX3VQWLIACGPSSCAPPPS;гдеX1 представляет собой Aib;Х2 представляет собой Aib;K в положении 20 является химически модифицированным посредством конъюгации эпсилонаминогруппы боковой цепи K с ([2-(2-амино-этокси)этокси]ацетил)2-(уС1u)а-CO-(СН2)b-CO2H, где а равен от 1 до 2 и b равен от 10 до 20;Х3 представляет собой Phe или 1-Nal;и С-концевая аминокислота необязательно является амидированной в форме С-концевого первичного амида (SEQ ID NO: 11), или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для лечения ожирения.
- 2. Применение соединения, представляющего собой коагонист рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (ГИП) и глюкагоноподобного пептида-1 (ГПП-1), формулы- 22 035055или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для лечения ожирения.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201562101488P | 2015-01-09 | 2015-01-09 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201892057A1 EA201892057A1 (ru) | 2019-02-28 |
| EA035055B1 true EA035055B1 (ru) | 2020-04-22 |
Family
ID=55315708
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA202090392A EA202090392A3 (ru) | 2015-01-09 | 2016-01-05 | Соединения-коагонисты гип и гпп-1 |
| EA201791281A EA031591B1 (ru) | 2015-01-09 | 2016-01-05 | Соединения-коагонисты гип и гпп-1 |
| EA201892057A EA035055B1 (ru) | 2015-01-09 | 2016-01-05 | Соединения-коагонисты гип и гпп-1 |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA202090392A EA202090392A3 (ru) | 2015-01-09 | 2016-01-05 | Соединения-коагонисты гип и гпп-1 |
| EA201791281A EA031591B1 (ru) | 2015-01-09 | 2016-01-05 | Соединения-коагонисты гип и гпп-1 |
Country Status (46)
Families Citing this family (107)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP4212180A1 (en) | 2013-12-18 | 2023-07-19 | The Scripps Research Institute | Modified therapeutic agents, stapled peptide lipid conjugates, and compositions thereof |
| TWI622596B (zh) | 2015-10-26 | 2018-05-01 | 美國禮來大藥廠 | 升糖素受體促效劑 |
| WO2018104263A1 (en) | 2016-12-06 | 2018-06-14 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods of enhancing the potency of incretin-based drugs in subjects in need thereof |
| JOP20180028A1 (ar) | 2017-03-31 | 2019-01-30 | Takeda Pharmaceuticals Co | مركب ببتيد |
| US11590237B2 (en) | 2017-05-18 | 2023-02-28 | Merck Sharp & Dohme Llc | Pharmaceutical formulation comprising incretin-insulin conjugates |
| KR102665710B1 (ko) | 2017-08-24 | 2024-05-14 | 노보 노르디스크 에이/에스 | Glp-1 조성물 및 그 용도 |
| TWI767095B (zh) * | 2017-12-21 | 2022-06-11 | 美商美國禮來大藥廠 | 腸促胰島素(incretin)類似物及其用途 |
| AR113486A1 (es) * | 2017-12-21 | 2020-05-06 | Lilly Co Eli | Análogos de incretina y sus usos |
| WO2019140030A1 (en) | 2018-01-12 | 2019-07-18 | Eli Lilly And Company | Combination therapy |
| KR102647171B1 (ko) | 2018-02-02 | 2024-03-15 | 노보 노르디스크 에이/에스 | Glp-1 작용제 및 n-(8-(2-하이드록시벤조일)아미노)카프릴산의 염을 포함하는 고형 조성물 |
| AU2019238090B2 (en) | 2018-03-22 | 2024-08-01 | Viking Therapeutics, Inc. | Crystalline forms and methods of producing crystalline forms of a compound |
| MA52483A (fr) * | 2018-05-04 | 2021-03-10 | Novo Nordisk As | Dérivés de gip et leurs utilisations |
| TWI705820B (zh) * | 2018-06-22 | 2020-10-01 | 美商美國禮來大藥廠 | Gip/glp1促效劑組合物 |
| KR20210031533A (ko) * | 2018-07-23 | 2021-03-19 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | Gip/glp1 공효능제 화합물 |
| EP3826662B9 (en) * | 2018-07-23 | 2025-02-19 | Eli Lilly and Company | Method of using a gip/glp1 co-agonist for diabetes |
| TW202432173A (zh) | 2018-07-23 | 2024-08-16 | 美商美國禮來大藥廠 | 使用gip/glp1共促效劑之療法 |
| WO2020023702A1 (en) | 2018-07-25 | 2020-01-30 | AskGene Pharma, Inc. | Novel il-21 prodrugs and methods of use thereof |
| JP6564539B1 (ja) | 2018-09-14 | 2019-08-21 | 長瀬産業株式会社 | スルホン酸化合物によるペプチド精製方法 |
| WO2020067575A1 (en) | 2018-09-24 | 2020-04-02 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Gip receptor agonist peptide compounds and uses thereof |
| US12102646B2 (en) | 2018-12-05 | 2024-10-01 | Viking Therapeutics, Inc. | Compositions for the treatment of fibrosis and inflammation |
| TWI799680B (zh) * | 2019-01-29 | 2023-04-21 | 美商美國禮來大藥廠 | 製備gip/glp1雙重促效劑之方法 |
| US11845801B2 (en) | 2019-06-12 | 2023-12-19 | AskGene Pharma, Inc. | IL-15 prodrugs and methods of use thereof |
| GB201908424D0 (en) | 2019-06-12 | 2019-07-24 | Imp College Innovations Ltd | Novel compounds |
| AR119471A1 (es) * | 2019-08-01 | 2021-12-22 | Lilly Co Eli | Compuestos agonistas de gipr |
| MY201700A (en) | 2019-08-19 | 2024-03-13 | Lilly Co Eli | Methods of making incretin analogs |
| US20230000950A1 (en) * | 2019-10-04 | 2023-01-05 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Composition comprising glucagon and glp-1 and gip receptor dual agonist and therapeutic use of same |
| CN110684082B (zh) * | 2019-10-08 | 2021-12-10 | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 | Gip和glp-1双激动多肽化合物及药学上可接受的盐与用途 |
| TWI795698B (zh) * | 2019-12-18 | 2023-03-11 | 美商美國禮來大藥廠 | 腸促胰島素(incretin)類似物及其用途 |
| US20230265151A1 (en) | 2020-01-23 | 2023-08-24 | Eli Lilly And Company | Gip/glp1 co-agonist compounds |
| TW202140058A (zh) | 2020-01-30 | 2021-11-01 | 美商美國禮來大藥廠 | 提派肽（ｔｉｒｚｅｐａｔｉｄｅ）之治療用途 |
| CN111253475B (zh) * | 2020-02-18 | 2021-03-09 | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 | Glp-1激动多肽化合物及其盐与合成方法及用途 |
| JP7544838B2 (ja) | 2020-03-06 | 2024-09-03 | サノフイ | 選択的ｇｉｐ受容体アゴニストとしてのペプチド |
| CN113493503B (zh) * | 2020-04-08 | 2022-08-05 | 浙江道尔生物科技有限公司 | 一种肠促胰岛素类似物及其制备方法和用途 |
| TW202216746A (zh) * | 2020-06-22 | 2022-05-01 | 印度商太陽製藥工業有限公司 | 長效型ｇｌｐ－１／ｇｉｐ雙重促效劑 |
| WO2022007805A1 (zh) * | 2020-07-06 | 2022-01-13 | 鸿绪生物医药科技（北京）有限公司 | 新型多肽及其治疗用途 |
| TW202315883A (zh) | 2020-07-22 | 2023-04-16 | 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 | 適用於口服的glp-1及gip受體共促效劑 |
| CA3184723A1 (en) * | 2020-07-22 | 2022-01-27 | Patrick J. KNERR | Glp-1 and gip receptor co-agonists |
| CA3193453A1 (en) * | 2020-09-30 | 2022-04-07 | Beijing Ql Biopharmaceutical Co., Ltd. | Polypeptide conjugates and methods of uses |
| CN116419765A (zh) * | 2020-10-16 | 2023-07-11 | 韩美药品株式会社 | Glp-1/gip双重激动剂、其长效缀合物，以及包括其的药物组合物 |
| AU2021361263A1 (en) * | 2020-10-17 | 2023-02-16 | Sun Pharmaceutical Industries Limited | GLP-1/GIP dual agonists |
| KR20230116894A (ko) * | 2020-12-02 | 2023-08-04 | 둥바오 퍼플 스타 (항저우) 바이오파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 | 락탐 변형을 포함한 폴리펩타이드계 화합물 |
| WO2022159395A1 (en) * | 2021-01-20 | 2022-07-28 | Viking Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of metabolic and liver disorders |
| CA3208208A1 (en) | 2021-02-17 | 2022-08-25 | Mathijs Christiaan Michael BUNCK | Tirzepatide therapeutic methods |
| WO2022177744A1 (en) * | 2021-02-17 | 2022-08-25 | Eli Lilly And Company | Gip/glp1 dual agonist therapeutic methods |
| EP4317179B1 (en) * | 2021-03-25 | 2025-10-29 | BrightGene Bio-Medical Technology Co., Ltd. | Gip and glp-1 dual receptor agonist, pharmaceutical composition, and use |
| US12215133B2 (en) * | 2021-03-25 | 2025-02-04 | Brightgene Bio-Medical Technology Co., Ltd. | GIP and GLP-1 dual receptor agonist, pharmaceutical composition, and use |
| US20240226017A1 (en) | 2021-05-07 | 2024-07-11 | Eli Lilly And Company | Erodible tablet |
| CR20230530A (es) | 2021-05-13 | 2024-02-19 | Carmot Therapeutics Inc | Moduladores de los receptores acoplados a proteínas g. |
| CN117866050A (zh) * | 2021-05-28 | 2024-04-12 | 广东众生睿创生物科技有限公司 | 多肽的制备及其应用 |
| CN117440964A (zh) * | 2021-06-01 | 2024-01-23 | 南京知和医药科技有限公司 | 一种glp-1r和gipr双重靶向激动作用的多肽衍生物及其制备方法和用途 |
| KR20240032010A (ko) | 2021-06-09 | 2024-03-08 | 더 스크립스 리서치 인스티튜트 | 장기 지속형 이중 gip/glp-1 펩타이드 접합체 및 사용 방법 |
| TW202302624A (zh) * | 2021-06-18 | 2023-01-16 | 大陸商廣東眾生睿創生物科技有限公司 | 含內醯胺橋的多肽化合物 |
| WO2023031455A1 (en) | 2021-09-06 | 2023-03-09 | Sanofi Sa | New peptides as potent and selective gip receptor agonists |
| EP4259647A4 (en) | 2021-09-15 | 2025-03-26 | Viking Therapeutics, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF METABOLIC AND LIVER DISEASES |
| EP4433093A1 (en) | 2021-11-15 | 2024-09-25 | Adocia | Solid compositions comprising a peptide or a protein and an acylated amino acid |
| EP4299057A1 (en) | 2022-06-30 | 2024-01-03 | Adocia | Solid compositions comprising a peptide or a protein and an acylated amino acid |
| EP4180060A1 (en) | 2021-11-15 | 2023-05-17 | Adocia | Solid compositions comprising a peptide or a protein and an acylated amino acid |
| WO2023089594A1 (en) | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Sun Pharmaceutical Industries Limited | Process for the preparation of tirzepatide or pharmaceutically acceptable salt thereof |
| TW202330584A (zh) * | 2022-01-20 | 2023-08-01 | 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 | 前藥及其用途 |
| KR20240170837A (ko) * | 2022-04-07 | 2024-12-04 | 광둥 레이노벤트 바이오테크 컴퍼니 리미티드 | 당뇨병 및 비만 및 관련 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 약물의 제조에서의 폴리펩티드의 약학적 용도 |
| CN116947978A (zh) * | 2022-04-19 | 2023-10-27 | 北京惠之衡生物科技有限公司 | 一种glp-1和gip受体共激动多肽衍生物及其盐和制剂 |
| EP4299052A1 (en) | 2022-06-30 | 2024-01-03 | Adocia | Solid compositions comprising a peptide or a protein and a permeation enhancer |
| JP2025521770A (ja) | 2022-06-30 | 2025-07-10 | イーライ リリー アンド カンパニー | チルゼパチド組成物及び使用 |
| EP4299071A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-01-03 | Adocia | Compositions comprising a peptide or a protein and an acylated amino acid |
| AU2023305663A1 (en) | 2022-07-13 | 2025-02-20 | Hangzhou Zhongmeihuadong Pharmaceutical Co., Ltd. | Glp-1/gip dual agonist, and preparation method therefor and use thereof |
| IL318334A (en) * | 2022-07-20 | 2025-03-01 | Viking Therapeutics Inc | Pharmaceutical formulations and methods for treating metabolic and liver disorders |
| CA3266547A1 (en) | 2022-08-29 | 2024-03-07 | Eli Lilly And Company | COMPOSITIONS FOR ORAL ADMINISTRATION |
| JP2025531200A (ja) | 2022-09-15 | 2025-09-19 | イーライ リリー アンド カンパニー | Ｇｉｐ及びｇｌｐ－１二重アゴニスト化合物 |
| WO2024061310A1 (zh) * | 2022-09-23 | 2024-03-28 | 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 | 一种glp-1和gip双受体激动剂药物组合物及其用途 |
| AU2023356357A1 (en) | 2022-10-05 | 2025-04-24 | Eli Lilly And Company | Peptides for incretin synthesis |
| JP2025535379A (ja) * | 2022-10-19 | 2025-10-24 | イーライ リリー アンド カンパニー | 保存されたｇｉｐ／ｇｌｐアゴニスト組成物 |
| CN117756913B (zh) * | 2022-11-07 | 2025-05-09 | 内蒙古博睿精创科技有限公司 | 一种新型长效多肽化合物、组合物及其应用 |
| CN120569401A (zh) | 2022-11-21 | 2025-08-29 | 伊莱利利公司 | 制备gip/glp1双重激动剂的方法 |
| WO2024128882A1 (ko) | 2022-12-16 | 2024-06-20 | 주식회사 펩트론 | Glp-1 수용체 작용제 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 서방형 미립구 및 이의 용도 |
| AU2023414623A1 (en) | 2022-12-29 | 2025-06-26 | Eli Lilly And Company | Processes and intermediates for preparing tirzepatide |
| KR20250141711A (ko) | 2022-12-30 | 2025-09-29 | 알지파마 에이에스 | 경구 투여되는 폴리펩타이드 치료제의 전신 생체이용률을 증가시키는 조성물 및 방법 |
| US20240270821A1 (en) | 2023-01-31 | 2024-08-15 | Eli Lilly And Company | Gip/glp1/gcg tri-receptor agonists and uses thereof |
| WO2024165571A2 (en) | 2023-02-06 | 2024-08-15 | E-Therapeutics Plc | Inhibitors of expression and/or function |
| AR132137A1 (es) * | 2023-03-15 | 2025-05-28 | Viking Therapeutics Inc | Composiciones farmacéuticas y métodos para el tratamiento de trastornos metabólicos y hepáticos |
| CN118684758A (zh) * | 2023-03-23 | 2024-09-24 | 上海民为生物技术有限公司 | 肠促胰岛素类似物及其应用 |
| CN121001735A (zh) | 2023-03-31 | 2025-11-21 | 伊莱利利公司 | 用于治疗t2d的替尔泊肽 |
| CN121002051A (zh) * | 2023-04-11 | 2025-11-21 | 上海多米瑞生物技术有限公司 | 肠促胰素类似物及其制备方法和应用 |
| CN121398835A (zh) * | 2023-05-21 | 2026-01-23 | 卡莫特治疗学股份有限公司 | 患有或未患有体重相关合并症的超重或肥胖成年人的治疗 |
| CN116832141B (zh) * | 2023-06-06 | 2024-02-09 | 诺博泰科(成都)生物科技有限公司 | 一种用于治疗糖尿病的glp-1、gip和gcg受体三激动多肽化合物 |
| CN121285571A (zh) | 2023-06-09 | 2026-01-06 | 太阳医药工业有限公司 | Glp-1/gip双重、glp-1/gcg双重和glp-1/gip/gcg三重受体激动剂 |
| JP2024180368A (ja) | 2023-06-15 | 2024-12-26 | ノヴォ ノルディスク アー／エス | シクロデキストリンを含む医薬製剤 |
| CN121443305A (zh) | 2023-06-30 | 2026-01-30 | 西兰制药公司 | 组合治疗 |
| CN116693652B (zh) * | 2023-08-02 | 2024-01-05 | 北京惠之衡生物科技有限公司 | 一种glp-1/gip受体双重激动剂衍生物及其制备方法和应用 |
| WO2025069009A1 (en) | 2023-09-29 | 2025-04-03 | Graviton Bioscience Bv | Rock2 inhibitors in the treatment of obesity |
| CN117646017A (zh) * | 2023-11-02 | 2024-03-05 | 中国人民解放军海军军医大学 | Gip/glp-1双激动剂多肽编码基因、及其重组乳酸菌和应用 |
| TW202521100A (zh) | 2023-11-17 | 2025-06-01 | 美商雅沛尼美德公司（德拉瓦州公司） | 使用ｇｌｐ－１受體促效劑及第二活性劑之組合治療睡眠呼吸中止之方法及組合物 |
| WO2025114501A1 (en) | 2023-11-30 | 2025-06-05 | Novo Nordisk A/S | Tri-agonists of the glp-1, gip, and amylin receptors |
| WO2025125576A2 (en) | 2023-12-15 | 2025-06-19 | E-Therapeutics Plc | Inhibitors of expression and/or function |
| CN120173084A (zh) * | 2023-12-20 | 2025-06-20 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种替尔泊肽的合成方法 |
| WO2025133348A1 (en) | 2023-12-22 | 2025-06-26 | E-Therapeutics Plc | Inhibitors of expression and/or function |
| EP4686757A1 (en) | 2024-07-31 | 2026-02-04 | e-therapeutics PLC | Inhibitors of expression and/or function |
| TW202535911A (zh) * | 2024-01-12 | 2025-09-16 | 大陸商杭州中美華東製藥有限公司 | 長效glp-1/gip雙激動劑的藥物組合物 |
| WO2025163674A1 (en) * | 2024-01-30 | 2025-08-07 | Msn Laboratories Private Limited, R&D Center | Process for the preparation of tirzepatide |
| WO2025185605A1 (en) * | 2024-03-05 | 2025-09-12 | Beijing Ql Biopharmaceutical Co., Ltd. | Polypeptide conjugates and methods of uses |
| WO2025191149A1 (en) | 2024-03-15 | 2025-09-18 | Krka, D.D., Novo Mesto | Pharmaceutical composition comprising dual gip and glp-1 receptor agonist |
| WO2025196502A1 (en) | 2024-03-20 | 2025-09-25 | North Carolina Agricultural & Technical State University | Choline kinase inhibitors as a therapeutic treatment for obesity |
| US20250352622A1 (en) | 2024-05-15 | 2025-11-20 | Rose Pharma Inc. | Glp-1 formulations and their uses |
| CN118440155B (zh) * | 2024-07-11 | 2024-11-22 | 中国药科大学 | 一种双激动多肽化合物及其医药用途 |
| US12434008B1 (en) | 2025-02-26 | 2025-10-07 | Genzyme Corporation | Lock ring for a medicament delivery device |
| US12420017B1 (en) | 2025-02-26 | 2025-09-23 | Genzyme Corporation | Damping device for a medicament delivery device |
| US12465697B1 (en) | 2025-02-26 | 2025-11-11 | Genzyme Corporation | Medicament delivery device |
| US12539367B1 (en) | 2025-02-26 | 2026-02-03 | Genzyme Corporation | Medicament delivery device |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012088379A2 (en) * | 2010-12-22 | 2012-06-28 | Marcadia Biotech, Inc. | Methods for treating metabolic disorders and obesity with gip and glp-1 receptor-active glucagon-based peptides |
| WO2013164483A1 (en) * | 2012-05-03 | 2013-11-07 | Zealand Pharma A/S | Gip-glp-1 dual agonist compounds and methods |
Family Cites Families (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050272652A1 (en) * | 1999-03-29 | 2005-12-08 | Gault Victor A | Peptide analogues of GIP for treatment of diabetes, insulin resistance and obesity |
| JP5410020B2 (ja) * | 2005-02-02 | 2014-02-05 | ノヴォ ノルディスク アー／エス | インスリン誘導体 |
| US20100317057A1 (en) * | 2007-12-28 | 2010-12-16 | Novo Nordisk A/S | Semi-recombinant preparation of glp-1 analogues |
| MX2011001030A (es) * | 2008-08-07 | 2011-04-26 | Ipsen Pharma Sas | Analogos de polipeptidos insulinotropicos dependientes de glucosa. |
| US8637647B2 (en) | 2008-09-12 | 2014-01-28 | Novo Nordisk A/S | Method of acylating a peptide or protein |
| CN101367873B (zh) * | 2008-10-08 | 2011-05-04 | 南开大学 | 一种改构的胰高血糖素样肽-1的类似物和修饰物及其应用 |
| EP2376097A4 (en) | 2008-12-19 | 2012-10-03 | Univ Indiana Res & Tech Corp | PEPTIDE PRODRUGS OF AMIDE-BASED GLUCAGON SUPERFAMILY |
| GB0917072D0 (en) * | 2009-09-29 | 2009-11-11 | Univ Ulster | Peptide analogues of glucagon for diabetes therapy |
| US8551946B2 (en) | 2010-01-27 | 2013-10-08 | Indiana University Research And Technology Corporation | Glucagon antagonist-GIP agonist conjugates and compositions for the treatment of metabolic disorders and obesity |
| AR080592A1 (es) * | 2010-03-26 | 2012-04-18 | Lilly Co Eli | Peptido con actividad para el gip-r y glp-1-r, formulacion famaceutica que lo comprende, su uso para preparar un medicamento util para el tratamiento de diabetes mellitus y para inducir la perdida de peso |
| KR101091041B1 (ko) * | 2010-07-29 | 2011-12-09 | 고려대학교 산학협력단 | 새로운 재조합 글루코스 의존성 인슐린분비 펩타이드(ｒｃＧＩＰ) 작용제 및 그 용도 |
| EP2654773B1 (en) | 2010-12-22 | 2018-10-03 | Indiana University Research and Technology Corporation | Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity |
| DK2694095T3 (en) | 2011-04-05 | 2018-05-28 | Longevity Biotech Inc | COMPOSITIONS COMPREHENSIVE GLUCAGON ANALOGS AND METHODS FOR PREPARING AND USING THE SAME |
| KR102002783B1 (ko) | 2011-06-10 | 2019-07-24 | 베이징 한미 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 | 포도당 의존성 인슐리노트로핀 폴리펩타이드 유사물질, 이의 약학적 조성물 및 응용 |
| US9260503B2 (en) | 2011-06-15 | 2016-02-16 | Novo Nordisk A/S | Multi-substituted insulins |
| CN104093735B (zh) | 2011-09-23 | 2018-07-06 | 诺沃—诺迪斯克有限公司 | 新的胰高血糖素类似物 |
| AP2014007797A0 (en) * | 2011-12-23 | 2014-07-31 | Boehringer Ingelheim Int | Glucagon analogues |
| EP2864351B1 (en) * | 2012-06-21 | 2016-08-10 | Indiana University Research and Technology Corporation | Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity |
| EP2908845A1 (en) | 2012-10-17 | 2015-08-26 | Novo Nordisk Health Care AG | Fatty acid acylated amino acids for growth hormone delivery |
| CA2894765A1 (en) | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Sanofi | Exendin-4 derivatives as dual glp1/gip or trigonal glp1/gip/glucagon agonists |
| MA38472B1 (fr) * | 2013-05-28 | 2018-09-28 | Takeda Pharmaceuticals Co | Composé peptidique |
-
2015
- 2015-01-09 JO JOP/2020/0119A patent/JOP20200119A1/ar unknown
- 2015-12-22 TW TW104143220A patent/TWI582109B/zh active
- 2015-12-22 JO JOP/2015/0334A patent/JO3575B1/ar active
- 2015-12-22 AR ARP150104252A patent/AR103242A1/es active IP Right Grant
-
2016
- 2016-01-05 RS RS20191110A patent/RS59146B1/sr unknown
- 2016-01-05 SI SI201630358T patent/SI3242887T1/sl unknown
- 2016-01-05 KR KR1020237004037A patent/KR20230023822A/ko not_active Ceased
- 2016-01-05 MA MA050422A patent/MA50422A/fr unknown
- 2016-01-05 EA EA202090392A patent/EA202090392A3/ru unknown
- 2016-01-05 IL IL281545A patent/IL281545B2/en unknown
- 2016-01-05 PE PE2017001142A patent/PE20170954A1/es unknown
- 2016-01-05 NZ NZ771043A patent/NZ771043A/en unknown
- 2016-01-05 US US14/987,791 patent/US9474780B2/en active Active
- 2016-01-05 KR KR1020197006498A patent/KR102330764B1/ko active Active
- 2016-01-05 SG SG11201705603YA patent/SG11201705603YA/en unknown
- 2016-01-05 HR HRP20191614 patent/HRP20191614T1/hr unknown
- 2016-01-05 CN CN201680005007.XA patent/CN107207576B/zh active Active
- 2016-01-05 TN TN2017000198A patent/TN2017000198A1/en unknown
- 2016-01-05 MY MYPI2017702464A patent/MY193616A/en unknown
- 2016-01-05 EA EA201791281A patent/EA031591B1/ru unknown
- 2016-01-05 MA MA41315A patent/MA41315B1/fr unknown
- 2016-01-05 KR KR1020177018584A patent/KR101957620B1/ko active Active
- 2016-01-05 DK DK16703620.1T patent/DK3242887T3/da active
- 2016-01-05 JP JP2016549352A patent/JP6219534B2/ja active Active
- 2016-01-05 ES ES16703620T patent/ES2747928T3/es active Active
- 2016-01-05 EP EP19188718.1A patent/EP3597662A1/en active Pending
- 2016-01-05 KR KR1020217037823A patent/KR20210145311A/ko not_active Ceased
- 2016-01-05 PT PT167036201T patent/PT3242887T/pt unknown
- 2016-01-05 NZ NZ771547A patent/NZ771547A/en unknown
- 2016-01-05 PH PH1/2017/501252A patent/PH12017501252B1/en unknown
- 2016-01-05 NZ NZ732000A patent/NZ732000A/en unknown
- 2016-01-05 MX MX2017008927A patent/MX382753B/es unknown
- 2016-01-05 PL PL16703620T patent/PL3242887T3/pl unknown
- 2016-01-05 MD MDE20170269 patent/MD3242887T2/ro unknown
- 2016-01-05 EP EP16703620.1A patent/EP3242887B1/en active Active
- 2016-01-05 AU AU2016205435A patent/AU2016205435B2/en active Active
- 2016-01-05 HU HUE16703620A patent/HUE045860T2/hu unknown
- 2016-01-05 CR CR20170310A patent/CR20170310A/es unknown
- 2016-01-05 ME MEP-2019-238A patent/ME03494B/me unknown
- 2016-01-05 CA CA2973352A patent/CA2973352C/en active Active
- 2016-01-05 LT LT16703620T patent/LT3242887T/lt unknown
- 2016-01-05 EA EA201892057A patent/EA035055B1/ru unknown
- 2016-01-05 KR KR1020247028815A patent/KR20240135032A/ko active Pending
- 2016-01-05 CN CN202011598548.2A patent/CN112608377B/zh active Active
- 2016-01-05 WO PCT/US2016/012124 patent/WO2016111971A1/en not_active Ceased
- 2016-01-05 IL IL320236A patent/IL320236A/en unknown
- 2016-05-01 UA UAA201707109A patent/UA118239C2/uk unknown
-
2017
- 2017-05-24 IL IL252499A patent/IL252499B/en active IP Right Grant
- 2017-06-01 SV SV2017005453A patent/SV2017005453A/es unknown
- 2017-06-08 ZA ZA2017/03930A patent/ZA201703930B/en unknown
- 2017-06-22 DO DO2017000153A patent/DOP2017000153A/es unknown
- 2017-07-03 CL CL2017001760A patent/CL2017001760A1/es unknown
- 2017-07-05 CO CONC2017/0006737A patent/CO2017006737A2/es unknown
- 2017-07-05 MX MX2021005835A patent/MX2021005835A/es unknown
- 2017-07-07 EC ECIEPI201743648A patent/ECSP17043648A/es unknown
- 2017-09-27 JP JP2017186721A patent/JP6545766B2/ja active Active
-
2019
- 2019-06-19 JP JP2019113638A patent/JP6754867B2/ja active Active
- 2019-09-12 CY CY20191100957T patent/CY1122028T1/el unknown
-
2020
- 2020-08-04 IL IL276492A patent/IL276492B/en active IP Right Grant
-
2023
- 2023-01-31 CY CY2023003C patent/CY2023003I2/el unknown
- 2023-01-31 LT LTPA2023504C patent/LTC3242887I2/lt unknown
- 2023-01-31 FR FR23C1006C patent/FR23C1006I2/fr active Active
- 2023-01-31 HU HUS2300006C patent/HUS2300006I1/hu unknown
- 2023-02-02 NO NO2023005C patent/NO2023005I1/no unknown
- 2023-02-02 FI FIC20230005C patent/FIC20230005I1/fi unknown
- 2023-02-03 LU LU00296C patent/LUC00296I2/fr unknown
- 2023-02-07 NL NL301217C patent/NL301217I2/nl unknown
-
2024
- 2024-02-15 AR ARP240100340A patent/AR131857A2/es unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012088379A2 (en) * | 2010-12-22 | 2012-06-28 | Marcadia Biotech, Inc. | Methods for treating metabolic disorders and obesity with gip and glp-1 receptor-active glucagon-based peptides |
| WO2013164483A1 (en) * | 2012-05-03 | 2013-11-07 | Zealand Pharma A/S | Gip-glp-1 dual agonist compounds and methods |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| GREEN B D, ET AL.: "STRUCTURALLY MODIFIED ANALOGUES OF GLUCAGON-LIKE PEPTIDE-1 (GLP-1) AND GLUCOSE-DEPENDENT INSULINOTROPIC POLYPEPTIDE (GIP) AS FUTURE ANTIDIABETIC AGENTS", CURRENT PHARMACEUTICAL DESIGN, BENTHAM SCIENCE PUBLISHERS, NL, vol. 10, no. 29, 1 January 2004 (2004-01-01), NL, pages 3651 - 3662, XP009068381, ISSN: 1381-6128, DOI: 10.2174/1381612043382774 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6754867B2 (ja) | Ｇｉｐおよびｇｌｐ−１コアゴニスト化合物 | |
| AU2016344433B2 (en) | Glucagon receptor agonists | |
| NZ748274B2 (en) | Gip and glp-1 co-agonist compounds | |
| HK1238253B (en) | Gip and glp-1 co-agonist compounds | |
| HK1238253A1 (en) | Gip and glp-1 co-agonist compounds | |
| BR112017010596B1 (pt) | Coagonistas de gip e glp-1, seus usos, e composição farmacêutica |