DE60316416T2

DE60316416T2 - Heterocyclische beta-aminoverbindungen als inhibitoren der dipeptidylpeptidase zur behandlung bzw. prävention von diabetes

Info

Publication number: DE60316416T2
Application number: DE60316416T
Authority: DE
Inventors: Linda L. Rahway BROCKUNIER; Joseph L. Rahway DUFFY; Dooseop Rahway KIM; Emma R. Rahway PARMEE; Ann E. Rahway WEBER
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2002-03-25
Filing date: 2003-03-21
Publication date: 2008-06-26
Anticipated expiration: 2023-03-22
Also published as: US20050107390A1; EP1490335A2; WO2003082817A3; CA2478389A1; WO2003082817A2; EP1490335B1; US7307164B2; EP1490335A4; AU2003225916A1; DE60316416D1; ATE373660T1; JP2005526811A

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Diabetes bezeichnet einen Erkrankungsprozess, der von mehreren ursächlichen Faktoren herrührt und sich durch erhöhte Plasmaglucosespiegel oder Hyperglykämie im nüchternen Zustand oder nach der Verabreichung von Glucose während eines oralen Glucosetoleranztests auszeichnet. Eine persistente oder nicht bekämpfte Hyperglykämie ist mit einer erhöhten und vorzeitigen Morbidität und Mortalität verbunden. Oft ist eine abnormale Glucosehomöostase sowohl direkt als auch indirekt mit Veränderungen des Fett-, Lipoprotein- und Apolipoproteinstoffwechsels und mit anderen metabolischen und hämodynamischen Erkrankungen verbunden. Daher besteht für Patienten mit Typ-2-Diabetes mellitus ein besonders großes Risiko für makrovaskuläre und mikrovaskuläre Komplikationen, einschließlich koronarer Herzerkrankung, Apoplexie, peripherer vaskulärer Erkrankung, Hypertonie, Nephropathie, Neuropathie und Retinopathie. Folglich ist die therapeutische Kontrolle der Glucosehomöostase, des Fettstoffwechsels und der Hypertonie für die klinische Handhabung und Behandlung von Diabetes mellitus von entscheidender Bedeutung.
Es existieren zwei allgemein anerkannte Formen von Diabetes. Beim Typ-1-Diabetes oder insulinabhängigen Diabetes mellitus (IDDM) produzieren die Patienten wenig oder kein Insulin, das Hormon, das die Glucoseverwertung steuert. Beim Typ-2-Diabetes oder nichtinsulinabhängigen Diabetes mellitus (NIDDM) besitzen die Patienten oft Plasmainsulinspiegel, die denen von nichtdiabetischen Subjekten entsprechen oder sogar höher sind; diese Patienten haben jedoch eine Resistenz gegenüber der insulinstimulierenden Wirkung auf den Glucose- und Fettstoffwechsel in den großen insulinempfindlichen Geweben, welche Muskel-, Leber- und Fettgewebe sind, entwickelt, und die Plasmainsulinspiegel sind, obwohl erhöht, nicht ausreichend, um die ausgeprägte Insulinresistenz zu überwinden.
Die Insulinresistenz ist nicht in erster Linie die Folge einer verringerten Anzahl von Insulinrezeptoren, sondern ist die Folge eines Post-Insulinrezeptorbindungsdefekts, der noch nicht aufgeklärt ist. Diese Resistenz gegenüber einem Ansprechen auf Insulin führt zu einer ungenügenden Insulinaktivierung der Glucoseaufnahme, -oxidation und -speicherung im Muskel und zu einer unzureichenden Insulinhemmung der Lipolyse im Fettgewebe und der Glucoseerzeugung und -sekretion in der Leber.
Die zur Verfügung stehenden Behandlungen für Typ-2-Diabetes, die sich über viele Jahre hinweg nicht wesentlich geändert haben, sind mit bekannten Einschränkungen behaftet. Zwar verbessern körperliche Bewegung und die Senkung der Kalorieneinnahme bei der Nahrungsaufnahme den diabetischen Zustand dramatisch, jedoch ist die Compliance bei dieser Behandlung aufgrund von fest verwurzelten sitzenden Lebensweisen und übermäßigem Nahrungsmittelverzehr, insbesondere von sehr fettreicher Nahrung, die große Mengen an gesättigtem Fett enthält, sehr gering. Die Erhöhung des Plasmainsulinspiegels durch Verabreichung von Sulfonylharnstoffen (z. B. Tolbutamid und Glipizid) oder Meglitinid, welche die pankreatischen β-Zellen dazu anregen, mehr Insulin auszuscheiden, und/oder die Injektion von Insulin, nachdem Sulfonylharnstoffe oder Meglitinid unwirksam geworden sind, kann zu Insulinkonzentrationen (ihren, die hoch genug sind, um die sehr insulinresistenten Gewebe zu stimulieren. Die Verabreichung von Insulin oder Insulinsekretagoga (Sulfonylharnstoffe oder Meglitinid) kann jedoch zu gefährlich niedrigen Plasmaglucosespiegeln führen, und aufgrund der noch höheren Plasmainsulinspiegel kann eine Steigerung der Insulinresistenz auftreten. Die Biguanide erhöhen die Insulinempfindlichkeit, was zu einer gewissen Korrektur von Hyperglykämie führt. Die beiden Biguanide Phenformin und Metformin können jedoch Lactatazidose und Übelkeit/Diarrhö hervorrufen. Metformin hat weniger Nebenwirkungen als Phenformin und wird oft zur Behandlung von Typ-2-Diabetes verschrieben.
Die Glitazone (d. h. 5-Benzylthiazolidin-2,4-dione) sind eine vor kurzem beschriebene Klasse von Verbindungen mit einem Potential zur Linderung vieler Symptome von Typ-2-Diabetes. Diese Mittel steigern die Insulinempfindlichkeit im Muskel-, Leber- und Fettgewebe bei mehreren Typ-2-Diabetes-Tiermodellen deutlich, was zu einer teilweisen oder vollständigen Korrektur der erhöhten Glucoseplasmaspiegel führt, ohne dass Hypoglykämie auftritt. Die Glitazone, die derzeit auf dem Markt sind, sind Agonisten des peroxisom-proliferator-aktivierten Rezeptors (PPAR), hauptsächlich der PPAR-gamma-Unterart. Man nimmt an, dass ein PPAR-gamma-Agonismus für die bei den Glitazonen beobachtete verbesserte Insulinempfindlichkeit verantwortlich ist. Neuere PPAR-Agonisten, die für die Behandlung von Typ-II-Diabetes getestet werden, sind Agonisten der alpha-, gamma- oder delta-Unterart oder einer Kombination davon, und in vielen Fällen sind sie von den Glitazonen chemisch verschieden (d. h. sie sind keine Thiazolidindione). Bei einigen Glitazonen, wie z. B. bei Troglitazon, traten schwere Nebenwirkungen (z. B. Lebertoxizität) auf.
Weitere Verfahren zur Behandlung von Diabetes werden noch untersucht. Neue biochemische Wege, die kürzlich vorgestellt wurden oder noch in der Entwicklung stehen, sind u. a. die Behandlung mit alpha-Glucosidase-Inhibitoren (z. B. Acarbose) und Proteintyrosinphosphatase-1B(PTP-1B)-Inhibitoren.
Verbindungen, die Inhibitoren des Enzyms Dipeptidylpeptidase-IV ("DP-IV" oder "DPP-IV") sind, werden ebenfalls als Arzneistoffe, die bei der Behandlung von Diabetes und speziell Typ-2-Diabetes geeignet sein können, untersucht (siehe zum Beispiel WO 97/40832 , WO 98/19998 , US-Patent Nr. 5939560 , Bioorg. Med. Chem. Lett., 6(10), 1163–1166 (1996), und Bioorg. Med. Chem. Lett., 6(22), 2745–2748 (1996). Die Eignung von DP-IV-Inhibitoren bei der Behandlung von Typ-2-Diabetes beruht auf der Tatsache, dass DP-IV in vivo leicht Glucagon-like Peptid-1 (GLP-1) und Gastric Inhibitory Peptid (GIP) deaktiviert. GLP-1 und GIP sind Inkretine und werden erzeugt, wenn Nahrung konsumiert wird. Die Inkretine stimulieren die Insulinproduktion. Die Inhibierung von DP-IV führt zu einer verringerten Deaktivierung der Inkretine, und dies wiederum führt zu einer erhöhten Wirksamkeit der Inkretine bei der Stimulierung der Insulinproduktion durch die Bauchspeicheldrüse. Die DP-IV-Inhibierung führt daher zu einem erhöhten Seruminsulinspiegel. Da die Inkretine vom Körper nur erzeugt werden, wenn Nahrung konsumiert wird, ist vorteilhafterweise nicht zu erwarten, dass die DP-IV-Inhibierung den Insulinspiegel zu unangemessenen Zeiten, wie z. B. zwischen den Mahlzeiten, steigen lässt, was zu einem übermäßig niedrigen Blutzucker führen kann (Hypoglykämie). Es wird daher angenommen, dass die Inhibierung von DP-IV Insulin erhöhen wird, ohne das Risiko von Hypoglykämie zu erhöhen, welches eine mit der Verwendung von Insulinsekretagoga verbundene gefährliche Nebenwirkung ist.
DP-IV-Inhibitoren haben auch andere therapeutische Nutzen, wie es hierin erörtert wird. DP-IV-Inhibitoren wurden bislang nicht ausgiebig untersucht, vor allem nicht auf ihre Eignungen anders als für Diabetes. Neue Verbindungen sind erforderlich, damit verbesserte DP-IV-Inhibitoren zur Behandlung von Diabetes und möglicherweise anderen Erkrankungen und Zuständen gefunden werden können.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, die Inhibitoren des Dipeptidylpeptidase-IV-Enzyms ("DP-IV-Inhibitoren") sind und die sich zur Behandlung oder Prävention von Erkrankungen, bei denen das Dipeptidylpeptidase-IV-Enzym beteiligt ist, wie z. B. Diabetes und insbesondere Typ-2-Diabetes, eignen. Die Erfindung betrifft auch pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen enthalten, und die Verwendung dieser Verbindungen und Zusammensetzungen bei der Prävention oder Behandlung solcher Erkrankungen, bei denen das Dipeptidylpeptidase-IV-Enzym beteiligt ist.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel I:
wobei:
Ar Phenyl ist, das unsubstituiert oder mit 1–5 R³ substituiert ist, wobei R³ unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Halogen,
(2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und unsubstituiert oder mit 1–5 Halogenen substituiert ist,
(3) C_1-6-Alkoxy, das linear oder verzweigt ist und unsubstituiert oder mit 1–5 Halogenen substituiert ist,
(4) CN und
(5) Hydroxy,

(1) N und
(2) CR²,

¹

²

(1) Wasserstoff,
(2) CN,
(3) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Halogenen oder Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, CN, OH, R⁴, OR⁴, NHSO₂R⁴, SO₂R⁴, CO₂H und CO₂C_1-6-Alkyl, wobei das CO₂C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist,
(4) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, CN, OH, R⁴, OR⁴, NHSO₂R⁴, SO₂R⁴, CO₂H und CO₂C_1-6-Alkyl, wobei das CO₂C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist, und
(5) einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocyclus, der gesättigt oder ungesättigt sein kann, umfassend 1–4 Heteroatome, unabhängig ausgewählt aus N, S und O, wobei der Heterocyclus unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig unabhängig ausgewählt aus Oxo, OH, Halogen, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls substituiert sind mit 1–5 Halogenen,

⁴

_1-6

₂

_1-6

₂

_1-6

⁵

⁶

(1) Wasserstoff,
(2) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit einem oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus: (a) Halogen, (b) Hydroxy, (c) Phenyl, wobei das Phenyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (d) Naphthyl, wobei das Naphthyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (e) CO₂H, (f) CO₂C_1-6-Alkyl, (g) CONR⁷R⁸, wobei R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus Wasserstoff, Tetrazolyl, Phenyl, C_3-6-Cycloalkyl und C_1-6-Alkyl, wobei C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist und gegebenenfalls substituiert ist mit 1–6 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus 0–5 Halogenen und 0–1 Phenyl, wobei das Phenyl oder C_3-6-Cycloalkyl, das R⁷ oder R⁸ ist, oder der optionale Phenylsubstituent am C_1-6-Alkyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und OC_1-6-Alkyl, wobei das C_1-6-Alkyl und OC_1-6-Alkyl linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, oder wobei R⁷ und R⁸ gegebenenfalls verbunden sind, um einen Ring zu bilden, ausgewählt aus Pyrrolidin, Piperidin oder Morpholin,
(3) CN,
(4) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,
(5) Naphthyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,
(6) CO₂H,
(7) CO₂C_1-6-Alkyl,
(8) CONR⁷R⁸ und
(9) C_3-6-Cycloalkyl, das gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,

⁵

⁶

Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel Ia:
wobei X, Ar, R¹, R⁵ und R⁶ wie hierin definiert sind,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein einzelnes Diastereomer davon.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel Ib:
wobei Ar, R¹, R⁵ und R⁶ wie hierin definiert sind,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein einzelnes Diastereomer davon.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel Ic:
wobei Ar, R¹ und R⁵ wie hierin definiert sind,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon oder ein einzelnes Diastereomer davon.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel Id:
wobei Ar, R¹ und R⁶ wie hierin definiert sind,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon oder ein einzelnes Diastereomer davon.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel Ie:
wobei Ar, R¹, R², R⁵ und R⁶ wie hierin definiert sind,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein einzelnes Diastereomer davon.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst Verbindungen der Formel If:
wobei Ar, R² und R⁵ wie hierin definiert sind,
und pharmazeutisch annehmbare Salze und einzelne Diastereomere davon.
Bei der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass Ar Phenyl ist, welches unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Fluor,
(2) Chlor und
(3) CF₃.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es besonders bevorzugt, dass Ar ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Phenyl,
(2) 2-Fluorphenyl,
(3) 3,4-Difluorphenyl,
(4) 2,5-Difluorphenyl,
(5) 2,4,5-Trifluorphenyl und
(6) 2-Fluor-4-(trifluormethyl)phenyl.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass R¹ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Wasserstoff und
(2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder mit Phenyl oder 1–5 Fluor substituiert ist.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es besonders bevorzugt, dass R¹ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Wasserstoff,
(2) Methyl,
(3) Ethyl,
(4) CF₃,
(5) CH₂CF₃,
(6) CF₂CF₃ und
(7) Benzyl.

(1) Wasserstoff,
(2) Methyl,
(3) Ethyl,
(4) CF₃ und
(5) CH₂CF₃.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es ganz besonders bevorzugt, dass R¹ Wasserstoff oder CF₃ ist.
Bei der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass R² ausgewählt ist aus:

(1) Wasserstoff,
(2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder mit 1–5 Fluor substituiert ist, und
(3) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Fluor, OCH₃ und OCF₃.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es besonders bevorzugt, dass R² ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Wasserstoff,
(2) Methyl,
(3) Ethyl,
(4) CF₃,
(5) CH₂CF₃,
(6) CF₂CF₃,
(7) Phenyl,
(8) (4-Methoxy)phenyl,
(9) (4-Trifluormethoxy)phenyl,
(10) 4-Fluorphenyl und
(11) 3,4-Difluorphenyl.

Bei der vorliegenden Erfindung ist es ganz besonders bevorzugt, dass R² CF₃ oder CF₂CF₃ ist.
Bei der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass R⁵ und R⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Wasserstoff,
(2) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit einem oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus: (a) Halogen, (b) Hydroxy, (c) Phenyl, wobei das Phenyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (d) CO₂H, (e) CO₂C_1-6-Alkyl, (f) CONR⁷R⁸, wobei R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus Wasserstoff, Tetrazolyl, Phenyl, C_3-6-Cycloalkyl und C_1-6-Alkyl, wobei C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist und gegebenenfalls substituiert ist mit 1–6 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus 0–5 Halogenen und 0–1 Phenyl, wobei das Phenyl oder C_3-6-Cycloalkyl_, das R⁷ ist, oder der optionale Phenylsubstituent am C_1-6-Alkyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, oder wobei R⁷ und R⁸ gegebenenfalls verbunden sind, um einen Ring zu bilden, ausgewählt aus Pyrrolidin, Piperidin oder Morpholin,
(3) CN,
(4) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, OC_1-6-Alkyl, Hydroxy und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und OC_1-6-Alkyl linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,
(5) CO₂H,
(6) CO₂C_1-6-Alkyl,
(7) CONR⁷R⁸ und
(8) C_3-6-Cycloalkyl, das gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,

⁵

⁶

Bei der vorliegenden Erfindung ist es besonders bevorzugt, dass R⁵ und R⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:

(1) Wasserstoff,
(2) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit einem oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus: (a) Halogen, (b) Phenyl, wobei das Phenyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind,
(3) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, OC_1-6-Alkyl und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und OC_1-6-Alkyl linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1-5 Halogenen substituiert sind, und
(4) CO₂C_1-6-Alkyl,

⁵

⁶

(1) Wasserstoff,
(2) CH₃,
(3) CH₂CH₃,
(4) CH(CH₃)₂,
(5) COOCH₃,
(6) CH₂-Phenyl,
(7) 3-Fluorphenyl und
(8) 2-(Trifluormethyl)phenyl,

⁵

⁶

Bei der vorliegenden Erfindung ist es ganz besonders bevorzugt, dass R⁵ und R⁶ unabhängig Wasserstoff oder CH₃ sind, mit der Maßgabe, dass einer der Reste R⁵ und R⁶ anders als Wasserstoff ist.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können ein oder mehrere Asymmetriezentren besitzen und daher als Racemate und racemische Mischungen, einzelne Enantiomere, Diastereomerenmischungen und einzelne Diastereomere auftreten. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung haben 1 Asymmetriezentrum am beta-Kohlenstoffatom. Weitere Asymmetriezentren können vorhanden sein, in Abhängigkeit von der Beschaffenheit der verschiedenen Substituenten am Molekül. Jedes solche Asymmetriezentrum wird unabhängig zwei optische Isomere erzeugen, und alle möglichen optischen Isomere und Diastereomere im Gemisch und als reine oder teilgereinigte Verbindungen sollen vom Umfang dieser Erfindung umfasst sein. Die vorliegende Erfindung soll alle solchen isomeren Formen dieser Verbindungen umfassen.
Einige der hierin beschriebenen Verbindungen enthalten olefinische Doppelbindungen und sollen, sofern nichts anderes angegeben ist, sowohl E- als auch Z-Strukturisomere umfassen.
Einige der hierin beschriebenen Verbindungen können als Tautomere existieren, die verschiedene Wasserstoffverknüpfungspunkte, begleitet von einer oder mehreren Doppelbindungsverschiebungen, besitzen. Zum Beispiel sind ein Keton und dessen Enol-Form Keto-Enol-Tautomere. Die einzelnen Tautomere sowie Mischungen davon sind von den Verbindungen der vorliegenden Erfindung umfasst.
Formel I zeigt die Struktur der Klasse von Verbindungen ohne bevorzugte Stereochemie. Formel Ia zeigt die bevorzugte Stereochemie am Kohlenstoffatom, das an die Amingruppe der beta-Aminosäure, aus der diese Verbindungen erzeugt werden, gebunden ist.
Die unabhängigen Synthesen dieser Diastereomere oder ihre chromatographischen Trennungen können wie im Stand der Technik bekannt durch geeignete Modifizierung der hierin offenbarten Verfahren durchgeführt werden. Ihre absolute Stereochemie kann durch Röntgenkristallographie von kristallinen Produkten oder kristallinen Zwischenprodukten, die, falls nötig, mit einem Reagenz, das ein Asymmetriezentrum bekannter absoluter Konfiguration enthält, derivatisiert sind, ermittelt werden.
Falls erwünscht, können racemische Mischungen der Verbindungen so getrennt werden, dass die einzelnen Enantiomere isoliert werden. Die Trennung kann durch im Stand der Technik gut bekannte Verfahren durchgeführt werden, wie z. B. durch Kupplung einer racemischen Mischung aus Verbindungen an eine enantiomerenreine Verbindung, um eine diastereomere Mischung zu bilden, gefolgt von der Auftrennung der einzelnen Diastereomere durch Standardverfahren, wie z. B. durch fraktionierte Kristallisation oder Chromatographie. Die Kupplungsreaktion ist oft die Bildung von Salzen unter Verwendung einer enantiomerenreinen Säure oder Base. Die diastereomeren Derivate können dann durch Abspaltung des zugegebenen chiralen Restes in die reinen Enantiomere umgewandelt werden. Die racemische Mischung der Verbindungen kann auch direkt durch chromatographische Verfahren unter Verwendung chiraler stationärer Phasen aufgetrennt werden, wobei diese Verfahren im Stand der Technik gut bekannt sind.
Alternativ kann jedes beliebige Enantiomer einer Verbindung durch stereoselektive Synthese unter Verwendung optisch reiner Ausgangsmaterialien oder Reagenzien bekannter Konfiguration durch im Stand der Technik gut bekannte Verfahren erhalten werden.
Die Bezeichnung "pharmazeutisch annehmbares Salz" bedeutet Salze, die aus pharmazeutisch annehmbaren nichttoxischen Basen oder Säuren, einschließlich anorganischer oder organischer Basen und anorganischer oder organischer Säuren, hergestellt worden sind. Von anorganischen Basen hergeleitete Salze sind u. a. Aluminium-, Ammonium-, Calcium-, Kupfer-, Eisen(II)-, Eisen(III)-, Lithium-, Magnesium-, Mangan(III)-, Mangan(II)-, Kalium-, Natrium-, Zinksalze und dergleichen. Besonders bevorzugt sind die Ammonium-, Calcium-, Magnesium-, Kalium- und Natriumsalze. Salze in fester Form können in mehr als einer Kristallstruktur existieren und können auch in Form von Hydraten vorliegen. Von pharmazeutisch annehmbaren organischen nichttoxischen Basen hergeleitete Salze sind u. a. Salze von primären, sekundären und tertiären Aminen, substituierten Aminen, einschließlich natürlich vorkommender substituierter Amine, cyclischen Aminen und basischen Ionenaustauschharzen, wie z. B. Arginin, Betain, Koffein, Cholin, N,N'-Dibenzylethylendiamin, Diethylamin, 2-Diethylaminoethanol, 2-Dimethylaminoethanol, Ethanolamin, Ethylendiamin, N-Ethylmorpholin, N-Ethylpiperidin, Glucamin, Glucosamin, Histidin, Hydrabamin, Isopropylamin, Lysin, Methylglucamin, Morpholin, Piperazin, Piperidin, Polyaminharze, Procain, Purine, Theobromin, Triethylamin, Trimethylamin, Tripropylamin, Tromethamin und dergleichen.
Wenn die Verbindung der vorliegenden Erfindung basisch ist, können Salze aus pharmazeutisch annehmbaren nichttoxischen Säuren, einschließlich anorganischer und organischer Säuren, hergestellt werden. Solche Säuren sind u. a. Essig-, Benzolsulfon-, Benzoe-, Camphersulfon-, Citronen-, Ethansulfon-, Fumar-, Glucon-, Glutamin-, Bromwasserstoff-, Salz-, Isethion-, Milch-, Malein-, Äpfel-, Mandel-, Methansulfon-, Schleim-, Salpeter-, Pamoa-, Pantothen-, Phosphor-, Succin-, Schwefel-, Wein-, p-Toluolsulfonsäure und dergleichen. Besonders bevorzugt sind Citronen-, Bromwasserstoff-, Salz-, Malein-, Phosphor-, Schwefel-, Fumar- und Weinsäure.
Man wird verstehen, dass, so wie hier verwendet, Verweise auf die Verbindungen der Formel I auch die pharmazeutisch annehmbaren Salze umfassen sollen.
Wie die Fachleute wissen, sollen Halo oder Halogen, wie hierin verwendet, Fluor, Chlor, Brom und Iod bedeuten. Ähnlich ist C_1-6, wie in C_1-6-Alkyl, derart definiert, dass damit die Gruppe gekennzeichnet wird, die 1, 2, 3, 4, 5 oder 6 Kohlenstoffe in einer linearen oder verzweigten Anordnung besitzt, so dass C_1-6-Alkyl speziell Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, Isobutyl, tert.-butyl, Pentyl und Hexyl umfasst. Ähnlich ist C₀, wie in C₀-Alkyl, derart definiert, dass damit die Gegenwart einer direkten kovalenten Bindung angezeigt wird. Eine Gruppe, die als unabhängig mit Substituenten substituiert bezeichnet wird, kann unabhängig mit mehreren solchen Substituenten substituiert sein. Die Bezeichnung "Heterocyclus", wie sie hierin verwendet wird, soll 5- oder 6-gliedrige Ringsysteme umfassen, die in der folgenden Auflistung genannt sind: Benzimidazolyl, Benzodioxanyl, Benzofuranyl, Benzopyrazolyl, Benzothiadiazolyl, Benzotriazolyl, Benzothiophenyl, Benzoxadiazolyl, Benzoxazolyl, Carbazolyl, Carbolinyl, Chromanyl, Cinnolinyl, Furanyl, Imidazolyl, Indolinyl, Indolyl, Indolazinyl, Indazolyl, Isobenzofuranyl, Isoindolyl, Isochinolyl, Isothiazolyl, Isoxazolyl, Naphthyridinyl, Oxadiazolyl, Oxazolyl, Pyrazinyl, Pyrazolyl, Pyridopyridinyl, Pyridazinyl, Pyridyl, Pyrimidyl, Pyrrolyl, Chinazolinyl, Chinolinyl, Chinoxalinyl, Tetrazolyl, Thiadiazolyl, Thiazolidinyl, Thiazolyl, Thienyl, Triazolyl, Azetidinyl, 1,4-Dioxanyl, Hexahydroazepinyl, Piperazinyl, Piperidinyl, Pyrrolidinyl, Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Dihydrobenzimidazolyl, Dihydrobenzofuranyl, Dihydrobenzothiophenyl, Dihydrobenzoxazolyl, Dihydrofuranyl, Dihydroimidazolyl, Dihydroindolyl, Dihydroisooxazolyl, Dihydroisothiazolyl, Dihydrooxadiazolyl, Dihydrooxazolyl, Dihydropyrazinyl, Dihydropyrazolyl, Dihydropyridinyl, Dihydropyrimidinyl, Dihydropyrrolyl, Dihydrochinolinyl, Dihydrotetrazolyl, Dihydrothiadiazolyl, Dihydrothiazolyl, Dihydrothienyl, Dihydrotriazolyl, Dihydroazetidinyl, Methylendioxybenzoyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydroimidazolyl, Tetrahydroisochinolinyl und Tetrahydrothienyl.
Die Erfindung veranschaulichend ist die Verwendung der in den Beispielen und hierin offenbarten Verbindungen.
Spezielle Verbindungen innerhalb der vorliegenden Erfindung sind u. a. eine Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus den in den folgenden Beispielen offenbarten Verbindungen und pharmazeutisch annehmbaren Salzen davon und einzelnen Diastereomeren davon.
Die vorliegenden Verbindungen eignen sich bei einem Verfahren zur Inhibierung des Dipeptidylpeptidase-IV-Enzyms bei einem Patienten, wie z. B. einem Säuger, der eine solche Inhibierung benötigt, umfassend die Verabreichung einer wirksamen Menge der Verbindung. Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung der hierin offenbarten Verbindungen als Inhibitoren der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzym-Aktivität.
Zusätzlich zu Primaten, wie z. B. Menschen, kann eine Reihe von anderen Säugern gemäß dem Verfahren der vorliegenden Erfindung behandelt werden. Zum Beispiel können Säuger, einschließlich, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Kühe, Schafe, Ziegen, Pferde, Hunde, Katzen, Meerschweinchen, Ratten oder andere Rinder-, Schaf-, Pferde-, Hunde-, Katzen-, Nager- oder Mausearten, behandelt werden. Das Verfahren kann jedoch auch bei anderen Spezies angewandt werden, wie z. B. bei Vogelarten (z. B. Hühnern).
Die vorliegende Erfindung betrifft ferner ein Verfahren zur Herstellung eines Medikaments zur Inhibierung von Dipeptidylpeptidase-IV-Enzym-Aktivität bei Menschen und Tieren, umfassend die Kombination einer Verbindung der vorliegenden Erfindung mit einem pharmazeutischen Träger oder Verdünnungsmittel.
Das bei den vorliegenden Verfahren behandelte Subjekt ist im Allgemeinen ein Säuger, vorzugsweise ein Mensch, der männlich oder weiblich ist, bei dem eine Inhibierung der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzymaktivität erwünscht ist. Die Bezeichnung "therapeutisch wirksame Menge" bedeutet die Menge der betreffenden Verbindung, die eine biologische oder medizinische Reaktion eines Gewebes, Systems, Tieres oder Menschen hervorruft, die von dem Forscher, Tierarzt, Arzt oder einem anderen Kliniker gewünscht wird. So wie hierin verwendet, bedeutet die Bezeichnung "Behandlung" sowohl die Behandlung als auch die Prävention oder prophylaktische Therapie der erwähnten Zustände.
Die Bezeichnung "Zusammensetzung", wie sie hier verwendet wird, soll ein Produkt umfassen, das die angegebenen Wirkstoffe in den angegebenen Mengen enthält, sowie ein beliebiges Produkt, das direkt oder indirekt aus der Kombination der angegebenen Bestandteile in den angegebenen Mengen resultiert. Eine solche Bezeichnung in Bezug auf eine pharmazeutische Zusammensetzung soll ein Produkt umfassen, das den/die Wirkstoff(e) und den/die inerten Bestandteil(e), der/die den Träger bildet/bilden, sowie jedes beliebige Produkt, das direkt oder indirekt aus der Kombination, Komplexierung oder Aggregation von beliebigen zwei oder mehreren der Bestandteile oder aus der Dissoziation von einem oder mehreren der Bestandteile oder aus anderen Arten von Reaktionen oder Wechselwirkungen von einem oder mehreren der Bestandteile entsteht. Demgemäß umfassen die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung jede beliebige Zusammensetzung, die durch Vermischen einer Verbindung der vorliegenden Erfindung und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägers erhalten wird. Mit "pharmazeutisch annehmbar" ist gemeint, dass der Träger, das Verdünnungsmittel oder der Hilfsstoff mit den anderen Bestandteilen der Formulierung verträglich sein muss und für dessen Empfänger nicht schädlich sein darf.
Die Bezeichnungen "Verabreichung von" und/oder "Verabreichen einer" Verbindung sollten so aufgefasst werden, dass sie das Bereitstellen einer Verbindung der Erfindung einem Individuum, das eine Behandlung benötigt, bedeuten.
Der Nutzen der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung als Inhibitoren der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzymaktivität kann durch im Stand der Technik bekannte Verfahren gezeigt werden. Inhibierungskonstanten werden wie folgt bestimmt. Ein kontinuierlicher fluorimetrischer Test wird mit dem Substrat Gly-Pro-AMC eingesetzt, welches durch DP-IV gespalten wird, um die fluoreszierende AMC-Abgangsgruppe freizusetzen. Die kinetischen Parameter, die diese Reaktion beschreiben, sind wie folgt: K_m = 50 μM; k_kat = 75 s^–1; k_kat/K_m = 1,5 × 10⁶ M^–1s^–1. Eine typische Reaktion enthält etwa 50 pM Enzym, 50 μM Gly-Pro-AMC und Puffer (100 mM HEPES, pH 7,5, 0,1 mg/ml BSA) in einem Gesamtreaktionsvolumen von 100 μl. Die Freisetzung von AMC wird kontinuierlich in einem Plattenfluorometer mit 96 Vertiefungen unter Verwendung einer Anregungswellenlänge von 360 nm und einer Emissionswellenlänge von 460 nm beobachtet. Unter diesen Bedingungen werden etwa 0,8 μM AMC in 30 Minuten bei 25°C erzeugt. Das bei diesen Untersuchungen verwendete Enzym war lösliches (die Transmembrandomäne und die zytoplasmische Verlängerung ausgenommen) menschliches Protein, das in einem Baculovirusexpressionssystem (Bac-To-Bac, Gibco BRL) erzeugt wurde. Die kinetischen Konstanten für die Hydrolyse von Gly-Pro-AMC und GLP-1 stimmten mit den Literaturwerten für das native Enzym überein. Zur Messung der Dissoziationskonstanten für Verbindungen wurden Lösungen des Inhibitors in DMSO zu Reaktionen, die Enzym und Substrat enthielten, zugegeben (die letztendliche DMSO-Konzentration beträgt 1%). Alle Versuche wurden bei Raumtemperatur unter Verwendung der oben beschriebenen Standard-Reaktionsbedingungen durchgeführt. Zur Ermittlung der Dissoziationskonstanten (K_i) wurden die Reaktionsgeschwindigkeiten durch nichtlineare Regression an die Michaelis-Menton- Gleichung für kompetitive Inhibierung angepasst. Die bei der Reproduktion der Dissoziationskonstanten erhaltenen Fehler sind typischerweise weniger als zweifach.
Speziell hatten die Verbindungen der folgenden Beispiele eine Aktivität bei der Inhibierung des Dipeptidylpeptidase-IV-Enzyms bei den oben genannten Tests von im Allgemeinen einem IC₅₀-Wert von weniger als etwa 1 μM. Ein solches Ergebnis ist ein Beweis für die intrinsische Aktivität der Verbindungen bei der Verwendung als Inhibitoren der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzymaktivität.
Das Dipeptidylpeptidase-IV-Enzym (DP-IV) ist ein Zelloberflächenprotein, das mit vielerlei biologischen Funktionen in Zusammenhang gebracht wurde. Es hat eine breite Gewebeverteilung (Darm, Niere, Leber, Bauchspeicheldrüse, Plazenta, Thymus, Milz, Epithelzellen, Gefäßendothel, Lymph- und myeloische Zellen, Serum) und ausgeprägte Gewebe- und Zelltypexpressionsgrade. DP-IV ist identisch mit dem T-Zellen-Aktivierungsmarker CD26, und es kann eine Reihe von immunregulatorischen, endokrinen und neurologischen Peptiden in vitro spalten. Dies legte eine mögliche Rolle für diese Peptidase bei einer Reihe von Erkrankungsprozessen bei Menschen oder anderen Spezies nahe.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung eignen sich zur Behandlung, Prävention, Linderung, Steuerung oder Verringerung des Risikos von einem oder mehreren der folgenden Zustände oder Erkrankungen: (1) Hyperglykämie, (2) niedrige Glukosetoleranz, (3) Insulinresistenz, (4) Fettleibigkeit, (5) Lipidstörungen, (6) Dyslipidämie, (7) Hyperlipidämie, (8) Hypertriglyceridämie, (9) Hypercholesterinämie, (10) niedrige HDL-Spiegeln, (11) hohe LDL-Spiegeln, (12) Atherosklerose und deren Folgekrankheiten, (13) vaskuläre Restenose, (14) Colon irritabile, (15) entzündliche Darmerkrankung, einschließlich Morbus Crohn und Colitis ulcerosa, (16) andere Entzündungszustände, (17) Pankreatitis, (18) abdominale Fettleibigkeit, (19) neurodegenerative Erkrankung, (20) Retinopathie, (21) Nephropathie, (22) Neuropathie, (23) Syndrom X, (24) Eierstock-Hyperandrogenismus (polyzystisches Ovarialsyndrom), (25) Typ-2-Diabetes, (26) Wachstumshormonmangel, (27) Neutropenie, (28) neuronale Störungen, (29) Tumormetastase, (30) benigne Prostatahypertrophie, (32) Gingivitis, (33) Hypertonie, (34) Osteoporose und andere Zuständen, die durch die Inhibierung von DP-IV behandelt oder verhindert werden können.
Die vorliegenden Verbindungen eignen sich ferner bei einem Verfahren zur Prävention, Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos der hierin angegebenen Erkrankungen, Störungen und Zustände.
Typ-II-Diabetes und verwandte Störungen:
Es ist gut bekannt, dass die Inkretine GLP-1 und GIP rasch in vivo durch DP-IV deaktiviert werden. Untersuchungen an DP-IV^(-/-)-defizienten Mäusen und erste klinische Tests zeigen, dass die DP-IV-Inhibierung die Gleichgewichtskonzentrationen von GLP-1 und GIP erhöht, was zu einer verbesserten Glucosetoleranz führt. Durch die Analogie zu GLP-1 und GIP ist es wahrscheinlich, dass andere Peptide der Glucagonfamilie, die bei der Glucoseregulierung beteiligt sind, ebenfalls durch DP-IV deaktiviert werden (z.B. PACAP). Die Deaktivierung dieser Peptide durch DP-IV kann auch bei der Glucosehomöostase eine Rolle spielen. Die DP-IV-Inhibitoren der vorliegenden Erfindung können daher bei der Behandlung, Prävention, Linderung, Steuerung oder Verringerung des Risikos von Typ-2-Diabetes und bei der Behandlung, Prävention, Linderung, Steuerung oder Verringerung des Risikos der zahlreichen Zustände, die Typ-2-Diabetes oftmals begleiten, einschließlich Syndrom X, reaktiver Hypoglykämie und diabetischer Dyslipidämie, geeignet sein. Fettleibigkeit, wie sie nachstehend erörtert wird, ist ein weiterer Zustand, der oft bei Typ-2-Diabetes zu finden ist, welcher auf die Behandlung mit den Verbindungen dieser Erfindung ansprechen kann.
Die folgenden Erkrankungen, Störungen und Zustände sind mit Typ-2-Diabetes verbunden und können daher durch Verabreichung der Verbindungen dieser Erfindung behandelt, gesteuert, gelindert oder verhindert werden: (1) Hyperglykämie, (2) niedrige Glukosetoleranz, (3) Insulinresistenz, (4) Fettleibigkeit, (5) Lipidstörungen, (6) Dyslipidämie, (7) Hyperlipidämie, (8) Hypertriglyceridämie, (9) Hypercholesterinämie, (10) niedrige HDL-Spiegel, (11) hohe LDL-Spiegel, (12) Atherosklerose und deren Folgekrankheiten, (13) vaskuläre Restenose, (14) Colon irritabile, (15) entzündliche Darmerkrankung, einschließlich Morbus Crohn und Colitis ulcerosa, (16) andere Entzündungszustände, (17) Pankreatitis, (18) abdominale Fettleibigkeit, (19) neurodegenerative Erkrankung, (20) Retinopathie, (21) Nephropathie, (22) Neuropathie, (23) Syndrom X, (24) Eierstock-Hyperandrogenismus (polyzystisches Ovarialsyndrom) und andere Störungen, bei denen die Insulinresistenz eine Komponente ist.
Fettleibigkeit:
DP-IV-Inhibitoren können zur Behandlung von Fettleibigkeit geeignet sein. Dies basiert auf den beobachteten inhibitorischen Wirkungen von GLP-1 und GLP-2 auf die Nahrungsaufnahme und die Magenentleerung. Die exogene Verabreichung von GLP-1 bei Menschen verringert die Nahrungsaufnahme deutlich und verlangsamt die Magenentleerung (Am. J. Physiol. 277: R910–R916 (1999)). Die ICV-Verabreichung von GLP-1 bei Ratten und Mäusen hat ebenfalls deutliche Auswirkungen auf die Nahrungsaufnahme (Nature Medicine 2: 1254–1258 (1996)). Diese Inhibierung der Nahrungsaufnahme wird bei GLP-1R^(-/-)-Mäusen nicht beobachtet, was zeigt, dass diese Wirkungen durch GLP-1-Rezeptoren im Gehirn vermittelt werden. Durch die Analogie zu GLP-1 ist es wahrscheinlich, dass GLP-2 ebenfalls durch DP-IV reguliert wird. Die ICV-Verabreichung von GLP-2- inhibiert ebenfalls die Nahrungsaufnahme, analog zu den bei GLP-1- beobachteten Wirkungen (Nature Medicine 6, 802–807 (2000)). Darüber hinaus legen Untersuchungen mit DP-IV-defizienten Mäusen nahe, dass diese Tiere gegen durch Nahrungsaufnahme hervorgerufene Fettleibigkeit und eine assoziierte Pathologie (z. B. Hyperinsulinonämie) resistent sind.
Wachstumshormonmangel:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung von Wachstumshormonmangel geeignet sein, basierend auf der Hypothese, dass wachstumshormonfreisetzender Faktor (GRF), ein Peptid, das die Freisetzung von Wachstumshormon aus dem Hypophysenvorderlappen stimuliert, durch das DP-IV-Enzym in vivo gespalten wird ( WO 00/56297 ). Die folgenden Daten liefern den Beweis, dass GRF ein endogenes Substrat ist: (1) GRF wird in vitro wirksam gespalten, um das inaktive Produkt GRF[3-44] zu erzeugen (BBA 1122: 147–153 (1992)); (2) GRF wird in Plasma rasch zu GRF[3-44] zersetzt, dies wird durch den DP-IV-Inhibitor Diprotin A verhindert, und (3) GRF[3-44] findet sich im Plasma eines mit menschlichem GRF transgenen Schweins (J. Clin. Invest. 83, 1533–1540 (1989)). Daher können DP-IV-Inhibitoren für das gleiche Spektrum an Indikationen geeignet sein, wie es im Falle von Wachstumshormonsekretagoga erwogen wurde.
Darmverletzung:
Die Möglichkeit der Verwendung von DP-IV-Inhibitoren zur Behandlung von Darmverletzung legen die Ergebnisse von Untersuchungen nahe, die zeigen, dass Glucagon-like Peptid-2 (GLP-2), ein wahrscheinlich endogenes Substrat für DP-IV, trophische Wirkungen auf das Darmepithel aufweisen kann (Regulatory Peptides 90: 27–32 (2000)). Die Verabreichung von GLP-2 führt zu einer erhöhten Dünndarmmasse bei Nagern und schwächt die Darmverletzung bei Nagermodellen von Colitis und Enteritis ab.
Immunsuppression:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Modulierung der Immunreaktion geeignet sein, basierend auf Untersuchungen, die das DP-IV-Enzym mit der T-Zellenaktivierung und der Chemokinverarbeitung in Zusammenhang bringen und auf eine Wirksamkeit von DP-IV-Inhibitoren in In-vivo-Krankheitsmodellen hinweisen. Es wurde gezeigt, dass DP-IV identisch mit CD26 ist, einem Zelloberflächenmarker für aktivierte Immunzellen. Die Expression von CD26 wird durch den Differenzierungs- und Aktivierungsstatus von Immunzellen reguliert. Es wird allgemein akzeptiert, dass CD26 als mitstimulierendes Molekül in In-vitro-Modellen für die T-Zellenaktivierung dient. Eine Reihe von Chemokinen enthalten Prolin in der vorletzten Position, vermutlich um sie vor einer Zersetzung durch nichtspezifische Aminopeptidasen zu schützen. Es wurde gezeigt, dass viele davon in vitro durch DP-IV verarbeitet werden. In mehreren Fällen (RANTES, LD78-beta, MDC, Eotaxin, SDF-lalpha) führt die Spaltung zu einer geänderten Aktivität bei Chemotaxis- und Signalwirkungstests. In manchen Fällen scheint auch die Rezeptorselektivität modifiziert zu sein (RANTES). Mehrere N-terminale trunkierte Formen von einer Reihe von Chemokinen wurden in In-vitro-Zellkultursystemen identifiziert, einschließlich der vorhergesagten Produkte der DP-IV-Hydrolyse.
DP-IV-Inhibitoren erwiesen sich als wirksame Immunsupressionsmittel bei Tiermodellen für Transplantation und Arthritis. Es wurde gezeigt, dass Prodipin (Pro-Pro-Diphenylphosphonat), ein irreversibler Inhibitor von DP-IV, die Überlebensdauer eines Herz-Allotransplantats in Ratten von 7 Tage auf 14 Tage verdoppelt (Transplantation 63: 1495–1500 (1997)). DP-IV-Inhibitoren wurden bei durch Collagen und Alkyldiamin induzierter Arthritis bei Ratten getestet und wiesen eine statistisch bedeutende Linderung der Hinterpfotenschwellung bei diesem Modell auf (Int. J. Immunopharmacology 19: 15–24 (1997), Immunopharmacology 40: 21–26 (1998)). DP-IV wird von einer Reihe von Autoimmunerkrankungen, einschließlich rheumatoider Arthritis, multipler Sklerose, Basedow-Krankheit und Hashimoto-Thyroiditis, hochreguliert (Immunology Today 20, 367–375 (1999)).
HIV-Infektion:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung oder Prävention einer HIV-Infektion oder AIDS geeignet sein, da eine Reihe von Chemokinen, die einen HIV-Zelleintritt inhibieren, potentielle Substrate für DP-IV sind (Immunology Today 20: 367–375 (1999)). Im Falle von SDF-lalpha verringert eine Spaltung die antivirale Aktivität (PNAS 95: 6331–6336 (1998)). Somit wäre zu erwarten, dass die Stabilisierung von SDF-lalpha durch die DP-IV-Inhibierung die HIV-Ansteckungsfähigkeit verringern würde.
Hämatopoese:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung oder Prävention von Hämatopoese geeignet sein, da DP-IV möglicherweise bei der Hämatopoese beteiligt ist. Ein DP-IV-Inhibitor, Val-Born-Pro, stimuliert die Hämatopoese bei einem Maus-Modell von cyclophosphamidinduzierter Neutropenie ( WO 99/56753 ).
Neuronale Störungen:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung oder Prävention von verschiedenen neuronalen oder psychiatrischen Störungen geeignet sein, da eine Reihe von Peptiden, die bei einer Vielzahl von neuronalen Prozessen beteiligt sind, in vitro durch DP-IV gespalten wird. Ein DP-IV-Inhibitor kann daher einen therapeutischen Nutzen bei der Behandlung von neuronalen Störungen besitzen. Endomorphin-2, beta-Casomorphin und Substanz P erwiesen sich alle als In-vitro-Substrate für DP-IV. In allen Fällen ist die In-vitro-Spaltung hocheffizient mit k_kat/K_m ~ 10⁶ M^–1s^–1 oder höher. Bei einem Elektroschocksprung-Analgesietestmodell bei Ratten zeigte ein DP-IV-Inhibitor eine bedeutende Wirkung, die unabhängig von der Gegenwart von exogenem Endomorphin-2 war (Brain Research 815: 278–286 (1999)).
Tumorinvasion und Metastase:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung oder Prävention von Tumorinvasion und Metastasen geeignet sein, da eine Erhöhung oder Verringerung der Expression von mehreren Ektopeptidasen, einschließlich DP-IV, während der Transformation von normalen Zellen in einen malignen Phänotyp beobachtet wurde (J. Exp. Med. 190: 301–305 (1999)). Die Hoch- oder Niederregulierung dieser Proteine scheint gewebe- und zelltypspezifisch zu sein. Zum Beispiel wurde eine erhöhte CD26/DP-IV-Expression bei T-Zellenlymphom, akuter lymphoblastischer T-Zellen-Leukämie, von Zellen herrührenden Schilddrüsenkarzinomen, Basalzellenkarzinomen und Brustkarzinomen beobachtet. Daher können DP-IV-Inhibitoren bei der Behandlung solcher Karzinome geeignet sein.
Benigne Prostatahypertrophie:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung von benigner Prostatahypertrophie geeignet sein, da eine erhöhte DP-IV-Aktivität in Prostatagewebe von Patienten mit BPH festgestellt wurde (Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem 30: 333–338 (1992)).
Spermienmotilität/Empfängnisverhütung beim Mann:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Veränderung der Spermienmotilität und für die Empfängnisverhütung beim Mann geeignet sein, da in der Samenflüssigkeit Prostatosome, von der Prostata stammende Organelle, die für die Spermienmotilität wichtig sind, sehr hohe DP-IV-Wirkungsgrade besitzen (Euro. J. Clin. Chem. Clin. Biochem 30: 333–338 (1992)).
Gingivitis:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung von Gingivitis geeignet sein, da eine DP-IV-Aktivität in Zahnfleischtaschenflüssigkeit gefunden wurde und bei einigen Untersuchungen mit der Schwere der periodontalen Erkrankung korrelierte (Arch. Oral Biol. 37: 167–173 (1992)).
Osteoporose:
Die DP-IV-Inhibierung kann zur Behandlung oder Prävention von Osteoporose geeignet sein, da GIP-Rezeptoren in Osteoblasten vorliegen.
Die vorliegenden Verbindungen eignen sich ferner bei einem Verfahren zur Prävention, Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos der oben genannten Erkrankungen, Störungen und Zustände in Kombination mit anderen Mitteln.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können in Kombination mit einem oder mehreren anderen Arzneistoffen bei der Behandlung, Prävention, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von Erkrankungen oder Zuständen, für die Verbindungen der Formel I oder die anderen Arzneistoffe geeignet sein können, verwendet werden, wenn die Kombination solcher Arzneistoffe zusammen sicherer oder wirksamer ist als jeder der Wirkstoffe für sich. Solche anderen Arzneistoffe können durch einen Weg und in einer Menge verabreicht werden, der/die üblicherweise dafür verwendet wird, gleichzeitig oder der Reihe nach mit einer Verbindung der Formel I. Wenn eine Verbindung der Formel I gleichzeitig mit einem oder mehreren anderen Arzneistoffen verwendet wird, ist eine pharmazeutische Zusammensetzung in Einheitsdosisform, die solche anderen Arzneistoffe und die Verbindung der Formel I enthält, bevorzugt. Die Kombinationstherapie kann jedoch auch Therapien beinhalten, bei denen die Verbindung der Formel I und ein oder mehrere andere Arzneistoffe in unterschiedlichen überlappenden Regimes verabreicht werden. Es ist auch vorgesehen, dass, wenn sie in Kombination mit einem oder mehreren anderen Wirkstoffen verwendet werden, die Verbindungen der vorliegenden Erfindung und die anderen Wirkstoffe in niedrigeren Dosen verwendet werden können, als wenn jede einzeln verwendet wird. Demgemäß sind die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung u. a. diejenigen, die ein oder mehrere andere Wirkstoffe zusätzlich zu einer Verbindung der Formel I enthalten.
Beispiele für andere Wirkstoffe, die in Kombination mit einer Verbindung der Formel I verabreicht werden können und entweder getrennt oder in der gleichen pharmazeutischen Zusammensetzung verabreicht werden, sind u. a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein:

(a) andere Dipeptidylpeptidase-IV(DP-IV)-Inhibitoren,
(b) Insulinsensibilisatoren, einschließlich Liganden für PPAR-Rezeptoren (alpha und/oder gamma und/oder beta-delta), die eine Wirkung als Agonisten, Antagonisten, selektive Aktivatoren oder Teilagonisten haben, einschließlich (i) PPARγ-Agonisten, wie z. B. die Glitazone (z. B. Troglitazon, Pioglitazon, Englitazon, MCC-555, Rosiglitazon und dergleichen) und andere PPAR-Liganden, einschließlich dualer PPARα/γ-Agonisten, wie z. B. KRP-297, PPARα-Agonisten, wie z. B. Fenofibrinsäurederivate (Gemfibrozil, Clofibrat, Fenofibrat und Bezafibrat), und PPARγ-Teilagonisten, (ii) Biguanide, wie z. B. Metformin und Phenformin, und (iii) Proteintyrosinphosphatase-1B(PTP-1B)-Inhibitoren,
(c) Insulin oder Insulin-Mimetika,
(d) Sulfonylharnstoffe und andere Insulinsekretagoga, wie z. B. Tolbutamid und Glipizid, Meglitinid und verwandte Materialien,
(e) α-Glucosidase-Inhibitoren (wie z. B. Acarbose),
(f) Glucagonrezeptorantagonisten, wie z. B. diejenigen, die in der WO 98/04528 , WO 99/01423 , WO 00/39088 und WO 00/69810 offenbart sind,
(g) GLP-1, GLP-1-Mimetika und GLP-1-Rezeptoragonisten, und Exendine, wie z. B. diejenigen, die in der WO 00/42026 und WO 00/59887 offenbart sind,
(h) GIP und GIP-Mimetika, wie z. B. diejenigen, die in der WO 00/58360 offenbart sind, und GIP-Rezeptoragonisten,
(i) PACAP, PACAP-Mimetika und PACAP-Rezeptoragonisten, wie z. B. diejenigen, die in der WO 01/23420 offenbart sind,
(j) Cholesterinsenkungsmittel, wie z. B. (i) HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren (Lovastatin, Simvastatin, Pravastatin, Fluvastatin, Atorvastatin, Itavastatin und Rosuvastatin und andere Statine), (ii) Sequestriermittel (Cholestyramin, Colestipol und Dialkylaminoalkylderivate eines vernetzten Dextrans), (iii) Nicotinylalkohol, Nicotinsäure oder ein Salz davon, (iv) PPARα-Agonisten, wie z. B. Fenofibrinsäurederivate (Gemfibrozil, Clofibrat, Fenofibrat und Bezafibrat), (v) duale PPARα/γ-Agonisten, wie z. B. KRP-297, (vi) Cholesterinabsorptionsinhibitoren, wie zum Beispiel beta-Sitosterol und Ezetimib, (vii) Acyl-CoA-Cholesterinacyltransferaseinhibitoren, wie z. B. Avasimib, und (viii) Antioxidantien, wie z. B. Probucol,
(k) PPARδ-Agonisten, wie z. B. diejenigen, die in der WO 97/28149 offenbart sind,
(l) Verbindungen gegen Fettleibigkeit, wie z. B. Fenfluramin, Dexfenfluramin, Phentermin, Sibutramin, Orlistat, Neuropeptid-Y₅-Rezeptorantagonisten, Melanocortinrezeptoragonisten, Cannabanoid-CB-1-Rezeptorantagonisten, wie z. B. Rimonabant, und β₃-adrenerge Rezeptoragonisten,
(m) Ileum-Gallensäure-Transporter-Inhibitoren,
(n) antihypertensive Mittel, einschließlich derjenigen, die auf die Angiotensin- oder Reninsysteme wirken, wie z. B. Angiotensinkonversionsenzyminhibitoren, Angiotensin-II-Rezeptor-Antagonisten oder Renin-Inhibitoren, wie z. B. Captopril, Cilazapril, Enalapril, Fosinopril, Lisinopril, Chinapril, Ramapril, Zofenopril, Candesartan, Cilexetil, Eprosartan, Irbesartan, Losartan, Tasosartan, Telmisartan und Valsartan, und
(o) Mittel, die zur Verwendung bei Entzündungszuständen gedacht sind, wie z. B. Aspirin, nichtsteroidale Antiphlogistika, Glukokortikoide, Azulfidin und Cyclooxygenase-2-selektive Inhibitoren.

Die obigen Kombinationen umfassen Kombinationen einer Verbindung der vorliegenden Erfindung nicht nur mit einer anderen Wirkverbindung, sondern auch mit zwei oder mehreren anderen Wirkverbindungen. Nichtlimitierende Beispiele sind u. a. Kombinationen aus Verbindungen mit der Formel I mit zwei oder mehreren Wirkverbindungen, ausgewählt aus Biguaniden, Sulfonylharnstoffen, HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, PPAR-Agonisten, PTP-1B-Inhibitoren, anderen DP-IV-Inhibitoren und Mitteln gegen Fettleibigkeit.
Ähnlich können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung in Kombination mit anderen Arzneistoffen verwendet werden, die bei der Prävention, Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos der Erkrankungen oder Zustände, für die Verbindungen der vorliegenden Erfindung geeignet sind, verwendet werden. Solche anderen Arzneistoffe können durch einen Weg und in einer Menge verabreicht werden, der/die üblicherweise dafür verwendet wird, gleichzeitig oder der Reihe nach mit einer Verbindung der vorliegenden Erfindung. Wenn eine Verbindung der vorliegenden Erfindung gleichzeitig mit einem oder mehreren anderen Arzneistoffen verwendet wird, ist eine pharmazeutische Zusammensetzung, die solche anderen Arzneistoffe zusätzlich zu der Verbindung der vorliegenden Erfindung enthält, bevorzugt. Demgemäß sind die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung u. a. diejenigen, die auch ein oder mehrere andere Wirkstoffe zusätzlich zu einer Verbindung der vorliegenden Erfindung enthalten.
Das Gewichtsverhältnis der Verbindung der vorliegenden Erfindung zum zweiten Wirkstoff kann variiert werden und wird von der wirksamen Dosis eines jeden Bestandteils abhängen. Allgemein wird von jedem eine wirksame Dosis verwendet werden. Wenn zum Beispiel eine Verbindung der vorliegenden Erfindung mit einem weiteren Mittel kombiniert wird, wird das Gewichtsverhältnis der Verbindung der vorliegenden Erfindung zu dem anderen Mittel im Allgemeinen von etwa 1000:1 bis etwa 1:1000, vorzugsweise von etwa 200:1 bis etwa 1:200, reichen. Kombinationen aus einer Verbindung der vorliegenden Erfindung und anderen Wirkstoffen werden im Allgemeinen ebenfalls innerhalb des oben genannten Bereichs liegen, in jeden Fall sollte jedoch eine wirksame Dosis eines jeden Wirkstoffs verwendet werden.
Bei solchen Kombinationen können die Verbindung der vorliegenden Erfindung und andere Wirkstoffe getrennt oder gemeinsam verabreicht werden. Ferner kann die Verabreichung von einem Element vor, gleichzeitig mit oder nach der Verabreichung des/der anderen Mittel erfolgen.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können durch orale, parenterale (z. B. intramuskuläre, intraperitoneale, intravenöse, ICV, intrazisternale Injektion oder Infusion, subkutane Injektion oder Implantierung), durch ein Inhalationsspray, nasale, vaginale, rektale, sublinguale oder topische Verabreichungswege verabreicht werden und können alleine oder zusammen in geeigneten Dosiseinheitsformulierungen, die herkömmliche nichttoxische pharmazeutisch annehmbare Träger, Hilfsstoffe und Vehikel enthalten, die sich für den jeweiligen Verabreichungsweg eignen, formuliert werden. Zusätzlich zur Behandlung von warmblütigen Tieren, wie z. B. Mäusen, Ratten, Pferden, Rindern, Schafen, Hunden, Katzen, Affen usw., sind die Verbindungen der Erfindung zur Verwendung beim Menschen wirksam.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Verabreichung der Verbindungen dieser Erfindung können zweckmäßigerweise in Einheitsdosisform dargereicht werden und können durch irgendeines der im Stand der pharmazeutischen Technik gut bekannten Verfahren hergestellt werden. Alle Verfahren umfassen den Schritt des Zusammenbringens des Wirkstoffs mit dem Träger, der ein oder mehrere Hilfsstoffe enthält. Im Allgemeinen werden die pharmazeutischen Zusammensetzungen durch gleichförmiges und inniges Zusammenbringen des Wirkstoffs mit einem flüssigen Träger oder einem feinteiligen festen Träger oder mit beiden und, falls notwendig, anschließendes Formen des Produkts in die erwünschte Formulierung hergestellt. In der pharmazeutischen Zusammensetzung ist die Wirkverbindung in einer ausreichenden Menge enthalten, um beim Verlauf oder beim Zustand der Krankheiten die erwünschte Wirkung zu erzeugen. So wie hierin verwendet, soll die Bezeichnung "Zusammensetzung" ein Produkt umfassen, das die angegebenen Bestandteile in den angegebenen Mengen enthält, sowie jedes beliebige andere Produkt, das direkt oder indirekt aus der Kombination der angegebenen Bestandteile in den angegebenen Mengen entsteht.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen, die den Wirkstoff enthalten, können in einer zur oralen Verwendung geeigneten Form vorliegen, zum Beispiel als Tabletten, Pastillen, Arzneimittelplätzchen, wässrige oder Ölsuspensionen, dispergierbare Pulver oder Granulate, Emulsionen, Hart- oder Weichkapseln oder Sirupe oder Elixiere. Zusammensetzungen, die zur oralen Verwendung gedacht sind, können gemäß einem beliebigen im Stand der Technik bekannten Verfahren zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen hergestellt werden, und solche Zusammensetzungen können ein oder mehrere Mittel enthalten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Süßstoffen, Aromastoffen, Farbmitteln und Konservierungsstoffen, um pharmazeutisch geschmackvolle und wohlschmeckende Präparate zu ergeben. Tabletten enthalten den Wirkstoff in einer Mischung mit nichttoxischen pharmazeutisch annehmbaren Hilfsstoffen, die zur Herstellung von Tabletten geeignet sind. Diese Hilfsstoffe können zum Beispiel inerte Verdünnungsmittel, wie z. B. Calciumcarbonat, Natriumcarbonat, Lactose, Calciumphosphat oder Natriumphosphat, Granulier- und Sprengmittel, zum Beispiel Maisstärke oder Alginsäure, Bindemittel, zum Beispiel Stärke, Gelatine oder Akaziengummi, und Gleitmittel, zum Beispiel Magnesiumstearat, Stearinsäure oder Talk, sein. Die Tabletten können überzugsfrei oder durch bekannte Verfahren überzogen sein, um die Auflösung und Absorption im Magendarmtrakt zu verzögern und dadurch über einen längeren Zeitraum eine verzögerte Wirkung zu ergeben. Zum Beispiel kann ein Zeitverzögerungsmaterial, wie z. B. Glycerinmonostearat oder Glycerindistearat, verwendet werden. Sie können auch durch die in den US-Patenten 4256108 , 4166452 und 4265874 beschriebenen Verfahren überzogen werden, um osmotische therapeutische Tabletten zur gesteuerten Freisetzung zu bilden.
Formulierungen zur oralen Verwendung können auch als Hartgelatinekapseln, worin der Wirkstoff mit einem inerten festen Verdünnungsmittel, zum Beispiel Calciumcarbonat, Calciumphosphat oder Kaolin, vermischt ist, oder als Weichgelatinekapseln, worin der Wirkstoff mit Wasser oder einem Ölmedium, zum Beispiel Erdnussöl, Flüssigparaffin oder Olivenöl, vermischt ist, vorgelegt werden.
Wässrige Suspensionen enthalten die Wirkstoffe in einer Mischung mit Hilfsstoffen, die zur Herstellung von wässrigen Suspensionen geeignet sind. Solche Hilfsstoffe sind Suspensionsmittel, zum Beispiel Natriumcarboxymethylcellulose, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Natriumalginat, Polyvinylpyrrolidon, Tragantgummi und Akaziengummi; Dispersions- oder Benetzungsmittel können ein natürlich vorkommendes Phosphatid, zum Beispiel Lecithin, oder Kondensationsprodukte eines Alkylenoxids mit Fettsäuren, zum Beispiel Polyoxyethylenstearat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit langkettigen aliphatischen Alkoholen, zum Beispiel Heptadecaethylenoxycetanol, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit Teilestern, erhalten aus Fettsäuren und einem Hexitol, wie z. B. Polyoxyethylensorbitolmonooleat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit Teilestern, erhalten aus Fettsäuren und Hexitolanhydriden, zum Beispiel Polyethylensorbitanmonooleat, sein. Die wässrigen Suspensionen können auch ein oder mehrere Konservierungsstoffe, zum Beispiel Ethyl- oder n-Propyl-p-hydroxybenzoat, ein oder mehrere Farbmittel, ein oder mehrere Aromastoffe und ein oder mehrere Süßstoffe, wie z. B. Saccharose oder Saccharin, enthalten.
Ölige Suspensionen können durch Suspendieren des Wirkstoffs in einem Pflanzenöl, zum Beispiel Arachisöl, Olivenöl, Sesamöl oder Kokosnussöl, oder in Mineralöl, wie z. B. Flüssigparaffin, formuliert werden. Die öligen Suspensionen können ein Verdickungsmittel, zum Beispiel Bienenwachs, Hartparaffin oder Cetylalkohol, enthalten. Süßstoffe, wie sie z. B. oben genannt wurden, und Aromastoffe können zugegeben werden, um ein wohlschmeckendes Oralpräparat zu ergeben. Diese Zusammensetzungen können durch die Zugabe eines Antioxidationsmittels, wie z. B. Ascorbinsäure, konserviert werden.
Dispergierbare Pulver und Granulate, die zur Herstellung einer wässrigen Suspension durch Zugabe von Wasser geeignet sind, stellen den Wirkstoff in einer Mischung mit einem Dispersions- oder Benetzungsmittel, Suspensionsmittel und einem oder mehreren Konservierungsmitteln zur Verfügung. Beispiele für geeignete Dispersions- oder Benetzungsmittel und Suspensionsmittel sind diejenigen, die bereits oben genannt wurden. Zusätzliche Hilfsstoffe, zum Beispiel Süß-, Aroma- und Farbstoffe, können ebenfalls vorhanden sein.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung können auch in Form von Öl-in-Wasser-Emulsionen vorliegen. Die ölige Phase kann ein Pflanzenöl, zum Beispiel Olivenöl oder Arachisöl, oder ein Mineralöl, zum Beispiel Flüssigparaffin, oder Mischungen aus diesen sein. Geeignete Emulgatoren können natürlich vorkommende Gummen, zum Beispiel Akaziengummi oder Tragantgummi, natürlich vorkommende Phosphatide, zum Beispiel Sojabohnen, Lecithin, und Ester oder Teilester, erhalten aus Fettsäuren und Hexitolanhydriden, zum Beispiel Sorbitanmonooleat, und Kondensationsprodukte der Teilester mit Ethylenoxid, zum Beispiel Polyoxyethylensorbitanmonooleat, sein. Die Emulsionen können auch Süß- und Aromastoffe enthalten.
Sirupe und Elixiere können mit Süßstoffen, zum Beispiel Glycerin, Propylenglycol, Sorbit oder Saccharose, formuliert werden. Solche Formulierungen können auch ein Demulzens, ein Konservierungsmittel und Aroma- und Farbstoffe enthalten.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in der Form einer sterilen injizierbaren wässrigen oder öligen Suspension vorliegen. Diese Suspension kann gemäß dem bekannten Stand der Technik unter Verwendung derjenigen geeigneten Dispersion- oder Benetzungsmittel und Suspensionsmittel, die oben genannt wurden, formuliert werden. Das sterile injizierbare Präparat kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nichttoxischen, parenteral annehmbaren Verdünnungsmittel oder Lösungsmittel sein, zum Beispiel eine Lösung in 1,3-Butandiol. Unter den annehmbaren Vehikeln und Lösungsmitteln, die verwendet werden können, sind Wasser, Ringer-Lösung und isotonische Natriumchloridlösung. Zusätzlich werden sterile nichtflüssige Öle herkömmlicherweise als ein Lösungsmittel oder Suspensionsmedium verwendet. Für diesen Zweck kann jedes beliebige milde nichtflüssige Öl verwendet werden, einschließlich synthetischer Mono- und Diglyceride. Zusätzlich finden Fettsäuren, wie z. B. Ölsäure, Verwendung bei der Herstellung injizierbarer Präparate.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch in der Form von Zäpfchen zur rektalen Verabreichung des Arzneistoffes verabreicht werden. Diese Zusammensetzungen können durch Vermischen des Arzneistoffes mit einem geeigneten nichtreizenden Hilfsstoff, der bei normalen Temperaturen fest ist, bei der Rektaltemperatur jedoch flüssig ist und deshalb im Rektum schmelzen wird und den Arzneistoff freisetzt, hergestellt werden. Solche Materialien sind Kakaobutter und Polyethylenglycole.
Zur topischen Verwendung werden Cremes, Salben, Gele, Lösungen oder Suspensionen usw. verwendet, welche die Verbindung der vorliegenden Erfindung enthalten. (Für die Zwecke dieser Anmeldung soll die topische Anwendung Mundwaschungen und Gurgelanwendungen beinhalten.) Die pharmazeutische Zusammensetzung und das Verfahren der vorliegenden Erfindung können ferner, wie hierin angegeben, andere therapeutisch wirksame Verbindungen enthalten, die üblicherweise bei der Behandlung der oben genannten pathologischen Zustände angewandt werden.
Bei der Behandlung, Prävention, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von Zuständen, bei denen die Inhibierung der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzymaktivität erforderlich ist, wird eine geeignete Dosismenge im Allgemeinen etwa 0,01 bis 500 mg pro kg Patientenkörpergewicht pro Tag betragen, und sie kann in Einzel- oder Mehrfachdosen verabreicht werden. Vorzugsweise wird die Dosismenge etwa 0,1 bis etwa 250 mg/kg pro Tag, besonders bevorzugt etwa 0,5 bis etwa 100 mg/kg pro Tag betragen. Eine geeignete Dosismenge kann auch 0,01 bis 250 mg/kg pro Tag, etwa 0,05 bis 100 mg/kg pro Tag oder etwa 0,1 bis 50 mg/kg pro Tag sein. Innerhalb dieses Bereichs kann die Dosis 0,05 bis 0,5, 0,5 bis 5 oder 5 bis 50 mg/kg pro Tag betragen. Zur oralen Verabreichung können die Zusammensetzungen vorzugsweise in Form von Tabletten bereitgestellt werden, die 1,0 bis 1000 Milligramm des Wirkstoffs enthalten, insbesondere 1,0, 5,0, 10,0, 15,0, 20,0, 25,0, 50,0, 75,0, 100,0, 150,0, 200,0, 250,0, 300,0, 400,0, 500,0, 600,0, 750,0, 800,0, 900,0 und 1000,0 mg des Wirkstoffs, zur symptomatischen Einstellung der Dosis auf den zu behandelnden Patienten. Die Verbindungen können in einem Regime mit 1 bis 4 Verabreichungen pro Tag, vorzugsweise ein- oder zweimal pro Tag, verabreicht werden.
Bei der Behandlung, Prävention, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von Diabetes mellitus und/oder Hyperglykämie oder Hypertriglyceridämie oder andere Erkrankungen, für die Verbindungen der vorliegenden Erfindung empfehlenswert sind, werden zufriedenstellende Ergebnisse im Allgemeinen erhalten, wenn die Verbindungen der vorliegenden Erfindung in einer Tagesdosis von etwa 0,1 Milligramm bis etwa 100 Milligramm pro Kilogramm Tierkörpergewicht, vorzugsweise als einzelne Tagesdosis oder in Teildosen zwei bis sechs Mal am Tag oder in einer Form mit verzögerter Freisetzung verabreicht werden. Für die meisten großen Säuger beträgt die Gesamttagesdosis etwa 1,0 Milligramm bis etwa 1000 Milligramm, vorzugsweise etwa 1 Milligramm bis etwa 50 Milligramm. Im Falle eines 70-kg-Erwachsenen wird die Gesamttagesdosis etwa 7 Milligramm bis etwa 350 Milligramm betragen. Dieses Dosisregime kann angepasst werden, um die optimale therapeutische Reaktion zu erhalten.
Man wird jedoch erkennen, dass die spezielle Dosismenge und Dosierungshäufigkeit für jeden einzelnen Patienten variiert werden kann und von einer Reihe von Faktoren abhängen wird, einschließlich der Wirkung der speziellen eingesetzten Verbindung, der Stoffwechselstabilität und der Wirkungsdauer dieser Verbindung, dem Alter, dem Körpergewicht, dem allgemeinen Gesundheitszustand, dem Geschlecht, der Ernährung, dem Verabreichungsweg und der Verabreichungszeit, der Ausscheidungsrate, der Arzneistoffkombination, der Schwere des speziellen Zustandes und dem Wirt, der sich einer Therapie unterzieht.
Mehrere Verfahren zur Herstellung der Verbindungen dieser Erfindung sind in den folgenden Schemata und Beispielen veranschaulicht. Ausgangsmaterialien werden gemäß im Stand der Technik bekannter Verfahren oder wie hierin veranschaulicht hergestellt.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können aus beta-Aminosäurezwischenprodukten, wie z. B. denjenigen der Formel II, und substituierten heterocyclischen Zwischenprodukten, wie z. B. denjenigen der Formel III, unter Verwendung von Standard-Peptidkupplungsbedingungen, gefolgt von dem Entfernen der Schutzgruppe, hergestellt werden. Die Herstellung dieser Zwischenprodukte ist in den folgenden Schemata beschrieben.
wobei Ar, X, R¹, R⁵ und R⁶ wie oben definiert sind und P eine geeignete Stickstoff-Schutzgruppe ist, wie z. B. tert.-Butoxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl oder 9-Fluorenylmethoxycarbonyl.
SCHEMA 1
Die Verbindungen der Formel II sind im Handel erhältlich, in der Literatur bekannt oder können durch eine Reihe von den Fachleuten bekannten Verfahren bequem hergestellt werden. Ein üblicher Weg ist in Schema 1 veranschaulicht. Säure 1, die im Handel erhältlich sein kann oder leicht aus der entsprechenden Aminosäure durch Schutz zum Beispiel unter Verwendung von Di-tert.-butyldicarbonat (für P = BOC), Carbobenzyloxychlorid (für P = Cbz) oder N-(9-Fluorenylmethoxycarbonyloxy)succinimid (für P = Fmoc) hergestellt werden kann, wird mit Isobutylchlorformiat und einer Base, wie z. B. Triethylamin oder Diisopropylethylamin, gefolgt von Diazomethan, behandelt. Das resultierende Diazoketon wird dann mit Silberbenzoat in einem Lösungsmittel, wie z. B. Methanol oder wässrigem Dioxan, behandelt und kann durch das Verfahren von Sewald et al., Synthesis, 837 (1997), Ultraschall ausgesetzt werden, um die beta-Aminosäure II zu ergeben. Wie die Fachleute erkennen werden, können zur Herstellung von enantiomerenreinen beta-Aminosäuren II enantiomerenreine alpha-Aminosäuren 1 verwendet werden. Alternative Wege zu diesen Verbindungen sind in den folgenden Übersichtsartikeln zu finden: E. Juaristi, Enantioselective Synthesis of β-Amino Acids, Hrsg., Wiley-VCH, New York: 1997, Juaristi et al., Aldrichimica Acta, 27: 3 (1994), und Cole et al., Tetrahedron, 32,: 9517 (1994).
SCHEMA 2
Die Verbindungen III sind im Handel erhältlich, in der Literatur bekannt oder können durch eine Reihe von den Fachleuten bekannten Verfahren leicht hergestellt werden. Ein praktisches Verfahren ist in Schema 2 gezeigt. Das ungesättigte Derivat 3 wird zum Beispiel durch Behandlung mit Wasserstoffgas und einem Katalysator, wie z. B. Palladium auf Kohle oder Platinoxid, in einem Lösungsmittel, wie z. B. Methanol oder Ethanol, reduziert, um Verbindung III zu ergeben.
SCHEMA 3
Die Zwischenprodukte 3 aus Schema 2 sind ihrerseits im Handel erhältlich, in der Literatur bekannt oder können durch eine Reihe von den Fachleuten bekannten Verfahren einfach hergestellt werden. Ein solches Verfahren ist in Schema 3 veranschaulicht, wobei X CR² ist und R⁶ H ist. Aminopyrazin 4 wird mit einem 2-Halogenketon, wie z. B. 2-Bromketon 5, in einem Lösungsmittel, wie z. B. Methanol oder Ethanol, behandelt, um Zwischenprodukt 7 zu ergeben. Alternativ können zur Herstellung von Zwischenprodukt 7, bei dem R² H ist, 2-Bromdimethylacetal 6 und eine katalytische Menge Säure, wie z. B. Salzsäure, anstelle von Zwischenprodukt 5 eingesetzt werden. Die Umwandlung von 4 in 7 kann auch in zwei Schritten erfolgen. Zunächst werden 4 und ein geeignetes Bromid 5 erwärmt, zweckmäßigerweise in einem Lösungsmittel, wie z. B. Dioxan, 16 Stunden auf 50°C. Anschließend wird das Lösungsmittel entfernt, der Rückstand mit Isopropanol behandelt und die Mischung etwa 2 Stunden zum Rückfluss erhitzt. Zwischenprodukt 7 wird durch Behandlung mit einem Grignard-Reagenz in Gegenwart von Kupferbromid gemäß dem Literaturverfahren (J. Org. Chem. 1987, 52, 3847) oder durch palladiumkatalysierte Suzuki-Kupplung einer Boronsäure in 3a umgewandelt.
SCHEMA 4
Die Zwischenprodukte 3b, bei denen X CR² ist und R⁵ H ist, können wie oben für Schema 3 beschrieben ausgehend von Aminopyrazin 8 wie in Schema 4 veranschaulicht hergestellt werden.
SCHEMA 5
Ein alternatives Verfahren zur Herstellung von Verbindung 3c, bei dem X N ist und R⁶ H ist, ist in Schema 5 veranschaulicht. Dichlorpyrazin 10 wird mit Hydrazin behandelt, um Hydrazinopyrazin 11 zu ergeben. Verbindung 11 kann entweder mit einem Orthoester, wie z. B. Triethylorthoester 12, oder mit einer Carbonsäure 13 in Polyphosphorsäure bei erhöhten Temperaturen kondensiert werden, um 14 zu ergeben. Alternativ kann das Hydrazin 11 zum Beispiel durch Behandlung mit einem Säurechlorid oder -anhydrid in Gegenwart einer Base, wie z. B. Triethylamin, acyliert werden, und das resultierende Hydrazid wird durch Erwärmen in Polyphosphorsäure zu 14 cyclisiert. Die Verdrängung des Halogenids mit Hilfe eines Grignard-Reagenzes oder durch Suzuki-Kupplung, wie es oben beschrieben ist, ergibt 3c.
SCHEMA 6
Die Zwischenprodukte 3d, bei denen X N ist und R⁵ H ist, können wie oben für Schema 5 beschrieben hergestellt werden, wobei von Dichlorpyrazin 15 ausgegangen wird, wie es in Schema 6 veranschaulicht ist.
SCHEMA 7
Die Zwischenprodukte 3e, bei denen X N ist, können aus Chlorpyrazin 18 wie in Schema 7 veranschaulicht hergestellt werden. Chlorpyrazin 18, das im Handel erhältlich ist, in der Literatur bekannt ist oder durch eine Reihe von den Fachleuten bekannten Verfahren leicht hergestellt werden kann, wird mit Hydrazin behandelt, um Hydrazinopyrazin 19 zu ergeben. Zwischenprodukt 19 kann entweder mit einem Orthoester, wie z. B. Triethylorthoester 12, oder mit einer Carbonsäure 13 in Polyphosphorsäure bei erhöhten Temperaturen kondensiert werden, um 3e zu ergeben. Alternativ kann das Hydrazin 19 zum Beispiel durch Behandlung mit einem Säurechlorid oder -anhydrid in Gegenwart einer Base, wie z. B. Triethylamin, acyliert werden, und das resultierende Hydrazid wird durch Erwärmen in Polyphosphorsäure zu 3e cyclisiert.
SCHEMA 8
Die Zwischenprodukte 3f, bei denen X CR² ist, können auch wie in Schema 8 veranschaulicht hergestellt werden. Aminopyrazin 20, das im Handel erhältlich ist, in der Literatur bekannt ist oder durch eine Reihe von den Fachleuten bekannten Verfahren leicht hergestellt werden kann, wird in einem Lösungsmittel, wie z. B. Methanol oder Ethanol, mit einem 2-Halogenketon, wie z. B. 2-Bromketon 5, behandelt, um Zwischenprodukt 3f zu ergeben. Alternativ können zur Herstellung von Zwischenprodukt 3f, bei dem R² H ist, 2-Bromdimethylacetal 6 und eine katalytische Menge Säure, wie z. B. Salzsäure, anstelle von Zwischenprodukt 5 eingesetzt werden. Die Umwandlung von 20 in 3f kann auch in zwei Schritten erfolgen. Zunächst werden Aminopyrazin 20 und ein geeignetes Bromid 5 erwärmt, zweckmäßigerweise in einem Lösungsmittel, wie z. B. Dioxan, 16 Stunden auf 50°C. Anschließend wird das Lösungsmittel entfernt, der Rückstand mit Isopropanol behandelt und die Mischung etwa 2 Stunden zum Rückfluss erhitzt, um 3f zu ergeben.
SCHEMA 9
Ein alternatives Verfahren zur Herstellung von Zwischenprodukt IIIa, bei dem X C-R² ist, ist in Schema 9 veranschaulicht. Die Ringöffnung von Epoxid 21, das im Handel erhältlich ist, in der Literatur bekannt ist oder durch eine Reihe von den Fachleuten bekannter Verfahren leicht hergestellt werden kann, mit Azid, zweckmäßigerweise unter Verwendung von Natriumazid in Gegenwart von Ammoniumchlorid in DMF, ergibt den Azidoalkohol 22. Der Alkohol wird in das entsprechende Triflat umgewandelt und mit einem N-Benzyl-alpha-aminosäureester, wie z. B. einem Ethylester, behandelt, um Aminoester 23 zu ergeben. Die Aza-Wittig-Reaktion ergibt Iminoether 24. Die Behandlung mit 3-Aminopropin gemäß dem Verfahren von Maffrand et al., Eur. J. Med. Chem. 1975, 10, 528, ergibt Tetrahydroimidazopyrazin 25, bei dem R¹ Me ist und R² H ist, welches unter Verwendung von Ammoniumformiat in Gegenwart eines Palladiumkatalysators von der Schutzgruppe befreit werden kann, um Zwischenprodukt IIIa zu ergeben. Alternativ kann der Iminoether 24 durch Behandlung mit einem alpha-Aminoketon durch Nacharbeiten der von Claxton et al. in J. Med. Chem. 1974, 17, 364, beschriebenen Verfahren in Tetrahydroimidazopyrazin 25 umgewandelt werden. SCHEMA 10
Ein alternativer Weg zur Herstellung von Zwischenprodukt IIIb, bei dem X N ist, ist in Schema 10 veranschaulicht. Iminoether 24 aus Schema 10 wird mit einem Hydrazid zum Beispiel in Ethanol bei 60°C behandelt, gefolgt von Erwärmen in Toluol am Rückfluss, um Triazolopiperazin 26 zu ergeben. Das Entfernen der Schutzgruppe, zum Beispiel mit Hilfe von Ammoniumformiat in Gegenwart eines Palladiumkatalysators, ergibt Zwischenprodukt IIIb.
SCHEMA 11
Die Zwischenprodukte II und 111 werden unter Standard-Peptidkupplungsbedingungen zum Beispiel unter Verwendung von 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid (EDC), 1-Hydroxybenzotriazol (HOBT) und einer Base, im Allgemeinen Diisopropylethylamin, in einem Lösungsmittel, wie z. B. N,N-Dimethylformamid (DMF) oder Dichlormethan, 3 bis 48 Stunden bei Umgebungstemperatur gekuppelt, um Zwischenprodukt 27 zu ergeben, wie es in Schema 11 gezeigt ist. Anschließend wird die Schutzgruppe zum Beispiel mit Trifluoressigsäure oder methanolischem Chlorwasserstoff im Falle von Boc entfernt, um das erwünschte Amin I zu ergeben. Falls notwendig, wird das Produkt durch Umkristallisation, Verreiben, präparative Dünnschichtchromatographie, Flashchromatographie auf Kieselgel, wie z. B. mit einer Biotage^®-Apparatur, oder HPLC von unerwünschten Nebenprodukten befreit. Durch HPLC gereinigte Verbindungen können als das entsprechende Salz isoliert werden. Die Reinigung der Zwischenprodukte erfolgt auf gleiche Weise.
In manchen Fällen können die in den obigen Schemata beschriebenen Zwischenprodukt zum Beispiel durch Manipulation der Substituenten an X, R¹, R⁵ oder R⁶ weiter modifiziert werden. Diese Manipulationen können, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Reduktion-, Oxidation-, Alkylierungs-, Acylierungs- und Hydrolysereaktionen sein, die den Fachleuten allgemein bekannt sind.
SCHEMA 12
Ein solches Beispiel ist in Schema 12 veranschaulicht. Zwischenprodukt IIIc, bei dem R⁵ Wasserstoff ist, wird zum Beispiel als dessen tert.-Butylcarbamatderivat durch Behandlung mit Di-tert.-butyldicarbonat geschützt, um Heterocyclus 28 zu ergeben. Dieses Derivat kann mit einer starken Base, wie z. B. n-Butyllithium, in Gegenwart von Tetramethylethylendiamin deprotoniert werden. Die Behandlung des resultierenden Anions mit einem Alkylhalogenid, gefolgt von der Entfernung der Schutzgruppe unter sauren Bedingungen, ergibt das alkylierte Derivat III, das als ein Salz isoliert werden, kann, wie z. B. als ein Hydrochloridsalz.
In einigen Fällen kann die Reihenfolge der Durchführung der obigen Reaktionsschemata variiert werden, um die Reaktion zu begünstigen oder unerwünschte Reaktionsprodukte zu verhindern. Die folgenden Beispiele sind angegeben, damit die Erfindung vollständiger verstanden werden kann. Diese Beispiele dienen lediglich der Veranschaulichung und sollten nicht als die Erfindung in irgendeiner Weise einschränkend aufgefasst werden.
ZWISCHENPRODUKT 1
(3R)-3-[(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,5-difluorphenyl)butansäure
Schritt A: (R,S)-N-(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)-2,5-difluorphenylalanin
Zu einer Lösung von 0,5 g (2,49 mmol) 2,5-Difluor-DL-phenylalanin in 5 ml tert.-Butanol wurden der Reihe nach 1,5 ml 2N wässrige Natriumhydroxidlösung und 543 mg Di-tert-butyldicarbonat zugegeben.
Die Reaktion wurde 16 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt und mit Ethylacetat verdünnt. Die organische Phase wurde der Reihe nach mit 1 N Salzsäure und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, 97:2:1 Dichlormethan:Methanol:Essigsäure) gereinigt, um 671 mg der Titelverbindung zu ergeben. MS 302 (M + 1).
Schritt B: (R,S)-3-[(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)amino]-1-diazo-4-(2,5-difluorphenyl)butan-2-on
Zu einer Lösung von 2,23 g (7,4 mmol) (R,S)-N-(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)-2,5-difluorphenylalanin in 100 ml Diethylether bei 0°C wurden der Reihe nach 1,37 ml (8,1 mmol) Triethylamin und 0,931 ml (7,5 mmol) Isobutylchlorformiat zugegeben und die Reaktion 15 Minuten bei dieser Temperatur gerührt. Anschließend wurde eine gekühlte etherische Lösung von Diazomethan zugegeben, bis die Gelbfärbung bestehen blieb, und das Rühren wurde weitere 16 Stunden fortgesetzt. Das überschüssige Diazomethan wurde durch tropfenweise Zugabe von Essigsäure gequencht und die Reaktion mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 5%iger Salzsäure, gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 4:1 Hexan:Ethylacetat) ergab 1,5 g Diazoketon. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,03–6,95 (m, 1H), 6,95–6,88 (m, 2H), 5,43 (br. s, 1H), 5,18 (br. s, 1H), 4,45 (br. s, 1H), 3,19–3,12 (m, 1H), 2,97–2,80 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).
Schritt C: (3R)-3-[(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,5-difluorphenyl)butansäure
Zu einer Lösung von 2,14 g (6,58 mmol) (R,S)-3-[(1,1-Dimetylethoxycarbonyl)amino]-1-diazo-4-(2,5-difluorphenyl)butan-2-on, gelöst in 100 ml Methanol bei –30°C, wurden der Reihe nach 3,3 ml (19 mmol) Diisopropylethylamin und 302 mg (1,32 mmol) Silberbenzoat zugegeben. Die Reaktion wurde 90 Minuten gerührt, bevor sie mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 2 N Salzsäure, gesättigtem wässrigem Natriumhydrogencarbonat und Salzlösung gewaschen wurde. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt, und die Enantiomere wurden durch präparative chirale HPLC (Chiralpak-AD-Säule, 5% Ethanol in Hexanen) getrennt, um 550 mg des erwünschten (R)-Enantiomers zu ergeben, welche zuerst eluierte. Dieses Material wurde in 50 ml einer Mischung aus Tetrahydrofuran:Methanol:1 N wässrigem Lithiumhydroxid (3:1:1) gelöst und 4 Stunden bei 50°C gerührt. Die Reaktion wurde abgekühlt, mit 5%iger verdünnter Salzsäure angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt, um 360 mg der Titelverbindung als einen weißen schaumigen Feststoff zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,21 (m, 1H), 6,98 (m, 2H), 6,10 (br. s, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 2,98 (m, 2H), 2,60 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
ZWISCHENPRODUKT 2
(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-[2-fluor-4-(trifluormethyl)phenyl]butansäure
Schritt A: (2R,5S)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-(2'-fluor-4'-(trifluormethyl)benzyl)-5-isopropylpyrazin
Zu einer Lösung von 3,32 g (18 mmol) von im Handel erhältlichem (2S)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-isopropylpyrazin in 100 ml Tetrahydrofuran bei –70°C wurden 12 ml (19 mmol) einer 1,6 M Lösung von Butyllithium in Hexanen zugegeben. Nach 20-minütigem Rühren bei dieser Temperatur wurden 5 g (19,5 mmol) 2-Fluor-4-trifluormethylbenzylbromid in 20 ml Tetrahydrofuran zugegeben und das Rühren 3 Stunden fortgesetzt, bevor die Reaktion auf Umgebungstemperatur erwärmt wurde. Die Reaktion wurde mit Wasser gequencht, im Vakuum eingeengt und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 0–5% Ethylacetat in Hexanen) ergab 5,5 g der Titelverbindung. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,33–7,25 (m, 3H), 4,35–4,31 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,60 (t, 1H, J = 3,4 Hz), 3,33 (dd, 1H, J = 4,6, 13,5 Hz), 3,03 (dd, 1H, J = 7, 13,5 Hz), 2,25–2,15 (m, 1H), 1,0 (d, 3H, J = 7 Hz), 0,66 (d, 3H, J = 7 Hz).
Schritt B: (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2-fluor-4-(trifluormethyl)phenylalaninmethylester
Zu einer Lösung von 5,5 g (15 mmol) (2R,5S)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-(2'-fluor-4'-(trifluormethyl)benzyl)-5-isopropylpyrazin in 50 ml einer Mischung aus Acetonitril:Dichlormethan (10:1) wurden 80 ml 1 N wässrige Trifluoressigsäure zugegeben. Die Reaktion wurde 6 Stunden gerührt und die organischen Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Natriumcarbonat wurde zugegeben, bis die Lösung basisch war (> pH 8), und anschließend wurde die Reaktion mit 100 ml Tetrahydrofuran und 10 g (46 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat versetzt. Die resultierende Aufschlämmung wurde 16 Stunden gerührt, im Vakuum eingeengt und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 20% Ethylacetat in Hexanen) ergab 5,1 g der Titelverbindung. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,38–7,28 (m, 3H), 5,10 (br. d, 1H), 4,65–3,98 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,32–3,25 (m, 1H), 3,13–3,05 (m, 1H), 1,40 (s, 9H).
Schritt C: (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2-fluor-4-(trifluormethyl)phenylalanin
Eine Lösung von 5,1 g (14 mmol) (R,S)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2-fluor-4-(trifluormethyl)phenylalaninmethylester in 350 ml einer Mischung aus Tetrahydrofuran:Methanol:1 N Lithiumhydroxid (3:1:1) wurde 4 Stunden bei 50°C gerührt. Die Reaktion wurde abgekühlt, mit 5%iger verdünnter Salzsäure angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt, um 4,8 g der Titelverbindung zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7,45–7,38 (m, 3H), 4,44–4,40 (m, 1H), 3,38–3,33 (m, 1H), 2,98 (dd, 1H, J = 9,6, 13,5 Hz), 1,44 (s, 9H).
Schritt D: (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-[2-fluor-4-(trifluormethyl)phenyl]butansäure
Zu einer Lösung von 3,4 g (9,7 mmol) des Produkts von Schritt C in 60 ml Tetrahydrofuran bei 0°C wurden der Reihe nach 2,3 ml (13 mmol) N,N-Diisopropylethylamin und 1,7 ml (13 mmol) Isobutylchlorformiat zugegeben und die Reaktion bei dieser Temperatur 30 Minuten gerührt. Eine abgekühlte etherische Diazomethanlösung wurde anschließend zugegeben, bis die Gelbfärbung bestehen blieb, und das Rühren wurde weitere 16 Stunden fortgesetzt. Das überschüssige Diazomethan wurde durch tropfenweise Zugabe von Essigsäure gequencht und die Reaktion mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 5%iger Salzsäure, gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 9:1 Hexan:Ethylacetat) ergab 0,5 g Diazoketon. Zu einer Lösung von 0,5 g (1,33 mmol) des Diazoketons, gelöst in 100 ml Methanol, bei 0°C wurden der Reihe nach 0,7 ml (4 mmol) N,N-Diisopropylethylamin und 32 mg (0,13 mmol) Silberbenzoat zugegeben. Die Reaktion wurde 2 Stunden gerührt, bevor sie mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 2 N Salzsäure, gesättigtem wässrigem Natriumhydrogencarbonat und Salzlösung gewaschen wurde. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und in 50 ml einer Mischung aus Tetrahydrofuran:Methanol:1 N wässrigem Lithiumhydroxid (3:1:1) gelöst und 3 Stunden bei 50°C gerührt. Die Reaktion wurde abgekühlt, mit 5%iger Salzsäure angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt, um 410 mg der Titelverbindung als einen weißen schaumigen Feststoff zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,47–7,33 (m, 3H), 4,88 (br. s, 1H), 4,26–3,98 (m, 1H), 3,06–3,01 (m, 1H), 2,83–2,77 (m, 1H), 2,58–2,50 (m, 2H), 1,29 (s, 9H).
ZWISCHENPRODUKT 3
(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butansäure
Schritt A: (2S,5R)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-isopropyl-5-(2',4',5'-trifluorbenzyl)pyrazin
Die Titelverbindung (3,81 g) wurde aus 3,42 g (18,5 mmol) (2S)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-isopropylpyrazin und 5 g (22,3 mmol) 2,4,5-Trifluorbenzylbromid durch Anwendung des für Zwischenprodukt 2, Schritt A, beschriebenen Verfahrens hergestellt. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,01 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,78 (m, 3H), 3,64 (m, 3H), 3,61 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 0,99 (d, 3H, J = 8 Hz), 0,62 (d, 3H, J = 8 Hz).
Schritt B: (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl-2,4,5-trifluorphenylalaninmethylester
Zu einer Lösung von 3,81 g (11,6 mmol) (2S,5R)-2,5-Dihydro-3,6-dimethoxy-2-isopropyl-5-(2',4',5'-trifluorbenzyl)pyrazin in 20 ml Acetonitril wurden 20 ml 2 N Salzsäure zugegeben. Die Reaktion wurde 72 Stunden gerührt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in 30 ml Dichlormethan gelöst und mit 10 ml (72 mmol) Triethylamin und 9,68 g (44,8 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat versetzt. Die Reaktion wurde 16 Stunden gerührt, mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 1 N Salzsäure und Salzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und durch Flashchromatographie (Kieselgel, 9:1 Hexane:Ethylacetat) gereinigt, um 2,41 g der Titelverbindung zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,99 (m, 1H), 6,94 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 3,78 (m, 3H), 3,19 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 1,41 (s, 9H).
Schritt C: (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2,4,5-trifluorphenylalanin
Die Titelverbindung (2,01 g) wurde aus 2,41 g (7,5 mol) (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2,4,5-trifluorphenylalaninmethylester durch Anwendung des für Zwischenprodukt 2, Schritt C, beschriebenen Verfahrens hergestellt. MS (M + 1 – BOC) 220,9.
Schritt D: (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butansäure
Zu einer Lösung von 0,37 g (1,16 mmol) (R)-N-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-2,4,5-trifluorphenylalanin in 10 ml Diethylether bei –20°C wurden der Reihe nach 0,193 ml (1,3 mmol) Triethylamin und 0,18 ml (1,3 mmol) Isobutylchlorformiat zugegeben, und die Reaktion wurde bei dieser Temperatur 15 Minuten gerührt. Anschließend wurde eine gekühlte etherische Diazomethanlösung zugegeben, bis die Gelbfärbung bestehen blieb, und das Rühren wurde 1 weitere Stunde fortgesetzt. Das überschüssige Diazomethan wurde durch tropfenweise Zugabe von Essigsäure gequencht, und die Reaktion wurde mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 3:1 Hexan:Ethylacetat) ergab 0,36 g Diazoketon. Zu einer Lösung von 0,35 g (1,15 mmol) des in 12 ml 1,4-Dioxan:Wasser (5:1) gelösten Diazoketons wurden 26 mg (0,113 mmol) Silberbenzoat zugegeben. Die resultierende Lösung wurde 2 Stunden mit Ultraschall behandelt, bevor sie mit Ethylacetat verdünnt und der Reihe nach mit 1 N Salzsäure und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt wurde. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 97:2:1 Dichlormethan:Methanol:Essigsäure) ergab 401 mg der Titelverbindung. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,06 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 5,06 (br. s, 1H), 4,18 (m, 1H), 2,98 (m, 2H), 2,61 (m, 2H), 1,39 (s, 9H).
ZWISCHENPRODUKT 4
(3R)-4-(2-Brom-4,5-difluorphenyl)-3-[(tert.-butoxycarbonyl)amino]butansäure
Zu einer Lösung von 2,4 g (10 mmol) 2-Brom-4,5-difluorbenzoesäure [hergestellt gemäß dem Verfahren von Braish et al., Syn. Comm., 3067–3074 (1992)] in 75 ml Tetrahydrofuran wurden 2,43 g (15 mmol) Carbonyldiimidazol zugegeben. Die Lösung wurde 3,5 Stunden unter Rückfluss erhitzt, auf Umgebungstemperatur abgekühlt und mit 0,38 g (10 mmol) Natriumborhydrid in 15 ml Wasser versetzt. Die Reaktion wurde 10 Minuten gerührt und zwischen Ethylacetat und 10%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgetrennt. Die organische Schicht wurde zweimal mit warmem Wasser, Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 4:1 Hexan:Ethylacetat) ergab 1,9 g 2-Brom-4,5-difluorbenzylalkohol. Zu einer Lösung von 1,9 g (8,4 mmol) 2-Brom-4,5-difluorbenzylalkohol in 30 ml Dichlormethan bei 0°C wurden 3,4 g (10 mmol) Tetrabromkohlenstoff und 2,7 g (10 mmol) Triphenylphosphin zugegeben. Die Reaktion wurde 2 Stunden bei dieser Temperatur gerührt, das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand mit 100 ml Diethylether gerührt. Die Lösung wurde filtriert, im Vakuum eingeengt und durch Flashchromatographie (Kieselgel, 20:1 Hexan:Ethylacetat) gereinigt, um 2,9 g 2-Brom-4,5-difluorbenzylbromid zu ergeben, das mit Tetrabromkohlenstoff verunreinigt war und das ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Durch Anwendung der für die Herstellung der Zwischenprodukte 1–3 skizzierten Verfahren wurde das Benzylbromidderivat in die Titelverbindung umgewandelt.
LC/MS 394 und 396 (M + 1).
Durch Anwendung im Wesentlichen der für die Herstellung der Zwischenprodukte 1–4 skizzierten Verfahren wurden die Zwischenprodukte in Tabelle 1 hergestellt.
TABELLE 1

Zwischenprodukt	R³	Ausgewählte ¹H-NMR-Daten (CD₃OD)
5	2-F, 4-Cl, 5-F	7,11 (dd, 1H, J = 8,9, 6,4 Hz), 7,03 (dd, 1H, J = 9,0, 6,6)
6	2-F, 5-Cl	7,27 (dd, 1H, J = 6,4, 2,5 Hz), 7,21 (m, 1H), 7,03 (t, 1H, J = 9,2 Hz)
7	2-Me, 5-Cl	7,16 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,11–7,07 (m, 2H), 2,34 (s, 3H)
8	2-Cl, 5-Cl	7,34 (d, 1H, J = 9,0), 7,33 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,21 (dd, 1H, J = 8,5, 2,5 Hz)
9	2-F, 3-Cl, 6-F	7,35 (td, 1H, J = 8,5, 5,8 Hz), 6,95 (t, 1H, J = 8,5 Hz)
10	3-Cl, 4-F	7,33 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,19–7,11 (m, 2H)
11	2-F, 3-F, 6-F	7,18–7,12 (m, 1H), 6,91 (m, 1H)
12	2-F, 4-F, 6-F	6,81 (t, 2H, J = 8,4 Hz)
13	2-OCH₂Ph,5-F	7,49 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,38 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 7,30 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 6,96–6,89 (m, 3H), 5,11 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,08 (d, 1H, J = 11,9 Hz)

BEISPIEL 1
7-[(3R)-3-Amino-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8- tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Schritt A. 1-Azido-3-phenyl-2-propanol
Zu einer Mischung aus 24,22 g, (372,5 mmol) Natriumazid und 19,93 g (372,5 mmol) Ammoniumchlorid in 150 ml DMF wurden 10,0 g (74,5 mmol) 2-Benzyloxiran zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 18 Stunden bei 100°C gerührt und anschließend zwischen Wasser und Ethylacetat aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit zwei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt, um 13,4 g eines viskosen Öls zu ergeben. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, Elution der Reihe nach mit 4:1 Hexan/Ethylacetat und 1:1 Hexan/Ethylacetat) ergab 10,5 g der Titelverbindung. DC (R_f = 0,41 in 4:1 Hexan/Ethylacetat); ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,37 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 7,30 (t, 1H, J = 6,4 Hz), 7,25 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 4,01–4,06 (m, 1H), 3,31–3,43 (m, 2H), 2,81–2,88 (m, 2H), 2,12 (s, 1H).
Schritt B. Ethyl-N-(1-azido-3-phenylprop-2-yl)-N-(phenylmethyl)-2-aminoacetat
Zu einer Lösung von 8,285 g (46,78 mmol) Azidoalkohol von Schritt A und 10,9 ml (10,026 g, 93,56 mmol) 2,6-Lutidin in 50 ml Dichlormethan bei 0°C wurden 7,87 ml (13,2 g, 46,78 mmol) Trifluormethansulfonsäureanhydrid zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 15 Minuten bei 0°C gerührt und anschließend mit 18,08 g (93,56 mmol) Ethyl-N-(phenylmethyl)-2-aminoacetat versetzt. Die resultierende Mischung wurde 20 Minuten bei 0°C und 90 Minuten bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Mischung wurde zwischen Dichlormethan und gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit drei Portionen Dichlormethan extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 9:1 Hexan/Ethylacetat) ergab 4,596 g der Titelverbindung als ein gelbes viskoses Öl. MS 353 (M + 1).
Schritt C. 5-Ethoxy-1,2-bis(phenylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydropyrazin
Eine Mischung aus 2,50 g (7,10 mmol) Ethylester von Schritt B und 1,863 g (7,10 mmol) Triphenylphosphin in 20 ml Toluol wurde 18 Stunden auf 100°C erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und zwischen Ethylacetat und Wasser aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit drei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, Elution der Reihe nach mit 9:1, 4:1, dann 1:1 Hexan/Ethylacetat) ergab 198 mg der Titelverbindung. MS 309 (M + 1).
Schritt D. 3-Methyl-6,7-bis(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Eine Mischung aus 195 mg (0,633 mmol) der Verbindung von Schritt C und 0,13 ml (104,6 mg, 1,90 mmol) 3-Amino-1-propin in 2 ml Toluol wurde 18 Stunden auf 100°C erhitzt und anschließend eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, Elution der Reihe nach mit 1:1 Hexan/Ethylacetat, 100% Ethylacetat, 10% Methanol/Dichlormethan) ergab 116 mg der Titelverbindung als ein braunes viskoses Öl. MS 318 (M + 1).
Schritt E. 3-Methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 410 mg (1,293 mmol) Tetrahydroimidazopyrazin aus Schritt D in 10 ml Ethanol wurden 410 mg Ammoniumformiat und 200 mg 10% Palladium auf Kohle zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde unter einer Wasserstoffatmosphäre 4 Stunden auf Rückflusstemperatur erhitzt. Die Mischung wurde anschließend durch Celite filtriert und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 10% Methanol/Dichlormethan) ergab 212 mg der Titelverbindung als ein Glas. MS 228 (M + 1).
Schritt F. 7-[(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8,-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 93,3 mg (0,30 mmol) 3-Methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin von Schritt E, 85 mg, (0,27 mmol) (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butansäure und 0,0454 ml (32,8 mg, 0,32 mmol) Diisopropylethylamin in 2 ml THF wurden 132,7 mg (0,30 mmol) Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)phosphoniumhexafluorphosphat (BOP) zugegeben. Die Reaktion wurde 18 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt und dann eingeengt und zwischen Ethylacetat und Wasser aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit drei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch präparative DC (Kieselgel, 10% Methanol/Dichlormethan) ergab 130 mg der Titelverbindung als ein hellgelbes Pulver, das durch HPLC (Gilson; YMC-Pack Pro C18-Säule, 100 × 20 mm ID; Lösungsmittelgradient von 10% Acetonitril, 90% Wasser und 0,1% Trifluoressigsäure bis 90% Acetonitril, 10% Wasser und 0,1% Trifluoressigsäure) weiter gereinigt wurde, um 101 mg der Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS 525 (M + 1).
Schritt G. 7-[(3R)-3-Amino-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Eine Lösung von 30 mg 7-[(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin von Schritt F in 2 ml 4 N Chlorwasserstoff in Dioxan wurde 2 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Einengen ergab 18 mg der Titelverbindung. MS 425 (M + 1).
BEISPIEL 2
7-[(3R)-3-Amino-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4- triazolo[4,3-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Schritt A. 3-Methyl-N,6-bis(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 628 mg (2,039 mmol) 5-Ethoxy-1,2-bis(phenylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydropyrazin von Beispiel 1, Schritt C, in 15 ml Ethanol wurden 181,3 mg (2,447 mmol) Essigsäurehydrazid zugegeben. Die Mischung wurde 14 Stunden bei 60°C gerührt und anschließend eingeengt. Das resultierende braune viskose Öl wurde in Toluol gelöst und 5 Stunden zum Rückfluss erhitzt. Die Mischung wurde eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, Elution der Reihe nach mit Ethylacetat, dann 10% Methanol/Dichlormethan) ergab 486 mg der Titelverbindung. MS 319 (M + 1).
Schritt B. 3-Methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 440 mg (1,384 mmol) 3-Methyl-N,6-bis(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazol[4,3-a]pyrazin aus Schritt A und 440 mg Ammoniumformiat in 10 ml Ethanol wurden 440 mg 10% Palladium auf Kohle zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde unter einer Wasserstoffatmosphäre 4 Stunden auf 80°C erwärmt. Anschließend wurde die Mischung durch Celite filtriert und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, Elution der Reihe nach mit 10% Methanol/Dichlormethan, dann 80:15:1 Chloroform/Methanol/Ammoniumhydroxid) ergab 105 mg der Titelverbindung als einen weißen Feststoff. MS 229 (M + 1).
Schritt C. 7-[(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6_'7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 12 mg (0,053 mmol) 3-Methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin aus Schritt B, 16,6 mg (0,053 mmol) (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butansäure und 8,6 mg (0,0636 mmol) HOBT in 3 ml Dichlormethan wurden 15,3 mg (0,080 mmol) EDC und 0,0186 ml (13,4 mg, 0,183 mmol) Diisopropylethylamin zugegeben. Die Reaktion wurde 18 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt, dann eingeengt und zwischen Dichlormethan und gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit drei Portionen Dichlormethan extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch präparative DC (Kieselgel, 10% Methanol/Dichlormethan) ergab 10,1 mg der Titelverbindung als ein viskoses Öl. MS 470 (M + 1 – tBu).
Schritt D. 7-[(3R)-3-Amino-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Eine Lösung von 9,0 mg 7-[(3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-3-methyl-6-(phenylmethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin aus Schritt C in 2 ml 4 N Chlorwasserstoff in Dioxan wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Einengen ergab 9,2 mg der Titelverbindung. MS 426 (M + 1).
BEISPIEL 3
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-8-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Trifluoracetatsalz
Schritt A. 2-Hydrazino-3-methylpyrazin
Zu 15 ml Hydrazinhydrat bei Umgebungstemperatur wurden tropfenweise 5 g (42,9 mmol) 2-Chlor-3-methylpyrazin zugegeben. Die resultierende Mischung wurde 45 Minuten auf 120°C erhitzt, dann 48 Stunden in einem Kühlschrank gekühlt. Der gelbe Niederschlag wurde durch Vakuumfiltration gesammelt und unter Vakuum getrocknet, um 1,6 g (30%) der Titelverbindung zu ergeben, die ohne weitere Reinigung verwendet wurde. ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7,94 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 2,32 (s, 3H).
Schritt B. N'-(3-Methylpyrazin-2-yl)-2,2,2-trifluoracetohydrazid
Zu 1,6 g (12,9 mmol) des Produkts von Schritt A bei 0°C wurden langsam und unter kräftigem Rühren 16 ml Trifluoressigsäureanhydrid zugegeben, die auf 0°C abgekühlt worden waren. Die resultierende Mischung wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt, im Vakuum eingeengt und durch Behandlung mit methanolischem Ammoniak basisch gemacht. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, 5% Methanol/0,5% Ammoniumhydroxid/Dichlormethan) gereinigt, um 2,83 g (100%) der Titelverbindung zu ergeben. MS 221 (M + 1).
Schritt C. 8-Methyl-3-(trifluormethyl)-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu 2,8 g (12,9 mmol) des Produkts von Schritt B wurden etwa 10 ml Polyphosphorsäure zugegeben und die resultierende Mischung 16 Stunden auf 140°C erhitzt. Die dunkle Mischung wurde in Eis gegossen, mit 29%igem Ammoniumhydroxid bis pH 9 basisch gemacht und in Ethylacetat extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und der Rückstand durch Säulenchromatographie (Kieselgel, 30% Ethylacetat/Hexan) gereinigt, um 815 mg (31%) der Titelverbindung zu ergeben. MS 203 (M + 1).
Schritt D. 8-Methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 400 mg (1,98 mmol) des Produkts aus Schritt C in 10 ml Ethanol wurden 231 mg 10% Palladium auf Aktivkohle zugegeben und die Mischung 16 Stunden bei Umgebungstemperatur unter 1 Atmosphäre Wasserstoff gerührt. Die Lösung wurde durch Celite filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt, um 390 mg (96%) der Titelverbindung zu ergeben, die ohne weitere Reinigung verwendet wurde. MS 207 (M + 1).
Schritt E. 7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl)-8-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8- tetrahydro- 1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Trifluoracetatsalz
Zu einer Lösung von 200 mg (0,97 mmol) des Produkts aus Schritt D in 5 ml Dimethylformamid wurden 280 mg (0,84 mmol) (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butansäure, 198 mg (1,45 mmol) 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (HOAt), 0,422 ml (2,4 mmol) N,N-Diisopropylethylamin und 443 mg (1,2 mmol) O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorphosphat (HATU) zugegeben. Nach 16-stündigem Rühren bei Umgebungstemperatur wurde die Mischung mit Ethylacetat verdünnt und die organische Schicht der Reihe nach mit einer Portion gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung, drei Portionen Wasser und einer Portion Salzlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und der Rückstand durch präparative DC (Kieselgel, 75% Ethylacetat/Hexan) gereinigt, um 86 mg der N-BOC-geschützten Titelverbindung als eine Mischung aus Diastereomeren zu ergeben. Die Trennung durch chirale HPLC (ChiralCel-OJ- oder ChiralCel-OD-Säule, 10% Ethanol/Hexan) ergab die einzelnen Diastereomere, von denen jedes mit einer 1:1-Mischung aus Trifluoressigsäure und Dichlormethan bei Umgebungstemperatur behandelt wurde. Die Entfernung der überschüssigen Trifluoressigsäure durch azeotrope Destillation mit Dichlormethan und Methanol ergab 24,3 mg eines jeden Diastereomers der Titelverbindung. Schneller eluierendes Diastereomer: MS 422 (M + 1); langsamer eluierendes Diastereomer: MS 422 (M + 1).
BEISPIEL 4
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-8-methyl-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Schritt A. 8-Chlor-2-(trifluormethyl)-2,3-dihydroimidazo[1,2-a]pyridin-2-ol-Hydrobromid
Zu einer Suspension von 5,58 g (43,1 mmol) 2-Amino-3-chlorpyrazin in 55 ml Dioxan wurden langsam 6,7 ml (64,5 mmol) 3-Brom-1,1,1-trifluoraceton zugegeben. Die Mischung wurde über Nacht auf 50°C erwärmt. Der resultierende Niederschlag wurde durch Filtration gesammelt und mit Diethylether gewaschen, um nach dem Trocknen unter Vakuum 12,62 g eines gräulichen Feststoffs zu ergeben, der ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Schritt B. 8-Chlor-2-(trifluormethyl)imidazo[1,2-a]pyrazin
Eine 9,62-g-Portion Hydrobromid von Schritt A wurde durch Behandlung mit 5 N wässriger Natriumhydroxidlösung in die freie Base umgewandelt. Die Extraktion in Ethylacetat, das Trocknen über Magnesiumsulfat und das Einengen ergaben 6,2 g (25,9 mmol) Alkohol, der in 250 ml Isopropanol zum Rückfluss erhitzt wurde. Nach 4 Stunden wurde die Reaktion durch DC-Analyse als beendet eingeschätzt. Die Mischung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Ethylacetat suspendiert, mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Biotage-Chromatographie (Kieselgel, 20% Ethylacetat/Hexan) ergab 3,96 g der Titelverbindung. MS 222 (M + 1).
Schritt C. 8-Methyl-2-(trifluormethyl)imidazo[1,2-a]pyrazin
Diese Reaktion wurde durch Nacharbeiten des in J. Org. Chem. 1987, 52, 3847, beschriebenen Verfahrens durchgeführt. Eine Suspension von 3,88 g (27,05 mmol) Kupfer(I)bromid in 30 ml wasserfreiem THF wurde auf –78°C abgekühlt. Eine Lösung von Methylmagnesiumbromid (18 ml, 54 mmol, 3,0 M in Diethylether) wurde zugegeben und die Mischung 30 Minuten bei –78°C gerührt. Dazu wurde tropfenweise eine Lösung von 1,5 g (6,77 mmol) Imidazopyrazin von Schritt B in 30 ml wasserfreiem THF zugegeben und die Mischung 2 Stunden bei –78°C gerührt. Man ließ die Reaktionsmischung innerhalb von 1 Stunde auf –70°C erwärmen, und anschließend wurde sie 3 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von 29%iger Ammoniumhydroxidlösung gequencht und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde der Reihe nach mit wässrigem Ammoniumhydroxid und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Biotage-Chromatographie (Kieselgel, 25% Ethylacetat/Hexan) ergab 690 mg der Titelverbindung. MS 202 (M + 1).
Schritt D. 8-Methyl-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Imidazopyrazin von Schritt C (690 mg, 3,43 mmol) in etwa 20 ml Ethanol wurde mit 400 mg 10% Palladium auf Kohle unter einer Wasserstoffatmosphäre 16 Stunden gerührt. Die Mischung wurde durch Celite filtriert und eingeengt, um 670 mg der Titelverbindung zu ergeben, die ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Schritt E. 7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-8-methyl-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Eine Mischung aus 670 mg (3,3 mmol) Tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin von Schritt D, 1,3 g (3,9 mmol) (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,3,5-trifluorphenyl)butansäure, 1,51 g (3,97 mmol) HATU, 674 mmol (4,95 mmol) HORT und 1,44 ml (8,3 mmol) Diisopropylethylamin in 10 ml DMF wurde 16 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Ethylacetat verdünnt, der Reihe nach mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung, vier Portionen Wasser und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Biotage-Chromatographie (Kieselgel, 30% Ethylacetat/Hexan) ergab 1,62 g des Boc-geschützten Derivats als zwei Diastereomere, die anschließend durch Chromatographie auf einer ChiralCel-OJ-Säule (10% Ethylacetat/Hexan) getrocknet wurden, um 640 mg des schneller eluierenden Diastereomers und 700 mg des langsam eluierenden Diastereomers zu ergeben. Jedes Diastereomer wurde getrennt durch 1,5-stündige Behandlung mit methanolischem Chlorwasserstoff bei Umgebungstemperatur von der Schutzgruppe befreit, um zwei Diastereomere der Titelverbindung zu ergeben. MS 421 (M + 1).
BEISPIEL 5
7-[(3R)-3-Amino-4-(3,4-difluorphenyl)butanoyl]-8-(4-fluorphenyl)-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Trifluoracetatsalz
Schritt A. 8-(4-Fluorphenyl)-2-(trifluormethyl)imidazo[1,2-a]pyrazin
Eine Mischung aus 150 mg (0,68 mmol) 8-Chlor-2-(trifluormethyl)imidazo[1,2-a]pyrazin (Beispiel 4, Schritt B) und 190 mg (1,36 mmol) 4-Fluorphenylboronsäure, 0,931 ml 2 M wässrige Natriumcarbonatlösung und 0,233 ml Ethanol wurden unter einer Stickstoffatmosphäre 16 Stunden auf 80°C erwärmt. Die Mischung wurde mit Ethylacetat verdünnt, der Reihe nach mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch präparative DC (Kieselgel, 30% Ethylacetat/Hexan) ergab 134 mg der Titelverbindung. MS 282 (M + 1).
Schritt B. 8-(4-Fluorphenyl)-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Imidazopyrazin von Schritt A (134 mg, 0,48 mmol) in 8 ml Ethanol wurde 16 Stunden unter einer Wasserstoffatmosphäre mit 53 mg 10% Palladium auf Kohle gerührt. Die Mischung wurde durch Celite filtriert und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung durch präparative DC (Kieselgel, 5% Methanol/Dichlormethan) ergab 106 mg der Titelverbindung als einen weißen Feststoff. MS 286 (M + 1).
Schritt C. 7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-8-(4-fluorphenyl)-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Trifluoracetatsalz
Das Tetrahydroimidazopyrazin von Schritt B (30 mg, 0,11 mmol) wurde durch Nacharbeiten des in Beispiel 4, Schritt E, skizzierten Verfahrens mit (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(3,4-difluorphenyl)butansäure gekuppelt. Die Reinigung durch präparative DC (Kieselgel, 50% Ethylacetat in Hexan) ergab 65 mg des Boc-Zwischenprodukts als eine Diastereomerenmischung, die durch Chromatographie mit Hilfe einer ChiralPak-AD-Säule (14% Ethanol/Hexane) getrennt wurde. Jedes Diastereomer wurde durch Behandlung mit 1:1 Trifluoressigsäure/Dichlormethan getrennt von der Schutzgruppe befreit, um 19,8 mg der Titelverbindung aus dem schneller eluierenden Diastereomer und 19,7 mg der Titelverbindung aus dem langsamer eluierenden Diastereomer zu ergeben. MS 483 (M + 1).
BEISPIEL 6
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-8-(methoxycarbonyl)-2-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin-Dihydrochlorid
Methyl-3-aminopyrazin-2-carboxylat wurde im Wesentlichen durch Nacharbeiten der in Beispiel 4, Schritte A, B, D und E, skizzierten Verfahren in die Titelverbindung als eine Diastereomerenmischung umgewandelt. MS 465 (M + 1).
BEISPIEL 7
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-6-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Schritt A. 2-Hydroxy-5-methylpyrazin
Zu einer Lösung von 10,1 g (80,9 mmol) L-Alaninamid-Hydrochlorid in 100 ml Methanol und 100 ml Wasser bei –40°C wurden 9,28 ml wässriges Glyoxal (40 Gew.%) tropfenweise zugegeben. Die Mischung wurde 5 Minuten bei –40°C gerührt, dann wurden 10 ml 50%iges wässriges Natriumhydroxid zugegeben. Die resultierende Mischung ließ man 18 Stunden bei Raumtemperatur rühren. Die Lösung wurde auf 0°C abgekühlt und mit 12 ml konzentrierter Salzsäure versetzt, gefolgt von 15 g Natriumhydrogencarbonat. Die Mischung wurde 5 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und anschließend mit weiteren 15 g Natriumhydrogencarbonat versetzt. Nach 20-minütigem Rühren wurde die Mischung filtriert. Das Filtrat wurde zu einem gelben Feststoff eingeengt. Zu diesem Feststoff wurden 500 ml 80:15:1 Dichlormethan/Methanol/Ammoniumhydroxid zugegeben und die Mischung kräftig gerührt. Ein gelber Feststoff wurde durch Filtration entfernt und das Filtrat eingeengt, um die Titelverbindung zu ergeben. MS 110,9 (M + 1).
Schritt B. 2-Chlor-5-methylpyrazin
Ein 250-ml-Rundkolben wurde mit 8,61 g 2-Hydroxy-5-methylpyrazin von Schritt A und 50 ml Phosphoroxychlorid beschickt. Nach der Zugabe von 0,2 ml Schwefelsäure wurde die Mischung 1 Stunde zum Rückfluss erhitzt. Weitere 2,5 ml Schwefelsäure wurden zugegeben und die resultierende Lösung 14 Stunden zum Rückfluss erhitzt und anschließend im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde zwischen Ethylacetat und wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgetrennt. Die wässrige Phase wurde mit drei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 4:1, dann 1:1 Hexan/Ethylacetat) ergab die Titelverbindung als ein gelbes Öl. MS 128,9 (M + 1).
Schritt C. 2-Hydroazino-5-methylpyrazin
Die Titelverbindung wurde aus 3,99 g 2-Chlor-5-methylpyrazin im Wesentlichen durch Nacharbeiten des in Beispiel 3, Schritt A, skizzierten Verfahrens hergestellt. MS 124,9 (M + 1).
Schritt D. N-(5-Methylpyrazin-2-yl)-2,2,2-trifluoracetohydrazid
Die Titelverbindung wurde aus 2,94 g 2-Hydrazino-5-methylpyrazin im Wesentlichen durch Nacharbeiten des in Beispiel 3, Schritt B, skizzierten Verfahrens hergestellt, außer dass die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt und das Produkt in Schritt E ohne weitere Reinigung Verwendung wurde. MS 221 (M + 1).
Schritt E. 6-Methyl-3-(trifluormethyl)-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu dem Produkt von Schritt D wurden 30 ml diphosphorhaltige Orthophosphorsäure zugegeben und die resultierende Mischung 4 Stunden auf 120°C erhitzt. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, in Eis gegossen, mit 29%iger Ammoniumhydroxid basisch gemacht und mit drei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, 50% Ethylacetat/Hexan) gereinigt, um die Titelverbindung zu ergeben. MS 202,9 (M + 1).
Schritt F. 6-Methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Die Titelverbindung wurde aus 2,65 g des Produkts von Schritt E im Wesentlichen durch Nacharbeiten des in Beispiel 3, Schritt D, skizzierten Verfahrens hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 10% Methanol/Dichlormethan) ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS 207 (M + 1).
Schritt G. 7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-6-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Die Titelverbindung wurde aus 509 mg des Produkts von Schritt F im Wesentlichen durch Nacharbeiten des in Beispiel 3, Schritt D, skizzierten Verfahrens hergestellt. Die Reaktionsmischung wurde vor der Aufarbeitung 3 Tage gerührt. Die Flashchromatographie (Kieselgel, 50% Ethylacetat/Hexan) ergab das gekuppelte Produkt als eine Mischung aus C-6-Diastereomeren. Die Trennung durch chirale HPLC (ChiralCel-OD-Säule, 15% Ethanol/Hexan) ergab die einzelnen Diastereomere, die jeweils mit einer 1:1-Mischung aus Methanol und gesättigtem methanolischem Chlorwasserstoff bei Umgebungstemperatur 1 Stunde behandelt wurden. Das Einengen ergab jedes Diastereomer der Titelverbindung. Schneller eluierendes Diastereomer: MS 422 (M + 1); langsamer eluierendes Diastereomer: MS 422 (M + 1).
BEISPIEL 8
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-6,8-dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Schritt A. 7-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-6-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 1,74 g (8,45 mmol) 6-Methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin von Beispiel 7, Schritt F, in 40 ml Dichlormethan wurden 2,03 g (9,29 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Einengen ergab die Titelverbindung. MS 307 (M + 1).
Schritt B. 7-(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)-6,8-dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin
Zu einer Lösung von 2,17 g (7,11 mmol) des Produkts von Schritt A in 25 ml Toluol bei –78°C wurden 1,13 ml (7,47 mmol) Tetramethylethylendiamin und 3,0 ml (7,47 mmol) 2,5 M n-Butyllithiumlösung in Hexan zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 10 Minuten gerührt und anschließend tropfenweise bei –78°C mit 0,465 ml (7,47 mmol) Iodmethan versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 10 Minuten gerührt, und dann ließ man sie allmählich auf Raumtemperatur erwärmen. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von wässriger Ammoniumchloridlösung gequencht und mit drei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Die Reinigung durch Flashchromatographie (Kieselgel, 0 bis 10% Methanol/Dichlormethan-Gradientenelution) ergab die Titelverbindung als eine Mischung aus Diastereomeren. MS 321 (M + 1), 265 (M + 1 – BOC).
Schritt C. 6,8-Dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Das Produkt von Schritt B wurde in gesättigtem methanolischem Chlorwasserstoff gelöst. Die Lösung wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Das Einengen ergab die Titelverbindung. MS 207 (M + 1).
Schritt D. 7-[(3R)-3-Amino-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butanoyl]-6,8-dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Die Titelverbindung wird hergestellt durch Kupplung des Produkts von Schritt C mit (3R)-3-[(1,1-Dimethylethylcarbonyl)amino]-4-(2,4,5-trifluorphenyl)butansäure (Zwischenprodukt 3). Die Behandlung des gekuppelten Produkts mit methanolischem Chlorwasserstoff ergibt die Titelverbindung.
BEISPIEL 9
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,5-difluorphenyl)butanoyl]-6-methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Die Titelverbindung wird durch Kupplung von 6-Methyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin von Beispiel 7, Schritt F, mit (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,5-difluorphenyl)butansäure (Zwischenprodukt 1) hergestellt. Die Behandlung des gekuppelten Produkts mit methanolischem Chlorwasserstoff ergibt die Titelverbindung.
BEISPIEL 10
7-[(3R)-3-Amino-4-(2,5-difluorphenyl)butanoyl]-6,8-dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid
Die Titelverbindung wird durch Kupplung von 6,8-Dimethyl-3-(trifluormethyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-Hydrochlorid von Beispiel 8, Schritt C, mit (3R)-3-[(1,1-Dimethylethoxycarbonyl)amino]-4-(2,5-difluorphenyl)butansäure (Zwischenprodukt 1) hergestellt. Die Behandlung des gekuppelten Produkts mit methanolischem Chlorwasserstoff ergibt die Titelverbindung.
Im Wesentlichen durch Nacharbeiten der für die Beispiele 1–10 skizzierten Verfahren wurden die in Tabelle 2 aufgeführten Verbindungen hergestellt.
TABELLE 2

Bsp.	R³	R⁵	R⁶	X	R¹	MS (M + 1)
11	2-F, 5-F	4-F-Ph (Diast 1)	H	C-CF₃	H	483
12	2-F, 5-F	4-F-Ph (Diast 2)	H	C-CF₃	H	483
13	2-F	3-CF₃-Ph (Diast 1)	H	C-CF₃	H	515
14	2-F	3-CF₃-Ph (Diast 2)	H	C-CF₃	H	515
15	2-F, 5-F	Me (Diast 1)	H	C-CF₃	H	403
16	2-F, 5-F	Me (Diast 2)	H	C-CF₃	H	403
17	2-F, 5-F	Et (Diast 1)	H	C-CF₃	H	417
18	2-F, 5-F	Et (Diast 2)	H	C-CF₃	H	417
19	2-F, 5-F	Isopropyl (Diast 1)	H	C-CF₃	H	431
20	2-F, 5-F	Isopropyl (Diast 2)	H	C-CF₃	H	431
21	3-F, 4-F	H	4-F-Ph	C-CF₃	H	483
22	2-F	H	4-F-Ph	C-CF₃	H	465
23	2-F, 5-F	H	Me (Diast 1)	C-CF₃	H	403
24	2-F, 5-F	H	Me (Diast 2)	C-CF₃	H	403
25	2-F, 5-F	H	3-CF₃Ph (Diast 1)	C-CF₃	H	533
26	2-F, 5-F	H	3-CF₃-Ph (Diast 2)	C-CF₃	H	533
27	2-F, 4-F, 5-F	Et (Diast 1)	H	N	CF₃	436
28	2-F, 4-F, 5-F	Et (Diast 2)	H	N	CF₃	436
29	2-F, 5-F	Me (Diast 1)	H	N	CF₃	404
30	2-F, 5-F	Me (Diast 2)	H	N	CF₃	404

BEISPIEL FÜR EINE PHARMAZEUTISCHE FORMULIERUNG
Als eine spezielle Ausführungsform einer oralen pharmazeutischen Zusammensetzung enthält eine Tablette mit einem Wirkstoffgehalt von 100 mg 100 mg irgendeiner der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, 268 mg mikrokristalline Zellulose, 20 mg Croscarmellose-Natrium und 4 mg Magnesiumstearat. Zunächst werden der Wirkstoff, die mikrokristalline Zellulose und die Croscarmellose vermischt. Anschließend wird die Mischung mit Magnesiumstearat versetzt und zu Tabletten verpresst.
Obwohl die Erfindung in Bezug auf bestimmte spezielle Ausführungsformen davon beschrieben und veranschaulicht wurde, können wirksame Dosen, anders als die hierin oben angegebenen speziellen Dosen, als Folge von Abweichungen beim Ansprechverhalten des für irgendeine der Indikationen mit den oben angegebenen Verbindungen der Erfindung behandelten Säugers zur Anwendung kommen. Die beobachteten speziellen pharmakologischen Reaktionen können gemäß und abhängig von den speziellen ausgewählten Wirkverbindungen oder abhängig davon, ob pharmazeutische Träger vorhanden sind, sowie abhängig von der Art der Formulierung und dem verwendeten Verabreichungsweg variieren, und solche erwarteten Variationen oder Unterschiede bei den Ergebnissen sind von den Zielen und Praktiken der vorliegenden Erfindung umfasst. Die Erfindung soll daher durch den Umfang der folgenden Ansprüche definiert sein, und solche Ansprüche sollen so breit wie angemessen interpretiert werden.

Claims

Eine Verbindung der Formel I:
wobei: Ar Phenyl ist, das unsubstituiert oder mit 1–5 R³ substituiert ist, wobei R³ unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Halogen, (2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und unsubstituiert oder mit 1–5 Halogenen substituiert ist, (3) C_1-6-Alkoxy, das linear oder verzweigt ist und unsubstituiert oder mit 1–5 Halogenen substituiert ist, (4) CN und (5) Hydroxy, X ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: (1) N und (2) CR², R¹ und R² jeweils unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Wasserstoff, (2) CN, (3) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Halogenen oder Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, CN, OH, R⁴, OR⁴, NHSO₂R⁴, SO₂R⁴, CO₂H und CO₂C_1-6-Alkyl, wobei das CO₂C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist, (4) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, CN, OH, R⁴, OR⁴, NHSO₂R⁴, SO₂R⁴, CO₂H und CO₂C_1-6-Alkyl, wobei das CO₂C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist, und (5) einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocyclus, der gesättigt oder ungesättigt sein kann, umfassend 1–4 Heteroatome, unabhängig ausgewählt aus N, S und O, wobei der Heterocyclus unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Oxo, OH, Halogen, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls substituiert sind mit 1–5 Halogenen, R⁴ C_1-6-Alkyl ist, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Gruppen, unabhängig ausgewählt aus Halogen, CO₂H und CO₂C_1-6-Alkyl, wobei das CO₂C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Wasserstoff, (2) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit einem oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus: (a) Halogen, (b) Hydroxy, (c) Phenyl, wobei das Phenyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (d) Naphthyl, wobei das Naphthyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (e) CO₂H, (f) CO₂C_1-6-Alkyl, (g) CONR⁷R⁸, wobei R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus Wasserstoff, Tetrazolyl, Phenyl, C_3-6-Cycloalkyl und C_1-6-Alkyl, wobei C_1-6-Alkyl linear oder verzweigt ist und gegebenenfalls substituiert ist mit 1–6 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus 0–5 Halogenen und 0–1 Phenyl, wobei das Phenyl oder C_3-6-Cycloalkyl, das R⁷ oder R⁸ ist, oder der optionale Phenylsubstituent am C_1-6-Alkyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, oder wobei R⁷ und R⁸ gegebenenfalls verbunden sind, um einen Ring zu bilden, ausgewählt aus Pyrrolidin, Piperidin oder Morpholin, (3) CN, (4) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (5) Naphthyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, (6) CO₂H, (7) CO₂C_1-6-Alkyl, (8) CONR⁷R⁸ und (9) C_3-6-Cycloalkyl, das gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, mit der Maßgabe, dass einer der Reste R⁵ und R⁶ anders als Wasserstoff ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Die Verbindung nach Anspruch 1 der Formel Ia:

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Die Verbindung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei Ar Phenyl ist, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–5 Substituenten, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Fluor, (2) Chlor und (3) CF₃.
Die Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 3, wobei R¹ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Wasserstoff und (2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder mit Phenyl oder 1–5 Fluor substituiert ist.
Die Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4, wobei R² ausgewählt ist aus: (1) Wasserstoff, (2) C_1-6-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder mit 1–5 Fluor substituiert ist, und (3) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Fluor, OCH₃ und OCF₃.
Die Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 5, wobei R⁵ und R⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: (1) Wasserstoff, (2) C_1-10-Alkyl, das linear oder verzweigt ist und das unsubstituiert oder substituiert ist mit einem oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus: (a) Halogen, (b) Phenyl, wobei das Phenyl gegebenenfalls substituiert ist mit 1–5 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, OH, C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy, wobei das C_1-6-Alkyl und C_1-6-Alkoxy linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, und (3) Phenyl, das unsubstituiert oder substituiert ist mit 1–3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, OC_1-6-Alkyl und Halogen, wobei das C_1-6-Alkyl und OC_1-6-Alkyl linear oder verzweigt und gegebenenfalls mit 1–5 Halogenen substituiert sind, und (4) CO₂C_1-6-Alkyl, mit der Maßgabe, dass einer der Reste R⁵ und R⁶ anders als Wasserstoff ist.
Eine Verbindung, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

oder einem pharmazeutisch annehmbaren Salz davon.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, die einen inerten Träger und eine Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 enthält.
Eine Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 zur Verwendung in der Therapie.
Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung eines Medikaments zur Inhibierung der Dipeptidylpeptidase-IV-Enzymaktivität.
Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von Diabetes, nichtinsulinabhängigem (Typ 2) Diabetes mellitus, Hyperglykämie, Fettleibigkeit, Insulinresistenz, einer oder mehreren Lipidstörungen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Dyslipidämie, Hyperlipidämie, Hypertriglyceridämie, Hypercholesterinämie, niedrigen HDL-Werten und hohen LDL-Werten, und einem oder mehreren Zuständen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus (1) Hyperglykämie, (2) niedriger Glukosetoleranz, (3) Insulinresistenz, (4) Fettleibigkeit, (5) Lipidstörungen, (6) Dyslipidämie, (7) Hyperlipidämie, (8) Hypertriglyceridämie, (9) Hypercholesterinämie, (10) niedrigen HDL-Spiegeln, (11) hohen LDL-Spiegeln, (12) Atherosklerose und deren Folgekrankheiten, (13) vaskulärer Restenose, (14) Colon irritabile, (15) entzündlicher Darmerkrankung, einschließlich Morbus Crohn und Colitis ulcerosa, (16) anderen Entzündungszuständen, (17) Pankreatitis, (18) abdominaler Fettleibigkeit, (19) neurodegenerativer Erkrankung, (20) Retinopathie, (21) Nephropathie, (22) Neuropathie, (23) Syndrom X, (24) Eierstock-Hyperandrogenismus (polyzystisches Ovarialsyndrom), (25) Hypertension und anderen Störungen, bei denen die Insulinresistenz eine Komponente ist.
Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung, Steuerung oder Prävention von Atherosklerose.
Eine Kombination aus einer ersten Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 oder einem pharmazeutisch annehmbaren Salz davon und einer oder mehreren anderen Verbindungen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus: (a) anderen Dipeptidylpeptidase-IV-(DP-IV)-Inhibitoren, (b) Insulinsensibilisatoren, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus (i) PPARγ-Agonisten, anderen PPAR-Liganden, dualen PPARα/γ-Agonisten und PPARα-Agonisten, (ii) Biguaniden und (iii) Protein-Tyrosin-Phosphatase-1B-(PTP-1B)-Inhibitoren, (c) Insulin oder Insulin-Mimetika, (d) Sulfonylharnstoffen oder anderen Insulinsekretagoga, (e) α-Glucosidaseinhibitoren, (f) Glucagonrezeptorantagonisten, (g) GLP-1, GLP-1-Mimetika und GLP-1-Rezeptoragonisten, (h) GIP, GIP-Mimetika und GIP-Rezeptoragonisten, (i) PACAP, PACAP-Mimetika und PACAP-Rezeptoragonisten, (j) Cholesterinsenkungsmittel, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus (i) HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, (ii) Sequestriermitteln, (iii) Nicotinylalkohol, Nicotinsäure oder einem Salz davon, (iv) PPARα-Agonisten, (v) dualen PPARα/γ-Agonisten, (vi) Cholesterinabsorptionsinhibitoren, (vii) Acyl-CoA:Cholesterinacyltransferaseinhibitoren und (viii) Antioxidantien, (k) PPARδ-Agonisten, (l) Verbindungen gegen Fettleibigkeit, (m) Ileum-Gallensäure-Transporter-Inhibitoren, (n) Antihypertensiva und (o) antiinflammatorischen Mitteln, zur Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von einem oder mehreren Zuständen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus (1) Hyperglykämie, (2) niedriger Glukosetoleranz, (3) Insulinresistenz, (4) Fettleibigkeit, (5) Lipidstörungen, (6) Dyslipidämie, (7) Hyperlipidämie, (8) Hypertriglyceridämie, (9) Hypercholesterinämie, (10) niedrigen HDL-Spiegeln, (11) hohen LDL-Spiegeln, (12) Atherosklerose und deren Folgekrankheiten, (13) vaskulärer Restenose, (14) Colon irritabile, (15) entzündlicher Darmerkrankung, einschließlich Morbus Crohn und Colitis ulcerosa, (16) anderen Entzündungszuständen, (17) Pankreatitis, (18) abdominaler Fettleibigkeit, (19) neurodegenerativer Erkrankung, (20) Retinopathie, (21) Nephropathie, (22) Neuropathie, (23) Syndrom X, (24) Eierstock-Hyperandrogenismus (polyzystisches Ovarialsyndrom), (25) Typ-2-Diabetes, (26) Wachstumshormonmangel, (27) Neutropenie, (28) neuronalen Störungen, (29) Tumormetastase, (30) benigner Prostatahypertrophie, (32) Gingivitis, (33) Hypertension, (34) Osteoporose und anderen Zuständen, die durch die Inhibierung von DP-IV beeinflusst werden können.
Eine Kombination aus einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7 und einem HMG-CoA-Reduktaseinhibitor zur Behandlung, Steuerung, Linderung oder Verringerung des Risikos von einem oder mehreren Zuständen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Hypercholesterinämie, Atherosklerose, niedrigen HDL-Spiegeln, hohen LDL-Spiegeln, Hyperlipidämie, Hypertriglyceridämie und Dyslipidämie.
Die Kombination nach Anspruch 14, wobei der HMG-CoA-Reduktaseinhibitor ein Statin ist.
Die Kombination nach Anspruch 15, wobei das Statin ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Lovastatin, Simvastatin, Pravastatin, Fluvastatin, Atorvastatin, Rivastatin, Itavastatin und Rosuvastatin.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend: (1) eine Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 7, (2) einen HMG-CoA-Reduktaseinhibitor und (3) einen pharmazeutisch annehmbaren Träger.
Die pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 8, ferner enthaltend einen oder mehrere zusätzliche Wirkstoffe, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus: (a) einem zweiten Dipeptidylpeptidase-IV-Inhibitor, (b) einem Insulinsensibilisator, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einem PPARγ-Agonisten, einem dualen PPARα/γ-Agonisten, einem PPARα-Agonisten, einem Biguanid und einem Protein-Tyrosin-Phosphatase-1B-Inhibitor, (c) einem Insulin oder Insulin-Mimetikum, (d) einem Sulfonylharnstoff oder einem anderen Insulinsekretagogum, (e) einem α-Glucosidaseinhibitor, (f) einem Glucagonrezeptorantagonisten, (g) GLP-1, einem GLP-1-Mimetikum oder einem GLP-1-Rezeptoragonisten, (h) GIP, einem GIP-Mimetikum oder einem GIP-Rezeptoragonisten, (i) PACAP, einem PACAP-Mimetikum oder einem PACAP-Rezeptoragonisten, (j) einem Cholesterinsenkungsmittel, wie z. B. (i) HMG-CoA-Reduktaseinhibitor, (ii) Sequestriermittel, (iii) Nicotinylalkohol, Nicotinsäure oder ein Salz davon, (iv) PPARα-Agonist, (v) dualer PPARα/γ-Agonist, (vi) Cholesterinabsorptionsinhibitor, (vii) Acyl-CoA:Cholesterinacyltransferaseinhibitor und (viii) Antioxidationsmittel, (k) einem PPARδ-Agonisten, (l) einer Verbindung gegen Fettleibigkeit, (m) einem Ileum-Gallensäure-Transporter-Inhibitor, (n) einem antiinflammatorischen Mittel und (o) einem Antihypertensivum.
Die pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 18, wobei der duale PPARα/γ-Agonist KRP-297 ist.