DE60117972T2

DE60117972T2 - Neue kristalline form einer triazolo(4,5-d)pyrimidin-verbindung

Info

Publication number: DE60117972T2
Application number: DE60117972T
Authority: DE
Inventors: Martin Bohlin; AstraZeneca R & D Charnwood Steve Loughborough COSGROVE; Bo Lassen
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2000-06-02
Filing date: 2001-05-31
Publication date: 2006-11-23
Anticipated expiration: 2021-06-01
Also published as: AU6287401A; SI1289992T1; MXPA02011795A; CZ20120293A3; IL202582A; US7265124B2; CZ304347B6; IL152777A; IL187482A; ATE320430T1; ES2384708T3; US20070173518A1; CA2408596C; IS2609B; NO20025756L; IL202582A0; HK1052347A1; EP1493745A1; JP5684192B2; BG66332B1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Formen einer chemischen Verbindung, insbesondere kristalline und amorphe Formen, ganz besonders vier kristalline Formen und eine amorphe Form. Die Erfindung betrifft weiterhin Verfahren zur Herstellung solcher Formen, pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Verbindung in kristalliner und/oder amorpher Form enthalten sowie die therapeutische Verwendung solcher Formen.
Bei der Formulierung von Arzneimittelzusammensetzungen ist es wichtig, daß die Arzneimittelsubstanz in einer Form vorliegt, in der sie sich leicht handhaben und verarbeiten läßt. Dies ist nicht nur für die Entwicklung eines kommerziell rentablen Herstellungsverfahrens wichtig, sondern auch hinsichtlich der sich anschließenden Herstellung von den Wirkstoff enthaltenden pharmazeutischen Formulierungen. Chemische Stabilität, Festphasenstabilität und Haltbarkeit der Wirkstoffe sind ebenfalls sehr wichtige Faktoren. Die Arzneimittelsubstanz und Zusammensetzungen, die diese enthalten, sollten sich effektiv über beträchtliche Zeitspannen lagern lassen, ohne daß es zu signifikanten Veränderungen bei den physikochemischen Charakteristika des Wirkstoffs (beispielsweise seiner chemischen Zusammensetzung, Dichte, Hygroskopizität und Löslichkeit) kommt. Außerdem ist es auch wichtig, das Arzneimittel in einer möglichst reinen Form zur Verfügung zu stellen. In dieser Hinsicht kann es bei amorphen Materialien zu beträchtlichen Problemen kommen. So sind solche Materialien typischerweise schwieriger zu handhaben und zu formulieren als kristallines Material, ihre Löslichkeit schwankt und man findet häufig, daß sie instabil und chemisch unrein sind. Dem Fachmann wird einleuchten, daß man die obigen Probleme lösen kann, wenn sich ein Arzneimittel leicht in einer stabilen kristallinen Form erhalten läßt. Bei der Herstellung von kommerziell rentablen und pharmazeutisch unbedenklichen Arzneimittelzusammensetzungen ist es daher wünschenswert, das Arzneimittel wenn immer möglich in einer im wesentlichen kristallinen und stabilen Form bereitzustellen. Es sollte jedoch angemerkt werden, daß sich dieses Ziel nicht immer erreichen läßt. Es ist sogar typischerweise so, daß es nicht möglich ist, aus der molekularen Struktur alleine das Kristallisationsverhalten einer Verbindung vorherzusagen; dieses läßt sich gewöhnlich nur empirisch bestimmen.
Thrombozytenadhäsion und -aggregation sind einleitende Ereignisse bei arterieller Thrombose. Die Adhäsion von Thrombozyten an die sub-endotheliale Oberfläche mag eine wichtige Rolle bei der Reparatur geschädigter Gefäßwände spielen, die diesen Vorgang einleitende Thrombozytenaggregation kann jedoch eine akute thrombotische Verstopfung vitaler Gefäßbahnen verursachen, was zu Ereignissen mit hoher Morbidität wie Herzinfarkt und instabiler Angina führt. Zum Erfolg von Eingriffen zur Verhinderung bzw. Linderung dieser Zustände, wie beispielsweise Thrombolyse, durch Thrombozyten vermittelte Okklusion bzw. Reokklusion, gehört auch Angioplastie.
Es wurde gefunden, daß Adenosin-5'-diphosphat (ADP) als einer der Hauptmediatoren bei Thrombose wirkt. Die ADP-induzierte Thrombozytenaggregation wird durch den P_2T-Rezeptor-Subtyp, der sich auf der Thrombozytenmembran befindet, vermittelt. Der P_2T-Rezeptor (auch als P2Y_ADP bzw. P2T_AC bekannt), bei dem es sich um einen mit einem G-Protein gekoppelten Rezeptor handelt, ist primär an der Vermittlung der Thrombozytenaggregation/-aktivierung beteiligt. Die pharmakologischen Eigenschaften dieses Rezeptors sind beispielsweise in den Literaturstellen Humphries et al., Br. J. Pharmacology, (1994), 113, 1057–1063 und Fagura et al., Br. J. Pharmacology (1998) 124, 157–164 beschrieben. Vor kurzem wurde gezeigt, daß Antagonisten für diesen Rezeptor gegenüber anderen Antithrombosemitteln beträchtliche Vorteile bieten (siehe J. Med. Chem. (1999) 42, 213). In der internationalen Patentanmeldung WO 9905143 werden allgemein eine Reihe von Triazolo[4,5-d]pyrimidinverbindungen, die als P_2T(P2Y_ADP- oder P2T_AC-) Antagonisten wirken, offenbart. Die Verbindung der Formel (I) (wie unten gezeigt) fällt mit in den allgemeinen Schutzbereich der internationalen Patentanmeldung WO 9905143, wird dort jedoch nicht speziell offenbart. Diese Verbindung zeigt eine hohe Wirksamkeit als P_2T(P2Y_ADP- oder P2T_AC-)Antagonist. Sie hat darüber hinaus eine überraschend hohe metabolische Stabilität und biologische Verfügbarkeit.
Die vorliegende Erfindung betrifft dementsprechend die Verbindung der Formel (I):
in im wesentlichen kristalliner Form.
Die Verbindung der Formel (I) wird herkömmlicherweise als: {1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl[amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol bezeichnet.
Die Verbindung der Formel (I) kann in vier verschiedenen im wesentlichen kristallinen Formen vorliegen, die im folgenden als polymorphe Form I, polymorphe Form II, polymorphe Form III und polymorphe Form IV bezeichnet werden. Eine polymorphe Form ist eine bestimmte kristalline Form einer Verbindung.
Die verschiedenen physikalischen Eigenschaften von polymorphen Formen im Vergleich zueinander und im Vergleich zum amorphen Zustand können die chemische und pharmazeutische Verarbeitung einer Verbindung deutlich beeinflussen, insbesondere wenn die Verbindung im großtechnischen Maßstab hergestellt oder verwendet wird.
Gemäß einem Aspekt der Erfindung ist die bevorzugte kristalline Form der Verbindung der Formel (I) in der Form von polymorpher Form I, polymorpher Form II, polymorpher Form III und/oder polymorpher Form IV.
Gemäß einem alternativen Aspekt der Erfindung ist eine bevorzugte kristalline Form der Verbindung der Formel (I) die polymorphe Form I.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung ist eine bevorzugte kristalline Form der Verbindung der Formel (I) die polymorphe Form II.
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung ist eine bevorzugte kristalline Form der Verbindung der Formel (I) die polymorphe Form III.
Gemäß einem zusätzlichen Aspekt der Erfindung ist eine bevorzugte kristalline Form der Verbindung der Formel (I) die polymorphe Form IV.
Wir haben die Verbindung der Formel (I) in kristallinen und amorphen Formen isoliert. Diese Formen können im wesentlichen wasserfrei vorliegen ("wasserfreie" Formen). Gemäß einem Aspekt der Erfindung wird daher eine wasserfreie Form der Verbindung der Formel (I) in einer kristallinen Form bereitgestellt. Durch die Verwendung des Ausdrucks "im wesentlichen rein und im wesentlichen in der wasserfreien Form" soll das Vorhandensein eines Lösungsmittels einschließlich Wasser innerhalb der Kristallgitterstruktur oder außerhalb der Kristallgitterstruktur nicht ausgeschlossen werden. Eine wasserfreie Form weist weniger als 0,4 Wassermoleküle pro Verbindungsmolekül auf (ist zu weniger als 40% hydratisiert). Die wasserfreie Form enthält vorzugsweise weniger als 0,1 Wassermoleküle pro Verbindungsmolekül.
Die polymorphen Formen I, II, III und IV lassen sich hinsichtlich ihres Schmelzbeginns, ihrer Röntgenpulverdiffraktogramme und/oder ihrer Einkristallröntgendaten unterscheiden.
Die polymorphe Form I hat einen Schmelzbeginn im Bereich von 146–152°C, beispielsweise etwa 151°C, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt.
Die polymorphe Form II hat einen Schmelzbeginn im Bereich von 136–139°C, beispielsweise etwa 137,5°C, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt.
Die polymorphe Form III hat einen Schmelzbeginn im Bereich von 127–132°C, beispielsweise etwa 132°C, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt.
Die polymorphe Form IV hat einen Schmelzbeginn, der sich typischerweise auf etwa 139°C beläuft, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt.
Form α durchläuft typischerweise einen Glasübergang, an den sich eine Kristallisation zu einer der obigen polymorphen Formen, beispielsweise der polymorphen Form II, anschließt, bevor es zum Schmelzen kommt.
Die Schmelzpunkte wurden durch Differentialkalorimetrie (differential scanning calorimetry, DSC) mit einem Perkin Elmer DSC7-Gerät bestimmt. Der Schmelzbeginn ist definiert als der Punkt, bei dem es zu einer signifikanten Veränderung vom Grundwert kommt; dieser Punkt wurde mit Perkin Elmer Pyris-Software bestimmt. Es versteht sich, daß man mit anderen Gerätetypen bzw. unter Anwendung von Bedingungen, die sich von den hier beschriebenen unterscheiden, alternative Schmelzpunktwerte erhalten kann. Die angegebenen Zahlen sollten daher nicht als absolute Werte angesehen werden. Dem Fachmann wird bewußt sein, daß der genaue Wert für den Schmelzpunkt von der Reinheit der Verbindung, dem Gewicht der Probe, der Aufheizgeschwindigkeit und der Teilchengröße abhängt.
Die polymorphe Form I hat, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt, ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 5,3° (±0,1°), 20,1° (±0,1°), 20,7° (±0,1°), 21,0° (±0,1°) und 21,3° (±0,1°) 2θ. Besonders bevorzugt hat die im wesentlichen reine und im wesentlichen wasserfreie polymorphe Form I ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 5,3° (±0,1°), 8,0° (±0,1°), 9,6° (±0,1°), 13,9° (±0,1°), 15,3° (±0,1°), 20,1° (±0,1° ), 20,7° (±0,1°), 21,0° (±0,1°), 21,3° (±0,1°), 26,2° (±0,1°) und 27,5° (±0,1°) 2θ.
Die polymorphe Form II hat, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt, ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 5,5° (±0,1°), 13,5° (±0,1°), 18,3° (±0,1°), 22,7° (±0,1°) und 24,3° (±0,1°) 2θ. Besonders bevorzugt hat die im wesentlichen reine und im wesentlichen wasserfreie polymorphe Form II ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 5,5° (±0,1°), 6,8° (±0,1°), 10,6° (±0,1°), 13,5° (±0,1°), 14,9° (±0,1°), 18,3° (±0,1°), 19,2° (±0,1°), 22,7° (±0,1°), 24,3° (±0,1°) und 27,1° (±0,1°) 2θ.
Die polymorphe Form III hat, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt, ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 14,0° (±0,1°), 17,4° (±0,1°), 18,4° (±0,1°), 21,4° (±0,1°) und 24,1° (±0,1°) 2θ. Besonders bevorzugt hat die im wesentlichen reine und im wesentlichen wasserfreie polymorphe Form III ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 5,6° (±0,1°), 12,5° (±0,1°), 14,0° (±0,1°), 17,4° (±0,1°), 18,4° (±0,1°), 21,4° (±0,1°), 22,2° (±0,1°), 22,9° (±0,1°), 24,1° (±0,1°) und 24,5° (±0,1°) 2θ.
Die polymorphe Form IV hat, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt, ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 4,9° (±0,1°), 9,2° (±0,1°), 11,6° (±0,1°), 15,6° (±0,1°) und 16,4° (±0,1°) 2θ. Besonders bevorzugt hat die im wesentlichen reine und im wesentlichen wasserfreie polymorphe Form IV ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 4,9° (±0,1°), 6,0° (±0,1°), 9,2° (±0,1°), 11,6° (±0,1°), 12,8° (±0,1°), 15,6° (±0,1°), 16,4° (±0,1°), 17,2° (±0,1°) und 18,1° (±0,1°) 2θ.
Form α hat, wenn sie im wesentlichen rein ist und im wesentlichen in der wasserfreien Form vorliegt, ein Röntgenpulverdiffraktogramm ohne scharfe Peaks.
Die Röntgenpulverdiffraktogramme für die polymorphe Form II, die polymorphe Form III, die polymorphe Form IV und die Form α wurden mit einem Siemens D5000-Gerät aufgenommen. Die Röntgenpulverdiffraktogramme für die polymorphe Form I wurden mit einem Philips X'Pert MPD-Gerät aufgenommen. Es versteht sich, daß verschiedene Instrumente und/oder Bedingungen dazu führen können, daß leicht abweichende Daten erhalten werden. Die Zahlen sind daher nicht als absolute Werte zu betrachten.
Gemäß einem alternativen Aspekt der Erfindung kann eine solvatisierte Form gebildet werden, beispielsweise eine hydratisierte Form (ein "Hydrat"). Gemäß diesem Aspekt der Erfindung wird daher ein Hydrat der Verbindung der Formel (I) in kristalliner Form bereitgestellt. Ein Hydrat weist 0,8 oder mehr Wassermoleküle pro Verbindungsmolekül auf (80% oder mehr hydratisiert). Ein Hemihydrat hat zwischen 0,4 und 0,8 Wassermoleküle pro Verbindungsmolekül (40–80% hydratisiert).
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird eine Mischung von kristallinen und/oder amorphen Formen der Verbindung der Formel (I) bereitgestellt. Vorzugsweise handelt es sich um eine Mischung von polymorpher Form I, polymorpher Form II, polymorpher Form III, polymorpher Form IV und/oder Form α. Besonders bevorzugt stellt die Erfindung eine Mischung von polymorpher Form II und polymorpher Form III bereit.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung einer kristallinen Form der Verbindung der Formel (I) durch Kristallisation der Verbindung der Formel (I) aus einem geeigneten Lösungsmittel bereitgestellt. Das Lösungsmittel ist vorzugsweise aus der aus Ethanol, Essigsäureethylester, Isopropanol, Isooctan, Acetonitril, Wasser oder einer Mischung davon bestehenden Gruppe ausgewählt. Besonders bevorzugt ist das Lösungsmittel aus der aus Ethanol, Essigsäureethylester, Isopropanol, Isooctan, Wasser oder einer Mischung davon bestehenden Gruppe ausgewählt. Das Lösungsmittel ist geeigneterweise aus der aus einer Mischung von Methanol und Wasser, Ethanol, Essigsäureethylester, einer Mischung von Ethanol und Wasser, einer Mischung von Isopropanol und Wasser, einer Mischung von Essigsäureethylester und Isooctan, und Acetonitril bestehenden Gruppe ausgewählt.
Die Verbindung der Formel (I) läßt sich analog den in WO 9905143 beschriebenen Verfahren darstellen.
Zum Einleiten der Kristallisation kann ein Impfen mit einem oder mehreren Kristallen der Verbindung der Formel (I) erforderlich sein. Ein Impfen mit der erforderlichen polymorphen Form kann erforderlich sein, damit man die gewählte polymorphe Form erhält. Ein Kristallisieren der Verbindung der Formel (I) aus einem geeigneten Lösungsmittelsystem läßt sich erreichen, indem man eine Übersättigung herbeiführt, beispielsweise durch Abkühlen, durch Abdampfen von Lösungsmittel und/oder durch Zusatz eines Antilösungsmittels (eines Lösungsmittels, in dem die Verbindung der Formel (I) schlecht löslich ist; als Antilösungsmittel eignen sich beispielsweise Heptan oder Isooctan). Kristallisationstemperaturen und -zeiten hängen von der Konzentration der Verbindung in Lösung, dem verwendeten Lösungsmittelsystem und dem angewendeten Kristallisationsverfahren ab.
Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner Form läßt sich aus der obigen Reaktionsmischung unter Anwendung von dem Fachmann gut bekannten Verfahren, zum Beispiel durch Dekantieren, Filtrieren oder Zentrifugieren, isolieren. In ähnlicher Weise kann man die Verbindung der Formel (I) in kristalliner Form gemäß wohlbekannter Vorschriften trocknen.
Zur Verminderung weiterer Verunreinigungen wie amorphem Material oder chemischen Verunreinigungen oder zur Umwandlung der kristallinen Form von einer polymorphen Form in eine andere polymorphe Form oder in ein Hydrat oder eine wasserfreie Form kann man einen oder mehrere Umkristallisierungsschritte unter Verwendung der gleichen oder anderer Lösungsmittelsysteme durchführen. Darüber hinaus läßt sich ein Konditionierungsschritt durchführen, bei dem man den Feststoff einer hohen Feuchtigkeit aussetzt, um amorphes Material zu entfernen.
Vorzugsweise erfolgt die Kristallisation direkt aus der Reaktionslösung. Alternativ dazu wird die Kristallisation aus einer anschließenden Lösung durchgeführt.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der polymorphen Form I bereitgestellt, bei dem man einige Impfkristalle der polymorphen Form I aus den langsam wachsenden Kristallen der polymorphen Form I aus einer Schmelze der polymorphen Form II gewinnt und diese zum Impfen einer Reaktionsmischung verwendet, die die Verbindung der Formel (I) und ein geeignetes gemischtes Lösungsmittelsystem wie Methanol/Wasser enthält.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der polymorphen Form II bereitgestellt, bei dem man in einem geeigneten Lösungsmittel wie Essigsäureethylester kristallisiert.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der polymorphen Form III bereitgestellt, bei dem man in einem geeigneten Lösungsmittel wie einem Alkohol, beispielsweise Ethanol oder Isopropylalkohol (IPA), kristallisiert, insbesondere unter Animpfen mit Kristallen der polymorphen Form III oder indem man eine Verbindung der Formel (I) in einem geeigneten Lösungsmittel wie IPA aufschlämmt.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der polymorphen Form IV bereitgestellt, bei dem man aus einem geeigneten Lösungsmittel wie Acetonitril kristallisiert, insbesondere unter Animpfen mit Kristallen der polymorphen Form IV oder unter zeitweiligem Aufschlämmen einer Verbindung der Formel (I) in einem geeigneten Lösungsmittel wie Acetonitril.
Ein weiteres Merkmal der Erfindung stellt ein Verfahren zur Herstellung der polymorphen Form III im wesentlichen frei von der polymorphen Form II bereit, bei dem man beispielsweise eine Verbindung der Formel (I) in einem Lösungsmittelsystem aus aliphatischem C_1-6-Alkohol und Wasser (vorzugsweise IPA/Wasser) 1–10 Tage lang bei einer Temperatur von 5–65°C aufschlämmt.
Gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der Verbindung der Formel (I) in im wesentlichen amorpher Form bereitgestellt, bei dem man eine Lösung einer Verbindung der Formula (I) unter Verwendung eines geeigneten Lösungsmittelsystems, beispielsweise Ethanol/Wasser, gefriertrocknet oder sprühtrocknet.
Der Ausdruck "im wesentlichen frei" bezieht sich auf weniger als 10% der anderen polymorphen Form, vorzugsweise weniger als 5%.
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine Verbindung bereitgestellt, die nach einem der oben erwähnten Verfahren erhältlich ist.
Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form wirkt als P_2T-(P2Y_ADP- oder P2T_AC-) Rezeptorantagonisten. Dementsprechend eignet sich die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form zur Verwendung in der Therapie, einschließlich der Kombinationstherapie. Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner Form ist insbesondere indiziert zur Verwendung bei der Behandlung bzw. Prophylaxe von arteriellen thrombotischen Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit. Zu den arteriellen thrombotischen Komplikationen zählen beispielsweise instabile Angina, primäre arterielle thrombotische Komplikationen einer Arteriosklerose wie z.B. thrombotischer oder embolischer Schlaganfall, vorübergehende ischämische Anfälle, periphere Verschlußkrankheit, Herzinfarkt mit oder ohne Thrombolyse, arterielle Komplikationen aufgrund von Eingriffen bei arteriosklerotischen Erkrankungen wie z.B. Angioplastie einschließlich Koronarangioplastie (PTCA), Endarterektomie, Stent-Plazierung, Transplantationen von Herz- und anderen Gefäßen, thrombotische Komplikationen chirurgischer oder mechanischer Schädigungen wie Gewebebergung nach Trauma als Folge eines Unfalls oder eines chirurgischen Eingriffs, rekonstruktive operative Eingriffe einschließlich Haut und Muskellappen, Zustände mit einer diffusen Komponente, bei der es zu einem thrombotischen/Thrombozytenverzehr kommt, wie z.B. disseminierte intravaskuläre Koagulation, thrombotische thrombozytopenische Purpura, hämolytisches urämisches Syndrom, thrombotische Komplikationen bei Septikämie, Adult Respiratory Distress Syndrome, Anti-Phospholipid-Syndrom, Heparin-induzierte Thrombozytopenie und Prä-Eklampsie/Eklampsie oder Venenthrombose wie Tiefvenenthrombose, venookklusiver Krankheit, hämatologische Zustände wie myeloproliferative Krankheit, einschließlich Thrombozythämie, Sichelzellenkrankheit; oder zur Prävention von mechanisch induzierter Thrombozytenaktivierung in vivo, wie kardiopulmonaler Bypass und extrakorporale Membranoxygenation (Prävention von Mikrothromboembolismus), mechanisch induzierte Thrombozytenaktivierung in vitro, wie die Verwendung zur Konservierung von Blutprodukten, z.B. Thrombozytenkonzentraten, oder Shunt-Verstopfung wie bei Nierendialyse und Plasmapherese, Thrombose als Sekundärerscheinung nach Gefäßschäden/-entzündung wie Vaskulitis, Arteritis, Glomerulonephritis, entzündlicher Darmerkrankung und Organtransplantatabstoßung, Erkrankungen wie Migräne, Raynaudsche Gangrän, Erkrankungen, bei denen Thrombozyten zum zugrundeliegenden entzündlichen Erkrankungsprozeß in der Gefäßwand beitragen können, wie etwa der Bildung/Ausbreitung von atheromatösen Plaques, Stenose/Restenose und andere entzündliche Erkrankungen wie Asthma, bei denen Thrombozyten und von Thrombozyten abgeleitete Faktoren im immunologischen Krankheitsprozeß impliziert sind. Weitere Indikationen sind beispielsweise die Behandlung von Erkrankungen des ZNS und die Prävention des Wachstums und der Ausbreitung von Tumoren.
Gemäß einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung wird eine Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form zur Verwendung bei einem Verfahren zur therapeutischen Behandlung des Körpers eines Menschen oder Tieres bereitgestellt.
Gemäß einem zusätzlichen Merkmal der vorliegenden Erfindung wird die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form zur Verwendung als Medikament bereitgestellt. Vorzugsweise verwendet man die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form als Medikament zum Antagonisieren des P2T-(P2Y_ADP- oder P2T_AC-) Rezeptors in einem Warmblüter wie einem Menschen. Besonders bevorzugt verwendet man die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form als Medikament zur Behandlung bzw. Prävention arterieller thrombotischer Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit bei einem Warmblüter wie einem Menschen..
Gemäß der Erfindung wird weiterhin die Verwendung der Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form bei der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung als Antagonist des P2T-(P2Y_ADP- oder P2T_AC-)Rezeptors bereitgestellt. Insbesondere wird weiterhin die Verwendung der Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form bei der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Behandlung bzw. Prävention arterieller thrombotischer Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit bereitgestellt.
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Behandlung bzw. Prävention arterieller thrombotischer Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit, bei dem man einer an einer solchen Erkrankung leidenden Person bzw. einer Person, bei der das Risiko einer solchen Erkrankung besteht, eine therapeutisch wirksame Menge der Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form verabreicht.
Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form kann topisch, z.B. an die Lunge und/oder die Atemwege, in Form von Lösungen, Suspensionen, HFA-Aerosolen und Trockenpulverformulierungen, oder systemisch, z.B. durch orale Verabreichung in Form von Tabletten, Pillen, Kapseln, als Sirup, als Pulver oder als Granulat, oder parenteral als sterile parenterale Lösungen oder Suspensionen, subkutan oder rektal als Zäpfchen oder transdermal verabreicht werden.
Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form kann für sich alleine oder als eine die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form in Kombination mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Verdünnungsmittel, Adjuvans oder Trägerstoff enthaltende pharmazeutische Zusammensetzung verabreicht werden. Daher wird als weiteres Merkmal der Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung bereitgestellt, die die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form zusammen mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Verdünnungsmittel, Adjuvans und/oder Träger enthält. Besonders bevorzugt sind Zusammensetzungen, die keine Materialien enthalten, die eine Nebenwirkung, z.B. eine allergische Reaktion, auslösen können.
Trockenpulverformulierungen und unter Druck stehende HFA-Aerosole der Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form können durch orale oder nasale Inhalation verabreicht werden. Zur Inhalation ist die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form wünschenswerterweise feinteilig. Die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form kann auch mittels eines Trockenpulverinhalationsgerätes verabreicht werden. Bei dem Inhalationsgerät kann es sich um ein Einzeldosis- oder Mehrfachdosisinhalationsgerät, z.B. ein durch Einatmen aktiviertes Trockenpulverinhalationsgerät, handeln.
Eine Möglichkeit besteht darin, die feinteilige Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form mit einem Trägerstoff, z.B. einem Mono-, Di- oder Polysaccharid, einem Zuckeralkohol oder einem anderen Polyol zu mischen. Geeignete Trägerstoffe sind beispielsweise Zucker und Stärke. Alternativ dazu kann man die feinteilige Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form mit einer anderen Substanz beschichten. Es ist weiterhin möglich, die Pulvermischung in Hartgelatinekapseln abzufüllen, die jeweils die gewünschte Dosis des Wirkstoffs der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form enthalten.
Eine weitere Möglichkeit besteht darin, das feinteilige Pulver zu kleinen Kügelchen zu verarbeiten, die während des Inhalationsvorgangs zerfallen. Man kann dieses sphäronisierte Pulver in das Arzneimittelreservoir eines Mehrfachdosisinhalationsgeräts, z.B. des als Turbuhaler^® bekannten Geräts, füllen, wobei eine Dosierungsvorrichtung die gewünschte Dosis abmißt, die dann vom Patienten inhaliert wird. Mit diesem System wird dem Patienten der Wirkstoff der Formel (I) mit oder ohne Trägerstoff verabreicht. Bei der die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form enthaltenden pharmazeutischen Zusammensetzung kann es sich zweckmäßigerweise um Tabletten, Pillen, Kapseln, Sirupe, Pulver oder Granulate zur oralen Verabreichung, um sterile parenterale oder subkutane Lösungen, um Suspensionen zur parenteralen Verabreichung oder um Zäpfchen zur rektalen Verabreichung handeln.
Zur oralen Verabreichung kann man die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form mit einem Adjuvans oder einem Trägerstoff, z.B. Lactose, Sucrose, Sorbit, Mannit, Stärken wie Kartoffelstärke, Maisstärke oder Amylopektin, Cellulosederivaten, einem Bindemittel wie Gelatine oder Polyvinylpyrrolidon und einem Gleitmittel wie Magnesiumstearat, Calciumstearat, Polyethylenglykol, Wachsen, Paraffin und dergleichen vermischen und dann zu Tabletten verpressen. Benötigt man überzogene Tabletten, so kann man die wie oben beschrieben hergestellten Kerne mit einer konzentrierten Zuckerlösung, die beispielsweise Gummi arabicum, Gelatine, Talk, Titandioxid und dergleichen enthalten kann, beschichten. Alternativ dazu kann man die Tablette mit einem geeigneten, in einem leichtflüchtigen organischen Lösungsmittel oder einem wäßrigen Lösungsmittel gelösten Polymer beschichten.
Zur Herstellung von Weichgelatinekapseln kann man die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form z.B. mit einem Pflanzenöl oder Polyethylenglykol mischen. Hartgelatinekapseln können ein Granulat der Verbindung enthalten, wobei man entweder die obengenannten Träger für Tabletten, z.B. Lactose, Sucrose, Sorbit, Mannit, Stärken, Cellulosederivate oder Gelatine verwendet. Hartgelatinekapseln können auch mit Flüssigkeiten oder Halbfeststoffen des Arzneistoffs gefüllt werden.
Flüssige Zubereitungen zur oralen Verabreichung können in Form von Sirupen oder Suspensionen vorliegen, beispielsweise als Lösungen, die die Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher Form enthalten, wobei der Rest aus Zucker und einem Gemisch aus Ethanol, Wasser, Glycerin und Propylenglykol besteht. Derartige flüssige Zubereitungen können gegebenenfalls Farbmittel, Geschmacksverbesserer, Saccharin und Carboxymethylcellulose als Verdickungsmittel oder andere dem Fachmann bekannte Hilfsstoffe enthalten.
1.1 ist ein Röntgendiffraktogramm der polymorphen Form I, das mit einem Philips X'Pert MPD-Gerät in θ-θ Konfiguration über den Scan-Bereich 1° bis 40° 2θ mit 2 oder 5 Sekunden Belichtung pro 0,02° 2θ-Inkrement aufgenommen wurde. Die Röntgenstrahlen wurden mit einer bei 40 kV und 50 mA betriebenen Kupfer-Langfeinfokusröhre erzeugt. Die Wellenlänge der Röntgenstrahlen betrug 1,5406 Å.
1.2 ist ein Röntgendiffraktogramm der polymorphen Form II, das mit einem Siemens D5000-Gerät in θ-θ Konfiguration über den Scan-Bereich 2° bis 30° 2θ mit 4 Sekunden Belichtung pro 0,02° 2θ-Inkrement aufgenommen wurde. Die Röntgenstrahlen wurden mit einer bei 45 kV und 40 mA betriebenen Kupfer-Langfeinfokusröhre erzeugt. Die Wellenlänge der Röntgenstrahlen betrug 1,5406 Å. Die Daten wurden mit einem Null-Hintergrund, auf den ~10 mg der Verbindung gegeben wurden, gesammelt. Der Halter bestand aus einem Silicium-Einkristall, der entlang einer nicht-beugenden Ebene geschnitten und so lange poliert worden war, bis die Oberfläche optisch flach war. Die auf diese Oberfläche auftreffenden Röntgenstrahlen wurden durch Bragg-Extinktion gelöscht.
1.3 ist ein Röntgendiffraktogramm der polymorphen Form III, das mit einem Siemens D5000-Gerät wie oben beschrieben aufgenommen wurde.
1.4 ist ein Röntgendiffraktogramm der polymorphen Form IV, das mit einem Siemens D5000-Gerät wie oben beschrieben aufgenommen wurde.
1.5 ist ein Röntgendiffraktogramm der Form α, das mit einem Siemens D5000-Gerät wie oben beschrieben aufgenommen wurde.
2 zeigt graphische DSC-Darstellungen der polymorphen Formen I, II, III und IV und der Form α, die mit einem Perkin Elmer DSC 7-Instrument aufgenommen wurden. Der Pfannentyp war Aluminium mit einem durchbohrten Deckel. Das Gewicht der Probe betrug 1 bis 3 mg. Die Vorschrift wurde unter einem Stickstoffstrom (30 ml/min) durchgeführt, wobei der untersuchte Temperaturbereich 30°C bis 325°C betrug und die Temperatur konstant um 10°C pro Minute erhöht wurde.
Man sollte sich darüber im klaren sein, daß bei der Analyse von Proben mit Körnern mit einer Größe von mehr als 30 Mikron und ungleichmäßigen Aspektverhältnissen die relative Intensität von Peaks beeinträchtigt sein kann. Dem Fachman wird weiterhin bewußt sein, daß die Position von Reflektionen durch die genaue Höhe beeinflußt wird, in der sich die Probe im Diffraktometer befindet, sowie von der Null-Kalibrierung des Diffraktometers. Die Planarität der Oberfläche der Probe kann ebenfalls eine kleine Auswirkung haben. Die angeführten Diffraktionsmusterdaten sollten daher nicht als absolute Werte angesehen werden.
Die Erfindung läßt sich durch die folgenden nicht einschränkenden Beispiele erläutern.
Beispiel 1
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)-cyclopentan-1,2-diol in Form der polymorphen Form I
Teil 1
Die Verbindung der Formel (I) in Form der polymorphen Form II (2 mg) wurde auf die folgende Weise in einem DSC erhitzt und abgekühlt: 35 bis 143 bis 35 bis 148 bis 35 bis 148 bis 35° C. Dieses Tempern führte zur Kristallisation der reinen polymorphen Form I, wie aus dem DSC ersichtlich war.
Part 2
Eine die Verbindung der Formel (I), 5 ml/g Methanol und 7,3 ml/g Wasser sowie eine kleine Menge an Impfkristallen der polymorphen Form I enthaltende Lösung wurde bei 30°C kristallisiert. Durch XRPD und DSC wurde bestätigt, daß sich die im wesentlichen reine polymorphe Form I gebildet hatte.
Beispiel 2
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol in Form der polymorphen Form II
Chloroform (150 μl) wurde zu 45 mg der Verbindung der Formel (I) gegeben, und die Mischung wurde über einem Dampfbad erwärmt, bis alles in Lösung gegangen war. Die so erhaltene Lösung wurde über Nacht kristallisieren gelassen und in einem Stickstoffstrom getrocknet. Durch XRPD und DSC wurde bestätigt, daß sich die im wesentlichen reine polymorphe Form II gebildet hatte.
Beispiel 3
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol in Form der polymorphen Form III
Ethanol (200 μl) wurde zu 10 mg der Verbindung der Formel (I) gegeben, und die Mischung wurde über einem Dampfbad erwärmt, bis alles in Lösung gegangen war. Die so erhaltene Lösung wurde über Nacht kristallisieren gelassen. Durch XRPD und DSC wurde bestätigt, daß sich eine Mischung der polymorphen Formen II und III gebildet hatte. Dieses Material wurde zum Animpfen eines größeren Ansatzes verwendet: 191 mg der polymorphen Form II wurden in 1 ml einer 50%igen wäßrigen Lösung von Isopropanol aufgeschlämmt. Diese Aufschlämmung wurde mit 15 mg Impfkristallen der gemischten polymorphen Form II/III versetzt. Nach 2 Tagen war es zu einer vollständige Umwandlung in die polymorphe Form III gekommen, wie durch XRPD gezeigt werden konnte.
Beispiel 4
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol in Form der polymorphen Form IV
Acetonitril (0,12 ml) wurde zu 10 mg der Verbindung der Formel (I) gegeben, und die Mischung wurde über einem Dampfbad erwärmt, bis alles in Lösung gegangen war. Die warme Lösung wurde langsam in einem mit heißem Wasser gefüllten Wassermantel abkühlen gelassen. Die so erhaltenen Kristalle wurden unter Stickstoff getrocknet. Durch XRPD konnte gezeigt werden, daß es sich hierbei um eine eigene polymorphe Form handelte.
Beispiel 5
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol vorwiegend in Form von Form α.
Die Verbindung der Formel (I) (218 mg) wurde in einer 50%igen wäßrigen Lösung von Ethanol (24 ml) gelöst. Diese Lösung wurde tropfenweise mit weiteren 14,5 ml Wasser versetzt. Die auf diese Weise erhaltene gesättigte Lösung wurde dann mit einem Virtis-Instrument unter den folgenden Bedingungen (Vakuum 2170 mT, Laufzeit 20,2 Stunden, Kühlertemperatur –52°C, Raumtemperatur 20,3°C) gefriergetrocknet.
Vergleichsbeispiel 1
{1S-[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]}-3-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-5-(2-hydroxyethoxy)cyclopentan-1,2-diol
Eine Lösung von {3aR-[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]}-2-[6-({7-[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-yl)oxy]ethanol (Verfahren A, 0,59 g) in Trifluoressigsäure (15 ml) und Wasser (15 ml) wurde 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde vorsichtig zu einer Lösung von Natriumhydrogencarbonat (21 g) in Wasser (150 ml) gegeben und 30 Minuten lang gerührt. Die Mischung wurde mit Essigsäureethylester extrahiert, der dann getrocknet und abgedampft wurde. Der Rückstand wurde auf gereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (0,44 g) erhielt. MS (APCI) 523 (M + H⁺, 100%); NMR: 8,95 (1H, d, J = 3,3), 7,39–7,21 (2H, m), 7,10–7,00 (1H, m), 5,12 (1H, d, J = 6,4), 5,05 (1H, d, J = 3,6), 4,96 (1H, q, J = 9,0), 4,62–4,54 (2H, m), 3,95 (1H, br s), 3,79–3,73 (1H, m), 3,55–3,47 (4H, m), 3,20–3,13 (1H, m), 2,98–2,81 (2H, m), 2,63 (1H, dt, J = 13,6, 8,5), 2,29–2,21 und 2,16–2,09 (1H, m), 2,07–2,00 (1H, m), 1,73–1,33 (4H, m), 0,99 (3H, t, J = 7,4).
Herstellung der Ausgangsmaterialien
Die Ausgangsmaterialien sind entweder im Handel erhältlich oder lassen sich einfach durch Standardverfahren aus bekannten Materialien herstellen. Die folgenden Umsetzungen zum Beispiel erläutern die Herstellung einiger der in den obigen Reaktionen verwendeten Ausgangsmaterialien, schränken sie jedoch nicht ein.
Verfahren A
{3aR-[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]}-2-[6-({7-[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-yl)oxy]ethanol
DIBAL-H^® (1,0 M Lösung in Hexan, 5,15 ml) wurde zu einer eisgekühlten Lösung von {3aR-[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]}-{[6-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-yl]oxy}essigsäuremethylester (Verfahren B, 0,76 g) in THF (1 ml) gegeben, und die Lösung wurde bei dieser Temperatur 2 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum eingeengt, und der Rückstand wurde in Essigsäureethylester (75 ml) gelöst. Eine gesättigte wäßrige Lösung von Natriumkaliumtartrat (75 ml) wurde zugefügt, und die Mischung wurde 16 Stunden lang kräftig gerührt. Die organische Phase wurde abgenommen und die wäßrige Phase wurde nochmals mit Essigsäureethylester (2 × 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und eingeengt und der Rückstand wurde auf gereinigt (SiO₂, Isohexan:Essigsäureethylester 1:1 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (0,63 g) erhielt. MS (APCI) 563 (M + H⁺, 100%).
Verfahren B
{3aR-[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]}-{[6-(7-{[2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropyl]amino}-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]-pyrimidin-3-yl)-tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4yl]oxy}essigsäuremethylester
Eine Mischung von [3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-({6-[7-Brom-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]-tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol}-oxy)essigsäuremethylester (Verfahren D, 0,80 g) und (1R-trans)-2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropanamin-[R-(R*,R*)]-2,3-dihydroxybutandioat (1:1) (Verfahren C, 0,61 g) in Dichloromethan (25 ml) wurde zu N,N-Diisopropylethylamin (0,85 ml) gegeben. Die auf diese Weise erhaltene Lösung wurde 16 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Aufreinigung (SiO₂, Isohexan:Essigsäureethylester 3:1 als Laufmittel) lieferte die Titelverbindung als einen farblosen Schaum (0,77 g). MS (APCI) 591 (M + H⁺, 100%).
Verfahren C
(1R-trans)-2-(3,4-Difluorphenyl)cyclopropanamin-[R-(R*,R*)]-2,3-dihydroxybutandioat (1:1)
Die Titelverbindung läßt sich gemäß der in WO 9905143 beschriebenen Vorschrift herstellen.
Verfahren D
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-({6-[7-Brom-S-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol}oxy)essigsäuremethylester
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-({6-[7-Amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol}oxy)essigsäure methylester (Verfahren E, 1,1 g) und Isoamylnitrit (2,4 ml) in Bromoform (30 ml) wurden 30 Minuten lang auf 80°C erhitzt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde aufgereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester:Isohexan 1:4 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (0,44 g) erhielt. MS (APCI) 502/4 (M + H⁺), 504 (100%).
Verfahren E
[3a,R-(3aα,4α,6α,6aα)]-({6-[7-Amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol}oxy)essigsäuremethylester
Eine Lösung von [3aR(3aα,4α,6α,6aα)]-6-(7-Amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol (Verfahren F, 0,50 g) in THF (25 ml) wurde bei 0°C mit Butyllithium (0,62 ml einer 2,5 N Lösung in Hexan) versetzt. Nach 20 Minuten wurde die Suspension mit einer Lösung von Trifluormethansulfonyloxyessigsäuremethylester (0,34 g) (hergestellt nach dem Verfahren von Biton, Tetrahedron, 1995, 51, 10513) in THF (10 ml) versetzt. Die auf diese Weise erhaltene Lösung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und dann eingeengt und aufgereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester:Hexan 4:6 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (0,25 g) erhielt. MS (APCI) 439 (M + H⁺, 100%).
Verfahren F
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-[7-Amino-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-[7-Chlor-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol (Verfahren G, 13,2 g) in THF (200 ml) mit 0,88 Ammoniak (5 ml) wurde 2 Stunden lang gerührt und dann zur Trockne eingeengt, und der Rückstand wurde zwischen Wasser und Essigsäureethylester verteilt. Die organischen Phasen wurden getrocknet und dann eingeengt, wodurch man die Titelverbindung (12,5 g) erhielt. MS (APCI) 367 (M + H⁺, 100%).
Verfahren G
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-[7-Chloro-5-(propylthio)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl]tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol
Isoamylnitrit (1,1 ml) wurde zu einer Lösung von [3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-{[5-Amino-6-chlor-2-(propylthio)pyrimidin-4-yl]amino}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol (Verfahren H, 2,0 g) in Acetonitril (100 ml) gegeben, und die Lösung wurde 1 Stunde lang auf 70° C erhitzt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde eingeengt und auf gereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester:Isohexan 1:3 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (1,9 g) erhielt. MS (APCI) 386 (M + H⁺, 100%).
Verfahren H
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-{[5-Amino-6-chlor-2-(propylthio)pyrimidin-4-yl]amino}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol
Eisenpulver (3,0 g) wurde zu einer gerührten Lösung von [3aR-(3aα,4α,6α,6aαa)]-6-{[6-Chlor-5-nitro-2-(propylthio)pyrimidin-4-yl]amino}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol (Verfahren I, 2,7 g) in Essigsäure (100 ml) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt, auf die Hälfte ihres Volumens eingeengt, mit Essigsäureethylester verdünnt und mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet und eingeengt, wodurch man die Titelverbindung (2,0 g) erhielt. MS (APCI) 375 (M + H⁺, 100%).
Verfahren I
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-{[6-Chlor-5-nitro-2-(propylthio)pyrimidin-4-yl]amino}tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol
Eine Lösung von [3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-Aminotetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol-hydrochlorid (Verfahren J, 10,0 g) und N,N-Diisopropylethylamin (35 ml) in THF (600 ml) wurde 1 Stunde lang gerührt. Die Mischung wurde filtriert, und die Lösung wurde im Verlauf von 1 Stunde zu einer Lösung von 4,6-Dichlor-5-nitro-2-(propylthio)pyrimidin (WO 9703084, 25,6 g) in THF (1000 ml) gegeben und weitere 2 Stunden lang gerührt. Das Lösungsmittelvolumen wurde im Vakuum eingeengt und Essigsäureethylester (1000 ml) wurde zugegeben. Die Mischung wurde mit Wasser gewaschen und die organischen Phasen wurden getrocknet, eingedampft und aufgereinigt (SiO₂, Isohexan-Essigsäureethylester als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (14,2 g) erhielt. MS (APCI) 405 (M + H⁺, 100%).
Verfahren J
[3aR-(3aα,4α,6α,6aα)]-6-Aminotetrahydro-2,2-dimethyl-4H-cyclopenta-1,3-dioxol-4-ol-hydrochlorid
[1R-(1α,2β,3β,4α)]-2,3,4-Trihydroxycyclopentenylimidodikohlensäure-bis(1,1-dimethylethyl)ester (Verfahren K, 17, 4 g) in 6 M HCl (100 ml)/Methanol (500 ml) wurde 18 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde eingedampft und dann azeotrop mit Toluol (4 × 200 ml) destilliert, wodurch man ein farbloses Pulver (8,7 g) erhielt. Dieser Feststoff wurde in Aceton (250 ml) mit 2,2-Dimethoxypropan (25 ml) und konz. HCl (0,2 ml) suspendiert und dann 2 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt.
Die Mischung wurde abgekühlt, eingedampft und azeotrop mit Toluol (3 × 200 ml) destilliert. Der Rückstand wurde in 20%iger wäßriger Essigsäure gelöst und 2 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde eingedampft und azeotrop mit Toluol (4 × 200 ml) destilliert, wodurch man die Titelverbindung (10,1 g) erhielt. MS (APCI) 174 (M + H⁺, 100%)
Verfahren K
[1R-(1α,2β,3β,4α]-2,3,4-Trihydroxycyclopentenylimidodikohlensäure-bis(1,1-dimethylethyl)ester
Eine Lösung von (1R-cis)-Bis(1,1-dimethylethyl)-4-hydroxy-2-cyclopentenylimido-dicarbonat (Verfahren L, 17,1 g) in THF (500 ml)/Wasser (50 ml) wurde mit N-Methylmorpholin-N-oxid (9,4 g) und dann mit Osmiumtetroxid (10 ml, 2,5%ige Lösung in t-Butanol) versetzt. Die Mischung wurde 4 Tage lang bei Raumtemperatur gerührt und dann mit Natriumhydrosulfit (6,0 g) versetzt. Die Suspension wurde über Diatomeenerde filtriert und das Produkt wurde aufgereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester:Hexan 1:1 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung (19,1 g) erhielt. NMR: 1,44 (18H, s), 1,46–1,60 (1H, m), 1,97–2,05 (1H, m), 3,55–3,58 (1H, m), 3,66–3,73 (1H, m), 4,11–4,21 (2H, m), 4,54 (1H, d, J = 4,8), 4,56 (1H, d, J = 5,9), 4,82 (1H, d, J = 4,6).
Verfahren L
(1R-cis)-Bis(1,1-dimethylethyl)-4-hydroxy-2-cyclopentenylimidodicarbonat
Eine Suspension von mit Ether gewaschenem Natriumhydrid (60%ige Dispersion in Öl; 0,31 g) in THF (30 ml) wurde mit Imidodikohlensäure-bis-(1,1-dimethylethyl)ester (1,84 g) versetzt. Die Mischung wurde 1 Stunde lang bei 40°C gerührt. Diese Mischung wurde bei Raumtemperatur mit (1S-cis)-4-Acetoxy-2-cyclopenten-1-ol (0,5 g) und Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (0,18 g) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 24 Stunden lang gerührt und dann aufgereinigt (SiO₂, Essigsäureethylester:Hexan 1:9 als Laufmittel), wodurch man die Titelverbindung als einen farblosen Feststoff (0,90 g) erhielt. NMR: 1,43 (18H, s), 1,61 (1H, ddd, J = 12,3, 7,7, 6,4), 2,54 (1H, dt, J = 12,6, 7,4), 4,51–4,5 (1H, m), 4,86 (1H, tq, J = 8,0, 1,8), 4,91 (1H, d, J = 5,4), 5,71–5,77 (2H, m).
Beispiel 2

Im folgenden werden repräsentative pharmazeutische Dosierungsformen, die eine Verbindung der Formel (I) in kristalliner und/oder amorpher From (im folgenden Verbindung X) enthalten, für die therapeutische oder prophylaktische Anwendung bei Menschen erläutert: (a)

Tablette I	mg/Tablette
Verbindung X	100
Lactose Ph. Eur.	182,75
Croscarmellose-Natrium	12,0
Maisstärkepaste (5% w/v Paste)	2,25
Magnesiumstearat	3,0

(b)

Tablette II	mg/Tablette
Verbindung X	50
Lactose Ph. Eur.	223,75
Croscarmellose-Natrium	6,0
Maisstärke	15,0
Polyvinylpyrrolidon (5% w/v Paste)	2,25
Magnesiumstearat	3,0

(c)

Tablette III	mg/Tablette
Verbindung X	1,0

Lactose Ph. Eur.	93,25
Croscarmellose-Natrium	4,0
Maisstärkepaste (5% w/v Paste)	0,75
Magnesiumstearat	1,0

(d)

Kapsel	mg/Kapsel
Verbindung X	10
Lactose Ph. Eur.	488,5
Magnesiumstearat	1,5

(e)

Injektion I	(50 mg/ml )
Verbindung X	5,0% w/v
1 N Natriumhydroxidlösung	15,0 v/v
0,1 N Salzsäure (zur Einstellung eines pH-Werts von 7,6) Polyethylenglykol 400	4,5% w/v
Wasser für Injektionszwecke ad 100%

(f)

Injektion II	(10 mg/ml)
Verbindung X	1,0% w/v
Natriumphosphat BP	3,6% w/v
0,1 N Natriumhydroxidlösung	15,0 v/v
Wasser für Injektionszwecke ad 100%

(g)

Injektion III	(1 mg/ml, auf pH 6 gepuffert)
Verbindung X	0,1% w/v
Natriumphosphat BP	2,26 w/v
Citronensäure	0,38% w/v
Polyethylenglykol 400	3,5% w/v
Wasser für Injektionszwecke ad 100%

Anmerkung

Die obigen Formulierungen können nach in der Pharmazie gut bekannten herkömmlichen Methoden erhalten werden. Die Tabletten (a) bis (c) können mit herkömmlichen Mitteln magensaftresistent überzogen werden, beispielsweise mit einem Überzug aus Celluloseacetatphthalat.
Die NMR-Spektren wurden auf einem Varian Unity Inova 300- oder -400-Spektrometer gemessen; die NMR-Daten sind in Form von delta-werten für die wichtigsten diagnostischen Protonen aufgeführt, angegeben in Parts Per Million (ppm) bezogen auf Tetramethylsilan (TMS) als interner Standard mit Perdeuterio-Dimethylsulfoxid (DMSO-δ₆) als Lösungsmittel, wenn nicht anders angegeben; bei Beispielen, bei denen die Protonen-NMR-Spektren das Vorhandensein von Rotamers zeigten, sind nur die chemischen Verschiebungen des Hauptrotamers angegeben; die Kopplungskonstanten (J) sind in Hz angeführt.
Die Massenspektren (MS) wurden wie folgt gemessen: EI-Spektren wurden mit einem VG70-250S- oder Finnigan Mat Incos-XL-Spektrometer aufgenommen, FAB-Spektren wurden mit einem VG70-250SEQ-Spektrometer aufgenommen, ESI und APCI-Spektren wurden mit einem Finnigan Mat SSQ7000- oder einem Micromass Platform-Spektrometer aufgenommen.
Auftrennungen durch präparative HPLC wurden im allgemeinen an einer mit BDSC-18-Umkehrphasenkieselgel gepackten Novapak^®-, Bondapak^®- oder Hypersil^®-Säule durchgeführt.
Flash-Chromatographie (in den Beispielen mit (SiO₂) gekennzeichnet) wurde mit Fisher Matrix-Kieselgel, 35–70 μm, durchgeführt.

Abkürzungen

THF

Tetrahydrofuran

XRPD

Röntgenpulverdiffraktogramm

DSC

Differentialkalorimetrie

Claims

Verbindung der Formel (I):
in im wesentlichen kristalliner Form, ausgewählt aus: einer Verbindung der Formel (I), dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 5,3° (±0,1°), 20,1° (±0,1°), 20,7° (±0,1°), 21,0° (±0,1°) und 21,3° (±0,1°)2θ aufweist; einer Verbindung der Formel (I), dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 14,0° (±0,1°), 17,4° (±0,1°), 18,4° (±0,1°), 21,4° (±0,1°) und 24,1° (±0,1°)2θ aufweist; und einer Verbindung der Formel (I), dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks mit hoher Intensität bei 4,9° (±0,1°), 9,2° (±0,1°), 11,6° (±0,1°), 15,6° (±0,1°) und 16,4° (±0,1°)2Θ aufweist.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, die in im wesentlichen wasserfreier Form vorliegt.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 5,3° (±0,1°), 8,0° (±0,1°), 9,6° (±0,1°), 13,9° (±0,1°), 15,3° (±0,1°), 20,1° (±0,1°), 20,7° (±0,1°), 21,0° (±0,1°), 21,3° (±0,1°), 26,2° (±0,1°) und 27,5° (±0,1°)2θ aufweist.
Verbindung der Formel (I) nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, gekennzeichnet durch eine Differentialkalorimetriekurve mit einem Schmelzbeginn im Bereich von 146–152°C.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 5,6° (±0,1°), 12,5° (±0,1°), 14,0° (±0,1°), 17,4° (±0,1°), 18,4° (±0,1°), 21,4° (±0,1°), 22,2° (±0,1°), 22,9° (±0,1°), 24,1° (±0,1°), und 24,5° (±0,1°)2θ aufweist.
Verbindung der Formel (I) nach einem der Ansprüche 1 oder 5, gekennzeichnet durch eine Differentialkalorimetriekurve mit einem Schmelzbeginn im Bereich von 127–132°C.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie ein Röntgenpulverdiffraktogramm mit spezifischen Peaks bei 4,9° (±0,1°), 6,0° (±0,1°), 9,2° (±0,1°), 11,6° (±0,1°), 12,8° (±0,1°), 15,6° (±0,1°), 16,4° (±0,1°), 17,2° (±0,1°) und 18,1° (±0,1°)2θ aufweist.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder 7, gekennzeichnet durch eine Differentialkalorimetriekurve mit einem Schmelzbeginn von ungefähr 139°C.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder einem der Ansprüche 2 bis 8 in Form eines Hydrats.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, bei dem man die Verbindung der Formel (I) aus einem Lösungsmittel ausgewählt aus der aus Niederalkylacetaten, Niederalkylalkoholen, aliphatischen und aromatischen Kohlenwasserstoffen, Dialkylethern, Dialkylketonen, Acetonitril, Wasser und Mischungen davon bestehenden Gruppe kristallisiert.
Verfahren nach Anspruch 10, wobei das Lösungsmittel aus der aus Ethanol, Essigsäureethylester, Isopropanol, Isooctan, Acetonitril, Wasser und Mischungen davon bestehenden Gruppe ausgewählt ist.
Verfahren nach Anspruch 11, wobei das Lösungsmittel aus der aus einer Mischung von Methanol und Wasser, Ethanol, Essigsäureethylester, einer Mischung von Ethanol und Wasser, einer Mischung von Isopropanol und Wasser, einer Mischung von Essigsäureethylester und Isooctan und Acetonitril bestehenden Gruppe ausgewählt ist.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 3 oder 4 gemäß Anspruch 10 oder 12, wobei es sich bei dem Lösungsmittel um eine Mischung aus Methanol und Wasser handelt.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 3 oder 4 unter Verwendung eines Impfkristalls.
Verfahren nach Anspruch 14, wobei die Impfkristalle durch Schmelzen einer Verbindung nach einem der Ansprüche 3 oder 4 hergestellt werden.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 5 oder 6 gemäß einem der Ansprüche 10 oder 11, wobei es sich bei dem Lösungsmittel um einen Alkohol handelt.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 5 oder 6, bei dem man eine Verbindung der Formel (I) bei einer Temperatur von 5 bis 65°C in einem Isopropylalkohol/Wasser-Lösungsmittelsystem aufschlämmt.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 7 oder 8, umfassend ein Verfahren gemäß Anspruch 10 oder 11, bei dem es sich bei dem Lösungsmittel um Acetonitril handelt.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Verwendung als Medikament.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 in einer Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Adjuvans, Verdünnungsmittel oder Träger.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, zur Verwendung bei der Prävention von arteriellen thrombotischen Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 bei der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Prävention von arteriellen thrombotischen Komplikationen in Patienten mit koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Verschlußkrankheit oder peripherer Verschlußkrankheit.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Verwendung bei der Prävention des Wachstums und der Ausbreitung eines Tumors.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 bei der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Prävention des Wachstums und der Ausbreitung eines Tumors.