DE1518125C3

DE1518125C3 - Asparaginsäure- und Glutaminsaureamide, Verfahren zu deren Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE1518125C3
Application number: DE1965R0041204
Authority: DE
Inventors: Giogio Da Re; Luigi Rovati
Original assignee: Rotta Research Laboratorium SpA
Current assignee: Rottapharm SpA
Priority date: 1964-07-31
Filing date: 1965-07-30
Publication date: 1978-03-23
Also published as: ES315993A1; GB1108819A; DE1518125B2; DK131282C; SE345659B; FI44616C; FI44616B; CH472380A; DE1518125A1; FR5853M; BE667776A; DK131282B; FR1555468A

Description

in welcher bedeutet

R¹ Wasserstoff; C₁- bis C₃-n-Alkyl,
R₂ (a) C₁- bis C₃-n-AIkyl, oder wenn R¹ Wasserstoff ist,

(b) Benzyl,

(c) 2-Phenyläthyl,

(d) 4-AlkoxycarbonyIphenyl mit C₁- bis C₆-Alkoxygruppen,

(e) 1 - Phenyl - 2,3 - dimethylpyrazolon - (5)-

yi-(4),

R¹ plus R² — (CH₂)_m- oder 3-Oxapentamethylen, R³ Benzoyl, Phenylacetyl,
m 4, 5, 6,
π 1,2

sowie ihre pharmakologisch verträglichen Salze.

2. Asparaginsäure-4- und Glutaminsäure-5-amide der allgemeinen Formel

R²R¹N

C—(CH₂),- CH- COOH
NH-R³

(II)

in welcher R¹, R², R³ und « die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben, sowie ihre pharmakologisch verträglichen Salze.

3. N - Benzoylglutaminsäure-1 -di-(n-propyl)-amid.

4. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß man N-Benzoyl- oder N-Phenylacetylasparaginsäure- oder -glutaminsäureanhydrid mit einem Amin der allgemeinen Formel

R¹

R²

Ν—Η

(III)

in der R¹ und R² die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben, in an sich bekannter Weise umsetzt und ggf. das erhaltene Dicarbonsäuremonoamid mit einer pharmakologisch verträglichen Base in ein Salz überführt.

5. Arzneimittel, enthaltend eine Verbindung nach Anspruch 1 bis 3.

Die Erfindung betrifft den in den vorstehenden Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand.

Die obenerwähnten primären und sekundären aliphatischen Amine sind vorteilhaft Methylamin, Dimethylamin, Methyläthylamin, Diäthylamin, n-Propylamin, Di-n-propylamin, Äthyl-n-propylamin oder Methyl-n-propylamin.

Die Verbindungen der allgemeinen Formeln 1 und II weisen eine interessante pharmazeutische Aktivität

ίο auf und wirken auf das Zentralnervensystem, und zwar je nach den speziellen Substituenten entweder mit einem depressiven oder stimulierenden Effekt. Sie sind besonders wirksam als antisekretorische Mittel im Gastrointestinaltrakt warmblütiger Säugetiere und zeigen auch eine protektive und trophische oder heilende Wirkung auf die Mucosa bei experimentellen Ulcera bei Laboratoriumstieren. Beispielsweise zeigte sich bei ihnen auch eine Schutzwirkung auf die gastrische Mucosa, falls hohe Dosierungen von Salicylaten oder Steroiden verabreicht wurden. Diese effektive antisekretorische Aktivität macht sie besonders wertvoll zur Behandlung von Krankheitsbildern, die sich aufgrund gastrischer Hypersekretion ergeben, wie beispielsweise zur Behandlung von

2_s peptischen Ulcera beim Menschen.

Zur Verwendung werden diese Verbindungen entweder allein oder in Kombination in einem inerten pharmazeutischen Trägerstoff zu Dosierungseinheiten, wie Pulver, Kapseln, Tabletten, Suspensionen, Lösungen, parenteral verabreichbaren Präparaten, Suppositorien und dergleichen, geformt, und sie können oral oder parenteral oder intramuskulär verabreicht werden, wobei der aktive Bestandteil in einer Menge zwischen etwa 50 mg bis 1000 mg je Dosierung vorhanden ist. Bei parenteraler oder intramuskulärer Verabreichung wird ein lösliches Salz der Säure angewandt, beispielsweise das Natriumsalz oder ein anderes wasserlösliches, nichttoxisches, pharmakologisch verträgliches Salz.

Zur Behandlung von peptischen Ulcera wird beispielsweise eine Dosierung von 50 mg bis 1000 mg mehrmals täglich angewandt. Die vorliegenden Verbindungen können auch mit anderen therapeutischen Mitteln, beispielsweise Spasmolytica, wie z. B. den Opium- oder Belladonnaalkaloiden, Parasympathicolytica, wie z. B. Tridihexethyljodid, anticholinergischen Mitteln, wie z. B. Propanthelinbromid, Antacida, wie z. B. Aluminium-, Magnesium- oder Calciumhydroxid, oder Magnesiumtrisilikat, Tranquilizern, wie z. B. den 1,4-Benzodiazepinen, Meprobamat, zur Steigerung und Verbreiterung ihres therapeutischen Spektrums kombiniert werden.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen wird nach folgendem, mehrstufigem Verfahren durchgeführt:

1. Stufe

Umsetzung von Asparaginsäure oder Glutaminsäure mit einem Halogenid oder dem Anhydrid der Benzoesäure oder Phenylessigsäure, wobei die N-Acylierung mit dem betreffenden Anhydrid bei einer Temperatur von 0 bis 15° C vorgenommen wird.

2. Stufe

Umsetzung der erhaltenen N-Benzoyl- oder N-Phe-

nylacetylasparaginsäure oder -glutaminsäure mit einem Carbonsäureanhydrid, wie Acetanhydrid, zu N-Benzoyl- oder N-Phenylacetylasparaginsäureanhydrid oder -glutaminsäureanhydrid.

Zur Herstellung dieser Anhydride kann auch Ben-

IU i j£.

zoesäureanhydrid oder Phthalsäureanhydrid eingesetzt werden, jedoch ist die Verwendung von Acetanhydrid am wirtschaftlichsten.

üblicherweise wird die Umsetzung, durch die das innere Anhydrid gebildet wird, bei einer Temperatur von 20 bis 30° C ausgeführt.
3. Stufe

Umsetzung des gemäß Verfahrensstufe 2 erhaltenen Anhydrides mit dem jeweiligen primären oder sekundären Amin, üblicherweise bei einer Temperatur zwischen —7 und +10⁰C, wobei ein Isomeren-Gemisch der erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formeln I und II erhalten wird.

Diese Isomeren können voneinander getrennt werden, indem das Gemisch in einer wäßrigen Lösung von Natriumcarbonat gelöst wird und dann die jeweiligen Isomeren fraktioniert durch allmähliche Zugabe von z. B. Salzsäure ausgefällt werden. Die Isomeren werden in unterschiedlichen Mengenanteilen gebildet, die von dem Lösungsmittel, in dem die Umsetzung ausgeführt wird, und der Struktur des eingesetzten Amins der allgemeinen Formel III abhängen.

So wird beispielsweise, falls R³ eine Benzoylgruppe ist, bei der Umsetzung mit einem schwach basischen Amin eine Begünstigung der Amidsubstitution am Kohlenstoffatom (1) festgestellt. Mit einem stark basischen Amin erfolgt die Substitution hauptsächlich am Kohlenstoffatom (5). Die Verwendung eines wäßrigen Reaktionsmediums begünstigt jedoch auch in diesem Falle stark die Amidsubstitution am Kohlenstoffatom (1), unter praktisch vollständigem Ausschluß der Amidsubstitution am Kohlenstoffatom (5).

Die verschiedenen gebildeten Isomeren können unterschieden werden, wenn sie in einem Gemisch von Acetanhydrid und Pyridin erhitzt werden (s. K i η g and McMillan, J. Amer. Chem. Soc, 74, Seite 5202 [1952]). Kohlendioxid entwickelt sich leicht aus dem Isomeren, in dem die unsubstituierte Carboxylgruppe der Acylaminogruppe benachbart ist. Falls der Amidsubstituent am Kohlenstoffatom (1) steht, wird beim Erhitzen dieses Isomeren in Acetanhydrid und Pyridin wenig oder gar kein Kohlendioxid gebildet. Die Isomeren können auch durch Papierchromatographie unterschieden werden.

Außer mittels allmählichem Ansäuern können bestimmte Isomerengemische durch fraktionierte Kristallisation aufgetrennt werden.

Sämtliche, ausgehend von L-, DL- oder D-Glutaminsäure, erhaltenen Glutaminsäureamide sind von beträchtlicher Aktivität. 5c

Im allgemeinen wird, auch wenn von L- oder D-Glutaminsäure ausgegangen wird, nach der Acylierung und nach der überführung der N-Acylverbindung in das innere Anhydrid eine Racemisierung zu der DL-Form erfolgen. Somit ergibt sich meist bei der Umsetzung des inneren DL-Anhydrides mit dem jeweiligen primären oder sekundären Amin die DL-Form.

Die folgenden Beispiele dienen zur weiteren Erläuterung der Erfindung.

A. Herstellung von Ausgangssubstanzen
Beispiel 1

(I.Stufe)
N-Benzoyl-glutaminsäure

588 g L(+^Glutaminsäure (technisch rein, F. 247 bis 249° C [Zers], [«]? + 31,4° [l%ige Lösung in 6 n-HCl]) wurden allmählich in kleinen Anteilen unter Rühren zu 2400 ml 2 n-NaOH in der Weise zugegeben, daß die Innentemperatur 5° C nicht überstieg, wozu äußeres Kühlen mittels Eis oder Salzlösung angewandt wurde.

Nachdem die Gesamtmenge an Glutaminsäure zugegeben und gelöst war, wurden zu dem Reaktionsgemisch unter fortgesetztem Rühren in der Weise, daß die Innentemperatur 15⁰C nicht überstieg, 471 ml Benzoylchlorid und 1600 ml 3 n-NaOH aus zwei Tropftrichtern zugegeben, wobei die Zugabe in folgender Weise erfolgte: Auf einmal wurden 94,2 ml Benzoylchlorid, dann tropfenweise 160 ml 3 n-NaOH (aus dem anderen Trichter) zugegeben, wobei die Geschwindigkeit der Zugabe so geregelt wurde, daß der pH-Wert des Gemisches den Wert 8 nicht überstieg (Universal-Indikator-Papier) und die Temperatur 15° C nicht überstieg. Nach vollständiger Zugabe der 160 ml 3 n-NaOH wurden 47,1 ml Benzoylchlorid und dann langsam 160 ml 3 n-NaOH, darauf wiederum 47,1 ml Benzoylchlorid und anschließend tropfenweise dasselbe Volumen an 3 n-NaOH zugegeben. Diese abwechselnde Zugabe wurde fortgesetzt, bis Benzoylchlorid und die 3 n-NaOH vollständig zugegeben waren. Danach wurde eine zusätzliche Menge von 1125 ml 3 n-NaOH mit einer Geschwindigkeit zugegeben, daß die Temperatur unterhalb 15°C und der pH-Wert unterhalb 8 blieb (Universal-Indikator-Papier). Nach Beendigung der Zugabe einschließlich der letzten Zugabe von NaOH wurde mit dem Rühren während weiterer 30 Minuten fortgefahren. Das Reaktionsgemisch wurde dann tropfenweise mit konzentrierter HCl angesäuert, bis Kongorotpapier in Blau umschlug. Die saure Lösung wurde weitere 5 Minuten gerührt, dann in einen geeigneten Behälter überbracht und während 10 bis 18 Stunden bei +5⁰C stehengelassen. Die Feststoffe wurden abfiltriert, in einem Mörser mit 600 ml Eiswasser aufgeschlämmt und erneut filtriert. Die Feststoffe wurden auf dem Filter mit 400 ml Eiswasser gewaschen und trockengepreßt. Das Material wurde dann in dünner Schicht ausgebreitet und an der Luft getrocknet, wobei N-Benzoylglutaminsäure, F. 136 bis 140° C, erhalten wurde, deren Kaliumsalz in lOprozentiger wäßriger Lösung folgenden Dreh wert aufweist: [*]?? +15° ± 0,5°.

Beispiel 2

(2. Stufe)
N-Benzoyl-glutaminsäureanhydrid

1500 g N-Benzoyl-glutaminsäure, erhalten nach Beispiel 1, wurden unter Rühren zu 6 1 Acetanhydrid, die vorhergehend in einen Kolben eingebracht worden waren, der mit Rückfiußkühler und Rührer versehen war, zugegeben. Unter Rühren wurde das Gemisch bei Raumtemperatur während 8 Stunden ohne ein Kühlbad gehalten und über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, trockengepreßt und in einem Luftstrom während 1 Stunde bei 60 bis 70° C und 1 Stunde bei 100° C getrocknet. Ausbeute 850 g (61%).

Infolge der in dieser Stufe eintretenden Razemisierung liegt das gebildete Anhydrid vollständig in der DL-Form vor.

Ib iö i'Zb

Il c-

B. Herstellung der erfindungsgemäßen Amide

(Stufe 3) Beispiel

N-Benzoyl-glutaminsäure-1 -di-(n-propyl)-amid

O CH₂-CH₂-CH₃

CH₂-CH₂-CH₃ C-N

CH- NH- C

CH₂ O

CH₂
C —

Il ο

H-N

O CH₂-CH₂-CH₃ CH-NH-C-

wäßriges Medium CH₂ O

CH₂
COOH

CH₂-CH₂-CH₃

Zu 1400 ml einer Lösung aus 334 ml Di-n-propylamin und Wasser wurden im Verlauf von 60 bis 75 Minuten unter wirksamem Rühren und Kühlen auf — 3°C 312 g N - Benzoylglutaminsäureanhydrid in der Weise zugegeben, daß die Temperatur zwischen -2⁰C und -4⁰C blieb. Nach beendeter Zugabe wurde mit dem Rühren während 10 bis 15 Minuten bei — 3°C fortgefahren, und es wurden 650 ecm Eisessig zugesetzt. Die Temperatur wurde auf 6° C steigen gelassen. Mit dem Rühren wurde während 60 bis 80 Minuten fortgefahren. Das Reaktionsgemisch wurde durch Zugabe von 2 bis 3 g vorhergehend hergestellten N - Benzoylglutaminsäure -1 - di - (n - propyl)-amid beimpft, wodurch die Ausfällung des gewünschten Produktes eingeleitet wurde. Das Produkt wurde durch Auflösen des Rohmaterials im 20fachen Gewicht Wasser und durch Zugabe einer stöchiometrischen Menge von NaHCO₃ oder eines geringen Überschusses davon bei 60 bis 70⁰C gereinigt. Das Gemisch wurde mit 20%iger Essigsäure unter kräftigem Rühren bei Raumtemperatur auf einen pH-Wert von 5,5 angesäuert. Das Rühren wurde während weiterer 10 bis 15 Minuten fortgesetzt, dann das erhaltene N- Benzoylglutaminsäure-1 -di-(n-propyl)-amid abfiltriert, unter Rühren mit 700 ecm Wasser während 15 Minuten gewaschen, erneut filtriert und in einem Luftstrom bei 25° C bis zum konstanten Gewicht getrocknet. Ausbeute 140 g (31% der Theorie), F. 142 bis 145° C.

CH₂
CH₂

Beispiel 4 N-Benzoyl-DL-glutaminsäure-5-diäthylamid

HN

I /■—\

CH-NH-C—< >

Ii X=/

C₂H₅

in Xylol

600 g N-Benzoyl-DL-glutaminsäureanhydrid wurden während 1 Stunde zu 320 ecm Diäthylamin, die in 3500 ecm Xylol gelöst waren, unter Rühren und äußerem Kühlen, so daß die Temperatur zwischen -7 und — 4°C während der Zugabe verblieb, zugegeben. Dann wurde die Temperatur auf 0⁰C erhöht und das Rühren während 14 Stunden bei dieser Temperatur fortgesetzt. Das Xylol wurde dekantiert, 3 1 Wasser zugegeben, das restliche Xylol mittels eines Scheidetrichters abgetrennt und die wäßrige Phase unter Verwendung von Kongorot als Indikator mit wäßriger HCl (1:1) unter fortgesetztem Rühren bei einer Tem-

peratur zwischen 0° C und 5° C angesäuert. Das Produkt wurde filtriert, unter Rühren mit 2 1 Wasser gewaschen und bis zum konstanten Gewicht bei 40⁰C getrocknet; nach zwei Umkristallisationen aus Essig-

säure/Wasser in einem Verhältnis von 1 : 1 wurden 375 g (47% der Theorie) der vorstehenden Verbindung, F. 178—180⁰C, erhalten.

O
C-

C-

Beispiel5 N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäure -1 -(p-carbäthoxyphenyl)-amid

COOH
CH₂

CH₂
CH₂

CH-NH-CCH₂
O

in Benzol

CH — NH -CCH₂

Il ^a ο

CNH-VT¹V-COOC₂H₅

25 g N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäureanhydrid wurden in 200 ecm Benzol gelöst und zu dieser Lösung 35 g p-Aminobenzoesäureäthylester, gelöst in 200 ecm Benzol, zugegeben, worauf die erhaltene Lösung während 3 bis 4 Minuten geschüttelt und dann bei Raumtemperatur über Nacht stehengelassen wurde. Die erhaltene Verbindung wurde abfiltriert, mit 200 ecm Äther unter Rühren während 30 Minuten am Rückfluß digeriert, danach filtriert und aus 100 bis 120 ecm Alkohol umkristallisiert. Ausbeute 25 g (58% der Theorie), F. 156—15 8° C.

Beispiel 6 N- Phenylacetyl-DL-glutaminsäure-1 -benzylamid

CH₂
CH₂

CH-NH-CCH₂
O

> CH-NH-CCH

Il ο

25 g N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäureanhydrid wurden im Verlauf ¹I₂ Stunde zu einer Lösung von 22 ecm Benzylamin in 110 ecm Äther unter Rühren zugegeben, wobei so gekühlt wurde, daß die Temperatur zwischen +5 und +6⁰C gehalten wurde. Das Rühren wurde während 15 bis 20 Minuten fortgesetzt, worauf das Gemisch filtriert und der Rückstand dann in 120 ecm Wasser gelöst Wurde. Die Lösung wurde unter Rühren durch Zugabe von wäßriger Salzsäure (1:1) unter Verwendung von Kongorot als Indikator angesäuert, wobei die Zugabe so erfolgte, daß die Temperatur nicht über +5⁰C stieg. Das Produkt wurde filtriert, unter Rühren mit 100 ecm Wasser während 10 Minuten gewaschen und erneut filtriert. Das erhaltene Produkt wurde dann mit 300 ecm siedendem Wasser während 3 bis 4 Minuten extrahiert und filtriert. Der nicht gelöste Anteil wurde zweimal extrahiert, die Filtrate vereinigt und dann auf 0⁰C zur Kristallisation abgekühlt. Ausbeute 14 g (38% der Theorie), F. 149—151⁰C.

809 612/1

9 10

Beispiel 7
N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäure-l-n-phenyl-^-dirnethylpyrazolon-S-yMj-amid

COOH

Il c-

CH₂
CH₂
CH-NH-CCH₂

Il ο

4-Aminoantipyrin

in Aceton/Methyläthylketon

C-

Il ο

25 g N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäureanhydrid, stehengelassen. Dann wurde die Lösung filtriert und gelöst in 150 ecm Aceton, wurden zu.40 g 4-Amino- mit 100 ecm Aceton unter Rühren während 10 Miantipyrin, gelöst in 150 ecm Methyläthylketon, bei 25 nuten gewaschen und das erhaltene Produkt dann aus

einer Temperatur von 6O⁰C zugegeben. Die erhaltene Lösung wurde bei Raumtemperatur über Nacht Alkohol umkristallisiert. Ausbeute 18 g (41% der Theorie), F. 130—133° C.

Beispiel 8
N-Benzoyl-DL-asparaginsäure-1 -benzylamid

COOH

CH,

=\ O H,N—CH

22 g N-Benzoyl-DL-asparagihsäureanhydrid wurden zu 22 ecm Benzylamin, gelöst in 150 ecm Äther, unter Rühren und äußerem Kühlen zugegeben, wobei die Zugabe so geregelt wurde, daß die Temperatur -5⁰C nicht überstieg und die Temperatur während der Umsetzung -8 bis -5° C betrug. Nach beendeter Zugabe wurde 1 Stunde gerührt und das gebildete CH-NH-C

CNH-CH;

Produkt abfiltriert und in 250 ecm 2 n-Salzsäure suspendiert, 15 Minuten gerührt, filtriert, unter Rühren mit 100 ecm Wasser bei 90⁰C während 10 Minuten gewaschen, filtriert und bis zu konstantem Gewicht bei 50⁰Cgetrocknet. Ausbeute 14 g(43% der Theorie), F. 146—148° C.
50

Beispiel

N-Benzoyl-DL-asparaginsäure-1 -(/f-phenyläthyl)-amid

COOH

CH₂

CH-NHCO

=\ O H₂N-CH₂-CH₂

in Äther

22 g N-Benzoyl-DL-asparaginsäureanhydrid wurden zu 25 ecm ß-Phenyläthylamin, gelöst in 120 ecm Äther, unter Rühren und äußerem Kühlen zugegeben,

wobei die Zugabegeschwindigkeit so geregelt wurde, daß die Temperatur —5° C nicht überstieg und die Temperatur während der Umsetzung zwischen —7

und —5" C betrug. Weitere 1'/₂ Stunden wurde gerührt, dann die Verbindung abfiltriert und in 250 ecm 2 η-Salzsäure unter Rühren während 15 Minuten suspendiert, worauf abfiltriert wurde. Das abfiltrierte Produkt wurde unter Rühren mit 150 ecm Wasser während 10 Minuten gewaschen, dann abfiltriert und in einem Luftstrom von 4O⁰C getrocknet. Ausbeute 16 g (47% der Theorie), F. 148—150° C.

Zur parenteralen und intramuskulären Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen werden ,₀ wasserlösliche, nichttoxische, pharmakologisch verträgliche Salze verwendet, wobei außer dem schon

genannten Natriumsalz auch andere Alkalisalze sowie die Erdalkalisalze und Salze der Verbindungen mit organischen Basen, wie z. B. Betain, Cholin oder Diäthanolamin, die in üblicher Weise hergestellt werden, verwendet werden.

Sowohl die vorstehend beschriebenen, als auch die weiteren erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen sind in den folgenden Tabellen 1 bis 8 aufgeführt, und zwar unter Angabe der Strukturformeln und Schmelzpunkte, der Herstellungsverfahren, der eingesetzten Aminmengen und der Ausbeuten.

Tabelle 1

N-Benzoyl-DL-glutaminsäure-1 -amide

NR¹R²

HOOC-CH₂-CH₂-CH — C

\ O

NH- C—^

Il ο

Verbindung R¹
Nr.

R²

1	H
2	H
3	H
4a	H

C₂H₅
n-C₃H₇

/"X-CH₂-

H₅C₂OOC

1-H₇C₃OOC

C₆H₅ N-

H,C

y ν

F. (Q	Herstellung entsprechend Beispiel	Eingesetztes Amin (Menge in g)	Ausbeute (% der Theorie)
112—115	3	112,5	21
127—130	3	147,7	25
160—162	6°)	21,6	35
168—170	5")	35	35
— 173—174	5°)	40,2	23
129—132	T)	40	26

7a	CH₃	CH₃	131—133	3	112,5	23
8a	C₂H₅	C₂H₅	139—142	3	182,7	27
9	n-C₃H₇	n-C₃H₇	142—145	3	247,5	31
10		(CH₂)₄	175—178	5").	15	32
11		-(CH₂J₅-	158—161	5^a)	20,7	31
12		-(CH₂J₂-O-(CHj₂-	181—184	5°)	18,3	32

^a) Mit 23,3 g (0,1 Mol) N-Benzoyl-DL-glutaminsäureanhydrid.

13

Tabelle 2
N-Benzoyl-DL-glutaminsäure-5-amide

NR¹R²

HOOC—CH — CH₂-CH₂-C

NH-C

Il ο

Verbindung R¹ Nr.

R²

4b	H	3	H₅C₂OOC -<
7b	CH₃	CH₃
8b	C₂H₅	C₂H₅
13		-(CH₂J₅-
Tabelle
N-Phenylacetyl-glutaminsäure-l-amide


NR¹R²

F. CC)	Herstellung entsprechend Beispiel	umgesetztes Amin (Menge in g)	Ausbeute (% der T
183—185	4	520	22
164—167	4 .	140	29
178—180	4	226,4	47
160—163	4	265	24

HOOC—(	^Γΐ2 \^ ΓΊ	ζ	X O	R²	C₂H₅	—i(	F. ("C)	Herstellung entsprechend Beispiel	Eingesetztes Amin (Menge in g)	35	40,2	Ausbeute (% der Theorie)
		:h —c	NH-C-CHj-^^	H₅C₂OOC-<^^>—	n-C₃H₇	:h,v,—	156—158	5	21,6	58
		O	n-C₄H₉-OOC-/~V		- 154—156	5	40	30
Verbindung Nr.	R¹			149—151	6		38
14	H	C₆H₅^ O		130—133	7		41
15	H	N /
16	H	^N A H₃C C				182,7
17	H	CH₃			247,2
		148—150	3")	15	25
		155—157	3°)		28
		180—182	6		24
18a	C₂H₅
19	n-C₃H₇
20

Mit33Og(l,33 Mol)N-Phenylacetyl-DL-glutaminsaureanhydnd.

15

Tabelle 4
N-PhenylacetyI-glutaminsäure-5-amide

NR¹R²

10 lö IZO

HOOC-CH-CH₂-CH₂-C

NH-C-CH₂-^ /y

O
Verbindung Nr. R¹ R²

C₂H₅ C₂H₅

-(C₂H₅)-

F.	Herstellung	Eingesetztes	Ausbeute
	entsprechend	Amin
	Beispiel
CC)		(Menge in g)	(% der Theorie)
174—177	4«)	227	28 ·
178—180	4")	265	22

^a) Mit 640 g (2,6 Mol) N-Phenylacetyl-DL-glutaminsäureanhydrid.

Tabelle 5
N-Benzoyl-DL-asparaginsäure-1 -amide

NR¹R²

/ HOOC-CH₂-CH-C

Ver bindung Nr.	R¹	R²	C₂H₅ C₂H₅	3H7 U-C₃H₇	F. ("C)	Herstellung entsprechend Beispiel	Eingesetztes Amin (Menge in g)	Ausbeute (% der Theorie)
22	H		n-C	-(CH₂J₄-	146—148	8	21,6	43
23	H	<T~^>—CH₂-CH₂-		-(CH₂J₅-	148—150	9	24,1	47
24a .	H	H₅C₂OOC —\/~		(CH₂J₂ O (CH₂J₂	163—165	5")	35	32
		C₆H₅-N-^=O
25	H	A A	133—135	7")	40	28
		H₃C \/
		CH₃
26 a	148—150	3°)	182,7	23
27	153—156	3°)	247,2	26
28	170—173	5")	15	33
29	163—164	5")	17,8	30
30	176—177	5")	18,3	32

") Mit 295 g (1,34 Mol) N-Benzoyl-DL-asparaginsäureanhydrid. ") Mit 21,9 g (0,1 Mol) N-Benzoyl-DL-asparaginsäureanhydrid.

809 612/1

17

Tabelle 6

LU IO A 18

N-Benzoyl-DL-asparaginsäure-4-amide

NR¹R

1_D2

HOOC-CH-CH₂-C

	NH-	H,	C- Il	\ O	F. CC)	Herstellung entsprechend Beispiel	Eingesetztes Amin (Menge in g)	Ausbeute (% der Theorie!
			Il O	O	^C ^ 177—179	4°)	520	16
	R¹			153—156	4")	226	19
Ver bindung Nr.	H		R²
24 b	C		H₅C₂OCO-
26 b	C₂H₅

^a) Mit 560 g (2,4 MoI) N-Ben7oyl-D L-asparaginsäureanhydrid.

Tabelle 7

N-Phenylacetyl-DL-asparaginsäure-l-amide

NR¹

HOOC-CH₂-CH-C

Ver- R¹

bindung

R²

ro Herstellung Eingesetztes Ausbeute

entsprechend Amin

Beispiel

(Menge in g) (% der Theorie)

H₅C₂OOC

32	C₂H₅	C₂H₅
33	n-C₃H₇	n-C₃H₇
34		-(CH₂).-

162—164	5")
139—140	3")
160—161	3")
180—182	5°)

35

182,7

247,2

15

30

25 27 31

^a) Mit 23,3 g (0,1 MolJN-Phenyl-acetyl-DL-asparaginsäureanhydrid. *) Mit312g(l,33 Mol) N-Phenyl-acetyl-D L-asparaginsäureanhydrid.

iö lö

Tabelle 8
N-Phenylacetyl-DL-asparaginsäure-4-amide

NR¹R²
HOOC-CH-CH₂-C

NH-C-CH₂^
0

Ver- R¹

bindung

R²

Herstellung Eingesetztes Ausbeute

entsprechend Amin

Beispiel

(Menge in g) (% der Theorie)

35 H H₅C₂-OOC-X >- 180—183

36 —(CH₂)₅— 164—166

^a) Mit 600 g (2,57 Mol) N-Phenylacetyl-DL-asparaginsäureanhydrid.

520
260

18 16

Die pharmakologische Wirkung der in den Tabellen 1 bis 8 aufgeführten erfindungsgemäßen Verbindungen geht aus der folgenden Tabelle 9 hervor, in deren Spalte I die Toxizitäten durch Angabe der LD₅₀-Werte in mg/kg wiedergegeben sind. Die Toxizitäten wurden durch Injizieren der Testverbindungen durch den Schwanz (i. v.) von jeweils 10 Mäusen bestimmt. In Spalte II der Tabelle 9 ist die antisekretorische Aktivität, ausgedrückt als ED₅₀ in mg/kg, wiedergegeben, die bei Ratten durch subkutane Injektion nach der Methode von S h a y (vgl. »Gastroenterology«, Bd. 5, S. 43, 1945) bestimmt wurde. Die in Spalte III wiedergegebenen ED₅₀-Werte der antisekretorischen Aktivität wurden ebenfalls nach der Methode von S h a y bei Ratten, jedoch bei oraler Applikation, bestimmt. Hierbei wurde eine Pylorus-Ligatur bei den Tieren vorgenommen und gleichzeitig die Testverbindung mittels einer Magensonde oral verabreicht. Der Mageninhalt jeder Ratte wurde 10 Stunden nach der Behandlung gesammelt und der Prozentsatz der Aktivität auf Basis dieses gastrischen Sekretionsrestes nach S h a y bestimmt. Schließlich ist in Spalte IV der Tabelle 9 der therapeutische Index als Quotient aus LD₅₀ und ED₅₀ s. c. wiedergegeben.

Die pharmakologische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde mit derjenigen von Atropinsulfat als einem anerkannt guten Mittel gleicher Wirkungsrichtung verglichen. Auch die für Atropinsulfat ermittelten Werte für LD₅₀, ED₅₀ s. c. und therapeutischem Index sind in Tabelle 9 aufgeführt.

In einer weiteren Versuchsreihe wurde die mydriatische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen und des Atropinsulfats durch intraperitoneale Injektion an Mäusen bestimmt, wobei die Verbindungen jeweils in der dem ED₅₀ s. c.-Wert entsprechenden Dosis verabreicht wurden. Diese Versuche, deren Ergebnisse in Tabelle 9 nicht wiedergegeben sind, zeigten, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen durchweg keinerlei mydriatische Aktivität besitzen, wogegen Atropin eine mydriatische ED₅₀ i. p. von mg/kg besitzt.

Ein Vergleich dieser Versuchsergebnisse und der in Tabelle 9 wiedergegebenen Ergebnisse zeigt, daß Atropin zwar eine erheblich stärkere antisekretorische Aktivität besitzt als die erfindungsgemäßen Verbindüngen, daß es aber auch eine erheblich größere Toxizität und erhebliche Nebenwirkungen, z. B. eine außerordentlich hohe mydriatische Aktivität, besitzt. Demgegenüber besitzen die erfindungsgemäßen Verbindungen überhaupt keine Nebenwirkungen in Form einer mydriatischen Aktivität, und sie sind wesentlich weniger toxisch als die Vergleichsverbindung.

Tabelle 9
Pharmakologische Wirkung

Ver	1	II	III	IV
bin
dung	LD₅₀	Anti	Anti-	Therapeu
50 Nr.	i. v. bei der	sekretorische	sekretorische	tischer
	Maus	Aktivität,	Aktivität,	Index
		ausgedrückt	ausgedrückt	LD₅₀(I)
		als ED₅₀	als ED₅₀	ED₅₀(II)
	(mg/kg)	(mg/kg),	(mg/kg),
		bestimmt bei	bestimmt bei
cc		Ratten durch	Ratten durch
JJ		subcutane	orale
		Injektion	Ver
			abreichung

60

65

3200

2800

2400

810

654

4300

3400

3800

950

720

725

467

410

1680

1360

910

500 301

3,36 3,88 3,28 1,73 1,59 2,56 2,50 4,18

21

Fortsetzung

Vcr- 1 bindung LD₅₁, Nr. i. ν. bei der Maus

(mg/kg)

2250 4000 2500 4000 870 3600 8b 4400 13 1600 770 350 2730 5300 4500 2670 4200 3900 1400 1600

Il

Antisekretorische Aktivität, ausgedrückt als ED₅₀ (mg/kg), bestimmt bei Ratten durch subeutanc Injektion

637 875

1216

3400 400

1180 857 901 618 210 837

1757 865 690 860 880 970 760

III

IV

ED_5n(H)

Anti- Therapeu-

sekretorische tischer Aktivität, Index ausgedrückt als ED₅₀ (mg/kg), bestimmt bei Ratten durch orale Verabreichung

454

>1500

471

1190

625 555 423 367

510

490

3,53 4,57 2,05 1,17 2,17 3,05 5,13 1,77 1,24 1,66 3,26 3,01 5,20 3,86 4,88 4,43 1,44 2,10

Verbin- duni; Nr.

15

23

i. v. bei der

Maus

(mg kg)

24a

26a

27 ²⁰ 28

30

24b ²⁵ 26b

33 3° 34

Atro-35 pin-

sulfat

2200

600
4800
3800
3100
3500
2045
3850

910
4800

770
4200
2210
3450

850

1560

90

III

IV

Antisekretorische
Aktivität.

Antisekretorische Aktivität,

Therapeutischer Index

ausgedrückt ausgedrückt LD₅₀(I) als ED₅₁, vrs,£p₅₀ ED₅₁JlU (mg kg)/ ,.UUf Hg), bestimm) bp\"-bestimmt bei V₁

Kutten durch Ralfen durch ''

subeulane ^; orale
Injektion Verabreichung

910 — 2,41

420 — 1,42

1850 — 2,59

780 806 4,87

720 — 4,30

910 — 3,84

115a — 1,77

3020 — 1,27

420 — 2,16

880 — 5,45

670 — 1,15

920 — 4,59

670 — 3,29

830 — 4,16

610 — 1,39

810 — 1,92

5,7 — 15,7

Claims

Patentansprüche:

I. Asparaginsäure-und Glutaminsäure-1-amide der allgemeinen Formel

HOOC- (CH₂),,- CH — C

NH-R³

NR¹R²