[go: up one dir, main page]

CZ20001478A3 - Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty - Google Patents

Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty Download PDF

Info

Publication number
CZ20001478A3
CZ20001478A3 CZ20001478A CZ20001478A CZ20001478A3 CZ 20001478 A3 CZ20001478 A3 CZ 20001478A3 CZ 20001478 A CZ20001478 A CZ 20001478A CZ 20001478 A CZ20001478 A CZ 20001478A CZ 20001478 A3 CZ20001478 A3 CZ 20001478A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amylase
amino acid
seq
positions
variant
Prior art date
Application number
CZ20001478A
Other languages
English (en)
Inventor
Chanchal Kumar Ghosh
Andre Cesar Baeck
Ryohe Ohtani
Alfred Busch
Michael Stanford Showell
Original Assignee
The Procter & Gamble Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27420734&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20001478(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by The Procter & Gamble Company filed Critical The Procter & Gamble Company
Publication of CZ20001478A3 publication Critical patent/CZ20001478A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38681—Chemically modified or immobilised enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G4/00—Chewing gum
    • A23G4/06—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G4/12—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A23G4/123—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/189—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10—Washing or bathing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/39—Organic or inorganic per-compounds
    • C11D3/3902—Organic or inorganic per-compounds combined with specific additives
    • C11D3/3905—Bleach activators or bleach catalysts
    • C11D3/3907—Organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/39—Organic or inorganic per-compounds
    • C11D3/3945—Organic per-compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/86—Products or compounds obtained by genetic engineering
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/12—Soft surfaces, e.g. textile
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/14—Hard surfaces

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Slot Machines And Peripheral Devices (AREA)
  • Confectionery (AREA)
  • Exhaust Gas After Treatment (AREA)

Description

Čistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty
Oblast techniky
Vynález se týká čistících prostředků, které zahrnují jeden nebo více proteázových enzymů, jež jsou mnohonásobně substituovanými proteázovými variantami a jeden nebo více enzymů, jež jsou amylázovými variantami. Konkrétněji, se tento vynález zabývá přípravky na praní prádla, přípravky pro mytí nádobí, přípravky na mytí tuhých povrchů a přípravky pro osobní čištění, které zahrnují jednu nebo více mnohonásobně substituovaných proteázových variant nebo jednu nebo více amylázových variant.
Dosavadní stav techniky
Různé typy enzymů se již delší dobu používají v pracích detergentech kvůli napomáhání při odstraňování určitých nečistot z tkaniny. Každá třída enzymů (amylázy, proteázy a pod.) obecně katalyzuje různé druhy chemických reakcí. Například, proteázové enzymy jsou známé pro jejich schopnost hydrolyzovat (rozbíjet sloučeniny na dvě nebo více jednoduší sloučeniny) jiné proteiny. Tato schopnost byla využita pomocí zabudování přírodních nebo opracovaných proteázových enzymů do přípravků na praní prádla.
V současné době je také prováděn výzkum použití enzymů při automatickém mytí nádobí. Naneštěstí, mnohé enzymy, jako třeba konvenční proteázové enzymy, se dobře nesnášejí s pracím prostředím. Konkrétně, k zajištění jejich uspokojivého působení musí být optimalizována jejich termická stabilita, pH stabilita, oxidativní stabilita a substrátová specifita.
U. S. Patent RE 34,606 (Estell et al.) popisuje modifikace aminokyselinových zbytků subtilisinového amionu odpovídajících pozicím v subtilisinu u Bacillus amyloliquefaciens, tyrosin -1, aspartát +32, asparagin +155, tyrosin +104, methionin +222, glycin +166, histidin +64, glycin +169, fenylalanin +189, serin +33, serin +221, tyrosin +217, glutamát +156 a alanin +152.
U. S. Patent 5,182,204 popisuje modifikaci aminokyselinového zbytku +224 u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens a ekvivalentních pozic u dalších subtilisinů, které mohou být modifikovány prostřednictvím substituce, inserce nebo vypuštění a které mohou být kombinovány s modifikacemi zbytků popsanými v U. S. Patent RE 34,606 za vzniku užitečných subtilisinových mutantů nebo variant. U. S. Patent 5,182,204 dále popisuje modifikace mnoha aminokyselinových zbytků v subtilisinu, včetně konkrétně +99, +101,+103,+107,+126,+135, +197 a+204.
U. S. Patent 5,679,630 (Baeck et al.) popisuje čistící přípravky zahrnující proteázovou variantu včetně substitucí aminokyselinových zbytků s jinými aminokyselinovými zbytky na pozicích odpovídajících pozici 76 v kombinaci s jednou nebo více následujících pozic: 99, 101, 103, 104, 107, 123, 27, 105, 109, 126, 128, 135, 156, 166, 195, 197, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 a/nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens a jedním nebo více čistících materiálů.
Kromě proteázových enzymů byly použity také amylázové enzymy v celé řadě různých účelů, nej důležitější z nich je ztekucování škrobu, odšlichtování tkanin, modifikace škrobu a v papírenském průmyslu, a dále pro pivovarnictví a pečení. Další použití amylázových enzymů, které nabývá na stále větším významu, je odstraňování skvrn a nečistot s obsahem škrobu během praní tkanin, čištění tuhých povrchů a/nebo nádobí.
WO 94/18314 (Genencor) publikovaný 18. srpna 1994, WO 94/02596 (Novo) publikovaný 3. února 1994 a WO 95/10603 (Novo) publikovaný 20. dubna 1995, popisují čistící prostředky obsahující mutantní amylázy.
Další amylázy známé svým využitím v čistících prostředcích zahrnují a- a β-amylázy. aAmylázy jsou známy v oboru a zahrnují takové, které jsou popsány v U. S. Patent 5,003,257, EP 252 666, WO 91/00353, FR 2,676,456, EP 285 123, EP 525 610, EP 368 341 a Britskou patentovou specifikaci 1,296,839 (Novo).
WO 95/26397 (Novo), publikovaná 5. října 1995, popisuje α-amylázu, mající specifickou aktivitu nejméně o 25% vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotách od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozmezí od 8 do 10.
WO 98/05748 (P&G), publikovaná 12. února 1998, popisuje varianty a-amylázy, popsané v WO 95/26397 použité v detergentních přípravcích.
WO 98/30669 (Henkel), publikovaná 16. července 1998, popisuje detergentní přípravky obsahující proteázy a amylázy, kde proteázou je proteázový mutant, ve kterém je aminokyselina leucin přítomná v poloze 211 (způsob číslování BLAP) přírodní proteázy vyměněna v této poloze za aspartamovou nebo glutamovou kyselinu, a amylásouje amylásový mutant, ve kterém je jeden methionin, tryptofan, cystein nebo tyrosin přítomný v přírodní amyláze odstraněn nebo vyměněn za jinou aminokyselinu, kterou je obzvláště cystein nebo methionin. Příklady amylásových • ·
mutantů, vhodných pro použití v přípravcích podle WO 98/30669 jsou popsány v WO 94/02597 (Novo), WO 95/10603 (Novo) a WO 94/18314 (Genecor) a jsou komerčně dostupné pod obchodními názvy Duramyl® (Novo) a Purafect OxAm® (Genecor).
Ovšem stále existují zákazníci, kteří vyžadují čistící prostředky zajišťující zvýšené a/nebo zlepšené čištění od nečistot (odstraňování a/nebo snížení nečistoty) a/nebo odstraňování skvrn ze substrátů ve srovnání s konvenčními čistícími prostředky obsahujícími enzymy.
V tomto vynálezu bylo shledáno, že kombinace nových proteázových enzymů, které jsou mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty, poskytuje zvýšené a/nebo zlepšené účinky při čištění a/nebo odstraňování skvrn ve srovnání s čistícími prostředky obsahujícími konvenční enzymy a ve srovnám s čistícími prostředky obsahujícími nové proteázové enzymy podle tohoto vynálezu bez přítomnosti amylázových enzymů podle tohoto vynálezu.
Dále bylo nalezeno, že čistící prostředky zahrnující novou kombinaci nových proteázovách enzymů podle tohoto vynálezu s amylázovými enzymy podle tohoto vynálezu zajišťují vynikající čistící účinky ve srovnání s čistícími schopnostmi prostředků, které obsahují buď jedno nebo druhé ale nikoliv oboje (proteázy nebo amylázy podle tohoto vynálezu).
Předmětem tohoto vynálezu je tedy zajištění čistících prostředků, obzvláště detergentních prostředků pro praní prádla a/nebo prostředků pro mytí nádobí, majících zvýšené účinky při odstraňování znečištění a skvrn a při praní tkanin.
Konkrétní kombinace nárokované v tomto vynálezu nejsou identifikovány v žádném referenci, týkající se současného stavu techniky v tomto oboru.
Podstata vynálezu
Tento vynález vychází vstříc výše zmíněných požadavkům v tom, že překvapivě odhaluje fakt, že mnohonásobně substituované proteázové varianty podle tohoto vynálezu, jsou-li použity v kombinaci s amylázovými variantami podle tohoto vynálezu v čistících prostředcích, zajišťují zvýšenou a silnější čistící schopnost včetně odstraňování skvrn a špíny a/nebo snížení zašpinění a/nebo stupně bělosti a/nebo vymizení zašpinění nebo skvrn a/nebo odstraňování nebo snižování povlaků ve srovnání s čistícími prostředky obsahujícími konvenční enzymy.
• ·
Mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty podle tohoto vynálezu jsou vhodné pro vysoko- i nízko koncentrované granulární přípravky, pro kapalné přípravky s vysokou i nižší účinností, tablety popř. kusové či jiné syntetické detergentní přípravky.
V jednom aspektu tohoto vynálezu čistící prostředek zahrnuje:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná proteázová varianta obsahuje substituci aminokyselinových zbytků s jinými přírodně se vyskytujícími aminokyselinami v aminokyselinových polohách odpovídajících pozicím 103 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens v kombinaci se substitucí aminokyselinových zbytků za přírodní aminokyseliny v jedné nebo více pozicích odpovídajících polohám 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 16,
17, 18, 19, 20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 58, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79,
86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 116, 117, 119, 121, 123, 126, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 166, 167, 170, 173, 174, 177,
181, 182, 183, 184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214,
215, 216, 217, 218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246,
247, 248, 249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269,
270, 271, 272, 274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens, kde když zmíněná varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminnokyselinového zbytku v jedné nebo více aminokyselinových poloh jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens.
(b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001 % do asi 10 % hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
(i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo (ii) α-amylázu podle (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v SEQ Π? č. 1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ID č. 1 a/nebo • · « · (iii) α-amylázu podle (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v SEQ DD č. 2 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ID č. 2 a/nebo (iv) α-amylázu podle (i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEQ DD č. 3) nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ID č. 3 a/nebo (v) α-amylázu podle (i-iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo (vi) α-amylázu podle (v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo (vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou kros-reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající SEQ ID č. 1, SEQ ID č. 2 nebo SEQ ID č. 3 a/nebo (viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská α-amyláza (1) má jednu z aminokyselinových sekvencí SEQ ID č. 1, SEQ ID č. 2 nebo SEQ ID č. 4, nebo (2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou kros-reaktivitu s protilátkou vzniklou proti α-amyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: (A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo (B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo (C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné α-amylázy; zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním nebo relativně vysokém pH, zvýšená a-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu (pí) takže pí hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH média a (c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
• · ······ ··· ··· ···· ··· ♦···· ···· • · · · · · · · Z! z
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn přípravek na čištění tkanin obsahuje:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku tkanin, kde zmíněná proteázová varianta je popsána výše;
(b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše;
(c) nejméně 5% hmotnosti přípravku na čištění tkanin surfaktantu a (d) nejméně 5 % hmotnosti přípravku na čištění tkanin plniva.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob čištění tkanin, které vyžadují vyčištění, zahrnující kontaktování tkaniny s prostředkem na čištění tkanin podle tohoto vynálezu.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn čistící prostředek na mytí nádobí, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku na mytí nádobí, kde zmíněná proteázová varianta je popsána výše;
(b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku na mytí nádobí, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše;
(c) od 0,1 % do asi 10 % hmotnosti čistícího prostředku na mytí nádobí surfaktantu.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob čištění nádobí, které potřebuje vyčistit, zahrnující kontaktování nádobí s prostředkem na mytí nádobí podle tohoto vynálezu.
V dalším aspektu podle tohoto vynálezu je zajištěn prostředek na osobní čištění, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti prostředku pro osobní čištění, kde zmíněná proteázová varianta je popsána výše;
(b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti prostředku osobní čištění, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše;
(c) od 0,1 % do asi 95 % (hmotnosti prostředku pro osobní čištění) surfaktantového systému a (d) případně, od 0,05 % do asi 50 % (hmotnosti prostředku pro osobní čištění) enzymového stabilizátoru.
···· ·· · · ··· ··· ···
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob osobního čištění částí lidského nebo zvířecího těla, vyžadujícího takovéto čištění, zahrnující kontaktování této části těla s přípravkem pro osobní čištění podle tohoto vynálezu.
V dalším aspektu podle tohoto vynálezu je zajištěn čistící prostředek, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více aminokyselinových polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, (b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
(i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotách v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo (ii) α-amylázu podle (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v SEQ ED č. 1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ID č. 1 a/nebo (iii) α-amylázu podle (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v SEQ ED č. 2 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ID č. 2 a/nebo (iv) α-amylázu podle (i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEQ ID č. 3) nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí SEQ ED č. 3 a/nebo (v) α-amylázu podle (i-iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo (vi) α-amylázu podle (v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCEB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo (vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou kros-reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající SEQ ID č. 1, SEQ ED č. 2 nebo SEQ ED č. 3 a/nebo • · · · • ·
• · ·· · · · · (viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská a-amyláza (1) má jednu z aminokyselinových sekvencí SEQ ID č. 1, SEQ ID č. 2 nebo SEQ ID č. 4, nebo (2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou kros-reaktivitu s protilátkou vzniklou proti α-amyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: (A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo (B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo (C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné α-amylázy; zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním nebo relativně vysokém pH, zvýšená a-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu (pl) takže pl hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH média a (c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn prostředek na čištění tkanin, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více aminokyselinových polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, (b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše, (c) nejméně 5 % hmotnosti čistícího prostředku surfaktantu, (d) nejméně 5 % hmotnosti čistícího prostředku plniva.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob čištění tkanin, které to potřebují, zahrnující kontaktování tkaniny s čistícím prostředkem podle tohoto vynálezu.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn prostředek na mytí nádobí, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více ·· ·· ·· ·· • ··· ···· • · · · » · · ·· · ··· ·· ··· ·· « • · · · · ···· • · · · ·· · · aminokyselinových polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, (b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti čistícího prostředku, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše, (c) od 0,1 % do asi 10 % hmotnosti čistícího prostředku surfaktantu.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob čištění nádobí, které to vyžaduje, zahrnující kontaktování nádobí s prostředkem na mytí nádobí podle tohoto vynálezu.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn prostředek pro osobní čištění, zahrnující:
(a) proteázovou variantu, s výhodou účinné množství proteázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti osobního čistícího prostředku, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více aminokyselinových polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, (b) amylázovou variantu, s výhodou účinné množství amylázové varianty, výhodněji od 0,0001% do asi 10% hmotnosti prostředku osobní čištění, kde zmíněná amylázová varianta je popsána výše;
(c) od 0,1 % do asi 95 % (hmotnosti prostředku pro osobní čištění) surfaktantového systému a (d) případně, od 0,05 % do asi 50 % (hmotnosti prostředku pro osobní čištění) enzymového stabilizátoru.
V dalším aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob čištění částí lidského nebo zvířecího těla, vyžadujícího takové čištění, zahrnující kontaktování části těla s osobním čistícím prostředkem podle tohoto vynálezu.
Předmětem tohoto vynálezu je tedy zajištění čistícího přípravku, majícího kombinaci proteázové a amylázové varianty, schopné zajištění zvýšeného a zlepšeného čištění tkanin, nádobí, příborů, kuchyňského zařízení a dalších substrátů s pevným povrchem. Dále je objektem tohoto vynálezu zajištění způsobu čištění těchto zmíněných substrátů pomocí použití čistících prostředků obsahť^cích proteázové a amylázové varianty podle tohoto vynálezu.
Tyto a další předměty, znaky a výhody tohoto vynálezu budou jasnější z následujícího detailního popisu vynálezu, příkladů provedení vynálezu a z připojených nároků.
Všechna procentuální vyjádření, poměry a proporce použité v textu jsou na základě hmotností pokud není přímo uvedeno jinak. Všechny zde citované dokumenty jsou zde zahrnuty jako reference.
• » v · · » • 0 ·· ·* ·· • · · • · · · · • * · · · • · · * • * * · · ·
Krátký popis zobrazení
Obrázek 1 A-C zobrazuje DNA aminokyselinovou sekvenci subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens a částečnou restrikční mapu tohoto genu.
Obrázek 2 zobrazuje zachované aminokyselinové zbytky subtilisinů Bacillus amyloliquefaciens (BPN)’ a Bacillus lentus (přírodní typ).
Obrázek 3A a 3B zobrazují aminokyselinovou sekvenci čtyř subtilisinů. Horní řádka reprezentuje aminokyselinovou sekvenci subtilisinu z Bacillus amyloliquefaciens (někdy také popisovaný jako substilisin BNP’). Druhá řádka ukazuje aminokyselinovou sekvenci subtilisinu z Bacillus subtilis. Třetí řádka zobrazuje aminokyselinovou sekvenci subtilisinu Bacillus licheniformis. Čtvrtá řádka ukazuje aminokyselinovou sekvenci subtilisinu z Bacillus lentus (také označovaný jako subtilisin 309 v PCT WO 89/06276). Symbol * označuje specifické aminokyselinové zbytky ve srovnání se subtilisinem BNP’.
Detailní popis vynálezu
I. Proteázy - Proteázy jsou karbonylhydrolázy, které obecně účinkují tak, že štěpí peptidovou vazbu proteinů nebo peptidů. V tomto textu označuje „proteáza“ přírodně se vyskytující proteázu nebo rekombinantní proteázu. Přírodně se vyskytující proteázy zahrnují aaminoacylpeptid hydrolázy, peptidylaminokyselinové hydrolázy, acylamino hydrolázy, serin karboxypeptidázy, metalokarboxypeptidázy, thiolproteinázy, karboxylproteinázy a metalloproteinázy. Jsou zahrnuty serin-, metallo-, thiol- a kyselinové proteázy, stejně jako endoa exo-proteázy.
Tento vynález zahrnuje proteázové enzymy, nevyskytující se v přírodě, které jsou variantami karbonylhydroláz (proteázové varianty), mající jinou proteolytickou aktivitu, stabilitu, substrátovou specifitu, pH profil a/nebo charakteristiku působení ve srovnání sprekurzorem karbonylhydrolázy, ze které je aminokyselinová sekvence varianty odvozena. Konkrétně, takovéto proteázové varianty mají aminokyselinovou sekvenci, která se nenachází v přírodě, která je vytvořena záměnou několika aminokyselinových zbytků vprekurzoru proteázy jinými aminokyselinovými zbytky.
Proteázové varianty podle tohoto vynálezu zahrnují substituci libovolné z devatenácti přírodně se vyskytujících L-aminokyselin na předem určených aminokyselinových pozicích. Tyto kombinace mohou být provedeny v libovolném prekurzorovém subtilisinu (prokaryotní, eukariotní, savčí a pod.). V tomto textu se na různé aminokyselinové zbytky odkazuje pomocí *»·”··· běžných jednopísmenných nebo třípísmenných zkratek. Tyto kódy jsou identifikovány v Dále M.
W. (1989), Molecular Genetics of Bacteria, John Wiley & Sons, Ltd., Příloha B.
Proteázové varianty užitečné podle tohoto vynálezu jsou s výhodou odvozeny od Bacillus subtilisin. Výhodněji jsou proteázové varianty odvozeny od subtilisinu Bacillus lentus a/nebo subtilisinu 309.
Karbonyl hydrolázy - Karbonyl hydrolázy jsou proteázové enzymy, které hydrolyzují sloučeniny obsahující O c-x vazbu, kde X je kyslík nebo dusík. Zahrnují přírodně se vyskytující karbonylová hydrolázy a rekombinantní karbonylhydrolázy. Přírodně se vyskytující karbonyl hydrolázy zahrnují hydrolázy, např. peptidhydrolázy jako je subtilisiny nebo metalloproteázy. Peptidhydrolázy zahrnují a-aminoacylpeptid hydrolázy, peptidylaminokyselinové hydrolázy, acylaminohydrolázy, serinkarboxypeptidázy, metallokarboxypeptidázy, thiolproteinázy, karboxyproteinázy a metalloproteinázy. Také jsou zahrnuty serin-, metallo-, thiol- a kyselinové peoteázy, stejně jako endo- a exo-proteázy.
Subtilisiny - Subtilisiny jsou bakterální nebo houbové proteázy, které obecně působí na štěpení peptidové vazby proteinů nebo peptidů. V tomto textu označuje „subtilisin“ přírodně se vyskytující subtilisin nebo rekombinantní subtilisin. Je známo, že série přírodně se vyskytujících subtilisinů je produkována a často vylučována různými mikrobiálními druhy. Aminokyselinová sekvence členů této série není plně homologická. Avšak subtilisiny v této sérii vykazují stejný nebo podobný typ proteolytické aktivity. Tato třída serinových proteáz vykazuje společnou aminokyselinovou sekvenci definující katalytickou triádu, která je odlišuje od třídy serinových proteáz, které jsou příbuzné chymotrypsinu. Subtilisiny a šeřino vé proteázy, které jsou příbuzné chymotripsinu mají oba katalytickou triádu, zahrnují aspartát, histidin a serin. U proteáz příbuzných se subtilisinem je relativní pořadí těchto aminokyselin, čtených od aminokonce směrem ke karboxylovému konci, je aspartát- histidin-serin. Subtilisin v tomto textu tedy označuje serinovou proteázu, mající katalytickou triádu proteáz příbuzných se subtilisinem. Příklady zahrnují (výčet není úplný) subtilisin popsaný v obrázku 3. Obecně a pro účely tohoto vynálezu odpovídá číslování aminokyselin v proteázách číslování určenému pro subtilisinovou sekvenci Bacillus amyloliquefaciens, uvedenému na obrázku 1.
• · · · • · · ·
Proteázové varianty - „Proteázová varianta“ má aminokyselinovou sekvenci, která je odvozena z aminokyselinové sekvence „prekurzorové proteázy“. Prekurzorové proteázy zahrnují přírodně se vyskytující proteázy a rekombinantní proteázy. Aminokyselinová sekvence proteázové varianty je „odvozena“ od aminokyselinové sekvence prekurzorové proteázy substitucí, vymazáním nebo inserci jedné nebo více aminokyselin aminokyselinové sekvence prekurzoru. Tato modifikace je modifikace „prekurzorové DNA sekvence“, která kóduje sekvenci aminokyselin v prekurzorové proteáze spíše než manipulace samotného prekurzoru proteázového enzymu. Vhodné metody pro takovouto manipulaci sekvence prekurzoru DNA zahrnují metody popsané v tomto vynálezu stejně jako metody známé odborníkům v oboru (viz. například EP 0 328 299, WO 89/06279 a U. S. patenty a patentové přihlášky, které byly popsány výše).
V preferovaném provedení proteázové varianty, které jsou proteázové enzymy užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, zahrnují proteázové varianty včetně substituce aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem na aminokyselinové pozici odpovídající poloze 103 v subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens v kombinaci se substitucí aminokyselinového zbytku za přírodní aminokyselinový zbytek na jedné nebo více aminokyselinových pozic odpovídajících polohám 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 58, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 116, 117, 119, 121, 123, 126, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181, 182, 183,
184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217,
218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249,
251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270, 271, 272,
274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens, kde když zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminokyselinového zbytku v jedné nebo více z aminokyselinových poloh, jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens a jeden nebo více čistící přídavný materiál.
I když může být využita libovolná kombinace výše uvedených aminokyselinových substitucí, preferované proteázové variantní enzymy užitečné podle tohoto vynálezu zahrnují substituci, vymazání nebo inzerci v následujících kombinacích:
♦ · · · • · (1) proteázová varianta zahrnující substituce aminokyselinových zbytku v polohách 103 a jedné nebo více z následujících poloh 236 a 245;
(2) proteázová varianta zahrnující substituce aminokyselinových zbytků v polohách 103 a 236 a jedné nebo více z následujících poloh: 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159,183, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213, 215,217,230, 232, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
(3) proteázová varianta zahrnující substituce aminokyselinových zbytků v polohách 103 a 245 a jedné nebo více z následujících poloh: 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159, 170, 183, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 222, 230, 232, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
(4) proteázová varianta zahrnující substituce aminokyselinových zbytků v polohách 103, 236 245 a jedné nebo více z následujících poloh: 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 230, 232, 243, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
Preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí (jedna sada substitucí v řádce následující Tabulky I) vybraný ze skupiny obsahující:
Tabulka I
76 98 103 104
76 78 103 104
76 103 104 107
4 76 103 104
76 103 104 246
76 77 103 104
76 103 104 183 218
16 76 103 104 248
1 76 103 104
76 103 104 261
76 103 104 160
76 103 104 216
17 76 103 104
37 76 103 104
76 77 103 104 174
38 76 103 104
• * • · · · « «
A
38 76 103 104 237
8 76 103 104
76 103 104 183
19 76 103 104
13 76 103 104
19 76 103 104
76 103 104 184
76 103 104 252
76 103 104 259
76 103 104 251
76 86 103 104
72 76 103 104 185
76 103 104 237 274
76 103 104 160
76 103 104 228
55 76 103 104 240
76 103 104 254
76 103 104 204
76 103 104 204
43 76 103 104
76 103 104 159
ΙΟ 76 103 104 177
58 76 103 104
76 103 104 270
76 103 104 185
27 76 103 104
76 103 104 262
76 78 103 104
24 76 103 104
76 103 104 166 236 251
17 76 103 104 237
76 103 104 130
• · · · ·· · · • « « * · • · · · · • · · · « · • · · · · · • · · · · *
76 103 104 109
76 99 103 104 204
76 103 104 181
12 76 103 104
76 103 104 212 271
76 103 104 252 261
76 103 104 242
76 103 104 271
12 76 103 104 242
43 76 103 104 116 183
76 103 104 258
76 103 104 271
61 76 103 104
38 76 103 104 182 263
76 103 104 182 272
76 103 104 109 246
76 87 103 104 206 ,249 265
76 103 104 137 238 271
103 104 228
76 103 104 182 198
21 76 103 104 182
76 103 104 119 137
76 103 104 137 248
13 76 103 104 206
76 103 104 206
76 103 104 212 258
58 76 103 104 271
76 103 104 206 261
4 76 103 104 206
76 77 103 104 206
76 103 104 158
76 103 104 206
« · • · · · · • · · · · · · • · · · · · * • · · · · · • · · · · ·
4 76 103 104 159 217 251
4 76 103 104 159 217 252
76 77 103 104 133 185 251
76 Ι03 104 159 206 244
4 76 103 104 188
4 76 103 104 158
76 77 103 104 185
76 103 104 206 251
48 76 103 104 111 159
68 76 103 104 159 236
42 76 103 104 159
12 62 76 103 104 159
42 76 103 104 159
76 103 104 146 159
76 103 104 159 238
76 103 104 159 224
76 103 104 212 268 271
76 89 103 104
76 87 103 104 212 271
76 103 104 212 245 271
76 103 104 134 141 212 271
76 103 104 212 236 243 271
76 103 104 109 245
76 103 104 109 210
20 62 76 103 104
68 76 103 104 236
68 76 103 104 159 236 271
68 76 103 104 159 236 245
68 76 103 104 159 217 236 271
17 68 76 103 104
68 76 103 104
68 76 103 104 159 236
-7?
68 75 76 103 104 159 236
68 76 76 103 114 121 159 236 245
12 68 76 103 104 159 236
68 76 103 104 159 209 236 253
68 76 103 104 117 159 184 236
68 76 103 104 159 236 243
68 76 103 104 159 236 245
68 76 103 104 142 159
68 76 103 104 123 159 236 249
68 76 103 104 159 236 249
76 103 104 222 245
12 76 103 104 222 249
76 103 104 173
76 103 104 222 263
21 76 103 104 222 237 263
76 103 104 109 222
76 103 104 109 222 271
61 76 103 104 222
76 103 104 137 222
76 103 104 109 222 248
76 103 104 222 249
68 76 103 104 159 236 245 261
68 76 103 104 141 159 236 245 255
68 76 103 104 159 236 245 247
68 76 103 104 159 174 204 236 245
68 76 103 104 159 204 236 245
68 76 103 104 133 159 218 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245
68 76 103 104 159 194 203 236 245
12 76 103 104 222 245
76 103 104 232 245
24 68 76 103 104 159 232 236 245
• · · * * ♦
68 103 104 159 232 236 245 252
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260
12 76 103 104 222 244 245
12 76 103 222 210 245
12 76 103 104 130 222 245
ηπ 68 76 103 104
68 76 103 104 184
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 140 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245
43 68 103 104 159 232 236 245 252
68 87 103 104 159 232 236 245 252 275
12 76 103 104 130 222 245 248 262
12 76 103 104 130 215 222 245
12 76 103 104 130 222 227 245 262
12 76 103 104 130 222 245 261
76 103 104 130 222 245
12 76 103 104 130 218 222 245 262 269
12 57 76 103 104 130 222 245 251
12 76 103 104 130 170 185 222 243 245
12 76 103 104 130 222 245 268
12 76 103 104 130 222 210 245
68 103 104 159 232 236 245 257
68 103 104 116 159 232 236 245
68 103 104 159 232 236 245 248
10 68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 203 232 236 245
68 103 104 159 232 236 237 245
68 76 79 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 183 232 236 245
• · · · I · · » · · · · • · * · · · ·
68 103 104 159 174 206 232 236 245
68 103 104 159 188 232 236 245
68 103 104 159 230 232 236 245
68 98 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 215 232 236 245
68 103 104 159 232 236 245 248
68 76 103 104 159 232 236 245
68 76 103 104 159 210 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 257
76 103 104 232 236 245 257
68 103 104 159 232 236 245 257 275
76 103 104 257 275
68 103 104 159 224 232 236 245 257
76 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 209 232 236 245
68 76 103 104 159 211 232 236 245
12 68 76 103 104 159 214 232 236 245
68 76 103 104 159 215 232 236 245
12 68 76 103 104 159 232 236 245
20 68 76 103 104 159 232 236 245 259
68 87 76 103 104 159 232 236 245 260
68 76 103 104 159 232 236 245 261
76 103 104 232 236 242 245
68 76 103 104 159 210 232 236 245
12 48 68 76 103 104 159 232 236 245
76 103 104 232 236 245
76 103 104 159 192 232 236 245
76 103 104 147 159 232 236 245 248 251
12 68 76 103 104 159 232 236 245 272
68 76 103 104 159 183 206 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 256
68 76 103 104 159 206 232 236 245
· « · εο
27 68 76 103 104 159 232 236 245
68 76 103 104 116 159 170 185 232 236 245
61 68 103 104 159 232 236 245 248 252
43 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 99 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 109 159 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 261
68 103 104 159 185 232 236 245 248 252
68 103 104 159 210 232 236 245 248 252
68 103 104 159 185 210 232 236 245 248 25π
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 159 213 232 236 245 248 252
68 103 104 213 232 236 245 248 252
68 103 104 159 215 232 236 245 248 252
68 103 104 159 216 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 173 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 251 252
68 103 104 159 206 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252
55 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 255
68 103 104 159 232 236 245 248 252 256
68 103 104 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252 257
68 103 104 159 232 236 245 248 252 258
8 68 103 104 159 232 236 245 248 252 269
• ·
68 103 104 116 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252 261
68 103 104 159 232 236 245 248 252 261
68 76 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252
18 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 76 101 103 104 159 213 218 232 236 245 260
68 103 104 159 228 232 236 245 248 252
-» -» 68 76 103 104 159 232 236 245 248 252
68 76 89 103 104 159 210 213 232 236 245 260
61 68 76 103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 205 210 232 236 245
61 68 103 104 130 159 232 236 245 248 252
61 68 103 104 133 137 159 232 236 245 248 252
61 103 104 133 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 218 232 236 245 248 252
61 68 103 104 159 160 232 236 245 248 252
3 61 68 76 103. 104 232 236 245 248 252
61 68 103 104 159 167 232 236 245 248 252
97 103 104 159 232 236 245 248 252
98 103 104 159 232 236 245 248 252
99 103 104 159 232 236 245 248 252
101 103 104 159 232 236 245 248 252
102 103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 106 159 232 236 245 248 252
103 104 109 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252 261
62 103 104 159 232 236 245 248 252
• · · · ζι
103 104 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 166 232 236 245 248 252
103 104 159 217 232 236 245 248 252
20 62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
103 104 159 206 217 232 236 245 248 252
62 103 104 159 206 232 236 245 248 252
103 104 130 159 232 236 245 248 252
103 104 131 159 232 236 245 248 252
27 103 104 159 232 236 245 248 252
38 103 104 159 232 236 245 248 252
38 76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260 271
68 76 103 104 159 209 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 210 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 205 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 210 232 236 245 260
68 103 104 159 213 232 236 245 260
76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 103 104 159 209 232 236 245
68 103 104 159 210 232 236 245
68 103 104 159 230 232 236 245
68 103 104 159 126 232 236 245
68 103 104 159 205 232 236 245
68 103 104 159 210 232 236 245
103 104 159 230 236 245
68 103 104 159 232 236 245 260
103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 174 232 236 245 257
68 103 104 159 194 232 236 245 257
68 103 104 159 209 232 236 245 257
103 104 159 232 236 245 257
• ·
Z3
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260 261
68 103 104 159 232 236 245 257 261
103 104 159 213 232 236 245 260
103 104 159 210 232 236 245 248 252
103 104 159 209 232 236 245 257
68 76 103 104 159 210 213 232 236 245 260
12 103 104 159 209 213 232 236 245 260
103 104 209 232 236 245 257
103 104 159 205 210 213 232 236 245 260
103 104 159 205 209 232 236 245 260
68 103 104 159 205 209 210 232 236 245
103 104 159 205 209 210 232 236 245 257
103 104 159 205 209 232 236 245 257
68 103 104 159 205 209 210 232 236 245 260
103 104 159 205 209 210 232 236 245
103 104 159 209 210 232 236 245
103 104 159 205 210 232 236 245
68 103 104 128 159 232 236 245
48 103 104 159 230 236 245
48 68 103 104 159 209 232 236 245
48 68 103 104 159 232 236 245 248 252
48 68 103 104 159 232 236 245 257 261
102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
12 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
101 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
102 103 104 159 213 232 236 245 248 252
103 104 131 159 232 236 245 248 252
103 104 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 244 245 248 252
62 103 104 159 213 232 236 245 248 252 256
12 62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
• · · ·
101 103 104 159 185 232 236 245 248 252
101 103 104 159 206 232 236 245 248 252
101 103 104 159 213 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 232 236 245 248 252
101 102 103 104 159 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 248 252
62 103 104 109 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 159 212 213 232 236 245 248 252
62 101 103 104 159 212 213 232 236 245 248 252
103 104 159 232 245 248 252
103 104 159 230 245
62 103 104 130 159 213 232 236 245 248 252
101 103 104 130 159 232 236 245 248 252
101 103 104 128 159 232 236 245 248 252
62 101 103 104 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 128 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 128 159 213 232 236 245 248 252
101 103 104 159 232 236 245 248 252 260
101 103 104 131 159 232 236 245 248 252
98 101 103 104 159 232 236 245 248 252
99 101 103 104 159 232 236 245 248 252
101 103 104 159 212 232 236 245 248 252
76 103 104 167 170 194
101 103 104 159 209 232 236 245 248 252
101 103 104 159 210 232 236 245 248 252
101 103 104 159 205 232 236 245 248 252
101 103 104 159 230 236 245
101 103 104 159 194 232 236 245 248 252
76 101 103 104 159 194 232 236 245 248 252
101 103 104 159 230 232 236 245 248 252
62 103 104 159 185 206 213 232 236 245 248 252 271
• · · · · ·· ·· · · ·· ·· · ·
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí (jedna sada substitucí v řádce následující Tabulky II) vybraný ze skupiny obsahující:
Tabulka II
N76D A98E S103A V104I
N76D S78T S103A V104I
N76D S103A V104I 1107V
V4E N76D S103A V104I
N76D S103A V104I I246V
N76D N77D S103A V1041
N76D S103A V] 041 N183D N218I
A16T N76D S103A V104I N248D
A1E N76D S103A V1041
N76D S103A V104I N261D
N76D S103A V104I S160T
N76D S103A V1041 S216C
H17Q N76D S103A V1041
S37T N76D S103A V104I
N76D N77D S103A V104I A174V
T38S N76D S103A V104I
T38S N76D S103A V104I K237Q
18V N76D S103A V1041
N76D S103A V104I N183D
R19L N76D S103A V104I
A13V N76D S103A VI041
RI9C N76D S103A V104I
N76D S103A V1041 N184D
N76D S103A VI04I N252D
N76D S103A V1041 S259C
N76D S103A V104I K251T
N76D P86S S103A V1041
172 V N76D S103A V1041 N185D
N76D S103A V1041 K237E T274A
N76D S103A V1041 S160L
• ·
N76D S1O3A V104I A228V
P55S N76D S1O3A V104I S240T
N76D S1O3A V1O4I A254T
N76D S1O3A I104N N204T
N76D SIO3A V1O4I N2O4D
N43S N76D S1O3A V1O4I
N76D S103A V104I G139D
R10H N76D S103A V104I V177A
T58S N76D SI03A V104I
N76D S1O3A V1041 A270V
N76D S1O3A V1O41 N185D
K27N N76D S1O3A V1041
N76D S1O3A V104I L262M
N76D S78P S1O3A V104I
S24P N76D S1O3A VI041
N76D S1O3A V104I S166G Q236R K251R
H17L N76D SI03A V104I K237E
N76D S1O3A V104I S130L
N76D S1O3A V104I Q109R
N76D S99R SIO3A V104I N204T
N76D S103A V104I D181N
QI2R N76D SIO3A V104I
N76D S1O3A V104I S212P E271V
N76D S103A V104I N252K N261Y
N76D SI03A VI04I S242T
N76D S1O3A V104I E271Q
Q12R N76D S1O3A V104I S242T
N43S N76D S1O3A V104I N116K NI 831
N76D S1O3A V104I G2J8R
N76D S1O3A V1O4I E271G
G61R N76D S103A V104I
T38S N76D S103A V104I Q182R Y263H
N76D S1O3A V104I Q182R A272S
N76D S1O3A V104I Q109R 1246V
N76D S87G SI03A V1041 Q206R H249Q S265G
N76D S1O3A V104I Q137R N238Y E271V
S103A V104I A228T
N76D S103A V104I Q182R I198V
L21M N76D S103A V1041 Q182R
N76D S103A V1041 Ml 191 Q137R
N76D S103A V1041 Q137R N248S
A13T N76D S103A V104I Q206R
N76D S103A VI041 Q206R
N76D S103A V104I S212P G258R
T58S N76D S103A V1041 E271G
N76D S103A V104I Q206E N261D
V4E N76D S103A V1041 Q206E
N76D N77D S103A V1041 Q206E
N76D S103A V104I A158E
N76D S103A V104I Q206E
V4E N76D S103A V104I G1J9D L217E K251Q
V4E N76D S103A V104I GI59D L217E N232D
N76D N77D SI03A V104I A133T N185D K2J1T
N76D S103A V104I G159D Q206E V244A
V4E N76D S103A V1041 S188E
V4E N76D S103A V104I A158E
N76D N77D S103A V104I N185D
N76D S103A V104I Q206E K251T
A48T N76D S103A V104I L111M G1J9D
V68A N76D S103A VI041 G159D Q236H
L42V N76D S103A V1041 G159D
Q12H N62H N76D S103A V1041 G139D
L421 N76D S103A V104! G159D
N76D S103A V104I G146S G1J9D
N76D S103A V104I G159D N238S
N76D S103A V1041 G159D T224A
N76D S103A V104I S212P V268F E271V
N76D E89A S103A V104I
N76D S87R S103A V104I S212P E271V
N76D S103A V104I S212P Q245L E271V
N76D S103A V1041 Tl?4S S141N S212P E271V
N76D S103A V104I S212P Q236L N243S E27IV
• · • » « · • · ·
N76D S103A VI041 Q109R Q245R
N76D S103A V1041 Q109R P210L
G20V N62S N76D S103A V104I
V68A N76D S103A V1O4I Q236H
V68A N76D S103A V1041 G159D Q236H E271V
V68A N76D S103A V104I G159D Q236H Q243R
V68A N76D S103A V1041 G159D L2171 Q236H E271V
H17Q V68A N76D S103A VI04I
V68A N76D S103A V104I
V68A N76D S103A V104I G1Í9D Q236R
V68A L75R N76D S103A V1041 G159D Q236H
V68A N76D N76D S103A Al I4V V121I G159D Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A VI041 G1J9D Q236H
V68A N76D S103A V1041 G159D Y209S Q236H T253K
V68A N76D S103A V1041 N117K G159D N184S Q236H
V68A N76D S103A V104I G159D Q236H N243I
V68A N76D S103A V104I G139D Q236H Q245L
V68A N76D S103A V1041 A142V G159D
V68A N76D S103A V104I N123S G159D Q236H H249Y
V68A N76D S103A V1041 G159D Q236H H249Q
N76D S103A V1041 M222S Q245R
Q12R N76D S103A V104I M222S H249R
N76D S103A V1041 N173R M222S
N76D S103A V] 041 M222S Y263F
L2IM N76D S103A V1041 M222S K237R Y263F
N76D S103A V104I Q109R M222S
N76D S103A V1041 Q109R M222S E271D
G61R N76D S103A V104I M222S
N76D S103A V104I Q137R M222S
N76D S103A VI041 Q109R M222S N248S
N76D S103A V1041 M222S H249R
V68A N76D S103A V104I G139D Q236H Q243R N261D
V68A N76D S103A V1041 S141N G159D O236H Q24JR T255S
V68A N76D S103A V1041 G159D Q236H Q245R R247H
V68A N76D S103A VI041 G159D A174V N204D Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D N204D Q236H Q245R
• · · · 9 9 • · • · «
V68A N76D S103A V104I A133V G1J9D N218D Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1O41 G159D A232V Q236H Q24JR
V68A N76D S103A V104I G159D A194I V203A Q236H Q24SR
Q12R N76D S103A V104I M222S Q245R
N76D S103A V104I A232V Q245R
S24T V68A N76D S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V1041 G159D A232V Q236H Q24JR N252K
V68A N76D S103A V1O4I G1Í9D T213R A232V Q236H Q245R T26OA
Q12R N76D S103A Π04Τ M222S V244I Q245R
Q12R N76D S103A M222S P210T Q24JR
Q12R N76D S103A I1O4T S130T M222S Q245R
T22K V68A N76D S103A V1041
V68A N76D S1O3A V1041 N184D
V68A S103A VIO4I G159D A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q24JR
V68A SIO3A V1O4I N140D G1J9D A232V Q236H Q245R N252K
N43S V68A S1O3A V1O4I G1J9D A232V Q236H Q245R N232K
N43K V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q24SR
N43D V68A S1O3A V104I G139D A232V Q236H Q24JR N252K
V68A S87G S1O3A V1041 G139D A232V Q236H Q245R N252K R275S
Q12R N76D S1O3A I104T S130T M222S Q245R N248S L262M
Q12R N76D S103A I104T S130T A215V M222S Q245R
Q12R N76D S1O3A I104T S130T M222S V227A Q245R L262S
Q12R N76D S1O3A I104T S130T A215T M222S Q245R
Q12R N76D S1O3A I104T S130T M222S Q245R N261D
N76D S1O3A I104T S130T M222S Q245R
Q12R N76D S103A I104T S130T N218D M222S Q243R L262S N269D
Q12R S57P N76D S103A I104T S130T M222S Q245R K251Q
Q12R N76D S1O3A I104T S130T RI70S N185D M222S N243D Q245R
Q12R N76D S1O3A 1104T S130T M222S Q245R V268A
Q12R N76D S1O3A II04T S130T M222S P210S Q245R
V68A S1O3A V1O4I G159D A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V104I N116D G159D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N248D
R10C V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1O4I G159D V203E A232V Q236H Q245R
• · »· • ·» « · « -· fc « *·· 9 9 fcfc fc· • · fcfc t a · · · · fc · · * < · • · fc fc 4
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H K237E Q245R —
V68A N76D I79N S103A VI041 G159D A232V Q236H Q243R
V68A S103A V1O4I G159D N183D A232V Q236H Q243R
V68A S1O3A V104I G159D A174V Q206L A232V Q236H Q245R
V68A S103A VI04I G159D S188C A232V Q236H Q243R
V68A S103A VIO41 G159D A230T A232V O236H Q245R
V68A A98T S103A VI04I G159D A232V Q236H Q24SR
V68A S103A VI041 G139D A21JT A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248S
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G139D P210R A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R L257V
N76D S103A V1041 A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q24JR L257V R27JH
N76D SI03A V104I L237V R275H
V68A S103A V104I G159D T224A A232V Q236H Q245R L257V
N76D S1O3A V104I GI59D A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V1041 G159D Y209W A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D G211R A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D G211V A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V104! G159D Y214L A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D A21SR A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
G20R V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R S259G
V68A S87R N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R T260V
V68A N76D S103A V1O41 G1J9D A232V Q236H Q245R N261G
V68A N76D S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q245R N261W
N76D S103A V104I A232V Q236H S242P O245R
V68A N76D S103A V104I G139D P210L A232V Q236H Q245R
Q12R A48V V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
N76D S103A V1041 A232V Q236H Q245R
N76D S1O3A V1041 G159D Y192F A232V Q236H Q24JR
N76D S1O3A V104I VI471 G159D A232V Q236H Q245R N248S K251R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R A272S
V68A N76D S103A V1041 G159D N183K Q206L A232V Q236H Q24JR
V68A N76D S103A V1O41 G1S9D A232V Q236H Q245R S256R
0000 «0 • 0 *0 00 • · * 0 ♦ “ • · 0 » * ··· • 0 · · · fc » • ·« · · <0 ·
0* 0' 0·
V68A N76D S103A V104I G159D Q206R A232V Q236H Q245R
K27R V68A N76D S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I N116T G139D R170S N185S A232V Q236H Q245R
G61E V68A S103A V1O41 G139D A232V Q236H Q243R N248D N2J2K
N43D V68A S103A V1041 G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D S212P A232V Q236H Q24JR N248D N252K
V68A S103A V1041 S99N G159D N184D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 GI59D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I Q109R G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209F A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K N261D
V68A S103A V104I G159D N185D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D P210R A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D P210T A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S103A VI041 G139D P210S A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D N185D P210L A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S103A VI041 G159D P210L A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D S2I2A A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D S212E A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D T2I3E A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I T213S A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A A103V V1041 G139D T213E A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G139D T2I3G A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A215V A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I G159D A215R A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I G159D S216T A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D S216V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I GI59D S216C A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20A V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24JR N248D N232K
V68A S103A VI041 G159D N173D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D K251V N252K
V68A S103A V104I G159D Q206R A232V Q236H Q245R N248D N232K
• · · · • ·
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N232F
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2L
P35S V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N232F
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K T233V
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256N
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256E
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256R
V68A S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K T26OR
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q243R N248D N252K L257R
V68A SI03A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N2Í2K G258D
I8V V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24ÍR N248D N252K N269D
V68A S103A V104I N1I6S GI39D A232V Q236H Q245R N248D N252K T260E
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K N261R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K N261D
V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I A232V Q236H Q24JR N248D N252K
S103A V1041 G159D A232S Q236H Q243R N248D N232K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236R Q245R N248D N2J2K
N18S V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G1S9D A232V Q236H Q24JV N248D N252K
V68A N76D S101T S103A V104I O159D T213R N218S A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V1041 G159D A228V A232V Q236H Q24ÍR N248D N252K
T33S V68A N76D S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A N76D E89D S103A V104I G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
G6IE V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248D N232K
S103A V1041 G1J9D V205I P210I A232V Q236H Q245R
G61E V68A S103A V104I S130A G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
G61E V68A SI03A V104I A133S Q137R G1Í9D A232V Q236H Q245R N248D N252K.
GóIE S103A V104I A133V G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A VI04I G1J9D A232V Q236H Q245R N248G N2J2K
V68A S103A V104I G159D N2I8S A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
G61E V68A S103A VI041 G139D S160V A232V Q236H Q245R N248D N232K
S3L GÓ1E V68A N76D S103A V104I A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
G61E V68A S103A V104] G1J9D S167F A232V Q236H Q245R N248D N252K
G97E S103A V104! G159D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
A98D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
• · • ·
S99E S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S101E S103A V, 041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
G102A S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I S106E G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I Q109E G159D A232V Q236H Q24SR N248D N252K
S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K N261R
SI03A V104I Q109R G159D A232V Q236H Q243R N248D N2J2K
N62D S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248D N232K
S1O3A V104I G159D N184D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A VI041 G159D S166D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 G159D L217E A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R N62D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R N248D N2Í2K
N62D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
S103A V1041 G1Í9D Q206R L217E A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V1041 G159D Q206R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1O3A V104I S130G G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I P131V G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N252K
K27N S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
T38G S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
T38A N76D S103A V1041 G1J9D T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R T260A E271G
V68A N76D S103A V104I G159D Y209W T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D SI03A V104I G159D P210I T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V104I G159D V2051 T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A VI04I G159D P210I A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V104I GIJ9D T213R A232V Q236H Q24JR T260A
N76D S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V104I G139D Y209W A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D P2101 A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G139D A230V A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D L126F A232V Q236H Q24JR
V68A S103A V1041 G139D V203I A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D P210L A232V Q236H Q245R
S103A V104I G159D A230V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R T260A
• · · ·
S103A V104I G159D A232V Q234SH Q245R
V68A S1O3A V104I G159D A174V A232V Q236H Q245R L257V
V68A S1Q3A V1041 G159D A194S A232V Q236H Q245R L257V
V68A S1O3A V1041 G159D Y209W A232V Q236H Q245R L257V
S103A V1041 G139D A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q24JR T260A N261 W
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R L257V N261W
S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V104I G159D P2101 A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V1041 G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
Q12R S1O3A V104I G159D Y209W T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V1041 Y209W A232V Q236H Q245R L257V
S103A V104I G159D V205I P210I T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V1041 G159D V2051 Y209W A232V Q236H Q245R T260A
V68A S1O3A V1041 G159D V2O51 Y209W P2101 A232V Q236H Q24JR
S103A V1041 G159D V2051 Y209W P2101 A232V Q236H Q245R L2J7V
S103A V1041 G159D V205I Y209W A232V Q236H Q243R L2Í7V
V68A S103A V1041 G159D V20S1 Y209W P2101 A232V Q236H Q24JR T260A
S103A V1041 G1J9D V205I Y209W R210I A232V Q236H Q245R
S103A V1041 G159D Y2O9W P2101 A232V Q236H Q245R
S103A V1041 G1J9D V2051 P2101 A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I S128L G1J9D A232V Q236H Q24JR
A48V S103A V1041 G159D A230V Q236H Q245R
A48V V68A S103A VI041 G159D Y209W A232V Q236H Q24JR
A48V V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
A48V V68A S103A V1041 GI59D A232V Q236H Q24JR L257V N261W
G102A S103A V104I G1J9D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
Q12R 0102 A S103A V1041 G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
SlOIG G102A S103A V1041 G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A V104! G1J9D S2I2G A232V Q236H Q24JR N248D N252K
G102A S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 P131V G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1O3A V104I G139D N184S A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
S1O3A V104I G159D N184G A232V Q236H Q245R N248D N252K
• · · · • · · ♦ · · • ·
S103A V1041 G139D A232V Q236H V244T Q245R N248D N232K
S103A V1041 G139D A232V Q236H V244A 9245R N248D N252K
N62D S1O3A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K S256R
Q12R N62D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q243R N248D N2S2K
S101G S103A V104I G139D N183D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S101G S1O3A V104I G139D Q206E A232V Q236H Q245R N248D N232K
S101G SI03A V104I G159D T213Q A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S101G G102A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A VI041 G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A V104I G139D S212G A232V Q236H N248D N232K
N62D S103A V104I Q109R G139D T213R A232V Q236H Q243R N248D N232K
N62D S1O3A V104I G139D S212G T213R A232V Q236H Q24SR N248D N232K
N62D SIOIG S103A VI041 G139D S2I2G T213R A232V Q236H Q245R N248D N232K
SI03A V1O4I G139D A232V Q245R N248D N232K
S103A V1041 G159D A23OV Q245R
N62D S103A VI041 S130G G139D T213R A232V Q236H Q245R N248D N232K
S101G S103A V104I S13OG G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1O1G S103A V1041 S128G G139D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S1O1G S103A V104I S128L G159D A232V Q236H Q243R N248D N252K
N62D SIOIG S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V1041 S128G G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N232K
N62D S103A V1041 S128L G159D T213R A232V Q236H Q243R N248D N232K
S1O1G S103A V1041 G159D A232V Q236H Q243R N248D N232K T260A
S1O1G S103A V104I P131V G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98V SIOIG S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S99G SIOIG S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R N248D N232K
S1O1G S103A V104I G159D S212G A232V Q236H Q243R N248D N232K
SIOIG S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R N248D N252K
SIOIG S103A V104I G139D P210I A232V Q236H Q243R N248D N232K
SIOIG S103A V104I G139D V205I A232V Q236H Q243R N248D N252K
SIOIG S103A V104I G159D A230V Q236H Q245R
SIOIG S103A V1041 G159D A194P A232V Q236H Q243R N248D N232K
N76D SIOIG S103A V1041 G159D A194P A232V Q236H Q245R N248D N252K
SIOIG S103A V104I G159D A230V A232V Q236H Q243R N248D N232K
• »
N62D S103A V1041 G159D N185D Q206E T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K E271Q
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnuji soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory z Tabulky I s výjimkou následujících substitučních souborů z Tabulky III.
Tabulka III
76 103 104 259
76 86 103 104
76 103 104 130
76 99 103 104 204
76 103 104 242
76 103 104 104 182 198
21 76 103 104 182
76 103 104 119 137
76 103 104 173 222
61 76 103 104 222
68 76 103 104 116 159 170 185 232 236 245
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory uvedené v Tabulce IV.
Tabulka IV
76 103 104 222 245
76 103 104 222 249
68 103 104 159 232 236 245 252
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260
22 68 76 103 104
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 140 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245
12 76 103 104 130 222 245 261
• • · • ·
76 103 104 130 222 245
68 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 210 232 236 245
68 103 104 159 224 232 236 245 257
76 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 211 232 236 245
12 68 76 103 104 159 214 232 236 245
68 76 103 104 159 215 232 236 245
12 68 76 103 104 159 232 236 245
20 68 76 103 104 159 232 236 245 259
68 76 87 103 104 159 232 236 245 260
68 76 103 104 159 232 236 245 261
12 48 68 76 103 104 159 232 236 245
76 103 104 159 192 232 236 245
76 103 104 147 159 232 236 245 248 251
12 68 76 103 104 159 232 236 245 272
68 ^76 103 104 159 183 206 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 256
68 76 103 104 159 206 232 236 245
27 68 76 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 109 159 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 159 210 232 236 245 248 252
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 159 213 232 236 245 248 252
68 103 104 213 232 236 245 248 252
68 103 104 159 215 232 236 245 248 252
68 103 104 159 216 232 236 245 248 252
• · «··· · · «· «· «·· ·«· * « · * * · · · «»·· « ·· ·
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 255
68 103 104 159 232 236 245 248 252 256
68 103 104 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 228 232 236 245 248 252
68 76 89 103 104 159 210 213 232 236 245 260
68 103 104 159 218 232 236 245 248 252
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory uvedené v Tabulce V.
Tabulka V
V68A S103A V1041 G159D A228V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G139D N218S A232V Q236H Q243R N248D N252K
G20R V68A S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A N76D E89D S103A V1041 G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256R
V&8A S103A V104I G139D A232V Q236H Q243R N248D N232K T260R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K T25SV
V68A S103A V1O41 G139D A232V Q236H Q24JR N248D N232K S256N
V68A S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N232L
V68A S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A215V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G139D A215R A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I GI39D S216T A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I G159D S216V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I T213S A232V Q236H Q243R N248D N232K
V68A S103A V1041 G159D P210L A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D S212C A232V Q236H Q243R N248D N232K
V68A S103A V1041 G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N232K
S103A V1041 G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I Q109R G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
G20R V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q243R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209F A232V Q236H Q245R N248D N252K
Q12R N76D S103A 1104T S130T M222S Q245R N261D
N76D S103A 1104T S130T M222S Q245R
N76D S103A V1041 M222S H249R
N76D S103A VI04I M222S Q245R
N76D S103A V1041 G159D Y192F A232V Q236H Q245R
N76D S103A V104I V147I G159D A232V Q236H Q245R N248S K231R
·· ·· ·· · · • · « · ···« • · · ···· · ·· ·
Q12R V68A N76D S103A V104I G139D A232V Q236H Q243R A272S
V68A N76D S103A V104I G159D N183K Q206L A232V Q236H Q24JR
V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24SR S256R
V68A N76D S103A V104I G139D Q206R A232V Q236H Q245R
K27R V68A N76D S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R
Q12R A48V V68A N76D S103A V104I G139D A232V Q236H Q243R
V68A N76D S103A VI04I G159D A232V Q236H Q245R N261W
V68A N76D S103A V1041 G159D G211R A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D G211V A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G139D Y214L A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D A215R A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G139D A232V Q236H Q245R
G20R V68A N76D S103A V104I G139D A232V Q236H Q243R S259G
V68A N76D S87R S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q245R T260V
N76D S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q24JR L237V
V68A N76D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
T22K V68A N76D S103A V1041
V68A N76D S103A V1041 G159D P210R A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D S212P A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V104I G159D T224A A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V104I G139D A232V Q236H Q24JR N232S
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24ÍR N252K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R N248D N2J2K
V68A S103A VI04I G1J9D A232V Q236H Q24ÍR
V68A S103A V104I N140D G159D A232V Q236H Q245R N232K
N43S V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R N252K
N43K V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
N43D V68A S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N252K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24ÍR L2J7V
• · « ·
Vysoce preferované proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující:
12/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 12/76/103/104/130/170/185/222/243/245;
12/76/103/104/130/222/245/261; 12/76/103/104/130/222/245;
12/76/103/104/222/245;
61/68/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/213/232/236/245/248/252
62/103/104/109/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/101/103/104/159/212/213/232/236/245/248/252;
62/103/104/130/159/213/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/185/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/185/210/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/230/232/236/245;
68/103/104/232/236/245/248/257/275;
68/103/104/159/232/236/245/248/252; 68/76/103/104/159/236;
68/76/103/104/159/232/236/245;
68/103/104/159/232/236/245;
68/76/103/104/159/211/232/236/245; 68/103/104/159/2 ] 0/232/236/245; 68/76/103/104/159/213/232/236/245/260; 68/76/103/104/159/210/232/236/245/260; 68/103/104/159/183/232/236/245/248/252; 68/103/104/232/236/245/257/275; 76/103/222/245;
76/103/104/159/232/236/245;
76/103/104/159/213/232/236/245/260;
76/103/104/131/159/232/236/245/248/252;
98/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 101/103/104/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/232/236/245;
103/104/159/205/209/232/236/245/257 103/104/159/205/209/210/232/236/245/257;
103/104/159/217/232/236/245/248/252; 103/104/159/230/236/245;
103/104/159/248/252/270;
103/104/159/205/209/232/236/245; and
68/103/104/159/232/236/245/248/252/270; 68/103/104/159/210/232/23 6/245/24 8/252; 68/103/104/159/213/232/236/245/248/252; 68/76/103/104/159/209/232/236/245;
68/103/104/213/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/209/232/236/245; 68/76/103/104/159/236/245; 68/103/104/159/232/236/245/252; 68/103/104/159/232/236/245/257; 68/76/103/104/159/215/232/236/245; 68/103/104/159/213/232/236/245/260; 68/103/104/159/236;
68/103/104/159/236/245;
68/76/103/104/159/236/245;
68/103/104/159/213/232/236/245; 76/103/104/222/245;
76/103/104/159;
97/103/104/159/232/236/245/248/252;
98/103/104/159/232/236/245/248/252;
102/103/104/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/232/245/248/252; 103/104/159/213/232/236/245/248/252; 103/104/130/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/236/245;
103/104/131/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/232/236/245/257.
« « « · • e » · • ·
Více vysoce preferované protéázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující:
12R/76D/103A/104T/130T/222S/245R; 12R/76D/103A/104I/222S/245R;
12R7102 A/103 A/1041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K;
12R/76D/103 A/l 04T7130G/222S/245R/261D;
12R/76D/103 A/l 04T/130G/170S/185D/222S/243D/245R; 61E/68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K:
62D/103 A/l 041/109R/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/104I/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K;
62D/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
62D/103 A/l 041/130G/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K: 62D/101 G/l 03 A/1041/159D/212G/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K/270A; 68A/76D/103 A/1041/159D/213 R/232V/236H/245R/260A;
68A/103 A/l 041/159D/236H;
A/103 A/1041/159D/236H/245R; 68A/76D/103A/104I/159D/210I/232V/236H/245R/260A;
68A/103 A/l 041/159D/183D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/104I/159D/209W/232V/236H/245R;
68A/76D/103 A/l 041/159D/211R/232V/236H/245R; 68A/76D/103 A/1041/159D/215R/232V/236H/245R; 68A/103A/1041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/76D/103A/1041/159D/236H; 68A/76D/103A/1041/159D/236H/245R;
68A/76D/103 A/1041/159D/232V/236H/245R;
68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/252K;
68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R; 68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/257V;
68A/103 A/l 041/159D/185D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/l 041/159D/210L/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/185D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/104I/159D/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/230V/232V/236H/245R;
A/76D/103 A/1041/159D/209W/232V/236H/245 R;
68A/103 A/l 04I/232V/236H/245R/248D/257V/275H;
68A/103 A/l 04I/232V/236H/245R/257V/275H;
68A/103 A/l 041/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/2101/232V/236H/245R; 68A/103A/1041/159D/210L/232V/236H/245R; 68A/103A/1041/159D/213G/232V/236H/245R; 76D/103A/222S/245R;
76D/103 A/l 04I/222S/245R;
76D/103A/1041/159D/232V/236H/245R;
76D/103 A/l 041/159D;
76D/103A/1041/131V/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 76D/103A/1041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 97E/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
98L/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
98L/Í02 A/l 03 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K; 101 G/l 03 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
102A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
1O3A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/130G/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/230V/236H/245R; 103A/104I/159D/217E/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/236H/245R;
103 A/l 041/159D/248D/252K/270V;
103 A/1041/159D/232V/236H/245R;
103 A/l 041/159D/205I/209W/232V/236H/245R; 103A/1041/159D/232V/236H/245R/257V; 103A/104I/159D/2051/209W/232V/236H/245R/257V;
103 A/l 041/131 V/l 59D/232V/236H/245R/248D/252K;
103A/1041/159D/205I/209W/2101/232V/236H/245R/257V; and
103A/104I/159D/232V/245R/248D/252K.
Dokonce ještě více vysoce preferované proteázové varianty užiteěne v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující:
• · • ·
12/76/103/104/130/222/245/261;
62/103/104/159/232/236/245/248/252;
62/103/104/159/213/232/236/245/248/252;
62/101/103/104/159/212/213/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/232/236/245; 68/103/104/159/230/232/236/245; 68/103/104/159/209/232/236/245; 68/103/104/159/232/236/245/257;
68/76/103/104/159/213/232/236/245/260;
68/103/104/159/213/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/183/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/185/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/185/210/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/210/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/213/232/236/245;
98/103/104/159/232/236/245/248/252;
98/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252;
101/103/104/159/232/236/245/248/252; 102/103/104/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/230/236/245;
103/104/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/217/232/236/245/248/252; 103/104/130/159/232/236/245/248/252;
103/104/131/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/213/232/236/245/248/252; a 103/104/159/232/236/245.
Nejvíce preferované proteázové varianty užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují soubor substitucí vybraný ze skupiny obsahující:
12R/76D/103 AJ104T/130T/222S/245R/261D; 62D/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103 A/l041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103A/104I/159D/209W/232V/236H/245R; 68A/76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/103A/104I/159D/213E/232V/236H/245R/248D/252K; 68 A/l 03 A/l 041/159D/183D/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
A/103 A/1041/159D/230V/232V/236H/245R;
68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/257V;
68A/103 A/1041/159D/213G/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/104I/159D/185D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/l 041/159D/185D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/1041/159D/210L/232V/236H/245R/248D/252K;
68A7103 AZ1041/159D/213G/23 2V/236H/245R;
98L/103 A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 98L/102A/103 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K; 101G/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 102A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/230V/236H/245R;
103 A/1041/159D/232 V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/217E/232V/236H/245R/248D/252K; 103A/104I/130G/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/131 V/l 59D/232 V/236H/245R/248D/252K;
103A/l041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; and 103 A/l 041/159D/232V/236H/245R.
V dalším preferovaném provedení proteázové varianty, které jsou proteázové enzymy užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu, zahrnují proteázové varianty zahrnující substituci aminokyselinového zbytku s jinou přírodní aminokyselinou v jedné nebo více polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens.
I když může být použita libovolná z výše uvedených aminokyselinových substitucí, preferované proteázové variantní enzymy užitečné v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituce, vypuštění nebo inserci aminokyselinového zbytku v následujících kombinacích:
• · · · • · (1) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 62 a jedné nebo více z následujících poloh 103, 104, 109, 159, 213, 232, 236, 245, 248 a 252;
(2) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 212 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 98,102,103,104,159,232, 236, 245, 248 a 252;
(3) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 230 a jedné nebo více z následujících poloh 68,103,104,159, 232, 236 a 245;
(4) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159,183,185,205,209,210,212,213, 217,230, 236, 245,248,252,257,260,270 a 275;
(5) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 212 a jedné nebo více z následujících poloh 103, 104, 236 a 245;
(6) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232 a 103 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
(7) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232 a 104 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131,159, 183,185, 205, 209,210, 212,213,217,230,236,245, 248, 252, 257,260, 270 a 275;
(8) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232 a 236 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159,183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236,245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
(9) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232 a 245 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185,205,209,210,212, 213,217,230,236,245,248,252,257,260, 270 a 275;
(10) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 232, 103, 104, 236 a 245 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
(11) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
(12) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a jedné nebo více z následujících poloh 103, 104,236 a 245;
• · • · (13) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a 103 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
(14) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a 104 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159,183, 185, 210,212, 213, 217,232, 236, 245,248 a 270;
(15) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a 236 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
(16) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252 a 245 a jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183,185, 210,212,213,217, 232,236, 245,248 a 270;
(17) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 252, 103, 104, 236 a 245 ajedné nebo více z následujících poloh 12,61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185,210,212,213,217, 232, 236,245, 248 a 270;
(18) proteázová varianta zahrnující substituci aminokyselinových zbytků v poloze 257 ajedné nebo více z následujících poloh 68,103,104, 205, 209,210,232,236,245 a 275;
Preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor (jeden substituční soubor na řádku v následující Tabulce VI) vybraný ze skupiny obsahující:
Tabulka VI
76 103 104 212 271
76 103 104 252 261
76 103 104 212 258
4 76 103 104 159 217 252
12 62 76 103 104 159
76 103 104 212 268 271
76 87 103 104 212 271
76 103 104 212 245 271
76 103 104 134 141 212 271
76 103 104 212 236 243 271
20 62 76 103 104
68 76 103 104 159 232 236 245
76 103 104 232 245
24 68 76 103 104 159 232 236 245
« · • · • · · · · · ··· · · · ···· ·· · · · · · · · · · · • · · · · · «. ··· · · « • · · · « ·« · · · · «
68 103 104 159 232 236 245 252
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 140 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245
43 68 103 104 159 232 236 245 252
68 87 103 104 159 232 236 245 252 275
68 103 104 159 232 236 245 257
68 103 104 116 159 232 236 245
68 103 104 159 232 236 245 248
10 68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 203 232 236 245
68 103 104 159 232 236 237 245
68 76 79 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 183 232 236 245
68 103 104 159 174 206 232 236 245
68 103 104 159 188 232 236 245
68 103 104 159 230 232 236 245
68 98 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 215 232 236 245
68 103 104 159 232 236 245 248
68 76 103 104 159 232 236 245
68 76 103 104 159 210 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 257
76 103 104 232 236 245 257
68 103 104 159 232 236 245 257 275
76 103 104 257 275
68 103 104 159 224 232 236 245 257
76 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 209 232 236 245
68 76 103 104 159 211 232 236 245
12 68 76 103 104 159 214 232 236 245
68 76 103 104 159 215 232 236 245
12 68 76 103 104 159 232 236 245
• « * · · · »· · · • ··· ···· • · · · · · · · · · «·· · · · · · ·· · • · · · · «··· ♦ · · ·
20 68 76 103 104 159 232 236 245 259
68 87 76 103 104 159 232 236 245 260
68 76 103 104 159 232 236 245 261
76 103 104 232 236 242 245
68 76 103 104 159 210 232 236 245
12 48 68 76 103 104 159 232 236 245
76 103 104 232 236 245
76 103 104 159 192 232 236 245
76 103 104 147 159 232 236 245 248 251
12 68 76 103 104 159 232 236 245 272
68 76 103 104 159 183 206 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 256
68 76 103 104 159 206 232 236 245
27 68 76 103 104 159 232 236 245
68 76 103 104 116 159 170 185 232 236 245
61 68 103 104 159 232 236 245 248 252
43 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 99 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 109 159 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 261
68 103 104 159 185 232 236 245 248 252
68 103 104 159 210 232 236 245 248 252
68 103 104 159 185 210 232 236 245 248 252
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 159 213 232 236 245 248 252
68 103 104 213 232 236 245 248 252
68 103 104 159 215 232 236 245 248 252
68 103 104 159 216 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 173 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 251 252
• · · ·
68 103 104 159 206 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252
55 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 255
68 103 104 159 232 236 245 248 252 256
68 103 104 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252 257
68 103 104 159 232 236 245 248 252 258
8 68 103 104 159 232 236 245 248 252 269
68 103 104 116 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252 261
58 103 104 159 232 236 245 248 252 261
>8 76 103 104 159 232 236 245 248 252
,8 103 104 232 236 245 248 252
)3 104 159 232 236 245 248 252
8 103 104 159 232 236 245 248 252
3 68 103 104 159 232 236 245 248 252
? 103 104 159 232 236 245 248 252
76 101 103 104 159 213 218 232 236 245 260
103 104 159 228 232 236 245 248 252
68 76 103 104 159 232 236 245 248 252
76 89 103 104 159 210 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 232 236 245 248 252
104 159 205 210 232 236 245
68 103 104 130 159 232 236 245 248 252
68 103 104 133 137 159 232 236 245 248 252
103 104 133 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 218 232 236 245 248 252
68 103 104 159 160 232 236 245 248 252
61 68 76 103 104 232 236 245 248 252
68 103 104 159 167 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252
·««· · · · · ·· · · > • « · · · · · · · • · · · · · · * · * ·
102 103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 106 159 232 236 245 248 252
103 104 109 159 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252 261
62 103 104 159 232 236 245 248 252
103 104 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 166 232 236 245 248 252
103 104 159 217 232 236 245 248 252
20 62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
103 104 159 206 217 232 236 245 248 252
62 103 104 159 206 232 236 245 248 252
103 104 130 159 232 236 245 248 252
103 104 131 159 232 236 245 248 252
27 103 104 159 232 236 245 248 252
38 103 104 159 232 236 245 248 252
38 76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260 271
68 76 103 104 159 209 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 210 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 205 213 232 236 245 260
68 76 103 104 159 210 232 236 245 260
68 103 104 159 213 232 236 245 260
76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 103 104 159 209 232 236 245
68 103 104 159 210 232 236 245
68 103 104 159 230 232 236 245
68 103 104 159 126 232 236 245
68 103 104 159 205 232 236 245
68 103 104 159 210 232 236 245
103 104 159 230 236 245
68 103 104 159 232 236 245 260
103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 174 232 236 245 257
68 103 104 159 194 232 236 245 257
68 103 104 159 209 232 236 245 257
• toto· « · ··· ··· ···· •to · to ···« · » * to ·· ··· · « ··· ·· · ·· · · ·· · · ·· · • · ·· ·· ·· ·· ··
103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260 261
68 103 104 159 232 236 245 257 261
103 104 159 213 232 236 245 260
103 104 159 210 232 236 245 248 252
103 104 159 209 232 236 245 257
68 76 103 104 159 210 213 232 236 245 260
12 103 104 159 209 213 232 236 245 260
103 104 209 232 236 245 257
103 104 159 205 210 213 232 236 245 260
103 104 159 205 209 232 236 245 260
68 103 104 159 205 209 210 232 236 245
103 104 159 205 209 210 232 236 245 257
103 104 159 205 209 232 236 245 257
68 103 104 159 205 209 210 232 236 245 260
103 104 159 205 209 210 232 236 245
103 104 159 209 210 232 236 245
103 104 159 205 210 232 236 245
68 103 104 128 159 232 236 245
48 103 104 159 230 236 245
48 68 103 104 159 209 232 236 245
48 68 103 104 159 232 236 245 248 252
48 68 103 104 159 232 236 245 257 261
102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
12 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
101 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
102 103 104 159 213 232 236 245 248 252
103 104 131 159 232 236 245 248 252
103 104 159 184 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 244 245 248 252
62 103 104 159 213 232 236 245 248 252 256
12 62 103 104 159 213 232 236 245 248 252
101 103 104 159 185 232 236 245 248 252
101 103 104 159 206 232 236 245 248 252
101 103 104 159 213 232 236 245 248 252
• φ * · φ · *· ·· » · · ► * · ♦ * * » » · * φ
98 102 103 104 159 232 236 245 248 252
101 102 103 104 159 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 245 248 252
98 102 103 104 159 212 232 236 248 252
62 103 104 109 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 159 212 213 232 236 245 248 252
62 101 103 104 159 212 213 232 236 245 248 252
103 104 159 232 245 248 252
103 104 159 230 245
62 103 104 130 159 213 232 236 245 248 252
101 103 104 130 159 232 236 245 248 252
101 103 104 128 159 232 236 245 248 252
62 101 103 104 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 128 159 213 232 236 245 248 252
62 103 104 128 159 213 232 236 245 248 252
101 103 104 159 232 236 245 248 252 260
101 103 104 131 159 232 236 245 248 252
98 101 103 104 159 232 236 245 248 252
99 101 103 104 159 232 236 245 248 252
101 103 104 159 212 232 236 245 248 252
101 103 104 159 209 232 236 245 248 252
101 103 104 159 210 232 236 245 248 252
103 103 104 159 205 232 236 245 248 252
101 103 104 159 230 236 245
101 103 104 159 194 232 236 245 248 252
76 101 103 104 159 194 232 236 245 248 252
101 103 104 159 230 232 236 245 248 252
62 103 104 159 185 206 213 232 236 245 248 252 271
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor (jeden substituční soubor na řádce následující Tabulky VII) vybraný ze skupiny obsahující:
Tabulka VII
N76D S103A V104I S212P E271V
·*·· »· *· ·» ·Γ 99
9 9 4 4 9 9 9 • » t »19 · -· « • t «»· 9 t ·*« » « · • · · · ·· » « · · « * · 9 4 9 4 4 9 9 · tt
N76D S103A V104I N252K N261Y
N76D S103A V104I S212P G258R
V4E N76D S103A V104I G139D L217E N252D
Q12H N62H N76D S103A V104I G159D
N76D S103A V104I S212P V268F E271V
N76D S87R S1O3A V1041 S212P E271V
N76D S1O3A V1041 S212P Q245L E271V
N76D S1O3A V104I T134S S141N S212P E271V
N76D S103A V104I S212P Q236L N243S E271V
G20V N62S N76D S103A V104I
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H 0245 R
N76D S103A V104I A232V Q245R
S24T V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24SR
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N252K
V68A N76D S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R T26OA
V68A S103A V1O4I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I N140D G159D A232V Q236H Q245R N252K
N43S V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N252K
N43K V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR
N43D V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N252K
V68A S87G S1O3A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K R275S
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R L257V
V68A S1O3A V104I N116D G159D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D
R10C V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V104I G159D V203E A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H K237E Q245R
V68A N76D 179N S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V104I G159D N183D A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A V1041 G159D A174V Q206L A232V Q236H Q245R
V68A S103A V104I G159D S188C A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A VI041 G159D A230T A232V Q236H Q245R
V68A A98T S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D A215T A232V Q236H Q245R
V68A S1O3A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248S
*· ·* ·· ·· « v · · 9 « · * · · • · · · ···· S * 9 * · 9 9 9 1 *, 9 9 9 * » 9 · 9 9 4 9 9 w · 9 9
9· »» 9 9 9 9 99 «··· ··
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G139D P210R A232V Q236H Q243R
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R L2J7V
N76D S103A VI041 A232V Q236H Q245R L237V
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24SR L257V R275H
N76D S103A V104I L257V R27JH
V68A S103A V104I G159D T224A A232V Q236H Q245R L237V
N76D S103A V104I G1S9D A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V104I G139D Y2O9W A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G139D G211R A232V Q236H Q24JR
V68A N76D S103A V1041 G159D G211V A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G139D Y214L A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D A215R A232V Q236H Q243R
Q12R V68A N76D S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R
G20R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R S259G
V68A S87R N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R T26OV
V68A N76D S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N261G
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N261W
N76D SI03A V104I A232V Q236H S242P Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D P210L A232V Q236H Q245R
Q12R A48V V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
N76D S103A V104I A232V Q236H Q245R
N76D SI03A V1041 G159D Y192F A232V Q236H Q245R
N76D S103A V1041 V! 471 G139D A232V Q236H Q24JR N248S K251R
Q12R V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R A272S
V68A N76D S103A V104I G1J9D N183K O206L A232V Q236H O245R
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R S256R
V68A N76D S103A V104I G1J9D Q206R A232V Q236H Q24JR
K27R V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A VI041 N116T G1J9D R170S NI85S A232V Q236H Q245R
G61E V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
N43D V68A S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D S212P A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I S99N G139D N184D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G1J9D Y209W A232V Q236H Q24JR N248D N232K
• · • · · • ·
V68A S103A V104I Q109R G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R V68A S103A V1O4I G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209F A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24JR N248D N252K N261D
V68A S103A V104I G159D N185D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D P210R A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G159D P210T A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G1J9D P210S A232V Q236H Q24JR N248D N252K
V68A S103A V104I G159D N185D P210L A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D P210L A232V Q236H Q24ÍR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D S212A A232V Q236H Q24 JR N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G1J9D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D S212E A232V Q236H Q24JR N248D N252K
V68A S103A V104I G139D T213E A232V Q236H Q243R N248D N2J2K
V68A S103A V104I T213S A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A A103V V104I G139D T213E A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A SI03A V1041 G139D T213G A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G1J9D A21JV A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D A21JR A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D S216T A232V Q236H Q24JR N248D N252K
V68A S103A V1041 G139D S216V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D S216C A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
G20A V68A S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S103A V104I G1J9D N173D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D K2J1V N2J2K
V68A S103A V1041 G159D Q206R A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2F
V68A S103A V104I G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N2J2L
PJJS V68A S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q24JR N248D N252F
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K T2JJV
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K S2J6N
V68A S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K S256E
V68A S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K S2J6R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K T260R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248D N2J2K L2J7R
• «
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K G258D
I8V V68A S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N232K N269D
V68A S103A V1041 N116S G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K T260E
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K N261R
V68A S103A VI041 G159D A232V Q236H Q24JR N248D N252K N261D
V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A S103A V1041 A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D A232S Q236H Q245R N248D N2J2K
V68A S1O3A V1041 G159D A232V Q236R Q24JR N248D N252K
N18S V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S1O3A V104I G159D A232V Q236H Q245V N248D N2J2K
V68A N76D S101T S103A V104I G159D T213R N218S A232V Q236H Q245R T26OA
V68A S103A VI04I G159D A228V A232V Q236H Q245R N248D N232K
T33S V68A N76D S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
V68A N76D E89D S103A V104I G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
GÓ1E V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 G159D V205I P210I A232V Q236H Q245R
G61E V68A S103A V1041 S130A G159O A232V Q236H Q245R N248D N232K
G61E V68A S103A V104I A133S Q137R G1S9D A232V Q236H Q245R N248D N232K
G61E S103A V104I A133V G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q24JR N248G N232K
V68A S103A V104I G1S9D N218S A232V Q236H Q245R N248D N232K
G61E V68A S103A V104I G159D S160V A232V Q236H Q24JR N248D N252K
S3L G61E V68A N76D S103A V104I A232V Q236H Q245R N248D N252K
G61E V68A S103A V104I G1J9D S167F A232V Q236H Q243R N248D N232K
G97E S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98D S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S99E S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101E S103A V1041 G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1OIG S103A V1041 G1J9D A232V Q236H Q243R N248D N252K
G102A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I S106E G1J9D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 Q109E G159O A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K N261R
S103A V104I Q109R G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V104I G159D A232V O236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D N184D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S103A V104I G159D S166D A232V Q236H Q245R N248D N232K
S103A V104I G159D L217E A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R N62D S103A V1041 G139D T213R A232V Q236H Q243R N248D N252K
N62D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R N248D N232K
S103A V104I G159D Q206R L217E A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V104I G159D Q206R A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
S103A V1041 S130G G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 P131V G159D A232V Q236H Q24JR N248D N232K
K27N S103A V104I G139D A232V Q236H Q245R N248D N252K
T38G S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N232K
T38A N76D S103A V1041 G139D T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A E271G
V68A N76D S103A VI041 G159D Y209W T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A VI041 G159D P210I T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V104I G139D V20J1 T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V104I G159D P210I A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V1O4I G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
N76D SI03A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V1041 G159D Y209W A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D P210I A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1O4I G159D A230V A232V Q236H Q243R
V68A S103A V104I G139D L126F A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1O4I G159D V205I A232V Q236H Q245R
V68A SI03A VIO41 GI59D P2I0L A232V Q236H Q245R
SI03A V104I G159D A230V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R T260A
S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D A174V A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V1O4I G159D A194S A232V Q236H Q24JR L257V
V68A S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R L257V
S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V104I G139D T213R A232V Q236H Q245R T260A N261W
V68A S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R L257V N261W
S103A V1041 G139D T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V1041 G159D P2101 A232V Q236H Q245R N248D N252K
• · ·· · · ···· « ·« «
S103A V104I G139D Y209W A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V104I G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
Q12R S103A V104I G159D Y209W T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V1O4I Y209W A232V Q236H Q245R L257V
S103A V104I G159D V205I P2101 T213R A232V Q236H Q245R T260A
S103A V104I G159D V2051 Y209W A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V1041 G159D V2051 Y209W P2101 A232V Q236H Q245R
S103A VIO41 G139D V205I Y209W P210I A232V Q236H Q24ÍR L257V
S103A VI04I G159D V205I Y209W A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V104I G159D V20JI Y209W P210I A232V Q236H Q245R T260A
S103A V104I G159D V205I Y209W P210I A232V Q236H Q245R
S103A V104I G159D Y209W P210I A232V Q236H Q245R
SI03A V1041 G159D V205I P210I A232V Q236H Q24JR
V68A S103A VI041 S128L G1J9D A232V Q236H Q243R
A48V S103A V104I G159D A230V Q236H Q245R
A48V V68A S103A V1041 G159D Y209W A232V Q236H Q245R
A48V V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A48V V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q243R L257V N261W
G102A S103A V104I G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
Q12R G102A S103A V104! G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G G102A S1O3A V104I G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A V104I G159D S212G A232V Q236H 0245R N248D N252K
G102A S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I P131V G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D N184S A232V 0236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D N184G A232V Q236H Q243R N248D N252K
S103A V1041 G159D A232V Q236H V244T Q245R N248D N252K
S103A V1041 G159D A232V Q236H V244A Q245R N248D N252K
N62D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K S256R
Q12R N62D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1O1G S103A V104I G159D N185D A232V Q236H Q24JR N248D N252K
S10IG S103A V1041 G159D Q206E A232V Q236H Q245R N248D N252K
S1OIG S103A V1041 G159D T213Q A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q24JR N248D N252K
S1O1G G102A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98L G102A S1O3A VI04I G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
• · • ·
A98L G102A S103A V104I G159D S212G A232V Q236H N248D N232K
N62D S103A V1041 Q109R G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V104I G159D S212G T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S101G S103A V104I G159D S212G T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V104I G1J9D A232V Q245R N248D N252K
S103A V104I G159D A230V Q245R
N62D S103A V104I S130G G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
S101G S103A V104I S130G G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V1041 S128G G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V104I S128L G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S101G S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
N62D S103A VI041 S128G G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
N62D S103A V1041 S128L G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K T260A
S101G S103A V104I P131V G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
A98V S101G S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
S99G S101G S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
S10IG S103A V104I G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V104I G139D Y209W A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G SI03A V1041 G159D P210I A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G SI03A V1041 G1J9D V2051 A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V104I G159D A230V Q236H Q245R
S101G S103A V104I G1J9D A194P A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
N76D S101G S103A V104I G159D A194P A232V Q236H Q245R N248D N252K
S101G S103A V104I G1J9D A230V A232V Q236H Q245R N248D N2J2K
N62D S103A V1041 G159D N185D Q206E T213R A232V Q236H Q24JR N248D N252K E271Q
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory v Tabulce VI s výjimkou následujících substitučních souborů v Tabulce VIII:
Tabulka Vlil
103
104
116
159
170 185 232 236
245 • · • · ·
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory z Tabulky IX:
Tabulka IX
Table IX
68 103 104 159 232 236 245 252
68 76 103 104 159 213 232 236 245 260
68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 140 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245 252
43 68 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 210 232 236 245
68 103 104 159 224 232 236 245 257
76 103 104 159 232 236 245 257
68 76 103 104 159 211 232 236 245
12 68 76 103 104 159 214 232 236 245
68 76 103 104 159 215 232 236 245
12 68 76 103 104 159 232 236 245
20 68 76 103 104 159 232 236 245 259
68 76 87 103 104 159 232 236 245 260
68 76 103 104 159 232 236 245 261
12 48 68 76 103 104 159 232 236 245
76 103 104 159 192 232 236 245
76 103 104 147 159 232 236 245 248 251
12 68 76 103 104 159 232 236 245 272
68 76 103 104 159 183 206 232 236 245
68 76 103 104 159 232 236 245 256
68 76 103 104 159 206 232 236 245
27 68 76 103 104 159 232 236 245
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
103 104 159 232 236 245 248 252 _
• · • · • · · · • · · • · «
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 109 159 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 209 232 236 245 248 252
68 103 104 159 210 232 236 245 248 252
68 103 104 159 212 232 236 245 248 252
68 103 104 159 213 232 236 245 248 252
68 103 104 213 232 236 245 248 252
68 103 104 159 215 232 236 245 248 252
68 103 104 159 216 232 236 245 248 252
20 68 103 104 159 232 236 245 248 252
68 103 104 159 232 236 245 248 252 255
68 103 104 159 232 236 245 248 252 256
68 103 104 159 232 236 245 248 252 260
68 103 104 159 228 232 236 245 248 252
68 76 89 103 104 159 210 213 232 236 245- 260
68 103 104 159 218 232 236 245 248 252
Ještě preferovanější proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor vybraný ze skupiny obsahující substituční soubory z Tabulky X:
Tabulka X
V68A S103A VI041 G159D A228V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D N218S A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A N76D E89D S103A V104I G159D P210L T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K T260R
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K T255V
V68A S103A VI041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K S256N
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252L
V68A S103A V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A215V A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D A215R A232V Q236H Q245R N248D N252K
• · c « • · · ·
Vb8A 5103 A V1041 G159D P210L A232V 1 Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D S212C A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D S212G A232V Q236H Q245R N248D N252K
S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V104I G159D Y209W A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V i 041 Q109R G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
G20R V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D Y209F A232V Q236H Q245R N248D N252K
N76D SI03A V1041 G159D Y192F A232V Q236H Q245R
N76D S103A V1041 V147I G159D A232V Q236H Q245R N248S K251R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R A272S
V68A N76D S103A V1041 G159D N183K. Q206L A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R S256R
V68A N76D S103A V1041 G159D Q206R A232V Q236H Q245R
K27R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
Q12R A48V V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N261W
V68A N76D S103A V1041 G159D G211R A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 GI59D G21IV A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G159D Y214L A232V Q236H Q245R
V68A N76D S103A V1041 G159D A215R A232V Q236H Q245R
Q12R V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
G20R V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R S259G
V68A N76D S87R S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R T260V
N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R L257V
V68A N76D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R T260A
V68A N76D S103A V1041 G159D P210R A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 G159D S212P A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D T224A A232V Q236H Q245R L257V
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252S
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
V68A S103A V1041 N140D G159D A232V Q236H Q245R N252K
N43S V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K
N43K. V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R
• *
N43D V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R L257V
Vysoce preferované proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor vybraný ze skupiny obsahující:
12/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 61 /68/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/103/104/130/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/213/232/236/245/248/252 62/103/104/109/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/101/103/104/159/212/213/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/232/236/245/248/252/270; 68/103/104/159/185/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/185/210/232/236/245/248/252: 68/103/104/159/230/232/236/245; 68/103/104/232/236/245/248/257/275; 68/103/104/159/232/236/245/248/252:
68/76/103/104/159/232/236/245;
68/103/104/159/232/236/245; 68/76/103/104/159/21 1/232/236/245; 68/103/104/159/210/232/236/245; 68/76/103/104/159/213/232/236/245/260; 68/103/104/159/183/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/213/23 2/236/24 5; 76/103/104/159/213/232/236/245/260; 97/103/104/159/232/236/245/248/252; 98/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252 102/103/104/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/248/252/270;
103/104/159/205/209/232/236/245/257 103/104/159/205/209/210/232/236/245/257;
103/104/159/217/232/236/245/248/252; 103/104/131/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/232/236/245/257.
68/103/104/159/210/232/236/245/248/252:
, 68/103/104/159/213/232/236/245/248/252; 68/76/103/104/159/209/232/236/245; 68/103/104/213/232/236/245/248/252;
68/103/104/159/209/232/236/245; 68/103/104/159/232/236/245/252; 68/103/104/159/232/236/245/257; 68/76/103/104/159/215/232/236/245;
68/103/104/159/213/232/236/245/260;
68/76/103/104/159/210/232/236/24 5/260;
68/103/104/232/236/245/257/275;
76/103/104/159/232/236/245;
76/103/104/131/159/232/236/245/248/252;
98/103/104/159/232/236/245/248/252;
; 101/103/104/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/232/236/245;
103/104/159/232/236/245/248/252;
103/104/159/232/245/248/252;
103/104/159/213/232/236/245/248/252; 103/104/130/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/205/209/232/236/245; and
Ještě více vysoce preferované proteázové varianty užitečné v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu zahrnují substituční soubor vybraný ze skupiny obsahující:
• · · ·
12R/102A/103 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K;
E/68 A/103 A/1041/159D/232V/23 6H/245R/248D/252K; 62D/103A/104I/109R/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
62D/103 A/l 041/130G/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/101G/103 A/1041/159D/212G/213 R/23 2 V/23 6H/245R/248D/252K; 68A/76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/76D/103 A/l 041/159D/2101/232V/236H/245R/260A; 68A/103A/104I/159D/183D/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/209W/232V/236H/245R;
A/76D/103 A/1041/159D/211R/232V/236H/245R; 68A/76D/103 A/l 041/159D/215R/232V/236H/245R;
68A/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A;
A/76D/103 A/1041/159D/232V/236H/245R; 68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/252K;
68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R:
68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/257V; 68A/103A/104I/159D/185D/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/1041/159D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/1041/159D/185D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/1041/159D/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103 A/l 041/159D/230V/232V/236H/245R;
68A/76D/103 A/l 041/159D/209W/232V/236H/245R; 68A/103A/104I/232V/236H/245R/248D/257V/275H;
68A/103 AJ 104I/232V/236H/245R/257V/275H; 68A/103A/1041/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/104I/159D/210I/232V/236H/245R;
68A/103 A/l 041/159D/210L/232V/236H/245R;
68A/103 A/l 041/159D/213G/232V/236H/245R; 68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K/270A; 76D/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
76D/103 A/1041/131 V/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 76D/103A/104I/159D/213R/232V/236H/245R/260A;
97E/103 A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 98L/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
• « » • ·
98L/102A/103 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K;
101G/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K:
102A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103A/1041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/130G/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/217E/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l 041/159D/248D/252K/270V;
103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
103 A/l 041/159D/205I/209W/232V/236H/245R;
103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/257V;
103A/104I/159D/2051/209W/232V/236H/245R/257V;
103 A/1041/131 V/l 59D/232V/236H/245R/248D/252K;
103 A/l041/159D/2051/209 W/210I/232V/236H/245R/257V; a 103A/1041/159D/232V/245R/248D/252K.
Rekombinantní proteázy/rekombinantní subtilisiny - „Rekombinantní proteázy“ nebo „rekombinantní subtilisin“ označuje proteázu nebo subtilisin, u kterého je DNA sekvence přírodně se vy skytuj ící proteázy nebo subtilisninu modifikována za vzniku mutantní DNA sekvence, která kóduje substituci, inserci nebo vymazání jedné nebo více aminokyselin v aminosekvenci proteázy nebo subtilisinu. Vhodné modifikační metody jsou popsány v tomto vynálezu a v U. S. Patentu RE 34,606, 5,204,015 a 5,185,258.
Jiné než humánní proteázy /jiné než humánní subtilisiny - „Jiné než humánní proteázy“ nebo Jiné než humánní subtilisiny“ a DNA, která je kóduje mohou být získány z mnoha prokaryotní ch a eukaryotních organismů. Vhodné příklady prokariotních organismů zahrnují gramnegativní organismy jako je E. coli nebo Pseudomonas a gram positivní baktérie jako jsou Micrococcus nebo Bacillus. Příklady eukaryotních organismů, z nichž mohou být získány karbonylhydrolázy a jejich geny, zahrnují kvasinky jako třeba Saccharomyces cerevisae, houby jako třeba Aspergillus sp. a nehumánní savčí zdroje jako např. hovězí sp., z nichž mohou být získány geny kódující proteázy chymosin nebo subtilisinový chymosin. Série proteáz a/nebo subtilisinů může být získána z různých příbuzných druhů, majících aminokyselinovou sekvenci, která mezi dvěma členy této série není plně homogenní, která ovšem vykazuje stejný typ biologické aktivity. Jiné než lidské proteázy nebo jiné než lidské subtilisiny použité v tomto • · « · · « · · » vynálezu mají funkční definici, která se odkazuje na proteázy nebo subtilisiny, které jsou spojeny přímo nebo nepřímo s prokaryotními nebo eukaryotními zdroji.
Variantní DNA sekvence - Variantní DNA sekvence kódující tyto proteázové nebo subtilisinové varianty jsou odvozeny od sekvence prekurzorové DNA, která kóduje přirozeně se vyskytující nebo rekombinantní prekurzory enzymu. Sekvence variantní DNA jsou odvozeny modifikací sekvence prekurzorové DNA tak, aby kódovaly substituci jedné nebo více ’ specifických aminokyselinových zbytků kódovaných prekurzorovou DNA sekvencí odpovídající polohám 103 v kombinaci s jednou nebo s více následujících poloh: 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 15, 16, 17, 18, 20,
21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98,
99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 115, 116, 117, 119, 121, 123, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 161, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181, 182,
183, 184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216,
217, 218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248,
249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270, 271,
272, 274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens, kde když zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminokyselinového zbytku v jedné nebo více z aminokyselinových poloh, jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Ačkoliv aminokyselinové zbytky identifikované pro modifikaci jsou identifikovány podle číslování použitelného pro B. amyloliquefaciens (což se stalo běžnou metodou identifikace pozice zbytku u všech subtilisinů), preferovaná sekvence prekurzorové DNA užitečné podle tohoto vynálezu je sekvence Bacillus lentus zobrazená na Obrázku 3.
V preferovaném provedení kódují tyto sekvence variantní DNA substituci, inserci nebo vymazání aminokyselinového zbytku odpovídajícího poloze 103 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens v kombinaci s jednou nebo s více dalšími aminokyselinovými zbytky odpovídajícími následujícím polohám: 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 15, 16, 17, 18, 20, 21, 22, 24, 27,
33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 115, 116, 117, 119, 121, 123, 128, 130, 131, 133, 134, 137, Ϊ40,
141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 161, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181, 182, 183, 184, 185,
188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 222,
224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 251, 252, · · ·
253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270, 271, 272, 274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens, kde když zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminokyselinového zbytku v jedné nebo více z aminokyselinových poloh, jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Výhodněji tyto sekvence variantní DNA kódují proteázové varianty popsané v tomto vynálezu.
V dalším provedení tyto sekvence variantní DNA kódují substituci, inserci nebo vymazání jednoho nebo více aminokyselinových zbytků odpovídajících polohám 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Výhodněji tyto sekvence variantní DNA kódují proteázové varianty popsané zde.
Ačkoliv aminokyselinové zbytky identifikované pro modifikaci jsou identifikovány podle číslování použitelného pro B. amyloliquefaciens (což se stalo běžnou metodou identifikace pozice zbytku u všech subtilisinů), preferovaná sekvence prekurzorové DNA užitečné podle tohoto vynálezu je sekvence Bacillus lentus zobrazená na Obrázku 3.
Tyto sekvence rekombinantní DNA kódují proteázové varianty, mající novou sekvenci aminokyselin a obecně alespoň jednu vlastnost, která je významně jiná než je stejná vlastnost u enzymu kódovaného sekvencí DNA prekurzorové proteázy. Tyto vlastnosti zahrnují proteolytické aktivity, substrátovou specifitu, stabilitu, změněný pH profil a/nebo zlepšené pracovní charakteristiky.
Specifické substituce odpovídají poloze 103 v kombinaci s jednou nebo svíce následujících poloh: 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 15, 16, 17, 18,20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 115, 116, 117, 119, 121, 123, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147,
158, 159, 160, 161, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181, 182, 183, 184, 185, 188, 192, 194, 198,
203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 222, 224, 227, 228, 230,
232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 251, 252, 253, 254, 255, 256,
257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270, 271, 272, 274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens, kde když zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminokyselinového zbytku v jedné nebo více z aminokyselinových poloh, jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274, kde •· · ··· · . .
, :: :.: : :··..: :: : 68 ’· ’··’ *..**..· číslování poloh odpovídá přírodně se vyskytujícímu subtilisinu z Bacillus amyloliquefaciens nebo ekvivalentním aminokyselinovým zbytkům v jiných karbonyl hydrolázách nebo subtilisinech (jako je subtilisin Bacillus lentus) zde popsaných. Dále jsou zde popsány specifické substituce odpovídající jedné nebo více z následujících poloh 62, 212, 230, 232, 252 a 257, kde číslované polohy odpovídají přírodně se vyskytujícímu subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens nebo ekvivalentním aminokyselinovým zbytkům u jiných karbonylhydroláz nebo subtilisinů (jako je subtilisin Bacillus lentus). Tato čísla poloh aminokyselin odkazují na sekvenci přírodního subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, která je zobrazena na Obrázku 1. Tento vynález ovšem není omezen na používání mutace tohoto konkrétního subtilisinu, aleje rozšířen i na prekursorové proteázy obsahující aminokyselinové zbytky v polohách, které jsou „ekvivalentní“ konkrétně identifikovaným zbytkům v subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. V preferovaném provedení tohoto vynálezu je prekurzorovou proteázou subtilisin Bacillus lentus a substituce, vymazání nebo inserce jsou provedeny na ekvivalentních aminokyselinových zbytcích v Bacillus lentus odpovídající výše uvedenému seznamu.
Zbytek (aminokyseliny) prekursorové proteázy je ekvivalentní ke zbytku Bacillus amyloliquefaciens pokud je buď homologický (to jest v odpovídající poloze primární nebo terciální struktury) nebo analogický k určitému zbytku nebo části subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens (to jest mající stejnou nebo podobnou funkční schopnost kombinovat, reagovat nebo interagovat chemicky).
Za účelem určení homologie k primární struktuře se sekvence aminokyselin prekursorové proteázy přímo srovnává s primární sekvencí subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens a obzvláště se sadou zbytků o níž je známo, že je invariantní u subtilisinu se známou strukturou. Například, obrázek 2 ukazuje zachované zbytky mezi subtilisinem Bacillus amyloliquefaciens a subtilisinem Bacillus lentus. Po seřazení zachovaných zbytků, dovolujícím nezbytnou inzerci a vymazání za účelem udržení základního uspořádání (to jest vyhnutí se eliminace zachovaných zbytků pomocí nezávislého vymazání nebo inzerce) jsou definovány zbytky odpovídající konkrétním aminokyselinám v primární sekvenci subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Uspořádání zachovaných zbytků by s výhodou mělo zachovávat 100 % těchto zbytků. Avšak uspořádání mající více než 75 % nebo dokonce jen 50 % zachovaných zbytků je také adekvátní k definování ekvivalentních zbytků. Zachování katalytické triády Asp32/His64/Ser221 by mělo být zachováno.
* ·
Například, na obrázku 3 jsou seřazeny aminokyselinové sekvence subtilisnů z Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis (carlsbergensis) a Bacillus lentus za účelem zajištění maximální homologie mezi aminokyselinovými sekvencemi. Tyto zachované zbytky (jako mezi BNP’ a B. lentus) jsou identifikovány na obrázku 2.
Tyto konservované zbytky mohou být tedy použity k definování odpovídajících ekvivalentních aminokyselinových zbytků Bacillus lentus (PCT Publication č. WO 89/06279 publikované 13. července 1989), preferovaný proteázový prekurzorový enzym nebo subtijisin označovaný jako PB92 (EP 0 328 299), který je vysoce homologický k preferovanému subtilisinu Bacillus lentus. Aminokyselinová sekvence některých z těchto subtilisinů jsou seřazeny na obrázku 3A a 3B spolu se sekvencí subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens za účelem vytvoření maximální homologie konservovaných zbytků. Jak je vidět, je zde mnoho vypuštění v sekvenci Bacillus lentus ve srovnání se subtilisinem Bacillus amyloliquefaciens. Tak například, ekvivalentní aminokyselina pro Vall65 v subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens v ostatních subtilisinech je isoleucin pro B. lentus a B. licheniformis. Tak například, aminokyselina v poloze +76 je asparagin (N) jak u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens tak u subtilisinu Bacillus lentus. V proteázových variantách podle tohoto vynálezu je však aminokyselinový ekvivalent k +76 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens substituován s aspartátem (D). Zkratky a jednopísmenné kódy pro všechny aminokyseliny podle tohoto vynálezu odpovídají Patentin User Manual (GenBank, Mountain View, CA), 1990, str. 101.
„Ekvivalentní zbytky“ mohou být také definovány určením homologie na úrovni terciální struktury pro prekursorovou proteázu, jejíž terciální struktura byla určena x-Ray krystalografií. Ekvivalentní zbytky jsou definovány jako ty, u nichž atomové koordináty dvou nebo více atomů hlavního řetězce konkrétního aminokyselinového zbytku prekursorové proteázy a subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens (N kN, CA kCA, C kC a O kO) jsou v rozmezí 0,13 nm a s výhodou 0,1 nm po seřazení. Seřazení je dosaženo poté co je nejlepší model Orientován a natočen tak, aby dával maximální překryv atomových koordinát nevodíkových proteinových atomů zkoumané proteázy se subtilisinem Bacillus amyloliquefaciens. Nejlepší model je krystalografický model dávající nejnižší R faktor pro experimentální difrakční data při nejvyšším dostupném rozlišení.
Ση |F0(h)|-|Fc(h)|
R faktor Ση |F0(h)| • ·
Ekvivalentní zbytky, které jsou funkčně analogické k určitým zbytkům subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, jsou definovány jako takové aminokyseliny prekursorové proteázy, které mohou přijmout takovou konformaci, kdy buď mění, modifikují nebo přispívají k proteinové struktuře, vázání substrátu nebo katalýze způsobem definovaným a připisovaným konkrétnímu zbytku v subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Dále jsou to takové zbytky prekursorové proteázy (u které byla terciální struktura získána pomocí X-ray krystalografie), které zaujímají analogickou pozici do té míry, že ačkoliv atomy hlavního řetězce daného zbytku nemusí splňovat kritéria ekvivalence na základě obsazení homologické pozice, leží atomové koordináty nejméně dvou atomů postranního řetězce v rozmezí 0,13 nm s odpovídajícími atomy postranního řetězce subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Koordináty troj dimenzionální struktury subtilisinů Bacillus amyloliquefaciens jsou sepsány v WPO publikaci číslo 0 251 446 (ekvivalentní s U. S. Patentem 5,182, 204, jejichž popis je zde zahrnut jako reference) a mohou být použity jak bylo naznačeno výše k určení ekvivalentních zbytků na úrovni terciální struktury.
Některé ze zbytků identifikovaných pro substituci, inserci nebo vymazání jsou konservované zbytky, zatímco ostatní nikoliv. V případě zbytků, které nejsou konservovány, je náhrada jedné nebo více aminokyselin limitována na substituci, která produkuje variantu, která má aminokyselinovou sekvenci jenž neodpovídá sekvenci nalézané v přírodě. V případě konservovaných zbytků by takovéto změny neměly vést k přírodním sekvencím. Proteázové varianty podle tohoto vynálezu zahrnují zralé formy proteázových variant, stejně jako pro- a prepro-formy těchto proteázových variant. Pre-pro-formy jsou preferovanou konstrukcí protože usnadňují expresi, sekreci a zrání proteázových variant.
„Prosekvence“ označuje sekvenci aminokyselin vázanou k N-terminální části zralé formy proteázy, přičemž po jejím odstranění vzniká „zralá“ forma proteázy. Mnoho proteolytických enzymů se nachází v přírodě jako produkty translačních proenzymů a bez post-translačního opracování se exprimují tímto způsobem. Preferovaná prosekvence pro produkci proteázových variant je putativní prosekvence subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens, ačkoliv mohou být použity i další proteázové prosekvence.
„Signálová sekvence“ nebo „prosekvence“ označuje libovolné sekvence aminokyselin vázanou k N’terminální částí proteázy nebo N-tterminální části proproteázy, které mohou participovat při sekreci zralých forem proteáz. Tato definice signálové sekvence je definicí funkční, zamýšlená tak, aby zahrnovala všechny tyto aminokyselinové sekvence kódované Nterminální částí proteázového genu, který participuje při efektuaci sekrece proteázy za nativních
• · * · podmínek. Tento vynález využívá takovéto sekvence k ovlivnění sekrece proteázových variant podle zde uvedené definice. Jedna možná signálová sekvence zahrnuje prvních sedm aminokyselinových zbytků signální sekvence ze subtilisinu Bacillus subtilis připojených ke zbytku signálové sekvence subtilisinu z Bacillus lentus (ATCC 21536).
„Prepro“ forma proteázové varianty se skládá z dospělé formy proteázy, mající prosekvenci operativně připojenou k aminokonci proteázy a „pre“ nebo „signální“ sekvence je „provozuschopně“ připojená k aminokonci prosekvence.
„Expresní vektor“ označuje DNA konstrukci obsahující DNA sekvenci, který je operativně připojen ke vhodné kontrolní sekvenci schopné ovlivňovat expresi zmíněné DNA ve vhodném hostiteli. Tyto kontrolní sekvence zahrnují promotér k ovlivnění transkripce, optimální perátorovou sekvenci pro kontrolu takovéto transkripce, sekvenci kódující vhodné vázací místo pro mRNA na ribosomu a sekvence, které řídí terminaci transkripce a translace. Vektor může být plasmid, částice fágu nebo jednoduše potenciální genomický insert. Po transformování do vhodného hosta se vektor může replikovat a fungovat nezávisle na hostitelském genomu nebo se v některých případech může integrovat do samotného genomu. V této přihlášce se označení „plasmid“ a „vektor“ někdy používají zaměnitelně, protože plasmid je v současné době nejčastěji používanou formou. Ovšem, vynález je zamýšlen tak, aby zahrnoval tyto další formy expresních vektorů, které plní stejnou funkci a které jsou známé v oboru.
„Hostitelské buňky“ používané v tomto vynálezu jsou obecně prokariotní nebo eukaryotní hostitelé, které byly s výhodou manipulovány způsoby popsanými v U. S. Patent RE 34,606 s cílem učinit je neschopnými sekrece enzymaticky aktivních endoprotéáz. Preferované hostitelské buňky pro expresi proteáz je kmen Bacillus BG2036, který je deficientní pokud jde o enzymaticky aktivní neutrální proteázy a alkalické proteázy (subtilisin). Konstrukce kmenu BG2036 je popsána detailně vU. S. Patent 5,264,366. Další hostitelské buňky pro expresi proteáz zahrnují Bacillus subtilis 168 (také popsaný vU. S. Patent RE 34,606 a U. S. Patent 5,264,366, jejichž popis je zde zařazen jako reference), stejně jako libovolné vhodné kmeny Bacillus jako třeba Bacillus licheniformis, Bacillus lentus a pod.).
Hostitelské buňky jsou transformovány nebo transfektovány s vektory konstruovanými s využitím technik rekombinantní DNA. Takto transformované hostitelské buňky jsou schopné buď replikace vektorů kódujících proteázové varianty nebo exprimování požadované proteázové varianty. V případě vektorů kódujících pre- nebo prepro-formu proteázové varianty, jsou tyto varianty jsou-li exprimovány, v typickém případě vylučovány z hostitelské buňky do média hostitelských buněk.
„Operativně spojen“, při popisu vztahů mezi dvěma oblastmi DNA tento termín jednoduše znamená, že jsou funkcionálně příbuzné jeden druhému. Například, prosekvence je operativně připojena k peptidů, pokud funguje jako signální sekvence a účastňuje se v sekreci dospělých forem proteinu což nejpravděpodobněji zahrnuje štěpení signální sekvence. Promotér je operativně připojen ke kódující sekvenci pokud řídí transkripci sekvence, ribosomové vázací místo je operativně připojen ke kódující sekvenci je-li umístěn tak, aby dovolil translaci.
Geny kódující přírodně se vyskytující prekurozorové proteázy mohou být získány podle obecné metody známé v oboru. Metody obecně zahrnují syntézu značených značek, majících oblasti putativních sekvencí kódujících příslušené proteázy, přípravu genomických knihoven z organismů exprimujících proteázu a skríning těchto knihoven hybridizací do vzorků. Pozitivně hybridizované klony jsou poté mapovány a sekvencovány.
Klonovaná proteáza je poté použita k transformaci hostitelské buňky za účelem exprimace proteázy. Proteázový gen je potom ligován do plasmidu. Tento plasmid se replikuje uvnitř vtom smyslu, že obsahuje dobře známé elementy nezbytné pro plasmidovou replikaci: promotér operativně připojen k genu (který může být dodán jako genu vlastní homologický promotér je-li rozeznán, to jestrtranskribován hostitelem.) terminaci transcripce a polyadenyl pro stabilitu m-RNA trenskribované hostitelem z proteázového genu v určitých eukaryotních hostitelských buněk, které jsou exogeníí nebo je zajištěn endogenní oblastí terminátoru proteázového genu a s výhodou výběrový gen jako je resistence genu proti antibiotikům, která zajišťuje kontinuální kultivaci hostitelských buněk infikovaných plasmidem v médiu obsahujícím antibiotika. Plasmidy vyšších kopií také obsahují počátek replikace pro hostitele, čímž uvolňuje velké množství plasmidů, které by měly být generovány cytoplasmě bez chromosomální limitaci. Ovšem, v rámci tohoto vynálezu je integrace násobných kopií proteázového genu do hostitelského genomu. To je usnadněno prokaryotními a eukaryotními organismy, které jsou obzvláště náchylné khomologické rekombinaci. Genem může být přírodní gen B. lentus. Alternativně, může být vyroben syntetický gen kódující přírodně se vyskytující nebo mutantní prekursorovou proteázu. V tomto případě se určuje DNA a/nebo aminokyselinová sekvence prekursorové proteázy. Poté se syntetizují násobné, překrývající se, syntetické fragmenty jednopramenných DNA, kódující prekurzorové proteázy. Příklad syntetické genové • · konstrukce je uveden v příkladu 3 U.S. Patentu 5,204,105, jehož popis je zde zařazen jako reference.
Jsou-li přírodně se vyskytující nebo syntetické prekursorové proteázy nakloňovány, provádí se mnoho modifikací za účelem většího použití genu kromě syntézy přírodně se vyskytující prekursorové proteázy. Takovéto modifikace zahrnují produkci rekombinantních proteáz jak je popsáno v U. S. Patent RE 34,606 a EPO publikace číslo 0 251 446 a produkci proteázových variant popsaných zde.
Následující metoda kazetové mutageneze může být použita k usnadnění konstrukce proteázových variant podle tohoto vynálezu, ačkoliv mohou být použity i jiné metody. Nejdříve se získají přírodně se vyskytující geny kódující proteázu a sekvence, a to celé nebo částečně. Poté se u sekvence hledá místo, ve kterém je vhodné provést mutaci (vymazání, inserce nebo substituce) jedné nebo více aminokyselin v kódovaném enzymu. Sekvence sousedící s tímto místem se prohlédnou s ohledem na přítomnost restrikčních míst pro náhradu krátkého segmentu genu s množstvím oligonukleotidů, které po expresi budou kódovat různé mutanty. Tyto restrikční místa jsou s výhodou unikátní místa v rámci proteázového genu takže usnadňují náhradu genového segmentu. Ovšem, může být použito libovolné konvenční restrikční místo proteázového genu, které není redundantní, za předpokladu, že genové fragmenty generované restrikčním trávením mohou být poskládány v příslušnou sekvenci. Nejsou-li přítomna restrikční místa v lokalitách v rámci konvenční vzdálenosti od vyhraného bodu (od 10 do 15 nukleotidů), jsou tato místa generována substitucí nukleotidů v genu takovým způsobem, že ani čtecí rámec ani kódované aminokyseliny nejsou změněny ve finální konstrukci. Mutace genu za účelem změny jeho sekvence a potvrzení požadované sekvence se provádí extensí Ml 3 primerů v souladu s obecně známými metodami. Úkol lokalizace vhodných sousedních regionů a vyhodnocení potřebných změn k dosažení dvou konvenčních sekvencí restrikčních míst se stává rutinním díky redundanci genetického kódu, restrikční enzymatické mapě genu a velkému množství různých restrikčních enzymů. Povšimněte si prosím, že je-li dosažitelné konvenční sousední restrikční místo, výše uvedená metoda musí být použita pouze ve spojení se sousedním regionem, neobsahujícím místo.
Poté, co je přírodně se vyskytující nebo syntetická DNA klonována, restrikční místa obklopující pozice, které mají být zmutovány, jsou natrávena s příbuznými restrikčními enzymy a množství koncově-komplementámích oligonukleotidových kazet je ligováno do genu. Mutageneze je touto metodou usnadněna, protože všechny oligonukleotidy mohou být • · syntetizovány tak, abychom měli stejná restrikční místa a k vytvoření restrikčních míst nejsou třeba žádné spojovací části. V tomto textu je definována proteolytická aktivita jako rychlost hydrolýzy peptidických vazeb na miligram aktivního enzymu. Pro měření proteolyíické aktivity existuje mnoho procedur (K. M. Kalisz, „Microbial Proteinases,“, Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology, A. Fiechter ed., 1988). Kromě toho popřípadě jako alternativa k modifikované proteolytické aktivitě mohou mít variantní enzymy podle tohoto vynálezu další modifikované vlastnosti jako je Km, kcat, poměr kcat/Km a/nebo specificky modifikovaný substrát a/nebo modifikovaným profilem pH aktivity. Tyto enzymy mohou být připraveny na míru pro konkrétní substrát o němž se přepokládá, že bude přítomen, např. v přípravě peptidů nebo u hydrolytických procesů jako je praní prádla.
V jednom aspektu vynálezu je předmětem vynálezu zajištění variantní proteázy, mající proteolytickou aktivitu ve srovnání s prekursorovou proteázou, protože zvýšení této aktivity (numericky vyšší) umožňuje použití enzymů k lepšímu působení na substrát. Předmětem zájmu jsou také variantní enzymy, mající změněnou termickou stabilitu a/nebo změněnou substrátovou specifitu ve srovnání s prekurzorem. V některých případech může být požadována nižší proteolytická aktivita, například snížení proteolytické aktivity by bylo užitečné tam, kde je požadována syntetická aktivita proteáz (jako při syntéze peptidů). Někdy je třeba snížení této proteolytické aktivity, která by byla schopná rozbití produktů této syntézy. Obráceně, v některých případech může být vhodné zvýšení proteolytické aktivity variantního enzymu ve srovnání s prekurzorem. Kromě toho, zvýšení nebo snížení (alterace) stability variant, ať již alkalické nebo termální stability, může být vyžadováno. Zvýšení nebo snížení v kcat, Km nebo kcat/Km jsou specifická k substrátu použitém k určení těchto kinetických parametrů.
V dalším aspektu tohoto vynálezu bylo určeno, že substituce v pozicích odpovídajících
103 v kombinaci s jedním nebo více následujících pozic 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 58, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 116, 117, 119, 121, 123, 126, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181, 182,
183, 184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216,
217, 218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248,
249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270, 271,
272, 274 a 275 substilisinu Bacillus amyloliquefaciens jsou důležité při modulování celkové stability a/nebo proteolytické aktivity enzymu.
• ·
V dalším aspektu vynálezu bylo určeno, že substituce na jedné nebo více následujících pozic odpovídajících polohám 62, 212, 230, 232, 252 a 257 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens jsou také důležité při modulování celkové stability a/nebo proteolytické aktivity anzymu.
Tyto substituce jsou s výhodou u subtilisinu Bacillus lentus (rekombinantní nebo přírodní typ), ačkoliv substituce mohou být provedeny v libovolné Bacillus proteáze.
Na základě výsledků screeningu získaného u variantních proteáz jsou zmíněné mutace subtilisinu Bacillus amyloliqefaciens důležité pro proteolytickou aktivitu, působení a/nebo stabilitu těchto těchto enzymů a pro čistící a prací působení těchto variantních enzymů.
Metody a způsoby přípravy enzymů použitých v detergentech a čistících prostředcích podle tohoto vynálezujsou známé a jsou diskutované v PCT Publikací č. WO 95/10615.
Enzymy podle tohoto vynálezu mají trypsinovou specifitu. To znamená, že enzymy podle tohoto vynálezu hydrolyzují proteiny přednostním štěpením peptidové vazby nabitého aminokyselinového zbytku, konkrétněji zbytků jako je arginin a lysin, spíše než preferenčním štěpením peptidových vazeb hydrofobních aminokyselinových zbytků, konkrétněji fenylalanin, tryptofan a tyrosin. Enzymy mající tento profil se označují jako enzymy s chymotrypsinovou specifitou. Substrátová specifita, diskutovaná výše, je ilustrována působením enzymu'na dva syntetické substráty. Proteázy mající trypsinovou specifitu hydrolyzují syntetický substrát bVGRpNA preferenčně ve srovnání se syntetickým substrátem sucAAPF-pNA. Oproti tomu, chymotripsinové proteázové enzymy hydrolyzují později zmíněný substrát (sucAAPF-pNA) mnohem rychleji než prvně jmenovaný. Pro účely tohoto vynálezu byla využita následující procedura pro definování trypsinové specifity enzymů podle tohoto vynálezu:
Fixní množství glycinového pufru při pH 10 a teplotě 25 °C bylo přidáno do standardní 10 ml zkumavky. Pak bylo do zkumavky přidáno 0,5 ppm aktivního anzymu, určeného k testování. Poté bylo do zkumavky přidáno 1,25 mg syntetického substrátu na 1 ml roztoku pufru. Směs byla ponechána inkubovat 15 minut při 25 °C. Po proběhnutí inkubační doby byl ke směsi přidán enzymový inhibitor PMSF v koncentraci 0,5 mg na 1 ml rozotku pufru. Poté byla naměřena absorbance nebo hodnoty OD směsi při 410 nm. Absorbance potom indikuje aktivitu enzymu vůči syntetickému substrátu. Čím vyšší je absorbance tím vyšší je úroveň aktivity vůči substrátu.
• ·
K určení specifity konkrétního enzymu může být absorbance dvou syntetických substrátových proteinů převedena na specifitní poměr. Pro účely tohoto vynálezu je poměr určen vzorcem:
[aktivita vůči sAAPF-pNA]/[aktivita vůči bVGR-pNA]
Enzym mající poměr menší než asi 10, výhodněji nižší než asi 5 a nejvýhodněji nižší než asi 2,5, mohou být považovány za enzymy, demonstrující trypsinu podobnou aktivitu.
Tyto varianty obecně mají nejméně jednu vlastnost, která je odlišuje od téže vlastnosti proteázových prekurzorů, z nichž jsou aminokyselinové sekvence variant odvozeny.
Jeden aspekt tohoto vynálezu jsou přípravky, jako jsou detergenty a čistící přípravky pro čištění textilu, kuchyňského nádobí a dalších substrátů s tuhými povrchy, které zahrnují jednu nebo více proteázových variant podle tohoto vynálezu. Přípravky obsahující proteázy mohou být použity pro čištění např.: hedvábí nebo vlny, stejně jako pro další typy tkanin, jak je popsáno v publikacích jako třeba RD 216,034, EP 134,267, US 4,533,359 a EP 344,259 a kuchyňského vybavení a dalších substrátů s pevným povrchem jak je popsáno v US 5,478,742, US 5,346,822, US 5,679,630 a US 5,677,272.
Π. Amylázové varianty - Amylázové varianty používané podle tohoto vynálezu zahrnují, výčet není limitující, amylázové enzymy popsané v WO 95/26397 a WO 96/23873 (Novo). Tyto enzymy jsou zahrnuty v čistících přípravcích v koncentracích od 0,0001 %, s výhodou od 0,00018 %, výhodněji od asi 0,00024 %, nejvýhodněji od 0,05 % do asi 0,1 %, s výhodou do asi 0,060 %, výhodněji do asi 0,048 % čistého enzymu na hmotnost čistícího prostředku.
Amylázové varianty jsou s výhodou vybrány ze skupiny obsahující α-amylázové varianty.
Vhodné α-amylázové varianty pro použití podle tohoto vynálezu zahrnují, výčet není limitující, následující a-amylázy:
(i) α-amylázy charakterizované tím, že mají specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu 25 °C až 55 °C a při pH hodnotách v rozsahu od 8 do 10, měřeno stanovením α-amylázové aktivity Phadebas®, a/nebo (ii) α-amylázy podle bodu (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci ukázanou na SEQ ID č. 1 nebo α-amylázy, které jsou nejméně z 80 % homologické s aminokyselinovou sekvencí ukázanou na SEQ ID č. 1 a/nebo (iii) α-amylázy podle bodu (i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci ukázanou na SEQ ID č. 2 nebo α-amylázy, které jsou nejméně z 80 % homologické s aminokyselinovou sekvencí ukázanou na SEQ ID č. 2 a/nebo • ··· (iv) α-amylázy podle bodu (i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-AsnAsp- (SEQ ID č. 3) nebo amylázy, které jsou nejméně z 80 % homogenní s aminokyselinovou Nterminální sekvencí ukázanou na SEQ ID č. 3 a/nebo (v) α-amyláza podle bodů (i-iv), kde je α-amyláza získatelná z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo (vi) α-amyláza podle bodu (v), kde amyláza je získatelná z libovolných kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo (vii) α-amyláza vykazující pozitivní imunologickou kros-reaktivitu s protilátkami vyrobenými proti α-amyláze, mající aminokyselinovou sekvenci odpovídající SEQ ID č. 1, ID č. 2 nebo ID č. 3 a/nebo (viii) varianta matečné α-amylázy, kde matečná α-amyláza (1) má jednu z aminokyselinových sekvencí ukázanou na SEQ ID č. 1, ID č. 2 nebo ID č. 4, (2) vykazují alespoň 80 %homologii s jednou nebo více zmíněných aminokyselinových sekvencí a'nebo vykazuje imunologickou kros-reaktivitu s protilátkou získanou proti α-amyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejnou značkou jako DNA sekvence kódující a-amylázu, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde varianty: (A) alespoň jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn, a/nebo (B) alespoň jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jinou aminokyselinou a/nebo (C) alespoň jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován ve srovnání se zmíněnou matečnou α-amylázou; přičemž zmíněné varianty mají a-amylázovou a vykazují alespoň jednu z následujících vlastností ve srovnání se zmíněnou matečnou α-amylázou: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním nebo relativně vysokém pH, zvýšený nebo snížený isoelektrický bod (pí) aby pí hodnoty pro α-amylázovou variantu lépe odpovídaly pH hodnotám média.
Polypeptid se pokládá za X % homologický k matečné amyláze, pokud srovnání odpovídajících aminokyselinových sekvencí, prováděné algoritmem jako např. popsaným v Lipman a Pearson v Science 227, 1985, 1435, potvrdí X% identitu.
···· ·· • · * < · · • * <
• · «
V kontextu tohoto vynálezu označuje termín „získatelný z“ nejen to, že je amyláza produkována kmenem Bacillus, ale také to, že je amyláza kódována DNA sekvencí izolovanou z kmene Bacillus a produkována v hostitelském organismu transformovaném s DNA sekvencí.
ΠΙ. Proteázové/amylázové kombinace - Ačkoliv libovolná jedna nebo více proteázových variant popsaných výše může být kombinováno s jednou nebo více amylázovými variantami, podle vysoce preferovaného provedení tohoto vynálezu zahrnují proteázové varianty substituční sadu: 101/103/104/159/232/236/245/248/252 a ještě preferovanější provedení obsahuje substituční sadu: 101G/103A/104I/232V/236H/245R/248D/252K.
Ačkoliv proteázové varianty a amylázové varianty podle tohoto vynálezu mohu být přítomny v čistících prostředcích v libovolném poměru ppm, preferovaný poměr proteázové varianty k amylázové variantě v ppm čistícího prostředku podle tohoto vynálezu v rozmezí od 1:20 do asi 20:1, s výhodou od asi 1:10 do asi 10:1, ještě výhodněji od 1:3 do 3:1.
Čistící prostředky
Čistící prostředky podle tohoto vynálezu zahrnují, kromě jedné nebo více proteázových variant popsaných výše, jednu nebo více pomocných čistících materiálů, s výhodou kompatibilní s proteázovou variantou. Termín „čistící přídavný materiál“ označuje libovolný kapalný, tuhý nebo plynný materiál, vybraný pro určitý typ čistícího přípravku určeného pro konkrétné formu produktu (např. kapaliny, granule, prášek, kus, pasta, sprej, tableta, gel, pěna), přičemž tyto materiály jsou s výhodou kompatibilní s proteázovými enzymy používanými v přípravku. Granulámí přípravky mohou být také v „kompaktní“ formě a kapalné přípravky mohou být „koncentrované“ formě.
Konkrétní výběr čistících přídavných materiálů je snadno proveden na základě povrchu, druhu tkaniny určenému čištění a požadované formy přípravku pro zamýšlené čištění (např. pomocí pracího detergentů). Termín „kompatibilní“ označuje v tomto vynálezu, že materiály čistícího přípravku nesnižují proteolytickou aktivitu proteázových enzymů do takové míry, že by proteázy nebyly účinné jak je požadováno za normálních okolností. Příklady vhodných čistících přídavných materiálů zahrnují (výčet není úplný) surfaktanty, pojivá, bělidla, aktivátory bělení, katalyzátory bělení, další enzymy, systémy pro stabilizaci enzymů, chelanty, optické zjasňovače, polymery pro uvolňování špíny, činidla bránící přenosu barev, disperzanty, protipěnová činidla, barviva, parfémy, koloranty, soli plnidla, hydrotropy, fotoaktivátory, fluorescenční látky, kondicionéry látek, hydrolyzovatelné surfaktanty, preservativa, antioxidanty, látky proti smršťování, látky proti mačkání, germicidy, fungicidy, látky proti skvrnám, látky proti zákalu • · a/nebo antikorozivní látky, zdroje alkality, činidla pro rozpouštění, nosiče, pomocná výrobní činidla, pigmenty a látky na úpravu pH podle popisu U. S. Patent 5,705,464, 5,710,115, 5,698,504, 5,695,679, 5,686,014 a 5,646,101. Konkrétní materiály čistícího přípravku jsou detailně uvedeny v níže uvedených příkladech.
Pokud přídavné čistící materiály nejsou kompatibilní s proteázovou variantou v čistícím prostředku, může být použito vhodných metod udržujících čistící přídavné materiály a proteázové varianty oddělené (nejsou v přímém vzájemném kontaktu) až do doby použití čistícího přípravku. Vhodné metody mohou být libovolné metody známé v oboru, jako jsou gely, enkapsulace, tablety, fyzická separace a pod.
S výhodou je v přípravku na čištění různých povrchů, které vyžadují odstranění proteinových skvrn, zahrnuto účinné množství jedné nebo více výše popsaných proteázových variant. Tyto čistící přípravky zahrnují detergentní přípravky pro čištění tuhých povrchů, neomezené pokud jde o formu (např. kapalné a granulámí), detergentní přípravky pro čištění tkanin, neomezené pokud jde o formu (např. granulámí, kapalné a kouskové přípravky), přípravky na mytí nádobí (neomezené pokud jde o formu a zahrnující jak granulámí tak i kapalné prostředky na automatické mytí nádobí), ústní čistící prostředky bez omezení pokud jde o formu (např. ústní voda, zubní pasta a prostředky na vyplachování ústní dutiny) a přípravky na čištění zubních náhrad bez omezení pokud jde o formu (např. kapaliny, tablety).
„Účinné množství proteázové varianty“ označuje v tomto vynálezu množství proteázové varianty popsané v tomto vynálezu, potřebné pro dosažení enzymatické aktivity nezbytné pro konkrétní čistící prostředek. Tato účinná množství jsou snadno určena odborníky v oboru na základě mnoha faktorů jako jsou konkrétní použité varianty, použití čistícího prostředku, konkrétní čistící přípravky, popř. zdaje požadován kapalný nebo kusový čistící prostředek a pod.
S výhodou čistící prostředky zahrnují od asi 0,0001 %, s výhodou od asi 0,001 %, ještě výhodněji od 0,01 % (hmotnosti čistícího prostředku) jednu nebo více proteázových variant podle tohoto vynálezu do asi 10 %, s výhodou do asi 1 %, ještě výhodněji do 0,1 %. Také výhodně jsou proteázové varianty podle tohoto vynálezu přítomny v přípravcích v množstvích dostatečných pro zajištění poměru aktivní proteázy (v mg na 100 g přípravku) k ppm teoreticky dostupného O2 („AvCh“) z libovolné peroxykyseliny v pracím roztoku, který se zde označuje jako poměr enzymu a bělidla (E/B poměr), v rozmezí od asi 1:1 do asi 20:1. Několik příkladů různých čistících prostředků, v nichž mohou být použity proteázové varianty podle tohoto ···· ·· • « ' ·· vynálezu, je diskutováno dále. Čistící přípravky mohou také zahrnovat od 1% do asi 99,9 % hmotnosti přípravku pomocných čistících materiálů.
Čistící prostředky podle tohoto vynálezu mohou být ve formě „tkaninových čistících přípravků“ nebo jako „netkaninové čistící přípravky.“ „Tkaninové čistící přípravky“ zahrnují detergentní přípravky na ruční nebo automatické praní prádla včetně přídavných přípravků a kompozic vhodných pro použití při namáčení a/nebo předeprání zašpiněných tkanin.
„Netkaninové čistící přípravky“ zahrnují čistící přípravky na tuhé povrchy, detergentní přípravky na mytí nádobí, ústní čistící přípravky, čistící přípravky zubních náhrad a osobní čistící přípravky.
Jsou-li čistící přípravky podle tohoto vynálezu formulovány jako přípravky vhodné pro použití v automatickém praní prádla, obsahují přípravky podle tohoto vynálezu s výhodou jak surfaktant tak i pojivo a dále jeden nebo více čistících přídavných materiálů, s výhodou vybraných ze skupiny organických polymerních látek, bělících činidel, dalších enzymů, protipěnivých činidel, disperzantů, změkčovadel, činidel podporujících suspendování špíny a bránících jejímu zpětnému usazování a inhibitorů koroze. Přípravky na praní prádla mohu také obsahovat změkčující činidla jako další čistící přídavné látky.
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou být také použity jako detergentní aditivní produkty v tuhé nebo kapalné formě. Tyto aditivní produkty jsou zamýšleny pro doplnění nebo zesílení výkonu konvenčního detergentního přípravku a mohou být přidány v libovolném stupni čištění.
Jsou-li čistící přípravky podle tohoto vynálezu formulovány jako přípravky pro použití při manuálním mytí nádobí, s výhodou obsahují surfaktant a s výhodou i další čistící přídavné materiály jako jsou organické polymerní sloučeniny, činidla na zvýšení pěnivosti, kovy skupiny Π, rozpouštědla, hydrotropy a další enzymy.
Pokud je potřeba, hustota pracích detergentních prostředků podle tohoto vynálezu se pohybuje v rozmezí od 400 do 1200 g/1, s výhodu od 500 do 950 g/1 přípravku, měřeno při 20 °C.
„Kompaktní“ forma čistících prostředků podle tohoto vynálezu je nejlépe popsána pomocí hustoty, a pokud jde o složení pomocí množství anorganické plnící soli; anorganické plnící soli jsou konvenční složky detergentních přípravků v práškové formě; v konvenčních detergentních přípravcích jsou plnící soli přítomny ve značném množství, typicky od 17 do 35 % celkové hmotnosti přípravku. V kompaktních přípravcích jsou plnící soli přítomny v množstvích • · • · • · • · · · · · ··· · · · ···· nepřesahujících 15 % celkové hmotnosti, s výhodou ne více než 10 %, nejvýhodněji ne více než 5 % celkové hmotnosti přípravku. Anorganické plnící soli, ve smyslu tohoto vynálezu, jsou vybrány ze sulfátů a chloridů alkalických kovů a kovů alkalických zemin. Preferovanou plnící solí je síran sodný.
Kapalné čistící prostředky podle tohoto vynálezu mohou být také použity v „koncentrované formě“, v tomto případě bude kapalný čistící prostředek podle tohoto vynálezu obsahovat menší množství vody ve srovnání s konvenčními kapalnými detergenty. Typicky bude obsah vody v koncentrovaných kapalných čistících prostředcích nižší než 40 %, výhodněji menší než 30 %, nejvýhodněji nižší než 20 % hmotnosti čistícího prostředku.
Čistící přídavné materiály
Systém surfaktantu
Detersivní surfaktanty představují v plně formulovaném čistícím přípravku podle tohoto vynálezu od alespoň 0,01 %, s výhodou alespoň 0,1 %, výhodněji alespoň 0,5 %, nejvýhodněji alespoň 1 % do 60 %, výhodněji do asi 35 %, nejvýhodněji do asi 30 % hmotnosti čistícího prostředku, v závislosti na konkrétním surfaktantu použitém pro požadované účinky.
Detersivní surfaktant může být neionický, anionický, amfolytický, zwitterionický, kationický, semipolámí neionický a jejich směs, četné příklady jsou uvedeny vU. S. Patent 5,707,950 a 5,576,282. Preferovaný detergent a čistící protředky zahrnují anionické detersivní surfaktanty nebo směsi anionických surfaktantů s jinými surfaktanty, obzvláště neionickými surfaktanty.
Příklady surfaktantů užitečných podle tohoto vynálezu zahrnují konvenční Cu až Cis alkylbenzensulfonáty a primární, sekundární a náhodné alkylsulfáty, Cio až alkylalkoxysulfáty, Ci0 až Cis alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfonované polyglykosidy, C12 až Cis α-sulfonované estery mastných kyselin, C12 až Cis alkyl a alkylfenolalkoxyláta (obzvláště ethoxyláty a směsi ethoxy/propoxy), C12-C18 betainy a sulfobetainy („sultainy“), C10 až Cig aminoxidy a pod. Další konvenční užitečné surfaktanty jsou uvedeny ve standardních textech.
Surfaktant se s výhodou formuluje tak, aby byl kompatibilní s enzymovou složkou přítomnou v kompozici. V kapalných nebo gelových přípravcích je surfaktant nej výhodněji formulován tak, aby povzbuzoval nebo alespoň nesnižoval stabilitu enzymu v těchto přípravcích. Neionické surfaktanty • · · · • ·
Polyethylen, polypropylen a polybutylenoxidové kondenzáty alkylfenolů jsou vhodné pro použití jako neionické surfaktantní systémy podle tohoto vynálezu, přičemž jsou preferovány polyethylenoxidové kondenzáty. Komerčně dostupné neionické surfaktanty tohoto typu zahrnují Igepal™ CO-630, prodávaný firmou GAF Corporation a Triton™ X-45, X-l 14, X-100 a X-102, prodávané firmou Rohm & Haas Company. Tyto surfaktanty jsou běžně označovány jako alkylfenolalkoxyláty (např. alkylfenolethoxyláty).
Kondenzační produkty primárních a sekundárních alifatických alkoholů s 1 až 25 moly ethylenoxidu jsou vhodné pro použití jako neionické surfaktanty v neionických surfaktantní ch systémech podle tohoto vynálezu. Příklady komerčně dostupných neionických surfaktantů tohoto typu zahrnují Tergitol™ 15-S-9 (kondenzační produkt Cn až C15 lineárních alkoholů s 9 moly ethylenoxidu), Tergitol™ 24-L-6 NMW (kondenzační produkt C12 až C14 primárního alkoholu se 6 moly ethlenoxidu s úzkou distribucí molekulových hmot), oba prodávané firmou Union Carbide Corporation; Neodol™ 45-9 (kondenzační produkt C14 až C15 lineárních alkoholů s 9 moly ethylenoxidu), Neodol™ 23-3 (kondenzační produkt C12 až C13 lineárních alkoholů se 7 moly ethylenoxidu), Neodol™ 45-5 (kondenzační produkt C14 až C15 lineárního alkoholu s 5 moly ethylenoxidu) prodávané firmou Shell Chemical Company, Kyro™ EOB (kondenzační produkt C13 až C15 alkoholu s 9 moly ethylenoxidu), prodávaný firmou Procter & Gamble Company a Genapol LA 030 nebo 050 (kondenzační produkt C12 až C14 alkoholu se 3 až 5 moly ethylenoxidu), prodávané firmou Hoechst. Preferovaný rozsah HLB těchto produktů je od 8 do 11 a nejvýhodněji od 8 do 10.
Alkylpolysacharidy popsané v U. S. Patent 4,565,647 jsou užitečné neionické surfaktanty neionických surfaktantních systémů podle tohoto vynálezu.
Preferované alkylpolysacharidy mají vzorec R O(CnH2nO)t(glykosyl)x, kde R je vybrán ze skupiny obsahující alkyl, alkylfenyl, hydroxyalkyl, hydroxyalkylfenyl a jejich směsi, kde alkylová skupina obsahuje od 10 do 18, s výhodou od 12 do 14 uhlíkových atomů, n je 2 nebo 3, s výhodou 2, t je od O do asi 10, s výhodou 0 a x je od 1,3 do asi 10, s výhodou od 1,3 do asi 3, nejvýhodněji od 1,3 do asi 2,7.
Kondenzační produkty ethylenoxidu s hydrofobní bází vzniklou kondenzací propylenoxidu s propylenglykolem jsou také vhodné pro použití jako dodatečné neionické surfaktantní systémy podle tohoto vynálezu. Příklady sloučenin tohoto typu zahrnují některé
Λ ΤΆ Λ — komerčně dostupné surfaktanty Plurafac LF404 a Pluronic , prodávané firmou BASF.
Také vhodné pro neionické surfaktanty zneionických surfaktantních systémů podle tohoto vynálezu jsou kondenzační produkty ethylenoxidu s produktem, vzniklým reakcí propylenoxidu a ethylendiaminu. Příklady tohoto typu neionických surfaktantu zahrnují některé komerčně dostupné sloučeniny Tetronic™, prodávané firmou BASF.
Preferované neionické surfaktanty surfaktantních systémů podle tohoto vynálezu jsou polyethylenoxidové kondenzáty alkylfenolů, kondenzační produkty primárních nebo sekundárních alifatických alkoholů s 1 až 25 moly ethylenoxidu, alkylpolysacharidy a jejich směsi. Nejpreferovanější jsou Cg až C14 alkylfenolethoxyláty mající od 3 do 15 ethoxyskupin a Cg až Cig alkoholethoxyláty (s výhodou průměrně C10) mající od 2 do 10 atomů uhlíku a jejich směsi.
Vysoce preferované neionické surfaktanty jsou amidy polyhydroxymastných kyselin obecného vzorce: R2-C(O)-N(R’)-Z, kde R1 je H nebo R1 je C] až C4 hydrokarbyl, 2hydroxyethyl, 2-hydroxypropyl nebo jejich směsi; R je C5 až C31 hydrokarbyl a Z je polyhydroxyhydrokarbyl, mající lineární uhlovodíkový řetězec s nejméně 3 hydroxyly přímo napojenými na řetězec nebo jejich alkoxylované deriváty. S výhodou R je methyl, R je rovný Cn až Cj5 alkyl nebo Ci6 až Cis alkylový nebo alkenylový řetězec jako třeba kokosový alkyl nebo jejich směsi a Z je odvozený od redukujícího cukru jako je glukosa, fruktosa, maltosa, laktosa v reduktivní aminační reakci.
Anionické surfaktanty
Vhodné anionické surfaktanty pro použití podle tohoto vynálezu jsou lineární alkylbenzenové sulfonáty, alkylestersulfonátové surfaktanty včetně lineárních esterů Cg až C20 karboxylových kyselin (to jest mastných kyselin), které jsou sulfonovány s plynným SO3 podle Journal of the American Oil Chemists Society, 52 (1975), str. 323-329. Vhodné výchozí látky by zahrnovaly přírodní mastné kyseliny odvozené od loje, palmového oleje a pod.
Preferované alkylestersulfonátové surfaktanty, obzvláště pro praní prádla, zahrnují alkylesterové sulfonátové surfaktanty obecného vzroce:
O
II 4
R-CH-C-OR
I so3m kde R3 je Cg až C2o hydrokarbyl, s výhodou alkyl, nebo jejich kombinace, R4 je Cj až Có hydrokarbyl, s výhodou alkyl nebo jejich kombinace a M je kation, který vytváří vodorozpustnou sůl s alkylestersulfonátem. Vhodný kation vytvářející sůl zahrnuje kovy jako jsou sodík, draslík a lithium a substituované nebo nesubstituované amonné kationty jako jsou monoethanolamin, diethanolamin a triethanolamin. S výhodou R3 je Cio až Ci6 alkyl a R4 je methyl, ethyl nebo isopropyl. Obzvláště preferované jsou methylestersulfonáty, kde Cio až Ciď alkyl.
Další vhodné anionické surfaktanty zahrnují alkylsulfátové surfaktanty, které jsou vodorozpustné soli kyselin obecného vzorce ROSO3M, kde R je s výhodou C10 až C24 uhlovodíkový zbytek, s výhodou alkyl nebo hydroxylalkyl, mající C10 až C20 alkylovou komponentu, výhodněji C12 až Cis alkyl nebo hydroxyalkyl a M je H nebo kation. Typicky, jsou preferovány alkylové C12 až Ci6 řetězce pro nižší prací teploty (např. pod teploty 50 °C) a C]6 až Cig alkylové řetězce pro vyšší prací teploty (např. nad teploty 50 °C).
Další anionické surfaktanty užitečné pro detersivní účely zahrnují soli mýdel, C§ až C22 primární nebo sekundární alkansulfonáty, Cg až C24 olefinsulfonáty, sulfonované polykarboxylové kyseliny připravené sulfonací pyrolyzovaných produktů citrátů kovů alkalických zemin, např. popsané v britské patentové specifikaci 1,082,179, Cg až C24 alkylpolyglykolethersulfáty (obsahující až 10 molů ethylenoxidu); alkylglycerolsulfonáty, mastné acylglycerín sulfonáty, mastné oleylglycerínsulfáty, alkylfenolethylenoxidether sulfáty, parafinsulfonáty, alkylfosfáty, isethionáty jako jsou acylisethionáty, N-acyltauráty, alkylsukcináty a sulfosukcináty, monoestery sulfosukcinátů (obzvláště nasycené a nenasycené C12 až Cis monoestery) a diestery sulfosukcinátů (obzvláště nasycené nebo nenasycené C6 až C12 di estery), acylsarkosináty, sulfáty alkylpolysacharidy jako jsou sulfáty alkylpolyglukosidů (neionické nesulfátované sloučeniny popsané níže), větvené primární alkylsulfáty a alkylpolyethoxykarboxyláty jako jsou sloučeniny obecného vzorce RO(CH2CH2O)k-CH2COO‘ M+, kde Rje C8 až C22 alkyl, kje celé číslo od 1 do 10 a M je rozpustný sůl vytvářející kation. Pryskyřičné kyseliny a hydrogenované pryskyřičné kyseliny jsou také vhodné, jako např. rosin, hydrogenovaný rosin a pryskyřičné kyseliny a hydrogenované pryskyřičné kyseliny přítomné v taliovém oleji nebo z něho odvozené.
Další příklady jsou popsány v „Surface Active Agents and Detergents“ (vol. I a Π, Schwartz, Perry a Berch). Množství těchto surfaktantů je také obecně popsáno v U. S. Patentu 3,929,678, vydaném 30. prosince 1975 (Laughlin et al.) na sloupci 23, řádka 58 až sloupci 29, řádce 23 (zde zahrnutý jako reference).
Vysoce preferované anionické surfaktanty zahrnují alkylalkoxylované sulfátové surfaktanty podle tohoto vynálezu jsou vodo-rozpustné soli nebo kyseliny obecného vzorce RO(A)mSO3M, kde Rje nesubstituovaný Cjo až C24 alkyl nebo hydroxyalkylová skupina, mající • · • ·
Cίο až C24 alkylovou komponentu, s výhodou C12 až C20 alkyl nebo hydroxyalkyl, výhodněji C)2 až Cig alkyl nebo hydroxylalkyl, A je ethoxy nebo propoxyjednotka, m je vyšší než nula, typicky mezi 0,5 a asi 6, výhodněji mezi 0,5 a asi 3 a M je H nebo kation, který může být např. kation kovu (např. sodík, draslík, lithium, vápník, hořčík a pod.), amonný nebo substituovaný kation. Alkylethoxylované sulfáty stejně jako alkylpropoxylované sulfáty jsou zde také zahrnuty. Konkrétní příklady substituovaných amonných kationtů zahrnují methyl-, dimethyl-, trimethylamonné kationty a kvartémí amonné kationty jako tetramethylamonium a dimethylpiperidiniový kation a dále ty, které jsou odvozené od alkylaminů jako jsou ethylamin, diethylamin, triethylamin, jejich směsi a pod. Příklady surfaktantů jsou Cj2 až Cig alkylpolyethoxylát (1,0) sulfát (C12 až CigE(l.O)M), Ci2 až Cjg alkylpolyethoxylat (2,25) sulfát (C12 až CigE(2,25)M), Ci2 až Cig alkylpolyethoxylat (3,0) sulfát (C12 až CigE(3,0)M) a Cj2 až Cig alkylpolyethoxylat (4,0) sulfát (C12 až CjgE(4,0)M), kde M je konvenčně vybrán ze skupiny obsahující sodík a draslík.
Jsou-li obsaženy v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu, typicky anionické surfaktanty tvoří od 1 % , s výhodou od 3 % do asi 4 %, s výhodou kolem 20 ·% hmotnosti čistícího prostředku.
Kationické surfaktanty
Kationické detersivní surfaktanty pro použití v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu jsou surfaktanty, mající jednu dlouhou uhlovodíkovou skupinu. Příklady těchto kationických surfaktantů zahrnují amonné surfaktanty jako jsou alkyltrimethylamonium halogenidy a surfaktanty mající obecný vzorec[R2(OR3)y][R4(OR3)y]2R5N+X', kde R2 je alkyl nebo alkylbenzylová skupina, mající od 8 do asi 18 uhlíkových atomů v alkylovém řetězci, každý R3 je vybrán ze skupiny obsahující -CH2CH2-, -CH2CH(CH3)-, -CH2CH(CH2OH)-, CH2CH2CH2- a jejich směsi; každý R4 je vybrán ze skupiny obsahující Cj až C4 alkyl, Ci až C4 hydroxyalkyl, benzylové kruhové struktury vzniklé spojením dvou R4 skupin, ,-CH2CHOHCHOHCOR6CHOHCEt2OH, kde R6 je libovolná hexosa nebo hexosový polymer, mající molekulovou hmotnost nižší než 1000 a vodík, když y není 0; R5 je stejný jako R4 nebo je a r alkylový řetězec, když celkový počet atomů uhlíku v R plus R není vyšší než asi 18; každýy je od 0 do asi 10 a součet hodnot y je od 0 do asi 15; X je libovolný kompatibilní anion.
Vysoce preferované kationické surfaktanty, užitečné v přípravcích podle tohoto vynálezu, jsou vodo-rozpustné kvarterní amonné sloučeniny, mající vzorec (i): RiR2R3R4N+X', kde Ri je Cg až Cj6 alkyl, každý R2, R3 a R4 je nezávisle Cj až C4 alkyl, C] až C4 hydroxylalkyl, benzyl a • · · · • · • · (C2H4o)xH, kde x má hodnotu od 2 do 5 a X je anion. Ne více než jeden z R2, R3 nebo R4 by měl být benzylem. Délka preferovaného alkylového řetězce pro Ri je C12 až C15, obzvláště kde alkylová skupina je směsí různých délek řetězců odvozených od kokosového nebo palmového oleje neboje derivován synteticky výstavbou olefinů nebo OXO syntézou alkoholů. Preferované skupiny pro R2R3 a R4 jsou methyl a hydroxyethylová skupina a anion X může být vybrán ze skupiny obsahující halidy, methosulfát, acetát a fosfát.
Příklady vhodných kvartemích amonných sloučenin vzorce (i) pro použití podle tohoto vynálezu zahrnují, výčet není úplný, kokosový trimethylamonium chlorid nebo bromid, kokosový methyldihydroxyethylamonium chlorid nebo bromid, decyltriethylamonium chlorid, decyldimethylhydroxethyíamonium chlorid nebo bromid, C12 až C|5dimethylhydroxyethyl amonium chlorid nebo bromid, kokosový dimethylhydroxyethylamonium chlorid nebo bromid, myristyltrimethylamonium methylsulfát, lauryldimethylbenzylamonium chlorid nebo bromid, lauryldimethyl(ethenoxy)4amonium chlorid nebo bromid, chlolinové estery (sloučeniny obecného vzorce (i), kde R] je CH2-CH2-O-C(=O)-Ci2-i4 alkyl a R2R3R4 jsou methyl) a di-alkylimidazoliny [(i)]·
Další kationické surfaktanty užitečné podle tohoto vynálezu jsou také popsány vU. S. Patentu 4,228,044 (Cambre), vydaném 14. října 1980 a v Evropské patentové přihlášce· EP 000,224.
Jsou-li zahrnuty v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, kationické surfaktanty typicky představují od asi 0,2 %, s výhodou od 1 % do asi 25 %, s výhodou do asi 8 % hmotnosti přípravku.
Amfolytické surfaktanty
Amfolytické surfaktanty, jejichž příklady jsou popsány v U. S. Patent 3,929,678, jsou také vhodné pro použití v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu.
Jsou-li zahrnuty v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, amfolytické surfaktanty typicky představují od asi 0,2 %, s výhodou od 1 % do asi 15 %, s výhodou do asi 10 % hmotnosti přípravku.
Zwitterionické surfaktanty
Zwitterionické surfaktanty, jejichž příklady jsou popsány v U. S. Patent 3,929,678, jsou také vhodné pro použití v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu.
• » · · • · • ·
Jsou-li zahrnuty v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, zwitterionické surfaktanty typicky představují od asi 0,2 %, s výhodou od 1 % do asi 15 %, s výhodou do asi 10 % hmotnosti přípravku.
Semipolámí neionické surfaktanty
Semipolámí neionické surfaktanty jsou speciální kategorií, která zahrnuje vodo-rozpustné aminoxidy, mající vzorec:
O t
R3(OR4)xN(R5)2 kde R3 je alkyl, hydroxyalkyl nebo alkylfenylová skupina nebo jejich směsi obsahující od 8 do asi 22 uhlíkových atomů; R4 je alkylenová nebo hydroxyalkylenová skupina obsahující od 2 do asi 3 uhlíkových atomů; x je od 0 do asi 3; a každý R5 je alkyl nebo hydroxylalkylová skupina obsahující od 1 do asi 3 uhlíkových atomů nebo polyethylenoxidová skupina obsahující od 1 do asi 3 ethylenoxidových jednotek (R5 skupiny mohou být připojeny navzájem, například prostřednictvím kyslíku nebo dusíku za vzniku kruhové struktury); vodo-rozpustné fosfínové oxidy obsahující jednu alkylskupinu od 10 do asi 18 atomů uhlíku a 2 skupiny vybrané ze skupiny obsahující alkylové skupiny a hydroxyalkylové skupiny obsahující· od 1 do asi 3 uhlíkových atomů a vodo-rozpustné sulfoxidy obsahující jednu alkylovou jednotku od 10 do asi 18 uhlíkových atomů a jednotku vybranou ze skupiny obsahující alkyl nebo hydroxyalkylové jednotky mající od 1 do asi 3 atomů uhlíku.
Aminoxidové surfaktanty obzvláště zahrnují Cio až Cjg alkyldimethylaminoxidy a Cg až C12 alkoxyethyldihydroxyethylamin oxidy.
Jsou-li zahrnuty v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, semipolámí neionické surfaktanty typicky představují od asi 0,2 %, s výhodou od 1 % do asi 15 %, s výhodou do asi 10 % hmotnosti přípravku.
Kosurfaktanty
Čistící přípravky podle tohoto vynálezu mohou dále obsahovat kosurfaktant vybraný ze skupiny obsahující primární nebo terciální aminy. Vhodné primární aminy k použití podle tohoto vynálezu zahrnují aminy podle obecného vzorce R1NH2, kde Ri je C& až C12, s výhodou Ce až C10 alkylový řetězec nebo R4X(CH2)n, X je -O-, -C(O)NH- nebo -NH-, R4 je Cé až C12 alkylový řetězec, n je mezi 1 až 5, s výhodou 3, Ri alkylové řetězce mohou být rovné nebo rozvětvené a mohou být přerušovány až se 12, s výhodou méně než 5 ethylenoxidovými jednotkami.
*· ·· • ♦ # · · • 9· · 9 9
Preferované aminy podle výše uvedeného vzorce jsou n-alkylaminy. Vhodné aminy pro použití podle tohoto vynálezu mohou být vybrány z 1-hexylaminu, 1-oktylaminu, 1-decylaminu a laurylaminu. Další preferované primární aminy zahrnují Cg až Cio oxypropylamin, oktyloxypropylamin, 2-ethylhexyloxypropylamin, laurylamidopropylamin a amidopropylamin. Nejpreferovanější aminy pro použití v prostředcích podle tohoto vynálezu jsou 1-hexylamin, 1decylamin, 1-dodecylamin. Obzvláště vhodné jsou n-dodecyldimethylamin a bis(hydroxyethyl)kokosalkylamin a oleylamin sedmkrát hydroxylovaný, laurylamidopropylamin a kokoamidopropylamin.
LFNS
Obzvláště preferované surfaktanty pro přípravky určené pro automatické mytí nádobí (ADD) podle tohoto vynálezu jsou nízkopěnivé neionické surfaktanty (LFNI), které jsou popsány v U. S. Patent 5,705,464 a 5,710,115. LFNI mohou být přítomny v množstvích od 0,01 % do asi % hmotnosti, s výhodou od asi 0,1 % do přibližně 10 % a nejvýhodněji od asi 0,25 % do asi 4 %. LFNI jsou nejtypičtěji použity v ADD na základě jejich zvýšené schopnosti potahovat vodou (obzvláště pokud jde o sklo), kterou vnášejí do ADD produktů. Mohou také zahrnovat nesilikonové, nefosfátové polymerní materiály dále ilustrované, které jsou známy .tím, že odpěňují zbytky jídel s nimiž se setkávají v myčkách nádobí.
Preferované LFNI zahrnují neionické alkoxylované surfaktanty, obzvláště ethoxylované deriváty primárních alkoholů a jejich směsi se sofistikovanějšími surfaktanty, jako třeba polyoxypropylen/polyoxyethylen/polyoxypropylen (PO/PE/PO) reverzní blokové polymery podle popisu v U. S. Patent 5,705,464 a 5,710,115.
LFNI, které mohou být použity, zahrnují také POLY-TERGENT® SLF-18 neionické surfaktanty od firmy Olin Corp., a libovolné biodegradovatelné LFNI mající výše diskutované vlastnosti týkající se bodu tání.
Tyto a další neionické surfaktanty jsou dobře známé v oboru a jsou detailněji popsány vKirk Otmer’s Encyklopedia of Chemical Technology, 3. vydání, vol. 22. str. 360-379, „Surfactants and Detersive Systems“, zahrnuté zde jako reference.
Bělící systém
Čistící prostředky podle tohoto vynálezu s výhodou obsahují bělící systém. Bělící systém typicky obsahuje „bělící činidlo“ (zdroj peroxidu vodíku) a „iniciátor“ nebo „katalyzátor“. Jsou11 přítomny, bělící činidla budou typicky v množstvích od asi 1 %, s výhodou od asi 5 % do asi 30 %, s výhodou od 20 % hmotnosti přípravku. Jsou-li přítomny, množství bělícího aktivátoru • · · φ · * • » • · »· · · · · • · * * · · · • · · · » · · » · » · • · · · · * » «·· * · • ·· · · ··.· · « · •« ·· ·» * · · · · * bude typicky od asi 0,1 %, s výhodou od asi 0,5 % do asi 60 %, s výhodou do asi 40 % hmotnosti bělícího přípravku, zahrnujícího bělící činidlo plus aktivátor bělení.
Bělící činidla
Zdroje peroxidu vodíku jsou detailně popsány ve zde zahrnuté Kirk Othmer’s Encyclopedia of Chemical Technology, 4. vydání (1992, John Wiley & Sons)., vol. 4, str. 271 300. „Bleaching Agents (Survey)“ a zahrnují různé formy peroxyboritanu sodného a peroxyuhličitanu sodného, včetně různých potáhnutých a modifikovaných forem.
Preferovaný zdroj peroxidu vodíku použitý v tomto vynálezu může být libovolný zdroj, včetně samotného peroxidu vodíku. Například, perborát, třeba perborát sodný (libovolný hydrát ovšem s výhodou mono- nebo tetra hydrát), uhličitan sodný peroxyhydrát nebo ekvivalentní peruhličitanová sůl, pyrofosfát sodný peroxyhydrát, peroxyhydrát močoviny nebo peroxid sodný.
Také jsou užitečné zdroje dostupného kyslíku jako třeba persulfátová bělidla (např. OXONE, vyráběný firmou DuPont). Perborát sodný monohydrát a perkarbonát sodný jsou obzvláště preferovány. Směsi libovolných zdrojů kyslíku mohou být také použity.
Preferovaná perkarbonátová bělidla zahrnují částice mající v průměru velikost v rozsahu od asi 500 mikrometrů do přibližně 1000 mikrometrů, ne více než asi 10 % hmotnosti zmíněných částic není menších než 200 mikrometrů a ne více než 10 % hmotnosti částic je větších než 1250 mikrometrů. Perkarbonát může být případně pokryt se silikátem, borátem nebo vodo-rozpustným surfaktantem. Perkarbonát je dostupný z různých komerčních zdrojů jako jsou FMC, Solvay a Tokai Denka.
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou také zahrnovat bělící činidlo chlorového typu.
Tato činidla jsou velmi dobře známa v oboru a zahrnují např. dichlorisokyanurát sodný („NaDCC“). Ovšem bělící činidla chlorového typu jsou méně preferována pro přípravky obsahující enzymy.
(a) Bělící aktivátory
Bělící složka s výhodou obsahuje aktivátor (prekursor perkyseliny). Aktivátor je přítomen v koncentracích od asi 0,01 %, s výhodou od asi 0,5 %, výhodněji od 1 % do přibližně 15 %, výhodněji 10 %, ještě výhodněji asi 8 % hmotnosti přípravku. Preferované aktivátory jsou vybrány ze skupiny obsahující tetraacetylethylendiamin (TAED), benzoylkaprolaktam (BzCl), 4nitrobenzoylkaprolaktam, 3-chlorbenzoylkaprolaktam, benzoyloxybenzensulfonát (BOBS), nonanoyloxybenzensulfonát (NOBS), fenylbenzoát (PhBz), dekanoyloxybenzensulfonát (CioOBS), benzoylvalerolaktam (BZVL), oktanoyloxybenzensulfonát (Cg-OBS), perhydrolyzovatelné « » * · » ·' ·«« ·· · · β · · * « » ·· «*· ř 4 . · » · β · estery a jejich směsi, nejvýhodněji benzoylkaprolaktam a benzoylvalerolaktam. Obzvláště výhodné jsou aktivátory pro pH rozsah od 8 do asi 9,5, které mají OBS nebo VL odstupující skupinu.
Preferované hydrofobní bělící aktivátory zahrnují (výčet není úplný) nonanoyloxybenzensulfonát (NOBS), sodná sůl 4-[N-(nonanoyl)aminohexanoyloxy]-benzensulfonátu (NACA-OBS), jejichž příklady jsou popsány vU. S. Patent 5,523,434, dodekanoyloxybenzensuífonát (LOBS nebo C12-OBS), 10-undecenoyloxyběnzensulfonát (UDOBS nebo Cn-OBS) s nenasycením v poloze 10 a dekanoyloxybenzoová kyselina (DOBA).
Preferované aktivátory bělení jsou popsány vU. S. Patent 5,698,504 (Christie et al.) vydaném 16. prosince 1997; U. S. Patent 5,695,679 (Christie et al.) vydaném 9. prosince 1997; U. S. Patent 5,686,401 (Willey et al.) vydaném 11. listopadu 1997; U. S. Patent 5,686,014 (Hartshom et al.) vydaném 11. listopadu 1997; U. S. Patent 5,405,412 (Willey et al.) vydaném
11. dubna 1995; U. S. Patent 5,405,413 (Willey et al.) vydaném 11. dubna 1995; U. S. Patent 5,130,045 (Mitchel et al.) vydaném 14.července 1992 a U. S. Patent 4,412,934 (Chung et al.) vydaném 1. listopadu 1983 a dosud nevyřízené patentové přihlášky U. S. pořadové číslo 08/709,072, 08/064,564, které jsou zde zahrnuty jako reference.
Molární poměr peroxydového bělícího činidla (AvO) k bělícímu aktivátoru v tomto vynálezu je obecně v rozsahu od nejméně 1:1 do asi 20:1, výhodněji od 10:1 do asi 1:1, s výhodou do asi 3:1.
Mohou být také zahrnuty kvartémí substituované bělící aktivátory. .Současné čistící prostředky s výhodou zahrnují kvartémí substituované bělící aktivátory (QSBA) nebo kvartémí substituované perkyseliny (QSP), přičemž výhodnější je dříve uvedený. Preferované QSBA strukturyjsou dále popsány v U. S. Patent 5,686,015 (Willey et al.), vydaném 11. listopadu 1997; U. S. Patent 5,654,421 (Taylor et al.), vydaném 5. srpna 1997; U. S. Patent 5,460,747 (Gosselink et al.), vydaném 24. října 1995; U. S. Patent 5,584,888 (Miracle et al.), vydaném 17. prosince 1996 a U. S. Patent 5,578,136 (Taylor et al.), vydaném 26. listopadu 1996, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference.
Vysoce preferované bělící aktivátory použitelné v tomto vynálezu jsou amidsubstituované aktivátory, jak je popsáno vU. S. Patent 5,698,504, U. S. Patent 5,695,679 a U. S. Patent 5,686,014, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference. Preferované příklady těchto aktivátorů bělení zahrnují: (6-oktanamidokaproyl)oxybenzensulfonát, · (6• « • · • · • · • Λ • · «
I · · <
• · ♦ · »· ·· • · · · • · · · · · • · · · · · · • · · · · • 4 · · · · nonanamidokaproyl)oxybenzensulfonát, (ó-dekanamidokaproyl)oxybenzensulfonát a jejich směsi.
Další užitečné aktivátory jsou popsány vU. S. Patent 5,698,504, U. S. Patent 5,695,679, U. S. Patent 5,686,014, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference a U. S. Patent 4,966,723 (Hodge et al.), vydaném 30. října 1990 a zahrnují aktivátory bezoxazinového typu, jako třeba CóKt kruh, ke kterému je přikondenzována v polohách 1,2 skupina -C(O)OC(R,)=N.
V závislosti na aktivátoru a použití mohou být získány dobré bělící účinky z bělících systémů majících použití při pH od 6 do 13, s výhodou od asi 9,0 do asi 10,5. Typicky se používají aktivátory s elektron přitahujícími skupinami pro neutrální nebo subneutrální pH.· Pro zajištění takového pH lze použít alkálie a pufřovací činidla.
Acyllaktamové aktivátory, podle popisu v U. S. Patent 5,698,504, U. S. Patent 5,695,679 a U. S. Patent 5,686,014, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference, jsou velmi užitečné podle tohoto vynálezu, obzvláště acylkaprolaktamy (viz. například WO 94-28102 A) a acylvalerolaktamy (viz. U. S. Patent 5,503,639 (Willey et al.), vydaný 2. dubna 1996), které jsou zde zahrnuty jako reference.
(b) Organické peroxidy, obzvláště diacylperoxidy
Tyto jsou široce dokumentovány v Kirk Othmer, Encyklopedia of Chemical Technology, vol. 17, John Wiley and Sons, 1982 na str. 27-90 a obzvláště na str. 63 až 72, všechny jsou zde zahrnuty jako reference. Jestliže je použit diacylperoxid, bude to s výhodou ten, který vykazuje minimální negativní vliv na tvorbu skvrn nebo vytváření filmů.
(c) Bělící katalyzátory obsahující kov
Přípravky podle tohoto vynálezu a metody zde obsažené mohou využívat bělících katalyzátorů s obsahem kovu, které jsou užitečné pro použití v bělících přípravcích. Preferovány jsou bělící katalyzátory s obsahem kobaltu a manganu.
Jeden typ katalyzátoru bělení obsahujícího kov je katalytický systém zahrnující kation přechodného kovu s definovanou bělící katalytickou aktivitou, jako je měď, železo, titan, ruthenium, wolfram, molybden nebo mangan, pomocný kovový kation mající žádnou nebo jen malou bělící aktivitu jako jsou zinek nebo hliník a sequestrant, mající definovanou konstantu stability pro kationty katalytického a pomocného kovu, obzvláště ethylendiamintetraoctová kyselina, ethylendiamintetra(methylenfosforečná kyselina) a jejich vodo-rozpustné soli. Takovéto katalyzátory jsou popsány vU. S. Patent 4,430,243 (Bragg), vydaném 2. února 1982.
Komplexy manganu
Je-li to požadováno, přípravky podle tohoto vynálezu mohou být katalyzovány pomocí sloučenin manganu. Takovéto sloučeniny a jejich koncentrace jsou známy v oboru a zahrnují například katalyzátory na bázi manganu popsané v U. S. Patent 5,576,282, U. S. Patent 5,246,621, U. S. Patent 5,244,594, U. S. Patent 5,194,416 a U. S. Patent 5,114,606 a publikace Evropské patentové přihlášky 549,271 Al, 549,272 Al, 544,440 A2 a 544,490 Al; Preferované příklady těchto katalyzátorů zahrnují MnIV2(u-O)3(l,4,7-trimethyl-l,4,7-triazacyklononan)2(PF6)2, Mnm2(u-O)i(u-OAc)2( 1,4,7-trimethyl-1,4,7-triazacyklononan)2(ClO4)2, MnIV4(uO)6( 1,4,7-triazacyklononan)4(ClO4)4, MnfflMnIV4(u-O)i(u-OAc)2( 1,4,7-trimethyl-1,4,7-triazacyklononan)2(ClO4)3, MnIV(l,4,7-trimethyl-l,4,7-triazacyklononan)(OCH3)3(PF6) a jejich směsi. Další bělící katalyzátory na bázi kovů zahrnují katalyzátory popsané v U. S. Patentu 4,430,243 a U. S. Patentu 5,114,611. Použití manganu s různými komplexními ligandy ke zvýšení bělícího účinku jsou také popsány v následujících U. S. Patentech 4,728,455, 5,284,944, 5,246,612, 5,256,779, 5,280,117, 5,274,147, 5,153,161 a 5,227,084.
Komplexy kobaltu
Kobaltové bělící katalyzátory užitečné v tomto vynálezu jsou popsány například v U. S. Patent 5,597,936, U. S. Patent 5,595,967 a U. S. Patent 5,703,030 a M. L. Tobě, „BAse Hydrolysis of Transition-Metal Complexes“, Adv. Inorg. Bioinorg. Mech., (1983), 2, str. 1-94. Nejpreferovanější kobaltový katalyzátor užitečný podle tohoto vynálezu jsou kobaltové soli pentaaminacetátu, mající vzorec [Co(NH3)5OAc]Ty, kde „OAc“ reprezentuje acetátovou jednotku a „Ty“ je anion a obzvláště kobalt pentaaminacetát chlorid [Co(NH3)5OAc]Cl2 stejně jako [Co(NH3)5OAc](OAc)2, [Co(NH3)5OAc](PF6)2, [Co(NH3)5OAc](SO4), [Co(NH3)5OAc](BF4)2 a [Co(NH3)5OAc](NO3)2 (označovaný jako „PAC“).
Tyto kobaltové katalyzátory jsou snadno připravovány známými postupy, jako třeba těmi popsanými v U. S. Patent 5,597,936, U. S. Patent 5,595,967 a U. S. Patent 5,703,030, v Tobeho článku a referencích tam uvedených a vU. S. Patent 4,810,410, J. Chem. Ed. (1989), 66, (12), 1043-45, The Synthesis and Characterization of Inorganic Compounds, W. L. Jolly (PrenticeHall, 1970), str. 461-3, Inorg. Chem., 18, 1497-1502 (1979), Inorg. Chem., 21, 2881-2885 (1982), Inorg. Chem., 18, 2023-2025 (1979), Inorg. Synthesis, 173-176 (1960) a Journal of Physical Chemistry, 56, 22-25 (1952).
Komplexy přechodných kovů s makropolycyklickými rigidními ligandy
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou také výhodně obsahovat jako bělící katalyzátor komplexy přechodných kovů s makropolycyklickými rigidními ligandy. Termín • · · · „makropolycyklický rigidní ligand“ je někdy v níže uvedené diskusi zkracován jako „MLR“. Množství použité v přípravcích je katalyticky účinné množství, vhodně kolem 1 ppb nebo více, například až do asi 99,9 %, typičtěji kolem 0,001 ppm nebo více, s výhodou od asi 0,05 ppm do asi 500 ppm (kde „ppb“ označuje part per bilion podle hmotnosti a „ppm“ označuje part per milion podle hmotnosti).
Vhodné přechodné kovy např. Mn jsou ilustrovány dále. „Makropolycyklický“ označuje že MLR je zároveň makrocyklický a polycyklický. „Polycyklický“ znamená, že je nejméně bicyklický. Termín „rigidní“ označuje fakt, že jde o „superstrukturu“ a „křížem přemostěnou“ strukturu. „Rigidní“ byl definován jako vynucený opak flexibilního: viz, D. H. Busch., Chemical Reviews., (1993), 93, 847-860, zahrnuté zde jako reference. Konkrétněji, „rigidní“ znamená, že MLR musí být určitelně více rigidní než je makrocylus („matečný makrocyklus“), který by byl jinak identický (mající stejnou velikost kruhu a typ a počet atomů v hlavním kruhu) ovšem postrádá superstrukturu (obzvláště spojovací jednotku, s výhodou přemosťující jednotky), nalézající se v MLR. Při určování komparativní rigidity makrocyklů se superstrukturou nebo bez superstruktury, bude hodnotitel používat volnou formu (nikolv formu s vázaným kovem) makrocyklů. Je známo, že rigidita je velmi užitečná při srovnávání makrocyklů, vhodné způsoby určování, měření srovnatelné rigidity zahrnují výpočetní metody (viz. např.: Zimmer, Chemical Reviews, (1995), 95(38), 2629-2648 nebo Hancock et al., Inorganica Chimica Acta, (1989), 164, 73-84.
Preferované MLR podle tohoto vynálezu jsou speciální typ ultrarigidního ligandu,-který je přemostěn. „Přemostění“ je nikoliv limitně popsáno v níže uvedeném 1.11. V 1.11 je přemostěním -CH2CH2-jednotka. Tato jednotka křížem přemosťuje N a N ilustrované níže. Pro o 112' srovnání, „můstek na stejné straně“, pokud by byl přemostěn N a Ν v 1.11, nevedlo by toto přemostění ke „křížovému přemostění“ a nebylo by tedy preferováno.
Vhodné kovy v komplexech rigidního ligandu zahrnují Μη(Π), Μη(ΠΓ), Mn(TV), Mn(V), Fe(H), Fe(HI), Fe(IV), Co(I), Co(D), Co(HI), Ni(I), Νί(Π), Ni(fil), Cu(I), Cu(H), Cu(ffl), Cr(fi), Cr(ffl), Cr(IV), Cr(V), Cr(VI), V(IH), V(IV), V(V), Mo(IV), Mo(V), Mo(VI), W(IV), W(V), W(VI), Pd(II), Ru(II), Ru(III) a Ru(IV). Preferované přechodné kovy v těchto katalyzátorech na bázi přechodných kovů zahrnují mangan, železo a chrom.
Obecněji, MLR (a odpovídající katalyzátory na bázi přechodných kovů) podle tohoto vynálezu vhodně zahrnují:
(a) alespoň jeden makrocyklický hlavní kruh, zahrnující čtyři nebo více heteroatomů a
• · » * (b) kovalentně vázané nekovové superstruktury schopné zvýšit rigiditu makrocyklu, s výhodou vybrány z (i) přemosťující superstruktury, jako třeba spojovací jednotka (ii) křížem přemosťující superstruktury jako křížem přemosťující spojovací jednotka a (iii) jejich kombinace.
Termín „superstruktura“ se zde používá podle definice v literatuře Busch et al., viz. např. články v „Chemical Reviews“.
Preferované superstruktury podle tohoto vynálezu nejen že zvyšují rigiditu matečného makrocyklu, ale také favorizují skládání makrocyklu tak, aby se koordinoval ke kovu ve formě klepet, λ/hodné superstruktury mohou být značně jednoduché, např. mohou být použity spojovací jednotky jako třeba ty, které jsou ilustrovány na níže uvedeném Obr. 1 a Obr. 2.
(CH,)
Obr. 1 kde n je celé číslo, např. od 2 do 8, s výhodou méně než 6, typicky 2 až 4 nebo T (CH,), /
Obr.2 kde m a n jsou celá čísla od 1 do 8, výhodněji od 1 do 3; Z je N nebo CH; a T je kompatibilní substituent, např. H, alkyl, trialkylamonium, halogen, nitro, sulfonát a pod. Aromatický kruh v 1.10 může být nahrazen nasyceným kruhem, ve kterém je atom Z připojen do kruhu obsahujícím N, O, S nebo C.
Vhodné MLR jsou dále (nikoliv vyčerpávajícím výčtem) ilustrovány následující sloučeninou:
Obr.3 • ·
Toto je MLR podle tohoto vynálezu, který je vysoce preferován, křížem přemostěný, methylsubstituovaný (všechny atomy dusíku jsou terciální) derivát cyklámu. Formálně se tento ligand jmenuje 5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan s využitím rozšířeného von Baeyerova sytému. Viz. „A Guide to IUPAC Nomenclature of Organic Compounds: Recommendations 1993“, R. Panico, W. H. Powell a J-C. Richter (Eds.), Blackwell Scientific Publications, Boston, 1993, viz. obzvláště sekci R-2.4.2.1.
Bělící katalyzátory na bázi přechodných kovů a makrocyklických rigidních ligandů (MLR), které jsou vhodné pro použití v prostředcích podle tohoto vynálezu mohou obecně zahrnovat známé sloučeniny, kde jsou v souladu s výše uvedenou definicí stejně jako výhodněji libovolnou z velkého množství nových sloučenin úmyslně navržených pro použití při praní prádla nebo čištění a které jsou (nikoliv vyčerpávajícím způsobem) ilustrovány dále: dichlor-5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (II) diaquo-5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (II) hexafluorofosfát aquo-hydroxy-5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (ΠΙ) hexafluorofosfát diaquo-5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (Π) tetrafluoroborát dichlor-5,12-dimethyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (ΠΙ) hexafluorofosfát dichlor-5,12-di-n-butyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (Π) dichlor-5,12-dibenzyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (Π) dichlor-5-n-butyl-12-methyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (Π) dichlor-5-n-octyl-12-methyl-l,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (II) dichlor-5-n-butyl-12-methyl-1,5,8,12-tetraazabicyklo[6.6.2]hexadekan mangan (Π).
Z praktických důvodů a nikoliv jako výsledek nějakého omezení se přípravky a způsoby čistění podle tohoto vynálezu mohou adjustovat za účelem zajištění řádově alespoň jednu part per sto milionů aktivní částice bělícího katalyzátoru ve vodném pracím roztoku a budou s výhodu zajištěny v koncentracích od 0,01 ppm do asi 25 ppm, výhodněji od 0,05 ppm do asi 10 ppm a nej výhodněji od 0,1 ppm do asi 5 ppm aktivní částice bělícího katalyzátoru v pracím roztoku. Za účelem získání těchto koncentrací v pracím roztoku při automatickém praní prádla, typické přípravky budou obsahovat od asi 0,0005 % do asi 0,2 %, výhodněji od 0,004 % do asi 0,08 % (hmotnosti bělícího přípravku) bělícího katalyzátoru, obzvláště manganového nebo kobaltového katalyzátoru.
(d) ostatní bělící katalyzátory 96 ·..··..· ·..·’.·* *.·*·..·
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou obsahovat jeden nebo více jiných bělících katalyzátorů. Preferované bělící katalyzátory jsou zwitterionické bělící katalyzátory, které jsou popsány v U. S. Patent 5,576,282 (obzvláště 3-(3,4-dihydroisochinolinium)propansulfonát. Další bělící katalyzátory zahrnují kationické bělící katalyzátory popsané v U. S. Patent 5,360,569, U. S. Patent 5,442,066, U. S. Patent 5,478,357, U. S. Patent 5,370,826, U. S. Patent 5,482,515, U. S. Patent 5,550,256 a WO 95/13351, WO 95/13352 a WO 95/13353.
Také jsou jako bělící činidla vhodné perkyseliny jako třeba ftalimidoperoxykaproová kyselina („PAP“). Viz. například U. S. Patent 5,487,818, U. S. Patent 5,310,934, U. S. Patent 5,246,620, U. S. Patent 5,279,757 a U. S. Patent 5,132,431.
Doplňkové detersivní enzymy
Detergenty a čistící prostředky podle tohoto vynálezu mohou také případně obsahovat jeden nebo více typů detergentních enzymů. Takovéti enzymy mohou zahrnovat další proteázy, amylázy, celulázy a lipázy. Tyto materiály jsou známé v oboru a jsou komerčně dostupné pod obchodními názvy. Mohou být zahrnuty do nevodných kapalných detergentních prostředků podle tohoto vynálezu ve formě suspenzí. Další vhodný typ enzymů zahrnuje ty, které jsou ve formě kaší enzymů v neionických surfaktantech, např. enzymy prodávané firmou Novo Nordisk pod obchodní značkou „SL“ nebo mikroenkapsulované enzymy prodávané firmou Novo Nordisk pod obchodním názvem „LDP“. Vhodné enzymy a koncentrace pro použití jsou .popsány v U. S. Patent 5,576,282, U. S. Patent 5,705,464 a U. S. Patent 5,710,115.
Enzymy přidávané do přípravků podle tohoto vynálezu ve formě konvenčních enzymových prilů jsou zde obzvláště preferovány. Tyto prily budou obecně velikosti v rozsahu od 100 do 1000 mikrometrů, výhodněji od 200 do 800 mikrometrů a budou suspendovány v nevodné kapalné fázi přípravku. Bylo zjištěno, že prily v přípravcích podle tohoto vynálezu ve srovnání s jinými formami enzymů, vykazují obzvláště vhodnou enzymovou stabilitu pokud jde o zachování enzymatické aktivity s časem. Přípravky využívající enzymové prily· tedy nemusí obsahovat konvenční stabilizační látky pro enzymy jak tomu musí často být jsou-li použity enzymy ve vodných kapalných detergentech.
Enzymy přidávané do přípravků ovšem mohou být ve formě granulátů, s výhodou Tgranulátů.
„Detersivní enzymy“ ozančuje enzymy, mající čistící efekt, schopnost odstraňování skvrn nebo jiný prospěšný vliv na prané prádlo, čištění tuhého povrchu nebo v detergentních přípravcích pro osobní čištění. Preferované detersivní enzymy jsou hydrolázy jako třeba • · • · proteázy, amylázy a lipázy. Preferované enzymy pro praní prádla zahrnují (výčet není úplný) proteázy, celulázy, lipázy a peroxidázy. Vysoce preferované pro automatické mytí nádobí jsou amylázy a/nebo proteázy, včetně jak v současné době komerčně dostupných typů tak i upravených typů, které, ačkoliv jsou stále více kompatibilní s bělením, mají určitou zbývající schopnost deaktivace při bělení.
Příklady vhodných enzymů zahrnují (výčet není úplný) hemicelulázy, peroxidázy, proteázy, celulázy, xylanázy, lipázy, fosfolipázy, esterázy, kutinázy, pektinázy, keratiriázy, reduktázy, oxidázy, fenoloxidázy, lipoxygenázy, ligninázy, pululanázy, tannázy, pentosanázy, malanázy, β-glukanázy, arabinosidázy, hyaluronidázy, chondroitinázy, lakkázy a známé amylázy nebo jejich směsi.
Příklady těchto vhodných enzymů jsou popsány vU. S. Patent 5,705,464, U. S. Patent
5,710,115, U. S. Patent 5,576,282, U. S. Patent 5,728,671 a U. S. Patent 5,707,950.
Celulázy užitečné podle tohoto vynálezu zahrnují jak bakteriální tak i houbové celulázy. S výhodou budou mít pH optimum mezi 5 až 12 a specifickou aktivitu vyšší než 50 CEVU/mg (Cellulose Viskosity Unit). Vhodné celulázy jsou popsány v U. S. Patent 4,435,307, J61078384 a WO 96/02653, které popisují houbové celulázy, produkované Humicola insolens, Trichoderma, Thielavia a Sporotrichum. EP 739 982 popisuje celulázy, izolované z nových druhů Bacillus. Vhodné celulázy jsou také popsány v GB-A-2.075.028, GB-A-2.095.275, DE-OS-2.247.832 a WO 95/26398.
Příklady těchto celuláz, produkovaných kmenem Humicola insolens (Humicola grisea var. thermoidea), obzvláště kmenem Humicola DSM 1800.
Další vhodné celulázy, mající původ v Humicola insolens, mají molekulovou hmotnost kolem 50 kDa, isoelektrický bod 5,5 a obsahují 415 aminokyselin, a 43 kDa endoglutináza z Humicola insolens, DSM 1800, vykazující celulázovou aktivitu, preferovaná endoglutinázová komponenta má aminokyselinovou sekvenci popsanou vWO 91/17243. Také vhodné celulázy jsou EGin celulázy z Trichoderma longibrachiatum, popsané ve WO 94/21801 Genecorem. Obzvláště vhodné celulázy jsou celulázy mající kladný vliv na péči o barvy. Příklady těchto celuláz jsou celulázy popsané v evropské patentové přihlášce 91202879.2, podané 6. listopadu 1991 (Novo). Carezyme a Celluzyme (Novo Nordisk A/S) jsou obzvláště užitečné. Viz také WO 91/17244 a WO 91/21801. Další vhodné celulázy pro péči o tkaniny a/nebo čištění tkanin jsou popsány ve WO 96/34092, WO 96/17994 a WO 95/24471.
• ·
Celulázy, jsou-li přítomny, jsou normálně obsaženy v čistících prostředcích v koncentracích od 0,0001 % do 2 % čistého enzymu na hmotnost čistícího prostředku.
Peroxidázové enzymy jsou používány v kombinaci se zdrojem kyslíku, např. perkarbonáty, perboráty, persulfáty, peroxidem vodíku a pod., a s fenolickým substrátem jako molekulou zesilující bělení. Jsou používány pro „roztokové bělení“, to jest k prevenci přenosu barev nebo pigmentů odstraněných ze substrátu během prací operace na ostatní substráty v pracím roztoku. Peroxidázové enzymy jsou známy v oboru a zahrnují například křenovou peroxidázu, ligninázu a haloperoxidázu jako jsou chlor- a brom-peroxidázy. Vhodné peroxidázy a detergentní přípravky obsahující peroxidázy jsou popsány v U. S. Patent 5,705,464, U. S. Patent 5,710,115, U. S. Patent 5,576,282, U. S. Patent 5,728,671 a U. S. Patent 5,707,950, PCT mezinárodní přihláška WO 89/099813, WO 89/09813 a v evropské patentové přihlášce EP 91202882.6, podané 6. listopadu 1991 a EP 96870013.8, podané 20. února 1996. Také jsou vhodné lakkázové enzymy.
Zesilovače jsou obecně zahrnuty v koncentracích od 0,1 % do 5 % celkové hmotnosti přípravku. Preferované zesilovače jsou substituovaný fenthiazin a fenoxazin 10fenothiazinpropionová kyselina (PPT), 10-ethylfenothiazin-4-karboxylová kyselina (EPC),. 10fenoxazinpropionová kyselina (POP) a 10-methylfnoxazin (popsaný ve WO 94/12621) a substituované syringáty (C3-C5 substituované alkylsyringáty) a fenoly. Preferovanými zdroji peroxidu vodíku jsou perkarbonát sodný a perborát sodný.
Zmíněné peroxidázy jsou normálně zahrnuty do čistících prostředků v koncentracích od 0,0001 % do 2 % čistého enzymu na hmotnost čistícího prostředku.
Enzymatické systémy mohou být použity jako bělící činidla. Peroxid vodíku můýe být také přítomen přidáním enzymatického systému (to jest enzymu a jeho substrátu), který je schopen generování peroxidu vodíku na začátku nebo během pracího a/nebo máchacího procesu. Tyto enzymové systémy jsou popsány v EP evropské patentové přihlášce 91202655.6, podané 9. října 1991.
Další preferované enzymy, které mohou být zahrnuty v čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, zahrnují lipázy. Vhodné lipázové enzymy pro použití v detergentech zahrnují enzymy, produkované mikroorganismy skupiny Pseudomonas, jako třeba Pseudomonas stutzeri ATCC 19.154 jak je popsáno v Britském patentu 1,372,034. Vhodné lipázy zahrnují lipázy vykazující pozitivní kros-reakce s protilátkou lipázy, produkované mikroorganismem Pseudomonas fluorescent IAM 1057. Tato lipáza je dostupná od Amano Pharmaceutical Co. Ltd., Nagoya, • · · « · « ·
Japonsko pod obchodním názvem Lipase P „Amano“, dále označována jako „Amano-P“. Další vhodné komerční lipázy zahrnují Amano-CEX, lipázy z Chromobacter viscosum, např. Chromobacter viscosum var. lipolyticum NRRLB 3673 od Toyo Jozo Co., Tagata Japonsko; Chromobacter viscosum lipázy z U. S. Biochemical Corp., USA a Disoynth Co., Nizozemí a lipázy ex Pseudomonas gladioli. Obzvláště vhodné lipázy jsou lipázy jako třeba Ml LipaseR a LipomaxR (Gist-Brocades) a LipolaseR a Lipolase UltraR (Novo), které byly shledány velmi účinnými, jsou-li použity v kombinaci s přípravky podle tohoto vynálezu. Také jsou vhodné lipolytické enzymy popsané vEP 258 068, WO 92/05249 a WO 95/22615 od firmy Novo Nordisk a WO 94/03578, WO 95/35381 a WO 96/00292 od firmy Unilever.
Také jsou vhodné kutinázy [EC 3.1.1.50], které mohou být považovány za speciální druh lipásy, jmenovitě lipásy, které nepotřebují mezifázovou aktivaci. Přídavek kutináz do čistících prostředků bylo popsáno např. v WO-A-88/09367 (Genecor), WO 90/09446 (Planí Genetic System) a WO 94/14963 a WO 94/14964 (Unilever).
Lipázy a/nebo kutinázy, jsou-li přítomny, jsou normálně zahrnuty v čistících prostředcích v koncentracích od 0,0001 % do 2 % čistého enzymu na hmotnost čistícího prosředku.
Kromě výše zmíněných lipáz mohou být v prostředcích podle tohoto vynálezu zahrnuty fosfolipázy. Nikoliv vyčerpávající příklady vhodných fosfolipáz zahrnují: EC 3.1.1.32 Fosfolipáza Al, EC 3.1.1.4 Fosfolipáza A2, EC 3.1.1.5 Lysofolopáza, EC 3.1.4.3 Fosfolipáza C, EC 3.1.4.4. Fosfolipáza D. Komerčně dostupné fosfolipázy zahrnují LECITASE® od firmy Novo Nordisk A/S z Dánska a Fosfolipáza A2 od firmy Sigma. Jsou-li zahrnuty fosfolipázy v přípravcích podle tohoto vynálezu, jsou preferovány amylázy. Bez toho aniž bychom se cítili býti vázáni teorií, má se za to, že kombinovaný účinek fosfolipázy a amylázy zajišťují značný účinek při odstraňování skvrn, obzvláště mastných a olejových, škrobových a vysoce barevných skvrn a špíny. S výhodou jsou fosfolipázy a amylázy přítomny v přípravcích podle tohoto vynálezu v poměru hmotností čistého enzymu v rozmezí od 4500:1 do 1:5, výhodněji od 50: J do 1:1.
Vhodnými proteázami jsou subtilisiny, které se získávají z některých kmenů Bacillus subtilis a Bacillus licheniformis (subtilisi BPN a BPN’). Jedna vhodná proteáza se získává z kmene Bacillus, mající maximální aktivitu při pH v rozmezí od 8 do 12, vyvinutá a prodávaná jako ESPERASE® od firmy Novo Industries A/S z Dásnka, dále označovanou jako „Novo“. Příprava tohoto enzymu a enzymů analogických je popsána v GB 1,243,784 (Novo). Proteolytické enzymy také zahrnují modifikované bakteriální šeřino vé proetázy, jako jsou • · · · proteázy popsané v přihlášce evropského patentu 87 303761.8, podané 28. dubna 1987 (obzvláště strany 17, 24 a 98) a které se zde dále nazývají „Proteáza B“ a evropské patentové přihlášce 199,404, Venegas, publikované 29. října 1986, která odkazuje na modifikovaný bakteriální serinový proteolytický enzym, který se zde dále nazývá „Proteáza A“. Vhodná je proteáza nazývaná zde „Proteáza C“, která je variantou alkalické serinové proteázy z Bacillus, ve které je Lysin nahrazen argininem v poloze 27, tyrosin nahrazuje valin v poloze 104, serin nahrazuje asparagin v poloze 123 a alanin nahrazuje threonin v poloze 274. Proteáza C je popsána vEP 90915958.4, odpovídající WO 91/06637, publikované 16. května 1991. Geneticky modifikované varianty, obzvláště Proteázy C, jsou zde také zahrnuty.
Preferovanou proteázou označovanou jako „Proteáza D“ je karbonyl hydroláza jak je popsána vU. S. Patent 5,677,272 a WO 95/10591. Také je vhodná karbonylhydrolázová varianta proteázy, popsaná ve WO 95/10591, mající aminokyselinovou sekvenci odvozenou náhradou několika aminokyselinových zbytků nahrazených v prekurzoru enzymu odpovídajícího pozici +210 v kombinaci s jedním nebo více následujícími zbytky: +33, +62, +67, +76, +100, +103, +104, +107, +128, +129, +130, +132, +135, +156, +158, +164, +166, +167, +170, +209, +215, +217, +218 a +222, kde číslované pozice odpovídají přírodně se vyskytujícímu subtilisinu z Bacillus amyloliquefaciens nebo ekvivalentním aminokyselinovým zbytkům v jiných karbonylhydrolázách nebo subtilisinech, jako třeba subtilisin z Bacillus lentus (dosud neuzavřená patentová přihláška US č. 60/048,550, podané
4. června 1997 a PCT mezinárodní přihlášce č. PCT/IB98/00853).
Také vhodné podle tohoto vynálezu jsou proteázy popsané v patentové přihlášce EP 251 446 a WO 91/06637, proteáza BLAP® popsaná ve WO 91/02792 a její varianty popsané ve WO 95/23221.
Viz. také proteázu pracující při vysokém pH z Bacillus sp. NCIMB 40338, popsané ve WO 93/18140 A (Novo). Enzymatické detergenty zahrnující proteázy, jeden nebo více enzymů, a reverzibilní proteázový inhibitor, jsou popsány ve WO 92/03529 A (Novo). Je-li to požadováno, jsou dostupné proteázy se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy jak je popsáno ve WO 95/07791 (Proster & Gamble). Rekombinantní trypsinová proteáza pro detergenty podle tohoto vynálezu je popsána ve WO 94/25583 (Novo). Další vhodné proteázy jsou popsány v EP 516 200 (Unilever).
Obzvláště užitečné proteázy jsou popsány v PCT publikacích: WO 95/30010, WO 95/30011, WO 95/29979. Vhodné proteázy jsou komerčně dostupné jako ESPERASE®, ALCALASE®, DURAZYM®, SAVINASE®, EVERLASE® a KANNASE®, všechny od Novo
101
Nordisk A/S z Dánska a jako MAXATASE®, MAXACAL®, PROPERASE® a MAXAPEM®, všechny od firmy Genecor International (dříve Gist-Brocades of the Netherlands).
Tyto proteolytické enzymy, jsou-li přítomny, jsou zabudovány v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu v koncentracích od 0,0001 % do 2 %, s výhodou od 0,001 % do 0,2 %, výhodněji od 0,005 % do 0,1 % čistého enzymu na hmotnost přípravku.
Amylázy (a a/nebo β) mohou být zahrnuty pro odstraňování karbohydrátových skvrn. WO 94/02597 popisuje čistící prostředky, které obsahují mutantní amylázy. Viz. také WO 95/10603. Další amylázy známé pro jejich použití v čistících prostředcích zahrnují jak a- tak i β-amylázy. α-Amylázy jsou známé v oboru s zahrnují ty, které jsou popsány v U. S. Patent 5,003,257, EP 252,666, WO/91/00353, FR 2,676,456, EP 285,123, EP 525,610, EP 368,341 a britská patentová specifikace č. 1,296,839 (Novo). Další vhodné amylázy jsou amylázy se zvýšenou stabilitou, popsané vWO 94/18314 a WO 96/05295, Genencor a amylázové varianty mající další modifikace v bezprostředních předchůdcích, dostupné od firmy Novo Nordisk A/S, popsané ve WO 95/10603. Také jsou vhodné amylázy popsané v EP 277 216.
Příklady komerčních α-amylázových produktu jsou Purafect Ox Am od firmy Genencor a Termamyl®, Ban®, Fungamyl® a Duramyl®, všechny dostupné od firmy Novo Nordisk A/S Dánsko. WO 95/26397 popisuje další vhodné amylázy: a-amylázy charakteristické tím, že mají specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotách v rozmezí od 25 °C do 55 °C a při pH v rozmezí od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas®. Vhodné jsou varianty výše uvedených enzymů, popsané ve WO 96/23873 (Novo Nordisk). Další amylolitické enzymy se zlepšenými vlastnostmi pokud jde o úroveň aktivity a kombinace termostability a vyšší úrovně aktivity jsou popsány ve WO 95/35382.
Tyto amylolytické enzymy, jsou-li přítomny, jsou zabudovány v čistících prostředcích podle tohoto vynálezu v úrovních od 0,0001 % do 2 %, výhodněji od 0,00018 % do 0,06 %, výhodněji od 0,00024 % do 0,048 % čistého enzymu na hmotnost přípravku.
Výše zmíněné enzymy mohou být libovolného původu, jako třeba rostlinného, živočišného, bakteriálního, houbového a kvasinkového. Původ může být dále mesofilní nebo extreemofilní (psychrofilní, psychrotropní, termofilní, barofilní, alkalofilní, acidofilní, halofilní, a pod.). Mohou být použity čištěné nebo nečištěné formy těchto enzymů. Dnes je běžnou praxí modifikovat divoké typy enzymů pomocí technik proteinového/genetického inženýrství za účelem optimalizace jejich působení v detergentech pro praní prádla a/nebo přípravcích pro péči o tkaniny podle tohoto vynálezu. Například, mohou být navrženy takové
102 varianty, že jejich kompatibilita vůči běžně se vyskytujícím ingrediencím v těchto přípravcích. Alternativně, mohou být varianty navrženy tak, aby bylo dosaženo optimálního pH, stability vůči bělení nebo chelantu, katalytické aktivity a pod., aby se co nejlépe hodily pro zymýšlené aplikace.
Obzvláště by měla být věnována pozornost citlivosti aminokyselin k oxidaci v případě stability vůči bělení a povrchovým nábojům kvůli kompatibilitě se surfaktantem. Izoelektrický bod takovýchto enzymů může být modifikován substitucí některých nabitých aminokyselin, např. zvýšení isoelektrického bodu může pomoci zvýšit kompatibilitu s anionickými surfaktanty. Stabilita enzymů může být dále zvýšena vytvořením např. dalších solných můstků a zesílením míst vázajících vápník ke zvýšení stability chelantu.
Tyto opční detersivní enzymy, jsou-li přítomny, jsou normálně zahrnuty v čistících prostředcích v koncentracích od 0,0001 % do 2 % čistého enzymu na hmotnost čistícího přípravku. Enzymy mohou být přidány jako oddělená jednotlivá ingredience (prily, granuláty, stabilizované kapaliny a pod. obsahující jeden enzym) nebo jako směsi dvou nebo více enzymů (např. kogranuláty).
Další vhodné detersivní ingredience, které mohou být přidány do přípravků podle tohoto vynálezu, jsou činidla bránící oxidaci enzymů. Příklady těchto činidel bránících oxidaci enzymů jsou ethoxylované tetraethylenpolyaminy.
Rozsah enzymových materiálů a prostředky pro jejich zavedení do syntetických detergentních prostředků je také popsán ve WO 9307260 (Genencor International), WO 8908694 a U. S. Patent 3,553,139, z 5. ledna 1971 (McCarty et al.). Enzymy jsou dále popsány v U. S. Patent 4,101,457 a U. S. Patent 4,507,219. Enzymové materiály užitečné pro kapalné detergentní přípravky a jejich zabudování do těchto přípravků jsou popsány v U. S. Patent 4,261,868.
Enzymové stabilizátory
Enzymy pro použití v detergentech podle tohoto vynálezu mohou být stabilizovány různými technikami. Techniky stabilizace enzymů jsou popsány a příklady uvedeny v U. S. Patent 3,600,319, EP 199,405 a EP 200,586. Systémy pro stabilizaci enzymů jsou také popsány např. vU. S. Patent 3,519,570. Užitečný Bacillus sp. AC13, poskytující proteázy, xylanázy a celulázy, je popsán ve WO 9401532. Enzymy zde použité mohou být stabilizovány přítomností vodo-rozpustných zdrojů iontů vápníku a/nebo hořčíku ve finálním přípravku, které zajišťují tyto ionty pro enzymy. Vhodné stabilizátory enzymů a jejich koncentrace pro použití jsou popsány v U. S. Patent 5,705,464, U. S. Patent 5,710,115 a U. S. Patent 5,576,282.
Plnidla
Detergentní a čistící prostředky podle tohoto vynálezu s výhodou obsahují jeden nebo více detergentních plniv nebo plnivových systémů. Jsou-li přítomny, přípravky podle tohoto vynálezu budou typicky obsahovat nejméně 1 % plniva, s výhodou od 5 %, výhodněji od asi 10 % do asi 80 %, s výhodou do asi 50 %, výhodněji do asi 30 % hmotnosti detergentního plniva. Nižší nebo vyšší koncentrace plniva, však nejsou tímto vyloučeny.
Preferovaná pojivá pro použití v detergentních a čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, obzvláště přípravků na mytí nádobí, zalamují vodo-rozpustné plnidla, (např. polykarboxyláty) podle popisu v U. S. Patent 5,695,679, JJ. S. Patent 5,705,464 a U. S. Patent
5,710,115. Další vhodné polykarboxyláty jsou popsány v U. S. Patent 4,144,226, U. S. Patent 3,308,067 a U. S. Patent 3,723,322. Preferované polykarboxyláty jsou hydroxykarboxyláty obsahující až tři karboxylové skupiny v molekule, konkrétněji titráty.
Anorganická nebo fosfor obsahující detergentní plniva zahrnují, výčet není úplný, soli alkalických kovů, amonné soli a alkanolamonné soli polyfosfátů (příklady jsou tripolyfosfáty, pyrofosfáty a sklovité polymerní meta-fosfáty), fosfonáty (viz. například U. S. Patent 3,159,581, U. S. Patent 3,213,030, U. S. Patent 3,422,021, U. S. Patent 3,400,148 a U. S. Patent 3,422,137), kyselina listová, silikáty, uhličitany (včetně bikarbonátů a sesquikarbonátů), sulfáty a aluminosilikáty.
Ovšem, v některých oblastech jsou vyžadovány nefosfátové plnidla. Je důležité, že přípravky podle tohoto vynálezu překvapivě dobře fungují dokonce i v přítomnosti tzv. „slabých“ plnidel (ve srovnání s fosfáty) jako jsou citrát nebo v tzv. „underbuilt“ situacích, ke kterým může dojít v přítomnosti zeolitů nebo vrstvených silikátových plnidel.
Vhodné silikáty zahrnují vodo-rozpustné sodné silikáty s poměrem SiC>2:Na2O v rozmezí od 1,0 do 2,8, s preferovaným poměrem od 1,6 do asi 2,4 a obzvláště preferovány jsou poměry kolem 2,0. Silikáty mohou být buď ve formě bezvodých solí nebo hydratovaných solí. Sodný silikát s poměrem SiC>2.Na2O kolem 2,0 je nejvíce preferován. Silikáty, jsou-li přítomny, jsou s výhodou přítomny v detergentech a čistících přípravcích popsaných v tomto vynálezu v koncentracích od asi 5 % do přibližně 50 % hmotnosti přípravku, výhodněji od asi 10 % do asi 40 % hmotnosti.
Částečně rozpustná nebo nerozpustná plnidla, vhodná pro použití v detergentních a čistících přípravcích podle tohoto vynálezu, obzvláště granulámí detergentní přípravky, > · · • · • · · ··
104 zahrnují krystalické vrstvené silikáty, s výhodou krystalické vrstvené sodné silikáty (obzvláště vodo-rozpustné) podle popisu vU. S. Patent 4,664,839 a sodné aluminosilikáty (vodonerozpustné). Jsou-li přítomny v detergentních nebo čistících prostředcích podle tohoto vynálezu, jsou tato plnidla typicky přítomna v koncentracích od asi 1 % do asi 80 % hmotnosti, s výhodou od 10 % do asi 70 % hmotnosti, nejvýhodněji od asi 20 % do asi 60 % hmotnosti přípravku.
Krystalické vrstvené sodné silikáty mající obecný vzorec NaMSixC>2X+i yH2O, kde M je sodík nebo vodík, x je číslo od 1,9 do asi 4, s výhodou od 2 do 4, nejvýhodněji 2 a y je číslo od 0 do 20, s výhodou 0, mohou být použity v přípravcích podle tohoto vynálezu. Krystalické vrstvené sodné silikáty tohoto typu jsou popsány v EP-A-0164514 a způsoby jejich přípravy jsou popsány v DE-A-3417649 a DE-A-3742043. Nejpreferovanější materiál je deltaNa2SiOs, dostupný od firmy Etoechst AG jako NaSKS-6 (obvykle zkracovaný jako „SKS-6“). Narozdíl od zeolitových plnidel, toto NaSKS-6 silikátové plnidlo neobsahuje hliník. NaSKS-6 má delta-Na2SiO5 morfologii vrstveného silikátu. SKS-6 je vysoce preferovaný vrstvený silikát pro použití podle tohoto vynálezu, ovšem v přípravcích popsaných v tomto vynálezu mohou být použity i další vrstvené silikáty, jako třeba ty které mají obecný vzorec NaMSixO2x+ryH2O, kde M je sodík nebo vodík, x je číslo od 1,9 do 4, s výhodou 2 a y je číslo od 0 do asi 20, s výhodou 0. Další různé silikáty od firmy Hoechst zahrnují NaSKS-5, NaSKS-7 a NaSKS-11) jako alfa, beta a gama formy. Jak bylo zmíněno výše, delta forma Na2SiO5 (NaSKS-6 form) je nejpreferovanější pro použití v tomto vynálezu. Další silikáty mohou být také použity jako např. silikát hořčíku, který může sloužit zostřovací činidlo v granulámí ch kondenzacích, jako stabilizační činidla pro kyslíkatá bělidla a jako komponenta do systému na řízení pěnivosti.
Krystalický vrstvený sodný silikátový materiál se s výhodou nachází v granulámích detergentních přípravcích jako částice v těsné směsi s tuhou, vodo-rozpustného ionizovatelného materiálu. Tuhý vodo-rozpustný materiál je s výhodou vybrán z organických kyselin, organických nebo anorganických solí a jejich směsí.
Aluminosilikátová pojivá jsou velmi důležitá ve většině v současné době prodávaných granulámích detergentních přípravcích a mohou být také významnou součástí plniva u kapalných detergentních formulací. Aluminosilikátová plnidla mají empirický vzorec:
[Mz(A102)y]-xH20 ·· ··.
• · · • · · · ·
105 kde z a y jsou celá čísla nejméně 6, molární poměr z ku y je v rozsahu od 1,0 do asi 0,5 a x je celé číslood 15 do asi 264. S výhodou aluminosilikátová plnidla jsou aluminosilikátové zeolity, mající vzorec:
Na2[(A102)2(SÍ02)y -H2O když z a y jsou alespoň 6, molární poměr z ku y je od 1,0 do 0,5 a x je alespoň 5, s výhodou 7,5 až 276, výhodněji od 10 do 264. Aluminosilikátová plniva jsou přednostně v hydratované formě a s výhodou krystalické, obsahující od 10 % do asi 28 %, výhodněji od 18 % do asi 22 % vody ve vázané formě.
Tyto aluminosilikátové iontoměničové materiály mohou být krystalické nebo amorfní pokud jde o strukturu a mohou to být přirozeně se vyskytující nebo derivované aluminosilikáty. Způsoby výroby aluminosilikátových iontoměničových materiálů jso.u popsány vU. S. Patent 3,985,669. Preferované syntetické krystalické aluminosilikátové ionexové materiály užitečné podle tohoto vynálezu jsou dostupné pod označeními Zeolite A, Zeolite B, Zeolite P, Zeolit X, Zeolite MAP a Zeolite HS a jejich směsi. V obzvláště preferovaném provedení mají aluminosilikátové iontově-výměnné materiály tento vzorec:
Na12[(AlO2)12(SÍO2)12]-xH2O kde x je od asi 20 do asi 30, s výhodou 27. Tento materiál je známý jako zeolit A. Dehydratovaé zeolity (x = 0-10) mohou být také užitečné. S výhodou má aluminosilikát velikost částic od 0,1 do 10 mikrometrů. Zeolit X má následující vzorec:
Na86[(AlO2)86(SiO2)106]-27H2O
Citrátová plnidla, např. kyselina citrónová a její rozpustné soli (obzvláště soli sodné) jsou polykarboxylová plnidla obzvláštního významu pro kapalné detergentní formulace s velkým výkonem, díky jejich dostupnosti z obnovitelných zdrojů a jejich biodegradovatelnosti. Citráty mohou být také použity v granulámích přípravcích, obzvláště v kombinaci se Zeolitem a/nebo vrstveném silikátovém plnidlem. Oxydisukcináty jsou také užitečné v těchto přípravcích a kombinacích.
Také 3,3-dikarboxy-4-oxa-l,6-hexanedionáty jsou vhodné pro zde popsané detergentní přípravky, stejně jako příbuzné sloučeniny popsané v U. S. Patent 4,566,984. Užitečné plnidla na bázi jantarové kyseliny zahrnují C5 - C2o alkyl a alkenyljantarové kyseliny a jejich soli. Obzvláště preferovanou sloučeninou tohoto typu je dodecenyljantarová kyselina. Konkrétní příklady jantarových plnidel zahrnují: laurylsukcinát, myristylsukcinát, palmitylsukcinát, 2dodecenylsukcinát (preferovaný), 2-pentadecenylsukcinát a pod. Laurylsukcináty jsou • · · · preferovaná plnidla této skupiny a jsou popsány v evropské patentové přihlášce 86200690.5/0.200,263, publikované 5. listopadu 1986.
Mastné kyseliny, např. C12 až C|g monokarboxylové kyseliny mohou být také zabudovány do přípravků, a to samotné nebo v kombinaci s dříve zmíněnými plnidly, obzvláště citrátovými nebo sukcinátovými plnidly, za účelem zajištění další plnidlové aktivity. Toto použití mastných kyselin obecně povede ke snížení pěnění, což musí být vzato v úvahu při formulaci přípravku.
Disperganty
Jedna nebo více vhodných polyalkyleniminových dispergantů může být zabudováno do čistících prostředků podle tohoto vynálezu. Příklady takovýchto vhodných dispergantů mohou být nalezeny v evropské patentové přihlášce 111,965, 111,984 a 112,592, U. S. Patent 4,597,898, U. S. Patent 4,548,744 a U. S. Patent 5,565,145. Ovšem v pracích prostředcích podle tohoto vynálezu mohou být použity jakékoliv disperganty špíny a jílu nebo činidla zabraňující jejich zpětnému usazování.
Kromě toho jsou pro použití podle tohoto vynálezu vhodné polymerní disperguj ící činidla, zahrnující polymerní karboxyláty a polyethylenglykoly. Nenasycené monomemí kyseliny, které mohou být polymerizovány za vzniku vhodných polymerních polykarboxylátů zahrnují kyselinu akrylovou, kyselinumaleinovou (nebo maleinanhydrid), kyselinu fumarovou, kyselinu itakonovou, kyselinu akonitovou, kyselinu mesakonovou, kyselinu citrakonovou a kyselinu methylenmalonovou. Obzvláště vhodné polymerní polykarboxyláty mohou být odvozeny od kyseliny akrylové. Tyto polymery založené na kyselině akrylové, užitečné podle tohoto vynálezu, jsou vodo-rozpustné soli polymerizo váné kyseliny akrylové. Průměrná molekulová hmotnost těchto polymerů v kyselé formě se s výhodou pohybuje od asi 2000 do 10000, výhodněji od asi 4000 do 7000 a nejvýhodněji od 4000 do 5000. Vodorozpustné soli těchto polymerů kyseliny akrylové mohou zahrnovat, např. soli alkalických kovů, amonné a substituované amonné soli. Vhodné polymery tohoto typu jsou známé materiály. Použití polyakrylátů tohoto typu v detergentních přípravcích bylo popsáno např. v U. S. Patent 3,308,067.
Kopolymery akrylové/maleinové kyseliny mohou být také použity jako preferované složky disperguj ících činidel a činidel zabraňujících opětnému usazení dispergované špíny. Takovéto materiály zahrnují vodo-rozpustné soli kopolymerů akrylové a maleinové kyseliny. Průměrná molekulová hmotnost těchto kopolymerů v kyselé formě se s výhodou pohybuje v rozmezí od asi 2000 až 100000, výhodněji od 5000 do 75000, nejvýhodněji od 7000 do • ·
107
65000. Poměr akrylátových a maleinových segmentů v těchto kopolymerech se bude obecně pohybovat od asi 30:1 do asi 1:1, výhodněji od asi 10:1 do 2:1. Vodo-rozpustné soli těchto kopolymerů akrylové a maleinové kyseliny mohou zahrnovat např. soli alkalických kovů, amonné a substituované amonné soli. Rozpustné kopolymery akrylové a maleinové kyseliny tohoto typu jsou známé materiály v oboru, které jsou popsány v evropské patentové přihlášce č. 66915, publikované 15. prosince 1982, stejně jako v EP 193,360, publikované 3. září 1986, které také popisují tyto polymery zahrnující hydroxypropylakrylát. Další užitečné dispergační činidla zahrnují terpolymery maleinové kyseliny/akrylové kyseliny/vinylalkoholu. Tyto materiály jsou také popsány vEP 193,360, včetně např. 45/45/10 terpolymeru akrylové kyseliny/maleinové kyseliny/vinyl alkoholu.
Další polymemí materiál, který může být zahrnut je polyethylenglykol (PEG). PEG může vykazovat účinky dispergujícího činidla stejně jako napomáhá odstraňování špíny a jejímu opětnému usazování. Typické molekulové hmotnosti se pohybují v rozsahu od asi 500 do 100000, s výhodou od asi 1000 do asi 50000, výhodněji od asi 1500 do 10000.
Mohou být použita polyaspartátová a polyglutamátová dispergační činidla, obzvláště ve spojení se zeolitovými plnidly. Dispergující činidla jako jsou polyaspartát mají s výhodou molekulovou hmotnost (průměr) kolem 10000.
Činidla uvolňující špínu
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou případně zahrnovat jedno nebo více činidel uvolňujících špínu. Jsou-li použity, budou tato činidla zahrnovat kolem 0,01 %, s výhodou od asi 0,1 %, výhodněji od asi 0,2 % do asi 10 %, s výhodou do 5 %, výhodněji do asi 3 % hmotnosti přípravku. Nikoliv limitující příklady vhodných činidel uvolňujících špínu jsou popsány vU. S. Patent 5,728,671, 5,691,298, 5,599,782, 5,415,807, 5,182,043, 4,956,447,
4,976,879, 4,968,451, 4,925,577, 4,861,512, 4,877,896, 4,771,730, 4,711,730, 4,721,580,
4,000,093, 3,959,230 a 3,893,929 a evropské patentové přihlášce 0 219 048.
Další vhodná činidla uvolňující špínu jsou popsány vU. S. Patent 4,201,824,
4,240,918, 4,525,524, 4,579,681, 4,220,918 a 4,787,989, EP 279,134 A, EP 457,205 A a v DE 2,335,044.
Chelatující činidla
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou také obsahovat chelatující činidla, která slouží k chelataci alkalických kovů a kovových nečistot, které by jinak vedly k deaktivaci bělícího činidla. Užitečná chelatující činidla mohou zahrnovat aminokarboxyláfy, fosfonáty, aminofosfonáty, polyfunkčně substituované aromatické chelatující činidla a jejich směsi.
• ·
Další příklady vhodných chelatujících činidel a koncentrací jejich použití jsou.popsány v U.
S. Patent 5,705,464, 5,710,115, 5,728,671 a 5,576,282.
Přípravky podle tohoto vynálezu také obsahují vodo-rozpustné soli nebo kyselé formy methylglycin dioctové kyseliny (MGDA) jako chelant nebo koplnidlo užitečné např. nerozpustnými plnidly typu zeolity, vrstvené silikáty a pod.
Jsou-li použita, chelatující činidla budou obecně představovat od asi 0,1 % do asi 15 %, výhodněji od 0,1 % do asi 3,0 % hmotnosti detergentního přípravku podle tohoto vynálezu.
Činidla potlačující pěnění
Další vhodné ingredience jsou činidla potlačující vznik pěny, jejichž příklady zahrnují silikony a směsi silikonů. Příklady činidel potlačujících vznik pěny jsou uvedeny v U. S. Patent 5,707,950 a 5,728,671. Tato činidla pro potlačení pěnivosti jsou obvykle použity v koncentracích od 0,001 % do 2 % hmotnosti přípravku, s výhodou od 0,01 % do 1 % hmotnosti.
Změkčující činidla
Do pracích prostředků podle tohoto vynálezu mohou být také zahrnuty změkčovadla látek. Anorganická změkčující činidla jsou např. smektické jíly popsané v GB-A-1 400 898 a U. S. 5,019,292. Organická změkčující činidla zahrnují vodo-rozpustné terciální aminy jak je popsáno v GB-A-1 514 276 a EP-B-011 340 a jejich kombinace s Ci2 až C14 kvartemími amonnými solemi jsou popsány v EP-B-026 527 a EP-B-026 528 a amidy se dvěma dlouhými řetězci podle popisu vEP-B-0 242 919. Další užitečné organické složky systémů změkčujících tkaniny zahrnují vysokomolekulámí polyethylenoxidové materiály podle popisu vEP-A-0 299 575 a 0 313 146.
Obzvláště vhodná činidla změkčující tkaniny jsou popsány v U. S. Patent 5,707,950 a 5,728,673.
Koncentrace smektických jílů jsou normálně v rozsahu od 2 % do 20 %, výhodněji od 5 % do 15 % hmotnosti, přičemž se materiál přidával ve formě na vzduchu sušeného materiálu ke zbytku přípravku. Organická činidla pro změkčování látek, jako jsou vodonerozpustné terciální aminy nebo amidy se dvěma dlouhými alkalickými řetězci jsou zabudovány v koncentracích od 0,5 % do 5 % hmotnosti, normálně od 1 % do 3 % hmotnosti, zatímco vysokomolekulámí polyethylenoxidové materiály a vodo-rozpustné kationické materiály se přidávají v koncentracích od 0,1 % do 2 %, normálně od 0,15 % do 1,5 % hmotnosti. Tyto materiály se normálně přidávají ke sprejováním usušené části přípravku,
109 ačkoliv v některých případech může být pohodlnější přidávat je jako suché míchané částice nebo sprej ovány jako roztavená kapalina na další tuhé složky přípravku.
Biodegradovatelné kvartérní amonné sloučeniny podle popisu v EP-A-040 562 a EPA-239 910 byly prezentovány jako alternativy k tradičně používaným amonium chloridům popř. amonium methylsulfátům se dvěma dlouhými alkyly.
Nikoliv vyčerpávající příklady aniontů kompatibilních s funkcí změkčovače pro kvartérní amonné soli a aminové prekursory zahrnují chlorid a methylsulfát.
Inhibitory přenosu barviva
Detergentní přípravky podle tohoto vynálezu mohou také zahrnovat sloučeniny pro inhibici přenosu barev (rozpuštěných popř. suspendovaných) z jedné látky na druhou během pracího procesu popřípadě během kondicionující operace barvených tkanin.
Polymerní činidla bránící přenosu barev
Detergentní přípravky podle tohoto vynálezu mohou také zahrnovat od 0,001 % do 10 %, s výhodou od 0,01 % do asi 2 %, výhodněji od 0,05 % do 1 % hmotnosti polymemího činidla bránícího přenosu barev. Zmíněná polymerní činidla bránící přenosu barev jsou normálně zabudovány do detergentního přípravku za účelem inhibice barev z jedné tkaniny na druhou. Tyto polymery mají schopnost komplexovat nebo adsorbovat nestálé barvy vymyté ven z tkaniny před tím, než dojde k usazení barev na jiném kusu prádla.
Obzvláště vhodná polymerní činidla pro inhibici přenosu barev jsou polyamin Noxidové polymery, kopolymery N-vinylpyrrolidonu a N-vinylimidazolu, polyvinylpyrrolidonové polymery, polyvinyloxazolidony a polyvinylimidazoly a jejich směsi. Příklady těchto činidel zabraňujících přenosu barev jsou popsány vU. S. Patent 5,707,950 a 5,707,951.
Další vhodná činidla inhibující přenos barev zahrnují (výčet není úplný) zesíťované polymery. Zesíťované polymery jsou polymery, jejichž hlavní řetězce jsou navzájem propojeny do určitého stupně; tato propojení mohou být chemické nebo fyzikální povahy, pravděpodobně s aktivními skupinami na skeletu nebo na rozvětvení; zěsíťované polymery byly popsány v Journal Polymer Science, vol. 22, str. 1035-1039.
V jednom provedení vynálezu jsou zesíťované polymery udělány tak, aby tvořily trojdimensionální rigidní strukturu, která může zachycovat barvivo ve vytvořených pórech, vzniklých trojdimensionální strukturou. V dalším provedení zesíťované polymery zachycují barvivo pomocí bobtnání. Tyto zesíťované polymery jsou popsány v dosud nevyřízené evropské patentové přihlášce 94870213.9.
• · • to to· ·· to · « • ♦ · · · to « to » · to <
·· · ·
110
Přídavek těchto polymerů také zesiluje účinky enzymů podle tohoto vynálezu.
Úprava pH a pufry
Mnohé detergentní a čistící prostředky podle tohoto vynálezu budou pufrovány, to znamená, že jsou relativně rezistentní ke změnám pH v přítomnosti kyselých znečištění. Ovšem, jiné přípravky podle tohoto vynálezu mohou mít výjimečně nízkou pufrovací kapacitu nebo mohou být v podstatě nepufrovány. Techniky kontroly a změny pH při doporučených užitných koncentracích obecně zahrnují použití nejen pufrů, ale také dalších alkálií, kyselin, systémů na skokovou změnu pH, dvojitých oddělených nádob a pod., a jsou velmi dobře známi odborníkům v oboru.
Preferované ADD přípravky podle tohoto vynálezu zahrnují složky pro úpravu pH, vybrané z vodo-rozpustných alkalických anorganických solí a vodo-rozpustná organická pojidla jak jsou popsány v U. S. Patent 5,705,464 a 5,710,115.
Činidla pro péči o materiál
Preferované ADD přípravky mohou obsahovat jedno nebo více činidel pro péči o materiál, která jsou účinná jako inhibitory koroze a/nebo činidla proti matnému zákalu podle popisu v U. S. Patent 5,705,464, 5,710,115 a 5,646,101.
Jsou-li přítomna, tato činidla pro ochranu materiálů jsou s výhodou zahrnuta v nízkých koncentracích od asi 0,01 % do asi 5 % ADD přípravku.
Další materiály
Detersivní ingredience nebo přídavné materiály případně zahrnuté v přípravcích podle tohoto vynálezu mohou obsahovat jeden nebo více materiálů pro asistování nebo zesílení čistícího účinku, pro zpracování čištěného substrátu nebojsou určeny pro estetické vylepšení přípravku. Doplňkové látky, které mohou být také obsaženy v přípravku v koncentracích obvyklých v oboru pro daný typ sloučenin; doplňkové materiály představují obecně od 30 % do asi 99,9 %, s výhodou od 70 % do asi 95 % hmotnosti přípravku, zahrnují další aktivní složky jako jsou třeba nefosfátové pojidla, barevné skvrny, protimatové a protikorozní činidla, barvy, plniva, germicidy, zdroje alkalinity, hydrotropy, anti-oxidanty, parfémy, rozpouštěcí činidla, nosiče, procesní látky, pigmenty a činidla pro kontrolu pH podle popisu v U. S. Patent
5,705,464, 5,710,115, 5,698,504, 5,695,679, 5,686,014 a 5,646,101.
Způsoby čištění
Kromě zde popsaných způsobů čištění tkanin, nádobí a dalších tuhých povrchů a části těla při osobní hygieně, obsahuje také proces předzpracování tkaniny, která byla poskvrněná nebo zašpiněná, zahrnující kontakt zmíněných skvrn s vysoce koncentrovanou formou ·* *·
• · čistícího prostředku před samotným praním této tkaniny s využitím konvenčního vodného pracího roztoku. Výhodně, čistící prostředky zůstávají v kontaktu se špínou nebo skvrnou po dobu 30 sekund až 24 h před tím, než je tkanina vyprána obvyklým konvenčním způsobem.Výhodněji zpracování předem bude trvat od 1 do 180 minut.
Následující příklady jsou míněny jako příklady přípravků podle tohoto vynálezu, ovšem nejsou nezbytně zamýšleny jako limitující z hlediska rozsahu tohoto vynálezu.
Ve všech následujících příkladech Proteáza označuje proteázovou variantu zahrnující substituci aminokyselinového zbytku s jiným přírodním aminokyselinovým zbytkem v pozici odpovídající polohám 101G/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K subtilisinu Bacillus amyloliquefacience. Proteáza může být substituována s libovolnou další proteázovou variantou podle tohoto vynálezu s prakticky podobnými výsledky v následujících příkladech.
V příkladec čistících prostředků podle tohoto vynálezu, konentrace proteázového enzymu je vyjádřena jako čistý enzym ku celkové hmotnosti přípravku, koncentrace jiných enzymů je vyjádřena hmotností surového materiálu k celkové hmotnosti přípravku pokud není specifikováno jinak, ostatní ingredience jsou vyjádřeny na celkovou hmotnost přípravku.
Ve všech následujících příkladech označuje Amyláza amylázovou variantu podle tohoto vynálezu.
V následujících příkladech jsou použity zkratky, které jsou známé odborníkům v oboru.
112
Příklady provedení vynálezu
Příklady 1-7
Kapalné čistící prostředky na pevné povrchy
Příklad číslo
Složka 1 2 3 4 5 6 7
Proteáza ‘ 0,05 0,05 0,20 0,02 0,03 0,10 0,03
Proteáza - - - - - - 0,20 .0,1
Amyláza3 - 0,002 0,002 0,0005 0,04 0,0008 0,005
Chelant** - - - 2,90 2,90 ‘ - -
Citrát - - - - - 2,90 2,90
LAS - 1,95 - 1,95 - 1,95 . -
AS 2,00 - 2,20 - 2,20 - 2,20
AES 2,00 - 2,20 - 2,20 - 2,20
Aminoxid 0,40 - 0,50 - 0,50 - 0,50
Hvdrotrop - 1,30 - 1,30 - 1,30 . -
Rozpouštědlo *** Voda a minority - 6,30 6,30 6,30 6,30 dop.lnit na 100 % 6,30 6,30
2Proteáza jiná než proteáza1 včetně dalších proteáz užitečných podle tohoto vynálezu **Na4 ethylendiamindioctová kyselina * * *Diethylenglykolmonohexylether **** Všechny formulace jsou adjustovány na pH 7
V příkladech 6 a 7, libovolné kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezu, jsou substituovány za Proteázu1 a Proteázu2, s v podstatě stejnými výsledky.
·· ·· » * <
f · ··*· ·«
113 • ·
Příklady 2-7 Příklad číslo:
Přípravky na mytí nádobí 2 3 _ 5 6 7
Proteáza1 0,05 0,50 0,02 0,40 0,10 0,03
Proteáza2 - - - - 0,40 0,1
Amyláza 3 0.002 1 0,002 0,0005 0,04 0,0008 0,005
TFAA 1 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90
AES 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00
2-methylundekanová kyselina 4,50 4,50 — 4,50 4,5Ó —
C12 ethoxy (2) karboxylát 4,50 4.50 t 4,50 4,50 4,50 4,50
C12 alkoholethoxylát (4) 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
Aminoxid 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
Hydrotrop 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 . 2,00
Ethanol 4,00 4,00 4,00 4,00 4;00 4,00
Mg4“* (jako MgCl2) 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20
Ca4-*- (jako CaCI2) 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40
Voda a minority doplnit do 100 %
2 , .. i Proteáza jiná než proteáza včetně dalších zde popsaných proteáz užitečných podle tohoto
vynálezu **** Všechny formulace jsou adjustovány na pH 7
V příkladech 6 a 7, libovolné kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezujsou substituovány za Proteázu1 a Proteázu2, s v podstatě stejnými výsledky.
Příklad 8
Přípravek na mytí nádobí (A & B ADW, C kapalina)
Složka A B c
STPP 17,5 - -
Citrát 15,0 -
Natrium polyakrylát (MW 4500) 0,80 - -
Acusol 480 N - 5,10 -
Uhličitan draselný 8,30 -
Uhličitan sodný - 8,50 -
2.Ir K silikát 3,99 - -
2.0r Na Silikát 2,00
• · • · · · • · ’ • · ’
114
3.2r Na silikát 5,18 - -
tristearát hlinitý 0,10 - -
neionický surfaktant - 2,50 - ·
NaAEO.ÓS - - 24,70
glukosamid - - 3,09
C10E8 - - .4,11
Betain - - 2,06
aminoxid - - 2,06
hořčík jako oxid - - 0,49
hydrotrop - - 4,47
natrium hypochlorit jako AvCf 1,15 - -
Amyláza1 0,002 0,03 0,005
Proteáza1 0,01 0,43 0,05
Doplněno na 100 %
Příklad 9
Kapalné prostředky na mytí nádobí (obzvláště vhodné do japonských podmínek)
Složka A B
AE1.45 24,69 24,69
N-kokoyl-N-methylglukamin 3,09 3,09
aminoxid 2,06 2,06
betain 2,06 2,06
neionický surfaktant 4,11 4,11
hydrotrop 4,47 · 4,47
hořčík 0,49 0,49
ethanol 7,2 7,2
LemonEase 0,45 0,45
Geraniol/BHT - 0,60/0,02
Amyláza3 0,03 0,005
Proteáza1 0,01 0,43
Doplněno na 100 %
115 • fc · · · · • · · • · · ·· fcfc ·· ·· • · · · · ♦ · • fcfc·· · · · *
• fcfc · • 9 · · • fcfc · · ·· · •fc ·· · · ··
Příklad 10
Granulámí přípravky na automatické praní prádla
Složka A B c
kyselina citrónová 15,0 - -
citrát 4,0 29,0 15,0
akrylát/methakrylát kopolymer 6,0 - 6,0
kyselina akrylová/kyselina maleinová kopolymer - 3,7 -
za sucha přidaný uhličitan 9,0 - 20,0
silikát alkalických kovů 8,5 17,0 9,0
parafín - 0,5 -
benzotriazol - 0,3 -
•5 Amyláza 1,6 1,6 1,6
Proteáza1 0,2 0,1 0,06
Peroxyuhličitan (AvO) 1,5 - -
peroxyboritan monohydrát - 0,3 1,5
peroxyboritan tetrahydrát - 0,9 -
tetraacetylethylendiamin 3,8 4,4 -
diethylentrieminpentamethylfosforečná kys. 0,13 0,13 0,13
(Mg sůl)
alkylethoxysulfát -3 krát ethoxylovaný 3,0 - -
alkylethoxypropoxyneionický surfaktant - 1,5 -
činidlo proti pěnění 2,0 - -
Olin SLF18 neionický surfaktant - - 2,0
Sulfát doplněno na 100 %
Příklad 11
Kompaktní detergentní přípravky A až F na mytí nádobí s vysokou hustotou (0,96 kg/1) podle tohoto vynálezu:
Složka A B c D E F
STPP • 51,4 51,4 44,3
Citrát 17,05 * 49,6 40,2
Karbonát 17,50 14,0 20,0 8,0 33,6
Hydrogenuhličitan • «. 26,0
Silikát 14,81 15,0 8,0 25,0 3,6
Metasilikát 2,50 4,5 4,5
PB1 9,74 7,79 7,79
PB4 - - _ -
• · • · • ·
• · · · • · « • · « • · · · • · · ·
116
Peroxyuhličitan - 11,8 4,8
Neionický 2,00 130 1,50 2,6 1,9 5,9
TAED 239 - • 3,8 1,4
HEDP 1,00 - - •
DETPMP 0,65 •
Mn TACN • - 0,008
PAAC 0,008 0,008 w
Parafín 0,50 0,38 0,38 0,6 -
Proteáza* 0,1 0,06 0,05 0,03 0,07 0,01
Amyláza·1 1,5 1,5 1,5 2,6 2,1 0,8
BTA 0,30 0,22 0,22 03 0,3 · 0,3
Polykarboxylát 6,0 4,2 0,9
Parfém 0,2 0,12 0,12 0,2 0,2 0,2
Síran / voda 20,57 1,97 2,97 3,6 4,5 3,9
pH (1 % roztok ) 11,0 11,0 11,3 9,6 10,8 10,9
Příklad 12
Příklady granulámích detergentních přípravků na mytí nádobí A až F o hustotě 1,02 kg/1 podle tohoto vynálezu:
Složka A B C D E F
STPP 30,00 33,5 27,9 29,62 33,8 22,0
Uhličitan 30,50 30,50 30,5 23,00 34,5 45,0
Silikát 7,40 7,50 12,6 13,3 3,2 6,2
Metasilikát 4,5
Peroxyuhličitan - 4,0
PBI 4,4 4,5 4,3
NaDCC 2,00 0,9
Neionický 1,0 0,75 1,0 1,90 0,7 0,5
TAED 1,00 0,9
PAAC 0,004
Parafín 0,25 0,25 -
Proteáza* 0,05 0,06 0,025 0,L 0,02 0,07
Amyláza3 0,38 0,64 0,46 0,6
BTA 0,15 0,15 0,2 ·
Parfém 0,2 0,2 0,05 0,1 0,2
Síran/voda 23,45 16,87 22,26 30,08 21,7 25/J
• · • 9 • ·
Příklad 13
Tabletové detergentní přípravky A až H podle tohoto vynálezu jsou připravovány kompresí granulámího detergentního přípravku při tlaku 13 KN/cm2 s využitím standardního dvanáctihlavého rotujícího lisu:
117
Složky A B C D E F G H
STPP 48,8 54,7 38,2 to 52,4 56,1 36,0
Citrát 20,0 - 35,9 to •
Karbonát 20,0 5,0 14,0 15,4 8,0 23,0 20,0 28,0
Silikát 15,0 14,8 15,0 12,6 23,4 2,9 4p 4,2
Proteáza1 0,05 0/19 0,05 0,03 0,06 0,03 0,03 o,i
Amyláza’ 1,5 lf5 1,5 0,85 1,9 θ,4 2,1 0,3
PB1 14,3 7,8 11,7 12,2 6,7 •8,5
PB4 • 22,8 to 3,4
Peroxyuhličitan to to to 10,4
Neionický 1,5 2,0 2,0 1,0 4,2 4,0 6,5
PAAC '0,016 0,009
MnTACN «. to to 0,007 w
TAED 2,7 2,4 to 2,1 0,7 1,6
HEDP b° • 0,93 to θ,4 0,2
DETPMP 0,7 to
Parafín 0,4 0,5 0,5 0,55 to to 0,5
BTA 0,2 0,3 0,3 0,33 0,3 0,3 op to
Polykarboxylát 4,0 4,9 0,6 0,8 to
PEG * to 2,0 • 2,0
Glycerín • to to O,4 0,5
Parfém 0,05 0,20 0,2 0,2 0,2
Síran/voda 17,4 14,7 15,74 to 11,3
hmotnost tablety 20p 25g 20g 30g 18g 20fi 25g 24,0
pH(l% roztok) 10,7 10,6 10,7 10,7 10,9 LL2 11,0 10,8
Příklad 14
Přípravek pro automatické mytí nádobí ve tvaru tablety s výplní
118
Složka A (% R. M.) B(gR. M.) C(gR. M.)
Těleso tablety
uhličitan sodný 15,348 3,500 5,25
STPP (12 % H2O) 46,482 10,600 9,93
Gran HEDP 0,789 0,180 0,28
SKS 6 6,578 1,500 2,25
silikát 7,016 1,600 1,65
PB1 10,743 2,450 3,68
Termamyl 2x PC A 0,491 0,112 0,17
Savináza 0,526 0,120 0,18
Plurafac 3,508 0,800 0,9
BTA 0,263 0,060 0,09
PEG 1,140 0,260 -
PEG 4000 - - 0,39
Winog 0,439 0,100 •0,15
Parfém 0,101 0,023 0,01
Výplň
kyselina citrónová 0,987 0,225 0,23
hydrogenuhličitan 2,600 0,593 0,59
Sandolan EHRL barvivo 0,007 0,0017 0,0017
PEG 400/4000 0,395 0,090 -
PEG 400 - - 0,02
PEG 4000 - - 0,08
Proteáza1 0,05 0,268 0,27
Amyláza3 1,412 0,322 .0,32
Granulámí přípravek na čištění tkanin
Granulámí přípravek na čištění tkanin podle tohoto vynálezu obsahuje účinné množství jednoho nebo více proteázových enzymů, s výhodou od asi 0,001 % do asi 10 %, výhodněji od asi 0,005 % do asi 5 %, ještě výhodněji od asi 0,01 % do asi 1 % hmotnosti proteázového enzymu na hmotnost přípravku (viz. U. S. Patent 5,679,630, Příklady).
• · • · * ·
119
Příklad 15
Granulámí přípravek na čištění tkanin
Příklad číslo:
Složka A B C D
Proteáza1 0,10 0,20 0,03 0,05
Proteáza2 - - 0,2 0,15
3 Amyláza 0,002 0,0005 0,04 0,005
C13 lineární alkylbenzensulfonát 22,00 22,00 22,00 · 22,00
Fosfát (jako tripolyfosfát sodný) 23,00 23,00 23,00 23,00
Uhličitan sodný 23,00 23,00 23,00 23,00
Silikát sodný 14,00 14,00 14,00 14,00
Zeolit 8,20 8,20 8,20 8,20
Chelant (diethylentriaminpentaoctová 0,40 0,40 0,40 0,40
kyselina)
Síran sodný 5,50 5,50 5,50 ' 5,50
Voda doplněno na 100 %
1
Proteáza jiná než Proteáza včetně dalších proteáz užitečných podle tohoto vynálezu.
V příkladech 15C a D může být namísto Proteázy1 a Proteázy2 použita libovolná kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezu, přičemž výsledky jsou v podstatě stejné.
Příklad 16
Granulámí přípravek pro čištění tkanin
Složka A Příklad číslo: B C D
Proteáza1 0,10 0,20 0,03 0,05
Proteáza2 - - 0,2 0,15
Amyláza3 0,002 0,0005 0,04 0,005
C12 lineární alkylbenzensulfonát 22,00 22,00 22,00 22,00
120 • ·
2-butyloktanová kyselina 4,00 4,00 4,00 4,00
C12-C14 sekundární (2,3)alkylsulfát 5,00 5,00 5,00 5,00
sodná sůl
Citrát sodný 5,00 5,00 5,00 5,00
Optický zjasňovač 0,10 0,10 0,10 0,40
Síran sodný 17,00 17,00 17,00 17,00
Plnidlo, Voda, minority doplněno na 100 %
2Proteáza jiná než 'Proteáza včetně dalších proteáz užitečných podle tohoto vynálezu.
V příkladech 16C a D může být namísto Proteázy1 a Proteázy2 použita' libovolná kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezu, přičemž výsledky jsou v podstatě stejné.
Příklad 17
Granulární přípravek na čištění tkanin
Složka Příklad číslo: A B
Lineární alkylbenzensulfonát 11,4 10,70
Lůj alkylsulfát 1,80 2,40
C14-C15 alkylsulfát 3,00 3,10
C14-C15 alkohol 7krát ethoxylovaný 4,00 4,00
Lůj alkohol 11 krát ethoxylovaný 1,80 1,80
Dispergant 0,07 0,1
Silikonová kapalina 0,80 0,80
Citrát trisodný 14,00 15,00
Kyselina citrónová 3,00 2,50
Zeolit 32,50 32,10
Maleinová kys/akrylová kys. kopolymer 5,00 5,00
Diethylentriaminpentamethylen fosforečná 1,00 0,20
kyselina • · · ·
121 • · • · · ·
Proteáza1 0,1 0,01
Lipáza 0,36 0,40
Amyláza3 0,30 0,30
Silikát sodný 2,00 2,50
Síran sodný 3,50 5,20
Polyvinylpyrrolidon 0,30 0,50
Peroxyborát 0,5 1
Fenolsulfonát 0,1 0,2
Peroxidáza 0,1 0,1
Minority až do 100 až do 100
Příklad 18 Granulární přípravky na čištění tkanin Složka Příklad číslo: A B
sodný lineární C12 alkylbenzensulfonát 6,5 8,0
Síran sodný 15,0 18,0
Zeolit A 26,0 22,0
Nitrilotriacetát sodný 5,0 5,0
Polyvinylpyrrolidon 0,5 0,7
T etraacety lethy lendiamin 3,0 3,0
Kyselina boritá 4,0 -
Peroxyboritan 0,5 1
Fenolsulfonát 0,1 0,2
Proteáza1 0,02 0,05
Amyláza3 0,005 0,002
Plnidla (např. silikáty, uhličitany, až do 100 až do 100
parfémy, voda) • · • · • · • ·
122
Příklad 19
Kompaktní granulámí přípravek na čištění tkanin
Složky Hmotnostní %
Alkylsulfát 8,0
Alkylethoxysulfát 2,0
Směs C25 a C45 alkohol 3-krát až 7-krát ethoxylovaný 6,0
Amid polyhydroxymastné kyseliny 2,5
Zeolit 17,0
Vrstvený silikát/citrát 16,0
Uhličitan 7,0
Maleinová kyselina/akrylová kyselina kopolymer 5,0
Polymer uvolňující špínu 0,4
Karboxymethylcelulóza 0,4
Poly(4-vinylpyridin)-N-oxid 0,1
Kopolymer vinylimidazolu a vinylpyrrolidonu 0,1
PEG2000 0,2
Proteáza1 0,03
Lipáza 0,2
Celuláza 0,2
-2 Amyláza 0,005
T etraacetylethylendiamin 6,0
Perkarbonát 22,0
Ethylendiamindijantarová kyselina 0,3
Potlačovač pěnění 3,5
Disodná sůl 4,4’-bis(2-morfolino-4-anilino-s-triazin-6- 0,25
ylamino)stilben-2,2 ’ -disulfonátu
Disodná sůl 4,4’-bis(2-sulfostyril)bifenylu 0,05
Voda, Parfém a minority doplnit do 100
• · • ·
123
Příklad 20
Granulámí přípravek na čištění tkanin
Složky Hmotnostní %
Lineární alkylbenzensulfonát 7,6
Cj6-Ci8 alkylsulfát 1,3
Cu a C15 alkohol 7-krát ethoxylovaný 4,0
Kokoalkyldimethylhydroxyethylamonium chlorid 1,4
Disperzant 0,07
Silikonová kapalina 0,8
Citrát trisodný 5,0
Zeolit 4A 15,0
Maleinová kyselina/akrylová kyselina kopolymer 4,0
Diethylentriaminpentamethylenfosforečná kyselina 0,4
Peroxyboritan 15,0
Tetraacetylethylen diamin 5,0
Smektickýjíl 10,0
Poly(oxyethylen) (MW 300,000) 0,3
Proteáza1 0,02
Lipáza 0,2
Amyláza3 0,3
Celuláza 0,2
Silikát sodný 3,0
Uhličitan sodný 10,0
Karboxymethylcelulóza 0,2
Zjasňovače 0,2
Voda, parfém a minority doplnit do 100 • · • · ·
124
Příklad 21
Granulámí přípravek na čištění tkanin
Složky
Lineární alkylbenzensulfonát
Lůj alky lsulfát
C14 a C15 alkohol 7-krát ethoxylovaný
C12 a Ci5 alkoholethoxysulfát 3-krát ethoxylovaný
Kokoalkyldimethylhydroxyethylamonium chlorid
Zeolit
Citrát
Uhličitan
Silikát
Maleinová kyselina/akrylová kyselina kopolymer Diethylentriaminpentamethylenfosforečná kyselina Karboxymethylcelulóza
Polymer uvolňující špínu
Proteáza1
Lipáza
Celuláza
Amyláza
Perborát tetrahydrát
Perborát monohydrát
T etraacetylethy lendiamin
Diethylentriaminpentamethylfosforečná kyselina
Síran hořečnatý
Zjasňovač
Parfém, silikon a potlačovače pěnění
Minority
Hmotnostní %
6,92
2,05
4.4 0,16
1.4 20,2
5.5 15,4 3,0 4,0 0,4 0,31 0,30 0,1 0,36 0,13 0,005 11,64 8,7 5,0 0,38 0,40 0,19 0,85 doplnit do 100
Příklad 22 Granulární přípravky na čištění tkanin
Složka A B C
Základní složky granulí
LAS/AS/AES (63/35) 9,95 - -
LAS/AS/AES (70/30) 12,05 7,70
Aluminosilikát 14,06 15,74 17,10
Uhličitan sodný 11,86 12,74 13,07
Silikát sodný 0,58 0,58 0,58
NaPAA tuhá 2,26 2,26 1,47
PEG tuhé 1,01 1,12 0,66
Zjasňovače 0,17 0,17 0,11
DTPA - - 0,70
Sulfát 5,46 6,64 4,25
DC-1400 deareant 0,02 0,02 0,02
Vlhkost 3,73 3,98 4,33
Minority 0,31 0,49 0,31
BOT nasprej ováný
Neionický surfaktant 0,50 0,50 0,50
Složky aglomerátů
LAS/AS (25/75) 11,70 9,60 10,47
Aluminosilikát 13,73 11,26 12,28
Uhličitan 8,11 6,66 7,26
PEG 4000 0,59 0,48 0,52
Vlhkost/minority 4,88 4,00 4,36
Funkční aditiva
Uhličitan sodný 7,37 6,98 7,45
Peroxyboritan 1,03 1,03 2,56
AC základní povlak - 1,00 -
NOBS - - 2,40
Polymer uvolňující špínu 0,41 0,41 0,31
• · · ·
126 « · · • · · · • ···· ♦ ·· • · · · · ·
Celuláza 0,33 0,33 0,24
Proteáza1 0,1 0,05 0,15
Amyláza3 0,002 0,005 0,04
AE-vločky 0,40 0,40 0,29
Kapalina nasprej ováná
Parfém 0,42 0,42 0,42
Neionické sprej ování 1,00 1,00 0,50
Miority doplnit do 100
Příklad 23
Granulámí prostředek na čištění tkanin
A B
Surfaktant
-Na LAS 6,40 -
-KLAS - 9,90
-AS/AE3S 6,40 4,39
-TAS 0,08 0,11
-C24AE5 3,48 -
-Genagen - 1,88
-N-kokoyl-N-methyl 1,14 2,82
glukamin (lin)
hydroxyethyl amonium chlorid 1,00 1,40
Pojidlo
-Zeolit 20,59 13,39
-SKS-6 10,84 10,78
-Kyselina citrónová 2,00 -
Pufr
-Uhličitan 9,60 12,07
-Hydrogenuhličitan 2,00 2,00
-Síran 2,64 -
-Silikát 0,61 0,16
Polymer
-Akrylová kyselina/maleinová kyselina 1,17 1,12
kopolymer (Na)
-CMC 0,45 0,24
127 ··· »· ·· ·· ·* ··· · · · ··· • · · · · · · · · · · ·« ·· ·· ·· *·
-Polymer 0,34 0,18
-Hexamethylendiamin tetra-E24 1,00 1,00
ethoxylát, dikvartemizovaný s methyl chloridem
Enzymy
-Proteáza1 0,03 0,03
(% čistého enzymu) -Celuláza 0,26 0,26
-Amyláza 0,65 0,73
-Lipáza 0,27 0,15
Bělidlo
-TAED (100%) 3,85 3,50
-Fenolsulfonát ester N-nonanoyl-6- - 2,75
aminokapronová kyselina -Peroxyuhličitan 16,20 18,30
-HEDP 0,48 0,48
-EDDS 0,30 0,30
Různé
-Jablečné částice 2,20 + bicarb.
-Zjasňovač 15/49 0,077/0,014 0,07/0,014
-Zinečný ftalokyaninsulfonát 0,0026 0,0026
-Polydimethylsiloxan s trimethylsilylovou 0,25 0,24
koncovou blokující skupinou -Mýdlo 1,00
-Parfém 0,45 0,55
CELKEM 100 100
• » • ·
128 • · « ·
Příklad 24
Granulární prostředek na čištění tkanin
A % B %
Surfaktant
Na LAS 6,8 0,4
KLAS - 10,9
FAS 0,9 0,1
AS 0,6 1,5
C25AE3S 0,1 -
AE5 4,2 -
N-kokoyl-N-methylglukamin - 1,8
Genagen - 1,2
C8-10 dimethylhydroxyethyl - 1,0
amonium chlorid
Pojidlo
SKS-6 3,3 9,0
Zeolit 17,2 18,9
Kyselina citrónová 1,5 -
Pufr
Uhličitan 21,10 15,0
Hydrogenuhličitan sodný - 2,60
Síran 15,2 5,5
Kyselina jablečná - 2,9
Silikát 0,1 -
Polymer
Akrylová kyselina/maleinová kyselina 2,2 0,9
kopolymer (Na)
Hexamethylendiamin tetra-E24 ethoxylát 0,5 0,7
dikvartemizovaný s methylchloridem
Polymer 0,1 0,1
CMC 0,2 0,1
Enzymy
Proteáza1 0,02 0,05
(% čistého enzymu)
Lipáza 0,18 . 0,14
Amyláza 0,64 0,73
Celuláza 0,13 0,26
• · · · 9t * * · « ·» »♦ β « · · · * « T · ·
190 · t * ··*·« · * « <
Z V 9 9 »·· »» · · · 9 · ·
Bělidlo
TAED 2,2 2,5
Fenolsulfonát ester N-nonanoyl-6- - 1,96
aminokapronové kyseliny
Peroxyuhličitan sodný - 13,1
PB4 15,6 -
EDDS 0,17 0,21
MgS04 0,35 0,47
HEDP 0,15 0,34
Různé
Zjasňovač 0,06 0,04
Zinečný ftalokyaninsulfonát 0,0015 0,0020
Polydimethylsiloxan s trimethylsilylovou 0,04 0,14
koncovými blokujícími skupinami
Mýdlo 0,5 0,7
Parfém 0,35 0,45
Tečky 0,5 0,6
Příklad 25
Granulámí detergentní přípravky pro praní prádla 25 A-C jsou obzvláště užitečné v evropských pračkách a připravují se v souladu s tímto vynálezem:
Složka A B C
LAS 7,° 5,61 4,76
TAS - - b57
C45AS 6,0 2,24 3,89
C25E3S 1.0 / 0,76 1,18
C45E7 - 2,0
C25E3 4,0 5,5 -
• · ·
130 ·»·· ·* » · v · * · • β • ·· »· 0· k 9 9 4 ♦ r ·*
QAS 0.8 r 2,0 2/0
STPP - -
Zeolit A 25,0 19/5 19,5
kyselina citrónová 2,θ 2,0 2/0
NaSKS-6 8,0 10,6 10/6
Uhličitan 1 8,0 10.0 f ¥
MA/AA i.o 2,6 1,6
CMC 0/5 0,4 0,4 t
PB4 - 12,7 -
Peroxyuhličitan - - 19,7
TAED 3,1 5/0
Citrát 7/0 - -
DTPMP 0,25 0,2 0,2
HEDP 0,3 0,3 0,3
QEA 1 0,9 1,2 1,0
1 Proteáza 0,02 0,05 0,035
Lipáza 0,15 0,25 0,15
Celluláza 0,28 0/28 0,28
Amyláza 0/4 0,7 0,3
PVPI/ PVNO o,4 - o,i
fotoaktivované bělidlo (ppm) 15 ppm 27 ppm 27 ppm
• · · · • · • ·
131
Zjasňovač 1 0,08 0,19 0,19
Zjasňovač 2 - 0,04 0,04
Parfém θ,3 0,3 0,3
Šumivé granule (kyselina mléčná 40%, hydrogenuhličitan sodný 40 %, uhličitan sodný 20% 15 15 5
Silikonové protipěnivé činidlo θ,5 2,4 2.4
Minority/inerty do 100 %
Příklad 26
Následující formulace jsou příklady přípravků podle tohoto vynálezu, které mohou být buď ve formě granulí nebo ve formě tablet.
Složka 26
Základní produkt
C45 AS/TAS 3,0
LAS 8,0
C25AE3S 1,0
NaSKS-6 9,0
C25AE5/AE3 5,0
Zeolit A 10,0
SKS-6 (1) (za sucha přidávaný) 2,0
MA/AA 2,0
citrónová kyselina 1,5
EDDS 0,5
HEDP 0,2
PB1 10,0
NACA OBS 2,0
TAED 2,0
uhličitan . - 8,0
síran 2,0
Amyláza3 0,3
Lipáza 0,2
Proteáza1 0,02
Minority (zjasňovač/SRP1/ CMC/fotobělidlo/MgS04/ PVPVI/potlačovač pěnění/ 0.5 r
Parfém
0,5
132
Příklad 27
Následující granulámí prostředky pro praní prádla 27 A-E jsou obzvláště užitečné v japonských pračkách a jsou připravovány v souladu s tímto vynálezem:
Složka A B C D E
LAS 23,57 23,57 21,67 21,68 21,.68
FAS 4,16 4,16 3,83 3,83 3,83
Neionický surfaktant 3,30 3,30 2,94 3,27 3,27
Bis(hydroxyethyl)methyl alkyl amoniumchlorid 0,47 0,47 1,20 1,20 1,20
SKS-6 7,50 7,50 5,17 5,76 5,06
Polyakrylátový kopolymer (m. h. 11000) (kyselina maleinová/ kyselina akrylová v poměru 4:6) 7,03 7,03 14,36 14,36 14,36
Zeolit 11,90 11,40 10,69 1 1,34 11,34
Uhličitan 14,90 14,82 11,71 1 1,18 1 1,18
Silikát 12,00 12,00 12,37 12,38 12,38
Proteáza 0,016 0,016 0,046 0,046 0,046
Lipáza - - 0,28 - -
Amyláza2 - - 0,62 - -
Celuláza - - 0,48 - 0,70
NOBS 3,75 3,75 2,70 2,70 2,70
PBl 3,53 - 2,60 - -
• · • · · · • 9
133
Peroxyuhličitan sodný - 4,21 - 3.16 3,16
SRP 0,52 0,52 0,70 0,70 0,70
Zjasňovač 0,31 0,31 0,28 0,28 0,50
AE- vločky 0,17 0,20 0,17 0,17 0,17
Polydimethylsiloxan - - 0,68 0,68 0,68
Parfém 0,06 0,06 0,08 - -
Parfém - - - 0,23 0,23
Hydrofobní srážený oxid křemičitý 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30
PEG4000 0,19 0,19 0,17 0,17 0,17
' Minority/inerty do 100 % I
Kapalné prostředky pro čištění tkanin
Kapalné prostředky pro čištění tkanin podle tohoto vynálezu s výhodou zahrnují účinné množství jednoho nebo více proteázových enzymů, s výhodou od 0,0001 % do asi 10 %, výhodněji od 0,001 % do asi 1 % a nejvýhodněji od asi 0,001 % do asi 0,1 % hmotnosti aktivního enzymu na hmotnost přípravku (Viz. U. S. Patent 5,679,630 Příklady).
Příklad 28
Kapalný prostředek na čištění tkanin
Example No.
Složka A B C D E
Proteázal 0,05 0,03 0,30 0,03 0,10
Proteáza 2 - - - 0,1 0,20
Amyláza 3
C12-C14 alkylsulfát sodný 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00
2-butyloktanová kyselina 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
citrát sodný l,00 1,00 1,00 1,00 1,00
C10 alkohol ethoxylát (3) 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00
Monoethanolamin 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
Voda/propylenglykol/ethanol (100:1:1) doplněno na 100 % • ·
134 2Proteáza jiná než 'Proteáza včetně dalších proteáz užitečných podle tohoto vynálezu.
2
V příkladech 28D a E může být namísto Proteázy a Proteázy použita libovolná kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezu, přičemž výsledky jsou v podstatě stejné.
Příklady 29
Kapalné prostředky na čištění tkanin
Složka Příklad č. A B
C12-C14 alkenyljantarová kyselina 3,0 8,0
Monohydrát kyseliny citrónové 10,0 15,0
Sodný C12-C15 alkylsulfát 8,0 8,0
Sodný sulfát C12-C15 alkohol 2-krát ethoxylovaný - 3,0
C12-C15 alkohol 7-krát ethoxylovaný - 8,0
C12-C15 alkohol 5-krát ethoxylovaný 8,0 -
Diethylentriaminpenta(methylenfosforečná kyselina) 0,2 -
Kyselina olejová 1,8 -
Ethanol 4,0 4,0
Propandiol 2,0 2,0
Proteáza1 0,01 0,02
-3 Amyláza 0,005 0,002
Polyvinylpyrrolidon 1,0 2,0
Potlačovač pěnění 0,15 0,15
NaOH až do pH 7,5
Peroxyboritan 0,5 1
Fenolsulfonát 0,1 0,2
Peroxidáza 0,4 0,1
Voda a minority doplnit do 100 % • · 9 · * · • · • ·
135
Příklad 30
Kapalné přípravky pro čištění tkanin
Příklad č.
Složka 28
NaLAS(100%) 16
Neodol 21,5
Citrát 6,8
EDDS 1,2
Dispergant 1,3
Peroxyboritan 12
Fenolsulfonátový ester N-nonanoyl-6-aminokapro- 6 nové kyseliny
Proteáza1 (% čistého enzymu) 0,03
Amyláza3 0,40
Carezym 0,03
Rozpouštědlo (BPP) 18,5
Polymer 0,1
Elhličitan 10
FWA 15 0,2
TiO2 0,5
PEG 8000 0,4
Parfém 1,0-1,2
Potlačovač pěnění 0,06
Voda a minority až do 100 %
Příklad 31
Kapalné prostředky pro čištění tkanin
Složky Příklady č. A B
Dl H2O 38,43 -
MEA 0,48 9,0
NaOH 4,40 1,0
Pdiol 4,00 10,0
Kyselina citrónová 2,50 2,0
136
DTPA
FWA Premix (Br 15/MEA/NI23-9)
Na C25AE1.80S AE3S (H)
C11.8HLAS Neodol EtOH Ca formiát
Borax premix (Borax/MEA/Pdiol/citronová kys.)
CIO APA
TEPA 105
FA 02-18
Neptune LC
Barvivo
Celuláza
Amyláza3
Proteáza1
DC 2-3597
Řepkový FA
Voda a minority
Příklady 32
Kapalný přípravek pro čištění tkanin
Složka
NaOH
Pdiol
Kyselina citrónová
DTPA
FWA Premix (Br 15/MEA/NI 23-9)
AE3S (H)
LAS (H)
Neodol
EtOH
Ca formiát
Kyselina boritá
Jíly
Amyláza
Proteáza1 ···· · · · · ·· *· ·· « · « ··« · « » * ·· · · ···· · ·· ·
0,50 1,0
0,15 0,15
23,50 -
- 4,0
3,00 14,0
2,00 6,0
0,50 2,0
0,10 0,10
2,50 -
1,50 -
1,20 -
5,00 -
0,50 -
0,0040 0,0015
0,053 0,2
0,15 0,2
0,1 0,1
0,12 0,2
6,50 4,0
až do 100 %
5.50 6,90
1.50
1.50 0,15
2.50 13,0 2,00
3.50 0,10 1,00 4,00 0,15 0,02 • * · · • · • to • · • ·
137
Mastné kyseliny Voda a minority
16,50 až do 100%
Příklad 34
Kapalné přípravky na čištění tkanin
Následující kapalný přípravek je obzvlášť vhodný pro japonské pračky a připravuje se
pomocí tohoto vynálezu.
Složka 34
AE2.5S 15,00
AS 5,50
N-kokoyl N-methylglukamin 5,00
Neionický surfaktant 4,50
Kyselina citrónová 3,00
Mastná kyselina 5,00
Báze 0,97
Monoethanolamin 5,10
1,2-Propandiol 7,44
EtOH 5,50
HXS 1,90
Kyselina boritá 3,50
Ethoxylovaný tetraethylen 3,00
pentaimin
SRP 0,30
Proteáza1 0,069
3 Amyláza 0,06
Celuláza 0,08
Lipáza 0,18
Zjasňovač 0,10
Minority/inerty do 100 %
Příklad 35
Kapalné přípravky na čištění tkanin
Následující kapalný přípravek je obzvlášť vhodný pro japonské pračky pro praní jemného prádla a připravuje se pomocí tohoto vynálezu.
Složka 34
AE2.5S 2,16
AS 3,30
N-kokoyl N-methylglukamin 1,10
Neionický surfaktant 10,00
Kyselina citrónová 0,40
Mastná kyselina 0,70
Báze 0,85
Monoethanolamin 1,01
138
1,2-Propandiol 1,92
EtOH 0,24
HXS 2,09
Proteáza1 0,01
-3 Amyláza Minority/inerty do 100 % 0,06
Kusové čistící prostředky na tkaniny
Kusové čistící prostředky na tkaniny podle tohoto vynálezu vhodné pro ruční mytí zašpiněných tkanin typicky obsahují účinné množství jednoho nebo více proteázových enzymů, s výhodou od asi 0,001 % do asi 10 %, výhodněji od asi 0,01 % do asi 1 % hmotnosti aktivního proteázového enzymu na hmotnost přípravku (viz. U. S. Patent 5,679,630 Příklady).
Příklad 36
Kusové čistící prostředky na tkaniny
Příklady č.
Proteáza 1 0.3 i - θ,ι ' 0,02
Proteáza 2 - - 0,4 θ,ι
Amyláza 3 0,01 0,02 0,002 0,005
C12-C16 alkylsulfát sodný 20,0 20,0 20,0 20,00
C12_C14 N-methylglukamid 5,0 5,0 5,0 · 5,00
C11 -C13 alkylbenzensulfonát sodný 10,0 10,0 10,0 10,00
uhličitan sodný 25,0 25,0 25,0 25,00
tripolyfosfát sodný 7,0 7,0 7,0 7,00
Zeolit A (0,1-10μ) 5,0 5,0 5,0 • 5,00
Karboxymethylcelulóza 0,2 0,2 0,2 0,20
Polyakrylát (m. h. 1400) 0,2 0,2 0,2 0,20
kokosový monoethanolamid 5,0 5,0 5,0 5,00
Zjasňovač, parfém 0,2 0,2 0,2 0,20
CaSO4 l.O 1 i,o 1,0 ι,οο’
MgSO4 1,0 1,0 i,o 1,00
Voda 4,0 4,0 4,0 4,00
Plnidlo * doplněno do 100 % *Může být vybrán z konvenčních materiálů jako jsou CaCCty talek, jíl, silikáty a pod.
2Proteáza jiná než Proteáza1 včetně dalších proteáz užitečných podle tohoto vynálezu.
V příkladech 28D a E může být namísto Proteázy a Proteázy použita libovolná kombinace proteázových enzymů užitečných podle tohoto vynálezu, přičemž výsledky jsou • · · ·
139 v podstatě stejné.
Zatímco byly popsány konkrétní provedení předmětu vynálezu, bude odborníkům v oboru zřejmé, že mohou být provedeny různé změny a modifikace aniž bychom se vzdálili od platnosti a rozsahu vynálezu.
Přípravky podle tohoto vynálezu mohou být vhodně připraveny libovolným procesem vybraným pracovníkem provádějícím formulaci, přičemž nikoliv vyčerpávající příklady lze nalézt v U. S. 5,691,297 (Nassano et al.) vydaném 11. listopadu 1997, U. S. 5,574,005 (Welch et al.) vydaném 12. listopadu 1996, U. S. 5,569,645 (Dinniwell et al.), vydaném 29. října 1996, U. S. 5,565,422 (Del Greco et al.), vydaném 15. října 1996, U. S. 5,516,448 (Capeci et al.) vydaném 14. května 1996, U. S. 5,489,392 (Capeci et al.) vydaném 6. února 1996, U. S. 5,486,303 (Capeci et al.) vydaném 23. ledna 1996, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference.
Kromě výše uvedených příkladů mohou být čistící přípravky podle tohoto vynálezu formulovány do vhodných detergentních prostředků na praní prádla, jejichž nikoliv vyčerpávající příklady lze nalézt v U. S. 5,679,630 (Baeck et al.) vydaném 21. října 1997, U. S. 5,565,145 (Watson et al.) vydaném 15. října 1996, U. S. 5,478,489 (Fredj et al.) vydaném 26. prosince 1995, U. S .5,470,507 (Fredj et al.) vydaném 28. listipadu 1995, U. S. 5,466,802 (Panandiker et al.) vydaném 14. listopadu 1995, U. S. 5,460,752 (Fredj et al.) vydaném 24. října 1995, U. S. 5,458,810 (Fredj et al.) vydaném 17. října 1995, U. S. 5,458,809 (Fredj et al.) vydaném 17. října 1995, U. S. 5,288,431 (Huber et al.) vydaném 22. února 1994, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference.
Zatímco byl detailně popsán vynález s odkazy na preferovaná provedení a příklady, bude odborníkům v oboru zřejmé, že mohou být provedeny různé změny a modifikace aniž bychom se vzdálili od platnosti a rozsahu vynálezu, neboť vynález není omezen pouze popisy ve specifikacích.
Průmyslová využitelnost
Vynález popisuje nové čistící prostředky zahrnující proteázové varianty, vzniklé substitucí aminokyselinových zbytků ve vybraných polohách přirozeně se vyskytujícího subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens. Tyto čistící prostředky jsou vhodné jako prací prostředky pro praní prádla, čistící prostředky na mytí nádobí nebo prostředky pro osobní hygienu.
140
Seznam sekvencí
Sekvence ID č. 1
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr
10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ala
25 30
Asn Leu Lys Ser Lys Gly lle Thr Ala Val Trp He Pro Pro Ala Trp
40 - 45
Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly 65 70 75 80
Tnr Aro Asn Gin Leu Gin Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly
90 95
He Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Giy Tnr Glu lle Val Asn Ala Val Glu Val Asn Arg Ser Asn Arg Asn
115 120 125
Gin Giu Thr Ser Gly Glu Tyr Ala lle Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Pne Pro Gly Arg Gly Asn Asn His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr 145 150 155 160
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Leu Gin Asn Lys
165 170 175 lle Tyr Lys Phe Arg Gly Tnr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Giu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val lle His Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg lle Asp Ala Val Lys His 225 230 235 240 lle Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Thr
245 250 . 255
Thr Gly Lys Pro Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270 • ·
141
Gly Ala lle Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly·
290 295 300
Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Asn lle Leu Asn Gly Ser Val Val Gin Lys 305 310 315 320
His Pro Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro
325 - 330 335
Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gin Gin Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Val leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly lle Pro Tnr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser
370 375 380
Lys lle Asp Pro leu Leu Gin Ala Arg Gin Thr Phe Ala Tyr Gly Tnr 385 390 395 400
Gin His Asp Tyr Phe Asp His His Asp lle lle Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asr. Ser Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Tnr lle Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Asn Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Asn Lvs Ala Gly
435 440 445
Gin Val Trp Arg Asp lle Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr lle
450 455 ,. 460
Asn Ala Asp Giy Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Giy Giy Ser Val Ser 465 470 475 480
Val Trp Val Lys Gin
485 • · · ·
142
Sekvence ID č. 2
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp His
5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ser
25 30
Asn Leu Arg Asn Arg Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
40 - 45
Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Vat Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
55 60
Asp Leu Gly GJu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
70 75
Tnr Arg Ser Gin Leu Glu Ser Ala Ile His Ala Leu Lys Asn Asn Gly 80 85 90 95
Val Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ata Tnr Glu Asn Val Leu Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gin Giu Ile Ser Gly Asp Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Pne Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Phe Gin Asn Arg 160 165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Tri Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Ser Giu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Arg Trp Gly Glu Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Ata 240 245 250 255
Thr Gly Lys Glu Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270 ι · · · • · · • · · '· ·
143
Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val 275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly 290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Ala Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Gin Lys 305 310 315
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro 320 325 330 335
Gly Glu Ser Leu Glu Ser Phe Val Gin Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu He Leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Glv Asp Tyr Tyr Gly lle Pro Thr His Ser Val Pro Ala Met Lys Aia
370 375 380
Lys He Asp Pro lle Leu Glu Ala Arg Gin Asn Phe Ala Tyr Gly Thr
385 390 395
Gin His Asd Tyr Pne Asp His His Asn lle He Glv Trp Thr Arg Glu 400 405 410 415
Gly Asn Thr Tnr His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr lie Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Glu Lys Trp Met Tyr Val Gly Gin Asn Lys Aia Gly
435 440 445
Gin Val Trp His Asp lle Thr Gly Asn Lys Pro Gly Thr Val Thr lle
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Ala Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475
He Trp Val Lys Arg 480 • ·
144
Sekvence ID č. 3
His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-GIn-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-ProAsn-Asp • · » · • ·
145
Sekvence ID č. 4
AAPFNGTMMQ
SRSDVGYGVY
DWFDHKGGA
YSSFKWRWYH
TENGNYDYLM
YADLDMDHPE
VRSQTGKPLF
SGGTFDMRTL
YFEWYLPĎOG
OLYOLGEFNQ
AHAAGMQVYA
DGTEWVDAVE
FOGVDWDESR
TLWTKVANEA
KGAVRTKYGT
VNPSDRNQE»
KLSR1YKFRG
NNLSSLGrTA LWLPPAYKGT KAQYLQAJOA
SGTYQIQAWT KFDFPGRGNT JGKAWDWEVD
WTELKSWGK
TVGEYWSYD:
MTNTLMKDQP
WVDPWFKPLA
WYVNTTNIDG
NKLHNYIMKT
TLAVTFVDNH
FRLDAVKHIK FSFFPDWLSD NGTMSLFDAP LHNKFYTASK DTEPGQALQS
YAFILTRQEG
DYLDHSDJIG
GKQHAGKVFY
DLTGNRSDTV
DEFVRWTEPP.
YPCVFYGDYY
WTREGVTEKP
TINSDGWGEř
LVAWP
GJPQYNIPSL
GSGLAALrTC
KSKIDPLLIA RRDYAYGTQH GPGGSKWMYV
KVNGGSVSVW VPRKTTVSTI AWSITTRPWT

Claims (18)

  1. PATENT OVÉ NÁROKY
    1. Čistící prostředek na tkaniny, mytí nádobí a/nebo čištěni pevných povrchů, vyznačující se t i m, že zahrnuje:
    a) účinné množství proteázové varianty, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v poloze odpovídající pozici 103 u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens v kombinaci se substitucí aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více polohách odpovídajících pozicím 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 16, 17, 18,
    19, 20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38,42, 43, 48, 55, 57, 58, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87,
    89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 116, 117, 119, 121, 123, 126, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181,
    182, 183, 184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215,
    216, 217, 218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247,
    248, 249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270,
    271, 272, 274 a 275 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens; kde když zmíněná varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v.pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminnokyselinového zbytku v jedné nebo více aminokyselinových poloh jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens;
    b) amylázovou variantu, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
    i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo ii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č.
    1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 1 a/nebo iii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č.
    2 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 2 a/nebo iv) α-amylázu podle i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp,
    77Tooofcfc»· ·· ·· ·» · · ·· • · · · · · * ·
    147 :
    fc fcfc · · · * · ·· *
    Sekvence ID č. 3 nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 3 a/nebo
    v) α-amylázu podle i) až iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo vi) α-amylázu podle v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 3 a/nebo viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská α-amyláza 1) má jednu z aminokyselinových sekvencí Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 4, nebo
  2. 2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkou vzniklou proti aamyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné aamylázy; přičemž zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním až relativně vysokém pH, zvýšená α-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu, pí, takže pí hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH v médiu a
    c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
    2. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že zmíněná proteázová varianta je odvozena od subtilisinu Bacillus, s výhodou subtilisinu Bacillus lentus nebo subtilisinu 309.
    99 9· 'fale
    9 -99 99 9- ** « · ♦ * t * * · - * , * » » · · * ♦ » w <t * · · ·
    49 « · ·· · *
    3. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznaču jící se tím, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituce aminokyselinového zbytku v poloze 103 a jedné nebo více následujících pozic 236 a 245, s výhodou pozic 103 a 236 a na jedné nebo více z následujících pozic 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 230, 232, 248, 252, 257, 260, 270 a 275 nebo v pozicích 103 a 245 a na jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159, 170, 182, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 222, 230, 232, 248, 252, 257, 260, 261, 270 a 275, výhodněji v polohách 103, 236 a 245 a v jedné nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 211, 212, 213,215, 217, 230, 232, 248, 252,257, 260,270 a 275.
    4. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje soubor substitucí vybraných z následující skupiny obsahující:
    12/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 12/76/103/104/130/170/185/222/243/245:
    12/76/103/104/ i 30/222/24 5/261: 12/76/103/104/222/245;
    12/76/103/104/130/222/245;
    61 /68/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/213/232/236/245/248/252;
    62/103/104/109/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/232/236/245/248/252: 62/101/103/104/159/212/213/232/236/245/248/252;
    62/103/104/130/159/213/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/232/236/245/248/252/270;
    68/103/104/159/185/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/210/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/185/210/232/236/245/248/252: 68/103/104/159/213/232/236/245/248/252: 68/103/104/159/230/232/236/245; 68/76/103/104/159/209/232/236/245;
    68/103/104/232/236/245/248/257/275; 68/103/104/213/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/209/232/236/245;
    68/76/103/104/159/236; 68/76/103/104/159/236/245;
    68/76/103/104/159/232/236/245: 68/103/104/159/232/236/245/252;
    68/103/104/159/232/236/245; 68/103/104/159/232/236/245/257;
    68/76/103/104/159/211/232/236/245: 68/76/103/104/159/215/232Z236/245;
    68/103/104/159/210/232/236/245; 68/103/104/159/213/232/236/245/260;
    68/76/103/104/159/213/232/236/245/260; 68/1OJ/104/159/236:
    68/76/103/104/159/210/232/236/245/260; 68/103/104/159/236/245;
    68/103/104/159/183/232/236/245/248/252: 68/76/103/104/159/236/245;
    68/103/104/232/236/245/257/275; 68/103/104/159/213/232/236/245;
    76/103/222/245; 76/103/104/159/232/236/245;
    76/103/104/159/213/232/236/245/260; 76/103/104/159;
    76/103/104/131/159/232/236/245/248/252; 76/103/104/222/245;
    97/103/104/159/232/236/245/248/252;
    98/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 98/103/104/159/232/236/245/248/252; 101/103/104/159/232/236/245/248/252; 102/103/104/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/232/236/245; 103/104/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/205/209/232/236/245/257 103/104/159/232/245/248/252;
    ·»·»
    149
    103/104/159/205/209/210/232/236/245/257;
    103/104/159/217/232/236/245/248/252;
    103/104/159/230/236/245;
    103/104/159/248/252/270;
    103/104/159/205/209/232/236/245; a /77 cToáo— 74? <f
    I* ·» ·» ·· ·· • · » · · • · · * * * t · « * · X1 Φ í- J « ·· * * ·· ·* ÍC »· ·· **
    103/104/159/213/232/236/245/248/252; 103/104/130/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/236/245;
    103/104/131/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/232/236/245/257.
    5. Čistící prostředek podle nároku 4, vyznačuj ící se t í m, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje soubor substitucí vybraných z následující skupiny obsahující;
    12R/76D/103 AJ 104T/130T/222S/245R;
    12R/76D/103 A/l 041/222S/245R;
    12R/102A/103 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K; 12R/76D/103A/I04T/130G/222S/245R/261D;
    12 R/76D/103 A/104T/13 0G/170S/185 D/222S/243 D/24 5 R;
    61E/68A/103 A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    62D/103 A/1041/109R/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103 A/l 041/159D/213R/232 V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    62D/103 A/l 041/130G/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/101 G/l 03 A/l 041/159D/212G/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/103A/1041/159D/236H; 68A/103A/104I/159D/236H/245R;
    68A/76D/103 A/l 041/159D/2101/232 V/236H/245R/260A;
    68 A/103 AJ 1041/159D/183 D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/1041/159D/209W/232V/236H/245R;
    68A/76D/103 A/l 041/159D/211R/232V/236H/245R; 68A/76D/103A/1041/159D/215R/232V/236H/245R;
    68A/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/76D/103 A/l 041/159D/236H;
    68A/76D/103 A/l 041/159D/236H/245R; 68A/76D/103A/1041/159D/232V/236H/245R;
    68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/252K;
    68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R;
    68A/103 A/1041/159D/232V/236H/245R/257V;
    68A/103A/104I/159D/185D/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/l 041/159D/210L/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103A/1041/159D/185D/210L/232V/236H/245R/248D/252K;
    oZcOe — • · ·· · · · · • · * · · · · • ···· · · * ·
    150
    68A/103 A/l 041/159D/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103 A/l 041/159D/230V/232V/236H/245R;
    68A/76D/103 A/l 041/159D/209W/232V/236H/245R;
    68A/103A/104I/232V/236H/245R/248D/257V/275H;
    68A/103 A/l 04I/232V/236H/245R/257V/275H;
    68 A/l 03 A/l 041/213E/232V/236H/245R/248D/252K: 68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103 A/l 041/159D/210I/232V/236H/245R;
    68A/103A/1041/159D/210L/232V/236H/245R;
    68A/103A/1041/159D/213G/232V/236H/245R;
    68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K/270A; 76D/103A/222S/245R; 76D/103A/104I/159D/232V/236H/245R;
    76D/103A/1041/159D;
    76D/103 A/1041/222S/24 5 R;
    76D/103A/104I/131 V/l 59D/232V/236H/245R/248D/252K; 76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A;
    97E/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K: 98L/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K:
    98L/102A/103A/1041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K: 101G/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 102A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K:
    103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 103A/104I/130G/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103A/1041/159D/230V/236H/245R; 103A/104I/159D/217E/232V/236H/245R/248D/252K;
    103A/1041/159D/236H/245R; 103A/1041/159D/248D/252K/270V;
    103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
    103 A/l 041/159D/205I/209W/232V/236H/245R;
    103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/257V;
    103 A/l 041/159D/205I/209W/232V/236H/245R/257V;
    103 A/l 041/131 V/l 59D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103A/1041/159D/205I/209W/210I/232V/236H/245R/257V; a 103 A/l 041/159D/232V/245R/248D/252K.
    • · · ·
    151
    6. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznačuj ící se tím, že doplňkové čistící materiály jsou vybrány ze skupiny obsahující surfaktanty, rozpouštědla, pufry, enzymy, činidla pro odstraňování skvrn, činidla pro uvolňování špíny, dispergační činidla, zjasňovače, činidla pro potlačení pěnění, změkčovače tkanin, zpěňovače, enzymové stabilizátory, plnidla, další bělící činidla, barviva, parfémy, chelatující látky a jejich směsi.
    7. Čistící prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jeden detersivní surfaktant, s výhodou rozvětvený surfaktant, výhodněji rozvětvený surfaktant se střední délkou řetězce.
    8. Čistící prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň 0,1 % surfaktantu na hmotnost přípravku, kde zmíněné surfaktant obsahující materiály jsou vybrány ze skupiny obsahující alkylbenzensulfonáty, primární alkylsulfáty, sekundární alkylsulfáty, alkylalkoxysulfáty, alkylalkoxykarboxyláty, alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfátované polyglykosidy, α-sulfonované estery mastných kyselin, alkyl a alkylfenolalkoxyláty, betainy a sulfobetainy, aminoxidy, Nmethylglukamidy, ethoxyláty neionických primárních alkoholů, směsné ethoxyláty/propoxyláty neionických primárních alkoholů a jejich směsi.
    9. Čistící prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že dále zahrnují alespoň 5 % plnidla vybraného ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi.
    10. Čistící prostředek podle nároku 6, v y z n a č u j í c í se t í m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jeden detersivní enzym vybraný ze skupiny obsahující celulázy, lipázy, další amylázy, fosfolipázy, další proteázy, peroxidázy a jejich směsi.
    11. Čistící prostředek podle nároku 6, v y z n a č u j í c í se t í m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jedno bělící činidlo vybrané ze skupiny obsahující peroxyuhličitany, peroxyboráty a jejich směsi a nepovinně dále zahrnují alespoň jeden bělící aktivátor s výhodou vybraný ze skupiny obsahující benzoyloxybenzensulfonát, nonanoyloxybenzensulfonát, dekanoyloxybenzensulfonát, oktanoyloxybenzensulfonát, perhydrolyzovatelné estery, sodná sůl
    152 ···· ·· ·· ··* ·· · · ··· · · · ···· • · · · «··· · ··'<.
    ·· « · · ··· ··*· • ·· · · β · · · ·· ·
    4-[N-(nonanoyl)aminohexanoyloxy]benzensulfonátu, lauryloxybenzensulfonát, 10undecenoyloxybenzensulfonát a dekanoyloxybenzoovou kyselinu a jejich směsi a dále nepovinně zahrnuje katalyzátor bělení, s výhodou 3-(3,4-dihydroisochinolinium)-propansulfonát.
    v
    12. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že čistící prostředek je přípravek pro čištění tkanin, s výhodou ve formě kapaliny, granulí, kusů, tablet, gelu, prášku nebo pěny, zahrnující alespoň 5 % surfaktantů a alespoň 5 % plnidla na hmotnost přípravku.
    13. Čistící prostředek podle nároku 1,vyznačuj ící se tím, že zmíněný čistící prostředek je prostředek pro čištění tkanin, zahrnující:
    a) od 0,0001 % do asi 10 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty;
    b) od 0,0001 % do asi 0,1 % hmotnosti zmíněné amylázové varianty;
    c) alespoň 5 % hmotnosti surfaktantů s výhodou vybraného ze skupiny obsahující alkylbenzensulfonáty, primární alkylsulfáty, sekundární alkylsulfáty, alkylalkoxysulfáty, alkylalkoxykarboxyláty, alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfátované polyglykosidy, asulfonované estery mastných kyselin, alkyl a alkylfenolalkoxyláty, betainy a sulfobetainy, aminoxidy, N-methylglukamidy, ethoxyláty neionických primárních alkoholů, směsné ethoxyláty/propoxyláty neionických primárních alkoholů a jejich směsi, a kde dále plnidlo je vybráno ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi a
    d) alespoň 5 % hmotnosti plnidla s výhodou vybraného ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi.
    14. Čistící prostředek podle nároku 25, vy zn a č u j í c í se t í m, že je ve formě koncentrovaného granulámího čistícího prostředku na tkaniny obsahujícího alespoň 15 % surfaktantů.
    15. Způsob čištění tkaniny, vyznačující se t í m, že zmíněný způsob zahrnuje kontaktování tkaniny s čistícím prostředkem podle nároků 12 nebo 13.
    16. Čistící prostředek podle nároku 1, v y z n a č u j í c í se t í m, že zmíněný čistící prostředek je prostředkem pro mytí nádobí, s výhodou ve formě kapaliny, granulí, prášku, gelu nebo tablet, zahrnující > · fc · • · · « · · · • · • · • ·
    153
    a) od 0,0001 % do asi 10 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty;
    b) od 0,0001 % do asi 0,1 % hmotnosti zmíněného přípravku na mytí nádobí amylázové varianty; a
    c) od 0,1 % do 10 % hmotnosti surfaktantu.
    17. Způsob čištění nádobí, vyznačující se t í m, že zmíněný způsob zahrnuje kontaktování nádobí s čistícím prostředkem podle nároku 16.
    18. Čistící osobní prostředek, v y zn a č uj í c í se t í m, že zahrnuje:
    a) účinné množství proteázové varianty, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v poloze odpovídající pozici 103 u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens v kombinaci se substitucí aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více polohách odpovídajících pozicím 1, 3, 4, 8, 9, 10, 12, 13, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 24, 27, 33, 37, 38, 42, 43, 48, 55, 57, 58, 61, 62, 68, 72, 75, 76, 77, 78, 79, 86, 87, 89, 97, 98, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 111, 114, 116, 117, 119, 121, 123, 126, 128, 130, 131, 133, 134, 137, 140, 141, 142, 146, 147, 158, 159, 160, 166, 167, 170, 173, 174, 177, 181,
    182, 183, 184, 185, 188, 192, 194, 198, 203, 204, 205, 206, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215,
    216, 217, 218, 222, 224, 227, 228, 230, 232, 236, 237, 238, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247,
    248, 249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 265, 268, 269, 270,
    271, 272, 274 a 275 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens; kde když zmíněná varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku v pozicích 103 a 76, obsahuje také substituci aminnokyselinového zbytku v jedné nebo více aminokyselinových poloh jiných než odpovídá aminokyselinovým pozicím 27, 99, 101, 104, 107, 109, 123, 128, 166, 204, 206, 210, 216, 217, 218, 222, 260, 265 nebo 274 subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens;
    b) amylázovou variantu, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
    i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo ii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č. 1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 1 a/nebo
    154
    T/Zbor — //7/ ···· ·· ·· · · ·· · · ··· ··· ···· • · · · · · ♦ · · · · · iii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č. 2 nebo α-amylázu, kteráje alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence Π) č. 2 a/nebo iv) α-amylázu podle i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp, Sekvence ID č. 3 nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 3 a/nebo
    v) α-amylázu podle i) až iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo vi) α-amylázu podle v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 3 a/nebo viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská α-amyláza 1) má jednu z aminokyselinových sekvencí Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 4, nebo 2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkou vzniklou proti aamyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné aamylázy; přičemž zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním až relativně vysokém pH, zvýšená α-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu, pí, takže pí hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH v médiu a
    c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
    ···· · · ·· ·· · · «·· · · a · · · » ·· · · · · · · · « · ·
    155
    19. Čistící osobní prostředek podle nároku 18, v y z n a č u j i c i se t i m, že zahrnuje:
    a) od 0,001 % do asi 5 %, s výhodou od 0,001 % do asi 2 %, výhodněji od 0,002 % do asi 0,8 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty,
    b) od 0,0001 % do asi 0,1 % hmotnosti čistícího osobního prostředku zmíněné amylázové varianty,
    c) od 0,1 % do asi 95 % hmotnosti surfaktantového systému s výhodou zahrnujícího surfaktant vybraný ze skupiny obsahující anionické karboxyláty, aminoxidy, alkylglukosidy, glukosamidy, alkylsulfáty, alkylethersulfáty, acylisethioriáty, alkylsulfosukcináty, alkylfosfátové estery, ethoxylované fosfátové estery, alkylglycerylethersulfonáty a jejich směsi, výhodněji zahrnující surfaktant vybraný ze skupiny obsahující mýdla, acylglutamáty, alkylsarkosináty, lauraminoxidy, kokaminoxidy, kokamindopropylaminoxidy, decylglukosidy, laurylsulfáty, laurethsulfáty, C12-C18 acylisethionáty a jejich směsi a
    d) případně od 0,05 % do asi 50 % hmotnosti enzymového stabilizátoru.
    20. Čistící osobní prostředek podle nároku 19, vy zn a č u j i c i se t i m, že zmíněným surfaktantem je mýdlo v úrovních kolem 2 %, s výhodou alespoň 10 %, výhodněji nejméně 25 % hmotnosti čistícího přípravku.
    21. Čistící osobní prostředek podle nároku 20, v y z n a č u j i c i se t i m, že poměr mýdla k proteázové variantě je od 2000:1 do asi 8:1, s výhodou od 400:1 do asi 40:1.
    22. Způsob osobního čištění, vyznačující se tím, že zahrnuje kontaktování části lidského nebo zvířecího těla s čistícím prostředkem podle nároku 18.
    23. Čistící prostředek na tkaniny, mytí nádobí a/nebo čištění pevných povrchů, vyznačující se tím, že zahrnují:
    a) účinné množství proteázové varianty, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens;
    b) amylázovou variantu, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
    dZvoo- Jfcze
    9 · ·· ·· · ·
    156
    i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo ii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č.
    1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 1 a/nebo iii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č.
    2 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 2 a/nebo iv) α-amylázu podle i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp, Sekvence ID č. 3 nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 3 a/nebo
    v) α-amylázu podle i) až iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo vi) a-amylázu podle v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCEB 12513 a DSM 935 a/nebo vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající Sekvence ID č. 1, Sekvence ED č. 2 nebo Sekvence ID č. 3 a/nebo viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská α-amyláza 1) má jednu z aminokyselinových sekvencí Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ED č. 4, nebo 2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkou vzniklou proti aamyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné aamylázy; přičemž zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání /Λ yfáoo - 4½¼ • · ·· · · · · ·· • ··· · · · · ·· · · ··«· · * · ·
    157 s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním až relativně vysokém pH, zvýšená α-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu, pl, takže pl hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH v médiu a
    c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
    24. Čistící prostředek podle nároku 23, vy zn a č u j í c í se t í m, že zmíněná proteázová varianta je odvozena ze subtilisinu Bacillus lentus nebo subtilisinu 309.
    25. Čistící prostředek podle nároku 23, vy zn a č u j í c í se t í m, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituce aminokyselinových zbytků v jedné nebo více z následujících pozic vybraných ze skupiny obsahující:
    1) pozice 62 a jedna nebo více z následujících poloh 103, 104, 109, 159, 213, 232, 236, 245, 248 a 252;
    2) pozice 212 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 98, 102, 103, 104, 159, 232, 236,245, 248 a 252;
  3. 3) pozice 230 a jedna nebo více z následujících poloh 68,103, 104,159,232, 236 a 245;
  4. 4) pozice 232 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102,
    103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
  5. 5) pozice 232 a jedna nebo více z následujících poloh 103, 104, 236 a 245;
  6. 6) pozice 232 a 103 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98,
    101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
  7. 7) pozice 232 a 104 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62·, 68, 76, 97, 98,
    101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248,252, 257, 260, 270 a 275;
  8. 8) pozice 232 a 236 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98,
    101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
    • · · · · · • «· · · · to ·, - - - * · « n * * ·
    158
  9. 9) pozice 232 a 245 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98,
    101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
  10. 10) pozice 232, 103, 104, 236 a 245 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 76, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 205, 209, 210, 212, 213, 217, 230, 236, 245, 248, 252, 257, 260, 270 a 275;
  11. 11) pozice 252 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104,109,130, 131, 159, 183,185, 210, 212,213,217, 232, 236, 245, 248 a 270;
  12. 12) pozice 252 a jedna nebo více z následujících poloh 103, 104, 236 a 245;
  13. 13) pozice 252 a 103 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101,
    102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
  14. 14) pozice 252 a 104 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
  15. 15) pozice 252 a 236 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101,
    102, 103,104,109,130, 131, 159, 183, 185, 210,212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270; ·
  16. 16) pozice 252 a 245 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102,103, 104, 109, 130, 131, 159,183,185, 210, 212,213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
  17. 17) pozice 252, 103, 104, 236 a 245 a jedna nebo více z následujících poloh 12, 61, 62, 68, 97, 98, 101, 102, 103, 104, 109, 130, 131, 159, 183, 185, 210, 212, 213, 217, 232, 236, 245, 248 a 270;
  18. 18) pozice 257 a jedna nebo více z následujících poloh 68, 103, 104, 205, 209, 210, 232, 236, 245 a 275.
    ·ζ« · · · · ·» • · · · · · «··· · ·· ♦
    1 CQ ····· * * ·····♦
    1jj · ·· · · · * · · · · * ·· ·· ·· ·· · · ··
    26. Čistící prostředek podle nároku 23,vyznačující se tím, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje soubor substitucí vybraných ze skupiny obsahující:
    12/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252; 61 /68/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/103/104/130/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/213/232/236/245/248/252 62/103/104/109/159/213/232/236/245/248/252; 62/103/104/159/232/236/245/248/252; 62/101/103/104/159/212/213/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/232/236/245/248/252/270; 68/103/104/159/185/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/185/210/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/23 0/232/236/245;
    68/103/104/232/236/245/248/257/275; 68/103/104/159/232/236/245/248/252; 68/76/103/104/159/232/236/245;
    68/103/104/159/232/236/245;
    68/76/103/104/159/211 /232/236/245;
    68/103/104/159/210/232/236/245:
    68/76/103/104/159/213/232/236/245/260;
    68/103/104/159/183/232/236/245/248/252;
    68/103/104/159/213/232/236/245;
    76/103/104/159/213/232/236/245/260;
    97/103/104/159/232/236/245/248/252;
    98/102/103/104/159/212/232/236/245/248/252
    102/103/104/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/248/252/270;
    103/104/159/205/209/232/236/245/257
    103/104/159/205/209/210/232/236/245/257;
    103/104/159/217/232/236/245/248/252;
    103/104/131/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/232/236/245/257.
    68/103/104/159/210/232/236/245/248/252;
    ,68/103/104/159/213/232/236/245/248/252; 68/76/103/104/159/209/232/236/245;
    68/103/104/213/232/236/245/248/252; 68/103/104/159/209/232/236/245; 68/103/104/159/232/236/245/252; 68/103/104/159/232/236/245/25 7;
    68/76/103/104/159/215/232/236/245; 68/103/104/159/213/232/236/245/260; 68/76/103/104/159/210/232/236/245/260; 68/103/104/232/236/245/257/275; 76/103/104/159/232/236/245;
    76/103/104/131/159/232/236/245/248/252; 98/103/104/159/232/236/245/248/252;
    ; 101/103/104/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/232/236/245;
    103/104/159/232/236/245/248/252; 103/104/159/232/245/248/252;
    103/104/159/213/232/236/245/248/252; 103/104/130/159/232/236/245/248/252;
    103/104/159/205/209/232/236/245; a ·· ·· ·· ·· • , · · · w • · u · · » ·
    160
    27. Čistící prostředek podle nároku 26, vyznačující se tím, že zmíněná proteázová varianta zahrnuje soubor substitucí vybraných ze skupiny obsahující:
    12R/102 A/l 03 A/1041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K;
    61E/68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/1041/109R/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/103A/1041/130G/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K; 62D/101 G/l 03 A/1041/159D/212G/213 R/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/76D/103A/1041/159D/210I/232V/236H/245R/260A; 68A/103A/104I/159D/183D/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103 A/l 041/159D/209W/232V/236H/245R;
    68A/76D/103 A/l 041/159D/211R/232V/236H/245R; 68A/76D/103 A/l 041/159D/215R/232V/236H/245R; 68A/103A/104I/159D/213R/232V/236H/245R/260A; 68A/76D/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
    68 Μ103 A/1041/159D/232V/236H/245R/252K;
    68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
    68A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/257V;
    68A/103A/1041/159D/185D/232 V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/l 041/159D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/1041/159D/185D/210L/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103A/1041/159D/213E/232V/236H/245R/248D/252K; 68A/103 A/l 041/159D/230V/232V/236H/245R;
    68A/76D/103A/1041/159D/209W/232V/236H/245R;
    68A/103A/104I/232V/236H/245R/248D/257V/275H;
    68A/103A/104I/232V/236H/245R/257V/275H;
    68A/103A/104I/213E/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103A/104I/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    68A/103A/104I/159D/210I/232V/236H/245R;
    68A/103 A/l 041/159D/210L/232V/236H/245R;
    161 • · · · ·· ·· · · · ·
    68Α/103 A/l 041/159D/213G/232V/236H/245R;
    68A/103A/1041/159D/232V/236H/245R/248D/252K/270A;
    76D/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R;
    76D/103A/104I/131 V/l 59D/232V/236H/245R/248D/252K;
    76D/103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/260A;
    97E/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    98L/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    98L/102 A/103 A/l 041/159D/212G/232V/236H/245R/248D/252K;
    101 G/l 03 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    102A/103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103 A/l 041/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103 A/l 041/159D/213R/232V/236H/245R/248D/252K;
    103 A/l 041/130G/159D/232V/236H/245R/248D/252K; 103A/104I/159D/217E/232V/236H/245R/248D/252K;
    103 A/l 041/159D/248D/252K/270V; 103A/104I/159D/232V/236H/245R;
    103 A/l 041/159D/2051/209W/232V/236H/245R; 103A/1041/159D/232V/236H/245R/257V;
    103 A/l 041/159D/205I/209W/232V/236H/245R/257V;
    103 A/l 041/131 V/159D/232V/236H/245R/248D/252K;
    103A/1041/159D/205I/209W/2101/232V/236H/245R/257V; a 103 A/l 041/159D/232V/245R/248D/252K.
    28. Čistící prostředek podle nároku 23,vyznačuj ící se tím, že zmíněné doplňkové čistící materiály jsou vybrány ze skupiny obsahující surfaktanty, rozpouštědla, pufry, enzymy, činidla pro odstraňování skvrn, činidla pro uvolňování špíny, dispergační činidla, zjasňovače, činidla pro potlačení pěnění, změkčovače tkanin, zpěňovače, enzymové stabilizátory, plnidla, další bělící činidla, barviva, parfémy, chelatující látky a jejich směsi.
    29. Čistící prostředek podle nároku 28, vy zn a č u j i c i se t i m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jeden detersivní surfaktant, s výhodou rozvětvený surfaktant, výhodněji rozvětvený surfaktant se středně dlouhým řetězcem.
    30. Čistící prostředek podle nároku 28, vy zn a č u j i c i se t i m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň 0,1 % surfaktantu na hmotnost přípravku, kde zmíněné surfaktant obsahující materiály jsou vybrány ze skupiny obsahující alkylbenzensulfonáty, primární alkylsulfáty, sekundární alkylsulfáty, alkylalkoxysulfáty, alkylalkoxykarboxyláty,
    162 • · · ty Λ0Ο&- 'ffač • * · · ·· · · • » · » · li « · · · · <n · · alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfátované polyglykosidy, α-sulfonované estexy mastných kyselin, alkyl a alkylfenolalkoxyláty, betainy a sulfobetainy, aminoxidy, Nmethylglukamidy, ethoxyláty neionických primárních alkoholů, směsné ethoxyláty/propoxyláty neionických primárních alkoholů a jejich směsi.
    31. Čistící prostředek podle nároku 30, v y z n a č u j í c í se t í m, že dále zahrnuje alespoň 5 % plnidla vybraného ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi.
    32. Čistící prostředek podle nároku 28, vy zn a č u j í c í se t í m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jeden detersivní enzym vybraný ze skupiny obsahující celulázy, lipázy, amylázy, fosfolipázy, další proteázy, peroxidázy a jejich směsi.
    33. Čistící prostředek podle nároku 28, vy zn a č u j í c í se t í m, že zmíněné doplňkové čistící materiály zahrnují alespoň jedno bělící činidlo vybrané ze skupiny obsahující peroxyuhličitany, peroxyboráty a jejich směsi a nepovinně dále zahrnují alespoň jeden bělící aktivátor s výhodou vybraný ze skupiny obsahující benzoyloxybenzensulfonát (BOBS), nonanoyloxybenzensulfonát, dekanoyloxybenzensulfonát, oktanoyloxybenzensulfonát, perhydrolyzovatelné estery, sodná sůl 4-[N-(nonanoyl)aminohexanoyloxy]benzensulfonátu, lauryloxybenzensulfonát, 1O-undecenoyloxybenzensulfonát a dekanoyloxybenzoovou kyselinu a jejich směsi a dále nepovinně zahrnuje katalyzátor bělení, s výhodou 3-(3,4dihydroisochinolinium)-propansulfonát.
    34. Čistící prostředek podle nároku 23, v y z n a č u j í c í se t í m, že čistící přípravek je přípravek pro čištění tkanin, s výhodou ve formě kapaliny, granulí, kusů, tablet, gelu, prášku nebo pěny, zahrnující alespoň 5 % surfaktantu a alespoň 5 % plnidla na hmotnost přípravku.
    35. Čistící prostředek podle nároku 23,vyznačující se tím, že zmíněný čistící prostředek je prostředek pro čištění tkanin, zahrnující:
    a) od 0,0001 % do asi 10 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty;
    b) od 0,0001 % do asi 0,1 % hmotnosti zmíněné amylázové varianty;
    fy?# • · · · · · · · • » * · · « ·· · · « » · · * · · *
    c) alespoň 5 % hmotnosti surfaktantů s výhodou vybraného ze skupiny obsahující alkylbenzensulfonáty, primární alkylsulfáty, sekundární alkylsulfáty, alkylalkoxysulfáty, alkylalkoxykarboxyláty, alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfátované polyglykosidy, asulfonované estery mastných kyselin, alkyl a alkylfenolalkoxyláty, betainy a sulfobetainy, aminoxidy, N-methylglukamidy, ethoxyláty neionických primárních alkoholů, směsné ethoxyláty/propoxyláty neionických primárních alkoholů a jejich směsi, a kde dále plnidlo je vybráno ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi a
    d) alespoň 5 % hmotnosti plnidla s výhodou vybraného ze skupiny obsahující zeolity, polykarboxyláty, vrstvené silikáty, fosfáty a jejich směsi.
    36. Čistící prostředek podle nároku 35, vy zn a č u j í c í se t í m, že je ve formě koncentrovaného granulámího čistícího prostředku na tkaniny obsahujícího alespoň 15 % surfaktantů.
    37. Způsob čištění tkaniny, vyznačující se tím, že zmíněný způsob zahrnuje kontaktování tkaniny s čistícím prostředkem podle nároků 34 nebo 35.
    38. Čistící prostředek podle nároku 23, vy zn a č u j í c í se t í m, že zmíněný čistící prostředek je prostředkem pro mytí nádobí, s výhodou ve formě kapaliny, granulí, prášku, gelu nebo tablet, zahrnující:
    a) od 0,0001 % do asi 10 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty;
    b) od 0,1 % do 10 % hmotnosti surfaktantů.
    39. Způsob čištění nádobí, vyznačující se tím, že zmíněný způsob zahrnuje kontaktování nádobí s čistícím prostředkem podle nároku 38.
    40. Čistící osobní prostředek, vy zn a č uj í c í se t í m, že zahrnují:
    a) účinné množství proteázové varianty, kde zmíněná proteázová varianta zahrnuje substituci aminokyselinového zbytku s jiným přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem v jedné nebo více polohách odpovídajících pozicím 62, 212, 230, 232, 252 a 257 u subtilisinu Bacillus amyloliquefaciens;
    b) amylázovou variantu, kde zmíněná amylázová varianta je vybrána ze skupiny obsahující:
    ···« ·· »* • · « · • * · · ·· ♦ «
    A · » ·
    164
    i) α-amylázu charakterizovanou tím, že má specifickou aktivitu nejméně o 25 % vyšší než je specifická aktivita Termamyl® při teplotě v rozsahu od 25 °C do 55 °C a při hodnotách pH v rozsahu od 8 do 10, měřeno pomocí stanovení α-amylázové aktivity Phadebas® a/nebo ii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence Π) č.
    1 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 1 a/nebo iii) α-amylázu podle i) zahrnující aminokyselinovou sekvenci popsanou v Sekvence ID č.
    2 nebo α-amylázu, která je alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 2 a/nebo iv) α-amylázu podle i) zahrnující následující aminokyselinovou N-terminální sekvenci: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp, Sekvence ID č. 3 nebo α-amylázu, která je N-terminálně alespoň z 80 % homologická s aminokyselinovou sekvencí Sekvence ID č. 3 a/nebo
    v) α-amylázu podle i) až iv), kde α-amyláza se získává z alkalofilních druhů Bacillus a/nebo vi) α-amylázu podle v), kde amylázu lze získat z libovolného z kmenů NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 a DSM 935 a/nebo vii) α-amylázu vykazující pozitivní imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkami vzniklými proti α-amyláze, mající sekvenci aminokyselin odpovídající Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 3 a/nebo viii) variantu mateřské α-amylázy, kde mateřská α-amyláza 1) má jednu z aminokyselinových sekvencí Sekvence ID č. 1, Sekvence ID č. 2 nebo Sekvence ID č. 4, nebo 2) vykazuje alespoň 80 % homologii s jednou nebo více ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo vykazuje imunologickou křížovou reaktivitu s protilátkou vzniklou proti aamyláze, mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí a/nebo je kódována DNA sekvencí, která hybridizuje se stejným vzorkem jako DNA sekvence kódující α-amylázu mající jednu ze zmíněných aminokyselinových sekvencí, kde jsou varianty: A) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl vypuštěn a/nebo B) nejméně jeden aminokyselinový zbytek zmíněné matečné α-amylázy byl nahrazen jiným aminokyselinovým zbytkem a/nebo C) nejméně jeden aminokyselinový zbytek byl inzerován do zmíněné matečné aamylázy; přičemž zmíněná varianta má α-amylázovou aktivitu a vykazuje ve srovnání
    165 • · · * ·· ·· »· f» * · ··« · · · · * » » • « · · * · 4 · « 1 · « ·· ··· · β » . · « · · • · · · · · · * · * * · ' s matečnou α-amylázou následující vlastnosti: zvýšená termostabilita, zvýšená stabilita vůči oxidaci, snížená závislost na Ca iontech, zvýšená stabilita a/nebo α-amylolytická aktivita při neutrálním až relativně vysokém pH, zvýšená α-amylolytická aktivita při relativně vyšší teplotě a zvýšení nebo snížení isoelektrického bodu (pl) takže pl hodnoty α-amylázové varianty lépe vyhovují pH v médiu a
    c) jeden nebo více čistících doplňkových materiálů.
    41. Čistící osobní prostředek podle nároku 40, v y z n a č u j í c í se t í m, že zahrnuje:
    a) od 0,001 % do asi 5 %, s výhodou od 0,001 % do asi 2 %, výhodněji od 0,002 % do asi 0,8 % hmotnosti zmíněné proteázové varianty,
    b) od 0,0001 % do asi 0,1 % hmotnosti čistícího osobního prostředku zmíněné amylázové varianty,
    c) od 0,1 % do asi 95 % hmotnosti surfaktantového systému s výhodou zahrnujícího surfaktant vybraný ze skupiny obsahující anionické karboxyláty, aminoxidy, alkylglukosidy, glukosamidy, alkylsulfáty, alkyléthersulfáty, acylisethionáty, alkylsulfosukcináty, alkylfosfátové estery, ethoxylované fosfátové estery, alkylglycerylethersulfonáty a jejich směsi, výhodněji zahrnující surfaktant vybraný ze skupiny obsahující mýdla, acylglutamáty, alkylsarkosináty, lauraminoxidy, kokaminoxidy, kokamindopropylaminoxidy, decylglukosidy, laurylsulfáty, laurethsulfáty, C12-C18 acylisethionáty a jejich směsi a
    d) případně od 0,05 % do asi 50 % hmotnosti enzymového stabilizátoru.
    42. Čistící osobní prostředek podle nároku 41,vyznačující se tím, že zmíněným surfaktantem je mýdlo v úrovních kolem 2 %, s výhodou alespoň 10 %, výhodněji nejméně 25 % hmotnosti čistícího přípravku.
    43. Čistící osobní prostředek podle nároku 42, vy zn a č u j í c í se t í m,.že poměr mýdla k proteázové variantě je od 2000:1 do asi 8:1, s výhodou od 400:1 do asi 40:1.
    44. Způsob osobního čištění, vyznačující se t í m, že zahrnuje kontaktování části lidského nebo zvířecího těla s čistícím prostředkem podle nároku 40.
    99 ·* 9 9 99 9· • · » · * » · - · « « · · · · ♦ » · « « · ·«··
    45. Způsob předčištění tkanin, vyznačující se t í m, že zahrnuje kontaktování tkaniny před praním s vodným roztokem obsahujícím surfaktant s bělícím přípravkem podle nároku 12 nebo 13.
    46. Způsob předčištění tkanin, vyznačující se t í m, že zahrnuje kontaktování tkaniny před praním s vodným roztokem obsahujícím surfaktant s bělícím přípravkem podle nároku 34 nebo 35.
CZ20001478A 1997-10-23 1998-10-23 Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty CZ20001478A3 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US95632497A 1997-10-23 1997-10-23
US95632397A 1997-10-23 1997-10-23
US95656497A 1997-10-23 1997-10-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20001478A3 true CZ20001478A3 (cs) 2001-12-12

Family

ID=27420734

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001503A CZ301469B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Subtilizín a prostredek s jeho obsahem
CZ20001504A CZ302287B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Varianta subtilisinu
CZ20001493A CZ300347B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Zpusob zvýšení úcinnosti subtilizinu a zpusob výroby pracího prostredku
CZ20001477A CZ20001477A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Čistící prostředky obsahující mnohočetně substituované proteázové varianty
CZ20001478A CZ20001478A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty
CZ20001479A CZ20001479A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Bělící prostředky obsahující mnohočetné substituované proteázové varianty

Family Applications Before (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001503A CZ301469B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Subtilizín a prostredek s jeho obsahem
CZ20001504A CZ302287B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Varianta subtilisinu
CZ20001493A CZ300347B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Zpusob zvýšení úcinnosti subtilizinu a zpusob výroby pracího prostredku
CZ20001477A CZ20001477A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Čistící prostředky obsahující mnohočetně substituované proteázové varianty

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001479A CZ20001479A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Bělící prostředky obsahující mnohočetné substituované proteázové varianty

Country Status (26)

Country Link
US (5) US6312936B1 (cs)
EP (10) EP1624050B9 (cs)
JP (7) JP4346237B2 (cs)
KR (6) KR20010031380A (cs)
CN (9) CN1279721A (cs)
AR (10) AR015977A1 (cs)
AT (9) ATE511540T1 (cs)
AU (7) AU758371B2 (cs)
BR (6) BR9813879A (cs)
CA (9) CA2618389C (cs)
CZ (6) CZ301469B6 (cs)
DE (7) DE69840335D1 (cs)
DK (9) DK1612271T3 (cs)
EG (2) EG21711A (cs)
ES (7) ES2332915T3 (cs)
HK (1) HK1039159B (cs)
HU (3) HUP0103080A2 (cs)
ID (4) ID25897A (cs)
MA (2) MA24811A1 (cs)
NO (3) NO20001901L (cs)
NZ (3) NZ519204A (cs)
PL (1) PL191529B1 (cs)
PT (8) PT1612271E (cs)
TR (8) TR200002013T2 (cs)
TW (2) TW585912B (cs)
WO (5) WO1999020726A1 (cs)

Families Citing this family (613)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA23346A1 (fr) * 1993-10-14 1995-04-01 Genencor Int Variantes de la subtilisine
CA2301851C (en) * 1997-08-29 2012-08-07 Novo Nordisk A/S Protease variants and compositions
AR015977A1 (es) * 1997-10-23 2001-05-30 Genencor Int Variantes de proteasa multiplemente substituida con carga neta alterada para su empleo en detergentes
ES2367505T3 (es) * 1997-10-23 2011-11-04 Danisco Us Inc. Variantes de proteasa con sustituciones múltiples con carga neta alterada para usar en detergentes.
JP2002519050A (ja) 1998-07-02 2002-07-02 ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド 炭水化物成分を有する化学的に修飾されたタンパク質
AR020951A1 (es) * 1998-10-23 2002-06-05 Procter & Gamble Metodos para enmascarar variantes de proteasa para su utilizacion en composiciones detergentes
AU772427B2 (en) 1998-11-10 2004-04-29 Genencor International, Inc. Chemically modified mutant serine hydrolases show improved catalytic activity and chiral selectivity
JP5180417B2 (ja) * 1999-04-28 2013-04-10 ジェネンコー・インターナショナル・インク 特異的に標的化された触媒性アンタゴニストおよびその使用
US6627744B2 (en) 1999-07-02 2003-09-30 Genencor International, Inc. Synthesis of glycodendrimer reagents
AU5928400A (en) * 1999-07-22 2001-02-13 Procter & Gamble Company, The Protease conjugates having sterically protected clip sites
WO2001007578A2 (en) * 1999-07-22 2001-02-01 The Procter & Gamble Company Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions
CN1375000A (zh) * 1999-09-09 2002-10-16 宝洁公司 含有蛋白酶的洗涤剂组合物
US6899961B2 (en) * 1999-12-15 2005-05-31 Samsung Sdi Co., Ltd. Organic electroluminescence device
US7067049B1 (en) * 2000-02-04 2006-06-27 Exxonmobil Oil Corporation Formulated lubricant oils containing high-performance base oils derived from highly paraffinic hydrocarbons
DE10007608A1 (de) * 2000-02-18 2001-08-30 Henkel Kgaa Protease und Percarbonat enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel
WO2001064852A1 (en) * 2000-03-03 2001-09-07 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
US6777218B1 (en) 2000-03-14 2004-08-17 Novozymes A/S Subtilase enzymes having an improved wash performance on egg stains
WO2001075087A2 (en) * 2000-04-03 2001-10-11 Maxygen, Inc. Subtilisin variants
EP2258853B1 (en) * 2000-04-28 2016-06-08 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variant
BR0017277A (pt) * 2000-06-30 2003-05-06 Procter & Gamble Composições detergentes compreendendo uma enzima ciclodextrina glicanotransferase
AU2000260631A1 (en) * 2000-06-30 2002-01-14 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising a maltogenic alpha-amylase enzyme
RU2003105683A (ru) 2000-07-28 2004-08-20 Хенкель Кгаа (De) Новый амилолитический фермент из bacillus sp.а7-7(dsm12368), а также моющее и чистящее средство с этим новым амилолитическим ферментом
US20020155574A1 (en) 2000-08-01 2002-10-24 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
US6893855B2 (en) * 2000-10-13 2005-05-17 Novozymes A/S Subtilase variants
US6803222B2 (en) 2000-11-22 2004-10-12 Kao Corporation Alkaline proteases
US7303907B2 (en) * 2001-01-08 2007-12-04 Health Protection Agency Degradation and detection of TSE infectivity
EP1241112A3 (en) 2001-03-15 2003-02-26 The Procter & Gamble Company Flexible multiple compartment pouch
AU2002254374A1 (en) * 2001-03-23 2002-10-08 Genencor International, Inc. Proteins producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
WO2002092797A2 (en) 2001-05-15 2002-11-21 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
DK200101090A (da) * 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
DE10153792A1 (de) 2001-10-31 2003-05-22 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease-Varianten und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neuen Alkalischen Protease-Varianten
DE10162728A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10162727A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14391) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10163884A1 (de) 2001-12-22 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14392) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
WO2003057713A2 (en) * 2001-12-31 2003-07-17 Genencor International, Inc. Proteases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
MXPA04006811A (es) * 2002-01-16 2004-10-11 Genencor Int Variantes de proteasa substituidas con multiplos.
DK1523553T3 (da) * 2002-01-16 2010-04-19 Genencor Int Multi-substituerede proteasevarianter
US7223386B2 (en) * 2002-03-11 2007-05-29 Dow Corning Corporation Preparations for topical skin use and treatment
US20030180281A1 (en) * 2002-03-11 2003-09-25 Bott Richard R. Preparations for topical skin use and treatment
EP2339017A3 (en) 2002-03-29 2011-10-12 Genencor International, Inc. Enhanced protein expression in bacillus
AU2003256171A1 (en) 2002-07-29 2004-03-29 Aminotech As Method for production of peptides/amino acids produced by said method and use of the same
US7082689B2 (en) * 2002-10-11 2006-08-01 Black & Decker Inc. Keyless shoe lock for reciprocating saw
US7888093B2 (en) 2002-11-06 2011-02-15 Novozymes A/S Subtilase variants
TWI319007B (en) * 2002-11-06 2010-01-01 Novozymes As Subtilase variants
DE10260903A1 (de) 2002-12-20 2004-07-08 Henkel Kgaa Neue Perhydrolasen
US20050059567A1 (en) * 2003-09-11 2005-03-17 The Procter & Gamble Company Methods of formulating enzyme cocktails, enzyme cocktails for the removal of egg-based and grass-based stains and/or soils, compositions and products comprising same
US7985569B2 (en) * 2003-11-19 2011-07-26 Danisco Us Inc. Cellulomonas 69B4 serine protease variants
KR20130083461A (ko) 2003-11-19 2013-07-22 더 프록터 앤드 갬블 캄파니 세린 프로테아제, 세린 효소들을 인코딩하는 핵산 및 이를 편입시킨 벡터 및 숙주 세포
WO2005078074A2 (en) 2004-02-13 2005-08-25 Novozymes A/S Protease variants
BRPI0511171A (pt) 2004-05-17 2007-12-04 Procter & Gamble composição de alvejamento compreendendo um carboidrato oxidase
US20090060933A1 (en) * 2004-06-14 2009-03-05 Estell David A Proteases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
JP2006143855A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp 飲料シミ汚れ除去効果を向上させたアミラーゼ含有漂白性組成物
JP2006143853A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp アミラーゼ含有漂白性組成物
US7147634B2 (en) 2005-05-12 2006-12-12 Orion Industries, Ltd. Electrosurgical electrode and method of manufacturing same
US8814861B2 (en) 2005-05-12 2014-08-26 Innovatech, Llc Electrosurgical electrode and method of manufacturing same
MX2007016045A (es) * 2005-07-08 2008-03-10 Novozymes As Variantes de subtilasa.
US20070161531A1 (en) * 2005-07-08 2007-07-12 Novozymes A/S Subtilase variants
WO2011014783A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Akzo Nobel N.V. Hybrid copolymer compositions
GB0603775D0 (en) * 2006-02-24 2006-04-05 Health Prot Agency Infectivity assay
EP2007506B1 (en) 2006-03-31 2014-03-19 Danisco US Inc. Tangential flow filtration apparatuses, systems, and processes for the separation of compounds
US7629158B2 (en) * 2006-06-16 2009-12-08 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
EP2032698B1 (en) * 2006-06-23 2012-06-27 Danisco US Inc. Systematic evaluation of sequence and activity relationships using site evaluation libraries for engineering multiple properties
CN101511998A (zh) * 2006-07-18 2009-08-19 丹尼斯科美国公司 在宽温度范围内具有活性的蛋白酶变体
CA2660645C (en) 2006-08-11 2016-04-05 Novozymes Biologicals, Inc. Bacillus cultures for use in washing, cleaning, stain removal, or degrading waste materials
MX2009003637A (es) * 2006-10-16 2009-04-22 Danisco Us Inc Genencor Div Detergentes sin fosfato para lavar platos.
US8779112B2 (en) 2007-03-12 2014-07-15 Danisco Us Inc. Modified protease propeptides
US7922970B2 (en) * 2007-04-03 2011-04-12 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Use of sonication to eliminate prions
DK2152732T3 (da) 2007-05-10 2012-06-04 Danisco Us Inc Modificeret sekretionssystem til at øge ekspression af polypeptider i bakterier
DK2171055T3 (en) * 2007-06-06 2016-06-27 Danisco Us Inc Process for the improvement of protein many properties
PL2205343T3 (pl) 2007-09-12 2013-12-31 Danisco Us Inc Filtracja z wewnętrzną kontrolą zanieczyszczeń
US8021436B2 (en) 2007-09-27 2011-09-20 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a xyloglucan conjugate
US7618801B2 (en) 2007-10-30 2009-11-17 Danison US Inc. Streptomyces protease
DK2215110T3 (da) 2007-11-05 2025-10-13 Danisco Us Inc Alfa-amylasevarianter med ændrede egenskaber
CA2704791A1 (en) 2007-11-05 2009-05-14 Danisco Us Inc. Variants of bacillus sp. ts-23 alpha-amylase with altered properties
EP2235176B1 (en) 2007-12-21 2017-06-21 Danisco US Inc. Enhanced protein production in bacillus
DK2245130T3 (da) 2008-02-04 2021-01-18 Danisco Us Inc Ts23 -alpha-amylasevarianter med ændrede egenskaber
PL2088187T3 (pl) * 2008-02-08 2013-01-31 Procter & Gamble Sposób otrzymywania rozpuszczalnej w wodzie saszetki
US8066818B2 (en) * 2008-02-08 2011-11-29 The Procter & Gamble Company Water-soluble pouch
US20090209447A1 (en) 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
EP2100947A1 (en) 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP2100948A1 (en) * 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US20090233830A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Penny Sue Dirr Automatic detergent dishwashing composition
JP5973166B2 (ja) 2008-03-26 2016-08-23 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 安定化された液体酵素組成物
NZ587540A (en) 2008-03-28 2012-06-29 Danisco Us Inc Method for amplifying locus in bacterial cell
EP2297314B1 (en) * 2008-06-06 2015-04-15 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising variant microbial proteases
ES2527645T3 (es) 2008-06-06 2015-01-27 Danisco Us Inc. Variantes de alfa-amilasa de Geobacillus stearothermophilus (AMYS) con propiedades mejoradas
EP2166092A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP2166073A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166075A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
EP2166076A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
CA2738447C (en) 2008-09-25 2019-01-08 Danisco Us Inc. Alpha-amylase blends and methods for using said blends
CN103122345A (zh) 2008-11-11 2013-05-29 丹尼斯科美国公司 包含一种或多种可组合的突变的芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶
CN102209782A (zh) * 2008-11-11 2011-10-05 丹尼斯科美国公司 包含枯草杆菌蛋白酶变体的组合物和方法
EP2589651A3 (en) * 2008-11-11 2013-08-28 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising serine protease variants
AR074106A1 (es) * 2008-11-11 2010-12-22 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden una variante de subtilisina
US20100267304A1 (en) * 2008-11-14 2010-10-21 Gregory Fowler Polyurethane foam pad and methods of making and using same
US20100125046A1 (en) * 2008-11-20 2010-05-20 Denome Frank William Cleaning products
EP2216390B1 (en) 2009-02-02 2013-11-27 The Procter and Gamble Company Hand dishwashing method
ES2488117T3 (es) 2009-02-02 2014-08-26 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
EP2216391A1 (en) 2009-02-02 2010-08-11 The Procter & Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
EP2216392B1 (en) 2009-02-02 2013-11-13 The Procter and Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
EP2213715A1 (en) 2009-02-02 2010-08-04 The Procter & Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
ES2461892T3 (es) 2009-02-02 2014-05-21 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
EP2216393B1 (en) 2009-02-09 2024-04-24 The Procter & Gamble Company Detergent composition
US8153574B2 (en) 2009-03-18 2012-04-10 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene polyol acetal derivatives and detersive enzymes
US8293697B2 (en) 2009-03-18 2012-10-23 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene sorbitol acetal derivatives
WO2010115021A2 (en) 2009-04-01 2010-10-07 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising alpha-amylase variants with altered properties
EP2435547A1 (en) 2009-05-26 2012-04-04 The Procter & Gamble Company Aqueous liquid composition for pre-treating soiled dishware
AR076941A1 (es) 2009-06-11 2011-07-20 Danisco Us Inc Cepa de bacillus para una mayor produccion de proteina
WO2011005623A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Laundry detergent composition comprising low level of bleach
EP2451919A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a liquid laundry detergent composition
BR112012000520A2 (pt) 2009-07-09 2016-02-16 Procter & Gamble composição catalítica detergente para lavagem de roupa que compreende teores relativamente baixos de eletrólito solúvel em água
EP2451921B1 (en) 2009-07-09 2016-08-17 The Procter and Gamble Company A mildly alkaline, low-built, solid fabric treatment detergent composition comprising phthalimido peroxy caproic acid
WO2011005911A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a compacted liquid laundry detergent composition
JP2012532246A (ja) 2009-07-09 2012-12-13 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 比較的低濃度の水溶性電解質を含む触媒性洗濯洗剤組成物
US20110009307A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 Alan Thomas Brooker Laundry Detergent Composition Comprising Low Level of Sulphate
WO2011005917A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a liquid laundry detergent composition
EP2292725B2 (en) 2009-08-13 2022-08-24 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabrics at low temperature
WO2011036263A1 (en) * 2009-09-25 2011-03-31 Novozymes A/S Subtilase variants
CN102549136A (zh) * 2009-09-25 2012-07-04 诺维信公司 去污剂组合物
CA2782613C (en) 2009-12-09 2016-08-23 The Procter & Gamble Company Fabric and home care products
AR079338A1 (es) 2009-12-09 2012-01-18 Danisco Us Inc Variantes de proteasa de bacillus y acidos nucleicos que codifican dichas variantes
ES2422593T3 (es) 2009-12-10 2013-09-12 Procter & Gamble Método y uso de una composición para lavavajillas
EP2333039B2 (en) 2009-12-10 2020-11-11 The Procter & Gamble Company Method and use of a dishwasher composition
ES2399311T5 (es) 2009-12-10 2020-06-19 Procter & Gamble Composición detergente
EP2333042B1 (en) 2009-12-10 2015-07-01 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing product and use thereof
MX2012007168A (es) 2009-12-21 2012-07-23 Danisco Us Inc Composiciones de detergentes que contienen lipasa thermobifida fusca y metodos de uso de esta.
WO2011084599A1 (en) 2009-12-21 2011-07-14 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing bacillus subtilis lipase and methods of use thereof
US8741609B2 (en) 2009-12-21 2014-06-03 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing Geobacillus stearothermophilus lipase and methods of use thereof
US9045514B2 (en) * 2010-01-22 2015-06-02 Dupont Nutrition Biosciences Aps Methods for producing amino-substituted glycolipid compounds
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
JP6185243B2 (ja) 2010-02-10 2017-08-23 ノボザイムス アクティーゼルスカブ キレート剤存在下で高安定な変異体及び変異体含有組成物
ES2401126T3 (es) 2010-02-25 2013-04-17 The Procter & Gamble Company Composición detergente
EP2365059A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising C.I. fluorescent brightener 260 in alpha-crystalline form
EP2380957A1 (en) 2010-04-19 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having a dynamic in-wash ph profile
EP2365054A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising secondary alcohol-based detersive surfactant
EP2363456A1 (en) 2010-03-01 2011-09-07 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising brightener in micronized particulate form
EP2365058A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having an excellent anti-encrustation profile
EP2377914B1 (en) 2010-04-19 2016-11-09 The Procter & Gamble Company Mildly alkaline, low-built, solid fabric treatment detergent composition comprising perhydrolase
US20120067373A1 (en) 2010-04-15 2012-03-22 Philip Frank Souter Automatic Dishwashing Detergent Composition
AR080886A1 (es) 2010-04-15 2012-05-16 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden proteasas variantes
US20110257069A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Stephen Joseph Hodson Detergent composition
US20110257062A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Liquid laundry detergent composition comprising a source of peracid and having a ph profile that is controlled with respect to the pka of the source of peracid
US8889612B2 (en) 2010-04-19 2014-11-18 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a compacted liquid laundry detergent composition
US20110257060A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Laundry detergent composition comprising bleach particles that are suspended within a continuous liquid phase
ES2533368T3 (es) 2010-04-23 2015-04-09 The Procter & Gamble Company Producto para lavavajillas
EP2380478A1 (en) 2010-04-23 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing product
EP2380963B1 (en) 2010-04-23 2015-12-23 The Procter and Gamble Company Method of perfuming
EP2383329A1 (en) 2010-04-23 2011-11-02 The Procter & Gamble Company Particle
EP2380961B1 (en) 2010-04-23 2018-05-23 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP2380962B1 (en) 2010-04-23 2016-03-30 The Procter and Gamble Company Particle
WO2011140364A1 (en) * 2010-05-06 2011-11-10 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising subtilisin variants
DE102010028951A1 (de) 2010-05-12 2011-11-17 Henkel Ag & Co. Kgaa Lagerstabiles flüssiges Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend Protease und Lipase
AR081423A1 (es) 2010-05-28 2012-08-29 Danisco Us Inc Composiciones detergentes con contenido de lipasa de streptomyces griseus y metodos para utilizarlas
EP2395070A1 (en) 2010-06-10 2011-12-14 The Procter & Gamble Company Liquid laundry detergent composition comprising lipase of bacterial origin
EP2395071A1 (en) 2010-06-10 2011-12-14 The Procter & Gamble Company Solid detergent composition comprising lipase of bacterial origin
EP2585573A1 (en) 2010-06-23 2013-05-01 The Procter and Gamble Company Product for pre-treatment and laundering of stained fabric
US8685171B2 (en) 2010-07-29 2014-04-01 The Procter & Gamble Company Liquid detergent composition
EP2412792A1 (en) 2010-07-29 2012-02-01 The Procter & Gamble Company Liquid detergent composition
CN101922108B (zh) * 2010-09-14 2012-09-05 东华大学 使用1，4，7-三氮杂环壬烷配合物的活化漂白的方法
WO2012057781A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a fungal serine protease
FI123942B (fi) 2010-10-29 2013-12-31 Ab Enzymes Oy Sieniperäisen seriiniproteaasin variantteja
WO2011026154A2 (en) 2010-10-29 2011-03-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
DE102010063458A1 (de) * 2010-12-17 2012-06-21 Henkel Ag & Co. Kgaa Lagerstabiles flüssiges Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend Protease und Amylase
CA2827405C (en) 2011-02-15 2023-01-10 Novozymes Biologicals, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
DE102011005354A1 (de) 2011-03-10 2012-09-13 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte Proteasevarianten
BR112013027305A2 (pt) 2011-04-29 2016-11-29 Danisco Us Inc "polipeptídeo recombinante, composição detergente que o compreende, método para limpeza de produto têxtil, vetor de expressão e célula hospedeira".
WO2012149333A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing bacillus sp. mannanase and methods of use thereof
BR112013027209A2 (pt) 2011-04-29 2016-11-29 Danisco Us Inc "polipeptídeo recombinante, composição detergente contendo mananase de geobacillus tepidamans, método para limpeza de produto têxtil, vetor de expressão e célula hospedeira"
WO2012151480A2 (en) 2011-05-05 2012-11-08 The Procter & Gamble Company Compositions and methods comprising serine protease variants
US9856466B2 (en) 2011-05-05 2018-01-02 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising serine protease variants
US20140371435A9 (en) 2011-06-03 2014-12-18 Eduardo Torres Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
US20120324655A1 (en) 2011-06-23 2012-12-27 Nalini Chawla Product for pre-treatment and laundering of stained fabric
WO2013001078A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
JP2014521769A (ja) 2011-07-27 2014-08-28 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 多相液体洗剤組成物
US8636918B2 (en) 2011-08-05 2014-01-28 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide hybrid polymer composition and methods of controlling hard water scale
US8679366B2 (en) 2011-08-05 2014-03-25 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide graft polymer composition and methods of controlling hard water scale
US8841246B2 (en) 2011-08-05 2014-09-23 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide hybrid polymer composition and methods of improving drainage
US8853144B2 (en) 2011-08-05 2014-10-07 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide graft polymer composition and methods of improving drainage
EP2751263A1 (en) 2011-08-31 2014-07-09 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising a lipolytic enzyme variant
PL2584028T3 (pl) 2011-10-19 2017-10-31 Procter & Gamble Cząstka
MX2014005089A (es) 2011-11-04 2014-08-08 Akzo Nobel Chemicals Int Bv Copolimeros de dendrita de injerto, y metodos para producir los mismos.
US9988526B2 (en) 2011-11-04 2018-06-05 Akzo Nobel Chemicals International B.V. Hybrid dendrite copolymers, compositions thereof and methods for producing the same
CN104053780A (zh) 2011-12-09 2014-09-17 丹尼斯科美国公司 用于在微生物中生产蛋白质的来自枯草芽孢杆菌的核糖体启动子
KR20140122704A (ko) 2011-12-13 2014-10-20 다니스코 유에스 인크. 혼합 배양으로부터 제조된 효소 칵테일
MX2014007446A (es) * 2011-12-20 2014-08-01 Novozymes As Variantes de subtilasa y polinucleotidos que las codifican.
CN104024407A (zh) 2011-12-22 2014-09-03 丹尼斯科美国公司 包含脂解酶变体的组合物和方法
ES2644007T3 (es) 2012-01-26 2017-11-27 Novozymes A/S Uso de polipéptidos con actividad de proteasa en piensos para animales y en detergentes
BR112014019142A2 (pt) 2012-02-03 2017-06-27 Procter & Gamble composições e métodos para tratamento de superfícies com lipases
MX361441B (es) 2012-03-19 2018-12-06 Milliken & Co Colorantes de carboxilato.
US9909109B2 (en) 2012-04-02 2018-03-06 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
AR090971A1 (es) 2012-05-07 2014-12-17 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de degradacion de xantano y polinucleotidos que los codifican
CN104394936B (zh) * 2012-05-30 2017-08-25 科莱恩金融(Bvi)有限公司 N‑甲基‑n‑酰基葡糖胺作为表面活性剂溶液中的低温稳定剂的用途
EP2674475A1 (en) 2012-06-11 2013-12-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
AU2013279440B2 (en) 2012-06-20 2016-10-06 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
MX2015000312A (es) 2012-07-12 2015-04-10 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad lipasa y polinucleotidos que los codifican.
US8945314B2 (en) 2012-07-30 2015-02-03 Ecolab Usa Inc. Biodegradable stability binding agent for a solid detergent
US8871699B2 (en) 2012-09-13 2014-10-28 Ecolab Usa Inc. Detergent composition comprising phosphinosuccinic acid adducts and methods of use
US9994799B2 (en) 2012-09-13 2018-06-12 Ecolab Usa Inc. Hard surface cleaning compositions comprising phosphinosuccinic acid adducts and methods of use
US20140308162A1 (en) 2013-04-15 2014-10-16 Ecolab Usa Inc. Peroxycarboxylic acid based sanitizing rinse additives for use in ware washing
US9752105B2 (en) 2012-09-13 2017-09-05 Ecolab Usa Inc. Two step method of cleaning, sanitizing, and rinsing a surface
EP2712915A1 (en) 2012-10-01 2014-04-02 The Procter and Gamble Company Methods of treating a surface and compositions for use therein
US8753453B2 (en) 2012-10-04 2014-06-17 Ecolab Usa Inc. Pre-soak technology for laundry and other hard surface cleaning
KR20150067336A (ko) 2012-10-12 2015-06-17 다니스코 유에스 인크. 지방분해 효소 변이체를 포함하는 조성물 및 방법
CN104781400A (zh) 2012-11-05 2015-07-15 丹尼斯科美国公司 包含嗜热菌蛋白酶变体的组合物和方法
WO2014100018A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Danisco Us Inc. Novel mannanase, compositions and methods of use thereof
MX2015007802A (es) 2012-12-20 2015-09-04 Procter & Gamble Composiciones de detergente con blanqueador recubierto con silicato.
EP3354728B1 (en) 2012-12-21 2020-04-22 Danisco US Inc. Alpha-amylase variants
WO2014099525A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Danisco Us Inc. Paenibacillus curdlanolyticus amylase, and methods of use, thereof
EP2767579B1 (en) 2013-02-19 2018-07-18 The Procter and Gamble Company Method of laundering a fabric
ES2834373T3 (es) 2013-02-19 2021-06-17 Procter & Gamble Método para lavado de un tejido
EP2767582A1 (en) 2013-02-19 2014-08-20 The Procter and Gamble Company Method of laundering a fabric
CA2902279C (en) 2013-03-05 2019-05-28 The Procter & Gamble Company Mixed sugar amine or sugar amide surfactant compositions
EP2970930B2 (en) 2013-03-11 2021-12-08 Danisco US Inc. Alpha-amylase combinatorial variants
WO2014143773A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Lubrizol Advanced Materials, Inc. Itaconic acid polymers
WO2014147127A1 (en) 2013-03-21 2014-09-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
MX2015013670A (es) 2013-03-28 2016-02-18 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que contiene una polieteramina.
CN103215151B (zh) * 2013-04-25 2015-01-07 上海巴方精细化工有限公司 矢车菊低刺激护肤香皂
EP2997143A1 (en) 2013-05-17 2016-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
JP6188199B2 (ja) * 2013-05-20 2017-08-30 ライオン株式会社 食器洗い機用洗浄剤
CN103361198B (zh) * 2013-05-22 2015-01-07 上海巴方精细化工有限公司 川芎消炎复合香皂
EP3699256A1 (en) 2013-05-28 2020-08-26 The Procter & Gamble Company Surface treatment compositions comprising photochromic dyes
WO2014194117A2 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
EP3882346B1 (en) 2013-05-29 2025-10-01 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3004314B1 (en) 2013-05-29 2018-06-20 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
CN105492603B (zh) 2013-05-29 2022-06-03 丹尼斯科美国公司 新型金属蛋白酶
US10378001B2 (en) 2013-06-27 2019-08-13 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
US20160152925A1 (en) 2013-07-04 2016-06-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Anti-Redeposition Effect and Polynucleotides Encoding Same
US20160160197A1 (en) 2013-07-19 2016-06-09 Danisco Us Inc. Compositions and Methods Comprising a Lipolytic Enzyme Variant
CN117165561A (zh) * 2013-07-29 2023-12-05 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
JP2016533739A (ja) * 2013-07-29 2016-11-04 ダニスコ・ユーエス・インク 変異酵素
DK3044313T3 (da) 2013-09-12 2020-02-17 Danisco Us Inc Sammensætninger og fremgangsmåder omfattende lg12-clade- proteasevarianter
WO2015042087A1 (en) 2013-09-18 2015-03-26 The Procter & Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
US9834682B2 (en) 2013-09-18 2017-12-05 Milliken & Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
WO2015042013A1 (en) 2013-09-18 2015-03-26 Lubrizol Advanced Materials, Inc. Stable linear polymers
CN105555936A (zh) 2013-09-18 2016-05-04 宝洁公司 包含羧化物染料的衣物洗涤护理组合物
EP3047010B1 (en) 2013-09-18 2018-05-09 The Procter and Gamble Company Laundry care compositions containing thiophene azo carboxylate dyes
DE102013219467A1 (de) * 2013-09-26 2015-03-26 Henkel Ag & Co. Kgaa Stabilisierte Inhibitor-Proteasevarianten
EP2857485A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857486A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857487A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
US20160244699A1 (en) 2013-10-15 2016-08-25 Danisco Us Inc. Clay Granule
DK3068879T3 (da) 2013-11-14 2020-03-16 Danisco Us Inc Stabile enzymer opnået ved glykeringsreduktion
EP3910057A1 (en) 2013-12-13 2021-11-17 Danisco US Inc. Serine proteases of the bacillus gibsonii-clade
EP3080262B1 (en) 2013-12-13 2019-02-06 Danisco US Inc. Serine proteases of bacillus species
KR20160099629A (ko) 2013-12-16 2016-08-22 이 아이 듀폰 디 네모아 앤드 캄파니 점도 조절제로서의 폴리 알파-1,3-글루칸 에테르의 사용
CN106029700B (zh) 2013-12-18 2019-04-12 纳幕尔杜邦公司 阳离子聚α-1，3-葡聚糖醚
WO2015102814A1 (en) 2013-12-31 2015-07-09 Danisco Us Inc. Enhanced protein expression
EP3097174A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
WO2015112341A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112339A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112338A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
CA2841024C (en) 2014-01-30 2017-03-07 The Procter & Gamble Company Unit dose article
CN105992796A (zh) 2014-02-14 2016-10-05 纳幕尔杜邦公司 用于粘度调节的聚-α-1,3-1,6-葡聚糖
WO2015130669A1 (en) 2014-02-25 2015-09-03 The Procter & Gamble Company A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
US10752562B2 (en) 2014-02-25 2020-08-25 The Procter & Gamble Company Process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
CA2937355A1 (en) 2014-02-26 2015-09-03 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising alkoxylated polyalkyleneimine, organomodified silicone and siloxane-based diluent
EP2915873A1 (en) * 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
CN106132997A (zh) 2014-03-11 2016-11-16 纳幕尔杜邦公司 作为洗涤剂助洗剂的氧化的聚α‑1，3‑葡聚糖
WO2015138872A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Lubrizol Advanced Materials, Inc. Itaconic acid polymers and copolymers
JP6585698B2 (ja) 2014-03-21 2019-10-02 ダニスコ・ユーエス・インク バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種のセリンプロテアーゼ
US9719052B2 (en) 2014-03-27 2017-08-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
WO2015148361A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP2924108A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP2924105A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
WO2015150457A1 (en) 2014-04-01 2015-10-08 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
JP2017518407A (ja) 2014-05-06 2017-07-06 ミリケン・アンド・カンパニーＭｉｌｌｉｋｅｎ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ ランドリーケア組成物
US9365805B2 (en) 2014-05-15 2016-06-14 Ecolab Usa Inc. Bio-based pot and pan pre-soak
WO2015187757A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers
CN106414729A (zh) 2014-06-12 2017-02-15 诺维信公司 α‑淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
WO2015195777A1 (en) 2014-06-19 2015-12-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
WO2016001450A2 (en) 2014-07-04 2016-01-07 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
CN106661566A (zh) 2014-07-04 2017-05-10 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
BR112017002158B1 (pt) 2014-08-01 2022-03-15 Ecolab Usa Inc Método de limpeza manual de superfície usando produtos têxteis de limpeza e sistema
EP2987848A1 (en) 2014-08-19 2016-02-24 The Procter & Gamble Company Method of laundering a fabric
EP2987849A1 (en) 2014-08-19 2016-02-24 The Procter and Gamble Company Method of Laundering a Fabric
BR112017004572A2 (pt) 2014-09-10 2018-01-23 Basf Se composição de limpeza encapsulada, e, método para formar uma composição de limpeza encapsulada.
US9617502B2 (en) 2014-09-15 2017-04-11 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid
CN107075423A (zh) 2014-09-25 2017-08-18 宝洁公司 包含聚醚胺的清洁组合物
US20160090552A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer
US9388368B2 (en) 2014-09-26 2016-07-12 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
DK3207129T3 (da) 2014-10-17 2020-02-24 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus-arten
WO2016065238A1 (en) 2014-10-24 2016-04-28 Danisco Us Inc. Method for producing alcohol by use of a tripeptidyl peptidase
WO2016069569A2 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
DK3212781T3 (da) 2014-10-27 2019-12-16 Danisco Us Inc Serinproteaser
DK3212662T3 (da) 2014-10-27 2020-07-20 Danisco Us Inc Serinproteaser
EP3212783B1 (en) 2014-10-27 2024-06-26 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069557A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
BR112017010239A2 (pt) 2014-11-17 2018-01-02 Procter & Gamble composições para liberação de agente de benefício
EP3221447A1 (en) * 2014-11-20 2017-09-27 Novozymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
WO2016099917A1 (en) 2014-12-16 2016-06-23 Danisco Us Inc Enhanced protein expression
CN107278230B (zh) 2014-12-19 2021-10-29 丹尼斯科美国公司 增强的蛋白质表达
WO2016106011A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 E. I. Du Pont De Nemours And Company Enzymatically produced cellulose
DK3259358T3 (da) 2015-02-19 2024-09-09 Danisco Us Inc Forøget proteinekspression
CN107454914B (zh) 2015-03-12 2021-09-21 丹尼斯科美国公司 包含lg12进化枝蛋白酶变体的组合物和方法
CN117683589A (zh) 2015-04-29 2024-03-12 宝洁公司 洗涤织物的方法
WO2016176240A1 (en) 2015-04-29 2016-11-03 The Procter & Gamble Company Method of treating a fabric
EP3088502B1 (en) 2015-04-29 2018-05-23 The Procter and Gamble Company Method of treating a fabric
CN107532116B (zh) 2015-04-29 2021-05-07 宝洁公司 处理织物的方法
ES2682178T3 (es) 2015-04-29 2018-09-19 The Procter & Gamble Company Composición detergente
JP6866302B2 (ja) 2015-05-04 2021-04-28 ミリケン・アンド・カンパニーＭｉｌｌｉｋｅｎ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ ランドリーケア組成物中の青味剤としてのロイコトリフェニルメタン色素
EP4212609A1 (en) 2015-05-08 2023-07-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP3964575A3 (en) 2015-05-08 2022-09-28 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2016180792A1 (en) 2015-05-08 2016-11-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants having improved performance and stability
RU2733987C2 (ru) 2015-05-13 2020-10-09 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Варианты протеазы клады aprl и их применения
EP3303536B1 (en) 2015-06-02 2019-04-17 Unilever PLC Laundry detergent composition
FI3307427T3 (fi) 2015-06-09 2023-11-09 Danisco Us Inc Osmoottiset puhkeavat kapselit
US10941372B2 (en) 2015-06-11 2021-03-09 Conopco, Inc. Laundry detergent composition
WO2016205755A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
CN107810260B (zh) 2015-06-26 2020-07-17 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
US20180171315A1 (en) 2015-09-17 2018-06-21 Novozymes A/S Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same
US11053486B2 (en) 2015-09-17 2021-07-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent compositions comprising polypeptides having xanthan degrading activity
WO2017060518A1 (en) * 2015-10-09 2017-04-13 Novozymes A/S Laundry method, use of polypeptide and detergent composition
US11028346B2 (en) 2015-10-28 2021-06-08 Novozymes A/S Detergent composition comprising protease and amylase variants
WO2017079756A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Danisco Us Inc Paenibacillus and bacillus spp. mannanases
JP7364331B2 (ja) 2015-11-05 2023-10-18 ダニスコ・ユーエス・インク パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属種マンナナーゼ
JP2019504932A (ja) 2015-11-13 2019-02-21 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーＥ．Ｉ．Ｄｕ Ｐｏｎｔ Ｄｅ Ｎｅｍｏｕｒｓ Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケアおよび織物ケアにおいて使用するためのグルカン繊維組成物
WO2017083228A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
EP3374488B1 (en) 2015-11-13 2020-10-14 DuPont Industrial Biosciences USA, LLC Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
CN108291179B (zh) * 2015-11-25 2020-07-07 荷兰联合利华有限公司 液体洗涤剂组合物
JP2019500058A (ja) 2015-12-09 2019-01-10 ダニスコ・ユーエス・インク α−アミラーゼ組み合わせ変異体
JP6591278B2 (ja) * 2015-12-15 2019-10-16 花王株式会社 食器用固体洗浄剤組成物
US20180362946A1 (en) 2015-12-18 2018-12-20 Danisco Us Inc. Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof
US11407986B2 (en) * 2015-12-30 2022-08-09 Novozymes A/S Enzyme variants and polynucleotides encoding same
EP3205393A1 (en) 2016-02-12 2017-08-16 Basf Se Process for preparation of microcapsules
EP3205392A1 (en) 2016-02-12 2017-08-16 Basf Se Microcapsules and process for preparation of microcapsules
WO2017140391A1 (en) 2016-02-17 2017-08-24 Unilever Plc Whitening composition
WO2017140392A1 (en) 2016-02-17 2017-08-24 Unilever Plc Whitening composition
EP3419991B1 (en) 2016-03-04 2022-10-26 Danisco US Inc. Engineered ribosomal promoters for protein production in microorganisms
CA3016373A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Basf Se Encapsulated laundry cleaning composition
BR112018068068B1 (pt) 2016-03-21 2023-04-18 Unilever Ip Holdings B.V. Composição aquosa líquida de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
CN108779416B (zh) 2016-04-08 2021-01-05 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
WO2017182295A1 (en) 2016-04-18 2017-10-26 Basf Se Liquid cleaning compositions
US20190194636A1 (en) * 2016-05-03 2019-06-27 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
EP3452584B1 (en) 2016-05-05 2021-01-06 Danisco US Inc. Protease variants and uses thereof
JP6067168B1 (ja) * 2016-05-30 2017-01-25 株式会社ニイタカ 自動洗浄機用洗浄剤組成物
CN119307476A (zh) 2016-05-31 2025-01-14 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
CN110283803B (zh) * 2016-06-02 2021-08-03 天津科技大学 一种磷脂酶d及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法
WO2017213168A1 (ja) * 2016-06-09 2017-12-14 花王株式会社 変異アルカリプロテアーゼ
MX2018015559A (es) 2016-06-17 2019-06-06 Danisco Us Inc Variantes de proteasa y sus usos.
EP3275988B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275985A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275986B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275989A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275987A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
AU2017317564B2 (en) 2016-08-24 2021-09-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising GH9 endoglucanase variants I
CN109563498A (zh) 2016-08-24 2019-04-02 汉高股份有限及两合公司 包含黄原胶裂解酶变体i的洗涤剂组合物
WO2018037061A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
EP3504330A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
CN109890950A (zh) 2016-11-01 2019-06-14 宝洁公司 衣物洗涤护理组合物中作为上蓝剂的隐色着色剂
JP6790257B2 (ja) 2016-11-01 2020-11-25 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケア組成物における青味剤としてのロイコ着色剤、その包装、キット及び方法
JP2019535857A (ja) 2016-11-01 2019-12-12 ミリケン・アンド・カンパニーＭｉｌｌｉｋｅｎ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケア組成物における青味剤としてのロイコ着色剤
US20180119056A1 (en) 2016-11-03 2018-05-03 Milliken & Company Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions
WO2018085524A2 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Danisco Us Inc Laundry detergent composition
US10577571B2 (en) 2016-11-08 2020-03-03 Ecolab Usa Inc. Non-aqueous cleaner for vegetable oil soils
US10550443B2 (en) 2016-12-02 2020-02-04 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
EP3330348B1 (en) 2016-12-02 2021-11-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
JP6907317B2 (ja) 2016-12-02 2021-07-21 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 酵素を含む洗浄組成物
WO2018108382A1 (en) 2016-12-15 2018-06-21 Unilever Plc Laundry detergent composition
US11946081B2 (en) 2016-12-21 2024-04-02 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
US20200392477A1 (en) * 2016-12-21 2020-12-17 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
EP3339423A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
PL3357994T3 (pl) 2017-02-01 2024-03-25 The Procter & Gamble Company Kompozycje czyszczące zawierające warianty amylazy
FI3585910T3 (fi) 2017-02-24 2024-06-19 Danisco Us Inc Koostumukset ja menetelmät proteiinin tuotannon lisäämiseksi bacillus licheniformiksessa
WO2018169750A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Danisco Us Inc Trypsin-like serine proteases and uses thereof
US20200040283A1 (en) 2017-03-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents
JP7672197B2 (ja) 2017-03-31 2025-05-07 ダニスコ・ユーエス・インク α－アミラーゼ組み合わせ変異体
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
EP3645696A1 (en) 2017-06-30 2020-05-06 Danisco US Inc. Low-agglomeration, enzyme-containing particles
WO2019008035A1 (en) 2017-07-07 2019-01-10 Unilever Plc Laundry cleaning composition
EP3649222B1 (en) 2017-07-07 2024-03-13 Unilever IP Holdings B.V. Whitening composition
EP3668973A2 (en) 2017-08-18 2020-06-24 Danisco US Inc. Alpha-amylase variants
US11879127B2 (en) 2017-08-23 2024-01-23 Danisco Us Inc. Methods and compositions for efficient genetic modifications of Bacillus licheniformis strains
WO2019038059A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITIONS COMPRISING GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS II
CA3070749A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
US20210130744A1 (en) 2017-08-24 2021-05-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising xanthan lyase variants ii
CN111344404A (zh) 2017-08-24 2020-06-26 诺维信公司 黄原胶裂解酶变体以及编码其的多核苷酸
EP3682010A1 (en) 2017-09-13 2020-07-22 Danisco US Inc. Modified 5'-untranslated region (utr) sequences for increased protein production in bacillus
EP3694980A1 (en) 2017-10-12 2020-08-19 The Procter and Gamble Company Leuco colorants in combination with a second whitening agent as bluing agents in laundry care compositions
EP3694973A1 (en) 2017-10-12 2020-08-19 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
TWI715878B (zh) 2017-10-12 2021-01-11 美商美力肯及公司 隱色著色劑及組成物
US10717950B2 (en) 2017-10-12 2020-07-21 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care composition
US11053392B2 (en) 2017-11-01 2021-07-06 Milliken & Company Leuco compounds, colorant compounds, and compositions containing the same
WO2019089898A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Danisco Us Inc Freezing point depressed solid matrix compositions for melt granulation of enzymes
US20200354708A1 (en) 2017-11-29 2020-11-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants having improved stability
BR112020010648A2 (pt) 2017-11-30 2021-02-02 Unilever N.V. composição detergente, composição detergente de lavanderia, método para aprimorar limpeza enzimática em água e uso de uma enzima protease
DE102017223281A1 (de) * 2017-12-19 2019-06-19 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigugnsmittel enthaltend durch Betain stabilisierte Amylase
ES2990037T3 (es) 2017-12-19 2024-11-28 Procter & Gamble Composición detergente para lavavajillas
ES3036958T3 (en) 2017-12-19 2025-09-25 Procter & Gamble Automatic dishwashing detergent composition
DK3502244T3 (da) 2017-12-19 2025-03-24 Procter & Gamble Rensemiddelsammensætning til automatisk opvask
EP3502245B1 (en) 2017-12-19 2025-03-05 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
BR112020012584A2 (pt) 2017-12-21 2020-11-24 Danisco Us Inc. grânulos fundidos a quente contendo enzima que compreendem um dessecante termotolerante
JP6967447B2 (ja) * 2017-12-27 2021-11-17 小林製薬株式会社 錠剤状義歯洗浄剤
CN111670244B (zh) 2018-01-03 2023-08-01 丹尼斯科美国公司 突变的和遗传修饰的芽孢杆菌属细胞及其用于增加蛋白质产生的方法
WO2019147533A1 (en) 2018-01-26 2019-08-01 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose articles comprising enzyme
EP3749107A1 (en) 2018-02-08 2020-12-16 Danisco US Inc. Thermally-resistant wax matrix particles for enzyme encapsulation
KR20200124258A (ko) 2018-02-23 2020-11-02 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물
JP2021512986A (ja) 2018-02-28 2021-05-20 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗浄方法
CA3089281A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a glycogen debranching enzyme
US12188064B2 (en) * 2018-03-23 2025-01-07 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
CN112119147B (zh) 2018-05-17 2023-09-29 联合利华知识产权控股有限公司 清洁组合物
WO2019245839A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3799601A1 (en) 2018-06-19 2021-04-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants
US12415996B2 (en) 2018-06-19 2025-09-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants
WO2019245838A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US20200032178A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose articles comprising water-soluble fibrous structures and particles
CA3108284A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Variant alpha-amylases having amino acid substitutions that lower the pka of the general acid
WO2020047215A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Danisco Us Inc Enzyme-containing granules
WO2020046613A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Danisco Us Inc Compositions comprising a lipolytic enzyme variant and methods of use thereof
WO2020058024A1 (en) 2018-09-17 2020-03-26 Unilever Plc Detergent composition
JP2022503923A (ja) 2018-09-27 2022-01-12 ダニスコ・ユーエス・インク 医療用器具を洗浄するための組成物
CA3116128A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Danisco Us Inc Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants
WO2020104157A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
BR112021009807A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima isomerase
EP3884026B1 (en) 2018-11-20 2024-06-26 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
CN113166689A (zh) 2018-11-20 2021-07-23 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
BR112021009828A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente líquida, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima esterol esterase
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2020127775A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novozymes A/S Detergent pouch comprising metalloproteases
EP3702452A1 (en) * 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
US20200291332A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
JP7275298B2 (ja) 2019-03-14 2023-05-17 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 酵素を含むクリーニング組成物
MX2021011106A (es) 2019-03-14 2021-10-22 Procter & Gamble Metodo para tratar el algodon.
CA3122942A1 (en) 2019-03-21 2020-09-24 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CN113874484A (zh) 2019-05-16 2021-12-31 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣组合物
BR112021022167A2 (pt) 2019-05-16 2022-01-18 Unilever Ip Holdings B V Composição de lavanderia auxiliar, método para administrar enzimas a tecidos, método para aprimorar o benefício amaciante de um condicionador de tecido e uso de uma composição de lavanderia auxiliar
US11261404B2 (en) 2019-05-20 2022-03-01 Ecolab Usa Inc. Surfactant package for high foaming detergents with low level of medium to long chain linear alcohols
EP3741283B1 (en) 2019-05-22 2025-03-19 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
EP3976775A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US20220220419A1 (en) 2019-05-24 2022-07-14 Danisco Us Inc Subtilisin variants and methods of use
CN114174486A (zh) 2019-06-06 2022-03-11 丹尼斯科美国公司 用于清洁的方法和组合物
CN114040972A (zh) 2019-06-24 2022-02-11 宝洁公司 包含淀粉酶变体的清洁组合物
EP3990599B1 (en) 2019-06-28 2023-01-18 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
WO2020259949A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent composition
EP3990604B1 (en) 2019-06-28 2022-12-14 Unilever Global IP Limited Detergent composition
WO2020260006A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent compositions
US20220364020A1 (en) 2019-06-28 2022-11-17 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
CN113891930A (zh) 2019-06-28 2022-01-04 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3770241A1 (de) * 2019-07-22 2021-01-27 Henkel AG & Co. KGaA Reinigungsmittel mit protease zur automatischen dosierung
US11873465B2 (en) 2019-08-14 2024-01-16 Ecolab Usa Inc. Methods of cleaning and soil release of highly oil absorbing substrates employing optimized extended chain nonionic surfactants
WO2021043764A1 (en) 2019-09-02 2021-03-11 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
US20220372399A1 (en) 2019-09-19 2022-11-24 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent compositions
AR120142A1 (es) 2019-10-07 2022-02-02 Unilever Nv Composición detergente
US20220403359A1 (en) 2019-10-24 2022-12-22 Danisco Us Inc Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
US12410385B2 (en) 2019-10-24 2025-09-09 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition comprising an amylase
US11492571B2 (en) 2019-10-24 2022-11-08 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition comprising a protease
KR102316445B1 (ko) * 2019-11-29 2021-10-26 씨제이제일제당 주식회사 신규 세린 프로테아제 변이체
EP3835396B1 (en) 2019-12-09 2025-12-03 The Procter & Gamble Company A detergent composition comprising a polymer
EP4090727A1 (en) 2020-01-13 2022-11-23 Danisco US Inc. Compositions comprising a lipolytic enzyme variant and methods of use thereof
WO2021146411A1 (en) 2020-01-15 2021-07-22 Danisco Us Inc Compositions and methods for enhanced protein production in bacillus licheniformis
CN115066484A (zh) 2020-01-29 2022-09-16 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣洗涤剂产品
EP3862412A1 (en) 2020-02-04 2021-08-11 The Procter & Gamble Company Detergent composition
MX2022013878A (es) 2020-06-05 2022-11-30 Procter & Gamble Composiciones detergentes que contienen un surfactante ramificado.
BR112022024537A2 (pt) 2020-06-08 2022-12-27 Unilever Ip Holdings B V Método de aprimoramento da atividade de protease em uma composição detergente e uso de saponina
WO2022010911A1 (en) 2020-07-06 2022-01-13 Ecolab Usa Inc. Foaming mixed alcohol/water compositions comprising a structured alkoxylated siloxane
US12350362B2 (en) 2020-07-06 2025-07-08 Ecolab Usa Inc. Foaming mixed alcohol/water compositions comprising a combination of alkyl siloxane and a hydrotrope/solubilizer
WO2022010906A1 (en) 2020-07-06 2022-01-13 Ecolab Usa Inc. Peg-modified castor oil based compositions for microemulsifying and removing multiple oily soils
CA3187735A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 Nina Elizabeth GRAY Automatic dishwashing method and pack
JP7594088B2 (ja) 2020-08-04 2024-12-03 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 自動食器洗浄方法
CA3187725A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
WO2022031309A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
US20240034960A1 (en) 2020-08-27 2024-02-01 Danisco Us Inc Enzymes and enzyme compositions for cleaning
WO2022043042A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
CN116323931A (zh) * 2020-08-28 2023-06-23 诺维信公司 降解聚酯的蛋白酶变体
CN116096845B (zh) 2020-08-28 2025-08-19 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
US20230287300A1 (en) 2020-08-28 2023-09-14 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Surfactant and detergent composition
US20230303951A1 (en) 2020-08-28 2023-09-28 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
WO2022042989A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Unilever Ip Holdings B.V. Surfactant and detergent composition
WO2022074037A2 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
WO2022093189A1 (en) 2020-10-27 2022-05-05 Milliken & Company Compositions comprising leuco compounds and colorants
WO2022094163A1 (en) 2020-10-29 2022-05-05 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising alginate lyase enzymes
EP4001388A1 (en) 2020-11-17 2022-05-25 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method with amphiphilic graft polymer in the rinse
WO2022108766A1 (en) 2020-11-17 2022-05-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition comprising amphiphilic graft polymer
CA3197110A1 (en) 2020-11-17 2022-05-27 Patrick Firmin August Delplancke Automatic dishwashing method with alkaline rinse
EP4006131A1 (en) 2020-11-30 2022-06-01 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric
AU2021394636A1 (en) 2020-12-07 2023-06-08 Unilever Global Ip Limited Detergent compositions
EP4256020A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 Unilever IP Holdings B.V. Detergent compositions
MX2023006625A (es) 2020-12-23 2023-07-04 Procter & Gamble Poliaminas alcoxiladas anfifilicas y sus usos.
CN112662652A (zh) * 2021-01-20 2021-04-16 天津科技大学 一种胶原降解活力降低的碱性蛋白酶突变体
EP4284906A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Danisco US Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
EP4039806A1 (en) 2021-02-04 2022-08-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability
US20250263682A1 (en) 2021-02-12 2025-08-21 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CA3199985A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Lars Lehmann Hylling Christensen Cleaning compositions containing polypeptide variants
CA3211422A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Neil Joseph Lant Methods for making cleaning compositions and detecting soils
EP4086330A1 (en) 2021-05-06 2022-11-09 The Procter & Gamble Company Surface treatment
CN117677689A (zh) 2021-05-18 2024-03-08 诺力昂化学品国际有限公司 在清洁应用中的聚酯聚季铵盐
WO2022243533A1 (en) 2021-05-20 2022-11-24 Nouryon Chemicals International B.V. Manufactured polymers having altered oligosaccharide or polysaccharide functionality or narrowed oligosaccharide distribution, processes for preparing them, compositions containing them, and methods of using them
EP4108767A1 (en) 2021-06-22 2022-12-28 The Procter & Gamble Company Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes
EP4359518A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
EP4363541A1 (en) 2021-06-30 2024-05-08 Nouryon Chemicals International B.V. Chelate-amphoteric surfactant liquid concentrates and use thereof in cleaning applications
US20240294888A1 (en) 2021-06-30 2024-09-05 Danisco Us Inc. Variant enzymes and uses thereof
EP4123007A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Fabric treatment using bacterial spores
EP4123006A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and pro-perfume materials
JP7739435B2 (ja) 2021-08-10 2025-09-16 株式会社日本触媒 ポリアルキレンオキシド含有化合物
EP4388077A1 (en) 2021-08-20 2024-06-26 Danisco US Inc. Polynucleotides encoding novel nucleases, compositions thereof and methods thereof for eliminating dna from protein preparations
CN117916354A (zh) 2021-09-03 2024-04-19 丹尼斯科美国公司 用于清洁的衣物洗涤组合物
EP4402258A2 (en) 2021-09-13 2024-07-24 Danisco US Inc. Bioactive-containing granules
WO2023041694A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
WO2023057367A1 (en) 2021-10-08 2023-04-13 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry composition
WO2023064749A1 (en) 2021-10-14 2023-04-20 The Procter & Gamble Company A fabric and home care product comprising cationic soil release polymer and lipase enzyme
EP4194536A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
EP4194537A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
WO2023114792A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 The Procter & Gamble Company Home care composition comprising an amylase
US20240166973A1 (en) 2021-12-16 2024-05-23 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition comprising a protease
US20230272310A1 (en) 2021-12-16 2023-08-31 The Procter & Gamble Company Home care composition
EP4448708A1 (en) 2021-12-16 2024-10-23 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition comprising a protease
EP4448751A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
CN118679252A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
JP2025500229A (ja) 2021-12-16 2025-01-09 ダニスコ・ユーエス・インク マルトペンタオース／マルトヘキサオースを形成するアルファ－アミラーゼバリアント
EP4448750A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and uses thereof
CN118974227A (zh) 2022-03-01 2024-11-15 丹尼斯科美国公司 用于清洁的酶和酶组合物
EP4273210A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4273209A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Machine-cleaning compositions containing enzymes
AU2023272468A1 (en) 2022-05-14 2024-11-14 Novonesis Plant Biosolutions A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
EP4279571A1 (en) 2022-05-19 2023-11-22 The Procter & Gamble Company Laundry composition comprising spores
EP4532648B1 (en) 2022-05-27 2025-11-05 Unilever IP Holdings B.V. Liquid composition comprising linear alkyl benzene sulphonate, methyl ester ethoxylate and alkoxylated zwitterionic polyamine polymer
EP4532659A1 (en) 2022-05-27 2025-04-09 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an aminocarboxylate, an organic acid and a fragrance
EP4532661A1 (en) 2022-05-27 2025-04-09 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer and a protease
CN119301227A (zh) 2022-05-27 2025-01-10 联合利华知识产权控股有限公司 包含特定甲基酯乙氧基化物表面活性剂和脂肪酶的组合物
WO2023227356A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition containing enzyme
US20250346830A1 (en) 2022-05-27 2025-11-13 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Composition
EP4532672A1 (en) 2022-06-03 2025-04-09 Unilever IP Holdings B.V. Liquid detergent product
CN119487167A (zh) 2022-06-21 2025-02-18 丹尼斯科美国公司 用于清洁的包含具有嗜热菌蛋白酶活性的多肽的组合物和方法
US20240026248A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Ecolab Usa Inc. Novel nonionic extended surfactants, compositions and methods of use thereof
EP4321604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester
JP2025530749A (ja) 2022-09-02 2025-09-17 ダニスコ・ユーエス・インク 洗剤組成物及びそれに関連する方法
CA3265718A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc VARIANTS OF SUBTILISINE AND ASSOCIATED PROCESSES
WO2024050339A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Mannanase variants and methods of use
EP4587543A1 (en) 2022-09-13 2025-07-23 Unilever IP Holdings B.V. Washing machine and washing method
EP4587542A1 (en) 2022-09-13 2025-07-23 Unilever IP Holdings B.V. Washing machine and washing method
CN119895021A (zh) 2022-09-13 2025-04-25 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣机和洗涤方法
WO2024056334A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
EP4349942A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349947A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349945A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349948A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349946A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose fabric treatment product
EP4349943A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349944A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4361239A1 (en) 2022-10-25 2024-05-01 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4608958A1 (en) 2022-10-25 2025-09-03 Unilever IP Holdings B.V. Composition
WO2024088716A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024094800A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024094803A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4612207A1 (en) 2022-11-04 2025-09-10 Clariant International Ltd Polyesters
CN120303400A (zh) 2022-11-09 2025-07-11 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
AU2023405411A1 (en) 2022-11-29 2025-04-24 Unilever Global Ip Limited Composition
EP4630526A1 (en) 2022-12-05 2025-10-15 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound
WO2024129520A1 (en) 2022-12-12 2024-06-20 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4386074B1 (en) 2022-12-16 2025-12-03 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4388967A1 (en) 2022-12-19 2024-06-26 The Procter & Gamble Company Dishwashing method
KR20250130619A (ko) 2022-12-23 2025-09-02 노보자임스 에이/에스 카탈라제 및 아밀라제를 포함하는 세제 조성물
WO2024163695A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4658776A1 (en) 2023-02-01 2025-12-10 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
CN120712348A (zh) 2023-03-06 2025-09-26 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN120813242A (zh) 2023-03-16 2025-10-17 营养与生物科学美国第四公司 用于清洁和臭味控制的短芽孢杆菌发酵物提取物及其用途
WO2024193937A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Machine dishwash filter cleaner
CN120813673A (zh) 2023-03-17 2025-10-17 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
WO2024194098A1 (en) 2023-03-21 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent unit dose
WO2024213428A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024213430A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024213438A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024213376A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
CN120882844A (zh) 2023-04-11 2025-10-31 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
WO2024223218A1 (en) 2023-04-25 2024-10-31 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4458932A1 (en) 2023-05-04 2024-11-06 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition
EP4458933A1 (en) 2023-05-05 2024-11-06 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising a propoxylated polyol
EP4481027A1 (en) 2023-06-19 2024-12-25 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing enzymes
EP4484536A1 (en) 2023-06-26 2025-01-01 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4488351A1 (en) 2023-07-03 2025-01-08 The Procter & Gamble Company Compositions containing a porphyrin binding protein
WO2025011886A1 (en) 2023-07-11 2025-01-16 Unilever Ip Holdings B.V. Method for treating fabric
DE24728530T1 (de) 2023-07-11 2025-11-27 Unilever Global Ip Limited Verfahren zur behandlung von gewebe
WO2025012293A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and method
WO2025016669A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry capsule
WO2025026734A1 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2025031925A1 (en) 2023-08-04 2025-02-13 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2025031752A1 (en) 2023-08-04 2025-02-13 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4509589A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose product
WO2025071996A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Danisco Us Inc. Variant cutinase enzymes with improved solubility and uses thereof
WO2025085351A1 (en) 2023-10-20 2025-04-24 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4549540A1 (en) 2023-11-02 2025-05-07 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4549541A1 (en) 2023-11-02 2025-05-07 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4553137A1 (en) 2023-11-08 2025-05-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising a polyester
EP4559998A1 (en) 2023-11-22 2025-05-28 The Procter & Gamble Company Composition comprising microcapsules comprising spores
DE102023212361A1 (de) * 2023-12-07 2025-06-12 Henkel Ag & Co. Kgaa Protease-varianten mit verbesserter bleichestabilität
WO2025124811A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4570890A1 (en) 2023-12-14 2025-06-18 Unilever IP Holdings B.V. Composition
EP4570893A1 (en) 2023-12-15 2025-06-18 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4570892A1 (en) 2023-12-15 2025-06-18 The Procter & Gamble Company A laundry detergent composition
WO2025153644A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2025153645A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Unilever Ip Holdings B.V. Use for fabric shape retention
EP4610340A1 (en) 2024-03-01 2025-09-03 The Procter & Gamble Company A laundry detergent composition comprising a polyester
EP4624554A1 (en) 2024-03-26 2025-10-01 The Procter & Gamble Company Fabric care compositions
EP4624555A1 (en) 2024-03-26 2025-10-01 The Procter & Gamble Company Fabric and home care compositions
WO2025202369A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202379A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202370A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202382A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in cleaning compositions
WO2025202374A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
EP4624572A1 (en) 2024-03-27 2025-10-01 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202372A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025213357A1 (en) 2024-04-09 2025-10-16 The Procter & Gamble Company Particulate fabric care composition
WO2025214659A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing method
WO2025214720A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
EP4636063A1 (en) 2024-04-19 2025-10-22 The Procter & Gamble Company A unit dose laundry detergent product
WO2025217909A1 (en) 2024-04-19 2025-10-23 The Procter & Gamble Company Particulate fabric care product
EP4644515A1 (en) 2024-05-02 2025-11-05 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and cationic glucan
CN119662610A (zh) * 2024-11-20 2025-03-21 天津科技大学 一种碱性蛋白酶突变体及其应用

Family Cites Families (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1611703B1 (de) * 1967-10-11 1972-03-09 Windmoeller & Hoelscher Vorrichtung zum Abteilen einer bestimmten Stueckzahl innerhalb einer am Ende einer Sack- oder Beutelmaschine gebildeten kontinuierlichen Folge von Saecken oder Beuteln
US4028263A (en) * 1973-08-24 1977-06-07 Colgate-Palmolive Company Bleaching and brightening detergent composition
NL7904044A (nl) 1978-05-31 1979-12-04 Unilever Nv Werkwijze ter bereiding van homogene, vloeibare compo- sities.
US4261868A (en) 1979-08-08 1981-04-14 Lever Brothers Company Stabilized enzymatic liquid detergent composition containing a polyalkanolamine and a boron compound
US4404128A (en) 1981-05-29 1983-09-13 The Procter & Gamble Company Enzyme detergent composition
GR76237B (cs) 1981-08-08 1984-08-04 Procter & Gamble
JPS58144105A (ja) 1982-02-12 1983-08-27 Kurabo Ind Ltd スケ−ル除去獣毛繊維の製法
GB8310080D0 (en) 1983-04-14 1983-05-18 Interox Chemicals Ltd Bleach composition
US4760025A (en) 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
US5182204A (en) 1984-05-29 1993-01-26 Genencor International, Inc. Non-human carbonyl hydrolase mutants, vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
US5204015A (en) 1984-05-29 1993-04-20 Genencor International, Inc. Subtilisin mutants
US5264366A (en) 1984-05-29 1993-11-23 Genencor, Inc. Protease deficient bacillus
JPS6141481U (ja) * 1984-08-10 1986-03-17 三菱電機株式会社 シ−ム溶接装置
US4797362A (en) * 1985-06-06 1989-01-10 Lion Corporation Alkaline proteases and microorganisms producing same
US4908773A (en) * 1987-04-06 1990-03-13 Genex Corporation Computer designed stabilized proteins and method for producing same
US4728455A (en) 1986-03-07 1988-03-01 Lever Brothers Company Detergent bleach compositions, bleaching agents and bleach activators
SG30639G (en) 1986-04-30 1995-09-01 Genencor Int Non-human carbonyl hydrolase mutants DNA sequences and vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
GB8629837D0 (en) 1986-12-13 1987-01-21 Interox Chemicals Ltd Bleach activation
US4853871A (en) * 1987-04-06 1989-08-01 Genex Corporation Computer-based method for designing stablized proteins
US5314692A (en) 1987-08-24 1994-05-24 Cultor Ltd. Enzyme premix for feed and method
KR920008256B1 (ko) 1987-10-30 1992-09-25 엘에스아이 로직 코포레이션 반도체 장치 패키지의 제조방법 및 장치
DK6488D0 (da) * 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
PT89702B (pt) * 1988-02-11 1994-04-29 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos enzimas proteoliticos e de detergentes que os contem
US5543302A (en) 1988-05-27 1996-08-06 Solvay Enzymes, Inc. Proteases of altered stability to autolytic degradation
DE3841152A1 (de) 1988-12-07 1990-06-13 Hoechst Ag Verwendung von bakterienlysierendem enzymprodukt als zusatzstoff zur verbesserung der futterverwertung in der tierproduktion
GB8908416D0 (en) 1989-04-13 1989-06-01 Unilever Plc Bleach activation
JPH03505976A (ja) * 1989-05-17 1991-12-26 アムジエン・インコーポレーテツド 多重突然変異スブチリシン
US5665587A (en) * 1989-06-26 1997-09-09 Novo Nordisk A/S Modified subtilisins and detergent compositions containing same
DK316989D0 (da) * 1989-06-26 1989-06-26 Novo Nordisk As Enzymer
BR9006827A (pt) * 1989-06-26 1991-08-06 Unilever Nv Composicoes detergentes enzimaticas
GB9003741D0 (en) 1990-02-19 1990-04-18 Unilever Plc Bleach activation
EP0458398B1 (en) 1990-05-21 1997-03-26 Unilever N.V. Bleach activation
DE69128094T2 (de) * 1990-12-21 1998-03-19 Novonordisk As Enzym-mutanten mit einer geringen variation der molekularladung über einen ph-bereich
US5769630A (en) * 1991-02-25 1998-06-23 Louisiana State University, Subperiosteal bone anchor
GB9108136D0 (en) 1991-04-17 1991-06-05 Unilever Plc Concentrated detergent powder compositions
US5340735A (en) * 1991-05-29 1994-08-23 Cognis, Inc. Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability
EP0522817A1 (en) 1991-07-11 1993-01-13 Unilever Plc Process for preparing manganese complexes
EP0525610A3 (en) * 1991-07-27 1993-03-24 Solvay Enzymes Gmbh & Co. Kg Process for increasing the stability of enzymes and stabilized enzymes
GB9118242D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Unilever Plc Machine dishwashing composition
GB9124581D0 (en) 1991-11-20 1992-01-08 Unilever Plc Bleach catalyst composition,manufacture and use thereof in detergent and/or bleach compositions
US5194416A (en) 1991-11-26 1993-03-16 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Manganese catalyst for activating hydrogen peroxide bleaching
EP0544490A1 (en) 1991-11-26 1993-06-02 Unilever Plc Detergent bleach compositions
US5153161A (en) 1991-11-26 1992-10-06 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Synthesis of manganese oxidation catalyst
GB9127060D0 (en) 1991-12-20 1992-02-19 Unilever Plc Bleach activation
CA2085642A1 (en) 1991-12-20 1993-06-21 Ronald Hage Bleach activation
US5316935A (en) 1992-04-06 1994-05-31 California Institute Of Technology Subtilisin variants suitable for hydrolysis and synthesis in organic media
CA2097000A1 (en) * 1992-05-27 1993-11-28 Norio Moriya Alkaline lipase, method for producing the same, microorganism producing the same and detergent composition containing alkaline lipase
DE4218448A1 (de) 1992-06-04 1993-12-09 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Alkalische Proteasen aus Bacillus pumilus
US5256779A (en) 1992-06-18 1993-10-26 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Synthesis of manganese oxidation catalyst
US5284944A (en) 1992-06-30 1994-02-08 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Improved synthesis of 1,4,7-triazacyclononane
EP0717778B1 (en) * 1992-07-17 2007-10-17 Genencor International, Inc. High alkaline serine proteases
US5280117A (en) 1992-09-09 1994-01-18 Lever Brothers Company, A Division Of Conopco, Inc. Process for the preparation of manganese bleach catalyst
US5567601A (en) * 1993-06-01 1996-10-22 University Of Maryland Subtilisin mutants lacking a primary calcium binding site
WO1995005477A1 (en) * 1993-08-12 1995-02-23 University Of Maryland Thermostable alkaline metalloprotease produced by a hyphomonas, and preparation thereof
US6436690B1 (en) * 1993-09-15 2002-08-20 The Procter & Gamble Company BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
MA23346A1 (fr) * 1993-10-14 1995-04-01 Genencor Int Variantes de la subtilisine
CN1177921C (zh) * 1993-10-14 2004-12-01 普罗格特-甘布尔公司 含有蛋白酶的漂白组合物
WO1995010591A1 (en) * 1993-10-14 1995-04-20 The Procter & Gamble Company Protease-containing cleaning compositions
BR9407886A (pt) * 1993-10-23 1996-10-29 Imp Tobacco Co Ltd Artigo para fumar e filtro para o mesmo
EP1921147B1 (en) * 1994-02-24 2011-06-08 Henkel AG & Co. KGaA Improved enzymes and detergents containing them
ES2364774T3 (es) * 1994-02-24 2011-09-14 HENKEL AG &amp; CO. KGAA Enzimas mejoradas y detergentes que las contienen.
US5691295A (en) * 1995-01-17 1997-11-25 Cognis Gesellschaft Fuer Biotechnologie Mbh Detergent compositions
ES2250969T3 (es) * 1994-03-29 2006-04-16 Novozymes A/S Amilasa alcalina de bacilo.
DE69504489T2 (de) * 1994-04-07 1999-05-20 The Procter & Gamble Co., Cincinnati, Ohio Bleichmittel enthaltend metall haltige bleichkatalysatoren und antioxidantien
US6599730B1 (en) * 1994-05-02 2003-07-29 Procter & Gamble Company Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
GB9409336D0 (en) 1994-05-10 1994-06-29 Finnfeeds Int Ltd Use of an enzyme for manufacturing an agent for the treatment and/or prophylaxis of coccidiosis
GB9416841D0 (en) * 1994-08-19 1994-10-12 Finnfeeds Int Ltd An enzyme feed additive and animal feed including it
WO1996017921A1 (en) 1994-12-09 1996-06-13 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition containing particles of diacyl peroxides
US5534302A (en) 1995-01-05 1996-07-09 National Science Council Method of preparing a fiber reinforced modified phenolic resin composite
AR000862A1 (es) * 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
US5534179A (en) 1995-02-03 1996-07-09 Procter & Gamble Detergent compositions comprising multiperacid-forming bleach activators
US5780285A (en) * 1995-03-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues
US5837516A (en) * 1995-03-03 1998-11-17 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing basic residues
US6455295B1 (en) 1995-03-08 2002-09-24 The Procter & Gamble Company Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
IL117350A0 (en) * 1995-03-09 1996-07-23 Procter & Gamble Proteinase k variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
IL117352A0 (en) * 1995-03-09 1996-07-23 Procter & Gamble Thermitase variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6475765B1 (en) * 1995-03-09 2002-11-05 Procter & Gamble Company Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US5523434A (en) 1995-03-15 1996-06-04 The Procter & Gamble Company Synthesis of bleach activators
NZ305268A (en) * 1995-04-17 1999-07-29 Procter & Gamble Detergent cleaning composition comprising diacyl peroxide particulates, and preparation thereof
US5837517A (en) * 1995-05-05 1998-11-17 Novo Nordisk A/S Protease variants and compositions
US5597936A (en) 1995-06-16 1997-01-28 The Procter & Gamble Company Method for manufacturing cobalt catalysts
ES2158312T3 (es) 1995-06-16 2001-09-01 Procter & Gamble Composiciones de blanqueo que comprenden catalizadores de cobalto.
CA2224558C (en) 1995-06-16 2003-07-15 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing compositions comprising cobalt catalysts
US5576282A (en) 1995-09-11 1996-11-19 The Procter & Gamble Company Color-safe bleach boosters, compositions and laundry methods employing same
US5703034A (en) * 1995-10-30 1997-12-30 The Procter & Gamble Company Bleach catalyst particles
US5762647A (en) * 1995-11-21 1998-06-09 The Procter & Gamble Company Method of laundering with a low sudsing granular detergent composition containing optimally selected levels of a foam control agent bleach activator/peroxygen bleaching agent system and enzyme
HUP9903617A3 (en) * 1995-12-20 2001-11-28 Procter & Gamble Bleach catalyst plus enzyme particles
US5883065A (en) * 1996-01-22 1999-03-16 The Procter & Gamble Company Phase separated detergent composition
DE69731282T2 (de) * 1996-03-07 2006-03-02 The Procter & Gamble Company, Cincinnati Waschemittelzusammensetzungen mit proteasen und verbesserten amylasen
US6069122A (en) * 1997-06-16 2000-05-30 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent compositions containing organic diamines for improved grease cleaning, sudsing, low temperature stability and dissolution
US6177392B1 (en) * 1997-01-13 2001-01-23 Ecolab Inc. Stable solid block detergent composition
US6369011B1 (en) * 1997-06-04 2002-04-09 The Procter & Gamble Company Protease enzymes for tough cleaning and/or spot and film reduction and compositions incorporating same
US6057171A (en) * 1997-09-25 2000-05-02 Frequency Technology, Inc. Methods for determining on-chip interconnect process parameters
AR015977A1 (es) * 1997-10-23 2001-05-30 Genencor Int Variantes de proteasa multiplemente substituida con carga neta alterada para su empleo en detergentes

Also Published As

Publication number Publication date
CZ302287B6 (cs) 2011-02-09
TR200101861T2 (tr) 2002-06-21
AR052282A2 (es) 2007-03-07
EG21711A (en) 2002-02-27
TW562859B (en) 2003-11-21
ES2241180T5 (es) 2010-03-26
BR9813266A (pt) 2001-11-20
CA2308206A1 (en) 1999-04-29
AR052354A2 (es) 2007-03-14
BR9815230A (pt) 2001-10-02
CZ300347B6 (cs) 2009-04-29
PT1398367E (pt) 2009-03-12
TR200001112T2 (tr) 2002-01-21
KR20010031380A (ko) 2001-04-16
AU1118199A (en) 1999-05-10
CN100342016C (zh) 2007-10-10
US6815193B2 (en) 2004-11-09
PT1624050E (pt) 2010-01-13
EP1398367B1 (en) 2008-12-10
AU742632B2 (en) 2002-01-10
EP1025194A1 (en) 2000-08-09
CA2307640A1 (en) 1999-04-29
ATE416624T1 (de) 2008-12-15
KR20010031372A (ko) 2001-04-16
CA2308113A1 (en) 1999-04-29
CN100506963C (zh) 2009-07-01
EP1612271A3 (en) 2009-02-25
ES2255189T3 (es) 2006-06-16
AU742573B2 (en) 2002-01-10
CA2306794C (en) 2009-07-07
ES2310014T3 (es) 2008-12-16
CZ20001477A3 (cs) 2001-12-12
NO20001901D0 (no) 2000-04-12
ES2319470T5 (es) 2012-05-16
CA2308113C (en) 2011-07-26
EP1624050B9 (en) 2010-03-24
DE69839057T2 (de) 2009-03-12
ATE292179T1 (de) 2005-04-15
DE69829577T2 (de) 2006-02-02
WO1999020723A3 (en) 2001-01-04
ATE399469T1 (de) 2008-07-15
CZ20001479A3 (cs) 2002-01-16
NZ519204A (en) 2004-02-27
BR9813115A (pt) 2000-08-15
DK1025194T4 (da) 2012-04-02
DK1398367T3 (da) 2009-04-06
HUP0104539A3 (en) 2002-12-28
HUP0104539A2 (hu) 2002-04-29
ES2241180T3 (es) 2005-10-16
EP1398367A1 (en) 2004-03-17
HUP0100859A2 (hu) 2001-06-28
DE69840346D1 (de) 2009-01-22
TR200002057T2 (tr) 2001-03-21
EP1624050A3 (en) 2006-06-21
ID25897A (id) 2000-11-09
CZ20001493A3 (cs) 2001-11-14
TW585912B (en) 2004-05-01
AU1199699A (en) 1999-05-10
KR20010031374A (ko) 2001-04-16
WO1999020726A1 (en) 1999-04-29
BRPI9813266B1 (pt) 2015-10-13
WO1999020769A3 (en) 1999-08-26
HUP0103080A2 (hu) 2001-12-28
EP1624050A2 (en) 2006-02-08
NO20001901L (no) 2000-06-19
EP1027418A1 (en) 2000-08-16
JP2001520307A (ja) 2001-10-30
AR016969A1 (es) 2001-08-01
AR052453A2 (es) 2007-03-21
DE69839677D1 (de) 2008-08-14
CA2306894C (en) 2009-10-06
HK1039159A1 (en) 2002-04-12
ID25637A (id) 2000-10-19
EP1571199A3 (en) 2006-01-11
ID28256A (id) 2001-05-10
AR015977A1 (es) 2001-05-30
AU1199499A (en) 1999-05-10
US20030119690A1 (en) 2003-06-26
AR013718A1 (es) 2001-01-10
JP4511025B2 (ja) 2010-07-28
JP2001520305A (ja) 2001-10-30
EG22075A (en) 2002-07-31
TR200101199T2 (tr) 2002-05-21
CN1191347C (zh) 2005-03-02
ATE417099T1 (de) 2008-12-15
TR200001113T2 (tr) 2002-05-21
EP1624050B1 (en) 2009-10-07
DK1025241T3 (da) 2005-08-08
TR200002013T2 (tr) 2001-01-22
ID26501A (id) 2001-01-11
EP1027418B2 (en) 2011-01-19
ATE511540T1 (de) 2011-06-15
AU742694B2 (en) 2002-01-10
CZ20001504A3 (cs) 2001-03-14
CN1327476A (zh) 2001-12-19
CN1597898A (zh) 2005-03-23
CA2307638C (en) 2012-01-03
KR20010024555A (ko) 2001-03-26
WO1999020769A2 (en) 1999-04-29
EP1025239A2 (en) 2000-08-09
KR100564039B1 (ko) 2006-03-28
DK1025239T3 (da) 2008-06-02
EP1025240A2 (en) 2000-08-09
CN1279721A (zh) 2001-01-10
AR052355A2 (es) 2007-03-14
PT1027418E (pt) 2008-10-14
EP1025240B1 (en) 2005-12-28
DE69829577D1 (de) 2005-05-04
WO1999020723A2 (en) 1999-04-29
EP1612271B1 (en) 2011-06-01
EP1025241A2 (en) 2000-08-09
AR013719A1 (es) 2001-01-10
MA25044A1 (fr) 2000-10-01
DE69829577T3 (de) 2010-05-20
EP1571199A2 (en) 2005-09-07
EP1025241B2 (en) 2009-10-21
NO20001900D0 (no) 2000-04-12
DE69840335D1 (de) 2009-01-22
US6673590B1 (en) 2004-01-06
PT1571199E (pt) 2011-09-27
CN1286723A (zh) 2001-03-07
BRPI9813115B1 (pt) 2015-03-31
AR052281A2 (es) 2007-03-07
PT1612271E (pt) 2011-09-01
NO20001899D0 (no) 2000-04-12
CA2618389A1 (en) 1999-04-29
ATE513479T1 (de) 2011-07-15
BR9813260A (pt) 2000-08-22
CA2672500A1 (en) 1999-04-29
US6927055B2 (en) 2005-08-09
EP1082404A2 (en) 2001-03-14
WO1999020770A3 (en) 1999-09-02
CA2306794A1 (en) 1999-04-29
US20030073222A1 (en) 2003-04-17
EP1027418B1 (en) 2008-07-02
ES2319470T3 (es) 2009-05-07
DK1025194T3 (da) 2009-04-06
NO326992B1 (no) 2009-03-30
EP1025194B2 (en) 2012-01-04
AU758371B2 (en) 2003-03-20
AU1197199A (en) 1999-05-10
DK1025240T3 (da) 2006-05-22
WO1999020771A3 (en) 1999-07-01
NZ520771A (en) 2004-06-25
BR9814097A (pt) 2000-10-03
AU1196999A (en) 1999-05-10
NO20001900L (no) 2000-06-15
DE69833015D1 (de) 2006-02-02
AR052353A2 (es) 2007-03-14
CN100558871C (zh) 2009-11-11
DK1612271T3 (da) 2011-09-12
KR100616143B1 (ko) 2006-08-25
JP5612026B2 (ja) 2014-10-22
EP1025241B1 (en) 2005-03-30
KR20010024554A (ko) 2001-03-26
CA2618389C (en) 2012-12-11
ATE314478T1 (de) 2006-01-15
WO1999020723A9 (en) 1999-09-02
PT1025241E (pt) 2005-08-31
CN102021159A (zh) 2011-04-20
NO20001899L (no) 2000-06-19
HK1039159B (zh) 2008-05-09
CN1195857C (zh) 2005-04-06
ATE445002T1 (de) 2009-10-15
CN1198912C (zh) 2005-04-27
EP1612271A2 (en) 2006-01-04
JP2012183078A (ja) 2012-09-27
CZ20001503A3 (cs) 2000-12-13
CZ301469B6 (cs) 2010-03-17
EP1025194B1 (en) 2008-12-10
KR20010031377A (ko) 2001-04-16
WO1999020770A2 (en) 1999-04-29
DK1027418T3 (da) 2008-11-10
EP1571199B1 (en) 2011-06-22
JP4346237B2 (ja) 2009-10-21
CN1279720A (zh) 2001-01-10
DK1025241T4 (da) 2010-03-08
ES2310014T5 (es) 2011-05-24
DE69833015T2 (de) 2006-08-10
ES2301214T3 (es) 2008-06-16
CN1295313C (zh) 2007-01-17
CA2308206C (en) 2009-10-06
AU1276299A (en) 1999-05-10
PL340600A1 (en) 2001-02-12
AU8733701A (en) 2002-01-03
DK1571199T3 (da) 2011-09-26
KR100612981B1 (ko) 2006-08-14
US6312936B1 (en) 2001-11-06
CN1286724A (zh) 2001-03-07
CA2306894A1 (en) 1999-04-29
CA2307640C (en) 2011-08-02
DE69841226D1 (de) 2009-11-19
TR200002014T2 (tr) 2000-12-21
WO1999020771A2 (en) 1999-04-29
CN1306577A (zh) 2001-08-01
BR9813879A (pt) 2000-09-26
PT1025194E (pt) 2009-03-17
DE69839057D1 (de) 2008-03-13
CA2672492A1 (en) 1999-04-29
WO1999020723A8 (en) 2001-03-08
NO327607B1 (no) 2009-08-31
ES2319401T3 (es) 2009-05-07
CA2307638A1 (en) 1999-04-29
NZ520770A (en) 2004-05-28
PL191529B1 (pl) 2006-06-30
CN1597899A (zh) 2005-03-23
JP2001520308A (ja) 2001-10-30
US6482628B1 (en) 2002-11-19
MA24811A1 (fr) 1999-12-31
JP2001520045A (ja) 2001-10-30
ATE384799T1 (de) 2008-02-15
ES2332915T3 (es) 2010-02-15
TR200001111T2 (tr) 2002-12-23
JP2001520044A (ja) 2001-10-30
EP1025239B1 (en) 2008-01-23
DK1027418T4 (da) 2011-05-16
JP2001520046A (ja) 2001-10-30
PT1025239E (pt) 2008-04-30
DK1624050T3 (da) 2010-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20001478A3 (cs) Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty
US6376450B1 (en) Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants
WO1999020727A1 (en) Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants
US6831053B1 (en) Bleaching compositions comprising multiply-substituted protease variants
MXPA00003977A (en) Multiply-substituted protease variant and amylase variant-containing cleaning compositions
MXPA00003978A (en) Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants
AU8938701A (en) Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants
MXPA00003973A (en) Bleaching compositions comprising multiply-substituted protease variants

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic