CN1469919A - 包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及提供优异清洁性能的包括一种甘露聚糖酶和一种蛋白酶的洗涤剂组合物。

Description

包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物

发明领域

本发明涉及包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物。

发明背景

洗涤剂产品的性能通过众多因素来判断，这些因素包括去污能力和防止污垢再沉积的能力或在洗涤液中物品上污垢的分解产物。因此现在的洗涤剂组合物包括能满足某些具体需要的活性成分的复杂组合。具体地说，现在的洗涤剂一般包括提供清洁和织物护理益处的洗涤用酶。

食品和化妆品污渍/污垢是大多数消费者常遇见的污渍/污垢并通常包括食品添加剂诸如稠化剂/稳定剂。水胶体树胶和乳化剂是常用的食品添加剂。所述术语“树胶”是指工业上可用的多糖(长链聚合物)或其衍生物，其在热水或冷水中水合形成粘性溶液、分散体或凝胶。树胶被归类为天然树胶和改性树胶。天然树胶包括海藻提取物、植物压出物、来自种子或根的树胶和通过微生物发酵获得的树胶。改性的(半合成)树胶包括纤维素和淀粉衍生物以及某些合成树胶诸如低甲氧基果胶、丙二醇藻酸酯和羧甲基和羟丙基瓜耳胶(参见J.Baird，Kelco division of Merck的第四版Encyclopedia Chemical Technology第12卷842到862页中的树胶章节)。也参见R.L.Whistler和J.N.BeMiller的Carbohydrate Chemistry for Food Scientists(Eagan出版社，1997)，第4章66到89页和P.Laslo的Direct Food Additives in FruitProcessing(Technomie出版社，1996年)，Bioprinciples and Applications，第1卷11章313到325页。一些这类树胶诸如瓜耳胶(E412)、刺槐豆胶(E410)在许多食品加工中广泛被单独使用或组合使用(参见J.Baird，Kelco division of Merck的第四版Encyclopedia ChemicalTechnology第12卷842到862页中的树胶章节)。

在这些食品和化妆品污渍中所用的瓜耳胶从豆科植物胍尔豆(Cyamopsis tetragonoloba)的种子胚乳获得。从所述双子叶种子提取的瓜耳胶(也称guaran)包括1-4 b-D-甘露吡喃糖基单元主链并且在调味品和冷冻食品以及化妆品中用作稠化剂(H.D.Belitz，Food Chemistry，243页，第二版的英文版，Springer-verlag，1987，ISBN 0-387-15043-9，美国)和(Carbohydrate Chemistry for Food Scientists，R.L.Wilstler，Eagan Press，1997，ISBN 0-913250-92-9)和(Industrial Gum，第二版，R.L.Whistler，308页，Academic Press，1973，ISBN 0-12-74-6252-x)。刺槐豆胶(也称为角豆树胶或St Jon’s bread)也被用于食品工业中并且从地中海地区栽种的一种常绿植物的种子中提取而来。刺槐豆胶与瓜耳胶结构上的不同之处可能只是其较少的D-半乳糖基侧链的数目并且刺槐豆胶具有同样的1-4 b-D-甘露吡喃糖基主链。在豆科植物种子中，水溶性的半乳甘露聚糖是主要的贮存碳水化合物，在某些情况下高达总干重的20％。半乳甘露聚糖具有与甘露糖残基的O-6相连的一个α-半乳糖并且可在甘露糖残基的O-2和O-3上乙酰化到各种程度。

蛋白酶在洗涤剂组合物中的作用已久为人们所熟悉，它被用于提供从餐具、硬表面去除蛋白质类食品残留物或用于提供对蛋白质类污垢以及在洗衣中常见的其它污垢的清洁效能。

无论如何，存在着对配制提供优异清洁性能(特别是对一般在久经洗涤/穿着的衣物上发现的结垢的污渍)的洗涤剂组合物的持续需要。该目标已经通过配制包括甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物而达到。

现已出乎意料地发现这些酶组合物由于其混合酶体系的增效作用而提供了优异的清洁性能，即优异的去除污渍、特别是去除通常在久经洗涤/穿着的衣物上发现的结垢的污渍的效能。

还已发现本发明的洗涤剂组合物的性能通过加入所选的表面活性剂、助洗剂和/或漂白体系而被增强。

在几种芽孢杆菌机体中已经证实存在甘露聚糖酶。例如Talbot等人在1990年56卷11期的Appl.Environ.Microbiol.的3505到3510页描述了分子量为162kDa以及最佳pH为5.5-7.5的二聚物形式的源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的β-甘露聚糖酶。Mendoza等人在1994年10卷5期的World J.Microbio.Boitech.的551到555页描述了一种具有38kDa的分子量、在pH5.0和55℃下的最佳活性和4.8的等电点(pI)、源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilisis)的β-甘露聚糖酶。J0304706公开了一种具有37±3 kDa的凝胶过滤测得的分子量、8-10的最佳pH和5.3-5.4的等电点的源于芽胞杆菌属菌种(Bacillus sp.)的β-甘露聚糖酶。J63056289描述了一种水解例如甘露聚糖的β-1，4-D-吡喃甘露糖苷键和产生甘露低聚糖的碱性、热稳定β-甘露聚糖酶的生产。J63036774涉及在碱性pH下产生β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的芽孢杆菌属微生物FERM P-8856。一种可用于漂白纸浆和纸的源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的纯化的甘露聚糖酶及其制备方法公开于WO 97/11164中。WO91/18974描述了在极端pH和温度下具有活性的半纤维素酶诸如葡聚糖酶、木聚糖酶或甘露聚糖酶及其生产。WO 94/25576公开了一种显示出甘露聚糖酶活性、源于棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)CBS 101.43的酶，其可用于植物或藻类细胞壁物质的降解或修饰。WO 93/24622公开了可用于漂白木素纤维素纸浆、从木霉属Trichoderma reesie分离的甘露聚糖酶。

但是，所述甘露聚糖酶和蛋白酶的增效组合物所具有的优异的在洗涤剂组合物中的清洁性能先前并没有被人认识到。

本发明简述

本发明涉及提供优异清洁性能的包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物。

本发明的详细说明

本发明的洗涤剂组合物的一个基本组分是甘露聚糖酶。甘露聚糖酶将提供对包含水胶体树胶诸如用作食品添加剂的瓜耳胶的污渍显著的去污效果。本发明的洗涤剂组合物的第二个基本成分是蛋白酶。已知蛋白酶用于去除蛋白质类污垢。

不希望受理论束缚，相信含蛋白质污渍诸如可可食品污渍、巧克力布丁污渍和/或化妆品污渍也可能包含添加剂诸如水胶体树胶。这些水胶体树胶的例子有瓜耳胶或刺槐豆胶。当这类污渍存在时，已经发现使用蛋白酶不能足够有效地提供显著的清洁效能。同样，单纯使用甘露聚糖酶也不足以提供显著的效能。确实，相信在食品组合物中蛋白质和水胶体树胶的混合物非常粘稠并且对酶作用不那么敏感。

现已惊异地发现甘露聚糖酶与蛋白酶、优选与枯草菌素洗衣用蛋白酶的组合提供了显著的清洁效能。

此外，甘露聚糖酶与蛋白酶的结合使用提供了对硬表面诸如餐具和其它厨房硬表面的食品和化妆品污渍优异的清洁效能。

还有，已知棉织物在纤维素纤维内包含甘露糖部分。这些甘露糖部分可将其它污渍诸如体垢粘附到棉织物上。现已惊异地发现甘露聚糖酶和蛋白酶的组合使用对这些体垢并特别是在低温下提供了显著的清洁效能。

甘露聚糖酶

本发明的洗涤剂组合物的一种基本组分是甘露聚糖酶。

包括在本发明中的有下列三种甘露聚糖降解酶：E.C.3.2.1.25：β-甘露糖苷酶；E.C.3.2.1.78：内-1，4-β-甘露糖苷酶(后文称为“甘露聚糖酶”)和E.C.3.2.1.100：1，4-β-甘露二糖糖苷酶(mannobiosidase)(IUPAC分类-酶命名法，1992 ISBN 0-12-227165-3 Academic Press)。

更优选，本发明的洗涤剂组合物包括称为甘露聚糖酶的β-1，4-甘露糖苷酶(E.C.3.2.1.78)。术语“甘露聚糖酶”或“半乳甘露聚糖酶”是指按照该领域技术定义的一种甘露聚糖酶，正式名称为甘露聚糖内-1，4-β-甘露糖苷酶并具有可替用名β-甘露聚糖酶和内-1，4-甘露聚糖酶并催化下列反应：在甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖中1，4-β-D-甘露糖苷键的无规水解。

具体地说，甘露聚糖酶(E.C.3.2.1.78)包括一组降解甘露聚糖并指能裂解含甘露糖单元的多糖链的多糖酶，即能裂解在甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖中的糖苷键的多糖酶。甘露聚糖是指具有包括β-1，4-连接的甘露糖的主链的多糖；葡甘露聚糖是指具有一个主链即一定程度上规则地交替的β-1，4-连接的甘露糖和葡萄糖的多糖；半乳甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖是指具α-1，6-连接的半乳糖侧链的甘露聚糖和葡甘露聚糖。这些化合物可被乙酰化。

半乳甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖的降解通过全部或部分除去半乳糖侧链来进行。此外乙酰化的甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖的降解通过完全或部分脱乙酰化来进行。乙酰基可通过碱或通过甘露聚糖乙酰酯酶去除。由甘露聚糖酶或通过甘露聚糖酶和α-半乳糖苷酶和/或甘露聚糖乙酰酯酶的组合物释放的低聚物可进一步通过β-甘露糖苷酶和/或β-葡糖苷酶降解而释出游离麦芽糖。

在几种芽孢杆菌机体中已经证实存在甘露聚糖酶。例如Talbot等人在1990年56卷11期的Appl.Environ.Microbiol.的3505到3510页描述了分子量为162kDa以及最佳pH为5.5-7.5的二聚物形式的源于嗜热脂肪芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶。Mendoza等人在1994年10卷5期的World J.Microbiol.Biotech.的551到555页描述了一种具有38kDa的分子量、在pH5.0和55℃下的最佳活性和4.8的等电点的源于枯草芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶。JP-0304706公开了一种具有373kDa的凝胶过滤测得的分子量、8-10的最佳pH和5.3-5.4的等电点的源于芽孢杆菌属菌种的β-甘露聚糖酶。JP-63056289描述了一种水解例如甘露聚糖的β-1，4-D-吡喃甘露糖苷键和产生甘露低聚糖的碱性、热稳定β-甘露聚糖酶的生产。JP-63036774涉及在碱性pH下产生β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的芽孢杆菌属微生物FERM P-8856。JP-08051975公开了源于嗜碱的芽孢杆菌属菌种AM-001的碱性β-甘露聚糖酶。一种可用于漂白纸浆和纸的源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的纯化的甘露聚糖酶及其制备方法公开于WO97/11164中。WO91/18974描述了在极端pH和温度下具有活性的半纤维素酶诸如葡聚糖酶、木聚糖酶或甘露聚糖酶。WO 94/25576公开了一种显示出甘露聚糖酶活性、源于棘孢曲霉CBS 101.43的酶，其可用于植物或藻类细胞壁物质的降解或修饰。WO 93/24622公开了可用于漂白木素纤维素纸浆、从木霉属Trichoderma reseei分离的甘露聚糖酶。一种能降解含甘露聚糖半纤维素的半纤维素酶描述于WO91/18974中，一种纯化的源于解淀粉芽孢杆菌的甘露聚糖酶公开于WO97/11164中。

具体地说，这种甘露聚糖酶将是如下定义的碱性甘露聚糖酶，最优选是源于细菌源的甘露聚糖酶。特别是，本发明的洗涤剂组合物将包括选自源于菌株芽孢杆菌属Bacillus agaradherens和/或枯草芽孢杆菌菌株168，基因yght的甘露聚糖酶的碱性甘露聚糖酶。

术语“碱性甘露聚糖酶”是指包括在指定的7到12、优选7.5到10.5的pH范围具有其最大活性的至少10％、优选至少25％、更优选至少40％的酶活性的酶。

最优选本发明的洗涤剂组合物包括源于芽孢杆菌属Bacillusagaradherens的碱性甘露聚糖酶。所述甘露聚糖酶为：

i)一种由Bacillus agaradherens，NCIMB 40482产生的多肽，或

ii)一种包括在SEQ ID NO：2的位置32-343中所示的氨基酸序列的多肽，或

iii)一种i)或ii)中定义的多肽的类似物，其至少70％与所述多肽同源；或者是通过一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加而源于所述多肽；或能与由针对所述纯化形式的多肽而产生的多克隆抗体起免疫反应。

本发明也包括具有甘露聚糖酶活性的、选自下列的分离的多肽：

(a)编码具有甘露聚糖酶活性的多肽并包括如SEQ ID NO：1中核苷酸97到核苷酸1029所示的核苷酸序列的多核苷酸分子；

(b)(a)的物种同系物；

(c)编码一种具有甘露聚糖酶活性、其至少70％与SEQ ID NO：2中的氨基酸残基32到343的氨基酸序列相同的多肽的多核苷酸分子；

(d)与(a)、(b)或(c)互补的分子；和

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的简并核苷酸序列。

包括编码本发明的甘露聚糖酶的多核苷酸分子(DNA序列)的质粒pSJ1678已经被转化成一种大肠杆菌(Escherichia coli)的菌株，本发明根据国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约，在德意志微生物保藏中心(DSM)(德意志联邦共和国，Mascheroder Weg 1b，D-38124 Braunschweig)，于1998年5月18对该菌株进行了保藏，保藏号为DSM12180。

第二种最优选的酶是源于枯草芽孢杆菌菌株168的甘露聚糖酶，该甘露聚糖酶：

i)通过SEQ ID NO：5所示的DNA序列的编码部分或所示序列的类似物被编码和/或

ii)包括如SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列的多肽或

iii)一种ii)定义的多肽的类似物，其至少70％与所述多肽同源，或者是通过一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加而源于所述多肽，或能与由针对所述纯化形式的多肽产生的多克隆抗体起免疫反应。

本发明也包括具有甘露聚糖酶活性的选自下列的分离的多肽：

(a)编码具有甘露聚糖酶活性的多肽并包括如SEQ ID NO：5中所示的核苷酸序列的多核苷酸分子；

(b)(a)的物种同系物；

(c)编码一种具有甘露聚糖酶活性、其至少70％与SEQ ID NO：6中的氨基酸序列相同的多肽的多核苷酸分子；

(d)与(a)、(b)或(c)互补的分子；和

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的简并核苷酸序列。

定义

在更详细地讨论本发明之前，首先定义下列术语：

术语“直向同源物(ortholog)”(或“物种同系物”)是指从一个物种中获得的、与来自不同物种的类似多肽或蛋白质具有同源性的多肽或蛋白质。

术语“共生同源物(paralog)”是指从一指定物种获得的、与来自相同物种的不同多肽或蛋白质具有同源性的多肽或蛋白质。

术语“表达载体”是指线性或环状的DNA分子，其包括一个编码可操作性连接到另一提供其转录的片段上的目标多肽的片段。这种另外的片段可包括启动子和终止子序列并且可任选包括一个或多个复制起点、一个或多个可选标记、一个增强子、一个聚腺苷酸化信号等。表达载体一般源于质粒或病毒DNA或可包括两者的要素。本发明的表达载体可以是任何方便进行重组DNA处理的表达载体并且载体的选择通常取决于被导入载体的宿主细胞。因此，所述载体可以是一个自主复制载体，即作为染色体外的实体存在的载体，其复制独立于染色体复制，如质粒。或者，所述载体可以为在导入宿主细胞时整合入宿主细胞基因组并与己被整合的染色体一起复制的载体。

此中连同多肽或蛋白质的表达一起使用的术语“重组体表达的”采用本领域的标准定义。蛋白质的重组表达一般通过使用刚在上面所述的表达载体进行。

当用于多核苷酸分子时术语“分离的”是指多核苷酸从其自然的遗传环境移除并因此不含其它外来的或不需的编码序列并且为适用于基因工程蛋白质生产系统内的形式。这种分离的分子是从其自然环境分离并且包括cDNA和基因组克隆的分子。本发明的分离的DNA分子没有其它与其正常联系的基因，但可能包括自然存在的5’和3’非翻译区诸如启动子和终止子。本领域技术人员均熟悉相关区的鉴定(参见例如Dynan和Tijan在1985年Nature 316：774-778的文章)。

术语“分离的多核苷酸”也可称为“克隆的多核苷酸”。当应用于蛋白质/多肽时，术语“分离的”是指非自然环境条件下发现的蛋白质。在一种优选的形式中，分离的蛋白质基本没有其它蛋白质、特别是其它同源蛋白质(即“同源杂质”(参见下述内容))。优选提供40％以上纯度形式、更优选60％以上纯度形式的蛋白质。再更优选最好提供高纯度形式的蛋白质，即80％以上纯度、更优选95％以上纯度、甚至更优选99％以上纯度的蛋白质(纯度通过SDS-PAGE测定)。

术语“分离的蛋白质/多肽”也可称为“纯化的蛋白质/多肽”。

术语“同源杂质”是指来源于最初获得本发明的多肽的同源细胞的任何杂质(例如本发明的多肽以外的另一多肽)。与具体微生物源有关的此中所用的术语“获得自”是指由具体源或者来自所述源的基因已被插入的细胞产生的多核苷酸和/或多肽。

当涉及DNA片段时，术语“可操作连接”是指将所述片段排列成按所预期的目的起作用，例如转录起始于启动子并连续地通过编码片段直到终止子。

术语“多核苷酸”是指一种从5’端向3’端阅读的脱氧核苷酸或核苷酸碱基的单链或双链聚合物。多核苷酸包括RNA和DNA并且可以从天然源分离、体外合成或从天然和合成分子的组合来制备。

术语“多核苷酸分子的互补物”是指具有互补的碱基序列的多核苷酸分子并且与参照的序列成反向配对。例如序列5’ATGCACGGG3’与5’CCCGTGCAT3’互补。

术语“简并的核苷酸序列”是指包括一个或多个简并的密码子的核苷酸序列(与编码多肽的参照多核苷酸分子比较)。简并的密码子包含不同的核苷酸三联体，但编码同样的氨基酸残基(即GAU和GAC三联体各编码Asp)。

术语“启动子”是指包含提供RNA聚合酶的结合和转录的起始的DNA序列的基因的一部分。启动子序列通常(但不总是)出现在基因的5’非编码区。

术语“分泌信号序列”是指一个编码多肽(“分泌肽”)的DNA序列，其作为大分子多肽的一个组分引导大分子多肽通过将其合成的细胞分泌途径。在通过分泌途径转运中，大分子肽通常被裂解除去所述分泌肽。

如何使用本发明的序列来获取另外相关的序列

此中所公开的涉及编码本发明的甘露聚糖酶的多核苷酸序列的序列资料可用作验证其它同系甘露聚糖酶的工具。例如，聚合酶链反应(PCR)可用于扩增编码来自各种微生物源、特别是不同芽孢杆菌菌种的其它同系甘露聚糖酶的序列。

活性测试分析

具有甘露聚糖酶活性的本发明的多肽可按照本领域已知的标准测定方法进行甘露聚糖酶活性测定，例如将待测溶液置于在含0.2％AZCL半乳甘露聚糖(角豆树)的琼脂板上钻出的4毫米直径的孔中，即置于供测定可以以每3克110.00美元从Megazyme公司购置的内-1，4-β-D-甘露聚糖酶(Cat No.I-AZGMA)的底物中(Megazyme的互联网网址为： http：//www.megazyme.com/Purchase/index.htmI)。

多核苷酸

本发明分离的多核苷酸会在至少中度严格的条件下杂交到SEQID No：1的类似大小的区域或互补于该区域的序列。

本发明的多核苷酸可在至少中等严格的条件下、但优选在如下详述的高度严格的条件下具体杂交到包括在SEQ ID No：1的97-1029位中所示的全长序列的变性双链DNA探针或任何包括至少约100个碱基对的长度的SEQ ID No：1的亚序列的探针中。测定在中度或高度严格的条件下核苷酸探针和同源DNA或RNA序列之间的杂交的适合实验条件包括含DNA片段或RNA的滤膜的预浸泡以便在5×SSC(氯化钠/柠檬酸钠，Sambrook等人，1989)中杂交10分钟和滤膜在5×SSC、5×Denhardt’s溶液(Sambrook等人，1989)、0.5％SDS和100微克/毫升变性超声破碎的鲑精DNA(Sambrook等人，1989)的溶液中预杂交，接着在约45℃下在包含10纳克/毫升随机引物的(Feinberg.A.P.和Vogelstein，B.(1983)，Anal.Biochem.132：6-13)、32P-dCTP-标记的(比活性高于1×109cpm/μg)探针的相同溶液中杂交12小时。然后将滤膜在2×SSC、0.5％SDS中在至少60℃(中度严格)、更优选至少65℃(中/高度严格)、甚至更优选至少70℃(高度严格)、和还更优选至少75℃(非常高度严格)下洗涤两次30分钟。

在这些条件下寡核苷酸探针杂交的分子采用X光片测定。

正如前面所述，本发明分离的多核苷酸包括DNA和RNA。分离DNA和RNA的方法为本领域人员所熟悉。编码目标基因的DNA和RNA可通过本领域人员已知的方法在基因库或DNA文库中克隆。

然后将编码具有本发明的甘露聚糖酶活性的多肽的多核苷酸通过例如杂交或PCR进行验证和分离。

本发明还提供了来自不同的细菌菌株的对应多肽和多核苷酸(直向同源物或共生同源物)。特别有意义的是来自革兰氏染色阳性的噬碱菌株，包括芽孢杆菌菌种的甘露聚糖酶多肽。

具有本发明的甘露聚糖酶活性的多肽的物种同源物可使用通过本发明提供的资料和组成连同常规的克隆技术来克隆。例如，本发明的DNA序列可使用从表达蛋白质的细胞类型获得的染色体DNA克隆。适合的DNA源可通过由此中公开的序列设计的探针探测RNA印迹来鉴定。然后从阳性细胞系的染色体DNA制备文库。然后可通过各种方法来分离编码具有甘露聚糖酶活性的多肽的本发明的DNA序列，诸如通过用由本说明书和权利要求书中公开的序列设计的探针探测或用一套或多套基于所公开的序列的简并探针探测。本发明的DNA序列也可使用聚合酶链反应即PCR(Mullis，美国专利4683202)、使用由此中公开的序列设计的引物克隆。在另外的方法中，DNA文库可用于转化或转染宿主细胞，并且目标DNA的表达如在材料和方法以及实施例1中所述的那样可用针对从B.agaradherensNCIMB 40482克隆、表达和纯化的甘露聚糖酶产生的抗体(单克隆或多克隆)来检测或通过涉及具有甘露聚糖酶活性的多肽的活性测试来检测。

编码部分克隆成存在于大肠杆菌DSM 12180中的质粒pSJ1678的DNA序列和/或本发明的类似DNA序列的甘露聚糖酶可从产生具有甘露聚糖降解活性的酶的细菌菌种Bacillus agaradherens的菌株克隆、优选从菌株NCIMB 40482克隆，或从如此中所述的另外的或相关的生物克隆。

或者，类似的序列可在从存在于大肠杆菌DSM 12180的质粒获得的DNA序列(相信其与所附的SEQ ID NO：1相同)的基础上构建，例如为其一亚序列，和/或通过导入不会产生由DNA序列编码的甘露聚糖酶的另一氨基酸序列，但其相当于将进行所述酶生产的宿主生物的密码子用途的核苷酸置换来构建，或通过导入可产生不同氨基酸序列(即本发明的甘露聚糖降解酶的变体)的核苷酸置换来构建。

多肽

SEQ ID No：2的32到343位的氨基酸序列是一成熟的甘露聚糖酶序列。

本发明也提供基本上与SEQ ID No：2的多肽和其物种同系物(直向同源物或共生同源物)同源的甘露聚糖酶多肽。术语“基本上同源的”此中用来指具有70％、优选至少80％、更优选至少85％、甚至更优选至少90％的序列与SEQ ID No：2的氨基酸32到343位中所示的序列或其直向同源物或共生同源物相同的多肽。这种多肽更优选至少95％、最优选98％或以上与SEQ ID No：2的氨基酸32到343位中所示的序列或其直向同源物或共生同源物相同。百分序列等同性借助于本领域人员已知的电脑程序通过常规方法测定，诸如借助于如其完整地通过引用并入本文的Needleman，S.B.和Wunsch，C.D.在1970年Journal of Molecular Biology，48，443-453页中所公开的，在GCG程序包(Program Manual for the Wisconsin Package，Version 8，August 1994，Genetics Computer Group，575 Science Drive，Madison，Wisconsin，USA 53711)中提供的GAP来进行。使用GAP时采用下列多肽序列比较的设置：3.0的GAP生成补偿(creation penalty)和0.1的GAP扩张补偿(extension penalty)。

多核苷酸分子的序列等同性使用GAP通过类似方法测定，其GAP采用下列DNA序列比较的设置：5.0的GAP生成补偿和0.3的GAP扩张补偿。

本发明的酶制剂优选来源于微生物，最好是来源于细菌、archea或真菌，特别是来源于细菌诸如属于芽孢杆菌属的细菌、优选属于嗜碱芽孢杆菌菌株的细菌，所述嗜碱芽孢杆菌菌株选自Bacillusagaradherens菌种和高度相关的芽孢杆菌菌株，在所述高度相关的芽孢杆菌菌种中所有菌种优选至少95％、甚至更优选至少98％在线状16SrDNA序列上与Bacillus agaradherens同源。

基本上同源的蛋白质和多肽的特征在于具有一个或多个氨基酸置换、缺失或添加。这些变化优选为微小性质的变化，它是保守性氨基酸置换(参见表2)和不显著影响蛋白质或多肽的折叠或活性的其它置换；小的缺失(一般1-约30个氨基酸的缺失)和小的氨基或羧基末端的延伸，诸如氨基末端的蛋氨酸残基、一个多至约20到25个残基的小连接肽或便于提纯的小的延伸(一种亲和标记物)诸如聚组氨酸段、蛋白质A(Nilsson等人，EMBO J.4：1075，1985；Nilsson等人，Methods Enzymol.198：3，1991)。总的来说参见通过引用并入本文的Ford等人在Protein Expression and Purification  2：95-107，1991中的文章。编码亲和标记物的DNA可从供应商(例如Pharmacia Biotech，Piscataway，NJ；New England Biolabs，Beverly，MA)购买。

但是，即使上述的变化优选为小的性质变化，这种变化也可能是较大性质的变化，诸如作为氨基或羧基末端延伸的达到300个氨基酸或以上的较大多肽向本发明的甘露聚糖酶多肽的融合。

表1

保守性氨基酸置换

碱性              精氨酸、赖氨酸、组氨酸

酸性              谷氨酸、天冬氨酸

极性              谷氨酰胺、天冬酰胺

疏水性            亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸

芳香              苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸

小分子            甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、蛋氨酸

除了20个标准氨基酸外，非标准氨基酸(诸如4-羟基脯氨酸、6-N-甲基赖氨酸、2-氨基异丁酸、异缬氨酸和a-甲基丝氨酸)也可置换按照本发明的多肽的氨基酸残基。有限数量的非保守氨基酸、没有被遗传密码编码的氨基酸和非天然氨基酸可置换氨基酸残基。“非天然氨基酸”已在蛋白质合成后修饰，和/或在其侧链上具有与标准氨基酸不同的化学结构。非天然氨基酸可化学合成，或优选可购买并且包括2-哌啶酸、噻唑烷羧酸、脱氢脯氨酸、3-和4-甲基脯氨酸和3，3-二甲基脯氨酸。

在本发明的甘露聚糖酶多肽中的必需氨基酸可按照本领域人员已知的方法鉴定，诸如用定向位点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells，Science 244：1081-1085，1989)。在后一种技术中，单丙氨酸突变在分子的每个残基中导入，得到的突变分子进行生物活性(即甘露聚糖酶活性)测试以鉴定氨基酸残基，其对分子活性是重要的。也参见Hilton等人在1996年的J.Biol.Chem.271：4699-4708中的文章。所述酶的活性位点或其它生物相互作用也可通过连同推定的接触位点氨基酸的突变进行的结构的物理分析来测定，诸如通过象核磁共振、结晶学、电子衍射或光亲和标记等技术来测定。也参见例如de Vos等人在1992年Science 255：306-312，1992的文章；Smith等人在1992年J.Mol.Biol.224：899-904的文章；Wlodaver等人在1992年FEBS Lett.309：59-64中的文章。必需氨基酸的鉴定也可通过采用与按照本发明的多肽相关的多肽的同系物的分析推断。

可进行多个氨基酸置换并使用已知的诱变、重组和/或改组的方法并接着相应的筛选程序诸如由Reidhaar-Olson和Sauer(Science241：53-57，1988)、Bowie和Sauer(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：2152-2156，1989)、WO95/17413或WO95/22625公开的程序来测试。简要地说，这些作者公开了用于同时随机选出两个或多个多肽上的位置、或不同突变的重组/改组(WO95/17413、WO95/22625)并接着选择多肽的功能并然后测序经诱变的多肽以测定每个位置可容许置换的范围的方法。其它可用的方法包括噬菌体展示(例如Lowman等人，Biochem.30：10832-10837，1991；Ladner等人的美国专利5223409；Huse，WIPOPublication WO92/06204)和定向位点诱变(Derbyshire等人，Gene46：145，1986；Ner等人，DNA 7：127，1988)。

如上公开的诱变/改组方法可与高流通量、自动筛选方法相结合来测定宿主细胞中克隆的、诱变处理的多肽的活性。编码活性多肽的诱变处理的DNA分子可从宿主细胞回收并使用现代仪器设备快速测序。这些方法可快速确定单个氨基酸残基在目标多肽中的重要性并可应用于未知结构的多肽。

使用上面讨论的方法，本领域技术人员可鉴定和/或制备各种基本上与SEQ ID No：2的残基32到343同源并且保留野生型蛋白质的甘露聚糖酶活性的多肽。

蛋白质生产

本发明的蛋白质和多肽(包括全长蛋白质、其片段和融合蛋白质)可按照常规的技术在遗传工程用宿主细胞中生产。适合的宿主细胞是可用外源DNA转化或转染并在培养基中生长的细胞类型，并且包括细菌、真菌细胞和培养的较高级的真核细胞。优选细菌细胞、特别是革兰氏阳性生物的培养细胞。特别优选来自芽孢杆菌属的革兰氏阳性细胞，诸如来自枯草芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、灿烂芽孢杆菌(Bacilluslautus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和Bacillus agaradherens的细胞，特别是来自Bacillus agaradherens的细胞。

操作克隆的DNA分子和将外源DNA导入各种宿主细胞的技术公开于通过引用并入本文的Sambrook等人的Molecular Cloning：ALaboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press，ColdSpring Harbor，NY，1989；Ausubel等人(编辑)，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley and Sons，Inc.，NY，1987；和“Bacillussubtilis and Other Gram-Positive Bacteria”，Sonensheim等人，1993，American Society for Microbiology，Washington D.C中。

一般来说，编码本发明的甘露聚糖酶的DNA序列可操作性连接到其表达所需的其它遗传成分上，这种遗传成分一般包括在表达载体内的转录启动子和终止子。所述载体也通常包含一个或多个选择性标记和一个或多个复制起点，尽管本领域技术人员会认识到在某些系统内选择性标记可以在分开的载体上提供并且外源DNA的复制可由整合提供到宿主细胞基因组。启动子、终止子、可选的标记、载体和其它成分的选择是本领域技术人员水平内的常规设计的事性。许多这种成分描述于文献中并且可通过供应商获得。

为将多肽导入到宿主细胞的分泌途径，分泌信号序列(也称为前导序列、前序列或预序列)在表达载体中提供。所述分泌信号序列可以是所述多肽的序列或者可以源于另一分泌蛋白质或从头合成。各种适合的分泌信号序列为本领域人员所熟悉并可参照“Bacillus subtilisand Other Gram-Positive Bacteria”，Sonensheim等人，1993，AmericanSociety for Microbiology，Washington D.C.和Cutting.S.M.(编辑)“Molecular Biological Methods for Bacillus”，John Wiley and Sons，1990有关适合的分泌信号序列、特别是有关在芽孢杆菌宿主细胞中分泌的进一步的描述。分泌信号序列以正确读框结合到DNA序列中。尽管某些信号序列可以定位在目标DNA序列的其它位置，但是分泌信号序列通常被在5’位定位在编码目标多肽的DNA序列中(参见例如Welch等人的美国专利5037743；Holland等人的美国专利5143830)中。

转化或转染的宿主细胞按照常规的方法在包含养分和所选宿主细胞生长所需的其它组分的培养基中培养。各种适用的培养基(包括所定义的培养基和复合培养基)为本领域人员所熟悉并且一般包括碳源、氮源、必需氨基酸、维生素和矿物质。如需要，培养基也可包含诸如生长因子或血清等组分。一般所述生长培养基选择包含外源添加的DNA的细胞，例如通过药物选择或通过基本养分的缺乏，所述基本养分通过在表达载体上携带的可选择标记或共转染到宿主细胞来补充。

蛋白质分离

当所表达的重组多肽被分泌时，所述多肽可从生长培养基中提纯。优选在所述多肽提纯前从培养基去除表达宿主细胞(例如通过离心)。

当所表达的重组多肽没有从宿主细胞分泌时，优选将宿主细胞破裂并且将多肽释放到水“提取物”中，这是这种提纯技术的第一阶段。优选在细胞破裂前，从培养基收集表达宿主细胞(例如通过离心)。

细胞裂解可通过常规的技术诸如通过溶菌酶消化或使细胞通过高压来进行。这种细胞破裂技术的进一步描述可参见(Robert K.Scobes的Protein Purification，第二版，Springer-Verlag)。

无论所表达的重组多肽(或嵌合多肽)是否分泌，其均可使用分级分离和/或常规的提纯方法和介质进行纯化。

硫酸铵沉淀和酸或离液剂提取可用于样品的分级分离。提纯步骤的例子可包括羟基磷灰石、空间排阻、FPLC和反相高效液相色谱。适合的阴离子交换介质包括衍生葡聚糖、琼脂糖、纤维素、聚丙烯酰胺、特殊性能硅石等。优选PEI、DEAE、QAE和Q衍生物，特别优选DEAE快速琼脂糖凝胶(可购自Pharmacia，Piscataway，NJ)。层析介质包括由苯基、丁基或辛基衍生的介质，诸如苯基-琼脂糖FF(Pharmacia)、Toyopearl butyl 650(Toso Haas，Montgomeryville，PA)、辛基-琼脂糖(Pharmacia)等；或聚丙烯酸树脂，诸如Amberchrom CG 71(Toso Haas)等。适合的固体载体包括玻璃珠、硅石基树脂、纤维素树脂、琼脂糖珠、交联琼脂糖珠、聚苯乙烯珠、交联聚丙烯酰胺树脂等，它们在使用条件下是不溶的。这些载体可用活性基团改性从而使通过氨基、羧基、巯基、羟基和/或糖部分与蛋白质连接。偶联化学的例子包括溴化氰活化、N-羟基琥珀酰亚胺活化、环氧化物活化、巯基活化、酰肼活化和用于碳化二亚胺偶联化学的羧基和氨基衍生物。这些及其它固体介质为人们所熟悉并且广泛用于本领域，而且可从供应商处购置。

具体方法的选择为常规设计的事情并且部分取决于所选载体的性质。参见例如1988年Pharmacia LKB Biotechnology(瑞典，Uppsala)的《亲和色谱：原理和方法》一书。

本发明的多肽或其片段也可通过化学合成制备。本发明的多肽可以是单体或多聚体、糖基化或非糖基化、pegylated或non-pegylated；并可包括或不包括起始蛋氨酸氨基酸残基。

基于此中公开的序列资料，可克隆编码本发明的甘露聚糖酶和包括SEP ID No：1所示的DNA序列的全长DNA序列，至少是97位到1029位的DNA序列。

克隆通过本领域人员熟悉的标准方法进行，诸如通过：

-从芽孢杆菌属菌株、特别是B.agaradherens，NCIMB 40482菌株制备基因组库；

-将这种组库接种在合适的底物板上；

-使用基于SEQ ID NO：1的探针通过标准杂交技术鉴定包括本发明的多核苷酸序列的克隆；或通过

-使用基于来自SEQ ID NO：1序列资料的引物通过反向PCR策略鉴定来自所述Bacillus agaradherens NCIMB 40482基因组库的克隆。有关反向PCR的更详尽资料可参照M.J.MCPherson等人的“PCRA Practical approach”，Information Press Ltd.，Oxford England。

基于此中公开的序列资料(SEQ ID No：1、SEQ ID No：2)，本领域技术人员的一项常规工作是使用来自相应微生物的基因组库、特别是使用来自芽孢杆菌属其它菌株诸如芽孢杆菌属嗜碱菌种的基因组库，通过类似的策略分离编码本发明的同系甘露聚糖酶的同系多核苷酸序列。

或者，编码本发明的甘露聚糖或半乳甘露聚糖降解酶的DNA可通过使用基于从存在于大肠杆菌DSM 12180中的质粒获得的DNA序列制备的合成寡核苷酸探针按照众所周知的方法方便地从适合的来源诸如上述的任何生物来克隆。

因此，本发明的多核苷酸分子可从大肠杆菌DSM 12180中分离，其中通过如上述那样克隆获得的质粒被沉积。本发明也涉及菌株大肠杆菌DSM 12180的分离的基本纯的生物培养物。

在本发明说明书中，术语“酶制剂”用于指可能从单种微生物经分离和纯化的常规酶发酵产品，这种制剂通常包括各种不同酶活性物；或者是指单成分酶的混合物、优选通过使用常规重组技术从细菌或真菌菌种获得的酶的混合物，所述酶已经发酵并可能经分别分离和纯化并且其可能源于不同的菌种、优选源于真菌或细菌；或者是指用作重组甘露聚糖酶表达的宿主细胞的微生物的发酵产物，但所述微生物同时产生作为所述微生物自然发生的发酵产物的其它酶如果胶降解酶、蛋白酶或纤维素酶，即常规由相应天然微生物产生的酶复合物。

此中还涉及一种制备本发明的酶制剂的方法，所述方法包括培养能在允许酶生产的条件下产生甘露聚糖酶的微生物如野生型菌株并从培养基回收所述酶。培养可使用常规的发酵技术来进行，例如在摇瓶中培养或者在具搅拌的发酵罐中培养以确保在诱导产生甘露聚糖酶的生长培养基中足够的通气。所述生长培养基可包含常规的N源诸如蛋白胨、酵母提取物或酪蛋白氨基酸，减量的常规C源诸如右旋糖或蔗糖和诱导物诸如瓜耳胶或刺槐豆胶。所述回收可使用常规技术进行，例如通过离心或过滤进行生物质和上清液的分离、上清液的回收或细胞的破裂(如果目标酶在细胞内)、或许接着如EP0406314中所述的进一步提纯或接着如WO 97/15660中所述结晶。

免疫交叉反应性

用于测定免疫交叉反应性的多克隆抗体可通过使用经提纯的甘露聚糖酶来制备。更准确地说，抗本发明的甘露聚糖酶的抗血清可按照N.Axelsen等人在1973年由Blackwell Scientific Publications出版的A Manual of Quantitative Immunoelectrophoresis的第23章中所述方法或按照A.Johnstone和R.Thorpe在1982年由Blackwell ScientificPublications出版的Immunochemistry in Practice(更具体地说在27到31页)中的所述方法，免疫接种兔子(或其它啮齿动物)来产生。提纯的免疫球蛋白可例如通过盐沉淀((NH₄)₂SO₄)、接着透析和例如在DEAE-葡聚糖凝胶上离子交换层析来从抗血清中获得。蛋白质的免疫化学鉴定可通过Outcherlony双向扩散分析[O.Ouchterlony的Handbook of Experimental Immunology(D.M.Weir编辑)，BlackwellScientific Publications，1967，655-706页]、通过交叉免疫电泳(N.Axelsen等人，上文第3和4章)或通过火箭免疫电泳(N.Axelsen等人，第二章)。

可用于生产本发明的酶或酶制剂的有用的细菌的例子有革兰氏阳性细菌，优选来自芽孢杆菌/乳杆菌亚门，优选来自芽孢杆菌属的菌株、更优选来自Bacillus agaradherens的菌株、特别是菌株Bacillusagaradherens，NCIMB 40482。

本发明包括具有上述性质的分离的甘露聚糖酶，它没有同系杂质并且使用常规的重组技术生产。

甘露聚糖酶催化活性(ManU)的测定

比色法测定：底物：来自角豆树的0.2％AZCL-半乳甘露聚糖(Megazyme，Australia)在0.1 M甘氨酸缓冲液中的溶液，pH10.0。测定在一台具搅拌并温控在40℃的热混合器上的1.5毫升Eppendorf微量管中进行。将0.750毫升底物用0.05毫升酶孵化20分钟，然后在15000rpm下离心4分钟来终止。将上清液在1厘米比色池中在600纳米波长下比色。在1厘米比色池中一个ManU(甘露聚糖酶单位)具有0.24的吸光度。

Bacillus agaradherens甘露聚糖酶NCIMB 40482的obtention

菌株

Bacillus agaradherens NCIMB 40482包含编码甘露聚糖酶的DNA序列。

大肠杆菌菌株：制备大肠杆菌SJ2细胞并使用一台购自BIO-RAD的Gene Pulser^TM电穿孔仪按供应商所述通过电穿孔进行转化(Diderichsen，B.，Wedsted，U.，Hedegaard，L.，Jensen，B.R.，Sjoholm，C.(1990)编码α-乙酰乳酸脱羧酶---一种来自短芽孢杆菌的胞外酶的aldB的克隆，J.Bacteriol.，172，4315到4321页)。

枯草芽孢杆菌PL2306：该菌株是具破裂的apr和npr基因的枯草芽孢杆菌DN1885(Diderichsen，B.，Wedsted，U.，Hedegaard，L.，Jensen，B.R.Sjoholm，C.(1990)编码α-乙酰乳酸脱羧酶---一种来自短芽孢杆菌的胞外酶的aldB的克隆，J.Bacteriol.，172，4315到4321页)，它在已知的枯草芽孢杆菌纤维素酶基因的转录单位中破裂，产生纤维素酶阴性的细胞。所述破裂基本上按照A.L.Sonenshein，J.A.Hoch和Richard Losick在1993年编的Bacillus subtilis and other Gram-PositiveBacteria，American Society for Microbiology 618页中的所述来进行。

如Yasbin，R.E.，Wilson，G.A和Young，F.E在1975年J.Bacteriol.121：296-304  中的文章“Transformation and transfection in lysogenicstrains of Bacillus subtilis：evidence for selective induction of prophagein competent cells”中的所述制备和转化感受态细胞。

质粒

pSJ1678(如其全文通过引用并入本文的WO 94/19454中的详尽说明)

pMOL944：这种质粒是一种pUB110衍生物，基本上包含使所述质粒可在枯草芽孢杆菌中繁殖的元件、卡那霉素抗性基因并且具有一强启动子和从地衣芽孢杆菌ATCC 14580的amyL基因克隆的信号肽。这种信号肽包含一个使其便于克隆编码与该信号肽融合的蛋白质成熟部分的DNA的SacII位点。这导致一种导向细胞外表的蛋白质前体的表达。

所述质粒借助于常规的基因工程技术构建，其简述如下：

pMOL944的构建：

将pUB110质粒(McKenzie，T.等人，1986，Plasmid 15：93-103)用单一限制酶NciI消化。将从在质粒pDN1981(P.L.Jorgensen等人，1990，Gene，96，37-41页)上编码的amyL启动子扩增的PCR片段用NciI消化并插入到NciI消化的pUB110中而形成质粒pSJ2624。

所用的两种PCR引物具有下列序列：#LWN5494 5′-GTCGCCGGGGCGGCCGCTATCAATTGGTAACTGTATCTCAGC-3′#LWN5495 5′-GTCGCCCGGGAGCTCTGATCAGGTACCAAGCTTGTCGACCTGCAGAATGAGGCAGCAAGAAGAT-3′

所述引物#LWN5494插入到所述质粒的NotI位点。

然后将质粒pSJ2624用SacI和NotI消化并将在质粒pDN1981上编码的amyL启动子扩增的一个新PCR片段用SacI和NotI消化并将这个DNA片段插入到SacI-NotI消化的pSJ2624中形成质粒pSJ2670。

用相同启动子但以反向以该克隆替代第一个amyL启动子克隆。用于PCR扩增的两种引物具有下列序列：#LWN5938 5′-GTCGGCGGCCGCTGATCACGTACCAAGCTTGTCGACCTGCAGAATGAGGCAGCAAGAAGAT-3′#LWN5939 5′-GTCGGAGCTCTATCAATTGGTAACTGTATCTCAGC-3′

然后将质粒pSJ2670用限制酶PstI和BclI消化并将从编码碱性淀粉酶SP722(公开于其全文通过引用并入本文的国际专利申请WO95/26397中)的克隆的DNA序列扩增的一个PCR片段用PstI和BclI消化并插入而形成质粒pMOL944。用于PCR扩增的两种引物具有下列序列：#LWN7864 5′-AACAGCTGATCACGACTGATCTTTTAGCTTGGCAC-3′#LWN7901 5′-AACTGCAGCCGCGGCACATCATAATGGGACAAATGGG-3′

引物#LWN7901插入到所述质粒的一个SacII位点。

从Bacillus agaradherens进行甘露聚糖酶基因的克隆

基因组DNA的制备：

按WO94/01532中的所述在液体培养基中繁殖菌株Bacillusagaradherens NCIMB 40482。在30℃和300rpm下孵育16小时后，收获细胞并通过Pitcher等人所述的方法(Pitcher，D.G.，Saunders，N.A.，Owen，R.J.(1989)，用硫氰酸胍快速提取细菌基因组DNA，lett.Appl.Microbiol.，8，151到156页)分离基因组DNA。

构建基因组库：

将基因组DNA用限制酶Sau3A部分消化并在0.7％琼脂糖凝胶上通过电泳大小分级。将大小在2到7kb之间的片段在DEAE-纤维素纸上通过电泳分离(Dretzen.G.，Bellard，M.，Sassone-Corsi，P.，Chambon，P.(1981)。一种可靠的从琼脂糖和丙烯酰胺凝胶回收DNA片段的方法，Anal Biochem.，112，295-298页)。

将分离的DNA片段连接到BamHI消化的pSJ1678质粒DNA上并将连接混合物用于转化大肠杆菌SJ2。

阳性克隆的鉴定

将在大肠杆菌中如上述构建的DNA文库在含0.2％AZCL-半乳甘露聚糖(Megazyme)和9微克/毫升氯霉素的LB琼脂平板上筛选并在37℃孵育过夜。表达甘露聚糖酶活性的克隆显示出蓝色扩散的晕圈。通过Qiagen质粒spin preps由1毫升过夜培养液分离来自这些克隆之一的质粒DNA(用9微克/毫升氯霉素和在250rpm摇动下在TY中37℃孵育细胞)。

该克隆(MB525)通过克隆的Sau3A DNA片段的DNA测序进一步鉴定。DNA测序通过使用Taq脱氧终止循环测序试剂盒(Perkin-Elmer，美国)、荧光标记的终止子和适合的作为引物的低聚核苷酸引物步移(primerwalking)来进行。

序列数据的分析按照Devereux等人在1984年的Nucleic AcidsRes.，12，387到395页中所述的方法进行。编码甘露聚糖酶的序列在SEQ ID No：1中显示。衍生的蛋白质序列显示于SEQ ID No：2中。

甘露聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的亚充隆和表达：

本发明的编码甘露聚糖酶的DNA序列使用包括以下两个低聚核苷酸的PCR引物组PCR扩增：甘露聚糖酶.上游.SacII5’-CAT TCT GCA G CC GCG GCA GCA AGT ACA GGC TTT TATGTT GAT GG-3’甘露聚糖酶.下游.NotI5’-GAC GAC GTA CAA  GCG GCC GCG CTA TTT CCC TAA CATGAT GAT ATT TTC G-3’。

限制位点SacII和NotII在下部划线。

从如上所述的Bacillus agaradherens NCIMB 40482分离的染色体DNA按照厂商说明在使用Amplitaq DNA聚合酶(Perkin Elmer)的PCR反应中用作模板。所述PCR反应在包含200μM的每种dNTP、2.5单位AmpliTaq聚合酶(Pekin-Elmer，Cetus，美国)和100pmol的每种引物的PCR缓冲液(10mM Tris-HCl，pH 8.3，50mM KCl，1.5mMMgCl₂，0.01％(w/v)明胶)中进行。

所述PCR反应使用DNA循环变温加热器(Landgraf，德国)来进行。在94℃孵育1分钟(一次)后，进行30个在94℃下变性30秒钟、在60℃退火1分钟和在72℃延伸2分钟(一个循环分布)的PCR循环。取5微升等份的扩增产物通过在0.7％琼脂糖凝胶(NuSieve，FMC)中电泳来分析。DNA片段大小的值1.4kb指示了基因片段的适合扩增。

PCR片段的亚克隆

如上述产生的45微升等份的PCR产物按照生产商的说明使用QIA快速PCR纯化试剂盒(Qiagen，美国)纯化。经提纯的DNA在50微升pH 8.5的10mM Tris-HCl中洗提。

将5微克pMOL944和25微升经提纯的PCR片段用SacII和NotI消化、在0.8％低胶凝温度琼脂糖(SeaPlaque GTG，FMC)凝胶中电泳，将相关片段从凝胶上切下并按照生产商的说明使用QIA快速凝胶提取试剂盒(Qiagen，美国)纯化。然后将分离的PCR DNA片段连接到经SacII-NotI消化和提纯的pMOL944中。所述连接使用0.5微克的每种DNA片段、1U的T4 DNA连接酶和T4连接酶缓冲液(BoehringerMannheim，德国)在16℃进行过夜。

连接混合物被用于转化感受态枯草芽孢杆菌PL2306。转化的细胞被接种在LBPG-10微克/毫升卡那霉素平板上。在37℃孵育18小时后，在平板上看到菌落。通过从过夜培养液分离质粒DNA分析几种克隆。

一个这种阳性克隆在如上所用的琼脂平板上被重划线几次，该克隆被称为MB594。该克隆MB594在TY-10微克/毫升卡那霉素中在37℃生长过夜，第二天按照生产商有关枯草芽孢杆菌质粒制备的建议，使用Qiaprep Spin Plasmid Miniprep Kit#27106用1毫升细胞从该细胞中分离质粒。对该DNA进行DNA测序和揭示相应于甘露聚糖酶的成熟部分即所附SEQ ID No：3的94-1404位的DNA序列。衍生的成熟蛋白质显示于SEQ ID No：4中。显然，由于在PCR中所用的下游引物的设计，由SEQ ID No：1的序列编码的甘露聚糖酶的3’末端被改变成如SEQ ID No：3所示的情况。得到的氨基酸序列显示于SEQ ID No：4中并且显然SEQ ID No：2的C末端(SHHVREIGVQFSAADNSSGQTALYVDNVTLR)被改变成SEQ IDNo：4的C末端(IIMLGK)。

培养基：

TY(如Ausubel，F.M等人(编辑)，John Wiley and Sons在1995年出版的“Current protocols in Molecular Biology”中所述)；

LB琼脂(如Ausubel，F.M等人(编辑)，John Wiley and Sons在1995年出版的“Current protocols in Molecular Biology”中所述)；

LBPG是补充以0.5％葡萄糖和0.05 M磷酸钾(pH 7.0)的LB琼脂(参见上面)。

BPX培养基如EP 0506780(WO 91/09129)中所述。

来自Bacillus agaradherens的甘露聚糖酶的表达、提纯和鉴定

按如上的材料和方法部分所述获得的克隆MB594在于500毫升两个带挡板的摇瓶中的具10微克/毫升卡那霉素的25×200毫升BPX培养基中于37℃及300rpm下生长5天。

收集6500毫升克隆MB594(批号#9813)的摇瓶培养液并将pH调节到5.5。在搅拌下加入146毫升阳离子剂(C521)和292毫升阴离子剂(A130)进行絮凝。通过使用一台Sorval RC 3B离心机在6℃下以9000rpm离心20分钟分离絮状物。上清液使用Whatman玻璃滤膜GF/D和C澄清并最后在一filtron上浓缩并截留10kDa的部分。

用氢氧化钠将750毫升该浓缩液调节到7.5的pH。将透明溶液施加到采用用50毫摩尔Tris(pH 7.5)平衡的900毫升Q-Sepharose柱的阴离子交换色谱中。使用氯化钠梯度洗脱甘露聚糖酶活性结合物。

所述纯酶在SDS-PAGE上显示了38kDa分子量的单谱带。甘露聚糖酶的氨基酸序列即翻译的DNA序列显示于SEQ ID No：2中。

动力常数的测定：

底物：刺槐豆胶(角豆树)和还原糖分析(PHBAH)。刺槐豆胶购自Sigma(G-0753)。

使用不同浓度的刺槐豆胶并在40℃在pH10下孵育20分钟进行动力测定：

K_催化：467/秒

K_m：0.08g/l

MW：38kDa

pI(等电点)：4.2

发现甘露聚糖酶的最佳温度为60℃。

pH活性分布图显示最大活性在pH 8到10之间。

差示扫描量热法(DSC)得到在Tris缓冲液中pH 7.5下的熔点为77℃，显示出这种酶非常热稳定。

使用0.2％来自角豆树的AZCL-半乳甘露聚糖作为底物并如上所述在40℃孵育的洗涤剂配伍性显示出与常规液体洗涤剂的良好配伍性和与常规粉状洗涤剂的良好配伍性。

枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶的168的obtention

如下进行枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的鉴定和提纯：

搜索与已知芽孢杆菌属菌种β-甘露聚糖酶基因序列相同的枯草芽孢杆菌基因组(Mendoza等人，Biochemica et Biophysica Acta 1243：552-554，1995)。其产物未知的ydhT编码区显示出与已知芽菌杆菌β-甘露聚糖酶58％的相似性。设计下列低聚核苷酸来扩增编码推定的β-甘露聚糖酶的成熟部分：5’-GCT CAA TTG GCG CAT ACT GTGTCG CCT GTG-3’和5’-GAC GGA TCC CGG ATT CAC TCA ACGATT GGC G-3’。来自枯草芽孢杆菌1A95菌株的总基因组DNA被用作使用前述引物扩增ydhT成熟区的模板。PCR使用具AMPLITAQDNA聚合酶的基因-AMP PCR试剂盒(Perkin Elmer，AppliedBiosystems，Foster City，CA)进行。开始在95℃解链5分钟后接着25次下列程序的循环：95℃解链1分钟，55℃回火2分钟和72℃延伸2分钟。最后一次循环后，反应物在72℃保持10分钟以完成延伸。所述PCR产物使用QIA快速PCR提纯试剂盒(Qiagen，Chatsworth，CA)提纯。

将从枯草芽孢杆菌1A95菌株扩增的YdhT成熟区如下插入到表达载体pPG1524(如前述)中。将扩增的1028bp片段用MfeI和BamHI消化。将表达载体pPG1527用EcoRI和BamHI消化。限制产物使用QIA快速PCR提纯试剂盒(Qiagen，Chatsworth，CA)提纯。所述两个片段使用T4 DNA连接酶连接(13小时，16℃)并用于转化感受态大肠杆菌DH5-α菌株。培养耐氨苄青霉素菌落供DNA制备。然后将DNA通过限制酶切分析鉴定。质粒pPG3200包含ydhT基因的成熟区。然后用质粒pPG3200转化感受态枯草芽孢杆菌PG632菌株(Saunders等人，1992)。

挑取7种耐卡那霉素枯草芽孢杆菌克隆和一种PG632对照克隆并在补充了1毫升25％maltrin、120微升10mM MnCl₂和20微升50mg/ml卡那霉素的20毫升20/20/5培养基(20g/l胰化蛋白胨、20g/l酵母提取物、5g/l NaCl)中生长。克隆在37℃250rpm下摇动的250毫升带挡板的摇瓶中生长过夜而表达蛋白质。以14000rpm 15分钟离心分离出细胞。一微升每种上清液用99微升50mM乙酸钠(pH6.0)稀释。取1微升这种稀释液按照生产商说明使用内-1，4-β-甘露聚糖酶β-Mannazyme Tabs(Megazyme，爱尔兰)测定。在Beckman DU640分光光度计上590nm处读取吸光度。克隆7显示出1.67的最高吸光度值。PG632对照在590nm处没有显示出有吸光度。

上清液通过在10-20％Tris-甘氨酸凝胶(Novex，San Diego，CA)上经SDS-PAGE分析以证实所预期的38 kDa的蛋白质大小。样品如下制备。将500微升ydhT克隆7的样品和PG632上清液用55.5微升100％三氯乙酸(Sigma)沉淀、用100微升5％三氯乙酸洗涤、重新悬浮于50微升Tris-甘氨酸SDS样品缓冲液(Novex)中并沸腾5分钟。每种样品取一微升在30mA下在所述凝胶上电泳90分钟。观察到在38kDa处ydhT克隆7的一个宽的蛋白质带。

在B.Braun Biostat C发酵罐进行10升枯草芽孢杆菌ydhT克隆7的发酵。发酵条件如下。在37℃，细胞在类似于20/20/5的丰富培养基中生长18小时。发酵结束时，去除细胞并使用切向流过滤系统将上清液浓缩到1升。测得在浓缩上清液中的β-甘露聚糖酶的最终收率为3g/l。

如下进行来自发酵上清液的β-甘露聚糖酶的提纯：在4℃将500ml上清液以10000rpm离心10分钟。然后于4℃将离心的上清液在更换两次，每次4升的10mM磷酸钾(pH 7.2)中通过Spectrapor 12000-14000mol.wt.截留膜(Spectrum)透析过夜。在4℃将经透析的上清液在10000rpm下离心10分钟。将200毫升Q Sepharose fast flow(Pharmacia)阴离子交换柱在20℃下用1升10mM磷酸钾(pH 7.2)平衡并将300毫升上清液加到柱上。收集210毫升(样品A)和175毫升(样品B)两个流过的组分。除了样品用199微升50mM乙酸钠(pH 6.0)稀释外，将两个组分和前面那样进行测定，它们分别显示出0.38和0.52的吸光度。每种样品取2微升加入到8微升Tris-甘氨酸SDS样品缓冲液(Novex，CA)中并沸腾5分钟。在30mA下将得到的样品在10-20％Tris-甘氨酸凝胶(Novex，Ca)上电泳90分钟。相应于38kDa的主带在每个样品中均存在并且占总蛋白质的95％以上。按照生产商的说明使用牛血清清蛋白作为标准对两个样品进行BCA蛋白质测定(Pierce)。样品A和样品B分别包含1.3mg/ml和1.6mg/ml的β-甘露聚糖酶。通过离子喷射质谱和氨基端氨基酸序列分析证实蛋白质的同一性。

将提纯的β-甘露聚糖酶样品如下用于鉴定酶活性。所有测定均使用了如前所述的内-1，4-β-甘露聚糖酶Beta-Mannazyme Tabs(Megazyme，爱尔兰)。在3.0-9.0pH范围内的活性在50mM柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液中进行，对于在pH9.5下的活性测定则使用50mMCAPSO(Sigma)，对于pH10.0-11.0范围内的活性则使用50mM CAPS缓冲液。发现枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的最佳pH范围为6.0-6.5。温度活性分布曲线在50mM柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 6.5)中测定。所述酶在40-45℃显示出最佳活性。所述枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在15℃以下和80℃以上保持了明显的活性。按照生产商的说明使用内-1，4-β-甘露聚糖酶Beta-Mannazyme Tabs(Megazyme，爱尔兰)测得针对β-1，4-半乳甘露聚糖的比活性为160000微摩尔/分钟.毫克β-甘露聚糖酶。枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的核苷酸和氨基酸序列示于SEQID No：5和SEQ ID No：6中。

所述甘露聚糖酶优选以占组合物0.0001-2％(重量)、更优选0.0005-0.1％(重量)、最优选0.001-0.02％(重量)纯酶的水平加入到本发明的组合物中。

除了包括催化域的酶核心外，本发明的酶也包括纤维素结合域(CBD)，所述酶的纤维素结合域和酶核心(催化活性域)可操作连接。所述纤维素结合域(CBD)可作为所编码酶的整合部分存在，或者来自另一来源的CBD可导入到所述酶中而产生酶杂化物。在本文中，术语“纤维素结合域”可按Peter Tomme等人在John N.Saddler和MichaelH.Penner(编辑)的“Enzymatic Degradation of InsolubleCarbohydrates”(ACS Symposium Series，No.618，1996)中的“纤维素结合域：分类和性质”中的定义来理解。该定义将120种以上的纤维素结合域分成10个家族(I-X)，并验证了CBD发现于各种酶诸如纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、乙酰酯酶和壳多糖酶中。也已在藻类如红藻Porphyra purpurea发现非水解多糖结合蛋白质形式的CBD，参见Tomme等人，在所引用的书中。但是，大多数CBD来自纤维素酶和木聚糖酶，CBD被发现于蛋白质的N和C末端或为内部的。酶杂化物为本领域人员所熟悉，参见例如WO90/00609和WO95/16782，并可如下制备：将一个包括至少一个编码纤维素结合域的DNA片段的DNA构建物转化入宿主细胞中[所述纤维素结合域连接到(有或没有连接体)编码甘露聚糖酶的DNA序列]并使宿主细胞生长以表达融合的基因。酶杂化物可通过下式说明：

CBD-MR-X式中CBD为相应于至少所述纤维素结合域的氨基酸序列的N-末端或C-末端区；MR为中区(连接体)并可为一个键或一优选约2到约100个碳原子、更优选2到40个碳原子的短连接基团，或优选为约2到约100个氨基酸、更优选2到40个氨基酸；X为本发明的酶的N-末端区或C-末端区。

上述的酶可以来自任何合适的来源诸如植物、动物、细菌、真菌和酵母菌。来源可进一步是中温生物或嗜极生物(嗜冷生物、嗜冷菌、嗜热生物、嗜压生物、嗜碱生物、嗜酸生物、嗜卤生物等)。可使用经纯化或未纯化形式的这些酶。现在，为了使在本发明的清洁组合物的效能最佳化，经蛋白质/基因工程技术修饰野生类型的酶是常规的实践。例如，可设计所述变体从而提高所述酶与这种组合物的所用常规成分的配伍性。或者所述变体可设计成使所述酶变体的最佳pH、漂白或螯合剂稳定性、催化活性等适合具体的清洁用途。

具体地说，对漂白稳定性来说应该将注意力放在对氧化敏感的氨基酸上，对表面活性剂配伍性来说应该将注意力放在表面电荷上。这种酶的等电点可通过一些带电氨基酸的取代来改变，例如等电点的提高可有助于改善与阴离子表面活性剂的配伍性。所述酶的稳定性可进一步通过例如另外的盐桥的产生和增强金属结合位点以提高螯合剂稳定性来增强。

蛋白酶

本发明的洗涤剂组合物的第二种基本组分是蛋白酶。

适用的蛋白酶是来自IUPAC分类EC 3.4.-.-的蛋白酶，优选来自IUPAC分类EC 3.4.21.-的内丝氨酸蛋白酶，更优选来自IUPAC分类EC 3.4.21.62的枯草芽孢杆菌蛋白酶。这些EC3.4.21.62蛋白酶是从枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的具体菌株获得的枯草杆菌蛋白酶(枯草芽孢杆菌蛋白酶BPN和BPN’)。一种适用的蛋白酶是从芽孢杆菌属的菌株获得并在整个8到12的pH范围具有最大的活性且由丹麦的Novo Industries A/S(后文称为“Novo”)开发并以ESPERASE^的商品名出售。这种酶和其类似酶的制备描述于Novo的GB1243784中。其它适用的蛋白酶包括来自Novo的ALCALASE^、DURAZYM^和  SAVINASE^以及来自Gist-Brocades的MAXATASE^、MAXACAL^、PROPERASE^和  MAXAPEM^(蛋白质工程的Maxacal)。蛋白水解酶也包括经修饰的细菌丝氨酸蛋白酶，诸如1987年4月28日申请的欧洲专利申请系列号87 303761.8(特别是17、24和98页)中所述并在此中称为“蛋白酶B”的这类蛋白酶和在此中称为“蛋白酶A”的经修饰的细菌丝氨酸蛋白水解酶并在1986年10月29日Venegas的欧洲专利申请199404中所述的这类蛋白酶。适用的蛋白酶是此中称为“蛋白酶C”的蛋白酶，它是一种源于芽孢杆菌的碱性丝氨酸蛋白酶的变体，其中赖氨酸在27位取代了精氨酸、酪氨酸在104位取代了缬氨酸、丝氨酸在123位取代了天冬酰胺和丙氨酸在274位取代了苏氨酸。蛋白酶C描述于与WO91/06637相当的1991年5月16日公开的EP 90915958.4中。常规改性的变体、特别是蛋白酶C也包括在其中。

一种称为“蛋白酶D”的优选的蛋白酶是具有天然中没有发现的氨基酸序列的羰基水解酶变体，如同WO95/10591和具有美国专利申请系列号08/322677的C.Ghosh等人1994年10月13日提出的名为“Bleaching Compositions Comprising Protease Enzymes”的母申请中的所述，其根据解淀粉芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶的编号，通过用一种不同的氨基酸取代在相当于+76位置的所述羰基水解酶中位置，优选也连同相当于选自+99、+101、+103、+104、+107、+123、+27、+105、+109、+126、+128、+135、+156、+166、+195、+197、+204、+206、+210、+216、+217、+218、+222、+260、+265和/或+274的一个或多个氨基酸残基位置处的众多氨基酸残基来从前体羰基水解酶衍生而来。适用的酶还有描述于WO95/10591中的蛋白酶的羰基水解酶变体，其具有通过取代在前体酶中相当于+210位上的取代的多个氨基酸残基和一个或多个下列残基的氨基酸序列：+33、+62、+67、+76、+100、+101、+103、+104、+107、+128、+129、+130、+132、+135、+156、+158、+164、+166、+167、+170、+209、+215、+217、+218和+222，其中编码的位置与天然存在的来自解淀粉芽孢杆菌的枯草芽孢杆菌蛋白酶相当或与在其它羰基水解酶或枯草芽孢杆菌蛋白酶诸如迟缓芽孢杆菌枯草芽孢杆菌蛋白酶(1997年6月4日申请的同时待审的美国专利申请系列号60/048550)中等效的氨基酸残基相当。

适用于本发明的蛋白酶也包括描述于专利申请EP 251446和WO91/06637中的蛋白酶、描述于WO 91/02792中的蛋白酶BLAP^和其描述于WO 95/23221中的其变体。

也参见来自描述于Novo的WO 93/18140A中的芽孢杆菌属菌种NCIMB 40338的高pH蛋白酶。包括蛋白酶、一种或多种其它酶和可逆蛋白酶抑制剂的酶洗涤剂描述于Novo的WO 92/03529A中。需要时，具有降低了吸附和增加了水解的蛋白酶可如Procter & Gamble的WO 95/07791中所述那样获得。一种用于适合于此中洗涤剂的重组的胰蛋白酶样的蛋白酶描述于Novo的WO 94/25583中。其它适用的蛋白酶描述于Unilever的EP516200中。

所述蛋白水解酶以占所述组合物重量的0.0001-2％、优选0.001-0.2％、更优选0.005-0.1％纯酶的水平掺入到本发明的洗涤剂组合物中。

洗涤剂组分

本发明的洗涤剂组合物必须包含至少另外的一种洗涤剂组分。这些另外组分的准确性质和其掺入的水平将取决于所述组合物的物理形式和使用这些组合物的清洁操作的性质。

本发明的洗涤剂组合物还优选包括选自所选的表面活性剂、另一种酶、一种助洗剂和/或一种漂白体系的洗涤剂成分。

按照本发明的洗涤剂组合物的形式可以是液体剂、膏剂、凝胶剂、条剂、片剂、喷雾剂、泡沫剂、粉剂或颗粒剂。颗粒组合物也可以是“高密度”形式，液体组合物也可以是“浓缩”形式。

在一种优选的实施方案中，本发明涉及包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物(实施例1-16)。在第二种实施方案中，本发明涉及餐具洗涤剂组合物或家用洗涤剂组合物(实施例17-22)。

本发明的组合物可例如配制成手洗和机洗餐具洗涤组合物、手洗和机洗洗衣用洗涤剂组合物(包括洗衣添加剂组合物和适用于带污织物的浸泡和/或预处理的组合物、漂洗加入的织物软化剂组合物和用于常规家庭硬表面清洁处理的组合物)。

当配制成用于手洗餐具方法的组合物时，本发明的组合物优选包含一种表面活性剂和优选其它的选自有机聚合化合物、增泡剂、II族金属离子、溶剂、增溶剂和另外的酶的洗涤剂化合物。

当配制成适用于洗衣机洗涤的组合物时，本发明的组合物优选包含表面活性剂和助洗剂化合物两者以及另外的一种或多种优选选自有机聚合化合物、漂白剂、另外的酶、抑泡剂、分散剂、钙皂分散剂、污垢悬浮剂和抗再沉积剂和腐蚀抑制剂的洗涤剂组分。洗衣用组合物也可包含软化剂作为另外的洗涤剂组分。配制成洗衣用洗涤剂组合物时，这种含甘露聚糖酶和蛋白酶的组合物可提供织物清洁、污渍去除、白度保持的效能。

本发明的组合物也可用作固态或液态形式的洗涤剂添加剂产品。这种添加剂产品用于补充或增强常规洗涤剂组合物的性能并且可以在清洁过程的任何阶段加入。

如果需要，本发明的洗涤剂组合物的密度(在20℃测定)范围为400-1200g/l、优选500-950g/l。

本发明组合物的“高密度”形式受密度的影响最大，同时根据组合物的具体情况受无机填料盐的量的影响；无机填料盐是粉末形式洗涤剂组合物的常规成分；在常规洗涤剂组合物中，所述填料盐大量存在，一般为总组合物的1 7-35％(重量)。在高密度组合物中，填料盐的存在量一般不超过总组合物重量的15％(重量)、优选不超过10％、最优选不超过5％(重量)。诸如在本发明的组合物中所指的无机填料盐选自碱金属和碱土金属的硫酸盐和氯化物。一种优选的填料盐是硫酸钠。

按照本发明的液体洗涤剂组合物也可以是“浓缩”形式。在这种情况下，按照本发明的液体洗涤剂组合物将包含比常规液体洗涤剂更低量的水。一般浓缩液体洗涤剂的水含量优选少于洗涤剂组合物的40％(重量)、更优选少于30％、最优选少于20％。

适用于此中的洗涤剂化合物选自下面所述的化合物。

表面活性剂体系

按照本发明的洗涤剂组合物一般包括一种表面活性剂体系，其中所述表面活性剂可选自非离子和/或阴离子和/或阳离子和/或两性和/或两性离子和/或半极性表面活性剂。优选本发明的洗涤剂组合物包括一种非离子、一种阴离子和/或一种阳离子表面活性剂。

现已惊异地发现还包括一种非离子、一种阴离子和/或一种阳离子表面活性剂的本发明的洗涤剂组合物提供了优异的去污性能。

不希望受理论的束缚，相信酶水解产生了更易于被已知用于颗粒污垢的非离子表面活性剂去除的小颗粒。优选的非离子表面活性剂是烷基乙氧基化物AE3到AE7。也相信织物直接(substantive)阳离子表面活性剂与所述复合酶的酶水解的结合提供了改善的性能。

所述表面活性剂一般以0.1-60％(重量)的水平存在。更优选掺入的水平为按照本发明的洗涤剂组合物的1-35％(重量)、最优选为1-30％(重量)。

所述表面活性剂优选制成可与存在于组合物中的酶组分配伍的形式。在液体或凝胶组合物中，所述表面活性剂最优选制成能促进或至少不降低在这些组合物中酶的稳定性的形式。

非离子表面活性剂

烷基酚的聚氧乙烯、聚氧丙烯和聚氧丁烯缩合物适合用作本发明的表面活性剂体系的非离子表面活性剂，其中优选聚氧乙烯缩合物。这些化合物包括其烷基具有约6到约14个碳原子、优选约8到约14个碳原子并且为直链或支链构型的烷基酚与氧化烯的缩合产物。在一优选的实施方案中，氧化乙烯以每摩尔烷基酚约2到约25摩尔、更优选约3到约15摩尔的量存在。这种类型的商品非离子表面活性剂包括由GAF Corporation推向市场的Igepal^TM CO-630；和由Rohm &Haas Company推向市场的Triton^TM X-45、X-114、X-100和X-102。这些表面活性剂通常被称为烷基酚烷氧基化物(例如烷基酚乙氧基化物)。

伯和仲脂族醇与约1到约25摩尔氧乙烯的缩合产物适合用作本发明的非离子表面活性剂体系的非离子表面活性剂。脂族醇的烷基链可以是直链或支链、伯或仲，并一般包含约8到约22个碳原子。优选的是其烷基包含约8到约20个碳原子、更优选约10到约18个碳原子的醇与每摩尔醇约2到约10摩尔氧乙烯的缩合产物。在所述缩合产物中存在每摩尔醇约2到约7摩尔氧乙烯并最优选2到5摩尔氧乙烯。这种类型的商品化非离子表面活性剂的例子包括由UnionCarbide Corporation推向市场的Tergitol^TM 15-S-9(C₁₁-C₁₅线性醇与9摩尔氧乙烯的缩合产物)和Tergitol^TM 24-L-6 NMW(C₁₂-C₁₄伯醇与6摩尔氧乙烯的窄分子量分布的缩合产物)；由Shell Chemical Company推向市场的Neodol^TM 45-9(C₁₄-C₁₅线性醇与9摩尔氧乙烯的缩合产物)、Neodol^TM 23-3(C₁₂-C₁₃线性醇与3.0摩尔氧乙烯的缩合产物)、Neodol^TM 45-7(C₁₄-C₁₅线性醇与7摩尔氧乙烯的缩合产物)、Neodol^TM45-5(C₁₄-C₁₅线性醇与5摩尔氧乙烯的缩合产物)；由Procter & GambleCompany推向市场的Kyro^TM EOB(C₁₃-C₁₅醇与9摩尔氧乙烯的缩合产物)和由Hoechst推向市场的Genapol LA O3O或O5O(C₁₂-C₁₄醇与3或5摩尔氧乙烯的缩合产物。这些产品优选的HLB的优选范围是8到11并最优选为8到10。

也可用作本发明的表面活性剂体系的非离子表面活性剂的是1986年1月21日授权的Llenado的美国专利4565647中公开的烷基多糖，其具有一种含约6到约30个碳原子、优选约10到约16个碳原子的疏水基团和一种具有含约1.3到约10、优选约1.3到约3、最优选约1.3到约2.7个糖单元的亲水基的多糖如聚糖苷。可使用任何含5或6个碳原子的还原糖例如葡萄糖和半乳糖并且半乳糖基可取代葡糖基(任选疏水基团在2-、3-、4-等位置连接从而使葡萄糖或半乳糖与葡糖苷或半乳糖苷相对)。糖间的键可以是例如另外的糖单元的一个位置和前面糖单元的2-、3-、4-和/或6-位之间的键。

优选的烷基多糖苷具有下式：

R²O(C_nH_2nO)_t(糖基)_x其中R²选自烷基、烷基苯基、羟基烷基、羟烷基苯基和其混合物，其中所述烷基包含约10到约18、优选约12到约14个碳原子；n为2或3并优选为2；t为0到约1 0并优选为0；x为约1.3到约10并优选为约1.3到约3和最优选为约1.3到约2.7。糖基优选源于葡萄糖。为制备这些化合物，首先形成所述醇或烷基聚乙氧基醇并然后与葡萄糖或葡萄糖源反应而形成葡糖苷(连接在1位)。然后可在其1位和前面糖基单元的2-、3-、4-和/或6-位(优选主要在2位)之间连接另外的糖基单元。

氧乙烯与通过氧丙烯与丙二醇的缩合形成的疏水基的缩合产物也适用作为本发明的另外的非离子表面活性剂体系。这些化合物的疏水部分优选具有约1500到约1800的分子量并显示出水不溶性。将聚氧乙烯部分加入该疏水部分有助于提高分子整体的水溶性，产品的液体特征被保持到聚氧乙烯含量达到缩合产物总重量约50％的水平，其相当于与多至约40摩尔的氧乙烯缩合。这种类型的化合物的例子包括某些由BASF推向市场的商品Plurafac^TM LF 404和Pluronic^TM表面活性剂。

也适用作为本发明的非离子表面活性剂体系的非离子表面活性剂有氧乙烯与源于氧丙烯和乙二胺反应的产物的缩合产物。这些产物的疏水部分包括乙二胺和过量氧丙烯的反应产物并一般具有约2500到约3000的分子量。该疏水部分与氧乙烯缩合到其缩合产物包含约40-约80％(重量)聚氧乙烯并具有约5000到约11000的分子量的程度。这种类型的非离子表面活性剂的例子包括某些由BASF推向市场的商品Tetronic^TM化合物。

优选用作本发明的表面活性剂体系的非离子表面活性剂为烷基酚的聚氧乙烯缩合物、伯和仲脂族醇与约1到约25摩尔氧乙烯的缩合产物、烷基多糖和其混合物。最优选具有3到1 5个乙氧基的C₈-C₁₄烷基酚乙氧基化物和具有2到10个乙氧基的C₈-C₁₈醇乙氧基化物(优选平均C₁₀)和其混合物。

高度优选的非离子表面活性剂是下式的多羟基脂肪酰胺表面活性剂式中R¹为H，或者R¹为C_1-4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基或其混合物，R²为C_5-31烃基，Z为具有至少3个直接连接到链上的羟基的线性烃基链的多羟基烃基或其烷氧基化衍生物。优选R¹为甲基，R²为直链C_11-15烷基或C_16-18烷基或链烯基链诸如椰油烷基或其混合物，并且Z源于在还原胺化反应中的一种还原糖诸如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。

阴离子表面活性剂

优选的用于本发明的阴离子表面活性剂是烷基酯硫酸盐和线性烷基苯表面活性剂。适用的阴离子表面活性剂是线性烷基苯磺酸盐、烷基酯磺酸盐表面活性剂，包括按照“The Journal of the American OilChemists Society”，52(1975)，323-329页的方法将C₈-C₂₀羧酸(即脂肪酸)的线性酯用气态SO₃磺化的烷基酯磺酸盐表面活性剂。适用的原料将包括诸如源于牛脂、棕榈油等的天然脂肪物质。

优选的烷基酯磺酸盐表面活性剂、特别是用于洗衣用途的烷基酯磺酸盐表面活性剂包括下面结构式的烷基酯磺酸盐表面活性剂其中R³为C₈-C₂₀烃基，优选烷基或其组合，R⁴为C₁-C₆烃基、优选为烷基，或其组合，M为与烷基酯磺酸形成水溶性盐的阳离子。适合的成盐阳离子包括金属诸如钠、钾和锂，取代或未取代的铵阳离子诸如单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。优选R³为C₁₀-C₁₆烷基，R⁴为甲基、乙基或异丙基。特别优选的是R³为C₁₀-C₁₆烷基的甲酯磺酸盐。

其它适用的阴离子表面活性剂包括式ROSO₃M的水溶性盐或酸的烷基硫酸盐表面活性剂，其中R优选为C₁₀-C₂₄烃基、优选具有C₁₀-C₂₀烷基组分的烷基或羟烷基、更优选为C₁₂-C₁₈烷基或羟烷基，并且M为H或一阳离子，例如碱金属阳离子(例如钠、钾、锂)或铵或取代铵(例如甲铵、二甲铵和三甲铵阳离子和季铵阳离子诸如四甲铵和二甲基哌啶鎓阳离子和源于烷基胺诸如乙胺、二乙胺、三乙胺和其混合物的季铵阳离子等)。一般对于较低的洗涤温度(例如低于约50℃)来说，优选C₁₂-C₁₆烷基链，对于较高洗涤温度(例如在约50℃以上)来说，优选C₁₆-C₁₈烷基链。

其它可用于洗涤剂目的的阴离子表面活性剂也可包括在本发明的洗涤剂组合物中。它们可包括肥皂的盐(包括例如钠、钾、铵和取代铵盐诸如单、二和三乙醇胺盐)、C₈-C₂₂伯或仲链烷磺酸盐、C₈-C₂₄烯烃磺酸盐、例如按英国专利说明书1082179中所述通过碱土金属柠檬酸盐热解产物的磺化制备的磺化多元羧酸、C₈-C₂₄烷基聚乙二醇醚硫酸盐(包含多至10摩尔的氧乙烯)、烷基甘油磺酸盐、脂肪酰甘油磺酸盐、脂肪油酰甘油硫酸盐、烷基酚氧乙烯醚硫酸盐、链烷烃磺酸盐、烷基磷酸盐、羟乙磺酸盐例如酰基羟乙磺酸盐、N-酰基牛磺酸盐、烷基琥珀酰胺酸盐和磺基琥珀酸盐、磺基琥珀酸盐的单酯(特别是饱和和不饱和C₁₂-C₁₈单酯)和磺基琥珀酸盐的二酯(特别是饱和和不饱和C₆-C₁₂二酯)、酰基肌氨酸盐、烷基多糖的硫酸盐诸如烷基聚葡糖苷的硫酸盐(非离子非硫酸化的化合物在下面描述)、分支的伯烷基硫酸盐和烷基多乙氧基羧酸盐诸如具有式RO(CH₂CH₂O)_k-CH₂COO-M⁺的羧酸盐，式中R为C₈-C₂₂烷基，k为1到10的整数，M为成可溶性盐的阳离子。树脂酸和氢化树脂酸也适用，诸如松香、氢化松香和在妥尔油中存在或源于妥尔油的树脂酸和氢化树脂酸。

在Schwartz、Perry和Berch的“Surface Active Agents andDetergents”第I和II卷描述了其它例子。各种这类表面活性剂也概括性地公开于1975年12月30日授权的、Laughlin等人的美国专利3929678的第23栏58行到29栏23行(通过引用并入本文)中。

当这种阴离子表面活性剂存在时，本发明的洗涤剂组合物一般包括约1-约40％(重量)、优选约3-约20％(重量)的这类阴离子表面活性剂。

高度优选的阴离子表面活性剂包括烷基烷氧基化硫酸盐表面活性剂，在这里其为式RO(A)_mSO₃M的水溶性盐或酸，式中R为未取代的C₁₀-C₂₄烷基或具有C₁₀-C₂₄烷基组分的羟烷基，优选为C₁₂-C₂₀烷基或羟烷基，更优选为C₁₂-C₁₈烷基或羟烷基，A为乙氧基或丙氧基单元，m大于0，一般在约0.5到约6之间，更优选在约0.5到约3之间，并且M为H或一个阳离子，所述阳离子可以是例如金属阳离子(例如钠、钾、锂、钙、镁等)、铵或取代铵阳离子。烷基乙氧基化硫酸盐以及烷基丙氧基化硫酸盐是此中所考虑的。取代铵阳离子的具体例子包括甲铵、二甲铵、三甲铵阳离子和季铵阳离子诸如四甲铵和二甲基哌啶鎓阳离子和源于烷基胺诸如乙胺、二乙胺、三乙胺、其混合物的阳离子等。这种表面活性剂的例子有C₁₂-C₁₈烷基聚乙氧基化物(1.0)硫酸盐(C₁₂-C₁₈E(1.0)M)、C₁₂-C₁₈烷基聚乙氧基化物(2.25)硫酸盐(C₁₂-C₁₈E(2.25)M)、C₁₂-C₁₈烷基聚乙氧基化物(3.0)硫酸盐(C₁₂-C₁₈E(3.0)M)和  C₁₂-C₁₈烷基聚乙氧基化物(4.0)硫酸盐(C₁₂-C₁₈E(4.0)M)，式中M方便地选自钠和钾。

阳离子表面活性剂

适用于本发明的洗涤剂组合物中的阳离子洗涤剂表面活性剂是那些具有一个长链烃基的阳离子表面活性剂。这种阳离子表面活性剂的例子包括铵表面活性剂诸如烷基三甲铵卤化物和那些具有下式的表面活性剂：

[R²(OR³)_y][R⁴(OR³)_y]₂R⁵N⁺X^-式中R²为其烷基链具有约8到约18个碳原子的烷基或烷基苄基，各个R³选自-CH₂CH₂-、-CH₂CH(CH₃)-、-CH₂CH(CH₂OH)-、-CH₂CH₂CH₂-和其混合物；各个R⁴选自C₁-C₄烷基、C₁-C₄羟烷基、两个R⁴基团结合形成的苄基环结构、-CH₂CHOHCHOHCOR⁶CHOHCH₂OH，其中R⁶为分子量低于约1000的己糖或己糖聚合物以及氢(当y不是0时)；R⁵与R⁴相同或者是一烷基链，其中R²加R⁵的碳原子的总数不超过约18；各个y为0到约10并且y值的和为0到约15；X为任何可配伍的阴离子。

适用于本发明的季铵表面活性剂具有式(I)：

                          式I式中R₁是一短链(C₆-C₁₀)烷基或式(II)的烷基酰氨基烷基：

                         式IIy为2到4，优选3；其中R₂为H或C₁-C₃烷基，x为0到4，优选0到2，最优选0；R₃、R₄和R₅可相同或不同并可以是一短链(C₁-C₃)烷基或式III的烷氧基化烷基；X^-为一相反离子，优选为氢卤酸根例如氢氯酸根或甲基硫酸根

                                式IIIR₆为C₁-C₄并且z为1或2。

优选的季铵表面活性剂是那些如式I中所定义的表面活性剂，式中：

R₁为C₈、C₁₀或其混合物，x＝0，

R₃、R₄＝CH₃和R₅＝CH₂CH₂OH。

高度优选的阳离子表面活性剂是可用于本发明组合物中的水溶性季铵化合物，其具有下式：

R¹R²R³R⁴N⁺X^-(i)式中R¹为C₈-C₁₆烷基；R²、R³和R⁴各独立地为C₁-C₄烷基、C₁-C₄羟烷基、苄基和-(C₂H₄₀)_xH，其中x具有2到5的值，X为一阴离子。R²、R³或R⁴中不超过一个应为苄基。

优选用作R¹的烷基的链长为C₁₂-C₁₅，特别是其中所述烷基为源于椰油脂或棕榈仁脂的链长的混合物或者通过烯烃增长合成或OXO醇合成得到。优选的R²、R³和R⁴的基团为甲基和羟乙基并且阴离子X可选自氢卤酸根、甲基硫酸根、乙酸根和磷酸根离子。

适用于此中的式(i)的季铵化合物的例子有：

椰油基三甲基氯化铵或溴化铵；

椰油基甲基二羟乙基氯化铵或溴化铵；

癸基三乙基氯化铵；

癸基二甲基羟乙基氯化铵或溴化铵；

C₁₂-C₁₅二甲基羟乙基氯化铵或溴化铵；

椰油基二甲基羟乙基氯化铵或溴化铵；

肉豆蔻基三甲基铵甲基硫酸盐；

月桂基二甲基苄基氯化铵或溴化铵；

月桂基二甲基(乙烯氧基)4氯化铵或溴化铵；

胆碱酯(式(i)的化合物，其中R¹为CH₂-CH₂-O-CO-C_12-14烷基并且R²、R³、R⁴为甲基)；

二烷基咪唑啉[式(i)的化合物]。

其它可用于此中的阳离子表面活性剂也描述于1980年10月14日授权的Cambre的美国专利4228044和欧洲专利申请EP 000224中。

典型的阳离子织物软化组分包括水溶性季铵织物软化活性物或其相应的胺前体，最常用的是二-长烷基链氯化铵或甲基硫酸盐。

其中优选的阳离子软化剂包括下面物质：

1)二牛油基二甲基氯化铵(DTDMAC)；

2)二氢化牛油基二甲基氯化铵；

3)二氢化牛油基二甲基铵甲基硫酸盐；

4)二硬脂基二甲基氯化铵；

5)二油基二甲基氯化铵；

6)二棕榈基羟乙基甲基氯化铵；

7)硬脂基苄基二甲基氯化铵；

8)牛油基三甲基氯化铵；

9)氢化牛油基三甲基氯化铵；

10)C₁₂-C₁₄烷基羟乙基二甲基氯化铵；

11)C₁₂-C₁₈烷基二羟乙基甲基氯化铵；

12)二(硬脂酰氧乙基)二甲基氯化铵(DSOEDMAC)；

13)二(牛油基氧乙基)二甲基氯化铵；

14)二牛油基咪唑啉鎓甲基硫酸盐；

15)1-(2-牛油酰氨基乙基)-2-牛油基咪唑啉鎓甲基硫酸盐。

可生物降解的季铵化合物已经作为传统使用的二-长烷基链氯化铵和甲基硫酸盐的替代物出现。这种季铵化合物包含被官能基诸如羧基间隔的长链烷基(链烯基)。所述物质和包含其的织物软化组合物公开于众多出版物诸如EP-A-0040562和EP-A-0239910中。

此中的季铵化合物和胺前体具有下面的式(I)或(II)：

或

其中Q选自-O-C(O)-、-C(O)-O-、-O-C(O)-O-、-NR⁴-C(O)-、-C(O)-NR⁴-；R¹为(CH₂)_n-Q-T²或T³；R²为(CH₂)_m-Q-T⁴或T⁵或R³；R³为C₁-C₄烷基或C₁-C₄羟烷基或H；R⁴为H或C₁-C₄烷基或C₁-C₄羟烷基；T¹、T²、T³、T⁴、T⁵独立地为C₁₁-C₂₂烷基或链烯基；n和m为1到4的整数；和X^-为一软化剂可配伍的阴离子。软化剂可配伍的阴离子的非限定性实例包括氢氯酸根或甲基硫酸根。

所述烷基或链烯基链T¹、T²、T³、T⁴、T⁵必须包含至少11个碳原子、优选至少16个碳原子。所述链可以是直链或支链。牛脂是长链烷基和链烯基材料的方便和便宜的来源。特别优选其中T¹、T²、T³、T⁴、T⁵代表一般来自牛脂的长链物质的混合物的化合物。

适用于此中含水织物软化组合物中的季铵化合物的具体实例包括：

1)N，N-二(牛油基-氧-乙基)-N，N-二甲基氯化铵；

2)N，N-二(牛油基-氧-乙基)-N-甲基，N-(2-羟乙基)铵甲基硫酸盐；

3)N，N-二(2-牛油基-氧-2-氧代乙基)-N，N-二甲基氯化铵；

4)N，N-二(2-牛油基-氧-乙基羰基氧乙基)-N，N-二甲基氯化铵；

5)N-(2-牛油基-氧-2-乙基)-N-(2-牛油基-氧-2-氧代乙基)-N，N-二甲基氯化铵；

6)N，N，N-三(牛油基-氧-乙基)-N-甲基氯化铵；

7)N-(2-牛油基-氧-2-氧代乙基)-N-(牛油基-N，N-二甲基氯化铵)；和

8)1，2-二牛油基-氧-3-三甲氨基氯丙烷；和任何上述物质的混合物。

当这种阳离子表面活性剂存在时，本发明的洗涤剂组合物一般包括约0.2-约25％、优选约1-约8％(重量)的阳离子表面活性剂。

漂白剂

现已惊异地发现还包括漂白剂、特别是漂白活性剂漂白体系的本发明的洗涤剂组合物提供了增强的食品污渍/污垢去除、肮脏物清洁和白度保持。不希望受理论束缚，相信由复合酶水解产生的较小的发色颗粒更易被漂白活性漂白体系浸蚀、在低温下更是如此。

这些漂白剂包括过氧化氢、PB1、PB4和粒度为400-800微米的过碳酸盐。这些漂白剂组分可包括一种或多种氧漂白剂并根据所选的漂白剂还可包括一种或多种漂白活性剂。当存在氧漂白化合物时，其一般以约1-约25％的水平存在。

此中所用的漂白剂组分可以是任何可用于洗涤剂组合物的漂白剂，包括氧漂白剂以及其它为本领域人员所熟悉的漂白剂。适用于本发明的漂白剂可以是活化或未活化的漂白剂。

可用的一类氧漂白剂包括过羧酸漂白剂和其盐。这类漂白剂的适合例子包括一过氧邻苯二甲酸镁六水合物、间氯过苯甲酸、4-壬氨基-4-氧代过氧丁酸和二过氧十二烷二酸的镁盐。这种漂白剂公开于美国专利4483781、美国专利申请740446、欧洲专利申请0133354和美国专利4412934中。高度优选的漂白剂也包括描述于美国专利4634551中的6-壬氨基-6-氧代过氧己酸。

另一类可用的漂白剂包括卤漂白剂。例如次卤酸盐漂白剂的例子包括三氯异氰脲酸和二氯异氰脲酸的钠盐和钾盐和N-氯和N-溴链烷磺酰胺。这种物质一般以终产品0.5-10％(重量)、优选1-5％(重量)的水平加入。

过氧化氢释放剂可与漂白活性剂诸如四乙酰基乙二胺(TAED)、壬酰氧基苯磺酸盐(NOBS，描述于美国专利4412934)、3，5-三甲基己酰氧基苯磺酸盐(ISONOBS，描述于EP 120591)或五乙酰基葡萄糖(PAG)或N-壬酰基-6-氨基己酸的苯酚磺酸酯(NACA-OBS，描述于WO94/28106)一起使用，这些漂白活性剂可过氧化氢解而形成产生改善的漂白效果的作为活性漂白物质的过酸。适用的活化剂还有例如公开于同时待审的欧洲专利申请91870207.7中的酰化柠檬酸酯和如公开于Procter & Gamble同时待审的美国专利申请系列60/022786号(1996年7月30日提出)和60/028122号(1996年10月15日提出)中的下式的不对称无环酰亚胺漂白活性剂：

其中R₁为C₇-C₁₃线性或分支链状的、饱和或不饱和烷基；R₂为C₁-C₈线性或分支链状的饱和或不饱和烷基；R₃为C₁-C₄线性或分支链状的饱和或不饱和烷基。

用于按照本发明的洗涤剂组合物中的可用的漂白剂、包括过氧酸和含漂白活性剂与过氧漂白化合物的漂白体系描述于我们的同时待审的申请USSN 08/136626、PCT/US95/07823、WO95/27772、WO95/27773、WO95/27774和WO95/27775中。

过氧化氢也可通过在洗涤开始或洗涤期间和/或漂洗过程中加入能产生过氧化氢的酶体系(即一种酶和一种底物)而存在。这种酶体系描述于1991年10月9日提出的欧洲专利申请91202655.6中。

用于漂白组合物中的含金属催化剂包括含钴催化剂诸如乙酸五胺钴(III)盐和含锰催化剂诸如描述于EPA 549271；EPA 549272；EPA458397；US 5246621；EPA 458398；US 5194416和US 5114611中的这类催化剂。包含过氧化合物、含锰漂白催化剂和螯合剂的漂白组合物描述于母专利申请94870206.3中。

氧漂白剂以外的漂白剂也为本领域人员所熟悉并且可用于此中。一类特别有意义的非氧漂白剂包括光活化的漂白剂诸如磺化的酞花菁锌和/或铝。这些物质可在洗涤过程中沉积在携污体上。在氧的存在下经光辐照后，诸如通过将衣服挂在日光下干燥时，磺化的酞花菁锌被激活并从而将携污体漂白。优选的酞花菁锌和光活化漂白方法描述于美国专利4033718中。一般来说，洗涤剂组合物将包含约0.025-约1.25％(重量)磺化酞花菁锌。

助洗剂体系

本发明的洗涤剂组合物将优选包括助洗剂，更优选包括沸石、层状硅酸钠和/或三聚磷酸钠。现已惊异地发现还包括助洗剂的本发明的洗涤剂组合物提供了增强的清洁效能。不希望受理论的束缚，相信钙沉积在含水胶体树胶的污渍上依此限制酶水解。所以，相信使用助洗剂可去除夹带的钙以及有助于本发明的复合酶的作用。

常规的助洗剂体系均适用于此中，包括硅铝酸盐物质、硅酸盐、聚羧酸盐、烷基或链烯基琥珀酸和脂肪酸诸如乙二胺四乙酸盐、二亚乙基三胺五亚甲基乙酸盐的物质、金属离子多价螯合剂诸如氨基多聚磷酸盐特别是乙二胺四亚甲基膦酸和二亚乙基三胺五亚甲基膦酸。磷酸盐助洗剂也可用于此中。

适用的助洗剂可以是无机离子交换材料，通常是无机水合硅铝酸盐材料，更具体是水合的合成沸石诸如水合沸石A、X、B、HS或MAP。

另一种适用的无机助洗剂材料是层状硅酸盐例如SKS-6(Hoechst)。SKS-6是一种包括硅酸钠(Na₂Si₂O₅)的结晶层状硅酸盐。

适用的包含一个羧基的聚羧酸盐包括公开于比利时专利831368、821369和821370中的乳酸、乙醇酸和其醚衍生物。含两个羧基的聚羧酸盐包括琥珀酸、丙二酸、(亚乙二氧基)二乙酸、马来酸、二甘醇酸、酒石酸、丙醇二酸和富马酸的水溶性盐以及在德国公开说明书(Offenlegenschrift)2446686和2446687及美国专利3935257中所述的醚羧酸盐以及在比利时专利840623中所述的亚硫酰基羧酸盐。含三个羧基的聚羧酸盐具体包括水溶性柠檬酸盐、aconitrates和柠康酸盐以及琥珀酸盐衍生物诸如英国专利1379241中所述的羧甲氧基琥珀酸盐、荷兰专利申请7205873中所述的乳酰氧基琥珀酸盐和氧聚羧酸盐材料诸如英国专利1387447中所述的2-氧杂-1，1，3-丙烷三羧酸盐。

含四个羧基的聚羧酸盐包括英国专利1261829中公开的氧二琥珀酸盐、1，1，2，2-乙烷四羧酸盐、1，1，3，3-丙烷四羧酸盐和1，1，2，3-丙烷四羧酸盐。含磺基取代基的聚羧酸盐包括公开于英国专利1398421和1398422和美国专利3936448中的磺基琥珀酸盐衍生物和英国专利1082179中所述的磺化热解柠檬酸盐，而含phosphone取代基的聚羧酸盐公开于英国专利1439000中。

脂环和杂环聚羧酸盐包括环戊烷-顺，顺，顺-四羧酸盐、环戊二烯负离子五羧酸盐、2，3，4，5-四氢呋喃-顺，顺，顺-四羧酸盐、2，5-四氢呋喃-顺-二羧酸盐、2，2，5，5-四氢呋喃-四羧酸盐、1，2，3，4，5，6-己烷-六羧酸盐和多元醇诸如山梨醇、甘露糖醇和木糖醇的羧甲基衍生物。芳族聚羧酸盐包括苯六甲酸、1，2，4，5-苯四酸和英国专利1425343中公开的邻苯二甲酸衍生物。在上面的聚羧酸盐中，优选的是每分子含至多3个羧基的羟基羧酸盐，特别是柠檬酸盐。

优选用于本发明的组合物中的助洗剂体系包括水不溶性硅铝酸盐助洗剂诸如沸石A或层状硅酸盐(SKS-6)和水溶性羧酸盐螯合剂诸如柠檬酸的混合物。其它优选的助洗剂体系包括水不溶性硅铝酸盐助洗剂诸如沸石A和水溶性羧酸盐螯合剂诸如柠檬酸的混合物。优选用于本发明的液体洗涤剂组合物中的助洗剂体系是肥皂和聚羧酸盐。

其它可构成用于颗粒组合物的助洗剂体系一部分的助洗剂材料包括无机材料诸如碱金属碳酸盐、碳酸氢盐、硅酸盐和有机物质诸如有机膦酸盐、氨基聚烯烃膦酸盐和氨基聚羧酸盐。其它适用的水溶性有机盐有均聚或共聚酸或其盐，其中所述聚羧酸包括至少两个通过不超过两个碳原子相互分隔的羧基。这种类型的聚合物公开于GB-A-1596756中。这种盐的例子有分子量为2000到5000的聚丙烯酸盐和其与马来酸酐的共聚物，这种共聚物具有20000到70000的分子量、特别是约40000的分子量。

洗涤助洗剂盐正常以占组合物重量5-80％、优选10-70％、最优选30-60％的量包括在其中。

其它表面活性剂体系

本发明的洗涤剂组合物也可包含阳离子、两性、两性离子和半极性表面活性剂以及前面所述以外的非离子和/或阴离子表面活性剂。

两性表面活性剂也适用于本发明的洗涤剂组合物。这些表面活性剂可泛称为仲胺或叔胺的脂族衍生物，或者是杂环仲胺和叔胺的脂族衍生物(其中所述脂族基团可为直链或支链)。所述脂族取代基之一包含至少约8个碳原子、一般约8到约18个碳原子，并且至少一个包含阴离子水加溶基团例如羧基、磺酸根、硫酸根。对于两性表面活性剂的例子来说，可参见1975年12月30日授权的Laughlin等人的美国专利3929678的19栏18到35行。

当这种两性表面活性剂存在时，本发明的洗涤剂组合物一般包括0.2到约15％、优选约1-约10％(重量)的这种两性表面活性剂。

两性离子表面活性剂也适用于洗涤剂组合物。这些表面活性剂可泛称为仲胺和叔胺的衍生物、杂环仲胺和叔胺的衍生物或季铵、季鏻或叔锍化合物的衍生物。对于两性离子表面活性剂的例子来说，可参见1975年12月30日授权的Laughlin等人的美国专利3929678的19栏38行到22栏48行。

当这种两性离子表面活性剂存在时，本发明的洗涤剂组合物一般包括0.2到约15％、优选约1-约10％(重量)的这种两性离子表面活性剂。

半极性非离子表面活性剂是一种特殊种类的非离子表面活性剂，它包括水溶性胺氧化物(所述胺氧化物包含一个含约10到约18个碳原子的烷基部分和两个选自含约1到约3个碳原子的烷基和羟烷基的部分)、水溶性膦氧化物(所述膦氧化物包含一个含约10到约18个碳原子的烷基部分和两个选自含约1到约3个碳原子的烷基和羟烷基的部分)和水溶性亚砜(所述亚砜包含一个含约10到约18个碳原子的烷基部分和一个选自含约1到约3个碳原子的烷基和羟烷基的部分)。

半极性非离子洗涤剂表面活性剂包括具有下式的胺氧化物表面活性剂：式中R³为烷基、羟烷基或烷基苯基或其混合物，其含约8到约22个碳原子；R⁴为含约2到约3个碳原子的亚烷基或羟基亚烷基或其混合物；x为0到约3；各个R⁵为含约1到约3个碳原子的烷基或羟烷基或者是含约1到约3个氧乙烯基团的聚氧乙烯基。所述R⁵基团可例如通过氧原子或氮原子相互连接而形成环结构。

这些胺氧化物表面活性剂具体包括C₁₀-C₁₈烷基二甲基胺氧化物和C₈-C₁₂烷氧基乙基二羟基乙胺氧化物。

当这种半极性非离子表面活性剂存在时，本发明的清洁组合物一般包括0.2-约15％、优选约1-约10％(重量)的这种半极性非离子表面活性剂。

本发明的洗涤剂组合物还可包括选自伯胺或叔胺的助表面活性剂。适用于此中的伯胺包括按照式R¹NH₂的胺，式中R¹为C₆-C₁₂、优选C₆-C₁₀烷基链或R⁴X(CH₂)_n，X为-O-、-C(O)NH-或-NH-，R⁴为一个C₆-C₁₂烷基链，n为1到5并优选为3。R¹烷基链可以是直链或支链并且可以被多至12、优选少于5个氧乙烯基隔开。

优选的按照上式的胺是正烷基胺。适用此中的胺可选自1-己胺、1-辛胺、1-癸胺和月桂胺。其它优选的伯胺包括C8-C10氧丙胺、辛氧基丙胺、2-乙基己氧基丙胺、月桂酰氨基丙胺和酰氨基丙胺。

适用于此中的叔胺包括具有式R₁R₂R₃N的叔胺，式中R₁和R₂为C₁-C₈烷基链或R₃为C₆-C₁₂、优选C₆-C₁₀烷基链或者R₃为R₄X(CH₂)_n，其中X为-O-、-C(O)NH-或-NH-，R₄为C₄-C₁₂，n为1到5、优选2到3。R₅为H或C₁-C₂烷基并且x为1到6。R₃和R₄可为线性或分支；R₃烷基链可被多至12、优选少于5个氧乙烯基隔开。

优选的叔胺为式R₁R₂R₃N其中R¹为C₆-C₁₂烷基链，R₂和R₃为C₁-C₃烷基或式中R₅为H或CH₃并且x为1到2。

优选的还有下式的酰氨基胺：

式中R₁为C₆-C₁₂烷基；n为2到4，优选n为3；R₂和R₃为C₁-C₄。

最优选的本发明的胺包括1-辛胺、1-己胺、1-癸胺、1-十二烷胺、C8-C10氧基丙胺、N-椰油基-1，3-二氨基丙烷、椰油基烷基二甲胺、月桂基二甲胺、月桂基双(羟乙基)胺、椰油基双(羟乙基)胺、月桂胺2摩尔丙氧化物、辛胺2摩尔丙氧化物、月桂酰氨基丙基二甲胺、C8-C10酰氨基丙基二甲胺和C10酰氨基丙基二甲胺。

最优选用于本发明的组合物中的胺是1-己胺、1-辛胺、1-癸胺、1-十二烷胺。特别需要的是正十二烷基二甲胺和双羟乙基椰油烷基胺和7倍乙氧基化的油胺、月桂酰氨基丙胺和椰油酰氨基丙胺。

常规的洗涤用酶

除了甘露聚糖酶和蛋白酶外，所述洗涤剂组合物还可包括一种或多种提供清洁性能、织物护理和/或环境卫生益处的酶。

所述酶包括选自纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶、葡糖淀粉酶、淀粉酶、木聚糖酶、脂酶、磷酸脂酶、酯酶、角质素酶、果胶酶、角蛋白酶(keratanase)、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧化酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanases、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶或其混合物的酶。

一种优选的组合是具有常规使用酶像淀粉酶、脂酶、角质素酶和/或纤维素酶连同一种或多种植物细胞壁降解酶的混合物的洗涤剂组合物。

可用于本发明的纤维素酶包括细菌纤维素酶或真菌纤维素酶。优选它们具有在5到12之间的最佳pH和高于50 CEVU/mg(纤维素粘度单位)的比活性。适用的纤维素酶公开于美国专利4435307、Barbesgoard等人的J61078384和WO96/02653中，其公开了分别从腐质霉属Humicola insolens、马木霉(Trichoderma)、梭孢壳属(Thielavia)和侧孢霉属(Sporotrichum)产生的真菌纤维素酶。EP 739982描述了从新的芽孢杆菌菌种分离的纤维素酶。适合的纤维素酶描述于GB-A-2075028、GB-A-2095275、DE-OS-2247832和WO95/26398中。

这种纤维素酶的例子有通过Humicola insolens菌株(灰腐质霉Humicola grisea var.thermoidea)，特别是Humicola菌株DSM 1800生产的纤维素酶。

其它适合的纤维素酶有源于Humicola insolens、具有约50KDa分子量、5.5的等电点和含415个氨基酸的纤维素酶；和源于Humicolainsolens DSM 1800、显示出纤维素酶活性的43kD内切葡聚糖酶；优选的内切葡聚糖酶组分具有公开于PCT专利申请号WO91/17243的氨基酸序列。适用的纤维素酶还有描述于1994年9月29日公开的Genencor的WO 94/21801中的来自Trichoderma longibrachiatum的EGIII纤维素酶。特别适合的纤维素酶是具有护色益处的纤维素酶。这种纤维素酶的例子有描述于1991年11月6日提出的、Novo的欧洲专利申请91202879.2中所述的纤维素酶。Carezyme和Celluzyme(Novo Nordisk A/S)特别有用。也参见WO 91/17244和WO 91/21801。其它用于织物护理和/或清洁性能的纤维素酶描述于WO96/34092、WO96/17994和WO95/24471中。

所述纤维素酶一般以占所述洗涤剂组合物重量0.0001-2％的纯酶水平掺入到所述洗涤剂组合物中。

过氧化物酶连同氧源例如过碳酸盐、过硼酸盐、过硫酸盐、过氧化氢等一起使用并以酚底物作为漂白增强分子。它们用于“溶液漂白”，即防止洗涤过程中从携污体去除的染料或颜料转移到洗涤溶液中的其它携污体上。过氧化物酶为本领域人员所熟悉并且包括例如辣根过氧化物酶、木质素酶和卤代过氧化物酶诸如氯代和溴代过氧化物酶。含过氧化物酶的洗涤剂组合物公开于例如PCT国际申请WO89/099813、WO89/09813和1991年11月6日提出的欧洲专利申请EP91202882.6和1996年2月20日提出的EP96870013.8中。适用的还有漆酶。

增效剂一般占总组合物的0.1-5％(重量)。优选的增效剂是取代的吩噻嗪和吩噁嗪10-吩噻嗪丙酸(PPT)、10-乙基吩噻嗪-4-羧酸(EPC)、10-吩噁嗪丙酸(POP)和10-甲基吩噁嗪(描述于WO94/12621)和取代的丁香酸盐(syringate)(C3-C5取代的烷基丁香酸盐)和苯酚。过碳酸钠或过硼酸钠是优选的过氧化氢源。

所述过氧化物酶正常以占所述洗涤剂组合物0.0001-2％纯酶的水平掺入到所述洗涤剂组合物中。

其它可优选包括在本发明的洗涤剂组合物中的酶包括脂酶。适用于洗涤剂用途的脂酶包括假单胞菌属的微生物如英国专利1372034中公开的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)ATCC 19.154产生的脂酶。适用的脂酶包括显示出与由微生物荧光假单胞菌(Pseudomonasfluoresent)IAM 1057产生的脂酶的抗体阳性免疫交叉反应的脂酶。这种脂酶可从日本Nagoya的Amano Pharmaceutical Co.Ltd.以脂酶P“Amano”的商品名购买(后文称为“Amano-P”)。其它适用的商品脂酶包括Amano-CES、源于粘稠色杆菌(Chromobacter viscosum)如来自日本Tagata的Toyo Jozo Co.的粘稠色杆菌的变种lipolyticumNRRLB 3673的脂酶；来自美国的U.S.Biochemical Corp.和荷兰的Disoynth Co.的粘稠色杆菌脂酶和源于唐菖蒲假单胞菌(Pseudomonasgladioli)的脂酶。特别适用的脂酶是已经发现连同本发明的组合物一起使用时非常有效的如Ml Lipase和Lipomax(Gist-Brocades)和Lipolase和Lipolase Ultra(Novo)的脂酶。适用的还有在NovoNordisk的EP258068、WO92/05249和WO 95/22615和Unilever的WO94/03578、WO95/35381和WO96/00292中所述的脂解酶。

适用的还有可认为一种特殊种类的脂酶即不需要界面活化的脂酶的角质素酶[EC 3.1.1.50]。将角质素酶加入到洗涤剂组合物中的情况描述于例如WO-A-88/09367(Genencor)、WO 90/09446(Plant GeneticSystem)和WO 94/14963和WO94/14964(Unilever)。

所述脂酶和/或角质素酶正常以占所述洗涤剂组合物重量的0.0001-2％纯酶的水平掺入到所述洗涤剂组合物中。

淀粉酶(α和/或β)可包括其中用于去除碳水化合物基的污渍。1994年2月3日公开的Novo Nordisk A/S的WO94/02597描述了掺入突变型淀粉酶的洗涤剂组合物。也可参见1995年4月20日公开的NovoNordisk A/S的WO 95/10603。其它已知用于洗涤剂组合物的淀粉酶包括α和β淀粉酶。α-淀粉酶为本领域人员所熟悉并且包括美国专利5003257；EP 252666；WO/91/00353；FR 2676456；EP 285123；EP525610；EP 368341和英国专利说明书1296839(Novo)中公开的淀粉酶。其它适用的淀粉酶是1994年8月18日公开的WO94/18314和1996年2月22日公开的Genencor的WO96/05295中所述的增强了稳定性的淀粉酶和如1995年4月公开的WO 95/10603中所述并可购自NovoNordisk A/S、直接亲本附加修饰的淀粉酶变体。适用的还有均为NovoNordisk的EP 277216、WO 95/26397和WO 96/23873中所述的淀粉酶。

商品α-淀粉酶产品的例子有来自Genencor的Purafect Ox Am^和可购自丹麦的Novo NordiskA/S的Termamyl^、Ban^、Fungamyl^和Duramyl^。WO95/26397描述了其它适用的淀粉酶：即具有在25-55℃的温度和8-10的pH值下，通过Phadebas^α-淀粉酶活性测定法测得的比活性比Termamyl^至少高25％的α-淀粉酶。适用的是描述于WO96/23873(Novo Nordisk)的上述酶的变体。其它就活性水平和热稳定性与较高活性水平的结合来说具有改良的性质的淀粉分解酶描述于WO95/35382中。

掺入到本发明的洗涤剂组合物中淀粉分解酶的水平为占所述组合物重量的0.0001-2％、优选0.00018-0.06％、更优选0.00024-0.048％纯酶的水平。

上述的酶可以来自任何合适的来源诸如植物、动物、细菌、真菌和酵母菌。所述源可进一步是中温生物或嗜极生物(嗜冷生物、嗜冷菌、嗜热生物、嗜压生物、嗜碱生物、嗜酸生物、嗜卤生物等)。可使用经纯化或未纯化形式的这些酶。现在，为了使在本发明的洗涤剂组合物中的效能最佳化，经蛋白质/基因工程技术修饰野生类型的酶是常规的实践。例如，可设计所述变体从而提高所述酶与这种组合物的常用成分的配伍性。或者所述变体可设计成使所述酶变体的最佳pH、漂白或螯合剂稳定性、催化活性等适合具体的清洁用途。

具体地说，对漂白稳定性来说应该将注意力放在对氧化敏感的氨基酸上，对表面活性剂配伍性来说应该将注意力放在表面电荷上。这种酶的等电点可通过一些带电荷氨基酸的取代来改变，例如等电点的提高可有助于改善与阴离子表面活性剂的配伍性。所述酶的稳定性可进一步通过例如另外的盐桥的产生和增强钙结合位点以提高螯合剂稳定性来增加。因为大多数纤维素酶具有单独的结合域(CBD)，特殊的注意力应放在纤维素酶上。这种酶的性质可通过在这些域中的修饰来改变。

所述酶正常以占所述洗涤剂组合物重量的0.0001-2％纯酶的水平掺入到所述洗涤剂组合物中。所述酶可作为独立的单成分(含一种酶的球粒、颗粒、稳定化的液体等)或作为两种或多种酶的混合物(例如cogranulates)加入。

其它可加入的适用的洗涤剂成分是描述于1992年1月31日提出的同时待审的欧洲专利申请92870018.6中的酶氧化清除剂。这种酶氧化清除剂的例子有乙氧基化四亚乙基聚胺。

酶材料和其掺入合成洗涤剂组合物中的方法也描述于GenencorInternational的WO9307263A和WO9307260A、Novo的WO 8908694A和McCarty等人的1971年1月5日的美国专利3553139中。酶还公开于1978年7月18日的、Place等人的US4101457和1985年3月26日的、Hughes的US4507219中。可用于液体洗涤剂组合物的酶材料和其在这种制剂中的掺入描述于1981年4月14日的、Hora等人的US4261868中。用于洗涤剂中的酶可通过各种技术稳定。酶稳定的技术公开和举例说明于1971年8月17日Gedge等人的US3600319、1986年10月29日的、Venegas的EP199405和EP200586中。酶稳定体系也描述于例如在US3519570中。一种提供蛋白酶、木聚糖酶和纤维素酶的有用的芽孢杆菌的菌种AC13描述于Novo的WO9401532A中。

护色和织物护理益处

也可包括提供护色益处的工艺。这些工艺的例子有用于颜色保持的金属催化剂。这种金属催化剂描述于同时待审的欧洲专利申请92870181.2中。固色剂、用于抗皱和改善吸水性的聚烯烃分散体、用于护色处理和香料亲和处理的香料和氨基官能聚合物(PCT/US97/16546)是护色/织物护理工艺的其它例子并且描述于1996年11月7日提出的同时待审的专利申请96870140.9中。

织物软化剂也可掺入到按照本发明的洗涤剂组合物中。这些软化剂可以是无机类型也可以是有机类型。无机软化剂的例子有公开于GB-A-1400898和美国专利5019292中的绿土。有机织物软化剂包括公开于GB-A1514276和EP-B0011340中的水不溶性叔胺和公开于EP-B-0026527和EP-B-0026528中的其与单C12-C14季铵盐的混合物以及公开于EP-B-0242919中的二-长链酰胺。其它有用的织物软化体系的有用有机成分包括如公开于EP-A-0299575和0313146中的高分子量聚氧乙烯材料。

绿土的水平正常为2-20％、更优选5-15％(重量)，该材料作为与制剂其它成分干燥混合的组分的形式加入。有机织物软化剂诸如水不溶性叔胺或二长链酰胺物质以0.5-5％(重量)、正常1-3％(重量)的水平掺入，而高分子量聚氧乙烯物质和水溶性阳离子物质以0.1-2％、正常0.15-1.5％(重量)的水平加入。这些物质通常加入到组合物的喷雾干燥部分，尽管有时将它们作为干燥混合的颗粒物加入或将它们作为熔融液体喷雾到组合物的其它固体组分上更为方便。

螯合剂

本发明的洗涤剂组合物也可任选包含一种或多种铁和/或锰螯合剂。这种螯合剂可选自氨基羧酸盐、氨基膦酸盐、多官能取代的芳族螯合剂和其混合物，所有均如后文定义。不希望受理论束缚，相信这些物质的益处部分是由于其通过形成可溶性螯合物导致的超常的从洗涤液中去除铁和锰的能力。

可用作任选的螯合剂的氨基羧酸盐包括乙二胺四乙酸盐、N-羟乙基乙二胺三乙酸盐、次氮基三乙酸盐、乙二胺四丙酸盐、三亚乙基四胺六乙酸盐、二亚乙基三胺五乙酸盐和乙醇二甘氨酸、其碱金属、铵和取代铵盐和其混合物。

当至少低水平的总磷容许存在于洗涤剂组合物中时，氨基膦酸盐也适用作为本发明的组合物中的螯合剂并且包括作为DEQUEST的乙二胺四(亚甲基膦酸盐)。优选这些氨基膦酸盐并不包含多于约6个碳原子的烷基或链烯基。

多官能取代的芳族螯合剂也可用于本发明的组合物中。参见1974年5月21日授权的Connor等人的美国专利3812044。优选的酸式的这种类型的化合物为二羟基二磺基苯诸如1，2-二羟基-3，5-二磺基苯。

一种优选用于此中的可生物降解螯合剂是乙二胺二琥珀酸盐(“EDDS”)、特别是1987年11月3日Hartman和Perkins的美国专利4704233中所述的[S，S]异构体。

此中的组合物也可包含水溶性甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)盐(或酸式)作为可与例如不溶性助剂诸如沸石、层状硅酸盐等一起使用的螯合剂或第二助洗剂。

如果使用，这些螯合剂一般占本发明洗涤剂组合物的约0.1-约15％(重量)。更优选，如果使用，所述螯合剂占这种组合物的约0.1-约3.0％(重量)。

抑泡剂

另一种任选的成分是抑泡剂，例如硅氧烷和硅石-硅氧烷混合物。硅氧烷可一般由烷基化聚硅氧烷物质代表，而硅石正常以细碎形式使用，例如硅石气溶胶和干凝胶和各种类型的疏水硅石。这些物质可以颗粒物形式掺入，其中所述抑泡剂有利地可释放地掺入到水溶性或可水分散的、基本上非表面活性洗涤剂不渗透载体中。或者所述抑泡剂可溶解或分散于液体载体中并可通过喷雾在一种或多种其它组分上来施用。

一种优选的硅氧烷泡沫控制剂公开于Bartollota等人的美国专利3933672中。其它特别有用的抑泡剂是描述于1977年4月28日公开的德国专利申请DTOS 2646126中的自乳化硅氧烷抑泡剂。这种化合物的一个例子是可购自Dow Corning的DC-544，它是一种硅氧烷-二元醇共聚物。特别优选的泡沫控制剂是包括硅油和2-烷基链烷醇的混合物的抑泡剂系统。适用的2-烷基链烷醇是可以以Isofol 12R的商品名购买的2-丁基-辛醇。

这种抑泡剂体系描述于1992年11月10日提出的同时待审的欧洲专利申请N92870174.7中。

特别优选的硅氧烷泡沫控制剂描述于同时待审的欧洲专利申请No92201649.8中。所述组合物可包括连同热解法无孔硅石诸如Aerosil^的硅氧烷/硅石混合物。

上述的抑泡剂正常以占组合物的0.001-2％(重量)、优选0.01-1％(重量)的水平使用。

其它

可使用用于洗涤剂组合物中的其它组分，诸如污垢悬浮剂、去污剂、荧光增白剂、摩擦剂、杀菌剂、晦暗抑制剂、着色剂和/或包封或非包封香料。

特别适合的包封物质是包括诸如在GB1464616中所述的多糖和多羟基化合物的基体的水溶性胶囊。其它适用的水溶性包封物质包括源于诸如US3455838中所述的取代二元羧酸的未胶凝化淀粉酸酯的糊精。这些酸酯糊精优选从诸如蜡质玉米、蜡质高粱、西米、木薯淀粉和马铃薯淀粉制备。适用的所述包封物质的例子包括由National Starch生产的N-Lok。所述N-Lok包封物质包括改性的玉米淀粉和葡萄糖。所述淀粉通过加入单官能取代的基团诸如辛烯基琥珀酸酐改性。

适用于本发明的抗再沉积剂和污垢悬浮剂包括纤维素衍生物诸如甲基纤维素、羧甲基纤维素和羟乙基纤维素以及均聚或共聚聚羧酸或其盐。这种类型的聚合物包括前述为助剂的聚丙烯酸盐和马来酸酐-丙烯酸共聚物以及马来酸酐与乙烯、甲基乙烯基醚或甲基丙烯酸的共聚物，所述马来酸酐占该共聚物的至少20％(摩尔)。这些物质正常以占组合物的0.5-10％(重量)、更优选0.75-8％(重量)、最优选1-6％(重量)的水平使用。

优选的荧光增白剂是具有阴离子性质的荧光增白剂，其例子为4，4’-双(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；4，4’-双(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；4，4’-双(2，4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；4’，4”-双(2，4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)均二苯代乙烯-2-磺酸一钠；4，4’-双(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；4，4’-双(4-苯基-2，1，3-三唑-2-基)-均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；4，4’-双(2-苯胺基-4-(1-甲基-2-羟乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；2(基-4”-(萘并-1’，2’：4，5-)-1，2，3-三唑-2”-磺酸钠和4，4’-双(2-磺基苯乙烯基)联苯。高度优选的荧光增白剂是公开于EP753567中的具体的荧光增白剂。

其它可用的聚合物质是聚乙二醇、特别是分子量1000到10000、更具体是2000到8000、最优选约4000的聚乙二醇。它们可以以0.20-5％、更优选0.25-2.5％(重量)的水平使用。这些聚合物和前述的均聚或共聚聚羧酸盐对于改善白度保持、织物灰分沉积和在过渡金属杂质的存在下对泥土、蛋白质类和可氧化的污垢的清洁性能是极有价值的。

可用于本发明组合物中的去污剂是常规的对苯二甲酸与各种排布的乙二醇和/或丙二醇单元的共聚物或三元共聚物。这种聚合物的例子公开于共同转让的美国专利4116885和4711730和欧洲公开的专利申请0272033中。一种特别优选的按照EP-A-0272033的聚合物具有下式：

(CH₃(PEG)₄₃)_0.75(POH)_0.25[(T-PO)_2.8(T-PEG)_0.4]T(POH)_0.25((PEG)₄₃CH₃)_0.75式中PEG为-(OC₂H₄)O-，PO为(OC₃H₆O)和T为(pcOC₆H₄CO)。

非常有用的还有作为对苯二甲酸二甲酯、磺基间苯二甲酸二甲酯、乙二醇和1，2丙二醇的无规共聚物的改性聚酯，其端基主要包括磺基苯甲酸盐，其次包括乙二醇和/或丙二醇的单酯。目标是获得两端均被磺基苯甲酸盐基团封端的聚合物，在本专利说明书中“主要”这里是指大多数所述共聚物被磺基苯甲酸盐基团封端。但是，一些共聚物并没有被完全封端，因此其端基可能包括乙二醇和/或丙1，2二醇的单酯，因此“其次”包括这种物质。

此中所选的聚酯包含约46％(重量)对苯二甲酸二甲酯、约16％(重量)丙烷1，2-二醇、约10％(重量)乙二醇、约13％(重量)磺基苯甲酸二甲酯和约15％(重量)磺基间苯二甲酸并且具有约3000的分子量。所述聚酯和其制备方法详细描述于EPA311342中。

本领域人员熟知在自来水中的游离氯快速钝化洗涤剂组合物中包含的酶。因此，在配方中以占总组合物的0.1％(重量)以上的水平使用氯清除剂诸如过硼酸盐、硫酸铵、亚硫酸钠或聚亚乙基亚胺以便提供改善的整个洗涤剂用酶的洗涤稳定性。包括氯清除剂的组合物描述于1992年1月31日提出的欧洲专利申请92870018.6中。

烷氧基化聚羧酸酯诸如从聚丙烯酸酯制备的那些在此中可用于提供另外的脱脂性能。这种物质描述于均通过引用并入本文的WO91/08281和PCT 90/01815的第4页及后文中。化学上，这些物质包括每7到8个丙烯酸酯单元一个乙氧基侧链的聚丙烯酸酯。所述侧链为式-(CH₂CH₂O)_m(CH₂)_nCH₃，式中m为2到3并且n为6到12。所述侧链被酯连接到聚丙烯酸酯“主链”上以提供“梳”聚合物类型结构。所述分子量可不同，但是一般在约2000到约50000的范围。这种烷氧基化聚羧酸酯可占此中组合物的约0.05-约10％(重量)。

分散剂

本发明的洗涤剂组合物也可包含分散剂。适合的水溶性有机盐为均聚或共聚酸或其盐，其中所述聚羧酸包括至少两个由不超过两个碳原子相互隔开的羧基。这种类型的聚合物公开于GB-A-1596756中。这种盐的例子有分子量为2000到5000的聚丙烯酸盐和其与马来酸酐的共聚物，这种共聚物具有1000到100000的分子量。

特别是诸如分子量为4000的480N的丙烯酸盐和甲基丙烯酸盐的共聚物可以以组合物0.5-20％(重量)的水平加入到本发明的洗涤剂组合物中。

本发明的组合物可包含优选具有如后文所定义的不大于8、优选不大于7、最优选不大于6的钙皂分散力(LSDP)的钙皂胶溶剂化合物。所述钙皂胶溶剂化合物优选以0-20％(重量)的水平存在。

钙皂胶溶剂效力的数字测量通过使用如在H.C.Borghetty和C.A.Bergman在1950年J.Am.Oil.Chem.Soc.第27卷88到90页的文章中所述的钙皂分散剂试验方法测得的钙皂分散力(LSDP)给出。这种钙皂分散试验方法为本领域人员广泛使用，并出现在例如下列综述文章中：W.N.Linfield在Surfactant science Series第7卷第3页的文章；W.N.Linfield在1990年Tenside surf.det.第27卷159到163页的文章；和M.K.Nagarajan、W.F.Masler在1989年Cosmetics andToiletries第104卷71到73页的文章。所述LSDP是在30毫升333ppmCaCO₃(Ca∶Mg＝3∶2)当量硬度的水中分散由0.025克油酸钠形成的钙皂沉积所需的分散剂与油酸钠的重量百分比率。

具有良好钙皂胶溶能力的表面活性剂包括某些胺氧化物、甜菜碱、磺基甜菜碱、烷基乙氧基硫酸盐和乙氧基化醇。

可按本发明使用的LSDP不超过8的表面活性剂的例子包括C₁₆-C₁₈二甲胺氧化物；平均乙氧基化度为1到5的C₁₂-C₁₈烷基乙氧基硫酸盐、特别是乙氧基化度为3(LSDP＝4)的C₁₂-C₁₅烷基乙氧基硫酸盐表面活性剂；和由BASF GmbH分别以Lutensol A012和Lutensol A030的商品名出售的平均乙氧基化度为12(LSDP＝6)或30的C₁₄-C₁₅乙氧基化醇。

适用于此中的聚合钙皂胶溶剂由M.K.Nagarajan和W.F.Masler描述于1989年Cosmetics and Toiletries第104卷71到73页的文章中。

疏水漂白剂诸如4-[N-辛酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐、4-[N-壬酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐、4-[N-癸酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐和其混合物以及壬酰氧基苯磺酸盐与亲水/疏水漂白制剂一起也可用作钙皂胶溶剂化合物。

染料转移抑制剂

本发明的洗涤剂组合物也可包括用于抑制在涉及有色织物的织物洗涤操作中遇到的溶解和悬浮染料从一种织物转移到另一种织物的化合物。

聚合染料转移抑制剂

按照本发明的洗涤剂组合物也包括0.001-10％、优选0.01-2％、更优选0.05-1％(重量)的聚合染料转移抑制剂。为了抑制洗涤时染料从有色织物转移到所洗涤的其它织物上，通常将所述聚合染料转移抑制剂掺入到洗涤剂组合物中。这些聚合物具有在染料附着所洗涤的其它织物前配合或吸附有色织物洗出的短效染料的能力。

特别适用的聚合染料转移抑制剂是聚胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基吡咯烷酮聚合物、聚乙烯基噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑或其混合物。

这种聚合物的加入也增强了按照本发明的酶的效能。

a)聚胺N-氧化物聚合物

适用的聚胺N-氧化物聚合物包含下列结构式的单元：式中P为可聚合单元，其上面可连接R-N-O基团或者其中R-N-O基团构成了可聚合单元的一部分或者是两种情况的组合。A为NC，

X为0或1；R为脂族、乙氧基化脂族、芳族、杂环或脂环基团或其组合，其上可连接N-O基团的氮或者其中N-O基团的氮为这些基团的一部分。

所述N-O基团可由下面通式表示：其中R1、R2和R3为脂族基团、芳族、杂环或脂环基团或其组合，x或/和y或/和z为0或1并且其中可连接N-O基团的氮或者其中N-O基团的氮构成这些基团的一部分。

所述N-O基团可以是可聚合单元(P)的一部分或者可连接到聚合主链上或者是两者的组合。

适用的其中N-O基团构成可聚合单元的一部分的聚胺N-氧化物包括R选自脂族、芳族、脂环或杂环基团的聚胺N-氧化物。

一类所述聚胺N-氧化物包括其中N-O基团的氮构成R基团一部分的聚胺N-氧化物。优选的聚胺N-氧化物为其中R为杂环基团诸如吡啶、吡咯、咪唑、吡咯烷、哌啶、喹啉、吖啶和其衍生物聚胺N-氧化物。

另一类所述聚胺N-氧化物包括其中N-O基团的氮连接到R基团上的聚胺N-氧化物。

其它适用的聚胺N-氧化物为其中N-O基团连接到可聚合单元上的聚胺氧化物。

优选类型的聚胺N-氧化物为具有通式(I)且式中R为芳族、杂环或脂环基团以及其中N-O官能基的氮为所述R基的一部分的聚胺N-氧化物。

这些类型的例子有其中R为杂环化合物诸如吡啶、吡咯、咪唑和其衍生物的聚胺氧化物。

另一优选类型的聚胺N-氧化物为具有通式(I)且式中R为芳族、杂环或脂环基团(其中N-O官能基的氮连接到所述R基团上)的聚胺氧化物。这些类型的例子有其中R基团为芳族基团诸如苯基的聚胺氧化物。

只要所形成的胺氧化物聚合物为水溶性且具有染料转移抑制性能，任何聚合物主链均可使用。适用的聚合物主链的例子有聚乙烯、聚烯烃、聚酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺、聚丙烯酸酯和其混合物。

本发明的胺N-氧化物聚合物一般具有10∶1到1∶1000000的胺与胺N-氧化物的比率。但是，在聚胺氧化物聚合物中存在的氧化胺基的量可通过适当的共聚或通过适度的N-氧化而改变。优选胺与胺N-氧化物的比率为2∶3到1∶1000000。更优选1∶4到1∶1000000，最优选从1∶7到1∶1000000。本发明的聚合物实际包括无规或嵌段共聚物，其中一种单体类型是胺N-氧化物，另一种单体类型可以是胺N-氧化物也可以不是。所述聚胺N-氧化物的氧化胺单元具有＜10、优选＜7、更优选＜6的pKa。

可以获得几乎任何聚合程度聚胺氧化物。聚合的程度并不重要，只要该物质具有所需的水溶性和染料分散能力即可。

一般来说，其平均分子量范围为500到1000000；优选1000到50000；更优选2000到30000。最优选3000到20000。

b)N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物

用于本发明的N-乙烯基咪唑N-乙烯基吡咯烷酮聚合物具有5000到1000000、优选5000到200000的平均分子量。

用于按照本发明的洗涤剂组合物中的高度优选的聚合物包括选自N-乙烯基咪唑N-乙烯基吡咯烷酮共聚物的聚合物，所述聚合物具有5000到50000、更优选8000到30000、最优选10000到20000的平均分子量。

所述平均分子量范围如Barth H.G.和Mays J.W.在ChemicalAnalysis第113卷“Modern Methods of Polymer Characterization”中所述通过光散射法测定。

高度优选的N-乙烯基咪唑N-乙烯基吡咯烷酮共聚物具有5000到50000、更优选8000到30000、最优选10000到20000的平均分子量。

具有所述平均分子量特征的N-乙烯基咪唑N-乙烯基吡咯烷酮共聚物提供了优良的染料转移抑制性能，同时不会负面影响用其配制的洗涤剂组合物的清洁性能。

本发明的N-乙烯基咪唑N-乙烯基吡咯烷酮共聚物具有1到0.2、更优选0.8到0.3、最优选0.6到0.4的N-乙烯基咪唑与N-乙烯基吡咯烷酮的摩尔比率。

c)聚乙烯基吡咯烷酮

本发明的洗涤剂组合物也可使用具有约2500到约400000、优选约5000到约200000、更优选约5000到约50000、最优选约5000到约15000的平均分子量的聚乙烯基吡咯烷酮(“PVP”)。适用的聚乙烯基吡咯烷酮是可从纽约，NY和加拿大的蒙特利尔的ISP Corporation以PVP K-15(10000的粘度分子量)、PVP K-30(40000的平均分子量)、PVP K-60(160000的平均分子量)和PVP K-90(360000的平均分子量)的商品名购买的聚乙烯基吡咯烷酮。其它适用的可购自BASFCooperation的聚乙烯基吡咯烷酮包括Sokalan HP 165和Sokalan HP12；为洗涤剂领域技术人员所熟悉的聚乙烯基吡咯烷酮(参见例如EP-A-262897和EP-A-256696)。

d)聚乙烯基噁唑烷酮

本发明的洗涤剂组合物也可使用聚乙烯基噁唑烷酮作为聚合染料转移抑制剂。所述聚乙烯基噁唑烷酮具有约2500到约400000、优选约5000到约200000、更优选约5000到约50000、最优选约5000到约15000的平均分子量。

e)聚乙烯基咪唑：

本发明的洗涤剂组合物也可使用聚乙烯基咪唑作为聚合染料转移抑制剂。所述聚乙烯基咪唑具有约2500到约400000、优选约5000到约200000、更优选约5000到约50000、最优选约5000到约15000的平均分子量。

f)交联的聚合物：

交联聚合物是其主链相互连接到一定程度的聚合物；这些连接可以是化学性质也可以是物理性质，可能带有主链或分支上的活性基团；交联聚合物已被描述于Journal of Polymer Science的22卷1035到1039页。在一种实施方案中，交联聚合物被制备成三维刚性结构，其可在三维结构形成的孔隙中包夹染料。在另一种实施方案中，所述交联聚合物通过溶胀包夹染料。这种交联聚合物描述于同时待审的专利申请94870213.9中。

洗涤方法

本发明的组合物基本上可采用任何洗涤或清洁方法，包括浸渍法、预处理法和带有漂洗步骤(可加入单独的漂洗助剂组合物)的方法。

此中所述的方法包括将织物、餐具或任何硬表面以通常和下面举例说明的方式与清洁溶液接触。

本发明的方法方便地在清洁过程中进行。所述清洁方法优选在5-95℃下、特别是在10-60℃之间进行。处理溶液的pH优选为7到12。

一种优选的餐具机洗方法包括用其中溶解或分散了有效量的餐具机洗组合物或漂清组合物的水液处理带污物品。餐具机洗组合物的有效量是指8到60克产品溶解或分散于3到10升的洗涤体积中。按照餐具手洗方法，带污餐具与一般0.5到20克(每处理25只碗碟)的有效量的餐具洗涤组合物接触。优选的餐具手洗方法包括将所述洗涤剂组合物的浓溶液施加到碗碟表面或者将碗碟浸泡在所述洗涤剂组合物的大体积稀溶液中。

下面的实施例用于说明本发明的组合物，但并不意味着限制或限定本发明的范围。

除非另加说明，在所述洗涤剂组合物中，酶水平被表示为纯酶占总组合物的重量比率，洗涤剂成分以占总组合物的重量比率表示。此中缩写的组分名称具有下面的意义：

LAS：线性C_11-13烷基苯磺酸钠；

TAS：牛油基烷基硫酸钠；

CxyAS：C_1x-C_1y烷基硫酸钠；

CxySAS：C_1x-C_1y仲(2，3)烷基硫酸钠；

CxyEz：与平均z摩尔氧乙烯缩合的C_1x-C_1y主要为线性的伯醇；

CxyEzS：与平均z摩尔氧乙烯缩合的C_1x-C_1y烷基硫酸钠；

QAS：R₂N⁺(CH₃)₂(C₂H₄OH)，其R₂为C₁₂-C₁₄；

QAS1：R₂N⁺(CH₃)₂(C₂H₄OH)，其R₂为C₈-C₁₁；

APA：C_8-10酰氨基丙基二甲胺；

肥皂：源于80/20牛脂和椰油脂肪酸的混合物的线性烷基羧酸钠；

非离子：具平均3.8的乙氧基化度和平均4.5的丙氧基化度的C₁₃-C₁₅混合的乙氧基化/丙氧基化脂肪醇；

Neodol 45-13：由Shell Chemical Co.出售的C₁₄-C₁₅线性伯醇乙氧基化物；

STS：甲苯磺酸钠；

CFAA：C₁₂-C₁₄烷基N-甲基葡糖酰胺；

TFAA：C₁₆-C₁₈烷基N-甲基葡糖酰胺；

TPKFA：C₁₂-C₁₄拔顶全馏分脂肪酸；

硅酸盐：无定形硅酸钠(SiO₂∶Na₂O比率为1.6到3.2)；

硅酸盐(Metasilicate)：硅酸钠(SiO₂∶Na₂O比率为1.0)；

沸石A：初级粒径为0.1到10微米的式Na₁₂(AlO₂SiO₂)_12.27H₂O的水合硅铝酸钠(重量按无水情况表示)。

Na-SKS-6：式δ-Na₂Si₂O₅的结晶层状硅酸盐；

柠檬酸盐：粒径分布在425到850微米之间的活度为86.4％的柠檬酸三钠二水合物；

柠檬酸：无水柠檬酸；

硼酸盐：硼酸钠；

碳酸盐：粒径在200到900微米之间的无水碳酸钠；

碳酸氢盐：粒径分布在400到1200微米之间的无水碳酸氢钠；

硫酸盐：无水硫酸钠；

硫酸镁：无水硫酸镁；

STPP：三聚磷酸钠；

TSPP：焦磷酸四钠；

MA/AA：平均分子量为约70000到80000的4∶1丙烯酸盐/马来酸盐无规共聚物；

MA/AA1：平均分子量为约10000的6∶4丙烯酸盐/马来酸盐无规共聚物；

AA：平均分子量为4500的聚丙烯酸钠聚合物；

PA30：平均分子量在约4500到8000之间的聚丙烯酸；

480N：平均分子量约3500的7∶3丙烯酸盐/甲基丙烯酸盐无规共聚物；

Polygel/Carbopol：高分子量交联聚丙烯酸酯；

PB1：示性式NaBO₂.H₂O₂的一水合过硼酸钠的无水物；

PB4：示性式NaBO₂.3H₂O.H₂O₂的四水合过硼酸钠；

过碳酸盐：示性式2Na₂CO₃.3H₂O₂的无水过碳酸钠；

NaDCC：二氯异氰脲酸钠；

TAED：四乙酰基乙二胺；

NOBS：钠盐形式的壬酰氧基苯磺酸盐；

NACA-OBS：(6-壬酰氨基己酰基)氧苯磺酸盐；

DTPA：二亚乙基三胺五乙酸；

HEDP：1，1-羟基乙烷二膦酸；

DETPMP：由Monsanto以Dequest 2060的商品名推向市场的五(亚甲基)膦酸二乙基三胺盐；

EDDS：钠盐形式的乙二胺-N，N’-二琥珀酸，(S，S)异构体；

MnTACN：1，4，7-三甲基-1，4，7-三氮杂环壬烷锰；

光活化漂白剂：包封于糊精可溶聚合物中的磺化酞花菁锌；

光活化漂白剂1：包封于糊精可溶聚合物中的磺化酞花菁铝；

PAAC：乙酸五胺钴(III)盐；

石蜡：由Wintershall以Winog 70的商品名出售的石蜡油；

NaBz：苯甲酸钠；

甘露聚糖酶：源于Bacillus agaradherens，NCIMB 40482的甘露聚糖酶；

蛋白酶：由Novo Nordisk A/S以Savinase、Alcalase和Durazym的商品名出售的蛋白水解酶和由Gist-Brocades以Maxacal、Maxapem出售的蛋白水解酶和描述于专利WO91/06637和/或WO95/10591和/或EP251446中的蛋白酶；

淀粉酶：描述于WO94/18314、WO96/05295由Genercor以PurafactOx Am^的商品名出售的淀粉分解酶；可购自Novo Nordisk A/S的Termamyl^、Fungamyl^和Duramyl^和WO95/26397中所述的淀粉酶；

脂酶：Novo Nordisk A/S以Lipolase、Lipolase Ultra的商品名出售的脂解酶和Gist-Brocades以Lipomax的商品名出售的脂解酶；

纤维素酶：Novo Nordisk A/S以Carezyme、Celluzyme和/或Endolase的商品名出售的纤维素分解酶；

CMC：羧甲基纤维素钠；

PVP：平均分子量为60000的聚乙烯聚合物；

PVNO：平均分子量为50000的聚乙烯基吡啶-N-氧化物；

PVPVI：平均分子量为20000的乙烯基咪唑和乙烯基吡咯烷酮的共聚物；

增亮剂1：4，4’-双(2-磺基苯乙烯基)联苯二钠；

增亮剂2：4，4’-双(4-苯胺基-6-吗啉并-1，3，5-三嗪-2-基)均二苯代乙烯-2，2’-二磺酸二钠；

硅氧烷消泡剂：以硅氧烷-氧化烯烃共聚物作为分散剂的聚二甲基硅氧烷泡沫控制剂，所述泡沫控制剂与所述分散剂的比率为10∶1到100∶1；

抑泡剂：12％硅氧烷/硅石、18％硬脂醇、70％颗粒形式淀粉；

遮光剂：由BASF Aktiengesellschaft以Lytron 621的商品名出售的水基单苯乙烯胶乳混合物；

SRP1：阴离子封端的聚酯；

SRP2：二乙氧基化聚(对苯二甲酸1，2-丙二醇酯)短嵌段聚合物；

QEA：双((C₂H₅O)(C₂H₄O)_n)(CH₃)-N⁺-C₆H₁₂-N⁺-(CH₃)双((C₂H₅O)-(C₂H₄O))_n，其中n为20到30；

PEI：平均分子量为1800以及每个氮7个乙烯氧残基的平均乙氧基化度的聚乙烯亚胺；

SCS：枯烯磺酸钠；

HMWPEO：高分子量聚氧化乙烯；

PEGx：分子量为x的聚乙二醇；

PEO：平均分子量为5000的聚氧化乙烯；

TEPAE：四亚乙基五胺乙氧基化物。

BTA：苯并三唑；

pH：在20℃下以1％蒸馏水溶液测定。

实施例1

按照本发明制备下面的高密度洗衣用洗涤剂组合物：

         I      II      III      IV      V      VILAS          8.0    8.0     8.0      2.0     6.0    6.0TAS          -      0.5     -        0.5     1.0    0.1C46(S)AS     2.0    2.5     -        -       -      -C25AS        -      -       -        7.0     4.5    5.5C68AS        2.0    5.0     7.0      -       -      -C25E5        -      -       3.4      10.0    4.6    4.6C25E7        3.4    3.4     1.0      -       -      -C25E3S       -      -       -        2.0     5.0    4.5QAS          -      0.8     -        -       -      -QAS1         -      -       -        0.8     0.5    1.0沸石A        18.1   18.0    14.1     18.1    20.0   18.1柠檬酸       -      -       -        2.5     -      2.5碳酸盐       13.0   13.0    27.0     10.0    10.0   13.0Na-SKS-6     -      -       -        10.0    -      10.0硅酸盐       1.4    1.4     3.0      0.3     0.5    0.3柠檬酸盐     -      1.0     -        3.0     -      -硫酸盐       26.1   26.1    26.1     6.0     -      -硫酸镁       0.3    -       -        0.2     -      0.2MA/AA        0.3    0.3     0.3      4.0     1.0    1.0CMC          0.2    0.2     0.2      0.2     0.4    0.4PB4          9.0    9.0     5.0      -       -      -过碳酸盐     -      -       -        -       18.0   18.0TAED             1.5      0.4      1.5      -      3.9      4.2NACA-OBS         -        2.0      1.0      -      -        -DETPMP           0.25     0.25     0.25     0.25   -        -SRP1             -        -        -        0.2    -        0.2EDDS             -        0.25     0.4      -      0.5      0.5CFAA             -        1.0      -        2.0    -        -HEDP             0.3      0.3      0.3      0.3    0.4      0.4QEA              -        -        -        0.2    -        0.5蛋白酶           0.009    0.009    0.01     0.04   0.05     0.03甘露聚糖酶       0.05     0.009    0.03     0.009  0.03     0.009淀粉酶           0.002    0.002    0.002    0.006  0.008    0.008纤维素酶         0.0007   -        -        0.0007 0.0007   0.0007脂酶             0.006    -        -        0.01   0.01     0.01光活化漂白剂(ppm)15       15       15       -      20       20PVNO/PVPVI       -        -        -        0.1    -        -增亮剂1          0.09     0.09     0.09     -      0.09     0.09香料             0.3      0.3      0.3      0.4    0.4      0.4硅氧烷消泡剂     0.5      0.5      0.5      -      0.3      0.3密度，g/l        850      850      850      850    850      850杂项和微量组分                        到100％

实施例2

按照本发明制备具体在欧洲洗衣机洗涤条件下使用的下面的颗粒洗衣用洗涤剂组合物：

              I       II      III      IV      V     VILAS               5.5     7.5     5.0      5.0    6.0    7.0TAS               1.25    1.9     -        0.8    0.4    0.3C24AS/C25AS       -       2.2     5.0      5.0    5.0    2.2C25E3S            -       0.8     1.0      1.5    3.0    1.0C45E7             3.25    -       -        -      -      3.0TFAA              -       -       2.0      -      -      -C25E5             -       5.5     -        -      -      -QAS               0.8     -       -        -      -      -QAS1              -       0.7     1.0      0.5    1.0    0.7STPP              19.7    -       -        -      -      -沸石A                     -      19.5     25.0    19.5    20.0    17.0NaSKS-6/柠檬酸(79∶21)    -      10.6     -       10.6    -       -Na-SKS-6                  -      -        9.0     -       10.0    10.0碳酸盐                    6.1    21.4     9.0     10.0    10.0    18.0碳酸氢盐                  -      2.0      7.0     5.0     -       2.0硅酸盐                    6.8    -        -       0.3     0.5     -柠檬酸盐                  -      -        4.0     4.0     -       -硫酸盐                    39.8   -        -       5.0     -       12.0硫酸镁                    -      -        0.1     0.2     0.2     -MA/FDSFDSFDSFDS           0.5    1.6      3.0     4.0     1.0     1.0CMC                       0.2    0.4      1.0     1.0     0.4     0.4PB4                       5.0    12.7     -       -       -       -过碳酸盐                  -      -        -       -       18.0    15.0TAED                      0.5    3.1      -       -       5.0     -NACA-OBS                  1.0    3.5      -       -       -       2.5DETPMP                    0.25   0.2      0.3     0.4     -       0.2HEDP                      -      0.3      -       0.3     0.3     0.3QEA                       -      -        1.0     1.0     1.0     -蛋白酶                    0.009  0.03     0.03    0.05    0.05    0.02甘露聚糖酶                0.03   0.03     0.001   0.03    0.005   0.009脂酶                      0.003  0.003    0.006   0.006   0.006   0.004纤维素酶                  0.0006 0.0006   0.0005  0.0005  0.0007  0.0007淀粉酶                    0.002  0.002    0.006   0.006   0.01    0.003PVNO/PVPVI                -      -        0.2     0.2     -       -PVP                       0.9    1.3      -       -       -       0.9SRP1                      -      -        0.2     0.2     0.2     -光活化漂白剂(ppm)         15     27       -       -       20      20光活化漂白剂1(ppm)        15     -        -       -       -       -增亮剂1                   0.08   0.2      -       -       0.09    0.15增亮剂2                   -      0.04     -       -       -       -香料                      0.3    0.5      0.4     0.3     0.4     0.3硅氧烷消泡剂              0.5    2.4      0.3     0.5     0.3     2.0密度，g/l                 750    750      750     750     750     750杂项和微量组分                               到100％

实施例3

按照本发明制备具体在欧洲洗衣机洗涤条件下使用的下面的洗涤剂组合物：

                  I       II       III        IV吹制粉

LAS               6.0     5.0      11.0       6.0

TAS               2.0     -        -          2.0

沸石A             24.0    -        -          20.0

STPP              -       27.0     24.0       -

硫酸盐            4.0     6.0      13.0       -

MA/AA             1.0     4.0      6.0        2.0

硅酸盐            1.0     7.0      3.0        3.0

CMC               1.0     1.0      0.5        0.6

增亮剂1           0.2     0.2      0.2        0.2

硅氧烷发泡剂      1.0     1.0      1.0        0.3

DETPMP            0.4     0.4      0.2        0.4喷雾

增亮剂            0.02    -        -          0.02

C45E7             -       -        -          5.0

C45E2             2.5     2.5      2.0        -

C45E3             2.6     2.5      2.0        -

香料              0.5     0.3      0.5        0.2

硅氧烷消泡剂      0.3     0.3      0.3        -干添加剂

QEA               -       -        -          1.0

EDDS              0.3     -        -          -

硫酸盐            2.0     3.0      5.0        10.0

碳酸盐            6.0     13.0     15.0       14.0

柠檬酸            2.5     -        -          2.0

QAS1              0.5     -        -          0.5

  Na-SKS-6    10.0        -        -          -

  过碳酸盐    18.5        -        -          -

  PB4         -           18.0     10.0       21.5

  TAED        2.0         2.0      -          2.0

  NACA-OBS    3.0         2.0      4.0        -

  蛋白酶      0.03        0.03     0.03       0.03

  甘露聚糖酶  0.009       0.01     0.03       0.001

  脂酶        0.008       0.008    0.008      0.004

  淀粉酶      0.003       0.003    0.003      0.006

  增亮剂1     0.05        -        -          0.05杂项和微量组分                    到100％

实施例4

按照本发明制备下列颗粒洗涤剂组合物：

                 I       II     III     IV      V      VI吹制粉

      LAS        23.0    8.0    7.0     9.0     7.0    7.0

      TAS        -       -      -       -       1.0    -

      C45AS      6.0     6.0    5.0     8.0     -      -

      C45AES     -       1.0    1.0     1.0     -      -

      C45E35     -       -      -       -       2.0    4.0

      沸石A      10.0    18.0   14.0    12.0    10.0   10.0

      MA/AA      -       0.5    -       -       -      2.0

      MA/AA1     7.0     -      -       -       -      -

      AA         -       3.0    3.0     2.0     3.0    3.0

      硫酸盐     5.0     6.3    14.3    11.0    15.0   19.3

      硅酸盐     10.0    1.0    1.0     1.0     1.0    1.0

      碳酸盐     15.0    20.0   10.0    20.7    8.0    6.0

      PEG4000    0.4     1.5    1.5     1.0     1.0    1.0

      DTPA       -       0.9    0.5     -       -      0.5

     增亮剂2   0.3    0.2    0.3    -      0.1    0.3喷雾

     C45E7     -      2.0    -      -      2.0    2.0

     C25E9     3.0    -      -      -      -      -

     C23E9     -      -      1.5    2.0    -      2.0

     香料      0.3    0.3    0.3    2.0    0.3    0.3附聚物

     C45AS      -      5.0    5.0    2.0    -      5.0

     LAS        -      2.0    2.0    -      -      2.0

     沸石A      -      7.5    7.5    8.0    -      7.5

     碳酸盐     -      4.0    4.0    5.0    -      4.0

     PEG4000    -      0.5    0.5    -      -      0.5

     其它(水等) -      2.0    2.0    2.0    -      2.0干添加剂

     QAS        -      -      -      -      1.0    -

     柠檬酸     -      -      -      -      2.0    -

     PB4        -      -      -      -      12.0   1.0

     PB1        4.0    1.0    3.0    2.0    -      -

     过碳酸盐   -      -      -      -      2.0    10.0

     碳酸盐     -      5.3    1.8    -      4.0    4.0

     NOBS       4.0    -      6.0    -      -      0.6

     甲基纤维素 0.2    -      -      -      -      -

     Na-SKS-6   8.0    -      -      -      -      -

     STS        -      -      2.0    -      1.0

     枯烯磺酸   -      1.0    -      -      -      2.0

     蛋白酶     0.02   0.02   0.02   0.01   0.02   0.02

     甘露聚糖酶 0.009  0.01   0.03   0.009  0.01   0.001

     脂酶       0.004  -      0.004  -      0.004  0.008

     淀粉酶     0.003  -      0.002  -      0.003  -

  纤维素酶      0.0005  0.0005  0.0005  0.0007  0.0005  0.0005

  PVPVI         -       -       -       -       0.5     0.1

  PVP           -       -       -       -       0.5     -

  PVNO          -       -       0.5     0.3     -       -

  QEA           -       -       -       -       1.0     -

  SRP1          0.2     0.5     0.3     -       0.2     -

  硅氧烷消泡剂  0.2     0.4     0.2     0.4     0.1     -

  硫酸镁        -       -       0.2     -       0.2     -杂项和微量组分                      到100％

实施例5

按照本发明制备具体用于洗涤有色衣服的下面含零漂白剂的洗涤剂组合物：

                   I        II      III吹制粉

          沸石A    15.0     15.0     -

          硫酸盐   -        5.0      -

          LAS      3.0      3.0      -

          DETPMP   0.4      0.5      -

          CMC      0.4      0.4      -

          MA/AA    4.0      4.0      -附聚物

          C45AS    -        -        11.0

          LAS      6.0      5.0      -

          TAS      3.0      2.0      -

          硅酸盐   4.0      4.0      -

          沸石A    10.0     15.0     13.0

          CMC      -        -        0.5

          MA/AA    -        -        2.0

            碳酸盐        9.0    7.0    7.0喷雾

            香料          0.3    0.3    0.5

            C45E7         4.0    4.0    4.0

            C25E3         2.0    2.0    2.0干添加剂

            MA/AA         -      -      3.0

            Na-SKS-6      -      -      12.0

            柠檬酸        10.0   -      8.0

            碳酸氢盐      7.0    3.0    5.0

            碳酸盐        8.0    5.0    7.0

            PVPVI/PVNO    0.5    0.5    0.5

            蛋白酶        0.03   0.02   0.05

            甘露聚糖酶    0.001  0.004  0.03

            脂酶          0.008  0.008  0.008

            淀粉酶        0.01   0.01   0.01

            纤维素酶      0.001  0.001  0.001

            硅氧烷消泡剂  5.0    5.0    5.0

            硫酸盐        -      9.0    -密度(g/l)                     700    700    700杂项和微量组分                   到100％

实施例6

按照本发明制备下面洗涤剂组合物：

                    I       II      III     IV基础颗粒

           沸石A    30.0    22.0    24.0    10.0

           硫酸盐   10.0    5.0     10.0    7.0

           MA/AA    3.0     -        -      -

        AA             -      1.6     2.0     -

        MA/AA1         -      12.0    -       6.0

        LAS            14.0   10.0    9.0     20.0

        C45AS          8.0    7.0     9.0     7.0

        C45AES         -      1.0     1.0     -

        硅酸盐         -      1.0     0.5     10.0

        肥皂           -      2.0     -       -

        增亮剂1        0.2    0.2     0.2     0.2

        碳酸盐         6.0    9.0     10.0    10.0

        EG 4000        -      1.0     1.5     -

        DTPA           -      0.4     -       -喷雾

        C25E9          -      -       -       5.0

        C45E7          1.0    1.0     -       0

        C23E9          -      1.0     2.5     -

        香料           0.2    0.3     0.3     -干添加剂

        碳酸盐         5.0    10.0    18.0    8.0

        PVPVI/PVNO     0.5    -       0.3     -

        蛋白酶         0.03   0.03    0.03    0.02

        甘露聚糖酶     0.002  0.009   0.015   0.03

        脂酶           0.008  -       -       0.008

        淀粉酶         0.002  -       -       0.002

        纤维素酶       0.0002 0.0005  0.0005  0.0002

        NOBS           -      4.0     -       4.5

        PB1            1.0    5.0     1.5     6.0

        硫酸盐         4.0    5.0     -       5.0

        SRP1           -      0.4     -       -

        抑泡剂         -      0.5     0.5     -

        杂项和微量组分          到100％

实施例7

按照本发明制备下列颗粒洗涤剂组合物：

                    I        II       III吹制粉

      沸石A         20.0     -        15.0

      STPP          -        20.0     -

      硫酸盐        -        -        5.0

      碳酸盐        -        -        5.0

      TAS           -        -        1.0

      LAS           6.0      6.0      6.0

      C68AS         2.0      2.0      -

      硅酸盐        3.0      8.0      -

      MA/AA         4.0      2.0      2.0

      CMC           0.6      0.6      0.2

      增亮剂1       0.2      0.2      0.1

      DETPMP        0.4      0.4      0.1

      STS           -        -        1.0喷雾

      C45E7         5.0      5.0      4.0

      硅氧烷消泡剂  0.3      0.3      0.1

      香料          0.2      0.2      0.3干添加剂

      QEA           -        -        1.0

      碳酸盐        14.0     9.0      10.0

      PB1           1.5      2.0      -

      PB4           18.5     13.0     13.0

      TAED          2.0      2.0      2.0

      QAS           -        -        1.0

      光活化漂白剂  15ppm    15ppm    15ppm

      Na-SKS-6        -        -        3.0

    蛋白酶      0.03     0.03     0.007

    甘露聚糖酶  0.001    0.005    0.02

    脂酶        0.004    0.004    0.004

    淀粉酶      0.006    0.006    0.003

    纤维素酶    0.0002   0.0002   0.0005

    硫酸盐      10.0     20.0     5.0密度(g/l)           700      700      700杂项和微量组分            到100％

实施例8

按照本发明制备下列洗涤剂组合物：

                I        II       III吹制粉

    沸石A       15.0     15.0     15.0

    硫酸盐      -        5.0      -

    LAS         3.0      3.0      3.0

    QAS         -        1.5      1.5

    DETPMP      0.4      0.2      0.4

    EDDS        -        0.4      0.2

    CMC         0.4      0.4      0.4

    MA/AA       4.0      2.0      2.0附聚物

    LAS         5.0      5.0      5.0

    TAS         2.0      2.0      1.0

    硅酸盐      3.0      3.0      4.0

    沸石A       8.0      8.0      8.0

    碳酸盐      8.0      8.0      4.0喷雾

    香料        0.3      0.3      0.3

       C45E7        2.0     2.0       2.0

       C25E3        2.0     -         -干添加剂

       柠檬酸盐     5.0     -         2.0

       碳酸氢盐     -       3.0       -

       碳酸盐       8.0     15.0      10.0

       TAED         6.0     2.0       5.0

       PB1          14.0    7.0       10.0

       PE0          -       -         0.2

       膨润土       -       -         10.0

       蛋白酶       0.03    0.03      0.03

       甘露聚糖酶   0.001   0.005     0.01

       脂酶         0.008   0.008     0.008

       纤维素酶     0.001   0.001     0.001

       淀粉酶       0.01    0.01      0.01

       硅氧烷消泡剂 5.0     5.0       5.0

       硫酸盐       -       3.0       -密度(g/l)               850     850       850杂项和微量组分              到100％

实施例9

按照本发明制备下列洗涤剂组合物：

                I        II      III        IVLAS                 18.0     14.0    24.0       20.0QAS                 0.7      1.0     -          0.7TFAA                -        1.0     -          -C23E56.5            -        -       1.0        -C45E7               -        1.0     -          -C45E3S              1.0      2.5     1.0        -STPP                32.0     18.0    30.0       22.0硅酸盐                  9.0       5.0     9.0       8.0碳酸盐                  11.0      7.5     10.0      5.0碳酸氢盐                -         7.5     -         -PB1                     3.0       1.0     -         -PB4                     -         1.0     -         -NOBS                    2.0       1.0     -         -DETPMP                  -         1.0     -         -DTPA                    0.5       -       0.2       0.3SRP1                    0.3       0.2     -         0.1MA/FDSFDSFDSFDS         1.0       1.5     2.0       0.5CMC                     0.8       0.4     0.4       0.2PEI                     -         -       0.4       -硫酸盐                  20.0      10.0    20.0      30.0硫酸镁                  0.2       -       0.4       0.9甘露聚糖酶              0.001     0.005   0.01      0.015蛋白酶                  0.03      0.03    0.02      0.02淀粉酶                  0.008     0.007   -         0.004脂酶                    0.004     -       0.002     -纤维素酶                0.0003    -       -         0.0001光活化漂白剂            30ppm     20ppm   -         10ppm香料                    0.3       0.3     0.1       0.2增亮剂1/2               0.05      0.02    0.08      0.1杂项和微量组分                        到100％

实施例10

按照本发明制备下列液体洗涤剂制剂(其水平以重量份计，酶以纯酶计)：

           I       II     III    IV     VLAS            11.5    8.8    -      3.9    -C25E2.5S       -       3.0    18.0   -      16.0C45E2.25S        11.5    3.0    -        15.7    -C23E9            -       2.7    1.8      2.0     1.0C23E7            3.2     -      -        -       -CFAA             -       -      5.2      -       3.1TPKFA            1.6     -      2.0      0.5     2.0柠檬酸(50％)     6.5     1.2    2.5      4.4     2.5甲酸钙           0.1     0.06   0.1      -       -甲酸钠           0.5     0.06   0.1      0.05    0.05SCS              4.0     1.0    3.0      1.2     -硼酸盐           0.6     -      3.0      2.0     2.9氢氧化钠         5.8     2.0    3.5      3.7     2.7乙醇             1.75    1.0    3.6      4.2     2.91，2-丙二醇      3.3     2.0    8.0      7.9     5.3单乙醇胺         3.0     1.5    1.3      2.5     0.8TEPAE            1.6     -      1.3      1.2     1.2甘露聚糖酶       0.001   0.01   0.015    0.015   0.001蛋白酶           0.03    0.01   0.03     0.02    0.02脂酶             -       -      0.002    -       -淀粉酶           -       -      -        0.002   -纤维素酶         -       -      0.0002   0.0005  0.0001SRP1             0.2     -      0.1      -       -DTPA             -       -      0.3      -       -PVNO             -       -      0.3      -       0.2增亮剂1          0.2     0.07   0.1      -       -硅氧烷消泡剂     0.04    0.02   0.1      0.1     0.1杂项和水

实施例11

按照本发明制备下列液体洗涤剂制剂(其水平以重量份计，酶以纯酶计)：

                            I      II       III      IVLAS                            10.0    13.0     9.0      -C25AS                          4.0     1.0      2.0      10.0C25E3S                         1.0     -        -        3.0C25E7                          6.0     8.0      13.0     2.5TFAA                           -       -        -        4.5APA                            -       1.4      -        -TPKFA                          2.0     -        13.0     7.0柠檬酸                         2.0     3.0      1.0      1.5十二碳烯基/十四碳烯基琥珀酸    12.0    10.0     -        -菜籽脂肪酸                     4.0     2.0      1.0      -乙醇                           4.0     4.0      7.0      2.01，2-丙二醇                    4.0     4.0      2.0      7.0单乙醇胺                       -       -        -        5.0三乙醇胺                       -       -        8.0      -TEPAE                          0.5     -        0.5      0.2DETPMP                         1.0     1.0      0.5      1.0甘露聚糖酶                     0.001   0.015    0.01     0.03蛋白酶                         0.02    0.02     0.01     0.008脂酶                           -       0.002    -        0.002淀粉酶                         0.004   0.004    0.01     0.008纤维素酶                       -       -        -        0.002SRP2                           0.3     -        0.3      0.1硼酸                           0.1     0.2      1.0      2.0氯化钙                         -       0.02     -        0.01增亮剂1                        -       0.4      -        -抑泡剂                    0.1    0.3    -      0.1遮光剂                    0.5    0.4    -      0.3加NaOH到pH                8.0    8.0    7.6    7.7杂项和水

实施例12

按照本发明制备下列液体洗涤剂组合物(其水平以重量份计，酶以纯酶计)：

                           I       II      III     IVLAS                            25.0    -       -       -C25AS                          -       13.0    18.0    15.0C25E3S                         -       2.0     2.0     4.0C25E7                          -       -       4.0     4.0TFAA                           -       6.0     8.0     8.0APA                            3.0     1.0     2.0     -TPKFA                          -       15.0    11.0    11.0柠檬酸                         1.0     1.0     1.0     1.0十二碳烯基/十四碳烯基琥珀酸    15.0    -       -       -菜籽脂肪酸                     1.0     -       3.5     -乙醇                           7.0     2.0     3.0     2.01，2-丙二醇                    6.0     8.0     10.0    13.0单乙醇胺                       -       -       9.0     9.0TEPAE                          -       -       0.4     0.3DETPMP                         2.0     1.2     1.0     -甘露聚糖酶                     0.001   0.0015  0.01    0.01蛋白酶                         0.05    0.02    0.01    0.02脂酶                           -       -       0.003   0.003淀粉酶                         0.004   0.01    0.01    0.01纤维素酶                       -       -       0.004   0.003SRP2                          -      -      0.2    0.1硼酸                          1.0    1.5    2.5    2.5膨润土                        4.0    4.0    -      -增亮剂1                       0.1    0.2    0.3    -抑泡剂                        0.4    -      -      -遮光剂                        0.8    0.7    -      -加Na0H到pH                    8.0    7.5    8.0    8.2杂项和水

实施例13

按照本发明制备下列液体洗涤剂组合物(其水平以重量份计，酶以纯酶计)：

                I       IILAS                27.6    18.9C45AS              13.8    5.9C13E8              3.0     3.1油酸               3.4     2.5柠檬酸             5.4     5.4氢氧化钠           0.4     3.6甲酸钙             0.2     0.1甲酸钠             -       0.5乙醇               7.0     -单乙醇胺           16.5    8.01，2-丙二醇        5.9     5.5二甲苯磺酸         -       2.4TEPAE              1.5     0.8蛋白酶             0.05    0.02甘露聚糖酶         0.001   0.01PEG                -       0.7增亮剂2             0.4    0.1香料                0.5    0.3水和微量组分

实施例14

按照本发明制备提供“洗涤过程软化”能力的下列颗粒织物洗涤剂组合物：

                          I      IIC45AS                         -      10.0LAS                           7.6    -C68AS                         1.3    -C45E7                         4.0    -C25E3                         -      5.0椰油烷基二甲基羟乙基氯化铵    1.4    1.0柠檬酸盐                      5.0    3.0Na-SKS-6                      -      11.0沸石A                         15.0   15.0MA/AA                         4.0    4.0DETPMP                        0.4    0.4PB1                           15.0   -过碳酸盐                      -      15.0TAED                          5.0    5.0绿土                          10.0   10.0HMWPEO                        -      0.1甘露聚糖酶                    0.001  0.01蛋白酶                        0.02   0.01脂酶                          0.02   0.01淀粉酶                        0.03   0.005纤维素酶                      0.001  -硅酸盐                        3.0    5.0碳酸盐                                10.0        10.0抑泡剂                                1.0         4.0CMC                                   0.2         0.1杂项和微量组分                            到100％

实施例15

按照本发明制备下列洗衣用条状洗涤剂组合物(其水平按重量份计，酶以纯酶表示)：

          I       II       III     VI       V        III       VI       VLAS           -       -        19.0    15.0     21.0     6.75      8.8      -C28AS         30.0    13.5     -       -        -        15.75     11.2     22.5月桂酸钠      2.5     9.0      -       -        -        -         -        -沸石A         2.0     1.25     -       -        -        1.25      1.25     1.25碳酸盐        20.0    3.0      13.0    8.0      10.0     15.0      15.0     10.0碳酸钙        27.5    39.0     35.0    -        -        40.0      -        40.0硫酸盐        5.0     5.0      3.0     5.0      3.0      -         -        5.0TSPP          5.0     -        -       -        -        5.0       2.5      -STPP          5.0     15.0     10.0    -        -        7.0       8.0      10.0膨润土        -       10.0     -       -        5.0      -         -        -DETPMP        -       0.7      0.6     -        0.6      0.7       0.7      0.7CMC           -       1.0      1.0     1.0      1.0      -         -        1.0滑石          -       -        10.0    15.0     10.0     -         -        -硅酸盐        -       -        4.0     5.0      3.0      -         -        -PVNO          0.02    0.03     -       0.01     -        0.02      -        -MA/AA         0.4     1.0      -       -        0.2      0.4       0.5      0.4SRP1          0.3     0.3      0.3     0.3      0.3      0.3       0.3      0.3甘露聚糖酶    0.001   0.001    0.01    0.01     0.015    0.001     0.05     0.01淀粉酶        -       -        0.01    -        -        -         0.002    -蛋白酶        0.001   0.004    0.001   0.003    0.003    0.001     0.001    0.003脂酶          -       0.002    -       0.002    -        -         -        -纤维素酶      -       0.0003   -       -        0.0003   0.0002    -        -PEO           -       0.2      -       0.2      0.3      -         -        0.3香料          1.0     0.5      0.3     0.2      0.4      -         -        0.4硫酸镁         -         -         3.0      3.0     3.0     -    -    -增亮剂         0.15     0.1        0.15     -       -       -    -    0.1光活化漂白     -        15.0       15.0     15.0    15.0    -    -    15.0剂(ppm)

实施例16

按照本发明制备下列洗涤添加剂组合物：

                  I        II       IIILAS                   -        5.0      5.0STPP                  30.0     -        20.0沸石A                 -        35.0     20.0PB1                   20.0     15.0     -TAED                  10.0     8.0      -甘露聚糖酶            0.001    0.01     0.01蛋白酶                0.3      0.3      0.3淀粉酶                -        0.06     0.06微量组分、水和杂项            到100％

实施例17

按照本发明制备下列压型高密度(0.96Kg/l)餐具洗涤剂组合物：

                    I     II    III    IV     V     VI    VII   VIIISTPP                    -     -     54.3   51.4   51.4  -     -     50.9柠檬酸盐                35.0  17.0  -      -      -     46.1  40.2  -碳酸盐                  -     17.5  14.0   14.0   14.0  -     8.0   32.1碳酸氢盐                -     -     -      -      -     25.4  -     -硅酸盐                  32.0  14.8  14.8   10.0   10.0  1.0   25.0  3.1硅酸盐(Metasilicate)    -     2.5   -      9.0    9.0   -     -     -PB1                     1.9   9.7   7.8    7.8    7.8   -     -     -PB4                     8.6   -     -      -      -     -     -     -过碳酸盐                -     -     -      -      -     6.7   11.8  4.8非离子                  1.5   2.0   1.5    1.7    1.5   2.6   1.9   5.3TAED                    5.2    2.4     -       -      -      2.2   -        1.4HEDP                    -      1.0     -       -      -      -     -        -DETPMP                  -      0.6     -       -      -      -     -        -MnTACN                  -      -       -       -      -      -     0.008    -PAAC                    -      -       0.008   0.01   0.007  -     -        -BzP                     -      -       -       -      1.4    -     -        -石蜡                    0.5    0.5     0.5     0.5    0.5    0.6   -        -甘露聚糖酶              0.001  0.001   0.002   0.002  0.001  0.003 0.002    0.002蛋白酶                  0.072  0.072   0.029   0.053  0.046  0.026 0.059    0.06淀粉酶                  0.012  0.012   0.006   0.012  0.013  0.009 0.017    0.03脂酶                    -      0.001   -       0.005  -      -     -        -BTA                     0.3    0.3     0.3     0.3    0.3    -     0.3      0.3MA/FDSFDSFDSFDS         -      -       -       -      -      -     4.2      -480N                    3.3    6.0     -       -      -      -     -        0.9香料                    0.2    0.2     0.2     0.2    0.2    0.2   0.1      0.1硫酸盐                  7.0    20.0    5.0     2.2    0.8    12.0  4.6      -PH                      10.8   11.0    10.8    11.3   11.3   9.6   10.8     10.9杂项和水                                       到100％

实施例18

按照本发明制备下列堆积密度为1.02Kg/l的颗粒餐具洗涤剂组合物：

                      I      II     III     IV       V       VI      VII   VIIISTPP                    30.0    30.0    33.0    34.2    29.6    31.1    26.6   17.6碳酸盐                  30.5    30.5    31.0    30.0    23.0    39.4    4.2    45.0硅酸盐                  7.4     7.4     7.5     7.2     13.3    3.4     43.7   12.4硅酸盐(Metasilicate)    -       -       4.5     5.1     -       -       -      -过碳酸盐                -       -       -       -       -       4.0     -      -PB1                     4.4     4.2     4.5     4.5     -       -       -      -NADCC                   -       -       -       -       2.0     -       1.6    1.0非离子                  1.2     1.0     0.7     0.8     1.9     0.7     0.6    0.3TAED                    1.0     -       -       -       -       0.8     -      -PACC                    -       0.004   0.004   0.004   -       -       -      -BzP                     -       -       -       1.4     -       -       -      -石蜡                0.25    0.25    0.25    0.25    -       -     -      -甘露聚糖酶          0.001   0.001   0.001   0.001   0.001   0.001 0.001  0.001蛋白酶              0.036   0.015   0.03    0.028   0.001   0.03  0.03   0.03淀粉酶              0.003   0.003   0.01    0.006   -       0.01  -      -脂酶                0.005   -       0.001   -       -       -     -      -BTA                 0.15    0.15    0.15    0.15    -       -     -      -香料                0.2     0.2     0.2     0.2     0.1     0.2   0.2    -硫酸盐              23.4    25.0    22.0    18.5    30.1    19.3  23.1   23.6pH                  10.8    10.8    11.3    11.3    10.7    11.5  12.7   10.9杂项和水                                     到100％

实施例19

按照本发明通过使用标准12头旋转压机，在13KN/cm²的压力下，通过颗粒餐具洗涤组合物的压制来制备下列片剂洗涤剂组合物：

            I       II      III     IV      V        VISTPP            -       48.8    49.2    38.0    -        46.8柠檬酸盐        26.4    -       -       -       31.1     -碳酸盐          -       5.0     14.0    15.4    14.4     23.0硅酸盐          26.4    14.8    15.0    12.6    17.7     2.4甘露聚糖酶      0.001   0.001   0.001   0.001   0.001    0.02蛋白酶          0.058   0.072   0.041   0.033   0.052    0.013淀粉酶          0.01    0.03    0.012   0.007   0.016    0.002脂酶            0.005   -       -       -       -        -PB1             1.6     7.7     12.2    10.6    15.7     -PB4             6.9     -       -       -       -        14.4非离子          1.5     2.0     1.5     1.65    0.8      6.3PAAC            -       -       0.02    0.009   -        -MnTACN          -       -       -       -       0.007    -TAED            4.3     2.5     -       -       1.3      1.8HEDP            0.7     -       -       0.7     -        0.4DETPMP          0.65    -        -      -       -        -石蜡        0.4      0.5      0.5    0.55     -      -BTA         0.2      0.3      0.3    0.3      -      -PA30        3.2      -        -      -        -      -Ma/AA       -        -        -      -        4.5    0.55香料        -        -        0.05   0.05     0.2    0.2硫酸盐      24.0     13.0     2.3    -        10.7   3.4片剂重量    25g      25g      20g    30g      18g    20gPH          10.6     10.6     10.7   10.7     10.9   11.2杂项和水                        到100％

实施例20

按照本发明制备下列液体餐具洗涤组合物：

                          I      II      III     IV      VC17ES                        28.5   27.4     19.2   34.1   34.1氧化胺                       2.6    5.0      2.0    3.0    3.0甜菜碱                       0.9    -        -      2.0    2.0二甲苯磺酸盐                 2.0    4.0      -      2.0    -Neodol C11E9                 -      -        5.0    -      -多羟基脂肪酰胺               -      -        -      6.5    6.5二亚乙基五乙酸钠(40％)       -      -        0.03   -      -TAED                         -      -        -      0.06   0.06蔗糖                         -      -        -      1.5    1.5乙醇                         4.0    5.5      5.5    9.1    9.1烷基二苯基氧二磺酸盐         -      -        -      -      2.3甲酸钙                       -      -        -      0.5    1.1柠檬酸铵                     0.06   0.1      -      -      -氯化钠                       -      1.0      -      -      -氯化镁                       3.3    -        0.7    -      -氯化钙                       -      -        0.4    -      -硫酸钠              -        -      0.06     -        -硫酸镁              0.08     -      -        -        -氢氧化镁            -        -      -        2.2      2.2氢氧化钠            -        -      -        1.1      1.1过氧化氢            200ppm   0.16   0.006    -        -甘露聚糖酶          0.001    0.05   0.001    0.001    0.015蛋白酶              0.017    0.005  0.035    0.003    0.002香料                0.18     0.09   0.09     0.2      0.2水和微量组分                    到100％

实施例21

按照本发明制备下列液体硬表面洗涤剂组合物：

                    I       II        III        IV        V甘露聚糖酶             0.001    0.0015    0.0015     0.05      0.01淀粉酶                 0.01     0.002     0.005      -         -蛋白酶                 0.05     0.01      0.02       0.01      0.01过氧化氢               -        -         -          6.0       6.8乙酰三乙基柠檬酸盐     -        -         -          2.5       -DTPA                   -        -         -          0.2       -丁羟基甲苯             -        -         -          0.05      -EDTA^*                 0.05     0.05      0.05       -         -柠檬酸/柠檬酸盐        2.9      2.9       2.9        1.0       -LAS                    0.5      0.5       0.5        -         -C12AS                  0.5      0.5       0.5        -         -C10AS                  -        -         -          -         1.7C12(E)S                0.5      0.5       0.5        -         -C12，13E6.5非离子      7.0      7.0       7.0        -         -Neodol 23-6.5          -        -         -          12.0      -Dobanol 23-3           -        -         -          -         1.5Dobanol 91-10               -            -        -      -      1.6C25AE1.8S                   -            -        -    6.0        -链烷基磺酸钠                -            -        -    6.0        -香料                        1.0        1.0      1.0    0.5      0.2丙二醇                      -            -        -    1.5        -乙氧基化四亚乙基五胺        -            -        -    1.0        -2-丁基辛醇                  -            -        -    -        0.5己基卡必醇^**               1.0        1.0      1.0    -          -SCS                         1.3        1.3      1.3    -          -pH调节到                    7-12      7-12     7-12    4          -杂项和水                                    到100％^*乙二胺二乙酸四钠^**二甘醇单己醚

实施例22

按照本发明制备用于清洁硬表面和去除家庭用具霉变的喷雾组合物：甘露聚糖酶                0.01淀粉酶                    0.01蛋白酶                    0.01辛基硫酸钠                2.0十二烷基硫酸钠            4.0氢氧化钠                  0.8硅酸盐                    0.04丁基卡必醇^*              4.0香料                      0.35水和微量组分            到100％^*二甘醇单丁基醚

                      序列表：(1)一般资料(i)申请人：(A)收信人：The Procter & Gamble Company(B)街道：One Procter & Gamble Plaza(C)城市：辛辛那提(D)州：俄亥俄(E)国家：美国(F)邮编：45202(ii)发明名称：包含甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物(iii)序列数：6(iv)计算机可读形式：(A)媒体类型：软盘(B)计算机：IBM PC兼容机(C)操作系统：PC-DOS/MS-DOS(D)软件：PatentIn Release#1.0，版本1.25(EPO)(2)SEQ ID NO：1的信息(i)序列特征(A)长度：1407个碱基对(B)类型：核酸(C)链型：单链(D)拓扑学：线性(ii)分子类型：DNA基因组(iii)来源(iv)特征：(A)名称/关键词：CDS(B)位置：1-1482(v)序列描述：SEQ ID NO：1ATGAAAAAAAAGTTATCACAGATTTATCATTTAATTATTTGCACACTTATAATAAGTGTGGGAATAATGGGGATTACAACGTCCCCATCAGCAGCAAGTACAGGCTTTTATGTTGATGGCAATACGTTATATGACGCAAATGGGCAGCCATTTGTCATGAGAGGTATTAACCATGGACATGCTTGGTATAAAGACACCGCTTCAACAGCTATTCCTGCCATTGCAGAGCAAGGCGCCAACACGATTCGTATTGTTTTATCAGATGGCGGTCAATGGGAAAAAGACGACATTGACACCATTCGTGAAGTCATTGAGCTTGCGGAGCAAAATAAAATGGTGGCTGTCGTTGAAGTTCATGATGCCACGGGTCGCGATTCGCGCAGTGATTTAAATCGAGCCGTTGATTATTGGATAGAAATGAAAGATGCGCTTATCGGTAAAGAAGATACGGTTATTATTAACATTGCAAACGAGTGGTATGGGAGTTGGGATGGCTCAGCTTGGGCCGATGGCTATATTGATGTCATTCCGAAGCTTCGCGATGCCGGCTTAACACACACCTTAATGGTTGATGCAGCAGGATGGGGGCAATATCCGCAATCTATTCATGATTACGGACAAGATGTGTTTAATGCAGATCCGTTAAAAAATACGATGTTCTCCATCCATATGTATGAGTATGCTGGTGGTGATGCTAACACTGTTAGATCAAATATTGATAGAGTCATAGATCAAGACCTTGCTCTCGTAATAGGTGAATTCGGTCATAGACATACTGATGGTGATGTTGATGAAGATACAATCCTTAGTTATTCTGAAGAAACTGGCACAGGGTGGCTCGCTTGGTCTTGGAAAGGCAACAGTACCGAATGGGACTATTTAGACCTTTCAGAAGACTGGGCTGGTCAACATTTAACTGATTGGGGGAATAGAATTGTCCACGGGGCCGATGGCTTACAGGAAACCTCCAAACCATCCACCGTATTTACAGATGATAACGGTGGTCACCCTGAACCGCCAACTGCTACTACCTTGTATGACTTTGAAGGAAGCACACAAGGGTGGCATGGAAGCAACGTGACCGGTGGCCCTTGGTCCGTAACAGAATGGGGTGCTTCAGGTAACTACTCTTTAAAAGCCGATGTAAATTTAACCTCAAATTCTTCACATGAACTGTATAGTGAACAAAGTCGTAATCTACACGGATACTCTCAGCTCAACGCAACCGTTCGCCATGCCAATTGGGGAAATCCCGGTAATGGCATGAATGCAAGACTTTACGTGAAAACGGGCTCTGATTATACATGGCATAGCGGTCCTTTTACACGTATCAATAGCTCCAACTCAGGAACAACGTTATCTTTTGATTTAAACAACATCGAAAATAGTCATCATGTTAGGGAAATAGGCGTGCAATTTTCAGCGGCAGATAATAGCAGTGGTCAAACTGCTCTATACGTTGATAACGTTACTTTAAGATAG(3)SEQ ID NO：2的信息(i)序列特征(A)长度：493个氨基酸(B)类型：氨基酸(C)拓扑学：线性(ii)分子类型：蛋白质(iii)序列描述：SEQ ID NO：2MKKKLSQIYHLIICTLIISVGIMGITTSPSAASTGFYVDGNTLYDANGQPFVMRGINHGHAWYKDTASTAIPAIAEQGANTIRIVLSDGGQWEKDDIDTIREVIELAEQNKMVAVVEVHDATGRDSRSDLNRAVDYWIEMKDALIGKEDTVIINIANEWYGSWDGSAWADGYIDVIPKLRDAGLTHTLMVDAAGWGQYPQSIHDYGQDVFNADPLKNTMFSIHMYEYAGGDANTVRSNIDRVIDQDLALVIGEFGHRHTDGDVDEDTILSYSEETGTGWLAWSWKGNSTEWDYLDLSEDWAGQHLTDWGNRIVHGADGLQETSKPSTVFTDDNGGHPEPPTATTLYDFEGSTQGWHGSNVTGGPWSVTEWGASGNYSLKADVNLTSNSSHELYSEQSRNLHGYSQLNATVRHANWGNPGNGMNARLYVKTGSDYTWHSGPFTRINSSNSGTTLSFDLNNIENSHHVREIGVQFSAADNSSGQTAIYVDNVTLR(4)SEQ ID NO：3的信息(i)序列特征(A)长度：1407个碱基对(B)类型：核酸(C)链型：单链(D)拓扑学：线性(ii)分子类型：DNA基因组(iii)序列描述：SEQ ID NO：3ATGAAAAAAAAGTTATCACAGATTTATCATTTAATTATTTGCACACTTATAATAAGTGTGGGAATAATGGGGATTACAACGTCCCCATCAGCAGCAAGTACAGGCTTTTATGTTGATGGCAATACGTTATATGACGCAAATGGGCAGCCATTTGTCATGAGAGGTATTAACCATGGACATGCTTGGTATAAAGACACCGCTTCAACAGCTATTCCTGCCATTGCAGAGCAAGGCGCCAACACGATTCGTATTGTTTTATCAGATGGCGGTCAATGGGAAAAAGACGACATTGACACCATTCGTGAAGTCATTGAGCTTGCGGAGCAAAATAAAATGGTGGCTGTCGTTGAAGTTCATGATGCCACGGGTCGCGATTCGCGCAGTGATTTAAATCGAGCCGTTGATTATTGGATAGAAATGAAAGATGCGCTTATCGGTAAAGAAGATACGGTTATTATTAACATTGCAAACGAGTGGTATGGGAGTTGGGATGGCTCAGCTTGGGCCGATGGCTATATTGATGTCATTCCGAAGCTTCGCGATGCCGGCTTAACACACACCTTAATGGTTGATGCAGCAGGATGGGGGCAATATCCGCAATCTATTCATGATTACGGACAAGATGTGTTTAATGCAGATCCGTTAAAAAATACGATGTTCTCCATCCATATGTATGAGTATGCTGGTGGTGATGCTAACACTGTTAGATCAAATATTGATAGAGTCATAGATCAAGACCTTGCTCTCGTAATAGGTGAATTCGGTCATAGACATACTGATGGTGATGTTGATGAAGATACAATCCTTAGTTATTCTGAAGAAACTGGCACAGGGTGGCTCGCTTGGTCTTGGAAAGGCAACAGTACCGAATGGGACTATTTAGACCTTTCAGAAGACTGGGCTGGTCAACATTTAACTGATTGGGGGAATAGAATTGTCCACGGGGCCGATGGCTTACAGGAAACCTCCAAACCATCCACCGTATTTACAGATGATAACGGTGGTCACCCTGAACCGCCAACTGCTACTACCTTGTATGACTTTGAAGGAAGCACACAAGGGTGGCATGGAAGCAACGTGACCGGTGGCCCTTGGTCCGTAACAGAATGGGGTGCTTCAGGTAACTACTCTTTAAAAGCCGATGTAAATTTAACCTCAAATTCTTCACATGAACTGTATAGTGAACAAAGTCGTAATCTACACGGATACTCTCAGCTCAACGCAACCGTTCGCCATGCCAATTGGGGAAATCCCGGTAATGGCATGAATGCAAGACTTTACGTGAAAACGGGCTCTGATTATACATGGCATAGCGGTCCTTTTACACGTATCAATAGCTCCAACTCAGGAACAACGTTATCTTTTGATTTAAACAACATCGAAAATATCATCATGTTAGGGAAATAG(5)SEQ ID NO：4的信息(i)序列特征(A)长度：468个氨基酸(B)类型：氨基酸(C)拓扑学：线性(ii)分子类型：蛋白质(iii)序列描述：SEQ ID NO：4MKKKLSQIYHLIICTLIISVGIMGITTSPSAASTGFYVDGNTLYDANGQPFVMRGINHGHAWYKDTASTAIPAIAEQGANTIRIVLSDGGQWEKDDIDTIREVIELAEQNKMVAWEVHDATGRDSRSDLNRAVDYWIEMKDALIGKEDTVIINIANEWYGSWDGSAWADGYIDVIPKLRDAGLTHTLMVDAAGWGQYPQSIHDYGQDVFNADPLKNTMFSIHMYEYAGGDANTVRSNIDRVIDQDLALVIGEFGHRHTDGDVDEDTILSYSEETGTGWLAWSWKGNSTEWDYLDLSEDWAGQHLTDWGNRIVHGADGLQETSKPSTVFTDDNGGHPEPPTATTLYDFEGSTQGWHGSNVTGGPWSVTEWGASGNYSLKADVNLTSNSSHELYSEQSRNLHGYSQLNATVRHANWGNPGNGMNARLYVKTGSDYTWHSGPFTRINSSNSGTTLSFDLNNIENIIMLGK(6)SEQ ID NO：5的信息(i)序列特征(A)长度：1029个碱基对(B)类型：核酸(C)链型：单链(D)拓扑学：线性(ii)分子类型：DNA基因组(iii)序列描述：SEQ ID NO：5

5′ AAT TGG CGC ATA CTG TGT CGC CTG TGA ATC CTA ATG CCC AGC

AGA CAA CAA AAA CAG TGA TGA ACT GGC TTG CGC ACC TGC CGA ACC

GAA CGG AAA ACA GAG TCC TTT CCG GAG CGT TCG GAG GTT ACA GCC

ATG ACA CAT TTT CTA TGG CTG AGG CTG ATA GAA TCC GAA GCG CCA

CCG GGC AAT CGC CTG CTA TTT ATG GCT GCG ATT ATG CCA GAG GAT

GGC TTG AAA CAG CAA ATA TTG AAG ATT CAA TAG ATG TAA GCT GCA

ACG GCG ATT TAA TGT CGT ATT GGA AAA ATG GCG GAA TTC CGC AAA

TCA GTT TGC ACC TGG CGA ACC CTG CTT TTC AGT CAG GGC ATT TTA

AAA CAC CGA TTA CAA ATG ATC AGT ATA AAA ACA TAT TAG ATT CAG

CAA CAG CGG AAG GGA AGC GGC TAA ATG CCA TGC TCA GCA AAA TTG

CTG ACG GAC TTC AAG AGT TGG AGA ACC AAG GTG TGC CTG TTC TGT

TCA GGC CGC TGC ATG AAA TGA ACG GCG AAT GGT TTT GGT GGG GAC

TCA CAT CAT ATA ACC AAA AGG ATA ATG AAA GAA TCT CTC TAT ATA

AAC AGC TCT ACA AGA AAA TCT ATC ATT ATA TGA CCG ACA CAA GAG

GAC TTG ATC ATT TGA TTT GGG TTT ACT CTC CCG ACG CCA ACC GAGATT TTA AAA CTG ATT TTT ACC CGG GCG CGT CTT ACG TGG ATA TTGTCG GAT TAG ATG CGT ATT TTC AAG ATG CCT ACT CGA TCA ATG GATACG ATC AGC TAA CAG CGC TTA ATA AAC CAT TTG CTT TTA CAG AAGTCG GCC CGC AAA CAG CAA ACG GCA GCT TCG ATT ACA GCC TGT TCATCA ATG CAA TAA AAC AAA AAT ATC CTA AAA CCA TTT ACT TTC TGGCAT GGA ATG ATG AAT GGA GCG CAG CAG TAA ACA AGG GTG CTT CAGCTT TAT ATC ATG ACA GCT GGA CAC TCA ACA AGG GAG AAA TAT GGAATG GTG ATT CTT TAA CGC CAA TCG TTG AGT GAA TCC GGG ATC 3′(7)SEQ ID NO：6的信息(i)序列特征(A)长度：363个氨基酸(B)类型：氨基酸(C)拓扑学：线性(ii)分子类型：蛋白质(iii)序列描述：SEQ ID NO：6ydhT                                                    1LFKKHTISLLIIFLLASAVLAKPIEAHTVSPVNPNAQQTTKTVMNWLAHL 50ydhT                                                    51PNRTENRVLSGAFGGYSHDTFSMAEADRIRSATGQSPAIYGCDYARGWLE 100ydhT                                                    101TANIEDSIDVSCNGDLMSYWKNGGIPQISLHLANPAFQSGHFKTPITNDQ 150ydhT                                                    151YKNILDSATAEGKRLNAMLSKIADGLQELENQGVPVLFRPLHEMNGEWFW 200ydhT                                                    201WGLTSYNQKDNERISLYKQLYKKIYHYMTDTRGLDHLIWVYSPDANRDFK 250ydhT                                                    251TDFYPGASYVDIVGLDAYFQDAYSINGYDQLTALNKPFAFTEVGPQTANG 300ydhT                                                    301SFDYSLFINAIKQKYPKTIYFLAWNDEWSAAVNKGASALYHDSWTLNKGE 350ydhT                                                    351IWNGDSLTPIVE^*.363

Claims (8)

1.一种包括洗涤剂成分、甘露聚糖酶和蛋白酶的洗涤剂组合物。

2.按照权利要求1的洗涤剂组合物，其中所述甘露聚糖酶以占总组合物的0.0001-2％(重量)、优选0.0005-0.5％(重量)、更优选0.001-0.02％(重量)纯酶的水平存在。

3.按照权利要求1到2的洗涤剂组合物，其中所述蛋白酶以占所述组合物的0.0001-2％(重量)、优选0.001-0.2％(重量)、更优选0.005-0.1％(重量)纯酶的水平存在。

4.一种洗涤剂组合物，其中所述蛋白酶是来自IUPAC分类EC3.4.-.-的蛋白酶，优选来自IUPAC分类EC 3.4.21.-的内丝氨酸蛋白酶，更优选来自IUPAC分类EC 3.4.21.62的枯草芽孢杆菌蛋白酶和其变体。

5.按照前述权利要求任一项的洗涤剂组合物，还包括一种选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂和/或其混合物的表面活性剂。

6.按照前述权利要求中任一项的洗涤剂组合物，还包括一种漂白剂。

7.按照前述权利要求中任一项的洗涤剂组合物，还包括一种助洗剂，优选沸石、层状硅酸钠、三聚磷酸钠和/或其混合物。

8.用按照前述权利要求中任一项的提供清洁性能的洗涤剂组合物清洁织物、餐具或硬表面的方法。