CN104803902A - 1-(4-{1-[(e)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐 - Google Patents

Abstract

本发明涉及1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐、包含这种盐的药物组合物、用于形成这种盐的方法以及这种盐在医学治疗中的用途。此外，本发明还涉及化合物I的半富马酸盐形式的新型多晶型物、以及包含这些多晶型物的药物组合物、用于获得它们的方法以及它们在医学治疗中的用途。

Description

1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐

本申请是申请日为2009年12月16日、发明名称为“1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐”的中国专利申请200980151274.8的分案申请。

发明领域

本发明涉及1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(本文被称为化合物I)的新型盐形式、包含这种盐形式的药物组合物、用于形成这种盐形式的方法以及这种盐形式在医学治疗中的用途。此外，本发明还涉及本文所述的化合物I的新型盐形式的特定多晶型物、和包含这些多晶型物的药物组合物、用于获得它们的方法以及它们在医学治疗中的用途。

发明背景

鉴定可方便地制备、配制以及施用于患者的药物形式是非常重要的。

此外，重要的是，在口服药物组合物的制备中，药物是在施用于患者后提供可靠且可重现的血浆浓度的形式。

药物的化学稳定性、固态稳定性和“贮藏期限”也是特别重要的因素。药物及含有其的组合物应理想地能够被有效地储存相当长一段时间，而不呈现该活性组分的物理化学特性(例如其化学组成、密度、吸水性及溶解度)的显著改变。

此外，能够提供呈尽可能化学纯形式的药物也很重要。

已知无定形药物材料在此方面可能存在一些问题。例如，此等材料通常难以处理及配制，提供不可靠的溶解度，并且发现其通常不稳定且化学上不纯。

因此，熟练技术人员应了解，如果可容易地以稳定的结晶形式获得药物，则可解决许多上述问题。因此，在制备商业上可行且医药上可接受的药物组合物中，重要的是只要有可能就提供基本上结晶且稳定形式的药物。然而，应注意该目标未必能实现。的确，仅仅根据分子结构，通常不可能预测原样或呈盐形式的化合物的结晶性质如何。这仅可根据经验确定。

WO2004/103306，其全部内容以引用方式并入本文，揭示了能够抑制EDG受体的系列化合物。WO2004/103306教导了本文所公开的化合物是用于治疗由淋巴细胞介导的多种医学病况如移植排斥、自身免疫病况和癌症的潜在有用药剂。可能病况之全部列表引述于WO2004/103306的第13页第9行至第14页第3行。公开于WO2004/103306中的一种特定化合物是1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)，其结构如下所示。

然而，WO2004/103306未公开化合物I的任何盐或结晶形式。

发明概述

第一方面，提供化合物I的半富马酸盐。

另一方面，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A。

另一方面，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式B。

另一方面，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C。

另一方面，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D。

另一方面，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式E。

另一方面，提供用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的方法，其包括以下步骤：

(i)提供含有化合物I的半富马酸盐的溶液；及

(ii)使该溶液经受一段时间的降低的温度和/或压力条件以便形成化合物I的半富马酸盐的C型晶体。

附图概述

图1示出化合物I半富马酸盐的结晶形式A的代表性XRPD-衍射图。

图2示出化合物I半富马酸盐的结晶形式B的XRPD-衍射图。

图3示出化合物I半富马酸盐的结晶形式C的代表性XRPD-衍射图。

图4示出化合物I半富马酸盐的结晶形式D的XRPD-衍射图。

图5示出化合物I半富马酸盐的结晶形式A的代表性FT-拉曼光谱。

图6示出化合物I半富马酸盐的结晶形式B的代表性FT-拉曼光谱。

图7示出化合物I半富马酸盐的结晶形式C的代表性FT-拉曼光谱。

图8示出化合物I半富马酸盐的结晶形式D的代表性FT-拉曼光谱。

图9示出化合物I半富马酸盐的结晶形式E的FT-拉曼光谱。

发明内容

化合物I的半富马酸盐

我们已经发现，化合物I可以半富马酸盐形式获得，其具有许多有利的医药性质(包括例如有利的稳定性和低吸湿性)，这使得能够对其进行方便地处理、加工及配制用以向患者施用。

因此，第一方面，本发明提供化合物I的半富马酸盐。

化合物I的半富马酸盐可以以无定形存在或其可以以一种或多种结晶形式存在，如下进一步所述。

适宜地，化合物I的半富马酸盐基本上是结晶的。所谓“基本上结晶”意指如X射线粉末衍射数据所测定的结晶度便利地大于约20％、更便利地大于60％、甚至更便利地大于约80％、且优选大于约90％。

本发明的结晶形式可由X射线粉末衍射(XRPD)来表征。也可以使用其它技术例如FT-拉曼光谱法、示差扫描量热法(DSC)和动态蒸气吸附等。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式A

根据另一方面，本发明提供了化合物I的半富马酸盐的结晶形式A。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的特征在于，其提供基本上如图1所示的X射线粉末衍射图谱。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的最突出的X射线粉末衍射峰示于表1中：

表1–化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的最突出的峰

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝20.7°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝6.9°、17.5°、18.1°或20.7°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝6.9°、17.5°、18.1°和20.7°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝6.9°、10.1°、10.6°、12.1°、17.5°、18.1°或20.7°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝6.9°、10.1°、10.6°、12.1°、17.5°、18.1°或20.7°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约上表1中所示值处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式A，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图1所示的X射线粉末衍射图谱相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的特征进一步为FT-拉曼光谱基本上与图5所示的相同。

同样根据本发明，提供用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的方法，其包括以下步骤：

(i)提供含化合物I的半富马酸盐的溶液；及

(ii)使该溶液经受一段时间的降低的温度和/或压力条件以便形成化合物I的半富马酸盐的A型晶体。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式B

根据另一方面，本发明提供了化合物I的半富马酸盐的结晶形式B。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式B的特征在于，其提供基本上如图2所示的X射线粉末衍射图谱。

结晶形式B在2.7°(2-θ)处仅具有单一XRPD峰。

因此，根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式B，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝2.7°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式B，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图2中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式B的特征进一步为FT-拉曼光谱基本上与图6所示的相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式C

根据另一方面，本发明提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的特征在于，其提供基本上如图3所示的X射线粉末衍射图谱。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的最突出的X射线粉末衍射峰示于表2中：

表2–化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的最突出的峰

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝7°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝21.4°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝7°和21.4°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝7°、9.5°、12.5°、15.2°和21.4°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约上表2中所列2-θ值处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式C，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上如图3中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的特征进一步为FT-拉曼光谱基本上与图7所示的相同。

同样根据本发明，提供用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的方法，其包括以下步骤：

(i)提供含化合物I的半富马酸盐的溶液；和

(ii)使该溶液经受一段时间的降低的温度和/或压力条件以便形成化合物I的半富马酸盐的C型晶体。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式D

根据另一方面，本发明提供了化合物I的半富马酸盐的结晶形式D。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式D的特征在于，其提供基本上如图4所示的X射线粉末衍射图谱。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式D的最突出的X射线粉末衍射峰示于表3中：

表3–化合物I的半富马酸盐的结晶形式D的最突出的峰

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝10.7°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝21.5°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝10.7°和21.5°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝7.1°、10.7°或21.5°处具有至少一个特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝7.1°、10.7°和21.5°处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约上表3中所示的值处具有特征峰。

根据本发明，提供化合物I的半富马酸盐的结晶形式D，其中所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图4中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式D的特征进一步为FT-拉曼光谱基本上与图8所示的相同。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式E

根据另一方面，本发明提供了化合物I的半富马酸盐的结晶形式E。

化合物I的半富马酸盐的结晶形式E的特征在于，其提供基本上与图9中所示的相同的FT-拉曼光谱。

已发现化合物I的半富马酸盐的结晶形式、特别是结晶形式A具有特别良好的稳定性和低吸湿性。

本文所定义的术语“稳定性”包括化学稳定性和/或固态稳定性。

就“化学稳定性”而言，其包括可以以分离形式或以与药学上可接受的载体、稀释剂或佐剂混合提供的制剂形式(例如口服剂型，例如片剂、胶囊等)在标准储存条件下储存且化学降解或分解程度有限的相应化合物。

就“固态稳定性”而言，其包括可以以分离的固体形式或以与药学上可接受的载体、稀释剂或佐剂混合提供的固体制剂形式(例如口服剂型，例如片剂、胶囊等)在标准储存条件下储存且固态转化(例如结晶、再结晶、固态相转化、水合、脱水、溶剂化或去溶剂化)程度不明显的相应化合物。

本领域已知，可获得的X射线粉末衍射图谱根据测量条件(例如所用设备、样品制备或机器)而具有一种或多种测量误差。具体而言，众所周知X射线粉末衍射图谱中的强度可能随测量条件和样品制备而波动。例如，熟习X射线粉末衍射的技术人员应理解，峰的相对强度可受例如尺寸在30微米以上且不均一纵横比的颗粒的影响，这可影响试样分析。熟练技术人员也将认识到，反射位置可能受试样在衍射仪中所处的精确高度及衍射仪的零校正的影响。试样的表面平整度亦有小影响。因此本领域技术人员应理解，本文所示的衍射图谱数据不应理解为绝对值(进一步信息参见Jenkins，R&Snyder，R.L.‘Introduction to X-Ray Powder Diffractometry’John Wiley&Sons，1996)。因此，应理解，本发明的化合物I的半富马酸盐的结晶形式并不限于具有与附图中所示的X射线粉末衍射图谱相同的X射线粉末衍射图谱的晶体，具有基本上与附图中所示相同的X射线粉末衍射图谱的任何晶体均属于本发明范围内。熟习X射线粉末衍射的技术人员能够判定基本上相同的X射线粉末衍射图谱。

在定义化合物I的半富马酸盐的结晶形式的X射线粉末衍射峰的前述段落中，术语“在约”用于表达“…在约2-θ＝…”中以指示峰的精确位置(即所述的2-θ角度值)不应视为绝对值。在前述段落中亦陈述化合物I的半富马酸盐的结晶形式提供“基本上”与附图中所示X射线粉末衍射图谱相同的X射线粉末衍射图谱。应了解，在该上下文中使用的术语“基本上”亦意指示X射线粉末衍射图谱的2-θ角度值可因伴随这些测量的固有实验变化而具有轻微变化。因此，附图中所示的峰迹线不能视为具有绝对性。

通常，在X射线粉末衍射图中衍射角的测量误差为约2-θ＝0.2°或以下，在考量本文所述的X射线粉末衍射图谱数据时应将此程度的测量误差考虑在内。因此，例如，若陈述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝15.2°处具有至少一个特征峰时，则可理解为2-θ＝15.2°±0.2°。

同样，FT-拉曼光谱中个别峰的强度也可随涉及的样品和测量条件而有所轻微变化，但本领域技术人员应能够确定两个FT-拉曼光谱是否基本上相同。

制备方法

根据本发明的另一方面，提供制备化合物I的半富马酸盐的方法，所述方法包括将化合物I的游离碱与富马酸在适合溶剂存在下反应的步骤。

化合物I的游离碱可根据WO2004/103306的实施例3中所述的操作制备。

可使用任何适宜溶剂来形成化合物I的半富马酸盐，但所利用的溶剂及实验条件可影响所获得的半富马酸盐的固态形式。

本领域技术人员应能够选择适宜的反应时间和条件以实施成盐反应。

适宜地，将化合物I的游离碱与富马酸一起溶解于适宜的溶剂(例如所附实施例中所述的那些溶剂)。或者，可将化合物I的游离碱的溶液溶解于适宜溶剂中并与富马酸溶液(其溶解于相同或相容溶剂中)混合。适宜地，将该溶液搅拌以促进化合物I的游离碱与富马酸混合。可将环境温度混合该溶液，但也可在更高温度实施该操作。

本发明的化合物I的半富马酸盐形式可使用本领域技术人员所熟知的技术、例如倾析、过滤或离心加以分离。适宜地，通过过滤收集该盐。

该方法可另外包含用适宜溶剂洗涤化合物I的半富马酸盐及将该盐干燥的其它步骤。优选地，在真空下干燥经洗涤的盐。技术人员应理解，干燥温度和干燥时间可影响呈溶剂合物形式的化合物的固态性质(例如在升高的温度和/或压力下可发生去溶剂化)。

化合物I的半富马酸盐的特定结晶形式A至E可通过半富马酸盐自不同溶剂系统以及在不同条件下结晶来形成，如所附实施例中进一步阐述。

在一些情形中，化合物I的半富马酸盐的特定结晶形式可通过将化合物I的游离碱与富马酸在指定条件下反应来形成。在其它情形中，特定结晶形式可通过将化合物I的半富马酸盐在某些指定条件下重结晶来制备。

本发明还提供了用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式C的方法，其包括以下步骤：

(i)提供含有化合物I的半富马酸盐的溶液；及

(ii)使该溶液经受一段时间的降低的温度和/或压力条件以便形成化合物I的半富马酸盐的C型晶体。

在上述方法中，步骤(i)的溶液可通过将半富马酸盐溶解于适宜的溶剂中来提供。适宜溶剂的选择在本领域技术人员的能力范围之内。用于制备半富马酸盐的C型的适合溶剂的一个实例是醇，例如乙醇。

步骤(i)的溶液可在升高的温度即高于环境条件(例如25℃)的温度提供。升高的温度优选地为小于70℃、例如小于60℃、例如小于50℃或小于45℃。

自晶形A和C所产生的温度溶解度曲线可见，此两种形式在乙醇中于低于50℃的温度表现出相似的溶解度曲线(其中C型在高于50℃的温度表现出更高的溶解度)。然而，令人惊讶地，使用上述方法在低于50℃的温度可获得C型的高产率(例如大于60％、70％、80％、90％、99％)。不希望受理论限制，应认为此令人惊讶的结果归因于C型比A型表现出更快的沉淀动力学。

在使该溶液经受降低的温度和/或压力时，可降低温度、压力或两者。在优选的实施方案中，例如通过降低温度并随后降压压力来降低温度和压力两者。

使溶液经受降低的温度和/或压力条件的步骤后，可使溶液经受过滤步骤以便回收在该过程中形成的C型晶体。

在降低温度的实施方案中，温度降低可大于5℃。温度降低也可小于30℃、例如小于20℃或小于15℃。一方面，温度降低在8-12℃的范围内、例如约10℃。

在降低压力的实施方案中，可将压力降至小于200mBar的值，例如小于100mBar或小于50mBar。在降低压力时，压力通常大于10mBar。一方面，将压力降至10-30mBar范围内的值，例如约20mBar。

在降低半富马酸盐的温度和/或压力的步骤期间和/或之后(例如在通过例如过滤自溶液分离晶体前)于溶液中形成多晶型物C的晶体所需时间可视反应条件而定。一般而言，为了避免溶液中一旦形成的C型晶体的明显损失(例如通过转化为A型晶体)，时间应小于4小时，例如小于3小时，例如小于2小时或小于90分钟，例如约1小时。

为了自溶液获取C型晶体的最大产率，在降低半富马酸盐的温度和/或压力的步骤期间和/或之后(例如在通过例如过滤自溶液分离晶体前)于溶液中形成多晶型物C的晶体所需时间通常大于1分钟，例如大于5分钟或大于15分钟，例如大于30分钟。

为了优化C型的形成，即使其自溶液的形成最大化并使因转化为其它形式所致的损失最小化，时间可在30-90分钟的范围内，例如45-75分钟，例如约1小时。

本发明还提供了用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的方法，所述方法包括以下步骤：

(i)提供含有化合物I的半富马酸盐的溶剂；及

(ii)使液体经受一段时间的降低的温度和/或压力的条件，以便化合物I的半富马酸盐的A型晶体的形成发生。

在上述方法中，步骤(i)的溶液可通过将半富马酸盐溶解于适宜溶剂中来提供。适宜溶剂的选择是在本领域技术人员的能力范围内。用于制备半富马酸盐的A型的适宜溶剂的实例是醇，例如乙醇。该溶剂也可为醇(例如乙醇)与酸(例如富马酸)和任选的水的混合物，例如乙醇、富马酸和水的混合物，例如富马酸于80％:20％乙醇:水混合物中的4.35％饱和溶液。

含有化合物I的半富马酸盐的液体也可通过将溶剂(例如任何上述溶剂)用呈晶形的化合物I的半富马酸盐加晶种，例如以获得含有化合物I的半富马酸盐的晶体例如A型晶体的溶液。

步骤(i)的溶液可在升高的温度即高于环境温度(例如25℃)的温度提供。升高的温度优选地为小于70℃、例如小于60℃或小于55℃。升高的温度也可为大于30℃、例如大于40℃或45℃。一方面，升高的温度为约50℃。

在步骤(i)之后，在溶液含有化合物I的半富马酸盐的晶体的情形中，可通过温度循环来使该溶液循环，期间将溶液温度升至大于升高的温度的水平(例如溶液中所存在的80％以上、例如90％以上、例如99％以上、例如基本上所有晶体均为A型的水平)并随后降至低于升高的温度的水平(例如溶液中所存在晶体的80％以上、例如90％以上、例如99％以上、例如基本上所有晶体均为C型的温度)，之后再次将温度升至高于升高的温度的值。该循环阶段确保在使溶液经受上述阶段(ii)中的降低的温度和/或压力的条件之前晶体主要呈所需A型。此外，晶体自A型向C型转化以及再转化回来也可用来降低晶体内的杂质水平。可如上所述使该溶液循环一或多次，例如2次或2次以上，3次或3次以上，或者4次或4次以上。可使该溶液循环10次或10次以下，例如8次或8次以下，例如6次或6次以下。一方面，使该溶液循环1-3次，例如两次。

一方面，将温度升至高于升高的温度约20℃或以下，例如约15℃或以下，或约10℃或以下，例如约5℃或以下。也可将温度升至高于升高的温度约1℃或以上，例如约2℃或以上，例如3℃或以上。一方面，将温度升至高于升高的温度约3-10℃、例如约4-10℃，例如5-10℃，例如约5℃。

一方面，将温度降至低于升高的温度约20℃或以下，例如约15℃或以下，或约10℃或以下，例如约5℃或以下。可将温度降至低于升高的温度约1℃或以上，例如约2℃或以上，例如3℃或以上。一方面，可将温度降至低于升高的温度约3-10℃、例如约4-10℃，例如5-10℃，例如约5℃。

在循环期间，温度升高可与温度下降相同或不同，例如相同。一方面，将温度升高至高于升高的温度并随后降至低于升高的温度约20℃或以下，例如约15℃或以下，或约10℃或以下，例如约5℃或以下，例如约5℃。可选地或此外，将温度升高至高于升高的温度并随后降至低于升高的温度约3-10℃、例如约4-10℃，例如5-10℃，例如约5℃。

在使溶液经受降低的温度和/或压力条件时，可降低温度、压力或两者。在优选的实施方案中，降低温度与压力两者。温度可与压力同时、相继(例如降低温度并随后降低压力，或反而亦然)或分阶段(例如降低温度、降低压力并随后进一步降低温度)降低。

在分阶段降低温度和压力的实施方案中，优选首先将温度降至25℃或更高的温度，之后使溶液经受降低的压力条件，该初始温度也优选地为小于35℃，例如约30℃。随后将该溶液经受降低的压力条件。

在使溶液经受降低的温度和/或压力条件的步骤后，可使溶液经受过滤步骤以便回收在该过程中所形成的A型晶体。

在降低温度的实施方案中，总温度降低可为大于5℃、例如大于10℃、大于15℃、大于20℃或大于25℃。温度降低也可为小于40℃、例如小于30℃、例如小于20℃。一方面，温度降低在35-25℃的范围，例如约30℃。

为了使晶形A的量最大化，优选温度降低缓慢进行，例如以10℃/小时或以下、例如8℃/小时或以下、6℃/小时或以下、或4℃/小时或以下的速率。也可以以大于1℃/小时、例如大于2℃/小时的速率降低温度。

在降低压力的实施方案中，可将压力降至小于300mBar，例如小于200mBar或小于100mBar的值。当降低压力时，压力通常应大于30mBar。一方面，将压力降至约100mBar的值。通常使用压力降低以将溶剂水平降低例如5％以上、例如10％以上、例如15％以上。可将溶剂水平降低50％以下、例如40％以下，例如30％以下或20％以下。

在降低半富马酸盐的温度和/或压力的步骤期间和/或之后(例如在通过例如过滤自溶液分离晶体前)于溶液中形成多晶型物A所需的时间可视反应条件而定。一般而言，为了促进A型晶体形成，时间可为2小时以上，例如3小时以上，例如4小时以上或5或6小时以上。时间也可为36小时以下，例如24小时以下，例如12或8小时以下。

在优选的方面，提供用于制备化合物I的半富马酸盐的结晶形式A的方法，其包括以下步骤：

(i)提供含有化合物I的半富马酸盐的溶剂，其中该溶液在升高的温度提供并含有呈晶形的半富马酸盐；及

(ii)使液体经受一段时间的降低的温度和/或压力条件，以便进行化合物I的半富马酸盐的A型晶体的形成。

其中在步骤(ii)之前，通过温度循环使该溶液循环，期间将溶液温度升至大于升高的温度的水平并随后降至低于升高的温度的水平，之后再次将温度升至高于升高的温度的值。

在该方面，升高的温度可为约50℃。

在该方面，可将温度升至升高的温度以上且随后降至低于升高的温度约3-10℃、例如约4-10℃。

在该方面，步骤(ii)中的温度降低可分阶段实施，即降低温度，降低压力并随后再次降低温度。首先可将温度降至25-35℃的值、例如约30℃，之后降低压力。随后将温度降至约20-25℃、例如约20℃。

其它实验详细内容提供于各实施例中。

药物制剂及医学用途

根据本发明，化合物I的半富马酸盐(包括本文所定义的结晶形式A至E中的任一种)可经口、静脉内、皮下、口腔、直肠、真皮、鼻、气管、支气管、通过任何其它胃肠外途径施用、或经由吸入、以在可药用剂型中包含该盐或其结晶形式A至E之一的药物制剂形式施用。

因此，通常，本发明的化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)可经口或胃肠外(本文所用的“胃肠外”是指包括以下施用方式：静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下及关节内注射和输注)施用于宿主。在较大动物例如人的情形中，化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)可单独施用或作为与药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体组合的组合物形式施用。

根据病症及待治疗的患者以及施用途径，化合物I的半富马酸盐(包括结晶形式A至E中的任一种)可以以不同剂量(参见下文)施用。

化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)可在配制成适宜的药物制剂之前进一步处理，例如可将其研磨或磨碎成较小颗粒。

根据本发明的另一方面，提供药物组合物，其包含本文所定义的化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)和药学上可接受的佐剂、稀释剂或载体。

此组合物中所用的本发明化合物I的半富马酸盐的量可随病况及待治疗的患者以及所使用的一种或多种结晶形式而定，而且不需创造性龙洞即可确定。

用于胃肠外注射的本发明的药物组合物适宜地包括药学上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散液、混悬液或乳剂以及在临用前重构成可注射溶液或分散液的无菌粉末。适合的水性或非水性载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其适宜的混合物，植物油(例如橄榄油)及可注射有机酯例如油酸乙酯。可例如通过下述各项来维持适当的流动性：利用卵磷脂等包衣材料、在分散液情形中维持所需粒度和利用表面活性剂。

这些组合物也可包含佐剂，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可通过纳入各种抗菌和抗真菌剂、例如对羟基苯甲酸、氯丁醇或苯酚山梨酸来确保防止微生物的作用。还可期望包括等渗剂，例如糖或氯化钠。可通过纳入延缓吸收的试剂(例如单硬脂酸铝和明胶)来实现可注射药物形式的延长吸收。

在一些情形中，为了延长药物效果，期望延缓自皮下或肌内注射的药物的吸收。这可通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬液来实现。则药物吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率可取决于晶体尺寸和结晶形式。可选地，胃肠外施用的药物形式的延迟吸收可通过将药物溶解或悬浮于油性媒介物中来实现。

可注射储库形式可适宜地通过在生物可降解聚合物、例如聚乳酸-聚乙醇酸交酯中形成药物的微囊基质来制备。根据药物与聚合物的比率及所用特定聚合物的性质可控制药物释放速率。其它生物可降解聚合物包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储库可注射制剂也可通过将药物包裹于与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。可注射制剂可例如通过经细菌截留滤器过滤或通过在无菌固体组合物形式中掺入灭菌剂来灭菌，该无菌固体组合物形式可在临用前溶解或分散于无菌水或或其它无菌可注射介质中。

经口施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒剂。在此类固体剂型中，化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)通常与至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或一种或多种以下混合：a)填充剂或增容剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖和硅酸；b)粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，例如甘油；d)崩解剂，例如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐及碳酸钠；e)溶液阻滞剂，例如石蜡；f)吸收促进剂，例如季铵化合物；g)湿润剂例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，例如高岭土和膨润土以及i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，剂型也可包含缓冲剂。类似类型的固体组合物也可以用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，例如使用赋形剂如乳糖以及高分子量聚乙二醇。

适宜地，口腔制剂包含溶解助剂。溶解助剂的同一性不受限制，只要其是可药学上可接受的。实例包括非离子表面活性剂，例如蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如脱水山梨糖醇三油酸酯)、聚乙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基醚、甲氧基聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚乙二醇脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基胺、聚氧乙烯烷基硫醚、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、聚氧乙烯甘油脂肪酸酯、季戊四醇脂肪酸酯、丙二醇单脂肪酸酯、聚氧乙烯丙二醇单脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、脂肪酸烷基醇酰胺(fatty acid alkylolamides)和氧化烷基胺；胆汁酸及其盐(例如鹅脱氧胆酸、胆酸、去氧胆酸、去氢胆酸及其盐，及甘氨酸或其牛磺酸轭合物)；离子型表面活性剂，例如月桂硫酸钠、脂肪酸皂类、烷基磺酸盐、烷基磷酸盐、醚磷酸盐、碱性氨基酸脂肪酸盐；三乙醇胺皂和烷基季铵盐；和两性表面活性剂，例如甜菜碱类及氨基羧酸盐。

可使用例如肠溶包衣和药物配制领域所熟知的其它包衣等包衣及外壳制备片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型。它们可任选地含有遮光剂并且也可具有仅在或优选在肠道某一部分和/或以延迟方式释放活性成分的组成。埋入组合物的实例包括聚合物质和蜡类。

化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)也可酌情呈含有一种或多种上述赋形剂的微胶囊形式。

化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)可呈微细形式，例如其可微粉化。

经口施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液剂、混悬液、糖浆剂或酏剂。除了化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)之外，液体剂型可包含本领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(具体而言棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可包括佐剂，例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、增甜剂、调味剂和增香剂。除了活性化合物之外，悬浮液可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂-琼脂和黄蓍胶及其混合物。

用于直肠或阴道施用的组合物优选为栓剂，其可通过将本发明的化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)与适宜的无刺激性赋形剂或载体如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，该赋形剂或载体在室温为固体但在体温为液体，因此可在直肠或阴道腔内融化并释放活性化合物。

化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)还可以以脂质体的形式施用。如本领域所知，脂质体通常源自磷脂类或其它脂质物质。脂质体可通过分散于水性介质中的单层或多层水合液晶形成。可以使用任何非毒性、生理上可接受的、能够形成脂质体的可代谢脂质。除本发明的化合物之外，呈脂质体形式的本发明组合物可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是天然和合成的磷脂类和磷脂酰胆碱类(卵磷脂)。用于形成脂质体的方法在本领域是已知的，例如Prescott编辑，Methods inCell Biology，第XIV卷，Academic Press，New York，N.Y.(1976)，第33页以及下列。

有利地，本发明的化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E中的任一种)可具有口服活性，具有快速活性发动和低毒性。

本发明药物组合物中化合物I半富马酸盐的实际剂量水平可有所变化，以便获得有效实现对特定患者、组合物和施用方式的期望治疗反应的活性药物量。所选的剂量水平将视化合物活性、施用途径、所治疗病况的严重性和所治疗患者的身体状况及先前用药史而定。然而，本领域技术涵盖以低于实现期望治疗效果所需的量开始化合物剂量，且逐渐增加剂量直至实现期望效果。

WO2004/103306在实施例3(第29页第1至15行)公开了本发明的化合物I，并且其也作为优选化合物列表(第8页第19行至第11页第28行)之一提及。此外，WO2004/103306也教导本文所述的化合物是EDG受体的有效抑制剂，因此是用于治疗与淋巴细胞相互作用相关、其中EDG受体活性变化对疾病的病状和症状有作用的疾病的有用药剂。

因此，化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E)可用于治疗由淋巴细胞相互作用介导的疾病或病症，例如在移植中，例如细胞、组织或器官同种或异种移植物的急性或慢性排斥或延迟移植物功能、移植物抗宿主疾病；自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎、多发性硬化症、重症肌无力、I型或II型糖尿病及与其相关的病症、脉管炎、恶性贫血、Sjoegren综合征、葡萄膜炎、银屑病、格雷夫斯氏眼病(Graves ophthalmophy)、斑秃及其它；过敏型疾病，例如过敏性哮喘、特应性皮炎、过敏性鼻炎/结膜炎、过敏性接触性皮炎；任选具有潜在异常反应的炎症型疾病，例如炎症性肠病、局限性回肠炎或溃疡性结肠炎、内源性哮喘、炎症性肺损伤、炎症性肝损伤、炎症性肾小球损伤、动脉粥样硬化、骨关节炎、刺激性接触性皮炎及其它湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、免疫介导病症的皮肤症状、炎症性眼病、角膜结膜炎、炎症性肌病；心肌炎或肝炎；缺血/再灌注损伤，例如心肌梗塞、中风、肠道缺血、肾衰竭或出血性休克、外伤性休克、T细胞淋巴瘤或T细胞白血病；感染性疾病，例如中毒性休克(例如超抗原所诱导的)、脓毒性休克、成人呼吸窘迫综合征或病毒性感染，例如AIDS、病毒性肝炎、慢性细菌型感染；肌肉疾病，例如多肌炎(polymyositis)；或老年性痴呆。细胞、组织或实体器官移植物的实例包括例如胰岛、干细胞、骨髓、角膜组织、神经元组织、心、肺、联合心-肺、肾、肝、肠、胰脏、气管或食道。对于上述用途，所需剂量当然随施用方式、拟治疗的特定病况和所期望的效果而变化。

此外，化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E)潜在可用于癌症化学治疗，具体而言用于实体肿瘤如乳癌的化学治疗，或作为抗血管生成剂。

此外，化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E)可用于治疗多种外周神经病变，具体而言是急性或慢性脱髓鞘性神经病变。因此，化合物I的半富马酸盐可用于治疗Guillain-Barré综合征(GBS)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根病变(polyradiculoneuropathy)(CIDP)、具有传导阻滞的多病灶性运动神经病变(MMN)和副蛋白血症性(paraproteinaemic)脱髓鞘性外周神经病变(PDN)中的一种或多种。具体而言，该病变是CIPD。此类化合物的有效性在患者间可能不同。

化合物I的半富马酸盐(包括其结晶形式A至E)潜在可用于治疗多发性硬化症、葡萄膜炎、炎症性肠病、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、感染型疾病(例如病毒性感染)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根病变(CIDP)，尤其多肌炎。

化合物的治疗用途可包括预防性用途，以预防、控制或降低个体所处危患有的外周神经病的严重性，以及治疗用途，以控制或降低现有疾病的严重性。可在症状发作前施用化合物；其可在症状发作后施用。可将其施用于处危患外周神经病变的个体。

因此，可使用化合物I的半富马酸盐的治疗，可改善、维持或延缓患有或处危患有外周神经病变的患者的医学病况的恶化和/或舒适感。

术语“治疗”包括缓解外周神经病变的一种或多种病状或延缓此疾病进展的治疗；其也包括治愈此疾病、使个体处于功能状态和/或使个体维持于功能状态中、或延长复发时间的治疗。

所需剂量当然将根据施用模式、拟治疗的特定病况和期望效果而变化。一般而言，已指出以约0.01-500mg/kg患者体重/天的日剂量经全身性施用获得满意结果，该剂量可以以单一或多剂量施用。剂量水平可以是约0.1至约250mg/kg/天；例如约0.5-约100mg/kg/天。适宜的剂量水平可以是约0.01至250mg/kg/天、约0.05至100mg/kg/天、或约0.1至50mg/kg/天。在该范围内，剂量可以是0.05至0.5mg/kg/天、0.5至5mg/kg/天或5至50mg/kg/天。对口服施用而言，可以以含有1.0至1000毫克活性成分，特别是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0或1000.0毫克活性成分的片剂形式提供组合物。此类化合物可以按1至4次/天、优选1次或2次/天的方案施用。剂量方案可经调整以提供优化的治疗反应。

根据上文，本发明还提供了：

1.01在需要这种治疗的个体中预防或治疗由淋巴细胞介导的病症或疾病例如如上所述的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.02在需要这种治疗的个体中预防或治疗器官或组织移植排斥、移植物对宿主病、自身免疫疾病、过敏性疾病、炎症性疾病或病况、或肌肉疾病的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.03在需要这种治疗的个体中预防或治疗急性或慢性移植排斥或T细胞介导的炎症性或自身免疫疾病、例如如上所述的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.04在需要这种治疗的个体中抑制或控制失调性血管生成、例如鞘氨醇-I-磷酸酯(SIP)介导的血管生成的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.05在需要这种治疗的个体中预防或治疗新血管生成过程介导的或与失调性血管生成相关的疾病的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.06在需要这种治疗的个体中预防或治疗癌症的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.07在需要这种治疗的个体中预防或治疗外周神经病变的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.08在需要这种治疗的个体中预防或治疗外周神经病变的方法，所述外周神经病变选自Guillain-Barré综合征、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根病变(CIDP)、具有传导阻滞的多病灶性运动神经病变(MMN)和副蛋白血症性脱髓鞘性外周神经病变(PDN)，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.09在需要这种治疗的个体中防或治疗慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根病变(CIPD)的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.10在需要这种治疗的个体中预防或治疗多发性硬化症的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.11在需要这种治疗的个体中预防或治疗葡萄膜炎的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.12在需要这种治疗的个体中预防或治疗炎症性肠病、局限性回肠炎或溃疡性结肠炎的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.13在需要这种治疗的个体中预防或治疗炎症性肠病的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.14在需要这种治疗的个体中预防或治疗局限性回肠炎的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.15在需要这种治疗的个体中预防或治疗溃疡性结肠炎的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.16在需要这种治疗的个体中预防或治疗感染性疾病(例如细菌或病毒感染)的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.17在需要这种治疗的个体中预防或治疗病毒感染的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

1.18在需要这种治疗的个体中预防或治疗多肌炎的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种；

2.本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种，其用作药物。

2.1本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种，其用作药物，用于以上段落1.01至1.18中所定义方法中的任一种，或用于治疗前文所提及的医学病况中的任一种；

3.药物组合物，例如用于以上段落1.01至1.18中所定义方法中的任一种或用于治疗前文所提及的医学病况中的任一种，其包含本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种以及其药学上可接受的稀释剂或载体。

4.本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种，用于制备药物组合物，该药物组合物用于以上段落1.01至1.18中所定义方法中的任一种，或用于治疗前文所提及的医学病况中的任一种。

本发明还涉及本文所定义的化合物I的半富马酸盐或其结晶形式A至E中的任一种在制备用于前文或以上段落1.01至1.18中所提及的医学病况中的任一种的药剂中的用途。

组合疗法

化合物I的半富马酸盐可作为唯一活性成分施用，或例如作为佐剂与其它药物例如免疫抑制剂或免疫调节剂或其它抗炎剂、例如用于治疗或预防同种或异种移植物急性或慢性排斥或炎症性或自身免疫病症或化疗剂、例如恶性细胞抗增殖剂结合施用。例如，化合物I的半富马酸盐可与以下组合使用：钙调磷酸酶抑制剂，例如环孢菌素A或FK 506；mTOR抑制剂，例如雷帕霉素、40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素、CCI779、ABT578或AP23573；具有免疫抑制剂性质的子囊霉素，例如ABT-281,ASM981等；皮质类固醇；环磷酰胺；咪唑硫嘌呤(azathioprene)；氨甲喋呤；来氟米特；咪唑立宾；麦考酚酸；麦考酚酸吗乙酯；15-脱氧精胍菌素或其免疫抑制同系物、类似物或衍生物；免疫抑制单克隆抗体，例如对白细胞受体的单克隆杭体，例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CDB、CD25、CD28、CD40、CD45、CD58、CD80、CD86或其配体；其它免疫调节化合物，例如具有至少一部分CTLA4或其突变体的胞外域的重组结合分子，例如与非-CTLA4蛋白序列结合的CTLA4或其突变体的至少细胞外部分，例如CTLA4Ig(例如命名为ATCC 68629)或其突变体，例如LEA29Y；粘附分子抑制剂，例如LFA-I拮抗剂、ICAM-1或-3拮抗剂、VCAM-4拮抗剂或VLA-4拮抗剂；或者化疗剂。

术语“化疗剂”表示任何的化疗剂，且包括但不限于：

i.芳香酶抑制剂，

ii.抗雌激素药、抗雄激素药(特别是患前列腺癌时)或戈那瑞林(gonadorelin)激动剂，

iii.拓扑异构酶I抑制剂或拓扑异构酶II抑制剂，

iv.微管活化剂、烷化剂、抗肿瘤抗代谢药物或铂化合物，

v.靶向/降低蛋白或脂质激酶活性或者蛋白或脂质磷酸酶活性的化合物，其它抗血管生成化合物或诱导细胞分化过程的化合物，

vi.缓激肽1受体或血管紧张素II拮抗剂，

vii.环加氧酶抑制剂、二膦酸化合物、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、类肝素酶(heparanase)抑制剂(防止硫酸乙酰肝素降解)如PI-88、生物应答修饰剂、优选淋巴因子或干扰素如干扰素γ、遍在蛋白化抑制剂或能阻断抗细胞凋亡途径的抑制剂，

viii.Ras致癌同种型抑制剂，例如H-Ras、K-Ras或N-Ras，或法尼基转移酶抑制剂，例如L-744,832或DK8G557，

ix.端粒末端转移酶抑制剂，例如telomestatin，

x.蛋白酶抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、蛋氨酸氨基肽酶抑制剂，例如bengamide或其衍生物，或蛋白体抑制剂，例如PS-341，和/或

xi.mTOR抑制剂。

如本文所用的术语“芳香酶抑制剂”涉及能抑制雌激素生成，也就是底物雄烯二酮和睾酮分别向雌酮和雌二醇转化的化合物。该术语包括但不限于类固醇，尤其阿他美坦(atamestane)、依西美坦和福美坦，以及特别是非类固醇，尤其氨鲁米特、罗谷亚胺(roglethimide)、吡鲁米特(pyridoglutethimide)、曲洛司坦(trilostane)、睾内酯(testolactone)、酮康唑、伏氯唑、法倔唑、阿那曲唑和来曲唑。包含芳香酶抑制剂化疗剂的本发明的组合对于治疗激素受体阳性肿瘤如乳腺瘤是特别有用的。

本文所用的术语“抗雌激素”涉及在雌激素受体水平上拮抗雌激素效应的化合物。该术语包括但不限于他莫昔芬、氟维司群、雷洛昔芬和盐酸雷洛昔芬。包含抗雌激素化疗剂的本发明的组合对于治疗雌激素受体阳性肿瘤如乳腺瘤是特别有用的。

本文所用的术语“抗雄激素”涉及能够抑制雄性激素生物学效应的任何物质，包括但不限于比卡鲁胺。

如本文所用的术语“戈那瑞林激动剂”包括但不限于阿巴瑞克、戈舍瑞林和乙酸戈舍瑞林。

本文所用的术语“拓扑异构酶I抑制剂”包括但不限于拓扑替康、伊立替康、9-硝基喜树碱和大分子喜树碱缀合物PNU-166148(WO 99/17804中的化合物A1)。

本文所用的术语“拓扑异构酶II抑制剂”包括但不限于蒽环素类(anthracyclines)如阿霉素、柔红霉素、表柔比星、伊达比星和奈莫比星(nemorubin)，蒽醌类的米托蒽醌和洛索蒽醌，和鬼臼毒素类的依托泊苷和替尼泊苷。

术语“微管活性剂”涉及微管稳定化与微管去稳定化剂，包括但不限于紫杉烷类如泰素(paclitaxel)和多西他赛(docetaxel)，长春花属生物碱，例如长春碱，尤其硫酸长春碱，长春新碱，尤其硫酸长春新碱，和长春瑞滨，海绵内酯(discodermolides)和埃坡霉素及其衍生物，例如埃坡霉素B或其衍生物。

本文所用的术语“烷基化剂”包括但不限于白消安、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、苯丙氨酸氮芥或亚硝基脲(BCNU或GliadeI^TM)。

术语“抗肿瘤抗代谢物”包括但不限于5-氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、阿糖胞苷、氟达拉滨、硫鸟嘌呤、甲氨喋呤和依达曲沙。

本文所用的术语“铂化合物”包括但不限于卡铂、顺铂和奥沙利铂。

如本文所用的术语“靶向/降低蛋白或脂质激酶活性的化合物或其它抗血管生成化合物”包括但不限于蛋白酪氨酸激酶和/或丝氨酸和/或苏氨酸激酶抑制剂或脂质激酶抑制剂，例如靶向、降低或抑制以下活性的化合物：受体酪氨酸激酶的表皮生长因子家族(EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4作为均或杂二聚物)、受体酪氨酸激酶的血管内皮生长因子家族(VEGFR)、血小板源性生长因子受体(PDGFR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、胰岛素样生长因子受体-1(IGF-IR)、Trk受体酪氨酸激酶家族、Axl受体酪氨酸激酶家族、Ret受体酪氨酸激酶、KitlSCFR受体酪氨酸激酶、c-Ab1家族成员及其基因融合物(例如BCR-Ab1)、蛋白激酶C(PKC)和丝氨酸/苏氨酸激酶的Raf家族成员、MEK、SRC、JAK、FAK、PDK或PI(3)激酶家族成员或与PI(3)激酶有关的激酶家族成员、和/或细胞周期蛋白依赖性激酶家族(CDK)成员，和具有其它例如与蛋白或脂质激酶抑制无关的活性机理的抗血管生成化合物。

靶向、降低或抑制VEGFR活性的化合物尤其是抑制VEGF受体酪氨酸激酶、抑制VEGF受体或与VEGF结合的化合物、蛋白质或抗体，特别是在下列文献中一般和具体公开的那些化合物、蛋白质和单克隆抗体：WO 98/35958，例如1-(4-氯苯氨基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪或其可药用盐，如琥珀酸盐；WO 00/127820中的例如N-芳基(硫代)氨基苯甲酸酰胺衍生物，例如2-[(4-吡啶基)甲基]氨基-N-[3-甲氧基-5-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺或2-[(1-氧化-4-吡啶基)甲基}氨基-N-[3-三氟甲基苯基}苯甲酰胺，或者WO00/09495、WO 00/159509、WO 98/11223、WO 00/27819和EP 0769947中的那些；如M.Prewett等人在Cancer Research 59(1999)5209-5218中、F.Yuan等人在Proc.Natl.Acad.Sci.USA，第93卷，第14765-14770页，1996年12月中、Z.Zhu等人在Cancer Res.58，1998，3209-3214中和J.Mordenti等人在Toxicologic Pathology，第27卷第1期，第14-21页，1999中描述的那些；WO 00/37502和WO 94/10202中的那些；M.S.O'Reilly等人在Cell 79，1994，315-328中描述的Angiostatin TM；M.S.O'Reilly等人在Cell 88，1997，277-285中描述的Endostatin TM；氨基苯甲酸酰胺类；ZD4190；ZD6474；SU5416；SU6668；或抗VEGF抗体或抗-VEGF受体抗体，例如RhuMab。

抗体表示完整的单克隆抗体、多克隆抗体、由至少两种完整抗体形成的多特异性抗体以及抗体碎片，只要它们显示出所需的生物活性即可。

靶向、减小或抑制表皮生长因子受体家族活性的化合物尤其是抑制EGF受体酪氨酸激酶家族成员如EGF受体、ErbB2、ErbB3和ErbB4或结合EGF或EGF有关配体的化合物、蛋白质或抗体，或者是对ErbB及VEGF受体激酶具有双重抑制作用的那些，它们特别是在下述文献中概括和具体公开的那些化合物、蛋白质和单克隆抗体：WO 97/02266，如实施例39的化合物，或者EP 0564409、WO 99/03854、EP 0520722、EP 0566226、EP 0787722、EP 0837063、US 5,747,498、WO 98/10767、WO 97/30034、WO 97/49688、WO 97/38983，尤其是在WO 96/30347(例如称为CP 358774的化合物)、WO 96/33980(例如化合物ZD 1839)及WO 95/03283(例如化合物ZM105180)或PCT/EP02/08780中公开的那些；例如曲妥单抗西妥昔单抗、Iressa、OSI-774、CI-1033、EKB-569、GW-2016、E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、E6.3或E7.6.3。

靶向、降低或抑制PDGFR活性的化合物尤其是抑制PDGF受体的化合物，例如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，如伊马替尼。

靶向、降低或抑制c-AbI家族成员及其基因融合产物活性的化合物例如是N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，如伊马替尼；PD180970；AG957或NSC680410。

靶向、降低或抑制蛋白激酶C、Raf、MEK、SRC、JAK、FAK和PDK家族成员或PI(3)激酶或与PI(3)激酶有关家族成员和/或细胞周期蛋白依赖性激酶家族(CDK)成员活性的化合物，尤其是EP 0296110中公开的星孢素衍生物如米哚妥林；其它化合物的实例包括例如UCN-Ol、沙芬戈(safingol)、BAY 43-9006、苔鲜抑素1、派立福辛(perifosine)；伊莫福新(Ilmofosine)；RO 318220和RO 320432；GO 6976；Isis 3521；或LY333531/LY379196。

其它抗血管生成化合物例如是沙利度胺(THALOMID)和TNP-470。

靶向、降低或抑制蛋白或脂质磷酸酶活性的化合物例如是磷酸酶1、磷酸酶2A、PTEN或CDC25的抑制剂，如冈田酸(okadaic acid)或其衍生物。

诱导细胞分化过程的化合物例如是视黄酸、α-、β-或γ-生育酚或α-、β-或γ-生育三烯酚。

本文所用的术语环加氧酶抑制剂包括但不限于例如塞来考昔罗非考昔etoricoxib、伐地考昔或5-烷基-2-芳基氨基苯基乙酸如5-甲基-2-(2’-氯-6’-氟苯胺基)苯基乙酸。

本文所用的术语组蛋白去乙酰酶抑制剂包括但不限于MS-275、SARA、pyroxamide、FR-901228或丙戊酸。

本文所用的术语“二膦酸化合物”包括但不限于依曲膦酸、氯膦酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、伊班膦酸、利塞膦酸和唑来膦酸。

本文所用的术语“基质金属蛋白酶抑制剂”包括但不限于胶原模拟肽和非模拟肽抑制剂、四环素衍生物例如氧肟酸模拟肽抑制剂巴马司他(batimastat)及其口服生物可接受类似物马立马司他、普啉司他(prinomastat)、BMS-279251、RAY12-9566、TAA211或AAJ996。

本文所用的术语“mTOR抑制剂”包括但不限于雷帕霉素(西罗莫司)或其衍生物，例如32-去氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32-去氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氢-雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氢-40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素及更优选的40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素。雷帕霉素衍生物的其它实例包括例如CCI779或40-[3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸盐]-雷帕霉素或其可药用盐，如USP 5,362,718中所公开；ABT578或40-(四唑基)-雷帕霉素、特别是40-表-(四唑基)-雷帕霉素，例如WO99/15530中所公开；或者是如例如WO 98/02441和W001/14387中公开的雷帕霉素类似物，例如AP23573。

当化合物I的半富马酸盐与其它免疫抑制剂、免疫调节剂、抗炎或化疗疗法组合施用时，共同施用的免疫抑制剂、免疫调节剂、抗炎或化疗化合物的剂量当然可以根据所共用药物的类型、例如它是类固醇还是钙调磷酸酶抑制剂、所用的具体药物和所治疗的病症等而变化。

为了治疗外周神经病变，化合物I的半富马酸盐可与可用于治疗外周神经病变、例如脱髓鞘外周神经病变的其它治疗剂一起施用。举例而言，第二治疗剂可以是免疫抑制剂(例如环孢菌素A、环孢菌素G、FK-506、ABT-281、ASM981、雷帕霉素、40-O-(2-羟基)乙基-雷帕霉素、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌呤、氨甲喋呤、来氟米特、咪唑立宾、麦考酚酸吗乙酯或15-脱氧精胍菌素)、类固醇(例如泼尼松或氢化可的松)、免疫球蛋白或1型干扰素。可同时或连续施用化合物I的半富马酸盐和第二活性剂。

根据上述，本发明在又一方面还提供了：

5.上文定义的方法，该方法包括共同施用、例如并行或依次施用治疗有效的非中毒量的化合物I的半富马酸盐以及至少第二种药物物质，例如免疫抑制剂、免疫调节剂、抗炎药物或化疗药物，例如上文所指出的；

6.药物组合，例如药盒，包含a)第一种药物，为如本文所公开的化合物I的半富马酸盐，及b)至少一种共用药物，例如免疫抑制剂、免疫调节剂、抗炎药物或化疗药物，例如上文所指出的。

该药盒可以包含其施用说明。

本文所用的术语“共同施用”或“组合施用”等意欲囊括给单个患者施用选定的治疗剂，并且意欲包括其中药物不一定通过相同施用途径或在相同时间施用的治疗方案。

如本文所用的术语“药物组合”表示将一种以上的活性成分混合或组合而得到的产品，包括活性成分的固定组合及非固定组合。术语“固定组合”表示以单一实体或剂量的形式给患者同时施用活性成分、例如化合物I的半富马酸盐及共用药物。术语“非固定组合”表示活性成分、例如化合物I的半富马酸盐及共用药物作为单独的实体同时、并行或没有具体时间限制地依次施用于患者，其中这种施用在患者体内提供这两种化合物的治疗有效水平。后者还应用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或三种以上活性成分。

实施例

通过以下实施例以及参考所附附图对本发明举例说明，但决不限制本发明。

一般操作

X射线粉末衍射

根据标准方法对所制备的样品进行X射线粉末衍射分析(XRPD)，所述方法例如在Giacovazzo，C.等人(1995)，Fundamentals of Crystallography，牛津大学出版社；Jenkins，R.和Snyder,R.L.(1996)，Introduction to X-RayPowder Diffractometry，John Wiley&Sons，纽约；Bunn，C.W.(1948)，Chemical Crystallography，Clarendon Press，伦敦；或Klug，H.P.&Alexander，L.E.(1974)，X-ray Diffraction Procedures，John Wiley和Sons，纽约中所述的方法。使用Bruker D8Advance Powder X-ray Diffactometer进行X射线分析。样品以粉末形式被分析并且以粉末形式放置在样品支架上。

XRPD衍射角(2-θ)可在±0.2°(2-θ)的范围内变化。

在一些以下实施例中，通过不同方法制备相同结晶形式。在这些情形中，引用相同的代表性表征数据，因为每个方法制备具有“基本上”相同XRPD衍射图谱的相同结晶形式。换言之，从相关图谱(考虑实验误差)清楚可见，相同的结晶形式已被制备。

示差扫描量热法

根据标准方法、例如那些在G.W.H.等人(1996)，DifferentialScanning Calorimetry，Springer，Berlin中所述的方法，使用Perkin ElmerDSC7仪器进行示差扫描量热法(DSC)。

动态蒸气吸附

使用DVS-1水蒸气吸附分析仪(Surface Measurement Systems Ltd.)或Projekt Messtechnik SPS11-100n进行动态蒸气吸附测量。将样品在50％r.h下保持平衡，然后开始预定的湿度方案(50-0-95-50％r.h.，用5％Δr.h.小时-1扫描，经历数个等湿平衡周期)。

傅里叶变换拉曼光谱法

在Bruker RFS100上进行FT-拉曼光谱法测量。

原料的制备

除非本文另有说明，否则可以如WO2004/103306的实施例3中所述制备化合物I的游离碱形式。

缩写

EtOH         乙醇

NaBH(OAc)₃   三乙酰氧基硼氢化钠

NaOH         氢氧化钠

MEK          2-丁酮

2PrOH        2-丙醇

THF          四氢呋喃

实施例1—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的制备

使用WO2004/103306的实施例3的方法制备30g化合物I。

然后通过在室温(25℃)将30.0g化合物I与20g富马酸(5％浓度)在200g无水乙醇(>99.9％)中反应，制备本发明的半富马酸盐。

然后将两种溶液经受升高的温度(40℃、50℃和60℃)的条件达一周时间，测试半富马酸盐溶液相对于游离碱溶液的稳定性。

半富马酸盐在测试的所有条件下表现出优异的稳定性。

实施例2—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式A的制备

方法1

将4-[1-(4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基)-乙基]-2-乙基-苯甲醛(4.32g)和氮杂环丁烷-3-甲酸(1.42g)悬浮于75ml甲醇中并且在23-27℃的温度搅拌15-30分钟。在23-27℃、在1-2小时内分批加入NaBH(OAc)₃(3.81g)。一旦反应完成，则蒸馏出甲醇。加入另外50mL乙酸乙酯，然后将其蒸馏出。在下一步骤中，将50mL乙酸乙酯、2.55mL甲醇和25mL水加至蒸馏残余物，搅拌混合物直至获得两个澄清相。通过加入2N NaOH将pH调节至pH 6，然后分离各相。用10ml水萃取有机相，浓缩至原体积的50％。然后，加入无水乙醇以恢复原始体积。将这些浓缩/蒸馏步骤和添加无水乙醇步骤重复两次。然后加入炭(0.43g)和Cellflock(0.43g)，将混合物在25℃的温度搅拌30分钟，然后过滤。然后将滤液浓缩至约50g，在45℃的温度加入0.87g固体形式的富马酸。当所有物质都溶解时，将溶液用60mg1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸,(E)-丁-2-烯二酸引晶。通过在40-45℃的温度搅拌1小时、然后在1-2小时内冷却至20-25℃并且在20-25℃搅拌另外15-20小时，完成结晶。过滤收集所得产物并洗涤，得到4.9g 1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸,(E)-丁-2-烯二酸，为白色粉末。

方法2

将化合物I的游离碱(400mg)和富马酸(89mg)加至2mL EtOH中。将混合物加热至50℃达2小时，然后在持续搅拌下冷却至室温。然后保持在冰箱中冰冷达72小时，真空过滤，收集白色固体。

方法3

将化合物I的游离碱(100mg)和1.5mL 0.125mM富马酸加至1mLEtOH中。将溶液加热至40℃，并蒸发至干。加入乙腈(2mL)，搅拌混合物。使用定性滤纸、通过真空过滤收集白色固体。

方法4

将化合物I的游离碱(100mg)和富马酸(22.4mg)加至2mL乙腈中。将溶液搅拌过夜，然后将混合物过滤以收集白色固体沉淀。

方法5—料浆法(slurry method)

将化合物I的游离碱(400mg)和富马酸(89mg)加至10mL乙腈中。将溶液超声处理，加热至40℃达30分钟，然后冷却至室温。再加入2mL乙腈将溶液搅拌另外2小时。然后将溶液转移至冰箱中放置72小时，真空过滤收集白色固体。

方法6

在70℃将化合物I的半富马酸盐的结晶形式A(33.9mg)溶解于3mLMEK中。然后将澄清、微黄色溶液直接贮存于冰箱中。在冰箱储存2天后，经P4玻璃滤器过滤收集白色沉淀，抽吸空气通过样品约3分钟。

方法7

在50℃、将化合物I的半富马酸盐的结晶形式A(34.6mg)溶解于5ml丙酮中，将所得澄清无色溶液直接储存在冰箱中。储存1天后，将白色沉淀滤过P4玻璃滤器，抽吸空气通过样品约3分钟。

方法8

在50℃的入口温度，将以80:20乙醇:水混合物中的4.35％饱和溶液形式存在的富马酸以4.35％饱和溶液形式分两次加至反应器。首先加入10％富马酸，接着在50℃的入口温度用结晶形式A(可通过以上方法1至7获得)引晶，然后于2小时内、在50℃的入口温度加入第二部分富马酸(90％量)。

然后将白色沉淀悬液加热至55℃并冷却至45℃两次，以便使多晶型物A稳定。

然后在5小时内缓慢冷却至30℃的套层温度(Jacket temperature)来完成结晶。然后在30℃的套层温度和100mbar的压力下蒸馏以在2小时内除去20％悬液量而使悬液减少，然后在20℃的内部温度冷却1小时。最后，过滤分离半富马酸盐的形式A，用ALANP洗涤，之后在40℃的套层温度和真空下干燥过夜。

结晶形式A的分析

XRPD分析表明，上述方法1至8的产物是1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式A，具有上表1中所列出的峰，XRPD迹线与图1所示的代表性迹线相同或基本上相同。由方法1至8产生的结晶形式A也提供了FT-拉曼光谱，其与图5所示的代表性迹线相同或基本上相同。

动态蒸气吸附测量表明，结晶形式A具有低吸湿性。

还测试了结晶形式A的压力稳定性，通过将几毫克该形式暴露于10ton的压力下5分钟来进行。在拉曼显微镜下分析初始样品和所得样品，观察到没有形式变化。

实施例3—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式B的制备

将49.7mg化合物I的半富马酸盐的结晶形式A溶解于10mL EtOH中，然后将澄清无色溶液滤过0.2μm PTFE滤器，使其在环境温度从9cm直径的结晶盘蒸发。2天后，观察到无色残余物，将其从盘中刮出。获得并分析所得白色细粉。

结晶形式B的分析

XRPD分析表明，该产物为1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式B，具有在2.7°(2-θ)处的单一峰，XRPD迹线如图2中所示。也发现结晶形式B具有图6中所示的FT-拉曼光谱。

实施例4—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式C的制备

方法1

在70℃、将103.9mg化合物I的半富马酸盐的结晶形式A溶解于2ml丙酮/水1:1中，然后将澄清无色溶液直接储存在冰箱中。储存1天后，用P4玻璃滤器将白色沉淀过滤，抽吸空气通过样品约3分钟。

方法2

在75℃、将35.0mg化合物I的半富马酸盐的结晶形式A溶解于1mL2PrOH中，然后将所形成的澄清无色溶液直接储存在冰箱中。储存1天后，用P4玻璃滤器将白色沉淀过滤，抽吸空气通过样品约3分钟。通过FT-拉曼光谱法和XRPD分析所得白色细粉。

方法3

将30.0g溶液化合物I和20g富马酸(5％浓度)在200g乙醇溶质(>99.9％)中的悬液加热至40℃套层温度。在200rpm搅拌速度下将40℃的温度保持1小时。之后将溶液冷却至30℃，将乙醇溶液在20mbar蒸馏直到溶液析出沉淀。通过直接过滤悬液来收集晶体，然后在40℃和10mbar下干燥8小时。获得80％的收率(即5.5g)。

结晶形式C的分析

对通过上述方法1和2所得的白色固体进行的XRPD分析表明，该产物为1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式C，具有上表2中所列出的峰，XRPD迹线与图3所示的代表性迹线相同或基本上相同。也发现结晶形式C具有与图7所示的代表性迹线相同或基本上相同的FT-拉曼光谱。动态蒸气吸附测量表明，结晶形式C不是吸湿性的。

实施例5—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式D的制备

将100.6mg化合物I的半富马酸盐的结晶形式A溶解于4.5mL THF中，获得澄清且无色的溶液。加入水作为反溶剂(5.1ml:8.2mL)，获得乳液类型。将混合物搅拌20分钟，加入2.5mL水，将溶液储存在冰箱中。2天后，白色沉淀已形成，用P4玻璃滤器分离。溶液并没有被很好的过滤。抽吸空气通过样品约2分钟，通过FT-拉曼光谱法和XRPD分析白色固体。6天后，在真空下将样品干燥另外15分钟，通过FT-拉曼光谱法和XRPD再次分析。

结晶形式D的分析：

对白色沉淀进行的XRPD分析表明，该产物为1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式D，具有上表2中所列出的峰，XRPD迹线如图4所示。也发现结晶形式D具有与图8所示的代表性迹线相同或基本上相同的FT-拉曼光谱。

实施例6—1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基- 苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物I)的半富马酸盐的结晶形式E的制备

将100.8mg化合物I的半富马酸盐的结晶形式A悬浮于1mL THF/水1:1中，用0.2μm PTFE滤器过滤，获得澄清且浅黄色溶液。加入1mL正己烷作为反溶剂，出现白色沉淀。然后将混合物搅拌另外5分钟，然后将其滤过0.45μm PTFE离心滤器，所有固体均通过滤器。用0.45μm PTFE离心滤器在更短的时间内将悬液再过滤，滗出上清液以使白色粉末分离。通过FT-拉曼光谱法分析湿滤饼，显示化合物I的半富马酸盐的结晶形式B的图谱。

然后将固体在环境温度于FT-拉曼样品支架中干燥。随后通过FT-拉曼光谱法分析样品，显示如图9中所示的结晶形式E的光谱。

Claims (10)

1.1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐。

2.根据权利要求1的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐，其为结晶形式A，其特征在于，所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱在约2-θ＝6.9°、10.1°、10.6°、12.1°、15.7°、16.2°、17.5°、18.1°、20.4°、20.7°、22.1°、24.0°、27.3°处具有特征峰。

3.根据权利要求2的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐的结晶形式A，其特征在于，所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图1中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

4.根据权利要求1的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐，其为结晶形式B，其特征在于，所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图2中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

5.根据权利要求1的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐，其为结晶形式C，其特征在于，所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图3中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

6.根据权利要求1的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐，其为结晶形式D，其特征在于，所述结晶形式的X射线粉末衍射图谱基本上与图4中所示的X射线粉末衍射图谱相同。

7.根据权利要求1的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐，其为结晶形式E，所述结晶形式的FT-拉曼光谱基本上与图9中所示的FT-拉曼光谱相同。

8.药物组合物，其包含根据权利要求1至7中任一项的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐和药学上可接受的佐剂、稀释剂或载体。

9.有效量的根据权利要求1至7中任一项的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐在制备用于在需要这种治疗的个体中预防或治疗由淋巴细胞介导的病症或疾病的药物中的用途。

10.有效量的根据权利要求1至7中任一项的1-(4-{1-[(E)-4-环己基-3-三氟甲基-苄氧基亚氨基]-乙基}-2-乙基-苄基)-氮杂环丁烷-3-甲酸的半富马酸盐在制备用于在需要这种治疗的个体中预防或治疗器官或组织移植排斥、移植物对宿主病、自身免疫疾病、过敏性疾病、炎症性疾病或病况、肌肉疾病的药物中的用途。