MX2012004373A

MX2012004373A - Metodos sinteticos para compuestos espiro-oxoindol.

Info

Publication number: MX2012004373A
Application number: MX2012004373A
Authority: MX
Inventors: Jean-Jacques Cadieux; Mikhail Chafeev; Sultan Chowdhury; Jianmin Fu; Jia Qi; Stefanie Abel; Emad El-Sayed; Elke Huthmann; Thomas Isarno
Original assignee: Xenon Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2009-10-14
Filing date: 2010-10-14
Publication date: 2012-06-28
Also published as: US9260446B2; RU2544852C2; CN102753556A; RU2015103694A; AU2010306768A1; JP2016130260A; ECSP12011815A; PE20121350A1; MA33730B1; MY179342A; MY165579A; US8742109B2; ES2467166T3; HK1197233A1; BR112012008993A2; CN102753556B; NZ712378A; KR20120099429A; US9695185B2; HK1174908A1

Abstract

Esta invención se dirige a métodos para preparar ciertos derivados de espiro-oxindol, que son útiles para el tratamiento y/o prevención de enfermedades o afecciones mediadas por el canal de sodio, tal como dolor.

Description

METODOS SINTETICOS PARA COMPUESTOS ESPIRO-OXOINDOL CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se dirige a métodos mejorados para preparar ciertos compuestos espiro-oxoindol asi como también varios intermedios involucrados con ellos. En particular, esta invención se dirige a métodos para preparar compuestos espiro-oxoindol, y sus sales farmacéuticamente aceptables, que son útiles en el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por el canal de sodio, tal como dolor, asi como también otras enfermedades y afecciones asociadas con la mediación de canales de sodio.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los canales de sodio tienen un grupo diverso de funciones en el mantenimiento de los estados normales y patológicos, que incluyen la función reconocida que cumplen desde hace tiempo los canales de sodio regulados por voltaje en la generación de actividad neuronal anormal y neuropática o el dolor patológico. El daño a los nervios periféricos posterior a trauma o enfermedad pueden resultar en cambios en la actividad del canal de sodio y el desarrollo de actividad aferente anormal que incluye descargas ectópicas provenientes de aferentes axotomisados y actividad espontánea de nocipetores intactos sensibilizados . Estos cambios pueden producir hipersensibilidad anormal prolongada hasta estímulos normalmente inocuos, o alodinia. Ejemplos de dolor neuropático incluyen, pero no se limitan a, neuralgia posherpética , neuralgia trigeminal, neuropatía diabética, dolor lumbar crónico, dolor de miembro fantasma, y dolor que resulta de cáncer y quimioterapia, dolor pélvico crónico, síndrome de dolor regional complejo y neuralgias relacionadas .

Ha habido algunos avances en el tratamiento de los síntomas de dolor neuropático al utilizar medicamentos, tal como gabapentina, y más recientemente pregabalina, como tratamiento de primera línea a corto plazo. Sin embargo, la farmacoterapia para el dolor neuropático de manera general ha tenido un éxito limitado para los fármacos que reducen el dolor comúnmente utilizados, tales como NSAIDS y opiatos. Por consiguiente, subsiste aún una necesidad considerable para explorar modalidades de tratamiento novedosas.

Aún queda un número limitado de bloqueadores de canal de sodio potentes efectivos con un mínimo de eventos adversos en la clínica. También hay una necesidad médica insatisfecha para tratar dolor neuropático y otros estados patológicos asociados al canal de sodio efectivamente y sin efectos secundarios adversos.

La Solicitud de Patente Publicada PCT No. WO 2006/110917, Solicitud de Patente Publicada PCT No. WO 2010/45251 y Solicitud de Patente PCT No. PCT/US2010/040187 describen ciertos compuestos espiro-oxoindol. Se describen estos compuestos como útiles para el tratamiento de enfermedades mediadas por canal de sodio, preferiblemente enfermedades relacionadas con dolor, afecciones del sistema nervioso central tal como epilepsia, ansiedad, depresión y enfermedad bipolar; afecciones cardiovasculares tales como arritmias, fibrilación auricular y fibrilación ventricular ; afecciones neuromusculares tales como síndrome de piernas inquietas; neuroprotección contra apoplejía, trauma neuronal y esclerosis múltiple; y canalopatías tales como eritromelalgia y síndrome de dolor rectal familiar.

También se describen métodos para preparar estos compuestos y composiciones farmacéuticas que los contienen en la Solicitud de Patente Publicada PCT No. WO 2006/110917, Solicitud de Patente Publicada PCT No. WO 2010/45251 y Solicitud de Patente PCT No. PCT/US2010/040187.

Subsiste, por lo tanto, una necesidad de métodos mejorados para preparar ciertos compuestos espiro-oxoindol. SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige a métodos para preparar ciertos compuestos espiro-oxoindol como estereoisómeros individuales o enantiómeros individuales, o mezclas de los mismos, o como sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Estos compuestos son útiles en el tratamiento de enfermedades y afecciones mediadas por canal de sodio, tal como dolor.

De acuerdo con lo anterior, en un aspecto, esta invención se dirige a un método para preparar un compuesto de la fórmula ( I ) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos; en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula ( 8 ) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, compuesto de la fórmula (9): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para proporcionar el compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos.

En otro aspecto, esta invención se dirige a un método para preparar un compuesto de la fórmula (I-S): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un compuesto de la fórmula (I-R) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde método comprende resolver un compuesto de la fórmula (I): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos; bajo condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (I-S), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un compuesto de la fórmula (I-R), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, esta invención se dirige a un método para preparar un compuesto de la fórmula (II): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos ; en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula ( 15 ) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un compuesto de la fórmula (16) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para proporcionar el compuesto de la fórmula (II), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos.

En otro aspecto, esta invención se dirige a un método para preparar un compuesto de la fórmula (II-S) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, compuesto de la fórmula (II-R) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde método comprende resolver un compuesto de la fórmula (II) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos; bajo condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (II-S), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un compuesto de la fórmula (II-R) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones Como se utiliza en la especificación y reivindicaciones adjuntas, a menos que se especifique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado indicado: "Amino" se refiere al sustituyente -NH2.

"Ciano" se refiere al sustituyente -CN.

"Hidroxilo" se refiere al sustituyente -OH .

"Imino" se refiere al sustituyente =NH.

"Nitro" se refiere al sustituyente -NO2.

"Oxo" se refiere al sustituyente =0.

"Trifluorometilo" se refiere al sustituyente -CF3.

"Analgesia" se refiere a una ausencia de dolor en respuesta a un estimulo que normalmente seria doloroso.

"Alodinia" se refiere a una afección en la que se percibe una sensación normalmente inofensiva, tal como presión o toque ligero, que es extremadamente dolorosa.

"Compuesto estable" y "estructura estable" pretenden indicar un compuesto que es suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento a un grado de pureza útil a partir de una mezcla de reacción y formulación en un agente terapéutico eficaz.

"Mamífero" incluye humanos y tanto animales domésticos como animales de laboratorio y mascotas, (por ejemplo, gatos, perros, cerdos, vacas, ovejas, cabras, caballos y conejos), y animales no domésticos tales como fauna y similares.

"Sal farmacéuticamente aceptable" incluye sales de adición ácida y básica. "Sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de las bases libres, y que no son bioló.gicamente o de otra forma indeseables y que se forman con ácidos orgánicos tales como, pero que no se limitan a, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos tales como, pero no limitados a, ácido acético, ácido 2 , 2-dicloroacét ico, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido aspártico, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido 4-acetamidobenzoico, ácido canfórico, ácido alcanfor-10-sulfónico, ácido cáprico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido carbónico, ácido cinámico, ácido cítrico, ácido ciclámico, ácido dodecilsulfúrico, ácido etano-1, 2 -disulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido glucoheptónico, ácido glucónico, ácido glucurónico, ácido glutámico, ácido glutárico, ácido 2-oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, glicólico, ácido hipúrico, ácido isobutírico, ácido láctico, ácido lactobiónico, ácido láurico, ácido maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido múcico, ácido naftaleno-1 , 5-disulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico, ácido l-hidroxi-2-naftoico, ácido nicotínico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico, ácido propiónico, ácido piroglutámico, ácido pirúvico, ácido salicíli o, ácido 4-aminosalicílico, ácido .sebácico, ácido esteárico, ácido succinico, ácido tartárico, ácido tiociánico, ácido p-toluenosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido undecilénico, y similares.

"Sal de adición básica farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que ' retienen la efectividad biológica y propiedades de las los ácidos libres, que no son biológicamente o de otra forma indeseables. Estas sales se preparan a partir de la adición de una base inorgánica o una base orgánica al ácido libre. Las sales derivadas de las bases inorgánicas incluyen, pero no se limitan a, las sales de sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, hierro, zinc, cobre, manganeso, aluminio y similares. Las sales inorgánicas preferidas son las sales de amonio, sodio, potasio, calcio, y magnesio. Las sales derivadas de las bases orgánicas incluyen, pero no se limitan a, sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de ocurrencia natural, aminas cíclicas y resinas de intercambio iónico básicas, tal como amoniaco, isopropilamina , trimetilamina , dietilamina, trietilamina, tripropilamina, dietanolamina , etanolamina, deanol, 2-dimetilaminoetanol , 2-dietilaminoetanol , diciclohexilamina, lisina, arginina, histidina, cafeína, procaína, hidrabamina, colina, betaína, benetamina, benzatina, etileriodiamina, glucosamina, metilgluc.amina, teobromina, trietanolamina, trometamina, purinas, piperazina, piperidina, N-etilpiperidina, resinas de poliamina y similares. Las bases orgánicas particularmente preferidas son isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetilamina, diciclohexilamina , colina y cafeína.

"Tratar" o "tratamiento" como se utiliza aquí cubre el tratamiento de la enfermedad o afección de interés en un mamífero, preferiblemente un humano, que tiene la enfermedad o afección de interés, e incluye: (i) prevenir la enfermedad o afección a partir de la ocurrencia en un mamífero, en particular, cuando tal mamífero se predispone a la afección pero aún no se ha diagnosticado como que la tiene; (ii) inhibir la enfermedad o afección, es decir, detener su desarrollo; (iii) aliviar la enfermedad o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad o afección; o (iv) aliviar los síntomas que resultan de la enfermedad o afección, es decir, aliviar dolor sin tratar la enfermedad o afección subyacente.

Como se utiliza aquí, se pueden utilizar los términos "enfermedad" y "afección" de forma intercambiable o puede ser diferente en que la enfermedad particular o afección puede no tener un agente causal conocido (de modo que aún no se ha resuelto la etiología) y por lo tanto aún no se reconoce como una enfermedad sino solo como una afección o síndrome no deseable, en donde se ha identificado un conjunto se síntomas más o menos específico por los médicos.

Los compuestos preparados aquí pueden contener uno o más centros asimétricos y puede así dar lugar a enantiómeros que se pueden definir, en términos de estereoquímica absoluta, como (R)- o (S)- o, como (D)- o (L)- para los aminoácidos. La presente invención se entiende que incluye todos los posibles enantiómeros, así como- también sus formas racémicas y ópticamente puras. Los isómeros ( + ) y (-), (R) - y (S)-, o (D)- y (L)- ópticamente activos se pueden preparar utilizando sintones quirales o reactivos quirales, o se resuelven utilizando técnicas convencionales, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccional, o mediante las técnicas descritas aquí. Las técnicas convencionales para la preparación/aislamiento de los enantiómeros individuales incluyen la síntesis quiral a partir de un precursor ópticamente puro adecuado o resolución del racemato (o el racemato de una sal o derivado) utilizando, por ejemplo, cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC) .

Un "estereoisómero" se refiere a un compuesto formado de los mismos átomos unidos por los mismos enlaces pero que tienen diferentes estructuras tridimensionales, que no son intercambiables. La presente invención contempla varios estereoisómeros y mezclas de los mismos e incluye "enantiómeros" , que se refieren a dos estereoisómeros cuyas moléculas son imágenes de espejo que no se pueden superponer entre si.

El protocolo de nomenclatura química y los diagramas des estructura utilizados aquí son una forma modificada del sistema de nomenclatura I.U.P.A.C., utilizando el programa de software ACD/Name Versión 9.07, en donde los compuestos de la invención se mencionan aquí como derivados de la estructura de núcleo central, es decir, la estructura 2-oxindol. Para los nombres químicos complejos empleados aquí, un grupo sustituyente se nombra antes que el grupo al cual se adhiere. Por ejemplo, el ciclopropiletilo comprende una estructura principal de etilo con el sustituyen ciclopropilo . En los diagramas de estructura química, se identifican todos los enlaces, excepto para algunos átomos de carbono, que se supone están unidos a suficientes átomos de hidrógeno para completar la valencia.

Así, por ejemplo, un compuesto de la fórmula (I): se menciona aquí como 1' - { [5- ( trifluorometil) -2-furil] metil } espiro [furo [2, 3-f] [1,3] benzodioxol-7 , 3 ' -indol ] -2' (l'H) ona.

Modalidades de la invención De los varios aspectos de la invención establecidos anteriormente en el Resumen de la invención, se prefieren ciertas modalidades de los métodos descritos aqui .

Del método para preparar un compuesto de la fórmula (I), como se estableció anteriormente en el Resumen de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos, una modalidad es el método que comprende adicionalmente la preparación de un compuesto de la fórmula (8), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (7) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata con una base bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (8), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo .

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (7), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (6) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata bajo condiciones de reacción Mitsunobu estándar para formar un compuesto de la fórmula (5), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (6), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (5) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata con un aldehido bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (6), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (5), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (4) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (5), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (4), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (2) : (2) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata con un reactivo Grignard de la fórmula (3) : (3) bajo condiciones adecuadas para formar un producto intermedio; y el producto intermedio luego se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula (1) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (4), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Del método para preparar un compuesto de la fórmula (II), como se estableció anteriormente en el Resumen de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos, una modalidad es el método que comprende adicionalmente la preparación de un compuesto de la fórmula (15), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (14) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata con un agente de alquilación bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (15) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (14), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (13): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se trata bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (14), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo .

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (13) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (12) : (12) se hace reaccionar con un reactivo Grignard de la fórmula * (3) : bajo condiciones adecuadas para formar un producto intermedio; y luego el producto intermedio se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula (1) : (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (13), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (12), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde un compuesto de la fórmula (11) : (11) se trata con un agente de oxidación bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (12), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

De esta modalidad, otra modalidad es un método que comprende adicionalmente la preparación del compuesto de la fórmula (11), en donde un compuesto de la fórmula (10): (10) se trata con un reactivo de alquilación adecuado bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (11) · Las modalidades especificas de los métodos de la invención, que incluyen las condiciones adecuadas para cada una de las etapas descritas anteriormente, se describen en más detalle adelante en los Métodos de la Invención.

Métodos de la invención Los métodos de la invención se dirigen a métodos para preparar compuestos de las fórmulas (I) y (II) y los compuestos de las fórmulas (I-S), (I-R), (II-S) y/o (II-R), como se describe aquí, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En general, se pueden obtener los componentes de partida de fuentes tales como Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI, y Fluorochem USA, etc. o se sintetizan de acuerdo con las fuentes conocidas por aquellos expertos en la técnica (vw ver, por ejemplo, Smith, M.B. y J. March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, y Structure, 5th edition (Wiley,, diciembre 2000) ) o se preparan como, se describe aquí o mediante los métodos descritos en la Solicitud de Patente Publicada PCT No. O 2006/110917, Solicitud de Patente Publicada PCT No. WO 2010/45251 y Solicitud de Patente PCT No. PCT/US2010/040187.

Preparación de Compuestos de las Fórmulas (I), (I-S) y (I-R) Los compuestos de las fórmulas (I), (I-S) y (I-R) se preparan como se describe adelante en el Esquema de Reacción 1 : ESQUEMA DE REACCIÓN 1 Los compuestos de la fórmula (1), fórmula (2), fórmula (3) y fórmula (9) están disponibles comercialmente, o se pueden preparar mediante métodos conocidos por un experto en la técnica.

En general, los compuestos de la fórmula (I), (I-S) y (I-R) se preparan mediante el método descrito anteriormente en el Esquema de Reacción 1 al primero hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (2) con un reactivo de Grignard adecuado (tal como aquel de la fórmula (3)) bajo condiciones adecuadas, tal como a una temperatura de entre aproximadamente -25° C y aproximadamente 25° C, preferiblemente a aproximadamente 0o C, para permitir la formación de un producto intermedio de haluro de magnesio. Este producto intermedio experimenta adición nucleófila con el grupo ceto-carbonilo el compuesto isatina de la fórmula (1) bajo condiciones adecuadas, tal como en un disolvente, preferiblemente, pero no limitado a, tetrahidrofurano o diclorometano, para producir el compuesto oxoindol de la fórmula (4) .

La eliminación del grupo hidroxilo en la posición C-3 del anillo oxoindol en el compuesto de la fórmula (4) se logra al tratar el compuesto de la fórmula (4) bajo condiciones adecuadas, tal, como tratamiento con un reactivo silano, tal como trietilsilano, en la presencia de un ácido, tal como, pero no limitado a, ácido trifluoroacético, para proporcionar el compuesto de la fórmula (5) . La eliminación del grupo hidroxilo también se puede lograr al tratar el compuesto de la fórmula (4) bajo condiciones adecuadas, tal como tratamiento con SOCl2/NEt3, seguido por reducción del intermedio resultante con polvo de Zn, para dar el compuesto de la fórmula (5) . Alternativamente, la eliminación se puede alcanzar al tratar el compuesto de la fórmula (4) con ácido yodhídrico para dar el compuesto de la fórmula (5).

El compuesto de la fórmula (5) luego se trata bajo condiciones adecuadas, tal como tratamiento con una base, preferiblemente, pero no limitada a, diisopropilamina , diisopropiletil amina, diisopropilamida de litio, hidróxido de litio o hidróxido de sodio, seguido por reacción con formaldehído o paraformaldehído, para proporcionar el compuesto intermedio hidroximetilo de la fórmula (6).

La ciclización intramolecular del compuesto de la fórmula (6) para proporcionar el compuesto de la fórmula (7) se logra al tratar el compuesto de la fórmula (6) con condiciones de reacción Mitsunobu, tal como el empleo de un reactivo de fosfina, preferiblemente, pero no limitado a, trifenilfosfina o tributilfosfina, y un reactivo azo, preferiblemente, pero no limitado , a, azodicarboxilato de dietilo, azodicarboxilato de diisopropilo, azodicarboxilato de di-terc-butilo o tetrametil diazenedicarboxamida, en un disolvente, preferiblemente, pero no limitado a, tetrahidrofurano, diclorometano o acetato de etilo. El compuesto resultante de la fórmula (7) se puede aislar a partir de la mezcla de reacción mediante técnicas de aislamiento estándar o se utiliza directamente en la siguiente etapa sin ser aislada de la mezcla de reacción.

Alternativamente, la ciclización intramolecular se logra al tratar el compuesto de la fórmula (6) con un bis-electrófilo adecuado tal como, pero no limitado a, cloroyodometano en la presencia de una base tal como, pero no limitada a, carbonato de cesio en un disolvente adecuado tal como, pero-no limitado a, 2V, N-dimetilformamida o metil etil cetona para proporcionar un compuesto de la fórmula (8) .

La eliminación del grupo hidroximetilo en el nitrógeno del compuesto de la fórmula (7) se logra al tratar el compuesto de la fórmula (7) con una base, preferiblemente, pero no limitada a, hidróxido de sodio, hidróxido de litio o hidróxido de amonio, bajo condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (8), que se puede aislar a partir de la mezcla de reacción mediante técnicas de aislamiento estándar.

El compuesto de la fórmula (8) luego se hace reaccionar con un electrófilo de la fórmula (9) bajo condiciones adecuadas, tal como en la presencia de una base, preferiblemente, pero no limitada a, hidruro de sodio, carbonato de cesio o hidróxido de sodio, en un disolvente, preferiblemente, pero no limitado a, 2V,.V-dimetilformamida, acetonitrilo, tetrahidrofurano o acetona, para proporcionar el compuesto de la fórmula (I), que se puede aislar a partir de la mezcla de reacción mediante técnicas de aislamiento estándar.

El compuesto de la fórmula (I) se puede resolver en el (S) -enantiómero (es decir, el compuesto de la fórmula (I-S) ) y el (R) -enantiómero correspondiente (es decir, el compuesto de la fórmula (I-R) ) bajo condiciones adecuadas, por ejemplo, mediante separación cromatográfica quiral tal como, pero no limitado a, cromatografía en lecho móvil simulado o HPLC quiral .

Preparación de Compuestos de las fórmulas (II), (II-S) y (II-Rl Compuestos de la fórmula (II), (II-S) y (II-R) se preparan como se describe adelante en el Esquema de Reacción 2 : ESQUEMA DE REACCIÓN 2 Los compuestos de la fórmula (10), fórmula (11), fórmula (12), fórmula (1), fórmula (3) y fórmula (16) están disponibles comercialmente, o se pueden preparar mediante métodos conocidos por un experto en la técnica.

En general, los compuestos de las fórmulas (II), (II-S) y (II-R) se preparan mediante el método descrito anteriormente en el Esquema de Reacción 2 primero al calentar un dihidroxialdehido de la f.órmula (10) con un reactivo de bis-alquilación adecuado tal como, pero no limitado a, 1,2-dibromoetano en la presencia de una base tal como, pero no limitado a, carbonato de potasio en un disolvente tal como, pero no limitado a, acetona para proporcionar un compuesto de la fórmula ( 11 ) .

Los compuestos de la fórmula (12) se preparan mediante tratamiento de un compuesto de la fórmula (11) con un agente de oxidación tal como, pero no limitado a, ácido 3-cloroperoxibenzoico en la presencia de una base tal como, pero no limitado a, bicarbonato de sodio en un disolvente adecuado tal como, pero no limitado a, diclorometano, seguido por tratamiento con agua y una base tal como, pero no limitado a, hidróxido de sodio para proporcionar un compuesto de la fórmula (12) .

El compuesto de la fórmula (12) luego se trata con un reactivo de Grignard adecuado tal como, pero no limitado al reactivo de Grignard de la fórmula (3) bajo condiciones adecuadas, tal como a una temperatura de entre aproximadamente -25° C y aproximadamente 25° C, preferiblemente a aproximadamente 0o C, para formar un producto intermedio de haluro de feniloximagnesio que luego se hace reaccionar con el compuesto de la fórmula (1) bajo condiciones adecuadas, tal como en un disolvente polar no prótico, preferiblemente, pero no limitado a, diclorometano o tetrahidrofurano, para producir el compuesto oxoindol de la fórmula (13) .

La eliminación del grupo hidroxilo en la posición C-3 del compuesto oxoindol de la fórmula (13) se logra al tratar el compuesto de la fórmula (13) bajo condiciones adecuadas, tal como tratamiento con un reactivo silano, preferiblemente, pero no limitado a, trietilsilano, en la presencia de un ácido, preferiblemente, pero no limitado a, ácido trifluoroacético, para producir el compuesto de la fórmula (14) . La eliminación del grupo hidroxilo en la posición C-3 del compuesto oxoindol de la fórmula (13) también se puede lograr primero al tratar el compuesto de la fórmula (13) con SOCl2/ Et3, luego reduciendo el intermedio resultante con polvo de Zn para dar el compuesto de la fórmula (14). Alternativamente, la eliminación se puede alcanzar al tratar el compuesto de la fórmula (13) con ácido yodhídrico para dar el compuesto de la fórmula (14) .¦ La ciclización intramolecular se logra al tratar el compuesto de la fórmula (14) con un agente de jis-alquilación, preferiblemente, pero no limitado a, cloroyodometano, bajo condiciones adecuadas, tal como en la presencia de una base, preferiblemente, pero no limitada a, carbonato de cesio, para producir el compuesto de la fórmula (15), que se aisla a partir de la mezcla de reacción mediante técnicas de aislamiento estándar.

El compuesto de la fórmula (15) luego se hace reaccionar con un electrófilo de la fórmula (16) bajo condiciones adecuadas, tal como en la presencia de una base, preferiblemente, pero no limitada a, hidruro de sodio, carbonato de cesio o hidróxido de sodio, en un disolvente, preferiblemente, pero no limitado a, N, IV-dimetilformamida, acetonitrilo, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano o acetona, para proporcionar el compuesto de la fórmula (II), que se puede aislar a partir de la mezcla de reacción mediante técnicas de aislamiento estándar.

El compuesto de la fórmula (II) se puede resolver cromatográficamente en el (S ) -enantiómero (es decir, el compuesto de la fórmula (II-S) ) y el (R) -enantiómero correspondiente (es decir, el compuesto de la fórmula (II-R)) mediante cromatografía en lecho móvil simulado utilizando una fase estacionaria quiral adecuada tal como, pero no limitada a, ChiralPAK®-IC y una fase móvil adecuada tal como, pero no limitada a, diclorometano/acetona .

Todos los compuestos descritos y preparados que pueden existir en la forma de ácido o base libre se pueden convertir en sus sales farmacéuticamente aceptables mediante tratamiento con las bases o ácidos inorgánicos u orgánicps apropiados. Las sales de los compuestos preparados anteriormente se pueden convertir a su forma de base o ácido libre mediante técnicas estándar. Se entiende que todos las formas polimorfas, amorfas, anhidratos, hidratos, solvatos y sales de los compuestos de la fórmula (I) y (II) están destinadas a estar dentro del alcance de la invención. Adicionalmente, todos los compuestos de la fórmula (I) y (II) que contienen un ácido o un grupo éster se pueden convertir al éster o ácido correspondiente, respectivamente, mediante métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante los métodos descritos aquí.

Las siguientes Preparaciones Sintéticas especificas (para la preparación de materiales de partida e intermedios) y Ejemplos Sintéticos (para la preparación de los compuestos de la fórmula (I) y fórmula (II) mediante los métodos de la invención) se proporcionan como una guia para asistir en la práctica de la invención, y no están destinados como una limitación en el alcance de la invención. Cuando se dan una o más RMN para un compuesto particular, cada RMN puede representar un estereoisómero único, una mezcla no racémica de los estereoisómeros o una mezcla racémica de los estereoisómeros del compuesto.

PREPARACIÓN SINTÉTICA 1 Síntesis de 3-hidroxi-3- (6-hidroxi-l, 3-benzodioxol-5-il) -1, 3- dihidro-2H-indol Compuesto de la fórmula (4) Un reactor de 630 L se carga con sesamol (42.6 kg, 299 mol) . Se agrega tetrahidrofurano (400 kg) y la solución resultante se enfría a Io C durante 42 minutos. Se agrega cloruro de isopropilmagnesio (solución 2 M en tetrahidrofurano, 173 kg, 337 mol) durante 2 h de tal manera que la temperatura interna se mantiene ente ü y 4o C. Una vez se completa la adición, la temperatura interna se reduce a -5o C y se agrega isatina (37.9 kg, 250 mol) en cuatro porciones. La mezcla de reacción se agita durante 2.75 h a 1 a 3o C. Un reactor de 1000 L se carga con cloruro de amonio (72 kg) , seguido por agua desionizada (356 kg) . La mezcla se agita a 15° C hasta que el sólido se disuelve completamente y la solución resultante se enfría a Io C durante 1 h. Los contenidos del reactor de 630 L se transfieren al reactor de 1000 L durante' 1 h de tal manera que la temperatura interna permanece entre 3 y 4° C. El reactor de 630 L se enjuaga con tolueno (133 kg) y la solución enjuagada se agrega al reactor de 1000 L. Los contenidos del reactor de 1000 L se dejan calentar a 20-25° C durante 29 minutos y se agitan durante unos 15 minutos adicionales. La agitación se detiene y los contenidos del reactor se mantienen a 25° C durante 15 minutos, permitiendo que las fases se separen. La fase acuosa se elimina y una solución de cloruro de sodio (42 kg) en agua desionizada (218 kg) se agrega durante 25 minutos a una temperatura interna de 22-24° C. La agitación se detiene y la mezcla se mantiene a 25° C durante 1 h, permitiendo que las fases se separen. La fase orgánica se desgasifica durante 0.5 h con nitrógeno y se agrega tolueno (89 kg) . Se aplica un vacio de 300 mbar al reactor y la temperatura externa del reactor se establece en 50-60° C. Los componentes volátiles de la mezcla se eliminan mediante destilación durante un periodo de 12 h de tal manera que se recolectan 670 L de destilado. La temperatura externa del reactor se establece en 20-25° C. Un precipitado naranja se deposita luego se enfriamiento. Se agrega tolueno (114 kg) y la suspensión se agita durante 10 minutos. El sólido se recolecta mediante filtración, se lava con éter de terc-butil metilo (171 kg) y heptano (85 kg) y se seca a 55-60° C bajo una presión reducida de 170 a 4 mbar durante un periodo de 10.5 h para producir 3-hidroxi-3- ( 6-hidroxi-l , 3-benzodioxol-5-il ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (73.5 kg, rendimiento cuantitativo) como un sólido rosa pálido: pureza (HPLC-UV a 300 nm) 99.3% a/a; 1H ? (300 MHz , DMSO-d6) d 10.18 (s, 1 H) , 9.08 (s, ' l H) , 7.21-7.07 (m, 2H) , 6.88-6.74 (m, 3H) , 6.38 (br s, 1 H) , 6.23 (s, 1 H) , 5.92 (s, 2H) ; 13C RMN (75 MHz, DMSO-d6) d 178.4, 148.4, 146.6, 143.0, 139.4, 133.2, 128.6, 123.8, 121.1, 120.1, 109.0, 106.8, 100.8, 97.4, 75.1.

PREPARACION SINTÉTICA 2 Síntesis de 3- ( 6-hidroxi-l , 3-benzodioxol-5-il ) -1, 3-dihidro 2H-indol-2-ona Compuesto de la fórmula (5) Un reactor de 600 L se carga con 3-hidroxi-3- ( 6-hidroxi- 1, 3-benzodioxol-5-il) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (113.1 kg, 396 mol), se evacúa y carga con nitrógeno. Se agrega ácido trifluoroacético (679 kg) en dos porciones durante 20 minutos y la temperatura interna se reduce a 10° C durante 1 h. Se agrega trietilsilano (69.2 kg, 595 mol) durante 2 h 05 min a 10-11° C y la mezcla se agita durante unas 0.5 h adicionales a 10-11° C. Un reactor de 1000 L se carga con heptano (524 kg) y éter de terc-butil metilo (63 kg) . Los contenidos del reactor de 1000 L se transfieren a el reactor de 1600 L durante 13 minutos a una temperatura interna de 10-11° C. La suspensión amarillo-naranja resultante se deja calentar a 23° C durante 1 h. El sólido se recolecta mediante filtración, se lava con heptano (464 kg) seguido por éter de terc-butil metilo (57 kg) y se seca a 50° C bajo una presión reducida de 58 a 7 mbar durante un periodo de 25 h para producir 3- (6-hidroxi-1, 3-benzodioxo.l-5-il ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (82.8 kg, 75%) como un sólido blancuzco: pureza (HPLC-UV a 300 nm) 98.0% a/a; 1ñ RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 10.40 (s, 1 H) , 9.25 (s, 1 H), 7.17-7.10 (m, 1 H) , 6.95-6.81 (m, 3H) , 6.55 (s, 1 H) , 6.43 (s, 1 H), 5.92-5.85 (m, 2H) , 4.66 (s, 1 H) ; 13C RMN (75 MHz, DMS0-d6) d 177.9, 150.1, 146.6, 142.7, 139.6, 130.9, 127.4, 123.8, 121.2, 115.9, 109.5, 109.0, 100.7, 97.8, 55.0.

PREPARACIÓN SINTÉTICA 3 Síntesis de 3- (6-hidroxi-l, 3-benzodioxol-5-il) -1, 3- bis (hidroximetil) -1, 3-dihidro- 2H-indol-2-ona Compuesto de la fórmula (6) Un reactor de 1000 L se carga con 3- ( 6-hidroxi-l , 3-benzodioxol-5-il) -1, 3-dihidro-2H-ind.ol-2-ona (56.3 kg, 209 mol), seguido por paraformaldehido (25.4 kg, 847 mol) y agua desionizada (285 kg) . La mezcla de reacción se enfria a una temperatura interna de 5o C durante 25 minutos y una solución acuosa al 30% en peso de hidróxido de sodio (1 13 kg, 847 mol) se agrega a 5o C durante 40 minutos. La mezcla de reacción se agita durante 1 h a 5o C. Un segundo reactor de 1000 L se carga con agua desionizada (260 kg) y 32% de ácido clorhídrico (124 kg) . Los contenidos del primer reactor se agregan a los contenidos del segundo reactor a Io C durante 80 minutos. El primer reactor se enjuaga con agua desionizada (35 kg) y la solución enjuagada se transfiere al segundo reactor. La suspensión resultante se agita durante a Io C durante 1 h y el sólido se recolecta mediante filtración, se lava con una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (1 1 kg) y agua (20 kg) y se seca a 55-60° C bajo una presión reducida de 50 a 6 mbar durante un periodo de 24 h para producir 3- (6-hidroxi-1, 3-benzodioxol-5-il ) -1, 3-bis (hidroximetil ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (69.8 kg, 99%) como un sólido marrón pálido: pureza (HPLC-UV a 230 nm) 95.4% a/a; XH RMN (DMSO-d6, 300 MHz) d 9.06 (s, 1 H) , 7.17-6.84 (m, 5H) , 6.19-6.10 (m, 2H), 5.86 (s, 2H) , 5.12-4.92 (m, 3H) , 4.11-4.06 (m, 1 H) , 3.79-3.73 (m, 1 H) ; 13C RMN (DMSO-d6, 75 MHz) d 179.0, 150.5, 146.7, 143.9, 139.9, 132.6, 127.4, 124.0, 121.9, 118.2, 108.7, 1.08.6, 101.1, 98.0, 65.4, 63.2, 56.2. .

PREPARACIÓN SINTÉTICA 4 Síntesis de espiro [furo [2 , 3-f] [ 1 , 3] benzodioxol-7 , 3' -indol] - 2 ' (l'H) -ona Con.puesto de la fórmula (8) Un reactor de 1000 L se carga con 3- ( 6-hidroxi-l , 3-benzodioxol-5-il ) -1, 3-bis (hidroximetil ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (65.0 kg, 197 mol), seguido por tetrahidrofurano (586 kg) . La solución resultante se enfría a -4° C durante 20 minutos y tri-n-butilfosfina (40.0 kg, 197 mol) se agrega durante 6 minutos, seguido por una solución de azodicarboxilato de diisopropilo (44.8 kg, 197 mol) en tetrahidrofurano (75 kg) durante 125 minutos de tal manera que la temperatura interna permanece por - debajo de 0o C. La mezcla de reacción se agita a -3o C durante unos 25 minutos adicionales y los contenidos del reactor se transfieren a un reactor de 2500 L. El reactor de 1000 L se enjuaga con tetrahidrofurano (16 kg) y la solución enjuagada se agrega al reactor de 2500 L. Una solución al 25% en peso de amoniaco en agua (1 18 kg) se agrega a -3 a -2° C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se deja calentar a 25° C durante 1.25 h y se agita durante .unas 2 h adicionales. Se agregan, agua desionizada (650 kg) y acetato de etilo (585 kg) y la mezcla se calienta a 40° C durante 40 minutos. Después de agitación durante unos 15 minutos adicionales, la agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 1 h. La fase acuosa se elimina y se agrega agua desionizada (650 kg) . La mezcla se agita durante 15 minutos a 40° C. La agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 1 h. La fase acuosa se elimina y se agrega agua desionizada (325 kg) . La mezcla se concentra parcialmente mediante destilación bajo presión reducida a una temperatura interna de 21 -39° C y una presión de 382 a 98 mbar hasta 950 L de destilado se ha recolectado durante un periodo de 4.5 h. Se agrega metanol (1600 kg) y la mezcla se calienta a 60° C durante 35 minutos. La mezcla se concentra parcialmente mediante destilación bajo presión reducida a una temperatura interna de 32-58° C y una presión de 530 a 170 mbar hasta 1260 L de destilado se ha recolectado durante un periodo de 9.33 h. La suspensión resultante se deja enfriar a 22° C durante 2 h y se agita durante unas 6 h adicionales. El sólido se recolecta mediante filtración, se lava con una mezcla de metanol (34 kg) y agua desionizada (17 kg) y se seca a 55-60° C bajo una presión reducida de 50 a 3 mbar durante un periodo de 31 h para producir 35.8 kg de un sólido marrón, que se transfiere a un reactor de 400 L. Se agrega metanol (163 kg) y la suspensión resultante se agita durante 0.5 h. La mezcla se calienta a reflujo durante un periodo de 35 minutos y se calienta a reflujo durante unos 15 minutos adicionales. Se agrega agua desionizada (33 kg) y la mezcla se calienta a reflujo durante 155 minutos. La suspensión se fultra mientras está caliente y la torta de filtro se lava con una mezcla de metanol (22 kg) y agua desionizada (11 kg) y se seca a 55-60° C bajo una presión reducida de 50 a 4 mbar durante un periodo de 8 h para producir espiro [furo [2, 3-f] [1, 3] benzodioxol-7, 3' -indol] -2' (l'H)-ona (30.44 kg, 49%) como un sólido marrón pálido: pureza (HPLC-UV a 230 nm) 89.4%; MS (ES+) m/z 282.3 (M + 1); XH RMN (400 MHz , CDC13) d 10.56 (s, 1 H) , 7.27-6.92 (m, 4H) , 6.67 (s, 1 H), 6.26 (s, 1 H) , 5.93 (s, 2H) , 4.79-4.64 (m, 2H) .

PREPARACIÓN SINTÉTICA 5 Síntesis de 2 , 3-dihidro-l , -benzodioxina-6-carbaldehído Compuesto de la fórmula (11) Un reactor de 2000 L se carga con acetona (404.5 kg) , seguido por carbonato de potasio (256 kg, 1852 mol) y 1,2-dibromoetano (241.5 kg, 1298 mol). La* mezcla se calienta a reflujo. Un reactor de 500 L se carga con acetona (606 kg) y 3, 4-dihidroxibenzaldehido (128 kg, 926 mol) . Los contenidos del reactor de 500 L se agregan al reactor de 2000 L a un índice de 150-180 kg/h mientras que la temperatura de reacción se mantiene a 50-60° C. La mezcla de reacción se agita a 54-60° C durante 12 h, se enfría a 20° C y se filtra a través de un filtro Nutsche 500 L. La torta de filtro se lava con acetona (2 ? 202 kg) . El filtrado y los lavados de acetona se combinan en un reactor de 2000 L y la solución resultante se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura < 40° C. Al residuo se agrega acetato de etilo (683 kg) y la solución resultante se lava con una solución acuosa al 5% en peso de carbonato de potasio (256 kg) . La mezcla se agita durante 0.5 h, se deja sedimentar durante 0.5 h y la fase acuosa se elimina. Este procedimiento de lavado se repite tres veces en total. La fase orgánica se sedimenta temporalmente a un lado en tambores. Un reactor de 2000 L se carga con los lavados acuosos combinados, seguido por acetato de etilo (113.9 kg) . La mezcla se agita durante 0.5 h, se deja sedimentar durante 0.5 h y la fase acuosa se elimina. La fase orgánica de los tambores se agrega al reactor seguido por una solución acuosa al 28% en peso de cloruro de sodio (192 kg) . La mezcla se agita durante 0.5 h, se deja sedimentar durante 0.5 h y la fase acuosa se elimina.

La fase orgánica se concentra bajo presión reducida a una temperatura < 45° C hasta que el contenido de acetato de etilo en la mezcla está por debajo de 10% (según se determina por cromatografía de gas). Se agrega éter de petróleo (268.8 kg) al residuo a un índice de 80-90 kg/h mientras la mezcla se mantiene a una temperatura de 35-45° C. La mezcla se enfría a 5° C durante 3 h y se mantiene a esta temperatura durante 1 h adicional, durante cuyo tiempo se deposita un precipitado. La suspensión resultante se filtra a través de un filtro de centrífuga y se seca para producir 2,3-dihidro-1 , 4-benzodioxina-6-carbaldehído (111.4 kg, 73%) como un sólido blancuzco: pureza (HPLC-UV a 230 nm) 99.3%.

PREPARACIÓN SINTÉTICA 6 Síntesis de 2 , 3-dihidro-l , 4-benzodioxin- Compuesto de la fórmula (12) Un reactor de 2000 L se carga con diclorometano (1303.4 kg) seguido por 2 , 3-dihidro-l , -benzodioxina-6-carbaldehído (98.0 kg, 597 mol) y se agita hasta que se obtiene una solución homogénea. Se agrega ácido 3-Cloroperoxibenzoico (144.3 kg, 836 mol) . , La mezcla se calienta a reflujo a . un índice de 8-10° C/h, se calienta a reflujo durante unas 6 h adicionales y se deja enfriar a 20° C. La suspensión resultante se filtra a través de un filtro Nutsche 500 L y la torta de filtro se lava con diclorometano (391 kg) . El filtrado y la solución de lavado se transfieren a un reactor de 2000 L. Una solución acuosa al 7% en peso de bicarbonato de sodio (212.7 kg) se agrega y la mezcla se agita durante 0.5 h. La agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 0.5 h. La capa acuosa se elimina. El procedimiento de lavado con bicarbonato de sodio acuoso se repite tres veces en total. La fase orgánica se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura '< 30° C. Se agrega metanol (116.1 kg) y la mezcla resultante se enfría a 0o C. Una solución de 15.5% en peso de hidróxido de sodio (234.3 kg) se agrega a un índice de 30-40 kg/h de tal manera que la temperatura de la mezcla se mantiene entre 0-10° C. La mezcla se agita a esta temperatura durante unas 2.25 h adicionales y el pH de la mezcla se ajusta a 6-7 mediante la adición de ácido clorhídrico 4 N (266.5 kg) de tal manera que la temperatura de la mezcla se mantiene entre 0-10° C. La mezcla se deja calentar a temperatura ambiente y se extrae tres veces en total con éter de metil tere-butilo (145 kg para cada extracción) al agitar durante 0.5 h, deteniendo la agitación y permitiendo que las, fases se separen durante 0.5 h. Los extractos orgánicos combinados se lavan tres veces en total con una solución acuosa al 7% de¦ bicarbonato de sodio (212.7 kg para cada lavado) al agitar durante 0.5 h, al detener la agitación permitiendo que las fases se separen durante 0.5 h y eliminar la fase acuosa La fase orgánica luego se lava con una solución acuosa al 30% en peso de cloruro de sodio (212.7 kg) al agitar durante 0.5 h, detener la agitación permitiendo que las fases se separen durante 0.5 h y eliminar la fase acuosa La fase orgánica se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura < 45° C. Se agrega tetrahidrofurano (170 kg) y la solución resultante se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura < 45° C. Se agrega tetrahidrofurano adicional (17.1 kg) y la solución resultante se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura < 45° C. Se agrega tetrahidrofurano (122.5 kg) para producir una solución roja-marrón de 2,3-dihidro- 1 , 4-benzodioxin-6-ol (86.3 kg, 95%) en tetrahidrofurano que se lleva a cabo sin purificación adicional: pureza (HPLC-UV a 220 nm) 95.7%.

PREPARACIÓN SINTÉTICA 7 Síntesis de 3-hidroxi-3- ( 7-hidroxi-2 , 3-dihidro-l, 4- benzodioxin-6-il) -1, 3-dihidro-2H- , indol-2-ona Compuesto de la fórmula (13) Un reactor de 1000 L se carga con tetrahidrofurano (296.8 kg) . El tetrahidrofurano se calienta a reflujo durante 1 h y se deja enfriar a temperatura ambiente. Se agregan Magnesio (15.0 kg, 625 mol), yodo (19.5 g, cantidad catalítica) y bromoetano (147.0 g, cantidad catalítica) a una temperatura de 15-30° C. La mezcla resultante se calienta a 50-55° C durante 0.5 h y se agrega 2-cloropropano (4.5 kg, 57 mol) , seguido por una solución 2 M de cloruro de isopropilmagnesio en tetrahidrofurano (7.6 kg, cantidad catalítica) . Se agrega 2-Cloropropano (39.2 kg, 500 mol) a un índice de 8-10 kg/h de tal manera que la temperatura de la mezcla de reacción se mantiene entre 55-70° C. La mezcla de reacción se calienta a 58-68° C durante 3 h, se deja enfriar a temperatura ambiente y se agita durante unas 4 h adicionales. Un reactor de 2000 L se carga con una solución de 2, 3-dihidro-l, -benzodioxin-6-ol (86.3 kg, 567 mol) en tetrahidrofurano (122.5 kg) , seguido por tetrahidrofurano adicional (804.1 kg) . La solución resultante se enfría a 0° C y los contenidos del reactor de 1000 L se agregan al reactor de 2000 L a 14? índice de 30-50 kg/h de tal manera que la temperatura de la mezcla de reacción se mantiene entre 0-5° C. El reactor de 1000 L se enjuaga tres veces con tetrahidrofurano (5 kg para cada enjuague) y las soluciones enjuagadas se agregan al reactor de 2000 L. La mezcla de reacción se agita a 7-13° C durante 1 h y se enfria a -5° C. Se agrega Isatina (69.5 kg, 472.5 mol) en tres porciones iguales durante 0.5 h y la mezcla se agita durante 0.5 h a -5-0° C. La mezcla de reacción se calienta a 50-55° C durante 7.5 h y se deja enfriar a temperatura ambiente. Un reactor de 5000 L se carga con agua (576.9 kg) y cloruro de amonio (118.2 kg) . La solución resultante se enfria a 0-5° C. Los contenidos del reactor de 2000 L se agregan un reactor de 5000 L a un índice de 300-500 kg/h de tal manera gue la temperatura de la mezcla se mantiene entre 0-5° C. La mezcla se agita a 15-25° C durante 0.5 h y la agitación se detiene. Las fases se dejan separar durante 1 h y la fase acuosa se elimina. Una solución acuosa al 27% en peso de cloruro de sodio (69.6 kg) se agrega y la mezcla se agita durante 0.5 h. La agitación se detiene, las fases se dejan separar durante 1 h y la capa acuosa se elimina. El proceso de lavado con cloruro de sodio acuoso se repite dos veces en total. La fase orgánica se transfiere a un reactor de 2000 L y se concentra bajo presión reducida a una temperatura de 45-55° C. Se agrega tolueno (302.3 kg) al residuo a un índice de 90-130, kg/h y a una temperatura de 45-50° C. La mezcla resultante se enfría a 15° C a un índice de 8-10° C/h y se agita a 10-15° C durante 1 h adicional. La suspensión resultante se filtra a través de un filtro de centrífuga y la torta de filtro se lava con agua (69.5 kg) y se seca a 45-50° C para producir 3-hidroxi-3- ( 7-hidroxi-2 , 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (130.8 kg, 93%) como un sólido blancuzco: pureza (HPLC-UV a 210 nm) 99.7%.

PREPARACIÓN SITÉTICA 8 Síntesis de 3- (7-hidroxi-2, 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il) - 1 , 3-dihidro-2H-indol-2- ona Compuesto de la fórmula (14) Un reactor de 2000 L se carga con diclorometano (489.4 kg) , seguido por 3-hidroxi-3- (7-hidroxi-2 , 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (92.0 kg, 307 mol) en cuatro porciones de 23· kg durante 1 h La solución resultante se agita a temperatura ambiente durante 1 h y se agrega trietilsilano (107.2 kg, 921 mol). La mezcla se enfría a -5° C y se agrega ácido trifluoroacético (105.1 kg, 921 mol) a un índice de 25-30 kg/,h de tal manera que la temperatura de la mezcla de reacción se mantiene por debajo de 0o C. La mezcla se agita a -5-0° C durante 2.5 h, se calienta a 18-20° C, se agita durante unas 6.5 h adicionales y se concentra hasta secado bajo presión reducida a una temperatura <30° C. Se agrega éter de Metil tere-butilo (139.8 kg) al residuo a 15-20° C y la mezcla se concentra hasta cerca de secado bajo presión reducida a una temperatura <35° C. La mezcla se filtra en un filtro de centrifuga y un reactor de 2000 L se carga con la torta de filtro, seguido por metanol (72.7 kg) . La mezcla se agita a 10-15° C durante 0.5 h y se filtra en un filtro de centrifuga. La torta de filtro se seca bajo presión reducida a 40-50° C para producir 3- (7-hidroxi-2, 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (68.0 kg, 78%) como un sólido incoloro: pureza (HPLC-UV a 254 nm) 99.3%.

PREPARACIÓN SINTÉTICA 9 Síntesis de 2 , 3-dihidrospiro [ furo [ 2 , 3-g] [1 , 4 ] benzodioxina- 8, 3' -indol] -2' (l'H)-ona Compuesto de la fórmula (15) Un cristalizador en acero inoxidable de 2000 L se carga con N, N, dimetilformamida (113.7 kg) y tetrahidrofurano (1070.9 kg) . Los contenidos se enfrian a 0-5° C y se agrega 3- (7-hidroxi-2, 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il ) -1, 3-dihidro-2H-indol-2-ona (12.0 kg, 42.4 mol), seguido por carbonato de cesio (30.4 kg, 93.3 mol). Una solución de cloroyodometano (9.4 kg, 53.7 mol) en N, N, dimetilformamida (16.9 kg) se agrega a un índice de 39.5 kg/h de tal manera que la temperatura de la mezcla de reacción se mantiene entre 0 y 5o C. La mezcla de reacción se agita a 0-5° C durante 2 h y se calienta a 20-25° C durante 18.5 h. La mezcla se filtra y la torta de filtro se suspende en tetrahidrofurano (26.4 kg) y se filtra de nuevo. Los filtrados combinados se combinan y concentran a un volumen de 110 L bajo presión reducida a una temperatura < 60° C. La mezcla se enfría a 20-25° C y se agrega agua purificada (1200.8 kg) a un índice de 343.1 kg/h. La mezcla se enfría a 0-5° C y se filtra. La torta de filtro se suspende en agua (310.5 kg) , se filtra y se seca a una temperatura < 60° C hasta que el contenido de agua es 10.6% en peso mediante titulación Karl-Fisher. Un reactor de 200 L se carga con tetrahidrofurano (98.0 kg) . La torta de filtro se seca parcialmente (~11.0 kg) se agrega al reactor de 200 L por medio de un embudo de adición sólida. La mezcla se calienta a refluj.o durante 4.5 h, se enfría a 10-15°. C y se agita durante 3.5 h a 10-15° C. La mezcla se filtra y la torta de filtro se lava con (0-5° C) tetrahidrofurano frió (2 x 0.7 kg) y se seca en un secador de bandeja a una temperatura < 55° C para producir 2 , 3-dihidrospiro [ furo [2 , 3-g] [l,4]benzodioxina-8,3'-indol]-2' (l'H)-ona (6.88 kg, 63%) como un sólido amarillo pálido: pureza (HPLC-UV a 210 nm) 98.3%; mp > 250° C; XH RMN (300 MHz , DMS0-d6) d 10.58 (br s, 1 H), 7.26-7.19 (m, 1 H) , 7.09 (d, J = 7.2 Hz, 1 H) , 6.99-6.90 (m, 2H), 6.47 (s, 1 H) , 6.16 (s, 1 H) , 4.74, 4.60 (ABq, JAB = 9.2 Hz, 2H) , 4.20-4.07 (m, 4H) ; 13C RMN (75 MHz, DMSO-d6) d 178.4, 154.7, 144.0, 141.8, 137.8, 132.6, 128.7, 123.8, 122.3, 121.5, 111.1, 109.8, 98.7, 79.5, 64.2, 63.6, 57.7; MS (ES+) m/z 295.9 (M + 1) .

EJEMPLO SINTÉTICO 1 intesis de 1' -{ [5- (trifluorometil) -2- furil]metil}espiro [furo [2, 3- ] [ 1, 3 ] enzodioxol- 7,3'-indol]- 2' (l'H) -ona Compuesto de la fórmula Un reactor de 100 L se carga con espiro f furo [2 , 3-] [1, 3]benzodioxol-7,3' -indol] -2' (l'H)-ona (6.03 kg, 19.5 mol), seguido por carbonato de cesio (16.02 kg, 48.7 mol). Se agrega acetona (48.8 kg) y la suspensión resultante se calienta a reflujo durante 1 h se agrega 2-Bromometil-5- (trifluorometil) furano (4.92 kg, 21.2 mol) por medio de un embudo de adición durante un periodo de 2 h mientras que la mezcla de reacción se mantiene a reflujo. La mezcla de reacción se agita a reflujo durante unas 2 h adicionales y la acetona se elimina mediante destilación a presión atmosférica hasta que se ha recolectado 37 L de destilado. Se agrega tolueno (48.8 kg) y la destilación se continúa, primero a presión atmosférica luego bajo presión reducida hasta que se ha recolectado 37 L de destilado. Se agrega tolueno (36.9 kg) y la destilación se continúa a 54-55° C y una presión de 150-180 mbar hasta se ha recolectado 37 L de destilado. Los contenidos del reactor de 100 L se dejan enfriar a 25° C y se agrega tolueno (40.9 kg) . Los contenidos del reactor de 100 L se transfieren a un reactor de 200 L y se agrega agua desionizada (48.8 kg) . La mezcla agitada se calienta a 39° C, la agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 11 h. La fase inferior se elimina y la fase de tolueno restante se somete a destilación a 55-64° C bajo una presión reducida de 100 mbar hasta que se ,ha recolectado 18 L de destilado. La solución resultante se diluye con tolueno a un volumen total de 98 L. Los contenidos del reactor de 200 L se pasan a través de una columna de cromatografía empacada con gel de sílice (20 kg) y tolueno (40 kg) . La columna se eluye con tolueno de tal manera que diez fracciones de 30 kg se recolectan. La columna se lava con acetona (100 kg) . Las fracciones 2 a 10 se transfieren de manera sucesiva a un reactor de 200 L como una destilación bajo presión reducida que procede. Los contenidos del reactor se ajustan con tolueno a un volumen de 50 L y la solución se calienta a 79° C. Se agrega heptano (85 kg) durante 15 minutos y la mezcla se enfría a 10° C durante un periodo de 3 h. la cristalización inicia a una temperatura interna de 56° C. El sólido se recolecta mediante filtración, se lava con una mezcla de heptano (10.2 kg) y tolueno (5.1 kg) y se seca a 45-50° C bajo una presión reducida de 50 mbar durante un periodo de 15 h para producir 1 '-{[ 5- (trifluorometil ) -2-furil] metil } espiro [furo [2,3-/] [1, 3 ] benzodioxol-7 , 3' -indol ] -2' (l'H)-ona (6.08 kg, 73%) como un sólido incoloro: pureza (HPLC-ÜV a 230 nm) 99.6%; mp 139-141° C; XH RMN (300 MHz , CDC13) 57.32-6.97 (m, 5H) , 6.72 (d, J = 3.3 Hz, 1 H) , 6.66 (s, 1 H), 6.07 (s, 1 H) , 5.90-5.88 (m, 2H) , 5.05, 4.86 (ABq, JAB = 16.1 Hz, 2H), 4.91 (d, J = 9.0 Hz, 1 H) , 4.66 (d, J = 9.0 Hz, l.H); 13C RMN (75 MHz, CDC13) d 176.9, .155.7, 153.5, 148.8, 142.2, 141.9, 140.8, 140.2, 139.7, 139.1, 132.1, 129.2, 124.7, 124.1, 123.7, 121.1, 120.1, 1 17.6, 1 14.5, 114.4, 110.3, 109.7, 103.0, 101.9, 93.8, 80.0, 57.8, 36.9; MS (ES+) m/z 430.2 (M + 1), 452.2 (M + 23); Calculado para C22H 14F3 05: C, 61.54%; H, 3.29%; N, 3.26%; Found: C, 61.51 %; H, 3.29%; N, 3.26%.

EJEMPLO SINTÉTICO 2 Resolución de Compuesto de la fórmula (I) mediante HPLC Quiral El compuesto de la fórmula (I) se resuelve en el compuesto de la fórmula (I-S) y el compuesto de la fórmula (I-R) mediante HPLC Quiral bajo las siguientes condiciones: Columna: Chiralcel ® OJ-RH; 20 mm I.D. ? 250 mm, 5 mic; Lote: OJRH CJ- EH001 (Daicel Chemical Industries, Ltd) Eluyente: Acetonitrilo Agua (60/40, v/v, isocrático) índice de flujo: 10 mL/min Tiempo de serie: 60 min Carga: 100 mg of compuesto de la fórmula (I) en 1 mL de acetonitrilo Temperatura: Ambiente Bajo las condiciones de HPLC quiral anteriores, el compuesto de la fórmula (I-R) , es decir, (R)-l'-{ [5-( trifluorometil) furano-2 -i1 ] metil } espiro [ furo [2 , 3-f ] [1,3]-benzodioxol-7 , 3' -indol] -2' (1?7) -ona, se aisla como la primer fracción como un sólido blanco; ee (exceso enantiomérico) >99% (OJ-RH analítico, 55% acetonitrilo en agua); pf 103-105° C; 1ti RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 7.32-6.99 (m, 5H) , 6.71 (d, J = 3.4 Hz, 1 H), 6.67 (s, 1 H) , 6.05 (s, 1 H) , 5.89 (d, J = 6.2 Hz, 2H) , 5.13, 5.02 (ABq, JAB = 16.4 Hz, 2H) , 4.82, 4.72 (ABq, JAB = 9.4 Hz, 2H) ; 13C RMN (75 MHz, CDC13) d 177.2, 155.9, 152.0, 149.0, 142.4, 142.0, 141 .3, 132.0, 129.1, 123.9, 120.6, 1 19.2, 1 17.0, 1 12.6, 109.3, 108.9, 103.0, 101 .6, 93.5, 80.3, 58.2, 36.9; MS (ES+) m/z 430.2 (M + 1), [a]D -17.46° (c 0.99, DMSO) . El compuesto de la fórmula (I-S), es decir, ( S ) -1' -{ [ 5- (trifluorometil ) furano-2-il] metil } espiro- [furo [2, 3-r] [1, 3 ] benzodioxol-7 , 3' -indol] -2' (l'/-)-ona, se aisla como la segunda fracción como un sólido blanco; ee > 99% (OJ-RH analítico, 55% acetonitrilo en agua); mp 100-102° C; 1 H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 7.32-6.99 (m, 5H) , 6.71 (d, J = 3.4 Hz, 1 H) , 6.67 (s, 1 H) , 6.05 (s, 1 H), 5.89 (d, J = 6.3 Hz, 2H) , 5.12, 5.02 (ABq, JAB = 16.4 Hz, 2H), 4.82, 4.72 (ABq, JAB = 9.4 Hz, 2H) ; 13C RMN (75 MHz, CDC13) d 177.2, 155.9, 152.0, 149.0, 142.4, 142.0, 141 .3, 132.0, 129.1, 123.9, 120.6, 1. 19.2, 1 17.0, 1 12.6, 109.3, 108.9, 103.0, 101 .6, 93.5, 80.3, 58.2, 36.9; S (ES+) m/z 430.2 (M + 1), [ct]D +14.04° (c 0.99, DMSO) .

EJEMPLO SINTÉTICO 3 Resolución de Compuesto de la fórmula (I) por Cromatografía SMB El compuesto de la fórmula (I) se resuelve en el compuesto de la fórmula (1-S) y el compuesto de la fórmula (1-R) mediante cromatografía SMB bajo las siguientes condiciones : Extracto: 147.05 mL/min Refinado : 86.13 mL/min Eluyente: 183.18 mL/min carga: 50 mL/min Reciclaje: 407.88 mL/min Tiempo de serie: 0.57 min Temperatura: 25° C Presión: 55 bar La solución de carga (25 g del compuesto de la fórmula (I) en 1.0 L de fase móvil (25:75 (v:v) mezcla de acetonitrilo /metanol) ) se inyecta de forma continua en el sistema SMB (Novasep Licosep Lab Unit) , que se equipa con ochp columnas idénticas en configuración. 2-2-2-2 que contiene 110 g (pir Columna, 9.6 cm, 4.8 cm I.D.) de ChiralPAK-AD como fase estacionaria. El primer enantiómero eluyente (el compuesto de la fórmula (I-R) ) está contenido en la corriente refinada y el segundo enantiómero eluyente (el compuesto de la fórmula (I-S)) está contenido en la corriente de extracto. Los datos caracterizados del compuesto de la fórmula (I-R) y el compuesto de la fórmula (I-S) obtenidos de la resolución SMB son idénticos a aquellos obtenidos anteriormente utilizando HPLC quiral.

El compuesto de la fórmula (I) se resuelve en el compuesto de la fórmula (I-R) y el compuesto de la fórmula (I-S) sobre un sistema de autopurificación LCMS preparativo de aters. El primer enantiómero eluyente de la columna quiral se broma (en un sitio bien retirado del centro estereogénico) para dar el derivado de 5' -bromo correspondiente, que se cristaliza posteriormente para generar estructuras de cristal adecuadas para cristalografía por rayos X. la estructura de cristal de este derivado bromado del primer enantiómero de elusión se obtiene y se encuentra que su configuración absoluta es la misma como el compuesto de la fórmula (1 -R) . Por lo tanto, el segundo enantiómero eluyente de la Columna quiral es el compuesto de la fórmula (1 -S) . Más aún, el material obtenido de la corriente de extracto de la resolución SMB tiene una rotación óptica especifica del mismo signo (positivo, es decir dextrorotatorio) como aquel del material obtenido de la resolución LC mencionada anteriormente.

EJEMPLO SINTÉTICO 4 Síntesis de 1 '-{[ 3- ( trifluorometil ) piridin-2-il ] metil } -2 , 3- dihidrospiro [ furo [2 , 3- g] [ 1 , 4 ] benzodioxina-8 , 3' -indol ] - 2' (l'H) -ona Compuesto de la fórmula (II) Un reactor de 160 L se carga con 1,4-dioxano (43 L) a temperatura ambiente seguido por 2 , 3-dihidrospiro [ furo [2 , 3-g] [1, 4]benzodioxina-8, 3' -indol] -2' (1,H) -ona (6.80 kg, 23 mol) . A la suspensión resultante se agrega carbonato de cesio (18.7 kg, 58 mol) y la mezcla se calienta a 82° C durante 72 minutos. Un contenedor se enjuaga con ,4-diozano (7 L) y se utiliza para la adición de clorhidrato de 2- (Clorometil) -3- (trifluorometil) piridine (5.88 kg, 25 mol) en forma de porción durante 35 minutos. La temperatura de la mezcla de reacción se incrementa, a 100° C durante 43 minutos y la mezcla se agita a 00° C durante 3 h, se enfría a 20° C durante 90 minutos y se agita durante unas 16 h adicionales. Se agregan agua desionizada (40 L) y diclorometano (40 L) y la mezcla resultante se agita a 22° C durante 12 minutos. La agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 21 minutos. Las fases acuosas y orgánicas se separan en tambores. Un reactor de 160 L se carga con la fase acuosa y se agrega diclorometano (41 L) . La mezcla se agita a 19° C durante 10 minutos, la agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 10 minutos. La fase acuosa se elimina y la fase orgánica de la etapa previa se trasfiere al tambor del reactor Se agrega agua desionizada (40 L) y la mezcla se agita a 22° C durante 10 minutos. La agitación se detiene y las fases se dejan separar durante 43 minutos. La fase acuosa se elimina y la fase orgánica se concentra hasta secado bajo una presión reducida de 712-97 mbar a 19-38° C. Al residuo se agrega metanol (56 L) durante 19 minutos. La suspensión resultante se enfría a 3° C durante 64 minutos y se agita durante 98 minutos. La mezcla se filtra y la torta de filtro se lava con metanol frió (0° C) (14 L) y se seca bajo una presión reducida de 90-9 mbar a 21-46° C durante 10.5 h para obtener l'-{ [3- (trifluorometil ) piridin-2-il ] metil } -2 , 3-dihidrospiro [furo [2, 3-g] [1, 4 ] benzodioxina-8, 3' -indol] -2*(l'H)-ona (8.00 kg, 81 %) como, un sólido blancuzco: pureza (HPLC-UV) 99.8%; XH RMN (300 MHz, CDC13) d 8.67-8.63 (m, 1 H) , 8.01-7.96 (m, 1 H) , 7.35-7.28 (m, 1 H) , 7.22-7.13 (m, 2H) , 7.05-6.98 (m, 1 H) , 6.63 (s, 1 H) , 6.62-6.58 (m, 1 H) , 6.49 (s, 1 H) , 5.42, 5.14 (ABq, JAB = 17.3 Hz, 2H) , 5.00, 4.74 (ABq, JAB = 8.9 Hz, 2H) , 4.22-4.10 (m, 4H) ; 13C RMN (75 MHz, CDCI3) d 178.3, 155.3, 152.5, 144.6, 142.4, 138.4, 134.3 (q, 3JC-F = 5.2 Hz), 132.8, 128.7, 124.4, (q, 2JC-F = 32.6 Hz), 123.9 (q, 1JC.F = 273.3 Hz) , 123.8, 123.4, 122.2, 121.7, 1 12.6, 108.6, 99.2, 80.2, 64.6, 64.0, 58.3, 42.3 (q, JC-F = 3.3 Hz) ; MS (ES+) m/z 454.8 (M + 1) .

EJEMPLO SINTÉTICO 5 Resolución de Compuesto de la fórmula (II) mediante Cromatografía SMB el compuesto de la fórmula (II) se resuelve en el compuesto de la fórmula (II-S) y el compuesto de la fórmula (II-R) mediante cromatografía SMB bajo las siguientes condiciones : Extracto: 182.67 mL/min Refinado: 67.44 mL/min Eluyente: 224.1 1 mL/min carga: 26.0 mL/min Reciclaje: 420 mL/min T.iempo de serie: 1 .05 min Temperatura: 25° C Presión: 50-55 bar La solución de carga (68.4 g de compuesto de la fórmula (II) en 1 .0 L de fase móvil (97:3 (v:v) mezcla de diclorometano/acetona ) ) se inyecta de forma continua en el sistema SMB (Novasep Licosep Lab Unit), que se equipa con ocho columnas idénticas en la configuración 2-2-2-2 que contiene 1 10 g (por Columna, 10.0 cm, 4.8 cm I.D.) de ChiralPAK®-IC como fase estacionaria . El compuesto de la fórmula (II-R) está contenido en la corriente refinada y el compuesto de la fórmula (I-S) está contenido en la corriente de extracto.

Un total de 10.62 kg del compuesto de la fórmula (II) se procesa mediante cromatografía SMB utilizando las condiciones anteriores. Todas las fracciones de extracto con una pureza quiral (HPLC) > 99.0 a/a se agrupan, se concentran a un volumen de 26 L bajo presión reducida y se transfieren a un reactor de 100 L. La solución se concentra adicionalmente bajo una presión reducida de 700-590 mbar a 26-37° C hasta que se ha recolectado 13 L de destilado. Se agrega metanol (25 L) y la mezcla se concentra bajo una presión reducida de 650-360 mbar a 30-38° C hasta que se ha recolectado, 15 L de destilado. La mezcla se enfria a 20° C y se agrega metanol (15 L) . La mezcla se concentra bajo una presión reducida de 650-320 mbar a 20-39° C hasta que se ha recolectado 15 L de destilado y se enfria a 1° C durante 53 minutos y se agita durante unos 70 minutos adicionales. La suspensión se filtra y la torta de filtro se lava con metanol frió (0o C) (9 L) y se seca a temperatura ambiente bajo un flujo de gas de nitrógeno durante 15.5 h. El sólido se seca adicionalmente a una presión reducida de 40-1 mbar a 50° C durante 195 minutos para producir el compuesto de la fórmula (II-S) , es decir, (S) -1' -{ [3- (trifluorometil) piridin-2-il]metil}-2, 3-dihidro [furo [2, 3-g] [1 , 4 ] benzodioxina-8 , 3' -indol ] -2 ' (l'H)-ona (3.62 kg) como un sólido incoloro: pureza (HPLC-UV) 100%; XH RMN (300 MHz , CDC13) d 8.67-8.63 (m, 1 H) , 8.01-7.96 (m, 1 H), 7.35-7.28 (m, 1 H) , 7.22-7.13 (m, 2H) , 7.05-6.98 (m, 1 H) , 6.63 (s, 1 H), 6.62-6.58 (m, 1 H) , 6.49 (s, 1 H) , 5.42, 5.14 (ABq, JAB = 17.3 Hz, 2H) , 5.00, 4.74 (ABq, JAB = 8.9 Hz, 2H), 4.22-4.10 (m, 4H) ; 3C RMN (75 MHz, CDC13) d 178.3, 155.3, 152.5, 144.6, 142.4, 138.4, 134.3 (q, 3 C-F = 5.2 Hz) , 132.8, 128.7, 124.4, (q, 2JC.F = 32.6 Hz), 123.9 (q, 1 C.F = 273.3 Hz), 123.8, 123.4, 122.2, 121.7, 112.6, 108.6, 99.2, 80.2, 64.6, 64.0, 58.3, 42.3 (q, 4JC.F = 3.3 Hz); MS (ES+ ) m/z 454.8 (M + 1); [a]D +45.1° (c 2.02, DMSO) ; ee (CHIRALPAK IC, diclorometano/acetona .97/3 (v/v) ) 100%.

El compuesto de la fórmula (II-R), es decir, (R)-l'-{[3-(triflúorornetil) piridin-2-il]metil}-2,3-dihidrospiro [furo [2, 3-g] [1, 4 ] benzodioxina-8 , 3' -indol] -2' (l'H)-ona, se aisla a partir del refinado mediante procedimientos estándar.

ENSAYOS BIOLÓGICOS Con el fin de que la invención descrita aqui se pueda entender más completamente el siguiente ensayo biológico se establece para demostrar la utilidad de los compuestos preparados aqui se debe entender que este Ejemplo es solo para propósitos . ilustrativos y no se debe constituir como limitante de esta, invención en cualquier manera.

EJEMPLO BIOLÓGICO 1 Ensayo de Influjo de Guanidina (ensayo in vitro) Este ejemplo describe un ensayo in vitro para probar y perfilar agentes de prueba contra canales de sodio regulados por voltaje humanos o de rata expresados de forma estable en las células de un endógeno u origen expresado heterólogamente . Este ensayo también es útil para determinar el IC50 de un compuesto que modula el canal de sodio regulado por voltaje (preferiblemente que bloquea) . El ensayo se basa en el ensayo de influjo de guanidina orno se describió por Reddy, N.L., et aL, J. Med. Chem. (1$98), 41 (7 ): 3298-302.

El ensayo de influjo de guanidina es un ensayo de influjo de radiotrazador utilizado para determinar la actividad de flujo de iones de canales de sodio regulados por voltaje en un formato basado en microplaca de alto rendimiento. El ensayo utiliza clorhidrato de 1 C-guanidina en combinación con diversos moduladores del canal de sodio regulados por voltaje conocidos que producen influjo mantenido, para ensayar la potencia de los agentes de ensayo. La potencia se determina por un cálculo CI50. La selectividad se determina mediante al comparar la potencia del compuesto para el canal de sodio regulado por voltaje de interés para su potencia contra otros canales de sodio regulados por voltaje (también llamado "perfil de selectividad") .

Cada uno de los agentes de prueba se ensaya contra las células que expresan los canales de sodio regulados por voltaje de interés. Los canales de sodio regulados por voltaje se caracterizan por sensibilidad o insensibilidad al TTX. Esta propiedad es útil en la evaluación de las actividades de un canal de sodio regulado por voltaje de interés cuando se reside en una población mixta con otros canales de sodio regulados por voltaje. La siguiente Tabla 1 resume las estirpes celulares útiles en la detección de una cierta actividad de canal de sodio regulado voltaje en la presencia o ausencia de TTX.

TABLA 1 TABLA 1 (CONTINUACIÓN) También es posible emplear estirpes celulares Drtalizadas que expresan de forma heteróloga los canales sodio regulados por voltaje. La clonación, transfección estable y propagación de tales estirpes celulares se conoce por aquellos expertos en la técnica (vee, por ejemplo, Klugbauer, N, et al.r EMBO J. (1995), 14(6): 1084-90; y Lossin, C, et al., Neuron (2002), 34, pp. 877-884).

Las células que expresan el canal de sodio regulado por voltaje de interés se producen de acuerdo con el proveedor o en al caso de una célula recombinante en la presencia de medio de crecimiento selectivo tal como G418 (Gibco/Invitrogen) . Las células se disocian de las placas de cultivo con una solución enzimática (IX) Tripsina/EDTA (Gibco/Invitrogen) y se analiza para densidad y viabilidad utilizando un hemocitómetro (Neubauer) . Las células disociadas se lavan y se resuspenden en su medio de cultivo luego se colocan en placas Scintiplates cubiertas con Poli-D-Lisina (Perkin Elmer) (aproximadamente 100,000 células/pozo) y se incuban a 37° C/5% de C02, durante 20-24 horas. Después de un lavado extenso con Solución Salina regulada con HEPES-baja en sodio (LNHBSS) (150 mM de cloruro de Colina, 20 nM de HEPES (Sigma) , 1 mM de cloruro de Calcio, 5 mM de cloruro de Potasio, 1 mM de cloruro de Magnesio, 10 mM de Glucosa) , los agentes de prueba se diluyen con LNHBSS y luego se agregan a cada pozo en la concentración deseada. (Puedes ser útiles concentraciones que varían de este agente de prueba) . La mezcla de activación/radioetiqueta contiene un alcaloide tal como veratridina o Aconitina (Sigma) o a piretroide tal como deltametrina, veneno del escorpión Leiurus quinquestriatus hebraeus" (Sigma) y clorhidrato de 14C-guanidina (ARC) para medir el flujo a través de los canales de sodio regulados por voltaj e .

Después de cargar las células con agente de prueba y la mezcla de activación/radioetiqueta, las placas Scintiplates cubiertas con Poli-D-Lisina se incuban a temperatura ambiente. Luego de la incubación, las placas Scintiplates cubiertas con Poli-D-Lisina se lavan extensamente con LNHBSS complementado con Guanidina (Sigma) . Las placas Scinti cubiertas con Poli-D-Lisina se secan y luego se cuentan utilizando un Wallac MicroBeta TriLux ( Perkin-Elmer Life Sciences) . Se determina la capacidad del agente de prueba para bloquear la actividad del canal de sodio regulado por voltaje al comparar la cantidad de 14C-guanidina presente dentro de las células que expresan los canales de sodio regulados por voltaje diferentes. .Con base en estos datos, una variedad de cálculos, como se establece en alguna parte de esta especificación, se pueden utilizar para determinar si un agente de prueba es selectivo para un canal de sodio regulado por voltaje particular.

El valor IC50 de un agente de prueba para un canal de sodio regulado por voltaje especifico se puede determinar utilizando el anterior método general. El IC50 se puede determinar utilizando una curva de punto 3, 8, 10, 12 o 16 en duplicado o triplicado con una concentración de partida de 1, 5 o 10 µ? diluida serialmente con una concentración final que alcanza los rangos sub-nanomolares , nanomolares y micromolares bajos. Típicamente la concentración de punto medio del agente de prueba se establece a 1 µ?, y las concentraciones secuenciales de las diluciones medias mayores o menores se aplican (por ejemplo, 0.5 µ?; 5 µ y 0.25 µ?; 10 µ y 0.125 µ?; 20 µ? etc.) . La curva IC50 se calcula utilizando la fórmula de Modelo Logistico de Parámetro 4 o Modelo de Respuesta de Dosis Sigmoidal (ajuste= (A+((B-A)/(1 + ( (C/x^D) ) ) ) .

Las veces de selectividad, factor de selectividad o múltiplo de selectividad, se calcula al dividir el valor IC50 del canal de sodio regulado por voltaje de prueba por el canal de sodio regulado por voltaje de referencia, por ejemplo, Nav1.5.

De acuerdo con lo anterior, los compuestos preparados por los métodos descritos aquí demuestran actividad de canal de sodio regulado por voltaje contra hNavl .7 como se establece adelante en la Tabla 2: TABLA 2 Todas las patentes de los EE.UU., publicaciones de solicitudes de patentes EE.UU., solicitudes de patentes de los EE.UU., patentes extranjeras, solicitudes de patentes extranjeras y publicaciones de no patente mencionadas en esta especificación y/o enumeradas , en la Hoja de Datos de Solicitud se incorporan aquí como referencia, en su totalidad .

Aunque la invención anterior ha sido descrita con algún detalle para facilitar la comprensión, será evidente que ciertos cambios y modificaciones se pueden practicar dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas. De acuerdo con lo anterior, las modalidades descritas han de considerarse como ilustrativas y no restrictivas, y la invención no se limitada a los detalles dados aqui, sino que puede modificarse dentro del alcance y los equivalentes de las reivindicaciones adjuntas.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como prioridad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1. Un método para preparar un compuesto de la fórmula (I) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos; el método caracterizado porque comprende tratar un compuesto de la fórmula (8): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un compuesto de la fórmula (9): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para proporcionar el compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (8), en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (7): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con una base bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (8), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo . 3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (7), en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (6): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones de reacción Mitsunobu estándar para formar el compuesto de la fórmula (7) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (6), en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (5) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un aldehido bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (6), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo . 5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (5), en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (4): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (5), o una sal farmacéuticamente ac ptable del mismo. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (4), en donde el método comprende : a) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (2): (¾ o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un reactivo Grignard de la fórmula (3): bajo condiciones adecuadas para formar un producto intermedio; y b) hacer reaccionar el producto intermedio de a) con un compuesto de la fórmula (1): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (4), o u,na sal farmacéuticamente aceptable de,l mismo. 7. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende adicionalmente resolver el compuesto de la fórmula (I) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas, para proporcionar un compuesto de la fórmula (I-S): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un compuesto de la fórmula (I-R) : una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Un método para preparar un compuesto de la fórmul (II) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos; el método caracterizado porque comprende tratar un compuesto de la fórmula (15) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un compuesto de la fórmula (16) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para proporcionar el compuesto de la fórmula (II), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un estereoisómero o enantiómero individual o una mezcla de los mismos. 9. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (15) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (14): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un agente de alquilación bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (15), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (14), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (13) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (14), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 11. El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (13), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende: a) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (12) : con un reactivo Grignard de la fórmula bajo condiciones adecuadas para formar un producto intermedio; and b) hacer reaccionar el producto intermedio de a) con un compuesto de la fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (13), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (12) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (11): con un agente de oxidación bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (12), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 13. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque comprende adicionalmente una preparación del compuesto de la fórmula (11), en donde el método comprende tratar un compuesto de la fórmula (10) : con un reactivo de alquilación adecuado bajo condiciones adecuadas para formar el compuesto de la fórmula (11) . 14. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque comprende adicionalmente resolver un compuesto de la fórmula (II) bajo condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (II-S) : o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un compuesto de la fórmula (II-R) : 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.