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WO2003048139A1 - Derives de piperazine et leur utilisation comme inhibiteurs de phospholipase - Google Patents

Derives de piperazine et leur utilisation comme inhibiteurs de phospholipase Download PDF

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Publication number
WO2003048139A1
WO2003048139A1 PCT/FR2002/004225 FR0204225W WO03048139A1 WO 2003048139 A1 WO2003048139 A1 WO 2003048139A1 FR 0204225 W FR0204225 W FR 0204225W WO 03048139 A1 WO03048139 A1 WO 03048139A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
aryl
compound
formula
mmol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/FR2002/004225
Other languages
English (en)
Inventor
Françoise HEYMANS
Aazdine Lamouri
Jean-Jacques Godfroid
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yang Ji Chemical Co Ltd
Original Assignee
Yang Ji Chemical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yang Ji Chemical Co Ltd filed Critical Yang Ji Chemical Co Ltd
Priority to EP02799795A priority Critical patent/EP1456186A1/fr
Priority to JP2003549331A priority patent/JP2005511689A/ja
Priority to AU2002364435A priority patent/AU2002364435A1/en
Priority to CA002469395A priority patent/CA2469395A1/fr
Priority to US10/497,742 priority patent/US20050075345A1/en
Publication of WO2003048139A1 publication Critical patent/WO2003048139A1/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/06—1,2,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,4-oxadiazoles
    • C07D271/07—1,2,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,4-oxadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
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    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
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    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
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    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/34—Oxygen atoms

Definitions

  • the present invention relates to new specific inhibitor compounds for secreted non-pancreatic phospholipase A 2 (PLA 2 -snph) group II, their preparation process, compositions containing them and their use in particular in therapy of inflammatory pathologies.
  • PKA 2 -snph non-pancreatic phospholipase A 2
  • PLA 2 Acting upon the penetration into the body of pathogenic agents (viruses, bacteria, parasites or antigens) or even in response to inflammatory stimuli such as trauma, burns or irradiation, PLA 2 play a pivotal role in the spread and amplification of inflammation. These enzymes catalyze the hydrolysis of phospholipids
  • lipid mediators including the platelet activating factor (PAF), leukotrienes and prostaglandins. They are endowed with multiple biological activities (proliferation and cell migration,
  • PKA 2 -snph group II 25 secreted non-pancreatic human (PLA 2 -snph) group II plays a central role, probably acting in an autocrine / paracrine way by participating in the production of proinflammatory lipid mediators, stimulating migration and cell proliferation and through its properties antibacterial. In many situations
  • the level of circulating PLA 2 -snph is closely correlated with the severity and outcome of the disease. This is the case in septic shock caused by either a gram negative infection, peritonitis, malaria or even aspirin poisoning. In this case, an excessive release of PLA 2 -snp contributes to circulatory collapse,
  • PLA 2 -snp accumulates in cartilage, joint and extra-articular matrix, chondrocytes and synovial fluid and the level of circulating enzyme is in accordance with the size and number of inflamed joints.
  • PLA 2 -snp is involved in asthma, allergic rhinitis, asbestosis.
  • this enzyme is activated by ischemia (its expression is also increased after an ischemic brain shock) and plays an important role in the deposition of high density lipoproteins (it is indeed found to be strongly expressed in the atheroma plaque) suggesting a potential role in atherosclerosis and cardiovascular morbidity.
  • PLA 2 -snph group II is not the only secreted PLA 2 present in the human body where the PLA 2 of groups I (pancreas), N (heart, lung) and X (spleen, leukocytes, lung) play also an important role.
  • pancreatic PLA 2 has a role physiological primordial since its catalytic activity is responsible for the digestion of lipids of food origin. It is therefore important not to influence this function, this being complicated by the fact that all of these enzymes have a great similarity in their size (13 to 14 kDa), their three-dimensional structure (three oc helices more or less connected by 6 with 8 disulfide bridges) and their dependence on calcium necessary for catalytic activity at concentrations of the order of mM. They also have the same action mechanism based on a relay system of protons which involves several residues of the active site: histidine 48, glycine 30, aspartates 49 and 99 and tyrosines 52 and 73.
  • the new family of group II PLA2 selective inhibitor compounds having an inhibitory activity much higher than that shown for previously known compounds, in particular the compounds described in French patent application No. FR 99 06366. supra.
  • the new compounds according to the invention are characterized in particular by the presence of a substituted or unsubstituted piperazinyl ring on carbon atoms.
  • the compounds according to the invention not only have the selective inhibitory activity on group II PLA 2 while remaining completely inactive on group I pancreatic PLA 2, but also have an in vivo activity greater than that of indometacin.
  • the compounds according to the invention have excellent bioavailability when administered orally.
  • - D signifies the Z-HET group or the Z ⁇ HET group
  • -HET is a 5-membered heterocycle such as oxadiazolone (II) or thiazolidine dione (III) of the following formulas: .4.
  • -Z- is chosen from the group consisting of - (CR ⁇ R2) n - and - (CRi ⁇ CR 2 ) n
  • n an integer having a value ranging from 1 to 6
  • R 2 identical or different, independently of one another represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms.
  • -Z represents -CRi ⁇ , in which Ri represents a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group of 1 to 6 carbon atoms; - p is an integer having the value 0 or 1;
  • -Y- is chosen from the group consisting of C ⁇ O, SO2 and - (CR3R) m- with m being an integer having a value ranging from 1 to 6, R 3 and R, identical or different, independently represent the one of the other a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms.
  • - A and B on the piperazine cycle identical or different, independently of one another represent a carbon atom linked to hydrogens, a carbon atom linked both to a hydrogen and to a linear or branched alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, or a -C ⁇ O group.
  • - q is an integer having the value 0 or 1;
  • -W- is chosen from the group consisting of - c -, - 0 - c - and
  • H C ; -R is chosen from the group consisting of linear or branched alkyl groups having from 1 to 22 carbon atoms, the polyaryl groups and the aryl-alkyl, alkyl-Q-alkyl, alkyl-Q-aryl, aryl-Q-aryl and aryl-Q-alkyl groups for which:
  • aryl represents an aryl group having from 5 to 10 members, it is understood any aryl compound, substituted or unsubstituted, known to those skilled in the art, in particular the phenyl, naphthyl, phenylphenyl (or biphenyl) group or else a heterocyclic aryl such as the indolyl group.
  • the aryl group is preferably substituted by one or more halogen atoms, such as F, Cl or Br, or also by groups chosen from CF 3 , OH, MeO and N0 2 .
  • alkyl represents a linear or branched alkyl group having from 1 to 12 carbon atoms, and
  • Q is selected from the group consisting of -O-, -S-, -NH-, -NRs-, -
  • the compounds of formula (I) defined above have a selective inhibitory activity on PLA2 from group II, expressed as the concentration of compound (I) capable of inhibiting 50% of the enzymatic activity (IC50), which is in general less than 1 ⁇ M, often less than 0.5 ⁇ M and for some of these compounds is approximately 0.1 ⁇ M, while the most active of the compounds described in application FR 99 06366 has an inhibitory activity, expressed as an IC50 , 3 ⁇ M.
  • a family of preferred compounds according to the invention having a very high inhibitory activity selectively on human PLA 2 of Group II is the family of compounds for which p is equal to 1 and Y represents the group C ⁇ O, groups D, A , B, q, W and R having the meanings defined above.
  • the compounds of formula (I) above are chosen from the group consisting of: a) l- [4 ′ - (4,5-dihydro-1,2,4 (4H) -5-oxo-oxadiazol-3-ylmethyl) benzyl] - 4-tetradecyl piperazine b) l- [4 '- (4,5-dihydro-1,2,4 (4H) -5-oxo- oxadiazol-3-ylmethyl) benzoyl] -4-octa decylpiperazine c) l- [4 '- (4,5-dihydro-1,2,4 (4H) -5-oxo-oxadiazol-3-ylmethyl) benzoyl] -2,5-di methyl-4-dodecylpiperazine d) l- [4 '- (4,5-dihydro-1,2,4 (4H) -5-oxo-oxadiazol-3-ylmethyl) benzoyl]
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the compounds of formula (I) described above.
  • the preparation process can be chosen from processes I and II below:
  • R, q, W, A, B, p, and Y are defined as above and:
  • - Z- is chosen from the group consisting of - (CRiR ⁇ Jn- and - (CRi ⁇ CR2) n - with n being an integer having a value ranging from 1 to 6, Ri and
  • R2 identical or different, independently of one another represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, or to form the corresponding intermediate oxime, then to subject this oxime cyclization by reaction with a chlorocarbonate (or chloroformate) followed by heating to a temperature sufficient to achieve substantially complete cyclization; a) - Method II: reacting the thiazolidine-2,4-dione on the aldehyde function of the derivative of formula (VII):
  • R, q, W, A, B, p and Y are defined as above and, -r is an integer having the value 0 or 1, -U- is chosen from the group consisting of - (CR 6 R7) s - and - (CR ⁇ CR7) S - with s being an integer having a value ranging from 1 to 6 and with R 6 and R 7 , identical or different, representing a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms.
  • This reaction is carried out in refluxing toluene in the presence of pyridinium benzoate to form the ethylenic derivative (V) as defined above, and followed by a possible reduction of the Z ⁇ C double bond by catalytic hydrogenation (Parr apparatus ) in the presence of 100% black palladium and hydrogen under pressure in absolute ethanol at 50 ° C.
  • the starting materials for the above process steps can be prepared according to methods well known to those skilled in the art (see in particular Examples 1 to 6 below).
  • the invention also relates to the use of a compound of formula (I) as defined above for selectively inhibiting a group II PLA 2 , preferably in an in vitro test.
  • the present invention further relates to a pharmaceutical composition characterized in that it comprises at least one compound of general formula (I) described above in association with at least one excipient chosen from the group consisting of pharmaceutically acceptable excipients.
  • a pharmaceutical composition as defined is suitable for daily oral or parenteral administration of an amount of a compound of formula (I) of between 1 ⁇ g and 10 mg and preferably between 1 ⁇ g and 1 mg per kg of weight of the patient.
  • a pharmaceutical composition as defined above is suitable for local, preferably topical, daily administration of an amount of a compound of formula (I) of between I ⁇ g and 100 mg and preferably between 100 ⁇ g and 10 mg per kg of patient weight.
  • composition according to the invention comprises at least one pharmaceutically acceptable excipient
  • it is in particular an excipient suitable for administration of the composition by topical route, an excipient suitable for administration of the composition by oral route and / or an excipient suitable for administration of the composition by the parenteral route.
  • the present invention also relates to a compound of general formula (I) as described above, for its use as a therapeutically active principle in a drug.
  • the subject of the invention is the use of at least one compound of general formula (I) as described above for the preparation of a medicinal composition intended to inhibit the activity of non-secreted PLA 2 human pancreatic group IL
  • the present invention also relates to the use of at least one compound of general formula (I) as described above, for the preparation of a medicament intended for the prevention or treatment of inflammation, in particular of chronic inflammation and acute inflammation, that is to say, in particular inflammatory pathologies in which the non-pancreatic secreted PLA2 is involved.
  • the present invention also relates to the use of at least one compound of general formula (I) as described above, for the preparation of a medicament intended for the treatment of rheumatic disorders.
  • the invention also relates to a method for treating an inflammation state in a patient, preferably a chronic inflammation state or an acute inflammation state, said method comprising a step during which the patient is administered a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or of a pharmaceutical composition containing a compound of formula (I).
  • the subject of the invention is also a method for preventing a state of inflammation in a patient, said method comprising a step during which the patient is administered a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or of a pharmaceutical composition containing a compound of formula (I).
  • the compound of formula (I) or the pharmaceutical composition containing the compound of formula (I) can be administered orally, parenterally or even be applied topically, locally to the skin of a patient.
  • the following examples are intended to illustrate the present invention and should in no way be interpreted as being capable of limiting its scope.
  • N-bromosuccinimide N-bromosuccinimide
  • AIBN 2.2'- azobis (2-methyl-piOpionitrile)
  • the carbonate intermediate obtained is then taken up in 40 ml of dry toluene and heated for 12 hours at reflux.
  • the toluene is then evaporated under reduced pressure and the residue obtained is purified by chromatography on a column of silica gel eluted with a mixture of EfeCfe / MeOH, 98: 2, v / v.
  • the product crystallizes from an acetone / ether mixture and leads to 500 mg of white crystals of the terminal compound. Yield: 26%.
  • Rf 0.33 (CH 2 Cl 2 / MeOH, 90:10, v / v).
  • step 1.4 of Example 1 Following the same protocol as that described for step 1.4 of Example 1, but starting with 1.3 g (2.53 mmol) of amidoxime prepared in the previous step 2.5, 0.45 ml (3 , 28 mmol) of triethylamine as well as 0.4 ml (3.03 mmol) of phenyl chloroformate. The product crystallizes from acetone and leads to 500 mg of white crystals of terminal compound. Yield: 37%. Melting point: 121 ° C. Rf: 0.38 (CH 2 Cl 2 / MeOH, 90:10, v / v).
  • step 1.3 of Example 1 Following the same protocol as that described for step 1.3 of Example 1, but starting from 1.52 g (21 mmol) of hydroxylamine hydrochloride, 3.64 g (26 mmol) of potassium carbonate and 2 g (4 mmol) of the nitrile obtained in step 4.3 above.
  • the crude product is purified by chromatography on a column of silica gel with dichloromethane as eluent and gives an oil which crystallizes from acetone. 600 mg of white crystals of the title amidoxime are thus recovered. Yield: 28%. Melting point: 110.1 ° C. Rf: 0.40 (CH 2 Cl 2 / MeOH, 95: 5, v / v). 48139
  • a suspension of 210 mg (3.69 10 ⁇ 4 mole) of the compound of Example 5, dissolved in 50 ml of absolute ethanol is subjected to catalytic hydrogenation in a Parr apparatus, in the presence of 100% black palladium and of hydrogen under pressure (40 to 50 psi) and stirred for more than 5 hours at 60 ° C.
  • the palladium is filtered, the ethanol evaporated and the residue obtained is purified by chromatography on a gel column. silica with a dichloromethane / methanol mixture, 99: 1, v / v as eluent.
  • the product is then crystallized from acetonitrile and 126 is recovered.
  • the salt formed (ZnCl) is filtered under vacuum and washed several times with water. A precipitate is deposited cold in the filtrate, it is filtered and washed several times with water and then dried. A white solid is recovered. Yield: 68%. Fusion point :
  • the bromine derivative prepared above is transformed into nitrile according to the same protocol described in Example 1 above with a yield of 75% and of viscous appearance.
  • This amidoxime is obtained under the same conditions as those described above from 5.8 g (84 mmol) of hydroxylamine hydrochloride, 14.07 (102 mmol) of potassium carbonate and 8.9 g (17 mmol) of 1 - (4'-cyanomethylbenzoyl) -4- (octadecylaminocarbonyl) piperazine.
  • the residue obtained is purified by chromatography on silica gel with a mixture of CH 2 Cl 2 / MeOH, 98: 2, v / v as eluent. 2.36 g of white crystals are thus obtained. Yield: 38%. Melting point: 104-106 ° C. Rf: 0.43 (CH 2 Cl 2 / MeOH, 90:10, v / v).
  • Phospholipases A 2 hydrolyze the ester bond in position sn-2 of the glycerol phospholipids and release a fatty acid and a lysophospholipid.
  • the action of the compounds was in particular evaluated in vitro by the determination of fatty acid according to the fluorimetric method of Radvanyi et al. (Anal. Biochem. 1989, 177, 103-109) and by the determination of lysophospholipid according to the UN spectrophotometric method of Reynolds et al. (Anal. Biochem. 1992, 204, 190-197).
  • the enzymes used are two secreted group II enzymes, recombinant human PLA 2 and the basic PLA 2 subunit of Crotalus durissus terrificus and a secreted group I enzyme, pig pancreatic PLA 2 .
  • the substrates are: a fluorescent substrate, palmitoyl-2- (10-pyrenyl decanoyl) -sn-glycero-3-phosphatidylglycerol acid, for the fluorimetric method and a sulfur substrate, the lithium salt of 1,2-bis - (dihexanylthio) -dideoxy-rac-glycero-3- ⁇ hosphorylglycerol for the spectrophotometric method UN.
  • the fluorimetric assays are carried out on a Perkin Elmer LS50 device in single-use polystyrene tanks, 1 cm wide. The exact concentration of the fluorescent substrate is determined on a UN spectrometer. Unicam in quartz tanks.
  • PLA2 is an enzyme which hydrolyzes the ester bond in position sn-2 of phospholipids.
  • the fluorescent substrate has a maximum fluorescence emission at 490 nanometers (nm), and zero at 398 nm.
  • the fluorescence emitted by the fatty acid released (pyrenyl decanoic acid), complexed with bovine serum albumin (SAB) is exalted and a strong emission is then observed at 378 and 398 nm.
  • SAB bovine serum albumin
  • the principle of the assay is based on the measurement of this difference in fluorescence at 398 nm which is used to study the appearance of the fatty acid released over time, in other words, the PLA2 activity.
  • the measurement of the enzymatic activity is carried out in tanks in which we sample: 960 ⁇ l of Tris buffer, 50 mM HCl at pH 7.5; 0.5 M NaCl, EGTA, ImM; 1 ⁇ M substrate. This mixture is stirred for one minute using a vortex, to allow the formation of substrate vesicles, then 10 ⁇ l of 10% BSA, 10 ⁇ l of solvent (efhanol or DMSO) or inhibitor solution, are added successively, with stirring. ⁇ l of PLA2 at a given concentration and finally, 10 ⁇ l of 1 M calcium chloride (CaCl 2 ) which triggers the activity.
  • the initial concentrations used are therefore: (i) human recombinant PLA 2 : 0.1 ⁇ g / ml; (ii) PL A 2 pancreatic pork: 0.6 ⁇ g / ml; (iii) PLA 2 Crotalus durissus terrificus (CB): 0.05 ⁇ g / ml.
  • the mother solution containing the inhibitor is prepared at an initial concentration of 10 ′ 2 M.
  • PLA 2 have more affinity for organized substrates.
  • the inhibitor disorganizes the substrate micelles and makes them inaccessible to the enzyme. In this case, the inhibition is due to the unavailability of the substrate.
  • the IC50 can be underestimated.
  • the inhibitor reacts either with a group of the active site or with another part of the enzyme, thus preventing hydrolysis of the substrate.
  • the inhibition observed is real, it takes place at the active site, and may or may not have a reversible character.
  • the fluorimetric test is a very sensitive technique, but does not make it possible to differentiate between these three types of inhibition, the substrate being in micellar form.
  • the substrate being in micellar form.
  • the spectrophotometric test described below, the monomeric state of the substrate 48139
  • LTPL lysothiophospholipid released by the lipolytic action of PLA 2 in the presence of calcium reacts with dithionitrobenzoic acid (DTNB) present in the medium to form an LTPL-TNB complex and a TNB- anion which induces a yellow coloration of the reaction medium.
  • DTNB dithionitrobenzoic acid
  • the measurement of the optical density at 412 nanometers (wavelength of absorption of the TNB- ion) reflects the appearance of the lysothiophospholipid and therefore a PLA 2 activity.
  • the enzymatic activity is measured in multi-well plates, each well containing 190 ⁇ l of buffer IX, 2 ⁇ l of DTNB at 10 mM, 2 ⁇ l of substrate at 20 mM, 2 ⁇ l of solvent or inhibitor solution, 2 ⁇ l of PLA 2 at a given concentration.
  • the plate is shaken and 2 ⁇ l of 1 M calcium chloride are added to trigger the enzymatic reaction.
  • the substrate is used here at a concentration lower than the cmc, critical micellar concentration (it is of ImM), in monomeric form, and the substrate / enzyme ratio is respected. This justifies the use of the substrate at a concentration 5 times lower than the cmc (200 ⁇ M). Good measurement conditions also require enzyme saturation.
  • the concentrations used are therefore: (i) pancreatic pig PLA 2 : 1.5 mg / ml; (ii) PLA 2 Crotalus durissus terrificus: 0.43 mg / ml.
  • the mother solution containing the inhibitor is prepared at an initial concentration of 10 ' 2 M.
  • the IC50 is determined using software coupled to the UN spectrophotometer. It directly calculates the initial rate of the reaction. This speed is represented by the ratio: 048139
  • the reference product, indomethacin, or compound No. 5 to be evaluated were administered either intraperitoneally (ip) or orally (po) one hour before the injection of carrageenan in the hind paw of the rat.
  • the volume of the edema was measured at times 0, 3 and 5 hours after the injection of carrageenan.
  • the doses used were 5, 10 and 20 mg / kg for the two products tested. 048139
  • the two products have equivalent activity.
  • the inhibitions of edema by indomethacin and compound No. 5 are 79% and 73% respectively.
  • compound No. 5 has a clearly superior activity to that of indomethacin since, after 5 hours after the injection of carrageenan, it inhibits edema by 65%, while the reference product has an inhibitory activity of 16%, the two products having been administered at a dose of 10 mg / kg po
  • Example 13 relates to a study of the anti-inflammatory activity in vivo of certain compounds of the invention, by means of the test of ear edema as an experimental model of acute inflammation.
  • PMS1289 1- para ((1,2,4- (4H) -5-oxo) oxodiazol-3-ylmethyl) benzoyl) 4-dodecyl-2,5-dimethylpiperazine.
  • PMS 1314 1- [4 '- (4,5-dihydiO-1,2,4 (4H) -5-oxo-oxadiazol-3-ylmethyl) benzoyl] - 4-dodecylpiperazine.
  • CMC cyclopentane
  • ethanol hexane
  • ether hexane
  • PEG polyethylene glycol
  • the animals used were male mice of the ICR strain having a weight of 25 g.
  • A3 As instruments, we used: a punch for taking skin samples, an ear thickness measuring device (Ozaki, Japan), a balance, an automatic pipette, tweezers, a Nortex shaker, a anesthesia chamber, hood, cage, Eppendorf ® tube, safety mat, tubes etc.
  • the weight of the tissue developing an edema was taken by punching the skin and compared with a sample by punching the skin of a control part in order to calculate the inhibition ratio. .
  • the anti-inflammatory activities in vivo of the PMS compounds are classified from the 048139

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  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
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  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

Les composés de formule générale (I) dans laquelle D signifie le groupe Z-HET, -HET étant un hétérocycle à 5 chaînons tel que l'oxadiazolone (II) ou la thiazolidine dione (III) de formules (II et III) et -Z étant choisi dans le groupe constitué par -(CR>1<R>2<)>n<- et -(CR>1<=CR>2<)>n<; ou D signifie le groupe Z=HET, -Z- représentant, avec l'hétérocycle, un groupement -Z=HET de formule (IV) ou (V) dans laquelle -Z= représente -CR>1<=; sont utiles comme inhibiteurs spécifiques de la phospholipase A>2< sécrétée non pancréatique humaine (PLA>2<-snph) de groupe (II), notamment en thérapie de pathologies inflammatoires.

Description

DΞRIVES DE PIPERAZINE ET LEUR UTILISATION COMME INHIBITEURS DE PHOSPHOLIPASE
5 La présente invention concerne de nouveaux composés inhibiteurs spécifiques de la phospholipase A2 sécrétée non pancréatique humaine (PLA2-snph) de groupe II, leur procédé de préparation, des compositions les contenant et leur utilisation notamment en thérapie de pathologies inflammatoires .
10 Agissant suite à la pénétration dans l'organisme d'agents pathogènes (virus, bactéries, parasites ou antigènes) ou encore en réponse à des stimuli inflammatoires tels que traumatisme, brûlure ou irradiation, les PLA2 jouent un rôle pivot dans la propagation et l'amplification de inflammation. Ces enzymes catalysent l'hydrolyse des phospholipides
15 en position sn-2 et libèrent des lysophospholipides et des acides gras comme l'acide arachidonique. Ces derniers peuvent être les précurseurs d'une variété de médiateurs lipidiques dont le facteur d'activation plaquettaire (PAF), les leucotriènes et les prostaglandines. Ils sont doués d'activités biologiques multiples (prolifération et migration cellulaire,
20 contraction, neurosécrétion, libération hormonale, etc) et sont impliqués dans différentes pathologies inflammatoires et certains cancers.
Parmi les phospholipases A2 référencées sous le n°EC 3.114 selon la Classification Internationale, les phospholipases A2 du groupe II constituent une classe particulière d'enzymes. La phospholipase A2
25 sécrétée non pancréatique humaine (PLA2-snph) de groupe II joue un rôle central, agissant vraisemblablement de manière autocrine/paracrine en participant à la production de médiateurs lipidiques proinflammatoires, en stimulant la migration et la prolifération cellulaire et au travers de ses propriétés antibactériennes. Dans de nombreuses situations
30 pathologiques, le taux de PLA2-snph circulante est en étroite corrélation avec la sévérité et l'issue de la maladie. C'est le cas dans le choc septique causé soit par une infection gram négative, une péritonite, la malaria ou même une intoxication à l'aspirine. Dans ce cas, une libération en quantité excessive de la PLA2-snp contribue au collapsus circulatoire, à
35 l'hypotension, au développement du syndrome de détresse respiratoire et à la mortalité. Dans l'arthrite rhumatoïde, la PLA2-snp s'accumule dans le cartilage, la matrice articulaire et extra-articulaire, les chondrocytes et le liquide synovial et le niveau d'enzyme circulante est en accord avec la taille et le nombre d'articulations enflammées. Dans les voies respiratoires et le poumon, la PLA2-snp est impliquée dans l'asthme, la rhinite allergique, l'asbestose. Dans le système cardiovasculaire, cette enzyme est activée dμrant l'ischémie (son expression est aussi augmentée après un choc ischémique cérébral) et joue un rôle important dans le dépôt de lipoprotéines de haute densité (on la trouve en effet fortement exprimée au niveau de la plaque d' athérome) suggérant un rôle potentiel dans l'athérosclérose et dans la morbidité cardiovasculaire. Dans le tractus gastro-intestinal, des concentrations élevées en cette enzyme sont mesurées dans la maladie de Crohn, les colites ulcératives et l'inflammation intestinale, de même dans la cirrhose et la pancréatite aiguë. Dans le psoriasis, une augmentation de son activité est démontrée dans les lésions de la peau. Au niveau du cerveau, elle serait impliquée dans les dommages cellulaires et tissulaires de l'ischémie cérébrale et de la schizophrénie. Enfin on lui attribue un rôle dans la sclérose en plaque et dans divers cancers, notamment du sein et du tractus gastro-intestinal. La PLA2-snph de groupe II n'est pas la seule PLA2 sécrétée présente dans l'organisme humain où les PLA2 des groupes I (pancréas), N (cœur, poumon) et X (rate, leucocytes, poumon) jouent aussi un rôle important. Si les deux dernières, des groupes V et X découvertes récemment et dont les fonctions sont encore mal définies, sont elles aussi, comme celle du groupe II, impliquées dans l'inflammation, celle de groupe I, la PLA2 sécrétée pancréatique a un rôle physiologique primordial puisque son activité catalytique est responsable de la digestion des lipides d'origine alimentaire. Il est donc important de ne pas influer sur cette fonction, ceci étant compliqué par le fait que toutes ces enzymes ont une grande similitude par leur taille (13 à 14 kDa), leur structure tridimensionnelle (trois hélices oc plus ou moins reliées par de 6 à 8 ponts disulfure) et leur dépendance au calcium nécessaire à l'activité catalytique à des concentrations de l'ordre du mM. Elles possèdent en outre le même mécanisme d'action reposant sur un système de relais de protons qui implique plusieurs résidus du site actif : l'histidine 48, la glycine 30, les aspartates 49 et 99 et les tyrosines 52 et 73.
Selon la demande de brevet français déposée sous le numéro FR 99 06366, il a été montré que des composés ayant un hétérocycle de type oxadiazolone étaient capables d'induire une très bonne sélectivité sur la PLA2-snp de groupe II par rapport à la PLA2 pancréatique de groupe I. Des composés de cette série, très actifs in vitro ont révélé in vivo une activité analogue à l'indométacine (anti-inflammatoire de référence) sur l'œdème à la carragénine sur la patte de rat en administration intrapéritonéale. En revanche, les composés décrits dans la demande de brevet français n° FR 99 06366 possédaient une faible biodisponibilité par voie orale.
Ils est fourni selon l'invention une nouvelle famille de composés inhibiteurs sélectifs des PLA2 du groupe II ayant une activité inhibitrice bien supérieure à celle montrée pour les composés antérieurement connus, en particulier les composés décrits dans la demande de brevet français n° FR 99 06366 précitée. Les nouveaux composés selon l'invention se caractérisent notamment par la présence d'un cycle pipérazinyl substitué ou non substitué sur des atomes de carbone. Les composés selon l'invention possèdent non seulement l'activité inhibitrice sélective sur les PLA2 de groupe II tout en restant totalement inactives sur la PLA2 pancréatique de groupe I mais possèdent aussi une activité in vivo supérieure à celle de l'indométacine. De plus, les composés selon l'invention possèdent une excellente biodisponibilité lorsqu'ils sont administrés par voie orale.
La présente invention a ainsi pour objet un composé ayant la formule générale (I) suivante :
Figure imgf000004_0001
dans laquelle:
- D signifie le groupe Z-HET ou le groupe Z≈HET et
(i) lorsque D signifie le groupe Z-HET :
-HÉT est un hétérocycle à 5 chaînons tel que l' oxadiazolone (II) ou la thiazolidine dione (III) de formules suivantes: .4.
Figure imgf000005_0001
-Z- est choisi dans le groupe constitué par -(CRιR2)n- et -(CRi≈ CR2)n
- avec n étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, Ri et
R2, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
(ii) lorsque D signifie le groupe Z≈HET :
-Z- représente, avec l'hétérocycle, un groupement -Z≈HÉT de formule (IV) ou (V) suivante:
Figure imgf000005_0002
dans laquelle -Z= représente -CRi≈, dans laquelle Ri représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone; - p est un entier ayant la valeur 0 ou 1;
-Y- est choisi dans le groupe constitué par C≈O, SO2 et -(CR3R )m- avec m étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, R3 et R , identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
- A et B sur le cycle pipérazinique, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome de carbone lié à des hydrogènes, un atome de carbone lié à la fois à un hydrogène et à un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 3 atomes de carbone, ou un groupe -C≈O.
- q est un entier ayant la valeur 0 ou 1;
0 o
-W- est choisi dans le groupe constitué par — c — , — 0 — c — et
0
__N_J__
H C ; -R est choisi dans le groupe constitué par des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, ayant de 1 à 22 atomes de carbone, les groupes polyaryle et les groupes aryl-alkyl, alkyl-Q-alkyl, alkyl-Q-aryl, aryl-Q-aryl et aryl-Q-alkyl pour lesquels :
"aryl" représente un groupe aryle ayant de 5 à 10 chaînons soit entendu tout composé aryle, substitué ou non substitué, connu de l'homme du métier, en particulier le groupe phényle, naphtyle, phénylphényl (ou biphényle) ou encore un aryle hétérocyclique tel que le groupe indolyle. Le groupe aryle est préférentiellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, tels que F, Cl ou Br, ou encore par des groupes choisis parmi CF3, OH, MeO et N02. "alkyl" représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 12 atomes de carbone, et
"Q" est choisi dans le groupe constitué par -O-, -S-, -NH-, -NRs-, -
O 0
0 0 M II
-N-
NH-CO-NH-, — o — c — , — c — o — , H et H , avec R5 représentant un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
Globalement, les composés de formule (I) définis ci-dessus ont une activité inhibitrice sélective des PLA2 du groupe II, exprimée en concentration de composé (I) capable d'inhiber 50% de l'activité enzymatique (CI50), qui est en général inférieure à 1 μM, souvent inférieure à 0,5 μM et est pour certains de ces composés d'environ 0,1 μM, alors que le plus actif des composés décrits dans la demande FR 99 06366 a une activité inhibitrice, exprimée en CI50, de 3 μM.
Une famille de composés préférés selon l'invention possédant une très haute activité inhibitrice sélectivement sur la PLA2 humaine de Groupe II est la famille de composés pour lesquels p est égal à 1 et Y représente le goupe C≈O, les groupes D, A, B, q, W et R ayant les significations définies précédemment.
Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux de la présente invention les composés de formule (I) ci-dessus sont choisis dans le groupe constitué par: a) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzyl]- 4-tétradécyl pipérazine b) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3- ylméthyl)benzoyl]-4-octa décylpipérazine c) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3- ylméthyl)benzoyl]-2,5-di méthyl-4-dodécylpipérazine d) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)phényl]- 4-octa décylpipérazine e) la [4-(4'-octadécylpipérazin-l'-ylcarbonyl)benzylidène]-l,3- thiazolidine-2,4-dione f) la l-[4'-(2,4-dioxo-l,3-thiazolidin-5-ylméthyl)benzoyl]-4-octadécyl pipérazine g) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzyl]-4- tétradécylpipérazin-2-one h) la l-[4'-(4,5-dihydro-l52,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-yléthyl)benzoyl]-4- tétradécylpipérazine i) la 1 -[4'-(4,5-dihydro-l ,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylpropyl)benzoyl]-4- tétradécylpipérazine j) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-yl-méthylbenzoyl]-4-(N- octadécylaminocarbonyl)pipérazine
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des composés de formule (I) décrits ci-dessus. D'une manière générale, comme cela est illustré par les exemples ci-après, le procédé de préparation peut être choisi parmi les procédés I et II ci-dessous :
- Procédé I : faire réagir du chlorhydrate d'hydroxylamine sur un dérivé de formule (VI) :
Figure imgf000007_0001
où R, q, W, A, B, p, et Y sont définis comme précédemment et:
- Z- est choisi dans le groupe constitué par -(CRiR∑Jn- et -(CRi≈ CR2)n - avec n étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, Ri et
R2, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, ou pour former l'oxime intermédiaire correspondant, puis à soumettre cet oxime à une cyclisation par réaction avec un chlorocarbonate (ou chloroformiate) suivie d'un chauffage à une température suffisante pour obtenir une cyclisation pratiquement complète; a) - Procédé II : faire réagir la thiazolidine-2,4-dione sur la fonction aldéhyde du dérivé de formule (VII) :
Figure imgf000008_0001
dans laquelle R, q, W, A, B, p et Y sont définis comme précédemment et, -r est un entier ayant la valeur 0 ou 1, -U- est choisi dans le groupe constitué par -(CR6R7)s- et -(CRβ≈ CR7)S - avec s étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6 et avec R6 et R7, identiques ou différents, représentant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone. Cette réaction est effectuée dans le toluène à reflux en présence de benzoate de pyridinium pour former le dérivé éthylénique (V) tel que défini précédemment, et suivie d'une éventuelle réduction de la double liaison Z≈C par une hydrogénation catalytique (appareil de Parr) en présence de palladium noir à 100% et d'hydrogène sous pression dans l'éthanol absolu à 50°C. Les produits de départ pour les étapes de procédé ci-dessus peuvent être préparés selon les méthodes bien connues de l'homme de métier (voir en particulier les exemples 1 à 6 ci-après).
L'invention concerne aussi l' utilisation d'un composé de formule (I) telle que définie ci-dessus pour inhiber sélectivement une PLA2 du groupe II, préférentiellement dans un test in vitro.
La présente invention a en outre pour objet une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé de formule générale (I) décrits ci-dessus en association avec au moins un excipient choisi dans le groupe constitué par les excipients pharmaceutiquement acceptables.
Pour formuler une composition pharmaceutique selon l'invention, l'homme du métier pourra avantageusement se référer à la dernière édition de la Pharmacopée Européenne ou de la pharmacopée des Etats- Unis d'Amérique (USP).
L'homme du métier pourra notamment avantageusement se référer à la 4ème édition « 2002 » de la Pharmacopée Européenne, ou encore à l'édition USP 25-NF20 de la pharmacopée américaine (U.S. Pharmacopeia).
Avantageusement, une composition pharmaceutique telle que définie est adaptée pour une administration orale ou parentérale quotidienne d'une quantité d'un composé de formule (I) comprise entre 1 μg et 10 mg et de préférence entre 1 μg et 1 mg par kilo de poids du patient.
Avantageusement, une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus est adaptée pour une administration locale, de préférence topique, quotidienne d'une quantité d'un composé de formule (I) comprise entre Iμg et 100 mg et de préférence entre 100 μg et 10 mg par kilo de poids du patient.
Lorsque la composition selon l'invention comprend au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable, il s'agit en particulier d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie topique, d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie orale et/ ou d'un excipient approprié pour une administration de la composition par voie parentérale.
Enfin, faisant en particulier référence à l'étude d'activité biologique ci-après, la présente invention a encore pour objet un composé de formule générale (I) telle que décrite ci-dessus, pour son utilisation en tant que principe thérapeutiquement actif dans un médicament.
Plus particulièrement, l'invention a pour objet l'utilisation d'au moins un composé de formule générale (I) telle que décrite ci-dessus pour la préparation d'une composition médicamenteuse destinée à inhiber l'activité de la PLA2 sécrétée non pancréatique humaine de groupe IL
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'au moins un composé de formule générale (I) telle que décrite ci-dessus, pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement de l'inflammation, notamment de l'inflammation chronique et de l'inflammation aiguë, c'est à dire, en particulier des pathologies inflammatoires dans lesquelles est impliquée la PLA2 sécrétée non pancréatique.
Il s'agit donc tout particulièrement des pathologies inflammatoires mentionnées ci-dessus, à savoir la polyarthrite rhumatoïde, le choc septique, que la cause en soit une infection, une péritonite, la malaria ou même une intoxication à l'aspirine, le collapsus respiratoire, l'hypotension, le syndrome de détresse respiratoire, l'asthme, la rhinite allergique, la lésion aiguë du poumon, l'asbestose, l'ischémie, l'athérosclérose, la morbidité cardiovasculaire, la maladie de Crohn, les colites ulcératives, les inflammations intestinales, la cirrhose, la pancréatite aiguë, le psoriasis, les lésions cellulaires et tissulaires de l'ischémie cérébrale et de la schizophrénie et d'autres pathologies telles que la sclérose en plaque et certains cancers du sein et du tractus gastro- intestinal.
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'au moins un composé de formule générale (I) telle que décrite ci-dessus, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des troubles rhumatismaux. L'invention concerne aussi une méthode pour traiter un état d'inflammation chez un patient, préférentiellement un état d'inflammation chronique ou un état d'inflammation aiguë, ladite méthode comprenant une étape au cours de laquelle on administre au patient une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé de formule (I) ou d'une composition pharmaceutique contenant un composé de formule (I).
L'invention a aussi pour objet une méthode pour prévenir un état d'inflammation chez un patient, ladite méthode comprenant une étape au cours de laquelle on administre au patient une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé de formule (I) ou d'une composition pharmaceutique contenant un composé de formule (I).
Le composé de formule (I) ou la composition pharmaceutique contenant le composé de formule (I) peut être administré par voie orale, par voie parentérale ou encore être appliqué de manière topique, localement sur la peau d'un patient. Les exemples suivants sont destinés à illustrer la présente invention et ne doivent en aucun cas être interprétés comme pouvant en limiter la portée.
Exemple 1 : Préparation de la l-r4 4,5-dihydro-l,2,4(41ï0-5-oxo- oxadiazol-3-ylméthyl) benzyl1-4-tétradécylpipérazine
(composé de formule (I) dans laquelle D= Z-HET avec HÉT ≈ l'oxadiazolone (II), Z = -CH2-, soit n ≈ 1, Y = -CH2-, A = B = -CH2-, R = -
Figure imgf000011_0001
1.1- Préparation de la 1-tétradécylpipérazine
Dans un ei enmeyer rodé de 250 ml sont agités 13 g (0,151 mole) de pipérazine dissous dans 100 ml d'un mélange THF/CH2Cl2, 3:1, v/v. 4,24 g (15 mmoles) de 1-bromotétradécane sont additionnés au mélange et l'agitation est maintenue à température ambiante pendant une heure. Les solvants sont alors évaporés, le résidu obtenu est repris dans le dichlorométhane puis lavé deux fois à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée et évaporée. Une cristallisation dans un mélange acétone/ éther à -18°C conduit à 3,4 g de cristaux blancs qui fondent à température ambiante. Rendement : 80 %. Rf : 0,40 (CH2Cl2/MeOH/NH4OH, 80:20:2, v/v/v).
IR (KBr): 3440 (N-H) cm-i
RMN Η (200 MHz, CDCls, HMDS) δ ppm: 6-8 (massif, 1H, NH), 2,85 et 2,33 (2t, 8H, / = 4,88 et 4,50 Hz, H de la pipérazine), 2,21 (t, 2H, / ≈ 7,56 Hz, CH2-N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,20 (si, 22H, CH2), 0,80 (t, 3H, / ≈ 6,62 Hz, CH3).
1.2- Préparation de la l-(4'-cyanométhylbenzyl)-4- tétradécylpipérazine a) Préparation du 4-bromométhylphényl acétonitήle
Dans un erlenmeyer rodé d'un litre sont dissous 25 g (0,19 mole) de
4-méthylphényl acétonitrile dans 300 ml de tétrachlorure de carbone. On additionne 41 g (0,23 mole) de N-bromosuccinimide (NBS), préalablement recristallisé dans l'acide acétique, ainsi que 0,5 g de 2,2'- azobis(2-méthyl-piOpionitrile) (AIBN). La solution est chauffée à reflux pendant 3 heures. En fin de réaction, le mélange est refroidi puis lavé trois fois à l'eau. La phase organique est ensuite séchée sur MgS04, filtrée et évaporée sous vide. Une distillation sous pression réduite (1 mm de Hg) du résidu obtenu permet de recueillir, successivement, trois fractions à 95, 110 et 140°C. Cette dernière correspond au 4-bromométhylphényl acétonitrile attendu qui par cristallisation dans l'éther à -18°C conduit à 14 g de cristaux blancs. Rendement : 35 % . Point de fusion : 63°C. Rf : 0,19 (éther/éther de pétrole, 30:70, v/v).
IR (KBr): 2224 (CNN), 1594 (C≈Car) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,34 et 7,24 (2d, 4H, / = 8,30 et
8,27 Hz, H aromatiques), 4,41 (s, 2H CH2-Br), 3,68 (s, 2H, CH2-G≡N).
b) Préparation de la l-(4'-cyanométhylbenzyl)-4-tétradécylpipérazine
Dans un erlen eyer rodé de 250 ml, surmonté d'un réfrigérant et d'une garde à chlorure de calcium, sont mélangés 7 g (24 mmoles) de 1- tétradécylpipérazine, 6 g (28 mmoles) de 4-bromométhylphényl acétonitrile, 9,93 g (71 mmoles) de carbonate de potassium ainsi que 0,5 g d'iodure de potassium dans 200 ml d' acétonitrile. Le mélange réactionnel est chauffé à reflux pendant 6 heures. En fin de réaction, la suspension est filtrée et le K2C03 rincé plusieurs fois au dichlorométhane. Les solvants sont ensuite évaporés sous vide et le résidu obtenu est repris dans 150 ml de dichlorométhane puis lavé à l'eau jusqu'à pH neutre. La phase organique est alors séchée sur MgS04, filtrée et concentrée sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant le mélange MeOH/CTfcC , 1:99, v/v, pour donner 8,2 g du nitrile titre sous forme d'une huile brunâtre. Rendement : 83 %. Rf : 0,33 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 2248 (C≡N), 1607 (C≈Car) cm-i
RMN m (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,26 et 7,18 (2d, 4H, / = 8,09 et 9,52 Hz, H aromatiques), 3,64 (s, 2H, CH -C≡N), 3,42 (s, 2H, Ph-CH2-N), 2,40 (m, 8H, H de la pipérazine), 2,25 (t, 2H, / = 7,64 Hz, CH2-N), 1,39 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,80 (t, 3H, / = 6,13 Hz, CH3). 1.3- Préparation de la l-[4'-(N- hydroxyamidinométhyl)benzyl]-4-tétra décyl pipérazine
Dans un erlenmeyer de 250 ml surmonté d'une ampoule à additionner et d'un réfrigérant sont mis en suspension 13,08 g (94 mmoles) de carbonate de potassium 5,48 g (78 mmoles) de chlorhydrate d'hydroxylamine dans 150 ml d'éthanol absolu et le mélange est chauffé à reflux. 6,5 g (15 mmoles) de l-(4'-cyanométhyl benzyl)-4- tétradécylpipérazine dissous dans 50 ml d'éthanol absolu sont ensuite additionnés goutte à goutte à cette suspension. Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation et à reflux pendant 24 heures. En fin de réaction, le sel est filtré à chaud et lavé plusieurs fois au dichlorométhane. Le filtrat est concentré sous pression réduite puis repris dans le dichlorométhane. La phase organique obtenue est lavée à l'eau jusqu'à neutralité, séchée sur MgS04 puis filtrée. Après évaporation du solvant, le produit cristallise dans l'acétone et conduit à 4,62 g de cristaux blancs d'amidoxime titre. Rendement : 65 %. Point de fusion : 74°C. Rf : 0,28 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 3490 (O-H), 3374 (NH2), 1655 (C=N), 1607 (C≈Car) cm-1
RMN (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,20 et 7,14 (2d, 4H, / = 7,39 et 8,10 Hz, H aromatiques), 4,41 (s, 2H, NH2), 3,41 (s, 2H, CH2-C=N), 3,35 (s, 2H, Ph-CH2-N), 2,41 (m, 8H, H de la pipérazine), 2,25 (t, 2H, / = 7,64 Hz, CH2-N), 1,36 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,80 (t, 3H, / = 6,13 Hz, CH3).
1.4- Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)benzyl]-4-tétradécylpipérazine
Cette synthèse est effectuée en deux étapes. Dans un ballon de 100 ml, sont dissous 1,8 g (4 mmoles) d'amidoxime et 0,66 ml (4 mmoles) de triéthylamine dans 40 ml de dichlorométhane anhydre. La solution est agitée à 0°C pendant une heure puis 0,60 ml (5 mmoles) de chlorof ormate de phényle sont additionnés goutte à goutte au mélange réactionnel. Après une heure d'agitation à 0°C, la solution est lavée successivement avec une solution alcaline (Na2Cθ3 saturée) et trois fois à l'eau, séchée sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide. L'intermédiaire carbonate obtenu est ensuite repris dans 40 ml de toluène sec et chauffé pendant 12 heures à reflux. Le toluène est alors évaporé sous pression réduite et le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice éluée avec un mélange ŒfeCfe/MeOH, 98:2, v/v. Le produit cristallise dans un mélange acétone/ éther et conduit à 500 mg de cristaux blancs du composé terminal. Rendement : 26 %. Point de fusion : 98°C. Rf : 0,33 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1732 (NC≈O), 1688 (C=N), 1599 (C≈Car) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 8-12 (massif, IH, NH), 7,27 et 7,18 (2d, 4H, / = 8,07 et 9,12 Hz, H aromatiques), 3,67 (s, 2H, CH2-C=N), 3,35 (s, 2H, PI1-CH2-N), 2,56 et 2,34 (2m, 8H, H de la pipérazine), 2,46 (t, 2H, / = 7,64 Hz, CH2-N), 1,47 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,80
Figure imgf000014_0001
Exemple 2 : Préparation de la l-f4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4jH)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)benzoyl -4-octadécylpipérazine (composé de formule (I) dans laquelle D= Z-HET avec HET = l'oxadiazolone (II), Z = -CH2-, soit n = 1, Y = C≈O, A = B = -CH2-, R = -
Figure imgf000014_0002
2.1- Préparation de la 1-octadécylpipérazine En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.1 de l'exemple 1, mais en partant de 13 g (0,151 mole) de pipérazine et 5 g (15 mmoles) de 1-bromooctadécane on obtient, après cristallisation dans l'acétone 4,5 g de cristaux blancs. Rendement : 89 %. Point de fusion : 61,5°C. Rf : 0,40 (CH2Cl2/MeOH/NH4OH, 80:20:2, v/v/v).
IR (KBr): 3440 (N-H) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 6-8 (si, IH, NH), 2,85 et 2,33 (2t, 8H, J = 4,88 et 4,50 Hz, H de la pipérazine), 2,21 (t, 2H, / = 7,56 Hz, CH2-N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,20 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, / = 6,62 Hz, CH3). 048139
14 -
2.2- Préparation du chlorure de 4-bromométhylbenzoyle
Dans un ballon de 250 ml surmonté d'un réfrigérant et d'une garde à chlorure de calcium sont solubilisés 8,4 g (54 mmoles) de chlorure de 4- méthylbenzoyle ainsi que 9,66 g (54 mmoles) de N-brornosuccinimide (NBS) préalablement recristallisé dans l'acide acétique et 0,5 g de 2,2'- azobis(2-méthylproρionitrile) (AIBN) dans 150 ml de tétrachlorure de carbone. La solution est chauffée à reflux pendant 3 heures. En fin de réaction, le sel est filtré, la solution est refroidie puis lavée trois fois à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée et concentrée sous vide. Le résidu est ensuite cristallisé dans le pentane et l'on obtient 9 g de cristaux blancs. Rendement : 72 %. Point de fusion : 86,7°C.
RMN *H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 8,02 et 7,46 (2d, 4H, / = 8,38 et 8,29 Hz, H aromatiques), 4,43 (s, 2H, CH2-Br).
2.3- Préparation de la l-(4'-bromométhylbenzoyl)-4- octadécylpipérazine
Dans un erlenmeyer de 250 ml surmonté d'une ampoule à additionner et d'une garde à chlorure de calcium sont dissous 4,4 g (13 mmoles) d'octadécylpipérazine ainsi que 2,7 ml (19 mmoles) de triéthylamine dans 100 ml de benzène sec. Le mélange est agité à 0°C puis 3,04 g (13 mmoles) de chlorure de 4-bromométhylbenzoyIe sont ajoutés goutte à goutte. Après deux heures d'agitation à température ambiante, le solvant est évaporé, le résidu obtenu est repris dans le dichlorométhane, lavé avec une solution alcaline puis plusieurs fois à l'eau jusqu'à neutralité. La phase organique est ensuite séchée sur
MgS04, filtrée et concentrée sous vide. Le produit est purifié par chiOmatographie sur colonne de gel de silice avec pour éluant le dichlorométhane. On obtient ainsi 5 g de produit pur sous forme d'huile.
Rendement : 72 %. Rf : 0,50 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 1624 (NC=0), 1607 (C≈Car) cm-1
RMN (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,34 (s, 4H, H aromatiques), 4,52 (s, 2H, CH2-Br), 3,72 et 3,38 (2m, 4H, CH2-N-C≈Q de la pipérazine), 48139
15
2,43 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,33 (t, 2H, / = 7,65 Hz, CH2-N), 1,41 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, / = 6,13 Hz, CH3).
2.4- Préparation de la l-(4'-cyanométhylbenzoyl)-4- octadécylpipérazine
Dans un erlenmeyer rodé de 250 ml surmonté d'un réfrigérant et d'une garde à chlorure de calcium, sont dissous 5,35 g (10 mmoles) du dérivé brome préparé dans l'étape 2.3 précédente dans 70 ml de diméthylsulfoxide. La solution est agitée à 0°C puis 1,96 g (40 mmoles) de cyanure de sodium sont ajoutés petit à petit au mélange réactionnel. L'ensemble est ensuite ramené à la température ambiante puis chauffé à 80°C pendant 1 heure. Le mélange réactionnel est dilué au dichlorométhane et à l'eau. La phase organique est lavée à l'eau plusieurs fois, séchée sur MgSOé, filtrée puis concentrée sous vide. Le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant le dichlorométhane. On obtient alors 3 g de nitrile titre pur sous forme d'une huile de couleur miel foncé. Rendement : 61 %. Rf : 0,5 (CH2Cl2/MeOH, 97:3, v/v).
IR (KBr): 2251 (C≡N), 1620 (NC≈O), 1607 (C≈Car) cm-1
RMN m (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,36 et 7,30 (2d, 4H, / = 8,51 et 8,48 Hz, H aromatiques), 3,71 (s, 2H, CH2-C≡N), 3,72 et 3,38 (2m, 4H, CH2-N-C=0 de la pipérazine), 2,43 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,33 (t, 2H, / = 7,65 Hz, CH2-N), 1,41 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, / = 6,13 Hz, CH3).
2.5- Préparation de la l-[4'-(N- hydroxyamidinométhyl)benzoyl]-4~octadécyl pipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.3 de l'exemple 1, mais en partant de 6 g (12 mmoles) de l-(4'- cyanométhylbenzoyl)-4-octadécylpipérazine, 10,26 g (74 mmoles) de carbonate de potassium et 4,30 g (61 mmoles) de chlorhydrate d'hydroxylamine. Le produit brut est cristallisé dans l'acétone et conduit à 4 g de cristaux blancs de l'oxime titre. Rendement : 67 %. Point de fusion : 105,2°C. Rf : 0,39 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v). 048139
16 -
IR (KBr): 3486 (O-H), 3373 (NH2), 1657 (NC≈O), 1625 (C=N), 1582 (C≈Car) cm--
RMN (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,30 et 7,24 (2d, 4H, J = 8,28 et 8,11 Hz, H aromatiques), 4,43 (s, 2H, NH2), 3,42 (s, 2H, CH2-C=N), 3,73 et 3,40 (2m, 4H, CH2-N-C=0 de la pipérazine), 2,55 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,29 (t, 2H, } = 6,64 Hz, CH2-N), 1,39 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,03 Hz, CH3).
2.6- Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)benzoyI]-4-octadécylpipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.4 de l'exemple 1, mais à partir de 1,3 g (2,53 mmoles) d'amidoxime préparée à l'étape 2.5 précédente, 0,45 ml (3,28 mmoles) de triéthylamine ainsi que 0,4 ml (3,03 mmoles) de chloroformate de phényle. Le produit cristallise dans l'acétone et conduit à 500 mg de cristaux blancs de composé terminal. Rendement : 37 %. Point de fusion : 121°C. Rf : 0,38 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1780 (OC≈O), 1734 (C≈N), 1640 (NC≈O), 1607 (C≈Car) cm-1
RMN iH (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 8-12 (massif, IH, NH), 7,16 (s, 4H, H aromatiques), 3,79 (s, 2H, CH2-C=N), 3,77 et 3,36 (2m, 4H, CH2-N- C≈O de la pipérazine), 2,52 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,35 (t, 2H, } = 5,86 Hz, CH2-N), 1,43 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J
Figure imgf000017_0001
Exemple 3 : Préparation de la l-r4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl) benzovn-2,5-diméthyl-4-dodécylpipérazine
(composé de formule (I) dans laquelle D= Z-HET avec HÉT = l'oxadiazolone (II), Z = -CH2-, soit n = 1, Y = C≈O, A = B = CH-CH3, R =
Figure imgf000017_0002
3.1- Préparation de la 2,5-diméthyl-l-dodécylpipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.1 de l'exemple 1, mais en partant de 3,27 g (13 mmoles) de bromure de 048139
- 17 -
dodécane et 12 g (0,105 mole) de trans-2,5-diméthylpipérazine dans 170 ml de THF, on récupère 2,8 g de la pipérazine substituée titre sous forme d'huile. Rendement : 76%. Rf : 0,3 (CH2Cl2/MeOH/NH4θH, 80:20:2, v/v/v).
IR (KBr): 3440 (N-H) cm"1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 6-8 (massif, IH, NH), 2,29 (m, 8H, CH2-N et H de la pipérazine), 1,36 (m, 5H, CH3 sur la pipérazine et CH2-C-N), 1,19 (si, 18H, CH2), 0,98 (si, 3H, CH3 sur la pipérazine), 0,81 (t,
3.2- Préparation de la l-(4'-chlorométhylbenzoyl)-2,5- diméthyl-4-dodé cylpipérazine
Dans un erlenmeyer de 250 ml sont dissous 6 g (21 mmoles) de la pipérazine substituée préparée dans l'étape 3.1 précédente et 3,18 g (31 mmoles) de triéthylamine dans 150 ml de benzène. Le mélange est agité à 0°C puis 4,82 g (25 mmoles) de chlorure de 4-chlorométhylbenzoyle (commercial ou préparé selon le même protocole que celui décrit à l'étape 2.2 de l'exemple 2 mais en utilisant le N-chlorosuccinimide) sont ajoutés goutte à goutte. Après 3 heures d'agitation à température ambiante, le benzène est évaporé, le résidu repris dans le dichlorométhane est lavé avec une solution saturée en Na2Cθ3 puis deux fois à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide. Le résidu est alors purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant le dichlorométhane. On obtient ainsi 4,33 g du dérivé chloré titre pur sous forme d'huile. Rendement : 48%. Rf : 0,36 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 1624 (NC≈O), 1595 (C≈Car) cm-1
RMN iH (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,34 et 7,27 (2d, 4H, J = 8,40 et 7,96 Hz, H aromatiques), 4,52 (s, 2H, CH2-CI), 3,36 et 2,62 (2d, 4H, J = 7,40 et 7,67 Hz, CH2 de la pipérazine), 2,88 et 2,28 (2m, 2H, CH de la pipérazine), 2,24 (t, 2H, J = 5,52 Hz, CH2-N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,35 048139
- 18 -
et 0,94 (2d, 6H, CH3 sur la pipérazine), 1,18 (si, 18H, CH2), 0,81 (t, 3H, } = 6,74 Hz, CH3).
3.3- Préparation de la l-(4'-cyanométhylbenzoyI)-2,5-diméthyI-4- dodécyl pipérazine
4,33 g (9,96 mmoles) du dérivé chloré préparé à l'étape 3.2 précédente sont dissous dans 50 ml de DMSO. A cette solution agitée à 0°C sont ajoutés petit à petit 1,49 g (29 mmoles) de cyanure de sodium. Après addition totale, la solution est chauffée à 80°C pendant 1 heure. En fin de réaction, une extraction est réalisée en ajoutant au mélange, du dichlorométhane et de l'eau. La phase organique est lavée deux fois à l'eau, séchée sur MgSθ4, filtrée puis concentrée sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant le dichlorométhane. On récupère alors 4 g du nitrile titre pur sous forme d'huile. Rendement : 94%. Rf : 0,5 (CH2Cl2/MeQH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 2245 (G≡N), 1611 (NC≈O), 1607 (C≈Car) cm-1 RMN (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,30 (s, 4H, H aromatiques), 3,71 (s, 2H, CH2- C≡N), 3,36 et 2,62 (2d, 4H, } ≈ 7,40 et 7,67 Hz, CH2 de la pipérazine), 2,88 et 2,28 (2m, 2H, CH de la pipérazine), 2,24 (t, 2H, J = 5,52 Hz, CH -N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,28 et 0,84 (2d, 6H, CH3 sur la pipérazine), 1,18 (si, 18H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,74 Hz, CH3).
3.4- Préparation de la l-[4'-(N- hydroxyamidinométhyI)benzoyl]-2,5-di méthyl-4- dodécylpipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.3 de l'exemple 1, mais en partant de 4 g (9,41 mmoles) du nitrile préparé à l'étape 3.3 précédente, 3,26 g (47 mmoles) de chlorhydrate d'hydroxylamine et 7,79 g (56 mmoles) de bicarbonate de potassium.
Après purification, on récupère 1,6 g de l'amidoxime titre sous forme d'huile. Rendement : 37%. Rf : 0,46 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v). 048139
19
IR (KBr): 3369 (O-H), 3328 (NH.), 1661 (NC≈O), 1612 (C≈N), 1595 (C≈Car) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,30 (s, 4H, H aromatiques), 3,36 et 2,62 (2d, 4H, J = 7,40 et 7,67 Hz, CH2 de la pipérazine), 5,70 (si, IH, OH), 4,44 (si, 2H, NH2), 3,39 (s, 2H, CH2- C≈N), 2,88 et 2,28 (2m, 2H, CH de la pipérazine), 2,24 (t, 2H, } = 5,52 Hz, CH2-N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,28 et 0,84 (2d, 6H, CHs.sur la pipérazine), 1,18 (si, 18H, CH2), 0,81 (t, 3H, 7 = 6,74 Hz, CH3).
3.5- Préparation de la l-[4'-(4,5~dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)benzoyl]-2,5-diméthyl -4- do décylpipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.4 de l'exemple 1, mais en partant de 1,6 g (3,49 mmoles) de l'amidoxime préparée à l'étape 3.4 précédente, 0,58 ml (4,19 mmoles) de triéthy lamine et 0,48 ml (3,83 mmoles) de chloroformate de phényle. Le résidu brut est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant, le dichlorométhane. On obtient ainsi 600 mg de composé terminal pur sous forme de mousse. Rendement : 35%. Rf : 0,4 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1670 (NOC≈O), 1634 (C≈N), 1595 (C=Car) cm-1 RMN (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,14 (s, 4H, H aromatiques), 6,11 (si, IH, NH), 3,74 (s, 2H, CH2-C=N), 3,36 et 2,62 (2d, 4H, ] = 7,40 et 7,67 Hz, CH2 de la pipérazine), 2,88 et 2,28 (2m, 2H, CH de la pipérazine), 2,24 (t, 2H, 7 = 5,52 Hz, CH2-N), 1,40 (m, 2H, CH2-C-N), 1,28 et 0,84 (2d, 6H, CH3 sur la pipérazine), 1,18 (si, 18H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,74 Hz, CH3).
Exemple 4: Préparation de la l-r4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)phényπ-4-oeta décylpipérazine
(composé de formule (I) dans laquelle D= Z-HET avec HÉT = l'oxadiazolone (II), Z = -CH2-, soit n = 1, p est 0, A = B = -CH2-, R = -
Figure imgf000020_0001
48139
- 20 -
4.1- Préparation de la N-octadécyldiéthanoIamine
Dans un erlenmeyer rodé de 500 ml sont mélangés 10 g (95 mmoles) de diéthanolamine, 37,96 g (0,114 mole) de bromure d'octadécane, 39,33 g (0,285 mole) de bicarbonate de potassium ainsi que 0,5 g d'iodure de potassium dans 200 ml d'acétonitrile. Le mélange réactionnel est agité et chauffé à reflux pendant 3 heures. En fin de réaction, les sels sont filtrés, le solvant est évaporé et le résidu est repris dans le dichlorométhane. La phase organique est lavée deux fois à l'eau, séchée sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide et le résidu est mis à cristalliser dans l'acétone. On obtient ainsi 33 g de cristaux blancs. Rendement : quantitatif. Point de fusion : 49°C. Rf : 0,20 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 3310 (O-H) cm"1 RMN (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 3,53 (t, 4H, } = 5,43 Hz, CH2- O), 3,27 (si, 2H, OH), 2,57 (t, 4H, J = 5,43 Hz, N-CH2-C-0), 2,44 (t, 2H, } = 7,06 Hz, CH2-N), 1,34 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, } = 5,85 Hz, CH3).
4.2- Préparation de la N,N'-di(chloroéthyl)octadécylamine
Dans un erlenmeyer de 250 ml sont dissous et refroidis à 0°C, 13 g (36 mmoles) de N-octadécyldiéthanolamine dans 100 ml de chloroforme. 7,95 ml (0,109 mole) de chlorure de thionyle sont alors ajoutés goutte à goutte. A la fin de l'addition, le mélange réactionnel est chauffé à reflux du chloroforme pendant 3 heures. Le solvant et le chlorure de thionyle en excès sont évaporés et le résidu repris dans le dichlorométhane est lavé avec une solution saturée de Na2Cθ3 puis plusieurs fois à l'eau jusqu'à neutralité. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide et le résidu purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant un mélange éther/éther de pétrole, 5:95, v/v. On récupère ainsi 10 g d'aminé chlorée pure sous forme d'huile. Rendement : 70 %. Rf : 0,43 (éther/éther de pétrole, 5:95, v/v). 048139
• 21
RMN iH (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 3,38 (t, 4H, } = 5,43 Hz, CH2- Cl), 2,75 (t, 4H, 7 = 7,30 Hz, N-CH2-C-CI), 2,43 (t, 2H, } = 6,67 Hz, CH2-N), 1,36 (m, 2H, CH2-C-N), 1,16 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, } = 5,85 Hz, CH3).
4.3- Préparation de la l-(4'-cyanométhylphényl)-4- octadécylpipérazine
Dans un ballon de 250 ml, sont mélangés 3 g (7,6 mmoles) de N,N'- di(chloroéthyl)octadécylamine, 2 g (15 mmoles) de 4- aminophénylacétonitrile et 0,2 g d'iodure de potassium dans 100 ml d' acétonitrile. La suspension est agitée à reflux pendant 16 heures. En fin de réaction, le solvant est évaporé, le résidu repris dans le dichlorométhane est lavé avec une solution basique puis à l'eau plusieurs fois. La phase organique est séchée sur MgSθ4, filtrée puis concentrée sous vide. Le résidu obtenu cristallise dans l'acétone et conduit à 2,66 g de cristaux blancs de la pipérazine disubstituée titre. Rendement : 77 %. Point de fusion : 94°C. Rf : 0,33 (CH2Cl2/MeOH, 98:2, v/v).
IR (KBr): 2252 (C≡N), 1607 (C≈Car) cm-1
RMN iH (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,17 et 6,84 (2d, 4H, J = 8,60 et 8,63 Hz, H aromatiques), 3,62 (s, 2H, CH2-C≡N), 3,61 et 3,22 (2sl, 8H, H de la pipérazine), 2,92 (t, 2H, J = 8,32 Hz, CH2-N), 1,85 (m, 2H, CH2-C-N), 1,19 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 5,90 Hz, CH3).
4.4- Préparation de la l-[4'-(N- hydroxyamidinométhyl)phényl]-4-octa décylpipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.3 de l'exemple 1, mais en partant de 1,52 g (21 mmoles) de chlorhydrate d'hydroxylamine, 3,64 g (26 mmoles) de carbonate de potassium et 2 g (4 mmoles) du nitrile obtenu à l'étape 4.3 précédente. Le produit brut est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant, le dichlorométhane et donne une huile qui cristallise dans l'acétone. On récupère ainsi 600 mg de cristaux blancs de l'amidoxime titre. Rendement : 28 %. Point de fusion : 110,1 °C. Rf : 0,40 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v). 48139
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IR (KBr): 3489 (O-H), 3375 (NH2), 1655 (C≈N), 1607 (C≈Car) cm-1 RMN Η (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,08 et 6,80 (2d, 4H, } = 8,60 et 8,62 Hz, H aromatiques), 4,36 (s, 2H, NH2), 3,44 (s, 2H, CH2-C=N), 3,14 et 2,56 (2sl, 8H, H de la pipérazine), 2,34 (t, 2H, } = 7,34 Hz, CH2-N), 1,47 (m, 2H, CH2-C-N), 1,19 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,05 Hz, CH3).
4.5- Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl)ρhényl]-4-octadécyl pipérazine
En suivant le même protocole que celui décrit pour l'étape 1.4 de l'exemple 1, mais à partir de 600 mg (1,2 mmoles) de l'amidoxime préparée à l'étape 4.4 précédente, 0,22 ml (1,6 mmole) de triéthylamine et 0,2 ml (1,6 mmole) de chloroformate de phényle. Le produit cristallise dans l'acétone et conduit à 210 mg de cristaux blancs de composé terminal. Rendement : 33 %. Point de fusion : 147,3°C. Rf = 0,35 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 1740 (OC≈O), 1716 (C≈N), 1607 (C≈Car) cm-1 RMN m (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 7,33 (s, IH, NH), 7,12 et 6,74 (2d, 4H, 7 = 8,62 et 8,60 Hz, H aromatiques), 3,71 (s, 2H, CH2-C=N), 3,14 et 2,56 (2sl, 8H, H de la pipérazine), 2,34 (t, 2H, } = 7,34 Hz, CH2-N), 1,47 (m, 2H, CH2-C-N), 1,19 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,05 Hz, CH3).
Exemple 5 : Préparation de la f4-(4'-octadécylpipérazin-l/-ylcarbonyl) benzylidène1-l,3-thiazolidine-2,4-dione
(composé de formule (I) dans laquelle D≈Z≈HET avec HET≈ le composé de formule (V), Z = CH≈ Y = C≈O, A ≈ B = -CH2-, R = -(CH2)ι7-CH3 )
5.1- Préparation du chlorure de 4-formylbenzoyle
Dans un erlenmeyer de 250 ml, sont dissous 5 g (33 mmoles) d'acide
4-formyl benzoïque dans 100 ml de chloroforme. Le mélange est agité à
0°C puis 3,63 ml (49 mmoles) de chlorure de thionyle solubilisé dans 50 ml de chloroforme sont additionnés goutte à goutte. Une fois l'addition terminée, le mélange réactionnel est chauffé à 40°C pendant 3 heures. En 048139
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fin de réaction, le mélange est évaporé et le résidu obtenu repris dans le dichlorométhane, est lavé avec une solution saturée de Na2Cθ3 puis deux fois à l'eau. La phase organique est séchée rapidement sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide. On récupère ainsi 4 g de chlorure d'acide titre sous forme d'une huile incolore utilisée à l'étape suivante sans purification. Rendement : 71 %.
IR (KBr): 1779 (C≈O aldéhydique), 1756 (CIC≈O) cm-1 RMN Ή (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 10,10 (s, IH, H aldéhydique), 8,18 et 7,96 (2d, 4H, J = 8,42 et 8,22 Hz, H aromatiques).
5.2- Préparation de la l-(4'-formylbenzoyl)-4- octadécylpipérazine
Dans un erlenmeyer de 250 ml surmonté d'une ampoule à additionner et d'une garde à chlorure de calcium, sont dissous 4 g (11 mmoles) d'octadécylpipérazine (préparée selon le protocole de l'étape 2.1 de l'exemple 2) et 2,46 ml (17 mmoles) de triéthylamine dans 150 ml de benzène sec. Le mélange est agité à 0°C puis 2,99 g (17 mmoles) du chlorure d'acide préparé à l'étape 5.1 précédente sont additionnés goutte à goutte. L'ensemble est agité pendant 2 heures à température ambiante.
En fin de réaction, le solvant est évaporé, le résidu est repris dans du dichlorométhane, lavé avec une solution alcaline puis deux fois à l'eau.
La phase organique est alors séchée sur MgS04, filtrée puis concentrée sous vide. Le produit brut obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant le dichlorométhane. On récupère ainsi 5,5 g de l'aldéhyde titre sous forme d'huile. Rendement :
98 %. Rf : 0,41 (CH2Cl2/MeOH, 97:3, v/v).
IR (KBr): 1705 (C≈O aldéhydique), 1642 (NC≈O), 1609 (C≈Car) cm-1 RMN (200 MHz, CDCI3, HMDS) δ ppm: 10,02 (s, IH, H aldéhydique), 7,87 et 7,50 (2d, 4H, J = 7,72 et 8,08 Hz, H aromatiques), 3,86 et 3,48 (2sl, 4H, CH2-N-C=0 de la pipérazine), 2,67 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,49 (t, 2H, 7 = 7,66 Hz, CH2-N), 1,51 (m, 2H, CH2-C-N), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, 7 = 6,16 Hz, CH3). 48139
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5.3- Préparation de la [5-(4'-octadécylρipérazin-l'-ylcarbonyl) benzylidène]-l,3-thiazolidine-2,4-dione
Dans un ballon de 100 ml surmonté d'un réfrigérant et d'un appareil de Dean et Starck, sont dissous 4,2 g (8,9 mmoles) de l'aldéhyde préparé dans l'étape 5.2 précédente, 1,04 g (8,8 mmoles) de 2,4-thiazolidinedione et 0,5 g de benzoate de pyridinium dans 50 ml de toluène. Le mélange est agité à reflux pendant 3 heures, l'eau étant éliminée au fur et à mesure. En fin de réaction, le toluène est évaporé, le résidu obtenu est repris dans l'éthanol à chaud et un précipité jaune apparaît en refroidissant. Les cristaux sont filtrés et l'on récupère ainsi 2,34 g du composé terminal pur. Rendement : 46 %. Point de fusion : 86,3°C. Rf : 0,3 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 1736 (NHC≈O), 1700 (NC≈O), 1604 (C≈Car) cm-1 RMN (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm: 7,69 (s, IH, CH≈), 7,45 (s, 4H,
H aromatiques), 4,73 (s, IH, NH), 3,79 et 3,46 (2sl, 4H, CH2-N-C=0 de la pipérazine), 2,48 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,39 (t, 2H, J = 7,33 Hz, CH2-
N), 1,45 (m, 2H, CH2-C-N), 1,17 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, J = 5,89 Hz,
CH3).
Exemple 6: Préparation de la l-r4'-(2,4-dioxo-l,3-thiazolidin-5- ylméthyl)benzoyπ-4-octadécylpipérazine
Composé de formule (I) dans laquelle D= Z-HET avec HÉT = la thiazolidine dione (III), Z = -CH2-, Y = C≈O, A = B = -CH2-, R = -(CH2)ι7- CH3)
Une suspension de 210 mg (3,69 10"4 mole) du composé de l'exemple 5, dissous dans 50 ml d'éthanol absolu est soumise à une hydrogénation catalytique dans un appareil de Parr, en présence de palladium noir 100% et d'hydrogène sous pression (40 à 50 psi) et agitée pendant plus de 5 heures à 60°C. En fin de réaction, le palladium est filtré, l'éthanol évaporé et le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant un mélange dichlorométhane/ méthanol, 99:1, v/v. Le produit est alors cristallisé dans l'acétonitrile et l'on récupère 126 48139
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mg de cristaux légèrement jaunâtres du composé terminal. Rendement : 60 %. Point de fusion : 106,7°C. Rf : 0,55 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v). IR (KBr): 1736 (NHC≈O), 1700 (NC≈O), 1604 (C≈Car) cm-1 RMN Η (200 MHz, CDCls, HMDS) δ ppm: 7,5 (si, IH, NH), 7,30 et 7,20 (2d, 4H, 7 = 8,15 et 8,18 Hz, H aromatiques), 4,44 (si, IH, CH-C≈O), 3,70 et 3,40 (2sl, 4H, CH2-N-C=0 de la pipérazine), 3,43 (dd, 2H, J = 3,90 Hz, Ph- CH2), 2,48 (m, 4H, H de la pipérazine), 2,39 (t, 2H, J = 7,33 Hz, CH2-N), 1,45 (m, 2H, CH2-C-N), 1,17 (si, 30H, CH2), 0,80 (t, 3H, J = 5,89 Hz, CH3).
Exemple 7 : Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3- ylméthyl)benzyl]-4-tétradécylpipérazin-2-one
(composé de formule (I) dans laquelle D = Z-ΗET avec ΗET = l' oxadiazolone (II), Z = -CΗ2-, soit n = 1, Y = A = -CH2-, B = CO, R ≈ -(CH2)13-CH3
7.1- Synthèse du N-benzylaminoacétaldéhyde diéthyl acétal Un mélange constitué de 42 ml (0,2 mol) d'aminoacétaldéhyde diéthyl acétal, 29,3 ml (0,2 mol) de benzaldéhyde, 48 g de sulfate de magnésium, et 300 ml de toluène est chauffé à reflux pendant six heures. La solution est filtrée et le solvant évaporé. Le résidu obtenu est utilisé sans purification. Repris dans le méthanol, il est additionné lentement de 12 g (0,3 mol) de borohydrure de sodium et laissé agiter pendant 30 minutes. Après hydrolyse et évaporation des solvants, le résidu obtenu est solubilisé dans le dichlorométhane puis lavé à l'eau. La phase organique est séchée (MgSO4), filtrée et évaporée sous pression réduite. Une flash chromatographie avec le dichlorométhane comme éluant conduit à 52 g d'une huile visqueuse. Rendement : 81%. Rf : 0,34 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (film): 3300 (NH), 1594 (C≈Car) cm-1 RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,23 (m, 5H, H^ , 4,56 (t, IH, J≈ 5,58 Hz, CH), 3,75 (s, 2H, PhCH2), 3,54 (m, 4H, OCH2), 2,68 (d, 2H, J≈ 5,58 Hz, CH2), 1,71 (s, IH, NH), 1,14 (t, 6H, J≈ 7,04 Hz, CH3). 048139
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7.2- Synthèse du (JV-tétradécyl-iV-benzyl) aminoacétaldéhyde diéthyl acétal
64 g (0,23 mol) de bromure de tétradécyle est ajouté à un mélange de 51,6 g (0,23 mol) de N-benzylaminoacétaldéhyde diéthyl acétal, 63,9 g (0,46 mol) de carbonate de potassium et une quantité catalytique d'iodure de potassium (1 g) dans 700 ml d' acétonitrile puis le mélange est chauffé une nuit à reflux. La solution est filtrée, évaporée et le résidu obtenu après évaporation est repris avec du dichlorométhane et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée sous pression réduite. Le produit brut est purifié par flash chromatographie avec du dichlorométhane comme éluant et donne 88 g du produit attendu sous forme d'une huile jaune. Rendement : 90 % Rf : 0,65 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (film): 1594 (C≈Car) cm-1
RMN *H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,21 (m, 5H, H*), 4,47 (t, IH, 7 = 5,16 Hz, CH), 3,56 (s, 2H, PhCH2), 3,50 (m, 4H, OCH2), 2,55 (d, 2H, J = 5,17 Hz, CH2N), 2,41 (t, 2H, } = 7,23 Hz, CH2), 1,39 (t, 2H, J = 6,87 Hz, CH ) 1,13 (m, 28H, CH2, CH3), 0,81 (t, 3H, J = 6,37 Hz, CH3).
7.3- Préparation du iV-tétradécylaminoacétaldéhyde diéthyl acétal
Un mélange de 88 g (0,2 mol) de (N-tétradécyl-N-benzyl) aminoacétaldéhyde diéthyl acétal, solubilisé dans 300 ml d'éthanol et additionné de 20 mg de Pd-C à 10 % est soumis à une hydrogénation sous pression à 40°C pendant 48 h. Le catalyseur est filtré et le solvant évaporé sous pression réduite conduit à un résidu qui est purifié par flash chromatographie avec comme éluant le dichlorométhane et conduit à 59 g d'une huile jaune. Rendement : 90 %. Rf : 0,29 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (film): 3300 (ΝH) cm' 48139
• 27 -
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 4,59 (t, IH, CH), 3,57 (m, 4H, CH2O), 2,63 (d, 2H, J≈ 5,57 Hz, CHCH2). 2,58 (t, 2H, J≈ 7,25 Hz, NHCH2), 2,32 (IH, NH), 1,45 (t, 2H, J≈ 7,03 Hz, CH2), 1,15 (m, 28H, CH3, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,39 Hz, CH3).
7.4- Préparation du N-benzyloxycarbonylaminoacétate d'éthyle. a) Un mélange de 138 g (1 mol) de carbonate de potassium, 70 g (0,5 mol) d'ester éthylique de la glycine dans 300 ml de tétrahydrofurane est agité pendant 10 mn, refroidi à 0°C puis additionné lentement de 71 ml (0,5 mol) de chloroformate de benzyle. La solution est agitée pendant 30 mn puis filtrée et le solvant évaporé. Le résidu obtenu est solubilisé dans le dichlorométhane et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et le solvant évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu est utilisé sans purification, pour l'étape suivante.
IR (film): 1735 (-O-CO-), 1750 (-O-CO-N) cm"1
RMN !H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,21 (m, 5H, H^), 5,81 (si, IH, NH), 5,01 (s, 2H, PhCH2), 4,06 (q, 2H, J≈ 7,14 Hz, CH2CH3), 3,80 (d, 2H, J≈ 14,27 Hz, NHCH2), 1,14 (t, 3H, J≈ 7,13 Hz, CH3).
b) Le résidu obtenu précédemment, solubilisé dans 250 ml d'éthanol est traité avec 250 ml d'une solution de potasse à 10 % puis chauffé à reflux durant une nuit. L'éthanol est évaporé et la phase aqueuse est acidifiée (pH = 1) avec de l'HCl concentré. Le précipité obtenu filtré et séché conduit à 105 g d'un solide blanc. Rendement : 90 %. Point de fusion : 110°C. Rf : 0,25 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1678 (C≈C), 1727 (OC≈O) cm-1 RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,24 (m, 5H, Har), 5,23 (si IH, NH), 5,06 (s, 2H, CH2, PhCH2), 4,63 (s, IH, OH), 3,94 (d, 2H, J = 5,50 Hz, CTLCOOH). 048139
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7.5- Préparation de la N-benzyloxycarbonyïamino-N'-2,2- diéthoxyéthyl-N'-tétradécylacétamide
A un mélange de 18,7 g (5,6 mmol) de tétxadécylaminoacétaldéhyde diétylacétal, 12,6 g (56 mmol) de N-benzyloxycarbonylaminoacétate d'éthyle, 15 ml (0,112 mol) de triéthylamine, 9 g (67 mmol) de 1-hydroxybenzotriazole dans 120 ml de dichlorométhane est ajouté 24,7 g (0,12 mole) de Ν,Ν'- dicyclohexylcarbodiimide. Après chauffage à reflux pendant deux heures, la solution est filtrée et lavée avec de l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est purifié sur colonne de gel de silice à l'aide d'un mélange CH Cl2/MeOH, 99:1, v/v) et conduit à 25 g d'une huile incolore. Rendement : 96 %. Rf : 0,42 (CH2Cl2/MeOH, 98:2, v/v).
IR (film): 1649 (C≈O), 1720 (OC≈O) cm"1 RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,17 (m, 5H, Har), 5,85 (si, IH,
NH), 5,01 (s, 2H, PhCH2), 4,54 (t, IH, J = 5,26 Hz, CH), 3,92-4,02 (m, 2H,
NHCH2CO), 3,48-3,65 (m, 2H, NCH2CH), 3,2 (m, 6H, CH2, OCH2), 1,44 (si,
2H, CH2), 1,17 (si, 22H, CH2), 1,09 (t, 6H, J≈ 6,98 Hz, CH3), 0,79 (t, 3H, J≈
6,2 Hz, CH3).
7.6-Préparation de la 4-benzyloxycarbonyl-l- tétradécylpipérazin-2-one
23 g (47 mmol) de l'amide préparé précédemment solubilisé dans 250 ml de toluène est agité et additionné d'une quantité catalytique d'acide paratoluène sulfonique (780 mg, 4,1 mmol) à température ambiante. Puis la solution est agitée à 75°C pendant 3 h. Après refroidissement, le mélange est lavé à l'eau et la phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et concentrée. Le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de gel de silice avec le dichlorométhane comme éluant pour donner 14 g d'une huile jaune. Rendement : 72 %. Rf : 0,61 (CH2Cl2/MeOH, 98:2, v/v).
IR (film): 1669 (C≈O, C≈C), 1700 (OC≈O) cm-1 48139
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RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,25 (m, 5H, Har), 6,29 (dd, IH, /= 21,58 et 5,98 Hz, CH≈CH), 5,42 (dd, IH, /= 18,78 et 6,01 Hz, CH≈CH), 5,12 (s, 2H, PhCH2O), 4,59 (s, 2H, COCH2N), 3,39 (t, 2H, /= 7,24 Hz, CH2), 1,33 (si, 2H, CH2), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,32 Hz, CH3).
7.7- Préparation du chlorhydrate de la l-tétradécylpipérazin- 2-one
A une solution de 10,5 g (24 mmol) de la 4-benzyloxycarbonyl-l- tétradécylpipérazin-2-one solubilisée dans 100 ml d'éthanol sont additionnés 5 ml d'HCl concentré. Le mélange est soumis à une hydrogénation catalytique sous pression d'hydrogène en présence de 1 g de Pd-C à 10 % à 40°C durant 24 h. Après filtration, le solvant est évaporé et le résidu est cristallisé dans de l'éther pour conduire à 7 g d'un solide jaune. Rendement : 86 %. Point de fusion : 161,6°C (déc). Rf : 0,25 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1655 (C≈O), 3451 (NH2) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 9,87 (si, IH, NH2), 7,7-8,9 (si, IH, NH2), 4,18 (si, 2H, NCH2), 3,93 (si, 2H, NCH2), 3,63 (si, 2H, NCH2), 3,30 (s, 2H, CH2), 1,46 (si, 2H, CH2), 1,19 (si, 22H, CH2), 0,81 (s, 3H, CH3).
7.8- Préparation de la 4-(4-cyanométhylbenzyl)-l- tétradécylpipérazin-2-one
2,2 g (10 mmol) de 4-bromométhylphénylacétonitrile est ajouté à un mélange constitué de 2,95 g (8,8 mmol) de chlorhydrate de 1-tétradécylpipérazin- 2-one, 2,6 g (17,6 mmol) de carbonate de potassium et 0,5 g d'iodure de potassium dans 100 ml d' acétonitrile. La solution est agitée à reflux pendant 4 h puis filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est solubilisé dans le dichlorométhane et lavé à l'aide d'une solution saturée de carbonate de sodium. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le composé brut obtenu est purifié par flash chromatographie avec un mélange de CH2C12 MeOH, 99:1, v/v et donne 3,6 g d'une huile jaune. Rendement : 95 %. Rf : 0,48 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v) 48139
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IR (film): 1647 (C≈O), 2249 (CN) cm4
RMN XH (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,19 (m, 4H, Har), 3,67 (s, 2H, PhCH2CN), 3,47 (s, 2H, NCH2Ph), 3,26 (m, 4H, NCH2), 3,07 (s, 2H, COCH2N), 2,58 (t, 2H, J≈ 5,39 Hz, CH2), 1,47 (si, 2H, CH2), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,40 Hz, CH3).
7.9- Préparation de la 4-[4-( -hydroxyamidino méthyl)benzyl]-l-tétradécylpipérazin-2-one A un mélange de 7 g (50 mmol) de carbonate de potassium, 2,9 g (41 mmol) de chlorhydrate d'hydroxylamine dans 80 ml d'éthanol chauffé à reflux pendant 15 mn est ajouté en goutte à goutte 3,6 g (8,4 mmol) de 4-(4- cyanométhylbenzyl)-l-tétradécylpipérazin-2-one solubilisée dans 20 ml d'éthanol. A la fin de l'addition, le mélange est chauffé à reflux pendant 12 h. Après filtration et évaporation des solvants, le résidu obtenu est repris au dichlorométhane et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4j filtrée et évaporée. Le résidu est alors purifié sur colonne de gel de silice avec un mélange de CH2Cl /MeOH, 98:2, v/v et conduit à 2,2 g d'une huile jaune. Rendement : 56 %. Rf : 0,43 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (film): 1636 (C≈O, C≈N) on 1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,17 (m, 4H, H*), 4,51 (s, 2H, NH2), 3,44 (s, 2H, PhCH2CN), 3,35 (s, 2H, NCH2Ph), 3,24 (m, 4H, NCH2), 3,05 (s, 2H, COCH2N), 2,58 (t, 2H, J≈ 5,21 Hz, CH2), 1,45 (si, 2H, CH2), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,80 (t, 3H, J≈ 6,38 Hz, CH3).
7.10- Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl méthyl) benzyl]-4-tétradécylpipérazin-2- one A une solution de 1,1 g (2,4 mmol) de 4-[4-(N- hydroxyamidinométhyl)benzyl]-l-tétradécylpipérazin-2-one et 0,4 ml (2,9 mmol) 048139
de triéthylamine dans 130 ml de dichlorométhane ref oidie à 0°C pendant 15 mn est ajouté en goutte à goutte 0,36 ml (2,8 mmol) de chlorocarbonate de phényle. Le mélange est agité pendant 2 h puis traité avec une solution saturée de Na2CO3> ensuite lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4j filtrée et concentrée pour donner un résidu qui est solubilisé dans 50 ml de toluène et chauffé à reflux pendant 6 h. Le toluène est évaporé et le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de gel de silice avec comme éluant CH Cl2/MeOH, 98:1, v/v puis cristallisé dans de l'éther pour donner 300 mg d'un solide jaune. Rendement : 30 %. Rf : 0,52 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 1636 (CON), 1775 (-O-CO-N) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,16 (m, 4H, Har), 5,23 (s, IH, NH), 3,76 (s, 2H, PhCH2CN), 3,38 (s, 2H, NCH2Ph), 3,25 (m, 4H, CH2N), 2,86 (s, 2H, COCH2N), 2,57 (t, 2H, J = 5,23 Hz, CH2), 1,45 (m, 2H, CH2), 1,18 (si, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J = 6,42 Hz, CH3).
Exemple 8. Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yléthyl)benzoyl]-4-tétradécylpipérazine
(composé de formule (I) dans laquelle D = Z-HET avec HET = l'oxadiazolone (II),
Z = -(CH2)2-, soit n = 2, A = B = -CH2-, Y = CO, R ≈ -(CH2)13-CH3
8.1- Préparation de l'acide 4-(2-chloro-2-cyanoéthyl)benzoïque Dans un erlenmeyer rodé de 250 ml, 10 g (72 mmol) d'acide para aminobenzoïque sont dissous dans 70 ml d'acide acétique auxquels on ajoute 6 ml d'acide chlorhydrique 12 N. Le mélange est refroidi à 0°C et 2,5 g (36,2 mmol) de NaN02 sont ajoutés par petites portions. Après 30 min d'agitation, le liquide visqueux obtenu est additionné goutte à goutte à un mélange de 6,5 ml (94,8 mmol) d'acrylonitrile et de quelques milligrammes d'oxyde de cuivre (CuO) en suspension dans 20 ml d'acétone anhydre. Le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant deux heures, le solide obtenu est filtré sous vide puis lavé plusieurs fois à l'eau. Le produit est purifié par recristallisation dans l'eau et conduit à un solide blanc. Rendement : 65 %. Point de fusion : 157°C. Rf : 0,29 (CH Cl2/MeOH, 50:50, v/v).
IR (KBr): 1690 (C≈O), 2240 (CN) cm-1 RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,9 (d, 2H, J = 8,22 Hz, Har), 7,4 (d, 2H, J = 8,18 Hz, Har), 5,5 (t, IH, J = 7 Hz, CNCHC1), 3,43 (d, 2H, J = 6,96 Hz, CH2CHCN).
8.2- Préparation de l'acide 4-(2-cyanoéthyl)benzoïque A 10 g (47 mmol) d'acide 4-(2-chloro-2-cyanoéthyl)benzoïque dissous dans 250 ml d'acide acétique glacial est ajouté par petites portions 1,56 g (23 mmol) de poudre de zinc. Le mélange est chauffé à reflux pendant deux heures.
Le sel formé (ZnCl ) est filtré sous vide et lavé plusieurs fois à l'eau. Un précipité se dépose à froid dans le filtrat, il est filtré et lavé plusieurs fois à l'eau puis séché. On récupère un solide blanc. Rendement : 68 %. Point de fusion :
165°C. Rf : 0,25 (CH2Cl2/MeOH, 50:50, v/v).
IR (KBr): 1700 (C≈O), 2252 (CN) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,9 (d, 2H, J = 8,17 Hz, Har), 7,25 (d, 2H, J = 8, 13 Hz, Har), 2,95 (t, 2H, J = 7,22 Hz, CH2CN), 2,6 (t, 2H, J = 7,36 Hz, CH2CH2CN).
Toutes les étapes de condensation ont été réalisées en suivant le même protocole expérimental de l'exemple 2 décrit précédemment avec sensiblement les mêmes rendements et conduisent au produit final avec 1 Oxadiazolone nommée ci- dessus.
Exemple 9. Préparation de la l-f4,-(4,5-dihydro-l.,2,4(4Hr)-5-oxo- oxadiazol-3-ylpropyDbenzoyπ-4-tétradécyIpipérazine
(composé de formule (I) dans laquelle D = Z-HET avec HET = l'oxadiazolone (II),
Z = -(CH2)3-, soit n = 3, A = B = -CH2-, Y = CO, R = -(CH2)13-CH3
9.1- Préparation du l-bromo-3-phénylpropane 048139
- 33 -
A 10 g (73 mmol) de 3-phénylpropan-l-ol en solution dans 150 ml de dichlorométhane anhydre sont ajoutés par petites fractions 50 ml d'une solution 1M de PBr3 (36 mmol) dans du dichlorométhane. Le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant une heure. Après un lavage de ce dernier plusieurs fois à l'eau, les phases organiques sont séchées puis évaporées. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice avec comme éluant un mélange éther/éther de pétrole, 5:95, v/v pour donner le dérivé brome d'aspect liquide visqueux. Rendement : 80%. Rf : 0,25 (éther/éther de pétrole, 5:95, v/v).
IR (film): 1605 (C=Car) cm-1
RMN Η (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,25-7,06 (m, 5H, Har), 3,29 (t, 2H, J = 6,59 Hz, CH2Br), 2,68 (t, 2H, J= 7,34 Hz, PhCH2CH CH2Br), 2,14-1,99 (m, 2H, CH2CH2CH2Br).
9.2- Préparation de la 4-(3-bromopropyl)acétophénone A un mélange de 17,5 g (88 mmol) de trichlorure d'aluminium et de 50 ml de chlorure d'acétyle en solution dans 100 ml de CS sont ajoutés à 0°C en goutte à goutte, 25 g (125 mmol) du dérivé brome l-bromo-3-phénylpropane en solution dans 20 ml de chlorure d'acétyle. Le mélange est agité à température ambiante pendant deux heures. L'excès de chlorure d'acétyle et le CS2 sont éliminés par évaporation sous pression réduite. Le résidu obtenu est repris dans du dichlorométhane, lavé plusieurs fois à l'eau, séché sur MgSO4 puis concentré sous vide. Une distillation sous pression réduite donne l'acétophénone substituée sous l'aspect d'un liquide jaunâtre avec un Rendement de 79 %. Point d'ébullition : 140-145°C / 3 mmHg. Rf : 0,25 (éther/éther de pétrole, 50:50, v/v).
IR (film): 1670 (C≈O), 1605 (C=Car) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13,HMDS) δ ppm : 7,79 (si, 2H, H^), 7,23 (si, 2H, H^), 3,26 (t, 2H, J = 6,49 Hz, CH2Br), 2,7 (t, 2H, J ≈ 6,26 Hz, PhCH2CH2CH2Br), 2,48 (s, 3H, CH3), 2,08-1,9 (m, 2H, CH2CH2CH2Br). 048139
• 34 -
9.3 - Préparation de l'acide 4-(3-bromopropyl)benzoïque
A 33 g de NaOH en solution dans 200 ml d'eau sont additionnés successivement 50 ml de Br2 goutte à goutte et 100 ml de dioxane. Le mélange est refroidi à 0°C et 22 g de 4-(3-bromopropyl)acétophénone sont additionnés goutte à goutte. L'agitation est maintenue à température ambiante jusqu'à disparition de la coloration brune du brome (une heure). Le mélange est acidifié avec précaution à l'aide d'une solution aqueuse de HC1 12 N (20 ml). Le précipité formé, filtré sous vide, rincé plusieurs fois à l'eau puis séché conduit à un solide jaune. Rendement : 85 %. Point de fusion : 120°C. Rf : 0,25 (MeOH/CH2Cl2, 20:80, v/v).
IR (KBr): 3340 (OH), 1700 (C≈O) cm4
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,9 (d, 2H, J = 8,16 Hz, Har), 7,2 (d, 2H, J = 8,3 Har), 3,3 (t, 2H, J = 6,47 Hz, CH2Br), 2,78 (t, 2H, J = 7,7 Hz, PhCH2CH2CH2Br), 2, 18-2,04 (m, 2H, CH2CH2CH2Br).
9.4- Préparation de l'acide 4-(3-cyanopropyl)benzoïque
Le dérivé brome préparé ci-dessus est transformé en nitrile suivant le même protocole décrit dans l'exemple 1 précédent avec un Rendement de 75 % et d'aspect visqueux. Rf : 0,29 (MeOH/CH2Cl2, 15:85, v/v).
IR (film): 3345 (OH), 1700 (C≈O), 2253 (CN) cm"1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,9 (d, 2H, J = 8,09 Hz, Har), 7,2 (d, 2H, J = 8,09 Hz, Har), 2,8 (t, 2H, J = 7,44 Hz, CH2CN), 2,28 (t, 2H, J = 6,99 Hz, PhCH2CH2CH2CN), 2,02- 1 ,91 (m, 2H, CH2CH2CH2CN).
9.5- Suite des étapes
La condensation de la tétradécylpipérazine sur le chlorure de 3- chlorométhylbenzoyle en milieu basique comme décrit précédemment dans l'exemple 2 conduit au chlorure correspondant. Ce dernier est transformé en nitrile puis en amidoxi e et enfin cyclisé en oxadiazolone : l-[4'-(4,5-dihydro- l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylpropyl)benzoyl]-4-tétradécylpipérazin-2-one, /048139
• 35 -
selon les mêmes protocoles déjà décrits. Les caractéristiques de tous les intermédiaires ainsi que du produit final sont données ci-dessous :
1 -(3 -clιlorométhylbenzoyl)-4-tétradécylpipérazine Aspect : huile visqueuse. Rendement : 67 %.
Éluant (MeOH/CH2Cl2, 5:95, v/v).
Rf : 0,25 (MeOH/CH2Cl2, 10:90, v/v).
IR (film): 1660 (NCO), 1610 (C≈Car) cm-1 RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,38 (si, 4H, Har), 4,55 (s, 2H, CH2C1), 3,72 (m, 2H, NCH2), 3,38 (m, 2H, NCH2), 2,52 (m, 4H, NCH2), 2,36 (t, 2H, NCH2), 1,41 (m, 2H, NCH2CH2), 1,25-1,15 (si, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,09 Hz, CH3).
1 -(3 -cyanométhylbenzoyl)-4-tétradécylpipérazine
Aspect : huile visqueuse. Rendement : 67 % Éluant (MeOH/CH2Cl2, 5:95, v/v). Rf : 0,25 (MeOH/CH2Cl2, 10:90, v/v).
IR (film): 1665 (NCO), 2253 (CN), 1605 (C≈Car) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,36-7,23 (si, 4H, Har), 3,71 (s, 2H, CH2CN), 3,74-3,71 (m, 2H, NCH2), 3,43 (m, 2H, NH2), 2,54-2,25 (m, 4H, NCH2), 2,29 (t, 2H, J≈ 7,45 Hz, NCH2), 1,5-1,35 (m, 2H, NCH2CH2), 1,3-1,1 (m, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,36 Hz, CH3).
l-[3-(N-hydroxyamidino)méthylbenzoyl]-4-tétradécylpipérazine Aspect : huile visqueuse. Rendement : 58 %.
Éluant (MeOH/CH2Cl2, 5:95, v/v).
Rf : 0,25 (MeOH/CH2Cl2, 10:90, v/v).
IR (film): 3430 (ΝH), 1660 (ΝCO), 1605 (C=Car) cm"1 048139
- 36 -
RMN !H (200 MHz, CDC13> HMDS) δ ppm : 7,24-7,07 (m, 4H, H^), 3,65-3,53 (m, 2H, NCH2), 3,33-3,28 (m, 2H, NCH2), 2,41-2,11 (m, 6H, NCH2), 2,09 (s, 2H, CH2CN), 1,5-1,3 (m, 2H, NCH2CH2), 1,25-1,15 (m, 22H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,41 Hz, CH3).
1 -[3 -(4,5-dihydro- 1 ,2,4(4H)-oxadiazol-5-one-3 -yl)méthylbenzoyl] -4- tétradécyl- pipérazine Aspect : huile visqueuse. Rendement : 67 %. Éluant (MeOΗ/CΗ2Cl2, 5:95, v/v).
Rf : 0,25 (MeOH/CH2Cl2, 10:90, v/v).
IR (film): 3435 (NH), 1665 (NCO), 1610 (C=Car) cm-1
RMN ]H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,3-7,2 (m, 4H, Har), 6,57 (si, IH, NH), 3,68-3,35 (m, 4H, NCH2), 2,52-2,29 (m, 6H, NCH2), 2,1 (s, 2H, CH2CN), 1,4-1,35 (m, 2H, NCH2CH2), 1,3-1,1 (m, 22H, CH2), 0,8 (t, 3H, J≈ 6 Hz, CH3).
Exemple 10. Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3- yl-méthylbenzoyl]-4-(N-octadécylaminocarbonyl)pipérazine (composé de formule (I) dans laquelle D = Z-ΗET avec ΗET = l'oxadiazolone (II), Z = -(CΗ2) -, soit n = 1, A = B = -CH2-, Y = CO, R = -(CH2)17-CH3
10.1- Préparation de la N-octadécylaminocarbonylpipérazine Dans un erlenmeyer rodé de 250 ml sont agités 13 g (0,151 mol) de pipérazine dissous dans 100 ml de dichlorométhane. 4,42 g (15 mmol) de 1- octadécylisocyanate sont additionnés au mélange et l'agitation est maintenue à température ambiante pendant 1 h. A la fin de la réaction, la solution est lavée deux fois à l'eau. La phase organique séchée sur MgSO ; filtrée et évaporée conduit à 5,21 g de cristaux blancs. Rendement : 91 %. Point de fusion : 72°C,
Rf : 0,46 (CH2Cl2/MeOH/NH4θH, 80:20:2, v/v/v).
IR (KBr): 3364 (NH), 1620 (N-CO-N) cm"1 048139
- 37 -
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 4,68 (t, 1H, J≈ 5,01 Hz, NHCO), 3,26 (t, 4H, J≈ 5,22 Hz, CH2NCO), 3,14 (q, 2H, J≈ 7,14 Hz, CH NHCO), 2,77 (t, 4H, J≈ 5,21 Hz, CH2NH), 1,73 (si, IH, NH), 1,42 (m, 2H, CH2CH2NH), 1,19 (si, 3 OH, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,20 Hz, CH3).
10.2- Préparation de la l-(4'-chlorométhylbenzoyl)-4-(N- octadécylaminocarbonyl) pipérazine
Cet intermédiaire a été obtenu dans les mêmes conditions que l'exemple 2 précédent à partir de 9,9 g (26 mmol) de N-octadécylcarbonylpipérazine, 5,4 ml (38 mmol) de triéthylamine et 5 g (26 mmol) de chlorure de l'acide 4- chlorométhylbenzoïque. La purification faite par chromatographie sur gel de silice avec comme éluant le dichlorométhane conduit à 12,2 g de produit sous forme de cristaux blancs. Rendement : 88 %. Point de fusion : 68-70°C. Rf : 0,4 (CH2Cl2/MeOH, 95:5, v/v).
IR (KBr): 2365 (CN), 1653 (COIN), 1730 (C=Car) cm 1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,30-7,39 (si, 4H, Har), 4,82 (t, IH, /= 5 Hz, NHCO ), 4,48 (s, 2H, PhCH2Cl), 3,52 ( si, 4H, CH2NCONH), 3,34 (si, 4H, CH2NCO), 3,15 (q, 2H, J = 7 Hz, CH2NH), 1,43 (m, 2H, CH2CH2NH), 1,19 (sm, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, / = 5,15 Hz, CH3).
10.3- Préparation de la l-(4'-cyanométhylbenzoyl)-4-(N- octadécylamino carbonyl)pipérazine
Ce composé a été obtenu suivant les mêmes protocoles de synthèse décrits précédemment dans l'exemple 2 en partant de 5,33 g (10 mmol) de l-(4'- chlorométhylbenzoyl)-4-(octadécylaminocarbonyl)pipérazine et de 1,96 g (40 mmol) de cyanure de sodium. On obtient 3,84 g de précipité blanc. Rendement : 74 %. Point de fusion : 90°C . Rf : 0,56 (CH2Cl2/MeOH, 93:7, v/v).
IR (KBr): 2365 (CN), 1653 (CON), 1730 (C=Car) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13, HMDS) δ ppm : 7,30-7,39 (si, 4H, Har), 4,53 (t, IH, J = 5 Hz, NHCON), 3,73 (s, 2H, PhCH2CN), 3,52 (si, 4H, CH2NCONH), 3,34 048139
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(sl, 4H, CH2NCO), 3,15 (q, 2H, J≈ 7 Hz, CH2NH), 1,43 (m, 2H, CH2CH2NH), 1,19 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 5,15 Hz, CH3).
10.4- Préparation de la l-[4'-(N-hydroxyamidinométhyl)benzoyl]- 4-(N-octadécylaminocarbonyl)pipérazine
Cette amidoxime est obtenue dans les mêmes conditions que celles décrites précédemment à partir de 5,8 g (84 mmol) de chlorhydrate d'hydroxylamine, 14,07 (102 mmol) de carbonate de potassium et 8,9 g (17 mmol) de 1 -(4'-cyanométhylbenzoyl)-4-(octadécylaminocarbonyl)pipérazine. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice avec comme éluant un mélange de CH2Cl2/MeOH, 98:2, v/v. On obtient ainsi 2,36 g de cristaux blancs. Rendement : 38 %. Point de fusion : 104-106°C. Rf : 0,43 (CH2Cl2/MeOH, 90:10, v/v).
IR (KBr): 3493 (OH), 3355 (NH2), 2200 (CN), 1615 (C=Car) cm-1
RMN 1H (200 MHz, CD3OD, HMDS) δ ppm : 7,35 et 7,30 (2d, 4H, J≈ 8,8 et 8,5 Hz, Har), 4,7 (t, IH, J ≈ 6 Hz, NHCON), 4,8 (s, 2H, NH2), 3,61 (m, 4H, CH2NCONH), 3,50 (s, 2H, PhCH2), 3,27 (m, 4H, CH2NCO), 3,07 (t, 2H, J ≈ 6 Hz, CH2NH), 1,39 (m, 2H, CH2CH2NH), 1,21 (si, 30H, CH2), 0,83 (t, 3H, J≈ 8 Hz, CH3).
10.5- Préparation de la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo- oxadiazol-3-yl-méthylbenzoyl]-4-(N- octadécylaminocarbonyl)pipérazine Cette synthèse est effectuée en deux étapes, selon le même protocole déjà décrit dans l'exemple 2 précédent à partir de 1,25 g (2,3 mmol) de l'amidoxine ci-dessus, 0,38 ml (2,75 mmol) de triéthylamine et 0,34 ml (2,75 mmol) de chlorocarbonate de phényle. Les 0,8 g de cristaux blancs sont obtenus après une chromatographie sur gel de silice avec le dichlorométhane comme éluant. Rendement : 59 %. Point de fusion : 150-152°C. Rf : 0,43 (CΗ2Cl2/MeOΗ, 93:7, v/v).
IR (KBr): 1780 (OCON), 1618 (C≈N), 1550 (C≈Car) cm"1 RMN ]H (200 MHz, CD3OD, HMDS) δ ppm : 7,36 (s, 4H, Har), 4,94 (t, IH, J≈ 5,53 Hz, NHCON), 3,77 (s, 2H, PhCH2), 3,56 (si, 2H, CH2NCONH), 3,27 (si, 2H, CH2NCO), 3,07 (q, 2H, J ≈ 7,37 Hz, CH2NHCO), 1,41 (si, 2H, CH2CH2NHCO), 1,18 (si, 30H, CH2), 0,81 (t, 3H, J≈ 6,8 Hz, CH3).
Exemple 11: Etude de l'activité biologique in vitro
Les phospholipases A2 hydrolysent la liaison ester en position sn-2 des glycéro phospholipides et libèrent un acide gras et un lysophospholipide. L'action des composés a en particulier été évaluée in vitro par le dosage de l'acide gras selon la méthode fluorimétrique de Radvanyi et coll. (Anal. Biochem. 1989, 177, 103-109) et par le dosage du lysophospholipide selon la méthode spectrophotométrique UN de Reynolds et coll. (Anal. Biochem. 1992, 204, 190-197).
11.1.1- Matériel et méthodes
11.1.1- Matériels
- Les enzymes utilisées sont deux enzymes sécrétées de groupe II, la PLA2 recombinante humaine et la sous-unité basique de la PLA2 de Crotalus durissus terrificus et une enzyme sécrétée de groupe I, la PLA2 de pancréas de porc.
- Les substrats sont : un substrat fluorescent, l'acide palmitoyl-2-(10- pyrényl décanoyl)-sn-glycéro-3-phosphatidylglycérol, pour la méthode fluorimétrique et un substrat soufré, le sel de lithium du 1,2-bis- (dihexanylthio)-didéoxy-rac-glycéro-3-ρhosphorylglycérol pour la méthode spectrophotométrique UN.
- Les dosages fluorimétriques sont effectués sur un appareil Perkin Elmer LS50 dans des cuves en polystyrène à usage unique, de 1 cm de largeur. La concentration exacte du substrat fluorescent est déterminée sur un spectromètre UN. Unicam dans des cuves en quartz.
- Les dosages en spectrophotométrie UN. sont réalisés sur un appareil spectro ELx 808 Ultra Micro Plate Reader (plaques à 96 puits).
11.1.2- Méthodes 048139
- 40 -
a) Dosage fluorimétrique
La PLA2 est une enzyme qui hydrolyse la liaison ester en position sn-2 des phospholipides. Sous forme agrégée, le substrat fluorescent présente une émission de fluorescence maximale à 490 nanomètres (nm), et nulle à 398 nm. Après hydrolyse enzymatique, la fluorescence émise par l'acide gras libéré (l'acide pyrényl décanoïque), complexé à la sérum albumine bovine (SAB) est exaltée et l'on observe alors une émission forte à 378 et 398 nm. Le principe du dosage repose sur la mesure de cette différence de fluorescence à 398 nm qui est mise à profit pour étudier l'apparition de l'acide gras libéré au cours du temps, autrement dit, l'activité PLA2.
La mesure de l'activité enzymatique est réalisée dans des cuves dans lesquelles on échantillonne : 960 μl de tampon Tris, HC1 50 mM à pH 7,5 ;NaCl 0,5 M, EGTA, ImM ; substrat 1 μM. Ce mélange est agité une minute au vortex, pour permettre la formation de vésicules de substrat puis sont ajoutés successivement, sous agitation, 10 μl de SAB à 10 %, 10 μl de solvant (éfhanol ou DMSO) ou de solution d'inhibiteur, 10 μl de PLA2 à une concentration donnée et enfin,10 μl de chlorure de calcium 1 M (CaCl2) qui déclenche l'activité. Les bonnes conditions de mesure de l'activité enzymatique exigent une saturation de l'enzyme, les concentrations initiales utilisées sont donc : (i) PLA2 recombinante humaine : 0,1 μg/ml ; (ii) PL A2 pancréatique de porc : 0,6 μg/ml ; (iii) PLA2 Crotalus durissus terrificus (CB) : 0,05 μg/ml. La solution-mère contenant l'inhibiteur quant à elle, est préparée à une concentration initiale de 10'2M.
L'activité enzymatique se traduit par une courbe dont la pente à l'origine permet de calculer la vitesse initiale de la réaction. Soit So est la pente de la courbe en absence de calcium (témoin), S la pente en présence de calcium, V le volume en μl de la solution de substrat et Fmaχ le signal de fluorescence maximale, obtenu une fois la réaction enzymatique terminée, alors, la relation : 048139
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(S - SQ) X V
A = 2.1CT4 x
F " max
permet de calculer l'activité enzymatique (A) en μmole d'acide gras libéré par minute. L'activité résiduelle en présence d'inhibiteur est alors évaluée par le rapport des pentes obtenues en absence et en présence d'inhibiteur.
n, « _. ._- - . , .. (S - Sn) en présence d'inhibiteur ^ ΛΛ % Activité résiduelle = - — -^ - x 100
(S - SQ) en absence d'inhibiteur
Les valeurs obtenues reportées en fonction des logarithmes des concentrations d'inhibiteur utilisées, permettent de déterminer la valeur de la Clδo, c'est-à-dire la concentration d'inhibiteur pour laquelle l'activité enzymatique est diminuée de moitié. Plus cette valeur de CISQ est faible, meilleure est l'activité inhibitrice du composé testé.
Les PLA2 ont plus d'affinité pour les substrats organisés.
Cependant, trois raisons peuvent expliquer l'inhibition éventuellement observée.
- L'inhibiteur désorganise les micelles de substrat et les rend inaccessibles à l'enzyme. Dans ce cas, l'inhibition est due à l'indisponibilité du substrat.
- Une partie de l'inhibiteur peut se fixer sur les vésicules de substrat et ainsi, la CI50 peut être sous estimée.
- L'inhibiteur réagit soit avec un groupement du site actif soit avec une autre partie de l'enzyme empêchant ainsi l'hydrolyse du substrat. Dans ce cas, l'inhibition observée est réelle, elle a lieu au niveau du site actif, et peut présenter ou non un caractère réversible.
Le test fluorimétrique est une technique très sensible, mais ne permet pas de faire la différence entre ces trois types d'inhibition, le substrat étant sous forme micellaire. En revanche, dans le test spectrophotométrique, décrit plus loin, l'état monomère du substrat 48139
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permet de lever toute ambiguïté sur la réalité de l'inhibition, même si, dans ce test, l'enzyme ne fonctionne pas tout à fait dans des conditions optimales.
b)Dosage spectrophotométrique U. V.
Le lysothiophospholipide (LTPL) libéré par l'action lipolytique de la PLA2 en présence de calcium réagit avec l'acide dithionitrobenzoïque (DTNB) présent dans le milieu pour former un complexe LTPL-TNB et un anion TNB- qui induit une coloration jaune du milieu réactionnel. La mesure de la densité optique à 412 nanomètres (longueur d'onde d'absorption de l'ion TNB-) traduit l'apparition du lysothiophospholipide et donc une activité PLA2. La mesure de l'activité enzymatique est réalisée dans des plaques multipuits, chaque puits contenant 190 μl de tampon IX, 2 μl de DTNB à 10 mM, 2 μl de substrat à 20 mM, 2 μl de solvant ou de solution d'inhibiteur, 2 μl de PLA2 à une concentration donnée. La plaque est agitée et 2 μl de chlorure de calcium 1 M sont ajoutés pour déclencher la réaction enzymatique. Le substrat est ici utilisé à une concentration inférieure à la cmc, concentration micellaire critique (elle est de ImM), sous forme monomère, et le rapport substrat/ enzyme est respecté. Ceci justifie l'utilisation du substrat à une concentration 5 fois inférieure à la cmc (200 μM). Les bonnes conditions de mesure exigent aussi une saturation en enzyme. Les concentrations utilisées sont donc: (i) PLA2 pancréatique de porc: 1,5 mg/ml ; (ii) PLA2 Crotalus durissus terrificus : 0,43 mg/ml. La solution mère contenant rinhibiteur est préparée à une concentration initiale de 10'2M. La CI50 est déterminée grâce à un logiciel couplé au spectrophotomètre UN. Il calcule directement la vitesse initiale de la réaction. Cette vitesse est représentée par le rapport : 048139
- 43 -
Figure imgf000044_0001
Pour chaque puit (3 puits par concentration) 15 lectures sont réalisées à des intervalles de 3 secondes.
11.2- Résultats
Les résultats sont regroupés dans le Tableau 1 dans lequel sont détaillées les significations respectives de R, W, A, B, Y et D (Z et HÉT) dans la formule (I) de la molécule testée. Les résultats présentés dans le Tableau I montrent que tous les composés de formule (I) testés sont très sélectifs vis-à-vis de la PLA2 du groupe IL
Les composés n° 6 à 9 et 13 à 15, pour lesquels p est 1 et Y= -CO- possèdent l'activité inhibitrice la plus forte, les composés n° 7, 8, 9, 12, 13 et 14 étant les plus actifs avec une valeur de IC50 inférieure ou égale à 0,3 μM vis-à-vis de la PLA2 humaine du groupe IL
Exemple 12. Etude de l'activité in vivo
12.1- Matériel et méthodes
La recherche de l'activité in vivo a été effectuée par le test bien connu de l'œdème à la carragénine chez le rat.
Dans le protocole expérimental suivi, le produit de référence, l'indométacine, ou le composé n°5 à évaluer, ont été administrés soit par voie intra-péritonéale (i.p.) soit par voie orale (p.o.) une heure avant l'injection de carragénine dans la patte arrière du rat. Le volume de l'œdème a été mesuré aux temps 0, 3 et 5 heures après l'injection de carragénine. Les doses utilisées étaient de 5, 10 et 20 mg/kg pour les deux produits testés. 048139
• 44 -
12.2- Résultats
Par voie i.p., les deux produits possèdent une activité équivalente. Ainsi, à la dose de 10 mg/kg, les inhibitions de l'œdème par l'indométacine et le composé n°5 sont de 79% et 73% respectivement.
Par voie p.o., le composé n°5 a une activité nettement supérieure à celle de l'indométacine puisque, au bout de 5 heures après l'injection de carragénine, il inhibe l'œdème de 65%, alors que le produit de référence a une activité inhibitrice de 16%, les deux produits ayant été administrés à la dose de 10 mg/kg p.o.
EXEMPLE 13 : Seconde étude de l'activité in vivo
L'exemple 13 concerne une étude de l'activité anti-inflammatoire in vivo de certains composés de l'invention, au moyen du test de l'œdème de l'oreille comme modèle expérimental d'une inflammation aïgue.
A. MATERIELS ET METHODES
A.l. Matériel et réactif.
Six échantillons des composés PMS 1227, PMS 1237, PMS 1281, PMS 1289, PMS 1314 et PMS 1315 ont été préparés.
La liste des différents composés référencés ci-dessus et leur identité chimique est donnée en détail ci-après :
PMS 1227
Figure imgf000045_0001
l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)ben2yl]-d- tétradécylpipérazine.
PMS 1281
C28H44N4O3 + 1/2 H20 = 493 g/mole l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzyl]-4- tétradécylpipérazine.
PMS1289
Figure imgf000045_0002
l-(para((l,2,4-(4H)-5-oxo)oxodiazol-3-ylméthyl)benzoyl)4-dodécyl- 2,5-diméthylpipérazine. PMS 1314
Figure imgf000046_0001
l-[4'-(4,5-dihydiO-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzoyl]- 4-dodécylpipérazine.
PMS 1315 C29H43 3θ3S + 1H20= 531g/mole l-[4'-(2,4-dioxo-l,3-thiazolidine-5ylidène)benzoyl]-4- tétradécylpipérazine.
Comme réactifs, on a utilisé de l'huile de croton de grade spécial ou de premier grade, de l'indométhacine (Sigma co.), de l'acétone, du chloroforme (100%), du chloroforme (80%), de la carboxyméthylcellulose
(CMC), de l'éthanol, de l'hexane, de l'éther, du polyéthylène glycol (PEG) et une solution saline.
A.2. Les animaux utilisés ont été des souris mâles de la souche ICR ayant un poids de 25g.
A.3. Comme instruments, on a utilisé : un poinçon pour prélèvement d'échantillons de peau, un appareil de mesure de l'épaisseur de l'oreille (Ozaki, Japan), une balance, une pipette automatique, des pincettes, un agitateur Nortex, une chambre d' anesthésie, une capuche, une cage, un tube Eppendorf ®, un tapis de sécurité, des tubes etc.
A.4. Pour évaluer l'effet anti-inflammatoire in vivo des composés PMS de l'invention listés ci-dessus, on a utilisé le test de l'œdème de l'oreille comme modèle expérimental d'une inflammation aigûe. Mesure de l'effet local anti-inflammatoire :
Après avoir induit un œdème sur l'une des oreilles des souris en appliquant l'huile de croton, des échantillons de chacun des composés PMS ci-dessus ont été dissous dans du chloroforme à 80%, puis la solution résultante a été appliquée sur l'oreille, à raison d'un milligramme de chacun des composés par oreille. De l'autre côté de l'oreille, on a appliqué seulement le solvant, c'est-à-dire du chloroforme à 80%.
5 heures après le début de l'expérience, le tissu de l'oreille au niveau de l'œdème a été prélevé par poinçonnage de la peau et le poids 048139
• 46 -
du tissu ainsi prélevé a été comparé avec un prélèvement par poinçon de la partie témoin de l'oreille afin de calculer le rapport d'inhibition. Effet anti-inflammatoire systémique :
Des échantillons des composés PMS listés ci-dessus ont été mis en suspension dans du CMC et administrés oralement à raison de 80 mg de chacun des composés par souris. Une heure après le début de l'expérience, l'œdème a été induit en appliquant de l'huile de croton .
Cinq heures après l'application d'huile de croton, le poids du tissu développant un œdème a été prélevé par poinçonnage de la peau et comparé à un prélèvement par poinçonnage de la peau d'une partie témoin afin de calculer le rapport d'inhibition.
A.5. Pour le calcul de la signification statistique, les résultats obtenus respectivement dans le groupe témoin et le groupe testé ont été évalués à l'aide du test du Student (Student's t-test). B. RESULTATS
B.l Effet anti-inflammatoire local
L'effet anti-inflammatoire local du test de l'œdème de l'oreille induit par l'huile de croton chez la souris par administration topique des composés PMS listés dans la partie Matériels et Méthodes sont représentés dans le tableau 2 ci-après.
TABLEAU 2
Figure imgf000047_0001
* Les nombres entre parenthèses indiquent le nombre d'expériences réalisées.
Selon un classement par ordre de grandeur décroissant, les activités anti-inflammatoires in vivo des composés PMS sont classés de la 048139
- 47 -
manière suivante : PMS 1289 > PMS 1227> PMS 1281> PMS1315> PMS1314 .
B. 2 Effet anti-inflammatoire systémique
Les résultats obtenus montrent que l'administration orale des composés PMS listés dans la partie Matériels et Méthodes n'induit pas d'effet anti-inflammatoire systémique dans le modèle expérimental de l'œdème de l'oral induit par l'huile de croton.
48
Figure imgf000049_0002
Figure imgf000049_0001
Ό Tableau I (suite)
Figure imgf000050_0001
Figure imgf000050_0002
" mesurée au fluorimètre avec la PLA2 recombinante humaine (groupe II) b mesurée au fluorimètre, sauf spécifié, avec la PLA2 pancréatique de porc (groupe I) c mesurées tel qu'indiqué avec la PLA2 de Crotalus durissus terrifiais (groupe II)
Tableau 1 (Suite 2)
Figure imgf000051_0001

Claims

REVENDICATIONS 1. Composé ayant la formule générale (I) suivante :
Figure imgf000052_0001
dans laquelle:
- D signifie le groupe Z-HET ou le groupe Z≈HET et (i) lorsque D signifie le groupe Z-HET :
-HÉT est un hétérocycle à 5 chaînons tel que l' oxadiazolone (II) ou la thiazolidine dione (III) de formules suivantes:
Figure imgf000052_0002
-Z- est choisi dans le groupe constitué par ~(CRιR2)n- et -(CRi≈ CR2)n - avec n étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, Ri et R2, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
(ii) lorsque D signifie le groupe Z≈HET :
-Z- représente, avec l'hétérocycle, un groupement -Z≈HÉT de formule (IV) ou (V) suivante:
Figure imgf000052_0003
dans laquelle -Z= représente -CRi≈, dans laquelle Ri représente un . atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone; - p est un entier ayant la valeur 0 ou 1;
-Y- est choisi dans le groupe constitué par C≈O, SO2 et -(CR3R4)m- avec m étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, R3 et R , identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
- A et B sur le cycle pipérazinique, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome de carbone lié à des hydrogènes, un atome de carbone lié à la fois à un hydrogène et à un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 3 atomes de carbone, ou un groupe -C≈O.
- q est un entier ayant la valeur 0 ou 1;
O 0
-W- est choisi dans le groupe constitué par — c — , — o — c — et
0
II — N~c— ;
-R est choisi dans le groupe constitué par des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, ayant de 1 à 22 atomes de carbone, les groupes polyaryle et les groupes aryl-alkyl, alkyl-Q-alkyl, alkyl-Q-aryl, aryl-Q-aryl et aryl-Q-alkyl pour lesquels "aryl" représente un groupe aryle ayant de 5 à 10 chaînons substitué ou non substitué.
2. Composé de formule (I) selon la revendication 1 caractérisé en ce que lorsque le groupe R représente aryl-alkyl, alkyl-Q-aryl, aryl-Q-aryl et aryl-Q-alkyl, le groupe aryle est choisi parmi le groupe phényle, naphtyle, phénylphényl (ou biphényle) ou encore un aryle hétérocyclique tel que le groupe indolyle, "alkyl" représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 12 atomes de carbone et "Q" est choisi dans le
0 groupe constitué par -O-, -S-, -NH-, -NRs-, -NH-CO-NH-, — o— S — ,
O 0
S Il M N C il O , O C il N _,
— c — o — , H et H , avec R5 représentant un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone.
3. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que p est égal à 1 et Y représente le groupe C≈O, les groupes D, A, B, q, W et R ayant les significations définies dans la revendication 1.
4. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi les composés suivants : a) l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzyl]-4- tétradécyl pipérazine ; b) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2/4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzoyl]-4- octa décylpipérazine; c) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzoyl]- 2,5-di méthyl-4-dodécylpipérazine; d) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)ρhényl]-4- octa décylpipérazine; e) la [4-(4'-octadécylpipérazin-l'-ylcarbonyl)benzylidène]-l,3- thiazolidine-2,4-dione; f) la l-[4'-(2,4-dioxo-l,3-thiazolidin-5-ylméthyl)benzoyl]-4-octadécyl pipérazine. g) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,2,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylméthyl)benzyl]-4- tétradécylpipérazin-2-one h) la l-[4'-(455-dihydro-l,254(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-yléthyl)benzoyl]-4- tétradécylpipérazine i) la l-[4'-(4,5-dihydro-l,254(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-ylproρyl)benzoyl]-4- tétradécylpipérazine j) la l-[4'-(4,5-dihydro-l52,4(4H)-5-oxo-oxadiazol-3-yl-rnéthylbenzoyl]-4-(N- octadécylaminocarbonyl)pipérazine
5. Procédé pour la préparation d'un composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) faire réagir du chlorhydrate d'hydroxylamine sur un dérivé de
Figure imgf000054_0001
où R, q, W, A, B, p, et Y ont la même signification que dans les revendications 1 et 2 :
- Z- est choisi dans le groupe constitué par -(CRιR2)n- et -(CRι= CR2)n - avec n étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6, Ri et R2, identiques ou différents, représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, ou pour former l'oxime intermédiaire correspondant, puis b) soumettre l'oxime obtenu à l'étape a) à une cyclisation par réaction avec un chlorocarbonate (ou chloroformiate) suivie d'un chauffage à une température suffisante pour obtenir une cyclisation pratiquement complète.
6. Procédé pour la préparation d'un composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il comprend une étape consistant à: a) faire réagir la thiazolidine-2,4-dione sur la fonction aldéhyde du
Figure imgf000055_0001
dans laquelle R, q, W, A, B, p et Y ont la même signification que dans les revendications 1 ou 2 ; et
-r est un entier ayant la valeur 0 ou 1, -U- est choisi dans le groupe constitué par ~(CReR7)s- et -(CR6= CR7)s - avec s étant un nombre entier ayant une valeur allant de 1 à 6 et avec Rβ et R7, identiques ou différents, représentant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, pour former le dérivé éthylénique de formule (V) tel que défini dans la revendication 1.
7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il comporte une étape additionnelle b) consistant à réduire la double liaison Z≈C par une hydrogénation catalytique.
8. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend un composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4.
9. Composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4, pour son utilisation en tant que principe actif d'un médicament.
10. Utilisation d'un composé de formule (I) selon l'une des revendications 1 à 4 pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement de inflarnmation.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011160043A2 (fr) 2010-06-18 2011-12-22 Whitehead Institute For Biomedical Research Pla2g16 utilisé en tant que cible pour des composés antiviraux
US8093249B2 (en) 2008-07-17 2012-01-10 Convergence Pharmaceuticals Limited Pyrazolo[1,5-A]pyrimidine-carbonyl-piperazine derivatives
US8288388B2 (en) 2008-07-17 2012-10-16 Convergence Pharmaceuticals Limited 3-pyridylcarbonyl-piperazinylsulfonyl derivatives

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050119251A1 (en) * 2001-12-21 2005-06-02 Jian-Min Fu Nicotinamide derivatives and their use as therapeutic agents
WO2006034341A2 (fr) 2004-09-20 2006-03-30 Xenon Pharmaceuticals Inc. Derives heterocycliques et leur utilisation en tant qu'agents therapeutiques
AU2005286648A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-30 Xenon Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic derivatives and their use as stearoyl-CoA desaturase inhibitors
AU2005286728A1 (en) 2004-09-20 2006-03-30 Xenon Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic derivatives and their use as mediators of stearoyl-CoA desaturase
EP1804792A1 (fr) * 2004-09-20 2007-07-11 Xenon Pharmaceuticals Inc. Derives heterocycliques bicycliques et leur utilisation comme inhibiteurs de stearoyl-coa desaturase (scd)
AR051026A1 (es) 2004-09-20 2006-12-13 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como inhibidores de la estearoil-coa desaturasa
BRPI0515505A (pt) 2004-09-20 2008-07-29 Xenon Pharmaceuticals Inc derivados heterocìclicos e sua utilização como inibidores da estearoil-coa desaturase
MX2007003321A (es) 2004-09-20 2007-06-05 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como agentes terapeuticos.
CA2580857A1 (fr) 2004-09-20 2006-09-28 Xenon Pharmaceuticals Inc. Derives heterocycliques et leur utilisation en tant qu'agents therapeutiques
MX2007015216A (es) * 2005-06-03 2008-02-22 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados de aminotiazol y sus usos como agentes terapeuticos.
MX2009004233A (es) * 2006-10-18 2009-08-12 Pfizer Prod Inc Compuestos de biaril eter urea.
EP2923710A1 (fr) 2014-03-27 2015-09-30 Universitätsklinikum Heidelberg Inhibiteurs de phospholipase bactérienne en tant que modulateurs de la flore bactérienne du côlon

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0848004A1 (fr) * 1995-07-31 1998-06-17 Shionogi & Co., Ltd. Derives de pyrrolidine possedant une activite d'inhibition de la phospholipase a2
WO2000071118A1 (fr) * 1999-05-19 2000-11-30 Universite Paris 7 - Denis Diderot Composes inhibiteurs specifiques de la phospholipase a¿2?

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0848004A1 (fr) * 1995-07-31 1998-06-17 Shionogi & Co., Ltd. Derives de pyrrolidine possedant une activite d'inhibition de la phospholipase a2
WO2000071118A1 (fr) * 1999-05-19 2000-11-30 Universite Paris 7 - Denis Diderot Composes inhibiteurs specifiques de la phospholipase a¿2?

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BINISTI C ET AL: "Structure-activity relationships in platelet-activating factor (PAF). 11-From PAF-antagonism to phospholipase A2 inhibition: syntheses and structure-activity relationships in 1-arylsulfamido-2-alkylpiperazines", EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 36, no. 10, 1 October 2001 (2001-10-01), pages 809 - 828, XP004329104 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8093249B2 (en) 2008-07-17 2012-01-10 Convergence Pharmaceuticals Limited Pyrazolo[1,5-A]pyrimidine-carbonyl-piperazine derivatives
US8288388B2 (en) 2008-07-17 2012-10-16 Convergence Pharmaceuticals Limited 3-pyridylcarbonyl-piperazinylsulfonyl derivatives
US8536183B2 (en) 2008-07-17 2013-09-17 Convergence Pharmaceuticals Limited 3-pyridylcarbonyl-piperazinylsulfonyl derivatives
WO2011160043A2 (fr) 2010-06-18 2011-12-22 Whitehead Institute For Biomedical Research Pla2g16 utilisé en tant que cible pour des composés antiviraux
US9011821B2 (en) 2010-06-18 2015-04-21 Whitehead Institute For Biomedical Research PLA2G16 as a target for antiviral compounds

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