CN1612868A

CN1612868A - 哌嗪衍生物及其作为磷脂酶的用途

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Publication number: CN1612868A
Application number: CNA028266633A
Authority: CN
Inventors: F·埃曼斯; A·拉穆利; J－J·戈德弗鲁瓦
Original assignee: Yang Ji Chemical Co Ltd
Current assignee: Yang Ji Chemical Co Ltd
Priority date: 2001-12-06
Filing date: 2002-12-06
Publication date: 2005-05-04
Also published as: AU2002364435A1; JP2005511689A; EP1456186A1; KR20050044694A; WO2003048139A1; US20050075345A1; FR2833261A1; CA2469395A1; FR2833261B1

Abstract

本发明涉及式(I)化合物，在式(I)中，D代表如式(II)的噁二唑酮或者式(III)的噻唑烷二酮的5元杂环，Z选自－(CR₁R₂)_n－和－(CR₁＝CR₂)_n－，或者D代表Z＝HET，－Z－与杂环一起代表式(IV)或者式(V)的－Z＝HET，其中，－Z＝代表－CR₁＝。这些化合物为非人胰腺分泌的II型磷脂酶(PLA₂－snph)的特异性抑制剂，特别是可用于治疗炎性疾病。

Description

哌嗪衍生物及其作为磷脂酶的用途

本发明涉及人非胰腺分泌的磷脂酶A2(PLA₂-snph)的新的特异性抑制剂、它们的制备方法、包括这些化合物的组合物以及它们的用途，特别是在治疗炎性疾病中的用途。

在病原性生物体(病毒、细菌、寄生虫或者抗原)侵入体内后或者在机体对如外伤、火伤或者照射的炎症刺激反应中，PLA₂在炎症的蔓延和扩大中起重要作用。这些酶可以催化sn-2位的磷脂的水解，释放出溶血磷脂和脂肪酸，如花生四烯酸。这些脂肪酸可能是各种脂质介质的前体，包括血小板活化因子、白三烯和前列腺素。从而具有多种生物活性(细胞增殖及迁移、收缩、神经分泌、荷尔蒙分泌等)，并且与各种炎症病理学以及某些癌症有关。

根据国际分类法，在EC 3.114分类下的磷脂酶A2中，II型磷脂酶A2为一类特殊的酶。II型的非人胰腺分泌的磷脂酶A2(PLA₂-snph)通过自分泌/旁分泌方式在促炎脂质介质的产生、刺激细胞的迁移和增殖以及抗菌性质中起重要作用。在众多的病理状态下，循环中的PLA₂-snph的量与疾病严重程度和解决方法紧密相关。这在革兰氏阴性菌感染引起的败血休克、腹膜炎、疟疾或者阿斯匹林中毒中正是如此。在这种情况下，PLA₂-snp的过量释放导致循环萎陷、低血压、呼吸窘迫综合征的恶化以及死亡。在风湿性关节炎中，PLA₂-snp在软骨、关节基质以及关节外、软骨细胞以及滑液中积聚，循环中的新酶的数量与炎性关节的大小和数目相符。而在呼吸系统和肺中，PLA₂-snp则与哮喘、过敏性鼻炎、石棉沉着有关。在心血管系统中，该酶在局部缺血(脑缺血性休克后加剧)中被活化，并且在高密度脂蛋白质的沉着中起重要作用(试验发现在动脉粥样斑块中具有很强的作用)，这表明该酶在动脉粥样硬化以及心血管疾病病因中起潜在作用。在胃肠道中，当患有局限性回肠炎、溃疡性结肠炎和肠炎，甚至是在肝硬化以及急性胰腺炎时，所述酶的浓度也较高。在牛皮癣中，皮肤损伤时，该酶的活性增加。在大脑中，该酶与脑缺血时的细胞和组织损伤有关，并且与精神分裂症有关。最后，该酶在硬化症以及各种癌症、尤其是在乳癌以及胃肠道癌中起作用。

II型的PLA₂-snph并不是人生物体分泌的唯一的酶，在人生物体中，I型的PLA₂(胰腺)、V型的PLA₂(心脏和肺)和X型的PLA₂(脾、白细胞和肺)也起重要作用。后两种类型的酶，即V型和X型的PLA₂是最近才被发现的，因此还没有对它们的功能进行充分的定义，它们与II型的PLA₂一样，与炎症有关，I型PLA₂，即胰腺分泌的PLA₂，起着极其重要的生理作用，这是因为它们的催化活性可以使外源脂质消化。因此，不对该酶的这种作用产生不利影响是关键，但是，这比较复杂，因为这些酶的大小类似(13至14kDa)，它们的三维结构(三重α螺旋通过大约6至8个二硫键连接)以及它们对钙浓度(mM)的依赖性是它们具有催化活性所必需的。并且，它们还与质子中继系统(système de relais de proton)具有相同的作用机制，所述质子中继系统与多个残基的活性位置有关：组氨酸48、甘氨酸30、天门冬氨酸49和99以及酪氨酸52以及73。

在法国专利申请FR 9906366中，公开了噁二唑酮型的杂环化合物，相对于I型胰腺PLA₂，这些化合物对II型PLA₂-snp具有良好的选择性。该系列的化合物在体外具有较高的活性，在经腹膜内途径给予大鼠后，对角叉菜胶引起的大鼠爪水肿具有与吲哚美辛类似的活性(参照抗炎药)。但是，在法国专利申请FR 9906366中所公开的化合物经口服途径给药的生物利用率较低。

根据本发明，提供这样一些化合物，与现有技术中已知的化合物、特别是法国专利申请FR 9906366中所公开的化合物相比，这些化合物对II型PLA₂显示选择性的抑制活性。根据本发明的新化合物的特征为：在碳原子上存在一个取代或未取代的哌嗪环。根据本发明的化合物对I型胰腺PLA₂完全不显示抑制活性而对II型PLA₂具有选择性抑制活性，而且活性吲哚美辛更高。此外，根据本发明的化合物经口服给药时具有优异的生物利用率。

本发明的目的是下述式(I)的化合物：

其中：

D代表Z-HET或者Z＝HET，

(i)当D代表Z-HET时，

HET代表如下式(II)的噁二唑酮或者下述式(III)的噻唑烷二酮的5元杂环：

或

Z-选自-(CR₁R₂)_n-和-(CR₁＝CR₂)_n-，n是1至6的整数，R₁和R₂相同或者不同，相互独立，为氢原子或者为具有1至6个碳原子的直链或支链烷基；

(ii)当D代表Z＝HET时，

Z-与杂环一起代表下述式(IV)或者式(V)的-Z＝HET基，

或

其中，-Z＝代表-CR₁＝，R₁代表氢原子或者1至6个碳原子的直链或者支链烷基；

p是0或者1的整数；

Y-选自C＝O、SO₂和-(CR₃R₄)_m-，其中m是1至6的整数，R₃和R₄相同或者不同，相互独立，为氢原子或者1至6个碳原子的直链或者支链烷基；

哌嗪环上的A和B相同或不同，相互独立，代表与氢结合的碳原子，同时与氢和具有1至3个碳原子的直链或者支链烷基结合的碳原子，或者代表-C＝O，

q是0或者1的整数；

W-选自

和

R选自具有1至22个碳原子的直链或者支链烷基、多芳基以及芳基-烷基、烷基-Q-烷基、烷基-Q-芳基、芳基-Q-芳基以及芳基-Q-烷基，其中“芳基”代表本领域技术人员已知的取代或未取代的5元-10元芳基，特别是苯基、萘基、苯基苯基(即联苯基)，还包括芳基杂环基，如吲哚基。优选所述芳基被一个或多个卤原子取代，所述卤原子为如F、Cl和Br，还可以被选自下列的基团取代：CF₃、OH、MeO和NO₂。

“烷基”是具有1至12个碳原子的直链或者支链烷基。

“Q”选自-O-、-S-、-NH-、-NR₅-、-NH-CO-NH-、

和

R₅代表具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基。

一般而言，上述的式(I)的化合物对II型PLA₂显示选择性抑制活性，对抑制50％酶活性的式(I)的化合物浓度(CI₅₀)进行测定，通常为1μM以下，一般为0.5μM以下，某些化合物为约0.1μM，而在法国专利申请9906366中所述的具有最大抑制活性的化合物的CI₅₀为3μM。

根据本发明，优选的化合物对II型人PLA₂具有很高的选择性抑制活性，在这些化合物中，p为1，Y代表C＝O基，D、A、B、q、W和R与上述定义相同。

根据本发明的一个实施方案，上述式(I)的化合物选自下列化合物：

a)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪；

b)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪；

c)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪；

d)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯基]-4-十八基哌嗪；

e)[4-(4’-十八基哌嗪-1’-基羰基)亚苄基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮；

f)1-[4’-(2，4-二氧代-1，3-噻唑烷-5-基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪；

g)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪-2-酮；

h)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基乙基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪；

i)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基丙基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪；和

j)1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基苯甲酰基)-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪。

本发明的目的还包括制备上述的式(I)化合物的方法。一般而言，在下面的实施例中对这些方法进行说明，制备方法可以选自下面的方法I和方法II。

方法I

使羟胺盐酸盐与下述式(VI)的衍生物反应，从而形成相应的中间体；然后，通过与氯甲酸盐或酯反应进行环化，在充分的温度下加热使环化反应进行完全，式(VI)如下：

其中，R、q、W、A、B、p和Y与上述定义相同；

Z-选自-(CR₁R₂)_n-和-(CR₁＝CR₂)_n-，其中n是1至6的整数，R₁和R₂相同或者不同，相互独立，代表氢原子或者1至6个碳原子的直链或者支链烷基。

方法II

使噻唑烷-2，4-二酮与下述式(VII)衍生物的醛官能团反应：

其中，R、q、W、A、B、p和Y与上述定义相同；

r是0或者1的整数；

U-选自-(CR₆R₇)_s-和-(CR₆＝CR₇)_s-，s是1至6的整数，R₆和R₇相同或者不同，代表氢原子或者具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基。该反应在吡啶苯甲酸盐存在下、在回流下于甲苯中进行，从而形成上述定义的式(V)的乙烯衍生物，然后在100％钯炭存在下、在氢压力下，于50℃在无水乙醇中进行催化氧化作用(parr装置)，以还原双键Z＝C。

可以根据本领域公知的方法(特别是在下面的实施例1-6中所述的方法)，制备上述方法中使用的起始原料。

本发明还涉及上述定义的式(I)化合物在选择性抑制II型PLA₂中的用途，优选在体外试验中。

本发明的目的还包括药物组合物，其特征作用该组合物包括至少一种上述的式(I)化合物和至少一种选自药用赋形剂的赋形剂。

在配制本发明的药物组合物时，本领域技术人员最好参考最新版的欧洲药典或美国药典。

本领域技术人员最好参考欧洲药典《2002》第4版，或者参考美国药典USP 25-NF20版。

在通过口服途径或肠胃外途径给药时，上述药物组合物的给药量最好为每日每公斤患者体重给予1μg至10mg、优选1μg至1mg式(I)化合物。

上述药物组合物可以方便地局部使用，局部使用的优选给药量为每日每公斤患者体重给予1μg至100mg、优选100μg至10mg式(I)化合物。

当本发明的药物组合物包括至少一种药用赋形剂时，该赋形剂最好为适合组合物局部给药的赋形剂、适合组合物口服给药的赋形剂和/或适合组合物肠胃外给药的赋形剂。

最后，根据下述的生物学活性研究结果，本发明的目的还包括所述的式(I)化合物在药物中作为治疗活性成分的用途。

更具体而言，本发明的目的还包括至少一种所述的式(I)化合物在制备用于抑制II型非人胰腺分泌的PLA₂活性的药物组合物中的用途。

此外，本发明的目的还包括至少一种所述的式(I)化合物在制备用于预防或治疗炎性疾病、特别是慢性炎性疾病以及急性炎性疾病的药物中的用途，即与非胰腺分泌的PLA₂有关的那些炎性疾病。

因此，具体而言，上述炎性疾病包括比如风湿性多发性关节炎、感染引起的败血休克、腹膜炎、疟疾或阿斯匹林中毒、呼吸萎缩(collapsus)、低血压、呼吸窘迫综合征、哮喘、过敏性鼻炎、急性肺损害、石棉沉着病、局部缺血、动脉粥样硬化、心血管病、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、肠炎、硬化、急性胰腺炎、牛皮癣、脑缺血性细胞以及组织损伤、精神分裂症以及其他病理学疾病，比如血小板硬化症以及如乳癌和胃癌的某些癌症。

此外，本发明的目的还包括至少一种所述的式(I)化合物在制备用于治疗风湿性疾病的药物中的用途。

另外，本发明的目的还包括治疗患者炎症、优选慢性炎症或急性炎症的方法，该方法包括给予所述患者治疗有效量的式(I)化合物或者包括式(I)化合物的药物组合物。

再者，本发明的目的还包括预防患者炎症的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的式(I)化合物或者包括式(I)化合物的药物组合物

所述式(I)化合物或者包括式(I)化合物的药物组合物可以通过口服途径给予、通过肠胃外途径给予，还可以通过局部途径给予，将其局部用于患者的皮肤上。

下述的实施例是用于说明本发明，而不是用于限制本发明的范围。

实施例1

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪的制备

(D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-CH₂-，n＝1，Y＝-CH₂-，A＝B＝-CH₂-，R＝-(CH₂)₁₃-CH₁₃的式I的化合物)

1.1：十四基哌嗪的制备

在250ml的磨光锥形烧瓶里，搅拌溶解于100ml的THF/CH₂Cl₂混合物(3∶1v/v)的13g(0.151mol)哌嗪。向上述混合物中加入4.24g(15mmol)的1-溴代十四烷，在室温搅拌一小时。其后，蒸发溶剂，将得到的残留物溶于二氯甲烷中，然后用水洗涤两次。经硫酸镁干燥有机相，过滤并蒸发。在-18℃下于丙酮/乙醚混合物中结晶，得到3.4g的白色结晶，在室温溶解。

收率：80％。

Rf：0.40(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH，80∶20∶2v/v/v)。

IR(KBr)：3440(N-H)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：6-8(主峰，1H，NH)，2.85和2.33(2t，8H，J＝4.88和4.50Hz，哌嗪的H)，2.21(t，2H，J＝7.56Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.20(s1，22H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.62Hz，CH₃)。

1.2： 1-(4’-氰基甲基苄基)-4-十四基哌嗪的制备

a) 4-溴代甲基苯基乙腈的制备

在1升锥形烧瓶里，将25g(0.19mol)4-甲基苯基乙腈溶解在300ml四氯化碳中。加入预先在乙酸中重结晶的41g(0.23mol)N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和0.5g的2，2’-偶氮双(2-甲基丙腈)(AIBN)。将溶液于回流下加热三个小时。反应结束后，冷却混合物，之后用水洗涤三次。经硫酸镁干燥有机相，过滤并真空下蒸发。得到的残留物经减压(1mmHg)下蒸馏回收，依次在95℃、110℃以及140℃下得到3种馏分。最后一个馏分为所需的4-溴代甲基苯基乙腈，使其在-18℃的乙醚中结晶，得到14g白色结晶。

收率：35％。熔点：63℃。Rf：0.19(乙醚/石油醚，30∶70v/v)。

IR(KBr)：2224(C≡N)，1594(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.34以及7.24(2d，4H，J＝8.30和8.27Hz，芳香族H)，4.41(s，2H CH₂-Br)，3.68(s，2H，CH₂-C≡N)。

b) 1-(4’-氰基甲基苄基)-4-十四基哌嗪的制备

在配有冷却装置以及氯化钙保护的250ml磨光锥形烧瓶中，将7g(24mmol)1-十四基哌嗪、6g(28mmol)4-溴代甲基苯基乙腈、9.93g(71mmol)碳酸钾以及0.5g碘化钾在200ml乙腈中混合。将反应混合物于回流下加热6小时。反应结束时，过滤悬浮液，用二氯甲烷将K₂CO₃洗涤数次。随后在真空下蒸发溶剂，将得到的残留物溶于150ml二氯甲烷中，然后用水洗涤至pH达到中性。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，并减压下浓缩。残留物经硅胶层析纯化，使用MeOH/CH₂Cl₂混合物(1∶99v/v)作为洗脱剂，得到8.2g油状目标腈。

收率：83％。Rf：0.33(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：2248(C≡N)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.26和7.18(2d，4H，J＝8.09和9.52Hz，芳香族H)，3.64(s，2H，CH₂-C≡N)，3.42(s，2H，Ph-CH₂-N)，2.40(m，8H，哌嗪的H)，2.25(t，2H，J＝7.64Hz，CH₂-N)，1.39(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，22H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.13Hz，CH₃)。

1.3：1-[4’-(N-羟基脒基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪的制备

在配有加液漏斗和冷却装置的250ml锥形烧瓶中，加入悬浮于150ml无水乙醇中的13.08g(94mmol)碳酸钾、5.48g(78mmol)羟胺盐酸盐，回流加热混合物。随后向该悬浮液中滴加溶于50ml无水乙醇中的6.5g(15mmol)1-(4’-氰基甲基苄基)-4-十四基哌嗪。搅拌并回流该反应混合物24小时。反应结束时，低温滤出盐，用二氯甲烷洗涤几次。在减压下浓缩滤液，随后溶于二氯甲烷中。得到的有机相用水洗涤至中性，经硫酸镁干燥，之后过滤。蒸发溶剂，在丙酮中结晶，得到为白色结晶的目标偕胺肟4.62g。

收率：65％。熔点：74℃。Rf：0.28(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：3490(O-H)，3374(NH₂)，1655(C＝N)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.20和7.14(2d，4H，J＝7.39和8.10Hz，芳香族H)，4.41(s，2H，NH₂)，3.41(s，2H，CH₂-C＝N)，3.35(s，2H，Ph-CH₂-N)，2.41(m，8H，哌嗪的H)，2.25(t，2H，J＝7.64Hz，CH₂-N)，1.36(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，22H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.13Hz，CH₃)。

1.4：1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪的制备

该合成分两个步骤进行。在100ml的圆底中，将1.8g(4mmol)所述偕胺肟和0.66ml(4mmol)三乙胺溶于40ml无水二氯甲烷酸中。将溶液在0℃搅拌一小时，随后向反应混合物中滴加0.60ml(5mmol)氯代甲酸苯酯。在0℃搅拌一小时之后，依次用碱溶液(饱和Na₂CO₃)洗涤一次、用水洗涤三次，经硫酸镁干燥，过滤，然后在真空下浓缩。然后将得到碳酸盐中间体溶于40ml的无水甲苯中，回流下加热12小时。减压下蒸发甲苯，经硅胶柱层析纯化残留物，用CH₂Cl₂/MeOH混合物(98∶2v/v)作为洗脱剂。产物在丙酮/乙醚混合物中结晶，得到500mg为白色结晶的最终化合物。

收率：26％。熔点：98℃。Rf：0.33(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：1732(NC＝O)，1688(C＝N)，1599(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：8-12(大部分，1H，NH)，7.27和7.18(2d，4H，7＝8.07和9.12Hz，芳香族H)，3.67(s，2H，CH₂-C＝N)，3.35(s，2H，Ph-CH₂-N)，2.56和2.34(2m，8H，哌嗪的H)，2.46(t，2H，J＝7.64Hz，CH₂-N)，1.47(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，22H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.13Hz，CH₃)。

实施例2

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-CH₂-，n＝1，Y＝C＝O，A＝B＝-CH₂-，R＝-(CH₂)₁₇-CH₃的的式(I)化合物)

2.1： 1-十八基哌嗪的制备

采用与实施例步骤1.1相同的方法，但是用13g(0.151mol)哌嗪以及5g(15mmol)1-溴代十八烷作为起始物质，在丙酮中结晶后得到4.5g的白色结晶。

收率：89％。熔点：61.5℃。Rf：0.40(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH，80∶20∶2v/v/v)。

IR(KBr)：3440(N-H)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：6-8(s1，1H，NH)，2.85和2.33(2t，8H，J＝4.88和4.50Hz，哌嗪的H)，2.21(t，2H，J＝7.56Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.20(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.62Hz，CH₃)。

2.2： 4-溴代甲基苯甲酰氯的制备

在配有冷却装置以及氯化钙保护的250ml烧瓶中，将8.4g(54mmol)4-甲基苯甲酰氯、9.66g(54mmol)预先在乙酸中结晶的N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和0.5g 2，2’-偶氮双(2-甲基丙腈)(AIBN)溶于150ml四氯化碳中。将溶液于回流下加热3小时。反应结束时，滤出盐，冷却溶液，随后用水洗涤三次。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，在真空下浓缩。在戊烷中结晶残留物，得到9g白色结晶。

收率：72％。熔点：86.7℃

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：8.02和7.46(2d，4H，J＝8.38和8.29Hz，芳香族H)，4.43(s，2H，CH₂-Br)。

2.3： 1-(4′-溴代甲基苯甲酰基)-4-十八基哌嗪的制备

在配有加液漏斗和氯化钙保护的250ml锥形烧瓶中，将4.4g(13mmol)十八基哌嗪以及2.7ml(19mmol)的三乙胺溶于100ml无水苯中。在0℃搅拌混合物，随后滴加3.04g(13mmol)4-溴代甲基苯甲酰氯。在室温搅拌2小时之后，蒸发溶剂，得到的残留物溶于二氯甲烷中，将其用碱溶液洗涤，随后用水洗涤至中性。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，在真空下浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到油状纯产物5g。

收率：72％。Rf：0.50(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：1624(NC＝O)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.34(s，4H，芳香族H)，4.52(s，2H，CH₂-Br)，3.72和3.38(2m，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.43(m，4H，哌嗪的H)，2.33(t，2H，J＝7.65Hz，CH₂-N)，1.41(m，2H，CH₂-CN)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.13Hz，CH₃)。

2.4： 1-(4’-氰基甲基苯甲酰基)-4-十八基哌嗪的制备

在配有冷却装置和氯化钙保护的250ml磨光锥形烧瓶中，将5.35g(10mmol)步骤2.3中制备的溴代衍生物溶于70ml的二甲亚砜中。在0℃搅拌溶液，随后向该反应混合物中逐渐添加1.96g(40mmol)氰化钠。使该混合物达到室温，然后在80℃加热一小时。用二氯甲烷和水稀释反应混合物。用水洗涤有机相几次，然后经硫酸镁干燥，过滤，并真空下浓缩。残留物经硅胶柱层析，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到浓蜂蜜色油状目标腈3g。

收率：61％。Rf：0.5(CH₂Cl₂/MeOH，97∶3v/v)。

IR(KBr)：2251(C≡N)，1620(NC＝O)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.36和7.30(2d，4H，J＝8.51和8.48Hz，芳香族H)，3.71(s，2H，CH₂-C≡N)，3.72和3.38(2m，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.43(m，4H，哌嗪的H)，2.33(t，2H，J＝7.65Hz，CH₂-N)，1.41(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.13Hz，CH₃)。

2.5： 1-[4’-(N-羟基脒基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪的制备

采用与实施例步骤1.3相同的方法，但是用6g(12mmol)1-(4′-氰基甲基苯甲酰基)-4-十八基哌嗪、10.26g(74mmol)的碳酸钾和4.30g(61mmol)羟胺盐酸盐。在丙酮中结晶粗品产物，得到为白色结晶的目标肟4g。

收率：67％。熔点：105.2℃。Rf：0.39(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：3486(O-H)，3373(NH₂)，1657(NC＝O)，1625(C＝N)，1582(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.30和7.24(2d，4H，J＝8.28和8.11Hz，芳香族H)，4.43(s，2H，NH₂)，3.42(s，2H，CH₂-C＝N)，3.73和3.40(2m，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.55(m，4H，哌嗪的H)，2.29(t，2H，J＝6.64Hz，CH₂-N)，1.39(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.03Hz，CH₃)。

2.6：1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪的制备

采用与实施例步骤1.4相同的方法，但是采用步骤2.5制备的1.3g(2.53mmol)偕胺肟、0.45ml(3.28mmol)三乙胺和0.4ml(3.03mmol)氯代甲酸苯酯作为原料。在丙酮中使产物结晶，得到为白色结晶的最终化合物500mg。

收率：37％。熔点：121℃。Rf：0.38(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：1780(OC＝O)，1734(C＝N)，1640(NC＝O)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：8-12(主峰，1H，NH)，7.16(s，4H，芳香族H)，3.79(s，2H，CH₂-C＝N)，3.77和3.36(2m，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.52(m，4H，哌嗪的H)，2.35(t，2H，J＝5.86Hz，CH₂-N)，1.43(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.21Hz，CH₃)。

实施例3

1-[4′-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-CH₂-，n＝1，Y＝C＝O，A＝B＝CH-CH₃，R＝-(CH₂)₁₁-CH₃的的式(I)化合物)

3.1： 2，5-二甲基-1-十二烷基哌嗪的制备

采用与实施例步骤1.1相同的方法，但是用溶于170ml THF中的3.27g(13mmol)十二烷基溴和12g(0.105mol)反式-2，5-二甲基哌嗪作为原料，得到2.8g油状取代的目标哌嗪。

收率：76％。Rf：0.3(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH，80∶20∶2v/v/v)。

IR(KBr)：3440(N-H)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：6-8(主峰，1H，NH)，2.29(m，8H，哌嗪的CH₂-N和H)，1.36(m，5H，哌嗪的CH₃和CH₂C-N)，1.19(s1，18H，CH₂)，0.98(s1，3H，哌嗪的CH₃)，0.81(t，3H，J＝6.73Hz，CH₃)。

3.2：1-(4’-氯代甲基苯甲酰基)-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪的制备

在250ml锥形烧瓶中，将由步骤3.1中得到6g(21mmol)取代的哌嗪和3.18g(31mmol)三乙胺溶于150ml苯中。在0℃搅拌混合物，之后滴加4.82g(25mmol)4-氯代甲基苯甲酰氯(可以由商业获得，或者采用与实施例步骤2.2相同的方法，但是用N-氯代琥珀酰亚胺获得)。在室温搅拌三个小时，之后蒸发苯，用Na₂CO₃饱和溶液洗涤溶于二氯甲烷中的残留物，然后用水洗涤两次。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，真空下浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到4.33g油状纯的目标氯代衍生物。

收率：48％。Rf：0.36(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：1624(NC＝O)，1595(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.34和7.27(2d，4H，J＝8.40和7.96Hz，芳香族H)，4.52(s，2H，CH₂-CI)，3.36和2.62(2d，4H，J＝7.40和7.67Hz，哌嗪的CH₂)，2.88和2.28(2m，2H，哌嗪的CH)，2.24(t，2H，J＝5.52Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.35和0.94(2d，6H，哌嗪的CH₃)，1.18(s1，18H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.74Hz，CH₃)。

3.3：1-(4，-氰基甲基苯甲酰基)-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪的制备

将前述步骤3.2制备的4.33g(9.96mmol)氯代衍生物溶于50ml的DMSO中。向在0℃搅拌的该溶液中逐渐添加1.49g(29mmol)氰化钠。全部添加之后，在80℃加热溶液一小时。反应结束时，加入二氯甲烷和水的混合物进行萃取。将有机相用水洗涤两次，经硫酸镁干燥，过滤，并真空下浓缩。采用硅胶柱层析进行纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到4g油状纯目标腈。

收率：94％。Rf：0.5(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：2245(C≡N)，1611(NC＝O)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm 7.30(s，4H，芳香族H)，3.71(s，2H，CH₂-C≡N)，3.36和2.62(2d，4H，J＝7.40和7.67Hz，哌嗪的CH₂)，2.88和2.28(2m，2H，哌嗪的CH)，2.24(t，2H，J＝5.52Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.28和0.84(2d，6H，哌嗪的CH₃)，1.18(s1，18H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.74Hz，CH₃)。

3.4：1-[4’-(N-羟基脒基甲基)苯甲酰基]-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪的制备

采用与实施例1步骤1.3相同的方法，但是使用在前述步骤3.3制备的4g(9.41mmol)腈、3.26g(47mmol)羟胺盐酸盐以及7.79g(56mmol)碳酸氢钾作为原料。纯化后，得到1.6g油状偕胺肟。

收率：37％。Rf：0.46(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：3369(O-H)，3328(NH₂)，1661(NC＝O)，1612(C＝N)，1595(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.30(s，4H，芳香族H)，3.36和2.62(2d，4H，J＝7.40和7.67Hz，哌嗪的CH₂)，5.70(s1，1H，OH)，4.44(s1，2H，NH₂)，3.39(s，2H，CH₂-C＝N)，2.88和2.28(2m，2H，哌嗪的CH)，2.24(t，2H，J＝5.52Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.28和0.84(2d，6H，哌嗪的CH₃)，1.18(s1，18H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.74Hz，CH₃)。

3.5：1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-2，5-二甲基-4-十二烷基哌嗪的制备

采用与实施例1步骤1.4相同的方法，但是使用上述步骤3.4中制备的1.6g(3.49mmol)偕胺肟、0.58ml(4.19mmol)三乙胺以及0.48ml(3.83mmol)氯代甲酸苯酯作为原料。粗品残留物经硅胶柱层析纯化，采用二氯甲烷作为洗脱剂。得到600mg为泡沫状的纯最终化合物。

收率：35％。Rf：0.4(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：1670(NOC＝O)，1634(C＝N)，1595(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.14(s，4H，芳香族H)，6.11(s1，1H，NH)，3.74(s，2H，CH₂-C＝N)，3.36和2.62(2d，4H，J＝7.40和7.67Hz，哌嗪的CH₂)，2.88和2.28(2m，2H，哌嗪的CH)，2.24(t，2H，J＝5.52Hz，CH₂-N)，1.40(m，2H，CH₂-C-N)，1.28和0.84(2d，6H，哌嗪的CH₃)，1.18(s1，18H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.74Hz，CH₃)。

实施例4

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯基]-4-十八基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-CH₂-，n＝1，p＝0，A＝B＝-CH₂-，R＝-(CH₂)₁₇-CH₃的的式(I)化合物)

4.1： N-十八基二乙醇胺的制备

在500ml磨光锥形烧瓶中，将10g(95mmol)二乙醇胺、37.96g(0.114mol)十八基溴、39.33g(0.285mol)碳酸氢钾以及0.5g碘化钾在200ml乙腈中混合。于回流下，将该反应混合物搅拌并加热三个小时。反应结束时，滤出盐，蒸发溶剂，将残留物溶于二氯甲烷中。将有机相用水洗涤两次，经硫酸镁干燥，过滤后在真空下浓缩，在丙酮中结晶残留物。得到33g白色结晶。

收率：定量。熔点：49℃。Rf：0.20(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：3310(O-H)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：3.53(t，4H，J＝5.43Hz，CH₂-O)，3.27(s1，2H，OH)，2.57(t，4H，J＝5.43Hz，N-CH₂-C-O)，2.44(t，2H，J＝7.06Hz，CH₂-N)，1.34(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝5.85Hz，CH₃)。

4.2： N，N’-二(氯代乙基)十八基胺的制备

在250ml锥形烧瓶中，将13g(36mmol)N-十八基胺溶于100ml三氯甲烷中并冷却至0℃。然后滴加7.95ml(0.109mol)亚硫酰氯。添加之后，将反应混合物在回流下的三氯甲烷中加热三个小时。蒸发过量的溶剂和亚硫酰氯，用Na₂CO₃饱和溶液洗涤溶于二氯甲烷中的残留物，然后用水洗涤至中性。将有机相经硫酸镁干燥，过滤后真空下浓缩，残留物经硅胶柱层析纯化，使用乙醚/石油醚混合物(5∶95v/v)作为洗脱剂。得到10g油状纯品氯化胺。

收率：70％。Rf：0.43(乙醚/石油醚，5∶95v/v)。

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：3.38(t，4H，J＝5.43Hz，CH₂-Cl)，2.75(t，4H，J＝7.30Hz，N-CH₂-C-Cl)，2.43(t，2H，J＝6.67Hz，CH₂-N)，1.36(m，2H，CH₂-C-N)，1.16(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝5.85Hz，CH₃)。

4.3： 1-(4’-氰基甲基苯基)-4-十八基哌嗪的制备

在250ml圆瓶中，将3g(7.6mmol)N，N′-二(氯代乙基)十八基胺、2g(15mmol)4-氨基苯基乙腈和0.2g碘化钾在100ml乙腈中混合。于回流下，将悬浮液加热16个小时。反应结束时，蒸发溶剂，用减性溶液洗涤溶于二氯甲烷中的残留物，随后用水洗涤几次。将有机相经硫酸镁干燥，过滤之后，在真空下浓缩。在丙酮中结晶残留物，得到2.66g为白色结晶的二取代的目标哌嗪。

收率：77％。熔点：94℃。Rf：0.33(CH₂Cl₂/MeOH，98∶2v/v)。

IR(KBr)：2252(C≡N)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.17和6.84(2d，4H，J＝8.60和8.63Hz，芳香族H)，3.62(s，2H，CH₂-C≡N)，3.61和3.22(2s1，8H，哌嗪的H)，2.92(t，2H，J＝8.32Hz，CH₂-N)，1.85(m，2H，CH₂-C-N)，1.19(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝5.90Hz，CH₃)。

4.4：1-[4’-(N-羟基脒基甲基)苯基]-4-十八基哌嗪的制备

采用与实施例1步骤1.3相同的方法，但是使用1.52g(21mmol)羟胺盐酸盐、3.64g(26mmol)碳酸钾以及在上述步骤4.3中得到的2g(4mmol)腈作为原料。粗品产物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到油状物，在丙酮中结晶，得到600mg为白色结晶的目标偕胺肟。

收率：28％。熔点：110.1℃。Rf：0.40(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：3489(O-H)，3375(NH₂)，1655(C＝N)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.08和6.80(2d，4H，J＝8.60和8.62Hz，芳香族H)，4.36(s，2H，NH₂)，3.44(s，2H，CH₂-C＝N)，3.14和2.56(2s1，8H，哌嗪的H)，2.34(t，2H，J＝7.34Hz，CH₂-N)，1.47(m，2H，CH₂-C-N)，1.19(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.05Hz，CH₃)。

4.5：1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯基]-4-十八基哌嗪的制备

采用与实施例1步骤1.4相同的方法，但是使用上述步骤4.4中得到的600mg(1.2mmol)偕胺肟、0.22ml(1.6mmol)三乙胺以及0.2ml(1.6mmol)氯代甲酸苯酯作为原料。在丙酮中结晶残留物，得到210mg为白色结晶的最终化合物。

收率：33％。熔点：147.3℃。Rf＝0.35(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：1740(OC＝O)，1716(C＝N)，1607(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.33(s，1H，NH)，7.12和6.74(2d，4H，J＝8.62和8.60Hz，芳香族H)，3.71(s，2H，CH₂-C＝N)，3.14和2.56(2s1，8H，哌嗪的H)，2.34(t，2H，J＝7.34Hz，CH₂-N)，1.47(m，2H，CH₂-C-N)，1.19(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.05Hz，CH₃)。

实施例5

[4-(4’-十八基哌嗪-1’-基羰基)亚苄基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备

(其中D＝Z＝HET，HET＝式(V)的化合物，Z＝CH＝，Y＝C＝O，A＝B＝-CH₂-，R＝-(CH₂)₁₇-CH₃的的式(I)化合物)

5.1： 4-甲酰基苯甲酰氯的制备

在250ml锥形烧瓶中，将5g(33mmol)4-甲酰基苯甲酸溶于100ml三氯甲烷中。在0℃搅拌混合物之后，滴加溶于50ml的三氯甲烷中的3.63ml(49mmol)亚硫酰氯。结束滴加之后，在40℃将反应混合物加热三个小时。反应结束时，蒸发混合物，用Na₂CO₃饱和溶液洗涤溶于二氯甲烷的残留物，然后用水洗涤两次。将有机相经硫酸镁迅速干燥，过滤之后，在真空下浓缩。得到4g为无色油状物的目标酰氯。该物质可以不经纯化直接用于下一步骤。

收率：71％.

IR(KBr)：1779(醛的C＝O)，1756(ClC＝O)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：10.10(s，1H，醛的H)，8.18和7.96(2d，4H，J＝8.42和8.22Hz，芳香族H)。

5.2： 1-(4’-甲酰基苄基)-4-十八基哌嗪的制备

在配有加液漏斗和氯化钙保护的250ml锥形烧瓶中，将4g(11mmol)十八基哌嗪(根据实施例2步骤2.1的方法制备)以及2.46ml(17mmol)三乙胺溶于150ml无水苯中。在0℃搅拌混合物之后，滴加2.99g(17mmol)在上述步骤5.1中制备的酰氯。将反应混合物在室温下搅拌两个小时。反应结束时，蒸发溶剂，将残留物溶于二氯甲烷中，用碱性溶液洗涤之后，用水洗涤两次。将有机相经硫酸镁干燥，过滤之后，在真空下浓缩。得到的粗品产物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂。得到5.5g油状目标醛。

收率：98％。Rf：0.41(CH₂Cl₂/MeOH，97∶3v/v)。

IR(KBr)：1705(醛的C＝O)，1642(NC＝O)，1609(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：10.02(s，1H，醛的H)，7.87和7.50(2d，4H，J＝7.72和8.08Hz，芳香族H)，3.86和3.48(2s1，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.67(m，4H，哌嗪的H)，2.49(t，2H，J＝7.66Hz，CH₂-N)，1.51(m，2H，CH₂-C-N)，1.18(s1，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.16Hz，CH₃)。

5.3：[5-(4’-十八基哌嗪-1’-基羰基)亚苄基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备

在配有冷却装置和迪安-斯达克装置的100ml圆瓶中，将4.2g(8.9mmol)前述步骤5.2中制备的醛、1.04g(8.8mmol)2，4-噻唑烷二酮和0.5g吡啶苯甲酸盐溶于50ml甲苯中。将混合物在回流下搅拌三个小时，逐步去除水。反应结束后，蒸发甲苯，在加热下将残留物溶于乙醇中，冷却后产生黄色沉淀物。过滤结晶，得到2.34g纯最终化合物。

收率：46％。熔点：86.3℃。Rf：0.3(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：1736(NHC＝O)，1700(NC＝O)，1604(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.69(s，1H，CH＝)，7.45(s，4H，芳香族H)，4.73(s，1H，NH)，3.79和3.46(2s1，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，2.48(m，4H，哌嗪的H)，2.39(t，2H，J＝7.33Hz，CH₂-N)，1.45(m，2H，CH₂-C-N)，1.17(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝5.89Hz，CH₃)。

实施例6

1-[4’-(2，4-二氧代-1，3-噻唑烷-5-基甲基)苯甲酰基]-4-十八基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噻唑烷二酮(III)，Z＝-CH₂-，Y＝C＝O，A＝B＝-CH₂-，R＝-(CH₂)₁₇-CH₃的的式(I)化合物)

将溶解于50ml的无水乙醇中的210mg(3.69 10^-4mol)实施例5的化合物的悬浮液在Parr装置上在100％钯黑存在下以及氢压力(40至50psi)下进行催化氧化作用，在60℃搅拌5个小时。反应结束时，滤出钯，蒸发乙醇，得到的残留物经硅胶柱层析纯化，用用二氯甲烷/甲醇混合物(99∶1v/v)作为洗脱剂。然后使产物在乙腈中结晶，得到126mg为微黄色结晶的最终化合物。

收率：60％。熔点：106.7℃。Rf：0.55(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：1736(NHC＝O)，1700(NC＝O)，1604(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.5(s1，1H，NH)，7.30和7.20(2d，4H，J＝8.15和8.18Hz，芳香族H)，4.44(s1，1H，CH-C＝O)，3.70和3.40(2s1，4H，哌嗪的CH₂-N-C＝O)，3.43(dd，2H，J＝3.90Hz，Ph-CH₂)，2.48(m，4H，哌嗪的H)，2.39(t，2H，J＝7.33Hz，CH₂-N)，1.45(m，2H，CH₂-C-N)，1.17(s1，30H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝5.89Hz，CH₃)。

实施例7

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑 -3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪-2-酮的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-CH₂-，n＝1，Y＝A＝-CH₂-，B＝CO，R＝-(CH₂)₁₃-CH₃的的式(I)化合物)

7.1： N-苄基氨基乙醛二乙缩醛(aminoacetaldehyde diethyl acetal)的合成

于回流下，将42ml(0.2mol)氨基乙醛二乙缩醛、29.3ml(0.2mol)苯甲醛、48g硫酸镁以及300ml甲苯组成的混合物加热6个小时。过滤溶液，蒸发溶剂。得到的残留物可以不经纯化直接使用。将残留物溶于甲醇中，缓慢加入12g(0.3mol)硼氢化钠，搅拌30分钟。水解并蒸发溶剂后，将得到的残留物溶解于二氯甲烷，然后用水洗涤。干燥有机相(硫酸镁)，过滤，减压下蒸发。经快速层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到52g粘性油状物。

收率：81％。Rf：0.34(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(薄膜)：3300(NH)，1594(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.23(m，5H，H_ar)，4.56(t，1H，J＝5.58Hz，CH)，3.75(s，2H，PhCH₂)，3.54(m，4H，OCH₂)，2.68(d，2H，J＝5.58Hz，CH₂)，1.71(s，1H，NH)，1.14(t，6H，J＝7.04Hz，CH₃)。

7.2： (N-十四基-N-苄基)氨基乙醛二乙缩醛的合成

将64g(0.23mol十四基溴加入到在700ml乙腈中的51.6g(0.23mol)N-苄基氨基乙醛二乙缩醛、63.9g(0.46mol)碳酸钾以及催化量的碘化钾(1g)的混合物中，于回流下加热混合物过夜。过滤溶液，蒸发，蒸发之后得到的残留物溶于二氯甲烷中，用水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，减压下蒸发。粗品产物经快速层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到88g黄色油形状产物。

收率：90％。Rf：0.65(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(薄膜)：1594(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.21(m，5H，H_ar)，4.47(t，1H，J＝5.16Hz，CH)，3.56(s，2H，PhCH₂)，3.50(m，4H，OCH₂)，2.55(d，2H，J＝5.17Hz，CH₂N)，2.41(t，2H，J＝7.23Hz，CH₂)，1.39(t，2H，J＝6.87Hz，CH₂)，1.13(m，28H，CH₂，CH₃)，0.81(t，3H，J＝6.37Hz，CH₃)。

7.3： N-十四基氨基乙醛二乙缩醛的制备

将溶解于300ml乙醇中的并且加入了20mg 10％的Pd-C的88g(0.2mol)(N-十四基-N-苄基)氨基乙醛二乙缩醛混合物置于压力下于40℃进行氢化处理48小时。过滤催化剂，减压下蒸发溶剂，得到残留物，将其经快速层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到59g黄色油状物。

收率：90％。Rf：0.29(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(薄膜)：3300(NH)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：4.59(t，1H，CH)，3.57(m，4H，CH₂O)，2.63(d，2H，J＝5.57Hz，CHCH₂)，2.58(t，2H，J＝7.25Hz，NHCH₂)，2.32(1H，NH)，1.45(t，2H，J＝7.03Hz，CH₂)，1.15(m，28H，CH₃，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.39Hz，CH₃)。

7.4： N-苄氧基羰基氨基乙酸乙酯的制备

a)将在300ml四氢呋喃中的138g(1mol)碳酸钾、70g(0.5mol)甘氨酸乙酯的混合物搅拌10分钟，然后冷却到0℃，缓慢加入71ml(0.5mol)氯代甲酸苄酯。将溶液搅拌30分钟，然后过滤，蒸发溶剂。将得到的残留物溶解于二氯甲烷中，用水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，减压下蒸发溶剂。得到的残留物可以不经纯化直接用于下一步骤。

IR(薄膜)：1735(-O-CO-)，1750(-O-CO-N)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.21(m，5H，H_ar)，5.81(sl，1H，NH)，5.01(s，2H，PhCH₂)，4.06(q，2H，J＝7.14Hz，CH₂CH₃)，3.80(d，2H，J＝14.27Hz，NHCH₂)，1.14(t，3H，J＝7.13Hz，CH₃)。

b)将溶解于250ml乙醇中的在上一步骤得到的残留物用250ml 10％的碳酸钾溶液处理，然后于回流下加热过夜。蒸发乙醇，将水相用浓HCl酸化到pH＝1。过滤产生的沉淀物，干燥，得到105g白色固体。

收率：90％。熔点：110C.Rf：0.25(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：1678(C＝C)，1727(OC＝O)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.24(m，5H，H_ar)，5.23(sl，1H，NH)，5.06(s，2H，CH₂，PhCH₂)，4.63(s，1H，OH)，3.94(d，2H，J＝5.50Hz，CH₂COOH)。

7.5 N-苄氧基羰基氨基-N’-2，2-二乙氧基乙基-N’-十四基乙酰胺的制备

向在120ml二氯甲烷中的18.7g(5.6mmol)十四基氨基乙醛二乙缩醛、12.6g(56mmol)N-苄氧基羰基乙酸乙酯、15ml(0.112mol)三乙胺、9g(67mmol)1-羟基苯并三唑的混合物中加入24.7g(0.12mol)N，N’-二环己基碳二亚胺。于回流下加热两个小时之后，过滤溶液，用水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，蒸发。得到的残留物经硅胶柱层析纯化，使用CH₂Cl₂/MeOH，99∶1v/v的混合物作为洗脱剂，得到25g无色的油状物。

收率：96％。Rf：0.42(CH₂Cl₂/MeOH，98∶2v/v)。

IR(薄膜)：1649(C＝O)，1720(OC＝O)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.17(m，5H，H_ar)，5.85(sl，1H，NH)，5.01(s，2H，PhCH₂)，4.54(t，1H，J＝5.26Hz，CH)，3.92-4.02(m，2H，NHCH₂CO)，3.48-3.65(m，2H，NCH₂CH)，3.2(m，6H，CH₂，OCH₂)，1.44(sl，2H，CH₂)，1.17(sl，22H，CH₂)，1.09(t，6H，J＝6.98Hz，CH₃)，0.79(t，3H，J＝6.2Hz，CH₃)。

7.6： 4-苄氧基羰基-1-十四基哌嗪-2-酮的制备

于室温下，搅拌溶解于250ml甲苯中的在上一步骤制备的23g(47mmol)酰胺，加入催化量的对甲苯磺酸(780mg，4.1mmol)。在75℃将该溶液搅拌三个小时。冷却之后，用水洗涤混合物，经硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩。得到的残留物经硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到14g黄色油状物。

收率：72％。Rf：0.61(CH₂Cl₂/MeOH，98∶2v/v)。

IR(薄膜)：1669(C＝O，C＝C)，1700(OC＝O)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.25(m，5H，H_ar)，6.29(dd，1H，J＝21.58和5.98Hz，CH＝CH)，5.42(dd，1H，J＝18.78和6.01Hz，CH＝CH)，5.12(s，2H，PhCH₂O)，4.59(s，2H，COCH₂N)，3.39(t，2H，J＝7.24Hz，CH₂)，1.33(sl，2H，CH₂)，1.18(sl，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.32Hz，CH₃)。

7.7： 1-十四基哌嗪-2-酮盐酸盐的制备

向溶解于100ml乙醇中的10.5g(24mmol)4-苄氧基羰基-1-十四基哌嗪-2-酮的溶液中加入5ml浓HCl。将该混合物在1g的10％Pd-C存在下、在40℃、氢气压力下进行催化氢化24小时。过滤之后，蒸发溶剂，使残留物在乙醚中结晶，得到7g黄色固体。

收率：86％。熔点：161.6℃(分解)。Rf：0.25(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)

IR(KBr)：1655(C＝O)，3451(NH₂)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：9.87(sl，1H，NH₂)，7.7-8.9(sl，1H，NH₂)，4.18(sl，2H，NCH₂)，3.93(sl，2H，NCH₂)，3.63(sl，2H，NCH₂)，3.30(s，2H，CH₂)，1.46(sl，2H，CH₂)，1.19(sl，22H，CH₂)，0.81(s，3H，CH₃)。

7.8： 4-(4-氰基甲基苄基)-1-十四基哌嗪-2-酮的制备

将2.2g(10mmol)4-溴代甲基苯基乙腈加入到2.95g(8.8mmol)1-十四基哌嗪-2-酮盐酸盐、2.6g(17.6mmol)的碳酸钾以及0.5g碘化钾的100ml乙腈混合物中。将该溶液在回流下搅拌4个小时，过滤，蒸发。得到的残留物溶解于二氯甲烷中，用碳酸钠饱和溶液洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，蒸发。得到的粗品化合物经快速层析纯化，使用CH₂Cl₂/MeOH，99∶1v/v混合物作为洗脱剂，得到3.6g黄色油状物。

收率：95％。Rf：0.48(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)

IR(薄膜)：1647(C＝O)，2249(CN)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.19(m，4H，H_ar)，3.67(s，2H，PhCH₂CN)，3.47(s，2H，NCH₂Ph)，3.26(m，4H，NCH₂)，3.07(s，2H，COCH₂N)，2.58(t，2H，J＝5.39Hz，CH₂)，1.47(sl，2H，CH₂)，1.18(sl，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.40Hz，CH₃)。

7.9 4-[4-(N-羟基脒基甲基)苄基]-1-十四基哌嗪-2-酮的制备

于回流下，将7g(50mmol)碳酸钾、2.9g(41mmol)羟胺盐酸盐的80ml乙醇混合液加热15分钟，然后滴加至溶解于20ml乙醇中的3.6g(8.4mmol)4-(4-氰基甲基苄基)-1-十四基哌嗪-2-酮中。然后将该混合物在回流下加热12个小时。过滤并蒸发溶剂之后，将得到的残留物溶于二氯甲烷中，用水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，使用CH₂Cl₂/MeOH，98∶2v/v混合物作为洗脱剂，得到2.2g黄色油状物。

收率：56％。Rf：0.43(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(薄膜)：1636(C＝O，C＝N)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.17(m，4H，H_ar)，4.51(s，2H，NH₂)，3.44(s，2H，PhCH₂CN)，3.35(s，2H，NCH₂Ph)，3.24(m，4H，NCH₂)，3.05(s，2H，COCH₂N)，2.58(t，2H，J＝5.21Hz，CH₂)，1.45(sl，2H，CH₂)，1.18(sl，22H，CH₂)，0.80(t，3H，J＝6.38Hz，CH₃)。

7.10 1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪-2-酮的制备

将在0℃冷却15分钟的130ml二氯甲烷中的1.1g(2.4mmol)4-[4-(N-羟基脒基甲基)苄基]-1-十四基哌嗪-2酮和0.4ml(2.9mmol)三乙胺的溶液中滴加0.36ml(2.8mmol)氯代甲酸苯酯。将混合物搅拌两个小时之后，用Na₂CO₃饱和溶液处理，用水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得到残留物，将其溶解于50ml甲苯中，回流下加热6个小时。蒸发甲苯，得到的残留物经硅胶柱层析纯化，使用CH₂Cl₂/MeOH，98∶1v/v作为洗脱剂，在乙醚中结晶，得到300mg黄色固体。

收率：30％。Rf：0.52(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：1636(CON)，1775(-O-CO-N)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.16(m，4H，H_ar)，5.23(s，1H，NH)，3.76(s，2H，PhCH₂CN)，3.38(s，2H，NCH₂Ph)，3.25(m，4H，CH₂N)，2.86(s，2H，COCH₂N)，2.57(t，2H，J＝5.23Hz，CH₂)，1.45(m，2H，CH₂)，1.18(sl，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.42Hz，CH₃)。

实施例8

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-(CH₂)₂-，n＝2，A＝B＝-CH₂-，Y＝CO，R＝-(CH₂)₁₃-CH₃的式(I)化合物)

8.1： 4-(2-氯代-2-氧基乙基)苯甲酸的制备

在250ml磨光锥形烧瓶中，将10g(72mmol)对氨基苯甲酸溶解于70ml乙酸中，其中加入了6ml的12N盐酸。在0℃冷却混合物，分小份加入2.5g(36.2mmol)NaNO₂。搅拌30分钟之后，将得到的粘性液体滴加于悬浮于20ml无水丙酮中的6.5ml(94.8mmol)丙烯腈以及数十mg氧化铜(CuO)混合物中。在室温下将该反应混合物搅拌两个小时，在真空下过滤得到的固体之后，用水洗涤几次。产物通过在水中再结晶纯化，得到白色固体。

收率：65％。熔点：157℃。Rf：0.29(CH₂Cl₂/MeOH，50∶50v/v)。

IR(KBr)：1690(C＝O)，2240(CN)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.9(d，2H，J＝8.22Hz，H_ar)，7.4(d，2H，J＝8.18Hz，H_ar)，5.5(t，1H，J＝7Hz，CNCHCl)，3.43(d，2H，J＝6.96Hz，CH₂CHCN)。

8.2： 4-(2-氰基乙基)苯甲酸的制备

向溶解于250ml冰醋酸的10g(47mmol)4-(2-氯代-2-氰基乙基)苯甲酸中分小份加入1.56g(23mmol)锌粉末。将混合物于回流下加热两个小时。在真空下过滤形成的盐(ZnCl₂)，用水洗涤几次。冷却后在滤液中形成沉淀物，过滤，用水洗涤几次之后，干燥。得到白色固体。

收率：68％。熔点：165℃。Rf：0.25(CH₂Cl₂/MeOH，50∶50v/v)。

IR(KBr)：1700(C＝O)，2252(CN)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.9(d，2H，J＝8.17Hz，H_ar)，7.25(d，2H，J＝8.13Hz，H_ar)，2.95(t，2H，J＝7.22Hz，CH₂CN)，2.6(t，2H，J＝7.36Hz，CH₂CH₂CN)。

采用与上述实施例2相同的方法进行缩合反应，以基本相同的收率，得到上述名称的噁二唑终产物。

实施例9

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基丙基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-(CH₂)₃-，n＝3，A＝B＝-CH₂-，Y＝CO，R＝-(CH₂)₁₃-CH₃的式(I)化合物)

9.1： 1-溴代-3-苯基丙烷的制备

向在150ml的无水二氯甲烷中的10g(73mmol)3-苯基丙-1-醇溶液中分小份加入在二氯甲烷中的50ml 1M PBr₃(36mmol)溶液。在室温下将该反应混合物搅拌一个小时。用水洗涤几次之后，干燥有机相，然后蒸发。得到的残留物经硅胶层析纯化，使用乙醚/石油醚的5∶95v/v混合物作为洗脱剂，得到具有粘性液体外观的溴代衍生物。

收率：80％。Rf：0.25(乙醚/石油醚，5∶95v/v)。

IR(薄膜)：1605(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃ HMDS)δppm：7.25-7.06(m，5H，H_ar)，3.29(t，2H，J＝6.59Hz，CH₂Br)，2.68(t，2H，J＝7.34Hz，PhCH₂CH₂CH₂Br)，2.14-1.99(m，2H，CH₂CH₂CH₂Br)。

9.2： 4-(3-溴代丙基)乙酰苯的制备

于0℃，向在100ml CS₂中的17.5g(88mmol)三氯化铝以及50ml乙酰氯的混合物中滴加在20ml乙酰氯中的溴代衍生物25g(125mmol)1-溴代-3-苯基丙烷溶液。在室温下，将该混合物搅拌两个小时。在减压下蒸发去除过量的乙酰氯以及CS₂。将得到的残留物溶于二氯甲烷中，用水洗涤几次，经硫酸镁干燥之后，真空下浓缩。在减压下蒸发，得到具有黄色液体外观的取代的乙酰苯。

收率：79％.沸点：140-145℃/3mmHg.Rf：0.25(乙醚/石油醚，50∶50v/v)。

IR(薄膜)：1670(C＝O)，1605(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.79(sl，2H，H_ar)，7.23(sl，2H，H_ar)，3.26(t，2H，J＝6.49Hz，CH₂Br)，2.7(t，2H，J＝6.26Hz，PhCH₂CH₂CH₂Br)，2.48(s，3H，CH₃)，2.08-1.9(m，2H，CH₂CH₂CH₂Br)。

9.3： 4-(3-溴代丙基)苯甲酸的制备

向在200ml水中的33g NaOH溶液中依次滴加50ml Br₂和100ml二氧杂环己烷。将该混合物冷却至0℃，滴加22g 4-(3-溴代丙基)乙酰苯。在室温下搅拌至黄色的溴消失(一个小时)。用12N(20ml)HCl水溶液小心酸化混合物。形成沉淀物，在真空下过滤，用水洗涤几次，得到黄色固体。

收率：85％。熔点：120℃。Rf：0.25(MeOH/CH₂Cl₂，20∶80v/v)。

IR(KBr)：3340(OH)，1700(C＝O)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.9(d，2H，J＝8.16Hz，H_ar)，7.2(d，2H，J＝8.3H_ar)，3.3(t，2H，J＝6.47Hz，CH₂Br)，2.78(t，2H，J＝7.7Hz，PhCH₂CH₂CH₂Br)，2.18-2.04(m，2H，CH₂CH₂CH₂Br)。

9.4： 4-(3-氰基丙基)苯甲酸的制备

采用与上述实施例所述相同的方法，将上述得到的溴代衍生物转化为腈。

收率：75％。粘性外观。Rf：0.29(MeOH/CH₂Cl₂，15∶85v/v)。

IR(薄膜)：3345(OH)，1700(C＝O)，2253(CN)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.9(d，2H，J＝8.09Hz，H_ar)，7.2(d，2H，J＝8.09Hz，H_ar)，2.8(t，2H，J＝7.44Hz，CH₂CN)，2.28(t，2H，J＝6.99Hz，PhCH₂CH₂CH₂CN)，2.02-1.91(m，2H，CH₂CH₂CH₂CN)。

9.5：后续步骤

采用与上述实施例2所述相同的方法，使十四基哌嗪与3-氯代甲基苯甲酰氯在碱性环境中缩合，得到相应的氯化物。采用与上述相同的方法，将氯化物转化为腈，然后转化为偕胺肟，最后转化为噁二唑酮：1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基丙基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪-2-酮。所有这些得到的中间体以及最终产物的特征描述于下。

1-(3-氯代甲基苯甲酰基)-4-十四基哌嗪

外观：粘性油状物。

收率：67％。洗脱剂：(MeOH/CH₂Cl₂，5∶95v/v)。Rf：0.25(MeOH/CH₂Cl₂，10∶90v/v)。

IR(薄膜)：1660(NCO)，1610(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.38(sl，4H，H_ar)，4.55(s，2H，CH₂Cl)，3.72(m，2H，NCH₂)，3.38(m，2H，NCH₂)，2.52(m，4H，NCH₂)，2.36(t，2H，NCH₂)，1,41(m，2H，NCH₂CH₂)，1.25-1.15(sl，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.09Hz，CH₃)。

1-(3-氰基甲基苯甲酰基)-4-十四基哌嗪

外观：粘性油状物。

收率：67％

洗脱剂：(MeOH/CH₂Cl₂，5∶95v/v)。Rf：0.25(MeOH/CH₂Cl₂，10∶90v/v)。

IR(薄膜)：1665(NCO)，2253(CN)，1605(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.36-7.23(sl，4H，H_ar)，3.71(s，2H，CH₂CN)，3.74-3.71(m，2H，NCH₂)，3.43(m，2H，NH₂)，2.54-2.25(m，4H，NCH₂)，2.29(t，2H，J＝7.45Hz，NCH₂)，1.5-1.35(m，2H，NCH₂CH₂)，1.3-1.1(m，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.36Hz，CH₃)。

1-[3-(N-羟基脒基)甲基苯甲酰基]-4-十四基哌嗪

外观：粘性油状物。收率：58％。洗脱剂：(MeOH/CH₂Cl₂，5∶95v/v)。Rf：0.25(MeOH/CH₂Cl₂，10∶90v/v)。

IR(薄膜)：3430(NH)，1660(NCO)，1605(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.24-7.07(m，4H，H_ar)，3.65-3.53(m，2H，NCH₂)，3.33-3.28(m，2H，NCH₂)，2.41-2.11(m，6H，NCH₂)，2.09(s，2H，CH₂CN)，1.5-1.3(m，2H，NCH₂CH₂)，1.25-1.15(m，22H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.41Hz，CH₃)。

1-[3-(4，5-二氢-1，2，4(4B)-噁二唑-5-酮-3-基)甲基苯甲酰基]-4-十四基哌嗪

外观：粘性油状物。收率：67％。洗脱剂：(MeOH/CH₂Cl₂，5∶95v/v)。Rf：0.25(MeOH/CH₂Cl₂，10∶90v/v)。

IR(薄膜)：3435(NH)，1665(NCO)，1610(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.3-7.2(m，4H，H_ar)，6.57(sl，1H，NH)，3.68-3.35(m，4H，NCH₂)，2.52-2.29(m，6H，NCH₂)，2.1(s，2H，CH₂CN)，1.4-1.35(m，2H，NCH₂CH₂)，1.3-1.1(m，22H，CH₂)，0.8(t，3H，J＝6Hz，CH₃)。

实施例10

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基-甲基苯甲酰基)-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪的制备

(其中D＝Z-HET，HET＝噁二唑酮(II)，Z＝-(CH₂)-，n＝1，A＝B＝-CH₂-，Y＝CO，R＝-(CH₂)₁₇-CH₃的式(I)化合物)

10.1： N-十八基氨基羰基哌嗪的制备

在250ml磨光锥形烧瓶中，将13g(0.151mol)哌嗪搅拌溶解于100ml二氯甲烷中。向该混合物中添加4.42g(15mmol)1-十八基异氰酸酯，在室温下搅拌1小时。反应结束时，将溶液用水洗涤两次。将有机相经硫酸镁干燥，过滤，蒸发，得到5.21g白色结晶。

收率：91％。熔点：72℃，Rf：0.46(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH，80∶20∶2v/v/v)。

IR(KBr)：3364(NH)，1620(N-CO-N)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：4.68(t，1H，J＝5.01Hz，NHCO)，3.26(t，4H，J＝5.22Hz，CH₂NCO)，3.14(q，2H，J＝7.14Hz，CH₂NHCO)，2.77(t，4H，J＝5.21Hz，CH₂NH)，1.73(sl，1H，NH)，1.42(m，2H，CH₂CH₂NH)，1.19(sl，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.20Hz，CH₃)。

10.2： 1-(4’-氯代甲基苯甲酰基)-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪的制备

采用与实施例2相同的反应条件，用9.9g(26mmol)N-十八基羰基哌嗪、5.4ml(38mmol)三乙胺和5g(26mmol)4-氯代甲基苯甲酰氯作为原料，得到该中间体。经硅胶层析进行纯化，使用二氯甲烷作为洗脱剂，得到12.2g白色结晶产物。

收率：88％。熔点：68-70℃。Rf：0.4(CH₂Cl₂/MeOH，95∶5v/v)。

IR(KBr)：2365(CN)，1653(CON)，1730(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.30-7.39(sl，4H，H_ar)，4.82(t，1H，J＝5Hz，NHCON)，4.48(s，2H，PhCH₂Cl)，3.52(sl，4H，CH₂NCONH)，3.34(sl，4H，CH₂NCO)，3.15(q，2H，J＝7Hz，CH₂NH)，1.43(m，2H，CH₂CH₂NH)，1.19(sm，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝5.15Hz，CH₃)。

10.3： 1-(4’-氰基甲基苯甲酰基)-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪的制备

采用与实施例2相同的反应条件，用5.33g(10mmol)1-(4’-氯代甲基苯甲酰基)-4-(十八基氨基羰基)哌嗪和1.96g(40mmol)氰化钠作为原料，制备该化合物。得到3.84g白色沉淀物。

收率：74％。熔点：90℃。Rf：0.56(CH₂Cl₂/MeOH，93∶7v/v)。

IR(KBr)：2365(CN)，1653(CON)，1730(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CDCl₃，HMDS)δppm：7.30-7.39(sl，4H，H_ar)，4.53(t，1H，J＝5Hz，NHCON)，3.73(s，2H，PhCH₂CN)，3.52(sl，4H，CH₂NCONH)，3.34(sl，4H，CH₂NCO)，3.15(q，2H，J＝7Hz，CH₂NH)，1.43(m，2H，CH₂CH₂NH)，1.19(sl，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝5.15Hz，CH₃)。

10.4： 1-[4’-(N-羟基脒基甲基)苯甲酰基]-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪的制备

采用与前述相同的反应条件，用5.8g(84mmol)羟胺盐酸盐、14.07g(102mmol)碳酸钾和8.9g(17mmol)1-(4’-氰基甲基苯甲酰基)-4-(十八基氨基羰基)哌嗪作为原料，制备该偕胺肟。得到的残留物经硅胶层析纯化，使用CH₂Cl₂/MeOH，98∶2v/v混合物作为洗脱剂，得到2.36g白色结晶。

收率：38％。熔点：104-106℃。Rf：0.43(CH₂Cl₂/MeOH，90∶10v/v)。

IR(KBr)：3493(OH)，3355(NH₂)，2200(CN)，1615(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CD₃OD，HMDS)δppm：7.35和7.30(2d，4H，J＝8.8和8.5Hz，H_ar)，4.7(t，1H，J＝6Hz，NHCON)，4.8(s，2H，NH₂)，3.61(m，4H，CH₂NCONH)，3.50(s，2H，PhCH₂)，3.27(m，4H，CH₂NCO)，3.07(t，2H，J＝6Hz，CH₂NH)，1.39(m，2H，CH₂CH₂NH)，1.21(sl，30H，CH₂)，0.83(t，3H，J＝8Hz，CH₃)。

10.5： 1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基-甲基苯甲酰基)-4-(N-十八基氨基羰基)哌嗪的制备

采用与实施例2相同的方法，用1.25g(2.3mmol)上述偕胺肟、0.38ml(2.75mmol)三乙胺和0.34ml(2.75mmol)氯代甲酸苯酯作为原料，分两个步骤进行该合成反应。经硅胶层析纯化，使用二氯甲烷作为洗脱剂，得到0.8g白色结晶。

收率：59％。熔点：150-152℃。Rf：0.43(CH₂Cl₂/MeOH，93∶7v/v)。

IR(KBr)：1780(OCON)，1618(C＝N)，1550(C＝C_ar)cm^-1

¹H NMR(200MHz，CD₃OD，HMDS)δppm：7.36(s，4H，H_ar)，4.94(t，1H，J＝5.53Hz，NHCON)，3.77(s，2H，PhCH₂)，3.56(sl，2H，CH₂NCONH)，3.27(sl，2H，CH₂NCO)，3.07(q，2H，J＝7.37Hz，CH₂NHCO)，1.41(sl，2H，CH₂CH₂NHCO)，1.18(sl，30H，CH₂)，0.81(t，3H，J＝6.8Hz，CH₃)。

实施例11

体外生物学活性实验

磷脂酶A2可以水解甘油磷脂的sn-2位的酯键并释放脂肪酸和溶血磷脂。具体而言，可以根据记载在文献[Radvanyi等，Anal.Biochem.1989，177，103-109]中的荧光法测定脂肪酸的量以及根据记载于文献[Reynolds等，Anal.Biochem.1992，204，190-197]的UV分光法测定溶血磷脂的量，测定所述化合物的体外作用。

11.1：材料以及方法

11.1.1：材料

使用的酶包括两种II型的分泌的酶和一种I型的分泌的酶，所述II型的酶为人重组PLA₂和Crotalus durissus terrificus的PLA₂碱性亚组，所述I型的酶为猪胰腺PLA₂。

底物为：在荧光法中使用荧光底物：棕榈酰基-2-(10-芘基癸酰基)-sn-甘油基-3-磷脂酰甘油，以及在UV分光中使用硫化动物：1，2-双-(二己硫基)-二脱氧-rac-甘油基-3-磷酰基甘油的锂盐。

荧光分析法采用1cm的聚苯乙烯比色杯在Perkin Elmer LS50装置上进行。荧光底物的准确浓度采用石英比色杯通过U.V.Unicam分光法测定。

U.V.分光分析法是在spectro ELx 808超微读板仪(96孔板)装置上进行。

11.1.2：方法

a) 荧光分析法

PLA₂是一种可以水解磷脂的sn-2位的酯键的酶。在聚合状态下，荧光底物在490nm处显示最大荧光，在398nm处没有荧光。在进行酶水解后，激发与牛血清白蛋白(BSA)络合的释放的脂肪酸(芘基癸酸)发出的荧光，在378和398nm处均可观测到荧光。含量测定的原理是398nm处的荧光之差，该差表示脂肪酸释放随时间而发生的改变，换句话说，也表示PLA₂的活性。

酶活性测定在包括下列物质的比色杯中进行：960μl Tris缓冲液，50mM HCl，pH7.5；0.5M NaCl，1mM EGTA；1μM底物。将该混合物在涡流下搅拌一分钟，形成底物气泡，随后在搅拌下依次加入10μl 10％的SAB、10μl的溶剂(乙醇或者DMSO)或者抑制剂溶液，10μl一定浓度的PLA₂，最后加入10μl 1M氯化钙(CaCl₂)，使反应开始。

酶活性测定的较好条件需要使酶饱和，因此使用的起始浓度是：(i)人重组PLA₂：0.1μg/ml；(ii)猪胰腺PLA₂：0.6μg/ml；(iii)Crotalus durissusterrificus(CB)PLA₂：0.05μg/ml。抑制剂母液的起始浓度为10^-2M。

通过原点的斜率计算的反应的初始反应速度来表示酶活性。S₀是无钙(对照组)存在时曲线的斜率，S是存在钙时的斜率，V是以μl表示的底物的体积，F_max是酶反应结束时获得的最大荧光信号，下述方程为以每分钟释放的脂肪酸μmol数表示的酶活性(A)。

A = {2.10}^{- 4} \times \frac{(S - S_{0}) \times V}{F_{\max}}

存在抑制剂时的残留活性是通过无抑制剂以及存在抑制剂条件下得到的倾斜评价。

残留活性(％)＝[抑制剂存在下的(S-S₀)/不存在抑制剂时的(S-S₀)]×100

得到的值为抑制剂浓度的对数函数，以此测定CI₅₀值，即将酶活性减少50％时所需要的抑制剂浓度。CI₅₀值越低，表示受试化合物的抑制活性越优秀。

PLA₂是有机底物的亲和性更高。但是，以下三种原因可能解释所观察到的抑制结果。

-抑制剂破坏底物的胶束，使其无法接近酶。在这种情况下，产生的抑制作用是用于无法利用底物所致。

-抑制剂的一部分可固定于基质的气泡上，由此可以估算CI₅₀。

-抑制剂和活性部位的基团发生反应或者和酶的另一部分一起防止底物的水解。在这种情况下，观察到的抑制明显并在活性部位发生，显示或者不显示可逆性质。

虽然荧光分析法是很敏感的分析法，但是无法区别三种抑制类型之间的差异，底物呈胶束形态。相反，在下述将要说明的分光分析法中，单体状态的底物对于抑制很模糊，酶在最适条件下完全不起作用。

b) U.V.分光测定法

在钙存在的条件下，通过PLA₂的解脂作用从而释放溶血硫磷脂(lysothiophospholipide)(LTPL)，该物质与介质中的二硫代硝基苯甲酸(DTNB)反应反应，形成LTPL-TNB络合物以及TNB^-阴离子，TNB^-阴离子诱导反应介质呈黄色。在412nm处测定光密度(TNB^-离子的吸光波长)，显示溶血硫磷脂的生成以及PLA₂活性。

酶活性的测定是在多孔培养板中进行，各孔中包括下列物质：190μl的1X缓冲液、2μl的10mM DTNB、2μl的20mM底物、2μl的溶剂或者抑制剂溶液、2μl的一定浓度的PLA₂。摇动各平板，加入2μl的1M氯化钙使酶反应开始。使用的单体底物的浓度比临界胶束浓度(cmc；1mM)低，保持底物/酶比率。这表明使用的底物的浓度比cmc低5倍(200μM)。

最好使用使酶饱和的测定条件。使用浓度是：(i)猪胰腺PLA₂：1.5mg/ml；(ii)Crotalus durissus terrificus PLA₂：0.43mg/ml。抑制剂母液的初始浓度为10^-2M。CI₅₀是利用与U.V.分光计结合的软件通过直接计算反应的初始速度测定的。该速度可以用下述方程表示。

v_{1} = \frac{ΔDO}{dt}

对各个孔(每浓度3个孔)按三秒的间隔进行读板15次。

11.2：结果

结果记载在下述表1中，在表中详细给出了受试的式(I)化合物分子中的R、W、A、B、Y和D(Z和HET)。

下述表1中给出的结果表明：受试的所有式(I)化合物均对II型PLA₂具有较高的选择性。

其中p为1、Y为-CO-的化合物编号为6至9和13至15的化合物的抑制活性最大，化合物编号为7、8、9、12、13和14的化合物对II型人PLA₂具有较大的活性，其CI₅₀为0.3μM或以下。

表1：

表1(续)：

表1(续)：

实施例12

体内活性测定

12.1：材料和方法

该体内活性测定采用公知的角叉菜胶诱导大鼠爪水肿试验进行。

在该实验中，通过腹膜内(i.p.)或口服(p.o.)途径给予大鼠参照化合物吲哚美辛或受试化合物5，1小时后，在大鼠的后腿上注射角叉菜胶。分别在注射角叉菜胶后0、3和5小时时，测定水肿的体积。两种受试化合物的使用剂量为5、10和20mg/kg。

12.2：结果

在经i.p.途径给药时，两种化合物具有基本相同的活性。在给药量为10mg/kg时，吲哚美辛和化合物5对水肿的抑制分别为79％和73％。

但是，在口服途径给药时，化合物5的活性比吲哚美辛要高，在注射角叉菜胶5个小时后，化合物5对水肿的抑制为65％，而参照化合物仅具有16％的抑制活性，此时，这两种化合物的给药量均为10mg/kg p.o.。

实施例13

体内活性的第二种测定方法

实施例13涉及本发明的某些化合物的体内抗炎活性测定，测定对急性耳朵水肿实验模型的抗炎活性。

A. 材料和方法

A.1材料和试剂

准备6种化合物样品：PMS 1227、PMS 1237、PMS 1281、PMS 1289、PMS 1314和PMS 1315。

所述各种化合物和它们的化学式如下。

PMS 1227

C₂₈H₄₆N₄O₂＝470g/mol

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-d-十四基哌嗪。

PMS 1281

C₂₈H₄₄N₄O₃+1/2H₂O＝493g/mol

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苄基]-4-十四基哌嗪。

PMS1289

C₂₈H₄₄N₄O₃＝484g/mol

1-(对((1，2，4-(4H)-5-氧代)噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基)-4-十二烷基-2，5-二甲基哌嗪。

PMS 1314

C₂₆H₄₀N₄O₃＝456g/mol

1-[4’-(4，5-二氢-1，2，4(4H)-5-氧代-噁二唑-3-基甲基)苯甲酰基]-4-十二烷基哌嗪。

PMS 1315

C₂₉H₄₃N₃O₃S+1H₂O＝531g/mol

1-[4’-(2，4-二氧代-1，3-噻唑烷-5-亚基)苯甲酰基]-4-十四基哌嗪。

作为试剂，使用特殊等级或者第一等级的巴豆油、吲哚美辛(SigmaCo.)、丙酮、三氯甲烷(100％)、三氯甲烷(80％)、羧甲基纤维素(CMC)、乙醇、己烷、乙醚、聚乙二醇(PEG)和生理盐水溶液。

A.2.使用的动物为体重为25g的ICR品系的雄性小鼠。

A.3.使用的工具包括：取皮肤样品的穿孔器、测定耳朵厚度的装置(Ozaki，日本)、天平、自动吸液管、小镊子、Vortex搅拌机、麻醉室、毛巾、笼子、Eppendorf^管、安全盖、试管等。

A.4.为了评价本发明的上述PMS化合物的体内抗炎活性，采用测定对急性耳朵水肿实验模型的抗炎活性试验。

局部抗炎作用的测定

通过施用巴豆油诱导小鼠的一只耳朵发生水肿，然后将上述各PMS化合物样品溶于80％的三氯甲烷中，将得到的溶液按每只耳朵1mg化合物的量对耳朵进行施用。另一只耳朵施用溶剂，即仅施用80％的三氯甲烷。

开始实验经过5个小时后，用皮肤穿孔器取水肿的耳朵组织，将该组织重量与穿孔器取的对照进行比较，籍此计算抑制率。

系统抗炎作用

将上述提及的PMS化合物样品悬浮于CMC中，经口服途径给予每只小鼠80mg化合物。实验开始1个小时后，施用巴豆油诱发水肿。

施用巴豆油5个小时后，用皮肤穿孔器取水肿组织，将重量增加与穿孔器取的对照进行比较，籍此计算抑制率。

A.5.计算统计学显著性，采用Student检验(Student′s t-检验)对对照组和受试组所得结果进行评价。

B.结果

B.1局部抗炎作用

下述表2中给出了在局部抗炎作用试验中使用的材料和方法，该试验通过巴豆油诱发小鼠耳朵水肿、局部给予PMS化合物进行。

表2：

试验化合物	给药量[(mg/耳朵)/mmol]	动物数目^*	水肿抑制率(％)
试验化合物	给药量[(mg/耳朵)/mmol]	动物数目^*	水肿抑制率(％)	PMS 1227	1/0.00212	56(7)	51.45±11.67
PMS 1281	1/0.00206	56(7)	47.83±12.34	PMS 1227	1/0.00212	56(7)	51.45±11.67
PMS 1281	1/0.00206	56(7)	47.83±12.34	PMS 1289	1/0.00206	24(3)	62.79±3.23
PMS 1314	1/0.00219	48(6)	28.5±6.85	PMS 1289	1/0.00206	24(3)	62.79±3.23
PMS 1314	1/0.00219	48(6)	28.5±6.85	PMS 1315	1/0.00195	32(4)	32.12±9.42
吲哚美辛	0.5/0.00139	72(9)	43.11±8.79	PMS 1315	1/0.00195	32(4)	32.12±9.42

^*括号内的数字表示实验的数目

按大小减小程度进行分类时，PMS化合物的体内抗炎活性为：PMS1289＞PMS 1227＞PMS 1281＞PMS 1315＞PMS 1314。

B.2系统抗炎作用

得到的结果表明，经口服途径给予在上述材料和方法中提及的PMS化合物，在经口巴豆油诱导的水肿实验模型中不具有系统抗炎作用。

Claims

1、下述式(I)的化合物：

其中：

D代表基团Z-HET或者基团Z＝HET，

(i)当D代表基团Z-HET时，

或

(ii)当D代表基团Z＝HET时，

Z-与杂环一起代表下述式(IV)或者式(V)的基团-Z＝HET，

或

其中，-Z＝代表-CR₁＝，R₁代表氢原子或者具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基；

p是0或者1的整数；

Y-选自C＝O、SO₂和-(CR₃R₄)_m-，其中m是1至6的整数，R₃和R₄相同或者不同，相互独立，为氢原子或者具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基；

哌嗪环上的A和B相同或不同，相互独立，代表与氢结合的碳原子、同时与具有1至3个碳原子的直链或者支链烷基和氢结合的碳原子，或者代表基团-C＝O，

q是0或者1的整数；

W-选自和

R选自具有1至22个碳原子的直链或者支链烷基、多芳基以及芳基-烷基、烷基-Q-烷基、烷基-Q-芳基、芳基-Q-芳基以及芳基-Q-烷基，其中“芳基”代表取代或未取代的5元-10元芳基。

2、根据权利要求1的式(I)化合物，其中R代表芳基-烷基、烷基-Q-芳基、芳基-Q-芳基或芳基-Q-烷基，所述芳基选自苯基、萘基、苯基苯基(或联苯基)或芳基杂环基，如吲哚基，所述“烷基”代表具有1至12个碳原子的直链或者支链烷基，“Q”选自-O-、-S-、-NH-、-NR₅-、-NH-CO-NH-、

和

R₅代表具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基。

3、根据权利要求1或者权利要求2的化合物，其中p为1，Y为基团C＝O，D、A、B、q、W和R与权利要求1中定义相同。

4、根据权利要求1或者权利要求2的化合物，它们选自：

5、制备权利要求1-4中任一项的式(I)化合物的方法，该方法包括下列步骤：

a)使羟胺盐酸盐与式(VI)的衍生物反应，得到相应的肟中间体，式(VI)如下：

其中，R、q、W、A、B、p和Y与权利要求1和权利要求2中定义相同；

Z-选自-(CR₁R₂)_n-和-(CR₁＝CR₂)_n-’其中n是1至6的整数，R₁和R₂相同或者不同，相互独立，代表氢原子或者1至6个碳原子的直链或者支链烷基；然后

b)使在a)步骤得到的肟通过与氯甲酸盐或酯反应进行环化，在充分的温度下加热使环化完全。

6、制备权利要求1-4中任一项的式(I)化合物的方法，该方法包括下列步骤：

a)使噻唑烷-2，4-二酮与下述通式(VII)衍生物的醛官能团反应，形成如权利要求1所定义的通式(V)的乙烯衍生物，通式((VII)如下：

其中，R、q、W、A、B、p和Y与权利要求1或者权利要求2定义相同；

r是0或者1的整数；

U-选自-(CR₆R₇)_s-和-(CR₆＝CR₇)_s-，s是1至6的整数，R₆和R₇相同或者不同，代表氢原子或者具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基。

7、根据权利要求6的方法，其特征在于还包括步骤b)：通过催化氢化还原双键Z＝C。

8、药物组合物，其特征在于该组合物包括根据权利要求1-4中任何一项的式(I)化合物。

9、用作药物活性组分的根据权利要求1-4中任何一项的式(I)化合物。

10、权利要求1-4中任何一项的式(I)化合物在制备用于预防或者治疗炎性疾病的药物中的用途。