TWI846385B

TWI846385B - 基尖葉野牡丹根的水萃取物在對抗冠狀病毒感染上的用途

Info

Publication number: TWI846385B
Application number: TW112109805A
Authority: TW
Inventors: 謝珮文; 黃聰龍; 黃鈺淩
Original assignee: 長庚大學
Priority date: 2023-03-16
Filing date: 2023-03-16
Publication date: 2024-06-21
Also published as: US20240307471A1; TW202438097A; CN118662539A

Abstract

本發明揭示一種基尖葉野牡丹根的水萃取物可被用來對抗冠狀病毒感染。

Description

基尖葉野牡丹根的水萃取物在對抗冠狀病毒感染上的用途

本發明是有關於使用基尖葉野牡丹根的水萃取物(water extract of Melastoma malabathricumroot)來對抗冠狀病毒感染。

冠狀病毒(coronavirus)是一群屬於冠狀病毒科(Coronaviridae)的正義單股RNA病毒(RNA viruses)，其會感染包括人類在內的各種動物，諸如嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus, SARS-CoV)[又被稱為嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒1型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 1, SARS-CoV-1)]以及中東呼吸道症候群冠狀病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV)。

值得注意的是，自2019年底開始，在全球造成大流行的冠狀病毒疾病2019 (coronavirus disease 2019, COVID-19)被發現是由一種新穎的冠狀病毒所引起，而國際病毒分類委員會(International Committee on Taxonomy of Viruses, ICTV)將此病毒的學名定為嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)。主要的症狀包括呼吸道症狀，諸如高於38℃的發燒、咳嗽、呼吸急促，以及呼吸困難。可能會觀察到諸如嗅覺與味覺喪失、腹瀉、頭痛、發冷、食慾喪失、全身不適以及意識受損的症狀。然而，目前治療藥物的療效還不甚理想，大部分的藥物仍是以對症治療(symptomatic treatment)為主。因此，本領域的相關研究人員嘗試從植物中來尋找可供用於對抗冠狀病毒感染的活性組分(active component)。

基尖葉野牡丹(拉丁學名： Melastoma malabathricum；英文俗名： Malabar melastome)是野牡丹科(Melastomataceae)野牡丹屬( Melastoma)的常綠灌木，適合生長於熱帶以及亞熱帶環境，主要分佈於東南亞地區。基尖葉野牡丹的全株植物(whole plant)皆為可利用的部位，且已有研究指出，基尖葉野牡丹具有抗發炎(anti-inflammatory)、抗氧化(antioxidant)、止痛(antinociceptive)、止瀉(antidiarrheal)以及傷口癒合(wound healing)等藥理作用。

此外，在Joffry SM. et al.(2012), Evid Based Complement Alternat. Med., 258434的回顧性論文中有提及，已有研究顯示基尖葉野牡丹地上部位(aerial part)的甲醇萃取物(methanol extract)具有對抗小兒麻痺病毒(poliovirus)與第一型單純疱疹病毒(herpes simplex virus-1, HSV-1)的效用以及基尖葉野牡丹葉(leaves)的甲醇萃取物具有對抗HSV-1與麻疹病毒(measles virus)的效用。

就申請人所知，迄今尚無任何文獻或專利前案曾經揭示基尖葉野牡丹根的水萃取物(water extract of Melastoma malabathricumroot)可被用於對抗冠狀病毒感染。

發明概要

於本發明中，申請人意外地發現，基尖葉野牡丹根的水萃取物及其在進一步依序以具有300 kDa、100 kD以及10 kDa的分子量截斷值(molecular weight cut off value, MWCO value)的濾膜予以過濾後所得到的各個分離部分(isolated fractions)皆能夠有效對抗SARS-CoV-2的感染。因此，本發明的基尖葉野牡丹根的水萃取物及其分離部分被預期可供用於對抗冠狀病毒感染。

於是，在第一個方面，本發明提供一種基尖葉野牡丹根的水萃取物供應用於製備一用來對抗冠狀病毒感染之醫藥品的用途。

在第二個方面，本發明提供一種用於對抗冠狀病毒感染的方法，其包括對一有此需要的個體投予一如上所述的基尖葉野牡丹根的水萃取物。

發明的詳細說明

要被瞭解的是：若有任何一件前案刊物在此被引述，該前案刊物不構成一個下述承認：在台灣或任何其他國家之中，該前案刊物形成本技藝中的常見一般知識之一部分。

為了這本說明書之目的，將被清楚地瞭解的是：文字“包含有(comprising)”意指“包含但不限於”，以及文字“包括(comprises)”具有一對應的意義。

除非另外有所定義，在本文中所使用的所有技術性與科學術語具有熟悉本發明所屬技藝的人士所共同瞭解的意義。一熟悉本技藝者會認知到許多與那些被描述於本文中者相似或等效的方法和材料，它們可被用於實施本發明。當然，本發明決不受到所描述的方法和材料之限制。

本發明提供一種基尖葉野牡丹根的水萃取物(water extract of Melastoma malabathricumroot)供應用於製備一用來對抗冠狀病毒(coronavirus)感染之醫藥品的用途。

如本文中所使用的，術語“對抗冠狀病毒感染(against coronavirus infection)”或“抗-冠狀病毒感染(anti-coronavirus infection)”意指預防冠狀病毒所造成的感染、抑制冠狀病毒複製，和/或治療和/或預防冠狀病毒所造成的感染性疾病。

依據本發明，該冠狀病毒可選自於由下列所構成的群組：嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒1型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 1, SARS-CoV-1)、嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)、中東呼吸道症候群冠狀病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV)，以及它們的組合。

較佳地，該冠狀病毒是SARS-CoV-2。

依據本發明，水萃取的方法可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行。

可瞭解到的是，有關萃取方法的操作條件會進一步隨著所使用的基尖葉野牡丹根的處理方式以及水與基尖葉野牡丹根的用量比例等因素而被變動，以便達致最佳的萃取效果。而這些操作條件的選擇是熟習此項技藝者能例行性地自行決定的。

依據本發明，該基尖葉野牡丹根的水萃取可以使用新鮮的基尖葉野牡丹根，或者可使用預先經過一選自於由下列所構成之群組中的加工處理的基尖葉野牡丹根來進行：乾燥處理(drying treatment)、研磨處理(grinding treatment)、切碎處理(chopping treatment)、粉碎處理(comminuting treatment)，以及它們的組合。

依據本發明，該基尖葉野牡丹根與水的重量比是介於1：1至1：20之間。在本發明的一個較佳具體例中，該基尖葉野牡丹根與水的重量比是1：10。

依據本發明，該基尖葉野牡丹根的水萃取是在一為60℃至150℃的溫度下被進行歷時0.5至4小時。在本發明的一個較佳具體例中，該水萃取是在一為100℃的溫度下被進行歷時2小時。

依據本發明，該基尖葉野牡丹根的水萃取物可進一步被進行使用分子量截斷值(molecular weight cut off value, MWCO value)為300 kDa、100 kD以及10 kDa的薄膜中的至少一者之薄膜過濾(membrane filtration)，而使得所得到的分離部分(isolated fractions)含有選自於由下列所構成之群組中的分子量之組分：小於10 kDa的組分、10至100 kDa的組分、100至300 kDa的組分、大於300 kDa的組分，以及它們的組合。較佳地，該分離部分含有分子量為10至300 kDa的組分。更佳地，該分離部分含有分子量為100至300 kDa的組分。而薄膜過濾的操作可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行。

依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥(oral administration)、非經腸道投藥(parenteral administration)、呼吸道投藥(respiratory tract administration)或局部投藥(topical administration)之劑型(dosage form)。

依據本發明，該醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之藥學上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該藥學上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。

依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥的劑型，這包括，但不限於：無菌的粉末、錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pellet)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。

依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於非經腸道投藥的劑型[包括注射品(injection)，例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]，且以一選自於由下列所構成的群組中的途徑來投藥：腹膜內注射(intraperitoneal injection)、胸膜內注射(intrapleural injection)、肌肉內注射(intramuscular injection)、靜脈內注射(intravenous injection)、動脈內注射(intraarterial injection)、關節內注射(intraarticular injection)、滑液內注射(intrasynovial injection)、椎管內注射(intrathecal injection)、顱內注射(intracranial injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮下注射(subcutaneous injection)、皮內注射(intradermal injection)、病灶內注射(intralesional injection)、以及舌下投藥(sublingual administration)。

依據本發明，該醫藥品可以一選自於由下列所構成的群組中的呼吸道途徑來投藥：經口吸入(oral inhalation)以及經鼻吸入(nasal inhalation)。

依據本發明，該醫藥品亦可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部地施用於皮膚上的外部製劑(external preparation)，這包括，但不限於：乳劑(emulsion)、凝膠(gel)、軟膏(ointment)、乳霜(cream)、貼片(patch)、擦劑(liniment)、粉末(powder)、氣溶膠(aerosol)、噴霧(spray)、乳液(lotion)、乳漿(serum)、糊劑(paste)、泡沫(foam)、滴劑(drop)、懸浮液(suspension)、油膏(salve)以及繃帶(bandage)。

本發明亦提供一種用於對抗冠狀病毒感染的方法，其包括對一有此需要的個體投予(administering)一如上所述的基尖葉野牡丹根的水萃取物。

如本文中所使用的，術語“投予”以及“投藥(administration)”可被交換地使用，並且意指藉由任何合適的途徑來對一個體導入(introducing)、提供(providing)或遞送(delivering)一預定的活性成分以執行其預期的效用。

如本文中所使用的，術語“個體(subject)”意指任何感興趣的哺乳類動物，諸如人(humans)、猴子(monkeys)、牛(cows)、綿羊(sheep)、馬(horses)、豬(pigs)、山羊(goats)、狗(dogs)、貓(cats)、小鼠(mice)以及大鼠(rats)。

依據本發明，該基尖葉野牡丹根的水萃取物的投藥劑量與投藥次數會視下列因素而變化：要被治療的疾病之嚴重性，投藥途徑，以及要被治療的個體之年齡、身體狀況與反應。而有關投藥劑量與投藥次數的選擇是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。 較佳實施例之詳細說明

本發明將就下面的實施例來做進一步說明，但應瞭解的是，該等實施例僅是供例示說明用，而不應被解釋為本發明的實施上的限制。 實施例 一般實驗材料： 1. 穩定表現人類ACE2的HEK293T細胞株(human ACE2 stable expressing HEK293T cell line)(以下稱為hACE2-HEK293T)是購自於中央研究院RNA技術平台與基因操控核心設施(RNA Technology Platform and Gene Manipulation Core, Academia Sinica)。hACE2-HEK293T細胞被培養於杜貝可氏改良的依格氏培養基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium, DMEM)(Gibco)[添加有10%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)(Gibco)、10 µg/mL滅瘟素(blasticidin)(Sigma)、100 U/mL盤尼西林(penicillin)(Gibco)以及0.1 mg/mL鏈黴素(streptomycin)(Gibco)]中，並且培養條件設定為37℃與5% CO ₂。之後，大約每隔2-3天更換新鮮的培養基。當細胞密度達到約80%匯聚(confluence)時，進行細胞繼代培養(subculture)。 一般實驗方法： 1. 統計學分析(statistical analysis)：

在下面的實施例中，各組的實驗被重複3次，而實驗數據是以平均值±平均值的標準誤差(standard error of the mean, SEM)來表示。所有的數據是藉由史徒登氏t-試驗(Student’s t-test)來作分析，俾以評估各組之間的差異性。若所得到的統計分析結果是 p＜0.05，這表示有統計學顯著性(statistical significance)。 實施例 1. 製備基尖葉野牡丹根的水萃取物 (water extract of Melastoma malabathricumroot) ：

首先，將基尖葉野牡丹的根之乾燥粉末(購自於惟元國際藥業有限公司)與水以一為1：10的重量比進行混合並於100℃下進行熱迴流萃取(heat reflux extraction)歷時2小時，接著以一孔徑為6 μm的濾紙(ADVANTEC)來進行過濾，繼而收取濾液。另外，所得到的殘餘物(residue)被拿來重複進行上述水混合-熱迴流萃取-過濾步驟。接著，收集所得到的濾液，藉此而得到一基尖葉野牡丹根的水萃取物。

另外，該基尖葉野牡丹根的水萃取物在被拿來進行下面實施例2與3的實驗之前，有被進行濃縮乾燥，而得到該基尖葉野牡丹根的水萃取物之粉末。 實施例 2. 基尖葉野牡丹根的水萃取物的高效能液相層析 (high performance liquid chromatography, HPLC) 分析 實驗方法：

為瞭解基尖葉野牡丹根的水萃取物的主要成分分佈，將依據上面實施例1所得到的水萃取物粉末溶於10%乙腈(acetonitrile)中以配製成一具有一濃度為1 mg/mL的待測樣品，繼而將之拿來進行HPLC分析。

本實驗所使用的HPLC分析儀器如下：高效能液相層析系統(廠牌為SHIMADZU，型號為LC-20AT)以及UV偵測器(廠牌為JASCO，型號為UV-1575)，而有關HPLC的各項操作參數與條件被顯示於下面的表1中。表1. HPLC的操作參數與條件

分析管柱	C18管柱 (廠牌為SUPELCOTM，型號為Ascentis®)
管柱規格	25 cm × 4.6 mm
管柱溫度	25℃
樣品注射體積	20 μL
偵測波長	275 nm
移動相	10%乙腈/0.05%三氟乙酸(trifluoroacetic acid)
流速(mL/分鐘)	1.0

結果：

圖1顯示將依據上面實施例1所製得的水萃取物粉末拿來進行HPLC所得到的洗提圖形(elution profile)。從圖1可見，基尖葉野牡丹根的水萃取物在第0至50分鐘的滯留期間出現有3個主要的洗提波峰(分別被標示為波峰a、b以及c)。 實施例 3. 基尖葉野牡丹根的水萃取物 在對抗嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒 2 (SARS-CoV-2) 的感染 上的效用 評估

在本實施例中，為瞭解基尖葉野牡丹根的水萃取物是否具有對抗SARS-CoV-2感染功效，申請人將之拿來進行抑制棘蛋白(spike protein, S)與血管收縮素轉化酶2 (angiotensin-converting enzyme 2, ACE2)之結合的活性分析。 實驗材料 ：

為供比較，申請人大體上依據上面實施例1當中所述方法來製備一基尖葉野牡丹根的甲醇萃取物(methanol extract of Melastoma malabathricumroot)，繼而進行濃縮乾燥，而得到該基尖葉野牡丹根的甲醇萃取物之粉末，不同之處在於：以100%的甲醇來替代純水。 實驗方法：

本實驗是藉由使用AlphaScreen® (Perkin Elmer)來進行棘蛋白-ACE2結合分析(spike-ACE2 binding assay)。首先，將該基尖葉野牡丹根的水萃取物粉末以及該基尖葉野牡丹根的甲醇萃取物粉末分別溶於純水以及100%的甲醇中而各自配製成一濃度為4 mg/mL的儲備溶液(stock solution)。接著，以純水來對該等儲備溶液進行稀釋，藉此而得到如下面表2所示之4種具有不同萃取物濃度的測試溶液。表2. 各個測試溶液所含有的萃取物及其濃度

萃取物	濃度(μg/mL)
水萃取物	160
400
甲醇萃取物	160
400

之後，將10 μL之各個測試溶液以及去離子水(作為對照組)分別添加至96-井培養盤的各井中，繼而加入5 μL之濃度為146.89 nM的His-標籤的人類ACE2蛋白(His-tagged human ACE2 protein)(Sino Biological Inc.)並於37℃下進行培養歷時15分鐘。接著，對各井添加5 μL之濃度為121.36 nM的SARS-CoV-2 Spike RBD-mFc重組蛋白(SARS-CoV-2 Spike RBD-mFc recombinant protein)(Sino Biological Inc.)並於37℃下進行培養歷時1小時，繼而添加10 μL之濃度為20 mg/mL的蛋白A受體磁珠(Protein A acceptor beads)(Perkin Elmer)並於25℃下進行避光培養歷時1小時，接著再添加10 μL之濃度為20 mg/mL的鎳螯合供體磁珠(nickel chelate donor beads)(Perkin Elmer)並於25℃下進行避光培養歷時1小時。

然後，使用EnVision讀取機(Perkin Elmer)並於680 nm的激發波長(excitation wavelength)以及615 nm的放射波長(emission wavelength)下來讀取各井的冷光強度(luminescence intensity)。各個萃取物對於棘蛋白與ACE2之結合的抑制活性百分比(%)是藉由將所測得的冷光強度代入下列公式(1)而被計算出：公式 (1) ： A= [(B-C)/B] ×100其中：A=抑制活性百分比(%) B=對照組所測得的冷光強度 C=各井所測得的冷光強度

此外，50%抑制濃度(50% inhibition concentration, IC ₅₀)是藉由計算各個萃取物抑制活性百分比達50% (與對照組相較之下)的濃度而從所繪製之劑量-反應曲線的線性部份被測定出。

之後，依照上面“一般實驗方法”的第1項當中所述的方法來分析所得到的實驗數據。 結果：

圖2顯示基尖葉野牡丹根的水萃取物以及甲醇萃取物所測得的IC ₅₀(μg/mL)。從圖2可見，水萃取物所測得的IC ₅₀是顯著低於甲醇萃取物所測得者，甚至低至其一半以下。這個實驗結果顯示：基尖葉野牡丹根的水萃物能夠有效地對抗SARS-CoV-2感染，並且此效用是顯著優於基尖葉野牡丹根的甲醇萃取物。 實施例 4. 不同分離部分 (isolated fractions) 的基尖葉野牡丹根的水萃取物 在對抗 SARS-CoV-2 感染上的效用 評估 實驗材料： 1. 製備基尖葉野牡丹根的水萃取物之分離部分：

使用平板過濾器(flat-bed filter)(廠牌為TEFLUX，型號為TX-PFR-1209-POM-FS)並依序以具有300 kDa、100 kD以及10 kDa的分子量截斷值(molecular weight cut off value, MWCO value)的濾膜來對依據上面實施例1所得到的水萃取物進行過濾，繼而收取各個濾液，藉此而得到如下面表3所示之4種含有不同分子量範圍的組分之分離部分(下稱分離部分I至IV)。表3. 分離部分I至IV的組分之分子量範圍

分離部分	組分的分子量範圍(kDa)
I	＜10
II	10-100
III	100-300
IV	＞300

2. 下列假病毒(pseudovirus)是購自於中央研究院RNA技術平台與基因操控核心設施： (1) VSV-G假型慢病毒(VSV-G pseudotyped lentivirus)。 (2) SARS-CoV-2 Spike假型慢病毒(SARS-CoV-2 Spike pseudotyped lentivirus)，其是表現B.1.617.2 (Delta)病毒株的棘蛋白。 實驗方法與結果： A. 棘蛋白- ACE2 結合分析：

為了瞭解不同分離部分的基尖葉野牡丹根的水萃物在對抗SARS-CoV-2感染上的效用，申請人依據上面實施例3的“實驗方法”，將上面“實驗材料”的第1項所得到的分離部分I至IV拿來進行棘蛋白-ACE2結合分析。

下面表4顯示分離部分I至IV所測得的IC ₅₀(μg/mL)。從表4可見，分離部分I至IV皆具有抑制S蛋白與ACE2之結合的活性，其中，分離部分II與III具有較為優異的抑制活性。這個實驗結果顯示：基尖葉野牡丹根的水萃物不同分離部分皆能夠有效地對抗SARS-CoV-2感染，特別是具有分子量落在10至300 kDa的範圍內之組分者。表4. 分離部分I至IV的IC ₅₀

分離部分	IC ₅₀(μg/ mL)
I	51.56±6.61
II	21.54±1.39
III	19.82±0.69
IV	23.18±1.70

基於此結果，在上述4種含有不同分子量範圍的組分之分離部分中，申請人選用效用最佳的兩者(亦即分離部分II與III)作為代表來進行下面第B項的實驗。 B. SARS-CoV-2 假病毒感染分析 (SARS-CoV-2 pseudovirus infection assay) ：

首先，將依據上面“一般實驗材料”的第1項來進行繼代培養的hACE2-HEK293T細胞分成6組，其中包括1個空白對照組、1個病理對照組以及4個實驗組(亦即實驗組1至4)。將各組細胞分別以一為2×10 ⁴細胞/井的數量培養於含有適量DMEM培養基(添加有10%FBS、100 U/mL盤尼西林以及0.1 mg/mL鏈黴素)的96-井培養盤中，並在培養箱(37℃、5% CO ₂)中進行培養歷時16小時。

接著，將適量之分離部分II與III分別添加至SARS-CoV-2 Spike假型慢病毒中，而使得分離部分II與III分別於濃度為125 μg/mL與375 μg/mL以及溫度為37℃的條件下與SARS-CoV-2 Spike假型慢病毒進行預混合歷時1小時，藉此而得到4種病毒混合液，亦即病毒混合液1至4。有關該等病毒混合液所含有的分離部分及其濃度是如下面表5所示。表5. 各個病毒混合液所含有的分離部分及其濃度

病毒混合液	分離部分	濃度(μg/mL)
1	II	125
2	375
3	III	125
4	375

然後，移除各組細胞培養物中的液體，繼而以一為0.1的病毒感染倍數(multiplicity of infection, m.o.i.)，將病毒混合液1至4分別添加至實驗組1至4中，將含有SARS-CoV-2 Spike假型慢病毒的DMEM培養基添加至病理對照組中，以及將含有VSV-G假型慢病毒的DMEM培養基添加至空白對照組中，來進行感染歷時24小時。

之後，將50 μL的冷光受質(luminescent substrate)(Promega, Cat. No. E2510)添加至各組的細胞培養物中，並於37℃下進行反應歷時5分鐘，繼而使用一微量孔盤分析儀(廠牌為Tecan，型號為Infinite F200 Pro)來測量各組的冷光強度。病毒感染率(%)是藉由將各組所測得的冷光強度代入下列公式(2)而被計算出：公式 (2) ： D ＝ [(E-G)/(F-G)] × 100其中：D＝病毒感染率(%) E＝各組所測得的冷光強度 F＝病理對照組所測得的冷光強度 G＝空白對照組所測得的冷光強度

圖3顯示hACE2-HEK293T細胞在以不同分離部分的基尖葉野牡丹根的水萃取物予以處理後所測得的病毒感染率(%)。從圖3可見，相較於病理對照組，實驗組1至4的病毒感染率皆有顯著的降低，尤其是實驗組2與4幾乎測不到病毒感染。這個實驗結果顯示：基尖葉野牡丹根的水萃取物的這兩種分離部分能夠在對抗SARS-CoV-2感染上展現出劑量-依賴的效用(dose-dependent effect)。

綜合以上的實驗結果，申請人認為：基尖葉野牡丹根的水萃取物及其分離部分能夠有效對抗冠狀病毒(諸如SARS-CoV-2)的感染。

於本說明書中被引述之所有專利和文獻以其整體被併入本案作為參考資料。若有所衝突時，本案詳細說明(包含界定在內)將佔上風。

雖然本發明已參考上述特定的具體例被描述，明顯地在不背離本發明之範圍和精神之下可作出很多的修改和變化。因此意欲的是，本發明僅受如隨文檢附之申請專利範圍所示者之限制。

本發明的上述以及其它目的、特徵與優點，在參照以下的詳細說明與較佳實施例和隨文檢附的圖式後，將變得明顯，其中：圖1顯示將基尖葉野牡丹根的水萃取物之粉末拿來進行高效能液相層析所得到的洗提圖形，其中波峰a、b與c表示在第0至50分鐘的滯留期間所出現的3個主要成份；圖2顯示基尖葉野牡丹根的水萃取物以及甲醇萃取物所測得的IC ₅₀(μg/mL)，其中“***”表示當與甲醇萃取物作比較， p＜0.001；以及圖3顯示hACE2-HEK293T細胞在以不同分離部分的基尖葉野牡丹根的水萃取物予以處理後所測得的病毒感染率(%)。

Claims

一種基尖葉野牡丹根的水萃取物供應用於製備一用來對抗冠狀病毒感染之醫藥品的用途。
如請求項1所述的用途，其中該冠狀病毒是選自於由下列所構成的群組：嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒1型(SARS-CoV-1)、嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒2型(SARS-CoV-2)、中東呼吸道症候群冠狀病毒(MERS-CoV)，以及它們的組合。
如請求項2所述的用途，其中該冠狀病毒是SARS-CoV-2。
如請求項1所述的用途，其中該醫藥品是呈一供一選自於下列的投藥途徑之劑型：非經腸道投藥、口服投藥、呼吸道投藥以及局部投藥。