TWI308591B - Organism-culturing apparatus and organism-culturing method - Google Patents

Description

1308591 玖、發明說明 (發明說明應敍明. 實铯方式及®式簡單說明） 域】 發明所屬之技術領域、先前技術' 内容' 【發明戶斤屬 發明領域 j發明係有關用於培養—生物體组織或_生物體細胞 5之I置與一方法。更詳細地，本發明係有關用於培養一 生物體組織或一生物體細胞之一裝置與一方法，其中匯集 的。養基與一培養組織並不直接接觸，1p i ' 且接接觸其係經由微孔體而 將-培養基供應予―生物體組織或_生物體細胞。 【先前技術】 1〇 發明背景 口近年來在生物科技領域之快速進展，自—特定基因 的表現作用及-特定因子的代謝作用之基礎研究層次之觀 點’及自-工業層次（諸如繁殖—稀有植物、擴大一基因 15 Μ、大量生產一有用物質、縮短一培養期間、保存一基 因來源等等）之觀點而言’生物體組織培養技術的重要性 顯著。 【發明内容】 發明概要 然而，就組織培卷括张& 士 ^ 脣技術而§，在使用固態基質（諸如 一環脂基質）之組織培養中， 瞀1f所培養的組織必須在相當短 的期間内繼代培養於—新 ' 貝中’因為所培養的組織迅

速消耗培養基中的水盥瑩I ，、呂養素，同時所培養的組織將廢物 排至培養基中。此外，在一此 〆 二h况下，培養基在繼代培養 之際受到污毕。:贫坌& . w、μ況下，面臨無法輕易地自組織培 20 1308591 玖、發明說明 養系統中分離出所培養的組織之問題，因為在習知的組織 °養系統中，所培養的組織與培養基直接接觸。再者，在 活細胞之計數中，藉由測量一複脂平板基質上的菌落數目 ，而計數—試樣中的活細胞（諸如細菌）數目。但是，在諸 ^乳酸菌之類細㈣情況下’則無法依此進行’因為該等 細=有高度酸性的生長pH質範圍，因此在該情況下，因 為壤脂的性質而無法將基f固化製成_填脂平板基質。 10 15 此外’發現微生物生存於嚴苛的環境中，諸如高壓、 低壓、強酸、強鹼、高溫、低溫、高鹽濃度、無氧條件、 有氧條件、輻射、-有機溶劑等等（嗜高墨性 '嗜酸性、 嗜驗性、嗜高溫性、嗜冷性、高度嗜鹽性 '抗有機溶劑性 心㈣等及已知其等製造有用的物質⑽如 酵素等），該物質即使在該等嚴苛的環境條件下亦 f軍作用。因此’預期藉由培養該等微生物而分離出 "有用物質，以工業應用於多種 培養該等微生物之培養裝置與方法。而要發展適用於 婉由本Γ者就前述問題進行深入研究，結果發現可藉由 • U微孔體將-培養基供應予所培養的_ 而H亥等問題’其進而完成本發明。 亦即，就第一部份.而 裝置，其包括m 本發咏供⑴-生物體培養 „ 〇 < 土、—個具有吸水能力的微孔體（其 邛份浸於培養基中）_ '、 ^(含有至少—部份的培養基 …玄螆孔體），其中該培養 微孔體内部的傳輸孔吸引作用之 寻輸孔白上輪适’以將培養基 20 1308591 玖、發明說明 孔體表面之一生物體組織或— 物體組織或生物體細胞。 生物體細胞，藉此培養該生 5 此外，就第二部份而士，士 而3本發明提供（2)依據（1)之生 物體培養裝置，立中哕外n丄 孔體具有直立式®柱型或柱型之 形狀 此外，就第三部份 而言，本發明提供（3)依據（1)或（2) 之生物體培養裝置，其中該 城孔體包括一圓柱型或柱型部 件：及自該圓柱型或柱型部件持續向上之一盤型部件(其 外徑大於該圓柱型或柱型部件），其中該盤型部件的中心 10 15 凹進’其中該盤型部件的-部件係於其直徑方向突出及1 外徑大於-容器開口之外徑，及該微孔體係藉由該突出部 件的底部與該容器開口的周界之接觸，而由該容器支撐。 此外，就第四部份而言，本發明提供（4)依據⑴至⑶ 中之任纟之生物體培養裝置，其中該微孔體係一種非金 屬無機固態材料之燒製產物。 此外，«五部份而言，本發明提供（5)依據⑴至⑺ 中之任—者之生物體培養裝置，其中該微孔體係-種開孔 型塑膠發泡體。 此外，就第六部份而言，本發明提供（6)一生物體培養 2〇裝置’其包括-培養基、一個具有吸水能力的微孔體、— 個與微孔體連接之中間體（其可藉由中間體的一部件與培 養基之接觸而將培養基供應予微孔體）及一容器（含有至少 一部份的培養基與該微孔體），其中經由中間體供應之該 培養基係經由具有毛細吸引作用之微孔體内部的傳輸孔向 1308591 玫、發明說明 上輸送’以將培養基供應予置於微孔體表面之一生物體組 織或一生物體細胞，藉此培養該生物體組織或生物體細胞。 此外，就第七部份而言，本發明提供（7)依據（1)至（6) 中之任一者之生物體培養裝置，其中該生物體組織或生物 5體細胞係植物、真菌或細菌之一組織或細胞。 此外，就第八部份而言，本發明提供（8)一種培養一生 物體之方法，其包括經由具有吸水能力的微孔體（其一部 份浸於培養基中）内部的傳輸孔而向上輸送一培養基，以 將培養基供應予置於微孔體表面之一生物體組織或一生物 10體細胞，藉此培養該生物體組織或生物體細胞。 此外，就第九部份而言，本發明提供（9)如（8)之培養 生物體方’去其中該生物體組織或生物體細胞係植物、 真菌或細菌之一組織或細胞。 15 在此除非另外說明之，否則諸如動物、植物、真菌或 細菌等之-生物體或生物體组織，係統稱為一生物體組織 。此外’該組織藉由—酵素處理所製備之個別的細胞，係 稱作一生物體細胞。吐冰 * .. 此外，含有多種基質成份（諸如營養 素、缓衝劑、黏度調替杳丨 „ ^ 杬生素、滲透壓調節劑、酵素 、天然物質（諸如酵母g贫 甘鹵卒取物）、調節劑（諸如植物荷爾蒙 )、胺基酸、維生素算彳夕— '、.）之一培養基，係稱作一培養基。 如本發明的第九邱 刀’可降低培養基的消耗，因為藉 由微孔體的毛細作用彳I g & & & 户用僅k供该生物體組織—所需量的培養 基’其係相較於習知的 〕杧養系統而言（其中藉由將生物體 組織與培«直接接^培養之）。 20 1308591 玫、發明說明 此外，在本發明之裝置與方法 動之所需科柞m. 降低诸如攪拌與振 * 為該生物體組織係於匯集的培参A之外 及於微孔體之上培養，藉此得以充分供 織所需的氣體(諸如氧氣)。 "生物體組 5 10 15 20 =，在本發明之裝置與方法中，可降低所需的繼代 < ^ ®為所排出與累積於該生物體組織附近的廢 亦^微孔體触至料基及於其中被_。因此， 具有別述效果之本發明的裝置與方法中，可避免在繼代 培養操作時可能引起的 ， 中而無須繼代培養。 及了長期間培養於-培養基 此外，即使當培養基受到微生物等之污染時，生物體 料並未受到污染’或至少延長生物體組織受到污染之前 之時間’因為培養基係經由微孔體而供應至該生物體組織 ’精此可在生物體組織受到污染之前將其轉移至新的培養 基中，以避免生物體組織本身受到污染。 此外’使得不受到pH值、溫度、高|、低塵、培養基 成份、紫外線、輕射等影響之壤脂平板培養變得可行，·藉 由將經殺g的微孔體置於培養容”，然後在其中倒入= 養基即可進行培養，㈣彡請行心㈣化或固化作用。 任擇=可藉由將浸於培養基中的微孔體以無菌方式轉移 至-清潔的實驗臺，諸如將微孔體無菌包裝於一個殺菌軟 袋之類中，及在清潔的實驗臺開啟及置入培養容器中，而 輕易地培養生物體組織。 更詳細地’如本發明的第二部份，#由使用可輕易製 J0 1308591 玖、發明說明 可降低生物體培養裝置之製造 成的圓柱型或柱型微孔體 成本。 此外’如本發明的第三部份，藉由使用包含一盤型部 分之微孔體(其直徑大於該圓柱型或柱型微孔體的直 使得生物體組織之長時期培養或大量培養變得可行。 此外，如本發明的第四部份，藉由使用-種非金屬盈 機固態材料之燒製產物作為微孔體，可提供具有極佳的; 成形性、耐久性及輕質的生物體培養裝置。 10 15 此外，如本發明的第五部份，藉由使用開孔型塑踢發 泡體作為微孔體，本發明的生物體培養裝置可應用於多種 用途，因為其具有極佳的可塑性，其可形成多種形狀及其 可製成輕質的微孔體。 此外’如本發明的生物體培養裝置可成形為一薄小形 狀以適用於諸如在太六 太工站的裱境（其中培養面積及該裝置 的重量受到限制）下之培養，因為可將上述的一種非金屬 機口先、材料之燒製產物或開孔型塑膠發泡體成形或模塑 成尺寸更小者。 此外’如本發明的第六部份，即使當培養基被消耗（ 其表面降低）時，可拉绩 了持續地將^養基供應至微孔體與生物 體組織’ If此可進杆具里 長d k養’因為即使當微孔體並未與 培養基直接接觸時， ° 土仍經由中間體而供應至微孔體 =物體㈣。此外’自培養襄置之設計觀點而言，可增 進5又相谷益之自由度，因為就微孔體與該容器的相對位 置而έ已有較大的彈性。 20 1308591 玖、發明說明 此外’更詳細地’相較於動物之一組織或一細胞而言 植物、真韌或細鮰之一組織或一細胞的代謝率與生長率 較低。有鑑於此，不可能在單一培養基中長期培養植物、 真菌或細菌之組織或細胞，因為習知培養基（諸如一瓊脂 5培養基）的壽命因培養基乾燥之故，而比所培養的組織或 細胞之壽命短。此外，在液態培養中之培養作用雖可持續 奴長時間，但除了需要振動之外，亦因所培養組織或細 胞附近的環境之劇烈變化而存在產生壓力之風險，及可能 在替換培養基之際造成污染。如本發明的第七部份，可培 W養生物體組織或細胞-段相當長的時間而無須繼代培養或 更換坨養合器，因為培養基係持續地供應至該培養裝置之 微孔體。因此，可提供一培養裝置，藉其可更方便地在單 。養操作中或自植物、真菌或細菌之—組織或—細胞萃 取一有用物質之際，獲得更大量的有用物質；及藉此可僅 15錢分化作用之後藉由替換培養基而進行調理操作，特別 是在無移盆種植操作下培養一植物之情況。 此外’如本發明的第八部份，可提供具有前述優點之 一種生物體培養裝置。 20

有，更詳細地，相較於動物之一組織或-細胞 ’植物'm細菌之_組織或_細胞的代謝率與幻 較低。有鑑於此，不可能太留一&总*山 ^ 在早一坨養基中長期培養植步 真菌或細菌之組織或

々、田肥，因為習知培養基（諸如一王I 培養基）的壽命因捭| | u 口養基乾爍之故’而比所培養的組錯 細胞之壽命短。壯休 , 此外，在液態培養中之培養作用雖可揭 12 1308591 玖、發明說明 亦因所培養組織或細 —段長時間’但除了需要振動之外 5 10

胞附近的環境之劇烈變化而存在產生麼力之風險，及可能 在替換培養基之際造成污染。如本發㈣第九部份，可培 養生物體組織或細胞-段相#長的時間而無須繼代培養或 更換培養容器，因為培養基係持續地供應至該培養裝。置之 微孔體。因此，可提供—培養方法，藉其可更方便地在單 一培養操作中或自植物、真菌或細菌之-組織或一細胞萃 取一有用物質之際’獲得更A量时用㈣；及藉此可僅 ^再分化作用之後藉由替換培養基而進行調理操作，特別 疋在無移盆種植操作下培養一植物之情況。 圖式簡單說明 一透視圖 其顯示本發明的培 一透視圖 ’其顯示本發明的培 一透視圖 ，其顯示本發明的培 一透視圖 ，其_示本發明的培 一截面圖 ，其顯示本發明的培 一截面圖 ，其顯示本發明的培 一照片， 其頒π在本發明的培 第1圖係自上視觀點之 養裝置之一實施例。 第2圖係自上視觀點之 15 養装置之另·一實施例。

第3圖係自上視觀點之 養裝置之另一實施例。 第4圖係自上視觀點之 養裝置之另一實施例。 20 第5圖係自側視觀點之 養裝置之另一實施例。 第6圖係自側視觀點之 養裝置之另一實施例。 第7圖係取代一圖式之 13 1308591 玖、發明說明 養裝置ι(含有一培養基與一植物荷爾蒙）萌芽之—终草（紅 花終草（Wcoit’ana iti&acMm))種子。 第8圖係取代一圖式之一照片，其顯示播種1〇天後之 於草（紅化於早Mhacwm))癒合組織，立传生長 5於本發明的培養裝置1(含有一培養基與一植物荷爾蒙）。 第9圖係取代一圖式之一照片，其顯示播種％天後之 一菸草癒合組織，其係生長於本發明的培養裝置1(含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 第10圖係取代一圖式之一照片’其顯示播種2 8天後之 10 一菸草癒合組織’其係生長於本發明的培養裝置丨（含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 第11圖係取代一圖式之一照片’其顯示播種3 2天後之 一菸草癒合組織，其係生長於本發明的培養裝置丨（含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 15 第12圖係取代一圖式之一照片，其顯示在本發明的培 養裝置1(含有一培養基不含一植物荷爾蒙）萌芽之一菸草種 子。 第13圖係取代一圖式之一照片，其顯示甫置於本發明 的培養裝置2(含有一培養基與一植物荷爾蒙）之一菸草幼苗 20 的一葉片與一尖端。 第14圖係取代一圖式之一照片，其顯示在置於本發明 的培養裳置2(含有一培養基與一植物荷爾蒙）ι〇天後之一终 草癒合組織。 第15圖係取代一圖式之一照片，其顯示在置於本發明 14 1308591 玖、發明說明 的培養裝置2(含有一培養基與一植物荷爾蒙）33天後之—终 草癒合組織。 第16圖係取代一圖式之一知、片’其顯示在置於本發明 的培養裝置2(含有一培養基與一植物荷_蒙）56天後之—养 5 草癒合組織。 第17圖係取代一圖式之一照片，其顯示在置於本發明 的培養裝置1(含有一培養基與一植物荷爾蒙）35天後之—草 莓（智利草莓（Fragar/a c/u’/oeni·/·?))花藥。 第18圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 10 瑰黃色卵孢子菌在本發明的培養麥置2 播種26小時後之真菌群落。 第19圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 塊黃色卵孢子菌在本發明的培養裝置2 播種49小時後之真菌群落。 15 帛2〇圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 瑰黃色卵孢子菌r£^ey7flVfl!))在本發明的培養裝置2 播種73小時後之真菌群落。 第21圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 瑰育色卵孢子菌（〇0邛〇/^在本發明的培養裝置2 20播種91小時後之真菌群落。 第22圖係取代一圖式之一照片，其顯示金兹（金針兹 (F/ammWna以/⑹如川在本發明的培養裝置2播種1〇天後 之真菌群落。 第23圖係取代—圖式之一照片，其顯示金兹在本發明 15 1308591 玖、發明說明 的培養裝置2播種11天後之真菌群落。 金菇在本發明 金兹在本發明 第24圖係取代一圖式之一照片其顯示 的培養裝置2播種13天後之真菌群落。 第25圖係取代一圖式之一照片，其顯示 的培養裝置2播種14天後之真菌群落。 其顯示金菇在本發明 弟26圖係取代一圖式之一照片 的培養裝置2播種16天後之真菌群落 10 第27圖係取代一圖式之一照片， 菌在本發明的培養 之細菌群落。 其顯示細菌（枯草桿 裝置2接種66小時後

第28圖係取代一圖式之—照片，其顯示細菌（枯草桿 菌似似如7⑷）在本發明的培養裝置2接種1〇9小時後 之細菌群落。

第29圖係取代一圖式之一照片，其顯示長枝膝梗抱菌 15 (⑺町如以㈣被接種在本發明的培養裝置2 中的培養基上55天後之真菌群落。 第30圖係取代一圖式之一照片，其顯示長枝膝梗孢菌 (Gow;yiric/iwm macroc/i^wm)被接種在本發明的培養裝置2 中的培養基上5 5天後之真菌群落。 20 【實施方式】 較佳實施例之詳細說明 如下參照第1至6圖說明本發明的生物體培養裝置之實 施例。 首先，如第】圖所示，本發明的生物體培養裝置之第 16 1308591 玖、發明說明 一實施例，係一個包括一匯集的培養基3及一圓柱型或柱 型微孔體2(其自該生物體培養裝置1的底部向上直立）之生 物體培養裝置，其可藉由將一生物體組織或一生物體細胞 4置於該微孔體之一表面上且無浸入該匯集的培養基，而 5 將其增殖、去分化、分化、再生、保存、選擇、分離或交 叉培養。

對於用於該生物體培養裝置中之培養基3並無特別限 制，可使用任一培養基，前提在於其等可增殖、去分化、 分化、再生、保存、選擇、分離或交叉培養該生物體組織 10 或生物體細胞。例如，其等的實例包括用於一植物組織之 一培養基，諸如：MS(Murashige-Skoog)培養基、B5培養 基、W培養基、NT培養基、Kao8P培養基、LS培養基、Η 培養基、KC培養基、ΗΒ培養基、WPM、卡薩尼斯 (Kassanis)培養基、尼爾森氏（Neelsen)培養基、加爾濟 15 (Galzy)培養基、尼區與尼區氏（Nitsh & Nitsh)培養基、諾 許（Noushi)培養基等，其中可視目的添加多種植物荷爾蒙 、胺基酸、維生素、抗生素、滲透壓調節劑、缓衝劑、天 然物質（諸如酵母菌萃取物）或酵素；用於一動物組織之一 培養基，諸如：199培養基、基礎型伊格爾（Eagle)培養基 20 (MEM)、杜貝可（Dulbecco)改良型基礎伊格爾培養基 (DMEM)、RPM1640、漢姆氏（Ham) F12 培養基、MCDB 104培養基、MCDB 153培養基、ES培養基、MEM1、 DEMEM1、DEMEM2等，其中可視目的添力口多種胺基酸成 份、維生素、酵素（諸如胰蛋白酶）、抗生素、滲透壓調節 17 1308591 玖、發明說明

劑、緩衝劑、天然物質（諸如酵母菌萃取物與血清）；用於 一真菌之一培養基，諸如：改良型歐塔（Ohta)培養基、濱 田氏（Hamada) EBI0S-葡萄糖培養基、Μ培養基、MYP培 養基、PDA培養基、歐塔（Ohta)培養基、莫扎爾（Mozel) b-5 培養基、用於接合之偉賽爾與尼德普龍（Wessel & Niderpruem)基礎型培養基、卡路許與達科斯塔（Kerruish & Da Costa)培養基、古迪與路齊投赫（Goodey & Lucetohole) 培養基、察派克（Czapek)培養基、酵母菌浸液培養基、衛 克漢（Wickerham)合成培養基、MY培養基、燕麥粉培養基 10 、歌羅科娃（Gorokowa)改良型培養基、克里斯潭森氏 (Christensen)尿素培養基、漢納堡（Henneberg)培養基、察 派克-道克斯（Czapek-Dox)培養基、佑辛斯基（Uschinsky)培 養基、用於厭氧性真菌之硫代羥基乙酸鹽培養基、克萊 (Kleyn)乙酸鈉培養基、酵母菌完全型合成培養基（衛克漢 15 (Wickerham)培養基）、琥珀酸鹽-硝酸鹽培養基、歌羅科娃 (Gorokowa)培養基、玉米粉培養基、硝酸鹽培養基、弗衛 爾（Fowells)醋酸納培養基、林德根（Lindergen)培養基等， 其中可視目的添加多種胺基酸、維生素、酵素、抗生素、 滲透壓調節劑、緩衝劑、天然物質（諸如酵母菌萃取物）； 20 用於一細菌之一培養基，諸如：馬鈴薯蔗糖培養基、BL培 養基、CW培養基、改良型CCFA培養基、B-CYEa培養基 、WYOa培養基、DNase培養基、PS膠乳培養基、TCBS 培養基、BGLB培養基、EC培養基、CVT培養基、EMB培 養基、BCM 0157培養基、NAC培養基、OF培養基基質、 18 1308591 玖、發明說明

右旋糖-膦酸化物-蛋白腺培養基、羅素（Rusell)培養基、克 林格勒（Kligler)培養基、TSI培養基、SIM培養基、昔蒙斯 (Simmons)擰檬酸納培養基、丙二酸鹽培養基、尿素培養 基、克里斯潭森氏（Christensen)尿素培養基、離胺酸鐵瓊 5 脂培養基、用於試驗離胺酸脫碳作用之培養基、LIM培養 基、OIML培養基、VPOF培養基、SS培養基、SS-SB培養 基、邁康基（McConkey)培養基、DHL培養基、亮綠培養基 、XLD培養基、雷派波特（Rappaport)培養液、海吉娜 (Hajna)連四硫酸鹽培養液基質、亞硒酸鹽培養液基質、 10 SBG硫培養液基質、連四硫酸鹽培養液、EEM培養液、心 浸液培養液、腦心浸液培養液、S C E)培養基、S C D L P培養 基、BTB乳糖培養基、卓蓋斯基（Ddgalski)培養基、 SCDLP培養液、乳糖培養液JP培養基、用於產甲烧細菌之 牛糞、用於高度嗜鹽性細菌之MS-1培養基（1.5%酪蛋白胺 15 基酸、0.01%半胱胺酸、0.01%色胺酸、0.05%檸檬酸鈉、 0.2%琥珀酸鈉、0.05%正磷酸二鉀、0.05%磷酸二氫鉀、 30.01% KNO、2.0%硫酸鎂七水合物、0.005%硫酸鐵七水 合物、22-26%氯化鈉）、MS-2培養基（0.5%酪蛋白胺基酸、 1.0%酵母菌萃取物、0.5%蛋白腺、0.3%檸檬酸鈉、0.5% 20 氣化鉀、2.0%硫酸鎂七水合物、0.005%硫酸鐵七水合物、 25%氯化鈉）及MS-3培養基（1.0%酵母菌萃取物、0.5%氯化 鎂六水合物、0.5%氣化銨、25%氣化鈉）、用於嗜鹼性與高 度嗜鹽性細菌之MSA-4培養基（1.0%蛋白腺、1.0%酵母菌 萃取物、0.3%檸檬酸鈉、2.0%硫酸鎂七水合物、0.2%氣化 19 1308591 玖、發明說明

钾、5.0% NaC03 . 10H2O ' 25%氯化鈉）、用於嗜熱性與邊 酸性細菌之YSG培養基、MH-1培養基（每丨公升蒸餾水含有 1·〇克酵母菌萃取物、1_0克胰化鰊、30克氣化鈉、35克硫 酸鎂七水合物、2.8克氣化鎂六水合物、2.〇克硫酸鐵七水 5 合物、〇·33克氯化鉀、0.2克氯化錢、50毫克漠化鈉、2〇毫 克硼酸、0.5毫克磷酸二氫鉀、7.5毫克氣化勰六水合物、 毫克硫酸錄、0.1毫克鶴酸納二水合物、50毫克蛾化钟 、〇·75克氣化鈣二水合物、2毫克氣化鎳六水合物、1毫克 刃天青、10毫升微量成份溶液（每1公升蒸餾水含有1 5克硝 10 基三乙酸、3克硫酸鎂七水合物' 0.5克硫酸猛七水合物、

1克氣化鈉、0· 18克硫酸鋅七水合物、1 〇毫克硫酸鋼五水 合物、20毫克硫酸銘钾七水合物' 1 〇毫克棚酸、1 〇毫克物 铜酸納一水合物、25¾克氣化錄六水合物、0.3毫克亞石西 酸納五水合物）、25克硫族、25克硫化鈉六水合物）、MH-2 15 培養基（0.01%酵母菌萃取物、0.01%路蛋白胺基酸、0.1% 碳源、0.2%氯化鈉、0.03%磷酸二氫鉀、0.13%硫酸銨、 0.025%硫酸鎂七水合物、0.005%氣化約二水合物、葡萄糖 )及用於嗜熱性古細菌之MH-3培養基（每1公升蒸餾水含有5 克貝可托（Bacto)蛋白腺、1克貝可托（Bacto)酵母菌萃取物 20 、〇.1克以(：5^07、19.45克氯化鈉、5.9克氯化鎂、3.24克 硫酸鈉、1.8克氯化鈣、0.55克氣化鉀、0.16克碳酸氫鈉、 0-08克溴化If ' 0.034克氣化鎖、0.022克棚酸、0.004克石夕 酸鈉、0.0024克氟化鈉、0.0016克硝酸銨、0.008克正磷酸 二鈉' 10克酪蛋白或澱粉）。 20 1308591 玖、發明說明 接著，對於本發明的生物體培養裝置中所用之1有吸 T能力的微孔體2並無特別限制，可使用任一微孔體，前 提在於其等在20。(：之吸水能力可留置〇〇〇5至5〇〇(重量/重 量)，，較佳讀至·(重量/重量）倍，更佳〇25至5〇(重量/ 5重量）倍，及最佳〇.05至5(重量/重量）倍的水量；及其所呈 有的傳輸孔之錄為0.02至9〇〇微米，較佳〇 〇5至8〇微米:、 更佳〇.1至9微米，最佳0.2至3微米，及其相對於微孔體的 孔率（體積/體積）為0.05L，較佳〇2至〇.4。依此方式，即 使當培養基受到病毒、細菌、絲狀真菌、藻類或原生動物 1〇之污染’藉由調整微孔體的孔徑與孔率，可藉由微孔體的 過效應而使得該等微生物無法觸及所培養的生物體組織， 或者該等微生物需-段長時間方能觸及所培養的生物體組 織，或者在該其將藉由將生物體組織轉移至另一培養裝置 中，而使彳于生物體組織本身免於受到污染。 15 &夕卜，微孔體較佳不僅具有前述特性，亦具有抗高溫 與尚壓殺菌處理（諸如高壓爸之處理）及抗強鹼、強酸、高 皿、低溫、南鹽濃度、高壓、低壓、有機溶劑、輻射或施 用重力條件等之性質m體的實例包括依據習知方法藉 由揉捏、成形與燒製非金屬無機固態材料（諸如10號黏土 2〇 、2 號黏土（Shiroyama Cerapot)及村上（Murakami)黏土（生 產於日本新瀉縣））所製得的多孔體，以及開孔型塑膠發泡 體材料（諸如聚乙烯醇發泡體、聚胺酯發泡體、聚苯乙烯 發泡體、氣乙烯樹脂發泡體、聚乙烯發泡體、聚丙烯發泡 體、苯酚樹脂發泡體及尿素樹脂發泡體）。更詳細地，當 21 1308591 玖、發明說明 以非金屬無機固態原料製成微孔體時，其輕易地吸收與釋 出水。所燒製的該等原料較佳含有例如50至60重量％的葉 長石與氧化鋁。一般而言，該葉長石較佳含有76 81重量％ 的二氧化矽，16.96重量％的三氧化二鋁，4〇3重量％的二 氧化鋰’ 0.26重量％的氧化鉀及194重量％無法免除的雜質 此外’非金屬g機固態原料可含有伞分末狀無機發泡體。 再者’本發明的生物體培養裝置中之微孔體係由一非金屬 無機材料所組成，當其吸水時，其強度不會降低及其形狀 不會改變。 10 15 20

就-非金屬無機固態原料的成形方法而言’技藝中己 知多種成形方法，諸如鑄造成形 '擠製成形、壓製成形及 陶輪成形方法。更詳細地’自大規模生產與降低成本之觀 點而言’以擠製成形方法為較佳者。此外，在成形作用之 後’可使㈣藝巾料之—財法與條件騎麟。在燒 製作用係以習知條件與方法進行之前提下，對於—成形物 體的後續燒製作用並無特別限制。例如，可選擇氧化燒製 作用’而輕易地獲致所欲的孔隙。燒製溫度為_至 屬。C，較佳為至⑽。C，更佳為U5(rc至12贼 ’最佳為120(TC。當—韭Α ® 非金屬無機固態原料的燒製溫度低 於麵。C時，硫組份容易留存；反之，當—非金屬無機固態原 料的燒製溫度高於2_1時，則無法獲致所欲的吸水性質。 ^一方面’就由―開孔型塑膠發泡體所組成的微孔體 之核每方法而言’例如，且女 具有嘁熔發泡模鑄、固相發泡模 鑄及洗铸發泡模鑄方法。 22 1308591 玖、發明說明 融溶發泡模鑄方法中 之主要步驟包括揉捏、模鑄—未 發泡板、熱發泡或擠製發泡、"、㈣ 固相發泡模鑄方法中，—兮人你产旧4』 聚口物在固相或接近固相之狀態 發/包。此外’在洗鑄發泡模镇方、、木ψ Α c , 匕褀鑄方法中，當—液態原料（單 5 體或募聚物）在空 成工乳中反應之際，將其逢鑄與發泡。為了 發泡形成—開孔型塑膠發泡體，-般使用一發泡劑。 此外，微孔體2具有—圓柱型或柱型之形狀；一個包 括圓柱i或柱型部件及自該圓柱型或柱型部件持續向上之 10 一盤型部件（其外徑大於該圓柱型或柱型部件）之形狀，其 中S亥盤型部件的中心凹進一 次構4，其中在該盤型部件 的凹進底部配置—立I*几山仏 凸出物或凹狀物，以依培養目的增 加比表面積。 15 20 培養基3係與—部份的微孔體2接觸，該培養基係因微 孔體㈣所具有的毛細作用而經由微孔體内部的傳輸孔向 '及七、應至一生物體組織或-生物體細胞4，該生 物體細胞4係被置放於該匯集培養基的外表面上，藉此引 發-生物體組織之增殖、去分化、分化、再生、保存、選 擇、分離或交叉培養。再者，如本發明的實施例，在培養 之初±物體組織或細胞係播種於微孔體上而不與培養基 接觸，但有時當其長大時會在培養過程中與匯集的培養基 接觸。 在可藉由蓋6 ’例如料，封閉容器開口而將培養基3 與生物體組織或生物體細胞4與容器外界隔離之前提下， 含有至少-部份的前述培養基3與微孔體2之一容器5係足 23 1308591 10 15 玖、發明說明 夠的。該容器較佳能抗离、、w 之處理)及各稀…。〜 殺菌處理(諸如高壓爸 之處理）及各種料條件料養基條 高溫、低溫、高鹽濃度、高麼 ：,、強酸、 施用重力條件等），1材辑… 有機;谷劑、輻射或 ，、材科與性質可得 狀態，其係由一般作•'介硯察培養 、塑膠及乙埽聚合物之類^材科（诸如玻璃 成及具有諸如圓柱型、平 底燒瓶型、杯f、格構型及平主I心狀。此外，當以一 特疋氣體取代空氣而培養—生物 物體、、且織或一生物體細胞時 ，及當加壓或減壓一容器中氣 轧體而培養一生物體組織或 一生物體細胞時，提供具有可咬合之_螺紋機_之一以 =一容器7’藉此即使在加愿或減壓條件下，亦可使該容 抑的内。[5封閉’及具有如第2圖所示之添加管％當以一特 定氣體取代容器中之空氣時，提供二或多個添加管）。再 者’當藉由施加重力而培養一生物體組織或-生物體細胞 時，或自微孔體收集所培養的一組織或一細胞所釋出的成 伤時’可使用離心管作為_容器及使用如第3圖所示之一 蓋。

當使用本發明的生物體培養裝置培養一生物體組織時 ’通常進行下列操作。 首先，經由開口7將培養基3與微孔體2置入一容器5中 ，谷器開口 7係以塞6(諸如鋁箔、棉花塞、矽氧樹脂塞、 橡膠塞及軟木塞）封閉’及確認培養基3被整體的微孔體2 吸收，之後該生物體培養裝置進行高溫與高壓殺菌處理（ 诸如高壓爸之處理）。任擇地，該生物體培養裝置可進行 24 1308591 玖、發明說明 非加熱式殺菌處理（諸如紫外線殺菌處理）。 ;然後，將生物體培養裝置i冷卻至室溫，在無菌條件 下（諸如在清潔的實驗臺）移除塞6 ,然後由嫻熟技藝者藉由 熟知方法，使用諸如鑷子、吸量管、白金環及白金針之一 5 10 設備，將事先經殺菌處理的-生物體組織或—生物體細胞 4置於微孔體2的表面上。之後，再度以—塞將開口7封閉 ’及藉由在適宜條件下將該培養裝置靜置，而培養—生物

體組織或-生物體細胞4。X，雖然本發明的培養裝置因 有供應-生物體組織或細胞所需的適宜氣體所以其優異功 效係呈現在靜置培養，但是可依據培養目的將該裝置振動 、離心等。 t六且W力一） 15 20

器中之培養基3分別進行高溫與高壓殺菌處理或乾熱㈤ 處理，及在無菌條件下將培養基3注入容器5中，而使得片 養基3被整體的微孔體2吸收。任擇地，置於一容考中之德 孔體2與培養基3係分別進行紫外線或r射線殺菌處理，及 在無菌條件下將微孔體2置入含有培養基之一容器中。 在該實施财，微孔體2係直立地配的底部 。然而，在本發明的生物體iiL I1 土视toio養裝置_，微孔體2的一部 份亦可以一種位置關係配置於宏 直β夺态5尹’ #此該部份係與 培養基3接觸或浸於培養。αϊ , 脣丞3尹例如，微孔體可懸掛於容 器5之一側或一上方部份或懸掛於塞6。 任擇地’如第6圖所示，Λ M _ 在微孔體】2的一底部部份提 供由聚乙;fep醉、石厌纖维束、姑迪祕你± a 玻每纖維束或吸水性丙烯酸酯 25 1308591 玫、發明說明 類纖維束所組成之-中間體20，及藉由浸泡一部份的中間 體’培養基13可.經由中間體而滲透進入微孔體中。此外， 该中間體20較佳具有彈性 '然後，藉由使用該中間體，使 得培養基3經由中間體而滲透進入微孔體中，而可賦予微 5孔體尺寸與容器尺寸一定程度的自由度。此外，藉由使用 中間體，使培養基中所含有的可沈殿性組份沈殿於該中 間體上，而阻止該可沈澱性組份沈澱於微孔體的孔中。此 外，微孔體與中間體較佳具有抗熱、低溫、強鹼、強酸、 有機溶劑、輻射、紫外線、壓力及減壓之性質，及其強度 10 可保護其形狀不會因重力而變形。 本發明的生物體培養裝置可用於培養植物組織或細胞 ，諸如種子 '葉 '苗端、莖、根、花藥、花絲、生長點（ 頂芽、側芽、苗端、根端）、腋芽、鱗片、子房、胚珠、 胚芽、知>粉、不定芽、不定胚及一有用樹種之不定根，諸 15如主教花（Λ_ζ·漏加）' 洋蔥（AZZ/wm ce/>a)、大蒜 {Allium sativum)、芽菜raveo/enj) 、 i 荀 〇介！ίϋα^)、製糖甜菜、花椰菜 (Brassica oleracea var. 、球芽甘藍^ o/eracea νπ· vmw/era) ' 結球甘藍（βπ抓_c<3 var. 2〇 capitata)、油茱（Brassica napus)、葛樓子（Carum carvi)、 菊 H (Chrysanthemum morifolium)、斑點毒芽（CommM maculatum)、i 逄（Coptis japonica)、菊苣（CVc/^Wwm intybus)、西葫嚴（Curcurbita pepo)、曼院蘿（Datura meteloides) ' 蜗籮蔔（Daucus carota)、康乃議：（Dianthus 26 1308591 玖、發明說明 caryophyllus)、^ 參、Fagopyrum acwZenium)、窗香 (Foeniculum vulgare)、草毒（Fragaria chiloensis)、大立 (G/yc/we m";^)、風信子⑺仏）、甘藷 (/po/npea办如如似）、萵苣如如以）、牛角花

5 corniculatus、Lotusi japonicus)、番祐（Lycopersicon esculenthum) @ ^ {Medicago sativa)、洛草（Nicotiana iahacMm)、稻米sativa)、跋許（Petroselinum hortense)、W 立（Pisum sativum)、故洗（Rosa hybrida)、H 子（So/flnwm me/owgena)、馬龄著（5^/。仙/77 、小 10 麥（TWhcMm 、玉米（Zea mays)等；一種觀葉植物 諸如金魚草（Ani/rr/nnwm mWw)、鼠耳水芹（ArflZ?/心p… thaliana)、巴豆（Codiaeum variegatum) ^ %· ^{Cyclamen persicum)、大钱（Euphorbia pulcherrima)、非洲大了葡 (Ger^ra 、太陽花anmms)、天竺葵 15 ZiorMrwm)、矮牽牛花（Peiwn/a 、非

洲紫堇（hi.nipaM/k，· inoatha)、蒲公英（Tbrajcacwm 〇j(/Vcina/e)、蝴蝶草（Tbren/a /owrwier/)、荷蘭三葉草 (TW/o/z’wm repens)、籣屬（CymZ?油’wm)等；一種有用樹種諸 如印苦楝樹（Λζα山Vac/ιία 、橘（C7irwi)、一般咖啡 20 (Co价e flmMca)、多枝桉（jEMCfl/ypiMS)、巴拉橡勝樹（//心⑽ brasiliensis)、冬青（Ilex aquifolium)、故（poncrius ί厂、甜扁桃樹（Prwnws 、卡羅來納楊樹 (jRopw/wS <：β77αύ^ηΛ7·5·)、側柏（β/οία 〇η·θ7ϊίβ//Λ·)、曰本雪松 (Cryptomeria japonica')、挪氣雲衫（Picea abies)、松屬 27 1308591 玖、發明說明 (Pinus) ' ^ ^ ^(Vitis vinifera)、蘋果（mfl/似 、山

杏（Primus armeniaca)、{Diospyros kaki) ' 無花果 carica)、板栗（CaiTimea crenaia)等；一種動物細胞諸如肺 纖維母細胞、表皮角質化細胞、黑色素細胞、皮膚纖維母 5 細胞、支氣管上皮細胞、支氣管平滑肌細胞、近端泌尿小 管的上皮細胞、大腦皮層上皮細胞、腎間隔細胞、細支氣 管上皮細胞、星形膠質細胞、臍帶血管的内皮細胞、冠狀 血管的内皮細胞、冠狀企管的平滑肌細胞、滑膜細胞、主 動脈的内皮細胞、主動脈的平滑肌細胞、肺動脈的内皮細 10 胞、肺動脈的平滑肌細胞、肺微血管的内皮細胞、皮膚微 血管的内皮細胞、縣内皮細胞、新生兒微血管的内皮細胞 、人髮表皮乳突細胞、軟骨細胞、牛冠狀動脈的内皮細胞 、牛冠狀動脈的平滑肌細胞、雞主動脈的平滑肌細胞、小 鼠大腦微小管的内皮細胞、豬肝巨噬細胞、豬睪丸巨噬細 15 胞、大鼠主動脈的平滑肌細胞、大鼠前脂肪細胞細胞及一 動物（諸如人類（i/omo 、日本獼猴（Macaco; /wscaiii) 、怪河猴（A/acaca 、黑猩獲（Pirn 、獲 (Pongo pygmmaeus) ' 豬（Swn scro/a)、小鼠（Mms mMi'cZwi1)、大鼠nwegicws)、家禽ga/ZMi1))之 20 該類細胞等；一真菌之菌絲體或細胞，諸如金菇 (•F/ammZha ve/wiipes)、香基I ec/oi/es)、真姬兹 (Hypsizygus marmoreus)、# 1¾ (Lyophyllum decastes) ' 滑兹（尸/ϊ〇"·〇ίβ 、墨汁鬼傘（Copr/nMi 、亞碑紅沿絲傘（/Vaemafo/oma sublaterilium)、馬勃 28 1308591 玖、發明說明 (Lycoperdon gemmatum)、赤 I 芝[Ganoderma lucidum)、裂 權镜（Schizophyllum commune)、緣菇（PleurotUs 〇streatus) 、舞菇（Grifola frondosa、、蛤茸（Tricholoma matsutake)、 柱狀田頭菇 、火雞尾（c〇ri〇/Mi 5 veri/co/or)、褐黃色牛肝菌（SM/Z/Mi /Miewi)、落葉松牛肝菌 (SiHm·? 小牛肝菌cav0eiS)、離摺傘菇 (Lyop/iynwm 、白黴菌屬、根黴菌屬、腐化米黴菌 屬、鬚黴屬、麴菌屬（諸如黑麴菌、米麴菌及溜麴菌等）、 青黴屬、鐮刀黴菌屬、木黴屬、念珠菌屬以及酵母菌 10 (Saccharomyces cereWhae)等；一種細菌諸如光合細菌（莫 氏紅螺菌mo心、嗜酸紅假單胞菌 (Rhodopseudomonas acidophila)、萬尼氏多工徽菌 (Rhodomicrobium vanm’e/i·!·)、酒色紅硫菌（C/iromirn'Mm v/n<9iMm)、桃紅色荚硫菌（77n_0Cfl；?ia roieoper们ϋα)、玫瑰 15 板硫細囷（TTi/opeiZ/fli mwii)、土樓綠桿菌

Hm/co/a)、褐弧綠桿菌p/iaeWfez-iWi/ej·)、格形 暗網菌clathratiforme) ' 紫色光合細菌 (£(：ί<3ί/π·〇λ*/ι〇ί/〇·ϊρζ>ίΐ /m/印/π_Ζα))、滑行細菌（褐黏球菌 (AfpiJCOCCMi/M/VM·?)、珊糊黏球菌（A^JCOCOCCMi cona/MWe·?) 20 、柄黏球菌（Mjxococcms 、黃黏球菌（M}?jc6>coccms

XimAw))、有鞘’細菌（浮游球衣細菌ηβία·!?))、 穿殖細囷、具有一附肢之細菌（錄生絲單胞菌 77.e尸、鎮色披毛菌（Ga/Htme/Za /errw尽/nea))、螺旋體 (出血黃疫螺旋體（S/)，>oc/uieia /_crerc)/iaemor/-/7w:ae)、梅毒 29 1308591 玖、發明說明 螺方疋體（Sp/roc/iaeia 、燈黃螺旋體 弧菌屬（办/以/_7)、螺旋或彎·曲型細菌、格蘭氏 陰性細菌、好氧性桿菌或球菌（螢光假單胞菌 /Zworejxew)、綠腹假單胞菌 5 aeaghwa)、卵狀假單胞菌⑽似0να/⑷、葡糖假 單胞囷（Psew^monfl^ g/Mccm/cKma)、稻黃單胞菌 (ZanMomanw oryzaefl)、氧化葡糖酸桿菌（G/MCtm0kcier 似Μ)）、固氮細菌（色球固氮菌 C/ir⑽⑶cCMm)、碗豆根瘤菌▲•峨叫細^如以疆）、 10三葉草根瘤菌（灿iwybh·/)、苜蓿根瘤菌（i?/n.zofc/wm meWim)、菜豆根瘤菌（及画Maw—·)、大豆根瘤菌 (i?/nz〇/?!_ japomcwm)、氮同化細菌（c^m•山_Mm 、甲基單胞菌科（甲烷甲基單胞菌 (Methylomonas methanica)) ' 醋酸細菌（醋酸醋菌 15 (Ace—acier此也)）、兼性厭氧細菌（大腸桿菌（心咖Α/π·« co/i·)、產氣腸桿菌（£wier〇feacier i3er〇geweiy)、傷寒桿菌（傷 寒沙門氏菌（Sa/mone«fl 〇^/π_))、鼠傷寒沙門氏菌 (Salmonella typhimuHumi)、陽良沙 n 氏菌（Saim〇nella 此）、痢疾桿菌（鼠傷寒志賀氏菌（从加… 20 typhimuHumi))、黏質沙電氏菌（Serratia marcescescens)、 普通變形桿菌（Pr〇i⑽㈣如咖）、霍亂弧菌（咐r〇 cW⑽e)、副溶血型弧菌（财ro尸以“北彻⑽·⑽）、厭氧 型細菌（產琥珀酸型擬桿菌（价^:如-0,心5仙cch〇gaa))、好 氧型球菌或球桿菌（金黃色葡萄球菌⑶ap/7v/〇c〇ccw 30 1308591 玖、發明說明 、表皮葡萄球菌（沿αρ/^/0ί：ί)£：ί：ι^ epwer/?n•山·5)、腐 生葡萄球囷（Siap/zy/ocOCCMj· ·5·σ/?"<7/7/ΐ}Ή·(：Μ5·)、釀膿鏈球菌 {Streptococcus 、無乳鍵球菌（S/TepiociJCCM·?

agalactiae)、草綠色鍵球菌（Sae/Jiococcwj1 viWdan·?)、肺炎 5 鏈球 (Streptococcus pneumoniae)、糞腸球菌 (EnierococcM·? /aeca/^e)、糞腸球菌（fnie/OcoccMi /aeci’Mm) 、鳥腸球菌（jEnier<9c<3Ccw5 flvi’wm)、白喉棒狀桿菌 (Corynebacterium diphtheriae)、枯草桿菌（Baci/Zw；? swlui沿）、炭疽桿菌（BacH//i/jrcicii·)、蝶狀芽抱桿菌 10 (Sacd/w cerew)、厭氧型球菌（淋病雙球菌（TVewer/a gonorAoeae))、格蘭氏陰性無機營養型細菌（歐洲亞硝化 單胞菌（iV/iroj'omcmaj· ewrijpaea)、海洋亞硝化單胞菌 (iWiroscoccM·? oceam·)、漢堡硝化桿菌 /zam办Mrge^m'j·)、普通石肖化桿菌（iViiro&acier vm/客aWs)、維氏 15 石肖化桿菌wi’no宏、敦化硫桿菌

Μ/(9(9Λ：3^(3；ΐ·5·))、格蘭氏陽性球菌（楚胺酸發酵 細菌（產麵胺酸小球菌（Mi’C/OCOCCMS g/Miami’CM·?))、金黃色 葡萄球菌（>Sia/7/i)心coccwi1 flMreMS)、乳鍵球菌（57repii?c:occM5· /flcib)、牛鏈球菌（S^epiococcMS hoWs)、突變型鍵球菌 20 (iSirepiococcMs mwyans)、腸繫膜明串球菌（Lewcowosioc mei'enieroWes)、乳酸明串球菌（Ζ^Μί：ί?/ι〇5·ί〇£： Zflciis)、啤酒 片球菌（Peii^(?c£>ccM5· cereWsae)、乳酸片球菌（Ped/ococcw·? «〇'山/«<：)!/(：/)、戍糖片球菌（尸6心<?<：<9(：<：«4/：^7^05^<：己1<5')、戴耳 布呂克氏乳酸桿菌（Lacio&aciZ/w d<?/Z>rwi?c‘A-/·/)、裂乳酸桿 31 1308591 玖、發明說明 逢 （Lactobacillus rimae)、 菊糖芽孢乳桿菌 (Sporolactobacillus /⑽Z/wws)、凝固芽孢桿菌 coa客κΖαη·?)、枯草桿菌（jBflCi’/Zwi· 、多黏桿菌 (·ββ(：///Μ·5· 、軟化桿菌（5β(：ζ_//Μί· maerceran·?)、敏 5 密桿菌（ββί："//^ pycnim'cwj·)、炭疽桿菌（iBacH/Ms imi/zrac/>y) 、丁酸發酵細菌（丁酸梭狀桿菌（C/cmH山_Mm Z?Mi;yr/Mm))、 丙酮-丁醇發酵細菌（乙醯丁酸梭狀桿菌（C/osm·山wm

、產芽抱桿菌（CZoiiW山·ι//η 、 肉毒桿菌botulinum)、產氣莢膜桿菌 10 (C7imr!_山‘Mm per/ri_nge/w)、破傷風桿菌（破傷風梭狀桿菌

(Clostridium ieian!·))、硫還原菌（瘤胃脫硫腸狀菌 (DeiMZ/oiomacw/Mm rwmiWj·))、芽孢八疊球菌（脲芽抱八疊 球菌（5>〇Γ〇5·αΓ<：ί_ηύ! wreae))、與分枝桿菌相關連之細菌（白 喉（白喉棒狀桿菌（Coryne办acrerkm 心/7/ii/ien’ae))、肋膜棒 15 狀桿菌（Co^ynefeacieWMm /fl^ckn·?)、惹薩氏棒狀桿菌 (Corynebacterium rathayi) 、 瘤孢棒 狀 桿 菌 (Corynebacterium sepedonicum) 、 P憙襲十生棒；|史桿菌 (Corynebacterium insidiosum)、 萎蔫 棒狀桿 菌 (Corynebacterium flaccumfaciens)、牛发氮蛰（Actinomyces 20 5·)、皮疽諾卡氏菌（Α^σ<：β/Άα /arc/m'ca)、灰色鍵黴菌 (Sirepiomyces gr/seMS)、枝鍵极函（Sirepiomyces· rameiis)、 委内瑞拉鍵Μ菌（Sirepiomycej· ve«ezwe丨ae)、大宮鏈徵菌 ⑶ombflenA)、金黴素鏈黴菌⑶repi⑽凡以 仙/-印/此/^〇、亞維氏鏈黴菌、 32 1308591 玖、發明說明 路提氏鍵黴菌（Sirepiomyces Zwi/⑽w·?))、嗜高溫細菌（惡性 氣熱囷（AeropyrMm perw/x)、氣生水狀菌（Agwz/ez aeo/Zcwi) 、硫酸根還原古細菌、印熱桿菌 (Bacillus thermoleovorans) 沸騰曱烧棲熱菌 5 (Mei/iimoi/iermw·? /erWi/Mi·)、嗜氣高溫桿菌

aerophilum) ' i'J ί§. # ® (Pyrobaculum calidifontis) ' 島高溫桿菌（P;yr<^acM/Mm ί··5·/ίΐ7ί山·cww)、奥古氏高溫桿菌 (Pyrobaculum ogw/i/ense)、狂暴高溫球菌（P;yr<3c<9CCM5 、何里高溫球菌（PyrocOCCMX /ισηΐοί/ι/ί·)、柯達高 10 溫球菌（jPyrococcws 、新卡高溫球菌 (Pyrococcus 5·/ι!·η灸α))、弗拉高溫裂片菌 /wramrii)、歐巴紅樓熱菌（jR/ioi/oi/iermMS 、斜線 糖多抱菌（SizccaropoZyspora 、嗜酸性高溫浴硫 化裂片菌（SmZ/oZo&ms 、席巴琉化裂片菌 15 (Sulfolobus s/n士aiae)、疏氣孔硫化裂片菌（SwZ/oZo/iMi·

βοΖ/αίατ^Μί·)、特科硫化裂片菌（Sw/yb/i?办 ms ίί?々£?ί/α//)、普通 而ί熱放線菌（r/zermoflci/no/wycej· 、迅速而寸熱球菌 (TTiermococcws ce/er)、柯達耐熱球菌（TTiermococcMS kodakamensis)、海岸而f 熱球菌（Thermococcus litoralis)、 20 深海財熱球菌（r/iermococcMS pro/Mni/MS)、财熱球菌菌種 (TTzer/nococcMi sirfl/w)、嗜酸性熱原體（77ια/ηο/?Ζα·ϊ7?ΐ£ϊ acidophilum) ' 火山型熱原體（TTiermo/jZflsma vo/cam’Mm)、 航海熱趨菌（Γ/iermoic^a mar/r/ma)、那不勒斯熱趨菌 {Thennotoga neapolitana) ' 嗜熱性棲熱菌（772ermw‘y 33 1308591 玖、發明說明 、曱烷細菌（曱酸曱烷桿菌⑽/㈣ /ormic/cwm)、熱自養性甲炫桿菌（似以/j⑽σ thermoautotrophium)、 嗜樹性甲 烧短桿 菌 (Methanobrevibacter arboriphilus)、瓦镇動物，惊择遠 5 (Methanobrevibacter ruminantium)、史密斯氏甲烧短桿菌 (Methanobrevibacter smithii) 、 詹氏曱 院 球菌 (Mei/ianococcws Μηαπ/π·/)、清谷小曱烧菌 、康氏熱曱烧囷（A/ei/ianopyrMs jtimWeW)、肯 氏兇惡曱烧菌（Α^ί/iflnoiiieia conci/h·)、貝克氏曱烧八疊球 10 菌（Mei/zanosarc/raa baAeW)、馬濟氏曱烧八疊球菌 (Methanosarcina mazeii) ' 史塔曼氏曱烷球狀菌 (Methanosphaera stadmaniae)、熱自養性曱烧而才熱桿菌 (Methanothermobacter thermoautotrophium)) ' 嗜鹽型.細菌（ 曰本嗜鹽弧菌（iYaZoarcw/a j^pcmica)、馬里弧形嗜鹽菌 15 (fialoarcula marismortui)、鹽支支物喷鹽菌（Halobacterium 、海水嗜鹽菌、地中 海野生·今鹽菌（Haloferax mediterranei)、火山野支今鹽菌 {Haloferax volcanii)、變異型嗜鹽單胞菌（Ha!omonas 、法老王嗜天然驗細菌（/VflirimobflcieHMm 20 pAwfl、嗜鹽四聯菌即Αβ/ΜΖ/α)、副溶 血型弧菌（V7&W<9 pflra/memc^yiz’cwj·)、創傷弧菌（V7for/<9 vi</n(/7cw))、嗜低溫細菌（寒冷克威氏菌 /^’c/7re)’i/irflea)、海水莫里特氏菌（ΜοηβΖ/β marina)、結 腸耶爾森氏菌(Ter,y/n/a 、假結核病耶爾森氏 34 1308591 玖、發明說明 镜（Yersinia pseudotuberculosis)、海底許旺氏菌 、嗜高壓性細菌（日本莫里特氏菌 japcmka)、良野氏莫里特氏菌 yayanosii)、深海發先菌（Photobacterium profundum)、海底 5 許旺氏菌（S/iewaneZZa 、蓳菜許旺氏菌（S/iewime/Za v/oZacea)、獨特許旺氏菌（SAewaneUa 、嗜酸性

細菌（惡性氣熱菌（Ae⑺尸}pernix)、硫氣孔硫化裂片菌 (Sulfolobus solfataricus)、礙化裂片逢（Sulfolobus tokodaii) 、嗜酸性高溫浴硫化裂片菌acic/oca/i/flr/i^)、 10 嗜酸性熱原體（TTiermop/fi^ma ac/i/op/ii/wm)、酸熱脂環酸芽 抱桿菌（A/icyc/obcm·//!^ ac/iiocflWim’Mi·)、酸 土脂環酸芽孢 桿菌（AZicyc/oimci·//!^ flc/i/oierresirb)、脂環酸芽孢桿菌屬 後（Alicyclobacillus cycZo/ie/jiam'CMj·)、嗜酸硫桿菌 (Thiobacillus acidophilus) ' 布氏酸镜（Acidianus brierleyiY) 15 、嗜驗性細菌（嗜驗性桿菌（βα£·!·//Μ·ί 、耐鹽桿

菌（·δβ<:/ΠΜ5· /liiZoi/Mrimi')、巴氏桿菌（ββί；!_"Μ5· pizi'iwr/i·)、燈 黃色微小細菌（fhgwohfitcierZMm 、抗輻射細 菌（而于輻射強球菌（Z)eiincoccM·? rati/oi/wrims)、耐輻射微球菌 (Micrococciu ra山、躐狀芽孢桿菌 20 areMJ))、自靜岡縣油田分離出之分解代謝石油的細菌HD- 1菌種（固定二氧化碳類型的石油生成或降解細菌）、TK-122菌種及抗有機溶劑細菌（惡臭假單胞菌（尸xewi/omcmas ρΜ"ί/α) ΙΉ-2000菌種）等等。就一特定的培養方法而言，可 使用技藝中已知的任一培養方法。當所涉及之培養對象係 35 1308591 玖、發明說明 植物8寸，其實例包括— 用）與再分化作用、花#養Ϊ刀化作用（癒合作 、分批Μ 化“培養、原生質體培養 。養、純株細皰與春、錄名+立矣 同i立表…. 培養、高密度培養、共 5 10 15 20 保月培養方法、調 、直接標記方法、子❸m 素競爭方法 卷方太 房。養方法、胚株培養方法、胚芽培 =、花粉培養方法、同步培養方法等等。此外，當所 養對象係真菌時’其實例包括自諸如柄、柄的上 1的子實體菌摺與菌傘部份之分離培養、跑子分離终 壤與空氣之分離培養'自所分離的真菌菌種之繼 代。養等等。此外，當所涉及之培養對象係動物時， 例包括胃腸道細胞培養、肝細胞培養、人類表皮角質仏田 胞培養、血管内皮細胞培養、腎細胞培養、朗格罕氏島細 胞培養、纖維母細胞培養、肌肉細胞培養、髓細胞培養、 癌細胞培養、神經細胞培養、支氣管表皮細胞培養、神經 細胞分化培養、血液細胞分化細胞培養、胚胎幹細胞分化 培養及肝癌細胞分化培養。再者，當所涉及之培養對象係 細菌時’其實例包括使用氮氣、二氧化碳等作為氣體環境 之厭氧性培養；使用空氣、加壓氧氣等之好氧性培養；在 強驗條件下之培養；在強酸條件下之培養；高溫培養；低 溫培養；高鹽濃度之培養；在超過大氣壓力之氣體環境下 之加壓培養；減壓培養；在有機溶劑中之培養；在輕射下 之培養；及藉由離心作用施加重力而進行之土立養。 本發明的生物體培養裝置之第二實施例，係—個包括 一培養基π及一微孔體12之生物體培養裝置u，該微孔體 36 1308591 玖、發明說明 具有-圓才主型部件與一盤型部件（其係自該圓才主型部件延 伸向上及其外徑大於該圓柱型部件的外徑）；該生物體培 養裝置可藉由將一生物體組織14置於其中心凹進的盤型: 件底部15(如第4與5圖所示）上，而將其增殖、去分化、^ 5化、再生、保存、選擇、分離或交叉培養。具有—圓柱型 部件與-盤型部件之微孔體12係由一容器18所支撐，及藉 由一部件16的底部17及一容器開口的周界之接觸而將㈣ 器的内部封閉。任擇地，微孔體12的盤型部件可藉由在其 10 裝配π 19而加以封閉，該蓋的材料與形狀可得以自外 界觀察培養狀態，諸如内徑對應於或大於該盤型部件外徑 之陪替氏（Petri)培養皿。任擇地，盤型部件可簡單地以 銘落加以封閉’如第-實施例所說明者。此外，蓋19、容 器18與添加管在-部件16上連接。即使在加魔或減麗下， 15 *玄裝置可維持封閉狀態。此外，微孔體較佳可抗熱、強鹼 、強酸、南壓、低壓、有機溶劑、輻射、紫外線等。 因為培養基、原料與微孔體材料以及可作為培養對象 之一生物體組織或一生物體細胞係與第一實施例相同，在 此省略相關說明。 實施方式 20 實例 使用下列裝置與樣本進行實驗，以清楚地顯示可使用 本發明的生物體培養裝置培養生物體細胞。 第一培養實驗 (])培養裝置 37 1308591 玖、發明說明 藉由在1250 °C將含有50-60重量％三氧化二鋁之村上 (Murakami)黏土（生產於日本新瀉縣）燒製24小時，製得外 徑1.4公分、内徑〇_9公分及高度4.5公分之圓柱型微孔體， 將其以直立方式置入一玻璃平底試管（直徑23公分及高度 5 15公分）的底部，及在試管中倒入6毫升的去分化MS液態培 養基（含有各2 ppm的萘乙酸（NAA)與苄腺嘌呤（BA))。之後 ，以雙層鋁箔將玻璃平底試管之開口封閉。在確認培養基 被試管中之整體的微孔體吸收之後，使用高壓釜在高溫與 高壓（121 °C及加壓至丨.2大氣壓）之下將其殺菌1〇分鐘，及 10讓其冷卻以製得一培養裝置1。用於本實驗中的微孔體具 有抗熱性。 另外，以培養裝置1所用之相同原料與條件，製得由 盤型部件（外控7.5公分、内徑5.5公分及深度5·〇公分）與 一圓柱型部件（外徑U公分、内敎7公分及高度4刀公分） 15、、且成及具有—個外控i 5公分及高度4 3公分之柱型部件（其 係以向上突出之方式置於其中盤型部件的中心凹進之該部 件底部）之微孔體，將其置入體積為57〇毫升之一玻璃容器 中’及藉由覆蓋-陪替氏（Petri)培養皿而封閉該盤型部件 的開口。另一方面，在一厄侖美厄氏（Erlenmeyer)燒瓶中 2〇倒入去分化MS液態培養基（含有各2啊的蔡乙酸（naa)與 节腺嗓吟（BA))，使用高壓爸在高温與高壓（i2i 〇c及加壓 至1.2大氣壓）之下將其殺菌1〇分鐘。然後，在無菌條件下 ’將微孔體略微提起以使之與該容器分離，及經由一間隙 倒入經殺菌處理的去分化Ms液態培養基。之後，讓其靜 38 1308591 玖、發明說明 置直至培養基被整體的微孔體吸收為止，而製得一培養裝置2。 (2)試驗材料

使用菸草種子與萌芽丨7天之未成熟菸草SRI 的一葉片以及草莓⑷蓓蕾中的 5花藥（直徑3毫米）作為試驗材料。藉由以流水清洗，浸於 70%乙醇中數秒’浸於5%次氯酸鈉水溶液中1〇分鐘，而進 订該等試驗材料之殺菌處理。就草莓蓓蕾中的花藥而言， 在無菌條件下，自經上述殺菌處理的草莓蓓蕾分離一花藥 ’以作為一試驗材料。 10 (3)培養 料置於該微孔體頂部之-内表面上，及再度以㈣封_ 口。另外’在無菌條件下，將培養裝置2的陪替氏㈣咖 15

養皿移除’將試驗材料置於該微孔體的盤型部件之底部， 及再度以陪替氏（Petd)培養㈣閉該盤型部件的開口。你

此方式，置於培養«丨或2之試驗材料，於天然日光條科 (置於磨砂玻璃後約H)公分）下及於26γ進行靜止培養。 (句結果 < 20 ⑴菸草種子 如上述置料«置i巾的料料之生長過程係示 別/表’及其於放置G、1G、26、28與32天後之狀態係分 :於弟圖。另外’培養於未含有秦乙酸⑽侧 卜票呤（BA)之-培養基中之一於草種子（作為對 長情形，示於第]2圖。 照組）的生 39 1308591 玖、發明說明 第1表 播種後之天數 菸草種子之生長過程 第0天 播種 第5天 萌芽，根尚未分化 第7天 形成癒合組織 第10天 癒合組織，直徑0.8毫米 第26天 癒合組織，直徑4.3毫米 第28天 癒合組織，直徑5.0毫米 第32天 癒合組織，直徑6.6毫米 (ii)未成熟菸草的葉片

如上述置於培養裝置2中的未成熟菸草植物的葉片之 生長過程係示於第2表，及其於剛放置後及放置10、33與 5 56天後之狀態係分別示於第13至16圖。 第2表 放置後之天數 第0天 第10天 第33天 第56天 (iii)草莓花藥 菸草葉片與癒合組織直徑之變化 放置，3.1毫米 癒合組織，直徑4.7毫米 癒合組織，直徑4.9毫米 癒合組織，直徑5.1毫米

如上述置於培養裝置1中的草莓花藥（N=29)之生長過 程係示於第3表。此外，在放置35天後之草莓花藥的癒合 10 組織照片係示於第17圖。 第3表 播種後之天數 第〇天 第7天 第10天 第28天 第35天 草莓花藥之生長過程 放置 形成癒合組織 癒合組織，直徑0.3毫米 癒合組織，直徑0.8毫米 癒合組織，直徑2.6毫米 由該等結果確認，植物組織（毋論植物物種與組織部 份為何）在本發明的培養裝置中之生長情形與習知的瓊脂 40 1308591 玖、發明說明 基貞類似，及培養基中的植物荷爾蒙經由微孔體而影響一 植物組織的形態形成作用與增殖作用。草每花藥的癒合組 織形成率為5 5.1 %。 第二培養實驗 5 (1)培養裝置 以上述第一培養實驗之相同方式進行實驗，除了在該 培養裝置中置人13〇毫升的改良型歐塔_a)培養基之外， 該培養基係藉由在丨公升的水巾溶解1()克葡萄糖、〗克棒樣 酸、1克酒石酸！安、！克碟酸鉀、以疏酸鎂、5〇毫克氯化 10 鈣及7克HEPES而製得。 (2) 試驗材料 使用絲狀真菌（玫瑰黃色卵孢子菌（〇卿_⑺邱叫 與金針菇加巾以)）作為試驗材料。 (3) 培養 15 在無菌條件下，將培養裝置2的陪替氏（Petri)培養胤移 除，以白金針將絲狀真g播種於該微孔體的盤型部件底部 的中央部份，及再度以陪替氏（Petri)培養皿封閉該盤型部 件。依此方式播種於培養裝置2之絲狀真菌，於天然曰光 條件（置於磨砂玻璃後約10公分）下及於26〇c進行靜止谇養。 20 (4)結果 ⑴玫瑰黃色卵孢子菌 如上述播種於培養裝置2中的玫瑰黃色卵跑子菌 (0仍ροπ 之生長過程，係示於第4表及第υ至Μ 圖。 41 1308591 玖、發明說明 第4表 播種後之小時數 絲狀真菌之生長過程 第0小時 播種 第26小時 群落，直徑5.2毫 第49小時 群落，直徑29.6毫 第73小時 群落，直徑56.8毫 第91小時 群落，直徑56.8毫 (底部22.9毫米，内側5.1毫米） (ii)金針益（FZamm“/i'na ve/im.pes) 如上述播種於培養裝置2中的金針菇

νβΖΜίφα)之生長過程’係示於第5表及第22至26圖。 第5表 播種後之時間 第0小時 第10天 第11天 第12天 第13天 第14天 第15天 播種 群落，直徑19.6毫 群落，直徑34.6毫 群落，直徑42.0毫 群落，直徑44.8毫 群落，直徑54_0毫 群落’直徑56.0毫

由該等結果確認，可藉由本發明的培養裝置培養真菌 (毋論真菌的種類為何）。 第三培養實驗 (1)培養裝置 〇 卩上述第—培養實驗之相同方式進行實驗，除了在該 培養裂置2中置入W毫升的馬鈐薯礒糖培養基之外，該 培養基係在適量的水中置入2〇0克馬鈴薯（大量削除馬铃薯 皮）’煮沸3〇分鐘，加以過濾，添加1〇克嚴糖及加水（以調 整至]公升的水）而製得。 ]_5 (2)試驗材料 42 !3〇859l 玖 '發明說明 使用...田函（枯草桿菌（万^))作為試驗材料。 (3) 培養 在黑菌條件下，將培養裝置2的陪替氏（Petri)培養皿移 除將枯草桿菌（5ac«7/Mi⑽如7/为塗覆於該微孔體的盤型 5部件底部，及再度以陪替氏（Petri)培養狐封閉該盤型部件 依此方式播種於培養裝置2之細菌，於天然日光條件（置 於磨砂玻螭後約10公分）下及於26°C進行靜止培養。 (4) 結果 如上述播種於培養裝置2中的枯草桿菌（fiac山w 10 ⑽之生長過程’係示於第27與28圖；群落的生長過 程係示於第6表。 43 1308591 玖、發明說明 4第6表 播種後之時間 細菌之生長過程 巧0小時 播種 ^66小時 群落，直徑2.00毫 ，92小時 群落，直徑5.29毫 第109小時 群落，直徑5.94毫 第118小時 群落，直徑7.12毫 時 群落，直徑7.74毫 由該等結果確認，可藉由本發明的培養裝置培養細菌。 污染抑制實驗 〇 在上述用於草莓花藥之培養裝置2的培養基中，播種 、’、狀真菌（長枝膝梗抱菌及 於天然日光條件（置於磨砂玻璃後約10公分）下及於26°C進 行靜止培養。結果示於第29與30圖。 如該等圖中明顯可見，播種於—培養基中之絲狀真菌 的生長與延伸作用，即使在播種55天之後仍偈限於微孔體 之柱型部件的下方部份，及並未觸及該盤型部件（培養—

生物體組織之處）。由該結果4認’在本發明的培養裝置 中，即使畲匯集的培養基受到一絲狀真菌污染時，因為微 ^體在培養基與該生物體樣本之間之過渡效應，而抑制或 壓抑4、狀真囷的入侵，及可在該生物體樣本受到污染之前 將其轉移至另一培養基中，藉此可繼續培養該樣本。 工業應用i 如本务明提供-培養裳置，其中僅消耗少量的培養基 ，及可降低諸如攪拌與振動之所需操作，降低所需的繼代 L養之數目’错此得以長期間培養—生物體組織或一生物 44 1308591 坎、發明說明 體細胞而無須繼代培養操作； a , 错此了k供—培養裝置，其 更方便地在單一培養操作中自一 、 、，且織或一細胞萃取獲 大量的有用物質。可避免在 你瑕η圪養刼作之際造成污 其他具有不利影響㈣激（繼 、及 ^ 食又丨不之物理刺激）。此 外，使不受到一培養基的Η 此 ^ 均養溫度等等影響之典 養作用成為可能。再者，可提供更镑 ° 域更$小、更輕的培養裝置。 【圖式簡單說明】 10 15 20 第1圖係自上視觀點之一透視圖 養裝置之一實施例。 第2圖係自上視觀點之一透視圖 養裝置之另一實施例。 第3圖係自上視觀點之一透視圖 養裝置之另一實施例。 第4圖係自上視觀點之一透視圖 養裝置之另一實施例。 第5圖係自側視觀點之一戴面圖 養裝置之另一實施例。 第6圖係自側視觀點之一截面圖 養裝置之另一實施例。 第7圖係取代一圖式之一照片，其 I壯π八 不在本發明的培 養裝置1( δ有一培養基與一植物荷爾蒙 ^ ^ 明牙之一菸草（紅 化菸草idacwm))種子。 第8圖係取代一圖式之一照片，其 一，^ 肩7^播種10天後 私尊[紅 專（NicotiariG tabacum))痕 q，··且織，其係生 其顯示本發明的培 Ο 其顯示本發明的 其顯示本發明的 其顯示本發明的 培 培 培 其顯示本發明的培 其顯示本發明的 培 之 長 Γ 45 1308591玖、發明說明 10 15 20 於本發明的培養裝置1(含有一捭春其 。養基與一植物荷爾蒙）。 第9圖係取代一圖式之一昭片 ^ …、乃 其顯示播種26天後之 一於草癒合組織，其係生長於太狢 我万、本叙明的培養裝置1(含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 第1〇圖係取代—圖式之一照片，其顯示播種28天後之 —於草癒合組織’其係生長於本發明的培養裝置〗（含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 第11圖係取代一圖式之一昭Κ，甘相 ^ d月’其顯示播種32天後之 一於草癒合組織’其係生長於本發明的培養裝置ι(含有一 培養基與一植物荷爾蒙）。 第_係取代一圖式之一照片，其顯示在本發明㈣ 養裝置1(含有-培養基不含—植物荷爾_芽之—於草種 子。 第13圖係取代一圖式之一照片，其顯示甫置於本發明 勺。養裝置2(含有-培養基與—植物荷爾蒙）之—於草幼苗 的一葉片與一尖端。 第14圖係取代一圖式之一照片，其顯示在置於本發明 的培養裝置2(含有—培養基與—植物荷_蒙）賊後之_於 草癒合組織。 ' 第15圖係取代一圖式之—照片，其顯示在置於本發明 的培養裝置2(含有—培養基與—植物荷爾蒙）33天後之—终 草療合組織。 、 第關係取代一圖式之—照片，其顯示在置於本” 的培養裝置2(含有一培養基與一植物荷爾蒙天後之… 於 Ο 〇 46 1308591 玖、發明說明 草癒合組織。 第π圖係取代一圖式之一照月’其顯示在置於本發明 的培養裝置1(含有一培養基與一植物荷爾蒙）35天後之一草 莓（智利草莓（f>叩π/α 花藥。 5 第18圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 瑰育色卵抱子菌（Oc^pora rc^e//ava))在本發明的培養裝置2 播種26小時後之真菌群落。 第19圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 瑰黃色卵孢子菌（CMspora 在本發明的培養裝置2 10 播種49小時後之真菌群落。 第20圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 瑰黃色卵孢子菌（Oosporfl rfue//flva))在本發明的培養裝置2 播種73小時後之真菌群落。 第21圖係取代一圖式之一照片，其顯示絲狀真菌（玫 15瑰黃色卵孢子菌⑺w/Mva))在本發明的培養裝置2 播種91小時後之真菌群落。 第22圖係取代一圖式之一照片，其顯示金菇（金針菇 (F/amm— 在本發明的培養裴置2播種1〇天後 之真菌群落。 2〇 帛23圖係取代-圖式之-照片，其顯示金益在本發明 的培養裝置2播種11天後之真菌群落。 第24圖係取代-圖式之—照片，其顯示金益在本發明 的培養裝置2播種13天後之真菌群落。 第25圖係取代-圖式之-照片’其顯示金益在本發明 47 1308591 玖、發明說明 的培養裝置2播種14天後之真菌群落。 第26圖係取代一圖式之一照片，其顯示金菇在本發明 的培養裝置2播種16天後之真菌群落。 第27圖係取代一圖式之一照片，其顯示細菌（枯草桿 5 菌在本發明的培養裝置2接種66小時後 之細菌群落。 第28圖係取代一圖式之一照片，其顯示細菌（枯草桿 菌（jBac/Hws 在本發明的培養裝置2接種109小時後 之細菌群落。 10 第29圖係取代一圖式之一照片，其顯示長枝膝梗孢菌 (Gonyir/c/iMm mflcroc/fli/Mm)被接種在本發明的培養裝置2 中的培養基上55天後之真菌群落。 第30圖係取代一圖式之一照片，其顯示長枝膝梗孢菌 (Gonyir/c/iMm macroc/fli/Mm)被接種在本發明的培養裝置2 15 中的培養基上55天後之真菌群落。 【圖式之主要元件代表符號表】 …生物體培養裝置 12·· •微孔體 …微孔體 13. •培養基 …培養基 14. •一生物體組織 —生物體組織或一生物體細胞 15· •盤型部件底部 …容器 16· •一部件 …蓋/塞 17. .底部 …容器開口 18· •容器 …螺紋機制 19. •蓋 …添加管 20· -中間體 11…生物體培養裝置 48

Claims (1)

1. /1308591 5 10 15 20 4. 第91133521號專利申請案申請專利範圍修正本”年ι〇月 澄(更)正 F合、申請專利範圍 [•一種生物體培養裝置，其包括一培養基：―個具有吸 水能力的微孔體及一個含有至少一部份的培養基與該 微孔體之容器以及用於密封該微孔體之蓋，該微孔體 之一部份係浸於該培養基中，其中該培養基係經由具 有毛細吸引作用之微孔體内部的傳輸孔向上輸送，以 將該培養基供應予置於該微孔體表面之—生物體組織 或一生物體細胞，藉此培養該生物體組織或生物體細 胞，其中該微孔體係一種非金屬無機固態材料之燒製 產物。 如申請專利範圍第1項之生物體培養裝置，其中該微孔 體具有一直立式圓柱型或柱型之形狀。 如申請專利範圍第1或2項之生物體培養裝置，其中該 微孔體包括一圓柱型或柱型部件及一個自該圓柱型或 柱型。P件持續向上之且具有大於該圓柱型或柱型部件 的外徑之外徑的盤型部件，其中該盤型部件的中心係 凹fe的其中*亥盤型部件的一部件係以其直徑方向突 出且具有大於一容器開口之外徑的外徑，及該微孔體 係藉由該突出部件的底部與該容器開口的周界之接觸， 而由該容器支撐。 —種生物體培養裝置’其包括-培養基、-個具有吸 水此力的微孔體、一個與該微孔體連接之中間體，， 個含有至少一部份的培養基與該微孔體之容器以及 用於畨封該微孔體之蓋子，該中間體可藉由該中間 體的-部件與該培養基之接冑而將該培 養基供應予該 [S 1 /1308591 拾、申請專利範圍 微孔體，其中經由該中間體所供應之該培養基係經由 具有毛細吸引作用之該微孔體内部的傳輸孔向上輸送 ’以將該培養基供應予置於該微孔體一表面之一生物 體組織或一生物體細胞，藉此培養該生物體組織或生 5 物體細胞，其中該微孔體係一種非金屬無機固態材料 之燒製產物。 5.如申請專利範圍第1、2或4項中任一項之生物體培養裝 置，其中該生物體組織或生物體細胞係植物、真菌或 細囷之一組織或一細胞。 10 6·如申請專利範圍第3項之生物體培養裝置，其中該生物 體組織或生物體細胞係植物、真菌或細菌之一組織或 一細胞。 15 20 7_ —種培養一生物體之方法，其包括經由具有吸水能力 的微孔體内部的傳輸孔而向上輸送一培養基，以將該 培養基供應予置於該微孔體表面之一生物體組織或一 生物體細胞，藉此培養該生物體組織或生物體細胞， 該微孔體之-部份係被浸於該培養基中，其中該微孔 體係-種非金屬無機固態材料之燒製產物。 申咕專利範圍第7項之方法，其中該生物體組織或生 物體細胞係植物、真菌或細菌之-組織或-細胞。 2 1308591 陸、（一）、本案指定代表圖爲：第1圖 (二）、本代表圖之元件代表符號簡單說明： 1···生物體培養裝置 2…微孔體 3…培養基 4··· 一生物體組織或一生物體細胞 5···容器 6…蓋/塞 7-··容器開口 柒、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化 .學式：