CN115812547A - 一种益生菌大米的种植方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种益生菌大米的种植方法，属于水稻种植技术领域，所述种植方法包括：定植完成后，在后续的培植过程中，向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液；将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米；其中，所述益生菌发酵液为凝结芽孢杆菌TBC—169的发酵液；喷施所述益生菌发酵液的时期包括水稻分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期，所述益生菌发酵液在三个时期的喷施总量为100L/亩。该方法能够提升大米中的益生菌含量，通过此方法获得的大米，经蒸煮后益生菌存活率高，食用后，能满足人体正常生活需要，无需额外补充益生菌制剂，长期食用有助于提升居民肠道健康水平。
Description
技术领域
本发明属于水稻种植技术领域，特别涉及一种益生菌大米的种植方法。
背景技术
水稻是四大农作物之首，大米是当今人类的主要食物，而我国是世界上最大的水稻生产与稻米消费国。
现代人高脂肪、低纤维的不良饮食习惯，长期服用抗生素或者是外出旅行饮食不正常等因素，常会导致肠道亚健康。益生菌能改善人体生态平衡从而发挥有益作用，达到提高人体健康状态的效果。目前，益生菌的补充通常是采用口服益生菌制剂等方式，人们难以长期坚持的同时，也会提升居民生活成本。
发明内容
为了提升居民肠道健康水平，本发明提供了一种益生菌大米的种植方法。该方法能够提升大米中的益生菌含量，通过此方法获得的大米，经蒸煮后益生菌存活率高，食用后，能满足人体正常生活需要，无需额外补充益生菌制剂，长期食用有助于提升居民肠道健康水平。
本发明通过以下技术方案实现：
本发明提供一种益生菌大米的种植方法，所述种植方法包括：
定植完成后，在后续的培植过程中，向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液；
将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米；
其中，所述益生菌发酵液为凝结芽孢杆菌TBC—169的发酵液；
喷施所述益生菌发酵液的时期包括水稻分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期，所述益生菌发酵液在三个时期的喷施总量为100L/亩。
进一步地，所述益生菌发酵液在水稻分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期的喷施量分别如下：
水稻分蘖期：20L/亩，水稻孕穗期：50L/亩，水稻灌浆期：30L/亩。
进一步地，所述益生菌发酵液通过以下方法制备：
配制益生菌培养液；
将所述益生菌培养液常温发酵48～96h，获得所述益生菌发酵液；
其中，所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.0～6.0mg/L，发酵助剂：2.0～5.0g/L。
进一步地，所述配制益生菌培养液，具体包括：
按配方称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至37℃～40℃，获得混合液；
向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.5～7.0，获得益生菌培养液。
进一步地，所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.1～0.3mg/L，谷氨酸：3.5～5.0mg/L，L-半光氨酸：0.5～1.0mg/L，天门冬氨酸：0.2～0.4mg/L，精氨酸：0.1～0.3mg/L。
进一步地，所述发酵助剂为红糖。
进一步地，所述益生菌发酵液在三个时期的喷施时间为下午15：00～18：00。
本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
1.本发明一种益生菌大米的种植方法，该方法能够提升大米中的益生菌含量，通过此方法获得的大米，经蒸煮后益生菌存活率高，食用后，能满足人体正常生活需要，无需额外补充益生菌制剂，有效降低生活成本，长期食用有助于提升居民肠道健康水平。
2.本发明一种益生菌大米的种植方法，益生菌发酵液中的益生菌采用凝结芽孢杆菌TBC—169，能提高消化道对膳食纤维的有效利用率，防止脂肪分子的过度吸收，能够减少患冠心病的危险，抗便秘，预防沙门氏菌、轮状病毒、副溶血孤菌等致病微生物引起的腹泻，从而保护人体肠道健康。
3.本发明一种益生菌大米的种植方法，该方法步骤简单，喷洒益生菌发酵液，不仅能够提升大米中益生菌含量，还能够改良土壤，益生菌在土壤中大量繁殖，改善了土壤的理化性质，预防板结盐碱化，从而达到对土壤的改良效果；同时，大量的益生菌在水稻根部形成保护层，抑制有害的微生物生长，增强水稻抗性。
4.本发明一种益生菌大米的种植方法，益生菌发酵液富含氨基酸，降解后可为水稻提供更全面的营养，减少化肥施用量，提高产量、改善品质、降低农药残留、保护生态环境，并且，采用的益生菌发酵液制作原料是水稻生长所需要的物质，绿色无污染，有机健康，满足人体日常生活需要。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明实施例1收获的“19”香稻谷和大米照片：左图为稻谷，右图为大米。
图2为本发明实施例1收获的大米培养出的益生菌菌落图。
图3为本发明实施例1收获的大米经蒸煮后培养出的益生菌菌落图。
图4为本发明图3中挑取的益生菌的染色镜检图。
图5为本发明实施例4收获的大米培养出的益生菌菌落图。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
下面将结合实施例及实验数据对本申请一种益生菌大米的种植方法进行详细说明。
实施例1
本实施例一种益生菌大米的种植方法，包括以下步骤：
S1.配制益生菌培养液：
称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至38℃，获得混合液；向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.8，获得益生菌培养液；
所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.2mg/L，发酵助剂：2.0g/L；
所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.1mg/L，谷氨酸：4.2mg/L，L-半光氨酸：0.6mg/L，天门冬氨酸：0.2mg/L，精氨酸：0.1mg/L；
所述发酵助剂为红糖。
S2.制备益生菌发酵液：
将S1获得的益生菌培养液常温发酵72h，获得所述益生菌发酵液；
S3.益生菌大米的培植：
定植完成后，在“19”香水稻的分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期分别向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液，喷施时间为下午15：00～18：00，各个时期喷施量分别如下：
水稻分蘖期：20L/亩，水稻孕穗期：50L/亩，水稻灌浆期：30L/亩；
如图1，将培植获得的“19”香稻谷进行碾磨，获得益生菌大米。
实施例2
本实施例一种益生菌大米的种植方法，包括以下步骤：
S1.配制益生菌培养液：
称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至38℃，获得混合液；向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.8，获得益生菌培养液；
所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.4mg/L，发酵助剂：5.0g/L；
所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.15mg/L，谷氨酸：4.3mg/L，L-半光氨酸：0.65mg/L，天门冬氨酸：0.15mg/L，精氨酸：0.15mg/L；
S2.制备益生菌发酵液：
将S1获得的益生菌培养液常温发酵72h，获得所述益生菌发酵液；
S3.益生菌大米的培植：
定植完成后，在水稻(品种“19”香)分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期分别向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液，喷施时间为下午15：00～18：00，各个时期喷施量分别如下：
水稻分蘖期：20L/亩，水稻孕穗期：50L/亩，水稻灌浆期：30L/亩；
将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米。
实施例3
本实施例一种益生菌大米的种植方法，包括以下步骤：
S1.配制益生菌培养液：
称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至38℃，获得混合液；向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.8，获得益生菌培养液；
所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.9mg/L，发酵助剂：5.0g/L；
所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.2mg/L，谷氨酸：4.6mg/L，L-半光氨酸：0.7mg/L，天门冬氨酸：0.2mg/L，精氨酸：0.2mg/L；
S2.制备益生菌发酵液：
将S1获得的益生菌培养液常温发酵72h，获得所述益生菌发酵液；
S3.益生菌大米的培植：
定植完成后，在水稻(品种“19”香)分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期分别向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液，喷施时间为下午15：00～18：00，各个时期喷施量分别如下：
水稻分蘖期：20L/亩，水稻孕穗期：50L/亩，水稻灌浆期：30L/亩；
将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米。
实施例4
S1.配制益生菌培养液：
称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至38℃，获得混合液；向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.8，获得益生菌培养液；
所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.2mg/L，发酵助剂：2.0g/L；
所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.1mg/L，谷氨酸：4.2mg/L，L-半光氨酸：0.6mg/L，天门冬氨酸：0.2mg/L，精氨酸：0.1mg/L；
所述发酵助剂为红糖。
S2.制备益生菌发酵液：
将S1获得的益生菌培养液常温发酵72h，获得所述益生菌发酵液；
S3.益生菌大米的培植：
定植完成后，在水稻(品种“19”香)插秧期、水稻分蘖期和水稻拨节期向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液，喷施时间为下午15：00～18：00，各个时期喷施量分别如下：
水稻插秧期：30L/亩，分蘖期：40L/亩，水稻拨节期40L/亩；
将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米。
选取位于同一区域且相互间距离3-10米的5块稻田种植水稻，每块稻田面积均为0.5亩，对其进行编号，编号为1～5，编号1～4的稻田分别采用实施例1～4的方式种植水稻，编号5的稻田采用常规的水稻种植方法，与编号1水稻种植的区别仅在于不喷施益生菌发酵液。
将编号1～5稻田收获的水稻进行碾磨得到大米，再对大米蒸煮前后的益生菌含量进行测定，并将测定结果记录在表1中。益生菌含量的测定方法如下：
1、称取研磨粉碎样品10g(精确到0.01g)，加入带玻璃珠的100mL的无菌水中，静置20min，放入水浴恒温振荡器用78～82℃，200r/min充分振荡30min，即成母液菌悬液(基础液)。
2、用5mL无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液(每个稀释度应更换无菌移液管)。
每个样品取3个连续适宜的稀释度，用0.5mL无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1mL，加至预先制备好的营养琼脂培养基平板上(培养基成分：K2HPO4 1g，乙酸钠2.5g，MgSO4 0.1g，MnSO4 0.025g，半胱氨酸0.25g，大豆蛋白胨5g，酵母粉2g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0.032g，琼脂粉20g)，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。或取1.0mL不同稀释度的菌悬液加入培养皿内，与琼脂培养基混匀。每一稀释度重复3次，倒置于36℃±2℃恒温培养箱厌氧培养48h～72h。
3、菌落识别。达到培养时间后，每个稀释度取5～10个菌落的菌体进行涂片、染色、镜检等技术手段确认菌落。
4、菌落计数。以出现出现10cfu～150cfu个菌落数的稀释度的平板为计数标准。当只有一个稀释度，其平均菌落数在10cfu～150cfu之间时，则以该菌落数计算。若有两个稀释度，其平均菌落数均在10cfu～150cfu之间时，应按两者菌落总数之比值(稀释度大的菌落总数×10与稀释度小的菌落总数之比)决定，若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。计算公式为：
公式中：
nm—菌落数，亿cfu/g
k—稀释倍数
v1—基础液体积，mL
v2—稀释的菌悬液加入量，mL
m0—样品量，g。
表1益生菌大米和普通大米蒸煮前后益生菌含量
其中，大米蒸煮方法为：米和水的比例为1：1.2，100℃蒸煮30min。
表1中，采用实施例1-3方法种植的水稻获得的大米益生菌(凝结芽孢杆菌TBC-169)含量远高于实施例4和5，且大米经蒸煮后，益生菌含量也明显高于实施例4和5。由此可知，采用本发明一种益生菌大米的种植方法，能够显著提升大米中益生菌含量，且大米经蒸煮后，益生菌存活率达到60～70％，同时还能在一定程度上提升大米产量。
本发明中，复合氨基酸作用在于为益生菌提供氮源，也可为益生菌体内蛋白质合成提供原料，是益生菌生长的营养增补剂和保护剂，同时也是水稻生长过程必需的营养成分。红糖作用在于为凝结芽孢杆菌提供碳源、矿物质与微量元素，提供凝结芽孢杆菌生长所需的辅酶并中和微生物生长所产生的细胞毒性物质。在益生菌发酵液喷施后，复合氨基酸、红糖经益生菌和水稻表面其他微生物发酵降解后，可为水稻提供养分，促进水稻生长。
本发明图2为实施例1收获的大米培养出的益生菌菌落图；图3为实施例1收获的大米经蒸煮后培养出的益生菌菌落图。图4为图3中挑取的益生菌的染色镜检图，菌落经形态观察，再对菌落进行生化鉴定试剂盒确证试验，鉴定为凝结芽孢杆菌TBC—169。图5为实施例4收获的大米培养出的益生菌菌落，从图5可知，实施例4培养出的益生菌菌落数量明显低于图2、3。
最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (7)
1.一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述种植方法包括：
定植完成后，在后续的培植过程中，向水稻秧苗叶面喷施益生菌发酵液；
将培植获得的稻谷进行碾磨，获得益生菌大米；
其中，所述益生菌发酵液为凝结芽孢杆菌TBC—169的发酵液；
喷施所述益生菌发酵液的时期包括水稻分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期，所述益生菌发酵液在三个时期的喷施总量为100L/亩。
2.根据权利要求1所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述益生菌发酵液在水稻分蘖期、水稻孕穗期和水稻灌浆期的喷施量分别如下：
水稻分蘖期：20L/亩，水稻孕穗期：50L/亩，水稻灌浆期：30L/亩。
3.根据权利要求1所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述益生菌发酵液通过以下方法制备：
配制益生菌培养液；
将所述益生菌培养液常温发酵48～96h，获得所述益生菌发酵液；
其中，所述益生菌培养液中，各成分及其浓度如下：
凝结芽孢杆菌TBC—169：(5～10)*108cfu/mL，复合氨基酸：5.0～6.0mg/L，发酵助剂：2.0～5.0g/L。
4.根据权利要求3所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述配制益生菌培养液，具体包括：
按配方称取复合氨基酸和发酵助剂溶解于水，煮沸后自然冷却至37℃～40℃，获得混合液；
向所述混合液中加入凝结芽孢杆菌TBC—169干粉，搅拌均匀，调节pH值6.5～7.0，获得益生菌培养液。
5.根据权利要求3或4所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述益生菌培养液中，所述复合氨基酸的成分及质量浓度如下：
甘氨酸：0.1～0.3mg/L，谷氨酸：3.5～5.0mg/L，L-半光氨酸：0.5～1.0mg/L，天门冬氨酸：0.2～0.4mg/L，精氨酸：0.1～0.3mg/L。
6.根据权利要求3或4所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述发酵助剂为红糖。
7.根据权利要求1所述的一种益生菌大米的种植方法，其特征在于，所述益生菌发酵液在三个时期的喷施时间为下午15：00～18：00。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20230321 |
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