1232760 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關一種含三木曱胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine)之非麻醉性陣痛消炎之口服腸溶製劑。 【發明背景】 按’手術後疼痛是醫藥界所面臨最棘手的問題，而目 前臨床最常用的止痛劑，大致可分為麻醉性鎮痛劑（鴉片 類製劑）及非類固醇性消炎劑（Nonsteroid antiinflammatory drug; NS AIDS) ’前者可用於中樞神經系統而發揮中度至重 度疼痛之緩解效果，但也容易誘發如鎮靜、欣快感或身體 依賴性等不良反應，而後者為非類固醇性消炎劑 (Nonsteroid antiinflammatory drug; NSAIDS)，其對於人體 之胃黏膜傷害大。 再者’礙於目前相關法令對於麻醉性鎮痛劑（鵪片類 製劑）該等藥物的管制與約束，則更加突顯醫療界對控制 緊急與嚴重性疼痛的無力感與無助感。 爰是，本發明之主要目的，在於解決上述之問題，係 提供一種含二木甲胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之非 麻醉性陣痛消炎之口服腸溶製劑，鎮痛效能優於傳統非類 固醇性消炎劑（Nonsteroid antiinflammatory drug; NSAIDS)，且活性至少與麻醉性鎮痛劑相當，其臨床應用 不受繁鎖的法令限制，可取代目前麻醉性鎮痛劑之使用， 使醫事人員在處理緊急與嚴重性疼痛病例時，更加得心應 手0 1232760 為達到上述目的，本發明提供一種含三木甲胺克妥洛 (Ketorolac Tromethamine)之口服腸溶製劑，其包括有：一 中性核心25〜85wt% ; —藥物層，係包覆於該中性核心外， 含有三木甲胺克妥洛3〜7wt%、黏合劑〇·3〜7wt%及崩散劑 3〜15wt% ; —保護層5〜16wt%，係包覆於該藥物層外；以 及一腸衣層10〜35wt%，係包覆於該保護層外，俾藉以形成 一含二木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之非麻醉性 陣痛消炎之口服腸溶製劑，而能減少胃黏膜損害，以使得 該含腸衣層之中性核心到達小腸後即發揮療效。 【詳細說明】 三木曱胺克妥洛為R-(+)及S-㈠之消旋性混合物，化學 全名為（RS)-5-Benzoyl_1.2-dihydro-3H_pyrrolo[l，2] pyrrole-1 -carboxylic acid 2_amino-2-hydroxymethyl -l，3-propanediol，對水溶解度極佳，易溶於曱醇，微溶於 乙醇、無水乙醇及四氫呋喃，不溶於丙酮、二氯曱烷、曱 苯、醋酸乙酯、二氧六環、己烷、丁醇及乙腈，約於162 °(：熔融並立即分解，易受濕氣及光線破壞而變色。 三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之化學結構 如下式所示：
為非類固醇消炎鎮痛劑（Nonsteroid antiinflammatory drug; NSAIDS)，其可選擇性阻斷致發炎因子、前列腺素 1232760 (prostaglandins)之生成而發揮優異的鎮痛、消炎及退熱效 能，資料顯示三木曱胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine)之 藥效強度優於其他同類藥物的主因可能與其導致内生性 嗎啡（Endogenous opioids)之釋放、干擾NMDA receptor activity或與GAB A interneuron等有關，其不與Μ ·Κ及占 opioid receptor結合，更不具麻醉性鎮痛劑那樣不良反應 (Narcotic-like action)，可選擇性抑制環氧酶 (cyclooxygenase)之活性而阻斷致發炎疼痛因子之合成。 三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)經空腹口服 投與吸收後，三木甲胺克妥洛於生理pH值環境下可解離成 陰離子型態，而其血中濃度之衰退情形可由中央室排泄之 二室或三室性模式加以描述。投與劑量之三木曱胺克妥 洛，其中約有91%可於48小時後由尿液中排除，其中75% 在最初7小時内排除；而有6%由糞便中排除，肝臟為其主 要的代謝部位。 三木甲胺克妥洛與酸醣酸結合成不活性物為其主要 之代謝途徑，代謝方式除了以克妥洛(Ket〇r〇lac)出現於尿 液之外；另一代謝方式為經對位之羥化形成對_經基克妥洛 (p-Hydroxy Ketorolac)，但此代謝物並不具有顯著之藥理活 性，且由資料顯示，其鎮痛活性低於克妥洛的1/1〇〇，消炎 活性低於克妥洛的1/5，而由體外血小板凝集試驗結果顯 示，其抗血小板凝集活性為克妥洛的1/25。經由不同年齡 層與肝或腎功能受損者之投與三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之試驗，由排泄情形可知，老年人及腎功能 1232760 受損者投與後之血中半衰期明顯延長，而血中總清除率也 有降低的趨勢，但對肝功能受損者之影響則較不明顯。 三木曱胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine)經空腹口服 投與後（10mg)，吸收完全（吸收率大於95%)且不受併服制酸 劑之影響，平均最高血中濃度約於30〜60分鐘之間到達。 其蛋白質結合率為99%，平均穩定血中濃度狀態之分佈容 積為0.11 L/kg，於排泄相（Elimination phase)之分佈容積 〇·17〜〇.25L/kg，平均排泄半衰期約為5.3小時。 服腸溶製劍之結楫 請審查委員參閱第1圖，係本發明之含三木甲胺克妥 洛(Ketorolac Tromethamine)之口服腸溶製劑結構示意圖 ，如第1圖所示：係由一中性核心1、一藥物層2、一保護 層3與一腸衣層4所構成。 中性核心1主要係由蔗糖、澱粉、滑石粉、微晶纖維 素與磷酸氫二鈣等成分單獨使用或以任意比例混和任兩 者以上所組成，其可自行藉由流動層遠心式造粒機(Glatt) 或流動層噴霧造粒機(Huttlin)造粒製備；抑或可自原料商 購得其可為：（1)蔗糖100%之中性核心；（2)蔗糖及殺粉之 中性核心，或（3)微晶纖維素之中性核心。 藥物層2主要係由三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)、黏合劑與崩散劑所組成，其中，黏合劑係 可由聚乙烯吼咯烷酮、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素 等成分單獨使用或以任意比例混和任兩者以上所組成；崩 1232760 散劑係可由澱粉、乳糖、蔗糖與甘露糖等成分單獨使用或 以任意比例混和任兩者以上所組成。而用以製備黏合劑所 使用之溶劑係可由乙醇與蒸餾水單獨使用或以其比例 1:1〜1··4之組成溶劑所組成。 保護層3主要係由羥丙基曱基纖維素、羥丙基纖維素 、羥甲基纖維素等成分單獨使用或以任意比例混和任兩者 以上所組成。另外，保護層必要時可再包含有可塑劑與遮 光劑，其中，可塑劑係可由苯二曱酸二乙酯、甘油三醋酸 酯、擰檬酸三乙酯、聚乙二醇等成分單獨使用或以任意比 例混和任兩者以上所組成；遮光劑可為二氧化鈦。 腸衣層4主要係由曱基丙烯酸一甲基丙烯酸曱酯共聚 物L、曱基丙烯酸一曱基丙烯酸曱酯共聚物S、苯二甲酸羥 丙基曱基纖維素與苯二甲酸醋酸纖維素等成分單獨使用 或以任意比例混和任兩者以上所組成。 根據本發明所形成之含三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之非麻醉性陣痛消炎之口服腸溶製劑，其組 成較佳比例為：中性核心25〜85wt%、藥物層由三木曱胺克 妥洛3〜7wt%、黏合劑0.3〜7wt%、崩散劑3〜15wt%組成、保 護層5〜16wt%、腸衣層10〜35wt%。 口服腸溶製劑之製備方法 請審查委員參閱第2圖，係本發明之製備含三木曱胺 克妥洛(Ketorolac Tromethamine)之口服腸溶製劑流程示意 圖，其製備方法依各組成成分適當比例操作如下： 1232760 (步驟1 )製備黏合劑液21 ··取聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基 纖維素、羥丙基曱基纖維素等成分單獨使用或 以任意比例混和任兩者以上加入蒸德水中擾拌 至溶解，同時再加入乙醇混合均勻。 (步驟2)製備藥物層之混合粉末22 :取三木曱胺克妥洛 (Ketorolac Tromethamine)與崩散劑（係可由 澱粉、乳糖、蔗糖與甘露糖等成分單獨使用或 以任意比例混和任兩者以上所組成）混合均勻 ，通過150 mesh目篩一次，40 mesh目篩二次。 (步驟3)製備保護層液23 :取羥丙基曱基纖維素、羥丙 基纖維素與羥曱基纖維素等成分單獨使用或以 任意比例混和任兩者以上加入蒸餾水中攪拌至 溶解，同時再加入聚乙二醇攪拌至溶解，再加 入已通過150 mesh目篩一次之遮光劑（可為二 氧化鈦）混合均勻。 (步驟4)製備腸衣層液24 :取曱基丙烯酸一曱基丙烯酸 甲酯共聚物L、甲基丙烯酸一曱基丙烯酸曱酯共 聚物S、苯二甲酸羥丙基曱基纖維素與苯二曱酸 醋酸纖維素等成分單獨使用或以任意比例混和 任兩者以上與可塑劑其可為由苯二曱酸二乙 酯、甘油三醋酸酯、檸檬酸三乙酯、聚乙二醇等 成分單獨使用或以任意比例混和任兩者以上所 組成混合均勻。 (步驟5)取中性核心，置入造粒機内，再將（步驟1)製 1232760 備之黏合劑液自喷鎗中喷出霧化之黏合劑，同 時再加入（步驟2)之混合粉末，如此操作並乾 燥之，即可得含藥物層之球型顆粒25。 (步驟6)取含有效成份之球型顆粒，置入造粒機中，再 將（步驟3)製備之保護層液自喷鎗中喷出霧化 之保護層液，如此操作並乾燥之，即可得含保 護層與含有效成份之球型顆粒；同時再將（步 驟4)製備之腸衣層液自喷鎗中喷出霧化之腸衣 層液，如此操作並乾燥之，即可得含腸衣層、 保護層與藥物層之球型顆粒26。 【實施例一】 1.中性核心：1070.4g 中性核心之製備： 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K_30) 40g 異丙醇（Isopropyl Alcohol) 300ml 蒸顧水（Purified water) 200ml 蔗糖（Sucrose) 400g 殿粉（Starch) 800g 滑石粉(Talc) 900g 製備之步驟： (1) 取聚乙烯吡咯烷酮加入異丙醇中，攪拌至溶解，再 加入蒸德水混合均勻。 (2) 取澱粉與滑石粉混合均勻。 11 1232760 (3)取蔗糖置入流動層遠心式造粒機（Glatt)中，再將第 (1)項自喷鎗中喷出霧化之黏合劑，同時再加入第（2 )項，如此操作並乾燥之，即形成為中性核心。 2·藥物層： 三木甲胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine) 129.6g 乳糖(Lactose) 115.2g 聚乙烯溁咯烷酮（PVP K_30) 9.6g 乙醇 96ml 蒸餾水 96ml 製備之步驟： (1) 取聚乙烯吡咯烷酮加入蒸餾水中攪拌至溶解，同時 再加入乙醇混合均勻。 (2) 取三木曱胺克妥洛與乳糖混合通過150 mesh目篩一 次，40 mesh目篩二次。 (3) 取中性核心置入微粒造粒機内，再將第（1)項自喷餘 中喷出霧化之黏合劑，同時再加入第（2)項粉末，如 此操作並乾燥之，即可得含有效成份之球型顆粒。 3·保護層： 羥丙基曱基纖維素(H.P.M.C.) 96g 聚乙二醇（P.E.G. 6000) 19.2g 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 19.2g 蒸鶴水(Purified water) 1368ml 製備之步驟： (1)取羥丙基曱基纖維素加入蒸餾水中攪拌至溶解，同 12 1232760 時再加入聚乙二醇，攪拌至溶解。 (2) 取二氧化鈦通過150 mesh目篩一次。 (3) 取第（1)項與第項混合均勻。 (4) 取含有效成份之球型顆粒置入流動層遠心式造粒機 (Glatt)中，再將第（3)項自喷鎗中噴出霧化之保護 層溶液，如此操作並乾燥之，即可得含保護層之球 形顆粒。 其中該霧化條件係為入風口溫度為45°C，出風口溫度 為3〇°C，霧化壓力為2.8kg/cm2，轉盤轉速為34rpm。 4·腸衣層： 甲基丙烯酸—甲基丙烯酸曱酯共聚物（Eudragit L30D) 1280g 76.8g 才宁樣酸二乙醋（Triethyl citrate) 製備之步驟： (1)取甲基丙烯酸一曱基丙烯酸曱酯與擰檬酸三乙酯混 合均勻。 ()取s保遵層之球型顆粒置入流動層遠心式造粒機 (G1:U)中’再將第⑴項自喷餘中噴出霧化之腸衣 層溶液，如此操作並乾燥之’即可得含腸衣層、保 護層、藥物層之球形顆粒。 溫 其中該霧化條件係為入風口溫度為45。(：，出風口 為3〇°C ’霧化壓力為2.琴m2 ’轉盤轉速為μ啊。 【實施例二】 13 1232760 1.中性核心：1043.52g 2·藥物層： 三木曱胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine) 129 6g 殿粉（Starch) 132.48g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP Κ·30) 9.6g 乙醇（Ethanol) 96ml 蒸餾水（Purified water) 96ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例一操作之。 3. 保護層： 羥丙基甲基纖維素(H.P.M.C·) li5.2g 聚乙二醇（P.E.G· 6000) 23.04g 二氧化鈦(Titanium Dioxide) 23.04g 蒸德水（Purified water) 1368ml 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4. 腸衣層： 曱基丙烯酸一曱基丙稀酸甲醋共聚物(Eudragit L30D) 1280g 檸檬酸三乙酯（Triethyl citrate) 76.8g 腸衣層之製備及操作依實施例一操作之。 【實施例三】 1. 中性核心：939.6g 2. 藥物層： 三木甲胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine) 126g 14 1232760 澱粉（Starch) 132.48g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K-30) 9.6g 乙醇（Ethanol) 96ml 蒸顧水（Purified water) 96ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例 一操作之。 3 ·保護層： 羥丙基曱基纖維素(H.P.M.C.) 192g 聚乙二醇（P.E.G· 6000) 38.4g 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 38.4g 蒸餾水(Purified water) 1920ml 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4·腸衣層： 曱基丙烯酸一曱基丙烯酸曱酯共聚物（Eudragit L30D) 1280g 檸檬酸三乙醋（Triethyl citrate) 76.8g 腸衣層之製備及操作依實施例一操作之。 【貫施例四】 1·中性核心：1090.5g 2·藥物層： 三木甲胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine) 157.5g 澱粉(Starch) 165.6g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K-30) 12g 乙醇（Ethanol) 120ml 15 1232760 蒸鶴水（Purified water) 120ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例一操作之。 3·保護層： 羥丙基甲基纖維素(H.P.M.C.) 240g 聚乙二醇（P.E.G· 6000) 48g 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 48g 蒸鶴水（Purified water) 2400ml 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4·腸衣層： 甲基丙烯酸一甲基丙烯酸曱酯共聚物(Eudragit L30D) 2〇〇〇g 檸檬酸三乙醋（Triethyl citrate) 60g 腸衣層之製備及操作依實施例一操作之。 【實施例五】 1·中性核心：1217.7g 2. 藥物層： 三木曱胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine) 157.5g 澱粉（Starch) 165.6g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K-30) 12g 乙醇（Ethanol) 120ml 蒸顧水（Purified water) 12〇ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例一操作之。 3. 保護層： 16 1232760 羥丙基曱基纖維素（H.P.M.C.) 288g 聚乙二醇（P.E.G· 6000) 57.6g 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 48g 蒸館水（Purified water) 3201ml 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4·腸衣層： 甲基丙烯酸一甲基丙烯酸甲酯共聚物（Eudragit L30D) 1440g 檸檬酸三乙醋（Triethyl citrate) 43.2g 腸衣層之製備及操作依實施例一操作之。 【實施例六】 1·中性核心：1212.9g 2·藥物層： 三木甲胺克妥洛(Ketorolac Tromethamine) 157.5g 澱粉（Starch) 165.6g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K-30) 12g 乙醇（Ethanol) 12〇ml 蒸顧水(Purified water) 12〇ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例 一操作之。 3 ·保護層： 羥丙基曱基纖維素(H.P.M.C.) 336g 聚乙二醇（P.E.G. 6000) 67.2g 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 48g 17 1232760 蒸I留水（Purified water) 3750ml 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4·腸衣層： 甲基丙烯酸一甲基丙烯酸曱酯共聚物（Eudragit L30D) I280g 檸檬酸三乙酯（Triethyl citrate) 38.4g 腸衣層之製備及操作依實施例一操作之。 【實施例七】 1·中性核心：1196.1g 2·藥物層： 三木曱胺克妥洛（Ketorolac Tromethamine) 157.5g 澱粉（Starch) 165.6g 聚乙烯吡咯烷酮（PVP K-30) I2g 乙醇（Ethanol) 12〇ml 蒸餾水（Purified water) 12〇ml 中性核心與藥物層之製備及操作依實施例一操作之。 3·保護層： 24〇g 48g 48g 24〇〇ml 羥丙基曱基纖維素(H.P.M.C.) 聚乙二醇（P.E.G· 6000) 二氧化鈦（Titanium Dioxide) 蒸德水（Purified water) 保護層之製備及操作依實施例一操作之。 4·腸衣層： 18 1232760 曱基丙烯酸一甲基丙烯酸曱酯共聚物（Eudragit L3〇d) 1680g 檸檬酸二乙 1旨（Triethyl citrate) 50.4g 腸衣層之製備及彳呆作依實施例^-操作之。 【試驗結果】 請參閱表一與表二，其係分別為實施例一〜七製劑依 1990年美國藥典（第22版)規定標準所檢測之溶離率、實施 例七製劑依1990年美國藥典（第22版）規定標準並改變溶 媒與轉速所檢測之溶離率，顯示依本發明製備方法製得之 製劑可以得到良好的溶離率。 請參閱表三與表四，其係分別為實施例七之參中滚度 變化（Treatment B)、市售品（Treatment A)之血中滚度 變化，數據經製圖後則如第3圖所示。 本發明利用粉末包覆原理，增加保護層以減少受光、線 、濕氣影響而變色，又增加腸衣層以減少胃黏膜損害’以 使得該含腸衣層、保護層及含有效成份之顆粒核心列遠+ 腸後即發揮療效。表三證明本發明口服腸溶製劑如中/麻& 上升較傳統非類固醇性消炎劑(Nonsteroid 〆 mtiinflammatory drug; NSAIDS)緩慢，因此，本發明大中〆 改善一般非類固醇消炎止痛劑(NSAIDS)所造成之胃黏媒 損害。另外，本發明方法所製得之三木曱胺克妥洛勝农^ 之中性核心符合美國藥典規定之溶離率，可保留固艘^ 而機 之優點，且本發明並無嗎啡樣之成癮性及禁斷症狀’ 19 1232760 器則可以使用一般之流動層遠心式造粒機（Glatt)或流動層 喷霧造粒機（Huttlin)，不受機型限制，對於製藥界為最好 的方法。 【圖式簡單說明】 有關本發明之詳細說明及技術内容，現就配合圖式說 明如下： 第1圖，係本發明之含三木曱胺克妥洛之口服腸溶製劑結 構示意圖。 第2圖，係本發明之製備含三木曱胺克妥洛之口服腸溶製 劑流程示意圖。 第3圖，係本發明實施例七與市售品之血中濃度變化圖。 表一：係本發明實施例----1製劑之溶離率。 表二：係本發明實施例七製劑之溶離率。 表三：係本發明實施例七製劑之血中濃度變化（Treatment B)。 表四：係市售品之血中濃度變化（Treatment A)。 【主要元件符號說明】 第1圖： 中性核心......1 藥物層.......2 保護層.......3 腸衣層.......4 1232760 第2圖： 製備黏合劑液.......21 製備藥物層之混和粉末··· 22 製備保護層液.......23 製備腸衣層液.......24 含藥物層之球型顆粒· · · · 25 含腸衣層、保護層與藥物層之球型顆粒·· ·26
21 1232760 o o 气 B cn B cn o B 溶離率時間 0.86% 1.14% 0.62% 0·1Ν HCI(120分鐘） 4.28% 4.56% 3.87% ρΗ4·5 (120分鐘） 107.26% 105.93% 103.11% ρΗ6·8 (120分鐘） 体丨 cV s HI n l 溶離率轉速 0.86% ο o 0.25% o 5.3% 8.5% 0.1N HCI(120分鐘）lOOrpm 107.26% 100.5% 95.7% 90.95% 99.6% 93.3% 86.7% pH6.8 (30分鐘）lOOrpm 29 1232760
unit : ng/ml ..below sensitivity iO iNJ 00 〇) 3.5 CO I 2.671 1 2.33| 1 1.671 1 1.331 1 0.831 1 0.671 …〇·5 1 0.331 10.1671 ο Time (hr) 1 20.4 1 78.0 109 172 272 727 270 I 38.0 I I 24.5 I I 29.3j I 37.31 1 20.6 1 * * * * * * * ο 1 ω 41.7 126 152 277 I 390 I 667 303 I 189 I I 205 I 32.1 * * * * * * * * * ο 2-Β _I 28.7 108 128 209 331 657 890 879 193 * * * * * * 卄 * * * ο 3-Β 33.1 97.2 127 203 I 272 I 448 514 I 584 1 I 671 I 1 781 I 831 1 811 I 501 1 1 61.2 1 1 17.2 1 * * * * ο 4-Β 39.7 110 125 197 322 532 631 838 I 874 363 67.5 * * * * * * * * ο 5~Β 25.0 ! 82.2 105 179 259 429 I 464 I 541 I 658 I 1 727 1 L918 1 960 1 1 252 1 1 11.3 1 * * * * * ο 6-Β 32.5 103 128 207 265 434 475 553 594 1 675 I 1 766 1 1 967 1 11045 1 I 63.1 I * * * * * ο 7-Β 25.5 73.0 100 162 251 488 527 603 656 773 832 1 572 | 1 99.5 1 * * * * * * ο 00 1 tfl 16.5 69.4 92.3 151 266 478 557 618 I 718 ! 1 753.1 11015 I 1 552 I L105J I 27.5 I 15.1 * * * * ο CO 1 ω 28.7 98.8 130 240 322 698 799 769 369 155 1 52.01 [24.3 1 30.4 1 15.6 1 13.9 12.5 10.8 * * ο Ο 1 td 32.8 96.8 121 237 409 913 260 27.0 * * * * * * * * * * * ο 1 td 36.0 93.9 109 171 218 338 357 411 449 518 584 1 308 1 11641 1 79.7 1 i 38.6 1 * * * * ο h·^ ΓΟ 1 td 30.1 94.7 119 200 298 567 504 504 492 481 56?—J 527—J [314 1 1 43.1 1 21.2 12.5 10.8 ο ο ο Mean Value I 7.5 1 16.6 CO cn CD L副 I 199 1 1 287 1 1 265 1 1 312 1 1 403 1 1 382 1 ! 357 1 28.61 11.7 0.0 0.0 ο ο ο Ul 〇 30 1232760
unit : ng/ml * : below sensitivity >s CO CO CO 2.67 I 2.331 〇) CO CO 1 0.831 1 0.67! L〇^J 1 0.331 10.1671 o Time (hr) 1 23.3 1 62.4 72.4 123 179 244 281 I 327 I 333 381 I 423 I 1 484 1 1 545 1 | 646」 1 701 1 1 784 1 1 934 I 111351 1 11011 o 1 一A 33.2 91.5 107 1 169 208 325 429 397 346 493 I 526 I 584 1593 I 1637 I L614J [482 1 1 252 1 1 61.3 1 * o i\D 1 31.7 91.0 103 159 222 335 372 399 ! 438 1 480 I 550 600 699 I 810 921 996 110731 1 10611 L3_47 1 o CO 1 > 32.2 94.6 106 163 275 ! 433 480 560 ! 608 676 760 835 965 916 1032 964 881」 1 662 I 227 o 1 > 1 28.8 1 77.6 82.5 144 186 269 | 299 329 349 377 428 46jJ I 544 I I 665 I I 706 I I 739 I 1 883 1 11048 1 1 969 1 o CJ1 1 > 25.3 79.4 95.3 148 214 346 362 427 436 489 I 559 ! 1 640 1 ! 719 I 841 951 ! 1009 I 11112] Illl6l 452 1 o 〇) 1 > 33.5 89.6 123 194 255 395 i 418 I 478 I 505 570 I 669 I 5761 I 373 I 1 247 I 198 L174 —155 — L122J 137.1 I o 7-A 24.2 82.9 99.4 159 251 393 435 418 | 483」 I 494 I 517 527 '590 592 594 591 521 334 86.1 o CO 1 > 26.3 82.8 110 1 189 265 457 468 525 555 582 I 636 1 ί 711 1 809 875 949 1013 1008 811 26.4 o CO 1 i> 21.0 66.9 83.6 155 228 322 366 413 1 429 丨 473 545 1 598 1 1 662 I I 784 I 1 847 1 981 1 ! 1043 1 11177 411 o 0 1 28.9 74.3 92.0 151 224 396 384 460 466 471 541 1 610 1 1 697 1 i 781 1 816 916 990 1097 1 561 o — 1 ί> 23.9 65.4 81.8 117 174 242 261 301 316 343 392 1 448 1 1 521 1 1 463 1 1 365 182 93.6 49.6 * o 1 > 27.7 79.9 96.3 156 223 346 380 420 439 486 546 1 1 590 1 643 1 1 688 1 725 736 745 723 422 o Mean Value | 4.3 1 10.9 1-副 i\D CO CO CO iO <1 CD ΓΟ CO 1 106 1 109. .....1531 19JLJ 251 312 381 458 371 o cn a 31