TW387812B - Novel process for the preparation of lyophilised cetrorelix - Google Patents

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經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 附件二A:第83100769 號專利申請案 中文說明書修正頁 民國88年10月修正 五發明說明（〗）钒10. 西唑瑞利克（cetrorelix)爲具末端羧醯胺基團之十 肽’且係以醋酸鹽使用。西唑瑞利克之結構爲A c — DNa 1— Dpc 1— Phe— DPa 1— Ser — 丁 yr— DCi t— Leu — Ar g — Pro— DAI a 一 NH2，其中Ac爲乙醯基，P指對位，D指D —構型 。其合成與一些藥效係述於歐洲專利申請案2994〇2。 可經皮下，以〇. 1至20mg之劑量，施用該活性物質。此 十肽之水溶液並不安定，於最終容器中進行熱壓消毒是不 可能的。以前述條件進行習用滅菌過程將使此十肽分解。 因此爲了得到可注射溶液，有必要發展一種冷凍乾燥物。 然而，被冷凍乾燥之溶液中活性物質之濃度太低，所 以在將不含輔助物質之溶液乾燥後，只能於安瓿之玻璃壁 上得到鬆散毛狀物》所以有需要使用膨脹劑（bulking agent )以形成安定的餅塊。此輔助物質可以高濃度分散 其中。下列輔助物質可被視爲膨脹劑：己糖醇，特別定甘 露糖醇，葡萄糖醇，山梨糖醇，如D-山梨糖醇，半乳糖 醇，阿洛糖醇（allitol)，阿卓糖醇（altritol)，例如D-與L -阿卓糖醇，艾杜糖醇（iditol)，例如D-與L -艾杜糖 醇，其光學活性形式（D型與L型），以及對應之消旋混 合物。多使用甘露糖醇，特別是D-甘露糖醇，L -甘露糖 醇，DL -甘露糖醇，山梨糖醇及/或半乳糖醇，且較好爲 D -甘露糖醇。所用己糖醇亦可爲所述各種己糖醇之混合 物，例如甘露糖醇與山梨糖醇及/或半乳糖醇之混合物。 因爲半乳糖醇之水溶性較，例如，甘露糖醇，爲低，所以 本紙張尺度適用令國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------^---------0 *(, (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) -3 - 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 附件二A:第83100769 號專利申請案 中文說明書修正頁 民國88年10月修正 五發明說明（〗）钒10. 西唑瑞利克（cetrorelix)爲具末端羧醯胺基團之十 肽’且係以醋酸鹽使用。西唑瑞利克之結構爲A c — DNa 1— Dpc 1— Phe— DPa 1— Ser — 丁 yr— DCi t— Leu — Ar g — Pro— DAI a 一 NH2，其中Ac爲乙醯基，P指對位，D指D —構型 。其合成與一些藥效係述於歐洲專利申請案2994〇2。 可經皮下，以〇. 1至20mg之劑量，施用該活性物質。此 十肽之水溶液並不安定，於最終容器中進行熱壓消毒是不 可能的。以前述條件進行習用滅菌過程將使此十肽分解。 因此爲了得到可注射溶液，有必要發展一種冷凍乾燥物。 然而，被冷凍乾燥之溶液中活性物質之濃度太低，所 以在將不含輔助物質之溶液乾燥後，只能於安瓿之玻璃壁 上得到鬆散毛狀物》所以有需要使用膨脹劑（bulking agent )以形成安定的餅塊。此輔助物質可以高濃度分散 其中。下列輔助物質可被視爲膨脹劑：己糖醇，特別定甘 露糖醇，葡萄糖醇，山梨糖醇，如D-山梨糖醇，半乳糖 醇，阿洛糖醇（allitol)，阿卓糖醇（altritol)，例如D-與L -阿卓糖醇，艾杜糖醇（iditol)，例如D-與L -艾杜糖 醇，其光學活性形式（D型與L型），以及對應之消旋混 合物。多使用甘露糖醇，特別是D-甘露糖醇，L -甘露糖 醇，DL -甘露糖醇，山梨糖醇及/或半乳糖醇，且較好爲 D -甘露糖醇。所用己糖醇亦可爲所述各種己糖醇之混合 物，例如甘露糖醇與山梨糖醇及/或半乳糖醇之混合物。 因爲半乳糖醇之水溶性較，例如，甘露糖醇，爲低，所以 本紙張尺度適用令國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------^---------0 *(, (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) -3 - A7: I年，月〆 五、發明說明（2 ) 禰 在水溶液中半乳糖醇之含置不應超過3重置％。另一方面 ，甘露糖醇與山梨糖醇則可以任何比例混合。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 除了己糖醇，亦可添加其他習用藥學輔助物質，例如 胺基酸，如丙胺酸，甘胺酸，賴胺酸，苯丙胺酸，天冬醯 胺酸，榖胺酸，亮胺酸，乳糖，聚乙烯吡咯烷酮，葡萄糖 ，果糖，白蛋白，以及類似之膨脹劑。尿素與氯化鈉亦可 用作爲膨脹劑。此類物質在冷凍乾燥溶液中之總量爲，例 如0—16. 9重量份，譬如0.重量份，前述數 值係基於，重量份之西唑瑞利克。在最後之冷凍乾燥物中 ，這些輔助物質的總含量可能高達16. 9重置份（基於 1重置之己糖醇）。詳細言之，此類輔助質的量取決於所 用己糖醇之量，且在最終冷凍乾燥物中，己糖醇與此類其 他輔助物質之總置不可超過1 7重量份之最大值（該數值 係基於1重量份之西唑瑞利克）。若在冷凍乾燥物中，只 有0. 1重置份之已糖醇，則可具有至髙達16. 9重量 份之其他輔助物質；又例如若在於冷凍乾燥物中，有 8. 5重量份之己糖醇，則可具有至高達8. 5重量份之其 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 他輔助物質，前述數值係基於1重量份西唑瑞利克而言。 然而在冷凍乾燥物之研發過程中，發現到活性物質在 加工處理過程中之表現大幅變動且不可預測。首次批次中 可能給出好結果，但很快便發現到於滅菌過濾時遇到困難 ，於是產生有缺點之批次。 由文獻可知，例如Powell，M.F.;Pharmacmaceutical Research,1258-1263(8)1991;Dathe, M： Int.J.Peptide 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐〉 一 4 一 A7: I年，月〆 五、發明說明（2 ) 禰 在水溶液中半乳糖醇之含置不應超過3重置％。另一方面 ，甘露糖醇與山梨糖醇則可以任何比例混合。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 除了己糖醇，亦可添加其他習用藥學輔助物質，例如 胺基酸，如丙胺酸，甘胺酸，賴胺酸，苯丙胺酸，天冬醯 胺酸，榖胺酸，亮胺酸，乳糖，聚乙烯吡咯烷酮，葡萄糖 ，果糖，白蛋白，以及類似之膨脹劑。尿素與氯化鈉亦可 用作爲膨脹劑。此類物質在冷凍乾燥溶液中之總量爲，例 如0—16. 9重量份，譬如0.重量份，前述數 值係基於，重量份之西唑瑞利克。在最後之冷凍乾燥物中 ，這些輔助物質的總含量可能高達16. 9重置份（基於 1重置之己糖醇）。詳細言之，此類輔助質的量取決於所 用己糖醇之量，且在最終冷凍乾燥物中，己糖醇與此類其 他輔助物質之總置不可超過1 7重量份之最大值（該數值 係基於1重量份之西唑瑞利克）。若在冷凍乾燥物中，只 有0. 1重置份之已糖醇，則可具有至髙達16. 9重量 份之其他輔助物質；又例如若在於冷凍乾燥物中，有 8. 5重量份之己糖醇，則可具有至高達8. 5重量份之其 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 他輔助物質，前述數值係基於1重量份西唑瑞利克而言。 然而在冷凍乾燥物之研發過程中，發現到活性物質在 加工處理過程中之表現大幅變動且不可預測。首次批次中 可能給出好結果，但很快便發現到於滅菌過濾時遇到困難 ，於是產生有缺點之批次。 由文獻可知，例如Powell，M.F.;Pharmacmaceutical Research,1258-1263(8)1991;Dathe, M： Int.J.Peptide 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐〉 一 4 一 附件一A :

第83100769號專利申請案中文補充資料 85年6月呈

批號 溶液於過濾前之濃度 (肽 ιβ/·1) 比例 醣酸：肽 (重量：重量） 過濉後之肽含 置 9511-001/02 0.25 122:1 >97% 94407 0.30 100:1 99. 94404 0·10 300:1 100.6% 93377 0.50 61:1 107.6¾ 9509-001/03 1.00 30:1 100.2X A6 B6 五、發明説明（3 ) Protein Res. 344-349(36)1990;Szejtli, J.： P h a r n a c e u t i c a 丨 T e c h n ο 1 o g y 丨 n t e r π a t i ο n a 1 16 - 2 2 , 1991，寡肽類易形成凝膠（gels)，特別是那些具有末端 羧臁胺基者。在滅菌過濾時，上述現象可由過濾速度很明 顯地看出，而且確實經常可藉感官觀察到這些溶劑之過濾 時間增長了。此外並有膠狀層留在殺菌濾膜上。所以無法 製得活性物質被準確定置之苐劑。 表1列出首次1 1個批次之各種結果。該活性物質之 含置在1 0 0%至3 6%間變動。 經濟部中央標準局貝工消费合作杜印製 表 西唑瑞利克醋酸盥 批次 繭量 活性物W 1 1 00 p g 100 2 5 0 0 # g 100 3 5 0 0 # g 90 4 5 0 0 ^ g 36 5 500 只 g 100 6 5 0 0 // g 85 7 lm g 80 8 lm g 100 9 2m g 100 10 2m g .80 11 2m g 100 % .....................................................................................¥......................•玎.....................線 {請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁)

本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） 387B12 組切.19 充丨付件一 A :第83丨00769號專利申請案中文補充資料 88年10月呈 過濾實驗 將西唑瑞利克溶於水或醋酸中。濃度示於以下之表中。溶液中之肽含 量以HPLC測定。使溶液通過一個孔隙爲〇.22μιη之濾膜。過濾之後濾液 中之肽含量再已相同之HPLC方法測定。 結果示於以下之表中： 實驗編號 肽含量 溶劑 過據前之含量 過濾後之含量 1 0.25 mg/ ml 水 100% 96.6% 2 0.25 mg/ ml 3%醋酸 100% 99.6% 3 1 mg/ ml 水 100% 76.2% 4 1 mg/ ml 3%醋酸 100% 100% 5 2 mg/ ml 水 100% 15.3% 6 2 mg/ ml 3%醋酸 100% 70.9% 7 5 mg/ ml 水 100% 4.1% 8 5 mg/ ml 3%醋酸 100% 78.6% 由這些結果所得之結論爲，肽在醋酸中之溶解作用對溶液之可過濾性 具有顯著之效果。若肽濃度較高，則此效果更顯著。若將肽溶於水中，則 導致於無菌過濾步驟後肽含Μ之降低。因此’無菌過濾步驟只可藉著使用 醋酸作溶劑而施行。 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 A6 B6_ 五、發明説明（4 ) 爲了避免凝膠形成，文獻中列出下列添加劑，其可以 實驗加以嘗試： 可考慮使用有機溶劑，例如乙腈，正丁'醉，第三丁 醇，乙醇，異丙酵，辛酵與苄醇。亦可使用鹽與緩衡溶液 ，例如醑酸鹽嫌街物質，檸様酸鹽緩衝物質，氣化鈉，磷 酸鈉，乙二胺四醑酸鈉*碳酸氫鈉，磷酸鹽緩衝物質，醋 酸胍，尿索。 亦可使用聚合物，例如明膠，聚乙二酵6 0 0，羥乙 基濉粉，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇。亦有述及使用胺基 酸，例如丙胺酸，甘胺酸，賴胺酸，苯丙胺酸，天冬醯胺 酸，穀胺酸與亮胺酸。 又所用的酸有檸嫌酸，癸酸，辛酸，》酸·，硫酸與醱 酸。生理上可接受調整張力物質（tens ides)爲氣化苄烷 醉，十六烷醉，膽汁酸，卵磷脂，聚山梨糖酵豳，

Spans®與Pluronics®。破水化合物與環糊精，如葡萄糖 ，乳糖，甘露糖醇.，蔗糖，α，点一與r 一葡糖糊精，羥 丙基一 α —與一々一環糊精，羥乙基環糊精以及甲基環糊 精業經使用。道些辅助物質經試驗可作爲過濾助劑以防止 凝膠形成。 但是對於此問題並無令人滿意之解決。只有以/賺酸酸 化顯示部分成功。然而其亦總是會有髙過濾損.失Υ令人訝 異的是西唑瑞利克易溶於3 p%v/v之醑酸中，^所以接 著可將此溶液以水稀釋至含3 %西唑瑞利克之最終澳度以 逋於注射所用，且其中再加入甘霣糖醇。雖然女獻中說道 表紙張尺度遑用中Β8家揉準（CNS)甲4规格(210x297公釐） _ c _ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} •裝 •訂 經濟部中央樣準局貝工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（5 ) 胲末端羧醯胺基於酸性介質中易水解，但此在西唑瑞利克 的例子中並未發現。根據此法製得的溶液在過濾時並無困 難發生，且總可得到正活性％ 過濾速度亦遑到可確保令人滿意製程之數値。殺菌冷 凍乾燥之一般步驟係述於Sucker ,Fuchs與Speriser (出 版者）* P h a r m a z e u t i s c h e T e c h n ο 1 〇 g i e ’ 第二版， 1 9 9 1，T h i e m e - V e r 1 a g，S t u 11 g a r t - N e w Y o r k，第 5 5 7 — 5 5 9頁。所用冷凍乾燥方法之進一步說明係於 德國公開說明害（DOS) 3735614中。 本案冷凍乾燥物係用於治療女性不孕。迄.今仍在使用 之一種療程爲使用人類絕經性腺激素來刺激滅泡成热，然 後再投予人類賊毛膜性腺激索來引發排卵。3 2小時後將 會發生所述引發之排卵。所收集的卵則可用於«外受精。 上述使用催動劑之治療法的缺點爲在刺激期中會有多 達1 0個《泡成熟。此過高之濾泡成熟現象導致LH激素 澳度高峰。這些高峰造成濾泡之早期成熟，而在時間上無 法預期排卵日。此種不良排卵在治療案例中的發生機率約 爲2 5 %，且屬於一種缺點，因爲如此類受干擾之排卵周 期無法被用來收集，且整個治療得在1個月後重來。 此習用刺激療法的另一個缺點爲療程長約4星期，因 爲4星期爲達成令人滿意的分泌閉止所必需。1 — 2 %的 病例中發現胲催動劑持績展稈過度刺激症候群，使濾泡細 胞肥大。過度剌激在多囊卵巢的例子中尤其危險。髙度刺 激症候群是很嚴重的副作用，其可能導致死亡。 {請先《讀背面之注意事项再填寫本頁) -裝 •訂. 本紙張尺度逋用中困國家橾準（CNS)甲4规格（210X297公釐） -7 - 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（6 ) 今發現拮抗劑西唑瑞利克在此特定治療法中具有下述 優酤： 以西唑瑞利克治療五天後便足以達到完全閉止分泌。 過度刺激症候群無法發生。此外在治療的第2期，即排卵 引發期，只窬使用較少的HCG (人類絨毛膜性腺激索） ，此使得«外受精治療不褥大量成本之優點。體外受精係 於，例如當输卵管異常（tube anomaly)發生時使用。欲 進行此療法，必須盡可能精確監視排卵周期與確立排卵時 間。此項工作迄今僅達到某一程度，因爲在 HMG/HCG (HMG :人類筢經性腺激素）的刺激下 ，排卵前之LH增加通常太早發生了，或是此增加現象維 持的不夠久。然而避免此成熟前之增加對於治療成功率是 非常重要的，因爲成功的治療需精確決定受精的時間。此 減少了病患生理上與心理上的負擔，且使得醫院調度可以 有最佳使用效率。爲了有效達到此目的，窬盡可能完全閉 止內生激素之產生（LH — FSH，雌二醇）以同時藉由 施用外生性腺激索（HMG/HC G )刺激濾泡成熟與隨 時監視激素的澳度狀態。惟有當足置濾泡數目'達成時（4 至6個），且具有相近成热度，才以HCG丸劑注射而引 發排卵。 使用拮抗劑基本上使治療較易成功且對病患較爲安全 Ο 本案西唑瑞利克冷凍乾燥物另一應用範圍爲保護雄性 病患之性腺。令雄性病患以西唑瑞利克冷凍乾燥物予以預

本紙張尺度適用中困國家揉準（CNS)甲4规格(210x297公;SN 裝...............:…·：訂.....................線 <請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) A6 B6 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製

五、發明説明（7 ) 治療（pre-treated) ，則性腺的活性被强化。所以其他 有害毒性試劑，例如族射線治療或以細胞增殖及發育阻止 劑之治療，對於性腺之敏感組織不會有影響或僅是很小的 影響。 製備方法之實例： 將約1·5升之注射用水置於逋當玻璃容器中。於另 —玻璃容器中置入2 1 0 g注射用水，並加入9 1 · 1 7 g醋酸。將預計數置之西唑瑞利克酿酸鹽（1 · 6 2至、、 V \、 1 · 6 9 5 g，視所用批次之含置而定）溶於製好客3/ %醋酸中，並攪拌。將此溶液移至裝有1 · 5升注X水 之玻璃容器中，加入82·2g甘霣糖醇，溶解，並以注 射用水配成3 0 3 9 g。 ! 皞上檢驗： PH 値：2.5-3.0 密度：1 · 009-1 . 017g/cm3(20°C) 折射率：1 .227-1 .340 (440nm，20 °C ) 於滅菌狀況下令此溶液經逋當濾膜（孔大小0 _ 2 #m)過濾而滅菌。首先流出之1 0 OmL應予丟棄。濾 膜應以過熱蒸氣滅菌。西唑瑞利克之冷凍乾燥溶液在貯存 時應避免再受污染。 I 立刻將此溶液於滅菌狀況下裝入無色注射瓶DIN <請先閲讀背面之注意事项再蜞窝本頁) •裝 .訂. -線. Ψ 本纸張尺度適用t國团家«準（CUS)甲4规格（210x297公釐} A6 _____B6_ 五、發明説明（8 ) 2 R，水解級數I，該注射瓶並附有滅菌之冷凍乾燥用塞 子。一般的裝塡量爲2 · 0mL=2 · 0 2 6g。 2 m L注射瓶係於注射瓶清洗機中清洗，以熱空氣乾 燥後滅菌。經洗淨之冷凍乾燥塞子則再經熱壓消毒。將加 盖塞子後之注射瓶移至冷凍乾燥裝置中，並於.- 4 0°C之 盤溫下冷凍。使用一盤溫由一4 OeC升至+ 2 OeC之乾燥 規畫程式進行乾燥。然後令此裝置中充滿無菌氮氣，於裝 置中令瓶子密閉，並以壓邊盖（crimped acp)繫緊塞子 Ο 目測注射瓶是否有密閉不良與外部缺黏，移除不良注 射瓶並銷毀。 西唑瑞利克冷凍乾燥物，lmg，於無色2mL注射 餌中係呈白色、固《、冷凍乾燥之塊狀，賅瓶經灰色冷凍 乾燥用塞子與黃色、彈開式（flip-off)壓邊羞所密封。 {請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)f4规格(210x297公釐） 附件一A :

第83100769號專利申請案中文補充資料 85年6月呈

批號 溶液於過濾前之濃度 (肽 ιβ/·1) 比例 醣酸：肽 (重量：重量） 過濉後之肽含 置 9511-001/02 0.25 122:1 >97% 94407 0.30 100:1 99. 94404 0·10 300:1 100.6% 93377 0.50 61:1 107.6¾ 9509-001/03 1.00 30:1 100.2X 實例1 將約Ο. 75升之注射用水置於適當玻璃容器中。於另 一玻璃容器中置入1 Ο 5 g注射用水，並加入4 5 . 5 9 s 醋酸。將預計數量之西唑瑞利克酷酸發（Ο. 1 62至 Ο . 1 7 O s ,視所用批次之含量而定）溶於製好之3 Ο% 醋酸中，並册伴。將此溶液移至裝有Ο. 7 5升注射用水之 玻璃容器中，加入8 2. 2 s甘露耱酵，溶解，並以注射用 水配成1 6 2 O s 〇 於滅菌狀況下令此溶液經適當滅膜（孔大小〇. 2 A/m )過施而滅菌。首先流出之1 OOmL應予丢棄。濂膜應以 過熱蒸氣滅菌。西唑瑞利克之冷凍乾燥溶液在貯存時應避免 再受污染。 立刻將此溶液於滅菌狀況下装入無色注射瓶D I N2 R ，水解级數I，該注射瓶並附有滅菌之冷凍乾燥用瘗子。一 般的裝镇量為1. 〇mL=l. OSOg。 2mL注射瓶係於注射瓶淸洗機中清洗，以熱空氣乾燥 後滅菌。經洗淨之冷凍乾燥塞子則再經熱陋消毒。將加蓋塞 子後之注射瓶移至冷凍乾燥裝置中，並於一 4 0 X：之盤溫下 冷凍。使用一盤溫由一 4 Ο TC升至+ 2 O °C之乾燥規畫程式 進行乾燥。然後令此裝置中充滿無菌氣氣，於裝董中令瓶子 密閉，並以邊蓋（crimped cap)繫緊塞子。 目測注射瓶是否有密閉不良與外部缺點，移除不良注射 瓶並銷毀。 西唑瑞利克冷凍乾燥物· 〇 . 1 m g ,於無色2 m L注 射瓶中像呈白色、固*8、冷凍乾燥之塊狀，該瓶經灰色冷凍 乾燥用塞子與黃色、彈開式（flip-off)壓邊蓋所密封。 實例2 將約3. Ο升之注射用水置於適當玻璃容器中。於另一 玻擁容器中置入4 3 O s注射用水，並加入1 8 3 . 9 β s 醋酸。將預計數量之西睡瑞利克酿酸鹽（1. 5 8至1· 8 1 s,視所用批次之含量而定）溶於製好之3 0%醋酸中， 並播拌。將此溶液移至裝有3. Ο升注射用水之玻璃容器中 ，加入32 8. 8Os甘露糖酵，溶解，並以注射用水配成 6 1 3 2 s 〇 線上檢驗： p Η 值·· 2 . 5 — 3 . Ο 密度：1. 018— 1. 026g/cm3 (2〇eC) 折射率：1. 341—1. 344 於滅菌狀況下令此溶液經適當濾膜（孔大小O. 2 )過濾而滅菌。首先流出之1OOmL應予丢棄。濾膜應以 過熱蒸氣滅菌。西唑瑞利克之冷凍乾燥溶液在貯存時應避免 再受汚染。 立刻將此溶液於滅薗狀況下裝入無色注射瓶D I 1ST 2 R ，水解級數I,該注射瓶並附有滅菌之冷凍乾燥用塞子。一 般的装填量為2. OmL=l. 022s。 2mL注射瓶偽於注射瓶清洗機中清洗，以熱空氣乾燥 38781» 後滅菌。經洗淨之冷凍乾燥塞子則再經熱IE消毒。將加蓋塞 子後之注射瓶移至冷凍乾燥裝置中，並於-4 0°C之盤溫下 冷凍。使用一盤溫由一 4 Or：升至+20 C之乾燥規耋程式 進行乾燥。然後令此裝置中充滿無菌氮氣，於裝置中令瓶子 密閉，並以歷邊蓋（crimped cap)繫緊塞子。 目測注射瓶是否有密閉不良與外部缺點，移除不良注射 瓶並銷毀。

西_瑞利克冷凍乾燥物，1. 2 5m g,於無色2mL 注射瓶中係^呈白色、固臞、冷凍乾燥之塊狀，該瓶經灰色冷 凍乾燥用塞子與黄色、彈開式（flip—〇ff)歷邊蓋所密封。 387B12 組切.19 充丨付件一 A :第83丨00769號專利申請案中文補充資料 88年10月呈 過濾實驗 將西唑瑞利克溶於水或醋酸中。濃度示於以下之表中。溶液中之肽含 量以HPLC測定。使溶液通過一個孔隙爲〇.22μιη之濾膜。過濾之後濾液 中之肽含量再已相同之HPLC方法測定。 結果示於以下之表中： 實驗編號 肽含量 溶劑 過據前之含量 過濾後之含量 1 0.25 mg/ ml 水 100% 96.6% 2 0.25 mg/ ml 3%醋酸 100% 99.6% 3 1 mg/ ml 水 100% 76.2% 4 1 mg/ ml 3%醋酸 100% 100% 5 2 mg/ ml 水 100% 15.3% 6 2 mg/ ml 3%醋酸 100% 70.9% 7 5 mg/ ml 水 100% 4.1% 8 5 mg/ ml 3%醋酸 100% 78.6% 由這些結果所得之結論爲，肽在醋酸中之溶解作用對溶液之可過濾性 具有顯著之效果。若肽濃度較高，則此效果更顯著。若將肽溶於水中，則 導致於無菌過濾步驟後肽含Μ之降低。因此’無菌過濾步驟只可藉著使用 醋酸作溶劑而施行。 387812 製備方法之實例 供注射用之水先被充入一適宜之玻璃容器內。在另一玻璃容器內，使 用供注射用之水與醋酸製備30%濃度之醋酸溶液。將適量之西唑瑞利克醋 酸鹽經攪拌溶解於適量之上述所製30%濃度醋酸溶液中。此溶液被移入盛 有供注射用水之玻璃容器內，添加適量之甘露糖醇並溶解之，再以注射用 之水補充至適當之最終量。 pH、密度及折射率被測定作爲方法步驟中之控制參數。 於無菌狀況下使溶液經適當濾膜過濾而滅菌。該濾器已先經滅菌處 理。在過濾前，欲被冷凍乾燥之西唑瑞利克溶液須有一適當量被作爲初流 出物而丟棄。欲被冷凍乾燥之西唑瑞利克溶液被妥善存放免於被再度污 染。於無菌狀況下，使溶液立刻裝入適宜之注射瓶中，其再被適宜之塞子 封好以供冷凍乾燥。將欲被冷凍乾燥之注射瓶及塞子淸洗、滅菌，及若適 宜的話，經高溫處理。將已封閉之注射瓶移至冷凍乾燥裝置中，於-4CTC 〜-50°C之盤溫下冷凍。使用一盤溫由-40°C〜-50°C升至+20°C~+25°C之 乾燥規畫程式進行乾燥。然後令此裝置中充滿無菌氮氣，於裝置中令瓶子 密閉，並以歷邊蓋繫緊塞子。 目視注射瓶是否有密閉不良及外部缺點。移除不良注射瓶並銷毀。 西唑瑞利克冷凍乾燥物於無色注射瓶中呈白色、固體、冷凍乾燥之塊 狀，該瓶經灰色冷凍乾燥用之塞子與壓邊蓋所密封。 依照本案方法之一般敘述，使用如下示之比例以製備所需之劑量濃 度： 西唑瑞利克 0.25 mg 1 mg 3 mg 10 mg 甘露糖醇 54.8 mg 54.8 mg 164.4 mg 219.2 mg 30%醋酸:1份數 1 ml 2 ml 3 ml 10 ml 注射用之水:9份數 387812 計算1份數之西唑瑞利克，獲得如下之重量比例: 西唑瑞利克 1份數 1份數 1份數 1份數 甘露糖醇 219.2份數 54.8份數 54.8份數 21.9份數 30%醋酸 400份數 200份數 100份數 100份數 注射用之水 3600份數 1800份數 900份數 900份數

Claims (1)

1. A8B8C8D8 387812 六、申請專利範圍 年月〆爹正 - 88. 11. 23 補充 公^吾禾： _I第83100769號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國88年1 1月修正 _1 .—種製備無菌西哩瑞利克（cetrorelix)醋酸鹽 冷凍乾燥物之方法，其特徵爲使1重量份之西唑瑞利克醋 酸鹽溶於1 0 0 — 1 0 0 0重量份之3 090濃度醋酸中， 使所得溶液移至1 0 0 — 4 0 0 0重量份之注射用之水中 ，及視褥要添加2 0 — 3 0 0重量份之構成結構用之物質 ，再使形成之混合物於無菌狀況下過濾，然後裝入注射用 瓶中並冷凍乾燥。 2 .如申請專利範圍第1項之方法，其中所使用構成 ' 結構用之物質爲甘露糖醇。 3. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中所製得 之西唑瑞利克醋酸鹽冷凍乾燥物可用於製備用以治療女性 不孕之藥品。 4. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中所製得 西唑瑞利克醋酸鹽冷凍乾燥物可用於製備用以保護性腺之 藥品。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------— — Ill — --- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂： 線. 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 A8B8C8D8 387812 六、申請專利範圍 年月〆爹正 - 88. 11. 23 補充 公^吾禾： _I第83100769號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國88年1 1月修正 _1 .—種製備無菌西哩瑞利克（cetrorelix)醋酸鹽 冷凍乾燥物之方法，其特徵爲使1重量份之西唑瑞利克醋 酸鹽溶於1 0 0 — 1 0 0 0重量份之3 090濃度醋酸中， 使所得溶液移至1 0 0 — 4 0 0 0重量份之注射用之水中 ，及視褥要添加2 0 — 3 0 0重量份之構成結構用之物質 ，再使形成之混合物於無菌狀況下過濾，然後裝入注射用 瓶中並冷凍乾燥。 2 .如申請專利範圍第1項之方法，其中所使用構成 ' 結構用之物質爲甘露糖醇。 3. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中所製得 之西唑瑞利克醋酸鹽冷凍乾燥物可用於製備用以治療女性 不孕之藥品。 4. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中所製得 西唑瑞利克醋酸鹽冷凍乾燥物可用於製備用以保護性腺之 藥品。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------— — Ill — --- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂： 線. 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 六 3 —“年、另有修 7 7 7 7 A B c D lET^f 本專利私团 食種製備肽類冷凍乾燥物 係由具3至15個胺基酸之肽與選 膨脹劑所成，此方法之特徽在於將 1 0 0至1 0 0 0 0重置份之醋酸 令如此所得溶液被冷凍乾燥。 2.如申請專利範鼸第1項之 爲甘霣糖醇。 3 .如申請專利範園第1項之 瑞利克（cetrorelix)。 4 . 一種以如申腈專利範摑第 乾燥物，其係用於治療女性不孕。 5. —種以如申請專利範園第 乾燥物，其係用於保護性腺。 6. —種以如申猜專利範圍第 乾燥物，其係用於製備治療女性不 7 .—種以如申請專利範園第 乾燥物，其係用於製備保護性腺之 之方法，骸冷凍乾燥物 擇性存在之一種或多種 1重量份之肽係溶於 中，然後移至水中，再 方法，其中所用膨脹劑 方法，其中.該肽爲西唑 1項之方法製得之冷凍 1項之方法製得之冷凍 1項之方法製得之冷凍 孕之槊物。 1項之方法製得之冷凍 薬物。 (請先«Is*!面之注項*瑱寫本¾) 丨装· 訂· (線. 經濟部中央《準為貝工消#合作杜印« 本紙張尺及迷用中國B家揉準（CNS) T 4规格（210 X 297公釐） -ττ^ 六 3 —“年、另有修 7 7 7 7 A B c D lET^f 本專利私团 食種製備肽類冷凍乾燥物 係由具3至15個胺基酸之肽與選 膨脹劑所成，此方法之特徽在於將 1 0 0至1 0 0 0 0重置份之醋酸 令如此所得溶液被冷凍乾燥。 2.如申請專利範鼸第1項之 爲甘霣糖醇。 3 .如申請專利範園第1項之 瑞利克（cetrorelix)。 4 . 一種以如申腈專利範摑第 乾燥物，其係用於治療女性不孕。 5. —種以如申請專利範園第 乾燥物，其係用於保護性腺。 6. —種以如申猜專利範圍第 乾燥物，其係用於製備治療女性不 7 .—種以如申請專利範園第 乾燥物，其係用於製備保護性腺之 之方法，骸冷凍乾燥物 擇性存在之一種或多種 1重量份之肽係溶於 中，然後移至水中，再 方法，其中所用膨脹劑 方法，其中.該肽爲西唑 1項之方法製得之冷凍 1項之方法製得之冷凍 1項之方法製得之冷凍 孕之槊物。 1項之方法製得之冷凍 薬物。 (請先«Is*!面之注項*瑱寫本¾) 丨装· 訂· (線. 經濟部中央《準為貝工消#合作杜印« 本紙張尺及迷用中國B家揉準（CNS) T 4规格（210 X 297公釐） -ττ^