TWI885001B

TWI885001B - 欣得泰乾粉注射劑穩定劑型

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Publication number: TWI885001B
Application number: TW109136923A
Authority: TW
Inventors: 杰戴普喬希; 拉凱什桑瑪; 蘇迪普阿戈沃; 蘇巴斯巴拉蘭帕米克; 阿魯恩庫瑪爾亞大夫; 拉加曼納瑟恩娜緹
Original assignee: 印度商聖製藥工業有限公司
Priority date: 2019-10-24
Filing date: 2020-10-23
Publication date: 2025-06-01
Also published as: SA522432367B1; RS62754B1; MX2022004859A; CL2022001021A1; MA55417A; PT3811927T; DK3811927T3; EP3811927B1; IL293908B1; JP2023501902A; PH12022550967A1; AU2020369236B2; HRP20211890T1; CA3155348A1; PL3811927T3; MA54713A; ES2902784T3; JP7682869B2; AR120290A1; MA55417B1

Abstract

本發明與具有欣得泰乾粉（cetrorelix acetate）的即可注射無菌穩定水溶液的穩定注射劑型有關。本發明也與一種預充有欣得泰乾粉的即可注射無菌穩定水溶液的注射裝置有關。本發明與一種抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，該方法包括具有欣得泰乾粉的即可注射無菌穩定水溶液的穩定注射劑型。

Description

欣得泰乾粉注射劑穩定劑型

本發明與一種具有欣得泰乾粉（cetrorelix acetate）的即可注射、無菌、穩定水溶液的穩定注射劑型有關。本發明也與一種預充有欣得泰乾粉的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射裝置有關。本發明與一種用於抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，該方法包括具有欣得泰乾粉的即可注射、無菌、穩定水溶液的穩定注射劑型。

欣得泰（cetrorelix）是促性腺素釋放激素拮抗劑（GnRH拮抗劑）乙醯基-D-3-(2'-萘基）-丙胺酸-D-4-氯苯丙胺酸-D-3-(3'-吡啶基)-丙胺酸-L-絲胺酸-L-酪胺酸-D-瓜胺酸-L-白胺酸-L-精胺酸-L-脯胺酸-D-丙胺酸-醯胺(C₇₀ H₉₂ ClN₁₇ O₁₄ )(acetyl-D-3-(2'-naphtyl)-alanine-D-4-chlorophenylalanine-D-3-(3'-pyridyl)-alanine-L-serine-L-tyrosine-D-citruline-L-leucine-L-arginine-L-proline-D-alanine-amide)，其具有下面的化學式。其具有末端醯胺基團的十胜肽。其藉由阻斷GnRH對垂體的作用而起作用，因此迅速抑制促黃體激素及卵泡刺激激素的產生及作用。

需要胜肽水溶液以用於注射投藥。然而，例如欣得泰之類的胜肽水溶液容易化學降解。它們還易聚集，因此，在儲存時，溶液的濁度或渾濁度升高。

市場上的第一個產品是Cetrotide^® 。其是以在玻璃小瓶中含有0.25 mg或3 mg欣得泰的冷凍乾燥粉可得的。獨立地提供具有1 ml或3 ml的注射用無菌水的預充玻璃注射器，並且只在注射之前製備該溶液。因此，僅藉由避免製備含有需要長時間儲存的水溶液的劑型，第一產品解決了水溶液中的降解問題。取而代之的是，為避免不穩定問題，除去水並且製備凍乾物。然而，針對該問題的解法具有明顯缺陷：（1）昂貴而且耗時製程；（2）產品不是即可注射的、且需要在投藥之前回溶；以及（3）回溶的溶液只在短時段穩定。因此，Cetrotide^® 未滿足即可注射水溶液的需要。

US 7,718,599揭露欣得泰水溶液容易聚集。在偏振光顯微鏡下，觀察到液晶結構。對欣得泰乾粉溶液（2.5 mg/ml）加入葡萄糖酸，藉以，對於造成pH為3.7的低於0.07%的葡萄糖酸濃度，2天內看到聚集。當pH大於3.7時，報告了類似的失敗。當葡萄糖酸的濃度升高到0.71%時，造成pH為3.1，在12天中看到聚集，說明較高的葡萄糖酸濃度及由此造成的較低pH導致改善。該方法的缺陷在於，聚集問題的解決程度取決於葡萄糖酸濃度，且隨著葡萄糖酸增多，pH降低。然而，US 7,718,599未報告pH對欣得泰的化學穩定性的影響。另外，不存在長期儲存穩定性研究期間未看到聚集的調配物。US 2013/0303464揭露用於注射的一種欣得泰的即可使用水性製劑，其包括欣得泰乾粉、冰醋酸、張力調節劑以及注射用水。藉由pH為約3的運作範例，例示較佳的pH。根據發明的較佳pH為pH 2.8至3.5。

US 7,214,662揭露包括欣得泰乾粉的胜肽水溶液及針對聚集問題建議的溶液。其教導羧酸並且特別是羥基羧酸（較佳為葡萄糖酸）與界面活性劑組合減小聚集。根據US 7,214,662，羧酸的使用造成例如2.5至3之類的低pH。

本發明的目的是提供一種包括欣得泰乾粉的即可注射無菌穩定水溶液的注射劑型。本發明的另一目的是提供一種預充有欣得泰乾粉的無菌穩定水溶液的注射裝置。如本文使用的術語「即可注射」指適合直接皮下或肌肉內投藥的欣得泰乾粉的即可注射、無菌、穩定水溶液，亦即，其為即可注射且在注射之前不需要回溶或稀釋。更特別是，另一個目的是注射裝置中分佈的欣得泰乾粉的無菌穩定水溶液即可注射，不僅在聚集或濁度發展的控制方面物理穩定，而且化學穩定，使得在該注射劑型儲存於貨架上時，且直到被皮下或肌肉內注射至患者內，不純物殘留少。

胜肽的降解能夠導致本身可具有藥理活性的其他胜肽及/或胜肽衍生物的產生。因此，更特別是，該目的是發展一種使個別不純物分離且計量這些不純物的方法。該目的為限制該等不純物的濃度。本發明人發現在本文之前的先前技術中沒有報導的一種使在本文之前的先前技術中沒有報導的幾種不純物的峰值分離的高效液體層析（「HPLC」）方法。然而先前技術主張低pH值以降低凝集，本發明人使用本發明人的HPLC方法發現，在本發明的注射劑型中，就在某個時間段內不純物水準增加而言，3至5的pH對於化學穩定是最佳的，而且還可以此較高pH製備欣得泰乾粉的水溶液，而沒有凝集問題。

本發明人發現的新穎不純物是下面給出的化學式I的化合物表示的不純物A：化學式I。

不純物B的特徵在於具有下面給出的化學式II的化合物表示的結構：化學式II。

不純物D的特徵在於具有下面給出的化學式III的化合物表示的結構：化學式III。

不純物F的特徵在於具有下面給出的化學式IV的化合物表示的結構：化學式IV。

先前技術為穩定性而考慮將3.0的低pH作為最佳pH；然而，本發明發現，在先前技術主張的2.5至3.0的pH值，在25^o C/60%相對濕度下儲存溶液後，不純物A的水準顯著增加。

先前技術都未分別鑑定化學式I、II、III及IV的化合物，亦即，不純物A、B、D及F。

本發明發現不僅可以在pH 3至5製備欣得泰乾粉的穩定水溶液而沒有凝集問題，並且不純物A及全部不純物的水準也可以被良好地控制、且在25^o C/60% RH下儲存注射劑型後保持低濃度至少1個月、至少2個月、至少3個月或至少6個月。該注射劑型亦可在2至8^o C下以良好穩定性儲存至少24個月。

在一個態樣中，本發明提供一種包括穩定水溶液的注射劑型，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；及（ii）在量上小於5% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物，化學式I。

較佳地，該注射劑型包括在量上小於4% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該注射劑型包括在量上小於3% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該注射劑型包括在量上小於2% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該注射劑型包括在量上小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。

該注射劑型進一步包括滲透劑以及注射用水。

在一較佳態樣中，本發明提供一種包括穩定水溶液的注射劑型，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；及（ii）在量上小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物，化學式I。

在另一個態樣中，本發明提供一種包括穩定水溶液的注射劑型，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；及（ii）在量上小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物，化學式I。

在另一個態樣中，本發明提供一種包括即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽，（ii）在3至5的範圍內調整pH的有機酸，（iii）在量上小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物A，即，十胜肽化學式I，（iv）滲透劑；以及（v）注射用水。

在一實施例中，本發明提供一種包括即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型，由下列構成：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽，（ii）在3至5的範圍內調整pH的有機酸，（iii）在量上小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物A，即，十胜肽化學式I，（iv）滲透劑；以及（v）注射用水。

當在2至8^o C下儲存至少1個月、至少3個月、至少6個月、至少12個月、至少18個月或至少24個月時；或者在室溫（在25^o C/60%RH）下儲存至少1個月、至少3個月或至少6個月時，根據本發明的包括欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型保持物理及化學穩定。

可對穩定注射劑型的較佳實施例加在2至8^o C下儲存期為至少24個月或24個月的標籤。可對注射劑型的更較佳實施例加在室溫（25^o C/60%RH）儲存條件儲存期為至少6個月或6個月的標籤。

在2至8^o C下儲存至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少6個月、至少12個月、至少18個月或至少24個月、及/或在室溫（25^o C/60%RH）下儲存至少1個月、至少2個月、至少3個月、或至少6個月後，以欣得泰基底的重量計，化學式I的十胜肽（不純物A）的濃度保持在0.001%至1.0%、較佳是0.05至0.5 %的範圍，以欣得泰基底的重量計，單一最大未知不純物保持小於0.5%，且以欣得泰基底的重量計，全部不純物保持不大於3.5%。

根據本發明的包括欣得泰的即可注射無菌水溶液的注射劑型是物理穩定的，在儲存期期間，該水溶液沒有聚集、凝膠形成或沉澱。藉由測量溶液的濁度或混濁度，可確定聚集或凝膠形成。其以FTU單位（福爾馬肼（Formazin）混濁度單位）或NTU單位（散射比濁法混濁度單位）而被測量。

根據歐洲藥典9.0中描述的規程執行該測試。如果渾濁度或濁度值小於或等於8 FTU/NTU，則確信該溶液沒有任何聚集或凝膠形成。FTU/NTU值越高，則該溶液的渾濁度或濁度越高，且反之亦然。劑量的一開始及在2至8^o C下長期儲存後在至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少6個月、至少12個月、至少18個月或至少24個月、或在室溫（25^o C/60%RH）下儲存至少6個月，根據本發明的即可注射注射劑型的NTU值保持小於2 NTU、較佳地小於1 NTU、更佳地小於0.5 NTU。因此，在儲存期期間，該水溶液不出現聚集、凝膠形成或沉澱。此外，在儲存後，該溶液的黏度不出現顯著升高。

根據本發明的包括欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型以範圍從0.26 mg/ml至0.28 mg/ml的濃度含有欣得泰乾粉，該量等同於0.25 mg/ml的欣得泰基底。較佳地，欣得泰乾粉以等同於0.25 mg/ml的欣得泰基底的濃度存在於即可注射、無菌、穩定水溶液中。

在一個實施例中，根據本發明的包括欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型包括以足以在3至6的範圍內調整pH的濃度包括pH調節劑。

在較佳實施例中，根據本發明的包括欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型以足以在3至5的範圍內、更佳地在4至4.5的範圍內調整pH的濃度包括有機酸作為pH調節劑。舉例而言，根據本發明的即可注射、無菌、穩定水溶液的pH可以是3、3.05、3.10、3.15、3.20、3.25、3.30、3.35、3.40、3.45、3.5、3.55、3.60、3.65、3.70、3.75、3.80、3.85、3.90、3.95、4.00、4.05、4.10、4.15、4.20、4.25、4.30、4.35、4.40、4.45、4.50、4.55、4.60、4.65、4.70、4.75、4.80、4.85、4.90、4.95、5.00、5.05、5.10、5.15、5.20、5.25、5.30、5.35、5.40、5.45、5.50、5.55及6或其中間範圍。

有機酸可選自可溶於水的任何注射可接受有機酸，但較佳地是醋酸，更較佳地是乳酸。舉例而言，乳酸可以範圍從約0.013 mg/ml至0.53 mg/ml的濃度，較佳地以範圍從約0.033 mg/ml至約0.53mg/ml的量；及其中間範圍使用於根據本發明的即可注射、無菌水溶液中。

較佳地，根據本發明，欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液包括以範圍從5 0.47 : 1至19.23:1的重量比、較佳地以範圍從約0.47:1至7.57:1的重量比、更佳地以範圍從約1.56:1至7.57:1、及其中間範圍的重量比包括欣得泰（基底）以及有機酸。

根據本發明的包括欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型以適合在約250-375 mOsm/kg、較佳地270-330 mOsm/kg的範圍內調整溶液的滲透壓的量包括滲透劑或張力調節劑。可用於根據本發明的水溶液中的滲透劑選自但並不限於：甘露醇、甘油、山梨糖醇、氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖、蔗糖及類似物以及其混合物。

根據一個較佳實施例，滲透劑是甘露醇，且其可以範圍從約40.0 mg/ml至60.0 mg/ml的量、較佳地以範圍從約50.0 mg/ml至58.0 mg/ml的量用於該水溶液中。在一個較佳實施例中，滲透劑是甘露醇，且其可以約55.0 mg/ml的量用於即可注射無菌水溶液中。

本發明的注射劑型的即可注射、無菌水溶液不含有其衍生物、聚合物或共聚物形式的乳酸，例如聚乳酸或聚乳酸-聚-乙醇酸（polylactic-co-glycolic acid）。較佳地，乳酸用作唯一的pH調節劑。在較佳實施例中，該即可注射無菌水溶液沒有例如tween 80、聚山梨醇酯、泊洛沙姆（poloxamer）、山梨醇酐月桂酸酯（span）及類似物之類的界面活性劑。該注射劑型的即可注射無菌水溶液避免使用用於增溶或穩定的界面活性劑、錯合劑、保存劑或抗氧化劑。在某些實施例中，該溶液沒有如環糊精的錯合劑、沒有例如乙醇或乙二醇之類的共溶劑、且亦沒有保存劑及抗氧化劑。

在另一個態樣中，本發明提供如上的欣得泰乾粉的無菌水溶液，其在溫度25^o C及60%相對濕度下保持穩定至少1個月，較佳至少3個月且更佳地至少6個月。

在又另一個態樣中，本發明提供如上的欣得泰乾粉的無菌水溶液，在2-8^o C下保持穩定至少1個月，較佳至少3個月，更佳至少6個月、甚至更佳至少12個月或18個月、及最較佳至少24個月。

包括根據本發明的欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液的穩定注射劑型適於透過皮下途徑或肌肉內途徑投藥。該即可注射、無菌、穩定水溶液適於直接皮下投藥，亦即，其為即可注射的或即可自行投予的，且不需要在使用之前回溶或稀釋。根據本發明的即可注射、無菌、穩定水溶液不涉及凍乾。

本發明的穩定注射劑型適於自行投藥、且使患者能夠自行皮下投予小體積的該水溶液。注射裝置的貯器中填充的欣得泰的即可注射無菌水溶液的體積範圍從約0.5 ml至10.0 ml，較佳為1.0 ml至2.0 ml，更佳為1.0 ml。根據一個較佳實施例，欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液以1.0 ml的體積填充至注射裝置的貯器中。較佳地，根據本發明的注射劑型適於投予單一劑量的欣得泰乾粉。在一個實施例中，該注射劑型包括適於作為單一劑量自行投藥的約1.0 ml的欣得泰乾粉的水溶液的填充體積。在某個實施例中，該注射劑型可包括約10.0 ml的填充體積的欣得泰水溶液，其適於多劑量投藥。

根據本發明的穩定注射劑型的注射裝置可選自但不限於：載藥注射器、自動注射器及類似物。在一個較佳實施例中，注射裝置為載藥注射器。在另一個較佳實施例中，注射裝置為自動注射器，例如筆式自動注射器。這些載藥注射器或自動注射器適於需要其的患者自行投藥或自動注射藥物溶液，因此提供使用者友好的方式。

在一個較佳實施例中，注射裝置為載藥注射器。載藥注射器包括以下元件：貯器，例如儲存水溶液的針筒（barrel）或藥筒（cartridge）；柄針（stalked needle），該柄針附接於貯器的一端處；針套（needle shield）或栓蓋（tip cap），該針套或栓蓋蓋住且密封針尖端開口，視情況具有蓋住針套或栓蓋的剛性護罩；柱塞檔止器，該柱塞檔止器位於貯器的另一端處，塞住且密封填充在貯器中的水溶液；柱塞桿，該柱塞桿接合至柱塞內、且在投藥的同時用於將柱塞檔止器與溶液一起推向針末端。

在另一個較佳實施例中，注射裝置為自動注射器。該自動注射器可具有變化設計。在一個較佳設計中，自動注射器包括以下元件：中心配件或本體部，其適於固持載藥注射器，該注射器包括貯器，例如針筒或藥筒，該貯器儲存水溶液，該貯器在一端具有柄針、且在另一端具有柱塞檔止器。中心本體部可具有透明檢查視窗，經由該透明檢查視窗，貯器中的溶液是可見的。自動注射器進一步包括前部配件，該前部配件具有固持針套或栓蓋的帽蓋部，且其附接至中心配件上、蓋住柄針且密封針尖端開口。自動注射器進一步包括後部配件，該後部配件包括帶有彈簧配件及啓動按鈕的塑膠桿。在水溶液的自行投藥期間，首先，自本體部移除帽蓋以及針套，露出針，且隨後在將自動注射器的本體部置於投藥位點後，按下啓動按鈕，這將帶有彈簧配件的塑膠桿推向柱塞檔止器，導致經由針將水溶液遞送至患者。

該貯器可以是針筒或藥筒，諸如，例如載藥注射器的針筒或自動注射器的藥筒。其可以由選自玻璃、塑膠或聚合物材料的材料製成。在一些較佳實施例中，貯器由例如USP型式I矽化玻璃或非熱原性（non-pyogenic）玻璃材料之類的玻璃製成。在其他實施例中，貯器由選自環烯烴聚合物、環烯烴共聚物、聚烯烴、苯乙烯聚烯烴系聚合物及嵌段共聚物、聚碳酸酯及類似物之類的非玻璃塑膠或聚合物材料製成。在一個較佳實施例中，貯器為載藥注射器的非熱原性玻璃針筒、或自動注射器的非熱原性玻璃藥筒。

在一或更多實施例中，貯器在一端可具有疊式針（stacked needle）。在一些其他實施例中，貯器是無針的，且在使用前在魯爾尖端處附接針的前提下，貯器的一端具有魯爾尖端鎖（luer tipped lock）。疊式針可由不鏽鋼製成。用針套或栓蓋護住或蓋住針尖端。在另一端用例如柱塞擋止器之類的擋止器進一步密封含有藥的無菌水溶液的貯器。此等擋止器、針套或栓蓋對外部環境提供阻擋。

較佳地，魯爾鎖的柱塞擋止器、針套/栓蓋、或帽蓋由非玻璃元件製成。非玻璃元件可以是橡膠或彈性材料，諸如例如溴化丁基橡膠、氯化丁基橡膠、USP型式II橡膠、由聚-順-1,4-異戊二烯製成的天然橡膠、苯乙烯丁二烯橡膠及類似物。其他適合的材料包括高密度聚乙烯或低密度聚乙烯或其他塑膠材料。在較佳實施例中，柱塞擋止器由溴化丁基橡膠製成，而針套或栓蓋由天然橡膠製成。可進一步藉由聚乙烯製成的剛性護罩在外側上蓋住針套。其防止破壞針套，且在注射之前增強針套的移除。注射裝置配件可具有柱塞桿，該柱塞桿附接至柱塞擋止器上、且用於在投藥時將柱塞及溶液推至針末端。

較佳地，將欣得泰的即可注射、無菌、穩定水溶液填充至注射裝置的貯器中、且以在貯器的內部實質上沒有頂部空間空氣的方式而被阻塞。在儲存期間，貯器中的水溶液始終與由彈性材料或橡膠材料製成的柱塞擋止器保持接觸。在載藥注射器有由不鏽鋼製成的疊式針的情況中，針由針套或栓蓋蓋住，在儲存期間，水溶液與針及針套或栓蓋保持接觸。

視情況，注射裝置可由二次包裝來包裝或封閉。二次包裝可以是氣泡包裝或鋁袋及/或不透明紙盒。視情況，將適合的去氧劑置於二次包裝內。

藉由在2-8°C及室溫（25°C/60 %相對濕度）下儲存劑型，進行注射劑型的穩定性測試。在穩定性測試期間，欣得泰的即可注射無菌溶液與由彈性橡膠材料製成的柱塞及針套及由不鏽鋼製成的疊式針保持接觸。在較佳實施例中，包括根據本發明的欣得泰即可注射無菌水溶液的注射劑型2-8°C下儲存時，保持物理及化學穩定1年、較佳為2年的時間段，且在室溫（25°C/60 %相對濕度）下儲存時，保持物理及化學穩定至少6個月。基於填充注射裝置在室溫（25°C/60 %相對濕度）下儲存時在至少6個月內而在2-8°C下儲存至少24個月，按照欣得泰基底的重量計，不純物A的濃度保持小於1.0%。發現對於水準不大於1%的不純物A藉由Minitab計算所確定的欣得泰水溶液的外推儲存期為122個月。

在一個態樣中，本發明與一種用於抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，包括：注射劑型，包括：即可注射無菌、穩定水溶液，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；及（ii）量小於5% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物，化學式I。

較佳地，該穩定水溶液包括量小於4% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該穩定水溶液包括量小於3% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該穩定水溶液包括量小於2% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。更佳地，該穩定水溶液包括量小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物。

該穩定水溶液進一步包括滲透劑及注射用水。

在一個態樣中，本發明與一種抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，該方法包括：注射劑型，包括：即可注射無菌、穩定水溶液，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；（ii）量小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物A，亦即，十胜肽，化學式I。

在一個態樣中，本發明與一種抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，該方法包括：注射劑型，該注射劑型包括：即可注射無菌、穩定水溶液，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；（ii）量小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物A，亦即，十胜肽，化學式I。

在一個較佳態樣中，本發明與一種抑制經受受控卵巢刺激的婦女中促黃體激素過早激增的方法有關，包括：注射劑型，該注射劑型包括：即可注射、無菌、穩定水溶液，包括：（i）欣得泰或其藥學上可接受的鹽；（ii）有機酸，以在3至5的範圍內調整pH，（iii）量小於1% w/v的欣得泰基底的化學式I的不純物A，亦即，十胜肽，化學式I，（iv）滲透劑，及（v）注射用水。

在另一個態樣中，此揭露提供化學式I的十胜肽化學式I。

本文中將此化合物稱為「不純物A」，因為其是欣得泰溶液的不純物。

此揭露還提供組成物，包括化學式I的十胜肽：化學式I。

在另一個態樣中，該揭露提供藉由HPLC分析鑑定化學式I的十胜肽的方法，該方法包括： a）將包括水、乙腈及甲酸的稀釋劑注射至層析系統內， b）注射包括欣得泰乾粉、稀釋劑及不純物原液的系統適合性溶液且記錄層析圖， c）將包括欣得泰乾粉及稀釋劑的標準溶液注射至層析系統內， d）將包括欣得泰乾粉水溶液及安慰劑製劑的樣品注射至層析系統內，以及 e）確定不純物及欣得泰乾粉相對於欣得泰乾粉的相對滯留時間及相對反應因子。

該揭露還提供化學式I的十胜肽，用HPLC分析鑑定該十胜肽，該方法包括： 1. 將包括水、乙腈及甲酸的稀釋劑注射至層析系統內， 2. 注射包括欣得泰乾粉、稀釋劑及不純物原液的系統適合性溶液並記錄層析圖， 3. 將包括欣得泰乾粉及稀釋劑的標準溶液注射至層析系統內， 4. 將包括欣得泰乾粉水溶液及安慰劑製劑的樣品注射至層析系統內，以及 5. 確定不純物及欣得泰乾粉相對於欣得泰乾粉的相對滯留時間及相對反應因子。

以下將用實例更具體描述本發明。實例並不意欲限制本發明的範圍、且僅用作說明。實例1A 降解產物的鑑定

為了調查欣得泰的降解，以固相胜肽合成的已知技術製備與欣得泰物質有關的胜肽。合成涉及從樹脂上的c端胺基酸開始連續一次偶聯一個胺基酸。使用具有N,N’-二異丙基碳二亞胺（diisopropyl carbodiimide）（DIPC）的芴甲氧羰基（Fluorenylmethyloxycarbonyl）/叔丁基(Fmoc/tBu)作為偶聯試劑，進行胜肽鏈的合成。經由在二甲基甲醯胺中利用20%哌啶進行處理，移除Fmoc基團。最後，使用三氟乙酸以使於樹脂上形成的胜肽裂解，以獲得相關物質，使用含有0.1%三氟乙酸的乙腈/水的梯度在C18矽管柱上的逆向高效液相層析（RP-HPLC）進一步純化相關物質。將經純化的胜肽相關物質凍乾，以獲得純固體形式。以質子NMR、碳NMR、質譜法及元素分析特徵化這些相關物質的結構，且這些相關物質被稱為不純物A、B、D及F。不純物-A：Ac-2-D-Nal-4-Cl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-OH（詳細結構如化學式I的化合物所示），不純物-B：2-D-Nal-4-Cl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2（詳細結構如化學式II的化合物所示），不純物-D：Ac-2-D-Nal-4-Cl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-OH（詳細結構如化學式III的化合物所示），以及不純物-F：Ac-2-D-Nal-4-Cl-D-Phe-3-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-OH（詳細結構如化學式IV的化合物所示）。

HPLC管柱上分離的降解峰基於其相對滯留時間經鑑定是此等化合物。HPLC方法的細節提供於下面的實例1B中。實例1B

使用梯度技術（管柱：X-Select CHS C18、（150 x 4.6）mm、2.5µ，由愛爾蘭的沃特斯公司（Waters, Ireland）製造，零件編號: 186006729），在逆相（C-18）管柱上分離、以紫外光譜法、於225 nm波長偵測並定量的水溶液樣品中的欣得泰及經鑑定的不純物（即，不純物A、不純物B、不純物D及不純物F）。移動相以0.7 ml/min及1.0 ml/min的流速流動。層析圖的流動時間是150分鐘。移動相細節：移動相A：緩衝溶液如下以（700:280:20）的比例與乙腈及四氫呋喃的混合物，透過音波處理被除氣。移動相B：緩衝溶液如下以（500:480:20）的比例與乙腈及四氫呋喃的混合物，透過音波處理被除氣。緩衝液：1000 ml水中的2.5 g的正磷酸二氫銨及0.75 g的1-辛烷磺酸鈉鹽，使用三乙胺將pH調整至8.0 ± 0.05。稀釋劑：（700:300:1）比例的水、乙腈及甲酸的混合物。表 1 ：梯度溶析細節

時間 ( 分鐘 )	流速	移動相 A (% v/v)	移動相 B (% v/v)
0	0.7	100	0
65	0.7	100	0
75	0.7	0	100
76	1.0	0	100
135	1.0	0	100
136	0.7	100	0
150	0.7	100	0

不純物原液的製備：

H取不純物A、不純物B、不純物D及不純物F中的每一個3.125 mg至50 ml容量瓶中、且藉由音波振盪而溶解於約5 ml的稀釋劑中，然後，使用稀釋劑補足體積。系統適合性溶液的製備：

此是藉由稱取約12.5 mg的工作級標準欣得泰乾粉並將其轉移至100 ml的容量瓶中、並且藉由音波振盪使其溶解於約50 ml的稀釋劑中、然後添加約2 ml的不純物原液且使用稀釋劑補足體積來製備的。欣得泰乾粉標準溶液的製備：

欣得泰乾粉標準溶液是藉由稱取約20 mg的工作級標準欣得泰乾粉並將其轉移至250 ml的容量瓶中、且藉由音波振盪以使其溶解於約50 ml的稀釋劑中、並且用稀釋劑補足體積來製備的。將2 ml的此溶液轉移至250 ml的容量瓶中，且在混合下，使用稀釋劑使體積至刻度。測試溶液的製備：

來自要測試的樣品的約10個載藥注射器的欣得泰乾粉水溶液（根據上面描述的實例製備的）在容器中混合。該溶液包括欣得泰乾粉、有機酸、滲透劑及注射用水。將約5.0 ml的此溶液精確地轉移至10 ml的容量瓶中、並添加約3 ml的稀釋劑，並且在中間搖動下，音波振盪該溶液5分鐘。在混合下，使用稀釋劑補足體積。

藉由將約5.0 ml的安慰劑溶液精確地轉移至10 ml的容量瓶中、添加約3 ml稀釋劑、且在中間搖動下音波振盪5分鐘以製備安慰劑。在混合下，使用稀釋劑補足體積。將一式兩份稀釋劑的50微升注射液作為空白注射至層析系統中。隨後，注射系統適合性溶液，且記錄層析圖。不純物D與不純物F之間的解析度不小於2.0。此後，注射六份標準溶液重複。隨後，將樣品及安慰劑製劑注射至層析系統中。

欣得泰乾粉的及不純物A、B、D及F相對於欣得泰乾粉的相對滯留時間及相對反應因子列於表2中。表 2 ：

混合物的名稱	滯留時間（分鐘）	相對滯留時間
欣得泰	42.3	1.00
不純物A	23.5	0.55
不純物B	56.8	1.34
不純物D	16.9	0.39
不純物F	20.3	0.48

排除在稀釋劑及安慰劑中的峰值，計算不純物A、B、D、F及未知不純物的百分比。全部已知不純物及未知不純物的總和提供總不純物百分比。

以下面的公式計算經鑑定的不純物（A、B、D、F）的百分比：其中 A1=在測試製劑的層析圖中每一種已知不純物的峰值反應，AS=在標準製劑的層析圖中欣得泰的平均峰值反應，WS=工作級標準欣得泰乾粉以mg為單位的重量， V=以ml為單位量取的樣品的體積， P=工作級標準欣得泰的效能百分比（作為基於的基礎），LC=以mg每ml為單位的欣得泰的標示量（Label claim）（0.25mg/ml），RRF=每一種不純物的相對反應因子，以下面的公式計算未知不純物的百分比：其中 A1=在測試製劑的層析圖中每一種未知不純物的峰值反應，AS=在標準製劑的層析圖中欣得泰的平均峰值反應，WS=工作級標準欣得泰乾粉以mg為單位的重量 V=以ml為單位量取的樣品的體積 P=工作級標準欣得泰的效能百分比（作為基於的基礎），LC=以mg每ml為單位的欣得泰的標示量（0.25mg/ml）全部不純物（%）=已知不純物的百分比與未知不純物的百分比的總和。 製備方法：

在2^o C與8^o C之間的溫度下量取注射用水至器皿中。在攪拌下，加入甘露醇，且使其逐步溶解於注射用水中，直到獲得澄清溶液。在攪拌下，將欣得泰乾粉加入至此中且使其逐步溶解。檢查溶液的pH、並使用指定量（體積）的0.1 % w/v乳酸溶液將該溶液的pH調整至表3中對本發明實例及比較實例中的每一個列出的pH。用注射用水補足體積。將溶液攪拌10-15分鐘。經由0.2 μm的膜過濾器的濾床無菌地過濾實例的溶液。將溶液無菌地填充至注射裝置的貯器中，亦即，具有1.1 ml的填充體積的1 ml玻璃注射器的針筒中。填充之前，針筒中的疊式針以彈性針套塞住、以剛性帽蓋蓋住。填充之後，藉由真空塞住、以在注射器內部實質上不留下頂部空間空氣的方式而用柱塞塞住玻璃注射器（針筒）。儲存後，水溶液與橡膠製成的柱塞、不鏽鋼製成的疊式針及天然橡膠製成的針套保持接觸。

操作實例1至9及比較實例10至14的即可注射水溶液在不同階段經受化學分析。首先，以上面描述的HPLC方法對過濾之前以及之後在該溶液中欣得泰的百分比進行測定。確定在過濾之前與之後的化學測定百分比變化。

然後，在玻璃注射器中含有的實例的溶液經受儲存穩定性測試。使用上面描述的高效液體層析方法，確定在室溫（25^o C/60%的相對濕度）及在2-8^o C下在初始時間點及不同時間點儲存時，如化學式I、II、III及IV的化合物的降解產物的水準、及在注射劑型的注射裝置中填充的經過濾溶液中的未知不純物及全部不純物的水準的百分比測定。

發現室溫下儲存6個月後，不純物A、B、單一最大未知不純物及全部不純物的水準保持不變或變化小。基於此資料，預期本發明的注射劑型在長時段內化學穩定。發現當製備時及當填充至注射裝置內並儲存時，溶液未顯現出凝集或黏度升高的任何問題。該資料還證實不存在欣得泰吸在或吸附在該裝置的元件（例如，在儲存期間與溶液接觸的橡膠塞）上或內。

根據本發明的穩定注射劑型在25^o C/60%RH及2-8^o C下的穩定性結果提供於下面的表4及表5中。表 6

相當於欣得泰的欣得泰乾粉的測定（ % ）
儲存條件
	2-8⁰ C	25⁰ C/60%RH
pH	未經過濾	初始	1M	2M	3M	6M	12M	18M	24M	1M	2M	3M	6M
2.5	104.05	103.97	103.03	105.51	105.04	104.54	103.7	-	-	102.76	102.9	102.9	99.97
3	103.56	101.11	101.8	104.9	105.42	104	103.5	104.93	104.77	102.09	104.71	105.08	102.36
3.5	103.86	102.51	101.82	104.88	102.88	104.2	103.1	104.13	104.16	103.65	103.62	102.23	103.68
4	103.76	102.96	104	104.17	104.75	104.84	103.3	104.48	103.61	102.58	103.28	103.72	103.39
4.5	102.52	99.56	103.43	103.97	103.57	103.59	102.6	103.97	103.86	101.66	103.62	102.79	102.77
5	99.48	-	-	-	-	-				99.02	-	-	-

在下面的表7中給出在25^o C/60%RH及2-8^o C下儲存時在不同時間點研究的附加中間pH範圍的穩定性結果。表 8

相當於欣得泰的欣得泰乾粉的測定（ % ）
	儲存條件
	2-8⁰ C	25⁰ C/60%RH
pH	未經過濾	初始	1M	3M	6M	12M	1M	3M	6M
3.1	99.96	98.67	99.12	99.32	98.98	98.94	98.65	97.65	97.52
3.2	100.89	100.21	99.9	100.89	99.61	101.27	100.06	100.38	98.2
3.3	99.96	99.05	98.58	100.03	99.13	100.29	98.97	99.87	98.13
3.4	100.02	98.54	99.59	-	-	-	99.91	99.97	99.03

表 9 欣得泰乾粉注射液 0.25mg/ml 、 pH 5 的 1 ml PFS 的穩定性資料 每一個mL含有相當於0.25 Mg欣得泰的欣得泰乾粉、甘露醇54.8 mg、將pH調整至5.0所需足夠的乳酸、達到1 mL所需的注射用水 ND ：未檢測到； RH ：相對濕度； BQL ：低於可計量限度； * 填充於 1 ml PFS 中的澄清無色溶液 比較實例 2

按照US 2013/0303464（Patel等人）的揭露內容，製備欣得泰乾粉的水溶液。組成物例示於下面的表12中：表 12

成分	量（mg/ml）
欣得泰乾粉	0.25
甘露醇	42.0
冰醋酸	至pH 3.0所需的量
注射用水	1 ml

製備方法：在2^o C與8^o C之間的溫度下量取注射用水至器皿中。在攪拌下，加入甘露醇且使其逐步溶解於注射用水中，直到獲得澄清溶液。在攪拌下，將欣得泰乾粉加入至此中且使其逐步溶解。然後，加入冰醋酸，且將溶液的pH調整至約3.0。用注射用水補足體積。將溶液攪拌10-15分鐘，且隨後經由0.2μm的膜過濾器（密理博（Millipore）公司製造的optiscale 47膠囊式聚醚碸（polyethersulfone）膜過濾器）的濾床無菌地過濾該溶液。將該溶液無菌地填充至注射裝置的貯器中，亦即，具有1.1 ml的填充體積的1 ml玻璃注射器的針筒中。填充之前，針筒中的疊式針以彈性針套塞住、以剛性帽蓋蓋住。填充之後，藉由真空塞住、以在注射器內部實質上不留下頂部空間空氣的方式而用柱塞塞住玻璃注射器（針筒）。儲存時，水溶液與橡膠製成的柱塞、不鏽鋼製成的疊式針及天然橡膠製成的針套保持接觸。

玻璃注射器中填充的此比較實例（比較實例2）的溶液經受儲存穩定性測試。在室溫下，以高效液體層析技術，一開始及在儲存時對溶液中不純物A、不純物B及全部不純物的水準進行分析。結果提供於下面的表13中。表 13 ：比較實例 2 的穩定性結果

不純物A （%）（25⁰ C/60%RH）	不純物B（%）（25⁰ C/60%RH）	T全部不純物（%）（25⁰ C/60%RH）
時間點（月）
0	3	6	0	3	6	0	3	6
0.06	0.84	1.77	ND	0.07	0.17	0.99	1.88	2.83

ND ：未檢測到； RH- 相對濕度

可以觀察到US 2013/0303464（比較例）的欣得泰乾粉溶液顯示出在室溫下儲存時的不純物A及全部不純物的水準顯著增加。特別是，為降解不純物的不純物A的水準顯著增加且在6個月中增加至欣得泰重量的1.77%。此外，全部不純物的水準在6個月中增加至欣得泰重量的2.83%。

相反，包括本發明的欣得泰乾粉的即可注射水溶液的注射劑型在室溫下在長時期內保持穩定，藉以實質上未發生降解或不純物A、其他不純物或全部不純物的水準在儲存時增加，且溶液具有大於24個月的外推儲存期。

Claims

一種包括一即可注射、無菌、穩定水溶液的注射劑型，包括：（i）一量為0.25mg/ml的欣得泰或其藥學上可接受的鹽；（ii）在足以將pH調整在4.00至5.00範圍內的一濃度的乳酸；（iii）一量小於1% w/v的欣得泰基底的一化學式I的十胜肽的不純物A，化學式I （iv）一滲透劑；以及（v）一注射用水。
如請求項1所述的注射劑型，其中該滲透劑以足以用於該溶液的一滲透壓在250至375 mOsm/Kg範圍內的一量出現。
如請求項1所述的注射劑型，其中該注射劑型在一注射裝置的一貯器中出現。
如請求項3所述的注射劑型，其中該注射裝置是一載藥注射器。
如請求項3所述的注射劑型，其中該注射裝置是一自動注射器。
如請求項3所述的注射劑型，其中該注射裝置是一筆式自動注射器。
如請求項1所述的注射劑型，其中該即可注射、無菌、穩定水溶液在25 ^oC及60%的相對濕度下穩定至少一個月。
如請求項1所述的注射劑型，其中該即可注射、無菌、穩定水溶液在25 ^oC及60%的相對濕度下穩定至少三個月。
如請求項1所述的注射劑型，其中該即可注射、無菌、穩定水溶液在25 ^oC及60%的相對濕度下穩定至少六個月。
如請求項1所述的注射劑型，其中該注射劑型適於皮下使用。
如請求項1所述的注射劑型，其中該注射劑型適於肌肉內使用。