TW200812940A - Deuterated hepatitis C protease inhibitors - Google Patents

Description

200812940 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種氘化之（]型肝炎蛋白酶抑制劑。 【先前技術】 - C型肝炎病毒（，，HCV，，）感染為引人注目之人類醫學問題。 .公認HCV為大多數非A塑、非B型肝炎病例之病原體，估 計全球人類血清流行率為3%[A· Alberti等人，"Natural History of Hepatitis C/ J· Hepatology，3 1·，（增刊 1)，第 17-

Cl ’ 24頁（1999)]。僅在美國有近四百萬個體可能受到感染 [M.J. Alter等人，’’The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States，Gastroenterol. Clin. North Am·，’’ 23，第 437-455 頁（1994); M. J· Alter ’’Hepatitis C Virus Infection in the United States，，，J· Hepatology，31·，（增刊 1)，第 88_91 頁（1999)]。 首次暴露於HCV後，僅約20%受感染個體發展為急性臨 ,, 床肝炎，而其他人似乎自發地使感染消退。然而，在幾乎

U 70%情況下，病毒產生持續數十年之慢性感染[S. Iwarson， !fThe Natural Course of Chronic Hepatitis/1 FEMS Microbiology Reviews, 14，第 201-204 頁（1994); D. Lavanchy，’’Global • Surveillance and Control of Hepatitis C，” J. Viral Hepatitis，6，第 35-47頁（1999)]。此通常導致再發性及逐漸惡化之肝發炎， 進而往往導致更嚴重之疾病狀況，諸如肝硬化症及肝細胞 癌[M.C· Kew，’’Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma’’， FEMS Microbiology Reviews，14，第 211-220 頁（1994); I. 119438.doc 200812940

Saito 等人，，’Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma，，，Proc. Natl. Acad· Sci· USA, 87，第 6547-6549 頁（1990)]。不幸的是， 尚無用於弱化慢性HCV進程之廣泛有效的治療方法。

HCV基因組編碼30 10-3033個胺基酸之聚合蛋白[Q.L. Choo，第人，’’Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus·’’ Proc. Natl· Acad· Sci. USA，88，第 245 1-2455 頁（1991); N. Kato 等人，”Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A，Non-B Hepatitis,” Proc· Natl· Acad· Sci. USA，87，第 9524-9528 頁（1990); A. Takamizawa 等 人，”Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers，’’ J. Virol·，65，第 1105-1113頁（1991)]。假定HCV非結構（NS)蛋白為病毒複 製提供必要的催化機械（catalytic machinery)。藉由聚合蛋 白之蛋白水解分裂得到NS蛋白[R. Bartenschlager等人， ’’Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 及 NS4/5 Junctions，” J. Virol·，67，第 3835-3844 頁（1993); A. Grakoui等人，’’Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded

Serine Proteinase: Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites/ J. Virol·，67，第 2832-2843 頁 (1993); A. Grakoui 等人，’’Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products，’’ J. Virol·， 119438.doc 200812940 67 ’ 弟 1385-1395 頁（1993); L. Tomei等人，’’NS3 is a serine protease lequired for processing of hepatitis C virus polyprotein’’，J. Virol·，67，第 4017-4026 頁（1993)]。 HCV NS蛋白3(NS3)含有幫助處理大多數病毒酶之絲胺 • 酸蛋白酶活性，且因此認為其為病毒複製及感染性所必需 - 的。已知黃熱病病毒NS3蛋白酶突變降低病毒感染性 [Chambers，T.J·等人，"Evidence that the N-terminal f) Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific

Cleavages in the Viral Polypr〇tein”，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，87，第 8898-8902頁（1990)]。表明NS3之前 181個胺基 酸（病毒聚合蛋白之殘基1027-1207)含有處理HCV聚合蛋白 之所有四個下游位點之NS3之絲胺酸蛋白酶結構域[c·乙出 #、，HepatitisCVirusNS3SerineProteinase:Trans-

Cleavage Requirements and Processing Kinetics11, J. Virol.? 〇 68，第 8147-8157 頁（1994)]。 HCV NS3絲胺酸蛋白酶及其相關辅因子NS4A幫助處理 所有病t S#，且因此说為其為病毒複製所必需的。此處理 似乎與病毒酶處理中所亦涉及之人類免疫缺陷病毒天冬胺 醯基蛋白酶所進行的類似。抑制病毒蛋白處理之出乂蛋白 酶抑制劑為人類之強效抗病毒劑表明中斷病毒生命週期之 :階段產生有效治療劑。因此HCV NS3絲胺酸蛋白酶亦為 藥物開發之吸引人的目標。 目前尚無任何令人滿意之抗HCV劑或治療方法。直至最 H9438.doc 200812940 近，唯一公認之HCV疾病療法為干擾素治療。然而干擾素 具有顯著副作用[M. A. Wlaker 等人，’’Hepatitis C Virus: An Overview 〇f Current Approaches and Progress，丨’ DDT，4 ’ 第 518-29 頁（1999); D. Moradpour 等人 ’ ’’Current and " Evolving Therapies for Hepatitis C?f, Eur. J. Gastroenterol. . Hepatol·，11，第 1199-1202 頁（1999); H. L· A· Janssen 等 人，,fSuicide Associated with A1 fa-Interferon Therapy for _ Chronic Viral Hepatitis，” J. Hepatol.，21 ’ 第 241-243 頁 Ο (1994); P.F. Renault等人，’’Side Effects of Alpha Interferon，’’ Seminars in Liver Disease，9，第 273-277 頁（1989)]且導致 僅一部分（〜25%)病例之長期缓解[0· Weiland，nInterferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection”，FEMS Microbiol. Rev·，14，第 279-2 88 頁（1994)]。最近引入聚乙 二醇化形式之干擾素（PEG-INTRON®及PEGASYS®)及病毒 唑（ribavirin)與聚乙二醇化千擾素（REBETROL⑧）之組合療 Q 法導致緩解率僅適度改良且副作用僅部分降低。此外，有 效抗HCV疫苗之前景仍不確定。 因此’需要更有效之抗HCV療法。此等抑制劑將具有作 _ 為蛋白酶抑制劑，特定言之作為絲胺酸蛋白酶抑制劑，且 •更特定言之作為HCV NS3蛋白酶抑制劑之治療潛能。特定 言之’此等化合物可用作抗病毒劑，特定言之用作抗HCV 劑。 最近發現，化合物中併有氘可經由氘同位素效應降低差 向異構作用速率，因此相對於其非氘化類似物增加活體内 119438.doc 200812940 活性異構體之濃度。 【發明内容】 本發明係關於式⑴之氘化化合物

R4 IΝχ \r5 ⑴，

前藥及溶劑合物 在式（I)中 及其醫藥學上可接受之鹽 D表示氘原子。 參照式（I)， D表示氘原子；

U

為視情況經取代之單戸^ 、 衣氮雜雜環基或視情況經 取代之多環氮雜雜環基，或視情 κ, ^ ^ , 、工取代之夕％虱雜雜環 席基、中不飽和鍵位於處在帶料21部分且連接有 娜2)-CDR3部)_⑽视¥部分之環之遠側之環中； R21 為 Q3-W3-q2-W2-q1 ;其中 當W2及W3中任一者為端基時，^及^各獨立為—鍵、 CO-、-CS…-C(〇)N(Q”_、c〇2 〇、_n(q4)_c(〇) 119438.doc -10. 200812940 -N(Q4)-、-N(Q4)-C(S)-N(Q4)_、-0C(0)NQ4-、-S-、-SO… -S02-、-N(Q4)-、-N(Q4)S02-、-N(Q4)S02N(Q4)-及氫； 當Q3、Q2或Q1中任一者為端基時，Q1、Q2及Q3各獨立為 一鍵、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之雜脂族 ' 基、視情況經取代之環脂族基、視情況經取代之芳基、視 ， 情況經取代之雜芳基、視情況經取代之芳烧基或視情況經 取代之雜芳烷基；或氫；其限制條件為當W3及W2皆存在 ^ 時Q2不為一鍵；且 〇 R2、R3及R4各獨立為Η或CN6烷基； R5為Η、烷基、環烷基、視情況經丨_4個烷基取代之芳基、 烷基芳基、芳基、視情況經1或2個烷基取代之胺基；且 R21為Q^W^Q^W^Q1 ;其中當W2&W3中任一者為端基 時，w2 及 w3 各獨立為一鍵、_co …-cs-、_c(〇)n(q4)_、 -C02. > -ο. > -N(Q4).C(0).N(Q4)-，-N(Q4)^C(S).N(Q4). ^ 〇c(o)NQ4-、-s …so-、_so2-、-n(q4)-、_N(Q4)s〇2… 〇 及氫；當Q3、Q2或Q1中任一者為端基 時，Q、Q及Q3各獨立為一鍵、視情況經取代之脂族基、 m經取代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族基、視 情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取 .狀純基或視情況經取代之雜芳烧基；或氫；其限制條 件為當W3及W2皆存在時Q2不為一鍵。

f 0 在一些實施例中，汉1為 R9 〇 119438.doc 200812940 其中 R6及R8各獨立為 一鍵；或 視情況經取代之（丨山或^·)環伸烷基；或 . 視情況經取代之（1山或1，2-)雜伸環基；或 • 經一選自由視情況經取代之脂族基、視情況經取代之 %基及視情況經取代之芳族基組成之群之取代基取代的 〇 亞曱基或伸乙基，且其中亞曱基或伸乙基進一步視情況 經脂族取代基取代； R、R及R11各獨立為氫或視情況經取代之脂族基； R為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環基或 視情況經取代之芳族基； L 為-C(O)-、-0C(0)…视llc(〇)〜s(〇)2、视lls(〇^ 或 一鍵；且 η為〇或1。 Ο 在一些實施例中，II為1。 在一些貫施例中，R6為經一選自由視情況經取代之脂族 基、視'It況經取代之環基及視情況經取代t芳族基組成之 '群之取代基取代之亞曱基。 在一些實施例中，R6為經異丁基取代之亞甲基。 在一些實施例中，R7為氳。 在些貝施例中，R8為經一選自由視情況經取代之脂族 基、視,清況經取代之環基及視情況經取代之芳族基组^ 群之取代基取代之亞甲基。在一些其他實施例中，R8為經 119438.doc -12- 200812940 視h况經取代之環基取代之亞甲基。在一些其他實施例 中，R8為經環己基取代之亞甲基。 在一些實施例中，R9為氫。 在一些實施例中，L為-CO-。 在一些實施例中，R1G為視情況經取代之芳族基。 在一些實施例中，R1 G係選自由以下各物組成之群：

U

0

0

W、及 Her、tr u 在一些實施例中’ R為視情況經取代之。比。秦基（例女 2_σ比嗪基） 在一些實施例中

為經取代之單環氮雜雜 環 119438.doc -13 - 200812940 基0

在一些其他實施例 氧基取代之吼咯啶基 個鹵素取代。 中

為在3位碳原子經雜芳 八中亥雜芳基進一步視情況經1 -4 在一些實施例中 雜環基。 在一些實施例中

Q

在另-實施例中，R2為&，R4AR5各獨立為氫或環丙 基。在另一實施例中，R3為丙基。在另一實施例中，η為 〇。在另一實施例中，L為-NRnC(0)-且R11為氫。在另一實 】中 R為視情況經取代之脂族基。在另一實施例 中，Rl〇為第三丁基。在另一實施例中，化合物為 119438.doc 200812940

在一些實施例中 Α為-(CHX1)^ ; B 為-(CHX2)b、； a為0至3 ;

其中 Ο b為0至3 ’其限制條 X1及X2各獨立選自 情況經取代之芳基； Y1及Y2各獨立為氫 取代之芳基、胺基或- 件為a + b為2或3 ; 氫、視情況經取代之C1 _4脂族基及視 、視情況經取代之脂族基、視情況經 OQ4 ;其中Q4各獨立為氫或視情況經 取代之脂族基； R22為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之雜脂族 基、視情況經取代之環脂族基、視情況經取代之雜環脂族 基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。在— U9438.doc • 15- 200812940 些實施例中，R21

為視情況經取代之烷基羰基。 \ /B部分包括其所有立體特定對映異構體，例如

在一些貫施例中，為各視情況經1-3個取代基取代之 胺基烷基羰基、鹵代烷基羰基、芳基烷基羰基、芳基烷基 獄基、環脂族烧基羰基或雜環脂族烷基羰基。在一些實施 例中，R21為各視情況經1-3個取代基取代之雜環烷基_氧基 魏胺基-烧基幾基、雜芳基-羰胺基-烷基-羰胺基_烷基-羰 基、雙環芳基-磺醯基胺基-烷基羰基、芳基-烷氧基_羰胺 基-烧基基、烷基_羰胺基-烷基_羰基、脂族基-氧基羰胺 基-烧基基、環脂族基-烷基_胺基羰胺基_烷基_羰基、雜 芳基-獄胺基··烷基-羰胺基-烷基-羰基、烷基_胺基羰胺基_ 烧基-魏基或雙環芳基-胺基羰胺基-烷基-羰基。在一些實 施例中’ R22為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之 雜脂族基、視情況經取代之環脂族基、視情況經取代之雜 環脂族基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳 基。在一些實施例中，r22為視情況經取代之苯基、視情 況經取代之萘基、視情況經取代之蒽基、視情況經取代之 萘或視情況經取代之蒽。在一些實施例中，X1、X2、Y1及 119438.doc -16 - 200812940 Y各為氫，a及b各為1。 在一些實施例中，R21為視情況經取代之烷基羰基。 在一些實施例中，R21為各視情況經1-3個取代基取代之 月安基烷基羰基、鹵代烷基羰基、芳基烷基羰基、芳基烷基 爹炭基、環脂族烷基羰基或雜環脂族烷基羰基。 在一些實施例中，R21為各視情況經1-3個取代基取代之 雜環烧基-氧基魏胺基-烧基戴基、雜芳基-戴胺基-烧基-幾 胺基-烷基-羰基、雙環芳基-磺醯基胺基-烷基羰基、芳基_ 烧氧基胺基-烧基基、烧基-幾胺基-烧基-獄基、脂族 基-氧基!^胺基-烧基-%基、壞脂族基-烧基-胺基魏胺基-烧 基-羰基、環脂族基•烷基-羰胺基-烷基-羰基、雜芳基-羰胺 基-烷基-羰胺基-烧基-羰基、烷基-胺基羰胺基-烷基-羰基 或雙環芳基-胺基羰胺基-烷基-羰基。 在一些實施例中，R22為視情況經取代之脂族基、視情 況經取代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族基、視情況 經取代之雜環脂族基、視情況經取代之芳基或視情況經取 代之雜芳基。 在一些實施例中’ R22為視情況經取代之苯基、視情況 經取代之萘基、視情況經取代之蒽基、視情況經取代之萘 或視情況經取代之蒽。 在一些實施例中，X1、X2、γι及Y2各為氫，a&b各為 1 ° 在一些實施例中，R22為視情況經取代之脂族基、視情 況經取代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族基、視情況 119438.doc -17- 200812940 Ο 經取代之雜環脂族基、視情況經取代 代之雜芳基。 在一實施例中，化合物為 之 芳基或視情況經取 〇

構作用 爪化化合物i極緩慢地轉 化中間物，該中間物接著 匕為非爪 者轉化為差向異構體2及3。掊荽 向異構體2及3保持平衡， 要者差 衡進一步減緩氘化化合物1 異構作用。 < 差向

對於 由於緩慢差向異構作用，因 其非氘化類似物可增加活體 此本發明之氘化化合物相 内活性異構體之濃度。 在-些實施例中’本發明之化合物中氛之高含量為至少 50%。在―些實施例中，本發明之化合物中氛之高含量為 至/ 80%。在一些貫施例中，本發明之化合物中氘之高含 119438.doc -18- 200812940 量為至少90%。在一些實施例中，本發明之化合物中氘之 高含量為至少99%。 本發明亦係關於包含醫藥學上可接受之載劑及式（1)化合 物或其上文所述實施例之任一實施例的醫藥組合物。 本發明亦係關於一種用於增加活體内藥劑之活性異構體 之濃度之方法，該方法包含投與有此需要之患者足以賦予 醫藥作用之量的藥劑之氘化異構體。

Ο 本發明亦係關於一種用於提高化合物之生物利用率之方 法，该方法包含以氣原子置換鍵結至化合物中之空間碳原 子之氫原？。在一實施例中，氘化化合物為式⑴或其上文 所述實施例之任一實施例之氘化化合物。 本發明亦係關於-種用於抑制HCV蛋白酶之方法，該方 法包含使HCV蛋白酶與式⑴之氣化化合物或其上文所述實 施例之任一實施例接觸。 本發明亦係關於一種用於、Λ瘩接為 卜 川％，口潦以叉HCV感染或由HCV蛋 白轉介導之病症之患者 ^ δ亥方法包含投與該患者醫 藥學上有效量之式⑴之氘 爪化化口物或其上文所述實施例之 任一實施例。 本發明亦涵蓋 法，其中 一種用於製備光學富集式 1化合物之方

羧基之CX及β位碳原子為立體中心 119438.doc -19- 200812940

Ri獨立地為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代 之環脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代 之雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； R’i為沉， R’2為-NHR2或-OE ;

U R2為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環脂 族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜脂 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；及 Ε為Ci_6烧基或苯甲基； 該方法包括以下步驟： a) 形成式1化合物之鹽，及 b) 使該鹽結晶以產生大於55%對映異構體過量之化人 物0 在一些實施例中，Ri為C〗·6烧基，且R’2為-NHR2，其中 L為Cw烷基或Cw環烷基。在一些實施例中，心為兩基且 I為環丙基。 胺化試劑使式Η 在一些實施例中，該方法進一步包括以 化合物胺化

r，2 以提供式iii化合物 H9438.doc 20- 200812940 ΝΗ2 Ο

Ri

R，2

OH 111 且藉由氫化作用 氧化試劑氧化不 在一些實施例中，胺化試劑為疊氮化物鹽 還原中間物疊氮基化合物。 在一些實施例中，該方法進一步包括以 飽和式i化合物，

其為顧HOE，其巾EgCl_5烧基或視情況經取代 之苯曱基，以提供式ii化合物

在一些其他實施例中，氧化試劑包含氫過氧化第三丁 基在一些其他實施例中，氧化試劑進一步包括對掌性試 背丨在些其他貫施例中，氧化試劑為異丙醇釤（in)、氧 化三苯基胂、S-(-)l，i，-聯萘酚及4 a分子篩之混合物。 在些其他實施例中，氧化試劑在三氟乙酸酐存在下包含 尿素··過氧化氫。 在些其他實施例中，該方法進一步包括使式ϋ化合物 &解以產生酸且接著使酸轉化為式ii之醯胺化合物，其中 119438.doc -21 - 200812940 R’2 為-NHR2。 本發明亦涵蓋一種用於製備式丨化合物之方法，

汨2 其中：

Ri為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環脂 無基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜脂 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； 1為氣， I為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環脂 知基視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜脂 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；且 式1化合物具有大於55%之對映異構體過量。 該方法包括以下步驟： a)氣化不飽和式Hti合物

Ri Ο 以提供式ii化合物 H9438.doc

ϋ 200812940 b)使式ii化合物與胺化試劑反應以提供式出化合物

iii Ο與光學活性有機酸形成式iH化合物之鹽；及 d)使該鹽結晶以產生大於55%對映異構體過量之化合 物。 在一些實施例中，式1化合物為（2S，3S)-3-胺基-3-氘代-N-環丙基-2-經基己醯胺。在一些實施例中，有機酸為L/;g 石酸或去氧膽酸。 本發明亦涵蓋一種用於製備光學富集式1化合物之方 法，

OH

Ri 1 其中： 竣基之α及β位碳原子為立體中心；

Ri獨立地為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代 之環脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代 之雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； R’i為氘以使氘之高含量為至少50% ; R’2為-NHR2或-OE ; 尺2為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之灣月匕 ^9438.(100 -23- 200812940 族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜脂 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；且 E為基或苯甲基。 該方法包括以下步驟：a)形成式1化合物之鹽，及b)使該鹽 結晶以產生大於55%對映異構體過量之化合物。 在一些實施例中環烷基。在一些實施例中，Ri為丙基 且R〗為環丙基。 在一些實施例中，該方法進一步包括以下步驟：以胺化 試劑使式ii化合物胺化

以提供式iii化合物

U 在一些實施例中，胺化試劑為疊氮化物鹽且藉由氮化作 用還原中間物疊氮基化合物。 在一些實施例中，該方法進一步包括以下步驟··以氧化 ϋ式劑氣化不飽和式i化合物，

Ri Ο 119438.doc -24- 200812940 況經取代 其中R’2為-NHR”H，其中烧基或視情 之苯甲基，以提供式ii化合物

在一些其他實施例中，氧化試劑包含氫過氧化第三丁美。 在一些其他實施例中，氧化試劑進-步包括對掌性試劑。 在一些貫施例中，氧化試劑為異丙醇釤（III)、氧化二苯美 胂、s-㈠聯-2-萘酚及4人分子篩之混合物。在一些二

施例中，氧化試劑在三氟乙酸酐存在下包含尿素-過氧I 氫。 在一些實施例中，R，2為-OE。在一些實施例中，為 -NHR2 〇 在一些實施例中，該方法進一步包括使式ii化合物水解 以產生酸且接著使酸轉化為式ii之醯胺化合物，其中R，2為 -NHR2 〇 在一些實施例中，該方法進一步包括氧化式iv化合物

Ri oh R，r^^R，2 以產生式ii化合物。在一些情況下，藉由使用二氧化I孟進 行氧化作用。 在一些實施例中，該方法進一步包括還原式v化合物 119438.doc -25- 200812940

OH

V 以*產生式1V化合物0在—此4杳、、W ~ττ τ% /g\ 牡二㈡况下，以1^〇1-八1@還原該化

合物且接著以氧Μ中止。如此項技術中已知的，”Red_ Ai⑧”係指化合物[(CH3〇CH2〇CH2)2A1H2]Na，其為市售 的⑯，通常為於甲苯中之溶液（例如，70% w/w)。關於Red· A1之更多資訊參見（例如）Bates R w等人，心办⑽， 1990, 46, 4063 。 本發明亦涵蓋一種用於製備式丨化合物之方法， NH2 0

Ri OH H u *中： R1為H、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環脂 族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜^ _ 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； R’ 1為氣， h為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環脂 族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之雜: 族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；且 式1化合物具有大於55%之對映異構體過量。 119438.doc -26- 200812940 該方法包括以下步驟： a)氧化不飽和式i化合物 以提供式ii化合物 〇 b)使式ii化合物與胺化試劑反應以提供式iii化合物

RiR，i ΝΗο Ο

111 R，2

OH c) 與光學活性有機酸形成式ni化合物之鹽；及 d) 使该鹽結晶以產生大於5 5%對映異構體過量之化合 物

I 在一些實施例中，式1化合物為（2S,3S)_3_胺基_3_氘代_ N-環丙基經基己醯胺。在一些實施例中，有機酸為卩酒 石酸或去氧膽酸。 【實施方式】 I·定義 A·術語 如本文所用之術語"脂族基”涵蓋烧基、烯基及快基。 如本文所用之，，烧基”係指含有工，例如η或個碳原 119438.doc -27- 200812940 子之飽和脂族烴基。烷基可為直鏈或支鏈。烷基之實例包 括（但不限於）甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁 基、第二丁基、第三丁基、正戊基、正庚基及2_乙基己 基。烷基可視情況經一或多個取代基取代，該等取代基諸 . 如烷氧基、環烷氧基、雜環烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、 - 方烷氧基、雜芳基烷氧基、胺基、硝基、羧基、氰基、鹵 素、羥基、磺酸基、巯基、烷基硫烷基、烷基亞磺醯基、 烷基磺醯基、胺基羰基、烷基羰胺基、環烷基羰胺基、環 烷基-烷基羰胺基、芳基羰胺基、芳烷基羰胺基、雜環烷 基-羰胺基、雜環烷基-烷基羰胺基、雜芳基羰胺基、雜芳 烷基羰胺基、脲、硫脲、胺磺醯基、磺醯胺、烷氧基羰基 或烷基羰基氧基。 如本文所用之”烯基”係指含有2_8(例如2-6或2_4)個碳原 子及至少一個雙鍵之脂族烴基。與烷基一樣，烯基可為直 鏈或支鏈。烯基之實例包括（但不限於）稀丙基、異戊二稀 〇 基、2- 丁烯基及2-己烯基。烯基可視情況經一或多個取代 基取代，該等取代基諸如烷氧基、環烷氧基、雜環烷氧 基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳基烷氧基、胺 基、硝基、羧基、氰基、ώ素、羥基、磺酸基、巯基、烷 基硫烷基、烷基亞磺醯基、烷基磺醯基、胺基羰基、烷基 羰胺基、環烷基羰胺基、環烷基_烷基羰胺基、芳基羰胺 基、芳烷基羰胺基、雜環烷基-羰胺基、雜環烷基_烷基羰 胺基、雜芳基羰胺基、雜芳烷基羰胺基、脲、硫脲、胺磺 醯基、磺醯胺、烷氧基羰基或烷基羰基氧基。 119438.doc -28- 200812940 士本文所用之丈夬基”係指含有2_8(例如2_6& 子且具有至少-個參鍵之脂族烴基。块基可為直鍵或支 鏈炔基之“列包括(但不限於)炔丙基及丁炔基。炔基可 視情況經-或多個取代基取代，該等取代基諸如絲基、 環烧氧基、雜環烧氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烧氧基、 雜方基烧氧基、胺基、石肖基、幾基、氛基、幽素n 績酸基、《、烧基硫㈣、㈣亞㈣基、烧基續酿 η

基，、胺基㈣、烧基胺基、環㈣Μ胺基、環烧基-烧 基叛月女基芳基羰胺基、芳烷基羰胺基、雜環烷基_羰胺 基、雜環烧基基幾胺基、雜芳基幾胺基、雜芳烧基魏 胺基、脲、硫脲、胺磺醯基、磺醯胺、烷氧基羰基或烷基 罗炭基氧基。 如本文所用之，，胺基”係指·nrxry，其中RX& RY各獨立 為氫、烷基、環烷基、（環烷基）烷基、芳基、芳烷基、雜 %烷基、（雜環烷基）烷基、雜芳基或雜芳烷基。當術語”胺 基”不為端基（例如烷基羰胺基）時，用-NRX—表示之。^具 有與上文所定義相同之含義。 如本文所用之”芳基"係指苯基、萘基或具有2至3個環之 苯并稠合基團（benzofused group)。舉例而言，苯并稠合基 團包括與一或兩個Cm環脂族部分稠合之苯基，例如丨，2, 3，4-四氫萘基、茚滿基、二氫茚滿基或苐基。芳基視情況 經一或多個取代基取代，該等取代基諸如烷基（包括缓基 烧基、羥基烷基及諸如三氟曱基之鹵代烷基）、稀基、炔 基、環烧基、（環烧基）烧基、雜環烧基、（雜環烧基）烧 H9438.doc -29- 200812940 基芳基、雜芳基、烧氧基、環烧氧基、雜環烧氧基、芳 氧基、雜芳氧基、芳烧氧基、雜芳烧氧基、芳醯基、雜芳 ^基、胺基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基、 胺基羰基、烧基幾胺基、環烧基幾胺基、（環院基）烧基幾 月女基、芳基.胺基、芳院基幾胺基、（雜環烧基）幾胺基、 (雜環烧基）烧基幾胺基、雜芳基幾胺基、雜芳院基幾胺 基、氰基、_素、經基、醯基、疏基、烧基硫烧基、次硫 (、' 酸基（sulfoxy)、脲、硫脲、胺磺醯基、磺醢胺、側氧基或 胺曱酿基。 如本文所用之”芳烷基”係指經芳基取代之烷基（例如Cl * 烷基烷基”及”芳基”上文已定義。芳烷基之實例為苯甲 基。 士本文所用之環脂族基涵蓋環烷基、環烯基及環炔基。 如本文所用之，，環烷基”係指3-H)(例如4-8)個碳原子之脂 族碳環。環烧基之實例包括環丙基、環戊基、環己基、環 ϋ 庚基、金剛烧基、降宿基、立方烧基（响丨）、八氫-節 十氣τ基、雙環[3 ·2·ι]辛基、雙環[2·2 ·2]辛基、雙環 [^•3.1]壬基及雙％ [3·2·3]壬基。如本文所用之”環烤基，，係 t /、有或夕個雙鍵之Μ 〇(例如4-8)個碳原子之非芳族碳 環。環稀基之實例肖枯戸& 』匕括％戊烯基、1，4-環己-二-烯基、環 庚稀基、環㈣基、六氫_茚基、人氫·萘基、雙環[2.2.2] 辛稀土及又％[3.3.1]壬稀基。環烧基或環稀基可視情況經 或多個取代基取代，該等取代基諸如烧基（包括缓基烧 基 '經基烧基及諸如三氟甲基之鹵代烧基）、烯基、块 119438.doc -30 - 200812940 基、環烷基、（環烷基）烷基、雜環烷基、（雜環烷基）烷 基、方基、雜芳基、烷氧基、環烷氧基、雜環烷氧基、芳 氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、芳醯基、雜芳 醯基、胺基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基、 胺基羰基、烷基羰胺基、環烷基羰胺基、（環烷基）烷基羰 胺基、芳基羰胺基、芳烷基羰胺基、（雜環烷基）羰胺基、 (雜裱烷基）烷基羰胺基、雜芳基羰胺基、雜芳烷基羰胺

U 基、氰基、_素、羥基、醯基、巯基、烷基硫烷基、次硫 酸基、脲、硫月尿、胺績醯基、石黃驢胺、侧氧基或胺甲酿 基。 如本文所用之雜環脂族基意謂雜環烷基、雜環烯基及雜 環炔基。如本文所用之”雜環烷基，，係指3至1〇員（例如，4至 8員）飽和環結構，其中—或多個環原子為雜原子，例如 N、〇或S。雜環烧基之實例包括派錢"底噪基、四氯旅 喃基、四氫呋喃基、二氧戊環基、噁唑啶基、異噁唑啶 基嗎淋基、八虱-苯并吱喃基、人氣-卩克烤基、人氯-硫代 咬稀基、人氫令朵基H㈣基、十氫·㈣基、八 氫·苯并阶塞吩基、2_氧雜·雙環[2.22]辛基、丨_氣雜_雙環 [2.2.2]辛基、3_氮雜_雙環[321]辛基及2,6_二氧雜-三環 [3.3.103J]壬基。如本文所用之"雜環烯基"係指具有—^ 多個雙鍵之3至1G員（例如4至8請芳族環結構，且其中一 或多個環原子為雜原子，例如N、〇或S。雜㈣基或雜環 稀基可視情況經一或多個取代基取代，該等取代基諸如燒 基（包㈣基烧基、經基烧基及諸如三I甲基之函代貌 119438.doc 200812940 基）、烯基、炔基、環烷基、（環烷基）烷基、雜環烷基、 (雜環燒基）垸基、芳基、雜芳基、烧氧基、環燒氧基、雜 環烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、 芳醯基、雜芳醯基、胺基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷 基叛基氧基、胺基羰基、烷基羰胺基、環烷基羰胺基、 (環烷基）烷基羰胺基、芳基羰胺基、芳烷基羰胺基、（雜環 烷基）羰胺基、（雜環烷基）烷基羰胺基、雜芳 芳烧基幾胺基、氰基、_素、《、醯基、録、絲: 烷基、次硫酸基、脲、硫脲、胺磺醯基、磺醯胺、側氧基 或胺曱醯基。纟-些情況下，#環烧基或雜環烯基上之取 代基自身可為環狀（其視情況含有一或多個雜原子）以使所 得經取代雜環烷基或雜環烯基為螺環系統，例如

如本文所用之’’雜芳基，，, 環、雙， 方基’’係指具有5至1 5個環原子之單

苯并哌喃（xanthene)、硫二苯并哌喃（thi〇xanthene)、啡噻 呋喃基、2,3·二氫苯并呋喃基、苯并噻唑基、二 如N、C 芳族。 吩基、°塞σ坐基、°惡σ坐基、_ π坐基、 基、喹啉基、1，2-二氫喹啉基、1 = 基、苯并吱喃基、2，3 ·二氫|其口本 119438.doc '32- 200812940 嗪（phenothiazine)、二氫吲哚及苯并[ΐ53]二氧雜環戊烯。 雜芳基視情況經一或多個取代基取代，該等取代基諸如烧 基（包括羧基烧基、羥基烷基及諸如三氟甲基之鹵代烧 基）、烯基、炔基、環烷基、（環烷基）烷基、雜環烷基、 (雜環烷基）烷基、芳基、雜芳基、烷氧基、環烷氧基、雜 環烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳烷氧基、 芳醯基、雜芳醯基、胺基、硝基、羧基、烷氧基羰基、烷 Ο

基羰基氧基、胺基羰基、烷基羰胺基、環烷基羰胺基、 (環烷基）烷基羰胺基、芳基羰胺基、芳烷基羰胺基、（雜環 烷基）斂胺基、（雜環烷基）烷基羰胺基、雜芳基羰胺基、雜 芳烧基m胺基、氰基、㈣、經基、酿基H、烧基硫 烷基、次硫酸基、脲、硫脲、胺磺醯基、磺醯胺、側氧基 或胺甲醯基。 如本文所用之”雜芳烷基”係指經雜芳基取代之烷基（例如 C!-4烷基）。，，烷基，，及，，雜芳基”上文已定義。 如本文所用之，，環狀部分”包括先前已各自定義之環烧 基、雜環烧基、環烯基、雜環烯基、芳基或雜芳基。 如本文所用之，，醯基”係指曱醯基或烷*_c(=0)_，其中 烧基上文已定義。乙醯基及三甲基乙酿基响為酿 基之實例。 如本文所用之，，胺甲醯基，，係指具有結構_o_co_NRXRy或 翁视m基團，其定義且rz可為烧 基、方基、芳烷基、雜環烷基、雜芳基或雜芳烷基。 如本文所用之”缓基"及"石黃酸基”分別指 <瞻及_§〇出。 119438.doc • 33 - 200812940 如本文所用之’’烷氧基”係指烷基基，其中”烷基”先前 已定義。 如本文所用之，，次硫酸基”係指-〇_S〇-Rx或-S0-0-Rx，其 中Rx上文已定義。 ’如本文所用之硫烷基係指-S-Rx，其中rx上文已定義。 如本文所用之亞磺醯基係指_S(0)-Rx，其中Rx上文已定 義。 如本文所用之績酿基係指-S(〇)2_Rx，其中Rx上文已定 義。 如本文所用之”!i素，，或，，鹵基”係指氟、氣、溴或碘。 如本文所用之”胺磺醯基，，係指結構-S(〇)2-NRxRy或_NRx -S(0)2-Rz，其中Rx、Ry及RZ上文已定義。 如本文所用之’’磺醢胺’’係指結構_NRx-S(〇)2-NRYRz，其 中Rx、RY&RZ上文已定義。 如本文所用之，，脲，，基係指結構-Nrx-C〇-NrYrz且，，硫脲” Ο 基係指結構-nRx-cs-nryrz。RX、ry&rz上文已定義。 如本文所用之，，胍基”係指結構_N=c(NRXRy)N(RXRy)，其 中RX&RZ上文已定義。 如本文所用之術語"曱脒基”係指結構_c = (NRX)N(RXRy)， -其中Rx及RY上文已定義。 如本文所用之術語•，羥亞胺基（oximino)"係指結構_c=n_ 〇Rx，其中Rx上文已定義。 如^所用之有效量定義為料受治療患者治療作用所 需之量’且通常根據患者之年齡、表面積、體重及病症決 119438.doc -34- 200812940 疋。Freireich等人，Cancer Chemother. Rep·，50: 219 (1966)描 述動物與人類之劑量（根據每平方公尺身體表面之毫克數） 之相互關係。可由患者身高及體重大致測定身體表面積。 例如見 Scientific Tables，Geigy Pharmaceuticals，Ardsley，New • Y〇rk? 537(1970) 〇 • 如本文所用之”患者”係指哺乳動物，包括人類。 如本文所用之拮抗劑為與受體結合而不活化受體之分 〇 子。其與内源配位基或底物競爭在受體上之結合位點，且 口此抑制X體響應於内源配位基結合而轉導細胞内信號之 能力。 短語”視情況經取代”可與短語，，經取代或未經取代，，交替 使用如本文所述，本發明之化合物可視情況經一或多個 諸如上文一般說明或如本發明之特定類、子類及種所例示 之取代基取代。除非另外說明，否則式⑴中變數Rl、R2、 R、R及R5之各特定基團可視情況經一或多個本文所述之 〇 取代基取代。特定基團之各取代基進一步視情況經齒素、 氛基、絲基、經基、石肖基、函代烧基及烧基中之一至三 者取代。舉例而言，烧基可經烧基硫烧基取代，且烧基硫 烧基可視情況經函素、側氧基、氰基、烧氧基、經基、硝 基、齒代烧基及烧基中之-至三者取代。作為另一實例， 烷基可經（環烷基）羰胺基取代且（環烷基）羰胺基之環烷基 部分可視情況經鹵素、氰基、側氧基、烧氧基、經基、硝 基、鹵代烷基及烷基中之一至三者取代。 不吕則面疋否有術語”視情況”，術語"經取代”通常係指 119438.doc -35- 200812940

Ο 在給定結構中以指定取代基之基團取代氣。在上述定義中 及下述化合物及其實例之描述中描述特定取代基。除非另 外說明，否則視情況經取代之基團可在基團之各可取代位 置具有取代基，且當任何給定結構中一個以上位置可婉一 個以上選自指定群之取代基取代時，各位置上之取代基可 相同或不同。諸如雜環烧基之環取代基可鍵結至另一諸如 環烧基之環以形成螺雙㈣統，例如兩個環共用一個原 子士沾白此項技術者所認為的，本發明所預想& 之組合為導致形成穩定或化學上可行化合物之組合。 如本文所用之短語"穩定或化學上可行"係指當經受供其 生產、㈣且較佳其时、純化且用於本文所揭示之-或 多個目的之條件時實質上不發生改變之化合物。在一些實 施例中，敎化合物或化學上可行化合物為當在無水分或 其他化學反應條件之情況下保持在，c或更低之溫度下至 少-週時實質上不發生改變之化合物。 除非另外說明，否則本文所述之結構亦意謂包括該結構 有-構$式（例如，對映異構體、非對映異構體及幾 何異構體（或構象異構體）)形式，例如各不對稱中心之r及 籌里（Z)及（E)雙鍵異構體及（z)及（E)構象異構體。因 此’本發明涵蓋本發明化合物之單一立體化學異構體及對 映異構體、非對咏g 4致、 t映異構體及幾何異構體（或構象異構體）混 合物。除非另外說明，否則本發明之化合物之所有互變異 構形式均在本發明之範疇内。 此外，除非另外却日日 T 〇丨丄 次月，否則本文所述之結構亦包括僅在 119438.doc -36- 200812940 或夕個同位素§集原子之存在方面不同之化合物。舉例 而a ，除以氛或氣置換氫或以nc或mc富集碳置換碳之 外，具有本發明結構之化合物亦在本發明之範疇内。舉例 而言，在生物學分析法中此等化合物可用作分析工具或探 針。 各式（I)化合物之N-氧化物衍生物或醫藥學上可接受之鹽 亦在本發明之範_内。舉例而言，㈣或対核心環之氮 〇 f原子或3氮雜雜環基取代基在諸如間氯過苯甲酸或H2〇2 之合適氧化劑存在下可形成氧化物。 性質上為酸性之式⑴化合物(例如具有羧基或酚羥基)可 :成酉藥子上可接文之鹽’諸如鈉、_、鈣或金鹽。與醫 樂學上可接受之胺類，諸如氨、烷基胺、羥基烷基胺及 曱基醣胺（N_methylglycamine)形成之鹽亦在本發明之範疇 内。可以酸處理式⑴化合物以形成酸加成鹽。此等酸之實 例$括鹽酸、氫漠酸、氫硬酸、硫酸、甲石黃酸、麟酸、對 漠苯基-績酸、碳酸、丁 -酿 ^ J —酉文、棹棣酸、苯甲酸、草酸、 丙二酸、水楊酸、蘋果酸、&丁烯二酸、抗壞血酸、順丁 稀二酸、乙酸及熟習此項技術者熟知之其他無機酸及有機 酸。可藉由以足量酸（例如鹽酸）處理為游離驗形式之式⑴ 化合物以產生酸加成鹽(例如鹽酸鹽)來製備酸加力鹽。可 藉由以合適稀驗水溶液(例如氯氧化納、碳酸氮鈉、碳酸 _或氨水)處理酸加成鹽使該鹽重新轉化為其游離驗形 式。舉例而言，式⑴化合物亦可為非對掌性化合物、外消 旋混合物、光學活性化合物、純非對映異構體或非對映里 119438.doc 200812940 構體混合物之形式。 B ·縮寫 以下縮寫具有以下含義。若縮寫未定義，則其具有所公 認的含義。 BEMP = 2-第三丁基亞胺基-2-二乙胺基-1，3-二曱基全氫 _1，3,2-二氣雜填烧

Boc=第三丁氧基獄基 B〇P=六氟磷酸苯并三唑《4-基氧基-參（二甲胺基）鐫 bd=寬雙重峰 bs=寬單峰 CDI=羰基二咪唑 d =雙重峰 dd=雙二重峰 DIC =二異丙基碳化二醯亞胺 DMF =二甲基曱醯胺 DMAP =二甲胺基吡啶 DMSO =二甲亞砜 EDCI=乙基-1-(3-二曱胺基丙基）碳化二醯亞胺 eq.=當量 EtOAc=乙酸乙酉旨 g=公克 ΗΟΒΤ=1-羥基苯并三唑 DIPEA=亨氏驗（Hunig’s base )=二異丙基乙胺 L=公升 119438.doc -38- 200812940 m=多重峰 莫耳 max:最大值 meq=毫當量 mg=毫克 mL=毫升 mm=毫米 mmol=毫莫耳 MOO甲氧基氧基羰基 N=正常 N/A=無數據 ng=奈克 nm=奈米 〇D=光學密度 PEPC= 1-(3-(1-吡咯啶基）丙基）-3-乙基碳化二醯亞胺 PP-HOBT=哌啶-哌啶-1-羥基苯并三唑 psi =每平方对碎數 Ph=苯基 q=四重岭 quint. =五重峰 rpm =每分鐘轉數 s =單峰 三重峰 TFA=三氟乙酸 119438.doc -39- 200812940 THF=四氫吱喃 11 c =薄層層析法 pL=微升 UV=紫外線 • II·本發明之化合物 . 除在合成製程期間使用氘化起始物質或反應試劑之外， 通常可藉由如用於合成本發明之氘化化合物之非氘化形式 〇 的此項技術中已知之方法合成本發明之氘化化合物。適用 方法之貫例包括以下文獻中所述之方法：美國申請案第 60/711，530 號；WO 02/18369 ; WO 〇7/022459 ; Advanced Organic Chemistry，第 2版，第 204 頁，j. March，McGraw Hill，New York，NY，1997 ;及 Synthesis of a: Elemes and Ragnarsosson，J· 〇f Chem· Soc·，Perkin 1，1996, 537 〇 本文所引用之所有公開案以引用的方式全文併入。 舉例而言，使用諸如下文於流程I所說明之已知方法製 Q 備式I化合物。

流程I

iii 參照流程I，在諸如EDCI及HOSu之縮合試劑存在了使式i 之酸與式11之氘化胺基-醇-醯胺反應以提供式沮之輕基-醯 胺。在一些實施例中，如π中所示之氘（D)富集量百分比大 於10%。在其他實施例中，富集量為10%至99.95%、40% -40- 119438.doc 200812940 至 99.95%、50% 至 99.95%、60% 至 99.95%、8〇% 至 99.95%、90%至 99.95%、93%至 99.95%、97% 至 99.95% 或 99-99.95%或99.95%或更高。以合適氧化試劑氧化111提供 式I化合物。合適氧化試劑包括（例如）戴斯_馬丁（Dess_ Martin)高碘烷或TEMPO及次氯酸鈉。 可藉由使用已知方法及（例如）如下文流程Η中所說明製 備流程I中所示之式让之氣化胺基-醇-胺。

流程II

ch3s、 ο ch3s

CH,S ]v OCH, ch3s

CH3s O ch3s ^X^och3 V

參照流程II，根據先前所述之程序使甘胺酸亞胺酯w轉 化為式vii之氘化磺内龜胺（sultam)(Y· Elemes及U· Ragnarsson，J· C/zem· 5W·，/，1996，6，第 537 頁）。 如先前所述以酸及鹼連續處理式vii化合物（L· 119438.doc -41 - 200812940

Lankiewicz，第人，CT^m. Soc.，Pah·” /，1994，17，第 25 03頁）隨後以苯甲氧基羰基氣處理中間物胺基酸（未圖示） 提供經保護之氘化胺基酸。在縮合試劑CDI存在下使 处11與曱氧基曱胺反應提供式ίχ之Weinreb醯胺。用（例如） 鼠化一異丁基銘或氫化銘锂還原处提供酸2L。使用與先前 所述類似之程序（例如見WO 02/1 8369)使醛2L轉化為氰醇2LI 且由此轉化為經保護之經基-胺基酸χϋ。使酸xii韓化為經 保護之醯胺2011，使醯胺2Llii去保護以提供胺基-醯胺Π。 或者，可（例如）如流程III中所說明製備流程I中所述之r2 為Η之気i化胺基-酿胺i i。

流程III

J · Red-AI 2. D20

NaCI02 NaH2P04 2H2〇 2-甲基-2-丁烯 第三丁醇

IBCF NMM CH2CI2 外消旋

xvii 對掌性離析

參照流程III ’以雙（2-曱氧基乙氧基）氫化鋁鈉還原炔丙 醇仏，隨後以氧化氛中止反應混合物以提供気化烯丙醇 119438.doc -42 - 200812940 丛。以一氧化猛氧化红提供醛，在鱗酸納及2-甲基-2-丁烯存在下以次氣酸鈉（NaC102)將醛xvi造一步氧化為酸 。在N-曱基嗎啉存在下使酸^^與氣甲酸異丁酯（icbf) 反應，隨後混合酸酐中間物與胺HNR4R5反應，提供醯胺 2LX1U。可在三氟乙酸及對甲苯磺酸存在下以尿素過氧化氫 0；〇>)使2^11環氧化以提供環氧化物&。&與疊氮化鈉反 應提供中間物疊氮基化合物Μ，隨後在鈀/碳存在下藉由 〇 催化氫化反應將該化合物Μ還原為外消旋胺基醇可 使用已知方法離析外消旋胺基醇^，該等方法諸如為對 阜欧層析4、製冑光學活性衍生斗勿或與光學活性酸ΗΑ形 成鹽隨後自有機溶劑結晶。適於製備鹽之光學活性有機酸 包括（例如）L-酒石酸、L-蘋果酸、（s)1桃酸、（ish+)_ 10-樟腦續酸、水合㈠2,2:4,6d亞異丙n酮基心古 洛糖酸（㈠2,2:4,6專〇七0_州他_-2如〇心細^ acnd hydrate)、N-乙醯基白胺酸、去氧膽酸、（+)_〇,〇,_ J =苯甲醯基-D-酒石酸、〇,〇、二，_甲苯甲醯基)_D_酒石 酉夂、/七）1，卜聯蔡基m粦酸、L-乳酸、D-葡萄糖酸、乳 糖鼷酸、二_三甲基乙醯基七酒石酸（di_心叫-她士 _d)、s-(+)-〇-乙醯基扁桃酸及s_〇2·(苯基胺甲醯氧基） 丙酸。適於再結晶之有機溶劑之實例包括二甲基乙酿胺、 乙fee乙S旨及丙g同。 y藉由例如NMR及質譜法之習知分析方法判別由此獲得 之说化化合物。NMR可用於測定化合物之結構，而質譜法 可用於藉由與化合物之非氣化形式比較來測定化合物中兔 119438.doc -43 - 200812940 原子之量。 本务明之說化化合物通常 e , , @ ^ y 巾一非爪化類似物穩定且較不 易差向異構化。因此，其可 α7、而要本發明化合物之專一 性立體組態之應用。舉例 上… 田於式⑴之氘化化合物可 抑制卿蛋白酶，因此其可用於治療或預防由HCV引起之 感染或，他由HCV蛋白酶介導之病症。可藉由傳統酶抑制 分析法$測其抑制活性，其中有些分析法已說明於上文所

Ο 引用之公開案中。例如見Perni，RB.等人，”抗微生物劑與 化療法（Antimicrobial Agents and Chemotherapy)”，2006 (3 月），50 (3)·· 899-909 〇 此外，式（I)之氘化化合物可用作生物工具以研究其非氘 化類似物之藥理學特性。因此，此等用途亦在本發明之範 _内。 實例 1· (15,33^625^-2-((5^)-2-((5)-2-環己基-2-(11 比噪 _2_ 曱 醯胺基）乙醯胺基）-3,3-二曱基丁醯基）-7V-(〇S)-l-(環丙基胺 基—側氧基-3-氖代-己-3-基）八氫環戊[e】11比洛-1-甲醯 胺之製備 步驟a

ch3s ch3s

之製備 119438.doc -44- 200812940 藉由諸如 Y. Elemes 及 U. Ragnarsson，J. o/C/zem. iSoc.， 7，1996，6，537; W.Oppolzer，第人，//Wv· CTn.m· AM·，1994, 25 : 23 63中所述之已知方法藉由使用相應未經 取代之磺内醯胺及1 -碘丙烷來製備氘化磺内醯胺（亦即下述 流程中所示之化合物M)。

接著將17.32 g化合物μ(45·8 mmol)及229 mL THF潰入具 有磁性攪拌棒及&入口的500 mL圓底燒瓶中。將所得溶液 冷卻至-78°C且以注射泵經！小時添加n_BuLi(3丨·5 mL於己 烧中之1.6 Μ溶液，5〇 3 mm〇1)。使所得黃色溶液老化3〇分 〇 鐘，之後經30分鐘於其中添加HPMA(56 mL)及n-PrI(13.4 mL，137 mmol)之溶液。經8小時使混合物溫至室温且接著 冷卻至2〇 ◦，之後將〇2〇(50 mL)添加至該混合物中。接 著將反應此合物以Et〇Ac(4〇〇 mL)萃取且將有機層經 MgSQ4乾_且濃縮以提供61·3 g粗油狀物。在以2:丨庚烧他⑽ ♦離之500 g矽膠上層析隨後濃縮近乎純的溶離份產生 2〇·35 g白色固體。接著將白色固體自EtOH(210 ml)再結晶 以產生15.39 g呈白色結晶固體之化合物如藉由ιΗ NMR所測定之氘併入量為93%。 119438.doc -45 - 200812940 步驟b : (S)-2-(苯甲氧基羰胺基）-2-氘代戊酸Viii之製備 將來自步驟a之化合物χϋ(1 5.39 g，32.1 mm〇l)潰入 丁HF(l〇〇 mL)及IN HC1(5 0 mL)中。將所得乳液在室溫下攪 拌隔仪且接著在真空下濃縮以提供稠油狀物。接著將油狀 物溶解於THF(100 mL)中，且將水（25 mL)及Li〇H(3.08 g 128 mmol)添加至該溶液中。將此溶液再次在室溫下攪拌 隔仪且接著濃縮以移除THF。剩下渾濁淡黃色乳液。將此 乳液以水（25 mL)稀釋且以CHAl2(三次，各50 mL)萃取。 將水相以THF(200 mL)稀釋且在迅速攪拌下冷卻至^(^且經 15为名里逐滴添加CBZ-C1(7.6 mL，54 mmol)。在〇。〇下授摔1 小時後，在真空中移除THF溶劑且藉由添加！ N HC1(50 mL)酸化殘餘物。將溶液以EtQAc(3次，各loo mL)萃取且 將有機相經Na2S〇4乾燥且濃縮以提供油狀物。將殘餘物溶 解於EtOAc(25 mL)及庚烷（150 mL)中、接種且在室溫下攪 拌隔夜。將固體收集於玻璃料過濾板上，以庚烷（3〇 mL) 沖洗且空氣乾燥以產生5·65 g(7〇%)上述流程中所示之化合 物]。如藉由1Η N M R所測定之氘併入量為9 3 %。 步驟c : 1-(甲氧基（甲基）胺基側氧基_2_氘代戊_2_基胺 基甲酸（S)-苯甲酯之製備

將3.0當量曱基嗎啉（7〇〇 _)、15當量％小二曱胲鹽 119438.doc -46- 200812940

酸鹽（5 81 含有於20 2 -氣代戊g 合物攪拌隔夜。接著將反應混合物稀釋於二氯甲烷中且以 HCK1 N)及鹽水洗滌。將有機層經MgS〇4乾燥。藉由急驟 層析法（於己烷中之乙酸乙酯15_75%)純化粗混合物以提供 814 mg純醯胺（標題化合物）。es+=296.15 ES-=295 2。 NMR光譜確認該結構。 步驟d · 1-側氧基-2-氛代戍-2-基胺基曱酸（s)_苯甲酯之製備

Cbzh

C 使用WO 02/18369中所述之程序，使步驟c之Cbz保護之 胺基酸轉化為標題化合物。特定言之，將1 · 7當量硼氫化 鐘之溶液（1.0 M)(4.67 mL)缓慢添加至維持在〇。(3下（於冰浴 中）之含有於10 mL無水THF中之1.0當量1-(甲氧基（甲基）胺 基）-1-側氧基-2-氘代戊-2-基胺基甲酸苯曱酯（81〇 mg， 2 ·75 mm〇l)之燒瓶中。約10分鐘後，移除冰浴且繼續反應1 小時。在0°C下藉由添加5 mL KHS04溶液（1〇〇/。）使反應中 止。接著藉由添加10 mL HC1(1 N)稀釋溶液。將混合物檀 拌3 0分鐘，接著以二氯甲烧萃取3次。將有機相組合且以 HC1溶液（丨n)、水及鹽水洗滌。接著將有機相經MgS04乾 燥且蒸發揮發物。如下一步驟使用該醛。ES+=237.1，ES- H9438.doc -47- 200812940 =23 5 ·2 〇 步驟e · (3S)-l-(環丙胺基）-2-羥基-1-側氧基_3_氘代己_3-基胺 基甲酸苯甲酯之製備

根據下文所示之流程製備環丙基異腈。

Na2C03 EtOH,0 ◊室溫

Bu3N, p-TsCI 100C, 20 mmHg 在-78°C下收集 接著如 J· E. Semple等人，Org. Lett·，2000，2(18)，第 2769 頁；Lumma W·，乂 〇rg. C/zem·，1981，46, 3668 中所述使環丙 基異腈與步驟d之醛產物偶合以產生標題化合物。 ES+=322.1 〇 () 步驟f ·· (3S)-3-胺基環丙基-3-氘代_2_羥基己醯胺之製備

0H

Η Ν

藉由在氫存在下使用鈀/碳催化劑達成步驟e之Cbz化合 物之氫解作用以產生標題化合物。以下流程中所示為步驟 c、d、e及 f 〇 119438.doc -48 - 200812940

Pd(OH)2/C H2> MeOH 二甲基咖定，TFAA 0(=^，〇->室溫

步驟 g : (lS，3aR，6aS)-2_((S)-2-((S)-2-環己基-2 十比嗪 士 甲醯胺 基）乙醯胺基）-3,3-二甲基丁醯基）-N_((3S)-l_(環丙胺基）_3_& 代羥基-1-側氧基己-3-基）八氫環戊[c]吡咯-1-甲醯胺之製備

藉由在諸如EDCI及HOSii之偶合試劑存在下與適當酸、缩 合自步驟f之羥基-胺基醯胺產物製備標題化合物。特定t 之，將2.5當量二異丙胺（980 μΙ〇、1.2當量水合1經基苯 并三。坐（411 mg)及1.3當量EDCI(558 mg)添加至含有於2〇 mL DMF 中之 1.2 當量（lS，3ai?，6a5>2-((6>2-((5>2-環己基 _ 2_(吼嗪-2-甲醯胺基）乙醯胺基）-3,3-二曱基丁醯基）八氫環 戊[c]吼咯-1-甲酸（1.59g)之燒瓶中。在室溫下攪拌15分鐘 後’將1.0當量（3S)-3-胺基環丙基-3-氛代經基己醯胺 鹽酸鹽（500 mg)添加至該混合物中。在另一 24小時後，將 反應混合物稀釋至400 mL乙酸乙酯中。將混合物之有機相 以HC1( 1 N)、水、飽和碳酸氫鈉溶液、鹽水洗務，且接著 經MgS〇4乾燥。藉由在二氧化矽（於己烷中之乙酸乙酯7〇_ 119438.doc -49- 200812940 100%)上層析純化粗產物以產生131 g呈白色固體之標題化 合物。ES+=683.65 ES- = 682.2。】H NMR確認該結構。 步驟h : (1Α33Λ，635>2-((Λ>2-((5>2-環己基-2_(吼嗪-2-曱醯 胺基）乙醯胺基）-3,3-二甲基丁醯基環丙胺基 二侧氧基-3-氘代-己-3-基）八氫環戊[c]吡咯-1-甲醯胺之製備

藉由以諸如戴斯-馬丁高碘烷或TEMPO及次氯酸鈉之合 適氧化試劑氧化步驟g之產物來製備標題化合物。特定言 之’在室温下將1.06 g戴斯-馬丁高碘烷添加至含有於4〇 mL二氯甲烧中之131g (u，3ai?，6a5>2_(⑺士（⑺_2_環己 基-2-(吡嗪-2-甲醯胺基）乙醯胺基）-3,3-二甲基丁醯基尽 ((3R-1-(環丙胺基）_弘氘代_2_羥基“―側氧基己_3_基）八氫 裱戊Μ吡咯甲醯胺之燒瓶中。攪拌2小時後，添加5〇 mL亞硫酸氫鈉（1 Ν)，且將混合物攪拌3〇分鐘。將2個相分 離，將有機相以水兩次、鹽水洗滌，且經Na2S〇4乾燥。藉 由在二氧化矽（於己烷中之乙酸乙酯2〇_1〇〇%)上層析純化 粗產物以產生丨·07 g呈白色固體之標題化合物。 ES + = 68L5, ES-680.0。iHNMR光譜確認該結構。 藉由MS測定氘併入量為93 %。藉由對掌性HpLc正相測 疋非對映異構體比率且該比率高於99¾ d.e。 以下流程展示步驟g及h之反應。 119438.doc -50- 200812940

實例2 : (2S，3S)-3-胺基-3-氘代-N-環丙基-2-羥基己醯胺鹽 酸鹽之製備 Γ

還原性氘化 OH 1.Red-AI 2. D20 95%

Mn〇2 90%

75%

A 直接環氧化 UHP € TFAA p-TsOH CH2CI2 86%

么 h2n-〇 IBCF NMM ch2ci2 65%

NaCI〇2 NaH2P04 2H2〇 2-甲基-2-丁烯 第三丁醇

NaN3

MgS〇4

MeOH

對掌性離析 去氧膽酸

NHoOCA

上文所示流程說明標題化合物之整個合成過程。下文詳 述各步驟。 -51 - 119438.doc 200812940 #耀/ ··夂氘代-(E)-己烯·i-醇之製備 ：己块小酉子（1〇 g，0·1莫耳）及丁耶（1〇〇 mL，10體積）潰 :配有機械授拌器及回流冷凝器之250 mL三頸圓底燒瓶 中。。將所得混合物冷卻條且接著在氮氣氛下在代與 :〇C之間緩慢添加Red-A1(於甲苯中，65%，32 mL，；!.6當 量）。使所得混合物升溫至25t且授摔5小時。將反應混: ^部至巧价且在代與说之間逐滴添加邮（8 2 ^ 4 〇 當量）。將1PAC(50 mL，5體積）及飽和NH4C1溶液（50 mL，5 體積）潰入所得混合物中。將混合物攪拌1〇分鐘後，濾出 斤形成之白色固體。將濾液中有機層分離出來且將水層以 AC(3 0 mL，3體積）萃取。將有機層組合且以水（3〇 mL，3 體積）洗滌且經MgS〇4乾燥且濃縮以提供9 8 g呈無色油狀 物之產物（化合物2)。粗產物2未經進一步純化用於下一步 驟〇 H NMR (500 MHz5 CDC13) δ 5.66 (t? 1Η5 J=5.0 Ηζ)? 4.12 (J (d，2Η，J=5.0 Ηζ)，2.04 (t，2Η，J=5.0 Ηζ)，1.38〜1·46 (m5 2Η)5 0.93 (t? 3Η? J = 5.0 Hz) #雜2 ·· 3_氘代-(E)-己_2·烯醛之製備 在室溫下將活化Mn〇2(87 g，1〇當量）潰入含有於 CH2C12(150 mL，15體積）中之3-氘代-2-己烯醇（10 g，〇·ΐ莫 耳）之配有機械攪拌器之250 mL三頸圓底燒瓶中。猛烈攪 拌1小時後，添加另一份Mn02(16 g，2當量）且繼續震盪4小 時。將反應溶液經矽藻土墊過濾。在真空（25。〇，1〇〇 mmHg)中移除溶劑以產生8·8 g呈淺黃色油狀物之粗酸產物 119438.doc -52- 200812940 (化合物3)。粗產物未經進一步純化用於下一步驟。 !H NMR (500 MHz, CDC13) δ 9.54 (d, 1Η, J=1〇.〇 Hz)j 6.14(s，1H), 2.34 (m，2H)，1.55〜1.60 (m，2H)，i 〇〇 (t，3H， J = 5.0 Hz) #雜3 : 3-氘代-(E)-己-2-烯酸之製備 將3-氘代-2-己烯-1_醛（10 g，ο.!莫耳）、第三丁醇（9〇㈤匕， 9體積）及2-曱基1 丁稀（3〇 mL，3體積）潰入配有機械授掉 〇 器及回流冷凝器之500 頸圓底燒瓶中。經30分鐘向所 得溶液中添加剛製備之NaCl〇2(27·4 g，3當量）及

NaH2P04(62.9 g，4當量）於水（200 mL)中之水溶液。將反應 混合物在室溫下攪拌2小時。將反應溶液冷卻至〇它且添加 飽和Na2S〇3水溶液直至反應顏色為無色。停止攪拌且將有 機層分離出來且將水層以Et0Ac(3體積x3)萃取。將有機層 組合且在真空中濃縮直至總體積為3體積。將所得溶液以 1 N NaOH(3體積χ3)萃取且丟棄剩餘有機層。將經合併水 ϋ 溶液以6 N HC1酸化直至PH值為1.0。將溶液以CH2Cl2(3體 積x5)萃取。將經合併有機層經MgS〇4乾燥且濃縮以提供 8.7 g呈白色固體之產物（化合物。 H NMR (500 MHz? CDC13) δ 5.84 (s? 1H)5 2.23 (t? 2H5 J = 5.0 Hz)，1.51 〜1.55 (m，2H)，0.98 (t，3H，J=5.0 Hz) 夕鑕4 : 3-氘代-(E)-N-環丙基己_2_烯醯胺之製備 將於 CH2C12(100 mL，10體積）中之 己烯酸-3d(1〇 g，〇 〇9 莫耳）、IBCF(13 g，1.1當量）潰入配有機械攪拌器及回流冷 凝器之250 mL三頸圓底燒瓶中。將所得溶液冷卻至〇。〇且 119438.doc •53 · 200812940 Ο 藉由將溫度控制在〇與心之間緩慢添加νμμ(ι3·2 Μ 當量）。接著，使混合物升溫至室溫且授拌1小時。將環丙 基胺（5.9 g，L2當量）添加至所得溶液中且將溶液授掉2小 時。將反應混合物以i N Na〇H(3體積χ2)、i n hc旧體積 x2)及鹽水溶液（3體積）及水（3體積）洗務。冑有機層經 MgS04乾燥且濃縮以提供呈油狀物之粗產物。將粗產物以 庚烷(5體積)溶解且在攪拌下冷卻至_加。將沉澱固體過 濾出來且乾燥以提供8.7 g呈白色固體之產物(化合物”。 lH NMR (5〇° MH^ DMS〇) ^ 7.92 (S, 1Η), 5.78 (s 1H) 2.66^2.68 (m, 1H), 2.08 (t, 2H, J.5.0 Hz), 1.38^1.42 2H), 0.87 (t, 3H, J=5.0 Hz), 0.63 (t, 2H, J=3.0 Hz), 〇.4〇 (t 2H? J = 3.0 Hz) ’ #鏔5: 3-氘代-N_環丙基_3_丙基氧玩_2_甲醯胺之製備 在〇°C下經30分鐘將於CH2C12(50 mL，5體積）中之三氟乙 酸酐（40.9 g，3當量）添加至配有機械攪拌器且含^於 CH2C12(100 mL，10體積）中之（E)_N_環丙基己_2_烯醯胺_ 3d(亦即，來自步驟4之產物）（i〇 g，〇·〇6莫耳）、尿素過氧化 氫（25 g，4 當；ϊ)及 p-TsOH(12.3 g，1 當量）之 25〇 mL^ 頸圓 底燒瓶中。將反應混合物加熱至40±5°C且授掉3小時、卜 卻至〇°C後，藉由緩慢添加6 N NaOH(l〇〇 mL，10體積）中止 反應混合物且攪拌30分鐘。將有機層分離出來且以_水 體積）及水（5體積）洗滌。將經洗滌有機層經MgS〇4乾炉且 將溶劑蒸發以提供9.7 g呈淺黃色油狀物之環氧化物2 (亦即，化合物6)。粗產物未經進一步純化用於下—步驟物 119438.doc •54- 200812940 NMR (500 MHz，DMSO) δ 8·〇1 (s，1H)，3 〇9 (§，叫 2.63〜2.65 (m，1H)，1·39〜1.54 (m，4H)，〇 91 (t，3H，j = 5 〇 Hz)，0.60 (t，2H，J=3.0 Hz)，〇·45 (t，2H，J==3 〇 Hz) #雜(5 ·· 3-疊氮基-3-氘代-N-環丙基_2_羥基己醯胺之製備 將疊氣化納（15.3 g，4.0當量）_次性添加至含有於 MeOH(100 mL, 10體積）中之環氧化物_3d 6(1〇 g, 〇 〇6莫耳、)

及無水硫酸鎂(14.1 g，2.0當量)之配有機械攪拌器及回流冷 凝器之250 mL三頸圓底燒瓶中。將所得混合物加埶: 65土代且授拌5小時。將反應混合物冷卻至室溫且添加 IPAC(100 mL，10體積）且將混合物再攪拌1〇分鐘。將混合 物經Celite®墊過滤、以移除不彳溶之鹽且將所得澄清溶液‘ 縮至3體積。將IPAC(170 mL，17體積）添加至所得溶液中且 將混合物再攪拌ίο分鐘。將溶液再次經Celite<g) 供呈於說中之澄清溶液（約· mL)之產物疊氮; 3d(化合物7)，其未經進一步純化用於下一步驟。

NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.91 (s, 1Η), 6.00 (d, 1H J=5.0 Hz), 4.03 (d, 1H, J=5.0 Hz), 2.66-2.67 (m, 1H) 1.30-1.58 (m, 4H), 0.88 (t5 3H, J=5.0 Hz), 0.60 (t5 2H J=3.0 Hz)，0.48 (t，2H，J=3.0 Hz) 夕鑕7: 3-胺基氘代_N_環丙基_2•羥基己醯胺之製備 將Pd/C(l〇/0 Pd，水50%，〇·8 g)潰入含有在先前步驟中 在虱化反應器中獲得之於1PAC中之疊氮化物_3d 7(20〇 mL， 〇·〇5莫耳）之配有機械攪拌器之5〇〇 mL高壓釜氫化反應器 中向"亥'合液中〉貝入氮氣（1.0大氣壓）且釋放三次且接著潰 119438.doc -55- 200812940 入氫氣（3.0大氣壓）且釋放三次。向所得溶液潰入氫氣（3大 氣壓）且攪拌5小時。釋放氫氣後，將溶液以氮氣淨化5分 鐘。將MeOH(30 ml，3體積）添加至所得溶液中且將反應混 合物加熱至50士5°C。將反應混合物經矽藻土墊過濾以提供 /且π浴液。藉由在20±5°C下濃縮溶液直至剩餘3體積溶液 ， 來分離產物。藉由過濾、洗滌（IPAC，3體積）且乾燥來收集 固體以產生7·7 g呈白色結晶固體之標題化合物（化合物 〇 8)0 lU NMR (500 MHz? DMSO) δ 7.70 (s? 1Η)? 5.31(s? 2Η)? 3.68 (s，1Η)，2.64〜2·66 (m，1Η)，1·1〇〜ι·5〇 (m，4Η)5 0.82 (t， 3H，J=5.0 Hz)，0.59 (t，3H，J=3.0 Hz)，0·45 (t，3H，J=3.〇

Hz) #鑽5 : (2S，3S)-3-胺基-3-氘代-N-環丙基_2_羥基己醯胺去 氧膽酸鹽之製備 將去氧膽酸（15·7 g，0.75當量）潰入配有機械攪拌器且含 U 有於THF(100 mL，1〇體積）中之步驟7之外消旋（28,33)_3_胺 基-3-氘代-N-環丙基-2-羥基己醯胺（1〇 g，〇〇5莫耳）之25〇 mL二頸圓底燒瓶中。將反應混合物加熱至65士5它且攪拌工 小時。經1小時將所得均質混合物冷卻至23±2t，且保留 在相同溫度範圍下1小時。藉由過濾、WTHF(5〇 mL，5體 積）洗滌且乾燥收集沉澱固體以產生12·4 §呈白色固體之鹽 化合物（化合物9)。產物之對映異構體比率（£11)為2:98。 步雜Ρ ·· (2S，3S)-3-胺基-3-氣代4環丙基|經基己醢胺鹽 酸鹽之製備 119438.doc -56- 200812940 將一氫膽酸鹽（來自步雜S)及2_丙醇（62 mL，5體積）潰入 配有機械攪拌器之250 mL三頸圓底燒瓶中。將溶液加熱至 75±5°C且在猛烈攪拌下緩慢添加於IpA(12 mL，3當量）中之 5至6 N HC1溶液。將所得溶液在相同溫度下攪拌丨小時且 =著冷卻至23±2。(：。將反應混合物維持在相同溫度下卜】、 時。藉由過濾、、以2-丙醇（36 mL，3體積）洗務、乾燥收集 沉澱固體以產生3.0 g呈白色固體之標題化合物（對映異構

Ο 體比率=0:100)。如藉由！^及巾NMR*測定的，氘併入量 高於99%。 | NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.07 (s5 lH)j 7.97 (s, 3H) 6-25 (d5 1H, J = 5.0 Hz), 4.16 (d5 1H, , J=5.0 Hz), 2.67L2.7〇 (m5 1H), 1.33~1.46(m, 4H), 0.84 (t, 3H, J=5.〇 Hz), 0.61 (t, 3H，J = 3.0 Hz)，0.53 (t，3H，J = 3.〇 Hz) ’ 實例3·用於量測差向異構化速率之分析法 本發明之氛化化合物如下經受緩慢的差向異構作用：

V

速率。特定言之，將 犬血漿或人類血漿）添 根據以下分析法量測差向異構化 100 pL培養基（緩衝液、大鼠血漿、 119438.doc -57- 200812940 加至96孔深培養盤中。接著將含有測試化合物 (lS，3ai?，6a5>2-((5>2-((5>2-環己基-2-(吡嗪-2-曱醯胺基） 乙酿胺基）-3,3-二甲基丁醯基）-，（（5>1-(環丙胺基）—1，2-二 側氧基-3-氘代-己-3-基）八氫環戊[c]吡咯-1-甲醯胺（為1 μΜ 或10 μΜ)及1200 pL乙酸乙酯之10 μί乙腈溶液添加至血聚 中，且藉由使用TomTec液體操作工作站（Hamden，CT， USA)置入96深孔培養盤中（2 mL)。接著將培養盤緊密覆蓋 f) 且以渦旋震盪20分鐘，之後將其在3000 rpm下離心1〇分 鐘。離心後，使用TomTec將900 pL上清液轉移至新穎v型 96深孔培養盤中，且接著在2yc下在氮氣（流速為6〇 L/min)下乾燥約30分鐘。以1〇〇 μΕ乙酸乙酯重組殘餘物， 且將溶液再次轉移至於96孔培養盤中之玻璃插入物中。將 20 μί重組溶液注入LC-MS/MS中以測定差向異構體之量。 LC-MS/MS 光譜儀使用 ChiralPak AD Coliimn(4.6xl50 mm 1〇4111)，異丙醇與正庚烷之混合物〇0:9〇、50:50或90:1〇) 〇 作為移動相且異丙醇作為洗滌溶劑。MS光譜儀中亦使用 環己基中含有1丨個氘原子之測試化合物之氘化類似物 ^36ηΑ2Όη^Ί〇^ MW 690.47) 〇 測试化合物之質量（M+H5 m/z)為68 1 ·36，而其非氣化類 似物（在氘化碳中心具有相同或不同對掌性構型）之質量 (Μ+Η，m/z)為 680.36。其 LC-MS/MS 光譜展示 323.30(有氛） 及322.30(未氣化）之片段。 在兩種濃度（1 μΜ及10 μΜ)下及在相同培養基（亦即，緩 衝液、大鼠血漿、犬血漿及人類血漿）中，與式⑴氘化化 119438.doc •58- 200812940 合物之非氣化形式相比，於緩衝液、大鼠血浆及犬血浆中 測試式（I)氣化化合物展示更慢之差向異構化速率，且在人 類止漿中展示慢得多之差向異構化速率。舉例而言，在人 類血漿中及在i μΜ4ΐ〇 μΜτ，氣化化合物在⑽分鐘内 差向異構化約30% ’而非氣化形式差向異構化幾乎為 • 4〇%。此外，在人類血漿中，氖化化合物以線性速率差向 異構化180分鐘，而非氘化形式在前6〇分鐘展示指數式差 (") 向異構化速率，之後穩定。 實例4··用於測定HCV複製子細胞中ICw之分析法 如 Lm，C·等人，1 c/2⑽，2〇〇4, 279· i75〇8 i75i七

Lm，K’專尺，Antimicr〇b ㈤则敲，：⑽今, 48.4784-4792中所述在本分析法中使用&及， 2-((6>2-環己基-2-(吡嗪-2-甲醯胺基）乙醯胺基）-3,3_二甲 基丁醯基）環丙胺基^义二側氧基氘代_己_3_ 基）八氫環戊[c] 口比咯-i_甲醯胺及（5&8χ)·3_(5_氯_2,心二曱 〇 氧基笨基）-7-((5)-2-(2-環己基乙醯胺基）_3,3_二甲基丁醯 基環丙胺基）-1，2_二側氧基-氘代己基 氧雜-2,7-二氮雜螺[4·4]壬-2-烯-8-甲醯胺。 將具有Coni細胞株之自主複製、亞基因組11〇：¥複製子之 Huh-7細胞維持在杜貝卡氏改良依格培養基（Duibecc〇，s modified Eagle’s medium)(DMEM)、1〇%熱鈍化胎牛血清 (FBS)、2 mM L-麩醯胺及非必需胺基酸（JRH Bi〇sciences，

Lenexa，KS)加 〇·25 mg/ml G418(Invitr〇gen，Carlsbad，CA) 中。亞基因組HCV複製子亦編碼新黴素（ne〇mycin)磷酸轉 119438.doc -59- 200812940 移酶，使得在G4 1 8存在下含hcV複製子之Huh-7細胞之選 擇性生長優於HCV複製子陰性Huh- 7細胞。使用4參數曲線 擬合（SoftMax Pro)在HCV Coni亞基因組複製子細胞（19)中 測定複製子細胞中HCV RNA含量降低50%(IC5G)或降低 90°/G(IC9())或細胞生存力降低5〇%(CC5G)之測試化合物之濃 度。在37°C下培育複製子細胞與稀釋於含有2% FBS及 0.5% DMSO(無G418)之DMEM中之測試化合物。使用 RNeasy-96套組（QIAGEN，Valencia，CA)萃取總細胞 RNA， 且在定量、即時多重反轉錄-PCR(QRT_PCR或Taqman)分析 法中測定HCV RNA之複本數。在相同實驗設定下使用基 於四唑鏽之細胞生存力分析法量測化合物在HCV複製子細 胞中之細胞毒性。 結果表明兩種測試化合物具有小於5〇 nM之Ki及小於 10·0 μΜ之 IC5G(經 5 天）。 其他實施例 應瞭解雖然已結合本發明之[實施方式]描述本發明，但 上述[實施方式]意欲說明且不限制由隨附申請專利範圍之 範嘴所定義之本發明之範4。其他態樣、優點及潤錦處在 隨附申請專利範圍之範疇内。 119438.doc ，60 ·

Claims (1)

1. 200812940 十、申請專利範圍： 1. -種式⑴之含高量氣之α•酮醯胺基化合物， 0 R4 ’其中：

   R3 〇 D表示氘原子； R1為 R 21·

   其中 Γ" 環基或視情況 為視情況經取代之單環氮雜雜 經取代之多環氮雜雜環基，或葙 ^ 丞^視十月況經取代之多環氮雜 雜環烯基’其巾不飽和鍵位於處在帶有㊇部分基團且連 接有-C⑼·Ν(的·咖3_C(q)_c⑼嫌4r5部分基團之環 之遠側之環中；

   R21 為 Q^W^Q^W^Q1 ;其中 當W2及W3中任一者為端基時，W2及w3各獨立為 一鍵、-CO-、-CS-、-C(〇)N(Q4)-、_c〇2_、… -N(Q4)-C(0).N(Q4)- > -N(Q4).C(S)-N(Q4)-, -0C(0)NQ4-、-S-、-SO-、-S02-、-N(Q4)-、-N(Q4)S〇2- 、-n(q4)so2n(q4)-及氫； 當Q3、Q2或Q1中任一者為端基時，Q1、Q2及Q3各 獨立為一鍵、視情況經取代之脂族基、視情況經取 代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族基、視情況 119438.doc 200812940 經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經 取代之芳烷基或視情況經取代之雜芳烷基；或氫； 其限制條件為當貿3及W2皆存在時Q2不為一鍵；且 R2、R3及R4各獨立為H或Ci6烷基；且 R為Η、烷基、環烷基、視情況經丨_4個烷基取代之芳 基、烷基芳基、芳基、視情況經丨或2個烷基取代之胺 基。

   2 · 如晴求項1之化合物，其中

   R6及R8各獨立為 一鍵；或

   視情況經取代之（^-或^^環伸烷基：或 視情況經取代之（丨，！-或雜伸環基；或 經一選自由視情況經取代之脂族基、視情況經取代 之每基及視情況經取代之芳族基組成之群之取代基取 代的亞甲基或伸乙基，且其中該亞甲基或伸乙基進一 步視情況經脂族取代基取代； R7、R9及R11各獨立為氫或視情況經取代之脂族基； RlG為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環基或 視情況經取代之芳族基； 1為-(：(〇)-、-〇c(〇)-、-NRnC(0)-、-S(0)2-、-NR"S(0)2-或一鍵； 119438.doc 200812940 η為0或1。 3 ·如請求項2之化合物，其中η為i。 4·如印求項2之化合物，其中R6為經一選自由視情況經取 代之舳私基、視情況經取代之環基及視情況經取代之芳 族基組成之群之取代基取代之亞曱基。 5 ·如明求項4之化合物，其中R6為經異丁基取代之亞甲 〇 6·如請求項2之化合物，其中R7為氫。 7·如清求項2之化合物，其中R8為經一選自由視情況經取 代之脂族基、視情況經取代之環基及視情況經取代之芳 族基組成之群之取代基取代之亞甲基。 8.如清求項7之化合物，其中R8為經視情況經取代之環基 取代之亞甲基。 9·如請求項8之化合物，其中R8為經環己基取代之亞甲 基。 〇 1〇·如請求項2之化合物，其中R9為氫。 Π·如請求項2之化合物，其中L為-CO-。 12·如請求項2之化合物，其中r1g為視情況經取代之芳族 ’基。 ' * 13.如請求項12之化合物，其中Rl0係選自由下列基團組成之 群：

   119438.doc 200812940

   14. 如請求項12之化合物，其中R1G為視情況經取代之吡嗪 基。 15. 如請求項14之化合物，其中R1G為2-吡嗪基。

   為經取代之單環氮 16.如請求項2之化合物，其中 雜雜環基。 119438.doc -4- 200812940

   為在C-3位上經雜 17.如請求項16之化合物，其中 芳氧基取代之吼咯啶基，其中該雜芳基進一步視情況經 卜4個鹵素取代。 18.如請求項16之化合物，其中

   CI 或

   rS

   為視情況經取代之 19.如請求項2之化合物，其中 多環氮雜雜環基

   或 20.如請求項19之化合物

   2 1 ·如請求項20之化合物，其中

   為

   或

   119438.doc 200812940 22.如請求項2之化合物，其中r2為氫，尺4及反5各獨立為氣 或環丙基。 I 23·如請求項2之化合物，其中R3為丙基。 24·如請求項2之化合物，其中11為〇。 25.如請求項2之化合物，其中二為以……⑴）-且r11為氫。 • 26.如請求項2之化合物，其中RlG為視情況經取代之脂族 基。 f) 27·如請求項26之化合物，其中R10為第三丁基。 28.如請求項2之化合物，其中該化合物為

   A為-(CHX1)^ ; B 為-(CHX2V; a為0至3 ; 119438.doc -6- 200812940 b為0至3，其限制條件為a + b為2或3 ; X1及X2各獨立選自氫、視情況經取代之k脂族基及 視情況經取代之芳基； Y1及Y2各獨立為氫、視情況經取代之脂族基、視情況 經取代之芳基、胺基或卻；其中q4各獨立為氫或視情 況經取代之脂族基； R22為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之雜脂族 η 30 31. (...)32. 基、視情況經取代之環脂族基、視情況經取代之雜環脂 知基、視h況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。 如請求項29之化合物，其中為視情況經取代之烷基羰 基。 如請求項30之化合物，其中R2〗為各視情況經丨_3個取代 基取代之胺基烧基羰基、齒代烷基羰基、芳基烷基羰 基、芳基烷基羰基、環脂族烷基羰基或雜環脂族烷基羰 基。 如請求項31之化合物，其中r2i為各視情況經1-3個取代 基取代之雜環烧基-氧基羰胺基-烧基羰基、雜芳基-羰胺 基-烧基-羰胺基-烷基-羰基、雙環芳基_磺醯基胺基_烷基 Ik基、芳基-烧氧基-幾胺基-烧基_幾基、烧基_幾胺基_烧 基-魏基、脂族基-氧基羰胺基-烷基-羰基、環脂族基_烷 基-胺基羰胺基-烷基-羰基、環脂族基-烷基-羰胺基-烷 基-羰基、雜芳基-羰胺基-烷基-羰胺基-烷基-羰基、烷 基•胺基幾胺基-烧基-幾基或雙環芳基_胺基羰胺基-烧基-幾基。 119438.doc 200812940

   33.如請求項29之化合物 其中 R及R8各獨立為 一鍵；或

   Ο 視情況經取代之（U-或1，2-)環伸烧基；或 視情況經取代之d，l-或1,2-)雜伸環基；或 經一選自由視情況經取代之脂族基、視情況經取代 之裒基及視情況經取代之芳族基組成之群之取代基取 代的亞甲基或伸乙基’且其中該亞甲基或伸乙基進一 步視h況經脂族基取代基取代； R、R及R11各獨立為氳或視情況經取代之脂族基； R10為視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環基或 視情況經取代之芳族基； [為 _C(0) 一、-〇C(〇l·、-NRnC(0)-、-S(0)2-、-NRnS(0V 或一鍵； η為0或1。 34.如請求項29之化合物，其中R22為視情況經取代之脂族 基、視情況經取代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族 基、視情況經取代之雜環脂族基、視情況經取代之芳基 或視情況經取代之雜芳基。 35·如請求項34之化合物，其中R22為視情況經取代之苯基、 視h況經取代之萘基、視情況經取代之蒽基、視情況經 取代之萘或視情況經取代之蒽。 119438.doc 200812940 、X2、γ1及γ2各為氫， 如睛求項29之化合物，其中χ 及b各為1。 3 7· 士明求項3 6之化合物，其中R22為視情況經取代之脂族 基、視情況經取代之雜脂族基、視情況經取代之環脂族 基、視情況經取代之雜環脂族基、視情況經取代之芳基 或視情況經取代之雜芳基。 38. 如請求項37之化合物，其中r22為視情況經取代之苯基、 〇 視h况經取代之萘基、視情況經取代之蒽基、視情況經 取代之萘或視情況經取代之蒽。 39. 如請求項38之化合物，其中為各視情況經1-3個取代 基取代之雜環烷基-氧基羰胺基-烷基羰基、雜芳基-羰胺 基-烧基-羰胺基-烷基-羰基、雙環芳基-磺醯基胺基-烷基 罗厌基 方基-烧乳基-魏胺基-烧基-藏基、烧基-魏胺基-烧 基-羰基、脂族基-氧基羰胺基-烷基-羰基、環脂族基-烷 基-胺基羰胺基-烷基-羰基、環脂族基-烷基-羰胺基-烷 基-羰基、雜芳基-羰胺基-烷基-羰胺基-烷基-羰基、烷 基- fee基碳胺基-烧基-幾基或雙環芳基-胺基魏胺基-烧基-羰基。

   40·如請求項29之化合物，其中 4 1.如請求項40之化合物，其中該化合物之結構為： 119438.doc 200812940

   其中該氘之高含量在 42·如請求項1之化合物 為至少50%。 該化合物中 43.如請求項42之化合物，其中該說 门3里為至少80%。 44·如請求項43之化合物，其中該 么 门3里為至少90%。 45·如請求項44之化合物，其中該 〇 3里為至少99% 〇 46· —種醫藥組合物，其包含 ,s 子」接文之载劑及如請 求項1-45中任一項之化合物。 47·種用於提高化合物之生物利用率之方法 —π 丁、乃在，该方法包含

   乂汛原子置換該化合物中盥妒 子。 /、立體性奴原子鍵結之氫原 长項其中該由此獲得之⑨化化合物為請 求項1-45中任一項之化合物。 月 49.ΓΓΓ物於製造用於抑制HCV蛋白酶之藥劑上之用 二=化合物為請求項“5中任-項之化合物。 白酶介：二：製造用於治療遭受HCV感染或由HCV蛋 叫”等之病症之串、者 ^ 為請求項1-45中^ ”浏上之用途，其中該化合物 51·-種用於㈣二一項之化合物。 備"光學性式1化合物之方法， 119438.doc -10. 200812940

   R 其中： 羧基之α及β位碳原子為立體中心； Ri獨立地為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取 代之環脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經 取代之雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； R 1為氛’以使氣之高含量為至少5〇% ; R、為-NHR2 或-ΟΕ ; R2為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環 脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之 雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；且 Ε為烧基或苯曱基； 該方法包含以下步驟： a) 形成式1化合物之鹽，及 b) 使該鹽結晶，以產生對映異構性超量大於55%之化 合物。 如請求項51之方法，其中心為^·6烷基，且R,2為 其中R2為Ci_6烧基或Cw環燒基。 如請求項52之方法，其中Rl為丙基叫為環丙基。 如請求項51至53中任-項之方法，其進_步包含以胺化 试劑使式ii化合物胺化 52 53 54 119438.doc 11 200812940

   ii 以提供式iii化合物 Γ NH2 O Ri R，

   OH 111 R，2 认^請求項54之方法，其中該胺化試劑為叠氮化物鹽，且 猎由氫化作用還原該中間物疊氮基化合物。 5 6.如請求項54之方法，其 一人^ /匕S以虱化試劑氧化式i化 合物 R丨Ο r，2 其中R* 抑4 4'NHR2或·0Ε，以wc,.5燒基或視情況經取 之苯甲基，以提供式π化合物 RV

   • · R.2 5 7 ·如清求項 化氫 5 8 ·如請求 試劑。 化^ 、之法，其中該氧化試劑包含第三丁基過氧 員57之方法，其中該氧化試劑進_步包括對掌性 119438.doc -12- 200812940 5 9 ·如請求項$ 6之方、 氧化三笨 /套’其中該氧化試劑為異丙醇彭（III)、 物。 土胂^)1，1’·聯·2·萘紛及4 A分子篩之混合 60·如請求項％ 下勹人 '，其中该氧化試劑在三氟乙酸酐存在 下包含尿素過氧化氫。 61. 如請求項6〇 貝60之方法，其中R，2為-OE。 62. 如請求項6 ^ 方法，其中R，2為-nhr2。 水解’、、員56之方凌，該方法進一步包含使該式ii化合物 =產生酸且接著使該酸轉化為式㈠之醯胺化合物， 其中R，2為-NHR2。 6 4 ·如請求項5 6夕古、、上 、 去，其進一步包含氧化式iv化合物 PH

   IV 以產生該式ii化合物。 氧化 65. 如請求項64之方法，豆 ”甲^乳化作用係藉由使用 在孟進行。 66. 如請求項64之方法，其進—步包含還原式v化合物 OH

   以產生該式iv化合物。 67.如請求項66之方法，其中該化合物係以RedAp還原且 接著以氧化沉中止反應。 119438.doc 200812940 68. —種用於製備式！化合物之方法，

   其中： Ri為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環 脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之 f) 雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基； R’i為氣， 汉2為Η、視情況經取代之脂族基、視情況經取代之環 脂族基、視情況經取代之芳基脂族基、視情況經取代之 雜脂族基或視情況經取代之雜芳基脂族基；且 該式1化合物具有之對映異構性超量大於55%之， 該方法包含以下步驟： a)氧化式i化合物

   以提供式Π化合物 ϋ b)使式ii化合物與胺化試劑反應以提供式iii化合物 119438.doc • 14 - 200812940

   iii c) 與光學活性有機酸形成式ni化合物之鹽； d) 使該鹽結晶以產生對映異構性超量大於55%之化合 物。 69_如明求項68之方法，其中該式1化合物為（2S，3S)-3-胺基 3-說代環丙基_2-羥基己醯胺。 70. 如請求項69之方法，其中該有機酸為l-酒石酸 酸0 或去氧膽 U 119438.doc -15- 200812940 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： Ο R2 Ο R4

   ⑴ 119438.doc