TW200816991A

TW200816991A - Treatment and prevention of intestinal fibrosis

Info

Publication number: TW200816991A
Application number: TW096130343A
Authority: TW
Inventors: John Parkinson; Stefano Fiorucci
Original assignee: Bayer Schering Pharma Ag
Priority date: 2006-08-23
Filing date: 2007-08-16
Publication date: 2008-04-16
Also published as: AR062478A1; KR20090042982A; BRPI0716576A2; CL2007002442A1; MX2009001994A; RU2009110244A; IL196983A0; AU2007287770A1; JP2010501506A; WO2008022807A2; CA2660741A1; CN101528219A; US20080119439A1; WO2008022807A3; EP2056816A2; PE20081360A1; ZA200902005B; UY30557A1

Description

200816991 九、發明說明： * 【發明所屬之技術領域】本發明係關於脂氧素A#類似物之用途，其係用作治療及/ 或預防腸纖維化之治療劑。【先前技術】諸如發炎性腸病（IBD)(包括克隆氏病（Cr〇hn，s以化⑸勾及潰瘍性結腸炎）及膠原性結腸炎之腸道病症係主要影響個體胃腸道之終生復發性病狀。纖維化為該等病症之併發瞻症。當前之療法可減輕炎症，但並不改變疾病之自然病程或該疾病發展為腸纖維化及腸阻塞，其通常導致腸切除。不幸地，手術並不防止引起纖維化及狹窄之腸道炎症復發或E C Μ變化。脂氧素連同白三烯、前列腺素及凝血脂素一起組成統稱為類廿烧酸之生物活性氧合脂肪酸群。類廿烷酸全部經由酶之二十碳四烯酸級聯反應自膜磷脂重新合成。自從其於 19 8 4年被首-人餐現，|曰氧素（結構上獨特之類廿烧酸類別），具有有效消炎特性變得顯而易見，此提示其可具有治療潛力（Serhan，C.N·，(1997)，第 53卷，第 1〇7 頁-第137頁；O’Meara，Y.M.等人，幻办吓/价.咖#/」 (1997)，第 58卷，第 S56頁-第 S61 頁；Brady，H.R.等人， Curr. Opin, Nephrol，Hypertens. [\996)，箄 5 卷、箄 -弟 27 頁，及 Serhan，C.N·，Bioc/zem· (1994)，第1212卷，第1頁-第25頁）。尤其關注脂氧素拮抗除諸如血小板活化因子、FMLP、免疫複合物及TNFa之其他發炎劑 123489.doc 200816991 外之白三烯的促發炎性功能之能力。因此，脂氧素為有效抗嘻中性白血球（PMN)劑，其抑制卩!^>^趨化性、同型聚集、黏附、穿過内皮細胞及上皮細胞之遷移、趨邊現象/ 血球滲出及組織浸潤（Lee，Τ· H.等人，C/h, &ζ·. (1989)，第 77卷，第 195 頁-第 203 頁；Fiore，S.等人， (1995)，第 34卷，第 16678 頁-第 16686 頁；Papyianni，Α·等人，J· /mm — o/· (1996)，第 56卷，第 2264 頁第 2272 頁； Hedqvist，P.等人，(1989)，第 137 卷，第157頁-第572頁；Papyianni，Α·等人，幻办e;; /价/, (1995)，第47卷，第1295頁-第1302頁）。此外，脂氧素能夠下調内皮P選擇素（selectin)之表現及PMN之黏附性 (Papyianni，A·等人，J. (1996)，第 56卷，第 2264 頁-第2272頁）、支氣管及血管平滑肌收縮、系膜細胞收縮及黏附性（Dahlen，S.E·等人，Wv·五；φ从价〇/· (1988)，第 229 卷，第 1〇7 頁·第 130 頁；Christie，P.E.等人，dm· 心印ζ>· £>以.（1992)，第 145卷，第 1281 頁-第 1284 頁，Badr，K.F.等人，Proe. (1989)，苐86卷’苐3438頁-第3442頁；及Brady，H.R·等人，乂所.j. (1990)，第259卷，第F809頁·第F815頁）及嗜伊紅金球趨化性及去顆粒作用（S〇y〇mb〇，〇·等人， (1994)，第 49卷，第 230頁-第 234頁）。脂氧素（尤其脂氧素A#)之此獨特消炎概況，引起對開發其作為治療發炎性或自體免疫性病症及肺部及呼吸道炎症之療法的潛力之關注。 123489.doc 200816991

如同其他内源性類廿烷酸，天然產生之脂氧素為不穩定產物，其迅速代謝且失去活性（Serhan，C.N·，PromgW如 (1997) ’第53卷’第1〇7頁_第137頁）。該現象已限制脂氧素領域研九之發展，尤其關於活體内脂氧素之消炎概況之藥用評估。已頒布若干針對具有脂氧素八4之活性位點，但具有較長組織半衰期之化合物之美國專利。參見，例如，吴國專利第5,441，951號及第M48,512號，其所揭示之内容以全文弓丨用的方式併人本文中。該等化合物保持脂氧素A4 受體結合活性及天然脂氧素之有效活體外及活體内消炎特 f生（Takano，丁·等人，j cnn 〇998)，第如卷，第

； Scalia, R. # Λ，Proc. Natl. Acad. ScL (1997) ’ 第 94卷，第 9967頁-第 9972I ; Tak咖，τ 等人，丄細·胸·（1997)，第185卷，第頁第17〇4頁，· add〇X’ •等人，J. Bio1· Ch·· (1997)，第 272卷，第 6972頁第6978頁；8_η，c n等人—吻 (1995)，第 34卷，第 14_ 頁-第 14615頁）。【發明内容】本發明係針對某些藥劑作為治療或預防腸纖維化之治療用边更特定s之，本發明係針對治療或預防腸纖維 ^之H其藉由投？ f要該治療之患者治療有效量之脂氧素a4類似物來實現0 除非本文另外要求，否則在整個本說明書及隨後之申請專：範圍中，詞語"包含"及其變化形式應理解為意味包含所㈣之整數或步驟或整數或步驟之群’但不排除任何其 123489.doc 200816991 、他整數或步驟或整數或步驟之群。 . _本文另外明確規定L本文所用之單數形式，，_，，及"該"包括複數指示物M列如，，，一化合物"係指_或多種該等化合物，而"該酶"包括特定酶以及其如熟習此項技術者已知之其他家族成員及等價物。此外’除非相反規定，否則如說明書及隨附申請 ‘圍所用之以下術語具有如下所示之含義：烧基’係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈烴基或支鍵 • 煙基’ #不含不飽和現象’具有個碳原子’且其經單鍵與刀子之其餘部分連接，例如，甲基、、 1:甲基乙基(異丙基)、正丁基、正戍基一二 • (第三丁基）及其類似基團。除非說明書中另外明確說明，否則烷基可視情況經一或多個選自由以下各基團組成之群的取代基取代：氰基、硝基、-R9_〇r6、、 -r9-n(r6)2、-R9_c(0)r6、hc(0)0r6、r9_c(〇)n(r6)2、 -RLnWkworb、_r9-N(r6)c(〇)r6、_R、s(〇)t〇R6(其中 t 為 0 至 2)、-R9-S(0)tR6(其中 t 為〇至 2)、-R9_s(〇)tN(R6)2 (其中t為0至2) ’其中各R6及R9係如以上發明内容中所定義、且各Rl6為氫、烷基或芳烷基。除非說明書中另外明確說明，否則應暸解該取代可發生於烷基之任何碳原子上。 π伸烧基鏈”係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈二價烴或支鏈二價烴鏈’其不含不飽和現象且具有1至8個碳原子，例如，亞甲基、伸乙基、伸丙基、伸正丁基及其類似基團。 123489.doc 200816991 ”稀基"係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈或支鏈一價烴鏈，其含有至少一個雙鍵，具有2至8個碳原子，且其經單鍵與分子之其餘部分連接，例如，乙稀基、丙_ 1 ·烯基、丁-1-烯基、戊_1_烯基、戊-1，4-二烯基及其類似基團。除非說明書中另外明確說明，烯基可視情況經一或多個選自由以下各基團組成之群的取代基取代：氰基、硝基、-〇R6、-r9-n=n-〇-r16、-R9_n(R6)2、_r9_c(〇)r6、_r9_ C(0)〇R6 . -R9-C(〇)N(R6)2 ^ -R9-N(R6)C(0)0R16 > .R9. n(r6)c(o)r6、-R9_s(〇)t〇R6(其中 t 為〇至 2)、-r9_ S(0)tR (其中 t為 0至 2)、-R9-S(0)tN(R6)2(其中 t為 0至 2)，其中各R6及R9係如以上發明内容中所定義且各R!6為氫、烷基或芳燒基。除非說明書中另外明確說明，否則應瞭解該取代可發生於烯基之任何碳原子上。 π伸烯基鏈”係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈或支鏈二價烴鏈，其含有至少一個雙鍵且具有2至8個碳原子，例如’伸乙烯基、伸丙_丨_烯基、伸丁烯基、伸戊-丨-烯基、伸己-1，4 -二稀基及其類似基團。块基’’係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈或支鏈一價烴鏈基團，其含有至少一個三鍵，具有2至8個碳原子，且其經單鍵與分子之其餘部分連接，例如，乙炔基、丙_1_炔基、丁-1-炔基、戊_；μ炔基、戊_3_炔基及其類似基團。除非說明書中另外明確說明，否則炔基可視情況經一或多個選自由以下各基團組成之群的取代基取代：氰基、硝基、-R’OR、-R9_N=N-0-R】6、-R9_N(R6)2、-R9-C(0)R6、 123489.doc •10- 200816991 -R -c(0)0r6、r9_c_(r6)2、_r9娜％⑼〇r】6、_r9· N(R6)c(0)im_s(0)t0R6(其中鴣〇至 2)，r9 s(外r6 (其^為0至2)、·υ(〇)離6)2(其中鹓〇至2)，其中各r6 及R9係如以上發明内容中所定義且各r16為氫、燒基或芳 1 :,除非„兒明書中另外明確說明’否則應瞭解對於如下所疋義之基團而言’其含有取代可發生於块基之任何碳原子上之經取代炔基。

”伸块基鏈"係指僅由碳原子及氫原子組成之直鏈或支鏈二價烴鏈，其含有至少一個三鍵且具有2至8個碳原子，例如伸乙快基、伸丙小炔基、伸丁小块基、伸戍-3·块基伸己-1，4-二块基及其類似基團。烧氧基係指式-0Ra之基團，其中Ra為如上所定義之统土 "例士 f氧基、乙氧基、正丙氧基、1_甲基乙氧基(異丙：基）、正丁氧基、正戊氧基、1，1-二甲基乙氧基(第三丁氧基）及其類似基團。 "胺基π係指-NH2基團。方基係指苯基或萘基。除非說明書中另外明確說明，否則術浯方基”或前綴”芳”（諸如於"芳烷基"中）意謂包括可視情況經一或多個選自由以下各基團組成之群的取代基取代之芳基.烷基、烯基、鹵基、鹵烷基、氰基、硝基、芳基、芳烷基、環烷基、_r9_〇r6、-r9_n=n_〇_r16、劣9_ N(R )2 > -R -C(0)R6 , -R9-C(〇)〇r6 . -R9-C(0)N(R6)2 > N(R )C(〇)〇r、⑼t〇R6(其中 f 為〇至 2) 11 -S(〇)tR6(其中 t 為〇至 2)、-R9-S(0)tN(R6)2(其中 t 123489.doc

II 200816991 為0至2)，其中各R6及R9係如以上發明内容中所定義且各 R16為氫、烷基或芳烷基。除非說明書中另外明確說明，否則應瞭解該取代可發生於芳基之任何碳原子上。 ”芳烷基”係指式-RaRb之基團，其中Ra為如上所定義之烷基且Rb為如上所定義之芳基，例如，苄基及其類似基團。芳基可視情況如上所述經取代。 ”羧基π係指-C(0)0H基團。

如本文所用之”市售”化合物可自包括以下來源之標準商業來源來獲得：Acros Organics(Pittsburgh PA)、Aldrich Chemical (Milwaukee W1，包括 Sigma Chemical 及 Fluka)、 Apin Chemicals Ltd. (Milton Park UK) - Avocado Research (Lancashire U.K.)、BDH Inc· (Toronto，Canada)、 Bionet(Cornwall? U.K.) > Chemservice Inc. (West Chester PA)、Crescent Chemical Co. (Hauppauge NY) ' Eastman

Organic Chemicals, Eastman Kodak Company (Rochester NY) 、 Fisher Scientific Co. (Pittsburgh PA) 、 Fisons Chemicals (Leicestershire UK)、Frontier Scientific (Logan UT)、ICN Biomedicals，Inc. (Costa Mesa CA)、Key Organics (Cornwall U.K.) > Lancaster Synthesis (Windham NH)、Maybridge Chemical Co· Ltd. (Cornwall U.K·)、 Parish Chemical Co.(Orem UT) ^ Pfaltz & Bauer, Inc. (Waterbury CN)、Polyorganix (Houston TX)、Pierce Chemical Co· (Rockford IL)、Riedel de Haen AG (Hannover, Germany)、Spectrum Quality Product, Inc. -12- 123489.doc 200816991 (New Brunswick, NJ) ' TCI America (Portland OR) - Trans

World Chemicals，Inc. (Rockville MD)及 Wako Chemicals USA, Inc. (Richmond VA) o

如本文所用之”一般技術者所已知之方法”可經由各種參考書及資料庫來鑑別。詳述適用於製備本發明化合物之反應物的合成或為描述該製備之文章提供參考之合適參考書及論文，包括例如，"Synthetic Organic Chemistry”，John Wiley & Sons，Inc.，New York ; S. R. Sandler 等人， "Organic Functional Group Preparations11 ，第 2 版， Academic Press, New York, 1983 ； H. O. House, "Modern Synthetic Reactions”，第 2版，W. A. Benjamin，Inc· Menlo Park， Calif· 1972 ； T. L. Gilchrist, ’’Heterocyclic

Chemistry”，第 2 版，John Wiley & Sons，New York， 1992 ; L March，’’Advanced Organic Chemistry: Reactions， Mechanisms and Structure"，第 4 版，Wiley-Interscience, New York，1992。特定及類似反應物亦可經由可在大多數公共圖書館及大學圖書館中獲得之美國化學協會之化學文摘社（Chemical Abstract Service of the American Chemical Society)所制定之已知化學品目錄以及經由在線資料庫（美國化學協會，Washington，D.C·，www·acs.org可接觸到更多細節）來鑑別。在目錄中已知但並未市售之化學品可由定製化學品合成機構來製備，其中多數標準化學品供應機構（例如，上文所列之彼等機構）提供定製合成服務。如本文所用之執行合成步驟之”合適條件”於本文中明確 123489.doc -13- 200816991 提供或可藉由參考針對用於有機合成化學之方法的公開案來加以辨別。上文所闡述之詳述適用於製備本發明化合物之反應物的合成之參考書及論文亦將提供執行本發明合成步驟之合適條件。

本文所用之’’籠形物"係指使氣體、液體或化合物凝固為包合複合物以便該複合物可以固體形式來處理且隨後所包括之組分（或’’客體11分子）藉由溶劑之作用或藉由熔融釋放的物質。本文中，術語”籠形物”與短語"包合分子"或與短語"包合複合物”可互換使用。本發明所用之籠形物係自環糊精製備。廣泛認為環糊精具有與多種分子形成籠形物 (亦即，包合化合物）之能力。參見，例如，

Compounds ，由 J.L. Atwood， J.E.D. Davies 及 D.D· MacNicol 編，London，Orlando, Academic Press，1984 ； Goldberg, I·，MThe Significance of Molecular Type, Shape and Complementarity in Clathrate Inclusion’’，Topics in Cwr⑼i 少（1988)，第 149 卷，第 2 頁-第 44 頁；

Weber，E.等人，"Functional Group Assisted Clathrate Formation-Scissor-Like and Roof-Shaped Host Molecules”， Γορία b CwrreW (1988) ’ 第 149卷，第 45 頁-第 135 頁；及 MacNicol，D.D·等人，"Clathrates and Molecular Inclusion Phenomena,,5 Chemical Society Reviews (1978) » 第7卷，第1期，第65頁·第87頁。已知轉化為環糊精籠形物將增加某些化合物之穩定性及溶解性，由此使其易於用作醫藥劑。參見，例如，Saenger，W.5 "Cyclodextrin 123489.doc •14- 200816991

Inclusion Compounds in Research and Industry”，Angew. C/zem. /ni. 五叹/. (1980) ’ 第 19卷’第 344 頁-第 362 頁；美國專利第4,886,788號（Schering AG);美國專利第 6,355,627 號（Takasago);美國專利第 6,288，119 號（Ono Pharmaceuticals);美國專利第 6，110,969號（Ono Pharmaceuticals) ，美國專利第 6,235,780號（Ono Pharmaceuticals);美國專利第 6,262,293 號（Ono Pharmaceuticals);美國專利第 6,225,347 號（Ono Pharmaceuticals)及美國專利第 4,935，446 號（Ono Pharmaceuticals) 〇、 /，〜〜二《义\甫』甸裱喃糖單元組成之環狀寡醣。寡醣環形成葡萄糖殘基之第爹工基位於圓環窄端上之圓環。葡萄痕喃糖之第二羥基位 ^已展示在水’谷液中環糊精藉由使疏水性分子結合至衣相精之工腔中來與疏水性分子形成包合複合物。該等複合物之形成保護”客體”分子免於蒸發損失，免於受氧、 7見光及紫外光之攻擊且勞免於刀子内及分子間之反應。該精。對於本發明之二解且解離為客體分子及環糊精規定為〜環糊精心萄糖早-之環糊糊特八W人可將具有7個及8個葡萄糖殘基之璜糊精分別命名為β-環糊精及γ-環糊精：基之¥ 用替代係將該等化合物人h㈣％糊精名稱之最常 ^ ^ 口物〒名為環狀澱粉。衣燒基π係指具有3 5 έ且成夕f 、至1 〇個碳原子僅由碳原子；？ &店組成之穩定單價單環^子及風原子 -又衣烴基，且其為飽和.烴基且經一 123489.doc 200816991 個單鍵與分子之其餘部分連接，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、十氫萘基及其類似基團。除非本說明書中另外明確說明，否則術語|，環院基"意謂包括視情況經一或多個獨立地選自由以下組成之群的取代基取代之環烧基·· 烷基、烯基、函基、自烷基、自烯基、氰基、硝基、芳基、方烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、_r9_〇r6、 -R、N=N-〇-R“、·ΑΝ(Ιι6)2、_r9_c(〇)r6、r9_c⑼〇R6、 -R9-C(〇)N(R6)2、-R9-N(R6)C(〇)〇Rl6、_r9_n(r6)c(〇)r6、 -R9-S⑼t〇R6(其中 t為〇至 2)，_R9_s(〇)tR6(其中如至2)、 -R9-嶋N(R6)2(其中⑽至2)，其中各R6及R9係如以上發明内容中所定義，叫16為氫、燒基或芳烧基。除非本說明書中另外明確說明，否則應瞭解該取代可發生於環燒基之任何碳原子上。 ”伸環烷基"係指具有3至10個碳原+僅由碳原子及氫原子組成之狀二價單環或雙環烴基，且其為飽和烴基且經 2個單鍵與分子之其餘部分連接，例如伸環丙基、伸環丁基、伸環戊基、伸環己基、伸十氫萘基及其類似基團。除非本沉明書中另外明確說明，否則術語”伸環烧基”意謂包括視情況經-❹個獨立地選自由以下組成之群的取代基取狀伸環燒基部分：炫基、烧氧基1基、幽院基、鹵烷氧基、羥基、胺基及羧基。 "画基"係指溴、氯、碘或氟。 ”㈣基"係指經-或多個如上所^義之南基取代之如上所定義之烷基，例如三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、 123489.doc 16 200816991 2,2,2-三氟乙基、丨·氟甲基-2_氟乙基、3_漠_2_氟丙基、卜溴甲基-2-溴乙基及其類似基團。 ”齒烧氧基”係指式娘基團，其中Re為如上所定義之鹵烧基^如^氟甲氧基、二氟甲氧基、三氯甲氧基、，2,2 一氟乙氧基、丨_氟甲基_2•氟乙氧基、弘溴_2_氟丙氧基、1-溴甲基·2-溴乙氧基及其類似基團。哺礼動物”包括人類及馴養動物··諸如貓、犬、豬、

牛、綿平、山羊、4、兔等。較佳地，對於本發明之目的而吕’哺乳動物為人類。 ’，可選’’或"視情況”意謂隨後所述之事件或情況可發生或可不’且該描㉛包括該事件或情況發生之實例及未發、之男例例如，視情況經取代之芳基”意謂芳基可經取代或可不經取代且該描述包括經取代之芳基及未經取代之芳基兩者。〜疋化&物及知定結構”意謂表明足夠穩固以便在自反應混合物分離至適用純度且調配為有效治療劑後仍存在之化合物。醫藥學上可接受之賦形劑，，包括（但不限於）已由美國食口口及‘物官理局（United States Food and Drug dministration)批准為可接受用於人類或家畜之任何佐劑、載劑、賦形劑、日士、* w 助k劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、增味劑、界面活性劑、濕潤劑、分散劑、懸•定劑、等張劑、溶劑或乳化劑。 ’’醫藥學上可接受之鹽”包括酸加成鹽及鹼加成鹽兩者。 123489.doc •17· 200816991

W藥學上可接受之酸加成鹽，，係指彼等保持游離鹼之生 2學有效性及特性之鹽，其並非在生物學上或其他方面不合需要且係與無機酸及有機酸形成，無機酸諸如（但不限於）鹽酉夂、氫漠酸、硫酸、#酸、鱗酸及其類似物，有機 =諸^⑽不限於）乙酸、2,2•二氯乙酸、己二酸、褐藻酉文抗壞金酸、天冬胺酸、苯石黃酸、苯甲酸、4-乙醯胺基苯甲駄、·樟恥酸、樟腦_丨〇_磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳 -文肉柽奴、榨棣酸、環拉酸、十二烷基硫酸、乙烷·〗2· 4酸、乙烧績酸、2,基乙燒二磺酸、甲酸、反丁婦二文半礼糖一酸、2,5_二羥苯甲酸、葡糖庚酸、葡萄糖酉义、葡糖駿酸、楚胺酸、戊二酸、2_側氧基_戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂 ^、順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、？烧石黃酸、钻液馱、奈·1，5-二磺酸、萘_2•磺酸、羥基_2_萘甲酸、於鹼酸、油酸、乳清酸、草酸、棕棚酸、雙經蔡酸、丙 I、焦麩胺酸、丙酮酸、水揚酸、4_胺基水楊酸、癸二酉欠硬酸、丁二酸、酒石酸、硫氰酸、對曱苯磺酸、三氣乙酸、十一碳烯酸及其類似物。醫樂學上可接受之鹼加成鹽"係指彼等保持游離酸之生物學有效性及特性之鹽’其並非在生物學上或其他方面不 :需要。料鹽係由將無機驗或有機鳥加至游離驗中來衣備。衍生自無機鹼之鹽包括（但不限於）鈉鹽、鉀鹽、鋰 ^锻孤鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、猛鹽、鋁鹽及其類似物。較佳無機鹽為銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽及鎂 123489.doc -18- 200816991

鹽。衍生自有機鹼之鹽包括（但不限於）以下各物之鹽：第一胺、第二胺及第二胺、包括天然產生之經取代胺、環胺及鹼性離子交換樹脂之經取代胺，諸如氨、異丙胺、三曱胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺'二乙醇胺、乙醇胺、地阿諾（deanol)、2-二甲胺基乙醇、2_二乙胺基乙醇、二環己胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡鹼、普魯卡因、海卓胺、膽驗、甜菜驗、节苯乙胺、f星#黴素伽職旧㈣、乙二胺、葡糖胺、甲基葡萄⑮、可可豆鹼、三乙醇胺、緩血酸胺、嗓呤、旅嗪，、N_乙基Μ、多元胺樹脂及其類似物。尤其較佳有機鹼為異丙胺、二乙胺、乙醇胺、二甲胺' 一環己胺、膽驗及咖啡驗。 ’:醫藥組合物”係指本I明化合物與一般在此項技術中可接受用於傳遞生物活性化合物至哺乳動物中（例如，人類) 之介質之調配物。因此，該介質包括所有醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑’所有該等介質於本文中均涵蓋於術語”醫藥學上可接受之賦形劑"中。當投予較佳為人類之哺乳動物時，，，治療有效量"係指足以有效治療（如以下所定義）或預防哺乳動物（較佳為人類）中所關注之疾病或病狀之本發明化合物之量。構成"治療 = <本發明化合物之量將視化合物、疾病或病狀及 :嚴/度、待治療之哺乳動物之年齡及其他已知及可計量之變數而變化 H , 一、又技術者根據其自身之知識及本揭不内容來常規確定。之m療涵盍治療具有所關注疾病或病狀之哺 123489.doc -19· 200816991 乳動物（較佳為人類）中所關注之疾病或病狀，且包括，· (I) 預防疾病或病狀在哺乳動物中發生，尤尤其當該哺孔動物易患該病狀但尚未診斷為患有該病狀時； (II) 抑制疾病或病狀’亦即，阻止其發展； (in)減輕疾病或病狀，亦即，使疾病或病 (iv)穩定疾病或病狀。 <

呈單-立體異構體、立體異構體混合物或呈立體異構體之外消旋混合物形式；或呈其環糊精㈣物或呈其醫藥學上可接受之鹽形式之本發明化合物，可含有一或多個不稱中心，且因此可產生對映異構體、非對映異構體及复他可根據胺基酸之絕對立體化學定義為（斗或（外或叫或 (L)-形式之立體異構形式。本發明意謂包括所有該等可能之異構體’以及其外消旋及光學純形式。光學活性⑻^ 構體及⑷-異構冑，或（D)_異構體及（L)_異構體可使用掌性合成組元或掌性試劑來製備或使用習矣。技術來加以拆分。除非另外說明，否則當本文所述之化合物含有烯性雙=或其他幾何不對稱中心時，化合物意欲包括E幾何異構體及z 幾何異構體兩者。另外，亦意欲包括所有互變異構形式。適用於本發明之脂氧素&類似物可選自於美國專利第 6,831，186號及專利公開案第US 2004-0162433號中所揭示及主張之脂氧素A4類似物，該等專利及公開案之全部揭示内容係以引用的方式併人本文中。該等化合物為適用於治療哺乳動物’尤其人類之發炎性或自體免疫病症及肺部或呼吸道人症之有效、選擇性及代謝上/化學上穩定之脂氡素 123489.doc 200816991 A』似物，4等化合物及其醫藥學上可接受之鹽之製備係於上文之美國專利及公開案中詳細描述。先前尚未揭示上文之月曰氧素八4類似物可有效治療或預防腸纖維化。因此，在一態樣中，本發明係'關於式（I)或式（II)之脂氧素A4類似物化合物用於治療及/或預防腸纖維化之用途： ⑴

及

R4

R1 R2

其中：各R1、R2及R3獨立地為鹵基、-〇R6、_SR6、_s(〇)tR7(其中t _ 為 1 或 2)或-N(R7)R8 ; 或R1及R2連同其所連接之碳一起形成選自以下各結構之單環狀雜環結構： • Α Λ; Λ;成☆ & ; 或R1及R2連同其所連接之碳一起形成以下雙環狀雜環結構： 123489.doc -21 . 200816991

或芳基）；為1^ A 2、-r9-R13-R"、-R9-O-R10-r"、-r9-〇_r12、

R c(〇)-R10.R!1 , -R9-N(R7)-R10-Ru x -R9-S(0)t-R10-R (其中 t為〇至 2)，或-R9_c(F)2_R9_Rn; 各汉為芳基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、i燒基及齒烷氧基之取代基取代）或芳烷基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、_基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）；各R獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、_C(0)R7、-C(S)R7 、-C(〇)〇R14、_C(S)〇R14、c(〇)N(R7)R8 或-C(S)N(R7)R8 ; 各R7獨立地為氫、烷基、環烷基、芳基或芳烷基； R獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、-C(0)R7、-C(0)OR14 或環烷基（視情況經一或多個選自烷基、-N(R7)2 及-C(0)0R7之取代基取代）；各R9獨立地為一直接鍵或直鏈或支鏈伸烷基鏈；各R1G獨立地為直鏈或支鏈伸烷基鏈、直鏈或支鏈伸烯基鏈、直鏈或支鏈伸炔基鏈或伸環烷基；各 R11獨立地為-C(0)0R7、-C(0)N(r7)2、-P(0)(0R7)2、 -s(o)2or7、-s(o)2n(h)r7或四。坐； 123489.doc -22- 200816991 R12為芳基（經-C(0)0R7或·0(0)Ν(ί17)2且視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）或芳烷基（經-C(0)0R7或-(：(0州(117)2且視情況經一或多個選自烧基、烧氧基、_基、鹵焼基及齒烧氧基之取代基取代）； R13為支鏈伸烷基鏈、直鏈或支鏈伸烯基鏈或伸環烷基；且 R14為烷基、芳基或芳烷基；呈單一立體異構體、立體異構體混合物或立體異構體之外

消旋混合物形式；或呈其環糊精籠形物，或呈其醫藥學上可接受之鹽形式。在本發明之一實施例中，適用於治療或預防腸纖維化之脂氧素A*類似物係選自式⑴化合物。在另一實施例中，適用於本發明之脂氧素A4類似物係選自式（II)化合物。在本發明之另一實施例中，適用於治療或預防腸纖維化之脂氧素A4類似物係選自式（ΙΙ-a)化合物··

R1 為-0- (其中t為〇 1或2)或直鏈或支鏈伸烷基 123489.doc -23- 200816991 鏈；且 R2為芳基（視情況經—或多個選自縣、烧氧基、函基、 ΰ &基及_烧氧基之取代基取代）或芳烧基（視情況經或夕個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）；呈卜立體異構體、立體異構體混合物或立體異構體之外消U物形式；或呈其環糊精籠形物或呈其醫藥學上可接受之鹽形式。

在本發明之另-實施例中，脂氧素A4類似物為2_ f⑽’紙…他叫13，-氣苯氧基）·2,3，12_三經基十 -呶-4’6’1〇-二烯·8·炔基氧基)乙酸或纟醫藥學上可接受之式⑴、（II)及（Π-a)之藥理學活性脂氧素⑽貝似物可根據 2國專利M31，186中所揭示之方法或藉由製備用於治療緘維化之樂物之習知蓋倫藥劑學(㈣他ph_㈣方法 “處理。㊅醫藥組合物包含治療有效量（亦即有效治療或預防腸纖維化之量）之脂氧素域似物及_或多種醫藥學 =接受之賦形劑。合適之賦形劑可包括（但不限於）適於騎、非經腸或局部投藥且不與活性化合物發生有室反摩 ::::有機或無機惰性載劑物質。合適之醫藥學上可接二=包括(但不限於)水、鹽溶液、醇、明膠、阿拉伯醇：：、殿粉、硬脂酸鎂、滑石、植物油、聚貌二絕t乙-比口各咬酮、經基.甲基纖維素、石夕酸、黏性石执月曰肪酸甘油單商旨及甘油二g§及其類似物。醫藥產Μ 123489.doc -24- 200816991 呈口體形4 %如錠劑、包衣錠劑、栓劑體形式，例如溶液、懸浮液或乳液。若適當，則4:; 包含不與活性發生有宏=& ⑷八r另外' 王有告反應諸如潤滑劑、防腐劑、稃定劑、濕潤劑、乳化劑、％、疋劑、調味劑及/或芳夭考色 ^貝及其類似物之助劑。合適醫藥、、且ά物之κ例包括以下實例： _ '、尤其適於經口传用夕 μ 用之商樂組合物為具有滑石化合物載劑或黏合劑（諸如，飞厌水

孔糠玉米歲粉或馬龄薯测· 粉）之錠劑、包衣錠劑 7署歲 ⑷及膠囊。亦可能以液體形式使用， 4如適* %其中添加有甜味劑之流體形式。對於非經腸投藥，使用益〜定用無囷洛液、可注射溶液、水溶液或油性溶液以及懸浮液、s 、十從礼液或包括栓劑之植入物。安瓶為便利之單位劑量。可纲$ 4士调配持續釋放組合物，包括里中活性化合物經可差異降解之塗層保護，例如經微膝囊:、多重塗層等保護之彼等組合物。匕亦可使用之載劑系統為諸如膽汁酸之鹽或動物或植物磷脂以及其混合物，及脂質體或其組分之表面活性賦形劑。經皮貼片亦可用作傳遞方式。曰月曰氧素A4類似物之劑量為有效治療或預防腸纖維化之里。活性成分之有效量可視投藥途徑、患者之年齡及體重待治療之病症之性質及嚴重程度及類似因素而變化。有效里可由熟習此項技術者所已知之方法來確定。日劑量叙為每天約〇.1-20〇叩/18，較佳為每天約〇^1〇111§/|^，田奴予人類患者時，所欲給予之劑量可能呈單一劑量形式 I23489.doc •25- 200816991 單入技予或分為兩次或兩次以上之日劑量。予純形^或適當醫藥組合物形式之本發明化合物或其 =學上可接受之鹽可經由用於類似用途之任何可接受藥劑投予方式來進行。本發明之醫藥組合物可藉由本發明化合，與適當醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑組合來製備’且可調配為固體、半固體、液體或氣體形式之製劑’諸如錠劑、膠囊、散劑、顆粒、軟膏、溶液、栓劑、、 /主射劑”及入劑、凝膠、微球體及氣溶膠。投予該等醫藥組合物之典型途徑包括（但不限於）經口、局部、經皮、吸 _ 腸舌下、直腸、陰道及鼻内。本文所用之術語非經腸包括皮下注射、靜脈内注射、肌肉内注射、胸骨内注射或輸液技術。調配本發明之醫藥組合物以使其中所含 :活!·生成分在組合物投予患者後具有生物可用性。投予受檢者或患者之組合物採用一或多個劑量單位之形式，其中例如-錠可為單一劑量單位，呈氣溶膠形式之本發明化合物之—個容器可容納多數劑量單位。製備該等劑型之實際為热白此項技術者已知或顯而易見；例如參見巧^ and Practice of Pharmacy ^ f 20^ (Philadelphia College of Pharmacy and Scie_，2〇〇〇)。在任何情況下， :於冶療根據本發明之教示内容所關注之疾病或病狀而 :&予之組合物含有治療有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽。本务明之醫藥組合物可呈固體或液體形式。在一態樣中’載劑為微粒，以便組合物呈例如旋劑或散劑形式。載 123489.doc -26 - 200816991 劑可為液體，而組合物為例如口服糖聚，可注射液體，或氣 >谷膠’其可用於例如吸入投藥。當意欲經口投藥時，醫藥組合物較佳呈固體或液體形式，其中半固體、半液體、懸浮液及凝膠形式包括於本文中視為固體或液體之形式中。、作為經口投藥之固體組合物，醫藥組合物可調配為散劑、顆粒、壓製鍵劑、丸劑、膠囊…爵錠(chewing

g·)、糯米紙囊劑(wafer)等形式。該固體組合物通常含有 :或多種惰性稀釋劑或可食用載劑。此外，可存在以下物 :::-或多纟：諸如緩甲基纖維素、乙基纖維素、微晶義：素、黃箸膠或明膠之黏合劑；諸如.澱粉、乳糖或糊精劑’諸如海藻酸、海藻酸鈉、澱粉羥基乙酸鈉、玉及一員似物之朋解劑；諸如硬脂酸鎂或Sterotex之諸如膠態二氧切之助流劑；諸如絲或糖精之甜味劑，諸如胡椒薄荷、水劑；及著㈣。料調味劑之調味組合物呈例如明膠膠囊之膠囊形式時，1除以上類型之物質外亦可含有才，、除以上醫藥組合物可呈液體”二Γ或油之液體載劑。乳液或懸浮液。作=二’例如，劑、糖漿、溶液、藉由注射傳遞。,以1列’該液體可用於經口投藥或化合物外亦可含；：;、;°投藥時，較佳組合物除本發明劑中之-或多者在立未劑、防腐劑、染料/著色劑及增味括界面、、““ 思欲藉由注射投予之組合物中，可包 1 /蜊、防腐劑、濕潤劑、分散劑、懸浮劑、緩衝 123489.doc * 27 - 200816991 劑、穩定劑及等張劑中之一或多者。、無論本發明之液體醫“合物為溶液、懸浮液或其他類似形式，其均可包括(但不限於)以下佐劑中之一或多者：無菌稀釋劑’諸如注射用水、鹽水溶液(較佳為生理鹽水）、林格氏液（Ringer，s SGlutiGn)、等張氯化納、諸如可用作溶劑或懸浮介質之合成甘油單醋或甘油二醋之不揮發性、,水乙—醇、甘油、丙二醇或其他溶劑；諸如节醇或對羥基苯曱酸甲醋之抗菌劑；諸如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉之抗氧化劑；諸如乙二胺四乙酸之螯合劑；諸如乙酸鹽、擰檬酸鹽或磷酸鹽之緩衝劑及諸如氯化納或右旋糖之調節張力之藥劑。非經腸製劑可密封於由玻璃或塑料製成之安瓶、拋棄式注射器或多劑量藥瓶中。生理鹽水為較佳佐劑。可注射醫藥組合物較佳為無菌的。意欲用於非經腸或經口投藥之本發明之液體醫藥組合物應含有-定量之本發明化合物以使得獲得合適劑量。通常在組合物中，為至少0.01%之本發明化合物。當意欲經口投藥時’該量可為變為組合物之〇1重量％與約7〇重量 %之間。較佳經口醫藥組合物含有約4%與約观之間的本發明化合物。製備本發明之較佳醫藥組合物及製劑以便在稀釋本發明前非經腸劑量單位含有〇〇1重量％至1〇重量％之間的本發明化合物。本杳明之酉藥組合物可意欲用於局部投藥，在該情況下載劑可適當包含溶液、乳液、軟膏或凝膠基質。例如，基質可包含以下物質中之一或多者：石蠟脂、羊毛脂、聚乙 123489.doc -28- 200816991 二醇、蜂蠟、礦物油、諸如水及醇之稀釋劑及乳化劑及穩定劑。增稠劑可存在於用於局部投藥之醫藥組合物中。若意欲經皮投藥，則組合物可包括經皮貼片或離子導入療法裝置。局部調配物可含有約〇 j% w/v至約1〇% w/v(每單位體積之重量）之一定濃度之本發明化合物。本發明之醫藥組合物可意欲用於例如以在直腸中熔融且釋放藥物之栓劑形式直腸投藥。用於直腸投藥之組合物可含有油脂性基質作為合適非刺激性賦形劑。該等基質包括 (但不限於）羊毛脂、可可脂及聚乙二醇。本發明之醫藥組合物可包括各種改質固體或液體劑量單位之物理形式之物質。舉例而言，組合物可包括在活性成分周圍形成塗層外殼之物質。形成塗層外殼之物質通常為惰性的，且可選自（例如）糖、蟲膠及其他腸衣劑。或者，可將活性組分密封入明膠膠囊中。呈固體或液體形式之本發明之醫藥組合物可包括與本發明，合物結合且由此有助於該化合物傳遞之藥劑。可在此容量下作用之合適藥劑包括單株抗體或多株抗體、蛋白質或脂質體。 ' 本發明之醫藥組合物可由可两』从乳溶膠形式投予之劑量單位組成。術語氣溶膠係用於矣-匕、表不具有膠悲性質之彼等系統至由加壓包裝组成之系統範图已圍内之多種糸統。傳遞可由液化或壓縮氣體或分配活性成. 双刀之合適泵糸統來實施。本發明化合物之氣溶膠可以單相雙相或三相系統傳遞以便傳遞活性成分。氣溶膠傳遞包 I括可一起形成套組之必要容 123489.doc -29. 200816991 ★ 閥子谷器及其類似物。熟習此項技術者益茜過度實驗即可禮定較佳氣溶膠。，、本舍明之醫藥組合物可蕤樂技術上所熟知之方法來衣爾举例而§ ，音你盤山、士 t ^人稭由注射投予之醫藥組合物可藉由偌…化合物與無菌蒸餾水組合以形成溶液來加以製添加界面活性劑以促使形成均質溶液或懸浮液。界面活性劑為與本發明化合物非共價相互作用以促使化合物於水性傳遞系統中溶解或均f懸浮的化合物。旦脂氧素〜類似物或其醫藥學上可接受之鹽係以治療有效里杈予’ 5亥置將視包括以下因素之多種因素而改變：所用特疋化合物之活性；化合物之代謝穩定性及作用時間長度；患者之年齡 '體重 '總體健康狀況、性別及飲食；投藥方式及時間；排泄率；藥物組合；特定病症或病狀之嚴重程度；及經受治療之受檢者。一般而言，治療有效日劑量為（對於70 kg之哺乳動物）約〇〇〇1 mg/kg(亦即，〇7 mg) 至約100 mg/kg(亦即，7.0 gm);較佳地，治療有效劑量為 (對於70 kg哺乳動物）約0.01 mg/kg(亦即，7 mg)至約5〇 mg/kg(亦即，3.5 gm);更佳地，治療有效劑量為（對於7〇 kg哺乳動物）約1 mg/kg(亦即，70 mg)至約25 mg/kg(亦即， 1.75 gm)。一般而言，一般技術者依賴於個人知識及本申请案之揭示内容，將能夠確定美國專利6,831，186中式Q)、 (Π)或（Il-a)之化合物用於治療給定疾病之治療有效量。亦可在投予一或多種治療或預防腸纖維化之其他治療劑同時、之前或之後投予脂氧素A*類似物或其醫藥學上可接 123489.doc -30- 200816991 ::衍生物。該組合療法包括投予含有本發明化合物及一，八他/舌丨生劑之單一醫藥劑量調配物，以及投予本發〇物及各自呈其自身之獨立醫藥劑量調配物形式之活 d舉例而S ’可將本發明化合物及其他活性劑以諸如

錠劑或膠囊之罝_統m Μ Θ , A 早、、二口背I ϊ組合物之形式一起投予患者，或。某刮可以獨立經口劑量調配物之形式投予。當使用獨立劑量調配物時，可基本上同時(亦即，共同地)或於分別錯開之時間（亦即，連續地）投予本發明化合物及一或多種其他活性劑；應瞭解組合療法包括所有該等療法。【實施方式】無而進一步闡述，利用先前之描述，咸信熟習此項技術者可將本發明應用至其最充分程度。因此，以下特定實施例僅視為說明性之實施例且不以任何方式限制本揭示案之其餘部分。實例活體内實驗性研究··慢性結腸炎誘發及宏觀評估材料及方法在遠#研究中使用藉由以逐漸增加之方式投予2,4,6_三補基苯磺酸（TNBS)7週誘發之慢性炎症模型。此模型導致與腸内膠原蛋白含量顯著增加相關之炎症引發之纖維化。个艾性結腸炎之誘發係根據由Lawrance等人於

Gastroenterology (2003) 125:1750-1761 中所提出之方案進行。自 Charles River(Breeding Laboratories，Monza，Italy) 獲得6至8週齡之雌性BALB/c品系小鼠。 123489.doc -31 - 200816991 在以下研究中’使用脂氧素幻類似物2_((25,3及，4£，6五， 10五，125>13_(4-氟苯氧基）-2,3，12-三羥基十三碳-4,6，10-三烯-8-炔基氧基）乙酸鈉··

作為測試化合物。然而，應瞭解其僅為說明之目的且其他醫藥學上有效之式（I)、（11)及（II_a)之脂氧素八4類似物涵蓋於本發明中。研究1方案：在第一個活體内實驗中，對照組（n=7)2BALB/c小鼠每週藉由結腸内注射來接受〇1 mL鹽水溶液。TNBS組（n=i5) 之小鼠以一週之間隔藉由結腸内注射逐步增加劑量⑺·$至 1·25 mg，每兩週增加〇·25 mg)之於3〇%乙醇中2Tnbs來處理8週。TNBS+脂氧素μ類似物組（n=15)之小鼠接受與僅有TNBS之組相同之每週TNBS投藥，加上每天藉由胃内投予之1 mg/kg脂氧素A*類似物。每週檢查小鼠之體重損失、腹瀉及直腸出血。於最後一次投予TNBS兩天後，處死小鼠且將結腸移除及檢查。分析考慮到存在硬結、水腫、厚度及黏膜出血跡象之宏觀表現。研究2方案：為測試脂氧素類似物對患有已確定之結腸炎之動物中發炎及纖維化反應之影響’在第二次活體内研究中，於投| 123489.doc -32- 200816991 TNBS(與如上所述相同之方案）第三週後，開始經口給予脂氧素A4類似物（1 mg/kg)。每週檢查小鼠之體重損失、腹瀉及直腸出血。於最後一次投予TNBS兩天後，處死小鼠且將結腸移除及檢查。分析考慮到存在硬結、水腫、厚度及黏膜出血跡象之宏觀表現。 MPO檢定：根據之前公開之方法，藉由使用以三甲基聯苯胺（TMB) 作為受質之分光光度檢定量測ΜΡΌ活性來監控結腸中之嗜中性血球浸潤。活性係以每毫克蛋白質之U表示。結腸組織學：對於組織檢查，將來自各動物之近端、中間及遠端結腸切片於10%福馬林（formalin)中加以固定，包埋入石躐中，切片，且用蘇木精及曙紅（H&E)或天狼星紅（Sirius Red)染色。對於後者，將切片於含有飽和苦味酸之0.1%天狼星紅 F 3 B及0.1 %堅牢綠中培養3 0分鐘。用蒸德水沖洗兩次後，將切片用7〇%乙醇簡單脫水。用BX60顯微鏡（Olympus Co·，Rome，Italy)獲得結腸切片之影像，使用分辨率為1315x1033像素之SPOT-2相機 (Diagnostic Instruments Inc·，Sterling Heights，MI)將其數位化且使用電腦影像分析系統（Image Acquisition System Ver·005，Delta Sistemi，Rome，Italy)對其進行分析。將來自各動物結腸之切片進行盲法檢查。從而使用已確定之方法（Lawrance 等人，swpra ; Neurath 等人，J. Exp· Med. (1995) 182:1281_1290)對炎症及纖維化之程度加以評 123489.doc -33- 200816991 分。簡言之，依據發炎性浸潤之密度及程度、杯狀細胞之損失及腸壁增厚來將炎症記為不存在、輕度、中度或重度。與水對照小鼠相比，根據天狼星紅陽性結締組織染色之密度及程度亦將纖維化記為不存在、輕度、中度或重度。結腸組織及腸纖維母細胞之基因表現：使用表1中所指示之有義及反義引子藉由定量即時聚合酶鏈反應（RT-PCR)(Heid CA 1996)來進行結腸組織及腸纖維母細胞中小鼠基因表現之量化。所有PCR引子係使用 PRIMER3-OUTPUT軟體採用來自NCBI資料庫之公開序列資料來設計。自取自遠端結腸及腸纖維母細胞之樣本中分離總 RNA(TRIzol試劑，Invitrogen srl，Milan, Italy)。在室溫下將1微克純化RNA用Dnasel處理15分鐘，隨後於95°C下在2.5 mmol/L之EDTA存在下培養5分鐘。使用隨機引子以 20 pL 反應體積用 Superscript III(Invitrogen srl，Milan， Italy)將RNA逆轉錄。對於定量RT-PCR，將100 ng模板溶解於 25 μί含有 0.3 μιηοΙ/L各引子與 12.5 pL 2XZ SYBR Green PCR Master混合物（Bio-Rad，Hercules，CA)之體積中。所有反應重複進行三次，且熱循環條件如下：在 iCycler iQ儀器（Bio-Rad，Hercules，CA)中，於 95°C 下歷時 2 分鐘，隨後於95°C下歷時10秒鐘循環50次，且於60°C下歷時30秒鐘。計算各樣本複製之平均值且將其表示為循環臨限（CT ;各PCR反應達到預定螢光臨限之循環數，其經設定處於所有反應之線性範圍内）。隨後，將基因表現量計 123489.doc -34- 200816991 算為目標基因樣本之CT值與内源性對照物（GAPDH)樣本之平均CT值之間之差值（.CT)。將相對表現計算為各目標基因之測試對照樣本之.CT值之間的差值（..CT)。將相對表現量表示為2-..CT。表1-定量RT-PCR引子基因有義引子反義引子小鼠GAPDH 5 ’，ctgagtatgtcgtggagtctac-3 ’ 3’-gttggtggtgcaggatgcattg-5’ 小鼠TNFa 5 Lacggcatggatctc 旺 aagac_3， 3f-gtgggtgagcacgtagt-5f 小鼠TGFpl 5!-ttgcttcagctccacagaga-3f 3 f-tggttgtagagggcaaggac-5f 小鼠al(l)膠原蛋白 5 f-acgtcctggtgaagttggtc-3f 3 !-cagggaagcctctttctcct-5' 結果上文之兩個研究說明在結腸炎症之慢性模型中脂氧素A4 之穩定類似物有效防止纖維化發展。當投予小鼠歷時7週時，如藉由天狼星紅染色結腸之形態量測分析及結腸纖維化標記（包括TGFP、α-SMA、αΐ膠原蛋白及纖維結合蛋白 mRNA之結腸表現）所量測，脂氧素八4類似物使結腸纖維化發展顯著衰減。此外，脂氧素A4類似物對纖維化標記發揮之調節作用於蛋白質水平上得以證實，因為發現與單獨投予TNBS之小鼠相比，投予脂氧素A4類似物之小鼠中TGBP 蛋白質減少。除此效應外，經口投予之脂氧素A4類似物使結腸炎症減弱。另外，第二個研究之結果證實當脂氧素A4類似物以治療方式（亦即投予TNBS後之第三週開始）投予時亦有效。 123489.doc -35-

Claims

200816991 十、申請專利範園： 1 · 一種治療腸纖維化於需要該治療之自本> + ’τ有t方法，其包含投予該患者治療有效量之式（1)或式（11)之脂氧素& (lipoxin A4)類似物化合物： Rl R2

R4 及 R1 R2

R4 、〇R6、-SR6、-S(〇)tR7(其起形成選自以下之單環雜各R1、R2及R3獨立地為鹵基中 t為 1 或 2)或-N(R7)R8 ; 或R1及R2連同其所連接之碳, 環結構：

或R1及R2連同其所連接之構： ΝΗ 起形成以下雙漆雜環結 123489.doc 200816991

p為1至4’各R15為氫、烧基、芳烧基 -R9-R13-Rn . -R9.〇-R10-Rn . -R9-〇- R12、-R9-C(0)-R'R"、

Rl〇-R"(其中 t為 0至 2)，或-R9_C(F)2_R9_R"; 、σ R為芳基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及齒烷氧基之取代基取代）或芳烷基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）；各R獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、4(0^7、_C(S)R7 、-C(0)〇R14、-C(S)OR14、-C(0)N(R7)R8 或-C(S)N (R7)R8 ;

(其中q為0至3 或芳基）；各 r4 為-R9-R12、各R7獨立地為氫、烷基、環烷基、芳基或芳烷基； R獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、-C(0)R7、-C(0)0R14 或環烧基（視情況經一或多個選自烧基、_N(R7)^ -C(〇)〇R7之取代基取代）；各R9獨立地為一直接鍵或直鏈或分支伸烷基鏈；各R1G獨立地為直鏈或分支伸烷基鏈、直鏈或分支伸烯基鏈、直鏈或分支伸炔基鏈、或伸環烷基；各 R 1獨立地為-C(0)0R7、·0(〇)Ν(Ι17)2、-P(〇)(〇r7)2、 123489.doc 200816991 -S(0)2〇R7、-s(o)2n(h)r7或四唑； R12為芳基（經-(:(0)0:^7或-C(0)N(R7)2且視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、_基、_烷基及鹵烷氧基之取代基取代）或芳烷基（經-c(o)〇R7或-C(0)N(R7)2a 視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、齒烷基及i烷氧基之取代基取代）； Rl3為分支伸烷基鏈、直鏈或分支伸烯基鏈、或伸環烷基；及

Rl4為烧基、芳基或芳烷基；單立體異構體、立體異構體混合物、或立體異構體之外消旋混合物形式； ” 或呈其環糊精籠形物(clathrate)、或呈其醫藥學上可接受之鹽形式。

2·如請求項1之方法式⑴化合物。 3·如請求項1之方法式（11)化合物。 4 ·如請求項 a)化合物 3之方法其中該脂氧素A*類似物係選自該等其中該脂氧素A*類似物係選自該等其中該脂氧素A4類似物係選自式（„_ OH

123489.doc 200816991 其中： R1為-Ο-、-S(0)r(其中t為〇、i或2)或直鏈或分支伸烷基鍵；及 2 R為芳基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、 _烧基及鹵烷氧基之取代基取代）或芳烷基（視情況經或夕個選自燒基、烧氧基、齒基、齒烧基及鹵烧氧基之取代基取代”

呈單一立體異構體、立體異構體混合物、或立體異構體之外消旋混合物形式；或呈其環糊精籠形物、或呈其醫藥學上可接受之鹽形式。 5·如明求項4之方法，其中該脂氧素&類似物為风雨，125Μ3_(4.氟苯氧基）_2 312三經基十三碳_ 4’6’10:二烯-8-块基氧基）乙酸或其醫藥學上可接受之鹽。月求項之方法，其中該脂氡素A4類似物為2-((25^3/^ 4學鹰，叫13_(4_氟苯氧基）_2,3，12•三經基十三碳_ 4,6，10·三烯-8_炔基氧基）乙酸鈉。 7. -種預防腸纖維化於需要該治療之患者之方法，其包含投予該患者治療有效量之式⑴或式（ιι)之脂氧素&類似

123489.doc 200816991 及 R1 R2

其中：各R〗、R2及R3獨立地為鹵基、_〇R6、_SR6、_s(〇)tR7(其中 t為 1 或 2)或-N(R7)R8 ;

或R1及R2連同其所連接之碳一起形成選自以下之單環雜環結構：

或R及R連同其所連接之碳一起形成以下雙環雜環結構：

q為0至3 ’ p為1至4，各R15為氫、烧基、芳烷基或芳基）·， Rlf -R:Rl2、_R9-R13_r11、-R^O-R^R11、-R'O· Rl〇 ^ C(°)'RI0^R11 ^ -R9.N(R7).R10-Rn . -R9.S(0)f M5 為：二二:為° 至2)’ 或·r9-c(f)2-r9-r11; 土 3况經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵 123489.doc 200816991 基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）或芳烷基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代）；各R6獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、-C(〇)R7、-C⑻R7 、-C(0)OR14、-C(S)OR14、-C(0)N(R7)R8a-C(S)N(R7)R8 ; 各R7獨立地為氫、烷基、環烷基、芳基或芳烷基； R8獨立地為氫、烷基、芳基、芳烷基、-C(〇)R7、/(ορκΗ 或環烧基（視情況經一或多個選自燒基、-N(r7)2& -C(0)0R7之取代基取代）；各R9獨立地為一直接鍵或直鏈或分支伸烷基鏈；各R獨立地為直鏈或分支伸烧基鏈、直鏈或分支伸晞基鏈、直鏈或分支伸炔基鏈、或伸環烧基；各 R11獨立地為-C(0)〇R7、-C(0)N(R7)2、-P(〇)(〇r7)2、 -s(o)2or7、-S(0)2N(H)R7或四唑； R12為芳基（經-c(o)〇R7或-c(o)n(r7)2且視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、函基、_烷基及鹵烷氧基之取代基取代）或芳烷基（經-C(0)0R7或_(：(0州(117)2且視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、齒基、鹵烷基及齒烷氧基之取代基取代）； 1 3 R為分支伸烧基鏈、直鏈或分支伸稀基鏈、或伸環烧基；及 R為烧基、方基或芳烧基；壬早立體異構體、立體異構體混合物、或立體異構體之外消旋混合物形式； 123489.doc 200816991 或呈其環式。糊精蘢形物或呈其醫藥學上可接受之鹽形 8. 如請求項7之方法式⑴化合物。 9. 如請求項7之方法式（Π)化合物。其中該脂氧素a4類似物係選自該等其中該脂氧素a4類似物係選自該等其中該脂氧素A4類似物係選自式（II-

1Q·㈣求項9之方法， θ化合物：

R為-〇S(0)r(其中t為0、1或2)或直鏈或分支伸烷基鏈；及 2 R為芳基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、_基、鹵烧基及_燒氧基之取代基取代）或芳烧基（視情況經一或多個選自烷基、烷氧基、鹵基、鹵烷基及鹵烷氧基之取代基取代)；呈單一立體異構體、立體異構體混合物、或立體異構體之外消旋混合物形式；或呈其環糊精籠形物、或呈其醫藥學上可接受之鹽形式0 123489.doc 200816991 4五，6五，10五，125>13一（4·顏 Η鼠本乳基）·2,3，12-三羥基十三碳 4,6，10-三烯-8_块基氧基）乙酸鈉。 11 ·如請求項i〇之方法，其中該脂氧素Μ類似物為孓((2&从紙6五，10£，mM3_(‘氟苯氧基）·2,3，12_三羥基十三碳 4,6’10 一烯8炔基氧基）乙酸或其醫藥學上可接受之鹽。月求項之方法，其中該脂氧素A*類似物為2-((2$，3及

123489.doc 200816991 七、指定代表圖： * (一)本案指定代表圖為：（無) • (二)本代表圖之元件符號簡單說明：八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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