TW200803903A - Novel compound having affinity to amyloid - Google Patents

Description

200803903 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 [技術領域] ‘ 【0 0 0 1】 ^ 本發明係有關於用於頭部退化（degeneration)疾病之診斷的化合物。 更詳細地說，係有關於阿茲海默氏症（Alzheimerdisease)初期狀態的澱粉 樣蛋白（amyloid)蓄積的疾病診斷方面，對於病灶部位澱粉樣蛋白的檢測 有幫助的化合物。 響 【先前技術】 [0002] 被稱爲澱粉樣蛋白的纖維狀蛋白質，因爲沉積於體內各個不同器官或 組織而導致發病的疾病，總稱爲澱粉樣變性病（amyloidosis)。 .澱粉樣變性病共通之處，係富含乙型-片（/5 -sheet)結構的纖維狀蛋白 質，被稱爲澱粉樣蛋白，沉積於全身各臟器或局部，使該臟器或組織發生 •機能難的讎。 [0 0 0 3] 澱粉樣變性病的代表性疾病就是阿茲海默氏症（Alzhemier disease)(以 下稱爲「AD」），已知是因認識記隱症狀的原因所形成的疾病。此疾病因爲 是進行性地殿粉樣蛋白在腦部沉積、一直到導致死亡，和其他澱粉樣變性 病比較，也可說是受到高度社會關心的疾病。近年來，先進各國中，高齡 化社會伴隨而來的阿茲海默氏症病患數也急速增加，已變成社會問題。 5 200803903 【0 0 0 4] 依據病理組織學的觀點，阿茲海默氏症的特徵，係老人斑塊（senile plaque)出現、神經纖維糾結（Neurofibrinary Tangles)及廣泛性神經功能喪 失等三個腦內病理特徵。老人斑塊係以澱粉樣蛋白爲主要構成成分的結構 物，在阿兹海默氏症的最初期、也就是臨床症狀出現的10年以上之前，就 可以在腦內病理發現。 【0005】 φ 阿茲海默氏症的診斷，除了電腦斷層檢查(CT )及核磁共振攝影(MRI) 等影像診斷的輔助配合之外，藉由進行各種認知功能評估（例如，長谷川 量表、ADAS-JCog、MMSE等）來加以實施。但是，以這樣的認知功能評估 爲基礎的方法，對於發病初期的診斷敏感度很低，並且，由於每個人與生 俱來的認知功能很谷易彭響檢查結果，是其缺點。還有，因爲對確定診斷 而言，疾病部位的病理組織切片檢查是不可缺少的，但是病患生存期間， 進行阿茲海默氏症的確定診斷，於現階段，事實上是不可能的（非專利文 ⑩獻一）。 【0 0 0 6】 另一方面，構成老人斑塊的澱粉樣蛋白係澱粉樣蛋白乙型蛋白質（以 下稱爲「A/3」）的凝集體（aggregates)，這已有硏究報告；並且，從許多 硏究報告，發現A/5凝集體係具有乙型片（/5片）的構造，顯示有神經細 胞毒性’以這些發現爲基礎，Α Θ在腦內的沉積爲開端，其向下發展的現象， 6 200803903 就是發生神經元纖維化的形成及神經功能喪失，所謂『激粉樣蛋白連串反 應（amyloidcascade)假說』就一直有人主張（非專利文獻二）。 【0 0 0 7】 基於這樣的事實，近年來，對澱粉樣蛋白有很高親和性的化合物被作 爲標記（marker)使用，在體內（invivo)檢測阿茲海默氏症的嘗試一直在 進行著。 像适樣腦內激粉樣蛋白影像診斷用探索劑（probe)的大多數；相對於 Φ 澱粉樣蛋白，係用不同的放射性核種如UC、18F、及1231等標示的親和性高、 且腦滲移性高的疏水性的低分子化合物，具體實例來說，以6-碘-2-[4’ -(N，N_ 二甲基氨基)苯基]苯並噻哩（6-iodine-2· [4’ -(N，N-dimethylamino) phenyl] benzothiazole ;以下稱爲「TZDM」）、或6-經基-2-[4’ -(N-甲基氨基)苯基] 苯並噻哇（6-hydroxy-2-[4’ - (N-methylamino) phenyl]benzothiazole ;以下稱爲 「6ΌΗ-ΒΤΑ-1」）等爲首之種種的硫黃素（Thioflavme)衍生物（專利文獻 一、非專利文獻三）；以(E)4-甲基氨基-4’ -羥基芪 _ ((E)-4-methylamino4，-hydroxystilbene ;以下稱爲「SB-13」）、或(E)-4_二 甲基氨基-4’ 碘民（(E)-4-dimethylamino4’ -iodine-stilbene ;以下稱爲 「m-I-SB」）等爲首之種種芪化合物（專利文獻二、非專利文獻四、非專利 文獻五）；以6-捵-2-[4’ -(N，N-二甲基氨基)苯基]苯並噁唑（6-1〇(1聽-2-[4’-(N，N-dimethylamino)phenyl]benoxazole ;以下稱爲「^B〇X」）、6-[2-(氟)乙 氧基]-2-[2-(2-二甲基氨基噻唑-5·基)乙烯基]苯並噁唑 (6-[2-(flouro)ethoxy]-2-[2- (2-dimethylamino thiazol -5-yl) ethenyl]benzoxazole ) 7 200803903 爲首之苯並噁嗤衍生物（非專利文獻六、非專利文獻七）；以2-(l-{6-[(2-氟乙基X甲基)氨基]-2-萘基}亞乙基)丙二腈（2-(146- [(2-fliioiO ethyl) (methyl)amino]-2-naphthyl}ethylidene)malononto^^ 首的DDNP衍生物（專利文獻四、非專利文獻八）；及，以6-碘-2-[4’-汎队 二甲基氨基)苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶（6-iodine-2-[4’ -(Ν,Ν-dimethylamino) phenyl]imidazo[l，2-a]pyridine ;以下稱爲「IMPY」）爲首的咪哩並批陡 (imidazopyndme)衍生物（專利文獻三、非專利文獻九）等用UC或放射性 • 鹵素標示後的化合物，都有報告至今。還有，關於這些影像診斷用探索劑 的一部份，實施頭部影像（headimaging)硏究，在阿茲海默氏症病人方面， 所謂健康正常例子，也有報告明確顯示放射能異常地集積於腦部（非專利 文獻十、非專利文）。 [0 0 0 8] 【專利文獻一】特表2004-506723號公報 '【專利文獻二】特表2005-504055號公報 • 【專利文獻三】特表2005-512945號公報 【專利文獻四】特表2002-523383號公報 【非專利文獻一】】· A· Hardy & G· A. Higgins，“Alzheimer’ s Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis·”，Science，1992,256,頁 184-185 【非專利文獻二】G· McKhann 等人 “Clinical diagnosis of Alzheimer’ s disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of 8 200803903

Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer' s Disease,”， Neurology，1984, 34，頁 939-944 【非專利文獻三】Z.-P. Zhuang 等人，“Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates·’’，J· Med. Chem·，2001，44,頁 1905-1914

【非專利文獻四】Masahiro 〇no 等人 “1 lC4abeled stilbene derivatives as A /3 -aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer’ s disease·”，Nuclear Mtedicine and Biology, 2003, 30，頁 565-571 【非專利文獻五】H. F. Kung 等人，“Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques.”，J. American Chemical Society，2001，123，頁 12740-12741 【非專利文獻六】Zhi-PingZhuang等人“IB〇X (2-(4， -dimethylaminophenyl) -6- iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain·”，Nuclear Medicine and Biology，2001，28，頁 887-894 【非專利文獻七】Furumoto Y 等人，“[uC]BF-227: A New uC-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid- β Plaques Imaging." , European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging, 2005, 32, Sup.l, M 759 【非專利文獻八】Eric D. Agdeppa等人， “2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes (DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer’ s Disease·”，Molecular Imaging and Biology，2003, 5,頁 404-417 200803903 【非專利文獻九】Zhi-PingZhuang 等人，.“Structure-Activity Relationship of Imidazo[l?2-a]pyridines as Ligands for Detecting β -Amyloid Plaques m the Brain·’’，L Med· Chem，2003,46,頁 237-243 【非專利文獻十】W. E. Klunk 等人，“Imaging brain amyloid in Alzheumer’ s disease with Pittsburgh Compound-B,”，Ann· Neurol·,2004, 55,頁 306-319 【非專利文獻^一】Nicolaas R L· G. Verhoeff 等人，“In-Vivo Imaging of • Alzheimer Disease β - Amyloid With [11C]SB-13 PET/' , American Journal of Geriatric Psychiatry，2004,12,頁 584-595 【發明内容】 【發明所欲解決之問題】 [0 0 0 9】 如同前述，以澱粉樣蛋白作爲對象的影像診斷探索劑，已經說明過各 種化合物，現在正以臨床應用爲導向而進一步的硏究著。 TZDM、IBOX及m-1-SB的碘用[1251]標示後的化合物，應用在正常老鼠 的實驗結果，給藥後2分鐘，任何一者都可發現向腦部滲移。但是這些化 合物從正常組織的廓清力（clearance)並不充分，隨著投與後的時間經過， 顯示有慢慢地向腦內集積的傾向（特表2005-512945號公報、Zhi-Ping Zhuang 等人 Nuclear Medicine and Biology, 2001，28,頁 887-894、Η· F· Kung 等人J· Am· Chem，Soc” 2001，123,頁1274042741)，從正常組織的廓清力不充分的 話，貝嘸法得到殿粉樣蛋白集積部份完整的對照影像，此爲其問題。SB_13 10 200803903 用[uc]標示後的化合物，用於大老鼠的實驗，得到結果顯示具有從正常組織 的廓清力，但是該廓清力的速度說不上很快（Masahiro〇no等人Nuclear Medicine and Biology，2003, 30，頁 565-571)。 【0010】 另一方面，IMPY爲首的具有咪哗並卩比陡（imidazopyridine )骨架結構 的化合物，投與後具有向腦內滲移、集積在澱粉樣蛋白處的性質之同時， 和前述化合物不同，具有較快的正常組織廓清力，有此優點，用ΓΙ]標示後 φ 的化合物所做實驗的結果已經明確顯示了。但是，IMPY在基因逆向變異測 試（Reverse Mutation Test)係呈現陽性的化合物，此化合物作爲影像診斷探 索劑使用的時候，就必須充分地注意其投與量和投與形態（國際公開第03 /106439號說明小冊）。關於FDDNP，也有報告說在基因逆向變異測試中 呈現陽性（國際公開第03/106439號說明小冊)。 【0 0 11] 作爲以®粉樣蛋白爲靶標的影像診斷探索劑，較理想的是，一方面繼 _ 續維持像MPY的優良性能，具有殿粉樣蛋白親和性、又非常快速地從正常 組織廓清’ 一方面又能抑制致突變性（mutagenicity)等毒性的化合物，是 較理想的，但是現階段尙未有人提出具備這種性能的化合物。 [0012] 本發明係鑑於前述內容而做出的成品，係以得到具有澱粉樣蛋白親和 性、正常組織廓清力十分快速、並且沒有致突變性等毒性的化合物及阿茲 海默氏症診斷劑作爲目的。 200803903 【解決問題所採取的方法】 [0013] 本發明團隊，藉由使用在咪唑並吡啶-苯基的骨架結構上的碳，與氫 氧基鍵合的化合物，找出能夠滿足前述條件的化合物群類，本發明就完成 了。 【0014】 也就是說，本發明係下列化學式（1)所表示之化合物或其鹽類、 [0015] 【化學7】

以及含有前述化學式（1)所表之化合物或其鹽類所形成的低毒性阿茲海默 氏症診斷劑。 [0016] 化學式（1)中，R3係以化學式 【化學8】 所表之基: R1係放射性鹵素取代基、m係0〜4的整數、N係0或1之整數; 作爲放射性鹵素，可以使用各種不同的元素，較理想的是選自氟18 (i8F)、 溴 76 (76Br)、碘 123 (1231)、碘 124 (1241)、碘 125 (1251)及碘 131 (1311)所形 12 200803903 成之群類；更理想的是，使用選自18F、1231及1251所形成之群類。還有，化 學式（1)中，n=〇時，m=〇〜4是較合於理想的；n=l時，〜4是較合於 理想的。 痔 【0017] A1、A2、A3及A4係各自獨立之碳或氮，必須至少有一個是碳。A1、A2、 A3及A4之中有三個以上是碳，則較爲理想，全部都是碳，則更理想。還有， 化學式（1)中，R3係碳，鍵合在A1、A2、A3或A4的任一個上。A1、A2、A3 • 及A4係各自未和R3鍵合的碳的情形時，與其鍵合的氫原子不可以被取代。 前述化學式（1)所示之氫氧基，和構成苯基骨架結構任一個碳鍵合，都可 以的，但與該苯基骨架結構的4’位置的碳鍵合，是較理想的。R3鍵合位置， 限於A1、A2、A3或A4的任一個，並無特別限制，但是A3的碳、也就是6位 置的碳’是較合於理想的。 [0018] 依據本發明其他的一方面，係提供下列化學式（2): • 本発明〇別Ο—側面丨乙上冬匕、下記式（2 ): [0019] 【化學9】

[0020】 所表之化合物或其鹽類。 13 200803903 [0 0 2 1] 化學式（2)中，R4係以化學式 【化學10】

所表之基； m係0〜4的整數；N係〇或1之整數；R2，於mzzn=〇時，係非放射性鹵素 取代基、硝基（nitro)取代基、碳數342的三烷基甲錫院基（tnalkyl stannyl) _ 取代基或三苯基甲錫院基（triphenyl stannyl)取代基；m#0及/或n#0的時 候，係非放射性鹵素取代基、甲院擴酸（methane sulfonic acid)取代基、三 氟甲院擴酸(trifluoromethane sulfonic acid)取代基或芳香族磺酸耳又代基。作 爲非放射性鹵素取代基，可以使用，能夠變成用在親核取代反應的放射性 氟的相關標的之鹵素，或能夠變成與放射性碘之間的同位素交換反應的標 的之鹵素，較理想的是可以使用碘、溴、或氯。作爲三院基甲錫院基取代 基，可以使用各種取代基，三甲基甲錫烷基取代基及三丁基甲錫烷基取代 φ 基可以較合於理想地使用。並且，化學式（2)中，n=0時，m：=0〜4是較合 於理想的；n=l時，m=l〜4是較合於理想的。 [0022] A5、A6、A7及A8係各自獨立之碳或氮，但必須至少有一個是碳。A5、 A6、A7及A8之中有三個以上是碳，則較爲理想，全部都是碳，則更理想。 還有，化學式（2)中，R4係碳，鍵合在A5、A6、A7或A8的任一個上。A5、 A6、A7及A8係各自未和R4鍵合的碳的情形時，與其鍵合的氫原子不可以被 14 200803903 取代。前述化學式（2)所示之氫氧基，和構成苯基骨架結構任一個碳鍵合， 都可以的，但與該苯基骨架結構的位置的碳鍵合，是較理想的。R4鍵合 位置，限於A5、A6、A7或A8的任一個，並無特別限制，但是A7的碳、也就 是6位置的碳，是較合於理想的。 【發明之成果】 [0 0 2 3] 根據本發明，具有澱粉樣蛋白親和性、從正常組織廓清非常快速，並 ^ 且沒有致突變性等毒性的化合物及低毒性阿茲海默氏症診斷劑，就可 以得到了。 【實施方式】 【本發明之最佳實施例】 【0024】 以下，舉6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -經基苯基]咪唑並[1,2-a]吡啶 (6-tribmylstannyl-2-[4，-hydroxyphenyl]imidazo[l，2-a]pyridine)爲例，說明有 ^ 關本發明之一個面向、放射性鹵素標示化合物之前驅化合物的合成方法。 [0025] 首先，使4’ -羥基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone )與溴化銅（CuBd ) 發生反應，合成2-溴4’ -羥基乙醯苯（2-bromo-4’ -hydroxyacetophenone )〔附 圖一、作業一〕。此時的反應，可以依照已知的方法例如文獻（King L. Carroll & Ostram G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry，1964, 29(12)，頁.3459-3461) 所記載的方法來進行。 [0026] 15 200803903 其次，將前述已合成之2-溴-4 羥基乙醯苯，與2-氨基-5-溴吡啶 (2-amino-5-bromopyridine)發生反應，合成6-溴-2-(4’ -經基苯基)咪ΰ坐並 [l，2-a]吡陡（6-bromo-2-(4’ 七ydroxyphenyl)imidazo[U 作業二〕。此作業可以依據以下之重點訣竅來進行。 【0 0 2 7】 首先，將2-溴-4 羥基乙醯苯和2-氨基-5-溴吡陡溶解在乙腈 (acetonitrile)等的惰性溶劑中，在回流溫度狀態下，使其反應2〜6小時， Φ 生成6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的溴化氫酸鹽，形成白色沉 澱。此際所用的溶劑，乙腈之外，甲醇或丙酮，在相同的反應情形時，通 常可以使用。又，反應溫度如果是可以進行回流的溫度的話，就可以，例 如，乙腈作爲溶劑的情形時，9〇°C的狀態就可以了。並且，所用溶劑的量， 如果對於反應係屬充分則很好，但是過量的話，由於無法得到反應物的沉 澱，必須要謹慎。例如，使用相當於10毫莫耳（mmol)的2-溴-4 羥基乙 醯苯來反應的情形時，大約使用40〜50毫升的溶劑就可以了。 • 【0028】 接下來，將反應液過濾，分離沉澱物後，將此白色沉澱物懸浮於甲醇 /水的混合液（1 : 1)中’該混合液中再加入相對於沉澱物超過甚多量的 碳酸氫鈉水溶液，則6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶游離出來，生 成沉澱。藉由過濾取得此新生成的沉澱物’就可以得到本作業目的產物6-溴_2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶（附圖一、作業二）。甲醇/水混合液 的量，爲了能使反應進行’若是充分的量，並無特別限定的必要，但是過 16 200803903 多的話，因爲會妨礙生成物的析出，有必要注意，舉例來說，使用相當於 10毫莫耳的2-溴-4,-羥基乙醯苯的情形時，使用大約40〜100毫升成度的 ^ 甲醇/7jC混合液，就可以了。又，碳酸氫鈉的量，相對於反應基礎物的前 述沉澱物，若超過甚多的話，並無特別限制，例如，若係於前述條件下使 其反應的情形時，添加大約25毫升程度的飽和碳酸氫鈉水溶液到反應液 中，就可以了。 【0029】 • 接著，將合成出來的6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶充分乾燥 後，溶解於二噁烷（dioxane)，加入三乙胺（diethylamine)後，添加雙[三丁 基錫](bis [tributyltin])及催化劑量的四個(三苯基膦)化钯（tetrakis (triphenyl phosphine) palladium(O))，將該反應液加熱到約90°C，使其反應24小時後， 蒸餾除去溶劑，進行色層分析精製，可以的到目標產物的6-三丁基甲錫烷 基-2- [4’ -經基苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶（附圖一、作業三）。此際，雙[三丁 基錫]的量，相對於反應基礎物而言，若是達到超過甚多的量則可以，具體 • 來說，相對於反應基礎物的6-溴-2·(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡陡而言， 莫耳數比爲1.5倍程度的話，就合於理想了。 [0 0 3 0] 並且，得到6位置的取代基係以三丁基甲錫烷基取代基以外的三烷基 甲錫烷基取代基所成之化合物的情形時，在作業三，用來取代三丁基錫的 物質，因應各種目的可以使用不同的三烷基錫。舉例來說，合成6位置取 代基爲三甲基甲錫烷基取代基的化合物時，在作業三，使用三甲基錫，也 17 200803903 會g進行與前述相同之反應，就可以了。 [ 0 0 3 1 ] . 再者，爲了得到6位置取代基係非放射性鹵素取代基的化合物，針對 鹵素取代基是溴的化合物，作業二所得到的化合物就此使用，是可以的； 針對鹵素取代基是氟、氯及碘的化合物，在作業二時，2-氨基-5-溴吡啶 (2-amino-5-bromo pyridine )的替代物，各別使用2-氨基-5-氟吡啶、2-氨基-5-氱吡啶及2_氨基碘吡啶，進行與作業二相同的反應就可以了。 # 【0 0 3 2 】 以6位置的氧原子爲介，得到鍵結取代基的化合物方面，在作業二，以2-氨基-5-羥基吡啶替代2-氨基-5-溴吡啶進行反應，合成2_(4’ _經基苯基)各 經基咪唑並[l，2-a]D比陡，在此於鹽基存在下，使其與希望導入的取代基漠化 物反麵話，就合於理想。舉例賴，爲了得到在6位置鍵結3·氟丙氧基 取代基的化合物，在碳酸鉀的存在下，使2-(4, _羥基苯基)_6_羥基咪唑並 [l.，2-a]吡啶和1-溴-3-氟丙烷發生反應就可以了。 【0 0 3 3 】 其次’爲了得到在6位置上以院基鏈爲介而鍵結取代基的化合物，若 進行如下操作就很好。例如，6位置的取代基，是3, 一溴丙基的化合物，在 作業一所得到的2-(4’ _經基苯基)咪唑並[1，2々]赃陡，使其與烯丙基三丁基 錫（allyltributyltin)反應，當轉化爲6-烯丙基-2、(4，_經基苯基)咪哩並[i，2_a] 吡D定後，進行硼氫化（hydroboration)及氧化反應，轉化爲2_(4，_經基苯 基)-6-(3’ -經基丙基)咪哩並[l，2-a]姐陡 18 200803903 (2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-(3’ -hydroxypropyl)imidazo[ 1，2-a]pyridi^^ 三苯基膦的存在下，藉由四溴化碳進行氫氧基的溴化，就可以了。 在前述化學式（1)中，A1、A2、A3及A4中之A1係氮的化合物、並且 前述化學式（2)中，A5、A6、A7及A8中之A5係氮的化合物，例如，在附 圖一之作業二，2-氨基-5-溴吡啶的替代物使用2-氨基-5-溴嘧啶 (2-amino-5-bromopyrimidine)以外，可以依照前述方法製造。 於前述化學式（1)中，A1、A2、A3及A4中之A2及A4係氮的化合物、 • 並且前述化學式（2)中，A5、A6、A7及A8中之A6及A8係氮的化合物，例 如，在附圖一之作業二，2-氨基-5-溴毗啶的替代物使用6-氨基-3-溴-1，2,4-三 嗪（6-amino3-bromo-l，2,4-triazine)以外，可以依照前述方法製造。 【0 0 3 4】 其次，以2-[4’ -經基苯基]各[1231]碘咪唑並[l，2-a]吡啶（2-[4’ -hydroxy pheny^-pIliodinerniidazofU-alpyridme)爲例，說明關於本發明另一方面 的放射性_素標示化合物的製造方法。 • 【0 0 3 5】 有關2-[4’ -經基苯基]-6-Π]碘咪唑並[l，2-a]吡啶的製造，首先，取得 供給標示的[1231]碘化鈉溶液’舉例來說，氣氣（xenongas)作爲標革巴’進行 質子（proton)照射，可以用一般所熟知的方法得到，將此以一般熟知的方 法所得到的[123ι]放射性碘做成严1]碘化鈉溶液，應用於標示上。 【0 0 3 6】 其次，將標示前驅物6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[U-a] 19 200803903 (6-tributylstannyl-2-[4， -hydroxyphenyl]imidazo[l,2-a]pyridine) 性有機溶劑中，加入前述[123I]碘化鈉溶液、酸及氧化劑，使之反應，得到目 標產物2-[4’ -羥基苯基]-6_Γΐ]碘咪唑並[1,2-a]吡啶（2-[4’妨加^ -6-[123I]iodineimidazo[l，2-a]pyndine)。作爲使前驅物溶解的惰性有機溶劑，可 以使用不會在前驅物和[1231]碘化鈉溶液之間發生反應的各種溶劑，較理想的 是可以使用甲醇。 [0037] • 酸，可以使用各種物質，較理想的是可以使用鹽酸。 氧化劑，只要能使反應液中的碘氧化的物質就可以，並沒有特別的限 制，較理想的是可以使用過氧化氫（hydrogenperoxide)或過醋酸（peracetic add)。氧化劑的添加量，能夠使反應溶液中的碘充分氧化的數量，是較好 的。 · 【0 0 3 8】 捵以外的放射性鹵素標示體，藉由用配合目的之放射性鹵素來標示， • 可以合成符合目的之前驅物。舉例來說，合成6-[18F]氟丙氧基-2-(4’ -羥基苯 基）咪哩並[i，2-a]D_^6-[18F]fluoropropoxy-2-(4’-hydroxyphenyl)imidaz〇U^ pyridm)的情形時，在相間移動催化劑和碳酸假的存在下，使標示前驅物 2-(4’ -羥基苯基)-6-(3’ -對甲苯硫醯氧代丙氧基）咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-(4，-hydroxyphenyl) -6-(3, -paratoluenesulfonyl oxypropoxy) imidazo[l,2-a] pyridin) SI[18F]氟化物反應，貝呵以達到目的。 【0 0 3 9】 20 200803903 本發明相關之診斷劑，與一般所知的放射性診斷劑相同，依照所要求 的本發明相關放射性鹵素標示化合物，調配在已適當調整酸鹼値的水或生 . 理食鹽水中、或者在林格氏液中，可以調製成爲溶液。在這種情形下，本 一 化合物的濃度，係已調配本化合物的安定性的濃度以下，是有必要得到的。 本化合物的投與量，爲了使投愈藥物的分布能影像化，只要數量足夠的話， 並沒有特別的限制。舉例來說，碘_123標示化合物及氟_18標示化合物的情 形時，體重60公斤的成人，一個人相當50〜6⑻百萬貝克(MBq)程度，可以 • 靜脈給藥或局部給藥來使用。投與後藥物的分布，可以藉由一般已知的方 法加以影像化，例如，碘_123標示化合物的情形時，用單光子射出電腦斷 層攝京’（Single Photon Emission Computed Tomography ; SPECT)裝置；氟-_18 木示不化合物的情形時，用正子射出斷層攝影（positr〇n Emission Tomography) 加以影像化。 【實施例】 [0 0 4 0] ⑩ 以下，記載實施例、比較例及參考例，對本發明更詳細地加以說明， 但是本發明並未侷限於這些內容。 再者，關於下列實施例，提供給實驗的各化合物名稱，如同附表一之 定義。 [0 04 1] 【附表一】 附表一在實施例所用評定化合物的化合物名稱 D匕合物名^—J 常用名_ 一 — 21 200803903 化合物1 6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪嗤並[l，2-a]吡啶 化合物2 2-(4’ -羥基苯基)各碘咪唑並[l，2-a]吡啶 化合物3 6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -經基苯_咪哗並[l，2-a]吡啶 化合物4 2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶 化合物5 -經基苯基)-6-碘咪唑並[l，2_a]吡啶 化合物6 鬥]_2-(4’ -經基苯基)-6-碘咪哗並[l，2-a]吡啶 化合物7 6-溴-2-(4，_羥基苯基)咪唑並[l，2-a]D比嗪 化合物8 2-(4’ -羥基苯基)-6-捵咪唑並[l，2-a]吡嗪 化合物9 [^冬钭’ _羥基苯基)各碘咪唑並[l，2-ap密啶 化合物10 [ί23Ι]-2-(4,-羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡嗪 化合物11 [1231]-2-(4’ -羥基苯基)-8-碘咪唑並[1，2-a]吡啶 [0 0 4 2】 (實施例1-1) 6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的合成 [0 0 4 3】 溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸乙酯（ethyl acetate) 50笔升，使其懸濁。將8·18公克4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone ) (相當60.0毫莫耳）溶解於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿（chloroform ) 的混合液中，將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後， 將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋酸乙 酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到的粗生成物， 用薄鍍砂凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography )(溶离隹 液：氯仿/甲醇二20/1)加以精製，然後從醋酸乙酯—石油醚進行再結晶， 得到 2-溴-4’ ·羥基乙醯苯（2-bromo- 4’ -hydroxyacetophdnone ) 7·25 公克（相 當33.7毫莫耳）（附圖一、作業一）。 [0 044] 將2善4’ ·羥基乙醯苯2.15公克（相當10.0毫莫耳）和2_氨基·5_溴吡 22 200803903 啶（2-amino-5-bromopyridine) 1·74公克（相當10.0毫莫耳）溶解於5〇毫升 乙腈（acetonitrile)中，在105°C油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反應 . 液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所 得到之粗結晶懸浮於20毫升水和20毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 入約25毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得到之 混合物過濾分離沉殿物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥，得到6-溴-2-(4’ -羥基苯_咪唑並[l，2-a]吡啶2· 41公克（相當8.32毫莫耳）（附圖一、作業 •二)。 [0 0 4 5] 將6-溴-2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶138毫克(相當0.476毫莫耳) 溶解於20毫升二嚼院（dioxane)，加入三乙胺2毫升後，再加入雙(三丁基 錫)360微升（相當0.713毫莫耳）和四個(三苯基膦)化鈀（tetrak1S(tnphenyl phosphine) palladmm⑼）20毫克（催化劑數量）。將反應混合物在90°C攪拌 22小時後，減壓將溶劑蒸餾除去，把殘渣用薄層色層分析法（溶離液：己 ® 烷/醋酸乙酯二1/4)加以精製。然後將所得到之粗生成物用循環分取高 壓液體色層分析（高壓液體色層分析裝置··日本分析工業公司製造之 LC-908，筒柱：日本分析工業公司製造之JAIGEL 2H、二個連結，移動相： 氯仿）加以精製，得到6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[U-a] 啦陡（6-tributylstannyl-2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo [l，2-a] ^ (相當94·9微莫耳）（附圖一、作業三）。 23 [0046] 200803903 所得到之6-三丁基甲錫院基-2-(4’ -經基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶的核 磁共振（NMR)測定結果（內部標準物質··四甲基砍[tetramethylsilane])，如 β 下所示。 [0 0 47] 使用的核磁共振裝置：爾M-ECP-500 (日本電子公司製造） iH—NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): 5 8.01-7.94 (m，1Η)、 7·71-7·67 (m，2H)、7,70-7.67 (m，1H)、7.64-7.60 (m，1Η)、7.20-7.11 (m，1H)、 • 6.89-6.85 (m，2H)、1.62-1.46 (m，6H)、1.34 (sext，/: 7·3 Hz，6H)、1.18-1.03 (m， 6H)、0.90(t,/=7.3Hz，9H)。 [0 0 48] 13C-NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：125MHz ): (5 157.85、145.11、144.72、 131.90、129.93、127.62、124.02、122.59、116.14、116.09、106.19、28.96、27.27、 13.62、9.81。 【0 0 4 9】 ® (實施例I·2) Π]·2-(4,-經基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶的合成 【0 0 5 0] 6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2_a]吡啶的甲醇溶液（濃 度:1毫克/毫升)53微升（// L )中，加入1莫耳/升之鹽酸75微升、136MBq 的C捵化鈉（容量爲40微升）、10%(W / V)過氧化氫1〇微升。將該混合 液在50°C靜置10分鐘後，用附有以下條件的高效能液相層析法（Hlgh performance liquid chromatography ; HPLC)，將[1251]-2-(4，-經基苯基)-6-碘咪哩 24 200803903 並[l，2-a]吡啶的部份（fraction)分離取得。 [0 0 5 1] HPLC之條件： 筒柱：Phenomenex Luna C18 (商品名，Phenomenex 公司製造，規格：4·6 X150 毫米） 移動相:0.1%三氟醋酸/乙腈=20/80—0/100 (17分鐘，直線斜率） 流速：1.0毫升/分鐘 φ 檢測器：紫外線可見光吸光光度計（檢測波長：282nm)及放射線檢測器（型 式：STEFFI型，瓜观贫公司製造) 【0 0 5 2] 於該分離部分加入水10毫升後，把該液體放入逆相筒柱（商品名： Sep-Pak Light C18 Cartridres，Waters公司製造，充塡劑之充塡量：130毫克） 中沖提之，將[1251]-2-(4’ -羥基苯基)各碘咪唑並[1,2-a]吡啶吸著捕集於該筒 柱。用1毫升水洗淨該筒柱後，再用1毫升乙醇沖提之，使Π]-2-(4’ -經基 • 苯基)各碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶出，所得到的放射能量在剛合成後係 37.5MBq。又，依據以下條件，用薄層層析法（TLC)測定時，其放射化學 純度係96.5%。 [0 0 5 3] 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC玻璃板·· RP-18F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相：甲醇/水=2〇/1 25 200803903 檢測器：Bio-Imaging Analyzer, BAS-2500 (型式：BAS-2500，富士照相底片 公司製造） 【0 0 5 4】 (實施例1-3) [1231]-2-(4’ -經基苯基)各捵咪唑並[l，2-a]吡啶的合成 [0 0 5 5] 6-三丁基甲錫院基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶的甲醇溶液（濃 度：1毫克/毫升）70微升（//L)中，加入1莫耳/升之鹽酸75〜100微 • 升、236〜454MBq的[1231]碘化鈉（容量爲15〜120微升）、1毫莫耳碘化鈉溶 液7.5〜10微升、10%(W / V)過氧化氫10〜15微升。將該混合液在50°C加 熱10分鐘後，以與實施例1-2相同條件的高效能液相層析法，將Γΐ>2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶的部份(fraction)分離取得，得到[1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶。 [0 0 5 6] 方令該分離部分加入水10毫升後，把該液體放入逆相筒柱（商品名： _ Sep-Pak Light C18 Cartridres，Waters公司製造，充塡劑之充塡量：130毫克） 中沖提之，使严1]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶吸著捕集於該筒 柱。用1毫升水洗淨該筒柱後，再用1毫升二乙基醚沖提之，使Π]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶出，所得到的放射能量在剛合成後係21 〜180MBq。又，依據與實施例1-2相同條件，用薄層層析法（TLC)測定時/ 其放射化學純度係99.5% 〇 [0 0 5 7] 26 200803903 (實施例Ι·4) 6·溴-2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的合成 [0 0 5 8] 在溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫开，、 使其懸濁，然後加入4’ -羥基乙醯苯8·18公克（相當60Ό毫莫耳）溶於5〇 毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶液，加熱進行回流，5小時以 後，將反應液冷卻至室溫，進行過瀘，將濾液減壓濃縮之。將殘瘡溶 醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過濾溶液，加以濃縮。所胃ifJ • 之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶離液:氯仿/甲醇=2〇/1)加以精製，然後從醋酸乙 酯—石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2七1*〇111〇-4’ -hydroxyacetophenone) 7.25 公克（相當 33.7 毫莫耳）（附圖二、作業〜^ 【0 0 5 9] 將2-溴-4’ -經基乙醯苯2.15公克（相當10.0毫莫耳）和2屬基丨 D定（2-amino-5-bromopyridine) 1.74 公克（相當 1〇·〇 毫旲耳）溶解於 ％ ⑩ 乙腈（acetonitrile)中，在105°C的油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反 應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將 所得到之粗結晶懸浮於20毫升水和20毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中 加入約25毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得到 之混合物過濾分離沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥，得到6-溴 -2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶2· 41公克（相當8·32毫莫耳）（附圖二、 作業二）。 27 200803903 [0060] 所得到之6-溴-2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的核磁共振（NMR) 測定結果（內部標準物質：二甲基亞礪[(1111^11咖1111(»此])，如下所示。 [0 0 6 1] 使用的核磁共振裝置：MM-ECP-500 (日本電子公司製造） ΐ—NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：500MHz) : (59.54 (k· s， 1H )，8.83-8.81 (m，1H )，8.17 (s，1H )，7.79-7.74 (m，2H )，7.51 (d，/= 9·6 Hz， # 1H)，7·30 (dd，/= 9·6,1.8 Hz，1H)，6·86-6·81 (m，2H)。 [0 0 6 2] 13C—NMR (溶劑：重二甲基亞楓、共振頻率：125MHz) : 5158.15， 146.40，143.79，127.82，127.67，127.14，125.01，117.87，116.15，108.60， 106.05。 [0 0 6 3] (實施例1-5) 2-(4’ -經基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶的合成 •【0 0 6 4】 在溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 使其懸濁，然後加入4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone) 8.18公克 (相當60.0毫莫耳)溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流，5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液 減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過 濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash 28 200803903 silicagel column chromatography)(溶離液··氯仿/甲醇二20/1)加以精製， 然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ #莖基乙醯苯^七^^士 4’ -hydimyacetophenone) 7.25 公克（相當 33·7 毫莫耳）（附圖三、作業一）。 [0 0 6 5] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯441毫克（相當2.0毫莫耳）和2_氨基_5_碘口比 陡（2-amino-5-iQdopyridine) 449毫克（相當2.0毫莫耳）溶解於μ毫升乙膳 (acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流5小時。反應結束後，將反應液 # ，冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得 到之粗結晶懸浮於10毫升水和10毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加λ 約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得到之混 合物過濾分離沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥，得到2_(4，巧其 苯基)各碘咪哩並[l，2-a]吡啶526毫克(相當1.56毫莫耳X附圖三、作業一）。 [0 0 6 6] 所得到之2-(4’ -羥基苯基)各碘-咪唑並[l，2-a]吡啶的核磁共振（nmr) ⑩ 測疋結果（內邰標準物質：一甲基亞颯[dimethylsulfoxide])，如下所〒 [0 0 6 7] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） 它一NMR (溶劑：重二甲基亞楓、共振頻率：500MHz) ·· δ 8·86、8私^ 1Η)’ 8.14 (s，1Η)’ 7.78-7.74 (m，2Η )，7.40-7.35 (m，2Η )，6·86‘6·82 (m )。 【0068】 13C—NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：^ΜΗζ) : δΐ58〇8， 29 200803903 145.87，143.87，132,48，13L72，127.67，124.99，118.14，116.14，108.02， 75.85。 [0 0 6 9] (實施例1-6) 2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶的合成 [0 070] 在溴化銅28· 17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 使其懸濁，然後加入4’ -經基乙醯苯（4，-hydroxyacetophenone) 8.18公克 ® (相當60.0毫莫耳）溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流，5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液 減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過 濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶離液：氯仿/甲醇=20/1)加以精製， 然後從醋酸乙酯一石油醚進彳了再結晶，得到2-溴-4’ -經基乙醯苯（2%〇111〇-4’ -hydroxyacetophenone) 7.25 公克（相當 33.7 毫莫耳）（附圖四、作業一）。 •【0 0 7 1】 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯646毫克（相當3.0毫莫耳)和2-氨基j捵嘧 陡（2-amino-5-iodopyrimidine) 668毫克（相當3.0毫莫耳）溶解於15毫升乙 腈（acetonitrile).中，在110°C的油浴加熱回流8小時。反應結束後，將反應 液冷卻至室溫，過濾分離沉殿物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所 得到之粗結晶懸浮於10毫升水和10毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 入約15毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動3分鐘。從所得到之 30 200803903 混合物過濾分離沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥，得到2-(4’ -羥 基苯基>6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶737毫克（相當2·19毫莫耳）（附圖四、作業 二)。 .

[0 0 7 21 所得到之2-(4’ -羥基苯基)-6-碘-咪唑並[l，2-a]嘧啶的核磁共振（NMR) 測定結果（內部標準物質：二甲基亞颯[出11^1：1^1111'€^(^])，如下所示。 【0 0 7 3】 # 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） 它一NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：500MHz) : 59.80(to. s， 1H)，9·35 (d，/= 2·3 Hz，1H)，8.60 (d，/= 13 Hz, 1H)，8.23 (s，1H)，7.94_7.9〇 (m，2H)，6.98-6.94 (m，2H)。 [0 0 7 4] 13C-NMR (溶劑：重二甲基亞砸、共振頻率：125MHz) : 5 158.87， 154.00，147.18，146.77，139.07，127.68，124.50，115.85，106.10，73.46。 •【0075】 (實施例1-7)6-(3’-氟丙氧基)-2-(4’-羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，2啕吡啶的 合成 【0076】 將 2-溴-3-經基咖定（2-bromo-3-hydroxypyridine ) 31.11 公克（相當 178.88 毫莫耳）溶解於二甲基亞颯95.8毫升中，於該溶液中加入1莫耳/公升之 甲醇鈉（sodiummethoxide) —甲醇溶液89.9毫升（相當89.9毫莫耳）後， 31 200803903 將反應液加熱至90°C，餾去甲醇。將反應液冷卻至5°C以下後，加入29.2 公克之甲基碘（methyl wduie)(相當205.62毫莫耳），在室溫中攪拌17小時。 反應結束後，將反應液注入冰水中，用氯仿抽提出來，操作二次。將氯仿 層合倂.，用1莫耳/公升之氫氧化鈉洗淨後，再用飽和食鹽水洗淨，操作 二次，用無水硫酸鈉乾燥後，減壓下除去溶劑，得到2-溴-3-甲氧基吡啶 (2-bromo-3-methoxypyridine) 20,74 公克（相當 110.31 毫莫耳）（附圖五、作 . 茉一）。 • 【0 0 7 7】 將濃硫酸83毫升冷卻至-5°C，再謹填地加入90%硝酸83毫升後，又謹 慎地加入2-溴-3-甲氧基吡啶20.69公克（相當110.04毫莫耳）。反應混合物 在冰浴下攪拌5分鐘後，在室溫中攪拌10分鐘，然後加熱至55°C攪拌1小 時。將反應液冷卻至室溫後，少量連續地注入冰中使其生成沉澱物，將沉 澱物過濾取得後，用水洗淨。在五氧化二磷存在下減壓使沉澱物乾燥，得 到 2-溴-3-甲氧基-6-硝基咖定（2%omo-3-methoxy-6-nitropyridine) 17.41 公克 • (相當74.71毫莫耳）（附圖五、作業二）。 [0 0 7 8】 2-溴-3-甲氧基-6-硝基啦D定（2-bromo-3-methoxy-6-nitropyridine) 17.36 公 克（相當74·50毫莫耳）溶解於乙醇520毫升，在氬氣環境下加入披鈀木炭 (palladiumcharcoal) (50%重量比）11.63 公克後，滴入一水合肼（hydrazin hydrate) 88.4毫升。將此混合物加熱回流45分鐘後，冷卻至室溫，過瀘披 鈀木炭，然後用乙醇洗淨過濾物，將洗淨液和濾液合倂一起。減壓下，將 32 200803903 此混合液濃縮，再接著減壓蒸餾，得到2-氨基-5-甲氧基吡啶 (2-amino-5-methoxypyridine) 8.14 公克（相當 65.57 毫莫耳）（附圖五、作業 三）。 [0 0 7 9】 將 4’ -苯醯氧基乙醯苯（4’ -benzoyloxyacetophenone) 13.50 公克（相 當59.66毫莫耳)溶解於甲醇1100毫升中，加入四-正-丁基三溴錢(tetra_n_butyl ammonium tribromide) 34.52公克（相當71.59毫莫耳），在室溫下攪拌整夜。 鲁 減壓餾去溶劑，將殘渣溶解於醋酸乙酯中，用水將此洗淨二次後，用飽和 食鹽水洗淨。醋酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥後，減壓下濃縮之，所得到的 •粗生成物，再用矽凝膠筒柱色層分析法（溶離液：己烷/甲叉二氯(methylene chloride)= 1/1)加以精製，得到4’ -苯醯氧基-2-漠乙釀苯 (4’ -benzoyloxy-2-bromo acetophenone) 13.38 公克（相當 43.84 毫莫耳）（附 圖五、作業四）。 — [0 0 8 0】 _ 將 4 -苯酿氧基-2-溴乙醯苯（4’ -benzoyloxy-2-bromo acetophenone) 13.33公克(相當43.68毫莫耳)和2-氨基-5-甲氧基咖定5.67公克(相當45.67 毫莫耳）溶解於乙醇481毫升中，加熱回流2小時。反應液冷卻後，加入碳 酸氫鈉6·64公克（相當79.09毫莫耳），接著使反應混合物加熱回流4小時。 反應結束後，減壓濃縮溶劑，將殘渣溶解於氯仿中，用水洗淨。氯仿層用 無水硫酸鈉乾燥後，減壓下餾去溶劑，所得到的粗生成物，再用矽凝膠筒 柱@層分析法（溶離液：氯仿/醋酸乙酯= 20/1)加以精製，得到2-(4’ - 33 200803903 苯醯氧基苯基)各甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶（2-(4’ -benzoyloxyphenyl) -6-methoxyimidazo[l，2-a]pyridine) 10.20 公克（相當 30.87 毫莫耳）（附圖五、 作業五）。 [00 8 1] 將經過充分乾燥除去水分的2-(4’ -苯醯氧基苯基)-6-甲氧基咪唑並 [1,2-a]吡啶4.90公克（相當14.83毫莫耳）溶解於氯仿245毫升中，冷卻至 -15°C。將三溴化硼12.62毫升（相當133.48毫莫耳）溶解於134毫升二氯甲 參 烷所形成之溶液滴入前述冷卻液中，溫度上升至室溫後攪拌17小時。反應 結束後，將反應液冰冷下來，加入甲醇668毫升，然後在室溫下攪拌3小時 以後，減壓下將反應物濃縮。所得到的粗生成物中加入氯仿290毫升和甲 醇29毫升，再壓成漿後，過濾分離沉澱物。用氯仿將過濾分離的沉澱物洗 淨後，減壓下進行乾燥，得到2-(4’ -經基苯基)各羥基咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-hydroxy imidazo [l，2-a] pyridine ) 3.00 公克（相當 .13.28毫莫耳）（附圖五、作業六）。 # [0 0 8 2] 2-(4’ -經基苯基)-6-羥基咪唑並[l，2-a]吡啶560毫克（相當2.48毫莫耳） 溶角军於21毫升的二甲基甲醯胺（dimethylformamide)中，加入碳酸鉀1.37 公克（相當9·90毫莫耳）及1-溴各氟丙烷（1-1τοιηο-3-ίΙιιο：Γ〇ρΐΌρΗη6349)毫 克（相當2.48毫莫耳），在室溫下攪拌24小時。減壓下將反應液濃縮後， 加入氯仿10毫升及甲醇10毫升，再壓成槳（repulp )，過濾之。將濾液濃縮， 所得到的粗生成物用矽凝膠筒柱色層分析法（溶離液：氯仿/甲醇=20 : 1) 34 200803903 加以精製，得到6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-(3’ -fluoropropoxy)-2-(4’ -hydoxyphenyl)imidazo[l,2-a]pyridine) 151 毫克 (相當0.527微莫耳(// mol))(附圖五、作業七）。 【0 0 8 3】 ’ 所得到之6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的核磁 共振（^0\叹）測定結果（內部標準物質：二甲基亞颯[出]116%18111&^(16])， 如下所示。 · [0 0 8 4] 使用的核磁共振裝置·· JNM-GSX-270 (日本電子公司製造） ΐ—ΝΜΙΙ(溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率·· 270MHz) ·· (59.52 (s，1H)， 8.22 (d，/= 2.2 Hz，1H)，8.08 (s，1H)，7.75-7.65 (m，2H)，7.44 (d，/= 9.6 Hz， 1H) ^ 6.99 (dd, /= 9.6, 2.2 Hz, 1H) ^ 6.85-6.75 (m, 2H) ^ 4.62 (dt? 2Jhf= 47.0 Hz, / =6·0 Hz，2H)，4Ό5 (t，7 = 6.0 Hz，2H)，2.13 ( dquint，/7价=25.9 Hz，/= 6.0 Hz， 2H)。 [0 0 8 5] (實施例1-8) 6-溴-2-(4’ -經基苯基）咪唑並[l，2-a]嘧啶的合成 [0 0 8 6] 在溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 使其懸濁，然後加入4’ -羥基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone) 8·18公克 (相當60Ό毫莫耳）溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流。5小時以後，將反應混合物冷卻至室溫，進行過濾，將 35 200803903 濾液減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後， 過濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法(flash silicagd column chromatography)(溶离隹液··氯仿/甲醇=20/1)加以精製， 然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2%〇111〇-4’ -hydroxyacetophenone ) 7.25 公克（相當 33.7 毫莫耳）（附圖六、作業一）。 [00 8 7] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯748毫克（相當3·5毫莫耳）和2-氨基-5-溴嘧 _ 陡（2-amino5-bromopyrimidine ) 605毫克（相當3·5毫莫耳）溶解於30毫升 乙腈（acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流5小時。反應結束後，將反 應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燥。 將所得到之粗結晶懸浮於10毫升水和10毫升甲醇之混合液中，使其成爲懸 浮液。於該懸濁液中加入約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振 動5分鐘。從所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使 之乾燥，得到之粗生成物用N，N-二甲基甲醯胺再結晶，得到6-溴^4’邁 參 基苯基）咪唑並[l，2-a赠啶（6-bromo -2-(4’ -hydroxyphenyl)imidazo[l，2-a]pyrimidine) 289 毫克（相當 0.997 毫莫耳） (附圖六、作業二）。 [0088] 所得到之6-溴-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]嘧啶的核磁共振（nmr) 測定結果（內部標準物質：二甲基亞颯_116%1811比(》^])，如下所示。 [0089] 36 200803903 使用的核磁共振裝置：JTNM-ECP-500 (日本電子公司製造） 它一NMR (溶劑··重二甲基亞颯、共振頻率：5〇〇MHz) : 5956(br.s, • )，9.21 (d, /- 2.5 Hz，1H) ’ 8·46 (d，/二 2.5 Hz，1H) ’ 8.09 (s 1H)，7 79-7 75 (m，2H)，6.83-6.79 (m，2H)。 【0 0 9 0】 13C—NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：i25MHz) : δ 158.63， 149.99，147.68，146.88，134·78，127.93，124·52，116·23，106.83，103.94。 • 【0 0 9 1】 (實施例1-9) 6-氟-2-(4’ -經基苯基)咪哩並[l，2-a]吡啶的合成 [0 0 9 21 在溴化銅40.0公克（相當179毫莫耳）中，加入醋酸乙酯70毫升，使 其懸濁，然後力D入4 -經基乙酸苯（4’ -hydroxyacetophenone ) 11.6公克（相 當85.3毫莫耳）溶於70毫升醋酸乙酯和70毫升氯仿混合液所成之溶液， 加熱進行回流。5·5小時以後，將反應混合物冷卻至室溫，進行過濾、，將瀘 % 液減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後， 過濾溶'液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法(flash silicagel column chromatography)(溶離液：氯仿/甲醇=20/1)力口以精製， 然後從醋酸乙酯-石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯、(2%〇111〇-4’ -hydroxyacetophenone ) 10.2 公克（相當 47.3 毫莫耳）（附圖七、作業一）。 【0 0 9 3】 將2-溴-4’ -經基乙醯苯439毫克（相當2.0毫莫耳）和2-氨基-5-氟吡 37 200803903 啶（2-ammo-5-fluoropyridine) 224毫克（相當2·0毫莫耳）溶解於20毫升乙 腈（acetonitrile)中，在ll〇°C的油浴加熱回流5小時。反應結束後，將反應 .液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燥。將 所得到之粗結晶溶解於§毫升水和§毫升甲醇之混合液以後，於該溶液中 加入約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液’用超苜波洗淨器振動5分鐘。從所得到 之混合物過濾分離所生成之沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥，得 到之粗生成物用N，N-二甲基甲醯胺再結晶，得到6-氟-2-(4’ -羥基苯基）咪 哩並[l，2-a]啦Q定（6-伽oro-2-(4’ -hydroxyphenyl)imidazo[l，2-a]pyridh^ 克（相當1·32毫莫耳）（附圖七、作業二）。‘ [0 0 9 4] 所得到之6-氟-2-(4’ -經基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶的核磁共振（NMR) 測定結果（內部標準物質：二甲基亞颯[出!加％細11〇1此])，如下所示。 【0 0 9 5】 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） iH—NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：500MHz) : 59.45 (br. s， 1H)，8.65 (ddd，J如二 4·6 Hz，/= 2.5,0.7 Hz，1H)，8.16-8.15 (m，1H)，7·75-7·69 (m, 2H)，7.56-7.51 (m，1H)，7.23 (ddd，8·4 Hz，/二 9.9,15 Hz，1H)，6.82-6.76 (nUH) 0 【0096】 13C—NMR(溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：125MHz): 5 157.82,152.81 (d，232.3 Hz) ’ 146·58 ’ 142.92 ’ 127.35 ’ 124·99 ’ 117.19 (d，9·6 Hz)， 38 200803903 116.40(d，/c’= 25.9 Hz)，115.89，113.66 Hz)，109·48。 [0 〇 9 7 ] ’ F—NMR (i谷劑.重—^甲基亞砸、共振頻率：470MHz ): 5 14L93(br. s)。 【0 0 9 8】 (實施例1-1〇)2-(4’-羥基苯基)-6-硝基咪唑並[1，2々]吡啶的合成 [0 0 9 9] 在溴化銅40.0公克（相當179毫莫耳)中，加入醋酸乙酯70毫升，使 _ 其懸濁，然働Π入4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone ) 1L6公克（相 當85.3毫莫耳）溶於70毫升醋酸乙酯和70毫升氯仿混合液所成之溶液， 加熱進行回流。5.5小時以後，將反應混合物冷卻至室溫，進行過濾，將濾 液減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後， 過濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法(flash silicagel column chromatography)(溶離液：氯仿/甲醇=20/1)加以精製， 然後從醋酸乙酯-石油醚進行再結晶，得到2-溴4’ -羥基乙醯苯(2-bromo _ 4’ -hydroxyacetophenone) 10.2 公克（相當 47.3 毫莫耳）（附圖八、作業一）。 [0!0〇] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯432毫克（相當2.0毫莫耳）和2-氨基-5-硝基 咖定（2-amino-5-nitropyridine ) 279毫克（相當2·0毫莫耳）溶解於20毫升 乙腈（acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反 應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燦。 將所得到之粗結晶懸浮於8毫升水和8毫升甲醇之混合液以後，於該懸濁 39 200803903 液中加入約8毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動3分鐘。從所 得到之混合物過瀘分離所生成之沉澱物，用水好好洗淨，減壓下使之乾燥， 得到 2-(4’ 袭基苯基)-6-硝基咪哩並[l，2-a]咖定(2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-nitro imidazo[l，2-a]pyridine) 148 毫克（相當 0.580 毫莫耳）（附圖八、作業二）。 [0 10 1] 所得到之2-(4’ _羥基苯基)-6-硝基咪唑並[1，2-a]吡啶的核磁共振(NMR ) 測定結果（內邰標準物質：二甲基亞颯[出11^1:1^18111£(^(16])，如下所示。 ， 【0 1〇2】 使用的核磁共振裝置·· JNM-ECP-500 (曰本電子公司製造） 它-NMR (溶劑:重二甲基亞颯、共振頻率:500MHz): δ 9.74-9.72 (m， 1H) ^ 9.59 (br. s, 1H) > 8.39 (s, 1H) ^ 7.87 (dd, /- 9.9, 2.3 Hz, 1H) ^ 7.79-7.74 (m, 2H)，7.65-7.61 (m，1H)，6.84-6.80 (nv2H)。 [0 10 3] 13C—NMR (溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：125MHz) : 5158.47.， • 148.51，145.25，136.63，127.93，127.81，124·06，118.92，116.09，115.92， 110.37。 【0104】 (實施例Π4)6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]嘧啶的合 成 【0105] 在溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 200803903 使其懸濁，然後加入4’-羥基乙醯苯（4’妨(±'(^&〇61邵]1611〇116)8.18公克 (相當60.0毫莫耳）溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流。5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液 減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過 濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶離液：氯仿/甲醇=20/1)加以精製， 然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2%〇皿> 藝 4’ -hydroxyacetophenone ) 7.25公克（相當33.7毫莫耳）（附圖十、作業一）。 [0106] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯748毫克（相當3.48毫莫耳）和5-溴-2-氨基嘧 陡（5-bromo-2-aminopyrimidine) 605 毫克（相當 3.48 毫莫耳）溶解於 30 毫 升乙腈（acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流5小時。反應結束後，將 反應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燥。 將所得到之粗結晶懸浮於10毫升水和15毫升甲醇之混合液以後，於該懸濁 • 液中加入約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。所得 到之固體用二甲基甲醯胺(dimethylforamide; DMF)再結晶，得到6-溴-2-(4’ -經基苯基)咪π坐並[l，2-a]喃陡（6七rc)mo2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyrimidine) 289 毫克（相當 1.00 毫莫耳）（附圖十、作業二）。 [0107] 將6-溴-2-(4’ -經基苯基)咪唑並[l，2-a]嘧啶75.4毫克（相當0.260毫莫 耳）溶解於1〇·〇毫升之二卩惡院（dioxane)中，加入三乙胺（triethylamine) 41 200803903 2.0毫升後，再加入雙[三丁基錫](bis[tributyl tin]) 0.20毫升（相當0.39毫莫 耳）及四個(三苯基膦)化銷（tetralds (triphenylphosphine)palladiiim⑼）20.1 毫 克（催化劑量）。將反應混合物於9(TC攪拌10小時以後，減壓下餾去溶劑， 殘渣用薄鑛砂凝膠筒柱色層分析法(flash silicagel column chromatography )(溶 離液：己烷/醋酸乙酯= 1/1)加以精製，得到6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -‘羥基苯基）咪唑並[l，2-a]嘧啶 (6-tributylstannyl-2-[ 4’ _hydroxyphenyl]imidazo[l，2-a]pyrimidin^ • 當0,048毫莫耳）（附圖十、作業三）。 【0108】 所得到之6_三丁基甲錫院基_2-[4’ -經基苯基]咪唑並[1,2-a]嘧啶的核 磁共振（NMR)測定結果（內部標準物質：四甲基砂[tetramethylsUane])，如 下所示。 [0109] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） # iH-NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): (5 8.41 (s, 1H)，8.23 (s， 1H)，7.80 (d，/= 8·7 Hz，2H)，7.63 (s，1H)，6.93 (d, /= 8.7 Hz，2H)，1.57-1.51 (m， 6H)，1.37-1.23 (m，6H)，1.16-1.12 (m，6H)，0.88 (d，/= 7.3 Hz，9H)。 【0110】 (實施例II-2) 6-三丁基甲錫院基-2-(4’ -經基苯基）咪唑並[l，2-a]吡嗪的 合成 【0 111] 42 200803903 在溴化銅28.17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 使其懸濁，然後加入4’-經基乙醯苯（4’妨(1]：(^3〇611她611〇1^)8.18公克 (相當60.0毫莫耳)溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流。5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液 減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過 濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶离隹液··氯仿/甲醇=20/1)加以精製， i 然後從醋酸乙酯-石油醚進行再結晶’得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2-bromo- 4’ -hydroxyacetophenone)7.25 公克（相當 33.7 毫莫耳）（附圖十一、作業一）。 【0 112】 將2-溴-4’ -經基乙醯苯4.66公克（相當2L6毫莫耳）和5-溴-2-氨基吡 嗪（5%omo-2-aminopyrazine) 2.53公克（相當14.5毫莫耳）溶解於1〇〇毫升 乙腈（acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流3.5小時。反應結束後，將 反應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燥。 馨將所得到之粗結晶懸浮於10毫升水和10毫升甲醇之混合液以後，於該懸濁 液中加入約20毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動1〇分鐘。從所 得到之混合物過濾分離沉澱物，用水加以洗淨，減壓下使其乾燥。得到6-溴_2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡嗪（6-bromo-2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyrazine) 1.32 公克（相當 4.55 毫莫耳）（附圖十一、作業二）。 [0113] 將6-溴-2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[1,2-a]吡嗪1·00公克（相當3.45毫莫 43 【0124】 200803903 將8-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶75·2毫克（相當0.260毫莫 耳）溶解於10.0毫升之二嚼院（dioxane)中，加入三乙胺（triethylamine) 2.0毫升後，再加入雙[三丁基錫](bis[tributyl tin]) 0.20毫升（相當0.39毫莫 耳）及四個(三苯基膦)化銷（tetrakis(triphenylphosphine)panadium⑼）20·1 毫 克（催化劑量）。將反應混合物於90t：攪拌11小時以後，減壓下餾去溶劑， 殘渣用薄鍍砂凝膠筒柱色層分析法(flash silicagel column chromatography )(溶 • 離液：己烷/醋酸乙酯= 1/1)加以精製，得到8-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶（8-tnbutyl stannyl-2-[4’ -hydroxyphenyl]imidazo[l,2-a]pyridme) 62.5 毫克（相當 0.125 毫 莫耳）（附圖十三、作業三）。 [0125】 戶斤得到之8-二丁基甲錫院基-2-[4 -¾基苯基]味ϋ坐並[l，2-a]卩比陡的核磁 共振^]\4幻測疋結果（內部標準物質：四甲基砂扣1：!^1116断18如11€])，如下 _所示。 [0126】 使用的核磁共振裝置：MM-ECP-50CK日本電子公司製造） 它一NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz) : (5 8Ol(d，/二 6.4 Hz， 1H)，7·87 (d，/二 8·7 Hz，2H)，7.70 (s，1H)，7·17 (d，6·4 Hz，1H)，6·87 (d，/ 二 8.7 Hz，2H)，6,68-6.66 (m，1H)，1.69-1.56 (m，6H)，1·38-1·30 (m，6H)，1.28-1.16 (m，6H)，0.88(t，/=7.3Hz，9H)。 、 47 200803903 耳）溶解於50.0毫升之二噁烷（dioxane)中，加入三乙胺（triethylamine) 20毫升後，再加入雙[三丁基錫](bis[tributyltin]) 4.5毫升（相當5.18毫莫 耳）及四個(三苯基膦)化钯（tetrakis (triphenyl phosphine)paUadium(O)) 239 毫 克（催化劑量）。將反應混合物於9〇°C攪拌24小時以後，減壓下餾去溶劑， 殘渣用薄鍍ϊ夕凝膠筒柱色層分析法(flash silicagel column chromatography)(溶 離液:己烷/醋酸乙酯= 1/1)加以精製，得到6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[1,2-a]吡嗪 (6-tributylstannyl-2-[ 4’ -hydroxyphenyl]imidazo[l，2-a]pyrari^ 當0.628毫莫耳）（附圖十一、作業三）。 [0 114】 所得到之6-三丁基甲錫院基-2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[l，2-a]吡嗪的核 磁共振（NMR)測定結果（內部標準物質·四甲基砍[tetramethylsilane])，如 下所示。 [0115] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） ^—NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz) : 59.21 (s，1H).，7·95 (s, 1Η)，7.79 (d，/= 8.7 Ηζ，2Η)，7·77 (s，1Η)，6.91 (d，/= 8.7 Ηζ，2Η)，1.7(M.55 (m, 6H)，1.384.31 (m, 6H)，1.18-1.15 (m，6H)，0.89 (d，/二 7·3 Hz，9H)。 【0116】 13C—NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): (Π57.3，146.4，143.5， 140.3，128Ό，124.9，123·6，116.1，106.9，29.0，27.3，13.7，10.0。 44 200803903 【0 117】 (實施例Π-3) 2-(4’ -羥基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡嗪的合成 [0118] 在實施例Π-2所得到的6-三丁基甲錫烷基冬[4’ -羥基苯基]咪唑並 [l，2-a]吡嗪314毫克（相當0.628毫莫耳)溶解於5.0毫升的二氯甲烷 (dichloromethane)，加入溶解於相同5.0毫升的二氯甲烷的捵114毫克（相 當〇·942毫莫耳)。將反應混合物在(TC攪拌10分鐘、在室溫攪拌30小時後， φ 加入飽和碳酸氫鈉水溶液及飽合硫代硫酸鈉水溶液，將沉澱物過濾分離 後，依序用水、醋酸乙酯洗淨，減壓下使其乾燥，得到2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪口坐並[l，2-a]吡嗪（2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-iodoimidazo[l，2-a]p^ 131毫克（相當0.389毫莫耳）（附圖十二、作業一）。 [0119] 所得到之2-(4’ -羥基苯基)各碘咪唑並[l，2-a]吡嗪的核磁共振(NMR) 測定結果（內部標準物質：四甲基砍[tetramethylsilane])，如下所示。 _ 【0 1 2 0】 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） 1H—NMR(溶劑:重二甲基甲醯胺、共振頻率：500MHZ):59.89(S，1H)， 9.01 (s, 1H)，8.82, (s，1H)，8.42 (s，1H)，7·92 (d，/= 8·7 Hz，2H)，6·93 (d，/= 8.7

Hz, ffi)。 【0121】 (實施例II-4) 8-三丁基甲錫院基-2-(4’ -經基苯基）咪哩並[i，2_a]吡陡的 45 200803903 合成 [0122] 在溴化銅28·17公克（相當126毫莫耳）中，加入醋酸乙酯50毫升， 使其懸濁，然後加入4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxyacetophenone) 8.18公克 (相當60.0毫莫耳）溶於50毫升醋酸乙酯和50毫升氯仿混合液所成之溶 液，加熱進行回流。5小時以後，將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液 減壓濃縮之。將殘渣溶解於醋酸乙酯中，加入活性碳進行脫色作業後，過 馨 濾溶液，加以濃縮。所得到之粗生成物用薄鍍矽凝膠筒柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶离隹液：氯仿/甲醇=20/1)力口以精製， 然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙醯苯（2%〇111〇 4’ -hydroxyacetophenone)7.25公克（相當33.7毫莫耳）（附圖十三、作業一）。 [0 12 3] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯432毫克（相當2.01毫莫耳）和3-溴冬氨基吡 陡（3-bromo-2-aminopyridine) 348毫克（相當2.01毫莫耳)溶解於20毫升 ⑩ 乙腈（acetonitrile)中，在110°C的油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反 應液冷卻至室溫，過濾分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓下使其乾燥。 將所得到之粗結晶懸浮於8毫升水和8毫升甲醇之混合液以後，於該懸濁 液中加入約8毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超首波洗淨器振動5分鐘。從戶斤 得到之混合物過濾分離沉澱物，用水加以洗淨，減壓下使其乾燥。得到8-溴_2-(4’ -羥基苯基)咪哩並[l，2-a]吡啶（8-bromo-2-(4，-hydrcxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyridine) 368毫克（相當1.27毫莫耳）（附圖十三、作業二）。 46 200803903 [0 12 7】 13C—NMR (溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): 5145.2，141.0，139.2， 132.4，131·8，127·7，127·3，125.0，115.4，1122，106.4，29.2，27·4，13·7， 10.2。 [0 12 8] (實施例ΙΙ-5) Γΐ]-2-(4’ -羥基苯基)各碘咪唑並[Ha]嘧啶的合成 [0129] 鲁 6-二丁基甲錫院基-2-(4 -經基本基)味π坐並[i，2-a]嚼H定的甲醇溶液（濃 度·· 1毫克/毫升）100微升中，加入2莫耳/升的鹽酸1〇〇微升、621MBq 的Γΐ]碘化鈉溶液（以容量計，150微升）、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液20 - 微升、10%(W/V)過氧化氫20微升。將該混合液在50°C加熱10分鐘後，與 實施例1-2相同條件的高效能液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)，將[i23I]-2-(4’ -經基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶的部 份（fraction)分離取出，得到严1]-2-(4’ -經基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶 ⑩ （[1231]-2-(4’ -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a]pyrimidine )。 [0 13 0] •不進行與前項相同之作業而得到[1231]-2-(4’ -經基苯基)各碘咪唑並 [l，2-a]嘧啶《試劑添加量：6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -經基苯基)咪唑並Ha] 嘧啶的甲醇溶液（濃度：1毫克/毫升）150微升、2莫耳/升的鹽酸75微 升、487MBq的[1231]碘化鈉溶液（以容量計，150微升）、1毫莫耳/升的碘 化鈉溶液20微升、10%(W/V)過氧化氫30微升》。 48 200803903 【0131】 將藉由前項及前前項的作業所得到之兩部份混合，並加入水毫升後 之溶液，流過逆向筒柱（商品名：Sep-Pak Light C8 Cartridges，Waters公司製 造，充塡劑之充塡量：130毫克）來沖提’於該筒柱將[i23I]-2-(4’ -經基苯基)_6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶吸著捕集。將該筒柱用水洗淨後，用1毫升之二乙基醚 爲通液，將Π]-2-(4’ -經基苯基)各碘咪唑並[l，2-a]嘧陡溶出。所得到之放射 肯I量在剛合成後爲67MBq。又，依照以下條件進行薄層層析法（TLC)測 • 定時，其放射化學純度係92.5%。 [0 13 2] 薄層層析法（TLC)的條件： 薄層層析法玻璃板：Sinca Gel 60 F2M (商品名，Memku公司製造） 展開相··氯仿/甲醇/三乙胺=100/1/2 檢測器·· Rita Star (商品名，raytest公司製造） 【0 13 3】 _ (實施例Π-6) [1231]-2-(4’ -經基苯基)各碘咪唑並[1，3]吡曝的合成 [0134】 6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[i，2-a]吡嗪的甲醇溶液（濃 度：1 克/毫升）100微升中，加入2莫耳/升的鹽酸75微升、469MBq 的[1231]碘化鈉溶液（以容量計，100微升）、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液2〇 微升、10%(W/V)過氧化氫20微升。將該混合液在5〇。〇加熱1〇分鐘後，與 實施例1-2相同條件的高效能液相層析法（Hlgh perf〇rmance liqmd 49 200803903 chromatography ; HPLC)，將严1]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1,3]吡嗪的部 份（fraction)分離取出，得到[1231]-2-(4’ -經基苯基)各碘咪唑並[1，3]吡嗪 ([1231]-2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-iodoimidazo [1,3] pyrazine)。 [0 13 5] 於該分離部分加入水10毫升後所成之溶液，流過逆向筒柱（商品名： Sep-Pak Light C8 Cartridges，Waters公司製造，充塡劑之充塡量·· 130毫克） 來沖提，於該筒柱將[1231]-2-(4’ -羥基苯基)各碘咪唑並[1，3]吡嗪吸著捕集。 • 將該筒柱用水洗淨後，用1毫升之二乙基醚爲通液，將[1231]-2-(4’ -羥基苯 基)-6_碘咪唑並[1，3]吡嗪溶出。所得到之放射能量在剛合成後爲133MBq。 又，依照與實施例Π-5相同條件進行薄層層析法（TLC)測定時，其放射化 學純度係99.0%。 [0 13 6] (實施例II-7) Γΐ]-2-(4’ -經基苯基碘咪唑並Ha]吡啶的合成 [0 13 7] 籲 8-三丁基甲錫院基_2-[4’ -羥基苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶的甲醇溶液（濃 度：1毫克/毫升）70微升中，加入2莫耳/升的鹽酸5〇微升、454MBq 的[131]碘化鈉溶液（以谷重I十，100微升）、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液2〇 微升、10%(W/V)過氧化氫20微升。將該混合液在5〇它加熱分鐘後，與 實施例1-2相同條件的高效能液相層析法（Hlgh perf〇rmance丨寧M chromatography ; HPLC )，將Π]-2-(4’ -經基苯基碘咪唑M[1，2_a]吡啶的部 份（fraction)分離取出’得到[1231]冬(4’ 一羥基苯基)_8·碘^ 50 200803903 ([mI]-2-(4’ -hydroxyphenyl)-8_iodo imidazo [l，2-a] pyri— [0138] _ 於該分離部分加入水10毫升後所成之溶液，流過逆向筒柱（商品名：

Sep-Pak Light C8 Cartridges ’ Waters公司製造，充塡劑之充塡量：130毫克） 進行沖提，於該筒柱將[1231]-2-(4’ -經基苯基)|碘咪唑並[l，2-a]吡啶吸著捕 集。將該筒柱用水洗淨後，用1毫升之二乙基醚爲通液，將Π]-2-(4’ -經基 苯基>8-碘咪唑並[l，2_a]毗D定溶出。所得到之放射能量在剛合成後爲 • KSMBq。又，依照與實施例Π-5相同條件進行薄層層析法（TLC )測定時， 其放射化學純度係91.7% 〇 【0139】 (參考例1) [125I]-IMPY的合成 【0140】 爲了應用在logP雜（logP_d)的硏究方面的比較例（比較例1-6)，依 照以下作業，合成[125I]-IMPY。 @【0141】 依照文獻（Zhi-Ping Zhuang 等人 J. Med. Chem，2003,46,頁 237-243 )記 戰的方法，合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4，-(N，N-二甲基氨基)苯基]咪唑並 tl>2-a]D]：l：D^ (5-tributylstannyl-2-[4， -(Ν,Ν-dimethylamino) phenyl] imidazo [l?2-a] Pyridme)，溶解於甲醇中（濃度：丨毫克/毫升）。於該溶液53微升中，加 入1莫耳/升的鹽酸75微升、13.5MBq的[1251]碘化鈉溶液20微升、10%(WV) 過氧化氫10微升。將該混合液在50°C靜置10分鐘後，與實施例1-2相同條 51 200803903 件的咼效能液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)，將 [125Ι]-ΙΜΡΥ 的部份（fractlon)分離取出。 【0142】 於該分離部分加入水10毫升後所成之溶液，流過逆向筒柱（商品名： Sep-Pak Light C8 Cartridges，Waters公司製造，充塡劑之充塡量：130毫克） 進行沖提，於該筒柱將[125IHMPY吸著捕集。將該筒柱用水1毫升洗淨後， * \ 用1毫升之乙醇爲通液，將[125I]- IMPY溶出。所得到之放射能量在剛合成後 • 爲2.6MBq。又，依照與實施例1-2相同條件進行薄層層析法（TLC )測定時， 其放射化學純度係98.0% 〇 【0143】 (參考例2) [123Ι]-ΙΜΡΥ的合成 【0 14 4】 爲了關於腦部集積性的硏究而使用的比較例（比較例1-6)，依照以下 作業，合成Hhmpy。 • 【0145】 依照文獻（Zhi-Pmg Zhuang 等人 J. Med. Chem，2003,46,頁 237-243 )記 載的方法，合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4’ -(N，N_二甲基氨基)苯_咪唑並 [l，2-a]啦陡（6-tributylstannyl-2-[4’ -(N，N-dimethyl脆ino) ^ pyndme)，溶解於甲醇中（濃度：1毫克/毫升）。於該溶液53微升中，加 入1莫耳/升的鹽酸100微升、190〜240MBq的[1231]碘化鈉溶液20〜50微 升、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液10微升、10%(W/V)過氧化氫10微升。將該 52 200803903 混合液在50°C靜置10分鐘後，與實施例1-2相同條件的高效能液相層析法 (High performance liquid chromatography ; HPLC)，將[123I]-IMPY 的部份 (fraction)分離取出。 【0146】 於該分離部分加入水10毫升後所成之溶液，流過逆向筒柱（商品名： Sep-Pak Light C8 Cartridges，Waters公司製造，充塡劑之充塡量：130毫克） 進行沖提，於該筒柱將[123IHMPY吸著捕集。將該筒柱用水1毫升洗淨後， • 用1毫升之乙醇爲通液，將[123I]_ IMPY溶出。所得到之放射能量在剛合成後 爲47〜56MBq。又，依照與實施例1-2相同條件進行薄層層析法（TLC)測 定時，其放射化學純度係98.0% 〇 【0147】 (實施例1-11〜1-14、比較例1-1〜1-5)殿粉樣蛋白親和性的測定 本發明化合物之澱粉樣蛋白親和性，藉由下列體外（m vltro)鍵合試 驗加以評定。 • 【0148】 (1) ΑΘμ。（胜肽硏究所）用磷酸緩衝液（酸鹼値(ph)7.4)溶解，在37t： 震盪62〜72小時，得到凝集A ^懸濁液（濃度：相當1毫克/毫升，以下 在本實施例中，稱爲「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 【0149】 (2) 關於前述澱粉樣蛋白懸濁液，依照文獻（Naiki，H.等人、Laboratory Investigation·；^、頁 374-383(1996))記載的方法，使用硫黃素（thioflavin，Fluka 53 200803903 公司製造），藉由螢光光度測定，進行定性實驗，確認在（1)得到之凝\集 化A召係澱粉樣蛋白（測定條件：激發波長446奈米(nm)、螢光波長490奈 米> [0150] (3) 依照文獻（Wang，Y·等人、J· Labelled Compounds Radiopharmaceut.44， S239(2001))記載的方法，將2-(4’ -氨基苯基)苯並噻唑（2-(4’ -ammophenyl) benzothiazole)作爲標示前驅物，配製[1251]2-(3’ -碘-4’ -氨基苯基）苯並噻唑 鲁 （pI]2-(3’ -iodo-4’ -aminophenyl) benzothiazole ;以下稱爲 「Γ25Ι]3’ -Ι-ΒΤΑ-0」），溶解於乙醇。在製造時，使用12〜71MBq的[i25I]碘 化鈉（以容量計，10〜30微升），在剛合成後，得到1〜22 MBq的 [1251]3，-Ι-ΒΤΑ-0。岡!1 果紅（Congored)、硫黃素、及 6-甲基-2-[4’ -(N，N-二甲 基氨基)苯基]苯並噻口坐（6-methyl-2- [4’ -(N，N- dimethyl amino)phenyl] benzothiazole ;以下稱爲「6-Me-BTA-2」），可以將市售試藥商品就其原樣粹 量使用。 •【0151】 (4) 分別依照文獻（Wang，Y·等人、J· Labelled Compounds Radiopharmaceut.44, S239(2⑻ 1))及文獻（Zhuang，Z.P·等人、J.Med.Chem·並，237(2003))記載的 方法，合成2-(3’ -碘-4’ -氨基苯基)苯並噻哩（2-(3’ -iodo-4’ -aminophenyl) benzothiazole ;以下稱爲「3’ -I-BTA-0」）及 IMPY。 [0 15 2] (5) 將[1251]3’ -Ι-ΒΤΑ-0、各評定化合物及殿粉樣蛋白的最後濃度如附表二 54 200803903 胃’胃»於含有〇·1%牛血清白蛋白（albumin)之磷酸緩衝液（酸 鹼値7·4) ’調製成試劑，充塡到有96洞孔的微量板（皿croplate)的各個小 井（well)(容量約〇·3毫升）中。 [0 15 3] 【附表二】 附表二試劑溶液中相關各化合物的最後濃度 實驗 評定化合物 評定化合物濃度 [丨251]3’ -Ι-ΒΤΑ-0 濃度 澱粉樣蛋白 比較例1-1 3’ -I-BTA-0 各種濃度： 0，0.001，0.01， 0.1，1，10， 100 ， 1000 毫微莫耳/公升 (nmol/L) 400微微莫耳/公升 (pmol/L) 1微莫耳/公升 (β mol/L) 比較例1-2 剛果紅 比較例1-3 7*-/r 比較例1-4 6-Me-BTA-2 比較例1-5 IMPY 實施例1-11 化合物1 實施例1-12 化合物2 實施例1-13 化合物3 實施例1-14 化合物4

【0154】 (6) 將已充塡試劑溶液的微量板在22°C用固定速度（400轉/分鐘）震盪 3小時以後，藉由將各試劑溶液用玻璃纖維過濾器（giass fiber fflter)(商品 名:Mulutiscreen™—FC，Milipoa公司製造）過濾，將與殿粉樣蛋白鍵合的 [I]3 -I-BTA-O及未與殿粉樣蛋白鍵贪的[125ι]3’ -I-BTA-O分離開。 [0 15 5] (7) 將各試劑溶液過濾所用的玻璃纖維過濾器，用含有0.1%牛血清白蛋白 的磷酸緩衝液（酸鹼値7.4)洗淨（〇.5毫升、5次），玻璃纖維過濾器之放 射能量，用自動小井·伽碼系統（autowel卜^system)(型式·· ARC-301B， 55 200803903

Aloka公司製造)測定，作爲鍵合在爾分樣蛋白的各試劑溶液之放射能量， 用於計算阻舍率（以下，各評定化合物濃度是_試劑，其相關放射能量 虽作A，評疋化合物濃度是〇 〇〇1毫微莫耳/公升的試劑，其相關放射能量 當作B)。 [0156] (8) 力外’ a有〇·!%牛血清白蛋白的磷酸緩衝液（酸鹼値74)中，調製 成6_Me-BTA-2的15微莫耳(// m〇l) /公升的溶液、門]3, -Ι-ΒΤΑ-0的400 微微莫耳(pmol) /公升的溶液、a召μ。的1微莫耳(a m〇i) /公升的溶液，進 行與刖述（6)及⑺相同的作業’測定放身寸能量。所求得的放射能量作 爲背景放射能量，用在計算阻害率（以下，當作BG)。 [0157] (9) 應用前述（7)及（8)所測定到之放射能量，藉由下列公式（1): 【0158】 【數學1】 阻害率=兰二^£>C100 (%) (1)

A-BG

[0159] 求出阻害率。所得到的阻害率轉換爲正規分布的槪率單位（problt)後之値， 將該値相對於評定化合物濃度之對數劃出區線作成圖形、藉由最小平方法 做成近似直線。應用此直線，放射能量，如同各評定化合物無添加試劑的 値的一半那樣求出各評定化合物的濃度，作爲各化合物的5〇%阻害濃度（以 56 200803903 下稱爲「ICm値」）。將此値作爲指標來使用，評定各評定化合物的殿粉樣蛋 白（概集化A /3 μ。）親和性。 [0160]

各日平疋化合物相關之IC5。%値顯τπ：於附表三。化合物1〜4，任何一者均 顯示不及100的1〇。41，具有比剛果紅和硫黃素都還高的殿粉樣蛋白（凝 集化Α沒1-4。）親和性。從這個結果，顯示化合物1〜4係具有良好殿粉樣蛋 白（凝集化A Aw)親和性的化合物。特別是，在化合物1的方面，具有比 3’ -I-BTA-0及6-Me-BTA-2都還高、與IMPY相同的爾分樣蛋白（凝集化A /3丨-4。）親和性。 【0161】 【附表三】 附表三本發明化合物的&%値 _實驗 —比較例1-2 _比較例1-4 ^Wmn-n ~Wmmu2 5wmi ~Wmn^4

物 _ICso% 値(nmol/L) """""ΐαϊ >1000 >1000 25.4 ~4Λ

~4J ΤόΌ 5Ϊ4

54J

[0 16 2] (‘實麵1-15、實施例Π-8410、比較例I-6)使用辛醇抽腿的分配係數 之測定 57 200803903 【0163】 使用一般所知的辛醇（octanol)抽出法測定得到之分配係數（以下稱 爲「logP_d」），作爲化合物之腦血液障壁（brain blood barrier，以下稱爲 「BBB」）透過性的指標。 [0164] 在實施例1-2所調製的化合物5的二乙基醚溶液（實施例H5 )、在實 施例II-5所調製的化合物9的二乙基醚溶液（實施例Π-8 )、在實施例Π-6 • 所調製的化合物10的二乙基醚溶液（實施例Π-9)、在實施例Π-7所調製的 化合物11的二乙基醚溶液(實施例Π-10)、及在參考例1所調製的[125IHMPY 的二乙基醚溶液（比較例1-6)，將這些分別稀釋在含有1〇毫克/毫升抗壞 血酸（ascorbic acid)的生理食鹽水，調整至放射能濃度爲20〜30MBq/毫 升。調製完成之試劑溶液各取10微升，分別加入辛醇（Qctanol) 2毫升， 然後，添加10毫莫耳/公升磷酸緩衝液（酸鹼値7·4 ) 2毫升，攪拌30秒 鐘。將混合液用低速離心機（2000轉/分，60分鐘）離心分離後，辛醇層 Φ ' 與水層分別取1毫升，在自動小井·伽碼系統（autowell · r system)(型式： ARC-301B，Aloka公司製造）測計各別的放射能讀數（count)。利用所得到 之放射目匕日賈數’應用公式（2)，算出lOgPocmnd値。 , 【0 16 5] 【數學2】 , logPcc- =log1Q丨辛醇層放射能讀數/水層放射能讀數}............ ⑵ 58 [0166] 200803903 將結果顯示於附表四。化合物5相關之logP_i値，係1.6 ; [125i]-impy 相關之l〇gP_^，係2.1。關於可能通過BBB的化合物方面，已知係logp^ 値爲 1 〜3 之間的値（Douglas D, Dischino 等人，J.NucLMed·，（1983)，24,頁 尊 - 1030-1038 )。從以上結果，顯示此二化合物，與服PY相同，具有BBB通過 性。 【0167] 【附表四】 Φ 附表四本發明化合物之logP_箱 實驗 ^ 化合物 l〇^Poctanolf直 比較例1-6 [125I]-IMPY 2.1 實施例1-15 化合物5 1.6 實施例Π-8 化合物9 1.7 實施例Π-9 化合物10 ' 2.3 實施例Π-10 化合物11 3.0 [0 16 8] (實施例1-16、比較例；[_7)腦部滲移性及廓清力的測定 【0169】 用化合物6，測定雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）相關之腦邰 放射能集積的隨時間之變化。 [0170] 將化合物6(實施例M6)溶解於含有10毫克/毫升抗壞血酸（ascCTblc acid)的生理食鹽水，所成之溶液〇.05毫升（放射能濃度2〇〜3030MBq /毫 升），及在前述參考例2所調製成的[123I]-IMPY (比較例⑺溶解於含有10 毫克/毫升抗壞血酸（ascorbic acid)的生理食鹽水，所成之溶液取0·05毫 59 200803903 升（放射能濃度20〜3〇3〇Mb # 4：ξ六縮趨、辟—q/笔升）’分別從被硫苯妥（thiopental，一種 短效麻樂）麻醉的威斯達⑽. ^ c 種類的大鼠（7週大）的尾靜脈注射進去體 內。投與後2分ia、5 刪《颂田白翻瓜朴， 〇分_ ' 6〇分鐘，從腹部大動脈抽血後，摘 職邰，用酬'井·伽碼 . Λ厂八二t削、出、、編-『 、吼 Uut〇well · r system)(型式：ARC-301B， AMa公司製迠）測計腦的放 λ7 ^ 叱（以下，在本實施例，以Α表示），然後， 測定腦的質重。又，將投與液 1()0〇倍所成之溶液，取0.05毫升，用同 樣的方法測疋其放射能耄（以 乂下’在本實施例，以B表示）。應用這些測定 結果，從下列公式（5)，寘中 Μ在各解剖時間點上，腦的單位重量所相當的 放射能集積量（％ID/g)〇 在各時間點，實施k —u H6、及比較例p同時使用2隻動物進行實驗。 【0171】 【數學3】 %ID/g= {A/(Bxi〇〇〇x腦的質量）丨 xl〇〇 ..........⑸ 【0172】 其結果顯示於附表五。如附表五所示，化合物6，在投與後2分鐘的 時點，和[123Ι]、ΜΡΥ有相同的集積，其後到達6〇分鐘時，則顯示有快速消 失的傾向。從這個結果，化合物6，和[123ι]-ιμρυ —樣，顯示具有很高的腦 部滲移性及快速從腦部的廓清力。 [01731 【附表五】 附表五化合物6靜脈注射後之腦部放射能集積（大鼠） 的放射能集積量(%id / g) - 60 200803903 2分鐘後 5分鐘後 30分鐘後 60分鐘後 比較例1-7 [l23I]-IMPY 1.02 0.99 0.20 0.08 實施例1-16 化合物6 0.96 0.69 0.16 0.04 【0174] (實施例1-17)腦部澱粉樣蛋白描現的確認 [0175】 爲了評斷本發明相關之化合物能否描現腦部澱粉樣蛋白，進行以下實 驗。 【0176] (1) 將A3⑽（胜肽硏究所製造）溶解於磷酸緩衝液（酸鹼値7.4)，在37 °C振盪72小時，得到凝集A/3懸濁液（A/3濃度：相’當1毫克/毫升，以 下於本實施例，稱爲「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 [0177】 (2) 在雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺，注射前述 殿粉樣蛋白懸濁液25微升（相當25微克）；作爲對照者，係另一側的扁桃 腺，注射磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼値7.4)。注射殿粉樣蛋白懸濁液和磷 酸緩衝生理食鹽水（酸鹼値7.4) 1日後，對大鼠進行體檢。 【0178】 (3) 將化合物6溶解於含有10毫克/毫升抗壞血酸的生理食鹽水中，當作 試劑溶液（放射能濃度32MBq /毫升）。將此溶液從尾靜脈注射到大鼠（投 與量：0.5毫升，投與後之放射能：相當16 MBq)。 【0179】 (4) 投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機（型式：CM3050S，萊卡公 61 200803903 司製造)製作成厚度10微米的腦切片。將該腦切片放在影像板(皿agmg plate) 上使其曝光20小時以後’使用生物影像分析儀(Bioimaging analyzer，型式： BAS-2500，富士照相底片公司製造）進行圖像解柝。 【0180】 (5)使用生物影像分析儀進行前述圖像解析結束以後，藉由硫黃素τ做病 理染色、使用螢光顯微鏡（型式·· TE2000-U型，Nikon公司製造;激發波長： 4〇〇〜440毫微米、檢測波長:470毫微米）做出影像，確認殿粉樣蛋白在該 • 切片上沉積的情形（附圖九b )。 【018 1] 澱粉樣蛋白進入腦內的大鼠的腦切片相關之自動射線攝影 (autoradiogram)及硫黃素T染色的影像顯示於附圖九。如該附圖所示，在 注入澱粉樣蛋白的一側之扁桃腺，看到明確的放射能集積。又，從放射能 集積部位的硫黃素T染色的結果，確認在該當部位存在有澱粉樣蛋白。另 一方面，在注射生理食鹽水之一側之扁桃腺，和其他部位比較，無法確認 • 有意義的放射能集積。 從這個結果來看，化合物6，具有集積於腦內澱粉樣蛋白的性能，顯 示有描現出腦內澱粉樣蛋白的能力。 [0 18 2] (實施例1-18〜1-20)基因逆向變異測試 [0 18 3] 爲了調查化合物1、化合物2及化合物4的基因突然變異誘發性，使 62 200803903 用老鼠傷寒桿菌（义加⑽e的TA98及ΤΑ1()0 ’進行基因逆 向變異測試（以下稱爲「Ames試驗」）。 [0184] 試驗係在無添加S 9 mix及添加S 9 mix的情形來實施。陰性對照，係 使用二甲基亞颯；陽性對照，在無添加S 9皿X的情形時，使用2-(2-聯糠 醯)各(5-硝基厶聯糠醯)丙烯醯胺（2-(2-furyl)-3-(5-mtro-2-furyl)acrylamide)，在 添加S 9 mix的情形時，使用2-氨基蒽（2-aminoanthracene)。 [0 18 5] 試驗用板（plate )的各試劑的添加量，以5〇〇〇微克/板做爲最高用量， 作成7種用量（公比數爲3 )。被驗物質和試驗菌株（TA98或TA1〇〇)、或 者被脚細S 9腿和試驗菌株混合後，在用洋菜凍做的試驗用板上的培 ’於 3TC 培養 4M、時。 上麵的麵逆向變異群落(colony)數來實行，基因逆向變異群纖顯示 陰性對照的2倍以上之値、並賊存濃獅增加的情形，作爲陽性。 [0186] 其結果顯示麵表六，於化合物i、化合物2及化合物4處理群的 細逆向變異群纖，任—難和S 9顏添加之有無、及碰__量 均娜縣，係未達陰性對照觀處理群的2倍。從以上之結果，化合物卜 化合物纖合物4判定爲A腦陰性姻1均可斷定並無基嗾然變 異誘發性。 [0 18 7] 63 200803903 【附表六】 附表六Ames試驗結果 化合物 致突變性 無添加 S9mix 添加S9mix TA98 TA100 TA98 TA100 實施例1-18 化合物1 陰性 陰性 陰性 陰性 實施術^ 化合物2 陰性 陰性 陰性 陰性 實施例1-20 化合物4 陰性 陰性 陰性· 1 陰性 [0188] _ (實施例Π-11、Π-12、比較例II-1)腦部滲移性及廓清力的測定 [0189] 使用化合物10及化合物11，測定雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週 大）相關之腦部放射能集積的隨時間之變化。 [0190] 在化合物10 (實施例Π·11)、化合物11 (實施例Π-12)、及前述參考例 2調製的[123Ι]-ΙΜΡΥ (比較例π])，各別溶解於含有10毫克/毫升抗壞血酸 φ 生理食鹽水中’所作成之溶液（放射能濃度2〇〜31MBQ /毫升）取0.05毫 升’分別i/t被硫本安（thiopental，~種短效麻藥）麻醉的威斯達(Wistar)種類 的大鼠（7週大）的尾靜脈注射進體內。投與後2分鐘、5分鐘、3〇分鐘、 60分鐘，從腹部大動脈抽血後，摘取腦部，測定腦的質量，然後用單頻分 析儀（Smgle-channelanal奴er)(型式：SP-20，應用光硏工業公司製造）測計 腦的放射能（以下’在本實施例，以A表示）。又，用同樣的方法測定殘餘 (以下，在賴雌J，以B表示）。麵這麵定結果， 從下列公式；（6)，算出在各解剖時間點上，腦的單位重量所相當的放射能 64 200803903 集積量（％ID/g)、 還有，在各時間點，係使用3隻動物來進行實驗。 【0191] 【數學四】 %ID/g= {A/(BX腦的質量)} X100 •…—(6) [0 19 2] 其結果顯示於附表七。如附表七所示，化合物10及化合物11，與 • [123Ι]-ΙΜΡΥ相同，可以看到在投與後2分鐘時高放射能集積，其後的60分 鐘，顯示快速消失的傾向。從這個結果，化合物10及化合物11，與Π]-ΙΜΡΥ 相同，顯示具有高的腦部滲移性及快速地從腦部廓清的性質。 [0193] 【附表七】 附表七本發明化合物靜脈投與後之腦部放射能集積（大鼠） 化合物 單位重量相當之放1 寸能集積量(％ID/g) 2分鐘後 5分鐘後 30分鐘後 60分鐘後 實施例Π-11 化合物10 0.62 0.33 0.08 0.02 實施例11-12 化合物11 0.65 0.43 0.09 0.03 比較例Π-1 [123I]-IMPY 1.19 0.97 0.23 0.09 【0 19 4】· (實施例ΙΗ3)採用注入澱粉樣蛋白的模型大鼠之化合物10的活體外（ex vivo)自動射線攝影（autoradiogram) 【0195】 (1)將ΑθM2 (胜肽硏究所製造）溶解於磷酸緩衝液（酸鹼値7.4)，在37 65 200803903 °C振盪72小時，得到1毫克/毫升之凝集A ^懸濁液（以下，於本實施例， 稱爲「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 [0196] (2) 在雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺，注射前述 ’ 澱粉樣蛋白懸濁液2.5微升(相當25微克）；作爲對照組，係另一側的扁桃 腺，注射磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼値7.4) 2.5微升。注射澱粉樣蛋白懸濁 液和磷酸緩衝生理食鹽水(酸鹼値7.4) 1日後，對大鼠進行體檢。 • 【0197】 (3) 將化合物10溶解於含有10毫克/毫升抗壞血酸的生理食鹽水中，當 作試劑溶液（試劑溶液中的放射能濃度3IMBq /毫升）。將此溶液從尾靜脈 ，注射到用硫笨妥麻醉的大鼠體內（投與量：0.5毫升，投與後之放射能:相 當 15MBq)。 , [0 19 8] (4) 投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機（型式：CM3050S，萊卡公 • 司製造）製作成厚度10微米的腦切片。將該腦切片放在影像板上使其曝光 20小時以後，使用生物影像分析儀（型式:BAS-2500，富士照相底片公司 製造）進行圖像解析。 [0199] (5) 使用生物影像分析儀進行前述圖像解析結束以後，藉由硫黃素T做病 理染色、使用螢光顯微鏡（型式：TE2000-U型，Mkon公司製造；激發波長： 400〜440毫微米、檢測波長：470毫微米）做出影像，確認澱粉樣蛋白在該 66 200803903 切片上沉積的情形（附圖十四b)。 [0200] 殿粉樣蛋白進入腦內的大鼠的腦切片相關之自動射線攝影 (autoradiogram )及硫黃素T染色的影像顯示於附圖十四。如該附圖所示， 在注入澱粉樣蛋白側之扁桃腺，看到明確的放射能集積。另一方面，在注 射生理食鹽水之一側之扁桃腺，和其他部位比較，無法確認有意義的放射 能集積。又，根據此自動射線攝影來看，澱粉樣蛋白進入部位以外，幾乎 • 看不到放射能集積。並且，從硫黃素T染色的結果，放射能集積部位的範 圍內，可以確認殿粉樣蛋白的存在（附圖十四b)。由這個結果，化合物10 具有在腦部澱粉樣蛋白處集積的性能，顯示有描現出腦部澱粉樣蛋白的能 力。 【0 2 0 1】 (實施例Π-14)採用注入澱粉樣蛋白的模型大鼠之化合物11的活體外（ex vivo)自動射線攝影（autoradiogram) • 【0 2 0 2】 將化合物11溶解於10毫克/毫升之抗壞血酸溶液中（試劑溶液中的 放射能濃度30 MBq /毫升）作爲試劑溶液，除此以外，進行與實施例Π-13 相同之作業。 [0203] 殿粉樣蛋白進入腦內的大鼠的腦切片相關之自動射線攝影 (autoradiogram)及硫黃素T染色的影像顯示於附圖十五。如該附圖所示， 67 200803903 在注入澱粉樣蛋白懸濁液側之扁桃腺，看到明確的放射能集積。又，從硫 黃素τ染色的結果，放射能集積部位的範圍內，可以確認澱粉樣蛋白的存' 在（附圖十五b)。另一方面，在注射生理食鹽水側之扁桃腺，和其他部位 比較，無法確認有意義的放射能集積。根據以上的結果，化合物η具有在 腦部澱粉樣蛋白處集積的性能，顯示有描現出腦部澱粉樣蛋白的能力。 [0204] (實施例11-15)基因逆向變異測試 i [0 2 0 5] 爲了調查化合物8的基因突然變異誘發性’使用老鼠傷寒桿菌 (&/皿观/如观紐?皿/腳）的TA98及TA100 ’進f了基因逆向變異測3式（以 下稱爲「Ames試驗」）。 [0206] 試驗係在無添加S 9 mk及添加S 9 mix的情形來實施。陰性對照，係 使用二甲基亞砸；陽性對照，在無添加S 9 mix的情形時，使用2-(2-聯糠 # 醯)各(5-硝基-2-聯糠醯)丙烯醯胺（2-(2-furyl)-3-(5-mtrc-2-furyl)acrylamide )，在 添加S 9皿X的情形時，使用2-氨基蒽（2-aminoanthracene)。 [02071 試驗用板（plate)的化合物8的添加量，以5000微克/板做爲最高用 量，作成7種用量（公比數爲3 )。化合物8和試驗菌株（TA98或TA100 )、 或者化合物§和S 9 mix和試驗菌株混合後，在用洋采凍做的式驗用板上的 培養基上重複塗層，在37°C培養48小時。評斷的方法係藉由計算培養後的 68 200803903 板上相關的基因逆向變異群落（cdony)數來實行，基因逆向變異群落數顯 不陰性對照的2倍以上之値、並且依存濃度而增加的情形，作爲陽性。 [0208] 其結果顯示於附表八。關於化合物8處理群的基因逆向變異群落數， 任一菌株和S 9 mlx添加之有無、及被驗物質添加量均無關係，係未達陰性 對照物質處理群的2倍。另一方面，陽性對照處理群，顯示明確的逆向變 異群洛數。從以上之結果’化合物8判定爲Ames陰性，可斷定並無基因突 φ 然變異誘發性。 [0209] 【附表八】 附表八Ames試驗之結果 » 化合物 _ 致突變丨生 ~Π 無添加 S9mix 添加S9mix ΤΑ98 TA100 TA98 TA100~~ 實施例Π-15 化合物8 陰性 陰性 陰性 陰性 【產業利用的可能性】 [0210] 本發明係有關於化合物及診斷劑，可以應用於診斷用藥之領域。 【圖式簡單說明】 [0211] 【附圖一】6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶（6-tnbutyl stannyl-2-(4, -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyridine)的合成體系 69 200803903 圖。 【附圖一】6-漠-2-(4 -經基苯基）咪口坐並[1，2-a]咖定（6-bromo-2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a]pyridine)的合成體系圖。 【附圖二】2-(4 -經基苯基)-6-碘：-味哇並[l，2-a]P比Π定（2-(4’ -hydroxyphenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a] pyridine)的合成體系圖。 【附圖四】2-(4 -經基苯基)-6-碘-咪哩並[l，2-a]卩密陡（2-(4’ -hydroxyphenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a] pyrimidine)的合成體系圖。 【附圖五】6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-(3’ -fluoro propoxy)-2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo[l,2-a] pyridine)的合成體系圖。 【附圖六】6-溴-2-(4’ -經基苯基）咪哩並[1，2-&]_定（6-bromo-2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo[l,2-a] pyrimidine)的合成體系圖。 【附圖七】6-氟冬(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶(6-fluoro-2_(4’ -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a] pyridine)的合成體系圖。 【附圖八】2-(4’ ·經基苯基)-6-硝基咪哩並[1，2-a]妣陡（2-(4’ -hydroxyphenyl) -6-nitroimidazo[l，2-a] pyridine)的合成體系圖。 【附圖九】（a)化合物6投與後之腦切片相關之自動射線攝影及 (b)硫黃素T染色試劑的螢光顯微鏡像（澱粉樣蛋白懸濁液投 與部位的放大圖示） 【附圖十】6-三丁基甲錫垸基-2-(4’ -經基苯基）咪唑並[l，2-a]嘧啶（6-tributyl stannyl-2-(4, -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyrimidine )的合成體 200803903 系圖。 【附圖十一】6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡嗪 (6-tributyl stannyl-2-(4, -hydroxyphenyl) imidazo[l,2-a]pyrazine) 的合成體系圖。 【附圖十二】2-(4’ -經基苯基)各碘-咪哇並[l，2-a]吡嗪 (2-(4’ -hydroxyphenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a] pyrazine)的合 成體系圖。 【附圖十三】8-三丁基甲錫院基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-tributyl stannyl-2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyridine)的合成體系 圖。 【附圖十四】U)化合物10投與後之腦切片相關之自動射線攝影及 (b)硫黃素T染色試劑的螢光顯微鏡像（澱粉樣蛋白懸濁液投 與部位的放大圖示） 【附圖十五】（a)化合物11投與後之腦切片相關之自動射線攝影及 < (b)硫黃素T染色試劑的螢光顯微鏡像（澱粉樣蛋白懸濁液投 與部位的放大圖示） 71

Claims (1)

1. 200803903 十、申請專利範圍： 1 . 一種新規澱粉樣蛋白親和性化合物，具下列化學式（1)所表示之化合 物或其鹽類： 【化學1:

   (1 ) 〔化學式(1)中，A1、A2、A3及A4係各自獨立之碳或氮 R3係以下化學式所表之基： 【化學2】 H2 R1- R1係放射性鹵素取代基、m係0〜4的整數、N係0或1之整數； 此處，A1、A2、A3及A4至少有一個是碳，R3係鍵合在A1、A2、A3或A4 的碳。 2 ·如申請專利範圍第1項所述之新規殿粉樣蛋白親和性化合物，其所稱 之化合物或其鹽類，其中A1、A2、A3及A4至少有三個是碳。 如申請專利範圍第2項所述之新規澱粉樣蛋白親和性化合物，其所稱 之化合物或其鹽類，其中A1、A2、A3及A4全部都是碳。 ^ 72 200803903 4·如申請專利範圍第1項至第3項之任一項所述之新規澱粉樣蛋白親和 性化合物，其所稱之化合物或其鹽類，其中R1係選自氟18 (18F)、溴 76 (7¾)、碘 123 (1231)、碘 124 (1241)、碘 125 (1251)及碘 131 (1311)所 形成之群類。 5 · —種新規澱粉樣蛋白親和性化合物，其爲下列化學式⑵所表示之化 合物或其鹽類：

   【化學3】

   〔化學式⑵中，A5、A6、A7及A8係各自獨立之碳或氮， R4係以化學式所表之基： 【化學4】 R2

   m係0〜4的整數；N係0或1之整數；R2 ’於ni=n=0時’係非 放射性鹵素取代基、硝基取代基'碳數342的三烷基甲錫烷基(tnalkyl 813111^1)取代基或三苯基甲錫烷基（_11卿丨血11取1)取代基；11：1：^0 及/或n#0的時候，係非放射性鹵素取代基、甲院磺酸（methane sulfonicacid)取代基、三氟甲烷磺酸（tri泡0romethanesu丨fonicacid) 73 200803903 取代基或芳香族磺酸取代基； 此處，A5、A6、A7及A8至少有一個是碳，R4係鍵合在A5、A6、 A7或A8的碳。〕 6 _如申請專利範圍第5項所述之新規殿粉樣蛋白親和性化合物，其所稱 之化合物或其鹽類，其中A5、A6、A7及A8之中至少之中有三個是碳。 7 ·如申請專利範圍第6項所述之新規殿粉樣蛋白親和性化合物，其所稱 之化合物或其鹽類，其中A5、A6、A7及A8全部都是碳。 8 ·如申請專利範圍第5項至第7項所述之新規殿粉樣蛋白親和性化合 物，其所稱之化合物或其鹽類，其中R2係選自碘、溴、三甲基甲錫烷 基取代基、三丁基甲錫烷基取代基、三氟甲烷甲錫院基取代基及三苯 基甲錫烷基取代基所形成之群類。 9 ·含有下列化學式（1)所表示之化合物或其鹽類所形成之低毒性阿茲海 默氏症（Alzheimer disease )診斷劑·· 【化學5】

   〔化學式⑴中，A1、A2、A3及A4係各自獨立之碳或氮， 74 200803903 R3係以化學式所表之基: 【化學6】 R1 H2 C---〇 Jib . J η

   R1係放射性鹵素取代基、m係0〜4的整數、Ν係0或1之整數； 此處，A1、A2、Α3及Α4至少有一個是碳，R3係鍵合在A1、A2、Α3 或Α4的碳。〕 1 0 ·如申請專利範圍第9項所稱之低毒性阿兹海默氏症診斷劑，其中Α1、 A2、Α3及Α4至少有三個是碳。 1 1 ·如申請專利範圍第1 〇項所稱之低毒性阿茲海默氏症診斷劑，其中 A1、A2、Α3及Α4全部都是碳。 75 1 2.如申請專利範圍第9項至第1 1項之任一項所稱之低毒性阿茲海默氏 2 症診斷劑，其中R1係選自氟18 (18F)、溴76 (76Br)、捵123 (1231)、碘 124 (1241)、碘 125 (1251)及碘 131 (1311)所形成之群類。