TW200804399A - Scalable process for the preparation of a rapamycin 42-ester from a rapamycin 42-ester boronate - Google Patents

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200804399 九、發明說明： I：發明所屬之技術領域3 發明領域 本發明係提供一種製備雷帕黴素42-酯的可調製程，其係 5 藉由將雷帕黴素42-酯棚酸酯（rapamycin 42-ester boronate)與二 醇起反應，而後利用再結晶並以二醇處理來純化而製得。 L先前技術3 發明背景 雷帕黴素42-酯係為由雷帕黴素之衍生物，雷帕黴素是屬 10 於吸水鏈黴菌所天然生成之巨環 三婦抗生素衍生物。雷帕黴素基於其抗腫瘤作用以及免疫抑制 作用已知可使用於各種應用上。此等用途包含有預防、抑制或 治療移植排斥、移植物對抗宿主疾病、包含有系統性紅斑狼瘡 之自體免疫疾、包含有肺部與眼部發炎之發炎性疾病、成人型 15 T細胞白血病/淋巴瘤、固態腫瘤、真菌感染以及包含有平滑 肌細胞增生以及血管手術後之内膜增厚的過度增生性疾病。雷 帕黴素及雷帕黴素衍生物，包含有雷帕黴素42-酯（例如帶有3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸之雷帕黴素42-酯（CCI-779))，是持 續地被研究以供此等以及其它病況的治療。 20 雷帕黴素之42-酯（包含(CCI-779))的製備與應用業已揭示 於美國專利第5,362,718號。CCI-779之位置選擇性 (regioselective)合成係揭示於美國專利第6,277,983。在美國專利 公開案第US 2005-0033046 A1號（即美國專利申請號 10/903,062)中亦揭示基於硼化之化學反應而位置選擇地合成 5 200804399 CCI-779。 所需要的是製備雷帕黴素之42_酯之其它有效的製程，包 含有純化雷帕黴素42-酯之可調製程。 【屬^明内容】 5 發明概要 本發明係提供一種從雷帕黴素42-酯硼酸酯製備並純化雷 帕黴素42-酯（包含有帶有3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸之雷帕 黴素42-酯（CCI-779))的可調製程。 經由雷帕黴素42-酯硼酸酯與二醇之轉硼酸反應而製備雷 10 帕黴素42-酯是在一種結晶產物可以生成的溶劑系統下進行。在 一實施態樣中，該雷帕黴素42-酯是進一步為二醇所純化，進而 降低不欲之副產物，再將之再結晶。在另一實施態樣中，由轉 硼酸反應所生成之雷帕黴素42-酯首先再結晶，而後雷帕黴素 42-酯的漿液是以二醇處理，以提供經純化之雷帕黴素42-S旨。 15 較有利的是，本發明方法可以避免使用四氫呋喃（THF)作 為溶劑，四氫呋喃是在製程中是無法完全被去除，且會造成油 性且黏稠之固體，因而造成雷帕黴素42-酯難以單離出來。本發 明亦克服了使用二醇之乙酮溶液在純化雷帕黴素42-酯上所具 有之單離問題，即在純化上殘餘的溶液會防止以所欲的方式結 20 晶且會造成安定性與加工上的問題，特別是在量產上的問題。 本發明優於習知技術之其它方法與優點是由下列對本發 明之詳細說明即清楚明白的。 圖式簡單說明 無 6 200804399 I：實施方式3 較佳實施例之詳細說明 本發明係為一種製備雷帕黴素42-酯的可調製程，其係藉 由將雷帕黴素42-酯硼酸酯與二醇起反應以及利用再結晶且漿 5 液以二醇處理來純化該粗雷帕黴素42-S旨，因而製得最終的雷帕 黴素42-S旨。在一實施態樣中，該粗雷帕黴素42-酯首先是在一 溶劑中以二醇處理，以形成固態的雷帕黴素42-酯，而後將之再 結晶，以形成經純化之雷帕黴素42-醋。在另一實施態樣中，該 粗雷帕黴素42- S旨首先再結晶以形成一雷帕黴素42- S旨漿液，而 10 後再以二醇處理，以形成經純化之雷帕黴素42-酯。 「雷帕黴素42-酯」一詞包含有在雷帕黴素之第42位置上 之羥基的酯類；以及，此等雷帕黴素42-酯的醚類、醯胺、碳酸 酯、胺基甲酸酯、磺酸酯、肟類、腙類以及羥基胺類，其中在 核上的官能基已被修飾，例如，經由還原或氧化方式而修飾； 15 雷帕黴素之中間代謝物，例如，各種去甲基雷帕黴素或開環雷 帕黴素，（例如，揭示於美國專利第5,252,579號之西可雷帕黴素 (secorapamycin))。雷帕黴素42-酯一詞亦包含有雷帕黴素42-酯 之藥學上可接受的鹽類，其係能夠經由含有酸或鹼部分而形成 該等鹽類。在此所用的藥學上可接受的鹽類包含有，但不限 20 於，氯化氫、溴化氫、鐵化氫、氟化氫、硫酸、檸檬酸、馬來 酸、乙酸、乳酸、烟酸、破ίέ酸、草酸、填酸、丙二酸、水楊 酸、苯乙酸、硬脂酸、0比σ定、銨、σ辰唤、二乙胺、烟醯胺、甲 酸、尿素、鈉、鉀、鈣、鋅、鋰、肉桂酸、甲基胺、甲基磺酸、 苦味酸、酒石酸、三乙胺、二甲胺以及三（羥甲基）胺基甲烷。 7 200804399 其它藥學上可接受的鹽類對此技術具有通常知識者是已知 者。 各種雷帕黴素之42-酯係揭示於下列專利中：烷酯（美國專 利第4,316,885號）；胺基烷脂（美國專利第4,650,803號）；氟 5 化酯（美國專利第5，100,883號）；醯胺酯（美國專利第5，118,677 號）；胺基甲酸酯（美國專利第5，118,678號）；矽烷醚（美國專利 第5,120,842號）；胺基酯（美國專利第5，130,307號）；縮醛（美 國專利第5,51，413號）；胺基二酯（美國專利第5,162,333號）； 磺酸酯以及硫酸酯（美國專利第5，177,203);酯類（美國專利第 10 5,221,670號）；烷氧醋（美國專利第5,233,036號)；0-芳基、-烷 基、-烯基以及-炔基醚（美國專利第5,258,389號)；碳酸酯（美 國專利第5,260,300號）；芳基羰基以及烷氧基羰基胺基甲酸酯 (美國專利第5,262,423);胺基甲酸酯（美國專利第5,302,584 號）；羥基酯（美國專利第5,362,718號）；受阻型酯類（美國專利 15 第5,385,908號）；雜環酯（美國專利第5,385,909號）；偕-二經 取代之酯類（美國專利第5,385,910號）；胺基烷酸酯（美國專利 第5,389,639號）；磷醯基胺基甲酸酯（美國專利第5,391，730號）； 胺基甲酸酯（美國專利第5,411，967號）；胺基甲酸酯（美國專利 第5,434,260號）；脒基胺基甲酸酯（美國專利第5,463,048號）； 2〇胺基甲酸酯（美國專利第5,480,988號）；胺基甲酸酯（美國專利 第5,480,989號）；胺基甲酸酯（美國專利第5,489,680號）；受 阻蜇N-氧化物酯類（美國專利第5,491，231號）；生物素酯（美國 專利第5,504,091號）；〇-烷基_(美國專利第5,665,772號）；以 及雷帕黴素PEG酯（美國專利第5,780,462)。在一實施態樣中， 8 200804399 則是選擇具有二酸之雷帕黴素42-酯，例如42-半琥珀酸、42-戊二酸以及42-半己二酸。 在一實施態樣中，雷帕黴素42-酯具有下列之核心結構：

5 在一實施態樣中，111係為-〇0.€117尺7’117’’，其中： R7、R7’ R7’’各自選自於氫、具1-6碳原子的烷基、具有 2-7碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR1()、 -CF3、_F 或-C02R10 ; R1()係為氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7碳原子的烯 10 基、具有2-7碳原子的炔基、三苯甲基、苯甲基、具有2-7碳 原子的烷氧基甲基、氯乙基或四氫呋喃； R12與R13各自獨立為氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7 碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、三氟甲基或-F ; 以及f二0-6。 15 上述的化合物可以含有一或多個不對稱中心，且因而產生 光學異構物以及非對映異構物。此等化合物可以包含有光學異 構物以及非對映異構物；消旋物與經解析之對映異構性純R與 S立體異構物；其它R與S立體異構物之混合物；以及其等 藥學上可接受的鹽類。 20 「烧基」一詞在此係指直鏈以及具有分支的飽和性脂族烴 9 200804399 類。在一實施態樣中，其係具1至約8個碳原子的烷基（即Cl、 <^'<：3、（：4、（：5、（：6、（：7或（：8)。在另一實施態樣中，其係具1 至約6個碳原子的烷基（即Cl、c2、c3、c4、c5或C6)。在又一 實施態樣中，其係具1至約4個碳原子的烷基（即q 5 或 C4) 〇 「烯基」一詞在此係指直鏈以及具有分支的具有一或多個 石反-碳雙鍵的脂族烴類。在一實施態樣中，該烯基係具丨或2個 碳-碳雙鍵且3至約6個碳原子的烷基（即Cl、C2、C3、C4、Q 或 C6)。 10 「炔基」一詞在此係指直鏈以及具有分支的具有一或多個 碳-碳三鍵的脂族烴類。在一實施態樣中，該炔基係3至約8個 碳原子的烷基（即Cl、Q、A、Q、Q或。在另一實施態樣 中，δ亥稀基係具1或2個碳-碳三鍵且3至約6個碳原子的烧基 (即 Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)。 15 「烷氧基」一詞在此指係〇(烷)基，其中該接合處係經由 氧原子，且該烷基係可如上所述者經取代。 在一實施態樣中，該雷帕黴素42-酯係為帶有3-羥基_2_(麫 甲基)-2-曱基丙酸之雷帕黴素42-S旨（CCI·779))[美國專利第 5,362,718號]以及d 42-0-(2-經基）乙基雷帕黴素[美國專利第 2〇 5,665,772號]。當論及立體化學時，CCI-779係具有下列結構特 徵： 10 200804399

在一實施態樣中，本發明以從雷帕黴素42-酯硼酸酯製備 雷帕黴素42-酯的製程係提供至少82%、至少85%或至少89% 的產率（對強度校正），且具有至少95%或至少98%的強度，以 5 及低於4%、低於2%之總雜質（且較佳低於1%總雜質）。在此所 使用之產率是以如下的方式作強度校正：產率（％) =[真正重量 X強度（％)]/[理論重量xlOO%]。 在另一實施態樣中，該雷帕黴素42-酯係為帶有3-羥基 -2-(羥甲基)-2-甲基丙酸之雷帕黴素42-酯（CCI-779)。在一實施 10 態樣中，該總雜質是低於0.1%苯硼酸，且較佳是低於0.05%苯 侧酸。 本發明方法，因為其是可調的，故可以提供一超過20kg 之量的經純化雷帕黴素42-酯（即，如上由總雜質量所自由界定 出來者）。但是本發明並受限於此。該方法亦可使用於獲致如 15 20 kg、1 kg、200 g、8 g、5 g，或更低之低量者。 依據本發明，該粗雷帕黴素42-酯是由雷帕黴素42-酯硼 酸酯製得者。在一實施態樣中，該雷帕黴素42-酯硼酸酯具有 下列通式： 11 200804399

其中，R係為-OO.CR7R8R9，其中： R7選自於下列群中：氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7 5 碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、-(CR12R13)fOR1()、-CF3、 -F 與-C02R10 ; R1()係為係為氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7碳原子 的烯基、具有2-7碳原子的炔基、三苯甲基、苯曱基、具有2-7 碳原子的烷氧基甲基、氯乙基或四氫呋喃； 10 R8與R9 —起形成X ; X係為2-苯基·二氧石朋環烧(dioxoborinane); R12與RnR7各自為氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7 碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、三氟曱基或-F ; 且 f = 0-6 〇 15 在此所使用之2-苯基-二氧硼環烷係可任擇地為1、2 或3基團所取代，該取代基係各自選自於下列群中：具1-6 碳原子的烷基、具有2-7碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔 基、-(CR12R13)fOR1G、-CF3、-F 或-C02R1G。在一實施態樣 中，該取代基係一、二或三個曱基。該2-苯基-二氧硼環烷 20 之苯基亦可任擇地被取代。 「經取代之芳基」係指芳基(例如，苯基），其可-- 12 200804399 或多個取代基所取代，該等取代基係各自選自於一包含有 鹵^、^0^〇2、胺基、烧基、環烷基、烯基、块基、 氧基（^至（：3全氟烧基、(^至（：3全氟烧氧基、芳氧基、 烷羰基、芳基、雜芳基。所欲的是，一經取代之芳基(例如， 5苯基)是為1至約4個取代基所取代。在-實施態樣中，該 取代基係為_素。在另一貫施態樣中，該取代基係為低級 烧基。 在一實施態樣中，該2-苯基-二氧硼環烷係選自於下 歹J所構成的群中· 2-苯基-4,6,6-三甲基-1，3,2-二氧删環烧、 1〇孓苯基-1，3,2·二氧硼環烷·5_基、2-苯基-1，3,2-二氧硼環烷-4-基，其中該苯基係如上所界定者可任擇地被取代。 在又一個實施態樣中，該雷帕黴素42-酯硼酸酯係為帶 有3-每基-2-(經甲基)_2_甲基丙酸之雷帕黴素42__(cci_779) 之硼酸酯。 15 該雷帕黴素42-酯硼酸酯是可使用先述的方法被製得，以 供用於本發明方法。例如，製備CCI-779硼化合之適當方法 係顯示於下述流程中，其係揭示於美國專利公開案 2005-0033046 A1 (亦為美國專利申請案10/9〇3,062)。 13 200804399

基於此等資料，此技術具有通常知識者可以容易地製 5備其匕雷帕黴素42_s曰爛酸酯。又，其它製備雷帕黴素42-酯 棚酸S旨之方法亦可使用。本發明之製備雷帕徽素必醋棚酸酷 的方法並不是對本發明之限制。 14 200804399 雷帕徵素42-S旨之製備 在〜適合的溶劑（如轉觸酸反應）使用二醇而將雷帕黴素 42-S旨蝴醆酯轉換成粗雷帕黴素42_酯。在此所揭示之轉硼酸 反應鮮所有被上述雷帕黴素42-酯硼酸酯通式所涵蓋到之雷 5 帕徽素42-酯硼酸酯皆可達成。此技術具有通常知識者基於所 使用之雷帕黴素42-酯糊酸酯，十分容易地修改該雷帕黴素42-醋蝴酸_在溶劑混合物中之濃度、二醇對雷帕黴素42-酯硼酸 醋之比例、溶劑的組成、反應的溫度以及所欲的反應時間或 基它在此揭示之可變變數。 10 在一實施態樣中，雷帕黴素42-酯硼酸酯是以在溶劑混 合物之重量為準約10%至約30%、約15%至約30%、約 20%至約3〇%，或約25%至約30%而被提供。在又一個實 施態樣中，該雷帕黴素42-酯硼酸酯是以約30%重量而被 提供。雷帕黴素42-酯硼酸酯之較高濃度，例如，40%，並不 15 是較佳者，蓋因其會造成黏滯固體的沈澱，而此等固體會 黏著到該反應器之壁，進而降低產率。此技術具有通常知 識者可以基於溶劑組成、反應溫度以及所欲的反應時間而 選擇出較佳的比例。 該二醇係以在反應混合物中二醇對雷帕黴素42-酯棚酸 20 酯之莫耳比例是由約2 : 1至約10 : 1而被提供出來。在一實 施態樣中，二醇對雷帕黴素42-酯硼酸酯之莫耳比例為至少 5:1。在另一實施態樣中，二醇對雷帕黴素42-酯硼酸酯之莫 耳比例為約5··1。在又一實施態樣中，二醇對雷帕黴素42-酯硼酸酯之莫耳比例為約6 : 1、約7 : 1、約8 ·· 1、約9 : 1、 15 200804399 約10 : 1或任何在此之增量’例如，5丨：i或8 5 .卜一 般而言’增高二醇之量會促進反應的完成。此技術具有通 常知識者可以基於雷帕黴素42-醋硼酸酯在溶劑混合物中之 濃度、溶劑的組成、反應的時間與所欲的反應時間而選擇出較 5 佳的比例。 各式各樣的1，2-、1，3-、1，4_與二醇係可使用以達 成該轉硼酸反應。經烷基取代之二醇是較佳的，例如2_甲 基_2,4-戊二醇。在另-實施態樣中，則是可應用二乙醇胺 I經固體支樓的聚苯乙稀二乙醇胺（PS_DEAM)。轉棚酸反 1〇應亦可使用羧酸試劑，例如，草酸、丙二酸、酒石酸、苯 二甲酸以及水楊酸來完成。 在-實«樣中，祕劑混合物係由醚類與所組成 者在又一個貫施悲樣中，该鱗係為乙。但，本發明並 15不限制於此。在一實施態樣中，該溶劑混合物含有醚與單 一—種。在另一實施態樣中，該溶劑混合物含有醚與混合 物。在其它的實施態樣中，諸如二甲苯、第三-丁基甲基醚 (TBME)、乙醚、"Pr^O、己烷、環已烷、二噁烷之類的溶 Μ或含有此溶劑的混合物亦可使用以取代。在此有引用到 的使用之處，亦被認為可使用此等溶劑或其等混合物。 >0 在此所使用」一詞包含有及其異構物。此一詞亦包 含有主要由c7異構物所組成且帶有殘留主要是c8異構物 組成份之製劑，例如，EXXSOL⑧流體（Exxon Mobil Chemicai)。但是，本發明並不限於此。其它可使用於本發 明之製劑，包含有商業上可取得之製劑，係為此技術具有 16 200804399 通韦知識者所知悉者，且被包含在為本發明之内。 5亥係為此技術具有通常知識者基於反應條件而選用 者。再者，醚對之比例亦可以調整。醚對之比例是落在i ·· 1至約3 : 1，或i : 1至約to約2 :丨（以重量計）之範圍内。 雖^向喊對之比例可以促進反應的完成，但增高的比例， 例如’ 4:1，會造成黏滯固體的沈澱，因而是不利的。在 一實施態樣中，醚對之比例係約2 : ι(以重量計）。但是， 此技術具有通常知識者可以基於二醇對雷帕黴素42-酯硼酸 酿之比例、雷帕黴素42_酯硼酸酯在溶劑混合物中之濃度、溶 1〇劑的組成、反應的時間與所欲的反應時間而選擇出較佳的比 例。 該反應亦可在落在約20 °C至約40 °C、約25 °C至約

40 °C、約 30 °C 至約 to about 40 °C，或約 35°C 至約 40oC 的範圍内進行，其中增高溫度一般可以促進反應完成。在 15 一實施態樣中，該溫度是約30 °C至約40 °C。在一實施態 樣中，該溫度是約34 °C至約35 °C。但是，此技術具有通 常知識者可以基於二醇對雷帕黴素42_酯硼酸酯之比例、雷帕 黴素42-酯硼酸酯在溶劑混合物中之濃度、溶劑的組成、反應 的時間與所欲的反應時間而選擇出較佳的溫度。 20 反應之完成系可利用此技術具有通常知識者所之知 之傳統方法來監測。在較佳的條件下，該反應係可有效地 在3至4小時内完成。在反應完成後，所生成之粗雷帕黴 素42-酯係被冷卻至約20至25 «C並被攪拌，以避免黏滯 或黏著之固體的生成。在一實施態樣中，反應混合物係被 17 200804399 攪拌約達18小時。在另一實施態樣中，反應混合物係被攪 拌約達38小時。在反應混合物在降低溫度下攪拌後，該粗 粗雷帕黴素4 2 -酯則藉由加入非極性且以碳為主的溶劑或其等 混合物而使之沈澱。在一實施態樣中，該非極性且以碳為主的 ’谷劑係可為己烷、戊烷以及與其等混合物。在又一實施態樣 中，該非極性且以碳為主的溶劑係為。在一實施態樣中，該 非極性且以碳為主的溶劑對醚之比例係為約3 : 1(以重量 计）。在一實施態樣中，所得到之經沈澱的粗雷帕黴素42_ 酉曰係被過滤並以加以清洗。 純化雷帕黴素42-酯 沈澱後’該粗雷帕黴素42-酯係經由多步驟製程而被純 化’該多步驟製程涉及再結晶與不純化（例如苯硼酸）與二醇之 反應。此等步驟的次序並不限制本發明。換言之，在一實施態 15樣中，該粗雷帕黴素42-酯是首被二醇處理，而後再將固態雷 帕黴素42-酯再結晶。在另一實施態樣中，該粗雷帕黴素42_ 醋係先被再結晶，而後該雷帕黴素42-酯之漿液再被二醇處 理。 在此所揭示的純化步驟對為上述雷帕黴素42-酯通式 20所包含之全部分雷帕黴素42-酯化合物皆是可以達成。此技術 具有通常知識者亦基於所使用之雷帕黴素4厶酯硼酸酯而十 分容易修改雷帕黴素42-酯在溶劑混合物中之濃度、二醇對粗 雷帕徽素42-醋之比例、溶劑的組成、反應的溫度、所欲的反 應時間或其它在此所揭示之變數。 18 200804399 於大量製程(例如，高於2 kg)中，在由雷帕黴素42_ 酯硼酸酯所製得之粗雷帕黴素42_酯中殘餘苯硼酸量是位在 1.8至2.9 %之間。以先述再結晶之純化方法僅可以降低此 量一半。較佳的是，本發明純化方法可以降低該苯硼酸之 5總量至低於(U%，且在某此實施態樣下，是低於〇 〇5%。 利用二 叶/订阳曲糾L 1C*祖哥中白 10 15 20 在此實施態樣中，利用二醇處理來純化是在再站曰 之前進行的，經由轉魏反應所生成之粗雷帕徽素42=

液是先被乾燥去除殘餘的溶劑。 K 該粗雷帕黴素42-醋是在一溶劑中以二醇處理之。在一 實施態樣中，該溶義嶋。在另—實施態樣中，該溶劑俾I 醚。在一實施態樣中，該二醇係為2_甲基-2,4·戊二醇。二醇 對雷帕黴素42-酯之莫耳比例是在約 1至約10 : 1之範圚 内。在一實施態樣中，雷帕徵辛42 t 倣常42-酉曰對二醇之莫耳比例係 約5:卜該反應係在約2〇至挪之範_進彳 、 二=’34°c’並不_的’因為其會造成黏Γ帶固 王 反應完成’例如。苯蝴酸的消失，係可以利用此技 術具有通常知識者已知的傳統方法來監測。 下，該反應係可以在5小時内有效率地完成。在= 施態樣中，該反應是可以重覆，以進_ 曰^ ^ 0 乂降低笨硼酸的含 1。在反應元成後，該經部分純化的雷帕徽素& 乾 燥以產生固體的雷帕黴素42-酯。 —” 19 200804399 該呈固態且經部分純化的雷帕黴素42-酯係被溶解於 極性溶劑。在一實施態樣中，該溶劑係為乙酮。在另一實施態 樣中，該溶劑係為乙酸乙酯。但是，其它的極性溶劑以及對粗 雷帕黴素42-酯為適當比例之溶劑係可為此技術具有通常知 5 識者所選用。在一實施態樣中，該溶劑對粗雷帕黴素42·酯 之比例是自約5 : 1至約8 : 1 (以重量計）。在一實施態樣中， 該溶劑係為乙酮，且乙酮對粗雷帕黴素42-酯之比例約5 : 1 (以重量計）。在雷帕黴素42-酯溶解後，不可純的雜質係被過 濾出來，且該過濾液係被濃縮以形成泡沫。 10 而後該泡沫係溶解於醚類中，經一段時間後，經純化之 雷帕黴素42-酯係結晶出來。在一實施態樣中，該醚類係為 乙醚。但是，其它的醚類亦可使用，以沈澱出雷帕黴素42-酯。在一實施態樣中，該雷帕黴素42-酯對醚的比例係為約1 ·. 4至約1 : 3。在另一個實施態樣中，該雷帕黴素42-酯在醚 15 類中約29%至37%或約29%至約30%(以重量計）。 在醚類再結晶後，所得到之於醚類中的雷帕黴素42-酯漿液係進一步為處理。在一實施態樣中，該對醚之比例 係為3 : 1(以重量計）。在另一實施態樣中，在處理且利用 過濾而單離出經純化之雷帕黴素42-酯之後，該雷帕黴素42-20 酯在乾燥之前先以醚與的溶液清洗。在另一實施態樣中，在 清液中醚對之比例係為1 : 2(以體積計）。在清洗後，所得 的產物係被乾燥以產生經純化之雷帕黴素42-酯。 利用再結晶/二醇純化粗雷帕黴素42-酯 20 200804399 在另一實施態樣中，由轉硼酸反應所得到之粗雷帕黴 素42-醋係首先進行再結晶。一般而言，粗雷帕黴素42_醋係 經過渡並以抽氣乾燥。而後粗雷帕黴素42-g旨係溶解於極性溶 劑，例如，乙酮或乙酸乙酯，任何的不溶雜質係被過濾，且 5該濾液係被#乾成泡沫，且所得到的泡沫係溶解於極性溶劑（例 如，簡）中。在-段時間後所*現的沈殿包含有經再結晶且部 分純化之雷帕黴素42-酯。 在一溶劑中的二醇溶液係與該經再結晶且部分純化之 雷帕黴素42_酯相混合，以形成一漿液。在—實施態樣中，該 10溶劑係醚類，在另一實施態樣中，該溶劑係乙醚。在一實 施態樣中，該部分純化之雷帕黴素仏醋在溶劑中係為約1〇% 至約30%重量，或約20%至約30%重量。名s者— 里隹另一實施態 樣中，該部分純化之雷帕黴素42-醋在溶劑中係為約3〇%重 量。 15 在一實施態樣中’該二醇係為2-甲基_2，屯戊二酸。 二醇對雷帕黴素42-酯之莫耳比例係落在約2 · ί吞, • 1 t 丄: 1 t 範圍内。在一實施態樣中，雷帕黴素42-酯對二醇之莫耳比例 係為約5 : 1。該反應係在約20至25°C之範圍内進行。車六 高的溫度，例如，34 QC，並不是較佳的，因為其會造成黏 20 滞固體之生成。 反應完成，例如，苯棚酸的消失，係可以利用此技 術具有通常知識者已知的傳統方法來監測。在較佳的條件 下，該反應係可以在5小時内有效率地完成。在另_個〒 施態樣中，該反應是可以重覆，以進一步降低笨硼酸的含 21 200804399

在反應完成後’則將加入至該混合物中，且所得到的 懸浮液係經由過遽而分離並乾燥以生成結晶性經純化之雷 帕黴素42-酯。 5 在一實施態樣中，本發明所製得之CCI-779係可依據 下列的製備·經趑允，#磊/4 CC/-779之才法進一步純化 〇〇以—，以《/·，美國專利申請案號60/748,006，於2〇〇5 年12月7曰申請，其與本案同曰於美國專利局申請），其 說明書與申請之内容在此列為參考資料。依據本發明方法 10所生成之CCI-779的結晶性係可利用一使用差示掃瞄量熱 法來測ϊ CCI-779的結晶性(jDaAmt/执以，美國專利申 請案號60/748,005，於2005年12月7日申請，其與本案 同曰申請），其說明書與申請之内容在此列為參考資料。 在一實施態樣中，本發明方法是用來由CCI_779蝴酸 15酯製造出經純化之CCI-779。下列的流程係摘述了本發明之 CCI-779的方法。 22 200804399

Ce^-i 90 BN 〇10 yw 1116.22 CgHi4〇2 mi 11818 %m 1030 31

三甲基_ 1’3,2-二氧硼頊垸 Cl2HlTB〇2 過滤 乙關/醚類再f晶 2-甲基-2,4-戊二酵 庚烷 COI-779

Gf6H：B7N〇i6 MW 1030 31 下列實施例例示說明本發明方法一種實施態樣。 實施例1 -經純化之CCI-779的製備 A·粗CCI-779之製備 5 在一設有機械攪拌器、溫度計、500-mL壓力平衡化 額外的漏料以及具有氮氣頭的迴流冷凝器的3-L多頸圓底 三角瓶中加入配置於371 g乙醚與185 g之199 g (0.178莫 耳）的CCI-779硼酸酯與105 g of 2-甲基-2,4-戊二酸 (0.891莫耳）。該混合物係在氮氣且擾摔下加熱到33-37 C 10 並維持達12 h。HPLC顯示起始之CCI-779硼酸酯（<3%) 與苯硼酸在反應混合中的消耗量是低於一低於3 0%或1.5 %的規袼。反應混合物在20分鐘的期間冷卻至20-25 °C， 經由該額外漏斗而在1小時中加入928 g，而後在20-25 °C 攪拌達1 h。所得到的混合物在布赫爾（Buchner)漏斗。該經 15過濾之固體是以二部分之500 mL的清洗。在用抽氣方式乾 23 200804399 無直到基本上不再有濾液被收集後，174克的粗CCI-779 被單離出來[強度=93·8%，總雜質<36%，雷帕徽素=〇·4〇% (HPLC 號）；醚=0.15%，庚烷=0.26 % (GC)]。 B·粗CCI-779之純化 5 所得到的粗CCI_779係被轉移到2-L三角瓶，而後加 入1 L的乙顯I，以彳寸到一霧狀溶液。該溶液經由一帶有微 細玻璃釉之玻璃布赫爾（Buchner)漏斗(4·5 ·5而澄清化。 該澄清的濾液被釋放至一設有機械攪拌器、溫度計以及真 空蒸館器的5-L多頸三角瓶中。該2丄三角瓶與布赫爾漏 1〇斗是以400 mL以同清洗。乙_洗液係被加入至該5-L三角 瓶中。於2G-3G°C且在減壓下移除該乙酮，所得到的泡沫 係在20-25 C下溶解於42〇 g乙_中，以形成一澄清溶液。 在20 後固體開始沈殿。已先經過&45哗針筒過滤之 配置52g乙鱗中的1〇5·3 g2_甲基_2,4_戊二酸溶液係被釋 入"亥5 [ —角瓿内。該混合物在2〇_25 〇c下攪拌達i h。 HPLC分析顯不該笨爛酸量是低於〇 〇5 %。而後在該反應 此口物中’經由漏斗而在2小時内加入。於2〇-25 C攪拌達1 h後’該混合物係在布赫爾漏斗上過濾、。所收 集到的固體係以三部分之500 mL喊/ (1/2, v/v)加以清 20洗，維持抽氣直到其停止滴落。該渥的滤餅係在別乂且 在真空下於真空烤箱中乾燥達21 h，以產生156克（89%， 強度枚正）之呈白色固體的純化cCI_779 (cz_7781_24-2) [強度-98.4%’總雜質=〇 98%，雷帕黴素=〇 36%，phB(〇Hh 24 200804399 -2,4-戊二酸= 0.096%，2-甲基-2,4-戊二酸硼酸酯=未偵測 (GC)]。 實施例2-經純化之CCI-779的製備 5 使用基本上前述實施例1的方法進行早期的中間工 廠試驗研究，但是變化各種CCI-779硼酸酯之濃度，且 CCI-779亦由不同路徑製得。在下列表中，製程代碼1係 指：在配於2/1 (wt/wt)醚/庚烷27% (wt%) CCI-779硼酸酯 在34-5°C下達6-12h，而後加入庚烧，過濾之。純化是經 10 由乙酮/醚類的結晶而後再以2-甲基-2,4-戊二酸處理來進 行。製程代碼2 :在配於2/1 (wt/wt)醚/庚烧17% (wt°/〇) CCI-779石朋酸酉旨在34-50C下達15-24 h，而後力口入庚烧，過 濾之。純化是經由乙酮/醚類的結晶而後再以2-甲基-2,4-戊二酸處理來進行的。 15 25 200804399 製 CCI-779 程 產 強度/純度 殘餘溶劑 代 率 (%) 碼 (%) 1 84 強度=99.3 總雜質=0.80 LSI = 0.26 PhB(OH)2 < 0.05 n/a 1 89 強度=98.4 醚=0.21 總雜質=0.98 庚烷=0.037 LSI = 0.31 2-甲基-2,4-戊二酸= 雷帕黴素=0.36 0.096 PhB(OH)2 < 0.05 CCI-779硼酸酯 偵測. =未 Diol-硼酸酯=未偵測 2 86 強度=100.7 醚=0.15 總雜質=0.92 庚烧.=0.016 LSI = 0.14 2-甲基-2,4-戊二酸= 雷帕黴素=0.29 0.044 PhB(OH)2 < 0.05 二醇-硼酸酯=未偵測. 2 83 強度=98.7 —0.11 總雜質=1.01 庚烧.=0.05 LSI = 0.26 2-曱基-2,4-戊二酸=0.15 雷帕黴素=0.29 PhB(OH)2< 0.05 CCI-779硼酸酯 偵測. =未 二醇-硼酸酯=0.05 26 200804399 實施例3-經純化之CCI-779的製備，另一路徑 粗CCI-779基本上是在34°C下使用配置於醚與庚烧 (2:1，斯/Wt)中5當量之2_甲基_2斗戊二酸混合物中達6小 時，而如上所述由CCI-779硼酸酯製得。該粗CCI_779係 5以過濾單離出。該粗CCI-779係懸浮於醚中，而後以5賞 里之of2-甲基-2,4-戊二酸處理，再加入庚烷，過濾並乾燥 之。該經乾燥之部分純化的CCI-779其後被溶解於乙酮 中，並澄清化並將乙酮去除。在此之後，醚係加入結晶產 物，庚烷加入該醚漿液，該漿液係被過濾並乾燥。所獲得 1〇之產率係為73%之CCI-779,其具有93.5%強度，總雜質 低於 4%(13·59%)，以及明顯地 PhB(OH)2 為 0.007。 所有在此所指出之文件皆列為參考資料。本技術具有 通常知識者可以認知到，對於在此所述之特定實施例中的 條件與技術之些微修改是可以在不偏離本發明精神下變化 15 的。此等修改與變化是落在本發明在此所揭示之範疇内， 且以下述的申請加以界定。 【明式簡單說明3 無 20 f生要元件符號說明】 無 27

Claims (1)

1. 200804399 十、申請專利範圍： 1 · 種製備雷帕黴素42-酯的製程，其包含： ()々Μ帕徽素42-酯蝴酸酯在一溶劑混合物中與二醇起反 應，以提供粗雷帕黴素42-酯；以及 (H)利用再結晶以及二醇處理而純化該粗雷帕黴素42_酯。 2·如申請專利範圍帛工項之製程，其中該步驟⑻包含在溶劑 以一醇處理該粗雷帕黴素42-酯以形成固體雷帕黴素42_ 8曰，而後再結晶該固體以形成經純化之雷帕黴素42•酯。 3·如申請專利範圍第工項之製程，其中該步驟⑼包含再結晶 。亥粗雷帕黴素42_g旨以形成一漿液，而後以二醇處理以形成 經純化之雷帕黴素42-酯。 申》月專利範圍第1至3項中任—項之製程，其中在該步 驟(a)中的雷帕黴素42_酯硼酸酯在該溶劑混合物中係呈由 約10%至約30%重量。 ^申明專利範圍第4項之製程，其中在該步驟⑷中的雷帕 黴素42-酯硼酸酯在該溶劑混合物中係呈約3〇%重量。 •如申請專利範圍第m項巾任―項之製程，其中在該步 驟⑷中二醇對雷帕#素42_醋删酸醋之莫耳比例係為由約 5 ·· 1 至約 ίο : 1。 7. ^申請專利範圍第6項之製程，其中在該步驟(a)中二醇對 雷帕黴素42-酯硼酸酯之莫耳比例係為約5 : i。 (如申請專利範圍第項中任—項之製程，其中在該步 驟(a)之二醇係為2_甲基'4_戊二醇。 乂 如申請專利範圍第1至3項中任一項之製程，其中在該步 28 200804399 驟（a)之混合物包含有乙醚以及庚烷。 10·如申請專利範圍第1至3項中任一項之製程，其中在該步 驟(a)之混合物包含有乙醚以及由庚烷所構成之混合物。 11.如申請專利範圍第10項之製程，其中在該乙醚對庚烷的比 5 例係為由約1 : 1至約2 : 1(以重量計）。 12·如申請專利範圍第1至3項中任一項之製程，其中在該步 驟(a)之反應是在約30至40°C下進行。 13·如申請專利範圍第12項之製程，其中該步驟(a)之粗雷帕黴 素42-酯係被冷卻至約20至25°C。 10 14.如申請專利範圍第1至3項中任一項之製程，其中該步驟 (a)之粗雷帕黴素42-酯係藉由加入一或多種以非極性碳為 主的溶劑而沈澱出來。 15·如申請專利範圍第14項之製程，其中該一或多種以非極性 碳為主的溶劑係選自於下列群中··己烷、戊烷以及庚烷。 15 16.如申請專利範圍第14項之製程，其中該溶劑係選為庚烷混 合物。 17. 如申請專利範圍第16項之製程，其中該庚烷對步驟(a)之溶 劑混合物之比例為約3 : 1(以重量計）。 18. 如申請專利範圍第1至3項中任一項之製程，其中在步驟 20 (b)中的再結晶包含有下列步驟： (I) 在極性溶劑中溶解該粗雷帕黴素42-酯，以及 (II) 過濾所得到的懸浮液並濃縮該粗雷帕黴素42-酯，以產 生一泡沫體。 19·如申請專利範圍第18項之製程，其中該極性溶劑係乙酮。 29 200804399 2〇·如u利_帛18項之製程，其中該極性溶劑係乙酸乙 iq ° .如申明專利|已圍第19項之製程，其中該乙嗣對該粗雷帕徽 素42-S旨之比例係為約5 : i。 女申明專範圍第18項之製程，其進_步包含有溶解該步 驟(H)之泡沫體於喊類中。 23.如申請專利範圍第22項之製程，其中綱類係為乙鍵。 士申-月專利範圍第22項之製程，其中該雷帕黴素42_醋對 鱗類之比例係為約1 : 4至約1 .· 3。 10 25.如中請專利範圍第22項之製程，其進-步包含有加入庚烧。 26.如申請專利範圍第25項之製程，其中該庚烧對域類的比例 係為3 : 1 (以重量計）。 27·如申請專利範圍第25項之製程，其進—步包含有過遽所形 成的懸浮液並以賴以及-或多種庚燒清洗該經沈殿之雷 15 帕黴素42-酯。 28·如申明專利範圍帛27項之製程，其中該趟類對庚燒的比例 係為1 : 2(以體積計）。 29. 如申請專利範圍帛27項之製程，其進一步包含有乾燥該經 單離之雷帕黴素42-酯。 30. 如申請專利範圍第m項中任一項之製程，其中在步驟 (b)以二醇之處理包含有下列步驟： (I)在溶劑中混合該粗雷帕黴素42-自旨，以及 (Π)令該粗雷帕黴素42-醋與二醇起反應。 31·如申請專利範圍帛30項之製程，其中該帽員係為乙鱗。 30 200804399 32. 如申請專利範圍第3〇 制 甘士备> μ 貝之衣％，其中在該步驟⑴中的雷帕 黴素42-醋在該溶劑中係呈約3〇%重量。 33. 如申請專利範圍第30項之製程，其中在該步刪之二醇 係為2-甲基-2,4-戊二醇。 34. 如申請專利範圍第3〇項之製程，其中在該步糊中二醇 對雷帕黴素42-醋之莫耳比例係為約5 :卜 35·如申請專利範圍第3〇項 貝，其中該步驟(11)反應是在 約20至25°C下進行。 3 6 ·如申请專利範圍第3 〇項贺， 10 、衣权其中该步驟（a)之粗雷帕黴 素42-酯係首先被乾燥去除殘餘溶劑。 37.如申請專利範圍第1 J負中任一項之製程，其中該雷帕 微素42-酯删酸醋具有下列通式：

   15 其中，R係為-C=〇.CR7R8R9，其中·· R k自於下列群中·氫、具1-6碳原子的烧基、具有P 碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、(CR12R13)foR10、·既、 20 -F 與-C02R10 ; R10係為氫、具1·6碳原子眺基、具有2_7碳原子的稀 基、具有2-7碳原子的炔基、三苯甲基、苯甲基、具有μ碳 原子的烷氧基甲基、氣乙基或四氫呋喃； R8與R9 —起形成X ; 31 200804399 X係為2-苯基-二氧硼環烷或2-(經取代）苯基-(經取代) 二氧石朋環烧（dioxoborinane); R12與R13R7各自為氫、具1-6碳原子的烷基、具有2-7 碳原子的烯基、具有2-7碳原子的炔基、三氟甲基或-F ; 5 且 f = 0-6。 38. 如申請專利範圍第37項之製程，其中在該2-苯基-二氧硼 環烷係選自於由下列所構成的群中：2-苯基-4,6,6-三甲基 -1，3,2-二氧硼環烷、2-苯基-1，3,2-二氧硼環烷-5-基、2-苯基-1，3,2-二氧硼環烷-4-基，其中該苯基係可任擇地被 10 取代。 39. 如申請專利範圍第37項之製程，其中該雷帕黴素42-酯硼 酸酯係為CCI-779硼酸酯。 40. —種經純化之雷帕黴素42-酯，其係由如申請專利範圍第1 至39項中任一項的製程所製得。 15 41. 一種經純化之3_羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸的雷帕黴素 42-酯（CCI-779)，其係由如申請專利範圍第39項的製程所 製得。 4 2. —種經純化之3 -羥基-2 -(羥甲基)-2 -甲基丙酸的雷帕黴素 42-酯（CCI-779)，其具有至少96%之純度。 20 43.如申請專利範圍第42項之經純化化合物，其中該化合物包 含低於1%之任何單一雜質。 44.如申請專利範圍第42或43項之經純化化合物，其中該化 合物包含低於0.5%之苯硼酸。 32 200804399 七、指定代表圖： . (一）本案指定代表圖為：（無）。 (二)本代表圖之元件符號簡單說明： (無） 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：