RU2010100638A - Композиции и способы лечения, направленные против cd20 - Google Patents

Abstract

1. Гуманизированная СD20-связывающая молекула, содержащая вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) и вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL), содержащие каркасные области и области CDR1, CDR2 и CDR3, где указанные каркасные области представляют собой каркасные области человеческих иммуноглобулинов и где: ! (a) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность CDR3 тяжелой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или ! (b) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность CDR3 легкой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или ! (с) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b); или ! (d) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или ! (e) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или ! (f) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или ! (g) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f); или ! (h) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или

Claims (15)

1. Гуманизированная СD20-связывающая молекула, содержащая вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) и вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL), содержащие каркасные области и области CDR1, CDR2 и CDR3, где указанные каркасные области представляют собой каркасные области человеческих иммуноглобулинов и где:

(a) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность CDR3 тяжелой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(b) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность CDR3 легкой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(с) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b); или

(d) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или

(e) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(f) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(g) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f); или

(h) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или

(i) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность домена VH, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(j) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность домена VL, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(k) как VH по (i), так и VL по (j); или

(l) VH по (i) и VL по (j), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или

(m) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности домена VH, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(n) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности домена VL, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(o) как VH по (m), так и VL по (n); или

(p) VH по (m) и VL по (n), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или

(q) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности домена VH, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(r) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности домена VL, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или

(s) как VH по (q), так и VL по (r); или

(t) VH по (q) и VL по (r), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности;

или CD20-связывающий фрагмент указанной связывающей молекулы.

2. Гуманизированная CD20-связывающая молекула по п.1, представляющая собой гуманизированное антитело или его антиген-связывающий фрагмент, или гуманизированное малое модульное иммунофармацевтическое средство (SMIP).

3. Гуманизированное SMIP, специфически связывающее CD20, где указанное гуманизированное SMIP обладает по меньшей мере одним из следующих свойств:

(а) активность ADCC;

(b) активность CDC;

(с) замедляет рост пересаженных опухолей;

(d) ослабляет прогрессию диссеминированной лимфомы in vivo;

(e) истощает CD19+ В-клетки в периферической крови, костном мозге и лимфатических узлах;

и

(f) связывает тот же самый эпитоп, конкурирует или перекрестно конкурирует с гуманизированной CD20-связывающей молекулой, содержащей аминокислотную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59.

4. Гуманизированное SMIP по п.3, содержащее:

(a) шарнирный домен, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:60;

(b) шарнирный домен, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:60, и эффекторный домен, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:61.

5. CD20-связывающая молекула по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4, помеченное детектируемой меткой.

6. Композиция, содержащая CD20-связывающую молекулу по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4.

7. Набор, содержащий CD20-связывающую молекулу по п.1 или 2, гуманизированное SMIP по п.3 или 4 или композицию по п.6 и инструкции по применению.

8. Нуклеиновая кислота, выбранная из группы, состоящей из:

a) нуклеиновой кислоты, кодирующей CD20-связывающую молекулу или антиген-связывающий фрагмент по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4;

b) нуклеиновой кислоты, которая кодирует домен VH и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность VH, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59;

c) нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO:118-126;

d) нуклеиновой кислоты, которая кодирует домен VL и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность VL, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; и

e) нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO:67-116.

9. Нуклеиновая кислота по п.8, функционально связанная с последовательностью, регулирующей экспрессию.

10. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.8 или 9.

11. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.8 или 9 или вектор по п.10.

12. Способ получения гуманизированной CD20-связывающей молекулы или ее антиген-связывающего фрагмента, включающий стадию культивирования клетки-хозяина по п.11 и сбора гуманизированной CD20-связывающей молекулы или антиген-связывающего фрагмента.

13. Способ обнаружения CD20 в биологическом образце субъекта, включающий стадию контактирования образца с CD20-связывающей молекулой или гуманизированным SMIP по п.5 и обнаружения связывания.

14. Применение композиции в производстве лекарственного средства для

a) лечения субъекта, страдающего или вероятно страдающего заболеванием, связанным с аберрантной активностью В-клеток; или

b) уменьшения количества В-клеток у субъекта, нуждающегося в этом,

где композиция представляет собой терапевтически эффективное количество гуманизированной CD20-связывающей молекулы по п.1 или 2, гуманизированного SMIP по п.3 или 4 или композиции по п.6.

15. Применение по п.14, где субъект страдает ревматоидным артритом, красной волчанкой или рассеянным склерозом.