RS61150B1 - Modulator regulatora transmembranske provodljivosti cistične fibroze, farmaceutske kompozicije, postupci lečenja, i postupak za dobijanje modulatora - Google Patents
Modulator regulatora transmembranske provodljivosti cistične fibroze, farmaceutske kompozicije, postupci lečenja, i postupak za dobijanje modulatoraInfo
- Publication number
- RS61150B1 RS61150B1 RS20201477A RSP20201477A RS61150B1 RS 61150 B1 RS61150 B1 RS 61150B1 RS 20201477 A RS20201477 A RS 20201477A RS P20201477 A RSP20201477 A RS P20201477A RS 61150 B1 RS61150 B1 RS 61150B1
- Authority
- RS
- Serbia
- Prior art keywords
- compound
- mmol
- pharmaceutically acceptable
- cftr
- trifluoromethyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
- C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
- C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
- C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D471/14—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D498/14—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Description
Opis
[0001] Ovde je opisan modulator regulatora transmembranske provodljivosti cistične fibroze (engl. Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR), farmaceutske kompozicije koje sadrže modulator, njihove upotrebe u postupcima lečenja cistične fibroze, i postupak za dobijanje modulatora.
[0002] Cistična fibroza (CF) je recesivna genetska bolest koja napada otprilike 70,000 dece i odraslih širom sveta. Uprkos napretku u lečenju CF, ne postoji lek.
[0003] Kod pacijenata sa CF, mutacije CFTR endogeno eksprimovane u respiratornom epitelijumu vode do smanjene apikalne sekrecije anjona izazivajući neravnotežu u jonskom i fluidnom transportu. Posledični pad u anjonskom transportu doprinosi povećanoj akumulaciji mukusa u plućima i koja je praćena mikrobiološkim infekcijama koje na kraju dovode do smrti pacijenata sa CF. Pored respiratorne bolesti, CF pacijenti uobičajeno pate od gastroinestinalih problema i insuficijencije pankresa, koje ukoliko se ne leče, vode do smrti. Pored toga, većina muškaraca sa cističnom fibrozom je neplodna, a plodnost je smanjenja i među ženama sa cističnom fibrozom.
[0004] Analiza sekvence gena za CFTR je otkrila da mutacije izazivaju različite bolesti (Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; and Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451). Do danas, je identifikovano više od 2000 mutacija u CF genu; trenutno, CFTR2 baza podataka sadrži informacije o samo 322 ovih identifikovanih mutacija, sa dovoljno dokaza da se definiše 281 mutacija kao onih koje izazivaju bolest. Mutacija koja preovlađuje u izazivanju bolesti je delecija u položaju 508 CFTR aminokiselinske sekvence, i uglavnom se uobičajeno naziva kao mutacija F508del. Mutacija se javalja približno u 70% slučajeva cistične fibroze i u vezi je sa nekoliko bolesti.
[0005] Delecija ostatka 508 u CFTR sprečava nascentni protein da se ispravno savija. Ovo dovodi do nemogućnosti mutiranog proteina da izađe iz endoplazmatičnog retikuluma (ER) i pređe do plazmine membrane. Kao rezultat, broj CFTR kanala za anjonski transport prisutnih u membrani je mnogo manji od primećenog u ćelijama koje eksprimuju divlji tip CFTR, tj., CFTR koji nema mutacija. Pored pogoršanog transporta, mutacije dovode do defektnog propuštanja. Zajedno, smanjeni broj kanala u membrani i defektno propuštanje vode do smanjenog anjonskog i fluidnog transprota kroz epitel. (Quinton, P. M. (1990), FASEB J. 4: 2709-2727). Kanali koji su defektni zbog F508del mutacije su još funkcionalni, mada manje funkcionalni od divljeg tipa CFTR kanala. (Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354: 526-528; Pasyk and Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347-50). Pored F508del, mutacije u CFTR koje izazivaju druge bolesti dovode do defektnog tranporta, sinteze i/ili propuštanja kanala koje može biti ushodno ili nishodno regulisano, da bi se izmenilo lučenje anjona i modifikovalo napredovanje bolesti i/ili njene ozbiljnosti.
[0006] CFTR je cAMP/ATP-posredovani anojnski kanal koji je eksprimovan u različitim tipovima ćelija, uključujući apsorcione i sekretrone ćelije epitela, gde reguliše anjonski fluks kroz membranu, kao i aktivnost ostalih jonskih kanala i proteina. U epitelnim ćelijama, normalno funkcionisanje CFTR je od ključnog značaja za održavanje transporta elektorlita kroz telo, uključujući respiratorno i digestivno tkivo. CFTR je sastavljen od približno 1480 aminokiselina koje kodiraju protein koji je napravljen od tandemskih ponovaka transmembranskih domena, od kojih svaki sadrži šest transmembranskih heliksa i nukleotidnog vezujućeg domena. Dva transmembranska domena su vezana sa velikim, polarnim, regulatornim (R)-domainom sa višestrukim fosforilacionim mestima koja regulišu aktivnost kanala i ćelijski saobraćaj .
[0007] Hloridni transport se odvija sa koordinisanom aktivnošću ENaC i CFTR prisutnog na apikalnoj membrani i Na<+>-K<+>-ATPazne pumpe i Cl-kanala eksprimovanih na bazolateralnoj površini ćelija. Sekundarmo aktivni transport hlorida iz luminalne strane vodi do akumulacije intracelularnih hlorida, koji mogu zatim pasivno napustiti ćeliju pomoću Cl-kanala, dovodeći do vektorskog transporta. Raspoređenost Na<+>/2Cl-/K<+>ko-transportera, Na<+>-K<+>-ATPazne pumpe i K<+>kanala bazolateralne membrane na bazolateralnoj površini i CFTR na luminalnoj strani koordinira lučenje hlorida pomoću CFTR na luminalnoj strani. Zbog toga što voda verovatno nikad nije aktivno transportovana sama, njen protok kroz epitel zavisi od malih transepitelijalnih osmotskih gradijenata sa masovnim protokom natrijuma i hlorida.
[0008] Prema tome, postoji potreba za novim postupcima lečenja bolesti koje su posredovane CFTR.
[0009] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje koje ima sledeću formulu :
njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih.
[0010] Prikazani pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže bar jedno jedinjenja koje ima formulu :
njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, čije kompozicije mogu dalje sadržati bar jedan dodatni farmaceutski aktivni sastojak i/ili bar jedan nosač. Jedinjenje prema pronalasku, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih mogu biti korišćenu u postupcima lečenja bolesti posredovanih CFTR-koje obuhvataju davanje bar jednog od jedinjenja prema pronalasku, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli ili deuterisanih derivata bilo koga od prethodno pomenutih, opciono kao deo farmaceutske kompozicije koja sadrži bar jednu dodatnu komponentu, subjektu kome je to potrebno.
[0011] Prikazani pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima sledeću fomulu:
njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, ili farmaceutsku kompoziciju prema pronalasku, za upotrebu u postupcima lečenja cistične fibroze posredovane sa CFTR. Jedinjenje prema pronalasku, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, ili farmaceutska kompozicija prema pronalasku, mogu biti davani sa, (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamidom (Jedinjenje II), i N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4-oksohinolin-3-karboksamidom (Jedinjenje III), opciono kao deo bar jedne farmaceutske kompozicije koja sadrži bar jednu dodatnu komponentu, pacijentu kome je to potrebno.
[0012] Jedinjenje prema pronalasku je jedinjenje 1:
[0013] N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid.
[0014] Prikazani pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutske kompozicije jedinjenja 1, i njihove oblike, koji mogu uključivati bar jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak i bar jedan nosač i njegovu upotrebu u postupcima za lečenje bolesti cistične fobroze posredovane CFTR, koji obuhvata davanje jedinjenja 1 subjektu kome je to potrebno. Postupak dobijanja jedinjenja 1 je takođe opisan.
Kratak opis slika nacrta
[0015]
SL.1 pokazuje strukture neograničavajućih primera ovde prikazanih novih jedinjenja.
SL.2 je XRPD oblika A jedinjenja 1.
SL.3 je eksperimentalni XRPD oblika A jedinjenja 1 (gore) poređen sa izračunatim XRD (dole), koji je izračunat iz podataka monokristala.
SL.4 su preklopljeni eksperimentalni i izračunati podaci XRPD oblika A jedinjenja 1 sa SL.3.
SL.5 je XRPD disperzije osušene raspršivanjem (SDD) 50 mas.% jedinjenja 1 sa HPMCAS-HG.
SL.6 je MDSC spektar SDD 50 mas.% jedinjenja 1 sa HPMCAS-HG.
SL.7 je reprezentativna lista CFTR mutacija.
SL.8 je spektar ugljenika-13 NMR u čvrstom stanju oblika A jedinjenja 1, sa MAS koji se okreće na 12.5 kHz, u odnosu na adamantan 29.5 ppm kao referencu, na 275 K. Spektar je snimljen na Bruker 400MHz WB SSNMR; BH085908; prednost V019431 (konzola), V015741 (magnet).
SL.9 je Fluor-19 NMR spektar u čvrstom stanju oblika A jedinjenja 1, sa MAS koji se okreće na 12.5 kHz, u odnosu na adamantan 29.5 ppm kao referencu, na 275 K. Spektar je snimljen na Bruker 400MHz WB SSNMR; BH085908; prednost V019431 (konzola), V015741 (magnet).
SL.10 pokazuje model kuglica i štapova kristalnog oblika A jedinjenja 1.
SL.11 pokazuje TGA grafik kristalnog oblika A jedinjenja 1.
SL.12 prikazuje grafik dinamične sorpcije pare (DVS) kristalnog oblika A jedinjenja 1.
SL.13 prikazuje difraktogram X-zraka na prahu kristalnog oblika M jedinjenja 1.
SL.14 prikazuje difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika E jedinjenja 1.
SL.15 prikazuje difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika X kalijumove soli jedinjenja 1.
SL.16 prikazuje difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika Y natrijumove soli jedinjenja 1.
SL.17 prikazuje difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika P2 jedinjenja 1.
Definicije
[0016] Kako je ovde korišćeno, izraz "alkil" odnosi se na zasićeni, razgranati ili nerazgranati alifatični ugljovodonik koji sadrži ugljenikove atome (kao što su, na primer, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 ugljenikvih atoma). Alkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0017] Izraz "alkoksi" kako je ovde korišćeno odnosi se na alkil ili cikloalkil kovelento vezan za kiseonikov atom. Alkoksi grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0018] Kako je ovde korišćeno, "cikloalkil" odnosi se na ciklične, biciklične, triciklične, ili policiklične nearomatične ugljovodonične grupe koje imaju 3 do 12 ugljenika (kao što je, na primer 3-10 ugljovodonika). "Cikloalkil" grupe obuhvataju monociklične, biciklične, triciklične, premošćene, spojene, i spiro prstene, uključujući mono spiro i dispiro prstenove. Neograničavajući primeri cikloalkil grupa su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, adamantil, norboril, i dispiro[2.0.2.1]heptan. Cikloalkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0019] "Supstituisane," bez obzira da li mu prethodi izraz "opciono" ili ne, ukazuje da bar jedan vodonik "supstituisane" grupe je zamenjen sa supstituentom. Osim ako nije drugačije navedeno, "opciono supstituisana" grupa može imati pogodan supstituent u svakom položaju koji se može supstituisati grupe, ali kada više od jednog položaja u datoj strukturi može biti supstituisano sa više od jednog supstituenta izabranih iz navedene grupe, supstituent može biti ili isti ili različit u svakom položaju.
[0020] Kako je ovde korišćeno, "deuterizovani derivati" označava istu hemijsku strukturu, sa jednim ili više atoma vodonika zamenjenih sa atomom deuterijuma.
[0021] Kako je ovde korišćeno, "CFTR" označava regulator transmembranske provodljivosti cistične fibroze .
[0022] Kako je ovde korišćeno, "mutacije" može da se odnosi na mutacije u CFTR genu ili CFTR proteinu. "CFTR genska mutacija " odnosi se na mutaciju CFTR gena, i "CFTR proteinsku mutaciju" odnosi se na mutaciju u CFTR proteinu. Genetski defekt ili mutacija, ili promena u nukleotidima u genu generalno dovodi do mutacije u CFTR proteinu koji se dobija translacijom tog gena, ili pomakom okvira.
[0023] Izraz "F508del" odnosi se na mutantni CFTR protein kome nedostaje aminokiselina fenilalanin u položaju 508.
[0024] Kako je ovde korišćeno, pacijent koji je "homozigotan" za određenu gensku mutaciju ima istu mutaciju na svakom alelu.
[0025] Kako je ovde korišćeno, pacijent koji je "heterozigotan" za određenu gensku mutaciju ima ovu mutaciju na jednom alelu, i različitu mutaciju na drugom alelu .
[0026] Kako je ovde korišćeno, izraz "modulator" odnosi se na jedinjenje koje povećava aktivnost biološkog jedinjenja kao što je protein. Na primer, CFTR modulator je jedinjenje koje povećava aktivnost CFTR. Porast u aktivnosti koja proističe iz CFTR modulatora uključuje ali nije ograničeno na jedinjanja koja koriguju, potenciraju, stabilizuju i/ili pojačavaju CFTR.
[0027] Kako je ovde korišćeno, izraz "CFTR korektor" odnosi se na jedinjenje koje olakšava obradu i prenos CFTR da bi se povećala količina CFTR na ćelijskoj površini. Jedinjenja formule (I), (II), (III), (IV), (V), i (VI), i jedinjenje II, i njihove ovde opisane farmaceutski prihvatljive soli su CFTR korektori.
[0028] Kako je ovde korišćeno, izraz "CFTR potencijator" odnosi se na jedinjenje koje povećava aktivnost kanala CFTR proteina smeštenog na ćelijsku površinu, dovodeći do povećanog jonskog transporta. Ovde opisano jedinjenje III je CFTR potencijator.
[0029] Kako je ovde korišćeno, izraz "aktivni farmaceutski sastojak" (eng. active pharmaceutical ingridient-"API") odnosi se na biološki aktivno jedinjenje .
[0030] Kako je ovde korišćeno, izraz "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na oblik soli jedinjenja prema ovom opisu gde je so netoksična. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja prema ovom opisu uključuju one koji potiču iz pogodnih neorganskih i organskih kiselina ili baza. Farmaceutski prihvatljive soli su dobro poznate u stanju tehnike. Na primer, S. M. Berge, et al. opisuje farmaceutski prihvatljive soli detaljno u J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19.
[0031] Kako je ovde korišćeno, izraz "amorfni" odnosi se na čvrsti materijal koji nema pravilan raspored u položaju svojih molekula. Amorfne čvrste supstance su generalno pothlađene tečnosti u kojima su molekuli raspoređeni na nasumični način tako da ne postoji dobro definisani raspored, npr., molekulsko pakovanje, i nemaju pravilan raspored. Amorfne čvrste supstance su generalno izotropske, tj. pokazuju slične osobine u svim pravcima i nemaju određene tačke topljenja. Na primer, amorfni material je čvrsti materijal koji nema oštar karakterističan kristalni signal(e) u njegovom uzorku difrakcije X-zraka na prahu (XRPD) (tj., nije kristalni kako je određeno sa XRPD). Umesto toga, jedan ili nekoliko širokih signala (npr., halogeni) javljaju se u njihovom XRPD uzorku. Široki signali su karakterisitčni za amorfne čvrste supstance. Videti, US 2004/0006237 radi poređenja XRPDs amorfnog materiala i kristalnog materijala.
[0032] Kako je ovde korišćeno, izraz "suštinski amorfni" odnosi se na čvrsti materijal koji ima malo ili nema pravilan raspored u položaju njegovih molekula. Na primer, suštinski amorfni materijali imaju manje od 15% kristalnosti (npr., manje 10% kristalnosti ili manje od 5% kristalnosti). Takođe je zabeleženo da izraz ’suštinski amorfni’ uključuje deskriptor, ’amorfni’,koji se odnosi na materijale koje imaju (0%) kristalnost.
[0033] Kako je ovde korišćeno, izraz "disperzija" odnosi se na disperzni sistem u kome jedna supstanca, disperzna faza, je dispergovana u diskretnim jedinicama, u drugoj supstanci (kontinualnoj fazi ili nosaču). Veličina dispergovane faze može značajno da varira (npr. koloidne čestce nanometarskih dimenzija do veličine više mirkona). Generalno, dispergovane faze mogu biti čvrste supstance, tečnosti ili gasovi. U slučaju čvrste disperzije, dispergovane i kontinualne faze su obe čvrste supstance. U farmaceutskim primenama, čvrsta disperzija može uključivati kristalni lek (dispergovanu fazu) u amorfnom polimeru (kontinualnoj fazi); ili alternativno, amorfni lek (disperznu fazu) u amorfnom polimeru (kontinualnu fazu). U nekim izvođenjima, čvrsta disperzija uključuje polimer koji se sastoji od dispergovane faze i leka koji čini kontinualnu fazu. Ili, čvrsta disperzija uključuje lek koji se sastoji iz dispergovane faze i polimera koji čini kontinualnu fazu.
[0034] Izrazi "pacijenti" i "subjekt"su ovde korišćeni zamenjivo i odnose se na životinju uključujući ljude.
[0035] Izrazi "efikasna doza" i "efikasna količina" su ovde korišćeni zamenjivo i odnosi se na onu količinu jedinjenja koja izaziva željeni efekat za koji se daje (npr., poboljšavnje u CF ili simptomima CF, ili smanjenje ozbiljnosti CF ilisimptoma CF). Tačna količina efikasne doze će zavisiti od svrhe lečenja, i utvrdiće ih stručnjak iz ove oblasti korišćenjem poznatih tehnika (videti, npr., Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[0036] Kako je ovde korišćeno, izrazi "lečenje," "tretiranje," i slično generalno označava poboljšanja CF ili njenih simtoma ili ublažavanje ozbiljnosti CF ili njenih simptoma kod subjekta. "Lečenje," kako je ovde korišćeno, obuhvata, ali bez ograničenja, sledeće: povećan rast subjekta, povećani dobitak u masi, smanjenje mukusa u plućima, poboljšanu funkciju pankreasa i/ili jetre, smanjenje infekcija u grudima, i/ili smanjenje kašljanja ili nedostatka daha. Poboljšanja ili ublažavanja ozbiljnosti bilo kojih od ovih simptoma može biti lako procenjeno prema standardnim postupcima i tehnikama poznatim u stanju tehnike.
[0037] Kako je ovde korišćeno, izraz "u kombinaciji sa," kada se odnosi na dva ili više jedinjenja, sredstava, ili dodatnih aktivnih farmaceutskih sastojaka, označava davanje dva ili više jedinjenja, sredstava, ili aktivnih farmaceutskih sastojka pacijentu pre, zajedno ili jedan posle drugog.
[0038] Izrazi "oko" i "približno", kada se koristi u vezi sa dozma, količinama, ili masenim procentima sastojaka kompozicije ili doznog oblika, uključuje vrednost specifične doze, količine ili masenog procenta ili opsega doze, količine, masnog procenta koga će prepoznati stručnjak iz ove oblast da bi se obezbedio farmakološki efekat koji je ekvivalentan onome dobijenom od specifične doze, količine ili masenog procenata.
[0039] Jedinjenja prema pronalasku, i jedinjenja II, III, IV, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i njihovi deuterisani derivati ovde opisani nezavisno mogu biti davani jednom dnevno, dva puta dnevno ili tri puta dnevno. U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i njihovi deuterisani derivati su davani jednom dnevno. U nekim izvođenjima, jedinjenja prema pronalasku, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i njihovi deuterisani derivati su davani dva puta dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja II i njihove farmaceutski prihvatljive soli je davano bar jednom dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja II i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je davano dva puta dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je davano jednom dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja III i njihove farmaceutski prihvatljive soli je davano dva puta dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja IV i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je davano jednom dnevno. U nekim izvođenjima, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja IV i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je davano dva puta dnevno. U nekim izvođenjima, deuterisani derivati jedinjenja II, III, i/ili IV ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je korišćeno u jednom od ovih izvođenja.
[0040] U nekim izvođenjima, 10 mg do 1,500 mg ovde opisanog jedinjenja, njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata tog jedinjenja ili soli je davano dnevno.
[0041] Prosečan stručnjak iz ove oblasti će znati da, kada je opisana količina "jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli", količina farmaceutski prihvatljiv soli nastala od jedinjenja je količina koja je ekvivalenta koncentraciji slobodne baze jedinjenja. Primećeno je da su ovde opisane količine jedinjenja ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli zasnovane na njihovom obliku baze. Na primer, "10 mg bar jednog jedinjenja izabranog od jedinjenja formule (I) i njihove farmaceutski prihvatljive soli" uključuju 10 mg jedinjenja formule (I) i koncentraciju farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) ekvivalentnu 10 mg jedinjenja formule (I).
[0042] Takođe su opisana jedinjenja formule (I):
njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodno navedenih, gde:
- jedan od Y<1>i Y<2>je N, a drugi je CH;
- X je izabran od O, NH, i N(C1-C4alkil) grupa;
- R<1>je-(C(R<2>)2)k-O-(C(R<2>)2)mR<7>,
- svaki R<2>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, cijano, hidroksila, C1-C2alkoksil grupa, i C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, hidroksila, i C3-5 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
- svaki R<3>je nezavisno izabran između C1-C4alkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više hidroksil grupa, ili opciono dve geminalne R<3>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, obrazuju C3-4cikloalkil;
- svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena;
- R<5>je izabran između vodonika i C1-C4alkil grupe;
- svaki R<6>je nezavisno izabran između halogena, cijano, hidroksila, hidroksimetila, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2alkil grupa, i halogenovanih C1-C2alkil grupa;
- R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano, C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena i hidroksila, i C3-C10cikoalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata svakog nezavisno izabranog između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
- k je 0 ili 1;
- r je 0 ili 1;
- m je 0,1, 2 ili 3;
- p je 0, 1, ili 2;
-p je 0, 1, ili 2; i
- q je 0, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, ili 8.
[0043] Takođe su ovde opisana jedinjenja formule (II):
njihove farmaceutski prihvatljiva soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodno pomenutih, gde:
-X je izabran između O, NH, i N(C1-C4alkil) grupa;
- R<1>je-(C(R<2>)2)k-O-(C(R<2>)2)mR<7>,
- svaki R<2>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, cijano, hidroksila, C1-C2alkoksil grupa, i C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, hidroksila, i C3-5cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
- svaki R<3>je nezavisno izabran između C1-C4alkil grupe opciono supstituisne sa jednom ili više hidroksilnih grupa, ili opciono dve geminalne R<3>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, obrazuju C3-4cikloalkil;
- svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena;
- R<5>je izabran između vodonika i C1-C4alkil grupa;
- svaki R<6>je nezavisno izabran između halogena, cijano, hidroksil, hidroksimetil, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2alkil grupa, i halogenovanih C1-C2alkil grupa;
- R<7>je izabran između vodonika halogena, cijano, C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena i hidroksi, i C3-C10 cikloalkil
1
grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2 alkil grupa, halogenovanih C1-C2 alkil grupa, i halogena;
- k je 0 ili 1;
- r je 0 ili 1;
- m je 0, 1, 2, ili 3;
- p je 0, 1, ili 2; i
- q je 0, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, ili 8.
[0044] Obuhvaćeni obimom formula (I) i (II) su jedinjenja koja sadrže
grupu (gde R’ je H ili C1-C4alkil), tj., gde X je izabran između NH i N(C1-C4alkil) grupa i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodno pomenutih. U nekim izvođenjima, jedinjenje koje ima bilo koju od struktura formula prikazanih na SL.1 ali jedan od (S=O) grupe sulfonamidne grupe u svakoj formuli je zamenjen sa NH ili NR’, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih je obuhvaćen, ili kao izomerna smeša ili enantiomerni višak (npr., >90% ee, >95% ee, ili >98% ee) izomera.
[0045] Takođe su opisana jedinjenja formule (III):
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodo pomenutih, gde:
- R<1>je-(C(R<2>)2)k-O-(C(R<2>)2)mR<7>,
- svaki R<2>je nezavisno izabran između vodonika; halogena; cijano; hidroksi; C1-C2alkoksi grupa; i C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, hidroksi, i C3-5 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena; -svaki R<3>je nezavisno izabran između C1-C4alkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više hidroksi grupa, ili opciono dve geminalne R<3>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, obrazuju C3-4cikloalkil;
- svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena;
- R<5>je izabran između vodonika i C1-C4alkil grupe;
- svaki R<6>je nezavisno izabran između halogena, cijano, hidroksi, hidroksimetil, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2alkil grupa, i halogenovanih C1-C2alkil grupa;
- R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano, C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena i hidroksi, i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
- k je 0 ili 1;
- r je 0 ili 1;
- m je 0, 1, 2, ili 3;
-p je 0, 1, ili 2; i
-q je 0, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, ili 8.
[0046] Takođe su ovde opisana jedinjenja formule (IV):
farmaceutski prihvatljive soli bilo koga od prethodno pomenutih, i deuterisani derivati bilo koga od gore pomenutih, gde:
- R<1>je -O-(CH2)(C(R<2>)2)(m-1)R<7>,
- svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, OH, C1-C2alkoksi grupa, i halogena;
- R<7>je izabran između C1-C2alkil grupe opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena
-R<5>je izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa;
- svaki R<6>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa; i
-p je 0, 1, ili 2.
[0047] Jedinjenje prema prikazanom pronalasku je jedinjenje koje ima sledeću fomulu:
njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih.
[0048] U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku je jedinjenje koje ima sledeću fomulu:
1
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0049] Pogodne farmaceutski prihvatljive soli su, na primer, one opisane u S. M. Berge, et al. J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Na primer, Tabela 1 tog članka obezbeđuje sledeće farmaceutski prihvatljive soli:
Tabela 1:
[0050] Neograničavajući primeri farmaceutski prihvatljivih soli koje potiču od odgovarajućih kiselina uključuju: soli obrazovane od neorganskih kiselina, kao što su hlorovodonična kiselina, bromvodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina, ili perhlorna kiselina; soli obrazovane od organskih kiselina, kao što su sirćetna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, ćilibarna kiselina ili malonska kiselina; i soli obrazovane korišćenjem drugih postupaka koji se koriste u ovoj oblasti , kaošto je izmena jona. Neograničavajući primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, camforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, dodecilsulfat, etansulfonat, format, fumarat, glukoheptonat, glicerofosfat, glukonat, hemisulfat, heptanoat, heksanoat, hidrojodid, 2-hidroksi-etansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat, pektinat, persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, sulfat, tartrat, tiocijanat, ptoluensulfonat, undekanoat, i valeratne soli. Farmaceutski prihvatljive soli koje potiču od odgovarajućih baza uklučuju alkalne metale, zemnoalkalne metale, amonijum, i N<+>(C1-4alkil)4soli. Ovaj opis takođe predviđa kvaternizaciju bilo koje grupe koja sadrži azot ovde opisanih jedinjenja. Pogodni neograničavajući primeri soli alkalnih i zemnoalkalnih metala uključuju natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, i magnezijum. Drugi neograničavajući primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju amonijum, kvaterarni amonijum, i amino katjone obrazovane pomoću suprotnih jona kao što su halid, hidroksid, karboksilat, sulfat, fosfat, nitrat, niži alkil sulfonat i aril sulfonat. Drugi pogodni, neograničavajući primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju besilat i glukozaminske soli.
[0051] U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku, njegove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati pretnodno pomenutih se daje u kombinaciji sa bar jednin jedinjenjem izabranim od jedinjenja II, njegove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisanih derivata prethodno pomenutih. U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati prethodno pomenutih se daje u kombinaciji sa bar jednim jedinjenjem izabranim od jedinjenja III i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli. U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku, njegove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati prethodno pomenutih se daje u kombinaciji sa bar jednim jedinjenjem izabranim od jedinjenja IV i njegovih farmaceutskih soli. U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku,, farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati prethodno pomenutih se daje u kombinacji sa jedinjenjima II ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli ili deuterisanim derivatom i bar jednim jedinjenjem izabranim od Jedinjenja III, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i deuterisanih derivata bilo koga od prethodno pomenutih. U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku,, farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodno navedenog se daje u kombinaciji sa bar jednim jedinjenjem izabranim između Jedinjenja III, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i deuterisanih derivata bilo koga od prethodno pomenutih i bar jednog jedinjenja izabranog između jedinjenja IV, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i deuterisanih derivata bilokoga od prethodno pomenutih.
1
[0052] U nekim izvođenjima, jedinjenje prema pronalasku, (i/ili bar jedna njegova farmaceutski prihvatljiva so i/ili bar jedan deuterizovani derivat takvog jedinjenja ili soli) može biti davan u kombinaciji sa bar jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom. U nekim izvođenjima, bar jedan dodatni aktivan farmaceutski sastojak je izabran između:
(a) Jedinjenja II:
i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
Hemisko ime jedinjenja II je (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid;
(b) Jedinjenja III:
i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
Hemijsko ime jedinjenja III je N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butil-fenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid; i
(c) Jedinjenje IV:
i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0053] Hemijsko ime za jedinjenje IV je 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeva kiselina. U nekim izvođenjima, jedinjenje 1 i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može biti davana u kombinaciji s ajedinjenjem II i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim izvođenjima, jedinjenje 1 i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može biti davano u kombinaciji sa jedinjenjem III i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim izvođenjima, jedinjenje 1 i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može biti davana u kombinaciji sa jedinjenjem IV i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim
1
izvođenjimjedinjenje 1 i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može biti davano u kombinaciji sa jedinjenjima II i/ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli i jedinjenjem III i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim izvođenjima jedinjenje 1 i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može biti davano u kombinaciji sa jedinjenjima II i/ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli i jedinjenjem IV i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.
[0054] U jednom aspektu, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje 1 i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0055] U jednom aspektu, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje 1 i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, jedinjenje II i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0056] U jednom aspektu, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje 1 i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, jedinjenje III i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0057] U jednom aspektu, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje 1 i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, jedinjenje II i/ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, jedinjenje III i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0058] Jedinjenje prema pronalasku,, kao što je na primer, jedinjenje 1, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati takvih jedinjenja i soli mogu se nalaziti u pojedinačnoj farmaceutskoj kompoziciji ili odvojenim farmaceutskim kompozicijama u kombinaciji sa drugim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojcima (npr., jedinjenje II, III, ili IV, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterizovani derivat kao što je jedinjenje ili so) . Takve farmaceutske kompozicije mogu biti davane jednom dnevno ili više puta dnevno kao što je dva puta dnevno. U nekim izvođenjima, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0059] U nekim izvođenjima, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja II i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0060] U nekim izvođenjima, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja III i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0061] U nekim izvođenjima, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja II i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jednog jedinjenja izabranog od jedinjenja III i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0062] U nekim izvođenjima, opis prikazuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja III i njegove farmaceutski prihvatljive soli, bar jednog jedinjenja izabranog od jedinjenja IV i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
1
[0063] U nekim izvođenjima, ovde opisane farmaceutske kompozicije sadrže bar jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak. U nekim izvođenjima, bar jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR modulator. U nekim izvođenjima, bar jednan dodatni farmaceutski sastojak je CFTR korektor. U nekim izvođenjima, bar jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR potencijator. U nekim izvođenjima, farmaceutska kmpozicija sadrži (i) jedinjenje prema pronalasku,, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deutersani derivat takvog jedinjenja ili soli; i (ii) bar jedan od dodatnih farmaceutskih aktivnih sastojaka, od kojih je jedan CFTR korektor i jedan ili više CFTR potencijatora.
[0064] U nekim izvođenjima, bar jedan dodatni aktivan farmaceutski sastojak je izabran od mukolitičkih sredstava, bronhodilatora, antibiotika, anti-infefektivnih sredstava i antiinflamatronih sredstava.
[0065] Farmaceutska kompozicija može dalje sadržati bar jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. U nekim izvođenjima, bar jedan farmaceutski prihvatljiv nosač je izabran između farmaceutski prihvatljivih nosača i farmaceutskih prihvatljivih adjuvanasa. U nekim izvođenjima, bar jedan farmaceutski prihvatljiv je izabran između farmaceutski prihvatljivih punioca, sredstava za dezintegraciju, površinski aktivnih sredstava, vezivnih sredstava i lubrikanata.
[0066] Takođe se smatra da farmaceutska kompozicija prema opisu, uključuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži ranije opisane kombinacije, može biti korišćena u kombinovanim terapijama; to jest, kompozicije mogu biti davane konkurento sa, pre ili naknadno, bar jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sredstvom ili medicinskim postupcima.
[0067] Farmaceutska kompozicije koje sadrže ove kombinacije su korisne u lečenju cistične fibroze.
[0068] Kako je gore opisano, ovde opisane farmaceutske kompozicije mogu opciono dalje sadržati bar jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Bar jedan farmaceutski prihvatljiv nosač može biti izabran od adjuvanata i nosača. Bar jedan farmaceutski prihvaltjiv nosač, kako je ovde korišćeno, uključuje bilo koji ili sve rastvarače, razblaživače, ostala tečna sredstva, pomoćne supstance za dispergovanje, pomoćne supstance za suspendovanje, površinski aktivna sredstva, izotonična sredstva, sredstva za zgušnjavanje, sredstva za emulgovanje, sredstva za održavanje, čvrsta vezivna sredstva, i lubrikanse, kako odgovara određenom željenom doznom obliku. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2005, ed. D.B. Troy, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, and Enciklopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York opisuje različite nosače koji se koriste u formulisanju farmaceutskih kompozicija i poznate tehnike za njihovo dobijanje. Osim ukoliko je bilo koji konvencionalni nosač nekomatibilan sa jedinjenjima prema opisu, tako da izaziva bilo koji neželjeni biološki efekat ili drugačije reaguje na štetan način sa bilo kojom drugom komponentom(ama) farmaceutske kompozicije, smatra se da je njihova upotreba obuhvaćene ovim opisom. Neograničavajući primeri pogodnih farmaceutski prihvatljivih nosača uključuju ali bez ograničenja samo na njih, jonske izmenjivače, aluminijumoksid, aluminijum stearat, lecitin, proteine seruma (kao što je humani serumski albumin), puferske supstance (kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, i kalijum sorbat), smeše parcijalnih glicerida zasićenih biljnih masnih kiselina , vode, soli, i elektrolita (kao što je protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, i cinkove soli), koloidni silicijumoksid, magenzijum trisilikat, polivinil pirolidon, poliakrilati, voskovi, polietilen-poioksipropilen-blok polimeri, masnoća iz vune, šećeri (kao što je laktoza, glukoza i saharoza), skrobovi (kao što je kukuruzni skrob i krompirov skrob), celuloza i njeni derivati (kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celulozni acetat), sprašeni tragakant, malt, želatin, talk, ekscipijent (kako što je kakao puter i voskovi za supozitorije), ulja
1
(kao što je ulje kikirikija, ulje semena pamuka, ulje suncokreta, ulje susama, ulje masline, ulje kukuruza i ulje soje), glikoli (kao što su propilen glikol i polietilen glikol), estri (kao što su etil oleat i etil laurat), agar, sredstva za puferovanje (kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid), algininska kiselina, voda bez pirogena, izotonični rastvor soli, Ringerov rastvor, etil alkohol, rastvori fosfatnog pufera, netoksični kompatibilni lubrikansi (kao što je natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat), sredstva za bojenje, sredstva za oslobađanje, sredstva za oblaganje, zaslađivači, koregensi ukusa, mirisne supstance, sredstva za održavanje, i antioksidasi.
[0069] U nekim izvođenjima, jedinjenja za upotrebu u postupcima prema opisu obuhvataju davanje pacijentu kome je potrebno jedinjenja prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i bar jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja II, jedinjenja III, jedinjenja IV, i farmaceutski prihvatljivih soli bilokoga od prethodno pomenutih.
[0070] Bilo koje pogodne farmaceutske kompozicije poznate u stanju tehnike mogu biti korišćene za ovde opisana nova jedinjenja, jedinjenje II, jedinjenje III, jedinjenje IV, i njegove farmaceutski prihvatljive soli. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenje 1 i njihove farmaceutski prihvatljive soli su opisani u primerima. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenje II i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu biti nađene u WO 2011/119984 i WO 2014/015841. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenja III i njhovih farmaceutski prihvatljivih soli mogu se naći u WO 2007/134279, WO 2010/019239, WO 2011/019413, WO 2012/027731, i WO 2013/130669. Neki primeri farmaceutskih kompozicijija za jedinjenje IV i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se naći u WO 2010/037066, WO 2011/127241, WO 2013/112804, i WO 2014/071122.
[0071] U nekim izvođenjima, farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli se daje sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži jedinjenje II i jedinjenje III. Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje II i jedinjenje III su opisane u PCT objavi br. WO 2015/160787. Primer izvođenja je prikazan u sledećoj tabeli 2:
1
Tabela 2. Primer tablete koja sadrži 100 mg jedinjenja II i 150 mg jedinjenja III.
[0072] U nekim izvođenjima, farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i njegove farmaceutski prihvatljive soli je davana sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži jedinjenje III. Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje III su opisane u PCT objavi br. WO 2010/019239. Primer izvođenja je prikazan u sledećoj tabeli 3:
Tabela 3: Sastojci za primer tablete sa jedinjenjem III.
[0073] Dodatne farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje III su opisane u PCT objavi br. WO 2013/130669. Primeri mini-tableta (∼2 mm prečnika, ∼2 mm debljine, svaka mini-tableta je teška oko
2
6.9 mg) je formulisana da ima približno 50 mg jedinjenja III po 26 mini-tableta i približno 75 mg jedinjenja III po 39 mini-tableta sa količinama sastojaka navedenim dole u tabeli 4.
Tabela 4: Sastojci mini-tableta jačine 50 mg i 75 mg
[0074] U nekim izvođenjima, farmaceutske kompozicije su tablete. U nekim izvođenjima, tablete su pogodne za oralno davanje.
[0075] Jedinjenja, njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani analozi bilo koga od gore pomenutih i, farmaceutske kompozicije, prema opisu, ili u monoterapijama ili kombinovanim terapijama su korisni u lečenju cistične fibroze.
[0076] U nekim izvođenjima, jedinjenja prema pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterisani analozi bilo kog od prethodno pomenutih, ili farmaceutska kompozicija prema pronalasku, su za upotrebu u postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti , ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenta koji obuhvata davanje efikasne količine jedinjenja, njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanih analoga bilo koga od prethodno pomenutih; ili farmaceutska kompozicija, prema opisu pacijentu, kao što je čovek, gde pomenuti pacijent ima cističnu fibrozu. U nekim izvođenjima, pacijent ima F508del/minimalnu funkciju (MF) genotipova, F508del/F508del genotipova, F508del/genotipova propuštanja, ili F508del/genotipova zaostale funkcije (RF).
[0077] Pacijenti sa F508del/minimalnom funkcijom genotipa su definisani kao pacijenti sa heterozigotnim F508del-CFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju koja je predviđena da dovede do CFTR proteina sa minimalnom funkcijom i da se ne očekuje da reaguje na jedinjenje II, jedinjenje III, ili kombinaciju jedinjenja II i jedinjenja III. Ove CFTR mutacije su definisane pomoću 3 glavna izvora:
• Biološka verodostojnost mutacije da reaguje (tj., klasa mutacije)
• Dokazi kliničke oziljnosti na osnovi populacije (po CFTR2 registru pacijenata; pristupljenom 15. februara 2016)
o Srednja vrednnost hlorida u znoju >86 mmol/L, i
o Prevalenca insuficijencije pankreasa (PI) >50%
• in vitro testiranje
o mutacije koje dovode do osnovnog transporta hlorida < 10% divljeg tipa CFTR su smatrane minimalnom funkcijom
o mutacije koje dodvode do transporra hlorida < 10% prirodnog tipa CFTR posle dodavanja jedinjenja II i/ili jedinjenja III se smatra da ne reaguju.
[0078] Pacijenti sa F508del/genotipom zaostale funkcije su definisani kao pacijenti koji su heterozigotni F508del-CFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju koja dovodi do smanjene količine proteina ili funkcije na ćelijskoj provršini koja može proizvesti parcijalnu CFTR aktivnost. CFTR genske mutacije poznate da dovode do zaostale funkcije fenotipa obuhvataju u nekim izvođenjima, mutacije zaostale funkcije CFTR izabrane između 2789+5G→ A, 3849+10kbC→T, 3272-26A→ G, 711+3A→ G, E56K, P67L, R74W, D110E, D110H, R117C, L206W, R347H, R352Q, A455E, D579G, E831X, S945L, S977F, F1052V, R1070W, F1074L, D1152H, D1270N, E193K, i K1060T. U nekim izvođenjima, mutacija zaostale funkcije CFTR je izabrana između R117H, S1235R, I1027T, R668C, G576A, M470V, L997F, R75Q, R1070Q, R31C, D614G, G1069R, R1162L, E56K, A1067T, E193K, ili K1060T. U nekim izvođenjima, mutacija CFTR zaostale funkcije je izabrana između R117H, S1235R, I1027T, R668C, G576A, M470V, L997F, R75Q, R1070Q, R31C, D614G, G1069R, R1162L, E56K, ili A1067T.
[0079] Pacijenti sa F508del/genotipom mutacije propuštanja su definisani kao pacijenti koji su heterozigotni za F508del-CFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju koja je u vezi sa nedostatkom propuštanja i klinički je pokazano da reaguje na jedinjenje III. Primeri takvih mutacija uključuju: G178R, S549N, S549R, G551D, G551S, G1244E, S1251N, S1255P, i G1349D.
[0080] U nekim izvođenjima, jedinjenja prema pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterizovani analozi bilo koga od gore pomenutog, ili farmaceutske kompozicije prema pronalasku, su za upotrebu u postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti, ili siptomatsko lečenje cistične fibroze ovde opisano gde svaki nezavisno proizvodi porast u transportu hlorida iznad osnovne linije transporta hlorida pacijenta.
[0081] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanje ozbiljnosti, ili simptomatsko lečenje cistične fibroze, pacijenta koji je heterozigotan za F508del, i druge CFTR mutacije je bilo koja mutacija koja izaziva CF. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga mutacija CFTR je bilo koja mutacija koja izaziva CF-, i očekuje se da bude i/ili reaguje na bilo koja ovde opisana nova jedinjenja, kao što je jedinjenje 1, jedinjenje II, jedinjenje III i/ili jedinjenje IV genotipova zasnovanih na in vitro i/ili kliničkim podacima. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i ostale CFTR mutacije su bilo koja mutacija koja izaziva CF, i očekuje se da bude i/ili ili reaguje na bilo koju kombinaciju (i) ovde opisanih novih jedinjenja, kao što je jedinjenje 1, i (ii) jedinjenje II, i/ili Jedinjenje III i/ili jedinjenje IV genotipa zasnovanih na in vitro i/ili kliničkim podacima.
[0082] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, smanjenje ozbiljnosti, ili simptomatološko lečenje cistične fibroze, pacijenti poseduju CFTR mutacije izabrane između bilo koje mutacije date u Tabeli 5.
Tabela 5. CFTR Mutacije
2
�
�
Takođe poznata kao
[0083] U nekim izvođenjima u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja simptoma, ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijenti imaju CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G>A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C, 621+3A->G, 1949del84, 3141del9, 3195del6, 3199del6, 3905InsT, 4209TGTT->A, A1006E, A120T, A234D, A349V, A613T, C524R, D192G, D443Y, D513G, D836Y, D924N, D979V, E116K, E403D, E474K, E588V, E60K, E822K, F1016S, F1099L, F191V, F311del, F311L, F508C, F575Y, G1061R, G1249R, G126D, G149R, G194R, G194V, G27R, G314E, G458V, G463V, G480C, G622D, G628R, G628R(G->A), G91R, G970D, H1054D, H1085P, H1085R, H1375P, H139R, H199R, H609R, H939R, I1005R, I1234V, I1269N, I1366N, I175V, I502T, I506S, I506T, I601F, I618T, I807M, I980K, L102R, L1324P, L1335P, L138ins, L1480P, L15P, L165S, L320V, L346P, L453S, L571S, L967S, M1101R, M152V, M1T, M1V, M265R, M952I, M952T, P574H, P5L, P750L, P99L, Q1100P, Q1291H, Q1291R, Q237E, Q237H, Q452P, Q98R, R1066C, R1066H, R117G, R117L, R117P, R1283M, R1283S, R170H, R258G, R31L, R334L, R334Q, R347L, R352W, R516G, R553Q, R751L, R792G, R933G, S1118F, S1159F, S1159P, S13F, S549R(A->C), S549R(T->G), S589N, S737F, S912L, T1036N, T1053I, T1246I, T604I, V1153E, V1240G, V1293G, V201M, V232D, V456A, V456F, V562I, W1098C, W1098R, W1282R, W361R, W57G, W57R, Y1014C, Y1032C, Y109N, Y161D, Y161S, Y563D, Y563N, Y569C, i Y913C.
2
[0084] U nekim izvođenjima, pacijent ima bar jednu kombinaciju mutacija izabranu između: G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G>T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T>C, i 621+3A->G.
[0085] U nekim izvođenjima, pacijent ima bar jednu kombinaciju mutacija izabranu između: 1949del84, 3141del9, 3195del6, 3199del6, 3905InsT, 4209TGTT->A, A1006E, A120T, A234D, A349V, A613T, C524R, D192G, D443Y, D513G, D836Y, D924N, D979V, E116K, E403D, E474K, E588V, E60K, E822K, F1016S, F1099L, F191V, F311del, F311L, F508C, F575Y, G1061R, G1249R, G126D, G149R, G194R, G194V, G27R, G314E, G458V, G463V, G480C, G622D, G628R, G628R(G->A), G91R, G970D, H1054D, H1085P, H1085R, H1375P, H139R, H199R, H609R, H939R, I1005R, I1234V, I1269N, I1366N, I175V, I502T, I506S, I506T, I601F, I618T, I807M, I980K, L102R, L1324P, L1335P, L138ins, L1480P, L15P, L165S, L320V, L346P, L453S, L571S, L967S, M1101R, M152V, M1T, M1V, M265R, M952I, M952T, P574H, P5L, P750L, P99L, Q1100P, Q1291H, Q1291R, Q237E, Q237H, Q452P, Q98R, R1066C, R1066H, R117G, R117L, R117P, R1283M, R1283S, R170H, R258G, R31L, R334L, R334Q, R347L, R352W, R516G, R553Q, R751L, R792G,R933G, S1118F,S1159F,S1159P,S13F,S549R(A->C), S549R(T->G),S589N,S737F,S912L,T1036N, T1053I, T1246I, T604I, V1153E, V1240G, V1293G, V201M, V232D, V456A, V456F, V562I, W1098C, W1098R, W1282R, W361R, W57G, W57R, Y1014C, Y1032C, Y109N, Y161D, Y161S, Y563D, Y563N, Y569C, i Y913C.
[0086] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju G551D. U nekim izvođenjima, pacijent je homozigotan za G551D mutaciju. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za G551D mutaciju. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za G551D muctaciju, ima G551D mutaciju na jendom alelu i bilo koju drugu mutaciju koja izaziva CF-na drugom alelu. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za G551D gensku mutaciju na jednom alelu i drugu mutaciju koja izaziva Cf na drugom alelu koja je jedna od F508del, G542X, N1303K, W1282X, R117H, R553X, 1717-1G->A, 621+1G->T, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, R1162X, G85E, 3120+1G->A, ΔI507, 1898+IG->A, 3659delC, R347P, R560T, R334W, A455E, 2184delA, ili 711+1G->T. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za G551D mutaciju, i druga CFTR mutacija je F508del. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za G551D mutaciju, i druga CFTR mutacija je R117H.
[0087] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju F508del. U nekim izvođenjima, pacijent je homozigotan za F508del mutaciju. U nekim izvođenjima, patent je heterozigotan za F508del mutaciju gde pacijent ima F508del mutaciju na jednom alelu i bilo koju mutaciju koja izaziva CF na drugom alelu. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, uključujući, ali bez ograničenja samo na njih G551D, G542X, N1303K, W1282X, R117H, R553X, 1717-1G->A, 621+1G->T, 2789+5G->A, 3849+10kbC>T, R1162X, G85E, 3120+1G->A, ΔI507, 1898+1G->A, 3659delC, R347P, R560T, R334W, A455E, 2184delA, ili 711+1G->T. U
2
nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR mutacija je G551D. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR mutacija je R117H.
[0088] U nekim izvođenjima, pacijent ima bar jednu kombinaciju mutacija izabranu od:
(i) D443Y;G576A;R668C,
(ii) F508C;S1251N,
(iii) G576A; R668C,
(iv) G970R; M470V,
(v) R74W;D1270N,
(vi) R74W;V201M, i
(vii) R74W;V201M;D1270N.
[0089] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između E193K, F1052V i G1069R. U nekim izvođenjima, postupak izaziva porast u transportu hlorida u odnosu na osnovnu liniju transporta hlorida pacijenta pacijenta.
[0090] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N i D1152H.
[0091] U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G>A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C i 621+3A->G. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 1811+1.6kbA>G, 2789+5G->A, 3272-26A->G i 3849+10kbC->T. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 2789+5G->A i 3272-26A->G.
[0092] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G>A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G-
2
>C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C i 621+3A->G, i CFTR mutacije izab od Frane508del, R117H, i G551D.
[0093] U nekim izvođenjima, u ovde opisanim postupcima lečenja, ublažavanja ozbiljnosti ili simptomatološkog lečenja cistične fibroze, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G>A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C, 621+3A>G, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D; i CFTR mutacije izabrane između F508del, R117H, i G551D.
[0094] U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, and G551D. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između E193K, F1052V i G1069R, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D.
[0095] U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N i D1152H, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D.
[0096] U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G>A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C i 621+3A->G, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 1811+1.6kbA->G, 2789+5G->A, 3272-26A->G i 3849+10kbC->T, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H, i G551D. U nekim izvođenjima, pacijent ima CFTR mutaciju izabranu između 2789+5G->A i 3272-26A->G, i CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H.
[0097] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan kada ima mutaciju koja izaziva CF-na alelu i mutaciju koja izaziva CF-na drugom alelu. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga mutacije koje izazivaju CFTR-je bilo koja od mutacija koja izaziva CF, uključujući, ali bezograničenja na F508del na jednom CFTR alelu i CFTR mutaciju na drugom CFTR alelu koja je u vezi sa minimalnom CFTR funkcijom, zaostalom CFTR funkcijom, ili nedostatkom u aktivnosti propuštanja CFTR kanala. U nekim izvođenjima, mutacija koja izaziva CF-je izabrana iz Tabele 5. U nekim izvođenjima, mutacija koja izaziva Cfje izrabrana iz tabele 6. U nekim izvođenjima, mutacija koja izaziva CF je izabrana iz tabele 7..
[0098] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan ako ima CFTR mutaciju na jednom CFTR alelu izabranom između mutacija datih u tabeli sa SL.7 i CFTR mutatacija na drugom CFTR alelu je izabran između CFTR mutacije date u tabeli 6:
Tabla 6: CFTR Mutacije
1
2
4
[0099] Gornja Tabela 7 uključuje izvesne primere mutacije CFTR minimalne funkcije, koji su detektovani sa FDA-očišćenim genotipskim testom, ali ne uključuje konačnu listu.
[0100] U nekim izvođenjima, pacijent je: sa F508del/MF (F/MF) genotipovima (heterozigotan za F508del i MF mutacija ne očekuje se da reaguje na CFTR modulatore, kao što je jedinjenje III); sa F508del/F508del (F/F) genotipom (homozigotan za F508del); i/ili sa F508del/genotipovima provođenja (F/G) (heterozigotan za F508del i mutacija provođenja poznata da reaguje na CFTR modulator (npr., reaguje na jedinjenje III). U nekim izvođenjima, pacijent sa F508del/MF (F/MF) genotipovima ima MF mutaciju koja se ne očekuje da reaguje na jedinjenje II, jedinjenje III, i oba jedinjenja II i jedinjenja III. U nekim izvođenjima, pacijent sa F508del/MF (F/MF) genotipovima ima samo jednu od MF mutacija u tabeli 7.
[0101] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, uključujući mutacije skraćivanja, „splice“ mutacije, mutacije pomeranja okvira sa malim (≤3 nukleotida) insercijama ili delecijama (ins/del); mutacije pomeranja okvira sa ne-malim (>3 nukleotida) insercijama ili delecijama (ins/del); i klasa II, III, IV mutacija ne reaguje na samo jedinjenje III ili na kombinaciju sa jedinjenjem II ili jedinjenjem IV.
[0102] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija skraćenja. U nekim specifičnim izvođenjima, mutacija skraćenja je mutacija koja je navedena u tabeli 7.
[0103] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je „splice“ mutacija. U nekim specifičnim izvođenjima, splice mutacija je splice mutacija navedena u tabeli 7.
[0104] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija pomeranja okvira sa malo (≤3 nukleotida) insercija ili delecija (ins/del). U nekim specifičnim izvođenjima, mutacija pomeranja okvira sa malo (≤3 nukleotide) insercija ili delecija (ins/del) je mutacija pomeranja okvira sa malo (≤3 nukleotida) insercija ili delecija (ins/del) navedenih u tabeli 7.
[0105] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF za koju se očekuje da reaguje i/ili reaguje na, na osnovu in vitro i/ili kliničkih podataka, bilo koju kombinaciju (i) jedinjenja prema pronalasku (npr., jedinjenje 1), i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i njihove deuterisane derivate), i (ii) jedinjenje II, i/ili jedinjenje III, i/ili jedinjenje IV.
[0106] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF koja se očekuje da reguje i/ili reaguje na, na osnovu in vitro i/ili kliničkih podataka data, na trostruku kombinaciju jedinjenja prema pronalasku (npr., jedinjenje 1), i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i njihove deuterisane derivate), i jedinjenje II, i jedinjenje III.
[0107] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija pomeranja okvira sa nemalom (>3 nukleotidom) insercijom ili delecijom (ins/del). U nekim specifičnim izvođenjima, mutacija pomeranja okvira sa nemalom (>3 nukleotida) insercijom ili delecijom (ins/del) je mutacija pomeranja okvira sa nemalom (>3 nukleotida) insercijom ili delecijom (ins/del) navedenom u tabeli 6.
[0108] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija klase II, III, IV mutacije koja ne reaguje na samo jedinjenje III ili u kombinaciji sa jedinjenjem II ili jedinjenjem IV. U nekim izvođenjima, mutacije klase II, III, IV koje ne odgovaraju na samo jedinjenje III ili u kombinaciji sa jedinjenjem II ili jedinjenjem IV je mutacija klase II, III, IV koja ne reaguje na samo jedinjenje III ili u kombinaciji sa jedinjenjem II ili jedinjenjem IV navedenim u tabeli 7.
[0109] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u tableli 7.
[0110] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija, ali drugačija od F508del, navedenih u tabelama 5, 6, 7, i SL.7.
[0111] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u tabeli 5. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u tabeli 6. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u tabeli 7. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena na SL.7.
[0112] U nekim izvođenjima, pacijent je homozigotan za F508del.
[0113] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan i ima jednu mutaciju koja izaziva CF na jednom CFTR alelu izabran od mutacije navedene u tabeli sa SL.7 i druga mutacija koja izaziva CF na drugom CFTR alelu je izabrana od CFTR mutacije navedene u tabeli 7.
[0114] U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne u lečenju, ublažavanju ozbiljnosti ili simptomatskom lečenju cistične fibroze kod pacijenat koji pokazuju zaostalu aktivnost CFTR na apikalnoj membrani respiratornih i nerespiratornog epitela. Prisutvo zaostale aktivnosti CFTR na površini epitela može biti lako detektovano pomoću poznatih postupaka u ovoj oblasti npr., standardnim elektrofiziološkim, biohemijskim, ili histohemijskim tehnikama. Takvi postupci identifikuju CFTR aktivnost pomoću in vivo ili ex vivo elektrofizioloških tehnika, merenja koncentracije Cl-u znoju ili pljuvački, ili ex vivo biohemijskim ili histogemijskim tehnikama za praćenje površinske gustine ćelija. Korišćenje takvih postupaka, zaostala aktivnost CFTR može biti lako detektovana za pacijente koju su heterozigotni ili homozigotni za raznovrsne različite mutacije, uključujući pacijente heterozigotane za većinu uobičajenih mutacija, F508del, kao i druge mutacije kao što su G551D mutacije, ili R117H mutacija. U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne za lečenje, ublažavanje ozbiljnosti ili simptomatološko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo ili ne pokazuju zaostalu aktivnost CFTR. U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne za lečenje, ublažavanje ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistilne fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo do bez zaotstale aktivnosti CFTR u apikalnoj membrani respiratornog epitela.
[0115] U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne u lečenju ili ublažvanju ozbiljnosti cistične fibroze kod pacijenta koji pokazuju zaostalu aktivnost CFTR korišćenjem farmaceutskih postupaka. Takvi postupaci povećavaju količinu CFTR prisutnu na ćelijskoj površini, tako uključujući do tada odsutnu CFTR aktivnost kod pacijenta ili povećavajući postojeći nivo zaostale CFTR aktivnosti kod pacijenta.
[0116] U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne u lečenju ili ublažavanju ozbiljnosti cistične fibroze kod pacijenata sa izvesnim genitipovima koji pokazuju zaostalu aktivnost CFTR .
[0117] U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne za lečenje, ublažavanje ozbiljnosti, ili simptomatsko lečenje fibroze kod pacijenata sa izvesnim kliničkim fenotipovima, npr., blag do umereni klinički fenotip koji je tipično u korelaciji sa količinom zaostale CFTR aktivnosti u apikalnim membranama epitela. Takvi fenotipovi uključuju pacijente koji pokazuju insuficijenciju pankreasa.
[0118] U nekim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su korisne u lečenju, ublažavanju ozbiljnosti ili simptomatskom lečenju pacijenata kod kojih je dijagnozirana insuficijencija pankreasa, idiopatski pankreatitis i urođeno bilateralno odsustvo testisa, ili blaga bolest pluća u kojoj pacijent pokazuje zaostalu CFTR aktivnost.
[0119] za jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena u postupku uvećavanja ili indukovanja aktivnosti anjonskih kanala in vitro ili in vivo, obuhvata dovođenje u kontakt kanala sa ovde opisanom kompozicijom. U nekim izvođenjima, anjonski kanal je hloridni kanal ili bikarobonatni kanal. U nekim izvođenjima, anjonksi kanal je hloridni kanal.
[0120] Tačna potrebna količina farmaceutske kompozicije će varirati od subjekta do subjekta, u zavisnosti od vrste, godina i opšteg stanja subjekta, ozbiljnosti bolesti, određenog sredstva, njegovog načina davanja i slično. Jedinjenja prema opisu mogu biti formulisana u obliku dozne jedinice za lako davanje i jednoobraznoj dozi. Izraz "jedinični dozni oblik" kako je ovde korišćeno odnosi se na fizički odvojenu jedinicu sredstva pogodnu za lečenje pacijenta. Razume se da, međutim, da će ukupno dnevno korišćenje jedinjenja i kompozicija prema opisu odrediti nadležni lekar na osnovu dobre medicinske prakse. Nivo specifične efikasne doze bilo kog posebnog pacijenta ili organizma će zavisiti od različitih faktora uključujući poremećaje koji se leče i ozbiljnost poremećaja; aktivnost specifičnog korišćenog jedinjenja; korišćene specifične kompozicije; godina, telesne mase, opšteg zdravlja, pola i ishrane pacijenta; vremena davanja, načina davanja, i brzine izlučivanja korišćenog specifičnog jedinjenja; trajanja lečenja; korišćenih lekova u kombinaciji ili slučajno sa korišćenim specifičnim jedinjenjima, i sličnim faktorima dobro poznatim u oblasti medicine. Izraz "pacijent", kako je ovde korišćeno, označava životinju, kao što je sisar, i čak dalje kao što je čovek.
[0121] U nekim izvođenjima, opis se takođe odnosi na jedinjenja i kompozicije za upotrebu u postupcima lečenja korišćenjem jedinjenja obeleženih izotopima gore pomenutih jedinjenja, koji imaju istu strukturu kao što je ovde opisano osim jednog ili više atoma koji su u njima zamenjeni sa atomom ili atomima koji imaju atomsku masu ili maseni broj koji se razlikuje od atomske mase ili masenog broja atoma koji se uglavnom javljaju u prirodi (izotopsko obeležavanje). Primeri izotopa koji su komercijalno dostupani i pogodni za ovaj opis uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, na primer<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, tim redom.
[0122] Jedinjenja obeležena izotopima i soli mogu biti korišćena na brojne korisne načine. Oni mogu biti pogodni za lekove i/ili različite tipove testova, kao što su testovi raspoređenosti u tkivu supstrata. Na primer, tricijumom (<3>H)-i/ili ugljenikom-14 (<14>C)-obeležena jedinjenja su naročito korisna za različite tipove analiza, kao što su testovi rapodele u tkivu supstrata, usled relativno jednostavnog dobijanja i odličnog detektovanja. Na primer, oni obeleženi deuterijumom (<2>H)-su terapeutski korisni za potencijalne terapeutske prednosti u odnosu na jedinjanja koja nisu obeležena sa -<2>H-. Generalno, jedinjenja i soli koja su obeleženi deuterijumom (<2>H)- mogu imati višu metaboličku stabilnost u poređenju sa onima koji nisu izotopski obeleženi usled kinetičkog izotopskog efekta koji je dole opisan. Viša metabolička stabilnost se prevodi direktno u povećani poluživot in vivo ili niže doze, što bi bilo poželjno. Jedinjenja obeležena izotopom i soli mogu uglavnom biti pripremljeni izvođenjem opisanih postupaka u šemama sinteze i sa njima povezanim opisom, u delu sa primerima i u delu sa dobijanjem ovoga teksta, zamenom neizotopskih obeleženih reaktanata sa lako dostupnim izotopski obeleženim reaktantima.
[0123] U nekim izvođenjima, jedinjenja i soli obeleženi izotopima i su oni obeleženi sa deuterijumom (<2>H). U nekim specifičnim izvođenjima, jedinjenja i soli obeleženi sa izotopom su oni obeleženi deuterijumom (<2>H), gde jedan ili više vodonikovih atoma u njima je zamenjeno sa deuterijumom. U hemijskim strukturama, deuterijum je prikazan kao "<2>H" ili "D."
[0124] Jedinjenja i soli obeleženi deuterijumom (<2>H) mogu uticati na oksidativni metabolizam jedinjenja pomoću primarnog kinetičkog izotopskog efekta. Primarni kinetički izotopski efekat je promena u brzini hemijske reakcije koja je posledica izmenjenog izotopskog jezgra, koja zauzvrat je izazvana promenom u osnovnom energetskom stanju neophodnom za obrazovanje kovalentne veze posle ove izotopske izmene. Izmene težim izotopom uglavnom dovodi do rezultata smanjenja osnovnog energetskog stanja hemijske veze i prema tome izaziva smanjenje u kidanju veze koje ograničava brzinu. Ukoliko se javi kidanje veze u ili u blizini regiona „sedla“ duž koordinate reakcije višestrukih proizvoda, odnosi raspoređenosti proizvoda mogu biti suštinski izmenjen. Za objašnjenje: ukoliko je deuterijum vezan za ugljenikov atom na položaju koji se ne može zameniti, razlike u brzinama kM/kD= 2-7 su tipične. Za dalju diskusiju, videti S. L. Harbeson and R. D. Tung, Deuterium In Drug Discovery and Development, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417; and T.G. Gant "Using deuterium in drug discovery: leaving the label in the drug" J. Med. Chem.2014, 57, 3595-3611.
[0125] Koncentracije izotopa (npr., deuterijuma) koje su ugrađene u jedinjenja i soli koje su obeleženi sa izotopom prema opisu mogu biti definisani sa faktorom obogaćenja izotopom. Izraz "izotopski faktor obogađenja" kako je ovde korišćeno označava odnos između izotopske zastupljenosti i prirodne zastupljenosti specifičnog izotopa. U nekim izvođenjima, ukoliko supstituent u jedinjenju prema opisu je obeležen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima faktor izotposkog obogaćenja za svaki obeleženi deuterijumski atom od bar 3500 (52.5% ugradnja deuterijum u svakom obeleženom atomu), bar 4000 (60% ugradnje deuterijuma), bar 4500 (67.5% ugradnje deuterijume), bar 5000 (75% ugradnje deuterijuma), bar 5500 (82.5% ugradnje deuterijume), bar 6000 (90% ugradnje deuterijume), bar
4
6333.3 (95% ugradnje deuterijume), bar 6466.7 (97% ugradnje deuterijume), bar 6600 (99% ugradnje deuterijume), ili bar 6633.3 (99.5% ugradnje deuterijume).
[0126] Pri otkrivanju i razvijanju terapeutskih sredstava, osoba iz stuke pokušava da optimizira farmakokinetičke parametre dok se zadržavju poželjne in vitro osobine. Racionalo se može pretpostaviti da mnoga jedinjenja sa slabim farmakokinetičkim profilima su podloži oksidativnom metabolizmu.
[0127] Prosečan stručnjak iz ove oblasti će znati da deuterizacija u jednom ili više metabolički labilnih položaja na jedinjenju ili jednog ili aktivnog metabolita mogu voditi do poboljšanja jedne ili više superiornijih DMPK osobina dok se održava biološka aktivnost u poređenju sa odgovarajućim analozima vodonika. Superiorna DMPK osobina ili osobine mogu imati uticaj na izloženost, poluživot, klirans, metabolizam, i/ili i čak zahteve za ishranu radi optimalne apsorpcije lekovitog proizvoda. Deuterizacija može takođe promeniti metabolizam na drugim nedeuterisanim položajima deuterisanog jedinjenja.
[0128] U nekim izvođenjima, opis obuhvata deuterisane derivate novih jedinjenja ovde opisanih i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Neograničavajući primeri deuterisanih jedinjenja kao što je opisano u SL.1.
[0129] U nekim izvođenjima, jedinjenje kako je ovde korišćeno obuhvata deuterisano jedinjenje opisano u U.S. patentu br.8,865,902, i CTP-656.
[0130] U nekim izvođenjima, jedinjenje je:
[0131] Jedinjenja prema pronalasku (npr., jedinjenje 1), njegove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od gore pomenutog, mogu biti pripremljeni sa pogodnim postupcima poznatim u ovoj oblasti. Na primer, oni mogu biti pripremljeni u saglasnosti sa postupcima opisanim u WO 2016/057572 i u primerima sinteze opisanim dole u Primerima. Na primer, deuterisani derivati jedinjenja formule (I) -(VI) i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu biti pripremljeni na sličan način kao za jedinjenja formule (I) -(VI) i njegove farmaceutski prihvatljive soli korišćenjem intermedijera i/ili reagenasa gde jedan ili više atoma vodonika je zamenjeno sa deuterijumom. Na primer, videti T.G. Gant "Using deuterium in drug discovery: leaving the label in the drug," J. Med. Chem.2014, 57, 3595-3611.
[0132] Jedinjenja formule (X), (III), (IV), (V), i (VI) i njegove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisani derivati bilo koga od prethodno navedenih mogu biti pripremljeni kao što je prikazano na Šemama 1-2, gde su njihove promenjive su svaka i nezavisno one za gornje formule (I), (II), (III), (IV), (V), ili (VI), i gde svaki R<a>je nezavisno izabran između C1-C4alkil grupe; i svaka X<a>je nezavisno izabrana između F ili Cl. Pogodni uslovi poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni za svaki prikazani korak na šemama. U nekim izvođenjima, svaki X<a>iz formula (B), (C), (D), (F), (B-1), (C-1), (D-1), i (F-1) u šemama 2-4 je nezavisno Cl. U nekim izvođenjima, svaki X<a>u formulama (D), (L), (O), i (P) u šemi 6 je nezavisno F. U nekim izvođenjima, r u formuli (X), (B), (C), (D), i (F) je nezavisno 0.
[0133] Kao što je prikazano na Šemi 1, postupci sadrže reagovanje jedinjenja formule (F) ili njegovih soli sa jedinjenjem formule (G) ili njegovim solima da bi se dobilo generalno jedinjenje formule (X), njegova farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih.
Šema 1
[0134] Na primer, u pomenutim formulama (F), (G) i (X):
- jedan od Y<1>i Y<2>je N, a drugi je CH;
-R<1>je -(C(R<2>)2)k-O-(C(R<2>)2)mR<7>,
-svaki R<2>je nezavisno izabran između vodonika; halogena; cijano; hidroksi; C1-C2alkoksi grupa; i C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, hidroksi, i C3-5 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
-svaki R<3>je nezavisno izabran između C1-C4alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više hidroksi grupa, ili opciono dve geminale R<3>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, obrazuju C3-4cikloalkil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena;
-R<5>je izabran između vodonika i C1-C4alkil grupa;
-svaki R<6>je izabran između halogena, cijano, hidroksi, hidroksimetil, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2alkil grupa, i halogenovanih C1-C2alkil grupa;
-R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano, C1-C2alkil grupe opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena i hidroksi, i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
-X<a>je F ili Cl;
-k je 0 ili1;
-r je 0 ili 1;
-m je 0, 1, 2, ili 3;
-p je 0, 1, ili 2; i
-q je 0, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, ili 8.
[0135] Na primer, r u formuli (X) je 0.
[0136] Bilo koji pogodni uslovi, kao što su oni za nuklofilnu reakciju amina, poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni. Na primer, reakcija prikazana na Šemi 1 je izvedena u prisustvu baze, kao što je karbonat metala (npr., Na2CO3ili K2CO3).
[0137] Na primer, jedinjenja formule (X), njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisani derivani bilo koga od prethodno pomenutih, gde Y<2>je N i Y<1>je CH u svakoj fomruli (F), (G) i (X), su pripremljeni prema postupcima na šemi 1. Na primer, korišćena je so jedinjenja formule (G). Na primer, korišćena je HCl so jedinjenja formule (G).
[0138] Jedinjenje formule (F) ili njegova so jedinjenja formule (G) ili njegova so može biti pripremljeno sa bilo kojim pogodnim postupkom u stanju tehnike, na primer, onim u WO 2016/57572 i onim u dole opisanom primeru sinteze u Primerima.
[0139] Kao što je prikazano u Šemi 2, jedinjenje formule (F), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih je pripremljen sa postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (D) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (E) ili njegovom soli. Na primer, jedinjenja formule (D), njihove soli, ili deuterisani derivati bilo koga od prethodno pomenutih su dobijenao postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (A) ili njegovih soli sa jedinjenjem formule (B) ili njegovom soli da bi se dobilo jedinjenje formule (C) ili njegova so; i hidrolizom -C(O)OR<a>jedinjenja formule (C) da bi se dobilo jedinjenje formule (D) ili njegova so. Bilo koji pogodan uslov poznat u ovoj obalsti može biti korišćen za korake (a), (b), i (c) donje Šeme 2, kao što su oni za reakcije kuplovanja između karboksilne kiseline i sulfonamida ili one za acilaciju sulfonamida u koraku (a), one za hidrolizu estara u koraku (b), i oni za nukleofilnu reakciju amina u koraku (c).
[0140] Na primer, korak (a) donje šeme 2 je izveden u prisustvu baze. Na primer, korak (a) je izveden u prisustvu nenukleofilne baze. Na primer, u koraku (a), reakcije jedinjenja formule (D) ili njene soli sa jedinjenjem formule (E) ili njegovom soli koja obuhvata reagovanje jedinjenja formule (D) ili njegove soli sa sredstvom za kuplovanje, kao što je karbonil diimidazol (CDI), i posle toga sa jedinjenjem formule (E) ili njegovom soli u prisustvu baze, kao što je nenukleofilna baza. Na primer, jedinjenje formule (D) ili njegova so reaguje sa CDI pre reakcije sa jedinjenjem formule (E) ili njegovom soli, i zatim posle toga sa jedinjenjem formule (E) ili njegovom soli u prisustvu baze kao što je DBU (1,8-diazabiciklo(5.4.0)undek-7-en).
[0141] Na primer, korak (b) donje šeme 2 je izveden u prisustvu baze. Na primer, korak (b) je izveden u prisustvu vodene baze, kao što je vodeni hidroksid. Na primer, korak (b) je izveden u prisustvu vodenog metalnog hidroksida, kao što je vodeni NaOH. Na primer, korak (b) donje šeme 2 je izveden u prisutvu kiseline. Na primer, korak (b) je izveden u prisutvuu vodene ksieline, kao što je vodena HCl.
[0142] Na primer, korak (c) donje šeme 2 je izveden u prisutvu baze. U nekim izvođenjima, korak (c) je izveden u pristutvu metalnog karbonata (npr., Na2CO3ili K2CO3).
4
Šema 2
[0143] Jedinjenje prema pronalasku sledeće formule (Jedinjenje 1):
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih može biti pripremljeno ovde opisanim postupcima. Postupak obuhvata reagovanje jedinjenja formule (F-1) ili njene soli sa jedinjenjem formule (G-1) ili njegovom soli, gde X<a>je F ili Cl, kako je prikazano na šemi 3:
Šema 3
[0144] Bilo koji pogodni uslovi, kao što su oni za nukleofilnu reakciju amina, poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni. U nekim izvođenjima, reakcija prikazana na šemi 3 je izvedena u prisustvu baze, kao što je metalni karbonat (npr., Na2CO3ili K2CO3).
[0145] U nekim izvođenjima, korišćena je so jedinjenje formule (G-1). U nekim izvođenjima, korišćena je HCl so jedinjenja formule (G-1).
[0146] Jedinjenje formule (F-1) ili njegova so i jedinjenje formule (G-1) ili njegova so mogu biti pripremljeni bilo kojim pogodnim postupkom u ovoj oblasti, na primer, onim u WO 2016/57572 i onim u primerima sinteze dole opisanim u Primerima.
[0147] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano na šemi 4, jedinjenje formule (F-1) ili njegova so, ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih je pripremljeno postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenje formule (D-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli. U nekim izvođenjima, jedinjenja formule (D-1) ili njegova so, ili njihovi deuterisani derivati su priremljeni postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (A-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (B-1) ili njegovom soli da bi se dobilo jedinjenje formule (C-1) ili njegova so; i hidrolizom -C(O)OR<a>jedinjenja formule (C-1) ili njegove soli da bi se dobilo jedinjenje formule (D-1) ili njegova so. Bilo koji pogodni uslovi poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni za korake (a-1), (b-1), i (c-1) donje šeme 4, kao što su oni za reakciju kuplovanja između karboksilne ksieline i sulfonamida ili oni za acilovanje sulfonamida u koraku (a-1), oni za hidrolizu estra u koraku (b-1), i oni za nukleofilnu reakciju amina u koraku (c-1).
[0148] U nekim izvođenjima, korak (a-1) donje šeme 4 je izveden u prisustvu baze. U nekim izvođenjima, korak (a-1) donje šeme 4 je izveden u prisutvu nenukleofilne baze. U nekim izvođenjima, u koraku (a-1), reakcija jedinjenja formule (D-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli obuhvata reagovanje jedinjenja formule (D-1) ili njegove soli sa sredstvom za kuplovanje, kao što je karbonil diimidazol (CDI), i posle toga sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli u prisutvu baze, kao što je nenukleofilna baza. U nekim izvođenjima, (i) jedinjenje formule (D-1) ili njegova so reaguju sa CDI pre reakcije sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli, i zatim naknadno (ii) reakcioni proizvod koraka (i) reaguje sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli u prisutvu baze, kao što je DBU (1,8-Diazabiciklo(5.4.0)undek-7-en).
[0149] U nekim izvođenjima, korak (b-1) donje šeme 4 je izveden u prisutvu baze. U nekim izvođenjima, korak (b-1) je izveden u prisustvu vodene baze, kao što je vodeni hidroksid. U nekim izvođenjima, korak (b-1) je izveden u prisutvu vodenog metalnog hidroksida, kao što je vodeni NaOH. U nekim izvođenjima, korak (b-1) donje šeme 4 je izveden u prisutvu kiseline. U nekim izvođenjima, korak (b-1) je izveden u prisutvu vodene kiseline, kao što je vodeni HCl.
[0150] U nekim izvođenjima, korak (c-1) donje šeme 4 je izveden u prisutvu baze. U nekim izvođenjima, korak (c-1) je izveden u prisustvu metalnog karbonata (npr., Na2CO3ili K2CO3).
4
Šema 4
[0151] Na šemi 4, R<a>je izabran između C1-C4alkil grupa; i svaki X<a>je nezavisno F ili Cl.
[0152] Na primer, postupci pripremanja jedinjenja formule (I) i (II), gde X je NH ili N(C1-C4alkil) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih, obuhvata reagovanje jedinjenje formule (L) ili njegove soli sa NR*3gde R* je H ili C1-C4alkil, kao što je prikazano na šemama 5 i 6:
4
Šema 5
gde X je
Šema 6
[0153] Bilo koji pogodni uslovi u ovoj oblasti mogu biti korišćeni za reakciju sulfoksaminacije, na primer, za one za elektorofilne adicije amina. Na primer, reakcija sulfoksaminacije je izvedena u prisustvu sredstva za hlorovanje ili oksidovanje, kao što je N-hlorosukcinimid (NCS).
[0154] Na primer, jedinjenje formule (L) ili njegova so je pripremljeno postupkom koji obuhvata oksidovanje sumprone jedinice
grupe jedinjenja formule (M) ili njegove soli kao što je dole prikazano na šemi 7:
4
Šema 7
[0155] Bilo koji pogodni uslovi poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni za reakciju oksidacije. U nekim izvođenjima, oksidacija je izvedena u prisutvu peroksikarboksilne kiseline, kao što je metahloroperoksibenzojeva kiselina (m-CPBA).
[0156] Na primer, jedinjenje formule (M) ili njegova so je pripremljeno postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (O) sa jedinjenjem formule (G) ili njegovom soli. Bilo koji pogodni uslovi poznati u ovoj oblasti mogu biti korišćeni.
[0157] Na primer, jedinjenje formule (O) ili njegova so je pripremljeno postupkom koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (P) ili njegove soli sa fenil disulfidom formule (Q):
U nekim izvođenjima, jedinjenje formule (P) ili njegova so je dobijeno amidacijom -C(O)OH grupe jedinjenja formule (D) ili njegove soli. Bilo koji pogodni uslovi u ovoj oblasti mogu biti korišćeni.
[0158] Dodatna izvođenja obuhvataju:
1. Jedinjenje koje ima sledeću fomulu:
4
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih 2. Jedinjenje prema izvođenju 1 koje ima sledeću formulu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja izvođenja 1 ili izvođenja 2, njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih. Farmaceutska kompozicija izvođenja 3 može opciono dalje sadržati jedno ili više:
(a) Jedinjenje II:
njegovu farmaceutski prihvatljivu soi, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih; (b) Jedinjenje III:
4
njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih; i
(c) farmaceutski prihvatljiv nosač.
4. Jedinjenje prema izvođenju 1 ili izvođenju 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, ili farmaceutska kompozicija prema izvođenju 3 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze.
[0159] Jedinjenje prema pronalasku može biti pripremljeno pomoću postupaka prema bilo kom od izvođenja 46-61.
46. Postupak za dobijanje jedinjenja sledeće formule:
(Jedinjenje 1)
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih, koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (F-1) ili njegove soli, gde X<a>je F ili Cl, sa jedinjenjem formule (G-1) ili njegove soli da bi se dobilo pomenuto jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih:
gde X<a>u formuli (F-1) je F ili Cl.
47. Postupak prema izvođenju 46, gde pomenuto reagovanje jedinjenja formule (F-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (G-1) ili njegova so je izvedena u prisustvu baze.
48. Postupak prema izvođenjima 46 ili 47, gde je korišćena so jedinjenja formule (G-1).
49. Postupak prema izvođenju 48, gde pomenuta so jedinjenja formule (G-1) je HCl so jedinjenja formule (G-1).
50. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (F-1) ili njegova so:
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, koji obuhvata reagovanje jedinjenja formule (D-1) i jedinjenja formule (E-1) da bi se dobilo jedinjenje formule (F-1) ili njegova so:
gde u svakoj pomenutoj formuli, X<a>je F ili Cl.
51. Postupak prema izvođenju 50, gde pomenuto reagovanje jedinjenja formule (D-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli je izedeno u prisutvu baze .
52. Postupak prema izvođenju 50, gde pomenuto reagovanje jedinjenja formule (D-1) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (E-1) ili njegovom soli obuhvata reagovanje jedinjenja formule (D-1) sa sredstvom za kuplovanje i naknadno sa jedinjenjem formule (E-1) u prisustvu baze.
53. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (D) ili njegove soli:
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, koji obuhvata:
(i) reagovanje jedinjenje formule (A) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (B) ili njegove soli da bi se stvorilo jedinjenje formule (C) ili njegova so:
1
(ii) hidroliza -C(O)OR<a>grupe jedinjenja formule (C) da bi se dobilo jedinjenje formule (D) ili njegova so,
gde u svakioj pomenutoj formuli:
-jedan od Y<1>i Y<2>je N i drugi je CH;
-R<1>je -(C(R<2>)2)k-O-(C(R<2>)2)mR<7>,
-svaki R<2>je nezavisno izabran između vodonika; halogena; cijano; hidroksi; C1-C2alkoksi grupa; i C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena, hidroksi, i C3-5 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, halogenovanih C1-C2alkil grupa, i halogena;
- svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena;
-R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano, C1-C2alkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između halogena i hidroksi, i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednim ili više supstituenata od kojih je svaki nezavisno izabran između C1-C2 alkil grupa, halogenovanih C1-C2 alkil grupa, i halogena;
<->Xa je F ili Cl;
<->k je 0 ili 1;
<->r je 0 ili 1; i
<->m je 0, 1, 2, ili 3.
54. Postupak prema izvođenju 53, gde Y<2>je N; i Y<1>je CH.
55. Postupak prema izvođenju 53 ili 54, gde je hidroliza -C(O)OR<a>grupe izvedena u prisustvu baze ili kiseline.
56. Postupak prema bilo kom od izvođenja 53-55, gde pomenuto reagovanje jedinjenje formule (A) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (B) ili njegovom soli je izvedeno u prisustu baze.
57. Postupak prema bilo kom od izvođenja 53-56, gde R<a>je etil ili t-butil.
58. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (D-1) ili njegove soli:
2
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, koji obuhvata:
(i) reagovanje jedinjenje formule (A-1) ili njegove soli i jedinjenja formule (B-1) ili njegove soli da bi se dobilo jedinjenje formule (C-1) ili njegova so:
I
(ii) hidroliza -C(O)OR<a>grupe jedinjenja formule (C-1) ili njegove soli da bi se dobilo jedinjenje formule (D-1) ili njegova so,
gde u svakoj pomenutoj formuli, svaki R<a>je nezavisno izabran između C1-C4alkil; i svaki X<a>je nezavisno F ili Cl.
59. Postupak prema izvođenju 58, gde je hidroliza -C(O)OR<a>grupe izvedena u prisustvu baze ili kiseline.
60. Postupak 58 ili 59, gde pomenuto reagovanje jedinjenja formule (A-1) ili njegove soli i jedinjenja formule (B-1) ili njegove soli je izvedeno u prisustvu baze.
61. Postupak prema bilo kom od izvoeđenja 58-60, gde R<a>je etil ili t-butil.
[0160] Jedinjenja formule (A-1), (C-1), (D-1) i (F-1) kao što su definisana u izvođenjima 64, i 68-70 su korisna kao intermedijeri za dobijanje jedinjenja prema pronalasku.
64. Jedinjenje formule (F-1) ili njegova so:
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, gde X<a>je F ili Cl.
68. Jedinjenje formule (C-1) ili (D-1), ili njegova so:
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, gde R<a>je C1-C4alkil; i svaki X<a>je nezavisno F ili Cl.
69. Jedinjenje prema izvođenju 68, njegova farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, gde R<a>je etil ili t-butil.
70. Jedinjenje formule (A-1), (C-1) ili (D-1), ili njegova so:
ili deuterisni derivat bilo koga prethodno pomenutih, gde R<a>je C1-C4alkil; i svaki X<a>je nezavisno F ili Cl.
71. Bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja prema izvođenju 1 ili izvođenju 2, njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih, i opciono jednog ili više:
(a) Jedinjenja II:
4
njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih; i
(b) Jedinjenja III:
njegove farmaceutski prihvatljive so, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih, za lečenje cistične fibroze.
[0161] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno u kristalnom obliku, ili kao solvat, prema izvođenjima 72-96.
72. Kristalni oblik A jedinjenja 1:
73. Kristalni oblik A prema izvođenju 72 u suštinski čistom obliku.
74. Kristalni oblik A prema izvođenju 72, karakterisan sa difraktorgamom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 6.6 ± 0.2, 7.6 ± 0.2, 9.6 ± 0.2, 12.4 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 16.4 ± 0.2, 18.2 ± 0.2, i 18.6 ± 0.2.
75. Kristalni oblik A prema izvođenju 72, karakterisan sa difraktorgamom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 6.6 ± 0.2, 9.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 18.2 ± 0.2, i 18.6 ± 0.2.
76. Kristalni oblik A prema izvođenju 72, karakterisan sa difraktorgamom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 6.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 18.2 ± 0.2.
77. Kristalni oblik A prema izvođenju 72, karakterisan sa difraktorgamom X-zraka na prahu koji ima signal u šest dva teta vrednosti od 6.6 ± 0.2, 9.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 18.260.2, i 18.6 ± 0.2.
78. Kristalni oblik A prema izvođenju 72, karakterisan sa difraktorgamom X-zraka na prahu suštinski sličnom onom na SL.2.
79. Kristalni oblik A Jedinjenje 1 pripremljen postupkom koji obuhvata desolvataciju bar jednog kristalnog oblika jedinjenja 1 izabranog između kristalnog oblika M, kristalnog oblika E, kristalnog oblika P1, kristalnog oblika P2, i kristalnog oblika AA2.
80. Kristalni oblik A jedinjenja 1 pripremljen postupkom koji obuhvata desolvataciju bar jednog solvata izabranog između solvata metanola, solvata etanola, solvata sirćetne kiseline, solvata toluena, solvata sulfolana, solvata 1-propanola, solvata 2-propanola, solvata propionske kiseline, solvata metil terc-butil etra, i solvata izobuterne kiseline jedinjenja 1 (kao što su, na primer, solvati metanola, solvati etanola, solvati sirćetne kiseline, solvati toluena, solvati sulfolana, solvati propionske kiseline, solvati metil terc-butil etra, i solvati izobuterne kiseline jedinjenja 1, dalje kao što su, na primer, solvati metanola, solvati etanola, solvati sirćetne kiseline, solvati toluena, i solvati sulfolana jedinjenja 1, i dalje kao što su, na primer, solvati metanola i solvati etanola jedinjenja 1) praćeni sa podvrgavanjem dobijenog desolvata vakuum sušenju na sobnoj temepraturi u toku 12 do 100 sati.
81. Bar jedan solvat jedinjenja 1:
izabran između solvata metanola, solvata etanola, solvata 1-propanola, solvata 2-propanola, solvata sirčetne kiseline, solvata toluena, solvata sulfolana, solvata propionske kiseline, solvata metil terc-butil etra, solvata izobuterne kiseline, solvata anizola, solvata metilbutil ketona, i solvata ksilena jedinjenja 1.
83. Kristalni oblik M jedinjenja 1:
84. Kristalni oblik M prema izvođenju 83 u suštinski čistom obliku.
85. Kristalni oblik M prema izvođenju 83, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 7.0 ± 0.2, 11.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 13.7 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 15.9 ± 0.2, 16.4 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, i 19.3 ± 0.2.
86. Kristalni oblik M prema izvođenju 83, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 11.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 13.7 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, i 19.3 ± 0.2.
87. Kristalni oblik M prema izvođenju 83, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 11.6 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, i 13.1 ± 0.2.
88. Kristalni oblik M prema izvođenju 83, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal šest dva teta vrednosti od 11.6 ± 0.2, 13.1 ± 0.2, 13.7 ± 0.2, 15.2 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, i 19.3 ± 0.2.
89. Kristalni oblik M izvođenja 83, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji je suštinski sličan onome na SL.13.
90. Kristalni oblik E jedinjenja 1:
91. Kristalni oblik E prema izvođenju 90 u suštinski čistom obliku.
92. Kristalni oblik E prema izvođenju 90, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 7.0 ± 0.2, 11.2 ± 0.2, 12.8 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 14.1 ± 0.2, 15.1 ± 0.2, 16.1 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, i 18.9 ± 0.2.
93. Kristalni oblik E prema izvođenju 90, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 11.2 ± 0.2, 12.8 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 15.1 ± 0.2, 16.1 ± 0.2, i 17.8 ± 0.2.
94. Kristalni oblik E prema izvođenju 90, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 12.8 ± 0.2, 16.1 ± 0.2, i 17.8 ± 0.2.
95. Kristalni oblik E prema izvođenju 90, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal šest dva teta vrednosti i od 11.2 ± 0.2, 12.8 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 15.1 ± 0.2, 16.1 ± 0.2, i 17.8 ± 0.2.
96. Kristalni oblik E prema izvođenju 90, karakterisa sa difraktogramom X-zraka na prahu koji je suštinski sličan onome ne SL.14.
[0162] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno u kristalnom obliku dobijenom prema izvođenju 97 ili izvođenjut 98.
97. Postupak dobijanja kristalnog oblika A jedinjenja 1:
koji obuhvata mešanje rastvora ili suspenzije jedinjenja 1 u sistemu rastvarača na temperaturi u opsegu od 50 °C do 85 °C.
98. Postupak dobijanja kristalnog oblika A jedinjenja 1:
koji obuhvata desolvataciju solvata jedinjenja 1 izabranog od solvata metanola, solvata etanola, solvata 1-propanola, solvata 2-propanola, solvata sirćetne kiseline, solvata toluena, solvata sulfolana, solvata propionske kiseline, solvata metil terc-butil etra, solvata izobuterne kiseline, solvata anizola, solvata metilbutil ketona, i solvata ksilena jedinjenja 1.
[0163] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno u kristalnom obliku prema izvođenjima 99-112.
99. Kristalni oblik X natrijumove soli jedinjenja 1:
100. Kristalni oblik X prema izvođenju 99 u suštinski čistom obliku.
101. Kristalni oblik X prema izvođenju 99, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 4.9 ± 0.2, 5.9 ± 0.2, 8.1 ± 0.2, 8.5 ± 0.2, 10.3 ± 0.2, 13.0 ± 0.2, 13.960.2, 14.6 ± 0.2, i 17.0 ± 0.2.
102. Kristalni oblik X prema izvođenju 99, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 4.9 ± 0.2, 5.9 ± 0.2, 8.1 ± 0.2, 13.0 ± 0.2, 13.9 ± 0.2, i 17.0 ± 0.2.
103. Kristalni oblik X prema izvođenju 99, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 4.9 ± 0.2, 5.9 ± 0.2, i 13.0 ± 0.2.
104. Kristalni oblik X prema izvođenju 99, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u šest dva teta vrednosti od 4.9 ± 0.2, 5.9 ± 0.2, 8.1 ± 0.2, 13.0 ± 0.2, 13.9 ± 0.2, i 17.0 ± 0.2.
105. Kristalni oblik X prema izvođenju 99, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji je suštinski sličan onome na SL.15.
106. Kristalni oblik Y natrijumove soli jedinjenja 1:
107. Kristalni oblik Y prema izvođenju 106 u suštinski čistom obliku.
108. Kristalni oblik Y prema izvođenju 106, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 3.5 ± 0.2, 7.0 ± 0.2, 11.7 ± 0.2, 12.8 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 14.2 ± 0.2, 15.4 ± 0.2, 16.6 ± 0.2, i 18.0 ± 0.2.
109. Kristalni oblik Y prema izvođenju 106, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 3.5 ± 0.2, 7.0 ± 0.2, 11.7 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 14.2 ± 0.2, i 18.0 ± 0.2
110. Kristalni oblik Y prema izvođenju 106, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 7.0 ± 0.2, 11.7 ± 0.2, i 13.2 ± 0.2.
111. Kristalni oblik Y prema izvođenju 106, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u šest dva teta vrednosti od 3.5 ± 0.2, 7.0 ± 0.2, 11.7 ± 0.2, 13.2 ± 0.2, 14.2 ± 0.2, i 18.0 ± 0.2.
112. Kristalni oblik Y prem aizvođenju 106, karakterisan sa difraktograom X-zraka na prahu koji je suštinski sličan onome na SL.16.
[0164] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno u čvrstoj disperziji prema bilo kom od izvođenja 113-115.
113. Čvrsta disperzija koja sadrži jedinjenje 1 i polimer.
114. Čvrsta dispezija prema izvođenju 113, koja sadrži 50 mas% jedinjenja 1 i 50 mas % polimera u odnosu na ukupnu masu čvrste disperzije ili 80 mas% jedinjenja 1 i 20 mas% polimera u odnosu na ukupnu masu čvrste disperzije.
115. Čvrsta disperzija prema izvođenjima 113 ili 114, gde polimer je hipromeloza acetat sukcinat, hidroksipropil celuloza, hidroksipropil metilceluloza, ili polivinilpirolidon.
[0165] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno u farmaceutskoj formulaciji prema izvođenju 116.
116. Farmaceutska formulacija sadrži bar jedan kristalni oblik prema bilo kojem od izvođenja 72 -96 i 99 -112, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0166] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno kao kristalni oblik za upotrebu prema izvođenju 117, ili kao čvrsta disperzija za upotrebu prema izvođenju 118.
117. Kristalni oblik prema bilo kom od izvođenja 72-96, i 199 -112 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebo bar jednog kristalnog oblika prema bilo kom od izvođenja 72-96, i 199 -112.
118. Čvrsta disperzija prema bilo kom od izvođenja 113 -115 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je potreno čvrste disperzije prema bilo kom od izvođenja 113 -115.
[0167] Jedinjenje 1 može biti obezbeđeno kao kristalni oblik prema bilo kom od izvođenja 119-125
119. Kristalni oblik P2 jedinjenja 1:
120. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119 u suštinski čistom obliku.
121. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 10.2 ± 0.2, 10.9 ± 0.2, 12.6 ± 0.2, 12.9 ± 0.2, 15.0 ± 0.2, 15.9 ± 0.2, 16.2 ± 0.2, 16.5 ± 0.2, i 17.6 ± 0.2.
122. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti izabrane od 10.9 ±0.2, 12.6 ±0.2,12.9 ±0.2, 15.0 ±0.2,16.5 ±0.2, i 17.6 ±0.2.
123. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal u bar tri dva teta vrednosti od 10.9 ± 0.2, 12.6 ± 0.2, i 17.6 ± 0.2.
124. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119, karakterisan sa difraktogramom X-zraka na prahu koji ima signal šest dva teta vrednosti od 10.9 ± 0.2, 12.6 ± 0.2, 12.9 ± 0.2, 15.0 ± 0.2,16.5 ± 0.2, i 17.6 ±6 0.2.
125. Kristalni oblik P2 prema zahtevu 119, karakterisan sa difraktograom X-zraka na prahu koji je suštinski sličan onome na SL.17.
[0168] Druga izvođenja prema pronalasku obuhvataju:
A. Jedinjenje 1 formule
B. Farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja 1 formule
1
C. Farmaceutska kompozicija koja sadrži:
(i) Jedinjenje 1 formule
i
(ii) farmaceutski prihvatljiv nosač.
D. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju C dalje sadrži jedinjenje II:
E. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju C koja sadrži još farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja II:
F. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju C koja dalje sadrži Jedinjenje III:
2
G. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju C koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
H. Farmaceutska kompozicija izvođenja D koja dalje sadrži jedinjenje III:
I. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju D koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
J. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju E koja dalje sadrži jedinjenje III:
K. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju E koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
L. Farmaceutska kompozicija koja sadrži:
(A) farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja 1 formule
i
(B) farmaceutski prihvatljiv nosač.
M. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju L koja dalje sadrži jedinjenje II:
N. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju L koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja II:
O. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju L koja dalje sadrži jedinjenje III:
4
P. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju L koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
Q. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju M koja dalje sadrži jedinjenje III:
R. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju M koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
S. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju M koja dalje sadrži jedinjenje III:
T. Farmaceutska kompozicija prema izvođenju M koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
U. Jedinjenje 1 za upotrenu u postupku lečenja cistične fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno jedinjenja 1 formule
V. Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja 1 za upotrebu u postupku lečenja cistilne fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno farmaceutski prihvatljive soli jedinjenje 1 formule
W. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje 1 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno farmaceutske kompozicije koja sadrži:
(A) Jedinjenje 1 formule
i
(B) farmaceutski prihvatljiv nosač.
X. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje 1 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno farmaceutske kompozicije koja sadrži:
a farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja 1 formule
farmaceutski prihvatljiv nosač.
Opšti eksperimentalni postupci
[0169] Dole su ukratko date definicije izvesnih skračenica za donje primere :
Boc anhidrid (Boc)2O): di-terc-butil dikarbonat
CDI: karbonil diimidazol
DABCO: 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan
DBU: 1,8-diazabiciklo(5.4.0)undek-7-en
DCM: dihlorometan
DIAD: diizopropil azodikarboksilat
DIEA (DIPEA; N,N-diizopropiletilamin)
DMA: N,N-Dimetilacetamid
DMF: N,N-dimetilformamid
DMSO: dimetil sulfoksid
Et2O: dietil etar
EtOH: etanol
HATU: 1-[Bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat IPA: izopropanol
MeOH: metanol
NMP: N-metil-2-pirolidon
MTBE: metil terc-butil etar
TBS-Cl: terc-Butildimetilsilil hlorid
TFA: trifluorosirćetna kiselina
THF: tetrahidrofuran)
p-TsOH: p-Toluensulfonska kiselina
TPPO-DIAD kompleks: kompleks trifenilfosfin oksida sa diizopropil azodikarboksilatom
[0170] Reagensi i polazni materijali su dobijeni iz komercijalnih izvora osim ako nije drugačije navedeno i korišćeni su bez daljeg prečišćavanja. Protonski i ugljenikovi NMR spektri su dobijeni ili na Bruker Biospin DRX 400 MHz FTNMR spektrometru koji radi na<1>H i<13>C rezonantnoj frekvanci od 400 i 100 MHz tim redom, ili na 300 MHz NMR spektrometru. Jednodimenzionalni protonski i ugljenikovi spektri su dobijeni korišćenjem sonde za širokopojasno posmatranje (BBFO) sa rotacijom uzorka od 20 Hz na 0.1834 i 0.9083 Hz/Pt digitalnom rezolucijom tim redom . Svi protonski i ugljenikovi spektri su dobijeni na kontrolnoj temperaturi 30°C korišćenjem standarda, prethodno objavljenih pulsnih sekvenci i parametara rutinske obrade. Krajnja čistoća jedinjenja je određena reverzno-faznom UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, 1.7 μm čestica) napravljen od Waters (pn: 186002350), i dvojnim gradijentom koji koristi od 1-99% mobilne faze B u toku 3.0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, injekciona zapremina = 1.5 μL, i temperatura kolone = 60 °C. Krajnja čistoća je izračunata kao prosečna vrednost površine ispod krive (AUC) dva UV traga (220 nm, 254 nm). Maseni spektri niske rezolucije su zabeleženi kao [M+H]<+>vrste dobijene korišćenjem jednog kvadripolnog masenog spektrometra snabdevenog sa izvorom jonizacije u elektrospreju (ESI) sposobnim za postizanje tačnosti mase od 0.1 Da i minimalne rezolucije od 1000 (bez jedinica rezolucije) duž detekcionog opsega . Optička čistoća metil (2S)-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoata je dodređena korišćenjem analize hiralne gasne hromatografije (GC) na Agilent 7890A/MSD 5975C instrumentu, korišćenem Restek Rt-βDEXcst (30m x 0.25mm x 0.25um_df) kolone, sa brzinom protoka 2.0 mL/min (H2gas nosač), pri injekcionoj temperaturi 220°C i temperaturi peći od 120°C, 15 minuta.
Difrakcija X-zraka na prahu
[0171] Merenje difrakcije x-zraka na prahu je izvedeno korišćenjem PANalytical’s X-pert Pro difraktometra na sobnoj temperaturi sa zračenjem bakra (1.54060 Å). Optika ulaznog snopa se sastojala od različitih divergentnih otvora da bi se osigurala konstantna dužina osvetljivanja uzorka i na strani difrakcionog snopa; brzi detektor linarnog čvrstog stanja je korišćen sa aktivnog dužinom 2.12 korake na 2 teta merenim u skanirajućem modu . Uzorak praha je spakovan na nameravanoj površini silikonskog držača sa nultom pozadinom i izvođena je rotacija da bi se dobila bolja statistika. Simetričnim skeniranje je mereno od 4 -40 stepena 2 teta sa korakom veličine 0.017 stepena i vremenom koraka skeniranja od 15.5s.
[0172] Slika 2 prikazuje XRPD spektar oblika A jedinjenja 1. Monokristalna struktura oblika A je razjašnjenja. Kristlna struktura potvrđuje apsolutnu konfiguraciju molekula i izračunati XRPD motivi pokazuju dobro slaganje sa ekperimentalnim motivima. Oblik A jedinjenja 1 obrazuje ortorombičnu jediničnu ćeliju P212121, a=15.74 b=22.86 c=26.59 (angstremi), α=β=γ=90, Z=12 V= 9575 Flack =0.08. Prosečan stručnjak iz ove oblasti će znati da može biti varijacija u ovim kristalnim parametrima u zavisnosti od , na primer, temperature, pritiska, ili varjabilnost od instrumenta do instrumenta .
[0173] Sllika 3 pokazuje eksperimentalni XRPD oblika A jedinjenja 1 (gore) u poređenju sa izračunatim XRD (dole), koji je izračunat iz podataka monokristala. Slika 3 pokazuje preklapanje eksperimentalnih i izračunatih XRPD oblika A jedinjenja 1 iz slike 3.
[0174] Slika 5 pokazuje XRPD spektar amorfnog Jedinjenja 1 pripremljen dispezijom sušenom raspršivanjem (SDD) 50 mas% jedinjenja 1 u HPMCAS-HG.
Podešena skanirajuća difrakciona kalorimetrija (MDSC)
[0175] MDSC je korišćen za određivanje temperature prelaska u staklo amorfnog materiala. MDSC je izvedena pomoću TA Discovery DSC kalorimetra za diferencijalno skaniranje (TA Instruments, New Castle, DE). Instrument je kalibrisan sa indijumom. Uzorci približno 1-3 mg su izmereni u hermetičke posude koje su komprimovane pomoću poklopaca sa jednim otvorom. MDSC uzorak je skeniran od -20°C do 200°C sa brzinom zagrevanja 2°C/min sah /-1°C modulacijom u toku 1 minuta. Podaci su sakupljani i analizirani sa TA Instruments Trios Software (TA Instruments, New Castle, DE).
[0176] Slika 6 prikazuje MDSC spektar disperzije sušenje raspršivanjem (SDD) 50 mas% jedinjenja 1 u HPMCAS-HG, i pokazuje da SDD ima srednju vrednost temperature od oko 106°C.
Analiza monokristala
[0177] Podaci difrakcije X-zraka su dobijeni na 100K ili 298K na Bruker-ovom difraktometru snabdevenom sa Mo Kαzračenjem (λ = 0.71073 Å) ili Cu Kαzračenjem (λ = 1.5478) i CCD detektoru. Struktura je rešena i rafinisana pomoću SHELX programa (Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122).
Termogravimetrijska analiza (TGA)
[0178] TGA je korišćen za ispitivanje prisustva zaostalih rastvarača u partijama karakterisanim i identifikovanje temperature na kojima se dešava raspadanje uzorka. TGA podaci su sakupljeni na TA Discovery Thermogravimetric Analyzer ili ekvivalentim instrumentima. Uzorak mase od približno 1-5 mg je skeniran od 25 °C do 350 °C pri brzini zagrevanja od 10 °C/min. Podaci su sakupljeni i analizirani sa Trios softverom (TA Instruments, New Castle, DE) ili sakupljeni sa Thermal Advantage Q SeriesTM softverom i analizirani sa Universal Analysis softverom (TA Instruments, New Castle, DE).
Diferencijalna skanirajuća kalorimetrija (DSC)
[0179] DSC podaci su dobijeni pomoću TA Instruments Q2000 ili ekvivalentih instrumenata. Uzorak mase između 1 i 10 mg je izmeren u aluminijumskoj posudi. Ova posuda je smeštena u isti položaj u kalorimetrijskoj ćeliji. Prazna posuda je smeštena u referentni položaj.Kalorimetrijska ćelija je zatvorena i struja azota je prolazila kroz ćeliju . Program zagrevanja je podešen da se uzorak zagreva sa brzinom zagrevanja od 10° C./min do temeprature 200-350° C. Kada je ciklus završen, podaci su anlizirani pomoću DSC programa za analizu u sistemu softvera. Dobijeni endo-i egzotermi su integrisani između osnovne linije temperaturnih tačaka koji su bili iznad i ispod temepraturnog opsega u kome je je primećen endoterm. Zabeleženi podaci su bili početak temperature raspadanja, temperatura maksimuma i entalpija .
Sintetski primeri
Sinteza Jedinjenje II: (R)-1-(2,2-Difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metitpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0180]
Korak 1: (R)-Benzil 2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropanoat i ((S)-2,2-Dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-(1-(((R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropanoat
[0181] Cezijum karbonat (8.23 g, 25.3 mmol) je dodat u smešu benzil 2-(6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropanoata (3.0 g, 8.4 mmol) i (S)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 4-metilbenzensulfonata (7.23 g, 25.3 mmol) u DMF (N,N-dimetilformamid) (17 mL). Reakcija je mešana na 80 °C u toku 46 sati u atmosferi azota. Smeša je zatim razdeljena između etil acetata i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni slojevi etil acetata su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko MgSO4, proceđeni i koncentrovani. Sirovi proizvod, viskozno braon ulje koje sadrži oba gore prikazna proizvoda, je sakupljeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanaja . (R)-Benzil 2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropanoat, ESI-MS m/z izrač. 470.2, nađeno 471.5 (M+1)<+>. Retenciono vreme 2.20 minuta. ((S)-2,2-Dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-(1-(((R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropanoat, ESI-MS m/z izrač.494.5, nađeno 495.7 (M+1)<+>Retenciono vreme 2.01 minuta.
Korak 2: (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol
[0182] Sirova reakciona smeša dobijena u koraku (A) je rastovrena u THF-u (tetrahidrofuran) (42 mL) i ohlađena u kupatilu led-voda . LiAlH4(16.8 mL 1 M rastvor, 16.8 mmol) je dodat u kapima. Pošto je dodavanje bilo završeno, smeša je mešana u toku dodatnih 5 minuta. Reakcija je zaustavljena dodavanjem vode (1 mL), 15% NaOH rastvora (1 mL) i zatim vode (3 mL). Smeša je proceđena preko celita, i čvrsta supstanca je isprana sa THF i etil acetatom. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (30-60% etil acetat-heksani) da bi se dobio (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol kao braon ulje (2.68g, 87 % u 2 koraka). ESI-MS m/z izrač.366.4, nađeno 367.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme 1.68 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.64 -4.60 (m, 1H), 4.52 -4.42(m, 2H), 4.16 -4.14 (m, 1H), 3.76 -3.74 (m, 1H), 3.63 -3.53 (m, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.38 -1.36 (m, 6H) i 1.19 (s, 3H) ppm. (DMSO je dimetilsulfoksid).
Korak 3: (R)-2-(5-amino-1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol
[0183] (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol (2.5 g, 6.82 mmol) je rastvoren u etanolu (70 mL) i reakcija je isprana sa N2. Zatim je dodat Pd-C (250 mg, 5% mas) . Reakcija je isprana sa azotom ponovo i zatim mešana pod H2(atm). Posle 2.5 sata primećeno je samo parcijalno pretvaranje proizvoda LCMS. Reakcija je proceđena preko celita i koncentrovana. Ostatak je ponovo podvrgnut gornjim uslovima . Posle 2 sata LCMS je pokazao potpunu konverziju u proizvod . Reakciona smeša je proceđenja preko celita. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio proizvod (1.82 g, 79 %). ESI-MS m/z izrač.336.2, nađeno 337.5 (M+1)<+>. Retenciono vreme 0.86 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.17 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.79 -4.76 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.37 -4.31 (m, 3H),4.06 (dd, J = 6.1, 8.3 Hz, 1H), 3.70 -3.67 (m, 1H), 3.55 -3.52 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.32 (s, 6H) i 1.21 (s, 3H) ppm.
Korak 4: (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0184] DMF (3 kapi) je dodat u smešu koja se meša 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksilne kiseline (1.87 g, 7.7 mmol) i tionil hlorida (1.30 mL, 17.9 mmol). Posle 1 sata obrazovan je bistar rastvor. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom i zatim je dodat toluen (3 mL) i smeša je ponovo koncentrovana. Korak sa toluenom je ponovljen još jednom i ostatak je smešen na visoki vakuum u toku 10 minuta. Kiselinski hlorid je zatim rastvoren u dihlorometanu (10 mL) i dodat u smešu (R)-2-(5-amino-1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan4-il)metil)-6-fluoro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-oal (1.8 g, 5.4 mmol) i trietilamina (2.24 mL, 16.1 mmol) u dihlorometanu (45 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Reakcija je isprana sa 1N HCl rastvorom, zasićenim NaHCO3rastvorom i rastvorom soli, osušena preko MgSO4i koncentrovana da bi se dobio proizvod (3g, 100%). ESI-MS m/z izrač. 560.6, nađeno 561.7 (M+1)<+>. Retenciono vreme 2.05 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 -7.40 (m, 2H), 7.34 -7.30 (m, 3H), 6.24 (s, 1H), 4.51 -4.48 (m, 1H), 4.39 -4.34 (m,2H), 4.08 (dd, J = 6.0, 8.3 Hz, 1H), 3.69 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.58 -3.51 (m, 2H), 1.48 -1.45 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.34 -1.33 (m, 6H), 1.18 (s, 3H) i 1.14 -1.12 (m, 2H) ppm.
Korak 5: (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0185] (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (3.0 g, 5.4 mmol) je rastvoren u metanolu (52 mL). Voda (5.2 mL) je dodata a zatim p-TsOH.H2O (nidrat p-toluensulfonske kiseline ) (204 mg, 1.1 mmol). Reakcija je zagrejana na 80 °C u toku 45 minuta. Rastvor je koncentrovan i zatim razdeljen između etil acetata i zasićenog rastvora NaHCO3. Sloj etil acetata je osušen preko MgSO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (50-100 % etil acetat -heksani) da bi se dobio proizvoa. (1.3 g, 47 %, ee >98% sa SFC). ESI-MS m/z izrač.520.5, nađeno 521.7 (M+1)<+>. Retenciono vreme 1.69 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 -7.38 (m, 2H), 7.33 -7.30 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 5.01 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 2.6, 15.1 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 8.7, 15.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.65 -3.54 (m, 2H), 3.48 -3.33 (m, 2H), 1.48 -1.45 (m, 2H), 1.35 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) i 1.14 -1.11 (m, 2H) ppm.
Sinteza jedinjenja III: N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksamid
Part A: Sinteza 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilne kiseline
[0186]
Korak 1: Dietil estar 2-fenilaminometilen-malonske kiseline
[0187] Smeša anilina (25.6 g, 0.275 mol) i dietil 2-(etoksimetilen)malonata (62.4 g, 0.288 mol) je zagrejana na 140-150 °C u toku 2 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i osušena na sniženom pritisku da bi se dobio dietil estar 2-fenilaminometilen-malonske kiseline kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja .<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.00 (d, 1H), 8.54 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.36-7.39 (m, 2H), 7.13-7.17 (m, 3H), 4.17-4.33 (m, 4H), 1.18-1.40 (m, 6H).
1
Korak 2: Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline
[0188] Trogrli balon od 1 L snabdeven sa mehaničkom mešalicom je napunjen sa dietil estrom 2-fenilaminometilen-malonske kiseline (26.3 g, 0.100 mol), polifosfornom kiselinoma (270 g) i fosforil hloridom (750 g). Smeša je zagrejana do 70 °C i mešana u toku 4 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i proceđena. Ostatak je tretiran sa vodenim rastvorom Na2CO3, proceđen, ispran sa vodom i osušen. Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline je dobijen kao bledo braon čvrsta supstanca (15.2 g, 70%). Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 3: 4-Okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilna kiselina
[0189] Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline (15 g, 69 mmol) je suspendovan u rastvoru natrijum hidroksida (2N, 150 mL) i mešan u toku 2 h na refluksu. Posle hlađenja, smeša je proceđena, i filtrat je zakišeljen do pH 4 sa 2N HCl. Dobijeni talog je sakupljen ceđenjem, ispran sa vodom i osušen pod vakumom da se dobije 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilna kiselina kao bleda bela čvrsta supstanca (10.5 g, 92 %).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 15.34 (s, 1 H), 13.42 (s, 1 H), 8.89 (s, 1H), 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H).
Part B: Sinteza N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksamida
[0190]
Korak 1: 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estar ugljene kiseline
[0191] Metil hloroformijat (58 mL, 750 mmol) je dodat u kapima u rastvor 2,4-di-terc-butil-fenola (103.2 g, 500 mmol), Et3N (139 mL, 1000 mmol) i DMAP (3.05 g, 25 mmol) u dihlorometanu (400 mL) ohlađenom u kupatilu led -voda na 0 °C. Dozvoljeno je da se smeša zagreje do sobne temperature u toku mešanja u toku noći , zatim je proceđena kroz sloj silikagela (približno.1L) pomoću 10% etil acetat -heksana (∼ 4 L) kao eluenta. Spojeni filtrati su koncentrovani da bi se dobio 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estar ugljene kiseline kao žuto ulje (132 g, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.35 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.30 (s, 9H), 1.29 (s, 9H).
Korak 2: 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estar ugljene kiseline i 2,4-di-terc-butil-6-nitro-fenil estar metil estar ugljene kiseline
2
[0192] U smešu koja se meša 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estara ugljene kiseline (4.76 g, 180 mmol) u konc. sumpornoj kiselini (2 mL), ohlađenu u kupatilu led-voda, dodata je ohlađena smeša sumporne kiseline (2 mL) i azotna kiselina (2 mL). Dodavanje je izvršeno polako tako da reakciona temperatura nije prelazila 50 °C. Reakcija je omogućeno da se meša u toku 2 h dok je zagrevana na sobnu temperaturu . Reakciona smeša je zatim dodata u led -vodu i ekstrahovana dietil etrom. Etarski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen sa hromatografijom na koloni (0 -10% etil acetat -heksani) da bi se dobila smeša 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estra ugljene kiseline i 2,4-diterc-butil-6-nitro-fenil estar metil estra ugljene kiseline kao beldo žute čvrste supstance (4.28 g), koja je korišćena direktno u sledećem koraku .
Korak 3: 2,4-Di-terc-butil-5-nitro-fenol and 2,4-Di-terc-butil-6-nitrofenol
[0193] Smeša 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estra ugljene kiseline i 2,4-di-terc-butil-6-nitrofenil estar metil estr ugljene kiseline (4.2 g, 14.0 mmol) je rastvorena u MeOH (65 mL) pre dodvanja KOH (2.0 g, 36 mmol) . Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 2 h. Reakciona smeša je zatim zakišeljena (pH 2-3) dodavanjem konc. HCl i razdeljena između vode i dietil etra. Etarski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen sa hromatografijom na koloni (0 -5 % etil acetat -heksani) da bi se dobio 2,4-di-terc-butil-5-nitrofenol (1.31 g, 29% over 2 koraks) i 2,4-di-terc-butil-6-nitro-fenol.2,4-Diterc-butil-5-nitro-fenol:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (s, 1H, OH), 7.34 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.30 (s, 9H).2,4-Di-terc-butil-6-nitro-fenol:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.48 (s, 1H), 7.98 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.34 (s, 9H).
Korak 4: 5-Amino-2,4-di-terc-butil-fenol
[0194] U rastvor koji refluktuje 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenola (1.86 g, 7.40 mmol) i amonijum formijata (1.86 g) u etanolu (75 mL) je dodat Pd-5% mas. na aktiviranom ugljeniku (900 mg). Reakciona smeša je mešana na refluksu u toku 2 h, ohlađena na sobnu temperaturu i proceđena kroz celit. Celit je ispran sa metanolom i spojeni filtrati su koncentrovani da bi se dobio 5-amino-2,4-di-terc-butil-fenol kao siva čvrsta supstanca (1.66 g, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H, OH), 6.84 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.39 (s, 2H, NH2), 1.27 (m, 18H); HPLC ret. vreme 2.72 min, 10-99 % CH3CN, 5 min ciklus; ESI-MS 222.4 m/z [M+H]<+>.
Korak 5: N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butil-fenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid
[0195]
[0196] U suspenziju 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilne kiseline (35.5 g, 188 mmol) i HBTU (85.7 g, 226 mmol) u DMF (280 mL) je dodat Et3N (63.0 mL, 451 mmol) na temperaturi okoline. Smeša je postala homogena i omogućeno je da se meša u toku 10 min pre dodavanja 5-amino-2,4-di-terc-butilfenola (50.0 g, 226 mmol) u malim porcijama. Omogućeno je da se smeša meša u toku noći na temperaturi okoline. Smeša je postala heterogena u toku reakcije . Pošto je sva kiselina iskorišćena (LC-MS analiza, MH+ 190, 1.71 min), rastvarač je uklonjen in vacuo. EtOH (etil alkohol) je dodat u narandžastu čvrstu supstancu da bi se dobila suspenzija . Smeša je mešana na rotacionom uparivaču (temperatura kupatila 65 °C) u toku 15 min bez smeštanja sistema pod vakuum . Smeša je proceđena i dobijena čvrsta supstanca je isprana sa heksanima da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je bila EtOH kristalat. Et2O (dietil etar) je dodat u gore dobijenu čvrstu supstancu do obrazovanja suspenzije. Smeša je mešana na rotacionom uparivaču ili (temperatura kupatila 25 °C) u toku 15 min bez smeštanja sistema pod vakuum. Smeša je proceđena i dobijena je čvrsta supstanca. Ovaj postupak je izveden ukupno pet puta. Dobijena čvrsta supstanca posle petog taloženja je smeštena pod vakuum u toku noći da bi se dobio N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butil-fenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid (38 g, 52%). HPLC ret. vreme 3.45 min, 10-99% CH3CN, 5 min ciklus;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (s, 1H), 11.83 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.33 (dd, J = 8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 1H), 7.76 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.54-7.50 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 1.38 (s, 9H), 1.37 (s, 9H); ESI-MS m/z calc’d 392.21; nađeno 393.3 [M+H]<+>.
Sinteza Jedinjenje IV: 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeva kiselina
[0197] Jedinjenje IV može biti dobijeno kuplovanjem dela kiselinskog hlorida sa amino delom prema šemama IV-A do IV-D.
Šema IV-A. Sinteza dela kiselinskog hlorida
[0198] Šema IV-A prikazuje dobijanje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hlorida, koji je korišćen u šemi IV-C da bi se dobila amidna veza jedinjenja IV.
[0199] Polazni materijal, 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksole-5-karboksilne kiseline, je komercijalno dostupan kod Saltigo (podružnica Lanxess Corporation). Redukcijom karboksilnog kiselinog dela u 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-karboksilnoj kiselini do primarnog alkohola, a zatim pretvaranjem u
4
odgovarajući hlorid pomoću tionil hlorida (SOCl2), dobijen je 5-(hlorometil)-2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol, koji je zatim pretvoren u 2-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)acetonitril pomoću natrijum cijanida. Tretman 2-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)acetonitrila sa bazom i 1-bromo-2-hloroetanom obezbeđuje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonitril. Nitrilni deo u 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonitrilu je pretvoren u karboksilnu kiselinu korišćenjem baze da bi se dobio 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksilna kiselina, koja je pretvorena u željeni kiselinski hlorid pomoću tionil hlorida .
Šema IV-B. Alternativna sinteza dela kiselinskog hlorida
[0200] Šema IV-B prikazuje alternativnu sintezu neophodnog kiselinskog hlorida. 5-bromometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksol je kuplovan sa etil cijanoacetatom u prisustvu katalizatora paladijuma da bi se obrazovao odgovarajući alfa cijano etil estar. Saponifikacija estarskog dela karboksilne kiseline daje cijanoetil jedinjenje IV. Alkilacija cijanoetil jedinjenja sa 1-bromo-2-hloro etanom u prisustvu baze daje cijanociklopropil jedinjenje. Tretiranje cijanociklopropil jedinjenja sa bazom daje karboksilatnu so , koja je pretvorena karboksilnu kiselinu tretiranjem sa kiselinom. Pretvaranje karboksilne kiseline u kiselinski hlorid je zatim postignuto sa sredstvom za hlorovanje kao štoje tionil hlorid ili slično.
Šema IV-C. Sinteza aminskog dela
[0201] Šema IV-C prikazuje dobijanje potrebnog terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il)benzoata, koji se spaja sa 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hloridom na šemi IV-C da bi se dobilo jedinjenje IV. Kuplovanje katalizovano paladijumom 2-bromo-3-metilpiridina sa 3-(tercbutoksikarbonil)fenilboronske kiseline daje terc-butil 3-(3-metilpiridin-2-il)benzoat, koji je naknadno pretvoren u željeno jedinjenje.
Šema IV-D. Obrazovanje kisele soli 3-(6-(1-2,2-difluorobenzo [d ] [1,3 ]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline
[0202] Šema IV-D prikazuje kuplovanje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hlorida sa terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il)benzoatom pomoću trietil amina i 4-dimetilaminopiridina da se inicijalno obezbedi terc-butil estar jedinjenja IV.
Sinteze jedinjenja
Sinteza Jedinjenje 1
Part A: Sinteza (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin hidrohlorida
[0203]
Korak 1: metil-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoat
[0204]
[0205] Tetrahidrofuran (THF, 4.5 L) je dodat u stakleni reaktor od 20 L i mešan pod N2na sobnoj temperaturi. 2-Nitropropan (1.5 kg, 16.83 mol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (DBU) (1.282 kg, 8.42 mol) su zatim sipani u reaktor, i temperatura obloge je povećana na 50 °C. Kada je sadržaj reaktora bio blizu 50 °C, polako je dodat metil metakrilat u toku 21 sat. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo zatim premeštena nazad u reaktor i razblažena sa metil terc-butil etrom (MTBE) (14 L).2 M HCl (7.5 L) je dodat, i ova smeša je mešana u toku 5 minuta, a zatim je omogućeno da se odvoji. Dva bistra sloja su bila vidljiva –niži žuti vodeni sloj i gornji zeleni organski sloj . Vodeni sloj je uklonjen i organski sloj je mešan ponovo sa 2 M HCl (3 L). Posle odvajanja, ostaci od ipiranja sa HCl su ponovo spojeni i mešani sa MTBE (3 L) u toku 5 minuta. Vodeni sloj je uklonjen, a svi organski slojevi su spojeni u reaktoru i mešani sa vodom (3 L) u toku 5 minuta. Posle odvajanja, organski slojevi su koncentrovani in vacuo da bi se dobilo sivo zeleno ulje. Sirovi proizvod je tretiran sa MgSO4i proceđen da bi se dobio metil-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoat kao bistro zeleno ulje (3.16 kg, 99% prinos).
[0206]<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.68 (s, 3H), 2.56 -2.35 (m, 2H), 2.11 -2.00 (m, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.55 (s, 3H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Korak 2: Sinteza metil (2S)-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoata
[0207]
[0208] Reaktor je napunjen sa prečišćenom vodom (2090 L; 10 vol) i zatim monobaznim kalijum fosfatom (27 kg, 198.4 molova; 13 g/L za punjenje vode). pH sadržaja reaktora je bio podešen na pH 6.5 (60.2) sa 20% (m/v) rastvorom kalijum karbonata . Reaktor je napunjen sa racemskim metil-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoatom (209 kg; 1104.6 moles), i Palatase 20000L lipazom (13 L, 15.8 kg; 0.06 vol).
[0209] Reakciona smeša je podešena na 32 ± 2 °C i mešana u toku 15-21 sati, i pH 6.5 je odražavan korišćenjem pH stata sa automatskim dodavanjem 20% rastvora kalijum karbonata . Kada je racemski polazni materijal bio pretvoren >98% u ee S-enantiomer, što je određeno hiralnom GC, spoljašnje zagrevanje je isključeno . Reaktor je zatim napunjen sa MTBE (35 L; 5 vol), i vodeni sloj je ekstrahovan sa MTBE (3 puta, 400-1000L). Spojeni organski ekstrakti su isprani sa vodenim Na2CO3(4 puta, 522 L, 18 % m/m 2.5 vol), voda (523 L; 2.5 vol), i 10% vodeni NaCl (314 L, 1.5 vol). Organski sloj je koncentrovan in vacuo da bi se dobio metil (2S)-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoat kao pokretno žuto ulje (>98% ee, 94.4 kg; 45 % prinos).
Korak 3: Sinteza (3S)-3,5,5-trimetilpirolidin-2-ona
[0210]
[0211] Reaktor od 20 L je očišćen sa N2. Sud je napunjen redom sa DI vodom-ispran, vlažnim Raney® Ni (2800 čistoće, 250 g), metil (2S)-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoatom (1741g, 9.2 mol), i etanolom (13.9 L, 8 vol). Reakcija je mešana na 900 oum, i reaktor je ispran sa H2i održavan na ∼2.5 bar. Reakciona smeša je zatim zagrejana na 60 °C u toku 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena i proceđena da bi se uklonio Raney nikl, i čvrsti kolač je ispran sa etanolom (3.5 L, 2 vol). Etanolni rastvor proizvoda je spojen sa drugom partijom iste veličine i koncentrovan in vacuo da se smanji na minimalnu zapreminu etanola (∼1.5 zapremine). Heptan (2.5 L) je dodat, i suspenzija je koncentrovana ponovo na ∼1.5 zapreminu. Ovo je ponovljeno 3 puta; dobijena suspenzija je ohlađena na 0-5 °C, proceđenja vakum filtracijom, i isprana sa heptanom (2.5 L). Proizvod je osušen pod vakumom u toku 20 minuta zatim premešen na poslužavnike za sušenje i osušen u vakuum sušnici na 40 °C u toku noći da bi se dobilo (3S)-3,5,5-trimetilpirolidin-2-on kao bela čvrsta kristalna supstanca (2.042 kg, 16.1 mol, 87 %).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 6.39 (s, 1H), 2.62 (ddq, J = 9.9, 8.6, 7.1 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 12.4, 8.6 Hz, 1H), 1.56 (dd, J = 12.5, 9.9 Hz, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.20 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
Korak 4: Sinteza (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin hidrohlorida
[0212]
[0213] Reaktor obložen staklom od 120 L je napunjen sa litijum aluminijum hidridnim peletama (2.5 kg, 66 mol) i suvim THF (60 L) i zagrejn je na 30 °C. Dobijena suspenzija je napunjena sa (S)-3,5,5-trimetilpirolidin-2-onom (7.0 kg, 54 mol) u THF (25 L) u toku 2 sata dok je održavana reakciona temperatura na 30 do 40 °C. Posle završetka dodavanja, reakciona temepratura je povećana na 60 -63 °C i održavana u toku noći. Reakciona smeša je ohlađena na 22 °C, zatim pažljivo razblažena dodavanjem etil acetata (EtOAc) (1.0 L, 10 mola), a zatim smeše THF (3.4 L) i vode (2.5 kg, 2.0 eq), i zatim smeše vode (1.75 kg) sa 50 % vodenim natrijum hidroksidom (750 g, 2 ekv. voda sa 1.4 ekv. Natrijum hidroksida prema aluminijumu ), a zatim 7.5 L vode. Pošto je završeno dodavanje, reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturi, i čvrsta supstanca je uklonjena ceđenjem i isprana sa THF (3 x 25 L). Filtrat i frakcije posle ispiranja su spojene i tretirane sa 5.0 L (58 mola) vodenog 37% HCl (1.05 ekv.) dok je temepratura održavana ispod 30°C. Dobijeni rastvor je koncentrovan vakum destilacijom do suspenzije . Izopropanol (8 L) je dodat i rastvor je koncentrovan gotovo do suva vakum destilacijom.
Izopropanol (4 L) je dodat, i proizvod je suspendovan zagrevanjem na oko 50 °C. MTBE (6 L) je dodat, i suspenzija je ohlađena na 2-5 °C. Proizvod je sakupljen ceđenjem i ispran sa 12 L MTBE i osušen u vakuum sušnici (55 °C/300 tor/ ispuštanje N2) da bi se dobio (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin•HCl kao bela, čvrsta kristalna supstanca (6.21 kg, 75% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.34 (br d, 2H), 3.33 (dd, J = 11.4, 8.4 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 11.4, 8.6 Hz, 1H), 2.50-2.39 (m, 1H), 1.97 (dd, J = 12.7, 7.7 Hz, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.38 (dd, J = 12.8, 10.1 Hz, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.05 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
Deo B: Dobijanje N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 1)
[0214]
Dobijanje polaznog materijala:
3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ol
[0216] Trogrli balon sa okruglim dnom od 1 L je snabdeven sa mehaničkom mešalicom , kupatilom za hlađenje, kapalicom, i J-Kem temperaturnom sondom. Sud je napunjen sa litijum aluminijum hidridnim (LAH) peletama (6.3 g, 0.1665 mol) u atmosferi azota. Sud je zatim napunjen sa tetrahidrofuranom (200 mL) u atmosferi azota. Smeša je omogućeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 0.5 sati da dozvolo da se pelete rastvore . Kupatilo za hlađenje je zatim napunjeno sa smrvljenim ledom u vodi i reakcijona temperatura je snižena na 0 °C. Kapalica je napunjena sa rastvorom 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propanske kiseline (20 g, 0.1281 mol) u tetrahidrofuranu (60 mL) u bistar bledo žut rastvor je dodat u kapima u toku 1 sata. Pošto je dodavanje bil završeno smeša je omogućeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu i mešanje je nastavljeno u toku 24 sata. Suspenzija je ohlađena na 0 °C sa smrvljenim ledom- vodom u kupatilu za hlađenje i zatim zasustavljna sa veoma laganim dodavanjem kap po kap vode (6.3 ml), a zatim rastvora natrijum hidroksida (15 masenih %; 6.3 mL) i zatim na kraju sa vodom (18.9 mL). Reakciona temperatura dobijene bele suspenzije je zabeležena na 5 °C. Suspenzija je mešana na ∼5 °C u toku 30 minuta i zatim je proceđena kroz sloj od 20 mm celita. Filter kolač je ispran sa tetrahidrofuranom (2 x 100 mL). Filtrat je osušen preko natrijum sulfata (150 g) i zatim proceđen. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pristikom da bi se dobilo bistro bezbojno ulje (15 g) koje sadrži smešu proizvoda 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ola u THF (73 % masenih proizvoda ∼10.95g, i 27 mas.% THF kako je određeno sa 1H-NMR). Destilat iz rotacionog uparivača je destilovao na atmosferskom pritisku pomoću Vigreux kolone od 30 cm da bi se dobilo 8.75 g ostatka koji sadrži 60 % masenih THF i 40 % masenih proizvoda (∼3.5 g). Procenjena ukupna količina proizvoda je 14.45 g (79% prinos).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.99 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 3.38 (dd, J = 5.8, 0.9 Hz, 2H), 1.04 (d, J = 0.9 Hz, 6H).
terc-Butil 3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazol-1-karboksilat
[0217]
[0218] Reaktor od 50L kontrolisan sa Syrris-om je pokrenut i obloga je podešena na 20 °C, mešanje na 150 oum, refluks kondenzator (10 °C) i prečišćavanje azotom. MeOH (2.860 L) i metil (E)-3-metoksiprop-2-enoat (2.643 kg, 22.76 mol) su dodati i rektor je poklopljen . Reakcija je zagrevana do unutrašnje temperature od 40 °C i sistem je podešen da drži temperaturu obloge na 40 °C. Hidrazin hidrat (1300 g 55 %m/m, 22.31 mol) je dodat u porcijama pomoću kapalice u toku 30 min. Reakcija je zagrejana na 60 °C u toku 1 h. Reakciona smeša je ohlađena na 20 °C i trietilamin (2.483 kg, 3.420 L, 24.54 mol) je dodat u porcijama (egzotermno), održavajući reakcionu temp <30 °C. Rastvor Boc anhidrida (di-terc-butil dikarbonata) (4.967 kg, 5.228 L, 22.76 mol) u MeOH (2.860 L) je dodat u porcijama održavajući temperaturu <45 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C u toku 16 h. Reakcioni rastvor je delom koncentrovan da bi se uklonio MeOH, dajući bistro svetlo ćilibarno ulje . Dobijeno ulje je premešteno u reaktor od 50L , mešano je i dodata je voda (7.150 L) i heptan (7.150 L). Dodavanje je izazvalo taloženje male količine proizvoda . Vodeni sloj je uparen u čistom sudu i kontaktni sloj i heptanski sloj su proceđeni da se odvoji čvrsta supstanca (proizvod). Vodeni sloj je premešten nazad u reaktor i sakupljena čvrsta supstanca je smeštena natrag u reaktor i mešana sa vodenim slojem . Kapalica je dodata u reaktor i napunjena sirćetnom kiselinom (1.474 kg, 1.396 L, 24.54 mol), zatim je započelo dodavanje kiseline u kapima . Obloga je podešena na 0 °C da bi se apsorbovao egzotermna reakcija. Posle dodavanja (pH=5), reakciona smeša je mešana u toku 1 h. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem i isprana sa vodom (7.150 L), i isprana drugi put sa vodom (3.575 L) i izvađena na suvo. Kristalna čvrsta supstanca je sakupljena sa filtera u balon rotacionog uparivača od 20L i dodat je heptan (7.150 L) . Smeša je suspendovana na 45 °C u toku 30 min, i zatim su predestilovana 1-zapremina rastvarača . Suspenzija u balonu rotacionog uparivača je proceđena i črsta supstanca je isprana sa heptanom (3.575 L) i izvađena na suvo. Čvrsta supstanca je dalje osušena in vacuo (50 °C , 15 mbar) da bi se dobio terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilat (2921 g, 71%) kao gruba, kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.98 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 1.54 (s, 9H).
Korak A: terc-Butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-karboksilat
[0219]
[0220] Smeša 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ola (10 g, 70.36 mmol) i terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (12.96 g, 70.36 mmol) u toluenu (130 mL) je tretirana sa trifenil fosfinom (20.30 g, 77.40 mmol) a zatim izopropil N-izopropoksikarboniliminokarbamatom (14.99 mL, 77.40 mmol) i smeša je mešana na 110 °C u toku 16 sati. Žuti rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, razblažen sa heptanom (100mL) i staloženi trifenilfosfin oksid je uklonjen ceđenjem i ispran sa heptan/toluen 4:1 (100mL). Žuti filtrat je uparen i ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu sa linearnim gradijentom etil acetata u heksanu (0-40%) da bi se dobio terc-butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-karboksilat (12.3 g, 57%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
308.13477, nađeno 309.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.84 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.18 (s, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.21 (s, 6H).
Korak B: 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol
[0221]
[0222] terc-Butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-karboksilat (13.5 g, 43.79 mmol) je tretiran sa 4 M hlorovodoonikom u dioksanu (54.75 mL, 219.0 mmol) i smeša je mešana na 45 °C u
1
toku 1 sat. Reakciona smeša je uparena do suvog i ostatak je ekstrahovan sa 1 M vodenim NaOH (100ml) i metil terc-butil etarom (100ml), ispran sa rastvorom soli (50ml) i ekstrahovan sa metil tercbutil etrom (50ml). Spojene organske faze su odvojene, proceđene i uparene da bi se dobio 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol (9.0 g, 96%) kao beličasta voskasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 208.08235, nađeno 209.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.22 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.91 (s, 1H), 7.52 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.69 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 1.19 (s, 6H).
Korak C: terc-Butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat
[0223]
[0224] Rastvor 2,6-dihloropiridin-3-karboksilne kiseline (10 g, 52.08 mmol) u THF (210 mL) je tretiran sukcesivno sa di-terc-butil dikarbonatom (17 g, 77.89 mmol) i 4-(dimetilamino)piridinom (3.2 g, 26.19 mmol) i ostavljen je da se meša u toku noći na sobnoj temperaturi. U ovoj tački, dodat je HCl 1N (400 mL) i smeša je mešana intenzivno u toku 10 minuta. Proizvod je ekstrahovan sa etil acetatom (2x300mL) i spojeni organski slojevi su isprani sa vodom (300 mL) i rastvorom soli (150 mL) i osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 12.94 g (96% prinos) terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata kao bezbojnog ulja. ESI-MS m/z izrač. 247.01668, nađeno 248.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.27 minuta.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1.60 (s, 9H), 7.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.2 Hz, 1H).
Korak D: terc-Butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0225]
[0226] U rastvor terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (10.4 g, 41.9 mmol) i 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazola (9.0 g, 41.93 mmol) u DMF (110 mL) dodati su kalijum karbonat (7.53 g, 54.5 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (706 mg, 6.29 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Krem suspenzija je ohlađena u kupatilu sa hladnom vodom i polako je dodavana hladna voda (130 mL) . Gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sat, proceđena i isprana sa puno vode da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (17.6 g, 99%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.419.12234, nađeno 420.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.36 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.44 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.27 (s, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.24 (s, 6H).
2
Korak E: 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0227]
[0228] terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (17.6 g, 40.25 mmol) je suspendovan u izopropanolu (85 mL) tretiran sa hlorovodoničnom kiselinom (34 mL 6 M, 201 mmol) i zagrevan do refluksa u toku 3 sata (prešao potpuno u rastvor pri refluksu i ponovo počeo da se taloži). Suspenzija je razblažena sa vodom (51 mL) pri refluksu i ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi uz mešanje u toku 2.5 h. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, isprana sa izopropanol/vodom 1:1 (50mL), sa puno vode i osušena u sušnici pod vakuumom na 45-50 °C sa ispuštanjem azota u toku noći da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (13.7 g, 91%) kao beličasta bela supstanca. ESI-MS m/z izrač. 363.05975, nađeno 364.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.79 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.61 (s, 1H), 8.44 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.25 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.28 (s, 2H), 1.24 (s, 6H).
Korak F: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karboksamid
[0229]
[0230] 2-Hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2667 mmol) i CDI (512 mg, 3.158 mmol) su spojeni u THF (582.0 μL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi. U međuvremenu, 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (62 mg, 0.3185 mmol) je spojen sa amonijakom (u metanolu) u odvojenoj fioli, trenutno obrazujući belu čvrstu supstancu. Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene uparavanjem, i 1 mL dihlorometana je dodat u ostatak čvrste supstance, i takođe je uparen. DBU (100 μL, 0.6687 mmol) je zatim dodat i smeša je mešana na 60 °C u toku 5 minuta, a zatim je dodat THF (1 mL) koji je zatim uparen. Sadržaj fiole koja sadrži CDI aktiviranu karboksilnu kiselinu u THF je zatim dodai u fiolu koja sadrži novoobrazovani sulfonamid i DBU, i reakciona smeša je mešana u toku 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetata, i isprana sa 10 mL rastvora limunske kiseline (1 M). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2x 10 mL) i spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata, i koncentrovane da bi se dobio proizvod koji je bela čvrsta supstanca (137 mg, 99%) koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač.
520.09076, nađeno 521.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.68 minuta.
Korak G: N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0231]
[0232] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (137 mg, 0.2630 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (118 mg, 0.7884 mmol), i kalijum karbonat (219 mg, 1.585 mmol) su spojeni u DMSO (685.0 μL) i smeša je zagrejana na 130 °C u toku 16 sati. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 mL vode. Posle mešanja u toku 15 minuta, sadržaj fiole jeomogućeno da se staloži, i vodeni deo je uklonjen pomoću pipete i preostala čvrsta supstanca je rastvorena u 20 mL etil acetata i isprana sa 1 M limunkse kiseline (15 mL). Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organske supstance su spojene, isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijentom metanola u dihlorometanu (0-10%) da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (72 mg, 41%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.597.2345, nađeno 598.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.1 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.36 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.41 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (dd, J = 12.4, 6.1 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.7, 5.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.2 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 1.23 (s, 6H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Alternativni koraci F i G:
Alternativni korak F: 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0233]
4
[0234] U suspenziju 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (20.0 g, 53.89 mmol) u THF (78.40 mL) je dodat čvrsti karbonildiimidazol (približno 10.49 g, 64.67 mmol) u porcijama i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi (primećen je blag egzoterm od 18-21 °C ). Posle 1 h, čvrsta supstanca 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 11.33 g, 64.67 mmol) je dodat, a zatim DBU (približno 9.845 g, 9.671 mL, 64.67 mmol) u dve jednake porcije u toku 1 min (egzoterm od 19 do 35 °C). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (118 mL) i zatim HCl (približno 107.8 mL 2 M, 215.6 mmol). Faze su odvojene i vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom (78 mL). Spojena organska supstanca je isprana sa vodom (39.2 mL), zatim rastvorom soli (40 mL), osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena pena je kristalisana iz smeše 1:1 izopropanol:heptan (80 mL) da bi se dobio 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (26.1 g, 93%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.520.0, nađeno 520.9 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.83 minuta.
Alternativni korak G: N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il] piridin-3-karboksamid
[0235]
[0236] 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (20.0 g, 38.39 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (približno 14.36 g, 95.98 mmol), i K2CO3 (približno 26.54 g, 192.0 mmol) su spojeni u DMSO (80.00 mL) i 1,2-dietoksietanu (20.00 mL) u balonu od 500-mL sa refluks kondenzatorom. Reakciona smeša je zagrejana na 120 °C u toku 16 h zatim ohlađena na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa DCM (200.0 mL) i HCl (približno 172.8 mL 2 M, 345.5 mmol); vodenim pH ∼1. Faze su odvojene, i vodena faza je esktrahovana sa DCM (100.0 mL). Organske faze su spojene, isprane sa vodom (100.0 mL) (3 x), i osušene (Na2SO4) da bi se dobio ćilibarni rastvor. Rastvor je porceđen preko sloja DCM-spakovanog silikagela (80 g; 4 g/g) i ispran sa 20% EtOAc/DCM (5 x 200 mL). Spojeni filtrati/frakicje posle ispiranja su koncentrovani da bi se dobilo 22.2 g beličastog praha. Prah je suspendovan u MTBE (140 mL) u toku 30 min. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem (papir/sinterovano staklo) da bi se dobilo 24 g posle sušenja na vazduhu. Čvrsta supstanca je preneta u posudu za sušenje i osušena u vakuumu (40 °C/200 tor/N2 ispuštanje) u toku noći da bi se dobilo 20.70 g (90%) belog praha. ESI-MS m/z izrač.597.2345, nađeno 598.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.18 minuta.
[0237]<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 13.85 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.44 (dd, J = 10.3, 8.4 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 10.3, 7.8 Hz, 1H), 2.67 -2.52 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.12 (dd, J = 12.3, 7.8 Hz, 1H), 1.70 (dd, J = 12.4, 9.6 Hz, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.27 (s, 6H), 1.20 (d, 3H).
Alternativna sinteza 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazola
[0238]
Korak 1: Dobijanje 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropan-1-ola
[0239]
[0240] Reaktor je napunjen sa toluenom (300 mL) i 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanskom kiselinom (30 g, 192.2 mmol), poklopljen, proćišćen pod azotom. Reakcija je podešena da kontroliše unutrašnju temperaturu na 40 °C. Rastvor Vitride (65% u toluenu. približno 119.6 g 65 %m/m, 115.4 mL 65 %m/m, 384.4 mmol) je podešen za dodavanje pomoću šprica, i dodavanje je počelo na 40 °C, sa ciljnom temperaturom dodavanja između 40 i 50 °C. Reakcija je mešana na 40 °C u toku 90 min. Reakcija je ohlađena na 10 °C zatim preostali Vitride je razblažen sporim dodavanjem vode (6 mL). Rastvor 15 % vod. NaOH (30 mL) je dodat u porcijama, i čvrste supstance su staložene na polovini pri dodavanju baze. Voda (60.00 mL) je dodata. Smeša je zagrejana do 30 °C i održavana u toku bar 15 min. Smeša je zatim ohlađena na 20 °C. Vodeni sloj je uklonjen. Organski sloj je zatim ispran sa vodom (60 mL x 3), i zatim ispran sa rastvorom soli (60 mL). Isprani organski sloj je osušen pod Na2SO4, a zatim MgSO4. Smeša je proceđena kroz celit, i kolač je ispran sa toluenom (60.00 mL) i izvučen na suvo. Proizvod 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ol (22.5 g, 82%) je dobijen kao bistar bezbojni rastvor.
Korak 2: Dobijanje 1-(terc-butil) 4-etil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1,4-dikarboksilata
[0241]
[0242] Reaktor je napunjen sa 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropan-1-olom (17.48 g, 123.0 mmol) rastvorom u toluenu (250g), 1-(terc-butil) 4-etil 3-hidroksi-1H-pirazol-1,4-dikarboksilatom (30.0 g, 117.1 mmol), i PPh3(35.33 g, 134.7 mmol). Reakcija je zagrejana na 40 °C. DIAD (26.09 mL, 134.7 mmol) izmerena je i smeštena u špric i dodata u toku 10 minuta dok je održavana unutrašnja temperatura u opsegu između 40 i 50 °C. Reakcija je zatim zagrejana na 100 °C u toku 30 minuta. Posle držanja na 100 °C u toku 30 minuta, reakcija je završena, i smeša je ohlađena na 70 °C u toku 15 minuta. Heptan (180.0 mL) je dodat, obloga je ohlađena na 15 °C u toku 1 sata. (TPPO je započeo kristalizaciju na ∼35 °C). Smeša koja se meša na 15 °C je proceđena (brzo), kolač je ispran sa prethodno pomešanim rastvorom toluena (60 mL) i heptana (60 mL) i zatim je izvučen na suvo. Bistar rastvor je koncentorvan do voskaste čvrste supstance (45 °C, vakuum, rotoacioni uparivač). Sirovi 1-(terc-butil) 4-etil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1,4-dikarboksilat (53.49g) je dobijen kao voskasta čvrsta supstanca, (∼120% regenesrisano teorijske mase).
Korak 3: Dobijanje 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline
[0243]
[0244] Rastvor 1-(terc-butil) 4-etil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1,4-dikarboksilata (50.0 g, 131 mmol) u 2-metiltetrahidrofuranu (500 mL) je pripremljen u reaktoru i mešan na 40 °C. Porcije KOt-Bu (80.85 g, 720.5 mmol) su zatim dodate u toku 30 minuta. Dodavanje je bilo egzotermno. Posle 2053.49g UPLC-MS je pokazao potpuno uklanjanje Boc grupe, tako da je dodata voda (3.53 g, 3.53 mL, 196 mmol) u kapima pomoću šprica u toku 20 min da bi se održala reakciona temperatura između 40-50 °C. Smeša je zatim mešana u toku 17 sati da bi se reakcija završila. Smeša je zatim ohlađena na 20 °C i dodata je voda (400 mL). Mešanje je zaustavljeno i slojevi su odvojeni. Željeni proizvod u vodenom sloju je vraćen u reaktor i organski sloj je odbačen. Vodeni sloj je ispran sa 2-Me-THF (200 mL). Izopropanol (50. mL) je dodat, a zatim u kapima vodena HCl (131 mL 6.0 M, 786.0 mmol) da se podesi pH na <3 dok se održava temperatura ispod 30 °C. Dobijena čvrsta supstanca je zatim izolovana ceđenjem i filter kolač je ispran sa vodom (100 mL) zatim izvičen na suvo dok nije dobijen lepljivi kolač. Čvrste supstanca je zatim osušena pod vakuumom na 55 °C da bi se dobila 3-(3,3,3-trifluoro-2,2dimetilpropoksi)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina (23.25 g) kao beličasta fina čvrsta supstanca.
Korak 4: Dobijanje 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazola
[0245] 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina (1.0 equiv) je dodata u reaktor a zatim DMF (6.0 vol, 2.6 mas ekv.). Smeša je mešana na 18 -22 °C. DBU (0.2 ekv.) je sipana u reakcionu smešu pri brzini od približno 45 mL/min. Reakciona temperatura je zatim povećana do 98 -102 °C u toku 45 minuta. Reakciona smeša je mešana na 98 -102 °C u toku manje od 10 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena na -2°C do 2 °C u toku približno 1 sata i korišćena je bez izolovanja da bi se napravio etil 2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat
Alternativni postupak za dobijanje 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]pitidin-3-karboksilne kiseline
[0246]
Korak 1. Etil 2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat
[0247]
[0248] Rastvor etil 2,6-dihloronikotinata (256 g, 1.16 mol) i 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazola (242 g, 1.16 mol) u DMF (1.53 L) je tretiran sa kalijum karbonatom (209 g, 1.51 mol) i DABCO (19.6 g, 174 mmol). Dobijena suspenzija je mešana do egzoterma od 14 do 25 °C i zatim održana na 20 -25 °C sa spoljašnjim hlađenjem u toku 3 dana. Suspenzija je ohlađena ispod 10 °C kada je voda (2.0 L) dodata u tankom mlazu dok je temepratura održavana ispod 25 °C. Pošto je dodavanje završeno, suspenzija je mešana u toku dodatnih 1 h. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem (sinterovano staklo /polipad) i filter kolač je ispran sa vodom (2 x 500-mL) i osušen na vakumu u toku 2 h da bi se dobio vodom navlaženi etil 2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat (512 g; 113% prinos) kao bela čvrsta supstanca koja je korišćena bez daljeg prečišaćvanja u naknadnoj reakciji.
Korak 2.2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1h-pirazol-1-il)nikotinska kiselina
[0249]
[0250] Vodom navlaženi etil 2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat (455 g, 1.16 mol; pretpostavljen 100% prinos iz prethodnog koraka) u EtOH (1.14 L) i THF (455 mL) je mešan na temperaturi okoline (17 °C) kada je dodat 1 M NaOH (1.16 L, 1.16 mol). Reakciona smeša je bila egzotermna do 30 °C i dalje je zagrevana na 40 °C u toku 2 h. Rastvor je zaustavljen sa 1 M HCl (1.39 L, 1.39 mol) što je dovelo do trenutnog taloženja koje je postalo intenzivnije sa dodavanjem kiseline. Krem suspenzija je omogućeno da se ohladi na sobnu temperaturu i mešana je u toku noći. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem (sinterovano staklo/polipad). Filter kolač je ispran sa vodom (2 x 500-mL). Filter kolač je osušen na vakum pumpi u toku 1 h, ali je ostavljen vlažan. Vlažna čvrsta supstanca je premeštena na 10-L Bucherov levak i dalje sušena (50 °C/20 torr), ali nije bilo efikasno. Dalji napori da se osuši sa i-PrOH su takođe bili nefiksani. Uspešno sušenje je postignuto pošto je vlažna čvrsta supstanca ponovo napunjena sa i-PrOAc (3 L), suspenzija je zagrejana na 60 °C (homogenizacija), i ponovo re-koncentrovana do suvog (50 °C/20 tor) da bi se dobila 2-hloro-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1h-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (408 g; 97% prinos za dva koraka kao fin, beli prah. Proizvod je dalje osušen u vakuum sušnici (50 °C/10 tor/N2 ispuštanje) u toku 2 h ali primećen je marginalni gubitak mase.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.64 (s, 1H), 8.49 -8.36 (m, 2H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.28 (s, 2H), 1.24 (s, 6H).19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -75.2. KF analiza: 0.04% voda.
2. Dobijanje oblika A jedinjenja 1
[0251] Kristalni oblik A jedinjenja 1 je dobijen kao rezultat sledeće sinteze. Spojeni 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (108 g, 207.3 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (77.55 g, 518.2 mmol), je spojen sa K2CO3(143.2 g, 1.036 mol) u DMSO (432.0 mL) i 1,2-dietoksietanom (108.0 mL) u balonu od 1-L RB sa refluks kondenzatorom. Dobijena suspenzija je zagrejana na 120°C i mešana je na temperaturi u toku noći. Zatim je reakcija razblažena sa DCM (1.080 L) i polako je dodavan HCl (933.0 mL 2 M, 1.866 mol). Tečne faze su odvojene i vodena faza, i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (540.0 mL).Organske faze su spojene, isprane sa vodom (540.0 mL) (3 x), zatim osušene sa (Na2SO4) da bi se dobio ćilibarni rastvor. Dodat je silkagel (25 g) i zatim je sredstvo za sušenje /silikagel proceđen. Filter sloj je ispran sa DCM (3 x 50-mL). Organske faze su spojene i koncentrovane (40 °C/40 tor) da se dobije sirov N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2+dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (198.6 g, 160% teorijski) kao beličasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je razblažena sa MTBE (750 mL), zagrejana na 60 °C (spoljašnja temperatura), i pomešana u homogenu suspenziju. Suspenzija je ohlađena na 30 °C uz mešanje i čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, osušena na vazduhu, i osušena na vakuumu da bi se dobilo jedinjenje 1 (111.1 g; 90 %) kao fini, beli prah.
[0252] Kristalni oblik A jedinjenja 1 je takođe dobijen pomoću sledećeg postupka. Suspenzija jedinjenja 1 (150.0 g, 228.1 mmol) u iPrOH (480 mL) i vodi (120 mL) je zagrejana na 82 °C da bi se dobio rastvor. Rastvor je ohlađen sa J-Kem kontrolerom sa brzinom hlađenja od 10 °C/h. Jednom kada je temperatura dostigla 74 °C, rastvor je zasejan sa uzorkom jedinjenja 1 u kristalni oblik A. Trenutno je došlo do kristalizacije. Suspenzija je ohlađena na 20 °C. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa i-PrOH (2 x 75 mL), osušena na vazduhu sa vodenom vakum pumom, i osušena na vakuuu (55 °C/300 tor/N2 ispuštanje) da bi se dobilo jedinjenje 1, oblik A (103.3 g) kao bli prah. Uzorak je ohlađen na ∼5 °C, omogućeno je da se meša 1 h, i zatim čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem (sinterovano staklo/papir). filter kolač je ispran sa i-PrOH (75 mL) (2 x), osušen na vazduhu uz vodenu vakum pumpu, osušen na vazduhu u posudi za sušenje (120.6 g uglavnom osušeno), osušeno u vakuumu (55 °C/300 tor/N2 ispuštanje) u toku 4 h, i zatim na RT preko noći. Sušenje u toku noći je dalo 118.3 g (87% prinos) belog praha.
Dobijanje kristalnog oblika M jedinjenja 1 (metanolni solvat jedinjenja 1)
[0253] Jedinjenje 1 (slobodna kiselina neutralni oblik) (800 mg) je dodat u 9.2 g metanola i obrazovan je bistri rastvor. Dodatnih 701.2 mg jedinjenja 1 je dodato, i obrazovana je suspenzija. Temperatura je podignuta do 45°C, u kojoj tački je obrazovan bistar rastvor. Rastvor je polako ohlađen, čvrsta supstanca staložena.
[0254] XRPD podaci kristlnog oblika M jedinjenja 1 su ukratko dole dati. Difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika M jedinjenja 1 je prikazan na SL.13.
Tabela. XRDP podaci za kristalni oblik M jedinjenja 1
Dobijanje kristalnog oblika E jedinjenja 1 (etanolni solvat jedinjenja 1)
[0255] Jedinjenje 1 (slobodna kiselina neutralni oblik) (800 mg) je dodata u 9.2 g etanola i zagrejan do 80°C. Obrazovan je bistar rastvor. Rastvor je polako ohlađen, i čvrsta supstanca je staložena.
[0256] XRPD podaci kristalnog oblika E jedinjenja 1 su ukratko dole dati. Difraktorgam X-zraka na prahu kristalnog oblika E jedinjenja 1 je prikazan na SL.14.
Tabela. XRDP podaci za kristalni oblik E jedinjenja 1
Dobijanje kristalnog oblika P2 jedinjenje 1 (izopropanolni solvata jedinjenja 1)
[0257] Rastvor 200 mg/mL jedinjenje 1 u 2-propanolu je zagrejan na 75°C i sva čvrsta supstanca je rastvorena. Rastvor je ohlađen na 50°C, i došlo je do taloženja. Smeša je održavana na 50°C u toku nekoliko sati, zatim ohlađena na sobnoj temperaturi i ostavljena da zri nekoliko sati.
[0258] XRPD podaci kristalnog oblika P2 jedinjenja 1 su ukratko dole dati. Difraktorgarm X-zraka na prahu kristalnog oblika P2 jedinjenja 1 je prikazan na SL.17.
Tabela. XRDP podaci za kristalni oblik P2 jedinjenja 1
Dobijanje različitih solvata jedinjenja 1
[0259] Različiti sovati jedinjenja 1 su dobijeni mešanjem amorfnog jedinjenja 1 u odgovarajućem suvom rastvaraču kako je prikazano u sledećoj tabeli 8 u toku tri nedelje na sobnoj temperaturi za solvate sulfolana, propinoske kiseline, MTBE, izobuterne kiseline, anizola, metilbutil ketona, sirćetne kiseline i ksilena, ili na 40 °C za solvate toluena. Primećeni čvrsti oblici dobijeni posle vakuum sušenja solvata u vakuumu na sobnoj temperaturi su takođe ukratko prikazani u tabeli. Kako je ovde korišćeno, "Kristalni oblik PA" odnosi se na kristalni oblik jedinjenja 1 dobijenog iz propionska ksieline kako je ovde navedeno, "Kristalni oblik AN" odnosi se na kristalni oblik jedinjenja 1 pripremljen iz anizola kako je ovde prikazano " "Kristalni oblik MK" odnosi se na kristalni oblik jedinjenja 1 pripremljen iz metilbutil
1
ketona kako je ovde navedeno, i "Kristalni oblik AA1" odnosi se na kristalni oblik jedinjenja 1 pripremljen iz sirćetne kiseline kako je ovde prikazano.
Tabela 8:
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 15)
[0260]
Sinteza polaznih paterijala:
Sinteza terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata
[0261]
2
[0262] Rastvor 2,6-dihloropiridin-3-karboksilne kiseline (10 g, 52.08 mmol) u THF (210 mL) je tretiran uzastopno sa di-terc-butil dikarbonatom (17 g, 77.89 mmol) i 4-(dimetilamino)piridinom (3.2 g, 26.19 mmol) i mešan je u toku noći na sobnoj temperaturi. U ovoj tački, dodata je HCl 1N (400 mL) , i smeša je mešana intenzivno u toku oko 10 minuta. Proizvod je ekstrahovan sa etil acetatom (2x300 mL), i spojeni organski slojevi su isprani sa vodom (300 mL) i rastvorom soli (150 mL) i osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije 12.94 g (96% prinos) terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata kao bezbojnog ulja. ESI-MS m/z izrač. 247.02, nađeno 248.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.27 minuta.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1.60 (s, 9H), 7.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.2 Hz, 1H).
Sinteza terc-butil 3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazol-1-karboksilata
[0263]
[0264] Pokrenut je reaktor od 50 L, i obloga je podešena na 20 °C, uz mešanje na 150 oum, sa refluksnim kondenzatorom (10 °C) i pročišćavanjem azotom. MeOH (2.860 L) i metil (E)-3-metoksiprop-2-enoat (2.643 kg, 22.76 mol) su dodati, i reaktor je poklopljen. Reakcija je zagrejana na unutrašnju temperaturu od 40 °C, i sistem je podešen da održava temperaturu obloge na 40 °C. Hidrazin hidrat (1300 g 55 %m/m, 22.31 mol) je dodat u porcijama pomoću kapalice u toku 30 min. Reakcija je zagrejana na 60 °C u toku 1 h. Reakciona smeša je ohlađena na 20 °C i trietilamin (2.483 kg, 3.420 L, 24.54 mol) je dodat u porcijama, održavajući reakcionu temperaturu <30 °C. Rastvor Boc anhidrida (diterc-butil dikarbonat) (4.967 kg, 5.228 L, 22.76 mol) u MeOH (2.860 L) je dodat u porcijama održavanjem temperature <45 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C u toku 16 h. Reakcioni rastvor je parcijalno koncentrovan da se ukloni MeOH, dovodeći do bistrog, svetlo žutog ulja. Dobijeno ulje je premešteno u reaktor od 50L, mešan i dodati su voda (7.150 L) i heptan (7.150 L). Dodavanje je uzrokovalo taloženje male količine proizvoda. Vodeni sloj je isušen u čistom sudu, i kontaktni sloj i heptanski sloj su proceđeni da bi se odvojila čvrsta supstanca (proizvod). Vodeni sloj je premešten nazad u reaktor, i sakupljena čvrsta supstanca je smeštena nazad u reaktor i mešana sa vodenim slojem. Kapalica je dodata u rekator i napunjena sa sirćetnom kiselinom (1.474 kg, 1.396 L, 24.54 mol) i dodavana u kapima. Obloga je podešena na 0 °C da bi apsorbovao egzoterm reakcije. Posle završenog dodavanja (pH=5), reakciona smeša je mešana u toku 1 h. Čvrsta supstanca je sakuplja ceđenjem i isprana sa vodom (7.150 L), i isprana drugi put sa vodom (3.575 L). Kristalna čvrsta supstanca je premeštena u balon rotacionog uparivača od 20 L, i dodat je heptan (7.150 L). Smeša je suspendovana na 45 °C u toku 30 min, i predestilovana je 1-2 zapremina rastvarača. Suspenzija u rotacionom balonu je proceđena i čvrsta supstanca je isprana sa heptanom (3.575 L). Čvrsta supstanca je dalje osušena in vacuo (50 °C, 15 mbar) da bi se dobio terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilat (2921 g, 71%) kao gruba, kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s,1H), 7.98 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 1.54 (s, 9H).
Sinteza 1,3-dimetil-1H-pirazol-4-sulfonamid
[0265]
[0266] Amonijum hidroksid (približno 186.5 mL 28 %m/v, 1.490 mol) je ohlađen na 0-5 °C u reakcionom sudu sa oblogom. Rastvor 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorida (29.0 g, 149.0 mmol) u DCM (116.0 mL) je dodat dok je reakciona temperatura održavana između 0 do 5 °C. Dve faze su odvojene, i organska faza je isprana sa vodom (100 mL). Vodene faze su spojene i koncentrovane da se ukloni većina zaostalog amonijaka. Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (200 mL i 100 mL). Organske faze su spojene, osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane da bi se dobilo 14.1 g bele čvrste supstance. Vodena baza je zakišeljena sa limunskom kiselinom (približno 28.63 g, 17.20 mL, 149.0 mmol) (pH ∼ 2). Kiseli vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa etil acetatom (200 mL i 100 mL). Spojene organske faze su osušene preko natrijum sulfata, i koncentrovane da bi se dobilo još 7.8 g bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je spojena i rekristalisana iz vrelog (78 °C) etil acetata (50 mL) da bi se dobilo 16.1 g 1,3-dimetil-1H-pirazol-4-sulfonamida kao bele, čvrste kristalne supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.01 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.77 (s, 3H).
Sinteza 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol
[0267]
[0268] U rastvor litijum aluminijum hidrida (293 mg, 7.732 mmol) u THF (10.00 mL) i ledenom kupatilu, dodat je 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sirćetna kiselina (1.002 g, 5.948 mmol) u THF (3.0 mL) u kapima u periodu u toku 30 minuta održavajući reakcionu temperaturu ispod 20 °C. Omogućeno je da se smeša postepeno zagreje na temepraturu okoline i mešana je u toku 18 h. Smeša je ohlađena sa u ledenom kupatili i sekvencionalno je razblažena sa vodom (294 mg, 295 mL, 16.36 mmol), NaOH (297 μL 6 M, 1.784 mmol), i zatim vodom (884.0 μL, 49.07 mmol) da bi se dobila granularna čvrsta supstanca u smeši. Čvrsta supstanca je proceđena pomoću celita, i talog je ispran sa etrom. Filtrat je dalje osušen sa MgSO4i proceđen i koncentrovan in vacuo da bi se dobio proizvod sa zaostalim THF i etrom. Smeša je sakupljena direktno u sledećem koraku baz daljeg prečišćavanja.
Korak 1: terc-Butil 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat
[0269]
4
[0270] terc-Butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilat (1.043 g, 5.660 mmol), 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol (916 mg, 5.943 mmol), i trifenil fosfin (1.637 g, 6.243 mmol) su spojeni u THF (10.48 mL), i reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu. Diizopropil azodikarboksilat (1.288 g, 1.254 mL, 6.368 mmol) je dodat u kapima u reakcionu smešu, i reakcija je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu u toku 16 sati. Smeša je uparena, i dobijeni materijal je razdeljen između etil acetata (30 mL) i1 N natrijum hidroksida(30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran sa rastvorom soli (30 mL), osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijentom etil acetata u heksanima (0-30%) da bi se dobio terc-butil 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat (1.03 g, 57%). ESI-MS m/z izrač.320.13, nađeno 321.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.72 minuta.
Korak 2: 3-[2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol
[0271]
[0272] terc-Butil-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat (1.03 g, 3.216 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (10.30 mL) sa trifluorosirćetnom kiselinom (2.478 mL, 32.16 mmol), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Reakcija je uparena, i dobijeno ulje je razdeljeno između etil acetata (10 mL) i zasićenog natrijum bikarbonatog rastvora. Organski sloj je odvojen, ispran sa rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i uparen da se dobije 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (612 mg, 86%). ESI-MS m/z izrač. 220.08, nađeno 221.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.5 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.86 (s, 1H), 7.50 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 5.63 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 4.14 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.01 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 0.96 -0.88 (m, 2H), 0.88 0.81 (m, 2H).
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0273]
[0274] terc-Butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (687 mg, 2.770 mmol), 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (610 mg, 2.770 mmol), i sveže samleveni kalijum karbonat (459 mg, 3.324 mmol) su spojeni u anhidrovanom DMSO (13.75 mL). 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (DABCO (1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan), 62 mg, 0.5540 mmol) je dodat, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i mešana u toku 15 minuta. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena i isprana sa vodom . Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena preko magnezijum sulfata. Smeša je proceđena i koncentrovana da se dobije terc-butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.01 g, 84%). ESI-MS m/z izrač. 431.12, nađeno 432.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.88 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0275]
[0276] terc-Butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.01 g, 2.339 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (1.8 mL, 23.39 mmol) su spojeni u dihlorometanu (10 mL) i zagrevani na 40 °C u toku 3 h. Reakcija je koncentrovana. Dodati su heksani, i smeša je koncentrovana ponovo da se dobije 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (873 mg, 99%) ESI-MS m/z izrač. 375.06, nađeno 376.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.69 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0277]
[0278] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (6 g, 15.97 mmol) u THF (60.00 mL) je tretirana sa CDI (približno 3.107 g, 19.16 mmol), i mutni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 h. Zatim je dodat 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 3.110 g, 17.57 mmol), a zatim DBU (približno 2.917 g, 2.865 mL, 19.16 mmol), i reakcija je mešana na sobnoj temepraturi u toku 12 sati. Smeša je tretirana sa hladnom limunskom kiselinom (približno 83.84 mL 1 M, 83.84 mmol) da bi se dobila emulzija. Većina THF je uklonjena pod sniženim pritiskom i ekstrahovana sa etil acetatom (100 ml), isprana sa 0.5 M limunskom kiselinom (80 ml) i rastvorm soli (80 ml) i vodene faze su su ponovo ekstrahovane jednom sa etil acetatom (80 ml). Spojene organske faze su osušene, proceđene i uparene. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silikagelu sa linearnim gradijentom dihlorometana do 2% metanola. Frakcije proizvoda su uparene da bi se dobio 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (4.64 g, 53%). ESI-MS m/z izrač.532.09076, nađeno 533.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.83 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.73 (s, 1H), 8.41 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.09 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.01 -0.82 (m, 4H).
Korak 6: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0279]
[0280] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (5.9 g, 10.74 mmol) je rastvoren u NMP (28.62 mL) i 1,2-dietoksietanu (5.723 mL), tretiran sa kalijum karbonatom (približno 7.422 g, 53.70 mmol) i (4S)-2,2,4-trimetilpirolidinom (Hidrohloridna so) (približno 3.537 g, 23.63 mmol), 3 puta podvrgavan ciklsu vakum/azot i zagrevan na 130 °C (uljano kupatilo na 135 °C) uz mešanje pod azotom u toku 20 sati. Reakciona suspenzija je ohlađena, razblažena sa vodom (34.34 mL) i pažljivo dodata u intenzivno mešan rastvor sirćetne kiseline (približno 9.674 g, 9.161 mL, 161.1 mmol) u vodi (137.4 mL). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku jednog sata , proceđena i isprana sa mnogo vode . Vlažna sirova supstanca od vode je rastvorena u vrelom etanolu (∼100 ml, braon mutan rastvor), izbistrena sa ugljem preko celita (samo blago svetliji) i vreo bistar rastvor je tretiran sa vodom (∼25 ml) dok nije postala mutan. Vreo mutan rastvor je ostavljen da se hladi na sobnu temperaturu uz mešanje u toku 2 sata da bi se dobila gusta suspenzija. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, isprana sa hladnim etanol/vodom 1:1 i dosta vode. Čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom u suvoj sušnici na 45 °C sa ispuštanje azota preko vikenda da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (4.27 g, 65%). ESI-MS m/z izrač.609.2345, nađeno 610.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.07 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.35 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.20 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.55 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 2.41 (dd, J = 10.1, 7.1 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.18 (dp, J = 17.8, 6.2 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.99 -0.86 (m, 4H), 0.82 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida
Korak 1: 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamide (Jedinjenje 14)
[0282] 1,5-Dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (9 g, 46.24 mmol) je suspendovan u hladnom amonijum hidroksidu (54 mL 30 %m/m), i THF (27.00 mL) je dodat kao korastvarač, i mutna emulzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom (uklonjen je THF i amonijak) da bi se dobila lepa suspenzija. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, isprana sa lednom vodom i osušena da bi se dobio 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (7.35 g, 90%) kao beličasta čvrsta supstanca . ESI-MS m/z izrač.175.04155, nađeno 176.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.8 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (s, 1H), 7.18 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 2.41 (s, 3H).
Korak 2: 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0283]
[0284] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (6 g, 15.97 mmol) u THF (60.00 mL) je tretirana sa CDI (približno 3.107 g, 19.16 mmol), i mutan rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sata. Zatim je dodat 1, 5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 3.110 g, 17.57 mmol), a zatim DBU (približno 2.917 g, 2.865 mL, 19.16 mmol), i obrazovana gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 4 sata. Suspenzija je tretirana sa hladnom limunskom kiselinom (približno 83.84 mL 1 M, 83.84 mmol), i većina THF je uklonjena pod sniženim pritiskom, i čvrsta supstanca je proceđena, isprana sa puno vode i osušena pod vakum pumpom . Sirovi (8 g) je kristalisao iz etanola (150 ml za rastvor pri refluksu) da bi se dobilo 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (6.9 g, 80%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.532.09076, nađeno 533.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.53 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.73 (s, 1H), 8.41 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.02 -0.84 (m, 4H).
Korak 3: N-(1,5-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0285]
[0286] 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (137 mg, 0.2571 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (115 mg, 0.7684 mmol), i kalijum karbonat (214 mg, 1.548 mmol) su spojeni u DMSO (685.0 μL) i zagrevani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu , i dodat je 1 mL vode . Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži, i vodeni deo je uklonjen pipetom , i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata, zatim isprana sa 15 mL 1 M limunskom kiselinom. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dodatna dva puta sa 15 mL etil acetata. Organske supstance su sakupljene, isprane sa rastvoreom soli, osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena silikagel hormatografijom eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca, N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (93 mg, 59%). ESI-MS m/z izrač.609.2345, nađeno 610.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.09 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.58 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.41 (dd, J = 10.3, 7.0 Hz, 1H), 2.17 (dq, J = 11.9, 6.0 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.91 -1.82 (m, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.43 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 0.96 (td, J = 5.0, 4.5, 3.2 Hz, 2H), 0.93 -0.85 (m, 2H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza 6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 18)
Korak 1: 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0287]
[0288] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2661 mmol) i CDI (približno 51.38 mg, 0.3169 mmol) su spojeni u THF (600.0 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sati. Za to vreme, 1,3,5-trimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (približno 55.53 mg, 0.2661 mmol) je spojen sa amonijakom (približno 250.0 μL of 7 M, 1.750 mmol) (u metanolu) u odvojenim fiolama, trenutno obrazujući belu čvrstu supstancu . Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene uparavanjem, i 1 mL dihlorometana je dodat u čvrsti ostatak , i takođe je uparen . DBU (približno 54.41 mg, 53.45 μL, 0.3574 mmol) je dodat i mešan na 60 °C u toku 5 minuta, (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka iz zaostalog amonijum hlorida ), a zatim 1 mL THF, koji je naknadno uparen . Sadržaj fiole koji sadrži CDI aktiviranu karboksilne kiselinu u THF je zatim dodat u fiolu koja sadrži novoobrazovani sulfonamid i DBU, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetata, i isprana sa 10 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 10 mL), i spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli , osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (139 mg, 96%). ESI-MS m/z izrač.546.1064, nađeno 547.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.7 minuta.
Korak 2: 6-[3-[2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-y1]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0289]
[0290] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (139 mg, 0.2541 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (114 mg, 0.7617 mmol), i kalijum karbonat (211 mg, 1.527 mmol) su spojeni u DMSO (508.2 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži, tečni deo je uklonjen pipetom, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata, zatim isprana sa 15 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca, 6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (80 mg, 50%) ESI-MS m/z izrač. 623.2502, nađeno 624.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.16 minuta.
Sinteza N-[1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 55)
Korak 1: 1-Metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-sulfonamid
[0291]
1
[0292] 1-Metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-sulfonil hlorid (250 mg, 1.006 mmol) je rastvoren u THF (2 mL), i dodat je amonijak u metanolu (750 μL 7 M, 5.2 mmol) . Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 3 h. Reakciona smeša je uparena do suvog, i ostatak je suspendovan u etil acetatu i zagrevan u toku 20 min na 65 °C. Smeša je proceđena vrela (da bi se uklonio amonijum hlorid nastao u reakciji ), i čvrsta supstanca je odbačena. Matična tečnost je uparena da bi se dobio 1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-sulfonamid (186 mg, 81%) ESI-MS m/z izrač.229.01328, nađeno 230.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.28 minuta.
Korak 2: 2-Hloro-N-[1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0293]
[0294] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (51 mg, 0.14 mmol) i CDI (37 mg, 0.23 mmol) su spojeni u THF (1 mL) i mešani u toku 1 h na sobnoj temperaturi. 1-Metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-sulfonamid (34 mg, 0.15 mmol) i DBU (64 μL, 0.4280 mmol) su dodati, i rekacija je mešana u toku dodatnih 16 h. Reakciona smeša je razdelja između etil acetata i rastvora 1 M limunske kiseline . Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i uparena. Sirovi materijal je korišćen direktno u sledećem koraku .2-Hloro-N-[1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (82 mg, 100%) ESI-MS m/z izrač.
586.0625, nađeno 587.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.73 minuta
Korak 3: N-[1-Metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0295]
[0296] 2-Hloro-N-[1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (82 mg, 0.14 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (64 mg, 0.43 mmol), i kalijum karbonat (100 mg, 0.724 mmol) su spojeni u DMSO (1 mL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) dajući gumu. Voda je dekatnovana i odbačena . Ostatak je razdeljen između etil acetata i rastvora
1 1
1 M limusnke ksielina. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobio N-[1-metil-3-(trifluorometil)pirazol-4-il]sulfonil6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (29.6 mg, 32%). ESI-MS m/z izrač.663.20624, nađeno 664.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.16 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.20 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.45 (dd, J = 3.9, 2.0 Hz, 1H), 2.29 -2.12 (m, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.88 (dd, J = 12.0, 5.7 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.42 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 0.99 -0.92 (m, 2H), 0.90 (d, J = 10.7 Hz, 2H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 19)
[0297]
Sinteza (1-trifluorometil-ciklobutil)-metanola
[0298]
[0299] 1-Trifluorometil-ciklobutanekarboksilna kiselina (5.0 g, 30. mmol) je rastvorena u dietil etru (60 mL) i ohlađena na 0 °C. Litijum aluminijum hidrid (38.66 mL, 1 M in dietil etar) je dodat u kapima, i rastvor je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu u toku noći . Reakcioni rastvor je ohlađen na 0 °C uz mešanje, i dodat je natrijum sulfat dekahidrat, što je dovelo do postepenog razvijanja gasa. Dodavanje u porcijama je nastavljeno dok prestanka primećivanja razvijanja gasa na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je zatim proceđen preko sloja celita, ispiranjem sa dietil etrom. Filtrat
1 2
je koncentrovan pod sniženim pritiskom i dobijeno je 5.44 g smeše koja sadrži željeni proizvod i nešto dietiletarskog ostatka (36% sa NMR integracijom). Ovako je dobijen 1-trifluorometil-ciklobutil-metanol (3.46 g, 78%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 3.82 (s, 2H), 2.39-2.14 (m, 2H), 2.10-1.85 (m, 4H).
Korak 1: terc-butil estar 3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-karboksilne kiseline
[0300]
[0301] 1-Trifluorometil-ciklobutil-metanol (1.50 g, 9.73 mmol) i terc-butil estar 3-okso-2,3-dihidropirazol-1-karboksilne kiseline (1.63 g, 8.85 mmol) su rastvoreni u anhidrovanom tetrahidrofuranu (32 mL). Rastvor je degasiran pod ultrazvukom i ispran sa gasovitim azotom . Trifenilfosfin (2.55 g, 9.73 mmol) je dodat, i diizopropil azodikarboksilat (1.92 mL, 9.73 mmol) su zatim dodati u kapima. Pošto je završeno dodavanje, reakcija je zagrejana na 50 °C u toku 16 sati. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je razblažena sa etil acetatom(100 mL) i isprana sa 1 M rastvorom natrijum hidroksida (2 x 100 mL), zatim rastvorom soli (125 mL). Organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, proceđene, i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovo žuto ulje je prečišćeno fleš hroamtografijom pomoću 0-10% etil acetata u heksanima gradijentnim postupkom da bi se dobio tercbutil estar 3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-karboksilne kiseline (2.48 g, 87%) kao beličaste čvrste supstance. ESI-MS m/z izrač. 320.31, nađeno 321.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.74 minuta
Korak 2: 3-(1-Trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-1H-pirazol hidrohloridna so
[0302]
[0303] terc-Butil estar 3-(1-Trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-karboksilne kiseline (2.48 g, 7.74 mmol) je rastvoren u 4 M hlorovodonika u dioksanu (77 mL). Rastvor je mešan u toku noći na sobnoj temperaturi, a zatim su uklonjene isparljive supstance pod sniženim pritiskom da bi se dobila hidrohloridna so 3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-1H-pirazol (1.95 g, 98%) kao beli čvrsti prah. ESI-MS m/z izrač.220.20, nađeno 221.2 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 2.67 minuta.
Korak 3: terc-butil estar 2-hloro-6-[3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina
[0304]
1
[0305] 3-(1-Trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-1H-pirazol hidrohloridna so (1.95 g, 7.61 mmol) i tercbutil estar 2,6-dihloronikotinska kiselina (1.89 g, 7.62 mmol) su rastvoreni u dimetilformamidu (15 mL), i dodat je kalijum karbonat (4.21 g, 30.5 mmol) a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (0.43 g, 3.8 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku noći, zatim je voda (150 mL) dodata i vodeni sloj je ekstrahovan sa 4:1 etil acetat:heksani (100 mL). Organska faza je isprana sa rastvorom soli (70 mL), osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovo ulje je prečišćeno hromatografijom na silikagelu pomoću 0-10% etil acetata u heksanu gadijentim postupkom da bi se dobio tert-butil estar 2-hloro-6-[3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina (1.94 g, 66%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.431.85, nađeno 432.2 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.61 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina
[0306]
[0307] terc-Butil estar 2-hloro-6-[3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinske kiseline (1.9 g, 4.40 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (20 mL), i dodata je trifluorosirćetna kiselina (5.0 mL). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći, posle čega su isparljive supstance uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(1-trifluorometil-ciklobutilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina (1.61 g, 97%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 375.74, nađeno 376.2 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.57 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0308]
[0309] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2661 mmol) i CDI (51 mg, 0.3145 mmol) su spojeni u THF (600.0 μL) i mešani na sobnoj
1 4
temperaturi u toku 2 sata u fioli (vial 1). Za to vreme, 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (62 mg, 0.3185 mmol) je spojen sa amonijakom (približno 250.0 μL 7 M, 1.750 mmol) (u metanolu) u odvojenoj fioli (fiola 2). Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene iz fiole 2 uparavanjem, i dodat je 1 mL dihlorometana u čvrsti ostatak, i takođe je uparen . DBU (60 μL, 0.4012 mmol) je zatim dodat u fiolu 2 i mešan na 60 °C u toku 5 minuta (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka od bilo kog zaostalog amonijum hlorida). Posle hlađenja na sobnu temperaturu , 1 mL THF je dodat i zatim uparen pod sniženim pritiskom . Sadržaj fiole 1 je zatim dodat u fiolu 2 špricom, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetata i isprana sa 10 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2 x 10 mL etil acetata, i spojeni organski slojevi su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata, i koncentrovani da bi se dobila bela čvrsta supstanca . Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (132 mg, 93%) ESI-MS m/z izrač.532.09076, nađeno 533.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.7 minuta.
Korak 6: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0310]
[0311] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (132 mg, 0.2477 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (111 mg, 0.7417 mmol), i kalijum karbonat (206 mg, 1.491 mmol) su spojeni u DMSO (500 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja tečni deo je uklonjen pipetom, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata zatim isprana sa 15 mL 1 M limunskom kiselinom. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca, N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklobutil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (93 mg, 62%) ESI-MS m/z izrač.609.2345, nađeno 610.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.14 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.36 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.41 (dd, J = 10.2, 7.0 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.31 -2.26 (m, 2H), 2.20 -2.07 (m, 4H), 2.01 -1.92 (m, 1H), 1.88 (dt, J = 11.8, 6.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.3 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 10)
[0312]
1
Korak A: (1-(Trifluorometil)ciklopropil)metanol
[0313]
[0314] Litijum aluminijum hidrid (približno 78.45 g, 2.067 mol) (pelete) su dodate u balon, THF (2.450 L) je dodat u kapalicu, i sistem je 3 puta podvrgnut ciklusu vakum/ azot. Rastvarač je brzo dodat u LAH pelete, mešan na sobnoj temperaturi u toku 0.5 h (pelete su počele da se raspadaju u dobijena je siva suspenzija ), u ohlaćen u lednom kupatilu. Rastvor 1-(trifluorometil)ciklopropankarboksilne kiseline (245 g, 1.590 mol) u THF (735.0 mL) je polako dodat pomoću kapalice u toku 0.5-1 h, održavajući unutrašnju temperaturu ispod 30 °C. Siva suspenzija je mešana u kupatilu sa otopljnenim ledom u toku 14 . Siva suspenzija je zaustavljena pri hlađenu ledom sa laganim dodavanjem vode (približno 75.92 g, 75.92 mL, 4.214 mol), a zatim NaOH (približno 76.32 mL 6 M, 457.9 mmol) i vode (približno 75.92 g, 75.92 mL, 4.214 mol). Siva suspenzija je mešana na ∼50 °C dok čvrsta supstanca nije postala bezbojna (∼0.5 h), tretirana sa magnezijum sulfatom (20 g), proceđena preko celita, i soli aluminijuma su isrpane sa tri porcije vrelog THF. Filtrat je osušen ponovo preko magnezijum sulfata, proceđen, i koncentrovan uparavanjem na 55 °C i 450 mbar da bi se dobio [1-(trifluorometil)ciklopropil]metanol kao 62 mas% rastvor (NMR) u THF (327 g, 91%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.94 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.56 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 0.91 -0.74 (m, 4H)
Korak 1: terc-Butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0315]
[0316] Trogrli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabedeven sa mehaničkom mešalicom, grejnim telom, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, kapalicom, refluksnim kondenzatorom hlađenim sa vodom i uvodnikom/odvodnikom za azot . Sud je napunjen u atmosferi azota sa terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilatom (70 g, 0.3800 mol) i tetrahidrofuranom (840 mL, 12 mL/g) koji su dali bistar
1
bledo žuti rastvor . Mešanje je počelo, i temperatura suda je zabeležena na 19 °C. Sud je zatim napunjen sa [1-(trifluorometil)ciklopropil]metanolom (58.56 g, 0.4180 mol) koji je dodat u jednoj porciji a zatim je dodat trifenilfosfin (109.6 g, 0.4180 mol) kao čvrsta supstanca u jednoj prociji. Dobijeni bistri bledi žuti rastvor je zatim tretiran sa diizopropil azodikarboksilatom (bistra crveno-naradžasta tečnost) (82.3 mL, 0.4180 mol) dodat u kapima u toku 1 sata koji je doveo do postepenog egzoterma na 40 °C i bistrog svetlo ćilibarnog rastvora . Reakciona smeša je zatim zagrevana na temepraturu suda od 50 °C, i uslov je održavan u toku 2 sata, kada je LC/MS ukazala ne nepotpuno iskorišćenje polaznog materijla . Bistra ćilibarna reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom , i dobijeno bistro tamno ćilibrano ulje je suspendovano u toluenu (560 mL) i mešano na sobnoj temperaturi u toku 1 sata, za koje vreme je čvrsta supstanca (trifenilfosfin oksid MW = 278.28) staložena. Gusta suspenzija je proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla i filter kolač je ispran i zamenjen sa toluenom (150 mL) i zatim izvađen u toku 30 minuta. Bistar ćilibarni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i dobijen je ćilibarni filtrat koji je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro ćilibarno ulje . Materijal je prečišćen sa fleš hromatografijom na silikagelu (čvrsto nanošen na celit 1.5 kg RediSep kolonu) eluacioni gradijent sa 100% heksana do 20% EtOAc u hekasnu sakupljajući 450 mL frakcija. Proizvod je eluira oko 5% EtOAc u heksanu. Željene frakcije su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se obezbedilo bisto bledo žuto ulje kao željeni proizvod terc-butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilata (81 g, 0.264 mol, 70%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.07 (dp, J = 4.9, 1.3 Hz, 4H). ESI-MS m/z izrač.306.11914, nađeno 259.0 (M-48)+; Retenciono vreme: 1.76 minuta
Korak 2: 3-[[1-(Trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazol
[0317]
[0318] Trogrli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničnkom mešalicom, grejnim telom, J-Kem temperaturnom sondom , refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom , kapalicom, i uvodnikom/odvodnikom azota. Sud je napunjen u atmosferi azota sa terc-butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilatom (80 g, 0.2612 mol), dihlorometanom (320 mL, 4 mL/g) i metil alkoholom (320 mL, 4 mL/g) što je obezbedilo bistar bledo žuti rastvor . Mešanje je nastavljeno i temepratura suda je zabeležena na 19 °C. Kapalica je napunjena sa 4 M HCl u 1,4-dioksanu (195.9 mL, 0.7836 mol) koji je naknadno dodat u kapima u toku 1 sata što je dovelo do postepenog egzotrema na 30 °C. Dobijeni bistri bledo žuti rastvor je zagrejan na temperaturu suda od 45 °C, i ovo je održavano u toku 1 sata, kada je analiza LC/MS ukazala da je reakcija završena. Reakciona smeša je omogućeno da se ohladi na sobnu temperaturu i zatim koncentruje pod siženim pristiskom. Zaostao ostatak je rastvoren u terc-butil metil etru (640 mL) i zatim je prenet u kapalici i razdeljen sa 2 M natrijum hidroksidnim rastvorom (391.8 mL, 0.7836 mol). Organski sloj je uklonjen , i zaostao vodeni deo je ekstrahvoan sa terc-butil metil etrom (2 x 200 mL). Spojena organska supstanca je isprana sa zasićenim natrijum hloridnim rastvorom (500 mL), osušena preko natrijum sulfata (300 g), i zatim proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla . Bistri beldo žuti filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i obezbežđeno je bisto svetlo žuto ulje koje je očvrslo posle stajanja da bi se dobila
1
bela čvrsta supstanca (49.5 g, 0.240 mol, 92%) kao poželjni proizvod 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazol.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.90 (s, 1H), 7.51 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 1.09 -0.97 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač. 206.0667, nađeno 207.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.07 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]meth-oksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0319]
[0320] Trogrli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje koje je korišćeno za sekundarno zadržavanje, J-Kem temperaturnom sondom, refluksnim kondenzatorom koji je hlađen vodom, kapalicom, i uvodnik/odvodnik azota . Sud je napunjen u atmosferi azota sa 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazolom (45 g, 0.2183 mol) i N,N-dimetilformamidom (540 ml, 12 mL/g) koji je obezbedio bistar belo žuti rastvor . Mešanje je počelo i temepratura suda je zabeležena na 17 °C. Sud je zatim napunjen sa terc-butil 2,6-dihloro-piridin-3-karboksilatom (54.16 g, 0.2183 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijeni bistar bledo žuti rastvor je zatim tretiran sa kalijum karbonatom (39.22 g, 0.2838 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (3.67 g, 0.03274 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji . Dobijena bledo žuta suspenzija je omogućeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 24 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 10 °C sa kupatilom za hlađenje sa smrvljenim ledom/vodom . Kapalica je napunjena sa vodom (540 mL) koja je dodavana u kapima u toku 45 minuta što je dovelo do guste suspenzije i egzoterma na 15 °C. Nastavljeno je mešanje dobijene suspenzije na 15 °C u toku 30 minuta i zatim je proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla . Filter kolač je ispran i zamenjen sa vodom (2 x 500 ml) i zatim povučen na Bihner u toku 2 sata. Materijal je zatim dozvoljeno da se osuši na vazduhu preko noći da bi se dobio (73 g, 0.175 mol, 80%) bele granularne čvrste supstance kao terc-butil 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata. ESI-MS m/z izrač.361.0441, nađeno 361.9 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.27 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-1[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0321]
1
[0322] Trogrli balon sa okruglim dnom od 1000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, grejnim telom, J-Kem temperaturnom sondom /kontrolerom, kapalicom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom, i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa terc-butil 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilatom (70 g, 0.1675 mol) i 2-propanolom (350 mL) koji je obezbedio beličastu suspenziju. Mešanje je započelo, i temperatura suda je zabeležena na 19 °C. Kapalica je napunjena sa vodenom 6 M HCl (139.6 mL, 0.8375 mol) koja je dodata u kapima u toku 10 minuta što je dovelo do egzoterma od 30 °C. Dobijena suspenzija je zatim zagrejana do refluksa (temepratura suda ∼82 °C). Posle zagrevanja suspenzija je postala bistar beložuti rastvor (t ∼75 °C temperatura suda u ovoj tački). Posle mešanja na refluksu u toku ∼30 minuta čvrsta supstanca je počela da se taloži. Suspenzija je nastavljeno da se meša na refluksu u toku dodatnih 30 minuta u kojoj tački je voda (210 mL) dodata u kapima u toku 15 minuta. Zatim je uklonjeno zagrevanje, i suspenzija je nastavljeno da se meša i omogući sporo hlađenje na sobnu temperaturu. Materijal je sakupljen vakuum filtracijom na Bihnerovom levku od poroznog stakla i filter kolač je ispran i zamenjen sa 1:1 voda/2-propanol (100 mL) a zatim vodom (2 x 100 mL) i zatim ivučen na Bihner u toku 30 minuta. Materijal je dalje osušen u vakuum pećnici na 45 °C u toku 24 sata da bi se dobila 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (56 g, 0.155 mol, 92%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.64 (s, 1H), 8.44 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 1.16 -1.07 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač.361.0441, nađeno 361.9 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.23 minuta
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0323]
[0324] U rastvor 2-hloro-6-[3-[[1-(tnfluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (1.05 g, 2.903 mmol) u THF (20.0 mL) je dodat karbonil diimidazol (670.8 mg, 4.137 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Zatim, 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (580.5 mg, 3.313 mmol) i DBU (670.0 μL, 4.480 mmol) su dodati. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Reakciona smeša je zaustavljena sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni organski ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata, i upareni da bi se dobio 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1.4 g, 93%) kao lepljiva bela čvrsta supstanca, koja je korišćena kao takva u sledećoj reakciji. ESI-MS m/z izrač.518.0751, nađeno 519.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.66 minuta.
Korak 6: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0325]
1
[0326] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (190 mg, 0.3662 mmol) je rastvoren u DMSO (1 mL), i (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (približno 124.4 mg, 1.099 mmol) je dodat, a zatim fino sprašeni kalijum karbonat (približno 303.6 mg, 2.197 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša na 130 °C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa vodenom 1 M limunskom kiselinom (13 50 mL) i rastvorom soli (13 50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Pritisak je izolovan sa silkagelom na koloni: kolona od 12 grama silikagela, 0-5% MeOH/DCM gradijent. Dobijen je N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (49.5 mg, 0.08310 mmol, 22.70%). ESI-MS m/z izrač. 595.2189, nađeno 596.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.06 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.42 -4.30 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.56 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.44 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (dq, J = 12.0, 5.9 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.12 -1.05 (m, 4H), 0.82 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza dva enantiomera 2-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida
[0327]
Korak 1: 3,3-Dimetilbutannitril
[0328]
11
[0329] Natrijum cijanid (9.20 g, 187.7 mmol) je dodat u rastvor 1-bromo-2,2-dimetilpropana (15.74 g, 104.2 mmol) u DMSO (100 mL), i reakciona smeša je mešana na 90 °C preko noći. Jednom kada je ohlađena na sobnu temperaturu reakciona smeša je sipana u vodu (900 mL) i ekstrahovana pomoću dietil etra (3 x 300 mL). Organski slojevi su spojeni, isprani sa 3 N HCl (300 mL), vodom (300 mL), i rastvorom soli (300 mL), osušeni preko magnezijum sulfata, proceđeni, i koncentrovani pod sniženim prisitskom da bi se dobio 3,3-dimetilbutannitril (11.78 g koji sadrže 50% dietil etar, 58% prinos) kao bistra tečnost.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) ppm 1.09 (s, 9 H), 2.22 (s, 2 H).
Korak 2: 2-terc-Butil-4-metil-pent-4-ennitril
[0330]
[0331] n-Butillitijum (27.2 mL of 2.5 M, 68.00 mmol) je dodat u rastvor diizopropilamina (8.7 mL, 62.07 mmol) u suvom THF (100 mL) na -78 °C, i smeša je mešana na ovoj temperaturi u toku 15 minuta, zagrejana na 0 °C u toku 15 minuta, zatim ponovo ohlađena na -78 °C. Posle toga, dodato je 3,3-dimetilbutannitrila (6.0 g, 61.75 mmol), i reakciona smeša je mešana na -78 °C u toku 1 sat.3-Hloro-2-metil-prop-1-en (12.1 mL, 123.6 mmol) je dodat, i reakciona smeša je polako zagrejana na sobnu temperaturu i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (200 mL) i isroana sa vodom (3x100 mL). Organski sloj je osušen preko magnesium sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-terc-butil-4-metil-pent-4-ennitril (10.69 g, čistoće 87% (13% THF), 99% prinos) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) ppm 1.08 (s, 9H), 1.78 (s, 3H), 2.17-2.28 (m, 2H), 2.46 (dd, J=11.3, 4.8 Hz, 1H), 4.91 (d, J=9.4 Hz, 2H).
Korak 3: 2-terc-Butil-4-metil-pent-4-en-1-amin
[0332]
[0333] Litijum aluminium hidrid (9.33 g, 245.8 mmol) je suspendovan u suvom etil etru (250 mL) na 0 °C.2-terc-Butil-4-metil-pent-4-ennitril (9.30 g, 61.49 mmol) je dodat, i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pod aztom. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C i zaustavljena sa vodom (10 mL), 2 N NaOH (10 mL), i vodom (30 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 30 minuta, zatim je dodat magnezijum sulfat, i mešanje je nastavljeno u toku još 30 minuta. Reakcija je proceđena preko celita, isprana sa dietil etrom, i koncentrovana pod sniženim prisitkom da bi se dobio 2-terc-butil-4-metil-pent-4-en-1-amin (10.70 g, sadrži 29% mol rastvarača, 79% prinos) kao žućkasta tečnost.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) ppm 0.91 (s, 9H), 1.22-1.45 (m, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.87-1.98 (m, 1H), 2.20 (d, J=14.1 Hz, 1H), 2.56 (dd, J=13.1, 6.0 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=13.1, 3.7 Hz, 1H), 4.73-4.82 (m, 2H).
Korak 4: 4-terc-Butil-2,2-dimetil-pirolidin
[0334]
[0335] Bis(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) tetrafluoroborat (262 mg, 0.64 mmol) i DavePhos (305 mg, 0.77 mmol) su dodati u rastvor 2-terc-butil-4-metil-pent-4-en-1-amina (2.00 g, 12.88 mmol) u dioksanu (12 mL) u zatopljenoj epruveti, i u reakcionu smešu je uvođen azot u obliku mehurova u toku 5 minuta. Epruveta je zatvorena i zagrejana na 120 °C u toku 48 sati. Jednom kada je ohlađena na sobnu temperaturu, dodata je 4 M HCl u dioksanu (6.0 mL), i reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa 1 N HCl (20 mL) i ispran pomoću dietil etra (3x20 mL). Vodeni sloj je zabažen do pH 8-9 sa 2 N NaOH, i dobijeni rastvor je ekstrahovan sa dietil etrom (3x20 mL). Organski slojevi su spojeni, osušeni preko natrijum sulfata, i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio 4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin (1.18 g, 59% prinos) kao braon tečnost.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) ppm 0.85 (s, 9H), 1.14 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.24-1.32 (m, 1H), 1.50-1.63 (m, 2H), 2.00-2.12 (m, 1H), 2.73 (dd, J=11.3, 8.7 Hz, 1H), 2.97 (dd, J=11.4, 8.2 Hz, 1H).
Korak 5: 2-(4-terc-Butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 40)
[0336]
[0337] U rastvor 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (300.6 mg, 0.5793 mmol) i 4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidina (272.8 mg, 1.757 mmol) u anhidrovanom DMSO (6.012 mL) je dodat cezijum fluorid (441.2 mg, 2.904 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C u toku 16 h u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je proceđena u prečišćena reverznofaznom HPLC-MS korišćenjem gracijenta 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio racemski 2-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (78 mg, 20%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 637.2658, nađeno 638.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.32 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.37 -8.31 (m, 1H), 8.24 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.35 (dt, J = 19.1, 9.8 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.44 -2.37 (m,1H), 1.94 -1.86 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.20 -1.12 (m, 2H),0.99 -0.94 (m, 2H), 0.97 (s, 9H).
Korak 6: Dva enantiomera 2-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida
[0338]
[0339] Racemski 2-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (78 mg, 0.122 mmol) je prečišćen sa hiralnom SFC pomoću ChiralPak AD-3 kolone (250x10 mm, 5 mm), eluiranjem sa 15% metanolom, 85% CO2, na pritisku od 100 bar, i brzinom protoka od 10 mL/min.
Frakcija 1: Čisti enantiomer 12-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (24.9 mg, 7%) sa 100% čistoćom i 98% ee (Jedinjenje 53). ESI-MS m/z izrač.637.2658, nađeno 638.6 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.19 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 13.68 (s, 1H), 8.32 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.53 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.35 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.39 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 1.96 -1.84 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.17 -1.12 (m, 2H), 0.98 -0.90 (m, 2H), 0.96 (s, 9H).
Frakcija 2: Čisti enantiomer 22-(4-terc-butil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (25.0 mg) sa 100% čistoćom i 98% ee (Jedinjenje 54). ESI-MS m/z izrač. 637.2658, nađeno 638.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.18 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 13.69 (s, 1H), 8.32 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.43 -3.27 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.44 -2.32 (m, 1H), 1.94 -1.87 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.18 -1.13 (m, 2H), 0.99 -0.94 (m, 2H), 0.97 (s, 9H).
Sinteza dva enantiomera N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1yl)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida
[0340]
11
Korak 1: Etil estar 2-izopropil-3-okso-buterne kiseline
[0341]
[0342] U kalijum terc-butoksid (61.7 g, 550 mmol) u tetrahidrofuranu (1 L) u ledenom kupatilu je dodat u kapima etil acetoacetat (64 mL, 500 mmol). U ovaj rastvor je dodat 2-jodopropan (55 mL, 750 mmol). Posle zagrevanja preko noći na 70 °C, reakcija je ohlađena, i dodat je 2-jodopropan (18 mL, 250 mmol), i reakcija je grejana dodatna 24 sata na 70 °C. Voda (250 mL) i zasićeni vodeni natrijujum bikarbonat (250 mL) su dodati u reakciju i estrahovana je sa dietil etrom (3 x 250 mL). Sirova supstanca je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena hromatografijom na koloni od silikagela pomoću 0-7% heksani -etil acetat da bi se dobio etil estar 2-izopropil-3-okso-buterne kiseline (55.11 g, 64%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač.172.2, nađeno 173.0 (M1). Retenciono vreme: 2.99 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) (ppm): 0.87 -1.07 (m, 6 H) 1.27 (t, J=7.14 Hz, 3 H) 2.23 (s, 3 H) 2.32 -2.52 (m, 1 H) 3.18 (d, J=9.45 Hz, 1 H) 4.19 (q, J=7.07 Hz, 2 H).
Korak 2: Etil estar 3-metil-2-metilen-buterne kiseline
[0343]
[0344] Rastvor etil estra2-izopropil-3-okso-buterne kiseline (53.77 g, 312.2 mmol) u tetrahidrofuranu (1.07 L) je ohlađen na -78 °C.1.0 M Litijum bis(trimetilsilil)amidni rastvor u tetrahidrofuranu (343.0 mL, 343.0 mmol) je dodat u kapima, i kupatilo suvog leda je uklonjeno u toku 30 minuta. Reakcija je poonovo ohlađena na -78 °C, i dodat je paraformaldehid (43 g, 1.4 mol) u jednoj porciji. Posle 30 minuta uklonjeno je kupatilo od suvog leda i omogućeno je da se zagreje do sobne temeprature preko noći. Reakcija je zatim proceđena preko celita. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i sirovi materijal je prečišćen destialcijom, sakupljanjem frakcije pri ključanju 72-75 °C na 67 tora da bi se dobio etil estar 3-metil-2-metilen-buterne kiseline (19.63 g, 40%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250MHz, CDC13) (ppm): 1.09 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.31 (t, J=7.14 Hz, 3 H) 2.75-2.90 (m, 1H) 4.22 (d, J=7.14 Hz, 2 H) 5.51 (d, J=1.21 Hz, 1 H) 6.12 (s, 1 H).
Korak 3: etil estar 2-Izopropil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline
[0345]
[0346] Etil estar 3-Metil-2-metilen-buterne kiseline (15.6 g, 109.7 mmol) i 2-nitropropan (2.2 mL, 24.2 mmol) su dodati u acetonitril (250 mL).1,8-Diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (3.6 mL, 24.2 mmol) je dodat u kapima, i reakciona smeša je mešana u toku 16 sati na sobnoj temperaturi. Acetonitril je uklonjen pod vakuumom, i dodata je u ostatak 1 M hlorovodonična kiselina (200 mL) . Proizvod je ekstrahovan sa dietil etrom (3 x 150 mL) i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu na koloni pomoću 0-15 % heksana -dietil etar da bi se dobio etil estar 2-izopropil-4-metil-4-nitropentanske kiseline (13.4 g, 53%) kao bezbojnog ulja.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) (ppm): 0.83 -0.97 (m, 6 H) 1.18 -1.35 (m, 3 H) 1.54 (d, J=17.03 Hz, 6 H) 1.86 (d, J=13.21, 1 H) 2.06 -2.22 (m, 2 H) 2.25 -2.45 (m, 1 H) 4.07 -4.21 (m, 2 H).
Korak 4: 3-Izopropil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[0347]
[0348] U rastvor etil estra 2-izopropil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline (14.6 g, 63.2 mmol) u etanolu (100 mL) je dodat Renej nikl (∼ 2 g, 34.0 mmol), i reakcija je zagrevana pod atmosferom vodonika na 60 °C i 120 PSI u toku 24 sata. Još Ranej nikal (∼ 1 g, 17.0 mmol) je dodato, i reakcija je zagrejana na 60 °C i 120 PSI preko noći u toku 24 sata. Reakcija je proceđena kroz celit, i matična tečnost je koncentrovana da bi se dobila smeša 4-amino-2-izopropil-4-metil-pentanske kiseline i 3-izopropil-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona. Smeša je rastvorena u toluenu (125 mL) i zagrejana na 110 °C u toku 16 sati. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni od silikagela pomoću 0-10% dihlorometan -metanola da bi se dobio 3-izopropil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (6.18 g, 63%) kao obojena čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 155.0, nađeno 155.3 [M+1]. Retenciono vreme: 2.14 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) (ppm): 0.87 (d, J=6.81 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.92 Hz, 3 H) 1.27 (d, J=10.66 Hz, 6 H) 1.64 -1.76 (m, 1 H) 1.84 -1.96 (m, 1 H) 2.13 -2.30 (m, 1 H) 2.57 (ddd, J=10.57, 8.98, 4.61 Hz, 1 H) 5.59 (br. s., 1 H).
Korak 5: 4- terc-Butil estar izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilne kiseline
[0349]
[0350] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (1.00 g, 26.28 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na sobnoj temperaturi je dodat u kapima rastvor (3-izopropil-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona (1.02 g, 6.57 mmol) u tetrahidrofuranu (7 mL), i reakcija je zagrejana na 60 °C u toku 3 dana. Reakcija je zatim ohlađena u ledenom kupatilu, i dodat je 2-metiltetrahidrofuran (20 mL) a zatim vodena Rošelova so (50 mL). Reakcija je zatim ekstrahovana sa 2-metiltetrahidrofuranom (4 x 50 mL), osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobio sirov 4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin. Sirov materijal je rastvoren u dihlorometanu (26 mL) i tretiran sa di-terc-butil dikarbonatom (1.72 g, 7.88 mmol) i N,N-diizopropiletilaminom (1.4 mL, 7.88 mmol) na 0 °C i omogućeno je da se zagreje u toku 48 sati. Reakcija je zatim sipana na 5% vodeni natrijum bikarbonat (40 mL) i ekstrahovana sa dihlorometanom (2 x 50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i prečišćen sa hromatografijom na koloni od silikagela korišćenjem 0-30% heksana -dietil etar da bi se dobio terc-butil estar 4-izopropil-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilne kiseline (1.23 g, 76%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 241.0, nađeno 242.0 [M+1]. Retenciono vreme: 4.01 minuta.
11
Korak 6: 4-Izopropil-2,2-dimetil-pirolidin hidrohlorid
[0351]
[0352] U terc-butil estar 4 -izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilne kiseline (1.23 g, 5.1 mmol) je dodat dihlorometan (15 mL) a zatim 4 M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (5 mL, 20.0 mmol). Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i koncentrovana. Ostatak je podvrgnut ultra zvuku sa heksanima (30 mL) i proceđen da bi se dobio 4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin hidrohlorid (669 mg, 74%) kao bela kristalna čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.141.0, nađeno 140.6 [M+1]. Retenciono vreme: 1.53 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) (ppm): 0.87 (dd, J=6.43, 3.46 Hz, 6 H) 1.30 (s, 3 H) 1.40 (s, 3 H) 1.42 -1.59 (m, 2 H) 1.91 (dd, J=12.69, 7.53 Hz, 1 H) 1.99 -2.21 (m, 1 H) 2.88 (t, J=9.72 Hz, 1 H).
Korak 7: N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 41)
[0353]
[0354] U rastvor 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (300 mg, 0.5781 mmol) i 4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidina (250.0 mg, 1.770 mmol) u anhidrovanom DMSO (5.0 mL) je dodat cezijum fluorid (450.0 mg, 2.962 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C u toku 16 h u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je sipana na smrvljen led. Dobijena braon čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem i osušena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela korišćenjem 10-100 % EtOAc-heksana da bi se dobila racemski N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (90 mg, 25%) kao bela amorfna čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.623.2502, nađeno 624.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.25 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.46 (dd, J = 10.3, 8.5 Hz, 1H), 3.25 (dd, J = 10.4, 7.9 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.16 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.11 -2.03 (m, 1H), 1.78 (dd, J = 12.0, 10.1 Hz, 1H), 1.67 (dt, J = 9.5, 6.6 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.20 -1.11 (m, 2H), 0.98 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.96 -0.94 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
Korak 8: Dva enantiomera N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida
[0355]
11
[0356] Racemski N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (90 mg, 0.144 mmol) je prečišćen sa hiralnom SFC pomoću ChiralPak AD-3 kolone (250x10 mm, 5mm), eluiranjem sa 15% metanol, 85% CO2, pri pritisku od 100 bar, i brzini protoka 10 mL/min.
Frakcija 1: Čist enantiomer 1 N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetilpirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (33.8 mg, 19%); (>98% ee) (Jedinjenje 46). ESI-MS m/z izrač.623.2502, nađeno 624.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.25 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 13.91 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 1.7 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.49 -3.40 (m, 1H), 3.25 (dd, J = 10.4, 7.9 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.16 (dt, J = 17.4, 8.7 Hz, 1H), 2.06 (dd, J = 12.0, 7.6 Hz, 1H), 1.77 (dd, J = 12.0, 10.1 Hz, 1H), 1.71 -1.57 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.19 -1.12 (m, 2H), 0.98 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.96 -0.94 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Frakcija 2: Čist enantiomer 2 N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-izopropil-2,2-dimetilpirolidin-1-il)6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (34.2 mg, 19%); (>98% ee) (Jedinjenje 47). ESI-MS m/z izrač.623.2502, nađeno 624.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.25 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 13.75 (s, 1H), 8.23 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.40 (dd, J = 10.3, 8.3 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 10.4, 8.0 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.18 -2.01 (m, 2H), 1.75 (dd, J = 11.9, 10.2 Hz, 1H), 1.64 (dp, J = 9.1, 6.6 Hz, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.18 -1.12 (m, 2H), 0.97 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.96 -0.92 (m, 2H), 0.90 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(7-metil-5-azaspiro[3.4]oktan-5-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 43)
[0357]
11
[0358] U rastvor 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]pindinei-3-karboksamida (50.0 mg, 0.09636 mmol) i 7-metil-5-azaspiro[3.4]oktana(hidrohloridna so) (50.0 mg, 0.3093 mmol) u anhidrovanom DMSO (1.000 mL) je dodat cezijum fluorid (75.0 mg, 0.4937 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C u toku 16 h u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena pomoću reverznofaznog HPLC-MS postupaka sa dvojnim gradijentom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(7-metil-5-azaspiro[3.4]oktan-5-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (8.6 mg, 15%). ESI-MS m/z izrač.
607.2189, nađeno 608.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.18 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.63 -3.54 (m, 1H), 2.97 (dd, J = 10.0, 6.7 Hz, 1H), 2.54 (q, J = 6.5, 5.2 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.25 -2.15 (m, 2H), 2.10 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 2.03 -1.95 (m, 1H), 1.91 (dd, J = 10.1, 5.5 Hz, 2H), 1.74 -1.60 (m, 1H), 1.55 -1.41 (m, 1H), 1.22 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.19 -1.12 (m, 2H), 1.02 -0.90 (m, 2H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(6-metil-4-azaspiro[2.4]heptan-4-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 44)
[0359]
[0360] U rastvor 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (50.0 mg, 0.09636 mmol) i 6-metil-4-azaspiro[2.4]heptana (hidrohloridna so) (45.0 mg, 0.3048 mmol) u anhidrovanom DMSO (1 mL) je dodat cezijum fluorid (75.0 mg, 0.4937 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C preko noći u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena pomoću reverznofaznog HPLC-MS postupka za dvojnim gradijentom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(6-metil-4-azaspiro[2.4]heptan-4-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (42.8 mg, 75%). ESI-MS m/z izrač.
593.2032, nađeno 594.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.17 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.40 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.64 (dd, J = 10.5, 7.9 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 10.5, 7.1 Hz, 1H), 2.75 -2.59 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.33 (dd, J = 12.2, 8.8 Hz, 1H), 1.77 (dd, J = 12.3, 6.4 Hz, 1H), 1.22 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.18 -1.12 (m, 2H), 0.95 (tt, J = 5.6, 2.8 Hz, 2H), 0.72 -0.54 (m, 4H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-etil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 49)
[0361]
11
Korak 1: Metil 2-etil-4-metil-4-nitro-pentanoat
[0362]
[0363] 2-Nitropropan (1.20 mL, 13.36 mmol) je rastvoren u dioksanu (10.0 mL). Dodata je vodeni rastvor benzil(trimetil)amonijum hidroksida (110.0 μL 40 %m/v, 0.2631 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C dok je u kapima dodavan metil 2-metilenbutanoat (2.5 g, 21.90 mmol) u toku 20 minuta. Reakciona smeša je zatim omogućeno da se meša na 100 °C u toku 4.5 sati. Reakcija je zaustavljena dodavanjem vodenog HCl (50.0 mL f 1 M, 50.00 mmol). Smeša je razblažena sa dietil etrom (75 mL) i isprana sa vodom (3 x 75 mL) i rastvorom soli (1 x75 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovani pod sniženim pritiskom i dobijena je žuta tečnost. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela korišćenjem 5% do 25% EtOAc-heksani da bi se dobio metil 2-etil-4-metil-4-nitro-pentanoat (1.6 g, 34%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.68 (s, 3H), 2.44 -2.36 (m, 1H), 2.30 (tdd, J = 9.8, 6.9, 1.9 Hz, 1H), 2.10 (dd, J = 14.6, 2.0 Hz, 1H), 1.69 -1.45 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 0.89 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
Korak 2: 3-Etil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[0364]
[0365] Rastvor metil 2-etil-4-metil-4-nitro-pentanoat (1.56 g, 7.676 mmol) i dihloronikl heksahidrat (366.4 mg, 1.541 mmol) u 1:4 vodi (5 mL) i MeOH (20.0 mL) su ohlađeni na 0 °C. U ovaj rastvor, natrijum borohidrid (730.8 mg, 19.32 mmol) je dodat polako u porcijama. Posle završenog dodavanja, reakciona smeša je omogučeno da se zagreje na sobnu temperaturu u toku 2 h. Reakciona smeša je ponovo ohlađena, i dodat je rastvor vodenog kalijum karbonata (1 M, 25 mL). Boja se promenila od crne do sivu pa zelenu. Smeša je omogućeno da zri u toku 3 h, zatim je dodat celit. Čvrsta supstanca je uklonjena ceđenjem kroz filter sloj od spakovanog celit i ispran sa MeOH (3 x 100 mL). Spojeni filtrati i ostaci od ispiranja su koncentrovani da bi se uklonila većina MeOH. Čvrsti natrijum hlorid je dodat u
11
vodeni koncentrat i ekstrahovan sa dietil etrom. Spojeni organski ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko magnezijum sulfata, i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela korišćenjem 10% EtOAc-heksani do 100% EtOAc da bi se dobio 3-etil-5,5-dimetilpirolidin-2-on (608 mg, 14%) kao bezbojno ulje sa čistoćom oko 59%. ESI-MS m/z izrač. 141.11537, nađeno 142.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.38 minuta
Korak 3: 4-Etil-2,2-dimetil-pirolidin
[0366]
[0367] U rastvor 3-etil-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona (302.6 mg, 2.143 mmol) u suvom THF (3 mL) je dodat rastvor litijum aluminijum hidrida (3.5 mL 2 M, 7.000 mmol) na 0 °C u atmosferi azota polako u kapima. Smeša je omogućeno da se zagreje do temeprature okoline i mešana je u toku 1 h, zatim zagrejana na 60 °C u toku 14 h. Smeša je ohlađena u lednom kupatilu i zatim zaustavljena sa vodom (150.0 μL, 8.326 mmol) (polako), a zatim NaOH (150.0 μL 6 M, 0.9000 mmol), zatim vodom (500 μL, 27.75 mmol) dajući granulisanu čvrstu supstancu u smeši. Čvrsta supstanca je proceđena pomoću celita, i talog je ispran sa etrom. Filtrat je zatim osušen sa magnezijum sulfatom, proceđen, i koncentrovan bez vakuuma na rotacionom uparivaču da bi se dobio 4-etil-2,2-dimetil-pirolidin (130.9 mg, 24%). Smeša je zatim korišćena direktno u sledećemo koraku (E33068-152).
Korak 4: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-etil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0368]
[0369] U rastvor 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (175.4 mg, 0.3380 mmol) i 4-etil-2,2-dimetil-pirolidina (130.9 mg, 1.029 mmol) u anhidrovanom DMSO (2 mL) je dodat cezijum fluorid (267.2 mg, 1.759 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C u toku 16 h u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je proceđenna pomoću reverznofaznog HPLC-MS postupka sa dvojnim gradijenom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-(4-etil-2,2-dimetil-pirolidin-1-il)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (4.5 mg, 2%). ESI-MS m/z izrač.609.2345, nađeno 610.59 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.17 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.35 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.56 -3.48 (m, 1H), 3.15 (dd, J = 10.4, 7.5 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.39 (dt, J = 16.9, 8.3 Hz, 1H), 2.13 (dd, J = 12.3, 7.9 Hz, 1H), 1.72 (dd, J = 12.4, 9.5 Hz, 1H), 1.59 (p, J = 7.3 Hz, 2H), 1.36 (s,3H), 1.30 (s,3H), 1.18 -1.13 (m, 2H), 0.99 -0.94 (m, 5H).
12
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 42)
[0370]
[0371] U rastvor 2-hloro-N-(l,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]pindin-3-karboksamida (50.0 mg, 0.09636 mmol) i 2,2,5-trimetilpirolidina (35.0 mg, 0.3092 mmol) u anhidrovanom DMSO (1.000 mL) je dodat cezijum fluorid (75.0 mg, 0.4937 mmol). Reakciona smeša je mešana na 130 °C u toku 16 h u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena pomoću reverznofaznog HPLC-MS postupka sa dvojnim gradijentom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)piridin-3-karboksamid (5.8 mg, 10%). ESI-MS m/z izrač.595.2189, nađeno 596.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.91 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.57 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.26 -4.18 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.39 -2.36 (m, 1H), 2.23 -2.12 (m, 1H), 1.99 -1.94 (m, 1H), 1.89 -1.80 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.20 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.18 -1.14 (m, 2H), 1.10 (s, 3H), 0.99 -0.93 (m, 2H).
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 9)
Korak 1: 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0372]
[0373] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5529 mmol) je rastvorena u THF (2 mL), i dodat je CDI (približno 107.6 mg, 0.6635 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u toku 1.5 sati, dodat je 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 125.9 mg, 0.7188 mmol) a zatim DBU (približno 101.0 mg, 99.21 μL, 0.6635 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa vodenom 1 M limunskom kiselinom (1350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[l-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (332 mg) ESI-MS m/z izrač. 518.08, nađeno 519.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.65 minuta.
Korak 2: N-(1,5-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0374]
[0375] 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (286.8 mg, 0.5528 mmol) je rastvoren u DMSO (2 mL). (4S)-2,2,4-Trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 248.1 mg, 1.658 mmol) je dodat, a zatim fino usitnjeni kalijum karbonat (približno 458.4 mg, 3.317 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša na 130 °C preko noći. Posle hlađenja na sobnu temperaturu dodata je EtOAc (50 mL). Smeša je isprana sa 1 N HCl (1350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušeni preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (72.7 mg) ESI-MS m/z izrač. 595.22, nađeno 596.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.28 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.43 -4.31 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.57 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.43 (dd, J = 10.2, 7.1 Hz, 1H), 2.25 -2.10 (m, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.44 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.09 (dt, J = 6.7, 2.0 Hz, 4H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1H-pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 5)
Korak 1: 2-Hloro-N-(1H-pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0376]
[0377] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5529 mmol) i CDI (približno 107.6 mg, 0.6635 mmol) su spojeni u THF (1.200 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. 1H-Pirazol-4-sulfonamid (približno 105.8 mg, 0.7188 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 101.0 mg, 99.21 μL, 0.6635 mmol), i reakcija je mešana u toku dodatnih 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je dalje isprana sa 1 M limunskom kiselinom i vodom, i ekstrahovana sa 3x 20 mL etil acetata. Spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata, koncentrovane, zatim prečišćene hromatografijom na silikagelu pomoću gradijenta 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca.2-hloro-N(1H-pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (190 mg, 70%) ESI-MS m/z izrač.490.0438, nađeno 491.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.61 minuta.
Korak 2: N-(1H-Pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-tri-metilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0378]
[0379] 2-Hloro-N-(1H-pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (115 mg, 0.2343 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (105 mg, 0.7016 mmol), i kalijum karbonat (194 mg, 1.404 mmol) su spojeni u DMSO (575.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i razblažena sa 15 mL vode, 15 mL 1 M limunske kiseline, i 30 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 30 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijentom 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca: N-(1H-pirazol-4-ilsulfonil)-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-tri-metilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (100 mg, 75%) ESI-MS m/z izrač.567.18756, nađeno 568.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.84 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.71 (s, 1H), 12.30 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.47 -4.26 (m, 2H), 2.60 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.43 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 2.15 (dd, J = 12.5, 6.6 Hz, 1H), 1.88 (dt, J = 11.6, 6.3 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 17.6 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 1.14 -1.05 (m, 4H), 0.79 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 6)
Korak 1: 2-Hloro-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0380]
[0381] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5529 mmol)i CDI (približno 107.6 mg, 0.6635 mmol) su spojeni u THF (1.200 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata.1-Metilpirazol-4-sulfonamid (približno 115.9 mg, 0.7188 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 101.0 mg, 99.21 μL, 0.6635 mmol), i reakcija je mešana u toku dodatnih
12
16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 1 M limunskom kiselinom i vodom, i ekstrahovana 3x 20 mL etil acetata. Spojena organaska supstanca je isprana sa rastvorom soli, zatim osušena preko natrijum sulfata, koncentrovana, i prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijentom 0-10% metanol/dihlorometan da bi se dobila bela čvrsta supstanca. 2-hloro-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (227 mg, 81%) ESI-MS m/z izrač.504.05945, nađeno 505.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.64 minuta.
Korak 2: N-(1-Metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0382]
[0383] 2-Hloro-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (115 mg, 0.2278 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (102 mg, 0.6815 mmol), i kalijum karbonat (189 mg, 1.368 mmol) su spojeni u DMSO (575.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa 15 mL voda, 15 mL 1 M limunske kiseline, i 30 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 30 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijentom 0-10% metanol u dihlorometanu da bi se dobio N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (88 mg, 66%) ESI-MS m/z izrač. 581.2032, nađeno 582.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.95 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.35 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.43 -4.31 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 2.64 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.48 -2.40 (m, 1H), 2.17 (dp, J = 18.4, 6.3 Hz, 1H), 1.88 (dd, J = 11.8, 5.6 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 17.0 Hz, 6H), 1.44 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.14 -1.04 (m, 4H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1-etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 7)
Korak 1: 2-Hloro-N-(1-etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0384]
[0385] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5529 mmol) i CDI (približno 107.6 mg, 0.6635 mmol) su spojeni u THF (1.200 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Dodat je 1-etilpirazol-4-sulfonamid (približno 125.9 mg, 0.7188 mmol) a zatim DBU (približno 101.0 mg, 99.21 μL, 0.6635 mmol), i reakcija je mešana dodatnih 6 h na sobnoj temperaturi. Rastvor 1 M limunske kiseline (1 mL) je dodat i reakciona smeša je mešana u toku 20 min. Reakciona smeša je razblažena sa 1 M limunske kiseline i vode, i ekstrahovana 3x 20 mL etil acetate. Spojena organaska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, koncentrovana, zatim prečišćana hromatografijom na silikahelu pomoću gradijenta 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstancu. 2-hloro-N-(1-etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (250 mg, 87%) ESI-MS m/z izrač.
518.0751, nađeno 519.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.67 minuta.
Korak 2: N-(1-Etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0386]
[0387] 2-Hloro-N-(1-etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (115 mg, 0.2216 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (100 mg, 0.6682 mmol), i kalijum karbonat (184 mg, 1.331 mmol) su spojeni u DMSO (570 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i razblažena sa 15 mL vode, 15 mL 1 M limunske kiseline, i 30 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 30 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. N-(1-etilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (110 mg, 83%) ESI-MS m/z izrač. 595.2189, nađeno 596.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.03 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.34 (s, 1H), 8.53 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.48 -4.31 (m, 2H), 4.20 (qd, J = 7.3, 5.0 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.17 (dp, J = 18.3, 6.4 Hz, 1H), 1.92 -1.83 (m, 1H), 1.55 (d, J = 17.5 Hz, 6H), 1.45 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.09 (dt, J = 5.2, 1.6 Hz, 4H), 0.80 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza N-(1-terc-butilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 8)
Korak 1: N-(1-terc-Butilpirazol-4-il)sulfonil-2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0388]
12
[0389] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5529 mmol) i CDI (približno 107.6 mg, 0.6635 mmol) su spojeni u THF (1.200 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. 1-terc-Butilpirazol-4-sulfonamid (približno 146.1 mg, 0.7188 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 101.0 mg, 99.21 μL, 0.6635 mmol), i reakcija je mešana u toku dodatnih 6 h na sobnoj temperaturi.1 M rastvor limuske kiseline (1 mL) je dodat, i reakcija je mešana u toku 20 min. Reakcija je razblažena sa 1 M limunskom kiselinom i vodom, i ekstrahovana 3x 20 mL etil acetata. Spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata, koncentrovane, i prečišćene sa hromatografijom na silikagelu pomoću gradijenta 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. N-(1-terc-butilpirazol-4-il)sulfonil-2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (190 mg, 63%) ESI-MS m/z izrač.546.1064, nađeno 547.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.73 minuta.
Korak 2: N-(1-terc-Butilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0390]
[0391] N-(1-terc-Butilpirazol-4-il)sulfonil-2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (125 mg, 0.2285 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (103 mg, 0.6882 mmol), i kalijum karbonat (190 mg, 1.375 mmol) su spojeni u DMSO (600 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h.Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i razblažena sa 15 mL voda, 15 mL 1 M limunske kiseline, i 30 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 30 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanol u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. N-(1-terc-butilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (122 mg, 86%) ESI-MS m/z izrač. 623.2502, nađeno 624.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.19 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.33 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.45 -4.27 (m, 2H), 2.73 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 2.58 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 2.21 (dt, J = 11.3, 5.9 Hz, 1H), 1.89 (dd, J = 11.9, 5.5 Hz, 1H), 1.62 -1.52 (m, 15H), 1.45 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 1.13 -1.06 (m, 4H), 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
12
Sinteza 6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 16)
Korak1:2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0392]
[0393] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridm-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2682 mmol) i CDI (52 mg, 0.3207 mmol) su spojeni u THF (582.0 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata u fioli (vial 1). U međuvremenu, 1,3,5-trimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (56 mg, 0.2684 mmol) je spojen sa amonijakom (250 μL 7 M, 1.750 mmol) (u metanolu) u posebnoj fioli (fiola 2). Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene iz fiole 2 uparavanjem, i dodat je 1 mL dihlorometan u čvrsti ostatak, i takođe je isparen. DBU (54 μL, 0.3611 mmol) je zatim dodat u fiolu 2 i mešan na 60 °C u toku 5 minuta (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka od bilo kog zaostalog amonijum hlorida). Posle hlađenja na sobnu temperaturu, 1 mL THF je dodat i zatim uparen pod sniženim pritiskom. Sadržaj fiole 1 su zatim dodati u fiolu 2 špricom, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetatom, i isprana sa 10 mL 1 M limunskom kiselinom. Vodeni sloj je ekstrahovan 2 x 10 mL etil acetatom, i spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata, i koncentrovane da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (140 mg, 98%) ESI-MS m/z izrač.532.09076, nađeno 533.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.67 minuta.
Korak 2: 6-[3-[[1-(Ttrifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0394]
[0395] 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (140 mg, 0.2627 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (118 mg, 0.7884 mmol), i kalijum karbonat (219 mg, 1.585 mmol) su spojeni u DMSO (700.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži, tečni deo je uklonjen pipetom, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata, zatim isprana sa 15 mL 1 M limunskom kiselinom. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil
12
acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. 6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (77 mg, 48%) ESI-MS m/z izrač. 609.2345, nađeno 610.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.07 minuta.
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 21)
[0396]
Korak 1: terc-Butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0397]
[0398] U degasirani rastvor trifenil fosfina (približno 51.28 g, 195.5 mmol) u toluenu (360.0 mL) pod gasovitim azotom na 0 °C je dodat DIAD (diizopropilazodikarboksilat) (približno 39.53 g, 37.86 mL, 195.5 mmol) u kapima. Smeša je mešana na 0 °C u toku 30 min dajući belu suspenziju. U smešu je dodat rastvor (2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metanol (približno 29.84 g 70 %m/m, 162.9 mmol) i terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (30 g, 162.9 mmol) u toluenu (600.0 mL) u kapima na ∼5 °C u toku 2 sata. Smeša je omogućeno da se zagreje do temperature i mešana je u toku 18 sati. Smeša je zagrejana do 75 °C u toku ukupno 6 sati i zatim je omogućeno da se ohladi na temperaturu okoline. Suspenzija je razblažena sa heptanom (900.0 mL) i mešana je na temperaturi okoline u toku 3 sata. Suspenzija je proceđena preko celita, i talog je ispran 3X sa 100 mL heptana. Filtrat je koncentrovan u vakuumu dajući gusto žuto ulje. Sirovi proizvod je hromatografisan na koloni od 750 grama silikagela nanošenjem sa dihlorometanom i eluiranjem sa gradijentom 0-20% EtOAc/heksani. Sakupljene frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu dajući beličastu čvrstu supstancu. Dobijen je terc-butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat (30.1 g, 63%).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.82 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.88 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.61 (s, 9H), 1.12
12
(s, 6H), 1.04 (s, 6H), 0.70 (t, J = 7.8 Hz, 1H). ESIMS m/z izrač. 294.19434, nađeno 295.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.19 minuta
Korak 2: 3-[(2,2,3,3-Tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol
[0399]
[0400] U rastvor terc-butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilata (127 g, 431.4 mmol) u THF (317.5 mL) i etil alkohola (635.0 mL) polako je dodat natrijum hidroksid (približno 431.4 mL 2 M, 862.8 mmol) i mešan je na sobnoj temperaturi preko noći. Većina rastvarača je uklonjena pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je razblažen sa vodom (400 mL) i ekstrahovan sa metil t-butil etrom (762.0 mL). Organska faza je isprana dva puta sa rastvrom soli (2 x 300 mL), i vodene faze su ponovo ekstrahovane jednom sa metil t-butil etrom (250 mL). Spojene organske faze su osušene, proceđene i uparene da bi se dobio 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol (75 g, 89%) kao viskozno ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.78 (s, 1H), 7.48 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 4.05 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.08 (s, 6H), 1.00 (s, 6H), 0.67 (t, J = 7.7 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač.194.1419, nađeno 195.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.43 minuta.
Korak 3: Etil 2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0401]
[0402] U etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (16.8 g, 76.35 mmol) i 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol (približno 14.83 g, 76.35 mmol) u DMF (201.6 mL) je dodat kalijum karbonat (približno 13.72 g, 99.26 mmol) a zatim DABCO (približno 1.284 g, 11.45 mmol). Suspenzija je mešana na temperaturi okoline u toku 16 sati. Krem fina suspenzija je polako razblažena sa vodom (201.6 mL), i dobijene gusta suspenzija je mešana na temperaturi okoline u toku 30 minuta sa mehaničkom mešačicom. Talog je sakupljen pomoću srednjeg sinterovanog levka i ispran 3 puta sa 25 mL vode. Čvrsta supstanca je osušena na vazduhu u toku 30 minuta, i zatim osušena u vakkumu pomoću azeotropa sa EtOAc. Etil 2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (28.8 g, 100%) je dobijen kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
377.1506, nađeno 378.37 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.47 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (dd, J = 2.9, 0.9 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 8.5, 0.9 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.5, 0.9 Hz, 1H), 6.24 (dd, J = 2.9, 0.9 Hz, 1H), 4.34 (td, J = 7.5, 6.6 Hz, 2H), 4.28 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 1.34 (td, J = 7.1, 0.9 Hz, 3H), 1.11 (s, 6H), 1.05 (s, 6H), 0.75 (t, J = 7.8 Hz, 1H).
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-1(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
12
[0404] Etil 2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (146 g, 386.4 mmol) u THF (730.0 mL) i EtOH (292.0 mL) su tretirani sa NaOH (približno 772.8 mL 1 M, 772.8 mmol), i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 5 sati. Većina rastvarača je uklonjena pod sniženim rpitiskom, i rastvor je zakišeljen dodavanjem limunske kiseline (približno 148.5 g, 89.19 mL, 772.8 mmol) uz hlađenje ledom. Dobijena gusta suspenzija (pH 2-3) je mešana u ledenom kupatilu u toku 1 sat, proceđena, isprana sa mnogo vode i osušena u sušinici pod vakuumom na 45 °C uz ispuštanje azota u toku dva dana da bi se dobila 2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (128.2 g, 90%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.349.11932, nađeno 350.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.11 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.64 (s, 1H), 8.69 -8.22 (m, 2H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.22 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 1.08 (d, J = 24.9 Hz, 12H), 0.75 (t, J = 7.8 Hz, 1H).
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0405]
[0406] 2-Hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (4 g, 11.43 mmol) u THF (40.00 mL) je tretiran sa CDI (približno 2.225 g, 13.72 mmol), i zamućeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Zatim 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 2.225 g, 12.57 mmol), a zatim DBU (približno 2.089 g, 2.052 mL, 13.72 mmol) je dodat, i obrazovana gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 4.5 sati. Suspenzija je tretirana sa hladnom limunskom kiselinom (približno 60.01 mL 1 M, 60.01 mmol) (pH∼2) da bi se dobila emulzija, iz koje je počelo da se taloži nešto čvrste supstance. Većina THF je uklonjena pod sniženim pritiskom i čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, isprana sa puno vode i osušena. Sirova čvrsta supstanca je apsorbovana na silikagelu i prečišćena hromatografijomna silikagelu (220g) sa linearnim gradijentom dihlorometan do 10% metanola u dihlorometanu. Frrakcije proizvoda su uparene i osušene da bi se dobio 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (5 g, 86%). ESI-MS m/z izrač. 506.1503, nađeno 507.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.9 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 1.10 (s, 6H), 1.04 (s, 6H), 0.74 (t, J = 7.8 Hz, 1H).
1
Korak 6: N-(1,5-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il] piridin-3-karboksamid
[0407]
[0408] 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (4.9 g, 9.665 mmol) u NMP (24.50 mL) i 1,2-dietoksietan (4.900 mL) je tretiran sa kalijum karbonatom (približno 6.678 g, 48.32 mmol) a zatim je pažljivo dodat (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 3.182 g, 21.26 mmol). Suspenzija je podvrgnuta 3 puta ciklusu vakuum/azot i zagrejana na 130 °C (uljano kupatilo) pod azotom u toku 16 sati. Zatim je dodat drugi deo (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (1 g, 6.682 mmol), i suspenzija je zagrejana na 130 °C (uljano kupatilo) pod azotom u toku 3 sata. Vrela suspenzija je polako dodata u intenzivno mešan rastvor sirćetne kiseline (približno 8.708 g, 8.246 mL, 145.0 mmol) u vodi (147.0 mL) (oslobađanje gasa, obrazovanje pene), mešanje na sobnoj temperaturi u toku 1h, proceđeno i isprano sa mnogo vode . Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu, osušena preko magnezijum sulfata, proceđena i uparena. Sirovi proizvod je prečišćen hormatografski preko silikagela (220g, nanošen u čvrstom stanju) sa linearnim gradijentom DCM do 5% metanola u dihlorometanu. Frakcije proizvoda su uparene da bi se dobilo 4.9 g žute pene. Jedinjenje je rastvoreno u DMSO (12 ml) i dodat je metanol (12 mL) i voda (8 mL) polako dovodeći do kristalizacije. Ponovo su zagrejane i razblažene sa više metanola (∼30 ml) i gusta vrela suspenzija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi u toku 1 h. Čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem, isprana sa hladnim metanol/voda 4:1, velikom količinom hladne vode i osušena pod vakuumom u sušnici na 45 °C pod azotom u toku vikenda da bi se dobio N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (3.12 g, 55%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 583.29407, nađeno 584.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.39 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.53 (s, 4H), 2.40 (dd, J = 10.2, 7.1 Hz, 1H), 2.18 (tt, J = 12.4, 6.6 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 15.2 Hz, 6H), 1.43 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.10 (s, 6H), 1.04 (s, 6H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.73 (t, J = 7.8 Hz, 1H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 20)
Korak 1: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0409]
1 1
[0410] 2-Hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2773 mmol) i CDI (54 mg, 0.3330 mmol) su spojeni u THF (500 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata u fioli (fiola 1). Za to vreme, 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (64 mg, 0.3288 mmol) je spojen sa amonijakom (260 μL 7 M, 1.820 mmol) (u metanolu) u posebnoj fioli (fiola 2). Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene iz fiole 2 uparavanjem, i 1 mL dihlorometana je dodat u čvrsti ostatak, i takođe je uparen. DBU (100 μL, 0.6687 mmol) je zatim dodat u fiolu 2 i mešan na 60 °C u toku 5 minuta (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka iz bio kog zaostalog amonijum hlorida ). Posle hlađenja na sobnu temperaturu, dodat je 1 mL THF i zatim je uparen pod sniženim pritiskom . Sadržaj fiole 1 je zatim dodat u fiolu 2 sa špricom, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetatom, i isprana sa 10 mL 1 M limunskom kiselinom. Vodeni sloj je ekstrahovan 2 x 10 mL etil acetatom, i spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da se dobije bela čvrsta supstanca . Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (133 mg, 95%) ESI-MS m/z izrač.
506.1503, nađeno 507.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.75 minuta.
Korak 2: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0411]
[0412] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (131 mg, 0.2584 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 116.0 mg, 0.7752 mmol), i kalijum karbonat (približno 214.8 mg, 1.554 mmol) su spojeni u DMSO (444.6 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži , tečni deo je uklonjen pipetom, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata, zatim isprana sa 15 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetatom. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Dobijeni materijal je dalje prečišćen sa drugim krugom hromatografije na silikagelu sa gradijentom 0-100% etil acetata u dihlorometanu, da bi se dobila bela čvrsta supstanca. N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (31 mg, 21%) ESI-MS m/z izrač.583.29407, nađeno 584.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.29 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.35 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.42 (q, J = 9.1 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.19 (dt, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.0 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.10 (s, 6H), 1.04 (d, J = 0.9 Hz, 6H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.73 (t, J = 7.7 Hz, 1H).
1 2
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (smeša cis izomera) (Jedinjenje 34)
[0413]
Korak 1: terc-Butil 3-(2-bromoetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0414]
[0415] U rastvor 2-bromoetanola (1.69 g, 13.53 mmol), terc-butil -2,3-dihidro-3-oksopirazol-1-karboksilata (2.08 g, 11.28 mmol) i trifenilfosfina (3.55 g, 13.53 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (45 mL) na 0 °C, dodat je diizopropil azodikarboksilat (2.74 g, 13.53 mmol) u kapima. Pošto je dodavanje završeno, reakcioni rastvor je mešan na 0 °C u toku 1 sat, zatim zagrejan na sobnu temperaturu i mešan u toku dodatna 2 sata. Etar (400 mL) je dodat. Organski rastvor je ispran sa zasićenim natrijum karbonatnim vodenim rastvorom (80 mL), rastvorom soli (50 mL), zatim osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu pomoću gradijentog postupka heksana -etil acetat (0 do 15% etil acetata) da bi se dobio terc-butil 3-(2-bromoetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat (2.56 g, 78%) kao bela čvrsta supstanca .<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 7.85 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.63 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 6.0 Hz, 2H),1.64 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.292.0 nađeno 292.9 (M+l)<+>. Retenciono vreme: 4.91 minuta.
1
Korak 2: terc-Butil 3-(viniloksi)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0416]
[0417] U rastvor terc-butil 3-(2-bromoetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilata (2.52 g, 8.66 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (90 mL) je dodat kalijum terc-butoksid (1.46 g, 13.0 mmol). Dobijeni rastvor je mešan u toku 2 sata, zatim je dodat di-terc-butil dikarbonat (5.67 g, 26.0 mmol), i reakcija je mešana u toku još 1 sat. Dietil etar (400 mL) je dodat. Organski slojevi su isprani sa vodom (50 mL), rastvorom soli (2 x 50 mL), osušeni preko osušeni preko magnezijum sulfata, proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostaci su prečićeni hromatografijom na silikagelu pomoću gradijentog postupka heksani-etil acetate (0 do 10% etil acetat) da bi se dobio terc-butil 3-(viniloksi)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.10 g, 60%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 7.89 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 6, 13.5 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.88 (dd, J = 1.8, 13.5 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 1.8, 6.0 Hz, 1H), 1.62 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.210.1 nađeno 211.0 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.74 minuta.
Korak 3: terc-Butil 3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat i terc-butil 3-((trans)- 2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0418]
[0419] terc-Buti 3-vinioksi-1H-pirazol-1-karoksiat (1.10 g, 5.23 mmol) u kruškastom balonu (100 mL) je dodata voda (20 mL) i uvođen je u obliku mehurova argon u toku 5 minuta, zatim je dodat natrijum acetat (85.8 mg, 1.05 mmol) a zatim 2,2,2-trifluoroetilamin hidrohlorid (3.57 g, 26.17 mmol) i koncentrovana sumporna kiselina (51.3 mg, 0.523 mmol). U rastvor je uvođen u obliku mehurića argon u toku još 5 minuta pre nego što je dodat bis[rodijum (α,α,α’,α’-tetrametil-1,3-benzendipropionske kiseline )] (397 mg, 0.523 mmol). Reakcioni rastvor je čuvan pod argonom sa balonom dok je dodat vodeni rastvor natrijum nitrita (2.17 g, 31.4 mmol) u vodi (12.8 mL) pomoću pumpe za injektiranje u toku 10 sati. Pošto je dodavanje bilo završeno, dobijeni rastvor je mešan u toku dodatnih 6 sati. Dietil etar (300 mL) je dodat i organski sloj je ispran sa rastvorom soli (30 mL), osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom od silikagela pomoću gradijentnog postupka heksana -dihlorometana (0 do 100% dihlorometana). Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu ponovo (heksani i etil acetat, gradijent 0 do 10% etil acetat) da se dobiju cis i trans izomeri. terc-butil 3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat: (366 mg, 24%). ESI-MS m/z izrač. 292.1 nađeno 293.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.22 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 7.84 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.49 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.62 (s, 9H), 1.56-1.25 (m, 2H). terc-butil 3-(1,2-cis-2-terc-butil 3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat: (314 mg, 21%). ESI-MS m/z izrač.292.1 nađeno
1 4
293.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.48 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 7.90 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.49 (m, 1H), 1.94 (m, 1H), 1.62 (s, 9H), 1.30 (m, 2H).
Korak 4: 3-((cis)-2-(Trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol
[0420]
[0421] Trifluorosirćetna kiselina (2.76 g, 24.3 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilata (708 mg, 2.43 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (24 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. 1,2-Dihloroetan (10 mL) je dodat u reakcioni rastvor. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je rastvoren u etil etru (150 mL), ispran sa zasićenim natrijum bikarbonatnim vodenim rastvorom (30 mL). Organski rastvor je osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirov 3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol (461 mg, 99%) kao žuto braon ulje. Sirovi proizvod je korišćen direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja . ESI-MS m/z izrač.192.1 nađeno 193.0 M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.26 minuta.
Korak 5: terc-Butil 2-hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat
[0422]
[0423] U rastvor sirovog 3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazola (461 mg, 2.43 mmol) u dimetilformamidu (8 mL) je dodat terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (659 mg, 2.67 mmol), kalijum karbonat (669 mg, 4.85 mmol) i 1,4-diazabiciklo [2.2.2]oktan (55 mg, 0.49 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 48 sati. Reakcioni rastvor je razblažen sa etrom (200 mL), ispran sa vodom (4 x 20 mL) i rastvorom soli (20 mL). Organski sloj je osušeni preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu pomoću gradijentnog postupka hekasni -dihlorometan (0 do 100% dihlorometan) da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat (731 mg, 68%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 8.39 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.22 (d, J =
1
8.5Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.5Hz, 1H), 6.01 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.33 (m, 1H), 1.93(m, 1H), 1.62(s, 9H), 1.45-1.26(m, 2H). ESI-MS m/z izrač.403.1 nađeno 404.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 7.29 minuta.
Korak 6: 2-Hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina
[0424]
[0425] Trifluorosirćetna kiselina d (2.03 g, 17.8 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 2-hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinata (718 mg, 1.78 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (18 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. 1,2-Dihloroetan (10 mL) je dodat u reakcioni rastvor. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijena sirova čvrsta supstanca je dodata u 10% etil etar u heksanima (25 mL) i podvrgnuta ultra zvuku u toku 30 minuta, proceđena, isprana sa 10% etil etrom u heksanima (10 ml), heksancima (10 mL) i osušena pod sniženim vakuumom da bi se dobilo 2-hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinske kiseline (517 mg, 84%) kao bele čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ (ppm): 13.6 (bs, 1H), 8.47 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.46 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.47 (m, 1H), 1.32 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač.347.0 nađeno 347.9 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.20 minuta.
Korak 7: 2-Hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0426]
[0427] 2-Hloro-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (125 mg, 0.3595 mmol) je rastvoren u THF (1 mL). Di(imidazol-1-il)metanon (približno 69.95 mg, 0.4314 mmol) je dodat. Reakciona smeša je omogućeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. 1,3-
1
Dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 75.59 mg, 0.4314 mmol) je dodat, a zatim DBU (približno 65.67 mg, 64.51 μL, 0.4314 mmol). Krajnja reakcona smeša je omogućeno da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Isparljive supstance su uklonjenje uparavanjem . Zatim su sakupljene u EtOAc (50 mL) i isprane sa vodenom 1 M rastvorom limunske kiseline (2x 50 mL) i rastvora soli (1 x 50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen, i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (210 mg). ESI-MS m/z izrač.504.05945, nađeno 505.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.61 minuta.
Korak 8: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša cis izomera)
[0428]
[0429] 2-Hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((cis)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (181.5 mg, 0.3595 mmol) je rastvoren u DMSO (1 mL). (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 161.3 mg, 1.078 mmol) je dodat a zatim kalijum karbonat (približno 298.1 mg, 2.157 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša na 130 °C preko noći. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa vodenom limunskom kiselinom (1 M, 2350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Proizvod je izolovan hromatografijom na koloni silikagela na koloni od 12 grama silikagela eluiranjem sa 0-10% gradijentom EtOAc/heksana da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetil-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša cis izomera) (128.4 mg) ESI-MS m/z izrač.581.2032, nađeno 582.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.93 minuta.
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša trans izomera) (Jedinjenje 35)
[0430]
1
Korak 1: 3-((trans)-2-(Trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol
[0431]
[0432] Trifluorosirćetna kiselina (3.15 g, 27.64 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-karboksilata (807 mg, 2.76 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (28 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. 1,2-Dihloroetana (15 mL) je dodato u reakcioni rastvor. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je rastvoren u etil etru (200 mL), ispran sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (30 mL). Organski rastvor je osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirov 3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol (525 mg, 99%) kao žuto –braon ulje. Sirovi proizvod je korišćen direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja . ESI-MS m/z izrač.192.1 nađeno 193.0 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 2.97 minuta.
Korak 2: terc-Butil 2-hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat [0433]
1
[0434] U rastvor sirovog 3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazola (525 mg, 2.76 mmoL) u dimetilformamidu (9.2 mL) je dodat terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (751 mg, 3.04 mmol), kalijum karbonat (763 mg, 5.53 mmol) i 1,4-diazabiciklo [2.2.2]oktan (62 mg, 0.55 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 48 sata. Reakcioni rastvor je razblažen sa etrom (250 mL), ispran sa vodom (4 x 20 mL) i rastvorom soli (20 mL). Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu korišćenjem gradijentog postupka heksani -dihlorometan (0 do 100% dihlorometana) da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat (314 mg, 21%) kao bezbojnog ulja. ESI-MS m/z izrač.403.1 nađeno 404.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 6.92 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm): 8.38 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.39 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.62 (s, 9H), 1.44 (m, 1H), 1.31 (m, 1H).
Korak 3: 2-Hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina
[0435]
[0436] Trifluorosirćetna kiselina (2.39 g, 21.0 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 2-hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinata (847 mg, 2.10 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (21 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u toku 20 sati. 1,2-Dihloroetan (15 mL) je dodat u reakcionu smešu. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijena sirova supstanca je dodata u 10% etil etar u heksanima (30 mL) i podvrgnuta ultra zvuku u toku 30 minuta, proceđena, isprana sa 10% etil etrom u heksanima (10 mL), heksance (10 mL) i osušena pod vakuumom da bi se dobilla 2-hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (600 mg, 82%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.347.0 nađeno 347.9 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.91 minuta.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ (ppm): 8.46 (d, J = 2.8 Hz, 1H),
1
8.41 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.46 (m, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.40 (m, 1H), 1.34 (m, 1H).
Korak 4: 2-Hloro-N-((1,3-dimetil-lH-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0437]
[0438] 2-Hloro-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (125 mg, 0.3595 mmol) je rastvorena u THF (1 mL). Di(imidazol-1-il)metanon (približno 69.95 mg, 0.4314 mmol) je dodat. Reakciona smeša je omogućeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 1 sata.1,3-Dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 75.59 mg, 0.4314 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 65.67 mg, 64.51 μL, 0.4314 mmol). Krajnja reakciona smeša je dozvoljeno da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Isparlljive supstance su uklonjene uparavanjem. Sakupljena je u EtOAc (50 mL) i isprana sa vodenim 1 M rastvorom limunske kiseline (2350 mL) i rastvora soli (1350 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (203 mg). ESI-MS m/z izrač.504.05945, nađeno 505.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.59 minuta.
Korak 5: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša trans izomera)
[0439]
[0440] 2-Hloro-N-((1,3-dimetil-lH-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-((trans)-2-(trifluorometil)ciklopropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (181.5 mg, 0.3595 mmol) je rastvoren u DMSO (1 mL). (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 161.3 mg, 1.078 mmol) je dodat, a zatim kalijum karbonat (približno 298.1 mg, 2.157 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša na 130 °C preko noći. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa
14
vodenom limunskom kiselinom (1 M, 2350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Proizvod je izolovan hromatografijom na koloni silikagela na koloni od 12 grama silikagela eluiranjem sa gradijentom 0-10% EtOAc/heksani da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[2-(trifluorometil)ciklopropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša trans izomera) (114.9 mg). ESI-MS m/z izrač. 581.2032, nađeno 582.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.86 minuta.
Sinteza (S)-N-((1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamida (Jedinjenje 25)
[0441]
Korak 1: 3-(terc-Butoksimetil)-1H-pirazol
[0442]
[0443] terc-Butilpropargil alkohol (2.5 g, 22.2 mmol) je mešan sa trimetilsilil diazometanom (2.0 M u heksanu, 11.1 mL, 22.2 mmol) i mešan u zatopljenoj epruveti na 115 °C u toku 18 sati. Smeša je ohlađena na 40 °C i zaustavljena sa metanolom (5 mL) i koncentrovana. Hromatografijom na koloni (silicijumdioksid; heptani/EtOAc 2:1 do 1:1) dobijen je 3-(terc-butoksimetil)-1H-pirazol kao bezbojno ulje (1.5 g, 44%).<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 1.26 (s, 9H); 4.53 (s, 2H); 6.22 (s, 1H); 7.48 (s, 1H).
Korak 2: terc-Butil 6-[3-(terc-butoksimetil)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat
[0444]
[0445] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen pod azotom sa 3-(terc-butoksimetil)-1H-pirazolom (1.241 g, 8.047 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (2.0 g, 8.061 mmol), kalijum karbonatom (1.448 g, 10.48 mmol) (sveže usitnjen u avanu) i DMF (12.41 mL). Dodat je DABCO (163 mg, 1.453 mmol) , i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL) i vodom i rastvorom soli (50 mL), i dve faze su odvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 mL). Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata, i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom . Materijal je podvrgnut fleš hromatografiji na silikagelu pomoću gradijenta etil acetata (0 do 10%) u heksanima. Čiste frakcije su spojene i uklonjeni su rastvarači pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 6-[3-(terc-butoksimetil)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (1.956 g, 66%) kao bezbojno ulje, koje je očvrslo u belu čvrstu supstancu preko noći na visokom vakuumu. ESI-MS m/z izrač.365.1506, nađeno 366.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.82 minuta.
Korak 3: 2-Hloro-6-[3-(hidroksimetil)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0446]
[0447] terc-Butil 6-[3-(terc-butoksimetil)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (538 mg, 1.471 mmol) je rastvoren u HCl u dioksanu (8.0 mL 4 M, 32.00 mmol) i zagrejan na 60 °C u toku 2 sata. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana do suvog, dajući beli prah.
2-hloro-6-[3-(hidroksimetil)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (370 mg, 99%) ESI-MS m/z izrač.
253.02542, nađeno 254.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.33 minuta
Korak 4: 2-Hloro-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina
[0448]
[0449] [1-(Trifluorometil)ciklopropil]metil 4-metilbenzensulfonat (1.3 g, 4.417 mmol), i 2-hloro-6-[3-(hidroksimetil)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (370 mg, 1.459 mmol), su spojeni u anhidrovanom DMSO (9.250 mL). terc-Butoksikalijum (660 mg, 5.882 mmol) je dodat, i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Posle 30 minuta reakciona smeša je sipana u 1 M limunska kiselina (15 mL) i ekstrahovana sa 3 x 15 mL etil acetatom. Spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu pomoću gradijenta 0-10% metanola u dihlorometanu . Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene i koncentrovane da bi se dobila bela čvrsta supstanca.2-hloro-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (292 mg, 53%) ESI-MS m/z izrač.375.05975, nađeno 376.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.62 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-N-((1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0450]
[0451] 2-Hloro-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinska kiselina (50 mg, 0.1331 mmol) i CDI (26 mg, 0.1603 mmol) su spojeni u THF (300.0 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata u fioli (fiola 1). U međuvremenu, 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (31 mg, 0.1593 mmol) je spojen sa amonijakom (125 μL 7 M, 0.8750 mmol) u posebnoj fioli (fioli 2). Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene iz fiole 2 uparavanjem, i dodat je 1 mL dihlorometana u čvrsti ostatak, i takođe je uparen. DBU (60 μL, 0.4012 mmol) je zatim dodat u fiolu 2 i mešan na 60 °C u toku 5 minuta (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka iz bilo kog zaostalog amonijum hlorida ). Posle hlađenja na sobnoj temperaturi , 1 mL THF je dodat i zatim uparen pod sniženim pritiskom. Sadržaj fiole 1 je dodat u fiolu 2 špricom, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetata, i isprana sa 10 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni sloj je ekstrahovan 2 x 10 mL etil acetatom, i spojeni organska materija je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-N-((1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(((l-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (65 mg, 50%) ESI-MS m/z izrač. 532.09076, nađeno 533.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.34 minuta.
Korak 6: (S)-N-((1,5-Dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamid
[0452]
14
[0453] 2-Hloro-N-((1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (67 mg, 0.1257 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (94 mg, 0.6281 mmol), i kalijum karbonat (174 mg, 1.259 mmol) su spojeni u DMSO (335.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži , tečni deo je uklonjen pipetom, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetatom, zatim isprana sa 15 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. (S)-N-((1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)6-(3-(((1-(trifluorometil)ciklopropil)metoksi)metil)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamid (17 mg, 22%). ESI-MS m/z izrač.609.2345, nađeno 610.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.96 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.36 (s, 1H), 8.34 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.85 -7.71 (m, 2H), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.58 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.45 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 2.19 (dt, J = 12.2, 6.6 Hz, 1H), 1.94 -1.84 (m, 1H), 1.56 (d, J = 15.0 Hz, 6H), 1.45 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.00 -0.96 (m, 2H), 0.86 (tq, J = 4.4, 3.1, 2.4 Hz, 2H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 51)
[0454]
Korak 1: terc-Butil 3-(((1S,2S,4R)-biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oai)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0455]
[0456] terc-Butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (1.632 g, 8.860 mmol), (+)-endo-2-norborneol (1 g, 8.915 mmol), i trifenil fosfin (2.57 g, 9.798 mmol) su spojeni u THF (21.98 mL), i reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu. U smešu je dodat DIAD (2 mL, 10.16 mmol) u kapima, i reakcija je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu i meša u toku 16 h. Smeša je uparena, i dobijeni materijal je razdeljen između etil acetata (30 mL) i 1 N natrijum hidroksida (30 mL). Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli (30 mL), osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-30% etil acetatom u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(((1S,2S,4R)-biciklo[2.2.1]heptan-2-il)oksi)-1H-pirazol-1-karboksilat (2.08 g, 84%) ESI-MS m/z izrač.
278.16306, nađeno 279.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.72 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.05 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.43 -2.36 (m, 1H), 2.32 -2.22 (m, 1H), 1.75 (td, J = 6.7, 2.4 Hz, 1H), 1.54 (s, 9H), 1.53 -1.49 (m, 2H), 1.42 (ddt, J = 14.8, 7.8, 4.4 Hz, 2H), 1.18 -1.07 (m, 3H).
Korak 2: 3-[(1S,2S,4R)-Norbornan-2-il]oksi-1H-pirazol
[0457]
[0458] terc-Butil 3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-karboksilat (2.08 g, 7.473 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (20.80 mL) sa trifluorosirćetnom kiselinom (5.8 mL, 75.28 mmol), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 h. Reakcija je uparena pod sniženim pritiskom, i dobijeno ulje je razdeljeno između etil acetata (50 mL) i zasićenog rastvora natrijum bikarbonata (30 mL). Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo ulje, 3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksi-1Hpirazol (1.29 g, 97%) ESI-MS m/z izrač.178.11061, nađeno 179.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.45 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0459]
14
[0460] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen pod azotom sa terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (1.796 g, 7.239 mmol), 3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksi-1H-pirazolom (1.29 g, 7.238 mmol), i kalijum karbonatom (1.310 g, 9.479 mmol) (sveže samleven u avanu) i anhidrovanim DMF (12 mL). DABCO (146 mg, 1.302 mmol) je dodat, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom i toku 8 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL), vodom i rastvorom soli (50 mL), i dve faze su odvojene . Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 50 mL). Spojeni ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Materijal je podvrgnut fleš hromatografiji na silikagelu pomoću gradijenta etil acetata (0 do 20%) u heksanima. Čiste frakcije su spojene i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.814 g, 64%) ESI-MS m/z izrač.
389.1506, nađeno 390.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.92 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.40 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 1.88 -1.78 (m, 1H), 2.45 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.29 (t, J = 4.3 Hz, 1H), 1.56 (s, 9H), 1.55 -1.39 (m, 4H), 1.22 -1.08 (m, 3H).
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-1(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0461]
[0462] terc-Butil 2-hloro-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.814 g, 4.653 mmol) i TFA (5 mL, 64.90 mmol) su spojeni u dihlorometanu (18.14 mL) i zagrejani na 40 °C u toku 2 h. Reakcija je uparena. Heksani su dodati i smeša je uparena ponovo da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1.47 g, 79%) ESI-MS m/z izrač. 333.088, nađeno 334.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.71 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0463]
14
[0464] 2-Hloro-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2487 mmol) i CDI (približno 52.42 mg, 0.3233 mmol) su spojeni u THF (približno 415.4 μL) i mešani u toku 2 sata na sobnoj temperaturi. 1,3-Dimetilpirazol-4-sulfonamid (58 mg, 0.3310 mmol) i DBU (približno 48.35 μL, 0.3233 mmol) su zatim dodati, i reakcija je mešana dodatna 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim sipana na 20 mL 1 M limuske kiseline i esktrahovana sa 3 x 20 mL etil acetatom. Spojene organske supstance su usprane sa vodom, zatim rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata, i koncentrovane da bi se dobio sirovi (sa značajnim nečistoćama ali je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja) 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksamid ESI-MS m/z izrač. 490.12, nađeno 491.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.75 minuta.
Korak 6: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0465]
[0466] Sirovi 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (125 mg, 0.2546 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 114.3 mg, 0.7638 mmol), i kalijum karbonat (približno 211.2 mg, 1.528 mmol) su spojeni u DMSO (približno 0.4243 mL) u fioli sa zatvaračem i zagrevani na 130 °C u toku 16 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu , i dodata je 3 mL voda , što je dovelo do obrazovanja taloga. posle 30 minuta, vodeni deo je uklonjen sa špricom i odbačen i preostala čvrsta supstanca je rastvorena u 15 mL etil acetata. Organska materija je isprana 15 mL 1 M limunskom kiselinom, i vodeni sloj je ekstrahovan dodatno vreme sa 15 mL etil acetatom. Spojene organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni od silikagela korišćenjem gradijenta od 0-10% metanola u dihlorometanu. Čiste frakcije su spojene i koncentrovane da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(1S,2S,4R)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (37 mg, 25%) ESI-MS m/z izrač.567.26, nađeno 568.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.23 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.35 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.18 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.4 Hz, 1H),
14
2.42 (dd, J = 13.7, 6.6 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.29 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 2.19 (tt, J = 12.1, 6.4 Hz, 1H), 1.91 -1.78 (m, 2H), 1.59 -1.38 (m, 11H), 1.20 -1.11 (m, 3H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi] pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 50)
[0467]
Korak 1: terc-Butil 3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0468]
[0469] terc-Butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (1.327 g, 7.204 mmol), [(1S,4R)-norbornan-2-il]metanol (1 g, 7.924 mmol) (smeša endo i egzo), i trifenil fosfin (2.09 g, 7.968 mmol) su spojeni u THF (17.87 mL), i reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu. U smešu je dodat DIAD (1.627 mL, 8.263 mmol) u kapima i reakcija je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku 72 h. Smeša je uparena, i dobijeni materijal je parcijalno razdeljen između etil acetata (50 mL) i 1 N natrijum hidroksida (50 mL). Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-30% etil acetata u heksanima da bi se dobilo terc-butil 3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-karboksilat (1.698 g, 81%) ESI-MS m/z izrač.292.17868, nađeno 293.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.77 minuta. (2 diasteroizomea -smeša endo i egzo supstituisanog norbornana)<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.06 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.10 (dd, J = 2.9, 1.0 Hz, 1H), 4.23 -3.81 (m, 2H), 2.29 -2.15 (m, 2H), 1.69 (dq, J = 12.1, 4.2 Hz, 1H), 1.54 (d, J = 1.4 Hz, 9H), 1.51 -1.03 (m, 7H), 0.75 (dd, J = 5.0, 2.4 Hz, 1H).
14
Korak 2: 3-[[(1S,4R)-Norbornan-2-il]metoksi]-1H-pirazol
[0470]
[0471] terc-Butil 3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-karboksilat (1.698 g, 5.808 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (16.98 mL) sa trifluorosirćetnom kiselinom (približno 6.622 g, 4.474 mL, 58.08 mmol), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 2 h. Reakcija je uparena, i dobijeno ulje je razdeljeno između etil acetata (50 mL) i zasićenog natrijum bikarbonatnog rastvora (30 mL). Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo ulje, 3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]-1H-pirazol (1.11 g, 99%) ESI-MS m/z izrač.192.12627, nađeno 193.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.52 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0472]
[0473] Balon sa okruglim dnom je punjen pod azotom sa 3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]-1H-pirazolom (1.11 g, 5.774 mmol) (smeša dva diastereomera), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (1.433 g, 5.776 mmol), kalijum karbonatom (1.05 g, 7.597 mmol) (sveže smaleven u avanu) i anhidrovanom DMF (10 mL). DABCO (117 mg, 1.043 mmol) je dodat, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL), i dve faze su odvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 mL). Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Materijal je podvrgnut fleš hromatografiji na slikagelu pomoću gradijenta etil acetata (0 to 20%) u heksanima. Čiste frakcije su kombinovane i rastvarači su uklonjeni da bi se obezbedio terc-butil 2-hloro-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.88 g, 81%) ESI-MS m/z izrač.403.16626, nađeno 404.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 0.94 minuta
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-1[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]pitidin-3-karboksilna kiselina
[0474]
14
[0475] terc-Butil 2-hloro-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.88 g, 4.655 mmol) i TFA (5 mL, 64.90 mmol) su spojeni u dihlorometanu (18.80 mL) i zagrejani na 40 °C u toku 2 h. Reakcija je uparena. Heksani su dodati i smeša je ponovo uparena da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-hloro-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (1.58 g, 98%) ESI-MS m/z izrač.347.10367, nađeno 348.2 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 0.75 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]razol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0476]
[0477] 2-Hloro-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg,0.2875 mmol) i CDI (60.59 mg, 0.3737 mmol) su mešani u THF (0.5 mL) na sobnoj temperaturi u toku 2 sata.1,3-Dimetilpirazol-4-sulfonamid (56 mg, 0.3196 mmol) je zatim dodat, a zatim DBU (55.88 μL, 0.3737 mmol), i reakcija je mešana dodatna 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razblažena sa 25 mL etil acetata i sipana u 25 mL 1 M limunsku kiselinu, i slojevi su odvojeni . Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnih 25 mL etil acetata, i spojena organska supstanca je isprana sa vodom a zatim rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja, 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (138 mg, 95%) (smeša egzo i endo steroizomera norbornana ) ESI-MS m/z izrač.504.13, nađeno 505.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.78 minuta.
Korak 6: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi] pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0478]
1
[0479] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (138 mg, 0.2733 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (122.7 mg, 0.8199 mmol), i kalijum karbonat (226.7 mg, 1.640 mmol) su spojeni u DMSO (0.4555 mL) u fioli sa zatvaračen i zagrevani na 130 °C u toku 16 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, i dodato je 3 mL vode , što je dovelo do obrazovanja taloga. Posle 30 minuta, tečni deo je uklonjen špricom i odbačen, i preostala čvrsta supstanca je rastvorena u 15 mL etil acetata i isprana sa 15 mL 1 M limunske kiseline. Vodeni sloj je ekstrahovan dodatno vreme sa 15 mL etil acetata. Spojene organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen sa hromatografijom na koloni silikagela pomoću gradijenta 0-10% metanola u dihlorometanu. Čiste frakcije su spojene i koncentrovane da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[[(1S,4R)-norbornan-2-il]metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (101 mg, 63%) (smeša egzo i endo steroizomera norbornana) ESI-MS m/z izrač.581.28, nađeno 582.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.32 minuta.
Sinteza 6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 32)
[0480]
Korak 1: terc-Butil 3-(2,2-diciklopropiletoksi) pirazol-1-karboksilat
[0481]
1 1
[0482] Rastvor 2,2-diciklopropiletanola (500 mg, 3.962 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (730 mg, 3.963 mmol), i trifenilfosfana (1.1 g, 4.194 mmol) u suvom THF (20.0 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu, i DIAD (800.0 μL, 4.063 mmol) je polako dodavan pod atmosferom azota. Reakcija je dozvoljeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom, rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu sa 100% heksana na 50% etil acetatu u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(2, 2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-karboksilat (783 mg, 68%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.292.17868, nađeno 293.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.98 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.62 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.13 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H), 0.58 (qt, J = 8.2, 5.0 Hz, 2H), 0.36 (tt, J = 8.9, 5.6 Hz, 1H), 0.32 -0.12 (m, 4H) 0.10 -0.08 (m, 4H).
Korak 2: 3-(2, 2-Diciklopropiletoksi)-1H-pirazol:
[0483]
[0484] Rastvor terc-butil 3-(2, 2-diciklopropiletoksi) pirazol-1-karboksilata (750 mg, 2.565 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (1.0 mL, 12.98 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je mešan u toku 2.5 sata. Isparljiva supstanca je uklonjena pod sniženim pritiskom, i ostatak je zabažen sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 3-(2,2-diciklopropiletoksi)-1H-pirazol kao bezbojno ulje koje je korišćeno kao takvo bez daljeg prečišćavanja u sledećoj reakciji. ESI-MS m/z izrač.192.12627, nađeno 193.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.32 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-(2, 2-diciklopropiletoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0485]
[0486] Smeša 3-(2,2-diciklopropiletoksi)-1H-pirazola (493.0 mg, 2.564 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (682.0 mg, 2.749 mmol), kalijum karbonata (430.0 mg, 3.111 mmol), i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (60 mg, 0.5349 mmol) u DMSO (20.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u toku 15 sati . Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli i osušeni preko natrijum sulfata i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela sa 100% heksanima do 20% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (680 mg, 66%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.403.16626, nađeno 404.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.49 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.35 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.5 Hz,
1 2
1H), 5.98 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.61 (s, 9H), 0.92 -0.75 (m, 2H), 0.70 -0.56 (m, 1H), 0.54 -0.36 (m, 4H), 0.32 -0.13 (m, 4H).
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-(2, 2-diciklopropiletoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina
[0487]
[0488] Rastvor terc-butil2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (675 mg, 1.671 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (1.5 mL, 19.47 mmol) i dihlorometanu (4.5 mL) je mešan u toku 4 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uparen, i ostatak je dva puta sakupljen sa THF i koncentrovan pod vakuumom da se dobije 2-hloro-6-[3-(2, 2-diciklopropiletoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (580 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač.347.10367, nađeno 348.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.95 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3karboksamid
[0489]
[0490] Rastvor 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (100 mg, 0.2875 mmol) i karbonil diimidazola (60 mg, 0.3700 mmol) u THF (2 mL) je mešan u toku 45 minuta. Zatim 1,3-dimetil-pirazol-4-sulfonamid (60.0 mg, 0.3424 mmol) i 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidropirimido[1,2-a]azepin (60 μL, 0.4012 mmol) su dodati, i reakciona smeša je mešana u toku dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zaustavljena sa rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid koji je korišćen kao takav za sledeću reakciju . ESI-MS m/z izrač.
504.13464, nađeno 505.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.73 minuta.
Korak 6: 6-[3-(2,2-Diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0491]
1
[0492] Smeša 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonilpiridin-3-karboksamida (140.0 mg, 0.2772 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (125.0 mg, 0.8352 mmol), i kalijum karbonata (230.0 mg, 1.664 mmol) u DMSO (2.0 mL) je mešana na 130 °C u toku 15 sati. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena korišćenjem reverznofaznog HPLC-MS postupka sa dvojnim gradijentom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio 6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-tri-metilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (50.1 mg, 31%). ESI-MS m/z izrač. 581.27844, nađeno 582.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.2 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.48 (dd, J = 10.3, 8.4 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 10.4, 7.7 Hz, 1H), 2.62 (dt, J = 15.7, 7.8 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.13 (dd, J = 12.3, 7.9 Hz, 1H), 1.70 (dd, J = 12.4, 9.5 Hz, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.21 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.90 -0.76 (m, 2H), 0.67 -0.57 (m, 1H), 0.53 -0.38 (m, 4H), 0.31 -0.11 (m, 4H).
6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 33)
Korak 1: 2-Hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0493]
[0494] Rastvor 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (50 mg, 0.1438 mmol) i karbonil diimidazola (30 mg, 0.1850 mmol) u THF (2 mL) je mešan u toku 45 minuta. Zatim, dodati su 1,5-dimetil-pirazol-4-sulfonamid (30 mg, 0.1712 mmol) i 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidropirimido[1,2-a]azepin (30 μL, 0.2006 mmol), i reakciona smeša mešana u toku dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zaustavljena sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid koji je korišćen kao takav u sledećoj reakciji. ESI-MS m/z izrač.
504.13464, nađeno 505.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.74 minuta.
Korak 2: 6-[3-(2,2-Diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetil-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
1 4
[0496] Smeša 2-hloro-6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonilpiridin-3-karboksamida (72.0 mg, 0.1426 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (72.0 mg, 0.4811 mmol), i kalijum karbonata (120.0 mg, 0.8683 mmol) u DMSO (2.0 μL) je mešana na 130 °C u toku 15 sati. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena korišćenjem reverznofaznog HPLC-MS postupka sa dvostrukim gradijenom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio 6-[3-(2,2-diciklopropiletoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-tri-metilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (33.6 mg, 41%). ESI-MS m/z izrač. 581.27844, nađeno 582.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.2 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.48 (dd, J = 10.3, 8.4 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 10.4, 7.7 Hz, 1H), 2.62 (dt, J = 15.7, 7.8 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.13 (dd, J = 12.3, 7.9 Hz, 1H), 1.70 (dd, J = 12.4, 9.5 Hz, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.21 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.90 -0.76 (m, 2H), 0.67 -0.57 (m, 1H), 0.53 -0.38 (m, 4H), 0.31 -0.11 (m, 4H).
Sinteza 6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 38)
[0497]
3,3-Diciklopropilpropan-1-ol
1
[0499] U rastvor 3,3-diciklopropilpropanske kiseline (200 mg, 1.297 mmol) u suvom THF (2.000 mL) je dodat litijum aluminijum hidrid (845.0 μL of 2 M, 1.690 mmol) u kupatilu led /voda u atmosferi azota polako u kapima . Dozvoljeno je da se smeša polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku 16 sati. Balon je ponovo ohlađen na ledenom kupatilu i zatim zaustavljen sa vodom (70.0 μL, 3.886 mmol) (plako), a zatim NaOH (70.0 μL 6 M, 0.4200 mmol), zatim vodom (200 μL, 11.10 mmol) dajući belu granularnu čvrstu supstancu kao smešu. U ovu smešu je dodat anhidrovani magnezijum sulfat i mešan je u toku 10 minuta. Dobijena bela heterogena smeša je proceđene kroz celit, i talog je ispran sa etrom. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio 3, 3-diciklopropilpropan-1-ol (140 mg, 77%). ESI-MS m/z izrač.140.12012, nađeno 141.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.5 minuta.
Korak 1: terc-Butil 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-karboksilat
[0500]
[0501] Rastvor 3,3-diciklopropilpropan-1-ola (140.0 mg, 0.9984 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (185.0 mg, 1.004 mmol), i trifenilfosfana (278 mg, 1.060 mmol) u suvom THF (7.0 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu, i DIAD (200.0 μL, 1.016 mmol) je polako dodat u atmosferi azota. Dozvoljeno je da se reakcija polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatnim rastvorom, rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu pomoću 100% hekasna do 50% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-karboksilat (255 mg, 83%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.306.19434, nađeno 307.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.81 minuta.
Korak 2: 3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol
[0502]
[0503] Rastvor terc-butil 3-(3, 3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-karboksilata (255 mg, 0.8322 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (325.0 μL, 4.218 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je mešan u toku 2.5 sata. Isparljive supstance su uklonjene pod vakumom da bi se dobio 3-(3, 3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol
1
(trifluoroacetatna so) kao bezbojno ulje koje je korišćeno kao takvo bez daljeg prečišćavanja za sledeću reakciju. ESI-MS m/z izrač.206.1419, nađeno 207.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.59 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0504]
[0505] Smeša terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (220.0 mg, 0.8867 mmol), 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazola (266.0 mg, 0.8305 mmol), kalijum karbonata (230 mg, 1.664 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (20 mg, 0.1783 mmol) u DMSO (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u toku 15 sati. Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni organski ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela pomoću 100% heksana do 20% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (245 mg, 71%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.417.18192, nađeno 418.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.28 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-(3, 3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0506]
[0507] Rastvor terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (245.0 mg, 0.5862 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (500.0 μL, 6.490 mmol) i dihlorometanu (1.5 mL) je mešan u toku 4 sata na sobnoj temperaturi . Rastvarač je uparen, i dva puta je ostatak sakupljen sa THF i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (204 mg, 96%) kao bela čvrsta supstanca koja je korišćena kao takva u sledećoj reakciji . ESI-MS m/z izrač.361.11932, nađeno 362.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.8 minuta.
<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.47 -8.32 (m, 2H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.98 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 0.75 -0.64 (m, 2H), 0.50 -0.39 (m, 4H), 0.35 -0.26 (m, 1H), 0.26 -0.19 (m, 2H), 0.15 -0.06 (m, 2H).
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonilpiridin-3karboksamid
[0508]
1
[0509] Rastvor 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (50 mg, 0.1382 mmol) i karbonil diimidazola (30.0 mg, 0.1850 mmol) u THF (1.000 mL) je mešan u toku 45 minuta. Zatim 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (30.0 mg, 0.1712 mmol) i 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidropirimido[1,2-a]azepin (30.0 μL, 0.2006 mmol) su dodati, i reakciona smeša je mešana u toku dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zaustavljena sa zasićenim amonijum hloridnim rastvoromi ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (70 mg, 98%) koji je korišćen kao takav u sledećoj reakciji. ESI-MS m/z izrač.518.1503, nađeno 519.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.78 minuta.
Korak 6: 6-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0510]
[0511] Smeša 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonilpiridin-3-karboksamida (70.0 mg, 0.1349 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (70.08 mg, 0.4683 mmol), i kalijum karbonata (112.0 mg, 0.8104 mmol) u DMSO (1 mL) je mešana na 130 °C u toku 15 sati. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena pomoću reverznofaznog HPLC-MS postupka sa dvojnim gradijentom od 50-99% acetonitrila u 5 mM HCl da bi se dobio 6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (34.7 mg, 43%). ESI-MS m/z izrač. 595.29407, nađeno 596.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.42 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.49 (dd, J = 10.2, 8.5 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 10.3, 7.6 Hz, 1H), 2.62 (q, J = 7.7 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.13 (dd, J = 12.3, 7.9 Hz, 1H), 1.97 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.71 (dd, J = 12.4, 9.5 Hz, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.21 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.73 -0.60 (m, 2H), 0.48 -0.38 (m, 4H), 0.39 -0.27 (m, 1H), 0.23 -0.16 (m, 2H), 0.16 -0.07 (m, 2H).
Sinteza 6-[3-(Ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 22)
[0512]
1
Korak 1: terc-Butil 3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-karboksilat
[0513]
[0514] U rastvor ciklopropanola (30.8 mg, 0.531 mmol), terc-butil 2,3-dihidro-3-oksopirazol-1-karboksilata (97.7 mg, 0.531 mmol) i trifenilfosfina (139.3 mg, 0.531 mmol) u anhidrovanom toluenu (2 mL) je dodat di-terc-butil azodikarboksilat (122.2 mg, 0.531 mmol). Rastvor je pročišćen sa argonom u toku 1 minuta, i mešan na temperaturi okoline u toku 30 minuta. Zatim reakcioni rastvor je zagrejan na 110 °C u toku dodatnih 5 sati pre nego što je ohlađen na temperaturu okoline. Rastvor je razblažen sa etrom (50 mL), ispran sa NaOH vodenim rastvorom, rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim rpitiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu (heksan i etil acetat, gradijent 0 do 10% etil acetat ) da bi se dobio terc-butil 3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-karboksilat (52 mg, 46%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 224.116, nađeno 225.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.38 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ (ppm) 7.86 (d, J = 2.8Hz, 1H), 5.93 (d, J = 2.8Hz, 1H), 4.20-4.15 (m, 1H), 1.61 (s, 9H), 0.85-0.72 (m, 4H).
Korak 2: 3-Ciklopropoksi-1H-pirazol
[0515]
[0516] U rastvor terc-butil 3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-karboksilata (131 mg, 0.584 mmol) u dihlorometanu (6 mL) je dodat TFA (667 mg, 0.38 mL, 5.84 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na temperaturi okoline u toku 3 sata. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom . Dobijeni ostatak je rastvoren u etru (100 mL), ispran sa zasićenim natrijum bikarbonatnim vodenim rastvorom, osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3-ciklopropoksi-1H-pirazol kao bledo žuto ulje. Dobijeni sirov proizvod je je korišćen u sledećem koraku.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-(3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksilat
1
[0518] Sirovi 3-ciklopropoksi-1H-pirazol (73mg, 0.584 mmol), terc-butil 2,6-dihloro piridin-3-karboksilat (159 mg, 0.643 mmol), K2CO3(162mg, 1.17 mmol) i DABCO (13 mg, 0.117 mmol) su rastvorenu u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Reakcioni rastvor je mešan na temperaturi okoline u toku 16 sati. Reakcioni rastvor je razblažen sa etrom (100 mL), ispran sa vodom (3 x 25 mL) i rastvorom sol (25 mL). Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko magnezijum sulfata, proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu (heksan i dihlorometan, gradijent 0 do 100% dihlorometan ) da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksilat (153 mg, 78%) kao lepljivo ulje. ESI-MS m/z izrač.335.104, nađeno 336.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 6.84 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-(3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksilna kiselina
[0519]
[0520] U rastvor terc-butil 2-hloro-6-(3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksilata (153 mg, 0.456 mmol) u dihlorometanu (2.2 mL) je dodat TFA (519 mg, 0.35 mL, 4.56 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na temperaturi okoline u toku 48 sati. Zatim je dodat 1,2-dihloroetan (2 mL), i svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom . Bela čvrsta supstanca je dobijena suspendovanjem u smeši heksana i etra (10 mL, heksan/etar, 19/1), podvrgnuta ultra zvuku, proceđena, isprana sa heksanom (10 mL) i osušena da bi se dobila 2-hloro-6-(3-ciklopropoksi-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksilna kiselina (122 mg, 97%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 279.041, nađeno 279.9 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.43 minuta.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 13.6 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.0Hz, 1H), 8.39 (d , J = 8.5Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.5Hz, 1H), 6.28 (d, J = 3.0Hz, 1H), 4.16-4.13 (m, 1H), 0.79-0.71 (m, 4H).
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-(ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0521]
1
[0522] 2-Hloro-6-[3-(ciklopropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (25 mg, 0.08939 mmol) u DMF (0.5 mL), 1-metilpirazol-4-sulfonamid (24 mg, 0.1489 mmol), HATU (70 mg, 0.1841 mmol), i DIEA (32 μL, 0.1837 mmol) su spojeni i mešani na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Reakciona smeša je proceđena i prečišćena na reverznofaznom HPLC (Waters, HCl, 25-75% ACN-H2O) da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (25 mg). Korišćen direktno u sledećem koraku.
Korak 6: 6-[3-(Ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il] piridin-3-karboksamid
[0523]
[0524] Smeša 2-hloro-6-[3-(ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamida (25 mg), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (20 mg, 0.1336 mmol), cezijum fluorida (30 mg, 0.1975 mmol), kalijum karbonata (60 mg, 0.4341 mmol) u DMSO (0.5 mL) je mešana na 140 °C u toku 16 sati. Reakcija je proceđena i prečišćena na HPLC (Waters, HCl, 25-75% ACN-H2O) da bi se dobio 6-[3-(ciklopropoksi)pirazol-1-il]-N-(1-metilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (8.3 mg, 18%). ESIMS m/z izrač.499.20016, nađeno 500.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.69 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.39 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.10 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.63 (s, 1H), 2.44 (s, 1H), 2.18 (s, 1H), 1.92 -1.85 (m, 1H), 1.55 (d, J = 17.1 Hz, 6H), 1.44 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.73 (s, 4H).
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 26)
[0525]
Korak 1: spiro[2.2]Pent-1-il-metanol
1 1
[0527] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (888 mg, 23.4 mmol) u tetrahidrofuranu (30 mL) je dodata spiro[2.2]pentan-1-karboksilna kiselina (1.75g, 15.6 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) u kapima u toku 5 minuta. Reakcija je zagrejana na 50 °C u toku 16 sati. Reakcija je razblažena sa dietil etrom (20 mL) i zaustavljena sa čvrstim natrijum sulfat dekahidratom. Smeša je razblažena sa dietil etrom (100 mL), proceđena kroz sloj celita i koncentrovana da bi se dobio spiro[2.2]pent-1-il-metanol (793 mg, 52%) kao ulje. ESI-MS m/z izrač.98.15 nađeno 98.8 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 2.54 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) ppm 0.58 -0.89 (m, 4 H) 0.91 -1.09 (m, 1 H) 1.20 -1.37 (m, 1 H) 1.43 (m, 1 H) 3.60 (dd, J = 11.98, 6.37 Hz, 2 H)
Korak 2: terc-Butil estar 3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-pirazol-1-karboksilna kiselina
[0528]
[0529] U rastvor sirovog spiro[2.2]pent-1-il-metanola (966 mg, 9.8 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL) je dodat trifenil fosfin (2.58 g, 9.8 mmol), terc-butil estar 3-hidroksi-pirazol-1-karboksilna kiselina (1.64 g, 8.9 mmol). Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu a zatim je dodat diizopropil azodikarboksilat (1.9 mL, 9.8 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je mešana u toku 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirova smeša je prečišćena hromatografijm na koloni silikagla pomoću 10-20% heksana-dietil etra da bi se dobio terc-butil estar 3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-pirazol-1-karboksilne kiseline (1.20 g, 44%) kao bistro ulje. ESI-MS m/z izrač. 264.33 nađeno 265.1 (M+1)+. Retenciono vreme: 3.36 minuta
Korak 3: 3-(spiro[2.2]Pent-1-ilmetoksi)-1H-pirazol
[0530]
[0531] U terc-butil estar 3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-pirazol-1-karboksilne kiseline (1.2 g, 4.54 mmol) je dodat dihlorometan (30 mL) i trifluorosirćetna kiselina (3.4 mL, 45 mmol). Reakciona smeša je mešana u toku 2 sata na sobnoj temperaturi i koncentrovana do suvog u vakuumu. Ostatak je azeotpski destilovan dva puta sa 1,2-dihloroetanom (15 mL) da bi se dobio sirov 3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-1H-pirazol (1.87 g, 51%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 164.09 nađeno 164.6 (M+1)+. Retenciono vreme: 2.11 minuta
Korak 4: Metil estar 2-hloro-6-[3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)pirazol-1-il]-nikotinske kiseline
[0532]
1 2
[0533] U sirov 3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-1H-pirazol (1.87 g, assumed 4.54 mmol) je dodat metil 2,6-dihloronikotinat (935 mg, 4.54 mmol), 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (102 mg, 0.91 mmol), dimetilformamid (8 mL) i kalijum karbonat (1.9 g, 13.6 mmol). Reakcija je mešana u toku 48 sati na sobnoj temperaturi, razblažena sa dietil etrom (75 mL) i isprana sa vodom koja sadrži malu količinu rastvora soli (3 x 50 mL) i rastvorom soli (50 mL). Ovaj organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na koloni silikagela korišćenjem 0-15% heksan:dietil etar da bi se dobio metil estar 2-hloro-6-[3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi) pirazol-1-il]-nikotinske kiseline (1.02 g, 67%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.333.09 nađeno 333.9 (M+1)+. Retenciono vreme: 3.85 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina
[0534]
[0535] U metil estar 2-hloro-6-[3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi) pirazol-1-il]-nikotinske kiseline (990 mg, 2.97 mmol) je dodata voda (6 mL), metanol (6 mL) i tetrahidrofuran (6 mL) a zatim litijum hidroksid (285 mg, 11.88 mmol). Reakcija je mešana u toku 1 sat i dodata je 1M hlorovodonična kiselina (12 mL). Obrazovana bela čvrsta supstanca je proceđena , isprana sa vodom i heksanima da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(spiro[2.2]pent-1-ilmetoksi)-pirazol-1-il]-nikotinska kiselina (927 mg, 98%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 319.07 nađeno 320.0 (M+1)+. Retenciono vreme: 3.25 minuta<1>H NMR (250 MHz, CDC13) ppm : 0.76 -0.88 (m, 5 H), 1.11-1.13 (m, 1 H), 1.60 -1.75 (m, 1H), 4.22 (dd, J=7.0, 3.3, Hz, 2H) 6.00 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.38 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.43 (d, J=8.5 Hz, 1H).
Korak 6: 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0536]
[0537] 2-hloro-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (približno 50 mg, 0.16 mmol) i karbonil diimidazol (približno 38 mg, 0.23 mmol) su spojeni u THF (1.5 mL) i mešani u toku 1 h. U ovoj tački, 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 28 mg, 0.16 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 70 μL, 0.47 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatna 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i isprana sa 1M limunske kiseline, a zatim rastvorom soli.
1
Organska supstanca je odvojena, osušena preko natrijum sulfata, i uparena. Sirovi materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (75 mg, 98%) ESI-MS m/z izrač.476.10336, nađeno 477.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.67 minuta.
Korak 7: N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0538]
[0539] 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (75 mg, 0.16 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (približno 70.63 mg, 0.4719 mmol), i kalijum karbonat (približno 108.7 mg, 0.7865 mmol) su spojeni u DMSO (1 mL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razblažena sa vodom (3mL) i mešana u toku 20 min. Čvrsta supstanca je obrazovana i vodena tečnost je dekantovana . Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i isprana sa rastvorom 1M limunske kiseline, zatim rastvorom soli. Organske supstance su osušene preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobio N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(spiro[2.2]pentan-2-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (35 mg, 40.19%). ESI-MS m/z izrač.553.24713, nađeno 554.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 minuta.
Sinteza N-(1,5-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 27)
[0540]
Korak 1: terc-Butil 3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0541]
1 4
[0542] Rastvor (3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metanola (0.27 g, 2.3 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (0.46 g, 2.5 mmol), i trifenil fosfina (0.67 g, 2.6 mmol) u THF (12 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu, i izopropil N-izopropoksikarboniliminokarbamat (0.50 mL, 2.6 mmol) je polako dodat. Dozvoljeno je da se reakcija polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku tri dana. Razblažena je sa etil acetatom, isprana sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom, osušena preko natrijum sulfata, i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu pomoću 0-40% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-karboksilat (0.43 g, 66%) ESI-MS m/z izrač.282.13797, nađeno 283.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.65 minuta.
Korak 2: 3-[(3-Fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]-1H-pirazol
[0543]
[0544] Rastvor terc-butil 3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-karboksilata (0.43 g, 1.523 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (587 μL, 7.62 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je mešan u toku 5 sati. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, i ostatak je zabažen sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]-1H-pirazol (0.28 g, 100%) ESI-MS m/z izrač.182.08554, nađeno 183.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.39 minuta.
Korak 3: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0545]
[0546] Smeša 3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]-1H-pirazola (0.28 g, 1.5 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (0.38 g, 1.5 mmol), kalijum karbonata (0.26 g, 1.9 mmol), i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (34 mg, 0.30 mmol) u DMSO (7.5 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 h. Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli i vode, osušeni preko natrijum sulfata, i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu sa 0-5% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (0.50 g, 85%) ESI-MS m/z izrač.393.12555, nađeno 394.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.86 minuta.
1
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0547]
[0548] Rastvor terc-butil 2-hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (0.50 g, 1.270 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (978 μL, 12.7 mmol) u dihlorometanu (6 mL) je mešan u toku 15 sati. Rastvarač je uparen, i ostatak je sakupljen sa acetonitrilom. Rastvarač je uparen da bi se dobila 2-hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (0.43 g, 100%) ESI-MS m/z izrač. 337.06296, nađeno 338.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.63 minuta<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.43 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 2.13 (d, J = 2.6 Hz, 6H).
Korak 5: 2-Hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0549]
[0550] Rastvor 2-hloro-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (0.10 g, 0.30 mmol) i karbonil diimidazola (približno 58 mg, 0.36 mmol) u THF (1.5 mL) je mešan u toku 30 minuta, i dodati su 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 68 mg, 0.39 mmol) i 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidropirimido[1,2-a]azepin (približno 55 mg, 54 μL, 0.36 mmol). Posle 16 sati reakcija je razblažena sa 1 M vodenom limunskom kiselinom i ekstrahovana je sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (0.18 g). Materijal je uzet kao takav za sledeći korak.
Korak 6: N-(1,5-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0551]
[0552] Smeša sirovog 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (0.15 g, 0.3031 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (približno 136.1 mg, 0.9093 mmol), i kalijum karbonata (približno
1
251.4 mg, 1.819 mmol) u DMSO (1.515 mL) je mešana na 130 °C u toku 15 sati. Reakcija je proceđena i prečišćena sa reverznofaznim HPLC-MS (30%-99% acetonitril / voda (5 mM HCl)) da bi se dobio N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[(3-fluoro-1-biciklo[1.1.1]pentanil)metoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (51 mg, 29%) kao bezbojna čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 571.23773, nađeno 572.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.01 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.20 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.60 -2.54 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.46 -2.37 (m, 1H), 2.25 -2.12 (m, 1H), 2.08 (d, J = 2.8 Hz, 6H), 1.87 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 15.0 Hz, 6H), 1.43 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 0.80 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza (S)-N-((1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamida (Jedinjenje 28)
[0553]
Korak 1: terc-butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0554]
[0555] Rastvor dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metanola (1.36 g, 11.0 mmol) (Meijere, et al., Eur. J. Org. Chem.2002, 485-492), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (2.3 g, 12 mmol), i trifenil fosfina (3.2 g, 12 mmol) u THF (28 mL) je ohlađena u ledenom kupatilu, i diizopropil azodikarboksilat (DIAD) (2.4 mL, 12 mmol) je polakao dodat. Uklonjeno je kupatilo za hlađenje i reakcija je mešana u toku 15 sati. Reakcija je razblažena sa etil acetatom, isprana sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom, osušena preko natrijum sulfata, i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-20% etil acetatom u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.57 g, 49% prinos) kao bezbojnog ulja. ESI-MS m/z izrač.
290.16306, nađeno 291.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.76 minuta.
Korak 2: 3-(Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol
1
[0557] Rastvor terc-butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metoksi)-1H-pirazol-1-karboksilata (1.57 g, 5.41 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (2.2 mL, 29 mmol) u dihlorometanu (20 mL) je mešan u toku tri sata. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, i ostatak je zabažen sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahvoan sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol (0.94 g, 91% prinos) kao bledo žuto ulje. ESI-MS m/z izrač.190.11061, nađeno 191.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.52 minuta
Korak 3: Etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat
[0558]
[0559] Smeša 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazola (0.94 g, 4.9 mmol), etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (1.15 g, 5.23 mmol), kalijum karbonata (0.83 g, 6.0 mmol), i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (0.12 g, 1.1 mmol) u DMSO (16 mL) je mešana u toku 24 sati. Reakcija je razblažena sa voda i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli i vode, osušeni preko natrijum sulfata, i upareni pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa 0-20% etil acetatom u heksanima da bi se dobio etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat (1.39 g, 75% prinos) kao bezbojana čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 373.11932, nađeno 374.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.87 minuta.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.36 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.30 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.94 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 1.42 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02-0.89 (m, 4H), 0.75-0.65 (m, 2H), 0.65-0.53 (m, 2H)
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0560]
[0561] Rastvor etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinata (1.39 g, 3.72 mmol) i natrijum hidroksida (7.5 mL of 1 M rastvor, 7.5 mmol) u THF (6 mL) i etanolu (3 mL) je mešan u toku 90 minuta. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, and voda je dodata.
1
Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu, i hlorovodonična kiselina (7.5 mL 1 M rastvor, 7.5 mmol) je polako dodavana. Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahvoana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata, i upareni da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1.16 g, 82% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.345.088, nađeno 346.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.73 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ 8.41 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.93 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 0.97 -0.79 (m, 4H), 0.76 -0.66 (m, 2H), 0.65 -0.56 (m, 2H)
Korak 5: -2-Hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0562]
[0563] U 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinsku kiselinu (19.0 g, 54.95 mmol) u THF (250 mL) polako je dodat CDI (11.1 g, 68.5 mmol). Smeša je mešana na temperaturi okoline u toku dva stata. Dodat je dodatni CDI (1.0 g, 6.167 mmol) i mešana još jedan sat. U aktivirani estar je dodat 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (12.0 g, 68.5 mmol) u porcijama a zatim DBU (12.3 mL, 82.2 mmol), i smeša je mešana na temperaturi okoline u toku jednog sata. U reakcionu smeše je polako dodata limunska kiselina (61 g, 320 mmol) u vodi (500 mL). Smeša je razblažena sa EtOAc (1.0 L), i vodena faza je dalje zakišeljena na ∼pH 1 sa 1 M hlorovodoničnom kiselinom. Organska faza je odvojena, isprna sa 300 mL rastvora soli, osušena preko magnezijum sulfata, proceđena preko celita, i koncentrovana u vakuumu. Proizvod je kristalisao pomoću 80 mL EtOH i zagrevanja. U rastvor je dodato 50 mL vode do tačke zamućenja. Rastvor je zagrejan do homogenosti i omogućeno je da stoji na temperaturi okoline u toku 16 sati, dajući beličastu čvrstu supstancu. U smešu je dodato 200 mL 50% vodenog EtOH, i suspenzija je proceđena. Čvrsta supstanca je isprana dva puta sa 200 mL 50% vodenog EtOH, osušena na vazduhuu toku tri sata, zatim osušena u vakuumu na 45 °C u toku 24 sata, dajući beličastu čvrstu supstancu, 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (25.49 g, 92%). ESI-MS m/z izrač.
502.119, nađeno 503.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.95 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.73 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.39 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.92 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 0.95 -0.84 (m, 4H), 0.76 -0.65 (m, 2H), 0.65 -0.54 (m, 2H).
Korak 6: (S)-N-((1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamid
[0564]
1
[0565] U rastvor 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamida (2.0 g, 3.976 mmol) i (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (2.0 g, 13 mmol) u NMP (10 mL) je dodat kalijum karbonat (2.9 g, 21 mmol). Suspenzija je zagrejana na 130 °C u toku 20 sati. Reakcija je ohlađena na temepraturu okoline i polako je dodavana u brzo mešani rastvor HCl (7 mL 6 M, 42.00 mmol) u lednoj vodi (100 mL) dajući beličastu suspenziju. Sakupljen je talog i ispran tri puta sa 10 mL vode. Čvrsta supstanca je osušena na vazduhu u toku jedan sat . Čvrsta supstanca je rastvorena u 50 mL EtOAc, i voda je uklonjena. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, ulje je rastvoreno u acetonitrilu, i sirovi proizvod je hromatografisan na 415g ISCO reverofaznoj koloni eluiranjem sa 5-100% acetonitril/voda. Frakcije proizvoda su sakupljene i koncentrovane u vakuumu dajući beličastu penu, (S)-N-((1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamid (1.8 g, 75%). ESI-MS m/z izrač. 579.26276, nađeno 580.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.26 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.35 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.18 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.56 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.41 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (dq, J = 11.6, 6.1 Hz, 1H), 1.95 -1.82 (m, 2H), 1.54 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.94 -0.84 (m, 4H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.75 -0.66 (m, 2H), 0.63 -0.56 (m, 2H).
Sinteza (S)-N-((3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamida (Jedinjenje 31)
Korak 1: 2-hloro-N-[(3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0566]
[0567] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (75 mg, 0.2000 mmol) i karbonil diimidazol (približno 42.16 mg, 0.2600 mmol) su spojeni u THF (1.5 mL) i mešani u toku 2 h . U ovoj tački, 5-metil-1H-pirazol-4-sulfonamid (približno 32.24 mg, 0.2000 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 101.4 mg, 99.61 μL, 0.6658 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i siorana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim rastvorom soli. Organska supstanca je odvojena, osušena preko natrijum sulfata, i uparena. Sirovi material je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10 % metanola u dihlorometanu da bi se dobio 2-hloro-N-[(3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (70 mg, 69%) ESI-MS m/z izrač.506.07507, nađeno 507.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.67 minuta.
Korak 2: (S)-N-((3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-2-(2,2,4-trimetilpirolidin-1-il)nikotinamid
[0568]
1
[0569] 2-hloro-N-[(3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (70 mg, 0.1381 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (približno 62.00 mg, 0.4143 mmol), i kalijum karbonat (približno 95.43 mg, 0.6905 mmol) su spojeni u DMSO (1 mL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razdeljena između etil acetata i 1M rastvora limunske kiseline. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobio N-[(3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (18 mg, 23%). ESI-MS m/z izrač.583.2189, nađeno 584.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 minuta .
Sinteza (S)-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-2-(2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamida (Jedinjenje 29)
[0570]
Korak 1: Metil-d34-metil-2-(metil-d3)-4-nitropentanoat-3,3-d2
[0571]
[0572] Trogrli balon sa okruglim dnom od 500-mL, je snabdeven sa magnetnom mešalicom koja se meša , linijom za azot i J-Kem termoparom, sa oblogom za grejanje je napunjen sa 2-nitropropanom (34.3 g, 385 mmol), d8-metil metaaktilatom (50.0 g, 460 mmol), i mešan je na temperaturi okoline kada 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (DBU, 1.47 g, 9.62 mmol) je dodat u jenoj porciji. Reakcioni rastvor je pokazao egzoterm od 20 do ∼40 °C i omogućeno je da se meša bez daljeg zagrevanja ili hlađenja u toku 16 h. Reakcija je samo parcijalno završena (HPLC) tako da je rastvor zagrejan na 80 °C u toku 4 h. Reakciona smeša je razblažena sa MTBE (170 mL), isprana sa 1 M HCl (15 mL), osušena preko
1 1
magnezijum sulfata, proceđena i koncentrovana (29" Hg na 60 °C) da se ukloni rastvarač i bilo koji zaostali polazni materijal da bi se dobio proizvod kao žuto ulje (75 g, 99%). Korišćen je u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja destilacijom.
Korak 2: Metil-d3(S)-4-metil-2-(metil-d3)-4-nitropentanoat-3,3-d2
[0573]
[0574] Trogrli balon sa okruglim dnom od 5-L snabdeven sa mehaničkom mešalicom, linijom za azot i J-Kem termoparom sa oblogom za zagrevanje je napunjen sa metil-d34-metil-2-(metil-d3)-4-nitropentanoat-3,3-d2(75 g, 380 mmol) i 2000 mL pH 7.5 Na-fosfatnim puferom @ 0.8 M. U ovo je dodata lipaza iz Rhizomucor miehei (sigma L4277, palataza iz Novozymes) (0.5 vol) i mešano je na 30 °C u toku 25 h. Hiralna HPLC (ADH 4.6 x250 mm, 5mm, 1.0 mL/min, 98%Heptan /2% IPA) pokazuje odnos 99.8/0.2 enentiomera. Reakciona smeša je ekstrahovana dva puta sa MTBE (1 L svaki put). Organska materije je obuhvatala bilo koju emulziju koja je obrazovana u toku ekstrakcija. Spojene organska supstanca je isprana dva puta sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (5 vol), rastvora soli (5 vol), osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod metil-d3(S)-4-metil-2-(metil-d3)-4-nitropentanoate-3,3-d2kao bledo žuto ulje (32.5 g, 43% prinos).
Korak 3: (S)-5,5-Dimetil-3-(metil-d3)pirolidin-2-on-4,4-d2
[0575]
[0576] Sud pod visokim pritiskom (Parr-ova boca za mućkanje, 500 mL) je pročišćen i održavan pod N2. Sud je napunjen redom sa dejonizovanom vodom ispranim (3 times) vlažnim Raney®2800 Ni (6.1 g), metil-d3(S)-4-metil-2-(metil-d3)-4-nitropentanoatom-3,3-d2(32.5 g, 165 mmol), i etanolom (290 mL). Sud je zatvoren i evakuisan /ponovo napunjen sa N2(3 puta). Bez mešanja, sud je zatim evakuisan i ponovo napunjen sa H2(30 psi). Parr-ova flaša je mućkana dok je zagrevan sadržaj na 60 °C, i pritisak H2je održavan na 30 psi u toku 8 sati. Sud je evakuisan /ponovo napunjen sa N2(3 puta) i sadržaj je uklonjen vakuum filtracijom (sloj Celita ; N2prekriven). Balon/filter-sloj je ispran sa etanolom (3 x 50 mL). Posle krajnjeg ispiranja, filter kolač vlažan od rastvarača je premešten u drugi recipijent i prektriven sa vodom za odlaganje. Primedba: Katalizaor ni u kom trenutku ne treba biti potpuno osušen (održavan je vlažnim u toku postupka ceđenja). Filtrat i delovi posle ispiranja su spojeni i koncentrovani (40 °C/40 tor) da bi se dobio (S)-5,5-dimetil-3-(metil-d3)pirolidin-2-on-4,4-d2kao bela čvrsta supstanca (20 g, 92%).
Korak 4: (4S)-3,3-Dideuterio-2,2-dimetil-4-(trideuteriometil)pirolidin hidrohlorid
[0577]
1 2
[0578] Trogrli balon sa okruglim dnom od 1-L, je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, i azotnom linijom i J-Kem termoparom je napunjen sa peletama litijum aluminijum hidrida (7.6 g, 202 mmol) u THF (80 mL, 4 vol) zagrejanim na 20 - 36 °C (toplota pri mešanju). Rastvor (S)-5,5-dimetil-3-(metild3)pirolidin-2-on-4,4-d2(20. g, 150 mmol) u THF (120 mL, 6 vol) je dodat u suspenziju u toku 30 minuta dok je omogućeno da se reakciona temperatura podigne ∼60 °C. Reakciona temepratura je povećana blizu refluksa (∼68 °C) i održavana tamo u toku 16 h. Reakciona smeša je ohlađena ispod 40 °C i razblažena sa 200 mL (10 vol) MTBE. Smeša je zaustavljena polako sa dodavanjem u kapima zasićenog vodenog rastvora natrijum sulfata (1 vol) u toku 2 h. Primedba: Primećeno je intenzivno oslobađanje gasa (H2), smeša je postala gusta zatim se proredila, i zatim tamno siva smeša se pretvorila u belu. Pošto je dodavanje bilo završeno , reakciona smeša ohlađena na sobnu temperaturu. Čvrsta supstanca je uklonjena ceđenjem (sloj celita) i isprana sa etil acetatom (4 vol). Sa spoljašnjim hlađenjem i prekrivanjem N2, filtrat i ostaci od ispiranja su spojeni i tretirani dodavanjem u kapima anhidrovanog 4 M HCl u dioksanu (38 mL, 152 mmol) dok je održavana temepratura ispod 20 °C. Pošto je završeno dodavanje (20 minuta), dobijena suspenzija je koncentrovana pod vakuumom na 45 °C. Suspenzija je ponovo napunjena sa heptanima (4 vol) dva puta u toku koncentrovanja . Suspenzija je ohlađena ispod 30 °C zatim čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem pod slojem N2. Čvrsta supstanca je osušena pod isisavanjem N2i dalje osušena pod visokim vakuumom 45 °C da bi se dobio (4S)-3,3-dideuterio-2,2-dimetil-4-(trideuteriometil)pirolidin hidrohlorid (17.5 g, 75%). Proizvod je veoma higroskopna so sa kojom je rađeno u azotu .
Korak 5: (S)-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-2-(2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid
[0579]
[0580] 2-hloro-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (2 g, 3.839 mmol) je rastvoren u DMSO (10 mL) i 1,2-dietoksietanu (2.000 mL). Kalijum karbonat (približno 2.654 g, 19.20 mmol) i (4S)-3,3-dideuterio-2,2-dimetil-4-(trideuteriometil)pirolidin (Hidrohloridna so) (približno 1.485 g, 9.598 mmol) su dodati i suspenzija je zagrejana na 130 °C u toku 28 h. Reakcioan smeša je ohlađena i sipana u ledenu vodu (60.00 mL) i sirćetnu kiselinu (približno 3.458 g, 3.275 mL, 57.58 mmol) koje se brzo mešaju. Posle mešanja u toku 20 min čvrste supstance su proceđene i isprane sa vodom. Dobijana čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i isprana sa vodom, zatim rastvorom soli. Organske supstance su osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane. Dobijeni material je zagrejan u heptanima i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena i osušena da bi se dobio (S)-N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-2-(2,2-dimetil-4-(metil-
1
d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (0.8 g, 35%). ESI-MS m/z izrač.602.27, nađeno 603.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.82 minuta.
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 13)
Korak 1: 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0581]
[0582] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2749 mmol) i karbonildiimidazol (53 mg, 0.3269 mmol) su spojeni u THF (600.0 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (53 mg, 0.3025 mmol) je dodat a zatim DBU (55 μL, 0.3678 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatnih 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL 1 M limunske kiseline, i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 10 mL). Spojene organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfoni1-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (140 mg, 98%) ESI-MS m/z izrač.520.09076, nađeno 521.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.68 minuta.
Korak 2: N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0583]
[0584] 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (140 mg, 0.2688 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (120 mg, 0.8018 mmol), i kalijum karbonat (224 mg, 1.621 mmol) su spojeni u DMSO (700.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je dozvoljeno da se staloži , i tečni deo je uklonjen pipetom. Preostale čvrste supstance su rastvorene u 20 mL etil acetata, zatim isprane sa 15 mL 1M limunske kiseline. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. N-(1,5-
1 4
dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (96 mg, 60%) ESI-MS m/z izrač. 597.2345, nađeno 598.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.1 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.32 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.57 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.41 (dd, J = 10.3, 7.1 Hz, 1H), 2.17 (dq, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.43 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.23 (s, 6H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[4-(hidroksimetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 30)
[0585]
Korak 1: Metil estar 2-hidroksimetil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline
[0586]
[0587] 1,8-Diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (3.6 mL, 24 mmol) je dodat u 2-nitropropan (26.5 mL, 292 mmol). Ova smeša je zagrejana na 65 °C i zagrevanje je prekinuto i dodat je metil 2-(hidroksimetil)akrilat (25 mL, 243 mmol) u kapima. Zagrevanje je vraćeno na 80 °C. Posle zagrevanja u toku 1h zagrevanje je isključeno i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre zagrevanja na 80 °C u toku dodatnih 2h. Reakcija je razblažena sa etil acetatom (250 mL) i isprana sa 1M hlorovodonika (2 x 125 mL), vodenog bikarbonata (125 mL) i rastvora soli (125 mL). Smeša reakcionog proizvoda je hromatografisana na koloni od 330g silikagela u 0-60% heksani:etar eluiranjem 55-60% da bi se dobio metil estar 2-hidroksimetil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline (29.68g, 60%) kao svetlo zeleno ulje. ESIMS m/z izrač.205.21, nađeno 206.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 1.67 minuta.
1
Korak 2: 3-Hidroksimetil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[0588]
[0589] Metil estar 2-hidroksimetil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline (4.45g, 21.7 mmol) je dodat u apsolutni etanol (60 mL) a zatim Raney Nickel (1.7g, ∼15% mas). Reakcija je zagrejana na 60 °C pod 2 bar H2preko noći. Više Raney Nickela (1.0g, ∼50% mas) je dodato i reakcija je zagrejana na 60 °C pod 5 bar H2u toku 3.5 h. U ovoj tački, više metil estra 2-hidroksimetil-4-metil-4-nitro-pentanske kiseline (3.95g, 19.3 mmol) je dodato i reakcija je zagrevana u toku 72 h ponovo napunjena H2da bi se održalo 5 bar. Reakcija je proceđena kroz celit i isprana sa metanolom. Sirova reakcija je hromatografisana na silikagelu i eluirana sa 0-10% dihlorometan:metanol na 10%, dajući 3-hidroksimetil-5,5-dimetilpirolidin-2-on (3.69g, 63%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ ppm 1.31 (d, J=9.01 Hz, 6 H) 1.72 (dd, J=12.52, 10.33 Hz, 1 H) 2.04 (dd, J=12.58, 8.84 Hz, 1 H) 2.73 -2.91 (m, 1 H) 3.31 (d, J=4.72 Hz, 1 H) 3.64 -3.95 (m, 2 H) 5.93 (br. s., 1 H)
Korak 3: (5,5-Dimetil-pirolidin-3-il)-metanol
[0590]
[0591] Litijum aluminijum hidrid (3.90g, 103.00 mmol) je suspendovan u tetrahidrofuranu (60 mL).3-hidroksimetil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (3.69g, 25.77 mmol) u tetrahidrofuranu (30 mL) je zatim dodat u kapima i reakcija je zagrejana na 65°C u toku 40h. Reakcija je razblažena sa 2-metiltetrahidrofuranom (125 mL) i zatim ohlađena u ledenom kupatilu pre dodavanja u kapima zasićene vodenog rastvora Rochelle soli (200 mL). Organski sloj je ekstrahovan sa 2-metil-tetrahidrofuranom (2 x 200 mL) i osušen preko natrijum sulfata da bi se dobio sirov (5,5-dimetil-pirolidin-3-il)-metanol (3.47g, 104%).<1>H NMR (250 MHz, CDCl3δ ppm 1.06 -1.24 (m, 6 H) 1.29 (dd, J=12.58, 7.20 Hz, 2 H) 1.43 (s, 1 H) 1.68 -1.89 (bs, 1 H) 2.31 -2.52 (m, 1 H) 2.83 (dd, J=11.10, 5.49 Hz, 1 H) 3.05 -3.26 (m, 1 H) 3.48 -3.71 (m, 1 H)
Korak 4: 4-(terc-Butil-dimetil-silaniloksimetil)-2,2-dimetil-pirolidin
[0592]
1
[0593] U (5,5-dimetil-pirolidin-3-il)-metanol (3.08g,23.8 mmol), terc-butildimetilsilil hlorid (4.31g, 28.6 mmol) u acetonitrilu (24 mL) je dodat 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (5.3 mL, 35.7 mmol). Reakcija je mešana u toku 3.5 h. Reakcija je razblažena sa hloroform (250 mL) i isprana sa vodom (125 mL) i rastvorom soli (125 mL) zatim osušen preko natrijum sulfata. Sirova supstanca je hromatografisna na silikagelu i eluirana sa dihlorometan/metanol, eluiranjem sa 15-35% metanolom da bi se dobio 4-(tercbutil-dimetil-silaniloksimetil)-2,2-dimetil-pirolidin (3.88g, 67%) kao žuto ulje posle dve kolone . ESI-MS m/z izrač.243.47, nađeno 244.2 (M+1)<+>Retenciono vreme: 2.52 minuta.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ ppm -0.05 -0.11 (m, 6 H) 0.89 (s, 9 H) 1.19 (d, J=18.02 Hz, 6 H) 1.25 -1.32 (m, 1 H) 1.74 (dd, J=12.63, 8.79 Hz, 1 H) 1.92 (br. s., 1 H) 2.32 -2.50 (m, 1 H) 2.81 (dd, J=11.54, 6.37 Hz, 1 H) 3.11 (dd, J=11.48, 7.97 Hz, 1 H) 3.453.61 (m, 2 H).
Korak 5. 2-[4-[[terc-butil(dimetil)silyl]oksimetil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0594]
[0595] 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (30 mg, 0.05759 mmol), terc-butil-[(5,5-dimetilpirolidin-3-il)metoksi]-dimetilsilan (približno 42.07 mg, 0.1728 mmol), i K2CO3(približno 39.80 mg, 0.2880 mmol) su spojeni u DMSO (600.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razdeljena između rastvora 1M limunske ksieline i etil acetata i organska supstanca je odvojena. Organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobio 2-[4-[[tercbutil(dimetil)silil]oksimetil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (19 mg, 45%). ESI-MS m/z izrač. 727.3159, nađeno 728.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.94 minuta.
Korak 6. N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[4-(hidroksimetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0596]
1
[0597] 2-[4-[[terc-butil(dimetil)silyl]oksimetil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (19 mg) je rastvoren u THF (1 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu. TBAF (približno 288.0 μL f 1 M, 0.2880 mmol) je dodat i reakcija je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu . Reakciona smeša je mešana u toku 1 h i zatim razdeljena između etil acetata i 1M rastvora limunske kiseline . Organske supstance su isprane sa rastvorom soli, osušene preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[4-(hidroksimetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (8.7 mg, 54%). ESI-MS m/z izrač. 613.22943, nađeno 614.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.81 minuta.
Sinteza N-[3-(hidroksimetil)-1-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 39)
[0598]
Korak 1: metil 4-(3-metoksi-3-okso-propil)sulfonil-1-metil-pirazol-3-karboksilat
[0599]
[0600] metil 4-bromo-1-metil-pirazol-3-karboksilat (508 mg, 2.319 mmol), (3-metoksi-3-oksopropil)sulfiniloksinatrijum (810 mg, 4.651 mmol), i bakar(1+) (jodidni jon (1)) (1.31 g, 6.878 mmol) su spojeni u degasiranom DMSO (3.048 mL). Uvođen je azot u obliku mehurića u reakciju u toku još 5 min i zatim je zatvorena i zagrejana na 80 °C. Reakcija je zagrejana u toku 48 h zatim ohlađena na sobnu temperaturu . Reakcija je razblažena sa etil acetatom (25 mL) i NH4Cl (10 mL). Obrazovan je gusti talog
1
koji je proceđeni odbačen. Slojevi su odvojeni i organska supstanca je isprana sa zasićenim NH4Cl (30 mL) rastvorom, i zas. NaHCO3rastvorom (30 mL), i rastvorom soli (30 mL). Organske supstance su osušene preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-100% etil acetatom u heksanima da bi se dobio metil 4-(3-metoksi-3-oksopropil)sulfonil-1-metil-pirazol-3-karboksilat (297 mg, 44%) ESI-MS m/z izrač.290.05725, nađeno 291.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.32 minuta.
Korak 2: metil 1-metil-4-sulfamoil-pirazol-3-karboksilat
[0601]
Korak 1: metil 4-(3-metoksi-3-okso-propil)sulfonil-1-metil-pirazol-3-karboksilat (297 mg, 1.023 mmol) je rastvoren u THF (4 mL) i dodat je 25% NaOMe u metanolu (220 μL 25 %m/v, 1.018 mmol). Reakcija je mešana u toku 5 min i uparena. Heksan je dodat i smeša je ponovo uparena. Korak 2: Proizvod iz koraka 1 je rastvoren u dihlorometanu (4 mL) i dodat je N-hlorosukcinimid (138 mg, 1.033 mmol). Reakcija je mešana u toku 30 min. Reakciona smeša je dodata polako u na kupatilu ohlađen rastvor amonijaka u metanolu (1.5 mL 7 M, 10.50 mmol) i on je mešan u toku još 30 min. Reakciona smeša je razdeljena između etil acetata i vode. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. metil 1-metil-4-sulfamoil-pirazol-3-karboksilat (110 mg, 49%) ESI-MS m/z izrač.
219.03137, nađeno 220.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.2 minuta.
Korak 3: metil 4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-1-metil-pirazol-3-karboksilat
[0602]
[0603] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (približno 186.2 mg, 0.5018 mmol) i karbonil diimidazol (približno 81.37 mg, 0.5018 mmol) su spojeni u THF (2 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 3 h. Reakciona smeša je dodata metil 1-metil-4-sulfamoil-pirazol-3-karboksilatu (110 mg, 0.5018 mmol) i DBU (približno 76.39 mg, 75.04 μL, 0.5018 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatnih 16 h. Reakciona smeša je razdeljena između etil acetata i 1M rastvora limunske kiseline. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi proizvod je sakupljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. metil 4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-
1
karbonil]sulfamoil]-1-metil-pirazol-3-karboksilat (178 mg, 63%) ESI-MS m/z izrač.564.08057, nađeno 565.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.67 minuta.
Korak 4. N-[3-(hidroksimetil)-1-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il] piridin-3-karboksamid
[0604]
Korak 1:
metil 4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-1-metil-pirazol-3-karboksilat (145 mg, 0.2567 mmol) je rastvoren u litijum borohidridu (2.0 M in THF) (približno 1.283 mL 2 M, 2.567 mmol) i mešan u toku 4h. Reakciona smeša je zaustavljena sa metanolom, zatim razdeljena između etil acetata i 1M rastvora limunske kiseline. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena.
Korak 2:
Dobijeni alkohol iz koraka 1 je rastvoren u NMP (0.5 mL) sa (4S)-2,2,4-trimetilpirolidinom (Hidrohloridna so) (približno 76.84 mg, 0.5134 mmol) i kalijum karbonatom (približno 106.4 mg, 0.7701 mmol) i reakcija je zagrejana na 130 °C u toku 16 h. Reakciona smeša je razdeljena između etil acetata i 1M rastvora limunske kiseline. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu. Proizvod sadrži NMP tako da je proizvod dalje prečišćen sa LC/MS korišćenjem gradijenta 10-99% acetonitrila u 5 mM vod HCl. Željena frakcija je ekstrahovana sa etil acetatom. Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena da bi se dobio N-[3-(hidroksimetil)-1-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (8 mg, 5%) ESI-MS m/z izrač.613.22943, nađeno 614.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.96 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.25 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.60 (q, J = 13.0 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.56 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 2.16 (s, 1H), 1.91 -1.84 (m, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.42 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.23 (s, 6H), 0.83 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza (7S)-7,9,9-trimetil-2-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-6a,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-d]pirolo[2,1-b][1,3]oksazin-5-on (Jedinjenje 57)
Korak 1: 6-[3-(3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0605]
1
[0606] 2-Hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0.5389 mmol) i cezijum fluorid (približno 81.86 mg, 0.5389 mmol) su spojeni u DMSO (2 mL). (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 242.0 mg, 1.617 mmol) je dodat a zatim fino sprašeni kalijum karbonat (približno 223.5 mg, 1.617 mmol). Reakciona smeša je zatvorena i omogućeno je da se meša preko noći na 150 °C. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) isprana sa vodenom limunskom ksielinom (1 M, 2350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušeni preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Proizvod je izolovan hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa 0-5% MeOH/DCM gradijentom u toku 40 minuta na koloni od 12 grama silikagela. Čiste frakcije su spojene i koncentrovane da bi se dobio 6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (154 mg, 65%) kao bela penasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.440.20352, nađeno 441.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.87 minuta.
Korak 2: (7S)-7,9,9-trimetil-2-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-6a,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-d]pirolo[2,1-b][1,3]oksazin-5-on
[0607]
[0608] 6-[3-(3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (50 mg, 0.1135 mmol), voda (20 μL, 1.110 mmol), natrijum acetat (19 mg, 0.2316 mmol) i [Ir[dF(CF3)ppy]2(dtbpy)]PF6(5 mg, 0.004457 mmol) su rastvoreni u DMA (872 mL). Reakciona smeša je smeštena pod 23 W kompaktni fluorescentni izvor svetlosti u toku pet sati. Izvor svetlosti je emitovao dovoljno toplote da se reakciona smeša zagreje na ∼40 °C. Sirova smeša je prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa gradijenom 0-100% EtOAc/heksan da bi se dobio (7S)-7,9,9-trimetil-2-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-6a,7,8,9-tetrahidro5H-pirido[2,3-d]pirolo[2,1-b][1,3]oksazin-5-on (24.6 mg, 50%). ESI-MS m/z izrač.438.18787, nađeno 439.6 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.27 minuta.
Sinteza N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4R)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 37)
[0609]
1 1
[0610] U smešu 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (2 g, 3.839 mmol) i (4R)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 1.322 g, 8.830 mmol) u N-metilpirolidinonu (10.00 mL) i 1,2-dietoksietanu (2.000 mL) je dodat kalijum karbonat (približno 2.654 g, 19.20 mmol). Suspenzija je zagrejana na 130 °C u toku 40 sati. Reakciona suspenzija je ohlađena na temperaturu okoline i polako je dodata u brzo mešani rastvor HCl (približno 8.958 mL 6 M, 53.75 mmol) u ledenoj vodi (100.0 mL) dajući beličasti suspenziju . Talog je sakupljen i ispran tri puta sa 10 mL vode. Čvrsta supstanca je osušena na vazduhu u toku jednog sata . Sirova čvrsta supstanca je rastvorena u vrelom izopropil alkoholu (30.00 mL) i dozvoljeno je da stoji u toku dva sata. Čvrsta supstanca je sakupljena, i beličasta čvrsta supstanca je isprana tri puta sa 2 mL hladnog izopropil alkohola. Čvrsta supstanca je osušena na vazduhu u toku jednog sata i zatim osušena u valuumu na 45 °C u toku 18 sati da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4R)-2,2,4-tri-metilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (1.4 g, 61%). ESI-MS m/z izrač. 597.2345, nađeno 598.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.1 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.36 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.55 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.41 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.19 (dt, J = 12.0, 6.2 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.42 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.23 (s, 6H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
Sinteza 6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 17)
Korak 1: 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0611]
[0612] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0.2749 mmol) i CDI (53 mg, 0.3269 mmol) su spojeni u THF (600.0 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata u fioli (fioli 1). U međuvremenu, 1,3,5-trimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (69 mg, 0.3307 mmol) je spojen sa amonijakom (250 μL 7 M, 1.750 mmol) (u metanolu) u odvojenoj fioli (fiola 2). Posle mešanja u toku dodatnih 20 min, isparljive supstance su uklonjene iz fiole 2 uparavanjem, i 1 mL dihlorometana je dodato u čvrsti ostatak, i takođe je uparen. DBU (60 μL, 0.4012 mmol) je zatim dodat u fiolu 2 i mešan na 60 °C u toku 5 minuta (da bi se olakšalo uklanjanje amonijaka iz bilo kod zaostalog amonijum hlorida ). Posle hlađenja na sobnu temepraturu, 1 mL THF je dodat i zatim uparen pod sniženim pritiskom. Sadržaj fiole 1 je zatim dodat u fiolu 2 špricom, i reakciona smeša je mešana u toku 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL etil acetata, isprana sa 10 mL 1M limunskom kiselinom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2 x 10 mL etil acetatom, i spojene organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bala čvrsta supstanca. Ovaj materijal je korišćen u sledećem koraku bez
1 2
daljeg prečišćavanja. 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (142 mg, 97%) ESI-MS m/z izrač. 534.1064, nađeno 535.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.7 minuta.
Korak 2: 6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0613]
[0614] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (142 mg, 0.2655 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (119 mg, 0.7951 mmol), i kalijum karbonat (221 mg, 1.599 mmol) su spojeni u DMSO (531.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, i dodat je 1 ml vode. Posle 15 minuta mešanja, sadržaj fiole je omogućeno da se staloži , tečni deo je uklonjen pipetom i preostala čvrsta supstanca je rastvorena sa 20 mL etil acetata zatim isprana sa 15 mL 1M limunskom kselinom. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. 6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol1-il]-N-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (84 mg, 52%) ESI-MS m/z izrač. 611.2502, nađeno 612.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.16 minuta.
(S)-2-(2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)-N-((3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (Jedinjenje 3)
[0615]
[0616] 2-Hloro-N-[(3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (5.34 g, 10.5 mmol), kalijum karbonat (7.27 g, 52.6 mmol) i (4S)-3,3-dideuterio-2,2-dimetil-4-(trideuteriometil)pirolidin (Hidrohloridna so) (4.88 g, 31.6 mmol) su spojeni u DMSO (45 mL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razdeljena između etil acetata (30 vol) i 1M rastvora limunske kiseline (pH 4-5). Organska supstanca je odvojena, i isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-40% etil acetata u heptanu a zatim trituracijom sa MTBE/dihlorometan (2:1). Čvrsta
1
dobijena supstanca je premeštena u balon sa okruglim dnom od 100 mL i osušena u toku 4 dana na sobnoj temperaturi da bi se dobio (S)-2-(2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)-N-((3-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (2.6 g, 42%). ESI-MS m/z izrač.588.66, nađeno 589.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 20.2 minuta (35 min run).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 11)
[0617]
Korak 1: terc-butil 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-karboksilat
[0618]
[0619] terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (2.03 g, 11.02 mmol), 3,3,3-trifluoropropan-1-ol (približno 1.320 g, 11.57 mmol), i trifenil fosfin (približno 3.189 g, 2.817 mL, 12.16 mmol) su spojeni u THF (20.40 mL) i reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu. U smešu je dodat DIAD (približno 2.507 g, 2.441 mL, 12.40 mmol) u kapima i reakcija je omogućeno da se zagreje na sobnoj temperautri u toku 16 h. Smeša je uparena i dobijeni materijal je razdeljen između etil acetata (50 mL) i U natrijum hidroksida (50 mL). Organska supstanca je odvojena, isprana sa rastvorom soli (30 mL), osušena preko natrijum sulfata i uparena. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-30% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-karboksilat (2.0 g, 65%) ESI-MS m/z izrač.280.1035, nađeno 281.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.62 minuta.
Korak 2: 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)-1H-pirazol
1 4
[0621] terc-butil 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-karboksilat (2.0 g, 7.137 mmol) i TFA (približno 8.138 g, 5.499 mL, 71.37 mmol) su rastvoreni u dihlorometanu (20.00 mL) i mešani u toku 2 h i zatim upareni do čvrste supstance . Čvrsta supstanca je razdeljena između etil acetata i zasićenog rastvora natrijum bikarbonata . Organske supstance su odvojene, isprane sa rastvorom soli, i osušene preko natrijum sulfata. Organske supstance su osušene da bi se dobio 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)-1H-pirazol (1.24 g, 96%) ESI-MS m/z izrač.180.05104, nađeno 180.9 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.37 minuta.
Korak 3: terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0622]
[0623] terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (približno 1.433 g, 5.774 mmol), 3-(3,3,3-trifluoropropoksi)-1H-pirazol (1.04 g, 5.774 mmol), i kalijum karbonat (približno 957.6 mg, 6.929 mmol) (sveže spraćeni) su spojeni u anhidrovanom DMSO (28.66 mL).1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (približno 129.6 mg, 1.155 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i mešana u toku 15 min. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena i isprana sa vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i mala količina vodenog sloja je uklonjena . Organska supstanca je osušena preko natrijum sulfata i uparena da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.81 g, 80%) ESI-MS m/z izrač.391.09106, nađeno 392.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.84 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-[(1R,2S,4S)-norbornan-2-il]oksipirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0624]
[0625] terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.81 g, 4.620 mmol) i TFA (3.6 mL, 47 mmol) su spojeni u metilen hloridu (18 mL) i zagrejani na 40 °C u toku 3 h. Reakcija je uparena do suvog i dobijena čvrsta supstanca je ponovo uparena iz heksana . Čvrsta supstanca je dalje osušena da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-
1
karboksilna kiselina (1.55 g, 100%) ESI-MS m/z izrač. 335.02844, nađeno 336.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.61 minuta.
Korak 5: 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0626]
Korak 1: obrazovanje sulfonamida
1,3-dimetilpirazol-4-sulfonil hlorid (približno 97.42 mg, 0.5005 mmol) je rastvoren u amonijaku u metanolu (približno 298.0 μL 7 M, 2.086 mmol) i mešan je na sobnoj temperaturi u toku 30 min. Smeša je uparena do suvog i ponovo uparena iz dihlorometana. Čvrsta supstanca je rastvorena u THF (1 mL) i dodat je DBU (približno 211.6 mg, 207.9 μL, 1.390 mmol) . Smeša je mešana na 70 °C u toku 30 min da se oslobodi bilo koja količina zaostalog amonijaka u reakciji .
Korak 2:
2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (140 mg, 0.4171 mmol) i karbonil diimidazol (približno 85.36 mg, 0.5264 mmol) su spojeni u THF (1.250 mL) i mešani u toku 2 h. U ovoj tački, smeša je dodata u sulfonamidnu smešu iz koraka 1. DBU (približno 211.6 mg, 207.9 μL, 1.390 mmol) je dodat i reakcija je mešana u toku dodatnih 30 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i isprana sa 1M rastvora limunske kiseline, i zatim rastvorom soli. Organska supstanca je odvojena, osušena preko natrijum sulfata, i uparena da bi se dobio 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (196 mg, 95%) ESI-MS m/z izrač.492.05945, nađeno 493.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.61 minuta.
Korak 6: N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetil-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0627]
[0628] 2-hloro-N-metilsulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (približno 100 mg, 0.2 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (približno 91 mg, 0.60 mmol), i kalijum karbonat (približno 141 mg, 1.0 mmol) su spojeni u DMSO (500.0 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razblažena sa vodom (3mL) i mešana u toku 20 min. Čvrsta obrazovana supstanca i vodena tečnost su dekantovane. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i isprana sa
1
1M rastvora limunske kiseline, zatim rastvorom soli. Organske supstance su osušena preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanola u dihlorometanu da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (29 mg, 25%) ESI-MS m/z izrač.569.20, nađeno 570.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.89 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.36 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.83 (qt, J = 11.5, 5.9 Hz, 2H), 2.59 -2.53 (m, 1H), 2.46 -2.37 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.26 -2.10 (m, 1H), 1.88 (dd, J = 11.9, 5.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.81 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 12)
Korak 1: 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0629]
[0630] 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (151 mg, 0.4499 mmol) i karbonil diimidazol (približno 92.07 mg, 0.5678 mmol) su spojeni u THF (1.348 mL) i mešani u toku 2 h. U ovoj tački, 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 78.83 mg, 0.4499 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 228.4 mg, 224.4 μL, 1.500 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatnih 30 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim rastvorom soli. Organska supstanca je odvojena, osušena preko natrijum sulfata, i uparena da bi se dobio 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (216 mg, 97%) ESI-MS m/z izrač. 492.05945, nađeno 493.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.61 minuta.
Korak 2: N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0631]
[0632] 2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (približno 100 mg, 0.2 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (Hidrohloridna so) (približno 91 mg, 0.60 mmol), i kalijum karbonat (približno 141 mg, 1.0 mmol) su spojeni u DMSO (500.0 μL) i
1
zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je razblažena sa vodom (3mL) i mešana u toku 20 min. Obrazovana je čvrsta supstanca i vodena tečnost je dekantovana. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim rastvorom soli. Organske supstance su osušene preko natrijum sulfata i uparene. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-10% metanolom u dihlorometanu da bi se dobio N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoropropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (51 mg, 44%) ESI-MS m/z izrač. 569.20, nađeno 570.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.89 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.36 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.83 (qt, J = 11.5, 5.9 Hz, 2H), 2.59 -2.53 (m, 1H), 2.46 -2.37 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.26 -2.10 (m, 1H), 1.88 (dd, J = 11.9, 5.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 0.81 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Sinteza 6-[3-(Diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 48)
[0633]
Korak 1: terc-butil 3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-karboksilat
[0634]
1
[0635] diciklopropilmetanol (približno 468.9 mg, 4.180 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (700 mg, 3.800 mmol), i PPh3 (približno 1.296 g, 4.940 mmol) su rastvoreni u THF (19.00 mL), i ohlađeni na 0 °C u ledenom kupatilu. DIAD (približno 998.9 μg, 956.8 mL, 4.940 mmol) je dodat u kapima špricom, i reakciona smeša je omogućeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu u toku jendog sata, i zatim meša u toku 16 sati na sobnoj temperaturi, i 2 sata na 60 °C. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Preostalo ulje je zatim rastvoreno u 60 mL etil acetata, i isprano sa 50 mL IN NaOH. Vodeni sloje je ekstrahovan sa etil acetatom (2x40mL), i spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sirovi materijal je zatim prečišćen hromatografijom na silikagelu, pomoću gradijenta 0-40% etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobio terc-butil 3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (483 mg, 46%). ESI-MS m/z izrač. 278.16306, nađeno 279.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.11 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMF) δ 8.02 (dd, J = 3.1, 0.9 Hz, 1H), 6.07 (dd, J = 3.1, 0.9 Hz, 1H), 3.80 (td, J = 7.8, 1.0 Hz, 1H), 1.53 (d, J = 1.0 Hz, 9H), 1.23 -1.04 (m, 2H), 0.59 -0.27 (m, 8H).
Korak 2: 3-(diciklopropilmetoksi)-1H-pirazol
[0636]
[0637] U terc-butil 3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (470 mg, 1.689 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (5.875 mL) je dodat natrijum karbonat (537 mg, 5.067 mmol) u vodi (2.5 mL), i reakciona smeša je zagrevana na 90 °C u toku 16 sati u fioli sa zatvaračem. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa vodom (50 mL) i etil acetatom (50 mL). Organska supstanca je odvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan 2x 25 mL etil acetatom. Spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, i osušena preko natrijum sulfata, zatim koncentrovana da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.3-(diciklopropilmetoksi)-1H-pirazol (230 mg, 76%) ESI-MS m/z izrač.178.11061, nađeno 179.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.32 minuta.
Korak 3: etil 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0638]
[0639] Balon sa okruglim dnom je napunjen pod azotom sa 3-(diciklopropilmetoksi)-1H-pirazolom (226 mg, 1.268 mmol), etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (280 mg, 1.272 mmol), K2CO3(264 mg, 1.910 mmol) (sveže smaleven u avanu) i anhidrovanim DMF (2.100 mL). DABCO (26 mg, 0.2318 mmol) je
1
dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati . Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL) i odvojene su dve faze. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 mL), i spojene organske faze su isprane sa rastvorom soli i osušene preko natrijum sulfata, posle čega je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom. Materijal je podvrgnut fleš hromatografiji na silikagelu pomoću gradijenta 0-30% etil acetata u heksanima. Čiste frakcije su spojene i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom da bi se dobila bela čvrsta supstanca; etil 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (210 mg, 46%). ESI-MS m/z izrač.361.11932, nađeno 362.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.82 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.48 -8.31 (m, 2H), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.34 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.88 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.27 -1.14 (m, 2H), 0.60 -0.35 (m, 8H).
Korak 4: 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0640]
[0641] U rastvor etil 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (5g, 13.82 mmol) u THF (35.00 mL) i MeOH (15.00 mL) je dodata NaOH (približno 13.82 mL of 2 M, 27.64 mmol). Smeša je mešana na temperaturi okoline u toku 45 min. Smeša je zakišeljena sa laganim dodavanjem HCl (približno 27.64 mL 1 M, 27.64 mmol) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (125 mL). Vodena faza je. odvojena i organska faza je isprana sa 75 mL rastvora soli, osušena preko MgSO4, proceđena i koncentrovana u vakuumu. Proizvod je bio beličasta čvrsta supstanca koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (4.5 g, 98%). ESI-MS m/z izrač.333.088, nađeno 334.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.81 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.60 (s, 1H), 8.41 -8.34 (m, 2H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.88 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 1.29 -1.12 (m, 2H), 0.59 -0.38 (m, 8H).
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0642]
[0643] U 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnu kiselinu (4.5 g, 13.48 mmol) u THF (45 mL) polako je dodat CDI (2.4 g, 15 mmol). Smeša je mešana na temperaturi okoline u toku jednog sata. U aktivirani estar je dodat 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (2.6 g, 14.84 mmol) u
1
porcijama a zatim DBU (2.4 mL, 16 mmol), i smeša je mešana na temperaturi okoline u toku jednog sata. U reakcionu smešu je polako dodata limunska kiselina (10.4 g, 54.1 mmol) u vodi (90 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (120 mL), i organska faza je isprana sa rastvorom soli, osušena preko magnezijum sulfata, proceđena, i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je hromatografisan na ISCO koloni od 120g silikagela eluiranjem sa 0-100% EtOAc/heksani dajući 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (5.3 g, 80%). ESI-MS m/z izrač.490.119, nađeno 491.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.57 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 8.52 -8.25 (m, 2H), 8.07 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.87 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.26 -1.14 (m, 2H), 0.55 -0.40 (m, 8H).
Korak 6: 6-[3-(Diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetil-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0644]
[0645] U rastvor 2-hloro-6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonilpiridin-3-karboksamida (5.2 g, 10.59 mmol) i (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (3.65 g, 24.39 mmol) u NMP (25 mL) i 1,2-dietoksietana (5 mL) je dodat kalijum karbonat (7.32 g, 53.0 mmol). Suspenzija je zagrejana na 130 °C u toku 20 sati. Reakciona suspenzija je ohlađena na temperaturu okoline i polako je dodata u rastvor HCl (18 mL of 6 M, 108 mmol) u ledenoj vodi (150 mL) koji se brzo meša da bi se dobila beličasta smeša. Talog je sakupljen i ispran tri puta sa 10 mL vode. Čvrsta supstanca je sušena na vazduhu u toku jednog sata. Čvrsta supstanca je rastvorena u 150 mL EtOAc i isprana sa 100 mL 1 M HCl i 100 mL rastvora soli. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, proceđena, i koncentrovana u vakuumu dajući beličastu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je rastvorena u 20 mL acetonitrila i hromatografisana je na ISCO koloni od 415g sa reverznom fazom eluiranjem sa 5-100% acetonitril/voda. Frakcije proizvoda su sakupljene i koncentrovane u vakuumu. Proizvod je ponovo hromatografisan na ISCO koloni od silikagela eluiranjem sa 0-100% EtOAc/heksani. Čiste frakcije su sakupljene i koncentrovane u vakuumu dajući beličastu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom na 45°C u toku četiri sata da bi se dobio 6-[3-(diciklopropilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (4.1 g, 68%). ESI-MS m/z izrač.567.26276, nađeno 567.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.06 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.34 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.16 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.84 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.55 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.41 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (dq, J = 11.5, 6.1 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.54 (d, J = 10.8 Hz, 6H), 1.41 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 1.18 (dtd, J = 12.9, 8.0, 5.1 Hz, 2H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.56 -0.38 (m, 8H).
Sinteza 6-[3-(3-Biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 23)
1 1
[0646] Korak 1: terc-Butil 3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-karboksilat
[0647]
[0648] Rastvor 3-biciklo[1.1.1]pentanilmetanola (0.23 g, 2.3 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (0.42 g, 2.3 mmol), i trifenil fosfina (0.66 g, 2.5 mmol) u THF (12 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu, i polako je dodat izopropil N-izopropoksikarboniliminokarbamata (0.49 mL, 2.5 mmol). Dozvoljeno je da se reakcija polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku tri dana. Razblaćena je sa etil acetatom, isprana sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom, osušena preko natrijum sulfata, i uparena pod vakuumom. Ostatak je prelišćen hromatografijom na silikagelu sa 0-40% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-karboksilat kao bezbojno ulje (0.40 g, 66%) ESI-MS m/z izrač.264.15, nađeno 265.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.79 minuta.
Korak 2: 3-({Biciklo[1.1.1]pentan-1-il}metoksi)-1H-pirazol
[0649]
[0650] Rastvor terc-butil 3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-karboksilata (0.40 g, 1.513 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (583 μL, 7.57 mmol) u dihlorometanu (3 mL) je mešan u toku četiri sata. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom i ostatak je zabažen sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio 3-({biciklo[1.1.1]pentan-1-il}metoksi)-1H-pirazol kao bezbojno ulje (0.23 g, 93%) ESI-MS m/z izrač.164.09, nađeno 165.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.45 minuta.
1 2
Korak 3: terc-Butil 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat
[0651]
[0652] Smeša 3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)-1H-pirazola (0.23 g, 1.4 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (0.35 g, 1.4 mmol), kalijum karbonata (0.23 g, 1.7 mmol), i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (32 mg, 0.29 mmol) u DMSO (7 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli i vodom, osušeni preko natrijum sulfata, i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu sa 0-5% metanolom u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (0.45 g, 85%) ESI-MS m/z izrač.
375.13, nađeno 376.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.93 minuta.
Korak 4: 6-[3-(3-Biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina
[0653]
[0654] Rastvor terc-butil 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloropiridin-3-karboksilata (0.45 g, 1.2 mmol) i trifluorosirćetne kiseline (0.95 mL, 12 mmol) u dihlorometanu (6 mL) je mešan u toku četiri sata. Rastvarač je uparen, i ostatak je sakupljen u acetonitrilu. Rastvarač je uparen da bi se dobila 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina kao bezbojna čvrsta supstanca (0.38 g, 100%) ESIMS m/z izrač.319.07, nađeno 320.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.69 minuta<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.50 -8.34 (m, 2H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 2.54 (s, 1H), 1.81 (s, 6H).
Korak 5: 6-[3-(3-Biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0655]
[0656] Rastvor 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilne kiseline (0.12 g, 0.3753 mmol) i karbonil diimidazola (približno 73 mg, 0.45 mmol) u THF (1.9 mL) je mešan u toku 30 minuta, i dodati su 1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 85 mg, 0.49 mmol) i
1
diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (približno 68 mg, 67 μL, 0.45 mmol). Posle 16 sati reakcija je razblažena sa 1 M vodenom limunskom kiselinom i ekstrahovana sa etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobio sirov 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid koji je korišćen u sledećem koraku kao takav (0.19 g, 106%) ESI-MS m/z izrač. 476.10, nađeno 477.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.68 minuta.
Korak 6: 6-[3-(3-Biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0657]
[0658] Smeša 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamida (približno 0.18 g, 0.38 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidina (hidrohloridna so) (približno 160 mg, 1.1 mmol), i kalijum karbonata (približno 320 mg, 2.3 mmol) u DMSO (1.9 mL) je mešana na 130 °C u toku 16 sati. Reakcija je proceđena i prečišćena sa reverznofaznim HPLC-MS (30%-99% acetonitril / voda (5 mM HCl)) da bi se dobio 6-[3-(3-biciklo[1.1.1]pentanilmetoksi)pirazol-1-il]-N(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (90 mg, 42%) ESI-MS m/z izrač. 553.25, nađeno 554.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.11 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.19 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.62 -2.52 (m, 5H), 2.40 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.27 -2.11 (m, 1H), 1.87 (dd, J = 11.9, 5.6 Hz, 1H), 1.80 (s, 6H), 1.55 (d, J = 15.0 Hz, 6H), 1.43 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 0.80 (d, J = 6.2 Hz, 3H)
Sinteza N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 56)
[0659]
1 4
Korak 1: 1-ciklopropilciklopropanol
[0660]
[0661] U rastvor metil ciklopropankarboksilata (75 g, 749.1 mmol) u etru (450 mL) je dodat titanijum(IV) izopropoksid (55.3 mL, 187.4 mmol). U smešu je polako dodat etil magnezijum bromid (1.6 L 1 M, 1.60 mol) u toku 2 hr. Dodavanje je bilo egzotermno i kontrolisano praćenjem brzine dodavanja i korišćenjem hladnog kupatila. Reakciona temperatura je održavana između 21-26°C u toku dodavanja. Smeša je mešana dodatna 2 hr na temperaturi okoline. Posle 2 sata, smeša je rashlađena na -5 °C pomoću kupatila aceton/suvi led i polako je zaustavljena sa sumpornom kiselinom (970 g 10 %m/m, 990 mmol). Reakciona smeša je ohlađena u kupatilu suvo led /aceton da bi se održao reakcioni sud ispod 0 °C u toku dodavanje. Kako je hlađenje nastavljeno, obrazovana je siva /ljubičasta čvrsta supstanca . Posle potpunog dodavanja vodenene sumporne kiseline, čvrsta supstanca nije otišla u rastvor. Smeša je mešana na 0 °C u toku 1 h. Talog je proceđen kroz celit pomoću srednjeg levka sa sinterovanim staklom i talog je ispran sa dietil etrom (900 mL). Filtrat je premešten u levak za odvajanje i organska faza je isprana sa rastvorom soli (1 L), zasićenim natrijum bikarbonatom (1L), i rastvorom soli (1L). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, proceđena prako celita, i rastvarač je uparen u vakuumu na 100 tor i vodeno kupatilo je podešeno na 20 °C. Sirovi proizvod je čiuvan na -23 °C preko noći i korišćen je bez daljeg prečišćavanja.1-ciklopropilciklopropanol (61 g, 83%) je nađeno
1
da sadrži ∼50% rastvarača (THF i iPrOH) i korišćen je kao takav u sledećem koraku.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 1.32 (tt, J = 8.2, 5.1 Hz, 1H), 0.71 -0.61 (m, 2H), 0.51 -0.43 (m, 2H), 0.43 -0.33 (m, 2H), 0.23 -0.14 (m, 2H).
Korak 2: 1-bromo-1-ciklopropil-ciklopropan
[0662]
[0663] Rastvor trifenilfosfina (56.1 g, 213.9 mmol) u DCM (200 mL) je ohlađen na -10 °C. Rastvor broma (11.0 mL, 214 mmol) u DCM (40 mL) je dodat i reakcija je mešana na -10°C u toku dodatnih 15 minuta. Reakcija je zatim ohlađena na -30°C i dodat je piridin (3.3 mL, 41 mmol). Rastvor 1-ciklopropilciklopropanola (20.0 g, 204 mmol), piridina (17.3 mL, 214 mmol), i DCM (100 mL) je dodat u kapima dok je temperatura održavana između -15°C do -20°C. Posle 30 minuta, dodavanje je završeno i reakcija je omogućeno da se polako zagreje nast.<1>H NMR analiza je pokazala nešto proizvoda. Reakcija je omogućeno da se meša na 40°C preko noći. GCMS analiza je pokazala 89% proizvoda. Reakcija je ohlađena na st i zatim zaustavljena sa vodom (100 mL). Reakcija je mešan u toku 10 minuta a zatim su odvojene faze. Organska faza je uzastopno isprana sa 1 M HCl (102 mL), zas. natrijum bikarbonatom (50 mL), osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana (30 °C/kućni vakuum ∼300 tor) da se ukloni vlaga DCM. Sirova reakciona smeša je brzo destilovana (40°C/20 tor) da se dobije proizvod (približno 50 g). Ostatak čvrste supstance (Ph3PO i proizvod) je ponovo zagrejan i destilovan (50 -60 °C/20 torr) da bi se dobilo 60.4 g. Posle kombinovanja svega gore navedenog i ispiranja sa DCM, koncentrovanjem je dobijeno 21.5 g (65% prinos) mutne, bezbojne tečnosti.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 5.30 (s, 1H), 1.61 (tt, J = 8.2, 5.0 Hz, 1H), 1.07 -1.02 (m, 2H), 0.78 -0.66 (m, 2H), 0.67 -0.51 (m, 2H), 0.35 -0.21 (m, 2H).
Korak 3: ciklopropilideneciklopropan
[0664]
[0665] Rastvor kalijum terc-butoksida (16.7 g, 148.8 mmol) u DMSO (100 mL) je mešan na ST u 3-grlom balonu sa okruglim dnom od 250-mL.1-bromo-1-ciklopropil-ciklopropan (20.0 g, 124.2 mmol) je dodat u kapima i reakcija je momentalno postala tamna, a zatim braon. Reakcija je bila blago egzotermna (održavanjem temperature između 18°C do 22°C pomoću kupatila led-voda). Posle 10 minuta, dodavanje je nastavljeno. Kupatilo led-voda je uklonjeno i reakcija je omogućeno da se meša na ST. Posle 90 minuta,<1>H NMR analiza je pokazala da je reakcija gotovo završena. Reakciona smeša je destilovana u vakuumu pomoću destilacije „ iz balona u balon“. Destilacija se odvijala od 60°C do 80°C između 40 i 100 tora. Destilat je polako sakupljen u recipijentu da bi se dobio 18.2 g (∼95% za olefin/t-BuOH kombinovan;) bezbojne tečnosti koja je analizirana sa<1>H NMR i sadrži (7.28 grama olefina) zajedno sa t-BuOH.
[0666] Destilat je dalje ispran sa vodom (5x 10 mL). DCM (10 mL) je dodat i rekacione faze su odvojene sa svakim ispiranjem. Organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, proceđeni, i upareni da bi
1
se dobilo 17.30 g (sadrži 7.30 g proizvoda; 73%) kao bezbojna tečnost (rastvor).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 1.19 (s, 8H).<1>H NMR Potvrđuje prisustvo DCM i male količine terc-butanola.
Korak 4: etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat
[0667]
[0668] U rastvor ciklopropilidenciklopropana (49.5 g, 617.8 mmol) u DCM (110 mL) na 0°C u atmosferi azota je dodat rodijum (II) acetat (4.2 g, 9.503 mmol). U smešu na 0°C je dodat etil 2-diazoacetat (106.8 mL, 1.016 mol) pomoću seta šprica sa pumpom pri brzini dodavanja od 0.02 mL/min (1.2 mL/hr). Dodavanje je nastavljeno u toku 89 hr. Sirova reakciona smeša je proceđena kroz sloj silikagela, ispiranjem 3X sa 150 mL DCM. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu dajući tamno žuto ulje, koje sadrži 20% DCM, dietil (E)-but-2-enedioata i dietil (Z)-but-2-endioata kao sporedne proizvode etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilata (100 g, 97%),<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.23 (s, 1H), 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.08 -0.93 (m, 4H), 0.90 -0.82 (m, 2H), 0.77 (ddd, J = 8.2, 5.0, 3.5 Hz, 2H).
Korak 5: dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metanol
[0669]
[0670] U suspenziju LiAlH4(7.8 g, 200.2 mmol) u dietil etru (300 mL) ohlađenu u lednom kupatilu je polako dodat etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat (10.77 g, 64.79 mmol). Smeša je omogućeno da se zagreje na blagom refluksu u toku dodadavanja i nastavljeno je mešanje na temperaturi okoline u toku 1 hr. Prema<1>H NMR, reakcija je bila završena. Reakcija je ohlađena u lednom kupatilu i polako zaustavljena sa dodavanejm vode (8.0 mL, 440 mmol), a zatim natrijum hidroksida (8.0 mL 2 M, 16 mmol) i zatim vode (24.0 mL, 1.33 mol). Svetlo žuta suspenzija je proceđena preko celita i 3X sa 150 mL MTBE. Filtrat je koncentrovan u vakuumu dajući 8.87 g bistrog ulja. {dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metanol (8.87 g, 110%).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.71 (dd, J = 6.7, 5.5 Hz, 2H), 1.76 -1.65 (m, 1H), 1.46 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 0.87 (q, J = 1.9 Hz, 4H), 0.72 -0.61 (m, 2H), 0.60 -0.50 (m, 2H).
Korak 6: 7-(bromometil)dispiro[2.0.2.1]heptan
[0671]
[0672] U 3-grlom balon sa okruglim dnom od 1000 mL snabdvenom sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, kapalicom, J-Kem temperaturnom snodom i uvodnikom/odvodnikom za azot.
1
Sud je napunjen u atmosferi azota sa trifenilfosfinom (102.7 mL, 443.2 mmol) i dihlorometanom (1 L) pri čemu je dobijen bistar bezbojan rastvor. Počelo je mešanje i kupatilo za hlađenje je je napunjeno sa acetonom. Suvi led je dodat u porcijama dok nije dobijena temperatura suda -15 °C . Kaplalica je napunjena sa rastvorom broma (22.82 mL, 443.0 mmol) u dihlorometanu (220 mL, 10 mL/g) koji je zatim dodat u kapima u toku 1 sata. Suvi led je dodat u porcijama u toku dodavanja da bi se održala temperatura suda na -15 °C. Pošto je dodavanje završeno, bledo žuta suspenzija je nastavljeno da se meša na -15 °C u toku 15 minuta u kojoj tački je suspenzija ohlađena na -30 °C. Kapalica je napunjenja sa rastvorom dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetanola (50 g, 402.6 mmol), piridina (35.82 mL, 442.9 mmol) i dihlorometana (250 mL, 5 mL/g). Bistar bledo žuti rastvor je zatim dodat u kapima u toku 1.5 sata održavajući temepraturu suda na -30 °C. Dobijena bistra svetlo žuta reakciona smeša je omogućeno da se sud postepeno zagreje na temepraturu od -5°C i zatim nastavi da se meša na -5°C u toku 1 sata. Alikvot je uklonjen, razblažen sa heksanom što je dovelo do obrazovanja taloga. Suspenzija je proceđenja kroz čep celita. Bistar filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (voda temperaturog kupatila na 20°C) da bi se dobilo bistro žuto ulje. Analiza sa<1>H NMR je pokazala da ne postoji više zaostalog materijala. Završetak reakcije je određen izčezavanjem dubleta polaznog materijala na 3.71 ppm i javljanjem dubleta proizvoda na 3.49 ppm. Reakciona smeša je sipana u heksan (2000 mL) što je dovelo do obrazovanja taloga . Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 30 minuta i zatim proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla sa slojem od 20 mm Celita. Bisti filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (voda temperatura kupatila na 20°C) da bi se dobilo žuto ulje sa nešto prisutnog taloga . Ulje je razblaženo sa heksanom, omogućeno da stoji na sobnoj temperaturi u toku 15 minuta i zatim je proceđeno na Bihnerovom levku od poroznog stakla na sloju od 20 mm celita. Bistar filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (voda temperatura kupatila na 20°C) da se dobije 7-(bromometil)dispiro[2.0.24.13]heptan (70 g, 93%)<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.49 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 1.90 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 1.06 -0.84 (m, 4H), 0.71 (ddd, J = 9.1, 5.1, 4.0 Hz, 2H), 0.54 (dddd, J = 8.6, 4.8, 3.8, 1.0 Hz, 2H). kao bistro žuto ulje (70 g, 0.374 mol, 93% prinos).
Korak 7: 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitril
[0673]
[0674] 3-grli balon sa okruglim dnom od 1000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje korišćenim za sekundarno zadržavanje, J-Kem temperaturnom sondom i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa 7-(bromometil)dispiro[2.0.2.1]heptanom (35 g, 187.1 mmol) i dimetil sulfoksidom (245 mL) što je dalo bistar ćilibarni rastvor. Mešanje je nastavljeno i temepratura suda je zabeležena na 19°C. Sud je zatim napunjen sa natrijum cijanidom (11.46 g, 233.8 mmol) dodata je čvrsta supstanca u jednoj porciji što je dovleo do tamnog rastvora i postepenog egzoterma na 49°C u toku 15 minuta. Posle nekoliko minuta temperatura suda je počela da pada i smeša je nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći (oko 15 sati). Tamna reakciona smeša je zaustavljena sa ledno hladnim zasićenim natrijum karbonatnim rastvorom (500 mL) i zatim preneta u kapalicu i razdeljena sa dietil etrom (500 mL). Ogranska supstanca je uklonjena i zaostali vodeni deo je ekstrahovan sa dietil etrom (2 x 250 mL). Spojena organska supstanca je isprana sa vodom (500 mL), osušena preko natrijum sulfata (200 g) i zatim proceđena kroz Buhnerov levak od poroznog stakla. Bistar ćilibarni filtrat je koncentrovan pod
1
sniženim pritiskom (temperatura vodnog kupatila 20°C) da bi se dobio 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitril(21 g, 84%)<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 2.42 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 1.69 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 1.02 -0.88 (m, 4H), 0.79 -0.70 (m, 2H), 0.66 -0.55 (m, 2H) kao bistro tamno ćilibarno ulje (21 g, 0.158 mol, 84% prinos).
Korak 8: 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilsirćetna kiselina
[0675]
[0676] 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, oblogom za grejanje, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je zatim napunjen u atmosferi azota sa 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitrilom (105 g, 788.3 mmol) i etil alkoholom (1.05 L) što je dalo bistar ćilibarni rastvor. Mešanje je započelo i temepratura suda je zabeležana na 19°C. Sud je zatim napunjen sa natrijum hidroksidom (525.5 mL 6 M, 3.153 mol) koji je dodat u jednoj prociji. Dobijeni bistro žuti rastvor je zagrejan na temperaturu suda od 70°C i uslovi su održavani u toku 24 sata. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni etil alkohol. Zaostali vodeni deo je razblažen sa vodom (500 ml) i zatim prenet u levak za odvajanje i razdeljen sa dietil etrom (250 mL). Organska supstanca je uklonjena i vodeni ostatak je ekstrahovan sa dietil etrom (250 mL). Vodeni deo je ukllonjen i pH je podešen na pH∼1 sa 6 Molarnim HCl rastvorom. Dobijeni vodeni rastvor je premešten u levak za odvajanje i razdeljen sa dietil etrom (500 ml). Organska supstanca je uklonjena i vodeni ostatak je ekstrahovan sa dietil etrom (2 x 250 mL). Spojene organska supstanca je osušena preko natrijum sulfata (250 g) i zatim proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla. Bistar filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i dobijen je željeni proizvod 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il sirćetna kiselina (103 g, 86%)<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 2.44 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.67 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 0.91 (ddd, J = 9.0, 5.2, 3.9 Hz, 2H), 0.81 (ddd, J = 8.9, 5.2, 3.9 Hz, 2H), 0.68 (ddd, J = 8.9, 5.2, 3.9 Hz, 2H), 0.50 (dddd, J = 8.9, 5.0, 3.9, 0.9 Hz, 2H). (103 g, 0.676 mol, 86% prinos) bistrog ćilibarnog ulja koje je očvrslo stajanjem .
Korak 9: 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanol
[0677]
[0678] 3-grli balon sa okruglim dnom od 1000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, kapalicom, J-Kem temperaturnom snodom , i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa litijum aluminijum hidridom (6.483 g, 170.8 mmol). Sud je zatim napunjen u atmosferi azota sa tetrahidrofuranom (200 mL). Mešanje je nastavljeno i temepratura suda je zabeležena na 20°C. Smeša je omogućeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 0.5 sati da se dozvoli da se rastvore pelete . Temperatura suda sa dobijenom sivom suspenzijom je zabeležena na 24°C. Kupatilo za hlađenje je zatim napunjeno sa smrvljenim led /voda i temperatura suda je snižena na 0°C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilsirćetne kiseline (20
1
g, 131.4 mmol) u tetrahidrofuranu (60 mL, 3 mL/g) i bistar bledo ćilibarni rastvor je dodat u kapima u toku 1 sata. Posle završenog dodavanja, temperatura suda dobijenog sivo-braon supsnezije je zabeležena na 5°C. Smeša je omogućeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu i nastavi mešanje na ST u toku 24 sata. Suspenzija je ohlađena na 0°C sa kupatilom za hlađenjem sa smrvljenim ledom /vodom i zaustavljena sa veoma laganim dodavanjem u kapima vode (6.483 mL), a zatim 15 mas% rastvora natrijum hidroksida (6.483 mL) i zatim na kraju sa vodom (19.45 mL). Temperatura suda dobijene bele suspenzije je zabeležena na 5°C. Suspenzija je nastavljeno da se meša na ∼5°C u toku 30 minuta i zatim je proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla kroz sloj od 20 mm celita. Filter kolač je ispran i zamenjen sa tetrhidrofuranom (2 x 150 ml) i zatim osušen pod sniženim pritiskom u toku 15 minuta. Filtrat je osušen preko natrijum sulfata (250 g) i zatim proceđen kroz Bihnerov levak. od poroznog stakla Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanol (16.7 g, 92%) 1H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 3.63 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.68 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 0.90 -0.73 (m, 4H), 0.65 (ddd, J = 8.0, 4.8, 3.5 Hz, 2H), 0.57 -0.43 (m, 2H) kao bledo ćilibarno ulje. Protonski NMR ukazuje na 5 mas% zaostalog tetrahidrofurana (0.95) 17.6 g = 16.7 g (92% prinos)
Korak 10: terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilat
[0679]
[0680] 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, grejnim telom, J-Kem temperaturom sondom /kontrolerom, kapalicom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilatom (100 g, 542.9 mmol) i tetrahidrofuranom (1,200 mL) da bi se dobio bistar bledo žuti rastvor . Mešanje je nastavljeno i temperatura suda je zabeležena na 19 °C. Sud je zatim napunjen sa 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanolom (82.54 g, 597.2 mmol) koji je pažljivo dodat u jednoj porciji a zatim trifenilfosfinom (156.6 g, 597.1 mmol) kao čvrstom supstancom. Dobijeni bistar beldo žuti rastvor je zatim tretiran sa diizopropil azodikarboksilatom (120.8 g, 597.4 mmol) (bistra crvenonarandžasta tečnost) dodata pažljivo u kapima u toku 60 minuta što je dovelo do blagog egzoterma na 40°C i bistar svetlo ćilibarni rastvor. Reakciona smeša je zatim zagrejana na temperaturu suda od 50°C i uslov je održavan u toku 2 sata zatim analiziran sa LC/MS što je ukazivalo na kompletno iskorišćene polaznog materijala. Bistra ćilibarna reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijena bistro tamno ćilibarno ulje je supsendovano u toluenu (800 mL) i mešano na sobnoj temperaturi u toku 1 sat za koje vreme je staložena čvrsta supstanca (trifenilfosfin oksid). Gusta suspenzija je proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla i filter kolač je isrpan sa toluenom (2 x 500 mL) pod vakuumom u toku dodatnih 30 minuta. Beličasti čvrsti filter kolač je konzistentan sa LC/MS za trifenilfosfin oksid. Bistri ćilibarni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro bledo žuto ulje (175 g). Materijal je prečišćen fleš hromatorfijom na čepu od silikagela eluiranjem sa gradijentom 100% heksan do 20% etil acetata u heksanu da bi se sakupio 50 ml frakcija. Proizvod je eluirao oko 5% etil acetata u heksanima. Željne frakcije su sakupljene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilat (124 g, 75%)<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.06 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.05 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.16 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.77 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.43 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 0.88 -0.77 (m, 4H), 0.67 -0.60
2
(m, 2H), 0.52 -0.45 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 304.17868, nađeno 305.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.18 minuta kao bistro bledo žuto ulje (124 g, 0.407 mol, 75% prinos) koje je očvršćavano posle stajanja.
Korak 11: 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-1H-pirazol
[0681]
[0682] 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, grejnim telom, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom, kapalicom, i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilatom (123 g, 404.1 mmol), dihlorometanom (492 mL) i metil alkoholom (492 mL) pri čemu je dobijen bistar beldo žuti rastvor. Mešanje je počelo i temperatura suda je zabeležana na 19°C. Kapalica je napunjena sa hlorovodonikom u 1,4-dioksanu (303 mL of 4 M, 1.212 mol), koji je zatim dodat u kapima u toku 2 sata što je dovelo do postepenog egzoterma na 30°C. Dobijeni bistar beldo žuti rastvor je zagrejan na temepraturu suda od 45°C i uslovi su održavani u toku 1 sat kada je analiza LC/MS pokazala da je reakcija završena . Reakciona smeša je dozvoljena da se ohladi na sobnu temperaturu i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom . Preostala bela čvrsta supstanca je rastvorena u metil terc-butil etru (984 mL) i zatim premeštena u levak za odvajanje i razdeljena sa ledno hladnim natrijum hidroksidom (606 mL 2 M, 1.212 mol). Organska supstanca je uklonjena i preostao vodeni sloj je ekstrahovan sa terc-butil metil etrom (2 x 250 mL). Spojena organska supstanca je isprana sa zasićenim natrijum hloridnim rastvorom (2 x 100 mL), osušena preko natrijum sulfata (150 g) i zatim proceđena preko Bihnerovog levka od poroznog stakla . Bistar bledo žuti filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-<1>H-pirazol (77 g, 93%) ESI-MS m/z izrač. 204.12627, nađeno 205.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.53 minuta kao bisto žuto ulje (77 g, 0.377 mol, 93% prinos).
Korak 12: etil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0683]
[0684] 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL 3 je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje korišćenim za sekundarno zadržavanje, J-Kem temperaturom sondom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom, kapalicom, i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-1H-pirazolom (64.98 g, 318.1 mmol) i N,N-dimetil formamidom (840 mL) pri čemu je dobijen bistar beldo žuti rastvor. Mešanje je otpočelo i temperatura suda je zabeležena na 17°C. Sud je zatim napunjen sa etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (70 g, 318.1 mmol) dodatim kao čvrsta supstanca u jednoj porciji . Dobijeni bistar bledo
2 1
žuti rastvor je zatim tretiran sa kalijum karbonatom (57.15 g, 413.5 mmol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktanom (5.353 g, 47.72 mmol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoh porciji. Dobijena bledo žuta suspenzija je omogućeno da se meša na ST u toku 24 sata.
Posle 24 sata, 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje koje je korišćeno za sekundarno zadržavanje, J-Kem temperaturnom sondom i kapalicom. Sud je napunjen sa ledeno hladnom vodom (2.800 L) i otpočelo je mešanje. Temperatura suda je zabeležena na 5°C. Kapalica je napunjena sa reakcionom smešom, koja je zatim dodata u toku 1 sata dovodeći do obrazovanja taloga i egzoterma na 15°C. Dobijena suspenzija je nastavljeno da se meša na 15°C u toku 30 minuta i zatim je proceđena kroz sinterovani Bihnerov levak . Filter kolač je ispran i zamenjen sa vodom (3 x 500 mL) i zatim osušen pod smanjenim pritiskom na Bihnerovom levku od poroznog stakla u toku 2 sata.Materijal je zatim osušen pod vakuumom preko noći da bi se dobilo (137 g) beličaste čvrste supstance kao sirovog proizvoda. Materijal je dalje prečišćen fleš hromatografijemom na čepu od silikagela (15:1) na Bihnerovom lekvu od poroznog stakla eluiranjem sa gradijentom od 100% heksana do 10% etil acetata u heksanu sakupljanjem 1000 mL frakcija. Željene frakcije su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio etil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (121 g, 98%) ESI-MS m/z izrač.
387.13498, nađeno 388.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 3.57 minuta kao bela čvrsta supstanca.
Korak 13: 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]pitidin-3-karboksilna kiselina
[0685]
[0686] 3-grli balon sa okruglim dnom 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, oblogom za grejanje, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, kapalicom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom, i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa etil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilatom (155 g, 399.6 mmol), tetrahidrofuranom (1,240 mL) i metil alkoholom (1,240 mL) koji je obezbedio bistar bledo ćilibarni rastvor. Mešanje je nastavljeno i temperatura suda je zabeležena na 19°C. Kapalica je napunjena sa natrijum hidroksidom (399.6 mL 2 M, 799.2 mmol) koji je naknadno dodat u toku 15 minuta što je dovelo do postepenog egzotermna na 27°C. Bistra svetlo ćilibarna reakciona smeša je zagrejana na temepraturu suda od 40°C u toku 30 minuta. Analiza LC/MS je ukazala na potpuno iskorišćenje polaznog materijala . Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se ukloni većina organske supstance. Preostala vodena suspenzija je dalje razblažena sa vodom (1000 mL). pH je zatim podešen na pH∼1 sa ledeno hladnim 2 M HCl rastvorom. Dovodeći do veoma guste suspenzije koja je ceđena pod vakuumom kroz Bihnerov levak od poroznog stakla. Filter kolač je ispran i zamenjen sa vodom (2 x 250 mL) i zatim je osušen pod sniženim pritiskom u toku 45 minuta. Materijal je rastvoren u dihlorometanu (1000 mL) i prenet u levak za odvajanje i razdeljen sa zasićenim natrijum hloridnim
2 2
rastvorom (250 mL). Organska supstanca je uklonjena i osušena preko natrijum sulfata (250 g) i zatim proceđena kroz Bihnerov levak od poroznog stakla. Bistar filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (143 g, 97%) ESI-MS m/z izrač. 359.10367, nađeno 360.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.97 minuta bela čvrsta supstanca. HPLC analiza je pokazala 97.12 površine % stvarni prinos : 0.9712 (143) = 138.9 g (96% prinos)
Rekristalizacija 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0687] 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (143 g, 397.4 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1000 mL) koji je dao bistat bledo žuti rastvor. Rastvor je filtriran pod vakuumom kroz Bihnerov levak sa Whatman-ovim papirom da se uklone bilo koje čvrste nečistoće. Bistar dihlorometanski rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se obezbedi bela čvrsta supstanca . Čvrsta supstanca je koncentrovana pod sniženim pritiskom iz toluena (1000 mL). Dobijena čvrsta supstanca je ponovo koncentrovana pod sniženim pritiskom iz toluena (1000 mL) koji obezbeđuje belu čvrstu supstancu. 3-grli balon sa okruglim dnom od 5000 mL je snabdeven sa mehaničkom mešalicom, grejnim omotačem, J-Kem temperaturnom sondom /kontrolerom, kapalicom, refluksnim kondenzatorom hlađenim vodom i uvodnikom/odvodnikom za azot. Sud je napunjen u atmosferi azota sa 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (143 g, 0.3974 mol) i toluenom (1430 mL) (10 mL/g) koji je dao belu suspenziju. Otpočelo je mešanje (spora rotacija) i temperatura suda je zagrejana do (110°C) refluksa koji je dao balgo mutni beldo žuti rastvor. Rastvor je održavan u refluksu u toku 15 minuta i zatim je dozvoljeno da se ohladi veoma polako na sobnu temperaturu. Postupak hlađenja od 110°C do sobne temperature je postignut u toku vremenskog perioda od 6 satu. Počelo je obrazovanje čvrste supstance kada je temepratura suda bila zabeležena na 90°C. Materijal je sakupljen vakuum filtracijom na Bihnerovom levku sa Whatman papirom. Filter kolač je ispran i zamenjen sa toluenom (125 mL) i zatim izvučen na Bihnerov levak u toku 1 sata da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (113 g, 79%) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.59 (s, 1H), 8.56 -8.33 (m, 2H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.82 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 1.47 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 0.95 -0.75 (m, 4H), 0.72 -0.58 (m, 2H), 0.60 -0.44 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.
359.10367, nađeno 360.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.98 minuta (113 g, 0.314 mol, 79% regeneracija) bele čvrste supstance. HPLC analiza je pokazala 99.45 površine%.
Korak 14: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0688]
[0689] 2-Hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (20 mg, 0.05559 mmol) i karbonil diimidazol (13.52 mg, 0.08338 mmol) su spojeni u THF (260 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku jedan sat. 1,3-Dimetilpirazol-4-sulfonamid (97.4 mg, 0.5559 mmol) je
2
dodat a zatim DBU (42.34 mg, 0.2781 mmol), i reakcija je mešana u toku dodatna tri sata. Reakciona smeša je razblažena sa 1 M limunskom kiselinom i esktrahovana dva puta sa etil acetatom. Spojene organska supstanca je isprana sa vodom i rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobio 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (28.74 mg, 100%) ESI-MS m/z izrač. 516.13464, nađeno 517.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.77 minuta kao bela čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 15: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0690]
[0691] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (28.74 mg, 0.05559 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (81.79 mg, 0.5465 mmol), molekulska sita od tri angstrema (1 sloj), i kalijum karbonat (150.1 mg, 1.086 mmol) su spojeni u DMSO (492.6 μL) i zagrejani na 165 °C u toku 16 sati. Sirova reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, proceđena i zatim je prečišćena direktno preparativnom hromatografijom sa reverznom fazom pomoću C18 kolone i postupkom HPLC 50-99 (acetonitril -(voda 5 mmol HCl)) u toku 15 minuta da bi se dobila bela čvrsta supstanca N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(2dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (13 mg, 39%) ESI-MS m/z izrač. 593.27844, nađeno 594.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.38 minuta.
Sinteza 6-[3-[(2,2-Difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje 24)
[0692]
2 4
Korak 1: terc-Butil 3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0693]
[0694] terc-Butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (1.00 g, 5.429 mmol), (2,2-difluoro-1-metilciklopropil)metanol (približno 729.3 mg, 5.972 mmol), i trifenilfosfin (približno 1.994 g, 1.761 mL, 7.601 mmol) su spojeni i rastvoreni u THF (10 mL). Dobijeni rastvor je ohlađen na 0 °C, i DIAD (približno 1.537 g, 1.472 mL, 7.601 mmol) je dodat u kapima. Reakciona smeša je omogućeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u preko noći.
[0695] Isparljive supstance su uparene pod sniženim pritiskom. Preostali ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL) i ispran sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (2350 mL) i rastvorom soli (23 50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa 0-25% EtOAc/heksan gradijentom na koloni od 80 grama silikagela. terc-Butil 3-[(2,2-difluoro-1-metilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat (1.27 g, 75%) je dobijen kao bistro bezbojno ulje . ESI-MS m/z izrač. 288.12854, nađeno 289.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.75 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.32 (dt, J = 10.8, 2.4 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.66 (dt, J = 11.4, 7.8 Hz, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.39 (dt, J = 10.2, 7.5 Hz, 1H), 1.30 (d, J = 2.3 Hz, 3H).
Korak 2: 3-[(2,2-Difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]-1H-pirazol
[0696]
[0697] terc-Butil 3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat (1.27 g, 4.405 mmol) je rastvoren u 1,2-dimetoksietanu (15.88 mL). Dodat je rastvor natrijum karbonata (približno 750.7 mg, 7.083 mmol) u vodi (4.762 mL) . Reakcioan fiola je zatvorena i zagrejana preko noći na 90 °C i zatim na 100 °C u toku jedan dan. Reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi i razblažena sa vodom (50 mL) i etil acetatom (50 mL). Organski sloj je izolovan, i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2350 mL). Spojene organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa 0-100% EtOAc/heksan gradijetnom na koloni od 80 grama silikagela. 3-[(2,2-Difluoro-1metilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol (490 mg, 59%) je dobijen kao bistro beldo žuto ulje . ESI-MS m/z izrač.
188.07613, nađeno 189.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.01 minuta.
Korak 3: Etil 2-hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0698]
2
[0699] 3-[(2,2-Difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]-1H-pirazol (490 mg, 2.604 mmol) je rastvoren u DMF (5 mL). Etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (približno 573.0 mg, 2.604 mmol) je dodat, a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (približno 58.42 mg, 0.5208 mmol) i fino sprašeni kalijum karbonat (približno 539.8 mg, 3.906 mmol). Reakciona smeša je omogućeno da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2350 mL). Spojeni organski slojevi su zatim isprani sa rastvorom soli (1375 mL), osušeni preko natrijum sulfata, proceđeni, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je izolovan hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa gradijentom 0-20% EtOAc/heksan na koloni od 40 grama silikagela. Etil 2-hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (797 mg, 82%) je dobijen kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (dd, J = 2.8, 0.9 Hz, 1H), 8.41 (dd, J = 8.4, 0.9 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 8.5, 0.9 Hz, 1H), 6.27 (dd, J = 2.9, 0.9 Hz, 1H), 4.44 -4.37 (m, 1H), 4.37 -4.31 (m, 2H), 4.17 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.67 (q, J = 8.9 Hz, 1H), 1.42 (q, J = 8.4 Hz, 1H), 1.38 -1.30 (m, 6H). ESI-MS m/z izrač.371.08484, nađeno 372.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.09 minuta.
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline
[0700]
[0701] Rastvor natrijum hidroksida (približno 428.8 mg, 10.72 mmol) u vodi (3.985 mL) je dodat u rastvor etil 2-hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (797 mg, 2.144 mmol) u izopropanolu (3.985 mL) mešanom na 90 °C. Reakciona smeša je omogućeno da smeša na 85 °C u toku 30 minuta. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL) i ekstrahovana sa vodenim NaOH (1 N, 2350 mL). Vodeni slojevi su spojeni , ohlađeni na 0 °C, i zakišeljeni do pH 1 uz dodavanje 6 N HCl. Čvrste supstance su sakupljene ceđenjem. Čvrste supstance dobijene iz vodenog sloja su rastvorene u EtOAc i dodate u organski sloj. Koji je zatim osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom.2-hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (950 mg, 129%) je dobijena kao bela čvrsta supstanca.<1H>NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 8.2, 1.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.37 (dt, J = 10.8, 2.3 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.64 (dd, J = 10.4, 7.9 Hz, 1H), 1.40 (q, J = 8.1 Hz, 1H), 1.33 (d, J = 2.1 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač.343.05353, nađeno 344.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.63 minuta.
Korak 5: 2-Hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0702]
2
[0703] Karbonil diimidazol (približno 28.31 mg, 0.1746 mmol) je dodat u rastvor 2-hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (50 mg, 0.1455 mmol) u THF (2 mL). Rastvor je dozvoljeno da se meša na sobnoj temperaturi u toku 1 sata.1,5-dimetilpirazol-4-sulfonamid (približno 33.15 mg, 0.1891 mmol) je dodat a zatim DBU (približno 26.58 mg, 26.11 μL, 0.1746 mmol). Krajnja reakciona smeša je zatim omogućeno da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Isparljive supstance su uparene . Preostali ostatak je razblažen sa etil acetatom (2 mL) i ispran sa vodenom limunskom kiselinom (1 M, 232 mL) i rastvorom soli (132 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen, i koncentrovan pod sniženim pritiskom . Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-Hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metilciklopropil)metoksi]pirazol1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (61 mg, 83.70%) je dobijen. ESI-MS m/z izrač.500.0845, nađeno 501.0 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.67 minuta.
Korak 6: 6-[3-[(2,2-Difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0704]
[0705] 2-Hloro-6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (61 mg, 0.1218 mmol) je rastvoren u DMSO (2 mL). (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (približno 54.69 mg, 0.3654 mmol) je dodat a zatim fino sprašeni kalijum karbonat (približno 101.0 mg, 0.7308 mmol). Reakciona fiola je zatvorena i omogućeno je da se meša preko noći na 130 °C. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL) i isprana sa vodenom limunskom kiselinom (1 N, 2350 mL) i rastvorom soli (1350 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan pod snižeim pritiskom. Proizvod je izolovan hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem sa gradijentom 0-5% MeOH/DCM na koloni od 24 grama silikagela da bi se dobio 6-[3-[(2,2-difluoro-1-metil-ciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]-N-(1,5-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (20.3 mg, 28.85%) ESI-MS m/z izrač.577.2283, nađeno 578.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.99 minuta.
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 45)
[0706]
2
Korak 1: Dimetil 2-(trifluorometil)propandioat
[0707]
[0708] 2-[difluoro(metoksi)metil]-1,1,1,3,3,3-heksafluoro-propan (4.64 g, 19.99 mmol) je rastvoren u anhidrovanom DMF (4 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu. Trietilamin (5.6 mL, 40.18 mmol) je dodat u kapima špricom , a zatim u kapima dodat je metanol (4 mL, 98.75 mmol) i nastavljeno je mešanje na 0 °C u toku 90 minuta. Reakciona smeša je sipana u levak za odvajanje sa 70 mL vode, i dobijeni organski sloj je odvojen. Vodeni sloj je dalje ekstrahovan 2x 40 mL dietil etrom, i organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sumporna kiselina (0.5 mL, 9.380 mmol) je zatim dodata u dobijeno ulje, i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Reakciona smeša je zatim sipana u 40 mL ohlađene vode i ekstrahovana sa 3x20mL dietil etra. Spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Sirovi materijal je zatim prečišećn hromatografijom na silikagelu pomoću gradijenta 0-90% etil acetata u heksanima da bi se dobilo bezbojno ulje, sa nešto preostalog rastvarača, ali je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. dimetil 2-(trifluorometil)propandioat (1.79 g, 45%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5.39 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.78 (s, 6H).
Korak 2: Dimetil 2-metil-2-(trifluorometil)propandioat
2
[0710] Dimetil 2-(trifluorometil)propandioat (1.79 g, 8.945 mmol) i jodometan (640 μL, 10.28 mmol) su spojeni u diglimu (18 mL), i cezijum fluorid (4.1 g, 26.99 mmol) je dodat u jednoj porciji. Reakciona smeša je zatim mešana u toku 16 sati na sobnoj temperaturi. Posle ovog vremena reakciona smeša je razblažena sa 100 mL vode i 100 mL dietil etra, i organska supstanca je odvojena. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodanih 50 mL dietil etra i organska supstanca je spojena i isprana sa 50 mL vode, zatim sa rastvorom soli, i osušena preko natrijum sulfata. Posle ceđenja, reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobilo 6 g sirovog ulja. Sirovi materijal je podvrgnut hromatografiji na koloni silikagela korišćenjem gradijenta 0-100% etil acetata u heksanima. Frakcije su spojene i koncentrovane. Dobijeno ulje je zatim rastvoreno sa 250 mL dietil etra i isprano 10x50mL vodom i 1x50 mL rastvorom soli da se ukloni preostao diglim posle hromatografije. Organske supstance su koncentrovane i osušene preko natrijum sulfata da bi se dobio blago žuto ulje (preostalo je nešto zaostalih rastvarača). Materijal je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. dimetil 2-metil-2-(trifluorometil)propandioat(880 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 3.79 (s, 6H), 1.65 (q, J = 0.8 Hz, 3H).
Korak 3: 2-metil-2-(trifluorometil)propan-1,3-diol
[0711]
[0712] Dimetil 2-metil-2-(trifluorometil)propandioat (880 mg, 4.109 mmol), rastvoren u anhidrovanom THF (8.218 mL), je dodat u kapima u rastvor litijum aluminijum hidrida (8 mL 2 M, 16.00 mmol) (u THF) na 0 °C. Posle 20 minuta, reakciona smeša je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu , i mešana je dodatnih 5 sati. Reakciona smeša je zatim ponovo ohlađena na 0 °C, i pažljivo ostavljena sa 2 mL vode, i 2 mL 1M NaOH. Posle mešanja u toku 20 minuta na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je razblažena sa dietil etrom, proceđena kroz celit, zatim potpuno osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Ovaj sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silikagela pomoću gradijenta 0-100% etil acetat u heksanima, dajući bezbojnu čvrstu supstancu. 2-metil-2-(trifluorometil)propan-1,3-diol (280 mg, 43%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 4.87 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.54 -3.43 (m, 4H), 0.97 (d, J = 0.7 Hz, 3H).
Korak 4: terc-butil 3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat
[0713]
2
[0714] 2-Metil-2-(trifluorometil)propan-1,3-diol (278 mg, 1.758 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (324 mg, 1.759 mmol), i PPh3(507 mg, 1.933 mmol) su rastvoreni u THF (11.72 mL), i ohlađeni na 0 °C u ledenom kupatilu. DIAD (358 mL, 1.848 mmol) je dodat u kapima špricom, i reakciona smeša je omogućeno da se polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je u toku 16 h. UPLC/LCMS je pokazao veoma nisko pretvaranje u željeni proizvod, i reakciona temperatura je povećana na 60 °C. Povećana je konverzija u proizvod, zatim je staložena posle 7 sati. Reakcija je uklonjena sa toplote, i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Preostalo ulje je zatim rastvoreno u 60 mL etil acetata, i isprano sa 50 mL U NaOH. Vodeni sloj je ekstrahovan 2x40mL etil acetata, i spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sirovi materijal je zatim prečišćen hromatografijom na silikagelu , korišćenjem 0-100% gradijenta etil acetata u heksanima. Čiste frakcije su spojene i koncentrovane da bi se dobio terc-butil 3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat (115 mg, 20%) ESI-MS m/z izrač.324.1297, nađeno 325.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.58 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.11 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.22 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.34 -4.19 (m, 2H), 3.65 (dd, J = 11.2, 5.7 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 11.2, 5.6 Hz, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.14 (s, 3H).
Korak 5: terc-butil 3-[2-[[terc-butil(difenil)silyl]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat
[0715]
[0716] terc-Butil 3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat (113 mg, 0.3484 mmol) i imidazol (47 mg, 0.6904 mmol) su rastvoreni u DMF (696.8 mL) i ohlađeni u ledenom kupatilu. terc-Butilhloro-difenilsilan (110 μL, 0.4230 mmol) je zatim dodat u jednoj porciji, i posle 15 minuta ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je omogućeno da se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. 2 mL zasićenog vodenog amonijum hlorida je dodato i reakciona smeša je mešana u toku 10 minuta, zatim je dalje razblažena sa dietil etrom (50 mL) i dodatnim zasićenim amonijum hloridom (10mL) i vodom (30mL). Slojevi su odvojeni , i vodeni deo je ekstrahovan dva dodatna puta sa etrom, zatim spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana. Dobijeno ulje je prečišćeno hromatografijom na silikagelu pomoću 0-20% gradienta etil acetata u heksanima, da bi se dobilo bezbojno ulje, (neidentifikovana nečistoća prisutna ali korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja) terc-butil 3-[2-[[tercbutil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat (195 mg, 99%). ESI-MS m/z izrač.562.2475, nađeno 563.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.97 minuta
Korak 6: terc-butil-difenil-[3,3,3-trifluoro-2-metil-2-(1H-pirazol-3-iloksimetil)propoksi]silan
[0717]
21
[0718] terc-Butil 3-[2-[[terc-butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-karboksilat (195 mg, 0.3465 mmol) je rastvoren u DCM (4.062 mL) sa TFA (350 μL, 4.543 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 60 minuta. Heksani (1 mL) su dodati, i reakcija je uparena. Dobijeno ulje je parcijalno razdeljeno između etil acetata (10 mL) i zasićenog natrijum bikarbonatnog rastvora (10 mL). Organska supstanca je odvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan dodatnim 2x10mL etil acetatom. Spojene organska supstanca je isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i uparena da bi se dobilo bezbojno ulje (sa prisutnom neindetifikovaninom nečistoćom, ali korišćenom u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja) terc-butil-difenil-[3,3,3-trifluoro-2-metil-2-(1H-pirazol-3-iyloksimetil)propoksi]silan (159 mg, 99%) ESI-MS m/z izrač.
462.19504, nađeno 463.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.86 minuta.
Korak 7: terc-Butil 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silyl]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metilpropoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat
[0719]
[0720] Fiola prečišćena sa azotom je napunjena sa terc-butil-difenil-[3,3,3-trifluoro-2-metil-2-(1H-pirazol-3-iloksimetil)propoksi]silanom (159 mg, 0.3437 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (110 mg, 0.4434 mmol), K2CO3(76 mg, 0.5499 mmol) (sveže smaleven u avanu) i anhidrovanim DMF (572.8 μL). DABCO (7 mg, 0.06240 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u toku 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL) i dve faze su odvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 mL). Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli i osušeni preko natrijum sulfata, i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom . Materijal je podvrgnut fleš hroamtografiji na silikagelu pomoću gradijenta etil acetata (0-5%) u heksanima. Čiste frakcije su spojene i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metilpropoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (170 mg, 73%) ESI-MS m/z izrač.673.23505, nađeno 674.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.87 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.46 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (dt, J = 8.1, 1.8 Hz, 4H), 7.50 -7.40 (m, 6H), 6.25 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H), 1.23 (s, 3H), 0.96 (s, 9H).
Korak 8: 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina
[0721]
[0722] terc-butil 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (170 mg, 0.2521 mmol) i TFA (450 mL, 5.841 mmol) su spojeni u dihlorometanu (1.703 mL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 4 sata. Reakcija je uparena. Heksani su dodati i smeša je ponovo uparena da bi se dobila bela čvrsta supstanca 6-[3-[2-[[tercbutil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilne kiseline (117 mg, 75%) ESI-MS m/z izrač. 617.1724, nađeno 618.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.63 minuta.
Korak 9: 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silyl]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid
[0723]
[0724] 6-[3-[2-[[terc-butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloropiridin-3-karboksilna kiselina (40 mg, 0.06471 mmol) i CDI (14 mg, 0.08634 mmol) su spojeni u THF (200 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata.1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (14 mg, 0.07990 mmol) je dodat a zatim DBU (13 μL, 0.08693 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL 1 M limunske kiseline, i ekstrahovana sa 3x 10 mL etil acetata. Spojena organska supstanca je isprana sa vodom, rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je korišćena u sedećem koraku bez daljeg prečišćavanja (zaostalo je nešto polaznog materijala). 6-[3-[2-[[tercbutil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (48 mg, 96%) ESI-MS m/z izrač. 774.2034, nađeno 775.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.6 minuta
Korak 10: N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0725]
[0726] 6-[3-[2-[[terc-Butil(difenil)silil]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (48 mg, 0.06191 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (56 mg, 0.3742 mmol), i kalijum karbonat (103 mg, 0.7453 mmol) su spojeni u DMSO (154.8 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 9 sati. Reakcija je ohlađena na sobnoj temperaturi i razblaena sa 15 mL 1M limunske kiseline i 20 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 15 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silikagelu (eluiranjem sa 0-10% metanolom u DCM), i deo proizvoda koji je destilovan pod reakcionim uslovima je izolovan . Ovaj materijal je dalje prečišćan sa prep HPLC (1-99ACN) HCl modifikatorom, da bi se dobio, posle ekstrakcije sa etil acetatom i koncentrovan pod sniženim pritiskom , N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-[3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1 il]piridin-3-karboksamid (8 mg, 21%) ESI-MS m/z izrač.613.22943, nađeno 614.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 1.81 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.36 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 2.71 -2.62 (m, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.27 -5.18 (m, 1H), 4.38 -4.25 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.67 (dd, J = 11.1, 5.7 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 11.2, 5.6 Hz, 1H), 2.41 (s, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.17 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 12.0, 5.6 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 11.3 Hz, 6H), 1.43 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.16 (s, 3H), 0.81 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-2-((S)-2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1-il-3,3-d2)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (Jedinjenje 4)
[0727]
[0728] 6-[3-[2-[[terc-Butil(difenil)silyl]oksimetil]-3,3,3-trifluoro-2-metil-propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-piridin-3-karboksamid (900 mg, 1.16 mmol), (4S)-3,3-dideuterio-2,2-dimetil-4-(trideuteriometil)pirolidin (Hidrohloridna so) (1.8 g, 12 mmol), i kalijum karbonat (3.2 g, 23 mmol) su spojeni u DMSO (3 mL) i dimetoksietanu (0.5 mL) i zagrejani na 130 °C u toku 2 dana. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa 20 mL 1M limunske kiseline i 40 mL etil acetata. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta sa 50 mL etil acetata. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silikagelu da bi se dobio slobodan
21
alkohol N-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-2-((S)-2,2-dimetil-4-(metil-d3)pirolidin-1il-3,3-d2)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinamid (0.7 g, 98%) ESI-MS m/z izrač.618.26, nađeno 619.7 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.06 minuta (17 minute run).
Sinteza N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje 52)
[0729]
Koraci 1-3: terc-Butil 3-(7-biciklo[2.2.1]hept-2-enilmetoksi)pirazol-1karboksilat
[0730]
Korak 1: biciklo[2.2.1]hept-2-en-7-karbaldehid
7-bromobiciklo[2.2.1]hept-2-en (400 mg, 2.311 mmol) i magnezijum (67 mg, 2.757 mmol) (zagrebane površine) su spojene u fiolu u anhidrovanom dietil etru (4 mL), i zagrevane na 40 °C u toku 2 sata, za koje vreme je magnezijum uglavnom, ali ne potpuno iskorišćen . Reakciona smeša je zatim ohlađena na 0 °C, i DMF (220 μL, 2.841 mmol) je dodat u kapima, što je dovelo do obrazovanja čvrstog belog taloga . Reakciona smeša je ponovo vraćena na 40 °C u toku dodatna 2 sata, zatim ohlađena na sobnu temepraturu i zaustavljena sa 3 mL 0.1 M HCl. Posle razblaživanja sa 25 mL vode i 25 mL dietil etra slojevi su odvojeni , i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnih 3x 20 mL dietil etra. Spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli i osušena preko natrijum sulfata, zatim parcijalno koncentrovana na zapreminu ispod 1 mL, zatim korišćena u sledećem koraku bez izolovanja.
Korak 2: 7-biciklo[2.2.1]hept-2-enilmetanol
Smeša iz prethodnog koraka je razblažena sa metanolom (3 mL) i ohlađena na 0 °C u ledenom kupatilu. Natrijum borohidrid (262 mg, 6.925 mmol) je dodat, i reakciona smeša je mešana u toku 2 sata, za koje vreme se led uglavnom otopio. Reakciona smeša je zaustavljena sa 3 mL zasićenog amonijum hlorida, zatim razblažena sa 20 mL vode id 20 mL etil acetata. Organske supstance su odvojene, i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim 4x 20 mL etil acetata. Spojena organska supstanca je isprana sa rastvorom soli i osušena preko natrijum sulfata, zatim koncentrovana do ulja. Dobijena čvrsta supstanca je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 3:
Sirovi materijal iz koraka 2 je spojen sa PPh3(606 mg, 2.310 mmol), i terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilatom (426 mg, 2.313 mmol) u THF (6 mL), zatim ohlađen na 0 °C, kada je DIAD (448 μL, 2.313 mmol) dodat u kapima. Posle 30 minuta reakciona smeša je omogućeno da se zagreje na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Reakciona temperatura je zatim povećana na 50 °C u toku 1 sat, ali je ubrzo postala neuredna i vraćena je na sobnu temperaturu u toku dodatnih 16 sati. Reakciona smeša je zatim razblažena sa 100 mL etil acetata, i isprana sa vodenim 50 mL vodenih 1M NaOH, i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnih 50 mL etil acetata. Spojena organska supstanca je zatim isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni materijal je zatim prečišćen sa fleš hromatografijom na silikagelu da bi se dobio terc-butil 3-(7-biciklo[2.2.1]hept-2-enilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (20 mg, 2%) ESI-MS m/z izrač.290.16306, nađeno 291.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.74 minuta sa zanačajnim neidentifikovanim nečistoćama.
Korak 4: terc-butil 3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-karboksilat
[0731]
[0732] terc-butil 3-(7-biciklo[2.2.1]hept-2-enilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (20 mg, 0.04959 mmol) je spojen sa 10% paladijumom na ugljeniku (20 mg, 0.01879 mmol) u etanolu (500 μL) i vodonikov gas je uvođen u mehurićima kroz reakcionu smešu iz balona u toku 15 minuta, i reakcija je mešana još 6 sati sa balonom vodonika na mestu gornjeg nivoa rastvarača . Reakciona smeša je zatim proceđena i koncentrovana da bi se dobio terc-butil 3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (17 mg, 84%) ESI-MS m/z izrač.292.17868, nađeno 293.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.83 minuta.
Korak 5: 3-(norbornan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol
21
[0734] terc-butil 3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-karboksilat (17 mg, 0.0412 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1 mL) sa TFA (približno 84.81 mg, 57.30 μL, 0.7438 mmol), i mešan je u toku 1 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Heksani su dodati i reakciona smeša je ponovo koncentrovana da bi se dobio 3-(norbornan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol (11 mg, 83%) ESI-MS m/z izrač.192.12627, nađeno 193.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.56 minuta
Korak 6: terc-butil 2-hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0735]
[0736] Reakciona fiola je napunjena pod azotom sa terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (14 mg, 0.05643 mmol), 3-(norbornan-7-ilmetoksi)-1H-pirazolom (11 mg, 0.04119 mmol), i K2CO3(10 mg, 0.07236 mmol) (sveže smaleven u avanu) i anhidrovanim DMF (200 μL). DABCO (1 mg, 0.008915 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u azotu u toku 8 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (10 mL) i voda (10 mL) i dve faze su odvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 10 mL). Spojeni ekstrakti su isprani sa rastvorom soli, osušeni preko natrijum sulfata, i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Materijal je podvrgnut fleš hromatografiji na silikagelu pomoću gradijenta etil acetata (0 to 20%) u heksanima. Čiste frakcije su spojene i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (9 mg, 39%) ESI-MS m/z izrač. 403.16626, nađeno 404.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.95 minuta.
Korak 7: 2-Hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0737]
21
[0738] terc-butil 2-hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (9 mg, 0.02228 mmol) i TFA (30 μL, 0.3894 mmol) su spojeni u dihlorometanu (90.00 μL) i zagrejani na 40 °C u toku 2 h. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, zatim su dodati heksani i smeša je uparena ponovo da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (7 mg, 90%) ESI-MS m/z izrač. 347.10367, nađeno 348.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.76 minuta.
Korak 8: 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0739]
[0740] 2-Hloro-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (7 mg, 0.02013 mmol) i CDI (5 mg, 0.03084 mmol) su spojeni u THF (100 μL) i mešani na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. 1,3-dimetilpirazol-4-sulfonamid (54.233 mg, 0.3095 mmol) je dodat a zatim DBU (8 μL, 0.05350 mmol) i reakcija je mešana u toku dodatnih 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL 1 M limunske kiseline, i ekstrahovana sa 3x 10 mL etil acetata. Spojene organska supstanca je isprana sa vodom, rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 2-hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (10 mg, 98%) ESI-MS m/z izrač.504.13464, nađeno 505.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.74 minuta.
Korak 9: N-(1,3-Dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetil-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid
[0741]
[0742] 2-Hloro-N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (10 mg, 0.01980 mmol), (4S)-2,2,4-trimetilpirolidin (hidrohloridna so) (15 mg, 0.1002 mmol), i kalijum karbonat (27 mg, 0.1954 mmol) su spojeni u DMSO (150 μL) i zagrejani na 130 °C u toku 16 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa 15 mL etil acetata i 15 mL 1M limunske kiseline. Vodeni i organski slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan dva dodatna puta
21
sa 15 mL etil acetatom. Organska supstanca je spojena, isprana sa rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Dobijena sirova supstanca je prečišćena sa prep HPLC (1-99ACN) sa HCl modifikatorom, 30 minuta ciklus. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i osušene pod vakuumom da bi se dobio N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(norbornan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (2 mg, 17%) ESI-MS m/z izrač. 581.27844, nađeno 582.5 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.32 minuta.
Sinteza (7S)-6-((1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)sulfonil)-7,9,9-trimetil-2-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il)-6a,7,8,9-tetrahidropirido[3,2-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-5(6H)-ona (Jedinjenje 36)
[0743]
[0744] N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (50.5 mg, 0.08450 mmol), NaOAc (13.86 mg, 0.1690 mmol), voda (15.22 mg, 15.22 μL, 0.8450 mmol), i [Ir{dF(CF3)ppy}2(dtbpy)]PF6 (94.80 mg, 0.08450 mmol) su spojeni u DMA (880.7 μL) i reakciona smeša je smeštena do 23 WCFL svetlosnog izvora u toku 1.5 h. Reakcija je injektovana direktno u kolonu od silikagela bez prečišćavanja. Sirova smeša je prečišćena hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-100% etil acetatom u heksanima. Proizvod je kontaminiran sa DMA tako da je proizvod ponovo prečišćen hromatografijom na silikagelu eluiranjem sa 0-100% etil acetatom u heksanima da bi se dobio C26H32F3N7O4S (10.4 mg, 21%) ESI-MS m/z izrač.595.2189, nađeno 596.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.4 minuta.
Preparati disperzija sušenih raspršivanjem (eng. Spray Dried Dispersions SDDs) jedinjenja 1
[0745] Disperzija sušena raspršivanjem jedinjenja 1 je pripremljena korišćenjem Buchi Mini sušilice sa raspršivanjem B290. HPMCAS-HG (6.0 grama) je rastvoreno u 200 mL MeOH (metanol)/DCM (dihlorometan) (1/3), i jedinjenje 1 (15.0 grama) je dodato i mešano u toku 30 obrazujući bistar rastvor. Dobijeni rastvor sušen raspršivanjem pod sledećim uslovima koji su dali 50 mas% jedinjenja 1/50 mas% HPMCAS-HG disperzije sušene raspršivanjem (Prinos: 70%, Solid load: 13%).
21
[0746] Dodatni SDDs jedinjenja 1 je prirpemljen kao što sledi: 400mg jedinjenja 1 je dodato u 100mg jednog od sledećih polimera: HPMC E15, HPC, HPMCAS-HF, i PVP VA64. Svaka od čestiri dobijene smeše je rastvorena u 40mL t-butanola mešanjem preko noći i rastvori su zatim brzo zamrznuti u kupatilu aceton/suvi led. Zamrznuti uzorci su bili liofilizirani (0.01mbar vakum, -55C kolektor) u toku 72 sata. Liofilizovnai uzorci su određeni kao amorfni sa XRPD.
Testovi za detektovanje i merenje F508del-CFTR modulatorski osobina jedinjenja
Optički postupci membranskog potencija za testiranje osobina F508del-CFTR modulatora
[0747] Test koristi fluorescentnu naposku osetljivu boju za merenje promena u membranskom potencijalu korišćenjem fluorescentog čitača ploča (npr., FLIPR III, Molecular Devices, Inc.) kao očitavanja za povećanje funkcionalnog F508del u NIH 3T3 ćelijama. Pokretačka sila za odgovor je stvaranje gradijenta hloridnog jona u konjukciji sa aktivacijom kanala i konkurentim tretmanom sa jedinjenjem u jednom koraku dodavanja tečnosti pošto su ćelije prethodno napunjene sa bojom osetljivom na napon.
A1. Identifikacija F508del-CFTR modulatora
[0748] Da bi se identifikovali modulatori F508del, razvijen je format HTS testa zasnovanog na fluorescenciji. Ovaj HTS test koristi fluorescentne boje osetljive na napon da bi se merile promene u membranskom potencijalu na FLIPR III kao merenja za povećano propuštanje (provodljivost) F508del NIH 3T3 ćelija. Pokretačka sila za odgovor je nastanak hloridnog gradijenta u konjukciji sa aktivacijom kanala i konkurento sa tretmanom jedinjenja jednim korakom dodavanja tečnosti pošto su ćelije prethodno napunjene bojom koja je osetljiva na napon. Podaci za jedinjenja 1-65 koja su bila dobijena korišćenjem ovde opisanih testova su ukratko prikazani dole u Tabeli 9. Na primer, korišćenjem ovog postupka, jedinjenje 1 imalo je EC50manji od 3 μM i % efikasnosti ≥ 100% u odnosu na jedinjenje II.
Rastvori
[0749] Rastvor za kupatilo #1: (u mM) NaCl 160, KCl 4.5, CaCl22, MgCl21, HEPES 10, pH 7.4 sa NaOH, Glukoza 10.
[0750] Rastvor za kupatilo bez hlorida: Hloridne soli u rastvoru za kupatilo #1 (gore) su zamenjenje sa glukonatnim solima.
Ćelijska kultura
[0751] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimuju F508del su korišćeni za optička merenja membranskog potencijala. Ćelije su održavana na 37 °C u 5% CO2i 90 % vlažnosti u Dulbekovom modifikovanom Eagle medijumu obogaćenom sa 2 mM glutamina, 10 % fetusnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, i 25 mM HEPES u 175 cm<2>balonima za kulture. Za sve optičke testove, ćelije su zasejane pri 12,000 ćelija/bunaru u pločama prevučenim sa matrigelom sa 384-bunarčića i kultivisane u toku 18-24 h na 37 °C za test sa potencijatorom. Za korekcioni test, ćelije su kultivisane na 37 °C sa i bez jedinjenja u toku 18 -24 sati.
[0752] Elektrofiziološki testovi za testiranje osobina F508del modulacije jedinjenja.
21
Koristi se test u komori
[0753] Eksperimenti u Ussing komori su izvedeni na polarizovanim epitelnim ćelijama disajnih puteva koje eksprimuju F508del da bi se dalje karakterisali F508del modulatori identifikovani u optičkim testovima. Ne-CF i CF epitel disajnih puteva je izolovan iz bronhijalnog tkiva, kultivisan kao što je prethodno opisano (Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra-Moran, O. (1998) In Vitro Cell. Dev. Biol.34, 478-481), i nanet na Costar® Snapwell™ filtere koji su prethodno obloženi sa NIH3T3-kondicioniranim medijumom. Posle četiri dana apikalni medijum je uklonjen i ćelije su gajene na dodirnoj površini tečnosti i vode u toku >14 dana pre upotrebe. Ovo je dovelo do monosloja potpuno diferenciranih stubastih ćelija sa obrazovanim cilijama, karakteristikama koje su karakteristične za epitel vazdušnih puteva. Ne-CF HBE su izolovane od nepušača koji nemaju nikakvu poznatu bolest pluća. CF-HBE su bile izolovane od pacijentata homozigotnih za F508del ili jedinjenja heterozigotana za F508del sa različitom bolesti koja izaziva mutacije na drugom alelu.
[0754] HBE gajen na Costar® Snapwell™ umetcima za ćelijske kulture su montirani u Ussing komoru (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA), i meren je transepitelijalni otpor i struja kratkoj spoja u prisustvu bazolateralnog do apikalnog Cl-gradijenta (ISC) pomoću sistema nametanja voltaže na deliću membrane (eng. voltage-clamp ) (Department of Bioengineering, University of Iowa, IA). Ukratko, HBE su ispitivani pod uslovima snimanja nametanja voltaže na deliću membrane (Vhold= 0 mV) na 37 °C. Bazolateralni rastvor je sadržao (in mM) 145 NaCl, 0.83 K2HPO4, 3.3 KH2PO4, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 Glukoza, 10 HEPES (pH podešen na 7.35 sa NaOH) i apikalni rastvor je sadržao (in mM) 145 NaGlukonat, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 glukoza, 10 HEPES (pH podešen na 7.35 sa NaOH).
A2. Identifikacija F508del-CFTR modulatora
[0755] Uobičajeni protokol koristi bazolateralni do apikalni membranski Cl-koncentracioni gradijent. Da bi se podesio ovaj gradijent, normalne alke su korišćeni na bazolateralnoj membrani, dok apikalni NaCl je zamenjen sa ekvimolarnim natrijum glukonatom (titriranim do pH 7.4 sa NaOH) da bi se dobio veliki Cl-koncentracioni gradijent duž epitelijuma. Modulatori su dodati ili na bazolateralnu stranu 18 -24 pre testa ili sa apikalne strane u toku testa. Forskolin (10 mM) je dodat na apikalnu stranu u toku testa da se stimuliše CFTR-posredovani Cl-transport.
Snimanja nametanjem voltaže na delić membrane
[0756] Ukupna Cl-struja u F508del-NIH3T3 ćelijama je praćena pomoću konfiguracije snimanja perforiranog delića membrane kao što je prethodno opisano (Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15-26). Snimanja nametanjem voltaže na delić membrane su izvedena na 22 °C korišćenjem Axopatch 200B amplifikatora nametanja voltaže na delić membrane (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). Rastvor u pipeti je sadržao (u mM) 150 N-metil-D-glukamin (NMDG)-Cl, 2 MgCl2, 2 CaCl2, 10 EGTA, 10 HEPES, i 240 mg/mL amfotericina-B (pH podešen na 7.35 sa HCl). Ekstracelularni medijum je sadržao (u mM) 150 NMDG-Cl, 2 MgCl2, 2 CaCl2, 10 HEPES (pH podešen na 7.35 sa HCl). Stvaranje pulsa, skupljanje podataka, i analiza su izvedene korišćenjem PC snabdevenog sa Digidata 1320 A/D interfejsom zajesno sa Clampex 8 (Axon Instruments Inc.). Da bi aktivirali F508del, 10 mM forskolin i 20 mM genistein su dodati u kupatilo i odnos struje i napona je kontrolisan svakih 30 s.
A3. Identifikacija F508del-CFTR modulatora
22
[0757] Sposobnost F508del-CFTR modulatora da poveća makroskopsku F508del Cl-struju (IF508del) u NIH3T3 ćelijama koje stabilno eksprimuju F508del je takođe ispitivana korišćenjem tehnika snimanja sa perforiranim delićem membrane. Identifikovani modulatori iz optičkih testova su izazvali dozno zavistan porast u IΔF508sa sličnom jačinom i efikasnošću koja je primećena u optičkim testovima .
Ćelijska kultura
[0758] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimuju F508del su korišćeni za snimanja celih ćelija. Ćelije su održavane na 37 °C u 5% CO2i 90 % vlažnosti u Dulbekovom modifikovanom Eagle medijum obogaćenom sa 2 mM glutaminom, 10 % fentusnim goveđim serumom, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, i 25 mM HEPES u balonu za kulture od 175 cm<2>. Za snimanje celih ćelija, 2,500 -5,000 ćelija je zasejano na poli-L-lizin-obložene staklene pokrivke i kultivisano u toku 18 -24 h u prisustvu ili odsustvu modulatora 37 °C.
Snimanja pojedinačnog kanala
[0759] Aktivnost provođenja F508del-CFTR eksprimovana u NIH3T3 ćelijama posle tretmana sa modulatorom je primećena korišćenjem snimanja isečenih delića prevrnute membrane kako je prethodno opisano (Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526 -528) pomoću Axopatch 200B amplifikatora nametanja voltaže na delić membrane (Axon Instruments Inc.). Pipeta je sadržala (u mM): 150 NMDG, 150 aspartanska kiselina, 5 CaCl2, 2 MgCl2, i 10 HEPES (pH podešeno na 7.35 sa Tris bazom). Kupatilo je sadržalo (u mM): 150 NMDG-Cl, 2 MgCl2, 5 EGTA, 10 TES, i 14 Tris bazu (pH podešeno na 7.35 sa HCl). Posle. isecanja, oba dt-i F508del su aktivirani dodavanjem 1 mM Mg-ATP, 75 nM katalitičke podjedinice cAMP-zavisne protein kinaze(PKA; Promega Corp. Madison, WI), i 10 mM NaF za inhibiciju protein fosfataze, što sprečava trenutni pregled. Potencijal pipete je održavana na 80 mV. Aktivnost kanala je analizirana iz membranskih delića koji sadrže ≤ 2 aktivna kanala. Maksimalni broj simultanih otvaranja određen brojem aktivnih kanala u toku eksperimenta. Da bi se odredila amplituda stuje jednog kanala, podaci su snimani od 120 s F508del aktivitnost je filtrirana "van linije" na 100 Hz i zatim korišćena da se konstruišu histogrami sa svim tačkama koji su uklapani sa multigausnim funkcijama pomoću Bio-Patch Analysis softver (Bio-Logic Comp. France). Ukupna mikroskopska struja i verovatnoća otvaranje (Po) je određena iz 120 s aktivnosti kanala. Poje određen korišćenjem Bio-Patch softvera ili iz odnosa Po= I/i(N), gde I = srednja vrednost struje, i = amplituda struje jednog kanala, i N = broja aktivnih kanala u deliću.
Ćelijska kultura
[0760] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimuju F508del su korišćeni za snimanja nametanja voltaže na isečene delove membrane . Ćelije su održavane na 37 °C u 5% CO2i 90 % vlažnosti u Dulbekovom modifikovanom Eagle medijumu obogaćenom sa 2 mM glutamina, 10 % fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, i 25 mM HEPES u balonu za kulture od 175 cm<2>. Za snimanja pojedinačnih kanala, zasejano je 2,500 -5,000 ćelija na poli-L-lizin-obložene staklene pokrivke i kultivisano u toku 18 -24 h u prisustvu ili odsustvu modulatora na 37 °C.
B. Hromatografsko određivanje testa humanog albumina u serumu (HSA)
[0761] Hromatografsko određivanje vrednosti humanog albumina(HSA) u serumu je izvedeno sa UPLC-MS sistemom pomoću ChiralPak® HSA kolone (p/n: 58469AST) iz Sigma Aldrich. Mobilna faza A se sastojala od 50 mM pufera amonijum acetata u vodi podešenom na pH=7.4, i mobilnom faza B je bila 2-propanol. Deo sa kolonom je održavan na konstantnoj temperaturi od 30°C. Određivanje retencionog vreme na HSA koloni je izvedeno injektovanjem 3 mL 0.5 mM jedinjenja (u DMSO) korišćenjem linearnog gradijenta sa 0% -30% B u 2.5 minuta, a zatim održavana na 30 %B u toku 2 minuta, i krajnji korak uravnotežavaja od 30% -0% B u 1.5 minuta, za ukupno vreme ciklusa od 6 minuta. Brzina protoka je održavana konstantnom kroz gradijenat i podešena na 1.8 mL/min. Retenciono vreme jedinjenja na HSA koloni je pretvoreno u %HSA vrednosti prema ranije objavljenom protokolu (Valko, et. al, 2003) koji dovode u korelaciju retenciona vremena na koloni sa standardnim vrenostima vezivanja proteina plazme (PPB) dobijenim iz eksperimenata dijalize. HSA podaci za izvesna jedinjenja su ukratko dati dole u tabeli 9.
[0762] Valko, K., Nunhuck, S., Bevan, C., Abraham, M. H., Reynolds, D. P. Fast Gradient HPLC Method to Determine Compoudns Binding to Human Serum Albumin. Relationships with Octanol/Water and Immobilized Artificial Membrane Lipophilicity. J. of Pharm. Sci.2003, 92, 2236-2248.
C. Eksperimentalni protokol za PK ispitivanjt IV i PO pacova
[0763] Testirano jedinjenje je davano muškim Sprague-Dawley pacovima kao pojedinačana nominalna intravenska doza od 3.0 mg/kg kao rastvor u 10% NMP, 10% solutolu, 15% EtOH, 35% PEG400 i 30% D5W. Testirana jedinjenja su takođe davana muškim Sprague-Dawley pacovima kao pojedinačna nominalna oralna doza 3 mg/kg kao rastvor u 5% NMP, 30% PEG400, 10% TPGS, 5% PVP-K30 at 5 mL/kg doznoj zapremini. Analiza preparata plazme i doze je izvedena pomoću LC/MS/MS.
[0764] Profili koncentracije u plazmi i vremena testiranih jedinjenja na Sprague-Dawley pacovima u vremenima uzorkovanja prema rasporedu (nominalna) su analizirani sa farmakokinetičkim postupcima van odeljenja pomoću PK funkcija u okviru Watson LIMS softvera, Version 7.4.2 (Thermo Scientific Inc, Waltham, MA). AUC vrednosti su izračunavane pomoću linearnog trapezoidnog pravila.
D. Eksperimentalni protokol za PXR test
[0765] Sklonost ka PXR posredovanoj CYP3A4 indukciji je procenjena korišćenjem DPX-2 ćelijske linije in vitro. Ova ćelijska linija, koja je bila licencirana od Puracyp Inc. potiče od HepG2 ćelija i stabilno je transfekovana sa genima koji kodiraju humani PXR kao i modifikatorima reporter luciferaze vezanim za region CYP3A4 promotera i povezanim distalnim i proksimalnim pospešivačima.
[0766] Testovi su izvođeni u formatu 384 bunarčića i svaki testirani proizvod je davan u 11 doza u opsegu od 0.1 do 60 μM. Dana 1, DPX-2 ćelije koje su prethodno razvijene u kući i otpopljene i zasejane na ploče za ćelijske kulture. Sledećeg dana, medijum je napunjen i ćelije su kultivisane u medijumu koji sadrži testirani proizvod, kontrolni nosač ili pozitivno kontrolno jeidnjenje, klinički potvrđeni CYP3A4 induktor rifampicin. Ćelije su kultivisane u prisustvu testiranog proizvoda u toku 48 sati i zatim ćelijska vijabilnost je procenjena korišćenjem testa na bazi fluorescencije (Cell Titer-Fluor, Promega) sa EnVision čitačem ploča (PerkinElmer). Naknadno, CYP3A4 transaktivacija, koja je proporcionalna aktivnosti, je merena na čitaču luminiscencije pomoću Promega One-Glo sistema regenasa korišćenjem istog čitača ploča.
[0767] Obrada podataka u okviru Genedata paketa softvera dozvoljava izveštavanje maksimalno izazvanim vrednostima uvećanja u odnosu na kontrolni nosačl, EC50vrednost za CYP3A4 induktore i krivu odgovora od 11 tačaka. Bunarčići sa vitalnošću ćelija većom od 70% nisu korišćeni za analizu i ploče gde odgovor pozitivne kontrole rifampicina spada van očekivanog opsega, ili u jačini ili maksimalnoj vrednosti izazvanog uvećanja nisu zabeleženi.
E. CFTR podaci jedinjenja
[0768] Jedinjenja formule (I) su korišćena kao modulatori CFTR aktivnosti. Donja tabela 9 prikazuje EC50 jedinjenja iz tabele 9 korišćenjem gore opisanih postupaka (testovi opisani gore u A1). Donja tabela 9 takođe daje ukratko p CFTR aktivnost (CFTR dF508 EC50), PXR maksimalnu indukciju, IV klirans pacova, PO AUC pacova, i podatke PO pacova za izvesna gore opisana jedinjenja.
22
iac
pod SA
iHst no tiv akTR CF
9. la
Tabe
F. Metaboliti
[0769] Određeno je da jedinjenje 1 je metabolisano i in vitro i in vivo, većinom oksidativnim metabolizmom. Jedinjenja 30, 31, 36, 39, 45, i 57 su metaboliti jedinjenja 1.
Primer G: Eksperimenti hloridnog transporta
[0770] U jednom eksperimentu u Ussing komori sa F508del/F508del-HBE ćelijama, jedinjenje 1 je pospešilo hloridni transport. Efekat jedinjenja 1 na hloridni transport je bio aditivan efektu jedinjenja II. Dodatno, F508del-CFTR dostavljen na ćelisku površinu ili samo jedinjenjem 1 ili u kombinaciji sa jedinjenjem II je pospešeno jedinjenjem III. Trostruka kombinacija jedinjenja 1 / jedinjenja II / jedinjenja III obezbeđena superiornim porastom u transprotu hlorida u poređenju sa 3 dualna režima testirana pod većinom uslova.
Primer G2: F508del-CFTR obrada i prenošenje u in vitro eksperimentima
[0771] Kombinacija jedinjenje 1 i jedinjenje II dovela je do više od aditivnog poboljšanja u CFTR obradi i prenosu u poređenju sa ili samo CFTR korektorom, sugerišući da dva CFTR korektora deluju sa različitim mehanizmima dejstva, koji deluje sinergijski da poveća količinu F508del-CFTR dostavljenog na ćelijsku površinu.
[0772] Pored toga, više od aditivnog efekta kombinacije jedinjenje 1 i jedinjenja II na obradu i prenošenje CFTR sugeriše da dva CFTR korektora deluju preko različitih mehanizama da bi se došlo do dostavljanja više CFTR proteina na ćelijskoj površinu u poređenju sa samo jedinim koretktorom CFTR.
2
Claims (10)
- Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje ima sledeću fomulu:njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih.
- 2. Jedinjenje prema zahtevu 1 koje ima sledeću formulu:ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
- 3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži bar jedno jedinjenje izabrano od jedinjenja prema zahtevu 1 ili zahtevu 2, njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisanog derivata bilo koga od prethodno pomenutih.
- 4. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili zahtevu 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo koga od prethodno pomenutih, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 3 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze.
- 5. Jedinjenje prema zahtevu 1 koje ima sledeću formulu: 2
- 6. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 3 koja sadrži jedinjenje prema zahtevu 5 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
- 7. Jedinjenje ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema zahtevu 4, pri čemu je jedinjenje prema zahtevu 5, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 6, za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze.
- 8. Farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 1 jedinjenja koje ima sledeću fomulu:
- 9. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 3 koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so prema zahtevu 8 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
- 10. Farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema zahtevu 4 pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 8, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 9, za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662432537P | 2016-12-09 | 2016-12-09 | |
| EP17826629.2A EP3551622B1 (en) | 2016-12-09 | 2017-12-08 | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
| PCT/US2017/065425 WO2018107100A1 (en) | 2016-12-09 | 2017-12-08 | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RS61150B1 true RS61150B1 (sr) | 2020-12-31 |
Family
ID=60953944
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RS20201477A RS61150B1 (sr) | 2016-12-09 | 2017-12-08 | Modulator regulatora transmembranske provodljivosti cistične fibroze, farmaceutske kompozicije, postupci lečenja, i postupak za dobijanje modulatora |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10793547B2 (sr) |
| EP (2) | EP3551622B1 (sr) |
| JP (3) | JP6916285B2 (sr) |
| KR (1) | KR102269492B1 (sr) |
| CN (2) | CN117843619A (sr) |
| AR (1) | AR110346A1 (sr) |
| AU (3) | AU2017371200B2 (sr) |
| CA (1) | CA3046086A1 (sr) |
| CL (1) | CL2019001553A1 (sr) |
| CO (1) | CO2019007129A2 (sr) |
| CY (1) | CY1123736T1 (sr) |
| DK (1) | DK3551622T3 (sr) |
| EA (2) | EA202192783A1 (sr) |
| EC (1) | ECSP19048759A (sr) |
| ES (1) | ES2837431T3 (sr) |
| GE (1) | GEP20247634B (sr) |
| HR (1) | HRP20201946T1 (sr) |
| HU (1) | HUE052205T2 (sr) |
| IL (3) | IL277491B (sr) |
| JO (1) | JOP20190125B1 (sr) |
| LT (1) | LT3551622T (sr) |
| MA (2) | MA54847A (sr) |
| MD (1) | MD3551622T2 (sr) |
| MX (2) | MX388103B (sr) |
| NZ (1) | NZ795112A (sr) |
| PE (2) | PE20191304A1 (sr) |
| PT (1) | PT3551622T (sr) |
| RS (1) | RS61150B1 (sr) |
| SA (1) | SA519401947B1 (sr) |
| SG (1) | SG10201913606VA (sr) |
| SI (1) | SI3551622T1 (sr) |
| SM (1) | SMT202000617T1 (sr) |
| TW (1) | TWI774712B (sr) |
| UA (1) | UA128449C2 (sr) |
| UY (2) | UY37513A (sr) |
| WO (1) | WO2018107100A1 (sr) |
| ZA (2) | ZA201904062B (sr) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102336926B1 (ko) | 2014-10-06 | 2021-12-08 | 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 낭성 섬유증 막횡단 전도도 조절자의 조정제 |
| EP3436446B1 (en) | 2016-03-31 | 2023-06-07 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| UA124708C2 (uk) | 2016-09-30 | 2021-11-03 | Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед | Модулятор муковісцидозного регулятора трансмембранної провідності, фармацевтичні композиції, способи лікування та спосіб отримання модулятора |
| AU2017371200B2 (en) | 2016-12-09 | 2021-05-06 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
| MA54105A (fr) | 2017-06-08 | 2021-09-15 | Vertex Pharma | Méthodes de traitement de la fibrose kystique |
| MA49631A (fr) * | 2017-07-17 | 2020-05-27 | Vertex Pharma | Méthodes de traitement de la fibrose kystique |
| KR102606188B1 (ko) * | 2017-08-02 | 2023-11-23 | 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 피롤리딘 화합물을 제조하기 위한 공정 |
| US10654829B2 (en) | 2017-10-19 | 2020-05-19 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Crystalline forms and compositions of CFTR modulators |
| US11465985B2 (en) | 2017-12-08 | 2022-10-11 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| TWI810243B (zh) * | 2018-02-05 | 2023-08-01 | 美商維泰克斯製藥公司 | 用於治療囊腫纖化症之醫藥組合物 |
| RS64018B1 (sr) * | 2018-02-15 | 2023-03-31 | Vertex Pharma | Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade |
| US11414439B2 (en) | 2018-04-13 | 2022-08-16 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
| TWI848092B (zh) * | 2019-04-03 | 2024-07-11 | 美商維泰克斯製藥公司 | 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑 |
| WO2020214921A1 (en) | 2019-04-17 | 2020-10-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of modulators of cftr |
| WO2020242935A1 (en) * | 2019-05-29 | 2020-12-03 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Methods of treatment for cystic fibrosis |
| TWI867024B (zh) | 2019-08-14 | 2024-12-21 | 美商維泰克斯製藥公司 | 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑 |
| MX2022001828A (es) | 2019-08-14 | 2022-06-08 | Vertex Pharma | Formas cristalinas de moduladores del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quistica (cftr). |
| TWI899097B (zh) | 2019-08-14 | 2025-10-01 | 美商維泰克斯製藥公司 | 製備cftr調節劑之方法 |
| CR20230120A (es) | 2020-08-07 | 2023-09-01 | Vertex Pharma | Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística |
| MX2023005721A (es) * | 2020-11-18 | 2023-07-25 | Vertex Pharma | Macrociclos que contienen un anillo de 1,3,4-oxadiazol para su uso como moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica. |
| US12324802B2 (en) | 2020-11-18 | 2025-06-10 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| MX2023006770A (es) | 2020-12-10 | 2023-08-14 | Vertex Pharma | Metodos de tratamiento para fibrosis quistica. |
| JP2025505577A (ja) | 2022-02-03 | 2025-02-28 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | （６ａ，１２ａ）－１７－アミノ－１２－メチル－６，１５－ビス（トリフルオロメチル）－１３，１９－ジオキサ－３，４，１８－トリアザトリシクロ［１２．３．１．１２，５］ノナデカ－１（１８），２，４，１４，１６－ペンタエン－６－オールの調製方法及び結晶形態 |
| CA3249378A1 (en) | 2022-02-03 | 2023-08-10 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | TREATMENT METHODS FOR CYSTIC FIBROSIS |
| US20250122218A1 (en) | 2022-02-08 | 2025-04-17 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| CA3253977A1 (en) | 2022-05-16 | 2023-11-23 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | SOLID FORMS OF MACROCYCLIC COMPOUNDS AS CFTR MODULATORS AND THEIR PREPARATION |
| JP2025517322A (ja) | 2022-05-16 | 2025-06-05 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 嚢胞性線維症の治療方法 |
| PE20250932A1 (es) * | 2022-06-10 | 2025-04-02 | Sionna Therapeutics Inc | Compuestos, composiciones y metodos de uso de los mismos |
| MA71698A (fr) | 2022-08-04 | 2025-05-30 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions pour le traitement de maladies médiées par cftr |
| KR20250065916A (ko) | 2022-09-15 | 2025-05-13 | 이도르시아 파마슈티컬스 리미티드 | 마크로시클릭 cftr 조절제와 cftr 교정제 및/또는 cftr 강화제의 조합 |
| JP2025531206A (ja) | 2022-09-15 | 2025-09-19 | イドルシア・ファーマシューティカルズ・リミテッド | 大環状ｃｆｔｒ調節剤 |
| WO2025166342A1 (en) | 2024-02-04 | 2025-08-07 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Combination of vanzacaftor, tezacaftor, deutivacaftor for use in treating cystic fibrosis |
| WO2025186214A1 (en) | 2024-03-05 | 2025-09-12 | Idorsia Pharmaceuticals Ltd | Macrocyclic cftr modulators |
| WO2026006653A1 (en) | 2024-06-28 | 2026-01-02 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Combination comprising exacaftor/tezacaftor/ivacaftor for use in treating cystic fibrosis where the patient has at least one cftr mutation |
Family Cites Families (241)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1117936A (en) * | 1914-03-04 | 1914-11-17 | Harry H West | Circular-knitting machine. |
| GB967177A (en) | 1959-10-13 | 1964-08-19 | Rohm & Haas | A method for preparing pyrrolidinones and piperidinones |
| FR1335705A (fr) | 1961-10-11 | 1963-08-23 | Dow Corning | Silanes cycliques contenant de l'azote, leur préparation et leur hydrolyse |
| EP0194599A3 (en) | 1985-03-14 | 1988-01-20 | Nissan Chemical Industries Ltd. | Benzamide derivatives, process for producing the same, and soil fungicides containing the same |
| EP0523141A4 (en) | 1990-03-30 | 1993-04-21 | Merck & Co. Inc. | Substituted pyrazoles, isoxazoles and isothiazoles |
| GB9122590D0 (en) | 1991-10-24 | 1991-12-04 | Lilly Industries Ltd | Pharmaceutical compounds |
| DE4410453A1 (de) | 1994-03-25 | 1995-09-28 | Hoechst Ag | Substituierte heterocyclische Carbonsäureamidester, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| GB9514160D0 (en) | 1994-07-25 | 1995-09-13 | Zeneca Ltd | Aromatic compounds |
| WO1996022022A1 (en) | 1995-01-19 | 1996-07-25 | Novartis Ag | Herbicidal composition |
| AU719770B2 (en) | 1995-11-23 | 2000-05-18 | Syngenta Participations Ag | Herbicidal composition |
| CA2238875C (en) | 1995-12-15 | 2003-09-16 | Merck Frosst Canada Inc. | Tri-aryl ethane derivatives as pde iv inhibitors |
| AU717430B2 (en) | 1996-08-26 | 2000-03-23 | Genetics Institute, Llc | Inhibitors of phospholipase enzymes |
| JPH10114654A (ja) | 1996-10-09 | 1998-05-06 | Fujisawa Pharmaceut Co Ltd | 新規用途 |
| WO1998031226A1 (de) | 1997-01-15 | 1998-07-23 | Novartis Ag | Herbizides mittel |
| GB9716657D0 (en) | 1997-08-07 | 1997-10-15 | Zeneca Ltd | Chemical compounds |
| DE19742951A1 (de) | 1997-09-29 | 1999-04-15 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Acylsulfamoylbenzoesäureamide, diese enthaltende nutzpflanzenschützende Mittel und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| DE19802697A1 (de) | 1998-01-24 | 1999-07-29 | Bayer Ag | Selektive Herbizide auf Basis von N-Aryl-triazolin(thi)onen und N-Arylsulfonylamino(thio)carbonyltriazolin(thi)onen |
| AU754616C (en) | 1998-02-13 | 2003-06-26 | Kureha Corporation | N-(phenylsulfonyl) picolinamide derivatives, process for producing the same, and herbicide |
| CN1150167C (zh) | 1998-04-06 | 2004-05-19 | 藤泽药品工业株式会社 | 吲哚衍生物 |
| EA004405B1 (ru) | 1999-06-10 | 2004-04-29 | Уорнер-Ламберт Компани | Способ ингибирования агрегации амилоидных белков и визуализации амилоидных отложений с использованием производных изоиндолина |
| DE19936438A1 (de) | 1999-08-03 | 2001-02-08 | Aventis Cropscience Gmbh | Kombinationen von Herbiziden und Safenern |
| DE19940860A1 (de) | 1999-08-27 | 2001-03-01 | Bayer Ag | Selektive Herbizide auf Basis eines substituierten Phenylsulfonyl aminocarbonyltriazolinons und Safenern II |
| DE19958381A1 (de) | 1999-12-03 | 2001-06-07 | Bayer Ag | Herbizide auf Basis von N-Aryl-uracilen |
| AU2001286557A1 (en) | 2000-08-23 | 2002-03-04 | Merck Frosst Canada And Co. | Method of treating or preventing urinary incontinence using prostanoid ep1 receptor antagonists |
| US20020055631A1 (en) | 2000-09-20 | 2002-05-09 | Augeri David J. | N-acylsulfonamide apoptosis promoters |
| AR031130A1 (es) | 2000-09-20 | 2003-09-10 | Abbott Lab | N-acilsulfonamidas promotoras de la apoptosis |
| US6720338B2 (en) | 2000-09-20 | 2004-04-13 | Abbott Laboratories | N-acylsulfonamide apoptosis promoters |
| KR20030036917A (ko) | 2000-10-10 | 2003-05-09 | 스미스클라인 비참 코포레이션 | 치환된 인돌, 이를 함유하는 약제학적 조성물, 및 이의ＰＰＡＲ-γ결합제로서의 용도 |
| DE10119721A1 (de) | 2001-04-21 | 2002-10-31 | Bayer Cropscience Gmbh | Herbizide Mittel enthaltend Benzoylcyclohexandione und Safener |
| WO2002096883A1 (en) | 2001-05-31 | 2002-12-05 | Vicore Pharma Ab | Tricyclic compounds useful as angiotensin ii agonists |
| HU229551B1 (hu) | 2001-06-28 | 2014-01-28 | Zoetis P Llc | Mikroszóma triglicerid transzfer protein (MTP) és/vagy apolipoprotein B(APO B) kiválasztás inhibitorokként alkalmazható triamiddal helyettesített indol-, benzofurán- és benzotiofén-származékok |
| DE10145019A1 (de) | 2001-09-13 | 2003-04-03 | Bayer Cropscience Gmbh | Kombinationen aus Herbiziden und Safenern |
| DE10146873A1 (de) | 2001-09-24 | 2003-04-17 | Bayer Cropscience Gmbh | Heterocyclische Amide und -Iminderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende Mittel und ihre Verwendung als Schädlingsbekämpfungsmittel |
| HUP0501067A2 (en) | 2001-11-14 | 2006-02-28 | Teva Pharma | Amorphous and crystalline forms of losartan potassium and process for their preparation |
| JPWO2003043655A1 (ja) | 2001-11-19 | 2005-03-10 | 小野薬品工業株式会社 | 頻尿の治療剤 |
| DE10157545A1 (de) | 2001-11-23 | 2003-06-12 | Bayer Cropscience Gmbh | Herbizide Mittel enthaltend Benzoylpyrazole und Safener |
| WO2004043939A1 (en) | 2002-03-27 | 2004-05-27 | Smithkline Beecham Corporation | Amide compounds and methods of using the same |
| GB0212785D0 (en) | 2002-05-31 | 2002-07-10 | Glaxo Group Ltd | Compounds |
| HRP20041165A2 (en) | 2002-06-08 | 2005-04-30 | Bayer Cropscience Gmbh | Combinations of herbicidal aromatic carboxylic acids and safeners |
| DE10237461A1 (de) | 2002-08-16 | 2004-02-26 | Bayer Cropscience Gmbh | Herbizide Mittel enthaltend Benzoylpyrazole und Safener |
| WO2004021987A2 (en) | 2002-09-06 | 2004-03-18 | Merck & Co., Inc. | Treatment of rheumatoid arthritis by inhibition of pde4 |
| CN100356922C (zh) | 2002-09-30 | 2007-12-26 | 加利福尼亚大学董事会 | 囊性纤维化跨膜传导调节因子蛋白抑制剂及其用途 |
| WO2004037798A1 (en) | 2002-10-22 | 2004-05-06 | Merck Frosst Canada & Co. | Nitric oxide releasing selective cyclooxygenase-2 inhibitors |
| GB0225548D0 (en) | 2002-11-01 | 2002-12-11 | Glaxo Group Ltd | Compounds |
| AU2003302106A1 (en) | 2002-11-21 | 2004-06-15 | Vicore Pharma Ab | New tricyclic angiotensin ii agonists |
| MXPA05006679A (es) | 2002-12-20 | 2005-08-16 | Pfizer Prod Inc | Inhibidores de la proteina de transferencia de trigliceridos microsomales. |
| JP2006514032A (ja) | 2002-12-20 | 2006-04-27 | ファイザー・プロダクツ・インク | ミクロソームトリグリセリド転送タンパク質阻害剤 |
| US7265122B2 (en) | 2003-02-28 | 2007-09-04 | Encysive Pharmaceuticals, Inc. | Pyridine, pyrimidine, quinoline, quinazoline, and naphthalene urotensin-II receptor antagonists |
| AU2003219291A1 (en) | 2003-03-24 | 2004-10-18 | Vicore Pharma Ab | Bicyclic compounds useful as angiotensin ii agonists |
| EP1646615B1 (en) | 2003-06-06 | 2009-08-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrimidine derivatives as modulators of atp-binding cassette transporters |
| WO2005049593A2 (en) | 2003-11-13 | 2005-06-02 | Abbott Laboratories | N-acylsulfonamide apoptosis promoters |
| RU2006120549A (ru) | 2003-11-14 | 2007-12-27 | Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) | Тиазолы и оксазолы, применяемые в качестве модуляторов транспортеров арт-связывающей кассеты |
| GB0328024D0 (en) | 2003-12-03 | 2004-01-07 | Glaxo Group Ltd | Compounds |
| US20090131342A1 (en) | 2004-01-22 | 2009-05-21 | Nitromed, Inc. | Nitrosated and/or nitrosylated compounds, compositions and methods of use |
| US7977322B2 (en) | 2004-08-20 | 2011-07-12 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of ATP-binding cassette transporters |
| CN1938279B (zh) | 2004-01-30 | 2011-09-14 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | Atp-结合弹夹转运蛋白调控剂 |
| CA2555133A1 (en) | 2004-02-04 | 2005-09-01 | Pfizer Products Inc. | Substituted quinoline compounds |
| WO2005082414A2 (en) | 2004-03-02 | 2005-09-09 | Astellas Pharma Inc. | Concomitant drugs of a sulfonamide and another therapeutic agent |
| CN102558082B (zh) | 2004-03-05 | 2015-09-30 | 日产化学工业株式会社 | 异噁唑啉取代苯甲酰胺化合物的制备中间体 |
| WO2005099705A2 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-27 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Preparation of imidazole derivatives and methods of use |
| EP1740532A4 (en) | 2004-03-30 | 2009-06-10 | Univ California | CFTR INHIBITOR COMPOUNDS CONTAINING HYDRAZIDS AND USES THEREOF |
| GB0410121D0 (en) | 2004-05-06 | 2004-06-09 | Glaxo Group Ltd | Compounds |
| US7495103B2 (en) | 2004-06-24 | 2009-02-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of ATP-binding cassette transporters |
| US8354427B2 (en) | 2004-06-24 | 2013-01-15 | Vertex Pharmaceutical Incorporated | Modulators of ATP-binding cassette transporters |
| EP1790638B1 (en) | 2004-09-15 | 2013-04-03 | Shionogi Co., Ltd. | Carbamoylpyridone derivative having hiv integrase inhibitory activity |
| MX2007003836A (es) | 2004-09-29 | 2007-08-20 | Portola Pharm Inc | 2h-1,3-benzoxazin-4(3h)-onas sustituidas. |
| JP2008523139A (ja) | 2004-12-14 | 2008-07-03 | アストラゼネカ・アクチエボラーグ | 置換アミノピリジン類及びその使用 |
| RU2423351C2 (ru) | 2004-12-16 | 2011-07-10 | Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед | Пирид-2-оны, применимые как ингибиторы протеинкиназ семейства тес для лечения воспалительных, пролиферативных и иммунологически-опосредованных заболеваний |
| DE602005013116D1 (de) | 2004-12-23 | 2009-04-16 | Glaxo Group Ltd | Pyridin-verbindungen für die behandlung von prostaglandin-vermittelten krankheiten |
| GB0428173D0 (en) | 2004-12-23 | 2005-01-26 | Astrazeneca Ab | Compounds |
| JP5426878B2 (ja) | 2005-05-24 | 2014-02-26 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | Ａｔｐ−結合カセットトランスポーターのモジュレーター |
| WO2007019397A2 (en) | 2005-08-05 | 2007-02-15 | Genelabs Technologies, Inc. | 6-membered aryl and heteroaryl derivatives for the treatment of hepatitis c virus |
| CA2618057A1 (en) | 2005-08-11 | 2007-02-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| WO2007053641A2 (en) | 2005-11-01 | 2007-05-10 | Mars, Incorporated | A-type procyanidins and inflammation |
| DK2395002T3 (da) | 2005-11-08 | 2014-09-08 | Vertex Pharma | Farmaceutisk sammensætning indeholdende en heterocyclisk modulator af ATP-bindende kassettetransportører |
| EP1974212A1 (en) | 2005-12-27 | 2008-10-01 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compounds useful in cftr assays and methods therewith |
| CA2635581C (en) | 2005-12-28 | 2017-02-28 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of n-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide |
| US7671221B2 (en) | 2005-12-28 | 2010-03-02 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of ATP-Binding Cassette transporters |
| NZ569327A (en) | 2005-12-28 | 2011-09-30 | Vertex Pharma | 1-(benzo [d] [1,3] dioxol-5-yl) -n- (phenyl) cyclopropane- carboxamide derivatives and related compounds as modulators of ATP-binding cassette transporters for the treatment of cystic fibrosis |
| WO2007113327A2 (en) | 2006-04-05 | 2007-10-11 | Bayer Cropscience Sa | Fungicide n-cyclopropyl-sulfonylamide derivatives |
| SI2007756T1 (sl) | 2006-04-07 | 2015-11-30 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulatorji prenašalcev z atp-vezavno kaseto |
| AU2007249269A1 (en) | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl)-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide |
| EP2038272B8 (en) | 2006-06-30 | 2013-10-23 | Sunesis Pharmaceuticals, Inc. | Pyridinonyl pdk1 inhibitors |
| ES2646175T3 (es) | 2006-11-03 | 2017-12-12 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Derivados de azaindol como moduladores de CFTR |
| US7754739B2 (en) | 2007-05-09 | 2010-07-13 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of CFTR |
| AU2008216382A1 (en) | 2007-02-12 | 2008-08-21 | Array Biopharma, Inc. | Novel inhibitors hepatitis C virus replication |
| WO2008141385A1 (en) | 2007-05-21 | 2008-11-27 | Biota Scientific Management Pty Ltd | Viral polymerase inhibitors |
| US8058299B2 (en) | 2007-05-22 | 2011-11-15 | Via Pharmaceuticals, Inc. | Diacylglycerol acyltransferase inhibitors |
| EP2167471B1 (en) | 2007-05-25 | 2013-10-16 | Amgen Inc. | Substituted hydroxyethyl amine compounds as beta-secretase modulators and methods of use |
| GB0716532D0 (en) | 2007-08-24 | 2007-10-03 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Therapeutic compounds |
| RU2010111550A (ru) | 2007-08-29 | 2011-10-10 | Шеринг Корпорейшн (US) | 2,3-замещенные индольные производные для лечения вирусных инфекций |
| RU2010114732A (ru) | 2007-09-14 | 2011-10-20 | Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) | Твердые формы n-[2,4-бис(1,1-диметилэтил)-5-гидроксифенил]-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоксамида |
| AU2013231151B2 (en) | 2007-11-16 | 2015-06-25 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Isoquinoline modulators of ATP-Binding Cassette transporters |
| US8765757B2 (en) | 2007-11-16 | 2014-07-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 3-heterocyclic substituted indole derivatives and methods of use thereof |
| GB0723794D0 (en) | 2007-12-05 | 2008-01-16 | Lectus Therapeutics Ltd | Potassium ion channel modulators and uses thereof |
| MX2010006183A (es) | 2007-12-07 | 2010-10-15 | Vertex Pharma | Procesos para producir acidos cicloalquilcarboxamido-piridin benzoicos. |
| SG186638A1 (en) | 2007-12-07 | 2013-01-30 | Vertex Pharma | Solid forms of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl) benzoic acid |
| AU2013270464B2 (en) | 2008-03-31 | 2016-05-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyridyl derivatives as CFTR modulators |
| US20110071197A1 (en) | 2008-04-16 | 2011-03-24 | Peter Nilsson | Bis-aryl compounds for use as medicaments |
| US20110112193A1 (en) | 2008-05-14 | 2011-05-12 | Peter Nilsson | Bis-aryl compounds for use as medicaments |
| EP2145537A1 (en) | 2008-07-09 | 2010-01-20 | Bayer CropScience AG | Plant growth regulator |
| UY31982A (es) | 2008-07-16 | 2010-02-26 | Boehringer Ingelheim Int | Derivados de 1,2-dihidropiridin-3-carboxamidas n-sustituidas |
| US20100074949A1 (en) | 2008-08-13 | 2010-03-25 | William Rowe | Pharmaceutical composition and administration thereof |
| HRP20180328T1 (hr) | 2008-08-13 | 2018-04-20 | Vertex Pharmaceuticals Inc. | FARMACEUTSKI PRIPRAVAK N-[2,4-bis(1,1-DIMETILETIL)-5-HIDROKSIFENIL]-1,4-DIHIDRO-4-OKSOKINOLIN-3-KARBOKSAMIDA I NJEGOVO DAVANJE |
| US20110160227A1 (en) | 2008-08-21 | 2011-06-30 | Antony Shaw | Prolyl Hydroxylase Inhibitors |
| EP2321303B1 (en) | 2008-08-27 | 2019-11-27 | Calcimedica, Inc. | Compounds that modulate intracellular calcium |
| MX2011003249A (es) | 2008-09-29 | 2011-05-19 | Vertex Pharma | Unidades de dosificacion del acido 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1 ,3]dioxol-5-il)ciclopropancarboxamido)-3-metilpiridin-2-il)benzoi co. |
| TWI465449B (zh) | 2008-10-23 | 2014-12-21 | Vertex Pharma | 囊腫性纖維化跨膜傳導調節因子之調控因子 |
| UA104876C2 (uk) | 2008-11-06 | 2014-03-25 | Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед | Модулятори atф-зв'язувальних касетних транспортерів |
| HRP20150288T1 (hr) * | 2008-11-06 | 2015-04-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulatori atp-vezujuä†ih kasetnih transportera |
| UA108193C2 (uk) | 2008-12-04 | 2015-04-10 | Апоптозіндукуючий засіб для лікування раку і імунних і аутоімунних захворювань | |
| US20100160322A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-06-24 | Abbott Laboratories | Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases |
| US8367660B2 (en) | 2008-12-30 | 2013-02-05 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| PT2511264E (pt) | 2009-01-19 | 2015-07-17 | Abbvie Inc | Agentes indutores de apoptose destinados ao tratamento de cancro e de doenças imunes e autoimunes |
| AU2010223535B2 (en) | 2009-03-11 | 2015-09-10 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Halogenalkylmethylenoxy-phenyl-substituted ketoenols |
| SMT201700593T1 (it) | 2009-03-20 | 2018-03-08 | Vertex Pharma | Procedimento per preparare modulatori di regolatore di conduttanza transmembrana di fibrosi cistica |
| RU2518897C2 (ru) | 2009-03-20 | 2014-06-10 | Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед | Производные 3-карбоксамида-4-оксохинолина, полезные в качестве модуляторов регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза |
| EP2412708A4 (en) | 2009-03-26 | 2014-07-23 | Shionogi & Co | SUBSTITUTED 3-HYDROXY-4-PYRIDONE DERIVATIVE |
| WO2010123822A1 (en) | 2009-04-20 | 2010-10-28 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising pyridazine sulfonamide derivatives |
| EP2944638A1 (en) | 2009-05-26 | 2015-11-18 | AbbVie Bahamas Limited | Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases |
| WO2011102514A1 (ja) | 2010-02-22 | 2011-08-25 | 武田薬品工業株式会社 | 芳香環化合物 |
| US8247436B2 (en) | 2010-03-19 | 2012-08-21 | Novartis Ag | Pyridine and pyrazine derivative for the treatment of CF |
| AU2011227021A1 (en) | 2010-03-19 | 2012-10-18 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide |
| CN106083832A (zh) | 2010-03-25 | 2016-11-09 | 弗特克斯药品有限公司 | (r)‑1(2,2‑二氟苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯‑5‑基)‑n‑(1‑(2,3‑二羟基丙基)‑6‑氟‑2‑(1‑羟基‑2‑甲基丙‑2‑基)‑1h‑吲哚‑5‑基)环丙烷甲酰胺的固体形式 |
| CN106943403A (zh) | 2010-04-07 | 2017-07-14 | 弗特克斯药品有限公司 | 药物组合物和其给药方法 |
| NZ602795A (en) | 2010-04-07 | 2015-01-30 | Vertex Pharma | Solid forms of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid |
| US8344137B2 (en) | 2010-04-14 | 2013-01-01 | Hoffman-La Roche Inc. | 3,3-dimethyl tetrahydroquinoline derivatives |
| MX2012012204A (es) | 2010-04-22 | 2012-12-05 | Vertex Pharma | Proceso para producir compuestos de cicloalquilcarboxamido-indol. |
| WO2011133951A1 (en) | 2010-04-22 | 2011-10-27 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pharmaceutical compositions and administrations thereof |
| TWI520960B (zh) | 2010-05-26 | 2016-02-11 | 艾伯維有限公司 | 用於治療癌症及免疫及自體免疫疾病之細胞凋亡誘導劑 |
| US8563593B2 (en) | 2010-06-08 | 2013-10-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Formulations of (R)-1-(2,2-difluorobenzo[D] [1,3] dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl)cyclopropanecarboxamide |
| CN103153287A (zh) | 2010-08-23 | 2013-06-12 | 弗特克斯药品有限公司 | (R)-1-(2，2-二氟苯并[d][1，3]间二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2，3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺的药物组合物及其施用 |
| CA2809263A1 (en) | 2010-08-27 | 2012-03-01 | Eleni Dokou | Pharmaceutical composition and administrations thereof |
| JP2013540145A (ja) | 2010-10-21 | 2013-10-31 | ウニベルシテート デス ザールランデス | コルチゾール依存性疾患の治療用の選択的ｃｙｐ１１ｂ１阻害剤 |
| WO2012087938A1 (en) | 2010-12-20 | 2012-06-28 | Glaxosmithkline Llc | Quinazolinone derivatives as antiviral agents |
| EP2471363A1 (de) | 2010-12-30 | 2012-07-04 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Aryl-, Heteroaryl- und Benzylsulfonamidocarbonsäuren, -carbonsäureestern, -carbonsäureamiden und -carbonitrilen oder deren Salze zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen |
| US20130331378A1 (en) | 2011-01-26 | 2013-12-12 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Pyrazolopyridine derivative or pharmacologically acceptable salt thereof |
| WO2012110519A1 (de) | 2011-02-17 | 2012-08-23 | Bayer Cropscience Ag | Substituierte 3-(biphenyl-3-yl)-8,8-difluor-4-hydroxy-1-azaspiro[4.5]dec-3-en-2-one zur therapie und halogensubstituierte spirocyclische ketoenole |
| WO2012116960A1 (de) | 2011-03-01 | 2012-09-07 | Bayer Cropscience Ag | 2-acyloxy-pyrrolin-4-one |
| AR085585A1 (es) | 2011-04-15 | 2013-10-09 | Bayer Cropscience Ag | Vinil- y alquinilciclohexanoles sustituidos como principios activos contra estres abiotico de plantas |
| EP2709986B1 (en) | 2011-05-18 | 2017-03-22 | Concert Pharmaceuticals Inc. | Deuterated derivatives of ivacaftor |
| HUE047354T2 (hu) | 2011-05-18 | 2020-04-28 | Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd | Ivacaftor deuterizált származékai |
| US9260416B2 (en) | 2011-05-27 | 2016-02-16 | Amira Pharmaceuticals, Inc. | Heterocyclic autotaxin inhibitors and uses thereof |
| CN103827095A (zh) | 2011-08-30 | 2014-05-28 | Chdi基金会股份有限公司 | 犬尿氨酸-3-单加氧酶抑制剂、其药物组合物及其使用方法 |
| WO2013038373A1 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | Novartis Ag | Pyridine amide derivatives |
| CN103946221B (zh) | 2011-09-16 | 2016-08-03 | 诺华股份有限公司 | 用于治疗囊性纤维化的杂环化合物 |
| CA2848620C (en) | 2011-09-16 | 2020-03-10 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Use of cyprosulfamide for inducing a growth regulating response in useful plants and increasing the yield of harvested plant organs therefrom |
| US9226505B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-01-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | 4-substituted 1-phenylpyrazole-3-carboxylic acid derivatives as agents against abiotic plant stress |
| ME02650B (me) | 2011-11-08 | 2017-06-20 | Vertex Pharma | Modulatori atp- vezujućih kasetnih transportera |
| US8426450B1 (en) | 2011-11-29 | 2013-04-23 | Helsinn Healthcare Sa | Substituted 4-phenyl pyridines having anti-emetic effect |
| PL2806859T3 (pl) | 2012-01-25 | 2019-11-29 | Vertex Pharma | Formulacje kwasu 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5- ilo)cyklopropanokarboksyamido)-3-metylopirydyn-2-ylo)benzoesowego |
| JP2015083542A (ja) | 2012-02-08 | 2015-04-30 | 大日本住友製薬株式会社 | ３位置換プロリン誘導体 |
| JP2015511583A (ja) | 2012-02-27 | 2015-04-20 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ | 薬学的組成物およびその投与 |
| US8889730B2 (en) | 2012-04-10 | 2014-11-18 | Pfizer Inc. | Indole and indazole compounds that activate AMPK |
| WO2013158121A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of n-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide |
| AU2013266398A1 (en) | 2012-05-22 | 2015-01-22 | Genentech, Inc. | N-substituted benzamides and their use in the treatment of pain |
| WO2013185112A1 (en) | 2012-06-08 | 2013-12-12 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pharmaceuticl compositions for the treatment of cftr -mediated disorders |
| WO2013185202A1 (en) | 2012-06-14 | 2013-12-19 | Beta Pharma Canada Inc | Apoptosis inducers |
| BR112015000187A2 (pt) | 2012-07-06 | 2017-06-27 | Genentech Inc | benzamidas substituídas com n e métodos de uso das mesmas |
| HK1209318A1 (en) | 2012-07-16 | 2016-04-01 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pharmaceutical compositions of (r)-1-(2,2-diflurorbenzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-n-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1h-indol-5-yl) cyclopropanecarboxamide and administration thereof |
| JP2015178458A (ja) | 2012-07-25 | 2015-10-08 | 杏林製薬株式会社 | ベンゼン環縮合含窒素５員複素環式化合物、またはその薬理学的に許容される塩 |
| CN103571906B (zh) | 2012-07-27 | 2018-12-11 | 上海泽元海洋生物技术有限公司 | 一种利用微藻高效生产虾青素的新方法 |
| JP6225187B2 (ja) | 2012-08-13 | 2017-11-01 | アッヴィ・インコーポレイテッド | アポトーシス誘発剤 |
| WO2014028968A1 (en) | 2012-08-21 | 2014-02-27 | Peter Maccallum Cancer Institute | Perforin inhibiting benzenesulfonamide compounds, preparation and uses thereof |
| ES2889757T3 (es) | 2012-09-06 | 2022-01-13 | Plexxikon Inc | Compuestos y procedimientos para la modulación de quinasas e indicaciones para estos |
| US10093640B2 (en) | 2012-09-21 | 2018-10-09 | Vanderbilt University | Substituted benzofuran, benzothiophene and indole MCL-1 inhibitors |
| SMT201800590T1 (it) | 2012-11-02 | 2019-01-11 | Vertex Pharma | Composizioni farmaceutiche per il trattamento di malattie mediate da cftr |
| EP2917203B1 (en) | 2012-11-02 | 2019-04-03 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Method for identifying myc inhibitors |
| EP2914265A4 (en) | 2012-11-05 | 2016-04-13 | Nant Holdings Ip Llc | SUBSTITUTED INDOL-5-OL COMPOUNDS AND THEIR THERAPEUTIC APPLICATIONS |
| MY183582A (en) | 2012-11-19 | 2021-02-26 | Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd | Deuterated cftr potentiators |
| US20150315146A1 (en) | 2012-12-05 | 2015-11-05 | Bayer Cropscience Ag | Use of substituted 1-(aryl ethynyl)-, 1-(heteroaryl ethynyl)-, 1-(heterocyclyl ethynyl)- and 1-(cycloalkenylethynyl)-bicycloalkanols as active agents against abiotic plant stress |
| EP2928296A1 (de) | 2012-12-05 | 2015-10-14 | Bayer CropScience AG | Verwendung substituierter 1-(arylethinyl)-, 1-(heteroarylethinyl)-, 1-(heterocyclylethinyl)- und 1-(cyloalkenylethinyl)-cyclohexanole als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress |
| UA115576C2 (uk) | 2012-12-06 | 2017-11-27 | Байєр Фарма Акцієнгезелльшафт | Похідні бензимідазолу як антагоністи ер4 |
| GB201223265D0 (en) | 2012-12-21 | 2013-02-06 | Selvita Sa | Novel benzimidazole derivatives as kinase inhibitors |
| US20150353542A1 (en) | 2013-01-14 | 2015-12-10 | Amgen Inc. | Methods of using cell-cycle inhibitors to modulate one or more properties of a cell culture |
| ES2705247T3 (es) | 2013-03-14 | 2019-03-22 | Univ Columbia | 4-fenilpiperidinas, su preparación y uso |
| WO2014152018A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Octahydrocyclopentapyrroles, their preparation and use |
| BR112015023349A2 (pt) | 2013-03-15 | 2017-07-18 | Ironwood Pharmaceuticals Inc | composto, composição farmacêutica, e, método de tratamento de uma doença, condição de saúde ou distúrbio |
| PT2978752T (pt) | 2013-03-29 | 2018-03-09 | Takeda Pharmaceuticals Co | Derivados de 6-(5-hidroxi-1h-pirazol-1-il)nicotinamida e o seu uso como inibidores de phd |
| LU92578B1 (fr) | 2013-05-07 | 2014-12-15 | Galapagos Nv | Nouveaux composés et compostions pharmaceutiques de ceux-ci pour le traitement de la mucoviscidose |
| WO2014181287A1 (en) | 2013-05-09 | 2014-11-13 | Piramal Enterprises Limited | Heterocyclyl compounds and uses thereof |
| EP3000073B1 (en) | 2013-05-21 | 2017-07-12 | Sicpa Holding SA | Identifying one- or two-dimensional bar codes via weighted image data combination |
| CA2911326A1 (en) | 2013-05-24 | 2014-11-27 | The California Institute For Biomedical Research | Compounds for treatment of drug resistant and persistent tuberculosis |
| WO2015010832A1 (en) | 2013-07-22 | 2015-01-29 | Syngenta Participations Ag | Microbiocidal heterocyclic derivatives |
| CA2922341C (en) | 2013-08-28 | 2022-06-07 | Vanderbilt University | Substituted indole mcl-1 inhibitors |
| US9663508B2 (en) | 2013-10-01 | 2017-05-30 | Amgen Inc. | Biaryl acyl-sulfonamide compounds as sodium channel inhibitors |
| WO2015069287A1 (en) | 2013-11-08 | 2015-05-14 | Allergan, Inc. | Compounds as tyrosine kinase modulators |
| PT3068392T (pt) | 2013-11-12 | 2021-05-14 | Vertex Pharma | Processo de preparação de composições farmacêuticas para o tratamento de doenças mediadas por condutância transmembrana da fibrose quística (cftr) |
| DK3925607T3 (da) | 2014-04-15 | 2023-08-21 | Vertex Pharma | Farmaceutiske sammensætninger til behandlingen af cystisk fibrosetransmembrankonduktansregulator-medierede sygdomme |
| KR102336926B1 (ko) | 2014-10-06 | 2021-12-08 | 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 낭성 섬유증 막횡단 전도도 조절자의 조정제 |
| CA2963945C (en) | 2014-10-07 | 2023-01-10 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Co-crystals of modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| CN107110831B (zh) | 2014-11-18 | 2020-02-21 | 弗特克斯药品有限公司 | 进行高通量试验高效液相色谱的方法 |
| WO2016105484A1 (en) | 2014-12-23 | 2016-06-30 | Proteostasis Therapeutics, Inc. | Derivatives of 5-(hetero)arylpyrazol-3-carboxylic amide or 1-(hetero)aryltriazol-4-carboxylic amide useful for the treatment of inter alia cystic fibrosis |
| MA41253A (fr) | 2014-12-23 | 2017-10-31 | Proteostasis Therapeutics Inc | Composés, compositions et procédés pour augmenter l'activité du cftr |
| EA033497B1 (ru) | 2015-02-15 | 2019-10-31 | Hoffmann La Roche | 1-(тиофенил или фенил)сульфонил-(пирролидин)-2-карбоксамидные производные и их применение в качестве антагонистов trpa1 |
| HK1249893A1 (zh) | 2015-03-31 | 2018-11-16 | Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited | 氘代vx-661 |
| MX388470B (es) | 2015-09-21 | 2025-03-20 | Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd | Administración de potenciadores de regulador de la conductancia transmembrana de fibrosis quística (cftr) deuterados. |
| US10759721B2 (en) | 2015-09-25 | 2020-09-01 | Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited | Deuterated CFTR potentiators |
| EP3854782A1 (en) | 2016-03-30 | 2021-07-28 | Genentech, Inc. | Substituted benzamides and methods of use thereof |
| EP3436446B1 (en) | 2016-03-31 | 2023-06-07 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| AR108203A1 (es) | 2016-04-07 | 2018-07-25 | Proteostasis Therapeutics Inc | Compuestos, composiciones y métodos para modular cftr (regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística) |
| MX2018013002A (es) | 2016-04-26 | 2019-01-31 | Abbvie Sarl | Moduladores de la proteina reguladora de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica. |
| US10138227B2 (en) | 2016-06-03 | 2018-11-27 | Abbvie S.Á.R.L. | Heteroaryl substituted pyridines and methods of use |
| ES2954658T3 (es) | 2016-06-21 | 2023-11-23 | Proteostasis Therapeutics Inc | Compuestos, composiciones y procedimientos para aumentar la actividad de CFTR |
| UA124708C2 (uk) | 2016-09-30 | 2021-11-03 | Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед | Модулятор муковісцидозного регулятора трансмембранної провідності, фармацевтичні композиції, способи лікування та спосіб отримання модулятора |
| US10399940B2 (en) | 2016-10-07 | 2019-09-03 | Abbvie S.Á.R.L. | Substituted pyrrolidines and methods of use |
| US9981910B2 (en) | 2016-10-07 | 2018-05-29 | Abbvie S.Á.R.L. | Substituted pyrrolidines and methods of use |
| AU2017348186A1 (en) | 2016-10-26 | 2019-05-16 | Proteostasis Therapeutics, Inc | Pyridazine derivatives, compositions and methods for modulating CFTR |
| WO2018081377A1 (en) | 2016-10-26 | 2018-05-03 | Proteostasis Therapeutics, Inc. | N-phenyl-2-(3-phenyl-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-1-yl)acetamide derivatives for treating cystic fibrosis |
| EP3532469A1 (en) | 2016-10-26 | 2019-09-04 | Proteostasis Therapeutics, Inc. | Compounds, compositions, and methods for modulating cftr |
| AU2017352206B2 (en) | 2016-10-27 | 2022-03-03 | Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited | Methods of treatment with deuterated CFTR potentiators |
| CR20190292A (es) | 2016-11-18 | 2019-09-03 | Cystic Fibrosis Found Therapeutics Inc | Pirrolopirimidinas como potenciadores de cftr |
| AU2017371200B2 (en) | 2016-12-09 | 2021-05-06 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
| SG10201911221RA (en) | 2016-12-16 | 2020-02-27 | Cystic Fibrosis Found | Bicyclic heteroaryl derivatives as cftr potentiators |
| EP3558982A1 (en) | 2016-12-20 | 2019-10-30 | AbbVie S.À.R.L. | Deuterated cftr modulators and methods of use |
| WO2018127130A1 (en) | 2017-01-07 | 2018-07-12 | Shanghai Fochon Pharmaceutical Co., Ltd. | Compounds as bcl-2-selective apoptosis-inducing agents |
| TW201831471A (zh) | 2017-02-24 | 2018-09-01 | 盧森堡商艾伯維公司 | 囊腫纖化症跨膜傳導調節蛋白的調節劑及其使用方法 |
| WO2018183367A1 (en) | 2017-03-28 | 2018-10-04 | Van Goor Fredrick F | Methods of treating cystic fibrosis in patients with residual function mutations |
| US20200055844A1 (en) | 2017-04-28 | 2020-02-20 | Proteostasis Therapeutics, Inc. | 4-sulfonylaminocarbonylquinoline derivatives for increasing cftr activity |
| MA54105A (fr) | 2017-06-08 | 2021-09-15 | Vertex Pharma | Méthodes de traitement de la fibrose kystique |
| CA3068609A1 (en) | 2017-07-01 | 2019-01-10 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions and methods for treatment of cystic fibrosis |
| WO2019018353A1 (en) | 2017-07-17 | 2019-01-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | METHODS OF TREATING CYSTIC FIBROSIS |
| MA49631A (fr) | 2017-07-17 | 2020-05-27 | Vertex Pharma | Méthodes de traitement de la fibrose kystique |
| WO2019026075A1 (en) | 2017-07-31 | 2019-02-07 | Technion Research & Development Foundation Limited | METHODS OF DETECTING MODIFIED AND UN-MODIFIED DNA |
| KR102606188B1 (ko) | 2017-08-02 | 2023-11-23 | 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 피롤리딘 화합물을 제조하기 위한 공정 |
| US10988454B2 (en) | 2017-09-14 | 2021-04-27 | Abbvie Overseas S.À.R.L. | Modulators of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein and methods of use |
| US20210369749A1 (en) | 2017-10-06 | 2021-12-02 | Proteostasis Therapeutics, Inc. | Compounds, compositions, and methods for increasing cftr activity |
| US10654829B2 (en) | 2017-10-19 | 2020-05-19 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Crystalline forms and compositions of CFTR modulators |
| WO2019109021A1 (en) | 2017-12-01 | 2019-06-06 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| WO2019113089A1 (en) | 2017-12-04 | 2019-06-13 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions for treating cystic fibrosis |
| US11465985B2 (en) | 2017-12-08 | 2022-10-11 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| TWI810243B (zh) | 2018-02-05 | 2023-08-01 | 美商維泰克斯製藥公司 | 用於治療囊腫纖化症之醫藥組合物 |
| WO2019191620A1 (en) | 2018-03-30 | 2019-10-03 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Crystalline forms of modulators of cftr |
| WO2019195739A1 (en) | 2018-04-05 | 2019-10-10 | Alexander Russell Abela | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator |
| US11414439B2 (en) | 2018-04-13 | 2022-08-16 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator |
| WO2020214921A1 (en) | 2019-04-17 | 2020-10-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of modulators of cftr |
| WO2020242935A1 (en) | 2019-05-29 | 2020-12-03 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Methods of treatment for cystic fibrosis |
| JP7684279B2 (ja) | 2019-08-14 | 2025-05-27 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子モジュレーター |
| MX2022001828A (es) | 2019-08-14 | 2022-06-08 | Vertex Pharma | Formas cristalinas de moduladores del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quistica (cftr). |
| TWI899097B (zh) | 2019-08-14 | 2025-10-01 | 美商維泰克斯製藥公司 | 製備cftr調節劑之方法 |
| TWI867024B (zh) | 2019-08-14 | 2024-12-21 | 美商維泰克斯製藥公司 | 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑 |
-
2017
- 2017-12-08 AU AU2017371200A patent/AU2017371200B2/en active Active
- 2017-12-08 MA MA054847A patent/MA54847A/fr unknown
- 2017-12-08 EA EA202192783A patent/EA202192783A1/ru unknown
- 2017-12-08 IL IL277491A patent/IL277491B/en unknown
- 2017-12-08 TW TW106143291A patent/TWI774712B/zh active
- 2017-12-08 HU HUE17826629A patent/HUE052205T2/hu unknown
- 2017-12-08 CN CN202311399758.2A patent/CN117843619A/zh active Pending
- 2017-12-08 IL IL294237A patent/IL294237A/en unknown
- 2017-12-08 CA CA3046086A patent/CA3046086A1/en active Pending
- 2017-12-08 PE PE2019001200A patent/PE20191304A1/es unknown
- 2017-12-08 RS RS20201477A patent/RS61150B1/sr unknown
- 2017-12-08 EP EP17826629.2A patent/EP3551622B1/en active Active
- 2017-12-08 MA MA49235A patent/MA49235B1/fr unknown
- 2017-12-08 WO PCT/US2017/065425 patent/WO2018107100A1/en not_active Ceased
- 2017-12-08 HR HRP20201946TT patent/HRP20201946T1/hr unknown
- 2017-12-08 US US15/836,627 patent/US10793547B2/en active Active
- 2017-12-08 JO JOP/2019/0125A patent/JOP20190125B1/ar active
- 2017-12-08 PE PE2024000612A patent/PE20241131A1/es unknown
- 2017-12-08 SM SM20200617T patent/SMT202000617T1/it unknown
- 2017-12-08 CN CN201780086007.1A patent/CN110267948B/zh active Active
- 2017-12-08 DK DK17826629.2T patent/DK3551622T3/da active
- 2017-12-08 PT PT178266292T patent/PT3551622T/pt unknown
- 2017-12-08 GE GEAP201715126A patent/GEP20247634B/en unknown
- 2017-12-08 MX MX2019006637A patent/MX388103B/es unknown
- 2017-12-08 ES ES17826629T patent/ES2837431T3/es active Active
- 2017-12-08 SG SG10201913606VA patent/SG10201913606VA/en unknown
- 2017-12-08 LT LTEP17826629.2T patent/LT3551622T/lt unknown
- 2017-12-08 SI SI201730537T patent/SI3551622T1/sl unknown
- 2017-12-08 KR KR1020197019725A patent/KR102269492B1/ko active Active
- 2017-12-08 NZ NZ795112A patent/NZ795112A/en unknown
- 2017-12-08 UA UAA201907583A patent/UA128449C2/uk unknown
- 2017-12-08 EP EP20199562.8A patent/EP3812379A1/en active Pending
- 2017-12-08 JP JP2019530713A patent/JP6916285B2/ja active Active
- 2017-12-08 MD MDE20191168T patent/MD3551622T2/ro unknown
- 2017-12-08 EA EA201991403A patent/EA039280B1/ru unknown
- 2017-12-08 UY UY0001037513A patent/UY37513A/es active IP Right Grant
- 2017-12-08 MX MX2021013639A patent/MX2021013639A/es unknown
- 2017-12-12 AR ARP170103464A patent/AR110346A1/es unknown
-
2019
- 2019-06-03 IL IL267048A patent/IL267048B/en active IP Right Grant
- 2019-06-06 CL CL2019001553A patent/CL2019001553A1/es unknown
- 2019-06-08 SA SA519401947A patent/SA519401947B1/ar unknown
- 2019-06-21 ZA ZA2019/04062A patent/ZA201904062B/en unknown
- 2019-07-03 CO CONC2019/0007129A patent/CO2019007129A2/es unknown
- 2019-07-09 EC ECSENADI201948759A patent/ECSP19048759A/es unknown
-
2020
- 2020-08-17 US US16/994,875 patent/US11453655B2/en active Active
- 2020-12-18 CY CY20201101200T patent/CY1123736T1/el unknown
-
2021
- 2021-04-28 JP JP2021075890A patent/JP7373522B2/ja active Active
- 2021-08-03 AU AU2021211993A patent/AU2021211993B2/en active Active
-
2022
- 2022-04-08 UY UY0001039723A patent/UY39723A/es active IP Right Grant
- 2022-06-20 ZA ZA2022/06810A patent/ZA202206810B/en unknown
- 2022-08-04 US US17/880,720 patent/US12384762B2/en active Active
-
2023
- 2023-06-22 AU AU2023203944A patent/AU2023203944A1/en not_active Abandoned
- 2023-08-14 JP JP2023132080A patent/JP2023154048A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12384762B2 (en) | Modulator of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| US11186566B2 (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| HK40049247A (en) | Crystalline form of a n-(pyrazol-4-yl)sulfonyl-6-(pyrazol-1-yl)-2-(pyrrolidin-1-yl)pyridine-3-carboxamide for treating cystic fibrosis | |
| HK40014130A (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| HK40014130B (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| BR112019011626B1 (pt) | Composto modulador do regulador de condutância transmembrana na fibrose cística, seu uso, e composições farmacêuticas | |
| BR122021023793B1 (pt) | Forma cristalina a, m, e, x, y, p2 do composto 1, seus usos, solvato do composto 1, método de preparo da forma cristalina a do composto 1, dispersão sólida, seu uso, e composição farmacêutica | |
| BR122024017810B1 (pt) | Derivado deuterado de um composto modulador do regulador de condutância transmembrana na fibrose cística, seu uso, e composições farmacêuticas | |
| BR122024017810A2 (pt) | Derivado deuterado de um composto modulador do regulador de condutância transmembrana na fibrose cística, seu uso, e composições farmacêuticas | |
| OA19688A (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator. | |
| HK40011778A (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| HK40011778B (en) | Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator | |
| EA040454B1 (ru) | Модулятор муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости, фармацевтические композиции, способы лечения и способы получения модулятора |