[go: up one dir, main page]

RS60190B1 - 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za lečenje raka - Google Patents

2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za lečenje raka

Info

Publication number
RS60190B1
RS60190B1 RS20200459A RSP20200459A RS60190B1 RS 60190 B1 RS60190 B1 RS 60190B1 RS 20200459 A RS20200459 A RS 20200459A RS P20200459 A RSP20200459 A RS P20200459A RS 60190 B1 RS60190 B1 RS 60190B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
methyl
mixture
ch2cl2
compound
Prior art date
Application number
RS20200459A
Other languages
English (en)
Inventor
Sam Butterworth
Richard Andrew Ward
Maurice Raymond Verschoyle Finlay
Vasantha Krishna Kadambar
Chandrasekhara Reddy Chintakuntla
Andiappan Murugan
Claudio Edmundo Chuaqui
Heather Marie Redfearn
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46875901&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS60190(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of RS60190B1 publication Critical patent/RS60190B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Luminescent Compositions (AREA)
  • Inks, Pencil-Leads, Or Crayons (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Liquid Crystal Substances (AREA)

Description

Ovaj pronalazak se odnosi na određena 2-(2,4,5-supstituisana-anilino)pirimidinska jedinjenja i na njihove farmaceutske soli koji mogu da budu korisni u tretmanu ili prevenciji bolesti ili medicinskog stanja posredovanog sa određenim mutiranim formama receptora za epidermalni faktor rasta (na primer, L858R aktivirajući mutant, mutant koji aktiviše izrezivanje egzona 19 i T790M rezistentan mutant). Takva jedinjenja i njihove soli mogu da budu korisni u tretmanu ili prevenciji velikog broja različitih tumora. Ovaj pronalazak takođe se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže pomenuta jedinjenja i njihove soli, na posebno korisne polimorfne forme pomenutih jedinjenja i soli, na intermedijare korisne za proizvodnju pomenutih jedinjenja i na navedena jedinjenja i njihove soli za upotrebu za tretman bolesti koje su posredovane sa brojnim različitim formama EGFR.
EGFR je trans-membranska proteinska tirozin kinaza koja je član porodice erbB receptora. Nakon vezanja liganda faktora rasta, poput epidermalnog faktora rasta (EGF), receptor može da se homo-dimerizuje sa drugim EGFR molekulom ili hetero-dimerizuje sa drugim članom porodice poput erbB2 (HER2), erbB3 (HER3), ili erbB4 (HER4).
Homo- i/ili hetero-dimerizacija erbB receptora dovodi do fosforilacije ključnih tirozinskih ostataka u intra-celularnom domenu i stimuliše brojne prenosne puteve intra-celularnih signala koji su uključeni u ćelijskoj proliferaciji i preživljenju. Negativno regulisanje signaliziranja putem erbB porodice omogućava proliferaciju, invaziju, metastaze, angiogenezu, i preživljenje tumorskih ćelija, a opisano je kod brojnih humanih tumora, uključujući one koje zahvataju pluća, glavu i vrat i dojke.
Porodica erbB prema tome predstavlja logična meta za razvoj anti-tumorskih lekova, a brojni agensi koji ciljaju EGFR ili erbB2 su klinički dostupni, uključujući gefitinib (IRESSA™), erlotinib (TARCEVA™) i lapatinib (TYKERB™, TYVERB™). Detaljne pregledne članke o signaliziranju preko erbB receptora i njegove uloge u tumorogenezi mogu da se pronađu u New England Journal of Medicine (2008) Vol. 358, 1160-74 i u Biochemical and Biophysical Research Communications (2004) Vol.319, 1-11.
Tokom 2004. je objavljeno (Science [2004] vol. 304, 1497-500 i New England Journal of Medicine [2004] vol. 350, 2129-39) da aktivirajuće mutacije u EGFR pokazuju korelaciju sa odgovorom na terapiju sa gefitinibom kod nesitnoćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). Najčešće EGFR aktivirajuće mutacije, L858R i delE746_A750, dovode do porasta afiniteta za male molekule inhibitore tirozin kinaze poput gefitiniba i erlotiniba i smanjenja afinitet za adenozin trifosfat (ATP) u odnosu na divlji tip (WT) EGFR. Na kraju krajeva, stečena rezistencija na terapiju sa gefitinibom ili erlotinibom se pojavljuje, na primer, usled mutacije gatekeeper residue T790M, koja je detektovana u 50% klinički rezistentnih pacijenata. Ova mutacija se veruje da sterički ne ometa vezanje gefitiniba ili erlotiniba na EGFR, već samo menja afinitet prema ATP do nivoa koji su uporedivi sa divljim tipom EGFR.
WO 2009/158571 A1 opisuje određena jedinjenja pirimidina kao inhibitore proteina kinaza, uključujući inhibitore EGFR. US 2011/046370 A1 opisuje određene 1,3,6-supstituisane derivate indola kao inhibitore protein kinaza. WO 2011/053476 A1 opisuje određena jedinjenja imidazopiridina kao inhibitore protein kinaza, uključujući EGFR. WO 02/083653 Al opisuje određene triazinil akrilamide kao inhibitore kinaze.
Šta se tiče važnosti ove mutacije za rezistenciju na postojeće terapije koje ciljaju EGFR, verujemo da agensi koji mogu da inhibiraju pojavu gatekeeper mutacije u EGFR mogu da budu posebno korisni u tretmanu raka.
Preostaje samo potreba za jedinjenjima koja mogu da poseduju favorizovane profile potencije protiv divljeg tipa EGFR u odnosu na forme sa aktivirajućim mutantima EGFR (na primer, L858R EGFR mutant, ili delE746_A750 mutant ili mutant sa delecijom egzona 19 iz EGFR) i/ili na forme sa rezistentnim mutantima EGFR (na primer T790M EGFR mutant), i/ili da poseduju selektivnost u odnosu na druge encimske receptore šta može da načini pomenuta jedinjenja posebno korisnima za razvoj terapeutskih agenasa. U tom pogledu, preostaje potreba za jedinjenjima koja mogu snažno da inhibiraju određene aktivirajuće i rezistentne mutante EGFR dok istovremeno relativno slabo inhibiraju divlji tip EGFR. Može da se očekuje da će takva jedinjenja da budu prikladna kao terapeutski agensi, posebno kod tretmana raka, zbog smanjivanja toksikologije koja je posledica inhibicije divljeg tipa EGFR. Takvi tipovi toksikologije su poznati i manifestiraju se kod ljudi u vidu kožnih osipa i/ili proliva. Podnositelji ove predmetne prijave su iznenađujuće pronašli da jedan ili više 2-(2,4,5-supstituisana-anilino)pirimidinska jedinjenja poseduju visoku potenciju protiv nekoliko mutiranih forma EGFR, dok istovremeno relativno slabo inhibiraju divlji tip EGFR.
Jedinjenje(a) iz ovoga pronalaska mogu takođe da poseduju napredne fizičke karakteristike (na primer, visoku rastvorljivost u vodi, višu permeabilnost, i/ili nižu stopu vezanja na belančevine iz plazme) i/ili napredne profile toksičnosti (na primer, smanjenu sposobnost blokiranja hERG) i/ili napredne metaboličke profile u odnosu na druge poznate inhibitore EGFR/EGFR-mutanta. Prema tome, takvo jedinjenje(a) može da bude posebno korisno u tretmanu bolesnih stanja u kojima su umešani EGFR i/ili aktivirajuće mutacije EGFR i/ili rezistentne mutacije EGFR, na primer u tretmanu raka.
U prvom aspektu pronalaska obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (I):
u kojoj:
G je izabran iz 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il,
1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran iz vodonika, fluoro, hloro, metila i cijano;
R<2>je izabran iz metoksi i metila; a
R<3>je izabran iz (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetil-amino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, [2-(metilamino)etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksa-hidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje Formule (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il,
1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, fluora, hlora, metila i cijano;
R<2>je izabran od metoksi i metila; i
R<3>je izabran iz grupe koja sadrži (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njihova farmaceutski prihvatljiva so.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje Formule (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran od 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]-piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, fluora, hlora, metila i cijano;
R<2>je izabran od metoksi i metila; i
R<3>je izabran iz grupe koja sadrži (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njihova farmaceutski prihvatljiva so.
Prikladna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja sa Formulom (I) je, na primer, kisela-adiciona so. Na primer, kisela adiciona so može da se dobije primenom neke anorganske ili organske kiseline. Kisela adiciona so može da se dobije uz pomoć neke anorganske kiseline koja je izabrana iz hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, sumporne kiseline i fosforne kiseline. Kisela adiciona so može da se formira uz pomoć korišćenja organske kiseline koja je izabrana iz trifluorosirćetne kiseline, limunske kiseline, maleinske kiseline, oksalne kiseline, sirćetne kiseline, mravlje kiseline, benzojeve kiseline, fumarne kiseline, sukcinske kiseline, vinske kiseline, mlečne kiseline, piruvinske kiseline, metansulfonske kiseline, benzensulfonske kiseline i p-toluensulfonske kiseline.
U jednoj realizaciji je obezbeđena mesilatna so N-(2-{2-dimetilamino-etil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)-prop-2-enamida.
Treba da se razume da jedinjenje sa Formulom (I), i njegove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da postoje u rastvorenim i nerastvorenim formama. Na primer, rastvorena forma može da bude hidratizovana forma. Treba da se razume da ovaj pronalazak obuhvata sve takve rastvorene i nerastvorene forme.
Jedinjenje sa Formulom (I) može da se administrira u formi proleka koji se raspada u ljudskom ili životinjskom telu kako bi dao jedinjenje sa Formulom (I). Primeri za prolekove uključuju estre, koji mogu da se hidrolizuju in-vivo u jedinjenja sa Formulom (I). Estri koji mogu da se hidrolizuju in-vivo mogu da se dobiju uz pomoć esterifikacije hidroksilne grupe u jedinjenju sa Formulom (I). Brojne forme prolekova su poznate u stanju tehnike. Primere derivata takvih prolekova vidi u:
a) Design of Prodrugs, izdanje: H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) i Methods in Enzymology, vol. 42, str.309-396, urednici: K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);
b) A Textbook of Drug Design and Development, urednici: Krogsgaard-Larsen & H.
Bundgaard, poglavlje 5 "Design and Application of Prodrugs" od H. Bundgaard str.
113-191 (1991);
c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);
d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); i N. Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984).
Jedan aspekt pronalaska obezbeđuje jedinjenja sa Formulom (I) koja inhibiraju jednu ili više aktivirajućih ili rezistentnih mutacija EGFR, na primer L858R aktivirajući mutant, aktivirajući mutant sa delecijom egzona 19 iz EGFR i T790M rezistentni mutant. Prikladno, takva jedinjenja mogu da budu korisna za tretman raka kod pacijenta koji je razvio, ili pokazuje rizik razvijanja, nivoa rezistencije na neku postojeću terapiju na bazi inhibiranja EGFR.
U jednom aspektu pronalaska obezbeđena su jedinjenja sa Formulom (I) koja pokazuju veću mogućnost inhibiranja aktivirajućih ili rezistentnih mutiranih forma EGFR nego EGFR divljeg tipa. Za takva jedinjenja može da se očekuje da budu prikladnija kao terapeutski agensi, posebno za tretman raka, zbog smanjene toksikologije koja je povezana sa inhibicijom EGFR divljeg tipa. Za takve toksikologije se zna da se manifestuju kod ljudi u formi kožnih opisna i/ili proliva.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je izabran između 1H-indol-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)-etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il; 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-amino-propanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je izabran između 1H-indol-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)-azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil](metil)amino, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il i 4-metilpiperazin-1-il; ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je 1 -metil- 1H-indol-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metil-heksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je 1 -metil- 1H-indol-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)-azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil](metil)amino i 4-metilpiperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)-etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metil-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između [2-(dimetilamino)-etil](metil)amino, (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il; ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano u prethodnom tekstu, pri čemu:
G je 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je vodik;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran između [2-(dimetilamino)-etil](metil)amino, (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il; ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je 1H-indol-3-il ili 1-metil-1H-indol-3-il;
R<1>je vodik;
R<2>je metoksi; i
R<3>je [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino ili
[2-(metilamino)etil](metil)amino;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
Neke vrednosti promenljivih grupa su kako sledi. Takve vrednosti mogu se koristiti u kombinaciji sa bilo kojom od ovde definisanih definicija, zahteva, aspekata ili ostvarenja da bi se obezbedile dalje realizacije ovog pronalaska:
G je 1H-indol-3-il.
G je 1-metil-1H-indol-3-il.
G je pirazolo[1,5-a]piridin-3-il.
G je 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il.
R<1>je vodik.
R<1>je hloro.
R<1>je metil.
R<1>je cijano.
R<2>je metoksi.
R<3>je (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il.
R<3>je (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il.
R<3>je 3-(dimetilamino)azetidin-1-il.
R<3>je [2-(dimetilamino)etil](metil)amino.
R<3>je [2-(metilamino)etil](metil)amino.
R<3>je 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il.
R<3>je (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il.
R<3>je 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il.
R<3>je 4-metilpiperazin-1-il.
R<3>je 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il.
R<3>je metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino.
R<3>je metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino.
R<3>je 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il.
1
U daljoj realizaciji ovog pronalaska, koja se odnosi na bilo koji patentni zahtev ili realizaciju sa Formulom (I) koja je ovde opisana ili izvedljiva, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, obezbeđen je takav zahtev ili realizacija gde je jedan od primera jedinjenja iz ove prijave odbijen. Da bi se izbegla sumnja, jedinjenja iz primera su ona koja su u daljem eksperimentalnom delu navedena kao Primer 1, Primer 2, itd.
Stoga, na primer, u jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran između 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, fluoro, hloro, metila i cijano;
R<2>je izabran između metoksi i metila; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, [2-(metilamino)etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so,
pri čemu jedinjenje sa Formulom (I) nije N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metil-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid.
Stoga, u jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran između 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, fluoro, hloro, metila i cijano;
R<2>je izabran između metoksi i metila; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so,
pri čemu jedinjenje sa Formulom (I) nije N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metil-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid.
Stoga, u sledećoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran između 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]-piridin-3-il;
R<1>je izabran između vodonika, fluoro, hloro, metila i cijano;
R<2>je izabran između metoksi i metila; i
R<3>je izabran između (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1 -il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so,
pri čemu jedinjenje sa Formulom (I) nije N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metil-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid.
U daljim obelodanjivanjima su obezbeđena sva intermedijarna jedinjenja, (navedena nadalje u tekstu u Eksperimentalnom delu, u formi njihove slobodne baze).
U daljim obelodanjivanjima su obezbeđena sva intermedijarna jedinjenja, (navedena nadalje u tekstu u Eksperimentalnom delu, u formi njihove slobodne baze), ili neka njihova farmaceutski prihvatljiva so.
Prema tome, primeri za samo neke od malopre pomenutih obelodanjivanja su dati ispod:
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 100, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamin.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 168, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N<1>-(2-dimetilaminoetil)-N<4>-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin ili neka njegova so.
U jednoj realizaciji je obezbeđen N<1>-(2-dimetilaminoetil)-N<4>-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin.
Aminska jedinjenja sa Formulom (II) mogu da se pripreme uz pomoć redukovanja odgovarajućih nitro jedinjenja. Kada G je indol-3-il, tada atom azota iz indolne grupe može da se zaštiti uz pomoć neke prikladne grupe koja štiti azot, na primer fenilsulfonil zaštitna grupa. Za primere zaštitnih grupa, uključujući zaštitne grupe prikladne za zaštitu atoma azota (kao i načini dobivanja i eventualno otklanjanje zaštite) vidi T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", drugo izdanje, John Wiley & Sons, New York, 1991.
Ovi dalji intermedijari obezbeđuju dalje otkrivanje.
Prema tome, u jednom dodatnom obelodanjivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (III):
u kojoj:
G je izabran iz 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il, 1-(N-zaštitna grupa)-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
1
R<1>je izabran iz vodonika, hloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi;
R<3>je izabran iz (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)-pirolidin-1-il; 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksa-hidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino, i 4-[(2S)-2-(tert-butoksikarbonil)amino-propanoil]piperazin-1-il; ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (III), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il 1-(N- zaštitna grupa)-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, kloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran od (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)-pirolidin-1-il; 3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-(tert-butoksikarbonil)amino-propanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova so.
U daljem obelodanjivanju pronalaska obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (III), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H indol-3-il 1-(N- zaštitna grupa)-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, kloro, metila i cijano;
R<2>je metoksi; i
R<3>je izabran od (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1 -il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, [2-(metilamino)etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il;
ili neka njegova so.
Jedan primer za 'N-zaštitnu grupu' iz '1-(N-zaštitna grupa)-indol-3-il' je fenilsulfonilna grupa.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 101, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamin.
U jednoj izvedbi je obezbeđen Intermedijar 169, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N'-(2-dimetilaminoetil)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N'-(2-dimetilaminoetil)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 175, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N<4>-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N<4>-metil-N<1>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-3-nitro-benzen-1,4-diamin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N<4>-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N<4>-metil-N<1>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitro-benzen-1,4-diamin.
Neka jedinjenja sa Formulom (III) imaju R<3>grupu koja je spojena na fenilni prsten sa Formulom (III) preko atoma azota iz R<3>grupe: ova jedinjenja mogu da se pripreme uz pomoć
1
reagovanja nekog odgovarajućeg amina sa odgovarajućim fluoro jedinjenjem. Takvi intermedijari obezbeđuju dalje otkrivanje.
Prema tome, u dodatnom obelodanjivanju opisano je jedinjenje sa Formulom (IV):
u kojoj:
G je izabran iz 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran iz vodonika, hloro, metila i cijano; a
R<2>je metoksi;
ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (IV), kao što je prikazano gore, pri čemu:
G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, klora, metila i cijano; i
R<2>je metoksi;
ili njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 68, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 129, ili njegova so.
1
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 176, ili neka njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitro-fenil)-4-(1-metilindol-3-il)-pirimidin-2-amin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitro-fenil)-4-(1-metilindol-3-il)-pirimidin-2-amin.
Neka jedinjenja sa Formulom (III) imaju R<3>grupu koja je spojena na fenilni prsten sa Formulom (III) preko atoma ugljenika iz R<3>grupe. Ova jedinjenja mogu da se pripreme uz pomoć reagovanja odgovarajućeg organoboronskog jedinjenja (na primer boronat estersko jedinjenje) sa odgovarajućim aril bromidom ili hloridom. Na primer, pomenuto organoboronsko jedinjenje može da bude (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-R<3>. Ovi intermedijari obezbeđuju dalje otkrivanje.
Prema tome, u dodatnom obelodanjivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (V):
u kojoj:
X je bromo ili hloro;
G je izabran iz 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
1
R<1>je izabran iz vodonika, hloro, metila i cijano; a
R<2>je metoksi;
ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju jedinjenja sa Formulom (V), X je bromo.
U jednom obelodanjivanju jedinjenja sa Formulom (V), X je hloro
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 145.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin, ili neka njegova so.
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin.
Povoljno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se pripreme uz pomoć reagovanja jedinjenja sa Formulom (II) sa 3-hloropropanoil hloridom u prisutnosti neke baze (na primer, karbonatne baze alkalnog metala, na primer kalijum karbonat, u nekom prikladnom rastvaraču, kao šta je na primer aceton. Tako nastaje intermedijarno jedinjenje sa Formulom (VI), koje može da se izoluje kao čvrsta materija (u formi slobodne baze ili kao so), ili može da se održava u rastvoru i da se tretira sa nekom bazom (na primer, hidroksid alkalnog metala, na primer NaOH), sa ciljem da se jedinjenje sa Formulom (VI) konvertuje u odgovarajuće jedinjenje sa Formulom (I). Prema tome, jedinjenja sa Formulom (VI), i njihove soli su korisni hemijski intermedijari za dobivanje jedinjenja sa Formulom (I). Prema tome, u dodatnom obelodanjivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (VI):
1
ili neka njegova so, pri čemu G, R<1>, R<2>i R<3>su kao šta je već ovde definisano.
U jednoj realizaciji obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (VI), kao što je prikazano gore, ili njegova so, pri čemu:
G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il, 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, fluora, hlora, metila i cijano;
R<2>je izabran od metoksi i metila; i
R<3>je izabran od (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, [2-(metilamino)etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksahidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il.
U daljem otkrivanju obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (VI), kao što je prikazano gore, ili njegova so, pri čemu:
G je izabran od 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]-piridin-3-il;
R<1>je izabran od vodika, fluora, hlora, metila i cijano;
R<2>je izabran od metoksi i metila; i
R<3>je izabran od (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, 3 -(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksa-hidropirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il, 4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il.
U daljem otkrivanju je obezbeđen Intermedijar 174, ili njegova so.
Prema tome, u ovom slučaju je obezbeđen 3-hloro-N-[2-[2-dimetilaminoetil-(metil)amino]-4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]-propanamid, ili neka njegova so.
1
U jednom obelodanjivanju je obezbeđen 3-hloro-N-[2-[2-dimetilaminoetil-(metil)amino]4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino)fenil]-propanamid.
Drugi intermedijari su korisni u pripremi nekih jedinjenja sa Formulom (I). Prema tome, na primer, u jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 170, ili njegova so. U dodatnom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 171 ili njegova so. U dodatnom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 172, ili njegova so. U jednom obelodanjivanju je obezbeđen Intermedijar 144, ili njegova so.
U skladu sa dodatnim obelodanjivanjem ovoga pronalaska je obezbeđena farmaceutska kompozicija, koja sadrži jedinjenje sa Formulom (I), ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao šta je već ovde definisano zajedno sa nekim farmaceutski-prihvatljivim razređivačem ili nosiocem.
Kompozicije iz ovoga pronalaska mogu da budu u formi koja je prikladna za oralnu upotrebu (na primer kao tablete, pastile, čvrste ili meke kapsule, vodene ili uljane suspenzije, emulzije, prahovi ili granule za dispergovanje, sirupi ili eliksiri), za topikalnu upotrebu (na primer kao kreme, masti, gelovi, ili vodeni ili uljani rastvori ili suspenzije), za administriranje uz pomoć inhalacije (na primer kao fino raspršeni prah ili tečni aerosol), za administriranje uz pomoć insufacije (na primer kao fino raspršeni prah) ili za parenteralno administriranje (na primer kao sterilni vodeni ili uljani rastvor za intravenozno, supkutano, intramišićno doziranje ili u formi čepića za rektalno doziranje).
Kompozicije iz ovoga pronalaska mogu da se dobiju uz pomoć konvencionalnih procedura uz korišćenje konvencionalnih farmaceutskih ekscipijenata, koji su dobro poznati u stanju tehnike. Tako, kompozicije koje su namenjene za oralnu upotrebu mogu da sadrže, na primer, jedan ili više agenasa za bojanje, zaslađivanje, ukus i/ili prezervativa.
Jedinjenje sa Formulom (I) normalno se administrira toplo-krvnoj životinji kao unitarna doza u rasponu od 5-5000 mg/m<2>telesne površine pomenute životinje, tj. približno 0.1-100 mg/kg, pri čemu pomenuti raspon uobičajeno obezbeđuje dozu koja je terapeutski efektivna. Unitarna dozna forma poput tablete ili kapsule uobičajeno sadrži, na primer, 1-250 mg aktivnog sastojka. Dnevna doza uobičajeno varira u zavisnosti o tretiranom domaćinu, određenoj ruti koja se
2
koristi za administriranje, i snazi bolesti koja se tretira. Prema tome, lekar koji leči određenog pacijenta može da odredi optimalnu dozu.
U kontekstu ove specifikacije, termin "terapija" takođe uključuje "profilaksu" osim ako je specifično navedeno drugačije. Termini "terapeutski" i "terapijski" se koriste u skladu sa značenjem.
Kao šta se ovde koristi, termin "tretman" ima svoje uobičajeno značenje koje ukazuje na tretiranje neke bolesti sa ciljem da joj se potpuno ili delomično odstrani jedan, neki ili svi njeni simptomi, ili da se popravi ili kompenzuje prateća patologija.
Kao šta se ovde koristi, termin "profilaksa" ima svoje uobičajeno značenje i uključuje primarnu profilaksu sa ciljem sprečavanja razvoja neke bolesti i sekundarnu profilaksu gde se bolest već pojavila, ali je pacijent privremeno ili permanentno zaštićen od pogoršanja pomenute bolesti ili od pojave novih simptoma povezanih sa samom bolesti.
Kao rezultat svoje inhibitorne aktivnosti protiv L858R EGFR mutanta, T790M EGFR mutanta i aktivirajućeg mutanta delecije egzona 19, jedinjenje sa Formulom (I), i njegove farmaceutski prihvatljive soli, se očekuje da budu korisni u tretmanu bolesti ili medicinskih stanja posredovanih samo sa ili barem delomično sa delovanjem EGFR mutanta, poput na primer raka. Tipovi raka koji mogu da odgovore na tretman u kojem se koristi jedinjenje sa Formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, uključuju, ali bez ograničenja, rak jajnika, rak vrata materice, rak debelog creva, rak dojke, rak pankreasa, gliom, glioblastom, melanom, rak prostate, leukemiju, limfom, ne-Hodgkins-ov limfom, rak želuca, rak pluća, hepatocelularni tumor jetra, gastrointestinalni stromalni tumor (GIST), karcinom štitaste žlezde, rak žučnog kanala, rak tela materice, rak bubrega, anaplastični limfom velikih ćelija, akutnu mijelocitnu leukemiju (AML), multipli mijelom, melanom i mezoteliom.
Za upotrebu jedinjenja sa Formulom (I) za tretman ovde pomenutog tumora je predviđeno da se jedinjenje sa Formulom (I)administrira sisaru, posebno ljudskom biću.
Prema tome, u skladu sa drugim aspektom ovoga pronalaska ovde je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I) kao šta je već definisano, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu kao lek.
U skladu sa drugim aspektom ovoga pronalaska, ovde je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I) kao šta je već definisano, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu neke bolesti koja je posredovana sa L858R EGFR mutantom i/ili T790M EGFR i/ili aktivirajućim mutantom delecije egzona 19. U jednoj izvedbi ovoga pronalaska, pomenuta bolest, koja je posredovana sa L858R EGFR mutantom i/ili T790M EGFR mutantom i/ili aktivirajućim mutantom delecije egzona 19, je rak.
U skladu sa dodatnim aspektom ovoga pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje sa Formulom (I)kao šta je već definisano, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za proizvodnju leka za upotrebu za tretman raka.
U bilo kojem od pomenutih aspekata ili realizacija u kojima se rak pominje u opštem smislu, pomenuti rak može da bude izabran iz raka jajnika, raka vrata materice, raka debelog creva, raka dojke, raka pankreasa, glioma, glioblastoma, melanoma, raka prostate, leukemije, limfoma, ne-Hodgkins-ovog limfoma, raka želuca, raka pluća, raka jetra, gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST), karcinoma štitaste žlezde, raka žučnog kanala, raka tela materice, raka bubrega, anaplastičnog limfoma velikih ćelija, akutne mijelocitne leukemije (AML), multiplog mijeloma, melanoma i mezotelioma.
U bilo kojem od pomenutih aspekata ili realizacija ovoga pronalaska, kada se rak pominje u opštem smislu, mogu da se primene sledeće izvedbe:
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak jajnika.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak vrata materice.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak debelog creva.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak dojke.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak pankreasa.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je gliom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je glioblastom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je melanom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak prostate.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je leukemija.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je limfom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je ne-Hodgkins-ov limfom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak želuca.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak pluća.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je nesitnoćelijski karcinom pluća.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak jetra.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak želuca.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je gastrointestinalni stromalni tumor (GIST).
U jednoj izvedbi pomenuti rak je karcinom štitaste žlezde.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak žučnog kanala.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak tela materice.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je rak bubrega.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je anaplastični limfom velikih ćelija.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je akutna mijelocitna leukemija (AML).
U jednoj izvedbi pomenuti rak je multipli mijelom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je melanom.
U jednoj izvedbi pomenuti rak je mezoteliom.
Anti-tumorski tretman koji je opisan malopre može da se primeni kao pojedinačna terapija ili može da uključuje, osim jedinjenja iz ovog pronalaska, konvencionalnu hirurgiju ili radioterapiju ili hemoterapiju ili imunoterapiju. Takva hemoterapija može da se administrira istovremeno, simultano, u redosledu (redom) ili odvojeno od tretmana sa jedinjenjem iz ovoga pronalaska i može da uključuje jednu ili više od sledećih kategorija anti-tumorskih agenasa: (i) antiproliferativni/antineoplastični lekovi i njihove kombinacije, kao šta se već koriste u medicinskoj onkologiji, poput alkilirajućih agenasa (na primer cis-platina, oksaliplatina, karboplatina, ciklofosfamid, azotni iperit, melfalan, hlorambucil, busulfan, temozolamid i nitrozouree); antimetabolita (na primer gemcitabin i antifolati poput fluoropirimidina kao 5-fluorouracil i tegafur, raltitreksed, metotrekzas, citozin arabinozid, i hidroksiurea); antitumorskih antibiotika (na primer antraciklini kao adriamicin, bleomicin, doksorubicin, daunomicin, epirubicin, idarubicin, mitomicin-C, daktinomicin i mitramicin); antimitotičkih agenasa (na primer vinka alkaloidi kao vinristin, vinblastin,
2
vindezin i vinorelbin i taksoidi kao taksol i taksoter i inhibitori polokinaze); i inhibitora topoizomeraze (na primer epipodofilotoksini kao etopozid i tenipozid, amsakrin, topotekan i kamptotecin);
(ii) citostatski agensi poput anti-estrogena (na primer tamoksifen, fulvestrant, toremifen, raloksifen, droloksifen i jodoksifen), anti-androgena (na primer bikalutamid, flutamid, nilutamid i ciproteron acetat), LHRH antagonista ili LHRH agonista (na primer goserelin, leuprorelin i buserelin), progestogena (na primer megestrol acetat), inhibitora aromataze (na primer, anastrozol, letrozol, vorazol i eksemestan) i inhibitora 5α-reduktaze poput finasterida;
(iii) agensi protiv invazije [na primer inhibitori porodice c-Src kinaza poput 4-(6-hloro-2,3-metilendioksianilino)-7-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]-5-tetrahidropiran-4-iloksihinazoline [AZD0530 (sarakatinib); WO01/94341], N-(2-hloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-ilamino}tiazol-5-karboksamida (dazasinib, BMS-354825; J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661) i bosutiniba (SKI-606), i inhibitora metaloproteinaze poput marimastata, inhibitora delovanja aktivatora receptora urokinaze iz plasminogena ili antitela protiv heparanazu];
(iv) inhibitori funkcije faktora rasta: na primer takvi inhibitori uključuju antitela protiv faktora rasta i antitela protiv receptora faktora rasta (na primer, anti-erbB2 antitelo trastuzumab [Herceptin™], anti-EGFR antitelo panitumumab, anti-erbB1 antitelo cetuksimab [Erbitux, C225] i bilo koje antitelo protiv faktora rasta ili receptora za faktor rasta otkriveno od autora Stem et al. Critical reviews in oncology/haematology, 2005, vol. 54, str.11-29); takvi inhibitori takođe uključuju inhibitore tirozin kinaze, na primer inhibitore porodice epidermalnog faktora rasta (na primer, inhibitori tirozin kinaze iz porodice EGFR poput N-(3-hloro-4-fluorofenil)-7-metoksi-6-(3-morfolinopropoksi)-hinazolin-4-amina (gefitinib, ZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bi(2-metoksietoksi)hinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) i 6-akrilamido-N-(3-hloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoksi)-hinazolin-4-amina (CI 1033), inhibitore erbB2 tirozin kinaze poput lapatiniba); inhibitori porodice hepatocitnog faktora rasta; inhibitori porodice insulinskog faktora rasta; inhibitori porodice faktora rasta dobivenog iz krvnih pločica poput imatiniba i/ili nilotiniba (AMN107); inhibitori serin/treoninskih kinaza (na primer, inhibitori Ras/Raf signaliziranja poput inhibitora farnezil transferaze, na primer sorafenib (BAY 43-9006), tipifamib (R115777) i lonafarnib (SCH66336)), inhibitori ćelijskog signaliziranja preko MEK i/ili AKT kinaza, inhibitori c-kit, inhibitori abl kinaze, inhibitori PI3 kinaze, inhibitori Plt3 kinaze, inhibitori CSF-1R kinaze, inhibitori IGF receptorske (insulinu-sličan faktor rasta) kinaze; inhibitori aurora kinaze (na primer, AZD1152, PH739358, VX-680, MLN8054, R763, MP235, MP529, VX-528 i AX39459) i inhibitori ciklin-zavisne kinaze poput inhibitora CDK2 i/ili CDK4;
(v) antiangiogeni agensi poput onih koji inhibiraju efekte vaskularnog endotelijalnog faktora rasta, [na primer, antitelo protiv vaskularnog endotelijalnog faktora rasta bevacizumab (Avastin™) i na primer, inhibitor VEGF receptorske tirozin kinaze poput vandetaniba (ZD6474), vatalaniba (PTK787), sunitiniba (SU11248), aksitiniba (AG-013736), pazopaniba (GW 786034) i 4-(4-fluoro-2-metilindol-5-iloksi)-6-metoksi-7-(3-pirolidin-1-ilpropoksi)hinazolina (AZD2171; Primer 240 u dokumentu WO 00/47212), jedinjenja poput onih koji su opisani u dokumentima WO97/22596, WO97/30035, WO97/32856 i WO98/13354 i jedinjenja koja deluju preko drugih mehanizama (na primer linomid, inhibitori funkcije integrina αvβ3 i angiostatina)];
(vi) agensi koji oštećuju vaskulaturu poput kombretastatina A4 i jedinjenja koja su opisana u dokumentima WO99/02166, WO00/40529, WO00/41669, WO01/92224, WO02/04434 i WO02/08213;
(vii) antagonist endotelinskog receptora, na primer zibotentan (ZD4054) ili atrasentan; (viii) antisens-terapije, na primer one koje su usmerene na mete koje su malopre navedene, poput ISIS 2503, i anti-ras antisens;
(ix) pristupi genske terapije, uključujući na primer pristupe koje menjaju aberantne gene poput aberantnog p53 ili aberantnog BRCA1 ili BRCA2, GDEPT (gensko-usmerena encimska pro-lek terapija) pristupi poput onih koji koriste citozin deaminazu, timidin kinazu ili bakterijski encim nitroreduktaza i pristupi koji povećavaju tolerantnost pacijenta na hemoterapiju ili radioterapiju poput multi-rezistentne genske terapije; i (x) imunoterapijski pristupi, uključujući na primer ex-vivo i in-vivo pristupe koji povećavaju imunogenost tumorskih ćelija pacijenta, poput transfekcije sa citokinima kao interleukin 2, interleukin 4 ili faktora koji stimuliše kolonije granulocita-makrofaga, pristupi koji smanjuju anergiju T-ćelija, pristupi koji koriste transfektovane imuno-ćelije poput citokinom-transfektovanih dendritnih ćelija, pristupi koji koriste citokinomtransfektovane tumorske ćelijske linije, pristupi koji koriste anti-idiotipska antitela, pristupi koji smanjuju delovanje imuno-supresivnih ćelija poput regulatornih T-ćelija, supresorskih ćelija izvedenih iz mijeloida ili IDO (dendritne ćelije koje eksprimiraju indolamin 2,3,-deoksigenazu), i pristupi koji koriste anti-tumorske vakcine koje se
2
sastoje od belančevina ili peptida koji su izvedeni iz antigena koji su povezani sa tumorom poput NY-ESO-1, MAGE-3, WT1 ili Her2/neu.
Prema tome, u dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđen farmaceutski produkt koji sadrži jedinjenje sa Formulom (I)kao šta je već definisano, i neku dodatnu anti-tumorsku supstanciju, kao šta je već definisano, za objedinjeni tretman raka.
U takvom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđen farmaceutski produkt koji sadrži jedinjenje sa Formulom (I), ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao šta je ovde definisano, i neku dodatnu anti-tumorsku supstanciju, kao šta je već ovde definisano, za objedinjeni tretman raka.
Ovde, gde god se termin "objedinjeni tretman" koristi kao referenca za kombinovani tretman, treba da se razume da se pomenuti odnosi na simultanu, odvojenu ili uzastopnu administraciju. Reference na "objedinjenu administraciju" treba da se razmatraju u istom kontekstu. U jednom aspektu ovoga pronalaska "objedinjeni tretman" se odnosi na simultanu administraciju. U drugom aspektu ovoga pronalaska "objedinjeni tretman" se odnosi na odvojenu administraciju. U dodatnom aspektu ovoga pronalaska "objedinjeni tretman" se odnosi na uzastopnu administraciju. Kada se pomenuta administracija provodi uzastopno ili odvojeno, dnevni način administriranja druge komponente ne bi trebao da bude takav da dovede do nestanka koristi koja proizlazi iz njihove kombinovane upotrebe. Prema tome, u jednoj izvedbi uzastopni tretman podrazumeva administraciju svake komponente iz kombinacije tokom perioda od 11 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je 10 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je 9 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je 8 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je 7 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 6 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 5 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 4 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 3 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 2 dana. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 24 h. U drugoj izvedbi ovaj period je tokom 12 h.
Prema tome, u jednoj izvedbi ovoga pronalaska je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, kao šta je ovde definisano, i neke dodatne antitumorske supstancije za upotrebu za objedinjeni tretman raka.
2
U jednoj izvedbi ovoga pronalaska je obezbeđeno jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, kao šta je ovde definisano, i neka druga anti-tumorska supstancija za upotrebu u simultanom, odvojenom ili uzastopnom tretmanu raka.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje Formule (I) za upotrebu u stvaranju antikancerogenog efekta kod toplokrvne životinje, kao što je čovek, kome je potreban takav tretman, koji obuhvata primenu navedenom sisaru, jedinjenja sa Formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i zajedno primene dodatne anti tumorske supstance navedenom sisaru, pri čemu su količine jedinjenja sa Formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i dodatne anti tumorske supstance zajedno efikasne u stvaranju antikancerogenog efekta.
U jednoj realizaciji je obezbeđeno jedinjenje Formule (I) za upotrebu u stvaranju antikancerogenog efekta kod toplokrvne životinje, kao što je čovek, kome je potreban takav tretman, koji obuhvata primenu navedenom sisaru, jedinjenja sa Formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i istovremene, odvojene ili uzastopne primene dodatne anti tumorske supstance navedenom sisaru, pri čemu su količine jedinjenja sa Formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i dodatne anti tumorske supstance zajedno efikasne u stvaranju antikancerogenog efekta.
U formulaciji lekovitih kompozicija vrlo je važno da pomenuta lekovita supstancija bude u formi koja dozvoljava da se sa njom prikladno rukuje i koristi u procesima. Ovo je važno ne samo sa gledne tačke omogućavanja komercijalno održivog proizvodnog procesa, već takođe sa gledne tačke naknadne proizvodnje farmaceutskih formulacija (na primer, oralne dozne forme poput tableta) koje sadrže aktivno jedinjenje.
Različite međusobne fizičke karakteristike kristalnih forma, ali i u odnosu na ne-kristalno stanje, mogu značajno da utiču na hemijsko i farmaceutsko procesiranje jedinjenja, posebno kada se pomenuto jedinjenje priprema ili koristi na industrijskoj skali.
Nadalje, kod proizvodnje oralnih lekovitih kompozicija, važno je da se obezbedi relevantan i reproducibilan profil koncentracije u plazmi samog leka nakon administriranja pacijentu. Varijabilnost između pacijenta, koja se odnosi na profil apsorpcije leka u želucu, crevu i krvotoku može da utiče na bezbednost leka i na njegovu efikasnost.
2
Hemijska stabilnost, stabilnost čvrstog stanja i "trajnost" aktivnih sastojaka su takođe veoma važni faktori. Pomenuta lekovita supstancija, i kompozicije koje ju sadrže, treba da mogu da se skladište tokom prihvatljivih vremenskih perioda, bez da podležu značajnoj promeni fizičkohemijskih karakteristika komponenata (na primer, hemijska kompozicija, gustoća, higroskopnost i rastvorljivost).
Štaviše, takođe je važna i mogućnost da se obezbedi lek u formi koja je hemijski čim više prečišćen.
Amorfni materijali mogu da stvaraju probleme u tom pogledu. Na primer, takvi materijali su tipično teški za rukovanje i za formulisanje, poseduju nepouzdanu rastvorljivost, a često su nestabilni i hemijski kontaminirani.
Stručnjak iz ove tehničke oblasti razume da, ako lek može da se obezbedi u stabilnoj kristalnoj formi, gore-pomenuti problemi će se rešiti.
Tako, u proizvodnji komercijalno dostupnih, i farmaceutski prihvatljivih, kompozicija za lekove, važno je da se, ako je moguće, obezbedi lek u kristalnoj, i stabilnoj, formi.
Treba da se razume, međutim, da ovaj cilj nije uvek ostvariv. U stvari, tipično, nije moguće da se predvidi, samo na osnovu molekularne strukture, koje su mogućnosti kristalizovanja nekog jedinjenja, kao takvog ili u formi neke svoje soli. Ovo može da se odredi jedino empirijski.
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska, neka jedinjenja i njihove soli mogu da se pripreme u kristalnim formama. Ove kristalne forme mogu da se karakterizuju kao posebna polimorfna forma. Kada je navedeno da se ovaj pronalazak odnosi na kristalnu formu, stepen kristalnosti je prikladno veći oko 60%, bolje veći od oko 80%, preferirano veći od oko 90%, a još bolje veći od oko 95%. Najbolje je da stepen kristalnosti bude veći od oko 98%.
Specifične čvrste forme, koje su ovde opisane, imaju obrasce difrakcije X-zraka na prahu koji su značajno slični kao i obrasci difrakcije X-zraka na prahu koji su prikazani u Slikama i imaju različite 2-teta vrednosti kao šta je prikazano u Tabelama koje su ovde uključene. Treba da se
2
razume da pomenute 2-teta vrednosti obrazaca difrakcije X-zraka na prahu mogu da variraju u odnosu na korišćeni aparat ili u odnosu na snimani primerak, pa prema tome navedene vrednosti se ne smatraju apsolutnima.
Poznato je da obrazac difrakcije X-zraka na prahu može da se dobije sa jednom ili više grešaka merenja u zavisnosti o uslovima merenja (poput korišćene opreme ili aparata). Specifično, opšte je poznato da intenziteti obrazaca difrakcije X-zraka na prahu mogu da fluktuišu u zavisnosti o uslovima merenja. Prema tome, treba da se razume da čvrste forme iz ovoga pronalaska nisu ograničene samo na kristale koji pokazuju obrasce difrakcije X-zraka na prahu koji su identični onim obrascima difrakcije X-zraka na prahu koji su prikazani na Slikama, a bilo koji kristal koji pokazuje obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno sličan nekom od onih koji su prikazani na Slikama spada u okvire ovoga pronalaska. Stručnjak u iz kristalografije može da oceni da li postoji značajna sličnost između upoređivanih obrazaca difrakcije X-zraka na prahu.
Stručnjak iz kristalografije razume da signali (šiljci) relativnog intenziteta mogu da budu pod uticajem, na primer, zrna koja su veća od 30 µm i omera ne-unitarnog aspekta, šta može da utiče na analizu primeraka. Pomenuti stručnjak takođe razume da pozicija refleksija može da bude pod uticajem tačne visine na kojoj se nalazi primerak u difraktometru i nulte kalibracije samog difraktometra. Površina koja je planarna u odnosu na primerak takođe može da utiče. Prema tome, podaci za difrakcijske obrasce koji su ovde predstavljeni ne bi trebali da se smatraju apsolutnim vrednostima. ((Jenkins, R & Snyder, R.L. 'Introduction to X-Ray Powder Diffractometry' John Wiley & Sons 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures).
Opšte uzeto, greška merenja difrakcijskog ugla u difraktometru za difrakciju X-zraka na prahu je približno plus/minus 0.2 ° 2-teta, pa prema tome ovaj stepen greške u merenju treba da se uzme u obzir kada se razmatraju obrasci difrakcije X-zraka na prahu koji su prikazani na Slikama i kada se analiziraju podaci koji su prikazani u Tabelama koje su ovde uključene. Nadalje, treba da se razume da intenziteti mogu da fluktuišu u zavisnosti o eksperimentalnim uslovima i pripremi primerka (preferirana orijentacija).
2
U ovoj specifikaciji N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid se naziva "Jedinjenje X". Inicijalno dobiveno Jedinjenje X je bilo u formi amorfne čvrste materije. Nekoliko korisnih kristalnih forma je naknadno proizvedeno uz pomoć primene uslova koji su ovde opisani u eksperimentalnom delu. U svim izvedbama koje se tuču kristalnih forma koje su ovde navedene, šiljci iz obrazaca difrakcije X-zraka su izmereni (snimljeni) uz pomoć CuKa zračenja.
Polimorfna Forma A Jedinjenja X
Prema tome, u dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje najmanje sa jednom od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene uz pomoć CuKa zračenja: 7.8 i 21.8.
Polimorfna Forma A Jedinjenja X je karakterizovana sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu onako kao šta prikazano na Slici 1.
Signali (šiljci) difrakcije X-zraka na prahu za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su 7.8 (100%), 21.8 (73.4%), 13.3 (59.4%), 6.6 (49.5%), 23.9 (40.5%), 9.6 (38.1%), 14.5 (35.3%), 15.6 (33.2%), 22.7 (31.2%) i 19.1 (29.8%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 7.8°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 21.8°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 7.8° i 21.8°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 7.8, 21.8, 13.3, 6.6, 23.9, 9.6, 14.5, 15.6, 22.7 i 19.1°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je podjednak sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 1.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 7.8° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 21.8° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 7.8° i 21.8° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu sa specifičnim šiljcima kod 2-teta = 7.8, 21.8, 13.3, 6.6, 23.9, 9.6, 14.5, 15.6, 22.7 i 19.1° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma B Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovaj pronalazak obezbeđuje polimorfnu Formu B Jedinjenja X. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa najmanje jednom od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 9.3 i 23.4.
Polimorfna Forma B Jedinjenja X je karakterizovana tome šta ima obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je istovetan sa onim na Slici 3.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su 9.3 (100%), 23.4 (75.0%), 10.5 (63.6%), 17.7 (54.3%), 21.0 (48.1%), 16.1 (46.4%), 26.1 (44.2%), 18.6 (41.8%), 26.7 (32.2%) i 20.6 (30.9%).
1
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 9.3°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 23.4°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 9.3° i 23.4°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 9.3, 23.4, 10.5, 17.7, 21.0, 16.1, 26.1, 18.6, 26.7 i 20.6°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 3.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 9.3° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 23.4° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 9.3° i 23.4° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 9.3, 23.4, 10.5, 17.7, 21.0,
2
16.1, 26.1, 18.6, 26.7 i 20.6° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma C Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time da poseduje najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti izmerenih primenom CuKa zračenja: 6.0 i 11.3.
Polimorfna Forma C Jedinjenja X je karakterizovana time što ima obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je suštinski istovetan sa onom na Slici 5.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su 6.0 (100%), 11.3 (58.2%), 7.5 (40.5%), 10.3 (21.9%), 12.0 (20.1%), 24.9 (19.4%), 13.0 (16.9%), 14.5 (13.5%), 16.5 (13.5%) i 18.3 (11.8%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 6.0°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 11.3°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 6.0° i 11.3°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 6.0, 11.3, 7.5, 10.3, 12.0, 24.9, 13.0, 14.5, 16.5, i 18.3°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan kao i obrazac difrakcije koji je prikazan na Slici 5.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 6.0° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 11.3° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 6.0° i 11.3° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma C Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 6.0, 11.3, 7.5, 10.3, 12.0, 24.9, 13.0, 14.5, 16.5, i 18.3° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma D Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X za koju se veruje da je monohidratna kristalna forma. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time šta sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 9.3 i 10.5.
Polimorfna Forma D Jedinjenja X je karakterizovana time šta ima obrazac difrakcije X-zraka na prahu, koji je značajno istovetan sa onim na Slici 7.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu, koji su specifični za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)], su 9.3 (100%), 10.5 (90.6%), 16.1 (75.8%), 26.1 (75.2%), 21.0 (70.9%), 20.6 (56.9%), 16.8 (56.5%), 17.7 (53.3%), 14.7 (41.3%) i 9.7 (38.3%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 9.3°.
4
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 10.5°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 9.3° i 10.5°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 9.3, 10.5, 16.1, 26.1, 21.0, 20.6, 16.8, 17.7, 14.7, i 9.7°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X koja ima značajno istovetan obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 7.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 9.3° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 10.5° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 9.3° i 10.5° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma D Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 9.3, 10.5, 16.1, 26.1, 21.0, 20.6, 16.8, 17.7, 14.7, i 9.7° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma E Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X za koju se veruje da je hidratizovana forma Jedinjenja X sa stehiometrijom od 1.25. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time šta sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 9.2 i 22.9.
Polimorfna Forma E Jedinjenja X je karakterizovana sa time šta ima obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa onim na Slici 10.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu, koji karakterizuju ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)], su: 9.2 (100%), 22.9 (84.0%), 14.6 (80.3%), 12.7 (77.8%), 16.5 (66.4%), 26.9 (60.3%), 9.7 (95.6%), 14.0 (52.3%), 10.4 (49.9%) i 19.5 (48.3%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 9.2°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 22.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 9.2° i 22.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 9.2, 22.9, 14.6, 12.7, 16.5, 26.9, 9.7, 14.0, 10.4 i 19.5°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 10.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena Forma E Jedinjenja X koje ima obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 9.2° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 22.9° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 9.2° i 22.9° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma E Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 9.2, 22.9, 14.6, 12.7, 16.5, 26.9, 9.7, 14.0, 10.4, i 19.5° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma F Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X za koju se veruje da je hidratizovana forma Jedinjenja X sa stehiometrijom od 0.25. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time šta sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 18.7 i 8.9.
Polimorfna Forma F Jedinjenja X je karakterizovana sa time šta sadrži obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa onim na Slici 13.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za pomenutu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su: 18.7 (100%), 8.9 (87.7%), 15.1 (80.3%), 25.4 (74.6%), 14.5 (72.3%), 22.9 (69.6%), 9.9 (51.1%), 28.2 (42.0%), 8.2 (24.2%) i 11.9 (22.3%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 18.7°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 8.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 18.7° i 8.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 18.7, 8.9, 15.1, 25.4, 14.5, 22.9, 9.9, 28.2, 8.2 i 11.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 13.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 18.7° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 8.9° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 18.7° i 8.9° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma F Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 18.7, 8.9, 15.1, 25.4, 14.5, 22.9, 9.9, 28.2, 8.2 i 11.9° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma K Jedinjenja X
U dodatnom aspektu ovaj pronalazak obezbeđuje polimorfnu Formu K Jedinjenja X. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time šta sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 8.4 i 9.7.
Polimorfna Forma F Jedinjenja X se karakterizuje sa time šta sadrži obrazac difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa onim na Slici 16.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za pomenutu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su: 8.4 (100%), 9.7 (37.7%), 12.2 (32.4%), 15.1 (25.2%), 24.7 (20.7%), 9.0 (16.8%), 21.9 (13.9%), 19.5 (13.9%), 24.2 (13.8%) i 18.3 (11.8%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 8.4°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 9.7°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 8.4° i 9.7°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta od oko = 8.4, 9.7, 12.2, 15.1, 24.7, 9.0, 21.9, 19.5, 24.2 i 18.3°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 16.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 8.4° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 9.7° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 8.4° i 9.7° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma K Jedinjenja X sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 8.4, 9.7, 12.2, 15.1, 24.7, 9.0, 21.9, 19.5, 24.2 i 18.3° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U ovoj specifikaciji, mesilatna so N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamida se naziva "mesilatna so Y".
Polimorfna Forma A mesilatne soli Y
U dodatnom aspektu ovoga pronalaska je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time da sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 5.6 i 6.5.
Polimorfna Forma A mesilatne soli Y se karakterizuje sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa onim iz Slike 18.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (20), Intenzitet (%)] su: 5.6 (100%), 6.5 (66.7%), 10.2 (97.2%), 21.0 (96.2%), 13.5 (91.7%), 22.7 (89.6%), 19.3 (80.6%), 27.3 (75.7%), 15.7 (71.2%) i 19.9 (66.7%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 5.6°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 6.5°.
4
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 5.6° i 6.5°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod oko 2-teta = 5.6, 6.5, 10.2, 21.0, 13.5, 22.7, 19.3, 27.3, 15.7 i 19.9°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 18.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 5.6° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 6.5° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 5.6° i 6.5° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma A mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 5.6, 6.5, 10.2, 21.0, 13.5, 22.7, 19.3, 27.3, 15.7 i 19.9° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Polimorfna Forma B mesilatne soli Y
U dodatnom aspektu ovaj pronalazak obezbeđuje polimorfnu Formu B mesilatne soli Y. Ova polimorfna forma može da se karakterizuje sa time šta sadrži najmanje jednu od sledećih 2θ vrednosti koje su izmerene primenom CuKa zračenja: 7.2 i 8.6.
Polimorfna Forma B mesilatne soli Y se karakterizuje sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa onim iz Slike 20.
Deset šiljaka difrakcije X-zraka na prahu za ovu polimorfnu formu [Ugao 2-teta (2θ), Intenzitet (%)] su: 7.2 (50.2%), 8.6 (55.2%), 15.3 (100%), 10.4 (92.6%), 25.7 (74.0%), 26.1 (63.9%), 16.4 (55.2%), 9.5 (47.5%), 22.1 (46.9%) i 18.8 (47.7%).
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 7.2°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod oko 2-teta = 8.6°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod oko 2-teta = 7.2° i 8.6°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta od oko = 7.2, 8.6, 15.3, 10.4, 25.7, 26.1, 16.4, 9.5, 22.1 i 18.8°.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je značajno istovetan sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji je prikazan na Slici 20.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 7.2° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje jedan specifičan šiljak kod 2-teta = 8.6° plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži najmanje dva specifična šiljka kod 2-teta = 7.2° i 8.6° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
U skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđena polimorfna Forma B mesilatne soli Y sa obrascem difrakcije X-zraka na prahu koji sadrži specifične šiljke kod 2-teta = 7.2, 8.6, 15.3, 10.4, 25.7, 26.1, 16.4, 9.5, 22.1 i 18.8° pri čemu pomenute vrednosti mogu da variraju plus/minus 0.2° 2-teta.
Lista Slika
Sve slike se odnose na čvrste forme jedinjenja: N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid ("Jedinjenje X") ili na njegovu mesilatnu so kada je tako navedeno ("mesilatna so Y").
Slika 1: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma A
Slika 2: DSC termogram – Forma A
Slika 3: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma B
Slika 4: DSC termogram – Forma B
Slika 5: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma C
Slika 6: DSC termogram – Forma C
Slika 7: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma D (monohidrat)
Slika 8: DSC termogram – Forma D, monohidrat
Slika 9: TGA termogram – Forma D, monohidrat
Slika 10: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma E (hidratizovana forma)
Slika 11: DSC termogram – Forma E (hidratizovana forma)
Slika 12: TGA termogram - Forma E (Hidratizovana forma)
Slika 13: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma F (hidratizovana forma)
Slika 14: DSC termogram – Forma F (hidratizovana forma)
Slika 15: TGA termogram – Forma F (hidratizovana forma)
4
Slika 16: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Forma K
Slika 17: DSC termogram – Forma K
Slika 18: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Mesilatna so Forme A
Slika 19: DSC termogram – Mesilatna so Forme A
Slika 20: Obrazac difrakcije X-zraka na prahu – Mesilatna so Forme B
Slika 21: DSC termogram – Mesilatna so Forme B
Hemijska sinteza i procedura biološkog testa
Sledeće skraćenice mogu da se koriste: Skraćenice: THF = tetrahidrofuran; DIPEA = diizopropiletilamin; zas. = zasićeni vodeni rastvor; FCC = fleš-kolonska hromatografija koja koristi silicijum dioksid (silika); TFA = trifluorosirćetna kiselina; s.t. = sobna temperatura; DMF = N,N-dimetilformamid; DMSO = dimetilsulfoksid; DMA = N,N-dimetilacetamid; EtOAc = etil acetat; h. = čas(ovi); Protonski NMR: (<1>H NMR) je izmeren uz pomoć deuterovanog dimetilsulfoksida kod 400 ili 500 MHz na oko 20-30° C, osim ako je drugačije navedeno. Korišćene su standardne NMR skraćenice, (s = singlet; d = dublet; dd = dupli dubleti; t = triplet; q = kvadriplet; p = pentet; m = multiplet; br = široko; itd.). Kada se gvožđe pominje kao reagens, radi se o gvožđu u prahu, koji je prosejano kroz 325 sito i redukovano sa vodonikom. Navedene testne vrednosti (µM) za određeni Primer su IC50vrednosti. Difrakcija X-zraka na prahu (XRPD) je provedena uz pomoć aparata Bruker D4. Difraktogram X-zraka na prahu je određen uz pomoć postavljanja primerka kristalnog materijala na Bruker-ov nosač od pojedinačnog silikonskog kristala (SSC) tako da se sam primerak ravnomerno rasporedi u tankom sloju uz pomoć mikroskopskog stakalca. Primerak je okretan 30 revolucija/min (sa ciljem poboljšanja merne statistike) i ozračen sa X-zrakama koje se generišu uz pomoć bakarne tube za dugo-fino fokusiranje koja je radila kod 40 kV i 40 mA sa talasnom dužinom od 1.5418 angstrema (CuKa zračenje). Paralelne X-zrake su propuštene kroz prorez kojem se automatski menjala divergencija i koji je bio podešen na V20, a reflektovano zračenje je usmeravano kroz proreza koji sprečava raspršivanje od 5.89 mm i prorez za detektovanje od 9.55 mm. Primerak je izlagan tokom 0.03 s po 0.00570° 2-teta povećanju (kontinuirani modus skeniranja) tokom raspona od 2 do 40 stepena 2-teta u teta-teta modusu. Period snimanja je bio 3 min i 36 s. Instrument je bio opremljen sa detektorom koji je bio osetljiv na položaj (Lynxeye). Kontrolni podaci i ostali podaci su obrađeni sa Dell Optiplex 686 NT 4.0 Workstation koja je koristila program Diffrac+. Diferencijalna skenirajuća kalorimetrija (DSC) je provedena uz pomoć aparata "TA Instruments Q1000 differential scanning calorimeter. Tipično, manje od 5 mg materijala koji se nalazio u standardnoj aluminijumskoj posudi sa poklopcem je grejano u temperaturnom rasponu od 25° C do 300° C uz konstantnu ratu grejanja od 10° C/min. Korišćen je gas za prečišćavanje – azot – kod rate protoka od 50 mL/min. Bilo koja kristalna forma koja ima XRPD difraktogram ili DSC termogram koji je značajno istovetan sa onima koji su ovde opisni spada u okvire ovih pronalazaka. Stručnjak iz pomenutih tehničkih oblasti je obučen da odredi značajnu sličnost različitih difraktograma i termograma.
Test 1: Test ćelijske fosforilacije sa EGFR sa delecijom egzona 19 (aktivirajući
pojedinačni mutant)
Humane plućne ćelije linije PC9 (EGFR sa delecijom egzona 19) su nabavljene od American type Culture Collection. PC9 su održavane u RPMI 1640, koji je sadržavao 10% fetalni teleći serum i 2 mM glutamin. Ćelije su uzgajane u vlažnom inkubatoru na 37° C uz 5% CO2. Testovi za merenje ćelijske fosforilacije endogenog p-EGFR u ćelijskim lizatima su provedeni u skladu sa protokolom koji je opisan u R&D Systems DuoSet IC Human Phospho-EGF R ELISA (R&D Systems: kataloški broj #DYC1095). 40 µL ćelija je posejano (10000 ćelija/rupici) u medijum za rast u crnim pločicama tipa Coming sa prozirnim dnom i 384-rupica i inkubirano na 37° C uz 5% CO2tokom noći. Ćelije su akustički dozirane primenom Echo 555 sa jedinjenjima koja su bila serijski razređena u 100% DMSO. Pločice su inkubirane tokom dodatna 2 h, a tada je usledila aspiracija medijuma, a u svaku rupicu je dodano 40 µL pufera za lizu (1x). Greiner-ove crne pločice za snažno vezanje sa 384-rupica su bile prekrivene sa antitelom za hvatanje pa su blokirane sa 3% BSA. Nakon odstranjivanja blokade, 15 µL lizata je bilo preneseno u Greiner-ove crne pločice za snažno vezanje sa 384-rupica pa je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om, dodano je 20 µL antitela za detekovanje i sve je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om dodano je 20 µL supstrata za QuantaBlu fluorogenu peroksidazu (Termo Fisher Scientific: kataloški broj 15169) i sve je inkubirano tokom 1 h. Dodano je 20 µL QuantaBlu stop-rastvora, a pločice su očitane na fluorescenciju primenom Envision plate reader uz korišćenje eksitacijske talasne dužine od 352 nm i emisijske talasne dužine od 460 nm. Dobiveni podaci za svako jedinjenje su uvedeni u prikladan softverski paket (poput Origin) sa ciljem sprovođenja analize podešavanja krive. Iz pomenutih podataka je određena IC50vrednost pomoću izračuna koncentracije jedinjenja koja je dovoljna da omogući 50% efekt.
Test 2: Test ćelijske fosforilacije sa L858R/T790M EGFR (dvostruki mutant)
4
Humane plućne ćelije linije NCI-H 1975 su nabavljene od American type Culture Collection. NCI-H1975 su održavane u RPMI 1640, koji je sadržavao 10% fetalni teleći serum i 2 mM glutamin. Ćelije su uzgajane u vlažnom inkubatoru na 37° C uz 5% CO2. Testovi za merenje ćelijske fosforilacije endogenog p-EGFR u ćelijskim lizatima su provedeni u skladu sa protokolom koji je opisan od R&D Systems DuoSet IC Human Phospho-EGF R ELISA (R&D Systems: kataloški broj #DYC1095).40 µL ćelija je posejano (10000 ćelija/rupici) u medijum za rast u crnim pločicama tipa Coming sa prozirnim dnom i 384-rupica, a sve je inkubirano na 37° C uz 5% CO2tokom noći. Ćelije su akustički dozirane primenom Echo 555 sa jedinjenjima koja su bila serijski razređena u 100% DMSO. Pločice su inkubirane tokom dodatna 2 h, a nakon aspiracije medijuma u svaku rupicu je dodano 40 µL pufera za lizu (1x). Greiner-ove crne pločice za snažno vezanje sa 384-rupica su prekrivene sa antitelom za hvatanje i blokirane sa 3% BSA. Nakon odstranjivanja blokade, 15 µL lizata je preneseno u Greiner-ove crne pločice za snažno vezivanje sa 384-rupica i sve je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om dodano je 20 µL antitela za detektovanje i sve je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om dodano je 20 µL supstrata za QuantaBlu fluorogenu peroksidazu (Termo Fisher Scientific: kataloški broj 15169) i sve je inkubirano tokom 1 h. U pločice je dodano 20 µL QuantaBlu stop-rastvora, a pločice su fluorescencijski očitane u čitaču pločica uz korišćenje eksitacijske talasne dužine od 352 nm i emisijske talasne dužine od 460 nm. Podaci dobiveni za svako jedinjenje su uvedeni u prikladni softverski paket (poput Origin) sa ciljem da se provede analiza uz pomoć podešavanja krive. Iz pomenutih podataka je određena IC50vrednost izračunavanjem koncentracije jedinjenja koja je neophodna za postizanje 50% efekta.
Test 3: Test ćelijske fosforilacije sa divljim-tipom EGFR
Humane ćelije debelog creva iz linije LoVo su nabavljene iz zbirke American type Culture Collection. LoVo su održavane u RPMI 1640 koji je sadržavao 3% osiromašenog fetalnog telećeg seruma i 2 mM glutamin. Ćelije su uzgajane u vlažnom inkubatoru na 37° C uz 5% CO2. Testovi merenja ćelijske fosforilacije endogenog p-EGFR u ćelijskim lizatima su provedeni u skladu sa protokolom koji je opisan od R&D Systems DuoSet IC Human Phospho-EGF R ELISA (R&D Systems: kataloški broj #DYC1095). 40 µL ćelija je posejano (15000 ćelija/rupici) u medijum za rast u crnim pločicama tipa Coming sa prozirnim dnom i 384-rupica i sve je inkubirano na 37° C uz 5% CO2tokom noći. Ćelije su akustički dozirane primenom Echo 555 sa jedinjenjima koja su bila serijski razređena u 100% DMSO. Pločice su inkubirane
4
tokom dodatna 2 h, a tada su ćelije u njima stimulisane sa 100 ng/mL tokom 10 min, a nakon aspiracije medijuma u svaku rupicu je dodano po 40 µL pufera za lizu (1x). Greiner-ove crne pločice za snažno vezanje sa 384-rupica su prekrivene sa antitelom za hvatanje i blokirane sa 3% BSA. Nakon odstranjivanja blokade po 15 µL lizata je preneseno u Greiner-ove crne pločice za snažno vezivanje sa 384-rupica i sve je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om dodano je po 20 µL antitela za detektovanje i sve je inkubirano tokom 2 h. Nakon aspiracije i ispiranja pločica sa PBS-om, dodano je po 20 µL supstrata za QuantaBlu fluorogenu peroksidazu (Termo Fisher Scientific: kataloški broj 15169) i sve je inkubirano tokom 1 h. Dodano je po 20 µL QuantaBlu stop-rastvora, a pločice su fluorescencijski očitane u čitaču pločica Envision uz pomoć eksitacijske talasne dužine od 352 nm i emisijske talasne dužine od 460 nm. Podaci dobiveni za svako jedinjenje su uvedeni u odgovarajući softverski paket (poput Origin) sa ciljem da se provede analiza primenom podešavanja krive. Iz pomenutih podataka je određena IC50vrednost izračunavanjem koncentracije jedinjenja koja je neophodna da se postigne 50% efekt.
Testni podaci (µM) za Primere iz ove predmetne prijave su prikazani u tabeli ispod. Mada su pomenuti testni podaci navedeni kod određenog broja važnih slika, to ne trena da se uzme kao potvrda da su pomenuti podaci određeni kao tačni za pomenuti broj važnih slika.
4
4
Primer 1: N-{4-metoksi-2-[1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il]-5-[(5-metil-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.331 mL, 1 M u THF, 0.33 mmol) je dodan kap po kap u rastvor 6-metoksi-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-N1-[5-metil-4-(pirazolo[1,5-a]-piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 1, 146 mg, 0.33 mmol) i DIPEA (0.086 mL, 0.50 mmol) u THF (4 mL) na -10° C tokom perioda od 1 min pod N2. Nastala smeša je mešana na 0° C tokom 15 min, a tada je koncentrisana in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(5 mL) uz malo CH3OH. Ovaj rastvor je tada ispran sa zas. NaHCO3(2 mL), osušen (MgSO4), a tada koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 5-25% CH3OH u CH2Cl2i koncentrisanje odgovarajućih frakcija in vacuo daje materijal koji je rastvoren u smeši CH2Cl2: 7 N metanolnog amonijaka u omeru 100:8 (1 mL) i filtriran kroz pločicu od silike (1 g). Koncentrisanje nastalog rastvora daje jedinjenje iz naslova (70 mg, 38%) u formi bledonarandžaste pene;<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.37 (2H, m), 2.42 (3H, s), 2.53-2.57 (2H, m), 2.97
4
(2H, m), 3.87 (3H, d), 5.66 (2H, d), 6.14 (1H, d), 6.39 (1H, d), 6.86 (1H, s), 7.07 (1H, t), 7.42 (1H, m), 7.98 (1H, s), 8.17 (1H, s), 8.32 (1H, s), 8.48 (1H, d), 8.58 (1H, s), 8.81 (1H, d), 9.29 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>496.
Primer 2: N-(5-{[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-[1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il]fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.217 mL, 1 M u THF, 0.22 mmol) je dodan kap po kap u gustu smešu N'-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 7, 100 mg, 0.22 mmol) i DIPEA (0.057 mL, 0.33 mmol) u THF (3 mL) na -5° C tokom perioda od 1 min pod N2. Nastala smeša je mešana na 0° C tokom 15 min, a tada je koncentrisana in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(5 mL) uz nekoliko kapi CH3OH, pa je ispran sa zas. NaHCO3(2 mL). Organski rastvor je tada osušen (MgSO4) i nabijen u siliku, in vacuo. Prečišćavanje uz pomoć FCC, eluiranje sa 5-25% CH3OH u CH2Cl2i koncentrisanje odgovarajućih frakcija in vacuo daje ostatak koji je ispran sa CH3OH (0.3 mL) i osušen na vazduhu šta daje jedinjenje iz naslova (37 mg, 31%) u formi bež kristalne čvrste materije.<1>H NMR: 2.28 (3H, s), 2.38 (2H, m), 2.55 (2H, m), 2.98 (2H, d), 3.85 (3H, s), 5.6-5.72 (2H, m), 6.15 (1H, m), 6.41 (1H, m), 6.88 (1H, s), 7.10 (1H, t), 7.18 (1H, t), 7.47 (1H, d), 7.98 (1H, s), 8.33 (1H, s), 8.36 (1H, d), 8.42 (1H, s), 8.49 (1H, s), 9.29 (1H, s), 11.86 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>515.
Primer 3: N-(5-{[4-(1H-indol-3-il)-5-metilpirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-[4-metilpiperazin-1-il]fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.025 mL, 0.30 mmol) je dodan kap po kap u N'-[4-(1H-indol-3-il)-5-metilpirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 12, 135 mg, 0.30 mmol) i DIPEA (0.090 mL, 0.33 mmol) u CH2Cl2(10 mL) i DMF (2 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 2 h. Tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i ekstrahovana sa CH2Cl2(40 mL). Nastao organski rastvor je ispran sa zas. Na2CO3(20 mL), a tada i sa zas. slanim rastvorom (20 mL). Rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje uz pomoć FCC, eluiranje sa 1-5% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje grubi produkt. Dodatno prečišćavanje uz pomoć preparativne HPLC (Waters SunFire kolona, 5µ silika, 19 mm dijametar, 100 mm dužina), eluiranje sa opadajuće polarnim smešama vode (koja sadrži 0.1% mravlju kiselinu) i CH3CN, a nakon toga sa HPLC (Waters XBridge Prep C18 OBD kolona, 5µ silika, 19 mm dijametar, 100 mm dužina), eluiranje sa opadajuće polarnim smešama vode (koja sadrži 1% NH3) i CH3CN daje jedinjenje iz naslova (23 mg, 15%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.37 (3H, s), 2.48-2.57 (4H, m), 2.87 (4H, t), 3.84 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.18 (1H, dd), 6.59 (1H, dd), 6.87 (1H, s), 7.05 (1H, dd), 7.15 (1H, t), 7.44 (1H, d), 7.83 (1H, s), 7.98 (1H, d), 8.22 (1H, s), 8.34 (1H, d), 8.49 (1H, s), 8.97 (1H, s), 11.68 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>498.60.
Primer 4: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.042 mL, 0.51 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-[(3R)-3-dimetilamino-pirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 18, 245 mg, 0.51 mmol) i DIPEA (0.097 mL, 0.56 mmol) u CH2Cl2(10 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 2 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje penu nakon koncentrisanja in vacuo. Ova pena je smrvljena sa CH2Cl2i dietil etrom, a nastala čvrsta materija je sakupljena sa filtracijom i osušena šta daje jedinjenje iz naslova (157 mg, 58%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.68-1.83 (1H, m), 2.05-2.16 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.64-2.76 (1H, m), 3.18-3.29 (3H, m), 3.36-3.47 (1H, m), 3.77 (3H, s), 5.67 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.48 (1H, dd), 6.54 (1 H, s), 7.12 (1H, t), 7.37 (1H, t), 7.43 (1H, s), 8.28-8.46 (2H, m), 8.55 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.94 (1H, s), 9.37 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>533.5.
Primer 5: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[3-dimetilaminoazetidin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.038 mL, 0.47 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-(3-dimetilamino-azetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 24, 220 mg, 0.47 mmol) i DIPEA (0.090 mL, 0.52 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koji je bio ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 3 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (221 mg, 90%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 2.09 (6H, s), 3.08 (1H, p), 3.55-3.62 (2H, m), 3.76 (3H, s), 3.97 (2H, t), 5.66 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.25 (1H, s), 6.45
1
(1H, dd), 7.10 (1H, dd), 7.35 (1H, s), 7.39 (1H, dd), 8.25-8.40 (1H, m), 8.35 (1H, s), 8.45 (1H, s), 8.81 (1H, d), 8.92 (1H, s), 9.24 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>519.56.
Primer 6: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[2-dimetilaminoetil-metilamino]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Akriloil hlorid (1.248 mL, 1 M u THF, 1.25 mmol) je dodan kap po kap u N<4>-[5-hloro-4-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-[2-(dimetilamino)etil]-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin (Intermedijar 33, 530 mg, 1.13 mmol) i DIPEA (0.244 mL, 1.36 mmol) u THF (20 mL) koji su bili ohlađeni do 0° C. Smeša je mešana na 0° C tokom 2 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL), a tada je ispran naknadno sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (25 mL), i zas. slanim rastvorom (25 mL). Organski rastvor je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% 2 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2i dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje smeđu gumu. LCMS analiza pokazuje prisutnost nečistoća. Dodatan pokušaj prečišćavanja je proveden sa FCC, uz eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane šta daje smeđu gumu koja sadrži jedinjenje iz naslova. Pokušaji da se pomenuta guma prevede u čvrstu materiju uz pomoć mrvljenja su bili neuspešni. Liofilizacija iz smeše CH3CN/voda je takođe propala, ali je liofilizacija iz smeše CH3OH/voda dala smeđu polu-čvrstu materiju. Mrvljenje pomenute polu-čvrste materije sa dietil etrom nakon isparavanje etra daje jedinjenje iz naslova (191 mg, 32%) u formi bledo žute, „slobodno-tečne“ čvrste materije;<1>H NMR: (CDCl3) 2.28 (6H, s), 2.32 (2H, t), 2.71 (3H, s), 2.84-2.92 (2H, m), 3.87 (3H, s), 5.67 (1H, dd), 6.29 (1H, dd), 6.37 (1H, dd), 6.80 (1H, s), 6.89 (1H, td), 7.23-7.33 (1H, m), 7.46 (1H, s), 8.45 (1H, s), 8.52 (1H, d), 8.56 (1H, d), 8.94 (1H, s), 9.39 (1H, s), 10.09 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>521.29.
Primer 7: N-{2-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]pirol-1-il]-5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-4-metoksifenil}prop-2-enamid Akriloil hlorid (1 M u THF, 0.225 mL, 0.22 mol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]pirol-1-il]-N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 35, 105 mg, 0.21 mmol) i DIPEA (0.041 mL, 0.24 mmol) u CH2Cl2(3 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 0.5 h, isprana sa slanim rastvorom, a tada je koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2.5% 7 N metanolnim
2
amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (60 mg, 52%) u formi bledo žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.77-1.81 (1H, m), 1.95-2.16 (5H, m), 2.24-2.35 (1H, m), 2.38-2.48 (1H, m), 2.86-2.90 (1H, m), 3.18-3.22 (1H, m), 3.37-3.45 (1H, m), 3.76 (3H, s), 4.33-4.37 (1H, m), 5.68 (1H, dd), 6.18 (1H, dd), 6.51 (1H, dd), 6.66 (1H, s), 7.10 (1H, dt), 7.33-7.41 (1H, m), 7.65 (1H, s), 8.3-8.4 (2H, m), 8.56 (1H, s), 8.81 (1H, d), 8.94 (1H, s), 9.38 (1H, s); m/z : ES<+>, MH<+>545.57.
Primer 8: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)aminol]-4-metoksi-2-[5-metil-2,5-diazaspiro-[3.4]oktan-2-il]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (5.71 mg, 0.06 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 45, 31 mg, 0.06 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 3 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (21 mg, 61%) u formi žute pene;<1>H NMR: 1.70 (2H, dd), 1.98-2.11 (2H, m), 2.37 (3H, s), 2.62 (2H, t), 3.65 (2H, d), 3.76 (3H, s), 3.95 (2H, d), 5.67 (1H, d), 6.09-6.27 (2H, m), 6.43 (1H, dd), 7.10 (1H, t), 7.30 (1H, s), 7.34-7.45 (1H, m), 8.35 (2H, s), 8.44 (1H, s), 8.81 (1H, d), 8.92 (1H, s), 9.20 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>545.5.
Primer 9: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il]pirimidin-2-il)amino]-4-metoksi-2-[1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.026 mL, 0.32 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 55, 150 mg, 0.32 mmol) i DIPEA (0.062 mL, 0.36 mmol) u CH2Cl2(5 mL), koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 3 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (120 mg, 72%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.28 (3H, s), 2.38 (2H, s), 2.54 (2H, t), 2.98 (2H, d), 3.81 (3H, s), 5.62-5.73 (2H, m), 6.14 (1H, dd), 6.43 (1H, dd), 6.88 (1H, s), 7.12 (1H, dt), 7.39-7.47 (1H, m), 7.83 (1H, s), 8.41-8.50 (2H, m), 8.63 (1H, s), 8.85 (1H, d), 8.95 (1H, s), 9.36 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>516.25.
Primer 10: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[4-(2-dimetilamino-2-oksoetil)piperazin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.030 mL, 0.37 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 2-(4-{2-amino-4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksifenil}piperazin-l1il)-N,N-dimetilacetamida (Intermedijar 57, 0.19 g, 0.35 mmol) i DIPEA (0.067 mL, 0.39 mmol) u CH2Cl2(5 mL). Smeša je mešana tokom 0.5 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(20 mL) i isprana sa zas. slanim rastvorom (2×25 mL). Organski rastvor je osušen (MgSO4), i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.157 g, 75%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (CDCl3) 2.76 (4H, s), 2.90-2.96 (4H, m), 2.98 (3H, s), 3.12 (3H, s), 3.30 (2H, s), 3.87 (3H, s), 5.65-5.77 (1H, m), 6.18-6.37 (2H, m), 6.80 (1H, s), 6.90 (1H, t), 7.28 (1H, d), 7.42 (1H, s), 8.44 (1H, s), 8.46-8.59 (3H, m), 8.93 (1H, s), 9.33 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>590.52.
Primer 11: (S)-N-{2-[4-(2-aminopronanulja)piperazin-1-il]-5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (10.2 µL, 0.13 mmol) u CH2Cl2(3 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor (S)-tert-butil N-[1-{4-{2-amino-4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksifenil}piperazin-1-il)-1-oksopropan-2-il]karbamat (Intermedijar 59, 65 mg) i DIPEA (0.75 mL) u CH2Cl2(10 mL) koji je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 0.75 h, a tada je ugašena sa vodom (10 mL) i 2 M Na2CO3(5 mL). Faze su razdvojene, a organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(3 mL) pa je tretiran sa TFA (0.1 mL). Nakon stajanja tokom 0.25 h je dodana druga porcija TFA (0.2 mL). Nakon dodatnih 0.25 h rastvor je koncentrisan in vacuo i prečišćen uz pomoć preparativne HPLC (Waters SunFire kolona, 5µ silika, 19 mm dijametar, 100 mm dužina), uz eluiranje sa opadajuće polarnim smešama vode (koja sadrži 0.1% mravlju kiselinu) i CH3CN. Frakcije koje sadrže željeno jedinjenje su koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (17 mg, 6% od 5-hloro-N-(4-fluoro-2-methdxy-5-nitrofenil)4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: 1.25 (3H, s), 2.83-2.96 (4H, m), 3.65-3.82 (7H, m), 4.14-4.23 (1H, m), 5.73 (1H, d), 61.9 (1H, d), 6.64-6.70 (1H, m), 6.69 (1H, s), 7.08-7.12 (1H, m) 7.30-7.37 (1H, m), 8.20-8.28 (2H, m), 8.35-8.41 (2H, m), 8.68 (1H, s), 8.80-8.84 (1H, m), 8.95 (1H, s), 9.11-9.15 (1H, m); mlz: ES<+>MH<+>576.60.
4
Primer 12: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.042 mL, 0.52 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu (S)-N<1>-[5-hloro-4-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]-4-[3-(dimetilamino)pirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 61, 250 mg, 0.52 mmol) i DIPEA (0.099 mL, 0.57 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 3 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnog amonijaka u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (194 mg, 70%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.69-1.83 (1H, m), 2.05-2.16 (1H, m), 2.19 (6H, s), 2.65-2.78 (1H, m), 3.18-3.29 (3H, m), 3.35-3.46 (1H, m), 3.77 (3H, s), 5.67 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.48 (1H, dd), 6.54 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.37 (1H, t), 7.43 (1H, s), 8.3-8.46 (2H, m), 8.55 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.94 (1H, s), 9.37 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>533.5.
Primer 13: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-4-metoksi-2-[4-metilpiperazin-1-il]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.092 mL, 1.14 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 63, 480 mg, 1.03 mmol) i DIPEA (0.214 mL, 1.24 mmol) u CH2Cl2(18 mL) na s.t. Nakon 0.25 h je dodano još akrolil hlorida (15 mg u 0.15 mL CH2Cl2). Smeša je mešana tokom 0.5 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (390 mg, 73%) u formi žute čvrste materije, nakon mrvljenja sa CH3OH;<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.53-2.61 (4H, m), 2.84-2.97 (4H, m), 3.77 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.17 (1H, d), 6.61 (1H, dd), 6.89 (1H, s), 7.11 (1H, t), 7.3-7.42 (1H, m), 8.10 (1H, s), 8.26-8.47 (2H, m), 8.70 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.96 (1H, s), 9.02 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>519.
Primer 14: N-{5-[(5-cijano-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-4-metoksi-2-[4-metilpiperazin-1-il]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.017 mL, 0.21 mmol) u CH2Cl2(0.6 mL) je dodan u smešu 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 65, 87 mg, 0.19 mmol) i DIPEA (0.063 mL, 0.38 mmol) u CH2Cl2(1.5 mL) na 0° C. Smeša je tada mešana na 0° C tokom 4 h. (tokom ovog perioda je dodano dodatnih 0.5 ekv. akriloil hlorida). Smeša je tada razređena sa CH2Cl2, isprana dva puta sa zas. NaHCO3, a tada sa vodom, pa je osušena (MgSO4). Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-6% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (67 mg, 69%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (102°C) 2.30 (3H, s), 2.56-2.59 (4H, m), 2.93-2.96 (4H, m), 3.78 (3H, s), 5.67-5.7 (1H, m), 6.16 (1H, d), 6.44-6.51 (1H, m), 6.95 (1H, s), 7.11 (1H, t), 7.35 (1H, t), 8.20 (1H, s), 8.32 (1H, d), 8.66 (1H, s), 8.72 (1H, br s), 8.76 (1H, d), 8.91 (1H, s), 8.96 (1H, br s); m/z: ES<+>MH<+>510.5.
Primer 15: N-(5-{[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-{4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
U mešani rastvor N'-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 66, 96 mg, 0.22 mmol) u CH2Cl2(15 mL) na 2° C su dodani DIPEA (0.039 mL, 0.22 mmol) i akriloil hlorid (0.018 mL, 0.22 mmol). Nastao rastvor je mešan na 2° C tokom 0.25 h, a tada je ostavljen da se ugreje do s.t. pa je mešan tokom dodatnih 3.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH (10 mL) i nabijena direktno u siliku. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2(koji sadrži 1% koncentrisanog amonijaka (vod.) daje kremovu čvrstu materiju koja sadrži DIPEA.HCl prema MNR analizi. Čvrsta materija je tada rastvorena u smeši CH2Cl2/2-metiltetrahidrofuran (1:1) (30 mL), a nastao rastvor je ispran sa NaOH rastvorom (2 M, 2×30 mL), vodom (2×30 mL), a tada sa zas. slanim rastvorom (30 mL). Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (2 mg, 2%) u formi bele čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom. Tečnost koja nastaje nakon mrvljenja je koncentrisana in vacuo šta daje drugi primerak jedinjenja iz naslova (10 mg, 9%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.55 (4H, s), 2.82-2.95 (4H, m), 3.84 (3H, d), 5.73 (1H, d), 6.24 (1H, dd), 6.62 (1H, dd), 6.89 (1H, s), 7.07-7.21 (2H, m), 7.25 (1H, d), 7.46 (1H, d), 7.89 (1H, s), 8.29 (1H, d), 8.32 (1H, d), 8.42 (1H, s), 8.69 (1H, s), 9.01 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>484.62.
Primer 16: N-[4-metoksi-2-(4-metilpiperazin-1-il)-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil]prop-2-enamid
(2,3,4,5,6-pentafluorofenil)prop-2-enoat (0.030 mL, 0.19 mmol) je dodan kap po kap u rastvor 4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 69, 67 mg, 0.16 mmol) u DMF (0.6 mL) na s.t. pod N2. Nastao rastvor je mešan na s.t. tokom 1.5 h, a tada je razređen sa CH2Cl2(9 mL). Ovaj rastvor je dodan u fleš-siliku (1.5 g) koja je ovlažena sa CH2Cl2u suvo-nabijenom patronu (punjenu), a grubi produkt je eluiran iz silike uz pomoć CH2Cl2. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-7% 2 N metanolnog amonijaka u CH2Cl2obezbeđuje materijal koji je dodatno prečišćen sa FCC, eluiran sa 5-20% CH3OH u CH2Cl2. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo, a mrvljenje obezbeđuje kristalnu čvrstu materiju koja je isprana sa THF (0.1 mL) šta daje jedinjenje iz naslova (23 mg, 28%) u formi bež kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.33-2.43 (3H, m), 2.62-2.81 (4H, m), 2.94 (4H, s), 3.85 (3H, s), 5.72 (1H, d), 6.18 (1H, m), 6.55-6.69 (1H, m), 6.89 (1H, s), 7.05 (1H, m), 7.26 (1H, d), 7.35-7.43 (1H, m), 8.15 (1H, s), 8.34 (1H, d), 8.44 (1H, d), 8.49 (1H, s), 8.79 (1H, d), 8.80 (1H, s), 9.03 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>485.
Primer 17: N-(5-{[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-{4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.621 mL, 1 M u THF, 0.62 mmol) je dodan kap po kap u N'-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 74, 288 mg, 0.62 mmol) i DIPEA (0.119 mL, 0.68 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL), a nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom. Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje grubi produkt u formi bledo smeđeg suvog filma. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a bež čvrsta materija je precipitirana iz rastvora. Rastvor je razređen sa dietil etrom, a tada je smeša filtrirana. Sakupljena čvrsta materija je isprana sa još dietil etra pa je osušena šta daje jedinjenje iz naslova (134 mg, 42%) u formi bež čvrste materije;<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.53-2.59 (4H, m), 2.87-2.94 (4H, m), 3.79 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.17 (1H, dd), 6.60 (1H, dd), 6.89 (1H, s), 7.01 (1H, t), 7.16 (1H, t), 7.45 (1H, d), 8.20 (1H, s), 8.27 (1H, d), 8.35 (1H, s), 8.43 (1H, s), 8.49 (1H, d), 8.96 (1H, s), 11.81 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>518.51.
Primer 18: N-(4-metoksi-5-{[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.358 mL, 1 M u THF, 0.36 mmol) je dodan kap po kap u smešu 4-metoksi-N'-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 77, 164 mg, 0.36 mmol) i DIPEA (0.069 mL, 0.39 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i koncentrisana in vacuo. Nastao materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL). Nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom. Organski rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje bledo žuti suvi film nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a nastao rastvor je razređen sa dietil etrom, šta je rezultovalo sa bež čvrstom materijom koja je precipitirala iz rastvora. Ova čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije, isprana sa dietil etrom, a tada je osušena šta daje jedinjenje iz naslova (96 mg, 52%);<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.37 (3H, s), 2.51 (4H, s), 2.87 (4H, s), 3.83 (3H, s), 3.89 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.17 (1H, d), 6.60 (1H, dd), 6.86 (1H, s), 7.09 (1H, t), 7.22 (1H, t), 7.48 (1H, d), 7.87 (1H, s), 8.05 (1H, s), 8.21 (1H, s), 8.37 (1H, d), 8.46 (1H, s), 9.00 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>512.46.
Primer 19: N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[5=metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.026 mL, 1 M u THF, 0.32 mmol) je dodan kap po kap u smešu N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 81, 147 mg, 0.32 mmol) i DIPEA (0.061 mL, 0.35 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i koncentrisana in vacuo. Nastao materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL). Nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom, a tada je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje žuti suvi film nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a nastao rastvor je razređen sa dietil etrom. Sve je koncentrisano in vacuo i osušeno šta daje jedinjenje iz naslova (93 mg, 57%) u formi bež čvrste materije;<1>H NMR: 2.21 (6H, s), 2.28-2.34 (2H, m), 2.37 (3H, s), 2.73 (3H, s), 2.89 (2H, t), 3.81 (3H, s), 3.89 (3H, s), 5.72 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.38 (1H, dd), 7.02 (1H, d), 7.06 (1H, d), 7.18-7.23 (1H, m), 7.48 (1H, d), 7.91 (1H, s), 8.06 (1H, s), 8.22 (1H, s), 8.36 (1H, d), 8.75 (1H, s), 10.11 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>514.36.
Primer 20: N-(2-{(3R)3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksi-5-{[5-metil-5-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.043 mL, 1 M u THF, 0.53 mmol) je dodan kap po kap u smešu 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)-pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 83, 252 mg, 0.53 mmol) i DIPEA (0.103 mL, 0.59 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i koncentrisana in vacuo. Nastao materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL). Nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom. Vodena ispiranja su ponovo ekstrahovana tri puta uz pomoć CH2Cl2. Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% CH3OH u CH2Cl2daje žuti suvi film nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a nastao rastvor je razređen sa dietil etrom. Nastala smeša je mešana tokom 30 min, a tada je koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (133 mg, 47%) u firmi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.67-1.81 (1H, m), 2.09 (1H, s), 2.19 (6H, s), 2.35 (3H, s), 2.72 (1H, s), 3.20 (3H, t), 3.30-3.43 (1H, m), 3.84 (3H, s), 3.89 (3H, s), 5.66 (1H, d), 6.16 (1H, d), 6.49 (1H, dd), 6.55 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.22 (1H, t), 7.48 (1H, d), 7.75 (1H, s), 7.92 (1H, s), 8.02 (1H, s), 8.18 (1H, s), 8.40 (1H, d), 9.32 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>526.66.
Primer 21: N-(5-{[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.459 mL, 1 M u THF, 0.46 mmol) je dodan kap po kap u smešu N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 85, 226 mg, 0.46 mmol) i DIPEA (0.088 mL, 0.51 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada razređena sa vodom (15 mL) i koncentrisana in vacuo. Nastao materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL). Nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom. Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje žuti suvi film nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a nastao rastvor je razređen sa dietil etrom. Ovo je rezultovalo sa žutom pihtijastom čvrstom materijom koja je precipitirala iz rastvora. Smeša je koncentrisana in vacuo i osušena šta daje jedinjenje iz naslova (142 mg, 57%) u firmi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.68-1.81 (1H, m), 2.04-2.14 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.64-2.75 (1H, m), 3.22 (3H, dd), 3.32-3.44 (1H, m), 3.78 (3H, s), 3.90 (3H, s), 5.66 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.49 (1H, dd), 6.54 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.23 (1H, t), 7.49 (1H, d), 7.54 (1H, s), 8.29-8.39 (3H, m), 8.53 (1H, s), 9.35 (1H, s); mlz: ES<+>MH<+>546.57.
Primer 22: N-(5-{[5-cijano-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.373 mL, 1 M u THF, 0.37 mmol) je dodan kap po kap u smešu 2-({5-amino-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksifenil}amino)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 89, 180 mg, 0.37 mmol) i DIPEA (0.072 mL, 0.41 mmol) u THF (15 mL) na 0° C pod N2. Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je razređena sa vodom (15 mL), a tada je koncentrisana in vacuo. Nastao materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (5 mL). Nastao rastvor je ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom. Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje žuti suvi film nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2, a nastao rastvor je razređen sa dietil etrom. Žuta pihtijasta čvrsta materija je tada precipitirana iz rastvora. Koncentrisanje smeša in vacuo daje jedinjenje iz naslova (91 mg, 46%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (100°C) 1.82 (1H, dq), 2.04-2.11 (1H, m), 2.22 (6H, d), 2.85 (1H, dd), 3.20-3.39 (4H, m), 3.79 (3H, s), 3.90 (3H, s), 5.62 (1H, d), 6.16 (1H, dd), 6.45 (1H, dd), 6.62 (1H, s), 7.10 (1H, t), 7.25 (1H, t), 7.49 (1H, d), 7.65 (1H, s), 8.26 (1H, d), 8.42 (1H, s), 8.59 (1H, s), 8.72 (1H, s), 8.93 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>537.61.
Primer 23: N-(5-{[5-cijano-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-{4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (39 mg, 0.43 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 90, 200 mg, 0.43 mmol) i DIPEA (0.081 mL, 0.47 mmol) u CH2Cl2(5 mL), koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1.5 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(25 mL). Ova smeša je tada isprana sa zas. NaHCO3(50 mL). Vodena ispiranja su dodatno ekstrahovana sa CH2Cl2(2×25 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova zajedno sa nešto rezidualnog početnog materijala. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje ostatak nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ovaj ostatak je rastvoren u malim količinama CH2Cl2i smrvljen sa dietil etrom šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom i osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (106 mg, 48%) u formi kremove čvrste materije;<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.57 (4H, br s), 2.92 (4H, br s), 3.74 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.17 (1H, d), 6.63 (1H, dd), 6.90 (1H, s), 7.01 (1H, br s), 7.25 (1H, s), 7.52 (1H, d), 7.88 (1H, br s), 8.02 (1H, s), 8.48 (1H, s), 8.67 (1H, s), 9.03 (1H, s), 9.40 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>523.27.
Primer 24: N-(5-{[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.044 mL, 0.54 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 93, 258 mg, 0.54 mmol) i DIPEA (0.103 mL, 0.59 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodnoj banji. Smeša je mešana tokom 3 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je suspendovan u CH3OH i filtriran šta daje nešto jedinjenja iz naslova (67 mg). Filtrat je tada koncentrisan in vacuo i prečišćen sa FCC, eluiran sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje čvrstu materiju koja je bila suspendovana u CH3OH i sakupljena uz pomoć filtracije šta daje više jedinjenja iz naslova (64 mg). Obe serije produkta su spojene šta daje jedinjenje iz naslova (131 mg, 46%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.68-1.83 (1H, m), 2.04-2.16 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.63-2.77 (1H, m), 3.15-3.29 (3H, m), 3.35-3.46 (1H, m), 3.78 (3H, s), 5.66 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.49 (1H, dd), 6.54 (1H, s), 7.04 (1H, t), 7.16 (1H, t), 7.45 (1H, d), 7.53 (1H, s), 8.23-8.4 (3H, m), 8.48 (1H, d), 9.34 (1H, s), 11.84 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>532.5.
Primer 25: N-(5-{[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{2-dimetilaminoetilmetilamino}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.027 mL, 0.33 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu N<4>-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 95, 155 mg, 0.33 mmol) i DIPEA (0.063 mL, 0.37 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo.
1
Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (120 mg, 69%) u formi bele čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.22 (6H, s), 2.34 (2H, br t), 2.75 (3H, s), 2.91 (2H, br t), 3.76 (3H, s), 5.73 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.39 (1H, dd), 6.96 (1H, t), 7.05 (1H, s), 7.14 (1H, t), 7.44 (1H, d), 8.26 (1H, d), 8.35 (1H, s), 8.48 (1H, s), 8.50 (1H, d), 8.54 (1H, s), 10.10 (1H, s), 11.85 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>520.6.
Primer 26: N-(5-{[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksinhenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.026 mL, 0.32 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan u smešu N<4>-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 97, 130 mg, 0.27 mmol) i DIPEA (0.090 mL, 0.54 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na 0° C. Smeša je mešana na 0° C tokom 2.5 h (tokom ovog perioda su dodana dodatna 0.2 ekv. akriloil hlorida). Smeša je tada razređena sa CH2Cl2, isprana dva puta sa zas. NaHCO3, a tada sa vodom, osušena (MgSO4), i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnog amonijaka u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (111 mg, 77%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (CDCl3) 2.26 (6H, s), 2.23-2.33 (2H, m), 2.70 (3H, s), 2.86-2.89 (2H, m), 3.88 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.67 (1H, d), 6.25-6.44 (2H, m), 6.79 (1H, s), 7.20-7.37 (3H, m), 7.57 (1H, s), 8.36-8.45 (3H, m), 9.54 (1H, s), 10.11 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>534, 536.
Primer 27: N-(5-{[5-cijano-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-{4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.100 mL, 1 M u THF, 0.1 mmol) je dodan kap po kap u finu gustu smešu 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 99, 47 mg, 0.10 mmol) i DIPEA (0.027 mL, 0.16 mmol) u THF (2 mL) na -10° C tokom perioda od 2 min pod N2. Smeša je tada mešana na 0° C tokom 10 min, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. tokom 20 min. Smeša je tada ohlađena ponovo do -10° C pa je kap po kap dodano još akriloil hlorida (0.06 mL, 1 M u THF, 0.06 mmol). Smeša je mešana na 0° C tokom dodatnih 10 min, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. tokom 20 min. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(2 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(1 mL), osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-7% 7 N metanolnog amonijaka u CH2Cl2date ostatak koji je ispran sa CH3OH (0.1 mL) i osušen na vazduhu šta daje jedinjenje iz naslova (11mg,
2
20%) u formi kremove kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.28 (3H, s), 2.54-2.65 (4H, m), 2.93 (4H, s), 3.75 (3H, s), 5.71 (1H, d), 6.18 (1H, d), 6.64 (1 H, dd), 6.91 (2H, m), 7.18 (1H, s), 7.47 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.52 (1H, s), 8.67 (1H, s), 9.04 (1H, s), 9.40 (1H, s), 11.99 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>509.
Primer 28: N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (34.5 mg, 0.38 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešanu smešu N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 100, 170 mg, 0.38 mmol) i DIPEA (0.073 mL, 0.42 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1.5 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(25 mL) i isprana sa zas. NaHCO3(50 mL). Vodena ispiranja su ekstrahovana sa CH2Cl2(2×25 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (75 mg, 39%) u formi kremove čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>HNMR: 2.21 (6H, s), 2.29 (2H, t), 2.72 (3H, s), 2.89 (2H, t), 3.86 (3H, s), 3.92 (3H, s), 5.77 (1H, dd), 6.27 (1H, dd), 6.43 (1H, dd), 7.04 (1H, s), 7.15 (1H, t), 7.20-7.27 (2H, m), 7.53 (1H, d), 7.91 (1H, s), 8.24 (1H, d), 8.33 (1H, d), 8.68 (1H, s), 9.14 (1H, s), 10.22 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>500.42.
Primer 28 (alternativna sinteza 1): N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
U mešani rastvor 3-hloro-N-[2-[2-dimetilaminoetil(metil)amino]4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]propanamida (Intermedijar 174, 31.5 g, 58.76 mmol) u acetonitrilu (310 mL) je dodan trietilamin (17.84 g, 176.28 mmol) na s.t. Nastala smeša je grejana do 80° C tokom 6 h, a tada je ohlađena do s.t. Tada je dodana voda (130 mL), a smeša je mešana tokom 12 h. Smeša je tada filtrirana, isprana sa smešom vode i acetonitrila (160 mL, 1:1) i osušena na 50° C tokom noći šta daje jedinjenje iz naslova (19.2 g, 94%) u formi čvrste materije koja je ovde identifikovana kao polimorfna forma D.<1>H NMR: 2.69 (3H, s), 2.83 (6H, d), 3.35 (4H, s), 3.84 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.75 (1H, d), 6.28 (1H, d), 6.67 (1H, dd), 7.05-7.23 (2H, m), 7.29 (1H, t), 7.43 (1H, d), 7.56 (1H, d), 8.21 (2H, s), 8.81 (1H, s), 9.47 (1H, s), 9.52 (1H, s), m/z: ES<+>MH<+>500.26.
Primer 28 (alternativna sinteza 2): N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
U mešani rastvor N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 100, 10 g, 21.32 mmol) u THF (95 mL) i vodi (9.5 mL) na 0° C je dodan 3-hloropropanoil hlorid (3.28 g, 25.59 mmol). Smeša je mešana na s.t. tokom 15 min, a tada je dodan NaOH (3.48 g, 85.28 mmol). Nastala smeša je grejana do 65° C tokom 10 h. Smeša je tada ohlađena do s.t. pa su dodani CH3OH (40 mL) i voda (70 mL). Nastala smeša je mešana tokom noći. Nastala čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije, isprana sa vodom (25 mL) i osušena na 50° C tokom 12 h šta daje jedinjenje iz naslova (7.0 g, 94%) u formi čvrste materije koja je ovde identifikovana kao polimorfna Forma D.<1>H NMR: 2.69 (3H, s) 2.83 (6H, d) 3.35 (4H, s) 3.84 (3H, s) 3.91 (3H, s) 5.75 (1H, d) 6.28 (1H, d) 6.67 (1H, dd) 7.05-7.23 (2H, m) 7.29 (1H, t) 7.43 (1H, d) 7.56 (1H, d) 8.21 (2H, s) 8.81 (1H, s) 9.47 (1H, s) 9.52 (1H, s) ES<+>MH<+>500.26.
Primer 28A: mesilatna so N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamida
4
Procedura 1: U mešani rastvor N-[2-[2-dimetilaminoetil(metil)amino]-4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (Primer 28, 20 g, 36.63 mmol) u etanolu (120 mL) i EtOAc (80 mL) na 70° C je dodana metan-sulfonska kiselina (3.59 g, 36.63 mmol) u formi rastvora u EtOAc (40 mL). Nastala smeša je mešana tokom 1.5 h. Nastala čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije i osušena na 80° C u vakuumu tokom noći šta daje so iz naslova (20.5 g, 94%) u formi čvrste materije koja je ovde definisana kao polimorfna Forma B pomenute soli.
Procedura 2: U mešani rastvor N-[2-[2-dimetilaminoetil(metil)amino]-4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]prop-2-enamida (Primer 28, 5 g, 9.11 mmol) u acetonu (45.5 mL) i vodi (4.55 mL) na 50° C je dodana metan sulfonska kiselina (0.893 g, 9.11 mmol) kao rastvor u acetonu (4.55 mL). Nastala smeša je mešana tokom 1.5 h. Nastala čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije i osušena na 80° C u vakuumu tokom noći šta daje so naslova (4.9 g, 94%) u formi čvrste materije koja je ovde definisana kao polimorfna Forma B pomenute soli;<1>H NMR (aceton-d<6>): 2.72 (3H, s), 2.96 (3H, s), 3.01 (6H, s), 3.58 (3H, t), 3.87-3.90 (7H, m), 5.76 (1H, dd), 6.38-6.53 (2H, m), 7.12 (1H, t), 7.20 (1H, t), 7.29 (1H, s), 7.40 (2H, t), 8.07-8.16 (3H, m), 8.56 (1H, s), 9.30 (1H, s), 9.60 (1H, s), 9.66 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>500.26.
Procedura 3: Polimorfna Forma A mesilatne soli N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamida je pripremljena na sličan način kao šta je malopre opisano na skali od ∼50 mg, osim šta je kao rastvarač korišćen acetonitril. Specifično, ∼9.6 mg metansulfonske kiseline je rastvoreno u minimalni volumen acetonitrila. ∼50 mg N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)-prop-2-enamida je takođe rastvoreno u minimalni volumen acetonitrila, a tada je nastao rastvor dodan u rastvor metansulfonske kiseline. Nakon dodavanja je nastala čvrsta materija. Ova čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije i osušena na vazduhu, a tada je analizirana. Specifična forma čvrste materije koja je dobivena u ovom eksperimentu je označena kao Polimorfna Forma A pomenute soli.
Primer 29: N-(5-{[5-cijano-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.035 mL, 0.44 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan u smešu 2-{[5-amino-4-(2-dimetilaminoetil-metilamino)-2-metoksifenil]-amino}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 102, 171 mg, 0.36 mmol) i DIPEA (0.120 mL, 0.73 mmol) u CH2Cl2(3 mL) na 0° C, a tada je smeša mešana na 0° C tokom 1 h. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2, isprana dva puta sa zas. NaHCO3, a tada sa vodom, pa je osušena (MgSO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (68 mg, 36%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (100°C) 2.22 (6H, s), 2.40 (2H, t), 2.76 (3H, s), 2.98 (2H, t), 3.77 (3H, s), 3.90 (3H, s), 5.69 (1H, dd), 6.17 (1H, dd), 6.40 (1H, dd), 7.02-7.06 (2H, m), 7.21-7.25 (1H, m), 7.49 (1H, d), 8.23 (1H, d), 8.45 (1H, s), 8.47 (1H, s), 8.63 (1H, s), 8.86 (1H, s), 9.59 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>525.32.
Primer 30: N-(2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (53.4 mg, 0.59 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešanu smešu 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 103, 270 mg, 0.59 mmol) i DIPEA (0.112 mL, 0.65 mmol) u CH2Cl2(10 mL), koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1.5 h pa je tada razređena sa CH2Cl2(25 mL) i isprana sa zas. NaHCO3(50 mL). Vodena ispiranja su ekstrahovana sa CH2Cl2(2x25 mL). Spojeni organski rastvori su tada osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje jedinjenje iz naslova koje je pomešano sa diaciliranim materijalom. Ovaj materijal je rastvoren u CH2Cl2i smrvljena sa dietil etrom. Nastao precipitat je sakupljen uz pomoć filtracije, ispran sa dietil etrom (10 mL) pa je osušen na vazduhu šta daje kontaminirani produkt (120 mg) u formi žute čvrste materije. Ova čvrsta materija je prečišćena uz pomoć kristalizovanja iz CH3CN šta daje jedinjenje iz naslova (47 mg, 0.092 mmol, 16%) u formi žute čvrste materije. Svi ostaci su spojeni, koncentrisani in vacuo i kristalizovani iz CH3CN šta daje drugu žetvu jedinjenja iz naslova (26 mg, 0.051 mmol, 9%) u formi žute čvrste materije. Totalni prinos jedinjenja iz naslova = 73 mg, 24%;<1>H NMR: (CDCl3) 1.87-1.99 (1H, m), 2.11-2.24 (1H, m), 2.30 (6H, s), 2.83-2.95 (1H, m), 3-3.19 (4H, m), 3.88 (3H, s), 3.99 (3H, s), 5.75 (1H, dd), 6.34 (1H, dd), 6.44 (1H, dd), 6.79 (1H, s), 7.20 (1H, d), 7.23-7.32 (2H, m) delomično sakriven sa CDCl3šiljkom, 7.37-7.42 (1H, m), 7.67 (1H, s), 8.08 (1H, d), 8.38 (1H, d), 8.46 (1H, s), 9.00 (1H, s), 9.71 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>512.26.
Primer 31: N-{5-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-4-metoksi-2-[metil-(2-morfolin-4-iletil)amino]fenil}prop-2-enamid
Akriloil hlorid (0.413 mL, 1 M u THF, 0.41 mmol) je dodan kap po kap u gustu smešu N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-5-metoksi-N<1>-metil-N<1>-(2-morfolin-4-iletil)benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 105, 298 mg, 0.59 mmol) i DIPEA (0.153 mL, 0.88 mmol) u THF (5 mL) na -10° C tokom perioda od 2 min pod N2. Smeša je mešana na 0° C tokom 10 min, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. tokom 20 min. Smeša je ohlađena ponovo do -10° C pa je dodano još akriloil hlorida (0.103 mL, 1 M u THF, 0.103 mmol), kap po kap. Gusta smeša je mešana na 0° C tokom dodatnih 10 min, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. tokom 20 min. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(5 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(2 mL), osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-7% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje gumu. Ova guma je rastvorena u EtOAc (1 mL), pa je dodavan dietil etar (∼1 mL) sve dok ne prestane pojava ulja. Smeša je tada mešana tokom 3 dana, filtrirana, a sakupljena čvrsta materija je osušena isisavanjem šta daje jedinjenje iz naslova (193 mg, 59%) u formi kremove kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.29-2.38 (4H, m), 2.41 (2H, t), 2.74 (3H, s), 3.03 (2H, t), 3.49-3.61 (4H, m), 3.78 (3H, s), 5.72 (1H, d), 6.18 (1H, m), 6.60 (1H, m), 7.00 (1H, s), 7.10 (1H, m), 7.27-7.38 (1H, m), 8.25 (1H, s), 8.40 (2H, m), 8.65 (1H, s), 8.82 (1H, d), 8.95 (1H, s), 9.28 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>563.
Primer 32: N-(5-{[5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il]amino}-4-metoksi-2-{metil-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.028 mL, 0.35 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešanu smešu N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-5-metoksi-N<1>-metil-N<1>-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 107, 0.174 g, 0.33 mmol) u CH2Cl2(2.5 mL) pod N2. Smeša je tada mešana na s.t. tokom 1 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(25 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), a vodeni rastvor od ispiranja je ekstrahovan sa CH2Cl2(20 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-8% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.12 g, 63%) u formi bež pene;<1>H NMR: (CDCl3) 2.31 (3H, s), 2.35-2.6 (10H, m), 2.67 (3H, s), 3.00 (2H, t), 3.88 (3H, s), 5.64-5.82 (1H, m), 6.31-6.50 (2H, m), 6.79 (1H, s), 6.91 (1H, t), 7.29 (1H, t), 7.48 (1H, s), 8.47 (1H, s), 8.54 (2H, t), 8.94 (1H, s), 9.15 (1H, s), 9.38 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>576.59.
Primer 33: N-(4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-(4-metilpiperazin-1-il}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (58.4 mg, 0.64 mmol) u CH2Cl2(1mL) je dodan kap po kap u smešu 4-metoksi-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 110, 286 mg, 0.64 mmol) i DIPEA (0.134 mL, 0.77 mmol) u CH2Cl2(20 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1.5 h na 0° C. Dodano je još DIPEA (30 µL), a tada još akriloil hlorida (20 mg), kap po kap, kao rastvor u CH2Cl2(1 mL). Ova smeša je mešana tokom 2 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(50 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. rastvorom NaHCO3(2×25 mL), a tada su spojena vodena ispiranja ekstrahovana sa CH2Cl2(2×25 mL). Spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Nastala guma je smrvljena sa dietil etrom šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom i osušena in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-8% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (55 mg, 17%) u formi svetlo-sive čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom (uz nekoliko kapi CH3OH);<1>H NMR: 2.27 (3H, s), 2.53-2.59 (4H, m), 2.85-2.91 (4H, m), 3.87 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.75 (1H, d), 6.24 (1H, d), 6.67 (1H, dd), 6.89 (1H, s), 7.15-7.28 (3H, m), 7.53 (1H, d), 7.89 (1H, s), 8.28 (1H, d), 8.32 (1H, d), 8.58 (1H, s), 8.81 (1H, s), 9.07 (1H, s); m/z: ES<+>ME<+>498.58.
Primer 34: N-(5-{[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{3-dimetilaminoazetidin-1-il}-4-metoksihenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.049 mL, 0.60 mmol) u CH2Cl2(0.5 mL) je dodan kap po kap u smešu N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 112, 260 mg, 0.54 mmol) u CH2Cl2(9 mL). Ova smeša je mešana tokom 1 h, a tada je nabijena u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH, a željeni produkt je tada eluiran iz kolone uz pomoć 2 M metanolnog amonijaka. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje smeđu gumu. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% CH3OH u CH2Cl2(koji sadrži 1% koncentrisani vodeni amonijak) daje jedinjenje iz naslova (214 mg, 74%) u formi žute čvrste materije nakon mrvljenja sa CH3OH (0.5 mL) uz primenu ultra-zvučne banje tokom 2 min;<1>H NMR: 2.10 (6H, s), 3.03-3.14 (1H, m), 3.59 (2H, t), 3.77 (3H, s), 3.90 (3H, s), 3.97 (2H, t), 5.66 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.23 (1H, s), 6.46 (1H, dd), 7.12 (1H, t), 7.23 (1H, t), 7.44-7.54 (2H, m), 8.20-8.38 (3H, m), 8.51 (1H, s), 9.21 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>532.
Primer 35: N-(2-{3-dimetilaminoazetidin-1-il}-4-metoksi-5-{[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.024 mL, 0.30 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 114, 130 mg, 0.28 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koji je ohlađen u banji sa ledom i slanim rastvorom do približ. 0° C. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(50 mL) i CH3OH (da se suspenzija koja nastaje potpuno rastvori). Rastvor je tada ispran sa zas. NaHCO3(100 mL) koji je bio razređen sa vodom (10 mL). Vodeni rastvor ispiranja je tada ekstrahovan sa CH2Cl2(2×50 mL), a spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje tamno-smeđu čvrstu materiju. Ova čvrsta materija je grejana u CH3CN pa je izolovana uz pomoć vakuumske filtracije, šta daje jedinjenje iz naslova (45 mg, 31%) u formi bledo-smeđe čvrste materije. Osnovne tečnosti su koncentrisane in vacuo pri čemu su zaostale kao druga serija jedinjenja iz naslova (30 mg, 21%) u formi tamno-smeđe čvrste materije. Totalni prinos jedinjenja iz naslova = 75 mg, 52%;<1>H NMR: 2.08 (6H, s), 2.34 (3H, s), 3-3.1 (1H, m), 3.55 (2H, t), 3.83 (3H, s), 3.88 (3H, s), 3.93 (2H, t), 5.65 (1H, dd), 6.15 (1H, dd), 6.24 (1H, s), 6.44 (1H, dd), 7.13 (1H, t), 7.21 (1H, t), 7.47 (1H, d), 7.66 (1H, s), 7.81 (1H, s), 7.99 (1H, s), 8.17 (1H, s), 8.37 (1H, d), 9.19 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>512.14.
Primer 36: N-(2-{3-dimetilaminoazetidin-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.044 mL, 0.54 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 116, 240mg, 0.54 mmol) i DIPEA (0.104 mL, 0.60 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (38 mg, 14%) u formi žute čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom i ispiranja nastale čvrste materije sa malim volumenom CH3OH;<1>H NMR: 2.10 (6H, s), 3.08 (1H, t), 3.56 (2H, t), 3.86 (3H, s), 3.89 (3H, s), 3.96 (2H, t), 5.69 (1H, dd), 6.18-6.29 (2H, m), 6.52 (1H, dd), 7.14 (1H, d), 7.17-7.28 (2H, m), 7.51 (1H, d), 7.75 (1H, s), 7.98 (1H, s), 8.26 (1H, d), 8.34 (2H, d), 9.29 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>498.44.
Primer 37: N-(5-{[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-{3-dimetilaminoazetidin-1-il}-4-metoksihenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.057 mL, 0.70 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 118, 310 mg, 0.67 mmol) i DIPEA (0.127 mL, 0.73 mmol) u CH2Cl2(40 mL) koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji na 0° C. Smeša je mešana uz održavanje ledeno/vodene banje tokom 1 h, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. Smeša je tada držana na s.t. tokom 18 h, pa je razređena sa CH2Cl2(100 mL). Ovaj rastvor je tada ispran sa zas. NaHCO3(200 mL), a vodeni rastvor od ispiranja je ekstrahovan sa CH2Cl2(2×100 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova zajedno sa nečistoćama (172 mg, 50%) u formi bledo-žute čvrste materije. 120 mg ovog materijala je prečišćeno kristalizovanjem iz CH3CN šta daje jedinjenje iz naslova (85 mg, 0.164 mmol) u formi žute čvrste materije bez primesa nečistoća šta pokazuje NMR analiza. Osnovne tečnosti iz procesa kristalizovanja i neočišćena frakcija iz FCC (koja sadrži smešu produkt:početni materijal, 75:25) su spojeni, koncentrisani in vacuo i prečišćeni kristalizovanjem iz CH3CN šta daje još jedinjenja iz naslova (40 mg, 12%) u formi tamne čvrste materije;<1>H NMR: 2.09 (6H, s), 3.03-3.12 (1H, m), 3.58 (2H, t), 3.78 (3H, s), 3.96 (2H, t), 5.66 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.25 (1H, s), 6.46 (1H, dd), 7.07 (1H, t), 7.16 (1H, t), 7.45 (1H, d), 7.48 (1H, s), 8.24 (1H, s), 8.27-8.31 (1H, br s), 8.31 (1H, s), 8.46 (1H, d), 9.22 (1H, s), 11.79 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>518.23.
Primer 38: N-{5-[(5-cijano-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.027 mL, 0.33 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u smešu 2-({5-amino-4-[(3R)-3-(dimetilamin)pirolidin-1-il]-2-metoksifenil}amino)-4-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 120, 155 mg, 0.33 mmol) i DIPEA (0.063 mL, 0.36 mmol) u CH2Cl2(10 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 2 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje penu. Koncentrisanje iz smeše CH3OH/CH2Cl2daje čvrstu materiju koja je smrvljena u dietil etru i sakupljena filtracijom šta daje jedinjenje iz naslova (95 mg, 55%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (100°C) 1.82 (1H, dq), 2.08 (1H, ddd), 2.22 (6H, s), 2.8-2.89 (1H, m), 3.19-3.45 (4H, m), 3.78 (3H, s), 5.63 (1H, dd), 6.16 (1H, dd), 6.44 (1H, dd), 6.61 (1H, s), 7.12 (1H, td), 7.34-7.46 (1H, m), 7.54 (1H, s), 8.33 (1H, d), 8.64 (1H, s), 8.77 (1H, d), 8.90 (2H, s), 8.96 (1H; s); m/z: ES<+>MH<+>524.57.
Primer 39: N-{5-[(5-cijano-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[2-dimetilaminoetil-metilamino]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.087 mL, 1 M, THF, 0.09 mmol) je dodan kap po kap u smešu 2-{[5-amino-4-(2-dimetilaminoetil-metilamino)-2-metoksifenil]-amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 121, 0.036 g, 0.08 mmol) i DIPEA (0.017 mL, 0.09 mmol) u THF (5 mL) koja je ohlađena do 0° C. Smeša je mešana na 0° C tokom 3 h, a tada je koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje grubi produkt koji je sadržavao hidrohloridnu so DIPEA. Materijal je rastvoren u CH2Cl2(10 mL) i mešan sa zas. NaHCO3rastvorom (10 mL). Faze su razdvojene, a organski rastvor je koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (24 mg, 60%) u formi žute gume;<1>H NMR: (CDCl3) 2.22 (6H, s), 2.26 (2H, dd), 2.67 (3H, d), 2.77-2.86 (2H, m), 3.81 (3H, s), 5.61 (1H, dd), 6.16-6.35 (2H, m), 6.76 (1H, s), 6.88 (1H, d), 7.23 (1H, s), 7.65 (1H, s), 8.50 (2H, dd), 8.59 (1H, s), 9.02 (1H, s), 9.28 (1H, s), 10.08 (1 H, s); m/z: ES<+>MH<+>512.29.
Primer 40: N-{5-[(5-cijano-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-2-[3-dimetilaminoazetidin-1-il]-4-metoksifenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.025 mL, 0.31 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 2-{[5-amino-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksifenil]amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitrila (Intermedijar 122, 136 mg, 0.30 mmol) u CH2Cl2(15 mL) koji je ohlađen u ledenoj banji do približno 0° C. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(50 mL) i metanolom (da se suspenzija potpuno rastvori). Ovaj rastvor je tada ispran sa zas. NaHCO3(100 mL) koji je bio razređen sa vodom (10 mL). Vodeni rastvor ispiranja je tada ekstrahovan sa CH2Cl2(2×50 mL), a spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim
1
amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (136 mg, 89%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 2.10 (6H, s), 3.05-3.13 (1H, m), 3.62 (2H, t), 3.74 (3H, s), 4.00 (2H, s), 5.67 (1H, d), 6.17 (1H, d), 6.27 (1H, s), 6.45 (1H, dd), 7.16 (1H, br s), 7.25 (1H, s), 7.42 (1H, brs), 7.95 (1H, brs), 8.68 (1H, s), 8.87 (1H, brs), 8.91 (1H, s), 9.28 (1H, s), 9.32 (1H, br s); m/z: ES<+>MH<+>510.18.
Primer 41: N-(2-{(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amlno}fenil)prop-2-enamid
Akriloil hlorid (41.3 mg, 0.46 mmol) u THF (1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 123, 195 mg, 0.42 mmol) u THF (3 mL) koji je ohlađen u ledeno/metanolnoj banji do približno -15° C. Nakon polaganog dodavanja akriloil hlorida se odmah pojavljuje precipitat. Smeša je mešana tokom 1 h uz postupnog grejanja do 0° C. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2(50 mL) i isprana sa zas. NaHCO3(50 mL). Nastao vodeni rastvor je ekstrahovan sa CH2Cl2(2×25 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje grubi čvrsti produkt nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Ova čvrsta materija je rastvorena u minimalnoj količini vrućeg CH2Cl2i smrvljena sa dietil etrom šta daje jedinjenje iz naslova (115 mg, 53%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3) 1.77-1.96 (2H, m), 2.15-2.26 (1H, m), 2.29 (3H, s), 2.26-2.37 (1H, m), 2.73 (1H, d), 2.80 (1H, d), 2.83-2.90 (1H, m), 2.95 (1H, td), 3.21 (1H, t), 3.57-3.68 (1H, m), 3.88 (3H, s), 4.00 (3H, s), 5.68-5.74 (1H, m), 6.45 (2H, d), 6.81 (1H, s), 7.20 (1H, d), 7.23-7.31 (2H, m) delomično sakriven ispod CDCl3signala, 7.37-7.43 (1H, m), 7.71 (1H, s), 8.02-8.10 (1H, m), 8.38 (1H, d), 9.09 (1H, s), 9.46 (1H, s), 9.85 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>524.25.
Primer 42: N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (0.354 mL, 4.35 mmol) u CH2Cl2(5 mL) je dodan kap po kap u smešu N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 125, 1.9 g, 4.35 mmol) u CH2Cl2(100 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Nastala smeša je mešana tokom 1 h, a tada je isprana sa zas. NaHCO3. Nastao organski rastvor je osušen (Na2SO4) i koncentrisan in vacuo.
2
Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (1.069 g, 50%) u formi ulja koje kristalizuje nakon stajanja šta daje kremovu kristalnu čvrstu materiju. Neke kasne frakcije iz FCC, koje su imale smeđu boju, su koncentrisane i ponovno obrađene hromatografijom šta daje više jedinjenja iz naslova (334 mg, 16%) u formi bledo-smeđeg ulja koje kristalizuje nakon stajanja šta daje tamno-obojenu kristalnu čvrstu materiju. Totalan prinos: 1.403 g, 66%;<1>H NMR: 1.69-1.77 (2H, m), 1.88-1.97 (2H, m), 2.21 (6H, s), 2.29 (2H, t), 2.71 (3H, s), 2.88 (2H, t), 3.02 (2H, t), 3.84 (3H, s), 4.09 (2H, t), 5.74 (1H, dd), 6.24 (1H, dd), 6.40 (1H, dd), 6.97-7.02 (2H, m), 7.87 (1H, s), 8.13 (1H, s), 8.31 (1H, d), 8.85 (1H, s), 10.08 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>491.34.
Primer 43: N-(2-{(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (26 mg, 0.29 mmol) u THF (1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 132, 120 mg, 0.26 mmol) u THF (3 mL), koji je ohlađen u ledeno/metanolnoj banji do približ. -15° C. Smeša je mešana tokom 1 h, postupno ugrejana do 0° C. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2(50 mL) i isprana sa zas. NaHCO3(50 mL). Nastalo vodeni rastvor ispiranja je dodatno ekstrahovan sa CH2Cl2(2×25 mL), a spojeni organski rastvori su tada osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo na silici. Delomično prečišćavanje je postignuto sa FCC uz eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2, a frakcije koje su sadržavale kontaminirani produkt su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2, a tada eluiranje sa 0-3% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (19 mg, 14%) u formi kremove pene;<1>H NMR (CDCl3): 1.82-1.97 (4H, m), 2.00-2.06 (2H, m), 2.13-2.24 (1H, s), 2.25-2.39 (1H, m), 2.29 (3H, s), 2.67-2.98 (4H, m), 3.17-3.26 (3H, m), 3.66 (1H, br s), 3.86 (3H, s), 4.18 (2H, t), 5.64-5.71 (1H, m), 6.30-6.47 (2H, m), 6.78 (1H, s), 6.81 (1H, d), 7.44 (1H, s), 8.06 (1H, s), 8.34 (1H, d), 9.24 (1H, s), 9.40 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>515.15.
Primer 44: N-(2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (32 mg, 0.36 mmol) u CH2Cl2(1mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 134, 152 mg, 0.34 mmol) u CH2Cl2(15 mL) koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Rastvor je mešan tokom 10 min uz hlađenje u ledenoj banji, a tada je ostavljen da se ugreje do s.t. pa je mešan tokom 1 h. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2i isprana sa zas. NaHCO3, a tada sa slanim rastvorom. Organski rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje grubi produkt (100 mg) u formi bež čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom. CH3CN (-3 mL) je tada dodan u grubi produkt, a nastala gusta smeša je mešana na 50° C tokom 4 h. Nakon hlađenja do s.t., suspendovana čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa CH3CN i osušena na 45° C tokom noći šta daje jedinjenje iz naslova (72 mg, 42%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.68-1.81 (3H, m), 1.89-1.98 (2H, m), 2.03-2.11 (1H, m), 2.17 (6H, s), 2.66-2.74 (1H, m), 3.00-3.05 (2H, m), 3.13-3.21 (3H, m), 3.31-3.38 (1H, m), 3.86 (3H, s), 4.09 (2H, t), 5.70 (1H, dd), 6.21 (1H, dd), 6.48-6.56 (2H, m), 6.96 (1H, d), 7.72 (1H, s), 8.03 (2H, d), 8.27 (1H, d), 9.30 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>503.67.
Primer 45: N-(4-metoksi-2-{1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il}-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (30 µL, 0.37 mmol) u CH2Cl2(2 mL) je dodan, kap po kap tokom 5 min, u 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin (Intermedijar 136, 154 mg, 0.36 mmol) u CH2Cl2(5 mL) koji je ohlađen u ledeno/CH3OH banji. Smeša je tada mešana tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa 10% CH3OH/CH2Cl2, a nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) pa koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (104 mg, 60%) u formi bledo-žute čvrste materije nakon mrvljenja sa smešom dietil etar/heptan;<1>H NMR: 1.76-1.84 (2H, m), 1.91-1.98 (2H, m), 2.27 (3H, s), 2.32-2.39 (2H, m), 2.48-2.56 (2H, m), 2.96-2.99 (2H, m), 3.08 (2H, t), 3.90 (3H, s), 4.11 (2H, t), 5.65-5.76 (2H, m), 6.21 (1H, d), 6.49 (1H, dd), 6.84 (1H, s), 7.07 (1H, d), 7.84 (1H, s), 8.10 (1H, s), 8.32-8.37 (2H, m), 9.33 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>486.73.
4
Primer 46: N-(2-{3-dimetilaminoazetidin-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (22.5 mg, 0.25 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-{3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 139, 108 mg, 0.25 mmol) u CH2Cl2(12 mL) koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Rastvor je mešan tokom 10 min uz hlađenje u banji, a tada je ostavljen da se ugreje do s.t. pa je mešan tokom 1 h. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2i isprana sa zas. NaHCO3, slanim rastvorom pa je osušena (MgSO4). Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (56 mg, 46%) u formi smeđe čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.75-1.82 (2H, m), 1.90-1.97 (2H, m), 2.08 (6H, s), 2.98-3.09 (3H, m), 3.54 (2H, t), 3.85 (3H, s), 3.93 (2H, t), 4.09 (2H, t), 5.69 (1H, dd), 6.18-6.25 (2H, m), 6.49 (1H, dd), 6.95 (1H, d), 7.70 (1H, s), 7.89 (1H, s), 8.03 (1H, s), 8.26 (1H, d), 9.24 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>489.63.
Primer 47: N-(4-metoksi-2-{8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il}-5-{[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (42 µL, 0.52 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-N'-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin (Intermedijar 141, 240 mg, 0.52 mmol) i DIPEA (0.099 mL, 0.57 mmol) u CH2Cl2(10 mL) koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (135 mg, 50%) u firmi žute čvrste materije nakon mrvljenja sa CH3CN;<1>H NMR: 1.61-1.74 (2H, m), 1.73-1.85 (2H, m), 1.87-1.99 (2H, m), 2.03 (2H, t), 2.35 (3H, s), 2.61 (2H, t), 3.01 (2H, t), 3.60 (2H, d), 3.84 (3H, s), 3.89 (2H, d), 4.09 (2H, t), 5.70 (1 H, d), 6.14-6.30 (2H, m), 6.47 (1H, dd), 6.95 (1H, d), 7.73 (1H, s), 7.83 (1H, s), 8.05 (1H, s), 8.26 (1H, d), 9.26 (1 H, s); m/z: ES<+>MH<+>515.7.
Primer 48: N-(4-metoksi-2-{1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il}-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (37 µL, 0.45 mmol) u CH2Cl2(2.32 mL) je dodan kap po kap tokom 5 min u 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin (Intermedijar 143, 189 mg, 0.43 mmol) u CH2Cl2(5.8 mL) koji je ohlađen u ledeno/CH3OH banji. Smeša je mešana tokom 0.5 h, a tada je razređena sa 10% CH3OH/CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (67 mg, 32%) u formi bledo-žute čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.29 (3H, s), 2.36-2.41 (2H, m), 2.53-2.58 (2H, m), 2.98-3.02 (2H, m), 3.90 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.69-5.73 (2H, m), 6.22 (1H, dd), 6.52 (1H, dd), 6.86 (1H, s), 7.20-7.28 (3H, m), 7.52-7.55 (1H, m), 7.88 (1H, s), 8.33-8.37 (2H, m), 8.43 (1H, s), 8.45 (1H, s), 9.34 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>495.70.
Primer 49: N-(4-metoksi-2-{8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il}-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (24 µL, 0.30 mmol) u CH2Cl2(1 mL) je dodan kap po kap u 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin (Intermedijar 146, 140 mg, 0.30 mmol) i DIPEA (57 µL, 0.33 mmol) u CH2Cl2(10 mL) koji je ohlađen u ledeno/vodenoj banji. Smeša je mešana tokom 1 h, a tada je isprana sa slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (43 mg, 28%) u formi bež čvrste materije nakon mrvljenja sa CH3CN;<1>H NMR: 1.63-1.76 (2H, m), 2.00-2.10 (2H, m), 2.38 (3H, s), 2.63 (2H, t), 3.64 (2H, d), 3.86 (3H, s), 3.89 (3H, s), 3.93 (2H, d), 5.70 (1H, dd), 6.21 (1H, dd), 6.26 (1H, s), 6.50 (1H, dd), 7.13 (1H, d), 7.16-7.29 (2H, m), 7.51 (1H, d), 7.73 (1H, s), 7.93 (1H, s), 8.26 (1H, d), 8.31-8.39 (2H, m), 9.24 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>524.7.
Primer 50: N-(2-{(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (1 M u CH2Cl2, 0.36 mL, 0.36 mmol) je dodan kap po kap u rastvor 4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 148, 183 mg, 0.40 mmol) u CH2Cl2(5 mL) na -10° C tokom perioda od 2 min u atmosferi N2. Nastala smeša je mešana na 0° C tokom 10 min, a tada je ostavljena da se ugreje do s.t. tokom 20 min. Smeša je tada isprana sa zas. NaHCO3(2 mL), osušena (MgSO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 3-25% CH3OH u CH2Cl2daje ulje koje je kasnije kristalizovalo. Ova čvrsta materija je smrvljena i isprana sa EtOAc (3 mL) šta daje jedinjenje iz naslova (67 mg, 33%) u formi bledo-žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.77 (1H, m), 2.08 (1H, s), 2.18 (6H, s), 2.72 (1H, m), 3.17 (1H, s), 3.21 (2H, d), 3.32-3.45 (1H, m), 3.87 (3H, s), 3.89 (3H, s), 5.70 (1H, d), 6.22 (1H, d), 6.48-6.58 (1H, m), 6.59. (1H, s), 7.20 (3H, m), 7.51 (1H, d), 7.76 (1H, s), 8.17 (1H, s), 8.28 (1H, d), 8.32 (1H, d), 8.39 (1H, s), 9.33 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>512.7.
Primer 51: N-{4-metoksi-2-[1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il]-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (20 µL, 0.25 mmol) je dodan kap po kap u 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 150, 180 mg, 0.42 mmol) i trietilamin (73 µL, 0.53 mmol) u THF (3 mL) na -5° C tokom perioda od 1 min u atmosferi N2. Nastala smeša je mešana na 0° C tokom 0.25 h. Reakcija je ocenjena kao nekompletna pa je dodano još akriloil hlorida (10 µL, 0.125 mmol), kap po kap, a smeša je mešana na 0° C tokom dodatnih 15 min. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(5 mL), uz nekoliko kapi CH3OH. Ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(2 mL), osušen (MgSO4), filtriran kroz pločicu od silike (1 g) i eluiran sa smešom CH2Cl2-CH3OH (4:1). Eluent koji je sadržavao željeni produkt je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 5-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (31 mg, 14%) u formi kremove kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.33 (3H, s), 2.40 (2H, s), 2.57 (2H, d), 3.03 (2H, s), 3.89 (3H, s), 5.70 (2H, m), 6.17 (1H, m), 6.46 (1H, m), 6.88 (1H, s), 7.09 (1H, t), 7.32 (1H, d), 7.47 (1H, t), 8.12 (1H, s), 8.21 (1H, s), 8.39 (1 H, d), 8.51 (1H, d), 8.81 (2H, m), 9.36 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>482.
Primer 52: N-{2-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-4-metoksi-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (64 µL, 0.79 mmol) u CH2Cl2(4 mL) je dodan, kap po kap tokom 10 min, u 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 153, 336 mg, 0.76 mmol) u CH2Cl2(11 mL) koji je ohlađen u banji sa smešom led/CH3OH. Sve je mešano tokom 0.5 h, a tada je razređeno sa smešom 10% CH3OH/CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (296 mg, 79%) u formi narandžaste čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.70-1.81 (1H, m), 2.05-2.13 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.68-2.76 (1H, m), 3.17-3.27 (3H, m), 3.35-3.42 (1H, m), 3.84 (3H, s), 5.67 (1H, dd), 6.17 (1H, dd), 6.51 (1H, dd), 6.56 (1H, s), 7.05 (1H, dd), 7.21 (1H, d), 7.40-7.45. (1H, m), 7.84 (1H, s), 8.02 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.46 (1H, d), 8.76 (1H, s), 8.78 (1H, d), 9.35 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>499.69.
Primer 53: N-{2-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-4-metoksi-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (49 µL, 0.60 mmol) u CH2Cl2(2.77 mL) je dodan kap po kap tokom 5 min u 4-(3-dimetilaminoazeridin-1-il)-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 156, 246 mg, 0.57 mmol) u CH2Cl2(8.3 mL) koji je ohlađen u banji sa smešom led/CH3OH. Sve je mešano tokom 0.5 h, a tada je razređeno sa smešom 10% CH3OH/CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (182 mg, 66%) u formi žute čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.09 (6H, s), 3.04-3.12 (1H, m), 3.55-3.60 (2H, m), 3.83 (3H, s), 3.96 (2H, t), 5.67 (1H, dd), 6.18 (1H, dd), 6.26 (1H, s), 6.48 (1H, dd), 7.05 (1H, td), 7.20 (1H, d), 7.41-7.46 (1H, m), 7.71 (1H, s), 8.00 (1H, s), 8.29 (1H, d), 8.43 (1H, br d), 8.75 (1H, s), 8.77 (1H, d), 9.29 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>485.69.
Primer 54: N-{2-[2-dimetilaminoetil-metilamino]-4-metoksi-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (63 µL, 0.78 mmol) u CH2Cl2(3.60 mL) je dodan kap po kap tokom 5 min u N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,2,4-triamin (Intermedijar 158, 320 mg, 0.74 mmol) u CH2Cl2(10.8 mL), koji je ohlađen u banji sa smešom led/CH3OH. Smeša je mešana tokom 0.5 h, a tada je razređena sa smešom 10% CH3OH/CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (228 mg, 63%) u formi bledo-ljubičaste čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.22 (6H, s), 2.33 (2H, t), 2.74 (3H, s), 2.91 (2H, t), 3.82 (3H, s), 5.73 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.41 (1H, dd), 7.02-7.06 (2H, m), 7.25 (1H, d), 7.29-7.34 (1H, m), 8.17 (1H, s), 8.34 (1H, d), 8.44 (1H, d), 8.75-8.79 (2H, m), 8.82 (1H, s), 10.06 (1H, br s); m/z: ES<+>MH<+>487.72.
Primer 55: N-[2-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-4-metoksi-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil]prop-2-enamid Rastvor akriloil hlorida (13 mg, 0.14 mmol) u THF (1 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 160, 100 mg, 0.13 mmol) u THF (3 mL) koji je ohlađen u banji sa smešom led/CH3OH do približno -15° C. Smeša je mešana tokom 1 h pa je ostavljena da se ugreje do -0° C. Smeša je tada razređena sa CH2Cl2(50 mL), a nasto rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(50 mL). Vodeni rastvor je dodatno ekstrahovan sa CH2Cl2(2×25 mL), a spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo na silici. Delomično prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-3.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje nešto jedinjenja iz naslova. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-1.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (33 mg, 49%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.77 (1H, s), 1.94-2.15 (1H, m), 2.10 (3H, s), 2.29 (1H, d), 2.39-2.48 (1H, m), 2.87 (1H, s), 3.11-3.20 (1H, m), 3.33-3.42 (2H, m), 3.81 (3H, s), 4.26-4.34 (1H, m), 5.68 (1H, dd), 6.18 (1H, dd), 6.53 (1H, dd), 6.67 (1H, s), 7.04 (1 H, td), 7.21 (1H, d), 7.36-7.43 (1H, m), 8.03 (1H, s), 8.08 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.42 (1H, d), 8.73-8.79 (2H, m), 9.41 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>511.16.
Primer 56: N-{4-metoksi-2-[8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il]-5-[(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]fenil}prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.766 mL, 0.77 mmol, 1.0 M u CH2Cl2) je dodan kap po kap tokom 10 min u 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 162, 333 mg, 0.73 mmol) u CH2Cl2(6 mL) koji je ohlađen u banji sa smešom led/CH3OH. Smeša je tada mešana tokom 0.5 h pa je razređena sa 10% CH3OH u CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (193 mg, 52%) u formi bež čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.69 (2H, dt), 2.03-2.08 (2H, m), 2.38 (3H, s), 2.63 (2H, t), 3.65 (2H, d), 3.83 (3H, s), 3.94 (2H, d), 5.68 (1H, dd), 6.19 (1H, dd), 6.25 (1H, s), 6.47 (1H, dd), 7.06 (1H, td), 7.19 (1H, d), 7.44 (1H, dd), 7.67 (1H, s), 7.98 (1H, s), 8.29 (1H, d), 8.47 (1H, d), 8.75 (1H, s), 8.78 (1H, d), 9.25 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>511.34.
Primer 57: N-(2-{(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il}-5-{[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.604 mL, 1 M u CH2Cl2, 0.60 mmol) je dodan kap po kap u 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin (Intermedijar 164, 268 mg, 0.60 mmol) u CH2Cl2(10 mL) i 10 mL DMA, koji su ohlađeni do -5° C. Nastala smeša je mešana na -5° C tokom 1 h, a tada je razređena sa CH2Cl2(100 mL). Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (25 mL), a tada sa zas. slanim rastvorom (4×25 mL) pa je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-30% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (135 mg, 45%) u formi bež čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3) 1.98 (1H, s), 2.18 (1H, d), 2.94 (1H, s), 3.11 (4H, d), 3.88 (3H, s), 5.73 (1H, d), 6.40 (2H, d), 6.76 (1H, s), 7.17 (1H, d), 7.22-7.24 (1H, m), 7.41-7.46 (1H, m), 7.62 (1H, s), 8.16 (1H, s), 8.39 (1H, d), 8.45 (1H, s), 8.75 (1H, s), 8.86 (1H, s), 9.56 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>498.
Primer 58: N-(2-[3-dimetilaminoazetidin-1-il]-5-{[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.522 mL, 1 M u CH2Cl2, 0.52 mmol) je dodan kap po kap u 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-6-metoksi-benzen-1,3-diamin (Intermedijar 166, 224 mg, 0.52 mmol) u CH2Cl2(10 mL), a smeša je tada mešana na -5° C tokom 1 h. Smeša je razređena sa CH2Cl2(100 mL), nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (25 mL) pa sa zas. slanim rastvorom (25 mL), a tada je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-30% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (46 mg, 18%) u formi bež čvrste materije;<1>H NMR: 2.09 (6H, d), 3.09 (1H, s); 3.56 (2H, t), 3.85 (3H, s), 3.96 (2H, t), 5.68 (1H, dd), 6.20 (1H, dd), 6.26 (1H, s), 6.50 (1H, dd), 7.14 (2H, dt), 7.18 (1H, t), 7.40-7.46 (1H, m), 7.82 (1H, s), 7.90 (1H, s), 8.23 (1H, d), 8.31 (1H, d), 8.38 (1H, d), 9.34 (1H, s), 11.76 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>484.
Primer 59: N-(2-[2-dimetilaminoetil-metilamino]-5-{[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-4-metoksifenil)prop-2-enamid
Rastvor akriloil hlorida (0.584 mL, 1 M u CH2Cl2, 0.58 mmol) je dodan kap po kap u N<1>-(2-dimetilaminoetil)-N<4>-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4triamin (Intermedijar 168, 252 mg, 0.58 mmol) u CH2Cl2(10 mL), a smeša je tada mešana na -5° C tokom 1 h. Smeša je razređena sa CH2Cl2(100 mL), nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (25 mL), a tada i sa zas. slanim rastvorom (25 mL) pa je koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-30% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (76 mg, 27%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3) 2.25 (6H, s), 2.27-2.34 (3H, m), 2.69 (3H, s), 2.84-2.94 (2H, m), 3.87 (3H, s), 5.68 (1H, dd), 6.40 (1H, d), 6.48 (1H, dd), 6.78 (1H, s), 7.03 (1H, d), 7.08-7.20 (2H, m), 7.33 (1H, dd), 7.65 (1H, s), 8.12 (1H, d), 8.26 (1H, d), 8.59 (1H, s), 9.74 (1H, s), 9.97 (1H, s), 10.24 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>486.
Primer 60: N-(4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}-2-[metil-(2-metilaminoetil)amino]fenil)prop-2-enamid
Rastvor tert-butil N-[2-[[5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]-2-(prop-2-enuljaamino)fenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamata (Intermedijar 170, 321 mg, 0.55 mmol) u CH2Cl2(10 mL) i TFA (2 mL) je mešan na s.t. tokom 0.5 h, a tada je koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u 10% CH3OH/CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (110 mg, 41%) u formi bledo-žute čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.35 (3H, s), 2.58-2.62 (2H, m), 2.71 (3H, s), 2.85-2.89 (2H, m), 3.86 (3H, s), 3.92 (3H, s), 5.74 (1H, dd), 6.28 (1H, dd), 6.59 (1H, dd), 6.99 (1H, s), 7.15 (1H, t), 7.21-7.27 (2H, m), 7.53 (1H, d), 7.87 (1H, s), 8.24 (1H, d), 8.32 (1H, d), 8.66 (1H, s), 9.16 (1H, s), 10.33 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>486.55.
Intermedijar 1: 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-(5-metil-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-5-metil-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 2, 279 mg, 0.59 mmol), gvožđa (198 mg, 3.55 mmol) i NH4Cl (22.16 mg, 0.41 mmol) u etanolu (10.5 mL) i vodi (3.50 mL) je
1
grejana kod refluksa tokom 0.75 h. Dodano je još NH4Cl (22.16 mg, 0.41 mmol) i gvožđa (198 mg, 3.55 mmol), a smeša je grejana kod refluksa tokom dodatnih 1.5 h. Smeša je tada ohlađena, filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-10% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (150 mg, 57%) u formi bež kristalne čvrste materije nakon mrvljenja sa THF i ispiranja nastale čvrste materije sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.30 (3H, s), 2.40 (5H, m), 2.59 (2H, t), 3.01 (2H, d), 3.73 (3H, s), 4.27 (2H, s), 5.71 (1H, s), 6.63 (1H, s), 7.10 (1H, m), 7.35-7.49 (2H, m), 7.83 (1H, s), 8.27 (1H, s), 8.50-8.63 (2H, m), 8.81 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>442.
Intermedijar 2: N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-5-metil-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
Rastvor 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 5, 271 mg, 1.00 mmol), p-toluensulfonske kiseline (monohidrat) (271 mg, 1.43 mmol) i 2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 3, 250 mg, 0.95 mmol) su grejani u 2-pentanolu (12 mL) kod refluksa pod N2tokom 30 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH3OH. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske izmene jona (SCX kolona), eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom daje jedinjenje iz naslova (283 mg, 63%) u formi narandžastog praha nakon mrvljenja sa CH3CN.<1>H NMR: 2.28-2.36 (5H, m), 2.44 (3H, s), 2.60 (2H, t), 3.00 (2H, d), 4.00 (3H, d), 5.64 (1H, s), 6.97 (1H, s), 7.13 (1H, m), 7.40 (1H, m), 8.27 (1H, s), 8.39 (1H, s), 8.53 (1H, d), 8.61 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.87 (1H, s); m/z: ES<->MH<->470.
Intermedijar 3: 2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitroanilin Smeša 4-bromo-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 4, 1.112 g, 4.5 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridina (1.004 g, 4.50 mmol) i K2CO3(2.488 g, 18.00 mmol) je mešana u 1,4-dioksanu (20 mL) i vodi (5 mL). Smeša je očišćena sa N2tokom 0.25 h. Tada je dodan tetrakis(trifenilfosfin)-paladijum(0) (0.052 g, 0.05 mmol), a smeša je grejana kod refluksa tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena, filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje vodenu smešu. Ova smeša je rastvorena u EtOAc, a voda i faze su razdvojene. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski rastvori su tada ekstrahovani dva puta sa 2 M HCl (40 mL). Vodeni rastvori su dovedeni u bazno područje uz pomoć 2 M Na2CO3(50 mL) i ekstrahovani sa EtOAc (3×40 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Ostatak je rastvoren u smeši CH2Cl2i 2 N
2
metanolnog amonijaka (10:1, 10 mL), a rastvor je filtriran kroz pločice od silike. Filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje ulje koje naknadno kristalizuje. Mrvljenje sa smešom izoheksana i dietil etra (1:1, 5 mL) i sakupljanje nastale čvrste materije uz pomoć filtracije daje jedinjenje iz naslova (1.093 g, 92%) u formi žute kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.23 (2H, dd), 2.27 (3H, s), 2.53 (2H, t), 2.93 (2H, d), 3.87 (3H, s), 5.27 (2H, s), 5.42-5.53 (1H, m), 6.65 (1H, s), 7.23 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>264.
Intermedijar 4: 4-bromo-2-metoksi-5-nitroanilin
85% sumporna kiselina je pripremljena pažljivim dodavanjem 98% sumporne kiseline (13 mL) u led (2 g). Dodan je gvanidin nitrat (1.221 g, 10.00 mmol) deo po deo tokom perioda od 10 min u ohlađenu (0-5° C) smešu 4-bromo-2-metoksianilina (2.020 g, 10 mmol) u 85% sumpornoj kiselini (15.68 mL, 250.00 mmol). Nastala tamno-plava smeša je mešana na 0-5° C tokom 0.75 h pa je izlivena veoma polako u dobro-mešanu smešu 50% vod. NaOH (40 mL) i leda (120 g). Narandžasti precipitat je sakupljen uz pomoć filtracije, ispran sa vodom (4×50 mL) i osušen na vazduhu. Ovaj materijal je rastvoren u dietil etru (100 mL) pa je filtriran kroz pločicu od silike. Nastao rastvor je razređen sa izoheksanom pa je prečišćen kristalizovanjem uz isparavanje iz smeše dietil etar/izoheksan šta daje jedinjenje iz naslova (1.821 g, 74%) u formi narandžaste kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 3.90 (3H, s), 5.52 (2H, s), 7.14 (1H, s), 7.32 (1H, s).
Intermedijar 5: 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridin
K2CO3(10.60 g, 76.68 mmol) je dodan u smešu 4-[(E)-2-butoksietenil]-2-hloro-5-metilpirimidina (Intermedijar 6, 6.95 g, 30.67 mmol) i 1-aminopiridin jodida (9.19 g, 41.40 mmol) u DMF (40 mL) na s.t. Nastala tamno-plava suspenzija je mešana na s.t. tokom 3 dana (boja se menja u bordo) pa je grejana na 110° C tokom 3 h. Smeša je tada ohlađena, razređena sa EtOAc (100 mL), uz malo CH2Cl2. Ovaj rastvor je ispran sa vodom (100 mL), a vodeni rastvor ispiranja je ekstrahovan sa EtOAc (100 mL). Spojeni organski rastvori su isprani sa vodom (4×100 mL) i zas. slanim rastvorom (50 mL), osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Ostatak je rastvoren u THF (100 mL) pa je filtriran kroz pločicu od silike (30 g). Eluirani rastvor je koncentrisan in vacuo, a ostatak je ispran sa CH3OH (-70° C) šta daje jedinjenje iz naslova (2.223 g, 30%) u formi bež kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.53 (3H, s), 7.22 (1H, m), 7.64 (1H, m), 8.53-8.59 (2H, m), 8.70 (1H, s), 8.90 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>245.
Intermedijar 6: 4-[(E)-2-butoksietenil]-2-hloro-5-metilpirimidin
Diacetoksipaladijum (0.482 g, 2.15 mmol) je dodan u jednoj porciji u smešu 1-(viniloksi)butana (11.91 mL, 92.02 mmol), 2,4-dihloro-5-metilpirimidina (5 g, 30.67 mmol) i trietilamina (4.51 mL, 32.21 mmol) u degaziranom polietilen glikolu 200 (25 mL) pod N2. Nastala smeša je mešana na 80° C tokom 18 h. Smeša je tada ohlađena i ekstrahovana sa dietil etrom (3×75 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4), razređeni sa heptanom (115 mL), filtrirani kroz pločicu od silike (75 g) i eluirani sa smešom dietil etar/heptani (2:1) šta daje jedinjenje iz naslova (8.62 g, 124%) u formi žutog ulja koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 0.92 (3H, t), 1.35-1.43 (2H, m), 1.60-1.71 (2H, m), 2.17 (3H, d), 4.06 (2H, t), 5.93 (1H, d), 7.90 (1H, d), 8.33 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>226.
Intermedijar 7: N'-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamin
NaOH (2 M, 1.488 mL, 2.98 mmol) je dodan u jednoj porciji u smešu N'-{4-[1-(benzensulfonil)indol-3-il]-5-hloropirimidin-2-il}-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 8, 283 mg, 0.47 mmol) u CH3OH (6 mL) na s.t. pod N2. Nastao rastvor je mešan kod refluksa tokom 0.5 h. Tada je dodan suvi led, a nastala smeša je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen sa smešom CH2Cl2/CH3OH (4:1, 20 mL), filtriran, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta dovodi do pojave ostatka. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (102 mg, 47%) u formi bledo-žutog praha;<1>H NMR: 2.30 (3H, s), 2.41 (2H, s), 2.60 (2H, t), 3.02 (2H, d), 3.70 (3H, s), 4.27 (2H, s), 5.73 (1H, s), 6.65 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.17-7.23 (1H, m), 7.26 (1H, s), 7.48 (1H, d), 8.18 (1H, s), 8.38 (1H, s), 8.41 (1H, d), 8.49 (1H, s), 11.85 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>460.
Intermedijar 8: N'-{4-[1-(benzensulfonil)indol-3-il]-5-hloropirimidin-2-il}-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 4-[1-(benzensulfonil)indol-3-il]-5-hloro-N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amina (Intermedijar 9, 349 mg, 0.47 mmol), gvožđa (157 mg, 2.82 mmol) i NH4Cl (17.60 mg, 0.33 mmol) u etanolu (9 mL) i vodi (3 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je ohlađena i koncentrisana in vacuo. Tada su dodani CH2Cl2(20 mL) i CH3OH (2 mL), a smeša je mešana tokom 5 min pa je filtrirana. Organski rastvor je ispran sa slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz
4
naslova (396 mg, 140%) u formi zelene pene koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja. m/z: ES<+>MH<+>601.
Intermedijar 9: 4-[1-(benzensulfonil)indol-3-il]-5-hloro-N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amin
Smeša 1-(benzensulfonil)-3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)indola (Intermedijar 10, 384 mg, 0.95 mmol), p-toluensulfonske kiseline (monohidrat) (271 mg, 1.43 mmol) i 2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 3, 250 mg, 0.95 mmol) je grejana u 2-pentanolu (12 mL) kod refluksa pod N2tokom 24 h. Tada je dodano još p-toluensulfonske kiseline (monohidrat) (0.090 g, 0.48 mmol), a smeša je grejana kod refluksa tokom dodatnih 6 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u smeši CH2Cl2, CH3OH i EtOAc (10 mL, 3 mL i 3mL). Ovaj rastvor je koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 4-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (415 mg, 56%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.29 (1.95H, s), 2.52 (0.7H, m), 2.73 (2.6H, s), 3.18 (1.4H, m), 3.57 (2H, s), 3.96 (3H, s), 5.68 (1H, s), 7.00 (1H, s), 7.11 (1.3H, d), 7.26 (1H, m), 7.44 (1H, m), 7.49 (1.3H, d), 7.64 (2H, t), 7.73 (1H, m), 8.01 (1H, d), 8.07-8.15 (2H, m), 8.19 (1H, d), 8.64 (2H, d), 8.70 (1H, s), 8.97 (1H, s); (spektar se čini da pokazuje smešu rotamera, koji nastaju zbog ograničene rotacije veza u molekulu) m/z: ES<+>MH<+>631.
Intermedijar 10: 1-(benzensulfonil)-3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)indol
Natrijum tert-butoksid (529 mg, 5.50 mmol) je dodan deo po deo tokom perioda od 2 min u smešu 3-(2,5-dihloro-pirimidin-4-il)-1H-indola (Intermedijar 11, 1.321 g, 5.0 mmol) i benzensulfonil hlorida (0.645 mL, 5.00 mmol) u DMF (30 mL) na s.t. pod N2. Nastao rastvor je mešan na s.t. tokom 1 h. Dodano je još benzensulfonil hlorida (0.064 mL, 0.50 mmol) i natrijum tert-butoksida (0.053 g, 0.055 mmol), a smeša je mešana na s.t. tokom dodatnih 0.25 h. Reakcija je ugašena uz pomoć dodavanja CH3OH (6 mL) i neutralizovanja dodavanjem čvrstih peleta CO2do postizanja pH=7. Rastvarač je tada odstranjen in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL). Rastvor je filtriran kroz pločicu od silike (20 g), a eluirani rastvor je razređen sa izoheksanom (50 mL). Ovaj rastvor je koncentrisan in vacuo šta daje volumen od 70 mL, a tada je ohlađen. Nastao kristalni precipitat je sakupljen uz pomoć filtracije, ispran sa smešom izoheksan/CH2Cl2(4:1, 50 mL) pa je osušen uz pomoć isisavanja šta daje jedinjenje iz naslova (923 mg, 46%) u formi kremove kristalne čvrste materije, koja se koristi bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 7.39-7.53 (2H, m), 7.64 (2H, t), 7.75 (1H, t), 8.04 (1H, d), 8.11-8.17 (2H, m), 8.28 (1H, d), 8.79 (1H, s), 9.00 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>404.
Intermedijar 11: 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)-1H-indol
CH3MgBr (3.2 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 3.37 mL, 10.79 mmol) je dodan kap po kap tokom 10 min u rastvor indola (1.28 g, 10.79 mmol) u THF (6 mL) na 0° C. Rastvor je tada mešan na 0-2° C tokom 0.5 h. Tada je dodan 2,4,5-trihloropirimidin (1 g, 5.40 mmol), kap po kap, nakon čega nastaje žuti rastvor. Ledena banja je odstranjena, a rastvor je mešan na s.t. tokom 1 h, nakon čega se pojavljuje crveni rastvor. Smeša je grejana do 60° C, a tada je mešana na 60° C tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena do s.t. pa je dodana sirćetna kiselina (634 µL, 11.06 mmol), kap po kap. Dodani su voda (9.90 mL) i THF (2 mL), a smeša je mešana tokom 20 min na 60° C, nakon čega nastaje bi-fazni rastvor. Slojevi su razdvojeni pa je dodan heptan (11 mL) u organski rastvor, nakon čega dolazi do kristalizovanja čvrste materije. Ova čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije, isprana sa heptanom (2 mL), pa je osušena u vakuumskoj peći šta daje jedinjenje iz naslova (1.015 g, 66%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 7.24-7.32 (2H, m), 7.55-7.58 (1H, m), 8.52-8.55 (1H, m), 8.71-8.73 (2H, m), 12.24 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>264, 266.
Intermedijar 12: N'-[4-(1H-indol-3-il)-5-metilpirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 4-(1H-indol-3-il)-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-5-metilpirimidin-2-amina (Intermedijar 13, 157 mg, 0.33 mmol), gvožđa (111 mg, 1.99 mmol) i NH4Cl (12.41 mg, 0.23 mmol) je grejana u etanolu (6 mL) i vodi (2 mL) kod refluksa tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. Tada su dodani CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je filtrirana. Filterkolač je ispran sa CH2Cl2(50 mL) i CH3OH (5 mL), a spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (113 mg, 77%) u formi bledo-žutog suvog filma; m/z: ES<+>MH<+>444.53.
Intermedijar 13: 4-(1H-indol-3-il)-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-5-metilpirimidin-2-amin
Smeša 2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 14, 204 mg, 0.77 mmol), p-toluensulfonske kiseline (monohidrat) (291 mg, 1.53 mmol) i 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)-1H-indola (Intermedijar 17, 192 mg, 0.77 mmol) je grejana na 120° C u 2-pentanolu (15 mL) tokom 24 h šta daje tamno-smeđu suspenziju. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, nastao ostatak je rastvoren u smeši CH2Cl2i CH3OH (50 mL i 5 mL), a ovaj rastvor je koncentrisan na silici in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (157 mg, 43%) u formi narandžaste gume; m/z: ES<+>MH<+>474.24.
Intermedijar 14: 2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitroanilin
tert-butil N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]karbamata (Intermedijar 15, 1.4 g, 3.82 mmol) je rastvoren u CH2Cl2(20 mL), a tada je dodan TFA (5 mL). Smeša je mešana tokom 2 h na s.t., a tada je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u CH3OH, apsorbiran na SCX kolonu, ispran sa CH3OH i eluiran sa metanolnim amonijakom. Frakcije koje su sadržavale produkt su spojene i koncentrisane. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.6 g, 59%) u formi narandžastog ulja koje kristalizuje nakon stajanja;<1>H NMR: 2.22 (3H, s), 2.39-2.47 (4H, m), 2.87-2.97 (4H, m), 3.88 (3H, s), 4.99 (2H, s), 6.72 (1H, s), 7.20 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>267.5.
Intermedijar 15: tert-butil N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]karbamat 2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzojeva kiselina (Intermedijar 16, 1.5 g, 5.08 mmol) je suspendovana u smeši t-butanola (20 mL) i DIPEA (1.318 mL, 7.62 mmol), a tada je dodan difenilfosforil azid (1.642 mL, 7.62 mmol). Smeša je tada grejana kod refluksa tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u EtOAc, ispran sa zas. NaHCO3, osušen (Na2SO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (1.45 g, 78%) u formi narandžastog ulja koje kristalizuje nakon stajanja;<1>H NMR: 1.45 (9H, s), 2.23 (3H, s), 2.41-2.49 (4H, m), 2.99-3.07 (4H, m), 3.92 (3H, s), 6.74 (1H, s), 8.24-8.32 (2H, m); m/z: ES<+>MH<+>367.3.
Intermedijar 16: 2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzojeva kiselina
1-metilpiperazin (0.962 mL, 8.67 mmol) je dodan u suspenziju 2-metoksi-4,5-dinitrobenzojeve kiseline (2.0 g, 8.26 mmol) u vodi (5 mL). Smeša je grejana kod 50° C tokom 1.5 h, a tada na 75° C tokom 3 h. Dodano je dodatnih 0.5 ekvivalenata 1-metilpiperazina, a smeša je grejana tokom noći. Smeša je tada ostavljena da se ohladi i stoji. Nastaje kristalna čvrsta materija koja je sakupljena filtracijom, isprana sa vodom, a tada je osušena na filteru šta daje jedinjenje iz naslova (1.87 g, 77%) u formi žute kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.25 (3H, s), 2.45-2.49 (4H, m), 3.13-3.21 (4H, m), 3.93 (3H, s), 6.63 (1H, s), 8.32 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>296.5.
Intermedijar 17: 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)-1H-indol
CH3MgBr (3.2 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 3.76 mL, 12.02 mmol) je dodan kap po kap tokom 10 min u rastvor indola (1.42 g, 12.02 mmol) u THF (4.9 mL) na 0° C. Rastvor je tada mešan na 0-2° C tokom 0.5 h. Tada je dodan rastvor 2,4-dihloro-5-metilpirimidina (1 g, 6.01 mmol) u THF (3 mL), kap po kap. Ledena banja je odstranjena, a rastvor je mešan na s.t. tokom 1 h pa na 60° C tokom 21 h. Dok je smeša još ugrejana na 60° C kap po kap je dodana sirćetna kiselina (708 µL, 12.32 mmol), a nakon toga i voda (10 mL). Nastala bifazna suspenzija je mešana na 60° C tokom 0.5 h. Nastala čvrsta materija je sakupljena sa filtracijom, isprana sa vodom (5 mL) pa je osušena u vakuumskoj peći šta daje jedinjenje iz naslova (805 mg, 50%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: 2.49 (3H, s), 7.20-7.28 (2H, m), 7.52-7.55 (1H, m), 8.20 (1H, d), 8.48 (1H, d), 8.51-8.54 (1H, m), 12.10 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>244.
Intermedijar 18: N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-[(3R]-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 19, 145 mg, 0.28 mmol), gvožđa (95 mg, 1.71 mmol) i NH4Cl (11.4 mg, 0.21 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (6 mL) i vodi (2 mL) tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljena uz pomoć 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) tokom 15 min, a smeša je filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni uz pomoć 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL), a smeša je filtrirana. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (112 mg, 82%) u formi žute gume;<1>H NMR: (CDCl3) 1.83-1.96 (1H, m), 2.08-2.23 (1H, m), 2.30 (6H, s), 2.82-2.92 (1H, m), 2.99-3.13 (2H, m), 3.17-3.28 (2H, m), 3.65 (2H, s), 3.84 (3H, s), 6.72 (1H, s), 6.96 (1H, td), 7.38 (1H, ddd), 7.52 (1H, s), 7.90 (1H, s), 8.36 (1H, s), 8.55-8.60 (1H, m), 8.65 (1H, dd), 8.94 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>479.5.
Intermedijar 19: 5-hloro-N-[4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin dihidrohlorid (90 mg, 0.48 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 200 mg, 0.48 mmol) i DIPEA (0.250 mL, 1.45 mmol) u DMA (3 mL). Ova smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu, isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Frakcije koje sadrže produkt su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (149 mg, 61%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 1.76-1.89 (1H, m), 2.14-2.25 (7H, m), 2.69-2.84 (1H, m), 3.12-3.27 (3H, m), 3.41-3.53 (1H, m), 3.89 (3H, s), 6.56 (1H, s), 7.13 (1H, td), 7.26-7.38 (1H, m), 8.06 (1H, s), 8.40-8.43 (2H, m), 8.73 (1H, s), 8.85 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>509.5.
Intermedijar 20: 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-amin
Smeša 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 21, 1.4 g, 5.28 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 1.032 g, 5.55 mmol) i ptoluensulfonske kiseline (monohidrat) (1.105 g, 5.81 mmol) je grejana na 125° C u 2-pentanolu (40 mL) tokom 18 h. Smeša je tada ohlađena, a čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije. Čvrsta materija je isprana sa CH3OH i dietil etrom, a tada je osušena na filteru šta daje jedinjenje iz naslova (1.73 g, 79%) u firmi žutog praha;<1>H NMR: 3.98 (3H, s), 7.16 (1H, td), 7.33-7.48 (2H, m), 8.49 (1H, d), 8.53 (1H, d), 8.66 (1H, d), 8.86 (1H, d), 8.90 (1H, s), 8.96 (1H, s).
Intermedijar 21: 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridin
K2CO3(20.82 g, 150.65 mmol) i KOH (16.91 g, 301.31 mmol) su dodani u jednoj porciji u smešu (E)-4-(2-butoksivinil)-2,5-dihloropirimidina (Intermedijar 22, 74.46 g, 301.31 mmol) i 1-aminopiridin jodida (66.9 g, 301.31 mmol) u DMSO (1.415 L) na s.t. Smeša je mešana na s.t. tokom 1.5 h, a tada na 90° C tokom 4 h. Nakon hlađenja, smeša je razređena sa vodom (5 L) i mešana tokom 0.5 h. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom i isprana sa vodom (5 L). Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% EtOAc u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (16.2 g, 20%) u formi kremove čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 7.29 (1H, td), 7.74 (1H, ddd), 8.58 (1H, dt), 8.82 (1H, s), 8.98 (1H, dt), 9.10 (1H, s). m/z: ES<+>, MH<+>264.89.
Intermedijar 22 : 4-[(E)-2-butoksietenil]-2,5-dihloropirimidin
Degazirani 1,4-dioksan (600 mL) je dodan u paladijum(II) acetat (4.80 g, 21.37 mmol) pod N2. Tada su dodani n-butil vinil etar (275 mL, 2.137 mol), 2,4,5-trihloropirimidin (200 g, 1.069 mol) i DIPEA (194 mL, 1.122 mol). Smeša je grejana do 80° C tokom 22.5 h, a tada je ohlađena do 30° C. Tada su dodani paladijum acetat (2.40 g, 10.68 mmol), n-butil vinil etar (138 mL, 1.068 mol) i DIPEA (97 mL, 561 mmol). Smeša je grejana do 80° C tokom 4 h, a tada je ostavljena da se ohladi na s.t. tokom noći. Smeša je dodana u vodu (2 L) pa je dodan i zas. slani rastvor (2 L). Faze su razdvojene, a vodeni rastvor je ekstrahovan sa metil-tert-butiletrom (2×1 L). Spojeni organski rastvor i su isprani sa vodom šta rezultuje u emulziju koja ne može da se razdvoji. Sve je filtrirano, a tada su razdvojene dve faze. Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan šta daje smeđe ulje (240 g). Ovaj materijal je podeljen u dve serije, a svaka je prečišćena sa FCC, eluirana sa 0-100% heptanom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (130 g, 49%) u firmi žutog ulja;<1>H NMR: 0.89-0.97 (3H, t), 1.33-1.45 (2H, m), 1.62-1.72 (2H, m), 4.13 (2H, t), 6.08 (1H, d), 8.06 (1H, d), 8.64 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>247.41.
Intermedijar 23: 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilin
4-fluoro-2-metoksianilin (2.4 g, 17.00 mmol) je dodan deo po deo u koncentrisanu H2SO4(15 mL) koja je ohlađena u ledeno/vodenoj banji u kojoj je temperatura održavana ispod 15° C tokom procesa dodavanja. Smeša je mešana dok se nastala čvrsta materija ne rastvori. Dodan je KNO3(0.815 mL, 17.00 mmol), deo po deo, tako da je temperatura održavana ispod 10° C. Smeša je mešana tokom noći, a tada je izlivena u led/vodu. Smeša je dovedena u bazno područje uz pomoć koncentrisane NH4OH. Nastala čvrsta materija je odstranjena filtracijom, a tada je rastvorena u CH2Cl2, isprana sa vodom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 50-0% heptanom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (2.450 g, 77%) u formi žute kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 3.91 (3H, s), 5.21 (2H, s), 7.03 (1H, d), 7.35 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>187.4.
Intermedijar 24: N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 25, 265 mg, 0.54 mmol), gvožđa (179 mg, 3.21 mmol) i NH4Cl (20.05 mg, 0.37 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (6 mL) i vodi (2 mL) tokom 1 h. Grubi produkt je prečišćen uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (235 mg, 94%) u firmi žute čvrste materije koja je bila korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.13 (6H, s), 3.07 (1H, s), 3.50 (2H, t), 3.66 (3H, s), 4.00 (3H, t), 4.05 (2H, s), 6.28 (1H, s), 6.79 (1H, s), 7.10 (1H, t), 7.3-7.39 (1H, m), 8.33 (1H, s), 8.37 (1H, s), 8.80 (1H, d), 8.93 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>465.25.
Intermedijar 25: 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
DIPEA (0.341 mL, 1.96 mmol) je dodana u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 254 mg, 0.61 mmol) i N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorida (Intermedijar 26, 106 mg, 0.61 mmol) u DMA (4mL), a sve je grejano do 100° C tokom 0.5 h. Dodano je još N,N-dimetilazetidin-3-amina (35 mg, 0.19 mmol), a smeša je grejana na 100° C tokom dodatna 2 h pa je tada ostavljena na s.t. tokom noći. Smeša je prečišćena direktno primenom hromatografske izmene jona na SCX koloni. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka pa je koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (310 mg, 102%) u formi narandžaste čvrste materije koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.14 (6H, s), 3.08-3.18 (1H, m), 3.76 (2H, dd), 3.89 (3H, s), 4.02-4.11 (2H, m), 6.28 (1H, s), 7.12 (1H, td), 7.30-7.39 (1H, m), 8.12 (1H, s), 8.37 (1H, br s), 8.42 (1H, s), 8.68 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.94 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>495.56.
Intermedijar 26: N,N-dimetilazetidin-3-amin – hidrohloridna so
HCl u dietil etru (200 mL) je polako dodavana u rastvor tert-butil 3-dimetil-aminoazetidin-1-karboksilata (Intermedijar 27, 62 g, 0.31 mol) u dietil etru (100 mL), a smeša je mešana tokom 40 min na s.t. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastala čvrsta materija je isprana sa dietil etrom šta daje so iz naslova (50 g, 119%) u formi bele čvrste materije koja je bila korišćena
1
bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.66 (6H, s), 4.00-4.05 (2H, m), 4.24-4.28 (m, 1H), 4.34-4.38 (m, 2H).
Intermedijar 27: tert-butil 3-dimetilaminoazetidin-1-karboksilat
U rastvor N,N-dimetilazetidin-3-amina (Intermedijar 28, 100 g, 1.0 mol) i trietilamina (487 mL, 3.5 mol) u CH2Cl2(500 mL) je dodan tert-butil (2-metilpropan-2-il)oksikarbonil karbonat (326 g, 1.5 mol) na 0° C. Smeša je tada mešana na s.t. tokom 5 h. Smeša je tada isprana sa vodom (4×500 mL), a organski rastvori su osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC daje jedinjenje iz naslova (62 g, 31%).
Intermedijar 28: N,N-dimetilazetidin-3-amin
1-hloroetil karbonohloridat (118 g, 0.83 mol) je dodan u rastvor 1-benzhidril-N,N-dimetilazetidin-3-amina (Intermedijar 29, 200 g, 0.75 mol) u dihloroetanu (1 L), a smeša je refluksovana na 100° C tokom 2 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, nastao ostatak je rastvoren u CH3OH (1 L), a nova smeša je refluksovana na 90° C tokom 2 h. Smeša je tada koncentrisana šta daje jedinjenje iz naslova koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Intermedijar 29: 1-benzhidril-N,N-dimetilazetidin-3-amin
Vodeni dimetilamin (1 L, 33%) je dodan u rastvor (1-benzhidrilazetidin-3-il) metansulfonata (Intermedijar 30, 260 g, 0.82 mol) u CH3CN (1 L), a smeša je refluksovana na 100° C tokom noći. Smeša je tada ohlađena, a rastvarač je odstranjen in vacuo. Smeša je podeljena između vode (300 mL) i CH2Cl2(300 mL), a slojevi su razdvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa CH2Cl2(3×500 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC daje jedinjenje iz naslova (200 g, 92%) u formi smeđe čvrste materije.
Intermedijar 30: (1-benzhidrilazetidin-3-il) metansulfonat
Rastvor metansulfonil hlorida (115 g, 1.01 mol) u CH2Cl2(500 mL) je dodan kap po kap u rastvor 1-benzhidrilazetidin-3-ol (Intermedijar 31, 200 g, 0.84 mol) i trietilamina (119 g, 1.17 mmol) u CH2Cl2(2 L) na 0° C, a smeša je mešana na 0° C tokom 1 h. Reakcija je ugašena dodavanjem vodenog NaHCO3. Faze su razdvojene, a vodeni rastvor je ekstrahovan sa CH2Cl2(3×500 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (260 g, 98%) u formi bele čvrste materije.
2
Intermedijar 31: 1-benzhidrilazetidin-3-ol
DIPEA (129 g, 1 mol) je dodan u rastvor 1-(benzhidrilamino)-3-hloropropan-2-ol (Intermedijar 32, 276 g, 1 mol) u etanolu (2 L) na 0° C, a tada je smeša refluksovana na 90° C tokom noći. Smeša je tada koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (179 g, 75%) koje može da se ponovo kristalizuje iz smeše acetona i petroleum etra.
Intermedijar 32: 1-(benzhidrilamino)-3-hloropropan-2-ol
2-(hlorometil)oksiran (92 g, 1 mol) je dodan kap po kap u rastvor difenil-metanamina (183 g, 1 mol) u CH3OH (1 L) na 0° C, a smeša je mešana na s.t. tokom noći. Smeša je tada koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (201 g, 73%) koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Intermedijar 33: N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1.5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin
Rastvor NH4Cl (45 mg, 0.85 mmol) u vodi (10 mL) je dodan u jednoj porciji u mešanu smešu N-(5-hloro-4-pirazolo(1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 34, 600 mg, 1.21 mmol) i gvožđa (405 mg, 7.24 mmol) u etanolu (30 mL). Nastala smeša je mešana na 105° C tokom 3 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je pomešan sa DMF (10 mL) i prečišćen hromatografskom jonskom izmenom na SCX koloni. Željeni produkt je eluiran iz kolone primenom 0.35 M metanolnog amonijaka u CH2Cl2, a čiste frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (530 mg, 94%) u formi smeđe gume;<1>H NMR: 2.16 (6H, d), 2.38 (2H, t), 2.66 (3H, d), 2.92 (2H, t), 3.66 (3H, s), 4.60 (2H, s), 6.78 (1H, s), 6.92 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.27-7.4 (1H, m), 8.38 (1H, s), 8.43 (1H, d), 8.49 (1H, s), 8.83 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>467.
Intermedijar 34: N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin
N,N,N'-trimetiletilendiamin (0.188 mL, 1.45 mmol) je dodan u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 500 mg, 1.2.1 mmol) i DIPEA (0.250 mL, 1.45 mmol) u DMA (5 mL), a smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa smešom metanolnog amonijaka u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (624 mg, 104%) u formi narandžaste čvrste materije, koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.17 (6H, d), 2.89 (3H, d), 3.87-3.93 (3H, m), 6.84 (1H, s), 7.14 (1H, td), 7.31-7.38 (1H, m), 8.15 (1H, s), 8.39 (1H, d), 8.44 (1H, d), 8.69 (1H, s), 8.85 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>497.
Intermedijar 35: 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]pirol-1-il]-N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin Smeša N-[4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 36, 155 mg, 0.30 mmol), gvožđa (100 mg, 1.79 mmol) i NH4Cl (11.2 mg, 0.21 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i filtrirana kroz dekalit (tip dijatomejske zemlje), a filtrat je koncentrisana in vacuo šta daje smeđu gumu. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (105 mg, 72%) u formi gume;<1>H NMR: (CDCl3) 1.76-1.80 (1H, m), 2.03-2.20 (2H, m), 2.28 (3H, s), 2.48 (1H, dd), 2.59-2.63 (2H, m), 2.76-2.98 (2H, m), 3.46 (1H, dt), 3.78 (2H, s), 3.84 (3H, s), 4.07-4.10 (1H, m), 6.73 (1H, s), 6.94 (1H, td), 7.36 (1H, ddd), 7.51 (1H, s), 7.86 (1H, s), 8.35 (1H, s), 8.54 (1H, d), 8.65 (1H, d), 8.93 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>491.29.
Intermedijar 36: N-{4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]-pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il-pirimidin-2-amin (3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-1H-pirolo[3,2-c]pirol (Intermedijar 37, 91 mg, 0.72 mmol) je dodan u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 250 mg, 0.60 mmol) i DIPEA (0.334 mL, 1.93 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (3 mL), a smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada apsorbirana u siliku. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje materijal koji je koncentrisan in vacuo i rastvoren u CH3OH. Nastao rastvor je apsorbiran u SCX kolonu, a kolona je isprana sa CH3OH pa je eluirana sa 7 N metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (155 mg, 49%) u formi narandžasto/crvene gumaste čvrste materije;<1>H NMR: (CDCl3) 1.89 (1H, dd), 2.04-2.19 (1H, m), 2.24 (3H, s), 2.30-2.39 (1H, m), 2.40-2.57 (2H, m), 2.68 (1H, t), 2.98-3.11 (1H, m), 3.23 (1H, t), 3.51-3.63 (1H, m), 3.97 (3H, s),
4
4.36-4.48 (1H, m), 6.46 (1H, s), 6.90-7.02 (1H, m), 7.31-7.43 (2H, m), 8.38 (1H, s), 8.48 (1H, dd), 8.53-8.57 (1H, m), 8.82 (1H, s), 8.93 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>521.45.
Intermedijar 37: (3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-1H-pirolo[3,4-b]-pirol Paladijum na ugljeniku (10 g) je dodan u rastvor (3aR,6aR)-5-metil-1-[(1R)-1-feniletil]-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]pirola (Intermedijar 38, 20 g, 0.087 mol) u etanolu (500 mL) pod N2. Nastala smeša je hidrogenovana na 70° C/45 psi tokom 24 h. Smeša je tada filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (10.9 g, 99%) u formi čvrste materije;<1>H NMR: 1.59-1.66 (1H, m), 1.86-1.95 (1H, m), 2.18 (s, 3H), 2.28-2.34 (2H, m), 2.46-2.47 (1H, m), 2.73 (2H, d), 3.00 (2H, m), 3.90 (2H, m).
Intermedijar 38: (3aR,6aR)-5-metil-1-[(1R)-1-feniletil]-2,3,3a,4,6,6aheksahidropirolo[3,2-c]pirol
37% vodeni formaldehid (1.6 L) je dodan u rastvor (3aR,6aR)-1-[(1R)-1-feniletil]-3,3a,4,5,6,6a-heksahidro-2H-pirolo[3,2-c]pirola (Intermedijar 39, 108 g, 0.5 mol) u HCOOH (800 mL) na s.t., a smeša je mešana na 70-80° C tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena do 0° C i dovedena u bazno područje (do pH ∼13) dodavanjem čvrstog NaOH. Ova smeša je tada ekstrahovana sa CH2Cl2(2×2 L). Spojeni organski rastvori su koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa smešama heksani/EtOAc (2:1 do 1:10) daje jedinjenje iz naslova (80 g, 70%) u formi crvenog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.36 (3H, d), 1.65 (1H, m), 1.85 (1H, m), 2.22 (3H, m), 2.32 (3H, s), 2.54 (1H, m), 2.68 (2H, m), 2.83 (1H, m), 3.10 (1H, m), 3.40 (1H, m), 7.21-7.33 (5H, m).
Intermedijar 39: (3aR,6aR)-1-[(1R)-1-feniletil]-3,3a,4,5,6,6a-heksahidro-2H-pirolo[3,2-c]pirol
Rastvor etil (3aR,6aR)-1-[(1R)-1-feniletil]-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,2-c]-pirol-5-karboksilata (Intermedijar 40, 300 g, 1.04 mol) u koncentrisanoj HCl (4 L, 37%) je refluksovan tokom noći. Smeša je tada ohlađena do 0° C i ekstrahovana sa CH2Cl2(2×1 L). pH vrednost vodenog rastvora je podešena do 12-13 uz pomoć NaOH (čvrsta materija). Spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (150 g, 67%) u formi tamnog ulja koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Intermedijar 40: etil (3aR,6aR)-1-[(1R)-1-feniletil]-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-pirolo[3,2-c]pirol-5-karboksilat
Smeša etil N-(2-oksoetil)-N-prop-2-enilkarbamata (Intermedijar 41, 466 g, 2.7 mol) i 2-{[(1R)-1-feniletil]amino}sirćetne kiseline (Intermedijar 43A, 490 g, 2.7 mol) u toluenu (4 L) je refluksovana tokom noći. Nastala smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa smešom petrol-EtOAc (10:1) daje jedinjenje iz naslova (300 g, 38%) u formi crvenog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.10-1.40 (8H, m), 1.55 (1H, m), 1.90 (1H, m), 2.45 (1H, m), 2.77 (1H, m), 3.20-3.65 (5H, m), 4.10-4.20 (2H, m), 7.25-7.38 (5H, m).
Intermedijar 41: etil N-(2-oksoetil)-N-prop-2-enilkarbamat
Rastvor etil N-(2,2-dimetoksietil)-N-prop-2-enilkarbamata (Intermedijar 42, 1218 g, 2.79 mol) u HCOOH (4.2 L) je refluksovan tokom 0.5 h. Tada je dodan smrvljen led sa ciljem da se reakcija ugasi, a smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(3×2 L). Spojeni organski rastvori su isprani sa zas. NaHCO3(3 L), osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo što daje jedinjenje iz naslova (480 g, 50%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.15-1.32 (3H, m), 3.89-4.00 (4H, m), 4.07-4.16 (2H, m), 5.10 (2H, m), 5.73 (1H, m), 9.53 (1H, s).
Intermedijar 42: etil N-(2,2-dimetoksietil)-N-prop-2-enilkarbamat
Smrvljeni KOH (1417 g, 25.3 mol) je dodan deo po deo u rastvor etil N-(2,2-dimetoksietil)karbamata (Intermedijar 43, 1123 g, 6.3 mol) u toluenu (5 L). Tada su dodani benziltrietil-amonijum hlorid (14.0 g, 0.06 mol) i alil bromid (532 g, 4.4 mol) na s.t. Smeša je tada mešana na s.t. tokom noći. Smeša je tada filtrirana, a reakciona smeša je isprana sa slanim rastvorom (2 L), osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (1218 g, 89%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.23 (3H, s), 3.28 (2H, s), 3.36 (6H, s), 3.92 (2H, d), 4.12 (2H, s), 4.47 (1H, d), 5.08 (2H, d), 5.73 (1H, s).
Intermedijar 43: etil N-(2,2-dimetoksietil)karbamat
Rastvor NaOH (578.4 g, 14.46 mol) u H2O (2 L) je dodan u rastvor 2,2-dimetoksietanamina (800 g, 7.6 mol) u toluenu (2 L), a nastala smeša je ohlađena do 0° C uz pomoć ledene banje. Dodan je etil hloroformat (825 g, 7.6 mol), kap po kap, uz održavanje temperature blizu 10° C. Smeša je tada mešana na s.t. tokom noći. Faze su razdvojene, a vodeni rastvor je zasićen sa čvrstim NaCl. Ovaj rastvor je tada ekstrahovan sa toluenom (3×1.25 L). Spojeni organski rastvori su osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (1.123 kg, 83%) u formi bezbojnog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.17 (3H, t), 3.14 (2H, s), 3.32 (6H, s), 4.02-4.07 (2H, m), 4.30 (1H, t).
Intermedijar 43A: 2-{[(1R)-1-feniletil]amino}sirćetna kiselina
Metil 2-{[(1R)-1-feniletil]amino}acetat (Intermedijar 44, 587.0 g, 3.0 mol) je refluksovan u vodenom KOH (3.36 g, 0.06 mol rastvorena u 2.5 L vode) tokom noći. Faze su tada razdvojene, a vodeni rastvor je ispran sa EtOAc (3×1 L). Spojeni organski rastvori su koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (490 g, 90%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: 1.48 (3H, d), 2.89 (1H, d), 3.00 (1H, d), 4.20 (1H, m), 7.37-7.43 (5H, m).
Intermedijar 44: Metil 2-{[(1R)-1-feniletil]amino}acetat
Metil 2-bromoacetat (621 g, 4.1 mol) je dodan kap po kap u smešu (1R)-1-feniletanamina (410 g, 3.4 mol) i trietilamina (377 g, 3.7 mol) u EtOAc (4.5 L) na s.t. Smeša je tada mešana na 50-60° C tokom noći pa je ohlađena do s.t. Smeša je isprana sa vodom (800 mL) i slanim rastvorom (100 mL), osušena (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (587 g, 90%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.29 (3H, d), 3.13-3.24 (2H, m), 3.60 (3H, s), 3.68-3.71 (1H, m), 7.13-7.26 (5H, m).
Intermedijar 45: N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 46, 95 mg, 0.18 mmol), gvožđa (61 mg, 1.09 mmol) i NH4Cl (7.32 mg, 0.14 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (10.5 mL) i vodi (3.5 mL) tokom 2 h. Smeša je ohlađena i filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™). Filtrat je koncentrisan in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2. Ovaj rastvor je ispran sa slanim rastvorom, osušen (Na2SO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-6% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (30 mg, 34%) u formi smeđe gume; m/z: ES<+>MH<+>491.5.
Intermedijar 46: 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
Smeša dihidrohloridne soli 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktana (Intermedijar 47, 400 mg) u smeši CH3OH/voda je apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom. Frakcije koje sadrže produkt su spojene i koncentrisane (pažnja: produkt je isparljiv). Smeša 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 250 mg, 0.60 mmol), 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktana (91 mg, 0.72 mmol) i DIPEA (0.365 mL, 2.11 mmol) u DMA (3 mL) je grejana na 140° C tokom 0.5 h u mikrotalasnoj peći. Smeša je tada razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Frakcije koje sadrže produkt su spojene i koncentrisane sa ciljem da se dobije čvrsta materija. Ova čvrsta materija je suspendovana u CH3OH, filtrirana, isprana sa dietil etrom i osušena šta daje jedinjenje iz naslova (267 mg, 85%) u formi crvene čvrste materije;<1>H NMR: 1.63-1.78 (2H, m), 2-2.12 (2H, m), 2.41 (3H, s), 2.69 (2H, t), 3.77 (2H, d), 3.90 (3H, s), 4.13 (2H, d), 6.30 (1H, s), 7.14 (1H, td), 7.34 (1H, t), 8.12 (1H, s), 8.41-8.46 (2H, m), 8.74 (1H, s), 8.86 (1H, d), 8.96 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>521.46.
Intermedijar 47: dihidrohloridna so 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktana
4 M rastvor HCl u EtOAc (120 mL) je pripremljena dodavanjem acetil hlorida (34 mL) u rastvor etanola (28 mL) i EtOAc (58 mL). Ovaj rastvor je tada dodan u smešu 2-benzil-5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktana (Intermedijar 48, 48 g, 221.89 mmol) i Pd(OH)2(34 g, 20% na ugljeniku) u 1.5 L CH3OH. Smeša je tada mešana na 30° C pod pritiskom H2od 55 psi tokom 24 h. Smeša je tada filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje so iz naslova (42.7 g, 96%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (d<4>-metanol) 1.98-2.11 (2H, m), 2.53 (2H, t), 3.02 (3H, s), 3.38 (2H, t), 4.17 (2H, d), 4.68 (2H, d).
Intermedijar 48: 2-benzil-5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan
Paraformaldehid (70.91 g, 787 mmol) i trietilamin (119.5 g, 1.18 mol) su dodani u smešu 2-benzil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan dihidrohlorida (Intermedijar 49, 65 g, 236.2 mmol) u 1,2-dihloroetanu (700 mL), a smeša je mešana tokom 1 h na 10° C. Tada je dodan natrijum triacetoksiborohidrid (110.8 g, 1.18 mol), a smeša je mešana tokom 12 h na 15° C. Smeša je tada filtrirana, a filterski kolač je ispran sa CH2Cl2(3×500 mL). Spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom (500 mL), osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (51.1 g, 94%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (300 MHz, CDCl3) 1.75 (2H, m), 2.16 (2H, m), 2.49 (3H, s), 2.64 (2H, d), 3.10 (2H, d), 3.28 (2H, d), 3.66 (2H, s), 7.22-7.62 (5H, m).
Intermedijar 49: 2-benzil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan dihidrohlorid
4 M rastvor HCl u EtOAc (2 L) je dodan u rastvor tert-butil 2-benzil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-5-karboksilata (Intermedijar 50, 195 g, 644.8 mmol) u EtOAc (0.5 L), a smeša je mešana tokom 12 h. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa tert-butilmetil etrom (2 L) šta daje so iz naslova (170 g, 96%) u formi bele čvrste materije;<1>H NMR: (d<4>-metanol) 2.04-2.11 (2H, m), 2.41 (2H, t), 3.39 (2H, t), 4.33 (2H, s), 4.81-4.88 (2H, m), 7.49-7.58 (5H, m).
Intermedijar 50: tert-butil 2-benzil-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-5-karboksilat
Rastvor CBr4(369.5 g, 1.115 mol) u 1 L CH2Cl2je dodan kap po kap u rastvor tert-butil 2-[(benzilamino)metil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijar 51, 178.5 g, 555 mmol) i trifenilfosfina (292 g, 1.115 mol) u CH2Cl2(1.8 L) na 0° C. Nastala smeša je mešana na s.t. tokom 2 h, a tada je koncentrisana in vacuo. Ostatak je suspendovan u smeši CH3CN (2 L) i trietilamina (563.5 g, 5.57 mol) pa je refluksovan na 80° C tokom 24 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa smešom petrol-EtOAc (1:1) daje jedinjenje iz naslova (97.5 g, 58%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (300 MHz, CDCl3) 1.47-1.72 (11H, m), 2.30 (2H, m), 3.19 (2H, d), 3.31-3.47 (2H, m), 3.82-4.12 (4H, m), 7.22-7.28 (5H, m).
Intermedijar 51: 2-[(benzilamino)metil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat Boran-dimetilsulfid (170 mL, 1.7 mol) je dodan u rastvor tert-butil 2-benzil-3-okso-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-5-karboksilata (Intermedijar 52, 179 g, 567 mmol) u 1.8 L THF, a smeša je refluksovana na 80° C tokom 12 h. Reakcija je tada ugašena dodavanjem CH3OH (1 L) i vode (1.5 L). Faze su razdvojene, vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3×1 L), a spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom (3×1 L), osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (119 g, 66%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.47 (10H, m), 1.55-1.78 (3H, m), 2.06 (1H, m), 2.57 (2H, d), 3.17 (1H, m), 3.35 (2H, m), 3.37 (1H, m), 3.75-3.87 (3H, m), 7.23-7.40 (5H, m).
Intermedijar 52: tert-butil 2-benzil-3-okso-2,5-diazaspiro[3.4]oktan-5-karboksilat n-butillitijum (268.7 mL, 0.672 mmol, 2.5 M u heksanima) je dodan u rastvor diizopropilamina (70 g, 691.7 mmol) na -70° C u suvom THF (1.5 L) pod N2, a smeša je mešana tokom 1 h na -70° C. Rastvor 1-tert-butil 2-metil pirolidin-1,2-dikarboksilata (Intermedijar 53, 140 g, 610 mmol) u bezvodnom THF (360 mL) je tada dodan kap po kap na -70° C. Nakon mešanja na -70° C tokom 1 h kap po kap je dodan rastvor 2-(benzilamino)-acetonitrila (Intermedijar 54, 45.9 g, 305.7 mmol) u bezvodnom THF (360 mL) na -70° C tokom perioda od 1 h. Tada, nastala smeša je ugrejana do s.t. pa je mešana tokom 12 h. Dodan je zas. NH4Cl (1.5 L), a nastale faze su razdvojene. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3×1 L). Spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom (3×1 L), osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa smešom petroleum etar/EtOAc (2:1) daje jedinjenje iz naslova (75.5 g, 76%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.44 (9H, m), 1.77 (1H, m), 1.93 (1H, m), 2.04 (1H, m), 2.37 (1H, m), 3.00 (1H, m), 3.40-3.67 (3H, m), 3.95 (1H, m), 4.25-4.89 (1H, m), 7.21-7.36 (5H, m).
Intermedijar 53: 1-tert-butil 2-metil pirolidin-1,2-dikarboksilat
K2CO3(1.1 kg, 8.0 mol) i CH3I (659 g, 4.65 mol) su dodani u rastvor 1-[(2-metilpropan-2-il)oksikarbonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (500 g, 2.32 mol) u DMF (2.5 L) na s.t., smeša je mešana tokom 12 h, a tada filtrirana. Filtrat je koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u EtOAc (2 L) i ispran sa vodom (2×1 L), slanim rastvorom (1 L), osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (417.8 g, 96%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 1.37 (9H, m), 1.72-1.84 (3H, m), 2.15 (1H, m), 3.26-3.51 (2H, m), 3.65 (3H, s), 4.17 (1H, m).
Intermedijar 54: 2-benzilamino)acetonitril
Rastvor ClCH2CN (316 g, 4.19 mol) u EtOAc (200 mL) je dodan kap po kap u benzilamin (900 g, 8.40 mol) uz snažno mešanje smeše. Smeša je polako ugrejana do 45° C tokom 0.5 h, a beli precipitat je odstranjen filtracijom. Filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (606 g, 99%) u formi žutog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 3.56 (2H, s), 3.94 (2H, s), 7.28-7.40 (5H, m).
Intermedijar 55: N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 56, 470 mg, 0.96 mmol), gvožđa (320 mg, 5.73 mmol) i NH4Cl (35.8 mg, 0.67 mmol) u etanolu (19 mL) i vodi (6.33 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h. Tada, smeša je ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu koja je smrvljena sa 10% CH3OH u CH2Cl2(50 mL) tokom 15 min. Smeša
1
je tada filtrirana, a mala količina zas. NaHCO3je dodana u filtrat. Nastale faze su razdvojene, a vodeni rastvor je ekstrahovan sa 10% CH3OH u CH2Cl2(50 mL). Spojeni organski rastvori su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (387 mg, 88%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.31 (3H, s), 2.38-2.44 (2H, m), 2.61 (2H, t), 3.02 (2H, dd), 3.68 (3H, s), 4.33 (2H, d), 5.72-5.76 (1H, m), 6.66 (1H, s), 7.08 (1H, s), 7.14 (1H, td), 7.35-7.43 (1H, m), 8.41 (1H, s), 8.44 (1H, s), 8.49 (1H, d), 8.84 (1H, d), 8.96 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>462.5.
Intermedijar 56: 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
Smeša 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 21, 575 mg, 1.86 mmol) i 2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 3, 490 mg, 1.86 mmol) je mešana u THF (30 mL) pa je ohlađena u ledeno/vodenoj banji. Dodan je litijum bi(trimetilsilil)amid (4.10 mL, 4.10 mmol; 1 M u THF), kap po kap, a smeša je mešana tokom 1 h. Dodan je CH3OH, a smeša je koncentrisana in vacuo. Grubi materijal je suspendovan u CH3OH, a smeša je filtrirana. Sakupljena čvrsta materija je isprana sa CH3OH i dietil etrom pa je osušena na filter-hartiji šta daje jedinjenje iz naslova (660 mg, 72%) u formi žutog praha;<1>H NMR: 2.29 (3H, s), 2.30-2.38 (2H, m), 2.58 (2H, t), 2.97 (2H, dd), 3.96 (3H, s), 5.60-5.68 (1H, m), 7.00 (1H, s), 7.16 (1H, td), 7.36-7.45 (1H, m), 8.49-8.56 (3H, m), 8.87 (1H, d), 8.90 (1H, s), 8.97 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>492.4.
Intermedijar 57: 2-(4-{2-amino-4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksifenil}piperazin-1-il)-N,N-dimetilacetamid
Smeša 2-(4-{4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksi-2-nitrofenil}piperazin-1-il)-N,N-dimetilacetamida (Intermedijar 58, 0.234 g, 0.41 mmol), gvožđa (0.139 g, 2.48 mmol) i NH4Cl (0.015 g, 0.29 mmol) u etanolu (10 mL) i vodi (3.33 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h. Smeša je tada ostavljena da se ohladi do s.t., pa je filtrirana, a filtrat je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje hromatografskom jonskom izmenom, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 1 metanolnim amonijakom, daje smeđu gumu nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.19 g, 86%) u formi žute pene;<1>H NMR: (CDCl3) 2.72 (4H, s), 2.93-3.01 (7H, m), 3.13 (3H, s), 3.27 (2H, s), 3.65-3.83 (2H, m), 3.84 (3H, s),
1 1
6.71 (1H, s), 6.96 (1H, td), 7.38 (1H, ddd), 7.55 (1H, s), 7.92 (1H, s), 8.36 (1H, s), 8.57 (1H, dt), 8.61-8.68 (1H, m), 8.94 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>536.53.
Intermedijar 58: 2-(4-{4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksi-2-nitrofenil}piperazin-1-il)-N,N-dimetilacetamid
DIPEA (0.105 mL, 0.60 mmol) je dodana u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 207 mg, 0.5 mmol) i N,N-dimetil-2-piperazin-1-ilacetamida (86 mg, 0.50 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (2.5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h pa je ohlađena do s.t. Smeša je prečišćena direktno hromatografskom jonskom izmenom, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, šta daje grubi produkt nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (234 mg, 83%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: (CDCl3) 2.71-2.78 (4H, m), 2.97 (3H, s), 3.09 (3H, s), 3.11-3.18 (4H, m), 3.26 (2H, s), 3.99 (3H, s), 6.66 (1H, s), 6.97 (1H, td), 7.35-7.42 (1H, m), 7.52 (1H, s), 8.41 (1H, s), 8.49 (1 H, d), 8.56 (1H, d), 8.92 (1H, s), 9.02 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>566.52.
Intermedijar 59: (S)-tert-butil N-[1-(4-{2-amino-4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksifenil}piperazin-1-il)-1-oksopropan-2-il]karbamat Smeša (S)-tert-butil N-[1-(4-{4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)amino]-5-metoksi-2-nitrofenil}piperazin-1-il)-1-oksopropan-2-il]karbamata (Intermedijar 60, 100 mg, 0.15 mmol), gvožđa (51.4 mg, 0.92 mmol) i NH4Cl (5.74 mg, 0.11 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (3 mL) i vodi (1 mL) tokom 1 h. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje materijal koji je dodatno prečišćen sa FCC, eluiran sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (65 mg, 68%) u formi žute čvrste materije; m/z: ES<+>MH<+>622.58.
Intermedijar 60: (S)-tert-butil N-[1-(4-{4-[(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ililpirimidin-2-il)amino]-5-metoksi-2-nitrofenil}piperarin-1-il)-1-oksopropan-2-il]-karbamat
DIPEA (0.105 mL, 0.60 mmol) je dodan u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 207 mg, 0.5 mmol) i (S)-tert-butil 1-okso-1-(piperazin-1-il)propan-2-ilkarbamata (129 mg, 0.50 mmol) u 2,2,2-
1 2
trifluoroetanolu (2.5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h, a tada je ohlađena do s.t. Smeša je prečišćena direktno uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, šta daje grubi materijal. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (110 mg, 34%) u formi čvrste materije/gume; m/z: ES<+>MH<+>552.59.
Intermedijar 61: N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 62, 295 mg, 0.58 mmol), gvožđa (194 mg, 3.48 mmol) i NH4Cl (23 mg, 0.43 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(25 mL) tokom 15 min pa je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(25 mL) i filtrirani. Spojeni filtrati su ispran sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SOa) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (260 mg, 94%) u formi žute gume;<1>H NMR: 1.73-1.86 (1H, m), 2.01-2.12 (1H, m), 2.20 (6H, s), 2.81-2.91 (1H, m), 2.92-3.05 (2H, m), 3.16 (1H, dd), 3.2-3.27 (1H, m), 3.67 (3H, s), 4.25 (2H, d), 6.71 (1H, s), 6.93 (1H, s), 7.12 (1H, td), 7.3-7.37 (1H, m), 8.36 (1H, s), 8.38-8.46 (2H, m), 8.82 (1H, dt), 8.94 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>479.5.
Intermedijar 62: 5-hloro-N-{4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
(3S)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (0.092 mL, 0.72 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 250 mg, 0.60 mmol) i DIPEA (0.125 mL, 0.72 mmol) u DMA (3 mL), a smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH pa je apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH pa je eluirana sa 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su koncentrisane i dodatno prečišćene sa FCC, eluirane sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (300 mg, 98%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 1.75-1.95 (1H, m), 2.09-2.30 (7H, m), 2.72-2.87 (1H, m), 3.11-3.27 (3H, m), 3.42-3.56 (1H, m), 3.90 (3H, s), 6.57 (1H, s), 7.13 (1H, t),
1
7.26-7.41 (1H, m), 8.09 (1H, s), 8.28-8.50 (2H, m), 8.67 (1H, s), 8.84 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>509.5.
Intermedijar 63: N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 64, 775 mg, 1.57 mmol), gvožđa (525 mg, 9.40 mmol) i NH4Cl (62.8 mg, 1.17 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (21 mL) i vodi (7 mL) tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™). Filtrat je koncentrisan in vacuo pa je rastvoren u CH2Cl2. Ovaj rastvor je ispran sa slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-6% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (480 mg, 66%) u formi smeđe gume;<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.52 (4H+DMSO, m), 2.89 (4H, t), 3.68 (3H, s), 4.35 (2H, d), 6.73 (1H, s), 6.99 (1H, d), 7.13 (1H, td), 7.28-7.39 (1H, m), 8.38 (1H, d), 8.39-8.46 (2H, m), 8.82 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>465.5.
Intermedijar 64: 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
1-metilpiperazin (0.267 mL, 2.41 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 500 mg, 1.21 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (6 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Smeša je tada nabijena u SCX kolonu, a kolona je isprana sa CH3OH. Kolona je tada eluirana sa 2 M metanolnim amonijakom, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (596 mg, 100%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: (CDCl3) 2.37 (3H, s), 2.57-2.68 (4H, m), 3.08-3.14 (4H, m), 4.00 (3H, s), 6.64 (1H, s), 6.98 (1H, t), 7.34-7.43 (1H, m), 7.53 (1H, s), 8.41 (1H, s), 8.49 (1H, d), 8.53-8.6 (1H, m), 8.93 (1H, s), 9.04 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>495.
Intermedijar 65: 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitril
Smeša N'-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 63,157 mg, 0.34 mmol), cinka (2.209 mg, 0.03 mmol),
1 4
tris(dibenzilidenaceton)dipaladijuma(0) (30.9 mg, 0.03 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropilbifenil-2-il)fosfina ('XFos', 32.2 mg, 0.07 mmol), i dicijanocinka (23.8 mg, 0.20 mmol) je stavljena u reakcionu tubu pod N2, a tada je dodana degazirana DMA (0.9 mL). Nastala suspenzija je mešana do 95° C tokom 1.5 h. Smeša je tada razređena sa EtOAc pa je pet puta isprana sa vodom pa sa slanim rastvorom. Rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je smrvljen sa dietil etrom, a nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom i isprana sa dietil etrom. Čvrsta materija je tada rastvorena u smeši CH2Cl2i CH3OH, a rastvor je ostavljen da prođe kroz punjenje stratospheres SPE patron PL-Thiol MP SPE (od Polymer Laboratories) uz pomoć gravitacijske snage. Nastao rastvor je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (87 mg, 57%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (100°C) 2.28 (3H, s), 2.49-2.58 (4H, m), 2.90-2.98 (4H, m), 3.70 (3H, s), 4.28 (2H, br s), 6.77 (1H, s), 6.99 (1H, s), 7.14 (1H, t), 7.37 (1H, t), 8.37 (1H, d), 8.55 (1H, s), 8.78 (1H, d), 8.85 (1H, s), 8.92 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>456.4.
Intermedijar 66: N'-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Rastvor NH4CI (0.021 g, 0.38 mmol) u vodi (3 mL) je dodan u jednoj porciji u mešanu suspenziju 4-(1H-indol-3-il)-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amina (Intermedijar 67, 0.235 g, 0.51 mmol) i gvožđa (0.171 g, 3.07 mmol) u etanolu (9 mL), a smeša je mešana na 105° C tokom 18 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u DMF (20 mL). Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2, i koncentrisanje odgovarajućih frakcija daje jedinjenje iz naslova (0.206 g, 94%) u formi žute čvrste materije; m/z: ES<+>MH<+>430.51.
Intermedijar 67: 4-(1H-indol-3-il)-N-(2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amin
Smeša 1-metilpiperazina (148 mg, 1.48 mmol), N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 68, 224 mg, 0.59 mmol) i trifluoroetanola (5 mL) je zatvorena u tubi za mikrotalasnu peć pa je grejana do 120° C tokom 1 h u mikrotalasnoj peći nakon čega je ohlađena do s.t. Smeša je tada koncentrisana in vacuo. Mrvljenje nastale smeđe gume sa etanolom pa sa dietil etrom daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (89 mg, 33%) u formi bledo-smeđe čvrste
1
materije;<1>H NMR: 3.02-3.13 (4H, m), 4.00 (3H, s), 6.86 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.18 (1H, t), 7.31 (1H, d), 7.45 (1H, d), 8.08 (1H, s), 8.33 (2H, dd), 8.82 (1H, d), 11.81 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>460.5.
Intermedijar 68: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin
Hidrat p-toluensulfonske kiseline (225 mg, 1.18 mmol) je dodan u jednoj porciji u smešu 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 200 mg, 1.07 mmol) i 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1H-indola (247 mg, 1.07 mmol) u 2-pentanolu (10 mL). Nastala smeša je tada mešana na 120° C tokom 18 h. Nastao precipitat je sakupljen filtracijom, ispran sa 2-pentanolom (5 mL) i osušen in vacuo šta daje žutu čvrstu materiju. Čvrsta materija je smrvljena sa CH3CN šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (224 mg, 55%) u formi žute čvrste materije; m/z: ES<+>MH<+>380.21.
Intermedijar 69: 4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Rastvor [(Z)-3-(dimetilamino)-3-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il-prop-2-eniliden]-dimetilamonijum heksafluorofosfata (Intermedijar 70, 116 mg, 0.3 mmol) u 2-metoksietanolu (2 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor 1-(5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)gvanidina (Intermedijar 72, 84 mg, 0.30 mmol) i 1,1,3,3-tetrametilgvanidina (0.056 mL, 0.45 mmol) u 2-metoksietanolu (2 mL) na s.t. pod N2. Nastao rastvor je zatvoren u tubu za mikrotalasnu peć pa je grejan do 120° C tokom 0.25 h, a onda je ohlađen do s.t. Dodano je još 1,1,3,3-tetrametilgvanidina (0.056 mL, 0.45 mmol), a smeša je mešana na 120° C tokom 0.25 h, a tada na 140° C tokom 0.25 h. Smeša je ohlađena, razređena sa EtOAc (10 mL) i isprana sa vodom (2×5 mL). Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (5 mL), a organski rastvor je ispran sa vodom (2×3 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (69 mg, 53%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.25 (3H, d), 2.51 (4H, m), 2.87 (4H, t), 3.73 (3H, s), 4.37 (2H, s), 6.72 (1H, s), 7.07 (1H, m), 7.22 (1H, d), 7.33 (1H, s),
1
7.40 (1H, m), 7.98 (1H, s), 8.31 (1H, d), 8.52 (1H, d), 8.76 (1H, s), 8.79 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>431.
Intermedijar 70: [(Z)-3-(dimetilamino)-3-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il-prop-2-eniliden]-dimetil-amonijum heksafluorofosfat
Dimetilamin (24.0 mL, 48.0 mmol, 2 M u THF) je dodan u jednoj porciji u suspenziju (Z)-N-(3-hloro-3-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)aliliden)-N-metilmetanaminijum heksafluorofosfata (Intermedijar 71, 6.07 g, 16 mmol) u CH3OH (40 mL) na s.t. pod N2. Nastao rastvor je mešan na s.t. tokom 0.25 h, a tada je ostavljen u hladnjaku tokom noći. Nastali kristali su sakupljeni, isprani sa CH3OH na -50° C i THF, pa su tada osušeni isisavanjem u mlazu N2. Sakupljene su dve žetve kristala šta daje jedinjenje iz naslova (5.29 g, 85%) u firmi bež kristalne čvrste materije; m/z: ES<+>M<+>244.
Intermedijar 71: (Z)-N-(3-hloro-3-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)aliliden)-N-metilmetanaminijum heksafluorofosfat
POCl3(0.951 mL, 10.20 mmol) je dodan u rastvor (E)-3-(dimetilamino)-1-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)prop-2-en-1-on (2.153 g, 10 mmol) u CH2Cl2(15 mL) na 20° C (uz hlađenje u led/vodi) tokom perioda od 3 min pod N2. Nastao rastvor je mešan na s.t. tokom 0.5 h, a tada je koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u minimalnoj količini CH3OH (100 mL). Ovaj rastvor je dodan tokom perioda od 2 min u rastvor natrijum heksafluorofosfata(V) (3.36 g, 20.00 mmol) u CH3OH (40 mL). Nakon 5 min precipitat je sakupljen filtracijom, dobro ispran sa CH3OH, ohlađen do -50° C i osušen isisavanjem u mlazu N2šta daje jedinjenje iz naslova (3.40 g, 90%) u formi žutog praha, koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 3.63 (6H, d), 7.36 (2H, m), 7.71-7.90 (1H, m), 8.45 (1H, d), 8.81 (1H, d), 9.05 (2H; d); m/z: ES<+>M<+>234.
Intermedijar 72: 1-[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]gvanidin Smeša 1-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]gvanidina (Intermedijar 73, 1.47 g, 4.58 mmol) i 10% Pd na ugljeniku (0.146 g, 0.14 mmol) u etanolu (30 mL) je mešan u atmosferi H2na s.t. tokom 18 h. Smeša je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™), a filtrat je koncentrisan in vacuo. Ostatak, zajedno sa 10% Pd na ugljeniku (0.146 g, 0.14 mmol) u CH3OH (60 mL), je mešan u atmosferi H2na s.t. tokom 2 h. Smeša je tada filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™), a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova
1
(1.253 g, 94%) u formi smeđe pene;<1>H NMR: 2.24 (3H, s), 2.51 (4H, m), 2.86 (4H, m), 3.72 (3H, s), 4.47 (2H, s), 6.54 (1H, s), 6.69 (1H, s), 7.30 (3H, s); m/z: ES<+>MH<+>279.
Intermedijar 73: 1-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]gvanidin Metansulfonska kiselina (0.508 mL, 7.83 mmol) je dodana u gustu smešu 2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 14, 1.39 g, 5.22 mmol) u butan-1-ol (10 mL) i vodi (0.5 mL) na s.t. Nastala gusta smešu je grejana do 90° C i na toj temperaturi je dodan rastvor cijanamida (0.439 g, 10.44 mmol) u vodi (0.22 mL), kap po kap, tokom perioda od 1 min. Smeša je grejana na 90° C tokom 0.5 h, a tada je dodana metansulfonska kiselina (0.339 mL, 5.22 mmol), kap po kap. U 10-minutnim intervalima postupno je dodavano još cijanamida (0.219 g, 5.22 mmol), još metansulfonske kiseline (0.339 mL, 5.22 mmol) i još cijanamida (0.329 g, 7.83 mmol) i još metansulfonske kiseline (0.339 mL, 5.22 mmol). Smeša je ostavljena da se ohladi pa je razređena sa 2-metiltetrahidrofuranom (75 mL) i dietil etrom (75 mL). Ovaj rastvor je tada doveden u bazno područje uz pomoć 5 M NaOH do ~pH 13. Nastale faze su razdvojene, a vodeni rastvor je ekstrahovan sa 2-metiltetrahidrofuranom (3×50 mL). Spojeni organski rastvori su isprani sa zas. slanim rastvorom i osušeni (MgSO4). Produkt je precipitirao na agensima za sušenje, pa je nakon filtracije MgSO4ispran sa vrućom smešom CH2Cl2/CH3OH (5:1; 5×100 mL), a spojeni filtrat je koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u vrućem 2-propanolu (80 mL), filtriran dok je još bio vruć pa je koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(50 mL), filtriran, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (1.49 g, 89%) u formi narandžaste pene. Produkt može jedino da se deponuje amorfno iz filtrata 2-propanola, ali je primerak od 38 mg iz finalnog produkta bio kristalizovan iz etanola (~100 µL) pa je sakupljen filtracijom, ispran sa etanolom (-70° C) i dietil etrom pa je osušen u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (11 mg, 28%) u formi žutog praha;<1>H NMR: 2.25 (3H, s), 2.44-2.49 (4H, m), 2.99-3.16 (4H, m), 3.91 (3H, s), 6.73 (1H, s), 7.38 (3H, s), 7.67 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>309.
Intermedijar 74: N'-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-4-(1H-indol-3-il)-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amina (Intermedijar 75, 350 mg, 0.71 mmol), gvožđa (237 mg, 4.25 mmol) i NH4Cl (26.5 mg, 0.50 mmol) je grejana kod refluksa u etanolu (24 mL) i vodi (8 mL) tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. Dodani su
1
CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je filtrirana. Filterski kolač je ispran sa dodatnom količinom CH2Cl2i CH3OH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (288 mg, 88%) u formi žutog suvog filma;<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.47-2.56 (4H, m), 2.88 (4H, t), 3.70 (3H, s), 4.29 (2H, d), 6.72 (1H, s), 7.04 (1H, t), 7.14 (1H, s), 7.15-7.22 (1H, m), 7.46 (1H, d), 8.18 (1H, s), 8.35 (2H, d), 8.48 (1H, d), 11.81 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>464.49.
Intermedijar 75: 5-hloro-4-(1H-indol-3-il)-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]pirimidin-2-amin
1-metilpiperazin (492 µL, 4.44 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 76, 612 mg, 1.48 mmol). Smeša je grejana na 120° C tokom 1 h, a tada je koncentrisana in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(25 mL) pa je ispran sa vodom (2×25 mL) i zas. slanim rastvorom (25 mL), a tada je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova u formi narandžaste gume. Ova guma je rastvorena u etanolu (25 mL), a čvrsta materija je precipitirala. Ova čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa etanolom i dietil etrom šta daje jedinjenje iz naslova (365 mg, 50%) u formi žuto/narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.47-2.55 (4H, m), 3.07-3.13 (4H, m), 3.93 (3H, s), 6.85 (1H, s), 6.99 (1H, t), 7.16-7.22 (1H, m), 7.48 (1H, d), 8.26 (1H, d), 8.36 (1H, s), 8.42 (1H, d), 8.51 (1H, s), 8.54 (1H, s), 11.88 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>494.46.
Intermedijar 76: 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)-pirimidin-2-amin
Smeša 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)-1H-indola (Intermedijar 11, 391 mg, 1.48 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 289 mg, 1.55 mmol) i monohidrata ptoluensulfonske kiseline (310 mg, 1.63 mmol) u 2-pentanolu (25 mL) je grejana na 125° C tokom 18 h. Smeša je ohlađena i korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja; m/z: ES<+>MH<+>414.12.
Intermedijar 77: 4-metoksi-N'-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
1
Smeša N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 78, 408 mg, 0.84 mmol), gvožđa (280 mg, 5.02 mmol) i NH4Cl (31.3 mg, 0.59 mmol) u etanolu (24 mL) i vodi (8.00 mL) je grejana kod refluksa tokom 3 h. Smeša je ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. Dodani su CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je tada filtrirana. Filterski kolač je ispran sa dodatnom količinom CH2Cl2i CH3OH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-7% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (163 mg, 43%) u formi žute gume koja kristalizuje nakon stajanja;<1>H NMR: (CDCl3) 2.36 (6H, s), 2.53 (3H, dd), 2.94 (4H, t), 3.69-3.79 (2H, m), 3.83 (3H, s), 3.86 (3H, s), 6.69 (1H, s), 7.24-7.27 (1H, m), 7.29 (1H, dd), 7.33 (1H, dd), 7.36-7.40 (1H, m), 7.49 (1H, s), 7.58 (1H, s), 8.23 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.56 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>458.37.
Intermedijar 78: N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
1-metilpiperazin (0.453 mL, 4.08 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 79, 554 mg, 1.36 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (10 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 120° C tokom 1 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(50 mL). Ovaj rastvor je ispran sa vodom (2×50 mL) i zas. slanim rastvorom (50 mL), a tada je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% CH3OH u CH2Cl2daje narandžastu gumu. Ova guma je rastvorena u etanolu (25 mL), a čvrsta materija je precipitirala. Ova čvrsta materija je sakupljena filtracijom i isprana sa etanolom šta daje jedinjenje iz naslova (413 mg, 62%) u formi žuto/narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.25 (3H, s), 2.39 (3H, s), 2.45-2.54 (4H, m), 3.03-3.10 (4H, m), 3.91 (3H, s), 3.98 (3H, s), 6.86 (1H, s), 7.06 (1H, dd), 7.22-7.28 (1H, m), 7.51 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.07 (1H, s), 8.26-8.30 (1H, m), 8.38 (1H, d), 8.69 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>488.29.
Intermedijar 79: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
Smeša 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)-1-metil-1H-indola (Intermedijar 80, 350 mg, 1.36 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 265 mg, 1.43 mmol) i ptoluensulfonske kiseline (284 mg, 1.49 mmol) u 2-pentanolu (25 mL) je grejana na 125° C
11
tokom 24 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastala guma je korišćena bez dodatnog prečišćavanja; m/z: ES<+>MH<+>240.13.
Intermedijar 80: 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)-1H-indol
NaH (0.862 g, 21.54 mmol, 30% disperzija u mineralnom ulju) je dodan u 3-(2-hloro-5-metilpirimidin-4-il)-1H-indol (Intermedijar 17, 5.0 g, 20.5 mmol) u THF (200 mL) na 0° C pod N2. Nastao rastvor je mešan na 0° C tokom 0.25 h. Tada je dodan CH3I (1.347 mL, 21.54 mmol), smeša je ostavljena da se ugreje do s.t. pa je mešana tokom 2 h. Smeša je ponovo ohlađena u ledenoj banji pa je dodano još NaH (0.862 g, 21.54 mmol, 30% disperzija u mineralnom ulju). Nastala suspenzija je mešana na 0° C tokom 10 min. Tada je dodan CH3I (1.347 mL, 21.54 mmol), a smeša je mešana tokom jednog dodatnog časa. Smeša je tada razređena sa vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (100 mL). Organski rastvor je ispran sa vodom (75 mL) nakon čega je došlo do pojave nešto čvrste materije na interfejsu sa rastvaračem. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa vodom i EtOAc nakon čega je osušena šta daje jedinjenje iz naslova u formi bele čvrste materije. Faze su razdvojene, a organski rastvor je dodatno ispran sa vodom nakon čega se pojavljuje još malo čvrste materije koja je takođe sakupljena filtracijom, isprana sa vodom i EtOAc pa je osušena šta daje još jedinjenje iz naslova u formi bele čvrste materije. (ukupno do sada: 3.82 g, 72%). Organski rastvor je tada ispran sa zas. slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je smrvljen sa dietil etrom šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (0.883 g, 17%) u formi bež čvrste materije; (sveukupno: 4.71 g, 89%);<1>H NMR: 2.48 (3H, s), 3.94 (3H, s), 7.24-7.36 (2H, m), 7.58 (1H, d), 8.25 (1H, s), 8.48 (1H, s), 8.57 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>258.12.
Intermedijar 81: N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamin
Smeša N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-[5-metil-4-(-metil-indol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 82, 202 mg, 0.41 mmol), gvožđa (138 mg, 2.48 mmol) i NH4Cl (15.45 mg, 0.29 mmol) u etanolu (16 mL) i vodi (5.33 mL) je grejana kod refluksa tokom 3 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. Dodani su CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je filtrirana. Filterski kolač je dodatno ispran sa CH2Cl2i CH3OH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (147 mg, 78%) u formi žutog suvog filma; m/z: ES<+>MH<+>460.36.
Intermedijar 82: N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamin
N<1>,N<1>,N<2>-trimetiletan-1,2-diamin (221 mg, 2.16 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 79, 400 mg, 0.98 mmol) u DMA (4 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL). Ovaj rastvor je ispran sa vodom (2×100 mL) i zas. slanim rastvorom (100 mL), osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (202 mg, 42%) u formi narandžastog suvog filma; m/z: ES<+>MH<+>444.55.
Intermedijar 83: 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 84, 325 mg, 0.65 mmol), gvožđa (217 mg, 3.89 mmol) i NH4Cl (24.26 mg, 0.45 mmol) u etanolu (16 mL) i vodi (5.33 mL) je grejana kod refluksa tokom 3 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL) su dodani, a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je filtrirana. Filterski kolač je dodatno ispran sa CH2Cl2i CH3OH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (257 mg, 84%) u formi žutog suvog filma;<1>H NMR: 1.76 (1H, td), 2.03 (1H, dt), 2.18 (6H, s), 2.37 (3H, s), 2.79-2.87 (1H, m), 2.88-2.97 (2H, m), 3.08-3.14 (1H, m), 3.18 (1H, dd), 3.73 (3H, s), 3.90 (3H, s), 4.19 (2H, s), 6.70 (1H, s), 7.13 (1H, t), 7.25 (1H, t), 7.44 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.65 (1H, s), 8.04 (1H, s), 8.19 (1H, s), 8.46 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>472.35.
Intermedijar 84: N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (255 mg, 2.24 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 79, 414 mg, 1.02 mmol) u DMA (4 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL). Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje polu-prečišćeni materijal nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (330 mg, 65%) u formi narandžastog suvog filma;<1>H NMR: 1.75-1.86 (1H, m), 2.13-2.19 (1H, m), 2.21 (6H, s), 2.37 (3H, s), 2.75 (1H, s), 3.10-3.20 (2H, m), 3.21-3.27 (1H, m), 3.46 (1H, td), 3.90 (3H, s), 3.94 (3H, s), 6.56 (1H, s), 7.03 (1H, t), 7.21-7.26 (1H, m), 7.49 (1H, d), 7.94 (1H, s), 8.05 (1H, s), 8.23 (1H, s), 8.37 (1H, d), 8.39 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>502.33.
Intermedijar 85: N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-[3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 86, 747 mg, 1.43 mmol), gvožđa (479 mg, 8.59 mmol) i NH4Cl (53.6 mg, 1.00 mmol) u etanolu (48 mL) i vodi (16 mL) je grejana kod refluksa tokom 3 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo šta daje gustu smešu. Tada su dodani CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a smeša je mešana tokom 0.25 h pa je filtrirana. Filterski kolač je ispran sa dodatnom količinom CH2Cl2i MeOH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC (podeljen u dve serije), eluiranje sa 1-9% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (230 mg, 33%) u formi žute gume koja kristalizuje nakon stajanja i (2. serija) još jedinjenja iz naslova (329 mg, 47%) u formi žute gume;<1>H NMR: (CDCl3) 1.87 (1H, ddt), 2.13 (1H, dtd), 2.29 (6H, s), 2.86 (1H, dq), 2.98-3.09 (2H, m), 3.20 (2H, dd), 3.66 (2H, s), 3.84 (3H, s), 3.88 (3H, s), 6.70 (1H, s), 7.25-7.35 (2H, m), 7.38 (1H, dd), 7.61 (1H, s), 8.10 (1H, s), 8.19 (1H, d), 8.32 (1H, s), 8.66 (1H, dd); m/z: ES<+>MH<+>492.27.
Intermedijar 86: 5-hloro-N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (126 mg, 1.11 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 87, 215 mg, 0.50 mmol) u DMA (5 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo pa je spojena sa materijalom iz reakcije ispod sa ciljem
11
dorade. Dodan je (3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (276 mg, 2.42 mmol) u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 87, 470 mg, 1.10 mmol) u DMA (10 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je koncentrisana in vacuo pa je spojena sa materijalom iz prve procedure, koja je opisana iznad, sa ciljem dorade. Spojeni ostaci su rastvoreni u CH2Cl2(100 mL), a nastao rastvor je ispran sa vodom (2×100 mL) i zas. slanim rastvorom (100 mL) pa je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (747 mg, 89%) u formi narandžaste gume; m/z: ES<+>M<+>522.30.
Intermedijar 87: 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
Smeša 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)-1-metilindola (Intermedijar 88, 1281 mg, 4.60 mmol), monohidrata p-toluensulfonske kiseline (964 mg, 5.07 mmol) i 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 900 mg, 4.84 mmol) u 2-pentanolu (50 mL) je grejana na 125° C tokom 18 h. Nakon hlađenja iz rastvora nastaje precipitat. Precipitat je sakupljen filtracijom, ispran sa CH3OH (10 mL) i dietil etrom (20 mL) i osušen na filter-hartiji šta daje jedinjenje iz naslova (1.42 g, 72%) u formi tamne čvrste materije, koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 3.91 (3H, s), 3.96 (3H, s), 7.05 (1H, t), 7.23-7.3 (1H, m), 7.39 (1H, d), 7.53 (1H, d), 8.33 (1H, d), 8.47 (1H, s), 8.58 (1H, s), 8.65 (1H, d), 8.76 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>428.10.
Intermedijar 88: 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)-1-metilindol
NaH (0.795 g, 19.88 mmol) je dodan u 3-(2,5-dihloropirimidin-4-il)-1H-indol (Intermedijar 11, 5.0 g, 18.9 mmol) u THF (200 mL) na 0° C pod N2, a smeša je mešana na 0° C tokom 0.25 h. Tada je dodan CH3I (1.243 mL, 19.88 mmol), a smeša je ostavljena da se ugreje do s.t. pa je mešana tokom 1 h. Smeša je ponovo ohlađena u ledenoj banji pa je dodano još NaH (0.795 g, 19.88 mmol). Suspenzija je mešana na 0° C tokom 10 min, dodan je CH3I (1.243 mL, 19.88 mmol), a smeša je mešana tokom 1 h. Smeša je tada razređena sa vodom (100 mL) šta rezultuje formiranjem nešto čvrste materije. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa vodom i EtOAc, a tada osušena šta daje jedinjenje iz naslova (3.67 g, 70%) u formi bež čvrste materije. Organski rastvor je dodatno ispran sa vodom i zas. slanim rastvorom pa je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Mrvljenje ostatka sa dietil etrom daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom i osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (477 mg, 9%) u formi smeđe čvrste materije. Ovaj materijal je samo 71% čist pa nije pomešan sa ranijom serijom;<1>H NMR: 3.97 (3H, s), 7.34 (2H, dtd), 7.59-7.65 (1H, m), 8.56 (1H, dd), 8.73 (1H, s), 8.79 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>278.06.
Intermedijar 89: 2-({5-amino-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksifenil}amino)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitril
Smeša N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-[(3R)-3-dimetil-aminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 85, 324 mg, 0.66 mmol), cinka u prahu (4.3 mg, 0.07 mmol), tris(dibenzilidenaceton)-dipaladijuma(0) (60.3 mg, 0.07 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropilbifenil-2-il)fosfina ('XFos', 62.8 mg, 0.13 mmol), i dicijanocinka (46.4 mg, 0.40 mmol) je stavljena u reakcionu tubu pod N2, a tada je dodana degazirana DMA (1.75 mL). Nastala suspenzija je grejana do 95° C pa je mešana tokom 2 h. Smeša je tada razređena sa EtOAc pa je isprana 5 puta sa vodom, a tada sa slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH3OH pa je ostavljen da prođe kroz patron stratospheres SPE patron PL-Thiol MP SPE (od Polimer Laboratories) uz pomoć gravitacijske sile. Nastao rastvor je koncentrisan in vacuo, a nastao ostatak je smrvljena sa dietil etrom. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom i isprana sa dietil etrom šta daje jedinjenje iz naslova (184 mg, 58%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: (100°C) 1.8-1.88 (1H, m), 2.03-2.11 (1H, m), 2.24 (6H, s), 2.92-2.99 (1H, m), 3.01-3.05 (1H, m), 3.06-3.11 (1H, m), 3.20 (2H, ddd), 3.69 (3H, s), 3.90 (3H, s), 4.17 (2H, br s), 6.73 (1H, s), 7.04 (1H, s), 7.10 (1H, t), 7.26 (1H, t), 7.50 (1H, d), 8.31 (1H, d), 8.42 (1H, s), 8.60 (1H, s), 8.62 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>483.31.
Intermedijar 90: 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitril
Smeša N'-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamina (Intermedijar 91, 344 mg, 0.72 mmol), cinka u prahu (4.71 mg, 0.07 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijuma(0) (65.9 mg, 0.07 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropilbifenil-2-il)fosfina ('XFos', 68.6 mg, 0.14 mmol), i dicijanocinka (50.7 mg, 0.43 mmol) je stavljena u reakcionu tubu pod N2, a tada je dodana degazirana DMA (1.91 mL). Nastala suspenzija je kuhana na 95° C tokom 2 h. Smeša je tada razređena sa EtOAc i isprana 5 puta sa vodom, a tada i sa slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH3OH i ostavljen da prođe kroz patron stratospheres SPE
11
patron PL-Thiol MP SPE (od Polimer Laboratories) uz pomoć snage gravitacije. Nastao rastvor je koncentrisan in vacuo, a nastao ostatak je smrvljen sa dietil etrom. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa dietil etrom šta daje jedinjenje iz naslova (208 mg, 62%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 2.28 (3H, s), 2.51-2.58 (4H, m), 2.89-2.95 (4H, m), 3.69 (3H, s), 3.91 (3H, s), 4.23 (2H, br s), 6.75 (1H, s), 7.08 (1H, s), 7.09-7.12 (1H, m), 7.26 (1H, ddd), 7.50 (1H, d), 8.31 (1H, d), 8.43 (1H, s), 8.61 (1H, s), 8.64 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>469.33.
Intermedijar 91: N'-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 92, 750 mg, 1.48 mmol), gvožđa (495 mg, 8.86 mmol) i NH4Cl (55.3 mg, 1.03 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje delomično prečišćen materijal koji je koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (367 mg, 52%) u formi žute čvrste materije. Nečiste frakcije koje sadrže željeni produkt su koncentrisane in vacuo, a nastao ostatak je smrvljen sa smešom CH2Cl2/dietil etra šta daje još jedinjenja iz naslova (230 mg, 33%) u formi žute čvrste materije. Total: 597 mg, 85%;<1>H NMR: (CDCl3) 2.37 (3H, s), 2.56 (4H, br s), 2.95 (4H, br t), 3.75 (2H, br s), 3.84 (3H, s), 3.90 (3H, s), 6.70 (1H, s), 7.27-7.36 (2H, m), 7.38-7.42 (1H, m), 7.63 (1H, s), 8.13 (1H, s), 8.21 (1H, s), 8.33 (1H, s), 8.63-8.69 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>478.55.
Intermedijar 92: 5-hloro-N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
1-metilpiperazin (0.50 mL, 4.51 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 87, 750 mg, 1.75 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (15 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 120° C tokom 1 h, a tada i na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL). Ovaj organski rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(100 mL), vodom (2×100 mL) pa sa slanim rastvorom (100 mL). Rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (772 mg, 87%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: (CDCl3) 2.37 (3H, s), 2.59-2.65
11
(4H, m), 3.07-3.14 (4H, m), 3.90 (3H, s), 3.99 (3H, s), 6.63 (1H, s), 7.25-7.3 (1H, m) delomično sakriven sa šiljkom od hloroforma, 7.31-7.36 (1H, m), 7.39 (1H, d), 7.56 (1H, s), 8.22 (1H, s), 8.39 (1H, s), 8.47 (1H, d), 9.18 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>508.19.
Intermedijar 93: N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitro-fenil}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 94, 350 mg, 0.69 mmol), gvožđa (231 mg, 4.13 mmol) i NH4Cl (27.6 mg, 0.52 mmol) u etanolu (15 mL) i vodi (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Ostatak je smrvljen sa 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) tokom 0.25 h, a tada je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) pa su filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 3% CH3OH u CH2Cl2, a tada sa 2-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (261 mg, 79%) u formi žute pene;<1>H NMR: 1.73-1.86 (1H, m), 1.99-2.12 (1H, m), 2.20 (6H, s), 2.81-2.91 (1H, m), 2.97 (2H, ddd), 3.12-3.26 (2H, m), 3.69 (3H, s), 4.20 (2H, d), 6.71 (1H, s), 7.03 (1H, t), 7.07 (1H, s), 7.14-7.22 (1H, m), 7.46 (1H, d), 8.18 (1H, s), 8.3-8.39 (2H, m), 8.48 (1H, s), 11.81 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>478.5.
Intermedijar 94: 5-hloro-N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin
(R)-(+)-3-(dimetilamino)pirolidin (0.111 mL, 0.87 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 76, 300 mg, 0.73 mmol) i DIPEA (0.151 mL, 0.87 mmol) u DMA (3 mL), a smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su koncentrisane i dodatno prečišćene sa FCC, eluirane sa 1.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (353 mg, 96%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 1.78-1.91 (1H, m), 2.16-2.27 (7H, m), 2.70-2.85 (1H, m), 3.12-3.29 (3H, m), 3.41-3.55 (1H, m), 3.89 (3H, s), 6.57 (1H, s), 6.95 (1H, t), 7.17 (1H, t), 7.46 (1H, d), 8.09 (1H, s), 8.24 (1H, br s), 8.37 (1H, s), 8.50 (1H, d), 8.54 (1H, s), 11.88 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>508.5.
11
Intermedijar 95: N<4>-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-(2-dimetilamino-etil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin
Smeša N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 96, 350 mg, 0.71 mmol), gvožđa (236 mg, 4.23 mmol) i NH4Cl (28.3 mg, 0.53 mmol) u etanolu (15 mL) i vodi (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) tokom 0.25 h pa je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) pa su tada filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 5% CH3OH u CH2Cl2, a tada sa 2-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (159 mg, 48%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.18 (6H, s), 2.38 (2H, t), 2.66 (3H, s), 2.91 (2H, t), 3.68 (3H, s), 4.54 (2H, s), 6.77 (1H, s), 6.99-7.10 (2H, m), 7.12-7.22 (1H, m), 7.46 (1H, d), 8.25 (1H, s), 8.30-8.40 (2H, m), 8.49 (1H, d), 11.85 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>466.6.
Intermedijar 96: N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin
N,N,N'-trimetiletilendiamin (0.113 mL, 0.87 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 76, 300 mg, 0.73 mmol) i DIPEA (0.151 mL, 0.87 mmol) u DMA (3 mL), a smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su koncentrisane i prečišćene sa FCC, eluirane sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (354 mg, 98%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 2.16 (6H, s), 2.52 (2H+DMSO, m), 2.87 (3H, s), 3.30 (2H, t), 3.89 (3H, s), 6.84 (1H, s), 6.97 (1H, t), 7.13-7.23 (1H, m), 7.46 (1H, d), 8.16 (1H, s), 8.23 (1H, br d), 8.40 (1H, s), 8.51 (1H, d), 8.55 (1H, s), 11.89 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>469.5.
Intermedijar 97: N<4>-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin
Smeša N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 98, 553 mg, 1.08 mmol), gvožđa (363 mg, 6.51 mmol) i NH4Cl (43.5 mg, 0.81 mmol) u etanolu (23 mL) i vodi (7.67 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je
11
rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i CH3OH (10 mL), a ova smeša je mešana tokom 0.25 h pa je tada filtrirana. Filterski kolač je ispran sa dodatnom količinom CH2Cl2i CH3OH, a spojene organske materije su osušene (MgSO4) i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje čvrstu materiju. Ova čvrsta materija je rastvorena u dietil etru, a mala količina smeđeg precipitata je odstranjena filtracijom. Filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (409 mg, 79%) u formi smeđeg stakla;<1>H NMR: (CDCl3) 2.26 (6H, s), 2.38-2.43 (2H, m), 2.68 (3H, s), 2.94-2.98 (2H, m), 3.84 (3H, s), 3.91 (3H, s), 6.71 (1H, s), 7.26-7.36 (2H, m), 7.40 (1H, d), 7.63 (1H, s), 8.09 (1H, s), 8.21 (1H, s), 8.33 (1H, s), 8.67 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>480.32.
Intermedijar 98: N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il-N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin
N<1>,N<1>,N<2>-trimetiletan-1,2-diamin (0.189 mL, 1.49 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 87, 700 mg, 1.24 mmol) i DIPEA (0.431 mL, 2.48 mmol) u DMA (5 mL). Smeša je tada grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa ∼1M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane i dodatno prečišćene sa FCC, eluirane sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (561 mg, 89%) u formi narandžastog ulja;<1>H NMR: (CDCl3) 2.26 (6H, s), 2.53-2.58 (2H, m), 2.88 (3H, s), 3.24-3.28 (2H, m), 3.91 (3H, s), 3.98 (3H, s), 6.68 (1H, s), 7.26-7.3 (1H, m), 7.31-7.4 (2H, m), 7.50 (1H, s), 8.23 (1H, s), 8.39 (1H, s), 8.47 (1H, d), 9.07 (1H, s); mlz: ES<+>MH<+>510.27.
Intermedijar 99: 2-{[5-amino-2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-5-karbonitril
N'-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-metoksi-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin (Intermedijar 74, 268 mg, 0.58 mmol), cink u prahu (3.78 mg, 0.06 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (52.9 mg, 0.06 mmol), diciklo-heksil(2',4',6'-triizopropilbifenil-2-il)fosfin ('XFos', 55.1 mg, 0.12 mmol) i dicijanocink (40.7 mg, 0.35 mmol) su stavljeni u bocu sa N2, a tada je dodana degazirana DMA (3 mL). Nastala suspenzija je mešana tokom 3 h na 95° C. Smeša je tada razređena sa EtOAc i isprana 5 puta sa vodom i slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen sa dietil etrom, a nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa dietil
11
etrom šta daje grubi produkt. Ovaj grubi materijal je rastvoren u smeši CH2Cl2/CH3OH pa je koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-8% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje čvrstu materiju koja je isprana sa CH3OH (0.2 mL) šta daje jedinjenje iz naslova (48 mg, 18%) u formi bež kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 2.26 (3H, s), 2.53 (4H, m), 2.91 (4H, s), 3.65 (3H, s), 4.38 (2H, d), 6.74 (1 H, s), 6.85 (1H, s), 6.99 (1H, s), 7.19 (1H, s), 7.48 (1H, d), 8.01 (1H, s), 8.52 (1H, s), 8.65 (1H, s), 9.21 (1H, s), 11.97 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>455.
Intermedijar 100: N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamin
Smeša N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 101, 220 mg, 0.46 mmol), gvožđa (155 mg, 2.78 mmol) i NH4Cl (17.32 mg, 0.32 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Gruba smeša je prečišćena hromatografskom jonskom izmenom, primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (175 mg, 85%) u formi bež pene;<1>H NMR: 2.17 (6H, s), 2.36 (2H, t), 2.63 (3H, s), 2.88 (2H, t), 3.74 (3H, s), 3.88 (3H, s), 4.58 (2H, br s), 6.76 (1H, s), 7.12-7.19 (2H, m), 7.21-7.27 (1H, m), 7.48 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.78 (1H, s), 8.27 (1H, d), 8.30 (1H, s), 8.42 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>446.32.
Intermedijar 101: N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-N-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitrobenzen-1,4-diamin
12
N<1>,N<1>,N<2>-trimetiletan-1,2-diamin (80 mg, 0.79 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129, (koja može da se pripremi uz pomoć postupka koji je opisan kod Intermedijara 87); 350 mg, 0.79 mmol) i DIPEA (0.342 mL, 1.97 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Ohlađena reakciona smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (230 mg, 62%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.16 (6H, s), 2.45-2.49 (2H, t, sakriven sa šiljkom od DMSO), 2.86 (3H, s), 3.26 (2H, t), 3.87 (3H, s), 3.95 (3H, s), 6.85 (1H, s), 7.11 (1H, t), 7.21 (1H, d), 7.25 (1H, t), 7.52 (1H, d), 8.10 (1H, s), 8.31 (1H, d), 8.33 (1H, s), 8.36 (1H, d), 8.62 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>476.40.
Intermedijar 102: 2-{[5-amino-4-(2-dimetilaminoetil-metilamino)-2-metoksifenil]amino}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-5-karbonitril
N<4>-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin (Intermedijar 97, 250 mg, 0.52 mmol), cink (3.41 mg, 0.05 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (47.7 mg, 0.05 mmol), dicikloheksil(2',4',6,-triizopropilbifenil-2-il)fosfin ('XFos', 49.7 mg, 0.10 mmol) i dicijanocink (36.7 mg, 0.31 mmol) su stavljeni u reakcionu tubu sa N2, a tada je dodana degazirana DMA (1.38 mL). Nastala suspenzija je kuvana tokom 3.5 h na 95° C. Smeša je tada razređena sa EtOAc i isprana 5 puta sa vodom, a tada i sa slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u smeši CH3OH/CH2Cl2, a rastvor je ostavljen da prođe kroz patron stratospheres SPE patron PL-Thiol MP SPE (od Polimer Laboratories) uz pomoć snage gravitacije. Nastao rastvor je koncentrisan in vacuo, a ostatak je smrvljen sa dietil etrom. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom i isprana sa dietil etrom šta daje jedinjenje iz naslova (80 mg) u formi žute čvrste materije. Vodeni rastvori za doradu su prečišćeni uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a čiste frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje smeđe ulje (126 mg). Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (94 mg) u formi žute čvrste materije. Obe serije sa produktom su spojene sa ciljem da se dobije žuta čvrsta materija (174 mg, 71%); m/z: ES<+>MH<+>471.33.
Intermedijar 103: 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša (N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 104, 360 mg, 0.74 mmol), gvožđa (247 mg, 4.43 mmol) i NH4Cl (27.6 mg, 0.52 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Gruba smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (280 mg, 83%) u formi bež pene;<1>H NMR: 1.69-1.83 (1H, m), 1.97-2.10 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.78-2.87 (1H, m), 2.88-2.98 (2H, m), 3.11 (1H, dd), 3.15-3.22 (1H, m), 3.74 (3H, s), 3.87 (3H, s), 4.29 (2H, br s), 6.70 (1H, s), 7.1-7.19 (2H, m), 7.21-7.28 (1H, m), 7.46 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.78 (1H, s), 8.25 (1H, d), 8.29 (1H, s), 8.43 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>458.35.
Intermedijar 104: N-[4-[3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (107 mg, 0.94 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129; (koja može da se pripremi uz pomoć postupka koji je opisan kod Intermedijara 87), 0.372 mL, 2.13 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Ohlađena smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (364 mg, 87%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 1.74-1.87 (1H, m), 2.11-2.22 (1H, m), 2.21 (6H, s), 2.70-2.81 (1H, m), 3.10-3.21 (2H, m), 3.21-3.28 (1H, m), 3.47 (1H, td), 3.87 (3H, s), 3.95 (3H, s), 6.56 (1H, s), 7.10 (1H, t), 7.18 (1H, d), 7.21-7.27 (1H, m), 7.51 (1H, d), 8.07 (1H, s), 8.29 (1H, d), 8.32 (1H, s), 8.36 (1H, d), 8.54 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>488.31.
Intermedijar 105: N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il]pirimidin-2-il)-5-metoksi-N<1>-metil-N<1>-(2-morfolin-4-iletil)benzen-1,2,4-triamin
Rastvor NH4Cl (28.1 mg, 0.53 mmol) u vodi (13.00 mL) je dodan u jednoj porciji u mešanu smešu N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-2-metoksi-N'-metil-N'-(2morfolin-4-iletil)-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 106, 426 mg, 0.75 mmol) i gvožđa (251 mg, 4.50 mmol) u etanolu (39 mL). Nastala smeša je mešana kod refluksa tokom 2 h. Dodano je još gvožđa (251 mg, 4.50 mmol) i NH4Cl (28.1 mg, 0.53 mmol), a smeša je mešana kod refluksa tokom dodatnih 0.5 h. Smeša je koncentrisana in vacuo, a ostatak je pomešan sa DMF (5 mL) pa je prečišćen uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka u CH2Cl2, a odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-7% 2 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (304 mg, 80%) u formi žute pene;<1>H NMR: 2.43 (4H, m), 2.45 (2H, t), 2.68 (3H, s), 2.93 (2H, t), 3.51-3.61 (4H, m), 3.66 (3H, s), 4.73 (2H, s), 6.77 (1H, s), 6.90 (1H, s), 7.12 (1H, m), 7.34 (1H, m), 8.37 (1H, s), 8.43 (1H, d), 8.49 (1H, s), 8.84 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>509.
Intermedijar 106: N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-2-metoksi-N'-metil-N'-(2-morfolin-4-iletil)-5-nitrobenzen-1,4-diamin
5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin (Intermedijar 20, 311 mg, 0.75 mmol), N-metil-2-morfolinoetanamin (130 mg, 0.90 mmol) i DIPEA (0.157 mL, 0.90 mmol) su rastvoreni u DMA (3 mL) pa zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć. Smeša je grejana do 140° C tokom 0.75 h u mikrotalasnoj peći, a tada je ohlađena do s.t. Smeša je razređena sa CH3OH i prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (429 mg, 106%) u formi narandžaste čvrste materije koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.36 (4H, s), 2.54 (2H, m), 2.89 (3H, s), 3.34 (2H, m), 3.49 (4H, m), 3.91 (3H, s), 6.81 (1H, s), 7.15 (1H, m), 7.35 (1H, t), 8.16 (1H, s), 8.45 (2H, m), 8.76 (1H, s), 8.86 (1H, d), 8.96 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>539.
Intermedijar 107: N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-5-metoksi-N<1>-metil-N<1>-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]benzen-1,2,4-triamin
Smeša N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-2-metoksi-N'-metil-N'-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-5-nitrobenzen-1,4-diamina (0.182 g, 0.33 mmol), gvožđa (0.110 g, 1.98 mmol) i NH4Cl (0.012 g, 0.23 mmol) u EtOH (10 mL) i vodi (3.33 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena do s.t., filtrirana i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa
12
1 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje smeđu gumu (162 mg) nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-7% 1 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.148 g, 86%) u formi žute gume;<1>H NMR: (CDCl3) 2.28 (3H, s), 2.32-2.63 (10H, m), 2.70 (3H, s), 2.98 (2H, t), 3.84 (3H, s), 4.05 (2H, d), 6.71 (1H, s), 6.95 (1H, td), 7.38 (1H, ddd), 7.52 (1H, d), 7.88 (1H, s), 8.36 (1H, s), 8.57 (1H, d), 8.65 (1H, d), 8.93 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>522.57.
Intermedijar 108: N-(5-hloro-4-pirazolo[1-5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-2-metoksi-N'-metil-N'-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-5-nitrobenzen-1,4-diamin
DIPEA (0.105 mL, 0.60 mmol) je dodana u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 20, 0.207 g, 0.5 mmol) i N-metil-2-(4-metilpiperazin-1-il)etanamina (Intermedijar 109, 0.079 g, 0.50 mmol) u DMA (5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 3 h. Dodana je još jedna porcija N-metil-2-(4-metilpiperazin-1-il)etanamina (8 mg, 0.05 mmol), smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom još jednog časa, a tada je ohlađena do s.t. Smeša je koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH3OH. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 1 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje grubi materijal nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-8% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.186 g, 67%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: (CDCl3) 2.26 (3H, s), 2.32-2.45 (4H, m), 2.45-2.57 (4H, m), 2.61 (2H, t), 2.89 (3H, s), 3.29 (2H, t), 3.98 (3H, s), 6.65 (1H, s), 6.93-7.00 (1H, m), 7.38 (1H, ddd), 7.44 (1H, s), 8.40 (1H, s), 8.49 (1H, d), 8.55 (1H, d), 8.91 (2H, d); m/z: ES<+>MH<+>552.59.
Intermedijar 109: N-metil-2-(4-metilpiperazin-1-il)etanamin
Etil karbonohloridat (8.14 mL, 85.14 mmol) je dodan kap po kap u N-metil-2-piperazin-1-iletanamin (5.0 g, 38.7 mmol) i trietilamin (12.95 mL, 92.88 mmol) u THF (40 mL) na 0° C tokom perioda od 10 min pod N2. Nastala smeša je ostavljena da se ugreje do s.t. pa je mešana tokom 2 h. Nastala bela suspenzija je filtrirana, pa je isprana sa THF (2×20 mL). Filtrat je koncentrisan in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u EtOAc (75 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. Na2CO3(50 mL). Vodeni rastvor od ispiranja je tada ekstrahovan sa EtOAc (50 mL). Spojeni organski rastvori su osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo šta daje grubi intermedijar (10.55 g). Pomenuti je rastvoren u THF (60 mL) i ohlađen do 0° C. Dodan je AlH4(101 mL, 100.6 mmol, 1 M u THF), kap po kap, pod N2. Nastala smeša je mešana kod refluksa tokom noći, a tada je ohlađena do 0° C pa je postepeno tretirana (kap po kap) sa vodom (3.8 mL), 15% vod. NaOH (3.8 mL) i vodom (11.4 mL) uz snažno mešanje. Dodani su dijatomejska zemlja (Celit™) i MgSO4, smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc, a filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje bezbojno ulje (3.35 g). Filterski kolač je ispran sa EtOAc (100 mL), grejan do 70° C, a tada je filtriran. Filtrat je koncentrisan in vacuo šta daje još jednu seriju (1.023 g) jedinjenja iz naslova. Totalno: 4.37 g, 72%;<1>H NMR: (CDCl3) 2.28 (3H, s), 2.33-2.6 (13H, m), 2.67 (2H, t).
Intermedijar 110: 4-metoksi-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-6-(4-metilpiperazin-1-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 111, 329 mg, 0.69 mmol), gvožđa (233 mg, 4.17 mmol) i NH4Cl (26.0 mg, 0.49 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 3 h. Smeša je ostavljena da se ohladi do s.t., a tada je filtrirana. Filtrat je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.7 M metanolnim amonijakom, daje smeđu gumu nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (287 mg, 93%) u formi svetlo-smeđe gume;<1>H NMR: (CDCl3) 2.37 (3H, br s), 2.59 (4H, s), 2.92-2.99 (4H, m), 3.79-3.86 (5H, m), 3.87 (3H, s), 6.71 (1H, s), 7.01 (1H, d), 7.27-7.34 (2H, m), 7.35-7.40 (1H, m), 7.57 (1H, s), 7.78 (1H, s), 8.17 (1H, s), 8.32 (1H, d), 8.47-8.53 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>444.54.
Intermedijar 111: N-[2-metoksi-4-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
1-metilpiperazin (89 mg, 0.89 mmol), N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 129 (koji može da se pripremi uz pomoć postupka koji je opisan kod Intermedijara 87), 350 mg, 0.89 mmol) i DIPEA (0.186 mL, 1.07 mmol) su suspendovani u DMA (6 mL) pa su zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć. Reakciona smeša ja grejana do 140° C tokom 1 h u mikrotalasnoj peći, a tada je ohlađena do s.t. Dodan je CH3OH, a narandžasta čvrsta materija je precipitirala iz rastvora. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa CH3OH i sa dietil etrom. Čvrsta materija je tada osušena šta daje jedinjenje iz naslova (339 mg, 80%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.26 (3H,
12
s), 3.06-3.11 (4H, m), 3.88 (3H, s), 3.99 (3H, s), 6.86 (1H, s), 7.13 (1H, t), 7.23-7.29 (2H, m), 7.53 (1H, d), 8.10 (1H, s), 8.32-8.38 (3H, m), 8.81 (1H, s); (signali za 4 protona nisu primećeni jer su verovatno bili sakriveni sa šiljkom od DMSO); m/z: ES<+>MH<+>474.56.
Intermedijar 112: N-[5-hloro-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 113, 285 mg, 0.56 mmol), gvožđa (188 mg, 3.37 mmol) i NH4Cl (22.51 mg, 0.42 mmol) u etanolu (9 mL) i vodi (3 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Smeša je tada ohlađena i filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™). Filtrat je koncentrisan in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2. Ovaj rastvor je ispran sa slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-20% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (263 mg, 98%) u formi smeđeg suvog filma;<1>H NMR: (CDCl3) 2.21 (6H, s), 3.08-3.18 (1H, m), 3.30 (2H, br s), 3.58 (2H, t), 3.86 (3H, s), 3.88 (3H, s), 3.93 (2H, t), 6.38 (1H, s), 7.2-7.42 (3H, m, delomično sakriven sa signalom od hloroforma), 7.50 (1H, s), 7.99 (1H, s), 8.20 (1H, s), 8.31 (1H, s), 8.63 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>478.
Intermedijar 113: 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
DIPEA (0.408 mL, 2.33 mmol) je dodana u smešu 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina i soli toluen-4-sulfonske kiseline (0.8) (Intermedijar 87, 330 mg, 0.58 mmol) u DMA (3 mL). Tada je dodan N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorid (Intermedijar 26, 121 mg, 0.70 mmol) u jednoj porciji. Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 100° C tokom 0.5 h, a tada je ohlađena i razređena sa CH3OH pa je apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH i eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (295 mg, 100%) u formi smeđe gume;<1>H NMR: (CDCl3) 2.18 (6H, s), 3.13-3.24 (1H, m), 3.67-3.75 (2H, m), 3.89 (3H, s), 3.96 (3H, s), 4.13 (2H, t), 6.04 (1H, s), 7.21-7.29 (1H, m, delomično sakriven sa signalom od hloroforma), 7.29-7.41 (3H, m), 8.22 (1H, s), 8.37 (1H, s), 8.46 (1H, d), 9.05 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>508.
12
Intermedijar 114: 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1.3-diamin
Smeša N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 115, 210 mg, 0.43 mmol), gvožđa (144 mg, 2.58 mmol) i NH4Cl (16.13 mg, 0.30 mmol) u etanolu (6 mL) i vodi (2 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Gruba smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje smeđu penu nakon koncentrisanja odgovarajućih frakcija in vacuo. Dodatno prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje materijal koji je koncentrisan in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (135 mg, 69%) u formi smeđe pene;<1>H NMR: 2.11 (6H, s), 2.35 (3H, s), 3.04 (1H, p), 3.44 (2H, t), 3.89 (3H, s), 3.92 (2H, s), 3.9-3.97 (2H, m), 6.28 (1H, s), 7.12 (1H, dd), 7.2-7.26 (1H, m), 7.28 (1H, s), 7.48 (1H, d), 7.55 (1H, s), 8.00 (1H, s), 8.15 (1H, s), 8.43 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>458.31.
Intermedijar 115: N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin (Intermedijar 26, 113 mg, 0.65 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-5-metil-4-(1-metilindol-3-il)-pirimidin-2-amina (Intermedijar 79, 250 mg, 0.61 mmol) i DIPEA (0.374 mL, 2.15 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Ohlađena smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (213 mg, 71%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 2.13 (6H, s), 2.37 (3H, s), 3.09-3.16 (1H, m), 3.72 (2H, dd), 3.89 (3H, s), 3.93 (3H, s), 4-4.08 (2H, m), 6.27 (1H, s), 7.04 (1H, t), 7.20-7.26 (1H, m), 7.49 (1H, d), 7.90 (1H, s), 8.03 (1H, s), 8.23 (1H, s), 8.35 (1H, d), 8.46 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>488.63.
Intermedijar 116: 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
12
Smeša N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 117, 160mg, 0.34 mmol), gvožđa (113 mg, 2.03 mmol) i NH4Cl (13.56 mg, 0.25 mmol) u etanolu (5 mL) i vodi (1.67 mL) je grejana kod refluksa tokom 2 h. Ohlađena smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (120 mg, 80%) u formi smeđe gume; m/z: ES<+>MH<+>444.61.
Intermedijar 117: N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorid (Intermedijar 26, 79 mg, 0.46 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129 (koji je pripremljen uz pomoć postupka koji je opisan kod Intermedijara 87), 150 mg, 0.38 mmol) i DIPEA (0.264 mL, 1.53 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (3 mL). Smeša je grejana na 140° C u mikrotalasnoj peći tokom 1 h. Smeša je tada prečišćena direktno uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone (50 g) uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Koncentrisanje odgovarajućih frakcija in vacuo daje crvenu čvrstu materiju. Ova čvrsta materija je suspendovana u CH3OH, a čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa CH3OH (10 mL) i osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (160 mg, 89%) u formi crvene čvrste materije; m/z: ES<+>MH<+>474.61.
Intermedijar 118: N-[5-hloro-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Smeša 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 119, 347 mg, 0.70 mmol), gvožđa (235 mg, 4.22 mmol) i NH4Cl (26.3 mg, 0.49 mmol) u etanolu (9 mL) i vodi (3 mL) je grejana kod refluksa tokom 1 h. Smeša je tada prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (323 mg, 99%) u formi tamne čvrste materije;<1>H NMR: 2.12 (6H, s), 3.06 (1H, p), 3.48 (2H, t), 3.68 (3H, s), 3.92-4.02 (4H, m), 6.28 (1H, s),
12
6.91 (1H, s), 7.04 (1H, dd), 7.12-7.19 (1H, m), 7.44 (1H, d), 8.14 (1H, s), 8.28 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.46 (1H, s), 11.77 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>464.21.
Intermedijar 119: 5-hloro-N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin (Intermedijar 26, 144 mg, 0.83 mmol) je dodan u suspenziju 5-hloro-N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 76, 312 mg, 0.75 mmol) i DIPEA (0.460 mL), 2.64 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Ohlađena smeša je prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (347 mg, 93%) u formi narandžaste čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.14 (6H, s), 3.09-3.18 (1H, m), 3.76 (2H, dd), 3.89 (3H, s), 4.01-4.11 (2H, m), 6.28 (1H, s), 6.98 (1H, t), 7.13-7.20 (1H, m), 7.46 (1H, d), 8.15 (1H, s), 8.23 (1H, d), 8.37 (1H, s), 8.47 (1H, s), 8.49 (1H, s), 11.84 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>494.16.
Intermedijar 120: 2-({5-amino-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksifenil}amino)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitril
Smeša N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamina (Intermedijar 18, 250 mg, 0.52 mmol), cink cijanida (36.8 mg, 0.31 mmol), cinka u prahu (3.41 mg, 0.05 mmol) i 2-(dicikloheksilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenila ('XFos' 49.8 mg, 0.10 mmol) je mešana u DMA (2 mL) i očišćena sa N2tokom 0.25 h. Tada je dodan tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (47.8 mg, 0.05 mmol), a smeša je grejana na 95° C tokom 2 h. Ohlađena smeša je tada apsorbirana u SCX kolonu, isprana sa CH3OH i eluirana sa rastvorom 7 M metanolnog amonijaka. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Nastao ostatak je suspendovan u CH3OH, a smeše su tada filtrirane. Sakupljena čvrsta materija je osušena na filter-hartiji šta daje jedinjenje iz naslova (160 mg, 65%) u formi tamnog praha,<1>H NMR: (100°C) 1.78-1.92 (1H, m), 2.00-2.15 (1H, m), 2.26 (6H, s), 2.95-3.02 (1H, m), 3.02-3.07 (1H, m), 3.07-3.13 (1H, m), 3.16-3.27 (2H, m), 3.68 (3H, s), 6.74 (1H, s), 6.95 (1H, s), 7.13 (1H, td), 7.33-7.43 (1H, m), 8.37 (1H, d), 8.64 (1H, s), 8.77 (1H, dt), 8.84 (1H, s), 8.91 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>470.60.
12
Intermedijar 121 : 2-{[5-amino-4-(2-dimetilaminoetil-metilamino)-2-metoksifenil]amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitril
N<4>-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin (Intermedijar 33, 120 mg, 0.26 mmol), dicijanocink (18.11 mg, 0.15 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropilbifenil-2-il)fosfin (24.50 mg, 0.05 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (23.5 mg, 0.03 mmol) i cink u prahu (1.681 mg, 0.03 mmol) su suspendovani u degaziranom DMA (1.1 mL) pa su zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć. Smeša je tada grejana do 95° C tokom 1 h u mikrotalasnoj peći. Ohlađena smeša je tada razređena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa zas. NaHCO3(20 mL), vodom (20 mL), i zas. slanim rastvorom (10 mL). Organski rastvor je tada koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (36 mg, 31%) u formi žute gume;<1>H NMR: (CDCl3) 2.41 (6H, s), 2.60 (2H, s), 2.72 (3H, s), 3.07 (2H, t), 3.86 (3H, s), 6.72 (1H, s), 7.02 (1H, t), 7.41-7.53 (1H, m), 7.80 (2H, d), 8.60 (2H, d), 8.70 (1H, d), 9.09 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>458.30.
Intermedijar 122: 2-{[5-amino-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-fenil]amino}-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-5-karbonitril
N-(5-hloro-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)-4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksibenzen-1,3-diamin (Intermedijar 24, 297 mg, 0.64 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (14.62 mg, 0.02 mmol), 2-(dicikloheksilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil ('XFos', 30.5 mg, 0.06 mmol), i dicijanocink (45.0 mg, 0.38 mmol) su stavljeni u tubu za mikrotalasnu peć pod N2. Tada je dodan poli(metilhidrosiloksan) (12 mg, 0.06 mmol) u degaziranu DMA (1.92 mL). Nastala smeša je grejana na 120° C tokom 2 h u mikrotalasnoj peći. Gruba smeša je nabijena u SCX kolonu. Kolona je isprana sa vodom pa sa smešom CH3OH/CH2Cl2. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka u CH2Cl2, a čiste frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Ostatak je rastvoren u smeši CH3OH/CH2Cl2pa je ostavljen da priđe kroz patron od stratospheres SPE patron PL-Thiol MP SPE (od Polimer Laboratories) uz pomoć snage gravitacije. Nastao rastvor je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (139 mg, 48%) u formi smeđe čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: (100°C) 2.18 (6H, s), 3.17 (1H, t), 3.60 (2H, t), 3.69 (3H, s), 3.87 (2H, br s), 4.00 (2H, t), 6.32
1
(1H, s), 6.86 (1H, s), 7.11 (1H, t), 7.34-7.46 (1H, m), 8.34 (1H, d), 8.61 (1H, s), 8.72 (1H, br s), 8.76 (1H, d), 8.90 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>456.23.
Intermedijar 123: 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 124, 256 mg, 0.51 mmol), gvožđa u prahu (172 mg, 3.07 mmol) i NH4Cl (19.19 mg, 0.36 mmol) je grejana u etanolu (3 mL) i vodi (1 mL) kod refluksa tokom 18 h. Gruba smeša je tada prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka i koncentrisana in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (198 mg, 82%) u formi žute pene;<1>H NMR (CDCl3) 1.78 (1H, td), 2.07-2.13 (1H, m), 2.15 (1H, dd), 2.29 (3H, s), 2.47 (1H, dd), 2.57-2.65 (2H, m), 2.82-2.95 (2H, m), 3.45 (1H, dt), 3.85 (3H, s), 3.88 (3H, s), 4.07 (1H, ddd), 6.74 (1H, s), 7.01 (1H, d), 7.27-7.35 (2H, m), 7.38 (1H, dd), 7.55 (1H, s), 7.79 (1H, s), 8.14 (1H, s), 8.33 (1H, d), 8.45-8.52 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>470.29.
Intermedijar 124: N-(4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
DIPEA (0.411 mL, 2.36 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129, 425 mg, 0.94 mmol) i (3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-1H-pirolo[3,4-b]pirola (Intermedijar 37, 250 mg, 1.98 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (4 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Ohlađena smeša je tada prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Željeni produkt je eluiran iz kolone uz pomoć 7 M metanolnog amonijaka pa je koncentrisana in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje neočišćeno jedinjenje iz naslova (396 mg, 84%) u formi narandžasto/crvene čvrste materije. Ova čvrsta materija je rastvorena u minimalnoj količini CH2Cl2, a nastao rastvor je smrvljen sa metanolom. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom šta daje jedinjenje iz naslova (272 mg, 58%) u formi crvene čvrste materije koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 1.86 (1H, dd), 1.94-2.06 (1H, m), 2.12 (3H, s), 2.23 (1H, dd), 2.36-2.45 (2H, m), 2.52-2.58 (1H, m) delomično sakriven sa šiljkom od DMSO, 2.91-3.04 (1H, m), 3.18 (1H, t), 3.49 (1H, td), 3.87 (3H, s), 3.95 (3H, s), 4.40 (1H, t),
1 1
6.61 (1H, s), 7.11 (1H, t), 7.18 (1H, d), 7.24 (1H, t), 7.51 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.27-8.31 (2H, m), 8.34 (1H, d), 8.51 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>500.17.
Intermedijar 125: N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamin
Smeša N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitro-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,4-diamina (Intermedijar 126, 3.7 g, 7.93 mmol), gvožđa (2.66 g, 47.58 mmol) i NH4Cl (0.318 g, 5.95 mmol) je grejana u etanolu (120 mL) i vodi (40 mL) kod refluksa tokom 2.5 h. Smeša je tada ohlađena, filtrirana i koncentrisana. Čvrste materije su smrvljene u 5% smeši CH3OH/CH2Cl2(100 mL) tokom 15 min pa su filtrirane. Filtrat je spojen sa koncentrisanom, filtriranom reakcionom smešom, ispran sa slanim rastvorom, osušen (Na2SO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (2.50 g, 72%) u formi smeđe gume;<1>H NMR (CDCl3): 1.90-1.99 (2H, m), 2.04-2.13 (2H, m), 2.25 (6H, s), 2.37-2.42 (2H, m), 2.67 (3H, s), 2.92-2.98 (2H, m), 3.25 (2H, t), 3.83 (3H, s), 4.00 (2H, s), 4.21 (2H, t), 6.70 (1H, s), 6.79 (1H, d), 7.48 (1H, s), 7.97 (2H, d), 8.30 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>437.39.
Intermedijar 126: N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitro-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,4-diamin
Smeša N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 127, 3.0 g, 7.81 mmol), N,N',N'-trimetiletan-1,2-diamina (1.190 mL, 9.37 mmol) i DIPEA (1.620 mL, 9.37 mmol) u DMA (45 mL) je grejana na 100° C tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i apsorbirana u SCX kolonu, isprana sa MeOH i eluirana sa metanolnim amonijakom. Frakcije koje sadrže željeni produkt su koncentrisane in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u EtOAc. Ovaj rastvor je ispran dva puta sa slanim rastvorom, osušen (Na2SO4) i koncentrisana in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (3.70 g, 102%) u formi narandžastog ulja;<1>H NMR (CDCl3): 1.90-1.98 (2H, m), 2.04-2.12 (2H, m), 2.26 (6H, s), 2.51-2.60 (2H, m), 2.87 (3H, s), 3.21-3.30 (4H, m), 3.96 (3H, s), 4.20 (2H, t), 6.67 (1H, s), 6.88 (1H, d), 7.43 (1H, s), 7.95 (1H, s), 8.31 (1H, d), 9.00 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>467.63.
Intermedijar 127: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
1 2
Smeša 3-(2-hloropirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 128, 3.6857 g, 15.70 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 2.92 g, 15.70 mmol) i hidrata p-toluensulfonske kiseline (3.29 g, 17.28 mmol) u 2-pentanolu (100 mL) je mešana na 85° C u atmosferi N2tokom 1.5 h. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a nastao ostatak je rastvoren u CH2Cl2(250 mL). Ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(2×100 mL), vodom (100 mL), i zas. slanim rastvorom (100 mL). Organski rastvor je koncentrisan in vacuo šta daje grubi produkt. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2obezbeđuje narandžastu čvrstu materiju. Ovaj materijal je smrvljen sa CH3OH šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (2.26 g, 37%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.75-1.86 (2H, m), 1.92-2.04 (2H, m), 3.09 (2H, t), 4.02 (3H, s), 4.12 (2H, t), 7.13 (1H, d), 7.35 (1H, d), 8.14 (1H, s), 8.25 (1H, s), 8.42 (1H, d), 9.02 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>385.
Intermedijar 128: 3-(2-hloropirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]-piridin Bi(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) (1.284 g, 1.81 mmol) je dodan u jednoj porciji u 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin (9 g, 36.27 mmol), 2,4-dihloropirimidin (5.40 g, 36.27 mmol) i 2 M rastvor Na2CO3(39.9 mL, 79.80 mmol) u dimetoksietanu (250 mL) u atmosferi N2. Nastala smeša je mešana na 85° C tokom 4 h, a tada je ostavljena da se ohladi do s.t. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(500 mL). Ovaj rastvor je ispran sa vodom (200 mL), a tada sa zas. slanim rastvorom (200 mL). Organski rastvor je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (7.91 g, 93%) u formi narandžastog ulja koje postaje čvrsto nakon stajanja;<1>H NMR: 1.86 (2H, dt), 1.93-2.00 (2H, m), 3.11 (2H, t), 4.13 (2H, t), 7.68 (1H, d), 8.18 (1H, s), 8.57 (1H, d); m/z: ES<+>MH<4>235.
Intermedijar 129: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
1
Hidrat p-toluensulfonske kiseline (22.73 g, 119.5 mmol) je dodan u jednoj porciji u smešu 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metilindola (Intermedijar 130, 24.27 g, 99.58 mmol) i 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 18.54 g, 99.58 mmol) u 2-pentanolu (500 mL). Nastala smeša je mešana na 105° C tokom 2.5 h, a tada je ohlađena do s.t. Nastao precipitat je sakupljen filtracijom, ispran sa 2-pentanolom (50 mL) i osušen u vakuumu šta daje nešto željenog produkta u formi žute čvrste materije. Filtrat je ohlađen, a nastao precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa 2-pentanolom (10 mL). Dve žetve produkta su spojene i smrvljene sa CH3CN šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (37.4 g, 95%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 3.92 (3H, s), 4.01 (3H, s), 7.13 (1H, dd), 7.27-7.36 (1H, m), 7.40-7.51 (2H, m), 7.59 (1H, d), 8.26 (1H, t), 8.35 (1H, d), 8.61 (1H, s), 8.85 (1H, d), 9.46 (1H, s); m/z: ES<->M<->392.
Intermedijar 130: 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metilindol
NaH (1.707 g, 42.68 mmol, 40% disperzija u mineralnom ulju) je dodana u malim porcijama u ohlađenu (0° C) smešu 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1H-indola (Intermedijar 131, 8.168 g, 35.57 mmol) u THF (250 mL). Nastala smeša je mešana na 0° C tokom 0.5 h, tada je dodan CH3I (2.67 mL, 42.68 mmol), a smeša je mešana na 0° C tokom dodatna 3 h. Reakcija je ugašena uz pomoć dodavanja zas. NaHCO3(25 mL). Smeša je tada razređena sa EtOAc (100 mL), a nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(50 mL), vodom (50 mL) i zas. slanim rastvorom (50 mL). Organski rastvor je tada koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (8.35 g, 96%) u formi bledožute čvrste materije;<1>H NMR: 3.90 (3H, s), 7.30 (2H, pd), 7.54-7.60 (1H, m), 7.82 (1H, d), 8.38-8.44 (1H, m), 8.49 (1H, s), 8.53 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>244.
Intermedijar 130: 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metilindol (Alternativna sinteza) AlCl3(197 g, 1.477 mol) je dodan, deo po deo, u rastvor 2,4-dihloro-pirimidina (200 g, 1342 mmol) u dimetoksietanu (2 L) uz održavanje temperature ispod 30° C, a smeša je mešana tokom 10 min. Tada je dodan 1-metilindol (0.172 L, 1.342 mol), a smeša je grejana do 80° C tokom 2 h pa je ostavljena da se ohladi tokom noći. Smeša je tada izlivena u mešanu vodu (20 L) pa je mešana tokom još jednog časa. Smeša je filtrirana, a nastala čvrsta materija je isprana sa vodom (3 L). Čvrsta materija je osušena na vazduhu tokom 16 h šta daje ljubičastu čvrstu materiju (315 g). Ova čvrsta materija je tada mešana u CH3CN (6.3 L) pod refluksom tokom 1.5 h kada je dodana voda (630 mL). Smeša je ostavljena da se ohladi do s.t. pa je mešana
1 4
tokom 18 h. Smeša je tada mešana na 5° C tokom 0.5 h, a nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom. Čvrsta materija je isprana sa hladnom 10% smešom CH3CN/voda (2×1 L), a tada je osušena šta daje jedinjenje iz naslova (220 g, 67%) u formi kremove čvrste materije.
Intermedijar 131: 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1H-indol
CH3MgBr (3 M u dietil etru, 22.68 mL, 68.03 mmol) je dodan, kap po kap tokom perioda od 10 min, u mešani rastvor 1H-indola (7.97 g, 68.03 mmol) u 1,2-dihloroetanu (250 mL) na 0° C u atmosferi N2. Nastao rastvor je mešan tokom 15 min, a tada je dodan 2,4-dihloropirimidin (15.00 g, 100.69 mmol) u jednoj porciji. Nastao rastvor je ostavljen da se ugreje do s.t. pa je mešana tokom dodatnih 16 h. Reakcija je ugašena uz pomoć dodavanja CH3OH (25 mL), a smeša je koncentrisana in vacuo i apsorbirana u siliku. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-20% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (7.17 g, 46%) u formi žute čvrste materije;<1>HNMR: 7.20-7.28 (2H, m), 7.49-7.53 (1H, m), 7.91 (1H, d), 8.42 (1H, dd), 8.50 (1H, d), 8.53 (1H, d), 12.06 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>230.
Intermedijar 132: 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]-pirol-1-il]-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1.5-a]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-{4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 133, 400 mg, 0.82 mmol), gvožđa (273 mg, 4.89 mmol) i NH4Cl (30.5 mg, 0.57 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h, a tada je mešana na s.t. tokom noći. Delomično prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje grubi materijal koji je koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje kontaminirani produkt u formi smeđe gume. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje jedinjenje iz naslova (123 mg, 33%) u formi smeđe gume; m/z: ES<+>MH<+>461.26.
Intermedijar 133: N-{4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]-pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
1
DIPEA (0.583 mL, 3.35 mmol) je dodana u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 127, 515 mg, 1.34 mmol) i (3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-1H-pirolo[3,4-b]pirola (Intermedijar 37, 186 mg, 1.47 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Nakon hlađenja, smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom, i koncentrisan in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (400 mg, 61%) u formi narandžasto/crvene pene;<1>H NMR (CDCl3): 1.87 (1H, dd), 1.90-1.98 (2H, m), 2.03-2.14 (3H, m), 2.20 (3H, s), 2.28 (1H, dd), 2.45 (2H, ddd), 2.60-2.67 (1H, m), 2.97-3.07 (1H, m), 3.18-3.34 (3H, m), 3.48-3.58 (1H, m), 3.96 (3H, s), 4.20 (2H, t), 4.40 (1H, ddd), 6.43 (1H, s), 6.86 (1H, d), 7.35 (1H, s), 7.95 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.92 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>491.15.
Intermedijar 134: 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 135, 198.7 mg, 0.42 mmol), gvožđa (139 mg, 2.49 mmol) i NH4Cl (15.6 mg, 0.29 mmol) u etanolu (15 mL) i vodi (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 2.5 h. Smeša je tada ostavljena da se ohladi do s.t., pa je filtrirana i koncentrisana in vacuo. Delimično prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje grubi materijal u formi žute gume. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (159 mg, 85%) u formi smeđe pene;<1>H NMR (CDCl3): 1.83-1.97 (3H, m), 2.05-2.17 (3H, m), 2.29 (6H, s), 2.83-2.91 (1H, m), 2.98-3.08 (2H, m), 3.15-3.20 (2H, m), 3.24 (2H, t), 3.69 (2H, s), 3.83 (3H, s), 4.20 (2H, t), 6.69 (1H, s), 6.78 (1H, d), 7.45 (1H, s), 7.97 (2H, d), 8.29 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>449.65.
Intermedijar 135: N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (64 mg, 0.56 mmol), N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 127, 267 mg, 0.53 mmol) i DIPEA (0.186 mL, 1.07 mmol) su suspendovani u DMA (2 mL), zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć, a tada su grejani do 140° C tokom 1 h u mikrotalasnoj peći. Nakon
1
hlađenja do s.t. smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Kolona je prvo isprana sa CH3OH, a tada je eluirana sa 0.7 M metanolnim amonijakom. Čiste frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje grubi materijal u formi narandžaste gume. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (201 mg, 79%) u formi narandžaste gume;<1>H NMR (CDCl3): 1.89-1.98 (3H, m), 2.05-2.12 (2H, m), 2.16-2.23 (1H, m), 2.30 (6H, s), 2.78-2.87 (1H, m), 3.14-3.37 (5H, m), 3.54 (1H, td), 3.96 (3H, s), 4.20 (2H, t), 6.34 (1H, s), 6.85 (1H, d), 7.33 (1H, s), 7.95 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.95 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>479.60.
Intermedijar 136: 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-y)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
1,1 bi(di-tert-butilfosfino)ferocen paladijum dihlorid (16.7 mg, 0.03 mmol) je dodan u rastvor 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2,3,6-tetrahidropiridina (139 mg, 0.62 mmol), 4-bromo-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamina (Intermedijar 137, 215 mg, 0.52 mmol), K3PO4(220 mg, 1.04 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i vodi (1.5 mL, degazirana tokom 20 min pre upotrebe). Smeša je tada grejana na 100° C tokom 1 h pa je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u EtOAc, rastvor je ispran tri puta sa vodom, a tada i sa slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (160 mg, 72%) u formi tamne čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.79-1.87 (2H, m), 1.96-2.03 (2H, m), 2.29 (3H, s), 2.34-2.40 (2H, m), 2.58 (2H, t), 2.98-3.02 (2H, m), 3.15 (2H, t), 3.75 (3H, s), 4.12 (2H, t), 4.32 (2H, br s), 5.67-5.71 (1H, m), 6.60 (1H, s), 7.01 (1H, d), 7.58 (1H, s), 7.69 (1H, s), 8.09 (1H, s), 8.32 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>432.72.
Intermedijar 137: 4-bromo-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]-piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 138, 944 mg, 2.12 mmol), gvožđe (710 mg, 12.7 mmol) i NH4Cl (85 mg, 1.59 mmol) su grejani u etanolu (40 mL) i vodi (13 mL) kod refluksa tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i filtrirana. Ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(30 mL) tokom 15 min, a tada je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(30 mL) pa su filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in
1
vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (814 mg, 92%) u formi smeđe čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.80-1.87 (2H, m), 1.96-2.03 (2H, m), 3.13 (2H, t), 3.77 (3H, s), 4.12 (2H, t), 4.82 (2H, s), 7.02 (1H, s), 7.05 (1H, d), 7.75 (1H, s), 7.77 (1H, s), 8.10 (1H, s), 8.34 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>415/417.
Intermedijar 138: N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
Rastvor 3-(2-hloropirimidin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 128, 0.893 g, 3.80 mmol), monohidrata p-toluensulfonske kiseline (1.034 g, 5.43 mmol) i 4-bromo-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 4, 0.895 g, 3.62 mmol) u 2-pentanolu (35 mL) je grejan kod refluksa tokom 16 h u atmosferi N2. Smeša je tada ostavljena da se ohladi, pa je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u CH3CN do pojave žutog precipitata. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa dietil etrom. Čvrsta materija je tada rastvorena u 10% CH3OH u CH2Cl2, a nastao rastvor je ispran dva puta sa zas. NaHCO3, a tada sa vodom. Rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen sa CH3CN, nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa dietil etrom, a tada je osušena na vazduhu šta daje jedinjenje iz naslova (0.946 g, 59%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.80-1.87 (2H, m), 1.96-2.03 (2H, m), 3.11 (2H, t), 4.04 (3H, s), 4.13 (2H, t), 7.17 (1H, d), 7.50 (1H, s), 8.13 (1H, s), 8.21 (1H, s), 8.45 (1H, d), 9.10 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>445/447.
Intermedijar 139: 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 140, 130 mg, 0.28 mmol), gvožđa (94 mg, 1.68 mmol) i NH4Cl (10.48 mg, 0.20 mmol) u etanolu (12 mL) i vodi (4 mL) je grejana kod refluksa tokom 2.5 h. Smeša je ostavljena da se ohladi do s.t., pa je filtrirana i koncentrisana in vacuo. Delomično prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.7 M metanolnim amonijakom, obezbeđuje grubi materijal u formi smeđe gume. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (111 mg, 91%) u formi smeđe gume;<1>H NMR (CDCl3): 1.90-1.98 (2H, m), 2.04-2.12 (2H, m), 2.20 (6H, s), 3.08-3.16 (1H,
1
m), 3.23 (2H, t), 3.35 (1H, s), 3.56 (2H, t), 3.84 (3H, s), 3.93 (2H, dd), 4.20 (2H, t), 6.37 (1H, s), 6.76 (1H, d), 7.35 (1H, s), 7.87 (1H, s), 7.95 (1H, s), 8.28 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>435.58.
Intermedijar 140: N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorid (Intermedijar 26, 109 mg, 0.63 mmol), N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 127, 300 mg, 0.60 mmol), DIPEA (0.386 mL, 2.22 mmol) i DMA (4 mL) su zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć i grejani do 140° C tokom 1 h u mikrotalasnoj peći. Nakon hlađenja do s.t. smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone. Kolona je najpre isprana sa CH3OH, a tada je željeni produkt eluiran iz kolone uz pomoć 0.7 M metanolnog amonijaka. Čiste frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje narandžastu gumu. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (140 mg, 50%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3): 1.90-1.98 (2H, m), 2.05-2.12 (2H, m), 2.20 (6H, s), 3.15-3.23 (1H, m), 3.28 (2H, t), 3.69 (2H, dd), 3.96 (3H, s), 4.18 (4H, dt), 6.03 (1H, s), 6.87 (1H, d), 7.35 (1H, s), 7.97 (1H, s), 8.31 (1H, d), 9.02 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>465.61.
Intermedijar 141: 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan-2-il)-N'-[4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 142, 320 mg, 0.65 mmol), gvožđe (219 mg, 3.91 mmol) i NH4Cl (26.2 mg, 0.49 mmol) su grejani kod refluksa u etanolu (18 mL) i vodi (6 mL) tokom 4 h. Smeša je tada ohlađena, filtrirana i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) tokom 15 min, a smeša je tada filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL), a smeša je filtrirana. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (251 mg, 84%) u formi smeđe gume koja kristalizuje nakon stajanja;<1>H NMR: 1.64-1.76 (2H, m), 1.75-1.87 (2H, m), 1.91-2.03 (2H, m), 2.08 (2H, dd), 2.39 (3H, s), 2.63 (2H, t), 3.06 (2H, t), 3.56 (2H, d), 3.72 (3H, s), 3.82 (2H, d), 4.01 (2H, s), 4.10 (2H, t), 6.25 (1H, s), 6.91 (1H, d), 7.21 (1H, s), 7.67 (1H, s), 8.04 (1H, s), 8.23 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>461.37.
1
Intermedijar 142: N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan-2-il-5-nitrofenil]-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin
N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 127, 300 mg, 0.78 mmol), 8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan (Intermedijar 47, 118 mg, 0.94 mmol) i DIPEA (0.162 mL, 0.94 mmol) su grejani na 100° C u DMA (4 mL) tokom 1.75 h. Smeša je tada apsorbirana u SCX kolonu, a kolona je isprana sa CH3OH pa je eluirana sa 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Frakcije koje sadrže željeni produkt su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (321 mg, 84%) u formi narandžaste pene;<1>H NMR: 1.62-1.74 (2H, m), 1.74-1.85 (2H, m), 1.91-2.00 (2H, m), 2.00-2.06 (2H, m), 2.38 (3H, s), 2.65 (2H, t), 3.03 (2H, t), 3.71 (2H, d), 3.95 (3H, s), 4.04-4.15 (4H, m), 6.27 (1H, s), 7.01 (1H, d), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, s), 8.33 (1H, d), 8.54 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>491.6.
Intermedijar 143: 4-metoksi-6-(1-metil-3.6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
1,1 bi(di-tert-butilfosfino)ferocen paladijum dihlorid (16.74 mg, 0.03 mmol) je dodan u rastvor koji sadrži 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2,3,6-tetrahidropiridin (139 mg, 0.62 mmol), 4-bromo-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin (Intermedijar 144, 220 mg, 0.52 mmol), K3PO4(220 mg, 1.04 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i vodi (1.5 mL, degazirana tokom 20 min pre upotrebe). Smeša je grejana na 100° C tokom 1 h, a tada je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je rastvoren u EtOAc. Ovaj rastvor je ispran sa vodom (3 puta), slanim rastvorom, a tada je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (191 mg, 84%) u formi tamne čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.31 (3H, s), 2.37-2.43 (2H, m), 2.61 (2H, t), 3.01-3.04 (2H, m), 3.76 (3H, s), 3.89 (3H, s), 4.37 (2H, br s), 5.70-5.73 (1H, m), 6.63 (1H, s), 7.18-7.22 (2H, m), 7.25-7.29 (1H, m), 7.54 (1H, d), 7.63 (1H, s), 7.81 (1H, s), 8.31 (1H, d), 8.34 (1H, s), 8.46 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>441.57.
14
Intermedijar 144: 4-bromo-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-benzen-1,3-diamin
N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 145, 1.074 g, 2.36 mmol), gvožđe (0.792 g, 14.19 mmol) i NH4Cl (95 mg, 1.77 mmol) su grejani kod refluksa u etanolu (39 mL) i vodi (13 mL) tokom 1.5 h. Smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(30 mL) tokom 15 min, a smeša je filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(30 mL), a smeša je filtrirana. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (0.937 g, 93%) u formi kremove pene;<1>H NMR: 3.79 (3H, s), 3.89 (3H, s), 4.86 (2H, s), 7.06 (1H, s), 7.18-7.30 (3H, m), 7.54 (1H, d), 7.83 (1H, s), 7.87 (1H, s), 8.33 (1H, d), 8.35 (1H, s), 8.43 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>424/426.
Intermedijar 145: N-(4-bromo-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
Rastvor 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metilindola (Intermedijar 130, 0.829 g, 3.40 mmol), monohidrata p-toluensulfonske kiseline (0.924 g, 4.86 mmol) i 4-bromo-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 4, 0.8 g, 3.24 mmol) je grejan kod refluksa u 2-pentanolu (32 mL) u atmosferi N2tokom 18 h. Smeša je ostavljena da se hladi, a tada je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen sa CH3CN do pojave žutog precipitata. Ova čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je isprana sa dietil etrom. Čvrsta materija je suspendovana u 10% CH3OH u CH2Cl2pa je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2×), a nakon toga sa vodom. Organski rastvor je koncentrisan in vacuo, a nastao ostatak je smrvljen u smeši CH3CN/voda. Smeša je filtrirana, a sakupljena čvrsta materija je isprana sa CH3CN pa sa dietil etrom, a tada je osušena na vazduhu šta daje jedinjenje iz naslova (1.082 g, 74%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 3.90 (3H, s), 4.05 (3H, s), 7.15-7.21 (1H, m), 7.26-7.31 (1H, m), 7.36 (1H, d), 7.52 (1H, s), 7.56 (1H, d), 8.34 (1H, s), 8.39 (1H, s), 8.40-8.45 (2H, m), 9.20 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>454/456.
Intermedijar 146: 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan-2-il)-N'-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 147, 200 mg, 0.40 mmol), gvožđa (134 mg, 2.40 mmol) i NH4Cl (16 mg, 0.30 mmol), etanola (18 mL) i vode (6 mL) je grejana kod refluksa tokom 1 h, a smeša je ostavljena da se ohladi. Smeša je tada filtrirana i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL) tokom 15 min, a smeša je filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(15 mL), a smeša je opet filtrirana. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (144 mg, 77%) u formi tamno zelene pene;<1>H NMR: 1.66-1.80 (2H, m), 2.06-2.16 (2H, m), 2.42 (3H, s), 2.66 (2H, t), 3.59 (2H, d), 3.75 (3H, s), 3.83-3.91 (5H, m), 4.01 (2H, s), 6.30 (1H, s), 7.09 (1H, d), 7.16 (1H, t), 7.21-7.28 (1H, m), 7.31 (1H, s), 7.51 (1H, d), 7.70 (1H, s), 8.23 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.43 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>470.7.
Intermedijar 147: N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
Smeša N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129, 300 mg, 0.76 mmol), 8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktana (Intermedijar 47, 115 mg, 0.92 mmol), DIPEA (0.158 mL, 0.92 mmol) i DMA (4 mL) je grejana kod 100° C tokom 1 h. Smeša je tada apsorbirana u SCX kolonu, a kolona je isprana sa CH3OH. Kolona je eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1), a frakcije koje sadrže željeni produkt su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (209 mg, 55%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 1.71 (2H, dt), 2.00-2.10 (2H, m), 2.40 (3H, s), 2.67 (2H, t), 3.74 (2H, d), 3.88 (3H, s), 3.96 (3H, s), 4.11 (2H, d), 6.31 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.20 (1H, d), 7.25 (1H, dd), 7.52 (1H, d), 8.02 (1H, s), 8.28-8.34 (2H, m), 8.36 (1H, d), 8.63 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>500.6.
Intermedijar 148: 4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 149, 230 mg, 0.47 mmol), gvožđa (158 mg, 2.83 mmol), NH4Cl (17.7 mg, 0.33 mmol), etanola (9 mL) i vode (3 mL) je grejana kod refluksa tokom 50 min. Ocenjeno je da reakcija nije kompletovana pa je dodano još gvožđa (158 mg, 2.83 mmol) i NH4Cl (17.7 mg, 0.33 mmol), a smeša je grejana kod refluksa tokom dodatnih 0.5 h. Nakon hlađenja, smeša je filtrirana i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1.5-7% 7 M metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (187 mg, 87%) u formi sive pene;<1>H NMR: 1.78 (1H, m), 2.06 (1H, m), 2.20 (6H, s), 2.86 (1H, d), 2.90-3.01 (2H, m), 3.12 (1H, m), 3.15-3.23 (1H, m), 3.76 (3H, s), 3.88 (3H, s), 4.27 (2H, s), 6.72 (1H, s), 7.14 (1H, d), 7.15-7.21 (1H, m), 7.22-7.34 (1H, m), 7.50 (1H, s), 7.52 (1H, d), 7.74 (1H, s), 8.26 (1H, s), 8.28 (1H, s), 8.43 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>458.75.
Intermedijar 149: N-{4-[(3S)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin
N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amin (Intermedijar 129, 295 mg, 0.75 mmol), (3S)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (103 mg, 0.90 mmol) i DIPEA (0.196 mL, 1.13 mmol) su rastvoreni u DMA (3 mL) pa su zatvoreni u tubu za mikrotalasnu peć. Smeša je grejana do 100° C tokom 45 min u mikrotalasnoj peći, a tada je ohlađena do s.t., razređena sa CH3OH i apsorbirana u SCX kolonu. Kolona je isprana sa CH3OH pa je eluirana sa metanolnim amonijakom u CH2Cl2(1:1). Frakcije koje sadrže željeni produkt su spojene i koncentrisane in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-7% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (235 mg, 64%) u formi crvene čvrste materije;<1>H NMR: 1.83 (1H, m), 2.17 (1H, m), 2.22 (6H, s), 2.72-2.86 (1H, m), 3.17 (2H, m), 3.26 (1H, m), 3.47 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.97 (3H, s), 6.58 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.19 (1H, d), 7.21-7.31 (1H, m), 7.52 (1H, d), 8.01 (1H, s), 8.23-8.33 (2H, m), 8.36 (1H, d), 8.58 (1H, s); m/z: ES<->MH<+>488.35.
Intermedijar 150: 4-metoksi-6-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 151, 285 mg, 0.56 mmol), gvožđa (188 mg, 3.36 mmol), NH4Cl (21 mg, 0.39 mmol), etanola (10.5 mL) i vode (3.5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Ocenjeno je da je reakcija nekompletna je dodano još NH4Cl (21 mg, 0.39 mmol) i gvožđa (188 mg, 3.36 mmol), a smeša je grejana kod refluksa tokom dodatnih 1.5 h. Nakon hlađenja smeša je filtrirana i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 2-10% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (183 mg, 69%) u formi narandžaste gume koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.30
14
(3H, s), 2.36-2.45 (2H, m), 2.60 (2H, t), 2.98-3.06 (2H, m), 3.74 (3H, s), 4.34 (2H, s), 5.73 (1H, s), 6.64 (1H, s), 7.09 (1H, m), 7.26 (1H, d), 7.38-7.49 (2H, m), 8.00 (1H, s), 8:35 (1H, d), 8.58 (1H, d), 8.80 (2H, m); m/z: ES<+>MH<+>427.
Intermedijar 151: N-[2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
Rastvor 3-(2-hloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 152, 256 mg, 1.00 mmol), monohidrata p-toluensulfonske kiseline (271 mg, 1.43 mmol) i 2-metoksi-4-(1-metil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)-5-nitroanilina (Intermedijar 3, 250 mg, 0.95 mmol) i 2-pentanola (12 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h u atmosferi N2. Smeša je tada koncentrisana in vacuo, a ostatak je rastvoren u CH3OH. Ovaj rastvor je prečišćen uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Frakcije koje sadrže željeni produkt su koncentrisane in vacuo šta daje ostatak koji je rastvoren u vrućem DMF (10 mL). Ovaj rastvor je filtriran i koncentrisana in vacuo šta daje gumu koja je smrvljena sa CH3CN (10 mL) šta daje jedinjenje iz naslova (285 mg, 66%) u formi žutog praha;<1>H NMR: 2.36 (5H, s), 2.67 (2H, s), 3.07 (2H, s), 4.02 (3H, s), 5.66 (1H, s), 7.00 (1H, s), 7.12 (1H, t), 7.41 (1H, m), 7.45 (1H, m), 8.45 (2H, t), 8.59 (1H, d), 8.83 (2H, t), 8.90 (1H, s); m/z: ES<->M-H<->456.
Intermedijar 152: 3-(2-hloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridin
K2CO3(5.18 g, 37.50 mmol) je dodan u 1-aminopiridin jodid (4.50 g, 20.25 mmol) i (E)-2-hloro-4-(2-etoksivinil)pirimidin (Intermedijar 153, 2.77 g, 15 mmol) u DMF (20 mL) na 25° C. Nastala tamno-plava suspenzija je mešana na 25° C tokom 15 h (postaje krvavo-crvena), a tada je grejana do 110° C tokom 2 h. Nakon hlađenja smeša je dodana u vodu (100 mL), a nastala smeđa čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa vodom i osušena isisavanjem. Vodeni filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (2×100 mL), a spojeni organski rastvori su isprani sa vodom (4×100 mL) i zasićenim slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Nastao ostatak je spojen sa prethodno sakupljenom smeđom čvrstom materijom i sve je rastvoreno u THF (100 mL). Ovaj rastvor je filtriran kroz pločicu od silike (30 g). Eluent je koncentrisan, a nastao ostatak je ispran sa CH3OH (-70° C) šta daje jedinjenje iz naslova (1.274 g, 37%) u formi bež kristalne čvrste materije;<1>H NMR: 7.19 (1H, m), 7.65 (1H, m), 7.95 (1H, d), 8.49 (1H, m), 8.61 (1H, d), 8.85-8.91 (1H, m), 8.92 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>231.
Intermedijar 153: 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 154, 440 mg, 0.93 mmol), gvožđa (311 mg, 5.56 mmol), NH4Cl (37.2 mg, 0.70 mmol), etanola (15 mL) i vode (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Nakon hlađenja smeša je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(20 mL) tokom 15 min, a tada je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(10 mL), a tada filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (339 mg, 82%) u formi žute čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.73-1.83 (1H, m), 2.00-2.10 (1H, m), 2.20 (6H, s), 2.81-2.90 (1H, m), 2.92-3.00 (2H, m), 3.11-3.16 (1H, m), 3.17-3.24 (1H, m), 3.73 (3H, s), 4.28 (2H, br s), 6.71 (1H, s), 7.07 (1H, td), 7.20 (1H, d), 7.27 (1H, s), 7.37-7.42 (1H, m), 7.97 (1H, s), 8.30 (1H, d), 8.53 (1H, d), 8.76 (1H, s), 8.79 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>445.33.
Intermedijar 154: N-[4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (0.166 mL, 1.31 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 155, 415 mg, 1.09 mmol) i DIPEA (0.227 mL, 1.31 mmol) u DMA (3.2 mL), a smeša je grejana na 85° C tokom 1 h. Delomično prečišćavanje je postignuto uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Čiste frakcije su spojene i koncentrisane. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-7% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (443 mg, 86%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 1.77-1.88 (1H, m), 2.13-2.20 (1H, m), 2.23 (6H, s), 2.75-2.84 (1H, m), 3.14-3.26 (3H, m), 3.43-3.51 (1H, m), 3.96 (3H, s), 6.58 (1H, s), 7.08 (1H, td), 7.27 (1H, d), 7.34-7.39 (1H, m), 8.24 (1H, s), 8.35 (1H, d), 8.40 (1H, s), 8.49 (1H, d), 8.78 (1H, s), 8.80 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>475.31.
Intermedijar 155: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
14
Smeša 3-(2-hloropirimidin-4-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijar 152, 1.476 g, 6.40 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitroanilina (Intermedijar 23, 1.310 g, 7.04 mmol), monohidrata p-toluensulfonske kiseline (1.339 g, 7.04 mmol) i 2-pentanola (45 mL) je grejana na 125° C tokom 22 h. Nakon hlađenja smeša je filtrirana. Čvrsta materija je isprana sa CH3OH, dietil etrom, a tada je osušena na filter-papiru šta daje smeđu čvrstu materiju. Čvrsta materija je rastvorena u CH2Cl2, a ovaj rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(3 puta), vodom i slanim rastvorom, a tada je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u ključajućim CH3CN, a tada je ostavljen da se ohladi. Nastala čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je osušena na vazduhu šta daje jedinjenje iz naslova (1.29 g, 53%) u formi smeđe čvrste materije;<1>H NMR: 4.03 (3H, s), 7.11 (1H, td), 7.37 (1H, d), 7.41 (1H, d), 7.43-7.48 (1H, m), 8.45 (1H, d), 8.51 (1H, s), 8.58 (1H, d), 8.82-8.84 (2H, m), 9.00 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>381.54.
Intermedijar 156: 4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 157, 355 mg, 0.77 mmol), gvožđa (258 mg, 4.63 mmol), NH4Cl (30.9 mg, 0.58 mmol), etanola (12.6 mL) i vode (4.2 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Nakon hlađenja smeša je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% CH3OH u CH2Cl2(20 mL) tokom 15 min, a smeša je filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(20 mL) pa su filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (249 mg, 75%) u formi smeđe čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.12 (6H, s), 3.02-3.09 (1H, m), 3.47 (2H, t), 3.71 (3H, s), 3.98 (2H, t), 4.04 (2H, br s), 6.28 (1H, s), 7.05 (1H, td), 7.09 (1H, s), 7.16 (1H, d), 7.36-7.41 (1H, m), 7.93 (1H, s), 8.27 (1H, d), 8.48 (1H, d), 8.74 (1H, s), 8.77 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>431.35.
Intermedijar 157: N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorid (Intermedijar 26, 227 mg, 1.31 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]-piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 155, 415 mg, 1.09 mmol) i DIPEA (0.755 mL, 4.36 mmol) u DMA (3.2
14
mL), a smeša je grejana na 85° C tokom 1 h. Smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Čiste frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-7% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (360 mg, 72%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.15 (6H, s), 3.12-3.19 (1H, m), 3.74-3.78 (2H, m), 3.95 (3H, s), 4.04-4.09 (2H, m), 6.29 (1H, s), 7.08 (1H, td), 7.28 (1H, d), 7.36-7.41 (1H, m), 8.26 (1H, s), 8.35 (1H, d), 8.45-8.49 (2H, m), 8.78 (1H, s), 8.80 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>461.33.
Intermedijar 158: N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,2,4-triamin
Smeša N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitro-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,4-diamina (Intermedijar 159, 440 mg, 0.95 mmol), gvožđa (319 mg, 5.71 mmol), NH4Cl (38.2 mg, 0.71 mmol), etanola (15 mL) i vode (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Nakon hlađenja smeša je koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen sa 10% CH3OH u CH2Cl2(20 mL) tokom 15 min, a smeša je filtrirana. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% CH3OH u CH2Cl2(20 mL) pa su filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (321 mg, 78 %) u formi smeđe gume nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 2.18 (6H, s), 2.37 (2H, t), 2.65 (3H, s), 2.91 (2H, t), 3.72 (3H, s), 4.57 (2H, br s), 6.77 (1H, s), 7.07 (1H, td), 7.22 (1H, d), 7.29 (1H, s), 7.37-7.42 (1H, m), 7.97 (1H, s), 8.31 (1H, d), 8.52 (1H, d), 8.76 (1H, s), 8.77-8.80 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>433.36.
Intermedijar 159: N'-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N'-metil-5-nitro-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,4-diamin
N<1>,N<1>,N<2>-trimetiletan-1,2-diamin (138 mg, 1.35 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 155, 428 mg, 1.13 mmol) i DIPEA (0.234 mL, 1.35 mmol) u DMA (3.3 mL), a smeša je grejana na 85° C tokom 1.5 h. Delomično prečišćavanje je postignuto uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Čiste frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (444 mg, 85%) u formi narandžastog ulja;<1>H NMR: 2.18 (6H, s), 2.50-2.53 (2H, m), 2.87 (3H, s), 3.26-3.30 (2H, m), 3.95 (3H, s), 6.86 (1H, s), 7.09
14
(1H, td), 7.30 (1H, d), 7.35-7.40 (1H, m), 8.27 (1H, s), 8.37 (1H, d), 8.47-8.51 (2H, m), 8.79 (1H, s), 8.79-8.82 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>463.33.
Intermedijar 160: 4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]-pirol-1-il]-6-metoksi-N-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 161, 190 mg, 0.39 mmol), gvožđa (131 mg, 2.34 mmol), NH4Cl (14.62 mg, 0.27 mmol), etanola (6 mL) i vode (2 mL) je grejana kod refluksa tokom 4 h, a tada je mešana na s.t. tokom noći. Delomično prečišćavanje je postignuto uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 N metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su tada koncentrisane in vacuo na silici. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2obezbeđuje kontaminirani materijal. Frakcije koje sadrže željeni produkt su spojene i dodatno prečišćene sa FCC, eluirane sa 0-2.5% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2šta daje jedinjenje iz naslova (100 mg, 56%); m/z: ES<+>MH<+>457.21.
Intermedijar 161: N-(4-[(3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidropirolo[3,4-b]-pirol-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
DIPEA (0.343 mL, 1.97 mmol) je dodana u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 155, 300 mg, 0.79 mmol) i (3aR,6aR)-5-metil-2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-1H-pirolo[3,4-b]pirola (Intermedijar 37, 109 mg, 0.87 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (5 mL), a smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 1 h. Nakon hlađenja smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su tada koncentrisane in vacuo na silici. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-4% 7 N metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (198 mg, 52%) u formi blago kontaminirane narandžasto/crvene čvrste materije koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR (CDCl3): 1.89 (1H, dd), 2.06-2.18 (1H, m), 2.21 (3H, s), 2.31 (1H, dd), 2.47 (2H, ddd), 2.65 (1H, t), 2.99-3.10 (1H, m), 3.26 (1H, t), 3.51-3.60 (1H, m), 3.98 (3H, s), 4.39-4.46 (1H, m), 6.46 (1H, s), 6.93 (1H, td), 7.04 (1H, d), 7.38 (1H, s), 7.43 (1H, ddd), 8.36 (1H, d), 8.46 (1H, s), 8.52 (1H, m), 8.58 (1H, m), 8.98 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>487.15.
14
Intermedijar 162: 4-metoksi-6-(8-metil-2,8-diazaspiro(3.4]oktan-2-il)-N'-(4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-il)benzen-1,3-diamin
Smeša N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3.4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amina (Intermedijar 163, 404 mg, 0.83 mmol), gvožđa (278 mg, 4.98 mmol), NH4Cl (33.3 mg, 0.62 mmol), etanola (15 mL) i vode (5 mL) je grejana kod refluksa tokom 1.5 h. Nakon hlađenja smeša je filtrirana, a ostaci su isprani sa smešom CH3OH/CH2Cl2(1:10; 20 mL). Spojeni filtrati su koncentrisani in vacuo na silici Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-10% metanolnim amonijakom u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (338 mg, 89%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR: 1.72 (2H, dt), 2.11 (2H, dd), 2.42 (3H, s), 2.66 (2H, t), 3.63 (2H, d), 3.72 (3H, s), 3.87 (2H, d), 4.03 (2H, s), 6.29 (1H, s), 7.06 (1H, td), 7.10 (1H, s), 7.16 (1H, d), 7.3 5-7.42 (1H, m), 7.93 (1H, s), 8.27 (1H, d), 8.52 (1H, d), 8.74 (1H, s), 8.77 (1H, t); m/z: ES<+>MH<+>457.36.
Intermedijar 163: N-[2-metoksi-4-(8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan-2-il)-5-nitrofenil]-4-pirazolo[1,5-a]piridin-3-ilpirimidin-2-amin
8-metil-2,8-diazaspiro[3,4]oktan (Intermedijar 47, 133 mg, 0.88 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-pirimidin-2-amina (Intermedijar 155, 280 mg, 0.74 mmol) i DIPEA (0.153 mL, 0.88 mmol) u DMA (3 mL), a smeša je grejana kod 100° C tokom 1 h. Smeša je tada delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 7 M metanolnim amonijakom. Čiste frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo. Dodatno prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 1-8% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (300 mg) u formi narandžastog suvog filma;<1>H NMR: 1.71 (2H, dt), 2.05 (2H, dd), 2.40 (3H, s), 2.67 (2H, t), 3.75 (2H, d), 3.95 (3H, s), 4.11 (2H, d), 6.31 (1H, s), 7.09 (1H, td), 7.28 (1H, d), 7.35-7.41 (1H, m), 8.25 (1H, s), 8.36 (1H, d), 8.47 (1H, s), 8.50 (1H, d), 8.79 (1H, s), 8.79-8.82 (1H, m); m/z: ES<+>MH<+>487.30.
Intermedijar 164: 4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Voda (4 mL) je dodana u mešanu smešu N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 165, 286 mg, 0.60 mmol), gvožđa (202 mg, 3.62 mmol), NH4Cl (22.6 mg, 0.42 mmol) i etanola (24 mL). Nastala smeša je mešana na 105° C tokom 3 h, a tada je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™) i
14
koncentrisana in vacuo. Delomično prečišćavanje uz pomoć hromatografske jonske izmene, primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom, daje jedinjenje iz naslova (312 mg, 116%) u formi smeđe gume, koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.13 (2H, d), 2.32 (2H, d), 2.80 (6H, d), 2.87-2.98 (2H, m), 3.19 (2H, d), 3.77 (3H, s), 6.74 (1H, s), 7.17 (4H, ddd), 7.46 (1H, d), 7.56 (1H, s), 7.77 (1H, s), 8.28 (2H, dd), 8.43 (1H, d), 11.76 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>444.
Intermedijar 165: N-{4-[(3R)-3-dimetilaminopirolidin-1-il]-2-metoksi-5-nitrofenil}-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin
(3R)-N,N-dimetilpirolidin-3-amin (92 mg, 0.81 mmol) je dodan u smešu N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 68, 404 mg, 0.73 mmol) i DIPEA (0.256 mL, 1.46 mmol) u DMA (3 mL). Smeša je tada grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Delomično prečišćavanje je postignuto uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone (20 g) uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje narandžasto/smeđu gumu. Ova guma je smrvljena sa etanolom (15 mL) šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (291 mg, 84%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 1.82 (1H, dt), 2.12-2.20 (1H, m), 2.22 (6H, s), 2.73-2.83 (1H, m), 3.12-3.22 (2H, m), 3.22-3.27 (1H, m), 3.41-3.51 (1H, m), 3.97 (3H, s), 6.58 (1H, s), 7.07 (1H, t), 7.18 (1H, t), 7.26 (1H, d), 7.45 (1H, d), 8.00 (1H, s), 8.28-8.31 (2H, m), 8.35 (1H, d), 8.57 (1H, s), 11.78 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>474.30.
Intermedijar 166: 4-(3-dmetilaminoazetidin-1-il)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-6-metoksibenzen-1,3-diamin
Voda (4 mL) je dodana u smešu N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 167, 240 mg, 0.52 mmol), gvožđa (175 mg, 3.13 mmol), NH4Cl (19.56 mg, 0.37 mmol) i etanola (24 mL). Nastala smeša je mešana na 105° C tokom 3 h, a tada je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™). Filtrat je koncentrisan in vacuo pa je delomično prečišćen uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (241 mg, 107%) u formi smeđe gume koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja; m/z: ES<+>MH<+>430.
1
Intermedijar 167: N-[4-(3-dimetilaminoazetidin-1-il)-2-metoksi-5-nitrofenil]-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amin
N,N-dimetilazetidin-3-amin dihidrohlorid (Intermedijar 26, 140 mg, 0.81 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 68, 406 mg, 0.74 mmol) i DIPEA (0.514 mL, 2.94 mmol) u DMA (3mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Smeša je delomično prečišćena uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone (20 g) uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje narandžasto/smeđu gumu. Ova guma je smrvljena sa etanolom (15 mL) šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (245 mg, 72%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.15 (6H, s), 3.17 (1H, dd), 3.76 (2H, dd), 3.97 (3H, s), 4.03-4.10 (2H, m), 6.29 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.14-7.21 (1H, m), 7.27 (1H, d), 7.45 (1H, d), 8.01 (1H, s), 8.28-8.37 (3H, m), 8.64 (1H, s), 11.79 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>460.32.
1 1
Intermedijar 168: N<1>-(2-dimetilaminoetil)-N<4>-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-5-metoksi-N<1>-metilbenzen-1,2,4-triamin
Voda (4 mL) je dodana u jednoj porciji u smešu N'-(2-dimetilaminoetil)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il]-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamina (Intermedijar 169, 270 mg, 0.59 mmol), gvožđa (196 mg, 3.51 mmol), NH4Cl (21.9 mg, 0.41 mmol) i etanola (24 mL). Nastala smeša je grejana na 105° C tokom 3 h pa je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju (Celit™). Filtrat je koncentrisan in vacuo pa je delomično prečišćen uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su spojene i koncentrisane in vacuo šta daje jedinjenje iz naslova (244 mg, 97%) u formi smeđe čvrste materije koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja;<1>H NMR: 2.18 (6H, s), 2.37 (2H, s), 2.64 (3H, s), 2.90 (2H, s), 3.76 (3H, s), 6.77 (1H, s), 7.03-7.26 (3H, m), 7.46 (1H, d), 7.52 (1H, s), 7.74 (1H, s), 8.18-8.35 (2H, m), 8.42 (1H, d), 11.72 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>432.
Intermedijar 169: N'-(2-dimetilaminoetil)-N-[4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-il)-2-metoksi-N'-metil-5-nitrobenzen-1,4-diamin
N<1>,N<1>,N<2>-trimetiletan-1,2-diamin (83 mg, 0.82 mmol) je dodan u smešu N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1H-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 68, 409 mg, 0.74 mmol), DIPEA (0.259 mL, 1.48 mmol) i DMA (3 mL). Nastala smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 140° C tokom 0.5 h. Delomično prečišćavanje je postignuto uz pomoć hromatografske jonske izmene primenom SCX kolone (20 g) uz eluiranje sa 0.35 M metanolnim amonijakom. Odgovarajuće frakcije su koncentrisane in vacuo šta daje narandžasto/smeđu gumu. Ova guma je smrvljena sa etanolom (15 mL) šta daje čvrstu materiju koja je sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumu šta daje jedinjenje iz naslova (275 mg, 80%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR: 2.18 (6H, s), 2.45-2.55 (2H, m), 2.87 (3H, s), 3.25-3.30 (2H, m), 3.97 (3H,
1 2
s), 6.87 (1H, s), 7.08 (1H, t), 7.18 (1H, t), 7.29 (1H, d), 7.46 (1H, d), 8.03 (1H, s), 8.33 (3H, dd), 8.66 (1H, s), 11.80 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>462.34.
Intermedijar 170: tert-butil N-[2-[[5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]-2-(prop-2-enuljaamino)fenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamat
Akriloil hlorid (0.069 mL, 0.85 mmol) u CH2Cl2(2.5 mL) je dodan, kap po kap tokom 5 min, u rastvor tert-butil N-[2-[[2-amino-5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamata (Intermedijar 171, 377 mg, 0.71 mmol) i DIPEA (0.234 mL, 1.42 mmol) u CH2Cl2(8 mL) koji je ohlađen u ledeno/metanolnoj banji. Smeša je mešana tokom 0.5 h. Smeša je tada razređena sa 10% CH3OH u CH2Cl2. Nastao rastvor je ispran sa zas. NaHCO3, osušen (MgSO4) pa je koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-3% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (325 mg, 78%) u formi žute pene;<1>H NMR: 1.38 (9H, s), 2.71 (3H, s), 2.77 (3H, s), 3.00 (2H, t), 3.34 (2H, t), 3.88 (3H, s), 3.91 (3H, s), 5.73-5.78 (1H, m), 6.27 (1H, dd), 6.67 (1H, dd), 6.99 (1H, s), 7.17 (1H, t), 7.21-7.27 (2H, m), 7.53 (1H, d), 7.87 (1H, s), 8.26 (1H, d), 8.33 (1H, d), 8.62 (1H, s), 8.99 (1H, s), 9.10 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>584.73.
Intermedijar 171: tert-butil N-[2-[[2-amino-5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamat
tert-butil N-[2-[[5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]-2-nitrofenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamat (Intermedijar 172, 428 mg, 0.76 mmol), gvožđe (255 mg, 4.57 mmol) i NH4Cl (30.6 mg, 0.57 mmol) su grejani u etanolu (16 mL) i vodi (5.33 mL) kod refluksa tokom 1.5 h (blok za grejanje na 100° C), a smeša je tada ohlađena i koncentrisana in vacuo. Nastao ostatak je smrvljen u 10% smeši CH3OH/CH2Cl2(30 mL) pa je filtriran. Ostaci su ponovo smrvljeni sa 10% smešom CH3OH/CH2Cl2(30 mL) i filtrirani. Spojeni filtrati su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrisani in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-5% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (380 mg, 94%) u formi svetlosmeđe pene;<1>H NMR: 1.41 (9H, s), 2.64 (3H, s), 2.80 (3H, s), 2.95 (2H, t), 3.34 (2H, t), 3.77 (3H, s), 3.89 (3H, s), 4.40 (2H, s), 6.78 (1H, s), 7.14-7.20 (2H, m), 7.23-7.27 (1H, m), 7.52 (1H, d), 7.55 (1H, s), 7.75 (1H, s), 8.28 (1H, d), 8.29 (1H, s), 8.42 (1H, d); m/z: ES<+>MH<+>532.37.
1
Intermedijar 172: tert-butil N-[2-[[5-metoksi-4-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]-2-nitrofenil]-metilamino]etil]-N-metilkarbamat
tert-butil N-metil-N-(2-metilaminoetil)karbamat (Intermedijar 173, 300 mg, 1.59 mmol) je dodan u suspenziju N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitrofenil)-4-(1-metil-indol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 129, 522 mg, 1.33 mmol) i DIPEA (0.462 mL, 2.65 mmol) u DMA (5 mL). Smeša je grejana u mikrotalasnoj peći na 100° C tokom 4 h. Smeša je tada razređena sa EtOAc i isprana sa vodom (5 puta), slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i koncentrisana in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-2% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (431 mg, 58%) u formi narandžaste čvrste materije nakon mrvljenja sa dietil etrom;<1>H NMR: 1.37 (9H, s), 2.79 (3H, s), 2.88 (3H, s), 3.29-3.36 (2H, m), 3.39-3.44 (2H, m), 3.89 (3H, s), 3.99 (3H, s), 6.85 (1H, d), 7.14 (1H, t), 7.21-7.28 (2H, m), 7.53 (1H, br d), 8.04 (1H, s), 8.31-8.38 (3H, m), 8.72 (1H, br s); m/z: ES<+>MH<+>562.35.
Intermedijar 173: tert-butil N-metil-N-(2-metilaminoetil)karbamat
Rastvor di-tert-butil dikarbonata (4.95 g, 22.69 mmol) u CH2Cl2(240 mL) je dodan kap po kap u mešani rastvor N,N'-dimetiletan-1,2-diamina (4 g, 45.38 mmol) u CH2Cl2(80 mL) tokom perioda od 20 h. Nastala smeša je mešana na s.t. tokom 3 h. Smeša je naknadno isprana sa zas. Na2CO3(2×100 mL), vodom (50 mL), i zas. slanim rastvorom (50 mL). Organski rastvor je osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Prečišćavanje sa FCC, eluiranje sa 0-10% CH3OH u CH2Cl2daje jedinjenje iz naslova (2.177 g, 51%) u formi bledo-žutog ulja;<1>H NMR: 1.40 (9H, s), 2.28 (3H, s), 2.57 (2H, t), 2.79 (3H, s), 3.20 (2H, t).
Intermedijar 174: 3-hloro-N-[2-[2-dimetilaminoetil(metil)amino]-4-metoksi-5-[[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino]fenil]propanamid
U mešanu suspenziju N<1>-(2-dimetilaminoetil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]benzen-1,2,4-triamina (Intermedijar 175, 33 g, 62.29 mmol) i K2CO3(6.09 g, 43.6 mmol) u acetonu (300 mL) je dodan 3-hloropropanoil hlorid (9.78 g, 74.74 mmol) na -50° C. Nastala smeša je grejana do -20° C pa je mešana tokom 0.5 h. Dodani su CH3OH (27.75
1 4
mL) i rastvor NaOH (2.24 g, 56.06 mmol u 300 mL vode). Nastala smeša je mešana tokom 3-4 h na s.t. Čvrsta materija je sakupljena uz pomoć filtracije pa je osušena na 50° C šta daje jedinjenje iz naslova (32.5 g, 95%).<1>H NMR: (CDCl3) 2.95 (2H, t), 3.04 (6H, d), 3.50 (3H, s), 3.63 (2H, s), 3.81 (2H, t), 4.01 (6H, s), 4.33-4.37 (2H, m), 7.33-7.42 (3H, m), 7.47 (1H, t), 7.51-7.55 (1H, m), 8.11-8.21 (3H, m), 8.48 (1H, s), 8.87 (1H, s), 9.17 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>536.24.
Intermedijar 175: N<4>-(2-dimetilaminoetil)-2-metoksi-N<4>-metil-N<1>-[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]-5-nitro-benzen-1,4-diamin
U mešani rastvor N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitro-fenil)-4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-amina (Intermedijar 176, 65 g, 160.28 mmol) i N,N',N'-trimetil-etan-1,2-diamina (19.65 g, 192.3 mmol) u DMA (630 mL) je dodan N-etil-N-izopropil-propan-2-amin (26.93 g, 208.4 mmol) na s.t. Nastala smeša je mešana na 85° C tokom 5-6 h pa je ohlađena do s.t. Tada je dodana voda (630 mL), a smeša je mešana tokom 3-4 h. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa vodom (315 mL) pa je osušena na 50° C tokom 12 h šta daje jedinjenje iz naslova (79.4 g, 96%) u formi narandžaste čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3): 2.29 (6H, s) 2.60 (2H, t), 2.93 (3H, s), 3.31 (2H, t), 3.96 (3H, s), 4.00 (3H, s), 6.69 (1H, s), 7.21 (1H, d), 7.30-7.38 (2H, m), 7.43 (1H, d), 7.56 (1H, s), 8.18 (1H, d), 8.30 (1H, s), 8.41 (1H, d), 9.59 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>476.23.
Intermedijar 176: N-(4-fluoro-2-metoksi-5-nitro-fenil)-4-(1-metilindol-3-il)-pirimidin-2-amin
1,4-dioksan (585 mL) je dodan u smešu 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metil-indola (Intermedijar 177, 50 g, 160.04 mmol), 4-fluoro-2-metoksi-5-nitro-anilina (38.03 g, 192.04
1
mmol) i monohidrata p-toluensulfonske kiseline (37.09 g, 192.04 mmol) na s.t. Nastala smeša je mešana na 85° C tokom 3 h. Nakon hlađenja do s.t. smeša je ugašena sa 23% vodenim amonijakom (39.59 mL, 480.1 mmol) i vodom (195 mL, 510.1 mmol), a čvrsta materija je precipitirana. Nastala gusta smeša je mešana na s.t. tokom 3-4 h. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom pa je osušena na 50° C in vacuo tokom 12 h šta daje jedinjenje iz naslova (74.6 g, 85%) u formi žute čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3): 4.01 (6H, s), 6.90 (1H, d), 7.37-7.48 (4H, m), 8.05-8.12 (2H, m), 8.43 (1H, s), 8.90 (1H, s), 9.34 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>394.12.
Intermedijar 177: 3-(2-hloropirimidin-4-il)-1-metil-indol
U mešani rastvor 2, 4-dihloropirimidina (70.5 g, 463.76 mmol) u dimetoksietanu (900 mL) su dodani FeCl3(77.16 g, 459.12 mmol) i 1-metil indol (68.28 g) na 60° C. Nastala smeša je mešana tokom noći na 60° C. Nakon hlađenja, čvrsta materija je precipitirana uz pomoć dodavanja metanola (345 mL) i vode (900 mL). Nastala gusta smeša je mešana tokom 3 h. Čvrsta materija je sakupljena filtracijom, isprana sa CH3OH (1.38 L) i osušena na 50° C tokom noći šta daje jedinjenje iz naslova (138.7 g, 81.5%) u formi ljubičaste čvrste materije;<1>H NMR (CDCl3) 3.89 (3H, s), 7.36-7.41 (3H, m), 7.49 (1H, s), 7.96 (1H, s), 8.34 (1H, s), 8.45 (1H, s); m/z: ES<+>MH<+>244.05.
Korisne kristalne polimorfne forme N-(2-{2-dimetilaminoetil-metilamino}-4-metoksi-5-{[4-(1-metilindol-3-il)pirimidin-2-il]amino}fenil)prop-2-enamida (ovde označene kao "Jedinjenje X") i njegova mesilatna so (ovde označena kao "Mesilatna so Y") Polimorfna Forma A Jedinjenja X
Inicijalno proizvedeno čvrsto Jedinjenje X je ispalo amorfno. Tada je pripremljena kristalna polimorfna Forma A Jedinjenja X uz pomoć mešanja određene količine Jedinjenja X (∼20 mg) sa cikloheksanom (∼2 mL) na 50° C uz mešanje na magnetnoj mešalici barem tokom ∼4 dana. Primerak je tada ostavljen da se ohladi, poklopac je odstranjen sa posude, a primerak je ostavljen da se suši u ambijentalnim uslovima sa ciljem da se dobije Forma A Jedinjenja X. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu A Jedinjenja X je prikazan na Slici 1. DSC termogram Forme A Jedinjenja X je prikazan na Slici 2 koja pokazuje inicijalni događaj sa početkom kod 35.1° C i šiljkom kod 50.1° C nakon čega sledi naknadna endoterma topljenja sa početkom kod 80.2° C i šiljkom kod 88.3° C.
1
Polimorfna Forma B Jedinjenja X
Inicijalno proizvedeno čvrsto Jedinjenje X je ispalo amorfno. Tada je pripremljena kristalna polimorfna Forma B Jedinjenja X uz pomoć rastvaranja određene količine amorfnog Jedinjenja X (∼20 mg) u minimalnoj potrebnoj količini EtOAc za potpuno rastvaranje. Ovaj rastvor je tada ostavljen da ispari do suvoće u ambijentalnim uslovima šta daje Formu B Jedinjenja X. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu B Jedinjenja X je prikazan na Slici 3. DSC termogram Forme B Jedinjenja X je prikazan na Slici 4 koja pokazuje endotermu topljenja sa početkom kod 94.1° C i šiljkom kod 113.6° C.
Polimorfna Forma C Jedinjenja X
Inicijalno proizvedeno čvrsto Jedinjenje X je ispalo amorfno. Tada je pripremljena kristalna polimorfna Forma C Jedinjenja X uz pomoć rastvaranja određene količine amorfnog Jedinjenja X (∼20 mg) u minimalnoj količini dietil etra koja je potrebna za potpuno rastvaranje. Ovaj rastvor je tada ostavljen da ispari do suvoće u ambijentalnim uslovima šta daje Formu C Jedinjenja X. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu C Jedinjenja X je prikazan na Slici 5. DSC termogram Forme C Jedinjenja X je prikazan na Slici 6 koja pokazuje endotermu topljenja sa početkom kod 91.1° C i šiljkom kod 103.8° C.
Polimorfna Forma D Jedinjenja X
Polimorfna Forma D Jedinjenje X, za koju se veruje da je kristalna monohidratna forma Jedinjenja X, je proizvedena uz pomoć postupka koji je opisan iznad kod Primera 28 -alternativna sinteza 1 & 2. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu D Jedinjenja X je prikazan na Slici 7. DSC termogram Forme C Jedinjenja X je prikazan na Slici 8 koja pokazuje endotermu topljenja sa početkom kod 108.8° C i šiljkom kod 117.7° C. Termogravimetrijska analiza pokazuje gubitak težine od približno 3.3% šta sugeriše monohidratizovanu formu (teoretski monohidrat = 3.5%). TGA termogram je prikazan na Slici 9.
Polimorfna Forma E Jedinjenja X
Polimorfna Forma E Jedinjenja X, za koju se veruje da je hidratizovana forma Jedinjenja X sa stehiometrijom od 1.25, je proizvedena uz pomoć pripreme guste smeše Jedinjenja X [154 g, pripremljeno kao šta je opisano u Primeru 28 (uz pomoć akriloil hlorida)] u smeši metanola (150 mL) i vode (600 mL). Dodano je 10 g Jedinjenja X (Forma D), a gusta smeša je mešana na s.t. tokom 4 dana. Nastala čvrsta materija je tada sakupljena filtracijom pa je isprana sa
1
vodom i ostavljena da se suši. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu E Jedinjenja X je prikazan na Slici 10. DSC termogram Forme E Jedinjenja X je prikazan u Slici 11 koja pokazuje inicijalni događaj sa početkom kod 66.1° C i šiljkom kod 77.2° C nakon čega sledi dodatni događaj sa početkom kod 93.6° C i sa šiljkom kod 101.5° C nakon čega sledi naknadna endoterma topljenja sa početkom kod 130.9° C i šiljkom kod 135.3° C. Termogravimetrijska analiza pokazuje gubitak težine od približno 4.7% šta sugeriše postojanje hidratizovane forme koja odgovara hidratu sa stehiometrijom od 1.25. (teoretski hidrat 1.25 = 4.3%). TGA termogram je prikazan na Slici 12.
Polimorfna Forma F Jedinjenja X
Polimorfna Forma F Jedinjenja X, za koju se veruje da je hidratizovana forma Jedinjenja X sa stehiometrijom od 0.25, je proizvedena uz pomoć sušenja male količine Forme E Jedinjenja X u vakuumskoj peći na s.t. do konstantne težine. Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu F Jedinjenja X je prikazan na Slici 13. DSC termogram Forme F Jedinjenja X je prikazan na Slici 14 koja pokazuje inicijalni događaj sa početkom kod 80.9° C i šiljkom kod 92.8° C nakon čega sledi naknadna endoterma topljenja sa početkom kod 130.7° C i šiljkom kod 135.7° C. Termogravimetrijska analiza pokazuje gubitak težine od približno 0.7% šta sugeriše postojanje delomično hidratizovane forme koja odgovara hidratu sa stehiometrijom od 0.25 (teoretski hidrat 0.25 = 0.89%). TGA termogram je prikazan na Slici 15.
Polimorfna Forma K Jedinjenja X
Ova polimorfna forma Jedinjenje X je proizvedena u skladu sa sledećim postupkom: rastvor akriloil hlorida (0.026 L, 318.48 mmol) u CH2Cl2(290 mL) je dodan kap po kap tokom 25 min u mešanu suspenziju N<1>-(2-(dimetilamino)etil)-5-metoksi-N<1>-metil-N<4>-(4-(1-metil-1H-indol-3-il)pirimidin-2-il)benzen-1,2,4-triamina (129 g, 289.52 mmol) u CH2Cl2(2.9 L) koja je ohlađena do -5° C. Korak dodavanja je egzoterman, ali smeša nije ostavljena da se ugreje za više od 1° C tokom dodavanja. Nastala smeša je mešana na -5° C tokom 2 h. Tada je dodan hladan zas. rastvor NaHCO3(1 L), kap po kap, uz održavanje temperature ispod -2° C. Smeša je tada ostavljena da se ugreje do s.t. Faze su razdvojene, a nastao organski rastvor je ispran sa vodom (100 mL) i zasićenim slanim rastvorom (100 mL). Rastvor je tada osušen (MgSO4) i koncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u 5% CH3OH u CH2Cl2(60 mL) pa je filtriran. Filtrirani rastvor je prečišćen sa FCC, eluiran sa 5% CH3OH u CH2Cl2, a čiste frakcije su spojene i koncentrisane šta daje kontaminirano Jedinjenje X u formi smeđe gume (96 g).
1
Dodatno prečišćavanje uz pomoć hiralne preparativne HPLC obezbeđuje primerak Jedinjenja X koji je pretvoren u gustu smešu uz pomoć CH3OH (50 mL). Nije sav raspoloživi materijal Jedinjenja X rastvoren. Tada je dodana voda (250 mL), a nastala smeša je ugušćena tokom noći uz pomoć magnetne mešalice. Nastala čvrsta materija je tada sakupljena filtracijom pa je osušena u vakuumskoj pećnici tokom vikenda šta daje 16.2 g Jedinjenja X kao polimorfna forma koja je ovde definisana kao Forma K.<1>H NMR: 2.20 (6H, s), 2.28 (2H, m), 2.71 (3H, s), 2.88 (2H, m), 3.85 (3H, s), 3.90 (3H, s), 5.76 (1H, d), 6.27 (1H, d), 6.43 (1H, m), 7.03 (1H, s), 7.15 (1H, m), 7.22 (2H, m), 7.51 (1H, d), 7.87 (1H, s), 8.23 (1H, m), 8.33 (1H, m), 8.68 (1H, s), 9.18 (1H, s), 10.16 (1H, s).
Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu K Jedinjenja X je prikazan u Slici 16. DSC termogram Forme K Jedinjenja X je prikazan na Slici 17 koja pokazuje endotermu topljenja sa početkom kod 129.3° C i šiljkom kod 133.4° C.
Polimorfna Forma A Mesilatne soli Y
Polimorfna Forma A Mesilatne soli Y je pripremljena uz pomoć postupka koji je opisan ranije (Primer 28A, Procedura 3). Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu A Mesilatne soli Y je prikazan na Slici 18. DSC termogram Forme A Mesilatne soli Y je prikazan na Slici 19 koja pokazuje inicijalni događaj sa početkom kod 28.1° C i šiljak kod 62.2° C nakon čega sledi naknadna endoterma topljenja sa početkom kod 258.8° C i šiljkom kod 262.0° C.
Polimorfna Forma B Mesilatne soli Y
Polimorfna Forma B Mesilatne soli Y je pripremljena uz pomoć postupka koji je opisan ranije (Primer 28A, Procedure 1 i 2). Obrazac difrakcije X-zraka na prahu za Formu B Mesilatne soli Y je prikazan na Slici 20. DSC termogram Forme B Mesilatne soli Y je prikazan na Slici 21 koja pokazuje endotermu topljenja sa početkom kod 245.0° C i šiljkom kod 246.5° C.
1

Claims (15)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje sa Formulom (I):
    naznačeno time što: G je izabran od 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il,1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il; R<1>je izabran od vodika, fluora, klora, metila i cijano; R<2>je izabran od metoksi i metila; i R<3>je izabran iz grupe koja sadrži (3R)-3-(dimetilamino)pirolidin-1-il, (3S)-3-(dimetil-amino)pirolidin-1-il,3-(dimetilamino)azetidin-1-il, [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino, [2-(metilamino)etil](metil)amino, 5-metil-2,5-diazaspiro[3.4]okt-2-il, (3aR,6aR)-5-metilheksa-hidro-pirolo[3,4-b]pirol-1(2H)-il, 1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il,4-metilpiperazin-1-il, 4-[2-(dimetilamino)-2-oksoetil]piperazin-1-il, metil[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]amino, metil[2-(morfolin-4-il)etil]amino i 4-[(2S)-2-aminopropanoil]piperazin-1-il; ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema zahtevu 1, naznačeno time što je G izabran od 1H-indol-3-il, 1-metil-1H-indol-3-il i pirazolo[1,5-a]piridin-3-il.
  3. 3. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema zahtevu 1 ili zahtevu 2 naznačeno time što R<1>je vodik.
  4. 4. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 3, naznačeno time što R<2>je metoksi.
  5. 5. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 4, naznačeno time što G je 1-metil-1H-indol-3-il.
  6. 6. Jedinjenje sa Formulom (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema zahtevu 1, naznačeno time što R<3>je [2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje sa Formulom (I) ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so kao šta se zahteva u bilo kojem od zahteva od 1 do 6 zajedno sa nekim farmaceutski prihvatljivim razređivačem ili nosačem.
  8. 8. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, naznačeno time, što se upotrebljava kao lek.
  9. 9. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, naznačeno time, što se koristi za tretman kancera.
  10. 10. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, naznačeno time, što se koristi za tretman nesitnoćelijskog kancera pluća.
  11. 11. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so kao šta se zahteva u bilo kojem od zahteva od 1 do 6, naznačeno time, što se upotrebljava u tretmanu bolesti koje su posredovane mutantom L858R EGFR i/ili T790M EGFR i/ili mutantom koji aktiviše deleciju Egzona 19.
  12. 12. Farmaceutski proizvod koji sadrži jedinjenje sa Formulom (I) ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, i dodatnu antitumorsku supstancu naznačen time, što se upotrebljava u objedinjenom tretmanu raka. 1 1
  13. 13. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 12, naznačen time što je kancer nesitnoćelijski kancer pluća.
  14. 14. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, i neka dodatna anti-tumorska supstancija, naznačeno time, što se upotrebljava u objedinjenom tretmanu kancera.
  15. 15. Jedinjenje sa Formulom (I), ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kom od zahteva 1 do 6, i neka dodatna anti-tumorska supstancija, naznačeno time, što se upotrebljava u objedinjenom tretmanu nesitnoćelijskog kancera pluća. 1 2
RS20200459A 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za lečenje raka RS60190B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161512061P 2011-07-27 2011-07-27
US201261591363P 2012-01-27 2012-01-27
EP17194307.9A EP3333161B1 (en) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS60190B1 true RS60190B1 (sr) 2020-06-30

Family

ID=46875901

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211378A RS62542B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati
RS20200459A RS60190B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za lečenje raka
RS20160094A RS54653B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za tretman raka
RS20171309A RS56679B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za tretman raka

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211378A RS62542B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160094A RS54653B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za tretman raka
RS20171309A RS56679B1 (sr) 2011-07-27 2012-07-25 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) pirimidinski derivati kao egfr modulatori korisni za tretman raka

Country Status (38)

Country Link
US (8) US8946235B2 (sr)
EP (7) EP4119551A1 (sr)
JP (3) JP5427321B2 (sr)
KR (3) KR101691268B1 (sr)
CN (7) CN104109151B (sr)
AR (1) AR087336A1 (sr)
AU (1) AU2012288626C1 (sr)
BR (4) BR122014026150B1 (sr)
CA (5) CA2881987C (sr)
CL (1) CL2013003281A1 (sr)
CO (1) CO6811863A2 (sr)
CR (1) CR20130629A (sr)
CY (4) CY1117431T1 (sr)
DK (5) DK3009431T3 (sr)
DO (1) DOP2013000263A (sr)
EA (3) EA033733B1 (sr)
EC (1) ECSP13013033A (sr)
ES (5) ES2564671T3 (sr)
GT (1) GT201300288A (sr)
HR (4) HRP20160135T1 (sr)
HU (4) HUE026429T2 (sr)
IL (6) IL229199A (sr)
LT (3) LT3686194T (sr)
ME (3) ME03785B (sr)
MX (3) MX2014000528A (sr)
MY (2) MY161925A (sr)
NI (1) NI201300134A (sr)
PE (1) PE20141700A1 (sr)
PH (2) PH12013502312A1 (sr)
PL (5) PL3333161T3 (sr)
PT (4) PT3686193T (sr)
RS (4) RS62542B1 (sr)
SG (5) SG10201910984XA (sr)
SI (4) SI2736895T1 (sr)
SM (3) SMT202000208T1 (sr)
TW (3) TWI555743B (sr)
UY (1) UY34219A (sr)
WO (1) WO2013014448A1 (sr)

Families Citing this family (223)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA029131B1 (ru) 2008-05-21 2018-02-28 Ариад Фармасьютикалз, Инк. Фосфорсодержащие производные в качестве ингибиторов киназы
US9273077B2 (en) 2008-05-21 2016-03-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus derivatives as kinase inhibitors
BRPI0918868B8 (pt) 2008-09-18 2021-05-25 Naurex Inc compostos moduladores do receptor de nmda e composições compreendendo os mesmos
EP2467387B1 (en) 2009-08-20 2015-01-07 Karus Therapeutics Limited Tricyclic heterocyclic compounds as phosphoinositide 3-kinase inhibitors.
CA2832504C (en) 2011-05-04 2019-10-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in egfr-driven cancers
JP5427321B2 (ja) 2011-07-27 2014-02-26 アストラゼネカ アクチボラグ ２−（２，４，５−置換−アニリノ）ピリミジン化合物
GB201204125D0 (en) 2012-03-08 2012-04-25 Karus Therapeutics Ltd Compounds
AU2013204563B2 (en) 2012-05-05 2016-05-19 Takeda Pharmaceutical Company Limited Compounds for inhibiting cell proliferation in EGFR-driven cancers
LT3514158T (lt) 2013-01-29 2023-02-10 Aptinyx Inc. Spirolaktaminiai nmda receptoriaus moduliatoriai ir jų panaudojimas
PE20151427A1 (es) * 2013-01-29 2015-10-10 Naurex Inc Moduladores de receptores nmda de espiro-lactama y sus usos
WO2014144326A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 G1 Therapeutics, Inc. Transient protection of normal cells during chemotherapy
US9611283B1 (en) 2013-04-10 2017-04-04 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting cell proliferation in ALK-driven cancers
WO2014210354A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Genentech, Inc. Azaindazole compounds as inhibitors of t790m containing egfr mutants
CN104292142B (zh) * 2013-07-17 2019-05-14 天津大地康和医药技术有限公司 一种n-芳基杂环丁烷脱芳基方法
CN111285813A (zh) 2013-08-23 2020-06-16 润新生物公司 化学实体、组合物和方法
AR098136A1 (es) 2013-10-21 2016-05-04 Merck Patent Gmbh Compuestos de heteroarilo como inhibidores de btk y usos de los mismos
GB201400034D0 (en) 2014-01-02 2014-02-19 Astrazeneca Ab Pharmaceutical Compositions comprising AZD9291
CN104761544B (zh) * 2014-01-03 2019-03-15 北京轩义医药科技有限公司 Egfr酪氨酸激酶的临床重要突变体的选择性抑制剂
GB201402431D0 (en) 2014-02-12 2014-03-26 Karus Therapeutics Ltd Compounds
CN104860941B (zh) * 2014-02-25 2017-03-22 上海海雁医药科技有限公司 2,4‑二取代苯‑1,5‑二胺衍生物及其应用以及由其制备的药物组合物和药用组合物
PL3125885T3 (pl) * 2014-04-04 2021-12-06 Astrazeneca Ab Kombinacja inhibitora EGFR i inhibitora MEK do zastosowania w leczeniu nowotworu złośliwego z mutacją NRAS
CA2946538A1 (en) 2014-04-04 2015-10-08 Del Mar Pharmaceuticals Use of dianhydrogalactitol and analogs or derivatives thereof to treat non-small-cell carcinoma of the lung and ovarian cancer
WO2015175632A1 (en) * 2014-05-13 2015-11-19 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl compounds for kinase inhibition
CN111875585B (zh) * 2014-06-12 2023-06-23 上海艾力斯医药科技股份有限公司 一类激酶抑制剂
KR102628356B1 (ko) * 2014-06-19 2024-01-24 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 키나제 저해를 위한 헤테로아릴 화합물
CN105254615B (zh) * 2014-07-11 2017-02-22 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 苯胺嘧啶衍生物及其在制备抗恶性肿瘤药物中的用途
CN105315285B (zh) * 2014-07-25 2017-12-08 上海海雁医药科技有限公司 2,4‑二取代7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶衍生物、其制法与医药上的用途
CN105315259B (zh) * 2014-07-29 2018-03-09 上海艾力斯医药科技有限公司 吡啶胺基嘧啶衍生物、其制备方法及应用
JO3589B1 (ar) 2014-08-06 2020-07-05 Novartis Ag مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها
CN104140418B (zh) * 2014-08-15 2016-08-24 常州润诺生物科技有限公司 2-(2，4，5-取代苯胺)嘧啶衍生物及其用途
WO2016029839A1 (zh) * 2014-08-25 2016-03-03 四川海思科制药有限公司 一种（取代的苯基）（取代的嘧啶）胺基衍生物及其制备方法和药物用途
CN104356040A (zh) * 2014-09-17 2015-02-18 爱斯特（成都）生物制药有限公司 一种1-二苯甲基-3-羟基氮杂环丁烷盐酸盐的制备方法
CN105461695B (zh) * 2014-09-29 2018-03-27 齐鲁制药有限公司 嘧啶或三嗪衍生物及其制备方法和用途
CN105524068B (zh) * 2014-09-30 2017-11-24 上海海雁医药科技有限公司 氮杂双环衍生物、其制法与医药上的用途
CN105237515B (zh) * 2014-10-10 2018-06-05 益方生物科技（上海）有限公司 氘代嘧啶类化合物、其制备方法、药物组合物和用途
DK3205650T3 (da) * 2014-10-11 2021-09-13 Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd Egfr-hæmmer og fremstilling og anvendelse deraf
PT4421069T (pt) 2014-10-13 2026-01-12 Yuhan Corp Compostos e composições para modular atividades da cinase do egfr mutante
CN105085489B (zh) * 2014-11-05 2019-03-01 益方生物科技（上海）有限公司 嘧啶或吡啶类化合物、其制备方法和医药用途
US10507210B2 (en) * 2014-12-03 2019-12-17 Auckland Uniservices Limited Kinase inhibitor prodrug for the treatment of cancer
US10590111B2 (en) 2014-12-11 2020-03-17 Beta Pharma, Inc. Substituted 2-anilinopyrimidine derivatives as EGFR modulators
CN107406442B (zh) 2014-12-23 2021-08-17 达纳－法伯癌症研究所公司 作为egfr抑制剂的新的嘧啶和治疗病症的方法
CN104788427B (zh) * 2015-02-05 2017-05-31 上海泓博智源医药股份有限公司 3‑(2‑嘧啶氨基)苯基丙烯酰胺类化合物及其应用
CN104961731A (zh) * 2015-02-05 2015-10-07 苏州晶云药物科技有限公司 一种表皮生长因子受体抑制剂的磷酸盐、其晶型及制备方法
CN107613769A (zh) 2015-02-17 2018-01-19 润新生物公司 某些化学实体、组合物和方法
CN107973791B (zh) 2015-04-29 2020-04-07 南京圣和药业股份有限公司 稠环或三环芳基嘧啶化合物用作激酶抑制剂
TWI685494B (zh) * 2015-04-29 2020-02-21 大陸商廣東眾生藥業股份有限公司 稠環或三環芳基嘧啶化合物用作激酶抑制劑
CN104817541B (zh) * 2015-05-11 2017-06-16 苏州东南药业股份有限公司 一种抗肿瘤药物的合成方法
HK1251567A1 (zh) * 2015-05-13 2019-02-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. 用於激酶抑制的杂芳基化合物
WO2016185333A1 (en) 2015-05-15 2016-11-24 Novartis Ag Methods for treating egfr mutant cancers
CN104910049B (zh) 2015-06-16 2016-06-29 苏州明锐医药科技有限公司 Azd9291中间体及其制备方法
RU2734849C2 (ru) * 2015-07-16 2020-10-23 Чиа Тай Тяньцин Фармасьютикал Груп Ко., Лтд. Производные анилинпиримидина и их применения
WO2017015363A1 (en) * 2015-07-20 2017-01-26 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Novel pyrimidines as egfr inhibitors and methods of treating disorders
CN107531678B (zh) * 2015-07-24 2020-12-22 上海海雁医药科技有限公司 Egfr抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用
CN105001208A (zh) * 2015-08-06 2015-10-28 南京雷科星生物技术有限公司 一种表皮生长因子受体egfr抑制剂及其制备方法与用途
GB201514760D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds and method of use
GB201514758D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Formulation
GB201514751D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds
GB201514754D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds
CN106117185B (zh) * 2015-08-31 2017-11-07 广州必贝特医药技术有限公司 2,4‑二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用
KR102051609B1 (ko) * 2015-08-31 2019-12-03 우시 상량 바이오테크놀로지 씨오., 엘티디. 2-아릴아미노피리딘, 피리미딘 또는 트리아진 유도체 및 그 제조방법과 사용
CN106478605A (zh) * 2015-09-02 2017-03-08 上海页岩科技有限公司 嘧啶类化合物、其制备方法和医药用途
RU2606949C9 (ru) * 2015-11-19 2018-03-14 ЗАО "Р-Фарм" Замещенные N-{ 3-[4-(1-метил-1Н-индол-3-ил)пиримидин-2-иламино]-4-метоксифенил} -амиды в качестве модуляторов EGFR, предназначенные для лечения рака
RU2603960C1 (ru) * 2015-11-19 2016-12-10 Закрытое акционерное общество "Р-Фарм" (ЗАО "Р-Фарм") Дихлорацетат n1,n2-дизамещенного n4-[4-(1-метил-1н-индол-3-ил)-пиримидин-2-ил]-5-метоксибензол-1,2,4-триамина в качестве модулятора egfr для лечения рака
CN106749267B (zh) * 2015-11-23 2020-08-21 南京圣和药业股份有限公司 新的表皮生长因子受体抑制剂及其应用
CN106810553B (zh) * 2015-11-30 2020-03-17 江苏正大丰海制药有限公司 3-(4,5-取代氨基嘧啶)苯基衍生物及其应用
EP3383877B1 (en) * 2015-12-03 2021-09-15 Zhejiang Jianfeng-Yien Biotechnology Co., Ltd. Heterocycle compounds and uses thereof
JP6978002B2 (ja) * 2015-12-03 2021-12-08 チョーチアン チアンフェン−イエン バイオテクノロジー カンパニー リミテッド チエノ−ピリミジン誘導体およびその使用
CN105601620A (zh) * 2015-12-25 2016-05-25 北京康立生医药技术开发有限公司 一种甲磺酸迈瑞替尼的制备方法
CN106928150B (zh) 2015-12-31 2020-07-31 恩瑞生物医药科技（上海）有限公司 丙烯酰胺苯胺衍生物及其药学上的应用
JP2019501222A (ja) 2016-01-07 2019-01-17 シーエス ファーマテック リミテッド Ｅｇｆｒチロシンキナーゼの臨床的に重要な変異体の選択的阻害薬
CN105646454B (zh) * 2016-01-19 2018-05-08 浙江大学 含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物及制备和应用
CN108530429B (zh) * 2016-01-22 2021-04-27 焦玉奇 2-(2,4,5-取代苯胺)嘧啶衍生物
CN106995437A (zh) * 2016-01-22 2017-08-01 齐鲁制药有限公司 取代吲哚或吲唑嘧啶衍生物及其制备方法和用途
TWI745345B (zh) 2016-02-01 2021-11-11 瑞典商阿斯特捷利康公司 製備奧希替尼（osimertinib，azd9291）或其鹽及「azd9291苯胺」或其鹽的改良方法
CN107043368B (zh) * 2016-02-05 2020-07-31 齐鲁制药有限公司 芳胺嘧啶化合物及其盐的结晶
CN107043369A (zh) * 2016-02-06 2017-08-15 焦玉奇 2‑(2,4,5‑取代苯胺)嘧啶衍生物
CN107098887B (zh) * 2016-02-22 2019-08-09 复旦大学 嘧啶类化合物
CN105585557B (zh) * 2016-02-25 2018-06-22 清华大学 用于靶向治疗癌症的egfr抑制剂及其制备方法与应用
CN105777716B (zh) * 2016-02-25 2018-04-10 清华大学 一种用于靶向治疗癌症的egfr抑制剂及其制备方法与应用
CN105646467B (zh) * 2016-02-25 2018-07-20 黄燕鸽 一种抗癌化合物奥美替尼及其合成方法
CN107163026B (zh) * 2016-03-07 2019-07-02 上海艾力斯医药科技有限公司 吡啶胺基嘧啶衍生物的盐及其制备方法和应用
CN107163027B (zh) * 2016-03-07 2019-11-05 上海艾力斯医药科技有限公司 吡啶胺基嘧啶衍生物甲磺酸盐的结晶形式及其制备和应用
CN107188888A (zh) * 2016-03-15 2017-09-22 罗欣生物科技（上海）有限公司 一种制备甲磺酸迈瑞替尼的方法
KR102765652B1 (ko) * 2016-03-22 2025-02-11 장쑤 한서 파마슈티칼 그룹 캄파니 리미티드 Egfr 억제제 유리 염기 또는 산 염 다결정질형, 이의 제조방법 및 응용
BR112018072887A2 (pt) 2016-05-11 2019-03-06 Beta Pharma, Inc. método de tratamento de câncer de cérebro em um indivíduo, e utilização de um composto
KR102128675B1 (ko) 2016-05-19 2020-06-30 앱티닉스 인크. 스피로-락탐 nmda 수용체 조정제 및 그의 용도
WO2017201285A1 (en) 2016-05-19 2017-11-23 Aptinyx Inc. Spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
MX383920B (es) * 2016-05-26 2025-03-14 Recurium Ip Holdings Llc Compuestos inhibidores de egfr.
EA201892661A1 (ru) 2016-06-17 2019-07-31 Бета Фарма, Инк. Фармацевтические соли n-(2-(2-(диметиламино)этокси)-4-метокси-5-((4-(1-метил-1h-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)фенил)акриламида и их кристаллические формы
CN107522690B (zh) * 2016-06-20 2022-08-05 海南先声药业有限公司 一种Osimertinib的制备方法
CN107540661A (zh) * 2016-06-24 2018-01-05 正大天晴药业集团股份有限公司 作为egfr抑制剂的苯胺嘧啶化合物的结晶
CN107663207B (zh) * 2016-07-27 2021-07-30 南京圣和药业股份有限公司 一种egfr激酶抑制剂的甲磺酸盐结晶及制备方法
CN107663208B (zh) * 2016-07-27 2021-10-15 南京圣和药业股份有限公司 一种新型egfr激酶抑制剂的药用盐及其制备方法与用途
EP3490974B1 (en) 2016-08-01 2023-12-06 Tenacia Biotechnology (Hong Kong) Co., Limited Spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
AU2017306164B2 (en) 2016-08-01 2021-10-21 Tenacia Biotechnology (Hong Kong) Co., Limited Spiro-lactam NMDA modulators and methods of using same
WO2018026792A1 (en) 2016-08-01 2018-02-08 Aptinyx Inc. Spiro-lactam and bis-spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
IL286107B2 (en) 2016-08-01 2024-09-01 Aptinyx Inc Spiro-lactam nmda receptor modulators and usesthereof
SG10202101055VA (en) 2016-08-01 2021-03-30 Aptinyx Inc Spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
CA3033370A1 (en) 2016-08-15 2018-02-22 Neupharma, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
CN106366022B (zh) * 2016-08-19 2018-03-13 上海工程技术大学 一种用于制备azd9291的中间体及其制备方法和应用
CN106366072B (zh) * 2016-08-19 2018-12-07 上海工程技术大学 一种azd9291的制备方法
CN106397407B (zh) * 2016-08-31 2018-09-04 浙江科聚化工有限公司 抗肿瘤药物azd9291衍生物的制备方法
CN106432231B (zh) * 2016-09-09 2018-06-12 无锡佰翱得生物科学有限公司 Azd9291的药用盐、及其晶型和制备方法
US10654851B2 (en) * 2016-09-19 2020-05-19 Nanjing Chuangte Pharmaceutical Technology Co., Ltd. Deuterated 3-(4,5-substituted aminopyrimidine)phenyl derivatives and use thereof
CN107955019B (zh) * 2016-10-17 2021-09-14 广东众生药业股份有限公司 一种egfr抑制剂的盐型、晶型及其制备方法
WO2018073839A1 (en) 2016-10-18 2018-04-26 Mylan Laboratories Limited Amorphous osimertinib mesylate, processes for its preparation and solid amorphous dispersions thereof
AU2017345574A1 (en) * 2016-10-19 2019-05-23 United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs Compositions and methods for treating cancer
CN106496196B (zh) * 2016-10-20 2019-07-02 南京雷科星生物技术有限公司 一种喹唑啉、吡啶并嘧啶或则双并嘧啶衍生物表皮生长因子抑制剂及其制备方法与用途
CN106543060B (zh) * 2016-10-31 2018-11-06 湖南欧亚药业有限公司 一种奥斯替尼甲磺酸盐的制备方法
CN108299419B (zh) * 2017-01-11 2022-04-26 南京圣和药业股份有限公司 一种新型egfr激酶抑制剂的几种新晶型及其制备方法
PL3514153T3 (pl) 2017-01-26 2022-01-17 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Związek pirymidynowy i jego zastosowanie farmaceutyczne
WO2018156812A1 (en) * 2017-02-22 2018-08-30 G1 Therapeutics, Inc. Treatment of egfr-driven cancer with fewer side effects
US11395821B2 (en) 2017-01-30 2022-07-26 G1 Therapeutics, Inc. Treatment of EGFR-driven cancer with fewer side effects
TWI796326B (zh) 2017-03-24 2023-03-21 日商第一三共股份有限公司 含有ａｘｌ抑制劑與ｅｇｆｒ酪胺酸激酶抑制藥的醫藥品及其用途
CN106883216B (zh) * 2017-04-06 2020-03-13 张家港威胜生物医药有限公司 一种奥希替尼的制备方法
CN108503627A (zh) * 2017-04-19 2018-09-07 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 用作egfr抑制剂的2,4-二取代苯-1,5-二胺衍生物及其应用
AR111469A1 (es) * 2017-04-21 2019-07-17 Yuhan Corp Sal de un compuesto del derivado de aminopiridina, una forma cristalina de la misma, y un proceso para preparar la misma
CN106967050A (zh) * 2017-05-11 2017-07-21 北京工业大学 一种azd9291的制备方法
CN108929311B (zh) * 2017-05-22 2020-07-28 焦玉奇 2-(2,4,5-取代苯胺)嘧啶衍生物
WO2018214886A1 (zh) 2017-05-24 2018-11-29 浙江同源康医药股份有限公司 一种氘代azd9291的晶型、制备方法及用途
CN107176954B (zh) * 2017-06-02 2019-01-11 无锡双良生物科技有限公司 一种egfr抑制剂的药用盐及其晶型、制备方法和应用
CN108707139B (zh) * 2017-06-13 2021-04-06 北京鞍石生物科技有限责任公司 氨基嘧啶类化合物及其制备方法和应用
BR112019026483A2 (pt) 2017-06-16 2020-07-14 Beta Pharma, Inc. formulação farmacêutica de n-(2-(2-(dimetilamina)etoxi)-4-metoxi-5-((4-(1-metil-1h-indol-3-il)pirimidin-2-il)amina)fenil)acrilamida e seus sais
WO2019001425A1 (zh) * 2017-06-27 2019-01-03 浙江同源康医药股份有限公司 一种氘代奥斯替尼衍生物及其应用
CN107095873A (zh) * 2017-06-28 2017-08-29 卢凯华 具有低耐药性的抗肺癌靶向药物组合物
CN107216313B (zh) * 2017-06-29 2019-11-19 山东四环药业股份有限公司 一种抗肿瘤药物azd9291的制备方法
WO2019010619A1 (zh) * 2017-07-10 2019-01-17 焦玉奇 2-(2,4,5-取代苯胺)嘧啶衍生物
MY201038A (en) 2017-07-28 2024-01-31 Yuhan Corp Intermediates useful for the synthesis of a selective inhibitor against protein kinase and processes for preparing the same
LT3658552T (lt) * 2017-07-28 2023-11-27 Yuhan Corporation N-(5-((4-(4-((dimetilamino)metil)-3-fenil-1h-pirazol-1-il)pirimidin-2-il) amino)-4-metoksi-2-morfolinofenil)akrilamido gamybos būdas, vykdant reakciją tarp atitinkamo amino ir 3-halogen-propionilo chlorido
CN107266426A (zh) * 2017-08-15 2017-10-20 南通因诺威医药科技有限公司 2‑氨烃基嘧啶类化合物及其制备方法和用途
US11471457B2 (en) 2017-08-21 2022-10-18 Eli Lilly And Company Method of treating epithelial growth factor receptor (EGFR) T790M-positive non-small cell lung cancer by administering a combination of a VEGFR-2 antibody and osimertinib
CN109485638B (zh) * 2017-09-12 2020-07-17 新发药业有限公司 一种奥希替尼中间体的制备方法
CN107915725B (zh) * 2017-10-20 2023-06-27 复旦大学 Azd9291的药用盐及其制备方法
WO2019099873A1 (en) * 2017-11-17 2019-05-23 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Cancer therapy by degrading dual mek signaling
BR112020013915A2 (pt) 2018-01-08 2020-12-01 G1 Therapeutics, Inc. regime de dosagem para liberação, e, método para tratar um câncer dependente de replicação de cdk4/6 em um humano
WO2019152696A1 (en) * 2018-01-31 2019-08-08 Aptinyx Inc. Spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
JP7210599B2 (ja) 2018-01-31 2023-01-23 アプティニックス インコーポレイテッド スピロラクタム系ｎｍｄａ受容体修飾因子およびその使用
CA3090528A1 (en) * 2018-02-08 2019-08-15 Neupharma, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
TWI868714B (zh) 2018-02-12 2025-01-01 瑞典商阿斯特捷利康公司 用於治療非小細胞肺癌之奧希替尼
JP2021514398A (ja) * 2018-02-20 2021-06-10 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド Ｅｇｆｒ阻害剤の組合せ医薬製剤およびその使用法
JP2021514011A (ja) * 2018-02-20 2021-06-03 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド Ｅｇｆｒ阻害剤の組合せ医薬製剤およびその使用法
CN108250187B (zh) * 2018-03-01 2021-01-05 中国科学院上海药物研究所 吲哚-1-碳酸酯类化合物、其制备方法和应用
CN108191861B (zh) * 2018-03-01 2020-10-02 天津大学 N-[5-(嘧啶-2-氨基)-2,4-二取代苯基]-反式-2,4-戊二烯酰胺
WO2019175093A1 (en) 2018-03-12 2019-09-19 Astrazeneca Ab Method for treating lung cancer
CN109666024A (zh) * 2018-03-20 2019-04-23 兰州大学 2-氧嘧啶类化合物及其制备方法和用途
CN108218839A (zh) * 2018-03-20 2018-06-29 上药康丽（常州）药业有限公司 一种抗肿瘤药物azd9291的制备方法
CN108484579A (zh) * 2018-03-28 2018-09-04 黑龙江鑫创生物科技开发有限公司 一种微通道反应器合成奥希替尼中间体的方法
CN108530450B (zh) * 2018-05-03 2021-03-30 赖建智 具有egfr抑制活性的化合物、制备方法及其在疾病治疗中的应用
MX2020012063A (es) 2018-05-14 2021-04-13 Takeda Pharmaceuticals Co Sales farmaceuticas de derivados de pirimidina y metodo de tratamiento de trastornos.
CN112119074A (zh) * 2018-05-15 2020-12-22 益方生物科技（上海）有限公司 Egfr抑制剂
CN110606842B (zh) * 2018-06-15 2021-06-01 上海艾力斯医药科技股份有限公司 吡啶胺基嘧啶衍生物的制备方法及其中间体
CN110698461B (zh) * 2018-07-09 2024-04-05 上海翰森生物医药科技有限公司 第三代egfr抑制剂的制备方法
KR101954370B1 (ko) 2018-07-25 2019-03-05 한미약품 주식회사 피리미딘 화합물 및 이를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물
AU2019354771A1 (en) 2018-10-05 2021-04-01 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Combination therapy for the treatment of uveal melanoma
CN109134435B (zh) * 2018-10-29 2023-01-03 湖南大学 一种奥希替尼azd9291的合成方法
CN111233774B (zh) * 2018-11-28 2023-04-14 鲁南制药集团股份有限公司 一种胺基嘧啶类化合物
KR20210107069A (ko) 2018-12-21 2021-08-31 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항체-약물 컨쥬게이트와 키나아제 저해제의 조합
CN113227073B (zh) * 2019-01-05 2022-09-16 山东轩竹医药科技有限公司 Egfr酪氨酸激酶的选择性抑制剂的盐及其晶型
CN111410651B (zh) * 2019-01-05 2021-06-04 山东轩竹医药科技有限公司 酪氨酸激酶抑制剂的盐及其晶型
PH12021551985A1 (en) 2019-02-22 2022-08-22 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd Pharmaceutical composition comprising flt3 inhibitor and hypomethylating agent for treating acute myeloid leukemia
CN113773304B (zh) * 2019-02-25 2023-03-10 江苏豪森药业集团有限公司 抗耐药抗肿瘤egfr抑制剂的制备方法
CN111606889B (zh) * 2019-02-25 2023-03-07 上海翰森生物医药科技有限公司 4-(1-环丙基-1h-吲哚-3-基)-n-苯基嘧啶-2-胺衍生物的制备方法
CN109928956B (zh) * 2019-02-27 2020-10-13 杭州偶联医药科技有限公司 一种靶向泛素化降解egfr蛋白的化合物及其药物组合物和应用
WO2020192302A1 (zh) * 2019-03-27 2020-10-01 广州必贝特医药技术有限公司 含嘧啶的三取代咪唑类化合物及其应用
CN111747950B (zh) 2019-03-29 2024-01-23 深圳福沃药业有限公司 用于治疗癌症的嘧啶衍生物
MX2021011810A (es) 2019-03-29 2021-10-26 Astrazeneca Ab Osimertinib para su uso en el tratamiento de cancer de pulmon de celulas no peque?as.
WO2020206603A1 (zh) * 2019-04-09 2020-10-15 河南真实生物科技有限公司 2-(2，4，5-取代苯氨基)嘧啶衍生物及其晶形b
CN109942550A (zh) * 2019-04-15 2019-06-28 广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心） 11c标记的egfr正电子示踪剂及其制备方法和应用
AU2020264808B2 (en) 2019-05-01 2025-01-02 Clexio Biosciences Ltd. Methods of treating pruritus
MA55909A (fr) 2019-05-05 2022-03-16 Qilu Regor Therapeutics Inc Inhibiteurs de cdk
US20220340547A1 (en) * 2019-05-22 2022-10-27 Shanghi Hansoh Biosoh Biomedical Co., Ltd. Indole derivative-containing inhibitor, preparation method therefor and application thereof
US12350265B2 (en) 2019-06-27 2025-07-08 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Pharmaceutical composition for treating acute myeloid leukemia, containing FLT3 inhibitor and chemotherapeutic agents
CN110283162B (zh) * 2019-07-09 2022-04-05 辽宁大学 一种表皮生长因子受体抑制剂及其应用
CN110483486B (zh) * 2019-09-17 2024-01-26 鲁南制药集团股份有限公司 一种奥西替尼酮咯酸盐晶型及其制备方法
US12012413B2 (en) 2019-11-11 2024-06-18 Tenacia Biotechnology (Hong Kong) Co., Limited Methods of treating painful diabetic peripheral neuropathy
WO2021094379A1 (en) 2019-11-12 2021-05-20 Astrazeneca Ab Epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors for the treatment of cancer
WO2021111462A1 (en) * 2019-12-02 2021-06-10 Natco Pharma Limited An improved process for the preparation of osimertinib mesylate
CA3164995A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
JP2023510426A (ja) 2020-01-20 2023-03-13 アストラゼネカ・アクチエボラーグ 癌を治療するための上皮細胞増殖因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤
IL272441B (en) * 2020-02-03 2021-08-31 Ottek Ltd System and method for driving an endoscope
CN113372331B (zh) * 2020-03-10 2023-09-12 鲁南制药集团股份有限公司 一种奥希替尼一水合物新晶型
CN113372332B (zh) * 2020-03-10 2023-09-12 鲁南制药集团股份有限公司 一种奥希替尼新晶型
CN111303123B (zh) * 2020-03-31 2021-08-31 南京雷正医药科技有限公司 2-(2,4,5-取代苯胺基)嘧啶化合物及其应用
CN111285852A (zh) * 2020-04-02 2020-06-16 广州博济医药生物技术股份有限公司 氘代奥希替尼药用盐的晶型及其制备方法
CN111303124A (zh) * 2020-04-08 2020-06-19 北京赛思源生物医药技术有限公司 一种甲磺酸奥希替尼的新晶体
US20210369709A1 (en) * 2020-05-27 2021-12-02 Astrazeneca Ab EGFR TKIs FOR USE IN THE TREATMENT OF NON-SMALL CELL LUNG CANCER
US10988479B1 (en) 2020-06-15 2021-04-27 G1 Therapeutics, Inc. Morphic forms of trilaciclib and methods of manufacture thereof
CN113801101A (zh) * 2020-06-15 2021-12-17 鲁南制药集团股份有限公司 Azd9291-2-酮戊二酸盐及其制备方法
CN113929663B (zh) * 2020-06-29 2025-06-17 鲁南制药集团股份有限公司 Azd9291-2-吲哚甲酸盐及其制备方法
CN113929664A (zh) * 2020-07-13 2022-01-14 鲁南制药集团股份有限公司 Azd9291-3,5-吡啶二羧酸盐及其制备方法
CN113968845A (zh) * 2020-07-24 2022-01-25 鲁南制药集团股份有限公司 Azd9291-没食子酸盐及其制备方法
US20230321098A1 (en) 2020-08-25 2023-10-12 Loxo Oncology, Inc. Osimertinib and selpercatinib combinations for the treatment of egfr- and ret-associated cancers
EP4217071A1 (en) 2020-09-23 2023-08-02 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
CN112430231B (zh) * 2020-11-06 2022-09-30 德州德药制药有限公司 一种azd9291的工业化制备方法
CN112358468B (zh) * 2020-11-10 2022-03-22 德州德药制药有限公司 一种工业化合成azd9291的方法
WO2022105882A1 (zh) * 2020-11-19 2022-05-27 上海翰森生物医药科技有限公司 一种含吲哚类衍生物的盐、晶型及其制备方法和应用
US11780824B2 (en) * 2020-12-16 2023-10-10 Scinopharm Taiwan, Ltd. Process for preparing osimertinib or a salt thereof
WO2022133345A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
CN117479943A (zh) 2021-06-15 2024-01-30 基因泰克公司 组合疗法中的egfr抑制剂和perk活化剂及其用于治疗癌症的用途
CN113387935B (zh) * 2021-07-23 2022-06-10 苏州雅深智慧科技有限公司 抑制三突变表皮生长因子受体酪氨酸激酶的化合物及用途
MX2024000261A (es) * 2021-08-06 2024-03-14 Abbisko Therapeutics Co Ltd Derivado de pirimidina o piridina, metodo de preparacion del mismo y aplicacion del mismo en la industria farmaceutica.
CA3229553A1 (en) * 2021-09-02 2023-03-09 Synthon B.V. A process for making osimertinib
CN113683612B (zh) * 2021-09-07 2022-06-17 山东铂源药业股份有限公司 一种帕布昔利布的制备方法
JP7702205B2 (ja) * 2021-09-15 2025-07-03 株式会社東芝 新規アミン化合物、酸性ガス吸収剤、酸性ガスの除去方法及び酸性ガス除去
CN116099006A (zh) * 2021-11-10 2023-05-12 上海交通大学医学院附属新华医院 奥西替尼及其药学上可接受的盐在制备急性髓细胞白血病药物中的应用
CN114014847B (zh) * 2021-12-08 2023-11-03 滨州医学院 一种含苯并噻吩嘧啶衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
CN114380806B (zh) * 2022-03-24 2022-06-10 中国药科大学 2-氨基-4-吲哚基嘧啶类化合物及其制备方法与应用
KR20240168418A (ko) 2022-03-31 2024-11-29 아스트라제네카 아베 암 치료를 위한 akt 억제제와 조합된 표피 성장 인자 수용체(egfr) 티로신 키나아제 억제제
AR128999A1 (es) 2022-04-07 2024-07-03 Astrazeneca Ab Proceso mejorado para la fabricación de osimertinib
US20240116926A1 (en) 2022-04-28 2024-04-11 Astrazeneca Ab Heteroaromatic compounds
WO2023209084A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Astrazeneca Ab Condensed bicyclic heteroaromatic compounds and their use in the treatment of cancer
WO2023209088A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Astrazeneca Ab Bicyclic heteroaromatic compounds and their use in the treatment of cancer
WO2023209090A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Astrazeneca Ab Bicyclic heteroaromatic compounds and their application in the treatment of cancer
WO2023213850A1 (en) * 2022-05-03 2023-11-09 Deutsches Zentrum Für Neurodegenerative Erkrankungen E. V. (Dzne) Inhibitors of tau proteins
KR20250029133A (ko) 2022-06-27 2025-03-04 아스트라제네카 아베 암 치료를 위한 표피성장인자 수용체 티로신 키나제 억제제를 포함하는 조합물
WO2024003241A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Astrazeneca Ab Treatment for immuno-oncology resistant subjects with an anti pd-l1 antibody an antisense targeted to stat3 and an inhibitor of ctla-4
TW202421146A (zh) 2022-07-08 2024-06-01 瑞典商阿斯特捷利康公司 用於治療癌症的上皮生長因子受體酪胺酸激酶抑制劑與ｈｇｆ受體抑制劑的組合
CN115650974B (zh) * 2022-08-04 2024-06-18 天津大学 N-[5-(嘧啶-2-氨基)-2,4-二取代苯基]-顺式戊二烯酰胺衍生物及应用
CA3267911A1 (en) * 2022-09-19 2024-03-28 Advenchen Pharmaceuticals, LLC NEW PYRIMIDINE COMPOUND USED AS A KINASE INHIBITOR WITH BIOLOGICAL ACTIVITY ON EGFR MUTANTS
CN116655601B (zh) * 2023-06-05 2025-08-29 河南应用技术职业学院 一种奥希替尼的合成方法
WO2025124936A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Synthon B.V. A process for making osimertinib
WO2025245045A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 The Regents Of The University Of California Methods of treating lung cancer
WO2026009146A1 (en) 2024-07-01 2026-01-08 Hetero Labs Limited Benzimidazole compounds as egfr inhibitors

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9523675D0 (en) 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
AU719434B2 (en) 1996-02-13 2000-05-11 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives as VEGF inhibitors
ES2169355T3 (es) 1996-03-05 2002-07-01 Astrazeneca Ab Derivados de 4-anilinoquinazolina.
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
MXPA01008182A (es) 1999-02-10 2003-08-20 Astrazeneca Ab Derivados de quinazolina como inhibidores de angiotensina.
EP1289952A1 (en) 2000-05-31 2003-03-12 AstraZeneca AB Indole derivatives with vascular damaging activity
UA73993C2 (uk) 2000-06-06 2005-10-17 Астразенека Аб Хіназолінові похідні для лікування пухлин та фармацевтична композиція
MXPA02012903A (es) 2000-07-07 2004-07-30 Angiogene Pharm Ltd Derivados de colquinol como inhibidores de angiogenesis.
CA2411160A1 (en) 2000-07-07 2002-01-17 Angiogene Pharmaceuticals Limited Colchinol derivatives as vascular damaging agents
US6881737B2 (en) * 2001-04-11 2005-04-19 Amgen Inc. Substituted triazinyl acrylamide derivatives and methods of use
DE10237722A1 (de) * 2002-08-17 2004-08-19 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Indol- oder Benzimidazolderivate zur Modulation der IKappaB-Kinase
WO2006068826A2 (en) * 2004-12-21 2006-06-29 Smithkline Beecham Corporation 2-pyrimidinyl pyrazolopyridine erbb kinase inhibitors
GB0500492D0 (en) 2005-01-11 2005-02-16 Cyclacel Ltd Compound
KR101313702B1 (ko) 2005-02-03 2013-10-04 와이어쓰 제피티니브 및/또는 에를로티니브 내성암 치료용 약제학적 조성물
AR056763A1 (es) 2005-11-03 2007-10-24 Vertex Pharma Aminopirimidinas sustituidas con tiazol o pirazol,utiles como agentes anticancer y composiciones farmaceuticas que las contienen.
GB0524436D0 (en) 2005-11-30 2006-01-11 Novartis Ag Organic compounds
US7807673B2 (en) * 2005-12-05 2010-10-05 Glaxosmithkline Llc 2-pyrimidinyl pyrazolopyridine ErbB kinase inhibitors
JP2009541318A (ja) 2006-06-22 2009-11-26 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド チロシンキナーゼ阻害剤
WO2008009458A1 (en) * 2006-07-21 2008-01-24 Novartis Ag 2, 4 -di (arylaminio) -pyrimidine-5-carboxamide compounds as jak kinases inhibitors
TWI475996B (zh) 2007-10-19 2015-03-11 Celgene Avilomics Res Inc 雜芳基化合物及其用途
US7989465B2 (en) * 2007-10-19 2011-08-02 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
DK2361248T3 (en) 2008-06-27 2019-01-14 Celgene Car Llc Heteroberl compounds and uses thereof
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
MY156789A (en) 2008-09-05 2016-03-31 Celgene Avilomics Res Inc Algorithm for designing irreversible inhibitors
WO2010042337A1 (en) 2008-10-07 2010-04-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel 6-azaindole aminopyrimidine derivatives having nik inhibitory activity
CN101723936B (zh) * 2008-10-27 2014-01-15 上海睿星基因技术有限公司 激酶抑制剂及其在药学中的用途
EP2440559B1 (en) * 2009-05-05 2018-01-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Egfr inhibitors and methods of treating disorders
KR101256018B1 (ko) * 2009-08-20 2013-04-18 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 1,3,6-치환된 인돌 화합물
RU2012114902A (ru) 2009-09-16 2013-10-27 Авила Терапьютикс, Инк. Конъюгаты и ингибиторы протеинкиназы
WO2011053476A1 (en) * 2009-11-02 2011-05-05 Abbott Laboratories Imidazopyridines as a novel scaffold for multi-targeted kinase inhibition
WO2011079231A1 (en) 2009-12-23 2011-06-30 Gatekeeper Pharmaceutical, Inc. Compounds that modulate egfr activity and methods for treating or preventing conditions therewith
US20130137709A1 (en) 2010-05-05 2013-05-30 Nathanael S. Gray Compounds that modulate EGFR activity and methods for treating or preventing conditions therewith
BR122014012788B1 (pt) 2010-06-23 2022-04-19 Hanmi Science Co., Ltd Derivados de pirimidina fundidos, seus usos, e composição farmacêutica para inibição da atividade de tirosina quinase
TW201219383A (en) 2010-08-02 2012-05-16 Astrazeneca Ab Chemical compounds
CA2832504C (en) * 2011-05-04 2019-10-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in egfr-driven cancers
JP5427321B2 (ja) 2011-07-27 2014-02-26 アストラゼネカ アクチボラグ ２−（２，４，５−置換−アニリノ）ピリミジン化合物

Also Published As

Publication number Publication date
BR122014026150A2 (pt) 2019-05-28
PH12013502312A1 (en) 2016-07-13
CA2843109A1 (en) 2013-01-31
TW201319057A (zh) 2013-05-16
ECSP13013033A (es) 2014-01-31
IL242284A0 (en) 2015-11-30
BR122014026094A2 (pt) 2019-08-20
EP3686194A1 (en) 2020-07-29
ME03785B (me) 2021-04-20
HUE049060T2 (hu) 2020-08-28
HK1192549A1 (zh) 2014-08-22
IL242279A (en) 2016-07-31
SG194783A1 (en) 2013-12-30
IL242286A (en) 2016-07-31
PH12015501326B1 (en) 2015-09-14
NZ617393A (en) 2014-11-28
CR20130629A (es) 2014-03-12
SG10201910984XA (en) 2020-01-30
HK1221216A1 (en) 2017-05-26
PT3686194T (pt) 2021-11-11
IL242284A (en) 2016-07-31
CN105198862B (zh) 2018-01-23
ES2914854T3 (es) 2022-06-17
AR087336A1 (es) 2014-03-19
IL229199A0 (en) 2014-01-30
SG10201910986QA (en) 2020-01-30
ES2791308T3 (es) 2020-11-03
IL242285A (en) 2016-07-31
JP2014139226A (ja) 2014-07-31
LT3686194T (lt) 2021-11-25
EP2736895A1 (en) 2014-06-04
KR101691268B1 (ko) 2016-12-29
CN105175396B (zh) 2018-01-16
US10858336B2 (en) 2020-12-08
ME02382B (me) 2016-06-20
CY1125405T1 (el) 2023-03-24
DK3333161T3 (da) 2020-05-18
IL229199A (en) 2015-11-30
IL242278A0 (en) 2015-11-30
DOP2013000263A (es) 2014-01-31
CN104109151A (zh) 2014-10-22
AU2012288626A8 (en) 2013-09-26
TWI583386B (zh) 2017-05-21
ES2564671T3 (es) 2016-03-28
US20130053409A1 (en) 2013-02-28
EA201792394A2 (ru) 2018-03-30
KR20140030089A (ko) 2014-03-11
KR101422619B1 (ko) 2014-07-24
EP3333161A1 (en) 2018-06-13
MX2014000528A (es) 2014-05-01
AU2012288626B2 (en) 2015-05-07
MY161925A (en) 2017-05-15
IL242286A0 (en) 2015-11-30
EP4086246A1 (en) 2022-11-09
CN105254616A (zh) 2016-01-20
CA2881987C (en) 2017-04-25
PT3009431T (pt) 2017-12-26
SI3686194T1 (sl) 2022-01-31
ES2900230T3 (es) 2022-03-16
EA201391491A1 (ru) 2014-08-29
CA2881991A1 (en) 2013-01-31
IL242285A0 (en) 2015-11-30
EP3333161B1 (en) 2020-02-19
EP4119551A1 (en) 2023-01-18
JP2013544273A (ja) 2013-12-12
LT3009431T (lt) 2018-01-10
US20190092746A1 (en) 2019-03-28
TW201443040A (zh) 2014-11-16
ES2654177T3 (es) 2018-02-12
RS54653B1 (sr) 2016-08-31
PT3686193T (pt) 2022-05-20
CN103702990B (zh) 2015-09-09
SI3009431T1 (en) 2018-01-31
US20240425476A1 (en) 2024-12-26
EP3686193B1 (en) 2022-03-02
PL3686193T3 (pl) 2022-06-13
DK3009431T3 (en) 2018-01-08
US20210130318A1 (en) 2021-05-06
EA029488B1 (ru) 2018-04-30
HK1192554A1 (en) 2014-08-22
CN104109161B (zh) 2016-08-17
WO2013014448A1 (en) 2013-01-31
SG10201402860QA (en) 2014-08-28
CA2881991C (en) 2016-10-25
BR122014026094B1 (pt) 2020-10-13
EP3686194B1 (en) 2021-09-15
US20240182441A1 (en) 2024-06-06
CN103702990A (zh) 2014-04-02
EP3009431B1 (en) 2017-10-25
US9732058B2 (en) 2017-08-15
HUE056365T2 (hu) 2022-02-28
DK3686193T3 (da) 2022-05-30
PL2736895T3 (pl) 2016-05-31
RS56679B1 (sr) 2018-03-30
JP5537704B2 (ja) 2014-07-02
TWI555743B (zh) 2016-11-01
SG10201402857QA (en) 2014-08-28
UY34219A (es) 2013-02-28
PL3333161T3 (pl) 2020-08-24
HRP20171957T1 (hr) 2018-02-09
US8946235B2 (en) 2015-02-03
EP2736895B1 (en) 2016-01-06
BR112014001768A2 (pt) 2017-02-14
HK1256370A1 (en) 2019-09-20
CN105254616B (zh) 2017-10-17
CY1120072T1 (el) 2018-12-12
US20190389834A1 (en) 2019-12-26
HUE026429T2 (en) 2016-05-30
PE20141700A1 (es) 2014-11-20
CN105348266A (zh) 2016-02-24
CN105348266B (zh) 2018-04-10
HRP20160135T1 (hr) 2016-03-11
US10017493B2 (en) 2018-07-10
JP5977779B2 (ja) 2016-08-24
EA033733B1 (ru) 2019-11-20
SMT201600070B (it) 2016-04-29
PL3686194T3 (pl) 2022-01-17
IL242279A0 (en) 2015-11-30
JP5427321B2 (ja) 2014-02-26
CO6811863A2 (es) 2013-12-16
KR101410902B1 (ko) 2014-06-20
BR122014026150B1 (pt) 2020-10-13
AU2012288626A1 (en) 2013-05-02
IL242278A (en) 2016-12-29
CY1117431T1 (el) 2017-04-26
HUE037645T2 (hu) 2018-09-28
EA201792394A3 (ru) 2018-07-31
CN105175396A (zh) 2015-12-23
CA2881993A1 (en) 2013-01-31
CA2882018C (en) 2017-04-25
BR122014026114B1 (pt) 2021-01-12
DK3686194T3 (da) 2021-11-22
EA201690328A1 (ru) 2016-11-30
MX377900B (es) 2025-03-10
BR122014026114A2 (pt) 2019-08-20
CA2882018A1 (en) 2013-01-31
LT3333161T (lt) 2020-05-11
ME02887B (me) 2018-04-20
US20150119379A1 (en) 2015-04-30
EP3009431A1 (en) 2016-04-20
HRP20211682T1 (hr) 2022-03-04
EP3686193A1 (en) 2020-07-29
HRP20200624T1 (hr) 2020-07-10
MY194532A (en) 2022-11-30
GT201300288A (es) 2017-10-09
SI3333161T1 (sl) 2020-07-31
KR20140047741A (ko) 2014-04-22
CN104109161A (zh) 2014-10-22
JP2014094930A (ja) 2014-05-22
US20180162832A1 (en) 2018-06-14
EA024421B1 (ru) 2016-09-30
US11524951B2 (en) 2022-12-13
CN105198862A (zh) 2015-12-30
CA2843109C (en) 2015-06-16
CN104109151B (zh) 2017-04-12
CY1123210T1 (el) 2021-10-29
PT3333161T (pt) 2020-05-18
SMT202100652T1 (it) 2022-01-10
TW201700099A (zh) 2017-01-01
PH12015501326A1 (en) 2015-09-14
AU2012288626C1 (en) 2015-09-17
CA2881993C (en) 2017-05-09
NI201300134A (es) 2014-02-12
SMT202000208T1 (it) 2020-05-08
BR112014001768B1 (pt) 2019-02-05
MX2020013020A (es) 2022-06-14
SI2736895T1 (sl) 2016-03-31
DK2736895T3 (da) 2016-02-29
RS62542B1 (sr) 2021-12-31
TWI465445B (zh) 2014-12-21
CL2013003281A1 (es) 2014-07-25
KR20140062181A (ko) 2014-05-22
PL3009431T3 (pl) 2018-02-28
CA2881987A1 (en) 2013-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240425476A1 (en) 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine compounds
HK40086830A (en) 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine compounds
AU2013204962C1 (en) Polymorphic form of a mesylate salt of n-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2-yl]amino}phenyl)prop-2-enamide
HK1256370B (en) 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer
EA036521B1 (ru) Производные 2-(2,4,5-замещенного анилино)пиримидина в качестве модуляторов egfr, полезных для лечения рака
HK1221216B (en) 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer
AU2015261672A1 (en) 2 - (2, 4, 5 - substituted -anilino) pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer
EA046985B1 (ru) Производные 2-(2,4,5-замещенного анилино)пиримидина в качестве модуляторов egfr, полезных для лечения рака
HK1192549B (en) 2 - (2, 4, 5 - substituted -anilino) pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer
NZ617393B2 (en) 2-(2,4,5-substituted-anilino)pyrimidine derivatives as egfr modulators useful for treating cancer