[go: up one dir, main page]

RS59434B1 - Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom - Google Patents

Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom

Info

Publication number
RS59434B1
RS59434B1 RSP20191352A RS59434B1 RS 59434 B1 RS59434 B1 RS 59434B1 RS P20191352 A RSP20191352 A RS P20191352A RS 59434 B1 RS59434 B1 RS 59434B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
formula
pharmaceutical composition
nitroxyl
compounds
Prior art date
Application number
Other languages
English (en)
Inventor
Vincent Jacob Kalish
Frederick Arthur Brookfield
Stephen Martin Courtney
Lisa Marie Frost
John P Toscano
Original Assignee
Cardioxyl Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cardioxyl Pharmaceuticals Inc filed Critical Cardioxyl Pharmaceuticals Inc
Publication of RS59434B1 publication Critical patent/RS59434B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/341—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide not condensed with another ring, e.g. ranitidine, furosemide, bufetolol, muscarine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/222—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having aromatic groups, e.g. dipivefrine, ibopamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/235—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group
    • A61K31/24—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group having an amino or nitro group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/255—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of sulfoxy acids or sulfur analogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/433—Thidiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4436—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/14—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/64—Sulfur atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

Opis pronalaska
1. STANJE TEHNIKE
[0001] Pokazano je da nitroksil (HNO) ima pozitivne kardiovaskularne efekte u in vitro i in vivo modelima insuficijencije srca. Ipak, pri fiziološkoj pH, nitroksil dimerizuje do hipoazotaste kiseline, koja naknadno dehidrira do azot-oksida; zbog ove metastabilnosti, nitroksil za terapijsku upotrebu mora biti generisan in situ iz donorskih jedinjenja. Razna jedinjenja sposobna za doniranje nitroksila su opisana i predložena za upotrebu u lečenju poremećaja za koje je poznato ili se sumnja da daju odgovor na nitroksil. Videti, npr., Američke Patente sa brojevima 6,936,639; 7,696,373; 8,030,356; 8,268,890; 8,227,639; i 8,318,705 i Američke brojeve objava pred odobrenje 2009/0281067; 2009/0298795; 2011/0136827; i 2011/0144067. Iako su sva ova jedinjenja sposobna za doniranje nitroksila, ona se razlikuju u raznim fizičko-hemijskim osobinama, i ostaje potreba da se identifikuju donori nitroksila koji imaju najpogodnije fizičko-hemijske osobine za lečenje specifičnih kliničkih stanja putem specifičnih puteva administracije.
[0002] Američki Patent sa brojem 8,030,356 opisuje sintezu derivata jedinjenja tipa Pilotijeve kiseline koji su sposobni za doniranje nitroksila pod fiziološkim uslovima i koji su korisni u lečenju insuficijencije srca i ishemijsko/reperfuzione povrede. Nitroksil donor CXL-1020 (N-hidroksi-2-metansulfonilbenzen-1-sulfonamid) je procenjen u Fazi I studije bezbednosti kod zdravih dobrovoljaca i u Fazi IIa placebo-kontrolisanoj, dvostruko-slepoj, dozno-eskalacionoj studiji sprovedenoj u više bolnica. Sabbah i ostali, "Nitroxyl (HNO) a novel approach for the acute treatment of heart failure", Circ Heart Fail., objavljeno on-line 09. oktobra 2013. (Online ISSN: 1941-3297, Print ISSN: 1941-3289). Studije su demonstrirale da kod pacijenata sa sistolnom srčanom insuficijencijom, CXL-1020, kada je administriran intravenski kao vodeni rastvor pri pH = 4, redukuje oba pritiska punjenja i levog i desnog srca i sistemski vaskularni otpor, dok povećava indeks volumena srčanog i moždanog udara. Stoga, studije su demonstrirale da CXL-1020 poboljšava miokardijalnu funkciju kod humanih pacijenata koji boluju od srčane insuficijencije. Ipak, pri graničnim dozama CXL-1020 potrebnim za izazivanje hemodinamskih efekata, uočeno je da jedinjenje izaziva neželjene efekte uključujući neprihvatljive nivoe inflamatorne iritacije distalno od mesta intravenske primene, i autori prijavljuju da zbog ovakvih sporednih efekata, ovo jedinjenje ne bi bilo pouzdan kandidat za humanu terapiju.
[0003] U skladu sa tim, postoji potreba da se razviju nova nitroksil donirajuća jedinjenja i kompozicije koje su korisne za lečenje insuficijencije srca i koja imaju pogodan toksikološki profil. Razvoj ovakvih jedinjenja zahteva razumevanje farmakokinetičkog profila koji je u vezi sa nitroksil donacijom i faktora koji utiču na toksiloški profil. Nedostatak razumevanja ovih faktora je ometao razvoj nitroksil donirajućih jedinjenja za kliničku upotrebu.
[0004] Dodatno, formulisanje nitroksil donirajućih jedinjenja se pokazalo kao značajan izazov. Mnogi od sadašnjih nitroksil donora su nerastvorni u vodenim rastvorima i/ili su nedovoljno stabilni. Problemi rastvorljivosti i stabilnosti često sprečavaju upotrebu ovakvih jedinjenja u farmaceutskim kompozicijama za parenteralnu i/ili oralnu administraciju. U skladu sa tim, postoji potreba da se razviju kompozicije koje sadrže nitroksil donirajuća jedinjenja za parenteralnu i/il oralnu administraciju koja su dovoljno stabilna i imaju povoljne farmakološke i toksikološke profile.
2. REZIME PREDMETNE OBJAVE
[0005] Predmetna objava se odnosi na otkrivanje nitroksil donirajuća jedinjenja koja su visoko efikasna u lečenju kardiovaskularnih bolesti (npr., srčana insuficijencija) i koja imaju pogodan toksikološki profil.
[0006] Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za primenu u (a) metodi za modulisanje in vivo nivoa nitroksila, ili b) metodu lečenja bolesti ili stanja koje reaguje na terapiju nitroksilom, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje sa formulom (1) i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. U vezi sa tim, jedinjenje za primenu u pronalasku je nitroksil donirajuće jedinjenje sa formulom (1):
[0007] Takođe ovde stavljeno na uvid javnosti, u referentne svrhe, je jedinjenje sa formulom
[0008] Takođe ovde stavljena na uvid javnosti, u referentne svrhe, su jedinjenja sa formulom (3):
gde je R vodonik, -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, fenil, benzil, ciklopentil, cikloheksil, -(C5-C7)heterocikloalkil, benziloksi, -O-(C1-C6)alkil, -NH2, -NH-(C1-C4)alkil, ili -N((C1-C4)alkil)2, gde navedeni -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, fenil, benzil, ciklopentil, cikloheksil, -(C5-C7)heterocikloalkil, benziloksi, -O-(C1-C6)alkil, -NH-(C1-C4)alkil, ili -N((C1-C4)alkil)2mogu biti nesupstituisani ili supstituisani sa jednim ili više supstituenata odabranih od halo, -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, -(C2-C3)alkinil, -(5- ili 6-člani)heteroaril, -O-(C1-C6)alkil, -S-(C1-C6)alkil, -C(halo)3, -CH(halo)2, -CH2(halo), -CN, -NO2, -NH2, -NH-(C1-C4)alkil, -N(-(C1-C4)alkil)2, -C(=O)(C1-C4)alkil, -C(=O)O(C1-C4)alkil, -OC(=O)(C1-C4)alkil, -OC(=O)NH2, -S(=O)(C1-C4)alkil, ili -S(=O)2(C1-C4)alkil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je metil, etil, benzil, ili fenil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je metil ili etil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je metil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je etil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je benzil ili fenil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je benzil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je fenil.
[0009] Takođe ovde stavljena na uvid javnosti, u referentne svrhe, su jedinjenja sa formulom (4):
gde su R i njegova tehnička rešenja kao što je definisano iznad u vezi sa jedinjenjem sa formulom (3).
[0010] Jedinjenja predmetne objave imaju ili se veruje da imaju visoko povoljan terapijski indeks. Naročito, jedinjenja sa formulom (1) i formulom (2) imaju poželjne i hemodinamske i toksikološke profile. Toksikološki profil jedinjenja sa formulom (1) i formulom (2) je značajno poboljšan u odnosu na klinički kandidat CXL-1020. Otkriveno je da povoljan toksikološki profil jedinjenja formule (1) i formule (2) proizilazi delimično od polu-života jedinjenja, i otkrića optimalnog opsega polu-života za ovakve nitroksil donore. Jedinjenje formule (1) ima polu-život od približno 68 minuta kada je meren u aerisanom fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom (phosphate buffered saline - PBS) pri pH od 7.4, i približno 65 minuta kada je meren u humanoj plazmi pri pH od 7.4 u prisustvu antikoagulanta (npr., heparin ili natrijum citrat), svaki meren pod uslovima navedenim u Primeru 4. Jedinjenje formule (2) ima polu-život od približno 50 minuta kada je meren u aerisanom PBS rastvoru pri pH od 7.4, i približno 37 minuta kada je meren u humanoj plazmi pri pH od 7.4 u prisustvu antikoagulanta (npr., heparin ili natrijum citrat), svaki meren pod uslovima navedenim u Primeru 4.
[0011] Takođe, jedinjenja formule (1) i formule (2) su stabilna u vodenim rastvorima i visoko su rastvorna u vodi; ona su, tako, podložna i parenteralnoj i oralnoj upotrebi. Jedinjenje formule (1) ima ravnotežnu rastvorljivost u vodi od više od 100 mg/mL dok jedinjenje formule (2) ima ravnotežnu rastvorljivost u vodi od oko 10 mg/mL (npr., pod uslovima navedenim u Primeru 5).
[0012] Jedinjenja predmetne objave mogu se koristiti za lečenje raznih stanja koja su dala odgovor na terapiju nitroksilom. Na primer, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može biti upotrebljeno za lečenje ili prevenciju pojave kardiovaskularnih bolesti. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može biti upotrebljeno za lečenje kardiovaskularne bolesti, ishemijsko/reperfuzione povrede, plućne hipertenzije ili drugog stanja koje daje odgovor na terapiju nitroksilom. U drugim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može biti upotrebljeno za lečenje srčane insuficijencije. U posebnom tehničkom rešenju, jedinjenje predmetne objave može biti upotrebljeno za lečenje dekompenzovane insuficijencije srca (npr., akutna dekompenzovana srčana insuficijencija). U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenja predmetne objave mogu biti upotrebljena za lečenje sistolne srčane insuficijencije. U posebnim tehničkim rešenjima, jedinjenja predmetne objave mogu biti upotrebljena za lečenje dijastolne srčane insuficijencije.
[0013] U jednom aspektu, jedinjenja predmetne objave mogu biti administrirana putem parenteralne (npr., subkutane, intramuskularne, intravenske ili intradermalne) administracije. Jedinjenja predmetne objave ne izazivaju neželjene lokalne sporedne efekte (npr., iritaciju i/ili inflamaciju) tokom ili nakon parenteralne administracije u dozama sposobnim za obezbeđivanje željenog nivoa efikasnosti.
[0014] U tehničkim rešenjima u kojima je jedinjenje predmetne objave administrirano parenteralno, ono je generalno administrirano kao vodeni rastvor ili suspenzija. Vodeni rastvor ili suspenzija može imati pH od oko 4 do oko 6.5. U posebnim tehničkim rešenjima, jedinjenje predmetne objave može biti formulisano za parenteralnu injekciju pri pH od oko 4 do oko 5. U drugim tehničkim rešenjima, jedinjenje predmetne objave može biti formulisano za parenteralu injekciju pri pH od oko 5 do oko 6. U nekim tehničkim rešenjima, formulacija za parenteralnu administraciju može uključiti agens za poboljšanje stabilnosti.
[0015] Kada se administrira parenteralno (npr., intravenski) humanom subjektu, jedinjenje predmetne objave može biti dozirano u opsegu od oko 5 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje predmetne objave može biti dozirano humanom subjektu u opsegu od oko 10 µg/kg/min do oko 70 µg/kg/min. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje predmetne objave može biti dozirano humanom subjektu u opsegu od oko 15 µg/kg/min do oko 50 µg/kg/min. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje predmetne objave može biti dozirano humanom subjektu u opsegu od oko 20 µg/kg/min do oko 40 µg/kg/min.
[0016] U drugom tehničkom rešenju, jedinjenja predmetne objave mogu biti formulisana za oralnu administraciju. Jedinjenja za oralnu administraciju mogu biti formulisana kao tečne ili čvrste dozne forme. U posebnim tehničkim rešenjima gde je nitroksil donirajuće jedinjenje formulisano kao oralna tečna dozna forma, polietilen glikol 300 (PEG300) može služiti kao reprezentativni ekscipijens.
3. KRATAK OPIS SLIKA
[0017]
SLIKA 1 prikazuje hemodinamski profil CXL-1020 i dva jedinjenja predmetne objave (jedinjenja formule (1) i formule (2)) korišćenjem tahikardnog pejsing modela insuficijencije srca (videti Primer 6). Svako jedinjenje je administrirano intravenski brzinom od 100 µg/kg/min. Hemodinamski parametri su dobijeni 180 minuta nakon administracije odgovarajućeg jedinjenja.
SLIKA 2 prikazuje hemodinamski profil jedinjenja formule (1) u raznim dozama korišćenjem tahikardnog pejsing modela insuficijencije srca za svesne životinje (videti Primer 6).
SLIKA 3 prikazuje hemodinamski profil jedinjenje formule (1) nakon indukcije srčane insuficijencije kod pasa. Hemodinamike su procenjene upotrebom modela mikroembolizacione srčane insuficijencije kod pasa (videti Primer 7). Podaci su prikazani za krajnju vremensku tačku tokom infuzije (180 minuta) pri dve brzine infuzije.
SLIKA 4 prikazuje procenu toksikološkog profila CXL-1020 i dva nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave (jedinjenje formule (1) i formule (2)) nakon 24 sata infuzije pri različitim dozama korišćenjem perifernog venskog modela kod pasa (videti Primer 9). Ključni markeri inflamacije koji su izmereni uključuju bela krvna zrnca (white blood cells -WBC), fibrinogen, i C-reaktivni protein (CRP).
SLIKA 5 prikazuje mere inflamacije uočene korišćenjem modela 72-očasovnog implantiranog centralnog katetera kod pasa upotrebom različitih doza CXL-1020 i jedinjenja formula (1) i (2) (videti Primer 9).
4. DETALJAN OPIS
[0018] Pronalazak uključuje sledeće:
(1.) Farmaceutsku kompoziciju za primenu u metodi za modulisanje in vivo nivoa nitroksila, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje sa formulom (1):
i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
(2.) Farmaceutsku kompoziciju za primenu u metodi lečenje bolesti ili stanja koje reaguje na terapiju nitroksilom, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje sa formulom (1):
i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
(3.) Farmaceutsku kompoziciju iz gornjeg (2.), gde bolest ili stanje je plućna hipertenzija.
(4.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (3.), gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski.
(5.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (4.), gde farmaceutska kompozicija ima pH od 4 do 6.
(6.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (5.), gde farmaceutska kompozicija ima pH od 4 do 5.
(7.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (6.), gde farmaceutsku kompoziciju ima pH od oko 4.
(8.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (7.), gde farmaceutsku kompoziciju treba da se administrira intravenski u količini koja je u opsegu od 1 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti do 100 µg jedinjenje sa formulom (1)/kg/minuti.
(9.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (7.), gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini koja je u opsegu od 10 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti do 50 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
(10.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (7.), gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini ne većoj od 30 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
(11.) Farmaceutsku kompoziciju iz bilo kog od gornjih (1.) do (7.), gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini od
(a) najmanje 2.5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti;
(b) najmanje 5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti;
(c) najmanje 7.5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti;
(d) najmanje 12 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti; ili
(e) najmanje 15 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
[0019] Predmetna objava uključuje sledeće:
(1.) Jedinjenje formule (1):
(2.) Jedinjenje formule (2):
(3.) Farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
(4.) Farmaceutsku kompoziciju gornjeg (3.), gde je farmaceutska kompozicija pogodna za intravensku administraciju.
(5.) Farmaceutsku kompoziciju gornjeg (3.) ili gornjeg (4.), gde farmaceutska kompozicija ima pH od oko 4 do oko 6.
(6.) Farmaceutsku kompoziciju od bilo kog od gornjih (3.)-(5.), gde farmaceutska kompozicija ima pH od oko 4 do oko 5.
(7.) Farmaceutsku kompoziciju od bilo kog od gornjih (3.)-(6.), gde farmaceutska kompozicija ima pH od oko 4.
(8.) Metod za lečenje kardiovaskularne bolesti, koji obuhvata administraciju efikasne količine jedinjenja gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili farmaceutsku kompoziciju od bilo kog od gornjih (3.)-(7.) pacijentu kod koga postoji takva potreba.
(9.) Metod gornjeg (8.), gde je kardiovaskularna bolest srčana insuficijencija.
(10.) Metod gornjeg (8.) ili gornjeg (9.), gde je kardiovaskularna bolest akutna dekompezovana srčana insuficijencija.
(11.) Metod bilo kog od gornjih (8.)-(10.), gde se jedinjenje ili farmaceutska kompozicija administriraju intravenski.
(12.) Metod bilo kog od gornjih (8.)-(11.), gde se jedinjenje ili farmaceutska kompozicija administriraju u dozi od oko 20 µg jedinjenja formule (1) ili (2)/kg/minut do oko 40 µg jedinjenja formule (1) ili (2)/kg/minut.
(13.) Metod bilo kog od gornjih (8.)-(10.), gde se jedinjenje ili farmaceutska kompozicija administriraju oralno.
(14.) Kit koji sadrži jedinjenje gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) u suvoj formi ili farmaceutsku kompoziciju bilo kog od gornjih (3.)-(7.) u suvoj formi; i
farmaceutski prihvatljiv tečni razblaživač.
(15.) Primena jedinjenja gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili primena farmaceutske kompozicije bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za proizvodnju leka korisnog za lečenje kardiovaskularne bolesti. (16.) Primena jedinjenja gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili primena farmaceutske kompozicije bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za proizvodnju leka korisnog za lečenje srčane insuficijencije.
(17.) Primena jedinjenja gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili primena farmaceutske kompozicije bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za proizvodnju leka korisnog za lečenje akutne dekompenzovane srčane insuficijencije.
(18.) Jedinjenje gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili farmaceutsku kompoziciju bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za primenu u lečenju kardiovaskularne bolesti.
(19.) Jedinjenje gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili farmaceutsku kompoziciju bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za primenu u lečenju srčane insuficijencije.
(20.) Jedinjenje gornjeg (1.) ili gornjeg (2.) ili farmaceutsku kompoziciju bilo kog od gornjih (3.)-(7.) za primenu u lečenju akutne dekompenzovane srčane insuficijencije.
4.1 Definicije
[0020] Sem ukoliko nije drugačije jasno naznačeno, sledeći termini kao što su upotrebljeni ovde imaju značenja niže naznačena.
"Farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na so bilo kog terapijskog agensa ovde stavljenog na uvid javnosti, čija so može uključiti bilo koji od raznih organskih i neorganskih suprotno naelektrisanih jona poznatih u oblasti i čija so je farmaceutski prihvatljiva. Kada terapijski agens sadrži kiselu funkcionalnost, razna reprezentativna tehnička rešenja suprotno naelektrisanih jona su natrijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, amonijum, tetraalkilamonijum, i slično. Kada terapijski agens sadrži baznu funkcionalnost, farmaceutski prihvatljiva so može uključiti kao suprotno naelektrisani jon, kao primer, organsku ili neorgansku kiselinu, kao što je hidrohlorid, hidrobromid, tartrat, mesilat, acetat, maleat, oksalat, i slično. Ilustrativne soli uključuju, ali nisu ograničene na, sulfat, citrat, acetat, hlorid, bromid, jodid, nitrat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, laktat, salicilat, kiseli citrat, tartrat, oleat, tanat, pantotenat, bitartrat, askorbat, sukcinat, maleat, besilat, fumarat, glukonat, glukaronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, i ptoluensulfonat soli. U skladu sa tim, so može biti pripremljena od jedinjenja bilo koje formule ovde stavljene na uvid javnosti koja ima kiselu funkcionalnu grupu, kao što je funkcionalna grupa karboksilne kiseline, i farmaceutski prihvatljive neorganske ili organske baze. Pogodne
1
baze uključuju, ali nisu ograničene na, hidrokside alkalnih metala kao što su natrijum, kalijum, i litijum; hidrokside zemnoalkalnih metala kao što su kalcijum i magnezijum; hidrokside drugih metala, kao što su aluminijum i cink; amonijak, i organske amine, kao što su nesupstituisani ili hidroksi-supstituisani mono-, di-, ili trialkilamini; dicikloheksilamin; tributil amin; piridin; N-metil-N-etilamin; dietilamin; trietilamin; mono-, bi-, ili tri-(2-hidroksi-niže-alkil amine), kao što su mono-, bi-, ili tri-(2-hidroksietil)amin, 2-hidroksi-tercbutilamin, ili tri-(hidroksimetil)metilamin, N,N-di-niže-alkil-N-(hidroksi-niže-alkil)-amine, kao što su N,N-dimetil-N-(2-hidroksietil) amin, ili tri-(2-hidroksietil)amin; N-metil-D-glukamin; i amino kiseline kao što su arginin, lizin, i slično. So takođe može biti pripremljena od jedinjenja bilo koje formule ovde stavljene na uvid javnosti koje ima baznu funkcionalnu grupu, kao što je amino funkcionalna grupa, i farmaceutski prihvatljive neorganske ili organske kiseline. Pogodne kiseline uključuju hidrogen sulfat, limunsku kiselinu, sirćetnu kiselinu, hlorovodoničnu kiselinu (HCl), bromovodoničnu kiselinu (HBr), jodovodonik (HI), azotnu kiselinu, fosfornu kiselinu, mlečnu kiselinu, salicilnu kiselinu, vinsku kiselinu, askorbinsku kiselinu, ćilibarnu kiselinu, maleinsku kiselinu, benzensulfonsku kiselinu, fumarnu kiselinu, glukonsku kiselinu, glukuronsku kiselinu, mravlju kiselinu, benzoevu kiselinu, glutaminsku kiselinu, metansulfonsku kiselinu, etansulfonsku kiselinu, benzensulfonsku kiselinu, i p-toluensulfonsku kiselinu.
"Farmaceutski prihvatljiv ekscipijens" se odnosi na bilo koju supstancu, koja nije terapijski agens, koja se koristi kao nosač, razblaživač, pomoćno sredstvo, vezujuće sredstvo, i/ili transporter za isporuku terapijskog agensa pacijentu, ili se dodaje u farmaceutsku kompoziciju da poboljša njeno rukovanje ili osobine skladištenja ili da dozvoli ili olakša formiranje jedinjenja ili farmaceutske kompozicije u jediničnu doznu formu za administraciju. Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi su poznati prosečnom poznavaocu farmaceutske oblasti i stavljeni su na uvid javnosti, na primer, u Gennaro, Izdanje, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20-to Izdanje (Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2000) and Handbook of Pharmaceutical Excipients, Američka Farmaceutska Asocijacija, Vašington, D.C., (npr., 1, 2. i 3. Izdanje, 1986, 1994 i 2000, redom). Kao što će biti poznato prosečnim poznavaocima oblasti, farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi mogu da obezbede razne funkcije i mogu biti opisani kao vlažeći agensi, agensi za puferovanje, suspendujući agensi, lubrikantni agensi, emulsifikatori, agensi za raspadanje, adsorbensi, konzervansi, surfaktanti, boje, arome, i zaslađivači. Primeri farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa uključuju bez ograničenja: (1) šećere, kao što su laktoza, glukoza i sukroza; (2) skrobove, kao što su kukuruzni skrob i krompirov skrob; (3) celulozu i njene derivate, kao što su natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza, celuloza acetat, hidroksipropilmetilceluloza, i hidroksipropilceluloza; (4) tragakant u prahu; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijense, kao što su kakao buter i supozitorijske voskove; (9) ulja, kao što su ulje kikirikija, ulje semena pamuka, ulje šafrana, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i ulje semena soje; (10) glikole, kao što su propilen glikol; (11) poliole, kao što su glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estre, kao što su etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferujuće agense, kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginsku kiselinu; (16) vodu bez pirogena; (17) izotonični fiziološki rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) pH puferovane rastvore; (21) poliestre, polikarbonate i/ili polianhidride; i (22) druge netoksične kompatibilne supstance upotrebljene u farmaceutskim formulacijama.
"Jedinična dozna forma" se odnosi na fizički odvojenu jedinicu koja je pogodna kao jedinična doza za ljude i životinje. Svaka jedinična dozna forma može sadržati prethodno određenu količinu terapijskog agensa za koju je izračunato da proizvodi željeni efekat.
Sem ukoliko nije drugačije jasno naznačeno, "pacijent" se odnosi na životinju, kao što je sisar, uključujući ali bez ograničenja, čoveka. Stoga, metode stavljene ovde na uvid javnosti mogu biti korisne u humanoj terapiji i veterinarskoj primeni. U posebnim tehničkim rešenjima, pacijent je sisar. U određenim tehničkim rešenjima, pacijent je čovek.
"Efikasna količina" se odnosi na onu količinu terapijskog agensa ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, koja u kombinaciji sa svojim parametrima efikasnosti i potencijala za toksičnost, kao i na osnovu znanja stručnjaka, treba da bude efikasna u datoj terapijskoj formi. Kao što je poznato u stanju tehnike, efikasna količina se može administrirati u jednoj ili više doza.
"Tretman", "lečenje" i slično je pristup za dobijanje korisnog ili željenog rezultata, uključujući kliničke rezultate. U svrhu ove objave, korisni ili željeni rezultati uključuju ali nisu ograničeni na inhibiciju i/ili supresiju početka i/ili razvoja stanja ili smanjenje ozbiljnosti ovakvog stanja, kao što je smanjenje broja i/ili ozbiljnosti simptoma koji su u vezi sa stanjem, poboljšanje kvaliteta života onih koji pate od stanja, smanjenje doze drugih lekova koji su potrebni za lečenje stanja, poboljšanje efekta drugih lekova koje pacijent koristi za to stanje, i/ili produžavanje preživljavanja pacijenata sa stanjem.
["Sprečiti", "sprečavanje" i slično se odnosi na smanjenje verovatnoće razvoja stanja kod pacijenta koji nema, ali koji je u riziku od razvoja stanja. Pacijent "u riziku" može ili ne mora imati uočeno stanje, i može ili ne mora imati ispoljeno uočeno stanje pre metoda za lečenje koje su ovde stavljene na uvid javnosti. "U riziku" označava da pacijent ima jedan ili više takozvanih faktora rizika, koji su merljivi parametri koji su u vezi sa razvojem stanja i poznati su prosečnim poznavaocima oblasti. Pacijent koji ima jedan ili više ovih faktora rizika ima veću verovatnoću razvoja stanja nego pacijent bez ovakvog (ovakvih) faktora rizika.
"Pozitivan inotrop" se odnosi na agens koji izaziva povećanje miokardijalne kontraktilne funkcije. Reprezentativni primeri pozitivnih inotropa su agonist beta-adrenergičkih receptora, inhibitor fosfodiesterazne aktivnosti, i pojačivači kalcijum osetljivosti. Agonisti betaadrenergičkih receptora uključuju, među ostalima, dopamin, dobutamin, terbutalin, i izoproterenol. Analozi i derivati ovakvih jedinjenja su takođe namenjeni. Na primer, Američki Patent sa brojem 4,663,351 stavlja na uvid javnosti dobutamin prolek koji može biti administriran oralno.
Stanje koje "daje odgovor na terapiju nitroksilom" uključuje bilo koje stanje u kome administracija jedinjenja koje donira efikasnu količinu nitroksila pod fiziološkim uslovima leči i/ili sprečava stanje, kao što su ti termini ovde definisani. Stanje čiji su simptomi potisnuti ili umanjeni nakon administriranja nitroksil donora je stanje koje daje odgovor na terapiju nitroksilom.
"Plućna hipertenzija" ili "PH" se odnosi na stanje u kome je povišen pritisak u plućnoj arteriji. Aktuelna hemodinamska definicija PH je srednji arterijski pritisak u plućnoj arteriji (mean pulmonary arterial pressure - MPAP) u mirovanju veći od ili jednak 25 mmHg. Badesch i ostali, J. Amer. Coll. Cardiol.54(Suppl.):S55-S66 (2009).
"N/A" znači nije procenjen.
"(C1-C6)alkil" se odnosi na zasićene linearne i razgranate uglovodonične strukture koje imaju 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 ugljenikova atoma. Kada se navede alkil ostatak koji ima specifičan broj ugljenika, svi geometrijski izomeri koji imaju taj broj ugljenika su obuhvaćeni; tako, na primer, "propil" uključuje n-propil i izo-propil i "butil" uključuje n-butil, sec-butil, izo-butil i terc-butil. Primeri (C1-C6)alkil grupa uključuju metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, tercbutil, n-heksil, i slično.
1
"(C1-C4)alkil" se odnosi na zasićene linerane i razgranate ugljovodonične strukture koje imaju 1, 2, 3, ili 4 ugljenikova atoma. Primeri (C1-C4)alkil grupa uključuju metil, etil, npropil, izo-propil, n-butil i terc-butil.
"(C3-C5)alkil" se odnosi na zasićene linearne i razgranate ugljovodonične strukture koje imaju 3, 4, ili 5 ugljenikova atoma. Kada se navede alkil ostatak koji ima specifičan broj ugljenika, svi geometrijski izomeri koji imaju taj broj ugljenika su obuhvaćeni; tako, na primer, "propil" uključuje n-propil i izo-propil i "butil" uključuje n-butil, sek-butil, izo-butil i terc-butil. Primeri (C3-C5)alkil grupa uključuju n-propil, izo-propil, n-butil, terc-butil, npentil, i slično.
"(C2-C4)alkenil" se odnosi na nezasićen ugljovodonični radikal ravnog ili razgranatog lanca koji ima 2, 3, ili 4 ugljenikova atoma i dvostruku vezu u bilo kojoj poziciji, npr., etenil, 1-propenil, 2-propenil (alil), 1-butenil, 2-butenil, 3-butenil, 1-metiletenil, 1-metil-1-propenil, 2-metil-2-propenil, 2-metil-1-propenil, 1-metil-2-propenil, i slično.
"(C2-C3)alkinil" se odnosi na neciklični ugljovodonik ravnog lanca koji ima 2 ili 3 ugljenikova atoma i uključuje najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. Primeri (C2-C3)alkenila uključuju -vinil, -alil, i 1-prop-1-enil.
"(C5-C7)heterocikloalkil" se odnosi na 5-, 6-, ili 7-člani, zasićen ili nezasićen, premošćen, mono- ili biciklični-heterocikl koji sadrži 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma u prstenu od kojih je svaki nezavisno odabran od azota, kiseonika i sumpora. Primeri (C5-C7)heterocikloalkil grupa uključuju pirazolil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, tetrahidro-oksazinil, tetrahidrofuran, tiolan, ditiolan, pirolin, pirolidin, pirazolin, pirazolidin, imidazolin, imidazolidine, tetrazol, piperidin, piridazin, pirimidin, pirazin, tetrahidrofuranon, γ-butirolakton, α-piran, γ-piran, dioksolan, tetrahidropiran, dioksan, dihidrotiofen, piperazin, triazin, tetrazin, morfolin, tiomorfolin, diazepan, oksazin, tetrahidro-oksazinil, izotiazol, pirazolidin, i slično.
"(5- ili 6-člani)heteroaril" se odnosi na monociklični aromatični heterocikl prsten od 5 ili 6 članova, tj., monociklični aromatični prsten koji sadrži najmanje jedan heteroatom u prstenu, npr., 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma u prstenu, svaki nezavisno odabran od azota, kiseonika, i sumpora. Primeri-(5- ili 6-članih)heteroarila uključuju piridil, pirolil, furil, imidazolil, oksazolil, imidazolil, tiazolil, izoksazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,3,4-oksadiazolil, 1,2,5-oksadiazolil, 1,2,3-triazolil, pirazolil, izotiazolil, piridazinil, pirimidil, pirazinil, 1,2,3-tiadiazolil, 1,3,4-tiadiazolil, 1,2,5-tiadiazolil, 1,3,5-triazinil, i tiofenil.
"Halo" se odnosi na -F, -Cl, -Br ili -I.
"Sulfo-n-butil etar derivat β-ciklodekstrina" se odnosi na β-ciklodekstrin koji ima najmanje jednu -OH grupu koja je derivatizovana zamenom njenog vodonikovog atoma sa -(CH2)4-S(O)2-OH ili -(CH2)4-S(O)2-O-Z<+>da se obezbedi -O-(CH2)4-S(O)2-OH ili -O-(CH2)4-S(O)2-O-Z<+>grupa, redom, gde je Z<+>katjon kao natrijum, kalijum, amonijum, tetrametilamonijum, i slično. U jednom tehničkom rešenju, svaki Z je natrijum.
4.2 Nitroksil donirajuća jedinjenja sa poboljšanim terapijskim indeksom
[0021] Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za primenu u metodi za modulisanje in vivo nivoa nitroksila ili metodu za lečenje bolesti ili stanja koje reaguje na terapiju nitroksilom, gde farmaceutska kompozicija sadrži određeno jedinjenje predmetne objave, naime jedinjenje formule (1).
[0022] U jednom aspektu, predmetna objava obezbeđuje nova jedinjenja pogodna za lečenje kardiovaskularne bolesti (npr., srčana insuficijencija). Naročito, predmetna objava obezbeđuje nitroksil donirajuća jedinjenja koja imaju kombinaciju osobina što ih čini pogodnim za primena kao humanih terapeutika. Naročito, nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave imaju pogodne polu-živote, povoljan terapijski indeks, su visoko rastvorna u vodi i imaju dovoljnu stabilnost čvrstog stanja. Tabela 1 obezbeđuje dva specifična N-hidroksisulfonamid nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave koja poseduju takve poželjne osobine i tako su pogodna za humanu terapijsku primenu. Jedinjenje formule (1) je za primenu u predmetnom pronalasku. Jedinjenje formule (2) je stavljeno na uvid javnosti u svrhe upućivanja.
Tabela 1: Nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave
N-Hidroksi-5-metilfuran-2-sulfonamid N-Hidroksi-3-metansulfonilbenzen-1-sulfonamid
[0023] U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuća jedinjenja u Tabeli 1 mogu biti upotrebljena kao njihove farmaceutski prihvatljive soli.
1
[0024] U drugim tehničkim rešenjima, N-hidroksi grupa jedinjenja navedenih u Tabeli 1 može biti esterifikovana da se obezbede prolekovi jedinjenja.
[0025] Na primer, predmetna objava obezbeđuje, za svrhe upućivanja, jedinjenja formule (3):
gde je R vodonik, -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, fenil, benzil, ciklopentil, cikloheksil, -(C5-C7)heterocikloalkil, benziloksi, -O-(C1-C6)alkil, -NH2, -NH-(C1-C4)alkil, ili-N((C1-C4)alkil)2, gde navedeni -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, fenil, benzil, ciklopentil, cikloheksil, -(C5-C7)heterocikloalkil, benziloksi, -O-(C1-C6)alkil, -NH-(C1-C4)alkil, ili -N((C1-C4)alkil)2mogu biti nesupstituisani ili supstituisani sa jednim ili više supstituenata odabranih od halo, -(C1-C6)alkil, -(C2-C4)alkenil, -(C2-C3)alkinil, -(5- ili 6-člani)heteroaril, -O-(C1-C6)alkil, -S-(C1-C6)alkil, -C(halo)3, -CH(halo)2, -CH2(halo), -CN, -NO2, -NH2, -NH-(C1-C4)alkil, -N(-(C1-C4)alkil)2, -C(=O)(C1-C4)alkil, -C(=O)O(C1-C4)alkil, -OC(=O)(C1-C4)alkil, -OC(=O)NH2, -S(=O)(C1-C4)alkil, ili -S(=O)2(C1-C4)alkil. U posebnim tehničkim rešenjima, R je metil, etil, benzil, ili fenil.
[0026] U posebnim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (3), R je metil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (3), R is etil. U određenim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (3), R je metil ili etil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje gde jedinjenje ima formulu (3), R je fenil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (3), R je benzil. U posebnim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (3), R je benzil ili fenil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (3), R je -NH2. U svakom od gore navedenih tehničkih rešenja u ovom pasusu, R je nesupstituisan u jednom tehničkom rešenju, mono-supstituisan u drugom tehničkom rešenju, bi-supstituisan sa dva nezavisno odabrana supstituenta u dodatnom tehničkom rešenju, ili trisupstitusan sa tri nezavisno odabrana supstituenta u narednom tehničkom rešenju. U raznim tehničkim rešenjima svakog od gore navedenih tehničkih rešenja u ovom pasusu, supstituent je -halo, -NH2, -NHCH3, -CF3, ili -OCH3ili su supstituenti nezavisno odabrani od -halo, -NH2, -NHCH3, -CF3, i -OCH3.
1
[0027] Na primer, predmetna objava obezbeđuje, za svrhe upućivanja, jedinjenja formule (4):
gde su R i njegov(i) supstituent(i) po izboru definisani gore u odnosu na jedinjenje formule (3).
[0028] U posebnim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (4), R je metil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (4), R je etil. U određenim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (4), R je metil ili etil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (4), R je fenil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (4), R je benzil. U posebnim tehničkim rešenjima gde je jedinjenje predmetne objave jedinjenje formule (4), R je benzil ili fenil. U drugim tehničkim rešenjima gde jedinjenje ima formulu (4), R je -NH2. U svakom od gore navedenih tehničkih rešenja u ovom pargrafu, R je nesupstituisan u jednom tehničkom rešenju, mono-supstituisan u drugom tehničkom rešenju, bi-supstituisan sa dva nezavisno odabrana supstituenta u dodatnom tehničkom rešenju, ili tri-supstituisan sa tri nezavisno odabrana supstituenta u narednom tehničkom rešenju. U raznim tehničkim rešenjima svakog od gore navedenih tehničkih rešenja u ovom pasusu, supstituent je -halo, -NH2, -NHCH3, -CF3, ili -OCH3ili su supstituenti nezavisno odabrani od -halo, -NH2, -NHCH3, -CF3, i -OCH3.
[0029] Neočekivano, otkriveno je da nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave obezbeđuju nivoe efikasnosti slične kao CXL-1020 kada se primene humanim pacijentima, ali sa značajno smanjenim sporednim efektima, naročito lokalnim sporednim efektima (npr., iritacija i/ili inflamacija) (videti Primere 8 i 9). Dodatno, nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave obezbeđuju početak hemodinamskih efekata za 1 sat ili manje, što je poželjno sa kliničkog gledišta.
[0030] Bez vezivanja teorijom, eksperimenti navedeni u primerima u ovoj objavi navode da nitroksil donori sa polu-životima suštinski kraćim od 15 minuta kada se meri u PBS ili
1
humanoj plazmi (videti Primer 4), kao CXL-1020, proizvodi visoke lokalne koncentracije nitroksila nakon administracije, i da je visoka lokalna koncentracija nitroksila uzrok uočenih neželjenih sporednih efekata. Poznato je da nitroksil u visokoj koncentraciji dimerizuje, što rezultira formiranjem hipoazotaste kiseline, koja je sposobna za proizvodnju hidroksil radikala. Alternativno, ili dodatno, peroksid koji nastaje iz belih krvnih zrnaca može reagovati sa nitroksilom čime sa stvaraju hidroksil radikali. Hidroksil radikali mogu biti toksični za endotelijske ćelije, što rezultije inflamacijom i/ili intolerancijom. Dok bi nitroksil jedinjenja sa dužim polu-životom mogla, u teoriji, da proizvode hidroksil radikale preko sličnih mehanizama, formiranje ovakvih radikala bi se očekivalo da bude redukovano zahvaljujući niskim koncentracijama nitroksila, tako redukujući sposobnost nitroksila da dimerizuje ili da reaguje sa peroksidom. Za jedinjenja sa veoma dugim polu-životima (npr, dužim od 95 minuta kada se meri u humanoj plazmi u skladu sa metodom opisanom u Primeru 4) bi se stoga moglo očekivati da imaju povoljan toksikološki profil; međutim, pošto se za ova jedinjenja očekuje da budu eliminisana iz cirkulacije i/ili razblažena pre značajnog formiranja nitroksila, za ova jedinjenja se očekuje da će imati nisku efikasnost.
[0031] Kao što je opisano u Primeru 4, jedinjenja formula (1) i (2) imaju polu-živote duže od oko 10 minuta i kraće od 95 minuta kada se meri u aerisanom (PBS) rastvoru pri pH od 7.4, i kada se meri u humanoj plazmi pri pH 7.4 u prisustvu antikoagulanta (npr., heparina ili natrijum citrata), svaki meren pod uslovima navedenim u Primeru 4. Naročito, jedinjenje formule (1) ima polu-život od približno 68 minuta kada se meri u aerisanom (PBS) rastvoru pri pH od 7.4, i približno 65 minuta kada se meri u humanoj plazmi pri pH 7.4 u prisustvu antikoagulanta (npr., heparina ili natrijum citrata), svaki meren pod uslovima navedenim u Primeru 4. Jedinjenje formule (2) ima polu-život od približno 50 minuta kada se meri u aerisanom (PBS) rastvoru pri pH od 7.4, i približno 37 minuta kada se meri u humanoj plazmi pri pH 7.4 u prisustvu antikoagulanta (npr., heparina ili natrijum citrata), svaki meren pod uslovima navedenim u Primeru 4.
[0032] Dodatno, kao što je opisano u Primeru 5, svako od jedinjenja formula (1) i (2) je visoko rastvorno u vodi i tako je pogodno za parenteralnu ili oralnu administraciju. Jedinjenja mogu biti formulisana bez dodatka agensa za rastvaranje. Dodatno, kao što je pretstavljeno u Primerima 10-12, jedinjenja formule (1) i formule (2) imaju odličnu stabilnost u farmaceutskim kompozicijama za parenteralnu (npr., intravensku) administraciju.
4.3 Merenje Nitroksil Donirajuće sposobnosti
1
[0033] Jedinjenja su lako testirana za nitroksil donaciju rutinskim eksperimentima. Iako je tipično nepraktično da se direktno meri da li je nitroksil doniran, nekoliko analitičkih pristupa su prihvaćeni kao pogodni za određivanje da li jedinjenje donira nitroksil. Na primer, jedinjenje od interesa može biti stavljeno u rastvor, na primer u fiziološki rastvor puferovan fosfatom (PBS) ili rastvor puferovan fosfatom pri pH od oko 7.4, i zatvoriti posudu. Nakon što je prošlo dovoljno vremena za disocijaciju, što je od nekoliko minuta do nekoliko sati, površinski gas je povučen i analiziran da se odredi njegova kompozicija, gasnom hromatografijom i/ili masenom spektrometrijom. Ukoliko je gas N2O formiran (što se zapaža dimerizacijom HNO), test je pozitivan na nitroksil donaciju i jedinjenje se smatra da je donor nitroksila.
[0034] Nivo sposobnosti nitroksil donacije se može izraziti kao procenat teorijskog stehiometrijskog maksimuma jedinjenja. Jedinjenje koje donira "značajan nivo nitroksila" znači, u raznim tehničkim rešenjima, da jedinjenje donira oko 40% ili više, oko 50% ili više, oko 60% ili više, oko 70% ili više, oko 80% ili više, oko 90% ili više, ili oko 95% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donor ovde stavljenog jedinjenja na uvid javnosti donira od oko 70% do oko 90% od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donor ovde stavljenog jedinjenja na uvid javnosti donira od oko 85% do oko 95% od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donor ovde stavljenog jedinjenja na uvid javnosti donira od oko 90% do oko 95% od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila. Jedinjenja koja doniraju manje od oko 40%, ili manje od oko 50%, od njihove teorijski maksimalne količine nitroksila su i dalje nitroksil donori i mogu biti upotrebljeni u metodama stavljenim na uvid javnosti. Jedinjenje koje donira manje od oko 50% od njihove teorijske količine nitroksila može biti upotrebljeno u metodama stavljenim na uvid javnosti, ali može zahtevati više dozne nivoe u poređenju sa jedinjenjem koje donira viši nivo nitroksila.
[0035] Ukoliko je poželjno, nitroksil donacija može takođe biti detektovana izlaganjem test jedinjenja metmioglobinu (Mb<3+>). Videti Bazylinski i ostali, J. Amer. Chem. Soc.
107(26):7982-7986 (1985). Nitroksil reaguje sa Mb<3+>čime formira Mb<2+>-NO kompleks, koji se može detektovati promenama u ultravioletnom/vidljivom spektru ili elektronskom paramagnetskom rezonancijom (electron paramagnetic resonance - EPR). Mb<2+>-NO kompleks ima EPR signal centriran oko g-vrednosti od oko 2. Azot-oksid, s druge strane,
1
reaguje sa Mb<3+>čime formira Mb<3+>-NO kompleks koji ima zanemarljiv, ukoliko postoji, EPR signal. U skladu sa tim, ukoliko jedinjenje reaguje sa Mb<3+>i formira kompleks koji može da se detektuje uobičajenim metodama, kao što je ultravioletna/vidljiva ili EPR, onda je test pozitivan na donaciju nitroksila.
[0036] Testiranje na nitroksil donaciju se može izvesti pri fiziološki relevantnim pH. Nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave su sposobna za donaciju nitroksila pri fiziološkoj pH (t.j., pH od oko 7.4) i fiziološkoj temperaturi (t.j., temperatura od oko 37°C) (zajedno, "fiziološki uslovi"). U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može donirati oko 40% ili više od njegove teorijski maksimalne (t.j., 100%) količine nitroksila pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može da donira oko 50% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može da donira oko 60% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može da donira oko 70% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može da donira oko 80% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može da donira oko 90% ili više od njegove teorijski maksimalne količine nitroksila pod fiziološkim uslovima.
[0037] Biće shvaćeno da nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave može takođe donirati ograničene količine azot-oksida, sve dok vrednosti nitroksil donacije prevazilaze vrednosti azot-oksid donacije. U određenim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati oko 25 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati 20 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati oko 15 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati oko 10 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati oko 5 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može
2
donirati oko 2 mol% ili manje azot-oksida pod fiziološkim uslovima. U posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje može donirati beznačajnu količinu (npr., oko 1 mol% ili manje) azot-oksida pod fiziološkim uslovima.
4.4 Farmaceutske kompozicije
[0038] Farmaceutske kompozicije za primenu u predmetnom pronalasku sadrže jedinjenje formule (1) i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. Međutim, predmetna objava takođe obuhvata farmaceutske kompozicije koje sadrže nitroksil donirajuće jedinjenje formule (2), (3), ili (4) i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. Primeri farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa uključuju one koji su iznad opisani, kao što su nosači, površinski aktivni agensi, agensi za zgušnjavanje ili emulgatori, čvrsti vezujući agensi, agensi za disperziju i suspenziju, solubilizatori, boje, arome, agensi sa oblaganje, agensi za raspadanje, lubrikanti, zaslađivači, konzervansi, izotonični agensi, i bilo koja njihova kombinacija. Odabir i upotreba farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa se razmatra, npr., u Troy, Ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21. izdanje (Lippincott Williams & Wilkins, Baltimor, MD, 2005).
[0039] U raznim tehničkim rešenjima, najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina. U posebnom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je ciklična struktura koja ima jedinice glukoze vezane pomoću α(1-4) veza. U drugom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je β-ciklodekstrin, t.j., ciklična struktura koja ima sedam jedinica glukoze vezanih pomoću α(1-4) veza. U drugom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je hemijski modifikovan derivatizacijom bilo koje kombinacije od tri dostupne hidroksilne grupe na svakoj njihovoj glukopiranoznoj jedinici.
[0040] U nekim tehničkim rešenjima gde farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina, ciklodekstrin je sulfo(C1-C6)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina. U nekim od ovih tehničkih rešenja, ciklodekstrin je sulfo(C1-C6)alkil etarski derivat βciklodekstrina koji ima od oko šest do oko sedam sulfo(C1-C6)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U raznim tehničkim rešenjima, ciklodekstrin je sulfo(C1-C6)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima prosek od oko šest do oko sedam sulfo(C1-C6)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo(C1-C6)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima šest ili sedam sulfo(C1-C6)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina.
[0041] U posebnim serijama tehničkih rešenja gde farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina, ciklodekstrin je sulfo(C3-C5)alkil etarski derivat βciklodekstrina. U jednom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo(C3-C5)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima od oko šest do oko sedam sulfo(C3-C5)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U raznim ovakvim tehničkim rešenjima, ciklodekstrin je sulfo(C3-C5)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima prosek od oko šest do oko sedam sulfo(C3-C5)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo(C3-C5)alkil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima šest ili sedam sulfo(C3-C5)alkil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina.
[0042] U posebnim tehničkim rešenjima gde farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina, ciklodekstrin je sulfobutil etarski derivat β-ciklodekstrin. U nekim od ovih tehničkih rešenja, ciklodekstrin je sulfobutil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima od oko šest do oko sedam sulfobutil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfobutil etarski derivat βciklodekstrina koji ima prosek od oko šest do oko sedam sulfobutil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfobutil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima šest ili sedam sulfobutil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina.
[0043] U određenim tehničkim rešenjima gde farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina, ciklodekstrin je sulfo-n-butil etarski derivat βciklodekstrina. U jednom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo-n-butil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima od oko šest do oko sedam sulfo-n-butil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo-nbutil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima prosek od oko šest do oko sedam sulfo-n-butil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina. U drugom ovakvom tehničkom rešenju, ciklodekstrin je sulfo-n-butil etarski derivat β-ciklodekstrina koji ima šest ili sedam sulfo-nbutil etarskih grupa po molekulu ciklodekstrina.
[0044] U raznim posebnim tehničkim rešenjima gde farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži najmanje jedan tip ciklodekstrina, ciklodekstrin sadrži mnoštvo negativnog naelektrisanja pri fiziološki kompatibilnim vrednostima pH, npr., pri pH od oko 5.0 do oko 6.8 u nekim tehničkim rešenjima, od oko 5.5 do oko 6.5 u nekim tehničkim rešenjima, od oko 5.7 do oko 6.3 u nekim tehničkim rešenjima, od oko 5.8 do oko 6.2 u nekim tehničkim rešenjima, od oko 5.9 do oko 6.1 u nekim tehničkim rešenjima, i oko 6.0 u posebnim tehničkim rešenjima. U jednom takvom tehničkom rešenju, najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens sadrži CAPTISOL® ciklodekstrin (Ligand Pharmaceuticals, La Jolla, CA).
[0045] Farmaceutske kompozicije mogu biti formulisane za administraciju u čvrstoj ili tečnoj formi, uključujući one prilagođene za sledeće: (1) oralnu administraciju, na primer, kao preparati koji se piju (na primer, vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije), tablete (na primer, one namenjene za bukalnu, sublingvalnu i sistemsku apsorbciju), kaplete, bolusi, praškovi, granule, paste za aplikaciju na jeziku, tvrde želatinozne kapsule, meke želatinozne kapsule, sprejevi za usta, pastile, lozenge, pelete, sirupi, suspenzije, eliksiri, tečnosti, emulzije i mikroemulzije; ili (2) parenteralnu administraciju putem, na primer, subkutane, intramuskularne, intravenske ili epiduralne injekcije kao, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija. Farmaceutske kompozicije mogu biti za trenutno, produženo ili kontrolisano otpuštanje.
[0046] U jednom posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija je formulisana za intravensku administraciju. U drugom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija je formulisana za intravensku administraciju putem kontinuirane infuzije.
[0047] U drugom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija je formulisana za oralnu administraciju. Jedinjenja za oralnu administraciju mogu biti formulisana kao tečne ili čvrste dozne forme. U posebnim tehničkim rešenjima gde su nitroksil donirajuća jedinjenja formulisana kao oralne tečne dozne forme, polietilen glikol 300 (PEG300) može korisno služiti kao ekscipijens.
[0048] Jedinjenja i farmaceutske kompozicije ovde stavljeni na uvid javnosti se mogu pripremiti kao bilo koja odgovarajuća jedinična dozna forma, kao što su kapsule, kesice, tablete, prašak, granule, rastvor, suspenzija u vodenoj tečnosti, suspenzija u nevodenoj tečnosti, ulje-u vodi tečna emulzija, voda-u-ulju tečna emulzija, lipozomi ili bolus.
[0049] Tablete mogu biti napravljene kompresijom ili oblikovanjem, po izboru sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Kompresovane tablete mogu biti pripremljene kompresijom u pogodnoj mašini terapijskog agensa ili agenasa u slobodno-protočnoj formi kao što su prašak ili granule, po izboru pomešanoj sa vezujućim agensom, lubrikantom, inertnim razblaživačem, konzervansom, površinski aktivnim ili agensom za disperziju. Oblikovane
2
tablete mogu biti napravljene oblikovanjem u pogodnoj mašini smeše jedinjenja u prahu nakvašenog sa inertnim tečnim razblaživačem. Tablete mogu po izboru biti obložene ili obeležene i mogu biti formulisane tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje njihovog aktivnog sastojka. Metode formulacije takvih kompozicija farmaceutski aktivnih sastojaka sa sporim ili kontrolisanim oslobađanjem, kao što su ovde prikazani terapijski agensi i druga jedinjenja poznata u oblasti, su poznate u stanju tehnike i stavljene na uvid javnosti u objavljenim američkim patentima, od kojih neki uključuju, ali nisu ograničeni na, Američke patente sa brojevima 4,369,174, 4,842,866, i reference navedene u njima. Agensi za oblaganje se mogu koristiti za dopremanje jedinjenja do creva (videti, npr., Američki patenti sa brojevima 6,638,534, 5,217,720, 6,569,457, i reference navedene u njima). Prosečni poznavalac oblasti će prepoznati da pored tableta, druge dozne forme mogu biti formulisane da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka. Ovakva dozne forme uključuju, ali nisu ograničene na, kapsule, granule ili gel-kapsule.
[0050] Farmaceutske kompozicije pogodne za topikalnu administraciju uključuju, bez ograničenja, lozenge koje sadrže sastojke u aromatizovanoj osnovi, kao što su sukroza, akacija i tragakant; i pastile koje sadrže aktivni sastojak u aromatizovanoj osnovi ili u inertnoj osnovi, kao što su želatin i glicerin.
[0051] Razna tehnička rešenja farmaceutskih kompozicija pogodnih za parenteralnu administraciju uključuju, bez ograničenja, ili vodene sterilne injekcione rastvore ili nevodene sterilne injekcione rastvore, od kojih svaki sadrži, na primer, anti-oksidanse, pufere, bakteriostatike i rastvore koji čine formulaciju izotoničnom sa krvlju nameravanog primaoca; i vodene sterilne suspenzije i nevodene sterilne suspenzije, od kojih svaka sadrži, na primer, agense za suspendovanje i agense za zgušnjavanje. Formulacije mogu biti date u pojedinačno-doznim ili multi-doznim posudama, na primer, zatvorenim ampulama ili bočicama, i mogu biti čuvane u stanju koje je dobijeno sušenjem zamrzavanjem (liofiliziranom stanju) čime se zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, kao što je voda, odmah pre upotrebe.
[0052] Farmaceutske kompozicije administrirane parenteralno mogu biti administrirane u kiselom, neutralnom ili baznom rastvoru. U jednom tehničkom rešenju, farmaceutske kompozicije koje sadrže nitroksil donirajuće jedinjenje predmetne objave mogu biti formulisane u kiselom rastvoru koji ima pH od oko 4 do oko 5, na primer, pH od oko 4, oko 4.5, oko 4.8, ili oko 5, uključujući vrednosti između. Dok se pH od oko 4 uopšteno smatrala optimalnom za formulisanje nitroksil donirajućih kompozicija čime se postizala adekvatna stabilnost jedinjenja, otkriveno je da formulisanje pod ovakvim kiselim uslovima može potencijalno izazvati ili pogoršati vensku iritaciju nakon parenteralne administracije. Stepen iritacije može biti smanjen formulacijom manje kiselih ili čak neutralnih rastvora nitroksil donirajućih jedinjenja (videti SLIKU 4). U skladu sa tim, u posebnim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuća jedinjenja predmetne objave mogu biti formulisana za parenteralnu upotrebu pri pH od oko 5 do oko 6.2 (npr., pH od oko 5, oko 5.5, oko 5.8, oko 6, ili oko 6,2, uključujući vrednosti između njih).
4.5 Metode upotrebe jedinjenja i farmaceutskih kompozicija predmetne objave [0053] Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za primenu u (a) metodi za modulisanje in vivo nivoa nitroksila, ili (b) metodi za lečenje bolesti li stanja koje reaguje na terapiju nitroksilom, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje formule (1) i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. Takođe stavljene na uvid javnosti, za svrhe upućivanja, su metode korišćenja jedinjenja trenutno stavljenih na uvid javnosti.
[0054] U jednom aspektu, predmetna objava obezbeđuje metodu za povećanje in vivo nivoa nitroksila, koja obuhvata administriranje pacijentu koji ima za njim potrebu efikasne količine jedinjenja ili farmaceutske kompozicije kao što je ovde stavljeno na uvid javnosti. U raznim tehničkim rešenjima, pacijent ima, sumnja se da ima, ili je u riziku da ima ili da se kod njega razvije stanje koje daje odgovor na nitroksil terapiju.
[0055] U posebnim tehničkim rešenjima, predmetna objava obezbeđuje metodu za lečenje, sprečavanje ili odlaganje početka i/ili razvoja stanja, koja obuhvata administriranje pacijentu (uključujući pacijenta kod koga je identifikovana potreba za ovakvim lečenjem, prevencijom ili odlaganjem) efikasne količine jedinjenja ili farmaceutske kompozicije kao što je ovde stavljeno na uvid javnosti. Identifikacija pacijenta koji ima potrebu za njima može biti u odluci lekara, kliničkog osoblja, osoblja službe hitne pomoći ili drugog stručnjaka iz oblasti zdravstva i može biti subjektivna (npr., mišljenje) ili objektivna (npr., merljiva pomoću test ili dijagnostičke metode).
[0056] Posebna stanja obuhvaćena metodama ovde stavljenim na uvid javnosti uključuju, bez ograničenja, kardiovaskularne bolesti, ishemijsko/reperfuzionu povredu, i plućnu hipertenziju (pulmonary hypertension - PH).
4.5.1 Kardiovaskularne bolesti
2
[0057] U jednom tehničkom rešenju, predmetna objava obezbeđuje metodu lečenja kardiovaskularne bolesti, koja obuhvata administriranje efikasne količine jedinjenja ili farmaceutske kompozicije kao što je ovde stavljeno na uvid javnosti pacijentu koji ima potrebu za njima.
[0058] Primeri kardiovaskularnih bolesti i simptoma koji mogu biti efikasno lečeni jedinjenjima i kompozicijama ovde stavljenim na uvid javnosti uključuju kardiovaskularne bolesti koje daju odgovor na terapiju nitroksilom, koronarne opstrukcije, koronarnu arterijsku bolest (coronary artery disease - CAD), anginu, srčani napad, infarkt miokarda, visok krvni pritisak, ishemijska kardiomiopatija i infarkt, plućna kongestija, plućni edem, srčanu fibrozu, valvularnu bolest srca, perikarditis, cirkulatorna kongestivna stanja, periferni edem, ascites, Chagas-ovu bolest, ventrikularnu hipertrofiju, bolest srčanih zalistaka, srčanu insuficijenciju, dijastolnu srčanu insuficijenciju, sistolnu srčanu insuficijenciju, kongestivnu srčanu insuficijenciju, akutnu kongestivnu srčanu insuficijenciju, akutnu dekompenzovanu srčanu insuficijenciju, i hipertrofiju srca.
4.5.1.1 Srčana insuficijencija
[0059] Nitroksil donirajuća jedinjenja i kompozicije predmetne objave mogu biti upotrebljena za lečenje pacijenata koji boluju od srčane insuficijencije. Insuficijencija srca može biti bilo kog tipa ili forme, uključujući bilo koju od srčanih insuficijencija ovde stavljenih na uvid javnosti. Neograničavajući primeri insuficijencije srca uključuju rano stanje srčane insuficijencije, Klasu I, II, III i IV srčane insuficijencije, akutnu srčanu insuficijenciju, kongestivnu insuficijenciju srca (congestive heart failure - CHF) i akutnu kongestivnu srčanu insuficijenciju. U jednom tehničkom rešenju, jedinjenja i kompozicije predmetne objave mogu biti upotrebljeni za lečenje akutne dekompenzovane srčane insuficijencije.
[0060] U tehničkim rešenjima gde se nitroksil donirajuća jedinjenja i kompozicije predmetne objave koriste za lečenje pacijenata koji boluju od srčane insuficijencije, drugi aktivni agens koji leči insuficijenciju srca takođe može biti administriran. U jednom takvom tehničkom rešenju, nitroksil donor može biti administriran u sprezi sa pozitivnim inotropom kao što je beta-agonist. Primeri beta-agonista uključuju, bez ograničenja, dopamin, dobutamin, izoproterenol, analoge ovakvih jedinjenja i derivate ovakvih jedinjenja. U drugom tehničkom rešenju, nitroksil donor može biti administriran u sprezi sa antagonistom beta-adrenergičkih receptora (takođe ovde naznačenim kao beta-antagonist ili beta-blokator). Primeri beta-
2
antagonista uključuju, bez ograničenja, propranolol, metoprolol, bisoprolol, bucindolol, i karvedilol.
[0061] Kao što je opisano u Primerima 6 i 7, razni modeli insuficijencije srca su korišćeni da se procene hemodinamski profili nekoliko nitroksil donirajućih jedinjenja predmetne objave. Kao što je prikazano na SLIKAMA 1-3, o kojima se diskutovalo u Primerima 6 i 7, jedinjenja formule (1) i formule (2) su proizvodila, na primer, značajno povećanje inotropije i lusitropije, i umereno smanjenje krvnog pritiska bez tahikardije. Štaviše, početak značajnih hemodinamskih efekata je bio brz (npr., u toku 1 sata) i skoro maksimalni efekat je postignut u toku 2 sata.
[0062] Dok je hemodinamska aktivnost jedinjenja formule (1) i formule (2) slična kompozicijama koje sadrže donor nitroksila CXL-1020 kada se administriraju intravenski, toksikološki profil jedinjenja formule (1) i formule (2), koja imaju duže polu-živote nego CXL-1020, je značajno poboljšan u poređenju sa kompozicijama koje sadrže CXL-1020 (videti Primer 9 i SLIKE 4 i 5). Na primer, "nivoi bez zapaženog neželjenog efekta" (No Observed Adverse Effect Levels - NOAEL) jedinjenja formule (1) i formule (2) su bili suštinski viši od NOAEL za CXL-1020 (videti Primer 9 za opis NOAEL određivanja). Naročito, jedinjenje formule (1) ima najpovoljniji toksikološki profil od svih donora nitroksila tipa N-hidroksisulfonamida koji su do sada testirani i ne prikazuje neželjene efekte na kliničke markere inflamacije kada se administrira intravenski u koncentracijama od barem 30 µg/kg/min (SLIKA 4). Nasuprot tome, CXL-1020 počinje da ispoljava neželjne sporedne efekte pri koncentracijama već od 0.3 µg/kg/min.
4.5.1.2 Ishemijsko/reperfuziona povreda
[0063] U drugom tehničkom rešenju, predmet stavljen na uvid javnosti obezbeđuje metodu za lečenje, sprečavanje ili odlaganje početka i/ili razvoja ishemijsko/reperfuzione povrede, koja obuhvata administriranje efikasne količine jedinjenja ili farmaceutske kompozicije kao što je ovde stavljeno na uvid javnosti pacijentu koji ima potrebu za njima.
[0064] U posebnom tehničkom rešenju, metoda je za sprečavanje ishemijsko/reperfuzione povrede. U posebnom tehničkom rešenju, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je primenjeno pre nastupanja ishemije. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirana pre procedura u kojima se može uočiti ishemija miokarda, na primer angioplastika ili operacija, kao što je bajpas graft operacija
2
koronarne arterije. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirana nakon ishemije ali pre reperfuzije. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirana nakon ishemije i reperfuzije.
[0065] U drugom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave može biti administrirana pacijentu koji je u riziku od ishemijskog događaja. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirana pacijentu koji je u riziku od budućeg ishemijskog događaja, ali koji nema prisutan dokaz ishemije. Određivanje da li je pacijent u riziku od ishemijskog događaja se može sprovesti bilo kojom metodom poznatom u oblasti, kao što je ispitivanjem pacijenta ili istorije bolesti pacijenta. U posebnom tehničkom rešenju, pacijent je imao prethodni ishemijski događaj. Tako, pacijent može biti u riziku od prvog ili kasnijeg ishemijskog događaja. Primeri pacijenta u riziku od ishemijskog događaja uključuju pacijente sa poznatom hiperholesterolemijom, EKG promenama udruženim sa ishemijom (npr., šiljati ili obrnuti T-talasi ili elevacije ST segmenata ili depresija u odgovarajućem kliničkom kontekstu), abnormalnim EKG-om koji nije povezan sa aktivnom ishemijom, povećanim CKMB, kliničkim dokazom ishemije (npr., snažni bol u grudima iza grudne kosti ili bol u ruci, kratak dah i/ili dijaforeza), prethodnom istorijom infarkta miokarda, povišenim serumskim holesterolom, statičnim stilom života, angiografskim dokazom parcijalne opstrukcije koronarne arterije, ehokardiografskim dokazom oštećenja miokarda, ili bilo kojim drugim dokazom rizika za budući ishemijski događaj. Primeri ishemijskih događaja uključuju, bez ograničenja, infarkt miokarda (MI) i neurovaskularnu ishemiju, kao što je cerebrovaskularni događaj (cerebrovascular accident -CVA).
[0066] U drugom tehničkom rešenju, predmet lečenja je organ koji treba da se transplantira. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave može biti administrirana pre reperfuzije organa kod primaoca transplantata. U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave može biti administrirana pre uklanjanja organa iz donora, na primer kroz perfuzione kanile korišćene u procesu uklanjanja organa. Ukoliko je donor organa živ donor, na primer donor bubrega, jedinjenja ili farmaceutske kompozicije predmetne objave mogu biti admiistrirane donoru organa. U posebnom tehničkom rešenju, jedinjenja ili farmaceutske kompozicije predmetne objave su administrirane skladištenjem organa u rastvor koji sadrži jedinjenje ili farmaceutsku kompoziciju. Na primer, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave može biti
2
deo rastvora za čuvanje organa, kao što je „University of Wisconsin“ - "UW" rastvor, rastvor koji sadrži hidroksietil skrob suštinski bez etilen glikola, etilen hlorohidrina i acetona (videti Američki patent sa brojem 4,798,824). U posebnom tehničkom rešenju, farmaceutska kompozicija predmetne objave koja je administrirana je takva da je ishemijsko/reperfuziona povreda tkiva organa redukovana nakon reperfuzije transplantiranog organa u primaocu. U posebnom tehničkom rešenju, metoda redukuje nekrozu tkiva (veličinu infarkta) u tkivima koja su u riziku.
[0067] Ishemijsko/reperfuziona povreda može oštetiti tkiva drugačija od miokardijuma i predmet objave stavljen na uvid javnosti obuhvata metode za lečenje i sprečavanje ovakvog oštećenja. U raznim tehničkim rešenjima, ishemijsko/reperfuziona povreda nije miokardijalna. U posebnim tehničkim rešenjima, metoda redukuje ishemijsko/reperfuzionu povredu u tkivu mozga, jetre, želuca, bubrega, creva ili bilo kog dela tela koje nije miokardijum. U drugom tehničkom rešenju, pacijent je u riziku od ovakve povrede. Odabir osobe u riziku za nemiokardijalnu ishemiju može uključiti određivanje pokazatelja koji su korišćeni za procenu rizika za ishemiju miokarda. Međutim, drugi faktori mogu ukazati na rizik od ishemije/reperfuzije u drugim tkivima. Na primer, operisani pacijenti često dožive ishemiju koja je u vezi sa operacijom. Tako, se može smatrati da su pacijenti koji su planirani za operaciju u riziku za ishemijski događaj. Sledeći faktori rizika za moždani udar (ili podvrsta ovih faktora rizika) mogu prikazati rizik pacijenta za ishemiju moždanog tkiva: hipertenzija, pušenje, stenoza karotidne arterije, fizička neaktivnost, diabetes mellitus, hiperlipidemija, prolazni ishemijski napad, atrijalna fibrilacija, bolest koronarnih arterija, kongestivna srčana insuficijencija, prethodni infarkt miokarda, disfunkcija leve komore sa muralnim trombon, i mitralna stenoza. Ingall, Postgrad. Med. 107(6):34-50 (2000). Dalje, komplikacije nelečene infektivne dijareje kod starije populacije mogu uključiti miokardijalnu, bubrežnu, cerebrovaskularnu i crevnu ishemiju. Slotwiner-Nie i ostali, Gastroenterol. Clin. N. Amer. 30(3):625-635 (2001). Alternativno, pacijenti mogu biti odabrani na osovu faktora rizika za crevnu, bubrežnu i/ili ishemijsku bolest jetre. Na primer, lečenje se započinje kod starijih pacijenata koji su u riziku od hipotenzivnih epizoda (kao što je gubitak krvi usled operacije). Stoga, za pacijente sa takvom indikacijom se smatra da su u riziku za ishemijski događaj. U drugom tehničkom rešenju, pacijent ima jedno ili više stanja koja su ovde navedena, kao što su diabetes mellitus i hipertenzija. Druga stanja koja mogu dovesti do
2
ishemije, kao što je cerebralna arteriovenska malformacija, mogu predstavljati rizik za ishemijski događaj kod pacijenta.
4.5.2 Plućna hipertenzija
[0068] U drugom tehničkom rešenju, jedinjenja ili farmaceutska kompozicija predmetne objave mogu biti upotrebljena za sprečavanje ili odlaganje početka i/ili razvoja plućne hipertenzije. U jednom ovakvom tehničkom rešenju, jedinjenja ili farmaceutska kompozicija predmetne objave mogu biti upotrebljene za sprečavanje ili odlaganje početka i/ili razvoja plućne arterijske hipertenzije (pulmonary arterial hypertension - PAH).
[0069] U drugom tehničkom rešenju, predmet stavljen na uvid javnosti obezbeđuje metodu za smanjenje srednjeg plućnog arterijskog pritiska (mean pulmonary arterial pressure - MPAP), koja obuhvata administriranje efikasne količine jedinjenja ili farmaceutske kompozicije stavljene ovde na uvid javnosti pacijentu koji ima potrebu za njima. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do oko 50%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do oko 25%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do oko 20%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do oko 15%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do 10%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen za do oko 5%. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen da bude od oko 12 mmHg do oko 16 mmHg. U drugom tehničkom rešenju, MPAP je snižen da bude oko 15 mmHg.
4.6 Načini administriranja, režimi i dozni nivoi
[0070] Jedinjenja i farmaceutske kompozicije predmetne objave mogu biti administrirani putem parenteralne (npr., subkutano, intramuskularno, intravenski ili intradermalno) administracije. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija je administrirano(a) intravenskom infuzijom. U drugim tehničkim rešenjima, jedinjenja i farmaceutske kompozicije predmetne objave mogu biti administrirane oralnom administracijom.
[0071] Kada je administrirana farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje predmetne objave, doze su predstavljene na osnovu količine aktivnog farmaceutskog sastojka, t.j., količine nitroksil donirajućeg(ih) jedinjenja predmetne objave prisutnog u farmaceutskoj kompoziciji.
[0072] Za intravensku administraciju, doza se korisno može izraziti po jedinici vremena, bilo kao fiksna količina po jedinici vremena ili kao količina na osnovu mase po jedinici vremena.
[0073] U raznim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano intravenski u količini od najmanje oko 0.1 µg/kg/min, najmanje oko 0.2 µg/kg/min, najmanje oko 0.3 µg/kg/min, najmanje oko 0.4 µg/kg/min, najmanje oko 0.5 µg/kg/min, najmanje oko 1 µg/kg/min, najmanje oko 2.5 µg/kg/min, najmanje oko 5 µg/kg/min, najmanje oko 7.5 µg/kg/min, najmanje oko 10 µg/kg/min, najmanje oko 11 µg/kg/min, najmanje oko 12 µg/kg/min, najmanje oko 13 µg/kg/min, najmanje oko 14 µg/kg/min, najmanje oko 15 µg/kg/min, najmanje oko 16 µg/kg/min, najmanje oko 17 µg/kg/min, najmanje oko 18 µg/kg/min, najmanje oko 19 µg/kg/min, najmanje oko 20 µg/kg/min, najmanje oko 21 µg/kg/min, najmanje oko 22 µg/kg/min, najmanje oko 23 µg/kg/min, najmanje oko 24 µg/kg/min, najmanje oko 25 µg/kg/min, najmanje oko 26 µg/kg/min, najmanje oko 27 µg/kg/min, najmanje oko 28 µg/kg/min, najmanje oko 29 µg/kg/min, najmanje oko 30 µg/kg/min, najmanje oko 31 µg/kg/min, najmanje oko 32 µg/kg/min, najmanje oko 33 µg/kg/min, najmanje oko 34 µg/kg/min, najmanje oko 35 µg/kg/min, najmanje oko 36 µg/kg/min, najmanje oko 37 µg/kg/min, najmanje oko 38 µg/kg/min, najmanje oko 39 µg/kg/min, ili najmanje oko 40 µg/kg/min.
[0074] U raznim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano intravenski u količini od ne više od oko 100 µg/kg/min, ne više od oko 90 µg/kg/min, ne više od oko 80 µg/kg/min, ne više od oko 70 µg/kg/min, ne više od oko 60 µg/kg/min, ne više od oko 50 µg/kg/min, ne više od oko 49 µg/kg/min, ne više od oko 48 µg/kg/min, ne više od oko 47 µg/kg/min, ne više od oko 46 µg/kg/min, ne više od oko 45 µg/kg/min, ne više od oko 44 µg/kg/min, ne više od oko 43 µg/kg/min, ne više od oko 42 µg/kg/min, ne više od oko 41 µg/kg/min, ne više od oko 40 µg/kg/min, ne više od oko 39 µg/kg/min, ne više od oko 38 µg/kg/min, ne više od oko 37 µg/kg/min, ne više od oko 36 µg/kg/min, ne više od oko 35 µg/kg/min, ne više od oko 34 µg/kg/min, ne više od oko 33 µg/kg/min, ne više od oko 32 µg/kg/min, ne više od oko 31 µg/kg/min, ili ne više od oko 30 µg/kg/min
[0075] U nekim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano intravenski u količini koja je u rasponu od oko 0.1 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, oko 1 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, oko 2.5 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, oko 5 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, oko 10 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, oko 1.0 µg/kg/min do oko 80 µg/kg/min, od oko 10.0 µg/kg/min do oko 70 µg/kg/min, od oko 20 µg/kg/min do oko 60 µg/kg/min, od oko 15 µg/kg/min do oko 50
1
µg/kg/min, od oko 0.01 µg/kg/min do oko 1.0 µg/kg/min, od oko 0.01 µg/kg/min do oko 10 µg/kg/min, od oko 0.1 µg/kg/min do oko 1.0 µg/kg/min, od oko 0.1 µg/kg/min do oko 10 µg/kg/min, od oko 1.0 µg/kg/min do oko 5 µg/kg/min, od oko 70 µg/kg/min do oko 100 µg/kg/min, ili od oko 80 µg/kg/min do oko 90 µg/kg/min.
[0076] U posebnim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano intravenski u količini u opsegu od oko 10 µg/kg/min do oko 50 µg/kg/min, oko 20 µg/kg/min do oko 40 µg/kg/min, oko 25 µg/kg/min do oko 35 µg/kg/min, ili oko 30 µg/kg/min do oko 40 µg/kg/min. U posebnim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano intravenski u količini od oko 20 µg/kg/min do oko 30 µg/kg/min.
[0077] U raznim tehničkim rešenjima, uključujući razna tehnička rešenja oralne administracije, jedinjenja ili farmaceutske kompozicije predmetne objave su administrirana u skladu sa dnevnim doznim režimom na osnovu mase, bilo kao pojedinačna dnevna doza (single daily dose - QD) ili u više podeljenih doza administriranih, npr., dva puta dnevno (twice a day - BID), tri puta dnevno (three times a day TID), ili četiri puta dnevno (four times a day - QID).
[0078] U određenim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano u dozi od najmanje oko 0.5 mg/kg/d, najmanje oko 0.75 mg/kg/d, najmanje oko 1.0 mg/kg/d, najmanje oko 1.5 mg/kg/d, najmanje oko 2 mg/kg/d, najmanje oko 2.5 mg/kg/d, najmanje oko 3 mg/kg/d, najmanje oko 4 mg/kg/d, najmanje oko 5 mg/kg/d, najmanje oko 7.5 mg/kg/d, najmanje oko 10 mg/kg/d, najmanje oko 12.5 mg/kg/d, najmanje oko 15 mg/kg/d, najmanje oko 17.5 mg/kg/d, najmanje oko 20 mg/kg/d, najmanje oko 25 mg/kg/d, najmanje oko 30 mg/kg/d, najmanje oko 35 mg/kg/d, najmanje oko 40 mg/kg/d, najmanje oko 45 mg/kg/d, najmanje oko 50 mg/kg/d, najmanje oko 60 mg/kg/d, najmanje oko 70 mg/kg/d, najmanje oko 80 mg/kg/d, najmanje oko 90 mg/kg/d, ili najmanje oko 100 mg/kg/d.
[0079] U određenim tehničkim rešenjima, nitroksil donirajuće jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano u dozi od ne više od oko 100 mg/kg/d, ne više od oko 100 mg/kg/d, ne više od oko 90 mg/kg/d, ne više od oko 80 mg/kg/d, ne više od oko 80 mg/kg/d, ne više od oko 75 mg/kg/d, ne više od oko 70 mg/kg/d, ne više od oko 60 mg/kg/d, ne više od oko 50 mg/kg/d, ne više od oko 45 mg/kg/d, ne više od oko 40 mg/kg/d, ne više od oko 35 mg/kg/d, ne više od oko 30 mg/kg/d.
2
[0080] U raznim tehničkim rešenjima, doza je od oko 0.001 mg/kg/d do oko 10,000 mg/kg/d. U određenim tehničkim rešenjima, doza jeod oko 0.01 mg/kg/d do oko 1,000 mg/kg/d. U određenim tehničkim rešenjima, doza je od oko 0.01 mg/kg/d do oko 100 mg/kg/d. U određenim tehničkim rešenjima, doza je od oko 0.01 mg/kg/d do oko 10 mg/kg/d. U određenim tehničkim rešenjima, doza je od oko 0.1 mg/kg/d do oko 1 mg/kg/d. U određenim tehničkim rešenjima, doza je niža od oko 1 g/kg/d.
[0081] U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano u doznom opsegu u kom je donja granica opsega bilo koja količina od oko 0.1 mg/kg/dan do oko 90 mg/kg/dan i gornja granica opsega je bilo koja količina od oko 1 mg/kg/dan do oko 100 mg/kg/dan (npr., od oko 0.5 mg/kg/dan do oko 2 mg/kg/dan u jednom nizu tehničkih rešenja i od oko 5 mg/kg/dan do oko 20 mg/kg/dan u drugom nizu tehničkih rešenja).
[0082] U posebnim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave je administrirano u doznom opsegu od oko 3 do oko 30 mg/kg, administrirano od jednom dnevno (QD) do tri puta dnevno (TID).
[0083] U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenja ili farmaceutske kompozicije predmetne objave su administrirane u skladu sa konstantnim (t.j., koji nije baziran na masi) doznim režimom, bilo kao pojedinačna dnevna doza (QD) ili u višestruko podeljenim dozama administriranim, npr., dva puta dnevno (BID), tri puta dnevno (TID), ili četiri puta dnevno (QID).
[0084] U raznim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave su administrirane u dozi od najmanje oko 0.01 grama/dan (g/d), najmanje oko 0.05 g/d, najmanje oko 0.1 g/d, najmanje oko 0.5 g/d, najmanje oko 1 g/d, najmanje oko 1.5 g/d, najmanje oko 2.0 g/d, najmanje oko 2.5 g/d, najmanje oko 3.0 g/d, ili najmanje oko 3.5 g/d.
[0085] U raznim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave su aministrirane u dozi od ne više od oko 5 g/d, ne više od oko 4.5 g/d, ne više od oko 4 g/d, ne više od oko 3.5 g/d, ne više od oko 3 g/d, ne više od oko 2.5 g/d, ili ne više od oko 2 g/d.
[0086] U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave su administrirani u dozi od oko 0.01 grama po danu do oko 4.0 grama po danu. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija predmetne objave mogu biti administrirani u dozi gde je donja granica opsega bilo koja količina od oko 0.1 mg/dan do oko 400 mg/dan i gornja granica opsega je bilo koja količina od oko 1 mg/dan do oko 4000 mg/dan. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija su administrirani u dozi od oko 5 mg/dan do oko 100 mg/dan. U raznim tehničkim rešenjima, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija su administrirani u dozi od oko 150 mg/dan do oko 500 mg/dan.
[0087] Dozni interval za parenteralnu ili oralnu administraciju može biti podešen u skladu sa potrebama pacijenta. Za duže intervale između administracija, mogu se koristiti formulacije produženog oslobađanja ili depo formulacije.
[0088] Jedinjenje ili farmaceutska kompozicija kao što je stavljeno ovde na uvid javosti mogu biti administrirani pre, u suštinski isto vreme sa, ili nakon administracije dodatnog terapijskog agensa. Administracioni režim može uključiti predtretman i/ili istovremenu administraciju sa dodatnim terapijskim agensom. U takvom slučaju, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija i dodatni terapijski agens mogu biti administrirani istovremeno, pojedinačno, ili redom.
[0089] Primeri administracionih režima uključuju bez ograničenja: administraciju svakog jedinjenja, farmaceutske kompozicije ili terapijskog agensa zaredom; i istovremenu administraciju svakog jedinjenja, farmaceutske kompozicije ili terapijskog agensa suštinski istovremeno (npr., kao u pojedinačnoj doznoj formi) ili u višestrukim, odvojenim jediničnim doznim formama za svako jedinjenje, farmaceutsku kompoziciju ili terapijski agens.
[0090] Prosečni poznavaoci oblasti će razumeti da "efikasna količina" ili "doza" ("dozni nivo") zavise od raznih faktora kao što je poseban način administracije, administracioni režim, jedinjenje, i odabrane farmaceutske kompozicije, kao i od posebnog stanja i pacijenta koji se leči. Na primer, odgovarajući dozni nivo može varirati zavisno od aktivnosti, brzine izlučivanja i potencijala za toksičnost specifičnog jedinjenja ili farmaceutske kompozicije koja je upotrebljena; starosti, telesne mase, opšteg zdravlja, pola i ishrane lečenog pacijenta; učestalosti administracije; drugog terapijskog agensa(agenasa) koji je ko-administriran; i vrste i ozbiljnosti stanja.
4.7 Kitovi koji sadrže jedinjenja ili farmaceutske kompozicije
[0091] Predmetna objava obezbeđuje kitove koji sadrže jedinjenje ili farmaceutsku kompoziciju ovde stavljenu na uvid javnosti. U posebnom tehničkom rešenju, kit sadrži
4
jedinjenje ili farmaceutsku kompoziciju ovde stavljenu na uvid javosti, svako u suvoj formi, i farmaceutski prihvatljiv tečni razblaživač.
[0092] U posebnim tehničkim rešenjima, bilo jedinjenje u suvoj formi ili farmaceutska kompozicija u suvoj formi sadrži oko 2.0% ili manje vode po masi, oko 1.5% ili manje vode po masi, oko 1.0% ili manjevode po masi, oko 0.5% ili manje vode po masi, oko 0.3% ili manje vode po masi, oko 0.2% ili manje vode po masi, oko 0.1% ili manje vode po masi, oko 0.05% ili manje vode po masi, oko 0.03% ili manje vode po masi, ili oko 0.01% ili manje vode po masi.
[0093] Farmaceutski prihvatljivi tečni razblaživači su poznati u oblasti i uključuju ali nisu ograničeni na sterilnu vodu, fiziološke rastvore, vodenu dekstrozu, glicerol, glicerolske rastvore, i slično. Drugi primeri pogodnih tečnih razblaživača su stavljeni na uvid javnosti od strane Nairn-a, "Solutions, Emulsions, Suspensions and Extracts," str. 721-752 u Remingtonu: The Science and Practice of Pharmacy, 20. Izdanje (Lippincott Williams & Wilkins, Baltimor, MD, 2000).
[0094] U jednom tehničkom rešenju, kit dalje sadrži instrukcije za upotrebu jedinjenja ili farmaceutske kompozicije. Instrukcije mogu biti u bilo kojoj odgovarajućoj formi, kao što je pisana ili elektronska forma. U drugom tehničkom rešenju, instrukcije mogu biti pisane instrukcije. U drugom tehničkom rešenju, instrukcije se nalaze u elektronskom medijumu za čuvanje (npr., magnetska disketa ili optički disk). U drugom tehničkom rešenju, instrukcije uključuju informacije o jedinjenju ili farmaceutskoj kompoziciji i načinu administriranja jedinjenja ili farmaceutske kompozicije pacijentu. U drugom tehničkom rešenju, instrukcije se odnose na način korišćenja ovde stavljen na uvid javnosti (npr., lečenje, sprečavanje i/ili odlaganje početka i/ili razvoja stanja odabranog od kardiovaskularnih bolesti, ishemijsko/reperfuzione povrede, plućne hipertenzije i drugih stanja koja daju odgovor na terapiju nitroksilom).
[0095] U drugom tehničkom rešenju, kit dalje sadrži pogodno pakovanje. Kada kit sadrži više od jednog jedinjenja ili farmaceutske kompozicije, jedinjenja ili farmaceutske kompozicije mogu biti strpljivo pakovane u zasebne posude, ili kombinovane u jednoj posudi kada dozvoljavaju ukrštena-reaktivnost i rok trajanja.
5. PRIMERI
[0096] Sledeći primeri su prikazani u ilustrativne svrhe i ne treba da služe da ograniče obim predmeta stavljenog na uvid javnosti.
5.1 Sinteza jedinjenja
[0097] Jedinjenja ovde stavljena na uvid javnosti mogu biti proizvedena u skladu sa metodama stavljenim na uvid javnosti u tekstu ispod ili pomoću procedura poznatih u oblasti. Polazni materijali za reakcije mogu biti komercijalno dostupni ili mogu biti pripremljeni pomoću poznatih procedura ili njihovih očiglednih modifikacija. Na primer, neki od polaznih materijala su dostupni od komercijalnih dobavljača kao što je Sigma-Aldrich (St. Louis, MO). Drugi mogu biti pripremljeni pomoću procedura ili njihovih očiglednih modifikacija stavljenih na uvid javnosti u standardnim referentnim tekstovima kao što su March's Advanced Organic Chemistry (John Wiley and Sons) i Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Izdavači).
Primer 1: Priprema N-Hidroksi-5-metilfuran-2-sulfonamida (1)
[0098] U rastvor hidroksilamina (0.92 mL 50% vodeni rastvor; 13.8 mmol) u THF-u (6 mL) i vodi (2 mL) ohlađenom na 0°C je dodavan je u kapima 5-metilfuran-2-sulfonil hlorid (1 g, 5.5 mmol) kao rastvor u THF-u (6 mL) tako da se održi temperatura ispod 10°C. Reakcija je mešana tokom 5 minuta, nakon čega je TLC (1:1 heksan:etil acetat (H:EA)) pokazao suštinski potpunu potrošnju sulfonil hlorida. Reakcija je razblažena dva puta sa 50 mL dihlorometanom (DCM) i organski deo je izdvojen i ispran sa vodom (10 mL). Organski deo je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Proizvod je hromatografiran pomoću silika gel hromatografije eluiran sa heptanima:EtOAc praćen trituracijom sa heptanom da se obezbedi jedinjenje navedeno u naslovu kao čvrsta supstanca žute boje (0.59 g, prinos 61%). LC-MS tR= 0.91 min;<1>H NMR (DMSO, 500 MHz) δ ppm 9.82 (1 H, d, J=3.1 Hz), 9.64 (1 H, d, J=3.2 Hz), 7.10 (1 H, d, J=3.4 Hz), 6.36 (1 H, d, J=3.4 Hz), 2.36 (3 H, s).
Primer 2: Priprema N-Hidroksi-3-metansulfonilbenzen-1-sulfonamida (2) (Referentni primer)
3-Metansulfonilbenzen-1-sulfonil hlorid
[0099] Intermedijer 3-metansulfonilbenzen-1-sulfonil hlorid je sintetisan u skladu sa metodama stavljenim na uvid javnosti u Park i ostali., J. Med. Chem. 51(21):6902-6915 (2008). Specifično, metil sulfonil benzen (110 g, 0.7 mol) je zagrevan tokom 18 sati na 90°C u hlorosulfonskoj kiselini (450 mL, 6.7 mol) nakon čega je reakcionoj smeši dozvoljeno da se ohladi na temperaturu od oko 21°C pre nego što je lagano sipana na zdrobljen led. Dobijeni mulj je dva puta ekstrahovan u EtOAc-u (2 L za svaku ekstrakciju). Organski delovi su kombinovani i isprani sa slanim rastvorom (50 mL) pre nego što se osuše preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se obezbedi intermedijer sulfonil hlorid kao čvrsta supstanca bele boje (125 g, prinos 75%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.61 (1 h, t, J=1.7 Hz), 8.35-8.31 (2 H, m), 7.90 (1 H, t, J=7.9 Hz), 3.15 (3 H, s).
N-Hidroksi-3-metansulfonilbenzen-1-sulfonamid
[0100] U rastvor vodenog hidroksilamina (16 mL 50%-tnog vodenog rastvora, 245 mmol) u THF-u (150 mL) i vodi (25 mL) ohlađenom na -5°C je polako dadan 3-metansulfonilbenzen-1-sulfonil hlorid (25 g, 98 mmol) održavajući reakcionu temperaturu ispod 10°C. Reakcija je održavana na ovoj temperaturi sve dok nje primećena suštinski potpuna potrošnja sulfonil hlorida (oko 5 min), nakon čega je reakcija razblažena sa DCM-om (250 mL), organski deo je izdvojen i ispran dva puta sa 50 mL vode. Vodeni ekstrakti su kombinovani i ponovo isprani dva puta sa DCM-om (250 mL za svako ispiranje). Svi organski delovi su kombinovani, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se obezbedi jedinjenje navedeno u naslovu kao čvrsta supstanca bež boje. Trituracija je sprovedena upotrebom heptana:EtOAc (1:1; v:v) da se obezbedi jedinjenje navedeno u naslovu kao čvrsta supstanca bež boje (14 g, prinos 56%). LC-MS tR= 0.90 min; masena spektroskopija visoke rezolucije (High Resolution Mass Spectroscopy - HRMS): teorijski (C7H9NO5S2) = 249.9844, mereno = 249.9833;<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.85 (2 H, q, J=3.3 Hz), 8.31 (1 H, t, J=1.6 Hz), 8.28 (1 H, dt, J=7.8, 1.3 Hz), 8.14-8.19 (1 H, m), 7.93 (1 H, t, J=7.9 Hz), 3.32 (3 H, s).
5.2 Primer 3: Proizvodnja nitroksila kao što je određeno putem N2O kvantifikacije [0101] Azotni oksid (N2O) se proizvodi putem dimerizacije i dehidratacije HNO, i najčešći je marker za proizvodnju nistroksila (Fukuto i ostali., Chem. Res. Toxicol. 18:790-801 (2005)). Nitroksil, međutim, može takođe biti delimično kvenčovan kiseonikom da se obezbedi proizvod koji ne proizvodi N2O (viddeti Mincione i ostali, J. Enzyme Inhibition 13:267-284 (1998); i Scozzafava i ostali, J. Med. Chem. 43:3677-3687 (2000)). Korišćenjem bilo gasa azotnog oksida ili Angeli-ove soli (AS) kao standarda, relativne količine N2O oslobođene iz jedinjenja predmetne objave su ispitane „headspace” analizom gasnom hromatografijom.
[0102] Procedura za određivanje relativnih količina N2O koji se oslobađa iz jedinjenja predmetne objave je kao što sledi. GC je sprovedena na Agilent gasnom hromatografu koji je opremljen injektorom za deljenje (10:1 deljenje), detektorom za zarobljavanje mikroelektrona, i kapilarnom kolonom sa molekulskim sitom HP-MOLSIV 30 m x 0.32 mm x 25 µm. Helijum je korišćen kao gas nosač (4 mL/min) i azot (20 mL/min) je korišćen kao gas za poboljšanje karakteristika. Injekciona peć i peć detektora su držane na 200°C i 325°C, redom. Sve analize azot oksida su sprovedene pri održavanju konstantne temperature kolonske peći na 200°C.
[0103] Sva injektiranja gasa su izvedena korišćenjem automatizovanog „headspace” analizatora. Pritisak na bočicu je bio 15 psi. Peć analizatora uzorka, ventila za uzorkovanje, i linije transfera je održavana na 40°C, 45°C, i 50°C, redom. Vremena stabilizacije peći, pritiska u bočici, popunjavanja petlje, izjednačavanja petlje, i injektiranja uzorka su bila 1.00 min., 0.20 min., 0.20 min., 0.05 min., i 1.00 min., redom.
[0104] Sva određivanja su koristila seriju nominalnih „headspace” bočica od 20 mL sa zapreminama koje su prethodno merene zbog uniformnosti uzoraka (stvarna zapremina bočice je varirala za ≤ 2.0% relativne standardne devijacije (n=6)). Prosečna zapremina bočice za seriju je određena iz šest nasumično izabranih bočica računanjem razlike u masi poklopljene i zatvorene prazne (t.j., vazduhom ispunjene) bočice i poklopljene i zatvorene bočice ispunjene dejonizovanom vodom korišćenjem poznate gustine dejonizovane vode, potom uprosečavanjem. Slepa proba je pripremljena poklapanjem i zatvaranjem dve bočice od kojih je svaka pročišćena blagom strujom argona tokom 20 sekundi. Standardi nitroksila su pripremljeni poklapanjem i zatvaranjem četiri bočice od kojih je svaka pročišćena tokom 1 minuta blagom strujom, iz gas cilindra, nitroksil standarda od 3000 ppm.
[0105] CXL-1020 (N-hidroksi-2-metansulfonilbenzen-1-sulfonamid) "standardi" su pripremljni, u dva primerka, tačnim merenjem 10±0.5 mg CXL-1020-a i njihovim dodavanjem u svaku bočicu od 4ml. Korišćenjem automatske pipete, 1 mL argonompročišćenog anhidrovanog DMF-a (Sigma-Aldrich) se dodaje u svaku bočicu od 4 mL da se formira CXL-1020 zasićen rastvor za svaki uzorak i bočice se poklope i promućkaju i/ili sonifikuju da se osigura potpuno rastvaranje što se vizuelno posmatra. Korišćenjem automatske pipete, bočice od 20 mL se pune sa 5 mL PBS-a (pročišćen argonom tokom barem 30 min pre upotrebe), pročišćene argonom tokom najmanje 20 sek., i zatvaraju sa gumenim zatvaračem. Korišćenjem šprica od 50 µL, 50 µL koncentrovanog rastvora CXL-1020-a se injektira u svaku bočicu od 20 mL koja sadrži PBS.
[0106] Uzorci se pripremaju kao što sledi. U dva primerka, 18±1 mg svakog uzorka se precizno odmerava u svaku bočicu od 4 mL. Korišćenjem automatske pipete, 1 mL argonom prečišćenog anhidrovanog DMF-a se dodaje u svaku bočicu od 4 ml čime se formira koncentrovani rastvor uzorka za svaki uzorak i bočice se pokrivaju i mućkaju i/ili sonifikuju da se obezbedi potpuno rastvaranje uzorka što se vizuelno posmatra. Korišćenjem automatske pipete, bočice od 20 mL se pune sa 5 mL PBS-a (pročišćen argonom tokom barem 30 min pre upotrebe) pročišćenog argonom tokom najmanje 20 sek., i zatvaraju sa gumenim zatvaračem. Bočice se ekvilibrišu tokom najmanje 10 min. na 37°C u suvom blok grejaču. Nakon toga, korišćenjem šprica od 50 µL, 50 µL koncentrovanog rastvora uzorka se injektira u svaku bočicu od 20 mL koja sadrži PBS. Bočice se potom drže na 37°C u suvom blok grejaču tokom perioda takvom da je zbir vremena provedenog u suvom blok grejaču i vremena provedenog u peći sa automatizovanim „headspace” analizatorom pre injektiranja jednak željenom vremenu inkubacije.
[0107] Redosled auto-injektiranja je kao što sledi: replikat 1 slepe probe, replikat 2 slepe probe, replikat 1 N2O standarda, replikat 2 N2O standarda, replikat 1 CXL-1020 standarda, replikat 2 CXL-1020 standarda, replikat 1 uzorka 1, replikat 2 uzorka 1, replikat 1 uzorka 2, replikat 2 uzorka 2, itd., zaključno sa replikatom 3 N2O standarda, i replikatom 4 N2O standarda. EXCEL tabela se koristi za unos tako određenih podataka i za računanje, za svaki uzorak, relativnog prinosa N2O u procentima za svako vreme inkubacije. Dobijeni rezultati su obezbeđeni u Tabeli 2.
Tabela 2. Rezultati „headspace” analize N2O
[0108] Za jedinjenja sa formulama (3) i (4), određivanja su kao što je iznad opisano izuzev enzimski aktiviranih uzoraka takođe sprovedena na sledeći način: (i) tačno odmeravanje 50 mg svinjske jetrene esteraze (porcine liver esterase - PLE, E3019-20KU, sirova, Sigma-Aldrich) u headspace bočicu od 20 mL; (ii) korišćenjem automatske pipete, 5 mL argonom pročišćenog anhidrovanog PBS-a se dodaje da bi se formirao zasićeni rastvor PLE-a; (iii) bočica se zatvara i mućka da se obezbedi potpuno rastvaranje što se vizuelno posmatra; (iv) uzorci nitroksil donora se pripremaju kao što je iznad stavljeno na uvid javnosti sem što se dodaje 4.75 mL PBS-a umesto 5 mL; i (v) korišćenjem automatske pipete, bočice od 20 mL se potom pune sa 250 µmL koncentrovanog rastvora PLE-a pre dodatka uzorka. Raspored auto-injektiranja je kao što sledi: replikat 1 slepe probe, replikat 2 slepe probe, replikat 1 N2O standarda, replikat 2 N2O standarda, replikat 1 CXL-1020 standarda, replikat 2 CXL-1020 standarda, replikat 1 uzorka 1 (bez PLE), replikat 2 uzorka 1 (bez PLE), replikat 1 uzorka 1 (sa PLE), replikat 2 uzorka 1 (sa PLE), replikat 1 uzorka 2 (bez PLE), replikat 2 uzorka 2 (bez PLE), replikat 1 uzorka 2 (sa PLE), replikat 2 uzorka 2 (sa PLE), itd., zaključno sa replikatom 3 N2O standarda, i replikatom 4 N2O standarda.
[0109] Druga procedura za određivanje relativnih količina N2O koji se oslobađa iz jedinjenja predmetne objave je kao što sledi. GC je sprovedena na Varian CP-3800 instrumentu koji je opremljen sa 1041 ručnim injektorom, detektorom zarobljavanja elektrona, i kapilarnom kolonom sa molekulskim sitom 25 m 5Å. Azot stepena 5.0 se koristi i kao nosač (8 mL/min) i kao gas za povećanje senzitivnosti (22 mL/min). Peć injektora i peć detektora se održavaju na 200°C i 300°C, redom. Sve analize azot oksida su izvršene pri održavanju kolonske peći na konstantnoj temperaturi od 150°C. Sva injektiranja gasa su izvršena korišćenjem šprica koji ne ispušta gas i onemogućava gubitak uzorka od 100 µL. Uzorci su pripremljeni u tamno žutim „headspace” bočicama od 15 mL sa zapreminama prethodno odmerenim zbog uniformnosti uzoraka (stvarna zapremina bočice se kreće u opsegu od 15.19 do 15.20 mL). Bočice se pune sa 5 mL PBS-a koji sadrži dietilentriamin pentaacetatni anhidrid (DTPA), prečišćenim sa argonom, i zatvaraju se gumenim zatvaračem. Bočice se ekvilibrišu tokom najmanje 10 minuta na 37°C u suvom blok grejaču. 10 mM zasićenog rastvora AS-a se priprema u 10 mM natrijum hidroksida, i rastvori nitroksil donora se pripremaju ili u acetonitrilu ili metanolu i koriste odmah nakon pripreme. Od ovih koncentrovanih rastvora, 50 µL se uvodi u individualne termalno-ekvilibrisane „headspace” bočice korišćenjem šprica
4
koji ne ispušta gas i onemogućava gubitak uzorka od 100 µL čime se obezbeđuju finalne koncentracije supstrata od 0.1 mM. Supstrati se potom inkubiraju tokom 90 minuta ili 360 minuta. Slobodan prostor (60 µL) se tada uzorkuje i injektira pet puta zaredom u GC aparaturu korišćenjem šprica koji ne ispušta gas i onemogućava gubitak uzorka. Ova procedura se ponavlja za dve ili više bočica po donoru.
5.3. Primer 4: In Vitro stabilnost nitroksil donora u plazmi
[0110] Jedinjenje (1), jedinjenje (2), i CXL-1020 su testirani na njihovu stabilnost u plazmi. Sistem ispitivanja sadrži (i) PBS, ili plazmu pacova, pasa ili humanu plazmu (najmanje 3 donora, mukog pola, objedinjeno) pri pH 7.4, i (ii) za testove koji se sprovode u plazmi, antikoagulans (natrijum heparin ili natrijum citrat). Svako test jedinjenje (5 µM) se inkubira u PBS-u ili plazmi na 37°C u THERMOMIXER®-u uz mešanje. Tri uzorka (n=3) se uzimaju na svakoj od sedam vremenskih tačaka za uzorkovanje: 0, 10, 30, 60, 90, 180 i 360 minuta. Uzorci se odmah kombinuju sa 3 zapremine (t.j., 3 puta zapremina PBS-a ili plazme) acetonitrila koji sadrži 1% mravlje kiseline i interni standard da bi se reakcija završila. AB SCIEX API 3000 LC-MS/MS analiza test jedinjenja se sprovodi bez standardne krive. Poluživoti (T1/2) test jedinjenja se određuju sa grafikona procenta preostalih vrednosti korišćenjem odnosa: površina ispod pika/odgovor. Određeni polu-životi su obezbeđeni u Tabeli 3.
Tabela 3. Polu-životi (T 1⁄2) Nitroksil donora
[0111] Za merenje polu-života jedinjenja formule (3) ili formule (4), koncentrovani rastvor svinjske jetrene esteraze (pig liver esterase - PLE) se dodaje u PBS ili plazmu pre dodavanja navedenog jedinjenja.
5.4. Primer 5: Rastvorljivost nitroksil donora
[0112] Na početku, rastvorljivosti jedinjenja formule (1) i formule (2) su merene vizuelnom procenom u 100 µg/ml i 1000 µg/mL u puferu sa pH 4. Pufer je pripremljen mešanjem 660 mL Rastvora A (10.5023 g limunske kiseline rastvoreno u 1 L vode) i 450 mL Rastvora B (14.7010 g natrijum citrat tribaznog dihidrata rastvorenog u 1 L vode). pH pufera je bio 3.98 kao što je izmereno pH metrom.
[0113] Svako jedinjenje je mućkano tokom oko 5 minuta u rastvoru pufera pri pH 4 koji je prethodno pripremljen u dve koncentracione tačke (100 µg/mL i 1000 µg/mL) i rastvorljivost je vizuelno posmatrana. Dobijeni rezultati su prikazani u Tabeli 4.
Tabela 4. Rastvorljivost u puferu sa pH 4 pri 100 µg/mL i 1000 µ/mL
[0114] Dodatno, uzorak jedinjenja formule (1) je pripremljen u vodi da bi se odredila prosečna rastvorljivost jedinjenja u odsustvu ekscipijenasa (npr., CAPTISOL®). Postignuta je koncentarcija od približno 300 mg/mL, ne računajući zapreminski doprinos jedinjenja. Određeno je da je pH uzorka 2.8, što je prilagođeno na ciljanih 4.0 korišćenjem 0.1 N NaOH. Nakon prilagođavanja pH, uočeno je taloženje male količine čvrste supstance. Bistar rastvor je razblažen u acetonitrilu i analiziran pomoću tečne hromatografije visokih performansi (High-performance liquid chromatography – HPLC), čime je dobijena koncentracija posmatranog rastvora od 268 mg/mL. Slična analiza je sprovedena za jedinjenje formule (2). Jedinjenje formule (2) ima rastvorljivost od približno 10 mg/mL.
5.5 Primer 6: Hemodinamska efikasnost nitroksil donora kod normalnih i pasa sa srčanom insuficijencijom (Tahikardni pejsing Model)
5.5.1 Materijali i metode
[0115] Kardiovaskularni efekti nitroksil donora su ispitani pomoću analize pritisakzapremina (pressure-volume - PV) krive (petlji) kod svesnih, imobilisanih bigl pasa. Životinjama je dozvoljeno da slobodno piju vodu i da jedu komercijalnu pseću hranu pod standardnim laboratorijskim uslovima. Fluorescentno osvetljenje je obezbeđeno pomoću automatskog tajmera tokom približno 12 sati po danu. Povremeno, tamni ciklus je privremeno prekidan usled aktivnosti vezanih za studiju. Temperatura i vlažnost su praćeni i svakodnevno snimani i održavani u maksimalnoj mogućoj meri između 64°F i 84°F i 30% do 70%, redom. Psi su aklimatizovani tokom perioda od najmanje 1 nedelje pre operacije. Nakon operacije i oporavka životinje su prilagođene na imobilizaciju tokom perioda do 4.5 sata. Živiotinje nisu jele tokom noći pre operacije.
Hirurška procedura
Anestezija
[0116] Trajni venski kateter je postavljen u perifernu venu (npr., cefaličnu) za administraciju anestetika. Opšta anestezija je indukovana intravenski (bolus) sa buprenorfinom (oko 0.015 mg/kg) praćenog intravenskim bolusom propofola (oko 6 mg/kg). Dodatno, profilaktički antibiotik (cefazolin 20 do 50 mg/kg i.v.) je dat nakon indukcije. Trahealna cev sa „cuff-om“ je plasirana i korišćena je za mehaničku ventilaciju pluća sa 100% O2pomoću volumencikličnog ventilatora za životinje (oko 12 udisaja/minut sa disajnim volumenom od oko 12.5 mL/kg) kako bi se održale vrednosti PaCO2u okviru fiziološkog opsega. Anestezija je održavana sa inhaliranim izofluranom (1% do 3%).
Kardiovaskularna instrumentacija
[0117] Kada se uspostavi stabilni (hirurški) nivo anestezije, leva-torakotomija je izvedena (pod strogo aseptičnim uslovima) i svaka životinja je stalno opremljena sa sonomikrometarskim kristalima koji obezbeđuju dimenzije/zapreminu leve komore. Dodatno, fluidom ispunjen kateter i manometar čvrstog stanja su plasirani u levu komoru zbog praćenja pritiska. Fluidom ispunjen kateter je postavljen u desnu komoru (right ventricle - RV) i aortu
4
(Ao) zbog praćenja pritiska/administracije test supstance. Hidraulični (In-Vivo merenja) zatvarač je postavljen/osiguran oko donje šuplje vene (inferior vena cava - IVC), da bi obezbedio njenu kontrolisanu konstrikciju za stvaranje LV pritisak-zapremina kriva tokom heterometrijske auto-regulacije. Kateteri/žice su aseptički uvedeni i eksternalizovani između lopatica. Tokom studije, fluidom ispunjeni kateteri su redovno (najmanje jednom nedeljno) ispirani sa lock-rastvorom da bi se sprečilo i zgrušavanje i rast bakterija (2-3 mL Taurolidin-Citrat rastvora, TCS-04; Access Technologies).
Implantacija pejsmejkera
[0118] Nakon kardiovaskularne instrumentacije, desna vratna vena je pažljivo izdvojena i kanulirana sa bipolarnom pejsing vodjicom/kateterom (CAPSUREFIX® Novus; Medtronic). Pod fluoroskopskim vođstvom, ova pejsing vođica je uvođena unapred u desnu komoru i aktivno je pričvršćena (zašrafljena) za apikalni endokardijum. Gornji kraj vođice je vezan za pejsing uređaj (Kappa 900; Medtronic). Nakon toga, pejsmejker je postavljen/obezbeđen u potkožni džep na vratu.
[0119] Uzimajući u obzir da je srce izloženo putem torakotomije, bipolarna pejsing žica je obezbeđena u sredini miokardijuma desne komore. Ova pejsing vođica je uvedena/eksternalizovana između lopatica, i korišćena u vezi sa spoljašnjim generatorom impulsa/pejsmejkerom. Implatiran endokardijalni pejsmejker je korišćen kao podrška eksternom/epikardijalnom pejsmejkeru.
Oporavak
[0120] Pre zatvaranja grudnog koša nakon torakotomije, plasira se grudna cev za drenažu bilo koje tečnosti i/ili gasa koji su akumulirani usled hirurške procedure. Cev je aspirirana dva puta dnevno sve dok količine uklonjene tečnosti ne budu manje od 35 mL po aspiraciji u periodu od približno 24 sata. Grudna cev se nakon toga uklanja.
[0121] Svim životinjama su administrirani profilaktički antibiotik (cefazolin 20 do 50 mg/kg i.v. putem) i lek protiv bolova (meloksikam oko 0.2 mg/kg i.v. putem). Ukoliko je neophodno, administrira se dodatni analgetik što uključuje fentanil flaster (25 do 50 mcg/sat). Svi hirurški rezovi su zatvoreni u slojevima; osnovna muskulatura je povezana apsorbujućim koncima i koža je zatvorena kopčama.
[0122] Nakon operacije, životinjama je dozvoljeno da se oporave tokom najmanje 14 dana. Cefaleksin (20 do 50 mg/kg) je administriran oralno dva puta na dan (BID) tokom najmanje 7 dana i meloksikam (0.1 mg/kg) je administriran oralno jednom dnevno (SID) ili subkutano tokom najmanje 2 dana nakon operacije. Tokom faze oporavka, životinje su posmatrane svakodnevno za uočavanje rutinskih znaka oporavka i rane su posmatrane na bilo kakve znakove mogućih infekcija. Životinje koje su doživljavale bol, distres i/ili infekcije su bile pod dodatnim nadzorom nadležnog veterinara i direktora studije. Kopče sa rezova na koži nisu uklanjane tokom najmanje 7 dana nakon operacije.
Indukcija srčane insuficijencije
[0123] Nakon oporavka od operacije i/ili dovoljnog prelaznog (washout) perioda od doziranja sa donorom nitroksila, životinje su podvrgnute 3-nedeljnom pejsing protokolu sa većom učestalošću (210 ppm) „overdrived“ sa namerom da se pokrene disfunkcija/remodelovanje leve komore koje je u skladu sa sindromom insuficijencije srca. Ukratko, preko implantirane vođice pejsmejker/desna komora, komora(e) je asinhronizovano i kontinuirano stimulisana na 210 otkucaja po minuti (beats per minute - bpm). Remodelovanje leve komore (i indukcija insuficijencije srca) su potvrđene i ehokardiografskim (npr., smanjenje ejekcione frakcije (EF)) od oko 60% do ciljnih od oko 35%, dilatacija leve komore (left ventricular - LV)) i neuro-humoralnim (npr., elevacija N-terminalnog prohormona moždanog natriuretskog peptida (N-terminal pro-brain natriuretic peptide - NT proBNP) na više od 1800 pM/L od osnovne vrednosti od oko 300 pM/L) promenama nakon približno 3 nedelje stimulacije. Ehokardiografski i uzorci krvi su sakupljeni u odsustvu stimulacije (tokom najmanje 15 min).
5.5.2 Rezultati
Procene hemodinamske efikasnosti
[0124] Životinje (normalne ili sa srčanom insuficijencijom) su ispitivane tokom lečenja i sa nosačem (kontrola) i sa donorom nitroksila (bilo CXL-1020, jedinjenje formule (1) bilo jedinjenje formule (2)). U svakom periodu doziranja, svesne imobilisane životinje su kontinuirano praćene tokom dva do tri sata. Nakon hemodinamske stabilizacije, započeta je infuzija nosača. Ubrzo nakon toga, predopterećenje leve komore je akutno smanjeno pomoću kratkih okluzija šuplje vene (putem prolaznog naduvavanja zatvarača krvnog suda) da bi se formirala grupa pritisak-zapremina krivi/petlji; do tri zatvaranja su izvedena, dozvoljavajući hemodinamski oporavak između testova. Nastavljena je infuzija nosača i nakon 30 min drugi (osnovni) set hemodinamskih podataka je prikupljen. Nakon prikupljanja osnovnih hemodinamskih podataka, započeta je infuzija nitroksil donorskog jedinjenja koje je testirano
4
i dobijeni hemodinamski/funkcionalni parametri su dobijeni/izvedeni u do četiri (4) vremenske tačke odabrane od sledećih: u 30, 60, 90, 120, i 180. minutu nakon početka infuzije nosač/test jedinjenje. Za placebo ili grupu koja je vremenski-kontrolisano lečena, svakoj životinji je administrirana infuzija pogodnog placeba tokom perioda do 180 minuta. U svim slučajevima, test jedinjenje je primenjivano intravenskom infuzijom konstantne brzine od 1 mL/kg/h i upoređeno pri molarno ekvivalentnoj brzini doze.
[0125] Dobijeni podaci pritiska i zapremine leve komore su analizirani da bi se dobila veza koja predstavlja kontraktilno i energetsko stanje miokarda. Prikupljeni su sistolni arterijski pritisak (Systolic arterial pressure - SAP), dijastolni arterijski pritisak (diastolic arterial pressure - DAP), i srednji arterijski pritisak (mean arterial pressure - MAP). Dobijeni su mehanički i/ili geometrijski pokazatelji za levu komoru od signala pritiska (ESP, EDP, dP/dt max/min, vremenska konstanta relaksacije-tau [na osnovu monoeksponencijalnog raspada sa asimptotom bez nule]) i zapremine ( end-sistolni volumen - volumen krvi u komori na kraju otkucaja srca (end-sistolic volume - ESV), end-dijastolni volumen - volumen krvi u komori neposredno pre otkucaja (end diastolic volume - EDV), udarni volumen (stroke volume -SV)). Dodatno, sledeća merenja su izvedena iz podataka za pritisak-volumen leve komore (pressure-volume - PV petlje) generisanih tokom kratkih perioda smanjenja predopterećenja: pritisak volumen površine (pressure volume area - PVA) i udarnog rada (stroke work - SW), end-sistolnih (ESPVR) i end-dijastolnih (EDPVR) pritisak volumen odnosa, i odnosa endsistolnog pritiska i udarnog volumena (arterijska elastičnost (Ea)). Reprezentativni podaci dobijeni iz studija kod normalnih i pasa sa insuficijencijom srca su prikazani u Tabeli 5 i Tabeli 6, redom. Smanjenje SVR (sistemske vaskularne rezistencije) je u vezi sa vazodilatacijom.
Tabela 5. Hemodinamski parametri za donore nitroksila kod normalnih pasa (% Promene od osnovnog stanja)
4
Skraćenice:
HR: Heart rate – brzina srčanog rada. Povišen HR, bilo usled refleksnog odgovora na nizak krvni pritisak ili usled primarnog efekta leka na srce, je loš.
ESP: End-sistolni pritisak -sličan MAP-u ispod.
EDP ili LVEDP: End-dijastolni pritisak (levo komorni). U vezi je sa plućnim pritiscima. Smanjenje ukazuje na redukciju plućne kongestije (ključni cilj u lečenju akutne insuficijencije srca).
Tau: Indeks lusitropije, ili relaksacije srca tokom dijastole. Smanjenje je pozitivno i ukazuje na poboljšanu dijastolnu performansu.
SW: Stroke work – udarni rad. Mera koja pokazuje koliko srce mora da radi da bi stvorilo datu vrednost toka unapred.
ESPVR: Odnos end-sistolnog pritiska volumena. Mera inotropije/kontraktilnosti (ključni cilj u lečenju akutne insuficijencije srca). Povećanja ukazuju na poboljšanu srčanu performansu i produktivnost.
PRSW: Regrutujući srčani rad u predopterećenju - Preload recruitable stroke work – sličan sa ESPVR iznad navedenim.
SV: Stroke volume – Udarni volumen. Količina krvi koja je izbačena iz leve komore sa svakim otkucajem srca. Inotrop bi trebalo da ga poveća, uzevši u obzir identične uslove
4
Tabela 6. Hemodinamski parametri za donore nitroksila kod pasa sa insuficijencijom srca (% Promene od osnovnog stanja)
4
[0126] SLIKA 1 prikazuje hemodinamski profil 180 minuta nakon administracije CXL-1020 i dva jedinjenja predmetne objave (jedinjenja sa formulom (1) i formulom (2)) upotrebom „tahikardni pejsing“ modela srčane insuficijencije. Svako jedinjenje je administrirano intravenski pri brzini od 100 µg/kg/min. SLIKA 2 prikazuje hemodinamski profil jedinjenja sa formulom (1) pri raznim dozama upotrebom „tahikardni-pejsing“ modela srčane insuficijencije. Rezultati prikazuju da jedinjenja sa formulama (1) i (2) imaju uporedivu hemodinamsku aktivnost sa CXL-1020 i u modelu normalnih pasa i u modelu sa srčanom insuficijencijom. Naročito, jedinjenja sa formulama (1) i (2) proizvode značajno poboljšanje inotropije i lusitropije, i umerena smanjenja krvnog pritiska.
5.6 Primer 7: Hemodinamska efikasnost donora nitroksila kod pasa sa insuficijencijom srca (Model mikroembolizacione insuficijencije srca kod pasa)
5.6.1 Materijali i metode
[0127] Insuficijencija srca je izazvana kod zdravih, u dobrom stanju, namenski odgajanih mongrel pasa (20-26 kg) upotrebom serijskog mikroembolizacionog modela. Koronarna mikroembolizacija je sprovođena dok LV-ejekciona frakcija (određena angiografski pod anestezijom) nije bila približno 30% ili niže. Potom su obezbeđene dve nedelje nakon poslednje mikroembolizacije da se osigura stabilizacija svake životinje pre započinjanja eksperimenata.
[0128] Inicijalna studija pronalaženja doze (2-100 µg/kg/min tokom 40 min) je sprovedena kod 3 psa da se utvrde terapijski relevantne doze jedinjenja sa formulom (1). Na osnovu ovih podataka, prva grupa od šest životinja je ispitivana, primajući 3 ili 10 µg/kg/min jedinjenja sa formulom (1) tokom perioda od 4 sata, nakon čega sledi jedan sat ispiranja. Samo je jedna doza ispitivana u datom danu, druga najmanje jednu nedelju kasnije, i proizvoljnim redosledom. Hemodinamska, ventrikulografska, i ehokardiografska merenja su izvedena tokom leve i desne kateterizacije srca kod anesteziranih pasa (uvođeje: hidromorfon (0.22 mg/kg i.v.) i dijazepam (0.17 mg/kg i.v.), održavanje: 1-2% izofluoran).
4
[0129] End-sistolni volumen (ESV) i end-dijastolni volumeni (EDV) leve komore su računati iz ventrikulograma korišćenjem površina-dužina metode. Maksimalna brzina krvi u aorti je dobijena u ascedentnoj aorti upotrebom Doplera protoka za merenja indeksa maksimalne snage (peak power index - PPI). Površina frakcije skraćenja (fractional area of shortening -FAS) leve komore je izmerena iz kratke ose leve komore na nivou papilarnih mišića dobijene iz 2-dimenzionalnih ehokardiograma. Izmereni indeksi dijastolne funkcije LV uključuju vreme usporavanja mitralnog protoka (deceleration time of mitral inflow velociti - DT), odnos integrala ranog mitralnog protoka (ratio of the integral of early mitral inflow velocity -Ei) i protoka tokom kontrakcije pretkomora (velociti during atrial contraction - Ai) (Ei/Ai) i end-dijastolni kružni stres na zidove leve komore (end-diastolic circumferential wall stress -EDWS).
[0130] Merenja miokardijalne potrošnje kiseonika su sprovedena u osnovnom stanju i 4 sata nakon infuzije od 10µg/kg/min. Naročito, arterijski i uzorci krvi koronarnog sinusa su istovremeno opisivani u osnovnom stanju i na kraju svake vremenske tačke studije. Sadržaj kiseonika je određen pomoću hemoksimetra. Brzina protoka krvi kroz koronarnu arteriju je merena pomoću žice Doplera brzine protoka koja je postavljena u levoj cirkumfleksnoj arteriji blizu prve marginalne grane ili u prednju silaznu levu koronarnu arteriju vrlo blizu prve dijagonalne grane. Protok krvi je procenjen izračunavanjem površine poprečnog preseka koronarne arterije na mestu merenja protoka koronarnom angiografijom. Pretpostavlja se da je ukupan koronarni protok krvi dvostruko veći od protoka merenog u cirkumfleksnoj ili predjoj silaznoj levoj koronarnoj arteriji. Potrošnja kiseonika u levoj komori (Oxigen consumption of the left ventricle - MVO2) je računata kao proizvod ukupnog koronarnog protoka krvi i razlike u sastavu kiseonika između arterijske i krvi koronarnog sinusa.
5.6.2 Rezultati
Procene hemodinamske efikasnosti
[0131] Životinje su ispitivane tokom tretmana i sa nosačem i sa donorom nitroksila. SLIKA 3 prikazuje hemodinamski profil jedinjenja sa formulom (1) nakon indukcije insuficijencije srca kod procenjenih pasa korišćenjem modela mikroembolizacione insuficijencije srca. Podaci su prikazani za krajnju tačku tokom infuzije pri dve brzine infuzije. Rezultati su pokazali da jedinjenje sa formulom (1) ima uporedivu hemodinamsku aktivnost sa CXL-1020.
5.7 Toksikološke studije sa donorima nitroksila
5.7.1 Primer 8: In Vivo ispitivanja sa CXL-1020
[0132] Tokom in vivo ispitivanja nitroksil donora, CXL-1020 (N-hidroksi-2-metansulfonilbenzen-1-sulfonamida), sprovedena je 14-dnevna studija da se proceni tolerancija kod pasa tretiranih kontinuiranom infuzijom CXL-1020 pri doznim brzinama do 90 µg/kg/min. Ova prva studija je pokazala da je CXL-1020 bio tolerisan kada je administriran u doznoj brzini od 60 µg/kg/min. Neočekivano, ipak, kliničke patološke promene koje su u skladu sa inflamatornim procesom, što se pokazalo u promenama u kliničkim patološkim markerima inflamacije, su uočeni pri brzini doze od 60 µg/kg/min. Da bi se dalje ispitao ovaj neželjeni propratni efekat, započeta je sledeća (follow-up) 14-todnevna studija kod pasa. Ova studija je morala biti prekinuta nakon samo 4 dana usled pojave drugih neželjenih propratnih efekata: neočekivana pojava značajnog oticanja i inflamacije zadnjih udova pasa gde su infuzioni kateteri bili hirurški implantirani, što je povremeno ometalo normalnu funkciju udova; promena boje kože u preponskoj regiji; smanjena aktivnost; gubitak apetita; i u grupi koja je primila najviše doze, koža hladna na dodir.
[0133] Da bi se odredio uzrok inflamacije i oticanja zadnjih udova, serije istraživačkih studija sa kontinuiranim infuzijama od 72-sata su sprovođene tokom narednih 6 meseci. Rezultati ovih studija su pokazali da CXL-1020, kada se administrira u pH 4 formulaciji sa 1:1 molarnim odnosom CXL-1020:CAPTISOL®, razblaženoj u rasvoru 5% dekstroze u vodi, izaziva kod pasa kliničke patološke promene koje su u skladu sa inflamatornim procesom pri doznim brzinama većim od ili jednakim sa 0.03 µg/kg/min. Vaskularna inflamacija je uočena oko mesta umetanja katetera u femoralnu-butnu venu (15 cm uzvodno od vrha katetera), pri vrhu katetera, i nizvodno od vrha katetera. Prvo mesto inflamacije, mesto umetanja katetera, izazvalo je oticanje zadnjih udova pasa i inflamacija je uočena u rano-završenoj „follow-up“ studiji. Povećanje pH infuzata od 4 to 6 smanjilo je inflamaciju, što poboljšava inflamatorni profil za približno 3 puta. Ipak, značajni propratni efekti su se i dalje pojavljivali kada je CXL-1020 administriran psima u doznim brzinama većim od ili jednakim sa 3 µg/kg/min.
[0134] Da bi se izbegli sporedni efekti koji su u vezi sa mestom umetanja katetera i da bi se procenilo da li se vaskularna inflamacija javljala usled dizajna implantiranog katetera, studija sa kontinuiranom infuzijom od 24-sata je sprovedena kod pasa upotrebom perkutanog katetera postavljnog u perifernu (cefaličnu) venu. Nakon 6 sati infuzije, uočen je značajan
1
edem u gornjem ekstremitetu, nizvodno od vrha katetera. Nakon 24 sata infuzije, primećene su kliničke patološke promene slične onima koje su uočene u prethodnim studijama korišćenjem implantiranog centralnog venskog katetera. Takođe je primećena mikroskopska patologija koja prikazuje ozbiljan tromboflebitis pri vrhu katetera i progresiju sa gradijentom smanjenja ozbiljnosti nizvodno od vrha katetera.
[0135] Da bi se odredilo da li bi se lokalni flebitis pojavio kod ljudi nakon dužeg trajanja doziranja, studija dužeg trajanja je sprovedena kod zdravih humanih dobrovoljaca. Studija dužeg trajanja je obuhvatila studiju eskalacije doze u kojoj grupi od 10 dobrovoljaca treba da se administrira u nizu konstantna infuzija CXL-1020 tokom 24-sata u doznim brzinama od 10, 20, i 30 µg/kg/min sa procenom bezbednosti između svake grupe. Svaka grupa se sastojala od 2 placebo i 8 aktivnih tretmana sa kontrolnim parom od 1 aktivnog i 1 placebo što je praćeno glavnom grupom od 1 placebo i 7 aktivnih tretmana. Infuzija je preko perkutanog katetera ubačena u venu podlaktice. Nakon 12 sati infuzije kateter je postavljen na ruku na drugoj strani tela. Primećeno je da je dobro tolerisana dozna brzina od 10 µg/kg/min tokom 24-sata. U drugoj grupi, kojoj je administrirana doza od 20 µg/kg/min tokom 24-sata, nije bilo štetnih ishoda kod 2 dobrovoljca tretirana placebom ali je bilo blagih ishoda (bilo kliničkih znaka i/ili promena u kliničkoj patologiji) kod svih 8 subjekata što je bilo u skladu sa flebitisom na mestu infuzije. Na osnovu ovih rezultata, dugotrajnija studija bezbednosti je obustavljena.
[0136] Istraživačke studije su nastavljene da bi se odredio uzrok neželjenih sporednih efekata CXL-1020 pri višim, ali još uvek klinički poželjnim, dozama. Studije sprovedene sa nusproizvodom od CXL-1020, delom koji ostaje nakon donacije nitroksila, bile su negativne, ukazujući da se sporedni efekti CXL-1020-a mogu pripisati ili osnovnom jedinjenju, CXL-1020, ili od njega proizvedenom HNO-u. Studije su izvođene sa alternativnim donorima nitroksila koji nisu strukturno odgovarali CXL-1020-u ali koji su imali slične polu-živote za nitroksil donaciju (polu-životi od oko 2 minuta). Za ove donore, nitroksil je bio na svojoj najvećoj intravaskularnoj koncentraciji pri vrhu katetera i neposredno nizvodno u veni u koju je kateter uveden. U svim slučajevima, uočeni su lokalni vaskularni sporedni efekti pri vrhu katetera. Ovi rezultati su ukazali da je inflamacija uzrokovana nitroksilom koga su brzo oslobađali nitroksil donori kratkog polu-života.
5.7.2 Primer 9: Jedinjenja predmetne objave poseduju poboljšan toksikološki profil u odnosu na CXL-1020
2
[0137] Studje su sprovedene nad mužjacima i ženkama bigl pasa. Životinjama je dozvoljen slobodan pristup vodi i komercijalnoj psećoj hrani pod standardnim laboratorijskim uslovima. Životinje nisu jele pre prikupljanja uzoraka krvi kada je to naznačeno protokolom studije. Fluorescentno osvetljenje je obezbeđeno pomoću automatskog tajmera tokom približno 12 sati po danu. Povremeno, tamni ciklus je prekidan privremeno usled aktivnosti vezanih za studiju. Temperatura i vlažnost su praćeni i beleženi tokom dana i održavani u najvećoj mogućoj meri između 64°F do 84°F i 30% do 70%, redom. Psi su aklimatizovani tokom perioda od najmanje 1 nedelje. Tokom ovog perioda, životinje su merene nedeljno i posmatrane vezano za opšte zdravstveno stanje i znakove bolesti. Životinje su aklimatizovane da nose jaknu tokom najmanje tri dana pre administracije doze. Dodatno, životinje su takođe aklimatizovane da nose Elizabetanski okovratnik (e-collar) tokom aklimatizacije nošenjem jakne.
Hirurška procedura i procedura doziranja
[0138] Životinje su kataterizovane dan pre administracije doze. Perkutani kateter je postavljen (upotrebom aseptične tehnike i sterilnog zavoja) u cefaličnu venu distalno od lakta. Životinje su se slobodno kretale u njihovim kavezima tokom kontinuirane infuzione administracije doze. Radi olakšavanja kontinuirane infuzione administracije doze, periferni kateter je privezan za produženi set sproveden ispod jakne pasa i potom privezan za vezni infuzioni sistem. Da bi se sprečilo da životinje pristupe/uklone periferno postavljen perkutani kateter, mesto kateterizacije je zavijeno upotrebom „Vet Wrap“ zavoja i „e-collar“ je postavljen na životinje tokom trajanja tretmana (t.j., kateterizovanog perioda). Tokom pretretmanskog perioda, venski kateter je kontinuirano infuziran pri brzini od približno 2-4 mL/h sa 0.9% natrijum hlorida za injekcije, USP (fiziološki rastvor) da se održi prolaznost katetera. Pre doziranja, infuzioni sistem je prethodno napunjen (spora bolus infuzija) sa odgovarajućim rastvorom za doziranje da bi se obezbedilo da doziranje počne čim se startuje infuziona pumpa. Infuziona linija je povezana sa rezervoarom koji sadrži kontrolno ili test jedinjenje i infuzija počinje. Test kompozicije su infuzirane kontinuirano, pri prethodno određenoj konstantnoj brzini infuzije (1 ili 2 mL/kg/h), tokom 24 sata i molarno ekvivalentnim brzinama doze.
Kliničke obzervacije, klinička patologija, i mikroskopska patologija
[0139] Detaljno kliničko ispitivanje svake životinje je izvođeno dva puta dnevno i merenja temperature tela i uzorci krvi za kliničku patologiju su prikupljani od svih životinja pre doziranja i 6 sati, 12 sati, 24 sata i 72 sata nakon početka infuzije kompozicije. Na završetku studije, sve životinje su eutanizovane po prethodnom planu i izvedena su kompletna ispitivanja tokom autopsije. Odabrana tkiva su prikupljena, fiksirana i sačuvana za moguće buduće mikroskopsko ispitivanje. Cefalična vena koja poseduje infuzioni kateter je izdvojena netaknuta zajedno sa brahijalnom venom i ispitana celom njenom dužinom. Položaj vrha katetera je obeležen na nefiksiranom uzorku. Nakon fiksacije, uzorak je isečen i obrađen tako da se na mikroskopskim pločicama obezbede poprečni histološki preseci koji predstavljaju vrh katetera i okolna tkiva i proksimalno i distalno od vrha katetera (t.j., 1 cm distalno od vrha katetera, pri vrhu katetera, i 1, 5, 10, 15, i 20 cm proksimalno od vrha katetera). U odnosu na vrh katetera, "proksimalno" je definisano kao bliže srcu i "distalno" je definisano kao dalje od srca.
Procene bezbednosti
[0140] Kliničke patološke promene koje su u skladu sa inflamatornim sindromom su uočene pri nekim doznim brzinama jedinjenja sa formulom (1), formulom (2) i CXL-1020. Svako jedinjenje je formulisano sa CAPTISOL®-om (7% w/v) u sterilnoj vodi pri pH od 4. Najosetljiviji biomarkeri inflamacije su bili: (1) broj belih ćelija (WBC, dobijen kao (broj belih krvnih zrnaca)/µL množenjem vrednosti u desnom delu SLIKE 4 sa 103), (2) koncentracija fibrinogena (izražena u mg/dL u desnom delu SLIKE 4), i (3) koncentracija C-reaktivnog proteina (C-Reactive Protein - CRP) (izražena u mg/L u desnom delu SLIKE 4). Ozbiljnost promena je zavisila od identiteta jedinjenja i brzine doze pri kojoj je jedinjenje administrirano (SLIKA 4). Na SLICI 4, rezultat koji se kreće u opsegu od 0 (niska ozbiljnost) do 2 (visoka ozbiljnost) je dodeljen svakom od ovih biomarkera inflamacije u skladu sa desnim delom na toj slici. Kumulativni rezultat je računat iz sume ovih rezultata markera. NOAEL-i, određeni na osnovu ovih klinički patoloških markera i izraženi u molarno ekvivalentnim doznim brzinama (µg/kg/min) prema CXL-1020, su obezbeđene u Tabeli 7.
Tabela 7. Nivoi bez zapaženog neželjenog efekta (NOAEL) donora nitroksila
4
[0141] Za CXL-1020, značajni porasti WBC, fibrinogena i CRP-a su uočeni, čak i pri koncentracijama niskim kao što je 0.03 µg/kg/min. I jedinjenje sa formulom (1) i jedinjenje sa formulom (2) imaju NOAEL pri znatno višim dozama od one za CXL-1020. Jedinjenje sa formulom (1) ima najpovoljniji toksikološki profil, koji ne pokazuje štetne efekte pri dozama barem visokim kao što je 20 µg/kg/min. Ovo predstavlja poboljšanje više od 660-puta u odnosu na CXL-1020.
[0142] Sveukupno, ovi nalazi sugerišu da CXL-1020 infuzija izaziva inflamatorni sindrom, koji je suštinski redukovan sa jedinjenjem formule (1) i jedinjenjem formule (2).
[0143] Nalazi sugerišu da su neželjeni vaskularni sporedni efekti koji su u vezi sa CXL-1020 pri vrhu katetera, nizvodno od vrha katetera i u određenim slučajevima, uzvodno od vrha katetera, usled lokalne inflamacije izazvani oslobađanjem nitroksila. Dodatno, pretpostavljeno je da inflamacija može biti značajno ublažena na ovim mestima upotrebom nitroksil donora sa dužim polu-životima. Potvrda je dobijena procenom donora nitroksila putem detaljne histopatologije vaskulature na mestu uvođenja u femoralnu venu (15 cm distalno od vrha katetera), duž puta katetera do vrha katetera, i posle vrha nizvodno 20 cm. Mikroskopski patološki nalazi edema, hemoragije, vaskularne inflamacije i perivaskularne inflamacije su određeni pri posebnim doznim brzinama donora nitroksila.
[0144] SLIKA 5 prikazuje toplotnu mapu ("heat-map"-u) koja pokazuje srednji laboratorijski rezultat za mikroskopske patološke nalaze u kojima je ozbiljnost vaskularne inflamacije, hemoragije, tromba i vaskularne degeneracije/regeneracije ocenjena u delovima vaskulature kao što je iznad opisano. Nalazi (1) edema, (2) vaskularne i perivaskularne inflamacije, i (3) hemoragije su ocenjeni (svakome je dodeljena vrednost odabrana od: 0 = u okviru normalnih granica; 1 = minimalno; 2 = blago; 3 = umereno; 4 = ozbiljno) u delovima krvnog suda počevši 1 cm distalno (uzvodno) od vrha katetera do 20 cm proksimalno (nizvodno) od vrha katetera. Srednji laboratorijski rezultat je izračunat iz sume ovih rezultata nalaza. Na SLICI 5, ukupni histološki srednji laboratorijski rezultat se kreće od 0-2 (niska ozbiljnost) do 11-12 (visoka ozbiljnost). Uočeno je da ozbiljnost mikroskopskih promena i razmak od vrha katetera u okviru koga su one primećene zavisi od identiteta donora nitroksila i brzine doze pri kojoj je donor nitroksila administriran. Vrednosti NOAEL-a određene na osnovu ovih mikroskopskih patoloških markera za serije donora nitroksila, izražene u molarno ekvivalentnim doznim brzinama (µg/kg/min) prema CXL-1020, su obezbeđene u Tabeli 8.
Tabela 8. Nivoi bez zapaženog neželjenog efekta donora nitroksila
[0145] Nalazi prikazani u Tabeli 8 obezbeđuju dodatni dokaz da jedinjenja sa formulama (1) i (2) imaju suštinski poboljšan toksikološki profil u odnosu na CXL-1020. Ozbiljnost vaskularnih sporednih efekata pri bilo kojoj dozi se smanjuju kao funkcija od rastojanja od vrha katetera, i ozbiljnost ovakvih vaskularnih sporednih efekata se smanjuje sa smanjenjem doze. Ovi nalazi su potvrdili visoku bezbednosnu marginu za jedinjenja sa formulama (1) i (2), što se prevodi u značajan terapijski indeks kod ljudi, i pogodnost za intravensku administraciju pri terapijski efikasnim dozama i doznim brzinama.
5.8 Stabilnost intravenskih rastvora za doziranje
5.8.1 Primer 10: Jedinjenje sa formulom (1) – Rastvor za doziranje čuvan na 25°C [0146] Stabilnost doznih rastvora jedinjenja sa formulom (1) pripremljenih od CAPTISOL® koncentrata razblaženog u komercijalno-dostupnim IV razblaživačima je procenjivana na 25°C tokom 48 sata, sa tačkama analize 0, 8, 12, 16, 24, i 48 sati nakon razblaživanja. Zbog potrebnih tačaka analize, dve studije su izvršene sa posebnim grupama rastvora za doziranje. Prva (grupa A) je obuhvatila sve vremenske tačke izuzev one za 16 sati. Druga (grupa B) je uključila analize samo za 0 i 16 sati. Koncentrati koji su korišćeni za pripremu dve grupe rastvora za doziranje su pripremljeni iz dve odvojene bočice liofiliziranog proizvoda leka iste serije (24 mg/mL jedinjenja sa formulom (1)/30% CAPTISOL®).
Priprema koncentrata
[0147] Liofilizirani proizvod leka u jednoj bočici (24 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) / 30% CAPTISOL®, pH 4) je rekonstituisan sa 10 mL vode kvaliteta vode za injekcije (water for injection - WFI) da bi se pripremio svaki koncentrat (za grupe A i B rastvora za doziranje). pH vrednosti dobijenih rastvora su merene, i određeno je da su približno 3.9 za obe bočice. Nije sprovedeno podešavanje pH. Koncentrati su razblaženi i analizirani pomoću HPLC (XBridge Phenyl Column (Waters); UV detektor apsorbcije na 272 nm; mobilna faza postepeni gradijent vodenog acetonitrila koji sadrži 0.1% (v/v) mravlje kiseline), i za oba je određeno da sadrže 20-21 mg/mL jedinjenja sa formulom (1), radije nego nominalnu vrednost od 24 mg/mL, navodno zbog doprinosa rastvorenog API-a i CAPTISOL®-a na ukupnu zapreminu rastvora.
Priprema razblaživača
[0148] Komercijalno dostupni rastvori kalijum acetata i kalijum fosfata su odabrani za procenu. Kalijum acetat je komercijalno dobijen, i USP rastvor kalijum fosfata je pripremljen u skladu sa Hospira-inim uputstvom za upotrebu za komercijalni proizvod. Svaki rastvor je razblažen do 10 mM u 5% dekstroze (D5W) i 2.5% dekstroze (D2.5W). Komercijalno dostupan D5W je razblažen 2-puta sa vodom WFI kvaliteta da bi se dobio D2.5W rastvor. pH svakog od koncentrovanog i razblaženog rastvora je izmeren; rezultati su prikazani u Tabeli 9.
Tabela 9. Rezultati merenja pH odabranih razblaživača
Priprema rastvora za doziranje
[0149] Koncentrat jedinjenja sa formulom (1) je razblaživan volumetrijski na skali od 5 mL u 10 mM rastvora razblaživača da se postignu koncentracije od 8, 1, i 0.1 mg/mL jedinjenja sa formulom (1), kao što je rezimirano u Tabeli 10. Svaki uzorak je pripremljen u dva primerka. Sadržaj dekstroze u 10% CAPTISOL® rastvoru je snižen da se osigura da su rastvori za doziranje suštinski izotonični. Svaki rastvor je čuvan na 25°C.
Tabela 10. Priprema rastvora za doziranje za procenu stabilnosti
Analiza uzorka
[0150] Uzorci su analizirani nakon pripreme i nakon 8, 12, 16, 24, i 48 sati čuvanja na 25°C. Vizuelni izgled svakog uzorka je zabeležen, pH je izmeren, i svaki uzorak je pomoću HPLC analiziran na koncentraciju i prisustvo glavnog degradacionog proizvoda, jedinjenja sa formulom (5), niže prikazanog, koji je formiran nakon oslobađanja HNO grupe.
Rezultati
[0151] Rezultati procene stabilnosti su prikazani u Tabeli 11, Tabeli 12 i Tabeli 13. Prisustvo pika koji odgovara degradacionom proizvodu (jedinjenju sa fomulom (5)) u uzorku je naznačeno sa "X".
[0152] Rezultati su bili generalno uniformni za svaka dva primerka iz para i među odgovarajućim rastvorima za doziranje pripremljenim u grupama A i B. Razlika u prečišćenom ostatku je primećena između dva primerka u vremenskim tačkama za 24 i 48 sati za uzorke pripremljene da sadrže 0.1 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) u fosfatu.
[0153] Potpuni prečišćeni ostatak (u okviru tačnosti HPLC metode) i odsustvo primetne vrednosti pika za jedinjenje sa formulom (5) je održavano tokom 48 sati za uzorke pripremljene kao 8 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) u diluentima na bazi acetata i fosfata. Ovi uzorci su zapravo sadržali približno 7 mg/mL jedinjenja sa formulom (1), što je odgovaralo koncentraciji od 20-21 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) u koncentratu. U oba rastvarača, stabilnost je bila bolja kod uzoraka pripremljenih na 8 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) nego u uzorcima pripremljenim na nižim koncentracijama. Bez vezivanja za teoriju, bolja stabilnost ovih uzoraka u poređenju sa onim pripremljenim na nižim koncentracijama jedinjenja sa formulom (1) može se pripisati višoj koncentraciji CAPTISOL®-a (10% u razblaženim rastvorima).
[0154] Svi uzorci su ostali bistri i bezbojni tokom 48 sati čuvanja. pH svih uzoraka se tokom vremena smanjivala. Poznati degradacioni proizvod (jedinjenje sa formulom (5)) je uočen u t0 (odmah nakon pripreme uzorka) u svim uzorcima pripremljenim da sadrže 0.1 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) i u svim narednim vremenskim tačkama u svim uzorcima pripremljenim da sadrže 0.1 mg/mL i 1 mg/mL jedinjenja sa formulom (1).
[0155] Uopšteno, stabilnost se smanjivala sa smanjenjem koncentracije jedinjenja sa formulom (1). Bez vezivanja za teoriju, smanjena stabilnost je verovatno bila zbog nižeg procenta CAPTISOL®-a u rastvorima za doziranje. Početni stepen degradacije (tokom 16 sati) je bio sličan u uzorcima pripremljenim da sadrže 0.1 mg/mL jedinjenja sa formulom (1) u razblaživačima na bazi acetata i fosfata. Ipak, stabilnost uzoraka pripremljenih da sadrže 1 mg/mL je značajno bolja u acetatu nego u fosfatu.
Tabela 11. Rezultati procene stabilnosti rastvora za doziranje na 25°C, Procenat prečišćenog ostatka
Tabela 12. Rezultati procene stabilnosti rastvora za doziranje na 25°C, pH
Tabela 13. Rezultati procene stabilnosti rastvora za doziranje na 25°C – Merenje pojave jedinjenja sa formulom (5)
1
5.8.2 Primer 11: Rasvor za doziranje jedinjenja sa formulom (1) čuvan na 2°C-8°C što je praćeno čuvanjem na 25°C
[0156] Stabilnost rastvora za doziranje jedinjenja sa formulom (1) pripremljenih od CAPTISOL® koncentrata razblaženog u komercijalno dostupnim IV razblaživačima je obezbeđena kao što je opisano u Primeru 10. Rastvori su procenjivani na 2°C-8°C tokom 24 sata nakon čega su čuvani na 25°C tokom 48 sati. Kao što je prikazano u Tabeli 14, prečišćeni ostaci jedinjenja sa formulom (1) su generalno viši nego odgovarajući uzorci čuvani na 25°C za sve rastvore za doziranje (videti Tabelu 12 iz prethodnog primera), što nagoveštava poboljšanu stabilnost za rastvore za doziranje koji su pripremljeni i čuvani na 2°C-8°C pre čuvanja na 25°C.
Tabela 14. Rezultati procene stabilnosti rastvora za doziranje na 2°C-8°C i 25°C, Procenat prečišćenog ostatka
2
5.8.3 Primer 12: Rastvor za doziranje jedinjenja sa formulom (2) čuvan na 25°C (Referentni primer)
[0157] Serija rastvora za doziranje jedinjenja sa formulom (2) za IV administraciju je procenjena. Odabran koncentrat jedinjenja sa formulom (2), koji je pripremljen na 30 mg/mL u nosaču od 30% CAPTISOL®-a pri pH 4.0, je procenjen pri niskoj, srednjoj i visokoj koncentraciji (0.1, 1 i 5 mg/mL, redom) nakon razblaživanja u raznim rastvorima za doziranje. Za razblaživanje jedinjenja sa formulom (2) do 0.1 i 1 mg/mL, tri rastvora za doziranje je procenjeno: (1) D5W, (2) D5W sa 5 mM K-fosfata (pH = 6), i (3) D5W sa 20 mM K-fosfata (pH = 6). Da bi se održala izo-osmolalnost za razređenja jedinjenja sa formulom (2) na 5 mg/mL, koncentracija dekstroze u rastvorima za doziranje je smanjena na 2.5% (w/v). Tako, su procenjeni rastvori za doziranje bili: (1) D2.5W, (2) D2.5W sa 5 mM K-fosfata (pH = 6), i (3) D2.5W sa 20 mM K-fosfata (pH = 6).
[0158] Mogućim rastvorima za doziranje su procenjeni vizuelni izgled, pH, osmolalnost, i koncentracija i čistoća pomoću HPLC (XBridge Phenil Column (Waters); UV detektor apsorbcije pri 272 nm; mobilna faza postepeni gradijent vodenog acetonitrila koji sadrži 0.1% (v/v) mravlje kiseline) nakon približno 0, 16, 24, i 48 sati čuvanja na 25 °C. Svi uzorci su bili bistri, bezbojni rastvori – sa jedinim izuzetkom od 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D2.5W sa 5 mM fosfata koji je imao bistar, blago žuti izgled nakon 48 sati na 25 °C. Svi rastvori su bili izo-osmotski (290 /- 50 mOsm/kg) – sa jedinim izuzetkom od 1 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D5W sa 20 mM fosfata koji je imao osmolalitet od približno 350 mOsm/kg. Pored toga, sa jedinim izuzetkom od 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D2.5W sa 5 mM fosfata, svi ostali rastvori za doziranje su održali jedinjenje sa formulom (2) pri ciljnim koncentracijama od 0.1, 1 i 5 mg/mL tokom 48 sati.
[0159] Dodatno, poznati degradacioni proizvod, jedinjenje sa formulom (6), prikazan ispod, koji se formira nakon oslobađanja aktivne nitroksil grupe, je uočen nakon 16 sati na 25°C u malim količinama pomoću HPLC u rastvorima za doziranje koji sadrže fosfatni pufer.
[0160] Primećena količina jedinjenja sa formulom (6) je bila približna granici detekcije metode.
[0161] Stabilnost rastvora za doziranje od 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) je dalje procenjivana kao funkcija od pH i pufera. Koncentrovan rastvor jedinjenja sa formulom (2), pripremljen kao 30 mg/mL u nosaču od 30% CAPTISOL®-a pri pH 4.0, je razblažen do 5 mg/mL u četiri moguća rastvora za doziranje. Četiri rastvora za doziranje su procenjena: (1)
4
D2.5W, 5 mM K-fosfata (pH = 6.0), (2) D2.5W sa 5 mM K-citrata (pH = 6.0), (3) D2.5W, 5 mM K-citrata (pH = 5.0), i (4) D2.5W, 5 mM K-acetata (pH = 5.0). Svi rastvori za doziranje jedinjenja sa formulom (2) su bili izo-osmotski (290 /- 50 mOsm/kg). Nakon približno 24 i 48 sati čuvanja na 25°C, rastvori za doziranje su procenjivani na vizuelni izgled, pH, i koncentraciju i čistoću pomoću HPLC. Nefosfatni rastvori za doziranje su bili bistri, bezbojni i održali su jedinjenje sa formulom (2) na ciljnoj koncentraciji od 5 mg/mL tokom 48 sati; dok u skladu sa prikazom rastvora za doziranje, rastvor za doziranje od 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D2.5W sa 5 mM fosfata (pH 6.0) je bio bistar, blago žutog izgleda sa samo 60% prečišćenog ostatka jedinjenja sa formulom (2) nakon 48 sati. Pored toga, poznati degradacioni proizvod, jedinjenje sa formulom (6), je primećen u malim količinama pomoću HPLC u svim uzorcima izuzev 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D2.5W, 5 mM citrata (pH 5.0).
[0162] Nakon 7 dana čuvanja na 25°C nefosfatni rastvori za doziranje su i dalje bili bistri i bezbojni. Izmeren je najmanji porast u kiselosti nakon 7 dana za rastvor za doziranje od 5 mg/mL jedinjenja sa formulom (2) u D2.5W, 5 mM citrata pH 6.0, dok je rastvor za doziranje D2.5W, 5 mM citrata pH 5.0 imao najmanju promenu u pH tokom početnih 24-48 h. Pored toga, nakon 14 dana čuvanja na 25°C uzorci sa rastvorom za doziranje koji sadrži 5 mM citrata pH 6.0 su bili bistri, bezbojni rastvori, dok su rastvori za doziranje koji sadrže bilo 5 mM citrata ili 5 mM acetata pri pH 5.0 bili bistri, rastvori žute boje. Rezultati su rezimirani u Tabeli 15.
Tabela 15. Prečišćeni ostatak jedinjenja sa formulom (2) iz rastvora za doziranje od 5 mg/mL
[0163] Biće jasno prosečnim poznavaocima oblasti da specifična tehnička rešenja predmeta stavljenog na uvid javnosti mogu biti usmerena na jedno ili više iznad i ispod naznačenih tehničkih rešenja u bilo kojoj kombinaciji.

Claims (11)

  1. Patentni zahtevi 1. Farmaceutska kompozicija za primenu u metodi za modulisanje in vivo nivoa nitroksila, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje sa formulom (1):
    i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
  2. 2. Farmaceutska kompozicija za primenu u metodi za lečenje bolesti ili stanja koje reaguje na terapiju nitroksilom, gde farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje sa formulom (1):
    i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
  3. 3. Farmaceutska kompozicija iz patentnog zahteva 2, gde bolest ili stanje je plućna hipertenzija.
  4. 4. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 3, gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski.
  5. 5. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 4, gde farmaceutska kompozicija ima pH od 4 do 6.
  6. 6. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 5, gde farmaceutska kompozicija ima pH od 4 do 5.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 6, gde farmaceutska kompozicija ima pH od oko 4.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini koja je u opsegu od 1 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti do 100 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
  9. 9. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini koja je u opsegu od 10 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti do 50 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
  10. 10. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini ne većoj od 30 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, gde farmaceutska kompozicija treba da se administrira intravenski u količini od: (a) najmanje 2.5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti; (b) najmanje 5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti; (c) najmanje 7.5 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti; (d) najmanje 12 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti; ili (e) najmanje 15 µg jedinjenja sa formulom (1)/kg/minuti.
RSP20191352 2013-01-18 2014-01-17 Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom RS59434B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361754237P 2013-01-18 2013-01-18
US201361782781P 2013-03-14 2013-03-14
EP17195759.0A EP3284463B1 (en) 2013-01-18 2014-01-17 Nitroxyl donors with improved therapeutic index

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59434B1 true RS59434B1 (sr) 2019-11-29

Family

ID=50064795

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP20191352 RS59434B1 (sr) 2013-01-18 2014-01-17 Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom
RS20180099A RS56968B1 (sr) 2013-01-18 2014-01-17 Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom
RS20181599A RS58174B1 (sr) 2013-01-18 2014-01-17 Farmaceutske kompozicije koje sadrže donore nitroksila

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180099A RS56968B1 (sr) 2013-01-18 2014-01-17 Donori nitroksila sa poboljšanim terapijskim indeksom
RS20181599A RS58174B1 (sr) 2013-01-18 2014-01-17 Farmaceutske kompozicije koje sadrže donore nitroksila

Country Status (29)

Country Link
US (13) US8987326B2 (sr)
EP (5) EP3567031A1 (sr)
JP (5) JP6449171B2 (sr)
KR (2) KR102277165B1 (sr)
CN (4) CN108610312A (sr)
AU (5) AU2014207408C1 (sr)
BR (2) BR112015017241B1 (sr)
CA (2) CA2898445C (sr)
CY (3) CY1120535T1 (sr)
DK (3) DK2945620T3 (sr)
ES (4) ES2659969T3 (sr)
HK (1) HK1251170B (sr)
HR (3) HRP20182144T1 (sr)
HU (3) HUE036589T2 (sr)
IL (4) IL239906B (sr)
LT (3) LT2945620T (sr)
MX (2) MX373176B (sr)
NZ (4) NZ748769A (sr)
PL (3) PL2945620T3 (sr)
PT (3) PT3284463T (sr)
RS (3) RS59434B1 (sr)
RU (3) RU2684916C2 (sr)
SG (6) SG10201913286PA (sr)
SI (3) SI3284463T1 (sr)
SM (3) SMT201800088T1 (sr)
TR (1) TR201802211T4 (sr)
TW (3) TWI619491B (sr)
WO (2) WO2014113700A1 (sr)
ZA (2) ZA201505090B (sr)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103435524B (zh) 2006-03-17 2016-02-10 约翰斯霍普金斯大学 作为有生理学价值的硝酰氧基供体的n-羟基磺酰胺衍生物
WO2013059194A1 (en) 2011-10-17 2013-04-25 Johns Hopkins University Meldrum 's acid, barbituric acid and pyrazolone derivatives substituted with hydroxylamine as hno donors
HUE036589T2 (hu) * 2013-01-18 2018-07-30 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Nitroxil donorok feljavított terápiás indexszel
ES2734060T3 (es) 2014-01-17 2019-12-04 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Donadores de nitroxilo de N-hidroximetanosulfonamida
US9464061B2 (en) 2014-05-27 2016-10-11 The Johns Hopkins University N-hydroxylamino-barbituric acid derivatives
ES2749682T3 (es) 2014-05-27 2020-03-23 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Derivados de pirazolona como donadores de nitroxilo
EP3348548A4 (en) 2015-09-07 2019-04-03 Zhejiang Huahai Pharmaceutical Co., Ltd STAIN OXIDE-RELIEFING PRODRUG MOLECULE
CN108473439B (zh) 2015-10-19 2022-03-15 卡尔迪奥克斯尔制药公司 作为硝酰基供体的吡唑啉酮衍生物
US10730828B2 (en) 2015-10-19 2020-08-04 Cardioxyl Pharmaceuticals, Inc. N-hydroxylsulfonamide derivatives as nitroxyl donors
KR20190070912A (ko) 2016-07-28 2019-06-21 더 존스 홉킨스 유니버시티 O-치환된 히드록삼산
MX388684B (es) * 2017-01-03 2025-03-20 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Metodo de administracion de compuestos donadores de nitroxilo.
KR102699958B1 (ko) * 2017-04-18 2024-08-29 장피트 엘라피브라노르와 같은 ppar 작용제 및 아세틸-coa 카르복실라아제 (acc) 저해제를 포함하는 조합
CN116283762B (zh) * 2023-03-28 2025-08-12 昆山市第一人民医院 一种用于制备白鲜碱的中间体化合物及其制备方法、白鲜碱的制备方法
WO2025043108A1 (en) 2023-08-23 2025-02-27 Bristol -Myers S Quibb Company Co-crystals of nitroxyl donating compounds

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1017976A (en) 1911-08-25 1912-02-20 Rudolph Koch Automatic mail-bag catcher and deliverer.
US1021340A (en) 1911-10-14 1912-03-26 William A Scott Means for attaching binding-posts to dry batteries.
US3751255A (en) 1972-03-24 1973-08-07 Eastman Kodak Co Photosensitive and thermosensitive element, composition and process
JPS567710A (en) 1979-06-28 1981-01-27 Sansho Seiyaku Kk Whitening cosmetic
US4539321A (en) 1981-10-26 1985-09-03 William H. Rorer, Inc. 5-Diaza-aryl-3-substituted pyridone compounds
ATE66143T1 (de) 1985-01-11 1991-08-15 Abbott Lab Feste zubereitung mit langsamer freisetzung.
US4663351A (en) 1985-08-23 1987-05-05 Berlex Laboratories, Inc. Dobutamine tri-isobutyric acid ester and the use thereof as a cardiotonic agent
US4798824A (en) 1985-10-03 1989-01-17 Wisconsin Alumni Research Foundation Perfusate for the preservation of organs
JPH01221371A (ja) 1988-02-29 1989-09-04 Hokko Chem Ind Co Ltd 環状オキシアミン誘導体の製造方法
JPH01221372A (ja) 1988-03-01 1989-09-04 Hokko Chem Ind Co Ltd 環状アシルヒドロキシルアミン誘導体
JPH0221372A (ja) 1988-07-08 1990-01-24 Sharp Corp はんだ付検査装置
JPH0828240B2 (ja) 1990-05-25 1996-03-21 矢崎総業株式会社 電線相互の圧着接続構造及び圧着接続方法
JP2773959B2 (ja) 1990-07-10 1998-07-09 信越化学工業株式会社 大腸内放出性固形製剤
JPH04321671A (ja) 1991-04-17 1992-11-11 Mitsubishi Petrochem Co Ltd カルバモイルトリアゾール誘導体およびそれを有効成分とする除草剤
BR9506549A (pt) * 1994-01-19 1997-10-14 Byk Nederland Bv Derivados de benzilamina contendo grupos nitróxi e sua aplicação para o tratamento de enfermidades cardiovasculares bem como de pressão interna dos olhos elevada
US6156728A (en) * 1996-11-01 2000-12-05 Genentech, Inc. Treatment of inner ear hair cells
JPH10142729A (ja) 1996-11-05 1998-05-29 Fuji Photo Film Co Ltd 熱現像画像記録材料
AU741180B2 (en) 1997-10-24 2001-11-22 Shionogi & Co., Ltd. Antirheumatic
SI0930302T1 (en) 1998-01-16 2003-10-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Benzosulfone derivatives
AU4333799A (en) 1998-06-04 1999-12-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Digital optical chemistry micromirror imager
UA73092C2 (uk) 1998-07-17 2005-06-15 Брістол-Майерс Сквібб Компані Таблетка з ентеросолюбільним покриттям і спосіб її приготування
US6638534B1 (en) 1998-07-28 2003-10-28 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Preparation capable of releasing drug at target site in intestine
GB9918684D0 (en) 1999-08-09 1999-10-13 Novartis Ag Organic compounds
JP2002072459A (ja) 2000-08-28 2002-03-12 Toyo Gosei Kogyo Kk 光酸発生剤及びそれを含有する感光性樹脂組成物
CN1800176A (zh) * 2000-12-13 2006-07-12 惠氏 β淀粉样蛋白产生的杂环磺酰胺类抑制剂
EP1219306A1 (en) * 2000-12-29 2002-07-03 Nicox S.A. Compositions comprising cyclodextrins and NO- releasing drugs
GB0114223D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Ici Plc Catalytic oxidation process
US20040038947A1 (en) 2002-06-14 2004-02-26 The Gov. Of The U.S. Of America As Represented By The Sec. Of The Dept. Of Health & Human Services Method of treating ischemia/reperfusion injury with nitroxyl donors
US6936639B2 (en) 2002-08-21 2005-08-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Nitroxyl progenitors in the treatment of heart failure
US20050250737A1 (en) * 2003-11-12 2005-11-10 Allergan, Inc. Therapeutic ophthalmic compositions containing retinal friendly excipients and related methods
EP1694686A1 (en) 2003-12-19 2006-08-30 Takeda San Diego, Inc. Kinase inhibitors
JP2007522135A (ja) 2004-01-30 2007-08-09 ザ ジョンズ ホプキンス ユニバーシティ ニトロキシル前駆化合物および使用方法
WO2006086188A2 (en) 2005-01-31 2006-08-17 The Johns Hopkins University Use of consensus sequence as vaccine antigen to enhance recognition of virulent viral variants
JP2008543947A (ja) 2005-06-23 2008-12-04 ジョンズ ホプキンス ユニバーシティ チオール感受性の正の変力物質
CN103435524B (zh) * 2006-03-17 2016-02-10 约翰斯霍普金斯大学 作为有生理学价值的硝酰氧基供体的n-羟基磺酰胺衍生物
AU2007238600B2 (en) 2006-04-13 2012-01-19 Wake Forest University Health Sciences C-nitroso-derived nitroxyl donors
EP2190814B1 (en) 2007-09-26 2017-02-01 The Johns Hopkins University N-hydroxylsulfonamide derivatives as new physiologically useful nitroxyl donors
PT2278975T (pt) 2008-05-07 2016-11-08 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Novos compostos de nitroso como dadores de nitroxilo e métodos de utilização dos mesmos
WO2011063339A1 (en) * 2009-11-23 2011-05-26 Cardioxyl Pharmaceuticals, Inc. Nitroxyl donors for the treatment of pulmonary hypertension
MX2012006349A (es) 2009-12-07 2012-10-03 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Derivados de n-aciloxisulfonamida y n-hidroxi-n-acilsulfonamida.
CN102753519B (zh) * 2009-12-07 2015-08-05 约翰斯霍普金斯大学 二酰基化的羟基胺衍生物
WO2013059194A1 (en) 2011-10-17 2013-04-25 Johns Hopkins University Meldrum 's acid, barbituric acid and pyrazolone derivatives substituted with hydroxylamine as hno donors
JP6306602B2 (ja) 2012-11-01 2018-04-04 ザ ジョンズ ホプキンス ユニバーシティ 分子内環化−脱離による制御されたｈｎｏ放出
HUE036589T2 (hu) 2013-01-18 2018-07-30 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Nitroxil donorok feljavított terápiás indexszel
ES2734060T3 (es) 2014-01-17 2019-12-04 Cardioxyl Pharmaceuticals Inc Donadores de nitroxilo de N-hidroximetanosulfonamida
US9464061B2 (en) 2014-05-27 2016-10-11 The Johns Hopkins University N-hydroxylamino-barbituric acid derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
EP3427728A1 (en) 2019-01-16
AU2014207404B2 (en) 2017-10-19
JP6533159B2 (ja) 2019-06-19
JP2016510326A (ja) 2016-04-07
NZ709985A (en) 2020-05-29
US10548872B2 (en) 2020-02-04
AU2014207408B2 (en) 2018-03-01
JP2017125015A (ja) 2017-07-20
US10245249B2 (en) 2019-04-02
TR201802211T4 (tr) 2018-03-21
RS56968B1 (sr) 2018-05-31
SG11201505568PA (en) 2015-09-29
US20200121633A1 (en) 2020-04-23
US20180235927A1 (en) 2018-08-23
CA2898445C (en) 2022-05-03
US20220193026A1 (en) 2022-06-23
SMT201900575T1 (it) 2019-11-13
AU2018241168A1 (en) 2018-11-01
DK2945621T3 (en) 2019-02-11
PT3284463T (pt) 2019-10-30
JP2019089764A (ja) 2019-06-13
LT2945620T (lt) 2018-02-12
TW201446242A (zh) 2014-12-16
HUE036589T2 (hu) 2018-07-30
ES2659969T3 (es) 2018-03-20
IL259233A (en) 2018-07-31
AU2017200147B2 (en) 2018-07-05
CN108610312A (zh) 2018-10-02
CN105073105B (zh) 2018-02-27
SMT201800088T1 (it) 2018-03-08
BR112015017251A8 (pt) 2019-10-29
ES2705240T3 (es) 2019-03-22
MX363843B (es) 2019-04-05
IL259233B (en) 2019-10-31
HK1251170B (en) 2020-04-09
CA2898445A1 (en) 2014-07-24
NZ748769A (en) 2020-05-29
JP6656345B2 (ja) 2020-03-04
TW201934120A (zh) 2019-09-01
CY1121480T1 (el) 2020-05-29
IL239906B (en) 2018-05-31
IL258882A (en) 2018-06-28
CN110179777B (zh) 2022-07-15
HRP20191919T1 (hr) 2020-01-10
BR112015017241A8 (pt) 2019-10-29
SG10201913441RA (en) 2020-03-30
SI3284463T1 (sl) 2019-12-31
NZ709986A (en) 2020-01-31
IL239952A0 (en) 2015-08-31
KR20150108879A (ko) 2015-09-30
CN105073105A (zh) 2015-11-18
US10213408B2 (en) 2019-02-26
DK2945620T3 (en) 2018-02-05
EP3284463A1 (en) 2018-02-21
PL2945621T3 (pl) 2019-05-31
RU2015134581A (ru) 2017-02-27
US11304924B2 (en) 2022-04-19
SG10201913286PA (en) 2020-02-27
US20210015784A1 (en) 2021-01-21
US12186301B2 (en) 2025-01-07
EP2945620A1 (en) 2015-11-25
WO2014113700A1 (en) 2014-07-24
ES2751922T3 (es) 2020-04-02
CA2898443A1 (en) 2014-07-24
BR112015017241B1 (pt) 2021-10-26
LT2945621T (lt) 2019-01-10
KR20150107853A (ko) 2015-09-23
EP3427728B1 (en) 2021-07-07
EP2945621A1 (en) 2015-11-25
EP2945621B1 (en) 2018-10-17
MX373176B (es) 2020-04-22
SI2945620T1 (en) 2018-01-31
JP2019172682A (ja) 2019-10-10
US20140206769A1 (en) 2014-07-24
MX2015009276A (es) 2015-10-30
AU2017200147A1 (en) 2017-02-02
CY1120535T1 (el) 2019-07-10
RS58174B1 (sr) 2019-03-29
US11786501B2 (en) 2023-10-17
HK1216857A1 (en) 2016-12-09
US10792273B2 (en) 2020-10-06
HRP20191919T8 (hr) 2021-10-01
US9968584B2 (en) 2018-05-15
US20150366977A1 (en) 2015-12-24
US20160031807A1 (en) 2016-02-04
ZA201505090B (en) 2016-10-26
NZ748771A (en) 2019-12-20
TWI686193B (zh) 2020-03-01
ZA201604798B (en) 2018-01-31
PL2945620T3 (pl) 2018-03-30
US20150175566A1 (en) 2015-06-25
US20170151210A1 (en) 2017-06-01
CA2898443C (en) 2022-05-31
HRP20180121T1 (hr) 2018-02-23
HK1216858A1 (en) 2016-12-09
EP3567031A1 (en) 2019-11-13
EP2945620B1 (en) 2017-11-22
SG10201802862WA (en) 2018-05-30
AU2014207408A8 (en) 2015-08-27
AU2014207408C1 (en) 2018-09-06
ES2882279T3 (es) 2021-12-01
US20190133990A1 (en) 2019-05-09
EP3284463B1 (en) 2019-07-24
CN110179777A (zh) 2019-08-30
AU2018203240B2 (en) 2019-12-12
JP6801045B2 (ja) 2020-12-16
RU2018143994A (ru) 2019-01-16
TWI619491B (zh) 2018-04-01
TWI712409B (zh) 2020-12-11
US9586896B2 (en) 2017-03-07
BR112015017241A2 (pt) 2017-07-11
KR102277165B1 (ko) 2021-07-14
US20200163929A1 (en) 2020-05-28
KR102177899B1 (ko) 2020-11-12
RU2684916C2 (ru) 2019-04-16
HRP20182144T1 (hr) 2019-03-08
US9156804B2 (en) 2015-10-13
MX2015009269A (es) 2015-10-30
RU2015134583A (ru) 2017-02-22
JP6449171B2 (ja) 2019-01-09
AU2014207404A1 (en) 2015-08-13
AU2014207408A1 (en) 2015-08-13
LT3284463T (lt) 2019-11-11
PT2945620T (pt) 2018-02-21
IL239952B (en) 2018-05-31
WO2014113700A9 (en) 2014-10-09
US11273143B2 (en) 2022-03-15
US10517847B2 (en) 2019-12-31
US8987326B2 (en) 2015-03-24
CY1122177T1 (el) 2020-11-25
JP6311038B2 (ja) 2018-04-11
WO2014113696A1 (en) 2014-07-24
DK3284463T3 (da) 2019-10-28
CN105142627A (zh) 2015-12-09
AU2018241168B2 (en) 2020-04-02
SG11201505567RA (en) 2015-09-29
PL3284463T3 (pl) 2019-12-31
SMT201900027T1 (it) 2019-02-28
AU2018203240A1 (en) 2018-05-31
IL239906A0 (en) 2015-08-31
TW201442702A (zh) 2014-11-16
HUE046722T2 (hu) 2020-03-30
US20190224159A1 (en) 2019-07-25
CN105142627B (zh) 2019-06-21
PT2945621T (pt) 2019-01-21
BR112015017251B1 (pt) 2021-10-26
BR112015017251A2 (pt) 2017-07-11
RU2676277C2 (ru) 2018-12-27
HUE041861T2 (hu) 2019-06-28
JP2016505044A (ja) 2016-02-18
US20240066002A1 (en) 2024-02-29
SI2945621T1 (sl) 2019-01-31
SG10201802855TA (en) 2018-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12186301B2 (en) Nitroxyl donors with improved therapeutic index
HK1251170A1 (en) Nitroxyl donors with improved therapeutic index
HK40017499A (en) Nitroxyl donors with improved therapeutic index
HK1216857B (en) Nitroxyl donors with improved therapeutic index