[go: up one dir, main page]

RS56232B1 - Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene - Google Patents

Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene

Info

Publication number
RS56232B1
RS56232B1 RS20170700A RSP20170700A RS56232B1 RS 56232 B1 RS56232 B1 RS 56232B1 RS 20170700 A RS20170700 A RS 20170700A RS P20170700 A RSP20170700 A RS P20170700A RS 56232 B1 RS56232 B1 RS 56232B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
mixture
chh
oxo
stirred
Prior art date
Application number
RS20170700A
Other languages
English (en)
Inventor
Hon-Wah Man
George W Muller
Alexander Ruchelman
Ehab M Khalil
Roger Shen-Chu Chen
Weihong Zhang
Original Assignee
Celgene Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Celgene Corp filed Critical Celgene Corp
Publication of RS56232B1 publication Critical patent/RS56232B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4412—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovde su obezbeđeni derivati 4'-arilmetoksi izoindolina. Takođe su obezbeđene farmaceutske kompozicije koje obuhvataju ta jedinjenja i njihova upotreba u postupcima za tretiranje, preveniranje i vođenje raznih poremećaja.
[0002] Kancer je primarno okarakterisan povećanjem abnormalnih ćelija izvedenih iz datog normalnog tkiva, invazijom ovih abnormalnih ćelija na susedna tkiva, ili širenjem putem limfe ili krvi, malignih ćelija do regionalnih limfnih čvorova i do udaljenih mesta (metastaze). Klinički podaci i molekulske biološke studije ukazuju da je kancer višefazni proces koji pročinje sa manjim predneoplastičnim promenama, koje mogu pod određenim uslovima da napreduju u neoplaziju. Neoplastična lezija može evoluirati klonski i razviti povećan kapacitet za invaziju, rast, metastaze, i heterogenilčnost, naročito pod uslovima u kojima neoplastične ćelije uspeju da pobegnu nadzoru imunog sistema domaćina. Roitt, I., Brostoff, J i Kale, D., Imunology, 17.1-17.12 (3rd ed., Mosby, St. Louis, Mo., 1993).
[0003] Postoji ogromna raznolikost kancera koji su detaljno opisani u medicinskoj literaturi. Primeri uključuju kancer pluća, debelog creva, rektuma, prostate, dojke, mozga, i tankog creva. Incidenca kancera nastavlja da raste kako opšta populacija stari, budući da se razvijaju novi kanceri, i budući da su podložne populacije (npr., ljudi inficirani sa SIDA ili preterano izložene sunčevoj svetlosti) u porastu. Međutim, opcije tretiranja kancera su ograničene. Na primer, u slučaju kancera krvi (npr., multipla mijeloma), dostupno je nekoliko opcija tretiranja, naročito kada konvencionalna hemoterapija ne uspe, a transplantacija koštane srži nije opcija. Prema tome, postoji orgoman zahtev za novim postupcima i kompozicijama koje se mogu koristiti za tretiranje pacijenata sa kancerom.
[0004] Mnoge vrste kancera povezane su sa formiranjem novih krvnih sudova, postupak poznat kao angiogeneza. Objašnjeno je nekoliko mehanizama koji su uključeni u angiogenezu indukovanu tumorima. Najdirektniji od ovih mehanizama su lučenje, od strane ćelija tuomora, citokina angiogenskih karakteristika. Primeri ovih citokina uključuju kiseli i bazni fibrobrastni faktor rasta (a,b-FGF), angiogenin, vaskularni endotelijalni faktor rasta (VEGF), i TNF-α. Alternativno, ćelije tumora mogu osloboditi angiogenske peptide putem proizvodnje proteaze i naknadnih cepanja ekstracelularne matrice u kojoj sz smešteni neki citokini (npr., b-FGF). Angiogeneza se takođe može indukovati putem upošljavanja zapaljenskih ćelija (naročito makrofaga) i njihovog naknadnog oslobađanja angiogenskih citokina (npr., TNF-α, b-FGF).
[0005] Razne druge bolesti i poremećaji takođe su povezani sa, ili okarakterisani sa, neželjenom angiogenezom. Na primer, pojačana ili neregulisana angiogeneza implicira se brojem bolesti i medicinskih stanja koja ukljuluju, ali nisu ograničena na, očne neovaskularne bolesti, korodialne neovaskularne bolesti, neovaskularne bolesti mrežnjače, rubeoza (neovaskularizacija ugla), virusne bolesti, genetske bolesti, zapaljenske bolesti, alergijske bolesti, i autoimune bolesti. Primeri takvih bolesti i stanja uključuju, ali nisu ograničeni na: dijabetična retinopatija; retinopatija prevremenosti; odbacivanje grafta rožnjače; neovaskularni glaukom; retrolentalna fibroplazija; artiritis; i proliferativna vitreoretinopatija.
[0006] Shodno tome, jedinjenja koja mogu da kontrolišu angiogenezu ili inhibiraju proizvodnju određenih citokina, uključujući i TNF-α, mogu biti korisna u tretiranju i prevenciji raznih bolesti i stanja.
[0007] Trenutne terapija kancera mogu da uključe hirurški zahvat, hemoterapiju, hormonalnu terapiju i/ili radijacioni tretman radi iskorenjivanja neoplastičnih ćelija kod pacijenta (videti, npr., Stockdale, 1998, Medicine, vol.3, Rubenstein and Federman, eds., Chapter 12, Section IV). Skorije, terapija kancera mogla bi takođe da uključi biološku terapiju ili imunoterapiju. Svi ovi pristupi predstavljaju značajne nedostatke za pacijenta. Operacija, na primer, može biti kontradiktorna zbog zdravstvenog stanja ili starosti pacijenta ili može biti neprihvatljiva pacijenta.
[0008] Dodatno, operacija ne mora u potpunosti otkloniti neoplastično tkivo. Radijaciona terapija je efektivna samo kada neoplastično tkivo eksprimira veću senzitivnost na radijaciju nego normalno tkivo. Radijaciona terapija takođe može proizvesti ozbiljne sporedne efekte. Hormonalna terapija retko se daje kao pojedinačan agens. Iako hormonalna terapija može da bude efektivna, ona se obično primenjuje da spreči ili odloži vraćanje kancera pošto su drugi tretmani uklonili većinu ćelija kancera. Biološke terapije i imunoterapije ograničene su u broju i mogu proizvesti sporedne efekte kao što su osip ili oticanje, simptome nalik gripu, koji uključuju groznicu, drhtavicu i zamor, probleme u digestivnom traktu ili alergijske reakcije.
[0009] U pogledu hemoterapije, postoje razni hemoterapeutski agensi dostupni za tretiranje kancera. Većina hemoterapeutika protiv kancera deluje inhibiranjem DNK sinteze, bilo direktno, ili indirektno inhibiranjem biosinteze deoksiribonukleotid trifosfat prekursora, kako bi se sprečila DNK replikacija i prateće deljenje ćelije. Gilman et al., Goodman i Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Tenth Ed. (McGraw Hill, New York).
[0010] Pored dostupnosti raznih hemoterapeutskih agenasa, hemoterapija ima mnoge nedostatke. Stockdale, Medicine, vol.3, Rubenstein i Federman, eds., ch.12, sect.10, 1998. Skoro svi hemoterapeutski agenski su toksični, i hemoterapija izaziva značajne, i često opasne sporedne efekte uključujući mučninu, depresiju koštane srži, i imunosčistsiju. Dodatno, čak i sa davanjem kombinacija hemoterapeutskih agenasa, mnoge ćelije tumora su rezistentne ili razvijaju rezistentnost na hemoterapeutske agense. Zapravo, te ćelije rezistentne na određene hemoterapeutske agense koji se koriste u tretmanskom protokolu pokazuju se često kao rezistentne na druge lekove, čak i na jedan agense koji deluju različitim mehanizmima u odnosu na jedan lekove koji se koriste u specifičnim tretmanima. Ovaj fenomen odnosi se na pleiotropski lek ili rezistenciju na više lekova. Zbog rezistencije na lekove, mnogi kanceri potvrđuju ili postaju otporni na standarne hemoterapeutske tretmanske protokole.
[0011] Druge bolesti ili stanja povezane sa, ili okarakterisane, neželjenom angiogenezom takođe se teško tretiraju. Međutim, neka jedinjenja kao što je protamin, hebol i steroidi predložena su kao korisna u tretiranju određenih specifičnih bolesti. Taylor et al., Nature 297:307 (1982); Folkman et al., Science 221:719 (1983); i U.S. Pat. Nos.5,001,116 i 4,994,443.
[0012] I dalje postoji značajna potreba za bezbednim i efektivnim postupcima tretiranja, preveniranja i vođenja kancera i ostalih bolesti i stanja, uključujući i bolesti koje su otporne na standardne tretmane, kao što je operacija, radijaciona terapija, hemoterapija i hormonalna terapija, a koji redukuju ili zaobilaze toksičnosti i/ili sporedne efekte povezane sa konvencionalnim terapijama.
[0013] Ovde su obezbeđena 4'-arilmetoksi izoindolin jedinjenja, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (npr., hidrati) ili stereoizomeri.
[0014] Takođe su obezbeđena jedinjenja za upotrebu u postupcima tretiranja i vođenja različitih bolesti ili poremećaja.
[0015] Dalje su obezbeđena jedinjenja za upotrebu u postupcima preveniranja različitih bolesti i poremećaja.
[0016] Ovde su takođe obezbeđene farmaceutske kompozicije, pojedinačni jedinični dozni oblici, dozni režimi i kompleti koji obuhvataju ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili stereoizomer.
[0017] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su izoindolin jedinjenja, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati, i stereoizomeri.
[0018] U drugom primeru izvođenja, obezbeđeno je jedinjenje obezbeđeno ovde, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer za upotrebu u postupcima tretiranja, vođenja, i preveniranja različitih bolesti i poremećaji.
[0019] U drugim primerima izvođenja, ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer, daje se u kombinaciji sa nekim drugim lekom ("drugi aktivni agens") ili tretman. Drugi aktivni agensi uključuju male molekule i velike molekule (npr., proteini i antitela), čiji su primeri ovde obezbeđeni, kao i matične ćelije. Postupci, ili terapije, koji se mogu primeniti u kombinaciji sa davanjem jedinjenja obezbeđenih ovde uključuju, ali nisu ograničeni na, operaciju, transfuziju krvi, imunoterapiju, biološku terapiju, radijacionu terapiju, i ostale terapije ne bazirane na lekovima koje se trenutno koriste za tretiranje, preveniranje ili vođenje različitih poremećaji opisanih ovde.
[0020] Takođe su obezbeđena farmaceutske kompozicije (npr., pojedinačni jedinični dozni oblici) koji se mogu primeniti u postupcima obezbeđenim ovde. U jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije obuhvataju ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili stereoizomer, i opciono neki drugi aktivni agens.
JEDINJENJA
[0021] U jednom primeru izvođenja, obezbeđeno ovde je jedinjenje formule (I):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer, gde:
X je C=O ili CH2;
R<1>je -Y-R<3>;
R<2>je H ili (C1-C6)alkil;
Y je: 6- do 10-člani aril, heteroaril ili heterocikl, od kojih svaki može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena;
R<3>je:
-(CH2)n-aril, -O-(CH2)n-aril ili -(CH2)n-O-aril, gde je aril opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkil, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkil, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena;
-(CH2)n-heterocikl, -O-(CH2)n-heterocikl ili -(CH2)n-O-heterocikl, gde je heterocikl opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkil, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkil, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; ili
-(CH2)n-heteroaril, -O-(CH2)n-heteroaril ili -(CH2)n-O-heteroaril, gde je heteroaril opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkil, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkil, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; i
n je 0, 1, 2 ili 3.
[0022] U jednom primeru izvođenja, X je C=O. U drugom primeru izvođenja, C je CH2.
[0023] U jednom primeru izvođenja, R<2>je H. U drugom primeru izvođenja, R<2>je (C1-C6)alkil.
[0024] U jednom primeru izvođenja, Y je aril. U drugom primeru izvođenja, Y je heteroaril. U drugom primeru izvođenja, Y je heterocikl.
[0025] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-aril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je<-(CH>2<)>n<-aril supstituisan jednim ili više (C>1<-C>6<)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više>halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članihh arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članihh heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogenaa. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0026] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -O-(CH2)n-aril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogenaa. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-aril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0027] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-O-aril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril<supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R3 je -(CH>2<)>n<-O-aril supstituisan jednim ili>više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n O-aril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-aril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0028] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-heterocikl. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisani jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0029] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -O-(CH2)n-heterocikl. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-<heterocikl supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R3 je -O-(CH>2<)>n<-heterocikl>supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisani jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkil. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više - CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heterocikl supstituisan jednim ili više - COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0030] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-O-heterocikl. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisani jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkil. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više - CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heterocikl supstituisan jednim ili više - COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0031] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-heteroaril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan<jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R3 je -(CH>2<)>n<-heteroaril supstituisan jednim ili više>hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkil. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0032] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -O-(CH2)n-heteroaril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)nheteroaril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -O-(CH2)n-heteroaril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0033] U jednom primeru izvođenja, R<3>je nesupstituisani -(CH2)n-O-heteroaril. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više okso. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više amino. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više karboksila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više cijano. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan<jednim ili više hidroksila. U drugom primeru izvođenja, R3 je -(CH>2<)>n<-O-heteroaril supstituisan jednim ili>više halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više deuterijuma. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih arila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više 6- do 10-članih heteroarila, opciono supstituisan jednim ili više (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogena. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više -CONH2. U drugom primeru izvođenja, R<3>je -(CH2)n-O-heteroaril supstituisan jednim ili više -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena.
[0034] U jednom primeru izvođenja, n je 0. U drugom primeru izvođenja, n je 1. U drugom primeru izvođenja, n je 2.
[0035] Sve specifične kombinacije koje mogu rezultirati iz ovde obezbeđenih definicija za X, R<1>, R<2>, Y, R<3>i n su obuhvaćene.
[0036] U jednom primeru izvođenja, X je CH2.
[0037] U jednom primeru izvođenja, Y je aril. U drugom primeru izvođenja, Y je fenil.
[0038] U drugom primeru izvođenja gde Y je fenil, R<3>je -(CH2)n-heterocikl. U jednom primeru izvođenja, heterocikl je morfolinil, piperidinil ili pirolidinil.
[0039] U jednom primeru izvođenja, Y je a heteroaril. U drugom primeru izvođenja, Y je a 10-člani heteroaril. U drugom primeru izvođenja, Y je benzo[d]tiazol. U drugom primeru izvođenja, Y je benzofuran. U drugom primeru izvođenja, Y je kvinolin.
[0040] U drugom primeru izvođenja u kojem Y je heteroaril, R<3>je -(CH2)n-heterocikl. U jednom primeru izvođenja, heterocikl je morfolinil, piperidinil ili pirolidinil.
[0041] U jednom primeru izvođenja, primeri uključuju, ali nisu ograničeni na:
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer.
[0042] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na soli pripremljene od farmaceutski prihvatljivih netoksičnih kiseline, koje uključuju neorganske kiseline i organske kiseline. Odgovarajuće netoksičnih kiseline uključuju neorganske i organske kiseline kao što je, ali nisu ograničeni na, sirćetna, alginska, antranilska, benzensulfonska, benzojeva, kamforsulforna, limunska, etensulfonska, mravlja, fumarna, furoatna, glukonska, glutaminska, glukuronska, galakturonska, glicidna, bromovodonična, hlorovodonična, izetionska, mlečna, maleinska, jabučna, mandelinska, metansulfonska, galaktarinska, azotna, pamoična, pantotenska, fenilsirćetna, propionska, fosforna, salicilna, stearinska, ćilibarna, sulfanilinska, sumporna, tartarna kiselina, p-toluenesulfonska i slično. U jednom primeru izvođenja, odgovarajuće kiseline su hlorovodonične, bromovodonične, fosforne, i sumporne kiseline.
[0043] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "solvat" označava jedinjenje koje dalje uključuje stohiometrijsku ili nestohiometrijsku količinu rastvarača vezanog nekovalentnim intermolekulskim silama. Kada je rastvarač voda, solvat je hidrat.
[0044] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "stereoizomer" obuhvata sve enantiomerno/stereomerno čista i enantiomerno/stereomerno obogaćena jedinjenja obezbeđena ovde.
[0045] Kako se ovde koristi i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "stereomerno čist" označava kompoziciju koja obuhvata jedan stereoizomer jedinjenja i suštinski je bez drugih stereoizomera tog jedinjenja. Na primer, stereomerno čist kompozicija jedinjenja koje ima jedan hiralni centar suštinski će biti bez opozitnog enantiomera tog jedinjenja. Stereomerno čista kompozicija jedinjenja koja ima dva hiralna centra suštinski će biti bez drugih diastereomera tog jedinjenja. Tipično stereomerno čisto jedinjenje obuhvata više od oko 80mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 20mas.% drugih stereoizomera tog jedinjenja, više od oko 90mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 10mas.% drugih stereoizomera tog jedinjenja, više od oko 95mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 5mas.% drugih stereoizomera tog jedinjenja, više od oko 97mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 3mas.% drugih stereoizomera tog jedinjenja, više od oko 98mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 2mas.% drugih stereoizomera jedinjenja ili više od oko 99mas.% jednog stereozomera jedinjenja i manje od oko 1mas.% drugih stereoizomera tog jedinjenja.
[0046] Kako se ovde koristi i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "stereomerno obogaćen" označava kompoziciju koja obuhvata više od oko 55mas.% jednog stereozomera jedinjenja, više od oko 60mas.% jednog stereozomera jedinjenja, više od oko 70mas.%, ili više od oko 80mas.% jednog stereozomera jedinjenja.
[0047] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "enantiomerno čist" označava stereomerno čistu kompoziciju jedinjenja koja ima jedan hiralni centar. Slično, izraz "enantiomerno obogaćen" označava stereomerno obogaćenu kompoziciju jedinjenja koje ima jedan hiralni centar.
[0048] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "alkil" odnosi se na zasićeni linerani ili razgranati ugljovodonik koji ima neki broj atoma ugljenika kako je ovde naznačeno. U nekim primerima izvođenja, alkil grupe imaju 1 do 15, 1 do 10, 1 do 6, ili 1 do 3 atoma ugljenika.
Reprezentativni zasićeni linerani alkili uključuju -metil, -etil, -n-propil, -n-butil, -n-pentil, i -n-heksil; dok zasićeni razgranati alkili uključuju -izopropil, -sec-butil, -izobutil, -tert-butil, -izopentil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 2-metilheksil, 3-metilheksil, 4-metilheksil, 5-metilheksil, 2,3-dimetilbutil, i slično. Izraz "alkil" takođe obuhvata cikloalkil.
[0049] Kako se ovde koristi, alkenil se odnosi na linerani ili razgranati ugljovodonik koji sadrži jedan ili više dvostrukih veza. Primerni alkenil ugljenični lanci sadrže od 2 do 20 ugljenika, a u određenim primerima izvođenja, sadrže 1 do 8 dvostrukih veza, a alkenil ugljenični lanci od 2 do 16 ugljenika, u određenim primerima izvođenja, sadrže 1 do 5 dvostrukih veza.
[0050] Kako se ovde koristi, alkinil se odnosi na linerani ili razgranati ugljovodonik koji sadrži jedan ili više trostrukih veza. Alkinil ugljenični lanci od 2 do 20 ugljenika, u određenim primerima izvođenja, sadrže 1 do 8 trostrukih veza, a alkinil ugljenični lanci od 2 do 16 ugljenika, u određenim primerima izvođenja, sadrže 1 do 5 trostrukih veza. Primerni alkenil i alkinil grupe ovde uključuju, ali nisu ograničeni na, eten, propen, buten, penten, acetilen i heksin. Kako se ovde koristi, niži alkil, niži alkenil, i niži alkinil odnose se na ugljenične lance koji imaju od oko 1 ili oko 2 ugljenika pa do oko 6 ugljenika.
[0051] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "cikloalkil" označava vrstu alkila, koje je ciklično i sadrži od 3 do 15, 3 do 9, 3 do 6, ili 3 do 5 atoma ugljenika, bez promene ili rezonovanja dvostrukih veza između atoma ugljenika. On može da sadrži od 1 do 4 prstena. Primeri nesupstituisanih cikloalkila uključuju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i adamantil. Cikloalkil može biti supstituisan jednim ili više supstituenti. U nekim primerima izvođenja, cikloalkil može biti cikloalkil fuzionisan sa arilnom ili heteroarilnom grupe.
[0052] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "heterocikloalkil" označava cikloalkil u kojem je jedan ili više atoma ugljenika zamenjeno heteroatomima kao što je, ali nisu ograničeni na, N, S, i O. U nekim primerima izvođenja, heterocikloalkilna grupa sadrži sadrži od 2 do 14, 2 do 8, 2 do 7, 2 do 5, ili 2 do 4 atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, heterocikloalkil može biti heterocikloalkil fuzionisan sa arilnom ili heteroarilnom grupe.
[0053] Kako se ovde koristi, izraz "aril" označava ugljenociklični aromatični prsten koji sadrži od 5 do 14 atoma prstena. Atomi prstena ugljenociklične aril grupe su svi atomi ugljenika. Strukture aril prstena uključuju jedinjenja koja imaju jedan ili više struktura prstena kao što su mono-, bi-, ili triciklična jedinjenja kao i benzo-fuzionisani ugljenociklični ostaci kao što je 5,6,7,8-tetrahidronaftil i slično.
Specifično, aril grupa može biti mono- , bi-, ili triciklični prsten. Reprezentativne aril grupe uključuju fenil, antracenil, fluorenil, indenil, azulenil, fenantrenil i naftil.
[0054] Kako se ovde koristi, "heteroaril" odnosi se na monociklični ili multiciklični aromatični sistem prstenova, u određenim primerima izvođenja, od oko 5 do oko 15 članova u kojima jedan ili više, u jednom primeru izvođenja 1 do 3, atoma u sistemu prstenova je heteroatom, to jest, neki element koji nije ugljenik, koji uključuju ali nisu ograničeni na, azot, kiseonik ili sumpor. Heteroarilna grupa može biti opciono fuzionisana za benzen prsten. Heteroaril grupe uključuju, ali nisu ograničene na, furil, imidazolil, indolinil, pirolidinil, pirimidinil, tetrazolil, tienil, piridil, pirolil, N-metilpirolil, kvinolinil i izokvinolinil.
[0055] Kako se ovde koristi, "heterociklil" odnosi se na monociklični ili multiciklični nearomatični sistem prstenova, u jednom primeru izvođenja od 3 do 10 članova, u drugom primeru izvođenja od 4 do 7 članova, u daljem primeru izvođenja od 5 do 6 članova, u kojem jedan ili više, u određenim primerima izvođenja, 1 do 3, atoma u sistemu prstenova je heteroatom, to jest, neki element koji nije ugljenik, koji uključuju ali nisu ograničeni na, azot, kiseonik ili sumpor. U primerima izvođenja gde heteroatom(i) je(su) azot, azot je opciono supstituisan sa alkilom, alkenilom, alkinilom, arilom, heteroarilom, aralkilom, heteroaralkilom, cikloalkilom, heterociklilom, cikloalkilalkilom, heterociklilalkilom, acilom, gvanidinom, ili azot može biti kvaternizovan radi obrazovanja amonijum grupe u kojoj se supstituenti biraju kako je prethodno navedeno.
[0056] Kako se ovde koristi, "aralkil" odnosi se na neku alkil grupu u kojoj je jedan od atoma vodonika alkila zamenjen aril grupom.
[0057] Kako se ovde koristi, "heteroaralkil" odnosi se na neku alkil grupu u kojoj je jedan od atoma vodonika alkila zamenjen heteroarilnom grupom.
[0058] Kako se ovde koristi, "alkilaminokarbonil" odnosi se na C(O)NHR u kojem R je alkil, koji uključuje niži alkil. Kako se ovde koristi, "dialkilaminokarbonil" odnosi se na C(O)NR'R u kojem R' i R su nezavisno alkil, koji uključuje niži alkil; "karboksamid" odnosi se na grupe formule -NR'COR u kojoj R' i R su nezavisno alkil, koje uključuju niži alkil.
[0059] Kako se ovde koristi, "arilaminokarbonil" odnosi se na -C(O)NHR u kojem R je aril, koji uključuje niži aril, kao što je fenil.
[0060] Kako se ovde koristi, "halo", "halogen" ili "halid" odnosi se na F, Cl, Br ili I.
[0061] Kada broj nekog datog supstituenta nije specifičniiran (npr., "haloalkil"), može biti prisutan jedan ili više supstituenata. Na primer, "haloalkil" može da uključuje jedan ili više istih ili različitih halogena.
[0062] Treba napomenuti da ukoliko postoji neslaganje u prikazanoj strukturi i nazivu te strukture, prikazanoj strukturi potrebno je dodati više mase. Dodatno, ukoliko stehiometrija strukture ili dela te strukture nije indikovana, na primer, zadebljanim ili isprekidanim linijama, struktura ili ddeo te strukture shvata se kao da obuhvata sve njene stereoizomere.
JEDINJENJA i KOMPOZICIJE ZA UPOTREBU U POSTUPCIMA TRETMANA, PREVENCIJE I VOĐENJA [0063] Ovde je obezbeđeno ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat (npr., hidrat) ili stereoizomer za upotrebu u postupcima tretiranja, preveniranja, i/ili vođenja različitih bolesti ili poremećaja.
[0064] Primeri bolesti ili poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, kancer, poremećaje povezane sa angiogenezom, bol koj uključuje, ali nije ograničen na, Kompleksni regionalni bolni sindrom ("CRPS"), Makularna degeneracija ("MD") i povezani sindromi, kožne bolesti, plućni poremećaji, poremećaji povezani sa azbestom, parazitske bolesti, poremećaji imunodeficijencije, CNS poremećaji, CNS povreda, ateroskleroza i povezani poremećaji, poremećaji disfunkcionalnog spavanja i povezani poremećaji, hemoglobinopatija i povezani poremećaji (npr., anemija), TNFα povezani poremećaji, i druge različite bolesti i poremećaji.
[0065] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izrazi "tretirati," "tretiranje" i "tretman" odnose se na iskorenjivanje ili ublažavanje neke bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više simptoma povezanih sa bolesti ili poremećajem. U određenim primerima izvođenja, ti izrazi se odnose na minimiziranje širenja ili pogoršavanje bolesti ili poremećaja koji je rezulat davanje jednog ili više profilaktičkih ili terapeutskig agenasa subjektu sa takvom bolešću ili poremećajem.
[0066] Kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "preveniranje" odnosi se na tretman sa ili davanje jedinjenja obezbeđenog ovde, sa ili bez drugog dodatnog aktivnog jedinjenja, pre početka simptoma, naročipacijentimama koji su uriziku od kancera i/ili drugih ovde opisanih poremećaja. Izraz "prevencija" uključuje inhibiciju ili redukciju simptoma određene bolesti. Pacijenti porodničnom istorijom bolesti naročito su kandidati za preventivne režime u određenim primerima izvođenja.
Dodatno, pacijenti koji imaju istoriju vraćanja simptoma takođe su potencijalni kandidati za prevenciju. Shodno tome, izraz "prevencija" može se naizmenično koristiti sa izrazom "profilaktički tretman."
[0067] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izrazi "upravljanje," "vođenje" i "upravljanje" odnose se na preveniranja ili usporavanje progresije, širenja ili pogoršavanja neke bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više njenih simptoma. U određenim slučajevima, dobrobitni efekti koje subjekat razvije od profilaktičkog ili terapeutskog agensa ne rezultiraju izlečenjem bolesti ili poremećaja.
[0068] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, "terapeutski efektivna količina" jedinjenja je neka količina dovoljna da obezbedi terapeutski benefit u tretmanu ili upravljanju bolesti ili poremećaja, ili odloži ili minimizira jedan ili više simptoma povezanih sa bolesti ili poremećajem.
Terapeutski efektivna količina jedinjenja označava neku količina terapeutskog agensa, samog ili u kombinaciji sa drugim terapijama, koji obezbeđuje terapeutski benefit u tretiranju ili upravljanju bolesti ili poremećaja. Izraz "terapeutski efektivna količina" može da obuhvati neku količinu koja poboljšava ukupnu terapiju, redukuje ili zaobilazi simptome ili uzroke bolesti ili poremećaja, ili pojačava terapeutsku efikasnost nekog drugog terapeutskog agensa.
[0069] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, "profilaktički efektivna količina" jedinjenja je neka količina dovoljna da inhibira ili redukuje simptom bolesti ili da spreči vraćanje bolesti. Profilaktički efektivna količina jedinjenja označava neku količinu terapeutskog agensa, samog ili u kombinaciji sa drugim agensima, koja obezbeđuje neki profilaktički benefit u inhibiciji ili redukciji simptoma bolesti ili vraćanje bolesti. Izraz "profilaktički efektivna količina" može da obuhvata neku količinu koja poboljšava ukupnu profilaksu ili pojačava profilaktičku efikasnost nekog drugog profilaktičkog agensa.
[0070] Primeri kancera i predkancerogenih stanja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. patentima br.6,281,230 i 5,635,517 od Muller et al., u različitim U.S. patentnim publikacijama od Zeldis, koje uključuju publikacije br.2004/0220144A1, objavljene Novembra 4, 2004 (Treatment of Myelodysplastic Sindrom); 2004/0029832A1, objavljene Februara 12, 2004 (Treatment of Various Vrste of Cancer); i 2004/0087546, objavljene 6 Maja, 2004 (Treatment of Myeloproliferative Diseases). Primeri takođe uključuju one opisane u WO 2004/103274, objavljene Decembra 2, 2004.
[0071] Specifični primeri kancera uključuju, ali nisu ograničeni na, kancere kože, kao što je melanom; limfnog čvora; dojke; grlića materice; materice; gastroitenstinalnog trakta; pluća; jajnika; prostate; debelog creva; rektuma; usta; mozga; glave i vrata; grla; testisa; bubrega; pankreasa; kosti; slezine; jetre; bešike; grkljana; nazalnih puteva; i kanceri povezani sa SIDA-om. Jedinjenja su takođe korisna za tretiranje kancera krvi i koštane srži, kao što je multipla mijeloma i akutne i hronične leukemije, na primer, limfoblastna, mijelogenozna, limfocitna, i mijelocitnu leukemija. Jedinjenja obezbeđena ovde mogu se primeniti za tretiranje, preveniranje ili vođenje bilo primarnih ili metastatičnih tumora.
[0072] Drugi specifični kanceri uključuju, ali nisu ograničeni na, uznapredovale malignitete, amiloidoza, neuroblastoma, meningioma, hemangiopericitoma, višestruke metastaze u mozgu, glioblastom multioblici, glioblastoma, gliom moždanog stebla, maligni tumor mozga sa lošom prognozom, maligni gliom, ponovljeni maligni gliom, anaplastični astrocitom, anaplastični oligodendrogliom, neuroendokrinski tumor, rektalni adenokarcinom, Dukes C & D kolorektalni karcinom, neresektabilni kolorektalni karcinom, metastatski hepatocelularni karcinom, Kaposiov sarkom, karotipna akutna mijeloblastna leukemija, hronična limfocitna leukemija (CLL), Hodgkinov limfom, ne-Hodgkinov limfom, kutani T-célijski limfom, kutani B-célijski limfom, difuzni veliki B-célijski limfom, folikularni limfom niskog stepena, metastatski melanom (lokalizovani melanom, uključujucí, bez ograničavanja na, melanom očiju), maligni mezoteliom, maligni sindrom mezotelioma pleuralnog izliva, peritonealni karcinom, papilarni serozni karcinom, ginekološki sarkom, sarkom mekog tkiva, skleroderma, kutni vaskulitis, histiocitoza Langerhansovih célija, leiomiosarkom, progresivno fibrodisplastično zarastanje, hormonski refraktarni karcinom prostate, resektovani sarkom mekog tkiva visokog rizika, neoperabilni hepatocelularni karcinom, Valdenstromova makroglobulinemija, tinjajucí mijelom, tromi mijelom, kancer jajovoda, rak prostate koji je nezavisni od androgena, stadijum IV nemetastatičnog karcinoma prostate zavistan atestroma, hormonski neosetljivi rak prostate, rak prostate neosetljiv na hemoterapiju, karcinomom papilarne štitne žlezde, karcinomom folikularne štitne žlezde, medularni karcinom štitne žlezde i lejomiom. U specifičnom primeru izvođenja, kancer je metastatičan. U drugom primeru izvođenja, kancer je povratan ili otporan na hemoterapiju ili zračenje.
[0073] U jednom primeru izvođenja, postupci su za tretiranje, preveniranje ili vođenje različitih oblika leukemjia kao što je hronična limfocitna leukemija, hronična mijelocitna leukemija, akutna limfoblastna leukemija, akutna mijelogenozna leukemija i akutna mijeloblastna leukemija, koje uključuju leukemije koje se vraćaju, koje su otporne ili rezistentne, kako je opisano u U.S. publikaciji br.2006/0030594, objavljene Februara 9, 2006.
[0074] Izraz "leukemija" odnosi se na maligne neoplazme krv-formirajućih tkiva. Leukemija uključuje, ali nije ograničena na, hroničnu limfocitna leukemiju, hroničnu mijelocitnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemiju, akutnu mijelogenoznu leukemiju i akutnu mijeloblastnu leukemiju. Leukemija se može vratiti, biti otporna ili rezistentna na uobičajenu terapiju. Izraz "vratiti se" odnosi se na situaciju u kojoj su se kod pacijeanta koji su imali remisiju leukemije nakon terapuje ponovo vratile ćelije leukemije u koštanoj srži i povećale u normalnim krvnim ćelijama. Izraz "otporna ili rezistentna" odnosi se okolnosti u kojima pacijenti, čak i nakon intezivnog tretmana, imaju recidivne ćelije leukemije u svojoj srži.
[0075] U drugom primeru izvođenja, postupci su za tretiranje, preveniranje ili vođenje različitih vrsta limfoma, koji uključuju Ne-Hodžkinov limfom (NHL). Izraz "limfom" odnosi se na heterogenu grupu neoplazme koja nastaje u retikuloendotelnim i limfnim sistemima. "NHL" se odnosi na malignu monoklonalnu proliferaciju limfoidnih ćelija na mestima imunog sistema, koje uključuju limfne čvorove, koštanu srž, slezinu, jetru i gastroitenstinalni trakt. Primeri NHL uključuju, ali nisu ograničeni na, limfom mantl ćelija (MCL), limfocitni limfom intermedijerne diferencijacije, intermedijerni limfocitni limfom (ILL), difuzno slabo diferenciran limfocitni limfom (PDL), centrocitni limfom, limfom difuzno malih cepajućih ćelija (DSCCL), folikularni limfom, i bilo koja vrsta limfoma mantl ćelija koja se može videti pod mikroskopom (limfom nodularne, difuzne, blastične i mantl zone).
[0076] Primeri bolesti i poremećaja povezanih sa, ili okarakterisane, neželjenom angiogenezom uključuju, ali nisu ograničeni na, zapaljenske bolesti, autoimune bolesti, virusne bolesti, genetske bolesti, alergijske bolesti, bakterijske bolesti, očne neovaskularne bolesti, korodialne neovaskularne bolesti, neovaskularne bolesti mrežnjače, i rubeoze (neovaskularizacija ugla). Specifični primeri bolesti i poremećaja povezanih sa, ili okarakterisane, neželjenom angiogenezom uključuju, ali nisu ograničeni na, artiritis, endometriozu, Kronovu bolest, otkazivanje srca, uznapredovalo otkazivanje srca, oštecénje bubrega, endotoksemiju, sindrom toksičnog šoka, osteoartiritis, retrovirusna replikacija, propadanje, meningitis, fibroza izazvana silicijum oksidom, fibroza izazvana azbestom, veterinarski poremećaj, hiperkalcemija povezana sa malignitetom, šlog, cirkulacioni šok, periodontitis, gingivitis, makrocitna anemija, otporna anemija, i sindrom 5q-delecije.
[0077] Primeri bola uključuju, ali nisu ograničeni na one opisane u U.S. patentnoj publikaciji br.
2005/0203142, objavljene 15 Septembra, 2005. Specifične vrste bola uključuju, ali nisu ograničene na, nociceptivni bol, neuropatski bol, pomešani bol nociceptivnog i neuropatičnog bola, visceralni bol, migrenu, glavobolja i post-operativni bol.
[0078] Primeri nociceptivnog bola uključuju, ali nisu ograničeni na, bol povezan sa hemijskih ili toplotnim opekotinama, posekotinama kože, kontuzijama kože, osteoartiritisom, reumatoidnim artiritisom, tendonitisom, i miofascijalnim bolom.
[0079] Primeri neuropatičnog bola čine, ali nisu ograničeni na, CRPS tip I, CRPS tip II, refleksna simpatetička distrofija (RSD), refleksna neurovaskularna distrofija, refleksna distrofija, simpatetički održavan bolni sindrom, kauzalgija, Sudeckova atrofija kosti, algoneurodistrofija, sidnrom rame-šaka, post-traumatska distrofija, trigeminalna neuralgija, postherpetična neuralgija, bol povezan sa kancerom, bol fantomskog uda, firbomijalgija, sindrom hroničnog umora, bol povezan sa povredom kičmene moždine, centralni bol posle šloga, radikulopatija, dijabetska neuropatija, bol posle šloga, luetična neuropatija, i ostala bolna neuropatiča stanja kao što su ona indukovana supstancama kao što su vinkristin i velkada.
[0080] Kako se ovde koristi, izrazi "kompleksni regionalni bolni sindrom," "CRPS" i "CRPS i povezani sindromi" označavaju poremećaje hroničnog bola okarakterisane jednim ili više od sledećih: bol, bilo spontani ili izazvani, koji uključuju alodiniju (bolni odgovor na stimulus koji uobičajeno nije bolan) i hiperalgeziju (preteran odgovor na stimulus koji je obično samo blago bolan); bol koji je disproporcionalan podsticajnim događajem (npr., godine jakog bola nakon uganuća zgloba); regionalni bol koji nije ograničen pojedinačnom perifernom distribucijom nerava; i autonomnu disregulaciju (npr., edem, alternaciju u krvnom protoku i hiperhidroza) povezana sa trofičnim promenama na koži (abnormalnosti rasta kose i noktiju i kožna ulceracija).
[0081] Primeri MD i povezani sindromi uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. patentnoj publikaciji br.2004/0091455, objavljene 13 Maja, 2004. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, atrofičnu (suvu) MD, eksudativnu (vlažnu) MD, staračku makulopatiju (ARM), koroidalnu neovaskularizaciju (CNVM), odvajanje epitelijalnog pigmenta mrežnjače (PED), i atrofija epitelnog pigmenta mrežnjače (RPE).
[0082] Primeri kožnih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.
2005/0214328A1, objavljene 29 Septembra, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, keratoze i povezane sipmtome, kožne bolesti ili poremećaje okarakterisani izraslinama epidermisa, akni, i nabora.
[0083] Kako se ovde koristi, izraz "keratoza" odnosi se na bilo koju leziju na epidermisu obeležena prisustvom okruženih izraslina rožnatog sloja, koje čine, ali nisu ograničene na aktinična keratoza, seboroična keratoza, keratoakantom, keratoza folikularis (Darierova bolest), invertovana folikularna keratoza, palmoplantarna keratoderma (PPK, keratoza palmaris et plantaris), keratoza pilaris, i stuko keratoza. Izraz "aktinična keratoza" takođe se odnosi na senilnu keratozu, keratozu senilis, verruca senilis, plana senilis, solarnu keratozu, keratodermu ili keratomu. Izraz "seboroična keratoza" takođe se odnosi na seboroična bradavicu, senilnu bradavicu, ili papilom bazalnih ćelija. Keratoza je okarakterisana jednim ili više od sledećih simptoma: grub izgled, ljuštenje, eritematozne papule, plakovi, spikule ili nodule na izloženim površinama (npr., lice, ruke, uši, vrat , noge i toraks), izrasline keratina koje se nazivaju kožni rogovi, hiperkeratoza, telangiektazije, elatoza, pigmentne mrlje na koži, akantoza, parakeratoza, diskeratoze, papilomatoze, hiperpigmentacija bazalnih ćelija, celularna atipija, mitotičke slike, abnormalno ćelija-ćelija spajanje, gusti zapaljenski infiltrati i mala prevalencija karcinoma skvamoznih célija.
[0084] Primeri kožnih bolesti ili poremećaja okarakterisani izraslinama epidermisa uključuju, ali nisu ograničeni na, bilo koje stanje, bolesti ili poremećaje obeležene prisustvom izraslina epidermisa, koje uključuju ali nisu ograničene na, infekcije povezane sa papiloma virusom, arsensku keratozu, znakove Leser-Trélat, bradavičasti diskeratom (WD), trihostaza spinuloza (TS), eritrokeratodermija variabilis (EKV), fetalna ihtioza (Harlekinove ihtioza), oticanje zglobova prstiju, kutani melanoakantom, porokeratozu, psorijazu, karcinom skvamoznih ćelija, konfluentnu i retikulisanu papilomatozu (CRP), akrohordone, kutani rog, kaudenovu bolest (sindrom multipla hamartoma), dermatoza papulozu nigra (DPN), sindrom epidermalnog nevusa (ENS), ihthiozu vulgaris, molluscum contagiosum, prurigo nodularis, i akantozu nigrikans (AN).
[0085] Primeri plućnih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.
2005/0239842A1, objavljene 27 Oktobra, 2005. Specifični primeri uključuju plućnu hipertenziju i povezane poremećaje. Primeri plućne hipertenzije i povezanih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na: primarnu plućnu hipertenziju (PPH); sekundarnu plućnu hipertenziju (SPH); familijarnu PPH; sporadičnu PPH; predkapilarnu plućnu hipertenziju; plućnu arterijsku hipertenziju (PAH); hipertenziju plućne arterije; idiopatsku plućnu hipertenziju; trombotičnu plućnu arteriopatiju (TPA); pleksogenu plućnu arteriopatiju; funkcionalne klase I do IV plućne hipertenzije; i plućnu hipertenziju povezanu sa, u vezi sa, ili sekundarna na, levu ventrikularnu disfunkciju, mitralnu valvularnu bolest, konstriktivni perikarditis, aortnu stenozu, kardiomiopatiju, medijastinalnu fibrozu, anomalnu plućnu vensku drenažu, plućnu venookluzivnu bolest, kolagen vaskularnu bolest, kongenitalnu bolest srca, HIV virusnu infekciju, supstance i toksine kao što su fenfluramini, kongenitalnu bolest srca, plućnu venoznu hipertenziju, hroničnu opstruktivnu plućnu bolest, intersticijsku bolest plucá, sanom poremećeno disanje, poremecáj alveolarne hipoventilacije, hronično izlaganje velikim visinama, neonatalnu bolest plucá, alveolarnokapilarnu displaziju, bolest srpastih célija, ostale koagulacijone poremećaje, hronične tromboembolije, bolest vezivnog tkiva, lupus koji uključuje sistemski i kutani lupus, šistosomijazu, sarkoidozu ili plućnu kapilarnu hemangiomatozu.
[0086] Primeri poremećaja povezani sa azbestom uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.2005/0100529, objavljene 12 Maja, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, mezoteliom, azbestozu, maligni pleuralni izliv, benigni eksudativni izliv, pleuralne plakove, pleuralnu kalcifikaciju, difuzno pleuralno zadebljanje, zaobljene atelektaze, fibrotične mase, i kancer pluća.
[0087] Primeri parazitskih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br. 2006/0154880, objavljene 13 Jula, 2006. Parazitske bolesti uključuju bolesti i poremećaje izazvane od strane humanih intracelularnih paraziti kao što je, ali nisu ograničeni na, P. falcifarium, P. ovale, P. vivax, P. malarijue, L. donovari, L. infantum, L. aethiopica, L. major, L. tropica, L. mexicana, L. braziliensis, T. Gondii, B. microti, B. divergens, B. coli, C. parvum, C. cayetanensis, E. histolytica, I. belli, S. mansonii, S. haematobium, Trypanosoma ssp., Toksoplasma ssp., i O. volvulus. Ostale bolesti i poremećaji izazvani od strane ne-humanih intracelularnih paraziti kao što je, ali nisu ograničeni na, Babesia bovis, Babesia canis, Banesia Gibsoni, Besnoitia darlingi, Cytauxzoon felis, Eimeria ssp., Hammondia ssp., i Theileria ssp., takođe su obuhvaćene. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, malariju, babeziozu, tripanosomijazu, leišmanijaza, toksoplazmozu, meningoencefalitis, keratitis, amebijazu, giardijazu, leišmanijaza, kriptosporijazu, izosporijazu, ciklosporijazu, mikrosporidiozu, askarijaza, trihurijazu, ankilostomijazu, strongiloidijazu, toksokarijazu, trihinozu, limfnu filarijazu, onhocercijazu, filarijazu, šistosomijazu, i dermatitis izazvan životinjskim šistosomama.
[0088] Primeri poremećaja imunodeficijencije uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. prijavi br..11/289,723, podnete 30 Novembra, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, nedostatak adenozin deaminaze, nedostatak antitela sa normalnim ili povišenim Ig, ataksijatelangiektazija, sindrom golih limfocita, obična varijabilna imunodeficijencija, nedostatak Ig sa hiper-IgM, delecije Ig teških lanaca, nedostatak IgA, imunodeficijencije sa timomom, retikularnu disgenezu, Nezelof sindrom, selektivni nedostatak IgG podklase, tranzijentnu hipogamaglobulinemiju novorođenčadi, Wistcott-Aldrich-ov sindrom, X-povezanu agamaglobulinemiju, X-povezanu tešku kombinovanu imunodeficijenciju.
[0089] Primeri CNS poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.
2005/0143344, objavljene 30 Juna, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, uključuju, ali nisu ograničeni na, Amiotrofnu lateralnu sklerozu, Alchajmerovu Bolest, Parkinsonovu Bolest, Hantingtonovu Bolest, Multipla sklerozu pored neuroimunoloških poremećaja kao što je Touretteov sindrom, delerijum, ili poremecáji u svesti koji se javljaju tokom kratkog vremenskog perioda, i poremećaj amnezije, ili diskretno oštecénje memorije koje se javlja u odsustvu drugih oštecénja centralnog nervnog sistema.
[0090] Primeri CNS povreda i povezanih sindroma uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.2006/0122228, objavljene 8 Juna, 2006. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, CNS povredu/oštećenje i povezane sindrome, koji uključuju, ali nisu ograničeni na, primarnu povredu mozga, sekundarnu povredu mozga, traumatsku povredu mozga, fokalnu povredu mozga, difuznu aksonalnu povredu, povreda glave, potres mozga, sindrom post-potresa mozga, celebralna kontuzija i laceracija, subduralni hematom, epidermalni hematom, post-traumatsku epilepsiju, hronično vegetativno stanje, kompletnu SCI, nekompletnu SCI, akutnu SCI, subakutnu SCI, hroničnu SCI, sindrom centralne moždine, Brown-Sequard sindrom, sindrom prednje moždine, conus medullaris sindrom, cauda equina sindrom, neurogeni šok, spinalni šok, izmenjeni nivo svesti, glavobolju, mučninu, povraćanje, gubitak pamćenja, vrtoglavicu, diplopiju, zamagljeni vid, emocionalnu labilnost, poremecáje spavanja, razdražljivost, nemogućnost koncentracije, nervozu, bihevioralno oštecénje, kognitivni deficit, i napad.
[0091] Ostale bolesti ili poremećaji uključuju, ali nisu ograničeni na, virusne, genetske, alergijske, i autoimune bolesti. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, HIV, hepatitis, sindrom respiratornog poremecája odrasle osobe, bolesti resorpcije kostiju, hronične plućne zapaljenske bolesti, dermatitis, cistična fibroza, septični šok, sepsa, endotoksičnih šok, hemodinamički šok, sindrom sepse, post ishemijsku reperfuzionu povredu, meningitis, psorijazu, fibrotičnu bolest, kaheksiju, bolest graft versus domaćin, odbacivanje grafta, auto-imunu bolest, reumatoidni spondilitis, Kronovu bolest, ulcerativni kolitis, zapaljenske bolesti creva, multipla sklerozu, sistemski lupus eritematouus, ENL kod lepre, radijaciono oštećenje, kancer, astmu, ili hiperoksičnu alveolarnu povredu.
[0092] Primeri ateroskleroze i povezanih stanja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.2002/0054899, objavljene 9 Maja, 2002. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, sve oblike stanja koje uključuje aterosklerozu, koji uključuju restenozu nakon vaskularne intervencije kao što je angioplastika, stentovanje, aterektomija i graftovanje. Ovde su razmatrani svi oblici vaskularne intervencije koji uključuju bolesti kardiovaskularnog i renalnog sistema, kao što su, ali nisu ograničene na, renalnu angioplastiku, perkutanu koronarnu intervenciju (PCI), perkutanu transluminalnu koronarnu angioplastiku (PTCA), karotidnu perkutanu transluminalnu angioplastiku (PTA), koronarni bajpas grafting, angioplastika sa implantiranjem stenta, perifernu perkutanu transluminalnu intervenciju bedrene kosti, femoralne ili poplitealne arterije, i hiruršku intervenciju primenom impregniranih veštačkih graftova. Sledeća tabela obezbeđuje spisak glavnih sistemskih arterija kojima može biti potrebno tretiranje, od kojih su sve razmatrane ovde:
Tabela 1
[0093] Primeri disfunkcionalnog spavanja i povezani sindromi uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.2005/0222209A1, objavljene 6 Oktobra, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, hrkanje, apneu spavanja, insomniju, narkolepcsiju, sindrom nemirne noge, noćne more, hodanje u snu, jedenje u snu, i disfunkcionalno spavanje povezano sa hroničnim neurološkim ili zapaljenskim stanjima. Hronična neurološka ili zapaljenska stanja, uključuju, ali nisu ograničena na, kompleksni regionalni bolni sindrom, hronični bol u donjem delu leđa, muskuloskeletni bol, artiritis, radikulopatiju, bol povezan sa kancerom, firbomijalgiju, sindrom hroničnog umora, visceralni bol, bol bešike, hronični pankreatitis, neuropatije (dijabetska, post-herpetična, traumatska ili zapaljenska), i neurodegenerativne poremećaje kao što je Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, amiotrofna lateralna skleroza, multipla skleroza, Hantingtonova bolest, bradikinezija; krutost mišicá; parkinsonsi tremor; parkinsonski hod; zamrzavanje kretanja; depresiju; defektivno dugoročno pamćenje, Rubinstein-Taybi sindrom (RTS); demenciju; nestabilnost u držanju; hipokinetičke poremećaje; sinukleinske poremećaje; multipla sistemske atropije; striatonigralnu degeneraciju; olivopontocerebelarnu atrofiju; Shy-Dragerov sindrom; motorno neuronsku bolest sa karakteristikama parkinsonizma; demeciju sa levi telima; Tau patološke poremećaje; progresivnu supranuklearnu paralizu; kortikobazalnu degeneraciju; frontotemporalnu demenciju; amiloidne patološke poremećaje; blago kognitivno oštecénje;
Alchajmerovu bolest sa parkinsonizmom; Wilsonovu bolest; Hallervorden-Spatz bolest; Chediak-Hagashi bolest; SCA-3 spino cerebelarnu ataksiju; X-povezani distonični parkinsonizam; prionsku bolest; hiperkinetičke poremećaje; drhtavicu; balizam; distonične tremore; Amiotrofnu lateralnu sklerozu (ALS); CNS traumu i miokloniju.
[0094] Primeri hemoglobinopatije i povezanih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. publikaciji br.2005/0143420A1, objavljene 30 Juna, 2005. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, hemoglobinopatiju, anemiju srpastih célija, i bilo koje druge poremećaje povezane sa diferencijacijom CD34+ ćelija.
[0095] Primeri TNFα povezanih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u WO 98/03502 i WO 98/54170. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na: endotoksemiju ili sindrom toksičnog šoka; kaheksiju; sindrom respiratornog poremecája odrasle osobe; bolesti resorpcije kostiju kao što je artiritis; hiperkalcemiju; Reakciju Graft versus Domaćin; celebralnu malariju; zapaljenja; rast tumora; hronične plućne zapaljenske bolesti; reperfuzionu povredu; miokardijalni infarkt; šlog; cirkulacioni šok; reumatoidni artiritis; Kronovu bolest; HIV infekciju i SIDA; druge poremećaje kao što je reumatoidni artiritis, reumatoidni spondilitis, osteoartiritis, psorijazni artiritis i ostala artritična stanja, septični šok, sepsu, endotoksičnih šok, bolest graft versus domaćin, propadanje, Kronova bolest, ulcerativni kolitis, multipla skleroza, sistemski lupus eritromatozis, ENL kod lepre, HIV, SIDA, i oportunističke infekcije kod SIDA; poremećaje kao što je septičpki šok, sepsa, endotoksičnih šok, hemodinamički šok i sepsa sindrom, post ishemijska reperfuziona povreda, malarija, mikobakterijska infekcija, meningitis, psorijaza, kongestivno otkazivanje srca, fibrotična bolest, kaheksija, odbacivanje grafta, onkogena ili kancerogena stanja, astma, autoimuna bolest, radijaciona oštećenja, i hiperoksična alveolarna povreda; virusne infekcije, kao što su one izazvane od strane herpes virusa; virusni konjunktivitis; ili atopični dermatitis.
[0096] U drugim primerima izvođenja, ovde su obezbeđena jedinjenja koja se koriste u kombinaciji sa različitim imunološkim aplikacijama, tj., upotreba jedinjenja obezbeđenih ovde u kombinaciji sa vakcinisanjem, na primer, kao adjuvans vakcine. Iako su ovde razmatrani bilo koji postupci i načini za upotrebu jedinjenja obezbeđenih ovde u kombinaciji sa vakcinom, neograničavajući primer takvih upotreba je upotreba ovde obezbeđenih jedinjenja kao adjuvanasa za vakcinu, u skladu sa režimima davanja opisanim u U.S. Provizionoj Prijavi br.60/712,823, podnesena 1 Septembra, 2005. Ovi primeri izvođenja takođe se odnose na upotrebe ovde obezbeđenih jedinjenja u kombinaciji sa vakcinama radi tretiranja ili preveniranja kancera ili infektivnih bolesti, i druge različite upotrebe ovde obezbeđenih jedinjenja, kao što je, ali nisu ograničene na, redukciju ili desenzitizaciju alergijskih reakcija.
[0097] Doze jedinjenja obezbeđenog ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata ili stereoizomer, variraju u zavisnosti od faktora kao što su: specifična indikacija koja se tretira, prevenira, ili vodi; starost i stanje pacijenta; i količina drugog aktivnog agensa koji se koristi, ako se koristi bilo koji. Generalno, ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati, klatrati ili stereoizomeri, može se upotrebiti u nekoj količini od oko 0.1 mg do oko 500 mg na dan, i može se podestiti na konvencionalan način (npr., ista količina daje se svaki dan tokom perioda tretmana, prevencije ili upravljanja), u ciklusima (npr., jedan nedelje se daje, druge nedelje se ne daje), ili u nekoj količini koja se povećava ili smanjuje tokom tretmana, prevencije, ili upravljanja. U drugim primerima izvođenja, doza može biti od oko 1 mg do oko 300 mg, od oko 0.1 mg do oko 150 mg, od oko 1 mg do oko 200 mg, od oko 10 mg do oko 100 mg, od oko 0.1 mg do oko 50 mg, od oko 1 mg do oko 50 mg, od oko 10 mg do oko 50 mg, od oko 20 mg do oko 30 mg, ili od oko 1 mg do oko 20 mg.
DRUGI AKTIVNI AGENSI
[0098] Ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer, može se kombinovati sa drugim farmakološki aktivnim jedinjenjima ("drugi aktivni agensi") u ovde obezbeđenim postupcima i kompozicijama. Određene kombinacije mogu da funkcionišu sinergistički u tretiranju određenih vrsta bolesti ili poremećaja, i stanja i simptoma povezanih sa takvim bolestima ili poremećajima. Ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer, takođe može funkcionisati tako da zaobilazi štetne efekte povezane sa određenim drugim aktivnim agensima, i obrnuto.
[0099] Jedan ili više drugih aktivnih sastojaka ili agenasa mogu se primeniti u ovde obezbeđenim postupcima i kompozicijama. Drugi aktivni agensi mogu biti veliki molekuli (npr., proteini) ili mali molekuli (npr., sintetički neorganski, organometalni, ili organski molekuli).
[0100] Primeri aktivnih agenasa velikih molekula uključuju, ali nisu ograničeni na, hematopoetske faktore rasta, citokine, i monoklonalna i poliklonalna antitela. Specifični primeri aktivnih agenasa su anti-CD40 monoklonalna antitela (kao što je, na primer, SGN-40); inhibitori histon deacetliaze (kao što je, na primer, SAHA i LAQ 824); inhibitori proteina-90 toplotnog šoka (kao što je, na primer, 17-AAG); inhibitori receptora kinaze insulinskog faktora rasta-1; inhibitori kinaze receptora vaskularnog endotelnog faktora rasta (kao što je, na primer, PTK787); inhibitori receptora faktora rasta insulina; inhibitori aciltransferaze lizofosfatidne kiseline; inhibitori IkB kinaze; inhibitori p38MAPK; inhibitori EGFR (kao što je, na primer, gefitinib i erlotinib HCL); HER-2 antitela (kao što je, na primer, trastuzumab (Herceptin<®>) i pertuzumab (Omnitarg™)); VEGFR antitela (kao što je, na primer, bevacizumab (Avastin™)); inhibitori VEGFR (kao što je, na primer, inhibitori flk-1 specifične kinaze, SU5416 i ptk787/zk222584); inhibitori PI3K (kao što je, na primer, vortmanin); inhibitori C-Met (kao što je, na primer, PHA-665752); monoklonalna antitela (kao što je, na primer, rituksimab (Rituxan<®>), tositumomab (Bexxar<®>), edrekolomab (Panorex<®>) i G250); i anti-TNF-α antitela. Primeri aktivnih agenasa malih molekula uključuju, ali nisu ograničeni na, antikancer agense i antibiotike (npr., klaritromicin).
[0101] Specifična druga aktivna jedinjenja koja se mogu kombinovati ovde obezbeđenim jedinjenjima zavisiće u zavisnosti od specifične indikacije koja se tretira, prevenira ili vodi.
[0102] Primera radi, za tretman, prevenciju ili upravljanje kancera, drugi aktivni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na: semaksanib; ciklosporin; etanercept; doksiciklin; bortezomib; lapatinib (Tykerb<®>); acivicin; aklarubicin; akodazol hidrohlorid; akronin; adozelesin; aldesleukin; altretamin; ambomicin; ametantron acetat; amsakrin; anastrozol; antramicin; asparaginaza; asperlin; azacitidin; azetepa; azotomicin; batimastat; benzodepa; bikalutamid; bisantren hidrohlorid; bisnafid dimesilat; biselesin; bleomicin sulfat; brekvinar natrijum; bropirimin; buzulfan; kaktinomicin; kalusteron; karacemid; karbetimer; karboplatin; karmustin; karubicin hidrohlorid; karzelesin; cedefingol; celecoksib; hlorambucil; cirolemicin; cisplatin; cladribin; crisnatol mezilat; ciklofosfamid; citarabin; dakarbazin; daktinomicin; daunorubicin hidrohlorid; decitabin; deksormaplatin; dezagvanin; dezagvanin mezilat; diazikvon; docetaksel; doksorubicin; doksorubicin hidrohlorid; droloksifen; droloksifen citrat; dromostanolon propionat; duazomicin; edatreksat; eflornitin hidrohlorid; elsamitrucin; enloplatin; enpromat; epipropidin; epirubicin hidrohlorid; erbulozol; esorubicin hidrohlorid; estramustin; estramustin fosfat natrijum; etanidazol; etopozid; etopozid fosfat; etoprin; fadrozol hidrohlorid; fazarabin; fenretinid; floksuridin; fludarabin fosfat; fluorouracil; flurocitabin; foskvidon; fostriecin natrijum; gemcitabin; gemcitabin hidrohlorid; hidroksiurea; idarubicin hidrohlorid; ifosfamid; ilmofosin; iproplatin; irinotekan; irinotekan hidrohlorid; lanreotid acetat; letrozol; leuprolid acetat; liarozol hidrohlorid; lometreksol natrijum; lomustin; lozoksantron hidrohlorid; mazoprokol; maitanzin; mehloretamin hidrohlorid; megestrol acetat; melengestrol acetat; melfalan; menogaril; merkaptopurin; metotreksat; metotreksat natrijum; metoprin; meturedepa; mitindomid; mitokarcin; mitokromin; mitogilin; mitomalcin; mitomicin; mitosper; mitotan; mitoksantron hidrohlorid; mikofenolna kiselina; nokodazol; nogalamicin; ilimaplatin; oksisuran; paclitaksel; pegaspargaza; peliomicin; pentamustin; peplomicin sulfat; perfosfamid; pipobroman; piposulfan; piroksantron hidrohlorid; plikamicin; plomestan; porfimer natrijum; porfiromicin; prednimustin; prokarbazin hidrohlorid; puromicin; puromicin hidrohlorid; pirazofurin; riboprin; safingol; safingol hidrohlorid; semustin; simtrazen; sparfosat natrijum; sparsomicin; spirogermanijum hidrohlorid; spiromustin; spiroplatin; streptonigrin; streptozocin; sulofenur; talisomicin; tekogalan natrijum; taksoter; tegafur; teloksantron hidrohlorid; temoporfin; teniposid; teroksiron; testolakton; tiamiprin; tiogvanin; tiotepa; tiazofurin; tirapazamin; toremifen citrat; trestolon acetat; triciribin fosfat; trimetreksat; trimetreksat glukuronat; triptorelin; tubulozol hidrohlorid; uracil mustard; uredepa; vapreotid; verteporfin; vinblastin sulfat; vincristin sulfat; vindesin; vindesin sulfat; vinepidin sulfat; vinglicinat sulfat; vinleurozin sulfat; vinorelbin tartrat; vinrozidin sulfat; vinzolidin sulfat; vorozol; zeniplatin; zinostatin; i zorubicin hidrohlorid.
[0103] Drugi agensi uključuju, ali nisu ograničeni na: 20-epi-1,25 dihidroksivitamin D3; 5-etiniluracil; abirateron; aklarubicin; acilfulven; adecipenol; adozelesin; aldesleukin; ALL-TK antagonisti; altretamin; ambamustin; amidoks; amifostin; aminolevulinska kiselina; amrubicin; amsakrin; anagrelid; anastrozol; irografolid; inhibitori angiogeneze; antagonist D; antagonist G; antareliks; anti-dorzalni morfogeni protein-1; antiandrogen, karcinom prostate; antiestrogen; antineoplaston; neosetljivi oligonukleotidi; afidikolin glicinat; modulatori gena apoptoze; regulatori apoptoze; apurinska kiselina; ara-CDP-DL-PTBA; arginin deaminaza; asulakrin; atamestan; atrimustin; aksinastatin 1; aksinastatin 2; aksinastatin 3; azasetron; azatoksin; azatirozin; derivati bakatina III; balanol; batimastat; BCR/ABL antagonisti; benzohlorini; benzoilstaurosporin; beta laktam derivati; beta-aletin; betaklamicin B; betulinska kiselina; bFGF inhibitor; bikalutamid; bisantren; bisaziridinilspermin; bisnafid; bistraten A; biselesin; breflat; bropirimin; budotitan; butionin sulfoksimin; kalcipotriol; kalfostin C; derivati kamptotecina; kapecitabin; karboksamid-amino-triazol; karboksiamidotriazol; CaRest M3; CARN 700; inhibitor izveden iz hrskavice; karzelesin; inhibitori kasein kinaze (ICOS); kastanospermin; cekropin B; cetroreliks; hloreni; hlorokvinoksalin sulfonamid; cicaprost; cis-porfirin; kladribin; analozi klomifena; klotrimazol; kolismicin A; kolismicin B; kombretastatin A4; analog kombretastatina; konagenin; krambescidin 816; krisnatol; kriptoficin 8; kriptoficin A derivate; curacin A; ciklopentantrahinone; cikloplatam; cipemicm; citarabin okfosfat; citolitički faktor; citostatin; dakliksimab; decitabin; dehidrodidemnin B; deslorelin; deksametazon; deksifosfamid; deksrazoksan; deksverapamil; diazikuon; didemnin B; didoks; dietilnorspermin; dihidro-5-azacitidin; dihidrotaksol, 9-; dioksamicin; difenil spiromustin; doketaksel; dokozanol; dolasetron; doksifluridin; doksorubicin; droloksifen; dronabinol; duocarmicin SA; ebselen; ecomustin; edelfosin; edrekolomab; eflornitin; elemen; emitefur; epirubicin; epristerid; analog estramustina; estrogen agoniste; estrogen antagoniste; etanidazol; etopozid fosfat; eksemestan; fadrozol; fazarabin; fenretinid; filgrastim; finasterid; flavopiridol; flezelastin; fiuasteron; fludarabin; fluorodaunorunicin hidrohlorid; forfenimeks; formestan; fostriecin; fotemustin; gadolininijum teksafirin; galinijum nitrat; galocitabin; ganireliks; inhibitore želatinaza; gemcitabin; inhibitore glutationa; hepsulfam; heregulin; heksametilen bisacetamid; hipericin; ibandronsku kiselinu; idarubicin; idoksifen; idramanton; ilmofosin; ilomastat; imatinib (Gleevec®), imihimod; imunostimulativne peptide; inhibitor receptora faktora rasta sličnog insulinu-1; interferon agoniste; interferone; interleukine; iobenguan; jododoksorubicin; ipomeanol, 4-; iropiakt; irsogladin; izobengazol; izohomohalikondrin B; itasetron; jasplakinolid; kahaialid F; lamelarin-N triacetat; ianreotid; leinamicin; lenograstim; lentinan sulfat; leptolstatin; letrozol; leukemia inhibiting faktor; leukocitni alfainterferon; leuprolid+estrogen+progesteron; leuprorelin; levamizol; liarozol; linearni analog poliamina; iipofilni disaharidni peptid; lipofilna jedinjenja platine; lizoklinamid 7; lobaplatin; lombricin; lometreksol; lonidamin; lozoksantron; loksoribin; lurtotekan; lutetinijum teksafirin; lizofilin; litički peptidi; maitanzin; manostatin A; marimastat; masoprokol; maspin; inhibitore matrilisina; inhibitore matriksa metaloproteinaze; menogaril; merbaron; meterelin; metioninaza; metoklopramid; MIF inhibitor; mifepriston; miltefosin; mirimostim; mitoguazon; mitolaktol; analozi mitomicina; mitonafid; mitotoksin fibroblast faktora rasta-saporin; mitoksantron; mofaroten; molgramostim; Erbituks, humani horionski gonadotropin; monofosforil lipid A+skelet mikobakterijskog ćelijskog zida; mopidamol; antikancer agens senfa; mikacaperoksid B; ekstrakt mikobackterijskog ćelijskog zida; miriaporon; N-acetildinalin; N-supstituisane benzamide; nafarelin; nagrestip; nalokson+pentazocin; napavin; nafterpin; nartograstim; nedaplatin; nemorubicin; neridronsku kiselinu; nilutamid; nisamicin; modulatore azot oksida; nitroksid antioksidant; nitrulin; oblimersen (Genasense<®>); O6-benzilgvanin; oktreotid; okicenon; oligonukleotid; onapriston; ondansetron; ondansetron; oracin; oralni citokin induktor; ormaplatin; osateron; oksaliplatin; oksaunomicin; paklitaksel; paklitaksel analoge; paklitaksel derivate; palauamin; palmitoilrhizoksin; pamidronic kiselinu; panaksitriol; panomifen; parabactin; pazeliptin; pegaspargaza; peldesin; pentosan polisulfat natrijum; pentostatin; pentrozol; perflubron; perfosfamid; perilil alcohol; fenazinomicin; fenilacetat; fosfataze inhibitore; picibanil; pilocarpin hidrohlorid; pirarubicin; piritreksim; piacetin A; piacetin B; inhibitor aktivatora plazminogena; platina kompleks; jedinjenja platine; platinatriamin kompleks; porfimer natrijum; porfiromicin; prednizon; propil bis-akridon; prostaglandin J2; inhibitore proteaze; protein A-baziran imuni modulator; inhibitor protein kinaze C; inhibitor protein kinaze C, mikroalgal; inhibitore fosfataze proteina tirozina; purin nucleosid fosforilase inhibitore; purpurins; pirazoloakridin; piridoksilovan hemoglobin polioksietilen konjugat; raf antagoniste; raltitreksed; ramosetron; inhibitore ras farnezil protein transferaze; inhibitore ras; inhibitore ras-GAP; reteliptin demetilisan; reninijum Re 186 etidronat; rizoksin; ribozime; R11 retinamid; rohitucin; romurtid; rohinimeks; rubiginon B1; ruboksil; safingol; saintopin; SarCNU; sarkofitol A; sargramostim; Sdi 1 mimetike; semustin; starenjem dobijen inhibitor 1; čulne oligonukleotide; inhibitore signala transdukcije; sizofiran; sobuzoksan; natrijum borokaptat; natrijum fenilacetat; solverol; somatomedin vezivni protein; sonermin; sparfosinsaka kiselinu; spicamicin D; spiromustin; splenopentin; spongistatin 1; skualamin; stipiamid; inhibitore stromelizina; sulfinosin; antagonist superaktivnog vazoaktivne intestinalnog peptida; suradista; suramin; svainsonin; talimustin; tamoksifen metiodid; tauromustin; tazaroten; tekogalan natrijum; tegafur; telurapirilinijum; telomerase inhibitore; temoporfm; teniposid; tetrahlorodekaoksid; tetrazomin; taliblastin; tiokoralin; trombopoietin; trombopoietin mimetik; timalfasin; agoniste timopoietin receptora; timotrinan; stimulišući hormon štitne žlezde; kalaj etil etiopurpurin; tirapazamin; titanocen bihlorid; topsentin; toremifen; translation inhibitore; tretinoin; triacetiluridin; triciribin; trimetreksat; triptorelin; tropisetron; turosterid; inhibitore tirozin kinaze; tirfostine; UBC inhibitore; ubenimeks; inhibitore urogenitalnog sinusnog faktora rasta;
antagoniste receptora urokinaze; vapreotid; variolin B; velarezol; veramin; verdins; verteporfin; vinorelbin; vinksaltin; vitaksin; vorozol; zanoteron; zeniplatin; zilaskorb i zinostatin stimalamer.
[0104] Specifični drugi aktivni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na, 2-metoksiestradiol, telomestatin, izazivače aptoze u višestrukim ćelijama mijeloma (kao što je, na primer, TRAIL), statine, semaksanib, ciklosporin, etanercept, doksiciklin, bortezomib, oblimersen (Genasense<®>), remikad, docetaksel, celekoksib, melfalan, deksametazone (Decadron<®>), steroidi, gemcitabin, cisplatinum, temozolomid, etopozid, ciklofosfamid, temodar, karboplatin, prokarbazin, gliadel, tamoksifen, topotekan, metotreksat, Arisa<®>, taksol, taksoter, fluorouracil, leukovorin, irinotekan, kseloda, CPT-11, interferon alfa, pegilovani interferon alfa (npr., PEGINTRON-A), kapecitabin, cisplatin, tiotepa, fludarabin, karboplatin, lipozomalni daunorubicin, citarabin, doksetaksol, pacilitaksel, vinblastin, IL-2, GM-CSF, dakarbazin, vinorelbin, zoledronsku kiselinu, palmitronat, biaksin, busulfan, prednizon, bisfosfonat, arsenik triooksid, vinkristin, doksorubicin (Doxil<®>), paklitaksel, ganciklovir, adriamicin, estramustin natrijum fosfat (Emcyt<®>), sulindak, i etopozid.
[0105] U drugom primeru izvođenja, primeri specifičnih drugih agenasa u skladu sa indikacijama koje se leče, preveniraju, ili vode, mogu se potražiti u sledećim referencama: U.S. patentima br.6,281,230 i 5,635,517; U.S. publikacijama br.2004/0220144, 2004/0190609, 2004/0087546, 2005/0203142, 2004/0091455, 2005/0100529, 2005/0214328, 2005/0239842, 2006/0154880, 2006/0122228,and 2005/0143344; i U.S. provizionoj prijavi br.60/631,870.
[0106] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje bola uključuju, ali nisu ograničeni na, konvencionalne terapeutike koji se koriste za tretiranje ili preveniranje bola kao što su antidepresanti, antikonvulzanti, antihipertenzivi, anksiolitici, blokatore kalcijumskog kanala, mišićni relaksansi, nenarkotični analgetici, opioidni analgetici, protivupalni lekovi, cox-2 inhibitore, imunomodulatorni agensi, agonisti ili antagonisti alfa-adrenergičkog receptora, imunosupresivni agensi, kortikosteroidi, hiperbarični kiseonik, ketamin, ostali anestetički agensi, NMDA antagonistI, i ostali terapeutici koji se mogu naći, na primer, u Physician's Desk Reference 2003.
Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, acetat salicilne kiseline (Aspirin<®>), celekoksib (Celebrex<®>), Enbrel<®>, ketamin, gabapentin (Neurontin<®>), fenitoin (Dilantin<®>), karbamazepin (Tegretol<®>), okskarbazepin (Trileptal<®>), valproinsku kiselinu (Depakene<®>), morfin sulfat, hidromorfon, prednizon, grizeofulvin, pentonijum, alendronat, difenhidramid, gvanethidin, ketorolak (Acular<®>), tirokalcitonin, dimetilsulfoksid (DMSO), klonidin (Catapress<®>), bretilijum, ketanserin, rezerpln, droperidol, atropin; fentolamin, bupivakain, lidokain, acetaminofen, nortriptilin (Pamelor<®>), amitriptilin (Elavil<®>), imipramin (Tofranil<®>), doksepin (Sinequan<®>), klomipramin (Anafranil<®>), fluoksetin (Prozac<®>), sertralin (Zoloft<®>), naproksen, nefazodon (Serzone<®>), venlafaksin (Effexor<®>), trazodon (Desyrel<®>), bupropion (Wellbutrin<®>), meksiletin, nifedipin, propranolol, tramadol, lamotrigin, vioxx, zikonotid, ketamin, dekstrometorfan, benzodiazepini, baklofen, tizanidin i fenoksibenzamin.
[0107] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti ta tretiranje, prevenciju i/ili upravljanje makularne degeneracije i povezanih sindroma uključuju, ali nisu ograničeni na, steroide, senzore svetla, integrin, antioksidant, interferon, derivat ksantina, hormon rasta, neutrotropni faktor, regulator neovaskularizacije, anti-VEGF antitelo, prostaglandin, antibiotik, fitoestrogen, protivupalno jedinjenje ili jedinjenje antiangiogeneze ili njihove kombinacije. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, verteporfin, purlitin, angiostatični steroid, rhuFab, interferon-2α, pentoksifilin, kalaj etiopurpurin, moteksafin, lucentis, lutetijum, 9-fluoro-11,21-dihidroksi-16, 17-1-metiletilidinbis(oksi)pregna-1,4-dien-3,20-dion, latanoprost (videti U.S. Patent br.6,225,348), tetraciklin i njegove derivate, rifamicin i njegove derivate, makrolide, metronidazol (U.S. Patenti br.6,218,369 i 6,015,803), genistein, genistin, 6'-O-Mal genistin, 6'-O-Ac genistin, daidzein, daidzin, 6'-O-Mal daidzin, 6'-O-Ac daidzin, glicitein, glicitin, 6'-O-Mal glicitin, biokanin A, formononetin (U.S. Patent br.6,001,368), triamcinolon acetomid, deksametaszon (U.S. Patent br.5,770,589), talidomid, glutation (U.S. Patent br.5,632,984), faktor rasta baznog fibroblasta (bFGF), transformišući faktor rasta b (TGF-b), neurotrofni faktor izveden iz mozga (BDNF), faktor aktivatora plazminogena tip 2 (PAI-2), EYE101 (Eyetech Farmaceuticals), LY333531 (Eli Lilly), Miravant, i RETISERT implant (Bausch & Lomb).
[0108] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje kožnih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, keratolitike, retinoide, α-hidroksi kiseline, antibiotike, kolagen, botulinum toksin, interferon, steroide, i imunomodulatorne agense. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, 5-fluorouracil, mazoprokol, trihlorosirćetnu kiselinu, salicilnu kiselinu, mlečnu kiselinu, amonijum laktat, ureu, tretinoin, izotretinoin, antibiotike, kolagen, botulinum toksin, interferon, kortikosteroid, transretinoičnu kiselinu i kolagene kao što je umani placentalni kolagen, životinjski placentalni kolagen, Dermalogen, AlloDerm, Fascia, Cymetra, Autologen, Zyderm, Zyplast, Resoplast, i Isolagen.
[0109] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje plućne hipertenzije i povezanih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na, antikoagulante, diuretike, srčane glikozide, blokatore kalcijumovih kanala, vazodilatore, prostaciklin analoge, endotelin antagoniste, inhibitore fosfodiesteraze (npr., PDE V inhibitori), inhibitore endopeptidaze, agense za smanjenje lipida, inhibitore tromboksana i ostale lekove poznate po snižavanju plućnog arterijskog pritiska. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, varfarin (Coumadin<®>), diuretik, srčani glikozid, digoksin-kiseonik, diltiazem, nifedipin, vazodilatore kao što su prostaciklin (npr., prostaglandin I2 (PGI2), epoprostenol (EPO, Floran<®>), treprostinil (Remodulin<®>), azotni oksid (NO), bozentan (Tracleer<®>),<amlodipin, epoprostenol (Floran®), treprostinil (Remodulin®), prostaciklin, tadalafil (Cialis®), simvastatin>(Zocor<®>), omapatrilat (Vanlev<®>), irbesartan (Avapro<®>), pravastatin (Pravachol<®>), digoksin, L-arginin, iloprost, betaprost, i sildenafil (Viagra<®>).
[0110] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje poremećaja povezanih sa azbestom uključuju, ali nisu ograničeni na, antraciklin, platinu, alkirajući agens, oblimersen (Genasense<®>), cisplatinu, ciklofosfamid, temodar, karboplatin, prokarbazin, gliadel, tamoksifen, topotekan, metotreksat, taksoter, irinotekan, kapecitabin, cisplatin, tiotepa, fludarabin, karboplatin, lipozomal daunorubicin, citarabin, doksetaksol, pacilitaksel, vinblastin, IL-2, GM-CSF, dakarbazin, vinorelbin, zoledronsku kiselinu, palmitronat, biaksin, busulfan, prednizon, bisfosfonat, arsen trioksid, vincristin, doksorubicin (Doxil<®>), paklitaksel, ganclklovir, adriamicin, bleomicin, hijaluronidazu, mitomicin C, mepakrln, tiotepa, tetraciklin i gemcitabin.
[0111] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje parazitskih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, hlorokin, kvinin, kvinidin, pirimetamin, sulfadiazin, doksiciklin, klindamicin, meflokvin, halofantrin, primakvin, hidroksihlorokvin, progvanil, atovakuon, azitromicin, suramin, pentamidin, melarsoprol, nifurtimoks, benznidazol, amfotericin B, petovalentna jedinjenja antimona (npr., natrijum stlboglukuronat), interfereon gama, itrakonazol, kombinaciju mrtvih promastigota i BCG, leukovorin, kortikosteroidi, sulfonamid, splramicin, IgG (serologija), trimetoprim I sulfametoksazol.
[0112] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje poremećaja imunodeficijencije uključuju, ali nisu ograničeni na: antibiotike (terapijski ili preventivno) kao što su, ali nisu ograničeni na, ampicilin, tetraciklin, penicilin, cefalosporin, streptomicin, kanamicin i eritromicin; antivirusne agense kao što su, ali nisu ograničeni na, amantadin, rimantadin, aciklovir i ribavirin; imunoglobulin; plazmu; lekovi za pojačavanje imuniteta kao što su, ali nisu ograničeni na, levimizol i izoprinosin; biološke agense kao što su, ali nisu ograničeni na, gamaglobulin, transfer faktor, interleukine i interferone; hormone kao što su, ali nisu ograničeni na, timusne; i ostale imunološke agense kao što su, ali nisu ograničeni na, B ćeliske stimulatore (npr., BAFF/BlyS), citokin (npr., IL-2, IL-4, i IL-5), faktore rasta (npr., TGF-α), antitela (npr., anti-CD40 i IgM), oligonukleotide koji sadrže nemetilisane CpG motive, i vakcine (npr., virusne i vakcine protiv peptida tumora).
[0113] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje CNS poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na: opioide; agoniste ili antagoniste dopamina, kao što su, ali nisu ograničeni na, Levodopa, L-DOPA, kokain, α-metil-tirozin, rezerpin, tetrabenazin, benzotropin, pargilin, fenodolpam mezilat, kabergolin, pramipeksol dihidrohlorid, ropinorol, amantadin hidrohlorid, selegilin hidrohlorid, karbidopa, pergolid mezilat, Sinemet CR i Symmetrel; MAO inhibitore, kao što su, ali nisu ograničeni na, iproniazid, klorgilin, fenelzin i izokarboksazid; COMT inhibitore, kao što su, ali nisu ograničeni na, tolkapon i entakapon; inhibitore holinesteraze, kao što su, ali nisu ograničeni na, fizostigmin saliclat, fizostigmin sulfat, fizostigmin bromid, meostigmin bromid, neostigmin metilsulfat, ambenonim hlorid, edrofonijum hlorid, takrin, pralidoksim hlorid, obidoksim hlorid, trimedoksim bromid, diacetil monoksim, endrofonijum, piridostigmin i demakarijum; protivupalni agense, kao što su, ali nisu ograničeni na, naproksen natrijum, diklofenak natrijum, diklofenak kalijum, celekoksib, sulindak, oksaprozin, diflunizal, etodoiak, meioksikam, ibuprofen, ketoprofen, nabumeton, refekoksib, metotreksat, lefiunomid, sulfasalazin, soli zlata, Rho-D imunoglobulin, mikofenilat mofetil, ciklosporin, azatioprin, takrolimus, baziliksimab, daklizumab, salicilna kiselina, acetilsalicilna kiselina, metil salicilat, diflunizal, salsalat, olsalazin, sulfasalazin, acetaminofen, indometacin, sulindak, mefenaminska kiselina, meklofenamat natrijum, tolmetin, ketorolak, diklofenak, flurbinprofen, oksaprozin, piroksikam, meioksikam, ampiroksikam, droksikam, pivoksikam, tenoksikam, fenilbutazon, oksifenbutazon, antipirin, aminopirin, apazon, zileuton, aurotioglukose, zlato natrijum tiomalat, auranofin, metotreksat, kolhicin, alopurinol, probenecid, sulfinpirazon i benzbromaron ili betametazon i ostali glukokortikoidi; i antimetički agensi, kao što su, ali nisu ograničeni na, metoklopromid, domperidon, prohlorperazin, prometazin, hlorpromazin, trimetobenzamid, ondansetron, granisetron, hidroksizin, acetileucin monoetanolamin, alizaprid, azasetron, benzhinamid, bietanautin, bromoprid, buklizin, kleboprid, ciklizin, dimenhidrinat, difenidol, dolasetron, meklizin, metaiatal, metopimazin, nabilon, oksiperndil, pipamazin, scopolamin, suipirid, tetrahidrokanabinol, tietilperazin, tioproperazin, tropisetron i njihove smeše.
[0114] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje CNS povreda i povezanih sindroma uključuju, ali nisu ograničeni na, imunomodulatorni agense, imunosupresivni agense antihipertenzive, antikolvulzive, fibrinolitičke agense, antiplatelet agense, antipsihotike, antidepresive, benzodiazepine, buspiron, amantadin i ostale poznate ili uobičajene agense koji se koriste kod pacijenata sa CNS povredama/oštećenjima i povezanim sindromima. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na: steroide (npr., glukokortikoide, kao što su, ali nisu ograničeni na, metilprednizolon, deksametazon i betametazon); protivupalni agens, uključujući, ali se neograničavajući na, naproksen natrijum, diklofenak natrijum, diklofenak kalijum, celekoksib, sulindak, oksaprozin, diflunizal, etodoiak, meioksikam, ibuprofen, ketoprofen, nabumeton, refekoksib, metotreksat, lefiunomid, sulfasalazin, soli zlata, RHo-D imunoglobulin, mikofenilat mofetil, ciklosporin, azatioprin, takrolimus, basiliksimab, daklizumab, salicilnu kiselinu, acetilsalicilna kiselinu, metil salicilat, diflunizal, salsalat, oisalazin, sulfasalazin, acetaminofen, indometacin, sulindak, mefenaminska kiselinu, meklofenamat natrijum, tolmetin, ketorolak, diklofenak, flurbinprofen, oksaprozin, piroksikam, meloksikam, ampiroksikam, droksikam, pivoksikam, tenoksikam, fenilbutazon, oksifenbutazon, antipirin, aminopirin, apazon, zileuton, aurotioglukoze, zlato natrijum tiomalat, auranofin, metotreksat, kolhicin, alopurinol, probenecid, sulfinpirazon i benzbromaron; cAMP analog uključujući, ali se neograničavajući na, db-cAMP; agens koji sadrži metilfenidat lek, koji sadrži 1-treo-metilfenidat, d-treo-metilfenidat, d1treo- metiifenidat, 1-eritro-metilfenidat, d-eritro-metilfenidat, d1-eritro-metilfenidat i njihovu smešu i diuretski agense kao što su, ali nisu ograničeni na, manitol, furosemid, glicerol i urea.
[0115] Primeri drugog aktivnog agensa koji se može primeniti za tretman, prevencija i/ili upravljanje poremećaja spavanja i povezanih sindroma uključuje, ali nije ograničen na, triciklični antidepresant agens, selektivni inhibitor ponovnog preuzimanja seorotonina, antiepileptički agens (gabapentin, pregabalin, karbamazepin, okskarbazepin, levitiracetam, topiramat), antiaritmijski agens, agens blokade natrijum kanala, selektivni inhibitor upalnog medijatora, opioidni agens, drugo imunomodulatorno jedinjenje, kombinacija agenasa i ostali poznati ili uobičajeni agensi koji se upotrebljavaju u terapiji sna. Specifični primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, Neurontin, oksikotin, morfijum, topiramat, amitriptilin, nortriptilin, karbamazepin, Levodopa, L-DOPA, kokain, α-metil-tirozin, rezerpin, tetrabenazin, benzotropin, pargilin, fenodolpam mezilat, kabergolin, pramipeksole dihidrohlorid, ropinorol, amantadin hidrohlorid, selegilin hidrohlorid, karbidopa, pergolid mezilat, Sinemet CR, Simetrel, iproniazid, klorgilin, fenelzin, izokarboksazid, tolkapon, entakapon, fizostigmin saliclat, fizostigmin sulfat, fizostigmin bromid, meostigmin bromid, neostigmin metilsulfat, ambenonim hlorid, edrofonijum hlorid, takrin, pralidoksim hlorid, obidoksim hlorid, trimedoksim bromid, diacetil monoksim, endrofonijum, piridostigmin, demakarijum, naproksen natrijum, diklofenak natrijum, diklofenak kalijum, celekoksib, sulindak, oksaprozin, diflunizal, etodolak, meloksikam, ibuprofen, ketoprofen, nabumeton, refekoksib, metotreksat, leflunomid, sulfasalazin, soli zlata, RHo-D imunogiobulin, mikofenilat mofetil, ciklosporin, azatioprin, takrolimus, basiliksimab, daklizumab, salicilnu kiselinu, acetilsalicilnu kiselinu, metil salicilat, diflunizal, salsaiat, olsalazin, sulfasalazin, acetaminofen, indometacin, sulindak, mefenaminsku kiselinu, meklofenamat natrijum, tolmetin, ketoroiak, diklofenak, flurbinprofen, oksaprozin, piroksikam, meloksikam, ampiroksikam, droksikam, pivoksikam, tenoksikam, fenilbutazon, oksifenbutazon, antipirin, aminopirin, apazon, zileuton, aurotioglukoza, zlato natrijum tiomalat, auranofin, metotreksat, kolhicin, alopurinol, probenecid, sulfinpirazon, benzbromaron, betametazon i ostale glukokortikoide, metoklopromid, domperidon, prohlorperazin, prometazin, hlorpromazin, trimetobenzamid, ondansetron, granisetron, hidroksizin, acetileucin monoetanolamin, alizaprid, azasetron, benzhinamid, bietanautin, bromoprid, buklizin, kleboprid, ciklizin, dimenhidrinat, difenidol, dolasetron, meklizin, metalatal, metopimazin, nabilon, oksipemdil, pipamazin, scopolamin, suipirid, tetrahidrokanabinol, tietilperazin, tioproperazin, tropisetron i njihove smeše.
[0116] Primeri drugih aktivnih agenasa koji se mogu primeniti za tretman, prevenciju i/ili upravljanje hemoglobinopatije i povezanih poremećaja uključuju, ali nisu ograničeni na: interleukine, kao što je IL-2 (koji uključuju rekombinantmi IL-II ("rIL2") i kanaripoks IL-2), IL-10, IL-12, i IL-18; interferone, kao što je interferon alfa-2a, interferon alfa-2b, interferon alfa-n1, interferon alfa-n3, interferon beta-I a, i interferon gama-I b; i G-CSF; hidroksiuree; butirate ili butirat derivate; azot oksid; hidroksi urea;
HEMOXIN™ (NIPRISAN™; videti United States Patent br.5,800,819); antagoniste Gardos kanala kao što su klotrimazol i triaril metan derivat; Deferoksamin; protein C; i t transfuziju krvi ili krvne zamene kao što su Hemospan™ ili Hemospan™ PS (Sangart).
[0117] Davanje jedinjenja obezbeđeno ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili stereoizomera, i drugih aktivnih agenasa pacijentu može se ivesti istovremeno ili uzastopno, istim ili različitim načinima davanja. Pogodnost određenog načina danja za navedeni aktivni agens zavisiće od samog aktivnog agensa (npr., da li se može davati oralno bez raspadanja pre ulaska u krvotok) i tretirane bolesti. Jedan od načina davanja ovde opisanih jedinjenja je oralan. Načini davanja za druge atkivne agense ili sastojke su poznati stručnjaku. Videti, npr., Physicians'Desk Reference (60th ed., 2006).
[0118] U jednom primeru izvođenja, drugi aktivni agens daje se intravensku ili subkutano i jednom ili dva puta na dan u količini od oko 1 do oko 1000 mg, od oko 5 do oko 500 mg, od oko 10 do oko 350 mg, ili od oko 50 do oko 200 mg. Specifična količina drugog aktivnog agensa zavisiće od specifičnog upotrebljenog agensa, vrste bolesti koja se tretira ili kojom se upravlja, ozbiljnost i stadijum bolesti, i količine(a) ovde opisanih jedinjenja provided i jednog od opcionih dodatnih aktivnih agenasa koji se istovremeno daju pacijentu
[0119] Kao što je ovde dato, pronalazak takođe obuhvata i postupak za smanjenje, tretiranje i/ili prevenciju štetnih ili neželjnih efekata povezanih sa uobičajenom terapijom uključujući, ali ne ograničavajući se na, hirurški zahvat, hemoterapiju, radijacionu terapiju, hormonalnui terapiju, biološku terapiju i imunoterapiju. Ovde opisana jedinjenja i ostali aktivni sastojci mogu se davati pacijentu pre, tokom ili posle pojave štetnih efekata povezanih sa uobičajenom terapijom.
CIKLIČNA TERAPIJA
[0120] U određenim primerima izvođenja, ovde opisani profilaktički ili terapeutski agensi daju se pacijentu ciklično. Ciklična terapija uključuje davanje aktivnih agenasa tokom određenog vremenskog perioda, nakon čega sledi pauza (tj. prekid davanja) određeno vreme, i ponavljanje tog sekvencijalnog davanja. Cikličnom terapiijom se može smanjiti razvoj rezistentnosti na jednu ili više terapija, mogu se izbeći ili umanjiti sporedni efekti jedne od terapija, i/ili poboljšati efikasnost tretiranja.
[0121] Shodno tome, u jednom primeru izvođenja, ovde dato jedinjenje daje se kao jednokratna dnevna doza ili u podeljenim dnevnim dozama u ciklusu od četiri do šest nedeljan sa pauzom u trajanju od oko nedelju ili dve dana. Ciklična terapija dalje omogućava povećanje frekventnosti, broja i dužine doznog ciklusa . Tako, sledeći primer izvođenja obuhvata davanje ovde opisanog jedinjenja za više ciklusa u odnosu na one tipične kada se daje samo. U narednom primeru izvođenja, ovde dato jedinjenje daje se u većem broju ciklusa u odnosu na one koje bi obično izazvali dozno-povezanu toksičnost kod pacijenata kojima takođe nije davan.
[0122] U jednom primeru izvođenja, ovde obezbeđeno jedinjenje daje se dnevno ili kontinulano tokom tri ili četiri nedelje u dozi od oko 0.1 mg do oko 500 mg na dan, praćeno pauzom od jedne ili dve nedelje. U drugim primerima izvođenja, doza može biti od oko 1 mg do oko 300 mg, od oko 0.1 mg do oko 150 mg, od oko 1 mg do oko 200 mg, od oko 10 mg do oko 100 mg, od oko 0.1 mg do oko 50 mg, od oko 1 mg do oko 50 mg, od oko 10 mg do oko 50 mg, od oko 20 mg do oko 30 mg, ili od oko 1 mg do oko 20 mg, praćeno odmorom.
[0123] U jednom primeru izvođenja, ovde obezbeđeno jedinjenje i neki drugi aktivni sastojak daju se oralno, uz davanje ovde obezbeđenog jedinjenja 30 do 60 minuta pre drugog aktivnog sastojka, tokom ciklusa od četiri do šest nedelja. U drugom primeru izvođenja, kombinacija ovde obezbeđenog jedinjenja i drugog aktivnog sastojka daje se intravenoznom infuzijom tokom približno 90 minuta svakog ciklusa.
[0124] Obično, broj ciklusa tokom kojeg se pacijentu daje kombinovani tretman iznosi od oko jednog do oko 24 ciklusa, od oko dva do oko 16 ciklusa, ili od oko četiri do oko tri ciklusa.
4.5 FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE I DOZNI OBLICI
[0125] Farmaceutske kompozicije mogu se upotrebiti u pripremanju pojedinačnih, jednokratnih jediničnih doznih oblika. Farmaceutske kompozicije i ovde obezbeđeni dozni oblici obuhvataju ovde obezbeđeno jedinjenje, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili stereoizomer. Farmaceutske kompozicije i dozni oblici mogu dalje da obuhvataju jedan ili više ekscipijenata.
[0126] Farmaceutske kompozicije i ovde obezbeđeni dozni oblici takođe mogu da obuhvataju jedan ili više dodatnih aktivnih sastojaka. Ovde su opisani primeri drugih opcionih, ili dodatnih, aktivnih sastojaka.
[0127] Jednokratni dozni oblici koji su ovde dati su podogni za oralnu, mukoznu (npr., nazalnu, sublingvalnu, vaginalnu, bukalnu, ili rektalnu), parenteralnu (npr., subkutanu, intravensku, bolus injekciju, intramuskularnu, ili intraarterijsku), topikalnu (npr., kapi za oči ili drugi oftamološki preparati), transdermalnu ili transkutanu administraciju pacijentu. Primeri doznih oblika uključuju, ali nisu ograničeni na: tablete; kaplete; kapsule, kao što su meke elastične želatinske kapsule; vrećice; trablete; lozengete; disperzije; supozitorije; prahove; aerosole (npr., sprejevi za nos ili inhalere); gelove; tečni dozni oblici pogodni za oralnu ili mukoznu adminstraciju pacijentu, uključujući suspenzije (npr., vodene ili nevodene tečne suspenzije, emulzije ulje-u-vodi, ili tečne emulzije voda-u-ulju), rastvori i eliksiri; tečni dozni oblici pogodni za parenteralnu administraciju pacijentu; kapi za oči ili druge oftalmološki preparati koji su pogodni za topikalnu administraciju; i sterilne čvrste preparate (npr., kristalne ili amorfne čvrste oblike) koji se mogu rekonstituisati tako da se dobije tečni dozni oblik pogodan za parenteralnu administraciju pacijentu.
[0128] Sastav, oblik i vrsta doznih oblika obično će varirati u zavisnosti od njihove upotrebe. Na primer, dozni oblik upotrebljen u akutnom lečenju bolesti može da sasdrži veće količine jednog ili više aktivnih sastojaka nego dozni oblik upotrebljen u hroničnom lečenju iste bolesti. Slično, parenteralni dozni oblik može da sadrži manje količine jednog ili više aktivnih sastojaka nego što sadrži oralni dozni oblik upotrebljen za lečenje iste bolesti. Ovaj i drugi načini u specifičnim doznim oblicima koji su upotrebljeni mogu međusovno da se razlikuju što je biti očigledno stručnjaku iz ove oblasti. Videti, npr., Remington's Farmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing, Easton PA (2000).
[0129] U jednom primeru izvođenja, faramceutske kompozicije i dozni oblici obuhvataju jedan ili više eksipijenasa. Odgovarajući eksipijensi su dobro poznati prosečnom stručnjaku iz oblasti farmacije, a neograničavajući primeri pogodnih eksipijenasa dati su ovdei. Da li je dati eksipijens odgovarajuć za dodavanje u faramceutsku kompoziciju ili dozni oblik zavisi od različitih faktora koji su poznati u tehnici, ali nisu ograničeni na, način koji se dozni oblik daje pacijentu. Na primer, oralni dozni oblici kao što su tablete mogu da sadrže eksipijense koji nisu pogodni za upotrebu u parenteralnim doznim oblicima. Podesnost datog eksipijensa takođe može da zavisi od specifičnih aktivnih sastojaka u doznom obliku. Na primer, degradacija (razlaganje, raspadanje) nekih aktivnih sastojaka može se ubrzati dodatkom nekih eksipijenasa kao što je laktoza, ili kada se izloži vodi. Aktivni sastojci koji sadrže primarne ili sekundarne amine su posebno podložni ovakvom ubrzanom razlaganju. Shodno tome, daju se farmaceutske kompozicije i dozni oblici koji sadrže malo, ako uopšte sadrže, laktoze druge mono- ili disaharide. Kao što je ovde upotrebljen, izraz "bez laktoze " označava da je količina prisutne laktoze, ukoliko je prisutna, dovoljna da suštinski poveća brzinu razlaganja aktivnog sastojka.
[0130] Kompozicije koje ne sadrže laktozu mogu da obuhvataju eksipijense koji su poznati u tehnici i navedeni su, na primer u U.S. Pharmacopeia (USP) 25-NF20 (2002). Generalno, kompozicije koje ne sadrže laktozu obuhvataju aktivne sastojke i vezivne agense/punioce, i sredstva za klizenje u farmaceutski kompatiblnim i farmaceutski prihvatljivim količinama. U jednom primeru izvođenja, dozni oblici bez laktoze obuhvataju aktivne sastojke, mikrokristalnu celulozu, preželatinizirani skrob, i magnezijum stearat.
[0131] Takođe su obezbeđena anhirdrovane farmceutske kompozicije i dozni oblici koji obuhvataju aktivne sastojke, budući da voda može da olakša degradaciju nekih jedinjenja. Na primer, dodatak vode (npr., 5%) je široko prihvaćen u faramciji i odnosi se na stimulativno dugotrajno skladištenje da bi se odredile karakteristike poput vremena trajanja tokom skladištenja formulacija ili stabilnost formulacija tokom određenog vremenskog intervala. Videti, npr., Jens T. Carstensen, Drug Stability: Principles & Practice, 2d. Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp.379-80. Kao rezultat, voda i toplota ubrzavaju dekompoziciju nekih jedinjenja. Tako, dejstvo vode na formulaciju može biti od većeg značaja budući da su vlaga i/ili vlažnost uobičajeno uključeni u tokom proizvodnje, rukovanja, pakovanja, skladištenja, transporta, i upotrebe formulacija.
[0132] Anhidrovane farmaceutske kompozicije i dozni oblici mogu se pripremiti od anhidrovanih sastojaka ili sastojaka sa malom količinom vlage i pod uslovima niske vlage ili vlažnosti. Farmaceutske kompozicije i dozni oblici koji sadrže laktozu i najmanje jedan aktivni sastojak koji uključuje primarni ili sekundarni amin poželjno su anhidrovani ukoliko se očekuje kontakt sa vlagom i/ili vlažnošću tokom proizvodnje, pakovanja i/ili skladištenja.
[0133] Anhidrovana faramceutska kompozicija treba da bude pripremljena i skladištena tako da se održava njihova anhidrovana priroda. Shodno tome, anhidrovane kompozicije su, u jednom primeru izvođenja, pakovane korišćenjem materijala za koje je poznato da sprečavaju izlaganje vodi tako što su dodati u odgovarajuće formulacione komplete. Primeri odgovarajućih pakovanja uključuju, ali nisu ograničeni na, hermetički zatvorene folije, plastike, amablažu sa jedninčnom dozom (npr., bočice), blister pakovanja, i strip pakovanja.
[0134] Takođe su opisane i faramceutske kompozicije i dozni oblici koji obuhvataju jedno ili više jedinjenja koja snižavaju brzinu kojim se aktivni sastojak razlaže. Ova jedinjenja, koja su u ovom tekstu označena kao "stabilizatori," uključuju, ali nisu ograničeni na, antioksidanse kao stoje askorbinska kiselina, pH puferi, ili slani puferi.
[0135] Kao i količine i vrste of ekscipijenata, količine i specifične vrste aktivnih sastojaka u doznom obliku može se razlikovati u zavisnosti od faktora kao što su, ali nisu ograničeni na, putanja kojom će se davati pacijentima. U jednom primeru izvođenja, dozni oblici obuhvataju ovde obezbeđeno jedinjenje u nekoj količini od oko 0.10 do oko 500 mg. U drugim primerima izvođenja, dozni oblici obuhvataju ovde obezbeđeno jedinjenje u nekoj količini od oko 0.1, 1, 2, 5, 7.5, 10, 12.5, 15, 17.5, 20, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, ili 500 mg.
[0136] U drugim primerima izvođenja, dozni oblici obuhvataju drugi aktivni sastojak u nekoj količini od 1 do oko 1000 mg, od oko 5 do oko 500 mg, od oko 10 do oko 350 mg, ili od oko 50 do oko 200 mg.
Naravno, specifična količina drugog aktivnog agensa zavisiće od korišćenog specifičnog agensa, bolesti ili poremećaji koji se tretira ili vodi, i količine(a) ovde obezbeđenih jedinjenja, i bilo kojeg drugog dodatnog aktivnog agensa po izboru, koji se istovremeno daje pacijentu.
Oralni dozni oblici
[0137] Farmaceutske kompozicije koje su pogodne za oralno davanje mogu se obezbediti lao diskretni dozni oblici, kao što su, ali nisu ograničeni na, tablete (npr., tablete za žvakanje), kaplete, kapsule, i tečnosti (npr., aromatizivani sirupi). Ovi dozni oblici sadrže prethodno određene količine aktivnih sastojaka, i mogu pripremiti prema faramceutskim postupcima koji su poznati sručnjaku. Videti uopšteno, Remington's Farmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing, Easton PA (2000).
[0138] Ovde obezbeđeni dozni oblici pripremljeni su kombinvanjem aktivnih sastojaka u mšavini sa bar jednim eksipijensom u skladu sa uobičajenim tehnikama kombinovanja. Eksipijensi mogu da budu u različitim oblicima zavisno od oblika preparata za željeni način davanja. Na primer, eksipijens pogodan za upotrebu u tečnim ili aeroslonim doznim oblicima uključuju, ali nisu ograničeni na, vodu, glikole, ulje, alkohole, aromate, konzervanse i agense za bojenje. Primeri eksipijenasa pogodnih za čvrste oralne dozne oblike (npr., prahovi, tablete, kapsule, i kaplete) su, ali nisu ograničeni na, skrobove, šećere, mikrokristalnu celulozu, razblaživače, agense za granuliranje, lubrikante, vezivne agense, i sredstva za raspadanje.
[0139] U jednom primeru izvođenja, oralni dozni oblici su tablete ili kapsule, u kom slučaju se koriste čvrsti eksipijensi. U sledećem primeru izvođenja, tablete mogu da budu obložene standardnim vodenim ili nevodenim tehnikama. Ovi dozni oblici mogu da se dobiju bilo kojim faramceutskim postupkom. Generalno, farmaceutske kompozicije i dozni oblici su pripremljeni uniformnim i bliskim mešanjem aktivnih sastojaka sa tečnim nosačima, fino podeljenim čvrstim nosačima, ili sa oba, a zatim oblikovanjem proizvoda u željeni oblik po potrebi.
[0140] Na primer, tableta se može pripremiti komprimovanjem ili izlivanjem. Komprimovane tablete se mogu dobiti komprimovanjem aktivnih sastojaka u odgovarajućoj mašini u slobodno tečućem obliku kao što su prah ili granule, po izboru pomešani sa eksipijensima. Izlivene tablete se mogu dobiti izlivanjem smese praškastog jedinjenja koje je nakvašeno odgovarajućim inertnim tečnim rastvaračem, u odgovarajućoj mašini.
[0141] Primeri eksipjenasa koji se mogu upotrebiti u oralnim doznim oblicima uključuju, ali nisu ograničeni na, vezivna sredstva, punioce, dezintegrante, i lubrikante. Vezivna sredstva pogodna za upotrebu u farmaceutskim kompozicijama i doznim oblicima uključuju ali nisu ograničena na, kukurzini skorb, krompirov skorb, ili ostale skrobove, želatin, prirodne i sintetničke gume kao što je akacija, natrijum alginat, alginska kiselina, ostali alginati, praškasti tragakant, guar guma, celuloza i njeni derivati (npr., etil celuloza, celuloza acetat, karboksimetil celuloza kalcijuma, karboksimetil celuloza natrijuma), polivinil pirolidon, metil celuloza, presželatinizirani skrob, hidroksipropil metil celuloza, (npr., br.2208, 2906, 2910), mikrokristalina celuloza, i njihove mešavine.
[0142] Odgovarajući oblici mikrokristaline celuloze obuvhataju, akli nisu ograničeni na, materijale koji se prodaju kao AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581, AVICEL-PH-105 (dostupni od FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PA), i njihove mešavine. Specifično vezivno sredstvo je smesa mikrokristalne celuloze i natrijum karboksimetil celuloze koja se prodaje kao AVICEL RC-581. Odgovarajući anhidrovani eksipijensi ili eksipijensi male vlažnosti ili aditivi uključuju AVICEL-PH-103™ i Talk 1500 LM.
[0143] Primeri punioca koji su pogodni za upotrebu u farmaceutskim kompozicijama i doznlm oblicima koji su ovde opisani obuhvataju, ali nisu ograničeni na, talk, kalcijum karbonat (npr., granule ili prah), mikrokristalinu celulozu, praškastu celulozu, dekstrate, kaolin, manitol, silicijumovu kiselinu, sorbitol, skrob, predželatinizirani skrob, i njihove mešavine. Vezivna sredstva ili punioci u faramceutskim kompozicijama, u jednom primeru izvođenja, prisutna su u količini od oko 50 do oko 99 mas.% farmaceutske kompozicije ili doznog oblika
[0144] Dezintegranti se mogu upotrebiti u kompozicijama tako da se obezbede tablete koje se dezintegrišu nakon izlaganja vodenoj sredini. Tablete koje sadrže suviše dezintegranta mogu da se dezintegrišu tokom skladištenja, dok one koje sadrže malo, mogu da se ne dezintegrišu željenom brzinom ili pod željenim uslovima. Shodno tome, dovoljna količina dezintegranta je ona koja nije ni suviše velika ni previše mala za štetno menjanje oslobađanja aktivnih sastojaka koji se mogu upotrebiti za dobijanje čvrstih oralnih doznih oblika. Količina upotrebljenog dezintegranta varira zavisno od tipa formulacije, i lako je odrediva za prosečnog stručnjaka. U jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije sadrže od oko 0.5 do oko 15 mas.% dezintegranta, ili od oko 1 do oko 5 mas.%
dezintegranta
[0145] Dezintegranti koji se mogu upotrebiti u farmaceutskim kompozicijama i doznim oblicima, uključuju, ali nisu ograničeni na, agar-agar, alginsku kiselinu, kalcijum karbonat, mikrokristalinu celulozu, kroskarmelozu natrijum, krospovidon, polakrilin kalijum, natrijum skrob glikolat, krompirov ili tapioka skrob, ostale skrobove, predželatinizirani skrob, ostali skrobovi, ostaki algini, ostale celuloze, gume, i njihove mešavine.
[0146] Sredstva za klizenje koja se mogu upotrebiti u farmaceutskim kompozicijama i doznim oblicima su, ali nisu ograničeni na, kalcijum stearat, magnezijum stearat, mineralno ulje, lako mineralno ulje, glicerin, sorbitol, manitol, polietilen glikol, ostali glikoli, stearinska kiselina, natrijum lauril sulfat, talk, hidrogenizovano biljno ulje (npr., ikiriki ulje, ulje lanenog semena, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje, i sojino ulje), cink stearat, etil oleat, etil laureat, agar, i njihove mešavine. Dodatni lubrikanti uključuju, na prlmer, siloldni silika gel (AEROSIL200, proizvođač W.R. Grace Co. Baltimore, MD), koagulisan aerosol sintetičkog solicijum dioksida (distributer Degussa Co. Iz Plano, TX), CAB-O-SIL (pirogeni silicijum dioksid , prodaje Cabot Co. iz Bostona, MA), i njihove mešavine. Ukoliko se uopšte koriste, lubrikanti se mogu upotrebiti u količini manjoj od oko 1mas.% farmaceutskih kompozicija ili doznih oblika u koji se dodaju.
[0147] U jednom primeruizvođenja, čvrsti oralni dozni oblik sadrži ovde opisano jedinjenje, anhidrovanu laktozu, mikrokristalinu celulozu, polivinilpirolidon, stearinsku kiselinu, koloidalni anhidrovani silicijum dioksid i želatin.
Dozni oblici sa kontrolisanim oslobađanjem
[0148] Aktivni sastojci koji su opisani, mogu se davati sa kontrolisanim oslobađanjem ili pomoću uređaja za distirbuciju koji su poznati prosečnom stručnjaku iz ove oblasti. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. Patentima br.: 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809; 3,598,123; i 4,008,719;
5,674,533; 5,059,595; 5,591,767; 5,120,548; 5,073,543; 5,639,476; 5,354,556; 5,639,480; 5,733,566; 5,739,108; 5,891,474; 5,922,356; 5,972,891; 5,980,945; 5,993,855; 6,045,830; 6,087,324; 6,113,943; 6,197,350; 6,248,363; 6,264,970; 6,267,981; 6,376,461; 6,419,961; 6,589,548; 6,613,358; 6,699,500. Takvi dozni oblici mogu se upotrebiti za obezbeđivanje sporog ili kontrolisanog oslobađanja jednog ili više aktivnih sastojaka koristeći, na primer, hidropropilmetil celulozu, ostale polimerne matrice, gelove, permeabilne membrane, osmotske sisteme, višeslojne obloge, mikročestice, lipozome, mikrosfere, ili njihove kombinacije za dobijanje željenog profila u različitim proporcijama. Odgovarajuće formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem, koje su poznate prosečnom stručnjaku, uključujući one koje su ovde opisane, mogu se lako odabrati za upotrebu sa aktivnim sastojcima koji su ovde dati. U jednom primeru izvođenja, dati su jedinični dozni oblici pogodni za oralno davanje, kao što su, ali nisu ograničeni na, tablete, kapsule, gelkapsule, i kaplete koje su prilagođene za kontrolisano oslobađanje.
[0149] Svi farmaceutski proizvodi sa kontrolisanim oslobađanjem imaju kao zajednički cilj da poboljšavaju terapiju lekovima u odnosu na onu postignutu njihovim nekontrolisanim kopijama.
Idealno, upotreba optimalno dizajniranog preparata sa kontrolisanim oslobađanjem u medicinskom lečenju je okarakterisana upotrebom minimalne količine lekovite supstance za lečenje ili kontrolu stanja u najkraćem vremenskom intervalu. Prednosti formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem uključuju produženu aktivnost leka, umanjenu feknvetnost doze i povećanu usklađenost sa pacijentom. Dodatno, formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem mogu se upotrebiti kako bi uticale na vreme početka dejstva ili ostalih karakteristika , kao što je nivo leka u krvi, i shodno tome može da utiče na sporedne (npr., štetne) efekte.
[0150] Većina formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem dizajnirana je tako da inicijalno oslobađaju neku količinu leka (aktivnog sastojka) koji bez odlaganja proizvodi željeni terapeutski ili profilaktički efekat, i postepeno i kontinualno oslobađa druge količine leka kako bi se održao konstantan nivo terapeutskog ili profilaktičkog efekta tokom dužeg vremenskog perioda. U jednom primeru izvođenja, u cilju održavanja konstantnog nivoa leka u telu, lek se može osloboditi iz doznog oblika brzinom koja će zameniti količinu leka koji se metabollše i izlučuje iz tela. Kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka može se stimulisati različitim uslovima uključujući, ali ne i ograničavjaući se na, pH, temperaturu, enzime, vodu, ili ostale fiziološke uslove ili jedinjenja.
[0151] U određenim primerima izvođenja, lek se može dati intravenoznom infuzijom, implantabilnom osmotskom pumpom, transdermalnim flasterima, lipozomima, ili nekim drugim načinom davanja. U jednom primeru izvođenja, može se koristiti pumpa (videti, Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng.14:201 (1987); Buchwald et al., Surgery 88:507 (1980); Saudek et al., N. Engl. J. Med.321:574 (1989)). U drugom primeru izvođenja, mogu se primeniti polimerni materijali. U još jednom primeru izvođenja, sistem sa kontrolisanim oslobađanjem može se smestiti u subjekta na pogodno mesto koje određuje stručnjak, tj., čime se zahteva samo frakcija sistemske doze (videti, npr., Goodson, Medical Applications of Controlled Release, vol.2, pp.115-138 (1984)). Drugi sistemi sa kontrolisanim oslobađanjem opisani su u pregledu od strane Langer (Science 249:1527-1533 (1990)). Aktivni sastojak može biti dispergovan u čvrstoj unutrašnoj matrici, npr., polimetilmetakrilat, polibutilmetakrilat, plastificirani ili neplastofocorani polivinilhlorid, plastificirani najlon, plastificirani polietilenterefthalat, prirodna guma, poliizopren, poliizobutilen, polibutadien, polietilen, etilen-vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetilsiloksani, silikon karbonatni kopolimeri, hidrofilni polimeri kao što su hidrogelovi estara akrilne i metakrilne kiseline, kolagen, umreženi polivinilalkohol i umreženi delimično hidrolizovani polivinil acetat, koji je okružen spoljnom polimernom membranom, npr., polietilen, polipropilen, etilen/propilen kopolimeri, etilen/etil akrilat kopolimeri, etilen/vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetil siloksani, neoprenska guma, hlorisani polietilen, polivinilhlorid, vinilhlorid kopolimeri sa vinil acetatom, viniliden hlorid, etilen i propilen, jonomer polietilen terefthalat, butilna guma epihlorohidrin gume, etilen/vinil alkohol kopolimer, etilen/vinil acetat/vinil alkohol terpolimer, i etilen/viniloksietanol kopolimer, koji je nerastvoriv u telesnim tečnostima. Aktivni sastojak se zatim difuzuje putem polimerne membrane na fazi oslobađanja sa kontrolisanom brzinom. Procenat aktivnog sastojka u takvim parenteralnim kompozicijama je veoma zavistan od njegove specifične prirode, kao i potreba subjekata.
Parenteralni dozni oblici
[0152] Parenteralni dozni oblici mogu se davati pacijentu različitim putanjama uključujući, ali ne ograničavajući se na, subkutanu, intravensku (uključujući bolus injekcije), intramuskularnu, i intraarterijsku. U nekim primerima izvođenja, davanje parenteralnog doznog oblika premošćava pacijentovu prirodnu odbranu od kontaminacija i shodno tome, u ovim primerima izvođenja, parenteralni dozni oblici su sterilni ili mogu da se sterilišu pre davanja pacijentu. Primeri parenteralnih doznih oblika uključuju, ali nisu ograničeni na, rastvor pripremljen za injekciju, suve proizvode koji se mogu rastvoriti ili suspendovati u farmaceutski prihvatljivom nosaču za injekciju, suspenzije pripremljene za injekciju i emulzije.
[0153] Odgovarjaući nosači koji se mogu upotrebiti za dobijanje parenteralnih doiznih oblika su poznati prosečnom stručnjaku. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na: vodu za injkeciju USP; vodene nosače kao što su, ali nisu ograničeni na, natrijum hloridne injekcije, Ringer-ove injkecije, injekcije dekstroze, injekcije sa dekstrozom i natrijum hloridom i Ringerov rastvor sa laktatom, nosači koji se mešaju sa vodom kao što su, ali nisu ograničeni na, etil alkohol, polietilen glikol, i polipropilen glikol; i nevodene nosače kao što su, ali nisu ograničeni na kukuruzno ulje, ulje lanenog semena, kikiriki ulje, susamovo ulje, etil oleate, izopropil miristat, i benzil benzoat.
[0154] Jedinjenja koja povećavaju rastvorljivost jednog ili više ovde opisanih aktivnih sastojaka takođe se mogu dodati u parenteralne dozne oblike. Na primer, ciklodekstrin i njegovi derivati mogu se upotrebiti za povećanje rastvorljivosti ovde datih jedinjenja. Videti, npr., U.S. Patent No.5,134,127.
Topikalni i mukozni dozni oblici
[0155] Topikalni i mukozni dozni oblici koji se ovde daju, uključuju, ali nisu ograničeni na, sprejeve, aerosole, rastvore, emulzije, suspenzije, kapi za oči ili ostale oftamološke preparate ili ostale oblike koji su poznati prosečnom stručnjaku. Videti, npr., Remington's Farmaceutical Sciences, 16th, 18th i 20th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980, 1990 i 2000); i Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985). Dozni oblici pogodni za tretiranjie mukoznih tkiva u usnoj šupljini mogu se formulisati kao tečnosti za ispiranje usta ili kao oralni gelovi.
[0156] Odgovarajući eksipijensi (npr., nosači i razblaživači) i drugi materijali koji se mogu upotrebiti za pripremu topikalnihi i mukoznih doznih oblika koji su ovde opisani, poznati su prosečnom stručnjaku, i zavisiće od datog tkiva na/u koje se naznačena farmaceutska kompozicija ili dozni oblik, nanosi. U jednom primeru izvođenja, eksipijensi uključuju, ali nisu ograničeni na, vodu, aceton, etanol, etilen glikol, propilen glikol, butan-1,3-diol, izopropil miristat, izopropil palmitat, mineralno ulje i njihove mešavine formiraju rastvore, emulzije ili gelove, koji su netoksični i farmaceutski prihvatljivi. Ovlaživači ili humektanti se takođe dodaju u farmaceutske kompozicije i dozne oblike. Primeri dodatnih sastojaka su dobro pozanti u tehnici. Videti, npr., Remington's Farmaceutska Sciences, 16th, 18th i 20th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980, 1990 i 2000).
[0157] pH farmaceutske kompozicije ili doznog oblika može dakođe da bude podešena tako da poboljša distribuciju jednog ili više aktivnih sastojaka. Takođe, polarnost nosača, njegova jonska jačina ili toničnost mogu da budu podešeni tako da poboljšaju distribuciju. Jedinjenja kao što su stearati takođe se mogu dodati u farmaceutiske kompozicije i dozne oblike da promene hidrofilnost ili lipofilnost jednog ili više aktivnih sastojaka tkao da se poboljša distribucija. U drugim primerima izvođenja, stearati mogu da posluže kao lipidni nosači za formulaciju, kao što je emulgator ili surfaktant, ili kao agens za poboljšanje distribucije ili penetracije. U narednom primeru izvođenja, soli, solvati, klatrati, ili stereoizomeri aktivnih sastojaka mogu se upotrebiti za dalje podešavanje osobina kompozicije.
KOMPLETI
[0158] U jednom primeru izvođenja, ovde opisani aktivni sastojci ne daju se pacijentu u isto vrem ili istom putanjom davanja. Ovde su opisani kompleti koji mogu da pojednostave davanje pogodne količine aktivnih sastojaka.
[0159] Komplet može da obuhvata dozni oblik jedinjenja koje je ovde opisano. Komplet dalje može da obuhvata dodatne aktivne sastojke kao što as oblimersen (Genasense<®>), melfalan, G-CSF, GM-CSF, EPO, topotekan, dakarbazin, irinotekan, taksoter, IFN, COX-2 inhibitor, pentoksifillin, ciprofloksacin, deskametazon, IL2, IL8, IL18, Ara-C, vinorelbin, izotretinoin, 13 cis- retinoinska kiselina, ili njihov farmakološki aktivni mutant ili derivat, ili njihova kombinacija. Primeri dodatnih aktivnih sastojaka su, ali nisu ograničeni na, oni prethodno opisani (videti, npr., deo 4.3).
[0160] Kompleti mogu dalje da obuhvataju uređaje koji se koriste za davanje aktivnih sastojaka. Primeri ovih uređaja su, ali nisu ograničeni na špriceve, kese za infuziju, flastere i inhalatore.
[0161] Kompleti dalje mogu da obuhvataju ćelije ili krv za transplantaciju kao i farmaceutski prihvatljive nosače koji se mogu upotrebiti za davanje jednog ili više aktivnih sastojaka. Na primer, ako se aktivni sastojak obezbeđuje u čvrstom obliku, mora se rekonstruisati za parenteralno davanje, pri čemu komplet može da obuhvata zatvoren sud odgovarajućeg nosača u kojem se aktivni sastojak rastvara i tako obrazuje sterilni rastvor bez čestica koji je pogodan za parenteralno davanje. Primer farmaceutski prihvatljih nosača uključuju, ali nisu ograničeni na: Vodu za injekciju USP; vodene nosače kao što su, ali nisu ograničeni na , natrijum hloridnu injekciju, Ringer-ovu injekciju, injekciju sa dekstrozom, injekviju sa dekstrozom i natrijum hloridoim, i Ringer-ovu injekciju sa laktatom; nosače rastvorne u vodi kao što su, ali nisu ograničeni na, etil alkohol, polietilen glikol, i polipropilen glikol; i nevodene rastvarače, kao što su, ali nisu ograničeni na, kukurzuno ulje, ulje lanenog semena, kikiriki ulje, susammovo ulje, etil oleat, izopropil miristat, i benzil benzoat.
5. PRIMERI
5.1 METIL ESTAR 4-KARBAMOIL-4-(4-HIDROKSI-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-BUTERNE KISELINE (referentni primer)
[0162]
5.1.1 Metil estar 3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline
[0163]
[0164] 3-hidroksi-2-metilbenzojeva kiselina (105 g, 690 mmol) dodata je MeOH (800 mL) u balonu od 2L sa okruglim dnom i tri grla opremljenim kondenzatorom, termometrom i mešalicom, nakon čega je usledilo dodavanje MeOH (250ml). H2SO4(10 mL, 180 mmol) dodata je gornjem rastvoru. Reakciona mešavina je mešana na 62°C tokom 17 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak (200 mL) je dodat u vodu (600 mL) lagano na sobnoj temperaturi i bela čvrsta supstanca je formirana. Suspenzija je mešana u ledenom kupatilu tokom 30 minuta i filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana vodom (5 x 250 mL) i osušena da bi se dobio metil estar 3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline kao bela čvrsta supstanca (100g, 87% prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 167;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.28 (s, 3H, CH3), 3.80 (s, 3H, CH3), 6.96 - 7.03 (m, 1H, Ar), 7.09 (t, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 7.14 - 7.24 (m, 1H, Ar), 9.71 (s, 1H, OH).
5.1.2 Metil estar 3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-2-metil-benzojeve kiseline
[0165]
[0166] U balon od 1L sa okruglim dnom i tri grla opremljen mešalicom i termometrom dodati su DMF (300 mL), metil 3-hidroksi-2-metilbenzoat (90 g, 542 mmol) i imidazol (92 g, 1,354 mmol). TBDMS-C1 (90 g, 596 mmol) dodat je gornjem rastvoru u delovima radi kontrole unutrašnje temperature između 15-19°C preko 20 minuta, a nakon dodavanja unutrašnja temperatura pala je ispod 1 °C. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona mešavina je dodata ledenoj vodi (500 mL), a dobijeni rastvor podeljen je na dva dela (700 mL x 2). Svaki deo je ekstrahovan sa EtOAc (700 mL). Svaki organski sloj je ispran hladnom vodom (350 mL) i slanim rastvorom (350 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Kombinovani organski sloj je koncentrovan da bi se dobio metil estar 3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-2-metil-benzojeve kiseline kao svetlo braon ulje (160 g, 100% sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 281;<1>H NMR (DMSO-d6) δ -0.21 (s, 6H, CH3, CH3), 0.73 - 0.84 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 2.10 (s, 3H, CH3), 3.60 (s, 3H, CH3), 6.82 (dd, 1H, Ar), 6.97 (t, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.13 (dd, J = 1.1, 7.7 Hz, 1H, Ar).
5.1.3 Metil estar 2-bromometil-3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-benzojeve kiseline
[0168] NBS (49,8 g, 280 mmol) je dodat metil 3-(tert-butil dimetilsililoksi)-2-metilbenzoatu (78,4 g, 280 mmol) u metil acetatu (500 mL) na sobnoj temperaturi da bi se dobila narandžasto obojena suspenzija. Dobijena reakciona mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 40°C i osvetljena sijalicom sunčeve svetlosti od 300 wt u refluksu tokom 4 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i isprana Na2SO3rastvorom (2 x 600 mL, 50% zasićena koncentracija), vodom (500 mL) i slanim rastvorom (600 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i obezbojen drvenim ugljem. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio metil estar 2-bromometil-3-(tert -butil-dimetil-silaniloksi)-benzojeve kiseline kao svetlo braon ulje (96 g, 91 % sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS M-Br = 279;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.05 - 0.11 (m, 6H, CH3, CH3), 0.82 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 3.65 (s, 3H, CH3), 4.74 (s, 2H, CH2), 6.94 (dd, J= 1.3, 8.1 Hz, 1H, Ar), 7.10 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.21 - 7.29 (m, 1H, Ar).
5.1.4 Metil estar 4-karbamoil-buterne kiseline
[0169]
[0170] Izmešanom rastvoru metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)benzoata (137,5 g, 325 mmol) u acetonitrilu (1100 mL) u balon sa okruglim dnom od 2 L, dodat je metil 4,5-diamino-5-oksopentanoat hidrohlorid (70,4 g, 358 mmol). Suspenziji je dodavan DIPEA (119 ml, 683 mmol) preko dodatnog levka preko 10 minuta i suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata pre nego što je mešavina zagrevana u uljanom kupatilu na 40°C tokom 23 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je mešan u etru (600 mL), i bela čvrsta supstanca je istaložena. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana etrom (400 mL). Filtrat je ispran sa HCl (1N, 200 mL), NaHCO3(zas.200 mL) i slanim rastvorom (250 mL). Vodeni sloj sa kiselinom i osnovni sloj držani su posebno. Potom je čvrsta supstanca dalje isprana etrom (250 mL) i tečnost je isprana gore navedenim rastvorom kiseline i osnovnim rastvorom. Dva organska sloja su kombinovana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-[4-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao braon ulje (152g, 115% sirovi prinos, 77% čistoće pomoću H NMR). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 407.
5.1.5 Metil estar 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline [0171]
[0172] Izmešanom hladnom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(tert-butildimetilsililoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (152 g, 288 mmol) u DMF (500 mL) i vode (55 mL), dodavan je K2CO3(19,89 g, 144 mmol) u delovima preko 5 minuta. Dobijena reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu. Mešavini je dodata HCl (12M, 23,99 ml, 288 mmol) lagano. Nakon dodavanja, mešavini je dodat acetonitril (280 mL) i čvrsta supstanca je istaložena. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (50 mL x 4). Filtrat je koncentrovan pod visokim vakuumom da bi se dobilo žuto ulje (168 g). Ulje je rastvoreno u acetonitrilu (600 mL) i mešano na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (25 mL x 2). Filtrat je koncentrovan pod visokim vakuumom da bi se dobilo žuto ulje (169g), koje je dodato mešavini vode (1200 mL) i etra (1000 mL). Mešavina je mešana tokom 3 minuta i slojevi su razdvojeni. Vodeni rastvor je koncentrovan pod visokim vakuumom i ostatak je mešan u acetonitrilu (160 mL) i bela čvrsta supstanca je formirana nakon prekonoćnog mešanja. Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (46 g, 54% prinos). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je dalje kristalizovan u acetonitrilu (60 mL) da bi se dobilo više metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (11,7 g, 14% prinos). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO hromatografije da bi se dobilo više metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol -2-il)-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (13,2 g, 15% prinos). Ukupan dobijeni proizvod iznosio je 70,9 g u 83% prinosu: LCMS MH = 293;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95 - 2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 3.51 (s, 3H, CH3), 4.32 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.49 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.73 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 6.99 (dd, J = 0.8, 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.10 - 7.23 (m, 2H, Ar, NHH), 7.25 - 7.38 (m, 1H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH), 10.04 (s, 1H, OH).
5.2 3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0173]
5.2.1 Postupak 1
[0174] Faza 1: Rastvoru 3-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (2,5g, 8,56 mmol) u THF (60 mL) dodat je trifenilfosfin (na polimernom nosaču 1,6mmol/g, 12 g, 18,8 mmol).
Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Diizopropil azodikarboksilat (3,96 mL, 18,8 mmol) dodat je na 0°C, a mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta. (4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (2,62 g, 12,4 mmol) dodat je na 0°C, a mešavina je ostavljena da se ugreje do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano metilen hloridom i metanolom (gradijent, proizvod je izašao pri 6% metanolu) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (2,2 g, 54% prinos). Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0175] Faza 2: THF rastvoru (50 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (2,2g, 4,57 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (0,51 g, 4,57 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta i ugašena je sa 1N HCl (5 mL, 5mmol) a zatim zasićenim NaHCO3(25 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (2 X 50 mL). Organski sloj je ispran vodom (30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušen iznad MgSO4i koncentrovan. Dobijenoj čvrstoj supstanci dodat je EtOAc (10 mL) a zatim heksan (10 mL) uz mešanje. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (1,5g, 73% prinos). HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3,9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent do 95/5 acetonitril/0,1% H3PO4u 5 min,: tR= 4.78 min (97.5%); mp: 210-212 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.29 - 2.38 (m, 4H, CH2,CH2), 2.44 (dd, J = 4.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.52 - 3.61 (m, 4H, CH2,CH2), 4.18 4.51 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.38 (m, 5H, Ar), 7.40 -7.53 (m, 3H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH)<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.09, 51.58, 53.14, 62.10, 66.17, 69.41, 114.97, 115.23, 127.64, 128.99, 129.81, 129.95, 133.31, 135.29, 137.68, 153.50, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS: 465; Anal. izrač. za C25H27N3O5 0.86 H2O: C, 64.58; H, 6.23; N, 9.04; Pronađeno: C, 64.77; H, 6.24; N, 8.88.
5.2.2 Postupak 2
[0176] Faza 1: Balon sa okruglim dnom od 2-L napunjen je metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (30 g, 103 mmol), 1,4-bis(bromometil)benzenom (81 g, 308 mmol) i kalijum karbonatom (14,19 g, 103 mmol) i acetonitrilom (1,2 L). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i zagrevana do 50°C tokom 12 sati. Reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan na rotacionom isparivaču. Dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u CH2Cl2 i napunjena na 2 kolone sa silikagelom (330 g svaka) i eluirana korišćenjem CH2Cl2/MeOH da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (40 g, 82% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.14 - 2.23 (m, 1H, CHH), 2.23 - 2.32 (m, 2H, CHH, CHH), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.34 - 4.63 (m, 2H, CH2), 4.67 - 4.80 (m, 3H, CH2, NCH), 5.25 (s, 4H, CH2), 7.19 (s, 1H, NHH), 7.24 - 7.34 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 5H, Ar), 7.58 (br. s., 1H, NHH).
[0177] Faza 2: CH2Cl2 rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (36,5 g, 77 mmol), dodat je morfolin (14,72 ml, 169 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Dobijena suspenzija je filtrirana, i filtrat je koncentrovan na rotacionom isparivaču. Dobijeno ulje je rastvoreno u 350 mL EtOAc i ispran vodom (50mLx3). Organski sloj je koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao penasta čvrsta supstanca (39 g, 100% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.00 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.14 - 2.22 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.29 (m, 2H, CHH,CHH), 2.30 - 2.39 (m, 4H, CH2,CH2), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.53 - 3.63 (m, 4H, CH2,CH2), 4.28 - 4.59 (m, 2H, CH2), 4.73 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.14 - 7.23 (m, 1H, NHH), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.51 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH).
[0178] Faza 3: THF rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (40 g, 83 mmol), dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (9,80 g, 87 mmol) u delovima na 0°C. Mešavina je mešana na ovoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakcionoj mešavini, dodato je 45 mL 1N HCl rastvora, a zatim 200 mL zasićenog NaHCO3 rastvora. Mešavina je razblažena sa 500 mL EtOAc na 0°C, mešana tokom 5 minuta i razdvojena. Organski sloj je ispran vodom (50 mL x 3) i slanim rastvorom (100 mL), i koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je mešana u dietil etru (300 mL) da bi se dobila suspenzija. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (28,5g, 72% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent do 95/5 acetonitril/0.1% H3PO4 u 5 min,: tR = 4.78 min (98.5%); mp: 209-211 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.29 - 2.38 (m, 4H, CH2,CH2), 2.44 (dd, J = 4.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.52 - 3.61 (m, 4H, CH2,CH2), 4.18 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.38 (m, 5H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.09, 51.58, 53.14, 62.10, 66.17, 69.41, 114.97, 115.23, 127.64, 128.99, 129.81, 129.95, 133.31, 135.29, 137.68, 153.50, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS: 465; Anal. izrač. za C25H27N3O5 0.86 H2O: C, 64.63; H, 6.22; N, 9.04; Pronađeno: C, 64.39; H, 6.11; N, 8.89; H2O, 3.24.
5.3 3-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-DEKADEUTERO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0179]
[0180] Faza 1: Perdeutero-piperidin (d11, 98% D, 136 mg, 1,42 mmol) dodat je rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (450 mg, 0,95 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0,24 mL, 1,42 mmol) u suvom MeCN (9 mL). Reakciona mešavina je zagrejana do 60°C uz mešanje tokom 2 sata. Mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i onda je čuvana na 4°C preko noći. Čvrsta supstanca je obrazovana usled hlađena i gusta suspenzija je raspodeljena između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3(40 mL). Vodeni sloj je ispran sa EtOAc (100 mL), a kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio tert-butil estar 4-karbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-dekadeutero-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (490 mg, 97% prinos): LCMS MH = 532. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0181] Faza 2: Rastvoru tert-butil estra 4-karbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-dekadeutero-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (490 mg, 0,92 mmol) u THF (10 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je KOtBu (109 mg, 0,96 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Rastvor je promenio boju od bledo do jarko žute usled dodavanja, a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 30 minuta. Više KOtBu (14 mg) dodato je reakciji i mešanje je nastavljeno preko noći. Nakon oko 17 sati, dodata je još jedna porcija KOtBu (28 mg), i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi dodatna 2 sata. Reakciona mešavina je ugašena sirćetnom kiselinom (0,158 mL, 2,76 mmol) na 0°C. Dobijena gusta suspenzija je koncentrovana u vakuumu i ostatak je raspodeljen između EtOAc (75 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Vodeni sloj je ispran sa više EtOAc (75 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobila svetlo braon čvrsta supstanca. Et2O (20 mL) je dodat čvrstom sirovom proizvodu i gusta suspenzija je pretvorena u prašak sonikacijom, a zatim filtracija i ispiranje čvrste supstance sa dodatnim Et2O. Kolač je osušen sukcijom da bi se dobio 3-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-dekadeutero-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bledo žuta čvrsta supstanca (205 mg, 49% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 5 min, acetonitril/0.1% H3PO4, 4.69 min (95.6%); mp: 186-188 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.41 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.57 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.07, 51.55, 62.42, 69.42, 114.94, 115.19, 127.57, 128.78, 129.78, 129.93, 133.28, 135.00, 138.58, 153.51, 167.99, 170.95, 172.80; CD2 ugljenični signali nisu primećeni u<13>C NMR; LCMS MH = 458; Anal. izrač. za C26H19D10N3O4 0.25 H2O: C, 67.58; H, 6.43; N, 9.09. Pronađeno: C, 67.51; H, 6.32; N, 9.16.
5.4 3-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-OKTADEUTERO-MORFOLIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0182]
[0183] Faza 1: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 0,95 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (0,24 mL, 1,42 mmol) u MeCN (9 mL), dodat je 2,2,3,3,5,5,6,6-oktadeutero-morfolin (d8, 98% D, 136 mg, 1,42 mmol). Reakcija je mešana na 60°C tokom 2,5 sata. Mešavina (bela gusta suspenzija) je koncentrovana do suvoće i čvrsti ostatak je podeljen između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3(35 mL). Vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (150 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio tert-butil estar 4-karbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-oktadeutero-morfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0,5 g, 99% prinos): LCMS MH = 532. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez
[0184] Faza 2: Ohlađenom rastvoru tert-butil estra 4-karbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-oktadeuteromorfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (0,5 g, 0,94 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C, dodat je KOtBu (0,137 g, 1,22 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Rastvor je postao jarko žut. Ledeno kupatilo je odmah uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 90 minuta. Mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem sirćetne kiseline (0,162 mL, 2,82 mmol).
[0185] Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je podeljena između EtOAc (125 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (oko 75 mL). EtOAc slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo 400 mg čvrste supstance. Ova bela čvrsta supstanca je suspendovana u Et2O (25 mL) i snažno vorteksovana i podvrgnuta sonikaciji da potpomogne pretvaranje u prah. Gusta suspenzija je potom filtrirana i osušena sukcijom na filter levku tokom oko 1/2 sat. Kolač je čuvan u vakuum sušnici na 60°C tokom nekoliko sati da bi se dobio 3-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-oktadeutero-morfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (236 mg, 55% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 10 min, acetonitril/0.1% H3PO4, 5.55 min (96.5%); mp: 206-208 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, CH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 51.55, 62.01, 69.38, 114.96, 115.20, 127.61, 128.97, 129.78, 129.93, 133.28, 135.25, 137.72, 153.48, 167.99, 170.96, 172.81; CD2ugljenični signali nisu primećeni usled spajanja i cepanja sa deuterijumima; LCMS MH = 458; Anal. izrač. za C25H19D8N3O5+ 0.25 H2O: C, 64.98; H, 6.00; N, 9.09. Pronađeno: C, 64.91; H, 5.71; N, 9.04.
5.5 3-[4-(2-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0187] Faza 1 : THF rastvoru (15 mL) metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,3g, 1 mmol), dodata je trifenilfosfin smola (1,38 g, 2,2 mmol/g punjenje, 2,2 mmol) i DIAD (0,43 mL, 2,2 mmol) na 0°C, i držana tokom 10 minuta. Mešavini je dodat (2-morfolin-4-ilmetilfenil)-metanol (0,31 g, 1,5 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,07 g, 15% prinos).
[0188] Faza 2: THF rastvoru (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,07 g, 0,15 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (20 mg, 0,18 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvora, a zatim 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i metanolom da bi se dobio 3-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 50% prinos): mp: 188-190 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 4.8 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.84 -2.11 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.44 (m, 5H, CHH, CH2CH2), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.89 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHH), 3.42 - 3.62 (m, 6H, CH2CH2, CH2), 4.17 - 4.52 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.43 (s, 2H, CH2), 7.17 - 7.40 (m, 5H, Ar), 7.42 - 7.65 (m, 2H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 0.03, 22.29, 31.13, 45.05, 51.52, 53.13, 60.10, 66.15, 67.17, 114.77, 115.09, 127.29, 127.54, 127.90, 129.76, 130.08, 133.25, 135.62, 135.75, 153.46, 167.94, 170.91, 172.75; LCMS MH = 450; Anal. izrač. za C25H27N3O5+ 0.2 H2O: C, 66.27; H, 6.10; N, 9.27; Pronađeno: C, 66.06% H, 5.85; N, 9.14%.
5.6 3-[4-(3-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0190] Faza 1 : THF (10 mL) rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (1,0 g, 3,42 mmol) su dodati trifenilfosfin smola (2,3 g, 2,2 mmol/g punjenje, 6,84 mmol) i DIAD (1,33 mL, 6,84 mmol) na 0°C i držani tokom 10 minuta. Mešavini je dodat (3-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (1,06 g, 3,42 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3 (20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,50g, 30%).
[0191] Faza 2: THF rastvoru (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,3 g, 0,6 mmol) je dodat kalijum t-butoksid (0,6 mL g, 0,6 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvora a zatim 15 mL zasićenog NaHCO3 rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i metanol da bi se dobio 3-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (120 mg, 44% prinos): mp: 247-249 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.8 min (96%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.26 - 2.38 (m, 4H, CH2,CH2), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.84 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.48 - 3.59 (m, 4H, CH2, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.4 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.42 (m, 6H, Ar), 7.44 - 7.51 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 45.10, 51.59, 53.11, 62.21, 66.16, 69.58, 115.20, 115.27, 126.37, 128.09, 128.38, 128.53, 129.79, 129.98, 133.31, 136.54, 138.06, 153.44, 167.99, 170.98, 172.85; LCMS MH = 450; Anal. izrač. za C25H27N3O5 0.4 H2O: C, 65.75; H, 6.14; N, 9.20; Pronađeno: C, 65.38% H, 5.95; N, 9.21.
5.7 3-(1-OKSO-4-(4-(2-(PIROLIDIN-1-IL)ETOKSI)BENZILOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0193] Faza 1: Mešavina 4-hidroksibenzaldehida (4,0g, 32,8 mmol) i Cs2CO3(26,7 g, 81,9 mmol) u DMF (80 mL) je mešana tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi. Ovoj mešavini je dodat 1-(2-hloroetil)pirolidin hidrohlorid (6,7 g, 39,3 mmol). Mešavina je zagrevana na 60°C tokom 2 sata a potom na 80°C preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (100 mL). Filtrat je izmešan sa hladnom vodom (200 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAC (3 X 50 mL). Kombinovani EtOAc rastvori su isprani sa 2N NaOH (40 mL), vodom (3X40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) i osušeni (K2CO3). Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)benzaldehid (5,9 g, 81% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.76-1.84 (m, 4H), 2.60-2.65 (m, 4H), 2.91-2.95 (m, 2H), 4.19 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 7.00-7.04 (m, 2H), 7.80-7.95 (m, 2H), 9.88 (s, 1H).
[0194] Faza 2: Rastvor 4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)benzaldehida (5,8 g, 26,5 mmol) u reagensu alkoholu (60 mL) je ohlađen do -60°C u suvi led/aceton kupatilu. LiBH4/THF (2M, 15,9 mL, 31,9 mmol) dodat je lagano na -60°C. Mešavina je mešana na -60°C tokom 1 sata. Reakciona mešavina je ugašena vodom (20 mL) lagano i potom zagrejana do sobne temperature. Mešavina je koncentrovana ,a ostatak je mešan sa EtOAc (80 mL) i 2N NaOH (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X30 mL), i kombinovani EtOAc rastvori su isprani vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL) i osušeni. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, NH4OH: CH3OH: CH2Cl20.5: 3: 97) da bi se dobio 4-[(2-pirolidin-1-iletoksi)-fenil]-metanol (2,5 g, 42% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.74-1.83 (m, 4H), 2.56-2.63 (m, 4H), 2.86 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 4.03 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.57 (s, 2H), 6.82-6.87 (m, 2H), 7.23-7.27 (m, 2H).
[0195] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (1,1 g, 5,5 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,8 g, 2,7 mmol), 4-[(2-pirolidin-1-iletoksi)-fenil]-metanola (0,9 g, 4,1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (1,8 g, 5,5 mmol) u THF (60 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH:CH2Cl2 = 3:97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(2-pirolidin-1-il)etoksi)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat (1,0 g, 77%).
[0196] Faza 4: Rastvor KO-t-Bu/THF (1M, 2,5 mL, 2,5mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(2-pirolidin-1-il)etoksi)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata (1,0 g, 2,1 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta, potom zagrevana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (4 mL). Mešavina je mešana sa EtOAc (40 mL) i zas. Na2CO3 (25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3X40 mL) i kombinovan EtOAc rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH:CH2Cl2 = 5:95) da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(2-pirolidin-1-il)etoksi)-benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,2 g, 20% prinos): mp 153-155 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.66-1.69 (m, 4H), 1.94-1.99 (m, 1H), 2.40-2.59 (m, 2H), 2.77 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.84-2.90 (m, 1H), 4.06 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.92-6.97 (m, 2H), 7.30-7.50 (m, 5H), 10.96 (s, 1H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 23.09, 31.17, 45.06, 51.54, 53.93, 54.24, 66.69, 69.34, 114.35, 115.04, 115.12, 128.42, 129.50, 129.75, 129.95, 133.25, 153.50, 158.33, 168.00, 170.96, 172.81; Izrač. za C26H29N3O5 0.5 Et2O: C, 66.65; H, 6.63; N, 8.64. Pronađeno: C, 66.95; H, 6.62; N, 8.71.
5.8 3-[4-(3-HLORO-4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0197]
[0198] Faza 1: Balon sa okruglim dnom napunjen je 3-hloro-4-metil-benzojevom kiselinom (1,5 g, 9 mmol) i trimetil ortoacetatom (25 mL). Mešavina je zagrevana na 100°C preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu. Dobijeno ulje, metil estar 3-hloro-4-metil-benzojeve kiseline, je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0199] Faza 2: CCl4rastvoru (50 mL) metil estra 3-hloro-4-metil-benzojeve kiseline (1,66 g, 0,9 mmol), dodat je NBS (1,58g, 9 mol). Suspenzija je okupana u svetlosti kvarc lampe 300-W i zagrevana na 65°C tokom 1 sata. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje, metil estar 4-bromometil-3-hloro-benzojeve kiseline, je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0200] Faza 3: Acetonitrilnom rastvoru (30 mL) metil estra 4-bromometil-3-hlorobenzojeve kiseline, dodat je morfolin (3 mL). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 0,5 sati i koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijeno ulje je ekstrahovano sa EtOAc (30 mL) i vodom (20 mL). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluiran sa EtOAc i heksanom da bi se dobio metil estar 3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-benzojeve kiseline (1,0 g, 42% za tri faze) kao žuto ulje.
[0201] Faza 4: THF rastvoru (30 mL) metil estra 3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-benzojeve kiseline (1,0g, 3,7 mmol) je dodat LiAlH4(3,7 mL, 1 M u THF, 3,7 mmol) u kapima na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona mešavina je ugašena sa zas. NaHCO3 (5 mL), a potom je razblažena sa EtOAc (30 mL) i vodom (20 mL). Nakon ekstrakcije, organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluiran sa EtOAc i heksanom da bi se dobio (3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol kao ulje (0,6g, 70%).
[0202] Faza 5: THF rastvoru metil estara 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,32 g, 1,1 mmol) je dodat trifenilfosfin smola (1,94 g, 1,6 mmol/g punjenje, 2,42 mmol) i DIAD (0.477 mL, 2,42 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, mešavini je dodat (3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,40 g, 1,66 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3 (20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,40g, 73%).
[0203] Faza 6: THF rastvoru (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3-hloro-4-morfolin-4-ilmetilbenziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,64 g, 1,2 mmol) dodat je kalijum tbutoksid (0,14 g, 1,2 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvora, a zatim 15 mL zasićenog NaHCO3 rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijena čvrsta supstanca je mešan u MeOH (5 ml) i filtrirana da bi se dobio 3-[4-(3-hloro-4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion (300 mg, 50%) kao bela čvrsta supstanca: mp: 240-242 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X<150 mm,5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H>3<PO>4<u H>2<O od 5/95 do 100/0 u 5 min i>ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.81 min (96%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.10 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.45 (m, 5H, CH2,CH2,CHH), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.84 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.42 - 3.69 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.07 - 4.58 (m, 2H, CHH), 4.98 - 5.17 (m, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.22 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.61 (m, 4H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.26, 31.10, 44.99, 51.49, 53.10, 58.68, 66.09, 68.38, 114.86, 115.31, 126.13, 128.22, 129.75, 129.88, 130.91, 133.23, 133.32, 134.85, 137.37, 153.19, 167.86, 170.88, 172.75; LCMS MH = 484; Anal. izrač. za C25H26N3O5Cl: C, 62.05; H, 5.42; N, 8.68; Pronađeno: C, 61.71; H, 5.08; N, 8.62.
5.9 3-(4-(4-(2-MORFOLIN-4-IL-ETOKSI)-BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION [0204]
[0205] Faza 1: Mešavina 4-hidroksibenzaldehida (4,0 g, 32,8 mmol) i Cs2CO3(26,7 g, 81,9 mmol) u DMF (80 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Ovoj mešavini je dodat 4-(2-hloroetil)morfolin hidrohlorid (7,3 g, 39,3 mmol). Dobijena mešavina je zagrevana na 80°C u uljanom kupatilu preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (100 mL). Filtrat je razblažen hladnom vodom (200 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 X 50 mL). Kombinovani EtOAc rastvor je ispran sa 2N NaOH (25 mL), vodom (3 X 40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 4-(2-morfolin-4-il-etoksi)-benzaldehid (6,2 g, 81% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.57-2.60 (m, 4H), 2.83 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.70-3.75 (m, 4H), 4.19 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 6.98-7.03 (m, 2H), 7.81-7.85 (m, 2H), 9.88 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 53.52, 56.73, 65.77, 66.11, 114.93, 129.58, 131.73, 163.40, 191.21.
[0206] Faza 2: LiBH4/THF (2M, 15,9 mL, 31,7 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru 4-(2-morfolin-4-il-etoksi)-benzaldehida (6,2 g, 26,4 mmol) u reagensu alkoholu (60 mL) na -60°C. Dobijena mešavina je mešana na -60°C tokom 1 sata, a potom je ugašena vodom (20 mL). Mešavina je koncentrovana ,a ostatak je mešan sa EtOAc (80 mL) i 1N NaOH (30 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X30 mL) i kombinovan EtOAc rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, NH4OH: CH3OH: CH2Cl20.5: 3: 100) da bi se dobio [4-(2-morfolin-4-il-etoksi)-fenil]-metanol (4,2 g, 67% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.25 (s, 1H), 2.54-2.57 (m, 4H), 2.78 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.70-3.73 (m, 4H), 4.08 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.59 (s, 2H), 6.85-6.89 (m, 2H), 7.25-7.29 (m, 2H);<13>C NMR (CDCl3) δ 54.06, 57.61, 65.79, 66.85, 114.62, 128.57, 133.52, 158.24.
[0207] Faza 3: Trifenilfosfin vezan za polimer (1,8 g, 5,5 mmol) je mešan sa suvim CH2Cl2(20 mL) tokom 10 minuta. Ovoj mešavini je dodat rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,8 g, 2,7 mmol) i [4-(2-morfolin-4-il-etoksi)-fenil]-metanola (1,0 g, 4,1 mmol) u THF (60 mL). Dobijena mešavina je ohlađena do 5°C i diizopropil azodikarboksilat (1,1 g, 5,5 mmol) dodat je lagano na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-(2-morfolinoetoksi)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-okso-pentanoat (1,0 g, 71%).
[0208] Faza 4: Rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2,6 mL, 2,6 mmol) dodat je lagano na 5°C izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(2-morfolinoetoksi)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1,1 g, 2,1 mmol) u THF (30 mL). Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (4 mL). Mešavina je mešana sa EtOAc (40 mL) i zas. Na2CO3(25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3X40 mL) i kombinovani EtOAc rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (Al2O3, CH3OH: CH2Cl23: 97) do 3-(4-(4-(2-morfolinoetoksi)-benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,2 g, 16% prinos): mp: 203-205°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90-2.05 (m, 1H), 2.40-2.70 (m, 8H), 2.84-2.96 (m, 1H), 3.55-3.58 (m, 4H), 4.06-4.10 (m, 2H), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.07-5.15 (m, 3H), 6.97 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.30-7.50 (m, 5H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.32, 31.17, 45.06, 51.55, 53.56, 56.92, 65.29, 66.11, 63.31, 114.41, 115.04, 115.11, 128.50, 129.47, 129.74, 129.94, 133.25, 153.49, 158.27, 167.99, 170.94, 172.80; Izrač. za C26H29N3O6 0.2 H2O: C, 64.64; H, 6.10; N, 8.70. Pronađeno: C, 64.54; H, 6.06; N, 8.63.
5.10 3-[4-(3-FLUORO-4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0209]
[0210] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil estra 3-fluoro-4-metil-benzojeve kiseline (5,45 g, 32,4 mmol) u ugljenik tetrahloridu (30 mL) dodat je N-bromosukcinimid (5,48 g, 30,8 mmol). Mešavina je zagrejana do 80°C, osvetljena svetlošću od 300W. Mešavina je zagrevana tokom dva sata i potom filtrirana. Filtrat je uparen da bi se dobio metil estar 4-bromometil-3-fluoro-benzojeve kiseline kao svetlo zeleno ulje (9,1 g, 113% sirovi prinos).
[0211] Faza 2: Morfolin (28,3 mL, 324,4 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-bromometil3-fluoro-benzojeve kiseline (8,01 g, 32,4 mmol) u acetonitrilu (40 mL) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana tokom deset minuta i rastvarač je uparen. Ostatku je dodata voda (40 mL), a potom je mešavina ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su uparene i prečišćene na koloni sa silikagelom (EtOAc/Heksani gradijent od 10% do 40% u 40 min) da bi se dobio metil estar 3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benzojeve kiseline kao žuta čvrsta supstanca (5,58 g, 68% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.35 - 2.44 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 - 3.65 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.87 (s, 3H, CH3), 7.55 - 7.63 (m, 1H, Ar), 7.63 - 7.70 (m, 1H, Ar), 7.75 - 7.82 (m, 1H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 52.36, 52.98, 53.22, 54.64, 65.84, 66.10, 66.35, 115.45, 115.75, 124.97, 129.95, 130.16, 130.44, 130.54, 131.72, 131.78, 158.73, 162.00, 165.09.
[0212] Faza 3: Litijum aluminijum hidrid (1,0 M u THF, 8,06 mL, 8,06 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benzojeve kiseline (1,02 g, 4,03 mmol) u THF (20 mL) na 0°C. Mešana je tokom 30 minuta i ugašena dodavanjem zasićenog natrijum bikarbonata u kapima. Mešavini je dodata voda (30 mL), a mešavina je ekstrahovana etil acetatom (3 x 100 mL). Dobijeni talog je filtriran. Kombinovani etil acetatni filtrat je uparen i prečišćen na koloni sa silikagelom (EtOAc/Heksani gradijent od 20% do 90% u 35 min) da bi se dobio (3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol kao uljana čvrsta supstanca (0,81 g, 89% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.31 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 3.46 -3.50 (m, 2H, CH2), 3.51 - 3.59 (m, 4H, CH2, CH2), 4.49 (br. s., 2H, CH2), 5.27 (br. s., 1H, OH), 7.04 - 7.14 (m, 2H, Ar), 7.29 - 7.38 (m, 1H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 52.89, 54.80, 62.02, 66.13, 112.63, 112.93, 121.80, 121.96, 122.17, 131.31, 131.38, 144.40, 144.50, 159.14, 162.38.
[0213] Faza 4: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 1,60 g, 2,60 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji (3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanola (0,39 g, 1,71 mmol) u THF (20mL) na 0°C, a zatim je dodat diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (0,37 ml, 1,88 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je metil estar 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,50 g, 1,71 mmol). Mešavina je mešana tokom tri sata potom filtrirana, isprana sa MeOH (3 x 20 mL) i metilen hloridom (3 x 20 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 5% u 40 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bistro ulje (0,54 g, 63% prinos).
[0214] Faza 5: Kalijum tert-butoksid (0,12 g, 1,08 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,54 g, 1,08 mmol) u THF (15 mL) na 0°C. Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1N HCl (3 mL), neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 mL do pH = 7), i brzo ekstrahovana etil acetatom (2 x 30 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene i prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2, gradijent od 1% do 5% u 90 min) da bi se dobio 3-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetilbenziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0,36 g, 72% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.90 min (97.8%); mp: 263-265°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2CH2), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.47 - 3.61 (m, 6H, CH2CH2, CH2), 4.23 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.56 (m, 6H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 45.09, 51.59, 52.93, 54.74, 66.13, 68.56, 114.09, 114.40, 114.92, 115.39, 123.22, 123.70, 123.89, 129.84, 130.00, 131.69, 131.75, 133.37, 138.16, 138.26, 153.28, 159.08, 162.33, 167.98, 170.96, 172.83; LCMS MH=468; Anal. Izrač. za C25H26N3O5F: C, 64.23; H, 5.61; N, 8.99. Pronađeno: C, 63.95; H, 5.41; N, 8.92.
5.11 3-{4-[4-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0215]
[0216] Faza 1: THF rastvoru 4-(2-bromoetil)benzojeve kiseline (25 g, 109 mmol) i trifluoroboran eterata (13,71 ml, 109 mmol), dodat je boran (196 ml, 196 mmol) u kapima kroz levak za kapanje na 0°C tokom 2 sata. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, i MeOH dodat je u kapima na sobnoj temperaturi dok zamućena suspenzija nije postala bistra i dok se više mehurovi nisu formirali . Bistar rastvor je koncentrovan na rotacionom isparivaču i dobijena čvrsta supstanca je mešana u vodi (100 mL) tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana da bi se dobila 4-(2-hloro-etil)-benzojeva kiselina kao bela čvrsta supstanca (25g, 107%).
[0217] Faza 2: Acetonitrilnom rastvoru (4-(2-bromoetil)fenil)metanola (25 g, 116 mmol), dodat je morfolin (25,3 ml, 291 mmol). Sav NaI je dodat odjednom. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom vikenda. Reakciona suspenzija je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i mešan u etru (100 mL) na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Suspenzija je filtrirana. Dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u 1N HCl i ekstrahovana je sa EtOAc (50 mL x 2). Vodeni sloj je neutralizovan sa 1N NaOH do pH = 7-8.
Dobijena suspenzija je filtrirana da bi se dobio [4-(2-morfolin-4-il-etil)-fenil]-metanol kao bela čvrsta supstanca (13g, 60%).
[0218] Faza 3: THF rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,5 g, 1,7 mmol), dodata je trifenilfosfin smola (2,3 g, 1,6 mmol/g punjenje, 3,74 mmol) i DIAD (0,73 mL, 3,74 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, mešavini je dodat [4-(2-morfolin-4-il-etil)-fenil]-metanol (0,65 g, 2,94 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3 (20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4- {4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0,74g, 88%).
[0219] Faza 4: THF rastvoru (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (0,74 g, 1,5 mmol) dodat je kalijum t-butoksid (0,16 g, 1,5 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvora a zatim sa 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i metanolom da bi se dobio 3-{4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (620 mg, 87% prinos): mp: 230-232°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 4.86 min (97%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.80 -2.12 (m, 1H, CHH), 2.40-2.44 (m, 4H, CH2,CH2), 2.45 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.69 -2.80 (m, 2H, CH2), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.52 - 3.61 (m, 4H, CH2, CH2), 4.18 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.19 - 7.54 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 32.04, 45.10, 51.58, 53.21, 59.93, 66.13, 69.47, 114.98, 115.19, 127.80, 128.70, 128.74, 129.79, 129.95, 133.29, 134.08, 140.25, 153.50, 168.01, 170.96, 172.82; LCMS MH = 464; Anal. izrač. za C26H29N3O5 0.5 H2O: C, 66.09; H, 6.40; N, 8.89; Pronađeno: C, 65.96; H, 6.33; N, 9.07.
5.12 3-[4-(4-IMIDAZOL-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0221] Faza 1: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 10 g, 16 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2,49 g, 8,52 mmol) u THF (100mL) na 0°C, a zatim diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (3,36 ml, 17,04 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je (4-(hlorometil)fenil)metanol (2,00 g, 12,78 mmol). Mešavina je mešana tokom jednog sata potom filtrirana. Smola je isprana metanolom (3 x 30 mL) i metilen hloridom (3 x 30 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 5% u 30 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (3,38 g, 92% prinos):
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 - 2.35 (m, 4H, CH2CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.35 - 4.62 (m, 2H, CH2), 4.73 (dd, J = 4.8, 10.3 Hz, 1H, NCH), 4.78 (s, 2H, CH2), 5.26 (s, 2H, CH2), 7.19 (d, 1H, NHH), 7.25 - 7.35 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 5H, Ar), 7.58 (d, J = 0.4 Hz, 1H, NHH).
[0222] Faza 2: Imidazol (0,19 g, 2,84 mmol), i diizopropiletilamin (0,24 mL, 1,42 mmol) su dodati izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0,61 g, 1,42 mmol) u acetonitrilu (15 mL). Mešavina je zagrevana na 70°C preko noći. Mešavini je dodat kalijum karbonat (0,20 g, 1,48 mmol), a mešavina je zagrevana na 80°C tokom tri sata. Mešavina je koncentrovana i potom prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 od 1% do 10% u 30 minuta) da bi se dobio 3-[4-(4-Imidazol-1-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0,12 g, 37% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 18/2 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 2.50 min (96.8%); mp: 248-250°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 -2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.17 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 6.92 (s, 1H, Ar), 7.20 (t, J = 1.2 Hz, 1H, Ar), 7.24 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.78 (s, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.20, 45.08, 49.20, 51.58, 69.19, 114.95, 115.27, 119.56, 127.58, 128.07, 128.54, 129.81, 129.97, 133.31, 136.14, 137.35, 137.59, 153.40, 167.99, 170.96, 172.83; LCMS MH = 431; Anal. izrač. za C24H22N4O4 0.5 H2O: C, 65.59; H, 5.28; N, 12.75. Pronađeno: C, 65.43; H, 5.15; N, 12.64.
5.13 3-{4-[4-(1,1-DIOKSO-1-TIOMORFOLIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0223]
[0224] Faza 1: Gusta suspenzija tert-butil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (1,5 g, 4,49 mmol), N,N-diizopropiletilamina (784 µl, 4,49 mmol), i K2CO3(620 mg, 4,49 mmol) u DMF (15 mL) je mešana tokom 5 minuta na sobnoj temperaturi, nakon čega je dodat (4-hlorometil-fenil)-metanol (902 mg, 4,49 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 15 sati, a potom zagrevana do 70°C tokom 3 sata. Piperidin (800 µl) je dodat mešavini da bi se sakupio neiskorišćen (4-hlorometil-fenil)-metanol. Mešavina je mešana dodatnih 18 sati na 70°C. Mešavina je razblažena vodom (50 mL) i EtOAc (200 mL). pH vodenog rastvora podešena je na oko 4 korišćenjem 1 N HCl, i faze su razdvojene u levku za razdvajanje. Vodeni sloj je zasićen sa NaCl i ekstrahovan dodatnim EtOAc (200 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobilo 3,5 g svetlo braon ulja. Deo ovog ulja (2,1 g) je prečišćen na „flash“ koloni sa SiO2(CombiFlash, kolona sa predhodno pakovanih 80 g SiO2, MeOH/dihlorometan gradijent) da bi se dobio tert-butil estar 4-karbamoil-2-[4-(4-hidroksimetilbenziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela pena (1,1 g, 90% prinos, baziran na prečišćenom delu):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, tBu), 2.00 - 2.13 (m, 3H, CHH, CH2), 2.13 - 2.31 (m, 1H, CHH), 4.41 (s, 2H, CH2), 4.50 (d, J = 5.7 Hz, 2H, CH2), 4.69 (dd, J = 4.6, 10.3 Hz, 1H, CH), 5.19 (t, J = 5.7 Hz, 1H, OH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.75 (br. s., 1H, NH), 7.22 (br. s., 1H, NH), 7.25 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.42 -7.53 (m, 3H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.69, 27.56, 31.50, 44.78, 54.08, 62.60, 69.45, 81.42, 114.97, 115.18, 126.52, 127.57, 129.71, 130.03, 133.27, 134.86, 142.40, 153.42, 168.12, 169.85, 172.94; LCMS MH = 455.
[0225] Faza 2: Rastvoru tert-butil estra 4-karbamoil-2-[4-(4-hidroksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline (250 mg, 0,55 mmol) u dihlorometanu (5 mL), ohlađenom u ledenom kupatilu do 0°C, dodat je N,N-diizopropiletilamin (115 µl, 0,66 mmol) a zatim metansulfonil hlorid (47 µl, 0,605 mmol). Nakon 5 minuta, mešavina je ostavljena da se ugreje do sobne temperature. Mešavina je mešana tokom oko 45 minuita na sobnoj temperaturi, potom je dodato još MsCl (20 µl). Reakcija je završena nakon 10 minuta sudeći po LCMS. Sirova mešavina je koncentrovana i ostatak je osušen onda u vakuum sušnici na 40°C preko noći da bi se dobio sirovi proizvod kao bela čvrsta supstanca (320 mg). LCMS pokazala je da je dobijena čvrsta supstanca sadržavala oko 5: 1 mešavina tert-butil estra 4-karbamoil-2-[4-(4-metansulfoniloksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline i tert-butil estra 4-karbamoil-2-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (MH = 533 i 473, respektivno). Mešavina je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. Rastvoru sirovog proizvoda (293 mg, 0,55 mmol, pretpostavljajući kvantitativni prinos iz prethodne faze) i N,N-diizopropiletilamin (240 µl, 1,375 mmol) u acetonitrilu (5 mL), dodat je tiomorfolin 1,1-dioksid (82 mg, 0,605 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 45 minuta, a potom je dodato još tiomorfolin 1,1-dioksida (82 mg, 0,605 mmol). Nakon 3 sata, mešavina je zagrejana do refluksa tokom oko 4 sata, a onda je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i ostatak je podeljen između EtOAc (150 mL) i 1 N NaHCO3(30 mL). Vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (150 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobio tert-butil estar 4-karbamoil-2-{4-[4-(1,1-diokso-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (340 mg). LCMS MH = 572. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0226] Faza 3: Izmešanom rastvoru tert-butil estra 4-karbamoil-2-{4-[4-(1,1-diokso-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (230 mg, 0,40 mmol) u THF (10 mL), dodat je 1 M rastvor KOtBu (402 µl, 0,402 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 2 sata, a onda je dodato još KOtBu (100 µl). Nakon približno drugih 2,5 sata, reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu, a onda preneta u 1 N vodeni HCl rastvor. Mešavina je koncentrovana do suvoće i ostatak je ponovo rastvoren u minimalno DMF i 1 N HCl (1: 1) i filtrirana. Filtrat koji sadrži sirovi proizvod je prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0,1% mravlja kiselina u obe pokretne faze), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-{4-[4-(1,1-diokso-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-<2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (113 mg, 56% prinos): HPLC: Waters Symmetry C>18<, 5 µm, 3.9 x 150>mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.91 min (97.5%); mp: 156-158 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.74 - 3.01 (m, 5H, 2CH2, CHH), 3.03 - 3.16 (m, 4H, 2CH2), 3.68 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.40 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.24, 30.06, 43.97, 48.93, 49.12, 50.46, 58.16, 68.23, 113.87, 114.13, 126.60, 127.76, 128.70, 128.83, 132.18, 134.44, 136.40, 152.36, 166.87, 169.84, 171.71; LCMS MH = 498; Anal. izrač. za C25H27N3O6S: C, 60.35; H, 5.47; N, 8.44; S, 6.44. Pronađeno: C, 55.59; H, 5.24; N, 7.92; S, 5.96.
5.14 TERT-BUTIL ESTAR 4-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-PIPERIDIN-1-KARBOKSILNE KISELINE
[0227]
[0228] Faza 1: THF rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,45 g, 1,5 mmol), dodata je trifenilfosfin smola (1,75 g, 1,6 mmol/g punjenje, 2,86 mmol) i DIAD (0,55 mL, 2,86 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, tert-butil estar 4-(4-hidroksimetil-benzil)-piperidin-1-karboksilne kiseline dodat je mešavini, i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3 (20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline kao ulje (0,85g, 90%).
[0229] Faza 2: THF rastvoru (20 mL) tert-butil estra 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,85 g, 1,5 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (0,16 g, 1,5 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvora a zatim 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i metanol da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline kao ulje (660 mg, 80%). mp: 180-182°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 7,.69 min (98%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.92 - 1.12 (m, 2H, CH2), 1.16-1.24 (m, 1H, CHH), 1.38 (s, 9H, CH3, CH3,CH3), 1.46 - 1.58 (m, 2H, CH2), 1.59 - 1.74 (m, 1H, CH), 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.56 - 2.71 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 2.79 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.79 - 4.00 (m, 2H, CH2), 4.18 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.01 - 5.16 (m, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.20 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.28 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.32 - 7.32 (m, 1H, Ar), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.43 - 7.56 (t, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 10.91 - 11.07 (m, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 28.01, 31.13, 31.39, 37.18, 41.74, 45.02, 51.51, 69.40, 78.31, 114.90, 115.13, 127.64, 129.06, 129.74, 129.89, 133.24, 134.00, 139.87, 153.46, 153.74, 167.94, 170.91, 172.76; LCMS MH = 548. Anal. izrač. za C31H37N3O6+ 0.8 H2O: C, 66.25; H, 6.92; N, 7.48; Pronađeno: C, 66.09; H, 6.83; N, 7.67.
5.15 3-[1-OKSO-4-(4-PIPERIDIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION HLOROVODONIK
[0230]
[0231] CH2Cl2 rastvoru (10 mL) tert-butil estra 4-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,5g, 1,0 mmol), dodat je hlorovodonik u rastvoru etra (2,0 M, 5 mL, 10 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana. Dobijena čvrsta supstanca je mešana sa etrom da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion hlorovodonik kao bela čvrsta supstanca (194 mg, 50%). mp: 200-202 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1% H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.90 min (96%).1H NMR (DMSO-d6) δ 1.35 (d, J = 11.9 Hz, 2H, CH2), 1.62 - 1.73 (m, 2H, CH2), 1.74 -1.87 (m, 1H, CH), 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 3H, CH2, CHH), 2.77 (d, J = 10.8 Hz, 2H, CH2), 2.84 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.21 (d, J = 12.1 Hz, 2H, CH2), 4.11 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.21 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.28 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.45 - 7.54 (m, 1H, Ar), 8.50 - 8.75 (m, 1H, HCl), 8.80 - 9.02 (m, 1H, HCl), 10.97 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 28.04, 31.14, 34.82, 41.23, 42.89, 45.01, 51.51, 69.34, 114.93, 115.16, 127.71, 129.09, 129.76, 129.87, 133.24, 134.25, 139.25, 153.43, 167.92, 170.91, 172.78; LCMS MH = 448. Anal. izrač. za C26H29N3O4HCl 1.1 H2O: C, 61.98; H, 6.44; N, 8.34; Cl, 7.04; Pronađeno: C, 61.96; H, 6.63; N, 8.00; Cl, 7.06.
5.16 3-(4-((5-(MORFOLINOMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METIOKSI)-1-OKSOSIOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0232]
[0233] Faza 1: Heksametilentetramin (14,0 g, 100 mmol) dodat je u jednoj porciji pod N2 izmešanom rastvoru 4-hidroksibenzaldehida (12,2 g, 100 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (100 mL). Nakon dodavanja, mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 90°C tokom 24 sata. Reakcija je ugašena sa 140 mL 3N HCl i ohlađena do sobne temperature tokom 1 sata. Mešavina je ekstrahovana sa CH2Cl2(4X100 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je koncentrovan. Etanol (15 mL) je dodat ostatku na 40°C i onda ohlađen u ledenom kupatilu tokom 30 minuta. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana hladnim etanolom (10 mL) da bi se dobio 5-formilsalicilaldehid (5,0 g, 33% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8,00-8,04 (dd, J = 2.4 i 8.7 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 9.89 (s, 1H), 10.34 (s, 1H), 11.79 (s, 1H).
[0234] Faza 2: Mešavina 5-formilsalicilaldehida (3,9 g, 26,0 mmol), etil bromoacetata (4,4 g, 26,0 mmol), kalijum karbonata (5,4 g, 39,0 mmol) i molekulskog sita (3,9 g) u DMF (40 mL) je zagrevana u uljanom kupatilu na 85°C tokom 2 sata a potom na 120°C tokom 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (100 mL). Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana EtOAc (50 mL). Filtrat je ispran vodom (3X50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa estrom (20 mL) i heksanom (20 mL) da bi se dobio etil 5-formilbenzofuran-2-karboksilat (3,3 g, 59% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.35-4.42 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 7.92-7.95 (m, 2H), 8.03-8.07 (dd, J = 1.5 i 8.7 Hz, 1H), 8.42 (b, 1H), 10.10 (s, 1H).
[0235] Faza 3: Morfolin (1,2 g, 13,8 mmol) dodat je izmešanom rastvoru etil 5-formilbenzofuran-2-karboksilata (1,5 g, 6,9 mmol) u metanolu (60 mL). Dodato je molekulsko sito (4A, 1,5 g), a zatim sirćetna kiselina (0,4 g, 6,9 mmol) i natrijum cijanoborohidrid (0,7 g, 10,3 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metanolom (40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL). EtOAc rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl240: 60) da bi se dobio etil estar 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-karboksilne kiseline (1,2 g, 61% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.43 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 2.45 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.58 (s, 2H), 3.71 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 4.41-4.48 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 7.42-7.45 (dd, J = 1.8 i 8.7 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 0.9 Hz, 1H).
[0236] Faza 4: Rastvor LiAlH4/THF (1M, 8 mL, 8,0 mmol) u THF (10 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu do 5°C. Rastvor etil estra 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-karboksilne kiseline (1,8 g, 6,2 mmol) u THF (20 mL) dodat je u kapima na 5-10°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana u ledenom kupatilu tokom 30 minuta. Reakciona mešavina je pažljivo ugašena sa zas. Na2CO3(50 mL) u ledenom kupatilu i mešavina je razblažena sa CH2Cl2(50 mL). Aq. sloj je ekstrahovan CH2Cl2(3X40 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl25: 95) da bi se dobio (5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (1,3 g, 86% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.45 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.70 (b, 1H), 3.55 (s, 2H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 4.74 (s, 2H), 6.59 (s, 1H), 7.20-7.24 (dd, J = 1.5 i 8.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 1.2 Hz, 1H).
[0237] Faza 5: Diizopropil azodikarboksilat (0,8 g, 4,1 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3,5 g, 4,4 mmol) u THF (40 mL) na 3-5°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 10 minuta, dodat je rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,8 g, 2,7 mmol) i 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanola (0,9 g, 3,6 mmol) u THF (60 mL) lagano na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 5 minuta, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(40 mL), vodom (2X30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl25: 95) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((5-morfolinometil)benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9 g, 64% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.13-2.47 (m, 8H), 3.57 (s, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.70-3.72 (m, 4H), 4.35 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.86-4.91 (d, J = 5.7 i 8.7 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 5.36 (b, 1H), 6.30 (b, 1H), 6.77 (s, 1H), 7.17-7.19 (dd, J = 1.8 i 6.9 Hz, 1H), 7.28-7.31 (dd. J = 1.5 i 8.4 Hz, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H).
[0238] Faza 6: Rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 1,9 mL, 1,9 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-((5-morfolinometil)brnzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9 g, 1,7 mmol) u THF (25 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5 °C tokom 1 h, a onda je ugašena sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (50 mL) i vodom (15 mL).
Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (30 mL), i kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl25:95) da bi se dobio 3-(4-((5-morfolinometil)benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,2 g, 25% prinos): mp 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95-2.09 (m, 1H), 2.35-2.59 (m, 6H), 2.89-2.92 (m, 1H), 3.54-3.57 (m, 6H), 4.25 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 6 i 12 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.27-7.57 (m, 6H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 31.16, 45.03, 51.56, 53.06, 62.32, 62.52, 66.15, 107.05, 110.80, 115.14, 115.66, 121.61, 126.00, 127.48, 129.81, 129.95, 132.58, 133.41, 152.80, 152.95, 153.82, 167.88, 170.93, 172.79; Izrač. za C27H27N3O6 1.0 H2O: C, 63.90; H, 5.76; N, 8.28. Pronađeno: C, 63.97; H, 5.40; N, 8.20.
5.17 3-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-DIMETILMORFOLINO)METIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0239]
[0240] Faza 1: U balon sa okruglim dnom od 250-mL, L-glutamin α-tert-butil estar (7,83 g, 32,8 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (11,46 ml, 65,6 mmol) su suspendovani u acetonitrilu (100 mL) na sobnoj temperaturi. Suspenzija je mešana tokom oko 10 minuta, a onda je dodavan rastvor metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)benzoata (11,4 g, 29,8 mmol) u acetonitrilu (20 mL) u kapima preko oko 10 minuta. Reakciona mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu do sporog refluksa (80 °C) tokom 4 sata. Reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature tokom oko 1 sat, a onda je dodat rastvor cezijum fluorida (4,53 g, 29,8 mmol) u vodi (15 mL). Dobijena mešavina je energično umešavana na sobnoj temperaturi tokom oko 1 sat u kojoj tački je završena LCMS naznačena destilacija. Reakciona mešavina je razblažena sa acetonitrilom i filtrirana da bi se uklonile nerastvorene čvrste supstance. Čvrste supstance su isprane dodatnim acetonitrilom. Filtrat i vode od ispiranja (ukupna zapremina 200 mL) razblaženi su dalje sa EtOAc (300 mL), preneti u levak za razdvajanje od 1-L, i isprani 0,5 N vodenim KH2PO4 (100 mL, pH ∼5). Vodenom sloju dodata je 1 N HCl u delovima (∼20 mL, pH se promenio od pH 7-8 do pH -5 uz upotrebu pH papira). NaCl (∼10 g) i EtOAc (∼200 mL) su dodati vodenom sloju. Mešavina je promućkana energično u levku za razdvajanje. Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobio 15 g beličaste čvrste supstance. Ovaj sirovi proizvod koji sadrži čvrstu supstancu je suspendovan u acetonitrilu (200 mL) i suspenzija je zagrejana u uljanom kupatilu do refluksa (85 °C) tokom 30 minuta uz mešanje. Mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature tokom 1 sata, a onda je starila na 4°C tokom naredna 2 sata. Obrazovana čvrsta supstanca je prikupljena usisnom filtracijom. Zaostala čvrsta supstanca u balonu je preneta na filter levak korišćenjem malo MTBE. Kolač je ispran dodatnim MTBE (ukupna zapremina filtrata -300 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 40°C tokom nekoliko sati da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (7,3 g 72% prinos, podešen za čistoću polaznog materijala i proizvoda): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 acetonitril/0.1% H3PO4, 2.91 min (96.9%); mp: 198-200 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, tBu), 1.93 - 2.14 (m, 3H, CH2, CHH), 2.15 - 2.33 (m, 1H, CHH), 4.35 (s, 2H, CH2), 4.61 - 4.83 (m, 1H, CH), 6.76 (br. s., 1H, NH), 6.97 - 7.07 (m, 1H, Ar), 7.11 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.26 (br. s., 1H, NH), 7.29 - 7.36 (m, 1H, Ar), 10.10 (s, 1H, OH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.81, 27.56, 31.44, 44.71, 54.02, 81.38, 113.72, 117.96, 127.99, 129.36, 133.36, 152.50, 168.36, 169.88, 172.94; LCMS MH = 335; Anal. izrač. za C17H22N2O5 0.19 H2O: C, 60.45; H, 6.68; N, 8.29. Pronađeno: C, 60.44; H, 6.62; N, 8.27.
[0241] Faza 2: U balon sa okruglim dnom od 250-mL, tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (3 g, 8,79 mmol) i trifenilfosfin na polistirenu (1,6 mmol/g smola, 10,99 g, 17,59 mmol) su suspendovani u THF (100 mL, 1220 mmol) na sobnoj temperaturi. Smola je ostavljena da nabubri uz lagano mešanje tokom 5 minuta potom je mešavina ohlađena u ledenom kupatilu na 0°C. Mešavini je dodat DIAD (3,42 mL, 17,59 mmol) korišćenjem šprica brzo u kapima. Nakon 10 minuta, dodat je (4-(hlorometil)fenil)metanol (2,066 g, 13,19 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji.
Ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 sati. Smola je usisno filtrirana i isprana na filter levku sukcesivnim ispiranjima dihlorometanom i MeOH (2X, ∼50 mL svako ispiranje). Kombinovani filtrati i vode od ispiranja su koncentrovani u vakuumu do sirupa koji je raspodeljen između EtOAc (∼300 mL) i vode (∼100 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi proizvod kao svetlo braon ulje (∼10g). Ulje je prečišćeno na “flash” koloni sa SiO2 (CombiFlash, kolona sa predhodno pakovanih 330 g SiO2, 0% do 5% MeOH u dihlorometan gradijentu) da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela pena, koji je izdrobljen u fini prah (3,6 g, 87% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, tBu), 2.00 - 2.14 (m, 3H, CHH, CH2), 2.14 - 2.35 (m, 1H, CHH), 4.43 (s, 2H,<CH>2<), 4.70 (dd, J = 4.7, 10.4 Hz, 1H, CH), 4.78 (s, 2H, CH>2<), 5.27 (s, 2H, CH>2<), 6.66 - 6.83 (m, 1H, NH), 7.18 ->7.28 (m, 1H, NH), 7.29 (d, J = 2.3 Hz, 1H, Ar), 7.32 (d, J = 2.6 Hz, 1H, Ar), 7.40 - 7.58 (m, 5H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.69, 27.56, 31.50, 44.78, 45.83, 54.08, 69.13, 81.41, 114.91, 115.26, 127.92, 129.00, 129.73, 130.03, 133.31, 136.78, 137.38, 153.35, 168.09, 169.85, 172.93.
[0242] Faza 3: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250 mg, 0,529 mmol) u acetonitrilu (10 mL), dodat je (2S,6R)-2,6-dimetilmorfolin (183 mg, 1,586 mmol) i DIEA (0,138 ml, 0,793 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 60°C tokom 3 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i dalje osušena u vakuum sušnici da bi se dobio tertbutil 5-amino-2-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bistro staklasta čvrsta supstanca (360 mg). LCMS MH = 552. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0243] Faza 4: tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0,528 mmol, pretpostavljeni teorijski prinos iz prethodne faze) sipan je u suvi THF (5 mL). Izmešanom rastvoru na sobnoj temperaturi, dodat je KOtBu (0.581 ml, 0.581 mmol, 1.0 M u THF) u kapima. Dobijena mešavina (tamno žuta bistar rastvor) je mešan tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Još jedan 1.1 eq of KOtBu dodat je (0.581 ml, 0.581 mmol, 1.0 M THF) i mešavina je mešana naredan 1 sat (LCMS je naznačio da je reakcija gotova). Reakciona mešavina je ohlađena na ledu a onda transferovana u porcijama u flašicu sa 2 M mravljom kiselinom u MeCN (50 mL). Sirova reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo uljani ostatak koji je rastvoren u minimalno voda/DMF mešavina (∼2mL / 8 mL) i filtrirana, i filtrat koji sadrži sirovi proizvod je prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0,1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5 do 30% MeCN preko 12 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (55 mg, 22% prinos po fazi 3 i faza 4): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 10 min, acetonitril/0.1% H3PO4, 5.84 min (95.6%); mp: 164-166 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.00 (s, 3H, CH3), 1.02 (s, 3H, CH3), 1.52 - 1.74 (m, 2H, CHH, CHH), 1.88 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.62 - 2.71 (m, 2H, CHH, CHH), 2.83 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.44 (s, 2H, CH2N), 3.48 - 3.63 (m, 2H, 2 x CH), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, C H2O), 7.20 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.59 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 18.93, 22.33, 31.18, 45.06, 51.55, 58.89, 61.66, 69.39, 70.94, 114.96, 115.22, 127.63, 128.95, 129.80, 129.92, 133.30, 135.25, 137.69, 153.49, 167.99,<170.96, 172.81; LCMS MH = 478; Anal. izrač. za C>27<H>31<N>3<O>5<+ 0.34 H>2<O: C, 67.05; H, 6.60; N, 8.69; H>2<O,>1.27. Pronađeno: C, 67.20; H, 6.63; N, 8.52; H2O, 1.27.
5.18 3-(1-OKSO-4-((5-(PIPERIDIN-1-IL)BENZOFURAN-2-IL)METOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0245] Faza 1: Mešavina etil 5-nitrobenzofuran-2-karboksilata (5,0 g, 21,2 mmol) i 10%Pd/C (05.g) u EtOAc (300 mL) je hidrogenovana na 50 psi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana kroz celit i isprana sa EtOAc (100 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 4: 6) da bi se dobio etil 5-aminobenzofuran-2-karboksilat (4,5 g, 100% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.68 (b, 2H), 4.38-4.45 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 6.80-6.84 (dd, J = 2.4 i 9.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.35-7.36 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H).
[0246] Faza 2: N,N-diizopropiletilamin (3,8 g, 29,2 mmol) dodat je izmešanom rastvoru etil 5-aminobenzofuran-2-karboksilata (2,5 g, 12,2 mmol) i 1,5-dibromopentana (5,0 g, 21,9 mmol) u toluenu (40 mL). Dobijena mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 110°C preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana toluenom (25 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 1: 9) da bi se dobio etil 5-piperidin-1-il-benzofuran-2-karboksilat (3,0 g, 89%);<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42 (t, J = 6.2 Hz, 3H), 1.53-1.61 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 4H), 3.09-3.13 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 4.39-4.46 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 7.09-7.10 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.15-7.19 (dd, J = 2.7 i 9.3 Hz, 1H), 7.42-7.46 (m, 2H).
[0247] Faza 3: Rastvor LiAlH4/THF (1M, 11 mL, 11 mmol) u THF (10 mL) je ohlađen do 3°C. Rastvor etil 5-piperidin-1-il-benzofuran-2-karboksilata (2,9 g, 10,7 mmol) u THF (30 mL) dodat je lagano na 3-10°C. Reakciona mešavina je mešana na 3°C tokom 30 minuta, a onda je ugašena sa zas. Na2CO3 (50 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (50 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (3X40 mL). Kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran sa zas. NaHCO3 (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl23: 7) da bi se dobio (5-piperidin-1-il-benzofuran-2-il)-metanol (2,4 g, 95% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.23-1.27 (m, 2H), 1.54-1.60 (m, 4H), 2.82 (b, 1H), 3.07 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 4.68 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 6.95-7.00 (m, 2H), 7.29 (d, J = 9.0 Hz, 1H);
<13>C NMR (CDCl3) δ 24.20, 26.14, 53.10, 58.11, 104.20, 108.83, 111.19, 117.01, 128.53, 149.07, 150.30, 156.94.
[0248] Faza 4: Diizopropil azodikarboksilat (0,8 g, 4,1 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3,5 g, 4,4 mmol) u THF (40 mL) na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,8 g, 2,7 mmol) i (5-piperidin-1-il-benzofuran-2-il)-metanola (0,8 g, 3,6 mmol) u THF (60 mL) dodat je lagano na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 10 minuta, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (80 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (40 mL), vodom (2X35 mL) i slanim rastvorom (35 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((5-piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0,7 g, 51% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.55-1.59 (m, 2H), 1.72-1.77 (m, 4H), 2.31-2.39 (m, 4H), 3.08-3.11 (m, 4H), 4.40 (d, J = 18 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 18 Hz, 1H), 4.87-4.92 (dd, J = 6.0 i 9.0 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.02-7.18 (m, 3H), 7.36-7.46 (m, 2H).
[0249] Faza 5: Rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 1,5 mL, 1,5 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((5-piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0,6 g, 1,2 mmol) u THF (20 mL) na 5°C i mešan tokom 30 minuta, a onda je ugašen sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2(50 mL) i voda (15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((5-(piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,3 g, 43% prinos): mp 242-244°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.09 (m,2H), 1.50-1.64 (m, 4H), 1.90-2.02 (m, 2H), 2.49-2.51 (m, 2H), 2.80-2.95 (m, 1H), 3.03-3.07 (m, 4H), 4.25 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.05-5.15 (m, 1H), 5.37 (s, 2H), 6.97-7.09 (m, 3H), 7.35-7.51 (m, 4H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 23.78, 25.53, 31.16, 45.04, 51.51, 62.61, 107.29, 107.71, 111.12, 115.15, 116.69, 127.96, 129.78, 129.95, 133.40, 148.89, 149.23, 152.57, 152.99, 167.88, 170.93, 172.70; Izrač. za C27H27N3O5+ 0.2 H2O: C, 67.97; H, 5.79; N, 8.81.
Pronađeno: C, 67.88; H, 5.75; N, 8.62.
5.19 4-AMINO-1-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-PIRIDINIJUM FORMAT
[0250]
[0251] Piridin-4-amin (0,82 g, 8,70 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,75 g, 1,74 mmol) u DMF (15 ml) na 50°C tokom tri sata. Mešavini je dodat kalijum karbonat (0,24 g, 1,74 mmol), a mešavina je zagrevana na 75°C tokom pet sati. Mešavina je prečišćena preparativnom HPLC da bi se dobio 4-amino-1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piridinijum format kao braon čvrsta supstanca (0,20 g, 26% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4): 5.00 min (99.1%); mp: 300-302°C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 -2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.26 (s, 2H, NH2 ili CH2), 5.36 (s, 2H, CH2 ili NH2), 6.86 (d, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 7.27 - 7.58 (m, 7H, Ar), 8.22 - 8.43 (m, 4H, Ar), 11.00 (br. s., 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.15, 45.09, 51.58, 59.39, 69.00, 109.56, 115.00, 115.36, 128.12, 128.32, 129.85, 129.94, 133.29, 135.35, 137.21, 142.93, 153.31, 158.57, 158.67, 168.02, 170.89, 172.80; LCMS M = 457; Anal. Izrač. za C26H25N4O4 HCOO: C, 64.53; H, 5.22; N, 11.15; Pronađeno: C, 56.18; H, 5.07; N, 10.01.
5.20 3-(1-OKSO-4-((5-PIPERIDIN-1-ILMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0252]
[0253] Faza 1: Piperidin (1,2 g, 14,1 mmol) dodat je izmešanom rastvoru etil 5-formilbenzofuran-2-karboksilata (1,5 g, 6,9 mmol) u metanolu (60 mL). Molekulsko sito (1,5 g) je dodato, a zatim sirćetna kiselina (0,4 g, 6,9 mmol) i natrijum cijanoborohidrid (0,7 g, 10,3 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metanolom (40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(35 mL) i slanim rastvorom (35 mL), i osušen (K2CO3). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-karboksilne kiseline etil estar (1,0 g, 49% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.40-1.48 (m, 3H), 1.57-1.64 (m, 4H), 2.44 (b, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.97-3.98 (m, 2H), 4.40-4.47 (q, 2H), 7.40-7.63 (m, 4H).
[0254] Faza 2: Rastvor etil estra 5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-karboksilne kiseline (1,0 g, 3,4 mmol) u THF (15 mL0 dodat je lagano izmešanom rastvoru LiAlH4/THF (1M, 4,4 mL, 4,4 mmol) u THF (10 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na 5°C tokom 30 minuta, a onda je ugašena sa zas. Na2CO3(50 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (50 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (2X30 mL).
Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen.
Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio (5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (0,5 g, 63% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.45-1.46 (m, 2H), 1.55-1.62 (m, 4H), 2.40 (s, 4H), 3.46 (s, 1H), 3.52 (s, 2H), 4.71 (s, 2H), 6.55 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H).
[0255] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (0,6 g, 3,1 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (2,5 g, 3,1 mmol) u THF (40 mL) na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,6 g, 2,0 mmol) i (5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanola (0,5 g, 2,0 mmol) u THF (40 mL) dodat je lagano na 3-6°C. Reakciona mešavina je mešana na 3°C tokom 5 minuta potom zagrejana do sobne temperature preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (30 mL), vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((5-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0,6 g, 56% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42-1.46 (m, 2H), 1.53-1.60 (m, 4H), 2.12-2.45 (m, 8H), 3.55 (s, 2H), 3.62 (s, 3H), 4.40 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.87-4.92 (dd, J = 5.7 i 8.7 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 5.47 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 7.15-7.18 (dd, J = 2.1 i 6.6 Hz, 1H), 7.26-7.32 (m, 1H), 7.40-7.51 (m, 4H).
[0256] Faza 4: Mešavina metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((5-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0,6 g, 1,1 mmol) i K2CO3(0,2 g, 1,1 mmol) u DMF (10 mL) je zagrejana u uljanom kupatilu na 80°C tokom 3 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana ,a ostatak je mešan sa vodom (10 mL) i EtOAc (10 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i resuspendovana u acetonu (10 mL) i heksanu (10 mL) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((5-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,2 g, 50% prinos): mp 202-204°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.46-1.47 (m, 6H), 1.96-2.00 (m, 1H), 2.31-2.58 (m, 6H), 2.84-2.96 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.06-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 7.07 (s, 1H), 7.23-7.27 (dd, J = 1.5 i 8.4 Hz, 1H), 7.34-7.37 (dd, J = 0.9 i 6.9 Hz, 1H), 7.46-7.53 (m, 4H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.25, 23.98, 25.50, 31.16, 45.03, 51.55, 53.74, 62.55, 62.70, 107.05, 110.68, 115.13, 115.65, 121.39, 125.89, 127.42, 129.81, 129.94, 133.41, 152.72, 152.97, 153.74, 167.88, 170.93, 172.79; Izrač. za C28H29N3O5: C, 68.98; H, 6.00; N, 8.62. Pronađeno: C, 68.67; H, 6.03; N, 8.53.
5.21 TERT-BUTIL 4-(4-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)FENIL) PIPERIDIN-1-KARBOKSILAT
[0258] Faza 1: BH3·THF (2,88 ml, 2,88 mmol, 1,0 M u THF) dodat je u kapima rastvoru 4-(1-(tertbutoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeve kiseline (800 mg, 2,62 mmol) u THF (10 ml) na 0°C. Nakon 15 minuta, ledeno kupatilo je uklonjeno i bistar rastvor je ostavljen da se meša preko noći (∼17 sati).
Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa H2O (25 mL). EtOAc (100 mL) je dodat i mešavina je isprana sa 1 N NaHCO3 (∼40 mL) i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), i koncentrovana u vakuumu. Uljani ostatak je rastvoren u dihlorometanu i koncentrovan ponovo, a onda osušen u vakuum sušnici na 40°C da bi se dobio tert-butil 4-(4-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilat kao bistro ulje (707 mg, 93% prinos). Ulje je očvrsnulo usled stajanja i korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. LCMS MH = 292, 218;<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 1.48 (s, 9H, tBu), 1.56 - 1.72 (m, 3H, CHH, CHH, OH), 1.75 - 1.89 (m, 2H, CHH, CHH), 2.53 - 2.71 (m, 1H, CH), 2.73 - 2.92 (m, 2H, CHH, CHH), 4.17 - 4.32 (m, 2H, CHH, CHH), 4.67 (d, J = 5.9 Hz, 2H, CH2), 7.21 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.32 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar);<13>C NMR (HLOROFORM-d) δ 28.50, 33.22, 42.49, 65.21, 77.22, 79.47, 127.02, 127.34, 138.96, 145.40. Karbamat ugljenični signal nije primećen.
[0259] Faza 2: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,7 g, 1,96 mmol) u THF (25 ml), dodat je trifenilfosfin na polistirenu (1,6 gm/mmol, 1,845 g, 2,95 mmol). Smola je ostavljena da nabubri nekoliko minuta na sobnoj temperaturi, a onda je reakciona mešavina ohlađena u ledenom kupatilu na 0°C. DIAD (0,574 ml, 2,95 mmol) je dodat u kapima uz mešanje. Nakon oko 15 minuta, tert-butil 4-(4-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilat (0,70 g, 2,40 mmol) dodat je kao rastvor u suvom THF (5 mL). Nakon oko 10 minuta, ledeno kupatilo je uklonjeno i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Reakciona mešavina je usisno filtrirana i smola je isprana sukcesivno dihlorometanom, a onda MeOH (3x ciklusi širenje/skupljanje). Nakon konačnog MeOH ispiranja, kombinovani filtrat je koncentrovan u vakuumu. Uljani ostatak je podeljen između EtOAc (∼200 mL) i Na2CO3 (zas. -70 mL). EtOAc sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila pena koja je čuvana u vakuum sušnici na 40°C preko noći da bi se dobio tert-butil 4-(4-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)piperidin-1-karboksilat) (1,9 g, pretpostavljeni teorijski prinos). Dobijena pena je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0260] Faza 3: KOtBu (0,722 mL, 0,722 mmol, 1,0 M u THF) dodat je u kapima rastvoru tert-butil 4-(4-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)piperidin-1-karboksilata (400 mg, 0,408 mmol) u suvom THF (5 mL) na sobnoj temperaturi. Više KOtBu (0,722 mL, 0,722 mmol) dodato je reakcionoj mešavini nakon 2,5 sata i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi. Nakon oko 20 minuta, mešavina je preneta u hladnu 0,5 N aq. HCl (∼50 mL). Dodat je EtOAc (250 mL) i mešavina je preneta u levak za razdvajanje. EtOAc sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu i ostatak je osušen dalje u vakuum sušnici da bi se dobilo 380 mg svetlo braon ulja. Sirovi proizvod je rastvoren u minimalno DMF (∼10 mL) i prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0,1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 30 do 80% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio tertbutil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)piperidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca (84 mg, 39% prinos za fazu 2 i fazu 3): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 60/40 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.76 min (98.7%); mp: 214-216 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.44 (m, 9H, tBu), 1.44 - 1.58 (m, 2H, 2 X CHH), 1.72 (br. s., 2H, CHH, CHH), 1.87 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.99 (m, 5H, 5 X CHH), 3.89 - 4.14 (m, 2H, 2 X CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.18 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.37 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 28.07, 31.18, 32.66, 41.35, 43.89, 45.06, 51.55, 69.35, 78.53, 114.90, 115.16, 126.81, 127.95, 129.78, 129.92, 133.28, 134.39, 145.62, 153.48, 153.86, 167.99, 170.97, 172.84; LCMS MH = 534; Anal. izrač. za C30H35N3O6+ 1.5 H2O: C, 64.27; H, 6.83; N, 7.49. Pronađeno: C, 64.22; H, 6.72; N, 7.36.
5.22 3-(1-OKSO-4-(4-(PIPERIDIN-4-IL)BENZILOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HLOROVODONIK
[0261]
[0262] 2 N HCl (10 mL, 20,00 mmol) u Et2O dodat je tert-butil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)piperidin-1-karboksilatu (54 mg, 0,101 mmol). Reakcioni balon je podvrgnut sonikaciji da bi se oslobodio čvrste supstance koja prijanja na zid balona, i dobijena suspenzija je zatvorena i mešana na sobnoj temperaturi. Nakon oko 4 sata, LCMS je naznačio da je reakcija gotova.
Reakciona mešavina je razblažena dodatnim Et2O i potom filtrirana kroz porozni levak uvlačenjem.
Zaostala čvrsta supstanca u reakcionom balonu je preneta u levak i isprana dodatnim Et2O. Kolač je osušen u vakuum sušnici na 40°C da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(piperidin-4-il)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao paperjasta beličasta čvrsta hidrohloridna so (47 mg, 99% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 acetonitril/0.1% H3PO4, 3.62 min (96.0%); mp: 280-282 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.67 - 2.12 (m, 5H, 5 X CHH), 2.32 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.76 - 3.08 (m, 4H, 4 X CHH), 3.26 - 3.46 (m, 2H, 2 X CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, C H2O), 7.26 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 8.48 - 9.01 (m, 2H, 2 X NH), 10.96 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 29.30, 31.18, 43.48, 45.03, 51.55, 69.28, 114.94, 115.22, 126.61, 128.08, 129.80, 129.92, 133.28, 134.86, 144.42, 153.45, 167.97, 170.96, 172.81.1 ugljenični signal nije primećen zbog preklapanja sa DMSO-d6; LCMS MH = 434; Anal. izrač. za C25H27N3O4 2 HCl 1.7 H2O: C, 55.91; H, 6.08; N, 7.82. Pronađeno: C, 55.84; H, 5.82; N, 7.70.
5.23 3-{4-[4-(3-MORFOLIN-4-IL-PROPIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0263]
[0264] Faza 1: (Trifenilfosforaniliden)acetaldehid (500 mg, 1,64 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 4-formilbenzoata (2,0 g, 12,18 mmol) u tetrahidrofuranu (50mL). Reakciona mešavina je zagrevana u refluksu tokom dva sata pre nego što je dodat (trifenilfosforaniliden)acetaldehid (500 mg, 1,64 mmol) reakcionoj mešavini. Reakciona mešavina je držana u refluksu tokom 21 sata, a onda je (trifenilfosforaniliden)acetaldehid (3,5 g, 11,45 mmol) dodat reakcionoj mešavini koja je držana u refluksu tokom 8 sati. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (80 mL) i potom isprana sa NH4Cl (zas.
40 mL), vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) respektivno. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan da bi se dobila tamna čvrsta supstanca. Tamna čvrsta supstanca je suspendovana u dietil etru (50 mL) i filtrirana kroz celit i čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (50mLx3). Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom sa silikom da bi se dobio metil estar 4-(3-okso-propenil)-benzojeve kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (1,04 g, 33% prinos); LCMS MH = 191;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.88 (s, 3H, CH3), 6.97 (dd, J = 7.6, 16.0 Hz, 1H, CH), 7.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H, CH), 7.90 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ar), 8.02 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 9.72 (d, J = 7.6 Hz, 1H, CHO).
[0265] Faza 2: Morfolin (0,715 ml, 8,20 mmol) je dodat izmešanom rastvoru (E)-metil 4-(3-oksoprop-1-enil)benzoata (520 mg, 2,73 mmol). U bistar rastvor dodata su molekulska sita (2,2g) i sirćetna kiselina (0,157 ml, 2,73 mmol). Nakon trideset minuta, natrijum cijanoborohidrid (258 mg, 4,10 mmol) dodat je gore pomenutoj žutoj reakcionoj suspenziji. Reakcija je završena za 15 minuta na sobnoj temperaturi. U reakcionu mešavinu kombinovanu sa drugom šaržom reakcije započetoj sa (E)-metil 4-(3-oksoprop-1-enil)benzoat) (512 mg) dodata je voda (2 mL) i mešana je tokom 10 minuta pre nego što je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan i prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-(3-morfolin-4-il-propenil)-benzojeve kiseline kao žuta tečnost (550mg, 39% prinos); LCMS MH = 262.
[0266] Faza 3: Paladijum na ugljeniku (120 mg, 0,056 mmol) dodat je izmešanom rastvoru (E)-metil 4-(3-morfolinoprop-1-enil)benzoata (710 mg, 2,72 mmol) u MeOH (20 mL). Reakcioni balon je zatvoren i vakumiran. Reakcija napunjena sa H2 (1atm) je mešana na sobnoj temperaturi i reakcija je završena za 1 sat. Reakciona mešavina kombinovana sa drugom šaržom reakcije započetoj sa (E)-metil 4-(3-morfolinoprop-1-enil)benzoatom (50mg) filtrirana je kroz celit. I čvrsta supstanca je isprana sa MeOH (20 mL x 3). Filtrat je koncentrovan i prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-(3-morfolin-4-il-propil)-benzojeve kiseline kao bistra čvrsta supstanca (690mg, 90% prinos) i jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 264.
[0267] Faza 4: LiAlH4 (1,3 mL, 2,62 mmol) u THF(2 M) rastvor dodat je izmešanom rastvoru metil 4-(3-morfolinopropil)benzoata (690 mg, 2,62 mmol) u tetrahidrofuranu (25 mL) ispod -78°C u kapima.
Reakciona mešavina je mešana ispod - 78°C tokom 30 minuta, a onda joj je omogućeno da se ohladi do 0°C lagano. Nakon dva sata, reakciona mešavina je ohlađena do -78°C i 1,3mL LiAlH4(2M u THF) dodat je reakcionoj mešavini. I hladno kupatilo je uklonjeno nakon dodavanja i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, i reakcija je završena. Reakcionoj mešavini su dodati NaOH(0,6 mL, 10 N) i voda (0,4 mL). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta pre nego što je isfiltrirana kroz celit. Čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc(40 mLx4) i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio [4-(3-morfolin-4-il-propil)-fenil]-metanol kao bistro ulje(600 mg, 97% sirovi prinos) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 236.
<[0268] Faza 5: Polimer vezani PPh>3<(727 mg, 2,77 mmol, 1,6 mmol/g) dodat je izmešanoj suspenziji metil>5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 1,540 mmol) u THF(17 mL) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 20 minuta pre dodavanja DIAD (0,539 ml, 2,77 mmol) u kapima. Dobijena reakciona mešavina je mešana tokom 20 minuta, pa je dodat (4-(3-morfolinopropil)fenil)metanol (471 mg, 2,001mmol) u THF(3 mL) mešavini. Nakon trideset minuta, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata pre nego što je reakcija prestala da napreduje. Reakciona mešavina kombinovana sa drugom šaržom reakcije započetoj sa metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (100 mg) je filtriran i isprana dihlorometanom(25 mL x 6). Filtrat je koncentrovan i prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao staklasta čvrsta supstanca (450 mg, 47% prinos); LCMS MH = 510;<1>H NMR (DMSO-d6) d 1.72 (quin, J = 7.5 Hz, 2H, CH2), 2.00 - 2.21 (m, 2H, CHH, CHH), 2.21 - 2.40 (m, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 2.60 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.52 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 4.31 - 4.45 (m, 1H, CHH), 4.45 - 4.61 (m, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.11 - 7.32 (m, 5H, Ar, NH), 7.35 - 7.49 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NH).
[0269] Faza 6: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(3-morfolinopropil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (400 mg, 0,785 mmol) u tetrahidrofuranu (18 mL) na 0°C, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (88 mg, 0,785mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 1,5 sata i reakcija je završena. Hladna reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (30mL), nakon čega je usledilo dodavanje HCl (aq, 1N, 1mL), NaHCO3(zas.0,6 mL) i slanog rastvora (3 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (5mL). Organski sloj je kombinovan sa organskim slojem iz druge šarže reakcione mešavine započete sa metil 5-amino-4-(4-(4-(3-morfolinopropil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (50 mg). Mešavina je osušena sa MgSO4 i koncentrovana da bi se dobila čvrsta supstanca (460mg). Čvrsta supstanca je pretvorena u prah u etru (15 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (165 mg, 41% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.0min (97%); mp: 190-192°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.71 (quin, J = 7.5 Hz, 2H, CH2), 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.21 - 2.36 (m, 6H, M01), 2.39 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.59 (t, J = 7.6 Hz, 3H, CHH, CH2), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.50 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 4.19 - 4.30 (m, 1H, CHH), 4.33 -4.48 (m, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.32 (d, J = 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.39 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.43 - 7.55 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 27.72, 31.16, 32.53, 45.07, 51.56, 53.28, 57.52, 66.17, 69.45, 114.97, 115.16, 127.79, 128.39, 129.77, 129.93, 133.27, 133.87, 141.92, 153.49, 168.00, 170.95, 172.81; LCMS MH = 478; Anal. izrač. za C27H31N3O5+ 1 H2O 0.26 Etar : C, 65.42; H, 6.97; N, 8.16; Pronađeno: C, 65.41; H, 6.77; N, 8.19.
5.24 3-(1-OKSO-4-((6-PIPERIDIN-1-ILMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0271] Faza 1: Mešavina 2-hidroksi-4-metilbenzaldehida (4,6 g, 33,9 mmol), etil 2-bromoacetata (5,7 g, 33,9 mmol), K2CO3(7,0g, 50,9 mmol) i molekulskog sita (4,6 g) u DMF (40 mL) je zagrejana na 85°C tokom 2 sata a zatim na 120°C tokom 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažena sa EtOAc (100 mL). Mešavina je isfiltrirana, i filtrat je ispran vodom (3X50 mL) i slanim rastvorom (50 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc:Heksan = 1:9) da bi se dobio etil 6-metilbenzofuran-2-karboksilat (3,1 g, 44% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.32-4.39 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 7.35-7.58 (m, 2H), 7.66-7.70 (m, 2H).
[0272] Faza 2: N-bromosukcinimid (5,6 g, 31,5 mmol) dodat je izmešanom rastvoru etil 6-metilbenzofuran-2-karboksilata (3,1 g, 15,0 mmol) u CCl4 (50 mL). Dobijena mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 70°C sa sijalicom od 300W koja je sijala tokom 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAC: Heksan = 1:9) da bi se dobio etil 6-(bromometil)benzofuran-2-karboksilat (2,8 g, 66% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.86 (s, 2H), 7.40-7.45 (m, 1H), 7.76-7.84 (m, 3H).
[0273] Faza 3: Mešavina piperidina (1,0 g, 11,3 mmol), K2CO3 (3,6 g, 26 mmol) i 18-kruna-6 (katalitička količina) u acetonu (10 mL) je zagrejana u uljanom kupatilu na 60°C. Rastvor etil 6-(bromometil)benzofuran-2-karboksilata (2,0 g, 7,1 mmol) u acetonu (10 mL) dodat je u kapima i mešavina je mešana u uljanom kupatilu na 60°C tokom 3 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom (2X35 mL) i slanim rastvorom (35 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio etil 6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-karboksilat (1,5 g, 73% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.40-1.46 (m, 5H), 1.53-1.61 (m, 4H), 2.37-2.40 (m, 4H), 3.59 (s, 2H), 4.40-4.47 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 7.26-7.30 (m, 1H), 7.49 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.56-7.60 (m, 2H).
[0274] Faza 4: Rastvor etil 6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-karboksilata (1,5 g, 5,2 mmol) u THF (20 mL) dodat je lagano izmešanom rastvoru LiAlH4/THF (1M, 6,7 mL, 6,7 mmol) u THF (10 mL) na 3-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na 3°C tokom 30 minuta, a onda je ugašena sa zas. Na2CO3(50 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2 (50 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (3X40 mL).
Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio [6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il]metanol (0,9 g, 68% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.41-1.46 (m, 2H), 1.54-1.61 (m, 4H), 2.39 (m, 4H), 3.56 (s, 2H), 4.72 (s, 2H), 6.60 (s, 1H), 7.14-7.17 (dd, J = 1.2 i 7.8 Hz, 1H), 7.42-7.47 (m, 2H);<13>C NMR (CDCl3) δ 24.34, 25.83, 54.42, 57.92, 63.95, 103.88, 111.95, 120.36, 124.36, 127.09, 135.02, 155.38, 156.71.
[0275] Faza 5: Diizopropil azodikarboksilat (0,8 g, 4,0 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3,4 g, 4,3 mmol) u THF (40 mL) na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,8 g, 2,7 mmol) i [6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il]metanola (0,9 g, 3,5 mmol) u THF (60 mL) je dodat lagano na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3°C tokom 5 minuta, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(40 mL), vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0,9 g, 64%).
[0276] Faza 6: Mešavina metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0,9 g, 1,7 mmol) i K2CO3 (0,2 g, 1,7 mmol) u DMF (10 mL) je zagrevana u uljanom kupatilu na 80°C tokom 2,5 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je mešan sa vodom (20 mL) i EtOAc (10 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i resuspendovana vrućim acetonom (10 mL) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,19 g, 22% prinos): mp 216-218°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39-1.49 (m, 6H), 1.95-1.99 (m, 1H), 2.33-2.58 (m, 6H), 2.86-2.94 (m, 1H), 3.53 (s, 2H), 4.25 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 6 i 15 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.22 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.49-7.59 (m, 4H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 23.92, 25.47, 31.16, 45.04, 51.55, 53.74, 62.52, 62.70, 107.01, 111.17, 115.09, 115.63, 120.86, 124.05, 126.34, 129.80, 129.93, 133.41, 135.94, 152.41, 152.97, 154.73, 167.88, 170.92, 172.79; Izrač. za C28H29N3O5+ 0.8 H2O: C, 67.00; H, 6.14; N, 8.37. Pronađeno: C, 66.96, H, 5.96, N, 8.03.
5.25 3-(4-((1-METIL-1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-I1)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0278] Faza 1: Mešavina N-metil 1,2-fenilenediamina (5,4 g, 44,0 mmol) i glikolne kiseline (5,0 g, 66,0 mmol) u 4N HCl (50 mL) je refluksovana tokom 45 minuta, a onda ohlađena do sobne temperature. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je razblažen vodom (100 mL). Mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu uz energično mešanje i neutralizovana čvrstim natrijum bikarbonatom pažljivo. Čvrsta supstanca je prikupljena i rekristalizovana iz 1,4-dioksana (40 mL) da bi se dobio (1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metanol (5,7 g, 80% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.82 (s, 3H, N-CH3), 4.70 (d, J = 5.7 Hz, 2H, CH2O), 5.75 (t, J = 5.7 Hz, 1H, OH), 7.14-7.26 (m, 2H, Ar), 7.50-7.57 (m, 2H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 29.75, 56.39, 109.83, 118.85, 121.28, 122.01, 136.02, 141.77, 153.90.
[0279] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (1,0 g, 4,9 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,7 g, 2,5 mmol), (1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metanola (0,6 g, 3,7 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (1,6 g, 4,9 mmol) u THF (150 mL) na sobnoj temperaturi. Nakon dodavanja, mešavina je mešana tokom 2 sata. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-2-(4-((1-metil-1H-benz0[d]imidazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0,7 g, 60%).
[0280] Faza 3: Kalijum t-butoksid/THF (1M, 1,5 mL, 1,5 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-2-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,7 g, 1,5 mmol) u THF (30 mL) i DMF (10 mL). Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (30 mL). Mešavina je mešana sa metilen hloridom (30 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan metilen hloridom (2X35 mL).
Kombinovani organski rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa vodom (20 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i resuspendovana etrom (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,3 g, 42%) kao bela čvrsta supstanca: mp 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94-1.99 (m, 1H), 2.39-2.59 (m, 2H), 2.86-2.90 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.28 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.06-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.57 (s, 2H), 7.22 (dt, J = 1.1 i 7.3 Hz, 1H), 7.30 (dt, J = 1.3 i 8.1 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 4.3 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 3.8 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 30.30, 31.13, 44.99, 51.56, 62.87, 110.26, 115.17, 115.76, 119.29, 121.78, 122.74, 129.83, 129.95, 133.40, 135.98, 141.70, 149.16, 152.91, 167.84, 170.88, 172.79; Izrač. za C22H20N4O4 0.1 H2O: C, 65.05; H, 5.01; N, 13.79. Pronađeno: C, 65.01; H, 5.08; N, 13.58.
5.26 TERT-BUTIL ESTAR 4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-PIPERIDIN-1-KARBOKSILNE KISELINE (referentni primer)
[0281]
[0282] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 1,76 g, 2,19 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,29 g, 1,01 mmol) u THF (15mL) na 0°C, nakon čega je dodat diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (0,44 ml, 2,19 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je tert-butil estar 4-hidroksimetil-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,43 g, 2,00 mmol). Mešavina je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), a onda metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 60 min) da bi se dobio tert-butil estar 4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline kao bistro ulje (0,27 g, 55% prinos).
[0283] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0,06 g, 0,55 mmol) dodat je izmešanom rastvoru tert-butil estra 4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,27 g, 0,55 mmol) u THF (10 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina je ugašena sa 1N HCl (2 ml) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8). Mešavina je isprana etil acetatom (3x20 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene, a onda prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio tert-butil estar 4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (0,15 g, 60% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 50/50 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 3.81 min (96.5%); mp: 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.07 - 1.29 (m, 2H, CH2), 1.40 (s, 9H, (CH3)3), 1.71 - 1.83 (m, 2H, CH2), 1.87 -2.06 (m, 2H, CHH, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.66 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.92 - 4.07 (m, 4H, CH2CH2), 4.17 - 4.45 (m, 2H, ArCH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.30 (d, J = 7.4 Hz, 1H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 28.09, 28.14, 31.20, 35.28, 43.11(brs zbog rotamera), 44.94, 51.55, 71.97, 78.50, 114.51, 114.98, 129.74, 129.84, 133.21, 153.73, 153.89, 168.03, 170.99, 172.83; LCMS MH = 358; Anal. izrač. za C24H31N3O6 0.1 H2O: C, 62.76; H, 6.85; N, 9.15; Pronađeno: C, 62.75; H, 6.92; N, 8.90.
5.27 3-[1-OKSO-4-(PIPERIDIN-4-ILMETOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0284]
[0285] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 1,76 g, 2,19 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0,29 g, 1,01 mmol) u THF (15mL) na 0°C, nakon čega je dodat diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (0,44 ml, 2,19 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je tert-butil estar 4-hidroksimetil-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,43 g, 2,00 mmol). Mešavina je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a potom je filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), a onda metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 60 min) da bi se dobio tert-butil estar 4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline kao bistro ulje (0,27 g, 55% prinos).
[0286] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0,060 g, 0,55 mmol) dodat je izmešanom rastvoru tert-butil estra 4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,27 g, 0,55 mmol) u THF (10 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina je ugašena sa 1N HCl (2 ml) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8). Mešavina je isprana etil acetatom (3x20 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene, a onda prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio tert-butil estar 4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (0,15 g, 60% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 50/50 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 3.81 min (96.5%); mp: 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.07 - 1.29 (m, 2H, CH2), 1.40 (s, 9H, (CH3)3), 1.71 - 1.83 (m, 2H, CH2), 1.87 -2.06 (m, 2H, CHH, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.66 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.92 - 4.07 (m, 4H, CH2CH2), 4.17 - 4.45 (m, 2H, ArCH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.30 (d, J = 7.4 Hz, 1H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 28.09, 28.14, 31.20, 35.28, 43.11(brs zbog rotamera), 44.94, 51.55, 71.97, 78.50, 114.51, 114.98, 129.74, 129.84, 133.21, 153.73, 153.89, 168.03, 170.99, 172.83; LCMS MH = 358; Anal. izrač. za C24H31N3O6 0.1 H2O: C, 62.76; H, 6.85; N, 9.15; Pronađeno: C, 62.75; H, 6.92; N, 8.90.
[0287] Faza 3: 2 M HCl/etar (20 mL) dodato je izmešanom rastvoru tert-butil estra 4-[2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-piperidin-1-karboksilne kiseline (0,090 g, 0,196 mmol) u dihlorometanu (3 mL). Mešavina je mešana tokom tri sata i filtrirana, a zatim je osušena da bi se dobio 3-[1-okso-4-(piperidin-4-ilmetoksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (0,076 g, 98% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 9/91 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 6.22 min (98.0%); mp: 298-300°C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.43 - 1.66 (m, 2H, CH2), 1.83 - 2.20 (m, 3H, CH2, CHH), 2.32 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.58 (d, J = 16.8 Hz, 1H, CHH), 2.80 - 3.02 (m, 2H, CH2), 3.19 - 3.44 (m, 2H, CH2), 4.02 (d, J = 6.2 Hz, 2H, OCH2), 4.16 - 4.48 (m, 2H, ArCH2), 5.13 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 7.26 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ar), 7.32 (d, J = 7.4 Hz, 1H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 1H, Ar), 8.69 (d, J = 3.4 Hz, 2H, NH2Cl), 10.99 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.49, 25.00, 31.18, 33.00, 42.60, 44.91, 51.55, 71.39, 114.60, 115.13, 129.72, 129.88, 133.22, 153.60, 168.01, 171.02, 172.85; LCMS MH = 358; Anal. izrač. za C19H24N3O4Cl 1.0 H2O: C, 55.41; H, 6.36; N, 10.20; Cl, 8.61; Pronađeno: C, 55.72; H, 6.16; N, 9.82; Cl, 8.69.
5.28 3-[1-OKSO-4-(TETRAHIDRO-PIRAN-3-ILMETOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0288]
[0289] Faza 1: Polimerom vezan trifenilfosfin (1,6 g, 2,06 mmol, 1,25 mmol/g) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1, 3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (300 mg, 1,03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DIAD (412 mg, 2,06 mmol). Nakon petnaest minuta, (tetrahidro-piran-3-il)-metanol (239 mg, 2,06 mmol) je dodat mešavini. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 sati i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dihlorometanom (6 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bistro ulje (256mg, 64% prinos): LCMS MH = 391.
[0290] Faza 2: KOtBu (72 mg, 0,64 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (250 mg, 0.0.64 mmol) u tetrahidrofuranu (18 mL) na 0 °C. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i reakciji je dodata HCl (aq.0,1N, 6 mL) nakon čega je usledilo dodavanje vode (10 mL). Mešavina je ekstrahovana dihlorometanom (2x 20 mL). Organski slojevi su osušeni pomoću MgSO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom i prep HPLC da bi se dobio 3-[1-okso-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (36 mg, 16% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70, (acetonitril/0.1% H3PO4): tR = 4.5(100%); mp: 118-120°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.25 - 1.72 (m, 3H, CH2, CHH), 1.79 - 1.92 (m, 1H, CHH), 1.92 - 2.09 (m, 2H, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.74 - 3.10 (m, 1H, CHH), 3.66 - 3.81 (m, 1H, CHH), 3.83 - 4.08 (m, 3H, CH2, CHH), 4.13 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.31 (d, J = 7.0 Hz, 1H, Ar), 7.43 -7.53 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH) * dva protona su preklopljena sa DMSO's Me pikom i potvrđeno je pomoću HMQC;<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.32, 24.59, 25.42, 31.16, 35.42, 44.90, 51.53, 67.48, 69.26, 69.44, 114.45, 115.00, 129.73, 129.81, 133.07, 153.43, 167.98, 170.99, 172.83; LCMS MH = 359; Anal. Izrač. za C19H22N2O5 0.57 H2O 0.015CH2Cl2 0.04HCOOH : C, 61.56; H, 6.3; N, 7.53; Pronađeno : C, 61.16; H, 5.9; N, 7.35.
5.29 3-(4-((1-METIL-1H-INDAZOL-3-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0291]
[0292] Faza 1: Jodometan (10,9 g, 77,1 mmol) dodat je lagano izmešanoj mešavini 1H-indazol-3-karboksilne kiseline (5,0g, 30,8 mmol) i kalijum karbonata (12,8g, 92,5 mmol) u DMF (30 mL). Dobijena mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 50°C tokom 4 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i sipana u ledenu vodu (200 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (4X50 mL) i kombinovani EtOAc rastvor je ispran vodom (3X40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen (MgSO4). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 2:8) da bi se dobio metil 1-metil-1H-indazol3-karboksilat (3,9 g, 66% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.93 (s, 3H), 4.17 (s, 3H), 7.33-7.38 (ddd, J = 1.8, 6.9 i 8.1 Hz, 1H), 7.48-7.53 (ddd, J = 1.1, 6.9 i 8.4 Hz, 1H), 7.77-7.80 (td, J = 0.8 i 8.5 Hz, 1H), 8.06-8.09 (td, J = 1.0 i 8.2 Hz, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 36.26, 51.54, 110.75, 120.99, 122.75, 123.10, 126.61, 133.25, 140.64, 162.28.
[0293] Faza 2: Rastvor metil 1-metil-1H-indazol-3-karboksilata (3,8 g, 20,0 mmol) u etru (100 mL) je ohlađen do 5°C. Rastvor LiBH4/THF (2M, 15,0 mL, 30 mmol) dodat je lagano na 5-10°C. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2,5 sata, a onda je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (30 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(50 mL) i kombinovani organski rastvor je ispran vodom (2X40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 4: 6) da bi se dobio (1-metil-1H-indazol-3-il)-metanol (2,8 g, 86% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.98 (s, 3H), 4.79 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 5.24 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.09-7.14 (dt, J = 0.9 i 6.0 Hz, 1H), 7.35-7.40 (dt, J = 1.2 i 6.0 Hz, 1H), 7.54-7.58 (dt, J = 9.0 i 0.6 Hz, 1H), 7.83-7.86 (dt, J = 9.0 i 0.9 Hz, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 34.96, 56.43, 109.39, 119.71, 120.72, 121.90, 125.91, 140.58, 144.42.
[0294] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (1,3 g, 6,4 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9g, 3,2 mmol), (1-metil-1H-indazol-3-il)-metanol (0,8 g, 4,8 mmol), i trifenilfosfina vezanog za polimer (2,1 g, 6,4 mmol) u THF (60 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((1-metil-1H-indazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0,5 g, 36%).
[0295] Faza 4: Rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 0,9 mL, 0,9 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-((1-metil-1H-indazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,4 g, 0,9 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 5 minuta, a potom je zagrevana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa zas. NH4Cl (10 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(50 mL) i vodom (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom<(40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO>2<, CH>3<OH: CH>2<Cl>2<3:>97) da bi se dobio 3-(4-((1-metil-1H-indazol-3-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-dion (0,2 g, 51% prinos): mp 14-142°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93-1.97 (m, 1H), 2.38-2.57 (m, 2H), 2.84-2.88 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 4.21 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.04-5.10 (dd, J = 4.8 i 13.2 Hz, 1H), 5.56 (s, 2H), 7.14-7.19 (dt, J = 0.6 i 6.9 Hz, 1H), 7.31-7.34 (dd, J = 3.9 i 4.8 Hz, 1H), 7.30-7.45 (dt, J = 3.9 i 4.8 Hz, 1H), 7.39-7.45 (dt, J = 0.9 i 6.6 Hz, 1H), 7.50-7.52 (m, 2H), 7.63 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 10.93 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.24, 31.15, 35.32, 45.08, 51.56, 63.13, 109.88, 115.10, 115.32, 120.06, 120.67, 122.15, 126.28, 129.78, 129.90, 133.30, 139.14, 140.58, 153.45, 167.92, 170.91, 172.77; Izrač. za C22H20N4O4: C, 65.34; H, 4.98; N, 13.85. Pronađeno: C, 64.96; H, 4.96; N, 13.74.
5.30 3-(4-((3-METILBENZOFURAN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0296]
[0297] Faza 1: Boran/THF (1M, 22,7 mL, 22,7 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru 3-metilbenzofuran-2-karboksilne kiseline (2 g, 11,4 mmol) u THF (30 mL) na 5-7°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta, a potom je zagrejana do sobne temperature tokom 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (15 mL) lagano. Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(35 mL) i vodom (15 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(2X35 mL).
Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (25 mL) i slanim rastvorom (25 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2) da bi se dobio (3-metil-benzofuran-2-il)-metanol (1,4 g, 78%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.21 (s, 3H), 4.56 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.29 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.20-7.31 (m, 2H), 7.47-7.56 (m, 2H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 7.46, 53.83, 110.71, 111.33, 119.48, 122.20, 124.14, 129.51, 152.98, 153.27.
[0298] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (1,3 g, 6,2 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-okso-pentanoata (0,9 g, 3,1 mmol), (3-metil-benzofuran-2-il)-metanola (0,8 g, 4,6 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2,1 g, 6,2 mmol) u THF (60 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((3-metil-benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-oksopentanoat (1,0 g , 72%).
[0299] Faza 3: Rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2,2 mL, 2,2 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-((3-metil-benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1,0 g, 2,2 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 5 minuta, a potom je zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 1N HCl (10 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(50 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-((3-metilbenzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,5 g, 60% prinos): mp 210-212°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-1.98 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.27-2.57 (m, 2H), 2.83-2.90 (m, 1H), 4.23 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.06-5.12 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 7.25-7.37 (m, 3H), 7.45-7.48 (dd, J = 0.6 i 8.1 Hz, 1H), 7.51-7.56 (dt, J = 0.9 i 8.1 Hz, 2H), 7.61-7.63 (dd, J-0.9 i 7.8 Hz, 1H), 10.94 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 7.55, 22.25, 31.16, 45.04, 51.54, 60.93, 111.04, 115.23, 115.64, 119.98, 122.60, 125.08, 128.95, 129.81, 130.00, 133.38, 147.64, 153.17, 153.68, 167.89, 170.82, 170.91, 172.78; Izrač. za C23H20N2O5: C, 68.31; H, 4.98; N, 6.93. Pronađeno: C, 68.09; H, 5.00; N, 6.81.
5.31 3-(1-OKSO-4-(PIRIDIN-2-ILMETOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer) [0300]
[0301] Mešavini trifenilfosfina na polimernom nosaču (0,63 g, 1,88 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,25 g, 0,86 mmol) u THF (15 mL) ohlađenoj do 0°C, dodat je u kapima DIAD (0,37 ml, 1,88 mmol).3-Piridil karbinol (0,10 mL, 1,03 mmol) je potom dodat. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata a onda na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je potom filtrirana kroz celit. Celit je opran etil acetatom (100 mL). faza etil acetata je isprana vodom, osušena sa MgSO4, i rastvarač je uparen. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO „flash“ (kolona od 40 g, gradijent MeOH/CH2Cl20/100 do 5/95 u 30 min, eluiranje proizvoda na 5/95). Rastvarač je uparen i sirovi proizvod je prenet u sledeću fazu.
[0302] Sirovom proizvodu mešanom u THF (10 mL) i ohlađenom do 0°C, dodat je KOtBu (0,064 g, 0,57 mmol) i reakciona mešavina je mešana tokom 1 sata i 30 minuta. Sirćetna kiselina (5 kapi) dodata je reakcionoj mešavini. Dodat je etil acetat (100 mL), i ona je isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), i osušena (MgSO4). Nakon filtracije agensa za sušenje, rastvarač je koncentrovan da bi se dobio 3-(1-okso-4-(piridin-2-ilmetoksi)izoindolin-2-il)piperidin 2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0,13 g, 43% prinos): HPLC: Waters XTerra RP18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 acetonitril/0.1% HCOONH4, 3.58 min (98.63%); mp: 235-237 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.16 (m, 1H, CHH), 2.18 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.70 (m, 1H, CHH), 2.78 -3.06 (m, 1H, CHH), 4.16 - 4.35 (m, 1H, CHH), 4.36 - 4.52 (m, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.31 (s, 2H, CH2), 7.36 (dd, J = 4.3, 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.41 - 7.69 (m, 2H, Ar), 7.93 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 8.65 (d, J = 49.3 Hz, 2H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.03, 51.56, 67.25, 114.97, 115.47, 123.62, 129.83, 130.02, 132.25, 133.36, 135.69, 148.94, 149.19, 153.23, 167.93, 170.93, 172.81; LCMS MH = 352; Anal. Izrač. za C19H17N3O4 0.4 H2O: C, 63.64; H, 5.00; N, 11.72; Pronađeno: C, 63.34; H, 5.12; N, 11.48.
5.32 3-(4-((2-METILIZOINDOLIN-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0303]
[0304] Faza 1: Rastvor LiAlH4/THF (1M, 24 mL, 24 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru tert-butil estra 5-hidroksimetil-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilne kiseline (3,0g, 12,0 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Nakon dodavanja, reakciona mešavina je zagrevana lagano tokom 2 sata do refluksa. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (20 mL). Mešavina je razblažena sa EtOAc (25 mL) i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL). EtOAc rastvor je ispran vodom (2X25 mL) i slanim rastvorom (25 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio (2-metil-2,3-dihidro-1H-izoindol-5-il)-metanol (1,2 g, 62% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.55 (s, 3H), 3.76 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 4.10 (b, 1H), 4.55 (s, 2H), 6.96 (s, 1H), 7.04-7.10 (m, 2H).
[0305] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (0,9 g, 4,6 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3,9 g, 4,9 mmol) u THF (40 mL) na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9 g, 3,1 mmol) i (2-metil-2,3-dihidro-1H-izoindol-5-il)-metanola (0,7 g, 4,0 mmol) u THF (60 mL) je dodat lagano na 3-6°C. Reakciona mešavina je mešana na 3°C tokom 5 minuta potom zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL). CH2Cl2rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(40 mL), vodom (2X30 mL), i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((2-metilizoindolin-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0,5 g, 39% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.14-2.46 (m, 4H), 2.60 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.92 (s, 4H), 4.34-4.48 (m, 2H), 4.88-4.92 (dd, J = 3.3 i 8.7 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.56 (s, 1H), 6.34 (s, 1H), 7.05-7.08 (dd, J = 1.5 i 6.9 Hz, 1H), 7.22-7.26 (m, 3H), 7.36-7.44 (m, 2H).
[0306] Faza 3: Mešavina metil 5-amino-4-(4-((2-metilizoindolin-5-il)metoksi)-1-okso-izoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,3 g, 0,6mol) i K2CO3 (0,09g, 0,6 mmol) u DMF (10 mL) je zagrejana u uljanom kupatilu na 80°C tokom 3 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana, a ostatak je mešan sa vodom (20 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i resuspendovana acetonom (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((2-metilizoindolin-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,2 g, 66% prinos): mp 262-264°C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-1.99 (m, 1H), 2.41-2.59 (m, 5H), 2.91 (m, 1H), 3.80 (s, 4H), 4.27 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 7.22-7.51 (m, 6H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.16, 41.83, 45.08, 51.56, 60.01, 60.13, 69.65, 115.00, 115.17, 121.54, 122.02, 126.25, 129.77, 129.93, 133.28, 134.96, 140.64, 141.08, 153.46, 167.98, 170.96, 172.81; Izrač. za C23H23N3O4 0.4 H2O: C, 66.94; H, 5.81; N, 10.18. Pronađeno: C, 66.80; H, 5.52; N, 10.14.
5.33 3-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)TIAZOL-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION [0307]
[0308] Faza 1: Mešavina etil 2-amino-2-tioksoacetata (2 g, 15,02 mmol) i 1,3-dihloropropan-2-ona (2,193 g, 17,27 mmol) u toluenu (20 mL) je zagrejana pod refluksom tokom 3 sata. Mešavina je ohlađena do sobne temperature, dodat je etil acetat (50 mL). Mešavina je isprana zasićenim vodenim NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušena iznad MgSO4. Rastvarač je uparen i proizvod je prečišćen pomoću ISCO (kolona sa 120 g silikagela, EtOAc/heksani gradijent od 0% do 20% u 30 min) da bi se dobio etil 4-(hlorometil)tiazol-2-karboksilat kao žuto ulje (2,07 g, 67% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) 1.45 (t, J = 7.2 Hz, 3H, CH3), 4.50 (q, J = 7.1 Hz, 2H, CH2), 4.78 (s, 2H, CH2), 7.64 (s, 1H, Ar).
[0309] Faza 2: Rastvoru etil 4-(hlorometil)tiazol-2-karboksilata (1,5 g, 7,29 mmol) u acetonitrilu (30 ml) su dodati morfolin (1,27 g, 14,59 mmol) i trietil amin (2,03 ml, 14,59 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran zasićenim vodeniim natrijum bikarbonatom (2 x 20 ml), vodom (2 x 50 mL), slanim rastvorom (30 ml), i osušen iznad MgSO4. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio etil 4-(morfolinometil)tiazol-2-karboksilat (1,72 g, 92% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 1.45 (t, J = 7.1 Hz, 3H, CH3), 2.47 - 2.66 (m, 4H, CH2, CH2), 3.68 - 3.78 (m, 4H, CH2, CH2), 3.80 (s, 2H, CH2), 4.49 (q, J = 7.1 Hz, 2H, CH2), 7.53 (s, 1H, Ar).
[0310] Faza 3: Rastvoru etil 4-(morfolinometil)tiazol-2-karboksilata (0,8 g, 3,12 mmol) u THF (10 ml) je lagano dodat rastvor diizobutilaluminijum hidrida (1 M u toluenu, 9,36 mL, 9,36 mmol) na 0 °C.
Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati su rastvor Rošelove soli (1,0 M, 50 ml) i etil acetat (50 ml). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Postignuto je jasno razdvajanje faza. Organska faza je odvojena, a vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (3 x 40 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim NaHCO3(5 mL) i slanim rastvorom, osušeni iznad MgSO4, i koncentrovani da bi se dobio (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (600 mg, 90% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.44 - 2.63 (m, 4H, CH2, CH2), 3.64 (s, 2H, CH2), 3.71 - 3.81 (m, 4H, CH2, CH2), 4.95 (s, 2H, CH2), 7.12 (s, 1H, Ar).
[0311] Faza 4: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 4,13 g, 6,61 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (966 mg, 3,31 mmol) u THF (40 mL) na 0 °C, a onda diizopropil azodikarboksilat (1,34 g, 6.61 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (850 mg, 3,97 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana dihlorometanom i metanolom (2 x 50 ml svako ispiranje). Kombinovani filtrati i vode od ispiranja su koncentrovani i prečišćeni pomoću ISCO (kolona sa 80 g silikagela, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (360 mg, 22% prinos);
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 - 2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 2.34 - 2.46 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.53 -3.59 (m, 4H, CH2, CH2), 3.60 (s, 2H, CH2), 4.33 - 4.65 (m, 2H, CH2), 4.74 (d, J = 5.5 Hz, 1H, CH), 5.55 (s, 2H, CH2), 7.20 (s, 1H, NHH), 7.35 (t, J = 7.2 Hz, 2H, Ar), 7.44 - 7.57 (m, 2H, Ar), 7.61 (s, 1H, NHH).
[0312] Faza 5: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (320 mg, 0,65 mmol) u THF (10 mL) dodat je kalijum tert-butoksid (73 mg, 0,65 mmol) na 0 °C. Formirana mešavina je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 2 sata. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (0,5 mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je podeljen između etil acetata (20 mL) i vodenog zasićenog natrijum bikarbonata (10 mL). Organska faza je isprana slanim rastvorom i osušena iznad magnezijum sulfata. Rastvarač je uparen i sirovi proizvod je resuspendovan acetonitrilom (4 mL) da bi se dobio 3-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (200 mg, 67% prinos); mp: 218-220 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.42 (d, J = 4.5 Hz, 4H, CH2), 2.44 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.55 (br. s., 1H, CHH), 2.82 - 3.08 (m, 1H, CHH), 3.57 (dd, J = 5.2, 9.7 Hz, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.18 - 4.55 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.56 (s, 2H, CH2), 7.38 (dd, J = 5.6, 7.5 Hz, 2H, Ar), 7.45 - 7.65 (m, 2H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.18, 45.03, 51.62, 52.97, 57.52, 66.10, 66.93, 115.47, 115.99, 118.09, 129.86, 129.99, 133.46, 152.71, 152.88, 165.07, 167.81, 170.93, 172.81; LCMS MH = 457; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, Gradijent (CH3CN/0.1% HCOONH4) 5/95 do 95/5 u 5min, 95/510min: tR = 3.95 (99.07%); Anal. Izrač. za C22H24N4O5S: C, 57.88; H, 5.30; N, 12.27; Pronađeno: C, 57.64; H, 5.36; N, 12.14.
5.34 1-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-IL OKSI METIL]-BENZIL}-PIROLIDIN-2-KARBOKSILNA KISELINA
[0313]
[0314] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (900mg, 1,89 mmol) u acetonitrilu (18 mL) dodat je (S)-tert-butil pirolidin-2-karboksilat (357 mg, 2,08 mmol) i DIPEA (0,661 ml, 3,79 mmol). Dobijeni žuti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći i reakcija je završena. Reakciona mešavina je koncentrovana i rastvorena u DCM (30mL). Rastvor je ispran sa NaHCO3(aq, zas., 15mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan da bi se dobio sirovi tert-butil estar 1-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilne kiseline kao svetlo braon ulje (1,23g). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 566.
[0315] Faza 2: Izmešanom rastvoru (2S)-tert-butil 1-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)pirolidin-2-karboksilata (1,071 g, 1,89 mmol) u tetrahidrofuranu (18 ml) dodat je kalijum t-butiloksid (0,212 g, 1,89 mmol) u jednoj porciji na 0 °C. Rastvor je odmah postao žut. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 10min i sobnoj temperaturi tokom 1 h pre nego što je reakciona mešavina razblažena sa DCM (70mL). Mešavina je zakišeljena sa HCl (1N, aq, 3 mL) a onda učinjena baznom sa NaHCO3 (aq, zas., 3mL). Mešavini je dodat slani rastvor (15 mL) i ekstrahovana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (25mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni iznad MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je mešana u DCM (2mL) i etru (40mL) preko noći i filtrirana da bi se dobio tert-butil estar 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin -2-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (700mg, 69% prinos). Filtrat je koncentrovan da bi se dobio drugi usev tert-butil estra 1-{4-[2(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilne kiseline sa malo nečistoća kao beličasta čvrsta supstanca (301mg, 30% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.62 - 1.88 (m, 3H, CHH, CH2), 1.91 - 2.10 (m, 2H, CH2), 2.29 - 2.48 (m, 2H, CHH, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.75 - 3.00 (m, 2H, CHH, CHH), 3.06 - 3.21 (m, 1H, CHH), 3.45 - 3.59 (m, 1H, CHH), 3.89 (d, J = 13.0 Hz, 1H, CHH), 4.18 - 4.48 (m, 2H, CHH, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.32 (d, J= 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); LCMS MH = 534.
[0316] Faza 3: Izmešanom rastvoru (2S)-tert-butil 1-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)pirolidin-2-karboksilata (620mg, 1,16 mmol) u DCM (5 ml) dodat je hlorovodonik, 2M u dietil etru (5,81 ml, 11,62 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana i reakcija je završena.
Reakciona mešavina je koncentrovana i ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom i prep HPLC da bi se dobila 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksi metil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilna kiselina (170mg, 31% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca: HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80 (CH3CN/0.1%H3PO4): tR= 3.81 (96.0%); mp: 260-262 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.66 - 1.81 (m, 1H, CHH), 1.82 - 2.09 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.21 (dq, J = 8.5, 12.7 Hz, 1H, CHH), 2.36 - 2.50 (m, 1H, CHH), 2.57 - 2.69 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.24 - 3.38 (m, 1H, CHH), 3.47 - 3.56 (m, 1H, CHH), 4.04 (d, J= 12.8 Hz, 1H, CHH), 4.04 - 4.04 (m, 1H, CHH), 4.21 - 4.36 (m, 2H, CHH, CHH), 4.47 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.32 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.47 - 7.58 (m, 5H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 22.72, 28.52, 31.18, 45.10, 51.56, 52.81, 56.90, 65.76, 69.32, 114.99, 115.25, 127.67, 129.38, 129.80, 129.95, 133.30, 135.95, 136.03, 153.45, 167.97, 170.96, 172.35, 172.81; LCMS MH = 478; Anal. izrač. za C26H27N3O6+3H2O 0.2CH2Cl2: C, 57.37; H, 6.14; N, 7.66; Pronađeno: C, 57.08; H, 5.74; N, 7.36.
5.35 3-[1-OKSO-4-(4-[1,2,3]TRIAZOL-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0317]
[0318] Faza 1: Izmešanom rastvoru 1H-1,2,3-triazola (139 mg, 2,020 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (800mg, 1,683 mmol) i DIPEA (0,588 ml, 3,37 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 19 h. Mešavini je dodat DCM (50 mL). Organski sloj je ekstrahovan sa NaHCO3 (zas. aq, 5 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je koncentrovan za ISCO prečišćavanje da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,3]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (710mg, 70% prinos); LCMS MH = 464;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.39 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.52 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.67 - 4.78 (m, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.63 (s, 2H, CH2), 7.18 (s, 1H, Ar), 7.23 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.57 (s, 1H, NHH), 7.75 (d, J = 0.8 Hz, 1H, Ar), 8.20 (d, J = 0.8 Hz, 1H, Ar).
[0319] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (710 mg, 1,53 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) dodat je KOtBu (200 mg, 1,78 mmol) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 4 h, pa je dodat KOtBu (40mg, 0,36mmol).30 min kasnije reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (50 mL) i zakišeljena sa HCl(1N, aq, 4 mL) nakon čega je usledilo dodavanje NaHCO3(zas., aq, 4 mL) i slanog rastvora (15 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen iznad MgSO4. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je suspendovana u etru (30 mL) i mešana preko vikenda. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-[1,2,3]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (440 mg, 67% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70, CH3CN/0.1%H3PO4), 4.84min (98.4%); mp: 133-135°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.03 (m, 1H, M01), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.63 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.75 (d, J = 0.8 Hz, 1H, CH), 8.20 (d, J = 0.9 Hz, 1H, CH), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.18, 45.06, 51.56, 52.26, 69.12, 114.90, 115.26, 124.94, 127.95, 128.06, 129.78, 129.93, 133.30, 133.52, 135.95, 136.51, 153.36, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS MH = 432; Anal. Izrač. za C23H21N5O4+0.7H2O: C, 62.21; H, 5.08; N, 15.77; Pronađeno: C, 62.07; H, 4.88; N, 15.46.
5.36 3-[4-(4-[1,4]OKSAZEPAN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0321] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600mg, 1,26 mmol) u acetonitrilu (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 1,4-oksazepan hidrohlorid (208 mg, 1,51 mmol) i DIPEA (0,44 ml, 2,52 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i razblažena sa DCM (50mL). Mešavina je isprana sa NaHCO3 (aq, zas.5 mL) i slanim rastvorom (15 ml). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-[1,4]oksazepan-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao lepljivo ulje (810 mg). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 496.
[0322] Faza 2: Izmešanoj suspenziji metil 4-(4-(4-((1,4-oksazepan-4-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (625 mg, 1,26 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0°C dodat je KOtBu (142 mg, 1,26 mmol) u jednoj porciji. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata i dodat je KOtBu (70 mg).15 minuta kasnije, reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (50 mL) i zakišeljena sa HCl (aq, 1N, 3 mL) nakon čega je usledilo dodavanje NaHCO3(aq, zas., 3 mL) i slanog rastvora (10 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je mešana u dietil etru (20 mL) i filtrirana da bi se dobio 3-[4-(4-[1,4]oksazepan-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (484 mg, 83% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 5 do 95% u 10min, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.7min (95.9%); mp: 119-121°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.72 - 1.88 (m, 2H, CH2), 1.92 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.69 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.54 - 3.65 (m, 4H, CH2, CH2), 3.69 (t, J = 6.0 Hz, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H,<CHH), 5.23 (s, 2H, CH>2<), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); 13C NMR>(DMSO-d6) δ 22.34, 29.28, 31.18, 45.07, 51.55, 53.24, 57.10, 60.98, 67.69, 68.33, 69.38, 114.94, 115.22, 127.66, 128.73, 129.78, 129.93, 133.30, 135.24, 139.05, 153.49, 167.99, 170.96, 172.81; LCMS MH = 464; Anal. Izrač. za C26H29N3O5+0.5 H2O : C, 66.09; H, 6.40; N, 8.89, Pronađeno: C, 65.83; H, 6.04; N, 8.60.
5.37 3-[1-OKSO-4-(4-[1,2,3]TRIAZOL-2-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0323]
[0324] Faza 1. Izmešanom rastvoru 1H-1,2,3-triazola (139 mg, 2,020 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (800mg, 1,683 mmol) i DIPEA (0,588 ml, 3,37 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 19 h i druga ista reakciona mešavina (12.5% razmere ove) je dodata, a zatim 1H-1,2,3-trazol (60 mg, 0,87 mmol). Kombinovana reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a onda je dodat DCM (50 mL), NaHCO3(zas. aq, 5 mL) i slani rastvor (10 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je koncentrovan za ISCO prečišćavanje da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,3]triazol-2-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao lepljivo bistro ulje (102mg, 9% prinos); LCMS MH = 464;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 - 2.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.39 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.52 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.66 - 4.78 (m, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.67 (s, 2H, CH2), 7.13 - 7.22 (m, 1H, NHH), 7.23 - 7.32 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.52 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH), 7.81 (s, 2H, Ar).
[0325] Faza 2. Izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (100mg, 0,216 mmol) u tetrahidrofuranu (Zapremina: 4 ml) na 0°C dodat je KOtBu (29,1 mg, 0,259 mmol) u jednoj porciji. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 h. Dodat je KOtBu (30mg, 0,26 mmol) reakcionoj mešavini. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta, a onda razblažena sa EtOAc (40 mL). Dobijeni rastvor je zakišeljen sa HCl (aq, 1N, 2 mL), a onda je učinjen baznim sa NaHCO3(aq, zas., 2 mL), nakon čega je usledilo dodavanje slanog rastvora (10 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen iznad MgSO4. Suspenzija je filtrirana i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je suspendovana u dietil etru (10mL) i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-[1,2,3]triazol-2-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (56 mg, 32% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 40/60, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.71min (96.8%); mp: N/A;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.67 (s, 2H, CH2), 7.21 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.81 (s, 2H, triazol), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.16, 45.04, 51.55, 57.23, 69.14, 114.90, 115.25, 127.95, 129.78, 129.94, 133.19, 134.70, 135.70, 136.39, 152.69, 167.98, 170.93, 172.80; LCMS MH = 432; Anal. izrač. za C23H21N5O4 : C, 64.03; H, 4.91; N, 16.23; Pronađeno: N/A.
5.38 PRIPREMANJE 3-(4-((6-(MORFOLINOMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0326]
[0327] Faza 1: Mešavina 2-hidroksi-4-metilbenzaldehida (4,2 g, 31,1 mmol), kalijum karbonata (5,6 g, 40,5 mmol) i molekulskog sita (4,0 g) u DMF (40 mL) je zagrejana do 50 °C. Etil bromoacetat (5,2 g, 31,1 mmol) dodat je lagano na 50-55 °C. Reakciona mešavina je zagrevana na 75 °C tokom 20 min, a potom na 110 °C tokom 1 h. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (100 mL). Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (50 mL). Filtrat je ispran vodom (3X60 mL), slanim rastvorom (60 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirova mešavina je prečišćena hromatografijom (SiO2, CH2Cl2) da bi se dobio etil 6-metilbenzofuran-2-karboksilat (1 g, 16%) :<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42 (t, J=6Hz, 3H), 2.49 (s, 3H), 4.40-4.47 (q, J=6Hz, 2H), 7.11-7.14 (d, J=9Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.53-7.56 (t, J=9Hz, 1H).
[0328] Faza 2: Mešavina etil 6-metilbenzofuran-2-karboksilata (0,9 g, 4,6 mmol) i N-bromosukcinimida (1 g, 6,0 mmol) u CCl4 (20 mL) je zagrejana na 70 °C u uljanom kupatilu sijalicom od 300W koja je osvetljavala reakcionu mešavinu tokom 4 h. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana i čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan u vakuumu i sirova mešavina je prečišćena hromatografijom (SiO2, 10%EtOAc/heksan) da bi se dobio etil 6-(bromometil)benzofuran-2-karboksilat (1,3 g, 100%) :<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 (t, J=6Hz, 3H), 4.34-4.41 (q, J=6Hz, 2H), 4.87 (s, 2H), 7.44-7.53 (m, 1H), 7.76-7.96 (m, 3H).
[0329] Faza 3: Mešavina kalijum karbonata (3,6 g, 26 mmol), morfolina (1,0 g, 11,3 mmol) i katalitičke količine 18-kruna-6 u acetonu (15 mL) je zagrejana na 60 °C u uljanom kupatilu. Rastvor etil 6-(bromometil)benzofuran-2-karboksilata (2,0 g, 7,1 mmol) u acetonu (15 mL) dodat je lagano i mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 60 °C tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom (2X30 mL), slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/heksan tokom 15 min, onda do 60% preko 20 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio etil 6-(morfolinometil)benzofuran-2-karboksilat (1,2g, 60%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.43 (t, 6Hz, 3H), 2.45-2.48 (m, 4H), 3.62 (s, 2H), 3.71-3.73 (m, 4H), 4.41-4.48 (q, J=6Hz, 2H), 7.27-7.31 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.58-7.62 (m, 2H).
[0330] Faza 4: Rastvor LiAlH4/THF (1M, 5,4 mL, 5,4 mmol) u THF (10 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu do 5 °C. Rastvor etil 6-(morfolinometil)benzofuran-2-karboksilata (1,2 g, 4,2 mmol) u THF (20 mL) dodat je u kapima na 5-10 °C. Reakciona mešavina je mešana u ledenom kupatilu tokom 30 min, onda je pažljivo ugašena vodom (10 mL). Mešavina je razblažena sa zas. Na2CO3 (40 mL) i CH2Cl2 (50 mL) i aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (3X30 mL). Kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio (6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metanol (0,9g, 88%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.40(b, 1H), 2.44-2.47 (m, 4H), 3.59 (s, 2H), 3.71-3.72 (m, 4H), 4.75 (s, 2H), 6.63 (s, 1H), 7.18-7.20 (m, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H).
[0331] Faza 5: Mešavina trifenilfosfina vezanog za polimer (3,5 g, 4,3 mmol) u THF (40 mL) je ohlađena u ledenom kupatilu do 3 °C. Diizopropil azodikarboksilat (0,8g, 4,6 mmol) dodat je lagano na 3-5 °C. Nakon što je izmešana na 3 °C tokom 10 min, dodat je rastvor (6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metanola (0,9g, 3,6 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9g, 3,1 mmol) u THF (60 mL) na 3-8 °C. Nakon što je izmešana tokom 10 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani i dobijeni ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (80 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (40 mL), vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 5 min, onda do 3% CH3OH/CH2Cl2 preko 5 min i držan tokom 20 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 20 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1,0g, 44%).
[0332] Faza 6: Mešavina metil 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1,0 g, 1,9 mmol) i kalijum karbonata (0,3 g, 1,9 mmol) u DMF (10 mL) je zagrejana u uljanom kupatilu na 80°C tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (80 mL). Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je ispran vodom (3X35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min, onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min, onda do 5% preko 5min i držan tokom 20 min) da bi se dobio 3-(4-((6-(morfolinometil)benzufuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,24g, 26%): mp 142-144°C;<1>H NMR(DMSO-d6) δ 1.95-1.99 (m, 1H), 2.35-2.59 (m, 1H), 2.84-2.96 (m, 1H), 3.33 (s, 4H), 3.56 (b, 2H), 4.26 (d, J=17.7Hz, 1H), 4.36 (d, J=17.4Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J=5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.23 (b, 1H), 7.34-7.37 (dd, J=0.9 i 6.9Hz, 1H), 7.46-7.61 (m, 4H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 31.17, 45.04, 51.56, 53.05, 62.50, 66.15, 107.01, 111.38, 115.10, 115.66, 121.02, 124.22, 126.55, 129.81, 129.93, 133.43, 135.00, 152.55, 152.96, 154.67, 167.87, 170.93, 172.80; Izrač. za C27H27N3O6+ 0.5H2O: C, 65.06; H, 5.66; N, 8.43. Pronađeno: C, 64.97; H, 5.49; N, 8.39.
5.39 3-(1-OKSO-4-(4-(TIOMORFOLINOMETIL)BENZILOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION [0333]
Faza 1 Metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat:
[0334] 1,4-bis(bromometil)benzen (2,71 g, 10,26 mmol) je suspendovan u suvom acetonitrilu (40 mL). Gusta suspenzija je zagrejana do 60 °C sve dok nije primećeno potpuno rastvaranje ∼15 min).
Temperatura je smanjena na 50 °C i rastvoru je dodat K2CO3(0,473 g, 3,42 mmol) kao čvrsta supstanca, a nakon njega metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1 g, 3,42 mmol, pripremanje je opisano ovde). Dobijena bela gusta suspenzija je mešana na 50 °C tokom ∼3 h tokom kog vremena je LCMS ukazala da je fenolni polazni materijal utrošen. Sirova reakciona mešavina je promućkana i usisno filtrirana. Zaostala čvrsta supstanca u boci i na filter levku je isprana sa minimalno MeCN (∼5 mL). Filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo 2,6 g bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u minimalno DCM i prečišćena korišćenjem SiO2 “flash” kolone (CombiFlash, kolona sa predhodno spakovanih 40 g SiO2). Kolona je eluirana sa 100% DCM tokom ∼15 min, gradijent do 5% MeOH u DCM preko 5 min, a onda držana na 5% MeOH u DCM. Frakcije su kombinovane i koncentrovane da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (1,3 g, 80% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.33 - 4.62 (m, 2H, CH2), 4.72 (s, 2H, CH2,), 5.25 (s, 2H, CH2), 5.27 - 5.36 (m, 1H, CH), 7.19 (br. s., 1H, NH), 7.23 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.70 (m, 6H, Ar, NH); LC/MS M+H = 475, 477.
Faza 2.3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion:
[0335] Metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (2,05 g, 4,31 mmol) je rastvoren u THF (50 mL) i rastvor je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu do -76 °C. Uz mešanje, dodat je čvrsti KO<t>Bu (0,532 g, 4,74 mmol) u jednoj porciji bistrom rastvoru. Reakciona mešavina postala je bledo žute boje i mešana je tokom ∼90 min na -76 °C. Ohlađen rastvor 1 N aq HCl (20 mL) brzo je prenet u reakcionu mešavinu, održavajući temperaturu na -76 °C. Mešavina je odmah postala mlečno bela i suvi CO2/aceton kupatilo je uklonjeno, omogućavajući mešavini da se ugreje uz mešanje. Mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču radi uklanjanja viška THF (koncentrovan do fiksne zapremine pri 160 mbar i u vodenom kupatilu na -35 °C). Nakon koncentrovanja reakcione mešavine, bela čvrsta supstanca je istaložena. Bela gusta suspenzija je razblažena sa više vode (∼80 mL), a onda usisno filtrirana. Kolač je ispran sa velikom količinom vode (ukupna zapremina filtrata ∼150 mL) i osušen sukcijom. Kolač je ispran sa Et2O (∼50 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 40 °C preko noći da bi se dobio 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (1,8 g, 94% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.70 min (97.9%); mp, 123-125 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.04 (m, 1H, CHH), 4.26 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.72 (s, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 5H, Ar), 10.83 - 11.07 (m, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 34.15, 45.06, 51.56, 69.12, 114.94, 115.28, 127.95, 128.33, 129.41, 129.80, 131.93, 133.31, 136.78, 153.36, 167.97, 170.95, 172.81; LC/MS M+H = 443, 445. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3.3-(1-okso-4-(4-(tiomorfolinometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion:
[0336] U reakcionoj fiolici od 20-mL, tiomorfolin (62,8 mg, 0,609 mmol) je dodat rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150 mg, 0,338 mmol) u MeCN (5 mL). Bistra reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona mešavina je ohlađena do 0 °C i ugašena dodavanjem 1,5 mL glacijalne sirćetne kiseline. Obrazovanja je gusta suspenzija koja je podeljena između EtOAc (100 mL) i 1N NaHCO3 (30 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa vodom i podvrgnuta sonikaciji da bi se dobio slobodno tečljiva čvrsta supstanca. Ova čvrsta supstanca je prikupljena filtracijom, osušena sukcijom, a onda osušena u vakuum sušnici na 40 °C da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(tiomorfolinometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (127 mg, 81% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.05 min (97.0%); mp: 134-136 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.60 (s, 9H, 4 x CH2, CHH), 2.80 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.49 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 4.8, 12.9 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.01 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.65 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 27.14, 31.16, 45.06, 51.55, 54.36, 62.23, 69.38, 114.94, 115.20, 127.63, 128.84, 129.78, 129.93, 133.28, 135.22, 137.89, 153.48, 167.97, 170.95, 172.81; LC/MS M+H = 466; Anal. izrač. za C25H27N3O4S 0.25 H2O: C, 63.88; H, 5.90; N, 8.94; S, 6.82. Pronađeno: C, 63.85; H, 5.93; N, 8.67; S, 6.50.
5.40 3-{1-OKSO-4-[4-(1-OKSO-TIOMORFOLIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0337]
[0338] U reakcionoj fiolici od 20-mL, N,N-diizopropiletilamin (0.197 mL, 1.128 mmol) dodat je suspenziji 1-okso-tiomorfolin hidrohlorid (97 mg, 0.620 mmol) u MeCN (5 mL). Mešavina je podvrgnuta sonikaciji na sobnoj temperaturi kako bi se slomili čvrste supstance. Upon full rastvaranje of the, 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (250 mg, 0.564 mmol) dodat je to rastvor u jednoj porciji i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon oko 1 sata, MeCN (∼5 mL) dodat je to improve mešanje. Mešavina je mešana tokom još jedan 4 sata na sobnoj temperaturi a onda razblažen sa EtOAc (15 mL). Gusta suspenzija je mešana tokom a few minuta potom filtrirana na filter levku finih pora uvlačenjem. Kolač je ispran sa a malom porcijom of EtOAc (∼5 mL), osušen sukcijom, a onda osušen dalje u vakuum sušnici na 40°C da bi se dobio 3-{1-okso-4-[4-(1-oksotiomorfolin-4-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (110 mg, 40% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.25 min (98.9%); mp: 170-172 °C,<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.66 (m, 3H, CH2, CHH), 2.66 - 2.77 (m, 2H, CH2), 2.79 - 3.01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3.57 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 43.56, 45.07, 45.51, 51.55, 61.15, 69.36, 114.96, 115.22, 127.67, 128.92, 129.80, 129.95, 133.28, 135.38, 137.67, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81; LC/MS M+H = 482; Anal. izrač. za C25H27N3O5S 1.0 H2O: C, 60.10; H, 5.85; N, 8.41; S, 6.42. Pronađeno: C, 59.94; H, 5.52; N, 8.26; S, 6.45.
5.41 (S)-2-(3-METIL-2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-(4-MORFOLINOMETIL)BENZILOKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0339]
[0340] Faza 1: U balonu sa okruglim dnom od 250 ml, dimetil 3-hidroksiftalat (1 g, 4,76 mmol) i trifenilfosfin na polistirenu (1,6 mmol/g smole) (2,98 g, 4,76 mmol) suspendovani su u THF (40 ml) na sobnoj temperaturi. Mešavina je ohlađena na 0°C i DIAD (1,850 ml, 9,52 mmol) je dodat pomoću šprica, nakon 10 minuta, dodat je (4-(morfolinometil)fenil) metanol (0,986 g, 4,76 mmol) u THF (10 ml), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, smola je isprana pranjem sa DCM i MeOH (2 x 50 ml svako ispiranje), kombinovani filtrati i vode od ispiranja su koncentrovani u vakuumu do sirupa. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO (80 g kolona, MeOH u DCM gradijent od 0-5 u 50 min, 5% MeOH u DCM 20 min) da bi se dobio dimetil 3-(4-(morfolinometil)benziloksi)ftalat (770 mg, 41% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.29 - 2.40 (m, 4H, CH2, CH2), 3.45 (s, 2H, CH2), 3.53 - 3.60 (m, 4H, CH2, CH2), 3.79 (s, 3H, CH3), 3.82 (s, 3H, CH3), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J= 0.9 Hz, 4H, Ar), 7.44 - 7.59 (m, 3H, Ar).
[0341] Faza 2: Rastvoru dimetil 3-(4-(morfolinometil)benziloksi) ftalata (770mg, 1,928 mmol) u EtOH (20 ml, 343 mmol), dodat je NaOH (3N, 10mL, prethodno napravljen od 12 N rastvor). Mešavina je refluksovana tokom 1 sata. Reakciona mešavina je uparena do suvoće u vakuumu. HCl (1N) je dodata ostatku, a pH je podešen na 3, i talog je prikupljen filtracijom da bi se dobio 3-(4-(morfolinometil)benziloksi)ftalna kiselina kao bela čvrsta supstanca (350 mg, 49% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.27 - 2.43 (m, 4H, CH2, CH2), 3.49 (s, 2H, CH2), 3.53 - 3.65 (m, 4H, CH2, CH2), 5.17 (s, 2H, CH2), 7.16 - 7.63 (m, 7H, Ar).
[0342] Faza 3: Mešavina 3-(4-(morfolinometil)benziloksi)ftalne kiseline (300 mg, 0,808 mmol) i (S)-3-amino-3-metilpiperidin-2,6-dion hidrobromida (198 mg, 0,889 mmol) u piridinu (20 ml) je zagrejana do refluksa tokom 2 dana i ohlađen do sobne temperature. Piridin je oduzet pod sniženim pritiskom, ostatak je podeljen između EtOAc (50 ml) i natrijum bikarbonata (10 ml), organski sloj je odvojen i ispran vodom (2x10 ml), slanim rastvorom (10 ml), i osušen (MgSO4). Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (12 g kolona, MeOH u DCM gradijent od 0-3% u 25 min) da bi se dobio (S)-2-(3-metil-2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-(4-(morfolinometil)benziloksi)izoindolin-1,3-dion (100 mg, 26% prinos). mp : 178-180 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 (s, 3H, CH3), 1.98 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.29 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 2.52 - 2.83 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3.47 (s, 2H, CH2), 3.53 - 3.66 (m, 4H, CH2, CH2), 5.31 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.51 (m, 5H, Ar), 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.80 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.96, 28.55, 29.03, 53.11, 58.53, 62.06, 66.13, 69.93, 115.09, 116.14, 119.86, 127.35, 129.01, 133.24, 134.74, 136.83, 137.69, 155.33, 166.06, 167.42, 172.10, 172.27; MH = 478; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent (CH3CN/0.1% HCOONH4) 5/95 do 95/5 u 5min, 95/510min: tR= 3.72 (100%); Anal. izrač. za C26H27N3O6C, 65.40; H, 5.70; N, 8.80; Pronađeno: C 65.28; H 5.67; N 8.60.
5.42 3-[1-OKSO-4-(4-[1,2,4]TRIAZOL-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[0344] Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,804 g, 1,691 mmol) u acetonitrilu (20 ml) dodat je 1H-1,2,4-triazol (0,350 g, 5,07 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,839 ml, 5,07 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva dana, a onda je razblažena metilen hloridom (50mL) i isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (10mL) i slanim rastvorom (10mL). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (0,53 g, 67% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.36 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.32 - 4.58 (m, 2H, CH2), 4.72 (dd, J = 4.9, 10.4 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.37 - 5.50 (m, 2H, CH2), 7.13 - 7.21 (m, 1H, NHH), 7.24 - 7.36 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.57 (br. s., 1H, NHH), 7.98 (s, 1H, Ar), 8.66 (s, 1H, Ar). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje 3-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion
[0345] Izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat (0,49 g, 1,057 mmol) u THF (20 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0,119 g, 1,057 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, dodata je 1 N HCl (2 ml), neutralizovana je zasićenim natrijum bikarbonatom (3 ml), i mešana sa etil acetatom (50 ml). Organska faza je odvojena, isprana slanim rastvorom (10 ml) i uparena do bele čvrste supstance, koja je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 4% u 40 min) da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0,177 g, 39% prinos); mp, 233-235°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.43 min (96.4%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.17 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.43 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 3H, Ar), 7.98 (s, 1H, Ar), 8.67 (s, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.20, 45.08, 51.58, 51.78, 69.19, 114.95, 115.27, 128.02, 129.81, 129.97, 133.32, 136.09, 136.35, 144.23, 151.72, 153.40, 167.99, 170.96, 172.82; LC/MS (M+1)<+>= 432; Anal. izrač. za C23H21N5O4+0.2 H2O: C, 63.50; H, 4.96; N, 16.10. Pronađeno: C, 63.11; H, 4.89; N, 16.00.
5.43 1-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-IL OKSIMETIL]-BENZIL}-PIROLIDIN-2-KARBOKSILNA KISELINA
[0346]
Faza 1: tert-butil estar 1-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilne kiseline
[0347] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (798mg, 1,679 mmol) i (R)-tert-butil pirolidin-2-karboksilat hidrohlorida (418 mg, 2,015 mmol) u acetonitrilu (12 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0,586 ml, 3,36 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 19 h pre nego što je razblažen sa DCM (50 mL). Rastvor je ispran sa NaHCO3 (zas, aq, 5 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio tert-butil estar 1-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil} -pirolidin-2-karboksilne kiseline kao bistro ulje (840mg, 88% prinos) koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 566;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, CH3, CH3), 1.64 - 1.86 (m, 3H, CH, CH2), 1.93 - 2.12 (m, 2H, CH2), 2.13 - 2.22 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.30 (m, 2H, CH2), 2.36 (q, J= 7.7 Hz, 1H, CHH), 2.77 - 2.92 (m, 1H, CHH), 3.13 (dd, J = 5.0, 8.8 Hz, 1H, CHH), 3.44 - 3.59 (m, 4H, CHH, CH3), 3.88 (d, J= 13.2 Hz, 1H, CHH), 4.39 (d, J= 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.53 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J= 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.24 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH).
Tert-butil estar 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilne kiseline
[0348] Izmešanom rastvoru (2R)-tert-butil 1-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)pirolidin-2-karboksilata (840mg, 1,485 mmol) u tetrahidrofuranu (13 mL) na 0 °C dodat je KOtBu (167 mg, 1,485 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 20 min pre nego što je razblažen sa EtOAc (50 mL). Mešavina je zakišeljena sa HCl(1N, aq, 3 mL), nakon čega je dodat NaHCO3(aq, zas, 3 mL) i slani rastvor (15mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran sa NaCl (10ml slanog rastvora 10mL vode). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilne kiseline kao lepljivo bistro ulje (810mg, 102% sirovi prinos) koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 534.
Faza 3: 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilna kiselina
[0349] Rastvoru (2R)-tert-butil 1-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)pirolidin-2-karboksilata (0,795 g, 1,489 mmol) u DCM (zapremina: 5 ml) dodavana je HCl, 2M u dietil etru (11,17 ml, 22,34 mmol) na sobnoj temperaturi tokom 4 dana i reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu, a onda je dodata sveža 2M HCl (etar, 15mL). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i ostatak je mešan u acetonitrilu (15 mL) tokom 4 h. Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-pirolidin-2-karboksilna kiselina kao beličasta čvrsta supstanca (420mg, 57,5% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 18/82, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.84min (96.67%); mp: 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.75 - 2.06 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 2.45 (d, J = 13.4 Hz, 2H, CHH, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.11 - 3.27 (m, 1H, CHH), 3.32 - 3.46 (m, 1H, CHH), 4.18 - 4.34 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 4.39 - 4.52 (m, 2H, CHH, CHH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.33 (dd, J = 4.9, 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.45 - 7.53 (m, 1H, Ar), 7.56 (s, 4H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 22.36, 27.90, 31.18, 45.06, 51.58, 54.00, 56.96, 65.32, 69.01, 115.00, 115.36, 127.79, 129.81, 129.95, 130.78, 130.95, 133.34, 137.83, 153.33, 167.94, 169.95, 170.96, 172.83; LCMS MH = 478; Anal. izrač. za C26H27N3O60.95HCl 1.2H2O: C, 58.51; H, 5.73; N, 7.87; Cl, 6.31; Pronađeno: C, 58.57; H, 5.46; N, 7.89; Cl, 6.14.
5.44 3-[1-OKSO-4-(4-[1,2,4]TRIAZOL-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0350]
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[0351] Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,804 g, 1,691 mmol) u acetonitrilu (20 ml) dodat je 1H-1,2,4-triazol (0,350 g, 5,07 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,839 ml, 5,07 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva dana, a onda je razblažena metilen hloridom (50mL) i isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (10mL) i slanim rastvorom (10mL). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (0,25 g, 32% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 - 2.33 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.34 - 4.58 (m, 2H, CH2), 4.72 (dd, J = 4.9, 10.4 Hz, 1H, NCH), 5.26 (d, J= 17.9 Hz, 4H, CH2, CH2), 7.18 (br. s., 1H, NHH), 7.22 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.58 (br. s., 1H, NHH), 8.62 (s, 2H, Ar). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje 3-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
[0352] Izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (0,23 g, 0,496 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0,134 g, 1,19 mmol). Mešavina je mešana tokom 10 minuta i dodata je 1N HCl (2ml do pH=2), a onda neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (3ml do pH=7). Etil acetat (40 ml) je dodat mešavini i mešan tokom pet dana. Organska faza je odvojena, isprana slanim rastvorom (10 ml), i uparena da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 od 0% do 10% u 30 min) da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidroizoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (58 mg, 27% prinos); mp173-175°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.05 min (95.2%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.18 - 4.46 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.43 -7.54 (m, 3H, Ar), 8.62 (s, 2H, 2NH), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.20, 45.08, 47.26, 51.59, 69.13, 114.97, 115.29, 127.81, 128.18, 129.81, 129.97, 133.32, 136.53, 143.22, 153.37, 167.98, 170.96, 172.83. LC/MS (M+1)<+>= 432; Anal. izrač. za C23H21N5O4C, 64.03; H, 4.91; N, 16.23. Pronađeno: C, 61.85; H, 5.06; N, 14.92.
5.45 3-(4-((4-((2-METIL-1H-IMIDAZOL-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0354] Suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) i 2-metil-1H-imidazola (0,108 g, 1,315 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIEA (0,22 ml, 1,260 mmol) na sobnoj temperaturi. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Suspenziji je dodata voda (15 mL). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Suspenzija je filtrirana i isprana vodom (3 X 10 mL) da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćena sa Prep HPLC (Xbridge C18, 10 µm, 50 x 250 mm, 143 mL/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradijent do 95/5 0.1%mravlja kiselina u CH3CN / 0.1% mravlja kiselina u H2O u 13 min), i željene frakcije su prikupljene. Rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobilo ulje. Ulju je dodat EtOAc (20 mL) da bi se dobila čvrsta supstanca i suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Suspenzija je filtrirana i isprana sa EtOAc (10 mL) i etrom (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((4-((2-metil-1H-imidazol-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (43 mg, 8,6% prinos): HPLC: (Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4): RT= 3.18 min (99.4%); mp: 275-277 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.22 (s, 3H, CH3), 2.33 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.03 (m, 1H, CHH), 4.16 - 4.30 (m, 1H, CHH), 4.33 - 4.46 (m, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.15 (s, 2H, CH2), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.76 (brs, 1H, Ar), 7.08 -7.20 (m, 3H, Ar), 7.26 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.52 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 12.70, 22.31, 31.16, 45.04, 48.31, 51.53, 69.16, 114.93, 115.25, 120.23, 126.46, 127.04, 128.06, 129.78, 129.95, 133.28, 135.88, 137.34, 153.39, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS: MH = 445; Anal. izrač. za C25H24N4O4+ 0.3 H2O: C, 66.74; H, 5.51; N, 12.45; Pronađeno: C, 66.69; H, 5.24; N, 12.23.
5.46 3-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-INDOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0355]
Faza 1 Pripremanje metil estra 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0356] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL je napunjen metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (9,76 g, 33,4 mmol), 1,4-bis(bromometil)benzenom (26,4 g, 100 mmol) i kalijum karbonatom (4,61 g, 33,4 mmol), dodato je 500 mL CH3CN. Mešavina je mešana na 50°C tokom pet sati i filtrirana, isprana sa CH3CN (20 ml). Filtrat je uparen da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-bromometilbenziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (13,4 g, 84% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.13 - 2.35 (m, 3H, CH2,CHH), 3.50 (s, 3H, CH2), 4.32 - 4.63 (m, 2H, CH2), 4.65 - 4.84 (m, 3H, CH2, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.19 (s, 1H, NHH), 7.23 -7.36 (m, 2H, Ar), 7.38 - 7.52 (m, 5H, Ar), 7.58 (br. s., 1H, NHH).
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(2,3-dihidro-indol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0357] CH3CN rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,5 g, 1,052 mmol) dodat je indolin (0,142 ml, 1,262 mmol) i DIPEA (0,220 ml, 1,262 mmol). Mešavina je mešana preko noći. Mešavina je koncentrovana i ekstrahovana vodom (15 mL) i EtOAc (20 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3 (zas.15 mL), slanim rastvorom (15 mL) i koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(2,3-dihidro-indol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao čvrsta supstanca (0,5 g, 93%). Korišćen je direktno u sledećoj fazi.
Faza 3: Pripremanje 3-{4-[4-(1,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro--izoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
[0358] THF rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(indolin-1-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,5 g, 0,974 mmol) dodat je KOtBu (0,131 g, 1,168 mmol) na 0 °C. Nakon mešanja na 0 °C tokom 15 min., mešavini je dodato 2 mL 1N HCl, a potom 10 mL zas. NaHCO3 i 25 mL EtOAc. Mešavina je razdvojena i organski sloj je ispran vodom (10 mL), slanim rastvorom (10 mL) i koncentrovan. Dobijena bela čvrsta supstanca je prečišćena na koloni sa silikagelom eluirana sa DCM i MeOH da bi se dobio 3-{4-[4-(1,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro--izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (200 mg, 43%). Tačka topljenja: 173-175 °C. LC-MS m/e=482. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 7.58 min (93%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.56 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.02 (m, 4H, CH2, CHH), 3.13 - 3.30 (m, 2H, CH2), 3.32 (s, 3H, CH2), 4.10 - 4.59 (m, 4H, CH2, CH2), 4.99 - 5.18 (m, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.49 6.65 (m, 2H, Ar), 6.82 - 7.16 (m, 2H, Ar), 7.25 - 7.43 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.62 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 27.92, 31.20, 45.09, 51.58, 52.15, 52.76, 69.39, 106.89, 114.98, 115.24, 117.20, 124.24, 127.04, 127.85, 128.07, 129.47, 129.81, 129.97, 133.31, 135.30, 138.16, 152.16, 153.48, 168.01, 170.96, 172.83. Anal. izrač. za C27H29N3O4: : C%:72.33, H%:5.65, N%:,8.73. Pronađeno: C%:72.14, H%:5.51, N%:,8.47.
5.47 3-(4-((3-(MORFOLINOMETIL)-1,2,4-OKSADIAZOL-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0359]
[0360] Faza 1: Natrijum borohidrid (179 mg, 4,72 mmol) dodat je rastvoru etil 3-(hlorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-karboksilata (900mg, 4,72 mmol) u etanolu (10 mL) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sata, a onda ugašena sa HCl (1N, 5 mL). Rastvarač je uparen, ostatak je podeljen između etil acetata (30 mL) i vode (10 mL), organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, i rastvarač je uparen da bi se dobilo 510 mg (3-(hlorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metanola, pri čemu je sirova supstanca korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0361] Faza 2: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1,6 mmol/g, 3,16 g, 5,05 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (984 mg, 3,37 mmol) u THF (30 mL) na 0 °C, a zatim diizopropil azodikarboksilat (1,02 g, 5,05 mmol), nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (3-(hlorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metanol (500 mg, 3,37 mmol), mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana etil acetatom (10 x 20 mL). Kombinovani filtrat je uparen do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 80 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((3-(hlorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (480 mg, 34% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.20 (d, J= 7.0 Hz, 2H, CH2), 1.95 - 2.22 (m, 2H, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.38 - 4.62 (m, 2H, CH2), 4.73 (d, J = 5.7 Hz, 1H, CH), 4.94 (s, 2H, CH2), 5.72 (s, 2H, CH2), 7.21 (br. s., 1H, NHH), 7.32 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.49 (d, J= 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.61 (br. s., 1H, NHH).
[0362] Faza 3: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((3-(hlorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (460mg, 1,088 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodati su morfolin (0,114 mL, 1,306 mmol) i trietil amin (0,182 mL, 1,306 mmol). Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen do suvoće, sirovi proizvod je podeljen između etil acetata (50 mL) i vode (10 mL), organski sloj je odvojen i ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata. Rastvarač je uparen da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentano- at (410 mg, 80% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.18 (d, J = 5.3 Hz, 2H, CH2), 1.96 - 2.23 (m, 2H, CH2), 2.42 - 2.50 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.53 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 3.68 (s, 2H, CH2), 4.30 - 4.65 (m, 2H, CH2), 4.67 - 4.83 (m, 1H, CH), 5.68 (s, 2H, CH2), 7.21 (br. s., 1H, NHH), 7.28 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.48 (d, J= 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.61 (br. s., 1H, NHH).
[0363] Faza 4: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (350 mg, 0,739 mmol) u THF dodat je kalijum tert-butoksid (83 mg, 0,739 mmol) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sata, dodatni kalijum tert-butoksid (20 mg, 0.27mmol) je dodat, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi naredan 1 sat. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (1 mL), rastvarač je uparen do suvoće, ostatak je podeljen između etil acetata (50 mL) i zasićenog natrijum bikarbonata (10 mL). Organski sloj je odvojen i ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, rastvarač je uparen pod vakuumom, sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio 3-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (230 mg, 70% prinos). mp: 150-152 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.31 - 2.44 (m, 1H, CHH), 2.44 - 2.49 (m, 4H, CH2, CH2), 2.53 (br. s., 1H, CHH), 2.79 - 3.05 (m, 1H, CHH), 3.48 - 3.63 (m, 4H, CH2, CH2), 3.69 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.52 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CH), 5.69 (s, 2H, CH2), 7.38 (dd, J = 7.6, 11.0 Hz, 2H, Ar), 7.47 - 7.66 (m, 1H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 31.18, 45.00, 51.62, 51.93, 52.58, 61.11, 65.95, 115.25, 116.41, 129.90, 130.00, 133.58, 152.43, 166.98, 167.69, 170.92, 172.81, 174.88; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% HCOONH4 tR = 4.65 (100%); Anal. izrač. za C21H23N5O6 C, 57.14; H, 5.26; N, 15.86;
Pronađeno: C, 56.99; H, 4.95; N, 15.90.
5.48 3-{4-[3-(4-IZOPROPIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0364]
[0365] CH3CN rastvoru (15 ml) 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,43 g, 0,970 mmol) dodat je 4-izopropilpiperidin (0,160 g, 1,261 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,321 ml, 1,940 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Bela suspenzija je uparena pod vakuumom da bi se oslobodila od CH3CN. Dobijena bela čvrsta supstanca je mešana u vodi (50 ml) i ekstrahovana metilen hloridom (3 x 80 ml). Kombinovane faze metilen hlorida su isprane zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 50 ml), osušene iznad natrijum sulfata i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (72 mg, 50% prinos); mp, 153-155°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.74 min (96.3%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.83 (d, J = 6.8 Hz, 6H, 2CH3), 0.89 - 1.02 (m, 1H, CH), 1.14 (qd, J = 3.9, 12.2 Hz, 2H, CH2), 1.37 (dq, J = 6.6, 13.2 Hz, 1H, CH), 1.55 (dd, J = 1.4, 10.9 Hz, 2H, CH2), 1.75 - 1.91 (m, 2H, CH2), 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.80 (d, J= 11.5 Hz, 2H, CH2), 2.84 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.43 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.20 - 7.28 (m, 1H, Ar), 7.28 - 7.41 (m, 5H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.68, 22.39, 28.89, 31.21, 31.95, 41.85, 45.09, 51.59, 53.62, 62.25, 69.63, 115.17, 115.26, 126.13, 127.87, 128.29, 129.78, 129.95, 133.31, 136.44, 139.01, 153.46, 167.99, 170.95, 172.80. LC/MS (M+1)<+>= 490; Anal. izrač. za C29H35N3O4 0.2 H2O: C, 70.62; H, 7.23; N, 8.52; Pronađeno: C, 70.41; H, 7.26; N, 8.44.
5.49 3-{1-OKSO-4-[3-(4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0366]
[0367] CH3CN rastvoru (15 ml) 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,442 g, 0,997 mmol) dodat je 4-fenilpiperidin (0,209 g, 1,296 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,330 ml, 1,994 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen u vakuumu da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca, koja je mešana u vodi (50 ml) i ekstrahovana metilen hloridom (3 x 50 ml). Kombinovane faze metilen hlorida su ponovo isprane vodom (50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušene iznad natrijum sulfata i uparene do beličaste čvrste supstance (∼0,5 g), koja je mešana u acetonitrilu (10ml) u uljanom kupatilu na 50°C tokom 10 minuta, potom filtrirana i osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-{1-okso-4-[3-(4-fenil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0,36 g, 69% prinos); mp, 226-228°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.79 min, 96.0%.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.53 - 1.79 (m, 4H, 2CH2), 1.89 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.33 - 2.47 (m, 2H, CHH, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.80 - 2.99 (m, 3H, CH2, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.12 - 7.53 (m, 12H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 33.05, 41.81, 45.13, 51.59, 53.57, 62.23, 69.63, 115.19, 115.26, 125.94, 126.24, 126.67, 128.04, 128.29, 128.45, 129.78, 129.97, 133.32, 136.49, 138.82, 146.21, 153.46, 167.99, 170.95, 172.80. LC/MS (M+1)<+>= 524; Anal. izrač. za C32H33N3O4+0.3 H2O: C, 72.65; H, 6.40; N, 7.94. Pronađeno: C, 72.48; H, 6.33; N, 7.78.
5.50 AMID 1-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-IL OKSIMETIL]-BENZIL}-1H-[1,2,3]TRIAZOL-4-KARBOKSILNE KISELINE
[0368]
Faza 1: metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0369] Mešavini natrijum azida (0,226 g, 3,47 mmol) u etanolu (40 mL) na sobnoj temperaturi dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1,5 g, 3,16 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do refluksa tokom 4 h pre nego što je ohlađena i dodata joj voda (50 mL) i EtOAc (200 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao žuta lepljiva čvrsta supstanca (1,5 g, 109% sirovi prinos)). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 439.
Faza 2: Amid propionske kiseline
[0370] Etil propiolat (2 g, 20,39 mmol) je dodat mešanom vodenom AMONIJAKU (5,99 g, 102 mmol) na -78 °C u kapima preko 7 min. Dobijena mešavina je mešana ispod -78 °C tokom 1 h i ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Reakciona mešavina je koncentrovana pod visokim vakuumom da bi se dobio amid propionske kiseline kao žuto ulje (1,41 g, 100% sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.07 (s, 1H, CH), 7.62 (br. s., 1H, NHH), 8.07 (br. s., 1H, NHH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 75.37, 78.51, 153.23.
Faza 3: metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-karbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0371] U mikrotalasnu bočicu dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(azidometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (300 mg, 0,69 mmol) i propiolamid (81 mg, 1,17 mmol) u etanolu (2 mL). Mešavina je zagrevana u mikrotalasnoj pećnici tokom 15min na 150°C. Reakciona mešavina je koncentrovana i mešana u EtOAc (20 mL). Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-karbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao čvrsta supstanca (255 mg, 73% sirovi prinos); LCMS MH = 507.
Faza 4: amid 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzil}-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline
[0372] Izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-(4-((4-karbamoil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250mg, 0,49 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na sobnoj temperaturi dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (55,4 mg, 0,49 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva sata i držana u frižideru preko noći. Reakcionoj mešavini je dodat KALIJUM TERT-BUTOKSID (110 mg, 1,0 mmol), dve porcije, i mešana je na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre nego što je razblažena sa EtOAc (30 mL). Suspenziji je dodata HCl (aq, 1N, 4 mL) i filtrirana je. Filtrat je ekstrahovan i organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom i proizvod je mešan u CH3CN (5 mL). Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio amid 1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline
[0373] kao bela čvrsta supstanca (21 mg, 9% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.5min (97.4%); mp: N/A;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.44 (dd, J = 4.3, 13.2 Hz, 1H, CHH), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.98 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J= 5.0, 13.3 Hz, 1H, CHH), 5.24 (s, 2H, CH2), 5.66 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.57 (m, 4H, NHH, Ar), 7.85 (s, 1H, NHH), 8.61 (s, 1H, triazol), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.32, 31.19, 45.07, 51.57, 52.75, 69.12, 114.94, 115.29, 126.66, 128.15, 129.82, 129.97, 133.32, 135.45, 136.73, 143.12, 153.38, 161.39, 167.99, 170.97, 172.83; LCMS MH = 475; Anal. izrač. za C24H22N6O5: C, 60.75; H, 4.67; N, 17.71; Pronađeno: N/A.
5.51 AMID 3-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-IL OKSIMETIL]-BENZIL}-3H-[1,2,3]TRIAZOL-4-KARBOKSILNE KISELINE
[0374]
Faza 1: metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0375] Mešavini natrijum azida (0,226 g, 3,47 mmol) u etanolu (40 mL) na sobnoj temperaturi dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1,5 g, 3,16 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do refluksa tokom 4 h pre nego što je ohlađena i dodata joj voda (50 mL) i EtOAc (200 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao žuta lepljiva čvrsta supstanca (1,5 g, 109% sirovi prinos)). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 439.
Faza 2: Amid propionske kiseline
[0376] Etil propiolat (2 g, 20,39 mmol) dodat je mešanom vodenom AMONIJAKU (5,99 g, 102 mmol) na -78 °C u kapima preko 7 min. Dobijena mešavina je mešana ispod -78 °C tokom 1 h i ostavljena je da se ohladi do sobne temperature. Reakciona mešavina je koncentrovana pod visokim vakuumom da bi se dobio amid propionske kiseline kao žuto ulje (1,41 g, 100% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.07 (s, 1H, CH), 7.62 (br. s., 1H, NHH), 8.07 (br. s., 1H, NHH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 75.37, 78.51, 153.23.
Faza 3: metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(5-karbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0377] U mikrotalasnu bočicu dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(azidometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (300 mg, 0,686 mmol) i propiolamid (81 mg, 1,166 mmol) u etanolu (2 mL).
Mešavina je zagrevana u mikrotalasnoj pećnici tokom 15min na 150°C. Reakciona mešavina je koncentrovana i mešana u EtOAc (20 mL). Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4(5-karbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao čvrsta supstanca (50 mg, 14% prinos); LCMS MH = 507.
Faza 4: amid 3-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzil}-3H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline
[0378] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((5-karbamoil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (50,0 mg, 0,099 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (41,00 mg, 0,37 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre dodavanja EtOAc (15 mL), nakon čega je usledilo dodavanje HCl (1N, aq, 2 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran sa NaHCO3(aq, zas., 5 mL) i slanim rastvorom (5 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je mešana u CH3CN (4 mL) i etru (15 mL).
Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio amid 3-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzil}-3H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (40 mg, 85% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.88min (95.7%); mp: 280-282 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.59 (br. s., 1H, CHH), 2.81 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H, NHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 5.94 (s, 2H, CH2), 7.24 (d, J = 8.1 Hz, 2H, M01), 7.31 (dd, J = 4.2, 7.6 Hz, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.81 (s, 1H, NHH), 8.23 (s, 1H, NHH), 8.26 (s, 1H, triazol), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.16, 45.04, 51.53, 51.65, 69.14, 114.85, 115.25, 127.69, 127.98, 129.78, 129.93, 130.34, 133.28, 134.67, 136.10, 136.27, 153.39, 158.90, 167.97, 170.93, 172.81; LCMS MH = 475; Anal. izrač. za C24H22N6O5+0.5H2O: C, 59.62; H, 4.80; N, 17.38; Pronađeno: C, 59.82; H, 4.65; N, 17.09.
5.52 (R)-3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
Faza 1: metil estar 3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline
[0380] 3-hidroksi-2-metilbenzojeva kiselina (105 g, 690 mmol) dodata je u MeOH (800 mL) u balonu sa okruglim dnom sa tri grla od 2L opremljenim kondenzatorom, termometrom i mešalicom, nakon čega je usledilo dodavanje MeOH(250ml). I H2SO4(10 mL, 180 mmol) je dodata gornjem rastvoru. Reakciona mešavina je mešana na 62°C tokom 17 h pre nego što je koncentrovana. Ostatak (200 mL) je dodat u vodu (600 mL) lagano na sobnoj temperaturi i obrazovana je bela čvrsta supstanca. Suspenzija je mešana u ledenom kupatilu tokom 30min i filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana vodom (5 x 250 mL) i osušena da bi se dobio metil estar 3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline kao bela čvrsta supstanca (100g, 87% prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 167;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.28 (s, 3H, CH3), 3.80 (s, 3H, CH3), 6.96 - 7.03 (m, 1H, Ar), 7.09 (t, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 7.14 - 7.24 (m, 1H, Ar), 9.71 (s, 1H, OH).
Faza 2: metil estar 3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-2-metil-benzojeve kiseline
[0381] U balon od 1L sa okruglim dnom i tri grla opremljen mešalicom i termometrom dodati su DMF (300 mL), metil 3-hidroksi-2-metilbenzoat (90 g, 542 mmol) i imidazol (92 g, 1354 mmol). TBDMS-Cl (90 g, 596 mmol) dodat je gornjem rastvoru u delovima radi kontrole unutrašnje temperature između 15-19°C preko 20min, a nakon dodavanja unutrašnja temperatura pala je ispod 10 °C. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16h. Reakciona mešavina je dodata ledenoj vodi (500 mL) i dobijeni rastvor je podeljen u dva dela (700mlx2). Svaki deo je ekstrahovan sa EtOAc (700 mL). I svaki organski sloj je ispran hladnom vodom (350ml) i slanim rastvorom (350ml). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio metil estar 3-(tert -butil-dimetil-silaniloksi)-2-metil-benzojeve kiseline kao svetlo braon ulje (160g, 100% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 281;<1>H NMR (DMSO-d6) δ -0.21 (s, 6H, CH3, CH3), 0.73 - 0.84 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 2.10 (s, 3H, CH3), 3.60 (s, 3H, CH3), 6.82 (dd, 1H, Ar), 6.97 (t, J = 7.9 Hz, 1 H, Ar), 7.13 (dd, J = 1.1, 7.7 Hz, 1 H, Ar).
Faza 3: metil estar 2-bromometil-3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-benzojeve kiseline
[0382] NBS (49,8 g, 280 mmol) dodat je metil 3-(tert-butil dimetilsililoksi)-2-metilbenzoatu (78,4 g, 280 mmol) u metil acetatu (500 mL) na sobnoj temperaturi da bi se dobila narandžasto obojena suspenzija. Dobijena reakciona mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu do 40°C i osvetljena sijalicom sunčeva svetlost od 300wt u refluksu tokom 4 h. Reakciona mešavina je ohlađena i isprana Na2SO3rastvorom 2 x (600 mL, 50% zasićena koncentracija), vodom (500 mL) i slanim rastvorom (600 mL). Organski sloj je<osušen pomoću MgSO>4<i obezbojen drvenim ugaljem. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio metil>estar 2-bromometil-3-(tert -butil-dimetil-silaniloksi)-benzojeve kiseline kao svetlo braon ulje (96g, 91 % sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS M-Br = 279;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.05 - 0.11 (m, 6H, CH3, CH3), 0.82 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 3.65 (s, 3H, CH3), 4.74 (s, 2H, CH2), 6.94 (dd, J= 1.3, 8.1 Hz, 1H, Ar), 7.10 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.21 - 7.29 (m, 1H, Ar); LCMS.
Faza 4: benzil estar (R) 4-[4-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0383] Izmešanom rastvoru metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)benzoata (15,32 g, 36,7 mmol) u acetonitrilu (130 mL) dodat je (R)-benzil 4,5-diamino-5-oksopentanoat hidrohlorid (10 g, 36,7 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijenoj suspenziji dodat je DIPEA (13,45 ml, 77 mmol) preko dodatnog levka preko 5 min i suspenzija je postala bistar rastvor. Reakciona mešavina je zagrevana na 40 °C tokom 31 h i sobnoj temperaturi 18 h pre nego što je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je mešan u dietil etru (120 mL) i obrazovana je bela čvrsta supstanca. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (80mLx4). Filtrati su isprani sa HCl (1N aq, 80mL) i NaHCO3(aq., zas., 80mL) uzastopno, pre nego što su koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio (R) benzil estar 4-[4-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il] -4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlo žuta lepljiva čvrsta supstanca (15,0 g, 101% sirovi prinos).
Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.00 (s, 3H, CH3), 0.01 (s, 3H, CH3), 0.75 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.73 - 2.16 (m, 4H, CH2, CH2), 4.03 - 4.35 (m, 2H, CHH, CHH), 4.53 (dd, J= 5.1, 10.4 Hz, 1H, CHH), 4.64 - 4.82 (m, 2H, CH2), 6.77 - 6.89 (m, 1H, Ar), 6.97 (s, 1H, NHH), 7.01 - 7.23 (m, 7H, Ar), 7.37 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 483.
Faza 5: benzil estar (R) 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline [0384] Izmešanom rastvoru (R)-benzil 5-amino-4-(4-(tert-butildimetilsililoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (8,37 g, 17,3 mmol) u DMF (40 mL) i vode (4,4 mL) na ∼15°C dodat je kalijum karbonat (1,20 g, 8,7 mmol) u jednoj porciji. Dobijena svetlo žuta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h pre dodavanja acetonitrila (50 mL), nakon čega je usledilo dodavanje hlorovodonika (aq, 12 N, 1,7 ml, 20,8 mmol) i obrazovana je bela čvrsta supstanca. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio (R) benzil estar 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao staklasta lepljiva čvrsta supstanca (5,75g, 90% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.01 - 2.39 (m, 4H, CH2, CH2), 4.34 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.49 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.75 (dd, J = 5.0, 10.3 Hz, 1H, CHH), 4.96 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHH), 5.03 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHH), 6.99 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.10 - 7.24 (m, 2H, NHH, Ar), 7.25 - 7.41 (m, 6H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH), 10.03 (s, 1H, OH); LCMS: MH = 369.
Faza 6: benzil estar (R) 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoilbuterne kiseline
[0385] Izmešanom rastvoru (R)-benzil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1 g, 2,71 mmol) u acetonitrilu (35 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 1,4-bis(bromometil)benzen (2,15 g, 8,1 mmol) i KALIJUM KARBONAT (0,375 g, 2,7 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na 50°C tokom 1 h i sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je isfiltrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio (R) benzil estar 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao bistra lepljiva čvrsta supstanca (1,18g, 78% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.04 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 4.44 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.55 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.68 - 4.80 (m, 3H, CHH, CH2), 4.96 (d, J= 12.5 Hz, 1H, CHH), 5.03 (d, J= 12.5 Hz, 1H, CHH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.20 (s, 1H, NHH), 7.24 - 7.38 (m, 7H, Ar), 7.40 - 7.52 (m, 5H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 551, 553.
Faza 7: benzil estar (R) 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[0386] Rastvoru (R)-benzil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (395 mg, 0,716 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je MORFOLIN (0,187 ml, 2,1 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2,5 h i reakcija je završena. Reakcionoj mešavini je dodat EtOAc (50 mL) i NaHCO3(zas. aq, 15 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan da bi se dobio (R) benzil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao lepljiva čvrsta supstanca (350 mg, 88% sirovi prinos) . Proizvod je stavljen u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.01 - 2.40 (m, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.56 (t, J = 4.5 Hz, 4H, CH2, CH2), 4.42 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.54 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.75 (dd, J = 5.0, 10.5 Hz, 1H, CHH), 4.95 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHH), 5.02 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.19 (s, 1H, NHH), 7.26 - 7.38 (m, 9H, Ar), 7.41 - 7.50 (m, 3H, Ar), 7.59 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 558.
Faza 8: (R)-3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion [0387] Izmešanom rastvoru (R)-benzil 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (350mg, 0,6 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0 °C dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (70,4 mg, 0,6 mmol). Mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 h i dodat je KOtBu (10 mg). I reakcija je završena za još 1 sat. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (40 mL) i zakišeljena sa HCl (2 mL, 1N) i neutralizovana sa NaHCO3(zas. aq, 5 mL. Mešavini je dodat slani rastvor (10 mL) i ekstrahovana je. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Lepljiva bela čvrsta supstanca je mešana u etru (40 mL) da bi se dobio (R) 3-[4-(4-morfolin -4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (252 mg, 89% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 15/85, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.41min (99.7%); mp: 141-143 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.25 - 2.47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.50 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J= 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 51.55, 53.11, 62.07, 66.14, 69.38, 114.94, 115.20, 127.61, 128.97, 129.78, 129.93, 133.28, 135.27, 137.66, 153.48, 167.99, 170.96, 172.81; LCMS MH = 450; Anal. izrač. za C25H27N3O5+0.3H2O: C, 66.01; H, 6.12; N, 9.24; Pronađeno: C, 66.00; H, 6.03; N, 9.12;Hiralna HPLC Hiralna AGP, 4 X 150 mm, 5 µm, 0.8 mL, 240 nm, 5/95 iPOH/10mM NH4OAc; R izomer = 92% ee.
5.53 3-(4-((5-MORFOLINOMETIL)BENZO[D]TIAZOL-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0388]
[0389] Faza 1: 2,3-dihloro-5H-1,2,3ditiazolijum hlorid (6,7g, 32,2 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 2-bromo-5-metilanilin (6,0g, 32,2 mmol) u CH2Cl2 (130 mL) i mešan tokom 2 h. Piridin (5,1 g, 64,5 mmol) je dodat i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona mešavina je isprana vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa estrom (20 mL) i heksanom (20 mL) da bi se dobio (Z)-2-bromo-N-(4-hloro-5H-1,2,3-ditiazol-5-iliden)-5-metilanilin (7,9g, 76%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.33 (s, 3H), 6.90=6.92 (m, 2H), 7.53-7.56 (d, J=9Hz, 1H).
[0390] Faza 2: Mešavina (Z)-2-bromo-N-(4-hloro-5H-1,2,3-ditiazol-5-iliden)-5-metilanilina (7,9g, 24,6 mmol) i bakar (I) jodida (5,2g, 27,1 mmol) u piridinu (100 mL) je zagrejana do refluksa tokom 2 h.
Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u EtOAc (150 mL) i voda (100 mL). EtOAc sloj je ispran vodom (3X50 mL), slani rastvor (50 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 4/6 hecan/CH2Cl2tokom 20 min onda do 2/8 tokom 15 min) da bi se dobio 5-metilbenzo[d]tiazol-2-karbonitril (3,1g, 71%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.56 (s, 3H), 7.44-7.48 (dd, J=3 i 9Hz, 1H), 7.84-7.87 (d, J=9Hz, 1H), 8.01 (s, 1H).
[0391] Faza 3: Mešavina 5-metilbenzo[d]tiazol-2-karbonitrila (3,0g, 17,2 mmol) u metanolu (100 mL) je ohlađena u ledenom kupatilu. Rastvor natrijum metoksid/metanol (25mas.%, 13 mL) dodat je lagano i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 6N HCl (15 mL). Mešavina je koncentrovana i ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran vodom (2X35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 2/8 heksan/CH2Cl2 tokom 15 min onda do CH2Cl2 preko 10 min i držan tokom 10 min) da bi se dobio metil 5-metilbenzo[d]tiazol-2-karboksilat (3,2g, 88%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.54 (s, 3H), 4.08 (s, 3H), 7.36-7.39 (dd, J=3 i 9Hz, 1H), 7.83-7.86 (d, J=9Hz, 1H), 8.02 (s, 1H).
[0392] Faza 4: Mešavina metil 5-metilbenzo[d]tiazol-2-karboksilata (3,1g, 15,1 mmol) i N-bromosukcinimida (3,0g, 16,6 mmol) u metil acetatu (50 mL) je zagrejana u uljanom kupatilu na 60°C sijalicom od 300W koja je osvetljavala reakcionu mešavinu tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (50 mL). Mešavina je isprana vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 2/8 CH2Cl2/heksan tokom 15 min onda do CH2Cl2tokom 15 min) da bi se dobio metil5-(bromometil)benzo[d]tiazol-2-karboksilat (2,8g, 65%):<1>H NMR (CDCl3) δ 4.09 (s, 3H), 4.66 (s, 2H), 7.59-7.62 (dd, J=3 i 9Hz, 1H), 7.95-7.98 (d, J=9 Hz, 1H), 8.22-8.23 (d, J=3 Hz, 1H).
[0393] Faza 5: Rastvor metil 5-(bromometil)benzo[d]tiazol-2-karboksilata (2,8g, 9,8 mmol) u acetonu (30 mL) dodat je lagano izmešanoj suspenziji morfolina (1,3g, 14,7 mmol) i kalijum karbonata (4,7g, 34,2 mmol) i katalitičke količine 18-kruna-6 u acetonu (20 mL) na 60°C u uljanom kupatilu. Reakciona mešavina je mešana u uljanom kupatilu na 60°C tokom 3 h, a onda ohlađena i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 10 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2 preko 5 min i držan tokom 15 min, onda do 5% preko 5 min i držan tokom 20 min) da bi se dobio metil 5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-karboksilat (2,3g, 80%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.47-2.50 (m, 4H), 3.67-3.73 (m, 6H), 4.09 (s, 3H), 7.57-7.60 (dd, J=3 i 9Hz, 1H), 7.91-7.94 (d, J=9 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H).
[0394] Faza 6: Rastvor metil 5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-karboksilata (2,2g, 2,5 mmol) u THF (50 mL) dodat je lagano izmešanom rastvoru LiAlH(t-BuO)3/THF (1M, 15,3 mL, 15,3 mmol) u THF (20 mL) i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona mešavina je ohlađena i ugašena vodom (20 mL) pažljivo. Mešavina je razblažena sa EtOAc (150 mL) i vodom (35 mL). Organski sloj je ispran vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 10 min onda do 3%CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min, onda do 5% preko 5min i držan tokom 20 min) da bi se dobio (5-<(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metanol (1,8g, 90%): 1H NMR (CDCl>3<) δ 2.46-2.49 (m, 4H), 3.63 (s,>2H), 3.71-3.73 (m, 4H), 3.94 (b, 1H), 5.04 (s, 2H), 7.37-7.41 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.81-7.83 (d, J=9 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 53.56, 62.56, 63.16, 66.98, 121.55, 123.14, 126.38, 133.51, 136.31, 153.13, 173.12.
[0395] Step7: Mešavina suspenzije trifenilfosfina vezanog za polimer (4,1g, 4,9 mmol) u THF (40 mL) je ohlađena do 3°C. Diizopropil azodikarboksilat (0,9g, 4,6 mmol) je dodat lagano na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 min, rastvor metil5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1,0g, 3,4 mmol) i (5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metanola (1,1g, 4,1 mmol) u THF (60 mL) dodat je lagano na 3-8°C. Reakciona mešavina je mešana na 3°C tokom 10 min, potom je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(80 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(30 mL), vodom (30 mL), slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 10 min, onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min, onda do 5% preko 5 min i držan tokom 20 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0,95g, 52%);<1>H NMR (CDCl3) δ 2.23 (m, 1H), 2.35-2.50 (m, 7H), 3.64-3.74 (m, 6H), 4.46-4.52 (d, J=18Hz, 1H), 4.57-4.63 (d, J=18Hz, 1H), 4.92-4.95 (, 1H), 5.30 (s, 3H), 5.58 (s, 2H), 5.65 (b, 1H0, 6.53 (b, 1H), 7.11-7.14 (d, J=9Hz, 1H), 7.40-7.48 (m, 2H), 7.81-7.87 (m, 2H), 7.99 (s, 1H).
[0396] Faza 8: Kalijum tert-butoksid/THF (1M, 1,7 mL, 1,7 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0,9g, 1,7 mmol) u THF (25 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 1 h, a onda ugašena sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2 (50 mL) i vodom (15 mL). Aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rekristalizovan iz acetona da bi se dobio 3-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0,4g, 55%): mp 228-230°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.00-2.04 (m, 1H), 2.37-2.63 (m, 6H), 2.88-2.94 (m, 1H), 3.56-3.62 (m, 6H), 4.32-4.38 (d, J=18Hz, 1H), 4.47-4.53 (d, J=18Hz, 1H), 5.11-5.17 (dd, J=3 i 12 Hz, 1H), 5.75 (s, 2H), 7.38-7.52 (m, 4H), 7.94 (s, 1H), 8.04-8.07 (d, J=9 Hz, 1H), 11.00 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.00, 51.63, 53.08, 62.00, 66.17, 67.41, 115.29, 116.12, 122.00, 122.74, 126.50, 129.96, 132.95, 133.52, 136.61, 152.60, 152.68, 167.80, 168.03, 170.96, 172.83; Izrač. za C26H26N4O5S+0.35H2O: C, 60.89; H, 5.25; N, 10.92; S, 6.25. Pronađeno: C, 60.59; H, 5.11; N, 10.85; S, 6.30.
5.54 3-(4-((4-((4,5-DIMETIL-1H-IMIDAZOL-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0398] Mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,40 g, 0,90 mmol) i 4,5-dimetil-1H-imidazola (0,24 g, 2,49 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je N,N-diizopropiletil amin (0,16 ml, 0,90 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Suspenziji je dodat 0,2 M fosfatni pufer pH 7,4 (50 mL) da bi se dobila suspenzija. Suspenziji je dodat EtOAc (30 mL) i suspenzija je mešana tokom 10 min. Deo rastvarača je uklonjen da bi se dobila suspenzija. Suspenzija je filtrirana i isprana vodom da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćen sa Prep HPLC (Xbridge C18, 10 µm, 50 x 250 mm, 143 mL/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradijent do 98/2 CH3CN 0.1 % mravlja kiselina/H2O 0.1 % mravlja kiselina u 13 min) da bi se dobilo ulje. Ulju je dodat etar (10 mL) i EtOAc (10 mL) da bi se dobila suspenzija. Suspenzija je filtrirana i isprana estrom (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((4-((4,5-dimetil-1H-imidazol-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (110 mg, 27% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, 5./95 gradijent do 95/5 u 5 min u CH3CN/0.1% H3PO4, 4.91 (97.5%); mp: 180-182 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.87 - 2.09 (m, 7H, CHH, CH3, CH3), 2.31 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 -2.65 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.14 - 4.30 (m, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.01 - 5.17 (m, 3H, CH2, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.12 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.25 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.56 (s, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 8.05, 12.67, 22.31, 31.16, 45.03, 47.19, 51.53, 69.17, 114.93, 115.25, 121.69, 126.87, 128.04, 129.78, 129.95, 132.92, 133.28, 135.54, 135.79, 137.53, 153.39, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS MH = 459; Anal. Izrač. za C26H26N4O4 0.5 H2O: C, 66.80; H, 5.82; N, 11.98; Pronađeno: C, 66.81; H, 5.66; N, 11.91.
5.55 3-(4-((3-(MORFOLINOMETIL)IZOKSAZOL-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0399]
Faza 1: (3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)metil)izoksazol-5-il)metanol
[0400] Rastvor etil 3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)metil)izoksazol-5-karboksilata (3,7 g, 14,49 mmol) u THF (100 mL) je ohlađen do 0 °C, a onda je dodat 1M rastvor DIBALH u toluenu (43.5 mL) u kapima preko 30 min, a potom je mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Mešavina je ugašena 1M vodenim rastvorom natrijum kalijum tartrata (100 mL) i potom je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (150 mL) i slanim rastvorom (150 mL), osušeni (MgSO4) i upareni, dajući 2,5 g proizvoda kao narandžasto ulje, u 81 % prinos;<1>H NMR (CDCl3) δ 1.56 - 1.86 (m, 6H), 2.31 (br, 1H), 3.50 - 3.61 (m, 1H), 3.83 - 3.95 (m, 1H), 4.61 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 4.68 - 4.83 (m, 4H), 6.32 (s, 1H).
Faza 2: (4S)-metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)metil)-izoksazol-5-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoat
[0401] Mešavina (S)-metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-4-metil-5-oksopentanoata (3.4 g, 11.7 mmol), (3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)metil)izoksazol-5-il)metanola (2.5 g, 11.7 mmol), i trifenilfosfina, vezan polimerom, 3 mmol/g (7.8 g, 23 mmol) u THF (200 mL) ohlađena je do 0 °C, i dodat je DIAD (4.6 ml, 23.5 mmol). Nakon 60 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, a mešavina je mešana tokom 16 h na temperaturi okoline. Zatim, mešavina je isfiltrirana, a filtrat uparen. Ostatak je hromatografisan u metilen hlorid-metanol gradijentu. Proizvod je euliran na 2% MeOH, 3.4 g, u 60% prinos;<1>H NMR (CDCl3) δ 1.51 - 1.87 (m, 6H), 2.09 - 2.51 (m, 4H), 3.46 - 3.60 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.81 - 3.94 (m, 1H), 4.31 - 4.57 (m, 2H), 4.59 - 4.66 (m, 1H), 4.67 - 4.85 (m, 2H), 4.87 - 4.98 (m, 1H), 5.12 - 5.32 (m, 2H), 5.52 (br. s., 1H), 6.30 - 6.53 (m, 2H), 7.08 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.35 - 7.52 (m, 2H).
Faza 3: 3-(4-((3-(Hidroksimetil)izoksazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion [0402] Rastvor (4S)-metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)metil)izoksazol-5-il)metoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (2.75 g, 5.64 mmol) ohlađen je do 0 °C, i dodat je kalijum tertbutoksid (0.633 g, 5.64 mmol). Nakon 30 min, dodati su AcOH (100 mL) i voda (25 mL), i mešavina je zagrejana do 45 °C. Mešavina je umešavana na ovoj temperaturi tokom 24 h, a zatim je uparena pod vakuumom. Deo osušenog intermedijera (1.86 g, 5.0 mmol) je rastvoreno u acetonitrilu (100 mL) i tretirano metansulfonil hloridom (0.389 ml, 5.00 mmol) i TEA (0.730 ml, 5.25 mmol). Nakon 2 h mešanja na sobnoj temperaturi metansulfonil hlorid (0.438 ml, 5.64 mmol) i TEA (0.823 ml, 5.92 mmol) su ponovo dodati. Nakon dodatnih 1 h, mešavina ugašena je sa AcOH (1 mL) i uparena pod vakuumom. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog NaHCO3 (100 mL), a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (50 mL). Kombinovane organske faze isprane su zasićenim vodenim NaHCO3 (100 mL), vodom (100 mL), i osušene (MgSO4). Mešavina je uparena i hromatografisana primenom metilen hlorid-metanol gradijenta. Proizvod je euliran na ∼2% MeOH. Prinos sušenja je 1.6 g (71%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.05 (m, 1H), 2.35 - 2.48 (m, 1H), 2.55 - 2.63 (m, 1H), 2.83 - 3.00 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 4.19 - 4.30 (m, 1H), 4.35 - 4.48 (m, 1H), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H), 5.38 (s, 2H), 5.49 (s, 2H), 6.84 (s, 1H), 7.40 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.48 - 7.57 (m, 1H).
Faza 4: 3-(4-((3-(morfolinometil)izoksazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion [0403] Mešavina (5-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoksazol-3-il)metil metansulfonata (0.5 g, 1.113 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je ohlađena do 0 °C. Dodati su morfolin (0.116 ml, 1.335 mmol) i DIEA (0.252 ml, 1.446 mmol), a mešavina umešavana na toj temperaturi. Nakon 16 h, rezultujuća suspenzija je filtrirana, a čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom. Proizvod je dobijen kao bela čvrsta supstanca, 0.4 g u 82% prinos; mp 228-230 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 10/90 gradijent do 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4 u 10 min: 4.38 (99.82%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.82 - 2.12 (m, 1H), 2.22 - 2.48 (m, 5H), 2.54 - 2.67 (m, 1H), 2.79 - 3.05 (m, 1H), 3.55 (br., 6H), 4.16 - 4.49 (m, 2H), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.32 - 7.46 (m, 2H), 7.46 - 7.61 (m, 1H), 10.98 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.16, 45.00, 51.58, 52.51, 52.87, 60.67, 65.98, 104.55, 115.09, 115.96, 129.84, 129.96, 133.49, 152.63, 167.26, 167.80, 170.92, 172.81 Anal. Izrač. za C22H24N4O6: C, 59.99%; H, 5.49%; N, 12.72%; Pronađeno: C, 59.69%; H, 5.43%; N, 12.66%.
5.563-{4-[4-(4-TERT-BUTIL-[1,2,3]TRIAZOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0404]
Faza 1: Metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0405] Mešavini natrijum azida (0.226 g, 3.47 mmol) u etanolu (40 mL) na sobnoj temperaturi dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.5 g, 3.16 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do refluksa tokom 4 h pre nego što je ohlađena i dodata joj voda (50 mL) i EtOAc (200 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-azidometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao žuta lepljiva čvrsta supstanca (1.5 g, 109% sirovi prinos)). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 439.
Faza 2: metil estar 4-{4-[4-(4-tert-butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline
[0406] 3,3-dimetilbut-1-in (752mg, 9.2 mmol), metil 5-amino-4-(4-(4-(azidometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (400 mg, 0.9 mmol) i Toluen (4 mL) zatvoreni su u mikrotalasnu bočicu i zagrejani u mikrotalasnoj rerni na 125°C tokom 3 h. Reakciona mešavina je koncentrovana, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO dajući metil estar 4-{4-[4-(4-tert-butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlu staklastu čvrstu supstancu (160 mg, 34% prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 520.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-tert-butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0407] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-tert-butil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (160mg, 0.3 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) na 0 °C dodat je kalijum tert-butoksid (34.6 mg, 0.3 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 0 °C tokom 10 min i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (30 mL), a onda zakišeljena pomoću HCl (1N, aq, 2 mL). Dobijenoj mešavini je dodat NaHCO3 (aq., zas., 2 mL) i slani rastvor (5 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO i prepHPLC da bi se dobio 3-{4-[4-(4-tert-butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (15 mg, 10% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 45/55, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.67min (97.5%); mp: N/A;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.26 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.86 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.54 -2.66 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.10 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.53 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.40 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.56 (m, 3H, Ar), 7.92 (s, 1H, triazol H), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 30.24, 31.16, 45.06, 51.55, 52.33, 69.12, 114.88, 115.25, 119.84, 128.04, 129.78, 129.93, 133.30, 136.01, 136.45, 153.38, 156.50, 167.96, 170.95, 172.81; LCMS MH = 488.
5.57 3-(1-OKSO-4-((4-((2,4,5-TRIMETIL-1H-IMIDAZOL-1-IL) METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION FORMAT
Faza 1: 2,4,5-Trimetil-1H-imidazol
[0409] Acetaldehid (0.32 ml, 5.8 mmol) dodat je mešavini biacetla (0.51 ml, 5.8 mmol), amonijum acetata (4.03 g, 52.3 mmol) i sirćetne kiseline (8 mL) u mikrotalasnoj bočici (20 mL). Bočica je zatvorena i smeštena u mikrotalasnu rernu tokom 5 min na 180°C. Reakciona mešavina je dodata mešavini leda i NH4OH aq (30 mL) lagano i rezultujući braon rastvor je razblažen vodom (50 mL) i mešavina je ekstrahovana sa EtOAC (3x 35 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,4,5-Trimetil-1H-imidazol kao braon ulje (460 mg, 77% sirovi prinos).
Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.75 (s, 3H, CH3), 1.96 (s, 3H, CH3), 2.12 (s, 3H, CH3), 11.10 (br. s., 1H, NH).
Faza 2: 3-(1-okso-4-((4-((2,4,5-trimetil-1H-imidazol-1-il)metil)benzil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion format
[0410] Izmešanom rastvoru 2,4,5-trimetil-1H-imidazola (447 mg, 4.1 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (400mg, 0.9 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.482 ml, 2.7 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 18 h pre dodavanja EtOAC (70 mL) i NaHCO3(aq, zas, 25 mL). Neka čvrsta supstanca je formirana i filtrirana. Filtrat je ekstrahovan i organski sloj je koncentrovan. Ostatak kombinovan sa čvrstom supstancom je prečišćen PrepHPLC da bi se dobla svetlo braon čvrsta supstanca koja je dalje prečišćena umešavanjem u CH3CN (4 mL) i dietil etrr (30 mL) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((2,4,5-trimetil-1H-imidazol-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il) piperidin-2,6-dion format kao beličasta čvrsta supstanca (93 mg, 20% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.09 min (99.8%); 254-256 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 (d, J = 9.1 Hz, 7H, CHH,<CH>3<, CH>3<), 2.18 (s, 3H, CH>3<), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.60 (br. s., 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.24>(d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.99 - 5.16 (m, 3H, CHH, CH2), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.00 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.25 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 3H, Ar), 8.20 (s, 1H, HCOOH), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 12.31, 12.78, 22.33, 31.16, 45.03, 45.89, 51.53, 69.16, 114.91, 115.23, 121.53, 126.10, 128.11, 129.78, 129.93, 130.18, 133.28, 135.60, 137.32, 141.81, 153.41, 163.55, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS MH = 473; Anal. Izrač. za C27H28N4O4·HCOOH+ 1H2O : C, 62.68; H, 6.01; N, 10.44; Pronađeno: C, 62.54; H, 5.63; N, 10.35.
5.583-(4-((5-METIL-1,3,4-OKSADIAZOL-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0411]
[0412] Faza 1: Rastvoru 2-(hlorometil)-5-metil-1,3,4-oksadiazola (500mg, 3.77 mmol) u DMF (10 mL) dodati su metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1103 mg, 3.77 mmol) i K2CO3 (573 mg, 4.15 mmol), a formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Rastvarač je uparen pod vakuumom, ostatak je podeljen između vode (10 mL) i etil acetata (100 mL), organski sloj je ispran zasićenim natrijum karbonatom (10 mL), slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, a rastvarač je uparen do suvoće. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO (80 g kolona, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 50 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (860 mg, 59% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.25 (d, J = 6.8 Hz, 4H, CH2, CH2), 2.53 (s, 3H, CH3), 3.49 (s, 3H, CH3), 4.29 - 4.61 (m, 2H, CH2), 4.68 -4.80 (m, 1H, CH), 5.52 (s, 2H, CH2), 7.20 (s, 1H, NHH), 7.31 - 7.45 (m, 2H, Ar), 7.49 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.59 (s, 1H, NHH)
[0413] Faza 2: Mešavini metil 5-amino-4-(4-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (422mg, 1.087 mmol) u THF (20 mL) dodat je kalijum tert-butoksid (146 mg, 1.304 mmol) na 0 °C. Formirana mešavina je zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakcija je ugašena vodenim HCl (1N, 1.5 mL), rastvarač je uparen, a ostatak je podeljen između zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (10 mL) i etil acetata (50 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata. Rastvarač je uparen pod vakuumom i sirovi proizvod je resuspendovan acetonitrilom (5 mL) i filtriran da bi se dobio 3-(4-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (250 mg, 33% prinos). mp: 206-208°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99 (s, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 (s, 3H, CH3), 2.55 - 2.68 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.04 (m, 1H, CHH), 4.17 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CH), 5.53 (s, 2H, CH2), 7.33 -7.48 (m, 2H, Ar), 7.49 - 7.61 (m, 1H, Ar), 10.98 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 10.46, 22.30, 31.16, 44.96, 51.59, 59.78, 115.29, 116.30, 129.90, 129.97, 133.53, 152.47, 162.12, 164.82, 167.71, 170.93, 172.80; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% HCOONH4tR= 3.08 (100%); Anal. Izrač. za C17H16N4O5+ 0.2 H2O C, 56.73; H, 4.59; N, 15.57; Pronađeno: C, 56.88; H, 4.52; N, 15.31.
5.59 3-{4-[4-(1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO--IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0414]
[0415] U THF rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(izoindolin-2-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 0.974 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (0.131 g, 1.168 mmol) na 0 °C.
Mešavina je mešana tokom 30 min i dodato je 2 mL 1N HCl praćeno 10 mL zas. NaHCO3 i 25 mL EtOAc. Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je koncentrovan i rezultujuća čvrsta supstanca je prečišćena na koloni sa silikagelom eluirana sa DCM i MeOH da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz 2 mL CH3CN da bi se dobio 3-{4-[4-(1,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro--izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion (60 mg, .13%). m.p.: 153-155 °C. LC-MS m/e= 482. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 4.99 min (95%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.83 (s, 4H, CH2, CH2), 3.87 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.10 - 7.25 (m, 4H, Ar), 7.27 - 7.54 (m, 8H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>CNMR (DMSO): δ 22.32, 31.17, 45.08, 49.30, 51.54, 58.16, 69.32, 114.89, 115.24, 122.29, 122.84, 123.50, 127.78, 127.82, 127.89, 129.94, 131.38, 133.50, 136.30, 137.50, 170.96, 172.82. Anal. izrač. za C29H27N3O4: C% 72.33, H% 5.65, N% 8.73. Pronađeno: C% 70.89, H% 5.31, N% 8.37.
5.603-{4-[4-(4-TERT-BUTIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI] -1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
Faza 1: 5-tert-butil-1H-imidazol
[0417] 1-bromo-3,3-dimetilbutan-2-on (2.0 g, 11.2 mmol) i formamid (1.11 g, 24.6 mmol) umešani su u mikrotalasnu bočicu i zagrejani na 147 °C u zaptivenoj cevi tokom 5.5 h. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažen vodom (40 mL). Mešavina je ekstrahovana sa hepatanom (50 mL). Aq sloj dodat je pomoću K2CO3(10mas.% aq, ∼25 mL) do pH 10. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa DCM (3 x 50 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan da bi se dobio 5-tert-butil-1H-imidazol kao lepljivo žuto ulje (560mg, 40% prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.21 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 6.66 (s, 1H, Ar), 7.47 (d, J = 0.9 Hz, 1H, Ar), 11.70 (br. s., 1H, NH).
Faza 2: metil estar 4-{4-[4-(4-tert-butil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline
[0418] Izmešanom rastvoru 4-tert-butil-1H-imidazola (549 mg, 4.4 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (600 mg, 1.3 mmol) i DIPEA (0.66 mL, 3.8 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (60 mL) i mešavina je isprana sa NaHCO3 ( aq, zas, 20 mL) i slani rastvor (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio metil estar 4-{4-[4-(4-tert-butil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (540 mg, 82% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.17 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.95 - 2.33 (m, 4H, CH2, CH2), 3.49 (s, 3H, CH3), 4.31 - 4.58 (m, 2H, CHH, CHH), 4.72 (dd, J = 4.5, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.11 (s, 2H, CH2), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.83 (d, J = 1.3 Hz, 1H, Ar), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.24 - 7.35 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.53 - 7.64 (m, 2H, NHH, Ar); LCMS MH = 519.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-tert-butil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0419] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-tert-butil-1H-imidazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (540mg, 1.0 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na 0 °C. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 25 min pre nego što je razblažena sa EtOAc (50 mL) a onda zakišeljena pomoću HCl (1N, aq, 4 mL) nakon čega je usledilo dodavanje NaHCO3(aq, zas, 10 mL).
Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćen umešavanjem u acetonitrilu (5 mL) i dietil etru (30 mL) da bi dala 3-{4-[4-(4-tert-butil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao belu čvrstu supstanca (327, 64% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.71 min (97.9%); 227-229 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.17 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.88 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (s, 3H, CHH, CH2), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.83 (d, J = 1.3 Hz, 1H, imidazol H), 7.31 (t, J = 7.4 Hz, 4H, Ar), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 1.1 Hz, 1H, imidazol H), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.24, 30.10, 31.11, 31.34, 44.99, 49.04, 51.48, 69.11, 112.48, 114.83, 115.17, 127.65, 127.97, 129.72, 129.86, 133.23, 135.97, 136.21, 137.62, 151.40, 153.32, 167.90, 170.88, 172.74; LCMS MH = 487; Anal. Izrač. za C28H30N4O4: C, 69.12; H, 6.21; N, 11.51; Pronađeno: C, 69.02; H, 6.05; N, 11.45. Struktura jedinjenja potvrđena je pomoću NOSEY.
5.61 (S)-3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0420]
Faza 1: Pripremanje metil estra (S)-4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0421] 2-L balon sa okruglim dnom napunjen je metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (30 g, 103 mmol), 1,4-bis(bromometil)benzenom (81 g, 308 mmol) i kalijum karbonatom (14.19 g, 103 mmol) i acetonitrilom (1.2 L). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i zagrejana do 50°C tokom 12 sati. Reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan na rotacionom isparivaču.
Rezultujuća čvrsta supstanca je rastvorena u CH2Cl2 i napunjena na 2 kolone sa silikagelom (330 g svaka) eluirana korišćenjem CH2C12/MeOH da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (40g, 82%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.14 - 2.23 (m, 1H, CHH), 2.23 - 2.32 (m, 2H, CHH, CHH), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.34 - 4.63 (m, 2H, CH2), 4.67 - 4.80 (m, 3H, CH2, NCH), 5.25 (s, 4H, CH2), 7.19 (s, 1H, NHH), 7.24 - 7.34 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 5H, Ar), 7.58 (br. s., 1H, NHH)
Faza 2: Pripremanje metil estra (S)-4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[0422] U CH2Cl2 rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (36.5 g, 77 mmol) dodat je morfolin (14.72 ml, 169 mmol) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 h. Mešavini je dodato 200 mL CH2Cl2, isprana vodom (100mL x 2) i slanim rastvorom (100 ml), osušena na Na2SO4i koncentrovana da bi se dobio metil estar (S)-4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela pena (39 g, 100%). M.p.
66-68 °C; Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 15/85 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O: 7.92 min (99%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.00 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.14 - 2.22 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.29 (m, 2H, CHH,CHH), 2.30 - 2.39 (m, 4H, CH2,CH2), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.53 - 3.63 (m, 4H, CH2,CH2), 4.28 - 4.59 (m, 2H, CH2), 4.73 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.14 - 7.23 (m, 1H, NHH), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.51 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.82, 30.33, 44.78, 51.24, 53.12, 53.38, 62.09, 66.14, 69.35, 114.66, 115.12, 127.60, 129.00, 129.55, 130.18, 133.43, 135.31, 137.66, 153.42, 167.84, 171.73, 172.46; Anal. izrač. za C26H31N3O6+0.3 H2O: C% 64.13; H% 6.54; N% 8.63; Pronađeno: C% 63.89; H% 6.39; N% 8.56.
Faza 3: Pripremanje (S)-3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
[0423] U THF rastvor (S)-metil 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (45 g, 93 mmol) dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (10.49 g, 93 mmol) u delovima (2g X5) na -78 °C. Mešavina je mešana na ovoj temperaturi tokom 30 min zatim je dodato 250 mL 1N HCl rastvor praćeno 200 mL zasićenog NaHCO3 rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa CH2Cl2 (150 mLx2). Organski sloj je ispran vodom (50 mL x 3) i slanim rastvorom (100 mL), koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je potom rekristalizovana iz CH3CN (100 mL) da bi se dobio (S)-3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (32g, 76%). mp: 140-142 °C. LC-MS m/e= 450. HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4u 5 min,: tR= 5.61 min (99.5%);<Hiralna AGP C>18<4.0 x 150 mm, 5 µm 10/90 i-propanol/ 10 mM NH>4<Ac u 20 min,: t>R<= 10.07 min (99.5%); 1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.28 - 2.38 (m, 4H, CH2,CH2), 2.44 (dd, J = 4.2, 13.1 Hz, 1H, CHH), 2.53-2.63 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.49 - 3.69 (m, 4H, CH2,CH2), 4.11 - 4.52 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 4H, Ar), 7.40 - 7.52 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.06, 51.55, 53.11, 62.07, 66.14, 69.38, 114.96, 115.20, 127.61, 128.97, 129.78, 129.93, 133.28, 135.27, 137.67, 153.48, 167.97, 170.95, 172.80. LC-MS: 465; Anal. izrač. za C25H27N3O5C: 66.80%; H: 6.05%; N: 9.35%. Pronađeno: C:66.59%; H:5.79%; N:9.26%.
5.62 3-(1-OKSO-4-((4-(((S)-2-(TRIFLUOROMETIL)PIROLIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0424]
[0425] Faza 1: (S)-2-(trifluorometil)pirolidin (198 mg, 1.420 mmol) dodat je kao čvrsta materija rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 0.947 mmol) u acetonitrilu (5 ml). Dobijeni rastvor je mešan tokom 4 h na sobnoj temperaturi a onda tokom 24 h na 70 °C. Dodatne porcije DIEA (0.165 ml, 0.947 mmol) i (S)-2-(trifluorometil)pirolidina (60 mg, 0.43 mmol) su dodate, a dobijena mešavina je mešana na 70 °C tokom dodatnih ∼16 h. Mešavina je ohlađena, a onda koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podeljen između EtOAc (50 mL) i 1N NaHCO3 (30 mL), a vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)pirolidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)pentanoat kao žuta staklasta čvrsta supstanca (500 mg, 99% sirovi prinos). Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja: LCMS: MH = 534.
[0426] Faza 2: Rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(((S)-2-(trifluorometil)pirolidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoatu (500 mg, 0.937 mmol) u DMF (5 mL), dodat je anhidrovani kalijum karbonat (155 mg, 1.125 mmol) i mešavina je mešana na 85 °C tokom ∼17 h. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc (∼150 mL), i isprana sa 1N aq.
NaHCO3(30 mL). Organski sloj je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo svetlo braon ulje. Ulje je rastvoreno u DMF (6 mL) i prečišćeno primenom reverzno fazne preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5 do 80% MeCN preko 30 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su ukombinovane a onda koncentrovane u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Dalje sušenje ove čvrste supstane u vakuum sušnici obezbedilo je 3-(1-okso-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)pirolidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao belu čvrsta supstanca (275 mg, 58% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 45/55 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.80 min (99.6%); mp: 178-180 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.57 - 1.91 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 1.92 - 2.15 (m, 2H, CHH, CHH), 2.31 - 2.48 (m, 2H, CHH, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.75 - 3.03 (m, 2H, CHH, CHH), 3.44 - 3.60 (m, 1H, CHH), 3.65 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CHH), 4.07 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 4H, Ar), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 24.12, 25.84, 31.18, 45.04, 51.55, 53.56, 59.08, 62.79 (q, J = 27.5 Hz, CCF3), 69.38, 114.94, 115.20, 127.66 (q, J = 280.6 Hz, CF3), 127.71, 128.27, 129.78, 129.95, 133.28, 135.24, 139.00, 153.48, 167.99, 170.96, 172.81; LCMS: MH = 502; Anal. izrač. za C26H26F3N3O4: C, 62.27; H, 5.23; N, 8.38; F, 11.36; Pronađeno: C, 61.99; H, 5.17; N, 8.32; F, 11.37.
5.63 (S)-3-METIL-3-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0427]
Faza 1: (S)-3-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-dion
[0428] Mešavini metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)benzoata (4.31 g, 12 mmol i (S)-3-metil-2,6-dioksopiperidin-3-aminijum bromida (2.68 g, 12.00 mmol) u acetonitrilu (100 mL) dodat je DIEA (3.4 g, 26.4 mmol). Mešavina je zagrejana do 60 °C tokom 48 h. Zatim, 50 mL AcOH je dodato, a mešavina je zagrejana do 80 °C, Nakon 15 min, mešavina je uparena radi uklanjanja acetonitrila, a preostao rastvor sirćetne kiseline zatim je zagrejan do refluksa. Nakon 1 h, mešavina je ohlađena do sobne temperature i filtrirana, a filtrat je ispran sirćetnom kiselinom (30 mL) i vodom (50 mL), i osušen pod vakuumom, dajući 2.6 g (79%) beličaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.68 (s, 3H), 1.81 -1.97 (m, 1H), 2.51 - 2.84 (m, 3H), 4.48 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.31 (t J = 7.7 Hz, 1H), 10.13 (s, 1H), 10.85 (s, 1H).
Faza 2: (S)-3-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-dion [0429] Mešavina (S)-3-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (0.3 g, 1.094 mmol), 1,4-bis(bromometil)benzena (0.866 g, 3.28 mmol), i natrijum karbonata (0.116 g, 1.094 mmol) u DMF (10 mL) umešana je na sobnoj temperaturi pod azotom tokom 16 h. Mešavina je podeljena između vode (75 mL) i etil acetata (75 mL), a organska faza je uparena pod vakuumom. Ostatak je hromatografisan primenom metilen hlorid-metanol gradijenta. Proizvod je euliran na 2% MeOH. Osušen, prinos je 190 mg (38% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.69 (s, 3H), 1.82 - 1.94 (m, 1H), 2.52 - 2.76 (m, 3H), 4.50 - 4.76 (m, 4H), 5.27 (s, 2H), 7.26 (dd, J = 7.8, 18.2 Hz, 2H), 7.39 - 7.59 (m, 5H), 10.84 (s, 1H).
Faza 3: (S)-3-metil-3-(4-((4-(morfolinometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion [0430] (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-dion (100 mg, 0.219 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL), i dodati su morfolin (0.021 ml, 0.241 mmol) i DIEA (0.046 ml, 0.262 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Zatim, mešavina je podeljena između EtOAc (50 mL) i vode (50 mL) i organska faza je isprana vodom (50 mL), a onda ekstrahovana sa 1N HCl (2 x 50 mL). Kombinovani kiseli vodeni ekstrakti isprani su sa EtOAc (2 x 50 mL) a zatim učinjeni baznim dodavanjem čvrstog natrijum karbonata, i koji su zatim ekstrahovani sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (MgSO4) i uparen, dajući 90 mg kao bela čvrsta supstanca, u 89% prinosu; mp 178-180 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 5/95 do 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2) preko 5 min zatim 10 min u 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2): 4.63 (96.34%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.68 (s, 3H), 1.83 - 1.93 (m, 1H), 2.28 - 2.40 (m, 4H), 2.52 - 2.80 (m, 3H), 3.46 (s, 2H), 3 .51 - 3.62 (m, 4H), 4.55 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 7.22 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.27 - 7.38 (m, 3H), 7.40 - 7.50 (m, 3H), 10.85 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.68, 27.77, 29.01, 45.60, 53.15, 57.19, 62.10, 66.17, 69.39, 114.79, 127.71, 129.01, 129.74, 129.98, 133.91, 135.28, 137.72, 153.35, 167.00, 172.47, 173.53. Anal. Izrač. za C26H29N3O5+ 2.0 H2O: C, 62.51 %; H, 6.66%; N, 8.41 %; Pronađeno: C, 62.52%; H, 6.29%; N, 8.19%.
5.643-(4-((1,5-DIMETIL-1H-PIRAZOL-3-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0431]
[0432] Faza 1: Rastvoru metil 1,5-dimetil-1H-pirazol-3-karboksilata (1 g, 6.49 mmol) u THF (20 mL) dodat je dibal-H (1 M u toluenu, 19.46 mL, 19.46 mmol) na 0 °C, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodat je rastvor Rošelove soli (1.0 M, 50 ml), praćeno etil acetatom (50 mL), dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi dok nije postignuto jasno razdvajanje faza, pri čemu je organska faza odvojena, a vodena faza ekstrahovana sa EtOAc (3x40 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim NaHCO3(5 mL) i slanim rastvorom, osušen iznad MgSO4, i koncentrovan da bi se dobio (1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metanol (700 mg, 86% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.20 (s, 3H, CH3), 3.63 (s, 3H, CH3), 4.29 (d, J = 5.9 Hz, 2H, CH2), 4.84 (t, J = 5.8 Hz, 1H, OH), 5.93 (s, 1H, Ar)
[0433] Faza 2: Thifenilfosfin na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 3.96 g, 6.34mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (927 mg, 3.17 mmol) u THF (30 mL) na 0 °C, praćeno diizopropil azodikarboksilatom (1.28 g, 6.34 mmol), nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je i (1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metanol (400 mg, 3.17 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana etil acetatom (10 x 20 mL). Kombinovani filtrat je uparen do suvoće, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (340 mg 27% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99 - 2.29 (m, 7H, CH2, CH2, CH3), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.70 (s, 2H, CH3), 4.26 - 4.57 (m, 2H, CH2), 4.70 (s, 1H, CH), 5.06 (s, 2H, CH2), 6.14 (s, 1H, Ar), 7.18 (br. s., 1H, NHH), 7.27 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.32 - 7.40 (m, 1H, Ar), 7.41 - 7.50 (m, 1H, Ar), 7.57 (s, 1H, NHH)
[0434] Faza 3: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (340mg, 0.849 mmol) u THF (20 mL) dodat je kalijum tert-butoksid (105 mg, 0.934 mmol) na 0 °C. Mešavina je zagrejana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. HCl (1N, 1.5 mL) dodat je ugašenoj reakciji, rastvarač je uparen, ostatak je podeljen između etil acetata (50 mL) i vodenog zasićenog natrijum bikarbonata (5 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, rastvarač je uklonjen pod vakuumom, ostatak je rastvoren u etil acetatu (3 mL), heksan (5 mL) je dodat u kapima, obrazovani talog je prikupljen filtracijom da bi se dobio 3-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (150 mg, 48% prinos); mp: 214-216 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.22 (s, 3H, CH3), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.70 (s, 3H, CH3), 4.11 - 4.43 (m, 2H, CH2), 5.00 - 5.18 (m, 3H, CH, CH2), 6.13 (s, 1H, Ar), 7.31 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.35 - 7.43 (m, 1H, Ar), 7.43 -7.59 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 10.62, 22.31, 31.19, 35.78, 45.07, 51.55, 64.00, 104.81, 114.93, 115.07, 129.73, 129.84, 133.21, 139.29, 145.31, 153.46, 168.00, 170.96, 172.81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% HCOONH4 tR = 4.51 (98.77%); Anal. Izrač. za C19H20N4O4 0.2 H2O C, 61.35; H, 5.53; N, 15.06; Pronađeno: C, 61.29; H, 5.30; N, 14.86.
5.652-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(TIOMORFOLINOMETIL)BENZIL)OKSI) IZOINDOLIN-1,3-DION [0435]
Faza 1: Dimetil 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)ftalat
[0436] Dimetil 3-hidroksiftalat (10 g, 47.6 mmol) i (4-(hlorometil)fenil)metanol (7.82 g, 50.0 mmol) rastvoreni su u suvom DMF (60 mL). Rastvoru je dodat K2CO3(6.90 g, 50.0 mmol) i mešavina je mešana na 80 °C tokom 16 h. DMF je uklonjen u vakuumu, a ostatak je podeljen između EtOAc (300 mL) i vode (100 mL). Organski sloj je ispran dodatnom vodom (100 mL) i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu do dimetil 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)-ftalata kao viskozno cílibarsko ulje (19 g): LCMS: MH = 331; Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja
Faza 2: 3-((4-(Hidroksimetil)benzil)oksi)ftalna kiselina
[0437] Dimetil 3-(4-(hidroksimetil)benziloksi)ftalat (19 g stvarna masa, 15.72 g, 47.6 mmol, pretpostavljajući kvantitativni prinos iz prethodne faze) je rastvoren u THF (30 mL). Rastvoru je dodata voda (30 mL). Vodeni NaOH (10 N, 25 mL, 250 mmol) dodat je i mešavina je energično umešavana na 70 °C tokom 2,5 h. Mešavina je ostavljena da se ohladi do st, koncentrovana u vakuumu do sirupa, a onda preneta u flašicu koja sadrži 6 N HCl (45 mL) preko leda. Odmah, čvrsta supstanca je istaložena i gusta suspenzija je razblažena vodom (∼60 mL). Mešavina je isfiltrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Kolač je ispran dodatnom vodom (∼60 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 4 h da bi se dobila 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)ftalna kiselina kao bledo žuta čvrsta supstanca (13.9 g, 97% prinos iz dimetil 3-hidroksiftalata):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.41 - 4.58 (m, 2H, CH2), 5.17 (s, 3H, CH2, OH), 7.20 - 7.64 (m, 7H, Ar), 13.02 (br. s., 2H, 2 x COOH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 62.63, 69.73, 117.03, 121.56, 126.46, 126.88, 127.13, 128.91, 129.57, 134.87, 142.19, 154.50, 166.45, 167.71; LCMS: MH = 303, 94 površina% pri 240 nm. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion
[0438] 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (0.915 g, 5.56 mmol) dodat je rastvoru 3-(4-(hidroksimetil)benziloksi)ftalne kiseline (1.4 g, 4.63 mmol) u suvom piridinu (15 mL) i mešavina je zagrejana do 118 °C u uljanom kupatilu tokom 16 h. Tamna reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakišeljena je sporim dodavanjem 1 N HCl (∼25 mL). Mešavina je dalje razblažena vodom (∼170 mL) a onda podvrgnuta sonikaciji tokom ∼30 minuta kako bi se potpomoglo razbijanje čvrstih agregata. Rezultujuća tamna gusta suspenzija je filtrirana na poroznom levku srednjih pora, a tamna čvrsta supstanca je isprana dodatnom vodom (70 mL). Kolač je osušen sukcijom a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 2,5 h da bi se dobilo 1.6 g tamno plave čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u mešavina DCM, MeCN, i MeOH (∼100 mL svaka) i tretirana obezbojenim drvenim ugljem. Mešavina je promućkana , a zatim filtrirana gravitacijom primenom filter papira. Filtrat/oprani deo (tamno žuta boja) tretirana je još jednom sa obezbojenim drvenim ugljem i potom filtriran na celitnom sloju. Čist filtrat je koncentrovan u vakuumu do suvoće da bi se dobila čvrsta supstanca koja je pretvorena u prah sa vodom i usisno filtrirana. Kolač je ispran dodatnom vodom (∼100 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 4 h da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (1.2 gm, 68% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.08 min (99.9%); mp: 250-252;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.67 (m, 2H, CHH, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.50 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2OH), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.19 (t, J = 5.6 Hz, 1H, OH), 5.36 (s, 2H, CH2O), 7.24 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.88, 30.83, 48.67, 62.53, 69.91, 115.40, 116.52, 120.18, 126.44, 127.09, 133.17, 134.31, 136.86, 142.32, 155.42, 165.21, 166.68, 169.81, 172.66. LCMS: M+Na = 417; MH nije primećen u pozitivno jonizacionom modu; Anal. izrač. za C21H18N2O6: C, 63.96; H, 4.60; N, 7.10; Pronađeno: C, 63.77; H, 4.52; N, 7.32.
Faza 4: 4-((4-(Bromometil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion
[0439] Suspenzija 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-(4-(hidroksimetil)benziloksi)izoindolin-1,3-diona (1.05 g, 2.66 mmol) u mešavini DCM i MeCN (25 mL, 10 mL) je umešana u ledenom kupatilu. Mešavini je dodat PBr3(0.502 mL, 5.32 mmol) u jednoj porciji. Nakon 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom ∼20 h. Reakcionoj mešavini je dodat NaBr (0.822 g, 7.99 mmol) i tetrabutilamonijum bromid (0.077 g, 0.240 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu do beličaste čvrste supstance, a čvrsta supstanca je resuspendovana u vodi intenzivnim mućkanjem i potom filtrirana (srednje porozni levak). Kolač je ispran sa velikom količinom vode (∼250 mL, ukupna zapremina filtrata i vode ispiranja) a onda osušen u vakuum sušnici na 50 °C da bi se dobio 4-((4-(bromometil)benzil)-oksi)-2-(2,6dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (1.21 g, 99% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.85 min (99.5%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.15 (m, 1H, CHH), 2.42 - 2.70 (m, 2H, CHH, CHH), 2.79 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.72 (s, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.4, 12.9 Hz, 1H, CH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.38 - 7.54 (m, 5H, Ar), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.3, 8.4 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.91, 34.12, 48.75, 69.64, 115.57, 116.62, 120.18, 127.48, 129.42, 133.26, 136.33, 136.99, 137.72, 155.37, 165.27, 166.73, 169.87, 172.72; LCMS: M+Na = 479, 481; MH nije primećen.
Faza 5: 2-(2,6-Dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(tiomorfolinometil)benzil) oksi)izoindolin-1,3-dion [0440] U gustu suspenziju 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) u MeCN (10 mL), dodat je tiomorfolin (62.1 mg, 0.601 mmol) praćeno DIEA (0.143 mL, 0.820 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina postaje bistra nakon ∼15 min mešanja i zatim, postepeno, čvrste supstance talože se iz rastvora. Nakon ∼2 h, reakciona mešavina je tretirana sa još DIEA (0.143 mL, 0.820 mmol) i gusta suspenzija je zagrejana do 80 °C uz konstantno mešanje tokom ∼1 h. Mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature lagano uz lagano mešanje. Nakon 2 h, gusta suspenzija je filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca u reakcionoj bočici je isprana na levku sa minimalno MeCN (1 mL). Kolač je ispran vodom (3 X 10 mL). Zaostala čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici na 60 C tokom 4 h da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(tiomorfolinometil)-benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (225 mg, 86%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.96 min (99.3%); mp: 221-223 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.10 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.66 (m, 11H, 4 x CH2, 3 x CHH), 2.80 - 2.97 (m, 1H, CHH), 3.50 (s, 2H, CH2N), 5.09 (dd, J = 5.3, 12.8 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2O), 7.26 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.53 (m, 2H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.21, 26.38, 30.16, 47.99, 53.65, 61.49, 69.19, 114.75, 115.82, 119.45, 126.52, 128.12, 132.51, 134.00, 136.23, 137.16, 154.78, 164.55, 166.00, 169.13, 171.98; LCMS: MH = 480; Anal. izrač. za C25H25N3O5S 0.28 H2O: C, 61.96; H, 5.32; N, 8.67; S, 6.62; Pronađeno: C, 61.97; H, 5.12; N, 8.63; S, 6.55.
5.663-(4-((6-(MORFOLINOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0441]
[0442] Faza 1: Etil 3-bromo-2-oksopropanoat (9.0g, 46.2 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 5-metilpiridin-2-amina (5.0g, 46.2 mmol) u etanolu (50 mL). Dobijena mešavina je refluksovana tokom 18 h. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (40 mL), vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 20% EtOAc/CH2Cl2 tokom 20 min zatim do 100% EtOAc preko 30 min) da bi se dobio etil 6-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilat (3.8g, 40%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.44 (t, J=6 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 4.42-4.49 (q, J=6 Hz, 2H), 7.07-7.11 (dd, J=3 i 12 Hz, 1H), 7.56-7.59 (d, J=9 Hz, 1H), 7.90-7.91 (d, J=3 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H).
[0443] Faza 2: Mešavina etil 6-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilat (3.7g, 18.2 mmol) i N-bromosukcinimida (3.2g, 18.2 mmol) u metil acetatu (50 mL) je zagrejana u 60°C uljanom kupatilu sa sijalicom od 300W koja je osvetljavala reakcionu mešavinu tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana vodom (2X35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 20% EtOAc/CH2Cl2for 25 min) da bi se dobio etil 3-bromo-6-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilat (4.7g, 90%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.46 (t, J=6 Hz, 3H), 2.41 (s, 3H), 4.45-4.52 (q, J=6 Hz, 2H), 7.16-7.19 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.58-7.61 (d, J=9 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 14.41, 18.45, 61.35, 99.75, 118.46, 121.90, 124.57, 129.95, 133.55, 144.27, 162.45.
[0444] Faza 3: Mešavina etil 3-bromo-6-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilata (4.5g, 15.8 mmol), N-bromosukcinimida (2.8g, 17.8 mmol) i 2,2'-azobisizobutironitrila (0.6g) u CCl4(75 mL) je zagrejana u 75°C uljanom kupatilu sa sijalicom od 300W koja je osvetljavala reakcionu mešavinu tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana , a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (100 mL) i ispran vodom (2X30 mL), slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 5 min onda do 10% EtOAc/CH2Cl2 preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 20% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio etil 3-bromo-6-(bromometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilat (2.5g, 44%);<1>H NMR (CDCl3) δ 1.47(t, J=6 Hz, 3H), 4.46-4.52 (q, J=6 Hz, 2H), 4.54 (s, 2H), 7.35-7.39 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.68-7.71 (d, J=9 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 14.35, 29.60, 61.54, 100.79, 119.60, 123.28, 125.38, 128.28, 134.56, 144.45, 162.09.
[0445] Faza 4: rastvor etil 3-bromo-6-(bromometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilata (2.4g, 6.7 mmol) u acetonu (50 mL) i DMF (40 mL) dodat je izmešanoj mešavini morfolina (0.9g, 10.1 mol), kalijum karbonata (3.3g, 23.6 mmol) i katalitičkoj količini od 18-kruna-6 u acetonu (50 mL) u 60°C uljanom kupatilu. Reakciona mešavina je mešana u 60°C uljanom kupatilu tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAC (100 mL) i ispran vodom (2X35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a čvrsti ostatak je mešan sa estrom da bi se dobio etil 3-bromo-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilat (1.4g, 55%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.47 (t, J=6 Hz, 3H), 2.48-2.51 (m, 4H), 3.55 (s, 2H), 3.72-3.75 (m, 4H), 4.46-4.53 (q, J=6 Hz, 2H), 7.39-7.42 (d, J=9 Hz, 1H), 7.63-7.66 (d, J=9 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H).
[0446] Faza 5: LiAlH4/THF (1M, 3.9 mL, 3.9 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru etil 3-bromo-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-karboksilata (1.2g, 3.3 mmol) u THF (40 mL) na 0-5°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 h. Reakciona mešavina ugašena je vodom (1 mL), 2N NaOH (1 mL), vodom (4 mL). Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (40 mL). Filtrat je ispran slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio (6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metanol (0.6g, 75%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.45-2.50 (m, 4H), 3.46 (s, 2H), 3.70-3.74 (m, 4H), 4.84 (s, 2H), 7.19-7.22 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.47-7.52 (m, 2H), 8.02 (s, 1H).
[0447] Faza 6: Trifenilfosfin vezan za polimer (2.5g, 3.4 mmol) u THF (30 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu do 3°C. Diizopropil azadikarboksilat (0.6g, 3.2 mmol) dodat je lagano na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 min, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.7g, 2.3 mmol) i (6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metanola (0.6g, 2.3 mmol) u THF (70 mL) dodat je lagano na 5-10°C. Nakon što je izmešan tokom 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(35 mL), vodom (35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 10% preko 5 min i držan tokom 10 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.5g, 43%).
[0448] Faza 7: rastvor metil 5-amino-4-(4-((-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.5g, 0.9 mmol) u THF (15 mL) je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu tokom 5 min. Dodat je rastvor kalijum tert-butoksid/THF (1M, 1.0 mL, 1.0 mmol). Reakciona mešavina je mešana na -78°C kupatilu tokom 1 h. Reakciona mešavina ugašena je sa 1N HCl (3 mL) i zagrejana do sobne temperature. Voda (20 mL) je dodata i učinjena baznom sa zas. NaHCO3 (8 mL) do pH=8. Mešavina je ekstrahovana sa CH2Cl2 (3X30 mL), a kombinovani organski rastvor je ispran slanim rastvorom (25 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je istaložen sa etrom da bi se dobio 3-(4-((6(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.4g, 83%): mp 155-157°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.01 (m, 1H), 2.36-2.39 (m, 4H), 2.39-2.60 (m, 2H), 2.85-2.96 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.55-3.58 (m, 4H), 4.20-4.26 (d, J=18Hz, 1H), 4.36-4.41 (d, J=18 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J=6 i 12 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 7.21-7.24 (m, 1H), 7.31-7.33 (d, J=9 Hz, 1H), 7.46-7.51 (m, 3H), 8.02 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.18, 45.06, 51.55, 52.97, 59.13, 64.61, 66.13, 111.89, 115.03, 115.18, 116.24, 122.06, 125.67, 126.91, 129.77, 133.27, 141.58, 143.90, 153.45, 167.99, 170.96, 172.81; Izrač. za C26H27N5O5+0.2CH2Cl2: C, 62.13; H, 5.45; N, 13.83. Pronađeno: C, 62.16; H, 5.74; N, 13.13.
5.673-{4-[4-(3,4-DIHIDRO-1H-IZOKVINOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0449]
Faza 1 Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(3,4-dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi] -1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0450] U CH3CN rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.37 g, 0.778 mmol) dodat je 1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin (0.124 g, 0.934 mmol) i DIPEA (0.272 ml, 1.557 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana , a zatim estrahovana sa CH2Cl2i vodom. Organski sloj je koncentrovan i dao je metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(3,4-dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0.4g, 97%). On je upotrebljen direktno u sledećoj fazi.
Faza 2 Pripremanje 3-{4-[4-(3,4-Dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0451] U CH3CN rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-((3,4-dihidroizokvinolin-2(1H)-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.4 g, 0.758 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (0.094 g, 0.834 mmol) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sata. Reakcija je ugašena dodavanjem 5 mL 1N HCl praćeno NaHCO3 (zas., 5 mL). Mešavini su dodati CH2Cl2 (20 mL), voda (20 mL) i zatim je ona ekstrahovana. Organski sloj je koncentrovan i dao je belu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz 4 mL CH3CN da bi se dobila bela čvrsta supstanca 170 mg (45%). m.p.: 173-175 °C. LC-MS m/e= 496. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.43 min (97%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.11 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, J = 4.4, 13.3 Hz, 1H, CHH), 2.52 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.63 - 2.74 (m, 2H, CH2), 2.74 - 2.84 (m, 2H, CH2), 2.84 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.54 (s, 2H, CH2), 3.65 (s, 2H, CH2), 4.13 - 4.54 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.82 - 7.20 (m, 4H, Ar), 7.26 - 7.68 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.64, 31.20, 45.10, 50.16, 51.58, 55.40, 61.48, 69.44, 114.98, 115.23, 125.43, 125.94, 126.32, 127.72, 128.41, 128.82, 129.82, 129.95, 134.05, 134.69, 135.29, 138.10, 153.51, 170.98, 172.83. Anal. izrač. za C30H29N3O4+0.3 H2O; C% 71.92; H% 5.96; N% 8.39; Pronađeno:C% 71.55; H% 5.72; N% 8.22.
5.683-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-BENZO[1,4]OKSAZIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0452]
[0453] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350mg, 0.79 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je rastvor 3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]oksazina (128 mg, 0.9 mmol) u acetonitrilu (2 mL) i DIPEA (0.21 ml, 1.2 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni svetlo žuti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 18 h i mešan na 40°C tokom 24 h. Proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC da bi se dobio 3-{4-[4-(2,3-dihidro-benzo[1,4]oksazin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (208 mg, 53% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 55/45, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.50min (99.0%); mp: 145-147 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.35 - 3.43 (m, 2H, CH2), 4.14 - 4.45 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 4.47 (s, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 6.44 - 6.56 (m, 1H, Ar), 6.57 - 6.76 (m, 3H, Ar), 7.22 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.59 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NHH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.16, 45.06, 47.06, 51.55, 53.57, 64.03, 69.32, 112.27, 114.91, 115.20, 115.77, 116.91, 121.24, 127.20, 127.96, 129.78, 129.95, 133.28, 135.17, 135.21, 138.23, 143.46, 153.45, 167.99, 170.95, 172.81; LCMS MH = 498; Anal. Izrač. za C29H27N3O5+0.3H2O : C, 69.25; H, 5.53; N, 8.35;
Pronađeno: C, 69.01; H, 5.29; N, 8.25.
5.69 3-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-5H-BENZO[F][1,4]OKSAZEPIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0454]
[0455] Izmešanom rastvoru 2,3,4,5-tetrahidrobenzo[f][1,4]oksazepina (141 mg, 0.9 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (350mg, 0.79 mmol) i DIPEA (0.21 ml, 1.1 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 h pre dodavanja 3-(4-(4-(bromometil)benzil oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (30mg, 0.07mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h i mešavina je prečišćena pomoću prep HPLC da bi se dobio 3-{4-[4-(2,3-dihidro-5H-benzo[f][1,4]oksazepin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (216 mg, 54% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 23/77, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.16min (99.7%); mp: 148-150°C;<1>HNMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 2.81 - 3.04 (m, 3H, CH2, CHH), 3.62 (s, 2H, CH2), 3.75 (s, 2H, CH2), 3.95 - 4.06 (m, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.03 - 5.17 (m, 1H, CHH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.91 - 7.09 (m, 3H, Ar), 7.13 - 7.25 (m, 1H, Ar), 7.33 (d, J = 7.2 Hz, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.07, 51.55, 57.28, 57.73, 57.87, 69.41, 69.87, 115.00, 115.22, 120.38, 123.08, 127.66, 128.36, 128.68, 129.78, 129.95, 130.53, 131.62, 133.30, 135.25, 138.62, 153.48, 159.60, 167.99, 170.96, 172.81; LCMS MH = 512; Anal. Izrač. za C30H29N3O5+0.4H2O : C, 69.46; H, 5.79; N, 8.10; Pronađeno: C, 69.25; H, 5.53; N, 8.35.
5.70 2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(MORFOLINOMETIL) TIAZOL-2-IL)METOKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0456]
[0457] Faza 1: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 3.5 g, 5.6 mmol) dodat je izmešanom rastvoru dimetil 3-hidroksiftalata (647 mg, 3.08 mmol) u THF (30 mL) na 0 °C, praćeno diizopropil azodikarboksilatom (1.13 g, 5.6 mmol), nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (600mg, 2.80 mmol), mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana etil acetatom (10 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su upareni pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 50 min) da bi se dobio dimetil 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)ftalat (800 mg, 70% prinos).
[0458] Faza 2: Mešavina dimetil 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)ftalata (320 mg, 0.787 mmol) i natrijum hidroksida (10 ml, 30.0 mmol) u etanolu (20 ml) je zagrejan do refluksa tokom 1 sata.
Reakciona mešavina je uparena do suvoće pod vakuumom, voda (20 mL) je dodat, mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 10 mL), vodeni sloj je odvojen i zakišeljen sa HCl (3N, 15 mL), zatim uparen pod vakuumom do suvoće. Sirovi proizvod je primenjen za sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja.
[0459] Faza 3: Mešavina 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)ftalna kiselina (298 mg, 0.787 mmol) i 3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (155 mg, 0.944 mmol) u piridinu (20 mL) je zagrejan do refluksa preko noći. Piridin je uparen do suvoće pod vakuumom, ostatak je podeljen između zasićenog natrijum bikarbonata (20mL) i etil acetata (50 mL), organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, rastvarač je upare, a proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC (uslovi gradijenta: 0-20% acetonitril u vodi, 0.1% mravlja kiselina u 15 min) da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoksi)izoindolin-1,3-dion (39 mg, 11% prinos); mp: 210-212 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.14 (m, 1H, CHH), 2.42 (d, J = 4.2 Hz, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.55 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.77 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.49 - 3.58 (m, 4H, CH2, CH2), 3.60 (s, 2H, CH2), 4.95 - 5.22 (m, 1H, CH), 5.66 (s, 2H, CH2), 7.44 - 7.58 (m, 2H, Ar), 7.65 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.93, 30.90, 48.78, 52.99, 57.52, 66.11, 67.56, 116.18, 116.82, 118.28, 120.45, 133.26, 136.97, 152.88, 154.60, 164.44, 165.07, 166.64, 169.84, 172.72; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% HCOONH4tR= 4.34 (99.30%); Anal. Izrač. za C23H24N4O8S C, 53.48; H, 4.68; N, 10.85; Pronađeno: C, 49.86; H, 4.42; N, 10.50.
5.713-(4-((1-METIL-5-(MORFOLINOMETIL)-1H-PIRAZOL-3-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0461] Faza 1: 250 mL bočica sa okruglim dnom napunjena je sa metil 1,5-dimetil-1H-pirazol-3-karboksilatom (2 g, 12.97 mmol), NBS (2.309 g, 12.97 mmol), AIBN (0.213 g, 1.297 mmol) kao i sa CC14 (40 ml, 415 mmol). Mešavina je refluksovana pod azotom preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena, čvrsta supstanca je filtrirana, filtrat je uparen do suvoće, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (120 g kolona, etil acetat/heksani gradijent od 0% do 30% u 50 min, 30% 30 min) da bi se dobio metil 5-(bromometil)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilat (500 mg, 17% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 3.93 (s, 3H, CH3), 3.99 (s, 3H, CH3), 4.47 (s, 2H, CH2), 6.83 (s, 1H, Ar).
[0462] Faza 2: Rastvoru metil 5-(bromometil)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilat (500mg, 2.145 mmol) u acetonitrilu (30 mL) su dodati morfolin (0.280 ml, 3.22 mmol) i trietil amin (0.449 ml, 3.22 mmol).
Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7 sati. Rastvarač je uparen do suvoće, ostatak je podeljen između etil acetata (50 mL) i vodenog zasićenog natrijum bikarbonata (20 mL), organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, rastvarač je uparen da bi se dobio metil 1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-karboksilat (450 mg, 88% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.45 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.52 (br. s., 2H, CH2), 3.70 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.93 (s, 3H, CH3), 4.00 (s, 3H, CH3), 6.54 - 6.87 (m, 1H, Ar).
[0463] Faza 3: Mešavini metil 1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-karboksilata (450mg, 1.881 mmol) u THF (15 mL) dodat je Dibal-H (5.64 mL, 5.64 mmol) na 0 °C. Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen pod vakuumom, ostatak je podeljen između Rošelove soli (1.0 M, 10 ml) i etil acetata (50 ml), organska faza je odvojena, a vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (3x20 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim natrijum bikarbonat (5 mL) i slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), i koncentrovani da bi se dobio (1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metanol (300 mg, 76% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.47 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.52 (br. s., 2H, CH2), 3.72 (d, J = 2.1 Hz, 4H, CH2, CH2), 3.90 (s, 3H, CH3), 4.65 (s, 2H, CH2), 6.17 (br. s., 1H, Ar).
[0464] Faza 4: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 1.78 g, 2.84mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (415 mg, 1.420 mmol) u THF (30 mL) na 0 °C, praćeno DIAD (574 mg, 2.84 mmol), nakon mešanja tokom 10 min, dodat je rastvor (1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metanola (300mg, 1.420 mmol) u THF (10 mL), i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smola je filtrirana i isprana etil acetatom (10 x 30 mL).
Kombinovani filtrat je uparen do suvoće, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH u DCM gradijent od 0-5% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (270 mg, 39% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.30 (m, 4H, CH2, CH2), 2.30 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 3.49 (s, 5H, CH2, CH3), 3.52 - 3.63 (m, 4H, CH2, CH2), 3.80 (s, 3H, CH3), 4.25 - 4.57 (m, 2H, CH2), 4.25 - 4.57 (m, 2H, CH2), 4.71 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CH), 5.09 (s, 2H, CH2), 5.02 - 5.19 (m, 2H, CH2), 6.27 (s, 1H, Ar), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.28 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.32 - 7.40 (m, 1H, Ar), 7.40 - 7.51 (m, 1H, Ar), 7.57 (s, 1H, NHH).
[0465] Faza 5: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250mg, 0.515 mmol) u THF dodat je kalijum tert-butoksid (63.6 mg, 0.566 mmol) na 0 °C, formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakcija je ugašena dodavanjem vodene HCl (1N, 1.5mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, ostatak je podeljen između zasićenog natrijum bikarbonata (5 mL) i etil acetata (30 mL), organski sloj je odvojen i ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata i filtriran, filtrat je uparen do suvoće, čvrsta supstanca je resuspendovana etrom (10 mL) i filtrirana da bi se dobio 3-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (130 mg, 56% prinos); mp: 125-127 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99 (d, 1H, CHH), 2.35 (d, J = 4.0 Hz, 4H, CH2, CH2), 2.46 (br. s., 1H, CHH), 2.52 -2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.49 (s, 2H, CH3), 3.51 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 3.80 (s, 3H, CH3), 4.12 - 4.43 (m, 2H, CH2), 5.03 - 5.17 (m, 3H, CH2, CH), 6.26 (s, 1H, Ar), 7.31 (d, J = 7.4 Hz, 1H, Ar), 7.35 - 7.43 (m, 1H, Ar), 7.43 - 7.55 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 30.38, 31.18, 36.41, 45.07, 51.55, 52.23, 52.93, 64.00, 66.08, 106.66, 115.07, 115.18, 129.74, 129.89, 133.24, 139.35, 145.27, 153.46, 167.97, 170.96, 172.81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% HCOONH4 tR = 3.31 (97.56%); Anal. Izrač. za C23H27N5O5 0.4 EtOAc C, 60.45; H, 6.23; N, 14.33; Pronađeno: C, 60.10; H, 6.04; N, 14.70.
5.724-((4-((7,8-DIHIDRO-1,6-NAFTIRIDIN-6(5H)-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0467] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 5,6,7,8-tetrahidro-1,6-naftiridina (81 mg, 0.601 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je DIEA (0.334 mL, 1.914 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h.
Reakciona mešavina je zagrejana do 80 °C sa ukonjenim poklopcem bočice. Veći deo čvrste supstance rastvoren je, a mešavina je koncentrovana do ∼1/2 originalne zapremine. Nakon ∼2.5 h, mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature uz lagano mešanje. Debela gusta suspenzija je obrazovana koja je starila na 4 °C preko noći. Gusta suspenzija je tretirana sa DIEA (250 µL) a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Gusta suspenzija je potom filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem i kolač je ispran vodom (∼30 mL). Sakupljena čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda osušena dalje u vakuum sušnici na 50 °C tokom 6 h da bi se dobio 4-((4-((7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (275 mg, 99%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.08 min (99.9%); mp: 165-167 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.15 (m, 1H, CHH), 2.38 - 2.65 (m, 2H, CHH, CHH), 2.73 - 3.01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3.58 (s, 2H, CH2), 3.70 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.37 (s, 2H, CH2O), 7.12 (dd, J = 4.7, 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.34 - 7.54 (m, 6H, Ar), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 8.33 (dd, J = 1.7, 4.7 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH;<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 31.89, 48.73, 50.02, 54.26, 61.13, 69.95, 115.50, 116.58, 120.19, 120.95, 127.36, 128.84, 129.81, 133.26, 134.17, 134.87, 136.99, 138.05, 147.15, 154.38, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.72; LCMS: MH = 511; Anal. izrač. za C29H26N4O5+0.6 H2O: C, 66.81; H, 5.26; N, 10.57;
Pronađeno: C, 66.75; H, 5.28; N, 10.84.
5.733-{1-OKSO-4-[4-(4-FENIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0469] Izmešanom rastvoru 4-fenil-1H-imidazol (179 mg, 1.2 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (500 mg, 1.1 mmol) i DIPEA (0.30 ml, 1.7 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 19 h i zagrejana na 40°C tokom 7 h pre dodavanja EtOAc (60 mL), vode (15 mL) i slanog rastvora (15 mL). Zatim acetonitril (20 mL) je dodat rastvorenoj ćvrstoj supstanci. Dobijeni rastvor je ekstrahovan, a organski sloj je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-fenil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (190mg, 33% prinos). ROESY je potvrdio izomernu strukturu proizvoda. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.84 min (99.9%); mp: 246-248 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99 (br. s., 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.60 (m, 1H, CHH), 2.81 -2.99 (m, 1H, CHH), 4.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.39 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.09 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 4H, CH2, CH2), 7.12 - 7.23 (m, 1H, Ar), 7.23 - 7.39 (m, 6H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.68 (d, J = 1.3 Hz, 1H, imidazol H), 7.70 - 7.78 (m, 2H, Ar), 7.83 (d, J = 1.3 Hz, 1H, imidazol H), 10.95 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.15, 45.04, 49.45, 51.53, 69.17, 114.90, 115.23, 115.79, 124.11, 126.17, 127.63, 128.12, 128.40, 129.78, 129.93, 133.28, 134.44, 136.17, 137.45, 137.94, 140.90, 153.38, 167.96, 170.93, 172.80; LCMS MH = 507; Anal. Izrač. za C30H26N4O4+0.1H2O : C, 70.88; H, 5.19; N, 11.00; Pronađeno: C, 70.66; H, 4.87; N, 10.83.
5.74 3-(4-((3-((4-METILPIPERIDIN-1-IL)METIL)IZOKSAZOL-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0470]
[0471] Mešavina (5-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoksazol-3-il)metil metansulfonata (.25 g, 0.556 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je ohlađena do 0 °C.4-metilpiperidin (0.066 g, 0.668 mmol) i TEA (0.073 g, 0.719 mmol) su dodati, ledeno kupatilo je uklonjeno, a mešavina mešana tokom 16 h. Mešavina je podeljena između EtOAc (100 mL) i vode (100 mL), a organska faza je isprana vodom (100 mL). Zatim, organska faza je ekstrahovana sa 1% aq. HCl (100 mL), a ovaj ekstrakt je učinjen baznim sa 5% aq. Na2CO3 (50 mL) i ekstrahovan u EtOAc (2 x 75 mL). Kombinovani organski ekstrakti isprani su vodom (100 mL), osušeni (MgSO4), i upareni, dajući 180 mg (72%), kao bela čvrsta supstanca; mp 168-170 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 10/90 gradijent do 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4 u 10 min: 4.95 (97.98%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.87 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.01 -1.19 (m, 2H), 1.21 - 1.38 (m, 1H), 1.49 - 1.65 (m, 2H), 1.88 - 2.04 (m, 3H), 2.36 - 2.47 (m, 1H), 2.54 - 2.62 (m, 1H), 2.68 - 2.80 (m, 2H), 2.83 - 2.99 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 6.60 (s, 1H), 7.33 - 7.44 (m, 2H), 7.46 - 7.57 (m, 1H), 10.97 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.73, 22.33, 29.97, 31.20, 33.79, 45.05, 51.61, 52.64, 53.14, 60.72, 104.53, 115.10, 115.97, 129.85, 129.98, 133.51, 152.67, 161.56, 167.06, 167.82, 170.94, 172.82. Anal. Izrač. za C24H28N4O5 H2O: C, 61.26%; H, 6.43%; N, 11.91%; Pronađeno: C, 61.41%; H, 6.33%; N, 12.10%.
5.753-(4-((3-(MORFOLINOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-6-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0472]
[0473] Faza 1: Mešavina etil 6-aminoniktinata (8.3g, 49.9 mmol) i hloroacetaldehida (50% u vodi, 15.7g, 99.9 mmol) u CH3CN (200 mL) je refluksovana tokom 17 h. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je umešan sa CH2Cl2(100 mL) i učinjen baznom sa zas. NaHCO3(120 mL). Aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (2X40 mL), a kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran vodom (50 mL), slanim rastvorom (50 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2 preko 5min i držan tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio etil imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilat (8.3g, 87%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42 (t, J=6 Hz, 3H), 4.38-4.45 (q, J=6 Hz, 2H), 7.61-7.75 (m, 4H), 8.93 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 14.33, 61.48, 113.49, 116.89, 117.13, 124.09, 130.02, 135.33, 145.93, 164.87.
[0474] Faza 2: Mešavina etil imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilata (2.9g, 15.4 mmon), 37% aq. formaldehida (1.3g, 15.4 mmol) i morfolina (1.4g, 15.4 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (5 mL) je zagrejana na 50°C tokom 3 h zatim umešavana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je razblažena sa CH2Cl2(40 mL) i učinjena baznom sa 2N NaOH do pH=8. Aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(2X40 mL), a kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio etil 3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilat (4.1g, 92%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.36 (t, J=6 Hz, 3H), 2.37-2.40 (m, 4H), 3.54-3.57 (m, 4H), 3.92 (s, 2H), 4.33-4.40 (q, J=6 Hz, 2H), 7.63-7.65 (m, 3H), 9.18-9.19 (d, J=3 Hz, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 14.07, 51.06, 52.81, 60.99, 66.18, 115.12, 116.58, 121.62, 122.95, 129.67, 134.98, 145.71, 164.47.
[0475] Faza 3: rastvor etil3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilata (4.1g, 14.2 mmol) u THF (50 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu. Rastvor litijum tri-tert-butoksialuminijum hidrid/THF (1M, 29 mL, 29 mmol) dodat je lagano. Nakon što je izmešano tokom 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona mešavina je ohlađena i ugašena vodom (1.5 mL), 2N NaOH (1.5 mL) i voda (4.5 mL). Mešavina je isfiltrirana, a filter je opran sa CH2Cl2 (100 mL). Filtrat je ispran zas. NaHCO3 (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 3% CH3OH/CH2Cl2tokom 10 min onda do 10% preko 10 min i držan tokom 30 min) da bi se dobio (3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanol (1.5g, 42%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.42-2.45 (m, 4H), 3.64-3.67 (m, 4H), 3.78 (s, 2H), 4.75 (s, 2H), 7.18-7.22 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.53-7.56 (d, J=9 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H).
[0476] Faza 4: Mešavina trifenilfosfin vezan za polimer (6.2g, 8.7 mmol) u THF (40 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu do 3°C. Diizopropilazadikarboksilat (1.5g, 7.6 mmol) dodat je lagano na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 min, rastvor (3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanola (1.4g, 5.8 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.7g, 5.8 mmol) u THF (120 mL) dodat je lagano na 5-8°C. Nakon što je izmešan tokom 10 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (120 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (40 mL), vodom (40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2 preko 5 min i držan tokom 10 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 20 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.3g, 43%):
<1>H NMR (CDCl3) δ 2.17-2.18 (m, 1H), 2.37-3.45 (m, 7H), 3.62-3.65 (m, 7H), 3.82 (s, 2H), 4.38-4.43 (d, J=15 Hz, 1H), 4.51-4.57 (d, J=18 Hz, 1H), 4.94-4.96 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 5.68 (b, 1H), 6.51 (b, 1H), 7.13-7.16 (dd, J=6 i 9 Hz, 1H), 7.26-7.28 (m, 1H), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.65-7.68 (d, J=9 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 24.24, 30.45, 45.22, 51.80, 52.61, 53.36, 53.89, 66.93, 68.07, 114.09, 116.25, 118.08, 120.30, 120.59, 123.97, 124.45, 129.92, 130.23, 133.65, 134.44, 146.03, 163.47, 169.14, 171.55, 172.83.
[0477] Faza 5: rastvor metil 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.2g, 2.4 mmol) u THF (30 mL) je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu tokom 15 min. Rastvor kalijum tert-butoksid/THF (1M, 2.6 mL, 2.6 mmol) dodat je lagano. Reakciona mešavina je mešana u -78°C kupatilu tokom 1 h potom zagrejana do 0°C tokom 1 h.
Reakciona mešavina ugašena je sa 1N HCl (5 mL) i dodata je voda (20 mL). Mešavina je učinjena baznom sa zas. NaHCO3do pH=8 i ekstrahovan sa CH2Cl2(3X30 mL). Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 10 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio 3-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.8g, 69%): mp 170-172°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-2.01 (m, 1H), 2.36-2.60 (m, 6H), 2.85-2.93 (m, 1H), 3.33-3.49 (m, 4H), 4.29 (d, J=18Hz, 1H), 4.40 (d, J=18 Hz, 1H), 5.09-5.15 (dd, J=6 i 12 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 7.35-7.62 (m, 6H), 8.63 (s, 1H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 31.16, 44.98, 51.04, 52.79, 66.07, 67.25, 115.04, 115.44, 116.92, 120.45, 120.58, 124.43, 124.77, 129.83, 133.34, 133.79, 144.80, 153.20, 167.94, 170.93, 172.80; Izrač. za C26H27N5O5+0.2Et2O+0.1CH2Cl2: C, 63.00; H, 5.74; N, 13.66. Pronađeno: C, 62.94; H, 5.98; N, 13.50.
5.763-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)FURAN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION [0478]
[0479] Faza 1: Redestilovan morfolin (3.81 mL, 43.7 mmol) je rastvoren u THF (300 mL) i ohlađen do -78 °C pod uslovima gasova azota. U ovaj rastvor n-butilitum (27.3 mL, 43.7 mmol) (1.6 M u heksanu) dodat je u kapima i dobijeni rastvor je mešan tokom dodatnih 20 min. Naknadno, lagano je dodat furan-3-karbaldehid (4 g, 41.6 mmol) u THF (8 mL), nakon dodatnih 20 min sec-butillitijum (31.2 mL, 43.7 mmol) (1.4 M u cikloheksan) dodat je u kapima, dobijena mešavina je mešana -78 °C tokom 2,5 h. Metil hloroformat (4.33g, 45.8mmoL) rastvoren u THF (8 mL) je lagano uveden i reakciona mešavina je mešana tokom 45 min na -78 °C i dodatnih 20 min na sobnoj temperaturi, rastvor je sipan u ledeno hladnu 10% HCl (400 mL, 2.87 M). Slojevi su razdvojeni i vodena faza je ekstrahovana sa estrom (4 x 100 mL), kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad magnezijum sulfata, filtrirani, i koncentrovani pod sniženim pritiskom do suvoće, sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (330 g kolona, EtOAc/heksani gradijent od 0% do 20% u 60 min, 20% tokom 20 min) da bi se dobio metil 4formilfuran-2-karboksilat (1.5 g, 23% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 3.89 (s, 3H, CH3), 7.09 - 7.30 (m, 2H, Ar), 9.75 (s, 1H, CHO).
[0480] Faza 2: Rastvoru metil 4-formilfuran-2-karboksilat (800mg, 5.19 mmol) u dihlorometanu (30 mL) dodat je morfolin (1.357 mL, 15.57 mmol) i sirćetna kiselina (1.783 mL, 31.1 mmol). Reakciona mešavina je mešana tokom 10 min, dodat je natrijum triacetoksib-orohidrid (3300 mg, 15.57 mmol), mešavina je mešana preko noći. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanomom (50 mL) i isprana vodom (2 x 30 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (30 mL), slanim rastvorom (30 mL) i osušena iznad magnezijum sulfata, nakon filtracije, rastvarač je uparen pod vakuumom da bi se dobio metil 4-(morfolinometil)furan-2-karboksilat;<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.46 - 2.59 (m, 4H, CH2, CH2), 3.62 (s, 2H, CH2), 3.69 - 3.79 (m, 4H, CH2, CH2), 3.89 (s, 3H, CH3), 6.37 (d, J = 3.2 Hz, 1H, Ar), 7.14 (d, J = 3.4 Hz, 1H, Ar).
[0481] Faza 3: Rastvoru metil 4-(morfolinometil)furan-2-karboksilata (1.12 g, 4.97 mmol) u THF (30 mL) dodat je Dibal-H (14.92 ml, 14.92 mmol) u toluenu na 0 °C. Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodat je rastvor Rošelove soli (1.0 M, 50 ml), praćeno etil acetatom (50 mL), a dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi. Organska faza je odvojena, a vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x40 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (5 mL) i slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), i koncentrovani da bi se dobio (4-(morfolinometil)furan-2-il)metanol;<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.43 - 2.65 (m, 4H, CH2, CH2), 3.57 (s, 2H, CH2), 3.68 - 3.85 (m, 4H, CH2, CH2), 4.61 (s, 2H, CH2), 6.17 - 6.30 (m, 2H, Ar).
[0482] Faza 4: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 1.98 g, 3.16mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (615 mg, 2.104 mmol) u THF (50 mL) na 0 °C, praćeno DIAD (638 mg, 3.16 mmol), nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (4-(morfolinometil)furan-2-il)metanol (415mg, 2.104 mmol) u THF (10 mL), mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, smola je isprana etil acetatom (10 x 20 mL), metanolom (5 x 10 mL), kombinovana organska faza je uparena do suvoće, sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (80 g kolona, MeOH u DCM gradijent od 0-5% u 45 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (440 mg, 44% prinos);<1>H<NMR (DMSO-d>6<) δ 2.24 (d, J = 6.6 Hz, 4H, CH>2<, CH>2<), 2.32 - 2.40 (m, 4H, CH>2<), 3.46 - 3.52 (m, 5H, CH>2<,>CH3), 3.52 - 3.57 (m, 4H, CH2, CH2), 4.26 - 4.55 (m, 2H, CH2), 4.71 (d, J = 5.5 Hz, 1H, CHH), 5.18 (s, 2H, CH2), 6.29 (d, J = 3.0 Hz, 1H, Ar), 6.56 (d, J = 3.2 Hz, 1H, Ar), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.30 (d, J = 7.4 Hz, 1H, Ar), 7.35 - 7.42 (m, 1H, Ar), 7.46 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.57 (s, 1H, NHH).
[0483] Faza 5: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (440mg, 0.933 mmol) u THF (20 mL) dodat je kalijum tert-butoksid(126 mg, 1.120 mmol) na 0 °C, mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sata, dodat je dodatni kalijum terbutoksid (20 mg, 0.27 mmol), mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakcija je ugašena dodavanjem vodene HCl (1N, 3mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, ostatak je podeljen između zasićenog natrijum bikarbonata (10 mL) i etil acetata (50 mL), organski sloj je odvojen i ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata i filtriran, filtrat je uparen do suvoće da bi se dobila čvrsta supstanca, čvrsta supstanca je resuspendovana u acetonitrilu (4 mL) i filtrirana da bi se dobio 3-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (160 mg, 39% prinos); mp:168-170 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.85 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.17 - 2.50 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.54 -2.65 (m, 1H, CHH), 2.88 (d, J = 12.3 Hz, 1H, CHH), 3.32 (br. s., 2H, CH2), 3.56 (br. s., 4H, CH2, CH2), 4.13 -4.42 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.09 - 6.52 (m, 1H, Ar), 6.58 (br. s., 1H, Ar), 7.34 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.38 - 7.46 (m, 1H, Ar), 7.46 - 7.56 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.18, 45.06, 51.55, 52.44, 54.08, 62.16, 65.81, 109.72, 111.65, 115.42, 115.54, 129.73, 129.99, 133.34, 149.29, 152.31, 152.98, 167.90, 170.95, 172.81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 nm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70 CH3CN/0.1% HCOONH4tR= 3.13 (96.19%); Anal. Izrač. za C23H25N3O6 0.5 H2O C, 61.60; H, 5.84; N, 9.37; Pronađeno: C, 61.28; H, 5.79; N, 9.31.
5.773-{4-[4-(1-IZOPROPIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0484]
Faza 1: Pripremanje tert-butil estra 4- {4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline
[0485] Trifenil fosfen (na polimernom nosaču, 1.6 mmol/g, 3.3 g) dodat je u umešanu belu suspenziju metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.444 g, 8.36 mmol) u THF (100 ml) na 0°C. Nakon deset minuta, diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (2.470 ml, 12.54 mmol) dodat je i mešan tokom 40 minuta a onda je dodat tert-butil 4-(4-(hidroksimetil)benzil)piperidin-1-karboksilat (3.32 g, 10.87 mmol) u THF (20 ml). Mešavina je mešana na 0°C i zagrejana do sobne temperature preko noći. Suspenzija je filtrirana, isprana sa MeOH(2 x 20 ml), CH2Cl2(2 x 30 ml), i filtrat je uparen da bi se dobilo ulje, koje je rastvoreno u CH2Cl2(80 ml), isprana sa zas. NaHCO3(50 ml), koncentrovano a onda prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline kao penasto ulje (2.2 g, 45% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[0486] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)piperidin-1-karboksilata (2.2 g, 3.80 mmol) u CH2Cl2(10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je hlorovodonik (2 M u etru) (10 ml, 38.0 mmol). Nakon četiri sata, suspenzija je filtrirana, isprana sa etrom i dobijena žuta čvrsta supstanca je osušena da bi se dobio 2.02 g, 111 % sirovi prinos (HCl so). Proizvod je kasnije upotrebljen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(1-izopropil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0487] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(piperidin-4-ilmetil) benziloksi) izoindolin-2-il)pentanoat hidrohlorida (1.24 g, 2.403 mmol) u MeOH (15 ml) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.397 ml, 2.403 mmol), propan-2-on (1.252 ml, 16.82 mmol), sirćetna kiselina (0.069 ml, 1.201 mmol), i natrijum cijanoborohidrit (0.302 g, 4.81 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Ledena voda (30 ml) je sipana u mešavinu, a talog je obrazovan, koji je ekstrahovan sa etil acetatom (100 ml), ispran zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 40 ml), slanim rastvorom (30 ml), osušen i koncentrovan do braon penastog ulja (1.11 g, 89% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje 3-{4-[4-(1-Izopropil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
[0488] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((1-izopropilpiperidin-4-il) metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.09 g, 2.090 mmol) u tetrahidrofuranu (12 ml) u ledenom kupatilu (0°C) dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.246 g, 2.194 mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta. Mešavini je dodata 1 N HCl (do pH=1) zatim je neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (do pH=7) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 30 ml), isprana slanim rastvorom (20 ml), osušena iznad natrijum sulfata, i koncentrovana do penaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(1-Izopropil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta penasta čvrsta supstanca (0.33 g, 32% prinos); mp, 182-184°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30 u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.19 min (97.4%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.92 (d, J = 6.4 Hz, 6H, CH3, CH3), 1.03 - 1.22 (m, 2H, CH2), 1.35 - 1.60 (m, 3H, CH, CH2), 1.90 - 2.10 (m, 3H, CHH, CH2), 2.34 - 2.48 (m, 2H, CHH, CH), 2.53 - 2.57 (m, 1H, CHH), 2.57 - 2.78 (m, 4H, CH2, CH2), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.17 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.36 (dd, J = 7.9, 18.9 Hz, 4H, Ar), 7.44 - 7.54 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 17.94, 22.36, 31.21, 32.13, 37.77, 42.14, 45.09, 48.18, 51.56, 53.78, 69.49, 114.95, 115.19, 127.67, 129.05, 129.81, 129.94, 133.29, 133.91, 140.32, 153.54, 168.01, 170.96, 172.83. LC/MS m/e=490. Anal. izrač. za C29H35N3O4(+0.3H2O): C, 70.36; H, 7.26; N, 8.49. Pronađeno: C, 70.18; H, 7.06; N, 8.36.
5.783-{4-[4-(1-METIL-1H-BENZOIMIDAZOL-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0489]
Faza 1: tert-butil estar (4-bromometil-fenil)-sirćetne kiseline
[0490] Umešani rastvor 2-(4-(bromometil)fenil)sirćetne kiseline (2.6 g, 11.35 mmol) u tionil hloridu (20 mL, 274 mmol) je zagrejan do refluksa tokom 2,5 h. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca dodata je izmešanom rastvoru 2-metilpropan-2-ola (20 ml, 213 mmol) u DCM (2 mL) u led/voda kupatilu. A mešavina je mešana u led/voda kupatilu tokom 2 h i na sobnoj temperaturi tokom 18 h. Reakciona mešavina je dodata u CH2Cl2 (40 mL). Organska faza je isprana sukcesivno sa H2O (20 mL), NaHCO3 (zas, aq, 20 mL), i slanim rastvorom (25 mL) i osušena iznad MgSO4. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar (4-bromo metil-fenil)-sirćetne kiseline kao svetlo žuta tečnost (2.4 g, 74% sirovi prinos).1H NMR (DMSO-d6): 1.39 (s, 9H, tBu), 3.54 (s, 2H, CH2CO2), 4.69 (s, 2H, CH2Br), 7.23, 7.39 (m, 4H, zbog nećistoća).
Faza 2: metil estar 4-[4-(4-tert-Butoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0491] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.5 g, 5.13 mmol) i tert-butil 2-(4-(bromometil)fenil) acetata (2.2 g, 7.7 mmol) u acetonitrilu (30 mL) dodat je kalijum karbonat (1.42 g, 10.3 mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na 50 °C tokom 27 h a između je dodat tert-butil 2-(4-(bromometil) fenil) acetat (800mg, 2.9 mmol) u dve porcije. Reakciona mešavina je isfiltrirana i svetlo braon čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (2 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO radi dobijanja metil estra 4-[4-(4-tertbutoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoilbuterne kiseline kao svetlo žute lepljive čvrste supstance (2.1 g, 82% sirovi prinos) LCMS MH = 497.
Faza 3: metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[0492] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(2-tert-butoksi-2-oksoetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.1 g, 4.2 mmol) u DCM (20 mL) na sobnoj temperaturi dodata je voda (0.38 ml, 21.1 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje TFA (1.63 ml, 21.1 mmol) lagano. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 h a između je dodat TFA (3.2 mL) i voda (0.15 mL). Mešavina je držana u frižideru preko noći i reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksi metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (2.3 g, 123% sirovi prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 -2.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.58 (s, 2H, CH2), 4.41 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.53 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 4.6, 10.3 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.18 (br. s., 1H, NHH), 7.24 - 7.34 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.50 (m, 3H, Ar), 7.57 (br. s., 1H, NHH); LCMS MH = 441.
Faza 4: metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(1-metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0493] Mešavina 2-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)sirćetne kiseline (500 mg, 1.1 mmol) i CDI (166 mg, 1.0 mmol) u THF ( 3 mL). Mešavina je mešana na 50 °C tokom 25 min pre dodavanja N1-metilbenzen-1,2-diamina (125 mg, 1.022 mmol) u THF (6 mL). Rezultujući braon rastvor je mešan na 50 °C tokom 21 h i reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (40 mL) i isprana sa NH4OH (aq, 10mas.%, 2x20 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(1-metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao ružičasta čvrsta supstanca(185 mg, 31% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 3.49 (s, 3H,<CH>3<), 3.71 (s, 3H, CH>3<), 4.25 - 4.58 (m, 4H, CHH, CHH, CH>2<), 4.65 - 4.78 (m, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH>2<),>7.09 - 7.24 (m, J = 1.3, 7.4, 7.4, 7.4, 7.4 Hz, 3H, Ar), 7.25 - 7.37 (m, 4H, Ar, NHH), 7.39 - 7.51 (m, 4H, Ar, NHH), 7.52 - 7.62 (m, 2H, Ar); LCMS MH = 527.
Faza 5: 3-4-[4-(1-Metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0494] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (660mg, 1.25 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na 0 °C (vodeno/ledeno kupatilo) dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (155 mg, 1.4 mmol) u jednoj porciji.
Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 h i reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (100 mL) nakon čega je usledilo dodavanje HCl (aq, 1N, 5 mL). Mešavina je mešana i joj je dodat NaHCO3(aq., zas., 20 mL). Mešavina je ekstrahovana i aq sloj je ekstrahovan pomoću DCM (20 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani slanim rastvorom (2 x 25 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan na dole radi ISCO prečišćavanja da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je dalje prečišćena umešavanjem u acetonitrilu (5 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(1-Metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (328 mg, 34% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 7.80 min (99.2%); Mp: 240-242 °C; NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.80 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.71 (s, 3H, CH3), 4.15 - 4.45 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.10 - 7.24 (m, J = 1.4, 7.4, 7.4, 7.4, 7.4 Hz, 2H, Ar), 7.32 (d, J = 7.4 Hz, 4H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 4H, Ar), 7.53 - 7.60 (m, 1H, Ar), 10.95 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 29.75, 31.16, 32.65, 45.06, 51.53, 69.35, 109.81, 114.91, 115.20, 118.41, 121.24, 121.59, 128.06, 128.84, 129.78, 129.93, 133.27, 134.83, 135.81, 136.74, 142.19, 153.46, 153.59, 167.99, 170.95, 172.80; LCMS MH = 495; Anal. Izrač. za C29H26N4O4 : C, 70.43; H, 6.30; N, 11.33; Pronađeno: C, 70.16; H, 5.03; N, 11.31.
5.793-(4-((2-(MORFOLINOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-6-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0495]
[0496] Faza 1: Mešavina etil 6-aminonikonitata (5.0g, 30.1 mmol) i 1,3-dihloropropan-2-ona (5.7g, 45.1 mmol) u acetonitrilu (100 mL) je refluksovana tokom 17 h. Mešavina je koncentrovana ,a ostatak je mešan sa CH2Cl2 (100 mL) i zas. NaHCO3 (35 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/CH2Cl2 tokom 25 min zatim do 100% EtOAc preko 15 min) da bi se dobio etil 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6karboksilat (4.7g, 65%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42 (t, J=6 Hz, 3H), 4.38-4.45 (q, J=6 Hz, 2H), 4.77 (s, 2H), 7.56-7.59 (d, J=9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.74-7.77 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 8.86-8.87 (d, J=3 Hz, 1H).
[0497] Faza 2: Diizobutilaluminijum hidrid/Toluen (1M, 22.0 mL, 22.0 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru etil 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilat (2.1g, 8.8 mmol) u THF (60 mL) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 4 h zatim ugašena metanolom (5 mL). CH2Cl2 (70 mL) i zas. NaHCO3(40 mL) dodat je i mešavina je zagrejana do sobne temperature. Aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(60 mL) a kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa estrom (25 mL) da bi se dobio (2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanol (1.1g, 65%):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.60 (s, 2H), 4.75 (s, 2H), 5.22 (b, 1H), 7.19-7.22 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.44-7.47 (d, J=9 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 8.24 (s, 1H).
[0498] Faza 3: Mešavina suspenzije (2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanola (1.5g, 7.4 mmol), morfolina (1.0g, 11.1 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (1.4g, 11.1 mmol) u acetonitrilu (30 mL) je zagrejana u 70°C uljanom kupatilu tokom 20 min. Reakciona mešavina je koncentrovana i ostatak je rastvoren u CH2Cl2(80 mL) i ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 3% CH3OH/CH2Cl2tokom 10 min onda do 10% preko 10 min i održavan tokom 40 min) da bi se dobio (2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanol (1.0g, 54%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.54-2.57 (m, 4H), 3.66-3.74 (m, 6H), 4.40 (b, 1H), 4.67 (s, 2H), 7.05-7.09 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.30-7.44 (m, 2H), 8.02 (s, 1H).
[0499] Faza 4: Mešavina trifenilfosfina vezanog za polimer (4.3g, 6.1 mmol) u THF (40 mL) je ohlađena u ledenom kupatilu do 3°C. Diizopropil azadikarboksilat (1.1g, 5.3 mmol) dodat je lagano na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 min, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.2g, 4.0 mmol) i (2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanola (1.1g, 4.0 mmol) u THF (80 mL) dodat je lagano na 5-8°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana , a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(60 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(120 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(35 mL), vodom (35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min onda<do 3% CH>3<OH/CH>2<Cl>2<preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min)>da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.2g, 57%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.18-2.44 (m, 4H), 2.57-2.60 (m, 4H), 3.63 (s, 3H), 3.72-3.76 (m, 6H), 4.38-4.44 (d, J=18 Hz, 1H), 4.49-4.55 (d, J=18 Hz, 1H), 4.90-4.95 (dd, J=6 i 9 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 5.50 (b, 1H), 6.38 (b, 1H), 7.12-7.20 (m, 2H), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.50-7.63 (m, 2H), 8.18 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 24.12, 30.45, 45.21, 51.83, 53.82, 53.90, 57.00, 66.98, 67.75, 111.50, 114.32, 116.64, 117.79, 120.97, 124.13, 124.26, 129.99, 130.20, 133.65, 144.40, 144.75, 153.35, 169.17, 171.46, 172.87.
[0500] Faza 5: rastvor metil 5-amino-4-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metioksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.2g, 2.2 mmol) u THF (30 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu tokom 15 min. Rastvor kalijum tert-butoksid/THF (1M, 2.5 mL, 2.5 mmol) dodat je lagano i mešavina je mešana u ledenom kupatilu tokom 2 h. Reakciona mešavina ugašena je sa 1N HCl (5 mL) i mešavina je razblažena sa CH2Cl2(30 mL) i vodom (20 mL). Mešavina je učinjena baznom sa zas. NaHCO3(7 mL) do pH=8. Aq. sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(3X30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušena Rastvarač je uklonjen, a ostatak je kristalizovan iz acetona (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.6g, 53%): mp 278-280°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.01 (m, 1H), 2.40-2.61 (m, 6H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.55-3.59 (m, 6H), 4.29 (d, J=18 Hz, 1H), 4.39 (d, J=15 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J=6 i 15 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H), 7.30-7.41 (m, 3H), 7.49-7.51 (m, 2H), 7.83 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.16, 45.04, 51.56, 53.19, 56.27, 66.18, 67.31, 111.68, 115.09, 115.44, 116.34, 120.69, 124.87, 125.69, 129.83, 130.02, 133.34, 134.51, 134.58, 153.26, 167.96, 170.95, 172.80; Izrač. za C26H27N5O5: C, 63.79; H, 5.56; N, 14.31. Pronađeno: C, 63.38; H, 5.64; N, 14.09.
5.803-{4-[4-(1H-BENZOIMIDAZOL-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0501]
Faza 1: tert-butil estar (4-bromometil-fenil)-sirćetne kiseline
[0502] Umešani rastvor 2-(4-(bromometil)fenil)sirćetne kiseline (2.6 g, 11.35 mmol) u tionil hloridu (20 mL, 274 mmol) je zagrejan do refluksa tokom 2,5 h. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca dodata je izmešanom rastvoru 2-metilpropan-2-ola (20 ml, 213 mmol) u DCM (2 mL) u led/voda kupatilu. A mešavina je mešana u led/voda kupatilu tokom 2 h i na sobnoj temperaturi tokom 18 h. Reakciona mešavina je dodata u CH2Cl2 (40 mL). Organska faza je isprana sukcesivno sa H2O (20 mL), NaHCO3 (zas, aq, 20 mL), i slanim rastvorom (25 mL) i osušena iznad MgSO4. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar (4-bromo metil-fenil)-sirćetne kiseline kao svetlo žuta tečnost (2.4 g, 74% sirovi prinos).1H NMR (DMSO-d6): 1.39 (s, 9H, tBu), 3.54 (s, 2H, CH2CO2), 4.69 (s, 2H, CH2Br), 7.23, 7.39 (m, 4H, zbog nećistoća).
Faza 2: metil estar 4-[4-(4-tert-butoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0503] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.5 g, 5.13 mmol) i tert-butil 2-(4-(bromometil)fenil) acetata (2.2 g, 7.7 mmol) u acetonitrilu (30 mL) dodat je KALIJUM KARBONAT (1.42 g, 10.3 mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na 50 °C tokom 27 h a između je dodat tert-butil 2-(4-(bromometil) fenil) acetat (800mg, 2.9 mmol) u dve porcije. Reakciona mešavina je isfiltrirana i svetlo braon čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (2 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO radi dobijanja metil estra 4-[4-(4-tert-Butoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoilbuterne kiseline kao svetlo žuta lepljiva čvrsta supstanca (2.1 g, 82% sirovi prinos) LCMS MH = 497.
Faza 3: metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[0504] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(2-tert-butoksi-2-oksoetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.1 g, 4.2 mmol) u DCM (20 mL) na sobnoj temperaturi dodata je voda (0.38 ml, 21.1 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje TFA (1.63 ml, 21.1 mmol) lagano. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 h a između je dodat TFA (3.2 mL) i voda (0.15 mL). Mešavina je držana u frižideru preko noći i reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksi metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline metil estar kao beličasta čvrsta supstanca (2.3 g, 123% sirovi prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 - 2.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.58 (s, 2H, CH2), 4.41 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.53 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 4.6, 10.3 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.18 (br. s., 1H, NHH), 7.24 - 7.34 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.50 (m, 3H, Ar), 7.57 (br. s., 1H, NHH); LCMS MH = 441.
Faza 4: metil estar 4-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline
[0505] Rastvor 2-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)sirćetne kiseline (621 mg, 1.4 mmol) u THF (4 mL) dodat je CDI (208 mg, 1.28 mmol) u jednoj porciji. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i na 50 °C tokom 1 h pre dodavanja rastvor benzen-1,2-diamina (139 mg, 1.28 mmol) u THF (6 mL). Reakciona mešavina je mešana na 50 °C tokom 20 h a onda mešana na 65°C tokom 30 h. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (40 mL) i isprana sa NH4OH ( aq, 10mas.%, 2x20 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO radi dobijanja metil estra 4-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline kao žute čvrste supstance (266 mg, 40% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.32 (m, 4H, CH2, CH2), 3.42 - 3.57 (m, 3H, CH3), 4.18 (s, 2H, CH2), 4.30 - 4.58 (m, 2H, CHH, CHH), 4.71 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.05 - 7.22 (m, 3H, NHH, Ar), 7.22 - 7.32 (m, 2H, Ar), 7.32 - 7.49 (m, 6H, Ar), 7.49 - 7.62 (m, 2H, Ar, NHH), 12.26 (s, 1H, NH); LCMS MH = 513.
Faza 5: 3-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0506] Izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (260mg, 0.5 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0 °C dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (62.6 mg, 0.56 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 2 h a između je dodat KOtBu (50 mg, 0.4 mmmol) u dve porcije. Dobijena reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (50 mL) i nakon čega je usledilo dodavanje HCl (aq, 1N, 3 mL). Dobijenoj mešavini je dodat NaHCO3(zas., aq, 20 mL) i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (110 mg). Beličasta čvrsta supstanca je prečišćen zagrevanjem u EtOAc (10 mL) na refluksu da bi se dobio 3-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (33 mg, 14% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.03min (99.3%); mp: 203-205 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.81 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.11 - 4.44 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.99 - 7.21 (m, 2H, Ar), 7.26 - 7.60 (m, 9H, Ar), 10.94 (s, 1H, NH), 12.27 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 31.16, 34.62, 45.06, 51.55, 69.35, 110.84, 114.90, 115.18, 118.22, 120.89, 121.58, 128.02, 128.88, 129.77, 129.93, 133.27, 134.82, 137.50, 153.38, 153.45, 167.97, 170.93, 172.78; LCMS MH = 481; Anal. Izrač. za C28H24N4O4: C, 69.99; H, 5.03; N, 11.66; Pronađeno: C, 69.97; H, 4.70; N, 11.58.
5.81 3-{4-[4-(OKTAHIDRO-IZOINDOL-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0507]
[0508] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.357 g, 0.805 mmol) dodat je Cis-Okta hidroizoindol hidrohlorid (0.195 g, 1.208 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.466 ml, 2.82 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i rezultujući beličasta čvrsta supstanca je mešana u metilen hloridu (100 ml), isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 80 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(Oktahidro-izoindol-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (20 mg, 5% prinos); mp, nije određen. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.17 min (97.7%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.18 - 1.34 (m, 2H, CH2), 1.35 - 1.62 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 1.92 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.04 - 2.22 (m, 2H, CH2), 2.36 -2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.80 (m, 4H, CH2, CH, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.58 - 3.86 (m, 2H, CH2), 4.17 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.54 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.27, 22.36, 31.21, 36.52, 45.10, 51.59, 57.64, 69.41, 114.98, 115.23, 127.67, 129.81, 129.95, 133.32, 153.50, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=488. Anal. izrač. za C29H33N3O4: C, 71.44; H, 6.82; N, 8.62.
5.823-(4-((4-((7,8-DIHIDRO-1,6-NAFTIRIDIN-6(5H)-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0509]
Faza 1: (S)-Metil 5-amino-4-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat [0510] 1,4-bis(Bromometil)benzen (2.71 g, 10.26 mmol) je suspendovan u suvom acetonitrilu (40 mL). Gusta suspenzija je zagrejana do 60 °C sve dok nije primećeno potpuno rastvaranje (∼15 min).
Temperatura je smanjena na 50 °C i rastvoru je dodat K2CO3(0.473 g, 3.42 mmol) kao čvrsta supstanca praćeno (S)-metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (1 g, 3.42 mmol, pripremanje je opisano ovde). Dobijena bela gusta suspenzija je mešana na 50 °C tokom ∼3 h tokom kog vremena je LCMS ukazala da je fenolni polazni materijal utrošen. Sirova reakciona mešavina je promućkana i usisno filtrirana. Zaostala čvrsta supstanca u boci i na filter levku je isprana sa minimalno MeCM (∼5 mL). Filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo 2.6 g bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u minimalno DCM i prečišćena primenom SiO2 “flash” kolone (CombiFlash, 40 g SiO2 unapred upakovana kolona). Kolona je eluirana sa 100% DCM četiri ∼15 min, a gradijent do 5% MeOH u DCM preko 5 min, a onda držana na 5% MeOH u DCM. Frakcije su kombinovane i koncentrovane da bi se dobio (S) metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (1.3 g, 80% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.33 - 4.62 (m, 2H, CH2), 4.72 (s, 2H, CH2,), 5.25 (s, 2H, CH2), 5.27 - 5.36 (m, 1H, CH), 7.19 (br. s., 1H, NH), 7.23 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.70 (m, 6H, Ar, NH); LCMS: MH = 475, 477.
Faza 2: (S)-3-(4-(4-(Bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[0511] (S)-Metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (2.05 g, 4.31 mmol) je rastvoren u THF (50 mL) i rastvor je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu do -76 °C. Uz mešanje, čvrsti KO<t>Bu (0.532 g, 4.74 mmol) dodat je u jednoj porciji bistrom rastvoru. Reakciona mešavina postala je bledo žute boje i mešana je tokom ∼90 min na -76 °C. Ohlađeni rastvor 1 N aq HCl (20 mL) brzo je transferovan u reakcionoj mešavini, održavajući temperaturu na -76 °C. Mešavina je odmah postala mlečno bela i suvi CO2/aceton kupatilo je uklonjeno, omogućavajući mešavini da se zagreje uz mešanje. Mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču radi uklanjanja većeg dela THF (koncentrovan do fiksne zapremine pri 160 mbar i vodenom kupatilu -35 °C). Nakon koncentrovanja reakcione mešavine, bela čvrsta supstanca je istaložena. Bela gusta suspenzija je razblažena sa više vode (∼80 mL) a onda usisno filtrirana. Kolač je ispran sa velikom količinom vode (ukupna zapremina filtrata ∼150 mL) i osušen sukcijom. Kolač je ispran sa Et2O (-50 mL), osušen sukcijom a onda stavljen u vakuum sušnicu na 40 °C preko noći da bi se dobio (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (1.8 g, 94% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.70 min (97.9%); mp: 123-125 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.04 (m, 1H, CHH), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.72 (s, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 5H, Ar), 10.83 - 11.07 (m, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 34.15, 45.06, 51.56, 69.12, 114.94, 115.28, 127.95, 128.33, 129.41, 129.80, 131.93, 133.31, 136.78, 153.36, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS: MH = 443, 445. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. Stereohemija benzil bromid proizvoda zaključena je iz stereohemijski dobijenog proizvoda izvedenog iz nje.
Faza 3: 3-(4-((4-((7,8-Dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[0512] U 20-mL scintilacionu bočicu, MeCN (5 mL, 96 mmol) dodat je mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) i 5,6,7,8-tetrahidro-1,6-naftiridina (72.6 mg, 0.541 mmol). DIEA (0.236 mL, 1.354 mmol) je dodata mešavini. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h. Suspenzija je filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana sa Et2O i osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-(4-((4-((7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (198 mg, 88% prinos): mp: 163-165 °C; HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.66 min (99.2%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.70 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.82 - 3.04 (m, 3H, CHH, CH2), 3.57 (s, 2H, CH2), 3.69 (s, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2O), 7.12 (dd, J = 4.8, 7.6 Hz, 1H, Ar), 7.27 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.37 - 7.58 (m, 6H, Ar), 8.33 (dd, J = 1.5, 4.7 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 31.92, 45.07, 50.00, 51.56, 54.27, 61.14, 69.41, 114.97, 115.22, 120.95, 127.73, 128.79, 129.80, 129.83, 129.93, 133.30, 134.16, 135.35, 138.10, 147.15, 153.49, 154.40, 167.99, 170.96, 172.80; LCMS: MH = 497; Anal. izrač. za C29H28N4O4+ 1.14 H2O: C, 67.36; H, 5.90; N, 10.83; Pronađeno: C, 67.36; H, 5.93; N, 10.68.
5.833-(1-OKSO-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0513]
Faza 1: 3-[4-(4-Hidroksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion [0514] U balon sa okruglim dnom ispunjen sa metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (5 g, 17.11 mmol), (4-(hlorometil)fenil)metanolom (2.81 g, 17.96 mmol), i anhidrovanim kalijum karbonatom (2.60 g, 18.82 mmol), dodat je DMF (50 mL). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi i napredovanje reakcije je praćeno sa LCMS. Nakon -3 h, DIEA (3.29 mL, 18.82 mmol) je dodat i reakcija je mešana preko noći. Nakon ∼18 h, čvrsti KI (1.6 g, 9.64 mmol) dodat je i mešavina je zagrejana do 40 °C i mešan tokom ∼2 dana. Reakciona mešavina, koja sadrži mešavinu željenog proizvoda i neciklizovan glutarimid prekursor, je zagrejana dalje do 80 °C tokom ∼30 h. Sirova reakciona mešavina je ohlađena do st, filtrirana na poroznom levku, a uklonjene čvrste supstance isprane su sa minimalno MeCN. Kombinovani filtrat i voda od ispiranja su koncentrovani na rotacionom isparivaču dok DMF nije počeo da se destiluje. Koncentrovana mešavina je razblažena vodenom 1 N HCl (∼150 mL) i vodom (-700 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 700 mL). Kombinovani organski sloj je ispran sa 1 N HCl (200 mL), 1 N Na2CO3 (2 x 300 mL), i slanim rastvorom .Rastvor je osušen (Na2SO4) i koncentrovan u vakuumu do -400 mL. Aktivirani drveni ugalj (∼11 g) dodat je i gusta suspenzija je umešavana tokom ∼15 min potom filtrirana na celitnom sloju na srednje poroznom levku uvlačenjem. Čist filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (4.1 g). Čvrsta supstanca je suspendovana u MeCN (60 mL) pomoću sonifikacije i blagog zagrevanja. Mešavina je zagrevana tokom ∼30 min na 60 °C uz umešavanje a onda je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Et2O (-30 mL) je dodat i gusta suspenzija je umešavana sa intermitentnom sonikacijom. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom na srednje poroznom levku i kolač je ispran dodatnim Et2O a onda osušen sukcijom. Zaostala čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici na 40 °C da bi se dobio 3-[4-(4-hidroksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (3.4 g, 52% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 18.1 Hz, 1H, CHH), 2.81 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.50 (d, J = 5.9 Hz, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.0 Hz, 1H, CH), 5.18 (t, J = 5.8 Hz, 1H, OH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH); LCMS: MH = 381.
Faza 2: 3-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion
[0515] U dobro umešan suspenziju 3-(4-(4-(hidroksimetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (2.4 g, 6.31 mmol) u suvom MeCN (40 mL) na 0 °C, dodat je PBr3(1.19 mL, 12.6 mmol) putem šprica. Izmešanoj mešavini je dodat tetrabutil amonijum bromid (0.203 g, 0.631 mmol). Nakon ∼5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom ∼4.5 h. Reakciona mešavina je sipans u bočicu sa vodom (200 mL) na ledu. Rezultujuća debela gusta suspenzija je filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca u balonu je preneta na filter levak sa dodatnom vodom. Kolač je ispran sa velikom količinom vode i heksanom (∼150 mL) a onda osušen sukcijom. Čvrsta supstanca je suspendovana sa Et2O (∼50 mL) i umešavana tokom 10 min zatim sakupljena usisnom filtracijom. Kolač je ispran dodatnim Et2O (∼50 mL) a onda osušen u vakuum sušnici na 40 °C preko noći da bi se dobio 3-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (2.61 g, 93%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.78 min (96.6%); NMR (MeCN-d3) δ 2.08 - 2.22 (m, J = 2.5, 5.2, 5.2, 12.8 Hz, 1H, CHH), 2.45 (qd, J = 4.9, 13.1 Hz, 1H, CHH), 2.62 - 2.94 (m, 2H, CHH, CHH), 4.31 (d, J = 17.0 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.2 Hz, 1H, CHH), 4.62 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.4 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ar), 7.38 (d, J = 7.0 Hz, 1H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 5H, Ar), 8.83 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (MeCN-d3) δ 22.37, 30.89, 33.02, 44.83, 51.64, 69.26, 114.62, 115.21, 127.79, 129.01, 129.55, 130.12, 133.27, 136.87, 137.98, 153.52, 168.29, 170.13, 171.79; LCMS: MH = 443, 445.
Faza 3: 3-(1-Okso-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[0516] U gustu suspenziju (3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol)) i 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (95 mg, 0.496 mmol) u suvom MeCN (5 mL, 96 mmol), dodat je DIEA (0.197 mL, 1.128 mmol) i dobijena bela suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h i zagrevana do 40 °C tokom 4 dodatnih sati Mešavina je ohlađena na 0 °C. Suspenzija je filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana vodom (-50 mL) i osušena u vakuum sušnici na 50 °C da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (135 mg, 54% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.33 min (98.2%); mp: 139-142 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 19.1 Hz, 1H, CHH), 2.82 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.02 (t, J = 5.5 Hz, 2H, CH2), 3.80 (s, 2H, CH2), 3.82 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.31 (m, 3H, CHH, CH2), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd,J=5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.30 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.38 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 45.07, 46.54, 47.73, 49.17, 51.56, 59.42, 69.35, 114.99, 115.23, 127.80, 128.92, 129.80, 129.95, 133.30, 135.73, 137.05, 152.82, 153.46, 167.97, 170.95, 172.80; Dva ugljenična signala nisu primećena (verovatno zbog razdvajanja CF3, i CCF3); LCMS: MH = 555; Anal. izrač. za C27H25F3N6O4+ 0.5 H2O: C, 57.55; H, 4.65; N, 14.91; F, 10.11; Pronađeno: C, 57.42; H, 4.32; N, 14.60; F, 9.92.
5.843-{4-[4-(6-METOKSI-3,4-DIHIDRO-1H-IZOKVINOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0517]
[0518] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.365 g, 0.823 mmol) dodat je 6-metoksi-1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin hidrohlorid (0.247 g, 1.235 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.408 ml, 2.470 mmol) na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i ostatak je mešan u CH2Cl2(100 ml) i ispran sa zas. NaHCO3(2 x 30ml), slanim rastvorom (20ml) i uparen do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(6-Metoksi-3,4-dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion (0.26 g, 60% prinos); mp, 169-171°C,. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.72 min (98.3%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.71 (m, 3H, CH2, CHH), 2.71 - 2.83 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.46 (br. s., 2H, CH2), 3.55 - 3.81 (m, 5H, CH2, CH3), 4.18 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.23 (br. s., 2H, CH2), 6.58 - 6.74 (m, 2H, Ar), 6.89 (d, J = 9.1 Hz, 1H, Ar), 7.24 - 7.62 (m, 7H, Ar), 10.98 (br. s., 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.94, 31.21, 45.10, 50.12, 51.58, 54.92, 61.51, 69.45, 111.91, 112.93, 114.97, 115.24, 126.73, 127.26, 127.72, 128.82, 129.81, 129.94, 131.81, 133.31, 135.22, 138.28, 153.51, 157.45, 168.01, 169.07, 170.96, 172.83. LC/MS m/e=526. Anal. izrač. za C31H31N3O5 (+1.1 H2O): C, 68.27; H, 6.14; N, 7.70. Pronađeno: C, 68.08; H, 5.92; N, 7.47.
5.85 3-(4-((3-((4-IZOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)IZOKSAZOL-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0519]
[0520] Mešavina (5-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoksazol-3-il)metil metansulfonat (0.28 g, 0.623 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi.4-Izopropilpiperidin (0.095 g, 0.748 mmol) i DIEA (0.11 g, 0.810 mmol) su dodati, a mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Zatim, mešavina je uparena pod vakuumom. Ostatak je podeljen između EtOAc (75 mL) i vode (75 mL), i organska faza je isprana vodom (75 mL). Zatim organska faza je ekstrahovana sa 1N HCl (2 x 50 mL). Kombinovani vodeni ekstrakti isprani su sa EtOAc (75 mL) a zatim učinjeni baznim sa čvrstim natrijum karbonatom, i dobijena mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti isprani su vodom (75 mL), osušeni (MgSO4) i upareni, dajući 180 mg (60%) kao bela čvrsta supstanca; mp 173-175 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 10/90 gradijent do 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4 u 10 min: 5.65 (96.83%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.83 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 0.97 (br. s., 1H), 1.09 - 1.24 (m, 2H), 1.30 - 1.46 (m, 1H), 1.58 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 1.80 - 2.06 (m, 3H), 2.36 - 2.47 (m, 1H), 2.52 - 2.64 (m, 1H), 2.72 - 3.01 (m, 3H), 3.41 - 3.63 (m, 2H), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 6.62 (s, 1H), 7.39 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.46 - 7.57 (m, 1H), 10.97 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.62, 22.35, 28.69, 31.21, 31.85, 41.46, 45.05, 51.61, 52.58, 53.49, 60.72, 104.57, 115.11, 115.99, 129.85, 129.98, 133.51, 152.67, 161.50, 167.12, 167.82, 170.92, 172.80. Anal. Izrač. za C26H32N4O5 0.2 H2O: C, 64.50%; H, 6.75%; N, 11.57%; Pronađeno: C, 64.48%; H, 6.73%; N, 11.31%.
5.863-{4-[4-(2-METIL-4-FENIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0521]
[0522] Izmešanom rastvoru 2-metil-4-fenil-1H-imidazola (157 mg, 0.99 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin -2-il)piperidin-2,6-dion (400 mg, 0.9 mmol) i DIPEA (0.24 ml, 1.35 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 dana pre nego što je reakciona mešavina razblažena pomoću EtOAC (40 mL) i NaHCO3(aq, zas., 20 mL). Mešavina je ekstrahovana. Neka čvrsta supstanca je formirana i mešavina je isfiltrirana. A čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (20 mL) i MeOH (5 mL). Svi organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4 i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-{4-[4-(2-Metil-4-fenil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (310 mg, 66% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.26min (99.6%); mp: 270-272 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.30 (s, 3H, CH3), 2.43 (dd, J = 4.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.97 (m, 1H, CHH), 4.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.39 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.04 - 5.16 (m, 1H, CHH), 5.18 (s, 2H, CH2), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.10 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.20 - 7.26 (m, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.26 -7.36 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.62 (s, 1H, NH), 7.64 - 7.75 (m, 2H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 12.76, 22.31, 31.16, 45.04, 48.59, 51.55, 69.17, 114.93, 115.25, 116.49, 123.92, 125.88, 127.15, 128.14, 128.36, 129.78, 129.95, 133.30, 134.58, 135.98, 137.15, 138.50, 144.57, 153.39, 167.97, 170.93, 172.80; LCMS MH = 521; Anal. Izrač. za C31H28N4O4+0.3 H2O : C, 70.79; H, 5.48; N, 10.65; Pronađeno: C, 70.68; H, 5.21; N, 10.52. Regio izomerna struktura je potvrđena pomoću ROESY.
5.872-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-1,2,3,4-TETRAHIDROIZOKVINOLIN-7-KARBONITRIL
[0523]
[0524] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.358 g, 0.808 mmol) dodat je 1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin-7-karbonitril (0.192 g, 1.211 mmol), suspenzija je obrazovana. Zatim je dodat N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.267 ml, 1.615 mmol), koji je postao bistar rastvor. Postaje mutan ponovo za 10 minuta. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen, dobijenoj čvrstoj supstanci dodat je etar (30 ml), mešani, filtrirani, a filter je prečišćen pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 2-{4-[2-(2,6-Dioksopiperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-1,2,3,4-tetrahidro-izokvinolin-7-karbonitril (0.324 g, 77% prinos); mp, 145-147°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.62 min (95.8%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.64 - 2.75 (m, 2H, CH2), 2.82 - 3.00 (m, 3H, CHH, CH2), 3.58 (s, 2H, CH2), 3.67 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.26 -7.42 (m, 5H, Ar), 7.43 - 7.61 (m, 5H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 28.88, 31.20, 45.09, 49.39, 61.14, 69.42, 108.23, 114.98, 115.24, 119.01, 127.77, 128.80, 129.49, 129.69, 129.82, 129.94, 130.32, 133.31, 135.38, 136.40, 137.99, 140.51, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83. LC/MS m/e=521. Anal. izrač. za C31H28N4O4(+0.8 H2O): C, 69.60; H, 5.58; N, 10.47. Pronađeno: C, 69.21; H, 5.21; N, 10.22.
5.883-(4-((5-(MORFOLINOMETIL)PIRIDIN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION [0525]
[0526] Faza 1: rastvor metil 5-(hlorometil)pikolinat (3.00 g, 16.14 mmol) u acetonitrilu (30 mL) dodat je u morfolin (4.5 mL, 51.7 mmol). Rezultujući tamni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona mešavina je razblažena sa Et2O (∼100 mL) i čvrsta supstanca koja je obrazovana je uklonjena filtracijom. Filtrat je koncentrovan i uljani ostatak je podeljen između EtOAc (125 mL) i 1N NaHCO3 (50 mL). Vodeni sloj je ispran sa još EtOAc (-100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio metil 5-(morfolinometil)pikolinat kao tamno ulje (3.4 g, 89% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.29 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 3.54 - 3.61 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.88 (s, 3H, CH3), 7.91 (dd, J = 2.2, 8.0 Hz, 1H, Pyr), 8.03 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Pyr), 8.64 (d, J = 1.5 Hz, 1H, Pyr);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 52.28, 53.02, 59.03, 66.08, 124.51, 137.47, 137.57, 146.28, 150.08, 165.11. Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0527] Faza 2: U dobro umešan rastvor metil 5-(morfolinometil)pikolinata (3.4 g, 14.39 mmol) u THF (30 ml) na 2 °C (u ledenom kupatilu), 1 M rastvor litijum aluminijum hidrida (15.83 ml, 15.83 mmol) u THF dodat je putem šprica. Gas je napredovao, a promenjena reakciona mešavina je mešana na ∼ °C tokom ∼1 h. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem 1N NaHCO3(20 mL) na 0 °C a onda razblažena sa EtOAc (-300 mL) i H2O (100 mL). Mešavina je umešavana a onda je dodat 1 N aq. rastvor Rošelove soli kako bi razbio emulziju. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (300 mL). Vodeni sloj je zasićen sa čvrstim NaCl i ekstrahovan još jednom sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je ispran sa minimalno slanog rastvora, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi (5-(morfolinometil)piridin-2-il)metanol kao narandžasto ulje (1.7 g, 56% sirovi prinos). Sirovi proizvod je upotrebljen u sledećoj fazi bez prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.30 - 2.38 (m, 4H, CH2, CH2), 3.47 (s, 2H, CH2), 3.51 - 3.63 (m, 4H, CH2, CH2), 4.54 (d, J = 5.5 Hz, 2H, CH2OH), 5.36 (t, J = 5.8 Hz, 1H, OH), 7.42 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Pyr), 7.70 (dd, J = 2.2, 8.0 Hz, 1H, Pyr), 8.38 (d, J = 1.7 Hz, 1H, Pyr).
[0528] Faza 3: Metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.0 g, 3.42 mmol) i trifenilfosfin na polistirenu (1.6 mmol/g smola) (4.28 g, 6.84 mmol) su suspendovani u THF (30 mL) na sobnoj temperaturi. Smola je ostavljena da nabubri uz lagano mešanje tokom oko 5 minuta potom je mešavina ohlađena u ledenom kupatilu na 0 °C i DIAD (1.330 mL, 6.84 mmol) je dodat korišćenjem šprica brzo u kapima. Nakon oko 10 minuta, (5-(morfolinometil)piridin-2-il)metanol (1.069 g, 5.13 mmol) u THF (5 mL) je dodat. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon oko 1.5 h, smola je filtriran kroz porozni levak i smola je isprana 3X sa sukcesivnim ciklusima širenje/skupljanje (DCM / MeOH pranja). Filtrat (žute boje) je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao braon ulje (3.3 g). Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0529] Faza 4: Izmešanom rastvoru sirovog metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1 g, 1.036 mmol) u suvom THF (10 mL) na 0 °C (ledeno kupatilo) dodat je kalijum tert-butoksid (0.233 g, 2.072 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom ∼10 min, zatim je ostavljena da se zagreje do st. Nakon ∼3 h, reakciona mešavina je preneta u rashlađeni rastvor 20% AcOH u MeCN (∼50 mL) na ledu. Dobijeni rastvor je koncentrovan do suvoće i braon uljani ostatak je podeljen između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3(35 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (∼150 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan do suvoće da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz MeCN/Et2O, filtrirana, i isprana dodatnim Et2O da bi se dobio 3-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao svetlo bež čvrsta supstanca (78 mg, 17% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 10/90 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.45 min (97.3%); mp: 194-196 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.30 - 2.41 (m, 4H, CH2, CH2), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.51 (br. s., 2H, CH2N), 3.53 -3.70 (m, 4H, CH2, CH2), 4.30 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.46 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.31 (s, 2H, CH2O), 7.25 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.55 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.76 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar), 8.50 (s, 1H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.16, 45.06, 51.56, 52.96, 59.16, 66.08, 70.37, 114.96, 115.41, 121.31, 129.84, 129.92, 132.53, 133.34, 137.50, 149.56, 153.27, 155.02, 167.94, 170.96, 172.83; LCMS: MH = 451; Anal. izrač. za : C24H26N4O5: C, 63.99; H, 5.82; N, 12.44; Pronađeno: C, 58.77; H, 5.34; N, 11.46; Cl, 1.10.
5.89 MRAVLJA KISELINA METIL ESTRA 4-KARBAMOIL-4-(4-HIDROKSI-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-BUTERNE KISELINE
[0530]
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[0531] Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 3.0 g, 3.78 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.50 g, 1.72 mmol) u THF (30mL) na 0°C. Nakon 5 minuta, dodat je diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (0.75 ml, 3.78 mmol). Nakon 30 minuta, dodat je (4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0.71 g, 3.43 mmol).
Mešavina je mešana preko noći na sobnoj temperaturi potom filtrirana, isprana sa MeOH(10 mL), metilen hloridom(10 mL), i ponovljeno još tri puta sa MeOH(10 mL), metilen hloridom(10 mL).
Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno pomoću ISCO “flash” kolona hromatografijom (120 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline kao penasta bela čvrsta supstanca (0.62 g, 75% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje 3-[4-(4-Morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
[0532] Kalijum tert-butoksid (0.14 g, 1.25 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.60 g, 1.25 mmol) u THF (15 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina ugašena je sa nekoliko pipeta ispunjuenih sa 1N HCl i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom do pH = 8. Mešavina je bila etil acetat (3x20 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene a onda prečišćene pomoću ISCO “flash” kolona hromatografijom (40 g, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio 3-[4-(4-Morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.13 g, 23% prinos); mp, 208-210°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 15/85 u 10 min (CH3CN/0.1%H3PO4): tR = 3.86 min (98.1 %). LC/MS (Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50mm, 0.8 mL/min, 1.7 µm, 5/95 gradijent do 85/15 u 5 min, izokratski na 85/15 for 1 min (CH3CN/0.1%HCOOH: voda/0.1% HCOOH)): m/e = 450.<1>H NMR (DMSO-d6) d 1.90 - 2.05 (m, 1H, CH), 2.28 - 2.40 (m, 4H,2CH2), 2.40 - 2.46 (m, 1H, CH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CH), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.51 - 3.65 (m, 4H,2CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, ArCH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, ArCH2O), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 4H, Arh), 7.39 - 7.55 (m, 3H, ArH), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) d 22.36, 31.20, 45.09, 51.58, 53.14, 62.10, 66.17, 69.41, 114.98, 115.24, 127.65, 128.99, 129.82, 129.95, 133.32, 135.30, 137.70, 153.50, 167.99, 170.98, 172.83. Anal. izrač. za C25H27N3O5. C, 66.80; H, 6.05; N, 9.35. Pronađeno: C, 66.49; H, 5.90; N, 9.29.
Faza 3: Pripremanje mravlje kiseline metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline
[0533] Vodonik peroksid (10.24 g, 90.2 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.507 g, 1.128 mmol) u acetonitrilu (30 ml) i vodi (10 ml) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći.
Rastvarač je uparen, a ostatak je prečišćen pomoću preparative HPLC (MeCN/voda, sa 0.1% HCOOH) da bi se dobila mravlja kiselina metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.23 g, 44% prinos); mp, 154-156°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.35 min (98.7%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.04 (d, J = 12.3 Hz, 2H, CH2), 3.54 (td, J = 3.8, 11.8 Hz, 2H, CH2), 3.71 - 3.82 (m, 2H, CH2), 3.92 - 4.07 (m, 2H, CH2), 4.22 - 4.49 (m, 2H, CH2), 4.63 (s, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.66 (m, 5H, Ar), 11.02 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.20, 45.08, 51.59, 60.67, 62.05, 69.15, 71.81, 114.95, 115.33, 127.21, 128.77, 129.84, 129.97, 133.12, 133.35, 137.87, 153.40, 164.93, 167.98, 170.98, 172.83. LC/MS m/e=466. Anal. izrač. za C25H27N3O6((+1.0HCOOH, 1.3H2O): C, 58.38; H, 5.95; N, 7.85.
Pronađeno: C, 58.21; H, 6.30; N, 7.81.
5.90 3-(4-((5-(MORFOLINOMETIL)IZOKSAZOL-3-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0534]
[0535] Faza 1: etil 5-(hidroksimetil)izoksazol-3-karboksilat (2 g, 11.69 mmol) je rastvoren u DCM (30 ml) i trifenilfosfin (3.37 g, 12.85 mmol) i CBr4 (3.68 g, 11.10 mmol) su dodati na 0 °C, Mešavina je mešana tokom 2 sata na 0 °C. Mešavina je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (80 g kolona, etil acetat u heksanu gradijent od o-20% u 40 min) da bi se dobio etil 5-(bromometil)izoksazol-3-karboksilat (2.5 g, 91% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H, CH3), 4.46 (q, J = 7.2 Hz, 2H, CH2), 4.50 (s, 2H, CH2), 6.74 (s, 1H, Ar).
[0536] Faza 2: Mešavina etil 5-(bromometil)izoksazol-3-karboksilata (2.3 g, 9.83 mmol), morfolina (1.284 ml, 14.74 mmol) i trietil amina (2.055 ml, 14.74 mmol) u acetonitrilu je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen do suvoće pod vakuumom, ostatak je podeljen između etil acetata (100 mL) i zasićenog natrijum bikarbonata (30 mL), organski sloj je odvojen i ispran slanim rastvorom, osušen iznad MgSO4, rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio etil 5-(morfolinometil)izoksazol-3-karboksilat (2.3 g, 95% prinos);<1>H NMR (HLOROF-ORM-d) δ 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 3H, CH3), 2.45 - 2.64 (m, 4H, CH2, CH2), 3.67 - 3.81 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.45 (q, J = 7.2 Hz, 2H, CH2), 6.65 (s, 1H, Ar).
[0537] Faza 3: Rastvoru etil 5-(morfolinometil)izoksazol-3-karboksilata (2.3 g, 9.57 mmol) u THF (50 mL) dodat je Dibal-H (28.7 ml, 28.7 mmol) na 0 °C. Formirana mešavina je zagrejana do sobne temperature i umešavana na sobnoj temperaturi. Mešavina ugašena je sa 1M Rošelovom soli i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50) mL, kombinovani organski sloj je ispran zasićenim natrijum bikarbonat, slanim rastvorom i osušena iznad magnezijum sulfata. Organski rastvarač je uparen da bi se dobio (5-(morfolinometil)izoksazol-3-il)metanol (1.48 g, 78% prinos);<1>H NMR (HLOROFORM-d) δ 2.50 - 2.66 (m, 4H, CH2), 3.70 (s, 2H, CH2), 3.72 - 3.82 (m, 4H, CH2, CH2), 4.76 (br. s., 2H, CH2), 6.29 (s, 1H, Ar).
[0538] Faza 3: Mešavina (5-(morfolinometil)izoksazol-3-il)metanol (740mg, 3.73 mmol), metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1091 mg, 3.73 mmol) i trifenilfosfina na polimernom nosaču (1.86 g, 5.6 mmol, 3mmol/g) u THF (100 mL) je ohlađena do 0 °C, i dodat je DIAD (1132 mg, 5.6 mmol), Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana kroz celit, smola je isprana etil acetatom (5 x 200 mL), kombinovani organski sloj je uparen do suvoće, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (80 g kolona, MeOH u DCM gradijent od 0-5% u 50 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)izoksazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (600 mg, 34% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 - 2.32 (m, 4H, CH2,CH2), 2.36 - 2.45 (m, 4H, CH2,CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.53 - 3.62 (m, 4H, CH2,CH2), 3.69 (s, 2H, CH2), 4.29 - 4.60 (m, 2H, CH2), 4.66 - 4.82 (m, 1H, CH), 5.33 (s, 2H, CH2), 6.59 (s, 1H, Ar), 7.19 (s, 1H, NHH), 7.33 (dd, J = 4.2, 7.6 Hz, 2H, Ar), 7.47 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar), 7.59 (s, 1H, NHH.
[0539] Faza 4: Mešavini metil 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)izoksazol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (580mg, 1.228 mmol) u THF (30 ml) dodat je kalijum tert-butoksid (152 mg, 1.350 mmol) na 0 °C. Formirana mešavina je mešana na 0 °C tokom 0,5 sati i zagrejana do sobne temperature u 0.5 sati. Reakcija je ugašena sa HCl (1N, 3 mL), THF je uparen pod vakuumom, dodat je zasićen natrijum bikarbonat (20 mL), obrazovani talog je prikupljen filtracijom i resuspendovan u acetonitrilu (7 mL) da bi se dobio 3-(4-((5-(morfolinometil)izoksa-zol-3-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (325 mg, 60 prinos); mp 218-220 °C. HPLC: (Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% HCOONH4): 3.45 (98.98%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.08 (m, 1H), 2.31 - 2.48 (m, 5H), 2.52 - 2.68 (m, 1H), 2.81 - 3.01 (m, 1H), 3.48 - 3.64 (m, 4H), 3.69 (s, 2H), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.34 - 4.53 (m, J = 17.6 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 6.57 (s, 1H), 7.25 - 7.43 (m, 2H), 7.44 - 7.59 (m, 1H), 10.98 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.20, 45.03, 51.61, 52.51, 52.73, 61.62, 66.03, 103.25, 115.13, 115.83, 129.87, 130.01, 133.42, 152.95, 160.09, 167.86, 169.84, 170.94, 172.82. Anal. Izrač. za C22H24N4O6:C, 59.99%; H, 5.49%; N, 12.72%; Pronađeno: C, 59.00%; H, 5.03%; N, 12.14%.
5.913-(4-((3-METILIZOKSAZOL-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0540]
[0541] Faza 1: Mešavina metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1 g, 3.42 mmol) i (3-metilizoksazol-5-il)metanola (0.387 g, 3.42 mmol) u THF (50 mL) je ohlađena do 0 °C. Dodat je trifenilfosfin, vezan polimerom, 3 mmol/g (2.3 g, 6.84 mmol), praćeno DIAD (1.347 ml, 6.84 mmol). Ledeno kupatilo je ostavljeno da se istopi, a mešavina je umešavana na temperaturi okoline tokom 16 h. Mešavina je uparena do suvoće i ostatak je nanesen suvo-nanesen direktno na kolonu sa silikagelom, sprovođenjem heksani-EtOAc gradijent. Proizvod je euliran na 100% EtOAc, čime je dobijen prinos sirove mešavina od 0.75 g (57%).
[0542] Faza 2: Ostatak iz faza 1 je rastvoren u THF (50 mL) i ohlađen do 0 °C. Zatim, dodat je kalijum tert-butoksid (0.230 g, 2.053 mmol). Nakon 30 min, reakcija je ugašena dodavanjem AcOH (0.5 mL) i mešavina je uparena pod vakuumom. Potom je mešavina suspendovana u mešavini EtOAc (100 mL) i 10% vodenom rastvoru natrijum karbonata (100 mL), a ova bifazna mešavina je mešana tokom 1 h, i potom filtrirana, a filtrat je ispran vodom (50 mL) i etil acetatom (50 mL). Sušenjem pod vakuumom, proizvod je dobijen kao bela čvrsta supstanca, 510 mg, u 42% prinos; mp 278 -280 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70 CH3CN/0.1% H3PO4: 3.27 (96.63%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.07 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.34 - 2.48 (m, 1H), 2.52 - 2.68 (m, 1H), 2.80 - 3.01 (m, 1H), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.33 - 4.47 (m, J = 17.6 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 4.9, 13.0 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 6.54 (s, 1H), 7.28 - 7.45 (m, 2H), 7.46 - 7.60 (m, 1H), 10.99 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 10.89, 22.39, 31.24, 45.00, 51.64, 60.65, 105.05, 115.03, 115.93, 129.85, 129.95, 133.51, 152.68, 159.68, 166.88, 167.83, 171.05, 172.96. Anal. Izrač. za C18H17N3O5 0.3 CH2Cl2: C, 57.72%; H, 4.66%; N, 11.03%; Pronađeno: C, 57.61%; H, 4.47%; N, 10.70%.
5.923-(1-OKSO-4-((4-((3-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[4,3-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENZIL) OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0544] Mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) i 3-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin hidrohlorida (113 mg, 0.496 mmol) u suvom MeCN (5 mL, 96 mmol), dodat je DIEA (0.276 mL, 1.579 mmol) na sobnoj temperaturi a onda je dobijena mešavina mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodat tetrabutilamonijum bromid (10.18 mg, 0.032 mmol), a temperatura je podignuta na 40 °C preko vikenda. Reakciona mešavina je transferovana u porcijama uz mešanje u bočicu sa vodom (∼50 mL). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi sa povremenom sonikacijom radi lomljenja čvrstig egregata. Nakon ∼1 h mešanja čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa malom porcijom vode. Sirova mešavina je prečišćena pomoću prep HPLC da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((3-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (120 mg, 48% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 35/65 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.86 min (97.7%); mp: 142-144 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 0H, CHH), 2.45 (dd, J = 4.3, 13.0 Hz, 0H, CHH), 2.57 (dd, J = 2.3, 15.5 Hz, 0H, CHH), 2.81 - 2.99 (m, 3H, CH2, CHH), 3.78 (s, 2H, CH2), 3.84 (s, 2H, CH2), 4.15 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 2H, Ar), 7.38 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.58 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 43.03, 45.06, 47.30, 48.09, 51.56, 59.51, 69.35, 114.99, 115.23, 116.80 (q, J = 269.6 Hz, M10), 127.79, 128.94, 129.78, 129.93, 133.30, 135.75, 136.99, 142.31 (q, J = 38.5 Hz, M24), 152.28, 153.46, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 555; Anal. izrač. za C27H25F3N6O4+ 0.75 H2O: C, 57.09; H, 4.70; N, 14.79; F, 10.03; Pronađeno: C, 57.09; H, 4.55; N, 14.74; F, 9.76.
5.931'-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-[2.4']BIPIRIDINIL-1'-IJUM FORMAT
[0546] U CH2Cl2(10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.52 g, 1.173 mmol) dodat je 2,4'-bipiridin (0.220 g, 1.408 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.388 ml, 2.346 mmol). To je svetlo zeleni bistar rastvor koji je umešavan na sobnoj temperaturi preko noći. Uljana čvrsta supstanca/ulje je mešano u vodi (20 ml) i CH2Cl2 (25 ml) tokom jednog sata. Aq faza je odvojena i dalje isprana sa CH2Cl2 (2 x 30 ml). Kombinovane CH2Cl2 faze ekstrahovane su vodom (2x10 ml). Kombinovane vodene faze su uparene u 50°C vodenom kupatilu da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca, koja je prečišćena preparativnom HPLC (MeCN/voda u 0.1% HCOOH) da bi se dobio 1'-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-[2,4']bipiridinil-1'-ijum format (0.213 g, 35% prinos); mp, 132-134°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.58 min (96.3%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.17 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.28 (s, 2H, CH2), 5.91 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.54 - 7.64 (m, 4H, Ar), 7.64 - 7.72 (m, 1H, Ar), 8.08 - 8.18 (m, 1H, Ar), 8.39 - 8.50 (m, 2H, Ar), 8.77 - 8.92 (m, 3H, Ar), 9.33 (d, J = 6.8 Hz, 2H, Ar), 10.99 (br. s., 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.18, 45.03, 51.58, 62.47, 68.94, 114.97, 115.36, 123.50, 124.75, 126.66, 128.41, 128.92, 129.82, 129.94, 133.34, 134.04, 137.93, 138.21, 145.31, 149.68, 150.64, 153.22, 153.30, 164.91, 167.93, 170.95, 172.82. LC/MS m/e=519, 520. Anal. izrač. za C31H27N4O4<+>.HCOO-: C, 68.08; H, 5.00; N, 9.92. Pronađeno: C, 61.92; H, 5.05; N, 8.98.
5.94 2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDROIMIDAZO[1,2-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0548] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazin hidrohlorida (137 mg, 0.601 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je DIEA (0.334 mL, 1.914 mmol) i dobijena gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Voda je dodata u delovima (∼35 mL ukupno) kako bi se obrazovao talog. Mešavina je obimno podvrgnuta sonikaciji uz blago zagrevanje, a zatim mešana tokom nekoliko sati na sobnoj temperaturi dok nije dobijena fino dispergovana čvrsta supstanca. Mešavina je isfiltrirana na srednje poroznom levku i kolač je ispran dodatnom vodom (∼50 mL), osušen sukcijom, i smešten u vakuum sušnicu na 50 °C preko noći da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidroimidazo[1,2-a]pirazin-7(8H)-il)metil)benzil)-oksi)izoindolin-1,3-dion kao svetlo bež čvrsta supstanca (275 mg, 89% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.44 min (97.2%); mp: 178-180 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95 - 2.14 (m, 1H, CHH), 2.42 - 2.66 (m, 2H, CHH, CHH), 2.80 - 2.99 (m, 3H, CH2, CHH), 3.62 (s, 2H, CH2), 3.74 (s, 2H, CH2), 4.02 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.3, 12.8 Hz, 1H, CH), 5.37 (s, 2H, CH2), 7.35 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.49 (t, 3H, Ar), 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.73 (d, J = 1.1 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 44.10, 48.37, 48.73, 50.63, 60.16, 69.89, 115.51, 116.58, 119.35, 119.40, 120.19, 123.98, 127.38, 128.92, 133.24, 135.15, 136.99, 137.31, 144.00, 155.49, 165.27, 166.75, 169.87, 172.72. Nisu svi Ar ugljenični signali primećeni zbog razdvajanja sa Fluorom; LCMS: MH = 568; Anal. izrač. za C28H24F3N5O5+ 0.2 H2O: C, 58.89; H, 4.31; N, 12.26; F, 9.98; Pronađeno: C, 58.91; H, 3.99; N, 11.91; F, 9.37.
5.953-(1-OKSO-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDROIMIDAZO [1,2-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0550] Suspenziji (S)-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) i 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazin hidrohlorida (113 mg, 0.496 mmol) u suvom MeCN (5 mL), dodat je DIEA (0.276 mL, 1.579 mmol). Dobijeni rastvor je mešan tokom 3 dana na sobnoj temperaturi a onda zagrejan do 50 °C tokom 16 h. Reakciona mešavina je razblažena vodom (-35 mL), a istaložena čvrsta supstanca je obimno podvrgnuta sonikaciji na 50 °C kako bi se potpomoglo razbijanje čvrstih agregata. Dobijena gusta suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana sa dodatnom vodom (∼50 mL) i Et2O (∼50 mL). Čvrsta supstanca je ponovo isprana vodom (∼75 mL) i Et2O (∼30 mL), a zatim osušena u vakuum sušnici na 50 °C preko noći da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidroimidazo[1,2-a]pirazin-7(8H)-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao svetlo braon čvrsta supstanca (189 mg, 76% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.99 min (95.8%); mp: 148-150 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.06 (m, 3H, CH2, CHH), 3.61 (s, 2H, CH2), 3.73 (s, 2H, CH2), 4.02 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.44 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.30 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.37 - 7.45 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.56 (m, 3H, Ar), 7.73 (d, J = 1.3 Hz, 1H, Imidazol), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 44.10, 45.07, 48.44, 50.55, 51.55, 60.18, 69.36, 114.96, 115.23, 123.98 (q, J = 266.3 Hz, CF3), 119.37 (q, J= 4.4 Hz, CCF3), 127.79, 128.93 (q, J= 37.4 Hz, CCF3), 128.90, 129.80, 129.93, 133.30, 135.63, 137.31, 143.99, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81. Kvartetas at 119.37 i 127.79 are incomplete; LCMS: MH = 554; Anal. izrač. za C28H26F3N5O4 0.58 H2O: C, 59.63; H, 4.85; N, 12.42; F, 10.11; Pronađeno: C, 59.25; H, 4.46; N, 12.41; F, 10.85.
5.963-(1-OKSO-4-((4-((3-PROPOKSIAZETIDIN-1-IL)METIL)BENZIL) OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0552] Rastvoru (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) u suvom MeCN (5 mL), dodat je 3-propoksiazetidin hidrohlorid (75 mg, 0.496 mmol) i DIEA (0.276 mL, 1.579 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h, a LCMS je pokazao da je benzil bromid polazni materijal utrošen. Mešavina je zagrejana do 50 °C tokom ∼30 min, ohlađena lagano do st, i onda je čuvana na 4 °C preko noći. Mešavina koja sadrži sirovi proizvod je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je rastvoren u minimalno DMF (∼5 mL) radi Prep HPLC prečišćavanja. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 60% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio bistar staklasti ostatak.1 N HCl (2-3 mL) dodata je i mešavina je koncentrovana u vakuumu do suvoće. Ovaj postupak je ponovljen dva puta radi dobijanja HCl soli. U čist ostatak, MeCN i Et2O su dodati u malim porcijama, a mešavina je podvrgnuta sonikaciji dok nije dobijena bela čvrsta supstanca. Gusta suspenzija je koncentrovana u vakuumu do suvoće i dva puta uparena iz Et2O (3-4 mL porcije) dok nije dobijena slobodno tečuća bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici preko noći da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((3-propoksiazetidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (52 mg , 22%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.60 min (99.8%); mp: 142-144 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.87 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH3), 1.40 - 1.59 (m, 2H, CH2), 1.91 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.84 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.28 -3.39 (m, 2H, CH2O, preklopljen sa DMSO), 3.89 (br. s., 2H, CH2), 4.06 - 4.23 (m, 2H, CH2), 4.23 - 4.32 (m, 2H, CHH, CHH), 4.36 (s, 2H, CH2), 4.44 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.53 (m, 1H, Ar), 7.55 (s, 4H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH), 11.09 (br. s., 1H, HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ -0.01, 12.34, 24.22, 32.97, 47.32, 53.70, 62.70, 63.30, 69.33, 71.21, 71.67, 117.13, 117.29, 129.67, 130.77, 131.82, 131.96, 134.99, 137.66, 138.23, 155.27, 170.35, 172.81, 174.98; LCMS: MH = 478; Anal. izrač. za C27H31N3O5·+ 3.2 H2O 1.3 HCl: C, 55.66; H, 6.70; N, 7.21; Cl, 7.91; H2O, 9.89; Pronađeno: C, 53.73; H, 6.33; N, 6.90; Cl, 7.63; H2O, 9.62.
5.97 ((S)-3-(4-((4-(((3S,5S)-3,5-DIMETILMORFOLINO)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID
[0553]
[0554] Suspenziji (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (250 mg, 0.564 mmol) u MeCN (5 mL), dodat je (3S,5S)-3,5-dimetilmorfolin (71.4 mg, 0.620 mmol). Mešavina je mešana i podvrgnuta sonikaciji na kratko da bi se dobio bistar rastvor zatim, DIEA (0.197 mL, 1.128 mmol) je odmah dodat i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i uljani ostatak je podeljen između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3 (30 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (8 mL) i prečišćena primenom reverzno fazne preparativna HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 50% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu.1N HCl (8 mL) dodata je u koncentratu i svi rastvarači su upareni da bi se dobila gumena čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je ponovo rastvorena u minimalno vode, zaleđena i liofilizovana da bi se dobio ((S)-3-(4-((4-(((3S,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela paperjasta čvrsta supstanca (160 mg, 55% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 10 min, CH3CN/0.1% H3PO4, 5.89 min (97.0%); mp: 230-232;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.28 (d, J = 6.8 Hz, 3H, CH3), 1.38 (d, J = 6.2 Hz, 3H, CH3), 1.86 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.36 -2.48 (m, 1H, CHH), 2.58 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.03 - 3.22 (m, 1H, CH), 3.48 -3.84 (m, 3H, CH2, CH), 3.91 (dd, J= 3.2, 12.3 Hz, 1H, CHH), 3.98 - 4.18 (m, 2H, CHH, CHH), 4.29 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 3.8, 13.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.54 (m, 1H, Ar), 7.58 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.83 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH), 11.40 (dd, J = 1.2, 3.1 Hz, 1H, HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 9.35, 11.92, 22.27, 31.09, 44.99, 51.38, 51.49, 53.34, 67.65, 67.88, 68.90, 114.89, 115.30, 127.81, 129.25, 129.75, 129.89, 130.93, 133.27, 137.63, 153.29, 167.87, 170.89, 172.76; LCMS: MH = 478; Anal. izrač. za C27H31N3O5·+ 1.3 H2O 2 HCl: C, 56.46; H, 6.25; N, 7.31; Pronađeno: C, 56.55; H, 5.93; N, 7.33.
5.983-{4-[4-(2-OKSA-6-AZA-SPIRO[3.3]HEPT-6-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0556] U dihlorometan (10 ml) suspenziju 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan oksalata (0.124 g, 0.857 mmol) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.425 ml, 2.57 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 min. Zatim dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.380 g, 0.857 mmol), koji je i dalje suspenzija. Oko 3 mL acetonitrila dodato je i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je prečišćena preparativnom HPLC (MeCN/voda u 0.1% HCOOH) da bi se dobio 3-{4-[4-(2-Oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion (39 mg, 10% prinos); mp, nije određen. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.32 min (95.2%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.84 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.30 (s, 3H, CH2CH2), 3.51 (s, 1H, CH2), 4.20 - 4.47 (m, 2H, CH2), 4.59 (s, 3H, CH2CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 1H, CH2), 7.23 -7.36 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (br. s., 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 31.21, 38.54, 45.13, 51.66, 61.97, 62.85, 69.47, 79.96, 115.05, 115.26, 127.62, 128.35, 129.79, 130.00, 133.35, 135.23, 137.96, 153.51, 167.99, 170.92, 172.76. LC/MS m/e=462.
5.99 3-(1-OKSO-4-{4-[2-(TETRAHIDRO-PIRAN-4-IL)-ETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0557]
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzojeve kiseline
[0558] Natrijum hidrid (60% u ulju) (0.378 g, 9.46 mmol) dodat je umešanom rastvoru anhidrovanog DMSO (50 ml). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 min. (4-metoksikarbonilbenzil)trifenilfosfonijum bromid (4.65 g, 9.46 mmol) (beli prah) mešavina dodata je u 5∼12°C hladno vodeno kupatilo. Nakon dva sata, dodat je tetrahidro-2H-piran-4-karbaldehid (0.9 g, 7.88 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva dana. Voda (50 ml) je dodata mešavini, i ekstrahovana sa etil acetatom (2x30 ml), isprana slanim rastvorom(50 ml), osušena i koncentrovana do uljane čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (EtOAc/Heksani) da bi se dobio metil estar 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzojeve kiseline kao bela čvrsta supstanca (1.2 g, 61 % prinos). LC/MS m/e=247. Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzojeve kiseline
[0559] Mešavina metil estra 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzojeve kiseline (1.36 g, 5.52 mmol) i paladijuma na aktiviranom ugljeniku 10 mas.% (50%vlažan) (0.21 g, 8.92 mmol) u metanolu (50 ml) je hidrogenovana sa balonom vodonika na sobnoj temperaturi preko noći. Crna suspenzija je filtrirana kroz celit, filtrat je uparen da bi se dobio metil estar 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzojeve kiseline kao bela čvrsta supstanca (1.33 g, 97% prinos). LC/MS m/e=217. Korišćen je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje {4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-fenil}-metanola
[0560] Litijum Aluminijum Hidrid (2.0M u THF) (2.29 ml, 4.58 mmol) dodat je u kapima izmešanom rastvoru metil estra 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzojeve kiseline (0.64 g, 2.58 mmol) u tetrahidrofuranu (8 ml) u ledenom kupatilu na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 30 min, rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu i dodata je voda u kapima kako bi se obrazovao beli gel, gas je potrošen. Još vode (30 ml) je dodato. Ekstrahovan je sa EtOAc (3 x 30 ml) i odvojene su dve faze dodavanjem "rastvora 1N Rošelove soli". Organska faza je uparena da bi se dobio {4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-fenil}-metanol kao bela čvrsta supstanca (0.58 g, 102% sirovi prinos). LC/MS m/e=203. Korišćen je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje 4-[2-(4-bromometil-fenil)-etil]-tetrahidro-pirana
[0561] U umešanu gustu suspenziju (4-(2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)fenil)metanola (0.57 g, 2.59 mmol) u suvom MeCN (8 mL) na 0 °C, dodat je tribromofosfin (0.466 ml, 4.94 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 20 minuta, zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Zamućena suspenzija ugašena je vodom (∼5 ml) u ledenom kupatilu, dodato je još vode (20 ml), ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 ml). Kombinovane organske faze isprane su slanim rastvorom (20 ml), osušene iznad natrijum sulfata i koncentrovane da bi se dobio 4-[2-(4-bromometil-fenil)-etil]-tetrahidro-piran kao ulje (0.74 g, 101% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 5: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-(1-okso-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline
[0562] Bela suspenzija metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.764 g, 2.61 mmol), 4-(4-(bromometil)fenetil)tetrahidro-2H-pirana (0.74 g, 2.61 mmol), i kalijum karbonata (0.361 g, 2.61 mmol) u acetonitrilu (15 ml) mešana je u 50°C uljanom kupatilu preko noći. Bela suspenzija je filtrirana, a filtrat je uparen do bele čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-(1-okso-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0.96 g, 74% prinos). LC/MS m/e=495. Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 6: Pripremanje 3-(1-Okso-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona
[0563] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0.96 g, 1.941 mmol) u tetrahidrofuranu (10 ml) na 0°C u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.218 g, 1.941 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta zatim ugašena sa 1 N HCl (do pH=1), neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom do pH=7, ekstrahovana metilen hloridom (3 x 30 ml). Kombinovane faze metilen hlorida isprane su sa (2 x 20 ml), osušene i koncentrovane do bele čvrste supstance. Umešana je u etru (20 ml) tokom nekoliko sati, i filtrirana da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.64 g, 71% prinos); mp, 254-256 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 7.18 min (96.7%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.13 -1.28 (m, 2H, CH2), 1.45 - 1.54 (m, 3H, CH2,CH), 1.61 (d, J = 13.0 Hz, 2H, CH2), 1.87 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.44 (m, 1H, CHH), 2.60 (t, J = 7.6 Hz, 3H, CH2, CHH), 2.91 (br. s., 1H, CHH), 3.24 (td, J = 1.7, 11.6 Hz, 2H, CH2), 3.82 (dd, J = 3.0, 11.1 Hz, 2H, CH2), 4.14 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.31 - 7.67 (m, 5H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 31.63, 32.64, 33.89, 38.24, 45.10, 51.59, 67.03, 69.49, 115.01, 115.20, 127.85, 128.34, 129.79, 129.97, 133.31, 133.86, 142.20, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=463. Anal. izrač. za C27H30N2O5 (+0.1 H2O): C, 69.84; H, 6.56; N, 6.03. Pronađeno: C, 69.57; H, 6.64; N, 5.93.
5.1002-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((6-(MORFOLINOMETIL) IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-2-IL)METOKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0564]
[0565] Faza 1: Mešavina 3-hidroksiftalnog anhidrida (1.6g, 9.8 mmol) u metanolu (25 mL) je refluksovana tokom 3 h. Mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak i NaHCO3(2.3g, 27.3 mmol) su umešani u DMF (20 mL). Jodometan (3.3g, 23.4 mmol) je dodat i reakciona mešavina je zagrevana u 50°C uljanom kupatilu tokom 3 h. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažena sa EtOAc (80 mL) i vodom (40 mL). Mešavina je zakišeljena sa 4N HCl i aq. sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X40 mL).
Kombinovan EtOAc rastvor je ispran vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 10% EtOAc/heksan tokom 15 min onda do 20% preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 30% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio dimetil 3-hidroksiftalat (1.8g, 89%):<1>H NMR (CDCl3) δ 3.89 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 6.95-6.98 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.06-7.10 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.41-7.48 (t, J=9 Hz, 1H), 10.55 (s, 1H);<13>C NMR (CDCl3) δ 52.64, 52.90, 110.19, 119.11, 119.83, 134.58, 135.46, 161.08, 169.33, 169.39.
[0566] Faza 2: Mešavina etil 6-aminonikonitata (5.0g, 30.1 mmol) i 1,3-dihloropropan-2-ona (5.7g, 45.1 mmol) u acetonitrilu (100 mL) je refluksovana tokom 17 h. Mešavina je koncentrovana i ostatak je umešan sa CH2Cl2(100 mL) i zas. NaHCO3(35 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/ CH2Cl2for 25 min zatim do 100% EtOAc preko 15 min) da bi se dobio etil 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilat (4.7g, 65%):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.42 (t, J=6 Hz, 3H), 4.38-4.45 (q, J=6 Hz, 2H), 4.77 (s, 2H), 7.56-7.59 (d, J=9 Hz, 1H), 7.74-7.77 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 8.86-8.87 (d, J=3 Hz, 1H).
[0567] Faza 3: rastvor etil 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboksilat (2.1g, 8.8 mmol) u anhidrovanom CH2Cl2(60 mL) je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu. Rastvor diizobutilaluminijum hidrid/CH2Cl2(1M, 26.4 mL, 26.4 mmol) dodat je lagano na -70°C. Nakon dodavanja, reakciona mešavina je mešana na -70°C tokom 1.5 h zatim ugašena metanolom (5 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(40 mL), i zas. NaHCO3(40 mL) i zagrejana do sobne temperature. Mešavina je isfiltrirana , a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (50 mL). Slojevi su odvojeni i organski sloj je ispran vodom (35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboaldehid (1.5g, 89%), koji je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0568] Faza 4: rastvor 2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-karboaldehida (1.5g, 7.9 mmol), morfolina (0.7g, 7.9 mmol) i sirćetne kiseline (0.6g, 9.4 mmol) u THF (60 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Natrijum triacetoksiborohidrid (3.3g, 15.7 mmol) dodat je i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, Reakciona mešavina je razblažena sa CH2Cl2 (50 mL) i ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa zas. NaHCO3 (40 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2 tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio 4-((2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metil)morfolin (1.1g, 53%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.45-2.49 (m, 4H), 3.47(s, 2H), 3.70-3.73 (m, 4H), 4.76 (s, 2H), 7.22-7.25 (dd, J=3 i 9 Hz, 1H), 7.53-7.57 (m, 2H), 8.03 (s, 1H).
[0569] Faza 5: Mešavina 4-((2-(hlorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metil)morfolin (1.1g, 4.2 mmol), dimetil 3-hidroksiftalat (0.9g, 4.2 mmol) i kalijum karbonat (0.6g, 4.2 mmol) u DMF (20 mL) je zagrejan u 55°C uljanom kupatilu tokom 7 h. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažena sa EtOAc (100 mL) i isprana vodom (3X30 mL), slanim rastvorom (30 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio dimetil 3-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoksi)ftalat (0.6g, 32%):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.43-2.45 (m, 4H), 3.45 (s, 2H), 3.70-3.73 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 5.39 (s, 2H), 7.19 (m, 1H), 7.30-7.38 (m, 2H), 7.45-7.61 (m, 3H), 8.01 (s, 1H).
[0570] Faza 6: Natrijum hidroksid (0.3g, 6.5 mmol) dodat je izmešanom rastvoru dimetil 3-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoksi)ftalatu (1.0g, 2.3 mmol) u etanolu (20 mL). Dobijena mešavina je refluksovana tokom 1 h zatim ohlađena i neutralizovana sirćetnom kiselinom (0.5g, 8.3 mmol). Mešavina je koncentrovana i ostatak je rastvoren u piridinu (30 mL). U ovaj rastvor dodat je αaminoglutarimid hidrohlorid (0.4g, 2.3 mmol) i dobijena mešavina je refluksovana tokom 5 h. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je mešan sa EtOAc (50 mL) i vodom (30 mL). Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (20 mL). Slojevi su odvojeni i aq. sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X40 mL). Kombinovan EtOAc rastvor je ispran vodom (2X30 mL), slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH2Cl2tokom 5 min onda do 3% CH3OH/CH2Cl2preko 5 min i držan tokom 10 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoksi)izoindolin-1,3-dion (0.12g, 10%): mp 255-257°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99-2.05 (m, 1H), 2.36-2.39 (m, 4H), 2.54-2.61 (m, 2H), 2.85-2.89 (m, 1H), 3.44-3.58 (m, 6H), 5.05-5.11 (dd, J=6 i 15 Hz, 1H), 5.46 (s, 2H), 7.22-7.25 (dd, J=3 i 6 Hz, 1H), 7.45-7.49 (m, 2H), 7.73-7.82 (m, 2H), 8.01 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 11.11 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.89, 48.72, 52.97, 59.11, 65.32, 66.13, 111.95, 115.41, 116.24, 115.40, 120.31, 122.31, 125.79, 127.03, 133.21, 136.87, 141.13, 143.91, 155.55, 165.24, 166.76,<169.87, 172.74; Izrač. za C>26<H>25<N>5<O>6<+0.9H>2<O: C, 60.09; H, 5.20; N, 13.47. Pronađeno: C, 60.05; H, 5.01; N,>13.22.
5.1013-{4-[4-(1,4-DIHIDRO-KVINAZOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
Faza 1: tert-butil estar (4-bromometil-fenil)-sirćetne kiseline
[0572] Umešani rastvor 2-(4-(bromometil)fenil)sirćetne kiseline (2.6 g, 11.35 mmol) u tionil hloridu (20 mL, 274 mmol) je zagrejan do refluksa tokom 2,5 h. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca dodata je izmešanom rastvoru 2-metilpropan-2-ola (20 ml, 213 mmol) u DCM (2 mL) u led/voda kupatilu. i mešavina je mešana u led/voda kupatilu tokom 2 h i na sobnoj temperaturi tokom 18 h. Reakciona mešavina je dodata CH2Cl2 (40 mL). Organska faza je isprana sukcesivno sa H2O (20 mL), NaHCO3 (zas, aq, 20 mL), i slanim rastvorom (25 mL) i osušena iznad MgSO4. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar (4-bromo metil-fenil)-sirćetne kiseline kao svetlo žuta tečnost (2.4 g, 74% sirovi prinos).1H NMR (DMSO-d6): 1.39 (s, 9H, tBu), 3.54 (s, 2H, CH2CO2), 4.69 (s, 2H, CH2Br), 7.23, 7.39 (m, 4H, zbog nećistoća).
Faza 2: metil estar 4-[4-(4-tert-Butoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[0573] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.5 g, 5.13 mmol) i tert-butil 2-(4-(bromometil)fenil) acetata (2.2 g, 7.7 mmol) u acetonitrilu (30 mL) dodat je KALIJUM KARBONAT (1.42 g, 10.3 mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na 50 °C tokom 27 h a između je dodat tert-butil 2-(4-(bromometil) fenil) acetat (800mg, 2.9 mmol) u dve porcije. Reakciona mešavina je isfiltrirana i svetlo braon čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (2 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO za metil estar 4-[4-(4-tert-Butoksikarbonilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlo žuta lepljiva čvrsta supstanca (2.1 g, 82% sirovi prinos) LCMS MH = 497.
Faza 3: metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[0574] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(2-tert-butoksi-2-oksoetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.1 g, 4.2 mmol) u DCM (20 mL) na sobnoj temperaturi dodata je voda (0.38 ml, 21.1 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje TFA (1.63 ml, 21.1 mmol) lagano. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 h a između je dodat TFA (3.2 mL) i voda (0.15 mL).
Mešavina je držana u frižideru preko noći i reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-karboksi metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (2.3 g, 123% sirovi prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 -2.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.58 (s, 2H, CH2), 4.41 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.53 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 4.6, 10.3 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.18 (br. s., 1H, NHH), 7.24 - 7.34 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.50 (m, 3H, Ar), 7.57 (br. s., 1H, NHH); LCMS MH = 441.
Faza 4: 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-aminobenzilamino)-2-oksoetil)benzil oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat
[0575] Izmešanom rastvoru 2-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)fenil)sirćetne kiseline (820 mg, 1.9 mmol) u DMF (10 mlL na sobnoj temperaturi dodat je HOBT (285 mg, 1.9 mmol). Minut kasnije, dodati su 2-(aminometil)anilin (227 mg, 1.9 mmol), EDC (357 mg, 1.9 mmol) i DIEA (0.81 ml, 4.65 mmol).
[0576] Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 17 h pre dodavanja vode (40 mL) i EtOAc (60 mL). Mešavina je ekstrahovana i aq sloj je ekstrahovan sa EtOAc (50 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušen sa MgSO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-amino benzilamino)-2-oksoetil)benzil oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao lepljivo ulje (300 mg, 30% prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja. LCMS MH = 545.
Faza 5: Metil 5-amino-4-(4-((4-(2-((2-aminobenzil)amino)-2-oksoetil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat
[0577] Rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-aminobenzilamino)-2-oksoetil)benzil oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (300mg, 0.55 mmol) u SIRĆETNOJ KISELINI (4 ml, 69.9 mmol) je zagrejan u mikrotalasnoj rerni na 125°C tokom 10 min. Reakciona mešavina je dodata NaHCO3 (aq, zas, 50 mL) lagano kako bi se kontrolisalo obrazovanje CO2. Dobijena mešavina je ekstrahovana sa DCM (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3(aq, zas, 15 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((4-(2-((2-aminobenzil) amino)-2-oksoetil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao svetlo braon čvrsta supstanca<(240 mg, 83% prinos); 1H NMR (DMSO-d>6<) δ 2.00 - 2.31 (m, 4H, CH>2<, CH>2<), 3.46 (s, 2H, CH>2<), 3.49 (s, 3H,>CH3), 4.33 - 4.57 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 4.71 (dd, J = 4.8, 10.3 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 6.88 (d, J = 4.2 Hz, 2H, Ar), 7.00 - 7.13 (m, 1H, Ar), 7.13 - 7.23 (m, 1H, NHH), 7.23 - 7.33 (m, 2H, Ar), 7.33 - 7.49 (m, 6H, Ar), 7.57 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 527.
Faza 6: 3-{4-[4-(1,4-Dihidro-kvinazolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0578] Izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-(4-((1,4-dihidrokvinazolin-2-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (240mg, 0.46 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0 °C (led/voda kupatilo) dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (56.3 mg, 0.5 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 2 h i KOtBu (37 mg, 0.33 mmol) dodati su reakcionoj mešavini radi dodatne reakcije na 0 °C.1.5 h kasnije, reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (50 mL) nakon čega je usledilo dodavanje HCl (2 mL, 1N, aq). Mešavina je mešana tokom 1 min, i dodat je NaHCO3(aq, zas., 20 mL). Mešavina je isfiltrirana kako bi se dobila neka žuta čvrsta supstanca. Filtrat je ekstrahovan i aq sloj je ekstrahovan sa DCM (30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa MgSO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-{4-[4-(1,4-Dihidro-kvinazolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (25 mg, 11% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 23/77, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.90 min (96.3%); mp: 153-155 °C (in house);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.98 (br. s., 1H, CHH), 2.35 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.87 (dd, J = 4.7, 12.8 Hz, 1H, CHH), 3.45 (s, 2H, CH2), 4.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.48 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.74 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 6.88 (d, J = 4.2 Hz, 2H, Ar), 6.99 - 7.10 (m, 1H, Ar), 7.25 - 7.56 (m, 8H, Ar, NH), 10.95 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.23, 31.09, 40.98, 45.02, 51.48, 69.32, 114.83, 115.11, 122.98, 125.44, 127.34, 127.78, 127.88, 128.75, 129.10, 129.72, 129.88, 133.22, 134.62, 137.18, 153.41, 167.92, 170.86, 172.73; LCMS MH = 495; Anal. Izrač. za C29H25N4O4 : C, 70.43; H, 5.30; N, 11.33;
Pronađeno: N/A.
5.1023-(1-OKSO-4-{4-[2-(TETRAHIDRO-PIRAN-4-IL)-ETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0579]
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-(Tetrahidro-piran-4-ilidenmetil)-benzojeve kiseline
[0580] Natrijum hidrid (60% u ulje) (0.240 g, 5.99 mmol) dodat je umešanom rastvoru anhidrovanog DMSO (50 ml). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta. Mešavini je dodat (4-metoksikarbonilbenzil) trifenilfosfonijum bromid (2.94 g, 5.99 mmol) (beli prah) u 5∼12°C hladnom vodenom kupatilu. Nakon dva sata, dodat je dihidro-2H-piran-4(3H)-on (0.5 g, 4.99 mmol) u DMSO (3 ml). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim razblažena vodom (80 ml) lagano i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 80 ml). Kombinovane faze etil acetata dalje su isprane vodom (2 x 100 ml). Faza etil acetata je uparena do beličaste čvrste supstance i prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (EtOAc/Heksani) da bi se dobio metil estar 4-(Tetrahidro-piran-4-ilidenmetil)-benzojeve kiseline kao ulje (0.74 g, 63% prinos). HNMR pokazuje 72% ćistoće. Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzojeve kiseline
[0581] Mešavina metil estra 4-(tetrahidro-piran-4-ilidenmetil)-benzojeve kiseline (0.743 g, 3.20 mmol) i paladijuma na aktiviranom ugljeniku 10mas.% (50% vlažan) (0.14 g, 69.4 mmol) u metanolu (30 ml) je hidrogenovana sa dva balona vodonika tokom tri sata. Suspenzija je filtrirana kroz jastučiće Celita, filtrat je uparen da bi se dobio metil estar 4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzojeve kiseline kao uljana čvrsta supstanca (0.71 g, 95% prinos). HNMR pokazuje 70% ćistoće. Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje [4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-fenil]-metanola
[0582] Litijum Aluminijum Hidrid (2.0 M u THF) (1.494 ml, 2.99 mmol) dodat je u kapima izmešanom rastvoru metil estra 4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzojeve kiseline (0.7 g, 2.99 mmol) u tetrahidrofuranu (8 ml) u ledenom kupatilu na 0°C. Mešavina je mešana tokom 20 minuta. Rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu i dodata je voda (30 ml) u kapima kako bi se obrazovao beli gel, a gas je potrošen. Ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 40 ml) i odvojeno dve faze dodavanjem "rastvora 1N Rošelove soli". Organska faza je uparena i prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (EtOAc/Heksani) da bi se dobio [4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-fenil]-metanol kao ulje (0.16 g, 26% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje 4-(4-bromometil-benzil)-tetrahidro-pirana
[0583] U umešanu gustu suspenziju (4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)fenil)metanola (0.16 g, 0.776 mmol) u acetonitrilu (anhidrovani) (8 ml, 0.776 mmol) na 0 °C, dodat je tribromofosfin (0.110 ml, 1.163 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 10 minuta. Suspenzija je ugašena vodom (25 ml) u ledenom kupatilu, ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 ml). Kombinovane org faze isprane su slanim rastvorom (20 ml), osušen iznad natrijum sulfata i koncentrovane da bi se dobio 4-(4-bromometilbenzil)-tetrahidro-piran kao ulje (0.206 g, 99% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 5: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-{1-okso-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0584] Bela suspenzija metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.195 g, 0.669 mmol), 4-(4-(bromometil)benzil)tetrahidro-2H-pirana (0.18 g, 0.669 mmol), i kalijum karbonata (0.092 g, 0.669 mmol) u acetonitrilu (10 ml) je umešana u 50°C uljanom kupatilu preko noći. Suspenzija je filtrirana i filtrat je uparen do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{1-okso-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidroizoindol-2-il}-buterne kiseline kao ulje (∼0.15 g, 46% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 6: Pripremanje 3-{1-Okso-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
[0585] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0.15 g, 0.312 mmol) u tetrahidrofuranu (8 ml) na 0 °C u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.035 g, 0.312 mmol). Rastvor je mešan tokom deset minuta i ugašen sa 1 N HCl do pH=1 zatim neutralizovan zasićenim natrijum bikarbonatom do pH=7, i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 30 ml). EtOAc faze su isprane vodom (20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušene i koncetrovane do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (40 g, MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benziloksi}-1,3-dihidroizoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (64 mg, 46% prinos); mp, 172-174°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.88(96.1%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.12 - 1.29 (m, 2H, CH2), 1.39 - 1.53 (m, 2H, CH2), 1.61 - 1.82 (m, 1H, CH), 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.16 - 3.28 (m, 0H, CH2), 3.75 - 3.87 (m, J = 0.9, 0.9, 4.7, 11.4 Hz, 0H, CH2), 4.18 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.20 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.32 (d, J = 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.44 - 7.54 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 32.46, 36.36, 42.28, 45.09, 51.58, 66.91, 69.48, 114.97, 115.20, 127.68, 129.11, 129.81, 129.94, 133.29, 134.04, 139.81, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=449. Anal. izrač. za C26H28N2O5(+0.4 H2O): C, 68.53; H, 6.37; N, 6.15. Pronađeno: C, 68.35; H, 6.44; N, 6.03.
5.1033-{1-OKSO-4-[4-(3-FENOKSI-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0587] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.36 g, 0.812 mmol) dodat je 3-fenoksiazetidin (0.158 g, 1.056 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.268 ml, 1.624 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom jednog sata. Rastvarač je uparen i umešan sa metilen hloridom (80 ml). Ispran je vodom (2 x 40 ml), osušen i koncetrovan do ulja, koje je prečišćeno silika gel kolonom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(3-fenoksi-azetidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.237 g, 57% prinos); mp, 150-152°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.83 min (96.0%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 -2.98 (m, 1H, CHH), 3.04 (ddd, J = 1.8, 5.3, 6.9 Hz, 2H, CH2), 3.65 (s, 2H, CH2), 3.68 - 3.79 (m, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, CH2), 4.80 (quin, J = 5.7 Hz, 1H, CH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.82 (dd, J = 1.0, 8.8 Hz, 2H, Ar), 6.89 - 6.98 (m, 1H, Ar), 7.22 - 7.37 (m, 5H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.10, 51.59, 60.56, 62.35, 66.23, 69.41, 114.49, 114.98, 115.23, 120.89, 127.68, 128.39, 129.60, 129.81, 129.95, 133.32, 135.23, 138.05, 153.50, 156.68, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=512. Anal. izrač. za C30H29N3O5(+0.9 H2O): C, 68.27; H, 5.88; N, 7.96. Pronađeno: C, 67.93; H, 5.69; N, 7.84.
5.1043-(4-{4-[3-(4-FLUORO-FENOKSI)-AZETIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION FORMAT (referentni primer)
[0588]
[0589] U 20-mL reakcionu fiolicu ispunjenu sa 3-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionom (300 mg, 0.677 mmol) i 3-(4-fluorofenoksi)azetidin hidrohloridom (145 mg, 0.711 mmol), dodat je suvi MeCN (10 mL) praćeno DIEA (0.355 mL, 2.0 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do 50 °C da bi se dobio bistar rastvor. Nakon -30 min, temperatura je podignuta dalje do 70 °C i reakciona mešavina je mešana tokom ∼16 h na 70 °C. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature a onda koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen u EtOAc (∼100 mL) a onda ekstrahovan sa 1N NaHCO3(2 x 35 mL) i slanim rastvorom. Sušenje (Na2SO4) i koncentrovanje na rotacionom isparivaču dalo je staklastu čvrstu supstancu. Et2O (∼15 mL) je dodat u staklo u malim porcijama i sa intermitentnom sonikacijom dok nije obrazovana dobro dispergovana čvrsta supstanca. Gusta suspenzija je umešavana energično i potom filtrirana kroz 15-mL fino porozni levak. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (7 mL) i prečišćena primenom reverzno fazne preparativna HPLC.
Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 95% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(4-{4-[3-(4-fluoro-fenoksi)-azetidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion format kao bela čvrsta supstanca (204 mg, 52% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 27/73 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.62 min (98.4%); mp: 166-168 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.91 (ddd, J = 5.3, 13.5, 17.4 Hz, 1H, CHH), 3.03 (dd, J = 5.6, 8.2 Hz, 2H, CHH, CHH), 3.64 (s, 2H, CH2N), 3.71 (dd, J = 6.2, 8.3 Hz, 2H, CHH, CHH), 4.25 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.77 (quin, J = 5.7 Hz, 1H, OCH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.75 - 6.91 (m, 2H, Ar), 7.00 - 7.21 (m, 2H, Ar), 7.28 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 -7.62 (m, 3H, Ar), 8.16 (s, 1H, HCOOH), 10.97 (s, 1H, NH). -1.8 equiv. of HCOOH na 8.16 ppm je primećen.
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.07, 51.56, 60.41, 62.29, 66.70, 69.36, 114.97, 115.20, 115.70, 115.80, 116.09, 127.66, 128.39, 129.78, 129.93, 133.30, 135.24, 137.98, 153.23 (d, J = 35.2 Hz, CF), 158.22, 163.15, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 530; Anal. izrač. za C30H28FN3O5 1.8 HCOOH 1.25 H2O: C, 60.16; H, 5.41; N, 6.62; Pronađeno: C, 60.08; H, 5.05; N, 6.56.
5.1053-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0591] U 20-mL reakciona fiolicu ispunjenu sa 3-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionom (300 mg, 0.677 mmol) i 3,3-difluoroazetidin hidrohloridom (92 mg, 0.711 mmol), dodat je suvi MeCN (10 mL) praćeno DIEA (0.355 mL, 2.0 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do 50 °C. Nakon -30 min, temperatura je podignuta dalje do 70 °C i reakciona mešavina postaje bistra.
Mešanje je nastavljeno tokom ∼16 h na 70 °C. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature a onda koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen u EtOAc (∼100 mL) a onda ekstrahovan sa 1N NaHCO3 (2 x 35 mL) i slanim rastvorom. Sušenje (Na2SO4) i koncentrovanje na rotacionom isparivaču daje staklastu čvrstu supstancu. Et2O (∼20 mL) dodat je u staklu u malim porcijama i sa intermitentnom sonikacijom dok nije obrazovana dobro dispergovana čvrsta supstanca. Gusta suspenzija je umešavana energično i potom filtrirana kroz 15-mL srednje porozni levak. Kolač je ispran dodatnim Et2O (∼50 mL) a onda vodom (∼50 mL). Preostala čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda osušena dalje u vakuum sušnici na 60 °C tokom nekoliko sati da bi se dobio 3-{4-[4-(3,3-difluoro-azetidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (187 mg, 61% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.20 min (99.1%); mp: 175-177 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.52 -2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.04 (m, 1H, CHH), 3.59 (t, J = 12.5 Hz, 4H, CH2CF2, CH2CF2), 3.72 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.59 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 51.56, 61.30, 63.55 (t, J = 22.0 Hz, CF2(CH2)2), 69.31, 117.29 (t, J = 275.1 Hz, CF2), 114.96, 115.22, 127.71, 128.36, 129.78, 129.93, 133.30, 135.49, 137.59, 153.45, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 456; Anal. izrač. za C24H23F2N3O4 0.65 H2O: C, 61.70; H, 5.24; N, 8.99; Pronađeno: C, 61.70; H, 5.01; N, 8.77.
5.1063-{4-[4-(3-METIL-3-FENOKSI-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0593] U CH2Cl2rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 3-metil-3-fenoksiazetidin (0.142 g, 0.869 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.336 ml, 1.974 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je dodata voda (10 mL) i CH2Cl2 (10 mL) , a zatim je estrahovana. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom da bi se dobio 3-{4-[4-(3-metil-3-fenoksi-azetidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (250 mg, 60%). Tačka topljenja: 127-129 °C. LC-MS m/e= 526. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1 % H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.82 min (94%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.58 (s, 3H, CH3), 1.87 - 2.14 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.44 (m, 0H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.17 (d, J = 7.6 Hz, 2H, CH2), 3.49 (d, J = 7.9 Hz, 2H, CH2), 3.64 (s, 2H, CH2), 4.16 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.71 (d, J = 7.7 Hz, 2H, Ar), 6.84 - 7.00 (m, 1H, Ar), 7.18 - 7.29 (m, 2H, Ar), 7.29 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.60 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.57, 22.33, 31.16, 45.06, 51.55, 62.12, 65.47, 69.36, 73.05, 114.94, 115.20, 116.40, 120.69, 127.67, 128.41, 129.48, 129.78, 129.93, 133.28, 135.21, 138.05, 153.46, 154.73, 167.97, 170.95, 172.80; Anal. izrač. za C31H31N3O5+ 0.5 H2O: C: 69.65%; H: 6.03%; N:7.83%; Pronađeno: C: 69.52%; H: 5.87%; N: 7.80%.
5.107 3-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-PIROLIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0594]
[0595] Izmešanoj mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.8 mmol) i 3,3-difluoropirolidin hidrohlorida (136 mg, 0.8 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DIPEA (0.28 ml, 1.6 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 22 h i reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (30 mL). Mešavina je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-{4-[4-(3,3-Difluoro-pirolidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (256 mg, 69% prinos. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.59min (98.6%); mp: 126-128 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.15 - 2.34 (m, 2H, CH2), 2.35 - 2.44 (m, 1H, CHH), 2.60 (br. s., 1H, CHH), 2.69 (t, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 2.76 - 3.01 (m, 3H, CHH, CH2), 3.62 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.32 (m, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.22 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.63 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 34.92, 35.55(t, JC-F= 22.50 Hz), 51.30, 51.56, 58.24, 60.99(t, JC-F= 27.57 Hz), 69.35, 114.97, 115.22, 127.69, 128.62, 129.78, 129.93, 130.38, 133.30, 135.44, 137.63, 153.46, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS MH = 470; Anal. Izrač. za C25H25F2N3O4+0.2H2O : C, 63.47; H, 5.41; N, 8.88; Pronađeno: C, 63.41; H, 5.46; N, 8.78.
5.108 3-{4-[4-(7-FLUORO-3,4-DIHIDRO-1H-IZOKVINOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0596]
[0597] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.36 g, 0.812 mmol) dodat je 7-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin hidrohlorid (0.198 g, 1.056 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.403 ml, 2.436 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen, i dodat je metilen hlorid (100 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do penaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(7-Fluoro-3,4-dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.205 g, 49% prinos); mp, 132-134°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.75 min (95.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.63 - 2.72 (m, 2H, CH2), 2.73 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.54 (s, 2H, CH2), 3.65 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.84 - 7.00 (m, 2H, Ar), 7.09 - 7.17 (m, 1H, Ar), 7.29 - 7.42 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 27.90, 31.20, 45.10, 50.02, 51.59, 55.13, 61.21, 69.44, 112.49, 112.78, 113.07, 115.00, 115.24, 127.74, 128.80, 129.82, 129.93 (d, JC-F=18), 130.19, 133.32, 135.33, 136.95 (d, JC-F=8), 138.13, 153.51, 160.20 (d, JC-F=240), 168.01, 170.96, 172.82.). LC/MS m/e=514. Anal. izrač. za C30H28N3O4F (+0.2 H2O): C, 69.67; H, 5.54; N, 8.12. Pronađeno: C, 69.34; H, 5.57; N, 7.96.
5.1093-{4-[4-(4,7-DIHIDRO-5H-TIENO[2,3-C]PIRIDIN-6-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0598]
[0599] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.359 g, 0.810 mmol) dodat je 4,5,6,7-tetrahidrothieno[2,3-c]piridin hidrohlorid (0.171 g, 0.972 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.402 ml, 2.430 mmol). On postaje bistar rastvor nakon dodavanja DIPEA. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i ostatku je dodat metilen hlorid (80 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 60 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(4,7-Dihidro-5H-tieno[2,3-c]piridin-6-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.304 g, 74% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.61 min (98.1%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.68 (m, 3H, CHH, CH2), 2.68 - 2.77 (m, 2H, CH2), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.59 (s, 2H, CH2), 3.68 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H, Ar), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 1H, Ar), 7.31 - 7.42 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 25.12, 31.20, 45.10, 49.59, 51.36, 51.59, 60.50, 69.45, 115.00, 115.24, 122.61, 126.99, 127.72, 128.83, 129.81, 129.95, 132.46, 133.32, 133.47, 135.35, 138.29, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=502. Anal. izrač. za C28H27N3O4S (+0.5 H2O): C, 65.86; H, 5.53; N, 8.23. Pronađeno: C, 65.64; H, 5.44; N, 8.04.
5.1103-{4-[4-(6,7-DIHIDRO-4H-TIENO[3,2-C]PIRIDIN-5-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0601] U CH3CN (10 ml) suspenziju 4,5,6,7-tetrahidrothieno[3,2-c]piridina (0.145 g, 1.038 mmol) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.354 g, 0.799 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.264 ml, 1.597 mmol). Ona postaje bistar rastvor nakon dodavanja DIPEA. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva sata. Rastvarač je uparen, i dodat je metilen hlorid (80 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncetrovana do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[4-(6,7-Dihidro-4H-tieno[3,2-c]piridin-5-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.312 g, 78% prinos); mp, 143-145°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.51 min (97.0%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.68 - 2.83 (m, 4H, CH2, CH2), 2.84 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.42 - 3.49 (m, 2H, CH2), 3.68 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.76 (d, J = 5.1 Hz, 1H, Ar), 7.25 (d, J = 5.1 Hz, 1H, Ar), 7.30 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 24.99, 31.20, 45.10, 50.18, 51.59, 52.42, 60.91, 69.45, 115.00, 115.24, 122.91, 125.42, 127.72, 128.82, 129.82, 129.95, 132.77, 133.32, 133.96, 135.30, 138.38, 153.53, 168.01, 170.96, 172.83. LC/MS m/e=502. Anal. izrač. za C28H27N3O4S (+0.4 H2O): C, 66.10; H, 5.51; N, 8.26. Pronađeno: C, 65.92; H, 5.45; N, 8.00.
5.1113-{1-OKSO-4-[4-(3,3,4,4-TETRAFLUORO-PIROLIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0602]
[0603] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 3,3,4,4-tetrafluoropirolidin hidrohlorid (0.142g, 0.79 mmol), i N-etil-Nizopropilpropan-2-amin (336 µl, 1.974 mmol). Mešavina je zagrejana do 70 °C tokom 3 dana. Reakciona mešavina je koncentrovana i rezultujuća čvrsta supstanca je uzeta u CH2Cl2(20 mL) i ekstrahovan vodom (20 mL). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluiran sa CH2Cl2 i MeOH da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(3,3,4,4-tetrafluoro-pirolidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela ćvrsta supstanca (120 mg, 30%). Tačka topljenja :164-166 °C. LC-MS m/e = 506. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.67 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.44 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.15 (t, J = 13.4 Hz, 4H, CH2, CH2), 3.72 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.58 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 51.56, 57.01, 57.47, 57.82, 58.15, 69.29, 114.97, 115.25, 119.39, 122.84, 127.80, 128.75, 129.80, 129.95, 133.30, 135.88, 136.13, 153.45, 167.97, 170.95, 172.80; Anal. izrač. za C25H23F4N3O4 0.4 H2O: C; 58.57%; H: 4.67%; N: 8.20%; Pronađeno: C; 58.46%; H: 4.35%; N: 8.08%.
5.1123-(4-{4-[2-(4-FLUORO-FENIL)-2-METIL-MORFOLIN-4-ILMETIL]-BENZILOKSI}-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0604]
[0605] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 2-(4-fluorofenil)-2-metilmorfolin (0.170 g, 0.869 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.336 ml, 1.974 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda i CH2C12 , a zatim je estrahovana. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluiran sa CH2Cl2 i MeOH da bi se dobio 3-(4-{4-[2-(4-fluoro-fenil)-2-metil-morfolin-4-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.27 g, 61%). Tačka topljenja: 118-120 °C. LC-MS m/e=558. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.90 min (94%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.32 (s, 3H, CH3), 1.87 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.46 (m, 4H, CHH, CH2,CHH), 2.57 (d, J = 18.5 Hz, 1H, CHH), 2.93 (br. s., 2H, CHH, CHH), 3.35 - 3.55 (m, J = 1.9 Hz, 3H, CH2, CHH), 3.57 - 3.76 (m, 1H, CHH), 4.16 - 4.54 (m, 2H, CH2), 5.00 - 5.19 (m, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.12 (td, J = 1.5, 8.9 Hz, 2H, Ar), 7.27 - 7.41 (m, 6H, Ar), 7.41 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 27.95, 31.16, 45.06, 51.56, 52.70, 60.63, 61.07, 61.77, 69.39, 74.52, 114.40, 114.68, 115.00, 115.22, 127.57, 127.76, 127.86, 128.98, 129.77, 129.95, 133.30, 135.37, 137.59, 141.20, 153.46, 159.21, 162.42, 167.97, 170.93, 172.80. Anal. izrač. za C32H32FN3O5: C: 68.93%; H: 5.78%; N:7.54%; Pronađeno: C: 67.20%; H: 5.26%; N: 7.17%.
5.1133-{4-[4-(6-FLUORO-3,4-DIHIDRO-1H-IZOKVINOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0606]
[0607] U CH2Cl23-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin hidrohlorid (0.163 g, 0.869 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.336 ml, 1.974 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda i CH2C12 i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je mešana sa etrom i suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(6-Fluoro-3,4-dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.28 g, 69%). Tačka topljenja: 123-125 °C. LC-MS m/e = 514. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.6 min (94%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, J = 13.4 Hz, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 18.3 Hz, 1H, CHH), 2.62 - 2.71 (m, 2H, CH2), 2.76 -3.00 (m, 3H, CH2, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2), 3.65 (s, 2H, CH2), 4.11 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.93 (d, J = 9.3 Hz, 2H, Ar), 6.99 - 7.12 (m, 1H, Ar), 7.28 - 7.43 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 28.70, 31.16, 45.07, 49.65, 51.55, 54.75, 61.33, 69.42, 112.29, 112.57, 114.36, 114.64, 114.97, 115.22, 127.70, 128.02, 128.14, 128.78, 129.78, 129.93, 130.78, 133.30, 135.30, 136.51, 136.61, 138.17, 153.49, 158.83, 162.04, 167.97, 170.95, 172.80; Anal. izrač. za C30H28FN3O4 0.5 H2O: C: 68.95%; H: 5.59%; N: 8.04%. Pronađeno: C: 68.68%; H: 5.31%; N: 7.89%.
5.1143-{1-OKSO-4-[4-(3-FENIL-5,6-DIHIDRO-8H-IMIDAZO[1,2-A] PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0608]
[0609] Mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.8 mmol) i 3-fenil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina (157 mg, 0.8 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DIPEA (0.28 mL, 1.6 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 23 h a onda joj je dodat 3-fenil-5,6,7,8-tetrahidro imidazo[1,2-a]pirazina (94 mg, 0.45 mmol) i DIPEA (0.1 mL, 0.6 mmol). Mešavina je koncentrovana i mešana u acetonitrilu (7 mL), DCM (2 mL) i DIPEA (0.2 mL) na 60°C tokom 16 h. Reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (30 mL) i isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(3-fenil-5,6-dihidro-8H-imidazo[1,2-a]pirazin-7-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao svetlo žuta čvrsta supstanca (82 mg, 18% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 27/73, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.89min (98.3%); mp: 131-133 °C (in house);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.84 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 2.88 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.64 (s, 2H, CH2), 3.74 (s, 2H, CH2), 4.03 (t, J = 5.2 Hz, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.26 (s, 2H, CH2), 7.02 (s, 1H, Ar), 7.29 - 7.38 (m, 3H, Ar), 7.39 - 7.46 (m, 4H, Ar), 7.46 - 7.54 (m, 5H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.43, 30.26, 42.58, 44.17, 48.31, 50.64, 59.57, 68.52, 114.13, 114.33, 125.24, 126.26, 126.33, 126.87, 127.83, 128.04, 128.83, 128.90, 129.06, 130.23, 132.40, 134.69, 136.60, 142.49, 152.59, 167.08, 170.04, 171.90; LCMS MH = 562; Anal. Izrač. za C33H31N5O4+0,8H2O 0.31 CH2Cl2: C, 66.42; H, 5.56; N, 11.63; Pronađeno: C, 66.10; H, 5.25; N, 11.49.
5.1153-{1-OKSO-4-[4-(4-TRIFLUOROMETIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0611] U CH3CN rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 4-(trifluorometil)-1H-imidazol (0.118 g, 0.869 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.336 ml, 1.974 mmol). Mešavina je zagrevana na 70 °C tokom 2 dana. Reakcionoj mešavini je zatim dodat CH2Cl2 i voda i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan, a rezultujuće ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i MeOH da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-trifluorometil-imidazol-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 20%). Tačka topljenja 148-150 °C. LC-MS m/e= 499. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 8.89 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.48 (m, J = 4.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 17.9 Hz, 1H, CHH), 2.80 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.18 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.43 - 7.57 (m, 3H, Ar), 7.91 (d, J = 1.1 Hz, 1H, Ar), 8.00 (s, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.16, 45.04, 49.62, 51.55, 69.10, 114.91, 115.26, 120.53, 127.83, 128.14, 129.78, 129.95, 133.30, 136.49, 136.64, 139.07, 153.36, 167.96, 170.93, 172.80. Anal. izrač. za C25H21F3N4O4+ 0.5 H2O: C;
59.17%; H, 4.37%; N, 11.04%. Pronađeno: C; 59.21%; H, 4.11%; N, 10.90%.
5.1163-(4-{3-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0612]
[0613] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.31 g, 0.699 mmol) dodat je 4-(4-fluorofenil)piperidin hidrohlorid (0.181 g, 0.839 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.347 ml, 2.098 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog sata. Rastvarač je uparen i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću kolona sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(4-{3-[4-(4-Fluorofenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi} -1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.176 g, 47% prinos); mp, 139-141°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.95 min (95.5%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.49 - 1.77 (m, 4H, CH2, CH2), 1.89 - 2.09 (m, 3H, CH2, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.81 - 2.99 (m, 3H, CH2, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.04 - 7.15 (m, 2H, Ar), 7.21 - 7.53 (m, 9H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 15.14, 22.36, 31.18, 33.13, 41.01, 45.12, 51.59, 53.50, 62.18, 69.63, 114.75, 115.01, 115.20, 115.26, 126.22, 128.00, 128.34, 128.44, 129.76, 129.98, 133.31, 136.47, 138.79, 142.35, 153.44, 160.58 (d, JC-F=242 Hz), 167.99, 170.95, 172.79. LC/MS m/e=542. Anal. izrač. za C32H32N3O4F (+0.2 H2O):C, 70.49; H, 5.99; N, 7.71. Pronađeno: C, 70.24; H, 6.14; N, 7.58.
5.1172-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-4-[4-(2-TRIFLUOROMETIL-5,6,8,8A-TETRAHIDRO-1H-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENZILOKSI]-IZOINDOL-1,3-DION
[0614]
Faza 1:Pripremanje dimetil 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)ftalata
[0615] Dimetil 3-hidroksiftalat (10 g, 47.6 mmol) i (4-(hlorometil)fenil)metanol (7.82 g, 50.0 mmol) rastvoreni su u suvom DMF (60 mL). Rastvoru je dodat K2CO3(6.90 g, 50.0 mmol) i mešavina je mešana na 80 °C tokom 16 h. DMF je uklonjen u vakuumu i ostatak je podeljen između EtOAc (300 mL) i vode (100 mL). Organski sloj je ispran dodatnom vodom (100 mL) i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu do dimetil 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)-ftalata kao viskozno cílibarsko ulje (19 g): LCMS: MH = 331; Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja
Faza 2:Pripremanje 3-((4-(Hidroksimetil)benzil)oksi)ftalne kiseline
[0616] Dimetil 3-(4-(hidroksimetil)benziloksi)ftalat (19 g stvarna masa, 15.72 g, 47.6 mmol, pretpostavljajući kvantitativni prinos iz prethodne faze) je rastvoren u THF (30 mL). Rastvoru je dodata voda (30 mL). Vodeni NaOH (10 N, 25 mL, 250 mmol) dodat je i mešavina je energično umešavana na 70 °C tokom 2,5 h. Mešavina je ostavljena da se ohladi do st, koncentrovana u vakuumu do sirupa, a onda preneta u flašicu koja sadrži 6 N HCl (45 mL) preko leda. Odmah, čvrsta supstanca je istaložena i gusta suspenzija je razblažena vodom (∼60 mL). Mešavina je isfiltrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Kolač je ispran dodatnom vodom (∼60 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 4 h da bi se dobila 3-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)ftalna kiselina kao bledo žuta čvrsta supstanca (13.9 g, 97% prinos iz dimetil 3-hidroksiftalat):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.41 - 4.58 (m, 2H, CH2), 5.17 (s, 3H, CH2, OH), 7.20 - 7.64 (m, 7H, Ar), 13.02 (br. s., 2H, 2 x COOH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 62.63, 69.73, 117.03, 121.56, 126.46, 126.88, 127.13, 128.91, 129.57, 134.87, 142.19, 154.50, 166.45, 167.71; LCMS: MH = 303, 94 površina% pri 240 nm. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3:Pripremanje 2-(2,6-Dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroksimetil)benzil) oksi)izoindolin-1,3-diona [0617] 3-Aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (0.915 g, 5.56 mmol) dodat je rastvoru 3-(4-(hidroksimetil)benziloksi)ftalne kiseline (1.4 g, 4.63 mmol) u suvom piridinu (15 mL) i mešavina je zagrejana do 118 °C u uljanom kupatilu tokom 16 h. Tamna reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakišeljena je sporim dodavanjem 1 N HCl (∼25 mL). Mešavina je dalje razblažena vodom (∼170 mL), a onda podvrgnuta sonikaciji tokom ∼30 minuta kako bi se potpomoglo razbijanje čvrstih agregata. Rezultujuća tamna gusta suspenzija je filtrirana na poroznom levku srednjih pora i tamna čvrsta supstanca je isprana sa dodatnom vodom (70 mL). Kolač je osušen sukcijom a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 2,5 h da bi se dobilo 1.6 g tamno plave čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u mešavina DCM, MeCN, i MeOH (∼100 mL svaka) i tretirana sa obezbojenim drvenim ugljem. Mešavina je promućkana , a zatim filtrirana gravitacijom primenom filter papira. Filtrat/pranje (tamno žuta boja) je tretirano još jednom sa obezbojenim drvenim ugljem i potom filtriran na celitnom sloju. Čist filtrat je koncentrovan u vakuumu do suvoće da bi se dobila čvrsta supstanca koja je pretvorena u prah sa vodom i usisno filtrirana. Kolač je ispran dodatnom vodom (∼100 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 4 h da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (1.2 gm, 68% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.08 min (99.9%); mp: 250-252;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.67 (m, 2H, CHH, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.50 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2OH), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7<Hz, 1H, CH), 5.19 (t, J = 5.6 Hz, 1H, OH), 5.36 (s, 2H, CH>2<O), 7.24 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar),>7.59 (d, J= 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.88, 30.83, 48.67, 62.53, 69.91, 115.40, 116.52, 120.18, 126.44, 127.09, 133.17, 134.31, 136.86, 142.32, 155.42, 165.21, 166.68, 169.81, 172.66. LCMS: M+Na = 417; MH nije primećen u pozitivno jonizacionom modu; Anal. izrač. za C21H18N2O6: C, 63.96; H, 4.60; N, 7.10; Pronađeno: C, 63.77; H, 4.52; N, 7.32.
Faza 4 Pripremanje 4-((4-(Bromometil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona [0618] Suspenzija 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-(4-(hidroksimetil)benziloksi)izoindolin-1,3-diona (1.05 g, 2.66 mmol) u mešavini DCM i MeCN (25 mL, 10 mL) je mešana u ledenom kupatilu. Mešavini je dodat PBr3(0.502 mL, 5.32 mmol) u jednoj porciji. Nakon 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom ∼20 h. Reakcionoj mešavini je dodat NaBr (0.822 g, 7.99 mmol) i tetrabutilamonijum bromid (0.077 g, 0.240 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu do beličaste čvrste supstance, a čvrsta supstanca je resuspendovana u vodi intenzivnim mućkanjem i potom filtrirana (srednje porozni levak). Kolač je ispran sa velikom količinom vode (∼250 mL, ukupna zapremina filtrata i vode od ispiranja) a onda osušen u vakuum sušnici na 50 °C da bi se dobio 4-((4-(bromometil)benzil)-oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (1.21 g, 99% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.85 min (99.5%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.15 (m, 1H, CHH), 2.42 - 2.70 (m, 2H, CHH, CHH), 2.79 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.72 (s, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.4, 12.9 Hz, 1H, CH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.38 - 7.54 (m, 5H, Ar), 7.59 (d, J= 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.3, 8.4 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.91, 34.12, 48.75, 69.64, 115.57, 116.62, 120.18, 127.48, 129.42, 133.26, 136.33, 136.99, 137.72, 155.37, 165.27, 166.73, 169.87, 172.72; LCMS: M+Na = 479, 481; MH nije primećen.
Faza 5: Pripremanje 2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-4-[4-(2-trifluorometil-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benziloksi]-izoindol-1,3-diona
[0619] U CH2Cl2rastvor 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion (0.13 g, 0.284 mmol) dodat je 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin (0.060 g, 0.313 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.152 ml, 0.853 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcionoj mešavini je dodata voda (10 mL) i CH2Cl2 (10 mL) i ekstrahovana. Organski sloj je koncentrovan , a rezultujuće ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa MeOH i CH2Cl2da bi se dobio 2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-4-[4-(2-trifluorometil-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benziloksi]-izoindol-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (120mg, 74%). Tačka topljenja: 128-130 °C. LC-MS m/e = 569. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, izokratski 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4 u H2O :tR = 3.64 min (99%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.77 - 2.95 (m, 1H, CHH), 3.01 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 3.81 (d, J = 7.6 Hz, 4H, CH2,CH2), 4.24 (t, J = 5.1 Hz, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, NCH), 5.37 (s, 2H, CH2), 7.37 - 7.55 (m, 5H, Ar), 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.76 7.88 (m, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 46.54, 47.67, 48.73, 49.21, 59.42, 69.89, 115.53, 116.59, 120.21, 127.42, 128.95, 133.26, 135.25, 136.99, 137.06, 152.84, 155.50, 165.29, 166.75, 169.87, 172.71. Anal. izrač. za C27H23F3N6O5 0.5 H2O 0.2 Et2O: C: 56.37%; H: 4.42%; N:
14.19%; Pronađeno C: 56.27%; H: 4.20%; N: 14.05%.
5.1183-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-DIMETILMORFOLINO)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID
[0620]
[0621] Faza 1: U gustu suspenziju metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250 mg, 0.526 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je (3R,5S)-3,5-dimetilmorfolin (79 mg, 0.684 mmol) kao čvrsta supstanca. Mešavina je mešana sa intermitentnom sonikacijom da bi se dobio bistar rastvor a onda je dodat DIEA (0.197 mL, 1.128 mmol). Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon oko 24 h, dodatni (3R,5S)-3,5-dimetilmorfolin (79 mg, 0.526 mmol) je dodat i mešavina je ostavljena da se meša tokom dodatnih 24 h na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu da bi se dobio (S)-metil 5-amino-4-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao uljani ostatak (268 mg). Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja, LCMS: MH = 510.
[0622] Faza 2: Ulje dobijeno u fazi 1, metil 5-amino-4-(4-(4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (268 mg, 0.526 mmol, pretpostavljajući kvantitativni prinos iz prethodne faze) je rastvoreno u DMF (5 mL). Rastvoru je dodat anhidrovani kalijum karbonat (189 mg, 1.367 mmol) i mešavina je mešana na 85 °C tokom oko 6 h. Grejanje je prekinuto preko vikenda (uzorak čuvan na 4 °C) a onda nastavljeno ponovo tokom dodatnih 24 h. Ohlađena reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (∼100 mL) i potom isprana sa 1N aq. NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen iznad Na2SO4a onda koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo svetlo braon ulje. Ulje je rastvoreno u DMF (8 mL) i prečišćeno primenom reverzno fazne preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5 do 50% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su ukombinovane, tretirane sa 1 N HCl (3 mL), a onda koncentrovane u vakuumu da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je tretirana sa 2 N HCl u Et2O (1 mL) i koncentrovana u vakuumu. Dobijena čvrsta supstanca je smeštena u vakuum sušnicu na 60 °C tokom nekoliko sati da bi se dobio 3-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)benzil) oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (130 mg, 48% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 10 min, CH3CN/0.1% H3PO4, 5.90 min (96.2%); mp: 235-237 °C;<1>H NMR (DMSO-d6 sa D2O) δ 0.89 (d, J = 6.2 Hz, 6H, CH3, CH3), 1.96 - 2.15 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.53 (m, 3H, CHH, CH, CH), 2.58 - 2.70 (m, 1H, CHH), 2.80 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.00 - 3.19 (m, 2H, morph. CHH, CHH), 3.65 (dd, J = 2.9, 11.2 Hz, 2H, morph. CHH, CHH), 3.78 (br. s., 2H, CH2), 4.31 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.58 (m, 7H, Ar);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 17.73, 24.16, 32.97, 47.23, 50.90, 53.61, 55.17, 56.71, 71.34, 74.46, 117.03, 117.20, 129.39, 129.90, 131.81, 131.90, 134.99, 136.37, 142.45, 155.36, 170.27, 172.80, 174.91; LCMS: MH = 478; Anal. izrač. za C27H31N3O5·+ 0.95 HCl: C, 63.31; H, 6.29; N, 8.20; Pronađeno: C, 63.51; H, 6.20; N, 7.91.
5.1193-(1-OKSO-4-((3-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0623]
[0624] Izmešanom rastvoru 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (500mg, 1.13 mmol) u DCM (10 mL) dodat je 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin (238 mg, 1.24 mmol) i DIPEA (0.59 mL, 3.38 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 40°C tokom 27 h. Reakcionoj mešavini je dodat DCM (30 mL) i slani rastvor (20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen da bi dao staklastu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je mešana u EtOAc(5 mL) i mešana u dietil etru (40 mL) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((3-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil) benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (391 mg, 62% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 50/50, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.25 min (95.7%); mp: 213-215°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 -3.07 (m, 3H, CHH, CH2), 3.81 (s, 4H, CH2, CH2), 4.17 - 4.49 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5.05 - 5.16 (m, 1H, CHH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.54 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.09, 46.52, 47.73, 49.14, 51.58, 59.55, 69.55, 115.13, 115.28, 126.72, 128.06, 128.44, 128.59, 129.77, 129.96, 133.30, 136.81, 137.47, 152.82, 153.45, 167.96, 170.95, 172.78; LCMS MH = 555; Anal. Izrač. za C27H25F3N6O4: C, 58.48; H, 4.54; N, 15.16; Pronađeno: C, 58.53; H, 4.21; N, 14.89.
5.120 3-{1-OKSO-4-[3-(4-TRIFLUOROMETANSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0625]
[0626] Izmešanom rastvoru 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (500 mg, 1.13 mmol) u DCM (10 ml) dodat je 1-(trifluorometilsulfonil)piperazin (320 mg, 1.47 mmol) i DIPEA (0.59 ml, 3.38 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 40°C tokom 22 h. Reakcionoj mešavini je dodata DCM (30 mL) i slani rastvor (20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO dajući staklastu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je umešana u EtOAc (5 mL) i dietil etru (40 mL) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[3-(4-trifluorometansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (257 mg, 39% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 27/73, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.82min (99.9%); mp: 150-152°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.41 - 3.53 (m, 4H, CH2, CH2), 3.57 (s, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CHH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.35 (m, 3H, Ar), 7.35 - 7.43 (m, 3H, Ar), 7.44 - 7.53 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 46.36, 51.56, 51.81, 61.11, 69.54, 115.13, 115.26, 126.49, 128.04, 128.46, 129.77, 129.95, 133.30, 136.64, 137.67, 153.43, 167.96, 170.93, 172.78; LCMS MH = 581; Anal. Izrač. za C26H27F3N4O6S 0.1 EtOAC 0.1 Et2O : C, 53.94; H, 4.86; N, 9.39; Pronađeno: C, 54.05; H, 4.77; N, 9.16.
5.121 3-(1-OKSO-4-{3-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[0627]
[0628] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.495 g, 1.117 mmol) (zapravo 0.55 g ali zaključeno kao 10mas.% THF) dodat je 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin dihidrohlorid (0.323 g, 1.340 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.738 ml, 4.47 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina postaje bistra čim je dodat DIPEA. Rastvor je mešan tokom 15 minuta i uparen pod vakuumom da bi se oslobodio od CH3CN. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću kolona sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{3-[4-(2,2,2-trifluoroetil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.485 g, 82% prinos); mp, 112-114°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 20/80 tokom 10 minuta, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.64 min (99.9%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.28 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.66 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.12 (q, J = 10.3 Hz, 2H, CH2), 3.47 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.20 - 7.28 (m, 1H, Ar), 7.28 - 7.41 (m, 5H, Ar), 7.44 - 7.52 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.20, 45.10, 51.59, 52.42, 53.09, 56.27, 56.65, 57.04, 57.42, 61.67, 69.58, 115.17, 115.26, 124.09, 126.27, 127.81, 127.93, 128.35, 129.78, 129.97, 133.32, 136.53, 138.37, 153.44, 167.99, 170.95, 172.80. LCMS: m/e = 531. Anal. izrač. za C27H29N4O4F3(+0.1 H2O, 0.1 EtOAc): C, 60.81; H, 5.59; N, 10.35. Pronađeno: C, 60.72; H, 5.65; N, 10.09.
5.1223-{4-[3-(3,4-DIHIDRO-1H-IZOKVINOLIN-2-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0629]
[0630] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.222 g, 0.501 mmol) dodat je 1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin hidrohlorid (0.102 g, 0.601 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.207 ml, 1.253 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta i uparena je pod vakuumom da bi se oslobodila od CH3CN. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću kolona sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{4-[3-(3,4-Dihidro-1H-izokvinolin-2-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.198 g, 80% prinos); mp, 117-119°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 20/80 tokom 10 minuta, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.88 min (99.9%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 1.99 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.63 - 2.71 (m, 2H, CH2), 2.75 - 2.83 (m, 2H, CH2), 2.84 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.53 (s, 2H, CH2), 3.67 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.45 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.26 (s, 2H, CH2), 6.94 - 7.15 (m, 4H, Ar), 7.28 - 7.53 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 14.07, 22.35, 28.64, 31.21, 45.09, 50.15, 51.59, 55.38, 61.58, 69.63, 115.14, 115.26, 125.43, 125.93, 126.29, 126.35, 127.88, 128.34, 128.42, 129.79, 129.95, 133.32, 134.05, 134.74, 136.62, 138.70, 153.47, 167.99, 170.95, 172.80. LC/MS m/e=496. Anal. izrač. za C30H29N3O4 (+0.3 H2O, 0.3 EtOAc): C, 71.05; H, 6.12; N, 7.97. Pronađeno: C, 71.00; H, 6.14; N, 7.91.
5.123 3-(4-((3-((4-(4-HLOROFENILIPIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0631]
[0632] U CH2Cl2rastvor 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.5 g, 1.128 mmol) dodat je 4-(4-hlorofenil)piperidin (0.232 g, 1.184 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.602 ml, 3.38 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda (10 mL), CH2Cl2 (15 mL) i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan zatim prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i MeOH da bi se dobio 3-(4-((3-((4-(4-hlorofenil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (340 mg, 54%). Tačka topljenja: 180-182 °C. LC-MS m/e=558, 560. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O: 4.34 min (99%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.49 - 1.78 (m, 4H, CH2, CH2), 1.89 - 2.10 (m, 3H, CHH,CH2), 2.33 - 2.47 (m, 2H, CHH,CH), 2.53 - 2.61 (m, J = 13.8 Hz, 1H, CHH), 2.79 - 2.98 (m, J = 11.5 Hz, 3H, CH2, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.19 - 7.53 (m, 11H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 32.85, 41.09, 45.09, 51.55, 53.40, 62.13, 69.58, 115.16, 115.23, 126.20, 127.95, 128.17, 128.30, 128.40, 128.56, 129.74, 129.96, 130.41, 133.30, 136.46, 138.75, 145.17, 153.42, 167.97, 170.93, 172.78. Anal. izrač. za C32H32ClN3O4: C%:68.87; H%:5.78; N%:7.53; Pronađeno: C%:
68.59; H%: 5.83; N%: 7.39.
5.1244-((4-((3,4-DIHIDROIZOKVINOLIN-2(1H)-IL)METIL)BENZIL) OKSI)-2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)IZOINDOLIN-1,3-DION
[0633]
[0634] U CH2Cl2suspenziju 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion (0.25 g, 0.547 mmol) dodat je 1,2,3,4-tetrahidroizokvinolin (0.080 g, 0.601 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.212 g, 1.640 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodat CH2C12 i voda i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i MeOH da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz CH3CN (3 mL) da bi se dobio 4-((4-((3,4-dihidroizokvinolin-2(1H)-il)metil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao žuta čvrsta supstanca (90 mg, 32%). Tačka topljenja (određeno na licu mesta): 124-126 °C. LC-MS m/e= 510. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O: 3.52 min (98.5 %).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97 - 2.11 (m, 1H, CHH), 2.42 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54-2.62 (m, 3H, CHH, CH2), 2.64 - 2.71 (m, 2H, CH2), 2.76 - 2.98 (m, 3H, CHH, CH2), 3.54 (s, 2H, CH2), 3.66 (s, 2H, CH2), 5.03 - 5.16 (m, 1H, NCH), 5.37 (s, 2H, CH2), 6.94 - 7.12 (m, 3H, Ar), 7.37 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.5, 8.4 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.09, 27.77, 30.06, 47.89, 49.30, 54.57, 60.62, 69.13, 114.65, 119.38, 124.57, 125.06, 125.46, 126.48, 127.54, 127.95, 132.41, 133.21, 133.87, 133.94, 136.13, 137.43, 154.69, 164.45, 165.90, 169.02, 171.87. Anal. izrač. za C30H27N3O5C: 70.71%; H: 5.34%; N: 8.25%. Pronađeno: C: 67.07%; H: 5.12%; N: 7.81%.
5.1253-(4-((3-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0636] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(3-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.45 g, 1.015 mmol) dodat je 4-(2,4-difluorofenil)piperidin (0.210 g, 1.066 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.542 ml, 3.05 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda i CH2Cl2, ekstrahovana i prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano sa MeOH i CH2Cl2da bi se dobio 3-(4-((3-((4-(2,4-difluorofenil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (250 mg, 44%). Tačka topljenja: 211-213 °C. LC-MS m/e=560. HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/0.1% H3PO4: 4.68 min (97.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.66 (br. s., 4H, CH2, CH2), 1.89 - 2.07 (m, 3H, CH2, CHH), 2.43 (dd, J = 4.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.61 (m, J = 19.3 Hz, 1H, CHH), 2.73 (quin, J = 7.5 Hz, 1H, CH), 2.82 - 3.03 (m, 3H, CH2, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.11 - 4.52 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.02 (td, J = 2.2, 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.10 - 7.21 (m, 1H, Ar), 7.24 - 7.54 (m, 8H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 31.61, 34.62, 51.58, 53.43, 62.12, 69.60, 103.20, 103.54, 103.90, 111.21, 111.49, 115.16, 115.25, 126.21, 127.96, 128.31, 128.41, 128.62, 128.68, 128.87, 128.98, 129.07, 129.74, 129.96, 133.30, 136.48, 138.74, 153.43, 158.17, 158.33, 158.84, 159.02, 161.42, 161.58, 162.08, 162.26, 167.97, 170.93, 172.77. Anal. izrač. za C32H31F2N3O4: C%:68.68; H%:5.58; N%:7.51.
Pronađeno: C%: 68.57; H%: 5.52; N%: 7.60.
5.1263-{1-OKSO-4-[4-(2-TRIFLUOROMETIL-5,6-DIHIDRO-8H-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0637]
[0638] Izmešanoj mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1.0 g, 2.256 mmol) i 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (0.477 g, 2.481 mmol) u MeCN (15 mL) dodat je DIPEA (1.0 mL, 5.6 mmol). Dobijena mešavina je zagrevana na 50 °C tokom 16 h i koncentrovana d oko 3 mL nakon čega je usledilo dodavanje Et2O (40 mL). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi i čvrsta supstanca je formirana. Čvrsta supstanca je prečišćena umešavanjem u CH3CN (17 mL) u refluksu da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(2-trifluorometil-5,6-dihidro-8H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (580 mg, 46% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 40/60, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.32min (99.8%); mp: 215-217°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.02 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 3.81 (d, J = 5.3 Hz, 4H, CH2, CH2), 4.19 - 4.32 (m, 3H, CHH, CH2), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.37 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 31.11, 45.02, 46.49, 47.67, 49.12, 51.52, 59.38, 69.29, 114.93, 115.19, 127.75, 128.87, 129.75, 129.89, 133.26, 135.69, 136.99, 152.77, 153.42, 167.92, 170.89, 172.74; LCMS MH = 555; Anal. Izrač. za C27H25F3N6O4: C, 58.48; H, 4.54; N, 15.16.\; Pronađeno: C, 58.50; H, 4.23; N, 15.08; Hiralna HPLC: Hiralna AGP/C18, 4.0X150 mm, 5 µm, 0.8 mL/min, UV 240 nm, mobilna faza A: MeOH, mobilna faza B: NH4OAc 10 mM), 20/80, na 8.78 min (1.37%) i 11.51 min ( 93.56%); ee% = (93.56-1.37)/ ( 93.56+1.37)*100% =97%.
5.1272-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-IZOINDOL-1,3-DION [0639]
[0640] Faza 1: Rastvoru dimetil 3-hidroksiftalata (1.0 g, 4.76 mmol) u THF (40 ml, 488 mmol), dodat je trifenilfosfin na polistirenskoj smoli (1.6 gm/mmol, 4.76 g, 7.61 mmol). Nakon ostavljana da smola nabubri nekoliko minuta na sobnoj temperaturi, reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu na 0 °C. Izmešanoj mešavini, DIAD (1.48 mL, 7.61 mmol) dodat je u kapima. Nakon oko 10 minuta, (4-(morfolinometil)fenil)metanol (1.48 g, 7.14 mmol) dodat je u jednoj porciji. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 min. Smola je uklonjena filtracijom i isprana na poroznom levku uvlačenjem primenom naizmeničnog MeOH i DCM pranja dva puta. Kombinovani filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi proizvod kao žuto ulje (4 g). Ulje je podeljena između EtOAc (200 mL) i 0.25 N HCl (150 mL). Organski sloj je ispran sa dodatnih 100 mL 0.25 N HCl. Vodeni sloj, koji sadrži proizvod, je koncentrovan na rotacionom isparivaču do sirupa (oko 10 mL). Sirup je podeljen između EtOAc (300 mL) i 1 N NaOH (100 mL). Vodeni sloj je ispran sa još jednom porcijom EtOAc (oko 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), koncentrovani u vakuumu, i osušeni u vakuum sušnici na 40 °C preko noći da bi se dobio dimetil estar 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-ftalne kiseline kao bledo žuto ulje (2.6 g). Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0641] Faza 2: Rastvoru dimetil 3-(4-(morfolinometil)benziloksi)ftalata (1.9 g, 4.76 mmol) u THF (20 ml, 244 mmol), dodata je voda (0.180 ml, 9.99 mmol). Uz mešanje na rt, KO<t>Bu (9.99 ml, 9.99 mmol, 1M u THF) dodat je u kapima. Nakon oko 24 h, dodata je voda (1 mL) i mešavina je zagrejana do 45 °C. Nakon oko 22 h, mešavina je razblažena sa Et2O (100 mL) i filtrirana putem poroznog levka. Čvrsta supstanca je zakišeljena vodenim 1 N HCl (10 mL) i dobijena mešavina je koncentrovana do suvoće na rotacionom isparivaču da bi se dobila bela čvrsta supstanca (2.2 g) koja je kako je određeno sa LCMS bila ∼1:3 mešavina 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-ftalna kiselina 1-metil estar i 3-(4-morfolin-4-ilmetilbenziloksi)-ftalna kiselina, respektivno. Mešavina je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0642] Faza 3: Suspenziji 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-ftalna kiselina 1-metil estra i 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-ftalne kiseline (1.7 g, 3.75 mmol, pretpostavljajući 82 mas.%) u piridinu (30 mL), dodat je rac.3-aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (0.803 g, 4.88 mmol) kao čvrsta supstanca. Refluksni kondenzator je smešten na RBF i dobijena mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu na 118 °C tokom oko 24 h. Reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do st a onda koncentrovana u vakuumu radi uklanjanja većeg dela piridina. Preostali tamni čvrsti ostatak je suspendovan u EtOAc (oko 100 mL), mešan preko noći na sobnoj temperaturi, potom filtriran na srednje poroznom levku. Čvrsta supstanca je isprana sa sa velikom količinom EtOAc a onda osušena sukcijom. Zaostala čvrsta supstanca je preneta u bočicu sa EtOAc (400 mL) i 0.5 N aq NaHCO3(100 mL). Mešavina je energično umešavana tokom noći. Faze su odvojene i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (∼300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom a onda tretirani sa Na2SO4i obezbojenim drvenim ugljem. Gusta suspenzija je umešana i potom filtrirana na sloju superćelija. Čist filtrat je koncentrovan u vakuumu i dobijena bela pena je rastvorena u minimalno MeCN (∼3 mL). Rastvoru je dodat Et2O u malim porcijama (oko 25 mL, ukupno), rezultirajući kao beli talog. Gusta suspenzija je podvrgnuta sonikaciji kako bi se slomili svi čvrsti agregati u dobro dispergovanu suspenziju. Gusta suspenzija je potom filtrirana, a kolač je ispran sa nekoliko malih porcija Et2O (∼50 mL, ukupno). Kolač je osušen sukcijom a onda dalje osušen u vakuum sušnici na 55 °C da bi se dobio 2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-izoindol-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (950 mg, 55% prinos po fazi 1-3): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.34 min (99.8%); mp: 205-207 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.14 (m, 1H, CHH), 2.28 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 2.43 - 2.66 (m, 2H, CHH, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 3.52 - 3.64 (m, 4H, CH2, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.9 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.88, 30.84, 48.67, 53.06, 62.01, 66.08, 69.85, 115.42, 116.50, 120.11, 127.18, 128.93, 133.18, 134.72, 136.91, 137.61, 155.44, 165.21, 166.68, 169.80, 172.66; LCMS: MH = 464; Anal. izrač. za C25H25N3O6+ 0.06 H2O: C, 64.64; H, 5.45; N, 9.04; H2O, 0.23; Pronađeno: C, 64.75; H, 5.13; N, 8.91; H2O, 0.23.
5.1283-[1-OKSO-4-(4-FENOKSIMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION [0643]
Faza 1: Pripremanje metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(fenoksimetil) benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata
[0644] U acetonitril rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.711 mmol) dodat je 1-(bromometil)-4-(fenoksimetil)benzen (0.474 g, 1.711 mmol) i kalijum karbonat (0.236 g, 1.711 mmol). Mešavina je mešana na 50 °C tokom 3 dana. Mešavina je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana i prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i MeOH da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(fenoksimetil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat kao bela čvrsta supstanca (0.8 g, 47%).
Faza 2: Pripremanje 3-[1-Okso-4-(4-fenoksimetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion
[0645] U THF rastvor metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(fenoksimetil)benziloksi) izoindolin-2-il)pentanoata (0.8 g, 1.638 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (0.202 g, 1.801 mmol) na -78 °C.
Mešavina je mešana na ovoj temperaturi tokom 1 h zatim je dodata voda i CH2Cl2. Nakon ekstrakcije, organski sloj je koncentrovan da bi se dobio 3-[1-Okso-4-(4-fenoksimetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.70 g, 94%). Tačka topljenja određena na licu mesta: 110-112 °C. LC-MS m/e= 457. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 10.48 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.31 - 2.48 (m, J = 4.3, 13.2 Hz, 1H, CHH), 2.52 -2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.16 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.03 - 5.16 (m, 3H, NCH, CH2), 5.26 (s, 2H, CH2), 6.88 - 7.05 (m, 3H, Ar), 7.21 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.56 (m, 5H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); CNMR (DMSO-d6): δ 15.11, 22.33, 31.17, 45.077, 51.57, 68.72, 69.28, 114.73, 114.97, 115.25, 120.68, 127.76, 129.45, 129.79, 129.96, 133.31, 136.16, 136.94, 153.41, 158.22, 167.98, 170.94, 170.94, 172.80. Anal. izrač. za C27H24N2O5+ 0.3 H2O, C 71.04%, H 5.30%, N 6.14%.Pronađeno: C 69.89%, H 5.48%, N 5.82%.
5.129 TERT-BUTIL 5-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)IZOINDOLIN-2-KARBOKSILAT (referentni primer)
[0646]
[0647] Faza 1: Natrijum hidrid (60%, 3.6 g, 90.5 mmol) dodat je izmešanom rastvoru N-BOC-propargilamin (10.8 g, 69.6 mmol) u THF (80 mL). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta i rastvor propargil bromid/toluena (80%, 16.6 g, 111.3 mmol) dodat je u kapima (blago egzotermno!). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana i ostatak je rastvoren u EtOAc (150 mL) i ispran vodom (4X40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 30: 70 do 80: 20) da bi se dobio N-BOC-diprop-2-inil-amin (8.5 g, 63% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ1.48 (s, 9H), 2.22 (s, 2H), 4.17 (b, 4H).
[0648] Faza 2: Propargil alkohol (7.3 g, 144.9 mmol) dodat je u kapima izmešanom rastvoru N-BOC-diprop-2-inil-amina (7.0 g, 36.2 mmol) u apsolutnom etanolu (150 mL) na 3°C. Tris(trifenilfosfin)rodijum dihlorid (1.0 g) dodat je u jednoj porciji. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 10: 90 do 40: 60) da bi se dobio tert-butil estar 5-hidroksimetil-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilne kiseline (5.2 g, 57% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.51 (s, 9H), 2.07 (b, 1H), 4.62 (s, 4H), 4.68 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.20-7.27 (m, 3H).
[0649] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (1.0 g, 5.0 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (4.3 g, 5.3 mmol) u THF (40 mL) na 3-5°C. Mešavina je mešana na 3°C tokom 10 minuta i rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.0 g, 3.3 mmol) i tert-butil estrs 5-hidroksmetil-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilne kiseline (1.1 g, 4.3 mmol) u THF (60 mL) na 3-6°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 5 minuta, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(80 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(25 mL), vodom (2X25 mL), i slanim rastvorom (25 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio tert-butil 5-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoindolin-2-karboksilat (1.3 g, 73% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.52 (s, 9H), 2.17-2.41 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 4.36-4.46 (dd, J = 17.7 i 29.4 Hz, 2H), 4.67-4.71 (m, 4H), 4.91 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 7.05-7.08 (m, 1H), 7.26-7.32 (m, 3H), 7.40-7.45 (m, 2H);<13>C NMR (CDCl3) δ 24.04, 28.55, 30.45, 45.28, 51.82, 52.27, 53.89, 70.02, 70.16, 79.81, 114.44, 116.18, 121.59, 121.98, 122.93, 123.08, 126.64, 129.90, 133.43, 135.50, 137.69, 153.70, 154.51, 169.36, 171.49, 172.88.
[0650] Faza 4: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2.4 mL, 2.4 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru tert-butil 5-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoindolin-2-karboksilata (1.3 g, 2.4 mmol) u THF (20 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 30 minuta zatim ugašena sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (50 mL) i vodom (15 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL). Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran sa zas. NaHCO3(30 mL), vodom (2X30 mL), i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio tert-butil 5-((2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoindolin-2-karboksilat (0.6 g, 50% prinos): mp 178-180°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.45 (s, 9H), 1.96-2.02 (m, 1H), 2.41-2.60 (m, 2H), 2.86-2.91 (m, 1H), 4.28 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.59 (b, 4H), 5.07-5.14 (dd, J = 5.1 i 13.5 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 7.31-7.51 (m, 6H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 28.12,31.18, 45.08, 51.48, 51.65, 69.42, 78.80, 115.01, 115.25, 122.15, 122.88, 126.94, 129.79, 129.95, 133.30, 135.82, 136.41, 136.96, 137.44, 138.40, 167.97, 170.96, 172.82; Izrač. za C27H29N3O6: C, 65.98; H, 5.95; N, 8.55. Pronađeno: C, 65.76; H, 6.10; N, 8.33.
5.1303-(4-(BENZO[B]TIOFEN-3-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0652] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (1.1 g, 5.5 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol), 1-benzotiofen-3-ilmetanoal (0.7 g, 4.1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer, (1.8 g, 5.5 mmol) u THF (60 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-3-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1 g, 77%).
[0653] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2.3 mL, 2.3 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-3-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il]-5-oksopentanoata (1.0g, 2.3 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrevana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 1N HCl (10 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2(50 mL) i vodom (10 mL), a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL). Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen.
Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-benzo[b]tiofen-3-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2il)-piperidin-2,6-dion (0.3 g, 32% prinos): mp231-233°C ;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94-1.98 (m, 1H), 2.28-2.58 (m, 2H), 2.85-2.95 (m, 1H), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.06-5.12 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.52 (s, 2H), 7.33-7.52 (m, 5H), 7.92-8.03 (m, 3H), 10.94 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 31.13, 45.04, 51.52, 64.29, 115.05, 115.31, 122.11, 122.96, 124.04, 124.64, 126.79, 129.80, 129.93, 131.36, 133.31, 137.71, 139.76, 153.34, 167.94, 170.94, 172.78; Izrač. za C22H18N2O4S 0.5 H2O: C, 63.30; H, 4.61; N, 6.74; S, 7.72. Pronađeno: C, 63.85; H, 4.41; N, 6.75; S, 7.96.
5.1313-[4-(2,3-DIHIDRO-BENZOFURAN-2-ILMETOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0654]
[0655] Faza 1: Polimerom vezan trifenilfosfin (1.6 g, 2.06 mmol, 1.25 mmol/g) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (300 mg, 1.03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DIAD (412 mg, 2.06 mmol). Deset minuta kasnije, (2,3-Dihidro-benzofuran-2-il)-metanol (250 mg, 1.66 mmol) dodat je mešavini. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7.5 sati i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dihlorometanom (7 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (380mg, 87% prinos): LCMS MH = 425.
[0656] Faza 2: KOtBu (100.5 mg, 0.89 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estru 4-karbamoil-4-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (380 mg, 0.89 mmol) u tetrahidrofuranu (18 mL) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 0,5 sati i reakcija je završena. Hladnoj reakcionoj mešavini je dodata HCl (aq.0.1N, 10 mL), nakon čega je usledilo dodavanje dihlorometana (25 mL) i slani rastvor (10 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio 3-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (243 mg, 70% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 40/60 (acetonitril/0.1%H3PO4): tR = 4.32(98%); mp: 258-260°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.28 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.04 - 3.20 (m, 1H, CHH), 3.35 - 3.43 (m, 1H, CHH), 3.97 - 4.45 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 5.03 - 5.22 (m, 2H, CNH, COH), 6.75 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 6.79 - 6.88 (m, 1H, Ar), 7.02 - 7.13 (m, 1H, Ar), 7.19 - 7.37 (m, 3H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 1H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 44.75, 51.52, 70.33, 80.31, 108.89, 114.88, 115.36, 120.29, 124.94, 126.61, 127.74, 127.79, 129.72, 129.76, 129.84, 133.24, 153.54, 159.08, 167.93, 170.96, 172.81; LCMS MH = 393; Anal. Izrač. za C22H20N2O5 0.3 H2O : C, 66.42; H, 5.22; N, 7.04. Pronađeno: C, 66.28; H, 5.12; N, 7.34.
5.1323-(4-(IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-2-ILMETOKSI)-1-PKSOIZOINDO1IN-2-I1)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0657]
[0658] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (1.1 g, 5.5 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol), imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetanol (0.6 g, 4.1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer, (1.8 g, 5.5 mmol) u THF (100 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (amin kolona, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.5 g, 41% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99-2.28 (m, 4H), 3.50 (s, 3H), 4.41 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 4.71-4.75 (m, 1H), 5.35 (s, 2H), 6.89 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.18-7.30 (m, 3H), 7.41-7.58 (m, 4H), 8.05 (s.1H), 8.55 (d, J = 6.0 Hz, 1H).
[0659] Faza 2: Kalijum t-butoksid/THF (1M, 1.1 mL, 1.1 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-2-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin- 2-il)-5-oksopentanoata (0.4 g, 1.1 mmol) u THF (30 mL) i DMF (20 mL). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (30 mL). Mešavina je mešana sa metilen hloridom (40 mL), a vodeni sloj je ekstrahovan metilen hloridom (2x40 mL). Kombinovani organski rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa vodom (20 mL). Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je resuspendovana metilen hloridom (15 mL) da bi se dobio 3-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.1 g, 28%) kao bela čvrsta supstanca: mp 222-224°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-2.01 (m, 1H), 2.35-2.51 (m, 2H), 2.58-2.91 (m, 1H), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J = 5.1 i 13.5 Hz, 1H), 5.36 (s, 2H), 6.87-6.91 (dt, J = 0.9 i 6.6 Hz, 1H), 7.21-7.55 (m, 5H), 8.03 (s, 1H), 8.51-8.53 (dd, J = 0.9 i 6.6 Hz, 1H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.17, 45.06, 51.54, 64.63, 111.79, 112.14, 115.01, 115.18, 116.65, 124.90, 126.95, 129.78, 129.84, 133.26, 141.54, 144.28, 153.45, 167.98, 170.96, 172.81; Izrač. za C21H18N4O4 0.25 H2O: C, 63.87, H, 4.72; N, 14.19. Pronađeno: C, 63.99, H, 4.60; N, 14.20.
5.1333-(4-(IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-6-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0660]
[0661] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (1.3 g, 6.2 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-okso-pentanonata (0.9 g, 3.1 mmol), imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetanola (0.7 g, 4.6 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2.1 g, 6.2 mmol), u THF (70 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na 5°C tokom 5 minuta potom zagrejana do sobne temperature preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.8 g, 65%).
[0662] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2.0 mL, 2.0 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmryhoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.0 mmol) u THF (50 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (30 mL). Mešavina je ekstrahovana sa CH2Cl2(3X30 mL) i kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-dion (0.25 g, 32% prinos): mp 270-272°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.00 (m, 1H), 2.26-2.53 (m, 2H), 2.85-2.97 (m, 1H), 4.29 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 7.28-7.41 (m, 3H), 7.51 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.58-7.61 (m, 2H), 7.97 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 10.97 (s, 1H);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.15, 45.04, 51.54, 67.26, 113.45, 115.07, 115.45, 116.84, 120.99, 125.10, 125.95, 129.83, 130.01, 133.34, 133.44, 144.01, 153.26, 167.94, 170.94, 172.80; Izrač. za C21H18N4O4+ 0.15 H2O: C, 64.19; H, 4.69; N, 14.25. Pronađeno: C, 64.10; H, 4.60; N, 14.32.
5.1343-(4-(BENZO[B]TIOFEN-3-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0663]
[0664] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (1.1 g, 5.47 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol), 1-benzotiofen-5-ilmetanola (0.7 g, 4.1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (1.8 g, 5.5 mmol), u THF (60 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.8 g, 56%).
[0665] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 2.3 ml, 2.3 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.0 g, 2.3 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 1N HCl (10 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(50 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL), a kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (2X40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-benzo[b]tiofen-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-dion (0.4 g, 36% prinos): mp 213-215°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95-2.01 (m, 1H), 2.36-2.52 (m, 2H), 2.85-2.95 (m, 1H), 4.30 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J = 5.1 i 13.5 Hz, 1H), 5.37 (s, 2H), 7.31-7.37 (2d, J = 8.1 i 7.5 Hz, 2H), 7.46-7.51 (m, 3H), 7.79 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.00-8.04 (m, 2H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.17, 45.09, 51.57, 69.67, 115.05, 115.23, 122.68, 122.77, 123.89, 124.11, 128.09, 129.79, 129.97, 132.84, 133.31, 138.75, 139.50, 153.46, 167.98, 170.95, 172.80; Izrač. za C22H1gN2O4S: C, 65.01; H, 4.46; N, 6.89; S, 7.89. Pronađeno: C, 64.66; H, 4.07; N, 6.76; S, 7.87.
5.1353-(1-OKSO-4-(KVINOLIN-6-ILMETOKSI)-IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0666]
[0667] Faza 1: DIBAL/toluen (1M, 16 mL, 16 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil kvinolin-6-karboksilat (1.0 g, 5.3 mmol) u THF (30 mL) na -60°C. Dobijeni rastvor je mešan na -20°C tokom 1,5 sata a onda pažljivo ugašen vodom (15 mL). Mešavina je koncentrovana ,a ostatak je mešan u EtOAc (80 mL) i zas. NaHCO3 (20 mL). Mešavina je isfiltrirana, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X30 mL). Kombinovan EtOAc rastvor je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL) i osušen (MgSO4).
Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl21: 1) da bi se dobio kvinolin-6-il-metanol (0.5 g, 62% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 4.69 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 5.42 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 7.49-7.53 (dd, J = 4.5 i 8.4 Hz, 1H), 7.69-7.72 (dd, J = 1.8 i 8.7 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.32-8.36 (dd, J = 0.9 i 8.4 Hz, 1H), 8.85-8.87 (dd, J = 1.8 i 4.2 Hz, 1H).
[0668] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (0.7 g, 3.6 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3 g, 3.8 mmon) u THF (40 mL) na 3-6°C. Nakon što je izmešan tokom 10 minuta na 3°C, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.7 g, 2.4 mmol) i kvinolin-6-il-metanola (0.5 g, 3.1 mmol) u THF (40 mL) dodat je lagano na 3-7°C. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl25: 95) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(kvinolin-6-ilmetoksi)-izoindolin-2-il)pentanoat (0.5 g, 46%).
[0669] Faza 3: KO-t-Bu/THF (1M, 1.1 mL, 1.1 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(kvinolin-6-ilmetoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0.5 g, 1.1 mmol) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana 30 minuta na 5°C zatim ugašena sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (50 mL) i zas. NaHCO3(15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL), a kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen (MgSO4). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa CH2Cl2(3 mL) i etrom (3 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena da bi se dobio 3-(1-okso-4-(kvinolin-6-ilmetoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.3g, 60% prinos): mp 267-269°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.02 (m, 1H), 2.42-2.62 (m, 2H), 2.86-2.92 (m, 1H), 4.35 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.10-5.16 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.47 (s, 2H), 7.33-7.37 (m, 2H), 7.47-7.57 (m, 2H), 7.86-7.89 (dd, J = 1.8 i 8.7 Hz, 1H), 8.04-8.09 (m, 2H), 8.38-8.41 (dd, J = 0.9 i 8.4 Hz, 1H), 8.90-8.92 (dd, J = 1.8 i 4.2 Hz, 1H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.17, 45.10, 51.58, 69.27, 115.08, 115.39, 121.74, 126.41, 127.60, 129.02, 129.22, 129.84, 120.02, 133.37, 134.96, 136.01, 147.36, 150.71, 153.40, 167.97, 170.98, 172.82; Izrač. za C23H19N3O4+ 0.2 H2O: C, 68.21; H, 4.83; N, 10.37. Pronađeno: C, 68.04; H, 4.78; N, 10.10.
5.1363-(4-(NAFTALEN-2-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPREIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0670]
[0671] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (0.8 g, 4.1 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3.0 g, 4.5 mmol) u THF (40 mL) na 3-6°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol), 2-naftalen-metanola (0.7 g, 4.1 mmol) i trietilamina (0.4 g, 4.1 mmol) u THF (40 mL) dodat je na 3-6°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(naftalen-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.6 g, 50%).
[0672] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 1.4 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(naftalen-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.6 g, 1.4 mmol) u THF (20 mL) na 5°C. Dobijeni rastvor je mešan na 5°C tokom 30 minuta zatim ugašena sa zas. NH4Cl (5 mL).
Mešavina je mešana sa CH2Cl2(40 mL) i vodom (15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(40 mL), a kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(naftalen-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-dion (0.2 g, 36% prinos): mp 277-279°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.02 (m, 1H), 2.42-2.61 (m, 2H), 2.85-2.95 (m, 1H), 4.33 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.09-5.15 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.46-7.56 (m, 3H), 7.60-7.64 (m, 1H), 7.91-7.96 (m, 3H), 8.02 (s, 1H), 10.979s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.17, 45.11, 51.58, 69.67, 115.08, 115.29, 125.58, 126.18, 126.31, 127.57, 127.77, 128.12, 129.81, 130.00, 132.57, 132.71, 133.34, 134.21, 153.47, 167.98, 170.96, 172.81; Izrač. za C24H20N2O4: C, 71.99; H, 5.03; N, 7.00. Pronađeno: C, 71.71; H, 5.09; N, 6.93.
5.1373-(4-((2,3-DIHIDRO-1H-INDAN-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0673]
[0674] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat (0.8 g, 4.1 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3.5 g, 4.4 mmol) u THF (40 mL) na 3-5°C. Nakon što je izmešan na 3°C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol) i 5-hidroksimetilindana (0.5 g, 3.6 mmol) u THF (40 mL) dodat je lagano na 3-5°C. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (80 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(30 mL), vodom (2X30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.7 g, 60% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.05-2.45 (m, 6H), 2.89-2.96 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 4.35-4.49 (dd, J = 17.4 i 26.4 Hz, 2H), 4.87-4.92 (dd, J = 6.0 i 8.7 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.37 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 7.08-7.28 (m, 4H), 7.37-7.44 (m, 2H).
[0675] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 1.5 mL, 1.5 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.6 g, 1.5 mmol) u THF (20 mL) na 5°C. Dobijeni rastvor je mešan na 5°C tokom 30 minuta zatim ugašen sa zas. NH4Cl (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2(50 mL) i vodom (15 mL), a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL). Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a čvrsti ostatak je mešan sa acetonom (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.3 g, 58% prinos): mp 216-218°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-2.08 (m, 3H), 2.41-2.60 (m, 2H), 2.82-2.96 (m, 5H), 4.26 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.5 Hz, 1H), 5.19 (s, 2H), 7.23-7.25 (m, 2H), 7.30-7.33 (m, 3H), 7.47 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 10.86 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 25.05, 31.17, 32.00, 32.17, 45.08, 51.56, 69.76, 114.98, 115.11, 123.77, 124.15, 125.84, 129.76, 129.92, 133.26, 134.32, 143.60, 143.98, 153.50, 167.99, 170.96, 172.81; Izrač. za C23H22N2O4+ 0.3 H2O: C, 69.79; H, 5.75; N, 7.08. Pronađeno: C, 69.72; H, 5.67; N, 6.91.
5.1383-(4-(BENZO[D]OKSAZOL-5-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0676]
[0677] Faza 1: Mešavina 5-metilbenzo[d]oksazol (2g, 15mmol), NBS (2.67g, 15mmol) i benzoil peroksid (50mg, 0.21mmol) je zagrejan do refluksa u CCl4 (50mL) preko noći. Mešavina je ohlađena do sobne temperature, a dobijeni talog je uklonjen filtracijom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, EtOAc/heksani gradijent od 0% do 20% u 40 min) da bi se dobio 5-(bromometil)benzo[d]oksazol (1.6 g, 50% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) : 4.88 (s, 2H, CH2), 7.55 (dd, J = 1.7, 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.91 (d, J = 1.5 Hz, 1H, Ar), 8.79 (s, 1H, Ar).
[0678] Faza 2: Suspenziji kalijum karbonata (189 mg, 1.37 mmol) u DMF (5 mL), dodati su 5-(bromometil)benzo[d]oksazol (261 mg, 1.23 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (400mg, 1.37 mmol). Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko vikenda. Dodat je dodatni 5-(bromometil)benzo[d]oksazol (87 mg, 0.41 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena vodom (40 mL) na 0°C, proizvod je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 30 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Rastvarač je uparen pod vakuumom, a proizvod je prečišćen sa ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(benzo[d]oksazol-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (440 mg, 76% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) : 1.82 - 2.37 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.34 - 4.64 (m, 2H, CH2), 4.67 - 4.83 (m, 1H, CH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.26 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.45 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.59 (dd, J = 1.4, 8.4 Hz, 2H, Ar), 7.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.96 (d, J = 0.9 Hz, 1H, NHH), 8.78 (s, 1H, Ar).
[0679] Faza 3: Mešavini metil 5-amino-4-(4-(benzo[d]oksazol-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 1.06 mmol) u THF (20 mL), dodat je kalijum tert-butoksid (119 mg, 1.06 mmol) na 0°C. Formirana mešavina je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Dodat je dodatni kalijum tert-butoksid (48 mg, 0.43 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (1 mL) na 0°C, rastvarač je uparen do suvoće, ostatak je uzet u actonitrilu (5 mL), a voda (10 mL) je dodata u kapima, zatim je dodat zasićeni natrijum bikarbonat radi podešavanja pH na 7. Mešavina je mešana preko noći, dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i resuspendovana sa acetonitrilom (3 mL) da bi se dobio 3-(4-(benzo[d]oksazol-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (180 mg, 43% prinos); mp: 209-211 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6): 1.89-2.07 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.60 (br. s., 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.22 - 4.54 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.35 (dd, J = 7.6, 10.6 Hz, 2H, Ar), 7.44 - 7.55 (m, 1H, Ar), 7.58 (dd, J = 1.5, 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.80 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.95 (d, J = 0.9 Hz, 1H, Ar), 8.78 (s, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) : 22.33, 31.16, 45.10, 51.58, 69.32, 111.09, 115.03, 115.29, 119.48, 125.56, 129.78, 130.02, 133.33, 133.40, 139.83, 149.05, 153.35, 154.75, 167.99, 170.95, 172.81; LCMS MH = 392; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 acetonitril/0.1% H3PO4 tR = 4.59 (98.54%); Anal. Izrač. za C21H17N3O5 0.3 H2O: C, 63.57; H, 4.47; N, 10.59; Pronađeno: C, 63.54; H, 4.31; N, 10.58.
5.1393-(4-(IZOINDOLIN-5-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0680]
[0681] Rastvor tert-butil 5-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)izoindolin-2-karboksilat (0.6g, 1.3 mmol) u THF (20 mL) je tretiran sa HCl/etar (2M, 1.9 mL, 3.8 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 8 sati. Etar (10 mL) je dodat. a čvrsta supstanca je prikupljena. Čvrsta supstanca je resuspendovana sa CH2Cl2 (15 mL) da bi se dobio 3-(4-(izoindolin-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid (0.5 g, 88% prinos): mp270-272°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.00 (m, 1H), 2.41-2.61 (m, 2H), 2.87-2.93 (m, 1H), 4.28 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 18 Hz, 1H), 4.50 (s, 4H), 5.08-5.14 (dd, J = 6 i 15 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 7.32-7.52 (m, 6H), 10.01 (s, 2H), 10.98 (s, 1H);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.18, 45.08, 49.73, 49.79, 51.57, 69.19, 115.01, 115.33, 122.14, 123.01, 127.77, 129.81, 129.93, 133.32, 134.89, 135.47, 136.95, 153.31, 167.95, 170.96, 172.83; Izrač. za C22H23N3O4Cl 0.5 H2O: C, 60.48; H, 5.31; N, 9.62; Cl, 8.11. Pronađeno: C, 60.11; H, 5.21; N, 9.38; Cl, 8.27.
5.1403-(4-((1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HLOROVODONIK (referentni primer)
[0682]
[0683] Faza 1: Izmešanom rastvoru 2-(hlorometil)-1H-benzo[d]imidazol (1 g, 6.00 mmol) u DMF (10 ml, 129 mmol), dodat je di-tert-butil dikarbonat (1.375 g, 6.30 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon oko 10 minuta, kat. količine DMAP (0.05 g, 0.409 mmol) dodate su u reakc. mešavinu. Dobijeni rastvor je mešan tokom dodatnih 5 minuta na sobnoj temperaturi (LCMS je pokazao da je reakcija završena) i mešavina je inkubisana na 4°C preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu do ulja koje je razblaženo sa EtOAc (∼200 mL), preneto u levak za razdvajanje, i isprano vodenim 1 M KH2PO4(pH∼5, 2 x 50 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je osušen u vakuum sušnici da bi se dobio tert-butil 2-(hlorometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat kao ćilibarno ulje (1.6 g, 97% prinos). Ulje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.59 - 1.76 (m, 9H, tBu), 5.13 (s, 2H, CH2), 7.33 - 7.51 (m, 2H, Ar), 7.62 - 7.84 (m, 1H, Ar), 7.87 - 8.10 (m, 1H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 27.36, 86.28, 114.88, 119.99, 124.52, 125.61, 132.77, 141.16, 147.47, 150.23; Ni jedan ugljenični signal (CH2Cl) nije primećen da se preklapa sa DMSO-d6; potvrđeno od strane HMQC; LCMS MH = 267, 269 (uglavnom videti -Boc fragmentaciju
[0684] Faza 2: tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (500 mg, 1.495 mmol) i kalijum karbonat (227 mg, 1.645 mmol) suspendovani su u DMF (7 mL) na sobnoj temperaturi. Izmešanoj mešavini na sobnoj temperaturi, dodat je tert-butil 2-(hlorometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat (439 mg, 1.645 mmol) kao rastvor u DMF (3 mL). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom oko 15 sati. Sirova reakciona mešavina je podeljena između EtOAc (150 mL) i vode (∼50 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu. Uljani ostatak je razblažen dihlorometanomom (∼10 mL), koncentrovan do suvoće (2x iz dihlorometana), a dobijeno ulje je smešteno u vakuum sušnici na 40°C tokom nekoliko sati da bi se dobio tert-butil 2-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat (1 g) kao svetlo braon ulje, koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. LCMS MH (-Boc) = 465.
[0685] Faza 3: tert-butil 2-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat (844 mg, 1.495) je rastvoren u THF (10 ml, 122 mmol). Izmešanom rastvoru na sobnoj temperaturi, dodat je KOtBu (2 ml, 2.0 mmol, 1.0 M u THF) brzo u kapima pomoću šprica i napredovanje reakcije pažljivo je praćeno sa LCMS. Nakon oko 50 minuta, dodat je dodatni KOtBu (1 mL, 1 mmol), a mešanje mešavine je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom oko 15 minuta. Reakciona mešavina je ostavljena na -20°C preko noći. Narednog jutra, dodatni KOtBu (0.5 mL, 5 mmol) je dodat, praćeno još jednim tretiranjem KOtBu (0.5 mL, 0.5 mmol) nakon 3 sata. Nakon oko 80 minuta, reakciona mešavina je transferovana rastvor 2 N HCl u Et2O (50 mL). Rezultujuća tamno žuta gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon oko 1 sata, gusta suspenzija je filtrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa dodatnim Et2O, a onda osušena sukcijom na filter levku. Sušnica je dala ∼1g sirovog proizvoda kao svetlo braon čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF/voda (10 mL/ 3 mL), podvrgnuta sonikaciji i potom filtrirana. Filtrat je prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 30% MeCN preko 12 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio čvrsti ostatak koji je ponovo rastvoren u 1 N HCl/acetonitril (∼1: 1, 40 mL). Mešavina je koncentrovana u vakuumu, a čvrsta supstanca je preneta u scintilacionu bočicu. Suspenzija je zaleđena i liofilizovana da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (145 mg). Ova čvrsta supstanca je suspendovana u vodi (5 mL), a mešavina je mešana tokom nekoliko sati potom filtrirana. Čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda ostavljena u vakuum sušnici preko noći da bi se dobio 3-(4-((1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (90 mg, 15% prinos). HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 13/87 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.01 min (96.6%); mp: 229-231 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91-2.12 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.70 (m, 1H, CHH), 2.84 - 3.04 (m, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.55 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.16 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CH), 5.73 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.65 (m, 5H, Ar), 7.68 - 7.85 (m, 2H, Ar), 11.02 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.49, 31.18, 45.13, 51.58, 62.19, 114.56, 114.93, 116.34, 124.67, 129.97, 130.21, 133.50, 133.55, 149.24, 152.50, 167.74, 170.99, 172.81; LCMS MH = 391; Anal. izrač. za C21H18N4O4 0.76 HCl 3.4 H2O: C, 52.62; H, 5.37; N, 11.69; Cl, 5.62. Pronađeno: C, 52.72; H, 4.98; N, 11.33; Cl, 5.45.
5.1413-(4-(BENZO[D]TIAZOL-2-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDO1IN-2-I1)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0686]
[0687] Faza 1: Diizopropil azodikarboksilat(1.3 g, 6.2 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.9 g, 3.1 mmol), 1,3-benzotiazol-2-metanola (0.8 g, 4.7 mmol) i trifenilfosfna-polimerom vezan (2.1 g, 6.2 mmol), u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-benzo[d]itiazol-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.6 g, 42%).
[0688] Faza 2: Kalijum t-butoksid (0.2 g, 1.4 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-benzo[d]thazol-2-ilmetoksi)1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.6 g, 1.4 mmol) u THF (40 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl(3 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(80 mL) i isprana vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je mešan sa CH2Cl2 (10 mL) da bi se dobio 0.4 g čvrste supstance. Čvrsta supstanca je resuspendovana vrućim metanolom (15 mL) da bi se dobio 3-(4-(benzo[d]tiazol-2-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.35g, 63% prinos): mp 253-255°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99-2.04 (m, 1H), 2.45-2.62 (m, 2H), 2.86-2.94 (m, 1H), 4.39 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.11-5.17 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.76 (s, 2H), 7.32-7.75 (m, 5H), 8.02- 8.05 (dd, J = 0.6 i 8.1 Hz, 1H), 8.11-8.14 (dd, J = 0.6 i 7.8 Hz, 1H), 11.00 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.44, 31.28, 45.10, 51.73, 67.53, 115.41, 116.24, 122.48, 122.86, 125.52, 126.47, 130.07, 133.63, 134.47, 152.58, 152.72, 167.89, 171.07, 172.94; Izrač. za C21H17N3O4S: C, 61.91; H, 4.21; N, 10.31; S, 7.87. Pronađeno: C, 61.76; H, 4.01; N, 10.24; S, 7.85.
5.1423-(4-(BENZOFURAN-5-ILMETOKSI)-1-OKSOIZOINDO1IN-2-I1)PIPERIDIN-2,-6-DION (referentni primer)
[0689]
[0690] Faza 1: rastvor 1-benzofuran-5-karboksilna kiselina (1.0 g, 6.2 mmol) i trimetil borate (5 mL) u THF (20 mL) je mešan tokom 10 minuta. BH3(CH3)2S/THF (2M, 3.7 mL, 7.4 mmol) dodat je u kapima. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina ugašena je metanolom (5 mL) i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u metilen hlorid (75 mL) i ispran vodom (25 mL) i slanim rastvorom (25 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio benzofuran-5-metanol(2.6 g, 95%).
[0691] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (1.4 g, 6.8 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.0 g, 3.4 mmol), benzofuran-5-metanola (0.8 g, 5.1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2.3 g, 6.8 mmol), u THF (80 mL) na 3-6°C. Nakon dodavanja, reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(benzofuran-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.9 g, 63% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.09-1.30 (m, 1H), 2.08-2.25 (m, 3H), 3.49 (s, 3H), 4.43 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.71-4.75 (dd, J = 5.0 i 10.4 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 6.98-6.99 (dd, J = 1.0 i 2.2 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.27-7.35 (m, 2H), 7.43-7.48 (m, 2H), 7.58-7.79 (m, 2H), 8.01 (s, 1H), 8.02 (s, 1H).
[0692] Faza 3: Kalijum t-butoksid (0.3 g, 2.1 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-benzofuran-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.9 g, 2.1 mmol) u THF (40 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (3 mL). Mešavina je razblažena sa metilen hloridom (80 mL) i isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4- (benzofuran-5-ilmetoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion(0.5 g, 57%) kao bela čvrsta supstanca: mp 168-170°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.00 (m, 1H), 2.42-2.59 (m, 2H), 2.90-2.91 (m, 1H), 4.28 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J = 5.4 i 13.5 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 6.97-6.98 (dd, J = 0.9 i 2.1 Hz, 1H), 7.31-7.51 (m, 4H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.0 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.32, 31.16, 45.09, 51.56, 69.75, 106.70, 111.23, 115.03, 115.18, 120.79, 124.40, 127.28, 129.78, 129.95, 131.25, 133.28, 146.55, 153.49, 153.99, 168.00, 170.96, 172.81; Izrač. za C22H18N2O5 0.2 H2O: C, 67.07; H, 4.71; N, 7.11. Pronađeno: C, 67.05; H, 4.57; N, 6.97.
5.1433-(1-OKSO-4-(KVINOLIN-2-ILMETOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0693]
[0694] Faza 1: rastvor 2-kvinolin karboksaldehida (1.0 g, 6.4 mmol) u reagensu alkoholu (40 mL) ohlađen je u suvi led/aceton kupatilu do -60°C. LiBH4/THF (2M, 3.8 mL, 7.6 mmol) je dodat u kapima na -60°C. Reakciona mešavina je mešana na -60°C tokom 1 sata zatim ugašena vodom (10 mL). Mešavina je koncentrovana, a ostatak je rastvoren u EtOAc (60 mL). EtOAc rastvor je ispran slanim rastvorom (35 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio kvinolin-2-ilmetanol (0.9 g, 89%).
[0695] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (1.4 g, 6.8 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.0 g, 3.4 mmol), kvinolin-2-ilmetanola (0.9 g, 5.7 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2.3 g, 6.8 mmol), u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (25 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4(kvinolin-2-ilmetoksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0.7 g, 47% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.08-2.31 (m, 4H), 3.51 (s, 3H), 4.54 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.73-4.78 (dd, J = 5.0 i 10.4 Hz, 1H), 5.52 (s, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.29-7.32 (m, 2H), 7.45 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.60-7.65 (m, 2H), 7.73-7.82 (m, 2H), 7.99-8.05 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 8.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.83, 30.34, 44.82, 51.25, 53.42, 71.05, 114.79, 115.44, 119.44, 126.63, 127.21, 127.94, 128.51, 129.63, 129.90, 130.29, 133.54, 137.16, 146.90, 153.23, 157.13, 167.81, 171.74, 172.48.
[0696] Faza 3: Kalijum t-butoksid (0.2 g, 1.6 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(kvinolin-2-ilmetoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0.7 g, 1.6 mmol) u THF (50 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (3 mL). Mešavina je razblažena sa metilen hloridom (80 mL) i isprana zasićenim NaHCO3 (25 mL). Organski sloj je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a čvrsti ostatak je suspendovan sa CH2Cl2(20 mL) da bi se dobio 3-(1-okso-4-(kvinolin-2-ilmetoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.2 g, 26%) kao bela čvrsta supstanca: mp269-271°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.99-2.04 (m, 1H), 2.44-2.63 (m, 2H), 2.88-2.93 (m, 1H), 4.39 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 5.11-5.17 (dd, J = 5.1 i 13.3 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H), 7.32-7.36 (dd, J = 2.6 i 6.9 Hz, 2H), 7.48 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.60-7.65 (dt, J = 1.2 i 6.9 Hz,1H), 7.72-7.82 (m, 2H), 7.99-8.04 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 8.41 -8.44 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 10.99 (s,1 H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 31.17, 45.12, 51.60, 71.05, 115.05, 115.52, 119.44, 126.64, 127.20, 127.93, 128.51, 129.87, 129.91, 130.03, 133.40, 137.11, 146.89, 153.29, 157.09, 167.94, 170.97, 172.83; Izrač. za C23H19N3O4: C, 68.82; H, 4.77; N, 10.47. Pronađeno: C, 68.66; H, 4.49; N, 10.24.
5.1443-(1-OKSO-4-(KVINOLIN-3-ILMETOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0697]
[0698] Faza 1: rastvor 3-kvinolinkarboksaldehida (1.2 g, 7.6 mmol) u reagensu alkoholu (60 mL) je ohlađen u suvi led/aceton kupatilu do -40°C. LiBH4/THF (2 M, 4.6 mL, 9.2 mmol) dodat je u kapima na -40 do -60°C. Reakciona mešavina je mešana na -60 °C tokom 1 sata zatim ugašena vodom (10 mL). Mešavina je koncentrovana i ostatak je rastvoren u EtOAc (90 mL). EtOAc rastvor je ispran zasićenim NaHCO3(30 mL) i slanim rastvorom (30 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio kvinolin-3-ilmetanol (1.2 g, 100%).
[0699] Faza 2: Diizopropil azodikarboksilat (1.6 g, 7.7 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopenatnoata (1.1 g, 3.8 mmol), kvinolin-3-ilmetanol(1.2 g, 7.9 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2.6 g, 7.7 mmol) u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (25 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(kvinolin-3-ilmetoksi)izoindolin-2-il)pentanoat (1.0 g, 24%).
[0700] Faza 3: Kalijum t-butoksid (0.3 g, 2.4 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(kvinolin-3-ilmetoksi)izoindolin-2-il)pentanoata (1.0 g, 2.4 mmol) u THF (50 mL) na 5°C. Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (4 mL). Mešavina je razblažena sa metilen hloridom (80 mL) i isprana zasićenim NaHCO3(30 mL) i vodom (40 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a čvrsta supstanca je suspendovana sa vrućim metanolom (10 mL) da bi se dobio 3-(1 -okso-4-(kvinolin-3-ilmetoksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.1 g, 47%) kao bela čvrsta supstanca: mp 270- 273°C;<1>H NMIR (DMSO-d6) δ 1.99-2.01 (m, 1H), 2.43-2.60 (m, 2H), 2.91(m, 1H), 4.33 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.09-5.15 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 7.37 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.64 (dt, J = 1.0 i 8.0 Hz, 1H), 7.79 (dt, J = 1.5 i 6.9 Hz, 1H), 8.03 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 8.48 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 9.04 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.08, 51.57, 67.52, 115.07, 115.51, 126.94, 127.24, 128.09, 128.72, 129.68, 129.72, 129.87, 130.06, 133.38, 134.68, 147.22, 150.52, 153.28, 167.95, 170.94, 172.81; Izrač. za C23H19N3O4+ 0.2 H2O: C, 68.21; H, 4.83; N, 10.37. Pronađeno: C, 68.29; H, 4.87; N, 10.15.
5.1453-[4-(HROMAN-3-ILMETOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0701]
[0702] Faza 1: Polimerom vezan trifenilfosfin (1.6 g, 2.04 mmol, 1.25 mmol/g) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (300 mg, 1.02 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DIAD (412 mg, 2.04 mmol). Deset minuta kasnije, hroman-3-il-metanol (336 mg, 2.04 mmol) dodat je mešavini. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dihlorometanom (5 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil -4-[4-(hroman-3-ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao žuta staklasta čvrsta supstanca (400mg, 90% prinos): LCMS MH = 439.
[0703] Faza 2: KOtBu (102.4 mg, 0.91 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(hroman-3-ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (400 mg, 0.91 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0°C. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati, nakon čega je usledilo dodavanje HCl (aq.1N, 1.3 mL), a onda vode (10 mL). Mešavina je ekstrahovana dihlorometanom (2 x 25 mL). Organski slojevi su osušeni pomoću MgSO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom i prep HPLC da bi se dobio 3-[4-(Hroman-3ilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 7.9% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 40/60 (acetonitril/0.1% H3PO4): tR = 7.07(100%); mp: 258-260°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 2H, CH2), 2.66 - 2.81 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 2H, CH2), 3.97 - 4.48 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 5.04 - 5.19 (m, 1H, CHN), 6.70 - 6.89 (m, 2H, Ar), 7.01 - 7.15 (m, 2H, Ar), 7.29 (dd, J = 7.7, 18.1 Hz, 2H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 1H, Ar), 10.99 (s, 1H, NH). *jedan proton je preklopljen sa DMSO, što je potvrđeno pomoću HMQC;<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 26.66, 31.15, 31.72, 31.75, 44.89, 51.52, 66.88, 68.18, 114.48, 115.18, 116.14, 120.26, 121.02, 127.07, 129.86, 129.99, 133.20, 153.52, 154.11, 167.99, 170.97, 172.83; LCMS MH = 407.5.14
6 3-[4-(4-BENZOTRIAZOL-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0704]
[0705] Faza 1: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.683 g, 1.43 mmol) u acetonitrilu (10 ml) dodat je 1H-benzo[d][1,2,3]triazol (0.205 g, 1.72 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.285 ml, 1.724 mmol). Mešavina je mešana preko noći, a onda koncentrovana da bi se dobio sirovi metil 4-(4-(4-((1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat kao bela penasta čvrsta supstanca (1.30 g). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0706] Faza 2: U umešanu belu suspenziju metil 4-(4-(4-((1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (0.73 g, 1.43 mmol) u THF (12 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.46 g, 4.11 mmol). Mešavina je mešana tokom 15 minuta i ugašena je sa 1 N HCl (∼3ml), a onda je neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (6 ml do pH = 7). Mešavina je mešana sa etil acetatom (20 ml), a potom filtrirana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ona je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 5% u 30 min) da bi se dobio 3-[4-(4-benzotriazol-1-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao beli prah (340 mg, 49% prinos); mp, 228-230°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.44 min (98.2%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.03 (m, 1H, CH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CH), 2.52 - 2.62 (m, 1H, CH), 2.81 - 2.98 (m, 1H, CH), 4.14 - 4.45 (m, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.00 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.58 (m, 11H, ArH), 7.86 (d, J = 8.5 Hz, 1H, ArH), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H, ArH), 10.95 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.20, 45.06, 50.64, 51.55, 69.12, 110.65, 114.89, 115.27, 119.22, 124.04, 127.45, 127.88, 128.15, 129.79, 129.94, 132.64, 133.31, 135.65, 136.53, 145.31, 153.37, 167.98, 170.94, 172.82. LC/MS MH = 482; Anal. izrač. za C27H23N5O4 0.7 H2O: C, 65.63; H, 4.98; N, 14.17. Pronađeno: C, 65.39; H, 4.79; N, 13.96.
5.1473-(4-(2-HLOROBENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer) [0707]
[0708] U gustu suspenziju metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (200 mg, 0.684 mmol,) i Cs2CO3 (233 mg, 0.677 mmol) u suvom DMF (5 mL), dodat je 1-hloro-2-hlorometil-benzen (820 µl, 10% rastvor u DMF, 0.650 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi i progres je praćen sa LCMS. Nakon 2 sata, dodat je N,N-diizopropiletilamin (120 µL, 0.684 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon 14 sati, mešavina je zagrejana u uljanom kupatilu do 80°C i mešana tokom 8 sati. Sirova reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu, a onda transferovana u malim porcijama u ohlađeni 0.5 N vodeni HCl rastvor (40 mL). Bela čvrsta obrazovana supstanca prikupljena je filtracijom, isprana dodatnom vodom na filter levku, i osušena u vakuum sušnici da bi se dobilo 220 mg sirovog proizvoda. Čvrsta supstanca je rastvorena u minimalno DMF i prečišćena injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 30% do 75% acetonitril preko 20 min), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(4-(2-hlorobenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (175 mg, 70% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.08 min (98.7%); mp: 213-215 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.87 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.46 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.31 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.46 (m, 4H, Ar), 7.48 - 7.59 (m, 2H, Ar), 7.62 - 7.72 (m, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.16, 45.03, 51.55, 67.25, 114.93, 115.51, 127.38, 129.42, 129.90, 129.95, 130.03, 130.22, 132.72, 133.37, 133.85, 153.26, 167.91, 170.96, 172.80; LCMS MH = 385, 387; Anal. Izrač. za C20H17ClN2O4 0.35 H2O: C, 61.42; H, 4.56; N, 7.16; Cl, 9.06. Pronađeno: C, 61.26; H, 4.32; N, 7.19; Cl, 9.18.
5.1483-(1-OKSO-4-(2,4,6-TRIHLOROBENZILOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0709]
[0710] Faza 1: rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.50g, 1.7 mmol) i 2,4,6-trihlorobenzil alkohola (0.72 g, 3.4 mmol) u THF (30 mL) je ohlađen do 0°C. Dodat je polimerom vezan trifenilfosfin (3 mmol/g punjenje, 1.2 g, 3.7 mmol), praćeno DIAD (0.76 gm 3.7 mmol). Nakon jednog sata, kupatilo za hlađenje je uklonjeno, a mešavina umešavana pod azotom tokom 20 sati. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je ispran etil acetatom (50 mL). Filtrat je razblažen sa dodatnim etil acetatom (50 mL) i ispran slanim rastvorom (3 x 100 mL) i uparen. Ostatak je hromatografisan u metilen hlorid-metanol gradijentu, eluirajući proizvod na 5% metanolu. Sirovi metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(2,4,6-trihlorobenziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat (1.15 g (>100%)) dobijen je kao lepak.
[0711] Faza 2: Sirovi material dobijen u fazi 1 je rastvoren u THF (25 mL) i ohlađen do 0°C. Zatim, dodat je kalijum tert-butoksid (0.19 g, 1.7 mmol), a mešavina je mešana pod azotom tokom 3 sata. Mešavina je ugašena dodavanjem 5 kapi sirćetne kiseline. Dobijena mešavina je razblažena etil acetatom (75 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (75 mL) i uparena pod vakuumom. Ostatak je hromatografisan u metilen hlorid-metanol gradijentu, eluirajući proizvod na 5% metanolu. Nakon uparavanja odgovarajuće frakcije, ostatak je suspendovan u etru (15 mL) tokom 1 sata, filtriran, i osušen pod vakuumom, dajući proizvod kao belu čvrstu supstancu, 0.53 g, u 68% prinos tokom dve faze; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 50/50 (acetonitril/0.1% H3PO4): tR = 6.94 (97.86%); mp 138-140 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.02 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.79 - 2.98 (m, 1H, CHH), 4.16 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.32 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.09 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.33 (d, J = 10.6 Hz, 1H, CHH), 5.39 (d, J = 10.8 Hz, 1H, CHH), 7.39 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.45 - 7.61 (m, 2H, Ar), 7.81 (s, 2H, Ar), 10.94 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.26, 31.18, 44.99, 51.58, 65.00, 115.07, 115.89, 128.58, 129.90, 130.03, 130.62, 133.44, 135.09, 136.85, 153.40, 167.83, 170.95, 172.79; LCMS MH=453/455/457; Anal. Izrač. za C20H15Cl3N2O4• 0.4 Et2O: C, 53.67; H, 3.96; N, 5.80; Pronađeno: C, 53.65; H, 3.89; N, 5.71.
5.1493-[4-(2,5-DIHLORO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0712]
[0713] Faza 1: Rastvoru 3-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (0.5g, 1.7 mmol) u THF (30 mL), dodat je trifenilfosfin (na polimernom nosaču 2.2 mmol/g, 1.64 g, 3.74 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Diizopropil azodikarboksilat (0.76 mL, 3.74 mmol) dodat je na 0°C i mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta.2,5-Dihloro fenilmetanol (0.45 g, 2.57 mmol) dodat je na 0°C, a mešavina je ostavljena da se ugreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano metilen hloridom i metanolom (gradijent, proizvod je izašao pri 6% metanolu) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(2,5-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.7 g, 92%).
[0714] Faza 2: U THF rastvor (30 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(2,5-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.7 g, 1.5 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (0.17 g, 1.7 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta i ugašena je sa 1N HCl (5 mL, 5mmol), praćeno zasićenim NaHCO3(25 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL x 2). Organski sloj je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen iznad MgSO4, i koncentrovan. Dobijenoj čvrstoj supstanci dodat je EtOAc (10 mL) praćeno heksanom (10 mL) uz mešanje. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-[4-(2,5-Dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.26g, 37%). mp: 256-258°C; HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent do 95/5 acetonitril/0.1% H3PO4 u 5 min,: tR = 6.87 min (96.5%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.67 -2.16 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.46 (m, J = 4.2 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, J = 19.5 Hz, 1H, CHH), 2.76 - 3.09 (m, 1H, CHH), 4.13 - 4.60 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.34 - 7.43 (m, 2H, Ar), 7.46 - 7.63 (m, 3H, Ar), 7.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.27, 31.14, 45.02, 51.56, 66.75, 114.95, 115.68, 129.66, 129.78, 129.88, 129.94, 131.11, 131.37, 131.91, 133.41, 136.01, 153.05, 167.83, 170.91, 172.76; LCMS: 465; Anal. izrač. za C26H16Cl2N2O4 0.2 H2O: C, 56.81; H, 3.91; N, 6.62; Pronađeno: C, 56.75; H, 4.19; N, 6.70.
5.1503-[4-(3-METIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0715]
[0716] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 2.40 g, 3.80 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.50 g, 1.71 mmol) u THF (10mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2-dikarboksilata (0.75 ml, 3.80 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je (2,3-dihloro-fenil)-metanol (0.45 g, 2.60 mmol). Mešavina je mešana tokom jednog sata potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (EtOAc/Heksani gradijent od 20% do 100% u 90 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(2,3-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0.35 g, 45% prinos).
[0717] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.17 g, 1.50 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil estra 4-karbamoil-4-[4-(2,3-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.34 g, 0.75 mmol) u THF (20 mL) na 0°C. Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1N HCl (3 mL), neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 mL do pH = 7), i brzo ekstrahovana etil acetatom (2 x 30 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene i prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2, gradijent od 1% do 9% u 60 min) da bi se dobio 3-[4-(2,3-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.03 g, 9% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 50/50 u 10 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.84 min (96.1%); mp: 272-274 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.22 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.12 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.32 - 7.73 (m, 6H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.20, 45.05, 51.59, 67.56, 114.97, 115.68, 128.41, 128.51, 129.95, 130.30, 130.60, 131.98, 133.44, 136.57, 153.09, 167.90, 170.96, 172.83; LCMS MH = 419, 421; Anal. izrač. za C20H16N2O4Cl2: C, 57.30; H, 3.85; N, 6.68; Cl, 16.91; Pronađeno: C, 57.31; H, 3.86; N, 6.46; Cl, 17.02.
5.1513-(4-(3,4-DIMETOKSIBENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0718]
[0719] Faza 1 : Diizopropil azodikarboksilat (1.3 g, 6.1 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.9 g, 3.1 mmol), 3,4-dimetoksibenzil alkohola (0.8 g, 4.6 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (2.1 g, 6.2 mmol), u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(3,4-dimetoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.5 g, 3.8%).
[0720] Faza 2: rastvor kalijum t-butoksida u THF (1 M, 1.2 mL, 1.2 mmol), dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(3,4-dimetoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.2 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sa 4N HCl (4 mL). Mešavina je razblažena sa metilen hloridom (70 mL) i vodom (20 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(3,4-dimetoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.2 g, 32%) kao bela čvrsta supstanca: mp 205-207°C;<1>H NMR (DMSO- d6) δ 1.96-2.00 (m, 1H), 2.41-2.60 (m, 2H), 2.91 (m, 1H), 3.76 (s, 6H), 4.26 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.07-5.13 (m, 3H), 6.94-7.09 (m, 3H), 7.31-7.35 (m, 2H), 7.48(t, J = 7.8 Hz, 1H), 10.96(s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.17; 45.11, 51.56, 55.47, 69.67, 111.59, 111.90, 115.07, 115.12, 120.51, 128.80, 129.75, 129.96, 133.24, 148.65, 153.51, 168.00, 170.96, 172.82; Izrač. za C22H22N2O6: C, 64.38; H, 5.40; N, 6.83. Pronađeno: C, 64.36; H, 5.25; N, 6.85.
5.1523-[4-(3-HLORO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0722] Faza 1: U THF rastvor metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (1.0 g, 3.42 mmol), dodata je trifenilfosfin smola (2.3 g, 2.2 mmol/g punjenje, 6.84 mmol) i DIAD (1.33 mL, 6.84 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, mešavini je dodata (3-hloro-4-ilmetil-fenil)-metanol (0.61 mL, 5.13 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-hloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (0.24g, 20%).
[0723] Faza 2: U THF rastvor (20 mL) of 4-karbamoil-4-[4-(3-hloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline metil estar (0.24 g, 0.57 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (0.57 mL g, 0.57 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvorom praćeno 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i metanolom da bi se dobio 3-[4-(4-Hloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (60 mg, 27%). mp: 224-226 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1% H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 4.9 min (97%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.05 (m, J = 1.9 Hz, 1H, CHH), 2.34 -2.46 (m, 1H, CHH), 2.57 - 2.65 (m, J = 3.6 Hz, 1H, CHH), 2.79 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.16 - 4.61 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.19 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.38 - 7.54 (m, 4H, Ar), 7.56<(s, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).13C NMR (DMSO-d>6<) δ 22.36, 31.21, 45.09, 51.61, 68.59, 114.95, 115.43,>126.19, 127.33, 127.91, 129.84, 129.98, 130.42, 133.13, 133.39, 139.20, 153.24, 167.95, 170.99, 172.87; LCMS MH = 385. Anal. izrač. za C20H17N2O4Cl: C, 62.42; H, 4.45; N, 7.28; Pronađeno: C, 61.51 % H, 4.04; N, 7.12.
5.1533-(4-(3-(2-(DIMETILAMINO)ETOKSI)-4-METOKSI BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0725] Faza 1: Mešavina 3-hidroksi-4-metoksibenzaldehid (4.2 g, 27.3 mmol) i Cs2CO3 (22.2 g, 68.2 mmol) u DMF (80 mL) je umešana tokom 10 minuta. Ovoj mešavini je dodat dimetilaminoetil hlorid hidrohlorid (4.7 g, 32.7 mmol). Reakciona mešavina je mešana u 50°C uljanom kupatilu tokom 18 sati. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana. Filtrat je razblažen vodom (200 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (4x50 mL). Kombinovani EtOAc rastvor je ispran vodom (3x50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 3-(2-(dimetilamino)etoksi)-4-metoksibenzaldehid (3.8 g, 62%).
[0726] Faza 2: rastvor 3-(2-(dimetilamino)etoksi)-4-metoksibenzaldehida (3.8 g, 16.8 mmol) u THF (20 mL) dodat je izmešanom rastvoru LiBH4/THF (2.0M, 10.1 mL) u THF (20 mL) na 6-10°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (15 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (3x50 mL) i kombinovana EtOAc rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl23: 7) da bi se dobio 3-(2-(dimetilamino)etoksi-4-metoksifenil)metanol (3.6g, 94% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.62 (s, 6H).3.13 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.73 (s, 3H), 4.31 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.42 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.08 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 6.84-6<.>97 (m, 3H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 51.74, 55.70, 61.89, 62.63, 64.07, 111.91, 112.38, 119.38, 135.12, 147.15, 147.97.
[0727] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (0.9 g, 4.4 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.7 g, 2.2 mmol), 3-(2-(dimetilamino)etoksi-4-metoksifenil)metanola (0.8 g, 3.3 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (1.5 g, 4.4 mmol) u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-4-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.6 g, 54%).
[0728] Faza 4: Kalijum t-butoksid/THF (1 M, 1.3 mL, 1.3 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-4-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.6 g, 1.3 mmol) u THF (20 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena zasićenimim NH4Cl (6 mL). Mešavina je razblažena sa metilen hloridom (70 mL) i zasićenim NaHCO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-4-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2- il)piperidin-2,6-dion (0.2 g, 39%) kao bela čvrsta supstanca: mp 201-203°C;<1>H NMR (DMSO- d6) δ 1.95-2.00 (m, 1H), 2.40-2.52 (m, 2H), 2.61 (s, 6H), 2.84-2.95 (m, 1H), 3.11-3.17 (m, 2H), 3.76 (s.3H), 4.26 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.37 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 7.00 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.05-7.08 (dd, J = 1.8 i 8.1 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.31-7.35 (m, 2H), 7.48 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.09, 51.54, 51.73, 55.67, 61.76, 64.10, 69.55, 112.01, 113.75, 115.09, 115.16, 121.31, 128.89, 129.77, 129.96, 133.25, 147.25, 149.00, 153.50, 168.00, 170.95, 172.80; Izrač. za C25H29N3O6 0.1 H2O: C, 61.84; H, 6.44; N, 8.65; Pronađeno: C, 62.02; H, 6.67; N, 8.58.
5.1543-(4-(4-(2-(DIMETILAMINO)ETOKSI)-3-METOKSI BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0729]
[0730] Faza 1: Mešavina vanilinaa (2 g.27.3 mmol) i Cs2CO3 (22.2 g, 68.2 mmol) u DMF (80 mL) je umešavana tokom 10 minuta. Ovoj mešavini je dodat diemthilaminoetil hlorid (4.7 g, 32.7 mmol).
Mešavina je mešana na 50°C uljanom kupatilu tokom 18 sati. Reakciona mešavina je isfiltrirana. Filtrat je razblažen vodom (100 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (4x50 mL). EtOAc rastvor je ispran vodom (3x50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksibenzaldehid (2.1 g, 34%).
[0731] Faza 2: rastvor 4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksibenzaldehid (1.8 g, 8.1 mmol) u THF (15 mL) dodat je izmešanom rastvoru LiBH4/THF (2M, 4.8 mL, 9.7 mmol) u THF (15 mL) na 8 to 10°C. Nakon dodavanja, reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (10 mL). Mešavina je mešana zasićenim NaHCO3(25 mL) i EtOAc (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x30 mL). Kombinovani EtOAc rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl23: 7) da bi se dobio (4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksifenil)metanol (2.6 g, 93% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.61 (s, 6H), 3.11 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.30 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.09 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 6.81-6.96 (m, 3H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 51.69, 55.48, 61.85, 62.69, 64.29, 110.81, 113.61, 118.51, 136.02, 146.11, 149.01.
[0732] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (1.4 g, 6.8 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopenatnoata (1.0 g, 3.4 mmol), (4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksifenil)metanola (1.2 g, 5.1 mmol) i triphenfosfina-polimerom vezanim (2.3 g, 6.8 mmol), u THF (80 mL) na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana metilen hloridom (30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-(2-dimetilamino)etoksi)-3-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.4 g, 81%).
[0733] Faza 4: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1 M, 3.0 mL, 3.0 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.5 g, 3.0 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena zasićenim NH4Cl (10 mL). Mešavina je razblažena sa CH2Cl2(50 mL) i zasićenim NaHCO3 (25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (2x30 mL), a kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(4-(2-(dimetilamino)etoksi)-3-metoksibenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.6 g, 39%) kao bela čvrsta supstanca: mp 190-192°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95-2.00 (m, 1H), 2.41-2.55 (m, 2H), 2.61 (s, 6H), 2.84-2.91 (m, 1H), 3.13 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.77(s, 3H), 4.27 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.37 (d, J = 17.5 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 7.02 (m, 2H), 7.12 (b, 1H),7.31-7.35 (m, 2H), 7.48 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.17, 45.11, 51.56, 51.72, 55.67, 61.77, 64.14, 69.59, 112.24, 113.42, 115.05, 115.16, 120.50, 129.77, 129.95, 133.25, 147.22, 149.06, 153.50, 168.00, 170.96, 172.82; Izrač. za C25H29N3O6 1.0 H2O: C, 6134; H, 6.44; N, 8.65. Pronađeno: C, 61.98; H, 6.84; N, 8.67.
5.1553-[4-(4-HLORO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0734]
[0735] Faza 1: U THF rastvor metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (1.0 g, 3.42 mmol), dodati su trifenilfosfin smola (2.3 g, 2.2 mmol/g punjenje, 6.84 mmol) i DIAD (1.33 mL, 6.84 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, mešavini je dodat (4-hloro-4-ilmetil-fenil)-metanol (0.73g, 5.13 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3 (20 mL).
Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-hloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline (0.13g, 13%).
[0736] Faza 2: U THF rastvor (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.18 g, 0.43 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (0.6 mL g, 0.6 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvorom, praćeno 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i metanolom da bi se dobio 3-[4-(4-hloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (70 mg, 42%). mp: 238-240 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 3.9 min (97%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.81 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.15 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.26 (s, 2H, CH2), 7.13 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.58 (m, 5H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.20, 45.06, 51.58, 68.65, 115.00, 115.38, 128.47, 129.47, 129.82, 129.97, 132.55, 133.35, 135.70, 153.27, 167.96, 170.98, 172.83; LCMS MH = 385. Anal. izrač. za C20H17ClN2O4+ 0.1 H2O: C, 62.13; H, 4.48; N, 7.25; Pronađeno: C, 61.76% H, 4.45; N, 7.28.
5.1563-[4-(3-METOKSI-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0737]
[0738] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 3.84 g, 4.78 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.78 g, 2.66 mmol) u THF (15mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2-dikarboksilata (0.95 ml, 4.78 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, (3-metoksi-fenil)-metanol (0.56 mL, 4.52 mmol) dodat je. Mešavina je mešana tokom jednog sata potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), zatim metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-metoksi-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (0.32 g, 36% prinos).
[0739] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.10 g, 0.92 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3-metoksi-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (1.13 g, 2.60 mmol) u THF (10 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina je ugašena sa 1N HCl (2 mL) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8). Mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (3x20 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene, a onda prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio 3-[4-(3-metoksi-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.23 g, 65% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 40/60 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.32 min (98.9%); mp: 225-227°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.76 (s, 3H, CH3), 4.20 - 4.52 (m, 2H, ArCH2N), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, ArC H2O), 6.91 (dd, J = 1.7, 8.1 Hz, 1H, Ar), 7.00 - 7.12 (m, 2H, Ar), 7.23 - 7.38 (m, 3H, Ar), 7.43 - 7.55 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 31.21, 45.12, 51.61, 55.05, 69.38, 113.26, 115.00, 115.26, 119.68, 129.59, 129.79, 129.97, 133.32, 138.19, 153.41, 159.35, 167.99, 170.98, 172.83 (nedostaje aromatični ugljenik zbog preklapanja, potvrđeno od strane HMQC); LCMS MH = 381; Anal. Izrač. za C21H20N2O5+ 0.1 H2O: C, 65.99; H, 5.33; N, 7.33. Pronađeno: C, 65.71; H, 5.36; N, 7.25.
5.1573-[4-(3-METIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0740]
[0741] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 3.76 g, 4.68 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.75 g, 2.60 mmol) u THF (15mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2dikarboksilat (0.93 ml, 4.68 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je m-tolil-metanol (0.53 mL, 4.40 mmol). Mešavina je mešana tokom jednog sata potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), zatim metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3-metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (1.13 g, 137% sirovi prinos).
[0742] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.30 g, 2.60 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3-metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (1.13 g, 2.60 mmol) u THF (10 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina ugašena je sa 1N HCl (2 mL) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8). Mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (3x20 mL).
Kombinovane faze etil acetata su uparene i prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 40 min) da bi se dobio 3-[4-(3-metil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.21 g, 29% prinos tokom dve faze); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 40/60 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 7.89 min (99.4%); mp: 244-246°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.32 (s, 3H, CH3), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.19 - 4.49 (m, 2H, ArCH2N), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.21 (s, 2H, ArC H2O), 7.11 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.23 - 7.37 (m, 5H, Ar), 7.43 - 7.55 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.99, 22.36, 31.21, 45.12, 51.59, 69.61, 114.98, 115.23, 124.78, 128.25, 128.38, 128.61, 129.81, 129.94, 133.32, 136.53, 137.64, 153.50, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS MH = 365; Anal. Izrač. za C21H20N2O4+ 0.2 H2O: C, 68.54; H, 5.59; N, 7.61. Pronađeno: C, 68.18; H, 5.49; N, 7.52.
5.1583-(4-(3-METOKSI-4-(2-PIROLIDIN-1-IL)ETOKSI)-BENZILOKSI)-1-OKSO-IZOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0743]
[0744] Faza 1: Mešavina Vanilina (4.2 g, 27.3 mmol) i Cs2CO3(22.2 g, 68.3 mmol) u DMF (80 mL) je mešana tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi. Ovoj mešavini je dodat 1-(2-hloroetil)pirolidin hidrohlorid (5.6 g, 32.7 mmol). Mešavina je zagrevana na 50°C preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana , a čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (100 mL). Filtrat je razblažen vodom (200 mL) , a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3X50 mL). Kombinovani EtOAc rastvor je ispran vodom (2X50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio 3-metoksi-4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)benzaldehid (6.2 g, 91% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.65-1.71 (m, 4H), 2.50-2.55 (m, 4H), 2.81 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.17 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.52-7.55 (dd, J = 1.8 i 8.1 Hz, 1H), 9.84 (s, 1H).
[0745] Faza 2: rastvor LiBH4/THF (2.0M, 14.7 mL, 29.4 mmol) u THF (20 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu do 5°C. Rastvor 3-metoksi-4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)benzaldehida (6.1 g, 24.5 mmol) u THF (20 mL) dodat je lagano na 5-8°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena vodom (15 mL). Mešavina je mešana sa EtOAc (50 mL) i zas. NaHCO3(25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X40 mL) i kombinovani EtOAc rastvor je ispran vodom (40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen (MgSO4).
Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: CH2Cl22: 8) da bi se dobio [3-metoksi-4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)-fenil]-metanol (4.8 g, 77% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.85-2.01 (m, 4H), 2.96-3.08 (m, 4H), 3.12 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.34 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 5.07 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 6.80-6.84 (dd, J = 1.8 i 8.1 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 8.1 Hz, 2H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.28, 55.48, 61.34, 62.58, 62.70, 64.65, 110.78, 113.26, 118.52, 135.84, 146.23, 148.91.
[0746] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (1.1 g, 5.5 mmol) dodat je lagano izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.7 mmol), [3-metoksi-4-(2-pirolidin-1-il-etoksi)-fenil]-metanola (1.0g, 4.1 mmol) i trifenilfosfina vezanog za polimer (1.8 g, 5.5 mmol) u THF (60 mL) na 5-7°C. Nakon dodavanja, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(30 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(3-metoksi-4-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.9 g, 59%).
[0747] Faza 4: rastvor kalijum t-butoksid/THF (1M, 1.6 mL, 1.6 mmol) dodat je lagano izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(3-metoksi-4-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)benzoiloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 1.6 mmol) u THF (30 mL) na 5°C. Mešavina je mešana na 5°C tokom 10 minuta potom zagrejana do sobne temperature tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom<kupatilu i ugašena sa 4N HCl (3 mL). Mešavina je mešana sa CH>2<Cl>2<(40 mL) i zas. NaHCO>3<(25 mL). Vodeni>sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (40 mL) i kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran vodom (2X25 mL) i slanim rastvorom (25 mL), i osušen (MgSO4). Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio 3-(4-(3-metoksi-4-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-piperidin-2,6-dion (0.4 g, 49% prinos): mp 160-162°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-2.01 (m, 5H), 2.42-2.59 (m, 2H), 2.95-3.16 (m, 7H), 3.76 (s, 3H), 4.27 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.35-4.42 (m, 3H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.4 i 13.5 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 6.98-7.02 (m, 2H), 7.11 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.30-7.35 (m, 2H), 7.48 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.27, 31.17, 45.12, 51.56, 55.57, 55.67, 60.48, 61.38, 64.55, 69.62, 112.24, 113.14, 115.05, 115.15, 120.54, 129.53, 129.77, 129.95, 133.25, 147.34, 149.00, 153.52, 168.00, 170.96, 172.81; Izrač. za C27H31N3O6 BH3: C, 63.91; H, 6.75; N, 8.28. Pronađeno: C, 63.90; H, 6.76; N, 8.17.
5.1593-[4-(3,5-DIHLORO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0748]
[0749] Faza 1: Polimerom vezan trifenilfosfin (1.6 g, 1.92 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1, 3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (300 mg, 1.03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DIAD (412 mg, 2.06 mmol). Deset minuta kasnije, (3,5-dihloro-fenil)-metanol (364.7 mg, 2.06 mmol) dodat je mešavini. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dihlorometanom (5 x 25 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(3,5-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (410mg, 88% prinos): LCMS MH = 451,453.
[0750] Faza 2: KOtBu (102 mg, 0.91 mmol) je dodat izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(3,5-dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (410 mg, 0.91 mmol) u THF (20 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 5 minuta i reakcija je završena. Reakcionoj mešavini je dodat HCl (0.1N aq, 14 mL), a mešavina je ekstrahovana dihlorometanom (25 mLx2).
Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa dietil etrom (15 mL) da bi se dobio 3-[4-(3,5-Dihloro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (230 mg, 60% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 60/40 (acetonitril/0.1%H3PO4): tR= 3.5(98%); mp: 271-273°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.22 - 4.56 (m, 2H, CHH, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.0 Hz, 1H, NCH), 5.27 (s, 2H, CH2), 7.29 (d, J = 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.35 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.46 - 7.54 (m, 1H, Ar), 7.57 (d, 2H, Ar), 7.58 - 7.63 (m, 1H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.09, 51.60, 67.92, 114.88, 115.57, 126.15, 127.57, 129.83, 129.99, 133.43, 134.14, 140.97, 153.03, 167.90, 170.95, 172.81; LCMS MH = 419, 421; Anal. Izrač. za C20H16Cl2N2O4 0.045 CH2Cl2 0.06 MeOH : C, 56.82; H, 3.87; N, 6.59; Cl, 17.43; Pronađeno: C, 56.58; H,3.86; N, 6.52; Cl, 17.15.
5.1603-[4-(4-METANSULFONIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0751]
[0752] Faza 1: Polimerom vezan trifenilfosfin (1.5 g, 1.92 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1, 3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (280 mg, 0.96 mmol) u THF (10mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 15minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DIAD (388 mg, 1.92 mmol). Pet minuta kasnije, (4-metansulfonil-fenil)-metanol (357 mg, 1.92 mmol) dodat je to gornjoj mešavini. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata a onda na 0°C preko noći, i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana dihlorometanom (20mLx5). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-metansulfonil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-isoin dol-2-il]-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (310mg, 70% prinos): LCMS MH = 461.
[0753] Faza 2: KOtBu (75.2 mg, 0.67 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-metansulfonil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoin dol-2-il]-buterne kiseline (310 mg, 0.67 mmol) u THF (18 mL) na 0°C. Dobijena mešavina je mešana na 0°C tokom 1,5 sata i KOtBu (35 mg, 0.31 mmol) dodat je reakcionoj mešavini. Reakcija je zaustavljena na 30minuta. Reakcionoj mešavini je dodat HCl (1N aq, 10 mL) i mešavina je ekstrahovana dihlorometanom (30mLx2). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa dietil etrom (30 ml) da bi se dobio 3-[4-(4-etansulfonil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (195mg, 68% prinos) : HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 30/70 (acetonitril/0.1%H3PO4): tR= 3.98(98%); mp: 248-250°C;<1>H NMR DMSO-d6) δ 1.90 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.04 (m, 1H, CHH), 3.22 (s, 3H, CH3), 4.20 - 4.57 (m, 2H, CHH, CHH), 5.13 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.40 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.48 (d, 1H, Ar), 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.96 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 31.16, 43.45, 45.04, 51.58, 68.52, 114.94, 115.51, 127.16, 128.05, 129.86, 129.97, 133.40, 140.27, 142.62, 153.13, 167.91, 170.95, 172.81; LCMS MH = 429; Anal. Izrač. za C21H20N2O6S : C, 58.87; H, 4.71; N, 6.54; Pronađeno: C, 58.98; H, 4.97 ; N, 6.21.
5.161 3-[1-OKSO-4-(4-PIROLIDIN-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0754]
[0755] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 1.83 g, 2.30 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.31 g, 1.04 mmol) u THF (20mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2-dikarboksilata (0.46 ml, 2.30 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je (4-pirolidin-1-ilmetilfenil)-metanol (0.40 g, 2.09 mmol). Mešavina je mešana tokom jednog sata potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), zatim metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno preparativnom HPLC da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-pirolidin-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bistro ulje (0.17 g, 35% prinos).
[0756] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.08 g, 0.74 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-pirolidin-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.17 g, 0.37 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1N HCl (3 mL), neutralizovan zasićenim natrijum bikarbonatom (6 mL do pH = 7), i brzo ekstrahovana etil acetatom (2 x 15 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene do svetlo zelenog penastog ulja, koje je mešano u vodi (15 mL) tokom jednog sata, filtrirano i osušeno da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-pirolidin-1-ilmetilbenziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona kao beličasta čvrsta supstanca (0.033 g, 20% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 15/85 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.51 min (98.2%); mp: N/A due to limited sample available;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.64 - 1.84 (m, 4H, CH2CH2), 1.97 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.72 (m, 6H, CHH, CHH, CH2CH2), 2.85 - 3.09 (m, 1H, CHH), 3.63 (s, 2H, CH2), 4.24 - 4.56 (m, 2H, CH2), 5.17 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.30 - 7.62 (m, 7H, Ar), 11.03 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 23.10, 31.21, 45.10, 51.58, 53.47, 59.29, 69.45, 115.00, 115.21, 127.61, 128.51, 129.81, 129.95, 133.31, 135.00, 139.36, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS MH = 434.
5.1623-(4-(3-NITROBENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer) [0757]
[0758] Mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600 mg, 2.05 mmol,) i N,N-diizopropiletilamina (358 µL, 2.05 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL), dodat je 1-(bromometil)-3-nitrobenzen (421 mg, 1.95 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati zatim zagrejana do 80°C tokom 24 sata. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu, a onda preneta u rashlađeni 0.5 N HCl rastvor (∼120 mL). Obrazovana čvrsta supstanca je prikupljena filtracijom i osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 720 mg sirovog proizvoda. Deo sirovog proizvoda je prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(4-(3-nitrobenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (60 mg, 37% prinos baziran na prečišćenom delu): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.20 min (99.0%); mp: 237-240 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 -2.67 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.30 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.46 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.42 (s, 2H, Ar), 7.23 - 7.45 (m, 2H, Ar), 7.45-7.59 (m, 1H, Ar), 7.66 -7.84 (m, 1H, Ar), 7.98 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 8.15 - 8.29 (m, 1H, Ar), 8.29 - 8.43 (m, 1H, Ar), 10.98 (br. s., 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.20, 45.10, 51.62, 68.33, 115.08, 115.61, 122.18, 122.90, 129.90, 130.00, 130.14, 133.45, 134.14, 139.01, 147.86, 153.15, 167.92, 170.96, 172.83; LCMS MH = 396; Anal. Izrač. za C20H17N3O6 0.9 H2O: C, 58.36; H, 4.60; N, 10.21. Pronađeno: C, 58.30; H, 4.21; N, 10.05.
5.1634-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)BENZAMID (referentni primer)
[0760] Faza 1: u a 250-mL Balon sa okruglim dnom, L-glutamin α-tert-butil estar (7.83 g, 32.8 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (11.46 ml, 65.6 mmol) su suspendovani u acetonitrilu (100 mL) na sobnoj temperaturi. Suspenzija je mešana tokom oko 10 minuta a onda je dodat rastvor metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)benzoata (11.4 g, 29.8 mmol,) u acetonitrilu (20 mL) u kapima preko 10 minuta. Reakciona mešavina je zagrevana u uljanom kupatilu do sporog refluksa (∼80 °C) tokom 4 sata. Reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature tokom oko 1 sata, a onda je dodat rastvor cezijum fluorida (4.53 g, 29.8 mmol) u vodi (15 mL). Dobijena mešavina je energično umešavana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata kada je LCMS označio da je destilacija završena. Reakciona mešavina je razblažena sa acetonitrilom i filtrirana da bi se uklonile nerastvorene čvrste supstance. Čvrste supstance su isprane dodatnim acetonitrilom. Filtrat i vode od ispiranja (ukupna zapremina 200 mL) razblaženi su dalje sa EtOAc (300 mL), prenete u levak za razdvajanje od 1-L, i isprane sa 0.5 N Vodeni KH2PO4(100 mL, pH ∼5). Vodenom sloju dodat je 1 N HCl u delovima (∼20 mL, pH se promenio od pH 7-8 do pH -5 uz upotrebu pH papira). NaCl (∼10 g) i EtOAc (∼200 mL) su dodati vodenom sloju. Mešavina je promućkana energično u levku za razdvajanje. Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobilo 15 g beličaste čvrste supstance. Ovaj sirovi proizvod koji sadrži čvrstu supstancu je suspendovan u acetonitrilu (200 mL) i suspenzija je zagrejana u uljanom kupatilu do refluksa (∼85 °C) tokom oko 30 minuta uz mešanje. Mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature tokom 1 sata onda je ostarena na 4°C tokom naredna 2 sata. Obrazovana čvrsta supstanca je prikupljena usisnom filtracijom. Zaostala čvrsta supstanca u balonu je preneta na filter levak korišćenjem malo MTBE. Kolač je ispran dodatnim MTBE (ukupna zapremina filtrata ∼300 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 40°C tokom nekoliko sati da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (7.3 g 72% prinos, podešen za čistoću polaznog materijala i proizvoda): mp: 198-200 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, tBu), 1.93 - 2.14 (m, 3H, CH2, CHH), 2.15 -2.33 (m, 1H, CHH), 4.35 (s, 2H, CH2), 4.61 - 4.83 (m, 1H, CH), 6.76 (br. s., 1H, NH), 6.97 - 7.07 (m, 1H, Ar), 7.11 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.26 (br. s., 1H, NH), 7.29 - 7.36 (m, 1H, Ar), 10.10 (s, 1H, OH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.81, 27.56, 31.44, 44.71, 54.02, 81.38, 113.72, 117.96, 127.99, 129.36, 133.36, 152.50, 168.36, 169.88, 172.94; LCMS MH = 335; Anal. izrač. za C17H22N2O5 0.19 H2O: C, 60.45; H, 6.68; N, 8.29.
Pronađeno: C, 60.44; H, 6.62; N, 8.27.
[0761] Faza 2: tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (300 mg, 0.897 mmol), N,N-diizopropiletilamin (157 µL, 0.897 mmol), i K2CO3 (124 mg, 0.897 mmol) su suspendovani u DMF (5 mL). Nakon 10 minuta, 4-(bromometil)benzamid (192 mg, 0.897 mmol) dodat je i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Uklanjanje DMF u vakuumu dalo je ostatak koji je podeljen između EtOAc i 0.2 N vodene HCl. Vodeni sloj je zasićen sa NaCl i ispran dodatnim EtOAc. Organski slojevi su kombinovani (ukupna zapremina ∼400 mL), isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio 400 mg tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata kao ulje. LCMS MH = 420. Ulje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0762] Faza 3: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (400 mg) u dihlorometanu (5 mL) dodat je TFA (1.5 mL) i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 sati (LCMS je pokazao da je završeno uklanjanje zaštite). Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i tragom isparljive supstance uhvaćene su malom porcijom dihlorometana (2x) i koncentrovane ponovo da bi se dobilo 400 mg 4-karbamoil-2-[4-(4-karbamoil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca. Ovaj materijal je primenjen bez daljeg prečišćavanja.4-karbamoil-2-[4-(4-karbamoil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterna kiselina (369 mg, 0.897 mmol, pretpostavljajući teoretski prinos iz prethodne faze) je rastvorena u DMF (10 mL). Rastvoru je dodat CDI (167 mg, 1.03 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati a onda zagrejana do 80°C tokom 6 sati. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu , a 0.1 N HCl rastvor je lagano dodat dok nije dobijen beli talog. Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa minimalno vode, zatim osušena u vakuum sušnici da bi se dobilo 150 mg sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je rastvoren u DMF i prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 60% acetonitril preko 30 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzamid kao bela čvrsta supstanca (85 mg, 24% kombinovan prinos za fazu 2 i fazu 3): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 acetonitril/0.1% H3PO4, 3.41 min (98.8%); mp: 278-280 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.68 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 4.29 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.19 - 7.41 (m, 3H, Ar, NH), 7.43 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.89 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.97 (br. s., 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.27, 30.11, 44.00, 50.50, 67.88, 113.91, 114.26, 126.08, 126.53, 128.72, 128.91, 132.26, 132.79, 138.72, 152.21, 166.42, 166.87, 169.88, 171.73; LCMS MH = 394; Anal. Izrač. za C21H19N3O5+ 0.8 H2O 0.28 acetonitril 1.1 HCOOH: C, 57.57; H, 4.68; N, 9.95. Pronađeno: C, 57.92; H, 5.07; N, 9.78.
5.1643-(4-(4-HLORO-3-METILBENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0763]
[0764] Faza 1: Rastvoru 4-hloro-3-metilbenzojeva kiselina (1 g, 5.86 mmol) u THF (10 mL), je lagano doda boran rastvor u THF (1M, 8.79 mL, 8.79 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem vode (1 mL) u kapima, a onda je dodato 30 mL vode. Mešavina je zasićen sa viškom kalijum karbonata, ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 50 mL), kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, i rastvarač je uparen pod vakuumom da bi se dobio (4-hloro-3-metilfenil)metanol (900 mg, 98% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.32 (s, 3H, CH3), 4.45 (d, J = 5.7 Hz, 2H, CH2), 5.22 (t, J = 5.7 Hz, 1H, OH), 7.15 (dd, J = 1.6, 8.2 Hz, 1H, Ar), 7.28 (s, 1H, Ar), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ar).
[0765] Faza 2: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (3 mmol/g, 0.69g, 2.06 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-opentanoata (300mg, 1.03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C, praćeno diizopropil azodikarboksilatom (416 mg, 2.06 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (4-hloro-3-metilfenil)metanol (322mg, 1.03 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana etil acetatom (7 x 10 mL). Kombinovani filtrat je ispran vodom i slanim rastvorom, rastvarač je uparen, i sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 3% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-hloro-3-metilbenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (430 mg, 97% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.25 (d, 4H, CH2, CH2), 2.35 (s, 3H, CH3), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.33 - 4.63 (m, 2H, CH2), 4.69 - 4.78 (m, 1H, CH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.19 (s, 1H, NH), 7.24 - 7.39 (m, 3H, Ar), 7.39 - 7.51 (m, 3H, Ar), 7.59 (br. s., 1H, NH).
[0766] Faza 3: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-hloro-3-metilbenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata u THF (10 mL), dodat je kalijum tert-butoksid (112 mg, 1mmol) na 0°C, a mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, zagrejana do sobne temperature, i mešana tokom 3 sata. Reakcija je ugašena dodavanjem vodene HCl (1N, 2mL). Mešavina je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni iznad MgSO4, rastvarač je uparen pod vakuumom, a sirovi proizvod je resuspendovan u acetonitrilu (5 mL) tokom 2 sata i filtriran da bi se dobio 3-(4-(4-hloro-3-metilbenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (180 mg, 45% prinos); mp: 217-219 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.35 (s, 3H, CH3), 2.48 (br. s., 1H, CHH), 2.61 (br. s., 1H, CHH), 2.80 - 3.03 (m, 1H, CHH), 4.19 - 4.52 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.39 (m, 3H, Ar), 7.39 - 7.57 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.56, 22.34, 31.16, 45.07, 51.58, 68.77, 114.97, 115.32, 126.87, 128.88, 129.80, 129.95, 130.43, 132.77, 133.33, 135.52, 135.66, 153.32, 167.96, 170.96, 172.81; LCMS MH = 399; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 50/50 acetonitril/0.1% H3PO4tR= 5.29 (99.50%); Anal. Izrač. za C21H19ClN2O4: C,63.24; H, 4.80; N, 7.02;
Pronađeno: C, 62.99; H, 4.94; N, 6.86.
5.1653-(1-OKSO-4-(4-(TRIFLUOROMETIL)BENZILOKSI) IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0767]
[0768] Mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.10 g, 0.34 mmol) i K2CO3 (0.05 g, 0.34 mmol) u DMF (10 mL), je lagano dodat 4-(trifluorometil)benzil bromid (0.07 g, 0.31 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodatni 4-(trifluorometil)benzil bromid (0.008 g, 0.03 mmol) dodat je, i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodatni K2CO3(0.05 g, 0.34 mmol) dodat je, i reakciona mešavina je zagrevana na 80°C tokom 24 sata. Sirćetna kiselina (5 kapi) dodata je reakcionoj mešavini. Rastvarač je uparen i dodat je etil acetat (100 mL) reakcionoj mešavini. Ona je potom isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), i osušena (MgSO4). Nakon filtracije agensa za sušenje, rastvarač je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO flash (kolona od 40 g, gradijent metanol/metilen hlorid 0/100 do 5/95 u 20 min, eluiranje proizvoda na 5/95). Rastvarač je uparen. Ostatak je mešan u etru, i čvrsta supstanca je filtrirana i osušena da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(trifluorometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.09 g, 72% prinos). Ovaj eksperiment je ponovljen sa5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (0.30 g, 1.03 mmol) da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(trifluorometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.12 g) i još jednom sa 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5oksopentanoatom (0.10 g, 0.34 mmol) da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(trifluorometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.05 g). Kombinovane su 3 serije. Čvrste supstance su rastvorene u etil acetatu (20 mL). Rastvarač je uparen. Ostatak je mešan u etru, a čvrsta supstanca je filtrirana i osušena da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(trifluorometil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.24 g): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, acetonitril/0.1% H3PO4: gradijent 10/90 do 90/10 u 15 min; 5 min na 90/10: 12.68 min (98.97%); mp: 241-243 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.17 (t, J = 7.1 Hz, 1H, Etil Acetat (5%)), 1.82 - 2.18 (m, 1H, CHH), 2.29 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.58 (d, J = 19.1 Hz, 1H, CHH), 2.79 - 3.12 (m, 1H, CHH), 4.03 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Etil Acetat (5%)), 4.17 - 4.39 (m, 1H, CHH), 4.38 - 4.69 (m, 1H, CHH), 5.13 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.33 (dd, J = 7.8, 10.5 Hz, 2H, Ar), 7.41 - 7.59 (m, 1H, Ar), 7.75 (q, J = 8.3 Hz, 4H, Ar), 10.99 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 31.16, 45.03, 51.56, 68.58, 114.94, 115.47, 124.16 (q, J = 270.8 Hz), 125.33 (q, J = 3.8 Hz), 128.01, 128.41 (q, J = 31.5 Hz), 129.84, 129.96, 133.39, 141.52, 153.17, 167.91, 170.96, 172.81; LCMS MH = 419; Anal. izrač. za C21H17N2O4F3 0.2 H2O: C, 59.77, H, 4.16, N, 6.64; Pronađeno: C, 59.66, H, 4.12, N, 6.52.
5.1663-[4-(3-BROMO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0769]
[0770] Faza 1: tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (300 mg, 0.897 mmol,), N,N-diizopropiletilamin (157 µL, 0.897 mmol), i K2CO3 (124 mg, 0.897 mmol) su suspendovani u DMF (5 mL). Nakon 10 minuta, 1-bromo-3-bromometil-benzen (224 mg, 0.897 mmol) dodat je i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Uklanjanje DMF u vakuumu dao je ostatak koji je podeljen između EtOAc i 0.2 N vodene HCl. EtOAc sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo 450 mg tert-butil estra 2-[4-(3-bromo-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlo braon ulje. LCMS MH = 503, 505. Ulje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0771] Faza 2: Rastvoru tert-butil estra 2-[4-(3-bromo-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline (450 mg) u dihlorometanu (5 mL), dodat je TFA (1.5 mL), i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata (LCMS je pokazao da je završeno uklanjanje zaštite).
Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i dobijena čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa Et2O a onda je sakupljen filtracijom. Sušenje čvrste supstance u vakuumu obezbedilo je 400 mg 2-[4-(3-bromo-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlo braon čvrste supstance. Ovaj materijal je primenjen bez daljeg prečišćavanja.
[0772] Faza 3: Rastvoru 2-[4-(3-bromo-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline (400 mg, 0.897 mmol, pretpostavljajući teoretski prinos iz prethodne faze) u DMF (5 mL), dodat je CDI (145 mg, 0.897 mmol). Reakciona mešavina je zagrejana do 70°C i mešana preko noći. Nakon 21 sat, katalitički DMAP dodat je, praćeno još jedan ekvivalentom CDI. Mešavina je mešana na 80°C tokom dodatnih 15 sati. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i sirovi proizvod je istaložen dodavanjem 0.2 N vodene HCl. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa velikom količinom vode, i osušena u vakuumu da bi se dobilo 150 mg sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je rastvoren u DMF i prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-[4-(3-bromo-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 21 % kombinovan prinos za fazu 1 i fazu 2): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.59 min (95.5%); mp: 238-240 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89-2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.28 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.26 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.42 (m, 3H, Ar), 7.45 - 7.59 (m, 3H, Ar), 7.70 (d, J = 1.7 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.26, 31.09, 45.00, 51.51, 68.48, 114.87, 115.34, 121.61, 126.52, 129.75, 129.88, 130.15, 130.61, 130.74, 133.30, 139.36, 153.15, 167.86, 170.88, 172.74; LCMS MH = 429, 431; Anal. izrač. za C20H17N2O4+ 0.8 H2O: C, 54.14; H, 4.23; N, 6.31; Br, 18.01. Pronađeno: C, 53.92; H, 3.88; N, 6.32; Br, 18.16.
5.1674-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)-N,N-DIMETILBENZEN SULFONAMID (referentni primer)
[0773]
[0774] Faza 1: Rastvoru 4-(N,N-dimetilsulfamoil)benzojeve kiseline (1 g, 4.36 mmol) u THF (10 mL), je lagano dodat boran rastvor u THF (1M, 8.72 mL, 8.72 mmol), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem vode (1 mL) u kapima, a onda je dodato 30 mL vode. Mešavina je zasićena sa viškom kalijum karbonata i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 40 mL), a kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4. Rastvarač je uparen pod vakuumom da bi se dobio 4-(hidroksimetil)-N,N-dimetilbenzensulfonamid (700 mg, 75% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.59 (s, 6H, CH3, CH3), 4.61 (d, J = 5.9 Hz, 2H, CH2), 5.44 (s, 1H, OH), 7.54 - 7.62 (m, 2H, Ar), 7.67 - 7.75 (m, 2H, Ar).
[0775] Faza 2: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (3 mmol/g, 0.69 g, 2.06 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-opentanoata (300mg, 1.03 mmol) u THF (10 mL) na 0°C, praćeno diizopropil azodikarboksilatom (416 mg, 2.06 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je 4-(hidroksimetil)-N,N-dimetilbenzensulfonamid (443mg, 2.06 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana etil acetatom (7 x 10 mL).
Kombinovani filtrat je ispran vodom i slanim rastvorom, rastvarač je uparen, i sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 4% u 40 min) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-(N,N-dimetilsulfamoil)benziloks-i)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (340 mg, 68% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93-2.36 (m, 4H, CH2, CH2), 2.62 (s, 6H, CH3, CH3), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.40 - 4.66 (m, 2H, CH2), 4.75 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.39 (s, 2H, CH2), 7.21 (s, 1H, NHH), 7.27 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.53 (m, 1H, Ar), 7.60 (s, 1H, NHH), 7.73 - 7.85 (m, 4H, Ar).
[0776] Faza 3: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(N,N-dimetilsulfamoil)benziloks-i)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (573 mg, 1.17 mmol) u THF (20 mL), dodat je kalijum tert-butoksid (131 mg, 1mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 4 sata. Dodatni kalijum t-butoksid (40 mg, 0.4 mmol) dodat je, a mešavina je ddržavana mešanjem tokom 2 sata. Reakcija je ugašena dodavanjem vodene HCl (1N, 2mL), a voda (50 mL) je dodata u kapima. Talog koji je obrazovan korigovan je filtracijom, i sirovi proizvod je resuspendovan acetonitrilom (10 mL) da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-N,N-dimetilbenzensulfonamid kao bela čvrsta supstanca (260 mg, 48% prinos); mp: 261-263 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.10 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.56 (d, J = 3.4 Hz, 1H, CHH), 2.62 (s, 6H, CH3, CH3), 2.82 - 3.03 (m, 1H, CHH), 4.25 - 4.56 (m, 2H, CH2), 5.13 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.39 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.45 - 7.57 (m, 1H, Ar), 7.73 - 7.83 (m, 4H, Ar), 10.99 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 31.15, 37.51, 45.04, 51.56, 68.56, 114.99, 115.54, 127.71, 127.95, 129.87, 129.96, 133.37, 134.20, 142.02, 153.19, 167.94, 170.96, 172.84; LCMS MH = 458; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 40/60 acetonitril/0.1% H3PO4 tR = 3.61 (98.56%); Anal. Izrač. za C22H23N3O6S 0.5 H2O: C, 56.64; H, 5.19; N, 9.01; Pronađeno: C, 56.62; H, 5.18; N, 8.89.
5.1683-[4-(3-AMINO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0777]
[0778] U gustu suspenziju 3-(4-(3-nitrobenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0.759 mmol) u etanolu (10 mL), dodat je rastvor natrijum ditionita (661 mg, 3.79 mmol) u vodi (5 mL). Mešavina je mešana tokom 20 miuta na sobnoj temperaturi zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u DMF, rastvor je prenet putem špric filtera, a filtrat injektovan na kolonu C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 60% acetonitril preko 20 min), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-[4-(3-amino-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion (10 mg, 3% prinos) kao bela čvrsta supstanca: HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.17 min (95.6%); mp; 109-113 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.87 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.00 - 5.20 (m, 5H, CH2, NH2, CH), 6.46 - 6.55 (m, 1H, Ar), 6.59 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar), 6.62 - 6.70 (m, 1H, Ar), 7.01 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.30 (dd, J = 7.6, 9.8 Hz, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 1H, Ar), 10.94 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.21, 45.10, 51.58, 69.95, 112.74, 113.49, 114.84, 114.98, 115.08, 128.93, 129.78, 129.87, 133.26, 137.14, 148.80, 153.60, 168.02, 170.99, 172.83; LCMS MH = 366; Anal. izrač. za C20H19N3O4: C, 65.74; H, 5.24 N, 11.50. Pronađeno: C, 58.81; H, 5.20; N, 9.99.
5.1693-[4-(3,4-DIFLUORO-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0780] Faza 1: rastvor metil estra 3-acetoksi-2-bromometil-benzojeve kiseline (1.0 g, 3.48 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je izmešanoj suspenziji tert-butil 4,5-diamino-5-oksopentanoat hidrohlorid i N,N-diizopropiletilamina (1.4 mL, 7.66 mmol) u acetonitrilu (20 mL). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 sata na sobnoj temperaturi. Sirćetna kiselina (0.5 mL) dodata je i temperatura je podignuta do 60°C. Nakon 3 dana, dodata je voda (2 mL) reakcionoj mešavini, temperatura je podignuta na 80 °C, a mešavina mešan tokom još jedno 3 dana. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature. Piperidin (1 mL) je dodat, i mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 6 sati na sobnoj temperaturi. Mešavina je koncentrovana u vakuumu radi uklanjanja uglavnom isparljivih supstanci. Rezultujuće viskozno ulje podeljeno je između EtOAc (200 mL) i 0.2 N HCl (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (150 mL). EtOAc slojevi su kombinovani, osušen (Na2SO4), i koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobilo 1.16 g sirovog proizvoda kao beličasta pena. Prečišćavanje ove pene na SiO2“flash” koloni (CombiFlash, 40 g SiO2unapred upakovana kolona, EtOAc/Heksani gradijent) dalo je tert-butil estar 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao bela pena (740 mg , 63% prinos). LCMS MH = 335.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.24 -1.37 (m, 9H, tBu), 1.81 - 2.06 (m, 3H, CHH, CH2), 2.08 - 2.27 (m, 1H, CHH), 4.32 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.49 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.71 (dd, J = 4.1, 10.1 Hz, 1H, CH), 6.88 - 7.04 (m, 1H, Ar), 7.08 - 7.23 (m, 2H, Ar, NH), 7.26 - 7.40 (m, 1H, Ar), 7.55 (br. s., 1H, NH), 10.02 (s, 1H, OH).
[0781] Faza 2: Gusta suspenzija tert-butil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (250 mg, 0.748 mmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 0.748 mmol), i Cs2CO3 (244 mg, 0.748 mmol) u DMF (5 mL) mešana je tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi, praćeno dodavanjem 4-hlorometil-1,2-difluoro-benzena (122 mg, 0.748 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 sati zatim koncentrovana u vakuumu da bi se dobio sirovi tert-butil estar 4-karbamoil-4-[4-(3,4-difluoro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao svetlo braon čvrsta supstanca (344 mg). Ova čvrsta supstanca sipana je u suvi THF (5 mL), i dodat je čvrsti KOtBu (84 mg, 0.747 mmol) u jednoj porciji uz mešanje. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta, zatim je reakcija ugašena dodavanjem 1 N vodene HCl (15 mL). Dobijena gusta suspenzija je razblažena dalje vodom, i čvrsta supstanca sakupljena filtracijom, isprana dodatnom vodom, i osušena sukcijom na filter levku. Čvrsta supstanca je rastvorena u minimalno DMF i prečišćena injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-[4-(3,4-difluoro-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion (140 mg, 48% prinos) kao bela čvrsta supstanca: HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 acetonitril/0.1% H3PO4, 5.53 min (97.9%); mp: 228-230 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90-2.08 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.41 (m, 3H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 2H, Ar), 7.59 (ddd, J = 1.9, 8.0, 11.4 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 45.04, 51.56, 68.17, 114.93, 115.44, 116.76 (d, JC-F= 17.6 Hz), 117.52 (d, JC-F= 17.6 Hz), 124.52 (dd, JC-F= 3.3, 6.6 Hz), 129.81, 130.00, 133.36, 134.42 (dd, JC-F = 3.3, 5.5 Hz), 149.12 (dd, JC-F = 23.2, 245.3 Hz), 149.44 (dd, JC-F = 23.2, 245.8 Hz), 153.14, 167.93, 170.95, 172.81; LCMS MH = 387; Anal. izrač. za C20H16F2N2O4 0.7 H2O: C, 60.21; H, 4.39; N, 7.00; F, 9.52. Pronađeno: C, 60.13; H, 4.09; N, 6.91; F, 9.45.
5.1703-(4-(4-ETILBENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0782]
[0783] Mešavini trifenilfosfina na polimernom nosaču (0.75 g, 2.26 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.30 g, 1.03 mmol) u THF (20 mL) ohlađena do 0°C, dodat je u kapima DIAD (0.45 ml, 2.26 mmol).4-Etilbenzil alkohol (0.16 mL, 1.23 mmol) je zatim dodat. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata a onda na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je potom filtrirana kroz celit. Celit je opran etil acetatom (100 mL). Faza etil acetata je isprana vodom, osušena sa MgSO4, i rastvarač je uparen. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO flash (kolona od 40 g, gradijent EtOAc/Heksani 50/50 do 100/0 u 20 min, eluiranje proizvoda pri 100/0). Rastvarač je uparen i metil 5-amino-4-(4-(4-etilbenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat je dobijen kao lepljiva, transparentna čvrsta supstanca (0.20 g, 48% prinos). U tu čvrstu supstancu umešanu u THF (10 mL) i ohlađenu do 0°C, dodat je KOtBu (0.05 g, 0.46 mmol), i reakciona mešavina je mešana tokom 3 sata. Sirćetna kiselina (1 mL) dodata je reakcionoj mešavini. Etil acetat (100 mL) dodat je, i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), i osušen (MgSO4). Nakon filtracije agensa za sušenje, rastvarač je koncentrovan da bi se dobio 3-(4-(4-etilbenziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.12 g, 69% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent: acetonitril/0.1% H3PO4, 10/90 do 90/10 u 15 min, 90/10 tokom 5 min, 12.96 min (98.16%); mp: 158-160 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.17 (t, J = 7.6 Hz, 3H, CH3), 1.82-2.13 (m, 1H, CHH), 2.31 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.72 (m, 3H, CHH, CH2), 2.78 - 3.10 (m, 1H, CHH), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.83 - 7.95 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 4H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 15.58, 22.33, 27.85, 31.18, 45.06, 51.55, 69.44, 114.96, 115.15, 127.82, 127.86, 129.77, 129.93, 133.27, 133.82, 143.59, 153.48, 167.99, 170.96, 172.81; LCMS MH = 379; Anal. Izrač. za C22H22N2O4 0.7 H2O: C, 67.57; H, 6.03; N, 7.16; Pronađeno: C, 67.40; H, 5.87; N, 7.12.
5.1713-[4-(4-HIDROKSIMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0784]
[0785] Faza 1: Gusta suspenzija tert-butil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (1.5 g, 4.49 mmol), N,N-diizopropiletilamin (784 µl, 4.49 mmol), i K2CO3(620 mg, 4.49 mmol) u DMF (15 mL) je mešana tokom 5 minuta na sobnoj temperaturi, praćeno dodavanjem (4-hlorometil-fenil)-metanola (902 mg, 4.49 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 sati zatim zagrejana do 70°C tokom 3 sata. Piperidin (800 µl) je dodat mešavini da bi se sakupio neiskorišćeni (4-hlorometil-fenil)-metanol. Mešavina je mešana tokom dodatnih 18 sati na 70°C.
Mešavina je razblažena vodom (50 mL) i EtOAc (200 mL). pH vodenog rastvora podešena je na 4 primenom 1 N HCl, i faze su razdvojene u levku za razdvajanje. Vodeni sloj je zasićen sa NaCl i ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (200 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobilo 3.5 g svetlo braon ulja. Deo ovog ulja (2.1 g) je prečišćeno na SiO2“flash” koloni (CombiFlash, 80 g SiO2unapred upakovana kolona, MeOH/dihlorometan gradijent) da bi se dobio tert-butil estar 4-karbamoil-2-[4-(4-hidroksimetilbenziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao bela pena (1.1 g, 90% prinos, baziran na prečišćenom delu):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, tBu), 2.00 - 2.13 (m, 3H, CHH, CH2), 2.13 - 2.31 (m, 1H, CHH), 4.41 (s, 2H, CH2), 4.50 (d, J = 5.7 Hz, 2H, CH2), 4.69 (dd, J = 4.6, 10.3 Hz, 1H, CH), 5.19 (t, J = 5.7 Hz, 1H, OH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.75 (br. s., 1H, NH), 7.22 (br. s., 1H, NH), 7.25-7.37 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.53 (m, 3H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.69, 27.56, 31.50, 44.78, 54.08, 62.60, 69.45, 81.42, 114.97, 115.18, 126.52, 127.57, 129.71, 130.03, 133.27, 134.86, 142.40, 153.42, 168.12, 169.85, 172.94; LCMS MH = 455.
[0786] Faza 2: KOtBu (1.1 mL, 1.1 mmol, 1 M u THF) dodat je pomoću šprica u umešanu mešavinu tertbutil estra 4-karbamoil-2-[4-(4-hidroksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (500 mg, 1.1 mmol) u TNF (20 mL). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata a onda je dodato još jedno 100 µl KOtBu. Nakon 6 sati, reakciona mešavina je ugašena transferovanjem u 1 N vodeni HCl rastvor (10 mL). Mešavina je razblažena sa EtOAc (150 mL) i 1 N NaHCO3 (35 mL). Vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (100 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani na rotacionom isparivaču da bi se dobio sirovi proizvod kao čvrsta supstanca (300 mg). Deo čvrste supstance (∼127 mg) je rastvoren u minimalno DMF i prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 60% acetonitril preko 20 min), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su ukombinovane, koncentrovane u vakuumu, i ostatak vode je liofilizovan da bi se dobio 3-[4-(4-hidroksimetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (115 mg, 55% prinos, baziran na prečišćenom delu): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 acetonitril/0.1% H3PO4, 3.30 min (97.2%); mp: 220-222 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 2.99 (m, 1H, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.41 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.50 (d, J = 5.5 Hz, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.18 (t, J = 5.8 Hz, 1H, OH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.18, 45.07, 51.56, 62.60, 69.42, 115.01, 115.18, 126.49, 127.52, 129.76, 129.96, 133.28, 134.87, 142.38, 153.43, 167.99, 170.96, 172.81. LCMS MH = 381; Anal. izrač. za C21H20N2O5+ 0.3 H2O: C, 65.38; H, 5.38; N, 7.26. Pronađeno: C, 65.44; H, 5.43; N, 7.29.
5.172 SO 3-[4-(4-DIETILAMINOMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION MRAVLJE KISELINE (referentni primer)
[0787]
[0788] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.50 g, 1.72 mmol) u DMF (10mL), su dodati kalijum karbonat (0.24 g, 1.72 mmol) i (4-bromometil-benzil)-dietil-amin (0.88 g, 2.42 mmol) u DMF (3 mL). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zagrejana na 70°C tokom tri sata. Mešavina je prečišćena preparativnom HPLC da bi se dobila so 3-[4-(4-dietilaminometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion mravlje kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (0.15 g, 20% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 15/85 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 7.31 min (95.5%); mp: 210-212oC; 1H NMR (DMSO-d6) δ 0.98 (t, J = 7.1 Hz, 6H, 2CH3), 1.92 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.49 (m, 5H, 2CH2, CH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.56 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (br. s., 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 11.95, 22.83, 31.68, 45.59, 46.52, 52.06, 56.93, 69.93, 115.46, 115.70, 128.07, 129.14, 130.29, 130.42, 133.77, 135.48, 139.85, 153.98, 168.49, 171.45, 173.31; LCMS MH = 436; Anal. Izrač. za C25H29N3O42.5HCOOH.: C, 59.99; H, 6.22; N, 7.63; Pronađeno: C, 51.24; H, 5.88; N, 6.38.
5.1733-[4-(4-ETILAMINOMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0789]
[0790] Etil amin (4.24 mL, 8.48 mmol, 2.0 M u THF) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.73 g, 1.70 mmol) u acetonitrilu (15 mL) na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je koncentrovana i zamenjena u DMF (10 mL). Rastvoru je dodat kalijum karbonat (0.23 g, 1.70 mmol), a mešavina je zagrevana na 80°C tokom tri sata. Rastvarač je uparen a onda mešan u 2 M HCl u etru (5 mL) tokom jednog sata, filtriran i mešan u metilen hloridu (8 mL) tokom dva sata, filtriran ponovo i osušen u vakuum sušnici da bi se dobio 3-[4-(4-etilaminometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (0.126 g, 29% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.89 min (93.2%); mp: 273-275oC; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 3H, CH2, CHH), 4.11 (t, J = 5.9 Hz, 2H, CH2), 4.22 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.63 (m, 5H, Ar), 9.20 (br. s., 2H, NH2Cl), 10.98 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 10.83, 22.38, 31.21, 41.63, 45.12, 49.11, 51.62, 69.01, 115.03, 115.33, 127.80, 129.81, 130.00, 130.10, 131.83, 133.35, 137.37, 153.30, 167.98, 170.98, 172.85; LCMS MH = 408; Anal. Izrač. za C23H25N3O4 HCl 0.5 H2O: C, 60.99; H, 6.01; N, 9.28; Cl, 7.83. Pronađeno: C, 60.65; H, 6.01; N, 9.12; Cl, 7.66.
5.1743-(4-(4-((HLOROAMINO)METIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2.6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0792] Faza 1: Mešavini trifenilfosfina na polimernom nosaču (0.93 g, 3.54 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.47 g, 1.61 mmol) u THF (20 mL) ohlađeni do 0°C, dodat je u kapima DIAD (0.70 ml, 3.54 mmol). Tert-butil estar 4-Hidroksimetil-benzil)-karbaminske kiseline (0.46 g, 1.93 mmol) je zatim dodat. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata a onda na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je potom filtrirana kroz celit. Celit je opran etil acetatom (100 mL). Rastvarač je uparen. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO flash (kolona od 40 g, gradijent EtOAc/Heksani 50/50 do 100/0 u 30 min, eluiranje proizvoda na 80/20). Rastvarač je uparen i metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat je dobijen kao lepljiva, transparentna čvrsta supstanca (0.34 g, 41% prinos). U tu čvrstu supstancu umešanu u THF (15 mL) i ohlađenu do 0 °C, dodat je KOtBu (0.07 g, 0.65 mmol) i reakciona mešavina je mešana tokom 1.5 sati. Sirćetna kiselina (1 mL) dodata je reakcionoj mešavini. Etil acetat (100 mL) dodat je, i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), i osušen (MgSO4). Nakon filtracije agensa za sušenje, rastvarač je koncentrovan da bi se dobio tert-butil 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzilkarbamat kao svetlo ružičasta čvrsta supstanca (0.25 g, 81% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent: acetonitril/0.1% H3PO4, 10/90 do 90/10 u 15 min, 90/10 tokom 5 min, 12.06 min (98.12%).
[0793] Faza 2: Rastvoru tert-butil 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzilkarbamat (0.10 g, 0.2 mmol) u THF (40 mL), je gasiran HCl tokom 15 minuta. Rastvarač je zatim uparen. Voda (10 mL) je dodata ostatku, a zatim filtriran. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je mešan u etru preko noći. Čvrsta supstanca je potom filtrirana i osušena u pećnici na 40°C da bi se dobio 3-(4-(4-((hloroamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2.6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (0.08 g, 94% prinos); mp: 198-200 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.86 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.69 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.05 (m, 1H, CHH), 4.02 (q, J = 5.6 Hz, 2H, CH2), 4.27 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.21 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.73 (m, 4H, Ar), 8.45 (br. s., 3H, NH3Cl), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 41.85, 45.09, 51.59, 69.01, 115.00, 115.28, 127.77, 129.06, 129.77, 129.97, 133.33, 133.75, 136.87, 153.26, 167.96, 170.96, 172.83; LCMS MH = 380; Anal. Izrač. za C21H22N3O4Cl 1.5 H2O: C, 56.95; H, 5.69; N, 9.49; Pronađeno: C, 56.81; H, 5.61; N, 9.37.
5.1753-(4-(4-((2-METOKSIETILAMINO)METIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION FORMAT (referentni primer)
[0794]
[0795] Faza 1: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250 mg, 0.529 mmol) u acetonitrilu (10 mL), su dodati 2-metoksietanamin (0.068 ml, 0.793 mmol) i DIEA (0.138 ml, 0.793 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 50°C tokom 1,5 sata, zatim je dodat dodatni 2-metoksietanamin (150 µl). Temperatura je podignuta na 60°C i mešavina je mešana tokom još jedno 2.5 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu primenom rotacionog isparivača da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-(4-((2-metoksietilamino)metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bela pena (295 mg, pretpostavljeni teorijski prinos). LCMS MH = 512. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0796] Faza 2: tert-butil 5-amino-2-(4-(4-((2-metoksietilamino)metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.528 mmol, pretpostavljeni teorijski prinos iz prethodne faze) sipan je u suvi THF (5 mL). Izmešanoj suspenziji na sobnoj temperaturi dodat je KOtBu (0.581 ml, 0.581 mmol, 1.0 M u THF) u kapima. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, a onda je dodat dodatni KOtBu (176 µL). Mešavina je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim tretirana sa dodatnim KOtBu (176 µL). Nakon 6 sati, dodata je finalna porcija KOtBu, a mešavina je mešana tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ugašena transferovanjem u 2 M rastvor mravlje kiseline u MeCN u ledenom kupatilu. Mešavina je koncentrovana u vakuumu primenom rotacionog isparivača da bi se dobilo ulje koje je rastvoreno u minimalnom DMF i prečišćeno injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 30% MeCN preko 12 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu, a ostatak vode je liofilizovan da bi se dobio 3-(4-(4-((2-metoksietilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion format kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 35% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 5% grad 95% u 10 min, acetonitril/0.1% H3PO4, 5.64 min (95.6%); mp: 200-202 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.65 (t, J = 5.6 Hz, 2H, CH2), 2.82 -3.01 (m, 1H, CHH), 3.23 (s, 3H, OCH3), 3.40 (t, J = 5.7 Hz, 2H, CH2O), 3.73 (s, 2H, CH2N), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.01 - 5.16 (m, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2O), 7.23-7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.55 (m, 3H, Ar), 8.07 - 8.55 (m, 1H, HCOOH), 10.39 - 11.40 (m, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.31, 31.18, 45.07, 47.62, 51.56, 52.33, 57.95, 69.41, 71.33, 114.97, 115.18, 127.61, 128.09, 129.77, 129.95, 133.28, 134.92, 140.17, 153.45, 167.99, 170.95, 172.81; LCMS MH = 438; Anal. izrač. za C24H27N3O5·HCOOH 2.8 H2O: C, 56.24; H, 6.53; N, 7.87. Pronađeno: C, 56.13; H, 6.18; N, 7.75.
5.1763-(4-{4-[(METIL-FENIL-AMINO)-METIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0797]
[0798] N-metilanilin (0.55 ml, 5.00 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.72 g, 1.67 mmol) u DMF (15 ml).
Mešavina je mešana na 50°C tokom dva dana. Mešavini je dodat kalijum karbonat (0.23 g, 1.67 mmol), a mešavina je zagrevana na 70°C preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i ostatak je prečišćen na koloni sa silikagelom (CH2Cl2/EtOAc gradijent od 5% EtOAc u CH2Cl2to 50%) da bi se dobio 3-(4-{4-[(Metil-fenil-amino)-metil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.29 g, 37% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4): 6.20 min (98.4%); mp: 201-203°C.1H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 1.98 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.82-2.97 (m, 1H, CHH), 3.01 (s, 3H, CH3), 4.19 -4.45 (m, 2H, CH2), 4.57 (s, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 6.60 (t, J = 7.3 Hz, 1H, Ar), 6.70 (dd, J = 0.9, 8.9 Hz, 2H, Ar), 7.09 - 7.18 (m, 2H, Ar), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.29 -7.36 (m, 2H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.20, 38.60, 45.09, 51.56, 55.05, 69.36, 111.99, 114.92, 115.21, 115.84, 126.85, 127.97, 128.95, 129.81, 129.95, 133.29, 134.95, 139.02, 148.97, 153.48, 168.01, 170.96, 172.83; LCMS MH = 470; Anal. Izrač. za C28H27N3O4 0.3 H2O: C, 70.81; H, 5.86; N, 8.85; Pronađeno: C, 70.51; H, 5.66; N, 8.71.
5.1773-(4-(4-((BIS(2-METOKSIETIL)AMINO)METIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0799]
[0800] Faza 1: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (250 mg, 0.529 mmol) u acetonitrilu (10 mL), su dodati bis(2-metoksietil)amin (106 mg, 0.793 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.138 ml, 0.793 mmol). Dobijena mešavina je mešana na 60°C tokom 2 dana. Mešavina je koncentrovana u vakuumu primenom rotacionog isparivača i dalje osušena u vakuum sušnici preko noći da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-(4-((bis(2-metoksietil)amino) metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao ćilibarno ulje (320 mg). Ulje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0801] Faza 2: tert-butil 5-amino-2-(4-(4-((bis(2-metoksietil)amino)metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.528 mmol, pretpostavljeni teorijski prinos iz prethodne faze) sipan je u suvi THF (5 mL). Izmešanoj suspenziji na sobnoj temperaturi, dodat je KOtBu (0.581 ml, 0.581 mmol, 1.0 M u THF) u kapima. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati, zatim je reakciji dodat dodatni KOtBu (200 µL, 0.2 mmol), a mešavina mešana tokom 3 sata. Dodata je još jedna porcija KOtBu (400 µL, 0.4 mmol)(iskorišćeno ukupnio 1.18 mmol KOtBu). Nakon oko 15 minuta, LCMS je pokazao da je ciklizacija završena. Reakciona mešavina je ohlađena na 0°C i ugašena sa mravljom kiselinom (500 µL) i koncentrovan primenom rotacionog isparivača da bi se dobio uljani ostatak, koji je rastvoren u H2O i DMF (2mL/6mL) i filtriran na špric filteru (0.2 µ polipropilen). Filtrat je prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 30% MeCN preko 12 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu, a ostatak vode je liofilizovan da bi se dobio 3-(4-(4-((bis(2-metoksietil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (110 mg, 42% prinos za fazu 1 i fazu 2): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 acetonitril/0.1% H3PO4, 3.22 min (95.4%); mp: 105-107 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89-2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.60 (m, 1H, CHH), 2.62 (t, J = 6.1 Hz, 4H, 2 x CH2), 2.80 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.20 (s, 6H, 2 x CH3), 3.39 (t, J = 6.1 Hz, 4H, 2 x CH2), 3.62 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2O), 7.28 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 45.07, 51.55, 52.99, 57.98, 58.52, 69.44, 70.57, 114.97, 115.18, 127.55, 128.52, 129.77, 129.93, 133.27, 134.95, 139.67, 153.48, 167.99, 170.95, 172.81; Anal. izrač. za C27H33N3O6· 0.7 HCOOH 2 H2O: C, 59.01; H, 6.86; N, 7.45. Pronađeno: C, 58.72; H, 6.49; N, 7.32.
5.178 TERT-BUTIL 3-(DIETILAMINO)PROPIL(4-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-IL OKSI)METIL)BENZIL)KARBAMAT (referentni primer)
[0802]
[0803] Faza 1: U bočicu sa okruglim dnom ubačen je metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (1.0 g, 2.321 mmol) u acetonitrilu (Zapremina: 30 ml) da bi se dobio bezbojan rastvor. Dodat je N1,N1-dietilpropan-1,3-diamin (0.907 g, 6.96 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko vikenda. Reakcija je koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijeno ulje je primenjeno u sledećoj fazi bez bilo kakvog prečišćavanja.
[0804] Faza 2: U CH2Cl2rastvor (30 mL) metil 5-amino-4-(4-(4-((3-(dietilamino)propilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.218 g, 2.32 mmol), dodat je BOC2O (2.70 ml, 11.61 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je koncentrovana i prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano metilen hloridom i metanol da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonil(3-(dietilamino)propil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao bistro ulje (500 mg, 35%).
[0805] Faza 3: U THF rastvor (20 mL) metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonil(3-(dietilamino)propil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 0.80 mmol), dodat je kalijum tert-butoksid (0.090 g, 0.80 mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta i ugašena dodavanjem 1N HCl (2mL) praćeno zasićenim NaHCO3 (15 mL) i EtOAc (30 mL). Mešavina je ekstrahovana i odvojena. Organski sloj je ispran slanim rastvorom i koncentrovan na rotacionom isparivaču. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom i eluirano sa CH2Cl2/MeOH da bi se dobio tert-butil 3-(dietilamino)propil(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)karbamat kao bela čvrsta supstanca (0.23 g, 49%). mp: 140-142 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 5.15 min (95%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.89 (t, J = 7.2 Hz, 6H, CH3, CH3), 1.29 - 1.47 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.48 - 1.62 (m, 2H, CH2), 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.29 (t, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 2.37 (q, J = 7.2 Hz, 4H, CH2, CH2), 2.42 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 -2.63 (m, 1H, CHH), 2.80 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.00 - 3.23 (m, 2H, CH2), 4.03 - 4.61 (m, 4H, CH2,CH2), 4.95 -5.18 (m, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.12 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.65 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.52, 28.01, 31.16, 45.06, 46.01, 49.58, 51.55, 69.29, 78.64, 114.94, 115.20, 127.29, 127.83, 129.77, 129.93, 133.28, 135.30, 138.66, 153.42, 167.99, 170.95, 172.81; LCMS MH = 593. Anal. izrač. za C33H44N4O6 0.1 H2O: C, 66.87; H, 7.49; N, 9.42; Pronađeno: C, 66.40; H, 7.43; N, 9.27.
5.179 TERT-BUTIL ESTAR [{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-AMINO]-SIRĆETNE KISELINE (referentni primer)
[0806]
[0807] Faza 1: U umešani bezbojan rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.18 g, 2.75 mmol) u acetonitrilu (15 ml), dodat je 2-morfolinoetanamin (1.08 ml, 8.24 mmol). Reakciona mešavina odmah pretvorena u svetlo zeleni rastvor. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je uparen da bi se dobilo svetlo zeleno ulje, koje nije dalje okarakterisano, a upotrebljeno je u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
[0808] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.442 g, 2.75 mmol) u dihlorometanu (15 ml), dodat je di-tertbutil dikarbonat (1.80 g, 8.25 mmol). Masa ograničavajuće SM procenjena je da je 1.44 g, što predstavlja teoretski prinos prethodne faze. Ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-{[tert-Butoksikarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao uljana čvrsta supstanca (0.88 g, 51 % tokom dve faze).
[0809] Faza 3: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.36 g, 0.58 mmol) u THF (10 ml) na 0°C, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.07 g, 0.58 mmol). Reakciona mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1 N HCl (2 mL) da bi se dobio bistar bezbojan rastvor.
Neutralizovan je zasićenim natrijum bikarbonatom (do pH = 7) da bi se dobila zamućena mešavina, koja je ekstrahovan etil acetatom (2x20mL). Faza etil acetata je koncentrovana i prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 5% u 30 min) da bi se dobio tert-butil estar [{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-sirćetne kiseline kao penasta bela čvrsta supstanca (0.21 g, 62% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.38 min (97.4%); mp: 110-112 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.49 (m, 9H, 3CH3), 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.25 - 2.39 (m, 6H, 3CH2), 2.44 (dd, J = 4.5, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.15 - 3.29 (m, 2H, CH2), 3.52 (t, J = 4.6 Hz, 4H, 2CH2), 4.19-4.49 (m, 4H, CH2, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.41 -7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.02, 31.21, 43.30, 45.09, 49.37, 50.05, 51.58, 53.33, 55.95, 56.39, 66.17, 69.32, 78.84, 115.00, 115.23, 127.39, 127.83, 129.78, 129.97, 133.31, 135.30, 138.56, 153.43, 155.02, 168.01, 170.96, 172.83 (2 dodatna pika u alkil regionu, mogucé od dva atoma alkila u blizini amidnih atoma azota usled rotamera); LCMS MH = 593; Anal. Izrač. za C32H40N4O7 0.1 H2O: C, 64.65; H, 6.82; N, 9.42. Pronađeno: C, 64.31; H, 6.82; N, 9.24.
5.180 N-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-N-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-FORMAMID (referentni primer)
[0810]
[0811] Faza 1: U umešanu bezbojan rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.18 g, 2.75 mmol) u acetonitrilu (15 ml), dodat je 2-morfolinoetanamin (1.08 ml, 8.24 mmol). Reakciona mešavina odmah pretvorena u svetlo zeleni rastvor. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcioni rastvor je uparen da bi se dobilo svetlo zeleno ulje, koje nije dalje okarakterisano, a upotrebljeno je u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
[0812] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.442 g, 2.75 mmol) u dihlorometanu (15 ml), dodat je di-tertbutil dikarbonat (1.80 g, 8.25 mmol). Masa ograničavajuće SM procenjena je da je 1.44 g, što predstavlja teoretski prinos prethodne faze. Ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio 4-[4-(4-{[tert-Butoksikarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline metil estar kao uljana čvrsta supstanca (0.88 g, 51 % prinos tokom dve faze).
[0813] Faza 3: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.36 g, 0.58 mmol) u THF (10 ml) na 0°C, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.07 g, 0.58 mmol). Reakciona mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena je sa 1 N HCl (2 mL) da bi se dobio bistar bezbojan rastvor.
Neutralizovan je zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 7) da bi se dobila zamućena mešavina, koja je ekstrahovana etil acetatom (2x20mL). Faza etil acetata je koncentrovana i prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 5% u 30 min) da bi se dobio [tert-butil estar {4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-sirćetne kiseline kao penasta čvrsta supstanca (0.213 g, 62% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.38 min (97.4%); mp: 110-112°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.49 (m, 9H, 3CH3), 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.25 - 2.39 (m, 6H, 3CH2), 2.44 (dd, J = 4.5, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.15 - 3.29 (m, 2H, CH2), 3.52 (t, J = 4.6 Hz, 4H, 2CH2), 4.19 - 4.49 (m, 4H, CH2, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.41 -7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.02, 31.21, 43.30, 45.09, 49.37, 50.05, 51.58, 53.33, 55.95, 56.39, 66.17, 69.32, 78.84, 115.00, 115.23, 127.39, 127.83, 129.78, 129.97, 133.31, 135.30, 138.56, 153.43, 155.02, 168.01, 170.96, 172.83 (2 dodatna pika u alkil regionu, mogucé od dva atoma alkila u blizini amidnih atoma azota usled rotamera); LCMS MH = 593; Anal. Izrač. za C32H40N4O7 0.1 H2O: C, 64.65; H, 6.82; N, 9.42. Pronađeno: C, 64.31; H, 6.82; N, 9.24.
[0814] Faza 5: Izmešanom rastvoru tert-butil 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil(2-morfolinoetil)karbamata (0.42 g, 0.71 mmol) u dihlorometanu (5 ml), dodat je 2M HCl/etar (4 ml). Beli talog je obrazovan gotovo odmah. Suspenzija je mešana preko noći i filtrirana da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je prečišćena pomoću prep HPLC da bi se dobilo bistro ulje (0.22 g, 58% prinos). Pronađeno je da je to mešavina željenog proizvoda (16% pomoću H NMR) i amida na benzil NH sa mravljom kiselinom (84% pomoću H NMR).
[0815] Faza 6: Izmešanoj mešavini 3-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.04 g, 0.08 mmol) u dihlorometanu (3 ml) na sobnoj temperaturi, dodat je etil format (6.04 µl, 0.075 mmol). Mešan je tokom jednog sata, i 0.12 mL etil formata dodato je i mešano tokom šest sati. Mešavina je uparena da bi se dobila bela čvrsta supstanca, u koju je dodat dietil etar (5 mL), mešan i uparen ponovo da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Mešan je u etil acetatu (2 mL) i uparen. Ponovljeno je dva dodatna puta (dodavanjem 2 mL EtOAc a onda uparena). Dobijena bela čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici preko noći da bi se dobio N-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-N-(2-morfolin-4-il-etil)-formamid kao bela čvrsta supstanca (0.16 g, 79% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.23 min (95.4%); mp: 216-218°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CH), 2.23 - 2.36 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CH), 2.53 - 2.66 (m, 1H, CH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CH), 3.20 (t, J = 6.6 Hz, 1H, CH), 3.27 (t, J = 6.0 Hz, 1H, CH), 3.51 (t, J = 4.6 Hz, 4H, ch2, ch2), 4.20 - 4.46 (m, 2H, CH2), 4.50 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.24 (d, J = 6.8 Hz, 2H, CH2), 7.24-7.37 (m, 4H, ArH), 7.41 - 7.54 (m, 3H, ArH), 8.15 (s, 0.5H, HCON, zbog rotamera), 8.29 (s, 0.5H, HCON, zbog rotamera), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 38.09, 43.31, 44.74, 45.08, 50.21, 51.58, 53.14, 55.02, 56.11, 66.11, 66.17, 69.29, 115.01, 115.24, 127.78, 127.85, 127.99, 129.79, 129.97, 133.31, 135.47, 136.05, 137.11, 137.36, 153.41, 163.00, 163.31, 167.99, 170.96, 172.83 (4 dodatna pika u aromatičnom regionu i 6 dodatnih pikova u alkil regionu zbog rotamera); LCMS MH = 521; Anal. Izrač. za C28H32N4O6 0.6 H2O: C, 63.29; H, 6.30; N, 10.54. Pronađeno: C, 63.06; H, 6.24; N, 10.35.
5.1814-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)-N-METIL-N-(2-MORFOLINOETIL)BENZAMID (referentni primer)
[0816]
[0817] Faza 1: 4-(hlorometil)benzoil hlorid (655 mg, 3.47 mmol) dodat je izmešanom rastvoru N-metil-2-morfolinoetanamin (500 mg, 3.47 mmol) u acetonitrilu(20 mL). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta i reakcija je završena. Reakciona mešavina je dodata pomoću NaHCO3 (aq. zas.30 mL). Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (40mLx3). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana da bi se dobio 4-hlorometil-N-metil-N(2-morfolin-4-il-etil)-benzamid kao svetlo braon ulje (1.0g, 97% sirovi prinos): LCMS MH = 297;<1>H NMR (DMSO-d6) d 2.07 - 2.25 (m, 2H, CH2), 2.32 - 2.47 (m, 2H, CH2), 2.82 - 3.01 (m, 3H, CH2), 3.31 (s, 3H, CH3), 3.39 - 3.67 (m, 5H, CH2), 4.80 (s, 2H, CH2), 7.39 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar).
[0818] Faza 2: Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (400 mg, 1.369 mmol), 4-(hlorometil)-N-metil-N-(2-morfolino etil)benzamida (406 mg, 1.369 mmol) i K2CO3(189 mg, 1.369 mmol) u DMF (10mL), dodat je DIPEA (0.239 ml, 1.369 mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana a onda zagrejana na 50°C tokom 24 sata pre dodavanja K2CO3(100 mg, 0.82 mmol) i zagrejan na 80°C tokom 3.5 sati. Reakciona mešavina kombinovan sa još još jednom serijom reakcije sa metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatom (100 mg, 0.34 mmol) je koncentrovana i prečišćena pomoću ISCO hromatografije da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-N-metil-N-(2-morfolinoetil) benzamid kao bela čvrsta supstanca (135mg, 15% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (acetonitril/0.1%H3PO4), 2.11min (98%); mp: 120-122°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96-2.09 (m, 1H, CHH), 2.28 - 2.37 (m, 4H, CH2, CH2), 2.39 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.44 - 2.52 (m, 2H, CH2), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.79 - 2.91 (m, 1H, CHH), 2.94 (s, 3H, CH3), 3.44 (t, J = 6.4 Hz, 2H, CH2), 3.52 (t, J = 4.7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4.32 (d, J = 17.2 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.2 Hz, 1H, CHH), 5.04 (dd, J = 5.3, 13.0 Hz, 1H, CHH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.57 (m, 7H, Ar), 10.62 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.16, 37.28, 43.50, 45.06, 51.56, 53.28, 55.04, 66.16, 69.03, 114.99, 115.32, 126.87, 127.29, 129.78, 129.96, 133.33, 136.39, 137.66, 153.32, 167.96, 170.95, 172.81; LCMS MH = 521; Anal. Izrač. za C28H32N4O6+ 1.3 H2O: C, 61.82; H, 6.41; N, 10.30; Pronađeno: C,61.73 ; H,6.29; N,10.11.
5.1824-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)-N-(2-(PIPERIDIN-1-IL)ETIL)BENZAMID (referentni primer)
[0819]
[0820] Faza 1: 4-(Hlorometil)benzoil hlorid (1.474 g, 7.80 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 2-(piperidin-1-il)etanamina (1 g, 7.80 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (50 mL) i ekstrahovan pomoću NaHCO3 (aq. zas.30 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2 x 25 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana da bi se dobio 4-hlorometil-N-(2-piperidin-1-il-etil)-benzamid kao svetlo braon čvrsta supstanca (2.46 g, 109% sirovi prinos): LCMS MH = 281;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.57 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2.30 - 2.46 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.26 - 3.45 (m, 2H, CH2), 4.80 (s, 2H, CH2), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.82 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.40 (t, J = 5.5 Hz, 1H, NH).
[0821] Faza 2: K2CO3 (284 mg, 2.053 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600 mg, 2.053 mmol) i 4-(hlorometil)-N-(2-(piperidin-1-il)etil)benzamida (576 mg, 2.053 mmol) u DMF (12 mL), nakon čega je usledilo dodavanje DIPEA (0.359 ml, 2.053 mmol) na sobnoj temperaturi. Rezultujući reakciona suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana i zagrejana na 50°C tokom 1 dana pre nego što je K2CO3(120mg, 0.87mmol) dodat reakciji. Dobijena reakciona mešavina je zagrevana na 80°C tokom 3 h i reakcija je završena.
Reakciona mešavina je zakišeljena sa HCl (1N, 8mL) do pH = 3. Bistar rastvor dodat je NaHCO3 (aq, zas., 8 mL) do pH = 8 pre dodavanja dihlorometana (40 mL) i slanog rastvora (10 mL). Mešavina je ekstrahovana i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanomom (30 mLx2). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobila bela čvrsta supstanca (220mg). Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu (2mL) i istaložena u EtOAc (10 mL). Čvrsta supstanca je filtrirana i osušena da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-N-(2-(piperidin-1-il)etil)benzamid kao bela čvrsta supstanca (205 mg, 19.8% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (acetonitril/0.1%H3PO4), 2.91min (97.6%); mp: 220-222 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.31 - 1.42 (m, 2H, CH2), 1.43 - 1.56 (m, 4H, CH2, CH2), 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.30 - 2.47 (m, 7H, CHH, CH2, CH2, CH2), 2.58 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.34 - 3.40 (m, 2H, CH2), 4.28 (d, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.56 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.84 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.38 (t, J = 5.6 Hz, 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 23.97, 25.53, 31.18, 36.92, 45.07, 51.58, 54.02, 54.93, 57.61, 68.97, 115.01, 115.35, 127.23, 129.78, 129.97, 133.34, 134.19, 139.64, 153.27, 165.73, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 505; C28H32N4O5 0.1 H2O 0.42CH2Cl2: C, 62.92; H, 6.14; N, 10.34; Pronađeno: C,62.85 ; H,6.26; N, 10.17.
5.1834-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-N-(3-MORFOLIN-4-IL-PROPIL)-BENZAMID (referentni primer)
[0823] Faza 1: 4-(Hlorometil)benzoil hlorid (1.311 g, 6.93 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 3-morfolinopropan-1-amina (1 g, 6.93 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi. Rezultujući reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (50 mL) i rastvor je ekstrahovan sa NaHCO3(aq. zas., 40 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2 x 20 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana da bi se dobio 4-hlorometil-N-(3-morfolin-4-ilpropil)-benzamid svetlo crvena bistra tečnost (2.23g, 117% sirovi prinos) koja je stavljena u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 297;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.68 (quin, J = 7.1 Hz, 2H, CH2), 2.24 -2.41 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.19 - 3.39 (m, 2H, CH2), 3.48 - 3.64 (m, 4H, CH2, CH2), 4.81 (s, 2H, M01), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.51 (t, J = 5.4 Hz, 1H, NH).
[0824] Faza 2: DIPEA (0.359 ml, 2.053 mmol) je dodat izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600 mg, 2.053 mmol), 4-(hlorometil)-N-(3-morfolinopropil)benzamida (640 mg, 2.155 mmol) i K2CO3 (284 mg, 2.053mmol) u DMF (12 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena mešavina je dovedena u reakciju na 50°C tokom 8 sati i sobnoj temperaturi tokom 2 dana pre dodavanja K2CO3(100 mg, 0.72 mmol). Mešavina je zagrevana na 80°C tokom 9 sati pre nego što je zaustavljena reakcija nastavljena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a filtrat je razblažen dihlorometanom (50 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan slanim rastvorom (15 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (25 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušen sa MgSO4. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio bistra čvrsta supstanca (480 mg), koja je pretvorena u prah u EtOAc (15 mL) i filtrirana da bi se dobio 4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksim etil]-N-(3-morfolin-4-ilpropil)-benzamid kao bela čvrsta supstanca (426 mg, 82% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 15/85, (acetonitril/0.1%H3PO4), 6.63min (99.9%); mp: 160-162°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.67 (quin, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 1.93 - 2.06 (m, 1H, CH2), 2.28 - 2.38 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2.39 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.23 - 3.31 (m, 2H, CH2), 3.56 (t, J = 4.7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.32 (dd, J = 7.6, 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.85 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.48 (t, J = 5.5 Hz, 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 25.91, 31.18, 37.71, 45.07, 51.58, 53.31, 56.02, 66.17, 68.98, 115.03, 115.35, 127.22, 127.28, 129.78, 129.97, 133.34, 134.22, 139.60, 153.27, 165.76, 167.94, 170.96, 172.81; LCMS MH = 521; Anal. Izrač. za C28H32N4O6 1.0 H2O: C, 62.44; H, 6.36; N, 10.40; Pronađeno: C, 62.29 ; H,6.41; N, 10.26.
5.1843-{4-[4-(IZOPROPILAMINO-METIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0825]
[0826] Faza 1: U acetonitril rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.160 mmol), dodat je propan-2-amin (0.593 ml, 6.96 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču i dobijeno ulje je upotrebljeno u sledećoj fazi direktno.
[0827] Faza 2: U THF suspenziju metil 5-amino-4-(4-(4-((izopropilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.45 g, 0.992 mmol), dodat je kalijum tert-butoksid (0.223 g, 1.984 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 5 minuta i ugašena dodavanjem 2 mL 1N HCl praćeno 10 mL zas. NaHCO3 i 20 mL CH2Cl2. Mešavina je ekstrahovana i odvojena. Organski sloj je koncentrovan na rotacionom isparivaču i dobijeno ulje je mešano sa estrom (20 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(izopropilaminometil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao žuta čvrsta supstanca (150 mg, 31%). mp: 165-167°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1% H3PO4u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.56 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.98 (d, J = 6.2 Hz, 6H, CH3,CH3), 1.88 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.63 - 2.74 (m, 1H, CH), 2.80 - 2.99 (m, 1H, CH), 3.68 (s, 2H, CH2), 4.15 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.62 (m, 7H, Ar),11.00-11.10 (broad, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 22.73, 31.21, 45.06, 47.08, 50.10, 51.57, 114.97, 115.16, 127.55, 127.92, 129.76, 129.94, 133.30, 134.56, 141.36, 153.46, 167.98, 171.08, 172.96. LCMS MH = 422. Anal. izrač. za C24H27N3O4+ 0.9 H2O: C, 65.86; H, 6.63; N, 9.60;
Pronađeno: C, 66.02; H, 6.46; N, 9.25.
5.1853-[4-(4-CIKLOHEKSILAMINOMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0828]
[0829] Faza 1: U acetonitril rastvor (10 mL) metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.160 mmol), dodat je cikloheksanamin (0.798 ml, 6.96 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijena mešavina je upotrebljena u sledećoj fazi direktno.
[0830] Faza 2: U THF rastvor (20 mL) metil 5-amino-4-(4-(4-((cikloheksilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.4 g, 0.810 mmol), dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.136 g, 1.216 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta. Mešavina je dodata 2 mL 1N HCl praćeno 10 mL zas. NaHCO3i 20 mL CH2Cl2. Mešavina je ekstrahovana i odvojena. Organski sloj je koncentrovan na rotacionom isparivaču i dobijena čvrsta supstanca je mešana sa etrom (20 mL) da bi dala 3-[4-(4-cikloheksilaminometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (250 mg, 47%). mp: 175-177°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.80min (95%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.94 - 1.20 (m, 4H, CH2, CH2,CHH), 1.42 -1.58 (m, 1H, CHH), 1.58 - 1.73 (m, 2H, CH2), 1.80-1.84 (m, 2H, CH2), 1.91 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.27 - 2.40 (m, 1H, CH), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.04 (m, 1H, CHH), 3.71 (s, 2H, CH2), 4.10 - 4.60 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.63 (m, 7H, Ar).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 24.34, 25.84, 31.14, 32.81, 45.04, 49.51, 51.53, 55.05, 69.43, 114.94, 115.12, 127.51, 127.83, 129.71, 129.90, 133.24, 134.50, 141.46, 153.43, 167.94, 170.90, 172.75 ; LCMS MH = 462. Anal. izrač. za C27H31N3O4 0.4 H2O: C, 69.18; H, 6.84; N, 8.96; Pronađeno: C, 69.02; H, 7.11; N, 8.79.
5.1863-(4-(4-((METIL(2-MORFOLINOETIL)AMINO) METIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0832] Faza 1: U acetonitril rastvor (10 mL) metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.160 mmol), dodat je N-metil-2-morfolinoetanamin (0.201 g, 1.392 mmol) praćeno DIPEA (0.243 ml, 1.392 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana i ekstrahovana sa CH2Cl2 (30 mL) i vodom (30 mL). Organski sloj je koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-{[metil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao penasta čvrsta supstanca. Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0833] Faza 2: U THF rastvor (20mL) metil 5-amino-4-(4-(4-((metil(2-morfolinoetil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.6g, 1.114 mmol), dodat je kalijum tert-butoksid (0.150 g, 1.337 mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 5 minuta. Reakciona mešavina je dodata 1N HCl (2 mL), praćeno zas. NaHCO3 (10 mL) i CH2Cl2 (30 mL). Mešavina je ekstrahovana i odvojena. Organski sloj je osušen iznad Na2SO4 i koncentrovan. Rezultujuća penasta čvrsta supstanca je prečišćena na koloni sa silikagelom i eluirana sa CH2Cl2/MeOH da bi se dobio 3-(4-(4-((metil(2-morfolinoetil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.34 g, 60%). mp: 193-195°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR 4.25 min (98%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.14 (s, 3H, CH3), 2.30-2.38 (br. s., 4H, CH2, CH2), 2.38-2.49 (br. s., 5H, CH2, CH2, CHH), 2.54-2.60 (m., 1H, CHH), 2.89 (m, 1H, CHH), 3.43 - 3.63 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.22 - 4.45 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.31-7.51 (m, 6H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 42.19, 45.10, 51.58, 53.63, 53.88, 56.11, 61.43, 66.16, 69.44, 115.01, 115.23, 127.58, 128.77, 129.79, 129.95,<133.31, 135.13, 139.01, 153.50, 168.01, 170.96, 172.83. Anal. izrač. za C>28<H>34<N>4<O>5<+ 0.4 H>2<O: C, 65.45; H,>6.83; N, 10.90; Pronađeno: C, 65.71; H, 7.11; N, 10.95.
5.1873-(4-{4-[(2-MORFOLIN-4-IL-ETILAMINO)-METIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION BIS HIDROHLORID (referentni primer)
[0835] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.18 g, 2.75 mmol) u acetonitrilu (15 ml), dodat je 2-morfolinoetanamin (1.08 ml, 8.24 mmol). Reakciona mešavina odmah je pretvorena u svetlo zeleni rastvor. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći a onda uparena da bi se dobilo svetlo zeleno ulje, koje nije dalje okarakterisano, a upotrebljeno je u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
[0836] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.44 g, 2.75 mmol) u dihlorometanu (15 ml), dodat je di-tert-butil dikarbonat (1.80 g, 8.25 mmol). Masa ograničavajuće SM procenjena je da je 1.44 g, što predstavlja teoretski prinos prethodne faze. Ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-[4-(4-{[tert-butoksikarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao uljana čvrsta supstanca (0.88 g, 51 % prinos tokom dve faze).
[0837] Faza 3: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butoksikarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.36 g, 0.58 mmol) u THF (10 ml) na 0°C, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.07 g, 0.58 mmol). Reakciona mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena je sa 1 N HCl (2 mL) da bi se dobio bistar bezbojan rastvor.
Neutralizovan je zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8) da bi se dobila zamućena mešavina, koja je ekstrahovana etil acetatom (2x20mL). Faza etil acetata je koncentrovana i prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 5% u 30 min) da bi se dobio tert-butil estar [{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-sirćetne kiseline kao penasta čvrsta supstanca (0.21 g, 62% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.38 min (97.4%); mp: 110-112°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.49 (m, 9H, 3CH3), 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.25 - 2.39 (m, 6H, 3CH2), 2.44 (dd, J = 4.5, 13.0 Hz, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.15 - 3.29 (m, 2H, CH2), 3.52 (t, J = 4.6 Hz, 4H, 2CH2), 4.19 - 4.49 (m, 4H, CH2, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.41 -7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.02, 31.21, 43.30, 45.09, 49.37, 50.05, 51.58, 53.33, 55.95, 56.39, 66.17, 69.32, 78.84, 115.00, 115.23, 127.39, 127.83, 129.78, 129.97, 133.31, 135.30, 138.56, 153.43, 155.02, 168.01, 170.96, 172.83 (2 dodatna pika u alkil regionu, mogucé od dva atoma alkila u blizini amidnih atoma azota usled rotamera); LCMS MH = 593; Anal. Izrač. za C32H40N4O7 0.1 H2O: C, 64.65; H, 6.82; N, 9.42. Pronađeno: C, 64.31; H, 6.82; N, 9.24.
[0838] Faza 4: U umešani rastvor tert-butil 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil(2-morfolinoetil)karbamata (0.27 g, 0.45 mmol) u dihlorometanu (3 ml) dodat je 2M HCl/etar (2.5 ml). Beli talog je obrazovan gotovo odmah. Mešan je na sobnoj temperaturi preko noći i potom filtriran da bi se dobio 3-(4- {4-[(2-Morfolin-4-il-etilamino)-metil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion dva hidrohlorid kao žuta čvrsta supstanca (176 mg, 74% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 05/95 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.89 min (95.4%); mp: 258-260°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.44 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.03 - 3.23 (m, 2H, CH2), 3.47 (br. s., 6H, CH2, CH2, CH2), 3.80 (br. s., 2H, CH2), 3.92 - 4.10 (m, 2H, CH2), 4.15 - 4.51 (m, 4H, CH2, CH2), 5.12 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.30 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.53 - 7.65 (m, 4H, ArH), 9.43 - 9.67 (br.s, 1.3H, NH ili HCl), 10.97 (s, 1H, NH), 11.06 - 11.23 (br.s, 0.6H, NH ili HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.22, 40.67, 45.15, 49.89, 51.62, 52.06, 54.93, 63.28, 69.03, 115.01, 115.33, 127.78, 129.81, 130.00, 130.17, 131.44, 133.35, 137.48, 153.30, 167.98, 170.96, 172.85; LCMS MH = 493; Anal. Izrač. za C27H32N4O5.2HCl: 1.1 H2O, 0.1CH2Cl2: C, 54.82; H, 6.18; N, 9.44; Cl, 13.13; Pronađeno: C, 54.56; H, 6.04; N, 9.31; Cl, 12.82.
5.1883-(4-{4-[(2-HIDROKSI-ETILAMINO)-METIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0839]
[0840] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoatu (0.52 g, 1.21 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi, su dodati 2-aminoetanol (0.15 ml, 2.41 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.60 ml, 3.62 mmol). Reakciona mešavina je zagrevana na 40°C preko noći i uparena u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je umešano sa metilen hloridom (40mL), isprano vodom (3x20mL) i upareno do bistrog ulja (0.61 g, 111% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0841] Faza 2: Izmešanoj mešavini metil 5-amino-4-(4-(4-((2-hidroksietilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.61 g, 1.34 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.65 g, 4.91 mmol), a mešavina je mešana tokom deset minuta. Mešavina je brzo ugašena sa 1N HCl (∼3mL) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (6 ml do pH = 7), a onda ekstrahovana metilen hloridom (3x30mL). Organske faze su ukombinovane, isprane slanim rastvorom (20mL) i koncentrovane do beličaste penaste čvrste supstance (0.31g, 54% prinos). Mešana u vodi (15mL) i ekstrahovana metilen hloridom (4x20mL). Vodena faza je brzo zaleđena mešavinom aceton/suvi led i liofilizovana preko noći. Masa bele paperjaste čvrste supstance nakon liofilizacije je 83 mg. Ona je umešana sa metilen hloridom (2 mL, delimično rastvoren), dodat je 2M HCl/etar (1.2 mL, 6 eq) i mešan preko noći. Suspenzija je filtrirana i isprana sa dietil etrom. Filtrirana beličasta čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-(4-{4-[(2-hidroksi-etilamino)-metil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion (57 mg, 10% prinos tokom dve faze); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.13 min (92.2%); mp: 251-253°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 -2.06 (m, 1H, CHH), 2.37 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.00 (m, 3H, CH2, CHH), 3.68 (t, J = 5.4 Hz, 2H, CH2), 4.11 - 4.20 (m, 2H, CH2), 4.23 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.64 (m, 5H, Ar), 9.18 - 9.41 (m, 2H, HClNH), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.13, 48.40, 49.49, 51.62, 56.30, 69.07, 115.01, 115.32, 127.74, 129.81, 130.00, 130.33, 131.65, 133.35, 137.30, 153.34, 167.98, 170.98, 172.85; LCMS MH = 424; Anal. izrač. za C23H25N3O5.HCl: C, 60.06; H, 5.70; N, 9.14; Cl, 7.71. Pronađeno: C, 48.95; H, 5.00; N, 7.28; Cl, 14.92.
5.189 4-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-IL OKSI)METIL)-N-(2-HIDROKSI-2METILPROPIL)BENZAMID (referentni primer)
[0842]
[0843] Rastvoru 4-(hlorometil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)benzamid (0.73 g, 3.02 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.839 g, 2.87 mmol) u DMF (10 mL), dodat je DIEA (0.527 ml, 3.02 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je zagrejan do 40°C. Mešavini je dodat K2CO3 (0.417 g, 3.02 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 dana. Reakciona mešavina je zagrejana do 35°C tokom 1 dana. Mešavina je zagrejana do 80°C preko noći. Mešavina je ohlađena do sobne temperature. Suspenzija je filtrirana i isprana sa acetonitrilom (15 mL). Filtrat je zakišeljen sa HCOOH (2 mL). Rastvor je prečišćen sa prep HPLC, (Xbridge C18, 10 µm, 50 x 250 mm, 143 mL/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradijent do 95/5 acetonitril 0.1%FA / H2O 0.1% mravlja kiselina u 30 min) da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)benzamid kao bela čvrsta supstanca (0.18 g, 12.8% prinos): HPLC: (Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 acetonitril/0.1% H3PO4) 4.72 (95.2%); mp: 165-167 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.10 (s, 6H, CH3, CH3), 1.87 - 2.11 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.77 - 3.04 (m, 1H, CHH), 3.25 (d, J = 6.0 Hz, 2H, CH2), 4.31 (s, 1H, CHH), 4.42 (s, 1H, CHH), 4.55 (s, 1H, OH), 5.00 - 5.20 (m, 1H, NCH), 5.33 (s, 2H, CH2), 7.33 (dd, J = 5.7, 7.0 Hz, 2H, Ar), 7.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.24 (t, J = 6.1 Hz, 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.27, 27.28, 31.11, 45.01, 50.12, 51.52, 68.92, 69.72, 114.96, 115.28, 127.15, 127.40, 129.73, 129.92, 133.28, 134.27, 139.59, 153.21, 166.30, 167.87, 170.89, 172.74; LCMS MH = 466; Anal. Izrač. za C25H27N3O6 1 H2O: C, 62.10; H, 6.05; N, 8.69; Pronađeno: C, 62.00; H, 5.74; N, 8.65.
5.1903-(4-{4-[(DIIZOPROPILAMINO)-METIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0844]
[0845] Faza 1: U umešani bezbojan rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.00 g, 2.32 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi, dodat je diizopropilamin (2.95 ml, 20.88 mmol). Mešavina je mešana na 100°C tokom dva dana. Reakcija nije mogla da se završi i mešavina je upotrebljena u sledećoj fazi pomoću razmene rastvarača u DMF bez bilo kakvog prečišćavanja.
[0846] Faza 2: Mešavina metil 5-amino-4-(4-(4-((diizopropilamino)metil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.15 g, 2.32 mmol) i kalijum karbonat (0.32 g, 2.32 mmol) u DMF (15 ml) je zagrejan na 80°C preko noći. Suspenzija je filtrirana i isprana sa DMF da bi se dobio braon filtrat i beličasta čvrsta supstanca. Filtrat je uparen do ulja i prečišćen na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio 3-(4-{4-[(Diizopropilamino)-metil]-benziloksi}-1-okso-1,3dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (38 mg, 7% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.35 min (95.8%); mp: 201-203°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.98 (d, J = 6.6 Hz, 12H, 4CH3), 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 2H, CHH, CHH), 2.82 - 3.05 (m, 2H, CHH, CHH), 3.61 (s, 2H, CH2), 4.18 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.55 (m, 7H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.60, 22.35, 31.21, 45.10, 47.35, 48.03, 51.58, 69.52, 114.95, 115.19, 127.56, 127.64, 129.81, 129.95, 133.29, 134.39, 142.81, 153.56, 168.02, 170.96, 172.83; LCMS MH = 464; Anal. Izrač. za C27H33N3O4+ 1.1 H2O: C, 67.09; H, 7.34; N, 8.69. Pronađeno: C, 66.73; H, 6.99; N, 8.56.
5.1913-(1-OKSO-4-{4-[(TETRAHIDRO-PIRAN-4-ilAMINO)-METIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0847]
[0848] Faza 1: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.16 mmol) u THF (10 mL), dodat je tetrahidro-2H-piran-4-amin (0.29 g, 2.90 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći a onda zagrejana na 45°C tokom tri sata. Reakciona mešavina je isfiltrirana da bi se oslobodila od čvrste supstance. Filtrat je koncentrovan i ekstrahovan vodom i dihlorometanom. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobila žuta penasta čvrsta supstanca (0.50 g, 87% prinos), koja je prečišćena na silika gelu (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 10% u 30 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-(1-okso-4-{4-[(tetrahidropiran-4-ilamino)-metil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline kao ulje (0.40 g, 70% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0849] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-((tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata (0.40 g, 0.81 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.10 g, 0.90 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta a onda ugašena sa 1N HCl (2 ml) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (3ml do pH = 7). Mešavina je mešana sa etil acetatom (30ml) i razdvojena. Organska faza je isprana slanim rastvorom (20ml) i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 10% u 30 min) da bi se dobio 3-(1-okso-4-{4-[(tetrahidro-piran-4ilamino)-metil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (80.8 mg, 22% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.89 min (98.7%); mp: 231-233°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.19-1.32(m, 3H, NH, CH2), 1.74-1.79(m, 2H, CH2), 1.96-2.00 (m, 1H, CHH), 2.37-2.47 (m, 1H, CHH), 2.51-2.60 (m, 2H, 2CH), 2.85-2.97 (m, 1H, CHH), 3.20-3.28 (m, 2H,CH2), 3.73 (s, 2H, CH2), 3.78-3.84 (m, 2H, CH2), 4.22 - 4.44 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.31 - 7.51 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.32, 31.17, 33.10, 45.08, 49.08, 51.56, 52.36, 65.76, 69.45, 115.00, 115.18, 127.57, 127.94, 129.77, 129.95, 133.28, 134.64, 141.20, 153.46, 167.99, 170.95, 172.81; LCMS MH = 464; Anal. Izrač. za C26H29N3O5(0.5 H2O): C, 66.09; H, 6.40; N, 8.89. Pronađeno: C, 65.90; H, 6.21; N, 8.62.
5.192 4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-N-(3-PIPERIDIN-1-IL-PROPIL)-BENZAMID (referentni primer)
[0850]
[0851] Faza 1: 3-(Piperidin-1-il)propan-1-amin (411 mg, 2.89 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 4-(hlorometil)benzoil hloridu (546 mg, 2.89 mmol) u acetonitrilu (10 mL) kroz špric. Nakon dodavanja rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta i reakcija je završena. Reakcionoj mešavini je dodat NaHCO3 (aq. zas., 20mL). Bistar rastvor je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (3 x 25 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio 4-hlorometil-N-(3-piperidin-1-il-propil)-benzamid kao svetlo braon ulje (700mg, 82%). Jedinjenje je upotrebljen u sledećoj fazi kakvo jeste:<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.37 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2), 1.42 - 1.54 (m, 4H, CH2, CH2), 1.66 (t, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 2.23 - 2.39 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.19 - 3.31 (m, 2H, CH2), 4.80 (s, 2H, CH2), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.83 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 8.53 (t, J = 5.4 Hz, 1H, NH); LCMS MH = 295.
[0852] Faza 2: Mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (694 mg, 2.374 mmol), 4-(hlorometil)-N-(3-(piperidin-1-il)propil)benzamida (700mg, 2.374 mmol) i K2CO3 (328 mg, 2.374 mmol), dodat je DMF (10 mL). Reakciona mešavina je mešana na 50°C preko noći i dodat je K2CO3 (150mg, 1.08mmol). Dobijena mešavina je zagrevana na 80°C tokom 2 sata. Reakciona mešavina je zakišeljena sa HCl (1N, aq.8mL) praćeno dodavanjem NaHCO3(aq. zas.8mL) i slanim rastvorom (10mL).
Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (3 x 35mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah u dihlorometanu (1mL) i etar (15mL) da bi se dobio 4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-N-(3-piperidin-1-il-propil)-benzamid kao bela čvrsta supstanca (84mg, 6.8% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 18/82, (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.54min (98.5%); mp: 183-185 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.37 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2), 1.43 - 1.54 (m, 4H, CH2, CH2), 1.67 (quin, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 1.93 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.31 (d, J = 5.7 Hz, 5H, CH2, CH2), 2.40 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.21 -3.37 (m, 3H, CH2, CHH), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.32 (dd, J = 7.6, 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.56 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.84 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 8.50 (t, J = 5.4 Hz, 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 24.05, 25.52, 26.19, 31.18, 37.97, 45.07, 51.59, 54.01, 56.43, 68.98, 115.03, 115.35, 127.25, 127.21, 129.78, 129.97, 133.34, 134.29, 139.58, 153.29, 165.73, 167.91, 170.96, 172.81; LCMS MH = 519; Anal. Izrač. za C29H34N4O5+ 0.4 H2O: C, 66.24; H, 6.67; N, 10.66; Pronađeno: C, 66.17; H, 6.43; N, 10.53.
5.1932-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-IL OKSIMETIL]-BENZILAMINO}-2-METIL-PROPIONSKE KISELINE (referentni primer)
[0853]
Faza 1: metil estar 4-(4-{4-[(1-tert-Butoksikarbonil-1-metil-etilamino)-metil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-4-karbamoil-buterne kiseline
[0854] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600mg, 1.262 mmol) u acetonitrilu (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je tert-butil 2-amino-2-metilpropanoat hidrohlorid (272 mg, 1.389 mmol) i DIPEA (0.551 ml, 3.16 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći tkom 5 dana i dodati su joj EtOAC(50 mL), NaHCO3(aq, zas, 5 mL) i slani rastvor (15 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio metil estar 4-(4-{4-[(1-tert-Butoksikarbonil-1-metiletilamino)-metil]-benziloksi}-1-okso -1,3-dihidro-izoindol-2-il)-4-karbamoil-buterne kiseline kao bistra lepljiva čvrsta supstanca (470mg, 67% prinos); LCMS MH = 554;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.21 (s, 6H, CH3, CH3), 1.44 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.97 - 2.32 (m, 4H, CH2, CH2, CH), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.58 (d, J = 5.7 Hz, 2H, CH2), 4.39 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.52 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.72 (dd, J = 4.6, 10.1 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.18 (s, 1H, NHH), 7.25 - 7.32 (m, 2H, Ar), 7.32 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.49 (m, 3H, Ar), 7.58 (s, 1H, NHH).
Faza 2: tert-butil estar 2-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzilamino}-2-metil-propionske kiseline
[0855] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((1-tert-butoksi-2-metil-1-oksopropan-2-ilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (470mg, 0.849 mmol) u tetrahidrofuranu (Zapremina: 10 ml) na 0 °C dodat je kalijum tert-butoksid (95 mg, 0.849 mmol) u jednoj porciji. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 15min. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC(50 mL) i ugašena pomoću HCl (1N, aq, 3 mL) nakon čega je usledilo dodavanje NaHCO3 (aq, zas., 3 mL) i slani rastvor (15 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobio tert-butil estar 2-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzilamino}-2-metil-propionske kiseline kao bela čvrsta supstanca (460mg, 104% sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 522.
Faza 3: 2-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il oksimetil]-benzilamino}-2-metil-propionska kiselina
[0856] Suspenziji tert-butil 2-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzilamino)-2-metilpropanoata (360mg, 0.690 mmol) u DCM (2 mL) dodat je hlorovodonik, 2M u etru (8ml, 16.00 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 dana pre nego što je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću prepHPLC da bi se dobila 2-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzilamino}-2-metilpropionska kiselina kao bela čvrsta supstanca (125mg, 39%); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 5-95% u 10min, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.96min (98.4%); mp: 271-272 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.32 (s, 6H, CH3, CH3), 1.93 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.88 (d, J = 18.5 Hz, 1H, CHH), 3.89 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J =<17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.27 (s, 2H, CH>2<), 7.26 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.40 ->7.58 (m, 5H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 23.26, 23.33, 31.18, 45.07, 46.38, 51.58, 61.65, 69.26, 115.16, 115.29, 127.66, 129.41, 129.77, 130.03, 133.30, 135.37, 136.33, 153.33, 167.97, 170.99, 172.81, 173.07; LCMS MH = 466; Anal. Izrač. za C25H27N3O6+1.9 H2O : C, 60.09; H, 6.21; N, 8.41; Pronađeno: C, 60.01; H, 5.98; N, 8.23.
5.1943-(4-(4-((METIL(TETRAHIDRO-2H-PIRAN-4-IL)AMINO) METIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION FORMAT (referentni primer)
[0857]
[0858] (3-(4-(4-(Bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (150 mg, 0.338 mmol)) je suspendovan u MeCN (5 mL). N-metiltetrahidro-2H-piran-4-amin (136 mg, 1.184 mmol) dodat je mešavini i dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom ∼15 min. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (100 mL) i 1N NaHCO3 (30 mL). Zamućena organski sloj je koncentrovan u vakuumu i preostali ostatak je pretvoren u prah sa vodom (100 mL) i Et2O (∼100 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i osušena sukcijom na filter levku a onda stavljena u vakuum sušnicu na 40 °C preko noći da bi se dobilo 125 mg bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF/1 N HCl (12 mL / 1 mL) i prečišćena injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 50% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(4-(4-((metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion Format kao bela čvrsta supstanca (25 mg, 15% prinos) kao bela čvrsta supstanca: HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.48 min (98.1%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.43 - 1.59 (m, 2H, CHH, CHH), 1.62 - 1.76 (m, 2H, CHH, CHH), 1.92 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.09 (s, 3H, CH3), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.71 (m, 2H, CHH, CH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.18 - 3.32 (m, 2H, CHH, CHH), 3.55 (s, 2H, CH2), 3.90 (dd, J = 3.8, 11.1 Hz, 2H, CHH, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.37 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 28.89, 31.18, 37.14, 45.07, 51.55, 56.77, 59.08, 66.61, 69.45, 114.99, 115.19, 127.60, 128.47, 129.78, 129.95, 133.28, 134.92, 139.93, 153.49, 167.99, 170.96, 172.81; LC/MS M+H = 478.
5.1953-{4-[4-(TERT-BUTILAMINO-METIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-{4-[4-(tert-butilamino-metil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline
[0860] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.611 g, 1.285 mmol) u acetonitrilu (15 ml) dodat je 2-metilpropan-2-amin (0.406 ml, 3.86 mmol). Mešavina je mešana tokom šest sati a onda je rastvarač uparen da bi se dobilo ulje, koje je mešano u vodi (20 ml) i metilen hloridu (30 ml). Dobijena bela suspenzija je filtrirana da bi se dobio metil estar 4-{4-[4-(tert-butilamino-metil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (0.523 g, 87% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.37 (s, 9H, 3CH3), 1.97 -2.34 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.06 - 4.22 (m, 2H, CH2), 4.35 - 4.61 (m, 2H, CH2), 4.74 (dd, J = 5.0, 10.3 Hz, 1H, NCH), 5.24 - 5.37 (m, 2H, CH2), 7.19 (br. s., 1H, NHH), 7.25 - 7.35 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.50 (m, 1H, Ar), 7.52 - 7.70 (m, 5H, NHH, Ar), 8.61 (br. s., 2H, NHHCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.96, 25.17, 30.36, 44.32, 44.77, 51.30, 53.40, 56.96, 69.01, 114.72, 115.24, 127.99, 129.59, 130.26, 132.17, 133.48, 137.55, 153.22, 167.80, 171.75, 172.51. Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje 3-{4-[4-(tert-butilamino-metil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
[0861] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((tert-butilamino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.069 mmol) u THF (20 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.240 g, 2.14 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta i dodata je 1N HCl (3ml) i neutralizovana je zasićenim natrijum bikarbonatom (6 ml) do pH=7. Etil acetat (50 ml) dodat je mešavini i mešan tokom 5 min. Organska faza je odvojena, isprana slanim rastvorom (10 ml) i uparena do bele penaste ćvrste supstance (0.38 g). Mešan je u etru (20 ml) tokom jednog sata potom filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(tert-butilamino-metil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.279 g, 60% prinos); mp 194-196°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.42 min (95.4%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.04 - 1.21 (m, 9H, 3CH3), 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.68 (br. s., 2H, CH2), 4.18 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.53 (m, 7H, Ar), 10.88 - 11.20 (weak, 0H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.62, 31.21, 45.10, 45.88, 51.59, 69.45, 115.04, 115.19, 127.55, 128.19, 129.78, 129.97, 133.31, 134.69, 153.46, 168.01, 170.96, 172.82; LC/MS (M+1)<+>= 436; Anal. izrač. za C25H29N3O4+0.2 H2O: C, 68.38; H, 6.75; N, 9.57. Pronađeno: C, 68.16; H, 6.62; N, 9.52.
5.1963-{1-OKSO-4-[4-(PIPERAZIN-1-KARBONIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0862]
[0863] Faza 1: Izmešanom rastvoru 4-(hlorometil)benzoil hlorid (1.890 g, 10 mmol) u MeCN (30 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je tert-butil piperazin-1-karboksilat (1.9 g, 10.20 mmol) i N-metilmorfolin (1.1 ml, 10.01 mmol). Mešavina je mešana tokom 5 min. Reakciona mešavina je ostavljena na -20 °C preko noći tokom koje je obrazovana čvrsta supstanca. Mešavina je razblažena sa jednakom zapreminom vode (oko 30 mL) i čvrsta supstanca je sakupljena usisnom filtracijom i isprana sa još jednom porcijom vode (oko 20 mL). Zaostala čvrsta supstanca na filteru je osušena u vakuum sušnici da bi se dobila bela čvrsta supstanca (1.93 g). Drugi usev čvrste supstance je obrazovan u kombinovanom filtratu/pranju i prikupljen filtracijom i osušena da bi se dobio tert-butil estar 4-(4-hlorometil-benzoil)-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (917 mg, 27% prinos). LCMS analiza je pokazala da je drugi usev veće čistoće i korišćen je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.41 (s, 9H,
<t>Bu), 3.11 - 3.72 (m, 8H, 4 x CH2), 4.80 (s, 2H, CH2), 7.42 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 27.97, 43.35, 45.48, 79.15, 127.32, 128.81, 135.56, 139.00, 153.76, 168.70; LCMS: MH = 339, 341.
[0864] Faza 2: Rastvoru metil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.400 g, 1.369 mmol) u DMF (5.01 mL), dodat je DIEA (0.239 ml, 1.369 mmol), i kalijum karbonat (0.189 g, 1.369 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom oko 5 min, tert-butil estar 4-(4-hlorometilbenzoil)-piperazin-1-karboksilne kiseline (0.455 g, 1.342 mmol) dodat je i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon oko 17 h, mešavina je zagrejana do 50 °C tokom 3 h a onda 60 °C tokom 22 h. Mešavina je zagrevana dalje do 80 °C tokom oko 24 h. Sirova mešavina je preneta u sušnicu sa 10% rastvorom AcOH u H2O (50 mL). Odmah, bela čvrsta supstanca je obrazovana nakon transfera. Gusta suspenzija je energično mešana i podvrgnuta sonikaciji tokom 5 minuta potom filtrirana na fritovanom filter levku srednje veličina pora. Čvrsta supstanca je isprana sa velikom količinom vode (ukupna zapremina filtrata oko 220 mL) i osušena sukcijom da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca koja je prečišćen silika gel flash hromatografijom (80 gm ISCO kolona, eluiran sa MeCN u DCM gradijentu) da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il-oksimetil]-benzoil}-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (350 mg, 46% prinos). LCMS: MH = 563. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0865] Faza 3: Izmešanom rastvoru tert-butila 4-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-il-oksimetil]-benzoil}-piperazin-1-karboksilne kiseline (350 mg, 0.622 mmol) u DCM (3 mL) na sobnoj temperaturi, dodata je HCl (2 mL, 4.00 mmol, 2 N u Et2O). Mešavina postaje sve više zamućena sa formiranjem značajne količine čvrste supstance. Debela gusta suspenzija je na kratko podvrgnuta sonikaciji a onda mešana na sobnoj temperaturi tokom 26 h. Gusta suspenzija je razblažena sa Et2O (∼40 mL) i potom filtrirana. Sakupljena bela čvrsta supstanca je osušena sukcijom i potom isprana na filter levku sa EtOAc (50 mL) praćeno MeCN (∼50 mL). Preostala čvrsta supstanca je osušena sukcijom na filter levku, zatim osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-{1-okso-4-[4-(piperazin-1-karbonil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (300 mg, 97% prinos): HPLC:Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.73 min (96.7%); mp: 285-287 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.02 - 3.24 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 - 4.03 (m, 4H, CH2, CH2), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.13 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.21 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.62 (m, 5H, Ar), 9.11 (br. s., 2H, NH2 so), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.11, 32.89, 46.57, 47.35, 53.72, 70.93, 117.11, 117.41, 128.97, 129.46, 131.79, 132.02, 134.89, 137.07, 139.91, 155.13, 171.08, 172.79, 175.11, 179.00; LCMS: MH = 463; Anal. izrač. za C25H26N4O5·HCl 0.6 H2O: C, 58.90; H, 5.58; N, 10.99; Pronađeno: C, 58.91; H, 5.58; N, 10.78.
5.1973-{4-[4-(MORFOLIN-4-SULFONIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0866]
Faza 1: 4-(4-bromometil-benzensulfonil)-morfolin
[0867] Izmešanom rastvoru morfolina (0.30 ml, 3.4 mmol) i TRIETILAMINA (0.53 ml, 3.8 mmol) u etru (5 mL) na 0 °C dodat je rastvor 4-(bromometil)benzen-1-sulfonil hlorida (0.928 g, 3.4 mmol) u etru (5 mL) u kapima. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17.5 h pre nego što je rastvorena u acetonitrilu (80 mL) i EtOAC (20 mL). Mešavina je isprana slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 4-(4-bromometil-benzensulfonil)-morfolin kao bela čvrsta supstanca (800 mg, 73%). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.77 - 2.94 (m, 4H, CH2, CH2), 3.54 - 3.70 (m, 4H, CH2, CH2), 4.81 (s, 2H, CH2), 7.74 (s, 4H, Ar); LCMS MH = 320, 322.
Faza 2: metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(morfolin-4-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0868] Metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (350 mg, 1.2 mmol), 4-(4-(bromometil)fenilsulfonil)morfolin (498 mg, 1.6 mmol) i K2CO3 (165 mg, 1.2 mmol) umešani su u acetonitrilu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena mešavina je mešana na 50 °C tokom 16 h i dodat je K2CO3 (15 mg, 0.1 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 50 °C tokom 3.5 h. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa DCM (2X20 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(morfolin-4-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (560 mg, 88% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.01 - 2.33 (m, 4H, CH2, CH2), 2.82 - 2.93 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.59 - 3.68 (m, 4H, CH2, CH2), 4.47 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.60 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.75 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.41 (s, 2H, CH2), 7.20 (s, 1H, NHH), 7.26 - 7.36 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.60 (s, 1H, NHH), 7.79 (s, 4H, Ar); LCMS MH = 532.
Faza 3: 3-{4-[4-(Morfolin-4-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion [0869] Izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-(4-(morfolinosulfonil)benzil oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (560mg, 1.1 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na 0 °C dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (130 mg, 1.2 mmol). Reakciona mešavina je mešana tokom 1 h i KALIJUM TERT-BUTOKSID (30 mg, 0.28 mmol) je dodat. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 15min a onda joj je dodat MeOH (20 mL) nakon čega je usledilo dodavanje HCl (aq, 1N, 5 mL). Mešavini je dodat slani rastvor (15 mL) i EtOAc (25 mL). Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan dok čvrsta supstanca nije počela da se taloži. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je prečišćen umešavanjem u umešanim rastvaračima MeOH (5 mL), DCM (15 mL) i EtOAc (15 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(Morfolin-4-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (209 mg, 39% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 35/65, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.06min (95.4%); mp: 308-310 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 -2.67 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.03 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3.55 - 3.69 (m, 4H, CH2, CH2), 4.32 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.48 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.13 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.41 (s, 2H, CH2), 7.34 (dd, J = 7.7, 10.0 Hz, 2H, Ar), 7.43 - 7.56 (m, 1H, Ar), 7.78 (s, 4H, Ar), 10.99 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 31.16, 45.01, 45.85, 51.56, 65.22, 68.55, 114.97, 115.54, 127.87, 128.04, 129.87, 129.96, 133.40, 133.82, 142.44, 153.19, 167.91, 170.96, 172.83; LCMS MH = 500; Anal. Izrač. za C24H25N3O7S 0.5H2O : C, 56.68; H, 5.15; N, 8.26; Pronađeno: C, 56.71; H, 5.00; N, 8.16.
5.1983-{4-[4-(4-IZOPROPIL-PIPERIDIN-1-SULFONIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0870]
Faza 1: 1-(4-bromometil-benzensulfonil)-4-izopropil-piperidin
[0871] Izmešanom rastvoru 4-izopropilpiperidina (0.22 g, 1.7 mmol) i TRIETIL AMINA (0.26 ml, 1.9 mmol) u etru (5 mL) na 0 °C dodat je rastvor 4-(bromometil)benzen-1-sulfonil hlorida (0.466 g, 1.7 mmol) u etru (5 mL) u kapima. Nakon dodavanja reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 3 h. Reakciona mešavina je isprana vodom (15 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 1-(4-bromometil-benzensulfonil)-4-izopropil-piperidin kao bela čvrsta supstanca (580mg, 93% prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR(DMSO-d6)δ 0.78 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0.89 - 1.04 (m, 1H, CH), 1.06 - 1.25 (m, 2H, CH2), 1.28 - 1.46 (m, 1H, CH), 1.55 - 1.73 (m, 2H, CH2), 2.16 (td, J = 2.2, 11.9 Hz, 2H, CH2), 3.68 (d, J = 11.7 Hz, 2H, CH2), 4.79 (s, 2H, CH2), 7.71 (d, J = 2.6 Hz, 4H, Ar); LCMS MH = 360, 362.
Faza 2: metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-izopropil-piperidin-1-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0872] Metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (360 mg, 1.2 mmol), 1-(4-(bromometil)fenilsulfonil)-4-izopropilpiperidin (577 mg, 1.6 mmol) i KALIJUM KARBONAT (187 mg, 1.4 mmol) umešani su u acetonitrilu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena mešavina je mešana na 50 °C tokom 8 h i K2CO3 (30 mg, 0.2 mmol) dodat je reakcionoj mešavini. Dobijena mešavina je zagrevana na 50 °C tokom 2 h pre nego što je reakcionoj mešavini dodat EtOAC (60 mL) i voda (20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL) i osušena sa MgSO4. Organski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-izopropil-piperidin-1-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (700 mg, 99% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.78 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0.88 - 1.04 (m, 1H, CH), 1.07 - 1.25 (m, 2H, CH2), 1.29 - 1.43 (m, 1H, CH), 1.57 - 1.73 (m, 2H, CH2), 2.02 - 2.32 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.69 (d, J = 11.7 Hz, 2H, CH2), 4.46 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.59 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.75 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.20 (s, 1H, NHH), 7.26 - 7.35 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.60 (s, 1H, NHH), 7.71 - 7.83 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 572.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-Izopropil-piperidin-1-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0873] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(4-izopropilpiperidin-1-ilsulfonil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (700mg, 1.2 mmol) u tetrahidrofuranu (12 mL) na 0 °C dodat je KALIJUM TERT-BUTOKSID (151 mg, 1.3 mmol) u jednoj porciji. Rastvor je mešan na 0 °C tokom 30 min. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (80 mL) i dodata joj je HCl (1N, aq, 3 mL). Mešavini je dodat NaHCO3 (zas. aq, 15mL) i ekstrahovan. Organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL) i osušen pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan i dobijena bela čvrsta supstanca je prečišćena umešavanjem u EtOAc (10 mL) i Acetonitrilu (10 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Izopropil-piperidin-1-sulfonil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (386 mg, 58% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 55/45, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.76 min (96.6%); mp: 245-247 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.78 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0.97 (dd, J = 5.5, 11.7 Hz, 1H, CH), 1.06 - 1.27 (m, 2H, CH2), 1.36 (dq, J = 6.5, 13.1 Hz, 1H, CH), 1.57 -1.71 (m, 2H, CH2), 1.93 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.06 - 2.24 (m, 2H, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.62 - 3.78 (m, 2H, CH2), 4.31 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.47 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.13 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.38 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.43 -7.58 (m, 1H, Ar), 7.68 - 7.86 (m, 4H, Ar), 10.99 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.28, 22.30, 27.75, 31.08, 31.39, 44.92, 46.29, 51.43, 68.45, 114.86, 115.44, 127.56, 127.89, 129.80, 129.86, 133.30, 134.91, 141.89, 153.10, 167.84, 170.92, 172.79; LCMS MH = 540; Anal. Izrač. za C28H33N3O6S 0.3H2O : C, 61.70; H, 6.21; N, 7.71; Pronađeno: C, 61.78; H, 6.00; N, 7.68.
5.1993-{1-OKSO-4-[4-(4-FENIL-PIPERAZIN-1-SULFONIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
Faza 1: 1-(4-bromometil-benzensulfonil)-4-fenil-piperazin
[0875] Izmešanom rastvoru 1-fenilpiperazina (0.51 g, 3.14 mmol) i TRIETIL AMINA (0.482 ml, 3.46 mmol) u dietil etru (10 mL) na 0 °C dodat je rastvor 4-(bromometil)benzen-1-sulfonil hlorida (0.847 g, 3.14 mmol) u etru (5 mL) u kapima. Dobijena suspenzija je mešana na 0 °C tokom 1.5 hr. Reakciona mešavini je dodat acetonitril (30 mL) i EtOAC (100 mL) nakon čega je usledilo dodavanje vode (30 mL). Mešavina je isfiltrirana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Filtrat je ekstrahovan. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak kombinovan sa bela čvrsta supstanca je prečišćena pomoću ISCO da bi se dobio 1-(4-bromometil-benzensulfonil)-4-fenil-piperazin kao bela čvrsta supstanca (760 mg, 61% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.95 - 3.08 (m, 4H, CH2, CH2), 3.13 - 3.25 (m, 4H, CH2, CH2), 4.80 (s, 2H, CH2), 6.75 - 6.85 (m, 1H, Ar), 6.90 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.10 - 7.29 (m, 2H, Ar), 7.57 - 7.90 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 395, 397.
Faza 2: metil estar 4-karbamoil-4-{1-okso-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benziloksi]-1,3-dihidroizoindol-2-il}-buterne kiseline
[0876] Metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (360 mg, 1.2 mmol), 1-(4-(bromometil)fenilsulfonil)-4-fenilpiperazin (584 mg, 1.5 mmol) i KALIJUM KARBONAT (204 mg, 1.5 mmol) umešani su u acetonitrilu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena mešavina je mešana na 50 °C tokom 20 h i K2CO3(15mg, 0.1 mmol) dodat je reakcionoj mešavini. Dobijena mešavina je mešana na 50 °C tokom 1.5 h pre dodavanja EtOAc (50 mL) i vode (20 mL). Dobijena mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{1-okso-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela čvrsta supstanca (730 mg, 98% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.01 - 2.33 (m, 4H, CH2, CH2), 2.96 - 3.09 (m, 4H, CH2, CH2), 3.14 - 3.26 (m, 4H, CH2, CH2), 3.50 (s, 3H, CH3), 4.46 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.59 (d, J = 17.8 Hz, 1H, CHH), 4.74 (dd, J = 4.7, 10.2 Hz, 1H, CHH), 5.40 (s, 2H, CH2), 6.80 (t, J = 7.3 Hz, 1H, Ar), 6.90 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.15 - 7.24 (m, 3H, Ar, NH), 7.25 - 7.35 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.51 (m, 1H, Ar), 7.59 (s, 1H, NHH), 7.74 - 7.89 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 607.
Faza 3: 3-{1-Okso-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0877] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(4-fenilpiperazin-1-ilsulfonil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata (730mg, 1.2 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) na 0 °C dodat je kalijum tert-butoksid (127 mg, 1.3 mmol) u jednoj porciji. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 10 min pre dodavanja HCl (1N, aq, 3 mL) na 0 °C nakon čega je usledilo dodavanje DCM (50 mL) i NaHCO3(zas. aq, 15 mL). Bela čvrsta supstanca je istaložena. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je ekstrahovan. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak kombinovan sa čvrstom supstancom je prečišćen umešavanjem u umešanom rastvaraču THF (3 mL) i DCM (25 mL) praćeno trirurisanjem u DMF (5 mL) na 80°C da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (256 mg, 37% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 50/50, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.15 min (98.9%); mp: 302-304 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 -3.08 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3.14 - 3.26 (m, 4H, CH2, CH2), 4.30 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.47 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CHH), 5.40 (s, 2H, CH2), 6.80 (t, J = 7.3 Hz, 1H, Ar), 6.90 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.20 (dd, J = 7.3, 8.6 Hz, 2H, Ar), 7.27 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.56 (m, 1H, Ar), 7.72 -7.85 (m, 4H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.08, 44.95, 45.70, 47.82, 51.46, 68.46, 114.87, 115.46, 116.04, 119.58, 127.79, 127.98, 128.86, 129.79, 129.88, 133.32, 133.96, 142.34, 150.22, 153.10, 167.83, 170.88, 172.74; LCMS MH = 575; Anal. Izrač. za C30H30N4O6S 0.3H2O : C, 62.12; H, 5.32; N, 9.66; Pronađeno: C, 62.05; H, 5.18; N, 9.63.
5.2002-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(HIDROKSIMETIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION (referentni primer)
[0878]
[0879] 3-Aminopiperidin-2,6-dion hidrohlorid (0.915 g, 5.56 mmol) dodat je rastvoru 3-(4-(hidroksimetil)benziloksi)ftalne kiseline (1.4 g, 4.63 mmol) u suvom piridinu (15 mL) i mešavina je zagrejana do 118 °C u uljanom kupatilu tokom 16 h. Tamna reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakišeljena sporim dodavanjem 1 N HCl (∼25 mL). Mešavina je dalje razblažena vodom (∼170 mL) a onda podvrgnuta sonikaciji tokom ∼30 minuta kako bi se potpomoglo razbijanje čvrstih agregata. Rezultujuća tamna gusta suspenzija je filtrirana na poroznom levku srednjih pora i tamna čvrsta supstanca je isprana sa dodatnom vodom (70 mL). Kolač je osušen sukcijom a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 2,5 h da bi se dobio 1.6 g tamno plave čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u mešavina DCM, MeCN, i MeOH (∼100 mL svaka) i tretirana obezbojenim drvenim ugljem. Mešavina je promućkana , a zatim filtrirana gravitacijom primenom filter papira. Filtrat/pranje (tamno žuta boja) je tretiran još jednom sa obezbojenim drvenim ugljem i potom filtriran na celitnom sloju. Čist filtrat je koncentrovan u vakuumu do suvoće da bi se dobila čvrsta supstanca koja je pretvorena u prah sa vodom i usisno filtrirana. Kolač je ispran dodatnom vodom (∼100 mL), osušen sukcijom, a onda stavljen u vakuum sušnicu na 60 °C tokom 4 h da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (1.2 gm, 68% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.08 min (99.9%); mp: 250-252;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.95 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.67 (m, 2H, CHH, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.50 (d, J = 5.1 Hz, 2H, CH2OH), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.19 (t, J = 5.6 Hz, 1H, OH), 5.36 (s, 2H, CH2O), 7.24 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.88, 30.83, 48.67, 62.53, 69.91, 115.40, 116.52, 120.18, 126.44, 127.09, 133.17, 134.31, 136.86, 142.32, 155.42, 165.21, 166.68, 169.81, 172.66. LCMS: M+Na = 417; MH nije primećen u pozitivno jonizacionom modu; Anal. izrač. za C21H18N2O6: C, 63.96; H, 4.60; N, 7.10; Pronađeno: C, 63.77; H, 4.52; N, 7.32.
5.2013-(4-((4-(4-METILPIPERAZIN-1-KARBONIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID (referentni primer)
[0880]
[0881] Izmešanoj suspenziji 3-(1-okso-4-(4-(piperazin-1-karbonil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorida (100 mg, 0.200 mmol) u DMF (2 mL), dodat je 1 N aq natrijum bikarbonat (0.441 mL, 0.441 mmol) praćeno jodometanom (0.014 mL, 0.220 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon oko 24 h, dodatnih 5 µl jodometana napunjeno je i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i 1N aq. NaHCO3(10 mL). Organski sloj je ispran dodatnom vodom (40 mL) i slanim rastvorom, zatim osušen iznad Na2SO4, i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC i proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 30% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su ukombinovane i tretirane sa 1 N HCl (4 mL). Rastvor je koncentrovan do suvoće i ostatak je tretiran sa 2 N HCl u Et2O (0.5 mL). Isparljive supstance su ponovo koncentrovane do suvoće i zaostala čvrsta supstanca je osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-(4-((4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao beličasta čvrsta supstanca (41 mg, 39%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.88 min (95.7%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.88 min (95.7%); mp: 360-362 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.67 - 2.83 (m, 3H, CH3), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.02 - 3.22 (m, 2H, CH2), 3.23 - 3.64 (m, 4H, CH2, CH2), 4.28 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.45 (d, J = 17.6 Hz,
<1>H, CHH), 4.98 - 5.21 (m, 1H, CH), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.22 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.46 - 7.55 (m, 3H, Ar), 7.56 -7.63 (m, 2H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH), 11.31 - 11.77 (m, 1H, HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 24.21, 33.00, 43.95, 47.07, 53.53, 53.79, 70.87, 73.78, 116.96, 117.34, 129.26, 129.44, 131.81, 135.14, 136.04, 140.55, 155.19, 170.00, 170.91, 172.79, 174.75; LCMS: MH = 477; Anal. izrač. za C26H28N4O5·HCl: C, 60.88; H, 5.70; N, 10.92; Pronađeno: C, 37.90; H, 4.33; N, 6.65.
5.2023-{4-[4-(4-ACETIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0882]
[0883] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (600 mg, 1.392 mmol) u acetonitrilu (10 mL), dodat je 1-(piperazin-1-il)etanon (178 mg, 1.392 mmol) i DIPEA (0.608ml, 3.48 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 sati, na 40°C tokom 2,5 sata i na 50 °C tokom 3 sata pre nego što je zaustavljena reakcija nastavljena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (40 mL) i isprana vodom (15 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan da bi se dobio metil estar 4-{4-[4-(4-Acetil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoilbuterne kiseline kao bistro ulje (840mg, 115% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 523.
[0884] Faza 2: KOtBu (156mg, 1.393mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 4-(4-(4-((4-acetilpiperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (728 mg, 1.393 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata pre dodavanja KOtBu (30 mg, 0.27 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (50 mL) i zakišeljena sa HCl (1N aq.4 mL). Mešavina je ekstrahovana sa NaHCO3(10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (2 x 15 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah u dietil etru (30mL) i filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-acetil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (500mg, 67.5% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 15/85, (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.03min (99.4%); mp: 208-210°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 4H, CH3, CHH), 2.23 - 2.40 (m, 4H, CH2, CH2), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.36 - 3.46 (m, 4H, CH2, CH2), 3.49 (s, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.37 - 7.61 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.12, 22.33, 31.18, 40.77, 45.06, 45.60, 51.55, 52.19, 52.74, 61.49, 69.36, 114.96, 115.22, 127.64, 128.94, 129.80, 129.93, 133.28, 135.33, 137.70, 153.48, 167.97, 168.03, 170.96, 172.81; LCMS MH = 491; Anal. Izrač. za C27H30N4O5+ 0.3 H2O: C, 65.39; H, 6.22; N, 11.30; Pronađeno: C, 65.31; H, 6.34; N, 11.32.
5.2033-{4-[4-(4-CIKLOPROPANKARBONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0886] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin -2-il)-5-oksopentanoata (600 mg, 1.392 mmol) u acetonitrilu (10 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je ciklopropil(piperazin-1-il)metanon (0.257 ml, 1.810 mmol) i DIPEA (0.608 ml, 3.48 mmol). Rezultujući svetlo zeleni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 dana i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (40 mL) i ekstrahovana vodom (15 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Mešavina je koncentrovana da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-ciklopropankarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bistro ulje (900mg, 118% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 549.
[0887] Faza 2: KOtBu (203 mg, 1.810 mmol) je dodat izmešanom rastvoru metil metil estra 5-4-karbamoil-4-{4-[4-(4-ciklopropankarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (764 mg, 1.392 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0°C. Dobijeni žuti rastvor je mešan na 0°C tokom 30 minuta i reakcija je završena. Reakcija je razblažen dihlorometanom (60mL) i ugašena na 0°C sa HCl (1N, aq, 3 mL) do pH = 2. Mešavini je dodat NaHCO3 (aq. zas., 10 mL) i slani rastvor (15 mL). Mešavina je ekstrahovana i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (2 x 25 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana. Ostatak je pretvoren u prah u dietil etru (50 mL) i filtriran da bi se dobio 3-{4-[4-(4-ciklopropankarbonilpiperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (578 mg, 80% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 15/85, (acetonitril/0.1%H3PO4), 7.29min (99.8%); mp: 233-235°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.60 - 0.77 (m, 4H, CH2, CH2), 1.87 - 2.08 (m, 2H, CH2), 2.24 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.39 - 3.55 (m, 4H, CH2, CH2), 3.57 - 3.74 (m, 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 6.83, 10.05, 22.27, 31.11, 41.46, 44.70, 44.99, 51.48, 52.20, 52.87, 61.44, 69.30, 114.89, 115.15, 127.57, 128.89, 129.73, 129.86, 133.23, 135.26, 137.65, 153.41, 167.92, 170.78, 170.89, 172.74; LCMS MH = 517; Anal. Izrač. za C29H32N4O5+ 0.2 H2O: C, 66.96; H, 6.28; N, 10.77; Pronađeno: C, 66.90; H, 6.41; N, 10.71.
5.2043-{4-[4-(4-FLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0888]
[0889] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)5-oksopentanoata (600 mg, 1.392 mmol) i 4-fluoropiperidin hidrohlorida (233 mg, 1.671 mmol) u acetonitrilu (10 mL) pod N2atmosferom, dodat je DIPEA (0.608 ml, 3.48 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i na 70°C tokom 3 sata pre K2CO3 (192 mg, 1.392 mmol) dodavanja reakcionoj mešavini. Dobijena mešavina je zagrevana na 50°C preko noći. K2CO3 (40 mg, 0.29mmol) i 4-fluoropiperidin hidrohlorid (35 mg, 0.25 mmol) su dodati reakcionoj mešavini, koja je mešana na 60°C tokom 7 sati. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (50 mL) i ekstrahovana slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-buterne kiseline kao svetlo zeleno lepljivo ulje (760mg, 110% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu kavo jeste: LCMS MH = 498.
[0890] Faza 2: KOtBu (203 mg, 1.810mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (693 mg, 1.392 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0°C pod N2atmosferom. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (50mL) i dodata joj je HCl (1N, aq, 4 mL) do pH = 1. Mešavina je ekstrahovana sa mešavinom NaHCO3(aq, zas., 10mL) i slanog rastvora (15 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (2 x 25 mL).
Organski slojevi su kombinovani i osušeni sa MgSO4. Mešavina je isfiltrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio 3-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (215mg, 33% prinos): HPLC:
Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 18/82, acetonitril/0.1%H3PO4), 4.02min (98.9%); mp: 141-143°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.57 - 2.06 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.19 - 2.34 (m, 2H, CH2), 2.35 - 2.55 (m, 3H, CH2, CHH), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.47 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.52 - 4.82 (m, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 31.09 (d, J = 19.8 Hz, M19), 31.10, 45.00, 48.92 (d, JC-F = 6.6 Hz), 51.49, 61.43, 69.34, 88.43 (d, J = 168.4 Hz, M14), 114.87, 115.15, 127.56, 28.74, 129.73, 129.87, 133.23, 135.12, 138.21, 153.44, 167.93, 170.90, 172.76; LCMS MH = 466; Anal. Izrač. za C26H28FN3O4+ 0.2 H2O: C, 66.57; H, 6.10; N, 8.96; Pronađeno: C, 66.35; H, 6.29; N, 8.79.
5.2053-{4-[4-(4,4-DIFLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2.6-DION
[0892] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (500 mg, 1.160 mmol) i 4,4-difluoropiperidin hidrohlorida (274 mg, 1.741 mmol) u acetonitrilu (10 mL) pod N2 atmosferom, su dodati Na2CO3 (160 mg, 1.160 mmol) i DIPEA (0.507 ml, 2.90 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 50°C tokom 8 sati i reakcija je zaustavljena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (50mL) i ekstrahovana slanim rastvorom (20mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (630mg, 105% sirovi prinos). Proizvod je stavljen u sledeću fazu kakav jeste: LCMS MH = 516.
[0893] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (630 mg, 1.222 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C, dodat je KOtBu (151 mg, 1.344 mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 5 minuta i reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (50 mL) i zakišeljena pomoću HCl (1N, aq.
3 mL) do pH = 2. Mešavina je ekstrahovana sa mešavinom NaHCO3 (aq. zas., 5 mL) i slanog rastvora (10 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan. Ostatak je mešan u etru (50 mL) i mešavina filtrirana da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah u EtOAc (5 mL) i filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (215mg, 36%): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 18/82 (acetonitril/0.1%H3PO4): tR= 4.17 (99.4%); mp: 193-195°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.84 - 2.09 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.55 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, 4H, M01), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 31.12, 33.25 (t, JC-F = 20.9 Hz), 45.00, 49.12, 51.51, 60.40, 69.29, 114.89, 115.16, 122.68 (t, JC-F= 239.9 Hz), 127.60, 128.84, 129.73, 129.88, 133.24, 135.32, 137.72, 153.42, 167.93, 170.91, 172.76; LCMS MH = 484; Anal. Izrač. za C26H27F2N3O5+ 1 H2O: C, 62.27; H, 5.83; N, 8.39, Pronađeno: C, 62.09; H, 5.73; N, 8.17.
5.206 N-(1-{4-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-PIPERIDIN-4-IL)-ACETAMID (referentni primer)
[0894]
[0895] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (500 mg, 1.160 mmol) u acetonitrilu (10 mL), su dodati N-(piperidin-4-il)acetamid (215 mg, 1.509 mmol), N-etil-N-izopropil propan-2-amin (0.405 ml, 2.321mmol) i K2CO3(160 mg, 1.160mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na 50°C tokom 2 sata i na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (70 mL) i ekstrahovana slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan da bi se dobio metil estar 4-{4-[4-(4-acetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il} -4-karbamoil-buterne kiseline kao lepljivo ulje (705mg, 113% sirovi prinos). Jedinjenje je upotrebljeno kakvo jeste: LCMS MH = 537.
[0896] Faza 2: KOtBu (130 mg, 1.160 mmol) dodat je suspenziji metil estra 4-{4-[4-(4-acetilaminopiperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline (622 mg, 1.16 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0°C. Dobijena žuta mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7 sati i KOtBu (60 mg, 0.46 mmol) dodat je reakcionoj mešavini na sobnoj temperaturi. Reakcija je završena u 10 minuta. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (30 mL) i zakišeljena pomoću HCl (1N, aq.4 mL) a onda neutralizovana pomoću NaHCO3(zas., aq.5 mL). Mešavina je ekstrahovana slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je pretvorena u prah etrom (30mL). Mešavina je isfiltrirana da bi se dobio N-(1-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-4-il)-acetamid kao bela čvrsta supstanca (293mg, 50% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 15/85, (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.85min (99.1%); mp: 270-272 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.26 - 1.44 (m, 2H, CH2), 1.62 - 1.73 (m, 2H, CH2), 1.77 (s, 3H, CH3), 1.89 - 2.05 (m, 3H, CHH, CH2), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.65 - 2.79 (m, 2H, CH2), 2.81 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.40 - 3.57 (m, 3H, CH2, CHH), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.56 (m, 3H, Ar), 7.74 (d, J = 7.7 Hz, 1H, NH), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 22.69, 31.18, 31.60, 45.07, 45.86, 51.55, 51.94, 61.80, 69.41, 114.94, 115.20, 127.61, 128.78, 129.80, 129.93, 133.28, 135.12, 138.50, 153.49, 167.99, 168.23, 170.96, 172.81; LCMS MH = 505; Anal. Izrač. za C28H32N4O5+ 0.5 H2O: C, 65.48; H, 6.48; N, 10.91; Pronađeno: C, 65.58; H, 6.40; N, 10.76.
5.2073-(4-(4-((2,6-DIMETILPIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0897]
[0898] Faza 1: U CNCH3rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.052 mmol), dodat je Cis-2,6-dimetilpiperidin (0.354 ml, 2.63 mmol). Mešavina je mešana na 50°C preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana. Filtrat je koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao čvrsta supstanca (0.6g, 112%). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0899] Faza 2: U THF rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.6 g, 1.182 mmol) na 0 °C, dodat je kalijum tert-butoksid (0.133 g, 1.182 mmol). Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina ugašena je sa 1N HCl rastvorom (2 mL) praćeno 20 mL NaHCO3 (zasićen) i EtOAc (20 mL). Nakon ekstrakcije, organski sloj je ispran sa 20 mL vode, zatim slanim rastvorom (10mL), i koncentrovan da bi se dobio 3-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.33g, 59%). mp: 205-207°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 4.74min<(96%).1H NMR (DMSO-d>6<) δ 0.94 (d, J = 6.2 Hz, 6H, CH>3<, CH>3<), 1.14 - 1.38 (m, 3H, CHH, CH>2<), 1.42 - 1.74>(m, 3H, CH2, CHH), 1.87 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 3H, CH2, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.70 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.33 (dd, J = 2.6, 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.39 (s, 4H, Ar), 7.43 - 7.56 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) 21.98, 22.31, 23.66, 31.15, 34.04, 45.03, 51.51, 53.56, 57.41, 69.50, 114.88, 115.13, 127.26, 127.41, 129.75, 129.90, 133.24, 134.00, 142.84, 153.52, 167.96, 170.91, 172.76; LCMS: 476; Anal. izrač. za C28H33N3O4+0.4 H2O: C, 69.66; H, 7.06; N, 8.70; Pronađeno: C, 69.46; H, 7.10; N, 8.41.
5.2083-{1-OKSO-4-[4-(4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0900]
[0901] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.60 g, 1.39 mmol) u acetonitrilu (15 ml) na sobnoj temperaturi, dodat je 4-fenilpiperidin (0.27 g, 1.67 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.28 ml, 1.67 mmol). Mešavina je mešana na 50°C tokom nekoliko sati i uparena da bi se dobilo ulje (1.20 g, 86% sirovi prinos).
[0902] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-((4-fenilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat (0.77 g, 1.39 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.31 g, 2.79 mmol), a mešavina je mešana tokom deset minuta.
Mešavina je brzo ugašena sa 1 N HCl (4ml) i odmah neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (5.5 ml do pH = 7). Mešavina je zatim mešan sa etil acetatom (25ml). Organska faza je odvojena, isprana slanim rastvorom (15 ml), i koncentrovana do svetlo žute čvrste supstance, koja je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 7% u 20 min) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-fenilpiperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.42 g, 58% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.80 min (96.3%); mp: 220-222°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.08-0.10 (d, 2H, CH2), 1.64-1.72 (m, 4H, CH2, CH2), 1.96-2.07 (m, 3H, CH, CH2), 2.39-2.42 (m, 1H, CHH), 2.51-2.60 (m, 1H, CHH), 2.85-2.97 (3H, CHH, CH2), 3.52 (br. s, 2H, CH2), 4.23 - 4.45 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.15 - 7.52 (m, 12H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 32.94, 41.69, 45.07, 51.55, 53.52, 62.05, 69.40, 114.96, 115.22, 125.97, 126.64, 127.64, 128.29, 129.00, 129.81, 129.94, 133.30, 135.21, 138.37, 146.19, 153.50, 167.99, 170.97, 172.82; LCMS MH = 524; Anal. Izrač. za C32H33N3O4: (+ 0.50 H2O): C, 72.16; H, 6.43; N, 7.89. Pronađeno: C, 71.83; H, 6.31; N, 7.80.
5.2093-{4-[4-(4-CIKLOPROPILMETIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0904] Faza 1: Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.50 g, 1.06 mmol) u acetonitrilu (50 mL), dodat je 1-(ciklopropilmetil)piperazin (0.35 ml, 2.33 mmol). Mešavina je mešana tokom jednog ipo sata, a onda koncentrovana da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-ciklopropilmetil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bela penasta čvrsta supstanca (0.83 g, 146% sirovi prinos). Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0905] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-(ciklopropilmetil)piperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.57 g, 1.06 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.29 g, 2.57 mmol). Mešavina je mešana tokom 15 minuta i ugašena je sa 1 N HCl (∼3ml) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (6 ml do pH = 7). Mešavina je mešana sa etil acetatom (20 ml), a onda je organska faza isprana slanim rastvorom (15 ml), odvojena i koncentrovana do beličaste penaste čvrste supstance. Ona je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 70 min) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-ciklopropilmetilpiperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beli prah (270 mg, 51% prinos); mp: 176-178°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.05 min (97.0%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.08- 0.10 (d, 2H, CH2), 0.45- 0.47 (d, 2H, CH2), 0.80-0.83 (m, 1H, CHH), 1.96-2.00 (m, 1H, CHH), 2.27-2.60 (preklopljen multiple peaks, 12H, CH2, CH2, CH2, CH2, CH2, CHH, CHH), 2.85-2.97 (m, 1H, CHH), 3.48 (s, 2H, CH2), 4.22 - 4.44 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.30 - 7.34 (m, 4H, Ar), 7.45 - 7.51 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 3.69, 7.75, 22.34, 31.18, 45.07, 51.55, 52.03, 52.37, 61.54, 62.36, 69.40, 114.96, 115.22, 127.63, 128.89, 129.80, 129.93, 133.29, 135.24, 137.92, 153.49, 167.99, 170.96, 172.82; LCMS MH = 503; Anal. Izrač. za C29H34N4O4: (+ 1.0 H2O): C, 66.90; H, 6.97; N, 10.76. Pronađeno: C, 66.67; H, 6.63; N, 10.42.
5.210 3-{4-[4-(4,4-DIMETIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0907] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil) benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.55 g, 1.28 mmol) u acetonitrilu (15 ml) na sobnoj temperaturi, dodati su 4,4-dimetilpiperidin hidrohlorid (0.23 g, 1.53 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.46 ml, 2.81 mmol). Mešavina je mešana preko noći a onda koncentrovana da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4,4-dimetil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il} -buterne kiseline kao svetlo žuta čvrsta supstanca (0.60 g, 92% prinos). Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0908] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4,4-dimetilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.59 g, 1.16 mmol) u THF (15 ml) u ledenom kupatilu, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.33 g, 2.94 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta i brzo ugašena sa 1 N HCl (4ml) i odmah neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (5.5 ml do pH = 7). Mešavina je zatim mešan sa etil acetatom (25 ml). Organska faza je odvojena, isprana slanim rastvorom (15 ml), i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 9% u 40 min) da bi se dobio 3-{4-[4-(4,4-dimetil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao fini beli prah (150 mg, 27% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.64 min (96.2%); mp: 168-170°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.95(s, 6H, 2CH3), 1.49 (br. s, 4H, CH2, CH2), 1.96-2.00 (m, 1H, CHH), 2.37-2.43 (m, 1H, CHH), 2.51-2.60 (m, 1H, CHH), 2.86-2.98 (3H, CHH, CH2), 3.50 (br. s, 2H, CH2), 4.23 - 4.45 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.31 - 7.51 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.35, 27.94, 31.18, 37.16, 45.06, 48.91, 51.56, 69.28, 114.97, 115.26, 127.69, 129.80, 129.94, 133.31,<153.44, 167.98, 170.97, 172.82; LCMS MH = 476; Anal. Izrač. za C>28<H>33<N>3<O>4<: C, 70.71; H, 6.99; N, 8.84.>Pronađeno: C, 66.15; H, 6.50; N, 8.02.
5.2113-(4-(4-((4-ETILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZILOKSI) -1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0910] Faza 1: U acetonitril rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.64 g, 1.346 mmol), dodat je 4-etilpiperidin (0.34 g, 3.00 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijena čvrsta supstanca je ekstrahovana sa CH2Cl2 (25 mL) i voda (25 mL). Organski sloj je ispran vodom (10 mL) zatim slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad Na2SO4, i koncentrovan da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao beličasta penasta čvrsta supstanca (0.67g, 98%). Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0911] Faza 2: U THF rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.67g, 1.320 mmol) dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.148 g, 1.320 mmol) na 0°C. Reakcija je ugašena dodavanjem zas. NaHCO3 (5 mL) nakon mešanja na 0°C tokom 1,5 sata. Mešavina je razblažena sa EtOAc (20 mL) i 10 mL vode, ekstrahovana, isprana slanim rastvorom. Organski sloj je koncentrovan na rotacionom isparivaču da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je delimično rastvorena u CH2Cl2(10mL), i dodat je etar (5 mL). Mešavina je mešana i filtrirana da bi se dobio 3-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao čvrsta supstanca (250 mg, 40%). mp: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 4.85 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.66 - 0.94 (m, 3H, CH3), 0.99 - 1.14 (m, 3H, CH, CH2), 1.15 - 1.29 (m, 2H, CH2), 1.47 - 1.71 (m, 2H, CH2), 1.78 - 1.92 (m, 2H, CH2), 1.93 - 2.06 (m, 1H, CH), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m1H, CHH), 2.77 (d, J = 10.8 Hz, 2H, CH2), 2.83 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.43 (s, 2H, CH2), 4.13 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.21 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.18, 22.36, 28.76, 31.21, 31.65, 36.97, 45.09, 51.58, 53.37, 62.19, 69.47, 114.97, 115.21, 127.61, 128.79, 129.81, 129.95, 133.31, 135.06, 138.66, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82; LCMS: 476; Anal. izrač. za C28H38N3O4+ 0.8 H2O: C, 68.63; H, 7.12; N, 8.58; Pronađeno: C, 68.66; H, 6.83; N, 8.44.
5.2123-(4-(4-((4-IZOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0913] Faza 1: U acetonitril rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.052 mmol), dodat je 4-izopropilpiperidin (0.294 g, 2.314 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijeno ulje je uzetu u EtOAc (15 mL) i ekstrahovano vodom (20 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad Na2SO4i koncentrovan da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-((4-izopropilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao ulje. Mešavina je upotrebljena bez daljeg prečišćavanja u sledećoj fazi.
[0914] Faza 2: U THF rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-((4-izopropilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.548 g, 1.05 mmol), dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.12 g, 1.069 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem 2 mL HCl (1N) i 5 mL NaHCO3(zasićen) praćeno 20 mL EtOAc i 10 mL vode. Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran vodom (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), i koncentrovan. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena na ISCO koloni da bi se dobio 3-(4-(4-((4-izopropilpiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (65 mg, 13%). mp: 124-126 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 4.98min (96.2%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.83 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0.90 - 1.06 (m, 1H, CH), 1.07 - 1.25 (m, 2H, CH2), 1.31 - 1.47 (m, 1H, CH), 1.51 - 1.63 (m, 2H, CH2), 1.76 - 1.92 (m, 2H, CH2), 1.93 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.74 - 2.88 (m, 2H, CH2), 2.88 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.40-3.46 (br. s., 2H, CH2), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.66, 22.36, 28.88, 31.21, 31.94, 41.84, 45.09, 51.58, 53.63, 62.13, 69.45, 114.97, 115.21, 127.61, 128.80, 129.81, 129.95, 133.31, 135.04, 153.51, 168.01, 170.96, 172.82; LCMS: 490; Anal. izrač. za C29H35N3O4+0.4 H2O: C, 70.11; H, 7.26; N, 8.46; Pronađeno: C, 70.10; H, 7.37; N, 8.36.
5.2133-{4-[4-(4-METOKSI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0916] Faza 1: U acetonitril rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 1.052 mmol), dodati su 4-metoksipiperidin (0.133 g, 1.157 mmol) i DIPEA (0.276 ml, 1.578 mmol). Nakon što je izmešana na sobnoj temperaturi preko noći, reakciona mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču, dajući metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-metoksi-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao ulje. Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0917] Faza 2: U THF rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-((4-metoksipiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.536 g, 1.052 mmol), dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.236 g, 2.104 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na ovoj temperaturi tokom 15 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem 10 mL 1N HCl praćeno 25 mL NaHCO3(zas.). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (30 mL). Organski sloj je koncentrovan da bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je mešana sa etrom preko noći. Dobijena suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-metoksipiperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.34g, 71%). mp: 149-151 °C. HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent do 95/5 acetonitril/0.1% H3PO4 u 5 min,: tR = 4.60 min (96%); ;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.28 - 1.51 (m, 2H, CH2), 1.70 - 1.87 (m, 2H, CH2), 1.90 - 2.15 (m, 3H, CHH, CH2), 2.34 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.56 - 2.69 (m, 3H, CHH, CH2), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.08 - 3.19 (m, 1H, CH), 3.21 (s, 3H, OCH3), 3.44 (s, 2H, CH2), 4.18 - 4.53 (m, 2H, CH2), 5.03 - 5.16 (m, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.57 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 30.63, 31.21, 50.48, 51.58, 54.77, 61.72, 69.44, 75.68, 114.95, 115.21, 127.62, 128.79, 128.83, 129.81, 129.95, 133.31, 135.12, 138.51, 153.51, 168.01, 170.96, 172.83; LCMS: 478; Anal. izrač. za C27H31N3O5 0.1 H2O: C, 67.40; H, 6.58; N, 8.73; Pronađeno: C, 67.32; H, 6.39; N, 8.52.
5.2143-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0919] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (600 mg, 1.262 mmol) u acetonitrilu (10 mL), su dodati 3,3-difluoropiperidin hidrohlorid (199 mg, 1.262mmol) i DIPEA (0.441 ml, 2.52 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom dva dana. Mešavina je koncentrovana i rastvorena u dihlorometanu (30 mL) i ponovo ekstrahovana sa NaHCO3(aq, zas.15 mL). Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(3,3-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (651 mg, 100% sirovi prinos). Čvrsta supstanca je uvedena u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja: LCMS MH = 516.
[0920] Faza 2: KOtBu (142 mg, 1.262 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-4-[4-(3,3-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benzil oksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (651 mg, 1.262 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0 °C. Dobijena reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 30 minuta pre nego što je razblažena dihlorometanom (20mL). Mešavina je zakišeljena sa HCl (1N, 2 mL, aq.) i neutralizovana sa NaHCO3 (zas. aq.2 mL) nakon čega je usledilo dodavanje slanog rastvora (8mL) i dihlorometana (30 mL). Mešavina je ekstrahovana i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (2 x 40 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni sa MgSO4. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je pretvoren u prah u dietil etru (50 mL) i filtriran da bi se dobio 3-{4-[4-(3,3-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (540 mg, 77% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 18/82, (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.44min (99.9%); mp: 140-142 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.57 - 1.71 (m, 2H, CH2), 1.76 - 2.08 (m, 3H, CH2, CHH), 2.34 - 2.45 (m, 2H, CH2), 2.45 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.68 (m, 3H, CH2, CHH), 2.81 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.57 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.32 (m, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.28 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.38 - 21.71, 22.33, 31.18, 31.61 (t, JC-F =23.1 Hz), 45.07, 51.12, 51.55, 57.48 (t, JC-F= 27.5 Hz), 60.56, 69.38, 114.94, 115.22, 121.05 (t, JC-F= 241.0 Hz), 127.67, 128.82, 129.78, 129.93, 133.30, 135.40, 137.34, 153.49, 167.99, 170.96, 172.81 ; LCMS MH = 484; Anal. Izrač. za C26H27F2N3O4+ 1.3 H2O: C, 61.6; H, 5.89; N, 8.29; Pronađeno: C, 61.39; H, 5.61; N, 8.00.
5.2153-(4-(4-((4-(METILSULFONIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0921]
[0922] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.455 g, 1.056 mmol) u acetonitrilu (10 ml), dodati su 1-(metilsulfonil)piperazin (0.225 g, 1.373 mmol) i DIPEA (0.436 ml, 2.64 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5.5 dana. Reakciona mešavina je razblažena dihlorometanom (40 mL) i isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je zatim osušen (MgSO4) i nakon filtracija agensa za sušenje, rastvarač je koncentrovan da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-(4-((4-(metilsulfonil) piperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat. Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0923] Kalijum tert-butoksid (0.154 g, 1.373 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.590 g, 1.056 mmol) u THF (20 mL) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 1 sata. Reakciona mešavina je zatim razblažen dihlorometanom (50 mL) i zakišeljena sa HCl (1N aq.4 mL). Mešavina je isprana sa NaHCO3 (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan ponovo dihlorometanom (2 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa MgSO4. Nakon filtracija agensa za sušenje, rastvarač je uparen. Ostatak je mešan u mešavini metanol/dihlorometan: 50/50. Filtrat je prečišćen pomoću ISCO Flash (suvo punjenje, gradijent, Metanol/dihlorometan: 0/100 do 5/95 u 30 min), eluiranjem proizvoda na 5/95. Rastvarač je zatim uparen i ostatak je mešan u etru. Čvrsta supstanca je filtrirana i osušena da bi se dobio 3-(4-(4-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.32 g, 2steps 58% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, acetonitril/0.1% H3PO4: gradijent 10/90 do 90/10 u 15 min; 5 min na 90/10: 6.23 min (97.27%), 8.02 min (2.25%); mp: 158-160 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.87 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.31 - 2.48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.53 - 2.69 (m, 1H, CHH), 2.86 (s, 3H, CH3), 2.89 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.02 - 3.20 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (s, 2H, CH2), 4.16 - 4.33 (m, 1H, CHH), 4.34 - 4.53 (m, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.40 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 33.55, 45.06, 45.41, 51.55, 51.71, 61.14, 69.35, 114.96, 115.22, 127.66, 128.90, 129.80, 129.93, 133.28, 135.38, 137.69, 153.46, 167.97, 170.96, 172.81; Anal. izrač. za C26H30N4O6S 0.2 H2O: C, 58.90, H, 5.78, N, 10.57; Pronađeno: C, 58.62, H, 5.51, N, 10.40.
5.2163-[1-OKSO-4-(4-PIPERIDIN-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0924]
[0925] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1∼1.5 mmol/g, 2.10 g, 2.63 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline u THF (20 mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil azodikarboksilata (0.52 mL, 2.63 mmol). Nakon mešanja tokom 15 minuta, dodat je (4-piperidin-1-ilmetil-fenil)-metanol (0.49 g, 2.39 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i potom filtrirana. Filtrat je uparen i prečišćen na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-piperidin-1-ilmetilbenziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline kao ulje (0.51 g, 88% prinos).
[0926] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.12 g, 1.06 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estar 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-piperidin-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.51 g, 1.06 mmol) u THF (8 mL) na 0°C tokom 10 minuta. Mešavina ugašena je sa 1N HCl (2 ml) i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 8). Mešavina je isprana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene i prečišćene pomoću prep HPLC da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-piperidin-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.07 g, 15% prinos); HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 acetonitril/0.1% H3PO4, 4.88 min (98.8%); mp: 186-188 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) d, 1.30 - 1.60 (m, 6H, 3CH2), 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.36 (m, 4H, 2CH2), 2.37 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.41 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, ArCH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) d 22.36, 23.99, 25.55, 31.21, 45.10, 51.58, 53.88, 62.54, 69.45, 114.97, 115.21, 127.59, 128.80, 129.81, 129.95, 133.31, 135.03, 138.58, 153.51, 168.01, 170.96, 172.83; LCMS MH = 448; Anal. Izrač. za C26H29N3O4.: C, 69.78; H, 6.53; N, 9.39. Pronađeno: C, 66.86; H, 6.15; N, 8.99.
5.2173-{4-[4-(4-METIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0927]
[0928] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 1.36 g, 1.85 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.45 g, 1.54 mmol) u THF (20mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2-dikarboksilatom (0.37 ml, 1.88 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je [4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-fenil]-metanol (0.41 g, 1.85 mmol). Mešavina je mešana tokom tri sata potom filtrirana, isprana metanolom (3 x 10 mL) i metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (aminska kolona, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 2% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao bistro ulje (0.50 g, 66% prinos).
[0929] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.11 g, 1.01 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline (0.50 g, 1.01 mmol) u THF (15 mL) na 0°C. Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1N HCl (3 mL), neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 mL do pH = 7), i brzo ekstrahovana etil acetatom (2 x 30 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca, koja je mešana u etil acetatu (10 mL) tokom jednog sata. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.12 g, 26% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 10/90 u 15 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 9.82 min (99.7%); mp: 188-190°C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 -<2>.0<4>(m, 1H, CHH), 2.14 (s, 3H, CH3), 2.20 - 2.46 (m, 9H, CHH, CH2CH2<,>CH2CH2), 2.55 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.05 (m, 1H, CHH), 3.45 (s, 2H, CH2), 4.17 - 4.50 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.56 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.09, 45.72, 51.58, 52.52, 54.71, 61.74, 69.44, 114.98, 115.23, 127.62, 128.88, 129.81, 129.95, 133.31, 135.17, 138.18, 153.51, 168.01, 170.96, 172.82; LCMS MH = 463; Anal. Izrač. za C26H30N4O4: C, 67.51; H, 6.54; N, 12.11; Pronađeno: C, 67.23; H, 6.67; N, 11.78.
5.218 TERT-BUTIL ESTAR 4-{4-[2-(2,6-DlOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-BENZIL}-PIPERAZIN-1-KARBOKSILNE KISELINE
[0930]
[0931] Faza 1: U acetonitril rastvor metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.8 g, 1.8 mmol), dodat je t-butil-piperazin-karboksilat (0.86 g, 4.6 mmol) i DIPEA (0.62 mL, 4.6 mmol). Nakon što je izmešana na sobnoj temperaturi preko noći, mešavina je koncentrovana i ekstrahovana sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), koncentrovan da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline kao ulje, koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0932] Faza 2: U THF rastvor (20 mL) tert-butil estra 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline (1.04g, 1.8 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (0.3 g, 2.7 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvorom praćeno 15 mL zasićenog NaHCO3rastvora. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i metanol da bi se dobio tert-butil estar 4-4-[2-(2,6-Dioksopiperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline kao ulje (170 mg, 18%). mp: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR= 5.03 min (94%); LCMS MH = 549.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, CH3, CH3,CH3), 1.87 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.30 (t, J = 4.8 Hz, 4H, CH2,CH2), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 -3.00 (m, 1H, CHH), 3.30 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.48 (s, 2H, CH2), 4.14 - 4.57 (m, 2H, CH2), 5.00 - 5.17 (m, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 4H, Ar), 7.45 (d, J = 8.7 Hz, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 27.96, 31.13, 45.02, 51.51, 52.28, 61.55, 69.33, 78.64, 114.91, 115.18, 127.58, 128.90, 129.76, 129.89, 133.25, 135.25, 137.70, 153.43, 153.71, 167.92, 170.91, 172.76; Anal. izrač. za C30H36N4O6 0.2 H2O: C, 65.25; H, 6.64; N, 10.15; Pronađeno: C, 64.96; H, 6.51; N, 10.11.
5.219 3-[1-OKSO-4-(4-PIPERAZIN-1-ILMETIL-BENZILOKSI)-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION
[0933]
[0934] Faza 1: U acetonitril rastvor metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.8 g, 1.8 mmol), dodati su t-butil-piperazin-karboksilat (0.86 g, 4.6 mmol) i DIPEA (0.62 mL, 4.6 mmol). Nakon što su umešani na sobnoj temperaturi preko noći, mešavina je koncentrovana i ekstrahovana sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline kao ulje, koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0935] Faza 3: U THF rastvor (20 mL) tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline (1.04g, 1.8 mmol), dodat je kalijum t-butoksid (0.3 g, 2.7 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana tokom 15 minuta na 0°C i ugašena sa 5 mL 1N HCl rastvor praćeno 15 mL zasićenim NaHCO3rastvorom. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i metanolom da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(2,6-Diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline kao ulje (170 mg, 18%). mp: 180-182°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1 % H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 5.03 min (94%); LCMS MH = 549.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, CH3, CH3,CH3), 1.87 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.30 (t, J = 4.8 Hz, 4H, CH2,CH2), 2.40 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.30 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.48 (s, 2H, CH2), 4.14 - 4.57 (m, 2H, CH2), 5.00 - 5.17 (m, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.7 Hz, 4H, Ar), 7.45 (d, J = 8.7 Hz, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 27.96, 31.13, 45.02, 51.51, 52.28, 61.55, 69.33, 78.64, 114.91, 115.18, 127.58, 128.90, 129.76, 129.89, 133.25, 135.25, 137.70, 153.43, 153.71, 167.92, 170.91, 172.76. Anal. izrač. za C30H36N4O6 0.2H2O: C, 65.25; H, 6.64; N, 10.15; Pronađeno: C, 64.96; H, 6.51; N, 10.11.
[0936] Faza 4: U CH2Cl2rastvor (10 mL) tert-butil estra 4-{4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperazin-1-karboksilne kiseline (0.37g, 0.675 mmol), dodat je hlorovodonik u rastvoru etra (2.0 M, 1.6 mL, 8 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana. Dobijena čvrsta supstanca je umešana sa etrom da bi se dobio 3-[1-okso-4-(4-piperazin-1-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (240 mg, 69%). mp: 196-198°C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1% H3PO4 u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 5.10 min (96%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.59 (d, J = 15.7 Hz, 1H, CHH), 2.84 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.09 - 3.32 (b, 2H, CH2), 3.41-3.51 (b, 4H, CH2,CH2), 4.22 - 4.53 (m, 4H, CH2, CH2), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.29 (s, 7H, CH2), 7.28 - 7.38 (m, 7H, Ar), 7.43 - 7.54 (m, 4H, Ar), 7.55 - 7.71 (m, 14H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 15.05, 22.32, 31.13, 45.02, 47.29, 51.52, 68.94, 114.90, 115.31, 127.79, 129.78, 129.90, 131.44, 133.30, 153.30, 167.89, 170.91, 172.76; LCMS MH = 449. Anal. izrač. za C25H28N4O42.1HCl+ 1 H2O: C, 55.29; H, 5.96; N, 10.32; Cl, 13.71%. Pronađeno: C, 55.39; H, 6.13; N, 10.19; Cl: 13.61.
5.2203-{4-[4-(4-METIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0937]
[0938] 4-Metilpiperidin (0.49 g, 4.94 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.71 g, 1.65 mmol) u DMF (15 mL) na 50°C preko noći. Mešavini je dodat kalijum karbonat (0.23 g, 1.65 mmol), i mešavina je zagrevana na 90°C preko noći. Mešavina je koncentrovana da bi se dobilo ulje, koje je umešano u etil acetatu (10mL) preko noći. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio braon filtrat, koji je uparen i prečišćen na koloni sa silikagelom sa MeOH(rastvarač B)/dihlorometan(rastvarač A) kao eluenti da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Metilpiperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.22 g, 30% prinos preko 3 steps); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.16 min (98.1%); mp: 189-191oC; 1H NMR (DMSO-d6) δ 0.88 (d, J = 6.4 Hz, 3H, CH3), 1.04 - 1.20 (m, 2H, CHH), 1.23 - 1.41 (m, 1H, CHH), 1.49 - 1.63 (m, 2H, CH2), 1.81 - 2.04 (m, 3H, CH, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.69 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.38 - 3.52 (m, 2H, CH2), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 21.79, 22.36, 30.23, 31.21, 33.89, 45.10, 51.58, 53.22, 62.10, 69.44, 114.97, 115.23, 127.61, 128.86, 129.81, 129.94, 133.31, 135.12, 153.51, 168.01, 170.96, 172.83; LCMS MH = 462; Anal. Izrač. za C27H31N3O4 0.1 H2O: C, 69.99; H, 6.79; N, 9.07. Pronađeno: C, 69.84; H, 6.81; N, 9.12.
5.2213-{4-[4-(4-TERT-BUTIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0939]
[0940] Faza 1: metil estar 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.63 g, 1.46 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 4-tert-butilpiperidin hidrohlorida (0.78 g, 4.37 mmol) i diizopropiletilaminu (0.96 mL, 5.83 mmol) u DMF (15 mL) na 70°C. Mešavina je zagrevana tokom 5 sati a onda uparena i prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-{4-[4-(4-tert-butil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline kao svetlo braon uljana čvrsta supstanca (1.23 g), koja je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0941] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil estra 4-{4-[4-(4-tert-butil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline u THF (15 ml) na sobnoj temperaturi dodat je kalijum tert-butoksid (0.33 g, 2.90 mmol). Mešavina je mešana tokom 30 minuta ili dok LCMS nije pokazala da nema polaznog materijala. Mešavina ugašena je sa 1 N HCl (2 ml) da bi se dobio bistar braon rastvor a onda neutralizovan zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 7). Mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 30 mL), isprana slanim rastvorom i koncentrovana do braon čvrste supstance. Ona je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-tert-butil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il} -piperidin-2,6-dion kao svetlo braon čvrsta supstanca (0.56 g, 76% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.62 min (96.6%); mp: 208-210°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.82 (s, 9H, 3CH3), 0.88 - 1.05 (m, 1H, CHH), 1.09 - 1.31 (m, 2H, CH2), 1.49 - 1.65 (m, 2H, CH2), 1.83 (t, J = 11.5 Hz, 2H, CH2), 1.92 -2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.79 - 3.00 (m, 3H, CH, CH2), 3.38 -3.47 (m, 2H, CH2), 4.20 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.25 -7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 26.4427.19, 31.21, 31.84, 45.09, 45.94, 51.58, 53.98, 62.09, 69.45, 114.97, 115.21, 127.61, 128.77, 129.81, 129.94, 133.31, 135.04, 138.64, 153.51, 168.01, 170.96, 172.82; LCMS MH = 504; Anal. Izrač. za C30H37N3O4+ 0.1 H2O: C, 71.29; H, 7.42; N, 8.31. Pronađeno: C, 70.96; H, 7.63; N, 8.32.
5.2223-{4-[4-(4-HIDROKSI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0942]
[0943] Faza 1: U umešani bezbojan rastvor metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.51 g, 1.19 mmol) u acetonitrilu (15 ml) dodat je piperidin-4-ol hidrohlorid (0.16 g, 1.19 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.49 ml, 2.98 mmol). Mešan je na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodat piperidin-4-ol hidrohlorid (0.09 g) i DIPEA (0.4 mL) i zagrejan na 50°C preko noći. Mešavina je prečišćena na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 minuta) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-hidroksi-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (0.75 g, 78% prinos).
[0944] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-hidroksipiperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.67 g, 1.35 mmol) u THF (30 ml) na sobnoj temperaturi, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.61 g, 5.41 mmol). Mešan je tokom deset minuta a onda ugašen sa 1N HCl (2 ml), i neutralizovan zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 7). Mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 20 mL). Kombinovane faze etil acetata su prečišćene na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-hidroksi-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.24 g, 38% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.16 min (97.3%); mp: 204-206°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.28 - 1.48 (m, 2H, CH2), 1.58-1.79 (m, 2H, CH2), 1.89- 2.15 (m, 3H, CHH, CH2), 2.37 -2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.71 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.39 - 3.49 (m, 3H, CH2, CHH), 4.21 - 4.47 (m, 2H, CH2), 4.53 (d, J = 4.2 Hz, 1H, OH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1 H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 34.37, 45.10, 50.82, 51.58, 61.77, 66.26, 69.44, 114.97, 115.21, 127.62, 128.80, 129.81, 129.95, 133.31, 135.10, 138.58, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS MH = 464; Anal. Izrač. za C26H29N3O5+ 0.5 H2O: C, 66.09; H, 6.40; N, 8.89. Pronađeno: C, 65.95; H, 6.31; N, 8.74.
5.223 3-{4-[4-(4-ETOKSIMETIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0945]
[0946] Faza 1: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.67 g, 1.54 mmol) u acetonitrilu (15 ml) u ledenom kupatilu, dodat je 4-(etoksimetil)piperidin (0.44 g, 3.09 mmol). Mešan je na sobnoj temperaturi tokom pola sata, praćeno dodavanjem jednog ekvivalenta DIPEA (0.26 mL), i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcionoj mešavini je dodato 0.17 g 4-(etoksimetil)piperidina i 0.30 mL DIPE. Mešavina je zagrevana na 70°C tokom tri sata a onda ohlađena do sobne temperature. Rastvor je uparen do ulja, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(4-etoksimetil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0947] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-(etoksimetil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.83 g, 1.54 mmol) u THF (10 ml) u ledenom kupatilu, dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.52 g, 6.18 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1 N HCl (4 mL) kako bi se obrazovao bistar rastvor koji je zatim neutralizovan zasićenim natrijum bikarbonatom (7 ml do pH = 8). Dobijena mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 20 mL) i prečišćen na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2 gradijent od 1% do 9% u 50 min) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-etoksimetil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso 1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.45 g, 58% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 5.38 min (96.7%); mp: 168-170°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 3H, CH3), 1.12 - 1.23 (m, 2H, CH2), 1.40 - 1.54 (m, 1H, CHH), 1.55 - 1.67 (m, 2H, CH2), 1.81 - 2.04 (m, 3H, CHH, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.72 - 2.82 (m, 2H, CH2), 2.84 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.19 (d, J = 6.2 Hz, 2H, CH2), 3.34 - 3.48 (m, 4H, CH2, CH2), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 15.10, 22.36, 28.92, 31.20, 35.80, 45.10, 51.58, 52.93, 62.19, 65.44, 69.45, 74.83, 114.97, 115.23, 127.61, 128.80, 129.81, 129.95, 133.31, 135.07, 138.64, 153.53, 168.01, 170.98, 172.83; LCMS MH = 506; Anal. Izrač. za C29H35N3O5+ 0.5 H2O: C, 67.68; H, 7.05; N, 8.17. Pronađeno: C, 67.42; H, 7.20; N, 8.05.
5.2243-(1-OKSO-4-(4-((4-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL) METIL)BENZILOKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0948]
Faza 1: tert-butil 5-amino-5-okso-2-(1-okso-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat
[0949] Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 0.95 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (0.42 mL, 2.38 mmol) u MeCN (9 mL), dodat je 4-(trifluorometil)piperidin hidrohlorid (271 mg, 1.43 mmol). Mešavina je mešana tokom 5 h na 60 °C. Sirova mešavina je podeljena između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Osnovni aq sloj je ispran dodatnim EtOAc (∼100 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio tert-butil 5-amino-5-okso-2-(1-okso-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat kao ulje (570 mg). LC/MS M+H = 590. Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: 3-(1-Okso-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benziloksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[0950] Ohlađenom rastvoru tert-butil 5-amino-5-okso-2-(1-okso-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoata (561 mg, 0.95 mmol) u THF (10 mL) u ledenom kupatilu, dodat je KO<t>Bu (128 mg, 1.14 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona mešavina je mešana tokom∼2 h na sobnoj temperaturi. Dodatni KO<t>Bu (28 mg) dodat je i reakciona mešavina je mešana tokom ∼2 h. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena sirćetnom kiselinom (0.163 mL, 2.85 mmol). Mešavina je koncentrovana u vakuumu i dobijena čvrsta supstanca je podeljena između EtOAc (100 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Aq. sloj je ekstrahovan sa EtOAc (50 mL), i kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca (∼400 mg). Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa Et2O (40 mL) sonikacijom, sakupljena filtracijom, i isprana dodatnim Et2O. Čvrsta supstanca je osušena sukcijom i drugo pretvaranje u prah je izvedeno primenom vode (120 mL). Preostala čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda osušena u vakuum sušnici na 40 °C preko noći da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (328 mg, 67% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.16 min (96.5 %); mp: 178-180 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 - 1.55 (m, 2H, CHH, CHH), 1.66 - 1.82 (m, 2H, CHH, CHH), 1.87 - 2.05 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.14 - 2.35 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3.48 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CHH), 5.17 -5.28 (m, 2H, CH2), 7.21 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 24.19, 31.18, 38.35, 39.07, 45.06, 51.39, 51.55, 61.59, 69.39, 114.96, 115.20, 127.64, 127.82 (q, J = 278 Hz, CF3), 128.79, 129.80, 129.93, 133.30, 135.22, 138.11, 153.49, 167.99, 170.96, 172.81; Deo kvarteta (2 signali) koji potiče iz CF3C zamaskirani su DMSO pikom oko δ 40 ppm. LC/MS M+H = 516; Anal. izrač. za C27H28F3N3O4 0.35 H2O: C, 62.15; H, 5.54; N, 8.05; F, 10.92. Pronađeno: C, 62.13; H, 5.48; N, 8.06; F, 9.84.
5.2253-(4-(4-(((2R,6S)-2,6-DIMETILPIPERAZIN-1-IL)METIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0951]
[0952] Faza 1: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (400 mg, 0.846 mmol) u acetonitrilu (10 ml) su dodati (3R,5S)-tert-butil 3,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (236 mg, 1.099 mmol), N,N-Diizopropiletilamin (328 mg, 2.54 mmol) i natrijum jodid (25 mg, 0.17mmol). Formirana mešavina je zagrevana na 70 °C tokom 2 dana. Reakciona mešavina je koncentrovana, ostatak je podeljen između etil acetata (50 ml) i vodenog zasićenog natrijum bikarbonata (10 ml), organski sloj je ispran vodom, slanim rastvorom i osušen iznad MgSO4, i rastvarač je uparen pod vakuumom, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 50 min) da bi se dobio (3R,5S)-tert-butil 4-(4-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoisoi-ndolin-4-iloksi)metil)benzil)-3,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (480 mg, 87% prinos).
[0953] Faza 2: Mešavini (3R,5S)-tert-butil 4-(4-((2-(5-amino-1-tert-butoksi-1,5-dioksopent -an-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)-3,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (480 mg, 0.738 mmol) u THF dodat je kalijum tert-butoksid (83 mg, 0.738 mmol) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 10 minuta, zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 4 sata. Dodatni kalijum tert-butoksid (25 mg, 0.22 mmol) dodat je i mešavina je mešana tokom naredna 2 sata. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (0.2 ml), THF je uparen, a ostatak je podeljen između etil acetata (100ml) i vodenog zasićenog natrijum bikarbonata (10 ml). Organska faza je isprana slanim rastvorom, osušen iznad MgSO4. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO (kolona od 40 g, MeOH/CH2Cl2 gradijent od 0% do 5% u 50 min) da bi se dobio (3R,5S)-tert-butil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)meth- il)benzil)-3,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 28% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 6H, CH3, CH3), 1.38 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.84 - 2.11 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.49 (m, 3H, CHH, CH2), 2.52 - 2.75 (m, 3H, CHH, CH2), 2.81 - 3.06 (m, 1H, CHH), 3.62 - 3.80 (m, 4H, CH2, CH, CH), 4.18 - 4.51 (m, 2H, CH2), 5.06 - 5.16 (m, 1H, CH), 5.18 - 5.26 (m, 2H, CH2), 7.29 - 7.52 (m, 7H, Ar), 10.84 - 11.10 (m, 1H, NH).
[0954] Faza 3: Mešavini (3R,5S)-tert-butil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoisoi- ndolin-4-iloksi)metil)benzil)-3,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120mg, 0.208mm- ol) u dihlorometanu (40 mL) dodat je HCl rastvor u etru (2 N, 5 ml, 10 mmol), Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Obrazovani talog je odvojen filtracijom da bi se dobio 3-(4-(4-(((2R,6S)-2,6-dimetilpiperazin-1-il)metil)-benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 75% prinos); mp: 253-255 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.16 - 1.40 (m, 6H, CH3, CH3), 1.97 (d, J = 5.3 Hz, 1H.CHH), 2.24 - 2.43 (m, 1H, CHH), 2.58 (d, J = 2.1 Hz, 1H, CHH), 2.71 - 3.06 (m, 3H, CH2, CHH), 3.07 - 3.59 (m, 4H, CH2, CH, CH), 4.04 - 4.54 (m, 4H, CH2, CH2), 5.02 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.21 -7.34 (m, 2H, Ar), 7.38 - 7.56 (m, 5H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 15.82, 22.27, 31.03, 38.23, 45.25, 45.90, 50.32, 51.69, 68.96, 115.10, 115.39, 127.82, 129.70, 129.86, 129.97, 133.11, 136.86, 153.24, 168.25, 170.87, 172.94; LCMS MH-2HCl = 477; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, Gradijent (CH3CN/0.1% HCOONH4) 5/95 do 95/5 u 5min, 95/510min: tR = 4.21 (100%); Anal. Izrač. za C27H34N4O4Cl2 0.9 H2O: C, 57.33; H, 6.38; N, 9.90; Pronađeno: C, 57.36; H, 6.36; N, 9.80.
5.2263-(1-OKSO-4-(4-((3-OKSOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZILOKSI) IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[0955]
[0956] Suspenziji tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (450 mg, 0.951 mmol, pripremanje je opisano ovde) u MeCN (9 mL) dodat je piperazin-2-on (191 mg, 1.903 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.249 mL, 1.427 mmol). Mešavina je zagrejana do 60 °C i mešan tokom ∼18 h, a onda je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Čvrsta supstanca je obrazovana usled hlađena koja je dispergovana dodavanjem DMF (3 mL) i sonikacijom. Mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i dodat je čvrsti KO<t>Bu (299 mg, 2.66 mmol) u jednoj porciji. Suvi THF(2 mL) dodat je i ledeno kupatilo je uklonjeno. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Mešavina je ohlađena do 0 °C u ledenom kupatilu a onda ugašena sirćetnom kiselinom (254 µl, 4.44 mmol). Mešavina je koncentrovana u vakuumu i uljani ostatak je podeljen između EtOAc (200 mL) i 1N NaHCO3 (40 mL). Proizvod podeljena i na vodeni i organski sloj. Svi slojevi su kombinovani, zakišeljeni sa HCl, i koncentrovani da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa sa velikom količinom DMF, mešavina je isfiltrirana, i nerastvorene čvrste supstance su isprane dodatnim DMF (ukupna zapremina filtrata ∼150 mL). Filtrat je koncentrovan do uljanog ostatka koji je ponovo rastvoren u DMF/1 N HCl (6 mL/4 mL) a onda prečišćen injektiranjem na koloni C-18 preparativne HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 30% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-((3-oksopiperazin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (177 mg, 43% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.58 min (98.3%); mp: 245-247 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.51 -2.63 (m, 3H, CHH, CH2), 2.80 - 2.99 (m, 3H, CHH, CH2), 3.06 - 3.23 (m, 2H, CH2), 3.54 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.21 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.56 (m, 3H, Ar), 7.74 (s, 1H, NH), 10.96 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.07, 48.35, 51.55, 56.62, 60.40, 69.38, 114.97, 115.22, 127.70, 128.91, 129.80, 129.95, 133.30, 135.49, 137.28, 153.48, 167.56, 167.99, 170.96, 172.81; LC/MS M+H = 463; Anal. izrač. za C25H26N4O5: C, 64.92; H, 5.67; N, 12.11. Pronađeno: C, 61.40; H, 5.38; N, 11.45.
5.2273-{4-[4-(4-DIMETILAMINO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0957]
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4- {4-[4-(4-izopropil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[0958] Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.674 g, 1.418 mmol) u acetonitrilu (15 ml) na sobnoj temperaturi dodat je N,N-dimetilpiperidin-4-amin (0.545 g, 4.25 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta i onda je uparena da bi se dobilo ulje. Ono je umešano u metilen hloridu (30ml) i vodi (10ml). Metilen hlorid faza je odvojena i uparena da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4- {4-[4-(4-izopropil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-buterne kiseline kao ulje (0.76 g, 103% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje 3-{4-[4-(4-Dimetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0959] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((4-(dimetilamino)piperidin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.76 g, 1.454 mmol) u THF (20 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.32 g, 2.90 mmol). Mešavina je mešana tokom deset minuta i dodata je 1 N HCl (2 ml do pH = 3), zatim je neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 ml do pH = 7).
Mešavina je mešana sa etil acetatom (50 ml). Organska faza je odvojena i isprana slanim rastvorom (20ml) i koncentrovana da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca. Mešana je u acetonitrilu (4 ml) na 70°C tokom pola sata i filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Dimetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.18 g, 25% prinos); mp 209-211°C;<1>HNMR(DMSO-d6)δ 1.35 (qd, J = 3.8, 11.8 Hz, 2H, CH2), 1.61 - 1.76 (m, 2H, CH2), 1.82 - 2.08 (m, 4H, CH2, CHH, CH), 2.14 (s, 6H,2CH3), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.74 - 3.01 (m, 3H, CH2, CHH), 3.43 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.37 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 28.05, 31.21, 41.49, 45.09, 51.58, 52.41, 61.61, 61.80, 69.45, 114.97, 115.21, 127.62, 128.77, 129.81, 129.95, 133.31, 135.09, 138.58, 153.51, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS (M+1)<+>= 491; Anal. izrač. za C28H34N4O4+0.2H2O: C, 68.05; H, 7.02; N, 11.34. Pronađeno: C, 67.88; H, 6.88; N, 11.19.
5.2283-{4-[4-(4-IZOPROPIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0961] U acetonitril rastvor mešavine (∼1:1) 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.25 g, 0.564 mmol) i 3-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.225 g, 0.564 mmol)dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.292 g, 2.256 mmol) praćeno 1-izopropilpiperazinom (0.174 g, 1.354 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Bela suspenzija je uparena pod vakuumom da bi se oslobodila od acetonitrila. Dobijena bela čvrsta supstanca je mešana u vodi (40 ml) i metilen hloridu (2x40 ml). Kombinovane faze metilen hlorida su ponovo isprane vodom (50 ml) a onda uparene u vakuumu da bi se dobila bela uljana čvrsta supstanca, koja je mešana u dietil etru (25 ml) preko noći. Suspenzija je filtrirana da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca, koja je umešana sa acetonitrilom (4 ml) i mešana u 50°C uljanom kupatilu tokom pola sata zatim je suspenzija filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Izopropil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.187 g, 34% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.94 min (95.8%); mp, 193-195°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.94 (d, J = 6.4 Hz, 6H, 2CH3), 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.21 - 2.48 (m, 9H, 4CH2, CH), 2.53 - 2.67 (m, 2H, CHH, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.44 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.36 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR(DMSO-d6) δ 18.22, 22.36, 31.21, 45.09, 47.95, 51.58, 53.04, 53.55, 61.81, 69.44, 114.97, 115.23, 127.62, 128.86, 129.81, 129.95, 133.31, 135.13, 138.24, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83. Anal. izrač. za C28H34N4O4 0.1H2O: C, 68.30; H, 7.00; N, 11.38.
Pronađeno: C, 68.21; H, 6.61; N, 11.19.
5.229 3-{1-OKSO-4-[4-(4-FENIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0962]
[0963] U CH3CN rastvor (15 ml) 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.50 g, 1.13 mmol) i dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.373 ml, 2.256 mmol) praćeno 1-fenilpiperazinom (0.257 ml, 1.692 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i dobijena bela čvrsta supstanca je mešana u vodi (50 ml) i ekstrahovana metilen hloridom (2 x 80 ml). Kombinovane faze metilen hlorida su ponovo isprane vodom (50 ml), slanim rastvorom (30 ml) i uparene do bele čvrste supstance koja je mešana u acetonitrilu (8 ml) na 50°C tokom jednog sata potom filtrirana, osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.316 g, 53% prinos); mp, 195-197°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.70 min (95.43%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.65 (m, 2H, CHH, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.12 (t, J = 5.1 Hz, 4H, CH2, CH2), 3.50 -3.62 (m, 2H, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 - 5.30 (m, 2H, CH2), 6.76 (t, J = 7.3 Hz, 1H, Ar), 6.91 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.15 - 7.25 (m, 2H, Ar), 7.28 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.09, 48.18, 51.58, 52.52, 61.71, 69.41, 114.97, 115.24, 115.35, 118.76, 127.68, 128.86, 129.01, 129.82, 129.95, 133.32, 135.30, 137.93, 150.98, 153.50, 168.01, 170.98, 172.83. LC/MS (M+1)<+>= 525; Anal. izrač. za C31H32N4O4: C, 70.97; H, 6.15; N, 10.68. Pronađeno: C, 70.69; H, 6.01; N, 10.49.
5.2303-{4-[4-(4-CIKLOPROPANSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0964]
Faza 1: tert-butil estar 4-ciklopropansulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0965] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (1.3 g, 6.98 mmol) u anhidrovanom DCM (10 mL) dodat je TEA (1.167 ml, 8.38 mmol) i ciklopropansulfonil hlorid (1.079 g, 7.68 mmol) na sobjoj temperaturi. Obrazovana je bela čvrsta supstanca i mešavina je mešana tokom 2 h. Reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (40 mL) i isprana vodom (25 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan da bi se dobio tert-butil estar 4-ciklopropansulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (2.3g, 113% sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. LCMS MH = 291.
Faza 2: 1-(ciklopropilsulfonil)piperazin hidrohlorid
[0966] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(ciklopropilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (2.3 g, 7.92 mmol) u DCM (Zapremina: 10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je HCl u etru (11.88 ml, 23.76 mmol). Reakciona mešavini je mešana na sobnoj temperaturi tokom 22 h i čvrsta supstanca je formirana tokom reakcije. Suspenzija je dodata dietil etrom (20 mL) i mešana tokom 10 min pre nego što je isfiltrirana. Bela čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (2 x 15 mL) i osušena pod sukcijom da bi se dobio 1-(ciklopropilsulfonil)piperazin hidrohlorid kao čvrsta supstanca (1.51 g, 84% prinos); LCMS MH = 191;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.85 - 1.09 (m, 4H, CH2, CH2), 2.63 - 2.81 (m, 1H, CH), 3.06 - 3.23 (m, 4H, CH2, CH2), 3.33 - 3.57 (m, 4H, CH2, CH2), 9.54 (br. s., 2H, NH2Cl).
Faza 3: 3-{4-[4-(4-ciklopropansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0967] Izmešanoj suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300mg, 0.677 mmol) i 1-(ciklopropilsulfonil)piperazin hidrohlorida (230 mg, 1.015 mmol) u acetonitrilu (Zapremina: 10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0.355 ml, 2.030 mmol). Suspenzija postaje bistra, a dobijena mešavina se umešava na sobnoj temperaturi tokom dalje reakcije. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 h pre dodavanja EtOAc (50 mL) i NaHCO3 (aq, zas, 20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću slikaa gel hromatografije da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Ciklopropansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (227 mg, 61% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, CH3CN/0.1%H3PO4), 4.09min (99.9%); m.p.145-147°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.86 - 1.05 (m, 4H, CH2, CH2), 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.53 - 2.66 (m, 2H, CHH, CH), 2.81 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.11 - 3.24 (m, 4H, CH2, CH2), 3.52 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.27 -7.38 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 3.75, 22.34, 24.46, 31.16, 45.06, 45.80, 51.55, 51.85, 61.20, 69.35, 114.94, 115.22, 127.67, 128.90, 129.80, 129.93, 133.28,<135.37, 137.69, 153.46, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 553; Anal. Izrač. za C>28<H>32<O>6<S 0.5H>2<O>0.15CH2Cl2 : C, 58.86; H, 5.84; N, 9.75; Pronađeno: C, 58.53; H, 5.47; N, 9.57.
5.2313-{4-[4-(4-CIKLOHEKSANIULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL) -BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
Faza 1: tert-butil estar 4-Cikloheksaniulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0969] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilat (450 mg, 2.416 mmol) u anhidrovanom DCM (10 mL) dodat je cikloheksaniulfonil hlorid (485 mg, 2.66 mmol) i trietilamin (0.370 ml, 2.66 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 min i reakcija je završena. Reakcija je završena. Reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (40 mL) i mešavina je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-Cikloheksaniulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (750 mg, 93% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH (bez boc group) = 233.
Faza 2: 1-Cikloheksaniulfonil-piperazin hidrohlorid
[0970] Rastvoru tert-butil 4-(cikloheksilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (750mg, 2.256 mmol) u DCM (5 mL) dodat je HCl (2M u etru, 5 mL, 10.00 mmol) i dietil etar (5.0 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 4 dana i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak dodat je pomoću HCl (2M u etru, 15 mL) i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i reakcija je završena. Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana etrom (2x15 mL) da bi se dobio 1-Cikloheksaniulfonil-piperazin hidrohlorid kao beličasta čvrsta supstanca (450 mg, 74% prinos). i HNMR were tested for jedinjenje.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.03 - 1.45 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1.54 - 1.69 (m, 1H, CH), 1.70 - 1.84 (m, 2H, CH2), 1.90 - 2.05 (m, 2H, CH2), 3.03 - 3.16 (m, 4H, CH2, CH2), 3.17 - 3.28 (m, 1H, CHH), 3.41 - 3.57 (m, 4H, CH2, CH2), 9.42 (br. s., 2H, NH2Cl); LCMS MH = 233.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-Cikloheksaniulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0971] U mešanu suspenziju 1-(cikloheksilsulfonil)piperazin hidrohlorida (273 mg, 1.01 mmol) u acetonitrilu (8 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0.36 ml, 2.03 mmol). Suspenzija je postala bistar rastvor odmah. Bistrom rastvoru dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (300mg, 0.68 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 h. Reakcionoj mešavini je dodata EtOAC (50 mL) i NaHCO3(zas. aq.20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi dao 3-{4-[4-(4-Cikloheksaniulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao belu čvrstu supstancu (150 mg, 37% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, CH3CN/0.1% H3PO4), 5.03min (99.9%); mp: 245-247°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.03 - 1.21 (m, 1H, CHH), 1.21 - 1.45 (m, 4H, CH2, CH2), 1.59 (br. s., 1H, CHH), 1.78 (br. s., 2H, CH2), 1.97 (d, J = 7.6 Hz, 3H, CHH, CH2), 2.32 - 2.47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.09 (t, J = 11.4 Hz, 1H, CH), 3.17 - 3.28 (m, 4H, CH2, CH2), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.18 - 4.32 (m, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.40 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 24.43, 24.75, 26.18, 31.16, 45.06, 45.52, 51.55, 52.54, 59.29, 61.31, 69.35, 114.96, 115.22, 127.64, 128.92, 129.80, 129.93, 133.28, 135.35, 137.64, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 595; Anal. Izrač. za C31H38N4O6S : C, 62.61; H, 6.44; N, 9.42; Pronađeno: C, 62.63; H, 6.21; N, 9.56.
5.2323-(4-((4-((4-(METILSULFONIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
(referentni primer)
[0972]
[0973] Bistrom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) u acetonitrilu (5 mL, 96 mmol), dodat je 4-(metilsulfonil)piperidin (110 mg, 0.677 mmol) i dobijena gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (10 mL), mešana tokom 5 min, potom filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana sa EtOAc (2 mL) i vodom (2 mL) i osušena dalje u vakuum pećnici na 50 °C da bi dala 3-(4-((4-((4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao belu čvrstu supstancu (140 mg, 59% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.92 min (98.2%); mp: 173-175 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.47 - 1.69 (m, 2H, CHH, CHH), 1.84 - 2.07 (m, 5H, CHH, CHH, CHH, CHH, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.97 (m, 6H, CHH, CHH, CHH, CH3), 2.98 - 3.11 (m, 1H, CH), 3.49 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.2 Hz, 4H, Ar), 7.41 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.26, 24.34, 31.09, 37.25, 44.99, 51.38, 51.48, 58.64, 61.29, 69.31, 114.90, 115.15, 127.57, 128.71, 129.73, 129.86, 133.23, 135.17, 138.03, 153.41, 167.90, 170.89, 172.74; LCMS: MH = 526; Anal. izrač. za C27H31N3O6S 0.4 H2O: C, 60.86; H, 6.02; N, 7.89; S, 6.02; Pronađeno: C, 60.79; H, 5.77; N, 7.78; S, 5.82.
5.2333-{4-[4-(4-CIKLOHEKSANKARBONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0974]
Faza 1: tert-butil estar 4-Cikloheksankarbonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0975] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (1.207 g, 6.48 mmol) u DCM (Zapremina: 15 ml) dodat je cikloheksankarbonil hlorid (1 g, 6.82 mmol) i DIPEA (1.187 ml, 6.82 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h pre nego što je razblažen sa DCM (20 mL).
Mešavina je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL) respektivno. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-Cikloheksankarbonilpiperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (1.92 g, 95% sirovi prinos); LCMS MH = 296.
Faza 2: Cikloheksil(piperazin-1-il)metanon hidrohlorid
[0976] Suspenzija tert-butil 4-(cikloheksankarbonil)piperazin-1-karboksilata (1.92 g, 6.48 mmol) u HCl (2M u etru, 25 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko vikenda i filtrirana. Bela čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (15 mL x2) i osušena pod sukcijom da bi se dobio cikloheksil(piperazin-1-il)metanon hidrohlorid(1.5 g, 99% sirovi prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.99 - 1.46 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1.52 - 1.82 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.54 - 2.68 (m, 1H, CHH), 2.85 - 3.19 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 - 3.94 (m, 4H, CH2, CH2), 9.52 (br. s., 2H, NHHCl); LCMS MH = 197.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-Cikloheksankarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0977] Izmešanoj mešavini cikloheksil(piperazin-1-il)metanon hidrohlorid (239 mg, 1.03 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.345 ml, 1.97 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350mg, 0.79 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (70 mL) i isprana sa NaHCO3(aq, zas.25 mL) i slanim rastvorom (15 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Cikloheksankarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (271 mg, 61% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1% H3PO4), 3.18 min (98.9%); mp : 215-217°C ;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.05 - 1.41 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1.52 - 1.76 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.21 - 2.40 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.60 (br. s., 2H, CHH, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.37 - 3.54 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.4 Hz, 4H, Ar), 7.38 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 25.10, 25.52, 29.08, 31.18, 44.74, 45.06, 51.55, 52.36, 53.18, 61.50, 69.36, 114.94, 115.20, 127.63, 128.97, 129.78, 129.93, 133.28, 135.31, 137.70, 153.46, 167.97, 170.96, 172.81, 173.22; LCMS MH = 559; Anal. Izrač. za C32H38N4O5+0.2H2O : C, 68.36; H, 6.88; N, 9.96; Pronađeno: C, 68.39; H, 6.75; N, 9.89.
5.2343-{4-[4-(4-BENZOIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0978]
[0979] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.422 g, 0.952 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je fenil(piperazin-1-il)metanon hidrohlorid (0.324 g, 1.428 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.472 ml, 2.86 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i dobijena čvrsta supstanca je mešana u vodi (30 ml) i metilen hloridu (50 ml). Org faza je isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušena i koncentrovana do svetlo žute penaste čvrste supstance (0.55 g) i mešana u dietil etru (15 ml) na sobnoj temperaturi preko noći. Etarska suspenzija je filtrirana i mešana u acetonitrilu (8 ml) na 55 °C tokom jednog sata zatim ohlađena i filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Benzoil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.258 g, 49% prinos); mp, 194-196°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.67 min (95.3%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.23 - 2.48 (m, 5H,
2CH2, CHH), 2.57 (d, J = 14.9 Hz, 1H, CHH), 2.81 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.18 - 3.44 (m, 3H, CH2, CH), 3.55 -3.77 (m, 1H, CH), 4.18 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.17 - 5.28 (m, 2H, CH2), 7.25 - 7.54 (m, 12H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 45.09, 41.53, 47.14, 51.58, 52.58, 61.51, 69.38, 114.97, 115.23, 126.85, 127.68, 127.90, 128.38, 128.98, 129.44, 129.81, 129.94, 133.31, 135.36, 135.89, 137.68, 153.50, 167.99, 168.87, 170.87, 170.98, 172.73, 172.83. LC/MS (M+1)<+>= 553; Anal. izrač. za C32H32N4O5+0.6 H2O: C, 68.22; H, 5.94; N, 9.94. Pronađeno: C, 67.95; H, 5.68; N, 9.84.
5.2353-{4-[4-(4-BENZIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0980]
[0981] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.44 g, 0.993 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je 4-benzilpiperidin (0.230 ml, 1.290 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.328 ml, 1.985 mmol). Mešavina postaje zamućena kroz nekoliko minuta. Ona je umešavana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je mešana u vodi (30 ml) i metilen hloridu (50 ml). Org faza je isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušena i koncentrovana do svetlo žute čvrste supstance (0.5 g). Čvrsta supstanca je mešana u acetonitrilu (8 ml) na 55°C tokom jednog sata potom filtrirana da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Benzil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.245 g, 46% prinos); mp, 169-17°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.15 min (94.1 %).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.08 -1.29 (m, 2H, CH2), 1.38 - 1.62 (m, 3H, CH2, CH), 1.77 - 1.91 (m, 2H, CH2), 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 -2.48 (m, 2H, CHH, CH), 2.57 (dd, J = 1.3, 11.7 Hz, 1H, CHH), 2.69 - 2.81 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.41 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.10 - 7.20 (m, 3H, Ar), 7.21 - 7.37 (m, 7H, Ar), 7.38 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 31.72, 37.32, 42.36, 45.09, 51.56, 53.18, 62.09, 69.45, 114.97, 115.21, 125.68, 127.62, 128.07, 128.73, 128.93, 129.81, 129.94, 133.31, 135.03, 138.66, 140.32, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83.
LC/MS (M+1)<+>= 538; Anal. izrač. za C33H35N3O4: C, 73.72; H, 6.56; N, 7.82. Pronađeno: C, 72.17; H, 6.08; N, 7.53.
5.2363-{4-[4-(4-ETANSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0982]
Faza 1: tert-butil estar 4-Etansulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0983] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (1.0 g, 5.37 mmol) u anhidrovanom DCM (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je etansulfonil hlorid (0.56 ml, 5.91 mmol) i TEA (0.898 ml, 6.44 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 22.5 h pre nego što je razblažena sa DCM (40 mL). Mešavina je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-etan sulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline kao svetlo žuto ulje (1.7 g, 114% sirovi prinos). LCMS MH (bez boc) = 179.
Faza 2: 1-(Etilsulfonil)piperazin hidrohlorid
[0984] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(etilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (1.7 g, 6.11 mmol) u DCM (5 mL) dodata je HCl (2M u dietil etru, 30 ml, 60.0 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 22.5 h i filtrirana. Bela čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (2x15 mL) i osušena pod sukcijom da bi se dobio 1-(etilsulfonil) piperazin hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (1.03g , 79% prinos). Proizvod je stavljen u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja. HNMR podaci spektra<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.21 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH3), 3.04 - 3.25 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.33 - 3.54 (m, 4H, CH2, CH2), 9.50 (br. s., 2H, NHHCl); LCMS MH = 179
Faza 3: 3-{4-[4-(4-Etansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0985] Izmešanoj suspenziji 1-(etilsulfonil)piperazin hidrohlorida (203 mg, 0.947 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.414 ml, 2.369 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.790 mmol). Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom dalje reakcije. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h pre nego što je razblažena sa EtOAc (70 mL) i NaHCO3(zas., aq., 20 mL). Neka čvrsta supstanca je formirana u mešavini. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je ekstrahovan. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i filtriran. Filtrat kombinovan sa čvrstom supstancom je koncentrovan, a ostatak je prečišćen ISCO hromatografijom da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Etansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3- dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (240 mg, 56% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.82 min (99.9%); mp: 135-137 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.20 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH3), 1.90 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.32 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.60 (br. s., 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.04 (q, J = 7.4 Hz, 2H, CH2), 3.11 - 3.21 (m, 4H, CH2, CH2), 3.52 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 7.40, 22.34, 31.16, 42.16, 45.06, 45.22, 51.55, 52.07, 61.23, 69.35, 114.96, 115.22, 127.66, 128.92, 129.80, 129.93, 133.30, 135.37, 137.64, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 541; Anal. Izrač. za C27H32N4O6S : C, 59.98; H, 5.97; N, 10.36; Pronađeno: C, 59.67; H, 5.93; N, 10.21.
5.2373-(1-OKSO-4-{4-[4-(PROPAN-2-SULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1.3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0986]
Faza 1: tert-butil estar 4-(Propan-2-sulfonil)-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0987] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (1.0 g, 5.4 mmol) u anhidrovanom DCM (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je propan-2-sulfonil hlorid (0.7 ml, 5.9 mmol) i TEA (0.89 ml, 6.44 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h pre nego što je razblažena sa DCM (40 mL), koja je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-(Propan-2-sulfonil)-piperazin-1-karboksilne kiseline kao svetlo braon čvrsta supstanca (1.63g, 104% sirovi prinos). Sirovi proizvod je uveden u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 293.
Faza 2: 1-(Izopropilsulfonil)piperazin hidrohlorid
[0988] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(izopropilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (1.63 g, 5.6 mmol) u DCM (5 mL) dodat je HCl (2M u dietil etru, 30 ml, 60.0 mmol). Dobijena reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 21 h pre nego što je isfiltrirana. Bela čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (2x15 mL) i osušena pod sukcijom da bi se dobio 1-(izopropilsulfonil)piperazin hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (0.84g, 66% sirovi prinos). Proizvod je stavljen u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.23 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 2.99 - 3.21 (m, 4H, CH2, CH2), 3.28 -3.57 (m, 5H, CH, CH2, CH2), 9.35 - 9.66 (m, 2H, NHHCl); LCMS MH = 179.
Faza 3: 3-(1-Okso-4-{4-[4-(propan-2-sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion
[0989] Izmešanoj suspenziji 1-(izopropilsulfonil)piperazin hidrohlorid (217 mg, 0.9 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.4 ml, 2.4 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.8 mmol). Dobijeni bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 17 h pre dodavanja EtOAc (70 mL) i NaHCO3(zas., aq., 20 mL). Neka čvrsta supstanca je formirana u mešavini. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je ekstrahovan. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i filtriran. Filtrat je kombinovan sa čvrstom supstancom koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{4-[4-(propan-2-sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (249mg, 57% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.03 min (99.2%); mp: 233-235 °C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.21 (d, J = 6.8 Hz, 6H, CH3, CH3), 1.91 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.54 (br. s., 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.17 - 3.28 (m, 4H, CH2, CH2), 3.28 - 3.37 (m, 1H, CH), 3.52 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.39 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 16.41, 22.34, 31.16, 45.06, 45.60, 51.55, 51.62, 52.52, 61.33, 69.35, 114.94, 115.22, 127.64, 128.94, 129.80, 129.93, 133.28, 135.37, 137.60, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 555; Anal. Izrač. za C28H34N4O6S : C, 60.63; H, 6.18; N, 10.10; Pronađeno: C, 60.41; H, 6.03; N, 9.94.
5.2383-(4-{4-{4-(1-HIDROKSI-1-METIL-ETIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0991] U CH3CN rastvor mešavine 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.50 g, 1.12 mmol) dodat je DIPEA (0.394 ml, 2.256 mmol) praćeno 2-(piperidin-4-il)propan-2-olom (0.194 g, 1.354 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana , a zatim estrahovana primenom vode (20 mL) i DCM (20 mL). Organski sloj je koncentrovan i rezultujuća čvrsta supstanca je rekristalizovana iz 2 mL CH3CN da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(1-hidroksi-1-metil-etil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion (240 mg ,42%). m.p.: 160-162 °C. LC_MS m/e = 506. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 4.78 min (95.2%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.94 - 1.06 (m, 6H, CH3, CH3), 1.07 - 1.33 (m, 3H, CH, CH2), 1.62 (d, J = 10.8 Hz, 2H, CH2), 1.82 (t, J = 10.9 Hz, 2H, CH2), 1.91 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 18.3 Hz, 1H, CHH), 2.84 (d, J = 11.7 Hz, 2H, CH2), 2.89 -2.99 (m, 1H, CHH), 3.42 (s, 2H, CH2), 4.02 (s, 1H, OH), 4.18 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.39 - 7.58 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, Ar)<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 26.54, 26.86, 31.18, 45.07, 46.94, 51.55, 53.82, 62.10, 69.44, 70.19, 114.96, 115.19, 127.58, 128.75, 129.78, 129.93, 133.28, 135.00, 138.71, 153.51, 167.99, 170.96, 172.81; Anal. izrač. za C29H35N3O5+0.2 H2O C%: 68.40; H%: 7.01; N%: 8.25; Pronađeno: C%: 68.20; H%: 7.05; N%: 8.12.
5.2393-{1-OKSO-4-[4-(3,4,5,6-TETRAHIDRO-2H-[4,4']BIPIRIDINIL-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0992]
[0993] U CH3CN rastvor mešavine 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.36g, 0.82 mmol) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.284 ml, 1.624 mmol) i 4-(piperidin-4-il)piridin (0.158 g, 0.975 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći zatim koncentrovana na rotacionom isparivaču. Rezultujućoj čvrstoj supstanci dodata je voda 30 mL i mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Suspenzija je filtrirana potom je rekristalizovana iz CH3CN (3 mL) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(3,4,5,6-tetrahidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca. m.p.: 198-200 °C. LC-MS m/e = 525. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 4.36 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.48 - 1.86 (m, 4H, CH2, CH2), 1.90 - 2.17 (m, 3H, CH2, CHH), 2.32 - 2.44 (m, 0H, CHH), 2.51 - 2.65 (m, 2H, CHH, CH), 2.80 - 3.08 (m, 3H, CHH, CH2), 3.41 - 3.63 (m, 2H, CH2), 4.15 - 4.57 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.12 - 7.70 (m, 9H, Ar), 8.45 (dd, J = 1.5, 4.5 Hz, 2H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 31.98, 40.86, 45.09, 51.58, 53.21, 69.42, 114.98, 115.23, 122.31, 127.65, 129.01, 129.82, 129.95, 133.32, 135.25, 149.56, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83; Anal. izrač. za C31H32N4O4+0.3H2O C%: 70.25; H%: 6.20; N%: 10.57; Pronađeno C%: 70.05; H%: 5.92; N%: 10.25.
5.2403-{4-[4-(4-BENZENSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[0994]
Faza 1: tert-butil estar 4-Benzensulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[0995] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (1.0 g, 5.4 mmol) u anhidrovanom DCM (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je benzensulfonil hlorid (0.75 ml, 5.9 mmol) i TEA (0.90 ml, 6.4 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 h pre nego što je razblažena sa EtOAc (40 mL) i NaHCO3 (aq, zas, 15 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL) i osušena pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-Benzensulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (2.0 g, 114% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH (226, loss of BOC group during LCMS).
Faza 2: 1-(Fenilsulfonil)piperazin hidrohlorid
[0996] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(fenilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (sirovi) (1.75 g, 5.4 mmol) u DCM (45 mL) dodat je HCl (2M u dietil etru) (20 ml, 40.0 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana pre nego što je isfiltrirana, a bela čvrsta supstanca je isprana etrom (2x 30 mL) i osušena pod sukcijom da bi se dobio 1-(fenilsulfonil)piperazin hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (1.4 g , 100% sirovi prinos). Jedinjenje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.16 (s, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 7.61 - 7.84 (m, 5H, Ar), 9.42 (br. s., 2H, NHHCl); LCMS MH = 227.
Faza 3: 3-{4-[4-(4-Benzensulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[0997] Izmešanoj suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-diona (360 mg, 0.8 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.43 ml, 2.4 mmol) i 1-(fenilsulfonil)piperazin hidrohlorid (256 mg, 0.98 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 21 h pre dodavanja EtOAc (50 mL) i NaHCO3 (zas., aq., 20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišćen pomoću ISCO. Proizvod čvrste supstance dalje je prečišćen umešavanjem u DCM (5 mL) i dietil etru (30 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-Benzensulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (392mg, 82% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.79 min (99.0%); mp: 220-222 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.33 - 2.47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.54 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.80 - 2.94 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 4.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.3 Hz, 1H, CHH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.14 - 7.54 (m, 7H, Ar), 7.56 -7.86 (m, 5H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.04, 45.92, 51.37, 51.53, 60.98, 69.32, 114.93, 115.20, 127.51, 127.63, 128.78, 129.36, 129.78, 129.90, 133.23, 133.28, 134.68, 135.33, 137.53, 153.45, 167.97, 170.95, 172.81; LCMS MH = 589; Anal. Izrač. za C31H32N4O6S 0.4H2O : C, 62.49; H, 5.55; N, 9.40; Pronađeno: C, 62.59; H, 5.40; N, 9.33.
5.2413-{4-[4-(4-HIDROKSI-4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[0999] U CH3CN rastvor (10 mL) 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.28 g, 0.62 mmol) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.22 ml, 1.24 mmol) praćeno 4-fenilpiperidin-4-ol (0.13 g, 0.76 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Reakciona mešavina je koncentrovana na rotacionom isparivaču i rezultujuća čvrsta supstanca je ekstrahovan primenom CH2Cl2i Vode. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca koja je rekristalizovana iz CH3CN (3 mL) da bi se dobio 3-{4-[4-(4-hidroksi-4-fenil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (154 mg, 44%). Tačka topljenja: 140-142 °C. LC-MS m/e=540. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 5.02 min (95%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.58 (d, J = 13.0 Hz, 2H, CH2), 1.80 - 2.10 (m, 3H, CH2,CHH), 2.32 - 2.43 (m, 3H, CHH" CH2), 2.60 (br. s., 3H, CHH, CH2), 2.79 - 3.06 (m, 1H, CHH), 3.57 (br. s., 2H, CH2), 4.04 - 4.56 (m, 2H, CHH), 4.80 (br. s., 1H, OH), 5.11 (d, J = 8.1 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.06 - 7.66 (m, 12H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.18, 31.25, 45.06, 48.89, 51.55, 69.41, 114.94, 115.20, 124.71, 126.13, 127.63, 127.77, 129.80, 129.93, 133.28, 153.49, 161.07, 167.99, 170.96.
172.81. Anal. izrač. za C32H33N3O5+0.6H2O C%: 69.64; H%: 5.70; N%: 7.27; Pronađeno C%: 69.83; H%: 6.26; N%: 7.63.
5.2422-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-IZOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1000]
[1001] 4-(4-(Bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion (250 mg, 0.547 mmol) je suspendovan u suvom MeCN (10 mL). U gustu suspenziju, dodat je 4-izopropilpiperidin (139 mg, 1.093 mmol) i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi dajući bistar rastvor kroz nekoliko minuta. Nakon ∼1 h, obrazovan je debeli talog. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i ostatak je podeljen između aq 1N NaHCO3 (40 mL) i EtOAc (∼100 mL). Vodeni sloj je zasićen sa čvrstim Na2CO3 a onda ekstrahovan još jednom sa EtOAc (∼50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa vodom, filtrirana, a potom isprana sa dodatnom vodom (∼200 mL, ukupno). Preostala čvrsta supstanca je isprana sa heksanom (∼1500 L, ukupno), osušena sukcijom, a onda osušena dalje u vakuum sušnici na 60 °C da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((4-izopropilpiperidin-1-il)metil)benzil)-oksi)izoindolin-1,3-dion kao bledo žuta čvrsta supstanca (220 mg, 80%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.86 min (96.4%). mp: 220-222 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.82 (s, 3H, CH3), 0.85 (s, 3H, CH3), 0.89 - 1.06 (m, 1H, CHH), 1.08 - 1.26 (m, 2H, CHH, CHH, CHH), 1.31 - 1.46 (m, 1H, CHH), 1.48 - 1.66 (m, 2H, CH2), 1.85 (t, J = 10.7 Hz, 2H, CH2), 1.95 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.66 (m, 2H, CHH, CHH), 2.72 - 3.00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3.42 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.5, 12.8 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.52 (m, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.74 - 7.92 (m, 1H, Ar), 11.09 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.64, 21.93, 28.86, 30.90, 31.92, 41.84, 48.73, 53.65, 62.15, 69.98, 115.48, 116.56, 120.21, 127.20, 128.78, 133.26, 134.52, 136.97, 138.65, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.71; LCMS: MH = 504; Anal. izrač. za C29H33N3O5+ 0.16 H2O; C, 68.77; H, 6.63; N, 8.30; Pronađeno: C, 68.77; H, 6.88; N, 8.22.
5.2433-{4-[4-(1-BENZIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION(referentni primer)
[1002]
Faza 1: Pripremanje tert-butil estra 4- {4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline
[1003] Trifenil fosfen (na polimernom nosaču, 1.6 mmol/g, 3.3 g) dodat je u umešanu belu suspenzija metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.444 g, 8.36 mmol) u THF (100 ml) na 0°C. Nakon deset minuta, diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (2.470 ml, 12.54 mmol) je doda i mešan tokom 40 minuta, a onda je dodat tert-butil 4-(4-(hidroksimetil)benzil)piperidin-1-karboksilat (3.32 g, 10.87 mmol) u THF (20 ml). Mešavina je mešana na 0°C i zagrejana do sobne temperature preko noći. Suspenzija je filtrirana, isprana sa MeOH(2 x 20 ml), CH2Cl2(2 x 30 ml), i filtrat je uparen da bi se dobilo ulje, koje je rastvoreno u CH2Cl2 (80 ml), isprano sa zas. NaHCO3 (50 ml), koncentrovano, a onda prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline kao penasto ulje (2.2 g, 45% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[1004] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)piperidin-1-karboksilata (2.2 g, 3.80 mmol) u CH2Cl2 (10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je hlorovodonik (2 M u etru) (10 ml, 38.0 mmol). Nakon četiri sata, suspenzija je filtrirana, isprana etrom i dobijena žuta čvrsta supstanca je osušena da bi se dobilo 2.02 g, 111 % sirovog prinosa (HCl so). Proizvod je kasnije upotrebljen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje metil estra 4-{4-[4-(1-Benzil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-4-karbamoil-buterne kiseline
[1005] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(piperidin-4-ilmetil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat hidrohlorida (0.321 g, 0.622 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amina (0.411 ml, 2.488 mmol) u acetonitrilu (10 ml) dodat je (bromometil)benzen (0.074 ml, 0.622 mmol). Nakon 15 minuta, rastvarač je uparen da bi se dobilo ulje, koje je umešano u vodi (20 ml), zas. NaHCO3(10 ml), i etil acetatu (30 ml). Org faza je osušena i uparena da bi se dobilo ulje (0.33 g, 93% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje 3-{4-[4-(1-Benzil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il} -piperidin-2,6-dion
[1006] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((1-benzilpiperidin-4-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.33 g, 0.579 mmol) u THF (8 ml) u ledenom-vodenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.065 g, 0.579 mmol). Nakon deset minuta, mešavina ugašena je sa 1 N HCl (do pH=1∼2), neutralizovana sa Zas. NaHCO3 (do pH=7∼8), i mešana u vodi (10ml) i CH2Cl2 (30 ml). Organska faza je isprana vodom (20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušena iznad Na2SO4 i koncetrovana do ulja, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio 3-{4-[4-(1-Benzilpiperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (121 mg, 39% prinos); mp, 110-112°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 27/73 u 10 min (CH3CN/0.1%H3PO4): 5.48 min (96.8%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.10 - 1.30 (m, 2H, CH2), 1.39 - 1.60 (m, 3H, CH2, CHH), 1.84 (t, J = 11.4 Hz, 2H, CH2), 1.92 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J = 10.8 Hz, 1H, CHH), 2.69 - 2.81 (m, 2H, CH2), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.40 (s, 2H, CH2), 4.18 - 4.46 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.19 (s, 2H, CH2), 7.13 - 7.35 (m, 9H, Ar), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.44 - 7.52 (m, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.20, 31.72, 37.30, 42.04, 45.09, 51.56, 53.17, 62.39, 69.49, 114.95, 115.19, 126.72, 127.68, 128.06, 128.61, 129.06, 129.81, 129.94, 133.29, 133.95, 138.72, 140.26, 153.54, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=538. Anal. izrač. za C33H35N3O4(+0.6 H2O): C, 72.27; H, 6.65; N, 7.66. Pronađeno: C, 72.10; H, 6.38; N, 7.49.
5.2442-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-FENILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1007]
[1008] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 4-fenilpiperidina (93 mg, 0.574 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je DIEA (0.143 mL, 0.820 mmol) i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon -20 h dodat je dodatni 4-fenilpiperidin (10 mg, 0.06 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom 1 dana. Kako bi se reakcija završila, dodatni DIEA (100 µL) je dodat i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona mešavina je tretirana sa dodatnim DIEA (0.143 mL) i potom zagrejana do 80 °C tokom ∼1 h. Mešavina je ostavljena da se ohladi lagano uz lagano mešanje. Nakon 2 h, gusta suspenzija je filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca u reakcionoj bočici je isprana na levak sa minimalno MeCN (∼1 mL). Čvrsti kolač na levku isprana je vodom (3 X 10 mL). Preostala čvrsta supstanca je osušena sukcijom, zatim dalje osušena u vakuum sušnici na 60 °C tokom 4 h da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((4-fenilpiperidin-1-il)metil)benzil)-oksi)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (254 mg, 86%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.34 min (99.6%); mp: 142-144 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.52 - 1.83 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 1.93 - 2.17 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.39 - 2.68 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.77 -3.02 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3.51 (s, 2H, CH2N), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.36 (s, 2H, CH2), 7.08 - 7.33 (m, 5H, Ar), 7.33 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 3H, Ar), 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.
83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 33.06, 41.81, 48.73, 53.60, 62.10, 69.98, 115.48, 116.56, 120.21, 125.92, 126.66, 127.23, 128.25, 128.92, 133.26, 134.63, 136.99, 138.45, 146.23, 155.55, 165.29, 166.75, 169.87, 172.72; LCMS: MH = 538; Anal. izrač. za C32H31N3O5+ 0.5 H2O: C, 70.31; H, 5.90; N, 7.69; Pronađeno: C, 70.39; H, 5.71; N, 7.65.
5.2452-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-(METILSULFONIL) PIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION (referentni primer)
[1009]
[1010] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 4-(metilsulfonil)piperidina (98 mg, 0.601 mmol) u MeCN (10 mL, 191 mmol) dodat je DIEA (0.143 mL, 0.820 mmol) i dobijena mešavina (belu suspension) je mešana na sobnoj temperaturi.
Reakcionoj mešavini je dodat DIEA (0.143 mL, 0.820 mmol) i gusta suspenzija je zagrejana do 80 °C i držana na toj temperaturi tokom ∼1 h, zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature lagano uz lagano mešanje. Nakon 2 h, gusta suspenzija je filtrirana. Čvrsti kolač na levku je ispran vodom (3 X 10 mL). Preostala čvrsta supstanca je osušena sukcijom, zatim dalje osušena u vakuum sušnici na 60 °C tokom 4 h. Da bi se dobio 2-(2,6-Dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (270 mg, 92% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.85 min (98.9%); mp: 204-206; °C<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.60 (qd, J = 4.0, 12.6 Hz, 2H, CHH, CHH), 1.88 - 2.12 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 2.41 - 2.66 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.81 - 2.97 (m, 6H, CH3, CHH, CHH, CHH), 2.98 - 3.13 (m, 1H, CH), 3.49 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.47 (dd, J = 2.0, 7.6 Hz, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.3 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 24.43, 30.90, 37.30, 48.73, 51.43, 58.73, 61.36, 69.95, 115.50, 116.56, 120.19, 127.29, 128.82, 133.26, 134.76, 136.97, 138.07, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.72; LCMS: MH = 540; Anal. izrač. za C27H29N3O7S 0.6 H2O 0.3 MeCN: C, 58.91; H, 5.57; N, 8.21; S, 5.70;
Pronađeno: C, 58.93; H, 5.41; N, 8.11; S,5.61.
5.2463-{4-[4-(1-CIKLOPROPILMETIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1011]
Faza 1: Pripremanje tert-butil estra 4- {4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline
[1012] Trifenil fosfen (na polimernom nosaču, 1.6 mmol/g, 3.3 g) dodat je u umešanu belu suspenziju metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (2.444 g, 8.36 mmol) u THF (100 ml) na 0°C. Nakon deset minuta, diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (2.470 ml, 12.54 mmol) dodat je i mešan tokom 40 minuta, a onda je dodat tert-butil 4-(4-(hidroksimetil)benzil)piperidin-1-karboksilat (3.32 g, 10.87 mmol) u THF (20 ml). Mešavina je mešana na 0°C i zagrejana do sobne temperature preko noći. Suspenzija je filtrirana, isprana sa MeOH(2 x 20 ml), CH2Cl2(2 x 30 ml), i filtrat je uparen da bi se dobilo ulje, koje je rastvoreno u CH2Cl2(80 ml), isprano sa Zas. NaHCO3(50 ml), koncentrovano, a onda prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio tert-butil estar 4-{4-[2-(1-karbamoil-3-metoksikarbonil-propil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-benzil}-piperidin-1-karboksilne kiseline kao penasto ulje (2.2 g, 45% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[1-okso-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benziloksi)-1,3-dihidroizoindol-2-il]-buterne kiseline
[1013] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(4-((2-(1-amino-5-metoksi-1,5-dioksopentan-2-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)piperidin-1-karboksilata (2.2 g, 3.80 mmol) u CH2Cl2(10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je hlorovodonik (2 M u etru) (10 ml, 38.0 mmol). Nakon četiri sata, suspenzija je filtrirana, isprana sa etrom i dobijena žuta čvrsta supstanca je osušena da bi se dobio 2.02 g, 111 % sirovi prinos (HCl so). Proizvod je kasnije upotrebljen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-{4-[4-(1-ciklopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline
[1014] Izmešanoj mešavini metil 5-amino-5-okso-4-(1-okso-4-(4-(piperidin-4-ilmetil)benziloksi)izoindolin-2-il)pentanoat hidrohlorida (0.325 g, 0.630 mmol)) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amina (0.416 ml, 2.52 mmol) u acetonitrilu (10 ml) dodat je (bromometil)ciklopropan (0.061 ml, 0.630 mmol)). Mešavina je zagrevana na 55°C tokom 5 sati, a onda na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen da bi se dobilo ulje, koje je umešano u vodi (20 ml), zas. NaHCO3(10 ml), i etil acetatom (40 ml). Organska faza je isprana vodom (20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušena i uparena da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-{4-[4-(1-ciklopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-buterne kiseline kao ulje (0.28 g, 83% prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje 3-{4-[4-(1-Ciklopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion
[1015] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-((1-(ciklopropilmetil)piperidin-4-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.28 g, 0.525 mmol) u THF (10 ml) u ledenom-vodenom kupatilu dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.059 g, 0.525 mmol) i mešan tokom 10 minuta. Mešavini je dodata 1 N HCl (do pH=1) zatim je neutralizovana sa Zas. NaHCO3 (do pH=7). Voda (10 ml) i CH2Cl2 (20 ml) dodati su i mešavina je isprana vodom (15 ml), slanim rastvorom (10 ml), osušena iznad Na2SO4 i koncentrovana do braon ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio 3-{4-[4-(1-Ciklopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao penasta čvrsta supstanca (20 mg, 8% prinos); mp, N/A. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.62 min (98.7%). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 27/73 u 10 min (CH3CN/0.1%H3PO4): 4.58 min (95.4%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.05 -0.14 (m, 2H, CH2), 0.44 - 0.57 (m, 2H, CH2), 0.78 - 0.96 (m, 1H, CH), 1.28 - 1.46 (m, 2H, CH2), 1.47 - 1.58 (m, 1H, CH), 1.59 - 1.72 (m, 2H, CH2), 1.86 - 2.01 (m, 2H, CH2), 2.12 - 2.43 (m, 4H, CH2CH2), 2.57 (d, J = 6.6 Hz, 2H, CH2), 2.73 - 2.96 (m, 2H, CH2), 3.09 (dt, J = 3.1, 11.8 Hz, 2H, CH2), 4.21 - 4.55 (m, 2H, CH2), 5.10 (s, 2H, CH2), 5.21 (dd, J = 5.3, 13.2 Hz, 1H, NCH), 7.06 - 7.21 (m, 3H, Ar), 7.31 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.38 -7.56 (m, 2H, Ar).( NH proton je jedva vidljiv).<13>C NMR (HLOROFORM-d) δ 0.03, 4.05, 8.18, 23.49, 31.64, 31.72, 37.75, 42.79, 45.15, 51.86, 53.75, 63.90, 70.30, 114.61, 116.40, 127.58, 129.55, 129.90, 130.12, 133.17, 133.68, 140.88, 153.91, 169.39, 169.74, 171.41. LC/MS m/e=502.
5.2473-(4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1017] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.513 g, 1.157 mmol) dodat je 4-(4-fluorofenil)piperidin hidrohlorid (0.311 g, 1.736 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.574 ml, 3.47 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi počevši tokom dva sata. Rastvarač CH3CN je uparen, i ostatku je dodata voda (20 ml) i metilen hlorid (40 ml). Isprana je zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 15 ml), vodom (20 ml), slanim rastvorom (20 ml), osušena iznad Na2SO4 i koncetrovana do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/EtOAc) da bi se dobio 3-(4- {4-[4-(4-Fluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dionas bela čvrsta supstanca (0.315 g, 50% prinos); mp, 180-182°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.79 min (95.7%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.51 - 1.80 (m, 4H, CH2CH2), 1.89 - 2.12 (m, 3H, CH, CH2), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 -2.63 (m, 2H, CH, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 3H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.04 - 7.15 (m, 2H, Ar), 7.22 - 7.39 (m, 6H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 33.16, 41.02, 45.09, 51.58, 53.55, 62.10, 69.45, 114.75, 115.03, 115.23, 127.62, 128.35, 128.45, 128.92, 129.82, 129.95, 133.31, 135.14, 138.44, 142.35, 153.51, 159.00, 162.19, 168.01, 170.98, 172.83. LC/MS m/e<+>= 542. Anal. izrač. za C32H32N3O4F: C, 70.96; H, 5.96; N, 7.76; F, 3.51. Pronađeno: C, 70.68; H, 5.90; N, 7.64; F, 3.54.
5.2483-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENZIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1018]
[1019] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.528 g, 1.191 mmol) dodat je 4-(4-fluorobenzil)piperidin (0.345 g, 1.787 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.394 ml, 2.382 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi počevši tokom dva sata. Rastvarač CH3CN je uparen, a ostatak je umešan u mešavini vode (20 ml), zasićenog natrijum bikarbonata (10 ml) i metilen hlorida (50 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 20 ml), slanim rastvorom (10 ml), osušena iznad natrijum sulfata i koncentrovana do bele čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-benzil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela penasta čvrsta supstanca (0.224 g, 34% prinos); mp, 148-150°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10 u 5 min, izokratski na 90/10 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.86 min (95.8%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.08 - 1.27 (m, 2H, CH2), 1.36 - 1.59 (m, 3H, CHH, CH2), 1.77 - 1.91 (m, 2H, CH2), 1.93 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 2H, CHH, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.70 - 2.81 (m, 2H, CH2), 2.83 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.41 (s, 2H, CH2), 4.18 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.02 - 7.12 (m, 2H, Ar), 7.13 - 7.22 (m, 2H, Ar), 7.25 - 7.36 (m, 4H, Ar), 7.38 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 31.60, 37.32, 41.37, 45.09, 51.58, 53.15, 62.07, 69.45, 114.57, 114.85, 114.97, 115.21, 127.61, 128.73, 129.81, 129.94, 130.55, 130.65, 133.31, 135.04, 136.46, 138.66, 153.51, 158.98, 162.17, 168.01, 170.98, 172.83. LC/MS m/e<+>= 556. Anal. izrač. za C33H34N3O4F: C, 71.33; H, 6.17; N, 7.56. Pronađeno: C, 71.02; H, 5.84; N, 7.47.
5.2493-(4-{4-[4-(3-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1020]
[1021] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.5 g, 1.128 mmol) dodat je 4-(3-fluorofenil)piperidin (0.101 g, 0.564 mmol) i DIPEA (0.146 g, 1.13 mmol). Rezultujući rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Mešavini je dodata voda (15 mL) i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2i MeOH. Rezultujuća čvrsta supstanca je rekristalizovana iz CH3CN (5 mL) da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(3-fluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion (430 mg, 70%). Tačka topljenja: 200-202°C. LC-MS m/e= 542. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min:6.95 min (94.75%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 - 1.80 (m, 4H, CH2, CH2), 1.86 - 2.15 (m, 3H, CHH, CH2), 2.30 - 2.45 (m, J= 4.2 Hz, 1H, CHH), 2.55 - 2.68 (m, 1H, CHH), 2.76 - 3.05 (m, 3H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 4.09 - 4.53 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.79 -7.19 (m, 3H, Ar), 7.24 - 7.60 (m, 8H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.21, 32.80, 41.50, 45.09, 51.58, 53.46, 62.07, 69.45, 112.53, 112.81, 113.30, 113.58, 114.97, 115.23, 122.84, 127.62, 128.93, 129.82, 129.95, 130.06, 130.16, 133.32, 135.16, 138.41, 149.26, 149.34, 153.51, 160.69, 163.89, 168.01, 170.98, 172.83. Anal. izrač. za C32H32FN3O4, C, 70.96%; H, 5.96%; N, 7.76%.Pronađeno: C, 70.57%; H, 6.01%; N, 7.67%.
5.2502-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)4-((4-((4-TRIFLUOROMETIL) PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)-OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1022]
[1023] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 4-(trifluorometil)piperidin hidrohlorida (114 mg, 0.601 mmol) u MeCN (10 mL), dodat je DIEA (0.334 mL, 1.914 mmol) i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom ∼ 15 h. Čep reakcione bočice je uklonjen i mešavina je zagrejana do 80 °C tokom ∼4.5 h. Koncentrovana reakciona mešavina (∼5 mL) je podeljena između EtOAc (∼150 mL) i vode (∼30 mL). Organski sloj je ispran sa 1N NaHCO3(2 x 30 mL). i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio čvrsti ostatak. MeCN (∼3 mL) i voda ((∼25 mL) su dodati i čvrsta supstanca je podvrgnuta sonikaciji na sobnoj temperaturi uz umešavanje dok nije dobijena fino dispergovana suspenzija. Čvrsta supstanca je sakupljena na srednje poroznom levku i osušena u vakuum sušnici na 60 °C da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benzil)-oksi)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (243 mg, 84% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.53 min (99.2%); mp: 190-192 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.36 - 1.55 (m, 2H, CHH, CHH), 1.66 - 1.83 (m, 2H, CHH, CHH), 1.87 - 2.14 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2.15 - 2.38 (m, 1H, CH), 2.40 - 2.68 (m, 2H, CHH, CHH), 2.77 - 3.00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3.48 (s, 2H, CH2N), 5.09 (dd, J= 5.5, 12.8 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2O), 7.25 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.60 (d, J= 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J= 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH); ostatak EtOAc (-0.07 eq);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 24.19, 30.90, 39.07, 48.73, 51.39, 61.61, 69.95, 115.50, 116.56, 120.19, 127.29, 128.84, 133.26, 134.73, 136.99, 138.12, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.72; signal for CF3 i CCF3 is delimično masked by DMSO-d6;<19>F NMR (DMSO-d6) δ -72.35; LCMS: MH = 530; Anal. izrač. za C27H26F3N3O5+ 0.1 H2O 0.07 EtOAc: C, 60.96; H, 5.02; N, 7.82; F, 10.60: Pronađeno: C, 61.17; H, 4.98; N, 7.46; F, 10.24.
5.2512-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(PIPERIDIN-1-ILMETIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-1,3-DION [1024]
[1025] Suspenziji 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (230 mg, 0.503 mmol) i piperidina (0.055 mL, 0.553 mmol) u suvom MeCN (15 mL, 287 mmol), dodat je DIEA (0.307 mL, 1.760 mmol) i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2,5 h. Reakciona mešavina je koncentrovana u vakuumu do staklaste čvrste supstance. Pretvaranje u prah čvrste supstance sa rastvorom ∼ 1:1 MeCN/ Et2O (∼10 mL) proizvelo je dobro dispergovanu gustu suspenziju. Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana dodatnim Et2O (40 mL). Preostala je podeljena između EtOAc (∼150 mL) i 1 N Na2CO3(∼30 mL). Organski sloj je ispran dodatnim 1 N Na2CO3(∼30 mL) i slanim rastvorom, zatim osušena (Na2SO4) i koncentrovana u vakuumu do staklaste čvrste supstance. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa produženom sonikacijom u rastvoru MeCN (∼2 mL) i Et2O (∼20 mL) dok nije formirana fino dispergovana čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je sakupljena na srednje poroznom levku uvlačenjem, potom isprana sa dodatnim Et2O (∼20 mL). Kolač je osušen u vakuum sušnici preko noći na 50 °C da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-(piperidin-1-ilmetil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion kao svetlo braon čvrsta supstanca (110 mg, 47%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.47 min (98.9%); mp: 153-155 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (d, J= 4.7 Hz, 2H, CH2), 1.43 - 1.59 (m, 4H, CH2, CH2), 1.94 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.19 - 2.40 (m, 4H, CH2, CH2), 2.42 - 2.67 (m, 2H, CHH, CHH), 2.77 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.42 (s, 2H, CH2N), 5.09 (dd, J= 5.4, 12.9 Hz, 1H, CH), 5.35 (s, 2H, CH2O), 7.26 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.60 (d, J= 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J= 7.4, 8.3 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 23.96, 25.51, 30.90, 48.73, 53.85, 62.50, 69.98, 115.47, 116.56, 120.19, 127.19, 128.82, 133.24, 134.54, 136.97, 138.52, 155.53, 165.27, 166.75, 169.87, 172.71; LCMS: MH = 462; Anal. izrač. za C26H27N3O5 0.18 H2O: C, 67.19; H, 5.93; N, 9.04; Pronađeno: C, 67.18; H, 5.78; N, 8.84.
5.2524-((4-((4,4-DIMETILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)-2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1026]
[1027] Mešavini 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) i 4,4-dimetilpiperidin hidrohlorida (90 mg, 0.601 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je DIEA (0.334 mL, 1.914 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h , a zatim je uklonjen poklopac bočice i mešavina je zagrejana do 75 °C. Nakon ∼2.5 h, preostala je ∼ 1/2 zapremina u obliku debele suspenzije. Mešavina je ohlađena uz lagano mešanje i onda je ostarena na 4 °C preko noći. Mešavini je dodata DIEA (250 µL) uz mešanje tokom 30 min. Gusta suspenzija je filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem i kolač je ispran vodom (∼30 mL). Sakupljena čvrsta supstanca je osušena sukcijom, a onda osušena dalje u vakuum sušnici na 50 °C tokom 6 h da bi se dobio 4-((4-((4,4-dimetilpiperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao beličasta čvrsta supstanca (230 mg, 86%): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.88 min (97.8%); mp: 208-210 °C:<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.89 (s, 6H, CH3, CH3), 1.19 -1.41 (m, 4H, CH2, CH2), 1.95 - 2.15 (m, 1H, CHH), 2.20 - 2.42 (m, 4H, CH2, CH2), 2.42 - 2.66 (m, 2H, CHH, CHH), 2.79 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.46 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J= 5.5, 12.8 Hz, 1H, CH), 5.34 (s, 2H, CH2O), 7.28 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.39 - 7.52 (m, 3H, Ar), 7.60 (d, J= 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.82 (dd, J= 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 28.04, 28.14, 30.90, 38.25, 48.73, 49.32, 62.03, 69.98, 115.48, 116.56, 120.19, 127.20, 128.81, 133.24, 134.57, 136.97, 138.68, 155.53, 165.27, 166.75, 169.87, 172.72; LCMS: MH = 490; Anal. izrač. za C28H31N3O5+ 0.3 H2O: C, 67.94; H, 6.43; N, 8.49; Pronađeno: C, 67.91; H, 6.42; N, 8.60.
5.2533-[4-(4-BROMOMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1028]
[1029] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.486 g, 1.096 mmol) dodat je 1,4'-bipiperidin dihidrohlorid (0.397 g, 1.645 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.725 ml, 4.39 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva sata. Rastvarač je uparen da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koja je mešana u vodi (20 ml) i metilen hloridu (40 ml). Isprana je zasićenim natrijum bikarbonatom (2x80 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena iznad natrijum sulfata i koncentrovana do bele penaste čvrste supstance (0.5 g), koja je prečišćena preparativnom HPLC(acetonitril/voda u 0.1% mravlja kiselina) da bi se dobio 3-[4-(4-bromometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.25 g, 43% prinos); mp, 202-204°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.64 min (98.5%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.29 - 1.40 (m, 3H, CH2, CH), 1.41 - 1.51 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1.63 (dd, J= 3.3, 12.0 Hz, 2H, CH2), 1.81 - 1.93 (m, 2H, CH2), 1.94 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.08 - 2.21 (m, 1H, CH), 2.35 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.75 - 2.99 (m, 3H, CHH, CH2), 3.42 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.36 (m, 3H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 24.58, 26.08, 27.54, 31.21, 45.09, 49.70, 51.56, 52.85, 61.84, 61.99, 69.44, 114.95, 115.21, 127.61, 128.82, 129.81, 129.94, 133.31, 135.09, 138.56, 153.51, 168.01, 170.98, 172.83. LC/MS m/e=531. Anal. izrač. za C31H38N4O4 (+0.7 H2O): C, 68.54; H, 7.31; N, 10.31. Pronađeno: C, 68.29; H, 7.49; N, 10.16.
5.2543-(4-{4-[4-(3-HLORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1031] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.354 g, 0.799 mmol) dodat je 4-(3-hlorofenil)piperidin hidrohlorid (0.278 g, 1.198 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.396 ml, 2.396 mmol) na sobnoj temperaturi. Zamućena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i ostatak je mešan u metilen hloridu (120 ml), ispran zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušen iznad natrijum sulfata, koncentrovan i prečišćen pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(3-Hloro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.246 g, 55% prinos); mp, 218-220°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.63 min (95.9%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.54 - 1.80 (m, 4H, CH2, CH2), 1.92 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 3H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.18 - 7.26 (m, 2H, Ar), 7.27 - 7.39 (m, 6H, Ar), 7.42 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.21, 32.78, 41.44, 45.10, 51.59, 53.43, 62.03, 69.45, 114.98, 115.23, 125.43, 125.96, 126.70, 127.62, 128.93, 129.82, 129.95, 130.16, 132.97, 133.32, 135.16, 138.41, 148.83, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=558, 560. Anal. izrač. za C32H32N3O4Cl (+0.3 H2O): C, 68.21; H, 5.83; N, 7.46. Pronađeno: C, 67.93; H, 5.64; N, 7.29.
5.2553-{1-OKSO-4-[4-(4-M-TOLIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[1032]
[1033] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.352 g, 0.794 mmol) dodat je 4-m-tolilpiperidin (0.209 g, 1.191 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.394 ml, 2.382 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor postaje zamućen u roku od ∼5 minuta i meša se na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca, koja je mešana u metilen hloridu (120 ml), isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2x50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance. Ona je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-m-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.272 g, 63% prinos); mp, 227-229°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.45 min (98.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.54 - 1.78 (m, 4H, CH2, CH2), 1.92 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.27 (s, 3H, CH3), 2.36 -2.48 (m, 2H, CHH, CH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 3H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 4.20 -4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.95 - 7.07 (m, 3H, Ar), 7.12 - 7.20 (m, 1H, Ar), 7.29 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.06, 22.36, 31.21, 33.12, 41.79, 45.10, 51.59, 53.65, 62.12, 69.47, 114.98, 115.23, 123.69, 126.59, 127.40, 127.64, 128.18, 128.90, 129.82, 129.95, 133.32, 135.13, 137.23, 138.53, 146.17, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=538. Anal. izrač. za C33H35N3O4: C, 73.72; H, 6.56; N, 7.82. Pronađeno: C, 73.37; H, 5.53; N, 7.52.
5.2563-{1-OKSO-4-[4-(4-M-TOLIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1034]
[1035] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.354 g, 0.799 mmol) dodat je 4-(4-metoksifenil)piperidin (0.229 g, 1.198 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.396 ml, 2.396 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i rezultujuća beličasta čvrsta supstanca je mešana u metilen hloridu (100 ml), isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 80 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-m-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.34 g, 77% prinos); mp, 189-191°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.42 min (98.2%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.51 - 1.77 (m, 4H, CH2, CH2), 1.92 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.34 - 2.48 (m, 2H, CHH, CH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 3H, CHH, CH2), 3.44 - 3.55 (m, 2H, CH2), 3.71 (s, 3H, CH3), 4.20 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.78 - 6.90 (m, 2H, Ar), 7.09 - 7.19 (m, 2H, Ar), 7.28 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 33.34, 40.93, 45.10, 51.59, 53.68, 54.96, 62.15, 69.47, 113.68, 114.97, 115.23, 127.52, 127.62, 128.90, 129.82, 129.95, 133.32, 135.13, 138.24, 138.51, 153.53, 157.49, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=554. Anal. izrač. za C33H35N3O5: C, 71.59; H, 6.37; N, 7.59. Pronađeno: C, 71.29; H, 6.30; N, 7.57.
5.2573-(4-{4-[4-(4-HLORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1036]
[1037] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.354 g, 0.799 mmol) dodat je 4-(4-hlorofenil)piperidin hidrohlorid (0.278 g, 1.198 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.396 ml, 2.396 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen do beličaste čvrste supstance, koja je mešana u metilen hloridu (100 ml), isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 80 ml), slanim rastvorom (80 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(4-Hloro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.286 g, 52% prinos); mp, 198-200°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.63 min (98.9%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.52 -1.78 (m, 4H, CH2, CH2), 1.92 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.36 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 3H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.49 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.22 - 7.39 (m, 8H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.38, 31.21, 32.93, 41.12, 45.10, 51.58, 53.47, 62.07, 69.45, 114.98, 115.23, 127.62, 128.19, 128.60, 128.90, 129.82, 129.95, 130.45, 133.32, 135.14, 138.44, 145.20, 153.53, 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=558, 560. Anal. izrač. za C32H32N3O4Cl (+0.1 H2O): C, 68.65; H, 5.80; N, 7.51.
Pronađeno: C, 68.44; H, 5.73; N, 7.41.
5.258 (S)-3-(4-((4-((4-IZOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL) OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-3-METILPIPERIDIN-2,6-DION
[1038]
[1039] (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-dion (500 mg, 0.765 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL), i 4-izopropilpiperidin (107 mg, 0.842 mmol) i DIEA (0.160 ml, 0.918 mmol) su dodati. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Zatim, mešavina je podeljena između vode (75 mL) i EtOAc (75 mL), i organska faza je isprana vodom (75 mL) i ekstrahovana sa 1N HCl (2 x 75 mL). Kombinovani vodeni ekstrakti isprani su sa EtOAc (2 x 75 mL), učinjeni baznim (čvrsti Na2CO3) a onda ekstrahovani u EtOAc (2 x 75 mL). Kombinovani ekstrakti isprani su vodom (75 mL), osušeni (MgSO4), dajući proizvod kao bela čvrsta supstanca, 230 mg (60% prinos); mp 160-162 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 10/90 gradijent do 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4 u 10 min: 6.05 (96.32%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.84 (d, J= 6.6 Hz, 6H), 0.91 - 1.07 (m, 1H), 1.13 - 1.26 (m, 2H), 1.31 - 1.46 (m, 1H), 1.49 - 1.63 (m, 2H), 1.68 (s, 3H), 1.76 - 1.97 (m, 3H), 2.52 -2.91 (m, 5H), 3.43 (s, 2H), 4.55 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.67 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 7.22 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.37 (m, 3H), 7.39 - 7.52 (m, 3H), 10.84 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.66, 20.70, 27.77, 28.86, 29.01, 31.94, 41.82, 45.59, 53.65, 57.18, 62.13, 69.45, 114.79, 127.67, 128.82, 129.74, 129.97, 133.91, 135.06, 138.6, 138.7, 153.38, 167.00, 172.41, 173.49. Anal. Izrač. za C30H37N3O4: C, 71.54%; H, 7.40%; N, 8.34%; Pronađeno: C, 71.23%; H, 7.61%; N, 8.12%.
5.2593-{1-OKSO-4-[4-(4-TRIFLUOROMETANSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1040]
Faza 1: tert-butil estar 4-trifluorometansulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline
[1041] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (4.6 g, 24.7 mmol) i trietilamina (4.1 ml, 29.6 mmol) u THF (50 mL) dodat je trifluorometansulfonil hlorid (3.1 ml, 29.6 mmol) na 0 °C putem šprica. Dobijena suspenzija je mešana na 0 °C tokom 2 h. Reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (100 mL) i isprana vodom (50 mL), HCl (1N, aq, 50 mL), NaHCO3 (zas. aq., 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-trifluorometansulfonil-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bistro ulje (5.9 g, 87% sirovi prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja; LCMS MH = 319.
Faza 2: 1-Trifluorometansulfonil-piperazi
[1042] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(trifluorometilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (5.9 g, 18.54 mmol) u DCM (20 ml) dodat je TFA (10.00 ml, 130 mmol) na sobnoj temperaturi. Mehuri su odmah razvijeni i reakciona mešavina je ohlađena u led/voda kupatilu. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h i reakcionoj mešavini je dodat dietil etar (100 mL) i mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Suspenzija je filtrirana, a bela čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (2 x 25 mL). Čvrstoj supstanci (5.5 g) dodat je NaHCO3(aq, zas, 35 mL) i EtOAC (80 mL). Mešavina je ekstrahovana, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (80 mL). Organski slojevi su kombinovani i osušeni pomoću MgSO4. Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 1-Trifluoro metansulfonilpiperazi kao svetlo braon ulje (1.9 g, 47 % prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.76 (t, J= 5.0 Hz, 4H, CH2, CH2), 3.36 (br. s., 4H, CH2, CH2); LCMS MH = 219.
Faza 3: 3-{1-Okso-4-[4-(4-trifluorometansulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il} -piperidin-2,6-dion
[1043] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1 g, 2.2 mmol) u DCM (10 mL) u led/voda kupatilu dodat je rastvor 1-(trifluorometilsulfonil)piperazina (0.640 g, 2.9 mmol) u DCM (10 mL) nakon čega je usledilo dodavanje DIPEA (0.79 ml, 4.5 mmol).
Dobijeni rastvor je držan u frižideru tokom dva dana i reakcionoj mešavini je dodata DCM (80 mL) i voda (30 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćena umešavanjem u dietil etru (20 mL) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-trifluorometan sulfonilpiperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca<(700 mg, 53% prinos). mp: 135-137 °C; 1H NMR (DMSO-d>6<) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 5H,>CH2, CH2, CHH), 2.54 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.40 - 3.52 (m, 4H, CH2, CH2), 3.55 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.29, 31.11, 45.00, 46.33, 51.51, 51.80, 60.95, 69.28, 118.06 (q, J= 324.6 Hz, CF3), 114.90, 115.22, 127.62, 128.90, 129.73, 129.88, 133.24, 135.45, 137.25, 153.41, 167.92, 170.89, 172.74; LCMS MH = 581.
Faza 4: 3-(1-okso-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid
[1044] Izmešanoj mešavini 3-(1-okso-4-(4-((4-(trifluorometilsulfonil)piperazin-1-il) metil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (680mg, 1.17 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je HCl u dietil etru (2 M, 1.7 ml, 3.5 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7 h i mešavina je isfiltrirana. Bela čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (2 x 10 mL) i osušena u vakuum sušnici da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil) benzil)oksi) izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (650 mg, 90% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.53 min (99.9%); mp: 228-230 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 -2.65 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.12 - 3.42 (m, 4H, CH2, CH2), 3.67 - 4.09 (m, 4H, CH2, CH2), 4.22 - 4.50 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5.12 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.29 (s, 2H, CH2), 7.34 (d, J= 7.6 Hz, 2H, Ar), 7.50 (t, J= 7.9 Hz, 1H, Ar), 7.58 (d, J= 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.66 (d, J= 8.1 Hz, 2H, Ar), 10.98 (s, 1H, CHH), 11.83 (s, br, 1H, HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.11, 43.11, 45.00, 49.90, 51.52, 58.21, 68.90, 114.86, 115.29, 119.34 (q, J = 321 Hz, CF3), 127.82, 128.95, 129.77, 129.89, 131.43, 133.27, 138.00, 153.28, 167.90, 170.90, 172.77; LCMS MH = 581; Anal. Izrač. za C26H27F3N4O6S HCl 2H2O :C, 47.82; H, 4.94; N, 8.58; Cl, 5.43; Pronađeno: C, 47.51; H, 5.01; N, 8.37; Cl, 5.24.
5.2603-{1-OKSO-4-[4-(4-P-TOLIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[1045]
[1046] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.352 g, 0.794 mmol) dodat je 4-p-tolilpiperidin (0.209 g, 1.191 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.394 ml, 2.382 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen i rezultujuća beličasta čvrsta supstanca je mešana u metilen hloridu (100 ml), isprana zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 80 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncentrovana do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(4-p-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidroizoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.144 g, 33% prinos); mp, 208-210°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.60 min (96.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.52 - 1.77 (m, 4H, CH2CH2), 1.91 - 2.10 (m, 3H, CHH, CH2), 2.25 (s, 3H, CH3), 2.36 - 2.48 (m, 2H, CHH, CH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 3H, CHH, CH2), 3.49 (s, 2H, CH2), 4.20 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.04 - 7.15 (m, 4H, Ar), 7.30 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.57, 22.36, 31.21, 33.18, 41.39, 45.10, 51.58, 53.65, 62.13, 69.47, 114.98, 115.23, 126.50, 127.64, 128.83, 128.90, 129.82, 129.95, 133.32, 134.81, 135.13, 138.51, 143.19, 153.53, 168.01, 170.98, 172.82. LC/MS m/e=538. Anal. izrač. za C33H35N3O4(+0.2 H2O): C, 73.23; H, 6.59; N, 7.76. Pronađeno: C, 73.01; H, 6.38; N, 7.54.
5.2613-{1-OKSO-4-[4-(3',4',5',6'-TETRAHIDRO-2'H-[3,4']BIPIRIDINIL-1'-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[1047]
[1048] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.5 g, 1.128 mmol) dodat je 3-(piperidin-4-il)piridin (0.192 g, 1.184 mmol) praćeno DIPEA (0.591 ml, 3.38 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati zatim je dodata voda (15 mL) Nakon ekstrakcije, organski sloj je koncentrovan da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz CH3CN (5 mL) da bi se dobio 3-{1-Okso-4-[4-(3',4',5',6'-tetrahidro-2'H-[3,4']bipiridinil-1'-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao čvrsta supstanca (200 mg, 34%). m.p: 161-163 °C. LC-MS m/e= 525. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 5.11 min (94%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.57 - 1.80 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1.89 - 2.15 (m, 3H, CH2, CHH), 2.43-2.50 (m., 1H, CHH), 2.55 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.04 (m, 3H, CHH, CH2), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.12 - 4.48 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.23 - 7.39 (m, 5H, Ar), 7.40 - 7.54 (m, 3H, Ar), 7.67 (dt, J= 1.9, 7.7 Hz, 1H, Ar), 8.40 (dd, J= 1.5, 4.7 Hz, 1H, Ar), 8.47 (d, J = 1.9 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 14.09, 21.30, 30.15, 31.60, 44.03, 50.52, 52.38, 61.01, 68.38, 113.93, 114.17, 122.41, 126.58, 127.89, 128.77, 128.90, 132.27, 133.06, 134.12, 137.34, 140.29, 146.32, 147.48, 152.46, 166.96, 169.93, 171.78. Anal. izrač. za C31H32N4O4:C% 70.97 H% 6.15 N% 10.68. Pronađeno, C% 68.36 H% 5.89 N% 10.08.
5.262 (S)-3-METIL-3-(1-OKSO-4-((4-((4-(TRIFLUOROMETIL) PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1049]
Faza 1: (S)-3-(4-((4-(hidroksimetil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-dion [1050] Mešavina (S)-3-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (1.9 g, 6.93 mmol), (4-(hlorometil)fenil)metanola (1.085 g, 6.93 mmol), kalijum jodida (0.115 g, 0.693 mmol) i kalijum karbonata (1.053 g, 7.62 mmol) u DMF (50 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 9 dana.
Mešavina je uparena pod vakuumom. Ostatku je dodata voda (150 mL) i EtOAc (150 mL), i dobijena suspenzija je mešana tokom 16 h. Suspenzija je filtrirana, a filtrat je ispran sa vodom (50 mL) i EtOAc (2 x 50 mL). Organska faza je isprana sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 x 75 mL), 1N HCl (100 mL), i slanim rastvorom (100 mL), osušena je (MgSO4) i uparena. Ostatak je kombinovan sa čvrstim talogom koji je isfiltriran, da bi se dobilo ukupno 2.09 g sirovog proizvoda.
Faza 2: (S)-4-(((2-(3-metil-2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil metansulfonat
[1051] Ostatak je suspendovan u 50 mL acetonitrila i mešavina je ohlađena do 0 °C. Metansulfonil hlorid (0.538 mL, 6.93 mmol) i DIEA (1.448 ml, 8.31 mmol) su dodati, a mešavina mešana na 0 °C tokom 30 min. Zatim, mešavina je ugašena dodavanjem AcOH (0.5 mL) izatim i vode (5 mL), a onda je uparena. Ostatak je podeljen između EtOAc (125 mL) i slanog rastvora (125 mL). Čvrsta supstanca koja se nije rastvorila ni u jednoj fazi je isfiltrirana, i faze su odvojene. Čvrsta supstanca je kombinovana sa organskim slojem i uparena. Ostatak je hromatografisan primenom metilen hlorid-acetonitril gradijenta.
Proizvod je euliran na ∼40% ACN. Prinos sušenja je 1.3 g (40% preko dve faze);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.69 (s, 3H), 1.82 - 1.95 (m, 1H), 2.52 - 2.83 (m, 3H), 3.24 (s, 3H), 5.27 (s, 2H), 5.30 (s, 2H), 7.17 - 7.35 (m, 2H), 7.39 - 7.62 (m, 5H), 10.85 (s, 1H).
Faza 3: (S)-3-metil-3-(1-okso-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[1052] Mešavina (S)-4-((2-(3-metil-2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil metansulfonata (0.40 g, 0.847 mmol) i 4-(trifluorometil)piperidin hidrohlorida (0.161 g, 0.847 mmol) je ohlađen do 0 °C, a onda je dodat DIEA (0.310 ml, 1.778 mmol). Nakon 6 h, reakc. je uparen pod vakuumom, a ostatak je rastvoren podeljen između EtOAc (50 mL) i vode (50 mL), i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL). Kombinovane organske frakcije ekstrahovane su sa 1N HCl (2 x 50 mL). Kombinovani vodeni ekstrakti isprani su sa EtOAc (50 mL), a zatim učinjeni baznim primenom 10% vodenog natrijum karbonata. Oni su umešani, a zatim estrahovani sa EtOAc (2 x 50 mL), i kombinovani ekstrakti isprani su slanim rastvorom (100 mL), osušeni (MgSO4), i upareni pod vakuumom, dajući 0.39 g kao bela čvrsta supstanca, u 87% prinos; mp 168-170 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 5/95 do 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2) preko 5 min zatim 10 min u 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2): 5.73 (100%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.33 - 1.54 (m, 2H), 1.68 (s, 3H), 1.73 - 1.81 (m, 2H), 1.83 -2.04 (m, 3H), 2.16 - 2.35 (m, 1H), 2.51 - 2.80 (m, 3H), 2.81 - 2.95 (m, 2H), 3.48 (s, 2H), 4.56 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.68 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 7.23 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.27 - 7.37 (m, 3H), 7.40 - 7.52 (m, 3H), 10.85 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.68, 24.24, 27.77, 28.99, 38.93, (q, J = 38.9 Hz), 45.59, 51.43, 57.18, 61.62, 69.41, 114.79, 114.81, 127.71, 127.87 (q, J = 278 Hz), 128.82, 129.74, 129.97, 133.91, 135.22, 138.18, 153.38, 167.00, 172.39, 173.47. Anal. Izrač. za C28H30F3N3O4+ 0.3 H2O: C, 62.87%; H, 5.77%; N, 7.85%; Pronađeno: C, 62.87%; H, 5.67%; N, 7.86%.
5.263 (S)-3-(4-((4-((4,4-DIMETILPIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZYOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)-3-METILPIPERIDIN-2,6-DION
[1053]
[1054] Mešavina (S)-4-((2-(3-metil-2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil metansulfonata (0.33 g, 0.698 mmol) i 4,4-dimetilpiperidin hidrohlorida (0.105 g, 0.698 mmol) je ohlađena do 0 °C, a onda je dodat DIEA (0.255 ml, 1.467 mmol). Nakon 16 h, mešavina je uparena pod vakuumom. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i vode (100 mL), i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (100 mL). Kombinovane organske faze ekstrahovane su sa 1N HCl (2 x 75 mL), i kombinovani ekstrakti su oprani sa EtOAc (100 mL) a zatim učinjeni baznim primenom čvrstog natrijum karbonata. Dodata je vodena mešavina, a zatim estrahovana sa EtOAc (2 x 75 mL), i kombinovani ekstrakti isprani su vodom (100 mL), osušeni (MgSO4), i upareni, dajući proizvod kao bela čvrsta supstanca, 250mg, u 73% prinos; mp 158-160 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 10/90 gradijent do 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4u 10 min zatim 90/10 CH3CN/0.1% H3PO4tokom 5 min: 5.79 (95.52%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.89 (s, 6H), 1.20 - 1.38 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.81 - 1.94 (m, 1H), 2.22 -2.41 (m, 4H), 2.53 - 2.83 (m, 3H), 3.46 (s, 2H), 4.56 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4.61 - 4.75 (m, J= 17.8 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 7.22 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.37 (m, 3H), 7.38 - 7.50 (m, 3H), 10.85 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 20.68, 27.77, 28.04, 28.18, 28.99, 38.32, 45.59, 49.38, 57.18, 62.09, 69.45, 114.78, 114.79, 127.67, 128.79, 129.72, 129.97, 133.89, 135.03, 138.76, 153.38, 167.00, 172.39, 173.47. Anal. Izrač. za C29H35N3O4 0.3 H2O: C, 70.36%; H, 7.25%; N, 8.49%; Pronađeno: C, 70.41%; H, 7.18%; N, 8.41%.
5.2643-(4-((4-((4-ETIL-3-OKSOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZIL) OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1055]
[1056] Rastvor 1-etilpiperazin-2-on hidrohlorida (83 mg, 0.496 mmol) i DIEA (0.276 mL, 1.579 mmol) u suvom MeCN (5 mL, 96 mmol) dodat je 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionu (200 mg, 0.451 mmol). Dobijeni rastvor (bledo amber) je mešan na 40 °C tokom 1h. Mešavina je ekstrahovana sa etil acetatom i 1N NaHCO3. Organski sloj je ispran slanim rastvorom i osušen (Na2SO4), filtriran, i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio 3-(4-((4-((4-etil-3-oksopiperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (169 mg, 76% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 7.41 min (99.5%); mp: 163-165 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.01 (t, J= 7.2 Hz, 3H, CH3), 1.87 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.68 (m, 3H, CH2, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 1H, CHH), 2.94 (s, 2H, CH2), 3.17 - 3.31 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.24 - 7.40 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.61 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.89, 22.33, 31.16, 45.07, 45.17, 48.86, 51.56, 56.81, 60.27, 69.36, 114.97, 115.22, 127.70, 128.95, 129.78, 129.93, 133.28, 135.52, 137.15, 153.48, 165.23, 167.97, 170.93, 172.78; Jedan ugljenični signal je preklopljen sa DMSO; LCMS: MH = 491; Anal. izrač. za C27H30N4O5 0.35 H2O: C, 65.27; H, 6.23; N, 11.28; Pronađeno: C, 65.27; H, 6.25; N, 11.06.
5.2653-(4-((4-((4-BUTIL-3-OKSOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZIL) OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1057]
[1058] Rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) u suvom MeCN (5 mL, 96 mmol), dodat je 1-butilpiperazin-2-on (82 mg, 0.496 mmol) i DIEA (0.158 mL, 0.902 mmol). Žućkasti bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3h. Sirova mešavina u etil acetatu je ekstrahovana sa 1N NaHCO3, zatim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran, i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio 3-(4-((4-((4-butil-3-oksopiperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (160 mg, 68% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.52 min (99.5%); mp: 138-140 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 3H, CH3), 1.14 - 1.33 (m, 2H, CH2), 1.36 - 1.55 (m, 2H, CH2), 1.88 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.68 (m, 3H, CH2, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 3H, CH2, CHH), 3.17 - 3.29 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.57 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 13.64, 19.44, 22.33, 28.41, 31.16, 44.85, 45.07, 45.73, 48.88, 51.56, 56.81, 60.27, 69.36, 114.97, 115.22, 127.70, 128.95, 129.78, 129.95, 133.30, 135.53, 137.13, 153.48, 165.48, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 519; Anal. izrač. za C27H30N4O5+ 0.6 H2O: C, 65.79; H, 6.70; N, 10.58; Pronađeno: C, 65.76; H, 6.59; N, 10.56.
5.2663-(1-OKSO-4-((4-((4-(PIRIMIDIN-2-IL)PIPERAZIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1060] Mešavina 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (205 mg, 0.462 mmol) u MeCN (8 mL) je mešana na sobnoj temperaturi. Rastvoru je dodat 2-(piperazin-1-il)pirimidin (81 mg, 0.495 mmol), praćeno DIEA (0.145 mL, 0.832 mmol). Mešavina je držana na sobnoj temperaturi tokom 4h. Sirovi reakc. mešavina je razblažena sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa 1N NaHCO3(2 x 25 mL), slanim rastvorom i osušen iznad Na2SO4. Rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((4-(pirimidin-2-il)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (244 mg, 100% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.26 min (97.3%), mp: 142-144 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.41 (t, J= 4.9 Hz, 4H, CH2, CH2), 2.47 (br. s., 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.52 (s, 2H, CH2), 3.72 (t, J= 4.7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4.26 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J= 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.61 (t, J= 4.7 Hz, 1H, Pyr), 7.27 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 3H, Ar), 8.34 (d, J= 4.7 Hz, 2H, Pyr), 10.97 (s, 1H, NH). See ∼0.15 eq. of EtOAc u H-NMR.<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 43.26, 45.07, 51.56, 52.35, 61.72, 69.39, 110.01, 114.96, 115.20, 127.64, 128.94, 129.78, 129.93, 133.30, 135.30, 137.89, 153.49, 157.82, 161.16, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 527; Anal. izrač. za C29H30N6O4 0.49 H2O 0.15 EtOAc: C, 64.80; H, 5.91; N, 15.32; Pronađeno: C, 64.80; H, 5.75; N, 15.32.
5.267 3-(1-OKSO-4-((4-((3-OKSO-4-(PIRIDIN-2-IL)PIPERAZIN-1-IL) METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1062] Suspenziji (S)-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) i 1-(piridin-2-il)piperazin-2-on dihidrohlorida (124 mg, 0.496 mmol) u suvom MeCN (5 mL), dodat je DIEA (0.276 mL, 1.579 mmol). Čvrste supstance rastvorene su uz umešavanje da bi se dobio žuti rastvor koji je zagrejan do 40 °C tokom 3 dana. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (∼150 mL) i isprana sa 1 N NaHCO3 (2 x 30 mL) i slanim rastvorom. Čist organski sloj je osušen iznad Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio staklasti ostatak. Ostatak je tretiran vodom (30 mL) i mešavina je podvrgnuta sonikaciji obimno da bi se dobila dobro dispergovana čvrsta supstanca koja je prikupljena filtracijom i isprana dodatnom vodom (∼45 mL). Kolač je suspendovan u Et2O, pretvoren u prah upotrebom špatuke, i potom filtriran. Ovaj postupak je ponovljen 4 puta (ukupna zapremina Et2O filtrata ∼ 125 mL). Kolač je osušen sukcijom a onda osušen u vakuum sušnici da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (143 mg). Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (10 mL) i prečišćena primenom reverzno fazne preparativna HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 80% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu i ostatak je tretiran vodom i podvrgnute sonikaciji da bi se dobila bela gusta suspenzija. Čvrsta supstanca je filtrirana, a onda osušena u vakuum sušnici na 50 °C preko noći da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((3-okso-4-(piridin-2-il)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (72mg, 30% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.98 min (97.9%); mp: 224-226 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.85 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.57 (d, J= 18.3 Hz, 1H, CHH), 2.80 (t, J= 5.0 Hz, 2H, CH2), 2.84 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.23 (s, 2H, CH2), 3.64 (s, 2H, CH2), 3.87 (t, J= 5.4 Hz, 2H, CH2), 4.26 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.25 (s, 2H, CH2), 7.22 (ddd, J= 2.3, 4.9, 6.0 Hz, 1H, Ar), 7.33 (dd, J= 1.6, 7.8 Hz, 2H, Ar), 7.37 - 7.44 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.55 (m, 3H, Ar), 7.74 - 7.88 (m, 2H, Ar), 8.44 (dt, J= 1.4, 4.7 Hz, 1H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.07, 46.11, 48.89, 51.56, 57.64, 60.09, 69.38, 114.99, 115.23, 119.62, 120.83, 127.74, 129.01, 129.80, 129.95, 133.30, 135.62, 136.99, 137.31, 147.70, 153.07, 153.48, 166.92, 167.97, 170.95, 172.80.; LCMS: MH = 540; Anal. izrač. za C30H29N5O 0.49 H2O 0.15 EtOAc: C, 64.80; H, 5.91; N, 15.31; Pronađeno: C, 64.80; H, 5.75; N, 15.32.
5.2683-(1-OKSO-4-((4-((4-(2,2,2-TRIFLUOROETIL)PIPERAZIN-1-IL) METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1063]
[1064] 20-mL reakciona fiolica napunjena je sa (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionom (307 mg, 0.693 mmol), 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazinom (170 mg, 0.706 mmol), i katalitičkim tetrabutilamonijum bromidom (22.33 mg, 0.069 mmol). Mešavini je dodat suvi MeCN (5 mL) praćeno DIEA (0.423 mL, 2.424 mmol). Mešanje je rezultiralo kao bistar žuti rastvor koji je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova mešavina je podeljena između EtoAc (∼150 mL) i 1N NaHCO3(∼50 mL). Organski sloj je ispran dva puta dodatno sa 1 N NaHCO3(2 x 35 mL) i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Et2O (∼30 mL) je dodat i mešavina je podvrgnuta sonikaciji obimno dok nije dobijena dobro dispergovana gusta suspenzija. Mešavini, dodat su n-heksani (∼30 mL) intermitentnom sonikacijom kako bi se dalje razbili preostali agregati. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i potom filtrirana na srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca u boci je preneta u levak sa još n-heksana (∼30 mL). Čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda pretvorena u prah sa H2O (20 mL). Preostala čvrsta supstanca je prikupljena u filter levku i kolač je ispran vodom (∼250 mL), osušen sukcijom, a onda osušen dalje u vakuum sušnici na 50 °C da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bledo žuta čvrsta supstanca (262 mg, 71% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.49 min (94.7%); mp: 133-135 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.22 - 2.48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.52 - 2.71 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.13 (q, J = 10.3 Hz, 2H, CH2CF3), 3.46 (s, 2H, CH2N), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, lactam CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, lactam CHH), 5.11 (dd, J = 4.9, 13.2 Hz, 1H, alpha-CH), 5.22 (s, 2H, CH2O), 7.26 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.06, 51.55, 52.42, 53.06, 56.81 (q, J= 29.7 Hz, CCF3), 61.56, 69.39, 114.96, 115.20, 125.90 (q, J= 280.6 Hz, CF3), 127.58, 128.85, 129.78, 129.93, 133.28, 135.21, 137.95, 153.49, 167.97, 170.95, 172.80. Spoljni signali kvarteta na 125.90 su preslabi da bi se mogli primetiti. LCMS: MH = 531; Anal. izrač. za C27H29F3N4O4·+ 0.24 H2O: C, 60.63; H, 5.56; N, 10.47; F, 10.66; Pronađeno: C, 60.64; H, 5.49; N, 10.20; F, 9.56.
5.2693-(1-OKSO-4-((4-(((S)-2-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL) METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1065]
[1066] U reakcionoj fiolici od 20-mL, (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (350 mg, 0.790 mmol) je rastvoren u suvom MeCN (5 m). Rastvoru je dodat (S)-2-(trifluorometil)piperidin (140 mg, 0.916 mmol) praćeno DIEA (0.345 mL, 1.974 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h a onda na 70 °C tokom 8 h preko noći. Reakciona mešavina je podeljena između EtOAc (∼100 mL) i vode (∼25 mL). Organski sloj je ispran sa 1 N NaHCO3(∼75 mL) i slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (8 mL), preneta pomoću špric filtera, a filtrat injektovan u reverzno-fazno preparativnu HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1% mravlja kiselina u obe pokretne faze, 5% do 95% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu radi uklanjanja svog MeCN i većeg dela vode, dajući belu gustu suspenziju (∼20 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, kolač osušen sukcijom, a onda osušen u vakuum sušnici na 50 °C tokom 5 h da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (506 mg, 51% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 45/55 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.46 min (97.6%); mp: 120-122;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 - 1.63 (m, 4H, CH2, CH2), 1.67 - 1.90 (m, 2H, CH2), 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 2H, CHH, CHH), 2.53 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.64 - 2.78 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.46 (qt, J= 4.9, 9.5 Hz, 1H, CHCF3), 3.84 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J= 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.64, 22.31, 22.94, 31.16, 45.06, 46.15, 51.55, 58.03 (q, J= 24.2 Hz, CCF3), 57.84, 69.39, 114.94, 115.20, 126.02, 127.70, 128.14, 129.78, 129.87, 129.95, 133.28, 135.25, 139.12, 153.49, 167.97, 170.95, 172.80. CF3 kvarteta nije određen. Ni jedan ugljenični signal u alifatičnom regionu nije primećen; moguće preklopljen sa još jednim signalom; LCMS: MH = 516; Anal. izrač. za C27H28F3N3O4·+ 0.5 H2O: C, 61.83; H, 5.57; N, 8.01; F, 10.87; Pronađeno: C, 61.92; H, 5.48; N, 7.94; F, 10.08.
5.2703-(4-{4-[4-(3,5-DIFLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION, HIDROHLORID
[1067]
[1068] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.790 mmol) dodat je DIPEA (0.414 ml, 2.369 mmol) i 4-(3,5-difluorofenil)piperidin (156 mg, 0.790 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, dodata je voda (20 mL) i ekstrahovana. Organski sloj je koncentrovan i rezultujuća čvrsta supstanca je prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2/MeOH da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u CH2Cl2 (20 mL) i u nju je dodato 3 mL HCl (2.0M u etru). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Rezultujuća suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(3,5-difluorofenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion, hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (0.27g, 61%). Tačka topljenja: 281-283 °C.LC-MS m/e= 560. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 7.05 min (98.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.14 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.36 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.79 - 2.95 (m, 2H, CHH), 2.95 -3.10 (m, J= 18.5 Hz, 2H, CH2), 3.42 (d, J= 11.9 Hz, 2H, CH2), 4.22 - 4.50 (m, 4H, CH2, CH2), 5.12 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.31 (s, 2H, CH2), 6.96 (dd, J= 2.1, 8.9 Hz, 2H, Ar), 7.04 - 7.16 (m, 1H, Ar), 7.29 - 7.38 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.54 (m, 1H, Ar), 7.55 - 7.69 (m, 4H, Ar), 10.66 (br. s., 1H, HCl), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.40, 29.02, 31.21, 38.24, 45.09, 51.30, 51.61, 58.65, 69.03, 101.73, 102.06, 102.40, 109.69, 109.79, 109.91, 110.01, 115.00, 115.39, 127.85, 128.03, 129.36, 129.85, 129.98, 131.09, 131.63, 133.38, 138.07, 148.79, 148.91, 153.37, 160.92, 164.00, 164.17, 167.96, 170.98, 172.83; Anal. izrač. za C32H31F2N3O4 HCl+1.3 H2O, C: 62.04; H: 5.63%; N: 6.78%; Pronađeno: C: 61.73; H: 5.56%; N: 6.72%.
5.2713-(4-{4-[4-(2,4-DIFLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION HIDROHLORID
[1069]
[1070] U CH2Cl2 rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.790 mmol) i 4-(2,4-difluorofenil)piperidina (171 mg, 0.869 mmol) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.422 ml, 2.369 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Voda (15 mL) je dodata reakcionoj mešavini i ekstrahovana. Organski sloj je koncentrovan i čvrsta supstanca je rastvorena u CH2Cl2. Rastvoru je dodata HCl (2 mL, 2.0 M u etru) i mešan tokom 1 sata. Suspenzija je filtrirana da bi dala 3-(4-{4-[4-(2,4-Difluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion hidrohlorid kao belu čvrstu supstancu (0.18 g, 40%). Tačka topljenja: 274-276 °C. LC-MS m/e= 560. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min:7.03 min (94%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.81 - 2.21 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.82 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.09 (d, J= 10.0 Hz, 3H, CH2, CHH), 3.42 (d, J= 11.7 Hz, 2H, CH2), 4.22 - 4.50 (m, 4H, CH2,CH2), 5.12 (dd, J= 4.9, 13.2 Hz, 1H, CHN), 5.31 (s, 2H, CH2), 7.04 - 7.15 (m, 1H, Ar), 7.16 - 7.27 (m, 1H, Ar), 7.27 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.54 (m, 1H, Ar), 7.56 - 7.67 (m, 3H, Ar), 10.52 (br. s., 1H, HCl), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.40, 28.37, 31.21, 32.04, 45.09, 51.48, 51.61, 58.84, 69.03, 103.60, 103.95, 104.30, 111.58, 111.83, 115.00, 115.39, 127.85, 128.73, 128.85, 128.93, 129.36, 129.85, 129.98, 131.62, 133.38, 138.09, 153.37, 161.62, 167.96, 170.98, 172.83; Anal. izrač. za C32H31F2N3O4 HCl+0.8 H2O; C: 62.96%; H: 5.55%; N: 6.88%; Pronađeno: C: 62.83%, H: 5.38%; N: 6.87%.
5.2723-(1-OKSO-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ACETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1072] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0.68 mmol) u DCM (7 mL) na sobnoj temperaturi dodat je rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(piperazin-1-il)etanona (185 mg, 1.0 mmol) u DCM (1 mL) nakon čega je usledilo dodavanje DIPEA (0.236 ml, 1.4 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 7.5 h i reakcija je uglavnom završena. Reakcionoj mešavini je dodata DCM (30 mL) i voda (20 mL). Mešavina je ekstrahovana. Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je dalje prečišćena umešavanjem u EtOAc (3 mL) da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-acetil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (180 mg, 49% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/0.1%H3PO4), 5.21 min (99.9%); mp: 125-127 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.38 - 2.48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.85 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.47 - 3.70 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4.17 - 4.55 (m, 2H, CHH, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.33 (dd, J = 4.1, 7.8 Hz, 4H, Ar), 7.40 - 7.56 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.82, 30.65, 42.42, 44.54, 44.81, 51.02, 51.14, 51.81, 60.57, 68.81, 114.43, 114.70, 127.15, 128.45, 129.28, 129.41, 132.78, 134.93, 136.90, 152.96, 167.46, 170.44, 172.29; LCMS MH = 545; Anal. Izrač. za C27H27F3N4O5+0.3H2O: C, 58.97; H, 5.06; N, 10.19; Pronađeno: C, 58.85; H, 4.82; N, 10.03.
5.2733-(4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION, DIHIDROHLORID
[1074] U CH2Cl2rastvor 3-(4-(4-((4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.23 g, 0.424 mmol) i 1-(4-fluorofenil)piperazina (142 mg, 0.790 mmol) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (422 µl, 2.369 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcionoj mešavini je dodata voda (15 mL) i ekstrahovana. Organski sloj je koncentrovan i rezultujuća čvrsta supstanca je rastvorena u CH2Cl2 (35 mL) i 2M HCl u etru dodata je u kapima.
Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Suspenzija je filtrirana da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(4-fluoro-fenil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1, 3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion, dihidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (230 mg, 54%). Tačka topljenja.: 191-193 °C. LC-MS m/e= 543. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro,1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min: 6.67 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.80 - 2.09 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.45 (m, J = 4.3 Hz, 1H, CHH), 2.58 (d, J = 18.5 Hz, 1H, CHH), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.16 (d, J = 8.9 Hz, 4H, CH2,CH2), 3.34 (d, J = 8.1 Hz, 2H, CH2), 3.63 - 3.80 (m, 2H, CH2), 4.15 - 4.62 (m, 4H, CH2, CH2), 5.12 (dd, J= 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHN), 5.30 (s, 2H, CH2), 6.89 - 7.06 (m, 2H, Ar), 7.04 - 7.16 (m, 2H, Ar), 7.26 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 1H, Ar), 7.54 - 7.64 (m, 2H, Ar), 7.64 - 7.79 (m, 2H, Ar), 10.97 (s, 1H, nh), 11.46 (br. s., 1H, HCl);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.39, 31.21, 45.10, 45.91, 50.16, 51.61, 58.05, 69.03, 114.98, 115.36, 115.65, 117.78, 117.88, 127.85, 129.24, 129.85, 130.00, 131.69, 133.37, 138.06, 146.34, 153.37, 154.99, 158.12, 167.98, 170.96, 172.83; Anal. izrač. za C31H31FN4O4 1.8 HCl 2H2O: C: 57.79%; H: 5.76%; N: 8.70%; Cl: 9.90%; Pronađeno: C: 57.61%, H: 5.64%; N: 8.60%, Cl: 9.54%.
5.2743-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENZIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1075]
[1076] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.40 g, 0.902 mmol) dodat je 1-(4-fluorobenzil)piperazin (0.193 g, 0.993 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.298 ml, 1.805 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom dva sata. Voda (20 ml) je dodata u reakcioni rastvor i ekstrahovana metilen hloridom (2 x 30 ml), isprana slanim rastvorom, uparena, a beličasta čvrsta supstanca je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-benzil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.336 g, 66.9% prinos); mp, 222-224°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/05 u 5 min, izokratski na 95/05 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.67 min (97.01%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.20 - 2.47 (m, 8H, 2CHH, 3CH2), 2.55 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.82 -3.01 (m, 1H, CHH), 3.30 - 3.35 (m, 2H, CH2), 3.45 (s, 2H, CH2), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.07 - 7.17 (m, 2H, Ar), 7.26 - 7.37 (m, 6H, Ar), 7.40 - 7.53 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.21, 45.10, 51.59, 52.48, 52.58, 61.08, 61.71, 69.44, 114.68, 114.95, 115.23, 127.62, 128.86, 129.81, 129.95, 130.55 (d, JC-F=10), 133.31, 134.37, 135.19, 138.12, 153.51, 161.17(d,JC-F=250), 168.01, 170.96, 172.82. LC/MS m/e=557. Anal. izrač. za C32H33N4O4F: C, 69.05; H, 5.98; N, 10.07. Pronađeno: C, 68.93; H, 5.99; N, 10.01.
5.2753-(1-OKSO-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ETANSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION
[1077]
Faza 1: tert-butil estar 4-(2,2,2-Trifluoro-etansulfonil)-piperazin-1-karboksilne kiseline
[1078] Izmešanom rastvoru tert-butil piperazin-1-karboksilata (0.850 g, 4.56 mmol) i TEA (0.76 ml, 5.48 mmol) u THF (10 mL) na 0°C dodat je 2,2,2-trifluoroetan sulfonil hlorid (1.0 g, 5.48 mmol) u THF (0.5 mL). Dobijena suspenzija je mešana na 0°C tokom 1.5 h i reakciona mešavina je razblažena pomoću EtOAC (30 mL). Mešavina je isprana vodom (15 mL), HCl (1N, aq, 15 mL) i NaHCO3 (15 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio tert-butil estar 4-(2,2,2-Trifluoro-etansulfonil)-piperazin-1-karboksilne kiseline kao bela čvrsta supstanca (1.3 g, 86% prinos). Jedinjenje je stavljeno u sledeću fazu bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.41 (s, 9H, tButil), 3.12 - 3.26 (m, 4H, CH2, CH2), 3.36 - 3.48 (m, 4H, CH2, CH2), 4.52 (q, J = 10.1 Hz, 2H, CH2); LCMS MH (bez boc) = 233.
Faza 2: 1-(2,2,2-Trifluoro-etansulfonil)-piperazin
[1079] Izmešanom rastvoru tert-butil 4-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil)piperazin-1-karboksilata (1.3 g, 3.9 mmol) u DCM (20 mL) na sobnoj temperaturi dodat je TFA (3.0 mL, 39.1 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 15 h i reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (30 mL) i joj je dodat NaHCO3(zas., aq, 15 mL) lagano kako bi se kontrolisala emisija gasa. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i podeljena. Organski sloj je ispran sa NaHCO3(zas., aq, 5 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Kombinovani vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (4x 40 mL). Kombinovan slojevi su osušeni pomoću MgSO4 i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio 1-(2,2,2-Trifluoroetansulfonil) -piperazin kao bela čvrsta supstanca (930 mg, 102% sirovi prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.41 (br. s., 1H, NH), 2.64 - 2.85 (m, 4H, CH2, CH2), 3.02 - 3.20 (m, 4H, CH2, CH2), 4.46 (q, J= 10.2 Hz, 2H, CH2); LCMS MH = 233.
Faza 3: 3-(1-Okso-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-etansulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidroizoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion
[1080] Izmešanoj mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il) piperidin-2,6-diona (350 mg, 0.79 mmol) i 1-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil) piperazina (183 mg, 0.79 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DIPEA (0.28 ml, 1.56 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (30 mL) i rastvor je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je dalje prečišćena umešavanjem u acetonitrilu (2 mL) i dietil etru (30 mL) da bi se dobio 3-(1-Okso-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoroetansulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (277 mg, 59% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 3.10 min (99.2%); 213-215°C (in house);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.45 (d, J = 8.7 Hz, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.83 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.17 - 3.27 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.36 - 4.58 (m, 3H, CH2, CHH),<5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CHH), 5.23 (s, 2H, CH>2<), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 4H, Ar), 7.39 - 7.53 (m, 3H, Ar),>10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 45.06, 45.15, 50.02 (q, J = 29.2 Hz, CF3), 51.56, 51.81, 61.10, 69.36, 114.97, 115.22, 123.22 (q, J = 275.2 Hz, CF3), 127.67, 128.91, 129.80, 129.93, 133.30, 135.43, 137.57, 153.48, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 595; Anal. Izrač. za C27H29F3N4O6S 0.5H2O : C, 53.73; H, 5.01; N, 9.28; Pronađeno: C, 53.67; H, 5.03; N, 9.17.
5.2763-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENZENSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1081]
[1082] Izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (330mg, 0.7 mmol) u DCM (10 mL) dodat je 1-(4-fluoro fenilsulfonil)piperazin (236 mg, 0.97 mmol) i DIPEA (0.26 mL, 1.5 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 h a onda su dodati DCM (20 mL) i voda (20 mL). Mešavina je ekstrahovana i organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je dalje prečišćena umešavanjem u acetonitrilu i dietil etru da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-benzen sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (245 mg, 54% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.70 min (98.9%); mp:192-194 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.01 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3.47 (s, 2H, CH2), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.08 (dd, J = 4.9, 8.1 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.25 (d, 2H, Ar), 7.29 - 7.34 (m, 2H, Ar), 7.40 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.44 - 7.56 (m, 3H, Ar), 7.73 - 7.87 (m, 2H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.04, 45.90, 51.33, 51.53, 60.95, 69.31, 114.93, 115.20, 116.60 (d, J = 23.25 Hz, Ar), 127.63, 128.79, 129.78, 129.90, 130.60 (d, J = 9.75 Hz, Ar), 131.17, 133.27, 135.34, 137.51, 153.45, 162.62 (d, J = 249.75 Hz, Ar), 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 607; Anal. Izrač. za C31H31FN4O6S 0.6H2O :C, 60.30; H, 5.26; N, 9.07; Pronađeno: C, 60.18; H, 5.18; N, 9.09.
5.2773-(4-{4-[4-(3,4-DIFLUORO-BENZENSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1084] Izmešanoj mešavini 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperi din-2,6-diona (350 mg, 0.79 mmol) i 1-(3,4-difluorofenilsulfonil) piperazina (269 mg, 1.0 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DIPEA (0.25 ml, 1.6 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana.
Reakciona mešavina je razblažena pomoću DCM (30 mL) i rastvor je ispran vodom (20 mL), slanim rastvorom (2x20 mL). Organski sloj je osušen pomoću MgSO4 i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. A ostatak je prečišćen pomoću ISCO da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je dalje prečišćena umešavanjem u acetonitrilu i dietil etru da bi se dobio 3-(4-{4-[4-(3,4-Difluorobenzensulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (296 mg, 60% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/0.1%H3PO4), 6.70 min (99.9%); mp: 225-227°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.04 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.02 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3.48 (s, 2H, CH2), 4.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.40 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CHH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.26 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.30 (d, J = 3.0 Hz, 1H, Ar), 7.33 (d, J = 2.1 Hz, 1H, Ar), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.62 (dd, J = 2.0, 4.1 Hz, 1H, Ar), 7.73 (dd, J = 7.7, 10.2 Hz, 1H, Ar), 7.84 (ddd, J = 2.1, 7.5, 9.7 Hz, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.16, 45.03, 45.90, 51.30, 51.53, 60.92, 69.31, 114.93, 115.20, 17.45 (d, J = 19.5, CF), 118.84(d, J = 17.2, CF), 125.43, 127.63, 128.81, 129.78, 129.90, 132.11, 133.28, 135.35, 137.50, 149.25 (dd, J=228.0 Hz, J=12.0 Hz), 152.60(dd, J = 230.2 Hz, J = 13.5 Hz), 153.43, 167.97, 170.96, 172.83; LCMS MH = 625; Anal. Izrač. za C31H30F2N4O6S : C, 59.61; H, 4.84; N, 8.97; Pronađeno: C, 59.34; H, 4.72; N, 8.88.
5.278 (S)-3-(1-OKSO-4-((4-((4-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL) METIL)BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1086] Suspenziji (S)-3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1 g, 2.256 mmol) u MeCN (20 mL) na 0 °C, dodat je 4-(trifluorometil)piperidin hidrohlorid (0.470 g, 2.481 mmol). DIEA (0.788 mL, 4.51 mmol) je odmah dodat i dobijena mešavina je mešana na 0 °C tokom 3 h. Tetrabutilamonijum bromid (0.036 g, 0.113 mmol) dodat je reakcionoj mešavini i mešanje je nastavljeno tokom 1 h na 0 °C zatim na sobnoj temperaturi tokom ∼18 h. Reakciona gusta suspenzija je koncentrovana do suvoće pod vakuumom da bi se dobio ∼1.2 g žute čvrste supstance. Ova čvrsta supstanca je podeljena između EtOAc (∼250 mL) i aq 1N NaHCO3(∼100 mL). Organski sloj je ispran sa još jedno 100 mL 1N NaHCO3, vodom (∼25 mL), i slanim rastvorom (∼50 mL). Rastvor je osušen iznad Na2SO4, filtriran, i koncentrovan na rotacionom isparivaču do minimalne zapremine EtOAc (∼5-7 mL) na 40 °C do prvog znaka zamućenja. Bočica je uklonjena iz rotacionog isparivača i ostavljena da se smiri na sobnoj temperaturi. Dodatne čvrste supstance obrazovane su usled stajanja.
[1087] Jednaka zapremina MTBE (5-7 mL) dodata je gustoj suspenziji. Mešavina je promućkana i potom filtrirana na 30-mL finom poroznom levku uvlačenjem. Dodatni MTBE je primenjen za pranje kolača i transfer preostale čvrste supstance iz bočice (∼25 mL). Kolač je osušen sukcijom a onda stavljen u vakuum sušnicu preko noći na 50 °C da bi se dobio 850 mg (73% prinos) bele svetlo krem onojene čvrste supstance. Radi uklanjanja neželjenog ostatka rastvarača (EtOAc i MTBE), izvedena je sdruga rekristalizacija iz toplog MeCN/voda. Čvrsta supstanca je sakupljena na finom poroznom levku, isprana vodom (∼25 mL), i kolač je osušen u vakuum sušnici na 60 °C preko noći da bi se dobio (S)-3-(1-okso-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (485 mg, 61% recovery): HPLC:Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.33 min (99.0 %); Hiralna HPLC: Chiral Technologies, AGP analitička kolona, 99% ee upoređivanjem sa racemskim uzorkom koji je prethodno sintetizovan; mp: 158-160;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.33 - 1.56 (m, 2H, CHH, CHH), 1.67 - 1.84 (m, 2H, CHH, CHH), 1.86 - 2.09 (m, 3H, CHH, CH2), 2.14 - 2.34 (m, 1H, CH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.00 (m, 3H, CH2, CHH), 3.48 (br. s., 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd,J=5.0, 13.3 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.25 - 7.39 (m, 4H, Ar), 7.40 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 24.21, 31.18, 45.06, 51.37, 51.56, 61.59, 69.38, 114.96, 115.22, 127.72 (q, J = 280.6 Hz, CF3), 127.64, 128.81, 129.78, 129.93, 133.30, 135.22, 138.12, 153.48, 167.97, 170.95, 172.80. CF3C je preklopljen sa DMSO i nije primećen; LCMS: MH = 516; Anal. izrač. za C27H28F3N3O4+ 0.5 H2O: C, 61.83; H, 5.57; N, 8.01; F, 10.87; Pronađeno: C, 61.81; H, 5.40; N, 8.06; F, 10.51.
5.2793-{1-OKSO-4-[4-(4-PIRIDIN-2-il-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION
[1088]
[1089] Suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0.677 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je 1-(piridin-2-il)piperazin (116 mg, 0.711 mmol) praćeno DIEA (0.236 mL, 1.354 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Debela gusta suspenzija je potom zagrejana do 50 °C, rezultirajući kao bistar žuti rastvor. Nakon ∼7 h na 50 °C, toplota je uklonjena i rastvor je mešan nežno tokom oko 1 h a onda ostavljen da miruje na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijena gusta suspenzija je nežno umešavana i potom filtrirana na 30-mL srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca koja je ostala u reakcionoj fiolici je preneta na levak sa dodatnim MeCN (∼2 mL). Kolač je ispran sa nekoliko porcija Et2O (ukupna zapremina -70 mL) a onda suspendovan u vodi a onda sukciono osušen. Čvrsta supstanca je isprana sa malim porcijama vode (ukupna zapremina ∼50 mL). Preostala bela čvrsta supstanca je resuspendovana u vodi na levku a onda sukciono osušena. Čvrsta supstanca je isprana sa dodatnom vodom (ukupna zapremina ∼50 mL) a onda stavljena u vakuum sušnicu na 60 °C preko noći da bi se dobio 3-{1-okso-4-[4-(4-piridin-2-il-piperazin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (260 mg, 73% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 13/87 CH3CN/0.1% H3PO4, 5.11 min (99.2%); mp: 165-167 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.57 (d, J = 18.7 Hz, 1H, CHH), 2.81 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.38 - 3.51 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (br. s., 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.63 (dd, J = 5.1, 6.8 Hz, 1H, Ar), 6.79 (d, J= 8.7 Hz, 1H, Ar), 7.25 - 7.42 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.66 (m, 4H, Ar), 8.09 (dd, J = 1.4, 4.8 Hz, 1H, Pyr), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 44.53, 45.07, 51.55, 52.29, 61.69, 69.36, 107.01, 112.94, 114.96, 115.22, 127.66, 129.03, 129.80, 129.93, 133.30, 135.33, 137.44, 137.86, 147.49, 153.48, 158.95, 167.99, 170.96, 172.83; LCMS: MH = 526; Anal. izrač. za C30H31N5O4+ 1.2 H2O: C, 65.87; H, 6.15; N, 12.80; Pronađeno: C, 65.87; H, 5.93; N, 12.68.
5.280 3-(1-OKSO-4-{4-[4-(5-TRIFLUOROMETIL-[1,3,4]THIADIAZOL-2-IL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1090]
[1091] Suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0.677 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je 2-(piperazin-1-il)-5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol (169 mg, 0.711 mmol) praćeno DIEA (0.236 mL, 1.354 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Mešavina je zagrejana do 50 °C tokom 8 h a onda na 80 °C tokom 1 h.
Reakciona mešavina je ostavljena da miruje preko noći na sobnoj temperaturi zatim promućkana nežno radi resuspendovanja čvrste supstance na dnu bočice. Čvrsta supstanca je sakupljenaa na 30-mL srednje poroznom levku uvlačenjem. Preostala čvrsta supstanca u bočici je preneta na levak sa dodatnim MeCN (∼1 mL). Beli kolač je ispran sa nekoliko porcija Et2O (ukupna zapremina ∼30 mL). Preostala bela čvrsta supstanca je resuspendovana u vodi na levku a onda sukciono osušena. Čvrsta supstanca je isprana sa dodatnom vodom (ukupna zapremina ∼50 mL) a onda stavljena u vakuum sušnicu na 60 °C preko noći da bi se dobio 3-(1-okso-4-{4-[4-(5-trifluorometil-[1,3,4]thiadiazol-2-il)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (332 mg, 82% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 CH3CN/0.1% H3PO4, 7.89 min (99.9%); mp: 160-162 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.08 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.50 -2.63 (m, 5H, CHH, pip CH2, CH2), 2.82 - 3.04 (m, 1H, CHH), 3.44 - 3.70 (m, 6H, CH2, pip CH2, CH2), 4.26 (d, J= 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.35 (t, J = 8.3 Hz, 4H, Ar), 7.43 - 7.54 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 45.06, 49.58, 51.27, 51.55, 61.29, 69.35, 114.97, 115.23, 121.36, 127.69, 129.00, 129.80, 129.95, 133.30, 135.47, 137.48, 153.48, 167.99, 170.96, 172.81, 173.95. Jedan ugljenični signal nedostaje, moguće CF3zbog razdvajanja; LCMS: MH = 601; Anal. izrač. za C28H27F3N6O4S 0.9 H2O: C, 54.52; H, 4.71; N, 13.62; F, 9.24; Pronađeno: C, 54.50; H, 4.57; N, 13.52; F, 9.24.
5.2813-(4-((4-((4-(2-METIL-6-(TRIFLUOROMETIL)PIRIMIDIN-4-IL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1092]
[1093] Suspenziji 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0.677 mmol) u suvom MeCN (10 mL), dodat je 2-metil-4-(piperazin-1-il)-6-(trifluorometil)pirimidin (175 mg, 0.711 mmol) praćeno DIEA (0.236 mL, 1.354 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Mešavina je zagrejana do 50 °C dok nije postala bistar rastvor i zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature uz lagano mešanje preko noći. Bela čvrsta supstanca je obrazovana usled stajanja. Mešavina je umešavana i čvrsta supstanca je sakupljena na 15-mL finom poroznom levku uvlačenjem. Čvrsta supstanca je isprana sa minimalno MeCN (∼1 mL) i nekoliko porcija Et2O (ukupna zapremina -35 mL). Bela čvrsta supstanca je osušena sukcijom a onda stavljena u vakuum sušnicu na 60 °C preko noći da bi se dobio 3-(4-((4-((4-(2-metil-6-(trifluorometil)pirimidin-4-il)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (276 mg, 67% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 CH3CN/0.1% H3PO4, 7.59 min (99.7%); mp: 165-167 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.89 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.38 - 2.48 (m, 8H, CH2, CH2, CHH. CH3), 2.53 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.79 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.53 (s, 2H, CH2), 3.59 - 3.91 (m, 4H, CH2, CH2), 4.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.05 (s, 1H, Pyr), 7.28 - 7.40 (m, 4H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);
<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 25.65, 31.18, 43.53, 45.07, 51.56, 52.06, 61.43, 69.38, 96.73 (q, J = 3.3 Hz, CCCF3), 114.97, 115.22, 121.18 (q, J = 275.1 Hz, CF3), 127.66, 128.97, 129.78, 129.95, 133.30, 135.38, 137.66, 153.26 (q, J = 34.1 Hz, CCF3), 153.49, 161.75, 167.64, 167.99, 170.96, 172.81. CF3kvarteta at 121.18 ppm je primećen kao dublet (spoljni signali nedostaju); LCMS: MH = 609; Anal. izrač. za C31H31F3N6O4 0.4 H2O: C, 60.46; H, 5.20; N, 13.65; F, 9.25; Pronađeno: C, 60.51; H, 5.13; N, 13.61; F, 8.97.
5.2823-{1-OKSO-4-[4-(4-FENOKSI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENZILOKSI]-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1094]
[1095] U 20-mL reakcionu fiolicu ispunjenu sa 3-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dionom (300 mg, 0.677 mmol) i 4-fenoksipiperidinom (126 mg, 0.711 mmol), dodat je suvi MeCN (10 mL) praćeno DIEA (0.236 mL, 1.35 mmol). Dobijena suspenzija je zagrejana do 50 °C da bi se dobio bistar rastvor. Nakon -30 min, temperatura je podignuta dalje do 70 °C i reakciona mešavina je mešana tokom ∼16 h na 70 °C. Mešavina je ostavljena da se ohladi do sobne temperature a onda smeštena na 4 °C preko noći formirajući belu čvrstu supstancu. Gusta suspenzija je nežno umešavana i čvrsta supstanca je sakupljena na 15-mL srednje porozno levku uvlačenjem. Kolač je ispran sa Et2O (∼50 mL) i osušen sukcijom da bi se dobila svetlo braon čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pretvorena u prah i isprana vodom (-50 mL), osušena sukcijom, a onda osušena dalje u vakuum sušnici na 50 °C da bi se dobio 3-{1-okso-4-[4-(4-fenoksi-piperidin-1-ilmetil)-benziloksi]-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao svetlo bež čvrsta supstanca (254 mg, 70% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 27/73 CH3CN/0.1% H3PO4, 4.54 min (99.0%); mp: 180-182 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.49 - 1.71 (m, 2H, CH2), 1.82 - 2.07 (m, 3H, CHH, CH2), 2.15 - 2.31 (m, 2H, CH2), 2.36 - 2.49 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.62 (m, 1H, CHH), 2.63 - 2.75 (m, 2H, CH2), 2.81 - 3.00 (m, 1H, CHH), 3.49 (s, 2H, CH2), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.32 - 4.49 (m, 2H, CHH, CHO), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.78 - 7.04 (m, 3H, Ar), 7.19 - 7.30 (m, 2H, Ar), 7.33 (dd, J = 1.7, 7.7 Hz, 4H, Ar), 7.42 - 7.62 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 30.62, 31.16, 45.07, 50.10, 51.55, 61.64, 69.41, 72.13, 114.96, 115.20, 115.76, 120.42, 127.61, 128.81, 129.46, 129.78, 129.93, 133.28, 135.15, 138.40, 153.49, 157.04, 167.97, 170.95, 172.80; LCMS: MH = 540; Anal. izrač. za C32H33N3O5+ 0.5 H2O: C, 70.06; H, 6.25; N, 7.66; Pronađeno: C, 70.11; H, 5.97; N, 7.62.
5.2832-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-IZOINDOL-1,3-DION
[1096]
[1097] U CH2Cl2 suspenziju 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-(4-((4-(4-fluorofenil)piperidin-1-il)metil)benziloksi)izoindolin-1,3-diona (170 mg, 0.306 mmol, 56.0 % prinos) dodat je 4-(4-fluorofenil)piperidin hidrohlorid (130 mg, 0.601 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.292 ml, 1.640 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini su dodati CH2Cl2i voda i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan. Rezultujuća čvrsta supstanca je mešana u CH2Cl2 (5 mL) i suspenzija je filtrirana da bi se dobila bela čvrsta supstanca (170 mg,56%). Tačka topljenja: 155-157 °C. LC-MS m/e=556. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 25/75 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O :tR = 4.06 min (98.5%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.53 - 1.76 (m, 4H, CH2, CH2), 2.03 (t, J = 11.3 Hz, 3H, CHH, CH2), 2.41 - 2.46 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 2H, CHH. CH), 2.80 -2.99 (m, 4H, CHH, CH2), 3.50 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 4.2, 13.4 Hz, 1H, CNH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.03 -7.16 (m, 2H, Ar), 7.22 - 7.31 (m, 2H, Ar), 7.32 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.43 - 7.50 (m, 3H, Ar), 7.54 - 7.68 (m, 1H, Ar), 7.81 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 11.10 (br. s., 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 33.13, 38.66, 41.00, 48.73, 53.51, 62.06, 69.99, 114.71, 114.99, 115.48, 116.58, 120.19, 127.23, 128.33, 128.43, 128.92, 133.26, 134.63, 136.97, 138.42, 142.34, 155.53, 158.96, 162.17, 165.27, 166.75, 169.85, 172.71; Anal. izrač. za C32H30FN3O5 0.6 CH2Cl2: C: 64.55%; H: 5.10%; N: 6.93%. Pronađeno: C: 64.49%; H: 4.89%; N: 7.03%.
5.2842-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-IZOINDOL-1,3-DION
[1099] U CH2Cl2rastvor 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (250 mg, 0.547 mmol) dodat je 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin hidrohlorid (123 mg, 0.601 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (292 µl, 1.640 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je dodata CH2Cl2 (15 mL) i voda (10 mL). i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa MeOH i CH2Cl2da bi se dobio 2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-izoindol-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (170 mg, 57%). Tačka topljenja: 163-165 °C. LC-MS m/e= 545. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, mL/min, 240 nm, izokratski 25/75 CH3CN/ 0.1 % H3PO4u H2O :tR= 5.40 min (99%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.96 - 2.10 (m, 1H, CHH), 2.37 (br. s., 4H, CH2,CH2), 2.43 - 2.47 (m, 0H, CHH), 2.52 - 2.66 (m, J = 4.5 Hz, 6H, CH2,CH2,CH2,CH), 2.79 - 2.97 (m, 1H, CHH), 3.14 (d, J = 10.2 Hz, 2H, CH2), 3.46 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, NCH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.33 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.46 (dd, J = 4.1, 7.6 Hz, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.93, 30.90, 48.73, 52.45, 53.06, 56.23, 56.62, 57.39, 57.01, 61.58, 69.95, 115.48, 116.58, 120.19, 127.23, 127.80, 128.87, 133.26, 134.71, 136.96, 137.98, 155.52, 165.27, 166.75, 169.85, 172.71. Anal. izrač. za C27H27F3N4O5, C: 59.56%; H: 5.00%; N: 10.29%. Pronađeno: C: 59.44%; H: 4.87%; N: 10.23%.
5.2853-(4-((4-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1100]
[1101] U CH2Cl2rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.5 g, 1.128 mmol) dodat je 1-(2,4-difluorofenil)piperazin (0.235 g, 1.184 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.602 ml, 3.38 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcionoj mešavini je dodata voda (15 mL), ekstrahovana je i koncentrovana da bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rekristalizovana iz CH3CN (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((4-((4-(2,4-difluorofenil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (330 mg, 52%). Tačka topljenja (određeno na licu mesta): 207-209 °C. LC-MS m/e= 561. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 25/75 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O: 6.80 min (98.8%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.45 (m, J = 4.2 Hz, 1H, CHH), 2.53-2.59 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.83 - 3.01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3.54 (s, 2H, CH2), 4.05 - 4.58 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, NCH), 5.24 (s, 2H, CH2), 6.89 - 7.12 (m, 2H, Ar), 7.17 (ddd, J = 2.8, 9.2, 12.4 Hz, 1H, Ar), 7.27 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.51 (m, 3H, Ar), 10.97 (s, 1H, Ar).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.16, 45.07, 50.44, 51.55, 52.52, 61.64, 69.39, 104.18, 104.52, 104.87, 110.80, 111.03, 114.96, 115.22, 119.86, 119.91, 127.63, 128.98, 129.80, 129.95, 133.30, 135.28, 137.88, 153.49, 167.99, 170.95, 172.80. Anal. izrač. za C31H30F2N4O4: C%:66.42, H%:5.39, N%:,9.99. Pronađeno: C%:65.08, H%:5.02, N%:9.66.
5.286 4-((4-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1102]
[1103] U CH2Cl2suspenziju 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (0.5 g, 1.093 mmol) dodat je 4-(2,4-difluorofenil)piperidin (0.216 g, 1.093 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.584 ml, 3.28 mmol). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda (10 mL), CH2Cl2 (10 mL), ekstrahovana je i koncentrovana. Rezultujuće ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom eluirano sa MeOH i CH2Cl2da bi se dobila čvrsta supstanca koja je mešana sa CH2Cl2(3 mL) i filtrirana da bi se dobio 4-((4-((4-(2,4-difluorofenil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (50 mg, 8%). Tačka topljenja: 153-155 °C. LC-MS m/e= 574. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O: 4.69 min (97.6%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.55 - 1.75 (m, 4H, CH2,CH2), 2.05 (d, J = 2.1 Hz, 3H, CH2, CHH), 2.43 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.55 - 2.67 (m, 2H, CHH), 2.68 - 2.86 (m, 2H, CHH, CH), 2.82 - 2.82 (m, 0H, M01), 2.86 - 2.99 (m, 3H, CHH,CH2), 3.51 (s, 2H, CH2), 4.89 - 5.18 (m, 1H, NCH), 5.36 (s, 2H, CH2), 6.91 - 7.08 (m, 1H, Ar), 7.09 - 7.23 (m, 1H, Ar), 7.27 -7.54 (m, 7H, Ar), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.74 - 7.95 (m, 1H, Ar), 11.10 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.93, 30.90, 31.63, 34.63, 48.73, 53.47, 62.01, 69.98, 103.20, 103.57, 103.90, 115.48, 116.58, 120.21, 127.25, 128.91, 129.09, 133.26, 134.65, 136.97, 138.40, 138.53, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.71.
5.2874-((4-((4-(4-HLOROFENIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)-2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)IZOINDOLIN-1,3-DION
[1104]
[1105] U CH2Cl2 suspenziju 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (0.35 g, 0.765 mmol) dodat je 4-(4-hlorofenil)piperidin (0.157 g, 0.804 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.409 ml, 2.296 mmol). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je napunjena na koloni sa silikagelom i eluirana sa MeOH i CH2Cl2 da bi se dobio 4-((4-((4-(4-hlorofenil)piperidin-1-il)metil)benzil)oksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion kao bela čvrsta supstanca (320 mg, 73%). Tačka topljenja: 236-238 °C. LC-MS m/e= 572, 574. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O: 6.17min (98.4%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.50 - 1.79 (m, 4H, CH2, CH2), 1.96 - 2.11 (m, 3H, CHH, CH2), 2.46 - 2.66 (m, 3H, CH, CHH, CHH), 2.79 - 2.99 (m, 3H, CH2, CHH), 3.50 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, NCH), 5.36 (s, 2H, CH2), 7.19 - 7.40 (m, 6H, Ar), 7.42 - 7.52 (m, 3H, Ar), 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.74 - 7.96 (m, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 32.88, 41.11, 48.73, 53.44, 62.03, 69.98, 115.48, 116.58, 120.19, 127.23, 128.15, 128.57, 128.91, 130.40, 133.26, 134.63, 136.97, 138.40, 145.21, 155.53, 165.27, 166.75, 169.85, 172.70. Anal. izrač. za C32H30ClN3O5: C%:67.19; H%:5.29;
N%:7.35. Pronađeno: C%:66.83; H%:5.31; N%:7.13.
5.2882-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-((TRIFLUOROMETIL) SULFONIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENZIL)OKSI) IZOINDOLIN-1,3-DION (referentni primer)
[1106]
[1107] U CH2Cl2rastvor 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (0.25 g, 0.547 mmol) dodat je 1-(trifluorometilsulfonil)piperazin (0.143 g, 0.656 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.212 g, 1.640 mmol). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavini je dodata voda (15 mL), CH2Cl2 (20 mL), ekstrahovana je, koncentrovana , a rezultujuće ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćena na prep-HPLC da bi se dobio 2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-1,3-dion čvrsta supstanca (80 mg, 25%). Tačka topljenja: 229-231 °C. LC-MS m/e= 595. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 30/70 CH3CN/ 0.1% H3PO4 u H2O: 3.79 (97%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.45 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.67 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.80 - 2.98 (m, 1H, CHH), 3.48 (br. s., 4H, CH2, CH2), 3.56 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, NCH), 5.35 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.42 (m, 2H, Ar), 7.48 (d, J = 6.8 Hz, 3H, Ar), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.3 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.89, 46.38, 48.73, 51.87, 61.01, 69.90, 115.50, 120.18, 127.35, 128.97, 133.26, 133.75, 134.99, 136.97, 137.34, 155.50, 165.29, 166.79, 169.85, 172.71. Anal. izrač. za C26H25F3N4O7S 1.1 H2O:
C%:51.17; H%:4.30; N%:9.12. Pronađeno: C%:50.83; H%:4.46; N%:8.74.
5.2892-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENZILOKSI}-IZOINDOL-1,3-DION
[1108]
[1109] U CH2Cl2 suspenziju 4-(4-(bromometil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-diona (0.25 g, 0.547 mmol) dodat je 1-(4-fluorofenil)piperazin (0.108 g, 0.601 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.212 g, 1.640 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcionoj mešavini je dodata voda (10 mL) i CH2Cl2 (15 mL) i ekstrahovana je. Organski sloj je koncentrovan zatim prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa CHCl2i MeOH da bi se dobio 2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-4-{4-[4-(4-fluoro-fenil)-piperazin-1-ilmetil]-benziloksi}-izoindol-1,3-dion kao žućkasta čvrsta supstanca (0.24 g,79%). Tačka topljenja: : 135-137 °C. LC-MS m/e= 557. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, izokratski 25/75 CH3CN/ 0.1 % H3PO4 u H2O :tR = 7.07 min (99%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.13 (m, 1H, CHH), 2.41 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.67 (m, 5H, CHH,CH2,CH2), 2.79 - 2.97 (m, 1H, CHH), 2.98 - 3.19 (m, 4H, CH2, CH2), 3.53 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, NCH), 5.36 (s, 2H, CH2), 6.80 - 6.97 (m, 2H, Ar), 6.97 - 7.15 (m, 2H, Ar), 7.29 - 7.41 (m, 2H, Ar), 7.42 - 7.55 (m, 3H, Ar), 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.83 (dd, J = 7.4, 8.5 Hz, 1H, Ar), 11.11 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 30.90, 48.75, 48.97, 52.51, 61.65, 69.96, 115.03, 115.31, 115.50, 116.98, 117.09, 120.21, 127.28, 129.00, 133.26, 134.79, 136.97, 137.94, 147.92, 154.35, 155.53, 157.47, 165.29, 166.75, 169.87, 172.71; Anal. izrač. za C31H29FN4O5 0.2 H2O: C: 66.47%; H: 5.29%; N: 10.00%; Pronađeno: C: 66.16%; H: 5.17%; N: 9.93%.
5.2903-(4-BENZO[D]TIAZOL-2-ILOKSI-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1110]
[1111] Faza 1: Cezijum karbonat (4.6 g, 14.1 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 3- hidroksi-2-metilbenzoata (2.0 g, 12.0 mmol) i 2-hlorobenzotiazola (3.1 g, 18.1 mmol) u acetonitrilu (50 mL).
Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isfiltrirana i isprana sa acetonitril (25 mL), filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 1 : 9) da bi se dobio metil 3-(benzo[d]tiazol-2-iloksi)-2-metilbenzoat (3.4 g, 93% prinos):
<1>H NMR (CDCl3) δ 2.52 (s, 3H, CH3), 3.92 (s, 3H, OCH3), 7.23-7.43 (m, 4H, Ar), 7.63-7.75 (m, 2H, Ar), 7.86 (dd, J = 1.2 i 7.8 Hz, 1H, Ar).
[1112] Faza 2: N-bromosukcinimid (2.2 g, 12.1 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 3-(benzo[d]tiazol-2-iloksi)-2-metilbenzoata (3.3 g, 11.0 mmol) u CC14 (70 mL). Dobijena mešavina je zagrevana na 70°C uljanom kupatilu sa sijalicom od 300W koja je osvetljavala reakcionu mešavinu tokom 2 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana. Filtrat je ispran vodom (2x40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 1: 9) da bi se dobio metil 3-(benzo[d]tiazol-2-iloksi)-2-(bromometil)benzoat (3.4 g, 81% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 3.92 (s, 3H, CH3), 4.98 (s, 2H, CH2), 7.21-7.50 (m, 2H, Ar), 7.56-7.76 (m, 2H), 7.79-7.93 (m, 2H,Ar), 7.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H,Ar).
[1113] Faza 3: Trietilamin (2.0 g, 19.8 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji metil 3-(benzo[d]tiazol-2-iloksi)-2-(bromometil)benzoata (3.0 g, 7.9 mmol) i α-aminoglutarimid hidrohlorida (1.3 g, 7.9 mmol) u acetonitrilu (100 mL). Nakon dodavanja, mešavina je zagrevana na 45°C tokom 3 sata zatim zagrejana do 85°C preko noći. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je mešan sa vodom (50 mL) da bi se dobila čvrsta supstanca, koja je resuspendovana acetonom (20 mL) da bi se dobila svetlo plava čvrsta supstanca (1.5 g, 46%) 3-(4- benzo[d] tiazol-2-iloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona. Boja je uklonjena rastvaranjem u acetonu, tretiranjem sa obezbojenim ugljenikom, i filtriranjem kroz Millpole (0.45 pM): mp 258-260°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90-2.04 (m, 1H), 2.31-2.45 (m, 1H), 2.57 (b, 1H), 2.78-2.99 (m, 1H), 4.33 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.12 (dd, Jz5.1 i 13.2 Hz, 1H), 7.30-7.49 (m, 2H), 7.64-7.84 (m, 4H), 7.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.15, 31.07, 45.10, 51.66, 121.29, 121.43, 122.33, 124.42, 124.44, 126.56, 130.40, 131.94, 133.22, 134.39, 148.20, 148.92, 167.03, 170.52, 170.75, 172.73; Izrač. za C20H15N3O4S: C, 61.06: H, 3.84; N, 10.68; S, 8.15. Pronađeno: C, 61.00; H, 3.72; N, 10.59; S, 8.20.
5.2913-[4-(4-METIL-CIKLOHEKSILMETOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
izomerski odnos ratio ∼ 62% do 38% pomoću HNMR
[1115] Faza 1: Trifenilfosfen na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 1.90 g, 2.36 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.31 g, 1.07 mmol) u THF (20mL) na 0°C, praćeno dodavanjem diizopropil diazen-1,2-dikarboksilata (0.27 ml, 2.14 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je (4-metil-cikloheksil)-metanol (cis i trans mešavina, 0.41 g, 1.85 mmol). Mešavina je mešana preko noći na sobnoj temperaturi potom filtrirana, isprana metanolom (3x10 mL), zatim sa metilen hloridom (3x10 mL). Kombinovani filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobilo ulje, koje je prečišćeno na koloni sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 9% u 60 min) da bi se dobio 4-karbamoil-4-[4-(4-metilcikloheksilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline metil estar kao bistro ulje (0.35 g, 81% prinos).<1>H NMR pokazuje 61% do 39% ratio. Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[1116] Faza 2: Kalijum tert-butoksid (0.10 g, 0.87 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-metil-cikloheksilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.35 g, 0.87 mmol) u THF (10 mL) na 0°C. Mešavina je mešana tokom deset minuta i ugašena sa 1N HCl (3 mL), neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom (4 mL do pH = 7), i brzo ekstrahovana etil acetatom (2 x 30 mL). Kombinovane faze etil acetata su uparene do beličaste čvrste supstance, koja je prečišćena preparativnom HPLC (0.1 % mravlja kiselina/voda, i 0.1 % mravlja kiselina/acetonitril) da bi se dobio 3-[4-(4-metil-cikloheksilmetoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (0.03 g, 10% prinos); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, izokratski na 40/60 u 10 min (acetonitril/0.1%H3PO4), 4.68 min (60.2%), 5.07 min (37.3%); mp: N/A due to limited sample available;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.78 - 2.08 (m, 15H, CH3, 5CH2, CH, CHH), 2.38 - 2.46<(m, 1H, CHH), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.80 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.87 - 4.08 (m, 2H, CH>2<(62% do 38%)),>4.15 - 4.46 (m, 2H, ArCH2), 5.11 (dd, 1H, NCH), 7.16 - 7.34 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 1H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 19.94, 22.35, 22.57, 24.87, 29.04, 29.39, 30.10, 31.20, 32.23, 34.10, 34.51, 36.82, 44.99, 51.58, 70.85, 73.02, 114.43, 114.54, 114.84, 129.71, 129.84, 133.18, 153.91, 168.08, 171.02, 172.85; LCMS MH = 371.
5.2923-[4-(2-BENZOFURAN-2-il-ETOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1117]
[1118] Faza 1: Suspenziji 2-jodo fenila (0.22g, 1 mmol) u vodi (3 mL), dodat je s-prolinol (0.29 mL, 3 mmol) praćeno Pd na ugljeniku (70 mg, 0.03 mmol), trifenilfosfinom (35 mg, 0.13 mmol), i bakar jodidom (13 mg, 0.07 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata.3-Butin-1-ol (0.23 mL, 3 mmol) dodat je i mešavina je mešana na 80°C tokom 3 sata. Mešavina je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana na rotacionom isparivaču. Dobijena mešavina je prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano sa etil acetatom i heksanom (gradijent, proizvod je izašao pri 6% metanolu) da bi se dobio 2-benzofuran-2-il-etanol (0.1 g, 62%).
[1119] Faza 2: U THF rastvor (10 mL) metil estra 4-karbamoil-4-(4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline (0.54 g, 1.85 mmol), su dodati trifenilfosfin smola (2.4 g, 1.5 mmol/g punjenje, 3.7 mmol) i DIAD (0.72 mL, 3.7 mmol) na 0°C. Nakon što je izmešana na 0°C tokom 10 minuta, mešavini je dodat 2-benzofuran-2-il-etanol (0.36 g, 2.2 mmol) i mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, i filtrat je koncentrovan i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL) i Na2CO3(20 mL). Organski sloj je ispran vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), i koncentrovan. Dobijeno ulje je prečišćeno na koloni sa silikagelom da bi se dobio metil estar 4-[4-(2-benzofuran-2-il-etoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline (0.20g, 21%).
[1120] Faza 3: U THF rastvor (10 mL) metil estra 4-[4-(2-benzofuran-2-il-etoksi)-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline (0.7 g, 1.5 mmol), dodat je kalijum tert-butoksid (0.45 mL, 0.45 mmol) na 0 °C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta i ugašena je sa 1N HCl (5 mL, 5mmol), praćeno zasićenim NaHCO3(25 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL x 2). Organski sloj je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen iznad MgSO4, i koncentrovan. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2/MeOHda bi dali 3-[4-(2-benzofuran-2-il-etoksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.15g, 83%). mp: 160-162 °C; HPLC: Waters Symmetry C18, 5µm, 3.9 x 150 mm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent do 95/5 acetonitril/0.1% H3PO4u 5 min,: tR= 5.01 min (99%);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.87 - 1.98 (m, 1H, CHH), 2.37 (qd, J = 4.5, 13.2 Hz, 1H, CHH), 2.59 (d, J = 1.9 Hz, 1H, CHH), 2.80 - 2.97 (m, 1H, CHH), 3.29 (t, J = 6.2 Hz, 2H, CH2), 4.10 - 4.36 (m, 2H, CH2), 4.49 (t, J = 6.3 Hz, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.4 Hz, 1H, NCH), 6.74 (s, 1H, Ar), 7.11 - 7.29 (m, 2H, Ar), 7.29 - 7.40 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.62 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 28.11, 31.18, 44.97, 51.56, 65.86, 103.43, 110.70, 115.01, 115.36, 120.52, 122.66, 123.52, 128.42, 129.84, 129.91, 133.31, 153.44, 153.99, 155.72, 167.95, 170.96, 172.80; LCMS: 405; Anal. izrač. za C23H20N2O5+ 0.06 EtOAc: C, 68.13; H, 5.04; N, 6.84; Pronađeno: C, 67.73; H, 5.16; N, 6.75.
5.2934-((2-(2,6-DIOKSOPIPERIDIN-3-IL)-1-OKSOIZOINDOLIN-4-ILOKSI)METIL)BENZONITRIL (referentni primer)
[1121]
[1122] Mešavini metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.25 g, 0.86 mmol) i K2CO3(0.38 g, 2.74 mmol) u DMF (40 mL), je lagano dodat 4-(bromometil)benzonitril (0.48 mL, 2.46 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodatni K2CO3(0.38 g, 2.74 mmol) dodat je i reakciona mešavina je zagrevana na 80°C preko noći. Sirćetna kiselina (5 kapi) dodata je reakcionoj mešavini. Rastvarač je uparen i ostatak je podeljen između etil acetata (100 mL) i zasićenog rastvora natrijum bikarbonata (100 mL). Čvrsta supstanca koja nije prešla u rastvor je filtrirana i umešana u metanolu (400 mL). Čvrsta supstanca je potom filtrirana, isprana metanolom (100 mL) i osušena da bi se dobio 4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzonitril kao bela čvrsta supstanca (0.31 g, 66% prinos): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, acetonitril/0.1% H3PO4: gradijent 10/90 do 90/10 u 15 min; 5 min na 90/10: 10.45 min (98.49%); mp: 290-292 °C; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.85 - 2.12 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.70 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.07 (m, 1H, CHH), 4.13 - 4.39 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.47 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.12 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.37 (s, 2H, CH2), 7.32 (dd, J = 7.6, 16.7 Hz, 2H, Ar), 7.41 -7.57 (m, 1H, Ar), 7.69 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 10.98 (s, 1H, NH); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.37, 31.16, 45.03, 51.58, 68.49, 110.60, 114.93, 115.53, 118.67, 128.01, 129.83, 129.97, 132.41, 133.40, 142.41, 153.07, 167.90, 170.95, 172.81; LCMS MH = 376; Anal. izrač. za C21H17N3O4+ 0.1 H2O: C, 66.87, H, 4.60, N, 11.14; Pronađeno: C, 66.43, H, 4.47, N, 11.05.
5.2943-[4-(4-HEKSILAMINOMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1123]
[1124] Faza 1: U acetonitril rastvor (20 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-hlorometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.7 g, 1.62 mmol), dodat je heksil amin (1.07 ml, 8.1 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana i dobijeno ulje je upotrebljeno u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
[1125] Faza 2: U DMF rastvor (10 mL) metil estra 4-karbamoil-4-[4-(4-heksilaminometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline (0.8 g, 1.62 mmol), dodat je kalijum karbonat (0.22 g, 1.62 mmol). Mešavina je mešana na 70°C tokom 9 sati. Mešavina je isfiltrirana. Filtrat je koncentrovan na rotacionom isparivaču. Dobijena mešavina je prečišćena na koloni sa silikagelom i eluirana sa CH2Cl2/MeOH da bi se dobio 3-[4-(4-heksilaminometil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (84 mg, 12%). mp: 155-157°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent acetonitril/ 0.1% H3PO4u H2O od 5/95 do 100/0 u 5 min i ostao je na 100/0 tokom 5 min: tR = 5.09 min (96%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.65 - 0.98 (m, 3H, CH3), 1.11 - 1.33 (m, 6H, CH2,CH2,CH2), 1.41 (d, J = 6.8 Hz, 2H, CH2), 1.86 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.54 - 2.66 (m, 1H, CHH), 2.78 - 3.09 (m, 1H, CHH), 3.71 (s, 2H, CH2), 4.17 - 4.53 (m, 2H, CH2), 5.10 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.12 - 7.63 (m, 7H, Ar).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 13.84, 21.99, 22.30, 26.35, 28.87, 31.13, 45.04, 48.35, 51.53, 52.28, 69.36, 114.94, 115.15, 127.56, 128.15, 129.73, 129.90, 133.24, 134.95, 139.89, 153.40, 167.94, 170.91, 172.7; LCMS MH = 464. Anal.<izrač. za C>27<H>33<N>3<O>4: C,<69.96; H, 7.18; N, 9.06; Pronađeno: C, 61.67; H, 6.22; N, 7.96.>
5.2954-[2-(2,6-DIOKSO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OKSO-2,3-DIHIDRO-1H-IZOINDOL-4-ILOKSIMETIL]-N-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-BENZAMID (referentni primer)
[1126]
[1127] Faza 1: 4-(Hlorometil)benzoil hlorid (1.452 g, 7.68 mmol) dodat je izmešanom rastvoru 2-morfolinoetanamina (1 g, 7.68 mmol) u acetonitrilu (25 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 2 sata i reakcija je završena. Reakciona mešavina koncentrovana i prečišćena sa ISCO da bi se dobio 4-hlorometil-N-(2-morfolin-4-il-etil)-benzamid kao bela čvrsta supstanca (1.7 g, 78% prinos); LCMS MH = 283, 285.<1>H NMR (DMSO-d6) d 2.43 (d, J = 14.5 Hz, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.35 - 3.44 (m, 2H, CH2), 3.50 -3.63 (m, 4H, CH2, CH2), 4.81 (s, 2H, CH2), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.34 - 8.49 (m, 1H, NH).
[1128] Faza 2: Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (400 mg, 1.36 mmol), 4-(hlorometil)-N-(2-morfolinoetil)benzamid (387 mg, 1.36 mmol) i K2CO3 (189 mg, 1.36 mmol) u DMF (10 mL), dodat je DIPEA (0.24 ml, 1.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 21 sata i zagrejana na 50°C tokom 4 dana. Potom je mešavina zagrevana na 80°C preko noći i koncentrovana radi prečišćavanja sa ISCO da bi se dobila bela čvrsta supstanca, koji je pretvorena u prah u acetonitrilu (3 mL) da bi se dobio 4-[2-(2,6-diokso-piperidin-3-il)-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-4-iloksimetil]-N-(2-morfolin-4-il-etil)-benzamid kao bela čvrsta supstanca (123 mg, 17.7% prinos). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5-50% u 10min (acetonitril/0.1%H3PO4), 7.28min (97.4%); mp: 193-195 °C.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.91 - 2.10 (m, 1H, CHH), 2.36 - 2.48 (m, 7H, CHH, CH2, CH2, CH2), 2.54 - 2.65 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.34 - 3.44 (m, 2H, CH2), 3.51 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 4.22 - 4.53 (m, 2H, CHH, CHH), 5.05 - 5.18 (m, 1H, CHN), 5.32 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.37 (m, 2H, Ar), 7.44 - 7.52 (m, 1H, Ar), 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 7.85 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 8.40 (s, 1H, NH), 10.98 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 31.18, 36.51, 45.07, 51.58, 53.25, 57.29, 66.16, 68.97, 115.01, 115.35, 127.23, 127.29, 129.78, 129.97, 133.34, 134.16, 139.67, 153.27, 165.78, 167.94, 170.96, 172.81. LCMS MH = 507. Anal. Izrač. za C27H30N4O6 1.2 H2O: C, 61.40; H, 6.18; N, 10.61; Pronađeno: C, 61.10; H, 6.11; N, 10.26.
5.2963-(4-((6-((DIETILAMINO)METIL)BENZOFURAN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1129]
[1130] Faza 1: Mešavina etil 5-formilbenzofuran-2-karboksilata (1.1 g, 4.8 mmol), dietilamina (0.4 g, 5.3 mmol) i sirćetne kiseline (0.3 g, 5.5 mmol) u THF (45 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Natrijum triacetoksiborohidrid (2.0 g, 9.6 mmol) dodat je i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (70 mL) i vodom (40 mL) i učinjena baznom sa NH4OH do pH∼11. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (40 mL).
Kombinovan EtOAc rastvor je osušen i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio etil 5-(dietilaminometil)benzofuran-2-karboksilat (0.9 g, 70% prinos):
<1>H NMR (CDCl3) δ 1.05 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.50-2.75 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 3.64 (s, 2H), 4.40-4.47 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 7.42-7.53 (m, 3H), 7.62 (d, J = 0.9 Hz, 1H).
[1131] Faza 2: rastvor etil 5-(dietilaminometil)-benzofuran-2-karboksilata (0.9 g, 3.3 mmol) u THF (15 mL) dodat je lagano izmešanom rastvoru LiAlH4/THF (1M, 4.3 mL, 4.3 mmol) u THF (10 mL) na 5°C.
Reakciona mešavina je mešana na 5°C tokom 30 minuta zatim ugašena sa zas. Na2CO3(30 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2(50 mL), a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(3X40 mL). Kombinovani CH2Cl2rastvor je ispran slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio [5-(dietilaminometil)benzofuran-2-il]metanol (0.6 g, 87%);<1>H NMR (CDCl3) δ 1.05 (t, J = 7.2 Hz, 6H), 2.50-2.57 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 2.93 (b, 1H), 3.62 (s, 2H), 4.71 (s, 2H), 6.56 (d, J = 0.3 Hz, 1H), 7.21-7.24 (dd, J = 1.8 i 8.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 1.2 Hz, 1H).
[1132] Faza 3: Diizopropil azodikarboksilat (0.8 g, 4.2 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3.5 g, 4.4 mmol) u THF (40 mL) na 3-5 °C. Nakon što je izmešan na 3 °C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.8 g, 2.8 mmol) i [5-(dietilaminometil)benzofuran-2-il]metanola (0.7 g, 2.8 mmol) u THF (60 mL) dodat je na 3-6°C. Nakon što je izmešana na 3 °C tokom 5 minuta, mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
Reakciona mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2 (40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3(40 mL), vodom (40 mL), i slanim rastvorom (40 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((5-((dietilamino)metil)benzofuran-2-il)metoksi)-<1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.7, 47% prinos): 1H NMR (CDCl>3<) δ 1.05 (t, J = 7.2 Hz, 6H), 2.12->2.44 (m, 4H), 2.50-2.57 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 3.62-3.64 (m, 5H), 4.40 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.87-4.92 (dd, J = 5.7 i 8.7 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 7.15-7.18 (dd, J = 2.4 i 6.6 Hz, 1H), 7.22-7.29 (m, 1H), 7.39-7.46 (m, 3H), 7.53 (d, J = 0.9 Hz, 1H).
[1133] Faza 4: Mešavina metil 5-amino-4-(4-((5-((dietilamino)metil) benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.7 g, 1.3 mmol) i K2CO3 (0.2 g, 1.3 mmol) u DMF (10 mL) je zagrejana na 80 °C uljanom kupatilu tokom 6 sati. Reakciona mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je mešan sa EtOAc (10 mL) i vodom (20 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i prečišćena hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97 to 5: 95) da bi se dobio 3-(4-((6-dietilamino)metil)benzofuran-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.3 g, 51% prinos): mp 193-195 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.97 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.94-1.98 (m, 1H), 2.39-2.58 (m, 6H), 2.84-2.94 (m, 1H), 3.59 (s, 2H), 4.25 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 5.07-5.13 (dd, J = 5.1 i 13.2 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 7.07 (s, 1H), 7.26-7.29 (dd, J = 1.2 i 8.4 Hz, 1H), 7.34-7.37 (dd, J = 0.9 i 6.9 Hz, 1H), 7.46-7.56 (m, 4H), 10.96 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.59, 22.28, 31.16, 45.03, 45.96, 51.55, 56.73, 62.55, 107.05, 110.68, 115.11, 115.64, 121.08, 125.66, 127.40, 129.81, 129.94, 133.42, 134.69, 152.67, 152.98, 153.68, 167.88, 170.93, 172.79; Izrač. za C27H29N3O5 0.2 H2O: C, 67.68; H, 6.18; N, 8.77.
Pronađeno: C, 67.70; H, 5.94; N, 8.63.
5.2973-(4-((6-((DIETILAMINO)METIL)BENZO[B]TIOFEN-2-IL)METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1134]
[1135] Faza 1: Mešavina suspenzije rodanina (6.0 g, 45 mmol) i natrijum acetata (11.3 g, 137 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (60 mL) je zagrejana u 75°C uljanom kupatilu. P-tolualdehid (5.8 g, 47.9 mmol) dodat je lagano i mešavina je zagrevana na 120°C tokom 1 sata. Mešavina je ohlađena do sobne temperature i sipana u ledenu vodu (400 mL). Nakon što je izmešana tokom 30 minuta, mešavina je isfiltrirana da bi se dobio 14 g narandžaste vrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u 5% NaOH (200 mL) i zagrejana u 80°C uljanom kupatilu tokom 1 sata zatim ohlađena do sobne temperature.
Mešavina je zakišeljena sa koncentrovan HCl i čvrsta supstanca je prikupljena da bi se dobio 2-merkapto-3-p-tolilakrilna kiselina (6.4 g, 73% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 2.34 (s, 3H), 7.28-7.31 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.57-7.60 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H).
[1136] Faza 2: Mešavina 2-merkapto-3-p-tolilakrilne kiseline (1.5 g, 7.7 mmol) i I2 (2.9 g, 11.6 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) je ozračena mikrotalasima na 160°C tokom 12 minuta. Mešavina je ohlađena do sobne temperature i sipana u zas. natrijum bisulfit (300 mL). Čvrsta supstanca je prikupljena i osušena da bi se dobila 6-metilbenzo[b]tiofen-2-karboksilna kiselina (1.8 g, 100%). Jedinjenje je upotrebljeno usledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
[1137] Faza 3: Koncentrovana H2SO4 (5 mL) dodata je izmešanoj mešavini 6-metilbenzo[b]tiofen-2-karboksilne kiseline (4.4 g, 23.2 mmol) u metanolu (100 mL). Dobijena mešavina je zagrejana do refluksa tokom 3 sata. Mešavina je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2 (150 mL) i ispran sa 2N NaOH (40 mL), vodom (2X40 mL), i slanim rastvorom (40 mL), i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc : Heksan 1: 9) da bi se dobio metil 6-metilbenzo[b]tiofen-2karboksilat (2.9 g, 60% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 2.49 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 7.20-7.26 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.74 (d, J = 6 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H).
[1138] Faza 4: N-bromosukcinimid (4.0 g, 22.5 mmol) dodat je izmešanom rastvoru metil 6-metilbenzo[b]tiofen-2-karboksilata (3.6 g, 17.4 mmol) u CCl4 (55 mL). Reakciona mešavina je zagrevana na 75 °C uljanom kupatilu sa 300W sijalicom koja je sijala tokom 17 sati. Reakciona mešavina je ohlađena i filtrirana i filtrat je ispran vodom (2 X 40 mL) i slanim rastvorom (40 mL), i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, EtOAc: Heksan 1:9) da bi se dobio metil 6-(bromometil)benzo[b]tiofen-2-karboksilat (2.2 g, 44% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 3.90 (s, 3H), 4.40 (s, 2H), 7.39-7.44 (m, 4H).
[1139] Faza 5: Mešavina dietilamina (1.0 g, 13.7 mmol), K2CO3 (3.5 g, 25.3 mmol) i 18-kruna-6 (katalitička količina) u acetonu (15 mL) je zagrejana u 35°C uljanom kupatilu. Rastvor metil 6-(bromometil)benzo[b]tiofen-2-karboksilata (1.6 g, 5.6 mmol) u acetonu (15 mL) je dodat. Reakciona mešavina je mešana u 45°C uljanom kupatilu tokom 3 sata a onda ohlađena do sobne temperature. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u EtOAc (70 mL) i ispran vodom (2 X 30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH : CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 6-[(dietilamino)metil] benzo[b]tiofen-2-karboksilat (1.3 g, 84% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.06 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 2.52-2.59 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 3.68 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 7.38-7.41 (dd, J = 1.2 i 8.4 Hz, 1H), 7.78-7.84 (m, 2H), 8.03 (s, 1H).
[1140] Faza 6: rastvor metil 6-[(dietilamino)metil]benzo[b]tiofen-2-karboksilat (1.3 g, 4.7 mmol) u THF<(20 mL) dodat je lagano izmešanom rastvoru LiAlH>4</THF (1M, 6 mL, 6 mmol) u THF (10 mL) na 3-6°C.>Dobijeni rastvor je mešan na 3°C tokom 30 minuta a onda ugašen vodom (5 mL). Mešavina je mešana sa CH2Cl2 (40 mL) i zas. NaHCO3 (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2 (2X30 mL) i kombinovani CH2Cl2 rastvor je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio [6-[(dietilamino)metil] benzo[b]tiofen-2-il]metanol (1.0 g, 84% prinos):<1>H NMR (CDCl3) δ 1.05 (t, J = 6 Hz, 6H), 2.51-2.58 (q, J = 6 Hz, 4H), 2.72 (b, 1H), 3.65 (s, 2H), 4.87 (s, 2H), 7.13 (d, J = 3 Hz, 1H), 7.29-7.32 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H).
[1141] Faza 7: Diizopropil azodikarboksilat (0.9 g, 4.3 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji trifenilfosfina vezanog za polimer (3.4 g, 5.4 mmol) u THF (40 mL) na 3-5 °C. Nakon što je izmešan na 3 °C tokom 10 minuta, rastvor metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.1 g, 3.6 mmol) i [6-[(dietilamino)metil] benzo[b]tiofen-2-il]metanola (0.9 g, 3.6 mmol) u THF (80 mL) dodat je lagano na 3-6°C. Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Mešavina je isfiltrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa CH2Cl2(40 mL). Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u CH2Cl2(100 mL) i ispran sa zas. NaHCO3 (30 mL), vodom (30 mL), i slanim rastvorom (30 mL), i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, CH3OH: CH2Cl23: 97) da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((6-((dietilamino)metil)benzo[b]tiofen-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (0.7 g, 35% prinos).
[1142] Faza 8: Mešavina metil 5-amino-4-(4-((6-((dietilamino)metil) benzo[b]tiofen-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.7 g, 1.2 mmol) i K2CO3(0.2 g, 1.2 mmol) u DMF (10 mL) je zagrejana na 80°C uljanom kupatilu tokom 3 sata. Reakciona mešavina je ohlađena i razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana vodom (3X35 mL) i slanim rastvorom (35 mL), i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je kristalizovan iz vrućeg EtOAc (10 mL) da bi se dobio 3-(4-((6-((dietilamino)metil) benzo[b]tiofen-2-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.3 g, 44% prinos): mp 190-192°C;
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.98 (t, J = 6 Hz, 6H), 1.96-2.02 (m, 1H), 2.43-2.60 (m, 6H), 2.90-2.93 (m, 1H), 3.32 (s, 2H), 4.29 (d, J = 18 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J = 3 i 12 Hz, 1H), 5.57 (s, 2H), 7.73-7.53 (m, 5H), 7.75-7.85 (m, 2H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.60, 22.31, 31.18, 45.04, 46.11, 51.59, 56.82, 65.28, 115.26, 115.62, 121.94, 123.35, 123.52, 125.56, 129.79, 130.05, 133.40, 137.83, 139.42, 152.87, 167.89, 170.95, 172.80; Izrač. za C27H29N3O4S 0.2 H2O: C, 65.49; H, 5.98; N, 8.49; S, 6.48. Pronađeno: C, 65.25; H, 5.82; N, 8.38; S, 6.63.
5.2983-(4-(4-(8-OKSA-3-AZABICIKLO[3.2.1]OKTAN-3-ILMETIL)BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1143]
[1144] Faza 1: Trifenilfosfin na polimernom nosaču (1.6 mmol/g, 14.2 g, 22.73 mmol) dodat je izmešanoj suspenziji tert-butil 5-amino-2-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (3.8g, 11.36 mmol) u THF (140 mL) na 0°C, praćeno diizopropil azodikarboksilatom (4.6 g, 22.73 mmol). Nakon mešanja tokom 10 minuta, dodat je (4-(hlorometil)fenil)metanol (2.67 g, 17.05 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Smola je isprana dihlorometanom (2 x 70 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani u vakuumu da bi se dobio a sirup koji je podeljen između EtOAc (300 ml) i vode (100 ml). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4,) i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi proizvod kao žuto ulje. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (330 g kolona, MeOH/CH2Cl2gradijent od 0% do 5% u 50 min) da bi se dobio tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (4 g, 74% prinos);<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 2.07 (d, J = 1.1 Hz, 4H, CH2,CH2), 4.43 (s, 2H, CH2), 4.64 - 4.75 (m, 1H, CH), 4.78 (s, 2H, CH2), 5.27 (s, 2H, CH2), 6.67 - 6.86 (m, 1H, NHH), 7.17 - 7.27 (m, 1H, NHH), 7.32 (d, J = 2.6 Hz, 2H, Ar), 7.49 (d, J = 5.1 Hz, 5H, Ar).
[1145] Faza 2: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (500mg, 1.06 mmol) u acetonitrilu (10 ml), su dodati 8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan hidrohlorid (190 mg, 1.27 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (410 mg, 3.17 mmol). Mešavina je obrazovana i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen pod vakuumom. Ostatak je uzet u etil acetatu (100ml), ispran vodom (10 ml) i slanim rastvorom, i osušen iznad MgSO4. Rastvarač je uparen da bi se dobio tert-butil 2-(4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat (560 mg, 96% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.66 -1.78 (m, 2H, CH2), 1.82 - 1.92 (m, 2H, CH2), 1.97 - 2.30 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.44 (s, 2H, CH2), 4.13 -4.28 (m, 2H, CH, CH), 4.42 (s, 2H, CH2), 4.63 - 4.80 (m, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.65 - 6.87 (m, 1H, NHH), 7.15 - 7.27 (m, 1H, NHH), 7.33 (d, J = 9.3 Hz, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar).
[1146] Faza 3: U gustu suspenziju tert-butil 2-(4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (560 mg, 1.019 mmol) u THF (20 ml), dodat je kalijum tert-butoksid (137 mg, 1.223 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 minuta, zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (3 ml), THF je uklonjen pod vakuumom, a ostatak je podeljen između etil acetata (70 ml) i zasićenog natrijum bikarbonata (10 ml). Talog je obrazovana i filtriran, a filtrat je ispran slanim rastvorom i osušen iznad magnezijum sulfata. Rastvarač je uparen i sirovi proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC da bi se dobio 3-(4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 17% prinos); mp: 228-230 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.58 - 2.31 (m, 6H, 6xCHH), 2.31 - 2.50 (m, 2H, CHH, CHH), 2.58 (d, J = 18.3 Hz, 2H, CHH, CHH), 2.82 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.12 (br. s., 1H, CHH), 3.39 - 3.60 (m, 2H, CH2), 3.92 - 4.76 (m, 4H, CH2, CH, CH), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, CH), 5.25 (br. s., 2H, CH2), 7.12 - 7.84 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.34, 27.94, 31.16, 45.06, 51.56, 58.19, 60.95, 69.25, 73.58, 114.94, 115.26, 127.64, 129.80, 129.93, 133.30, 137.72, 153.43, 157.78, 158.20, 162.96, 167.97, 170.96, 172.81; LCMS MH = 476; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, Gradijent (acetonitril/0.1% HCOONH4) 5/95 do 95/5 u 5min, 95/510min: tR= 5.26 (100%).
5.299 3-(4-(4-(8-OKSA-3-AZABICIKLO[3.2.1]OKTAN-3-ILMETIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1147]
[1148] Faza 1: Rastvoru tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (500mg, 1.06 mmol) u acetontrilu (10 ml) dodat je 8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan hidrohlorid (190 mg, 1.27 mmol) i N,N-Diizopropiletil- amin (410 mg, 3.17 mmol). Formirana mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen pod vakuumom. Ostatak je uzet u etil acetatu (100ml) i ispran vodom (10 ml), slanim rastvorom, osušen iznad MgSO4, rastvarač je uparen da bi se dobio tert-butil 2-(4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat (560 mg, 96% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1.66 -1.78 (m, 2H, CH2), 1.82 - 1.92 (m, 2H, CH2), 1.97 - 2.30 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3.44 (s, 2H, CH2), 4.13 -4.28 (m, 2H, CH, CH), 4.42 (s, 2H, CH2), 4.63 - 4.80 (m, 1H, CH), 5.23 (s, 2H, CH2), 6.65 - 6.87 (m, 1H, NHH), 7.15 - 7.27 (m, 1H, NHH), 7.33 (d, J= 9.3 Hz, 4H, Ar), 7.41 - 7.54 (m, 3H, Ar).
[1149] Faza 2: U gustu suspenziju tert-butil 2-(4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (560 mg, 1.019 mmol) u THF (20 ml) dodat je kalijum tert-butoksid (137 mg, 1.223 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 10 minuta, zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena sirćetnom kiselinom (3 ml), THF je uklonjen pod vakuumom, ostatak je podeljen između etil acetata (70 ml) i zasićenog natrijum bikarbonata (10 ml), obrazovani talog je filtriran da bi se dobio 2-((4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benzil)oksi)-6-((2,6-dioksopiperidin-3-il)karbamoil)benzojeva kiselina (210 mg, 38% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.65 - 1.79 (m, 2H, CHH, CHH), 1.81 - 1.90 (m, 2H, CHH, CHH), 1.97 (d, J= 3.4 Hz, 1H, CHH), 2.04 (br. s., 1H, CHH), 2.16 (d, J= 1.7 Hz, 1H, CHH), 2.20 (d, J= 1.7 Hz, 1H, CHH), 2.41 - 2.50 (m, 2H, CHH, CHH), 2.57 (br. s., 1H, CHH), 2.77 (s, 1H, CHH), 3.42 (s, 2H, CH2), 4.19 (dd, J= 2.0, 4.2 Hz, 2H, CH, CH), 4.70 (s, 1H, CH), 5.16 (s, 2H, CH2), 7.17 - 7.35 (m, 4H, Ar), 7.35 - 7.53 (m, 3H, Ar), 8.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H, NH), 10.85 (s, 1H, NH).
[1150] Faza 3: Mešavina 2-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-6-(2,6-dioksopiperidin-3-ilkarbamoil)benzojeve kiseline (210 mg, 0.41 mmol) i trietil amina (83 mg, 0.82 mmol) u sirćetnoj kiselini (5 ml) je refluksovana preko noći. Mešavina je ohlađena do sobne temperature, sirćetna kiselina je uklonjena pod vakuumom, ostatak je podeljen između EtOAc (50 ml) i zasićenog NaHCO3, organski sloj je ispran vodom, slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je resuspendovan u etru (2 x 5 ml) i filtriran da bi se dobio 4-(4-(8-oksa-3-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ilmetil)benziloksi)-2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)izoindolin-1,3-dion (120 mg, 78% prinos); m.p: 196-198 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.56 - 1.76 (m, 2H, CHH, CHH), 1.76 - 1.87 (m, 2H, CHH, CHH), 1.88 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.12 (d, J= 10.6 Hz, 2H, CHH, CHH), 2.41 (br. s., 2H, CHH, CHH), 2.45 - 2.63 (m, 2H, CHH, CHH), 2.79 (d, J= 11.7 Hz, 1H, CHH), 3.37 (s, 2H, CH2), 4.12 (d, J = 1.7 Hz, 2H, CH, CH), 5.02 (dd, J = 5.4, 12.7 Hz, 1H, CH), 5.28 (s, 2H, CH2), 7.27 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.40 (dd, J = 3.1, 7.6 Hz, 3H, Ar), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.69 - 7.85 (m, 1H, Ar), 11.04 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 21.95, 28.29, 30.90, 48.73, 58.06, 61.11, 69.95, 73.69, 115.48, 16.56, 120.19, 127.28, 128.56, 133.24, 134.68, 136.97, 155.53, 165.29, 166.75, 169.87, 172.71; HPLC: Waters Xterra C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 25/75 CH3CN/0.1% HCOONH4 tR = 3.97 (100%); Anal. Izrač. za C27H27N3O7+ 0.1 H2O; C, 66.00; H, 5.58; N, 8.55; Pronađeno: C, 65.96; H, 5.68; N, 8.27.
5.300 3-(4-(4-(3-OKSA-8-AZABICIKLO[3.2.1]OKTAN-8-ILMETIL) BENZILOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION
[1151]
Faza 1: tert-butil 2-(4-(4-(3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat
[1152] Suspenziji tert-butil 5-amino-2-(4-(4-(hlorometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (500 mg, 1.06 mmol) u MeCN (10 mL), dodat je (1R,5S)-3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan hidrohlorid (316 mg, 2.114 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.41 mL, 2.33 mmol). Mešavina je zagrejana do 60 °C i mešana preko noći. Nakon ∼15 h, reakciona mešavina je koncentrovana do suvoće i čvrsti ostatak je podeljen između EtOAc (150 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Vodeni sloj je ispran dodatnim EtOAc (150 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani u vakuumu a onda osušeni u vakuum sušnici na 60 °C kako bi se obrazovao tert-butil 2-(4-(4-(3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (580 mg, 100% prinos); LC/MS M+H = 550. Čvrsta supstanca je korišćena u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 2: tert-butil 2-(4-(4-(3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat
[1153] Ohlađenom rastvoru tert-butil 2-(4-(4-(3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoata (580 mg, 1.06 mmol) u THF (10 mL) u ledenom kupatilu, dodat je KO<t>Bu (154 mg, 1.38 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Ledeno kupatilo je odmah uklonjeno i reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 90 min. Reakciona mešavina je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem sirćetne kiseline (0.162 mL, 2.82 mmol). Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je podeljena između EtOAc (125 mL) i 1N NaHCO3(30 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (∼75 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (400 mg sirovi prinos). Čvrsta supstanca je pretvorena u prah sa Et2O (40 mL) sonikacijom, sakupljena na filter levku i isprana dodatnim Et2O. Slično pretvaranje u prah je izvedeno sa vodom (35 mL) i čvrsta supstanca je sakupljena filter levku, osušena sukcijom, zatim smeštena u vakuum sušnicu na 60 °C tokom nekoliko sati da bi se dobio tert-butil 2-(4-(4-(3-oksa-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilmetil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-amino-5-oksopentanoat kao bela čvrsta supstanca (305 mg, 61% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 CH3CN/0.1% H3PO4, 6.81 min (95.0%); mp: 243-245 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.69 - 1.81 (m, 2H, CH2), 1.86 - 2.06 (m, 3H, 3 x CHH), 2.33 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 1H, CHH), 2.81 - 3.02 (m, 3H, 3 x CHH), 3.35 - 3.46 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 3.48 - 3.59 (m, 2H, CHH, CHH), 4.25 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 4.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.22 (s, 2H, CH2), 7.27 - 7.55 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, Ar);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 24.56, 31.18, 45.06, 51.55, 56.42, 59.89, 69.41, 72.51, 114.94, 115.19, 127.61, 128.60, 129.78, 129.93, 133.28, 134.99, 139.32, 153.49, 167.99, 170.96, 172.81; LC/MS M+H = 476; Anal. izrač. za C27H29N3O5+ 0.17 H2O 0.26 EtOAc: C, 67.15; H, 6.31; N, 8.38. Pronađeno: C, 67.15; H, 6.23; N, 8.49.
5.3013-[5-HLORO-4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
Faza 1: Pripremanje metil estra 4-hloro-3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline
[1155] Izmešanom rastvoru 4-hloro-3-hidroksi-2-metilbenzojeve kiseline (2.5 g, 13.40 mmol) u MeOH (20 ml) dodata je sumporna kiselina (0.263 g, 2.68 mmol). Dobijeni rastvor je doveden u reakciju na 62 °C tokom dva dana. Reakciona mešavina je koncentrovana da bi se dobio braon rastvor (30 mL), u koji je dodata voda (80 mL). Mešavina je mešana i istaložena je svetlo braon čvrsta supstanca. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (100 mL). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću kolone sa silikagelom (120 g EtOAc/Heksani) da bi se dobio metil estar 4-Hloro-3-hidroksi-2-metil-benzojeve kiseline kao bela čvrsta supstanca (6.9 g, 74% prinos). Ona je upotrebljena u sledećoj fazi bez dalje obrade ili prečišćavanja.
Faza 2: Pripremanje metil estra 3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-4-hloro-2-metilbenzojeve kiseline [1156] Izmešanom rastvoru metil 4-hloro-3-hidroksi-2-metilbenzoata (6.34 g, 31.6 mmol) i 1H-imidazola (5.38 g, 79 mmol) u DMF (60 ml) u balonu sa okruglim dnom od 250 ml u ledenom kupatilu dodat je tertbutilhlorodimetilsilan (5.24 g, 34.8 mmol). Nakon 20 minuta, ledena kupka je uklonjena i mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Ledena voda (50 ml) dodata je mešavini, dobijeni talog je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 40 ml). Kombinovani EtOAc faze su isprane vodom (40ml), slanim rastvorom (40 ml), i koncetrovane do ulja (14.08 g), koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio metil estar 3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-4-hloro-2-metil-benzojeve kiseline kao ulje, 8.38 g, 84% prinos. Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 3: Pripremanje metil estra 2-bromometil-3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-4-hloro-benzojeve kiseline
[1157] Rastvoru metil 3-(tert-butildimetilsililoksi)-4-hloro-2-metilbenzoata (8.38 g, 26.6 mmol) u metil acetatu (50 ml, 26.6 mmol) dodat je 1-bromopirolidin-2,5-dion (4.74 g, 26.6 mmol) na sobnoj temperaturi. Mešavina je zagrejana do 50°C tokom jednog sata. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i isprana sa 50% natrijum sulfitom (Na2SO3, 50 ml), vodom (50 ml) i slanim rastvorom (50 ml). Organska faza je osušena u MgSO4i koncetrovana do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (120 g, 1% EtOAc u Heks gradijentu do 5% u 18 minuta) da bi se dobio metil estar 2-bromometil-3-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-4-hloro-benzojeve kiseline kao ulje (9.53 g, 91 % prinos). Proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Pripremanje metil estra 4-[4-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-5-hloro-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[1158] Izmešanom rastvoru metil 2-(bromometil)-3-(tert-butildimetilsililoksi)-4-hlorobenzoata (9.5 g, 24.13 mmol) u acetonitrilu (90 ml) na sobnoj temperaturi dodat je (S)-metil 4,5-diamino-5-oksopentanoat hidrohlorid (5.22 g, 26.5 mmol). Suspenziji je lagano dodat N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (8.37 ml, 50.7 mmol). Suspenzija je zagrejana na 40°C tokom 24 sata. Rastvarač je uparen da bi se dobilo žuto ulje, koje je umešano u etru (150 ml) preko noći. Suspenzija je filtrirana i isprana sa dodatnim dietil etrom (50ml) da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca i filtrat. Filtrat je ispran sa 1N HCl (50 ml), zasićenim natrijum bikarbonatom (80 ml), slanim rastvorom (50 ml). Etarska faza je uparena da bi se dobio metil estar 4-[4-(tert-butil-dimetil-silaniloksi)-5-hloro-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline kao ulje, 8.18 g, 76% sirovi prinos. Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 5: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-(5-hloro-4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il)-buterne kiseline
[1159] Izmešanom rastvoru (S)-metil 5-amino-4-(4-(tert-butildimetilsililoksi)-5-hloro-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (8.16 g, 18.50 mmol) u DMF (25 ml) i vodi (10 ml) u ledenom kupatilu dodat je kalijum karbonat (1.279 g, 9.25 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog sata. U braon mešavinu je dodat acetonitril (15ml) i mešana je na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta.
Rastvarač je uparen. Dobijeno ulje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2, 0.5% grada do 8% u 60 min) da bi se dobio metil estar 4-karbamoil-4-(5-hloro-4-hidroksi-1-okso-1,3-dihidroizoindol-2-il)-buterne kiseline kao beličasta čvrsta supstanca (4.62 g, 76% prinos). Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 6: Pripremanje metil estra 4-[4-(4-bromometil-benziloksi)-5-hloro-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-4-karbamoil-buterne kiseline
[1160] Mešavina metil 5-amino-4-(5-hloro-4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (4.6 g, 14.08 mmol), 1,4-bis(bromometil)benzena (11.15 g, 42.2 mmol) i kalijum karbonata (1.946 g, 14.08 mmol) u acetonitrilu (70 ml) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min zatim zagrejana na 50°C tokom 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i isprana sa acetonitrilom da bi se dobila gelasta bela čvrsta supstanca. Filtrat je prečišćen pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) do bele čvrste supstance (1.17 g, 16% prinos). Korišćena je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 7: Pripremanje metil estra 4-karbamoil-4-[5-hloro-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-buterne kiseline
[1161] Izmešanoj suspenziji metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-5-hloro-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.436 g, 0.855 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi dodat je morfolin (0.745 ml, 8.55 mmol) i mešana je tokom jednog sata. Rastvarač je uparen da bi se dobilo ulje, koje je umešano u vodi (15 ml) i EtOAc (20 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 30 ml), slanim rastvorom (15 ml), osušena i koncentrovana da bi se dobilo bistro ulje (0.46 g, 104% sirovi prinos). Korišćeno je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 8: Pripremanje 3-[5-Hloro-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion
[1162] Izmešanom rastvoru metil 5-amino-4-(5-hloro-4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.44 g, 0.853 mmol) u THF (10 ml) u 0°C ledenoj kupki dodat je kalijum 2-metilpropan-2-olat (0.192 g, 1.706 mmol) i mešan tokom 10 minuta. Reakcija je brzo ugašena sa 1 N HCl do pH ∼4, i neutralizovana zasićenim NaHCO3 do pH ∼7. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 ml), osušena i uparena do bele čvrste supstance, koja je prečišćena pomoću kolone sa silikagelom da bi se dobio 3-[5-Hloro-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (72 mg, 17% prinos); mp, 224-226°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 95/5 u 5 min, izokratski na 95/5 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.62 min (98.7%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.26 - 2.46 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2.55 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.47 (s, 2H, CH2), 3.52 - 3.62 (m, 4H, CH2, CH2), 4.39 - 4.66 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.21 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.39 (m, 2H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ar), 11.02 (s, 1H, NH).<1>H NMR (DMSO-d6)<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.11, 45.79, 51.68, 53.14, 62.07, 66.17, 73.52, 118.96, 128.10, 128.95, 130.65, 132.74, 133.96, 135.16, 138.06, 149.42, 166.80, 170.69, 172.80. LC/MS (M+1)<+>= 484; Anal. izrač. za C25H26N3O5Cl: C, 62.05; H, 5.42; N, 8.68; Cl, 7.33. Pronađeno: C, 61.93; H, 5.42; N, 8.61; Cl, 7.22.
5.3023-[5-METIL-4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1164] Mešavina 3-(5-hloro-4-(4-(morfolinometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.2 g, 0.413 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma (0) (0.096 g, 0.083 mmol) je isprana azotom, i dodat joj je tetrametilstanan (0.114 ml, 0.827 mmol) u toluenu (3 ml) i DMF (1 ml). Zagrejana je u 2-5 ml mikrotalasnoj bočici do 130°C od 12:20 pm tokom 2 sata. Mešavina je prečišćena preparativnom HPLC (Voda/MeCN, sve sa 0.1% HCOOH) da bi se dobio 3-[5-Metil-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (66 mg, 20% prinos); mp, 232-234°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 70/30u 5 min, izokratski na 70/30 u 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.78 min (96.3%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.90 - 2.07 (m, 1H, CHH), 2.23 - 2.48 (m, 8H, CHH, CH2CH2, CH3), 2.55 - 2.67 (m, 1H, CHH), 2.83 - 3.02 (m, 1H, CHH), 3.42 - 3.50 (m, 2H, CH2), 3.52 - 3.66 (m, 4H, CH2CH2), 4.35 - 4.64 (m, 2H, CH2), 5.01 - 5.19 (m, 3H, NCH, CH2), 7.26 - 7.52 (m, 6H, Ar), 11.00 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 16.47, 22.42, 31.18, 45.77, 51.55, 53.15, 62.13, 66.20, 72.82, 117.80, 127.97, 128.98, 131.30, 131.89, 133.74, 135.93, 137.80, 151.86, 167.74, 170.95, 172.90. LC/MS m/e=464. Anal. izrač. za C26H29N3O5: C, 67.37; H, 6.31; N, 9.07. Pronađeno: C, 67.07; H, 6.24; N, 9.04.
5.3033-(4-((3-((METILAMINO)METIL)IZOKSAZOL-5-IL) METOKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1165]
Faza 1: (5-(((tert-butildimetilsilil)oksi)metil)izoksazol-3-il)metanol
[1166] Natrijum borohidrid (0.596 g, 15.77 mmol) dodat je izmešanoj mešavini etil 5-((tertbutildimetilsililoksi)metil)izoksazol-3-karboksilata (4.5 g, 15.77 mmol) u etanolu (25 mL), a mešavina umešavana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Voda (50 mL) je dodat i mešavina je uparena radi uklanjanja etanola. Preostala voda je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 75 mL), i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 mL), osušeni (MgSO4), i upareni, dajući 3.67 g bezbojnog ulja;<1>H NMR (CDCl3) δ 0.12 (s, 6H), 0.92 (s, 9H), 4.70 - 4.82 (m, 4H), 6.25 (s, 1H).
Faza 2: 3-(Bromometil)-5-(((tert-butildimetilsilil)oksi)metil)izoksazol
[1167] Rastvor (5-((tert-butildimetilsililoksi)metil)izoksazol-3-il)metanola (3.47 g, 14.26 mmol) u dihlorometanu (25 mL) je ohlađen do 0 °C, i dodati su trifenilfoshin (4.11 g, 15.68 mmol) i ugljenik tetrabromid (4.49 g, 13.54 mmol). Nakon 2 h, mešavina je uparena pod vakuumom i ostatak je nanesen direktno na kolonu sa silikagelom, pokretanjem sa heksani-etil acetat gradijentom, i eluirajući proizvod na 5% EtOAc. Proizvod je dobijen kao bezbojno ulje, 3.7 g, u 85% prinosu;<1>H NMR (CDCl3) δ 0.13 (s, 6H), 0.93 (s, 9H), 4.41 (s, 2H), 4.77 (s, 2H), 6.29 (s, 1H).
Faza 3: tert-butil ((5-(hidroksimetil)izoksazol-3-il)metil)metil) karbamat
[1168] 3-(Bromometil)-5-((tert-butildimetilsililoksi)metil)izoksazol (3.7 g, 12.08 mmol) je rastvoren u Metilaminu, 33mas.%. rastvoru u apsolutnom etanolu (100 ml, 12.08 mmol) (100 mL), a mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a zatim je uparena do suvoće. Ostatak je rastvoren u THF, i Ditert butil dikarbonat (5.80 g, 26.6 mmol) i DIEA (6.94 ml, 39.9 mmol) su dodati. Mešavina je umešavana na temperaturi okoline tokom 16 h. Zatim je dodato 5 mL pH 7 puferskog rastvora, i 1M TBAF u THF (20 mL) su dodati, a mešavina je mešana na temperaturi okoline tokom 3 h. Zatim, mešavina je uparena pod vakuumom. Ostatak je podeljen između EtOAc (75 mL) i vode (100 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (75 mL), i kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), osušeni (MgSO4), i upareni. Sirovi proizvod je upotrebljen direktno kao takav u sledećoj fazi, bez dalje karakterizacije ili prečišćavanja.
Faza 4: Metil5-amino-4-(4-((3-(((tert-butoksikarbonil)metilamino) metil)izoksazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat
[1169] Mešavina metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (1.206 g, 4.13 mmol) i tert-butil (5-(hidroksimetil)izoksazol-3-il)metil(metil)karbamata (1 g, 4.13 mmol) je ohlađen do 0 °C. Trifenilfosfin, vezan polimerom, 3 mmol/g (2.75 g, 8.26 mmol) dodat je, praćeno DIAD (1.625 ml, 8.26 mmol). Ledeno kupatilo je ostavljeno da se istopi, a mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Mešavina je isfiltrirana, a filtrat je uparen. Ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran sa 10% vodenim Na2CO3 (2 x 100 mL) i vodom (2 x 100 mL), i uparen. Ostatak je hromatografisan primenom metilen hlorid-acetonitril gradijenta, eluirajući proizvod pri 70-80% acetonitrilu, i dajući 0.50 g dobijenog kao ulje, u 24% prinosu.
Faza 5: 3-(4-((3-((Metilamino)metil)izoksazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion [1170] Rastvor metil 5-amino-4-(4-((3-((tert-butoksikarbonil(metil)amino) metil)izoksazol-5-il)metoksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (0.5 g, 0.968 mmol) u THF (100 mL) je ohlađen do 0 °C, i dodat je kalijum tert-butoksid (0.109 g, 0.968 mmol). Mešanje je nastavljeno na ovoj temperaturi, počevši na t = 2:00 PM. Nakon 30 min, mešavina ugašena je sa AcOH (5 mL) i zatim je podeljena između zasićenog vodenog NaHCO3(100 mL) i EtOAc (100 mL), i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (100 mL).
Kombinovane organske faze su isprane zasićenim vodenim NaHCO3(100 mL), vodom (100 mL), i slanim rastvorom (100 mL), osušene su (MgSO4) i uparene, dajući 0.39 g kao ulje. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2(20 mL) uz mešanje na st, i 2M HCl u Et2O (4 mL) dodat je. Mešavina je mešana na temperaturi okoline, tokom 16 h. Zatim, mešavina podeljena između vode (50 mL) i CH2Cl2 (50 mL), i vodena faza je učinjena baznim primenom 10% vodenog rastvora natrijum karbonata. Mešavina je ekstrahovana u EtOAc (3 x 50 mL), i kombinovani ekstrakti su osušeni (MgSO4) i upareni. Sušenjem, dobijeno je 160 mg kao bela čvrsta supstanca, u 43% prinosu; mp 220-222 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, 5/95 do 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2) preko 5 min zatim 10 min u 95/5 CH3CN-0.1% NH4(HCO2): 3.70 (100%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 - 2.04 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.35 - 2.47 (m, 1H), 2.58 (d, J = 17.8 Hz, 1H), 2.82 - 3.00 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 4.24 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 4.34 - 4.47 (m, J = 17.6 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H), 5.44 (s, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.30 - 7.44 (m, 2H), 7.46 - 7.58 (m, 1H), 10.98 (s, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 31.20, 35.23, 45.02, 45.54, 51.62, 60.72, 103.86, 115.07, 115.96, 129.87, 129.94, 133.50, 152.68, 162.90, 166.98, 167.82, 170.94, 172.80. Anal. Izrač. za C19H20N4O5 0.5 H2O: C, 58.01%; H, 5.38%; N, 14.24%; Pronađeno: C, 58.00%; H, 5.20%; N, 13.90%.
5.3043-(1-OKSO-4-((4-((4-(5-(2-oksoHEKSAHIDRO-1H-TIENO[3,4-D]IMIDAZOL-4-IL)PENTANOIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL) BENZIL)OKSI)IZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1172] Faza 1: tert-butil piperazin-1-karboksilat (0.6g, 3.2 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (9.6 mL, 3.2 mmol) su dodati izmešanom rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.7g, 1.6 mmol) u CH2Cl2 (60 mL). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je isprana vodom (2X35 mL), slanim rastvorom (35 mL) i osušena. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 3% CH3OH/CH2Cl2tokom 15 min onda do 5% preko 5 min i držan tokom 15 min onda do 10% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio tertbutil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil)piperazin-1-karboksilat (0.7g, 83%):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H), 1.96-2.00 (m, 1H), 2.28-2.32 (m, 4H), 2.54-2.60 (m, 2H), 2.87-2.93 (m, 1H), 3.29-3.32 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 4.22-4.28 (d, J=18Hz, 1H), 4.39-4.45 (d, J=18 Hz, 1H), 5.08-5.14 (dd, J=6 i 12 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 7.31-7.51 (m, 7H), 10.97 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 28.00, 31.16, 45.06, 51.55, 52.30, 61.59, 69.36, 78.68, 114.94, 115.20, 127.63, 128.94, 129.78, 129.92, 133.27, 135.28, 137.72, 153.46, 153.74, 167.99, 170.95, 172.81.
[1173] Faza 2: 4M HCL/dioksan (1.7 mL, 6.8 mmol) dodat je izmešanom rastvoru tert-butil 4-(4-((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-iloksi)metil)benzil) piperazin-1-karboksilata (0.7g, 1.3 mmol) u 1,4-dioksan (10 mL) i CH2Cl2 (10 mL). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. 4M HCl/dioksan (1 mL) dodat je i mešavina je mešana preko noći. Etar (20 mL) dodat je i čvrsta supstanca je prikupljena filtracijom i osušena da bi se dobio 3-(1-okso-4-(4-(piperazin-1-ilmetil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.7g, 100%):<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.97-2.01 (m, 1H), 2.42-2.62 (m, 2H), 2.86-2.98 (m, 1H), 3.35-3.37 (m, 8H), 4.25-4.48 (m, 4H), 5.09-5.15 (dd, J=6 i 12 Hz, 1H), 5.29 (s, 2H), 7.35-7.68 (m, 7H), 9.62 (b, 2H), 10.98 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.36, 31.16, 45.06, 47.35, 51.58, 59.00, 66.30, 69.00, 114.96, 115.35, 127.83, 129.83, 129.95, 131.50, 133.34, 139.00, 153.35, 167.94, 170.96, 172.81.
[1174] Faza 3: 3-(1-Okso-4-(4-(piperazin-1-ilmetil)benziloksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.7g, 1.3 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL). U ovaj rastvor dodat je trietilamin (0.4g, 4.0 mmol) i biotin N-hidroksisukcinimid estar (0.4g, 1.3 mmol). Dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je rastvoren u CH2Cl2(120 mL). CH2Cl2 rastvor je ispran vodom (2X40 mL), slanim rastvorom (40 mL) i osušen. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom (SiO2, 3% CH3OH/CH2Cl2 tokom 10 min onda do 10% preko 10 min i držan tokom 10 min onda do 15% preko 5 min i držan tokom 15 min) da bi se dobio 3-(1-okso-4-((4-((4-(5-(2-oksoheksahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)izoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (0.5g, 55%): mp 168-170°C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.35-1.63 (m, 5H), 1.98-2.09 (m, 1H), 2.25-2.60 (m, 9H), 2.82-2.85 (m, 2H), 3.05-3.15 (m, 1H), 3.37-3.49 (m, 7H), 4.11-4.45 (m, 4H), 5.08-<5.14 (dd, J=6 i 15 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 6.35 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 7.32-7.51 (m, 7H), 10.97 (s, 1H); 13C NMR>(DMSO-d6) δ 22.33, 24.82, 28.06, 28.23, 31.16, 32.04, 40.93, 45.07, 51.56, 52.50, 52.90, 55.41, 59.13, 60.98, 61.52, 69.36, 114.97, 115.22, 127.64, 128.95, 129.93, 133.28, 135.33, 137.72, 153.48, 162.63, 167.99, 170.44.170.96, 172.83; Izrač. za C35H42N6O6S+1.0H2O; C, 60.68; H, 6.40; N, 12.13, S, 4.68.
Pronađeno: C, 60.32; H, 6.16; N, 11.68; S, 5.28.
5.3053-(4-((4-((BIS(3,3,3-TRIFLUOROPROPIL)AMINO)METIL) BENZIL)OKSI)-1-OKSOIZOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1175]
Faza 1: Metil 5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil) benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat
[1176] Rastvoru metil 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (182 mg, 0.383 mmol) u MeCN (5 mL), dodat je bis(3,3,3-trifluoropropil)amin (80 mg, 0.383 mmol) i DIEA (0.100 mL, 0.574 mmol). Bistar rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h a onda na 70 °C preko noći. Nakon 24 h, reakcija je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu da bi se dobio metil 5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat
Metil 5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat kao ulje. Sirovi proizvod je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja, pretpostavljajući kvantitativnu konverziju. LCMS: MH = 604, ∼95 površina % na 240 nm.
Faza 2: 3-(4-((4-((Bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion
[1177] Sirovi proizvod dobijen u fazi 1, metil 5-amino-4-(4-(4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (231 mg, 0.383 mmol) je rastvoren u DMF (5 mL). Rastvoru je dodat anhidrovani K2CO3(159 mg, 1.148 mmol). Mešavina je umešavana tokom 20 h na 85 °C a onda ostavljena da miruje na sobnoj temperaturi preko noći.
Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (∼150 mL) i isprana sa 1N aq. NaHCO3(30 mL). Organski sloj je ispran vodom (30 mL) i slanim rastvorom, osušen iznad Na2SO4, i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo svetlo braon ulje. Ulje je rastvoreno u DMF (7 mL) i prečišćeno primenom reverzno fazne preparativna HPLC. Proizvod je eluiran sa acetonitril/voda gradijentom (0.1 % mravlja kiselina u obe pokretne faze, 30 do 95% MeCN preko 20 minuta), a frakcije su prikupljene masenim okidačem. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane u vakuumu dok nije dobijena debela gusta suspenzija. Čvrsta supstanca je sakupljena na poroznom levku, isprana dodatnom vodom, i osušena sukcijom. Dalje sušenje čvrste supstance u vakuum sušnici na 60 °C obezbedilo je 3-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (57 mg, 26% prinos): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 µm, 3.9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/0.1% H3PO4, 3.77 min (99.9%); mp: 107-109 °C;<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.88 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.34 - 2.49 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.53 - 2.76 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.82 - 3.03 (m, 1H, CHH), 3.63 (br. s., 2H, CH2), 4.26 (d, J = 17.6 Hz, 1H, CHH), 4.43 (d, J = 17.4 Hz, 1H, CHH), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, CH), 5.24 (s, 2H, CH2), 7.26 - 7.41 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.60 (m, 3H, Ar), 10.96 (s, 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.33, 30.17 (q, J = 20.9 Hz, M02), 31.16, 45.07, 45.39, 51.58, 56.40, 69.35, 115.01, 115.22, 127.58, 128.62, 128.68, 128.92, 129.76, 129.96, 133.30, 153.46, 167.97, 170.93, 172.80. CCF3 na 30.17 ppm se pojavljuje kao dublet. CF3 nije detektovan, moguće zbog razdvajanja; LCMS: MH = 572; Anal. izrač. za C27H27F6N3O4 0.6 H2O: C, 55.69; H, 4.88; N, 7.22; Pronađeno: C, 55.72; H, 4.83; N, 7.16.
5.3063-{4-[4-(1H-BENZOIMIDAZOL-2-ilSULFANYLMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1178]
[1179] U CH2Cl2rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.35 g, 0.790 mmol) dodat je 1H-benzo[d]imidazol-2-tiol (0.119 g, 0.790 mmol) i DIPEA (0.276 ml, 1.579 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona mešavina 7545-071-B pokazuje proizvod i SM. Mešavini je dodata voda i CH2Cl2 , a zatim je estrahovana. Organski sloj je prečišćen na koloni sa silikagelom eluirano sa CH2Cl2 i MeOH da bi se dobio 3-{4-[4-(1H-benzoimidazol-2-ilsulfanylmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.2 g, 49%). Tačka topljenja: 160-162 °C. LC-MS m/e=513. HPLC Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 mikro, 1 mL/min, 240 nm, gradijent 5/95 do 5/95 CH3CN/ 0.1% H3PO4u H2O tokom 5 min i ostaje na 95/5 tokom 5 min:7.02 min (97%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.81 - 2.03 (m, 1H, CHH), 2.26 - 2.47 (m, 1H, CHH), 2.53 - 2.63 (m, 1H, CHH), 2.82 - 3.00 (m, 1H, CHH), 4.13 - 4.47 (m, 2H, CH2), 4.58 (s, 2H, CH2), 5.09 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.20 (s, 2H, CH2), 7.04 - 7.18 (m, 2H, Ar), 7.26 - 7.34 (m, 2H, AR), 7.37 -7.63 (m, 7H, Ar), 10.95 (s, 1H, NH), 12.56 (br. s., 1H, NH);<13>C NMR (DMSO-d6) δ 22.30, 31.16, 34.75, 45.06, 51.55, 69.22, 114.88, 115.22, 127.86, 128.92, 129.77, 129.95, 133.28, 135.66, 137.57, 149.59, 153.41, 167.97, 170.92, 172.80. Anal. izrač. za C28H24N4O4S, C: 63.27%; H: 4.55%; N:10.54%; Pronađeno, C: 62.94%; H: 4.59%; N:10.40%.
5.3073-[4-(4-{[ETIL-(2-FENOKSI-ETIL)-AMINO]-METIL}-BENZILOKSI)-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1180]
[1181] U CH3CN (10 ml) rastvor 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0.358 g, 0.808 mmol) na sobnoj temperaturi dodat je N-etil-2-fenoksietanamin (0.160 g, 0.969 mmol) i N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.267 ml, 1.615 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom četiri sata. Rastvarač je uparen i ostatku dodat je metilen hlorid (80 ml). Mešavina je isprana vodom (2 x 50 ml), slanim rastvorom (50 ml), osušena i koncetrovana do ulja, koje je prečišćeno pomoću kolone sa silikagelom (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio 3-[4-(4-{[Etil-(2-fenoksi-etil)-amino]-metil}-benziloksi)-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il]-piperidin-2,6-dion kao bela čvrsta supstanca (0.334 g, 78% prinos); mp, 94-96°C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm, gradijent od 10/90 do 90/10u 5 min, izokratski na 90/10 tokom 5 min (CH3CN/0.1%H3PO4), 4.72 min (96.2%).
<1>H NMR (DMSO-d6) δ 1.01 (t, J = 7.0 Hz, 3H, CH3), 1.91 - 2.05 (m, 1H, CHH), 2.35 - 2.48 (m, 1H, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 3H, CHH, CH2), 2.80 (t, J = 6.1 Hz, 2H, CH2), 2.84 - 2.99 (m, 1H, CHH), 3.66 (s, 2H, CH2), 4.03 (t, J = 6.1 Hz, 2H, CH2), 4.19 - 4.47 (m, 2H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.1, 13.2 Hz, 1H, NCH), 5.22 (s, 2H, CH2), 6.84 -6.95 (m, 3H, Ar), 7.21 - 7.29 (m, 2H, Ar), 7.30 - 7.53 (m, 7H, Ar), 10.97 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.81, 22.36, 31.20, 45.09, 47.42, 51.37, 51.58, 57.50, 65.95, 69.47, 114.38, 114.97, 115.20, 120.39, 127.59, 128.61, 129.40, 129.79, 129.94, 133.29, 135.00, 139.65, 153.51, 158.40, 168.01, 170.95, 172.82. LC/MS MH=528. Anal. izrač. za C31H33N3O5 (+0.1 H2O): C, 70.33; H, 6.32; N, 7.94. Pronađeno: C, 70.10; H, 6.22; N, 7.83.
5.3083-{4-[4-(2-DIETILAMINO-ETILSULFANYLMETIL)-BENZILOKSI]-1-OKSO-1,3-DIHIDRO-IZOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DION (referentni primer)
[1183] U 20 mL scint. bočici, 2-(dietilamino)etanthiol hidrohlorid (100 mg, 0.590 mmol) dodat je rastvoru 3-(4-(4-(bromometil)benziloksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0.451 mmol) u acetonitrilu (5 mL, 96 mmol). Sve čvrste supstance rastvorene su umešavanjem. Mešavini je dodat N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.197 mL, 1.128 mmol), tetrabutilamonijum bromid (29 mg, 0.09 mmol) i žućkasti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova mešavina je uparen do ulja, koje je prečišćeno preparativnom HPLC da bi se dobio 3-{4-[4-(2-Dietilamino-etilsulfanilmetil)-benziloksi]-1-okso-1,3-dihidro-izoindol-2-il}-piperidin-2,6-dion kao beličasta čvrsta supstanca (69 mg, 30% prinos); mp, 135-137°C. HPLC (Waters Symmetry C-18, 3.9 X 150 mm, 5 µm, 1 mL/min, 240 nm,, izokratski na 23%/77% MeCN/0.1% H3PO4): 3.99 min (96.4%). HPLC (LC5 grad):4.69 min(95.5%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 6H, 2CH3), 1.91 - 2.06 (m, 1H, CHH), 2.40 - 2.48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2.52 - 2.64 (m, 3H, CHH, CH2), 2.83 - 3.01 (m, 1H, CHH), 3.76 (s, 2H, CH2), 4.21 - 4.47 (m, 3H, CH2), 5.11 (dd, J = 5.2, 13.3 Hz, 1H, NCH), 5.23 (s, 2H, CH2), 7.29 - 7.38 (m, 4H, Ar), 7.41 - 7.53 (m, 3H, Ar), 8.21 (s, 1H, NH).<13>C NMR (DMSO-d6) δ 11.53, 22.38, 28.21, 31.20, 34.96, 45.09, 46.17, 51.58, 52.12, 69.33, 115.00, 115.23, 127.77, 128.90, 129.78, 129.95, 133.31, 135.10, 138.67, 153.46, 163.65(iz HCOOH), 167.99, 170.95, 172.82. LC/MS m/e=496. Anal. izrač. za C27H33N3O4S: C, 65.43; H, 6.71; N, 8.48.
5.309 OGLEDI
5.309.1 Ogled inhibicije TNFα u hPMBC
[1184] Humane monojedarne ćelije periferne krvi (hPBMC) od normalnih donora dobijene su centrifugiranjem u gradijentu gustine Ficoll Hypaque (Pharmacia, Piscataway, NJ, USA). Ćelije su gajene na RPMI 1640 (Life Technologies, Grand Island, NY, USA) dopunjen sa 10% AB+humani serum (Gemini Bio-products, Woodland, CA, USA), 2 mM L-glutamin, 100 U/ml penicillin, i 100 µg/ml streptomicina (Life Technologies).
[1185] PBMC (2 x 10<5>ćelije) su nanete na Costar ploče za gajenje tkiva sa 96-ležišta sa ravnim dnom (Corning, NY, USA) u triplikatu. Ćelije su stimulisane sa LPS (od Salmonella abortus equi, Sigma kat.br. L-1887, St.Louis, MO, USA) u finalnoj koncentraciji do 1 ng/ml u odsustvu ili u prisustvu jedinjenja. Ovde obezbeđena jedinjenja su rastvorena u DMSO (Sigma), a dalja razblaženja su izvedena u medijumu kulture neposredno pre upotrebe. Finalna koncentracija DMSO u svim ogledima može da bude oko 0.25%. Jedinjenja su dodata u ćelije 1 h pre stimulacije sa LPS. Ćelije su zatim inkubirane 18-20 sati na 37°C u 5 % CO2, a zatim su sakupljeni supernatanti, razblaženi medijumom za gajenje i analizirani na TNFα nivoe pomoću ELISA (Endogen, Boston, MA, USA). IC50s su izračunate primenom nelinearne regresije, sigmoidalnog doznog-odgovora, ogranučavajući se na 100% i 0%, dozvoljavajući varijabilne nagibe (GraphPad Prism v3.02).
5.309.2 IL-2 i MIP-3α proizvodnja pomoću T Ćelija
[1186] Iz PBMC su odstranjeni adherentni monociti dodavanjem 1 x 10<8>PBMC u 10 ml kompletnog medijuma (RPMI 1640 u koji je dodat 10% fetalni goveđi serum inaktiviran toplotom, 2 mM L-glutamin, 100 U/ml penicillin, i 100 µg/ml streptomicin) po 10 cm suda za gajenje tkiva, na 37°C, 5 % CO2 inkubatoru tokom 30-60 minuta. Sud je ispran medijumom za uklanjanje svih neadherentnih PBMC. T ćelije su prečišćene negativnom selekcijom primenom sledeće smeše antitela (Pharmingen) i Dynabead (Dynal) za svaki 1 x 10<8>neadherentni PBMC: 0.3 ml Ovčije anti-mišje IgG perlice, 15 µl anti-CD16, 15 µl anti-CD33, 15 µl anti-CD56, 0.23 ml anti-CD 19 perlice, 0.23 ml anti-HLA klasa II perlica, i 56 µl anti-CD14 perlica. Ćelije i mešavina perlice/antitelo rotirana je od kraja do kraja tokom 30-60 minuta na 4°C. Prećišćene T ćelije uklonjene su sa perlica primenom Dynal magneta. Tipičan prinos iznosi oko 50% T ćelije, 87-95% CD3<+>procenjeno protočnom citometrijom.
[1187] Ploče za gajenje tkiva sa 96-ležišta, sa ravnim dnom, obložene su sa anti-CD3 antitelom OKT3 na 5 µg/ml u PBS-u, 100 µl po ležištu, inkubirane na 37°C, 3-6 sati, zatim isprane četiri puta kompletnim medijumom 100 µl/ležištu neposredno pre nego što su dodate T ćelije. Jedinjenja su razblažena do 20 puta finalne koncentracije na ploči sa 96-ležišta sa okruglim dnom. Finalne koncentracije iznose oko 10 µM do oko 0.00064 µM. Osnovni rastvor 10 mM ovde obezbeđenih jedinjenja razblaženo je u odnosu 1:50 u potpunosti za prvo 20x razblaženje od 200 µM u 2 % DMSO i serijski razblaženo u odnosu 1:5 u 2 % DMSO. Jedinjenje je dodato kao 10 µl po 200 µl kulture, pri čemu se dobija finalna koncentracija DMSO od 0.1 %. Kulture su inkubirane na 37°C, 5 % CO2 tokom 2-3 dana, a supernatanti su analizirani na IL-2 i MIP-3α pomoću ELISA (R&D Systems). Nivoi IL-2 i MIP-3α su normalizovani do količine dobijene u prisustvu količine ovde obezbeđenog jedinjenja, a EC50s su izračunate primenom ne-linearne regresije, sigmoidalnog doza-odgovora, ograničavajući se na gonjih 100 % i donjih 0 %, ostavljajući varijabilni nagib (GraphPad Prism v3.02).
5.309.3 Ogled ćeliiske proliferacije
[1188] Ćelijske linije (npr., Namalwa, MUTZ-5, UT-7, i različite NHL ćelijske linije) dobijene su od Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (Braunschweig, Germany). Ćelijska linija KG-1 je dobijena od American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA). Ćelijska proliferacija indikovana inkorporacijom<3>H- timidina, merena je u svim ćelijskim linijama kao što sledi.
[1189] Ćelije su nanete na ploče sa 96-ležišta sa po 6000 ćelija po ležištu u medijumu. Ćelije su prethodno tretirane jedinjenjima na oko 100, 10, 1, 0.1, 0.01, 0.001, 0.0001 i 0 µM u finalnoj koncentraciji od oko 0.25 % DMSO u triplikatu na 37°C u vlažnom inkubatoru pri 5 % CO2 tokom 72 sata. Zatim je u svako ležište dodata po jedna mikrokurija<3>H- timidina (Amersham), a ćelije su inkubirane ponovo na 37°C u vlažnom inkubatoru pri 5 % CO2tokom 6 sati. Ćelije su sakupljene na UniFilter GF/C filter pločama (Perkin Elmer) primenom uređaja za sakupljanje (Tomtec), a ploče su ostavljene da se suše preko noći. Dodat je Microscint 20 (Packard) (25 µl/ležište), a ploče su analizirane u TopCount NXT (Packard). Svako ležište je brojano jedan minut. Procenat inhibicije ćelijske proliferacije izračunat je usrednjavanjem svih triplikata i normalizovanjem do DMSO kontrole (0 % inhibicije). Svako jedinjenje je testirano u svakoj ćelijskoj liniji u tri odvojena eksperimenta. Finalne IC50s izračunate su primenom nelinearne regresije, sigmoidalnog doza-odgovora, ograničavajući gonji nivo na 100 % i donji na 0 %, dozvoljavajući varijablni nagib (GraphPad Prism v3.02).
5.309.4 Imunotaloženje i Imunoblot
[1190] Ćelije (npr., različite NHL ćelijske linije) tretirane su sa DMSO ili nekom količinom ovde obezbeđenog jedinjenja tokom 1 sata, a zatim stimulisane sa 10 U/ml Epo (R&D Systems) tokom 30 minuta. Ćelijski lizati su pripremljeni i bilo imunoistaloženi sa Epo receptorom Ab ili odmah razdvojeni pomoću SDS-PAGE. Imunoblotovi su testirani sa Akt, fosfo-Akt (Ser473 ili Tr308), fosfo-Gab1 (Y627), Gab1, IRS2, aktin i IRF-1 Abs i analizirani na Storm 860 Imager-u primenom ImageQuant softvera (Molecular Dynamics).
5.309.5 Analiza ćelijskog ciklusa
[1191] Ćelije su tretirane sa DMSO ili nekom količinom ovde obezbeđenog jedinjenja, preko noći. Bojenje ćelijskog ciklusa propidijum jodidom izvedeno je pomoću CycleTEST PLUS (Becton Dickinson) prema protokolu proizvođača. Posle bojenja, ćelije su analizirane pomoću FACSCalibur protočnog citometra primenom softvera ModFit LT (Becton Dickinson).
5.309.6 Analiza apoptoze
[1192] Ćelije su tretirane sa DMSO ili nekom količinom ovde opisanog jedinjenja u različitim vremenskim tačkama, zatim isprane puferom za ispiranje annexin-V (BD Biosciences). Ćelije su inkubirane sa vezujućim proteinom annexin-V i propidijum jodidom (BD Biosciences), 10 minuta. Uzorci su analizirani primenom protočne citometrije.
5.309.7 Ispitivanje luferaze
[1193] Namalwa ćelije su transfektovane sa 4 µg AP1- luciferaze (Stratagene) po 1 x 10<6>ćelija i 3 µl Lipofektamin 2000 (Invitrogen) reagense prema instrukcijama proizvođača. Šest sati nakon transfekcije, ćelije su tretirane sa DMSO ili nekom količinom ovde opisanog jedinjenja. Aktivnost
Luciferaze je anlaizirana korišćenjem pufera za liziju luciferaze i supstrata (Promega) i merene pomoću luminometra (Turner Designs).
5.309.8 TNFα Inhibicija
[1194] Primenom postupaka suštinski sličnim onima obezbeđenim u sekciji 5.309.1 iznad, određene su IC50 vrednosti za određena ovde obezbeđena jedinjenja za TNFα inhibiciju. Testirana jedinjenja uključuju jedinjenja Primera 5.2, 5.6-5.24, 5.33-5.46, 5.48-5.57, 5.59-5.63, 5.65-5.69, 5.71-5.90, 5.92-5.102, 5.105, 5.107-5.119 i 5.121-5.128.
[1195] Određene IC50vrednosti kretale su se od oko 0.02 nM do oko 2 µM. Ovi rezultati pokazuju da su ovde obezbeđena jedinjenja korisna kao inhibitori TNFα.
5.309.9 IL-2 Proizvodnja
[1196] Primenom postupaka suštinski sličnim onima opisanim u sekciji 5.309.2. iznad, takođe su određene EC50 vrednosti određenih ovde obezbeđenih jedinjenja za proizvodnju IL-2. Testirana jedinjenja uključuju jedinjenja Primera 5.2, 5.6-5.24, 5.33-5.46, 5.48-5.57, 5.59-5.63, 5.65-5.69, 5.71-5.90, 5.92-5.102, 5.105, 5.107-5.119 i 5.121-5.128.
[1197] Određene EC50vrednosti kretale su se od oko 0.01 nM do oko 1.4 µM. Ovi rezultati pokazuju da su ovde obezbeđena jedinjenja korisna kao stimulatori IL-2 proizvodnje.

Claims (6)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer, u kojoj: X je C=O ili CH2; R<1>je -Y-R<3>; R<2>je H ili (C1-C6)alkil; Y je: 6- do 10-člani aril, heteroaril ili heterocikl, od kojih svaki može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; R<3>je: -(CH2)n-aril, -O-(CH2)n-aril ili -(CH2)n-O-aril, gde je aril opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više od (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogenaa; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; -(CH2)n-heterocikl, -O-(CH2)n-heterocikl ili -(CH2)n-O-heterocikl, gde je heterocikl opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više od (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogenaa; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; ili -(CH2)n-heteroaril, -O-(CH2)n-heteroaril ili -(CH2)n-O-heteroaril, gde je heteroaril opciono supstituisan jednim ili više: (C1-C6)alkila, koji je sam opciono supstituisan jednim ili više halogena; (C1-C6)alkoksi, koji je sam supstituisan jednim ili više halogena; okso; amino; karboksil; cijano; hidroksil; halogen; deuterijum; 6- do 10-člani aril ili heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više od (C1-C6)alkila, (C1-C6)alkoksi ili halogenaa; -CONH2; ili -COO-(C1-C6)alkila, pri čemu alkil može biti opciono supstituisan jednim ili više halogena; i n je 0, 1, 2 ili 3; pri čemu izraz (C1-C6)alkil obuhvata (C3-6)cikloalkil.
  2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, u kojem X predstavlja CH2.
  3. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde Y predstavlja fenil, a R<3>je -(CH2)n-heterocikl; ili gde Y predstavlja heteroaril, a R<3>je -(CH2)n-heterocikl.
  4. 4. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je:
    ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer.
  5. 5. Farmaceutska kompozicija koja obuhvata jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-4, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili stereoizomer.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-5, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili stereoizomer za upotrebu u postupku tretiranja, vođenja ili preveniranja bolesti ili poremećaja, pri čemu je ta bolest ili poremećaj kancer, neki poremećaj povezan sa angiogenezom, bolom, makularnom degeneracijom ili povezanim sindromom, neka kožna bolest, neki plućni poremećaj, neki poremećaj povezan sa azbestom, neka parazitska bolest, poremećaj disfunkcionalnog spavanja ili neki povezani poremećaj, neka infektivna bolest, hemoglobinopatija ili povezani poremećaj, ili neki poremećaj povezan saTNFα.
RS20170700A 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene RS56232B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US30361810P 2010-02-11 2010-02-11
PCT/US2011/024269 WO2011100380A1 (en) 2010-02-11 2011-02-10 Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56232B1 true RS56232B1 (sr) 2017-11-30

Family

ID=43708752

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170700A RS56232B1 (sr) 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene
RSP20190965 RS59275B1 (sr) 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene
RS20190249A RS58523B1 (sr) 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kombinacije koje ih obuhvataju i postupci njihove upotrebe

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP20190965 RS59275B1 (sr) 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kompozicije koje ih obuhvataju i postupci njihove primene
RS20190249A RS58523B1 (sr) 2010-02-11 2011-02-10 Derivati arilmetoksi izoindolina i kombinacije koje ih obuhvataju i postupci njihove upotrebe

Country Status (33)

Country Link
US (8) US8518972B2 (sr)
EP (6) EP4289838A3 (sr)
JP (5) JP2013519675A (sr)
KR (2) KR101812356B1 (sr)
CN (2) CN102822165B (sr)
AR (1) AR081058A1 (sr)
AU (1) AU2011215877C1 (sr)
CA (1) CA2787823C (sr)
CO (1) CO6571916A2 (sr)
CR (1) CR20120414A (sr)
CY (3) CY1119177T1 (sr)
DK (3) DK3202461T3 (sr)
EC (1) ECSP12012098A (sr)
ES (5) ES2956743T3 (sr)
HR (3) HRP20171078T1 (sr)
HU (3) HUE042011T2 (sr)
IL (2) IL220992A (sr)
LT (3) LT3202461T (sr)
ME (2) ME02766B (sr)
MX (3) MX2012009237A (sr)
NI (1) NI201200132A (sr)
NZ (3) NZ601289A (sr)
PH (2) PH12012501607A1 (sr)
PL (3) PL2536706T3 (sr)
PT (3) PT2536706T (sr)
RS (3) RS56232B1 (sr)
RU (1) RU2567753C2 (sr)
SG (3) SG10202012179RA (sr)
SI (3) SI3202460T1 (sr)
SM (3) SMT201900420T1 (sr)
TR (1) TR201903027T4 (sr)
UA (2) UA114856C2 (sr)
WO (1) WO2011100380A1 (sr)

Families Citing this family (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2436387B1 (en) 2009-05-25 2018-07-25 Celgene Corporation Pharmaceutical composition comprising crbn for use in treating a disease of the cerebral cortex
SG10202012179RA (en) 2010-02-11 2021-01-28 Celgene Corp Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
WO2012135299A1 (en) 2011-03-28 2012-10-04 Deuteria Pharmaceuticals Inc 2',6'-dioxo-3'-deutero-piperdin-3-yl-isoindoline compounds
JP6016892B2 (ja) 2011-04-29 2016-10-26 セルジーン コーポレイション セレブロンを予測因子として使用する癌及び炎症性疾患の治療方法
ES3013301T3 (en) 2012-06-29 2025-04-11 Celgene Corp Methods for determining drug efficacy using ikzf3 (aiolos)
US20140343058A1 (en) * 2012-08-09 2014-11-20 Celgene Corporation Treatment of systemic lupus erythematosus
MX385058B (es) * 2012-08-09 2025-03-14 Celgene Corp Procesos para la preparacion de (s)-3-4-((4-(morfolinometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona y formas farmaceuticamente aceptables de la misma.
HRP20190398T1 (hr) * 2012-08-09 2019-05-17 Celgene Corporation Čvrsti oblik (s)-3-(4-((4-morfolinometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidroklorida
SG10202108516PA (en) * 2012-08-09 2021-09-29 Celgene Corp Methods of treating cancer using 3-(4-((4-(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione
MX373328B (es) * 2012-08-09 2020-05-04 Celgene Corp Tratamiento de enfermedades inmuno - relacionadas e inflamatorias.
US20150038511A1 (en) * 2012-08-09 2015-02-05 Celgene Corporation Treatment of immune-related and inflammatory diseases
US9587281B2 (en) 2012-08-14 2017-03-07 Celgene Corporation Cereblon isoforms and their use as biomarkers for therapeutic treatment
AU2013312188A1 (en) * 2012-09-10 2015-03-26 Celgene Corporation Methods for the treatment of locally advanced breast cancer
AU2013204922B2 (en) 2012-12-20 2015-05-14 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
JP6359563B2 (ja) 2013-01-14 2018-07-18 デュートルクス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＤｅｕｔｅＲｘ， ＬＬＣ ３−（５置換−４−オキソキナゾリン−３（４ｈ）−イル）−３−ジュウテロピペリジン−２，６−ジオン誘導体
WO2014116573A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Celgene Corporation Processes for the preparation of isotopologues of 3-(4-((4-(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione and pharmaceutically acceptable salts thereof
US9290475B2 (en) 2013-03-14 2016-03-22 Deuterx, Llc 3-(substituted-4-oxoquinazolin-3(4H)-yl)-3-deutero-piperidine-2,6-dione derivatives and compositions comprising and methods of using the same
WO2014152177A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Anthrogenesis Corporation Modified t lymphocytes
CN105358177B (zh) 2013-04-17 2018-11-23 西格诺药品有限公司 包含tor激酶抑制剂和imid化合物的联合疗法用于治疗癌症
UA117141C2 (uk) * 2013-10-08 2018-06-25 Селджин Корпорейшн Склади (s)-3-(4-((4-(морфолінометил)бензил)оксі)-1-оксоізоіндолін-2-іл)піперидин-2,6-діону
WO2015085172A2 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Celgene Corporation Methods for determining drug efficacy for the treatment of diffuse large b-cell lymphoma, multiple myeloma, and myeloid cancers
US20180228907A1 (en) 2014-04-14 2018-08-16 Arvinas, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
WO2015160845A2 (en) * 2014-04-14 2015-10-22 Arvinas, Inc. Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use
ES2969532T3 (es) 2014-05-19 2024-05-21 Celgene Corp 3-(4-((4-(Morfolinometil-bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona para el tratamiento de lupus eritematoso sistémico
EP3827836A1 (en) 2014-06-27 2021-06-02 Celgene Corporation Compositions and methods for inducing conformational changes in cereblon and other e3 ubiquitin ligases
SG11201700816YA (en) 2014-08-07 2017-02-27 Calithera Biosciences Inc Crystal forms of glutaminase inhibitors
US10034872B2 (en) 2014-08-22 2018-07-31 Celgene Corporation Methods of treating multiple myeloma with immunomodulatory compounds in combination with antibodies
DK3643709T3 (da) * 2014-10-30 2021-12-20 Kangpu Biopharmaceuticals Inc Isoindolinderivat, mellemprodukt, fremgangsmåde til fremstilling, farmaceutisk sammensætning og anvendelse deraf
HK1245791A1 (zh) 2015-01-20 2018-08-31 阿尔维纳斯运营股份有限公司 用於雄激素受体的靶向降解的化合物和方法
US12312316B2 (en) 2015-01-20 2025-05-27 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of androgen receptor
WO2016197114A1 (en) 2015-06-05 2016-12-08 Arvinas, Inc. Tank-binding kinase-1 protacs and associated methods of use
IL286788B2 (en) * 2015-07-21 2024-01-01 Immunogen Inc Methods of preparing cytotoxic benzodiazepine derivatives
US9809603B1 (en) 2015-08-18 2017-11-07 Deuterx, Llc Deuterium-enriched isoindolinonyl-piperidinonyl conjugates and oxoquinazolin-3(4H)-yl-piperidinonyl conjugates and methods of treating medical disorders using same
WO2017030814A1 (en) 2015-08-19 2017-02-23 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of bromodomain-containing proteins
US20180271849A1 (en) * 2015-09-29 2018-09-27 Kangpu Biopharmaceuticals, Ltd. Pharmaceutical composition and application thereof
WO2017117118A1 (en) 2015-12-28 2017-07-06 Celgene Corporation Compositions and methods for inducing conformational changes in cereblon and other e3 ubiquitin ligases
US10759808B2 (en) * 2016-04-06 2020-09-01 The Regents Of The University Of Michigan Monofunctional intermediates for ligand-dependent target protein degradation
MX384905B (es) * 2016-04-12 2025-03-14 Univ Michigan Regents Degradadores de proteínas de bromodominio y dominioextraterminal (bet).
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
US10584101B2 (en) 2016-10-11 2020-03-10 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of androgen receptor
SG11201903483VA (en) * 2016-10-28 2019-05-30 Icahn School Med Mount Sinai Compositions and methods for treating ezh2-mediated cancer
WO2018102067A2 (en) 2016-11-01 2018-06-07 Arvinas, Inc. Tau-protein targeting protacs and associated methods of use
MX2019004621A (es) 2016-11-02 2019-11-28 Engmab Sarl Anticuerpo biespecifico contra bcma y cd3 y un farmaco inmunologico para uso combinado en el tratamiento del mieloma multiple.
JP6957620B2 (ja) 2016-12-01 2021-11-02 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． エストロゲン受容体分解物質としてのテトラヒドロナフタレン誘導体およびテトラヒドロイソキノリン誘導体
CN110267659A (zh) 2016-12-08 2019-09-20 西奈山伊坎医学院 用于治疗cdk4/6介导的癌症的组合物和方法
WO2018108147A1 (zh) 2016-12-16 2018-06-21 康朴生物医药技术（上海）有限公司 一种组合、其应用及治疗方法
US11173211B2 (en) 2016-12-23 2021-11-16 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of rapidly accelerated Fibrosarcoma polypeptides
JP2020505327A (ja) 2016-12-23 2020-02-20 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． Ｅｇｆｒタンパク質分解標的化キメラ分子およびその関連する使用方法
KR20250117470A (ko) 2016-12-23 2025-08-04 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 급속 진행성 섬유육종 폴리펩티드의 표적화 분해를 위한 화합물 및 방법
EP3559006A4 (en) 2016-12-23 2021-03-03 Arvinas Operations, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR TARGETED DEGRADATION OF F TAL LIVER KINASE POLYPEPTIDES
US11191741B2 (en) 2016-12-24 2021-12-07 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of enhancer of zeste homolog 2 polypeptide
JP7266526B6 (ja) 2017-01-26 2024-02-15 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド エストロゲン受容体タンパク質分解性の調節因子およびその関連方法
EP3573979A1 (en) * 2017-01-27 2019-12-04 Celgene Corporation 3-(1-oxo-4-((4-((3-oxomorpholino) methyl)benzyl)oxy)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione and isotopologues thereof
CA3050309A1 (en) 2017-01-31 2018-08-09 Arvinas Operations, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
WO2018144832A1 (en) 2017-02-03 2018-08-09 Celgene Corporation Methods for measuring small molecule affinity to cereblon
CN110248662B (zh) * 2017-02-13 2022-08-16 康朴生物医药技术（上海）有限公司 一种治疗前列腺癌的组合、药物组合物及治疗方法
CN108929307A (zh) * 2017-05-22 2018-12-04 苏州偶领生物医药有限公司 一类异吲哚酮-酰亚胺环-1,3-二酮-2-烯化合物、其组合物和用途
TWI830576B (zh) 2017-07-10 2024-01-21 美商西建公司 抗增生化合物及其使用方法
MX2020002010A (es) 2017-08-21 2020-07-13 Celgene Corp Procesos para la preparacion de 4,5-diamino-5-oxopentanoato de (s)-terc-butilo.
US10513515B2 (en) * 2017-08-25 2019-12-24 Biotheryx, Inc. Ether compounds and uses thereof
US11833156B2 (en) 2017-09-22 2023-12-05 Jubilant Epipad LLC Heterocyclic compounds as pad inhibitors
WO2019077631A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Jubilant Biosys Limited IMIDAZO-PYRIDINE COMPOUNDS FOR USE AS PAD INHIBITORS
KR20200085836A (ko) 2017-11-06 2020-07-15 주빌런트 프로델 엘엘씨 Pd1/pd-l1 활성화 억제제로서의 피리미딘 유도체
EP3710443A1 (en) 2017-11-17 2020-09-23 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of interleukin-1 receptor-associated kinase 4 polypeptides
BR112020010322A2 (pt) 2017-11-24 2020-11-17 Jubilant Episcribe Llc composto da fórmula i; composto da fórmula ia; composto da fórmula ib; processo de preparação de compostos da fórmula i; composição farmacêutica; método para o tratamento e/ou prevenção de várias doenças; uso dos compostos; método para o tratamento de câncer; e método para o tratamento e/ou prevenção de uma afecção mediada por prmt5 ou um distúrbio proliferativo ou câncer
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
WO2019140380A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
CN111655685B (zh) 2018-01-25 2023-11-17 藤本株式会社 噻吩衍生物及其用途
US11220515B2 (en) 2018-01-26 2022-01-11 Yale University Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use
MX2020008718A (es) 2018-02-21 2020-12-07 Celgene Corp Anticuerpos de union a bcma y usos de los mismos.
AU2019231689A1 (en) 2018-03-06 2020-09-24 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Serine threonine kinase (AKT) degradation / disruption compounds and methods of use
CN112105610B (zh) 2018-03-13 2024-01-26 朱比连特普罗德尔有限责任公司 作为pd1/pd-l1相互作用/活化的抑制剂的双环化合物
JP7720698B2 (ja) 2018-04-04 2025-08-08 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド タンパク質分解の調節因子および関連する使用方法
SI3784663T1 (sl) * 2018-04-23 2023-11-30 Celgene Corporation Spojine substituiranega 4-aminoizoindolin-1,3-diona in njihova uporaba za zdravljenje limfoma
WO2019246570A1 (en) 2018-06-21 2019-12-26 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Wd40 repeat domain protein 5 (wdr5) degradation / disruption compounds and methods of use
PE20211388A1 (es) 2018-06-29 2021-07-27 Hoffmann La Roche Compuestos
EP3817822A4 (en) 2018-07-06 2022-07-27 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
WO2020012334A1 (en) * 2018-07-10 2020-01-16 Novartis Ag 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of ikaros family zinc finger 2 (ikzf2)-dependent diseases
WO2020023782A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Biotheryx, Inc. Bifunctional compounds as cdk modulators
WO2020041331A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 Arvinas Operations, Inc. Proteolysis targeting chimeric (protac) compound with e3 ubiquitin ligase binding activity and targeting alpha-synuclein protein for treating neurodegenerative diseases
CN112689627B (zh) * 2018-09-07 2022-03-29 南京明德新药研发有限公司 三环取代哌啶二酮类化合物
AU2019348094B2 (en) * 2018-09-30 2022-12-22 Shanghai Institute Of Materia Medica, Chinese Academy Of Sciences Isoindoline compound, preparation method, pharmaceutical composition and use thereof
BR112021006318A2 (pt) 2018-10-01 2021-07-06 Celgene Corp terapia de combinação para o tratamento de câncer
IL282886B2 (en) 2018-11-08 2025-07-01 Juno Therapeutics Inc Methods and combinations for T-cell therapy and modulation
CA3119773A1 (en) 2018-11-30 2020-06-04 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
EP3891128A4 (en) * 2018-12-05 2022-08-17 Vividion Therapeutics, Inc. SUBSTITUTED ISOINDOLINONES AS MODULATORS OF CEREBLON-MEDIATED NEOSUBSTRATE RECRUITMENT
WO2020114482A1 (zh) 2018-12-06 2020-06-11 中国科学院上海药物研究所 一类异吲哚啉类化合物、其制备方法、药物组合物及其应用
MX2021008295A (es) * 2019-01-09 2021-10-13 Celgene Corp Formas sólidas que comprenden (s)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin -3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fl uorobenzonitrilo y sales del mismo, composiciones que comprenden y métodos de utilización del mismo.
EA202191904A1 (ru) 2019-01-09 2021-10-04 Селджин Корпорейшн Фармацевтические композиции, содержащие (s)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)бензил)пиперазин-1-ил)-3-фторбензонитрил и способы их применения
EA202191903A1 (ru) 2019-01-09 2021-11-12 Селджин Корпорейшн Антипролиферативные соединения и вторые активные агенты для комбинированного применения
AR119715A1 (es) 2019-04-12 2022-01-05 Celgene Corp Métodos para tratar linfoma no hodgkin con el uso de 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((2-fluoro-4-((3-morfolinoazetidin-1-il)metil)bencil)amino)isoindolin-1,3-diona
CN114423463B (zh) 2019-05-06 2025-09-26 西奈山伊坎医学院 作为hpk1的降解剂的异双功能化合物
WO2021011913A1 (en) 2019-07-17 2021-01-21 Arvinas Operations, Inc. Tau-protein targeting compounds and associated methods of use
MX2022002415A (es) 2019-08-26 2022-03-22 Arvinas Operations Inc Metodos de tratamiento del cancer de mama con derivados de tetrahidronaftaleno como degradadores del receptor de estrogenos.
CN115397821B (zh) 2019-10-17 2024-09-03 阿尔维纳斯运营股份有限公司 含有与bcl6靶向部分连接的e3泛素连接酶结合部分的双官能分子
EP4048666A1 (en) * 2019-10-21 2022-08-31 Celgene Corporation Solid forms comprising (s)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-((2-fluoro-4-((3-morpholinoazetidin-1-yl)methyl)benzyl)amino)isoindoline-1,3-dione and salts thereof, and compositions comprising the same and their use
AU2020377930A1 (en) 2019-11-05 2022-05-19 Bristol-Myers Squibb Company Uses of anti-BCMA chimeric antigen receptors
KR20220122615A (ko) 2019-11-07 2022-09-02 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｔ 세포 요법 및 (ｓ)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디하이드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 병용
JP2023504445A (ja) 2019-11-27 2023-02-03 キャプター セラピューティクス エス．エー． セレブロンに結合するピペリジン－２，６－ジオン誘導体、及びその使用方法
EP4065576A1 (en) 2019-11-27 2022-10-05 Captor Therapeutics S.A. Piperidine-2, 6-dione derivatives which bind to cereblon, and methods of use thereof
EP4069245A1 (en) 2019-12-02 2022-10-12 Celgene Corporation Therapy for the treatment of cancer
CN115003295B (zh) * 2019-12-12 2025-05-06 冰洲石生物科技公司 具有雌激素受体降解活性的新型色满衍生物及其用途
JP2023509366A (ja) 2019-12-17 2023-03-08 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
AU2020410514A1 (en) * 2019-12-18 2022-06-30 Novartis Ag 3-(5-methoxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
PE20221582A1 (es) 2019-12-19 2022-10-06 Arvinas Operations Inc Compuestos y metodos para la degradacion dirigida de receptor de androgenos
EP4081518A4 (en) 2019-12-23 2023-12-27 Accutar Biotechnology, Inc. COMBINATIONS OF ESTROGEN RECEPTOR DEGRADERS AND CYCLIN-DEPENDENT KINASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF CANCER
EP4095132A1 (en) * 2020-01-20 2022-11-30 Kangpu Biopharmaceuticals, Ltd. Isoindoline derivative, and pharmaceutical composition and use thereof
CN113372327B (zh) * 2020-02-25 2023-07-18 上海科技大学 基于戊二酰亚胺骨架的化合物及其应用
WO2021222150A2 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Anwita Biosciences, Inc. Interleukin-2 polypeptides and fusion proteins thereof, and their pharmaceutical compositions and therapeutic applications
US20230172923A1 (en) 2020-04-30 2023-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cytokine-related adverse events
EP4146642A1 (en) 2020-05-09 2023-03-15 Arvinas Operations, Inc. Methods of manufacturing a bifunctional compound, ultrapure forms of the bifunctional compound, and dosage forms comprising the same
US12103924B2 (en) 2020-06-01 2024-10-01 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Mitogen-activated protein kinase kinase (MEK) degradation compounds and methods of use
CA3182867A1 (en) 2020-06-25 2021-12-30 Aarif Ahsan Methods for treating cancer with combination therapies
CN113896711A (zh) * 2020-07-06 2022-01-07 北京诺诚健华医药科技有限公司 杂环类免疫调节剂
CN115916768B (zh) * 2020-07-20 2024-12-24 江苏恒瑞医药股份有限公司 含硫异吲哚啉类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
US20240294489A1 (en) 2020-08-03 2024-09-05 Captor Therapeutics S.A. Low molecular weight protein degraders and their applications
WO2022047145A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Arvinas Operations, Inc. Rapidly accelerating fibrosarcoma protein degrading compounds and associated methods of use
US20230310478A1 (en) * 2020-09-02 2023-10-05 Ann And Robert H. Lurie Children's Hospital Of Chicago Methods and compositions for the treatment of pulmonary hypertension and cancer
IL301048A (en) 2020-09-11 2023-05-01 Bristol Myers Squibb Co Combination therapy for cancer
US12162859B2 (en) 2020-09-14 2024-12-10 Arvinas Operations, Inc. Crystalline and amorphous forms of a compound for the targeted degradation of estrogen receptor
WO2022066580A1 (en) * 2020-09-23 2022-03-31 Kinnate Biopharma Inc. Raf degrading compounds
AR123650A1 (es) 2020-10-02 2022-12-28 Celgene Corp Métodos para el tratamiento del lupus eritematoso sistémico y el uso de biomarcadores como un predictor de sensibilidad clínica a terapias
EP4241278A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Celgene Corporation Car t cell therapy in patients who have had prior anti-cancer alkylator therapy
CN112174976A (zh) * 2020-11-19 2021-01-05 江西中医药大学 从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素及其方法和在抗痛风性关节炎上的用途
WO2022146151A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Captor Therapeutics S.A. Novel compounds which bind to cereblon, and methods of use thereof
TW202241891A (zh) 2020-12-30 2022-11-01 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑及其用途
CN116669736B (zh) * 2021-01-05 2025-11-11 江苏恒瑞医药股份有限公司 稠杂环基取代的环己二酰亚胺衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
EP4277901A1 (en) 2021-01-13 2023-11-22 Monte Rosa Therapeutics, Inc. Isoindolinone compounds
US12171768B2 (en) 2021-02-15 2024-12-24 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK4 degraders and uses thereof
MX2023009178A (es) 2021-02-15 2023-08-21 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la cinasa 4 asociada al receptor de interleucina 1 (irak4) y usos de los mismos.
UY39671A (es) 2021-03-15 2022-10-31 Novartis Ag Derivados de pirazolopiridina y sus usos.
KR20230171440A (ko) * 2021-03-31 2023-12-20 듀크 스트리트 바이오 리미티드 약학적 화합물
CR20230516A (es) 2021-04-16 2024-01-23 Arvinas Operations Inc Moduladores de la proteólisis bcl6 y métodos de uso asociados
WO2022255890A1 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Captor Therapeutics S.A. Compounds which bind to cereblon, and use thereof
WO2022255889A1 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Captor Therapeutics S.A. Compounds which bind to cereblon, and use thereof
WO2022254362A1 (en) 2021-06-03 2022-12-08 Novartis Ag 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and medical uses thereof
CN115504963A (zh) * 2021-06-22 2022-12-23 苏州开拓药业股份有限公司 一种c-Myc蛋白降解剂
WO2023025136A1 (zh) * 2021-08-27 2023-03-02 杭州格博生物医药有限公司 异吲哚啉酮化合物及其用途
WO2023034411A1 (en) * 2021-09-01 2023-03-09 Oerth Bio Llc Compositions and methods for targeted degradation of proteins in a plant cell
AR127505A1 (es) 2021-10-29 2024-01-31 Kymera Therapeutics Inc Degradadores irak-4 y síntesis de los mismos
EP4467536A4 (en) 2022-01-19 2025-08-06 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co Ltd CRYSTALLINE FORM OF A SULFUR-CONTAINING ISOINDOLINE DERIVATIVE
WO2023147594A2 (en) 2022-01-31 2023-08-03 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
WO2023220655A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
KR20250008774A (ko) 2022-05-11 2025-01-15 셀진 코포레이션 T 세포 요법 및 그의 생산과 관련된 방법 및 용도
CN115160211B (zh) * 2022-06-23 2023-11-03 温州大学 一种异吲哚啉酮类化合物的绿色合成方法
EP4545524A1 (en) * 2022-06-24 2025-04-30 Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences Substituted 4-aminoisoindoline compound, preparation method therefor, pharmaceutical composition thereof, and use thereof
WO2024054591A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 Arvinas Operations, Inc. Rapidly accelerated fibrosarcoma (raf) degrading compounds and associated methods of use
WO2024064646A1 (en) 2022-09-20 2024-03-28 Celgene Corporation Salts and solid forms of (s)- or racemic 3-(4-((4-(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione and methods of using the same
EP4611798A1 (en) 2022-11-02 2025-09-10 Celgene Corporation Methods of treatment with t cell therapy and immunomodulatory agent maintenance therapy
EP4619399A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se New substituted tetrahydrobenzoxazepine
AU2024212035A1 (en) 2023-01-26 2025-08-14 Arvinas Operations, Inc. Cereblon-based kras degrading protacs ans uses related thereto
WO2024167423A1 (en) 2023-02-07 2024-08-15 Captor Therapeutics S.A. Gspt1 degrader compounds
WO2025042742A1 (en) 2023-08-18 2025-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising antibodies that bind bcma and cd3 and methods of treatment
WO2025076472A1 (en) 2023-10-06 2025-04-10 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapies with a cell therapy expressing a gprc5d-targeting car and related methods and uses
WO2025120113A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Celgene Corporation Therapy for the treatment of multiple myeloma
WO2025122895A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Arvinas Operations, Inc. Use of androgen receptor degrader for the treatment of spinal and bulbar muscular atrophy
WO2025195464A1 (zh) * 2024-03-21 2025-09-25 上海惠康济民生物医药技术有限公司 取代的异吲哚啉类化合物、制备方法、药物组合物及应用
WO2026022712A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Sanofi Cereblon ligase modulator and bcma nk cell engager combination therapy

Family Cites Families (110)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3536809A (en) 1969-02-17 1970-10-27 Alza Corp Medication method
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3845770A (en) 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
US3916899A (en) 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
US4008719A (en) 1976-02-02 1977-02-22 Alza Corporation Osmotic system having laminar arrangement for programming delivery of active agent
US4421865A (en) * 1981-06-08 1983-12-20 Standard Oil Company (Sohio) Selective hydrogen-deuterium interchange using ion exchange resins
US4994443A (en) 1982-12-20 1991-02-19 The Children's Medical Center Corporation Inhibition of angiogenesis
US5001116A (en) 1982-12-20 1991-03-19 The Children's Medical Center Corporation Inhibition of angiogenesis
KR890002631B1 (ko) 1984-10-04 1989-07-21 몬산토 캄파니 생물학적으로 활성인 소마토트로핀을 지속적으로 유리하는 조성물
IE58110B1 (en) 1984-10-30 1993-07-14 Elan Corp Plc Controlled release powder and process for its preparation
US5149820A (en) * 1987-03-11 1992-09-22 Norsk Hydro A.S. Deuterated compounds
US5073543A (en) 1988-07-21 1991-12-17 G. D. Searle & Co. Controlled release formulations of trophic factors in ganglioside-lipsome vehicle
IT1229203B (it) 1989-03-22 1991-07-25 Bioresearch Spa Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative.
PH30995A (en) 1989-07-07 1997-12-23 Novartis Inc Sustained release formulations of water soluble peptides.
US5120548A (en) 1989-11-07 1992-06-09 Merck & Co., Inc. Swelling modulated polymeric drug delivery device
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5733566A (en) 1990-05-15 1998-03-31 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Controlled release of antiparasitic agents in animals
AU1531492A (en) * 1991-02-14 1992-09-15 Rockefeller University, The Method for controlling abnormal concentration tnf alpha in human tissues
US5580578A (en) 1992-01-27 1996-12-03 Euro-Celtique, S.A. Controlled release formulations coated with aqueous dispersions of acrylic polymers
US5646154A (en) * 1992-10-07 1997-07-08 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical compositions for inhibiting the formation of tumor necrosis factor
TW333456B (en) 1992-12-07 1998-06-11 Takeda Pharm Ind Co Ltd A pharmaceutical composition of sustained-release preparation the invention relates to a pharmaceutical composition of sustained-release preparation which comprises a physiologically active peptide.
US5591767A (en) 1993-01-25 1997-01-07 Pharmetrix Corporation Liquid reservoir transdermal patch for the administration of ketorolac
US6087324A (en) 1993-06-24 2000-07-11 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
WO1995003009A1 (en) 1993-07-22 1995-02-02 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Method of treatment of macular degeneration
WO1995003807A1 (en) 1993-07-27 1995-02-09 The University Of Sydney Treatment of age-related macular degeneration
IT1270594B (it) 1994-07-07 1997-05-07 Recordati Chem Pharm Composizione farmaceutica a rilascio controllato di moguisteina in sospensione liquida
IT1274549B (it) 1995-05-23 1997-07-17 Indena Spa Uso di flavanolignani per la preparazione di medicamenti ad attivita' antiproliferativa nei tumori dell'utero,dell'ovaio e del seno
DE69632684T2 (de) 1995-06-27 2005-06-09 Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. Verfahren zur herstellung von zubereitungen mit verzögerter freisetzung
TW448055B (en) 1995-09-04 2001-08-01 Takeda Chemical Industries Ltd Method of production of sustained-release preparation
JP2909418B2 (ja) 1995-09-18 1999-06-23 株式会社資生堂 薬物の遅延放出型マイクロスフイア
US5980945A (en) 1996-01-16 1999-11-09 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifique S.A. Sustained release drug formulations
US5800819A (en) 1996-01-25 1998-09-01 National Institute For Pharmaceutical Research And Development Federal Ministry Of Science And Technology Piper guineense, pterocarpus osun, eugenia caryophyllata, and sorghum bicolor extracts for treating sickle cell disease
US6264970B1 (en) 1996-06-26 2001-07-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
US5635517B1 (en) 1996-07-24 1999-06-29 Celgene Corp Method of reducing TNFalpha levels with amino substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-YL)-1-oxo-and 1,3-dioxoisoindolines
US6281230B1 (en) 1996-07-24 2001-08-28 Celgene Corporation Isoindolines, method of use, and pharmaceutical compositions
EP1285916B1 (en) 1996-07-24 2010-03-10 Celgene Corporation Substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-phthalimides and -1-oxoisoindolines and method of reducing TNF alpha levels
HU228769B1 (en) 1996-07-24 2013-05-28 Celgene Corp Substituted 2(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phthalimides and -1-oxoisoindolines and their use for production of pharmaceutical compositions for mammals to reduce the level of tnf-alpha
US6419961B1 (en) 1996-08-29 2002-07-16 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained release microcapsules of a bioactive substance and a biodegradable polymer
CA2217134A1 (en) 1996-10-09 1998-04-09 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Sustained release formulation
ATE272394T1 (de) 1996-10-31 2004-08-15 Takeda Chemical Industries Ltd Zubereitung mit verzögerter freisetzung
ZA9711385B (en) 1996-12-20 1999-06-18 Takeda Chemical Industries Ltd Method of producing a sustained-release preparation
US5891474A (en) 1997-01-29 1999-04-06 Poli Industria Chimica, S.P.A. Time-specific controlled release dosage formulations and method of preparing same
BR9908811A (pt) * 1998-03-16 2000-12-05 Celgene Corp Composto, composição farmacêutica e seu uso no tratamento de mamìferos
US6613358B2 (en) 1998-03-18 2003-09-02 Theodore W. Randolph Sustained-release composition including amorphous polymer
US6015803A (en) 1998-05-04 2000-01-18 Wirostko; Emil Antibiotic treatment of age-related macular degeneration
KR19990085365A (ko) 1998-05-16 1999-12-06 허영섭 지속적으로 약물 조절방출이 가능한 생분해성 고분자 미립구 및그 제조방법
US6225348B1 (en) 1998-08-20 2001-05-01 Alfred W. Paulsen Method of treating macular degeneration with a prostaglandin derivative
US6001368A (en) 1998-09-03 1999-12-14 Protein Technologies International, Inc. Method for inhibiting or reducing the risk of macular degeneration
US6248363B1 (en) 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US7182953B2 (en) 1999-12-15 2007-02-27 Celgene Corporation Methods and compositions for the prevention and treatment of atherosclerosis restenosis and related disorders
DE60117486T2 (de) 2000-08-23 2006-11-16 General Electric Co. Spritzgegossene Keramik-Metallhalogenidbogenröhre mit einem nicht-konischen Ende
US6458810B1 (en) * 2000-11-14 2002-10-01 George Muller Pharmaceutically active isoindoline derivatives
US20030045552A1 (en) * 2000-12-27 2003-03-06 Robarge Michael J. Isoindole-imide compounds, compositions, and uses thereof
US20040190609A1 (en) 2001-11-09 2004-09-30 Yasuhiko Watanabe Moving picture coding method and apparatus
US7323479B2 (en) 2002-05-17 2008-01-29 Celgene Corporation Methods for treatment and management of brain cancer using 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methylisoindoline
US7968569B2 (en) 2002-05-17 2011-06-28 Celgene Corporation Methods for treatment of multiple myeloma using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione
US7393862B2 (en) 2002-05-17 2008-07-01 Celgene Corporation Method using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for treatment of certain leukemias
EP2272513A1 (en) 2002-05-17 2011-01-12 Celgene Corporation Pharmaceutical compositions for treating cancer
US7189740B2 (en) 2002-10-15 2007-03-13 Celgene Corporation Methods of using 3-(4-amino-oxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for the treatment and management of myelodysplastic syndromes
US20050203142A1 (en) 2002-10-24 2005-09-15 Zeldis Jerome B. Methods of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for treatment, modification and management of pain
US20040091455A1 (en) 2002-10-31 2004-05-13 Zeldis Jerome B. Methods of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for treatment and management of macular degeneration
US7563810B2 (en) 2002-11-06 2009-07-21 Celgene Corporation Methods of using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for the treatment and management of myeloproliferative diseases
UA83504C2 (en) 2003-09-04 2008-07-25 Селджин Корпорейшн Polymorphic forms of 3-(4-amino-1-oxo-1,3 dihydro-isoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione
JP4943845B2 (ja) 2003-09-17 2012-05-30 ザ ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ アズ リプレゼンティッド バイ ザ セクレタリー オブ ザ デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ サリドマイド類似体
US20050100529A1 (en) 2003-11-06 2005-05-12 Zeldis Jerome B. Methods of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for the treatment and management of asbestos-related diseases and disorders
CN101966183A (zh) 2003-12-02 2011-02-09 细胞基因公司 用于治疗和控制血红蛋白病和贫血病的方法和组合物
US20050143344A1 (en) 2003-12-30 2005-06-30 Zeldis Jerome B. Methods and compositions using immunomodulatory compounds for the treatment and management of central nervous system disorders or diseases
MXPA06010699A (es) 2004-03-22 2006-12-15 Celgene Corp Metodos de usos y composiciones que contienen compuestos inmunomoduladores para el tratamiento y manejo de enfermedades o alteraciones de la piel.
US20050222209A1 (en) 2004-04-01 2005-10-06 Zeldis Jerome B Methods and compositions for the treatment, prevention or management of dysfunctional sleep and dysfunctional sleep associated with disease
EP1755600A2 (en) 2004-04-23 2007-02-28 Celgene Corporation Methods of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for the treatment and management of pulmonary hypertension
CA2565447A1 (en) 2004-05-05 2005-12-01 Celgene Corporation Method of using and compositions comprising immunomodulatory compounds for the treatment and management of myeloproliferative diseases
CA2573764A1 (en) 2004-07-16 2006-02-23 Schering Corporation Hydantoin derivatives for the treatment of inflammatory disorders
US7244759B2 (en) 2004-07-28 2007-07-17 Celgene Corporation Isoindoline compounds and methods of making and using the same
US7405237B2 (en) 2004-07-28 2008-07-29 Celgene Corporation Isoindoline compounds and methods of their use
KR20070057907A (ko) * 2004-09-03 2007-06-07 셀진 코포레이션 치환된 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린의제조 방법
EP1814543A2 (en) 2004-11-12 2007-08-08 Celgene Corporation Methods and compositions using immunomodulatory compounds for treatment and management of parasitic diseases
AU2005309733A1 (en) 2004-11-23 2006-06-01 Celgene Corporation Methods and compositions using immunomodulatory compounds for treatment and management of central nervous system injury
US8394832B2 (en) 2004-12-01 2013-03-12 Celgene Corporation Methods and compositions using immunomodulatory compounds for the treatment of immunodeficiency disorders
BRPI0612803A2 (pt) 2005-06-30 2012-10-02 Celgene Corp processo para preparar um composto
WO2007027527A2 (en) * 2005-08-31 2007-03-08 Celgene Corporation Isoindole-imide compounds and compositions comprising and methods of using the same
JO3235B1 (ar) 2006-05-26 2018-03-08 Astex Therapeutics Ltd مركبات بيررولوبيريميدين و استعمالاتها
DK2076260T3 (da) 2006-09-15 2011-06-27 Celgene Corp N-methylaminomethyl-isoindol-forbindelser og sammensætninger, der indeholder disse, samt fremgangsmåder til deres anvendelse
JP2010506937A (ja) 2006-10-19 2010-03-04 セルジーン・コーポレーション スピロヘータ及びその他の偏性細胞内細菌性疾患の治療及び管理のために免疫調節化合物を用いる方法及び組成物
ES2601131T3 (es) * 2007-03-20 2017-02-14 Celgene Corporation Derivados de isoindolina 4'-O-sustituidos y composiciones que los comprenden y métodos de uso de los mismos
SG10202012179RA (en) 2010-02-11 2021-01-28 Celgene Corp Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
WO2012027065A2 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Celgene Corporation Combination therapy for treatment of disease
MX2013005434A (es) 2010-11-18 2013-09-26 Deuteria Pharmaceuticals Inc 3´ - deutero - polidomida.
WO2012079022A1 (en) 2010-12-10 2012-06-14 Concert Pharmaceuticals, Inc. Substituted dioxopiperidinyl phthalimide derivatives
WO2012135299A1 (en) 2011-03-28 2012-10-04 Deuteria Pharmaceuticals Inc 2',6'-dioxo-3'-deutero-piperdin-3-yl-isoindoline compounds
ES3013301T3 (en) 2012-06-29 2025-04-11 Celgene Corp Methods for determining drug efficacy using ikzf3 (aiolos)
US20140343058A1 (en) 2012-08-09 2014-11-20 Celgene Corporation Treatment of systemic lupus erythematosus
SG10202108516PA (en) 2012-08-09 2021-09-29 Celgene Corp Methods of treating cancer using 3-(4-((4-(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione
MX385058B (es) 2012-08-09 2025-03-14 Celgene Corp Procesos para la preparacion de (s)-3-4-((4-(morfolinometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona y formas farmaceuticamente aceptables de la misma.
MX373328B (es) 2012-08-09 2020-05-04 Celgene Corp Tratamiento de enfermedades inmuno - relacionadas e inflamatorias.
HRP20190398T1 (hr) 2012-08-09 2019-05-17 Celgene Corporation Čvrsti oblik (s)-3-(4-((4-morfolinometil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion hidroklorida
US20150038511A1 (en) 2012-08-09 2015-02-05 Celgene Corporation Treatment of immune-related and inflammatory diseases
US9587281B2 (en) 2012-08-14 2017-03-07 Celgene Corporation Cereblon isoforms and their use as biomarkers for therapeutic treatment
AU2013312188A1 (en) 2012-09-10 2015-03-26 Celgene Corporation Methods for the treatment of locally advanced breast cancer
WO2014116573A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Celgene Corporation Processes for the preparation of isotopologues of 3-(4-((4-(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione and pharmaceutically acceptable salts thereof
CN105050624A (zh) 2013-03-14 2015-11-11 细胞基因公司 利用阿普斯特来治疗银屑病关节炎的方法
CN105358177B (zh) 2013-04-17 2018-11-23 西格诺药品有限公司 包含tor激酶抑制剂和imid化合物的联合疗法用于治疗癌症
UA117141C2 (uk) 2013-10-08 2018-06-25 Селджин Корпорейшн Склади (s)-3-(4-((4-(морфолінометил)бензил)оксі)-1-оксоізоіндолін-2-іл)піперидин-2,6-діону
WO2015085172A2 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Celgene Corporation Methods for determining drug efficacy for the treatment of diffuse large b-cell lymphoma, multiple myeloma, and myeloid cancers
US9415049B2 (en) 2013-12-20 2016-08-16 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
ES2969532T3 (es) 2014-05-19 2024-05-21 Celgene Corp 3-(4-((4-(Morfolinometil-bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona para el tratamiento de lupus eritematoso sistémico
EP3827836A1 (en) 2014-06-27 2021-06-02 Celgene Corporation Compositions and methods for inducing conformational changes in cereblon and other e3 ubiquitin ligases
EP3188745A1 (en) 2014-08-15 2017-07-12 Celgene Corporation Dosage titration of apremilast for the treatment of diseases ameliorated by pde4 inhibition
WO2016060702A1 (en) 2014-10-13 2016-04-21 Celgene Corporaton Methods for treating solid tumors and the use of biomarkers as a predictor of clinical sensitivity to immunomodulatory therapies
DK3643709T3 (da) 2014-10-30 2021-12-20 Kangpu Biopharmaceuticals Inc Isoindolinderivat, mellemprodukt, fremgangsmåde til fremstilling, farmaceutisk sammensætning og anvendelse deraf
US9717745B2 (en) 2015-03-19 2017-08-01 Zhejiang DTRM Biopharma Co. Ltd. Pharmaceutical compositions and their use for treatment of cancer and autoimmune diseases

Also Published As

Publication number Publication date
PL3202460T3 (pl) 2019-12-31
EP3202460A1 (en) 2017-08-09
MX337169B (es) 2016-02-16
NI201200132A (es) 2013-04-22
ES2956743T3 (es) 2023-12-27
JP2017200944A (ja) 2017-11-09
CA2787823C (en) 2018-04-10
HUE042011T2 (hu) 2019-06-28
LT3202461T (lt) 2019-04-25
EP4289838A3 (en) 2024-03-13
CN102822165A (zh) 2012-12-12
PH12012501607A1 (en) 2012-10-22
US9828361B2 (en) 2017-11-28
CR20120414A (es) 2012-10-31
LT2536706T (lt) 2017-10-25
US20130324518A1 (en) 2013-12-05
EP3202461B1 (en) 2018-12-26
PL3202461T3 (pl) 2019-07-31
EP3599236B1 (en) 2023-08-23
RS58523B1 (sr) 2019-04-30
PT2536706T (pt) 2017-07-20
CN104693193B (zh) 2018-09-18
PH12014501082B1 (en) 2015-09-28
SI3202460T1 (sl) 2019-10-30
UA114856C2 (uk) 2017-08-10
SMT201900155T1 (it) 2019-05-10
RS59275B1 (sr) 2019-10-31
JP2017031165A (ja) 2017-02-09
US8518972B2 (en) 2013-08-27
KR101812356B1 (ko) 2017-12-26
US11414399B2 (en) 2022-08-16
MX367522B (es) 2019-08-26
ES2713482T3 (es) 2019-05-22
US20160159768A1 (en) 2016-06-09
EP3106460A1 (en) 2016-12-21
AU2011215877C1 (en) 2017-01-19
JP2013519675A (ja) 2013-05-30
CN102822165B (zh) 2015-02-25
CY1119177T1 (el) 2018-02-14
CA2787823A1 (en) 2011-08-18
EP3106460B1 (en) 2019-04-10
DK2536706T3 (en) 2017-08-14
ES2638517T3 (es) 2017-10-23
KR20180000338A (ko) 2018-01-02
SI2536706T1 (sl) 2017-10-30
JP2016172746A (ja) 2016-09-29
JP6215976B2 (ja) 2017-10-18
US20190135780A1 (en) 2019-05-09
JP2016106106A (ja) 2016-06-16
DK3202460T3 (da) 2019-07-29
CN104693193A (zh) 2015-06-10
NZ700054A (en) 2016-03-31
ME02766B (me) 2018-01-20
DK3202461T3 (en) 2019-03-18
AU2011215877B2 (en) 2013-11-07
UA115220C2 (uk) 2017-10-10
US20160159772A1 (en) 2016-06-09
TR201903027T4 (tr) 2019-03-21
NZ601289A (en) 2014-10-31
US9309219B2 (en) 2016-04-12
EP3202461A1 (en) 2017-08-09
CY1121858T1 (el) 2020-10-14
NZ717149A (en) 2017-06-30
ME03441B (me) 2020-01-20
MX2012009237A (es) 2012-08-23
PT3202460T (pt) 2019-08-05
EP2536706B1 (en) 2017-06-14
JP6270944B2 (ja) 2018-01-31
US9822094B2 (en) 2017-11-21
US20180037567A1 (en) 2018-02-08
KR101931468B1 (ko) 2018-12-20
PH12014501082A1 (en) 2015-09-28
HRP20171078T1 (hr) 2017-10-06
AU2011215877A1 (en) 2012-08-16
ECSP12012098A (es) 2012-10-30
US20200231567A1 (en) 2020-07-23
SG10201501062SA (en) 2015-04-29
SG10202012179RA (en) 2021-01-28
PT3202461T (pt) 2019-03-19
LT3202460T (lt) 2019-10-10
ES2738776T3 (es) 2020-01-27
ES2730763T3 (es) 2019-11-12
EP3599236A1 (en) 2020-01-29
US10669257B2 (en) 2020-06-02
US20220411402A1 (en) 2022-12-29
EP4289838A2 (en) 2023-12-13
HRP20191312T1 (hr) 2019-10-18
SG183257A1 (en) 2012-09-27
IL248843A0 (en) 2017-01-31
US20110196150A1 (en) 2011-08-11
IL248843B (en) 2019-12-31
WO2011100380A1 (en) 2011-08-18
CY1121729T1 (el) 2020-07-31
US10189814B2 (en) 2019-01-29
SMT201900420T1 (it) 2019-11-13
SMT201700360T1 (it) 2017-09-07
KR20130010888A (ko) 2013-01-29
PL2536706T3 (pl) 2017-10-31
IL220992A (en) 2016-11-30
SI3202461T1 (sl) 2019-05-31
HRP20190368T1 (hr) 2019-04-19
RU2012138709A (ru) 2014-03-20
RU2567753C2 (ru) 2015-11-10
HUE044652T2 (hu) 2019-11-28
CO6571916A2 (es) 2012-11-30
EP2536706A1 (en) 2012-12-26
AR081058A1 (es) 2012-06-06
EP3202460B1 (en) 2019-06-12
HUE033009T2 (en) 2017-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11414399B2 (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK40105123A (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
AU2016203826A1 (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK40020802A (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK40020802B (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1242245B (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1242246A1 (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1242245A1 (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1242246B (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1231872A1 (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1179604B (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
HK1179604A (en) Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same