CN112174976A - 从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素及其方法和在抗痛风性关节炎上的用途 - Google Patents
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Abstract
从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素及其方法和在抗痛风性关节炎上的用途,本发明的提取工艺,以水芹菜为原料,综合采用乙醇回流提取,硅胶柱色谱、凝胶色谱和液相色谱制备等步骤协同配合的方式,从活性部位中成功分离得到了一种新二苯并呋喃型木脂素。提取得到的成品化合物结构新颖,提取方法简便快捷、易于操作、且产率较高。本发明还基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜中提取到的新二苯并呋喃型木脂素对小鼠血清中IL‑1β和TNF‑α水平的影响,评价其抗痛风性关节炎活性。首次公开了新二苯并呋喃型木脂素在制备抗痛风性关节炎药物方面的用途,为今后临床抗痛风性关节炎治疗药物的研究和开发奠定了基础。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体的说是一种从水芹菜中分离得到的一种新二苯并呋喃型木脂素及其制备方法,以及该化合物在制备抗痛风性关节炎药物方面的用途。
背景技术
水芹菜(Oenanthe Javanica)又名水芹、野芹等,一般生长在低洼湿地、浅水沼泽或河流岸边。它属于伞形科多年生宿根草本水生植物,茎细长,中空,具有匍匐性,各节间均能生根形成新株,是一种我国传统特色水生蔬菜。水芹菜药用历史悠久,历代文献记载水芹菜具有清热利水、化痰下气、祛瘀止带、解毒消肿、清肝利胆等功效,主治黄疸、驱风等症。
近年来,国内外对水芹菜的化学成分研究较为活跃,其主要化学成分有黄酮、生物碱、香豆素、挥发油、糖、脂肪酸、蛋白质、氨基酸等。现代药理研究发现,水芹菜还具有降血压、降血脂、降血糖、抗癌、神经保护、抗肝炎等作用。为了进一步对水芹菜这一丰富自然资源进行开发利用,本发明采用生物活性指导分离的方法,从水芹菜中分离出了一种用于治疗抗痛风性关节炎的新二苯并呋喃型木脂素,迄今在国内外上尚未见有关于从水芹菜中提取新二苯并呋喃型木脂素及活性相关的文献和专利报道。
发明内容
本发明的技术目的为:以药食两用的水芹菜为原料,通过工艺简单、提取方便的工艺方法从水芹菜中分离纯化出一种新的二苯并呋喃型木脂素,并提供了该化合物在制备抗痛风性关节炎药物中的用途。
为实现上述目的,本发明采取了以下技术方案:从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素,该二苯并呋喃型木脂素的化学名称为:2-丙烯基-3,4-(9-异丙醇基-呋喃)-5-甲氧基-5'-(4''-羟基-3'',5''-二甲氧基苯基)-4'-甲醇基-2′,3′-(11',12'-二甲基-8',9'-二羰基)-1,1'-二苯并呋喃型木脂素,分子式为C35H34O10,结构式如下:
一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,包括以下步骤:
(1)、取干燥的水芹菜粉碎成粗制颗粒,之后,采用质量浓度为70-90%的乙醇于加热条件下进行多次回流提取,合并所得提取液,备用;
(2)、将步骤(1)制得的提取液转置于温度为40-60 ℃的真空条件下进行浓缩干燥,制得干燥的总稠膏,备用;
(3)、按照体积比为1:(0.9-1.3)的比例,将步骤(2)制得的总稠膏加入蒸馏水中,超声分散后,制得总稠膏均匀混悬于水中的分散液,之后,依次用环己烷、乙酸乙酯和正丁醇对分散液进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位,备用;
(4)、将步骤(3)得到的乙酸乙酯部位上硅胶柱,然后依次采用体积比为12:1~3:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱,分别得到A、B、C、D共4个馏分;
(5)、将步骤(4)得到的馏分D上硅胶柱,然后依次采用体积比为4:1~2:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱,分别得到D-1、D-2、D-3共3个亚馏分;
(6)、将步骤(5)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,然后采用质量浓度为95%的MeOH溶液进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到D-1-1、D-1-2、D-1-3共3个次馏分;
(7)、将步骤(6)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和Sephadex LH-20凝胶柱进行分离纯化,之后,通过制备液相YMC-Pack ODS-A 柱,分离纯化后,即得淡黄色固体状的二苯并呋喃型木脂素。
进一步的,在步骤(1)中,所述水芹菜粉碎后所得粗制颗粒的粒径为70-100目。
进一步的,在步骤(1)中,所述回流提取的次数物3-5次,且每次回流提取的时间为4h。
进一步的,在步骤(4)中,所采用硅胶柱内填料的粒径为100-200目。
进一步的,在步骤(5)中,所采用硅胶柱内填料的粒径为200-300 目。
进一步的,在步骤(7)中,所述液相柱的色谱条件为:吸收波长:202-350 nm,流动相:15-40%甲醇。
进一步的,在步骤(7)中,所述液相YMC-Pack ODS-A 柱的型号为250 × 10 mm,S-5 μm, 12 nm。
所述的从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素在制备抗痛风性关节炎药物中的应用。
本发明的有益效果:
本发明的提取工艺,以药食两用蔬菜——水芹菜为原料,综合采用乙醇回流提取,硅胶柱色谱、凝胶色谱和液相色谱制备等步骤协同配合的方式,从活性部位中成功分离得到了一种新二苯并呋喃型木脂素。提取得到的成品化合物结构新颖,提取方法简便快捷、易于操作、且产率较高。本发明还基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜中提取到的新二苯并呋喃型木脂素对小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平的影响,评价其抗痛风性关节炎活性。首次公开了新二苯并呋喃型木脂素在制备抗痛风性关节炎药物方面的用途,为今后临床抗痛风性关节炎治疗药物的研究和开发奠定了基础。
附图说明
图1是本发明实施例1所制备新单体化合物Ⅰ的流程图;
图2是本发明实施例1所制备新单体化合物Ⅰ的偶联相关图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的说明,但不能作为对本发明保护范围的限定。
本发明主要在于提供一种从水芹菜中分离得到的新二苯并呋喃型木脂素,以及该化合物的制备方法和抗痛风性关节炎活性。所述的新化合物是从水芹菜中分离得到的。
新单体化合物Ⅰ的名称为:2-丙烯基-3,4-(9-异丙醇基-呋喃)-5-甲氧基-5'-(4''-羟基-3'',5''-二甲氧基苯基)-4'-甲醇基-2′,3′-(11',12'-二甲基-8',9'-二羰基)-1,1'-二苯并呋喃型木脂素
新单体化合物Ⅰ分子式:C35H34O10
新单体化合物Ⅰ结构式:
为得到上述新单体化合物Ⅰ,本发明所述的制备方法包括以下步骤:
(1)将干燥的水芹菜粉碎成粗品(70-100目),用70-90%乙醇加热回流提取3-5次(4小时/次)得到总提取液;
(2)将步骤(1)得到提取液在低温(40-60 ℃)真空条件下浓缩干燥,得到干燥总稠膏;
(3)将步骤(2)得到的总稠膏均匀混悬于水中(体积比=1:0.9-1.3,V/V),依次用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位,备用;
(4)采用生物活性指导分离的方法,基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜不同萃取部位对小鼠血清中 IL-1β和TNF-α水平的影响,确定步骤(3)中的乙酸乙酯部位为抗痛风性关节炎活性部位;
(5)将步骤(4)得到的乙酸乙酯部位上硅胶(100-200 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(12:1→3:1,V/V)进行梯度洗脱,得到4个馏分A、B、C、D。对这4个馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(6)将步骤(5)得到活性馏分D上硅胶(200-300 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(4:1→2:1)进行梯度洗脱得到亚馏分D-1、D-2、D-3;对这3个亚馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定亚D-1馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(7)将步骤(6)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,用95%MeOH进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到次馏分D-1-1、D-1-2、D-1-3;对这3个次馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D-1-2为抗痛风性关节炎活性次馏分;
(8)将步骤(7)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和凝胶柱进行分离纯化,通过制备液相分离(波长:202-350 nm,流动相:15%-40%甲醇,YMC-Pack ODS-A 柱:250 × 10 mm, S-5μm, 12 nm),最终得到淡黄色固体状的新单体化合物Ⅰ——二苯并呋喃型木脂素。
实施例1:
新单体化合物Ⅰ的制备:
(1)将干燥的水芹菜(20.0千克)粉碎成粗品(90目),用85%乙醇加热回流提取3次(4小时/次)得到总提取液;
(2)将步骤(1)得到提取液在低温(50 ℃)真空条件下浓缩干燥,得到干燥总稠膏(1.9千克);
(3)将步骤(2)得到的总稠膏均匀混悬于水中(体积比=1:1,V/V),依次用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷萃取部位(79.4克)、乙酸乙酯萃取部位(298.6克)、正丁醇萃取部位(462.5克);
(4)采用生物活性指导分离的方法,基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜不同萃取部位对小鼠血清中 IL-1β和TNF-α水平的影响,确定乙酸乙酯萃取部位为抗痛风性关节炎活性部位;
(5)将步骤(4)得到的乙酸乙酯部位上硅胶(100-200 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(12:1→3:1,V/V)进行梯度洗脱,得到4个馏分A(40.2克)、B(61.6克)、C(75.9克)、D(56.5克)。对这4个馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(6)将步骤(5)得到活性馏分D上硅胶(200-300 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(4:1→2:1)进行梯度洗脱得到亚馏分D-1(13.5克)、D-2(20.2克)、D-3(11.7克);对这3个亚馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定亚D-1馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(7)将步骤(6)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,用95%MeOH进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到次馏分D-1-1(4.1克)、D-1-2(5.5克)、D-1-3(3.2克);对这3个次馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D-1-2为抗痛风性关节炎活性次馏分;
(8)将步骤(7)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和凝胶柱进行分离纯化,通过制备液相分离(波长:210 nm,流动相:28%甲醇,YMC-Pack ODS-A 柱:250 × 10 mm, S-5 μm, 12nm),最终得到新单体化合物Ⅰ(8.24毫克)。
本实施例制得的新单体化合物Ⅰ的性状为淡黄色固体,HR-ESI-MS m/z 637.2053[M+Na]+提示其分子式为C35H34O10(calcd. for C35H34O10Na,637.2050)。化合物Ⅰ的UV(MeOH) λ max: 202、210、280 nm;IRν max: 3318、1660、1650、1525、1383 cm-1;1H NMR(CD3COCD3,400 MHz)和13C NMR(CD3COCD3,100 MHz)数据见下表1。根据新单体化合物Ⅰ的波谱数据和HMBC和1H-1H COSY偶联相关信息(图2),经SciFinder检索,鉴定化合物Ⅰ为一个新二苯并呋喃型木脂素。
表1化合物Ⅰ的1H NMR(400 MHz, CD3COCD3)、13C NMR(100 MHz, CD3COCD3)和HMBC相关数据
实施例2:
新单体化合物Ⅰ的制备:
(1)将干燥的水芹菜(20.0千克)粉碎成粗品(100目),用90%乙醇加热回流提取4次(4小时/次)得到总提取液;
(2)将步骤(1)得到提取液在低温(60 ℃)真空条件下浓缩干燥,得到干燥总稠膏(2.1千克);
(3)将步骤(2)得到的总稠膏均匀混悬于水中(体积比=1:0.9,V/V),依次用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷萃取部位(83.42克)、乙酸乙酯萃取部位(302.4克)、正丁醇萃取部位(453.9克);
(4)采用生物活性指导分离的方法,基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜不同萃取部位对小鼠血清中 IL-1β和TNF-α水平的影响,确定乙酸乙酯萃取部位为抗痛风性关节炎活性部位;
(5)将步骤(4)得到的乙酸乙酯部位上硅胶(100-200 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(12:1→3:1,V/V)进行梯度洗脱,得到4个馏分A(36.8克)、B(66.2.6克)、C(72.5克)、D(60.1克)。对这4个馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(6)将步骤(5)得到活性馏分D上硅胶(200-300 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(4:1→2:1)进行梯度洗脱得到亚馏分D-1(15.1克)、D-2(19.6克)、D-3(12.5克);对这3个亚馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定亚D-1馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(7)将步骤(6)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,用95%MeOH进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到次馏分D-1-1(3.9克)、D-1-2(5.8克)、D-1-3(3.9克);对这3个次馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D-1-2为抗痛风性关节炎活性次馏分;
(8)将步骤(7)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和凝胶柱进行分离纯化,通过制备液相分离(波长:210 nm,流动相:28%甲醇,YMC-Pack ODS-A 柱:250 × 10 mm, S-5 μm, 12nm),最终得到新单体化合物Ⅰ(8.31毫克)。
实施例3:
新单体化合物Ⅰ的制备:
(1)将干燥的水芹菜(20.0千克)粉碎成粗品(70目),用70%乙醇加热回流提取5次(4小时/次)得到总提取液;
(2)将步骤(1)得到提取液在低温(40 ℃)真空条件下浓缩干燥,得到干燥总稠膏(1.7千克);
(3)将步骤(2)得到的总稠膏均匀混悬于水中(体积比=1:1.3,V/V),依次用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷萃取部位(77.6克)、乙酸乙酯萃取部位(300.1克)、正丁醇萃取部位(466.4克);
(4)采用生物活性指导分离的方法,基于小鼠踝关节注射尿酸钠结晶建立痛风性关节炎模型,测定水芹菜不同萃取部位对小鼠血清中 IL-1β和TNF-α水平的影响,确定乙酸乙酯萃取部位为抗痛风性关节炎活性部位;
(5)将步骤(4)得到的乙酸乙酯部位上硅胶(100-200 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(12:1→3:1,V/V)进行梯度洗脱,得到4个馏分A(41.3克)、B(60.6克)、C(76.8克)、D(55.4克)。对这4个馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(6)将步骤(5)得到活性馏分D上硅胶(200-300 目)柱,用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统(4:1→2:1)进行梯度洗脱得到亚馏分D-1(14.8克)、D-2(22.1克)、D-3(10.9克);对这3个亚馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定亚D-1馏分为抗痛风性关节炎活性馏分;
(7)将步骤(6)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,用95%MeOH进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到次馏分D-1-1(4.3克)、D-1-2(6.1克)、D-1-3(3.4克);对这3个次馏分进行抗痛风性关节炎活性部位筛选,确定D-1-2为抗痛风性关节炎活性次馏分;
(8)将步骤(7)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和凝胶柱进行分离纯化,通过制备液相分离(波长:210 nm,流动相:28%甲醇,YMC-Pack ODS-A 柱:250 × 10 mm, S-5 μm, 12nm),最终得到新单体化合物Ⅰ(8.12毫克)。
对本发明实施例1所制备的化合物Ⅰ进行抗痛风性关节炎活性筛选实验研究:
(1)实验材料
SPF级小鼠;IL-1β ELISA试剂盒;TNF-α ELISA试剂盒;酶标仪;生物显微镜;高速冷冻离心机;CMC-Na溶液(0.5%);MSU溶液(3 mg/m L)。
(2)造模及给药
将小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、新单体化合物Ⅰ,并标记。将空白组、模型组灌胃 0.5%CMC-Na溶液,其它组给药相应剂量,连续给药5天,给药体积为 0.1 m L/10 g。给药第3天后开始造模,将小鼠后踝关节弯曲成直角,充分暴露出踝关节与胫腓骨之间的间隙,局部消毒后,用针头以45°自两骨突间进针,感觉有突破感后,证明针头进入踝关节内。空白组注射等量生理盐水,除空白组外的其它给药组均注射50 μL的MSU溶液。注射MSU溶液后,观察造模侧后踝关节,如有明显肿胀,即表明造模成功。
(3)样本的采集与处理
造模9 h后眼眶取血,取血量大于0.1 m L,置于冰水浴。以4000 r/min的转速离心5min,取上清液,按照IL-1β试剂盒的方法检测血清中 IL-1β和 TNF-α蛋白水平。实验数据用平均值±标准误差(Mean±SE)表示,并用SPSS 17.0分析,经方差齐性检验,F>0.05,可进行方差分析。组间采用双尾t检验比较,单因素方差分析LSD检验辨别多组间是否有统计意义,P<0.05为差异具有统计学意义。
(4)实验结果
实验结果表明,模型组小鼠血清中的IL-1β浓度和TNF-α浓度均显著上升(P<0.001,P<0.001)。与模型组相比,阳性组和新单体化合物Ⅰ的IL-1β水平均明显减小(P<0.001,P<0.01);另外,阳性组和新单体化合物Ⅰ可以明显抑制炎性因子 TNF-α的释放(P<0.001,P<0.05) (表2)。因此,新单体化合物Ⅰ具有一定的抗痛风性关节炎活性。这为新单体化合物Ⅰ在制备抗痛风性关节炎药物方面奠定了重要的理论基础。
表2新单体化合物Ⅰ对小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平的影响
注:与空白组比较,###p<0.001;与模型组比较, *p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
Claims (9)
2.一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、取干燥的水芹菜粉碎成粗制颗粒,之后,采用质量浓度为70-90%的乙醇于加热条件下进行多次回流提取,合并所得提取液,备用;
(2)、将步骤(1)制得的提取液转置于温度为40-60 ℃的真空条件下进行浓缩干燥,制得干燥的总稠膏,备用;
(3)、按照体积比为1:(0.9-1.3)的比例,将步骤(2)制得的总稠膏加入蒸馏水中,超声分散后,制得总稠膏均匀混悬于水中的分散液,之后,依次用环己烷、乙酸乙酯和正丁醇对分散液进行萃取,并将所得各部位萃取液进行旋蒸干燥,分别得到环己烷部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位,备用;
(4)、将步骤(3)得到的乙酸乙酯部位上硅胶柱,然后依次采用体积比为12:1~3:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱,分别得到A、B、C、D共4个馏分;
(5)、将步骤(4)得到的馏分D上硅胶柱,然后依次采用体积比为4:1~2:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱,分别得到D-1、D-2、D-3共3个亚馏分;
(6)、将步骤(5)得到的亚馏分D-1上Sephadex LH-20凝胶柱,然后采用质量浓度为95%的MeOH溶液进行洗脱,洗脱后根据色带颜色,得到D-1-1、D-1-2、D-1-3共3个次馏分;
(7)、将步骤(6)得到的次馏分D-1-2,反复上硅胶柱和Sephadex LH-20凝胶柱进行分离纯化,之后,通过制备液相YMC-Pack ODS-A 柱,分离纯化后,即得淡黄色固体状的二苯并呋喃型木脂素。
3.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述水芹菜粉碎后所得粗制颗粒的粒径为70-100目。
4.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述回流提取的次数物3-5次,且每次回流提取的时间为4h。
5.根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(4)中,所采用硅胶柱内填料的粒径为100-200目。
6.根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(5)中,所采用硅胶柱内填料的粒径为200-300 目。
7.根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(7)中,所述液相柱的色谱条件为:吸收波长:202-350 nm,流动相:15-40%甲醇。
8.根据权利要求1所述的一种从水芹菜中分离二苯并呋喃型木脂素的方法,其特征在于:在步骤(7)中,所述液相YMC-Pack ODS-A 柱的型号为250 × 10 mm,S-5 μm, 12 nm。
9.权利要求1所述的从水芹菜中分离的二苯并呋喃型木脂素在制备抗痛风性关节炎药物中的用途。
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|---|---|
| CN (1) | CN112174976A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118001268A (zh) * | 2024-04-08 | 2024-05-10 | 江西中医药大学 | 一种苯并呋喃木脂素类化合物的应用及其制备方法 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007010307A1 (en) * | 2005-07-19 | 2007-01-25 | Pharma Mar, S.A. | Antineoplastic compounds |
| CN101204429A (zh) * | 2006-12-21 | 2008-06-25 | 周亚伟 | 一种牡丹叶总黄酮提取物及其制备方法和用途 |
| WO2013161821A1 (ja) * | 2012-04-24 | 2013-10-31 | 花王株式会社 | Cgrp応答性促進剤 |
| CN104490969A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-04-08 | 北京工业大学 | 蒙药漏芦花抗炎有效部位的制备及其应用 |
| CN108570058A (zh) * | 2018-06-05 | 2018-09-25 | 南阳师范学院 | 一种从水芹菜提取的联苯型新木脂素化合物及其方法和用途 |
| US20190135780A1 (en) * | 2010-02-11 | 2019-05-09 | Celgene Corporation | Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same |
| CN110330503A (zh) * | 2019-06-27 | 2019-10-15 | 澳门大学 | 一种化合物、其制备方法及应用以及抗类风湿性关节炎的药物 |
| CN110396074A (zh) * | 2019-08-06 | 2019-11-01 | 江西中医药大学 | 一种苯丙素类化合物及其制备方法和用途 |
| JP2020033489A (ja) * | 2018-08-31 | 2020-03-05 | 国立研究開発法人理化学研究所 | 新規化合物及びその製造方法 |
| CN111423449A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-07-17 | 江西中医药大学 | 从荸荠中分离的新苯骈二氧六环型木脂素及其制备保肝药物用途 |
-
2020
- 2020-11-19 CN CN202011297828.XA patent/CN112174976A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007010307A1 (en) * | 2005-07-19 | 2007-01-25 | Pharma Mar, S.A. | Antineoplastic compounds |
| CN101204429A (zh) * | 2006-12-21 | 2008-06-25 | 周亚伟 | 一种牡丹叶总黄酮提取物及其制备方法和用途 |
| US20190135780A1 (en) * | 2010-02-11 | 2019-05-09 | Celgene Corporation | Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same |
| WO2013161821A1 (ja) * | 2012-04-24 | 2013-10-31 | 花王株式会社 | Cgrp応答性促進剤 |
| CN104490969A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-04-08 | 北京工业大学 | 蒙药漏芦花抗炎有效部位的制备及其应用 |
| CN108570058A (zh) * | 2018-06-05 | 2018-09-25 | 南阳师范学院 | 一种从水芹菜提取的联苯型新木脂素化合物及其方法和用途 |
| JP2020033489A (ja) * | 2018-08-31 | 2020-03-05 | 国立研究開発法人理化学研究所 | 新規化合物及びその製造方法 |
| CN110330503A (zh) * | 2019-06-27 | 2019-10-15 | 澳门大学 | 一种化合物、其制备方法及应用以及抗类风湿性关节炎的药物 |
| CN110396074A (zh) * | 2019-08-06 | 2019-11-01 | 江西中医药大学 | 一种苯丙素类化合物及其制备方法和用途 |
| CN111423449A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-07-17 | 江西中医药大学 | 从荸荠中分离的新苯骈二氧六环型木脂素及其制备保肝药物用途 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LEE HOOPER ET AL.: "A review of the health care potential of bioactive compounds", 《JOURNAL OF THE SCIENCE OF FOOD AND AGRICULTURE》 * |
| 乌莉娅·沙依提 等: "维药芹菜根化学成分的研究", 《中药材》 * |
| 侯顺超: "水芹多酚生物活性及其微胶囊制备", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118001268A (zh) * | 2024-04-08 | 2024-05-10 | 江西中医药大学 | 一种苯并呋喃木脂素类化合物的应用及其制备方法 |
| CN118001268B (zh) * | 2024-04-08 | 2024-06-11 | 江西中医药大学 | 一种苯并呋喃木脂素类化合物的应用及其制备方法 |
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
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