[go: up one dir, main page]

RS56654B1 - Antiviralna jedinjenja - Google Patents

Antiviralna jedinjenja

Info

Publication number
RS56654B1
RS56654B1 RS20171281A RSP20171281A RS56654B1 RS 56654 B1 RS56654 B1 RS 56654B1 RS 20171281 A RS20171281 A RS 20171281A RS P20171281 A RSP20171281 A RS P20171281A RS 56654 B1 RS56654 B1 RS 56654B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
imidazol
mmol
compound
alkyl
methyl
Prior art date
Application number
RS20171281A
Other languages
English (en)
Inventor
Hongyan Guo
Darryl Kato
Thorstens A Kirschberg
Hongtae Liu
John O Link
Michael L Mitchell
Jay P Parrish
Neil Squires
Jianyu Sun
James Taylor
Elizabeth M Bacon
Eda Canales
Aesop Cho
Jeromy J Cottell
Manoj C Desai
Randall L Halcomb
Evan S Krygowski
Scott E Lazerwith
Qi Liu
Richard Mackman
Hyung-Jung Pyun
Joseph H Saugier
James D Trenkle
Winston C Tse
Randall W Vivian
Scott D Schroeder
William J Watkins
Lianhong Xu
Zheng-Yu Yang
Terry Kellar
Xiaoning Sheng
Michael O'neil Hanrahan Clarke
Chien-Hung Chou
Michael Graupe
Haolun Jin
Ryan Mcfadden
Michael R Mish
Samuel E Metobo
Barton W Phillips
Chandrasekar Venkataramani
Chuong U Kim
Original Assignee
Gilead Pharmasset Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42645241&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS56654(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Pharmasset Llc filed Critical Gilead Pharmasset Llc
Publication of RS56654B1 publication Critical patent/RS56654B1/sr
Publication of RS56654B8 publication Critical patent/RS56654B8/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/113—Spiro-condensed systems with two or more oxygen atoms as ring hetero atoms in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C07F5/02—Boron compounds
    • C07F5/025—Boronic and borinic acid compounds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] Hepatitis C je prepoznat kao hronična virusna bolest jetre koja se karakteriše oboljenjem jetre. Iako su lekovi za ciljano lečenje jetre u širokoj upotrebi i pokazali su efikasnost, toksičnost i drugi neželjeni efekti ograničili su njihovu korisnost. Inhibitori virusa hepatitisa C (HCV) su korisni da ograniče uspostavljanje i progresiju infekcije HCV-om kao i u dijagnostičkim testovima za HCV. Jedinjenja za lečenje HCV-a stavljena su na uvid javnosti u WO2008/021927; WO2010/017401 (objavljen 11. februara 2010); WO2009/020828; WO2008/144380; WO2008/021928; i WO2009/102568 (objavljen 20. avgusta 2009).
[0002] Postoji potreba za novim HCV terapijskim agensima.
REZIME PREDMETNOG PRONALASKA
[0003] U jednom rešenju predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom:
gde:
V je alkil;
L je benzimidazolil;
M je 5-očlani heteroaril prsten;
A<15>je:
svako H<14>je nezavisno fuzionisani nezasićeni, parcijalno nezasićeni ili zasićeni triciklični karbociklus koji je po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od R<A1>i R<A3>; i
svako X<A>je nezavisno O, NR, SO, SO2, C(=O), NRC(=O), C(=O)NR, CR=CR, NRC(=O)NR, alenil, alkinil, ili je odsutan; svako R je nezavisno odabran od H ili alkila;
svako R<A1>je nezavisno odabrano od cijano, nitro, SOR<4>, SO2R<4>, -alkilSO2R<4>, haloalkoksi, cijanoalkila, NR<4>SO2R<4>, cikloalkila, (halo)cikloalkila, heterociklusa, (cikloalkil)alkila, (heterociklus)alkila, pri čemu je svaki alkil, heterociklus i cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više halo;
svako R<A3>je nezavisno odabrano od alkoksi, alkoksialkila, alkoksikarbonila, alkila, arilalkoksikarbonila, karboksi, formila, halo, haloalkila, hidroksi, hidroksialkila, -NR<a>R<b>, (NR<a>R<b>)alkila, i (NR<a>R<b>)karbonila; R<a>i R<b>su svaki nezavisno odabrani od grupe koja se sastoji od vodonika, alkenila, alkila, alkilkarbonila, arila, arilalkila, arilalkilkarbonila, cikloalkila, cikloalkilalkila, heterociklila, i heterociklilalkila;
svako R<4>je nezavisno odabrano od H, alkila, haloalkila, arila, i arilalkila; i
svako P je nezavisno odabrano od:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
DETALJAN OPIS PREDMETNOG PRONALASKA
[0004] Sada će se detaljno ukazati na određena tehnička rešenja predmetnog pronalaska, primere koji su ilustrovani u pratećim strukturama i formulama. Dok će predmetni pronalazak biti opisan zajedno sa nabrojanim rešenjima, jasno je da oni nisu namenjeni da ograniče pronalazak na ova rešenja.
Jedinjenja predmetnog pronalaska
[0005] Jedinjenja ovog predmetnog pronalaska isključuju do sada poznata jedinjenja.
[0006] Kad god je ovde opisano jedinjenje supstituisano sa više od jedne iste dezignirane grupe, npr., "R<1>" ili "A<3>", podrazumeva se da grupe mogu da budu iste ili različite, t.j., svaka grupa je nezavisno odabrana.
[0007] "Odsutan" – Neke grupe su definisane tako da mogu da budu odsutne. Kada je grupa odsutna ona postaje veza koja spaja. Dve grupe koje bi inače bile povezane sa tom odsutnom grupom povezane su jedna sa drugom putem veze. Na primer, kada je W odsutno, M je vezano za M.
[0008] "Alkil" je C1-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili ciklične atome ugljenika. Primeri su metil (Me, -CH3), etil (Et, -CH2CH3), 1-propil (n-Pr, n-propil, -CH2CH2CH3), 2-propil (i-Pr, i-propil, -CH(CH3)2), 1-butil (n-Bu, n-butil, - CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1-propil (i-Bu, i-butil, -CH2CH(CH3)2), 2-butil (s-Bu, s-butil, - CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propil (t-Bu, t-butil, -C(CH3)3), 1-pentil (n-pentil, - CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentil (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentil (-CH(CH2CH3)2), 2-metil-2-butil (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butil (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-metil-1-butil (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-1-butil (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-heksil (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-heksil (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-heksil (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentil (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metil-3-pentil (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentil (CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butil (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butil (-CH(CH3)C(CH3)3, i ciklopropilmetil
[0009] "Alkenil" je C2-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili ciklične atome ugljenika sa najmanje jednim mestom nezasićenja, t.j. ugljenik-ugljenik, sp<2>dvostruka veza. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, etilen ili vinil (-CH=CH2), alil (-CH2CH=CH2), ciklopentenil (-C5H7), i 5-heksenil (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).
[0010] "Alkinil" je C2-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili ciklične atome ugljenika sa najmanje jednim mestom nezasićenja, t.j. ugljenik-ugljenik, sp trostruka veza. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, acetilenski (-C=CH) i propargil (-CH2C≡CH).
[0011] "Alkilen" se odnosi na zasićeni, razgranati ili prav lanac ili ciklični ugljovodonični radikal 1-18 atoma ugljenika, i koji ima dva monovalentna radikalska centra koji su dobijeni uklanjanjem dva atoma vodonika od istog ili dva različita atoma ugljenika osnovnog alkana. Tipični alkilen radikali uključuju, ali nisu ograničeni na, metilen (-CH2-) 1,2-etil (-CH2CH2-), 1,3-propil (-CH2CH2CH2-), 1,4-butil (-CH2CH2CH2CH2-), i slično.
[0012] "Alkenilen" se odnosi na nezasićeni, razgranati ili prav lanac ili ciklični ugljovodonični radikal 2-18 atoma ugljenika, i koji ima dva monovalenta radikalska centra koji su dobijeni uklanjanjem dva atoma vodonika od istog ili dva različita atoma ugljenika parentalnog (osnovnog) alkena. Tipični alkenilen radikali uključuju, ali nisu ograničeni na, 1,2-etilen (-CH=CH-).
[0013] "Alkinilen" se odnosi na nezasićeni, razgranati ili prav lanac ili ciklični ugljovodonični radikal od 2-18 ugljenikovih atoma, i koji ima monovalentne radikalske centre koji su dobijeni uklanjanjem dva vodonikova atoma iz istog ili dva različita ugljenikova atoma osnovnog alkina. Tipični alkinilen radikali uključuju, ali nisu ograničeni na, acetilen (-C≡C-), propargil (-CH2C≡C-), i 4-pentinil (-CH2CH2CH2C≡CH).
[0014] "Aril" označava monovalentni aromatični ugljovodonični radikal od 6-20 ugljenikovih atoma koji su dobijeni uklanjanjem atoma vodonika iz jednog atoma ugljenika osnovnog aromatičnog sistema prstena. Tipične aril grupe uključuju, ali nisu ograničene na, radikale koji su dobijeni od benzena, supstituisan benzen, naftalen, antracen, bifenil, i slično.
[0015] "Arilalkil" odnosi se na aciklični alkil radikal u kome jedan od atoma vodonika vezan za ugljenikov atom, tipično terminalni ili sp<3>ugljenikov atom, je zamenjen sa aril radikalom. Tipične arilalkil grup eobuhvataju, ali nisu ograničene na, benzil, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil, 2-naftofeniletan-1-il i slično. Arilalkil grupa sadrži 6 do 20 ugljenikovih atoma, npr., alkil segment, uključujući alkanil, alkenil ili alkinil grupe, arilalkil grupe je 1 do 6 ugljenikovih atoma i aril segment je 5 do 14 ugljenikovih atoma.
[0016] Termin "polikarbociklus" odnosi se na zasićeni ili nezasićeni policiklični prstenasti sistem koji ima od oko 6 do oko 25 ugljenikovih atoma i koji ima dva ili više prstenova (npr.2, 3, 4, ili 5 prstena). Prstenovi mogu biti fuzionisani i/ili premošteni da formiraju policiklični prstenasti sistem. Na primer, termin obuhvata biciklo [4,5], [5,5], [5,6] ili [6,6] prstenaste sisteme, kao i sledeće premoštene prstenaste sisteme:
(t.j., [2.1.1], [2.2.1], [3.3.3], [4.3.1], [2.2.2], [4.2.2], [4.2.1], [4.3.2], [3.1.1], [3.2.1], [4.3.3], [3.3.2], [3.2.2] i [3.3.1] policiklični prstenovi, redom) koji mogu biti vezani za ostatak jedinjenja sa formulom (I) kroz bilo koju sintetički izvodljivu poziciju. Kao drugi polikarbociklusi, ovi reprezentativni biciklo i fuzionisani prstenasti sistemi mogu po izboru da sadrže jednu ili više dvostrukih veza u sistemu prstenova.
[0017] Termin "poliheterociklus" odnosi se na polikarbociklus kao što je definisano ovde, gde jedan ili više ugljenikovih atoma je zamenjeno sa heteroatomom (npr., O, S, S(O), S(O)2, N<+>(O-)Rx, ili NRx); gde svako Rxje nezavisno H, (C1-10)alkil, (C2-10)alkenil, (C2-10)alkinil, (C110)alkanoil, S(O)2NRnRp, S(O)2Rx, ili (C1-10)alkoksi, gde svako (C1-10)alkil, (C2-10)alkenil, (C2-10)Alkinil, (C1-10)alkanoil, i (C1-10)alkoksi je po izboru supstituisan sa jednim ili više halo).
[0018] "Supstituisan alkil", "supstituisan aril", i "supstituisan arilalkil" mean alkil, aril, i arilalkil redom, u kome su jednan ili više vodonikovih atoma svaki nezavisno zamenjen sa ne-vodoničnim supstituentom. Tipični supstituenti obuhvataju, ali nisu ograničeni na: halo (npr. F, Cl, Br, I), -R, -OR, -SR, -NR2, -CF3, -CCl3, -OCF3, -CN, -NO2, -N(R)C(=O)R, -C(=O)R, - OC(=O)R, -C(O)OR, -C(=O)NRR, -S(=O)R, -S(=O)2OR, -S(=O)2R, -OS(=O)2OR, -S(=O)2NRR, i svako R je nezavisno -H, alkil, aril, arilalkil, ili heterociklus. Alkilen, alkenilen, i alkinilen grupe mogu takođe biti slično supstituisane.
[0019] Termin "po izboru supstituisan" u odnosu na poseban segment jedinjenja sa formulom I, (npr., po izboru supstituisana aril grupa) odnosi se na segment koji ima 0, 1, 2, ili više supstituenata.
[0020] Simbol "-----" u strukturi prstena znači da je veza jednostruka ili dvostruka. U neograničavajućem primeru,
Može biti
[0021] "Haloalkil" kao što je ovde korišćeno obuhvata alkil grupu supstituisanu sa jednim ili više halogena (npr. F, Cl, Br, ili I). Reprezentativni primeri haloalkila uključuju trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, i 2,2,2-trifluoro-1-(trifluorometil)etil.
[0022] "Heterociklus" kao što je ovde korišćeno obuhvata kao primer i nije ograničenje ove heterocikluse opisane u Paquette, Leo A.; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, New York, 1968), naročito Poglavlja 1, 3, 4, 6, 7, i 9; Chemistry of Heterocyclic Compounds, a Series of Monograph" (John Wiley & Sons, New York, 1950 do danas), naročito tomovi 13, 14, 16, 19, i 28; i J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. U jednom posebnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska "heterociklus" obuhvata "karbociklus" kao što je definisano ovde, gde jedan ili više (npr. 1, 2, 3, ili 4) ugljenikovih atom su zamenjeni sa heteroatomom (npr. O, N, ili S).
[0023] Primeri heterociklusa obuhvataju kao primer i ne ograničenje piridil, dihidropiridil, tetrahidropiridil (piperidil), tiazolil, tetrahidrotiofenil, sumpor oksidovani tetrahidrotiofenil, pirimidinil, furanil, tienil, pirolil, pirazolil, imidazolil, tetrazolil, benzofuranil, tianaftalenil, indolil, indolenil, hinolinil, izohinolinil, benzimidazolil, piperidinil, 4-piperidonil, pirolidinil, 2-pirolidonil, pirolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrohinolinil, tetrahidroizohinolinil, dekahidrohinolinil, oktahidroizohinolinil, azocinil, triazinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 2H,6H-1,5,2-ditiazinil, tienil, tiantrenil, piranil, isobenzofuranil, chromenil, ksantenil, fenoksatinil, 2H-pirolil, izotiazolil, isoksazolil, pirazinil, piridazinil, indolizinil, izoindolil, 3H-indolil, 1H-indazolil, purinil, 4H-hinolizinil, ftalazinil, naftiridinil, hinoksalinil, hinazolinil, cinolinil, pteridinil, 4H-karbazolil, karbazolil, β-karbolinil, fenantridinil, akridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, phenotiazinil, furazanil, phenoksazinil, izohromanil, hromanil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperazinil, indolinil, isoindolinil, hinuclidinil, morpholinil, oksazolidinil, benzotriazolil, benzizoksazolil, oksindolil, benzoksazolinil, izatinoil, i bistetrahidrofuranil:
[0024] Kao primer i ne ograničenje, ugljenikom vezani heterociklusi su vezani na položaju 2, 3, 4, 5, ili 6 piridina, položaju 3, 4, 5, ili 6 piridazina, položaju 2, 4, 5, ili 6 pirimidinu, položaju 2, 3, 5, ili 6 pirazina, položaju 2, 3, 4, ili 5 furana, tetrahidrofurana, tiofurana, tiofena, pirola ili tetrahidropirola, položaju 2, 4, ili 5 oksazola, imidazola ili tiazola, položaju 3, 4, ili 5 izoksazola, pirazola, ili izotiazola, položaju 2 ili 3 aziridina, položaju 2, 3, ili 4 azetidina, položaju 2, 3, 4, 5, 6, 7, ili 8 hinolina ili položaju 1, 3, 4, 5, 6, 7, ili 8 izohinolina. Još tipičnije, ugljenikom vezani heterociklusi obuhvataju 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 5-piridil, 6-piridil, 3-piridazinil, 4-piridazinil, 5-piridazinil, 6-piridazinil, 2-pirimidinil, 4-pirimidinil, 5-pirimidinil, 6-pirimidinil, 2-pirazinil, 3-pirazinil, 5-pirazinil, 6-pirazinil, 2-tiazolil, 4-tiazolil, ili 5-tiazolil.
[0025] Kao primer i ne ograničenje, azotom vezani heterociklusi su vezani na položaju 1 aziridina, azetidina, pirolea, pirolidina, 2-pirolina, 3-pirolina, imidazola, imidazolidina, 2-imidazolina, 3-imidazolina, pirazola, pirazolina, 2-pirazolina, 3-pirazolina, piperidina, piperazina, indola, indolina, 1H-indazola, položaju 2 izoindola, ili izoindolina, položaju 4 morfolina, i položaju 9 karbazola, ili β-karbolina. Još tipičnije, azotom vezani heterociklusi obuhvataju 1-aziridil, 1-azetedil, 1-pirolil, 1-imidazolil, 1-pirazolil, i 1-piperidinil.
[0026] "Karbociklus" odnosi se na zasićeni, nezasićeni ili aromatični prsten koji ima do oko 25 ugljenikovih atoma. Tipično, karbociklus ima oko 3 do 7 ugljenikovih atoma kao monociklus, oko 7 do 12 ugljenikoviha atoma kao biciklus, i up do oko 25 ugljenikovih atoma kao policiklus. Monociklični karbociklusi tipično imaju 3 do 6 atoma u prstenu, još tipičnije 5 ili 6 atoma u prstenu. Biciklični karbociklusi tipično imaju 7 do 12 atoma u prstenu, npr., uređenih kao biciklo [4,5], [5,5], [5,6] ili [6,6] sistem, ili 9 ili 10 atoma u prstenu uređenih kao biciklo [5,6] ili [6,6] sistem. Termin karbociklus obuhvata "cikloalkil" koji je zasićen ili nezasićen karbociklus. Primeri monocikličnog karbociklusa obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, 1-ciklopent-1-enil, 1-ciklopent-2-enil, 1-ciklopent-3-enil, cikloheksil, 1-cikloheks-1-enil, 1-cikloheks-2-enil, 1-cikloheks-3-enil, fenil, spiril i naftil.
[0027] Termin "hiralni" odnosi se na molekule koji imaju svojstvo da ne mogu da se poklope sa svojim likom u ogledalu, dok "ahiralan" odnosi se na molekule koji mogu da se poklope sa svojim likom u ogledalu.
[0028] Termin "stereoizomeri" odnosi se na jedinjenja kojija imaju identičnu hemijsku konstituciju, ali se razlikuju u odnosu na raspored atome ili grupa u prostoru.
[0029] "Diastereomer" odnosi se stereoizomer sa dva ili više centara hiralnosti i čiji molekuli se ne odnose kao predmet i lik u ogledalu. Diastereomeri imaju različite fizičke osobine, npr. tačke topljenja, tačke ključanja, spektralne osobine, i reaktivnosti. Smeše diastereomera mogu se razdvojiti analitičkim procedurama visoke rezolucije kao što su elektroforeza i hromatografija.
[0030] "Enantiomeri” odnose na dva stereoizomera jedinjenja koja se ne odnose kao predmet i lik u ogledalu.
[0031] Termin "lečenje" ili "lečenje," u meri u kojoj se odnosi na bolest ili stanje obuhvata sprečavanje nastanka bolesti ili stanja, inhibiranje bolesti ili stanja, eliminisanje bolesti ili stanja, i/ili ublažavanje jednim ili više simptoma bolesti ili stanja.
[0032] Stereohemijske definicije i konvencije korišćene ovde generalno prate S. P. Parker, Ed., McCrraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; i Eliel, E. i Wilen, S., Stereochemistry of Organic Jedinjenjes (1994) John Wiley & Sons, Inc., New York. Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, t.j., oni imaju sposobnost da rotiraju ravan polarizovane svetlosti. U opisivanju optički aktivnog jedinjenja, prefiksi (D i L) ili (R i S) su korišćeni da označe apsolutnu konfiguraciju molekula oko njegovog hiralnog centra (centara). Prefiksi d i 1 ili (+) i (-) su upotrebljeni da naznače znak rotacije polarizovane svetlosti u ravni od strane jedinjenja, sa (-) ili 1 što znači da je jedinjenje levorotatorno. Jedinje sa prefiksom (+) ili d je dekstrorotatorno. Za datu hemijsku strukturu, ovi stereoizomeri su identični osim se odnose međusobno kao predmet i njegov lik u ogledalu. Specifični stereoizomer može takođe biti označen kao enantiomer, i smeša takvih izomera se često zove enantiomerna smeša. Smeša enantiomera u razmeri 50:50 je označena kao racemska smeša ili racemat, koja može da se pojavi kada nema stereoselekcije ili stereospecifičnosti u hemijskoj reakciji ili procesu. Termini "racemska smeša" i "racemat" odnose se na ekvimolarnu smešu dve enantiomerne vrste, lišene optičke aktivnosti. Pronalazak obuhvata sve stereoizomere jedinjenja opisanih ovde.
Specifične definicije za grupe A<0>, M<0>, W<0>, L<0>, P<0>, J<0>, T<0>, V<0>, Z<0>, E<0>, i R9<0>
[0033] Za grupe A<0>, M<0>, W<0>, L<0>, P<0>, J<0>, T<0>, V<0>, Z<0>, E<0>, i R9<0>sledeće definicije se primenjuju. Ove definicije se takođe primenjuju za sve druge A, M, W, L, P, J, T, B, V, Z, E, i R9 grupe ukoliko ove grup enisu drugačije definisane ovde.
[0034] Osim ukoliko nije navedeno drugačije, sve aril, cikloalkil, i heterociklil grupe predmetne objave mogu biti supstituisane kao što je opisano u svakoj od njihovih odgovarajućih definicija-Na primer, aril deo arilalkil grupe može biti supstituisan kao što je opisano u definiciji za termin 'Aril'.
[0035] Termin "alkenil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na grupu ravnog ili razgranatog lanca od dva do šest ugljenikovih atoma koji sadrže barem jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik.
[0036] Termin "alkeniloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkenil grupu prikačenu za parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0037] Termin "alkeniloksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkeniloksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0038] Termin "alkoksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu prikačenu za parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0039] Termin "alkoksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri alkoksi grupe.
[0040] Termin "alkoksialkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkoksialkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0041] Termin "alkoksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkoksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0042] Termin "alkoksikarbonilalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri alkoksikarbonil grupe.
[0043] Termin "alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na grupu izvedenu od zasićenog ugljovodonika pravog ili razgranatog lanca koji sadrži jedan do šest ugljenikovih atoma.
[0044] Termin "alkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0045] Termin "alkilkarbonilalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri alkilkarbonil grupe.
[0046] Termin "alkilkarboniloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkilkarbonil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0047] Termin "alkilsulfanil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma sumpora.
[0048] Termin "alkilsulfonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko sulfonil grupe.
[0049] Termin "aril," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na fenil grupu, ili bicikličan fuzionisani prstenasti sistem gde jedan ili oba prstena je fenil grupa. Biciklični fuzionisani prstenasti sistemi se sastoje od fenil grupe koja je fuzionisana za četvoročlani do šestočlani karbociklični prsten. Aril grupe predmetne objave mogu biti prikačene za parentalni molekularni segment kroz bilo koji ugljenikov atom koji se može supstituisati u grupi. Reprezentativni primeri aril grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, indanil, indenil, naftil, fenil, i tetrahidronaftil. Aril grupe predmetne objave su po izboru supstituisan sa jednim, dva, tri, četiri ili pet supstituenata nezavisno odabranih od alkoksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, alkil, alkilkarbonil, druge aril grupe, arilalkoksi, arilalkil, arilkarbonil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, heterociklil, heterociklilalkil, heterociklilkarbonil, hidroksi, hidroksialkil, nitro, -NR<X>R<Y>, -(NR<X>R<Y>)alkil, okso, i -P(O)OR2, gde svako R je nezavisno odabrano od vodonik i alkil; i gde alkil deo arilalkila i heterociklilalkila su nesupstituisani i gde druga aril grupa, aril deo arilalkila, aril deo arilkarbonila, heterociklil, i heterociklil deo heterociklilalkila i heterociklilkarbonila su dalje po izboru supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezaivsno odabranih od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, i nitro.
[0050] Termin "arilalkenil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkenil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri aril grupe.
[0051] Termin "arilalkoksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na aril grupu prikačenu za parentalni molekularni segment preko alkoksi grupe.
[0052] Termin "arilalkoksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri arilalkoksi grupe.
[0053] Termin "arilalkoksialkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na arilalkoksialkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0054] Termin "arilalkoksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na arilalkoksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0055] Termin "arilalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri aril grupe. Alkil deo arilalkila je dalje po izboru supstituisan sa jednom ili dve dodatne grupe nezavisno odabrane od alkoksi, alkilkarboniloksi, halo, haloalkoksi, haloalkil, heterociklil, hidroksi, i -NR<c>R<d>, gde heterociklil je dalje po izboru supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, nesupstituisani aril, nesupstituisan arilalkoksi, nesupstituisan arilalkoksikarbonil, halo, haloalkoksi, haloalkil, hidroksi, i -NR<X>R<Y>;
[0056] Termin "arilalkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na an Arilalkil grupa prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0057] Termin "arilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na aril grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0058] Termin "ariloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na aril grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0059] Termin "ariloksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri ariloksi grupe.
[0060] Termin "ariloksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na ariloksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0061] Termin "Arilsulfanil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na aril grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma sumpora.
[0062] Termin "arilsulfonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na aril grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko sulfonil grupe.
[0063] Termini "Cap" i "cap" kao što je ovde korišćeno, odnose se na grupu koja je postavljena na azotov atom krajnjeg prstena koji sadrži azot. Trebalo bi da se razume da "Cap" ili "cap" mogu da se odnose na reagens koji je korišćen da se doda grupi na krajnji prsten koji sadrži azot ili na fragment u finalnom proizvodu.
[0064] Termin "karbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -C(=O)-.
[0065] Termin "karboksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -CO2H.
[0066] Termin "cijano," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -CN.
[0067] Termin "cijanoalkil" kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu koji ima najmanje jedan -CN supstituent.
[0068] Termin "cikloalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na zasićeni monociklični, ulgjovodonični prstenasti sistem koji ima tri do sedam ugljenikovih atoma i nula heteroatoma. Reprezentativni primeri cikloalkil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklopentil, i cikloheksil. Cikloalkil grupe predmetne objave su po izboru supstituisani sa jednim, dva, tri, četiri ili pet supstituenata nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, aril, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, heterociklil, hidroksi, hidroksialkil, nitro, i -Nk<x>R<y>gde aril i heterociklil su dalje po izboru supstituisani sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, hidroksi, i nitro.
[0069] Termin "(cikloalkil)alkenil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkenil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri cikloalkil grupe.
[0070] Termin "(cikloalkil)alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri cikloalkil grupe. Alkil deo (cikloalkil)alkila je dalje po izboru supstituisan sa jednom ili dve grupe nezavisno odabrane od hidroksi i -NR<c>R<d>.
[0071] Termin "cikloalkiloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na cikloalkil grupu prikačenu za parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0072] Termin "cikloalkiloksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisan sa jednom, dve ili tri cikloalkiloksi grupe.
[0073] Termin "cikloalkilsulfonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na cikloalkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko sulfonil grupe.
[0074] Termin "formil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -CHO.
[0075] Termini "halo" i "halogen," kao što je ovde korišćeno, odnose se na F, Cl, Br, ili I.
[0076] Termin "haloalkoksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na haloalkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0077] Termin "haloalkoksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na haloalkoksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0078] Termin "haloalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednim, dva, tri, ili četiri halogena atoma.
[0079] Termin "haloalkilsulfanil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na haloalkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma sumpora.
[0080] Termin "heterociklil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na četvoročlani, petočlani, šestočlani ili sedmočlani prsten koji sadrži jedan, dva, tri ili četiri heteroatoma nezavisno odabranih od azota, kiseonika i sumpora. Četvoročlani prsten ima nula dvostrukih veza, petočlani prsten ima nula do dve dvostruke veze, i šestočlani do sedmočlani prstenoviimaju nula do tri dvostruke veze. Termin "heterociklil" also obuhvata biciklične grupe u kojima je heterociklil prsten fuzionisan za drugu monocikličnu heterociklil grupu, ili četvoročlani do šestočlani aromatični ili nearomatični karbociklični prsten; kao i premoštene biciklične grupe kao što su 7-azabiciklo[2.2.1]hept-7-il, 2-azabiciklo[2.2.2]oc-2-til, i 2-azabiciklo[2.2.2]oc-3-til. Heterociklil grupe predmetne objave mogu biti prikačene za parentalni molekularni segment preko bilo kog ugljenikovog atoma ili azotovog atoma u grupi. Primeri heterociklil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, benzotienil, furil, imidazolil, indolinil, indolil, izotiazolil, izoksazolil, morfolinil, oksazolil, piperazinil, piperidinil, pirazolil, piridinil, pirolidinil, pirolopiridinil, pirolil, tiazolil, tienil, tiomorfolinil, 7-azabiciklo[2.2.1]hept-7-il, 2-azabiciklo[2.2.2]oc-2-til, i 2- azabiciklo[2.2.2]oc-3-til. Heterociklil grupe predmetne objave su po izboru supstituisane sa jednim, dva, tri četiri ili pet supstituenata nezavisno odabranih od alkoksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, alkil, alkilkarbonil, aril, arilalkil, arilkarbonil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, druge heterociklil grupe, heterociklilalkil, heterociklilkarbonil, hidroksi, hidroksialkil, nitro, -NR<X>R<Y>, -(NR<X>R<Y>)alkil, i okso, gde alkil deo arilalkila i heterociklilalkil su nesupstituisan i gde aril, aril deo arilalkila, aril deo arilkarbonila, druga heterociklil grupa, i heterociklil deo heterociklilalkila i heterociklilkarbonila su dalje po izboru supstituisani sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, i nitro.
[0081] Termin "heterociklilalkenil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkenil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri heterociklil grupe.
[0082] Termin "heterociklilalkoksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterociklil grupu prikačenu za parentalni molekularni segment preko alkoksi grupe.
[0083] Termin "heterociklilalkoksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterociklilalkoksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0084] Termin "heterociklilalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisan sa jednom, dve ili tri heterociklil grupe. Alkil deo heterociklilalkila je dalje po izboru supstituisan sa jednom ili dve dodatne grupe nezavisno odabrane od alkoksi, alkilkarboniloksi, aril, halo, haloalkoksi, haloalkil, hidroksi, i -NR<c>R<d>, gde aril je dalje po izboru supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, nesupstituisan aril, nesupstituisan arilalkoksi, nesupstituisan arilalkoksikarbonil, halo, haloalkoksi, haloalkil, hidroksi, i -NR<X>R<Y>.
[0085] Termin "heterociklilalkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterociklilalkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0086] Termin "heterociklilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterociklil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0087] Termin "heterocikliloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterociklil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0088] Termin "heterocikliloksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri heterocikliloksi grupe.
[0089] Termin "heterocikliloksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na heterocikliloksi grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0090] Termin "hidroksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -OH.
[0091] Termin "hidroksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri hidroksi grupe.
[0092] Termin "hidroksialkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na hidroksialkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0093] Termin "nitro," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -NO2.
[0094] Termin "-NR<a>R<b>," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na dve grupe, R<a>i R<b>, koje su prikačene na parentalni molekularni segment preko azotovog atoma. R<a>i R<b>su nezavisno odabrani od vodonik, alkenil, i alkil.
[0095] Termin "(NR<a>R<b>)alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri -NR<a>R<b>grupe.
[0096] Termin "(NR<a>R<b>)karbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -NR<a>R<b>grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0097] Termin "-NR<c>R<d>," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na dve grupe, R<c>i R<d>, koje su prikačene na parentalni molekularni segment preko atoma azota. R<c>i R<d>su nezavisno odabrani od vodonik, alkeniloksikarbonil, alkoksialkilkarbonil, alkoksikarbonil, alkil, alkilkarbonil, alkilsulfonil, aril, arilalkoksikarbonil, arilalkil, arilalkilkarbonil, arilkarbonil, ariloksikarbonil, arilsulfonil, cikloalkil, cikloalkilsulfonil, formil, haloalkoksikarbonil, heterociklil, heterociklilalkoksikarbonil, heterociklilalkil, heterociklilalkilkarbonil, heterociklilkarbonil, heterocikliloksikarbonil, hidroksialkilkarbonil, (NR<e>R<f>)alkil, (NR<e>R<f>)alkilkarbonil, (NR<e>R<f>)karbonil, (NR<e>R<f>)sulfonil, -C(NCN)OR', i - C(NCN)NR<X>R<Y>, gde R' je odabrano od alkil i nesupstituisan fenil, i gde alkil deo arilalkila, arilalkilkarbonila, heterociklilalkila, i heterociklilalkilkarbonila su dalje po izboru supstituisani sa jednom -NR<e>R<f>grupom; i gde aril, aril deo arilalkoksikarbonila, arilalkila, arilalkilkarbonila, arilkarbonila, ariloksikarbonila, i arilsulfonila, heterociklila, i heterociklil deo heterociklilalkoksikarbonila, heterociklilalkila, heterociklilalkilkarbonila, heterociklilkarbonila, i heterocikliloksikarbonila su dalje po izboru supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, i nitro.
[0098] Termin "(NR<c>R<d>)alkenil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkenil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri -NR<c>R<d>grupe.
[0099] Termin "(NR<c>R<d>)alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri -NR<c>R<d>grupe. Alkil deo (NR<c>R<d>)alkila je dalje po izboru supstituisan sa jednom ili sve dodatne grupe odabrane od alkoksi, alkoksialkilkarbonil, alkoksikarbonil, alkilsulfanil, arilalkoksialkilkarbonil, karboksi, heterociklil, heterociklilkarbonil, hidroksi, i (NR<e>R<f>)karbonil; gde heterociklil je dalje po izboru supstituisan sa jednim, dva, tri četiri ili pet supstituenata nezavisno odabranih od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, i nitro.
[0100] Termin "(NR<c>R<d>)karbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -NR<c>R<d>grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0101] Termin "-NR<e>R<f>," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na dve grupe, R<e>i R<f>, koje su prikačene na parentalni molekularni segment preko azotovog atoma. R<e>i R<f>su nezavisno odabrani od vodonik, alkil, nesupstituisan aril, nesupstituisan arilalkil, nesupstituisan cikloalkil, nesupstituisan (ciklolalkil)alkil, nesupstituisan heterociklil, nesupstituisan heterociklilalkil, -(NR<X>R<Y>)alkil, i -(NR<X>R<Y>)karbonil.
[0102] Termin "(NR<e>R<f>)alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri -NR<e>R<f>grupe.
[0103] Termin "(NR<e>R<f>)alkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na (NR<e>R<f>)alkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0104] Termin "(NR<e>R<f>)karbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -NR<e>R<f>grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko karbonil grupe.
[0105] Termin "(NR<e>R<f>)sulfonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -NR<e>R<f>grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko sulfonil grupe.
[0106] Termin "-NR<X>R<Y>," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na dve grupe, R<X>i R<Y>, koje su prikačene na parentalni molekularni segment preko atoma azota. R<X>i R<Y>su nezavisno odabrane od vodonik, alkoksikarbonil, alkil, alkilkarbonil, nesupstituisan Aril, nesupstituisan Arilalkoksikarbonil, nesupstituisan Arilalkil, nesupstituisan cikloalkil, nesupstituisan heterociklil, i (NR<X'>R<Y'>)karbonil, gde R<X'>i R<Y'>su nezavisno odabrani od vodonik i alkil.
[0107] Termin "(NR<X>R<Y>)alkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri -NR<X>R<Y>grupe.
[0108] Termin "okso," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na =O.
[0109] Termin "sulfonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -SO2-.
[0110] Termin "trialkilsilil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na -SiR3, gde R je alkil. R grupe mogu biti iste ili različite
[0111] Termin "trialkilsililalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve ili tri trialkilsilil grupe.
[0112] Termin "trialkilsililalkoksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na trialkilsililalkil grupu prikačenu na parentalni molekularni segment preko atoma kiseonika.
[0113] Termin "trialkilsililalkoksialkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu supstituisan sa jednom, dve ili tri trialkilsililalkoksi grupe.
Zaštitne grupe
[0114] "Zaštitna grupa" odnosi se na segment jedinjenja koje maskira ili menja osobine funkcionalne grupe ili osobine jedinjenja kao celine. Hemijske zaštitne grupe i strategije za protekciju/deprotekciju su dobro poznate u oblasti. Videti npr., Protective Grupe in Organic Chemistry, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1991. Zaštitne grupe se često koriste za maskiranje reaktivnosti određenih funkcionalnih grupa, kako bi se pomoglo u efikasnosti željenih hemijskih reakcija, npr. stvaranje i kidanje hemijskih veza na uređen i planiran način. Zaštita funkcionalnih grupa jedinjenja menja i druga fizička svojstva osim reaktivnosti zaštitne funkcionalne grupe, kao što je polaritet, lipofilnost (hidrofobnost), i druga svojstva koja se mogu meriti zajedničkim analitičkim alatima. Hemijski zaštićeni intermedijeri mogu sami biti biološki aktivni ili neaktivni.
[0115] Zaštitne grupe su dostupne, uobičajeno poznate i korištene, i po izboru su korišćene da spreče bočne reakcije sa zaštitnom grupom tokom sintetičkih procedura, t.j. puteva ili metoda za pripremu jedinjenja predmetnog pronalaska. U najvećoj meri odluka o tome koje grupe treba da štite, kada to učiniti, i priroda hemijske zaštitne "PG" zavisiće od hemije reakcije koju treba zaštititi (npr. kiseli, bazni, oksidativni, redukcioni ili drugi uslovi), i predviđenog pravca sinteze. PGs ne moraju biti, i obično nisu, isti ako je jedinjenje supstituisan sa više PG. Generalno, PG će se koristiti za zaštitu funkcionalnih grupa kao što su karboksil, hidroksil, tio, ili amino grupe i, čime se sprečavaju bočne reakcije ili inače olakšava sintetička efikasnost. Redosled deprotekcije da bi se dobile slobodne deprotektovane grupe zavisi od predviđenog pravca sinteze i reakcionih uslova sa kojim se susreće, i mogu se pojaviti u bilo kom redosledu kako je određeno od strane prosečnog poznavaoca oblasti.
[0116] Različite funkcionalne grupe jedinjenja mogu biti zaštićene. Na primer, zaštitne grupe za -OH grupe (bilo hidroksil, karboksilna kiselina, fosfonska kiselina, ili druge funkcije) uključuju "etar- ili estar-formirajuće grupe". Etar- ili estar-formirajuće grupe mogu da funkcionišu kao hemijske zaštitne grupa u sintetičkim shemama koje su ovde navedene. Međutim, neke hidroksil i tio zaštitne grupe nisu niti etar- niti estar- formirajuće grupe, što će razumeti prosečni poznavaoci oblasti, i uključene su sa amidima, razmotreno ispod.
[0117] Veliki broj hidroksil zaštitnih grupa i odgovarajuć ereakcije hemijskog cepanja su opisane u Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., New York, 1991, ISBN 0-471-62301-6) ("Greene"). Videti takođe Kocienski, Philip J.; Protecting Groups (Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994). Posebno Poglavlje 1, Protecting Groups: An Overview, strane 1-20, Poglavlje 2, Hydroxyl Protecting Groups strane 21-94, Poglavlje 3, Diol Protecting Groups, strane 95-117, Poglavlje 4, Carboxyl Protecting Groups, strane 118-154, Poglavlje 5, Carbonyl Protecting Groups, strane 155-184. Za zaštitne grupe za karboksilnu kiselinu, fosfonsku kiselinu, fosfonat, sulfonsku kiselinu i druge zaštitne grupe za kiseline videti Green kao što je navedeno ispod.
[0118] Svaki put kad je jedinjenje opisano ovde supstituisano sa više od jedne naznačene grupe, npr., "R<1>" ili "R<3>", tada će serazuemti da grupe mogu bitiiste ili različite, t.j., svaka grupa je nezavisno odabrana. Talasaste linije označavaju mesto kačenja kovalentne veze za Wsusedne grupe, segmente, ili atome.
[0119] U jednom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, jedinjenje je u izolovanom i prečišćenom obliku. Generalno, termin "izolovan i prečišćen" znači da je jedinjenje suštinski oslobođeno bioloških materijala (npr. krvi, tkiva, ćelija, itd.). U jednom posebnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, termin označava da je jedinjenje predmetnog pronalaska najmanje oko 50 mas.% bez bioloških materijala; u drugom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje ili konjugat predmetnog pronalaska najmanje oko 75 mas.% bez bioloških materijala; u drugoj specifičnoj realizaciji, termin označava da je jedinjenje predmetnog pronalaska najmanje oko 90 tež.% bez bioloških materijala; u drugom specifičnomtehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje predmetnog pronalaska najmanje oko 98 mas.% bez bioloških materijala; u još jednom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje predmetnog pronalaska najmanje oko 99 mas.% bez bioloških materijala. U drugom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje predmetnog pronalaska koje je sintetički pripremljeno (npr., ex vivo).
Stereoizomeri
[0120] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu imati hiralne centre, npr., hiralni ugljenik ili atome fosfora. Jedinjenja predmetnog pronalaska tako uključuju racemske smeše svih stereoizomera, uključujući enantiomere, diastereomere, i atropizomere. Pored toga, jedinjenja predmetnog pronalaska uključuju obogaćene ili raspodeljene optičke izomere na bilo kojem ili svim asimetričnim, hiralnim atomima. Drugim rečima, hiralni centri očigledni iz prikaza su obezbeđeni kao hiralni izomeri ili racemske smeše. Obe i racemske i diastereomerne smeše, kao i pojedinačni optički izomeri izolovani ili sintetisani, suštinski bez njihovih enantiomernih ili diastereomernih partnera, su svi u okviru predmetnog pronalaska. Racemske smeše su odvojene u njihove pojedinačne, suštinski optički čiste izomere putem dobro poznatih tehnika kao što je, na primer, odvajanje diastereomernih soli formiranih sa optički aktivnim dodacima, npr. kiselinama ili bazama praćeno konverzijom nazad u optički aktivne supstance. U većini slučajeva, željeni optički izomer se sintetiše putem stereospecifičnih reakcija, počevši od odgovarajućeg stereoizomera željenog početnog materijala.
[0121] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu takođe postojati kao tautomerni izomeri u određenim slučajevima. Iako se može prikazati samo jedna delokalizovana rezonantna struktura, svi takvi oblici su obuhvaćeni obimom predmetog pronalaska. Na primer, ene-amin tautomeri mogu postojati za purinske, pirimidinske, imidazolne, guanidinske, amidinske, i tetrazolne sisteme i sve njihove moguće tautomerne forme su unutar obima predmetnog pronalaska.
Soli i hidrati
[0122] Primeri fiziološki prihvatljivih soli jedinjenja predmetnog pronalaska uključuju soli izvedene iz odgovarajuće baze, kao što su alkalni metal (na primer, natrijum), zemnoalkalni metal (na primer, magnezijum), amonijum i NX4<+>(gde X je C1-C4alkil). Fiziološki prihvatljive soli atoma vodonika ili amino grupe uključuju soli organskih karboksilnih kiselina kao što su sirćetna, benzoeva, mlečna, fumarna, vinska, mleinska, malonska, jabučna, izetionska, laktobionska i sukcinska kiselina; organske sulfonske kiseline, kao što su metansulfonska, etansulfonska, benzensulfoskan i p-toluensulfonska kiselina; i neorganske kiseline, kao što su hlorovodonična, sumporna, fosforna i sulfaminska kiselina. Fiziološki prihvatljive soli jedinjenja hidroksi grupe uključuju anjon pomenutog jedinjenja u kombinaciji sa pogodnim katjonom kao što su Na<+>i NX4<+>(gde X je nezavisno odabran od H ili C1-C4alkil grupa).
[0123] Za terapisjku primenu, soli aktivnih sastojaka jedinjenja predmetnog pronalaska tipično će biti fiziološki prihvatljive, t.j. one će biti soli izvedene iz fiziološki prihvatljive kiseline ili baze. Međutim, soli kiselina ili baza koje nisu fiziološki prihvatljive mogu takođe naći primenu u pripremi ili prečišćenju fiziološki prihvatljivog jedinjenja. Sve soli, bez obzira da li su izvedene iz fiziološki prihvatljivog kiselina ili baze, su u okviru predmetnog pronalaska.
[0124] Soli metala tipično se pripremaju reakcijom metalog hidroksida sa jedinjenjem ovog pronalaska. Primeri soli metala koji su pripremljeni na ovaj način su soli koje sadrže Li<+>, Na<+>, i K<+>. Manje rastvorna metalna so može biti precipitirana iz rastvora više rastvorljive soli dodavanjem odgovarajućeg jedinjenja metala.
[0125] Pored toga, soli se mogu formirati iz kiselog dodavanja određenih organskih i neorganskih kiselina, npr., HCl, HBr, H2SO4, H3PO4ili organskih sulfonskih kiselina, na bazne centre, ili na kisele grupe. Konačno, treba da se razume da će kompozicije ovde sadržati jedinjenja predmetnog pronalaska u njihovoj nejonizovanoj, kao i cviterjonskoj formi, i kombinacije sa stehiometrijskim količinama vode kao u hidratima.
[0126] U okviru ovog pronalaska takođe su obuhvaćene soli parentalnih jedinjenja sa jednom ili više aminokiselina. Bilo koja pod prirodnih ili neprirodnih aminokiselina su pogodne, naročito prirodno prisutna amino kiselina koja se nalaze kao komponente proteina, iako je amino kiselina tipično ona koja ima bočni lanac sa baznom ili kiselinskom grupom, npr. lizinom, argininom ili glutaminskom kiselinom, ili neutralna grupa kao što je glicin, serin, treonin, alanin, izoleucin, ili leucin.
Metode inhibicije HCV-a
[0127] Ovde su opisane metode inhibiranja aktivnosti HCV koje sadrže korak lečenja uzorka za koji se sumnja da sadrži HCV sa jedinjenjem ili kompozicijom predmetnog pronalaska.
[0128] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu delovati kao inhibitori HCV-a, kao intermedijeri za takve inhibitore ili imaju druge primene kao što je opisano u nastavku. Inhibitori se uglavnom vezuju za lokacije na površini ili u šupljini jetre. Jedinjenja koja se vezuju u jetri mogu se vezati sa različitim stepenima reverzibilnosti. Ova jedinjenja koja se vezuju suštinski nepovratno su idealni kandidata za upotrebi u ovom metodi. Jednom obeležena, suštinski nepovratno vezujuća jedinjenja su korisna kao probe za detekciju HCV. Shodno tome, ovde su opisane metode detektovanja NS3 u uzorku za koji se sumnja da sadrži HCV koji obuhvata korake: tretiranje uzorka za koji se sumnja da sadrži HCV sa kompozicijom koji sadrži jedinjenje predmetnog pronalaska vezano za oznaku; i posmatranje uticaj auzorka na aktivnost oznake. Pogodne oznake su dobro poznate u oblasti dijagnostike i uključuju stabilne slobodne radikale, fluorofore, radioizotope, enzime, hemiluminiscentne grupe i hromogene. Jedinjenja ovde su obeležena na konvencionalni način korišćenjem funkcionalnih grupa kao što su hidroksil ili amino. U kontekstu predmetnog pronalaska uzorci za koje se sumnja da sadrže HCV uključuju prirodne ili veštačkematerijale kao što su živi organizmi; tkiva ili ćelijske kulture; biološki uzorci kao što su uzorci biološkog materijala (krv, serum, urina, cerebrospinalna tečnost, suze, sputum, pljuvačka, uzorci tkiva, i slično); laboratorijske uzorke; hranu, vodu, ili uzorke vazduha; uzorke bioprodukta kao što su ekstrakti ćelija, naročito rekombinantne ćelije koje sintetišu željeni glikoprotein; i slično. Tipično će uzorak biti sumnjiv da sadrži HCV. Uzorci mogu biti sadržani u bilo kom medijumu, uključujući vodu i organske rastvarače/vodene smeše. Uzorci uključuju žive organizme kao što su ljudi, veštačkimaterijali kao što su ćelijske kulture.
[0129] Postupak tretiranja sadrži dodavanje jedinjenja predmetnog pronalaska u uzorak ili sadrži dodavanje prekursora kompozicije u uzorak. Korak dodavanja sadrži bilo koju metodu primene kao što je gore opisano.
[0130] Po želji, aktivnost HCV posle primene jedinjenja se može posmatrati bilo kojom metodom uključujući direktne i indirektne metode detektovanja aktivnosti HCV. Razmatrane su sve kvantitativne, kvalitativne, i polukuantitativne metode određivanja aktivnosti HCV-a. Tipično jedna od metoda skrininga opisana gore su primenjene, međutim, bilo koja druga metoda kao što je posmatranje fizioloških osobina živog organizma takođe je primenljiva.
[0131] Mnogi organizmi sadrže HCV. Jedinjenja ovog pronalaska su korisna u lečenju ili profilaksi stanja povezanih sa HCV aktivacijom kod životinja ili kod čoveka.
[0132] Međutim, u skriningu jedinjenja koja mogu inhibirati aktivnost HCV-a, treba imati u vidu da rezultati enzimskih testova ne mogu uvek biti u korelaciji sa testovima ćelijske kulture. Prema tome, test baziran na ćeliji bi trebala biti tipično alat za primarni skrining.
Farmaceutske formulacije
[0133] Jedinjenja ovog pronalaska su formulisana sa konvencionalnim nosačima i ekscipijensima, koja će biti odabrana u skladu sa uobičajenom praksom. Tablete će sadržati ekscipijense, glidante, punila, veziva i slično. Vodene formulacije se pripremaju u sterilnom obliku, i kada su nameravane za isporučivanje osim oralnim putem će uglavnom biti izotonične. Sve formulacije će po izboru sadržavati ekscipijense kao što su oni navedene u Priručniku za farmaceutske ekscipijense -Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986). Ekscipijensi uključuju askorbinsku kiselinu i druge antioksidanse, sredstva za heliranje kao što je EDTA, ugljeni hidrati kao što su dekstrin, hidroksialkilceluloza, hidroksialkilmetilceluloza, stearinska kiselina i slično. pH formulacija se kreće od oko 3 do oko 11, ali je obično oko 7 do 10.
[0134] Iako je moguće da se aktivni sastojci mogu samostalno administrirati može biti poželjno da se predstave kao farmaceutske formulacije. formulacije, kako za veterinarsku tako i za ljudsku upotrebu, predmetnog pronalaska sadrže najmanje jedan aktivni sastojak, kao što je gore definisano, zajedno sa jednim ili više prihvatljivih nosača za za njih i opciono ostle terapijske sastojke. Nosač(i) mora biti "prihvatljiv" u smislu da bude kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i fiziološki neškodljiv za njegovog primaoca.
[0135] Formulacije uključuju one koji su pogodne za gorepomenute puteve administracije. Formulacije mogu pogodno biti prikazane u jediničnoj doznoj formi i mogu biti pripremljene bilo kojom od metoda koje su dobro poznate u oblasti farmacije. Tehnike i formulacije se uglavnom nalaze u Remington's Farmaceutski Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Takve metode uključuju korak dovođenaj u vezu aktivnog sastojka sa nosačem koji čini jedan ili više pomoćnih sastojaka. Generalno se formulacije pripremaju uniformno i blisko dovodeći u vezu aktivni sastojak sa tečnim nosačima ili fino podeljenim čvrstim nosačima ili oba, pa onda, ako je potrebno, oblikovanjem proizvoda.
[0136] Formulacije predmetnog pronalaska pogodne za oralnu primenu mogu biti predstavljene kao diskretne jedinice kao što su kapsule, kesice ili tablete od kojih svaka sadrži unapred određenu količinu aktivnog sastojka; kao prah ili granule; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti; ili kao tečnost emulzija ulje u vodi ili tečna emulzija voda u ulju. Aktivni sastojak može se takođe primenjivati kao bolus, elektuarijum ili pasta.
[0137] Tableta se ppravi kompresijom ili oblikovanjem, opciono sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Kompresovane tablete mogu biti pripremljene kompresovanjem aktivnog sastojka u odgovarajućoj mašini u obliku koji slobodno protiče kao što su prah ili granule, opciono pomešanom sa vezivom, mazivom, inertnim razblaživačem, konzervansom, površinskim aktivnim sredstvom ili sredstvom za dispergovanje. Oblikovane tablete mogu se napraviti oblikovanjem smeše aktivnog sastojka u prahu navlaženog inertnim tečnim razblaživačem u odgovarajućoj mašini i mešavinom. Tablete mogu opciono biti premazane ili zarezane i opciono su formulisane tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka iz njih.
[0138] Za primenu na oku ili drugim spoljašnjim tkivima, npr. ustima i koži, formulacije su poželjno primenjene kao topikalne masti ili kreme koje sadrže aktivni sastojak (sastojke) u količini od, na primer, 0.075 do 20% w/w (m/m) (uključujući aktivni sastojak (sastojke) u opsegu između 0.1% i 20% u koracima od 0.1% w/w kao što je 0.6% w/w, 0.7% w/w, itd.), poželjno 0.2 do 15% w/w i najpoželjnije 0.5 do 10% w/w. Kada se formulišu u masti, aktivni sastojci mogu biti upotrebljeni ili sa parafinskom ili sa bazom masti koja se meša sa vodom. Alternativno, aktivni sastojci mogu biti formulisani u bazi kreme ulje u vodi.
[0139] Po želji, vodena faza kreme baze može da obuhvata, na primer, najmanje 30% w/w polihidričnog alkohola, t.j. alkohola koji ima dva ili više hidroksil grupa kao što su propilen glikol, butan 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol i polietilenglikol (uključujući PEG 400) i njihove smeše. Topikalne formulacije mogu poželjno uključiti jedinjenje koje povećava apsorpciju ili penetraciju aktivnog sastojka kroz kožu ili druge pogođene oblasti. Primeri takvih agenasa koji poboljšavaju dermalnu penetraciju uključuju dimetil sulfoksid i povezane analoge.
[0140] Uljana faza emulzije ovog pronalaska može biti sastavljena od poznatih sastojaka na poznat način. Dok faza može sadržati samo emulgator (inače poznat kao emulgent), poželjno sadrži smešu najmanje jednog emulgatora sa masti ili uljem ili sa oba i masti i uljem. Poželjno, hidrofilni emulgator je uključen zajedno sa lipofilnim emulgatorom koji deluje kao stabilizator. Takođe je poželjno uključiti i ulje i mast. Zajedno, emulgator(i) sa ili bez stabilizatora izgrađuje tzv. emulgirajući vosak, i vosak zajedno sa uljem i masti čini tzv. emulgirajuću bazu masti koja formira masnu dispergovanu fazu formulacija krema.
[0141] Emulgatori i emulzioni stabilizatori pogodni za upotrebu u formulaciji predmetnog pronalaska uključuju Tween<®>60, Span<®>80, cetostearil alkohol, benzil alkohol, miristil alkohol, gliceril mono-stearat i natrijum lauril sulfat.
[0142] Izbor pogodnih ulja ili masti za formulaciju zasniva se na postizanju željenih kozmetičkih svojstava. Krema poželjno ne treba da bude ne-masni, ne-bojivi i perljivi proizvod sa odgovarajućom konzistencijom kako bi se izbeglo curenje iz cevi ili drugih posuda. Ravni ili razgranati lanac, mono- ili dibazni estri u vodi kao što su di-izoadipat, izocetil stearat, propilen glikol diestar kokosovih masnih kiselina, izopropil miristat, decil oleat, izopropil palmitat, butil stearat, 2-etilheksil palmitat ili mešavina estara sa razgranatim lancima koji su poznati kao Crodamol CAP mogu se koristiti, poslednja tri su poželjni estri. One se mogu koristiti sami ili u kombinaciji u zavisnosti od potrebnih svojstava. Alternativno, koriste se lipidi sa visokim tačkama topljenja, kao što su beli mekani parafin i/ili tečni parafin ili druga mineralna ulja.
[0143] Farmaceutske formulacije prema predmetnom pronalasku obuhvataju jedno ili više jedinjenja predmetnog pronalaska zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača ili ekscipijensa i po izboru drugih terapijskih sredstava. Farmaceutske formulacije koje sadrže aktivni sastojak mogu biti u bilo kom obliku pogodnom za predvidjeni metod administracije. Kada se koristi za oralnu primenu, mogu se pripremati tablete, pastile, lozenge, vodene ili uljne suspenzije, disperzilni prahovi ili granule, emulzije, tvrde ili meke kapsule, sirupi ili eliksiri. Kompozicije koje su namenjene za oralnu upotrebu mogu biti pripremljene prema bilo kojoj metodi koja je poznata u oblasti za proizvodnju farmaceutskih kompozicija i takve kompozicije mogu da sadrže jedan ili više agenasa uključujući sredstva za zaslađivanje, sredstva za aromatizaciju, sredstva za bojenje i konzervanse, kako bi se obezbedio ukusan preparat. Tablete koje sadrže aktivni sastojak u mešavini sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom koji su pogodni za proizvodnju tableta su prihvatljive. Ovi ekscipijensi mogu biti, na primer, inertni razblaživači, kao što su kalcijum ili natrijum karbonat, laktoza, laktoza monohidrat, natrijum kroskarmeloza, povidon, kalcijum ili natrijum fosfat; granulirajući i dezinetrgišući agensi, kao što su kukuruzni skrob, ili alginska kiselina; vezujući agensi, kao što su celuloza, mikrokristalna celuloza, skrob, želatin ili akacija; i sredstva za podmazivanje, kao što su magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete mogu biti bez premaza ili mogu biti obložene poznatim tehnikama uključujući mikrokapsulaciju da bi se odložilo raspadanje i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i na taj način obezbediti produženo delovanje tokom dužeg vremenskog perioda. Na primer, mogu se koristiti materijali koji imaju mogućnost vremenskog odlaganja, kao što su gliceril monostearat ili gliceril distearat, ili sa voskom.
[0144] Formulacije za oralnu upotrebu mogu biti predstavljene i kao tvrde želatinske kapsule u kojima se aktivni sastojak pomeša sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer, kalcijum fosfatom ili kaolinom, ili kao mekim želatinskim kapsulama gde se aktivni sastojak pomeša sa vodom ili uljanim medijumom, kao što je kao ulje od kikirikija, tečni parafin ili maslinovo ulje.
[0145] Vodene suspenzije predmetnog pronalaska sadrže aktivne materijale u smeši sa ekscipijensima pogodnim za proizvodnju vodenih suspenzija. Takvi ekscipijensi obuhvataju sredstvo za suspendovanje, kao što je natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropil metilceloza, natrijum alginat, polivinilpirolidon, gumi tragakant i guma akacija, i dispergujući ili agensi za vlaženje kao što je prirodni fosfatid (npr., lecitin), proizvod kondenzacije alkilen oksida sa masnom kiselinom (npr., polioksietilen stearat), proizvod kondenzacije etilen oksida sa alifatičnim alkoholom sa dugim lancem (npr., heptadekaetilenoksicetanol), proizvod kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrom dobijenim od masne kiseline i heksitol anhidrida (npr., polioksietilen sorbitan monooleat). Vodena suspenzija može takođe da sadrži jedan ili više konzervanasa kao što su etil ili n-propil p-hidroksi-benzoat, jednim ili više sredstava za bojenje, jedno ili više sredstava za aromatizaciju i jednan ili više zaslađivača, kao što su saharoza ili saharin.
[0146] Uljane suspenzije mogu biti formulisane suspendovanjem aktivnog sastojka u biljnom ulju, kao što je ulje kikirikija, maslinovo ulje, susamovo ulje ili kokosovo ulje, ili u mineralnom uljm kao što je tečni parafin. Oralne suspenzije mogu sadržati sredstvo za zgušnjavanje, kao što je pčelinji vosak, tvrdi parafin ili cetil alkohol. Sredstva za zaslađivanje, kao što su ona koja su navedena gore, mogu dodati sredstva za ukus kako bi se obezbedio ukusan oralni preparat. Ove kompozicije mogu biti očuvane dodatkom antioksidanta kao što je askorbinska kiselina.
[0147] Disperzivni prahovi i granule predmetnog pronalaska pogodni za pripremu vodene suspenzije dodavanjem vode obezbeđuju aktivni sastojak u mešavini sa sredstvom za dispergovanje ili vlaženje, sredstvom za suspendovanje, i jednim ili više konzervanasa. Pogodna sredstva za dispergovanje ili vlaženje i agensi za suspendovanje su predstavljeni primerima koji su ovde stavljeni na uvid javnosti. Mogu biti prisutni takođe dodatni ekscipijensi, zaslađivači, arome i sredstva za bojenje.
[0148] Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska takođe može biti u obliku emulzija uljeu-vodi. Uljana faza može biti biljno ulje, kao što je maslinovo ulje ili arašidovo ulje, mineralno ulje, kao što je tečni parafin, ili njihova mešavina. Pogodni emulgatori obuhvataju prirodne gume, kao što su guma akacija i guma tragakant, prirodne fosfatide, kao što su lecitin soje, estri ili parcijalni estri dobijeni iz masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što su sorbitan monooleat, i proizvodi kondenzacije ovih parcijalnih estara sa etilen oksidom, kao što je polioksietilen sorbitan monooleat. Emulzija može takođe sadržati sredstva za zaslađivanje i aromatozaciju. Sirupi i eliksiri mogu biti formulisani sa zaslađivačima, kao što su glicerol, sorbitol ili sukroza. Takve formulacije mogu takođe sadržati demulcent, konzervans, konzervans ili sredstvo za bojenje.
[0149] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu biti u obliku sterilnog injektibilnog preparata, kao sterilne injekcione vodene ili uljane suspenzije. Ova suspenzija može biti formulisana u skladu sa poznatom oblasti upotrebom onih pogodnih sredstava za dispergovanje ili vlaženje i suspendujućih sredstava koja su gore pomenuta. Sterilni preparat za injektiranje može takođe biti sterilni injekcioni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, kao što je rastvor u 1,3-butan-diolu ili pripremljen kao liofilizovani prah. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji mogu biti upotrebljeni su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Pored toga, sterilna fiksna ulja se konvencionalno mogu koristiti kao rastvarač ili suspendujući medijum. Za ovu svrhu mogu se primeniti bilo koje blago fiksno ulje, uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Pored toga, masna kiselina kao što je oleinska kiselina može takođe da se koristi u pripremi injektibilnih materija.
[0150] Količina aktivnog sastojka koji se može kombinovati sa materijalom nosača za proizvodnju pojedinačnog doznog oblika variraće u zavisnosti od domaćina koji se tretira i određenog načina administracije. Na primer, formulacija za vremensko oslobađanje namenjena za oralnu administraciju za ljude može sadržati približno 1 do 1000 mg aktivnog materijala sjedinjenog sa odgovarajućom i pogodnom količinom materijala nosača koja može da varira od oko 5 do oko 95% ukupnih kompozicija (weight : weight - masa : masa). Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena da obezbedi lako merljive količine za administraciju. Na primer, vodeni rastvor namenjen za intravenosku infuziju može sadržati od oko 3 do 500 µg aktivnog sastojka po mililitru rastvora, tako da može doći do infuzije odgovarajuće zapremine brzinom od oko 30 mL/h.
[0151] Formulacije pogodne za primenu na oku uključuju kapi za oči gde se aktivni sastojak rastvara ili suspenduje u pogodnom nosaču, posebno vodenom rastvaraču za aktivni sastojak. Aktivni sastojak je poželjno prisutan u takvim formulacijama u koncentraciji od 0.5 do 20%, poželjno 0.5 do 10% naročito oko 1,5% m/w.
[0152] Formulacije pogodne za lokalnu primenu u ustima uključuju lozenge koje sadrže aktivni sastojak u aromatizovanoj bazi, obično saharoza i akacija ili tragakant; lozenge koje sadrže aktivni sastojak u inertnoj bazi kao što su želatin i glicerin, ili sukroza i akacija; i vodice za usta za koje sadrže aktivni sastojak u odgovarajućem tečnom nosaču.
[0153] Formulacije za rektalnu administraciju mogu biti predstavljene kao supozitoriaj sa pogodnom bazom koja sadrži primerak kakao maslac ili salicilat.
[0154] Formulacije pogodne za intraplućnu ili nazalnu administraciju imaju veličinu čestica na primer u opsegu od 0.1 do 500 mikrona (uključujući veličinu čestica u rasponu između 0.1 i 500 mikrona u mikronskim uvećanjima kao što su 0.5, 1, 30 mikrona, 35 mikrona, itd.), koje se primenjuju brzom inhalacijom kroz nazalni prolaz ili inhalacijom kroz usta tako da se dostignu alveolarne vreće. Pogodne formulacije uključuju vodene ili uljane rastvore aktivnog sastojka. Formulacije pogodne za administraciju u vidu aerosola ili suvog praha mogu biti pripremljene prema konvencionalnim metodama i mogu se isporučivati sa drugim terapeutskim agensima kao što su jedinjenja prethodno korišćena u lečenju ili profilaksi stanja povezanih sa HCV aktivnošću.
[0155] Formulacije koje su pogodne za vaginalnu primenu mogu biti predstavljene kao pesari, tamponi, kreme, gelovi, paste, pene ili formulacije u vidu spreja koje pored aktivnog sastojka sadrže i takve nosače koji su poznati u oblasti kao prikladni.
[0156] Formulacije koje su pogodne za parenteralno administriranje uključuju vodene i ne-vodene sterilne injekcione rastvore koji mogu sadržati anti-oksidante, pufere, bakteriostatike i rastvore, čime je formulacija izotonična sa krvlju nameravanog primaoca; i vodene i ne-vodene sterilne suspenzije koje mogu uključivati sredstva za suspendovanje i sredstva za zgušnjavanje.
[0157] Formulacije su predstavljene u kontejnerima sa jediničnim dozama ili kontejnerima za više dozama, na primer zatvorene ampule i bočice, i mogu se čuvati u stanju u kom su osušene zamrzavanjem (liofilizovane), koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injektiranje, neposredno pre upotrebe. Nepripremljeni rastvori za injekciju i suspenzije su pripremljeni od sterilnih praškova, granula i tableta prethodno opisanih vrsta. Poželjne jedinične dozne formulacije su one koje sadrže dnevnu dozu ili jediničnu dnevnu pod-dozu, kao što je ovde gore navedeno, ili njihovu odgovarajuću frakciju aktivnog sastojka.
[0158] Razumeće se da pored sastojaka posebno pomenutih iznad, formulacije iz ovog pronalaska mogu uključivati i druge agense konvencionalne u oblasti koji imaju u vidu vrstu formulacije u pitanju, na primer, oni pogodni za oralnu primenu mogu uključivati sredstva za aromatizaciju.
[0159] Pronalazak dalje obezbeđuje veterinarske kompozicije koje sadrže najmanje jedan aktivni sastojak kao što je prethodno definisano zajedno sa veterinarskim nosačim za njih.
[0160] Veterinarski nosači su materijali korisni u svrhu administriranja kompozicije i mogu biti čvrsti, tečni ili gasoviti materijali koji su inače inertni ili prihvatljivi u veterinarskoj oblasti i mogu biti kompatibilni sa aktivnim sastojkom. Ove veterinarske kompozicije mogu se administrirati oralno, parenteralno ili bilo kojim drugim željenim putem.
[0161] Jedinjenja predmetnog pronalaska takođe mogu biti formulisana da obezbede kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka da bi omogućili manje često doziranje ili poboljšati farmakokinetički ili profil toksičnosti aktivnog sastojka. Shodno tome, pronalazak takođe obezbeđuje kompozicije koje sadrže jedno ili više jedinjenja predmetnog pronalaska formulisani za produženo ili kontrolisano oslobađanje.
[0162] Efektivna doza aktivnog sastojka zavisi barem od prirode stanja koje se leči, toksičnosti, da li se jedinjenje koristi profilaktički (niže doze), načina isporuke, i farmaceutske formulacije, i biće određeno od strane kliničara korišćenjem studije eskalacije konvencionalne doze.
Putevi administracije
[0163] Jedno ili više jedinjenja predmetnog pronalaska (ovde su nazvani kao aktivni sastojci) se administriraju bilo kojim putem koja odgovara stanju koje se tretira. Pogodni putevi uključuju oralni, rektalni, nazalni, topikalni (uključujući bukalni i sublingvalni), vaginalni i parenteralni (uključujući subkutano, intramuskularno, intravensko, intradermalno, intratekalno i epiduralno), i slično. Ceniće se da željeni put može varirati sa na primer stanjem primaoca. Prednost jedinjenja ovog pronalaska je što su oralno biološki dostupna i mogu se dozirati oralno.
HCV kombinovana terapija
[0164] Primeri pogodnih kombinacija uključuju kombinacije jednog ili više jedinjenja predmetnog pronalaska sa jednim ili više interferona, ribavirinom ili njegovim analogom, HCV NS3 proteaznim inhibitorima, alfa-glukozidaza 1 inhibitorima, hepatoprotektantima, nucleozidnim ili nucleotidnim inhibitorima HCV NS5B polimeraze, ne-nukleozidnim inhibitorima HCV NS5B polimeraze, HCV NS5A inhibitorima, TLR-7 agonistima, ciklofilin inhibitorima, HCV IRES inhibitorima, farmakokinetičkim pojačivačima, i drugim lekovima za lečenje HCV.
[0165] Preciznije, jedno ili više jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se kombinovati sa jednim ili više jedinjenja odabranim od grupe koja se sastoji od
1) interferoni, npr., pegilirani rIFN-alfa 2b (PEG-Intron), pegilirani rIFN-alfa 2a (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A), rIFN-alfa 2a (Roferon-A), interferon alfa (MOR-22, OPC-18, alfaferone, alfanative, Multiferon, subalin), interferon alfacon-1 (Infergen), interferon alfa-n1 (Wellferon), interferon alfa-n3 (Alferon), interferon-beta (Avonex, DL-8234), interferon-omega (omega DUROS, Biomed 510), albinterferon alfa-2b (Albuferon), IFN alfa-2b XL, BLX-883 (Lokteron), DA-3021, glikolizovani interferon alfa-2b (AVI-005), PEG-Infergen, Pegilirani interferon lambda-1 (Pegilirani IL-29), i belerofon,
2) ribavirin i njegovi analozi, npr., ribavirin (Rebetol, Copegus), i taribavirin (Viramidine), 3) HCV NS3 proteazni inhibitori, npr., boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), TMC435350, BI-1335, BI-1230, MK-7009, VBY-376, VX-500, GS-9256, GS-9451, BMS-790052, BMS-605339, PHX-1766, aS-101, YH-5258, YH5530, YH5531, i ITMN-191,
4) alfa-glukozidaza 1 inhibitori, npr., celgosivir (MX-3253), Miglitol, i UT-231B, 5) hepatoprotektanti, npr., emericasan (IDN-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilin, i MitoQ,
6) nukleozidni ili nukleotidni inhibitori HCV NS5B polimeraze, npr., R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, BCX-4678, valopicitabin (NM-283), i MK-0608,
7) ne-nukleozidni inhibitori HCV NS5B polimeraze, npr., PF-868554, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, GS-9190, VBY-708, VCH-222, a848837, aNA-598, GL60667, GL59728, a-63890, a-48773, a-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125, i GS-9190,
8) HCV NS5A inhibitori, npr., aZD-2836 (A-831), BMS-790052, i A-689,
9) TLR-7 agonists, npr., imiquimod, 852A, GS-9524, aNA-773, aNA-975, aZD-8848 (DSP-3025), i SM-360320,
10) ciklofilin inhibitori, npr., DEBIO-025, SCY-635, i NIM811,
11) HCV IRES inhibitori, npr., MCI-067,
12) farmakokinetički pojačivači, npr., BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585, i roksitromicin,
13) drugi lekovi za lečenje HCV, npr., timozin alfa 1 (Zadaxin), nitazoksanid (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG-10101), GS-9525, KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, aNA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, aVI 4065, BMS-650032, BMS-791325, Bavituksimab, MDX-1106 (ONO-4538), Oglufanid, i VX-497 (merimepodib).
[0166] Predmetna prijava stavlaj na uvid javnosti farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje predmetnog pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, i/ili estar, u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim terapijskim agensom, i farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijensom.
[0167] Terapijski agens koji se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem predmetnog pronalaska može biti bilo koje sredstvo koje ima terapeutski efekat kada se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem predmetnog pronalaska. Na primer, terapeutski agens koji se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem ovog pronalaska može biti interferoni, ribavirin analozi, NS3 proteazni inhibitori, NS5b polimeraza inhibitori, alfa-glukozidaza 1 inhibitori, hepatoprotektanti, ne-nukleozidni inhibitori HCV, i drugi lekovi za lečenje HCV.
[0168] U drugom tehničkom rešenju, predmetna prijava stavlja na uvid javnosti farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje predmetnog pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat i/ili estar, u kombinaciji sa barem jednim dodatnim terapijskim agensom koji je odabran iz grupe koja se sastoji od - pegilirani rIFN-alfa 2b, pegilirani rIFN-alfa 2a, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, konsenzus IFN alfa, infergen, rebif, lokteron, aVI-005, PEG-infergen, pegilirani IFN-beta, oralni interferon alfa, feron, reaferon, intermaks alfa, r-IFN-beta, infergen aktimun, IFN-omega sa DUROS, albuferon, rebetol, copegus, levovirin, VX-497, viramidin (taribavirin), a-831, a-689, NM-283, valopicitabin, R1626, PSI-6130 (R1656), HCV-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, XTL-2125, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191, i BILN-2065, MX-3253 (celgosivir), UT-231B, IDN-6556, ME 3738, MitoQ, i LB-84451, benzimidazolni derivati, benzo-1,2,4-tiadiazin derivati, i fenilalanin derivati, zadaksin, nitazoksanid (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, aVI 4065, bavituksimab, oglufanid, PYN-17, KPE02003002, actilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, aNA-975 (isatoribin), XTL-6865, aNA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, i NIM811 i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijens.
[0169] Predmetna prijava stavlja na uvid javnosti kombinacioni farmaceutski agens koji sadrži:
a) prvu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje predmetnog proalaska, ilinjegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, ili estar; i
b) drugu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedan dodatni terapijski agens koji je odabran od grupe koja se sastoji od HIV proteaza inhibirajućih jedinjenja, HIV nenukleozidnih inhibitora reverzne transkriptaze, HIV nukleozidnih inhibitora reverzne transkriptaze, HIV nukleotidnih inhibitora reverzne transkriptaze, HIV integraznih inhibitora, gp41 inhibitora, CXCR4 inhibitora, gp120 inhibitora, CCR5 inhibitora, interferona, ribavirin analoga, NS3 proteaznih inhibitora, alfa-glukozidaza 1 inhibitora, hepatoprotektanata, nenukleozidnih inhibitora HCV, i i drugih lekova za lečenje HCV, i njihovih kombinacija.
[0170] Kombinacije jedinjenja sa formulom I i drugih aktivnih terapijskih agenasa mogu biti odabrani za lečenje pacijenata inficiranih sa HCV i drugih stanja kao što su HIV infekcije. Prema tome, jedinjenja sa formulom I mogu biti kombinovana sa jednim ili više jedinjenja korisnih u lečenju HIV, na primer HIV proteaza inhibirajuća jedinjenja, ne-nukleozidni inhibitori HIV reverzne transkriptaze, HIV nukleozidnih inhibitora reverzne transkriptaze, HIV nukleotidni inhibitori reverzne transkiptaze, HIV integrazni inhibitori, gp41 inhibitori, CXCR4 inhibitori, gp120 inhibitori, CCR5 inhibitori, interferoni, ribavirin analozi, NS3 proteazni inhibitori, NS5b polimeraza inhibitori, alfa-glukozidaza 1 inhibitori, hepatoprotektanti, ne-nukleozidni inhibitori HCV, i drugi lekovi tokom lečenja HCV.
[0171] Konkretnije, jedno ili više jedinjenaj predmetnog pronalaska mogu biti kombinovani sa jednjim ili više jedinjenja odabranih od grupe koja se sastoji od 1) HIV proteazni inhibitori, npr., amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, lopinavir ritonavir, nelfinavir, sahinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), aG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, i GW640385X, DG17, PPL-100, 2) HIV ne-nukleozidni inhibitor reverzne transkiptaze, npr., capravirin, emivirin, delaviridin, efavirenz, nevirapin, (+) kalanolid A, etravirin, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, i TMC-120, TMC-278 (rilpivirin), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453,061, RDEA806, 3) HIV nukleozidni inhibitor reverzne transkiptaze, npr., zidovudin, emtricitabin, didanosin, stavudin, zalcitabin, lamivudin, abacavir, amdoksovir, elvucitabin, alovudin, MIV-210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabin, fosfazid, fozivudin tidoksil, fosalvudin tidoksil, apricitibin (AVX754), amdoksovir, KP-1461, abacavir lamivudin, abacavir lamivudin zidovudin, zidovudin lamivudin, 4) HIV nukleotidni inhibitor reverzne transkiptaze, npr., tenofovir, tenofovir disoproksil fumarat emtricitabine tenofovir disoproksil fumarat emtricitabin efavirenz, i adefovir, 5) HIV integrazni inhibitor, npr., kurkumin, derivati kurkumina, cihorinska kiselina, derivati cihorinske kiseline, 3,5- dikafeoilhinska kiselina, derivati 3,5- dikafeoilhinske kiseline, aurintrikarboksilna kiselina, derivati aurintrikarboksilne kiseline, fenetil estar kafeinske kiseline, derivati fenetil estra kafeinske kiseline, tirfostin, derivati tirofostina, kvercetin, derivati kvercetina, S-1360, zintevir (AR-177), L-870812, i L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS-538158, GSK364735C, 6) gp41 inhibitor, npr., enfuvirtid, sifuvirtid, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Lokus gp41, CovX, i REP 9, 7) CXCR4 inhibitor, npr., aMD-070, 8) ulazni inhibitor, npr., SP01A, TNX-355, 9) gp120 inhibitor, npr., BMS-488043 i BlockAide/CR, 10) G6PD i NADH-oksidazni inhibitor, npr., imunitin, 10) CCR5 inhibitor, npr., aplavirok, vikrivirok, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCR5mAb004, i maravirok, 11) interferon, npr., pegilirani rIFN-alfa 2b, pegilirani rIFN-alfa 2a, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, konsenzus IFN alfa, infergen, rebif, lokteron, aVI-005, PEG-infergen, pegilirani IFN-beta, oral interferon alfa, feron, reaferon, intermaks alfa, r-IFN-beta, infergen aktimun, IFN-omega sa DUROS, i albuferon, 12) ribavirin analogs, npr., rebetol, kopegus, levovirin, VX-497, i viramidin (taribavirin) 13) NS5a inhibitori, npr., a-831, a-689, i BMS-790052, 14) NS5b polimeraza inhibitori, npr., NM-283, valopicitabin, R1626, PSI-6130 (R1656), HCV-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, i XTL-2125, 15) NS3 proteazni inhibitori, npr., SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191, i BILN-2065, 16) alfa-glukozidaza 1 inhibitori, npr., MX-3253 (celgosivir) i UT-231B, 17) hepatoprotektanti, npr., IDN-6556, ME 3738, MitoQ, i LB-84451, 18) ne-nukleozidni inhibitori HCV, npr., benzimidazol derivati, benzo-1,2,4-tiadiazin derivati, i fenilalanin derivati, 19) drugi lekovi za lečenje Hepatitias C, npr., zadaksin, nitazoksanid (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, aVI 4065, bavituksimab, oglufanid, PYN-17, KPE02003002, aktilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, aNA-975 (isatoribin), XTL-6865, aNA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, i NIM811, 19) farmakokinetički pojačivači, npr., BAS-100 i SPI452, 20) RNAse H inhibitori, npr., ODN-93 i ODN-112, 21) drugi anti-HIV agensi, npr., VGV-1, PA-457 (bevirimat), ampligen, HRG214, citolin, polimun, VGX-410, KD247, aMZ 0026, CYT 99007, a-221 HIV, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, aLG889, i PA-1050040.
Metaboliti jedinjenja predmetnog pronalaska
[0172] Takođe su ovde opisani in vivo metabolički proizvodi jedinjenja koaj su ovde opisana. Takvi proizvodi mogu da rezultuju na primer iz oksidacije, redukcije, hidrolize,a midacije, esterifikacije i slično administriranih jedinjenja, primarno usled enzimatskih procesa. Prema tome, ovde su opisana jedinjenja proizvedena procesom koji sadrži dovođenje u kontakt jedinjenja ovog pronalaska sa sisarom tokom perioda vremena koje je dovoljno da se dobije njegov metabolički proizvod. Takvi proizvodi su tipično identifikovani pripremanjem radioaktivno obeleženog (npr., C<14>ili H<3>) jedinjenja predmetnog pronalaska, administiranjem parenteralno u detektabilnoj dozi (npr., veća od oko 0.5 mg/kg) životinji kao što je pacov, miš, zamorče, ili čoveku, omogućavajući dovoljno vremena za metabolizam (tipično oko 30 sekundi do 30 sati) i izolovanjem njegovih konverzionih proizvoda iz urina, krvi, ilid rugih bioloških uzoraka. Ovi proizvodi se brzo izoluju jer su obeleženi (drugi su izolovani primenom antitela sposobnih za vezivanje epitopa koji preživljavaju u metabolitu). Strukture metabolita su određene na konvencionalan način, npr., pomoću MS ili NMR analize. Uopšte, analiza metabolita je odrađena na isti način kao konvencionalne studije metabolizma lekova koje su odbro poznate prosečnim poznavacima oblasti. Proizvodi konverzije, sve dok se drugačije ne nalaze in vivo, su korisni u dijagnostičkim esejima za terapijsko doziranje jedinjenja predmetnog pronalaska čak i ne poseduju sopstvenu HCV-inhibitornu aktivnost
[0173] Metode za određivanje stabilnosti jedinjenja u surogatnim gastrointestinalnim sekrecijama su poznate.
Jedinjenja formule
[0174] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35):
gde:
V je alkil;
L je benzimidazolil;
M je 5-člani heteroaril prsten;
A<15>je:
svako H<14>je nezavisno fuzionisani nezasićeni, delimično nezasićeni ili zasićeni triciklični karbociklus which je po izboru supstituisan sa jednim ili više grupe nezavisno odabranih od R<A1>i R<A3>; i
svako X<A>je nezavisno O, NR, SO, SO2C(=O), NRC(=O), C(=O)NR, CR=CR, NRC(=O)NR, alenil, alkinil, ili je odsutno i svako R je nezavisno odabran od H ili alkil;
svako R<A1>je nezavisno odabran od cijano, nitro, SOR<4>, SO2R<4>, -alkilSO2R<4>, haloalkoksi, cijanoalkil, NR<4>SO2R<4>, cikloalkil, (halo)cikloalkil, heterociklus, (cikloalkil)alkil, (heterociklus)alkil, gde svako alkil, heterociklus i cikloalkil je po izboru supstituisan sa jednim ili više halo;
svako R<A3>je nezavisno odabran od alkoksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, alkil, arilalkoksikarbonil, karboksi, formil, halo, haloalkil, hidroksi, hidroksialkil, -NR<a>R<b>, (NR<a>R<b>)alkil, i (NR<a>R<b>)karbonil; R<a>i R<b>su svako nezavisno odabrani od grupe koja se sastoji od vodonik, alkenil, alkil, alkilkarbonil, aril, arilalkil, arilalkilkarbonil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heterociklil, i heterociklilalkil;
svako R<4>je nezavisno odabran od H, alkil, haloalkil, aril, i arilalkil; i svako P je nezavisno odabrano od:
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0175] U specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0176] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib37):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0177] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), ili (Ib37) gde P je odabrano od:
[0178] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), ili (Ib37):
gde P ije:
[0179] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), ili (Ib37): gde P je:
po izboru supstituisan sa jednim ili više grupe nezavisno odabrane od R<P6>i R<P11>; svako R<P6>je nezavisno odabran od alkoksi, alkil, aril, halo, haloalkil, hidroksi, i -NR<Pa>R<Pb>, gde alkil može po izboru formirati fuzionisani tročlani do šestočlani prsten sa susednim ugljenikovim atomom, gde tročlani do šestočlani prsten je po izboru supstituisan sa jednom ili dve alkil grupe; R<Pa>i R<Pb>su svako nezavisno H, alkil, aril, ili Arilalkil; ili R<Pa>i R<Pb>uzeti zajedno sa atomom za koji su vezani formiraju heterociklus;
svako R<P11>je nezavisno odabran od cijano, alkilsulfonil, arilsulfonil, (NR<h>R<h>)sulfonil, heterociklilsulfonil, heteroarilsulfonil, haloalkoksi, alkoksialkiloksi, haloalkoksialkiloksi, cikloalkioksialkiloksi, ariloksialkiloksi, heteroariloksiakiloksi, heterociklooksialkiloksi, (NR<h>R<h>)alkiloksi, cijanoalkoksi, cijanocikloalkiloksi, cikloalkiloksi, okso, heterociklil, -NR<hh>R<h>, (NR<hh>R<h>)alkil, (NR<hh>R<h>)karbonil, gde svako R<h>je nezavisno -H, alkil, alkoksiamino, aril, arilalkil, heterociklus, heterociklioksi, alkenil, alkeniloksi, alkinil, alkoksialkil, haloalkil, cijanoalkil, haloalkoksialkil, aminoalkil, alkilaminoalkil, dialkilaminoalkil, sulfonilalkil; i kada su dve R<h>grupe prisutne onda one mogu doći zajedno sa atomima za koje su vezane da formiraju 4-15 člani heterociklični prsten; gde svako R<hh>je nezavisno aril, arilalkil, heterociklus, heterociklioksi, alkeniloksi, alkinil, alkoksialkil, haloalkil, cijanoalkil, haloalkoksialkil, aminoalkil, alkilaminoalkil, dialkilaminoalkil, sulfonilalkil, (NR<h>R<h>)sulfonil, heteroarilsulfonil, i -S(=O)2R<h>, -C(=O)R<h>, -C(=O)NR<h>R<h>.
[0180] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib38):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0181] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib39):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0182] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib40):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0183] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib41):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0184] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib42):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0185] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib43):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0186] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib44):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0187] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib45):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0188] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), (Ib37), (Ib38), (Ib39), (Ib40), (Ib41), (Ib42), (Ib43), (Ib44), ili (Ib45) gde svako X<A>koje može biti odsutno je odsutno.
[0189] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), (Ib37), (Ib38), (Ib39), (Ib40), (Ib41), (Ib42), (Ib43), (Ib44), ili (Ib45) gde A<15>je odabran od:
[0190] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), (Ib37), (Ib38), (Ib39), (Ib40), (Ib41), (Ib42), (Ib43), (Ib44), ili (Ib45) gde A<15>je odabran od:
[0191] U još jednom specifičnom tehničkom rešenju pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (Ib35), (Ib36), (Ib37), (Ib38), (Ib39), (Ib40), (Ib41), (Ib42), (Ib43), (Ib44), ili (Ib45) gde svako V is:
Sintetički intermedijeri
[0192] Ovde su takođe stavljeni na uvid javnosti sintetički procesi i sintetički intermedijeri:
terc.butil estar 1 -{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc. buti estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1 H- imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbaminske kiseline
terc.butil estar 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc. buti estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4il}-4,8-dimetoksi-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1 H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbaminske kiseline
4,8-Dimetil-1,5- ditia-s-indacen metil estar (1-{2-[5-(4-Bromofenil)-1 H-imidazol-2-il]-4-okso-pirolidin-1 -karbonil}-2-metilpropil)-karbaminske kiseline
terc-butil estar 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin 1-karboksilne kiseline terc-butil estar 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijanopirolidin-1-karboksilne kiseline
terc-butil estar
4-Cijano-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetra metiI-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1
H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilne kiseline
4-Metoksimetil-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar
1-terc-butil estar
terc-butil estar
2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-pirolidin
4-Difluorometoksimetilpirolidin-1,2-dikarboksilna
kiselina 1-terc-butil estar
-1-karboksilne kiseline
metil estar (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminske kiseline
4-Difluorometoksimetil-
(1 -{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1 H- Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-tercimidazol-2-il]-4-difluorometoksimetil-pirolidin-1- butil estar 2-[2-(3a,6a-dihidrokarbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2-okso-etil] metal estar estar
Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(5-bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2- 2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-okso-etil]estar 1-terc-butil estar b]tiofen-2-il)-1H-imidayol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
{1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-(1-{2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2- pirolidin-1-karbonil]-2-metilb]tiophen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1- propil}-karbaminska kiselina metil estar karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina
metil estar
(1 -{2-[5-(6- Etinil-naftalen-2-il)-1H- (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2- il]-4,4-difluoro-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil-propil)-karbaminska kiselina metil metil estar estar
(1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol- [2-Metil-1-(6-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2- [1,3,2]dioksaborolanmetil-propil)-karbaminska kiselina metil estar 2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar
(1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1/-/-imidazol-2-il]-4- 2-Bromo-9,9-difluoro-7-jodo-9H-fluoren cijano-pirrolidin-1-karbonil}-3-metansulfonil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
2-[4-Etinil-1-(2-trimetilsilanil- [1-(4-Metoksimetil-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametiletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]- [1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar
4-Difluorometoksimetil-pirolidin- 4,4-Difluoro-pirolidin-1,2-dikarboksilna 1,2-diarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo- kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar okso-etil] estar 1-terc-butil estar
1-(3a,6a- 2-Bromo-1-(3a,6a-Dihidrotieno[3,2 dihidro-tieno[3,2- 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2--b]tiofen-2-il)- b]tiofen-2-il)- il]-4-difluorometoksimetil-pirolidin-1-etanon karboksilna kiselina terc-butil estar
2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso- 2-{5-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-etilkarbamoil]-4-cijano- 3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il]-1H-imidazolpirolidin-1-karboksilna kiselina 2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar terc-butil estar
1-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-hloro-etanon6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar
2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2- 5-(4-Bromo-fenil)-2-[4-(2-metoksimetoksi-etoksi)pirolidin-1-karboksilna etoksi)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol kiselina terc-butil estar
[1-(4-(2-Metoksi-etoksi)-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil- 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}- etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar ksielina metil estar
{1-[2-[5-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4- [2-Metil-1-(4-(pirazin-2-iloksi)-2-{5-[4-(4,4,5,5-(pirazin-2-iloksi)-pirolidn-1-karbonil]-2-metil- tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-propil}-karbaminska kiselina metil estar imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar
{1-[2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol- 4-Difluorometoksi-pirolidin-1,2-2- il]-40-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1- d karboksilna kiselina 2-[2-(4- 2-{5-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska bromo-fenil)- imidazol-2-il]-pirolidin-3-kiselina metil estar 2-okso-etil] estar 1-terc-butil iloksi}-pirazin
estar
Primeri metoda pravljenja jedinjenja predmetnog pronalaska.
[0193] Pronalazak se takođe onodsi na metoda pravljenja kompozicija predmetnog pronalaska. Kompozicije se pripremaju pomoću bilo koje od primenljivih tehnika organske sinteze. Mnoge takve tehnike su dobro poznate u oblasti. Međutim, mnoge od poznatih tehnika se elaborirane u Compendium of Organic Synthetic Methods (John Wiley & Sons, New York), tom 1, Ian T. Harrison i Shuyen Harrison, 1971; tom 2, Ian T. Harrison i Shuyen Harrison, 1974; tom 3, Louis S. Hegedus i Leroy Wade, 1977; tom 4, Leroy G. Wade, Jr., 1980; tom 5, Leroy G. Wade, Jr., 1984; i tom 6, Michael B. Smith; kao i March, J., advanced Organic Chemistry, treće izdanje, (John Wiley & Sons, New York, 1985), Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry. U 9 tomova, Barry M. Trost, glavni urednik (Pergamon Press, New York, 1993 štampanje). Druge metode za pripremanje jedinjenja predmetnog pronalaska su opisane u objavi međunarodne prijave patenta sa brojem WO 2006/020276.
[0194] Nekoliko metoda koje služe kao primer za pripremu kompozicija predmetnog pronalaska su obezbeđeni u shemama i primerima ispod. Ove metode imaju za cilj da ilustruju prirodu takvih preparata i nisu namenjene da ograniče obim primenjivih metoda.
[0195] Uopšte, reakcioni uslovi kao što su temperatura, vreme reakcije, rastvarači, „work-up“ procedure (izvedeni postupci u hemijskoj proceduri), i slično, biće oni zajednički u oblasti za određenu reakciju koja se izvodi. Citirani referentni materijal, zajedno sa navedenim materijalom, sadrži detaljne opise takvih uslova. Tipično će temperature biti od -100°C do 200°C, rastvarači će biti aprotični ili protični, a reakciona vremena će biti od 10 sekundi do 10 dana. „Work-up“ se tipično sastoji od kvenčovanja bilo kakvih neizreagovanih reagenasa praćeno deljenjem između sistema vodenog/organskog sloja (ekstrakcije) i odvajanja sloja koji sadrži proizvod.
[0196] Reakcije oksidacije i redukcije se tipično izvode na temperaturama blizu sobne temperature (oko 20°C), iako se za redukcije metalnih hidrida često temperatura smanjuje na 0°C do -100°C, rastvarači su tipično aprotični za redukcije i mogu biti ili protični ili aprotični za oksidacije. Vremena reakcije prilagođavaju se postizanju željenih konverzija.
[0197] Kondenzacione reakcije tipično se izvode na temperaturama blizu sobne temperature, iako za ne-ravnotežnim, kinetički kontrolisane kondenzacije smanjene temperature (0°C do - 100°C) su takođe česte. Rastvarači mogu biti ili protični (uobičajeni u ravnotežnim reakcijama) ili aprotični (uobičajeni u kinetički kontrolisanim reakcijama).
[0198] Standardne sintetičke tehnike kao što su azeotropno uklanjanje sporednih proizvoda reakcije i primena anhidorvanih reakcionih uslova (npr., sredine inertnog gasa) su uobičajene u oblasti i primenjene kada je primenljivo.
[0199] Termini "tretiran", "tretiranje", "tretman", i slično, kada su korišćeni u vezi sa hemijskim sintetičkim operacijama, znače kontaktiranje, mešanje, reagovanje, dozvoljavanje da reaguje, dovođenje u kontakt, i druge termine uobičajene u oblastiza označavanje da je jedan ili više hemijskih entiteta tretiran na takav način da ga konvertuje u jedan ili više drugih hemijskih entiteta. Ovo znači da "tretiranje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva" je sinonim sa "dozvoljavanjem jedinjenju jedan da reaguje sa jedinjenjem dva, "kontaktiranje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva ", "reagovanje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva", i drugi izrazi uobičajeni u oblasti organske sinteze za razumno označavanje da je jedinjenje jedan "tretirano", "reagovalo", "ostavljeno da reaguje", itd., sa jedinjenjem dva. Na primer, tretiranje označava razumni i uobičajeni način u kome su organske hemikaljije ostavljene ad reaguju. Normalne koncentracije (0.01M do 10M, tipično 0.1M do 1M), temperature -100°C do 250°C, tipično -78°C do 150°C, tipičnije -78°C do 100°C, još tipičnije 0°C do 100°C), reakcioni sudovi (tipično stakleni, plastični,metalni), rastvarači, pritisci, atmosfere (tipično vazduh za reakcije neosetljive na kiseonik i vodu i reakcije neosetljiev na vodu ili azpt i argon za osetljive na kiseonik i vodu), itd., su namenjeni osim ukoliko nije naznačeno drugačije. Znanje o sličnim reakcijama poznatim u oblasti organse sinteze je korišćeno u odabiranju uslova i aparature za „tretiranje“ u datom procesu. Posebno, prosečan poznavalac oblasti organske sinteze selektuje uslove i aparaturu orazmno očekivanu da uspešno izvede hemijske reakcije opisanih procesa na osnovu znanja u oblasti.
[0200] Modifikacije svake od shema koje služe kao primer i u Primerima (u daljem "sheme koje služe kao primer") dovode do različitih analogija specifičnih primernih materijala koji su proizvedeni. Gore citirane refernce koje opisuju pogodne metode organske sinteze primenjuju se na takve modifikacije.
[0201] U svakoj od shema koje služe kao primer može biti povoljno da se odvajaju reakcioni proizvodi jedan od drugog i/ili od početnih materijala. Željeni proizvodi svakog koraka ili serije koraka su odvojeni i/ili prečišćeni (u daljem tekstu odvojeni) do željenog stepena homogenosti pomoću tehnika uobičajenih u oblasti. Tipično, takva razdvajanja uključuju višefaznu ekstrakciju, kristalizaciju iz rastvarača ili smeše rastvarača, destilaciju, sublimaciju, ili hromatografiju. Hromatografija može uključivati bilo koji broj metoda uključujući, na primer: reverzno faznu i normalno faznu; ekskluziono po veličini; jono izmenjivačku; metode i aparate za tečnu hromatografiju na visokom, srednjem i niskom pritisku i aparata; malu analitičku; simuliranog pokretnog sloja (SMB) i preparativnu hromatografiju na tankom ili debelom sloju, kao i tehnike tankosloje malih razmera i fleš hromatografije.
[0202] Druga klasa metoda razdvajanja podrazumeva tretiranje mešavine sa reagensom koji je odabran da se vezuje ili daje na drugi način odvojivi željeni proizvod, neizreagovan početni materijal, reakcioni sporedni proizvod, ili slično. Takvi reagensi uključuju apsorbente ili apsorbente kao što su aktivni ugalj, molekularna sita, medijumi za jonsku razmenu, ili slično. Alternativno, reagensi mogu biti kiseline u slučaju baznog materijala, baze u slučaju kiselog materijala, vezujući reagensi kao što su antitela, vezujući proteini, selektivni helatori kao što su krunski etri, reagensi za tečnost/tečnost jonski ekstrakcioni reagensi (LIKS), ili slično.
[0203] Odabir odgovarajućih metoda razdvajanja zavisi od prirode uključenih materijala. Na primer, tačka ključanja, i molekulska težina u destilaciji i sublimaciji, prisustvo ili odsustvo polarnih funkcionalnih grupa u hromatografiji, stabilnost materijala u kiselim i baznim medijumima u višefaznoj ekstrakciji, i slično. Prosečan poznavalac oblasti će primeniti tehnike koje će najverovatnije postići željeno razdvajanje.
[0204] Jedan stereoizomer, npr., enantiomer, suštinski oslobođen njegovog stereoizomera može biti dobijen razlaganjem racemske smeše korišćenjem metode kao što je formiranje diastereomera korišćenjem optički aktivnih agenasa za razlaganje (Stereochemistry of Carbon Jedinjenjes, (1962) od strane E. L. Eliel, McGraw Hill; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113, 3) 283-302). Racemske smeše hiralnih jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se odvojiti i izolovati bilo kojim pogodnim metodom, uključujući: (1) formiranje jonskih, diastereomernih soli sa hiralnim jedinjenjima i odvajanje frakcionom kristalizacijom ili drugim metodama, (2) formiranje diastereomernih jedinjenja sa hiralnim derivatizacionim reagensima, odvajanje dijastereomera, i konverzija u čiste stereoizomere, i (3) odvajanje suštinski čistih ili obogaćenih stereoizomera direktno pod hiralnim uslovima.
[0205] Prema metodi (1), diastereomerne soli se mogu formirati reakcijom enantiomerno čistih hiralnih baza kao što su brucin, hinin, efedrin, strihnin, α-metil-β-feniletilamin (amfetamin), i slično sa asimetričnim jedinjenjima koja imaju kiselinsku funkcionalnost, kao što su karboksilna kiselina i sulfonska kiselina. Diastereomerne soli mogu biti indukovane da se razdvoje frakcionom kristalizacijom ili jonskom hromatografijom. Za odvajanje optičkih izomera amino jedinjenja, dodavanje hiralnih karboksilnih ili sulfonskih kiselina, kao što je kamphorsulfonska kiselina, vinska kiselina, mandelična kiselina, ili mlečna kiselina mogu rezultirati stvaranjem diastereomernih soli.
[0206] Alternativno, u metodi (2), supstrat koji treba dase razloži je reagovan sa jednim enantiomerom hiralnog jedinjenja da formira diastereomerni par (Eliel, E. i Wilen, S. (1994) Stereochemistry of Organic Jedinjenjes, John Wiley & Sons, Inc., str. 322). Diastereomerna jedinjenja mogu biti formirana reagovanjem asimetričnih jedinjenja sa enantiomerno čistim hiralnim derivatizujućim reagensima, kao što su mentil derivati, praćeno razdvajanjem diastereomera i hidrolizom da se dobije čist, enantiomerno obogaćen supstrat. Metoda za određivanje optičke čistoće uključuje pravljenje hiralnih estara kao što je mentil estar, npr., (-) mentil hloroformat u prisustvu baze, ili Mosher estar, α-metoksi-α-(trifluorometil)fenil acetat (Jacob III. (1982) J. Org. Chem. 47:4165), racemske smeše, i analiziranje NMR spektra za prisustvo dva atropizomerna diastereomera. Pogodni diastereomeri atropizomernih jedinjenja mogu biti razdvojeni i izolovani hromatografijom na normalnoj i reverznoj fazi praćenjem metoda za separaciju atropizomernih naftil-izohinolina (Hoye, T., WO 96/15111). Po metodi (3), racemska smeša dva enantiomera može biti razdvojena hromatografijom korišćenjem hiralne stacionarne faze (Chiral Liquid Chromatography (1989) W. J. Lough, Ed. Chapman i Hall, New York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr.513:375-378). Obogaćeni ili prečišćeni enantiomeri mogu se razlikovati metodama koje se koriste za razlikovanje drugih hiralnih molekula sa asimetričnim ugljenikovima tomima, kao što je optička rotacija i cirkularni dihroizam.
Sheme i primeri
[0207] Opšti aspekti ovih metoda koje služe kao primer opisani su ispod i u Primeri. Svaki od proizvoda sledećih procesa je po izboru odvojen, izolovan, i/ili prečišćen pre upotrebe u narednim procesima.
[0208] Jedan broj metoda koje služe kao primer za pripremu jedinjenja predmetnog pronalaska su ovde navedene, na primer, u Primerima u nastavku. Ove metode imaju za cilj da ilustruju prirodu takvih pripremanja i nisu namenjene ograničavanju obima primenljivih metoda. Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se koristiti kao intermedijeri za pripremanje drugih jedinjenja predmetnog pronalaska. U opisanim metodama koje služe kao primer koje su opisane opisanim ovde, fragment E-V- takođe može biti napisan kao R9-. Zatim, fragment E-V-Z- ili R9-Z- može biti napisan kao T-. fragments E-V-Z-P, R9-Z-P-, ili T-P- mogu svi biti napisani kao J-.
Shema 1 prikazuje opštu sintezu T-P-M-A-A-M-P-T molekul predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi A-A veza i/ili A-M veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se vežu Br-M-P-T i (RO)2B-A-A-M-P-T intermedijer ili Br-A-M-P-T i (RO)2B-A-M-P-T intermedijer. Estar boronske kiseline 1 (ili 4) je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. srilbromid 2 ili 5) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 3. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju formiranje A-A veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
[0209] Shema 1a prikazuje opštu sintezu T-P-M-W-M-P-T molekula i P-M-W-M-P molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi W-M veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se vežu Br-M-P-T i (RO)2B-W-M-P-T intermedijer ili Br-M-P-PG za (RO)2B-W-M-P-PG intermedijer. Estar boronske kiseline 6 (ili 6.1) je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. Arilbromide 5 ili 5.1) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 7 i 8. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju formiranje A-A veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
[0210] Shema 2 prikazuje opštu sintezu A-M-P-T molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je maid ili imidazol. Kuplovanje amina 10 sa kiselinom 9 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije amid koji sadrži 11.
Kiselina 13 je kuplovana sa α-haloketonom, kao što je α-bromoketone12.1, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 14.1. Alternativno, kiselina 13 je kuplovana sa α-aminoketonom 12.2, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 14.2. Reakcija 14.1 ili 14.2 sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži molekul Br-A-M-P-T.
[0211] Benzamidin 16 je kuplovan sa α-haloketonom kao što je α -hloroketon 17 u baznim uslovima kao što je K2CO3da se dobije imidazol koji sadrži molekul Br-A-M-P-T 18. A-M-P-T 15 može biti pripremljen analogno.
[0212] Shema 3 prikazuje opštu sintezu A-M-P-T molekul predmetnog pronalaska gde borate ili boronska kiselina 1.1 može biti sintetisan od bromide 2.1.
[0213] Shema 4 prikazuje opštu sintezu A-M-P-Z-R9 fragmenta predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P = Pirolidin i Z = karbonil. Kuplovanje amina 20 sa kiselinom 21 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 22.
Shema 5: Reprezentativna sinteza L-P
[0214] Shema 5 prikazuje opštu sintezu L-P molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, L = benzimidazole. kiselina 24 je kuplovana sa 23 korišćenjem peptidnog kupljućeg reagensa kao što je HATU da se dobije 25. Zagrevanje u rastvaraču (kao što je refluksujući etanol) daje L-P fragment 26.
[0215] Alternativno, L-P fragment 26 je dobijen reakcijom diamin (kao što je 23) i karbonil jedinjenja (kao što je aldehid 27) u rastvaraču u uslovima zagrevanja (npr. etanol pod mikrotalasnim zračenjem).
Shema 6: Reprezentativna sinteza P-M-A-A-M-P fragmenta
[0216] Shema 6 prikazuje opštu sintezu P-M-A-A-M-P molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M = imidazol. Na primer, diketon 27 je konvertovan u 30 korišćenjem broma. Jedinjenje 27 može biti komercijalno dostupan ili može biti pripremljen od dibromida 27.1 kroz kuplovanje sa vinilkalaj reagensom kao što je tributil(etoksivinil)stanan sa paladijum. Kuplovanje 30 sa kiselinom 24 u baznim uslovima kao što je diizopropiletilamin daje diestar 31. Formiranje imidazola je postignuto tretmanom 31 sa amonijum acetatom da se obezbedi imidazol koji sadrži molekul P-M-A-A-M-P.
[0217] Alternativno, bromide 30 može biti sintetisan od 28. Metil jedinjenje 28 može biti konvertovano do odgovarajuće dikiselina 29 korišćenjem kalijum permanganata kao oksidansa. Konverzija 29 u 30 može biti postignuta reakcijomod više koraka, prvo tretmanom 29 sa oksalil hloridom, zatim trimetilsilil diazometanom, zatim sa hidrobromnom kiselinom da se dobije jedinjenje 30.
Shema 7: Reprezentativna sinteza E-V-P-M-A-A-M-P-V-E
[0218] Shema 7 prikazuje opštu sintezu E-V-P-M-A-A-M-P-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P = Pirolidin i Z = karbonil. Kuplovanje amina 33 sa kiselinom 34 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa, kao što je HATU, da se dobije 35.
Shema 8: Reprezentativna sinteza P-M-W-M-P
[0219] Shema 8 prikazuje opštu sintezu P-M-W-M-P molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, W = policiklus. Konverzija 36 u 37 je postignuta korišćenjem reakcije posredovane prelaznim metalom. Diestar boronske kiseline ili kiselina 37 je kuplovana sa pogodnim reakcionim partnerom, kao što je bromid 37.1 korišćenjem uslova za Suzuki kuplovanje da se dobije 38.
Shema 9: Reprezentativna sinteza E-V-P-M-W-M-P-V-E
[0220] Shema 9 prikazuje opštu sintezu E-V-P-M-W-M-P-V-E molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P = Pirolidin i Z = karbonil. Kuplovanje amina 38.1 sa kiselinom 34 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa, kao što je HATU, da se dobije 39.
Shema 9a: Reprezentativna sinteza P-M-W-M-P
[0221] Shema 9a prikazuje opštu sintezu P-M-W-M-P molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M = imidazol, W = policiklus. jedinjenje 36 je kuplovano sa vinilkalaj reagensom kao što je tributil(etoksivinil)stanan sa paladijumom, praćeno brominacijom i hidrolizom sa NBS i vodom, da se dobije bromoketon 36.1. Reakcija između bromida 36.1 i karboksilne kiseline (36.5) u baznim uslovima dala je estar 36.2. Praćenjem istog redosleda reakcije, jedinjenje 36.2 je konvertovan u diestar 36.4. Konverzija 36.4 u 38.1 je postignuta sa amonijačnim reagensima što je amonijum acetat na povišenoj temperaturi.
Shema 10: Reprezentativna sinteza M-P
[0222] Shema 10 prikazuje opštu sintezu M-P molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, PG je zaštitna grupa. Imidazol 40 može biti halogenovan, na primer, pod delovanjem N-bromosukcinimid da se obezbedi bromoimidazol 40.1. Bromoimidazol 40.1 može biti zaštićen korišćenjem standardnih uslova da se dobije 40.2, kao što je SEM-Cl i natrijum hidrid kada PG = SEM.
Shema 11: Reprezenzazivna sinteza P-M-A-A-M-P
[0223] Shema 11 prikazuje opštu sintezu P-M-A-A-M-P molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M = imidazol. Estar boronske kiseline 42, koji može biti pripremljen od bromida 41, je kuplovan sa pogodno zaštićenim odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromide 42.1, po izboru zaštićen sa PG) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 43. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju formiranje A-A veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada i Stille reakcije. Ako je po izboru zaštićen, uklanjanje zaštitne grupe (PG) (na primer, katalitička hidrogenizacija benzil etra) obezbeđuje deprotektovano jedinjenje 43.
Kuplovanje 43 sa pogodno zaštićenim imidazolom 40.2 (na primer, PG = SEM etar) korišćenjem metalnog katalizatora (npr. CuI) daje protektovani P-M-A-A-M-P (45). Deprotekcija (na primer deprotekcija SEM etra korišćenjem kiseline kao što je TFA) obezbeđuje imidazol koji sadrži fragment P-M-A-A-M-P 45.
Shema 12: Reprezentativna sinteza P-M-A-A-M-P
[0224] Shema 12 prikazuje opštu sintezu P-M-W-M-P molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, X = halogen ili triflat, M = imidazol, i W je 46, PG = zaštitna grupa. Haloimdiazole 40.3, kao što je bromoimidazol, je podvrgnut reakcija razmene metal-halogen, kao što je BuLi u THF, i zatim tretiran sa izovorom CO2, kao što je čvrst CO2, da se dobije 40.4.
Kuplovanje 40.4 i 46 korišćenjem uslova za peptidno kuplovanje, kao što je HATU, daje 47. PG deprotekcija, kao što je TFA deprotekcija SEM grupe, daje jedinjenje P-M-W-M-P 48.
Shema 13: Reprezentativna sinteza P-M-A-A-M-P
[0225] Shema 13 prikazuje opštu sintezu P-M-A-A-M-P molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, X = halogen, amineili triflat, M = imidazol, PG1i PG2= zaštitne grupe. zaštićena kiselina 49 (PG1 je pogodna zaštitna grupa, kao što je Cbz) je konvertovan u α-halometil keton 12.3., koji je transformisan u PG1-A-M-P 50 korišćenjem analognih uslova za konvertovanje 12.1 i 12.2 u 15. imidazol je podvrgnut protection, sa SEM na primer, da se dobije 51, koji je deprotektovan, sa H2i Pd da se ukloni Cbz na primer, praćeno kuplovanjem sa fragmentom X-A-M-P, korišćenjem standardnih Pd uslova za kuplovanje na primer, da se dobije 52. PG deprotekcija, kao što je TFA deprotekcija SEM grupe, daje jedinjenje P-M-A-A-M-P 53.
Shema 14: Reprezentativna sinteza A-M-P
[0226] Shema 14 prikazuje opštu sintezu A-M-P molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je amidna veza, ili imidazol. Kuplovanje amina 54 sa kiselinom 9 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije amid koji sadrži 55. kiselina 56 je kuplovana sa α-haloketonom, kao što je α-bromoketon 12.1, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 57.1. Alternativno, kiselina 56 je kuplovana sa α-aminoketonom 12.2, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 57.2. Reakcija 57.1 i 57.2 sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži molekul A-M-P.
[0227] benzamidine 18 je kuplovana sa α-haloketon kao što je α -hloroketon 59 u baznim uslovima kao što je K2CO3da se dobije imidazol koji sadrži molekul A-M-P 60. A-M-P 58 može biti pripremljen analogno.
Shema 15: Reprezentativna sinteza P-M-A-A-M-P
[0228] Shema 15 prikazuje opštu sintezu P-M-A-A-M-P molekula predmetnog pronalaska. Boronska kiselina ili njen estar 63, može biti pripremljena od bromida 62 korišćenjem paladijumskog katalizatora (npr. Pd(PPh3)4) i boronskog reagensa (bis(pinakolato)diboron, na primer), je kuplovana sa viškom odgovarajućeh partera za kuplovanje (npr. di-halo-aromatični ili di-halo-heteroaromatični segment 64) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije bromid 65, koji je zatim konvertovan u boronsku kiselinu ili estar 65.1.
Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju formiranje A-A veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada i Stille reakcije. Suzuki kuplovanje 65.1 sa halo-imidazolom kao što je bromo-imidazol korišćenjem paladijumskog katalizatora (kao što je Pd(PPh3)4) daje P-M-A-A-M-P fragment 67.
[0229] Alternativno, Suzuki kuplovanje 63 sa halo-A-M-P fragment korišćenjem paladijumskog katalizatora (kao što je Pd(PPh3)4) daje P-M-A-A-M-P fragment 67.
[0230] Shema 16 prikazuje opštu sintezu R9-P-L-A-M-P-R9 molekula i R9-P-L-L-P-R9 molekula predmetnog pronalaska gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi A-A veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se vežu (RO)2B-L-P-R9 i Br-A-M-P-R9. Estar boronske kiseline 68 je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromide 69) korišćenjem paladijumskog katalizatora (kao što je Pd(PPh3)4) da se dobije 70. Slično, R9-P-L-L-P-R9 72 je pripremljen kuplovanjem jedinjenja 68 i 71.
Shema 17: Reprezentativna sinteza P-T
[0231] Shema 17 prikazuje opštu sintezu P-T molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P = ili aciklični ili ciklični amino estar (kao što je etil estar), po izboru zaštićen sa PG ako je potrebno, Z = karbonil, X = ugljenik ili heteroatom, i m i n = 0 - 5, nezavisno. Kuplovanje amina 73 sa kiselinom 34 je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa, kao što je HATU, da se dobije 75, koji nakon uklanjanja etil grupe obezbeđuje P-T jedinjenje.
Shema 18: Reprezentativna sinteza P
[0232] Shema 18 prikazuje opštu sintezu P molekula predmetnog pronalaska gde X = ugljenik ili heteroatom i m i n = 0 - 5, nezavisno. Za ilustrativne svrhe, P je supstituisan sa etoksilkarbonil grupom. Komercijalno dostupan amino estar kao što je etil estar je konvertovan u supstituisan ili ciklizovan amino estar 73.1, kroz na primer, reduktivnu aminaciju ili Mitsunobu reakciju. Jedinjenje 73.1 može btii zaštićeno da se obezbedi jedinjenje 73 ako je potrebno.
Shema 19: Reprezentativna sinteza E-V
[0233] Shema 19 prikazuje opštu sintezu E-V molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, V je izobutil i E je metoksikarbonilamino. Amino kiselina 77 može biti konvertovana do odgovarajućeg karbamata 78, kao što je metil karbamat reakcijom sa metil hloroformatom u baznim uslovima (natrijum bikarbonat).
Shema 20: Sinteza E-V-Z-P-M-A
[0234] Shema 20 prikazuje sintezu E-V-Z-P-M-A molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je imidazol, P je Pirolidin, i Z je karbonil. Derivat amino kiseline može da reaguje sa N-zaštićenim prolinskim derivatom kroz reakcione uslove koji koriste reagens za kuplovanje, kao što je HATU, deprotekcija od dobijenog proizvoda kuplovanja, na primer u slučaju terc-butoksi karbonil, tretman sa izvorom protona kao što je HCl dalo je jedinjenje 80. konverzija 80 u E-V-Z-P-M-A (82) može btii dobijena pod uslovima reakcije nukleofilne aromatične supstitucije, na primer premeštanje metil sulfonata u baznim uslovima i povišenim temperaturama.
[0235] Alternativno, za ilustrativne svrhe, derivat aminokiseline 80 može biti konvertovan u guanidinijum koji sadrži jedinjenje 81, kroz reakciju sa reagensom za guanidilaciju. E-V-Z-P-M-A jedinjenje 82 može biti dobijeno putem reakcije sa 1,2 di-elektrofilom kao što je α-halogenovana karbonil grupa u baznim uslovima.
Shema 21: Reprezentativna sinteza P-M-W-M-P
[0236] Shema 21 prikazuje opštu sintezu P-M-W-M-P molekula predmetnog pronalaska gde. Estar boronske kiseline 84 je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 83) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 85. Karboksilat 85 je redukovan sa regensima kao što je DIBAL-H da se dobije diol 86. Tretman diola 86 sa kiselinama kao što je H3PO4na povišenoj temperaturi generiše P-M-W-M-P jedinjenje 89.
Alternativno, diol 86 može biti oksidovan sa reagensima kao što je piridin-sumpor trioksid da formira dialdehid 87, koji reaguje sa aminima u prisustvu redukujućih reagenasa kao što je NaBH(OAc)3da se obezbedi P-M-W-M-P jedinjenje 88.
Shema 21a: Reprezentativna sinteza P-M-W-M-P
[0237] Shema 21a prikazuje opštu sintezu P-M-W-M-P molekula predmetnog pronalaska. Za ilustrativne svrhe, FG1i FG2može biti konvertovan u estre prikačene za A grupu. Karboksilat 85.2 je redukovan sa regensima, kao što je DIBAL-H, da se dobije diol 86.1. tretman diola 86.1 sa kiselinama, kao što je H3PO4, na povišenoj temperaturi generiše P-M-W-M-P jedinjenje 89.3.
Alternativno, diol 86.1 može biti oksidovan sa reagensima kao što je piridin-sumpor trioksid da formira dialdehid 87.1, koji reaguje sa aminima u prisustvu redukujućih reagenasa kao što je NaBH(OAc)3da se obezbedi P-M-W-M-P jedinjenje 89.4. karboksilat 85.2 je selektivno redukovan da se obezbedi hidroksil estar 86.2, koji može biti ciklizovan da formira P-M-W-M-P jedinjenje 89.1. Jedinjenje 86.1 je konvertovano u amin estar 86.3, na primer kroz formiranje azida i redukciju sa hidrogenizacijom. Jedinjenje 86.3 može biti ciklizovan da formira P-M-W-M-P jedinjenje 89.2.
Shema 22: Konstrukcija R9-Z-P-M-A
[0238] Shema 22 prikazuje opštu sintezu R9-Z-P-M-A molekula, za ilustrativne svrhe počevši sa terc-butoksi karbonil derivatom 90 (J. Am. Chem. Soc. 2003, 1221). Jedinjenje 90 može biti acilovano sa supstituentom T gde Z je karbonil, kroz reakcione uslove koji koriste kuplujući reagens kao što je HATU. Uklanjanje zaštitne grupe, na primer u slučaju terc-butoksikarbonil tretmanom sa izvorom protona kao što je HCl, daje jedinjenje 91. Jedinjenje kao 91 može btii dobijeno pod uslovima reakcije nukleofilne aromatične supstitucije, na primer premeštanje metil sulfonata u baznim uslovima i povišenim temperaturama da se obezbedi R9-Z-P-M-A jedinjenje 92. Alternativno, 91 može biti konvertovanu u guanidijum derivat. Kada je pogodno supstituisan, ciklizacija obezbeđuje R9-Z-P-M-A jedinjenje 92.
Shema 23: Reprezentativna sinteza T-P-M-A-A-M-P-T
[0239] Shema 23 prikazuje opštu sintezu T-P-M-A-A-M-P-T molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M = imidazol i A = alkin. Bromoimidazol 93 je alkinilovan pomoću litijacije i zaustavljanjem sa ekvivalentom formata (npr. DMF). Aldehid 94 je konvertovan u alkin 95 korišćenjem reagensa zasnovanog na fosforu (npr. Ohira-Bestman reagens). Jedinjenje 95 je kuplovano sa Br-A-M-P-T u uslovima Sonagashira da se dobije jedinjenje koje sadrži alkin 96.
Shema 24: Reprezentativna sinteza R9 Fragmenta
[0240] Shema 24 prikazuje opštu sintezu R9 molekula predmetnog pronalaska. Reakcija hidrazin karboksilata 97 sa ketonom ili aldehidom, kao što je aceton, pod kiselim uslovima (npr. AcOH) daje imin 98. Reakcija 98 u redukujućim uslovima, kao što je PtO2i vodonični gas, daje supstituisan hidrazinkarboksilat 99.
Shema 25: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E
[0241] Shema 25 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi A-A veza i/ili A-M veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se vežu Br-M-P-Z-V-E i (RO)2B-A-A-M-P-Z-V-E ili (RO)2B-A-M-P-Z-V-E i Br-A-M-P-Z-V-E. Estar boronske kiseline 25a (ili 25d) je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 25b ili 25e) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 25c. Formiranje više A-M veza mož ebiti sprovedeno na sličan način. Na primer, Suzuki reakcija može takođe biti korišćena da se kupluju (RO)2B-A-A-B(OR)2(25f) i dva ekvivalenta od Br-M-P-Z-V-E. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju A-A i/ili A-M formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 26: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E
[0242] Shema 26 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je amid, ili imidazol. Kuplovanje kiselina 26a sa aminom 26b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije amidni proizvod 26c.
[0243] Formiranje imidazola je postignuto kuplovanjem kiseline26d sa an α-haloketon kao što je α-bromoketon 26e, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 26f. Alternativno, kiselina 26d je kuplovana sa α-aminoketon 26h, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 26i.
Reakcija 26f ili 26i sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži molekul 26g. Formiranje više imidazola je izveden na isti način, počevši sa bis- α-haloketonom kao što je α-bromoketon 26j, da se obezbedi molekul 261.
Shema 27: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E
[0244] Shema 27 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je Pirolidin i Z je karbonil. Kuplovanje amina 27a sa kiselinom 27b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 27c. Alternativno, amin 27d je kuplovan sa dva ekvivalenta 27b u sličnim uslovima da se obezbedi 27e.
Shema 28: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E
[0245] Shema 28 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-A-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je Metoksikarbonilamino. Tretman ili 28a ili 28d jednim ili dva ekvivalenta redom od 28b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje molekul 28c ili 28e.
Shema 29: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E
[0246] Shema 29 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi W-M veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se vežu Br-M-P-Z-V-E za (RO)2B-W-M-P-Z-V-E ili (RO)2B-W-B(OR)2molekul. Estar boronske kiseline 29a (ili 29d) je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 29b) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 29c. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju M-W formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 30: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E
[0247] Shema 30 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin i Z je karbonil. Kuplovanje amina 30a sa kiselinom 30b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 30c. Alternativno, amine 30d je kuplovana sa dva ekvivalenta 30b u sličnim uslovima da se obezbedi 30e.
Shema 31: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E
[0248] Shema 31 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-W-M-P-Z-V-E molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino. Tretman od ili 31a ili 31d sa jednim ili dva ekvivalenta redom od 31b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje molekul 31c ili 31e.
Shema 32: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E
[0249] Shema 32 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi M-A ili A-L veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se veže estar boronske kiseline za arilbromid. Estar boronske kiseline 32a (ili 32d) je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 32b ili 32e) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 32c. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju ili M-A ili A-L formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 33: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E
[0250] Shema 33 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin i Z je karbonil. Kuplovanje amina 33a ili 33d sa kiselinom 33b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 33c ili 33e, redom. Alternativno, amin 33f je kuplovan sa dva ekvivalenta 33b u sličnim uslovima da se obezbedi 33g.
Shema 34: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E
[0251] Shema 34 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-M-A-L-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino. Tretman ili 34a ili 34d sa 34b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje molekul 34c ili 34e. U skladu sa tim, tretman 34f sa dva ekvivalenta 34b obezbeđuje 34g u sličnim uslovima.
Shema 35: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E
[0252] Shema 35 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi L-L veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se veže estar boronske kiseline za arilbromid. Estar boronske kiseline 35a je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 35b) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 35c. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju ili L-L formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 36: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E
[0253] Shema 36 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E molekul predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin i Z je karbonil. Kuplovanje amina 36a sa kiselinom 36b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 36c.
Alternativno, amine 36d je kuplovana sa dva ekvivalenta 36b u sličnim uslovima da se obezbedi 36e.
Shema 37: Reprezentativna sinteza E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E
[0254] Shema 37 prikazuje opštu sintezu E-V-Z-P-L-L-P-Z-V-E molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino. Tretman ili 37a ili 37d sa 37b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje molekul 37c ili 37e.
Shema 38: Reprezentativna sinteza R-A-M-P-R<1>
[0255] Shema 38 prikazuje opštu sintezu R-A-M-P-R<1>intermedijer predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je amid ili imidazol, R je opšta grupa koja je prikazana kao Br, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -Z-V-E. Kuplovanje amina 38b sa kiselinom 38a je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije amid koji sadrži 38c. kiselina 38e je kuplovana sa α-haloketone, kao što je α-bromoketon 38d, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 38f. Alternativno, kiselina 38e je kuplovana sa α-aminoketon 38h, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 38i. Reakcija 38f ili 38i sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži intermedijer Br-A-M-P-Z-V-E (38g).
[0256] Benzamidin 38j je kuplovan sa α-haloketonom kao što je α -hloroketon 38k u baznim uslovima kao što je K2CO3da se dobije 38g. Br-A-M-P-Z-V-E intermedijer može biti pripremljen analogno iz kuplovanja 38d i 381.
Shema 39: Reprezentativna sinteza R-W-M-P-R<1>
[0257] Shema 39 prikazuje opštu sintezu R-W-M-P-R<1>intermedijer predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je amid ili imidazol, R je opšta grupa koja je prikazana kao Br, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -Z-V-E. Kiselina 39b je kuplovana sa α-haloketonom, kao što je α-bromoketon 39a, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 39c. Alternativno, kiselina 39b je kuplovana sa α-aminoketonpm 39e, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 39f. Reakcija 39c ili 39f sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži intermedijer Br-A-M-P-Z-V-E (39d).
[0258] Benzamidin 39g je kuplovan sa α-haloketonom kao što je α -hloroketon 39h u baznim uslovima kao što je K2CO3da se dobije 39d. Br-A-M-P-Z-V-E intermedijer može biti pripremljen analogno iz kuplovanja 39i i 39j.
Shema 40: Reprezentativna sinteza R-A-R<1>
[0259] Shema 40 prikazuje opštu sintezu R-A-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao estar boronske kiseline i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -M-P-Z-V-E, -M-P-PG, -L-P-Z-V-E, -L-P-PG, ili zaštitna grupa. Reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da postavi estar boronske kiseline na A grupu. Tretman odgovarajućeg arilbromida sa paladijumskim katalizatorom, kao što je PdCl2(dppf), i izvor bora kao što je bis(pinakolato)diboran obezbeđuje estar boronske kiseline 40b, 40d, 40f, 40h, ili 40j.
Shema 41: Reprezentativna sinteza R-W-R<1>
[0260] Shema 41 prikazuje opštu sintezu R-W-R<1>intermedijer predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao estar boronske kiseline i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -M-P-Z-V-E, -M-P-PG, ili zaštitna grupa. Reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da postavi estar boronske kiseline na W grupu. Tretman odgovarajućeg arilbromida sa paladijumskim katalizatorom, kao što je PdCl2(dppf), i izvor bora kao što je bis(pinakolato)diboran obezbeđuje estar boronske kiseline 41b, 41d, ili 41f.
Shema 42: Reprezentativna sinteza R-M-R<1>
[0261] Shema 42 prikazuje opštu sintezu R-M-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao estar boronske kiseline i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -P-Z-V-E ili -P-PG. Reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da postavi estar boronske kiseline na M grupu. Tretman odgovarajućeg arilbromida sa paladijumskim katalizatorom, kao što je PdCl2(dppf), i izvor bora kao što je bis(pinakolato)diboran obezbeđuje estar boronske kiseline 42b ili 42d.
Shema 43: Reprezentativna sinteza R-L-R<1>
[0262] Shema 43 prikazuje opštu sintezu R-L-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao estar boronske kiseline i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -P-Z-V-E ili -P-PG. Reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da postavi estar boronske kiseline na L grupu. Tretman odgovarajućeg arilbromida sa paladijumskim katalizatorom, kao što je PdCl2(dppf), i izvor bora kao što je bis(pinakolato)diboran obezbeđuje estar boronske kiseline 43b ili 43d.
Shema 44: Reprezentativna sinteza R-A-M-P-Z-V-E
[0263] Shema 44 prikazuje opštu sintezu R-A-M-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, Z je karbonil, i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -A-PG, -A-M-P-PG, -L-P-PG, ili zaštitna grupa. Kuplovanje amina 44a, 44d, 44f, ili 44h sa kiselinom 44b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 44c, 44e, 44g, ili 44i, redom.
Shema 45: Reprezentativna sinteza R-W-M-P-Z-V-E
[0264] Shema 45 prikazuje opštu sintezu R-W-M-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, Z je karbonil, i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -M-P-PG ili zaštitna grupa. Kuplovanje amina 45a ili 45d sa kiselinom 45b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 45c ili 45e, redom.
Shema 46: Reprezentativna sinteza R-A-L-P-Z-V-E
[0265] Shema 46 prikazuje opštu sintezu R-A-L-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, Z je karbonil, i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -M-P-PG ili zaštitna grupa. Kuplovanje amina 46a ili 46d sa kiselinom 46b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 46c ili 46e, redom.
S
[0266] Shema 47 prikazuje opštu sintezu R-L-P-Z-V-E ili R-M-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, Z je karbonil, i R je opšta grupa koja je prikazana kao Br. Kuplovanje amina 47a ili 47d sa kiselinom 47b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 47c ili 47e, redom.
Shema 48: Reprezentativna sinteza R-A-M-P-Z-V-E
[0267] Shema 48 prikazuje opštu sintezu R-A-M-P-Z-V-E intermedijer predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -A-PG, -A-M-P-PG, -L-P-PG, ili zaštitna grupa. Tretman 48a, 48d, 48f, ili 48h sa 48b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje intermedijer 48c, 48e, 48g, ili 48i, redom.
Shema 49: Reprezentativna sinteza R-W-M-P-Z-V-E
[0268] Shema 49 prikazuje opštu sintezu R-W-M-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -M-P-PG ili zaštitna grupa. Tretman 49a ili 49d sa 49b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje intermedijer 49c ili 49e, redom.
Shema 50: Reprezentativna sinteza R-A-L-P-Z-V-E
[0269] Shema 50 prikazuje opštu sintezu R-A-L-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino i R je opšta grupa koja je prikazana kao ili -M-P-PG ili zaštitna grupa. Tretman 50a ili 50d sa 50b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje intermedijer 50c ili 50e, redom.
Shema 51: Reprezentativna sinteza R-A-L-P-Z-V-E
[0270] Shema 51 prikazuje opštu sintezu R-L-P-Z-V-E ili R-M-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino i R je opšta grupa koja je prikazana kao Br. Tretman 51a ili 51d sa 51b u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) obezbeđuje intermedijer 51c ili 51e, redom.
Shema 51a: Reprezentativna sinteza R-P-Z-V-E
[0271] Shema 51a prikazuje opštu sintezu R-P-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, Z je karbonil, i R je opšta grupa koja je prikazana kao metoksikarbonil. Kuplovanje amina 51a sa kiselinom 51b je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije 51c.
Shema 52: Reprezentativna sinteza R-Z-V-E
[0272] Shema 52 prikazuje opštu sintezu R-Z-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksikarbonilamino i R je opšta grupa koja je prikazana kao hidroksil. Tretman 52a u baznim uslovima (npr. natrijum bikarbonat) sa 52b obezbeđuje intermedijer 52c.
Shema 53: Reprezentativna sinteza R-L-P-R<1>
[0273] Shema 53 prikazuje opštu sintezu R-L-P-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, L je benzimidazol, R je opšta grupa koja je prikazana kao bromid, i R<1>je zaštitna grupa. Kiselina 53b je kuplovana sa 53a korišćenjem peptidnog kupljućeg reagensa kao što je HATU da se dobije 53c. Zagrevanje u rastvaraču (kao što je refluksujući etanol) daje R-L-P-R<1>intermedijer 53d.
[0274] Alternativno, R-L-P-R<1>intermedijer 53d je dobijen reakcijom diamina (kao što je 53a) i karbonil jedinjenja (kao što je aldehid 53e) u rastvaraču u uslovima zagrevanja (npr. etanol pod mikrotalasnim zračenjem).
Shema 54: Reprezentativna sinteza R-M-P-R<1>
[0275] Shema 54 prikazuje opštu sintezu R-M-P-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je imidazol, R je opšta grupa koja je prikazana kao bromid, aldehid, ili alkin i R<1>je zaštitna grupa. Imidazol 54a može biti halogenovan, na primer, pod delovanjem N-bromosukcinimid da se obezbedi bromoimidazol 54b. Bromoimidazol 54b može biti zaštićen korišćenjem standardnih uslova da se dobije 54c, kao što je SEM-C1 i natrijum hidrid kada PG = SEM. Bromoimidazol 54b može dalje biti razrađen, na primer, do odgovarajućeg aldehida ili alkina. Litijacija 54c i kondenzacija sa ekvivalentom formata (npr. DMF) obezbeđuje aldehid 54d. aldehid 54d je konvertovan u alkin 54e korišćenjem reagensa na bazi fosfora (npr. Ohira-Bestmann reagens).
Shema 55: Reprezentativna sinteza R-P-M-A-A-M-P-R
[0276] Shema 55 prikazuje opštu sintezu R-P-M-A-A-M-P-R intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je imidazol i R je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. Na primer, diketon 55b je konvertovan u 55e korišćenjem broma. Jedinjenje 55b može biti komercijalno dostupno ili može biti pripremljeno od odgovarajućeg dibromida 55a kroz kuplovanje sa vinilkalaj reagensom kao što je tributil(etoksivinil)stanan u prisustvu paladijumskog katalizatora. Kuplovanje 55e sa kiselinom 55f u baznim uslovima kao što je diizopropiletilamin daje diestar 55g. Formiranje imidazola je postignuto tretmanom 55g sa amonijum acetatom da se obezbedi imidazol koji sadrži intermedijer R-P-M-A-A-M-P-R (55h).
[0277] Alternativno, bromid 55e može biti sintetisan od 55c. Dimetil jedinjenje 55c može biti konvertovano do odgovarajuće dikiseline 55d korišćenjem kalijum permanganata kao oksidansa. Konverzija 55d u 55e može biti postignuta homolagacijom od više koraka. Na primer, tretman 55d sa oksalil hloridom, praćeno sa trimetilsilil diazometanom i zatim hidrobromnom kiselinom može dati jedinjenje 55e.
Shema 56: Reprezentativna sinteza R-P-M-W-M-P-R
[0278] Shema 56 prikazuje opštu sintezu R-P-M-W-M-P-R intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je imidazol i R je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. jJedinjenje 56a je kuplovano sa vinilkalaj reagensom kao što je tributil(etoksivinil)stanan u prisustvu paladijumskog katalizatora, praćeno brominacijom i hidrolizom sa NBS i vodom, da se dobije bromoketon 56b. Reakcija između bromida 56b i karboksilne kiseline u baznim uslovima generiše estar 56d. Praćenjem istog redosleda reakcije, jedinjenje 56d može biti razrađeno do diestra 56f. Konverzija 56f u 56g je postignuta sa amonijačnim reagensima kao što je amonijum acetat na povišenoj temperaturi.
Shema 57: Reprezentativna sinteza R-A-A-M-P-R<1>
[0279] Shema 57 prikazuje opštu sintezu R-A-A-M-P-R<1>intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, M je amid ili imidazol, R je opšta grupa koja je prikazana kao Br, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao -Z-V-E. Kuplovanje amina 57b sa kiselinom 57a je postignuto korišćenjem peptidnog kuplujućeg reagensa (npr. HATU) da se dobije amid koji sadrži 57c.
[0280] kiselina 57e je kuplovana sa α-haloketonom, kao što je α-bromoketon 57d, u baznim uslovima (npr. Et3N) da se dobije 57f. Alternativno, kiselina 57e je kuplovana sa α-aminoketonom 57h, u uslovima formiranja amida (npr. EDC, Et3N) da se dobije 57i. Reakcija 57f ili 57i sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetat) daje imidazol koji sadrži intermedijer Br-A-M-P-Z-V-E (57g). Kuplovanje 57j i 57k i, u alternativi, kuplovanje 57d i 571 u odgovarajućim uslovima može takođe biti korišćeno u pripremanju intermedijera Br-A-M-P-Z-V-E (57g).
Shema 58: Reprezentativna sinteza R-A-A-M-P-R<1>
[0281] Shema 58 prikazuje opštu sintezu R-A-A-M-P-R<1>molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da se napravi A-A veza ili A-M veza. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se kupluju dva odgovarajuća intermedijera, R je opšta grupa koja je prikazana kao -M-P-Z-V-E, -M-P-PG, ili zaštitna grupa, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. Estar boronske kiseline 58a, 58d, 58f ili 58i je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 58b ili 58j) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 58c, 58e, ili 58g.
Formiranje višestrukih A-M veza može biti sprovedeno na sličan način. Na primer, Suzuki reakcija može takođe biti korišćena da kupluje (RO)2B-A-A-B(OR)2 (58h) i dva ekvivalenta Br-M-P-PG. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju A-A i/ili A-M formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 59: Reprezentativna sinteza R-W-M-P-R<1>
[0282] Shema 59 prikazuje opštu sintezu R-W-M-P-R<1>molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćen da izgradi W-M vezu. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se kupluju dva odgovarajuća intermedijera, R je opšta grupa koja je prikazana kao -M-P-Z-V-E, -M-P-PG, ili zaštitna grupa, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. Estar boronske kiseline 59a, 59d, ili 59f je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 59b) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 59c, 59e, ili 59g. Formiranje višestrukih W-M veza može biti sprovedeno na sličan način. Na primer, Suzuki reakcija može takođe biti korišćena da kupluje (RO)2B-W-B(OR)2(59h) i dva ekvivalenta Br-M-P-PG. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju W-M formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 60: Reprezentativna sinteza R-A-L-P-R<1>
[0283] Shema 60 prikazuje opštu sintezu R-A-L-P-R<1>molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćena da izgradi A-L vezu. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se kupluju dva odgovarajuća intermedijera, R je opšta grupa koja je prikazana kao -M-P-Z-V-E, -M-P-PG, ili zaštitna grupa, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. Estar boronske kiseline 60a, 60d, ili 60f je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 60b) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 60c, 60e, ili 60g. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju A-L formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 61: Reprezentativna sinteza R-A-M-P-R<1>
[0284] Shema 61 prikazuje opštu sintezu R-A-M-P-R<1>molekula predmetnog pronalaska, gde reakcija unakrsnog kuplovanja posredovana prelaznim metalom je korišćen da izgradi A-M vezu. Za ilustrativne svrhe, Suzuki reakcija je korišćena da se kupluju dva odgovarajuća intermedijera, R je opšta grupa koja je prikazana kao -L-P-Z-V-E, -L-P-PG, ili zaštitna grupa, i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa. Estar boronske kiseline 61a, 61d, ili 61f je vezan sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (npr. arilbromid 61b) korišćenjem paladijumskog katalizatora, kao što je Pd(PPh3)4, da se dobije 61c, 61e, ili 61g. Za svaku reakciju unakrsnog kuplovanja posredovanu prelaznim metalom uloge nukleofila i elektrofila mogu biti obrnute da se obezbedi isti proizvod kuplovanja. Reakcije kuplovanja posredovane paladijumom koje omogućavaju A-M formiranje veze, ali koriste alternativne partnere za kuplovanje i reagense, obuhvataju na primer Negishi, Kumada, Sonagashira i Stille reakcije.
Shema 62: Reprezentativna sinteza R
[0285] Shema 62 prikazuje opštu sintezu R-P-H molekula predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao etoksikarbonil i P je karbociklični ili heterociklični prsten (npr. X je ugljenik ili heteroatom) i m, n, i o su0 - 3, nezavisno. Amino estar 62a je konvertovan u supstituisan ili ciklizovan amino estar 62b kroz na primer reduktivnu aminaciju ili Mitsunobu reakciju. Jedinjenje 62b može btii zaštićeno da se obezbedi jedinjenje 62c ako je potrebno.
Shema 63: Reprezentativna sinteza R-P-M-W-M-P-R
[0286] Shema 63 prikazuje opštu sintezu R-P-M-W-M-P-R intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe, R je opšta grupa koja je prikazana kao zaštitna grupa i A je funkcionalizovana sa grupom prikazanom kao ili hidroksialkil, aminoalkil, karbonilalkil, ili alkoksikarbonilalkil. Ciklizacija 63a, 63c, i 63d može biti izvedena kroz nekoliko transformacija funkcionalnih grupa koje obuhvataju, ali nisu ograničene na, Mitsunobu reakciju, reduktivnu aminaciju i laktamizaciju.
Shema 64: Reprezentativna sinteza H-V-E
[0287] Shema 64 prikazuje opštu sintezu H-V-E intermedijera predmetnog pronalaska gde, za ilustrativne svrhe E je metoksikarbonilamino i V je izopropilamino. Reakcija hidrazin karboksilata 64a sa ketonom ili aldehidom, kao što je aceton, u kiselim uslovima (npr. AcOH) daje imin 64b.
Reakcija 64b u redukujućim uslovima, kao što je PtO2i vodonik gas, daje supstituisan hidrazinkarboksilat 64c.
[0288] Pronalazak će sada biti ilustrovan praćenjem ne-ograničavajućih primera, u kojima se Primeri DE, DG, DI, DJ, DK, DV, EA, EE, EK, EL, EP, EQ, DL, HW, HX, IB, JL, JP i JR odnose na jedinjenja u skladu sa pronalaskom, i preostali primeri su za referencu.
PRIMERI
Primer AA
[0289]
2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H- Pd(PPh3)4, Dioksan, 80 C [1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1- KOAc imidazolkarboksilna kiselina terc- 2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina butil estar terc-butil estar
[0290] (S)-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 1,4-Dioksan (300 mL) je dodat u smešu (S)-2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (21.1 g, 53.7 mmol), bis(pinakolato)diboron (27.3g, 107.5 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (3.10 g, 2.68 mmol), i kalijum acetat (15.02 g, 153.0 mmol), i zagrejan na 80°C tokom 16 sati. Smeša je ohlađena i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana. Većina 1,4-dioksana je uklonjena iz filtrata pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (300 mL). Organska faza je ispraan sa zasićenim natrijum bikarbonatom (2x 150 mL), slanim rastvorom (100 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon filtracije rastvarač je uklonjen iz filtrata pod smanjenim pritiskom.
Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 330 g ISCO kolone i protoka 20-100 % etil acetata i heksana. frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi (S)-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (18 g, 76 %) i svetlo žuta čvrsta supstanca.
Primer AB
[0291]
2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil- HCl/Dioksan 2-Pirolidin-2-il-5-[4-(4,4,5,5-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)fenil]-1H- DCM tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna il)-fenil]-1H-imidazol kiselina terc-butil estar
[0292] (S)-2-pirolidin-2-il-5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol hidrohlorid: Rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 N, 75 mL) je dodat u rastvor (S)-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (7.0 g, 15.9 mmol) u dihlormetanu (50 mL). Opaženo je razvijanje gasa. Nakon 30 minuta, formirana je čvrsta supstanca. Nakon 1.5 sati, dobijena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom ispiranjem sa dietil etrom. Bilo kakav preostali rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi (S)-2-pirolidin-2-il-5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol hidrohlorid (5.6 g, 95 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
Primer AC
[0293]
2-Pirolidin-2-il-5-[4-(4,4,5,5- [2-Metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametiltetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2- HATU, DIPEA, [1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1 H-imidazol-2-il)-fenil]-1H-imidazol DMF il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar
(S,S)-[2-Metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[0294] Diizopropiletilamin (7.63 mL, 43.8 mmol) je dodat u suspenziju (S)-2-pirolidin-2-il-5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol hidrohlorid (7.33 g, 19.5 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (7.6 g, 19.9 mmol) i (S) 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (3.59 g, 20.5 mmol) u dimetilformamidu (75 mL). Sve čvrste supstance su rastvorene. Nakon 30 min reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (300 mL) i isprana je sa 1⁄2 zasićenog natrijum hlorida (1 x 300 mL), polu zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 150 mL) i slanim rastvorom (1 x 100 mL). Organska faza je osušena sa natrijum sulfatom, filtrirana i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. dobijena žutomrka penaje podvrgnuta silika gel hromatografija sa eluatom 20 -100 % etil acetata i heksana, da se obezbedi (S,S)-[2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-l-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (6.6 g, 68 %) kao bela pena: 1H (DMSO-d6): δ= 11.81 (br s, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.61 (m, 2H), 7.51 (br s, 1H), 7.27 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.05 (m, 1H), 4.04 (m, 2 H), 3.78 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 2.11 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.28 (s, 12H), 0.85 (dd, J1= 6.6 Hz, J2= 11.4 Hz, 6H).
Primer AD
[0295]
[0296] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: N,N-diizopropiletilamin (5.3 mL, 30.6 mmol) je dodat u kapima u smešu pirolidin-1,3-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (2.2 g, 10.1 mmol), HATU (4.0 g, 10.5 mmol), HCl so 2-amino-1-(4-bromofenil)etanona (2.4 g, 9.6 mmol), i DMF (40 mL), i mešana u ambijentalnim uslovima tokom 1 sata. Većina ispraljive komponetne je uklonjena u vakuumu, i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca nalik peni (3.5 g, 90%). m/z 432.9, 434.9 (M Na)<+>.
[0297] 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (1.5 g, 3.6 mmol) i amonijum acetat (1.4 g, 18.2 mmol) u ksilenu (15 mL) je zagrejana u zatvorenoj epruveti na 140°C tokom 2 sata. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), ispran sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (795 mg, 56%). m/z 391.8, 393.8 (M H)<+>.
[0298] 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Pd(Ph3)4(54 mg, 0.046 mmol) je dodat u smešu 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (378 mg, 0.97 mmol), 2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (408 mg, 0.93 mmol), NaHCO3(273 mg, 3.26 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (8 mL) i vodi (2 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejan na 80°C tokom 6 sati, i zatim je isparljiva komponenta uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorом, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (370 mg, 64%). m/z 625.1 (M H)<+>.
[0299] (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, 0.232 mmol) u metanolu (5 mL) je dodat 4.0 M rastvor HCl u dioksanu (1 mL, višak). Smeša je mešana tokom 3 sata na 50°C i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak HCl. Dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL). U rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (123 mg, 0.71 mmol), HATU (285 mg, 0.75 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.14 mL, 0.77 mmol). Smeša je mešana na tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (100 mg, 42%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.00-7.80 (m, 10H), 5.26 (t, 1H), 4.40-3.42 (m, 15H), 2.65-2.00 (m, 8H), 1.50-0.93 (m, 12H); m/z 739.3 (M H)<+>.
Primer AE
[0300]
[0301] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 3-[2-(4-bromofenil)-2-okso-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar je korišćen umesto pirolidin-1,3-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estra.
[0302] 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 3-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što 3-[2-(4-bromofenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estra.
[0303] (1-{3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.0 g, 2.4 mmol) u metanolu (20 mL) je dodat 4.0 M rastvor HCl u dioksanu (4.0 mL, višak). Smeša je mešana tokom 3 sata na 50°C i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak HCl. Dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (20 mL). U rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.46 g, 2.6 mmol), HATU (1.0 g, 2.6 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (2.5 mL, 14.4 mmol). Smeša je mešana u usloviam okoline tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (200 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (1.0 g, 89%). m/z 475.1, 477.1 (M H)<+>.
[0304] [2-Metil-1-(3-15-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
Pd(PPh3)4(73 mg, 0.06 mmol) je dodat u zatvorenu epruvetu koja sadrži smešu (1-{3-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (600 mg, 1.27 mmol), bis(pinakolato)diboron (675 mg, 2.66 mmol), kalijum acetat (324 mg, 3.3 mmol) i 1,4-dioksan (15 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (440 mg, 66%). m/z 523.2 (M H)<+>.
[0305] (1-{2-[5-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenill-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što [2-metil-1-(3-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar i (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar su korišćeni umesto 2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.90-7.70 (m, 10H), 7.20-7.10 (m, 1H), 5.24 (t, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.40-3.80 (m, 4H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 2.60-1.60 (m, 13H), 1.05-0.90 (m, 12H); m/z 765.2 (M H)<+>.
[0306] (1-{3-[5-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što [2-metil-1-(3-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar i (1-{3-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar su korišćeni umesto 2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.90-7.20 (m, 10H), 4.83-4.25 (m, 5H), 3.90-3.40 (m, 6H), 2.90-2.70 (m, 2H), 2.40-2.10 (m, 3H), 2.10-1.40 (m, 11H), 1.10-0.90 (m, 12H); m/z 791.3 (M+H)<+>.
Primer AF
[0307]
[0308] 2-Bromo-1-{4-[4-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil]-etanon: Brom (2.02 mL, 39.3 mmol) u dihlormetanu (25 mL) je dodat polako u mešani rastvor 4-acetilfenil etra (5.0 g, 19.7 mmol) u dihlormetanu (65 mL) na 30°C. Smeša je mešana u usloviam okoline tokom 16 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je ponovo kristalisao iz etanola (40 mL) da se dobije proizvod žute boje nalik kristalu (2.3 g, 29%).
[0309] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-[2-(4-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksil-fenil)-2-okso-etil] estar: U mešanu smešu 2-bromo-1-{4-[4-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil}-etanona (2.0 g, 4.9 mmol) i pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estra (2.2 g, 10.2 mmol) u acetonitrilu (20 mL) je dodat DIPEA (1.76 mL, 10.1 mmol). Smeša je mešana tokom 3 sata na temperaturi okoline. Smeša je razblažena sa etil acetatom (150 mL), isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (2.2 g, 65%). m/z 703.1 (M Na)<+>.
[0310] 2-[5-(4-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksi}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-[2-(4-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksi}-fenil)-2-oksoetil] estar (250 mg, 0.37 mmol) i amonijum acetat (570 mg, 7.3 mmol) u ksilenu (8 mL) je zagrejana u mikrotalasnoj mašini na 140°C tokom 80 minuta. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (62 mg, 26%). m/z 641.1 (M H)<+>.
[0311] [1-(2-15-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenoksi)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-[5-(4-{4-[2-(1- Boc -pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksi}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.80-7.60 (m, 4H), 7.30-7.20 (m, 2H), 7.10-0.95 (m, 4H), 5.16 (t, 1H), 4.30-3.50 (m, 12H), 2.40-1.90 (m, 10H), 1.10-0.90 (m, 12H); m/z 755.2 (M H)<+>.
Primer AG
[0312]
3,4'-dimetilbifenil etar 2-Bromo-1-{4-[3-(2-bromo-acetil)-3,4'-Oksibis(benzoeva kiselina) fenoksi]-fenil}-etanon
Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-[2-(4-{3-[2-(1-Boc- pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksi}-fenil)-2-okso-etil] estar
2-[5-(4-{3-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksi}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[1-(2-{5-[4-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonillamino-3-metil-butiril)- pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenoksi)-fenil]-1H-imidazol-2-il}- pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar
[0313] 3,4'-Oksibis(benzoeva kiselina): Smeša 3,4'-dimetilbifenil etra (1.7 g, 8.6 mmol) i kalijum permanganat (6.0 g, 38 mmol) u vodi (200 mL) je refluksovana tokom 6 sati. Vruć rastvor je filtriran, ohlađen, i esktrakovan sa hloroformom. vodeni sloj je zakiseljen pomoću 2 N HCl. Precipitat je isfiltriran i ispran sa vodom da se dobije bela čvrsta supstanca (0.55 g, 25%). m/z 257.1 (M-H)-.
[0314] 2-Bromo-1-14-[3-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil}-etanon: Smeša 3,4'-oksibis(benzoeva kiselina) (0.55 g, 2.1 mmol)) i oksalil hlorid (10.6 mL, 21.3 mmol) u dihlormetanu (40 mL) koji sadrži DMF (4 kapi) je mešana na temperaturi okoline tokom 4 sata, zatim koncentrovana i koevaporisana sa toluenom (3x) i osušen pod visokim vakuumom. Dobijeni ostatak je suspendovan u dihlormetanu (15 mL) na 0°C i tretiran sa 2.0 M trimetilsilildiazometanom u etru (3.2 mL, 6.4 mmol) tokom 15 minuta da se dobije braon smeša. Reakciona smeša je zagrejana do ambijentalne temperature preko noći i zatim koncentrovana. Dobijena braon supstanca je suspendovana u etil acetatu (15 mL) i ohlađena do 0°C. HBr u sirćetnoj kiselini (1.2 mL, 33%W, 6.4 mmol) je dodat tokom 5 minuta i reakciona smeša je zagrejan do ambijentalne temperature tokom 1 sata. Čvrst natrijum bikarbonat (0.3 g) je dodat i mešana tokom 30 minuta. Voda je dodata dajući bifaznu smešu sa braon talogom. Čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom i filtrat je esktrakovan sa dihlorometanom, osušen preko MgSO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni da se dobije braon čvrsta supstanca (0.47 g).
[0315] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-[2-(4-{3-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksil-fenil)-2-okso-etil] estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-bromo-1-{4-[3-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil}-etanon je korišćen umesto 2-bromo-1-{4-[4-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil}-etanon. m/z 703.1 (M Na)<+>.
[0316] 2-[5-(4-{3-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-[5-(4-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksi}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-[2-(4-{3-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksi}-fenil)-2-okso-etil] estar je korišćen umesto pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-tercbutil estar 2-[2-(4-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenoksi}-fenil)-2-okso-etil] estar. m/z 641.0 (M H)<+>.
[0317] [1-(2-{5-[4-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenoksi)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-[5-(4-{3-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenoksi}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.80-7.10 (m, 10H), 5.30-5.15 (m, 2H), 4.30-4.20 (m, 2H), 4.18-4.05 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.70-3.60 (m, 6H), 2.65-2.45 (m, 2H), 2.40-2.00 (m, 8H), 1.05-0.85 (m, 12H); m/z 755.3 (M H)<+>.
Primer AH
[0318]
Pd(Ph3)
{1 -[2-(6-Bromo-1H- NaHC0
[2-Metil-1-(3-{5-[4-(4,4,5,5-3(1-{2-[6-(4-{2-[2-(2-benzoimidazol- tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)- DME/voda Metoksikarbonilamino-3-metil-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2- fenil]-1H-imidazol-2- butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1 ]hept-3-metil-propil}-karbaminska kiselina il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2- il]-3H-imidazol-4-il}-metil estar karbonil)-propil]-karbaminska kiselina )henil)-1H-benzoimidazol-2-il]-metil estar pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0319] (1-{2-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo [2.2.1] hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što [2-metil-1-(3-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar i {1-[2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar su korišćeni umesto 2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.10-7.80 (m, 7H), 5.42-5.30 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.40-4.25 (m, 2H), 4.20-3.90 (m, 2H, 3.80-3.60 (m, 6H), 3.00-2.80 (m, 1H), 2.70-2.55 (m, 1H), 2.50-1.60 (m, 12H), 1.10-0.80 (m, 12H); m/z 739.3 (M H)<+>.
Primer AI
[0320]
[0321] 5-(4-Bromo-fenil)-5-metil-imidazolidin-2,4-dion: smeša 4-bromo acetofenon (8.0 g, 40.2 mmol), amonijum karbonat (40 g, 402 mmol) i kalijum cijanid (3.4 g, 52.3 mmol) u izmešanom rastvarač etanola (90 mL) i vode (90 mL) je mešana na 55°C tokom 5 sati, zatim 12 sati na ambijentalnoj. Rastvor je podešen do pH = 6 sa 6 N HCl pažljivo i nakon toga mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Precipitat je isfiltriran, ispran sa vodom. Sakupljena bela čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom da se dobije proizvod (9.2 g, 85%). m/z 267.1, 269.1 (M-H)-.
[0322] 2-Amino-2-(4-bromo-fenil)-propionska kiselina: smeša 5-(4-bromo-fenil)-5-metilimidazolidin-2,4-diona (4.0 g, 14.9 mmol) i 3 N NaOH (50 mL) je zagrejana u zatvorenoj epruveti na 145°C tokom dva dana, zatim razblažena sa vodom (100 mL). Rastvor je podešen do pH = 4 sa 6 N HCl pažljivo i zatim mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Precipitat je isfiltriran, ispran sa vodom. Sakupljena bela čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom da se dobije proizvod (2.5 g, 65%). m/z 243.7, 245.7 (M H)<+>.
[0323] 2-Amino-2-(4-bromo-fenil)-propionska kiselina etil estar: U rastvor 2-amino-2-(4-bromo-fenil)-propionske kiseline (1.0 g, 4.1 mmol) u etanolu (20 mL) je propušten HCl gas tokom pet minuta. Smeša je mešana u uslovima okoline tokom 34 sata, zatim reflukosavana tokom 18 sati. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), ispran sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod (800 mg, 72%). m/z 271.7, 273.7 (M H)<+>.
[0324] 2-[1-(4-Bromo-fenil)-1-etoksikarbonil-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: N,N-diizopropiletilamin (4.1 mL, 23.6 mmol) je dodat u kapima u smešu od pirolidin-1,3-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estara (0.7 g, 3.2 mmol), HATU (1.2 g, 3.2 mmol) i 2-amino-2-(4-bromo-fenil)-propionska kiselina etil estar (0.8 g, 2.9 mmol) u DMF (20 mL), i mešana u ambijentalnim uslovima tokom 3 sata. Veći deo ispraljive komponente je uklonjen u vakuumu, i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bezbojno ulje (0.8 g, 58%). m/z 490.9, 492.9 (M Na)<+>.
[0325] 2-[1-(4-Bromo-fenil)-1-karbamoil-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U mešani rastvor 2-[1-(4-bromo-fenil)-1-etoksikarbonil-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (280 mg, 0.6 mmol) u etanolu (8 mL) je propušten kroz NH3gas tokom 5 minuta na -78°C. Rastvor je mešana u ambijentalnim uslovima tokom 3 dana u zatvorenoj epruveti. Veći deo isparljive komponente je uklonjena u vakuumu, i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bezbojno ulje (169 mg, 64%). m/z 439.8, 441.8 (M H)<+>.
[0326] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-5-metil-4-okso-4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U mešani rastvor 2-[1-(4-bromo-fenil)-1-karbamoiletilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (160 mg, 0.36 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat 1 N NaOH (5 mL), i mešano je u ambijentalnim uslovima tokom 3 sata. Veći deo ispraljive komponente je uklonjen u vakuumu, i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobbijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (120 mg, 79%). m/z 421.8, 423.8 (M H)<+>.
[0327] 2-{5-Metil-4-okso-5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Pd(PPh3)4(31 mg, 0.03 mmol) je dodat u zatvorenu epruvetu koja sadrži smešu 2-[5-(4-bromo-fenil)-5-metil-4-okso-4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (113 mg, 0.27 mmol), bis(pinakolato)diboron (144 mg, 0.57 mmol), kalijum acetat (66 mg, 0.68 mmol) i 1,4-dioksan (3 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bezbojno ulje (100 mg, 79%). m/z 470.0 (M H)<+>.
[0328] 2-(5-{4'-[4-Boc-2-(1-metil-pirolidin-2-il)-5-okso-4,5-dihidro-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što 2-{5-metil-4-okso-5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-4,5-dihidro-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. m/z 655.1 (M H)<+>.
[0329] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-(5-{4'-[4-Boc-2-(1-metil-pirolidin-2-il)-5-okso-4,5-dihidro-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.90-7.50 (m, 9H), 5.25 (t, 1H), 4.23 (d, 2H), 4.18-3.75 (m, 4H), 3.75-3.30 (m, 6H), 2.65-2.40 (m, 2H), 2.40-1.70 (m, 12H), 1.10-0.80 (m, 12H); m/z 769.2 (M H)<+>.
Primer AJ
[0330]
[0331] 2,7-Dibromo-9,10-dihidro-fenantren: U mešani rastvor 9,10-dihidrofenantrend (10 g, 55.5 mmol) u trimetilfosfatu (60 mL) je dodat broma (6.13 mL, 119.3 mmol) u trimetilfosfatu (40 mL) polako. Nakon dodavanja, smeša je mešana u ambijentalnim uslovima tokom 18 sati, Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. ostatak je ponovo kristalisao iz hloroforma da se dobije beli kristal (9.45 g, 51 %).
[0332] 4,4,5,5-Tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidrofenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan: Pd(PPh3)4(24 mg, 0.03 mmol) je dodat u zatvorenu epruvetu koja sadrži smešu 2,7-dibromo-9,10-dihidro-fenantren (1.0 g, 3.0 mmol), bis(pinakolato)diboron (3.8 g, 14.9 mmol), kalijum acetat (1.5 g, 14.9 mmol) i 1,4-dioksan (30 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotomom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (300 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (1.2 g, 93%). m/z 432.8 (M H)<+>.
[0333] 2-(5-17-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Pd(PPh3)4(31 mg, 0.03 mmol) je dodat u smešu 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan (115 mg, 0.27 mmol), 2-(4-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (173 mg, 0.55 mmol), NaHCO3(159 mg, 1.9 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (5 mL) i voda (1 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejan na 80°C tokom 6 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se obezbedi željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca (42 mg, 24%). m/z 651.0 (M H)<+>.
[0334] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1- {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.99 (d, 2H), 7.88 (s, 2H), 7.80-7.65 (m, 4H), 5.30-5.20 (m, 2H), 4.24 (d, 2H), 4.20-4.05 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.75-3.60 (m, 6H), 3.00 (s, H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.40-2.00 (m, 8H), 1.05-0.80 (m, 12H); m/z 765.3 (M H)<+>.
Primer AK
[0335]
[0336] 4,4,5,5-Tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9H-fluoren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan, osim što 2,7-dibromofluoren je korišćen umesto 2,7-dibromo-9,10-dihidro-fenantrena.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 2H), 7.84 (s, 4H), 3.90 (s, 2H), 1.38 (s, 24H).
[0337] 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioksaborolan-2-il)-9H-fluoren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan je korišćen umesto 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidrofenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan. m/z 637.1 (M H)<+>.
[0338] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.03 (d, 2H), 7.96 (s, 2H), 7.88 (s, 2H), 7.77 (d, 2H), 5.26 (t, 2H), 4.24 (d, 2H), 4.20-4.05 (m, 4H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.75-3.60 (m, 6H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.40-2.00 (m, 8H), 1.05-0.90 (m, 12H); m/z 751.3 (M H)<+>.
Primer AL
[0339]
[0340] 2,7-Bis-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fluoren-9-on: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan, osim što 2,7-dibromo-9-fluorenon je korišćen umesto 2,7-dibromo-9,10-dihidro-fenantren.
[0341] 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9-okso-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, osim što 2,7-bis-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fluoren-9-on je korišćen umesto 4,4,5,5-tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioksaborolan-2-il)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan. m/z 650.9 (M H)<+>.
[0342] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9-okso-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Praćenjem procedure korišćene da se pripremi jedinjenje (1-{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9-okso-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je korišćen umesto 2-(5-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.05-7.85 (m, 8H), 5.22 (t, 2H), 4.23 (d, 2H), 4.20-4.05 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.67 (s, 6H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.40-2.00 (m, 8H), 1.05-0.90 (m, 12H); m/z 765.3 (M H)<+>.
Primer AM
[0343]
[0344] 2-Bromo-5-jodo-benzoeva kiselina metil estar: u rastvor 2-bromo-5-jodo-benzoeve kiseline (10 g, 31 mmol) u metanolu (100 ml) je dodat tionil hlorid (5 ml, 68 mmol). Smeša je zagrejana na 55°C tokom 12 sati. Rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom i smeša je razblažena sa EtOAc. Organski rastvor je ispran sa zasićenim natrijum bikarbonatom, voda, i slanim rastvorom, i osušen je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2-bromo-5-jodo-benzoeva kiselina metil estar (10.5 g).
[0345] 2-Bromo-5-(2-bromo-acetil)-benzoeva kiselina metil estar: U rastvor 2-bromo-5-jodobenzoeva kiselina metil estar (4.33 g, 12.7 mmol) i tributil(etoksivinil)stanan (4.79 g, 13.3 mmol) u dioksanu (56 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(322 mg). Smeša je zagrejan na 80°C tokom 17 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (19 ml) je dodata, praćeno sa sporim dodavanjem NBS (2.33 g, 12.9 mmol) tokom perioda od 10 minuta. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i ispran je sa vodom i slanim rastvorom i osušen sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc = 2/1) dala je 2-bromo-5-(2-bromoacetil)-benzoeva kiselina metil estar (3.48 g).
[0346] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar: U rastvor (s)Boc-PrOH (2.5 g, 11.6 mmol) i trietilamin (1.55 ml, 11.1 mmol) u acetonitrilu (34 ml) je dodat rastvor 2-bromo-5-(2-bromoacetil)-benzoeva kiselina metil estar (3.48 g, 10.4 mmol) u acetonitrilu (17 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc = 1/1.5) dalo je pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (3.9 g): m/z: 491.9 (M Na)<+>.
[0347] 2-[5-(4-Bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (460 mg, 1 mmol) i amonijum acetat (860 mg, 11 mmol) u ksilenima (5 ml) je zagrejana na 140°C tokom 80 minuta pdo mikrotalasnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (EtOAc) dalo je 2-[5-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (320 mg). m/z: 449.8 (M H)<+>, 448.1 (M - H)-.
[0348] 2-{5-[3-Metoksikarbonil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, 0.44 mmol) i bis(pinakolato)diboron (225 mg, 0.89 mmol) u 1,4-dioksanu (3.4 ml) i DMF (2 ml) je dodat kalijum acetat (110 g, 1.1 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(20 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(20 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 12 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (EtOAc) dalo je 2-{5-[3-Metoksikarbonil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (168 mg). m/z: 498.0 (M H)<+>.
[0349] 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar: U rastvor 2-[5-(4-bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (158 mg, 0.35 mmol) i 2-{5-[3-Metoksikarbonil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (166 mg, 0.33 mmol) u 1,2-dimetoksietru (3 ml) i voda (1 ml) je dodat natrijum bikarbonat (91 mg, 1.1 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(15 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(15 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 7 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (EtOAc) dalo je 4,4'-Bis-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (85 mg). m/z: 741.0 (M H)<+>, 370.9 (M 2H)<+>/2.
[0350] 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dimetilhidroksi: U rastvor 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (85 mg, 0.11 mmol) u THF (2 ml) na -78°C je dodat DIBAL-H THF rastvor (1.4 ml, 1.4 mmol). Smeša je zagrejana do 25°C i mešana tokom 5 sati. Smeša je ohlađena do 0°C i kvenčovana sa 2.0 N NaOH rastvorom do PH=11. Smeša je esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/MeOH) dalo je 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dimetilhidroksi (54 mg). m/z: 685.1 (M H)<+>, 343.0 (M 2H)<+>/2.
Primer AN
[0351]
[0352] 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboaldehid: U rastvor 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dimetilhidroksi (54 mg, 0.08 mmol) u DMSO (1.2 ml) je dodat trietilamin (0.14 ml). Smeša je mešana tokom 5 minuta, i piridin-sumpor trioksid (170 mg) je dodat. Smeša je mešana tokom 90 mnuta i kvenčovana je sa ledenom vodom. Mešanej je nastavljeno tokom dodatnih 30 minuta i smeša je esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboaldehid (40 mg). m/z: 681.0 (M H)<+>.
[0353] 3,9-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il] -6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin: U rastvor 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dikarboaldehid (40 mg, 0.06 mmol) u MeOH/THF (2.5 ml/0.5 ml) je dodat metilamin metanol rastvor (29 µl, 0.06 mmol), praćeno sa sirćetnom kiselinom (14 µl, 0.23 mmol) i NaBH(OAc)3(50 mg, 0.23 mmol). Smeša je mešana tokom 12 sati i kvenčovana je sa vodom. Smeša je esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1.0 N rastvorom natrijum hidroksida, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/MeOH) dalo je jedinjenje 3,9- bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il] -6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepine (24 mg). m/z: 680.3 (M H)<+>.
[0354] 3,9-Bis-[2-(pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin: U rastvor 3,9- bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin (24 mg) u DCM/MeOH (1.6 ml/0.75 ml) je dodat hlorovodonična kiselina u dioksanu (0.44 ml, 1.7 mmol). Smeša je zagrejan na 50°C tokom 3 sata i rastvaračis u upareni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa vodom i acetonitrile, i je osušen zamrzavanjem da se dobije 3,9- bis-[2-(pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il] -6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin kao braon prah (25 mg). m/z: 480.1 (M H)<+>.
[0355] 1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3,9- bis-[2-(pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il] -6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin (25 mg, 0.035 mmol) i MeOCO-Val-OH (13 mg, 0.074 mmol) u DMF (1.2 ml) je dodat HATU (28 mg, 0.074 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (61 µl, 0.35 mmol). Smeša je mešana tokom 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (24 mg). m/z: 794.3 (M H)<+>, 397.8 (M 2H)<+>/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.0-7.9 (8 H, m), 5.27 (2 H, m), 4.3-4.2 (2 H, m), 4.2-3.8 (8 H, m), 3.66 (6 H, s), 3.08 (3 H, s), 2.7-2.5 (2 H, m), 2.4-1.9 (8 H, m), 0.94-0.90 (12 H, m).
Primer AO
[0356]
[0357] 3,9-Bis-[2-(pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]--5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin: U suspenziju 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2,2'-dimetilhidroksi (8 mg, 0.011 mmol) u vodi (1.5 ml) je dodata sumporna kiselina (1.5 ml). Smeša je zagrejana na 60°C tokom 14 sati. Smeša je ohlađena do 0°C, i 2 N rastvor natrijum hidroksida je dodat do pH = 7. Smeša je osušena smrzavanjem da se dobije 3,9- bis-[2-( pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]--5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin. m/z: 467.1 (M+H)<+>.
[0358] (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3,9- bis-[2-( pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]--5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin (0.011 mmol) i MeOCO-Val-OH (4 mg, 0.023 mmol) u DMF (5 ml) je dodat HATU (9 mg, 0.023 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (38 µl, 0.22 mmol). Smeša je mešana tokom 60 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.5 mg). m/z: 781.2 (M+1), 391.2 (M+2)/2;<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 7.9-7.8 (8 H, m), 5.27 (2 H, m), 4.44 (4 H, s), 4.22 (2 H, m), 4.17-4.05 (2 H, m), 3.95-3.83 (2 H, m), 5.67 (6 H, s), 2.65-2.50 (2 H, m), 2.35-1.95 (8 H, m), 0.99-0.89 (12 H, m).
Primer AP
[0359]
[0360] 2-[5-(4-Bromo-3-hidroksimetil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(4-Bromo-3-metoksikarbonil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, 0.44 mmol) u THF (4 ml) na -78°C je dodat DIBAL-H THF rastvor (3.33 ml, 3.33 mmol). Smeša je zagrejan do 25°C i mešana tokom 5 sati. Smeša je ohlađena do 0°C i kvenčovana sa 2.0 N NaOH rastvorom do PH=11. Smeša je esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2-[5-(4-bromo-3-hidroksimetil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (196 mg). m/z: 421.9 (M H)<+>, 420.2 (M - H)-.
[0361] 2-[5-(4-Bromo-3-formil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: U rastvor 2-[5-(4-bromo-3-hidroksimetil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (196 mg, 0.46 mmol) u DMSO (3.5 ml) je dodat trietilamin (0.40 ml). Smeša je mešana tokom 30 minuta, i piridin-sumpor trioksid (500 mg) je dodat. Smeša je mešana tokom 2 sata i kvenčovana je sa ledenom-vodom. mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 30 minuta i smeša je esktrakovan sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2-[5-(4-Bromo-3-formil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (180 mg).
[0362] 2-(5-{4-Bromo-3-[(terc-butoksikarbonil-metil-amino)-metil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(4-bromo-3-formilfenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (180 mg, 0.46 mmol) u MeOH/THF (2.5 ml/2.5 ml) je dodat metilamine metanol rastvor (0.69 ml, 1.38 mmol), praćeno sa sirćetnom kiselinom (110 µl, 1.84 mmol) i NaBH(OAc)3(975 mg, 4.6 mmol). Smeša je mešana tokom 12 sati i kvenčovana je sa 1 N rastvorom natrijum hidroksida. Smeša je esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala intermedijer (171mg). U rastvor gornjeg intermedijera (171 mg, 0.39 mmol) u DCM (4 ml) je dodat di-terc-butil dikarbonat (86 mg, 0.39 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (135 61, 0.78 mmol). Smeša je mešana tokom 12 sati, i rastvarač i reagens je uparen. Prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 2-(5-{4-bromo-3-[(terc-butoksikarbonilmetil-amino)-metil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (142 mg). m/z: 535 (M H)<+>.
[0363] 4,4'-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2-[(tercbutoksikarbonil-metil-amino)-2'-karboksilna kiselina dimetil estar: U rastvor 2-(5-{4-bromo-3-[(terc-butoksikarbonil-metil-amino)-metil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (142 mg, 0.27 mmol) i 2-{5-[3-Metoksikarbonil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (125 mg, 0.25 mmol) u 1,2-dimetoksietru (2.3 ml) i vodi (0.7 ml) je dodat natrijum bikarbonat (63 mg, 0.75 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(12 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(12 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 20 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2-[(terc-butoksikarbonil-metil-amino)-2'-karboksilna kiselina dimetil estar (82 mg). m/z: 826 (M+H)<+>, 413.6 (M 2H)<+>/2.
[0364] 2'-Metilaminometil-4,4'-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-2-karboksilna kiselina metil estar: U rastvor 4,4'-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-2-[(terc-butoksikarbonil-metil-amino)-2'-karboksilna kiselina dimetil estar (77 mg, 0.09 mmol) u DCM (3 ml) je dodata trifluorosirćetna kiselina (3 ml). Smeša je mešana tokom 2 sata, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je zamrzavanjem da se dobije 2'-metilaminometil-4,4'-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-2-karboksilna kiselina metil estar kao beli prah (90 mg). m/z: 526.1 (M H)<+>.
[0365] 6-Metil-3,9-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-6,7-dihidro-dibenzo[c,e]azepin-5-on: U rastvor 2'-metilaminometil-4,4'-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-2karboksilna kiselina metil estar (90 mg) u piridinu (5 ml) je dodat diizopropiletilamin (1 ml). Smeša je zagrejana na 100°C tokom 2 sata. Rastvarači su evaporisali. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, osušena je zamrzavanjem da se dobije 6-Metil-3,9-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-6,7-dihidro-dibenzo[c,e]azepin-5-on kao braon prah. m/z: 494.1 (M H)<+>.
[0366] (1-12-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-5-okso-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 6-metil-3,9-bis-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-6,7-dihidro-dibenzo[c,e]azepin-5-one (0.09 mmol) i MeOCO-Val-OH (33 mg, 0.19 mmol) u DMF (3 ml) je dodat HATU (71 mg, 0.19 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (323 µl, 1.86 mmol). Smeša je mešana tokom 60 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-5-okso-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (16 mg). m/z: 808.2 (M+1), 404.8 (M+2)/2, 806.3 (M-1).<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.1-7.8 (8 H, m), 5.4-5.2 (2 H, m), 4.6-4.2 (4 H, m), 4.2-4.0 (2 H, m), 3.95-3.80 (2 H, m), 3.64 (6 H, m), 3.25 (3 H, s), 2.65-2.45 (2 H, m), 2.35-2.0 (8 H, m), 1.05-0.9 (12 H, m).
Primer AQ
[0367]
[0368] 2,7-Dibromo-fenantren: smeša 2,7-dibromo-9,10-dihidro-fenantrene (2.4 g, 7.1 mmol), NBS (1.4 g, 7.8 mmol), i benzoil peroksid (0.2 g) u ugljenik tetrahloridu (300 ml) je refluksovan tokom 2 sata. Kalijum acetat (3.6 g) i sirćetna kiselina (3.2 ml) su dodati, i refluksovanje je nastavljeno tokom dodatna 2 sata. Smeša je ohlađena i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom, zasićenim natrijum bikarbonat, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2,7-dibromo-fenantren (2.3 g).
[0369] (4,4'-Dibromo-2'-hidroksimetil-bifenil-2-il)-metanol: rastvor 2,7-dibromo-fenantren (3.8 g) u DCM/MeOH (120 ml/1 ml) je ohlađena do -78°C, i postao je suspenzija. Ozon je propušten tokom 20 minuta, i smeša je postala plava. Kiseonik je propušten tokom 5 minuta i dimetil sulfid (3 ml) je dodat. Smeša je zagrejana do 25°C i mešana tokom 12 sati. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 4,4'-dibromobifenil-2,2'-dikarbaldehid (600 mg). U rastvor 4,4'-dibromo-bifenil-2,2'-dikarbaldehid (600 mg, 1.7 mmol) u THF/MeOH (10 ml/10 ml) na 0°C je dodat natrijum borohidrid (320 mg, 8.2 mmol). Smeša je zagrejana do 25°C i mešana tokom 12 sati. Smeša je kvenčovana sa vodom, i esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala (4,4'-dibromo-2'-hidroksimetil-bifenil-2-il)-metanol (550 mg).
[0370] 3,9-Dibromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin: suspenzija (4,4'-dibromo-2'-hidroksimetil-bifenil-2-il)-metanol (460 mg) u fosfornoj kiselini (25 ml) je zagrejana na 160°C tokom 4 sata. Smeša je ohlađena i razblažena sa vodom (100 ml), i esktrakovana je sa EtOAC. Organska faza je isprana sa vodom, zasićenim natrijum bikarbonatom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 3,9-dibromo-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin (416 mg).
[0371] 2-Bromo-1-[9-(2-bromo-acetil)-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il]-etanon: U rastvor 3,9-dibromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin (416 mg, 1.2mmol) i tributil(etoksivinil)stanan (878 µl, 2.6 mmol) u dioksanu (6 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(30 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (2 ml) je dodata, praćeno sa sporim dodavanjem NBS (464 mg, 2.6 mmol) tokom perioda od 5 minuta. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc) dalo je 2-bromo-1-[9-(2-bromo-acetil)-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il]-etanon (160 mg).
[0372] Diketoestar: U rastvor (S)-Boc-Pro-OH (275 mg, 1.28 mmol) i trietilamine (154 µl, 1.11 mmol) u acetonitrilu (3.4 ml) je dodat rastvor 2-bromo-1-[9-(2-bromo-acetil)-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il]-etanon (160 mg, 0.37 mmol) u DMF (6 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i ispran sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala intermedijer diketoestar. m/z: 729.1 (M Na)<+>.
[0373] 3,9-Bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin: smeša iznad diketoestra (0.37 mmol) i amonijum acetata (860 mg, 11 mmol) u ksilenu (5 ml) je zagrejana na 140°C tokom 80 minuta pod mikrotalasnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dalo je 3,9-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin (195 mg). m/z: 667.1 (M H)<+>.
[0374] (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3,9-bis-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin (190 mg) u DCM (3 ml) je dodat TFA (1.5 ml). Smeša je mešana tokom 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je zamrzavanjem da se dobije dipirolidin. U rastvor dipirolidina (0.29 mmol) i (S-)-Moc-Val-OH (100 mg, 0.57 mmol) u DMF (8 ml) je dodat HATU (227 mg, 0.60 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (0.5 ml, 2.9 mmol). Smeša je mešana tokom 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Oganska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (142 mg). m/z: 781.3 (M+1), 779.3 (M-1), 391.3 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 7.9-7.8 (8 H, m), 5.27 (2 H, m), 4.44 (4 H, s), 4.22 (2 H, m), 4.17-4.05 (2 H, m), 3.95-3.83 (2 H, m), 5.67 (6 H, s), 2.65-2.50 (2 H, m), 2.35-1.95 (8 H, m), 0.99-0.89 (12H, m).
Primer AR
[0375]
[0376] 2-Bromo-1-(9-bromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-etanon: U rastvor 3,9-dibromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin (416 mg, 1.2mmol) i tributil(etoksivinil)stanan (878 µl, 2.6 mmol) u dioksanu (6 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(30 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (2 ml) je dodata, praćeno sa sporim dodavanjem NBS (464 mg, 2.6 mmol) tokom 5 minutnog perioda. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc) dalo je 2-bromo-1-(9-bromo-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il)-etanon (120 mg).
[0377] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(9-bromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: U rastvor (S)-Boc-Pro-OH (118 mg, 0.55 mmol) i trietilamine (65 µl, 0.46 mmol) u acetonitrilu (2 ml) je dodat rastvor 2-bromo-1-(9-bromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-etanona (120 mg, 0.31 mmol) u DMF (4 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(9-bromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (160 mg). m/z: 553.8 (M Na)<+>.
[0378] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[9-(2-bromo-acetil)-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar: U rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(9-bromo-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (160 mg, 0.30) i tributil(etoksivinil)stanan (112 µl, 0.33 mmol) u dioksanu (2 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(8 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (0.7 ml) je dodata, praćeno sa sporim dodavanjem NBS (59, 0.33 mmol) tokom perioda od 5 minuta. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i ispran je sa vodom i slanim rastvorom i osušen sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc) dalo je Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[9-(2-bromoacetil)-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar (156 mg). m/z: 593.9 (M Na)<+>.
[0379] 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{9-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar: U rastvor 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (100 mg, 0.42 mmol) i trietilamin (50 µl, 0.36 mmol) u acetonitrilu (2 ml) je dodat rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[9-(2-bromo-acetil)-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar (136 mg, 0.24 mmol) u DMF (4 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{9-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar (142 mg). m/z: 731.3 (M - H)-, 755.2 (M Na)<+>.
[0380] 3-(5-'9-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{9-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar (142 mg, 0.19 mmol) i amonijum acetat (860 mg, 11 mmol) u ksilenu (5 ml) je zagrejan na 140°C tokom 80 minuta pod mikrotalasnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i esktrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dalo je 3-(5-{9-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (86 mg). m/z: 693.1 (M H)<+>.
[0381] (1-{3-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3-(5-{9-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,7-dihidrodibenzo[c,e]oksepin-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (86 mg) u DCM (3 ml) je dodat TFA (1.5 ml). Smeša je mešana tokom 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je zamrzavanjem da se dobije braon prah. U rastvor gornjeg praha (0.12 mmol) i (S)-Moc-Val-OH (44 mg, 0.25 mmol) u DMF (4 ml) je dodat HATU (99 mg, 0.26 mmol), praćeno sa diizopropiletilamin (0.22 ml, 1.2 mmol). Smeša je mešana tokom 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{3-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il)-1H-imidazol-2il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (84 mg). m/z: 807.4 (M+1), 805.3 (M-1), 404.4 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.0-7.8 (8 H, m), 5.26 (2 H, m), 4.66 (1 H, m), 4.44 (4 H, m), 4.35 (1 H, m), 4.25 (1 H, m), 4.15 (1 H, m), 3.89 (1 H, m), 3.67 (6 H, m), 2.85 (2 H, m), 2.60 (2 H, m), 2.3-1.4 (9 H, m), 1.05-0.85 (12 H, m).
Primer AS
[0382]
[0383] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon (HCl so, 1.0 g, 4 mmol) i 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (0.98 g, 4 mmol) u DMF (13 ml) je dodat HATU (1.64 g, 4.3 mmol), praćeno sa sporim dodavanjem diizopropiletilamina (2.2 ml, 12.7 mmol). Smeša je mešana tokom 4 sati i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksan/EtOAc) dalo je 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar (1.7 g). m/z: 460.9 (M Na)<+>.
[0384] 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.7 g, 4 mmol), sirćetna kiselina (24 µl), i amonijum acetat (1.54 g, 20 mmol) u ksilenu (20 ml) je zagrejana na 140°C tokom 20 sati. Smeša je kvenčovana sa zasićenim rastvorom natrijum karbonata, i esktrakovana sa EtOAc.
Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.21 g). m/z: 417.9 (M H)<+>.
[0385] 3-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 3-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (667 mg, 1.6 mmol) i bis(pinakolato)dibor (813 mg, 3.2 mmol) u 1,4-dioksanu (12.5 ml) je dodat kalijum acetat (401 mg, 4.1 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(78 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 12 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 3-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (560 mg). m/z: 466.1 (M+H)<+>.
[0386] 4,4'-Bis-[2-(2-terc-butoksikarbonil-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil: U rastvor 3-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (560 mg, 1.22 mmol) i 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (535 mg, 1.28 mmol) u 1,2-dimetoksietru (11 ml) i vodi (3.5 ml) je dodat natrijum bikarbonat (343 mg, 4 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(55 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 7 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/MeOH) dalo je 4,4'-bis-[2-(2-terc-butoksikarbonil-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil (50 mg). m/z: 677.2 (M H)<+>.
[0387] (1-{3-[5-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 4,4'-Bis-[2-(2-tercbutoksikarbonil-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil (50 mg, 0.07 mmol) u MeOH (2 ml) je dodata hlorovodonična kiselina (0.24 ml, 1.48 mmol) Smeša je zagrejan na 50°C tokom 5 sati, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je zamrzavanjem da se dobije braon prah. m/z: 477.2 (M+1), 239.1 (M+2)/2. U rastvor gornjeg praha (29 mg, 0.047 mmol) i MeOCO-Val-OH (20 mg, 0.0.113 mmol) u DMF (1.5 ml) je dodat HATU (40 mg, 0.10 mmol), praćeno sa diizopropiletilamin (50 ml, 0.28 mmol). Smeša je mešana tokom 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{3-[5-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (15 mg). m/z: 791.2 (M+1), 396.5 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 7.92-7.82 (10 H, m), 4.82 (2 H, m), 4.32 (2 H, m), 4.05 (2 H, m), 3.65 (6 H, m), 2.85 (2 H, m), 2.3-1.6 (14 H, m), 1.05-0.85 (12 H, m).
Primer AT
[0388]
[0389] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.0 g, 2.44 mmol) i Lawesson-ov reagens (1.23 g, 3.0 mmol) u THF (16 ml) je zagrejan na 80°C tokom 4 sata. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i smeša je razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonatom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 2-[5-(4-Bromo-fenil)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (655 mg). m/z: 410.7 (M H)<+>.
[0390] 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-tiazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(4-Bromo-fenil)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (380 mg, 0.93 mmol) i bis(pinakolato)dibor (500 mg, 2.0 mmol) u 1,4-dioksanu (7 ml) je dodat kalijum acetat (240 mg, 2.1 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(46 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 20 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-tiazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (400 mg). m/z: 479.0 (M Na)<+>.
[0391] 4,4'-Bis-[5-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-tiazol-2-il]-bifenil: U rastvor 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-tiazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (242 mg, 0.53 mmol) i 2-[5-(4-Bromo-fenil)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (224 mg, 0.55 mmol) u 1,2-dimetoksietru (4.7 ml) i voda (1.5 ml) je dodat natrijum bikarbonat (150 mg, 1.8 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(24 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 7 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/MeOH) dalo je 4,4'- bis-[5-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-tiazol-2-il]-bifenil (270 mg).
[0392] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-tiazol-5-il}-bifenil-4-il)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 4,4'- Bis-[5-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-tiazol-2-il]-bifenil (270 mg) u DCM (4 ml) je dodat TFA (2 ml) Smeša je mešana tokom 4 sati, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena DCM, i 1.0 N rastvor natrijum hidroksida je dodat do pH 11. Organska faza je odvojena i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala belu čvrstu supstancu (182 mg). U rastvor gornjeg praha (46 mg, 0.1 mmol) i MeOCO-Val-OH (42 mg, 0.24 mmol) u DMF (3 ml) je dodat HATU (84 mg, 0.22 mmol), praćeno sa diizopropiletilamin (100 µl, 0.6 mmol). Smeša je mešana tokom 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N rastvorom NaOH, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću fleš hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dalo je (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-tiazol-5-il}-bifenil-4-il)-tiazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (57 mg). m/z: 773.3 (M+1).<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.14 (2 H, s), 7.8-7.6 (8 H, m), 7.37 (2 H, d, J = 8.6 Hz), 5.32 (2 H, m), 4.11 (2 H, m), 3.80 (4 H, m), 3.51 (6 H, s), 2.3-1.9 (10 H, m), 0.90 (12 H, m).
Primer AU
[0393]
[0394] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4"-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: rastvor [2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (300 mg, 0.60 mmol), 1,4-dibromo-benzen (95 mg, 0.40 mmol) i vodeni K2CO3(800 µl 2M rastvora) u dimetoksietanu (4 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4i reakcija je zagrejana do 85°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je kvenčovana sa sirćetnom kiselinom, filtrirana, i zatim koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću reverzne preparativne HPLC (10-85% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobiju i monosupstituisan proizvod (1-{2-[5-(4'-bromo-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (111 mg, 0.21 mmol, 53% prinos) i željeni bis supstituisan proizvod (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4"-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (24 mg, 0.074 mmol, 19% prinos):<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.79 (s, 2H), 7.85-7.62 (m, 12H), 7.53 (s, 2H), 7.29 (d, 2H), 5.02 (m, 2H), 4.07 (t, 2H), 3.82 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.15-1.90 (m, 10H), 0.91 (d, 6H), 0.86 (d, 6H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H55N8O6: 815.4 (M+H<+>); Pronađeno: 815.7 (M H)<+>.
Primer AV
[0395]
[0396] {1-[2-(5-{4-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-tiazol-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno praćenjem metode detaljno za (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4"-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar, supstituisanjem 2,5-dibromo-tiazola za 2,6-dibromobenzen:<1>H (DMSO-d6): δ = 8.09 (s, 2H), 7.85 (m, 8 H), 7.71 (s, 2H), 7.33 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 5.13 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.11 (t, J = 10.4 Hz, 2H), 3.84 (m, 2H), 3.53 (s, 6H), 2.38 (m, 2H), 2.15 (m, 3H), 2.03 (m, 6H), 0.82 (m 12H). C43H51N9O6S izračunato 821.4 opaženo [M H]<+>822.6; rt = 1.61 min
Primer AW
[0397]
[0398] {1-[2-(5-{4-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-tiofen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno praćenjem metode detaljno za (1-{2-[5-(4-{2-[l-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4"-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar, supstituisanjem 2,5-dibromo-tiofena za 2,6-dibromobenzen:<1>H (DMSO-d6): δ = 8.47 (s, 2H), 8.09 (m, 4H), 7.89 (m, 6H), 7.33 (d J = 10.4 Hz, 2H), 5.12 (t, J = 10.0 ZH, 2H), 4.10 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.61 (m, 4H), 2.37 (m, 2H), 2.10 (m, 9H), 0.822 (m, 12H). C44H52N8O6S izračunato 820.4 opaženo [M 1]<+>821.8; rt = 1.66 min
Primer AX
[0399]
[0400] 2-Bromo-1-[4-(2-bromo-acetil)-fenil]-etanon: U rastvor Br2(1.27 mL, 24.66 mmol) u HOAc (12 mL) je dodat 1,4-diacetilbenzen (2.00 g, 12.33 mmol). Nakon mešanja tokom 2 h, reakcija je razblažena sa vodom i precipitat je sakupljen filtracijom. Sirov proizvod je zatim ponovo kristalisao iz toluena da se dobije 2-bromo-1-[4-(2-bromo-acetil)-fenil]-etanon (2.87 g, 8.97 mmol, 73% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ 8.13 (s, 4H), 5.01 (s, 4H).
[0401] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[4-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksikarbonil)-fenil]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar: Suspenzija 2-bromo-1-[4-(2bromo-acetil)-fenil]-etanona (2.87 g, 8.97 mmol) u CH3CN (15 mL) je dodat u kapima u rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar(3.85 g, 17.9 mmol) i trietilamina (2.49 mL, 17.9 mmol) u CH3CN (30 mL). Reakcija je mešana tokom 4 sata zatim koncentrovan i prečišćena pomoću silika gel hromatografija (20-60% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[4-(1-terc-butoksikarbonilPirolidin-2-karboniloksikarbonil)-fenil]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar (4.91 g, 8.34 mmol, 93% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.11 (s, 4H), 5.69-5.50 (m, 4H), 4.37-4.32 (m, 2H), 3.42-3.29 (m, 6H), 2.34-2.24 (m, 2H), 2.14-2.10 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 4H), 1.40 (s, 9H), 1.37 (s, 9H).
[0402] 1-[2-(5-'4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon: rastvor Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[4-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksikarbonil)-fenil]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar (4.91 g, 8.35 mmol) i amonijum acetat (6.44 g, 8.36 mmol) u ksilenima (42 mL) je zagrejan do 140°C preko noći u zatvorenom sudu pod pritiskom. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i ispran sa zasićenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušena preko Na2SO4zatim koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (3-10% MeOH- CH2Cl2gradijent) da se dobije 1-[2-(5-{4-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon (1.58 g, 2.87 mmol, 34% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C30H41N6O4: 549.3 (M+H<+>); Pronađeno: 549.3 (M+H<+>).
[0403] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U 1-[2-(5-{4-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon (500 mg, 0.91 mmol) u dioksanima (5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (3 mL). Suspenzija je mešana tokom 2 sata zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina (530 mg). U deo sirovog amina (200 mg, 0.41 mmol) u DMF (2 mL) je dodat N-metilmorfolin (270 µl, 2.44 mmol). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (144 mg, 0.82 mmol) i HATU (312 mg, 0.82 mmol) su dodati. Nakon mešanja tokom 1 sata reakcija je kvenčovana sa AcOH zatim prečišćena pomoću reverzne preparativne HPLC (10-85% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobije (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (56 mg, 0.085 mmol, 21% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.68 (s, 2H), 7.62 (m, 4H), 7.41 (s, 2H), 7.27 (d, 2H), 5.07-5.05 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.13 (m, 4H), 1.95 (m, 6H), 0.90 (d, 6H), 0.85 (d, 6H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C34H47N8O6: 663.4 (M+H<+>); Pronađeno: 663.1 (M+H<+>).
Primer AY
[0404]
[0405] (2-Metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (5.00 g, 11.1 mmol), TMS-acetilen (7.90 mL, 55.5 mmol) i trietilamin (4.64 mL, 33.3 mmol) u DMF (56 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(1.28 g, 1.11 mmol) i CuI (106 mg, 0.56 mmol). sud pod pritiskom je zatvoren zatim zagrejan na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa vodom. Vodena faza je povratno-esktrakovana dva puta zatim organske faze su kombinovane i osušene preko Na2SO4. Nakon koncentracije, sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (10-80% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije (2-metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3.08 g, 6.60 mmol, 59% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C25H35N4O3Si: 467.3 (M+H<+>); Pronađeno: 467.1 (M+H<+>).
[0406] (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U (2-metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3.08 g, 6.60 mmol) u MeOH je dodat K2CO3(1.82 g, 13.2 mmol). Nakon mešanja tokom 5 h, reakcija je filtrirana zatim koncentrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc zatim ispran sa H2O. Vodena faza je povratnoesktrakovan sa EtOAc dva puta zatim su organske faze kombinovane, isprane sa slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (5-10% MeOH- CH2Cl2gradijent) da se dobije (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.62 g, 6.6 mmol, kvantitativni prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H27N4O3: 395.2 (M+H<+>); Pronađeno: 395.2 (M+H<+>).
[0407] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (947 mg, 2.11 mmol), (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.00 g, 2.53 mmol), i trietilamina (882 µl, 6.33 mmol) u DMF (13 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(244 mg, 0.21 mmol) i CuI (40 mg, 0.21 mmol). Sud pod pritiskom je zatvoren zatim zagrejan na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa vodom. Vodena faza je povratno-esktrakovaana dva puta zatim su organske faze kombinovane i osušene preko Na2SO4. Nakon koncentracije, sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (0-20% MeOH-EtOAc gradijent) zatim preparativne HPLC na reverznoj fazi (10-85% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobije [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (600 mg, 1.00 mmol, 47% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.84 (s, 2H), 7.75 (d, 4H), (7.56 (s, 2H), 7.47 (d, 4H), 7.28 (d, 2H), 5.06 (m, 2H), 4.06-4.04 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.14 (m, 4H) 2.00-1.90 (m, 6H), 0.89 (d, 6H), 0.84 (d, 6H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H51N8O6: 763.4 (M+H<+>); Pronađeno: 763.4 (M+H<+>).
Primer AZ
[0408]
[0409] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (244 mg, 0.54 mmol), [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (270 mg, 0.49 mmol) i vodeni K2CO3(490 µl 2M rastvora, 0.98 mmol) u toluenu (3 mL) i DMF (1 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(31 mg, 0.027 mmol) i PdCl2(dppf) (20 mg, 0.027 mmol) zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je kvenčovana sa sirćetnom kiselinom, filtrirana, i zatim koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću reverzne preparativne HPLC (10-85% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobije [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (149 mg, 0.19 mmol, 35% prinos).
<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.82 (s, 1H), 11.79 (s, 1H), 8.21-8.16 (m, 2H), 7.92-7.79 (m, 8H), 7.62 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.31-7.29 (m, 2H), 5.10 (m, 2H), 4.09-4.07 (m, 2H), 3.82 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.20-1.85 (m, 10H), 0.95-0.86 (m, 12H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H53N8O6: 789.4 (M+H<+>); Pronađeno: 789.2 (M+H<+>).
Primer AA1
[0410]
[0411] 2,6-Antracen-bis-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan: smeša 2,6-dibromoantracena (500 mg, 1.49 mmol), bis(pinakolato)dibora (756 mg, 2.98 mmol) i KOAc (585 mg, 5.96 mmol) u DMSO (10 mL) je degazirana sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat PdCl2(dppf) (55 mg, 0.075 mmol) zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je sipana u H2O i esktrakovana sa CH2Cl2. Organska faza je sakupljena zatim isprana sa H2O i slanim rastvorom. Nakon sušenja preko Na2SO4, organska faza je koncentrovan zatim prečišćena pomoću silika gel hromatografije (30-100% CH2Cl2-heksani gradijent) da se dobije 2,6-antracen-bis-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (241 mg, 0.56 mmol, 38% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.57 (s, 2H), 8.46 (s, 2H), 8.00 (d, 2H), 7.79 (d, 2H).
[0412] 1-[2-(5-{6-[2-(1-1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-antracen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon: rastvor 2,6-antracen-bis-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (241 mg, 0.56 mmol), 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (531 mg, 1.68 mmol) i vod. K2CO3(1.12 mL 2M rastvora, 2.24 mmol) u toluenu (6 mL) i DMF (1 mL) je degaziran sa N2gas tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(32 mg, 0.028 mmol) i PdCl2(dppf) (21 mg, 0.028 mmol) zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana.
Sirov materijal je razblažena sa EtOAc zatim ispran sa zasićenim NaHCO3. Vodena faza je povratno-esktrakovana dva puta zatim su organski slojevi kombinovani, osušeni preko Na2SO4, i koncentrovani. Sirov proizvod je prečišćen pomoću reverzne preparativne HPLC (20-80% MeCN-H2O; modifikator 0.1 % mravlje kiseline) da se dobije 1-[2-(5-{6-[2-(1-1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-antracen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon (117 mg, 0.18 mmol, 32% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H45N6O4: 649.4 (M+H<+>); Pronađeno: 648.9 (M+H<+>).
[0413] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-antracen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U 1-[2-(5-{6-[2-(1-1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-antracen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-il]-etanon (117 mg, 0.18 mmol) u dioksanima (5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (180 µl, 0.72 mmol). Suspenzija preko noći je zatim koncentrovan da se dobije HCl so sirovog amina. U amin u DMF (3 mL) je dodat N-metilmorfolin (119 µl, 1.08 mmol). Nakon što je rastvoren sav materijal, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (76 mg, 0.43 mmol) i HATU (151 mg, 0.40 mmol) su dodati. Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa AcOH zatim prečišćena pomoću reverzne preparativne HPLC (15-70% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobije (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-antracen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (46 mg, 0.098 mmol, 54% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.84 (s, 2H), 8.38 (s, 2H), 8.31 (s, 2H), 8.00 (d, 2H), 7.86 (d, 2H), 7.62 (s, 2H), 7.30 (d, 2H), 5.12 (m, 2H), 4.10 (m, 2H), 3.84 (m, 4H), 3.55 (s, 6H), 2.18-1.95 (m, 10 H), 0.96 (d, 6H), 0.88 (d, 6H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H51N8O6: 763.4 (M+H<+>); Pronađeno: 763.1 (M+H<+>).
Primer AB1
[0414]
[0415] 4,4-Difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: rastvor 2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4,4-difluoro-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (700 mg, 1.56 mmol), TMS-acetilen (1.11 mL, 7.79 mmol) i trietilamin (1.1 mL, 7.8 mmol) u DMF (8 mL) je degaziran sa N2gas tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(180 mg, 0.16 mmol) i CuI (14.8 mg, 0.078 mmol). sud pod pritiskom je zatvoren zatim zagrejan na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa vodom. Vodena faza je povratno-esktrakovana dva puta zatim su organske faze kombinovane i osušene preko Na2SO4. Nakon koncentracije, sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (10-50% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije 4,4-difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (547 g, 1.23 mmol, 79% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C23H30F2N3O2Si: 446.2 (M+H<+>); Pronađeno: 445.8 (M+H<+>).
[0416] (1-{4,4-Difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U 4,4-difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (547 mg, 1.23 mmol) u dioksanima (6 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (1.65 mL, 6.6 mmol).
suspenzija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U amin u DMF (5 mL) je dodat N-metilmorfolin (406 µl, 3.69 mmol). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (236 mg, 1.35 mmol) i HATU (513 mg, 1.35 mmol) su dodati. Nakon mešanja tokom 2 sata reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa H2O. Vodena faza je povratno-esktrakovan dva puta zatim su organski slojevi kombinovani, osušen preko Na2SO4, i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (20-60% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije (1-{4,4-difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (412 mg, 0.82 mmol, 67% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C25H33F2N4O3Si: 503.2 (M+H<+>); Pronađeno: 503.2 (M+H<+>).
[0417] (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4,4-difluoro-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: U (1-{4,4-difluoro-2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (412 mg, 0.82 mmol) u MeOH (8 mL) je dodat K2CO3(227 mg, 1.64 mmol). Nakon mešanja tokom 5 h, reakcija je filtrirana zatim koncentrovana. Ostatak je razblažena sa EtOAc zatim isprana sa H2O. Vodena faza je povratno-esktrakovana sa EtOAc dva puta zatim su organske faze kombinovane, isprane sa slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4, i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (20-80% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (371 mg, 0.82 mmol, kvantitativni prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H25F2N4O3: 431.2 (M+H<+>); Pronađeno: 431.1 (M+H<+>).
[0418] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4,4-Difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: rastvor (1-{2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (400 mg, 0.89 mmol), (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (371 mg, 0.89 mmol), i trietilamin (372 µl, 2.67 mmol) u DMF (8 mL) je degaziran sa N2gaoms tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(103 mg, 0.089 mmol) i CuI (17 mg, 0.089 mmol). Sud pod pritiskom je zatvoren zatim zagrejan na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je kvenčovana sa AcOH zatim prečišćena pomoću reverzne preparativne HPLC (10-70% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) zatim silika gel hromatografija (0-10% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4,4-difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (231 mg, 0.29 mmol, 33% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 12.04 (s, 1H), 11.84 (s, 1H), 7.78-7.76 (m, 4H), 7.61 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.50-7.48 (m, 6H), 7.28 (d, 2H), 5.29 (t, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.24-4.14 (m, 1H), 4.06 (t, 1H), 3.93 (t, 1H), 3.80 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.93 (m, 1H), 2.77 (m, 1H), 2.14-1.88 (m, 6H), 0.90-0.84 (m, 12H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H49N8O6: 799.4 (M+H<+>); Pronađeno: 799.0 (M+H<+>).
Primer AC1
[0419]
[0420] 2-[(4-Bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U 2-aminometil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.00 g, 4.97 mmol) i 4-bromobenzoeva kiselina (996 mg, 4.97 mmol) u DMF (25 mL) je dodat N-metilmorfolin (655 µl, 5.96 mmol) i HATU (1.89 g, 4.97 mmol). Nakon mešanja tokom 3 sata reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa 1N HCl, zasićenim NaHCO3, i slanim rastvorom. Organska faza je zatim osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (20-50% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije 2-[(4-bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.91g, 4.97 mmol, kvantitativni prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C17H24BrN2O3: 383.1 (M+H<+>); Pronađeno: 383.6 (M+H<+>).
[0421] (1-{2-[(4-Bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U 2-[(4-bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.00 g, 2.61 mmol) u dioksanima (15 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (5 mL, 20 mmol). Rastvor je mešan preko noći zatim koncentrovan da se dobije HCl so sirovog amina. U amin u DMF (13 mL) je dodat N-metilmorfolin (574 µl, 5.22 mmol), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (457 mg, 2.61) i HATU (992 mg, 2.61 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata reakcija je koncentrovana zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa 1N HCl, zasićenim NaHCO3, i slanim rastvorom. Sirov proizvod je prečišćen silika gel hromatografijom (100% EtOAc) da se dobije (1-{2-[(4-bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (950 mg, 2.18 mmol, 84% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C19H27BrN3O4: 440.1 (M+H<+>); Pronađeno: 440.2 (M+H<+>).
[0422] [1-(2-{[(4'{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-karbonil)-amino]-metil}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{2-[(4-bromo-benzoilamino)-metil]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (104 mg, 0.24 mmol), [2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (117 mg, 0.24 mmol) i vod. K3PO4(480 µl rastvora, 0.96 mmol) u DME (3 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(13.9 mg, 0.012 mmol) zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (15-60% MeCN-H2O; modifikator 0.1% mravlje kiseline) da se dobije [1-(2-{[(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-karbonil)-amino]-metil}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (26 mg, 0.036 mmol, 15% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.8 (s, 1H), 8.61 (m, 1H), 7.94-7.73 (m, 9H), 7.34 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.23 (t, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.07 (t, 1H), 4.01 (t, 1H), 4.07-4.01 (m, 1H), 3.18 (m, 2H), 3.73-3.70 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.16-1.81 (m, 10H), 0.90-0.84 (m, 12H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H52N7O7: 730.4 (M+H<+>); Pronađeno: 730.1 (M+H<+>).
Primer AD1
[0423]
[0424] 1-(4-Etoksikarbonil-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina: Smeša 2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina metil estar (2.00 g), 1.0M tetrabutilamonijum hidroksida u H2O (13 ml) i toluena (50 mL) je mešana tokom 2 sata na temperaturi okoline. Smeša je koncentrovana i ko-evaporisana sa toluenom (3 x 100 mL) i osušena pod visokim vakuumom. U ostatak je dodat 4-Jodo-benzoeva kiselina etil estar (2.40 g) i ko-evaporisan sa toluenom (2 x 20 mL). Bakar jodid (0.829 g) i DMF (10 mL) su dodati i reakciona smeša zagrejana na 95°C tokom 18 sati, zaštićena od svetla. U ohlađenu reakcionu smešu je dodat 3N amonijum hidroksid i ekstrakovan sa dihlorometanom (4x). Organski sloj je osušen (MgSO4) koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 5% metan/dihlorometan 1% trietilamin) da se dobije 1-(4-Etoksikarbonil-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina (1.155 g) kao trietilamonijum so: LCMS-ESI-: izračunato za C15H12NO5: 286.27 (M-H<+>); Pronađeno: 286.1 (M-H<+>).
[0425] 1-(4-Karboksi-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina: U rastvor 1-(4-Etoksikarbonil-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina (1.155 g) u THF (20 mL) na 0°C je dodat 5 M natrijum hidroksid (1.19 mL) i smeša mešana preko noći na temperaturi okoline. Reakciona smeša je zakiseljena do pH 1 sa koncentrovanom HCl, proizvodeći talog. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa H2O i osušena pod visokim vakuumom da se dobije 1-(4-Karboksi-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina (0.7196 g). LCMS-ESI-: izračunato za C13H8NO5: 258.2 (M-H<+>); Pronađeno: 258.1 (M-H<+>).
[0426] 4-(2-Bromo-acetil)-1-[4-(2-bromo-acetil)-fenil]-1H-piridin-2-on: Smeša 1-(4-Karboksifenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-karboksilna kiselina (0.696 g) i oksalil hlorid (2.34 mL) u dihlormetanu (20 mL) koji sadrži DMF (4 kapi) je mešan na temperaturi okoline tokom 4 sata, zatim koncentrovan i ko-evaporisan sa toluenom (3x) i osušen pod visokim vakuumom. Dobijeni ostatak je suspendovan u dihlormetanu (10 mL) na 0°C i tretiran sa 2.0 M trimetilsilildiazometanom u etru (4.0 mL) tokom 15 minuta da se dobije braon smeša. Reakciona smeša je zagrejana do temperature okoline preko noći i zatim koncentrovana. Dobijena braon čvrsta supstanca je suspendovana u etil acetatu (10 mL) i ohlađena do 0°C.5.7 M HBr u sirćetnoj kiselini je dodata tokom 5 minuta i reakciona smeša je zagrejana do temperature okoline tokom 1 sata. Čvrst natrijum bikarbonat (0.3 g) je dodat i mešano je tokom 30 minuta. H2O je dodat dajući bifaznu smešu sa braon talogom. Čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom i filtrat je ekstrakovan sa dihlorometanom (2x), osušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 30 do 80% etil acetat/heksani) da se dobije 4-(2-Bromoacetil)-1-[4-(2-bromo-acetil)-fenil]-1H-piridin-2-on (0.555 g). LCMS-ESI<+>: izračunato za C15H12Br2NO3: 414.06 (M+H<+>); Pronađeno: 411.9, 413.9, 415.8 (M+H<+>).
[0427] 2-[5-(1-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-2-okso-1,2-dihidropiridin-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 4-(2-Bromo-acetil)-1-[4-(2-bromo-acetil)-fenil]-1H-piridin-2-on (0.555 g) pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (0.6 g) i diizopropiletilamin (0.48 mL) u acetonitrilu (10.8 mL) je mešan tokom 2 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom i povratno-ekstrakovana sa etil acetatom. Kombinovan organski sloj je ispran sa razblaženim slanim rastvorom (2x), osušen (MgSO4i koncentrovan da se dobije braon ulje (1.034 g). LCMS-ESI-: izračunato za C35H42N3O11: 680.73 (M-H<+>); Pronađeno: 680.3 (M-H<+>). Ostatak je rastvoren u toluenu (5.5 mL) i amonijum acetatu (2.066 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 2 sata i zatim koncentrovana. Ostatak je podeljen između dihlorometana i razblaženog rastvora natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je ekstrakovan sa dihlorometanom koji sadrži metan (3x) i kombinovan organski sloj je osušen (MgSO4) koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 15% metan/dihlorometan) da se dobije 2-[5-(1-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.098 g). LCMS-ESI<+>: izračunato za C35H44N7O5: 642.76 (M+H<+>); Pronađeno: 642.1 (M+H<+>).
[0428] [1-(2-{5-[1-(4-[2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(1-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.098 g) u dihlormetanu (6.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (2.0 mL) tokom 90 minuta na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.055 g), 4-metilmorfolin (0.099 mL), praćeno sa HATU (0.116 g). Reakciona smeša je mešana tokom 90 minuta na temperaturi okoline i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u dihlormetanu i ispran sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj povratno-ekstrakovan sa dihlorometanom i kombinovan organski sloj osušen (MgSO4) koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{5-[1-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.037 g):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ 8.14 (s, 2H), 7.88 (d, J=8.4, 2H), 7.79 (d, J=7.2, 1H), 7.63 (d, J=8.4, 2H), 7.35-7.30 (m, 2H), 6.88 (s, H), 6.74 (d, J=8.4, 1H), 5.13-5.10 (m, 2H), 3.90-3.80 (m, 8H), 3.53 (s, 6H), 2.40-2.01 (m, 10H), 0.83-0.75 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H50N9O7: 756.86 (M+H<+>); Pronađeno: 756.3 (M+H<+>).
Primer AE1
[0429]
[0430] 2-Benziloksi-4-bromo-piridin: Smeša 4-Bromo-1H-piridin-2-on (0.613 g), srebro karbonat (0.63 g) i benzil bromide (0.50 mL) u benzenu (10 mL) je zagrejana na 50°C tokom 24 sata, zaštićeno od svetla. Reakciona smeša mešana je na temperaturi okoline tokom 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak od Celite-a, koji je ispran etil acetatom. Filtrat je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% etil acetat/heksani) da se dobije 2-Benziloksi-4-bromo-piridin (0.6043 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C12H11BrNO: 265.12 (M+H<+>); Pronađeno: 263.8, 265.8 (M+H<+>).
[0431] 2-{5-[4-(2-Benziloksi-piridin-4-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-Benziloksi-4-bromo-piridin (0.292 g), 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.533 g, pripremljen prema WO2008021927 A2) i Pd(PPh3)4(0.064 g) u vod.
K2CO3rastvoru/dimetoksietan (1.82 mL/5.0 mL) je zagrejan na 80-90°C tokom 8 sati. Reakciona smeša je ohlađen, razblažen sa etil acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksani) da se dobije 2-{5-[4-(2-Benziloksi-piridin-4-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.530 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C30H33N4O3: 497.6 (M+H<+>); Pronađeno: 497.0 (M+H<+>).
[0432] 2-[5-[4-(2-Okso-1,2-dihidro-piridin-4-il)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-{5-[4-(2-Benziloksi-piridin-4-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.530 g) u DMF (5.0 mL) na 0°C je dodat 60% natrijum hidrid (0.047 g). Nakon mešanja tokom 5 minuta, 2-(trimetilsilil)etoksilmetil hlorid je dodat i reakciona smeša mešana tokom 2 sata. Zasićen amonijum hlorid je dodat i smeša je ekstrakovana sa etil acetatom (2x). Organski sloj je ispran sa 5% rastvorom litijum hlorida (2x), slanim rastvorom i osušen (MgSO4) Koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksani) da se dobije 2-[5-[4-(2-Benziloksi-piridin-4-il)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.495 g). LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H47N4O4Si: 627.87 (M+H<+>); Pronađeno: 627.1 (M+H<+>). Smeša 2-[5-[4-(2-Benziloksi-piridin-4-il)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.495 g) i 10% Pd/C (0.023 g) u etanolu (5.5 mL) je mešan u atmosferi vodonika tokom 1 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak od Celite-a, koji je ispran sa metanom. Filtrat je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% metan/etil acetate) da se dobije 2-[5-[4-(2-okso-1,2-dihidro-piridin-4-il)-fenil]-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.3027 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H41N4O4Si: 537.47 (M+H<+>); Pronađeno: 537.0 (M+H<+>).
[0433] 2-[4-(4-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-2-okso-2H-piridin-1-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-[4-(2-okso-1,2-dihidropiridin-4-il)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.3027 g) u etanolu (5.0 mL) je dodat tetrabutilamonijum hidroksid (0.375 mL 1.5 M rastvora) i reakciona smeša mešana tokom 1 sata, zatim koncentrovana da se dobije bezbojno ulje. Ostatak je liofilizovaniz acetonitrila da se dobije žuti ostatak. U ovaj ostatak je dodat 2-[4-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.301 g, pripremljen reagovanjem 2-(4-Bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (pripremljen prema WO2008021927 A2) sa 2-(trimetilsilil)etoksilmetil hlorida korišćenjem natrijum hidrida u DMF) i smeša je ko-evaporisana sa toluenom (15 mL). DMF (1.0 mL) i bakar(I) jodid (0.035 g) su dodati i reakciona smeša je mešan na 95°C tokom 24 sata, zaštićena od svetla. U reakiconu smešu je dodat tetrabutilamonijum jodid (50 mg) i reakcija je nastavljena tokom 2 dana. Dodato je više 2-[4-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estra (0.35 g) i bakar(I) jodida (0.050 g) i reakcija je nastavljena tokom 24 sata. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena sa etil acetatom i ispran sa 3N amonijum hidroksid. Vodeni sloj je povratnoekstrakovan sa etil acetatom (2x). Kombinovan organski sloj je ispran sa 3N amonijum hidroksidom, H2O, slanim rastvorom i osušen (MgSO4) zatim koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% izopropanol/heksan) da se dobije nečist proizvod koji je ponovo prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 25 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-[4-(4-{4-[2-(1-tercbutilkarbamil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil} -2-okso-2H-piridin-1-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.042g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H72N7O7Si2: 903.28 (M+H<+>); Pronađeno: 902.2, 903.2 (M+H<+>).
[0434] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4il}-fenil)-2-okso-2H-piridin-1-il]-1H-imidazo1-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-[4-(4-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-2-okso-2H-piridin-1-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.042g) u dihlormetanu (1.0 mL) je tretiran sa trifluorosirćetnom kiselinom (0.3 mL) tokom 7 sati na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovan i osušen tokom 1 sata pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (0.7 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (0.013 g), 4-metilmorfolin (0.024 mL), praćeno sa HATU (0.028 g). Reakciona smeša je mešan tokom 45 minuta na temperaturi okoline i zatim još 4-metilmorfolina (0.024 mL) je dodato. Reakcija je nastavljena tokom 30 minuta, razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom i osušena (MgSO4) koncentrovana i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-2-okso-2H-piridin-1-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.077 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.48 (d, J=7.2, 1H), 7.96-7.80 (m, 6H), 7.64 (s, 1H), 6.92-6.85 (m, 2H), 5.29-5.17 (m, 2H), 4.26-3.88 (m, 8H), 3.66 (s, 6H), 2.60-2.01 (m, 12H), 0.83-0.75 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H50N9O7: 756.86 (M+H<+>); Pronađeno: 756.3 (M+H<+>).
Primer AF1
[0435]
[0436] 2-(4-Bromo-benzilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U smešu 4-Bromo-benzilamina (2.00 g), Boc-L-prolina (2.01 g), i 4-metilmorfolina (3.26 mL) u DMF (40 mL) je dodat HATU (3.48 g). Reakciona smeša je mešan tokom 45 minuta, zatim koncentrovana, razblažena sa dihlorometanom i isprana sa rastvorom koji čine H2O/zasićen natrijum bikarbonat u odnosu 10:1. Vodeni sloj je povratno-ekstrakovan sa dihlorometanom i kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4) koncentrovani i prečišćeni pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-(4-Bromobenzilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (3.38 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C17H24BrN2NaO3: 405.29 (M+Na<+>); Pronađeno: 405.0 (M+Na<+>).
[0437] 2-({4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il metil}-karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(4-Bromobenzilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.257 g), 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.309 g, pripremljen prema WO2008021927 A2), NaHCO3(0.186 g) i Pd(PPh3)4(0.064 g) u H2O (2.0 mL)/dimetoksietan (6.0 mL) je zagrejana na 80°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u dihlormetanu, ispran sa H2O. Vodeni sloj je povratno-ekstrakovan sa dihlorometanom i kombinovan organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-({4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il metil}-karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.280 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C35H46N5O5: 616.76 (M+H<+>); Pronađeno: 616.1 (M+H<+>).
[0438] [1-(2-{5-[4'-({[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-karbonil]-amino}-metil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-({4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-ilmetil}-karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.280 g) u dihlormetanu (5.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (3.0 mL) tokom 2 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom da se dobije žuti prah (0.2548 g). Žuti prah (0.129 g) je rastvoren u DMF (2.0 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.090 g), 4-metilmorfolin (0.136 mL), praćeno sa HATU (0.192 g). Reakciona smeša je mešana tokom 90 minuta na temperaturi okoline i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u dihlormetanu i ispran sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je povratno-ekstrakovan sa dihlorometanom i kombinovan organski slojevi su osušeni (MgSO4), koncentrovani i prečišćeni pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{5-[4'-({[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-karbonil]-amino}-metil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.089 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.40-8.37 (m, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.83 (d, J=8.4, 2H), 7.72 (d, J=8.1, 2H), 7.63 (d, J=8.4, 2H), 7.37-7.29 (m, 3H), 4.90-4.87 (m, 1H), 4.35-4.28 (m, 3H), 4.03-3.95 (m, 4H), 3.90-3.80 (m, 3H), 3.53 (s, 6H), 2.30-1.80 (m, 10H), 0.90 (d, J=6.9, 3H), 0.86 (d, J=6.3, 3H), 0.78 (d, J=6.6, 3H), 0.68 (d, J=6.9, 3H).
LCMS-ESI-: izračunato za C39H50N7O7: 728.86 (M-H<+>); Pronađeno: 728.2 (M-H<+>).
Primer AG1
[0439]
[0440] 2-(6-Bromo-izohinolin-1-il karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U smešu 6-Bromo-izohinolin-1-ilamin (0.80 g), Boc-L-prolin (0.803 g), i 4-metilmorfolin (0.83 mL) u DMF (10 mL) je dodat HATU (1.39 g). Reakciona smeša je mešana tokom 6 sati. Dodatni Boc-L-proline (0.803 g), 4-metilmorfolin (0.83 mL) i HATU (1.39 g) su dodati i reakcija je mešana preko noći na temperaturi okoline i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa rastvorom u odnosu 10:1 H2O/zasićen natrijum bikarbonat, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 70% etil acetat/heksani) da se dobije 2-(6-Bromoizohinolin-1-il karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.74 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C19H23BrN3O3: 421.31 (M+H<+>); Pronađeno: 419.8, 421.8 (M+H<+>).
[0441] 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-izohinolin-1-il karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-Bromo-izohinolin-1-il karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.426 g), 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.405 g, pripremljen prema WO2008021927 A2), i Pd(PPh3)4(0.053 g) u 2M vod. K2CO3(1.4 mL)/dimetoksietan (3.0 mL) je zagrejan na 90°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena i razblažen sa etil acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-izohinolin-1-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.272 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C37H45N6O5: 653.78 (M+H<+>); Pronađeno: 653.1 (M+H<+>).
[0442] [1-(2-{5-[4-(1-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-karbonil]-amino}-izohinolin-6-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-izohinolin-1-il karbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.272 g) u dihlormetanu (5.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (5.0 mL) tokom 2 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovan i suspendovan u etil etru. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, ispran sa etil etrom i osušen preko noći pod vakuumom da se dobije žuti prah (0.2279 g). Žuti prah (0.1005 g) je rastvoren u DMF (1.5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.061 g), 4-metilmorfolin (0.092 mL), praćeno sa HATU (0.130 g). Reakciona smeša je mešaan tokom 1 sata na temperaturi okoline i zatim razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{5-[4-(1-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-karbonil]-amino}-izohinolin-6-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.093 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.36 (s, 1H), 8.30-8.15 (m, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.05-7.95 (m, 3H), 7.88 (d, J=8.7, 2H), 7.70 (d, J=8.4, 1H), 7.32 (d, J=8.7, 1H), 7.29 (d, J=8.7, 1H), 5.10-5.05 (m, 1H), 4.70-4.65 (m, 1H), 4.10-3.908 (m, 3H), 4.03-3.95 (m, 4H), 3.90-3.80 (m, 3H), 3.49 (s, 6H), 2.39-1.80 (m, 10H), 0.90-0.70 (m, 12H): LCMS-ESI-: izračunato za C41H51N8O7: 767.89 (M+H<+>); Pronađeno: 767.2 (M+H<+>).
Primer AH1
[0443]
[0444] 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il]-etanon: Smeša 5,5-Diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3,7-dikarboksilna kiselina (10.85 g, pripremljen prema OL' Khouk et. Al. Russian J. Org. Chem. 2006, 42(8) 1164-1168) i oksalil hlorid (31.11 mL) u dihlormetanu (250 mL) koji sadrži DMF (0.2 mL) je mešan na temperaturi okoline tokom 6 sati. Mala količina čvrstog materijala je uklonjena filtracijom i filtrat je koncentrovan da se dobije braon čvrsta supstanca.
Ova braon čvrsta supstanca je suspendovana u dihlormetanu i ohlađena do 0°C. u ovu smešu je dodat 2.0M (trimetilsilil)diazometan u heksanu (52.5 mL) i zagrejana do temperature okoline tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana obezbeđujući braon ostatak. Dobijen braon ostatak je suspendovan u etil acetatu (200 mL) i ohlađen do 0°C. 5.7M Bromovodonična kiselina u sirćetnoj kiselini (15.3 mL) je dodata polako i mešana tokom 1 sata na 0°C, zatim 1 sat na temperaturi okoline. Reakciona smeša je kvenčovana sa čvrstim natrijum bikarbonatom i mešana tokom 30 minuta Zasićen rastvor natrijum bikarbonata je dodat, dajući braon talog. Čvrsta supstanca je sakupljena, ispran sa H2O, etil acetatom i osušena pod vakuumom da se dobije 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il]-etanon kao braon čvrsta supstanca (25 g): LCMS-ESI-: izračunato za C16H11Br2O4S: 459.12 (M+H<+>); Pronađeno: nije opažena masa proizvoda.
[0445] 2-(5-{7-[2-(1-tercbutil-karbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il]-etanon (25 g), Boc-L-prolin (15.82 g) i diIzopropiletilamin (12.6 mL) u acetonitrilu (300 mL) je mešana 3 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak rastvoren u etil acetatu, ispran slanim rastvorom i povratno-ekstrakovan sa etil acetatom (3x). Kombinovan organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 800% etil acetat/heksani) da se dobije žuta pena (10 g). LCMS-ESI-: izračunato za C36H41N2O12S: 725.79 (M-H<+>); Pronađeno: 725.1 (M-H<+>). Smeša žute pene (7 g) i amonijum acetata (3.72 g) u ksilenima (20 mL) je mešana na 120°C tokom 3.5 sata i zatim ohlađena. Razblažena je sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je ekstrakovan sa etil acetatom (3x), zatim dihlorometanom koji sadrži metan (3x). Kombinovan organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 5% metan/etil acetat) da se dobije 2-(5-{7-[2-(1-tercbutil-karbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.56 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H43N6O6S: 687.82 (M+H<+>); Pronađeno: 687.0 (M+H<+>).
[0446] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-(5-{7-[2-(1-tercbutil-karbamilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.56 g) u dihlormetanu (50 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (50 mL) tokom 3 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana, triturisaan sa etil etrom i narandžasta čvrsta supstanca je osušena preko noći pod vakuumom. Deo ove narandžaste čvrste supstance (0.15g) je rastvoren u DMF (2.5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.187 g), 4-metilmorfolin (0.13 mL), praćeno sa HATU (0.184 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline i zatim razblažena sa etil acetatom, isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom osušean (MgSO4). Koncentracija i prečišćavanje pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) i liofilizacija dali su (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,5-diokso-5H-5λ<6>-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.150 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.40-8.14 (m, 8H), 7.33 (d, J=8.1, 2H), 5.13-5.10 (m, 2H), 4.13-4.07 (m, 2H), 3.90-3.80 (m, 4H), 3.53 (s, 6H), 2.34-1.98 (m, 10H), 0.85 (d, J=6.6, 6H), 0.81 (d, J=6.6, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H49N8O8S: 801.92 (M+H<+>); Pronađeno: 801.2 (M+H<+>). Primer AI1
[0447]
[0448] 2-{5-[4-(5-Bromo-tiofen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2,5-Dibromo-tiofene (4.93 g), 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.896 g, pripremljen prema WO2008021927 A2), i Pd(PPh3)4(0.118 g) u 2M K2CO3(3.06 mL)/dimetoksietan (6.12 mL) je zagrejan na 90°C tokom 8 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom i isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-{5-[4-(5-Bromo-tiofen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.955 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H25BrN3O2S: 475.42 (M+H<+>); Pronađeno: 473.8, 475.9 (M+H<+>).
[0449] 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiofen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{5-[4-(5-Bromotiofen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.4807 g), bis(pinakolato)diboron (0.54 g), Pd(PPh3)4(0.058) i kalijum acetat (0.257 g) u 1,4-dioksanu je zagrejan na 90°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena do temperatura okoline i razblažen sa etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksani) da se dobije 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiofen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.3752 g) kao braon pena: LCMS-ESI<+>: izračunato za C28H37BN3O4S: 522.48 (M+H<+>); Pronađeno: 521.9 (M+H<+>).
[0450] 2-[5-(5-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiofen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.1050 g), 2-(4-Bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.070 g, pripremljen prema WO2008021927 A2) i Pd(PPh3)4(0.012 g) u 2.0M rastvoru natrijum bikarbonata (0.33 mL) i dimetoksietan (0.66 mL) je mešan pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C tokom 20 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-[5-(5-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.069 g) kao braon pena: LCMS-ESI<+>: izračunato za C34H43N6O4S: 631.80 (M+H<+>); Pronađeno: 631.0 (M+H<+>).
[0451] [1-(2-{5-[4-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-tiofen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(5-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.069 g) u dihlormetanu (3.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (3.0 mL) tokom 30 minuta na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom da se dobije crvenkasto-braon čvrsta supstanca (0.084 g). Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.053 g), 4-metilmorfolin (0.083 mL), praćeno sa HATU (0.113 g). Reakciona smeša je mešan tokom 1 sata na temperaturi okoline zatim razblažen sa etil acetatom, isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvor litijum hlorida, slanim rastvorom, zatim osušena (MgSO4). Koncentracija i prečišćavanje pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) i liofilizacija dala je [1-(2-{5-[4-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-tiofen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il} - Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.040 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.09 (s, 1H), 7.81 (br s, 4H), 7.65-7.60 (m, 1H), 7.45-7.40 (m, 1H), 7.402-7.30 (m, 21H), 5.20-5.00 (m, 2H), 4.10 (q, J=6.9, 3H), 3.90-3.80 (m, 3H), 3.53 (s, 6H), 2.40-1.90 (m, 10H), 0.90-0.76 (m, 12H): LCMS-ESI-: izračunato za C38H49N8O6S: 745.90 (M+H<+>); Pronađeno: 745.2 (M+H<+>).
Primer AJ1
[0452]
[0453] 5-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol i 4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol: U rastvor 5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol (0.997 g) u DMF (15.0 mL) na 0°C je dodat 60% natrijum hidrid (0.197 g). Nakon mešanja tokom 5 minuta, 2-(trimetilsilil)etoksilmetil hlorid (1.18 mL) je dodat i reakciona smeša je mešan tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana, rastvorena u etil acetatu. Organski sloj je ispran sa 5% rastvorom litijum hlorida (2x), slanim rastvorom i osušen (MgSO4). Koncentrovan je i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, etil acetat/heksani) da se dobije smeša u odnosu 1:1 5-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazola i 4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazola (0.89 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C15H22BrN2OSi: 354.33 (M+H<+>); Pronađeno: nije opažena masa proizvoda.
[0454] 2-(5-{4'-[3-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{4'-[1-(2-Trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 1:1 smeše 5-(4-Bromofenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazola i 4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazola (0.145 g), 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.150 g, pripremljen prema WO2008021927 A2) i Pd(PPh3)4(0.020 g) u vod. K2CO3rastvoru (0.51 mL)/ dimetoksietan (1.5 mL) je zagrejan na 80°C tokom 18 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 1:1 smeša 2-(5-{4'-[3-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{4'-[1-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0998 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C33H44N5O3Si: 586.82 (M+H<+>); Pronađeno: 586.0 (M+H<+>).
[0455] [1-(2-{5-[4'-(3H-Imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 1:1 smeša 2-(5-{4'-[3-(2-Trimetilsilaniletoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{4'-[1-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0998 g) u dihlormetanu (3.0 mL) je tretiran sa trifluorosirćetnom kiselinom (3.0mL) tokom 18 sati na temperaturi okoline.
Reakciona smeša je koncentrovana, ko-evaporisana sa acetonitrilom i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) i koncentrovana da se dobije žuti film (0.087 g). Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.023 g), 4-metilmorfolin (0.055 mL), praćeno sa HATU (0.049 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline, razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom i osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{5-[4'-(3H-Imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.016 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 9.10 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.05 (br s, 1H), 7.93-7.80 (m, 8H), 7.32 (d, J=7.8, 1H), 5.20-5.12 (m, 1H), 4.15-4.05 (m, 1H), 3.85-3.80 (m, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.40-1.85 (m, 6H), 0.83 (d, J=7.2, 3H), 0.80 (d, J=6.9, 3H): LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H33N6O3: 513.61 (M+H<+>); Pronađeno: 513.1 (M+H<+>).
Primeri AK1 i AL1
[0456]
[0457] 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
U smešu 4-Bromo-benzen-1,2-diamina (5.0 g), Boc-L-prolina (6.0 g), i 4-metilmorfolina (5.88 mL) u DMF (100 mL) je dodat HATU (10.7 g). Reakciona smeša je mešana tokom 16 sati i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa 5% rastvorom litijum hlorida (2x), slanim rastvorom i osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 30 do 60% etil acetat/heksani) do tamno braon pene. Braon pena je rastvorena u etanolu (100 mL) i zagrejana u zatvorenoj epruveti na 110-130°C tokom 2 dana. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ekstrakovan sa 1N HCl (3x). Vodeni sloj je bazifikovan sa 50% rastvorom NaOH do pH 10 i ekstrakovan sa etil acetatom (2x). Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% izopropanol/heksani) da se dobije 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (6.5 g) kao prljavo bela pena: LCMS-ESI<+>: izračunato za C16H21BrN3O2: 367.26 (M+H<+>); Pronađeno: 365.8, 367.8 (M+H<+>).
[0458] 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: A smeša 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.257 g), 1,4-benzenediboronska kiselina, pinacol estar (1.158 g), Pd(PPh3)4(0.041 g) i kalijum karbonata (0.485 g) u H2O (2.0 mL)/dimetoksietan (5.0 mL) je zagrejan u mikrotaslasnoj na 120°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ohlađena i razblažen sa etil acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 70% etil acetat/heksani) da se dobije 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.187 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C28H37BN3O4: 490.42 (M+H<+>); Pronađeno: 490.0 (M+H<+>).
[0459] 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.116 g), 2-(5-Bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.112 g, pripremljen prema WO2008021927 A2) i Pd(PPh3)4(0.014 g) u 2.0M u rastvoru kalijum karbonata (0.35 mL) i dimetoksietan (1.0 mL) je zagrejan na 90°C tokom 6 sati. Dodatni Pd(PPh3)4(0.014 g) je dodat i reakcija je nastavljena tokom 12 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana sa H2O, slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 1 do 30% izopropanol/heksani) i preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.035 g) kao bis-TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C34H43N6O4: 599.74 (M+H<+>); Pronađeno: 599.1 (M+H<+>). Sporedni proizvod reakcije je takođe izolovan i utvrđenoje da je u 2-(6-{4'-[2-(1-terc-butilkarbamilpirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.013 g) kao bis-TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H49N6O4: 725.89. (M+H<+>); Pronađeno: 725.1 (M+H<+>).
[0460] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.035 g) u dihlormetanu (1.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0155 g), 4-metilmorfolin (0.023 mL), praćeno sa HATU (0.033 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline i zatim razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.0226 g).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 7.98 (s, 1H), 7.90-7.70 (m, 8H), 5.32 (t, J=6.9, 1H), 5.21 (t, J=6.9, 1H), 4.22 (dd, J=10.8, 6.9, 2H), 4.10-3.80 (m, 4H), 3.61 (s, 6H), 2.65-1.80 (m, 10H), 0.950-0.80 (m, 12H): LCMS-ESI-: izračunato za C38H49N8O6: 713.84 (M+H<+>); Pronađeno: 713.3 (M+H<+>).
Primer AL1
[0461] (1-{2-[6-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-(6-{4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (0.013 g) u dihlormetanu (1.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0155 g), 4-metilmorfolin (0.023 mL), praćeno sa HATU (0.033 g). Nakon mešanja tokom 1 sata na temperaturi okoline, dodatna 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0155 g), HATU (0.033 g) su dodati praćeno sa 4-metilmorfolinom (0.023 mL). Nakon mešanja tokom 30 minuta, reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[6-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.0106 g).<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.00 (s, 2H), 7.90-7.70 (m, 14H), 5.40-5.35 (m, 2H), 4.28 (d, J=7.2, 2H), 4.15-3.85 (m, 5H), 3.67 (s, 6H), 2.65-2.06 (m, 10H), 0.95 (d, J=6.6, 6H), 0.88 (d, J=6.6, 6H): LCMS-ESI-: izračunato za C48H55N8O6: 839.99 (M+H<+>); Pronađeno: 839.4 (M+H<+>).
Primer AM1
[0462]
[0463] 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.058 g), 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.052 g) i Pd(PPh3)4 (0.0069 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata (0.18 mL) i dimetoksietan (0.36 mL) je zagrejan u mikrotalasnoj na 110°C tokom 30 minuta, na 120°C tokom 60 minuta. Dodatni Pd(PPh3)4(0.069 g) je dodat i reakcija je zagrejana konvencionalno na 90°C tokom 12 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 1 do 20% izopropanol/heksani) i preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3Hbenzoimidazol-5-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0315 g) kao bis-TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H45N6O4: 649.79 (M+H<+>); Pronađeno: 649.1 (M+H<+>).
[0464] (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(6-{4-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-fenil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0315 g) u dihlormetanu (2.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0128 g), 4-metilmorfolin (0.023 mL), praćeno sa HATU (0.027 g). Reakciona smeša je mešan tokom 1 sata na temperaturi okoline i dodatni 4-metilmorfolin (0.023 mL) je dodat. Nakon mešanja tokom 30 minuta, reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.0263 g).<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.00 (s, 2H), 7.90-7.70 (m, 8H), 5.40-5.35 (m, 2H), 4.28 (d, J=7.2, 2H), 4.15-3.85 (m, 4H), 3.67 (s, 6H), 2.65-2.06 (m, 10H), 0.95 (d, J=6.6, 6H), 0.88 (d, J=6.6, 6H): LCMS-ESI-: izračunato za C42H51N8O6: 763.90 (M+H<+>); Pronađeno: 763.3 (M+H<+>).
Primer AN1
[0465]
[0466] 2-[6-(5-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiofen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.110 g), 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.115 g) i Pd(PPh3)4(0.012 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata (0.32 mL) i dimetoksietan (0.64 mL) je zagrejan u mikrotalasnoj na 110°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) i preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-[6-(5-{4-[2-(1-Formil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.085 g) kao bis-TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H45N6O4S: 681.86 (M+H<+>); Pronađeno: 681.0 (M+H<+>).
[0467] [1-(2-{6-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-tiofen-2-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-[6-(5-{4-[2-(1-Formil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-tiofen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (0.085 g) u dihlormetanu (2.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (2.0 mL) tokom 1.5 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.033 g), 4-metilmorfolin (0.060 mL), praćeno sa HATU (0.070 g). Reakciona smeša je mešana tokom 45 minuta na temperaturi okoline i reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{6-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-tiofen-2-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.048 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.09 (br s, 1H), 7.90-7.75 (m, 8H), 7.70-7.55 (m, 4H), 7.34 (d, J=8.1, 2H), 5.25-5.10 (m, 2H), 4.20-4.15 (m, 4H), 4.15-3.85 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.50-1.85 (m, 10H), 0.87-0.75 (m, 12H): LCMS-ESI-: izračunato za C42H51N8O6S: 795.96 (M+H<+>); Pronađeno: 795.2 (M+H<+>).
Primer AO1
[0468]
[0469] 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.450 g), bis(pinakolato)diboron (0.655 g), PdCl2(dppf) (0.050 g) i kalijum acetat (0.314 g) u 1,4-dioksanu je zagrejan na 90°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena do temperatura okoline i razblažena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 30 do 70% etil acetat/heksani) da se dobije 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.452 g) kao prljavo bela pena: LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H33BN3O4: 414.32 (M+H<+>); Pronađeno: 414.0 (M+H<+>).
[0470] 2-(6-{5-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-tiofen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.149 g), 2,5-Dibromo-tiofen (0.035 g) i PdCl2(dppf)2(0.006 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata (0.36 mL) i dimetoksietanu (1.0 mL) je zagrejana na 90°C tokom 18 sati. Dodatni 2.0 M rastvor kalijum karbonata (0.36 mL) i PdCl2(dppf) (0.006 g) je dodat i reakcija je nastavljena tokom 48 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena korišćenjem preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-(6-{5-[2-(1-tercbutilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-tiofen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0475 g) kao bis-TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H43N6O4S: 655.82 (M+H<+>); Pronađeno: 655.0 (M+H<+>).
[0471] (1-{2-[6-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-tiofen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(6-{5-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-tiofen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0475 g) u dihlormetanu (1.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1.5 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.0 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0196 g), 4-metilmorfolin (0.035 mL), praćeno sa HATU (0.042 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline i dodatni 4-metilmorfolin (0.023 mL) je dodat. Nakon mešanja tokom 30 minuta, reakciona smeša je razblažen sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[6-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-tiofen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.0296 g):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 7.91(s, 2H), 7.71 (s, 4H), 7.61 (s, 2H), 7.35 (d, J=9.0, 2H), 5.25-5.15 (m, 2H), 4.15-4.00 (m, 4H), 3.95-3.75 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.25-1.85 (m, 10H), 0.83 (d, J=6.6, 6H), 0.79 (d, J=6.9, 6H); LCMS-ESI-: izračunato za C40H49N8O6S: 769.92 (M+H<+>); Pronađeno: 769.2 (M+H<+>).
Primer AP1
[0472]
[0473] 2-(6-{6-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-naftalen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.170 g), 2,6-Dibromo-naftalena (0.047 g) i Pd(PPh3)4(0.0095 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata (0.41 mL) i dimetoksietanu (0.8 mL) je zagrejana u mikrotalasnoj na 110°C tokom 40 minuta. Reakciona smeša je ohlađena, razblažean sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2-(6-{6-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-naftalen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0961 g) kao žuti film: LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H47N6O4: 699.85 (M+H<+>); Pronađeno: 699.1 (M+H<+>).
[0474] (1-{2-[6-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(6-{6-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-naftalen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0961 g) u dihlormetanu (2.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.1 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0501 g), 4-metilmorfolin (0.091 mL), praćeno sa HATU (0.107 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline, razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[6-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.035 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.33 (s, 2H), 8.18-8.01 (m, 4H), 7.95-7.80 (m, 5H), 7.35 (d, J=8.70, 2H), 5.25-5.15 (m, 2H), 4.20-4.00 (m, 4H), 3.95-3.75 (m, 4H), 3.55 (s, 6H), 2.55-1.90 (m, 10H), 0.84 (d, J=6.6, 6H), 0.79 (d, J=6.9, 6H); LCMS-ESI-: izračunato za C46H53N8O6: 813.96 (M+H<+>); Pronađeno: 813.3 (M+H<+>).
Primer AQ1
[0475]
[0476] 2-[2-(4-Bromo-fenil)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 4-Bromo-benzamidina (0.202 g) i kalijum karbonata (0.237 g) u H2O (0.286 mL) i THF (1.1 mL) je zagrejana do65°C. 2-(2-Hloro-acetil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.106 g) u THF (0.7 mL) je dodata tokom 1 sata i reakciona smeša je zagrejana na 65°C tokom 18 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do ∼ 0.5 mL i ekstrakovana sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa H2O, slanim rastvorom i osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije 2
[2-(4-Bromo-fenil)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.075 g) kao narandžasti film: LCMS-ESI-: izračunato za C18H23BrN3O2: 393.30 (M+H<+>); Pronađeno: 391.8, 393.83 (M+H<+>).
[0477] 4-[2-(3H-Imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar]-fenilboronska kiselina: Smeša 2-[2-(4-Bromo-fenil)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.075 g), bis(pinakolato)dibor (0.102 g), Pd(PPh3)4(0.011 g) i kalijum acetat (0.049 g) u 1,4-dioksanu (1.5 mL) je zagrejan na 100°C tokom 16 sati. Još Pd(PPh3)4(0.011 g) je dodato i reakcija je nastavljena tokom 24 sati. Reakciona smeša je ohlađena do temperatura okoline i razblažena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 4-[2-(3H-Imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar]-fenilboronska kiselina (0.027 g) kao beli prah: LCMS-ESI<+>: izračunato za C18H25BN3O4: 357.21 (M+H<+>); Pronađeno: 357.9 (M+H<+>).
[0478] 2-(2-{4'-[5-(1-terc-butil-karbamil-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-2-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 4-[2-(3H-Imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar]-fenilboronska kiselina (0.0098 g), 2-[2-(4-Bromo-fenil)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0118 g) i Pd(PPh3)4(0.0012 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata(0.031 mL) i dimetoksietan (0.8 mL) je zagrejan na 90°C tokom 18 sati. PdCl2(dppf) (0.003 g) je dodat i reakciona smeša je zagrejana na 100°C tokom 18 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena korišćenjem preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-(2-{4'-[5-(1-terc-butil-karbamil-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-2-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0018 g) kao beli prah: LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H45N6O4: 624.77 (M+H<+>); Pronađeno: 625.0 (M+H<+>).
[0479] (1-{2-[2-(4'-{5-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-2-il}-bifenil-4-il)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(2-{4'-[5-(1-terc-butil-karbamil-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-2-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0018 g) u dihlormetanu (0.5 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (0.5 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovaan i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (0.4 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0008 g), 4-metilmorfolin (0.0024 mL), praćeno sa HATU (0.0016 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1.5 sata na temperaturi okoline, zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[2-(4'-{5-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-2-il}-bifenil-4-il)-3H-imidazol-4-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao smeša diastereomera bis-TFA soli (0.0017 g):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.10-7.95 (m, 8H), 7.55-7.40 (m, 2H), 5.25-5.15 (m, 2H), 4.20-3.65 (m, 6H), 3.62 (s, 6H), 2.40-1.90 (m, 10H), 1.05-0.85 (m, 12H); LCMS-ESI-: izračunato za C40H51N8O6: 739.88 (M+H<+>); Pronađeno: 739.3 (M+H<+>).
Primer AR1
[0480]
[0481] 2-(2-{4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 4-[2-(3H-Imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar]-fenilboronska kiselina (0.0177 g), 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0148 g) i Pd(PPh3)4(0.0022 g), PdCl2(dppf) (0.0016 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata (0.056 mL) i dimetoksietanu (0.8 mL) je zagrejana na 90°C tokom 18 sati. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena korišćenjem preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-(2-{4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0066 g) kao beli prah: LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H45N6O4: 624.77 (M+H<+>); Pronađeno: 625.0 (M+H<+>).
[0482] (1-{2-[5-(4'-{5-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-2-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(2-{4'-[2-(1-terc-butilkarbamil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-3H-imidazol-4-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.0066 g) u dihlormetanu (0.5 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (0.5 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (0.4 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.0028 g), 4-metilmorfolin (0.012 mL), praćeno sa HATU (0.006 g). Reakciona smeša je mešaan tokom 2 sata na temperaturi okoline, zatim prečišćean pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(4'-{5-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-2-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il] -pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao smeša diastereomera bis-TFA soli (0.0081 g):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.05-7.80 (m, 9H), 7.55-7.40 (m, 1H), 5.25-5.15 (m, 2H), 4.20-3.65 (m, 6H), 3.62 (s, 6H), 2.55-1.95 (m, 10H), 1.05-0.85 (m, 12H); LCMS-ESI-: izračunato za C40H51N8O6: 739.88 (M+H<+>); Pronađeno: 739.3 (M+H<+>).
Primer AS1
[0483]
[0484] 2-(6-{4'-[2-(2-terc-butilkarbamil-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.142 g), 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.1013 g) i Pd(PPh3)4(0.014 g) u 2.0 M rastvoru kalijum karbonata(0.036 mL) i dimetoksietanu (0.8 mL) je zagrejana u mikrotalasnoj na 110°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažen sa etil acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena korišćenjem preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-(6-{4'-[2-(2-terc-butilkarbamil-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.128 g) kao beli prah: LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H49N6O4: 701.87 (M+H<+>); Pronađeno: 701.1 (M+H<+>).
[0485] (1-{2-[6-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(6-{4'-[2-(2-terc-butilkarbamil-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.128 g) u dihlormetanu (2.0 mL) je tretiran sa 4N HCl u dioksanu (1.0 mL) tokom 1 sata na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2.0mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.050 g), 4-metilmorfolin (0.090 mL), praćeno sa HATU (0.106 g). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na temperaturi okoline. Dodatni 4-metilmorfolin (0.090 mL) je dodat i reakciona smeša je mešana tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata, 5% rastvorom litijum hlorida, slanim rastvorom i osušean (MgSO4), zatim koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan do (1-{2-[6-(4'-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.080 g):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD) δ: 8.05-7.70 (m, 13H), 7.35-7.25 (m, 2H), 5.25-5.15 (m, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.20-4.00 (m, 2H), 3.85-3.75 (m, 4H), 3.51 (s, 3H), 3.49 (s, 3H), 2.50-1.45 (m, 14H), 0.95-0.75 (m, 12H); LCMS-ESI-: izračunato za C46H55N8O6: 815.97 (M+H<+>); Pronađeno: 815.3 (M+H<+>).
Primer AT1
[0486]
[0487] 5-Formil-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar: 5-Formilpirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar je pripremljen prema: J. Org. Chem. 1995, 60, 5011 - 5015.
[0488] 5-[(terc-Butoksikarbonilmetil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar: Natrijum triacetoksiborohidrid (2.08 g, 9.86 mmol) je dodat u rastvor 5-formil-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar (891 mg, 3.29 mmol) i glicin t-butil estar (1.65 g, 9.86 mmol) u dihlormetanu (20 mL) tokom 2 minuta - mala količina razvijanja gasa je opažena. Nakon 1 sata reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridom (5 mL). Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom (3 x 25 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije sa metanom i dihlorometanom kao kao eluentom pri gradijentu od 0 - 10%. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 5-[(terc-butoksikarbonilmetil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-etil estar (601 mg, 1.55 mmol, 47 %). C19H34N2O6izračunato 386.2, opaženo [M 1]<+>387.2; rt = 1.61 min.
[0489] 5-[(terc-Butoksikarbonilmetil-metoksikarbonil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar: Metil hloroformat (0.065 mL, 0.85 mmol) je dodat u rastvor 5-[(terc-butoksikarbonilmetil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-etil estar (300 mg, 0.77 mmol) i 4-metilmorfolin (0.12 mL, 1.2 mmol) u dihlormetanu (10 mL) na 0°C. Nakon 15 minuta smeša je razblažena sa dihlorometanom (30 mL) i isprana sa vodom (15 mL), zasićenim amonijum hloridom (15 mL) i zasićenim natrijum hloridom (15 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 5-[(terc-butoksikarbonilmetil-metoksikarbonil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar (304 mg, 0.68 mmol, 88 %). C21H36N2O8izračunato 444.3, opaženo [M 1]<+>445.3; rt = 2.58 min.
[0490] 5-[(Karboksimetil-metoksikarbonil-amino)-metil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina etil estar: 5-[(terc-Butoksikarbonilmetil-metoksikarbonil-amino)-metil]-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-etil estar (304 mg, 0.68 mmol) je dodat u rastvor vodonik hlorida u dioksanu (4N, 15 mL). Nakon 16 sati rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je azeotropiran sa toluenom da obezbedi 5-[(karboksimetil-metoksikarbonilamino)-metil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina etil estar (224 mg) - pretpostavljeno 100 % prinos.
[0491] 4-Okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 6-etil estar 2-metil estar: HATU (390 mg, 1.03 mmol) je dodat u rastvorom 5-[(karboksimetil-metoksikarbonilamino)-metil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina etil estar (187 mg, 0.68 mmol) i 4-metilmorfolina (375 µL, 3.4 mmol) u dimetilformamidu (30 mL). Nakon 50 minuta rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (20 mL) koji je ispran sa polu zasićenim natrijum hloridom (2 x 10 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 10 mL) i osušen preko natrijum sulfata. Vodena faza takođe je sadržala proizvod. Voda je uklonjena pod smanjenim pritiskom i ostatak je azeotropiran sa toluenom i zatim mešan sa etil acetatom (50 mL). Smeša je filtrirana i kombinovana sa organskim ekstraktima. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 6-etil estar 2-metil estar (141 mg, 0.52 mmol, 76 %). C12H18N2O5izračunato 270.1, opaženo [M 1]<+>271.1; rt = 1.54 min.
Ono što sledi (estarska hidroliza) predstavlja primer za Metodu 801
[0492] 4-Okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 2-metil estar:
Rastvor litijum hidroksid monohidrata (16.8 mg, 0.38 mmol) u vodi (0.5 mL) je dodat u rastvor 4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 6-etil estar 2-metil estar (86 mg, 0.32 mmol) u metanu (1 mL) i tetrahidrofuranu (1 mL). Nakon 2 sata, vodeni rastvor vodonik hlorida (1N, 0.41 mL, 0.41 mmol) je dodat i organski rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Dobijen vodeni rastvor je liofilizovan tokom 16 sati da se dobije 4-okso-heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 2-metil estar. Prinos od 100 % je pretpostavljen za naredni korak. C10H14N2O5izračunato 242.1, opaženo [M 1]<+>242.9, [M 1]<->241.1; rt = 1.54 min.
Sledeća tri koraka (formiranje amida, ciklizacija imidazola i Suzuki kuplovanje) predstavljaju primer za Metodu 802
[0493] 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar: Rastvor 4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 2-metil estar (81 mg, 0.33 mmol), HATU (152 mg, 0.40 mmol), i 4-metil morfolin (146 µL, 1.33 mmol) u dimetilformamidu (4 mL) je mešan na temperaturi okoline tokom 5 minuta.2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon hidrohlorid (91 mg, 0.37 mmol) je dodat u reakcionu smešu. Nakon 1 sat rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (10 mL). Dobijen smeša sadržala je čvrstu supstancu i filtrirana je. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom iz filtrata. Dobijeni ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 6-[2-(4-bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar (110 mg, 0.25 mmol, 75 %). C18H20BrN3O5izračunato 437.1 opaženo [M 1]<+>438.1; rt = 1.82 min.
[0494] 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar: Smeša 6-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-oksoheksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar (110 mg, 0.25 mmol), amonijum acetat (193 mg, 2.5 mmol) i ksileni (8 mL) je zagrejana do 130°C. Nakon 1 sat smeša je ohlađena ksileni su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Dihlorometan je dodat u dobijeni ostatak i smeša je filtrirana. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom iz filtrata i dobijeni ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 6-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar (65 mg, 0.15 mmol, 60 %). C18H19BrN4O3izračunato 418.1 opaženo [M 1]<+>419.1; rt = 1.50 min.
[0495] 6-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar: Smeša 6-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar (65 mg, 0.15 mmol), [2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (77 mg, 0.15 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (18 mg, 0.015 mmol), kalijum karbonata (42.8 mg, 0.31 mmol), 1,2-dimetoksietana (4 mL) i vode (1mL) je zagrejana u mikrotalasnom reaktoru na 120°C tokom 20 minuta. Smeša je ohlađena i sve ispraljive supstance su uklonjene pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prebačen u dimetilformamid (2 mL) i podvrgnut hromatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da obezbedi 6-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar (16.8 mg, 0.024 mmol, 15 %). C38H44BrN8O6izračunato 708.3 opaženo [M 1]<+>709.4; rt = 1.39 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.10 (s, 2H), 7.89 (m, 7H), 7.33 (d, J = 9 Hz, 1H), 5.03 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.11 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 3.99 (m, 2H), 3.83 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.54 (m,3 H), 2.90 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.18 (m, 2H), 2.01 (m,4H), 1.67 (m, 1H), 0.82 (m, 6H).
Primer AU1
[0496]
[0497] (2-Okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar: 4-Metilmorfolin (4.73 mL, 43.0 mmol) je dodat u suspenziju R-5-amino-2-terc-butoksikarbonilamino-pentanske kiseline (5 g, 21.5 mmol) i HATU (9 g, 23.6 mmol) u dimetilformamidu (100 mL). Nakon 2 sata rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Zasićen natrijum bikarbonat (100 mL) je dodat u ostatak i dobijen smeša je ekstrakovana sa dihlorometanom (3 x 75 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa zasićenim natrijum hloridom (50 mL), osušeni preko natrijum sulfata i filtrirani. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi (R)-(2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar (3 g, 14.0 mmol, 66 %). C10H18N2O3izračunato 214.1 opaženo [M 1]<+>215.2; rt = 1.73 min.
[0498] R-(3-terc-Butoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetna kiselina benzil estar:
Rastvor litijum bis(trimetilsilil)amide (1.0 M, 16.8 mL, 16.8 mmol) u tetrahidrofuranu je dodat u kapimau rastvor R-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar (3 g, 14.0 mmol) u tetrahidrofuranu u suvom sudu u atmosferi azota. Nakon 30 minuta bromo-sirćetna kiselina benzil estar (2.41 mL, 15.4 mmol) je dodat u kapima. Nakon dodatnih 30 minuta smeša je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridom (30 mL). Vodena faza je ekstrakovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa zasićenim natrijum hloridom (50 mL) i osušene preko natrijum sulfata. Smeša je filtrirana i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovan i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi (R)-(3-tercbutoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetna kiselina benzil estar (2.31 g, 6.37 mmol, 45 %). C19H26N2O5izračunato 362.2 opaženo [M 1]<+>363.1; rt = 2.40 min.
Ono što sledi (cepanje benzil estra) predstavlja i primer Metode 803
[0499] (R)-(3-terc-Butoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetna kiselina: Paladijum na ugljeniku (10 %, 500 mg) je dodat u rastvor (R)-(3-terc-butoksikarbonilamino-2-oksopiperidin-1-il)-sirćetna kiselina benzil estar (2.31 g, 6.37 mmol) u etanolu (50 mL). Atmosfera je zamenjena sa vodonikom i održavana balonom koji je napunjen sa vodonikom i gornja smeša je energično mešana. Nakon 16 sati vodonik je uklonjen i CELITE je dodat u smešu sa mešanjem i zatim smeša je filtrirana kroz uložak od CELITE-a. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je azeotropiran sa toluenom da obezbedi (R)-(3-tercbutoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetna kiselina (1.65 g, 6.06 mmol, 95 %). C12H20N2O5izračunato 272.3 opaženo [M 1]<+>271.2; rt = 1.80 min.
[0500] (R)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar: (R)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar je pripremljen pomoću Metode 802 supstituisanjem (3-tercbutoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetne kiseline za 4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 2-metil estar. C40H50N8O6izračunato 738.4 opaženo [M 1]<+>739.5; rt= 1.83 min;<1>H (DMSO-d6): δ =11.82 (s, 1H), 7.79 (m, 4H), 7.64 (m, 4H), 7.47 (s, 1H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.05 (m, 1H), 4.62 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.1 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.11 (m, 2 H), 1.93 (m, 4H), 1.74 (m, 3H), 1.37 (s, 9H), 0.850 (m, 6H).
{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar
[0501] (S)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar: (S)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar je pripremljen praćenjem metode opisane iznad. C40H50N8O6izračunato 738.4 opaženo [M 1]<+>739.5; rt = 1.80 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.09 (s, 1H), 7.90 (m, 8H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.09 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.99 (m, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.43 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 2.20 (m, 1H), 2.14 - 1.86 (serija m, 9H), 1.34 (s, 9H), 0.810 (m, 6H).
Ono što sledi (Boc deportacija) predstavlja primer Metode 804
(R)-{1-[2-(5-{4'-[2-(3-Amino-2-okso-piperidin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0502] Rastvor vodonik hlorida (4N, 8 mL) u dioksanu je dodat u rastvor (R)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar (175 mg, 0.24 mmol) u dihlormetanu (2 mL). Nakon 1 sat rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je postavljen na visoki vakuum tokom 1 sata da obezbedi (R)-{1-[2-(5-{4'-[2-(3-amino-2-okso-piperidin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar. Prinos je pretpostavljeno da je 100 % procenta. Uzorak pogodan za nalizu je dobijen podvrgavanjem hormatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen liofilizacijom. C35H42N8O4izračunato 638.3 opaženo [M 1]<+>639.4; rt = 1.41 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.33 (m, 1H), 8.12 (m, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.92 (m, 6H), 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.13 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.83 (m, 2H), 4.09 (t J = 8.0 Hz,1H), 4.09 - 3.82 (serija m, 6H), 2.36 (m, 2H), 2.14 (m, 2H), 1.96 (m, 4H), 0.76 (m, 6H).
{1-[2-(5-{4'-[2-(3-Amino-2-okso-piperidin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar
[0503] (S)-{1-[2-(5-{4'-[2-(3-Amino-2-okso-piperidin-1-il metil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
(S)-{1-[2-(5-{4'-[2-(3-Amino-2-okso-piperidin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode korišćene za (R)-izomer sa odgovarajućom supstitucijom opisanom iznad. C35H42N8O4izračunato 638.3 opaženo [M 1]<+>639.5; rt = 1.39 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.32 (m, 2H), 7.91 (m, 8H), 7.27 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.13 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.79 (m, 3H), 4.09 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.89 (m, 4H), 3.51 (s, 3H), 3.45 (m, 1H), 3.40 (m, 1H), 2.35 (m, 2H), 2.32 (m, 3H), 1.95 (m, 6H), 0.78 (m, 6H).
Sledeća dva koraka (formiranje karbanata i deprotekcija imidazola) predstavljaju primer za Metodu 805
[0504] (R)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il metil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina metil estar: 4-Metilmorfolin (71 µL, 0.64 mmol) je dodat u suspenziju (R)-{1-[2-(5-{4'-[2-(3-amino-2-okso-piperidin-1-il metil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (137 mg, 0.21 mmol) u dihlormetanu (5 mL). Metil hloroformat (16.5 µL, 0.21 mmol) je dodat u dobijeni rastvor. Nakon 20 minuta rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u tetrahidrofuran (4 mL) i metan (2 mL) i vodeni rastvor natrijum hidroksida (2 N, 1 mL) je dodat. Nakon 2 sati organski rastvarači su uklonjen pod smanjenim pritiskom i vodena faza je decanted. Ostatak je prebačen u dimetilformamidu (2 mL) i podvrgnut hromatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovan i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da obezbedi (R)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-oksopiperidin-3-il}-karbaminska kiselina metil estar (46.7 mg, 0.67 mmol, 32 %). C37H44N8O6izračunato 696.3 opaženo [M 1]<+>697.4; rt = 1.58 min.<1>H (DMSO-d6,): δ = 8.05 (s, 1H), 7.87 (m, 8H) 7.30 (m, 1H), 5.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.08 (m, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.50 (s, 3H), 2.14 (m, 1H), 2.05 - 1.78 (serija m, 8H), 0.78 (m, 6H).
{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-oksopiperidin-3-il}-karbaminska kiselina metil estar
[0505] (S)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina metil estar: (S)-{1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode opisane iznad za (R) izomer sa odgovarajućom supstitucijom. C37H44N8O6izračunato 696.3 opaženo [M 1]<+>697.4; rt = 1.54 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.03 (m, 1H), 7.86 (m, 8H), 7.03 (m, 1H), 5.10 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.08 (m, 2H), 3.80 (m, 3H), 3.51 (s, 3H), 3005 (s, 3H), 2.29 (m, 1H), 2.14 -1.78 (serija m, 9H), 0.78 (m, 6H).
Primer AV1
[0506]
{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar
[0507] {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar: {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar je pripremljen praćenjem metode 802 supstituisanjem 6-tercbutoksikarbonilamino-5-okso-oktahidro-indolizine-3-karboksilna kiselina za 4-okso-heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 2-metil estar. C42H52N8O6izračunato 764.4 opaženo [M 1]<+>765.5; rt = 1.86 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 7.89 (m, 8H), 7.33 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 6.88 (m, 1H), 5.12 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.84 (m, 2H), 3.60 - 3.45 (serija m, 4H), 3.53 (s, 3H), 2.34 (m, 2H), 2.10 (m 8H), 1.79 (m, 3H), 1.37 (s, 9H), 0.81 (dd, J = 8.8 Hz, J = 17.2 Hz, 6H).
Primer AW1
[0508]
{3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H
imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina metil estar
[0509] {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina metil estar: {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode 804 praćeno sa metodom 805, supstituisanjem {3-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-okso-oktahidro-indolizin-6-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar za {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar u metodi 804, i supstituisanjem {1-[2-(5-{4'-[2-(6-Amino-5-oksooktahidro-indolizin-3-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar za {1-[2-(5-{4'-[2-(3-amino-2-okso-piperidin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar u metodi 805. C39H46N8O6izračunato 722.4 opaženo [M 1]<+>723.4; rt = 1.62 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.10 (m, 1H), 7.90 (m, 8H), 7.31 (m, 2H), 5.12 (m, 2H), 4.11 (m, 2H), 3.84 (m 2H), 3.74 (m, 1H), 3.53 (s, 6H), 2.38 (m, 2H), 2.14 (m, 3H), 2.05 (m, 5H), 1.82 (m 3H), 0.81 (dd, J = 8.8 Hz, J = 17.6 Hz, 6H).
Primer AX1
[0510]
[0511] [1-(2-{5-[4'-(2-terc-Butoksikarbonilamino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Smeša [2-(4-Bromofenil)-2-okso-etil]-karbaminska kiselina terc-butil estar (1 g, 3.2 mmol), [2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (1.57 g, 3.2 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (183 mg, 0.15 mmol), kalijum karbonata (878 mg, 6.5 mmol), 1,2-dimetoksietana (25 mL) i vode (2.5 mL) je mešana na 80°C tokom 16 sati. Smeša je ohlađena i sve isparljive supstance su uklonjene pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prebačen u dihlormetan (100 mL) i ispran sa vodom (25 mL) i zasićenim natrijum hloridom (25mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata i filtrirana. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi [1-(2-{5-[4'-(2-tercbutoksikarbonilamino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (869 mg, 1.4 mmol, 44 %).
C33H41N5O6izračunato 603.3 opaženo [M 1]<+>604.3; rt = 2.01 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 11.82 (s, 1H), 8.03 (m, 2H), 7.84 (m 4H), 7.72 (m, 2H), 7.56 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.08 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.46 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.80 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 2.14 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 0.86 (dd, J = 6.9 Hz, J = 15.9 Hz, 6H).
[0512] [1-(2-{5-[4'-(2-Amino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: [1-(2-{5-[4'-(2-Amino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen korišćenjem metode 804 supstituisanjem [1-(2-{5-[4'-(2-terc-butoksikarbonilaminoacetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar za {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar. C28H33N5O4izračunato 503.3 opaženo [M 1]<+>504.2; rt = 1.42 min.
Primer AY1
[0513]
[0514] 2-terc-Butoksikarbonilamino-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar: 4-Metilmorfolin (9.77 mL, 88.9 mmol) je dodat u suspenziju 2-terc-butoksikarbonilaminopentandionska kiselina 1-benzil estar (6 g, 17.7 mmol), i HATU (8.11 g, 21.3 mmol) u dimetilformamidu (20 mL). Nakon 5 minuta N,O- dimetilhidroksilamin hidrohlorid (2.60 g, 26.7 mmol), je dodat u rastvor. Nakon 1 sat rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u etil acetat (150 mL), i ispran sa vodom (100 mL), vodenim vodonik hloridom (0.5 N, 2 x 100 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (100 mL), i zasićenim natrijum hloridom (100 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 2-terc-butoksikarbonilamino-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar (6.8 g, 17.8 mmol, 99 %). C19H28N2O6izračunato 380.2 opaženo [M 1]<+>381.2; rt = 2.48 min.
[0515] 2,2-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar: Di-terc-butil dikarbonat (4.20 g, 19.6 mmol) je dodat u rastvor 2-tercbutoksikarbonilamino-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar (6.8 g, 17.8 mmol) i dimetilamino piridin (436 mg, 3.5 mmol) u acetonitrilu (40 mL). Nakon 16 sati mešanja materijal je preostao i di-terc-Butil dikarbonat (4.20 g, 19.6 mmol) je dodat ponovo. Nakon 6 dana rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u etil acetat (250 mL), ispran sa vodom (2 x 100 mL) i zasićenim amonijum hloridom (100 mL), osušen preko natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 2,2-bis(tercbutoksikarbonilamino)-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar (8.2 g, 17.0 mmol, 95 %). C24H36N2O6izračunato 480.3 opaženo [M 1]<+>481.1; rt = 2.83 min.
[0516] 2,2-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-5-okso-pentanska kiselina benzil estar: Rastvor DIBAL (1.0 M, 14.7 mL, 14.7 mmol) u heksanu je dodat u kapima u rastvor 2,2-bis(tercbutoksikarbonilamino)-4-(metoksi-metil-karbamoil)-buterna kiselina benzil estar (4 g, 10.5 mmol) u atmosferi azota na -78°C. Nakon 2 sati smeša je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridom (30 mL) i ostavljena da se ugreje do sobne temperature. Voda (20 mL) je dodata, i smeša je ekstrakovana sa dietil etrom (3 x 50 mL). Kombinovane organske faze su ostavljene da stoje na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Dobijen debeo gel je filtriran kroz uložak od Celite-a. Filtrat je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 2,2-bis(terc-butoksikarbonilamino)-5-okso-pentanska kiselina benzil estar (3.34 g, 7.9 mmol, 75 %). Ovaj korak j ekorišćen odmah u sledećem koraku.
[0517] 2,2-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina benzil estar: Natrijum triacetoksiborohidrid (5 g, 23.5 mmol) je dodat u rastvor 2,2-bis(terc-butoksikarbonilamino)-5-okso-pentanska kiselina benzil estar (3.34 g, 7.9 mmol) i alanin etil estar hidrohlorid (3.62 g, 23.5 mmol) u dihlormetanu (30 mL). Nakon 1 sat zasićen amonijum hlorid (10 mL) je dodat i smeša je mešana tokom 5 minuta. Vodena faza je ekstrakovana sa dihlorometanom (2 x 15 mL), i kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 2,2-bis(tercbutoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina benzil estar (1.7 g, 3.3 mmol, 41 %). C27H42N2O8izračunato 522.3 opaženo [M 1]<+>523.3; rt = 2.08 min.
[0518] 2,2-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina: 2,2-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina je pripremljena korišćenjem metode 803, supstituisanjem 2,2-bis(terc-butoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina benzil estar za (3-terc-butoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-sirćetna kiselina benzil estar. C20H36N2O8izračunato 432.3 opaženo [M 1]<+>433.1; rt = 1.73 min.
[0519] 2-[3,3-bis(terc-Butoksikarbonilamino)-2-okso-piperidin-1-il]-propionska kiselina etil estar: HATU (1.72 g, 4.5 mmol) je dodat u rastvor 2,2-bis(terc-butoksikarbonilamino)-5-(1-etoksikarbonil-etilamino)-pentanska kiselina (1.31 g, 3.0 mmol) i 4-metilmorfolin u dimetilformamidu (50 mL). Nakon 30 minuta rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 2-[3,3-bis(terc-butoksikarbonilamino)-2-okso-piperidin-1-il]-propionska kiselina etil estar (1.11 g, 2.6 mmol, 86 %). C20H34N2O7izračunato 414.2 opaženo [M 1]<+>415.2; rt = 2.77 min.
[0520] 2-(3-Amino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar: 2-(3-Amino-2-oksopiperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar je pripremljen korišćenjem metode 804 supstituisanjem 2-[3,3-bis(terc-butoksikarbonilamino)-2-okso-piperidin-1-il]-propionska kiselina etil estar za {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar. C10H18N2O3izračunato 214.2 opaženo [M 1]<+>215.2; rt = 1.21 min.
Ono što sledi (formiranje karbamata) predstavlja primer Metode 806
[0521] 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar:
Metil hloroformat (192 µL, 2.5 mmol) je dodat u rastvor 2-(3-amino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar (353mg, 1.6 mmol) i 4-metilmorfolin (907 µL, 8.24 mmol) u dihlormetanu (10 mL). Nakon 15 minuta smeša je razblažen sa dihlorometanom (20 mL) i ispran sa vodom (10 mL), i vodenim vodonik hloridom (0.5 N, 10 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata i filtrirana. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar (332 mg, 1.2 mmol, 75 %). C12H20N2O5izračunato 272.1 opaženo [M 1]<+>273.0; rt = 1.82 min.
[0522] 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina: 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina je pripremljena pomoću Metode 801 supstituisanjem 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionska kiselina etil estar za 4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 6-etil estar 2-metil estar. C10H16N2O5izračunato 244.1 opaženo [M 1]<+>245.1; rt = 1.53 min.
[0523] (1-{1-[2-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-2-okso-etilkarbamoil]-etil}-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor 2-(3-Metoksikarbonilamino-2-okso-piperidin-1-il)-propionske kiseline (48.5 mg, 0.20 mmol), HATU (91 mg, 0.24 mmol), i 4-metilmorfolina (109 µL, 0.99 mmol) u dimetilformamidu (5 mL) je mešan na temperaturi okoline tokom 5 minuta. [1-(2-{5-[4'-(2-Amino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (100 mg, 0.20 mmol) je dodat u reakcionu smešu. Nakon 40 minuta rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (10 mL). Dobijen smeša sadržala je čvrstu suspstancu i podvrgnuta je fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana praćeno sa 30 % metana u DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi (1-{1-[2-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-2-okso-etilkarbamoil]-etil}-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina metil estar (149 mg, 0.20 mmol, 99%). C38H47N7O8izračunato 729.4 opaženo [M 1]<+>730.6; rt = 1.78 min.
[0524] (1-{1-[4-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-etil}-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina metil estar: Smeša amonijum acetata (157 mg, 2.0 mmol), (1-{1-[2-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-2-oksoetilkarbamoil]-etil}-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina metil estar (149 mg, 0.20 mmol) i ksileni (20 mL) je zagrejana na 130°C tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u dihlormetan (15 mL) i filtriran. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u dimetilformamidu (2 mL) i podvrgnut hromatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovan i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da obezbedi (1-{1-[4-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1Himidazol-2-il]-etil}-2-okso-piperidin-3-il)-karbaminska kiselina metil estar (20.5 mg, 0.029 mmol, 15 %). C38H46N8O6izračunato 710.4 opaženo [M 1]<+>711.4; rt = 1.59 min.
<1>H (DMSO-d6): δ = 8.10 (m, 1H), 7.88 (m, 8H), 7.33 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 5.33 (m, 1H), 5.12 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 4.11 (t, J = 9.0Hz, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.26 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 2.26 - 1.74 (serija m, 8H), 1.63 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.81 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.2 Hz, 6H).
Primer AZ1
[0525]
[0526] 2,6-Diokso-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar: Suspenzija (tercbutoksikarbonil-karboksimetil-amino)-sirćetna kiselina (5 g, 21.4 mmol) i DCC (4.85 g, 23.6 mmol) u dihlormetanu je mešana tokom 16 sati. Smeša je filtrirana i rastvarač je uklonjen iz filtrata da obezbedi 2,6-diokso-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.86 g, 21.0 mmol, 99%).
[0527] ({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-sirćetna kiselina: 2,6-Diokso-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.5 g, 11.6 mmol) je doda tu rastvor 2-amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon hidrohlorida (3.05 g, 12.2 mmol) i 4-metilmorfolina (1.92 mL, 17.4 mmol) u dimetilformamidu (15 mL). Nakon 30 min rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u etil acetatu (100 mL) i ispran sa vodom (50 mL), vodenim vodonik hloridom (0.5 N, 2 x 50 mL), i zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 50 mL). Bazni ektrakti su neutralisani i ekstrakovani sa etil acetatom (2 x 75 mL). Kombinovane organske faze iz druge ekstrakcije su osušene preko natrijum sulfata, i filtrirane. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da obezbedi ({[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-sirćetnu kiselinu (4 g, 9.3 mmol, 80 %). C17H21BrN2O6izračunato 428.0 opaženo [M 1]<+>431.1; rt = 2.36 min.
[0528] 2-[2-({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina metil estar: 4-Metilmorfolin (4.1 mL, 37.3 mmol) je dodat u suspenziju ({[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonilamino)-sirćetna kiselina (4 g, 9.3 mmol), i HATU (4.61 g, 12.1 mmol) u dimetilformamidu (25 mL). Nakon 5 minuta d-valin metil estar hidrohlorid (1.56 g, 9.3 mmol), je dodat u rastvor. Nakon 1 sat rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u etil acetat (150 mL), i ispran sa vodom (100 mL), vodenim vodonik hloridom (0.5 N, 2 x 100 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (100 mL), i zasićenim natrijum hlorid om(100 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluent od(10 % metana u etil acetatu) Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 2-[2-({[2-(4-bromofenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina metil estar (4.37 g, 8.1 mmol, 87 %). C23H32BrN3O7izračunato 541.1 opaženo [M 1]<+>431.1; rt = 2.65 min.
[0529] 2-[2-({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina: 2-[2-({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}terc-butoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina je pripremljena korišćenjem metode 801 supstituisanjem 2-[2-({[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-tercbutoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina metil estar za 4-okso-heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2,6-dikarboksilna kiselina 6-etil estar 2-metil estar. C22H30BrN3O7izračunato 527.1 opaženo [M 1]<+>528.1; rt = 2.39 min.
[0530] 2-[2-({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-amino)-acetilamino]-3-metilbuterna kiselina: 2-[2-({[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-amino)-acetilamino]-3-metil-buterna kiselina je pripremljena korišćenjem metode 804 supstituisanjem 2-[2-({[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-metil}-terc-butoksikarbonil-amino)-acetilamino]-3-metilbuterna kiselina tokom 1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar. C17H22BrN3O5izračunato 427.1 opaženo [M 1]<+>428.0; rt = 2.39 min.
N-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etil]-2-(3-Izopropil-2,5-diokso-piperazin-1-il)-acetamid:
[0531] HATU (3.70 g, 9.7 mmol) je dodat u rastvor 2-[2-({[2-(4-bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-metil}-amino)-acetilamino]-3-metil-buterne kiseline (2.78 g, 6.5 mmol), i 4-metilmorfolina (3.57 mL, 32.5 mmol) u DMF (100mL). Nakon 30 min rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u dihlormetan (150 mL) i ispran sa vodom (50 mL), vodenim vodonik hloridom (0.5 N, 2 x 50 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (50 mL) i osušen preko natrijum sulfata. Smeša je filtriraan i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluent om od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije N-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil]-2-(3-Izopropil-2,5-diokso-piperazin-1-il)-acetamid (1.56 g, 3.8 mmol, 60 %). C17H20BrN3O4izračunato 409.1 opaženo [M 1]<+>410.1; rt = 2.00 min.
[0532] {1-[2-(5-{4'-[2-(3-Izopropil-2,5-diokso-piperazin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-{4'-[2-(3-Izopropil-2,5-diokso-piperazin-1-ilmetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen korišćenjem ciklizacije imidazola iz metode 802, supstituisanjem N-[2-(4-bromofenil)-2-okso-etil]-2-(3-Izopropil-2,5-diokso-piperazin-1-il)-acetamida za 6-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-okso-heksahidro-pirolo[1,2-a]pirazin-2-karboksilna kiselina metil estar i korišćenjem [2-Metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1Himidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar u reakciji kuplovanja. C37H44N8O5izračunato 680.3 opaženo [M 1]<+>681.4; rt = 1.57 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.39 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 8.11 (m, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.88 (m, 5H), 7.33 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.13 (m, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.65 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 4.26 - 4.02 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.73 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.38 (m, 1H), 2.14 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 8.40 (m, 8H).:
Sledeća 3 koraka (Sonogashira kuplovanje, SEM protekcija, Boc deprotekcija) predstavlja primer za Metodu 807
Primer BA
[0533]
[0534] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 4-(4-bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (686 mg, 1.74 mmol), (1-{2-[4-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (800 mg, 1.45 mmol), bakar(I) jodid (28 mg, 0.14 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (167 mg, 0.14 mmol), trietilamin (2.0 mL, 14.5 mmol) i degaziran dimetilformamid (10 mL) je mešan na 80°C tokom 1 sata. (1-{2-[4-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (200 mg, 0.57 mmol) je dodat. Nakon 1 sata rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u dihlormetan (50 mL) i ispran sa vodom (10 mL), zasićenim amonijum hloridom (2 x 10 mL), osušen preko natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluent om od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (439 mg, 0.50 mmol, 35%). C46H57N9O8izračunato 863.4 opaženo [M 1]<+>864.5; rt = 1.91 min.<1>H (DMSOd6): δ = 8.07 (m, 1H), 7.76 (m, 4H), 7.68 (m, H), 7.56 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.21 (m, 1H), 5.08 (m, 2H), 4.80 (m, 1H), 4.07 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 2.33 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.97 (m, 4H), 1.39 (s, 9H), 1.34 (m, 2H), 0.81 (m, 12H).
{1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-buta-1,3-diinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar
[0535] {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-buta-1,3-diinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-buta-1,3-diinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar je takođe izolovan u fleš hromatografiji. Frakcije koje sadrže ovaj proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prebačen u dimetilformamid (2 mL) i podvrgnut hromatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da se obezbedi {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -fenil)-buta-1,3-diinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (83.2 mg, 0.10 mmol). C44H50N8O6izračunato 786.4 opaženo [M 1]<+>787.6; rt = 2.59 min
<1>H (DMSO-d6): δ = 8.06 (s, 2H), 7.79 (m, 4H), 7.72 (m, 4H), 7.28 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.08 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.51 (s, 6H), 2.32 (m, 2H), 2.11 (m, 2H), 1.99 (m 6H), 0.84 (m, 1H), 0.78 (dd, J = 6.8 Hz, J = 17.6 Hz, 12H).
[0536] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar: Natrijum hidrid (60 % u mineralnom ulju, 27 mg, 0.55 mmol) je dodat u rastvor 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (248 mg, 0.23 mmol) u dimetilformamidu (8 mL) u atmosferi azota na 0°C. Nakon 15 minuta 2-(trimetilsilil)etoksimetil hlorid (107.5 µL, 0.48 mmol) je dodat i reakcija je ostavljena da se zagreje do temperature okoline. Nakon 2 sata rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prebačen u dihlormetan (50 mL) ispran sa vodom (20 mL), i osušen preko natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji sa eluentom od (10 % metana u etil acetatu) i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4- {2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazo 1-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina tercbutil estar (410 mg, 0.36 mmol). C58H85N9O10Si2izračunato 1123.6 opaženo [M 1]<+>1124.7; rt = 3.10 min.
[0537] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazol: 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazol je pripremljen korišćenjem metode 804 supstituisanjem 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4- {2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazo 1-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar za {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-ilmetil]-2-okso-piperidin-3-il}-karbaminska kiselina terc-butil estar. C53H77N9O8Si2izračunato 1023.5 opaženo [M 1]<+>1024.7; rt = 2.81 min.
Sledeći korak predstavlja primer metode 808.
[0538] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina metil estar: Metil hloroformat (15 µL, 0.19 mmol) je dodat u rastvor 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazo1-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazol (97 mg, 0.09 mmol), i 4-metilmorfolin (40 µL, 0.36 mmol) u dihlormetanu (3 mL). Nakon 30 minuta rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i azeotropiran sa toluenom. Ostatak je prebačen u dihlormetan (5 mL) i trifluorosirćetna kiselina (5 mL) je dodata. Nakon 16 sati ispraljive supstance su uklonjene pod smanjenim pritiskom i ostatak je prebačen u tetrahidrofuran (4 mL) i metan (2 mL). Vodeni rastvor natrijum hidroksida (2 N, 1 mL) je dodat. Nakon 30 min organski rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom i dobijen talog je izolovan filtracijom. Čvrsta supstanca je prebačen u dimetilformamid (2 mL) i podvrgnut hromatografiji na reverznoj fazi sa eluentom od 0.1 % TFA u vodi i 0.1 % TFA u acetonitrilu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da obezbedi 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3 -metilbutiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina metil estar (14.1 mg, 0.017 mmol, 10 %).
C43H51N9O8izračunato 821.4 opaženo [M 1]<+>822.8; rt = 1.72 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.07 (m, 1H), 7.77 (m, 7H), 7.67 (m, 2H), 7.57 (m, 3H), 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.41 (m, 1H), 5.27 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.15 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 5.08 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 13.2 Hz, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.76 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.58 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 2.33 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 2.03 (m, 5H), 1.90 (m, 2H), 0.805 (m, 18H).
Primer BB
[0539]
(1-{2-[5-(4-{4-[1'-Acetil-3'-(2-metoksiarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-3H,1'H-[2,4']biimidazolil-4-il]-feniletinil}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0540] (1-{2-[5-(4-{4-[1'-Acetil-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-3H,1'H-[2,4']biimidazolil-4-il]-feniletinil}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode 808 u Primeru BA supstituisanjem anhidrida sirćetne kiseline za metil hloroformat u prvom kroaku sinteze. C43H51N9O7izračunato 805.4 opaženo [M 1]<+>806.5; rt = 1.65 min;<1>H (DMSO-d6): δ = 8.06 (m,1 H), 776 (m, 6H), 7.68 (m, 3H), 7.56 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 7.29 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.38 (m, 1H), 5.27 (m,1 H), 5.18 (m,1 H), 5.08 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.17 (m,1 H), 4.07 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.93 (m, 2H), 3.84 (m, 4H), 3.52 (s, 3H), 3.51 (s, 6H), 3.37 (m, 1H), 2.34 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 1.99 (m, 12H), 0.81 (m, 18H).
Primer BC
[0541]
4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{5-[4-(4-{2-[1-(2- metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[0542] 4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je pripremljen praćenjem koraka jedan metode 807, supstituisanjem (1-{2-[4-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-piperazin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar za 4-(4-bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar u prvom koraku Primera BA. C47H59N9O8izračunato 877.5 opaženo [M 1]<+>878.5; rt = 1.65 min
<1>H (DMSO-d6): δ = 8.08 (m, 1H), 7.78 (m, 4H), 7.68 (m, 2H), 7.54 (m, 2H), 7.29 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.54 (m, 1H), 5.08 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.07 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.81 (m, 4H), 3.52 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.41 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.00 (m, 4H), 1.28 (3, 3H), 1.17 (br s, 3H), 0.80 (m, 12 H).
Primer BD
[0543]
[1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]
3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar
[0544] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode 807 supstituisanjem (1-{2-[4-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-piperazin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za 4-(4-bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar. Praćeno sa metodom 808, supstituisanjem [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar za 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazol i izostavljanjem metil hloroformata. C42H51N9O6izračunato 777.4 opaženo [M 1]<+>778.4; rt = 1.58 min.
<1>H (DMSO-d6): b = 9.30 (m, 1H), 7.9 (m, 2H), 7.75 (m, 3H), 7.63 (m, 2H), 7.52 (m 2H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.96 (1H), 5.07 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.06 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.56 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.27 (m, 2.12 (m, 1H), 1.96 (m, 4H), 0.95 (m, 1H), 0.81 (m, 12H).
Primer BE
[0545]
[0546] 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
Smeša 4-bromo-benzen-1,2-diamin (2.4 g) i 2-formil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.55 g) u etanolu (5 mL) je zagrejana u mikrotalasnoj na 80°C tokom 1 sata. Smeša je koncentrovana i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.6 g, prinos 55%). LCMS-ESI-: izračunato za C16H20BrN3O2: 366.25; Pronađeno: 365.8 (M+H<+>).
[0547] 2-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (890 mg, 2.43 mmol), bis(pinakolato)diboron(1.36g, 5.35 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(99 mg, 0.12 mmol) i kalijum acetat (620 mg, 6.32 mmol) u 15 mL dioksana je zagrejana do 95°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićen natrijum bikarbonatnim rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (588 mg, prinos 59%). LCMS-ESI-: izračunato za C32H20BN3O4: 413.32; Pronađeno: 414.0 (M+H<+>).
[0548] 2-[2'-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H,3'H-[5,5']bibenzoimidazolil-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (64 mg, 0.174 mmol), 2-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (72 mg, 0.174 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (30 mg, 0.026 mmol) i kalijum karbonata (48 mg, 0.35 mmol) u 2 ml 1,2-dimetoksietana i 1 mL vode je zagrejan do 110°C u mikrotalasnoj tokom 15 minuta. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% vodenim rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% metan/etil acetat) da se dobije 2-[2'-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H,3'H-[5,5']bibenzoimidazolil-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (15 mg, prinos 15%). LCMS-ESI-: izračunato za C32H40N6O4: 572.70; Pronađeno: 573.1(M+H<+>).
[0549] [1-(2-{2'-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H,3'H-[5,5']bibenzoimidazolil-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (0.5 mL) je dodat u (2-[2'-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H,3'H-[5,5']bibenzoimidazolil-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (15 mg, 0.0262 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (10 mg, 0.058 mmol), diIzopropiletilamin (27 µL), praćeno sa HATU (20 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(2-{2'-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H,3'H-[5,5']bibenzoimidazolil-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (8.1 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.02 (s, 2H), 7.88 (m, 4H), 5.38 (m, 2H), 4.27(d, 2H), 4.12(m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.62 (s, 6H), 2.62 (m, 2H), 2.40-2.20 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H46N8O6: 686.80; Pronađeno: 687.3 (M+H<+>).
Primer BF
[0550]
[0551] 2-{6-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (230 mg, 0.628 mmol), 4,4'-bifenildiboronska kiselina dipinakol estar (1.28 g, 3.14 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (73 mg, 0.063 mmol) i kalijum karbonata (521 mg, 3.77 mmol) u 10 ml 1,2-dimetoksietana i 5 mL vode je zagrejana do 120°C u mikrotalasnoj tokom 40 minuta. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i ispraan sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-{6-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (15 mg, prinos 15%). LCMS-ESI-: izračunato za C34H40BN3O4: 65.51; Pronađeno: 566.1 (M+H<+>).
[0552] 2-(6-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{6-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (147 mg, 0.26 mmol), 2-[5-bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (116 mg, 0.26 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (30 mg, 0.026 mmol), Pd(dppf)Cl2(21 mg, 0.026 mmol) i kalijum karbonata (72 mg, 0.52mmol) u 3 ml 1,2-dimetoksietana i 1 mL vode je zagrejana do 90°C tokom 2.5 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-(6-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (52 mg, prinos 25%); LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H60N6O5Si: 805.09; Pronađeno: 805.1 (M+H<+>).
[0553] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (2 mL) je dodata u 2-(6-{4'-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (52 mg, 0.056 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (20 mg), diizopropiletilamin (59 µL), praćeno sa HATU (43 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (4.8 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.0 (s, 1H), 7.92-7.82 (m, 11H), 5.38 (t, 1H), 5.24 (t, 1H), 4.27(dd, 2H), 4.16(m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.63 (s, 6H), 2.62 (m, 2H), 2.40-2.18 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H52N8O6: 788.93; Pronađeno: 789.3 (M+H<+>).
Primer BG
[0554]
[0555] 2-(6-trimetilsilaniletinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Smeša 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (309 mg, 0.84 mmol), etinil-trimetil-silana (1.2 mL, 8.4 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma (97 mg, 0.08 mmol), bakar(I) jodida (32 mg, 0.16 mmol) i trietilamina (0.7 mL, 5,04 mmol) u 5 ml DMF je zagrejana do 80°C tokom 8 sati. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorean u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(6-trimetilsilaniletinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, prinos 62%). LCMS-ESI-: izračunato za C21H29N3O2Si: 383.56; Pronađeno: 384.1 (M+H<+>).
2-(6-etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0556] Kalijum karbonat (144 mg) je dodat u 2-(6-trimetilsilaniletinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, 0.52 mmol) u 6 ml metana. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(6-etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (121 mg, prinos 75%). LCMS-ESI-: izračunato za C18H21N3O2: 311.38; Pronađeno: 311.8 (M+H<+>).
[0557] 2-{6-[2-(1-Boc-2-il)-1H-benzoimidazol-5-iletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (91 mg, 0.24 mmol), 2-(6-etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (77 mg, 0.24 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (14 mg), bakar(I) jodida (5 mg) i trietilamina (138 µL) u 2 ml DMF je zagrejana do 90°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0-10% IPA/ DCM: aceton(3:2) smeša) da se dobije 2-{6-[2-(1-Boc-2-il)-1H-benzoimidazol-5-iletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (5.4 mg). LCMS-ESI-: izračunato za C34H40N6O4: 596.72; Pronađeno: 597.0 (M+H<+>).
[0558] {1-[2-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-iletinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (1 mL) je dodata u 2-{6-[2-(1-Boc2-il)-1H-benzoimidazol-5-iletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (5.4 mg, 0.0065 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovan i osušen preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.6 mg), diIzopropiletilamine (9 µL), praćeno sa HATU (5.5 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije {1-[2-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-iletinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (0.9 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 7.82 (s, 2H), 7.68-7.60 (m, 4H), 5.32 (m, 2H), 4.27(dd, 2H), 4.11(m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.63 (s, 6H), 2.58 (m, 2H), 2.40-2.12 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H46N8O6: 710.82; Pronađeno: 711.2 (M+H<+>). Primer BH
[0559]
[0560] 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-buta-1,3-diinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-(6-etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (88 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (16 mg), bakar(I) jodid (3 mg) i trietilamin (120 µL) u 1.5 ml DMF je zagrejan do 50°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-buta-1,3-diinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (12 mg). LCMS-ESI-: izračunato za C36H40N6O4: 620.74; Pronađeno: 621.0 (M+H<+>).
[0561] (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-buta-1,3-diinil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (1 mL) je dodata u 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-buta-1,3-diinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (12 mg) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušen preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (5.5 mg), diIzopropiletilamin (13 µL), praćeno sa HATU (12 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-buta-1,3-diinil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (4 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 7.82 (s, 2H), 7.72-7.62 (m, 4H), 5.32 (m, 2H), 4.27(d, 2H), 4.11(m, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.63 (s, 6H), 2.54 (m, 2H), 2.38-2.12 (m, 6H), 2.06 (m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H46N8O6: 734.84; Pronađeno: 735.2 (M+H<+>).
Primer BI
[0562]
[0563] 2-[6-(4-Jodo-feniletinil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Smeša 2-(6-etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (100 mg, 0.321 mmol), 1,4-Dijodo-benzen (529 mg, 1.61 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (37 mg, 0.03 mmol), bakar(I) jodid (12 mg, 0.06 mmol) i trietilamin (0.135 mL, 0.96 mmol) u 2 ml DMF je zagrejan do 100°C u mikrotalasnoj tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[6-(4-Jodo-feniletinil)-1Hbenzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (123 mg, prinos 75%). LCMS-ESI-: izračunato za C24H24IN3O2: 513.37; Pronađeno: 531.8 (M+H<+>).
[0564] 2-{6-[4-boronska kiselina-feniletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-[6-(4-Jodo-feniletinil)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (123 mg, 0.24 mmol), bis(pinakolato)diboron (122 mg, 0.48 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (52 mg, 0.02 mmol) i kalijum acetat (52 mg, 0.53 mmol) u 3 ml 1,4-dioksana je zagrejana do 90°C tokom 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) i praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije odgovarajuća boronska kiselina od 2-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-feniletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (15 mg). LCMS-ESI-: izračunato za C24H26BN3O4: 431.29; Pronađeno: 431.9 (M+H<+>).
[0565] 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-feniletinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 2-{6-[4-boronska kiselina-feniletinil]-1H-benzoimidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (11 mg, 0.025), 2-[5-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (34 mg, 0.076 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (1.5 mg), Pd(dppf)Cl2(1 mg) i kalijum karbonata (3.5 mg) u 1 ml DME i 0.3 mL vode je zagrejana do 90°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-feniletinil}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4 mg, prinos 21%). LCMS-ESI-: izračunato za C43H60N6O5Si; 753.02; Pronađeno: 751.4 (M-H<+>).
[0566] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-iletinil}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (1 mL) je dodat u 2-(6-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-feniletinil}-1Hbenzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4 mg) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati. Reakciona smeša je koncentrovaan i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2 mg), diIzopropiletilamine (6 µL), praćeno sa HATU (4 mg). Reakciona smeša je mešan na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-iletinil} -fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao bis-TFA so (2.8 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 7.86 (s, 1H), 7.82(s, 1H), 7.78-7.60 (m, 5H), 5.32 (m, 2H), 4.27(dd, 2H), 4.11(m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.63 (s, 6H), 2.58 (m, 2H), 2.40-2.12 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H46N8O6: 736.86; Pronađeno: 737.3 (M+H<+>).
Primer BJ
[0567]
[0568] (2-Metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Smeša (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (364 mg, 0.81 mmol), Etinil-trimetil-silan (0.68mL, 4.9 mmol), Bakar(I) jodid (154 mg, 0.81 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (94 mg, 0.08 mmol) i trietilamin (0.67 mL, 4.9 mmol) u 5 ml DMF je zagrejan do 70°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i ispraa sa 5% rastvorom litijum hlorida. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) i praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije (2-Metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (324 mg). LCMS-ESI-: izračunato za C25H34BN4O3Si: 466.65; Pronađeno: 467.1 (M+H<+>).
[0569] (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Kalijum karbonat (192 mg) je dodat u (2-Metil-1-{2-[5-(4-trimetilsilaniletinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -propil)-karbaminska kiselina metil estar (324 mg) u 7 mL MeOH rastvora. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (234 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 7.84 (s, 1H), 7.84(d, 2H), 6.98 (d, 2H), 5.22 (t, 1H), 4.21(d, 1H), 4.11(m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.55 (m, 1H), 2.31-2.02 (m, 4H), 0.95-0.85 (m, 6 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H26N4O3: 394.47; Pronađeno: 395.1 (M+H<+>).
Primer BK
[0570]
[0571] {1-[2-(6-Etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: Trifluorosirćetna kiselina (1 mL) je dodata u 2-(6-Etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (20 mg) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (12 mg), diIzopropiletilamin (67 µL), praćeno sa HATU (24 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije {1-[2-(6-Etinil-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar kao mono TFA so (23 mg):<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 7.82 (s, 1H), 7.72(d, 1H), 7.62 (d, 1H), 5.32 (t, 1H), 4.24(d, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.63 (s, 4H), 2.58 (m, 1H), 2.38-2.12 (m, 3H), 2.04(m, 1H), 0.95-0.85 (m, 6 H); LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H26N4O3: 368.43; Pronađeno: 369.0 (M+H<+>).
Primer BL
[0572]
[0573] Piperidin-1,4-dikarboksilna kiselina monobenzil estar: Piperidin-4-karboksilna kiselina (64.8 g, 0.5 mol) u H2O (50 mL) je tretiran sa NaOH (44.0 g, 1.1 mol). Reakciona smeša je ohlađena do 0°C i tretirana sa CbzCl (93.8 g, 0.55 mol). Reakciona smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 4 sata i smeša je ekstrakovana sa Et2O (3 × 150 mL). Vodena faza je zakiseljena sa 6 N HCl (140 mL) i ekstrakovana sa EtOAc (3 × 200 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4, filtriran, i koncentrovan da se dobije sirov piperidin-1,4-dikarboksilna kiselina monobenzil estar (120 g), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 262 [M - H]<+>.
[0574] 4-hlorokarbonil-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: Piperidin-1,4-dikarboksilna kiselina monobenzil estar (40.2 g, 0.15 mol) u dihlormetanu (300 mL) je tretiran sa oksalil hloridom (100 g, 0.79 mol). Reakciona smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 4 sata i smeša je koncentrovana da se dobije sirov 4-hlorokarbonil-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (43 g), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0575] 4-(2-Diazo-acetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: 4-Hlorokarbonilpiperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (43 g, 0.15 mol) u dihlormetanu (300 mL) je tretiran sa (trimetilsilil)diazoMetan (2.0 M u heksanima, 150 mL, 0.31 mol) tokom 15 min. Reakciona smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 18 sati i smeša je koncentrovana da se dobije sirov 4-(2-diazo-acetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (44 g), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0576] 4-(2-Bromo-acetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: 4-(2-Diazo-acetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (44 g, 0.15 mol) u EtOAc (300 mL) je ohlađen do 0°C. Rastvor je tretiran sa 33% HBr/HOAc (75 mL, 0.42 mol) tokom 15 min i mešan na temperaturi okoline tokom 2 sata. Smeša je polako tretirana sa zasićenim NaHCO3rastvorom (300 mL) dok je pH neutralan ili blago bazan i filtriran. Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 330 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije 4-(2-bromoacetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (38.1 g, 81%): MS (ESI) m/z 341 [M H]<+>.
[0577] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(1-benziloksikarbonil-piperidin-4-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: (S)-Prolin (13 g, 61 mmol) u MeCN (250 mL) je tretiran sa trietilaminom (8.5 mL, 61 mmol).4-(2-Bromo-acetil)-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (19 g, 56 mmol) u MeCN (50 mL) je dodat u kapima tokom 15 min i reakcija je mešana tokom 2 sata. Smeša je koncentrovana i suspendovan u dihlormetanu (100 mL) i isprana sa H2O (50 mL). Rastvor je osušen prekoMgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 330 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(1-benziloksikarbonil-piperidin-4-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (20 g, 75%): MS (ESI) m/z 497 [M Na]<+>.
[0578] 4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(1benziloksikarbonil-piperidin-4-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (20 g, 42 mmol) u ksilenima (100 mL) je tretiran sa amonijum acetatom (16 g, 210 mmol). Reakcija je mešana na 130°C u zatvorenoj epruveti tokom 3 sata. Smeša je koncentrovana i suspendovana u dihlormetanu (100 mL) i isprana sa zasićenim NaHCO3(50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 330 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije 4-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (6.8 g, 36%): MS (ESI) m/z 455 [M H]<+>.
[0579] 4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: 4-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (6.8 g, 14.9 mmol) u DMF (115 mL) je tretirana sa NaH (60%disperzija u mineralnom ulju, 655 mg, 16.4 mmol) u jednoj porciji. Nakon 5 min, smeša je tretirana sa SEMCl (2.75 mL, 15.7 mmol) u procijama od 0.1 mL tokom 10 min. Reakcija je mešana 3 sata i razblažena sa zasićenim NH4Cl rastvorom (50 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 120 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije 4-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (2.8 g, 32%): MS (ESI) m/z 585 [M H]<+>.
[0580] 2-[5-Piperidin-4-il-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-piperidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (2.8 g, 6.1 mmol) u EtOH (60 mL) je tretiran sa 20% PdOH/C (600 mg) i postavljen u atmosferu H2. Reakcija je mešana tokom 18 sati i filtrirana kroz čep od CELITE-a da se dobije sirov 2-[5-piperidin-4-il-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.0 g), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 451 [M H]<+>.
[0581] 2-[3-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperidin-4-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-Piperidin-4-il-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (170 mg, 0.37 mmol) i 4-Bromofenil-1-SEM-imidazol-2-ilpirolidin-1-Boc (164 mg, 0.31 mmol, pripremljen prema WO 2008/021927) u toluenu (3.5 mL) su tretirani sa Pd(OAc)2(1.4 mg, 0.0064 mmol, putem 10% rastvora u toluenu), BINAP (19 mg, 0.031 mmol), i NaOtBu (42 mg, 0.44 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 110°C tokom 36 sati. Rastvor je koncentrovan, razblažen sa EtOAc (50 mL), i ispran sa zasićenim NaHCO3(20 mL), H2O (20 mL), i slanim rastvorom (20 mL). Rastvor je osušen prekoMgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 40 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije 2-[3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperidin-4-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (35 mg, 13%): MS (ESI) m/z 892 [M H]<+>.
[0582] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-piperidin-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-[3-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperidin-4-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (35 mg, 0.04 mmol) u dihlormetanu (1.0 mL) je tretiran sa trifluorosirćetnom kiselinom (0.2 mL) i smeša je mešana tokom 1 sati. Rastvor je koncentrovan i ostatak je suspendovan u DMF (1.0 mL) i tretiran sa (S)-Moc-Val-OH (15 mg, 0.086 mmol), HATU (32 mg, 0.085 mmol), i N-metil morfolin (0.034 mL, 0.31 mmol). Smeša je mešana tokom 2 sata zatim razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHC3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i suspendovan u trifluorosirćetnoj kiselini (1.0 mL) i mešan u bočici sa poklopcem koji se zavrće na 40°C tokom 1 sata. Rastvor je koncentrovan i stavljen na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-piperidin-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (9.5 mg, 33%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.64 (s, 1H), 7.57 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 5.18 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 4.08 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.84 (m, 2H), 3.65, (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 2.96 (m, 3H), 2.51 (m, 2H), 2.20 (m, 2H), 2.13 (m, 7H), 1.82 (m, 2H), 0.91 (m, 12H); MS (ESI) m/z 746 [M H]<+>.
Primer BM
[0583]
[0584] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.6 g, 5.8 mmol) u DMF (60 mL) je tretiran sa NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 256 mg, 6.4 mmol) u jednoj porciji. Nakon 5 min, smeša je tretirana sa SEMCl (1.08 mL, 6.1 mmol) u porcijama od 0.1 mL tokom 10 min. Reakcija je mešana tokom 2 sata i razblažena sa zasićenim NH4Cl rastvorom (50 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na 120 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.4 g, 71%).
[0585] {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-il]-fenil}-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (222 mg, 0.38 mmol) i piperazin (17 mg, 0.19 mmol) u toluenu (3.5 mL) su tretirani sa Pd (OAc)2(2.1 mg, 0.0096 mmol, preko 10% rastvora u toluenu), BINAP (12 mg, 0.019 mmol), i NaOtBu (64 mg, 0.67 mmol). Smeša je mešan u zatvorenoj epruveti na 120°C tokom 4 sata. Rastvor je koncentrovan, razblažen sa EtOAc (50 mL), i ispran sa zasićenim NaHCO3(20 mL), H2O (20 mL), i slanim rastvorom (20 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-il]-fenil}-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (8 mg, 4%): MS (ESI) m/z 1105 [M Na]<+>.
[0586] {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-il]-fenil}-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (8 mg, 0.007 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (1.0 mL) je mešan u bočici sa poklopcem koji se zavrće na 40°C tokom 1 sata. Rastvor je koncentrovan i stavljen na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije {1-[2-(5-{4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-il]-fenil}1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (1.9 mg, 32%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.66 (s, 2H), 7.60 (d, J = 8.7 Hz, 4H), 7.13 (d, J = 8.7 Hz, 4H), 5.21 (app t, J = 8.1 Hz, 2H), 4.22 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.66 (s, 6H), 3.31 (m, 5H), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 8H), 0.91 (m, 12H); MS (ESI) m/z 824 [M H]<+>.
Primer BN
[0587]
[0588] 2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karboksilna kiselina: 2-[4-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.0 g, 2.2 mmol) u THF (10 mL) je ohlađen do -78°C i tretiran sa t-BuLi (1.7 M u pentanu, 2.7 mL, 4.6 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata i tretirana sa čvrstim CO2(500 mg). Smeša je zagrejana do temperature okoline i smeša je koncentrovan. Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na COMBIFLASH kolonu sa 120 g SiO2(0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije 2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karboksilna kiselina (200 mg, 22%): MS (ESI) m/z 412 [M H]<+>.
[0589] 2-[4-{9-[1-(2-Trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karbonil]-3,9-diazaspiro[5.5]undekan-3-karbonil}-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karboksilna kiselina (141 mg, 0.34 mmol) u DMF (1.0 mL) je tretiran sa spiro-diaminom (38 mg, 0.16 mmol), HATU (136 mg, 0.36 mmol), i N-metil morfolin (0.90 mL, 0.82 mmol). Smeša je mešana tokom 2 sata zatim razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4da se dobije sirov 2-[4-{9-[1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karbonil]-3,9-diaza-spiro[5.5]undekan-3-karbonil}-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 941 [M H]<+>.
[0590] (1-{2-[4-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-karbonil}-3,9-diaza-spiro[5.5]undekan-3-karbonil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[4-{9-[1-(2-Trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-4-karbonil]-3,9-diaza-spiro[5.5]undekan-3-karbonil}-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (153 mg, 0.17 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (3.0 mL) je mešan tokom 18 sati. Smeša je koncentrovana, suspendovana u DMF (1.7 mL), i tretirana sa (S)-Moc-Val-OH (64 mg, 0.37 mmol), HATU (140 mg, 0.38 mmol), i N-metil morfolinom (185 mL, 1.66 mmol). Smeša je mešana tokom 2 sata zatim razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije 1-{2-[4-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-karbonil}-3,9-diaza-spiro[5.5]undekan-3-karbonil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3.0 mg, 2%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.77 (s, 2H), 5.18 (app t, J = 6.9 Hz, 2H), 4.22 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.66 (s, 6H), 3.31 (m, 5H), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 8H), 0.91 (m, 12H); MS (ESI) m/z 796 [M H]<+>.
Primer BO
[0591]
[0592] 4-{4-[2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperazin-1-karboksilna kiselina benzil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1033 mg, 1.8 mmol) i 4-Cbz-piperazin (588 mg, 2.7 mmol) u toluenu (9 mL) su tretirani sa Pd(OAc)2(20 mg, 0.09 mmol), BINAP (110 mg, 0.1 mmol), i NaOtBu (428 mg, 4.45 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 110°C tokom 18 sati. Rastvor je koncentrovan, razblažen sa EtOAc (50 mL), i ispran sa zasićen NaHCO3(20 mL), H2O (20 mL), i slanim rastvorom (20 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4stavljen na 120 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije 4-{4-[2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperazin-1-karboksilna kiselina benzil estar (166 mg, 13%): MS (ESI) m/z 719 [M H]<+>.
[0593] (2-Metil-1-{2-[5-(4-piperazin-1-il-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 4-{4-[2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-piperazin-1-karboksilna kiselina benzil estar (166 mg, 0.23 mmol) u EtOH (2.5 mL) je tretiran sa 20% PdOH/C (60 mg) i postavljen u atmosferu H2. Reakcija je mešana tokom 18 sati i filtrirana kroz čep od CELITE-a da se dobije sirov (2-metil-1-{2-[5-(4-piperazin-1-il-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (120 mg), koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 585 [M H]<+>.
[0594] 2-[4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3-metil-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-karbonil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: (2-Metil-1-{2-[5-(4-piperazin-1-il-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (28 mg, 0.047 mmol) i 2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-4-karboksilna kiselina (20 mg, 0.047 mmol) u DMF (1 mL) su tretirani sa HATU (20 mg, 0.052 mmol) i N-metil morfolinom (0.26 mL, 0.23 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati zatim razblažen sa EtOAc (25 mL), i ispran sa zasićen NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4da se dobije sirov 2-[4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3-metil-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-karbonil]-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 978 [M H]<+>.
[0595] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-karbonil}-piperazin-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-[4-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3-metil-3H-imidazol-4-il}-fenil)-piperazin-1-karbonil]-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (47 mg, 0.05 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (3.0 mL) je mešan tokom 18 sati. Smeša je koncentrovana, suspendovana u DMF (1.5 mL), i tretirana sa (S)-Moc-Val-OH (9 mg, 0.0.053 mmol), HATU (20 mg, 0.0.053 mmol), i N-metil morfolinom (0.26 mL, 0.24 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati zatim razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-karbonil}-piperazin-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (6.6 mg, 18%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.67 (s, 2H), 7.59 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 9.3 Hz, 2H), 5.20 (app t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.22 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.01 (m, 5H), 3.85 (m, 2H), 3.66 (s, 6H), 3.38 (m, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 8H), 0.91 (m, 12H); MS (ESI) m/z 775 [M H]<+>.
Primer BP
[0596]
[0597] {1-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropil}-karbaminska kiselina terc-butil estar: 2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon HCl (2.5 g, 10 mmol) u DMF (30 mL) je tretiran sa 1-terc-butoksikarbonilamino-ciklopropanekarboksilna kiselina (1.97 g, 9.8 mmol), HATU (4.02 g, 10.5 mmol), i DIPEA (5.6 mL, 31.1 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati i koncentrovana. Smeša je razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na 80 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije {1-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-ciklopropil}-karbaminska kiselina terc-butil estar (3.49 g, 90%). Ovaj materijal (3.49 g, 8.8 mmol) u ksilenima (20 mL) je tretiran sa amonijum acetatom (3.4 g, 44 mmol). Reakcija je mešana na 130°C u zatvorenoj epruveti tokom 18 sati. Smeša je koncentrovan i suspendovana u dihlormetanu (100 mL) i isprana sa zasićen NaHCO3(50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4da se dobije sirov {1-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropil}-karbaminska kiselina terc-butil estar, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 379 [M H]<+>.
[0598] (1-{1-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropilkarbamoil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropil}-karbaminska kiselina terc-butil estar (3.3 g, 8.77 mmol) je tretiran sa 4 N HCl/dioksan (40 mL) i mešan tokom 2 sata. Smeša je koncentrovana i suspendovana u DMF (50 mL). Smeša je tretirana sa (S)-Moc-Val-OH (1.69 g, 9.7 mmol), HATU (3.67 g, 9.7 mmol), i N-metil morfolonom (4.8 mL, 43.9 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati i koncentrovana. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), i isprana sa zasićen NaHCO3(3 × 50 mL), H2O (50 mL), i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na 120 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAcheksani gradijent) da se dobije (1-{1-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropilkarbamoil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3.37 g, 88%): MS (ESI) m/z 436 [M H]<+>.
[0599] [2-Metil-1-(1-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-ciklopropilkarbamoil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{1-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklopropilkarbamoil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.38 g, 3.2 mmol) u 1,4-dioksanu (25 mL) je tretiran sa bis(pinakolato)diborom (1.69 g, 6.7 mmol), Pd(PPh3)4(150 mg, 0.13 mmol), i KOAc (810 mg, 8.2 mmol). Smeša je mešan u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 18 sati. Smeša je filtriran kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je zatim suspendovana u dihlormetanu (10 mL) i filtrirana i stavljena na 120 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani gradijent) da se dobije [2-metil-1-(1-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-ciklopropilkarbamoil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (1.24 g, 81%): MS (ESI) m/z 483 [M H]<+>.
[0600] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-ciklopropil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: [2-Metil-1-(1-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-ciklopropilkarbamoil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (85 mg, 0.21 mmol) i (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (97 mg, 0.21 mmol) u 3:1 DME/H2O (2.5 mL) su tretiran sa Pd(PPh3)4(10 mg, 0.0084 mmol) i K2CO3(2 M rastvorom, 0.42 mL, 0.84 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 3 sati. Smeša je filtriran kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutirilamino)-ciklopropil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.3 mg, 2%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.93 (s, 2H), 7.84 (m, 4H), 5.20 (m, 1H), 4.23 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.01 (m, 2H), 3.83 (m, 4H), 3.70 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.38 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 2.18 (m, 4H), 2.04 (m, 4H), 1.75 (m, 4H), 1.58 (m, 4H), 0.95 (m, 12H); MS (ESI) m/z 725 [M H]<+>.
Primer BQ
[0601]
[0602] {1-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar: 2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon HCl (5.8 g, 23 mmol) u DMF (75 mL) je tretiran sa 1-terc-butoksikarbonilamino-ciklobutankarboksilnom kiselinom (5.0 g, 23 mmol), HATU (9.7 g, 25 mmol), i DIPEA (12.9 mL, 34 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati i koncentrovana. Smeša je razblažena sa EtOAc (25 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 10 mL), H2O (10 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4da se dobije sirov {1-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. Ovaj materijal (6.54 g, 16 mmol) u ksilenima (40 mL) je tretiran sa amonijum acetatom (6.1 g, 80 mmol). Reakcija je mešana na 130°C u zatvorenoj epruveti tokom 18 sati. Smeša je koncentrovana i suspendovana u dihlormetanu (100 mL) i isprana sa zasićen NaHCO3(50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4da se dobije sirov {1-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja: MS (ESI) m/z 393 [M H]<+>.
[0603] {1-[1H-Imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar boronska kiselina: {1-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar (110 mg, 0.28) u 1,4-dioksanu (2.5 mL) je tretiran sa bis(pinakolato)dibor (150 mg, 0.59 mmol), Pd(PPh3)4(13 mg, 0.011 mmol), i KOAc (71 mg, 0.73 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 18 sati. Smeša je filtrirana kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije {1-[1H-imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina tercbutil estar boronska kiselina.
[0604] 2-(5-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonilamino-ciklobutil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 1-[1H-Imidazol-2-il]-ciklobutil}-karbaminska kiselina terc-butil estar boronska kiselina (60 mg, 0.17 mmol) i 2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (65 mg, 17 mmol) u 3:1 DME/H2O (1.5 mL) su tretirani sa Pd(PPh3)4(10 mg, 0.0084 mmol) i K2CO3(2 M rastvorom, 0.25 mL, 0.50 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 18 sati. Smeša je filtrirana kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije 2-(5-{4'-[2-(1-tercbutoksikarbonilamino-ciklobutil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (10 mg, 9%): MS (ESI) m/z 625 [M H]<+>.
[0605] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-ciklobutil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-(5-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonilamino-ciklobutil)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (9.8 mg, 0.016 mmol) je tretiran sa 4 N HCl/dioksan (1.5 mL) i mešan tokom 4 sata. Smeša je koncentrovan i suspendovan u DMF (1.5 mL). Smeša je tretirana sa (S)-Moc-Val-OH (6.0 mg, 0.032 mmol), HATU (13 mg, 0.034 mmol), i N metil morfolonom (0.009 mL, 0.080 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati i koncentrovana. Smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije (1- {2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-ciklobutil]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.8 mg, 24%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.88 (m, 10H), 5.20 (m, 1H), 4.23 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.12(m, 1H), 3.88 (app d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 2.85 (br m, 2H), 2.65 (m, 4H), 2.09 (m, 10H), 0.95 (m, 12H); MS (ESI) m/z 739 [M H]<+>.
Primer BR
[0607] [2-Metansulfonil-2-metil-1-(2- {5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.02 g, 1.73 mmol) je tretiran sa 4 N HCl/dioksan (5 mL) i mešan tokom 4 sata. Smeša je koncentrovana i suspendovana u DMF (1.5 mL). Smeša je tretirana sa (S)-Moc-3-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (460 mg, 1.82 mmol), HATU (772 mg, 2.03 mmol), i N-metil morfolonom (0.950 mL, 8.65 mmol). Smeša je mešana tokom 18 sati i koncentrovan. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 50 mL), H2O (50 mL), i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i stavljen na 40g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije [2-Metansulfonil-2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (728 mg, 73%): MS (ESI) m/z 575 [M H]<+>.
[0608] (2-Metansulfonil-1-12-[5-(4'-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: [2-Metansulfonil-2-metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (700 mg, 1.22 mmol) i (1-{2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (565 mg, 1.26 mmol) u 3:1 DME/H2O (15 mL) su tretirani sa Pd(PPh3)4(56 mg, 0.0050 mmol) i NaHCO3(350 mg, 4.15 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 24 sati. Smeša je filtrirana kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije (2-Metansulfonil-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (150 mg, 15%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) 7.85 (m, 10H), 5.25 (m, 2H), 4.24 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.13 (m, 2H), 3.88 (app d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 2.57 (m, 2H), 2.16 (m, 10H), 1.81 (s, 3 H), 1.79 (s, 1H), 0.93 (m, 6H); MS (ESI) m/z 818 [M H]<+>.
Primer BS
[0609]
[0610] 2,7-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren i 2,8-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren: Tiantren (27 g, 125 mmol) u AcOH (150 mL) je tretiran sa bromom (44 g, 275 mmol) i zagrejan na 120°C tokom 8 sati. Smeša je ostavljena da odstoji preko noći na ambijentalnoj temperaturi, u koje se vreme se pojavila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je filtirana, isprana sa H2O (3 × 50 mL) i osušena na vazduhu da se dobije smeša 2,7-dibromo-tiantren i 2,8-dibromo-tiantren koji je prenešen dalje bez dodatnog prečišćavanja (42 g).
2,7-bibromo-tiantren/2,8-dibromo-tiantren smeša (1 g, 2.7 mmol) u DMSO (25 mL) je tretirana sa bis(pinakolato)diborom (2.7 g, 10.7 mmol), PdCl2dppf(218 mg, 0.27 mmol), i KOAc (2.1 g, 21.4 mmol). Smeša je mešan u zatvorenoj epruveti na 80°C tokom 18 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), i ispran sa zasićen NaHCO3(3 × 50 mL), H2O (50 mL), i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor osušen preko MgSO4stavljen na 40 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-50% EtOAcheksani gradijent) da se dobije smeša 2,7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren i 2,8-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren (1.25 g, 99%): MS (ESI) m/z 796 [M H]<+>.
[0611] 2-(5-{7-[3H-Imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{8-3H-imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2,7-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren i 2,8-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-tiantren (1.25 g, 2.67 mmol) i 2-(4-bromo-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.77 g, 5.6 mmol) u 3:1 DME/H2O (25 mL) su tretirani sa Pd(PPh3)4(185 mg, 0.160 mmol) i NaHCO3(1.12 g, 13.35 mmol). Smeša je mešana u zatvorenoj epruveti na 90°C tokom 24 sata. Smeša je filtirana kroz levak od poroznog stakla i koncentrovana. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 50 mL), H2O (50 mL), i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4stavljen na 120 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-50% EtOAcheksani gradijent) da se dobije smeša 2-(5-{7-[3H-imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{8-3H-imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0612] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il-tiantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar i (1{2-[5-(8-{2-[1(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-tiantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: smeša 2-(5-{7-[3H-Imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 2-(5-{8-3H-imidazol-4-il]-tiantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-bis-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (150 mg, 0.22 mmol) je tretirana sa 4 N HCl/dioksan (2.5 mL) i mešana tokom 4 sati. Smeša je koncentrovana i suspendovana u DMF (2.5 mL). Smeša je tretirana sa (5)-Moc-Val-OH (84 mg, 0.48 mmol), HATU (191 mg, 0.50 mmol), i N-metil morfolon (120 mL, 1.09 mmol). Smeša je mešana tokom 2 sata i koncentrovana. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 × 50 mL), H2O (50 mL), i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor osušen preko MgSO4stavljen na a40 g SiO2COMBIFLASH kolonu (0-100% EtOAc-heksani praćeno sa 0-20% MeOH-EtOAc gradijent), što je dalo čistu smešu 2,7/2,8 proizvoda. 2,7/2,8 smeša je stavljena na kolonu za HPLC na reverznoj fazi (5-95% MeCN-H2O; 0.1% TFA modifikator) da se dobije (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -tiantren-2-il)- H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil} -2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (26 mg, 15%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 7.88 (s, 2H), 7.80 (s, 2H), 7.63 (s, 4H), 5.20 (m, 2H), 4.23 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.72 (s, 6H), 2.99 (s, 3H), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 10H), 0.95 (m, 12H); MS (ESI) m/z 818 [M H]<+>; i (1-{2-[5-(8-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazo1-4-il}-tiantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (10 mg, 5%) kao bela čvrsta supstanca (TFA so):<1>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 7.86 (s, 2H), 7.80 (s, 2H), 7.63 (s, 4H), 5.20 (m, 2H), 4.23 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.72 (s, 6H), 2.99 (s, 3H), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 10H), 0.95 (m, 12H); MS (ESI) m/z 801 [M H]<+>.
Primer BT
[0613]
3-Benzilamino-2-terc-butoksikarbonilamino-propionska kiselina metil estar:
[0614] 3-Amino-2-terc-butoksikarbonilamino-propionska kiselina (5.0 g, 24.5 mmol) je suspendovana u metanolu (100 mL) i benzaldehidu (5.2 g, 49 mmol) je dodata, praćeno sa trietilaminom (TEA, 10.2 mL, 73.5 mmol). Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 90 minuta i ohlađena do 0 °C. Čvrst natrijum borohidrid (2.78 g, 73.5 mmol) je dodata u malim porcijama i reakcija je mešana tokom dodatnih 60 minuta nakon što je dodavanje završeno. Sve ispraljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov je rastvoren u NaOHaq (0.1 M, 100 mL). Rastvor je ispran sa dietil etrom i zakiseljen sa HCl aq. Smeša je ekstrakovana sa hloroformom. Organski ekstrakti su isprani sa slanim rastvorom i osušeni preko natrijum sulfate. Filtracija i uparavanje rastvarača u vakuumu dalo je sirovu polu čvrstu supstacu (9.0 g). Sirov materijal je rastvoren u metanolu (40 mL) i toluenu (20 mL) i rastvor je ohlađen do 0°C. Trimetisilil diazometan rastvor (2M, u heksanima) je dodat dok je postojala žuta boja (∼25 mL). Reakciona smeša je mešana tokom dodatnih 60 minuta na sobnoj temperaturi. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije čist proizvod 3-Benzilamino-2-terc-butoksikarbonilaminopropionska kiselina metil estar (4.09 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C16H24N2O4: 308.3 (M<+>); Pronađeno: 309.2 (M+H<+>).
[0615] 1-Benzil-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar: 3-Benzilamino-2-tercbutoksikarbonilamino-propionska kiselina metil estar (4.01 g, 13.02 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (20 mL) i HCl (4M Dioksan, 40 mL) je dodat. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom30 minuta, nakon čega su sve isparljive supstance uklonjene u vakuumu. Sirov material je izmešan sa para-formaldehidom (390 mg, 13.02 mmol), magnezijum sulfatom (2.6 g), kalijum karbonat (2.6 g) i suspendovane u hloroformu (40 mL). Trietilamin (5.07 mL) je dodat i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Suspenzija je filtirana i isparljive supstance uklonjene u vakuumu. Sirov materijal 1-Benzil-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (3.5 g) je korišćen u sledećem koraku bez dalje analize.
[0616] 1-Benzil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar: Sirov 1-Benzil-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (3.0 g, 13.6 mmol) je dodata kao DMF suspenzija u prethodno izmešan rastvor N-(metilkarbamoil)(L)-valin (2.39 g, 13.6 mmol), HATU (5.16g, 13.6 mmol) i diizopropil etilamin (DIEA, 3.58 g, 27.2 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 60 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijalje prebačen u dhlormetan. Organski sloj je ispran sa vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (0.1M), vodenim rastvorom litijum hlorida (5%), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom i osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i uparavanje rastvarača dalo je sirov materijal. Prečišćavanje pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10% / heksani) dalo je proizvod 1-Benzil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (1.95 g, 5.15 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato za C19H27N3O5: 377.4 (M<+>); Pronađeno: 378.4 (M+H<+>).
[0617] 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1,4-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar4-metil estar: 1-Benzil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (1.0 g, 2.64 mmol) je rastvoren u MeOH (30 mL) na sobnoj temperaturi. Pd na ugljeniku (10%, 350 mg) je dodat i reakcija je mešana u atmosferi vodonika. Nakon tri sata reakciona smeša je filtirana kroz CELITE i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je rastvoren u tetrahidrofuranu (10 mL) i Boc2O (576 mg) i diizo-propil etilamin (340 mg) su dodati i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 60 minuta sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc w10% MeOH / heksani) i dalo je proizvod (0.812 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C17H29N3O7: 387.4 (M<+>); Pronađeno: 388.4 (M+H<+>).
Primer BU
[0618]
[0619] 4-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-imidazolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1,4-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar4-metil estar (460 mg, 1.18 mmol) je rastvoren u THF (3 mL) i MeOH (2 mL). Vodeni sloj LiOH (49.8 mg, 1.18 mmol) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon završene hidrolize, reakcijaje neutralisana sa vodenim HCl (1.18 mL, 1M). Organski rastvarači su uklonjeni u vakuumu i vodena suspenzija je zamrznuta i liofilizovana. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (4.0 mL) i HATU (448 mg, 1.18 mmol) i DIEA (152 mg, 1.18 mmol) su dodati. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pet minuta, nakon čega amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid so (295 mg, 1.18 mmol) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 90 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije blago nečist proizvod 4-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (723 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC24H33BrN4O7:569.4 (M<+>); Pronađeno: 570.4 / 572.4 (M+H<+>).
[0620] 4-(4-Bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-[2-(4-Bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (723 mg) je rastvoren u m-ksilenima (6.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (500 mg, 6.48 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 45 minuta, reakcija je ohlađen do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa 10% MeOH / heksani) da se dobije proizvod 4-(4-Bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (436 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC24H32BrN5O5: 550.4 (M<+>); Pronađeno: 551.2 / 553.2 (M+H<+>).
[0621] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il-bifenil-4-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-(4-Bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (75 mg, 0.136 mmol) je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (67.6 mg, 0.136 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (37.5 mg, 0.272 mmol) i Pd(PPh3)4(15.7 mg, 0.014 mmol) su dodati, praćeno sa DME (3 mL) i vodom (0.6 mL). Smeša je zagrejan u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen putem RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1 % TFA) da se dobije proizvod (55 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H57N9O8: 839.9 (M<+>); Pronađeno: 840.5 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ 7.90-7.81 (m, 10H), 5.58 (m, 1H), 5.43 (m, 1H), 5.25-5.20 (m, 2H), 4.24 (d,J= 7.5Hz, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.86 (m,2H), 3.67 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.46 (d, J= 7.2Hz, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.22-2.10 (m, 5H), 1.53 & 1.44 (s, 9H) 1.04-0.89 (m, 12H).
Primer BV
[0622]
[0623] 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il-bifenil-4-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina metil estar: 4-Metilmorfolin (31 µL, 0.28 mmol) je dodata u suspenziju {1-[2-(5-{4'-[3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-3H,1'H-[2,4']biimidazolil-4-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (41.1 mg, 0.056 mmol) [pripremljen reakcijom 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazo1-4-il}-bifenil-4-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar sa HCl-rastvor] u dihlormetanu (5 mL). Metil hloroformat (16.5 µL, 0.21 mmol) je dodat u dobijeni rastvor. Nakon 20 minuta rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak jeprebačen u tetrahidrofuran (4 mL) i metanol (2 mL) i vodeni sloj natrijum hidroksida (2 N, 1 mL) je dodat. Nakon 2 sata organski rastvarači su uklonjeni u vakuumu i vodena faza je dekantovana. Ostatak je rastvoren u dimetilformamidu (2 mL) i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1 % TFA). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen liofilizacijom da obezbedi 3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-(4'- {2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazo1-4-il}-bifenil-4-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina metil estar (7.5 mg) C41H51N9O8izračunato 797.4 opaženo [M 1]<+>798.4;<1>H (DMSO-d6): δ = 8.08 (s, 1H), 7.83 (m, 8H), 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.29 (s, J = 8.4 Hz,1H), 5.42 (dd, J = 7.6, 3.6 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.08 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.82 (m, 4H), 3.65 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 2.36 (m, 1H), 2.01 (m, 5H), 0.83 (m, 12H).
Primer BW
[0624]
[0625] {1-[1'-Benzoil-4-(4-bromo-fenil)-1,2,4,5,-tetrahidro-1H-[2,4,]biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: 4-(4-Bromo-fenil)-3'-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2',3',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar (55.6 mg, 0.101 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (0.5 mL) i HCl (4M dioksan, 0.5 mL) je dodata. Dobijena suspenzija je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta, nakon čega sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je rastvoren u THF (1 mL) i diizopropil etilamin (26.0 mg, 0.202 mmol) je dodata, praćeno sa benzoil hloridom (15.6 mg, 0.11 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 10 minuta, sav početni aterijal je potrošen. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirova braon čvrsta supstanca {1-[1'-Benzoil-4-(4-bromo-fenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar je korišćen u reakicji kuplovanja bez dalje analize ili prečišćavanja: LCMS-ESI<+>: izračunato zaC26H28BrN5O4: 554.4 (M<+>); Pronađeno: 554.3 / 556.4 (M+H<+>).
{1-[1'-Benzoil-5-(4{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0626] {1-[1'-Benzoil-4-(4-bromo-fenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (sirov, <0.101 mmol) je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (45.1 mg, 0.091 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (27.8 mg, 0.202 mmol) i Pd(PPh3)4(10 mg, 0.009 mmol) su dodati, praćeno sa DME (2.0 mL) i voda (0.4 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod {1-[1'-Benzoil-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1', 2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (20.7 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H53N9O7: 843.9 (M<+>); Pronađeno: 844.3 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.90-7.84 (m, 10H), 7.66-7.52 (m, 5H), 5.68 (m,1H), 5.59 (m, 1H), 5.49 (m, 1H), 5.26 (m, 1H), 4.24 (d,J= 7.5Hz, 1H), 4.11 (m, 2H), 3.86 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 3.46 (d, J= 5.7Hz, 1H), 2.57 (m, 1H), 2.29-2.09 (m, 5H), 1.01-0.85 (m, 12H).
Primer BX
[0627]
[0628] 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-(2,2,2-trifluoro-etil)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar: 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1,4-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar4-metil estar (160 mg, 0.412 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (0.5 mL) i HCl (4M dioksan, 3 mL) je dodata. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 minuta, nakon čega sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.5 mL) i diizopropil etilamin (106 mg, 0.824 mmol) je dodata praćeno sa trifluoroetil triflatom (114.7 mg, 0.494 mmol). Nakon 14 sati dodatni diizopropil etilamin (212 mg, 1.648 mmol) i trifluoroetil triflat (229.4 mg, 0.988 mmol) su dodati. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 40 sati, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću fleš hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-(2,2,2-trifluoro-etil)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (95 mg, 0.257 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC14H23F3N3Os: 369.3 (M<+>); Pronađeno: 369.9 (M<+>).
{1-[5-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-(2,2,2-trifluoro-etil)-imidazolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0629] 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-(2,2,2-triftuoro-etil)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (95 mg, 0.257 mmol) je rastvoren u THF (1.8 mL) i MeOH (0.9 mL). Vodeni sloj LiOH (10.8 mg, 0.208 mmol) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon završene hidrolize, reakcija je neutralisana sa vodeni HCl (1M). Organski rastvarači su uklonjeni u vakuumu i vodena suspenzija je zamrznut i liofilizovan. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanje. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.5 mL) i HATU (97.6 mg, 0.257 mmol) i DIEA (66.3 mg, 0.514 mmol) su dodati. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pet minuta, nakon čega amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid so (64.2 mg, 0.257 mmol) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 60 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije blago nečist proizvod {1-[5-[2-(4-Bromofenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-(2,2,2-triftuoro-etil)-imidazolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (148 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato za C21H26BrF3N4O5: 551.3 (M<+>); Pronađeno: 551.2 / 553.2 (M<+>).
{1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0630] {1-[5-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-(2,2,2-trifluoro-etil)-imidazolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (148 mg, < 257 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (4.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrsta amonijum acetat (150 mg, 1.9 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 60 minuta, reakcija je ohlađen do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen putem RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1 % TFA) da se dobije proizvod {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (15.1 mg) kao TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato zaC21H25BrF3N5O3: 532.3 (M<+>); Pronađeno: 532.1 / 534.2 (M<+>).
[0631] {1-[5-(4{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil-karbaminska kiselina metil estar: {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (13.0 mg, 0.0244 mmol) je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (12.1 mg, 0.0244 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (6.7 mg, 0.048 mmol) i Pd(PPh3)4(2.7 mg, 0.0024 mmol) su dodati, praćeno sa DME (2.0 mL) i vodom (0.4 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (6.1 mg, 0.006 mmol) kao TFA so: LCMS-ESI<+>: izračunato za C41H50F3N9O6: 821.8 (M<+>); Pronađeno: 823.4 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.89-7.82 (m, 10H), 5.39 (dd, J=6.3, 6.3Hz, 1H), 5.25 (m, 1H), 4.78 (d, J=6.9Hz, 1H), 4.24 (d, J=7.5Hz, 1H), 4.10 (m,1H), 4.00 (d, J=7.5Hz, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.65-3.43 (m, 4H), 2.58 (m, 1H), 2.29-2.01 (m, 5H), 1.03-0.89 (m, 12H).
Primer BY
[0632]
[0633] 1-Acetil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar: 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1,4-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar4-metil estar (465 mg, 1.2 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (1 mL) i HC1 (4M dioksan, 3 mL) je dodata. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, nakon čega sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je rastvoren u THF i diizopropil etilamin (154 mg, 1.2 mmol) je dodat, praćeno sa anhidridom sirćetne kiseline (122 mg, 1.2 mmol). Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen silika gel hromatografijom (eluent: DCM / MeOH) da se dobije proizvod 1-Acetil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (273 mg, 0.829 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato za C14H23N3O6: 329.4 (M<+>); Pronađeno: 330.4 (M+H<+>).
(1-{3-Acetil-5-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-imidazolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0634] 1-Acetil-3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (273 mg, 0.829 mmol) je rastvoren u THF (1.8 mL) i MeOH (1.2 mL). Vodeni sloj LiOH (34.8 mg, 0.829 mmol) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon završene hidrolize, reakcija je neutralisana sa vodeni HCl (0.83 mL, 1M). Organski rastvarači su uklonjeni u vakuumu i vodena suspenzija je zamrznuta i liofilizovana. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (3 mL) i HATU (315 mg, 0.829 mmol) i DIEA (106 mg, 0.829 mmol) su dodati. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi pet minuta, nakon čega amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid so (207 mg, 0.829 mmol) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 120 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DCM. Organski sloj je ispran sa vodenim HCl (0.5 M), vodenim ratsvorom litijum hlorida (5%), slanim rastvorom i osušen preko natrijum sulfate. Filtracija i uparavanje rastvarača dalo je sirov proizvod koji je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (1-{3-Acetil-5-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-imidazolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (203 mg, 0.397 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato za C21H27BrN4O6: 511.4 (M<+>); Pronađeno: 511.3 / 513.2 (M+H<+>).
{1-[1'-Acetil-4-(4-bromo-fenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0635] (1- {3-Acetil-5-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-imidazolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (203 mg, 0.397 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (4 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrsta amonijum acetat (200 mg, 2.58 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 120 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa 10% MeOH/heksani) da se dobije proizvod {1-[1'-Acetil-4-(4-bromofenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (162 mg, 0.329 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC21H26BrN5O4: 492.4 (M<+>); Pronađeno: 492.3 / 494.3 (M+H<+>).
{1-[1'Acetil-5-(4{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il-bifenil-4-il)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0636] {1-[1'-Acetil-4-(4-bromo-fenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (150 mg, 0.304 mmol) je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (151 mg, 0.304 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (83.9 mg, 0.608 mmol) i Pd(PPh3)4(34 mg, 0.030 mmol) su dodati, praćeno sa DME (8 mL) i vodom (2 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod {1-[1'-Acetil-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1', 2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (69.8 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato za C41H51N9O7: 781.9 (M<+>); Pronađeno: 782.5 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.91-7.82 (m, 10H), 5.68 (m,1H), 5.59-5.37 (m, 2H), 5.25 (m, 1H), 4.34 (m,1H), 4.24 (d, J= 7.5Hz, 1H), 4.11-4.02 (m, 2H), 3.88 (m, 1H), 3.66 (s, 6H), 3.47 (d, J= 7.2Hz, 1H), 2.60 (m,1H), 2.29-2.10 (m, 8H), 1.05-0.89 (m, 12H).
Primer BZ
[0637]
[0638] {1-[1'-Metansulfonil-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-Metansulfonil-1,2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (62.9 mg, 0.119 mmol) [pripremljen kao što je opisano za sintezu {1-[1'-Acetil-4-(4-bromofenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil (Primer BY)]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar supstituisanjem anhidrida sirćetne kiseline sa metil sulfonil hlorid] je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (54.6 mg, 0.110 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (33.1 mg, 0.240 mmol) i Pd(PPh3)4(12.7 mg, 0.011 mmol) su dodati, praćeno sa DME (2.0 mL) i voda (0.4 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (20.1 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H51N9O8S: 817.9 (M<+>); Pronađeno: 818.6 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.90-7.81 (m, 10H), 5.69 (d, J=7.5Hz, 1H), 5.48 (dd, J=6.9, 6.9Hz, 1H), 5.27 (dd, J=8.1, 8.1Hz, 1H), 5.17 (d, J=8.4Hz, 1H), 4.41 (dd, J=12.0, 7.8Hz, 1H), 4.24 (d, J=7.2Hz, 1H), 4.11 (m, 2H), 4.00 (d, J=8.1Hz, 1H), 3.87 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.57 (m, 1H), 2.29-1.99 (m, 5H), 1.03-0.89 (m, 12H).
Primer CA
[0639]
[0640] {1-[1'-Benzensulfonil-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[1'-Benzenesulfonil-4-(4-bromo-fenil)-1,2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (63.1 mg, 106.9 mmol) [pripremljen kao što je opisano za sintezu {1-[1'-Acetil-4-(4-bromofenil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer BY)] supstituisanjem anhidrida sirćetne kiseline sa fenil sulfonil hlorid] je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (53.1 mg, 106.9 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (29.2 mg, 0.212 mmol) i Pd(PPh3)4(12.2 mg, 0.0106 mmol) su dodati, praćeno sa DME (2.5 mL) i voda (0.8 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod {1-[1'-Benzenesulfonil-5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (27.9 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC45H53N9O8S: 880.2 (M<+>); Pronađeno: 881.5 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300MHz, (MeOH-d4) δ: 8.01 (d, J=7.5Hz, 2H), 7.90-7.76 (m, 11H), 7.65 (t, J=7.8Hz, 2H), 5.59 (d, J=8.7Hz, 1H), 5.25 (dd, J=7.5, 7.5Hz, 1H), 5.19 (d, J=8.7Hz, 1H), 4.67 (dd, J=7.5, 7.5Hz, 1H), 4.32-4.22 (m, 2H), 4.08 (m, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.44 (d, J= 6.6Hz, 1H), 2.57 (m, 1H), 2.29-1.99 (m, 5H), 0.99-0.86 (m, 12H).
Primer CB
[0641]
[0642] 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-fenil-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar: 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-imidazolidin-1,4-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar4-metil estar (0.20 g, 0.515 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (1.0 mL) i HCl (4M dioksan, 1 mL) je dodata. Dobijena suspenzija je mešan na sobnoj temperaturi tokom 60 minuta, nakon čega sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je kombinovan sa fenil boronskom kiselinom (188 mg, 1.545 mmol) i DCM (15 mL) je dodata. Trietilamin (1.2 mL, 8.89 mmol) je dodat, praćeno sa bakar(II) acetatom i molekularnim sitima 4 Å. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 24 sata, reakcija je kvenčovana sa vodenim rastvorom amonijum hidroksida (10%) i organski sloj je izolovan. Organski sloj je ispran sa vodenim HCl rastvorom (0.5 M), slanim rastvorom, i osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i uparavanje dali su sirov materiajl. Prečišćavanje putem fleš hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) dalo je željeni proizvod 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-fenilimidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (51.0 mg, 0.14 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC18H25N3O5: 363.4 (M<+>); Pronađeno: 364.4 (M+H<+>).
[0643] (1-{5-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-3-fenil-imidazolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 3-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1-fenil-imidazolidin-4-karboksilna kiselina metil estar (51 mg, 0.14 mmol) je rastvoren u THF (1.2 mL) i MeOH (0.8 mL). Vodeni sloj LiOH (6.0 mg, 0.14 mmol) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon završene hidrolize, reakcija je neutralisana sa vodenim HCl (1M). Organski rastvarači je uklonjen u vakuumu i vodena suspenzija je zamrznuta i liofilizovana. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanje. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.5 mL) i HATU (54.3 mg, 0.14 mmol) i DIEA (36.9 mg, 0.28 mmol) su dodati. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi pet minuta, nakon čega amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid so (35.7 mg, 0.14 mmol) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 10 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije blago nečist proizvod (95 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC25H29BrN4O5: 545.4 (M<+>); Pronađeno: 545.2 / 547.4 (M+H<+>).
[0644] {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-fenil-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: (1-{5-[2-(4-Bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-3-fenil-imidazolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (90 mg) je rastvoren u m-ksilenima (3 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrsta amonijum acetat (100 mg, 1.29 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 120 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-fenil-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}karbaminska kiselina metil estar (40.2 mg, 0.0764 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC25H28BrN5O3: 526.4 (M<+>); Pronađeno: 526.4 / 528.3 (M+H<+>).
{1-[5-(4{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1'-fenil-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar:
[0645] {1-[4-(4-Bromo-fenil)-1'-fenil-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (40 mg, 0.076 mmol) je kombinovan sa [2-Metil-1-(2-{4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (37.6 mg, 0.076 mmol) u atmosferi argona. Kalijum karbonat (20.9 mg, 0.152 mmol) i Pd(PPh3)4(8.7 mg, 0.0076 mmol) su dodati, praćeno sa DME (1.8 mL) i vodom (0.3 mL). Smeša je zagrejana u mikrotalasnim uslovima tokom 20 minuta na 120 °C. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u DMF i prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod {1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -bifenil-4-il)-1'-fenil-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (5.4 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC45H53N9O6: 815.9 (M<+>); Pronađeno: 816.5(M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ 7.89-7.86 (m, 10H), 7.35 (m, 2H), 7.18 (m, 1H), 6.94 (m, 2H), 5.67 (m, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.25 (m, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.31-4.08 (m, 3H), 4.01-3.79 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 2.58 (m, 1H), 2.29-1.99 (m, 5H), 0.99-0.89 (m, 12H).
Primer CD
[0646]
[0647] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: N-(Metilkarbamoil)(L)-valin (2.0 g, 11.4 mmol) je rastvoren u DMF (15 mL) na sobnoj temperaturi. HATU (4.34 g, 11.4 mmol) i diizopropil etilamin (1.47 g, 11.4 mmol) su dodati i mešanje je nastavljeno. Nakon 10 minuta, čvrst piperazin-1,3-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (2.62 g, 11.4 mmol) je dodata. U dobijenu suspenziju je dodat DMF (10 mL) i diizopropil etilamin (1.47 g, 11.4 mmol). Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 min, HATU (4.34 g, 11.4 mmol) i diizopropil etilamin (1.47 g, 11.4 mmol) su dodati u dobijeni žuti rastvor praćeno sa amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid soli (2.85 g, 11.4 mmol). Nakon 30 minuta sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prebačen u EtOAc i organski sloj je ispran sa vodenim HCl (1 M), vodenim LiCl (5%), vodenim rastvorom bikarbonata, slanim rastvorom i osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i uparavanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću fleš hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10%/ heksani) da se dobije proizvod 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (3.62 g): LCMS-ESI<+>: izračunato za C25H35BrN4O7: 583.4 (M<+>); Pronađeno: 583.2 / 585.2 (M+H<+>).
3-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0648] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.0 g, 3.43 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (18 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (1.70 g, 22.0 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 120 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10% / heksani) da se dobije proizvod 3-[4-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (674 mg, 1.19 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC25H34BrN5O5: 564.5 (M<+>); Pronađeno: 564.2 / 566.2 (M+H<+>).
Primer CE
[0649]
[0650] {1-[2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: 3-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (400 mg, 0.686 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (1.0 mL) i HCl (4M dioksan, 2 mL) je dodata. Dobijena suspenzija je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta, nakon čega sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.0 mL) / THF (1.0 mL) i diizopropil etilamin (88.5 mg, 0.686 mmol) je dodat praćeno sa trifluoroetil triflatom (114.7 mg, 0.494 mmol). Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 14 sati, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen pomoću fleš hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10% / heksani) da se dobije proizvod {1-[2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (192 mg, 0.34 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H28BrF3N4O5: 565.3 (M<+>); Pronađeno: 565.2 / 567.2 (M+H<+>).
[0651] {1-[2-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-4-(2,2,2-triftuoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (192 mg, 0.34 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (2 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (128 mg, 1.66 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 110 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10%/heksani) da se dobije proizvod {1-[2-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2,2,2-triftuoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (98.7 mg, 0.181 mmol): LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H27BrF3N5O3: 546.4 (M<+>); Pronađeno: 546.0 / 548.2 (M+H<+>).
[0652] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (98.7 mg, 0.181 mmol) je kombinovan sa (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (71.2 mg, 0.181 mmol) i Pd(PPh3)4(21.5 mg, 0.018 mmol) u atmosferi argona. DMF (degaziran sa Argonom) je dodat praćeno sa trietilaminom (181 mg, 1.8 mmol) i bakar(I) jodidom (3.5 mg, 0.018 mmol). Smeša je zagrejana na 80 °C. Nakon 20 minuta, isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je polu--prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent EtOAc sa MeOH 10% / heksani) i dalje prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il} -Pirolidin-1 -karbonil)-2-metil-propil] -karbaminska kiselina metil estar (12.4 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC44H52F3N9O6: 859.9 (M<+>); Pronađeno: 860.5 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.91-7.68 (m, 10H), 6.06 (m, 2H), 5.24 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.23 (d, J=7.8Hz, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.49-3.45 (m, 2H), 3.15-3.02 (m, 3H), 2.77 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.29-2.01 (m, 5H), 1.07-0.83 (m, 12H).
Primer CF
[0653]
[0654] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4N-(2,2,2-trifluoroetil)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: {1-[4-(4-Bromofenil)-1'-(2,2,2-trifluoro-etil)-1',2',4',5'-tetrahidro-1H-[2,4']biimidazolil-3'-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (55.0 mg, 0.103 mmol) je kombinovan sa (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (37.5 mg, 0.095 mmol) i PdCl2(PPh3)2(7.0 mg, 0.010 mmol) u atmosferi argona. DMF (2.0 mL, degaziran sa argonom) je dodat praćeno sa trietilamineom(104 mg, 1.03 mmol) i bakar(I) jodidom (1.9 mg, 0.01 mmol). Smeša je zagrejana na 80 °C. Nakon 240 minuta, isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je polu-prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (eluent EtOAc sa MeOH 10% / heksani) i salje prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4N-(2,2,2-trifluoro-etil)-pirolidin-2-il]-1H-imidazo 1-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (4.9 mg): LCMS-ESI<+>: izračunato zaC43H50F3N9O6: 845.9 (M<+>); Pronađeno: 846.4 (M+H<+>);<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ: 7.91-7.68 (m, 10H), 5.35 (dd, J=6.3, 6.3Hz, 1H), 5.24 (m, 1H), 4.76 (d, J=6.9Hz, 1H), 4.23 (d, J=7.5Hz, 1H), 4.09 (m,1H), 4.00 (d, J=7.8Hz, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.66 (s, 6H), 3.65-3.42 (m, 4H), 2.56 (m, 1H), 2.29-2.06 (m, 5H), 0.99-0.88 (m, 12H).
Primer CG
[0655]
[0656] 2-(4-{4-[(Pirolidin-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar)-fenilkarbamoil}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-Amino-N-(4-aminofenil)-benzamid (3.00 g) i Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar(6.55 g) su rastvoreni u DCM (90 mL), i 1-etoksikarbonil-1,2-dihidrohinolin (7.88 g) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 17 sati i evaporisao pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u etil acetatu, formirajući talog, koji je sakupljen vakuumskom filtracijom i osušen pod vakuumom, dajući 2-(4-{4-[(Pirolidin-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar)-fenilkarbamoil}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (7.64 g, 93%) kao belu čvrstu supstancu.
[0657] Pirolidin-2-karboksilna-kiselina{4-[4-(pirolidin-2'-il-karbonil-amino)-fenilkarbamoil]-fenil}-amid: 2-(4-{4-[(Pirolidin-1'-karboksilna kiselina terc-butil estar)-fenilkarbamoil}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.01 g) je rastvoren u DCM (46 mL), i trifluorosirćetnoj kiselini (6 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3.5 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supsatanca je rastvorena u DCM i ekstrakovana dva puta sa zasićenim NaHCO3rastvorom. Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, isprana sa etil acetatom, i osušena pod vakuumom, dajući Pirolidin-2-karboksilna kiselina {4-[4-(pirolidin-2'-il-karbonil-amino)-fenilkarbamoil]-fenil}-amid (1.18 g, 87%) kao belu čvrstu supstancu.
[0658] (1-{2-[4-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-fenilkarbamoil)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Pirolidin-2-karboksilna kiselina {4-[4-(pirolidin-2'-ilkarbonilamino)-fenilkarbamoil]-fenil}-amid (0.305 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.277 g), i HATU (0.621 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (8 mL), i diizopropiletilamin (0.496 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 1 sata i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM i prečišćeno pomoću hromatografije (0-20% etil acetat:heksan), dajući (1-{2-[4-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-fenilkarbamoil)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.324 g, 58%) kao belu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ:10.3 (s, 1H), 10.1 (s, 1H), 10.0 (s, 1H), 7.9 (d, J=9.9, 2H), 7.7 (m, 4H), 7.5 (d, J=9.9, 2H), 7.3 (d, J=9.9, 2H), 4.5 (m, 2H), 4.0 (m, 2H), 3.8 (m, 2H), 3.6 (m, 2H), 3.5 (s, 6H), 2.2 (m, 2H), 1.9 (m, 8H), 0.9 (m, 12H); MS (ESI) m/z 736 [M H]<+>.
Primer CH
[0659]
[0660] 2-[4-(2-{4-[(1-karboksilna kiselina terc-butil estar-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenil}-etil)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4,4'-Etilenedianilin (2.98 g) i Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (7.09 g) su rastvoreni u DCM (90 mL), i 1-etoksikarbonil-1,2-dihidrohinolin (8.38 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 sati i evaporisao pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u etil acetatu, formirajući talog, koji je sakupljen vakuumskom filtracijom i osušen pod vakuumom, dajući 2-[4-(2-{4-[(1-karboksilna kiselina terc-butil estar-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenil}-etil)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (8.30 g, 97%) kao belu čvrstu supstancu.
[0661] Pirolidin-2-karboksilna kiselina (4-{2-[4-(Pirolidinkarbonil-amino)-fenil]-etil}-fenil)-amid: 2-[4-(2-{4-[(1-karboksilna kiselina terc-butil estar-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenil}-etil)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (3.01 g) je rastvoren u DCM (45 mL), i trifluorosirćetna kiselina (15 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešan na ambijentalnoj temperaturi tokom 4 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i ekstrakovana dva puta sa zasićen NaHCO3rastvor. Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, ispran sa etil acetate, i osušena pod vakuumom, dajući Pirolidin-2-karboksilna kiselina (4-{2-[4-(Pirolidinkarbonil-amino)-fenil]-etil}-fenil)-amid (1.86 g, 93%) kao svetlo sivu čvrstu supstancu.
[0662] [1-(2-{4-[2-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-fenil)-etil]-fenilkarbamoil}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Pirolidin-2-karboksilna kiselina (4-{2-[4-(Pirolidinkarbonil-amino)-fenil]-etil}-fenil)-amid (0.299 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.296 g), i HATU (0.648 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (5 mL), i diizopropiletilamin (0.513 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 1 sata i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM i prečišćeno hromatografijom (0-100% etil acetat:heksan), dajući [1-(2-{4-[2-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3 -metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil] -amino}-fenil)-etil]-fenilkarbamoil}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.254 g, 48%) kao belu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 9.9 (s, 2H), 8.2 (broad s, 2H), 7.4 (d, J=9.9, 4H), 7.3 (d, J=9.9, 2H), 7.1 (d, J=9.9, 4H), 4.4 (m, 2H), 4.0 (t, J=7.5, 2H), 3.8 (m, 2H), 3.6 (m, 8H), 3.5 (s, 6H), 3.1 (m, 8H), 2.8 (s, 4H), 2.1 (m, 2H), 1.9 (m, 8H), 0.9 (m, 12H); MS (ESI) m/z 721 [M H]<+>.
Primer CI
[0663]
[0664] 2-(4-{4-[(1-Acetil-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenilazo}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-(4-aminofenilazo)-fenilamine (3.02 g) i Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (7.00 g) su rastvoreni u DCM (90 mL), i 1-etoksikarbonil-1,2-dihidrohinolin (8.45 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 19 sati i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u etil acetatu, formirjući talog, koji je sakupljen vakuumskom filtracijom i osušen pod vakuumom, dajući 2-(4-{4-[(1-karboksilna kiselina terc-butil estar-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenilazo}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (9.28 g) kao braon čvrstu supstancu.
[0665] Pirolidin-2-karboksilna kiselina {4-[4-(Pirolidinkarbonil-amino)-fenilazo]-fenil}-amid: 2-(4-{4-[(1-karboksilna kiselina terc-butil estar-Pirolidin-2-karbonil)-amino]-fenilazo}-fenilkarbamoil)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (9.28 g, sirov) je rastvoren u DCM (75 mL), i trifluorosirćetna kiselina (25 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 sati i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i ekstrakovana dva puta sa zasićenim NaHCO3rastvorom. Rastvor je evaporisao pod vakuumom, dajući Pirolidin-2-karboksilna kiselina {4-[4-(Pirolidinkarbonilamino)-fenilazo]-fenil}-amid (6.18 g, sirov) kao crvenu čvrstu supstancu.
[0666] (1-{-[4-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-fenilazo)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Pirolidin-2-karboksilna kiselina {4-[4-(Pirolidinkarbonil-amino)-fenilazo]-fenil}-amid (0.302 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.284 g), i HATU (0.643 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (5 mL), i N-metilmorfolin (0.324 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2 sati i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM i prečišćeno hromatografijom (0-100% etil acetat:heksan), dajući (1-{2-[4-(4-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-fenilazo)-fenilkarbamoil]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.158 g, 30%) kao žutu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 10.4 (s, 2H), 7.8.(m, 8H), 7.4 (d, J=9.9, 2H), 4.5 (m, 2H), 4.0 (t, J=7.5, 2H), 3.8 (m, 2H), 3.6 (m, 8H), 3.5 (s, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.0 (m, 8H), 0.9 (m, 12H); MS (ESI) m/z 721 [M H]<+>.
Primer CJ
[0667]
[0668] 4-Bromo-naftalen-1-karbonil hlorid: 4-Bromonaftalen-1-karboksilna kiselina (9.80 g) je suspendovan u tionil hloridu (80 mL) i mešana je na 40°C tokom 16 sati i evaporisaola je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (20 mL) i evaporisala je pod vakuumom, dajući 4-bromonaftalen-1-karbonil hlorid (13.8 g, sirov) kao belu čvrstu supstancu.
[0669] 1-(4-Bromonaftalen-1-il)-2-diazoetanon: 4-Bromo-naftalen-1-karbonil hlorid (13.8 g) je rastvoren u dihlormetanu (130 mL) i ohlađen je do 0°C. TMS diazometan rastvor (40 mL, 2 M u DCM) je dodat, i ledeno kupatilo je uklonjeno. Reakciona smeša je mešana tokom 18 sati i evaporisala je pod vakuumom, dajući 1-(4-bromonaftalen-1-il)-2-diazoetanon (13.8 g, sirov) kao braon ulje.
[0670] 2-Bromo-1-(4-bromo-naftalen-1-il)-etanon: 1-(4-Bromonaftalen-1-il)-2-diazoetanon (13.8 g) je rastvoren u etil acetau (200 mL), i rastvor bromovodonične kiseline (8.4 mL, 5.7 M u sirćetnoj kiselini) je dodat na 0°C. Reakciona smeša je mešana 15 minuta, NaHCO3rastvor (100 mL) je dodat, i smeša je mešana 10 minuta. Rastvor etil acetata je ekstrakovan dva puta sa NaHCO3rastvorom (50 mL), jednom sa slanim rastvorom (50 mL), i evaporisan pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM i prečišćeno hromatografijom (0-20% etil acetat:heksan), dajući 2-bromo-1-(4-bromo-naftalen-1-il)-etanon (6.67 g, 51 %) kao mrkožutu čvrstu supstancu.
[0671] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromonaftalen-1-il)-2-okso-etil]estar 1-terc-butil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar(4.85 g) je rastvoren u acetonitrilu (65 mL), i trietilamin (3.09 mL) je dodat. Rastvor 2-bromo-1-(4-bromonaftalen-1-il)-etanona (6.60 g) u acetonitrilu (35 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana 90 minuta i evaporisana je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM (50 mL), ekstrakovano jednom sa vodom (20 mL) i jednom sa NaHCO3rastvorom (20 mL), i evaporisano je pod vakuumom u koncentrovanu tečnost. Rastvor je prečišćen hromatografijom (0-50% etil acetat:heksan) i evaporisao pod vakuumom, dajući pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromonaftalen-1-il)-2-okso-etil]estar 1-terc-butil estar (8.95 g, 95%) kao mrkožutu čvrstu supstancu.
[0672] 2-[5-(4-Bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromonaftalen-1-il)-2-okso-etil]estar 1-terc-butil estar (8.80 g) i ammonium acetate (7.51 g) su suspendovani u ksilenima. Reakciona smeša je mešan na 140°C tokom 15 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetate (50 mL) i ekstrakovana dva puta sa voda (20 mL) i jednom sa slanim rastvorom (20 mL). Ulje je rastvoreno u DCM, prečišćeno hromatografijom (0-50% etil acetat:heksani), i evaporisao pod vakuumom, dajući 2-[5-(4-bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.34 g, 52%) kao mrkožutu čvrstu supstancu.
[0673] 5-(4-Bromo-naftalen-1-il)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol: 2-[5-(4-Bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.00 g) je rastvoren u DCM (12 mL), i trifluorosirćetna kiselina (4 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (10 mL) i ekstrakovana sa zasićenim NaHCO3rastvorom (30 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, isprana sa DCM, i osušena pod vakuumom, dajući 5-(4-bromo-naftalen-1-il)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol (0.940 g, sirov) kao prljavo belu čvrstu supstancu.
[0674] (1-{2-[5-(4-Bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: 5-(4-bromo-naftalen-1-il)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol (0.925 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.441 g), i HATU (1.00 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (15 mL), i N-metilmorfolin (0.497 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 30 minuta i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DCM, prečišćeno hromatografijom (0-100% etil acetat:heksani), i evaporisano pod vakuumom, dajući (1-{2-[5-(4-bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.814 g, 72%) kao prljavo belu čvrstu supstancu.
[0675] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-1-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-naftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.115 g), [2-Metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.111 g), i NaHCO3(0.0623 g) su rastvoreni u smeša 1,2-dimetoksietanu (3 mL) i vodi (1 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0114 g) je dodata. Reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 16 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu (10 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom (10 mL) i jednom sa slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je uparen, rastvoren u DMF, prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovan, dajući [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-1-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.037 g, 21%) kao bela čvrsta supstanca:<1>H-NMR: 300 MHz, (CHCl3-d1) δ: 8.9 (m, 1H), 7.6 (m, 2H), 7.4 (m, 5H), 7.0 (m, 2H), 6.8 (m, 2H), 5.8 (m, 2H), 5.3 (m, 2H), 4.3 (m, 2H), 4.0 (m, 4H), 3.6 (s, 6H), 2.4 (m, 6H), 2.0 (m, 6H), 0.8 (m, 12H); MS (ESI) m/z 789 [M H]<+>.
Primer CJ
[0676]
[0677] 2,6-(bis-pinokolato) Diboranonaftalen: 2,6-Dibromonaftalen (10.2 g), bis-(pinocolato)dibor (37.3 g), i kalijum acetat (18.0 g) su rastvoreni u 1,4-dioksan (250 mL), i rastvor je degaziran sa azotom. Pd(PPh3)4(3.13 g) je dodata, i reakciona smeša je mešana na 80° tokom 20 sati. Suspenzija je vakuumski filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana sa etil acetatom, dajući 2,6-(bis-pinocolato)diboranonaftalen (7.71 g, 58%) kao žutu čvrstu supstancu.
[0678] 2-(5-{6-[2-(1'-karboksilna kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2,6-(bispinocolato)diboranonaftalen (0.501 g), 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.885 g), i NaHCO3(0.562 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietandihlorometana (15 mL) i vode (5 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0935 g) je dodata. Reakciona smeša je mešan na 90°C tokom 16 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (20 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom i jednom sa slanim rastvorom. Rastvor je uparen, ponovo kristalisan iz etil acetata, i osušen pod vakuumom, dajući 2-(5-{6-[2-(1'-karboksilna kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il)-3H-imidazo1-4-il]-naftalen-2-il}1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.365 g, 46%) kao belu čvrstu supstancu.
[0679] 2,6-bis(2-Pirolidin-2-il-1H-imidazol)naftalen: 2-(5-{6-[2-(1'-karboksilna kiselina tercbutil estar-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.365 g) je rastvoren u dihlormetanu (3 mL), i trifluorosirćetna kiselina (1 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 27 sati, zagrejana do 40°C tokom 3 sata, i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (10 mL) i ekstrakovan sa zasićenim NaHCO3rastvor (30 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, isprana sa DCM, i osušena pod vakuumom, dajući 2,6-bis(2-pirolidin-2-il-1H-imidazol)naftalen (0.180 g, 74%) kao žutu čvrstu supstancu.
[0680] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2,6-bis(2-Pirolidin-2-il-1H-imidazol)naftalen (0.170 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.168 g), i HATU (0.378 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (3 mL), i N-metilmorfolin (0.188 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešan na ambijentalnoj temperaturi tokom 30 minuta i evaporisao pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u DMF i prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda) i liofilizovano, dajući (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.051 g, 17%) kao belu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.3 (s, 2H), 8.1 (s, 2H), 8.0 (m, 4H), 7.3 (d, J=11.2, 2H), 5.1 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 3.9 (m, 4H), 3.5 (s, 6H), 2.4 (m, 1H), 2.0 (m, 5H), 0.8 (m, 12H); MS (ESI) m/z 713 [M H]<+>.
Primer CK
[0681]
[0682] (1-{2-[5-(4-Bromonaftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(4-Bromonaftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (3.80 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.57 g), i HATU (5.88 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (85 mL), i N-metilmorfolin (2.86 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 22 sata i evaporisana pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u dihlormetanu, prečišćeno hromatografijom (0-50% etil acetat:heksani), i evaporisalo pod vakuumom, dajući (1-{2-[5-(4-bromonaftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (6.10 g, sirov) kao mrkožut čvrstu supstancu.
[0683] {1-[2-(5-{4-[2-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-vinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromonaftalen-1-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.01 g) je rastvoren u anhidrovanom DMF (13 mL), i (E)-bis(tributilstanil)eten (0.585 mL) je dodat. Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0401 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 17 sati i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF, prečišćena pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovana, dajući {1-[2-(5-{4-[2-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}- fenil)-vinil]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (25 mg, 1.5%) kao belu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.0 (s, 2H), 7.8 (m, 8H), 7.4 (s, 2H), 7.3 (d, J=9.9, 2H), 5.1 (t, J=6.9, 2H), 4.1 (t, J=6.9, 2H), 3.8 (m, 4H), 3.8 (m, 2H), 3.5 (s, 6H), 2.4 (m, 2H), 2.0 (m, 6H), 0.8 (m, 12H); MS (ESI) m/z 765 [M H]<+>.
Primer CL
[0684]
[0685] 6-Bromo-naftalen-2-karbonil hlorid: 6-Bromonaftalen-2-karboksilna kiselina (25.1 g) je suspendovana u tionil hloridu (200 mL), mešana na 60°C tokom 16 sati i evaporisao pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlormetanu (50 mL) i evaporisala je pod vakuumom, dajući 6-bromonaftalen-2-karbonil hlorid (27.0 g, sirov) kao belu čvrstu supstancu.
[0686] 1-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-diazo-etanon: 6-Bromonaftalen-2-karbonil hlorid (27.0 g, sirov) je rastvoren u dihlormetanu (330 mL) i ohlađen do 0°C. TMS diazometan rastvor (100 mL, 2 M u DCM) je dodaa, i ledeno kupatilo je uklonjeno. Reakciona smeša je mešana tokom 16 sati i evaporisala je pod vakuumom, dajući 1-(6-bromonaftalen-2-il)-2-diazoetanon (34.7 g, sirov) kao narandžastu čvrstu supstancu.
[0687] 2-Bromo-1-(6-bromo-naftalen-2-il)-etanon: 1-(6-Bromonaftalen-2-il)-2-diazoetanon (34.7 g) su rastvoreni u etil acetatu (500 mL), i rastvor bromovodonične kiseline (21.1 mL, 5.7 M u sirćetnoj kiselini) je dodat na 0°C. Reakciona smeša je mešana 3 sata, NaHCO3rastvor (200 mL) je dodat, i smeša je mešana 10 minuta. Rastvor etil acetata je ekstrakovan dva puta sa NaHCO3rastvorom (50 mL), jednom sa slanim rastvorom (50 mL), i evaporisao je pod vakuumom, dajući 2-bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)-etanon (33.0 g, sirov) kao mrkožutu čvrstu supstancu.
[0688] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (24.0 g) je rastvoren u acetonitrilu (330 mL), i trietilamin (15.6 mL) je dodat. Rastvor 2-bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)-etanon (33.0 g) u acetonitrilu (170 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešan tokom 3 dana i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u dihlormetanu (100 mL), ekstrakovano sa vodom (50 mL) i sa NaHCO3rastvorom (50 mL), i evaporisalo je pod vakuumom u koncentrovanu tečnost. Rastvor je prečišćen hromatografijom (0-30% etil acetat:heksan) i evaporisao pod vakuumom, dajući Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (39.2 g, 84%) kao mrkožutu čvrstu supstancu.
[0689] 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromonaftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (39.0 g) i amonijum acetat (40.1 g) su suspendovani u ksilenima (420 mL). Reakciona smeša je mešana na 140°C tokom 15 sati i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlormetanu (300 mL), ekstrakovana dva puta sa vodom (50 mL) i jednom sa slanim rastvorom (50 mL), i evaporisala je pod vakuumom, dajući 2-[5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (30.3 g, 81%) kao prljavo belu čvrstu supstancu.
[0690] 5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol: 2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (5.03 g) je rastvoren u dihlormetanu (75 mL), i trifluorosirćetna kiselina (25 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 5 sati i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlormetanu (50 mL) i ekstrakovana sa zasićenim NaHCO3rastvorom (50 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, isprana sa dihlormetanom, i osušena pod vakuumom, dajući 5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol (98%) kao prljavo belu čvrstu supstancu.
[0691] (1-{2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: 5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-pirolidin-2-il-1Himidazol (3.80 g), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.21 g), i HATU (5.06 g) su rastvoreni u anhidrovanom DMF (75 mL), i N-metilmorfolin (2.68 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 16 sati i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u dihlormetanu, prečišćeno hromatografijom (0-100% etil acetat:heksani), i evaporisao pod vakuumom, dajući (1-{2-[5-(6-bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.814 g, 72%) kao prljavo belu čvrstu supstancu.
[0692] [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3.02 g), bis-(pinocolato)diboran (3.18 g), i kalijum acetat (1.52 g) su rastvoreni u 1,4-dioksanu (40 mL), i rastvor je degaziran sa azotom. Pd(PPh3)4(0.285 g) je dodat, i reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 20 sati i evaporisala je pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlormetanu (50 mL), ekstrakovana sa zasićenim NaHCO3rastvorom (50 mL), i evaporisala je pod vakuumom. Ulje je rastvoreno u dihlormetanu, prečišćeno hromatografijom (0-10% izopropanol:dihlormetan), i evaporisalo pod vakuumom, dajući [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (3.65 g, sirov) kao žutu čvrstu supstancu.
[0693] (1-{2-[5-(6'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[2,2']binaftalenil-6-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.174 g), [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.202 g), i NaHCO3(0.108 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (6 mL) i vode (2 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0176 g) je dodata. Reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 16 sati i evaporisala pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu (10 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom (10 mL) i jednom sa slanim rastvorom (10 mL). Rastvor je uparen, rastvoren u DMF, prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovan, dajući (1-{2-[5-(6'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[2,2']binaftalenil-6-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.050 g, 16%) kao belu čvrstu supstancu:<1>H-NMR: 300 MHz, (MeOH-d4) δ 8.3 (m, 4H), 8.1 (m, 6H), 8.0 (s, 2H), 7.8 (d, J=9.4, 2H), 5.3 (m, 2H), 4.3 (d, J=9.0, 2H), 4.1 (m, 2H), 3.9 (m, 2H), 3.7 (s, 6H), 2.6 (m, 2H), 2.2 (m, 6H), 0.9 (m, 12H); MS (ESI) m/z 839 [M H]<+>.
Primer CM
[0694]
[0695] 2-[5-(3'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (2.14 g, 5.01 mmol), (3-terc-Butoksikarbonilaminofenil)-boronska kiselina (1.19 g, 5.01 mmol), Pd(PPh3)4(289 mg, 0.251 mmol) i K2CO3(5.5 mL 2 M vodenog rastvora, 11.02 mmol) su kombinovani sa 1,2-dimetoksiettanom (20 mL). Suspenzija je mešana dok je N2ubačen kroz rastvor tokom 24 min. Refluksni kondenzator je prikačen i suspenzija je zagrejana do 85°C tokom 17 sati. Zatim je ohlađena, razblažena sa etil acetatom (150 mL), isprana sa voda i slanim rastvorom, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (25% do 50% EtOAc/heksani) da obezbedi 2-[5-(3'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (1.73 g, 64%).
[0696] Pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-3-il]-amid: 2-[5-(3'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (1.75 g, 3.25 mmol) je rastvoren u metanolu (40 mL) i koncentrovana HCl (2 mL) je dodata. Rastvor je mešan na 50°C tokom 19 sati pre nego što je koncentrovan do zapremine od 10 mL, sipan u zasićen NaHCO3(60 mL). Organska faza je ekstrakovana 3 puta sa 30 mL dihlormetana. Kombinovane organske faze su osušene sa natrijum sulfatom i koncentrovane. Deo dobijenog ostatka (515 mg, 1.17 mmol) je rastvoren u THF (2 mL). U odvojenom sudu, etilhloroformat (0.134 mL, 1.41 mmol) je dodat u kapima u mešani 0°C rastvor Boc-Pro-OH (303 mg, 1.41 mmol) i trietilamina (0.197 mL, 1.41 mmol) u THF (4 mL). Nakon 10 minuta, rastvor bifenil jedinjenja je dodat kanilom praćeno ispiranjem sa 2 mL THF. Nakom dodavanja, smeša je zagrejana do RT (sobne temperature). Nakon 70 min, smeša je razblažena sa etil acetatom (60 mL) i isprana sa voda i slanim rastvorom. Organska faza je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (25% do 50% EtOAc/heksani) da obezbedi Boc-Pro jedinjenje (470 mg, 63%). Ovaj materijal je rastvoren u etanolu(40 mL) i 10% Pd/C (300 mg) je dodat pre nego što je sud zatvoren i mehur napunjen vodonikom je prikačen. Igla za ventilaciju je postavljena u septum tokom 30 s da se dozvoli da vodonik u mehurićima uđe u rastvor. Nakon 13 h, smeša je filtirana preko CELITE-a i koncentrovana. Deo ovog ostatka (177 mg, 0.353 mmol) je rastvoren u metanolu (20 mL) i koncentrovana HCl (2 mL) je dodata. Smeša je mešana na 60°C pre nego što je koncentrovana da obezbedi pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-3-il]-amid (142 mg, 100%).
[0697] (1-{2-[5-(3'-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-3-il]-amid (142 mg, 0.353 mmol), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (124 mg, 0.706 mmol) i HATU (295 mg, 0.777 mmol) su suspendovani u DMF (7 mL) i ohlađeni do 0°C pre nego što DIPEA (0.615 mL, 3.53 mmol) je dodata. Nakon 80 min, smeša je zagrejana do RT zatim filtrirana i prečišćena preparativnom PLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(3'-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (50 mg, 20%):<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 10.11 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.83 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.80-7.56 (m, 3H), 7.41-7.29 (m, 4H), 5.90 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 3.82 (m, 3H), 3.64 (m, 2H), 3.54 (m, 6H), 2.18 (m, 2H), 2.02-1.92 (m, 6H), 0.96-0.82 (m, 12H); MS (ESI) m/z 716 [M H]<+>.
Primer CN
[0698]
[0699] 2-[5-(4'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (2.31 g, 5.42 mmol), (4-terc-Butoksikarbonilaminofenil)-boronska kiselina (1.28 g, 5.42 mmol), Pd(PPh3)4(313 mg, 0.271 mmol) i K2CO3(6 mL 2 M vodenog rastvora, 11.92 mmol) su kombinovani sa 1,2-dimetoksietanom (20 mL). Suspenzija je mešana dok je N2ubačen kroz rastvor tokom 14 min. Refluksni kondezator je prikačen i suspenzija je zagrejana do 85°C tokom 15 sati. Zatim je ohlađena, razblažena sa etil acetatom (150 mL), isprana sa voda i slanim rastvorom, osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (25% do 50% EtOAc/heksani) da obezbedi 2-[5-(4'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (1.20 g, 41%).
[0700] Pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-amid: 2-[5-(4'-terc-Butoksikarbonilamino-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina benzil estar (1.75 g, 3.25 mmol) je rastvoren u metanolu (40 mL) i koncentrovan HCl (2 mL) je dodata. Rastvor je mešan na 50°C tokom 19 sati pre nego što je koncentrovan do zapremine od 10 mL, sipan u zasićeni NaHCO3(60 mL). Organska faza je ekstrakovana 3 puta sa 30 mL dihlormetana. Kombinovane organske faze su osušene sa natrijum sulfatom i koncentrovane. Deo dobijenog ostatka (963 mg, 2.20 mmol) je rastvoren u THF (4 mL). U odvojenom sudu, etilhloroformat (0.231 mL, 2.24 mmol) je dodat u kapima mešani 0°C rastvor Boc-Pro-OH (568 mg, 2.64 mmol) i trietilamina (0.368 mL, 2.69 mmol) u THF (6 mL). Nakon 10 minuta, rastvor bifenil jedinjenja je dodat kanilom praćeno ispiranjem sa 2 mL THF. Nakon dodavanja, smeša je zagrejana do RT. Nakon 70 min, smeša je razblažena sa etil acetatom (60 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza osušen preko natrijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (25% do 50% EtOAc/heksani) da obezbedi Boc-Pro jedinjenje (470 mg, 63%). Ovaj materijal je rastvoren u etanolu (40 mL) i 10% Pd/C (300 mg) je dodat pre nego što je sud zatvoren i mehur koji sadrži vodonik je prikačen. Igla za ventilaciju je postavljena u septum tokom 30 s da se dozvoli da vodonik u mehurićima uđe u rastvor. Nakon 14 h, smeša je filtirana preko CELITE i koncentrovana. Deo ovog ostatka (169 mg, 0.337 mmol) je rastvoren u metanolu (20 mL) i koncentrovana HCl (2 mL) je dodata. Smeša je mešana na 60°C pre engo što je koncentrovana da obezbedi Pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-amid (135 mg, 100%).
[0701] (1-{2-[5-(4'-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Pirolidin-2-karboksilna kiselina [4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-amid (135 mg, 0.337 mmol), 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (118 mg, 0.674 mmol) i HATU (282 mg, 0.741 mmol) su suspendovani u DMF (6 mL) i ohlađeni do 0°C pre ngo što je DIPEA (0.470 mL, 2.70 mmol) dodat. Nakon 60 min, smeša je zagrejana do RT zatim filtrirana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(4'-{[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-Pirolidin-2-karbonil]-amino}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (136 mg, 56%).<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 10.16 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.80 (d, J = 4.5 Hz, 4H), 7.70 (d, J = 4.5 Hz, 4H), 7.30 (m, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.85-3.77 (m, 3H), 3.61 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.16-1.84 (m, 10H), 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.86 (d, 6.5 Hz, 3H), 0.80 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.75 (d, J = 6.6 Hz, 3H); MS (ESI) m/z 716 [M H]<+>.
Primer CO
[0702]
Trifluoro-Metansulfonska kiselina 5-trifluoroMetansulfoniloksi-naftalen-1-il estar:
[0703] Naftalen-1,5-diol (1 g, 6.25 mmol) je rastvoren u dihlormetanu (25 mL) i trietilamin (2.6 mL, 18.73 mmol) i anhidrid trifluorometansulfoniske kiseline a(1.58 mL, 9.86 mmol) su dodati. Nakon mešanja tokom 16 h, smeša je razblažena sa etil acetatom (250 mL) i ispran sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, koncentrovana i prečišćena silika gel hromatografijom na koloni (0% do 10% EtOAc/heksani) da obezbedi Trifluoro-Metansulfonic kiselina 5-trifluoroMetansulfoniloksinaftalen-1-il estar (957 mg, 48%).
[0704] 2-{5-[4-(5-TrifluoroMetansulfoniloksi-naftalen-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.30 g, 2.96 mmol), Trifluoro-Metansulfonska kiselina 5-trifluoroMetansulfoniloksinaftalen-1-il estar (982 mg, 2.31 mmol), Pd(PPh3)4(134 mg, 0.116 mmol) i kalijum karbonat (639 mg, 4.62 mmol) su suspendovani u toluenu. Nakon degaziranja sa azotom tokom 28 min, mešana suspenzija je zagrejana do 100°C tokom 18 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena do RT, razblažena sa etil acetatom (250 mL), isprana sa vodom, slanim rastvorom, osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (0% do 60% EtOAc/heksani) da obezbedi 2-{5-[4-(5-TrifluoroMetansulfoniloksi-naftalen-1-il)-fenil]-1H-imidazo1-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.09g, 80%).
[0705] 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-{5-[4-(5-TrifluoroMetansulfoniloksi-naftalen-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (468 mg, 0.796 mmol), bis(pinakolato)dibor (202 mg, 0.796 mmol), Pd(dppf)2Cl2(29 mg, 0.0398 mmol) i kalijum acetat (234 mg, 2.39 mmol) su suspendovani u dioksanu (4 mL) i zagrejani do 100°C 90 min. Nakon hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (100 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza osušen preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (40% do 60% EtOAc/heksani) da obezbedi 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (450 mg, 100%).
[0706] 2-(5-{4-[5-(1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilnakiselina terc-butil estar)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (159 mg, 0.281 mmol), 2-(5-Bromo-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (178 mg (0.562 mmol), Pd(PPh3)4(65 mg, 0.0562 mmol) i K2CO3(0.281 mL 2 M vodenog rastvora , 0.562 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (3 mL) i degazirani sa N2mehurićima tokom 12 min. Smeša je zatim zagrejana do 85°C tokom 22 sati zatim ohlađena do RT, razblažena sa etil acetato (50 mL) i ispran sa vodaom i slanim rastvorom. Organska faza osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (80% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije 2-(5-{4-[5-(1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (42 mg, 22%).
[0707] [1-(2-{5-[4-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-(5-{4-[5-(1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (41 mg, 0.0607 mg) je rastvoren u metanolu (5 mL) i koncentrovana HCl (1 mL) je dodata. Smeša je mešana na 60°C tokom 2 sati zatim ohlađena i koncentrovana. U ostatak je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (32 mg, 0.182 mmol), HATU (51 mg, 0.133 mmol) i DMF (2 mL). Smeša je ohlađena do 0°C i DIPEA (0.063 mL, 0.364 mmol) je dodata. Nakon 30 min, voda (1 mL) je dodata i smeša je filtirana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući [1-(2-{5-[4-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-1-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (17.6 mg, 38%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.89 (m, 2H), 7.72-7.57 (m, 6H), 7.16 (m, 1H), 5.28 (m, 2H), 4.25 (m, 2H), 4.11 (m, 3H), 3.86 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.59 (m, 2H), 2.30-2.04 (m, 8H), 0.95-0.89 (m, 12H); MS (ESI) m/z 789 [M H]<+>.
Primer CP
[0708]
[0709] {1-[2-(5-{4-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: 2-(5-{4-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (98 mg, 0.173 mmol), 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (102 mg, 0.260 mmol), Pd(PPh3)4(40 mg, 0.035 mmol) i kalijum karbonat (0.173 mL 2 M vodenog rastvora , 0.346 mmol) su suspendovani u 1,2-dimetoksietan. Smeša je degazirana tokom 10 min zatim zagrejana do 85°C tokom 4 sati. Komponente su zatim ohlađene do RT, razblažene sa etil acetatom (50 mL), isprane sa voda i slanim rastvorom, osušene preko magnezijum sulfata i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (80% do 100% EtOAc/heksani) da obezbedi {1-[2-(5-{4-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc butil estar (28 mg, 22%). Suzuki proizvod je rastvoren u metanolu (5 mL) i tretiran sa koncentrovanom HCl (1 mL). Smeša je zagrejana do 60°C tokom 100 min zatim ohlađena i koncentrovana. U ostatak je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (20 mg, 0.112 mmol), HATU (31 mg, 0.0821 mmol) i DMF (2 mL). Mešana smeša je ohlađena do 0°C zatim DIPEA (0.033 mL, 0.187 mmol) je dodata. Nakon 50 min, reakciona smeša je razblažena sa 1 mL vode i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da obezbedi {1-[2-(5-{4-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il} -fenil)-naftalen-1-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (12 mg, 38%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.89-7.87 (m, 4H), 7.80-7.78 (m, 4H), 7.49-7.41 (m, 8H), 5.22 (m, 2H), 4.26 (m, 2H), 4.02 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.66 (s, 6H), 2.40-2.19 (m, 6H), 2.11-2.03 (m, 4H), 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 6H); MS (ESI) m/z 865 [M H]<+>.
Primer CQ
[0710]
[0711] 2-[5-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-(5-Bromo-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4 g, 12.65 mmol) je rastvoren u DMF i ohlađena do 0°C. NaH (658 mg 60% disperzije mineralnog ulja, 16.45 mmol) je dodat i reakciona smeša je odstojala tokom 13 min pre dodavanja SEMCl (2.7 mL, 15.18 mmol) i zagrevanja na RT. Nakon 16 h, reakcija je kvenčovana vodom, razblažena sa etil acetatom (300 mL) i ispran sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (10% do 30% EtOAc/heksani) da se dobije 2-[5-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.67 g, 83%).
[0712] 2-[5-Formil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (3.804 g, 8.52 mmol) je rastvoren u THF (42 mL) i ohlađen do -78°C. n-BuLi (3.4 mL 2.5 M rastvora heksana, 8.52 mmol) je dodat u kapima tokom 3 min. Nakon 65 min, DMF (4 mL) je dodat i reakciona smeša je zagrejana do RT. Nakon mešanjea na RT tokom 75 min, zasićen vodeni rastvor amonijum hlorida (50 mL) je dodat i ceo sedržaj suda je sipan u zasićen vodeni natrijum bikarbonat. Vodena faza je ekstrakovana 3puta sa dietil etrom. Kombinovani organski slojevi su osušen preko magnezijum sulfata, koncentrovani i prečišćeni silika gel hromatografijom na koloni (30% do 70% EtOAc/heksani) da obezbedi 2-[5-Formil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (1.50 g, 45%).
[0713] 2-[5-Etinil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-Formil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.625 g, 4.11 mmol) i dimetil-1-diazo-2-oksopropilphosphonate (1.056 g, 5.50 mmol) su rastvoreni u 1:1 MeOH/THF (10 mL) i kalijum karbonat (1.14 g, 8.25 mmol) je dodata. Nakon mešanje tokom 200 min, još kalijum karbonata (1.14 g, 8.25 mmol) je dodato. 45 min kasnije, reakciona smeša je sipana u 100 mL 1:1 voda/zasićen vodeni natrijum bikarbonat. Vodena faza je ekstrakovana 3 puta sa dietil etrom. Kombinovane organske faze su osušene sa magnezijum sulfatom i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (20% do 45% EtOAc/heksani) da se dobije 2-[5-Etinil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (1.234 g, 77%).
[0714] {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-Etinil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.002 g, 2.56 mmol) je rastvoren u dioksan (5 mL) i 4 M HCl u dioksanu (5 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana tokom 3 sata i koncentrovana. U ostatak je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (561 mg, 3.20 mmol), HATU (1.22 g, 3.20 mmol) i DMF (15 mL). Mešana reakciona smeša je ohlađena do 0°C i DIPEA (2.23 mL, 12.8 mmol) je dodata). Nakon mešanja tokom 3 h, reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i ispran sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i slanim rastvorom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (40% do 75% EtOAc/heksani) da obezbedi kuplovano jedinjenje (741 mg, 65% preko 2 koraka). Ovaj materijal je rastvoren u dihlormetanu (10 mL) i trifluorosirćetna kiselina (5 mL) je dodata. Mešana reakciona smeša je zagrejana do refluksa 4 h, zatim ohlađena do RT, i sipana u zasićen vodeni rastvor natrijum bikarbonata. Vodena faza je ekstrakovan 3 puta sa dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (0% do 10% MeOH/DMC) da obezbedi {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (525 mg, 100%).
[0715] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (46 mg, 0.144 mmol), (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (78 mg, 0.173 mmol), Pd(PPh3)4(17 mg, 0.0144 mmol), CuI (5 mg, 0.0288 mmol) i trietilamin (0.200 mL, 1.44 mmol) su suspendovani u DMF (1.5 mL). Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 sata zatim 1 mL vode je dodat i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (24 mg,24%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.65 (d, J = 8.2 hz, 2H), 7.45 (d, J = 8.2 hz, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.98 (m, 1H), 5.17 (m, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.25-4.20 (m, 2H), 4.01-3.79 (m, 4H), 3.66 (s, 6H), 2.37-2.00 (m, 10H), 0.99-0.89 (m, 12H); MS (ESI) m/z 687 [M H]<+>.
Primer CR
[0716]
[0717] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-buta-1,3-diinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Trietilamine (0.270 mL, 1.92 mmol) je dodata u smešu {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (61 mg, 0.192 mmol), PhI(OAc)2(247 mg, 0.766 mmol), PdCl2(7mg, 0.0389 mmol), PPh3(30 mg, 0.115 mmol) i CuI (7 mg, 0.0389 mmol) u THF (2 mL). Nakon 50 min, reakciona smeša je filtirana, koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-buta-1,3-diinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (3 mg, 5%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.33 (s, 2H), 6.95 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.07 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.64 (s, 6H), 2.31-1.98 (m, 10H), 1.02-0.87 (m, 12H); MS (ESI) m/z 635 [M H]<+>.
Primer CS
[0718]
[0719] (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (62 mg, 0.195 mmol), (1-{2-[6-(4-Bromo-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (73 mg, 0.146 mmol), Pd(PPh3)4(11 mg, 0.00975 mmol), CuI (4 mg, 0.0195 mmol) i trietilamine (0.271 mL, 1.95 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL). Reakciona smeša je mešana na 80°C 3 sata zatim 1 mL vode je dodat i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (12 mg, 11%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.66-7.64 (m, 2H), 7.59-7.50 (m, 4H), 7.24 (s, 1H), 6.98 (m, 1H), 5.28 (m, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.28-4.19 (m, 2H), 4.04-3.82 (m, 4H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.43-2.01 (m, 10H), 0.99-0.87 (m, 12H); MS (ESI) m/z 737 [M H]<+>.
Primer CT
[0720]
[0721] (1-{2-[5-(4-Bromo-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (57 mg, 0.179 mmol), 1,4-dibromobenzene (211 mg, 0.895 mmol), Pd(PPh3)4(10 mg, 0.00895 mmol), CuI (3 mg, 0.0179 mmol) i trietilamine (0.249 mL, 1.79 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL) i smeša je degazirana tokom 10 min sa azotom. Reakciona smeša je mešana na 80°C 70 min zatim razblažena sa 20 mL etil acetata i isprana sa zasićenim vodeni natrijum bikarbonat i slanim rastvorom. Organska faza je osušena sa magnezijum sulfatom i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na koloni (0% do 5% MeOH/DCM) da se dobije (1-{2-[5-(4-Bromo-feniletinil)1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (43 mg, 51 %).
[0722] (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (49 mg, 0.154 mmol), (1-{2-[5-(4-bromofeniletinil)-1H-imidazo1-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (43 mg, 0.0908 mmol), Pd(PPh3)4(10 mg, 0.00908 mmol), CuI (2 mg, 0.00908 mmol) i trietilamin (0.127 mL, 0.908 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL) i smeša je degazirana tokom 10 min sa azotom. Reakciona smeša je mešana na 80°C 4 sata zatim ohlađena do RT. Mravlja kiselina (0.1 mL) i voda (1 mL) su dodati i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (11 mg, 17%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.46 (d, J = 3.9 Hz, 4H), 7.25 (s, 2H), 6.96 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.10 (m, 2H), 4.20 (m, 2H), 3.97 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.64 (s, 6H), 2.32-2.00 (m, 10H), 0.98-0.88 (m, 12H); MS (ESI) m/z 711 [M H]<+>.
Primer CU
[0723]
[0724] (1-{2-[5-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}naftalen-1-iletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil} 2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: {-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (98 mg, 0.207 mmol), trifluoro-Metansulfonic kiselina 5-trifluoroMetansulfoniloksi-naftalen-1il estar (29 mg, 0.0683 mmol), Pd(PPh3)4(12 mg, 0.0104 mmol), CuI (2 mg, 0.0104 mmol) i trietilamin (0.144 mL, 1.04 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL) i smeša je degazirana tokom 10 min sa azotom. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 90 min zatim ohlađena do RT. Mravlja kiselina (0.1 mL) i voda (1 mL) su dodati i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(5-{2-[1(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-naftalen-1-iletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (30 mg, 58%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 8.38 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.57-7.51 (m, 2H), 7.35 (s, 2H), 6.96 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.13 (m, 2H), 4.20 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.63 (s, 6H), 2.33-1.98 (m, 10H), 0.97-0.87 (m, 12H); MS (ESI) m/z 761 [M H]<+>.
Primer CV
[0725]
[0726] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (44 mg, 0.138 mmol), (1-{2-[5-(4'-Bromo-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (67 mg, 0.128 mmol), Pd(PPh3)4(15 mg, 0.0128 mmol), CuI (2 mg, 0.0128 mmol) i trietilamine (0.180 mL, 1.28 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL) i smeša je degazirana tokom 10 min sa azotom. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 15 sati zatim ohlađena do RT. Mravlja kiselina (0.1 mL) i voda (1 mL) su dodati i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (12 mg, 12%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.66-7.64 (m, 4 H), 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.98 (m, 2H), 5.18 (m, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.26-4.19 (m, 2H), 4.01-3.80 (m, 4H), 3.65 (s, 6H), 2.37-2.01 (m, 10H), 1.00-0.88 (m, 12H); MS (ESI) m/z 763 [M H]<+>.
Primer CW
[0727]
[0728] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (53 mg, 0.166 mmol), (1-{2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (100 mg, 0.200 mmol), Pd(PPh3)4(19 mg, 0.0166 mmol), CuI (3 mg, 0.0166 mmol) i trietilamine (0.230 mL, 1.66 mmol) su suspendovani u DMF (2 mL) i smeša je degazirana tokom 10 min sa azotom. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 1 sata zatim ohlađena do RT. Mravlja kiselina (0.1 mL) i voda (1 mL) su dodati i smeša je prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4iletinil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (24 mg, 20%). (DMSO-d6, 400 MHz) 12.00-11.85 (m, 2H), 7.99-7.83 (m, 4H), 7.64 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.29 (m, 2H), 5.10 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.06 (m, 2H), 3.82-3.76 (m, 4H), 3.54 (s, 6H), 2.15-1.97 (m, 10H), 0.94-0.81 (m, 12H); MS (ESI) m/z 737 [M H]<+>.
Primer CX
[0729]
[0730] 2-(4'-hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4'-Hloro-bifenil-3-ilamin hidrohlorid (1g, 4.16 mmol), pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-tercbutil estar (1.08 g, 5.00 mmol) i HATU (2.06 g, 5.41 mmol) su suspendovani u DMF (20 mL) i DIPEA (2.20 mL, 12.5 mmol) je dodat. Smeša je mešana tokom 16 sati pre nego što je razblažena sa etil acetatom (250 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (25% do 45% EtOAc/heksani) da se obezbedi 2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.66g, 99%).
[0731] {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: 2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.66 g, 4.14 mmol) je rastvoren u metanolu (20 mL) i koncentrovan HCl (4 mL) je dodat. Smeša je mešana na 50°C tokom 80 min zatim ohlađena i koncentrovana. Ostatak je tretiran sa 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (870 mg, 4.97 mmol) i HATU (2.05 g, 5.38 mmol) i stavljen u DMF (20 mL). Smeša je ohlađena do 0°C i DIPEA (3.60 mL, 20.7 mmol). Nakon 100 min, reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (250 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (50% do 80% EtOAc/heksani) da se dobije {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (1.83 g, 96% preko 2 koraka).
[0732] (2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-3-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (409 mg, 0.893 mmol), bis(pinakolato)dibor (249 mg, 0.982 mmol), Pd2(dba)3(20 mg, 0.0223 mmol), tris(cikloheksil)fosfin (30 mg, 0.107 mmol) i kalijum acetat (131 mg, 1.34 mmol) su suspendovani u dioksanu (5 mL) i degaziran azotom tokom 4 min. Mešana suspenzija je zagrejana do 80°C tokom 14 sati pre nego što je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa etil acetatom (250 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (55% do 85% EtOAc/heksani) da se dobije (2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-3-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (491 mg, 100%).
[0733] {1-[2-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-3"-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: (2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-3-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (135 mg, 0.246 mmol), (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (110 mg, 0.246 mmol), Pd(PPh3)4(14 mg, 0.0123 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum karbonata (0.246 mL, 0.492 mmol) su degazirani u 1,2-dimetoksietan (2.5 mL) tokom 13 min. Mešana suspenzija je zagrejana do 85°C tokom 3 sata zatim koncentrovana, stavljena u DMF/vodu i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi da se obezbedi {1-[2-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-3"-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}karbaminska kiselina metil estar (10 mg, 5%). (MeOH-d4, 400 MHz) 7.90 (s, 1H), 7.82-7.66 (m, 8H), 7.54-7.51 (m, 1H), 7.40-7.37 (m, 2H), 4.59 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.02-3.73 (m, 4H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.36-2.02 (m, 10H), 1.15-0.88 (m, 12H); MS (ESI) m/z 792 [M H]<+>.
Primer CY
[0734]
[0735] (4'-Bromo-bifenil-4-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar: 4-terc-Butoksikarbonilamino-fenilboronska kiselina (500 mg, 2.11 mmol), 1,4-dibromo-benzen (2.00 g, 8.44 mmol) Pd(PPh3)4(122 mg, 0.106 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum karbonata (4.2 mL, 8.44 mmol) su degazirani u 1,2-dimetoksietanu (20 mL) tokom 10 min. Mešana suspenzija je zagrejana do 80°C tokom 3 sata zatim razblažena sa etil acetatom (60 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (0% do 20% EtOAc/heksani) da se obezbedi (4'-Bromobifenil-4-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar (430 mg, 59%).
[0736] 2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: (4'-Bromo-bifenil-4-il)-karbaminska kiselina terc-butil estar (407 mg, 1.17 mmol) je rastvoren u metanolu (10 mL) i koncentrovan HCl (2 mL) je dodat. Rastvor je mešan na 60°C tokom 1 sata zatim koncentrovan. Sirov ostatak je tretiran sa Boc-Pro-OH (302 mg, 1.40 mmol) i HATU (578 mg, 1.52 mmol) i suspendovan u DMF (6 mL). DIPEA (1.02 mL, 5.85 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata nakon čega je razblažena sa etil acetatom (200 mL) i ispraan sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (30% do 55% EtOAc/heksani) da se dobije 2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (496 mg, 95% preko 2 koraka).
[0737] {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: 2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (496 mg, 1.11 mmol) je rastvoren u metanolu i koncentrovan HCl (2 mL) je dodat. Rastvor je mešan na 60°C tokom 30 min zatim koncentrovan. Dobijeni ostatak je tretiran sa 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (233 mg, 1.33 mmol), HATU (549 mg, 1.44 mmol) i DMF (10 mL). Nakon hlađenja ove smeše do 0°C, DIPEA (0.970 mL, 5.55 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana tokom 5 sati zatim razblažena sa etil acetatom (150 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (70% do 90% EtOAc/heksani) da se dobije {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (520 mg, 93% preko 2 koraka).
[0738] 2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (154 mg, 0.307 mmol), bis(pinakolato)dibor (156 mg, 0.613 mmol), Pd(dppf)2Cl2(11 mg, 0.0154 mmol) i kalijum acetat (90 mg, 1.21 mmol) su suspendovani u dioksanu i degazirani tokom 15 min. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 100°C tokom 2 sata zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena sa etil acetatom (100 mL) i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (70% do 90% EtOAc/heksani) da se dobije (2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (127 mg, 75%).
[0739] {1-[2-(4"-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: (2-Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (102 mg, 0.227 mmol), (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (125 mg, 0.227 mmol), Pd(PPh3)4(13 mg, 0.0114 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum karbonata (0.227 mL, 0.454 mmol) su degazirani u 1,2-dimetoksietanu (2mL) tokom 15 min. Mešana suspenzija je zagrejana do 85°C tokom 4 sata zatim koncentrovana, stavljena u DMF/vodu i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi da se obezbedi {1-[2-(4"-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[1,1';4',1"]terfenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (49 mg, 27%). (DMSO-d6, 400 MHz) 11.78 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 7.82-7.67 (m, 11H), 7.52 (d,J= 1.8 Hz, 1H), 7.34-7.28 (m, 2H), 5.08 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 3.81 (m, 3H), 3.64 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.17-1.88 (m, 10H), 0.97-0.85 (m, 12H); MS (ESI) m/z 792 [M H]<+>.
Primer CZ
[0740]
[0741] 2-[5-(4'-Hloro-2'-cijano-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2 g, 4.55 mmol), 2-Bromo-5-hlorobenzonitrile (985 mg, 4.55 mmol), Pd(PPh3)4(263 mg, 0.228 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum karbonata (4.6 mL, 9.2 mmol) su suspendovani u 1,2-metoksietanu (20 mL) i degazirani tokom 10 min. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 85°C tokom 21 sata zatim sipana u zasićen vodeni rastvor NaHCO3(250 mL). Vodena faza je ekstrakovana 3 puta sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (65% do 90% EtOAc/heksani) da se dobije 2-[5-(4'-Hloro-2'-cijano-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.65 g, 81%).
[0742] 2-{5-[2'-Cijano-4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-(4'-Hloro-2'-cijanobifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.68 g, 3.74 mmol), bis(pinakolato)dibor (1.43 g, 5.61 mmol), Pd2(dba)3(86 mg, 0.0935 mmol), x-phos (214 mg, 0.449 mmol) i kalijum acetat (1.10 g, 11.22 mmol) su suspendovani u dioksanu (20 mL) i degazirani tokom 10 min sa azotom. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 90°C tokom 15 h, zatim ohlađena i filtrirana preko sloja silikata, eluiranjem sa etil acetatom dok nije sav željeni proizvod uklonjen. Tečnost je koncentrovana i dobijeni ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (55% do 80% EtOAc/heksani) da se dobije 2-{5-[2'-Cijano-4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.57 g, 78%).
[0743] (1-{2-[5-(2'-Cijano-4{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-{5-[2'-Cijano-4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.60 g, 2.96 mmol), 2-(5-Bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (935 mg, 2.96 mmol), Pd(PPh3)4(171 mg, 0.148 mmol), Pd(dppf)Cl2(121 mg, 0.148 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum karbonata (3 mL, 6 mmol) su suspendovani u 1,2-dimetoksietanu i degazirani tokom 11 min. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 85°C tokom 100 min, zatim sipana u zasićen vodeni rastvor natrijum bikarbonata (200 mL) i ekstrakovana 3 puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (5% do 10% MeOH/DCM) da se dobije Suzuki kuplovan proizvod (438 mg, 23%). Ovaj materijal (174 mg, 0.268 mmol) je tretiran sa 4 M HCl u dioksanu (4 mL). Rastvorljivost je slaba pa su 2 mL dihlormetana i 4 mL DMF su dodati. Nakon mešanja tokom 40 min, smeša je koncentrovana. Sirov ostatak je tretiran sa 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (103 mg, 0.590 mmol), HATU (255 mg, 0.670 mmol) i DMF (5 mL) i ohlađen do 0°C. DIPEA (0.470 mL, 2.68 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana tokom 4 sata zatim sipana u zasićen vodeni rastvor natrijum bikarbonata (200 mL) i ekstrakovana 3 puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani. Sirov ostatak je stavljen u DMF i vodu i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi, dajući (1-{2-[5-(2'-Cijano-4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (75 mg, 37%). (MeOH-d4, 400 MHz) 8.19-7.35 (m, 11H), 5.18 (m, 2H), 4.24 (m, 2H), 4.03-4.86 (m, 4H), 3.65 (s, 6H), 2.37-2.00 (m, 10H), 1.00-0.90 (m, 12H); MS (ESI) m/z 764 [M H]<+>.
Primer DA i DB
[0744]
[0745] 3-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: u rastvor 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-tercbutil estar (0.327 g, 1.36 mmol, 1 ekv.), 4-Bromo-benzen-1,2-diamin (0.507 g, 2.71 mmol, 2 ekv.) i 4-metilmorfolin (0.299 mL, 2 ekv.) u 10 mL DMF je dodat HATU (0.543g, 1.05 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa razblaženim NaHCO3 vodenim rastvor i slanim rastvorom.
Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije smeša regioizomer 3-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0746] 3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Gore navedena smeša regioizomera 3-(2-Amino-4-bromofenilkarbamoil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar je rastvorena u etanolu i zagrejana do 130°C u zatvorenoj epruveti preko noći i nastavljeno je zagrevanje na 170°C tokom 3 dana. LC-MS je pokazala željeni proizvod i Boc iscepani proizvod (oko 1:1 razmera). Smeša je koncentrovana i rastvoren DCM. Di-terc-butil dikarbonat (0.6 ekv.) je dodat i reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.383 g, 72%) kao narandžasta pena.
[0747] 3-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša 3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (264 mg, 0.673 mmol), Benzen-1,4-diborska kiselina dipinokal estar (5 ekv., 3.36 g, 6.95 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 39 mg) i 2M vodeni rastvor kalijum karbonata (3 ekv., 1.01 mL) u 5 mL DME je zagrejan do 90°C pod Ar tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 60% etil acetat/heksan) da se dobije 3-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (295 mg, prinos 85%). LCMS-ESI-: izračunato za C30H38BN3O4: 515.45; Pronađeno: 516.1 (M+H<+>).
[0748] 3-(6-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-(6-{4'-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar(295 mg, 0.573 mmol, 1 ekv.), 3-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1Hbenzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (269 mg, 0.687 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma (5%, 33 mg) i 2M vodenog rastvora kalijum karbonata (5 ekv., 1.43 mL) u 5 mL DME je zagrejana do 90°C pod argonom preko noći. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 3-(6-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (163 mg, prinos 40%) i količina u tragovima sporednog proizvoda 3-(6-{4'-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar. LCMS-ESI<->za 3-(6-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: izračunato za C42H48N6O4: 700.87; Pronađeno: 701.1 (M+H<+>).
[0749] (1-{2-[5-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DA) i (1-{3-[6-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DB): 4N HCl u dioksanu (3 mL)je dodata u 3-(6-{4'-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-(6-{4'-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-bifenil-4-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar smeša (163 mg, 0.233 mmol) u 3 mL DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (3 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.1 ekv., 85 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 0.15 mL), praćeno sa HATU (2 ekv., 181 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 50 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% MeCN/H2O 0.1% TFA).
Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DA) (102 mg) i sporedni proizvod (1-{3-[6-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DB) (10.6 mg).
Primer DA:<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.13 (s, 1H), 7.95-7.80 (m, 12H), 7.40-7.20 (m, 2H), 5.18-5.10 (m, 1H), 4.76(m, 1H), 4.55(m,1H), 4.20-4.10 (m, 3H), 3.92-3.78 (m, 3H), 3.55(d, 6H), 2.76 (m, 1H), 2.40-1.55 (m, 10H), 0.95-0.78 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H54N8O6: 814.97; Pronađeno: 815.4 (M+H<+>).
Primer DB (sporedni proizvod):<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ 7.95-7.72 (m, 14H), 7.38-7.24 (m, 2H), 4.75 (m, 2H), 4.55(m, 2H), 4.24-4.16 (m, 3H), 3.55(d, 6H), 2.76 (m, 2H), 2.40-1.55 (m, 9H), 0.95-0.78 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C52H58N8O6: 891.07; Pronađeno: 891.4 (M+H<+>).
Primer DC
[0750]
[0751] 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina dimetil estar: Bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (5g, 18.5 mmol) i srebro sulfat (17 g, 54.5 mmol) su rastvoreni u 60 mL koncentrovan sumporna kiselina uz energično mešanje. Jod (11g, 43.3 mmol) je dodat u porcijama da se dobije ljubičast rastvor koji je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je zagrejana do 80°C tokom preko noći. Reakciona smeša je ohlađena, sipana u ledenu vodu, i rastvor natrijum tiosulfata. Braon čvrsta supstanca je formirana, filtrirana i osušena preko vakuuma na 80°C. Braon čvrsta supstanca je ekstrakovana korišćenjem Soxhlet ekstrakcije sa metanolom u dve serije. Proizvod je kristalisao tokom esktrakcije. Kristal je sakupljen i osušen da se dobije žuta čvrsta supstanca 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (5.7 g, 59%).
[0752] 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina: 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (3.24 g, 6,21 mmol) je rastvoren u 20 mL THF i KOH (1.02g, 2.5ekv.) je dodat, praćeno sa 5 mL vode. Reakcija je mešana na sobnoj tempaturi preko noći. Reakcija je zagrejana do 50°C tokom 7 sati. Reakcija je ohlađena do sobne temperature. Organski rastvarač je uklonjen pomoću rotovapa-a. Vodeni sloj je zakiseljen sa koncentrovanom HCl da se dobije bledo bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je filtrirana i osušena na vakuumu preko noći da se dobije proizvod 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina (2.74 g, prinos 89%).
[0753] Dibenzotiofen-3,7-dikarboksilna kiselina: smeša 2,2'-Dijodo-bifenil-4,4'-dikarboksilna kiselina (450 mg, 0.912 mmol, 1 ekv.) i kalijum karbonat (189 mg, 1.5 ekv.) u 5 mL DMF je zagrejan do 100°C da se dobije crvenkasto braon smeša. Natrijum sulfid (36 mg, 0.5 ekv.) i bakar(I) jodid (17 mg, 0.1 ekv.) su dodati i reakciona smeša je zagrejana do 150°C pod laganim protokom Ar. CuI (100 mg) je dodat i praćeno sa natrijum sulfid (100 mg). Reakcija je držana na 150°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa 25 mL vode i aktivni ugljenik (10 g) je dodat. Smeša je refluksovana tokom 10 minuta zatim filtrirana preko uloška od CELITE-a u 6N HCL (50 mL) i isprana sa vodom. Čvrsta supstanca je formirana i ohlađena do sobne temperature i filtrirana i ispran sa i osušena da se dobije proizvod Dibenzotiofen-3,7-dikarboksilna kiselina (179 mg, 72%).
[0754] 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzotiofen-3-il]-etanon: smeša dibenzotiofen-3,7-dikarboksilne kiseline (179 mg, 0.644 mmol), oksalil hlorida (0.56 mL, 6.44 mmol) i 1 kao DMF u 6 mL DCM je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijeni zamućeni žuti rastvor je koncentrovan i ko-evaporisan je sa toluenom. Ostatak je suspendovan u 6 mL DCM i ohlađen do 0°C. TMS diazometan (1 ml, 3 ekv.) je dodat u reakcionu smešu u kapima. Reakcija je mešan na 0°C tokom 1 sata i zatim zagrejana do sobne temperature preko noći. Smeša je koncentrovana da se dobije braon čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je suspendovana u 5 mL etil acetata i treatirana sa 5.7 M HBr u HOAc (0.28 mL, 2.5 ekv.) atna 0°C. Smeša je zagrejana do sobne temperature tokoom 2 sata. I zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Čvrst natrijum bikarbonat je dodat i mešan tokom 30 minuta. Smeša je razblažen sa natrijum bikarbonatnim rastvor i ekstrakovan sa etilacetatom 3 puta. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije nečist proizvod 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzotiofen-3-il]-etanon.
2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0755] Smeša gorepomenutog nečistog 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzotiofen-3-il]-etanona, Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar(2.1 ekv.), i DIEA (2.07 ekv.) u 5 mL MeCN je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana i razblažena sa etil acetatom, ispran sa slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u 1.5 mL ksilena i amonijum acetat (65 mg, 15 ekv.) je dodat. Reakcija je zagrejan ado 110°C tokom 2 dana. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zas. vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% MeCN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (12.4 mg). LCMS-ESI-: izračunato za C36H42N6O4S: 654.82; Pronađeno: 655.0 (M+H<+>).
[0756] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DC): 4 N HCl u dioksanu (1 mL)je dodata u 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (12.4 mg, 0.014 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (2.08 ekv., 5.1 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 9.2 µL), praćeno sa HATU (2.04 ekv., 10.9 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 90 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% MeCN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DC) (8.1 mg, 58%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.41-8.25 (m, 4H), 7.92-7.78 (m, 4H), 5.22(m, 2H), 4.22(m, 2H), 4.08(m,2H), 3.86 (m, 2H), 3.62 (d, 6H), 2.60-2.50 (m, 2H), 2.30-1.92 (m, 8H), 0.97-0.82 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H48N8O6S: 768.92; Pronađeno: 769.3 (M+H<+>). Primer DD
[0757]
(1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]- pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
(1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5-okso-5H-5λ⁴-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0758] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5-okso-5H-5λ<4>-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DD): (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.0041 mmol., 4 mg) je rastvoren u 1 mL DCM i ohlađen do -40°C. mCPBA(0.4 mg, 0.9 ekv.) je dodat. Reakciona smeša je mešana na -40°C tokom 2 sata i zagrejana do 0°C 2 sata, zatim zagrejana do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije žuti prah (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5-okso-5H-5λ<4>-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DD) (0.6 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.36 (m, 2H), 8.18-7.90 (m, 6H), 5.22(m, 2H), 4.19(m, 2H), 4.05(m,2H), 3.84(m, 2H), 3.61 (d, 6H), 2.56-1.96 (m, 10H), 0.97-0.84 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H48N8O6S: 768.92; Pronađeno: 769.3 (M+H<+>).
Primer DE
[0759]
[0760] Dibenzotiofen 5-oksid: rastvor mCPBA (8.27 g, 36.9 mmol) u 71 mL hloroforma je dodat u kapima tokom 30 minuta u rastvor dibenzotiofena u 89 mL hloroforma na - 35°C. Reakciona smeša je mešana na -35°C tokom 1 sata i zatim zagrejan do sobne temperature. Reakcija je kvenčovana sa zasićeni natrijum bikarbonat vodeni rastvor. Organski sloj je ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata dva puta i osušen preko MgSO4, koncentrovan da se dobije prljavo bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u refluksujućem etanolu i polako ohlađean do sobne temperature da se dobije beli kristalni čvrst Dibenzotiofen 5-oksid (5.65g, 76%). LCMS-ESI-: izračunato za C12H8OS: 200.26; Pronađeno: 200.9 (M+H<+>).
[0761] 3,7-Dinitro-dibenzotiofen 5-oksid: rastvor bibenzotiofen 5-oksida (5.34g, 26.7 mmol) u koncentrovanoj sumpornoj kiselini (120 mL) je ohlađen do 6°C. Azotna kiselina (108 mL) je dodata polako tako da je unutrašnja temperatura ostala na 10°C. Reakcija je mešana na 10°C tokom 30 minuta zatim zagrejana do sobne temperature tokom 30 minuta. Reakciona smeša je sipan u led i formiran je talog. Talog je ispran sa vodom i osušen da se dobije žuta čvrsta supstanca 3,7-Dinitro-dibenzotiofen 5-oksid (7.8 g, i dalje sadržeći nešto vode i neorganski materijal).
[0762] Dibenzotiofen-3,7-diamin: Dve serije čvrstog 3,7-dinitro-dibenzotiofen 5-oksida je hidrogenizovano pri 45 psi u etanolu (250 mL za svaku seriju) sa 10% Pd na ugljeniku (0.46 g svaka serija) tokom 2 sata. Dve serije su kombinovane i filtrirane kroz CELITE da se dobije narandžasti rastvor. Hlorovodonični gas je u mehurućima ubačen u rastvor da formira talog (pri pH 1). Talog je filtriran i ispran sa malom količinom etanola i osušen na vakuumu da se dobije narandžasti čvrst dibenzotiofen-3,7-diamin (2.46 g). LCMS-ESI-: izračunato za C12H10N2S: 214.29; Pronađeno: 215.0 (M+H<+>).
[0763] 3,7-Dibromo-dibenzotiofen: suspenzija Dibenzotiofen-3,7-diamin (2.46 g, 8.57 mmol) u vodi (16 mL) i koncentrovana HCl (4.3 mL) je ohlađena do 5°C (unutrašnja temperatura). Rastvor natrijum nitrita (1.54 g, 25.67 mmol) u vodi (5 mL) je dodat u kapima tako da unutrašnja temperatura ne prelazi 10°C. Nakon 1 sata reakciona smeša je sipana u rastvor CuBr (1.8 g, 12.55 mmol) u 48% HBr (18 mL). Smeša je prebačena u sud od 1 L sa 3 grla korišćenjem vode (100 mL) i refluksovan tokom 2 sati. Reakciona smeša je ohlađena i sipana u smešu ledene vode. Talog formiran i sakupljen filtracijom, osušen i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 10% MeOH/etil acetat) da se dobije beli čvrst 3,7-Dibromo-dibenzotiofen (1.6 g, 55%).
Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzotiofen-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar:
[0764] [1,l1-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(3%, 69 mg, 0.098 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (3%, 113 mg, 0.098 mmol) su dodati u smešu 3,7-Dibromodibenzotiofena (1.12 g, 3.27 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaja (1.2 ekv., 1.33 mL) u 25 mL dioksana. Reakcija je zagrejana do 80°C pod Ar preko noći. Reakcija je ohlađena do sobne temperature. 8 mL vode je dodato i praćeno sa NBS (1ekv., 699 mg). Reakcija je mešana na sobnoj tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i osušen na vakuumu da se dobije ostatak koji jekorišćen u sledećem koraku.
[0765] Ostatak je rastvoren u 20 mL anhidrovan DMF. Boc-L-Pro-OH (4 ekv., 2.815 g) je dodat, praćeno sa DIEA (3.5 ekv., 1.60 mL) u 20 mL MeCN i 15 mL DMF u kapima. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija sirov je razblažen sa EtOAc i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 50% etil acetat/heksan) da se dobije Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzotiofen-3-il)-2-okso-etil] estar 1-tercbutil estar (593 mg, prinos 33%) i bis proizvod. LCMS-ESI-: izračunato za C24H24BrNO5S: 518.42; Pronađeno: 541.9(M+Na<+>).
[0766] 2-[5-(7-Bromo-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 10 mL Ksileni je dodat u smešu od Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzotiofen-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (514 mg, 0.99 mmol) i amonijak acetat (20ekv., 1.53 g). Smeša je zagrejana u mikrotalasnoj na 140°C tokom 60 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[5-(7-Bromo-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (391 mg, prinos 79%). LCMS-ESI-: izračunato za C24H24BrN3O2S: 498.44; Pronađeno: 499.9(M+Na<+>).
3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0767] Smeša 2-[5-(7-Bromo-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (300 mg, 0.48 mmol, 1 ekv.), 3-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.1 ekv., 530 mg), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(3%, 12 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (3%, 17 mg) i 2N vodeni rastvor kalijum karbonata (3.3 ekv., 0.8 mL) u 2 mL DME je zagrejan do 80°C pod argonom tokom 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije žuta pena 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazo1-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (245 mg, prinos 70%). LCMS-ESI-: izračunato za C42H46N6O4S: 730.92; Pronađeno: 731.2(M+H<+>).
[0768] (1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DE): 4N HCl u dioksanu (3 mL) je dodata u 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo [2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (141 mg, 0.194 mmol) u 3 mL DCM. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (4 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.08 ekv., 71 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 0.12 mL), praćeno sa HATU (2.04 ekv., 150 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 20% MeOH/etil acetat), praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il} -dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DE) (121 mg, 59%).<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.60-8.40 (m, 4H), 8.16(m, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.90(m, 2H), 7.76(m, 1H), 7.33 (m, 2H), 5.15(m, 1H), 4.76(m,1H), 4.56(d, 1H), 4.22-4.08(m, 3H), 3.85(m, 2H), 3.55 (d, 6H), 2.76(m,1H), 2.30-1.50 (m, 9H), 0.96-0.75 (m, 12 H).<19>F-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: -112.88. LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H52N8O6S: 845.02; Pronađeno: 845.4 (M+H<+>).
Primer DF
[0769]
2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzotiofen-3-il]-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar:
[0770] [1,1'-Bis(trifenilfosfin) dihloropaladijum(II)(3%, 14 mg, 0.02 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (3%, 23 mg, 0.02 mmol) su dodati u smešu od Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzotiofen-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (345 mg, 0.665 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (1.2 ekv., 0.269 mL) u 5 mL dioksana. Reakcija je zagrejana do 80°C pod Are tokom 4 sata. Reakcija je ohlađen do sobne temperature.1.5 mL vode je dodato i praćeno sa NBS (1ekv., 142 mg). Reakcija je mešana na sobnoj tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata.
Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i osušen na vakuumu da se dobije ostatak koji je korišćen u sledećem koraku.
[0771] Ostatak je rastvoren u 4 mL anhidrovan DMF. 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (2 ekv., 321 mg, 1.33 mmol g) je dodat, praćeno sa TEA (2.2 ekv., 204 mg) u 4 mL MeCN i 3 mL DMF u kapima. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija sirov je razblažen sa EtOAc i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 50% etil acetat/heksan) da se dobije 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzotiofen-3-il]-2-okso-etil) estar 2-terc-butil kao žuti ostatak (92.5 mg, prinos 19%). LCMS-ESI-: izračunato za C38H44N2O10S: 720.83; Pronađeno: 743.2 (M+Na<+>).
[0772] 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: 3 mL Ksileni su dodati u 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzotiofen-3-il]-2-okso-etil) estar 2-tercbutil estar (92.5 mg, 0.128 mmol) i amonijak acetat (20ekv., 198 mg). Smeša je zagrejana u mikrotalasnoj na 140°C tokom 60 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćena pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H -imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazo1-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (62 mg, prinos 71%). LCMS-ESI-: izračunato za C38H44N6O4S: 680.86; Pronađeno: 681.2 (M+H<+>).
[0773] (2-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DF): 4N HCl u dioksanu (1 mL) je dodat u 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (62 mg, 0.091 mmol) u 2 mL DCM. Reakciona smeša je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovan i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-propionska kiselina (2.08 ekv., 28 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 0.06 mL), praćeno sa HATU (2.04 ekv., 71 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 20% MeOH/etil acetat), praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (2-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DF) (52.7 mg, 60%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.60-8.40 (m, 4H), 8.12(m, 2H), 8.01 (m, 1H), 7.92(m, 2H), 7.57-7.40 (m, 2H), 5.15(m, 1H), 4.70 (m,1H), 4.50-4.30(m, 3H), 3.54 (d, 6H), 2.76(m,1H), 2.42-1.50 (m, 6H), 1.30 -1.10 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H44N8O6S: 738.86; Pronađeno: 739.3 (M+H<+>).
Primer DG
[0774]
[0775] (2-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-oksoetil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DG): 4N HCl u dioksanu (2 mL) je dodat u 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzotiofen-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (103 mg, 0.141 mmol) u 3 mL DCM. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušen preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-propionska kiselina (2.08 ekv., 43 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 0.093 mL), praćeno sa HATU (2.04 ekv., 109 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 20% MeOH/etil acetat), praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (2-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il} -dibenzotiofen-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DG) (91.3 mg, 80%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.60-8.52 (m, 2H), 8.44(m, 2H), 8.15 (m, 1H), 8.05(m, 1H), 7.92 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 7.56-7.42(m, 2H), 5.15(m, 1H), 4.70 (m,1H), 4.50-4.30(m, 3H), 3.54 (d, 6H), 2.76(m,1H), 2.42-1.50 (m, 12H), 1.30 -1.10 (m, 6 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H44N8O6S: 788.91; Pronađeno: 789.4 (M+H<+>).
Primer DH
[0776]
[0777] 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar: 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-terc-butil estar (350 mg, 1.45 mmol) je pomešan sa HATU (551 mg, 1.45 mmol) u DMF (5 mL) i smeša je mešaan na sobnoj temperaturi 30 minuta.2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon bis HCl so (416 mg, 1.45 mmol) u 2 mL DMF je dodata, praćeno sa DIEA (3.5 ekv., 0.88 mL) u kapima na 0°C. Reakcija je mešana na 0°C tokom 40 minuta. Reakciona smeša je razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina tercbutil estar (424 mg, 67%). LCMS-ESI-: izračunato za C20H25BrN2O4: 437.33; Pronađeno: 460.1 (M+Na<+>).
[0778] 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar: 15 mL Ksilena je dodat o u 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (424 mg, 0.97 mmol) i amonijum acetat (20ekv., 1.5 g). Smeša je zagrejana u mikrotalasnoj na 140°C tokom 60 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (249 mg, prinos 61%). LCMS-ESI-: izračunato za C20H24BrN3O2: 418.33; Pronađeno: 418. (M+H<+>).
3-(6-{4'[2-(5-terc-Butoksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar:
[0779] Smeša 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (101 mg, 0.243 mmol, 1 ekv.), 3-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (150 mg, 0.291 mmol, 1.2 ekv.), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 17 mg) i 2M vodeni rastvor kalijum karbonata (5 ekv., 0.73 mL) u 1.5 mL DME je zagrejan do 90°C pod Are preko noći. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 50 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 3-(6-{4'-[2-(5-terc-Butoksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (53 mg, prinos 26%). LCMS-ESI-: izračunato za C44H50N6O4: 726.91; Pronađeno: 727.2 (M+H<+>).
[0780] (1-{6-[5-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DH): 4N HCl u dioksanu (2 mL)je dodata u 3-(6-{4'-[2-(5-terc-Butoksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-bifenil-4-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar (53 mg, 0.073 mmol) u 2 mL DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.1 ekv., 26.6 mg), 4-metilmorfolin (6 ekv., 0.048 mL), praćeno sa HATU (2 ekv., 56 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 50 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{6-[5-(4'-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DH) (41.6 mg, 53%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.13 (s, 1H), 7.95-7.80 (m, 9H), 7.69 (m, 2H), 7.40-7.24 (m, 2H), 5.25 (m, 1H), 4.76(m, 1H), 4.55(m,1H), 4.20-3.80 (m, 3H), 3.55(d, 6H), 2.74 (m, 2H), 2.40-1.55 (m, 10H), 0.95-0.65 (m, 12 H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H54N8O6: 841.01; Pronađeno: 841.5 (M+H<+>).
Primer DI
[0781]
[0782] 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 10 mL Ksileni i 10 ml DME su dodati u smešu od Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (480 mg, 0.935 mmol) i amonijak acetat (20ekv., 1.44 g). Smeša je zagrejana u mikrotalasnoj na 140°C tokom 90 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidrofenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (246 mg, prinos 53%). LCMS-ESI-: izračunato za C26H28BrN3O2: 494.42; Pronađeno: 495.5 (M+H<+>).
[0783] 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (246 mg, 0.497 mmol), 2-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1 ekv., 206 mg), [1,1'bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 20 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 29 mg) i kalijum acetat (2 ekv., 137 mg) u 5 mL DME i 1 mL vode je zagrejano do 80°C tokom 100 minuta. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (220 mg, prinos 63%). LCMS-ESI-: izračunato za C42H48N6O4: 700.87; Pronađeno: 701.1(M+H<+>).
[0784] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer A): 4N HCl u dioksanu (2 mL) je dodat u 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (220 mg, 0.314 mmol) u 1 mL DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (3 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2.1 ekv., 116 mg), izopropil etilamin (5 ekv., 270 µL), praćeno sa HATU (2 ekv., 239 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i ispraan sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DI) (115 mg, 45%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.02-7.95 (m, 3H), 7.95-7.80 (m, 3H), 7.66-7.62 (m, 4H), 5.40-5.23(m, 2H), 4.22(m, 2H), 4.16(m,2H), 3.96-3.82 (m, 2H), 3.62 (s, 6H), 3.00(s, 4H), 2.60 (m, 2H), 2.40-2.18 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H54N8O6: 814.97; Pronađeno: 815.4 (M+H<+>).
Primer DJ
[0785]
[0786] 2,7-Dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren: Deoksofluor (bis(2-metoksietil)aminosumpor trifluorid, 12 mL) je dodat u 2,7-dibromo-fluoren-9-on (3 grama, 8.87 mmol), praćeno sa 2 kapi etanola. Reakciona smeša je zagrejana do 90°C. Progres reakcije je praćen analitičkom HPLC i TLC (u čistom heksanu). Proizvod je više ne-polaran od početnog materijala. Reakcija je završena nakon 2 dana. Reakciona smeša je ohlađena, sipana u ledenu vodu i neutralisana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, zatim je ekstrakovana korišćenjem etil acetata i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata dva puta. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 20% etil acetat/heksan) da se dobije proizvod 2,7-dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren (3.1 gram, prinos 97%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CDCl3) δ: 7.76 (s, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.42 (d, 2H). F-NMR: 300 MHz, (CDCl3) δ: -111.57.
[0787] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 82 mg) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 115 mg) su dodati u smešu od 2,7-dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren (720 mg, 3 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (1 ekv., 0.677 mL) u 12 mL dioksana. Reakcija je zagrejana do 70°C pod argonom tokom 4 sata. Reakcija je ohlađena do sobne temperature. 3 mL vode je dodato i praćeno sa NBS (1ekv., 356 mg). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je rastvoren u etil acetatu i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan. Ostatak je rastvoren u 15 mL anhidrovan DMF. Boc-L-Pro-OH (4 ekv., 1.72 g) je dodat, praćeno sa DIEA (3.5 ekv., 1.22 mL) u 5 mL MeCN i 5 mL DMF u kapima. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona sirova supstanca je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (363 mg, prinos 34%). LCMS-ESI-: izračunato za C25H24BrF2NO5: 536.36; Pronađeno: 560.0(M+Na<+>), 535.9 (M-H).
[0788] 2-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 10 mL Ksilena je dodato u smešu od Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (363 mg, 0.677 mmol) i amonijak acetat (20ekv., 1.04 g). Smeša je zagrejana u mikrotalasnoj na 140°C tokom 90 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (324 mg, prinos 81%). LCMS-ESI-: izračunato za C25H24BrF2N3O2: 516.38; Pronađeno: 517.9 (M+H<+>).
[0789] 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (137 mg, 0.265 mmol), 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1 ekv., 110 mg), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 11 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 16 mg) i kalijum karbonat (2 ekv., 73 mg) u 4 mL DME i 2 mL vode je zagrejano do 90°C tokom 2 sata, Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (83 mg, prinos 43%). LCMS-ESI-: izračunato za C41H44F2N6O4: 722.82; Pronađeno: 723.1(M+H<+>).
[0790] (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DJ): TFA (2 mL) je dodata u 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (83 mg, 0.115 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovan i osušen preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (3 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2 ekv., 40 mg), izopropil etilamin (6 ekv., 120 µL), praćeno sa HATU (2 ekv., 88 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DJ) (37 mg, 39%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.05-7.82 (m, 9H), 5.40-5.22(m, 2H), 4.22(m, 2H), 4.16(m,2H), 4.00-3.82 (m, 2H), 3.62 (s, 6H), 2.60 (m, 2H), 2.42-2.18 (m, 6H), 2.08(m, 2H), 0.95-0.85 (m, 12 H).<19>F-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: -112.88. LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H50F2N8O6: 836.93; Pronađeno: 837.3 (M+H<+>).
Primer DK
[0791]
[0792] 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (324 mg, 0.627 mmol), 3-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.1 ekv., 304 mg), [1,1'bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(3%, 15 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (3%, 22 mg) i kalijum karbonat (3.3 ekv., 285 mg) u 10 mL DME i 3 mL vode je zagrejana do 90°C pod argonom tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (361 mg, prinos 77%). LCMS-ESI-: izračunato za C43H46F2N6O4: 748.86; Pronađeno: 749.2(M+H<+>).
[0793] (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo [2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DK): 4N HCl u dioksanu (2 mL) je dodata u 2-(5-{9,9-Difluoro-7-[2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (361 mg, 0.482 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2 ekv., 169 mg), izopropil etilamin (6 ekv., 0.5 mL), praćeno sa HATU (2 ekv., 367 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 20% MeOH/etil acetat), praćeno sa preparativnom HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (285 mg, 59%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.05-7.82 (m, 9H), 5.40-5.22 (m, 2H), 4.72(m,1H), 4.39(d, 1H), 4.239d, 1H), 4.17(m, 1H), 3.91(m, 2H), 3.62 (d, 6H), 2.98(m,1H), 2.58 (m, 1H), 2.37-2.18 (m, 4H), 2.18-1.92(m, 4H), 1.80(m, 2H), 1.09-0.85 (m, 12 H).<19>F-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: -112.88. LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H52F2N8O6862.96; Pronađeno: 863.5 (M+H<+>). Primer DL
[0794]
(1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9-okso-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DL):
[0795] (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (10 mg) je rastvoren u MeCN (1mL) i vodi (1 mL).1 kap TFA je dodata. Smeša je tretirana UV svetlom velike talasne dužine na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakcioni sirov proizvod je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije (1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9-okso-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DL) (3.7 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.05-7.82 (m, 9H), 5.27(m, 2H), 4.72 (m, 1H), 4.37(d,1H), 4.23(d, 1H), 4.19(m, 1H), 3.91(m, 2H), 3.62 (d, 6H), 2.98(m, 1H), 2.58 (m, 2H), 2.37-2.18 (m, 4H), 2.18-1.92(m, 4H), 1.80(m, 2H), 1.09-0.85 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H52F2N8O6840.97; Pronađeno: 841.6 (M+H<+>).
Primer DM
[0796]
[0797] 2-(5-{4-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.079g, 2.737 mmol), Naftalen-2,6-diboronska kiselina dominikal estar (5 ekv., 5.2 g, 13.68 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 96 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 158 mg) i kalijum karbonat (5 ekv., 757 mg) u 40 mL DME i 10 mL vode je zagrejano do 110°C pod argonom tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena sa etil acetatom i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(5-{4-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (730 mg, prinos 47%). LCMS-ESI-: izračunato za C34H40BN3O4: 565.51; Pronađeno: 566.1 (M+H<+>).
[0798] 3-[6-(6-{4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-(5-{4-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]fenil}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (216 mg, 0.382 mmol), 3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1 ekv., 150 mg, 0.382 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 16 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 22 mg) i kalijum karbonat (2 ekv., 106 mg) u 4 mL DME i 1 mL voda je zagrejan do 90°C pod argonom tokom 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 3-[6-(6-{4-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (100 mg, prinos 35%). LCMS-ESI-: izračunato za C46H50N6O4: 750.93; Pronađeno: 751.2 (M+H<+>).
[0799] [1-(3-{6-[6-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DM): TFA (2 mL) je dodata u 3-[6-(6-{4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (100 mg, 0133 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2 ekv., 47 mg), izopropil etilamin (6 ekv., 0.14 mL), praćeno sa HATU (2 ekv., 101 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(3-{6-[6-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DM) (19.7 mg, 17%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.13-7.82 (m, 14H), 5.40-5.22(m, 2H), 4.98(m,1H), 4.72(m, 1H), 4.38(d, 1H), 4.22(m, 1H), 4.10(m, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.66(d, 6H), 2.98(m,1H), 2.58 (m, 1H), 2.37-2.18 (m, 4H), 2.18-1.92(m, 4H), 1.80(m, 2H), 1.09-0.85 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H56N8O6: 865.03; Pronađeno: 866.3 (M+H<+>).
Primer DN
[0800]
[0801] 2-(5-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (615 mg, 1.39 mmol), Benzen-1,4-diborska kiselina dipinocal estar (5 ekv., 2.3 g, 6.95 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(5%, 57 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (5%, 80 mg) i kalijum karbonat (3 ekv., 576 mg) u 20 mL DME i 10 mL vode je zagrejana do 90°C pod Ar tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena i razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 2-(5-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (488 mg, prinos 62%). LCMS-ESI-: izračunato za C34H40BN3O4: 565.51; Pronađeno: 566.2 (M+H<+>).
[0802] 3-[6-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: smeša 2-(5-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (248 mg, 0.438 mmol, 1.1 ekv.), 3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1 ekv., 156 mg, 0.399 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(3%, 10 mg), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (3%, 14 mg) i kalijum karbonat (3.3 ekv., 182 mg) u 4 mL DME i 2 mL vode je zagrejana do 90°C pod argonom tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađean i razblažena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću fleš hromatografije na koloni (silika gel, 20 do 100% etil acetat/heksan) da se dobije 3-[6-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (178 mg, prinos 59%). LCMS-ESI-: izračunato za C46H50N6O4: 750.93; Pronađeno: 751.3 (M+H<+>).
[0803] [1-(3-{6-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DN): 4N HCl u dioksanu (1 mL) je dodata u 3-[6-(6-{4-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar (100 mg, 0133 mmol) u 2 mL DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (2 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (2 ekv., 83 mg), izopropil etilamin (6 ekv., 0.25 mL), praćeno sa HATU (2 ekv., 180 mg). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (GEMINI, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(3-{6-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-benzoimidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DN) (102 mg, 50%).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.13-7.82 (m, 14H), 5.40-5.22(m, 2H), 4.98(m,1H), 4.72(m, 1H), 4.38(d, 1H), 4.22(m, 1H), 4.10(m, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.66(d, 6H), 2.98(m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.37-2.18 (m, 4H), 2.18-1.92(m, 4H), 1.80(m, 2H), 1.09-0.85 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H56N8O6: 865.03; Pronađeno: 866.4 (M+H<+>).
Primer DO
[0804]
[0805] 4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 3-[4-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (600 mg, 1.06 mmol) je kombinovan sa (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (503 mg, 1.27 mmol) i Pd(PPh3)4(122 mg, 0.106 mmol) pod atmosferom argona. DMF (degaziran sa Argonom) je dodat praćeno sa trietilaminom (1.47 mL, 10.6 mmol) i bakar(I) jodidom (20.0 mg, 0.106 mmol). Smeša je zagrejana na 80 °C. Nakon 20 minuta, isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je polu-prečišćen putem hromatografije na silika gelu (eluent: EtOAc sa MeOH 10% / heksani) da se dobije proizvod 4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (542 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H59N9O8: 878.0 (M<+>); Pronađeno: 878.5 (M+H<+>).
[0806] SEM zaštićen imidazol intermedijer: 4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (512 mg, 0.586 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL). Natrijum hidrid (60 % u mineralnom ulju, 56 mg) je dodat na 0 °C, praćeno sa SEM-Cl (0.217 mL). Nakon dva sata, rastvarači su uklonjeni u vakuumu i sirov materijal je podeljen između DCM i vode. Organski sloj je osušen i sirov materijal je prečišćen pomoću fleš hromatografije na silika gelu da se dobije 591 mg SEM zaštićenog imidazol proizvoda. LCMS-ESI<+>: izračunato za C59H87N9O10Si2: 1138.6 (M<+>); Pronađeno: 1138.7 (M+H<+>).
[0807] de-Boc piperazin materijal: Gornji SEM zaštićen imidazol materijal je rastvoren u DCM (2.5 mL) na sobnoj temperaturi. HCl (4M u dioksanu, 5 mL) je dodat i mešanje dobijene suspenzije na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 60 minuta sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je korišćen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
[0808] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Acetil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer A): Gore pomenuti de-Boc piperazin materijal (139 mg, 0.129 mmol) je rastvoren u DCM (3 mL) koji sadrži NMM (0.057 mL) na sobnoj temperaturi. Anhidrid sirćetne kiseline (0.0183 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 60 minuta asve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je rastvoren u smeši od DCM (5 mL) i TFA (5 mL). Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 16 sati, isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i materijal je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1 % TFA). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i liofilizovane da se dobije proizvod [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Acetil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer DO) kao TFA so (15.7 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H53N9O7: 819.9 (M<+>); Pronađeno: 820.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.07 (m, 2 H), 7.91-7.68 (m, 10H), 7.28 (m, 2H), 5.64 (m, 1H), 5.38 (m, 1H), 5.17 (m, 2H), 4.23 (d, J=7.8Hz, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.85 (m,1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.49-3.45 (m, 2H), 3.15-3.02 (m, 3H), 2.77 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.29-2.01 (m, 5H), 1.07-0.83 (m, 12H) ppm.
Primer DP
[0809]
[0810] 4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina metil estar (Primer DP): Pripremljen je na sličan način kao [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Acetil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer DO) zamenjivanjem anhidrida sirćetne kiseline sa metilhloro formatom.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H53N9O8: 835.4 (M<+>); Pronađeno: 835.9 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.08 (m, 1 H), 7.76-7.54 (m, 10H), 7.30 (m, 2H), 5.58 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.95 - 3.75 (m, 4H), 3.50 (m, 9H), 2.29 (m, 1H), 2.13-1.95 (m, 4H), 0.87-0.68 (m, 12H) ppm.
Primer DQ
[0811]
[0812] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-metilkarbamoilpiperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DQ): Pripremljen je na sličan način kao [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Acetil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer DO), zamenjivanjem anhidrida sirćetne kiseline sa izocijanatometanom.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H54N10O7: 834.9 (M<+>); Pronađeno: 835.4 (M<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.08 (m, 1 H), 7.77-7.36 (m, 10H), 7.36 - 7.24 (m, 2H), 5.51 (m, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.06 (m, 2H), 3.95 - 3.75 (m, 4H), 3.52 -3.48 (m, 9H), 2.34 (m, 1H), 2.13-1.96 (m, 4H), 0.90-0.78 (m, 12H) ppm.
Primer DR
[0813]
[0814] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Dimetilsulfamoil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer DR): Pripremljen je na sličan način kao [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-Acetil-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-piperazin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer DO), zamenjivanjem anhidrida sirćetne kiseline sa N,N-dimetil sulfurilamido hloridom.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H56N10O8S: 885.0 (M<+>); Pronađeno: 885.4 (M<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.05 (m, 1 H), 7.91-7.52 (m, 10H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 5.72 (s, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.39 - 4.06 (m, 4H), 3.95 - 3.75 (m, 4H), 3.52 - 3.48 (m, 6H), 2.86 - 46 (m, 6H), 2.12-1.95 (m, 4H), 0.94-0.76 (m, 12H) ppm.
Primer DS
[0815]
3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-(2-metoksikarbonilamino-propionil)- piperazin-1-karboksilna kiselina metil estar
[0816] 3- {4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-piperazin-1-karboksilna kiselina metil estar (primer DS) je pripremljen na sličan način kao 4-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-3-{4-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-piperazin-1-karboksilna kiselina metil estar (primer DP), zamenjivanjem karbamata izvedenog iz valina sa odgovarajućim karbamatom izvedenim iz alanina.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H49N9O8: 783.8 (M<+>); Pronađeno: 784.3 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.08 (m, 1 H), 7.95-7.80 (m, 10H), 7.47 (m, 1H), 7.30 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 5H), 3.50 - 3.30 (m, 9H), 2.29 (m, 1H), 2.09-1.98 (m, 4H), 1.21 (m, 3H) 0.81-0.75 (m, 6H) ppm. Primer DT
[0817]
(1-{2-[5-(4-{4-[3'-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1'-metilkarbamoil-2',3',4',5'-tetrahidro-1H,1'H-[2,4']biimidazolil-4-il]-feniletinil}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0818] (1-{2-[5-(4-{4-[3'-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-1'-metilkarbamoil-2',3',4',5'-tetrahidro-1H,1'H-[2,4']biimidazolil-4-il]-feniletinil}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (primer DT) je pripremljen na sličan način kao [1-(2-{5-[4-(4-{2-[l-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-4-metilkarbamoil-piperazin-2-il]-1H-imidazo 1-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer DQ), zamenjivanjem piperazin karboksilne kiseline sa odgovarajućim 4-amino-pirolidin derivatom, korišćenjem metodologije opisane pod primerima BU i DO.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H52N10O7: 820.9 (M<+>); Pronađeno: 821.4 (M<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.05 (m, 1 H), 7.91 (s, 1H), 7.77-7.50 (m, 10H) 7.32 (m, 1H), 6.54 (m, 1H), 5.51 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.21 (m, 2H), 4.51 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.95 -3.75 (m, 2H), 3.51 (s, 6H), 2.57 (m, 3H), 2.13 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 4H), 0.94-0.77 (m, 12H) ppm.
Primer DU
[0819]
[0820] 2-(5-{6-[2-(1-boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-1,5-ditia-s-indacen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2,6-Dijodo-1,5-ditias-indacene (117 mg, 0.263 mmol), 2-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (109 mg, 0.263 mmol), Pd(PPh3)4(9.1 mg), K2CO3(69 mg, 0.52 mmol), su rastvoreni u toluenu (5 mL) / vodi (1 mL) pod atmosferom argona. Smeša je zagrejana tokom 30 minuta na 130 °C (mikrotalasna) i 30 minuta na 140 °C. Uklonjene su sve isparljive supstance u vakuumu i prečišćene putem hromatografije na siliak gelu (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 2-(5-{6-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-1,5-ditia-s-indacen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (36.3 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H44S2N6O4: 760.3 (M<+>); Pronađeno: 761.3 (M+H<+>).
[0821] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-benzoimidazol-5-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DU): 2-(5-{6-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-1H-benzoimidazol-5-il]-1,5-ditia-s-indacen-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (36 mg) je rastvoren u DCM (3 mL) i HCl u dioksanu (4M, 4 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 20 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Gore pomenuti sirovm materijal je rastvoren u DMF (3 mL) i NMM (0.025 mL) je dodat. rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (17 mg, 0.094 mmol), HATU (36 mg, 0.094 mmol) i NMM (0.025 mL) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-benzoimidazol-5-il}-1,5-ditia-sindacen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (3.8 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H50N8O6S2: 875.1 (M<+>); Pronađeno: 875.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.41 (s, 2 H), 7.94 - 7.91 (m, 4H), 7.73-7.67 (m, 4H), 7.31 (m, 2H), 5.19 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.85 (m, 4H), 3.51 (s, 6H), 2.31-1.82 (m, 10H), 0.94-0.77 (m, 12H) ppm.
Primer DV
[0822]
(1-{3-[6-(7-{2-[4-Cijano-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar metil ester
[0823] (1-{3-[6-(7-{2-[4-Cijano-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DV) je pripremljen na sličan način kao (1-{2-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DK), zamenjivanjem prolin derivata sa odgovarajućim 4-cijano-prolin derivatom.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H51F2N9O6: 887.9 (M<+>); Pronađeno: 888.3 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.10-7.95 (m, 8H), 7.70 (s, 2H), 7.34 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 5.12 (dd, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H) 4.52 (s, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.94 (m,1H), 3.74 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 2.85 (m, 1H), 2.73 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.03 - 1.72 (m, 6H), 1.54 (m, 2H), 0.94 - 0.77 (m, 15H) ppm.
<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -108.6 ppm [-74.3 ppm TFA].
Primer DW
[0824]
(1-{6-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0825] (1-{6-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DW) je pripremljen na sličan način kao (1-{2-[5-(4'-{2-[2-Hidroksi-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-etil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, zamenjivanjem oksazolidin izvedene karboksilne kiseline sa odgovarajućim 4-ciklopropilprolin derivatom i korišćenjem HCl u dioksanu za Boc deprotekciju.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H52N8O6: 764.9 (M<+>); Pronađeno: 765.3 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.08 (m, 2 H), 7.91-7.84 (m, 10H) 7.33 (m, 2H), 5.23 (m, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.95 - 3.75 (m, 4H), 3.53 (s, 6H), 2.40 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 4H), 0.94-0.80 (m, 12H), 0.63 (m, 4H) ppm.
Primer DX
[0826]
(1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-tiazolidin-3-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[0827] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-tiazolidin-3-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DX) je pripremljen na sličan način kao (1-{6-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer DW), zamenjivanjem ciklopropil prolin karboksilne kiseline sa odgovarajućim tiazolidin derivatom.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H48N8O6S: 756.9 (M<+>); Pronađeno: 757.0 (M<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.06 (m, 2 H), 7.86-7.70 (m, 10H), 7.45 (m, 1H), 7.22 (m, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 4H), 3.80 (m, 2H), 3.56 (s, 6H), 3.30 (m, 2H), 2.40 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 5H), 0.94-0.75 (m, 12H) ppm.
Primer DY
[0828]
(1-{6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0829] 3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (57.6 mg, 0.068 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.0 mL) i DIEA (26.4 mg, 0.204 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-propionska kiselina (9.95 mg, 0.068 mmol), HATU (25.9 mg, 0.068 mmol) i DIEA (8.8 mg, 0.068 mmol) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 45 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1 % TFA) da se dobije proizvod (1-{6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (25.4 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50F2N8O6: 860.9 (M<+>); Pronađeno: 861.8 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.20-7.99 (m, 8H), 7.73 (s, 2H), 7.37 - 7.27 (m, 2H), 5.24 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H) 4.50 (s, 1H), 4.41 (m,1H), 4.02 (m, 1H), 3.85 (m,1H), 3.74 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.77 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.88 -1.79 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.25 (d, J= 7.8 Hz, 3H), 0.94 - 0.77 (m, 9H) 0.63 (m, 4H) ppm.<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -109.1 ppm [-74.8 ppm TFA].
Primer DZ
[0830]
(1-{6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-4-metilsulfonil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0831] 3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (55.6 mg, 0.067 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.0 mL) i DIEA (25.8 mg, 0.201 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-4-metilsulfonilbuterna kiselina (15.9 mg, 0.067 mmol), HATU (25.4 mg, 0.067 mmol) i DIEA (8.6 mg, 0.067 mmol) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (1-{6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-4-metilsulfonil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (23 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54F2N8O8S: 953.1 (M<+>); Pronađeno: 954.0 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.20-7.99 (m, 8H), 7.77 (s, 2H), 7.65 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 5.25 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H) 4.56 (s, 1H), 4.5 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.88 (m,1H), 3.72 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.27 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.78 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.88 - 1.79 (m, 4H), 1.56 (m, 1H), 0.94 - 0.77 (m, 9H) 0.63 (m, 4H) ppm.<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -109.1 ppm [-74.8 ppm TFA].
Primer EA
[0832]
(3-Cijano-1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0833] 3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (61.9 mg, 0.074 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.0 mL) i DIEA (28.5 mg, 0.186 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-3-cijano-buterne kiseline (13.8 mg, 0.074 mmol), HATU (28.3 mg, 0.074 mmol) i DIEA (9.5 mg, 0.074 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (3-Cijano-1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (33.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H51F2N9O6: 899.9 (M<+>); Pronađeno: 900.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.20-7.99 (m, 8H), 7.76 (s, 2H), 7.59 (m, 1H), 7.36 (m, 1H), 5.25 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H) 4.55 (s, 1H), 4.41 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.86 (m,1H), 3.74 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.77 (m, 1H), 2.62 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 2.14 (m, 2H), 1.88 - 1.79 (m, 4H), 1.54 (m, 1H), 0.94 - 0.77 (m, 9H) 0.63 (m, 4H) ppm.
<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -109.1 ppm [-74.7 ppm TFA].
Primer EB
[0834]
(1-{4-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5,5-dimetil-tiazolidin-3-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0835] 5,5-Dimetil-tiazolidin-4-karboksilna kiselina (1.1 g, 6.91 mmol) i DIEA (891 mg, 6.91 mmol) su dodati kao DMF (5 mL) suspenzija u prethodno izmešani rastvor N-(metilkarbamoil)(L)-valina (1.21 g, 6.91 mmol), HATU (2.26g, 6.91 mmol) i DIEA (891 mg, 6.91 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, dodatni HATU (2.26g, 6.91 mmol) i DIEA (891 mg, 6.91 mmol) su dodati i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 5 minuta, kao suspenzija amino-(4'bromo) acetofenon hidrohlorid soli (1.72 g, 6.91 mmol) i DIEA (891 mg, 6.91 mmol) u DMF (3 mL) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 10 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prebačen u EtOAc. Organski sloj je ispran sa vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (0.1M), vodenim rastvorom litijum hlorida (5%), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirov materijal. Prečišćavanje putem silika gel hromatografije (eluent EtOAc / heksani) dalo je proizvod (3.46 g, 6.73 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C21H28BrN3O5S: 514.3 (M<+>); Pronađeno: 515.4 / 513.4 (M+H<+>).
Proizvod iz prethodnog koraka (1.04mg, 1.94 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (9.0 mL) i zagrejan je na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (700 mg, 9.07 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 240 minuta, reakcija je ohlađen do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (1-{4-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5,5-dimetiltiazolidin-3-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (190 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C21H28BrN43OS: 495.4 (M<+>); Pronađeno: 496.4/494.4(M+H<+>).
[1-(4-{5-[4-(4-[2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5,5-dimetil-tiazolidin-3-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
[0836] (1-{4-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5,5-dimetil-tiazolidin-3-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (83 mg, 0.167 mmol) je kombinovan sa (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (66.0 mg, 0.167 mmol) i PdCl2(PPh3)2(11.7 mg, 0.017 mmol) pod atmosferom argona. DMF (2.0 mL degaziran sa Argoomn) je dodat praćeno sa trietilaminom (168 mg, 1.67 mmol) i bakar(I) jodidom (3.2 mg, 0.017 mmol). Smeša je zagrejana na 80 °C. Nakon 20 sati, isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je polu-prečišćen putem hromatografije na silika gelu (eluent EtOAc sa MeOH 10% / heksani) i dalje prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda/ MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod [1-(4-{5-[4-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5,5-dimetiltiazolidin-3-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (32.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H52N8O6S: 808.9 (M<+>); Pronađeno: 809.9 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.09 (m, 2H), 7.83 - 7.69 (m, 12H), 7.56 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 5.33 (s, 1H), 5.12 (m, 2H), 5.01 (m, 1H) 4.01 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.09 - 2.04 (m, 3H), 1.55 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.92 - 0.76 (m, 12H) ppm.
Primer EC
[0837]
4-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2,2-dimetil-oksazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0838] 2,2-Dimetil-oksazolidine-4-karboksilna kiselina (350 mg, 1.02 mmol) je rastvoren u DMF (2.5 mL) i HATU (387 mg, 0.102 mmol) i DIEA (129.0 mg, 1.02 mmol) su dodati. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi tokom pet minuta, nakon čega su [1-(2-{5-[4'-(2-Amino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar hidrohloridna so (503 mg, 1.0 mmol) i DIEA (129.0 mg, 1.02 mmol) dodati. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeon. Nakon 18 sati, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov materijal je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (323 mg). Materijal je rastvoren je rastvoren u m-ksilenima (5.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (280 mg, 3.63 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 180 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 4-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2,2-dimetil-oksazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar (123 mg, 0.172 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H49N7O6: 711.8 (M<+>); Pronađeno: 712.7 (M+H<+>).
(1-{2-[5-(4'-{2-[2-Hidroksi-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-etil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0839] 4-[5-(4'-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-2,2-dimetil-oksazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar (61 mg, 0.086 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i TFA (4M, 0.2 mL) je dodat i mešanje na 0 °C je nastavljeno. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.5 mL) i DIEA (33.0 mg, 0.255 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (15.2 mg, 0.086 mmol), HATU (32.5 mg, 0.086 mmol) i DIEA (11.0 mg, 0.086 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i je ispran sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (1-{2-[5-(4'-{2-[2-Hidroksi-1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butirilamino)-etil]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (11.2 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H48N8O7: 728.8 (M<+>); Pronađeno: 729.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.62 (m, 1H), 8.11 (m, 2H), 7.95 - 7.86 (m, 8H), 7.34 (m, 1H), 7.22 (m, 1H), 5.10 (m, 2H), 4.78 (s, 1H) 4.13 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 3.83 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.09 - 2.04 (m, 5H), 0.88 - 0.75 (m, 12H) ppm.
Primer ED
Pripremanje Intermedijera 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-metil estar
[0840]
4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar:
[0841] 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (10.0 g, 44 mmol) je rastvoren u MeOH (75 mL) na sobnoj temperaturi i HCl (4M u dioksanu, 75 mL) je dodata. Mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno tokom 4 sata. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i bež čvrsta supstanca je dobijena.
[0842] Sirov materijal je suspendovan u DCM (100 mL) i N-Metil morfolin (13.3 g, 132 mmol) je dodat. Smeša je ohlađena do 0 °C i benzil hloroformat (8.26 g, 48.4 mmol) je dodat uz mešanje. Nakon 30 minuta, reakcija je zagrejana do sobne temperature i rastvor je ispran sa vodom i vodenom HCl (1M). Rastvor je osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (10.2 g). LCMS-ESI<+>: izračunato za C15H17NO4: 275.3 (M<+>); Pronađeno: 276.4 (M+H<+>).
[0843] 5-aza-spiro[2.4]heptani-5,6-dikarboksilna kiselina benzil estar: Sud sa okruglim dnom sa 3 grla osušen u rerni je opremljen sa adapterom za dovod azota i levkom za dodavanje od 250 mL. Treće grlo je zatvoreno pregradom. Sud je napunjen “štapićem” sa mešanje, dihlormetanom (120 mL) i dietil cinkom (1.0 M u heksanu, 118 mL, 118 mmol) zatim ohlađen do 0 °C u ledenom kupatilu. Dodatni levak je napunjen sa dihlormetanom (40 mL) i trifluorosirćetnom kiselinom (9.1 mL, 118 mmol). Nakon što je dietil cink rastvor ohlađen do 0 °C (about 25 minuta), rastvor trifluorosirćetne kiseline je dodat u kapima tokom 20 minuta u mešanu reakcionu smešu. Nakon mešanja tokom još 20 minuta na 0 °C, dijodometan (9.5 mL, 118 mmol) je dodat polako tokom 4 minuta. Nakon još 20 minuta, 4-metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar (8.10 g, 29.4 mmol) je dodat u 30 mL dihlormetan pomoću kanile. Sud koji sadrži 4-metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar je zatim ipsran sa još 10 mL dihlormetana i ovaj rastvor je takođe prebačen u reakcionu smešu pomoću kanile. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 110 sati (oko 5 dana) nakon čega su reagensi kvenčovani sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (-150 mL). Sadržaj suda je polako sipan i levak za separaciju od 2 L koji sadrži zasićeni vodeni natrijum bikarbonat (-800 mL). Vodena faza je ekstrakovana tri puta sa 300 mL etil acetata. Kombinovane organske supstance su osušene preko magnezijum sulfata i koncentrovane da se obezbedi sirov materijal. Sirov materijal je rastvoren u 3:1:1 THF/voda/aceton (165 mL) zatim tretiran sa N-metilmorfolin-N-oksidom (3.45 g, 29.4 mmol) i osmijum tetroksidom (4 mas% u vodi, 5 mL, 0.818 mmol). Nakon mešanje na sobnoj temperaturi tokom 7 h, reagensi su kvenčovani sa 1 M vodenim natrijum tiosulfatom (-100 mL). Sadržaj suda je zatim sipan u levak za separaciju od 1 L koji sadrži vodu (-300 mL). Vodena faza je ekstrakovana tri puta sa 300 mL dihlormetana. Kombinovane organske supstance su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (5% do 45% EtOAc/heksan) da se obezbedi 5-aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-metil estar kao bistro ulje (5.54g, 19.15 mmol, 65%) kao bistro ulje.<1>H NMR (CDCl3) δ 7.36-7.29 (m, 5H), 5.21-5.04 (m, 2H), 4.56-4.47 (m, 1H), 3.75 (s, 1.5H), 3.60 (m, 1.5H), 03.51-3.37 (m, 2H), 2.32-2.25 (m, 1H), 1.87-1.80 (m, 1H), 0.64-0.51 (m, 4H).
5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar:
[0844] 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-metil estar (244 mg, 0.840 mmol) je rastvoren u THF (2.0 mL)/MeOH (1.5 mL). Vodeni rastvor LiOH (35.5 mg, 0.84 mmol) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljen. Nakon 3 sata, reakcija je neutralisana sa vodenom HCl (1M) i organski rastvarači su uklonjeni u vakuumu. Sirova smeša je razblažena sa vodom i EtOAc i organski sloj je sakupljen. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i sirov kiselina je korišćena bez daljeg prečišćavanja. LCMS-ESI<+>: izračunato za C15H17NO4: 275.3 (M<+>); Pronađeno: 276.3 (M+H<+>).
Primer ED'
[0845]
2,7-Dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren:
[0846] 2,7-Dibromo-fluoren-9-on (4.0 g, 11.8 mmol) je suspendovan u deoksofluoru (12 mL) na sobnoj temperaturi i EtOH (4 kapi) je dodat. Mešana suspenzija je zagrejana na T = 90° C tokom 24 sata (OPREZ: Upotreba deoksofluora pri povišenim temperaturama, kao što je iznad opisano, je veoma obeshrabrena jer brza i intenzivna egzotermija može da se odigra).
Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u led koji sadrži natrijum bikarbonat. Čvrsta supstanca je formirana i sakupljena je filtracijom. Sirov materijal je prebačen u EtOAc i je ispran sa vodenom HCl (1M) i slanim rastvorom. Rastvor je osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 2,7-Dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren (3.2 g).<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -111.6 ppm.
[0847] Pre korišćenja materijala u sledećem koraku, izložen je kao rastvor u EtOAc uglju.
5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar:
[0848] 2,7-Dibromo-9,9-difluoro-9H-fluoren (372 mg, 1.04 mmol), Pd(PPh3)4(30.0 mg, 0.026 mmol), PdCl2(PPh3)2(18.2 mg, 0.026 mmol), As(PPh3)3(5.0 mg) su rastvoreni u dioksanu (10 mL) pod atmosferom argona. Etoksivinil-tributil kalaj (376.4 mg, 1.04 mmol) je dodat. Smeša je zagrejana tokom 140 minuta na 85°C (uljano kupatilo). Reakcija je ohlađena do sobne temperature. N-bromo sukcinimid (177 mg, 1.0 mmol) je dodat praćeno sa vodom (2 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata, nakon čega je veći deo dioksana uklonjen u vakuumu. Siroav reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana je sa vodom. Sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Toluen je dodat i sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu po drugi put. Sirov materijal je rastvoren u DMF / MeCN (2 mL, 1:1) na sobnoj temperaturi. Rastvor N-Cbz-4-ciklopropil (L) Prolin (0.84 mmol) i DIEA (268 mg, 2.08 mmol) u MeCN (2 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 14 sati, veći deo MeCN je uklonjen u vakuumu i sirova reakciona smeša je razblažena sa EtOAc. Smeša je ispran sa vodenom HCl (1M), vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirov reakcija proizvod, koji je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar (176 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C30H24BrF2NO5: 596.4 (M<+>); Pronađeno: 595.2 / 597.2 (M+H<+>).
6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar:
[0849] 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-2-okso-etil] estar (172 mg, 0.293 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (6.0 mL). Amonijum acetat (226 mg, 2.93 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 140°C tokom 60 minuta u mikrotalasnim uslovima. Reakcija je ohlađen do sobne temperature i sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (80.3 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C30H24BrF2N3O2: 576.4 (M<+>); Pronađeno: 575.2 / 577.2 (M+H<+>).
(1-{6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0850] 6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (800 mg, 1.38 mmol) je rastvoren u DCM (15 mL) i HBr u AcOH (37%, 2 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 180 minuta, suspenzija je razblažena sa heksanima i čvrsta supstanca je sakupljena putem filtracije i isprana je sa heksanima i podvrgnuta vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (4.0 mL) i DIEA (356 mg, 2.76 mmol) je dodat. rastvor 2-(L)-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (242 mg, 1.38 mmol), HATU (524 mg, 1.38 mmol) i DIEA (178 mg, 1.38 mmol) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 50 minuta, reakcija je razblažen sa EtOAc i isprana je sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije neznatno nečist proizvod (1-{6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (878 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H29BrF2N4O3: 599.5 (M<+>); Pronađeno: 598.5 / 600.5 (M+H<+>).
3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0851] (1-{6-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (840 mg, 1.4 mmol), 3-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (615 mg, 1.4 mmol), Pd(PPh3)4(161 mg, 0.14 mmol), K2CO3(579 mg, 4.2 mmol), su rastvoreni u DME (15 mL) / voda (3 mL) pod atmosferom argona. Smeša je zagrejana tokom 120 minuta na 85 - 90°C (uljano kupatilo). Nakon 120 minuta dodatni estar boronske kiseline (61 mg, 0.14 mmol) je dodat i zagrevanje je nastavljeno. Nakon 3 sati, reakcija je ohlađen do sobne temperature. Veći deo DME je uklonjen u vakuumu i sirova reakciona smeša je razblažena sa EtOAc. Smeša je isprana sa slanim rastvorom i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirov reakcioni proizvod, koji je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod 3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (878 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H51F2N7O5: 831.9 (M<+>); Pronađeno: 832.7 (M+H<+>).
(1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0852] 3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (115 mg, 0.138 mmol) je rastvoren u DCM (2 mL) i HCl u dioksanu (4M, 2 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 20 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.5 mL) i DIEA (53.4 mg, 0.414 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (24.2 mg, 0.138 mmol), HATU (52.4 mg, 0.138 mmol) i DIEA (17.8 mg, 0.138 mmol) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i je ispran sa vodenim rastvorom bikarbonata, vodenim rastvorom LiCl (5%), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (76 mg). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54F2N8O6: 888.9 (M<+>); Pronađeno: 890.0 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.20-7.99 (m, 8H), 7.73 (s, 2H), 7.37 - 7.27 (m, 2H), 5.25 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H) 4.54 (s, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.87 (m,1H), 3.74 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.75 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.88 -1.79 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 0.94 - 0.77 (m, 15H) 0.63 (m, 4H) ppm.<19>F-NMR: 282 MHz, (dmso-d6) δ: -109.1 ppm [-74.8 ppm TFA]
Primer EE
[0853]
[0854] 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar. Pd(Ph3)4(20 mg, 0.017 mmol) je dodat u smešu 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidrofenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (173 mg, 0.35 mmol), 3-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (154 mg, 0.35 mmol), NaHCO3(103 mg, 1.22 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (5 mL) i vodi (1 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, i zatim ispraljiva komponenta je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoćufleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (150 mg, 59%). m/z 727.4 (M+H)<+>.
[0855] (1-{3-[6-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: u rastvor 3-(6-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (135 mg, 0.19 mmol) u dihlormetanu (6 mL) je dodat trifluoroacetic kiselina (2 mL, višak). Smeša je mešana tokom 2 sata na ambijentalnoj temperaturi i koncentrovanapod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se okloni višak trifluorosirćetne kiseline. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (65 mg, 0.37 mmol), HATU (156 mg, 0.41 mmol) i N,N-izopropiletilamin (0.32 mL, 1.86 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{3-[6-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (57 mg, 36%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.05-7.60 (m, 10H), 5.25 (t, 1H), 4.40-4.05 (m, 3H), 3.95-3.60 (m, 8H), 3.10-2.90 (m 6H), 2.65-2.50 (m, 1H), 2.40-1.70 (m, 11H), 1.05-0.90 (m, 12H); m/z 839.2 (M+H)<+>.
Primer EF
[0856]
[0857] 2-{5-[7-(2-Bromo-acetil)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. Pd(Ph3)4(15 mg, 0.015 mmol) i PdCl2(Ph3)2(10 mg, 0.015 mmol) su dodati smeši 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (180 mg, 0.37 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (0.15 mL, 0.44 mL) u 5 mL dioksana. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (1.5 mL) i NBS (78 mg, 0.44 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta, zatim razblažena sa etil acetatom (100 mL). Isprana je sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je prenet reakciju u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0858] 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar. smeša 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (167 mg, 0.69 mmol) i DIPEA (0.11 mL, 0.67 mmol) je dodat u rastvor 2-{5-[7-(2-bromoacetil)-9,10-dihidro-fenantren-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.37 mmol, sirov) u acetonitrilu (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, zatim razblažen sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvor i voda, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-2-oksoetil) estar 2-terc-butil estar kao braon čvrsta supstanca (132 mg, 51% preko dva koraka). m/z 697.2 (M+H)<+>.
[0859] 3-(5-{7-[2-(1-terf-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar. Smeša 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-2-oksoetil) estar 2-terc-butil estar (132 mg, 0.19 mmol) i amonijum acetat (292 mg, 3.8 mmol) u ksilenu (10 mL) je zagrejan u zatvorenoj epruveti 140°C tokom 1.5 sata u mikrotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (36 mg, 28%). m/z 677.4 (M+H)<+>.
[0860] (2-{3-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-2-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (36 mg, 0.053 mmol) u dihlormetanu (6 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (2 mL, višak). Smeša je mešana tokom 2 sati na ambijentalnoj temperaturi i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak trifluoroasirćetne kiseline. Dobijen bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-propionska kiselina (17 mg, 0.12 mmol), HATU (50 mg, 0.13 mmol) i N,N-izopropiletilamin (0.09 mL, 0.53 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (2-{3-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilaminopropionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-2-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (5.5 mg, 14%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.05-7.60 (m, 8H), 5.35-5.25 (m, 1H), 4.65-4.40 (m, 3H), 4.05-3.80 (m, 2H), 3.75-3.50 (m, 7H), 3.00 (s, 4H), 2.87 (s, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.30-1.70 (m, 9H), 1.45-1.20 (m, 6H); m/z 735.3 (M+H)<+>.
Primer EG
[0861]
[0862] (1-{2-[5-(7-Bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (187 mg, 0.38 mmol) u metanolu (5 mL) je dodat 4.0 M rastvor HCl u dioksanu (2 mL, višak). Smeša je mešana tokom 3 sata na 50°C i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak HCl. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (70 mg, 0.40 mmol), HATU (173 mg, 0.46 mmol) i N,N-izopropiletilamin (0.66 mL, 3.8 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod (1-{2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil} -2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao ulje (200 mg, 95%). m/z 551.2, 553.2 (M+H)<+>.
[0863] 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar 3-[2-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidrofenantren-2-il)-2-okso-etil] estar: Pd(Ph3)4(15 mg, 0.015 mmol) i PdCl2(Ph3)2(10 mg, 0.015 mmol) su dodati smeši (1-{2-[5-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (200 mg, 0.37 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (0.15 mL, 0.44 mL) u 5 mL dioksana. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (1.5 mL) i NBS (78 mg, 0.44 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 minuta, zatim razblažena sa etil acetatom (100 mL). Isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je rastvoren u acetonitrilu (3 mL). U njega je dodat rastvor 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (167 mg, 0.69 mmol) i DIPEA (0.11 mL, 0.67 mmol) u 2 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati, zatim razblažena sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom i vodom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 2-Azabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar 3-[2-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-okso-etil] estar kao braon ulje (130 mg, 47% preko dvaka koraka). m/z 754.3 (M+H)<+>.
[0864] 3-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il] -2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar. smeša 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar 3-[2-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-okso-etil] estar (130 mg, 0.17 mmol) i amonijum acetat (292 mg, 3.8 mmol) u ksilenu (10 mL) je zagrejan u zatvorenoj epruveti na 140°C tokom 1.5 sati u mirkotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 3-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (38 mg, 28%). m/z 734.4 (M+H)<+>.
[0865] (1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 3-[5-(7-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (38 mg, 0.052 mmol) u dihlormetanu (6 mL) je dodat trifluoroacetic kiselina (2 mL, višak). Smeša je mešana tokom 2 sata na ambijentalnoj temperaturi i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak trifluorosirćetne kiseline. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-propionska kiselina (9 mg, 0.06 mmol), HATU (30 mg, 0.08 mmol) i N,N-izopropiletilamin (0.09 mL, 0.53 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{2-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidrofenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (15 mg, 39%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.10-7.60 (m, 8H), 5.35-5.25 (m, 1H), 4.70-4.45 (m, 3H), 4.30-3.80 (m, 3H), 3.67 (s, 6H), 2.70-1.60 (m, 12H), 1.41 (d, 3H), 1.05-0.80 (m, 6H); m/z 763.3 (M+H)<+>.
Primer EH
[0866]
[0867] 2,7-Dibromo-9,10-dihidro-fenantrene. Brom (6.13 mL, 119.3 mmol) je dodat polako u rastvor 9,10-dihidro-fenantrena (10 g, 55.5 mmol) u trimetilfosfatu (100 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je ponovo kristalisao iz hloroforma da se dobije proizvod 2,7-Dibromo-9,10-dihidro-fenantren kao beli kristal (9.45 g, 51 %).
[0868] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar. Pd(Ph3)4(347 mg, 0.3 mmol) i PdCl2(Ph3)2(210 mg, 0.3 mmol) su dodati smeši 2,7-dibromo-9,10-dihidro-fenantrena (2.5 g, 7.4 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaja (2.5 mL, 7.4 mL) u 70 mL dioksana. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (20 mL) i NBS (1.39 g, 7.8 mmol) su dodati i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 minuta, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je suspendovan u acetonitrilu (70 mL). U nju je dodat rastvor Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (3.2 g, 14.9 mmol) i DIPEA (2.4 mL, 14.1 mmol) u 20 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom i vodom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar bela čvrsta supstanca (1.76 g, 46% preko dva koraka). m/z 514.2, 516.2 (M+H)<+>.
[0869] 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar. Pd(Ph3)4(37 mg, 0.03 mmol) i PdCl2(Ph3)2(22 mg, 0.03 mmol) su dodati smeši Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar (410 mg, 0.8 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (0.32 mL, 0.96 mmol) u 8 mL dioksana. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (2 mL) i NBS (171 mg, 0.96 mmol) su dodati i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 minuta, zatim razblažena sa etil acetatom (100 mL). Ispraan sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Polovina dobijenog ostatka je suspendovana u acetonitrilu (5 mL). U to je dodat rastvor 2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (100 mg, 0.41 mmol) i DIPEA (0.068 mL, 0.39 mmol) u 2 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati, zatim razblažena sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom i vodom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijen ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (171 mg, 60% preko dva koraka). m/z 717.2 (M+H)<+>.
[0870] 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar. Smeša 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-2-oksoetil) estar 2-terc-butil estar (171 mg, 0.24 mmol) i amonijum acetat (800 mg, 10.2 mmol) u ksilenu (5 mL) je zagrejan u zatvorenoj epruveti na 140°C tokom 1.5 sata u mikrotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 3-(5-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidrofenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (100 mg, 62%). m/z 677.9 (M+H)<+>.
[0871] (1-{3-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 3-(5-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,10-dihidro-fenantren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (100 mg, 0.15 mmol) u metanolu (5 mL) je dodat 4.0 M rastvor HCl u dioksanu (2 mL, višak). Smeša je mešaan tokom 3 sata na 50°C i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak HCl. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (54 mg, 0.31 mmol), HATU (141 mg, 0.37 mmol) i N,N-diIzopropiletilamin (0.2 mL, 1.2 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{3-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,10-dihidro-fenantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (67 mg, 57%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.05-7.65 (m, 8H), 5.35-5.20 (m, 1H), 4.40-4.05 (m, 3H), 3.95-3.80 (m, 1H), 3.67 (d, 6H), 3.05-2.80 (m, 5H), 2.70-2.50 (m, 1H), 2.40-1.60 (m, 13H), 1.10-0.85 (m, 12H); m/z 791.3 (M+H)<+>.
Primer EI
[0872]
[0873] 2,7-Dibromo-9,9-dimetil-9H-fluoren. u mešan rastvor 2,7-dibromo-9H-fluoren (1.0 g, 3.1 mmol), KI (50 mg, 0.3 mmol) i KOH (750 mg, 13.3 mmol) u DMSO je dodat metil jodid (0.42 mL, 6.8 mmol). Smeša je mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, zatim razblažen sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 2,7-Dibromo-9,9-dimetil-9H-fluoren kao bela čvrsta supstanca (1.1 g, 100%).
[0874] 4,4,5,5-Tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioksaborolan-2-il)-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan. Pd(PPh3)4(347 mg, 0.3 mmol) je dodat u flask containing Smeša 2,7-dibromo-9,9-dimetil-9H-fluoren (1.0 g, 2.9 mmol), bis(pinakolato)dibor (2.9 g, 11.6 mmol), kalijum acetat (1.4 g, 14.5 mmol) i 1,4-dioksan (30 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (300 mL), ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 4,4,5,5-Tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolan kao bela čvrsta supstanca (0.8 g, 62%).
[0875] 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. Pd(Ph3)4(55 mg, 0.05 mmol) je dodat u smeša 4,4,5,5-Tetrametil-2-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il]-[1,3,2]dioksaborolane (205 mg, 0.48 mmol), 2-(4-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (309 mg, 0.98 mmol), NaHCO3(282 mg, 3.4 mmol) u 1,2-dimetoksietan (8 mL) i vodom (1 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar kao TFA so (45 mg, 14%). m/z 665.4 (M+H)<+>.
[0876] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 2-(5-{7-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (45 mg, 0.07 mmol) u metanolu (5 mL) je dodat 4.0 M rastvor HCl u dioksanu (1 mL, višak). Smeša je mešana tokom 3 sata na 50°C i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak HCl. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (5 mL), u rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (25 mg, 0.14 mmol), HATU (65 mg, 0.17 mmol) i N,N-diIzopropiletilamin (0.09 mL, 0.54 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-9,9-dimetil-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (15 mg, 28%).
<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.05-7.70 (m, 8H), 5.35-5.20 (m, 2H), 4.30-3.80 (m, 6H), 3.67 (s, 6H), 2.65-2.00 (m, 10H), 1.61 (s, 6H), 1.05-0.85 (m, 12H); m/z 779.4 (M+H)<+>.
Primer EJ
[0877]
[0878] 3,8-Dibromo-benzo[c]hromen-6-on. Rastvor TFAA (2.1 mL, 3.15 mmol) u dihlormetanu (5 mL) je dodat u kapima u suspenzija 2,7-dibromo-fluoren-9-on (3.3 g, 10 mmol) i H2O2-urea (1.4 g, 15 mL) u dihlormetanu (50 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 sati, druga porcija H2O2-urea je dodata, i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom još 72 sati. Smeša je filtrirana, organska faza je ekstrakovana sa vodom (50 mL), i osušena preko Na2SO4. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatak je zagrejan sa 2N NaOH na 80°C tokom 10 minuta, filtriran, ohlađen filtrat ekstrakovan sa etrom. Vodena faza je zakiseljena sa 2N HCl i ekstrakovana sa etil acetatom (200 mL). HCl (2 mL 4M rastvor) je dodata u etil acetat i zagrevano je tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, ostatak je ponovo kristalisao iz etil acetat/etanol da se dobije krajnji proizvod 3,8-Dibromo-benzo[c]hromen-6-on kao bela čvrsta supstanca (1.5 g, 40%).
[0879] 3,8-Dibromo-6H-benzo[c]hromen. u rastvor 3,8-dibromo-benzo[c]hromen-6-on (650 mg, 1.85 mmol) u THF (20 mL) je dodat 2 M rastvor LiBH4u THF (3.7 mL, 7.4 mmol). Smeša je mešana tokom 3 sata na sobnoj temperaturi. Kvenčovano je polako sa amonijum hloridnim rastvor. Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni ostatak je suspendovan u 85% fosfornoj kiselini (20 mL) i zagrejan na 160°C tokom 4h. Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom, isprana sa vodom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 3,8-Dibromo-6H-benzo[c]hromen kao bela čvrsta supstanca (539 mg, 86%).
[0880] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-(2-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-2-okso-etil) estar. Pd(PPh3)4(74 mg, 0.064 mmol) i PdCl2(Ph3)2(45 mg, 0.064 mmol) su dodati u smešu 3,8-dibromo-6H-benzo[c]hromen (539 mg, 1.6 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (1.2 mL, 3.5 mL) u 20 mL dioksana. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80°C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperaturi. Voda (7 mL) i NBS (623 mg, 3.5 mmol) su dodati i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 minuta, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Čvrsta supstanca je filtrirana i držana odvojeno. Sloj etil acetata je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak kombinovan sa čvrstom supstancom sakupljenom pre je suspendovan u acetonitrilu (20 mL) i DMF (10 mL). U to je dodat rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (1.6 g, 7.4 mmol) i DIPEA (1.2 mL, 7.1 mmol) u 5 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvoomr i vodom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-(2-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-2-okso-etil) estar kao bela čvrsta supstanca (602 mg, 54% preko dva koraka). m/z 715.2 (M+Na)<+>.
[0881] 2-(5-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. Smeša Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-(2-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-2-okso-etil) estar (168 mg, 0.24 mmol) i amonijum acetata (374 mg, 4.8 mmol) u ksilenu (10 mL) je zagrejana u zatvorenoj epruveti na 140°C tokom 1.5 sata u mikrotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), isprana sa NaHCO3rastvor, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se obezbedi željeni proizvod 2-(5-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4il]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar kao bela čvrsta supstanca (100 mg, 64%). m/z 653.4 (M+H)<+>.
[0882] (1-{2-[5-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor 2-(5-{8-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-6H-benzo[c]hromen-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (300 mg, 0.46 mmol) u dihlormetanu (10 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (2.5 mL, višak). Smeša je mešana tokom 2 sata na ambijentalnoj temperaturi i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom da se ukloni višak trifluorosirćetne kiseline. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (10 mL), u rastvor je dodata 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (161 mg, 0.92 mmol), HATU (437 mg, 1.2 mmol) i N,N-diIzopropiletilamin (0.64 mL, 3.7 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{2-[5-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (130 mg, 37%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.80-7.20 (m, 8H), 5.40-5.05 (m, 4H), 4.65-3.80 (m, 6H), 3.75-3.40 (m, 6H), 2.40-1.90 (m, 10H), 1.05-0.80 (m, 12H); m/z 767.3 (M+H)<+>.
Primer EK
[0883]
[0884] (1-{6-[5-(7-{2-[2-(3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. u rastvor {1-[6-(5-{7-[2-(2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (30 mg, 0.037 mmol) u DMF (2 mL) je dodat 3-cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina (8 mg, 0.045 mmol), HATU (20 mg, 0.052 mmol) i N,N-diIzopropiletilamin (0.051 mL, 0.3 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{6-[5-(7-{2-[2-(3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (18 mg, 54%).<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.30-7.70 (m, 10H), 7.45-7.30 (m, 1H), 5.26 (t, 1H), 5.00-4.80 (m, 2H), 4.60-4.45 (m, 1H), 4.10-3.70 (m, 4H), 3.63 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.00-2.65 (m, 4H), 2.30-1.10 (m, 12H), 1.00-0.60 (m, 8H); m/z 886.4 (M+H)<+>.
Primer EL
[0885]
(1-{6-[5-(7-{2-[2-(3-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.
[0886] U rastvor {1-[6-(5-{7-[2-(2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-imidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (30 mg, 0.037 mmol) u DMF (2 mL) je dodat 3-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina (8 mg, 0.045 mmol), HATU (20 mg, 0.052 mmol) i N,N-diIzopropiletilamin (0.051 mL, 0.3 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi željeni proizvod (1-{6-[5-(7-{2-[2-(3-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar kao TFA so (18 mg, 54%).<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.30-7.70 (m, 10H), 7.40-7.30 (m, 1H), 5.26 (t, 1H), 5.00-4.80 (m, 2H), 4.60-4.45 (m, 1H), 4.10-3.70 (m, 5H), 3.63 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.00-2.65 (m, 4H), 2.30-1.10 (m, 12H), 1.00-0.60 (m, 10H); m/z 939.4 (M+H)<+>.
A. Primer EM
[0887]
1,4-Dibromo-2-nitro-benzen: Jedinjenje je kupljeno od Sigma-Aldrich Co.
[0888] 4,4'-Dibromo-2,2'-dinitro-bifenil: Smeša 1,4-dibromo-2-nitro-benzena (25 g, 89 mmol) i praha bakra (12.5 g, 197 mmol) u DMF (150 ml) je zagrejana na 137 C tokom 2 sata. Smeša je ohlađena do 25°C i kvenčovana je sa vodom. Smeša je ekstrakovana sa EtOAc (2x). Kombinovan organski rastvor je ispran sa vodom i slanim rastvorom i osušen je sa Na2SO4. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dala je 4,4'-dibromo-2,2'-dinitro-bifenil (13.6 g).
[0889] 4,4'-Dibromo-2-metoksi-2'-nitro-bifenil: U rastvor 4,4'-dibromo-2,2'-dinitro-bifenila (6.58 g, 16.5 mmol) u DMF (50 ml) na 0°C je dodat rastvor natrijum metoksida u metanolu (4.4 M, 4.5 ml, 19.8 mmol). Smeša je mešana na 25°C tokom 12 sati i sipana je u ledenu vodu (140 ml). Smeša je ekstrakovana sa EtOAc (2x). Kombinovana organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom i osušena sa Na2SO4. Koncentracija pod smanjenim pritiskom dala je bledu čvrstu supstancu. Ponovna kristalizacija iz CH3CN/MeOH dala je 4,4'-dibromo-2-metoksi-2'-nitro-bifenil kao belu čvrstu supstancu (3.76 g).
[0890] 4,4'-Dibromo-2'-metoksi-bifenil-2-ilamin: u suspenziju 4,4'-dibromo-2-metoksi-2'-nitrobifenila (3.76 g, 9.8 mmol) i 5%Ru/C (400 mg) u etanolu (37 ml) at 65-70°C je dodat u kapima rastvor hidrazina (4.6 ml, 59 mmol) u etanolu (5 ml). Smeša je refluksovana tokom 7 sati i filtrirana kroz uložak od CELITE-a. CELITE uložak je ispran sa etanolom. Kombinovan rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Koevaporacija sa etanolom, EtOAc i DCM dala je 4,4'-dibromo-2'-metoksi-bifenil-2-ilamin kao žuta čvrsta supstanca (3.5 g).
[0891] 3,7-Dibromo-dibenzofuran: u suspenziju 4,4'-Dibromo-2'-metoksi-bifenil-2-ilamin (3.5 g, 9.8 mmol) u H2SO4 (2.4 g) i vodom (8.5 ml) na 0°C je dodat polako rastvor NaNO2 (682 mg, 9.8 mmol) u vodi (9 ml). Smeša je mešana na 0°C tokom 2 sata. Urea (1.2 g, 20 mmol) je dodata i smeša je mešana tokom 12 sati. Smeša je razblažena sa vodom i zagrejana je na 70°C tokom 24 sati. Smeša je ohlađena do 25°C i je filtriran. Sakupljena čvrsta supstanca je ponovo kristalisala iz benzen/metanola da se dobije 3,7-dibromo-dibenzofuran (2.27 g).
[0892] 2-Bromo-1-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-etanon i 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-etanon: U rastvor 3,7-dibromo-dibenzofuran (972 mg, 3 mmol) i tributil(etoksivinil)stanana (1.22 ml, 3.6 mmol) u dioksanu (20 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(90 mg) i Pd(PPh3)4 (90 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (7 ml) je dodat, praćeno sporim dodavanjem NBS (641 mg, 3.6 mmol) tokom perioda od 5 minuta. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija pod smanjenim pritiskom dala je smeši 2-bromo-1-(7-bromodibenzofuran-3-il)-etanona i 2-Bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-etanona, koja je korišćena direktno za sledeći korak.
[0893] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-2-oksoetil]estar 1-terc-butil estar i Diketoestar: U rastvor (s)Boc-PrOH (2.58 g, 12 mmol) i trietilamin (1.46 ml, 10.5 mmol) u acetonitrilu (20 ml)/DMF (15 ml) je dodat rastvor 2-bromo-1-(7-bromodibenzofuran-3-il)-etanon i 2-bromo-1-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-etanon u DMF (20 ml). Smeša je mešan tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa 0.5 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dala je Pirolidin1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (630 mg) i Diketoestar (620 mg).
Primer EN
[0894]
[0895] 3,7-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran:
Smeša diketoestra (600 mg, 0.89 mmol) i amonijum acetata (1.72g) u ksilenu (10 ml) je zagrejana na 140°C 80 minuta pod mikrotalsnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i ekstrakovan sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dala je 3,7-bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran (330 mg). m/z: 639.1 (M+1), 637.3 (M-1), 320.0 (M+2)/2.
(1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0896] U rastvor 3,7- bis-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran (330 mg, 0.51 mmol) u DCM (4 ml) je dodat TFA (2 ml). Smeša je mešana 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je u zamrzivaču da se dobije braon prah. U rastvor iznad pomenutog praha (0.51 mmol) i MeOCO-Val-OH (179 mg, 1.02 mmol) u DMF (15 ml) je dodat HATU (407 mg, 1.07 mmol), praćeno diizopropiletilamin (0.9 ml, 5.1 mmol). Smeša je mešana 60 minuta i uparena je i zatim razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N NaOH rastvorom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dala je (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (130 mg). m/z: 753.4 (M+1), 751.3 (M-1), 377.3 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.23 (2 H, d, J = 7.9 Hz), 8.0 (2 H, s), 7.98 (2 H, s), 7.78 (2 H, d, J = 7.9 Hz), 5.27 (2 H, m), 4.24 (2 H, d, J = 7.0 Hz), 4.15 (2 H, m), 3.90 (2 H, m), 3.67 (6 H, s), 2.60 (2 H, m), 2.35-2.0 (8 H, m), 1.0-0.8 (12 H, m).
B. Primer EO
[0897]
[0898] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-2-okso-etil}estar 1-terc-butil estar: U rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromodibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (250 mg, 0.5 mmol) i tributil(etoksivinil)stanan (188 µl, 0.55 mmol) u dioksanu (3.3 ml) je dodat PdCl2(PPh3)2(15 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati i ohlađena je do 0°C. Voda (1.1 ml) je dodata, praćeno sporim dodavanjem NBS (98 mg, 0.55 mmol) tokom perioda od 5 minuta. Smeša je mešana na 0°C tokom dodatnih 40 minuta, i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (heksan/EtOAc) dala je Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-2-okso-etil}estar 1-tercbutil estar (205 mg).
2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzofuran-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar:
[0899] U rastvor 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar (155 mg, 0.64 mmol) i trietilamina (77 µl, 0.55 mmol) u acetonitrilu (3 ml) je dodat rastvor Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-{2-[7-(2-bromo-acetil)-dibenzofuran-3-il]-2-okso-etil} estar 1-terc-butil estar (200 mg, 0.37 mmol) u DMF (6 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzofuran-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar (243 mg). m/z: 703.3 (M-1), 727.2 (M+Na)
[0900] 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar:
Smeša 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{7-[2-(1-terc-butoksikarbonilpirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-dibenzofuran-3-il}-2-okso-etil) estar 2-terc-butil estar (243 mg) i amonijum acetata (860 mg, 11 mmol) u ksilenu (5 ml) je zagrejana na 140°C 80 minuta pod mikrotalsnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i ekstrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušean je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dala je 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (170 mg). m/z: 665.0 (M+1), 663.4 (M-1), 333.0 (M+2)/2.
[0901] (1-{3-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 3-(5-{7-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (170 mg) u DCM (6 ml) je dodat TFA (3 ml). Smeša je mešana 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je u zamrzivaču da se dobije braon prah. U rastvor gore pomenutog praha (0.256 mmol) i MeOCO-Val-OH (90 mg, 0.51 mmol) u DMF (7.5 ml) je dodat HATU (204 mg, 0.54 mmol), praćeno diizopropiletilaminom (0.45 ml, 2.56 mmol). Smeša je mešana 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N NaOH rastvorom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{3-[5-(7-{2-[1-(2Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (127 mg). m/z: 779.3 (M+1), 777.3 (M-1), 390.2 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.23 (2 H, d, J = 8.2 Hz), 8.03 (2 H, s), 7.98 (2 H, m), 7.88 (2 H, d, J = 8.2 Hz), 5.25 (1 H, m), 4.85 (1 H, m), 4.33 (1 H, d, J = 6.1 Hz), 4.24 (1 H, d, J = 7.0 Hz), 4.15 (1 H, m), 3.88 (1 H, m), 3.69 (3 H, s), 3.67 (3 H, s), 3.45 (1 H, m), 2.89 (1 H, m), 2.60 (1 H, m), 2.35-1.6 (11 H, m), 1.05-0.8 (12 H, m).
C. Primer EP
[0902]
[0903] 2-[5-(7-Bromo-ibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina test-butil estar: Smeša Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (200 mg) i amonijum acetata (860 mg, 11 mmol) u ksilenu (5 ml) je zagrejana na 140°C tokom 80 minuta pod mikrotalsnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i ekstrakovan sa EtOAc. Organska faza je ispran sa vodom i slanim rastvorom, i je osušen sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dala je 2-[5-(7-Bromo-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (124 mg). m/z: 481.9 (M+1), 480.2 (M-1).
[0904] 2-(5-{7-[2-(1-t-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(7-Bromo-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (124 mg, 0.26 mmol) i 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (107 mg, 0.26 mmol) u DME (2.25 ml) i vode (0.75 ml) je dodat kalijum karbonat (72 mg, 0.52 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(15 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(15 mg). Smeša je zagrejana na 90°C tokom 6 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (EtOAc) dala je 2-(5-{7-[2-(1-t-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (83 mg). m/z: 689.1 (M+1), 687.3 (M-1), 345.0 (M+2)/2.
[0905] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirodin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 2-(5-{7-[2-(1-t-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (82 mg, 0.12) u DCM (4 ml) je dodat TFA (2 ml). Smeša je mešana tokom 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrile i vodom, i osušena je u zamrzivaču da se dobije braon prah. U rastvor gore pomenutog praha (0.12 mmol) i MeOCO-Val-OH (42 mg, 0.24 mmol) u DMF (3.5 ml) je dodat HATU (95 mg, 0.25 mmol), praćeno diizopropiletilaminom (0.21 ml, 1.2 mmol). Smeša je mešana 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N NaOH rastvorom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dala je (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (79 mg). m/z: 803.4 (M+1), 801.1 (M-1), 402.2 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.25 (2 H, m), 8.1-7.9 (5 H, m), 7.9-7.75 (3 H, m), 5.4-5.2 (2 H, m), 4.25 (2 H, m), 4.2-3.8 (4 H, m), 3.67 (6 H, s), 2.60 (2 H, m), 2.4-2.0 (8 H, m), 1.05 -0.8 (12 H, m).
D. Primer EQ
[0906]
[0907] 4-Bromo-3-metil-benzoeva kiselina metil estar: Hemikalija je kupljena od Sigma-Aldrich Co.
[0908] 3-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar:
U rastvor 4-Bromo-3-metil-benzoeva kiselina metil estar (4.56 g, 20 mmol) i bis(pinakolato)dibor (10.2 g, 40 mmol) u 1,4-dioksanu (160 ml) je dodat kalijum acetat (5.0 g, 51 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(924 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (heksani/EtOAc) dalo je 3-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar (4.8 g).
3-Bromometil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar:
[0909] Rastvor 3-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar (3.71 g, 13.4 mmol), NBS (2.39 g, 13.4 mmol), i AIBN (235 mg) u CCl4(20 ml) je zagrejan na 80°C tokom 14 sati. Smeša je ohlađena do 25°C, i je filtrirana je i isprana sa CCl4. Rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, i razblažen je sa EtOAc. Rastvor je ispran sa vodom i slanim rastvorom i osušen je sa Na2SO4. Koncentracija je dala 3-Bromometil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar (4.9 g).
[0910] 3-(2-Jodo-5-nitro-fenoksimetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estarMetan: Smeša 3-Bromometil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estar (3.63 g, 10.3 mmol), 2-Jodo-5-nitro-fenol (2.72 g, 10.3 mmol), i kalijum karbonat (2.26 g, 16.4 mmol) u DMF (21 ml) je zagrejana na 75°C tokom 3 sata. Smeša je ohlađena do 25°C, i DMF je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i zakiseljena je sa 0.5 N HCl do pH=4. Još vode (ukupna zapremina vode 100 ml) je dodata i smeša je mešana 5 minuta. Smeša je filtrirana i isprana sa vodom. Čvrsta supstanca je sakupljena i osušena pod smanjenim pritiskom. 3-(2-Jodo-5-nitro-fenoksimetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estarmetan je dobijena kao čvrsta supstanca (1.8 g).
[0911] 3-Nitro-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar: U rastvor 3-(2-Jodo-5-nitro-fenoksimetil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-benzoeva kiselina metil estarmetan (2.7 g, 5 mmol) u 1,2-dimetoksietru (75 ml) i vodi (25 ml) je dodat natrijum bikarbonat (1.26 g, 15 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(250 mg) i Pd(dppf)Cl2(250 mg). Smeša je zagrejana na 80°C tokom 16 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/heksani) dalo je 3-Nitro-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (690 mg).
[0912] 3-Amino-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar: U rastvor 3-Nitro-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (690 mg) u THF/DMF (5 ml/5 ml) je dodata sirćetna kiselina (10 ml), praćeno sporim dodavanjem cinka (800 mg). Smeša je mešana tokom 12 sati i rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa EtOAc, i 0.2 N rastvor natrijum hidroksida je dodat do pH=10. Organski sloj je izdvojen i ispran je sa vodom i slanim rastvorom i osušen sa Na2SO4. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dala je 3-Amino-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (300 mg).
[0913] 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar: u rastvor bakar (II) bromida (315 mg, 1.42 mmol) i t-butil nitrita (233 µl, 1.77 mmol) u CH3CN (4 ml) na 65°C je dodata u kapima suspenzija 3-Amino-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (300 mg, 1.18 mmol) u CH3CN (5 ml). Smeša je zagrejana na 65°C tokom 3 sata. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (DCM/EtOAc) dala je 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (160 mg).
[0914] 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina: Rastvor 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina metil estar (160 mg, 0.5 mmol) i natrijum hidroksid (1.0 N, 1 ml, 1 mmol) u THF/MeOH (2 ml/2 ml) je zagrejan na 50°C tokom 3 sata. Smeša je ohlađena do 25°C i je zakiseljena sa 2 N HCl (0.6 ml). Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je u zamrzivaču da se dobije 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina kao braon prah.
[0915] 2-Bromo-1-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-etanon: U 3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-karboksilna kiselina (0.5 mmol) je dodat rastvor oksalil hlorida u DCM (2.0 N, 5 ml, 10 mmol). Smeša je zagrejana na 45°C tokom 2 sata i ohlađena do 25°C. Vikovi reagensa i rastvarača su uklonjeni pod smanjenim pritiskom i ko-upareni sa toluenom. U rastvor gore pomenutog ostatka u DCM (5 ml) na 0°C trimetilsilildiazometan (2.0 N, 0.75 ml, 1.5 mmol) je dodat u kapima. Smeša je mešana na 25°C tokom 12 sati i koncentrovana je. Ostatak je rastvoren u EtOAc i ohlađen je do 0°C. U gornji rastvor HBr/HOAc (0.28 ml, 1.5 mmol) je dodat u kapima. Smeša je mešana na 25°C tokom 1 sata. Čvrst natrijum bikarbonat je dodat i smeša je mešana 30 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom i osušena je sa Na2SO4. Koncentracija dala je 2-Bromo-l-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-etanon, koji je korišćen za sledeći korak bez prečišćavanja.
[0916] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar: U rastvor (s)Boc-PrOH (1.07 g, 5 mmol) i trietilamina (0.63 ml, 4.5 mmol) u acetonitrilu (20 ml) je dodat rastvor 2-Bromo-1-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-etanona (0.5 mmol) u DMF (10 ml). Smeša je mešana tokom 10 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa 0.5 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija je dala Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar, koji je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
[0917] 2-[5-(3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Smeša Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(3-bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il) -2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (0.5 mmol) i amonijum acetata (860 mg, 11 mmol) u ksilenu (5 ml) je zagrejana na 140°C tokom 80 minuta pod mikrotalsnim zračenjem. Smeša je kvenčovana sa vodom, i ekstrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je 2-[5-(3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (8 mg). m/z: 496.0 (M+1), 494.1 (M-1).
[0918] 2-(5-{3-[2-(1-t-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-6H-benzo[c]hromen-8-i1}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 2-[5-(3-Bromo-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (9 mg, 0.02 mmol) i 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (9.6 mg, 0.02 mmol) u DME (0.75 ml) i vodi (0.25 ml) je dodat kalijum karbonat (10 mg, 0.07 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(2 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(2 mg). Smeša je zagrejana na 90°C tokom 6 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću hromatografije na koloni (EtOAc) dalo je 2-(5-{3-[2-(1-tbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-6H-benzo[c]hromen-8-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.2 mg). m/z: 729.2 (M+1), 727.3 (M-1), 365.2 (M+2)/2.
[0919] (1-{2-[5-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 2-(5-{3-[2-(1-t-butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-benzoimidazol-5-il]-6H-benzo[c]hromen-8-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (4.2 mg, 0.006) u DCM (2 ml) je dodat TFA (1 ml). Smeša je mešana 60 minuta, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Smeša je razblažena sa acetonitrilom i vodom, i osušena je u zamrzivaču da se dobije braon prah. U rastvor gore pomenutog praha (0.006 mmol) i MeOCO-Val-OH (2 mg, 0.012 mmol) u DMF (1 ml) je dodat HATU (4.6 mg, 0.012 mmol), praćeno diizopropiletilaminom (10 µl, 0.058 mmol). Smeša je mešana 90 minuta i razblažena je sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N NaOH rastvorom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{2-[5-(3-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-6H-benzo[c]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (2.5 mg). m/z: (M+1), (M-1), (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.07-7.7 (7 H, m), 7.62 (1 H, s), 7.45 (1 H, m), 7.38 (1 H, s), 5.25 (4 H, m), 4.35 (1 H, m), 4.22 (1 H, m), 4.15 (2 H, m), 3.85 (2 H, m), 3.65 (6 H, m), 2.98 (1 H, s), 2.6 (1 H, m), 2.3-1.7 (8 H, m), 1.05-0.85 (12 H, m).
Primer ER
[0920]
[0921] 6-Bromo-2-pirolidin-2-il-1H-benzoimidazol: Pripremljeno istom metodom kao (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar je korišćen kao supstrat.120 mg svetlo žuta čvrsta supstanca (66% prinos).
[0922] {1-[2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: Pripremljeno istom metodom kao (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar ali korišćenjem 6-bromo-2-pirolidin-2-il-1H-benzoimidazol kao supstrata. 193 mg sirove čvrste supstance je korišćeno za sledeći korak.
[0923] [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-metil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno korišćenjem iste procedure kao za [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar je je korišćen umesto Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar i 2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina je korišćena umesto 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina 2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina.
[0924] (1-{2-[6-(6-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo [2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: {1-[2-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.193 g), [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-metil]-karbaminska kiselina metil estar (0.241 g), i NaHCO3(0.123 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (6 mL) i vode (2 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0219 g) je dodat. Reakciona smeša je mešaan na 85°C tokom 2 dana i uparen pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu (15 mL) i ekstrakovan dva puta sa vodom (10 mL) i jednom sa slanim rastvorom (10 mL). Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta od 0-5% MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ulje je rastvoreno u DMF, prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovano, dajući (1-{2-[6-(6-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.039 g, 12%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.8 (s, 1H), 8.2 (d, J = 27 Hz, 2H), 7.9 (m, 4H), 7.6 (m, 3H), 7.3 (m, 2H), 5.3 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 3.8 (m, 2H), 3.5 (s, 6H), 2.5 (s, 6H), 2.8 (m, 1H), 2.1 (m, 4H), 2.0 (m, 4H), 0.9 (m, 12H); MS (ESI): m/z 763 [M H]<+>.
Primer ES
[0925]
[0926] N'-Izopropiliden-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar: Hidrazinkarboksilna kiselina metil estar (5.01 g) su rastvoreni u acetonu (28 mL), i sirćetna kiselina (0.0636 mL) je dodata. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Voda (50 mL) je dodata, i smeša je ekstrakovana tri puta sa DCM (50 mL) i uparena pod vakuumom, dajući N'-Izopropiliden-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar (6.45 g, 89%).
[0927] N'-Izopropil-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar: N'-Izopropilidenhidrazinkarboksilna kiselina metil estar (6.45 g) su rastvoreni u etanolu (50 mL) i sirćetna kiselina (50 mL). PtO2(0.231 g) je dodat, i reakcija je mešan na sobnoj temperaturi 22 sata u atmosferi vodonika. Smeša je uparena pod vakuumom, dajući N'-Izopropil-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar (5.08 g, 77%) kao bela čvrsta supstanca.
[0928] N'-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-N'-Izopropilhidrazin-karboksilna kiselina metil estar: Trifosgen (1.05 g) je rastvoren u DCM (17 mL) i mešan na 0°C. N'-Izopropil-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar (1.00 g) i DIPEA (1.5 mL) su rastvoreni u DCM (25 mL), i smeša je dodata u trifosgen rastvor i mešana tokom 10 minuta. 5-(4-Bromo-fenil)-2-pirolidin-2-il-1H-imidazol (2.65 g) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i ekstrakovan dva puta sa vodom (10 mL), jedanput sa slanim rastvorom (10 mL), i uparen pod vakuumom. Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluena 0-100% etil acetat:heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod vakuumom, dajući N'-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-N'-Izopropil-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar (533 mg, 16%).
[0929] N'-Izopropil-N'-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-hidrazinkarboksilna kiselina metil estar: N'-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-N'-Izopropil-hidrazin-karboksilna kiselina metil estar (0.533 g), 4,4,5,5,4',4',5',5'-Octametil-[2,2']-bi[[1,3,2]dioksaborolanil] (0.644 g), i KOAc (0.309 g) su rastvoreni u dioksanu (8 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0562 g) je dodat, i reakcija je mešana na 80°C tokom 2 dana. Čvrsta supstanca je uklonjena vakuum filtracijom, i rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta 0-5% MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod vakuumom, dajući N'-Izopropil-N'-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-hidrazinkarboksilna kiselina metil estar (0.564 g, 96%) kao žuta čvrsta supstanca.
[0930] N'-Izopropil-N'-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-hidrazinkarboksilna kiselina metil estar: N'-Izopropil-N'-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-hidrazinkarboksilna kiselina metil estar (0.295 g), (1-{2-[5-(6-Bromofenil-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.280 g), i NaHCO3su rastvoreni u DME (9 mL) i vodi (3 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0282 g) je dodat, i reakcija je mešana na 85°C tokom 19 sati. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF, prečišćena pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda) dva puta, i liofilizovana, dajući N'-Izopropil-N'-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-hidrazinkarboksilna kiselina metil estar (0.017 g, 4%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H-NMR: 300 MHz, (CH3OH-d4) δ: 7.9 (m, 12H), 5.3 (m, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.2 (d, J= 7 Hz, 2H), 4.1 (m, 1H), 3.9 (m, 4H), 3.6 (m, 6H), 3.3 (s, 3H), 2.6 (m, 2H), 2.0 (m, 8H), 1.1 (m, 6H), 0.9 (m, 6H); MS (ESI): m/z 740 [M H]<+>.
Primer ET
[0931]
[0932] [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.226 g), [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-metil]-karbaminska kiselina metil estar (0.297 g), i NaHCO3(0.154 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (9 mL) i vode (3 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0263 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 19 sati i uparena pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (15 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom (10 mL) i jedanput sa slanim rastvorom (10 mL). Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta 0 -5 % MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ulje je rastvoreno u DMF, prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovano, dajući [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo [2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil]-karbaminska kiselina metil estar (0.138 g, 32%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H-NMR: 300 MHz, (CH3OH-d4) δ: 8.3 (d, J= 9 Hz, 2H), 8.1 (m, 2H), 8.0 (m, 4H), 7.9 (m, 4H), 5.3 (t, J= 7 Hz, 2H), 4.6 (s, 2H), 4.5 (m, 2H), 4.2 (d, J= 7 Hz, 2H), 4.1 (m, 2H), 3.9 (m, 2H), 3.6 (s, 6H), 3.3 (s, 2H), 2.9 (s, 1H), 2.8 (m, 1H), 2.0 (m, 8H), 1.8 (m, 1H), 1.4 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.9 (m, 6H); MS (ESI): m/z 787 [M H]<+>.
Primer EU
[0933]
[0934] [2-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-2-il)-1-metil-2-oksoetil]-karbaminska kiselina metil estar: (2-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar (0.241 g), [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-metil]-karbaminska kiselina metil estar (0.303 g), i NaHCO3(0.164 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (9 mL) i vode (3 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0263 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 19 sati i uparena pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (15 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom (10 mL) i jedanput sa slanim rastvorom (10 mL). Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta 0-5 % MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ulje je rastvoreno u DMF, prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovano, dajući [2-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-2-il)-1-metil-2-okso-etil]-karbaminska kiselina metil estar (0.159 g, 38%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H-NMR: 300 MHz, (CH3OH-d4) δ: 8.3 (d, J = 9 Hz, 2H), 8.1 (m, 2H), 8.0 (m, 4H), 7.9 (m, 4H), 5.3 (m, 2H), 4.6 (s, 2H), 4.5 (m, 4H), 4.0 (m, 2H), 3.9 (m, 2H), 3.7 (d, J = 7 Hz, 6H), 3.3 (m, 2H), 2.9 (s, 1H), 2.8 (s, 1H), 2.6 (m, 1H), 2.0 (m, 8H), 1.8 (m, 2H), 1.4 (m, 6H); MS (ESI): m/z 759 [M H]<+>.
Primer EV
[0935]
[0936] [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno korišćenjem iste procedure kao za [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar, osim što 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar je je korišćen umesto Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar kao što je opisano u primeru CL.
[0937] [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-bicilo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.251 g), [2-Metil-1-(3-{5
[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.301 g), i NaHCO3(0.162 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (9 mL) i vode(3 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0254 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 21 sata i uparena pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (20 mL) i ekstrakovana dva puta sa vodom (10 mL) i jedanput sa slanim rastvorom (10 mL). Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta 0-5 % MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ulje je rastvoreno u DMF, prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovano, dajući [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.187 g, 44%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR: 300 MHz, (CH3OH-d4) δ: 8.3 (d, J= 9 Hz, 2H), 8.1 (m, 2H), 8.0 (m, 4H), 7.9 (m, 4H), 5.3 (m, 2H), 4.7 (s, 2H), 4.3 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 3.9 (m, 2H), 3.7 (d, J= 7 Hz, 6H), 3.3 (m, 2H), 2.9 (s, 1H), 2.6 (m, 2H), 2.1 (m, 8H), 1.8 (m, 2H), 1.4 (m, 12H); MS (ESI): m/z 815 [M H]<+>.
Primer EW
[0938]
[0939] [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: (2-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-1-metil-2-okso-etil)-karbaminska kiselina metil estar (0.235 g), [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.310 g), i NaHCO3(0.145 g) su rastvoreni u smeši 1,2-dimetoksietana (9 mL) i vode (3 mL). Rastvor je degaziran sa azotom, i Pd(PPh3)4(0.0260 g) je dodat. Reakciona smeša je mešan na 80°C tokom 24 sati i uparen pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvoren u DCM (20 mL) i ekstrakovan dva puta sa vodom (10 mL) i jedanput sa slanim rastvorom (10 mL). Dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem 40 g ISCO kolone i efluenta 0-5 % MeOH:DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ulje je rastvoreno u DMF, prečišćeno pomoću HPLC na reverznoj fazi (5-70% acetonitril:voda), i liofilizovano, dajući [1-(3-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.150 g, 36%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H-NMR: 300 MHz, (CH3OH-d1) δ: 8.3 (d, J = 9 Hz, 2H), 8.1 (m, 2H), 8.0 (m, 4H), 7.9 (m, 4H), 5.3 (m, 2H), 4.7 (s, 2H), 4.5 (m, 1H), 4.3 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.0 (m, 2H), 3.7 (d, J = 7 Hz, 6H), 3.3 (s, 6H), 2.9 (s, 1H), 2.3 (m, 2H), 2.1 (m, 8H), 2.0 (m, 2H), 1.8 (m, 2H), 1.3 (d, J = 7 Hz, 3H)1.0 (m, 6H); MS (ESI): m/z 787 [M H]<+>.
Primer EX
[0940]
[0941] 3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Rastvor (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (500 mg, 1.27 mmol), 3-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina test-butil estar (530 mg, 1.27 mmol), i trietilamina (531 □L, 3.81 mmol) u DMF (6.4 mL) je degaziran sa N2gas tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(150 mg, 0.13 mmol) i CuI (25 mg, 0.13 mmol). Sud pod pritiskom je sealed zatim zagrejan na 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperaturi, reakcija je kvenčovana sa AcOH zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (10-70% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) zatim silika gel hromatografijom (0-10% MeOH-EtOAc gradijent) da se dobije 3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (500 mg, 0.68 mmol, 54% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H50N7O5: 732.4 (M+H<+>); Pronađeno: 732.2 (M+H<+>).
[0942] [1-(3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (150 mg, 0.20 mmol) u dioksanima (2 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (250 □L). Suspenzija je mešana tokom 2 sata zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirovi amin u DMF (4 mL) je dodat N-metilmorfolin (330 □L, 0.30 mmol). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (53 mg, 0.30 mmol) i HATU (76 mg, 0.20 mmol) su dodati. Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovaan sa AcOH zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova [1-(3-{5-[4-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (83 mg, 0.11 mmol, 53% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 7.59-7.55 (m, 4H), 7.41-7.38 (m, 4H), 7.17 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.16 (m, 2H), 5.15 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.34-4.24 (m, 2H), 3.88-3.72 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.25-2.15 (m, 1H), 2.27-2.16 (m, 2H), 2.05-1.80 (m, 5H), 1.54 (d, 2H), 1.00-0.887 (m, 12H). LCMS-ESI<+>: izračunato zaC44H53N8O6: 789.4 (M+H<+>); Pronađeno: 789.5 (M+H<+>).
Primer EY
[0943]
[0944] 3-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: Rastvor [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (500 mg, 0.92 mmol), 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (383 mg, 0.92 mmol) i vod K2CO3(920 µl 2M rastvora, 1.84 mmol) u DME (9 mL) je degaziran sa N2gas tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(106 mg, 0.092 mmol) i PdCl2dppf (75 mg, 0.092 mmol) i zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperaturi, reakcija je kvenčovana sa sirćetnom kiselinom, filtrirana, i zatim koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (5-50% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije 3-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2karboksilna kiselina terc-butil estar (112 mg, 0.15 mmol, 16% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato zaC44H52N7O5: 758.4 (M+H<+>); Pronađeno: 758.0 (M+H<+>).
[0945] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.092 mmol) u dioksanima (3 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (1 mL). Suspenzija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) i koncentrovan. So mravlje kiseline je rastvoren u MeOH zatim propušten kroz jonoizmenjivačku kolonu (StratoSpheres SPE PL-HCO3MP SE) da se dobije slobodni amin (30 mg, 0.046 mmol, 58%). U amin (30 mg, 0.046 mmol) u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (10 □L, 0.092 mmol). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (12 mg, 0.068 mmol) i HATU (19 mg, 0.051 mmol) su dodati. Nakon mešanja tokom 3 sata reakcija je kvenčovana sa AcOH zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije [1-(2-{5-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (29 mg, 0.036 mmol, 77% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 8.04 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.63-7.58 (m, 4H), 7.52 (d, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.17 (m, 2H), 5.21 (m, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.35-4.26 (m, 2H), 3.86 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.64 (s, 6H), 2.90 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.30-2.1.82 (m, 9H), 1.55 (d, 2H), 1.02-0.87 (m, 12H). LCMS-ESI<+>: izračunato zaC46H55N8O6: 815.3 (M+H<+>); Pronađeno: 815.4 (M+H<+>).
Primer EZ
[0946]
[0947] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (151 mg, 0.32 mmol), [2-Metil-1-(6-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (200 mg, 0.35 mmol) i vod K2CO3(438 µl 2M rastvora, 0.88 mmol) u DME (4 mL) je degaziran sa N2gas tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(40 mg, 0.035 mmol) i zatim reakcija je zagrejana do 80°C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperaturi, reakcija je kvenčovana sa sirćetnom kiselinom, filtrirana, i zatim koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (5-50% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (40 mg, 0.047 mmol, 14% prinos).<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.75 (s, 1H), 11.72 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.93-7.74 (m, 8H), 7.63 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 5.22 (t, 1H), 4.52-4.50 (m, 2H), 4.16 (t, 1H), 4.00 (t, 1H), 3.81 (d, 1H), 3.75 (d, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.31 (s, 3H), 2.55 (m, 1H), 2.32-1.41 (m, 10H), 1.01-0.57 (m, 16H). LCMS-ESI<+>: izračunato zaC48H57N8O6: 841.4 (M+H<+>); Pronađeno: 842.1 (M+H<+>).
Primer FA i FB
[0948]
4-Cijano-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar:
[0949] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar u Primeru CL, supstituisanjem Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar sa N-Boc-cis-4-cijano-L-proline metil estar (643 mg, 67%)
2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[0950] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: u Primeru CL, izmenom temperature reakcije na 130°C i vremena reakcije na 75 minuta. (396 mg, 64%) MS (ESI) m/z 468.99 [M H]<+>.
(1-{2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0951] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-tiantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar i (1-{2-[5-(8-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-tiantren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar u Primeru BS, supstituisanjem N-metilmorfolin sa pet ekvivalenata diizopropiletilamina. (430 mg, 97%) MS (ESI) m/z 525.94 [M H]<+>.
[1-(4-Cijano-2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[0952] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar u Primeru CL, zamenjivanjem N-Boc Prolina sa N-Boc-4-cijano-prolinom. (407 mg, 87%) MS (ESI) m/z 572.46 [M H]<+>.
(1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-3-Metansulfonil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[0953]
[0954] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(4-Bromonaftalen-1-il)-1H-imidazo1-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)karbaminska kiselina metil estar u Primeru CK, supstituisanjem N-metilmorfolin sa pet ekvivalenata diizopropiletilamina.(99%)
Primer FA: [1-(4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[5-(4-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilaminobutiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar
[0955]
[0956] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(6'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[2,2']binaftalenil-6-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar u Primeru CL. (30%) :<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.14 (s, 2H), 8.09 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.85 - 7.78 (m, 5H), 7.46 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.33 (dd, J= 5.6 Hz, 7.6 Hz, 1H), 5.21 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 4.63 - 4.58 (m, 2H), 4.17 - 4.13 (m, 1H), 4.05 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.65 (d, J= 5.2 Hz, 6H), 3.48 - 3.42 (m, 3H), 3.21 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.98 (s, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.64 - 2.55 (m, 1H), 2.35 - 2.27 (m, 2H), 2.14 - 1.92 (m, 4H), 0.98 - 0.87 (m, 7H), 0.79 - 0.59 (m, 4H). MS (ESI) m/z 904.58 [M H]<+>.
Primer FB: [1-(4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[0957]
[0958] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(6'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-[2,2']binaftalenil-6-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar u Primeru CL. (35%) :<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.22 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.92 (dd, J= 2 Hz, 8.4 Hz, 2H), 7.85 - 7.76 (m, 6H), 7.44 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.21 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 2H), 4.33 - 4.27 (m, 1H), 4.16 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 4.05 (t, J= 10.4 Hz, 1H), 3.65 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 3.51 (m, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.29 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 2.00 - 1.84 (m, 4H), 1.65 - 1.56 (m, 2H), 1.31 (m, 1H), 1.02 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 0.971 - 0.86 (m, 8H). MS (ESI) m/z 840.64 [M H]<+>.
Primer FC
[0959]
[0960] 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AE), supstituisanjem Morfolin-3,4-dikarboksilna kiselina 4-terc-butil estar tokom 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar.
[0961] 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar (Primer AS), supstituisanjem 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar za 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0962] (1-{3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-morfolin-4-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CY), supstituisanjem 3-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-morfolin-4-karboksilna kiselina terc-butil estar za 2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0963] [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-morfolin-3-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer CT), supstituisanjem (1-{3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-morfolin-4-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ 12.05 (s, 1H), 11.84 (s, 1H), 7.81 - 7.74 (m, 4H), 7.69 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.50 - 7.47 (m, 4H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 4.42 - 4.34 (m, 2H), 4.08 - 3.95 (m, 2H), 3.85 - 3.79 (m, 3H), 3.72 - 3.68 (m, 2H), 3.56 (d, J= 7.6 Hz, 5H), 3.46 - 3.40 (m, 2H), 2.2 - 2.07 (m, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 4H), 1.02 -1.00 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 0.953 - 0.837 (m, 12H); MS (ESI) m/z 779 [M H]<+>.
Primer FD
[0964]
[0965] 2-[5-(4-Hloro-2-formil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: 2-(5-Bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.00 g, 6.32 mmol), 4-Hloro-2-formil-fenilboronska kiselina (1.17 g, 6.32 mmol), Pd(PPh3)4(365 mg, 0.316 mmol), Pd(dppf)Cl2-DCM (258 mg, 0.316 mmol) K2CO3(2 M, 6.3 mL, 12.6 mmol) i DME (30 mL) su kombinovane u sudu sa okruglim dnom. Mešana suspenzija je degazirana tokom 10 minuta sa mehurićima N2zatim zagrejana do 85 °C. Nakon 4 h, reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni NaHCO3. Vodena faza je ekstrakovana 3x sa EtOAc i kombinovane organske supstance su osušeen preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (25% do 75% EtOAc/Heksan) da se dobije jedinjenje iz naslova 2-[5-(4-Hloro-2-formil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.85 g, 78%).
[0966] 2-[5-(4-Hloro-2-cijano-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: 2-[5-(4-Hloro-2-formil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (985 mg, 2.62 mmol) je rastvoren u etanol (20 mL) i hidroksilaminu (50% w/w (m/m) iuH2O, 642 µL, 10.48 mmol) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 15 h, rastvor je koncentrovan. U sirovi oksim je dodat TBSC1 (474 mg, 3.14 mmol), imidazol (357 mg, 5.24 mmol) i DMF (10 mL). Reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 80 minuta n akojoj tački je dodato još TBSC1 (237 mg, 1.58 mmol) i imidazola (177 mg, 2.60 mmol). Reakciona smeša je mešana dodatnih 17 sati na 120 °C zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc. Organska faza je ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćena pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (25% do 50% EtOAc/Heksan) da se dobije jedinjenje iz naslova 2-[5-(4-Hloro-2-cijano-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (500 mg, 51%).
[0967] (1-{2-[5-(4-Hloro-2-cijano-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CX), supstituisanjem 2-[5-(4-Hloro-2-cijanofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar za 2-(4'-Hlorobifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0968] 3-Cijano-4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenilboronska kiselina: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-{5-[2'-Cijano-4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer CZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Hloro-2-cijano-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za 2-[5-(4'-Hloro-2'-cijano-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0969] (1-{2-[5-(3-Cijano-4'{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem 3-Cijano-4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenilboronska kiselina za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.13 - 8.04 (m, 2H), 7.85 - 7.75 (m, 4H), 7.57 (s, 1H), 7.31 (dd, J= 3.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 5.13 - 5.10 (m, 2H); MS (ESI) m/z 764 [M H]<+>.
Primer FE
[0970]
[0971] 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AE), supstituisanjem 4-Cijano-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar za 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar.
[0972] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AS), 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-cijanopirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar za 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0973] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CX), supstituisanjem 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar tokom 2-(4'-Hlorobifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0974] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[4-Cijano-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazo1-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ 11.98 (s, 1H), 11.82 (s, 1H), 8.22 (m, 2H), 7.92 - 7.77 (m, 6H), 7.62 (m, 2H), 7.44 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J= 8.0, 1H), 5.24 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 5.12 (d, J= 4.0, 1H), 4.22 - 4.19 (m, 1H), 4.09 - 4.0 (m, 4H), 3.89 - 3.83 (m, 4H), 3.56 (d, J= 5.6 Hz, 6H), 2.17 (brs, 2H), 2.06 - 1.90 (m, 4H), 0.95 - 0.84 (m, 14H); MS (ESI) m/z 814 [M H]<+>.
Primer FF
[0975]
[0976] (1-{2-[5-(6-Etinil-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar od (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer AY), supstituisanjem (1-{2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.
[0977] (1-{2-[5-(6-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo [2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-iletinil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-feniletinil)-11H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer CT), supstituisanjem {1-[3-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-feniletinil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar i (1-{2-[5-(6-Etinil-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar. NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.19-8.11 (m, 1H), 8.01-7.99 (m, 1H), 7.86-7.71 (m, 3H), 7.57-7.39 (m, 3H), 7.02-6.99 (m, 1H); MS (ESI) m/z 813 [M H]<+>.
Primer FG
[0978]
[0979] 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AE), supstituisanjem 4-Cijano-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estarfor 2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estar.
[0980] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AS), i supstituisanjem 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-4-cijanoPirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar za 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0981] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CX), supstituisanjem 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar za 2-(4'-Hlorobifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-l-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0982] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[4-Cijano-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar fza [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar. NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.12-8.03 (m, 2H), 7.89-7.74 (m, 6H), 7.48-7.36 (m, 2H), 5.20 (m, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.28-3.88 (m, 6H), 3.66 (s, 6H), 2.86 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.40-2.19 (m, 3H), 2.11-1.97 (m, 3H), 1.00-0.88 (m, 12H); MS (ESI) m/z 814 [M H]<+>.
Primer FH
[0983]
[0984] 3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina: Metil hloroformat (0.81 mL, 10.51 mmol) je dodat u kapima u mešanu suspenziju 2-Amino-3-cijano-propionske kiseline (1.00g, 8.76 mmol) i NaOH (5 N u H2O, 4.2 mL, 21.0 mmol) u THF (20 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 7h, reakciona smeša je sipana u 10% HCl i vodena faza je ekstrakovana 3x sa dietil etrom. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovan da se dobije 3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionska kiselina (295 mg, 20%).
[0985] [2-Cijano-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-etil]-karbaminska kiselina metil estar:
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CX), supstituisanjem 3-{5-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar tokom 2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionske kiseline za 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buternu kiselinu.
[0986] [1-(2-{5-[4-(6-{2-[2-(3-Cijano-2-Metoksikarbonilamino-propionil)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazo1-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem [2-Cijano-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-etil]-karbaminska kiselina metil estar za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.24-8.18 (m, 2H), 7.99-7.79 (m, 6H), 7.63-7.54 (m, 2H), 5.09 (m, 1H), 4.84 (m, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.92-2.87 (m, 1H), 2.79-2.75 (m, 1H), 2.72-2.67 (m, 1H), 2.16-1.42 (m, 9H), 0.91-0.87 (m, 12H); MS (ESI) m/z 812 [M H]<+>.
Primer FI
[0987]
[0988] [1-(4-Cijano-2-{5-[4-(4-{2-[4,4-difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4,4-Difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazo1-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AB1) supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1Himidazo1-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (400 mg, 0.89 mmol), i (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4,4-difluoro-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 7.71-7.61 (m, 4H) 7.46-7.34 (m, 4H), 5.30 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.55-4.45 (m, 2H), 4.20-3.94 (m, 5H), 3.61 (s, 6H), 3.47-3.40 (m, 2H), 2.84-2.76 (m, 3H), 2.52 (m, 1H), 1.96-1.91 (m, 2H), 0.96-0.83 (m, 12H); MS (ESI) m/z 824 [M H]<+>.
Primer FJ
[0989]
[0990] 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar: 4-Metilenpirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (12.00 g, 52.80 mmol) je rastvoren u MeOH (200 mL) i tretiran sa 4.0 M HCl/dioksan (50 mL). Nakon mešanja tokom 3.5 sata na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je rastvoren u DCM (200 mL) i tretiran sa DIPEA (22 mL, 127 mmol) i BnOCOCl (9.64 mL, 63.4 mmol). Nakon mešanja tokom 1 sata na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je sipana u H2O. Vodeni sloj je ekstrakovan 3x sa DCM. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (10% do 25% EtOAc/heksan) da se obezbedi 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar (8.20 g, 56%).
[0991] 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar: Dietil cink (1.0 M u heksanu (118 mL, 118 mmol) je dodat u sud sa okruglim dnom sa 3 grla koji sadrži “štapić” za mešanje, DCM (120 mL) i i opremljen levkom za dodavanje i adapterom za ulaz argona. Rastvor je ohlađen do 0 °C pre nego TFA (9.5 mL, 118 mmol) u DCM (40 mL) je dodata u kapima pomoću levka za dodavanje tokom 22 minuta.20 minuta nakon završetka dodavanja, CH2I2je dodat polako tokom 4 minuta. 20 minuta nakon završetka dodavanja, 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar 2-metil estar (8.10 g, 29.4 mmol) u DCM (30 mL) je dodat kanilom praćeno ispiranjem sa DCM (10 mL). 10 minuta kasnije, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 110 sati. Reakcija je kvenčovana dodavanjem 100 mL zasićenog vodenog NH4Cl. Celokupan sadržaj suda je sipan u zasićeni vodeni NaHCO3i vodena faza je ekstrakovana 3x sa EtOAc. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je rastvoren u THF (100 mL), acetonu (33 mL) i H2O (33 mL) i N-metilmorfolin-N-oksidu (3.45 g, 29.41 mmol) i osmijum tetroksidu (4 mas% u H2O, 5 mL, 0.818 mmol) su dodati sekvencijalno. Reakciona smeša je mešana 7 sati na sobnoj temperaturi zatim kvenčovan sa 100 mL zasićenim vodenim Na2S2O3. Celokupni sadržaj suda je sipan u H2O i vodeni sloj je ekstrakovan 3x sa DCM. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (10% do 25% EtOAc/heksan) da se obezbedi 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar (5.54 g, 65%).
[0992] 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar (361 mg, 1.25 mmol) je rastvoren u MeOH (10 mL) i LiOH (1 M u H2O, 5 mL, 5 mmol) je dodat. Nakon mešanje tokom 15 sati na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je sipana u 10% HCl i vodena faza je ekstrakovana 3x sa DCM. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je tretiran sa 2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon hidrohloridom (344 mg, 1.38 mmol), HATU (525 mg, 1.38 mmol) i DMF (14 mL). Suspenzija je mešana na 0 °C tokom 21 minuta pre nego što DIPEA (0.72 mL, 4.1 mmol) je dodat u kapima. Odmah nakon adicije, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature. 40 minuta kasnije smeša je razblažena sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom, zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (30% do 50% EtOAc/heksan) da se dobije 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (589 mg, 100%).
[0993] 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AS), supstituisanjem 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar za 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-oksoetilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[0994] (1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (478 mg, 1.04 mmol) je tretiran sa DCM (5 mL) zatim HBr (33 mas% u AcOH, 5 mL). Smeša je mešana tokom 160 minuta na sobnoj temperaturi, koncentrovana pod smanjenim pritiskom zatim koevaporisana 2x sa toluenom da se ukloni višak AcOH. Sirov ostatak je tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (274 mg, 1.56 mmol), HATU (435 mg, 1.14 mmol) i DMF (10 mL). Mešana smeša je ohlađena do 0 °C i DIPEA (0.91 mL, 5.2 mmol) je dodata pre zagrevanja do sobne temperature. Nakon 1h, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan i sirov ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (75% do 100% EtOAc/heksan) da se dobije (1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (297 mg, 60%).
[0995] (1-{6-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar od (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer AY), supstituisanjem (1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.
[0996] [1-(4-Cijano-2-{5-[4-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[4-(4-{2-[4,4-Difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-feniletinil)-fenil]-1H-imidazo1-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AB1), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijanopirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazo1-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (400 mg, 0.89 mmol), i (1-{6-[5-(4-Etinil-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-Etinil-fenil)- 1H-imidazo1-2-il]-4,4-difluoro-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 7.78-7.66 (m, 4H), 7.52-7.37 (m, 4H), 5.29 (m, 1H), 5.17 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 4.17-4.09 (m, 3H), 4.01 (m, 1H), 3.93-3.80 (m, 2H), 3.65 (s, 6H), 3.50-3.42 (m, 2H), 2.88-2.81 (m, 1H), 2.66-2.52 (m, 2H), 2.36-2.31 (m, 1H), 2.18-2.13 (m, 1H), 2.05-1.94 (m, 3H), 1.01-0.87 (m, 12H), 0.82-0.63 (m, 4H); MS (ESI) m/z 814 [M H]<+>.
Primer FK
[0997]
[0998] 6-[2-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-okso-etilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar (2.217 g, 7.66 mmol) je rastvoren u MeOH (30 mL) i LiOH (1 M u H2O, 15 mL, 15 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 15 sati na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je sipana u 10% HCl i vodena faza je ekstrakovan 3x sa DCM. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je tretiran sa MeCN (40 mL), Et3N (1.2 mL, 8.4 mmol) i 2-Bromo-1-(6-bromo-naftalen-2-il)-etanon i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 sati pre nego što je filtrirana preko CELITE i koncentrovana. Dobijeno ulje je rastvoreno u minimalnoj količini DCM i EtOAc (30 mL) je dodat uzrokujući proizvod da precipitira. Smeša je ohlađena do 0 °C zatim čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc dajući čist proivod (4.00g, 100%).
[0999] 6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 3-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer AS), supstituisanjem 6-[2-(6-Bromo-naftalen-2-il)-2-oksoetilkarbamoil]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar za 3-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar.
[1000] (1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, supstituisanjem 6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar za 6-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar u skladu sa primerom FJ.
[2-Metil-1-(6-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1001] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer CY), supstituisanjem (1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar.
[1002] [1-(4-Cijano-2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar i [2-Metil-1-(6-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.20-8.10 (m, 2H), 7.90-7.68 (m, 6H), 7.60-7.55 (m, 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 5.18 (m, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.04-3.69 (m, 6H), 3.40-3.38 (m, 1H), 3.30 (s, 6H), 2.71 (m, 1H), 2.40-1.90 (m, 5H), 0.90-0.79 (m, 12H), 0.70-0.54 (m, 4H); MS (ESI) mlz 841 [M H]<+>.
Primer DL
[1003]
[1004] 6-(2-Amino-5-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar i 6-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6 metil estar (987 mg, 3.41 mmol) je rastvoren u EtOH (10 mL) i LiOH (1 M u H2O, 5 mL, 5 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 2 sata na 50 °C, reakciona smeša je sipana u 10% HCl i vodena faza je ekstrakovana 3x sa DCM. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je tretiran sa 4-Bromo-benzen-1,2-diamin (1.60 g, 8.53 mmol), HATU (1.43 g, 3.75 mmol) i DMF (17 mL) zatim ohlađen do 0 °C. DIPEA (0.712 mL, 4.09 mmol) je dodat i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature polako preko noći. Reakciona smeša je zatim razblažena sa EtOAc i organski sloj je ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom da se dobije smeša 6-(2-Amino-5-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar i 6-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (1.47 g, 97%).
[1005] 6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: Smeša 6-(2-Amino-5-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar i 6-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (1.446 g, 3.25 mmol) je rastvoren u AcOH (20 mL) i reakciona smeša je mešan na 40 °C tokom 18 sati zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3. Vodeni sloj je ekstrakovan 2x sa EtOAc i kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da se obezbedi 6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (1.385 g, 100%).
[1006] {1-[6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: 6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (301 mg, 0.706 mmol) je rastvoren u DCM (10 mL) i HBr (33 mas% u AcOH, 5 mL) je dodat. Nakon 2h reakciona smeša je koncentrovana i postavljena pod visoki vakuum. Ostatak je ko-uparen sa PhMe, MeOH, zatim ponovo sa PhMe i MeOH i postavljen pod visoki vakuum. Ostatak je tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (130 mg, 0.741 mmol, HATU (282 mg, 0.741 mmol) i DMF (7 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C zatim DIPEA (0.615 mL, 3.53 mmol) je dodat bpre zagrevanja do sobne temperature. Nakon 30 minuta, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanimrastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćena pomoću hromatografije na koloni sa silika gelom (50% do 80% EtOAc/heksan) da se dobije {1-[6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (238 mg, 75%).
[1007] (2-Metil-1-{6-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi Metil-1-{2-[4'-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-bifenil-4-ilkarbamoil]-pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer CY), supstituisanjem {1-[6-(6-Bromo-1H-benzoimidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar za {1-[2-(4'-Bromo-bifenil-4-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar.
[1008] (1-{4-Cijano-2-[5-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(7-Bromo-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4-cijanopirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar i (2-Metil-1-{6-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.07-7.55 (m, 9H), 7.34 (m, 2H), 5.31 (m, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.08-3.87 (m, 6H), 3.63-3.54 (m, 9H), 3.41-3.28 (m, 4H), 2.73 (m, 1H), 2.40-2.25 (m, 2H), 2.15-2.13 (m, 1H), 1.95 (m, 3H), 0.93-0.83 (m, 12H), 0.74-0.57 (m, 4H); MS (ESI) mlz 889 [M H]<+>.
Primer FM
[1010] 4-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-buterna kiselina: Metil hloroformat (2.6 mL, 33 mmol) je dodat u kapima u mešanu suspenziju 2-Amino-4-Metansulfonil-buterne kiseline (5.03 g, 27.8 mmol) i NaOH (5 N u H2O, 13.3 mL, 66.6 mmol) u THF (50 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 9h, dodatni metil hloroformat (5.2 mL, 66.6 mmol) i NaOH (5 N u H2O, 30 mL, 150 mmol) su dodati. Nakon još 14 h, reakciona smeša je sipana u H2O. Vodena faza je isprana sa DCM 2x zatim zakiseljena do pH 1 sa 10% HCl. Zakiseljena vodena faza je ekstrakovana 3x sa EtOAc. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovan da se obezbedi 4-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-buterna kiselina (970 mg, 15%).
[1011] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-3-Metansulfonil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer CX), supstituisanjem 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar tokom 2-(4'-Hloro-bifenil-3-ilkarbamoil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar i 4-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-buterna kiselina za 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina.
[1012] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[4-Cijano-1-(4-Metansulfonil-2-Metoksikarbonilamino-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer AZ), supstituisanjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karbonil}-3-Metansulfonil-propil)-karbaminska kiselina metil estar za (1-{2-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazo1-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar i [2-Metil-1-(6-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar za [2-metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar.<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.09-8.07 (m, 2H), 7.92-7.22 (m, 8H), 7.42-7.38 (m, 2H), 5.33 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 5.21 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.17-4.11 (m, 2H), 3.95 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.83 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 3.66 (s, 6H), 3.55-3.49 (m, 3H), 3.19-3.15 (m, 3H), 2.94 (s, 3H), 2.89-2.03 (m, 10 H), 1.03-0.64 (m, 14H); MS (ESI) m/z 904 [M H]<+>.
Primer FN
[1013]
[1014] 4-Hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: 4-Hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (5.0 g) je rastvoren u metanolu (87 mL), i Cs2CO3(3.5 g) u vodi (56 mL) je dodat. Smeša je mešana 10 min. i uparena pod vakuumom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (100 mL), i 2-bromo-1-(4-bromofenil)-etanon (6.0 g) je dodat. Reakciona smeša je mešana 3 sata i uparena pod vakuumom. Sirova čvrsta supstanca je korišćena za sledeći korak.
[1015] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Sirov 4-Hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (10.8 g) i amonijum acetat (13.3 g) su suspendovani u toluenu (80 mL). Reakciona smeša je mešaan na 110°C tokom 80 min. i uparena pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je prebač u etil acetat (200 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonat (1 x 150 mL) i osušen preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 50 -90 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.3 g, 32 % over 2 steps) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
[1016] 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksipirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (500 mg) je rastvoren u DMF (8 mL), i NaH (54 mg) je dodat. Smeša je mešana 10 min. i SEM-C1 je dodat polako, i zatim mešan tokom 2 sata. Smeša je kvenčovana sa 3 mL zas. NH4Cl i prebačena je u etil acetat (100 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonata (1 x 100 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 20 -50 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (648 mg, 98 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
[1017] 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksietoksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (222 mg) je rastvoren u DMF (4 mL), i NaH (25 mg) je dodat. Smeša je mešana 20 min. i 1-bromo-2-metoksi-etan je dodat polako, i zatim je mešano tokom 2.5 sata. Smeša je kvenčovana sa 3 mL zas. NH4Cl i prebačena je u etil acetat (50 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonatom (1 x 50 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 20 -60 % etil acetatei heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (209 mg, 85 %) kao bistro ulje.
[1018] {1-[2[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: U 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (209 mg) u DCM (3 mL) je dodat 4N HCl u dioksanu (2.6 mL). Suspenzija je mešana tokom 16 sati zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (3 mL) je dodat N-metilmorfolin (193 µL). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (123 mg) i HATU (267 mg) su dodati. Nakon mešanja tokom 30 min. reakcija je prečišćena pomoću preparativne HPLC (10-60% MeCN-H2O; 0.1 % modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (169 mg, 92%).
[1019] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Smeša {1-[2[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar (169 mg), bis(pinakolato)dibor(107 mg), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)(24 mg) i kalijum acetat (95 mg) u 1.6 mL dioksana je zagrejana do 90 °C tokom 1.5 sat. (1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4] heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (170 mg) u 1mL dioksana i 2M trikalijum fosfat (565 µl) su dodati i mešano je na 90 °C preko noći. Smeša je prečišćena pomoću preparativne HPLC (10-60% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (119 mg, 41%).<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.20-8.10 (m, 2H), 7.90-7.68 (m, 6H), 7.60-7.55 (m.2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 5.18 (m, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.04-3.69 (m, 6H), 3.80-3.38 (m, 5H), 3.30 (m, 9H), 2.71 (m, 1H), 2.40-1.90 (m, 5H), 0.90-0.79 (m, 12H), 0.70-0.54 (m, 4H); MS (ESI) m/z 889.5 [M H]<+>.
Primer FO
[1020]
[1021] 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilaniletoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer 1), supstituisanjem 2-hloro-pirazina (50 µl) za 1-bromo-2-metoksi-etan (94 mg, 40%).
[1022] {1-[2[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi {1-[2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (Primer 1), supstituisanjem 2-[4-(4-Bromo-fenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (94 mg) tokom 2-[4-(4-Bromofenil)-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (88 mg, 99%).
[1023] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer 1), supstituisanjem {1-[2[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(pirazin-2-iloksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (88 mg) za {1-[2[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (38 mg, 26 %).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.20-8.10 (m, 3H), 7.90-7.68 (m, 8H), 7.60-7.55 (m. 2H), 7.33-7.30 (m, 2H), 5.68 (m, 1H), 5.39 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.04-3.69 (m, 6H), 3.80-3.38 (m, 1H), 3.30 (m, 6H), 2.71 (m, 1H), 2.40-1.90 (m, 5H), 0.90-0.79 (m, 12H), 0.70-0.54 (m, 4H); MS (ESI) m/z 910.5 [M+H]<+>. Primer FP
[1024]
[1025] 2-Metoksikarbonilamino-3-fenil-propionska kiselina: 2-Amino-3-fenil-propionska kiselina (1.65 g) je rastvorena u 1 N NaOH (10 mL), i Na2CO3(530 mg) je dodat. Smeša je ohlađena do 0°C i metil hloroformat je dodat polako, i zatim mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je isprana sa DCM i zakiseljena sa 3 mL 2N HCl, i zatim je prebačena u etar (200 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Uklonjen je rastvarač da se dobije 2-Metoksikarbonilamino-3-fenil-propionska kiselina (1.95 g, 87 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
[1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-fenil-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1026] U 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (40 mg) u metanolu (0.5 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (0.5 mL). Smeša je mešan tokom 1.5 sata zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (2 mL) je dodat N-metilmorfolin (30 µL). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-metoksi karbonilamino-3-fenilpropionska kiselina (24 mg) i HATU (42 mg) su dodati. Nakon mešanja tokom 30 min. reakcija je prečišćena pomoću preparativne HPLC (10-60% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (34 mg, 37%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.22-8.03 (m, 4H), 7.89-7.74 (m, 8H), 7.54-7.05 (m, 5H), 5.20 (m, 2H), 4.63 (m, 1H), 4.48(m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.15-3.88 (m, 4H), 3.69-3.51 (m, 8H), 3.45-3.15 (m, 4H) 3.10 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.45-2.04 (m, 7H), 1.00-0.88 (m, 6H); MS (ESI) m/z 837.4 [M H]<+>.
Primer FQ
[1027]
[1028] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-fenil-propionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-fenilpropionil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer 3), (33 mg, 36%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.22-8.03 (m, 4H), 7.89-7.74 (m, 9H), 7.54-7.05 (m, 4H), 5.20 (m, 2H), 4.63 (m, 1H), 4.48(m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.15-3.88 (m, 4H), 3.69-3.51 (m, 8H), 3.45-3.15 (m, 4H) 3.10 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.45-1.97 (m, 5H), 1.80 (m, 1H), 1.63 (m, 1H), 1.00-0.88 (m, 6H); MS (ESI) m/z 837.4 [M H]<+>.
Primer FR
[1029]
[1030] 4-Difluorometoksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar : U 4-Hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromofenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (500 mg) i Cu(I)I (45 mg) u MeCN (8 mL) na 45 °C je dodat o242 µl difluoro-fluorosulfonil-sirćetne kiseline u 2 mL MeCN u kapima tokom 60 min. Reakciona smeša je mešana na 45°C 60 min. i uparena pod smanjenim pritiskom, i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (100 mL). Organska faza je isprana sa slanim rastvorom (1 x 100 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 10 -50 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 4-Difluorometoksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (339 mg, 61 %) kao bistro ulje.
[1031] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4-difluorometoksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar : Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (Primer 1), supstituisanjem 4-Difluorometoksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (305 mg) za 4-Hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (244 mg, 83 %).
[1032] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4-difluorometoksi-pirolidin-1-karbonil}-2-metoksi-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4difluorometoksi-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (244 mg) u DCM (4 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (1.3 mL). Smeša je mešana tokom 1 sati zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (2.7 mL) je dodat N-metilmorfolin (234 µL). Nakon što je sav materijal rastvoren, 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (103 mg) i HATU (263 mg) su dodati. Nakon mešanja tokom 60 min. reakcija je uparena pod smanjenim pritiskom, i dobijeni ostatak je prebačen u etil acetat (100 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonatom (1 x 100 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 80 -100 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4-difluorometoksi-pirolidin-1-karbonil}-2-metoksi-propil)-karbaminska kiselina metil estar (166 mg, 61 %) kao bistro ulje.
[1033] 2-{5-[6-(4-{2-[4-Difluorometoksi-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-bitil estar: U (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4-difluorometoksi-pirolidin-1-karbonil}-2-metoksi-propil)-karbaminska kiselina metil estar (166 mg) i 2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (237 mg) u DME (1.6 mL) su dodati Pd2(dba)3(15 mg), Ksantfos (19 mg), i 2M K3PO4(483 µl). Nakon mešanja preko noći na 80°C, smeša je filtrirana i uparena pod smanjenim pritiskom, i dobijeni ostatak je podvrgnut silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta 10 -15 % MeOH i DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi proizvod iz naslova (30 mg, 12 %) kao providan film.
[1034] [1-(4-Difluorometoksi-2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il-4-difluorometoksi-pirolidin-1-karbonil}-2-metoksi-propil)-karbaminska kiselina metil estar (Primer 5), supstituisanjem Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetne kiseline (30 mg) za 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (22 mg, 58 %).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.20-8.05 (m, 3H), 7.95-7.72 (m, 5H), 7.56-7.35 (m.8H), 7.15 (m, 1H), 6.71-6.35 (m, 1H), 5.55 (m, 1H), 5.30-5.20 (m, 3H), 5.05-4.90 (m, 3H), 4.36 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.12-3.82 (m, 2H), 3.65 (m, 6H), 3.50 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.35-1.90 (m, 2H), 0.98-0.85 (m, 6H); MS (ESI) m/z 889.3 [M H]<+>.
Primer FS
[1035]
2-{2-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-2-okso-etilkarbamoil}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[1036] {1-[6-(4-{6-[4-(2-terc-Butoksikarbonilamino-acetil)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (395.0 mg, 0.581 mmol) je rastvoren u DCM (4 mL) i HCl u dioksanu (4M, 4 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 60 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (2.0 mL) i DIEA (110.8 mg, 0.860 mmol) je dodat. Rastvor N-Boc (S) tiazolidin -2-karboksilna kiselina (100.0 mg, 0.430 mmol), HATU (163.0 mg, 0.430 mmol) i DIEA (55.4 mg, 0.430 mmol) u DMF (1 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa slanim rastvorom, natrijum hidroksil rastvorom natrijum hidroksila (1M), slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal (350 mg), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H50N6O7S: 794.9 (M<+>); Pronađeno: 795.8 (M+H<+>).
2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[1037] 2-{2-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-2-okso-etilkarbamoil}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina tercbutil estar (350 mg, 0.44 mmol) je rastvoren u m-ksilenima (3.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (400 mg, 9.07 mmol) je dodatq i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 45 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperaturi i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov reakcioni proizvod je podeljen između hloroforma i vode. Organski sloj je sakupljen i osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirovi proizvod. Sirov materijal je prečišćen silika gel hromatografijom (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (151.3 mg, 0.195 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H49N7O5S: 775.9 (M<+>); Pronađeno: 776.8 (M+H<+>).
[1-(2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-tiazolidin-3-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1038] 2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar (49.9 mg, 0.064 mmol) je rastvoren u DCM (0.33 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.33 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljen. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (24.6 mg, 0.191 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (11.2 mg, 0.064 mmol), HATU (24.1 mg, 0.064 mmol) i DIEA (8.2 mg, 0.064 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 18 sati sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (8.5 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato zaC45H52N8O6S: 833.0 (M<+>); Pronađeno: 833.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.35-7.88 (m, 14H), 7.36 - 7.33 (m, 2H), 6.36 (m, 1H), 5.28 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.24 (m, 1H) 4.16 (m, 1H), 4.03 - 3.74 (m, 6H), 3.55 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.27 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 0.90 - 0.76 (m, 12H) 0.65 (m, 4H) ppm.
Primer FT
[1039]
[1-(6-{4-[6-(4-{2-[3-(4-Metoksi-2-Metoksikarbonilamino-butiril)-tiazolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1040] 2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar (49.9 mg, 0.064 mmol) je rastvoren u DCM (0.33 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.33 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljen. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (24.6 mg, 0.191 mmol) je dodat. Rastvor (L) 4-metoksi-2-Metoksikarbonilamino-buterne kiseline (12.1 mg, 0.064 mmol), HATU (24.1 mg, 0.064 mmol) i DIEA (8.2 mg, 0.064 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 3 sata sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: vodom / MeCN sa 0.1% TFA) dao je proizvod (21.3 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H52N8O7S: 849.0 (M<+>); Pronađeno: 849.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.37 (m, 2H), 8.20 - 8.14 (m, 2H), 8.06 - 7.88 (m, 10H), 7.36 - 7.33 (m, 2H), 6.36 (m, 1H), 5.30 (dd, J = 7.2 Hz, 1H), 4.45 (m, 1H) 4.06 (m, 1H), 4.06 -3.69 (m, 6H), 3.55 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.36 (m,2H), 3.25 (m, 3H), 2.26 (m, 2H), 2.02 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 0.90 - 0.76 (m, 6H) 0.65 (m, 4H) ppm.
Primer FU
[1041]
{1-[6-(4-{6-[4-(2-{3-[2-Metoksikarbonilamino-2-(tetrahidro-piran-4-il)-acetil]-tiazolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar:
[1042] 2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-tiazolidin-3-karboksilna kiselina terc-butil estar (49.9 mg, 0.064 mmol) je rastvoren u DCM (0.33 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.33 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (24.6 mg, 0.191 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-(tetrahidro-piran-4-il)-sirćetna kiselina (13.8 mg, 0.064 mmol), HATU (24.1 mg, 0.064 mmol) i DIEA (8.2 mg, 0.064 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 18 sati sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal, koji je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: vodom / MeCN sa 0.1 % TFA) dao je proizvod (6.2 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H52N8O7S: 875.0 (M<+>); Pronađeno: 875.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ:<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.31 - 7.89 (m, 14H), 7.36 - 7.33 (m, 2H), 6.34 (m, 1H), 5.27 (m, 1H), 4.30 (m, 1H) 4.03 (m, 1H), 4.06 - 3.69 (m, 6H), 3.57 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.28 - 2.95 (m, 4H), 2.26 (m, 2H), 2.02 (m, 2H), 1.50-1.32 (m,4H), 0.85 - 0.73 (m, 6H) 0.65 (m, 4H) ppm.
Primer FV
[1043]
2-{2-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-2-okso-etilkarbamoil}-4-fenil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[1044] {1-[2-(4-{6-[4-(2-terc-Butoksikarbonilamino-acetil)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (61.0 mg, 0.095 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljen. Nakon 90 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (1.0 mL) i DIEA (23.7 mg, 0.183 mmol) je dodat. Rastvor 4-Fenil-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (17.8 mg, 0.061 mmol), HATU (23.3 mg, 0.061 mmol) i DIEA (7.9 mg, 0.061 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa slanim rastvorom, zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtracija i uklanjanje rastvarača u vakuumu dala je sirov materijal (88 mg), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H54N6O7: 826.9 (M<+>); Pronađeno: 827.7 (M+H<+>).
2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-fenil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[1045] 2-{2-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-2-okso-etilkarbamoil}-4-fenil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (88 mg) je rastvoren u m-ksilenima (1.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (100 mg, 1.2 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 180 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov proizvod reakcije je podeljen između hloroforma i vode. Organski sloj je sakupljen i osušen preko natrijum sulfata. Filtracija i evaporacija rastvarača dala je sirovi proizvod. Sirov materijal je prečišćen silika gel hromatografijom (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (51.0 mg, 0.195 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H53N7O5: 807.9 (M<+>); Pronađeno: 808.4 (M+H<+>).
[1046] [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-fenil-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-fenil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (51.0 mg, 0.063 mmol) je rastvoren u DCM (1.0 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1.0 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (24.3 mg, 0.190 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (11.1 mg, 0.063 mmol), HATU (24.0 mg, 0.063 mmol) i DIEA (8.1 mg, 0.063 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 60 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.1 mL, 2 M) i je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (12.1 mg) kao TFA so. LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H56N8O6: 865.0 (M<+>); Pronađeno: 865.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.31 - 8.30 (d, J = 3 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 6.6 Hz, 2h), 7.98 - 7.86 (m, 10H), 7.34 - 7.21 (m, 7H), 5.28 (dd, J = 6.0 / 2.7 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 6.0 / 5.7 Hz, 1H), 4.26 (m, 1H) 4.11 (m, 1H), 4.06 (m, 1H) 3.85 - 3.73 (m, 3H), 3.48 (s, 3H), 3.47 (s, 3H), 2.27 (m, 2H), 2.14 - 2.09 (m, 7H), 0.89 - 0.72 (m, 12H) ppm.
Primer FW
[1047]
[1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-fenil-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1048] 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-fenil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (88.mg, 0.107 mmol) je rastvoren u DCM (1.0 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1.0 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 40 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.4 mL) i DIEA (40.8 mg, 0.321 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline (18.7 mg, 0.107 mmol), HATU (40.6 mg, 0.107 mmol) i DIEA (13.6 mg, 0.107 mmol) u DMF (0.4 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.1 mL, 2 M) i je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (38.7 mg) kao TFA so. LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H56N8O6: 865.0 (M<+>); Pronađeno: 865.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.37 - 8.35 (m, 2H), 8.16 - 7.91 (m, 12H), 7.47 - 7.28 (m, 7H), 5.24 (dd, J = 7.8 / 5.4 Hz, 1H), 5.16 (dd, J = 4.8 / 4.8 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 6.3 / 6.3 Hz, 1H) 4.16 - 4.09 (m, 2H) 3.85 - 3.80 (m, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.78 (m, 1H), 2.30 - 1.96 (m, 8H), 0.90 - 0.75 (m, 12H) ppm.
Primer FX
[1049]
[1-(4-Benzil-2-5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1050] 4-Benzil-2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (58.0 mg, 0.071 mmol) je rastvoren u DCM (1.0 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1.0 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 30 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (27.3 mg, 0.211 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline (12.3 mg, 0.071 mmol), HATU (26.8 mg, 0.071 mmol) i DIEA (9.1 mg, 0.071 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.1 mL, 2 M) i je prečišćen pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (25.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C51H57N8O6: 878.0 (M<+>); Pronađeno: 879.6 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.36 (s, 2H), 8.16 - 7.89 (m, 12H), 7.38 - 7.19 (m, 7H), 5.29 (dd, J = 5.7 / 3.9 Hz, 1H), 5.16 (dd, J = 5.1 / 5.1 Hz, 1H), 4.18 - 4.05 (m, 2H), 3.93 - 3.86 (m, 2H), 3.56 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.52 (m, 2H), 2.79 (m, 1H), 2.48 (m, 2H), 2.39 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 7H), 0.91 - 0.77 (m, 12H) ppm.
Primer FY
[1051]
4,8-Dimetil-1,5-ditia-s-indacen:
[1052] 1,5-Ditia-s-indacen-4,8-dion (2.0 g, 9.17 mmol) je dodat u rastvor metil magnezijum hlorida (60 mmol) u THF (80 mL) [Org. Lett., 2008, 10:4421-4424]. Reakciona smeša je zagrejana na 55° C (uljano kupatilo). Nakon 14 h, rastvor kalaj(II)hlorida (10 g) u vodenoj HCl (2M, 50 mL) je dodat pažljivo i grejanje je nastavljeno tokom 4 dodatna sata. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i THF je uklonjen u vakuumu. Sirova smeša je podeljena između hloroforma i slanim rastvorom. Dobijena gusta suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je odbačena. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata. Filtriranje i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal, koji je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc / heksani) da se dobije proizvod (355.0 mg, 1.63 mmol).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CDCl3) δ: 7.49 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 2.81 (s, 6H)ppm.
2-Hloro-1-[6-(2-hloro-acetil)-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il]-etanon:
[1053] 4,8-Dimetil-1,5-ditia-s-indacen (61.0 mg, 0.095 mmol) je rastvoren u THF (9 mL) i ohlađen do -78° C. Rastvor n-BuLi (1.6 M heksani, 0.946 mL) je dodat i mešanje na -78° C je nastavljeno tokom 90 minuta. U dobijenu suspenziju je dodat rastvor N-Metil, N-Metoksi-2-hloroacetata (209 mg, 1.51 mmol) u THF (1 mL). Mešanje na -78° C je nastavljeno 45 minuta. Reakcija je kvenčovana sa amonijum hloridnim rastvor i metanolom i zagrejana je do sobne temperature. Svetlo žuta čvrsta supstanca je sakupljena i korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc. butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina terc-butil estar
[1054] 2-Hloro-1-[6-(2-hloro-acetil)-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il]-etanon (sirov čvrsta supstanca iz prethodnog koraka)) je combined i sa (L)-N-Boc Proline karboksilna kiselina (324 mg, 1.51 mmol), kalijum karbonat (304 mg, 2.2 mmol), sodium iodide (21.6 mg) i je zagrejana u acetonu (10 mL) na -78° C. Nakon 120 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Reakcija je razblažena sa hloroform i isprana je sa slanim rastvorom, zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom, i osušena je preko natrijum sulfata. Filtriranje i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal (580 mg, 0.797 mmol), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[1055] Sirov proizvod iz prethodnog koraka (580.1 mg, 0.797 mol) je rastvoren u m-ksilenima (7.0 mL) i zagrejana na 140 °C. Čvrsta supstanca amonijum acetat (500 mg, 6.41 mmol) je dodata i reakcija je mešana na 140 °C. Nakon 240 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov proizvod reakcije je podeljen između hloroforma i vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj je sakupljen, ispran sa slanim rastvorom i osušen preko natrijum sulfata. Filtriranje i evaporacija rastvarača dalo je sirov proizvod (303.0 mg, 0.440 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C36H44N6O4S2: 688.9 (M<+>); Pronađeno: 688.3 (M+H<+>).
(1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1056] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (51.0 mg, 0.073 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (37.6 mg, 0.292 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (25.5 mg, 0.146 mmol), HATU (55.5 mg, 0.146 mmol) i DIEA (18.8 mg, 0.146 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (5.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H50N8O6S2: 803.0 (M<+>); Pronađeno: 803.2 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.88 (s, 4H), 7.30 (m, 2H), 5.10 (m, 2H), 4.12 (dd, J = 8.1 / 8.1 Hz, 2H), 3.83 (m, 4H) 3.53 (s, 6H), 2.73 (s, 6H), 2.27 (m, 2H), 2.14 -1.98 (m, 8H), 0.89 - 0.80 (m, 12H) ppm.
Primer FZ
[1057]
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
[1058] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (51.0 mg, 0.073 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (37.6 mg, 0.292 mmol) je dodat. Rastvor 2-(D) Metoksikarbonilamino-2-fenil-sirćetna kiselina (30.5 mg, 0.146 mmol), HATU (55.5 mg, 0.146 mmol) i DIEA (18.8 mg, 0.146 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (6.7 mg) kao smeša izomera i u obliku TFA soli.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H50N8O6S2: 871.0 (M<+>); Pronađeno: 871.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.95 - 7.66 (m, 6H), 7.40 - 7.34 (m, 8H), 7.06 (m, 2H), 5.51 (m, 2H), 5.13 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.54 i 3.52 (2x s, 6H), 3.16 (m, 2H), 2.76 (s, 6H), 2.19 - 1.98 (m, 8H) ppm.
Primer GA
[1059]
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-tetrahidropiranil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-tetrahidropiranil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-tetrahidropiranil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-tetrahidropiranil-etil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1060] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (51.0 mg, 0.073 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (37.6 mg, 0.292 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-2-(4-tetrahidropiranil)-sirćetna kiselina (31.6 mg, 0.146 mmol), HATU (55.5 mg, 0.146 mmol) i DIEA (18.8 mg, 0.146 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešaan na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (8.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H54N8O8S2: 887.0 (M<+>); Pronađeno: 887.9 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.81 (s, 4H), 7.39 (m, 2H), 5.08 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.85 (m, 8H) 3.53 (s, 6H), 3.22 (m, 4H), 2.72 (s, 6H), 2.27 (m, 2H), 2.14 - 1.98 (m, 8H), 1.58 -1.25 (m, 8H) ppm.
Primer GB
[1061]
(1-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[1-(2-metokikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il] pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
(1-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1062] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetoksi-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (49.3 mg, 0.070 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (36.0 mg, 0.280 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (24.5 mg, 0.140 mmol), HATU (53.2 mg, 0.140 mmol) i DIEA (18.0 mg, 0.140 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 45 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (5.1 mg) kao TFA so. [Potreban početni materijal za modifikovanu sekvencu je opisan u Org. Lett., 2008, 10:4421-4424.]
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H50N8O8S2: 835.0 (M<+>); Pronađeno: 835.2 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.95 (s, 2H), 7.85 (s, 2H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.09 (dd, J = 4.8 / 4.8 Hz, 2H), 4.10 - 4.07 (m, 8H), 3.82 (m, 4H) 3.57 (s, 6H), 2.30 (m, 2H), 2.15 - 1.96 (m, 8H), 0.87 - 0.80 (m, 12H) ppm.
Primer GC
[1063]
(2-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il] pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
(2-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1064] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetoksi-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (49.3 mg, 0.070 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (36.0 mg, 0.280 mmol) je dodat. Rastvor 2-(D) Metoksikarbonilamino-2-fenil-sirćetna kiselina (29.3 mg, 0.140 mmol), HATU (53.2 mg, 0.140 mmol) i DIEA (18.0 mg, 0.140 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 45 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (6.7 mg) kao smeša izomera i u obliku TFA soli.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H50N8O6S2: 871.0 (M<+>); Pronađeno: 871.7 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.01 - 7.67 (m, 6H), 7.39 - 7.35 (m, 8H), 7.06 (m, 2H), 5.51 (m, 2H), 5.13 (m, 2H), 4.13 (s, 6H), 3.91 (m, 2H), 3.54 i 3.52 (2x s, 6H), 3.16 (m, 2H), 2.19 - 1.87 (m, 8H) ppm.
Primer GD
[1065]
(2-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-2-tetrahidropiranil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-sindacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-tetrahidropiraniletil)-karbaminska kiselina metil estar
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-tetrahidropiranil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-tetrahidropiranil-etil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1066] 1-{2-[5-(6-{2-[1-karbaminska kiselina terc-butil estar-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetoksi-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbaminska kiselina tercbutil estar (49.3 mg, 0.070 mmol) je rastvoren u DCM (0.67 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.67 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.8 mL) i DIEA (36.0 mg, 0.280 mmol) je dodat. Rastvor 2- (L) Metoksikarbonilamino-2-(4-tetrahidropiranil)-sirćetna kiselina (30.4 mg, 0.140 mmol), HATU (53.2 mg, 0.140 mmol) i DIEA (18.0 mg, 0.140 mmol) u DMF (0.5 mL) je dodat. Reakcija je mešan na sobnoj temperaturi. Nakon 20 minuta, reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.2 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (8.1 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H54N8O8S2: 919.0 (M<+>); Pronađeno: 919.6 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.86 (s, 2H), 7.74 (s, 2H), 7.39 (m, 2H), 5.07 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.08 (s, 6H), 3.84 (m, 8H), 3.53 (s, 6H), 3.21 (m, 4H), 2.26 (m, 2H), 2.15 - 1.92 (m, 8H), 1.64 - 1.27 (m, 8H) ppm.
Primer GE
[1067]
(2-{2-[4-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[3-(2-metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-tiazolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-tiazolidin-3-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
(2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il]-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar
[1068] (2-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-4,8-dimetil-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-feniletil)-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode korišćene za (2-{2-[5-(4,8-Dimetoksi-6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-1,5-ditia-s-indacen-2-il)-1Himidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar supstituisanjem L- tiazolidin-2,3-dikarboksilna kiselina 3-terc-butil estar za L-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H42N8O8S4: 938.2 (M<+>) pronađeno: 939.1 (M H<+>)
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.85 - 7.63 (m 2H), 7.46 -7.29 (m10H), 7.08 -7.01 (m, 2H), 6.31 (m, 2H), 5.60 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.24 (m 2H), 4.13 (s, 6H), 4.06 - 3.76 (m 2H), 3.54 (m, 6H), 3.28 (m, 2H), 3.15 (m, 2H).
Primer GF
(1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1070] (1-{8-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-1,4-dioksa-7-aza-spiro[4.4]nonan-7-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (230.0 mg, 0.453 mmol) je rastvoren u acetonu (10 mL) i vodi (0.2 mL) i p-TsOH ∘ H2O (53 mg, 0.278 mmol) su dodati. Reakcija je zagrejana na 60 °C tokom 20 sati, nakon čega dodatni p-TsOH ∘ H2O (53 mg, 0.278 mmol) je dodat grejanje na 60 °C je nastavljeno. Nakon tri dana, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je stavljen u EtOAc i ispran je sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i osušen preko natrijum sulfata. Filtriranje i evaporacija rastvarača u vakuumu daje sirov proizvod. Sirov materijal je prečišćen putem silika gel hromatografije (eluent: EtOAc koji sadrži 10%MeOH / heksani) da se dobije proizvod (93.9 mg, 0.202 mmol).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C20H23BrN4O4: 463.3 (M<+>); Pronađeno: 463.6 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.92 (m, 1H), 7.64 (m, 5H), 7.49 (d, J = 6.5Hz, 1H), 5.56 (dd, J = 7.5 / 3.6 Hz, 1H), 4.34 (m, 2H), 3.91 (dd, J = 6.3 / 6.3 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.20 (dd, J = 14.4 / 7.8 Hz, 1H), 2.82 (br-d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.87 (m, 1H), 0.78 (d, J= 5.1 Hz, 3H), 0.71 (d, J = 4.8 Hz, 3H) ppm.
[1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pyirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-okso-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1071] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-okso-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (46.0 mg, 0.1 mmol), [2-Metil-1-(2-{4-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (54 mg, 0.1 mmol), i Pd[PPh3]4(11.5 mg, 0.01 mmol) su rastvoreni u DME (2 mL) pod atmosferom argona. Zasićeni, vodeni rastvor natrijum bikarbonata(0.3 mL) je dodat i reakcija je zagrejana 120 °C tokom 20 minuta. Čvrste supstance su uklonjene i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobije proizvod (4.0 mg) kao TFA so.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H50N8O7: 802.9 (M<+>); Pronađeno: 803.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.32 (m, 2H), 8.12 - 7.84 (m, 10H), 7.52 (d, J = 7.8Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4Hz, 1H), 5.61 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.12 (dd, J = 7.5 Hz, 1H), 3.94 (dd, J = 8.4 / 8.4 Hz, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.54 (2x s, 6H), 3.26 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.13 -1.90 (m, 6H), 0.86 - 0.74 (m, 12H) ppm.
Primer GG
[1072]
1-[2-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-2-okso-etilkarbamoil]-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilna kiselina tercbutil estar:
[1073] [1-(2-{4-[4'-(2-terc-Butoksikarbonilamino-acetil)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (107.0 mg, 0.177 mmol) je rastvoren u DCM (1 mL) i HCl u dioksanu (4M, 1 mL) je dodata i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 45 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.6 mL) i DIEA (68.4 mg, 0.531 mmol) je dodat. Rastvor racemskog 1,3-dihidro-izoindol-1,2-dikarboksilna kiselina 2-terc-butil estra (46.6 mg, 0.177 mmol), HATU (67.3 mg, 0.177 mmol) i DIEA (22.8 mg, 0.177 mmol) u DMF (0.4 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 15 minuta, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana je sa slanim rastvorom, zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom, i je osušen preko natrijum sulfata. Filtriranje i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je sirov materijal (147.8 mg), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H48N6O7: 748.8 (M<+>); Pronađeno: 749.2 (M+H<+>).
1-[5-(4'-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilna kiselina terc-butil estar:
[1074] 1-[2-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-2-okso-etilkarbamoil]-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (147.8 mg) je stavljen u m-ksilene (2.0 mL) i zagrejan na 135 °C. Čvrst amonijum acetat (120 mg, 1.5 mmol) je dodat i reakcija je mešana na 135 °C. Nakon 180 minuta, reakcija je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov proizvod reakcije je podeljena između EtOAc i vode. Organski sloj je sakupljen i osušen preko natrijum sulfata. Filtriranje i evaporacija rastvarača dala je sirov proizvod (142 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H47N7O5: 729.8 (M<+>); Pronađeno: 730.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 8.07 (m, 2H), 7.90 - 7.85 (m, 8H), 7.49 - 7.27 (m, 5H), 6.31 (s, 1H), 5.12 (dd, J = 6.9 / 6.9 Hz, 1H), 4.95 - 4.70 (m, 2H), 4.11 (dd, J = 7.5 / 7.5 Hz, 1H), 3.83 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 2.41 (m, 1H), 2.13 - 1.95 (m, 4H), 1.45 i 1.22 (2 x s, 9H), 0.88 - 0.78 (m, 6H) ppm.
(1-{1-[5-(4'-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-1,3-dihidro-izoindol-2-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar:
[1075] 1-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-1H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-1,3-dihidro-izoindol-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (71.0 mg, 0.086 mmol) je rastvoren u DCM (1.0 mL) i HCl u dioksanu (4M, 0.5 mL) je dodat i mešanje na sobnoj temperaturi je nastavljeno. Nakon 5 minuta, sve isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Sirov materijal je rastvoren u DMF (0.5 mL) i DIEA (30.9 mg, 0.24 mmol) je dodat. Rastvor 2-(L) Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (14.0 mg, 0.080 mmol), HATU (30.4 mg, 0.08 mmol) i DIEA (10.3 mg, 0.08 mmol) u DMF (0.4 mL) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 120 minuta, sirova reakcija je kvenčovana sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (0.1 mL, 2 M) i prečišćena je pomoću RP-HPLC (eluent: voda / MeCN sa 0.1% TFA) da se dobiju dva diastereomerna proizvoda (1.5 mg i 2.4 mg) kao TFA soli.
Jedinjenje A (brži eluirajući materijal na RP-HPLC)
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H50N8O6: 786.9 (M<+>); Pronađeno: 787.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.90 - 7.75 (m, 10H), 7.50 - 7.27 (m, 6H), 6.42 (m, 1H), .39 - 5.21 (m, 2H), 5.09 (m, 1H), 4.16 - 4.08 (m, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.52 (s, 6H), 2.41 (m, 1H), .13 - 1.95 (m, 5H), 0.91 - 0.79 (m, 12H) ppm.
Jedinjenje B (kasniji eluirajući materijal na RP-HPLC)
LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H50N8O6: 786.9 (M<+>); Pronađeno: 787.4 (M+H<+>).
<1>H-NMR: 300 MHz, (dmso-d6) δ: 7.80 - 7.58 (m, 10H), 7.40 - 7.13 (m, 6H), 6.29 (m, 1H), .09 - 4.70 (m, 3H), 4.06 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 2.18 (m, H), 1.98 - 1.82 (m, 5H), 0.75 - 0.59 (m, 12H) ppm.
Primer GH [1076]
(S)-2-benzil 1-terc-butil 4-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat
[1077] U mešan rastvor smeše (S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (2.85 g, 12.43 mmol) i kalijum karbonat (4.33 g, 24.87 mmol) u anhidrovanom N,N-dimetilformamidu (60 mL) je dodat benzil bromid (4.25 g, 24.87 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.
[1078] Dobijena sirova smeša je razblažena sa etilacetatom i organski sloj je ispran sa 10% natrijum karbonatom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i isparljive supstance su uklonjene u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni na normalnoj fazi da se dobije 2.82 g (71 %) željenog proizvoda.
(S)-benzil 4-oksopirolidin-2-karboksilat hidrohlorid
[1079] U mešani rastvor (S)-2-benzil 1-terc-butil 4-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (2.82 g, 8.8 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuran (44 mL) je dodat 4N HCl u 1,4-dioksanu (9.3 mL) na sobnoj temperaturi. smeša je mešan 18 sati na sobnoj temperaturi. Proizvod je zatim tri puta sa toluenom na rotovap-u do suva da se ukloni sav višak kiseline i dalje osušen na visokom vakuumu preko noći i korišćen kao što jeste u sledećem koraku. Kvantitativni prinos.
(S)-benzil 1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-oksopirolidin-2-karboksilat
[1080] Praćenjem procedure da se pripremi jedinjenje (S)-benzil 1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-oksopirolidin-2-karboksilat, osim što (S)-benzil 4-oksopirolidin-2-karboksilat i (S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbuterna kiselina su korišćeni umesto 2-{5-[4-(-4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin1-karboksilna kiselina terc-butil estar i 3-[5-(4-bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar.
(S)-benzil 7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-karboksilat
[1081] (S)-benzil 1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-oksopirolidin-2-karboksilat (2.45 g, 6.51 mmol) u sudu sa okruglim dnom je rastvoren u anhidrovanom toluenu (200 mL) i monohidrat p-toluen sulfonske kiseline (124 mg, 0.1 mmol) i etilen glikol (808 mg, 13.02 mmol) su dodati i smeša je refluksovana 18 sati, uklanjajući generisan sporedni proizvod vodu sa Dean-Stark aparatom. Sirova smeša je zatim razblažena sa etil acetatom i isprana, redom, sa 10% limunskom kiselinom, zasićenim amonijum hloridom, 10% natrijum karbonatom i konačno sa slanim rastvorom. Organski slojevi su kombinovani i osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani na rotovap-u. Sirov ostatak je zatim prečišćen hromatografijom na koloni na normalnoj fazi sa 5% MeOH/DCM. (2.3 g, 84%)
(S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-karboksilna kiselina
[1082] (S)-benzil 7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-karboksilat (2.3 g, 5.47 mmol) je rastvoren u etil alkoholu (55 mL) i pod argonom napunjenim sa 10% Pd/C u sudu sa okruglim dnom. Sud je zatim zatvoren sa guenom pregradom i vazduh je uklonjen vakuumom i zamenjen sa H2 iz balona. Ovaj proces je ponovljen tri puta i smeša je mešan pod atmosferom H2 18 sati. dobijena smeša je zatim propuštena kroz elite čep i koncentrovana na rotovap-u da se dobije 1.76 g, 98% željeni proizvod.
(S)-2-(4-bromofenil)-2-oksoetil 7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro [4.4]nonan-8-karboksilat
[1083] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-2-(4-bromofenil)-2-oksoetil 5-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksilat (2.07g, 74%)
Metil (S)-1-((S)-8-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat
[1084] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi metil (S)-1-((S)-6-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat (1.64 g, 82.2%)
(S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-il-karbaminska kiselina metil estar:
[1085] Metil (S)-1-((S)-8-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat (200 mg, 0.39 mmol), bis(pinakolato)dibor (130 mg, 0.51 mmol), kalijum acetat (116 mg, 1.18 mmol), i Pd(dppf)Cl2(29 mg, 0.039 mmol) su svi izmereni u staklenom sudu pod pritiskom i anhidrovani 1,4-Dioksan (2 mL) je dodat. Smeša je ključala sa gasom azota oko 5 min. Sud je zatim poklopljen i zaptiven i zagrejan u uljanom kupatilu na 90°C preko noći uz stalno mešanje.
[1086] Reakcioni sud je ohlađen do sobne temperature i metil (S)-1-((S)-6-(5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat (215 mg, 0.41 mmol), 2M K2CO3, i Pd(PPh3)4 (46 mg, 0.04 mmol) su svi dodati zajedno sa 2 mL DMSO i smeša je ključala sa gasom azota 5 minuta. Sud je ponovo poklopljen, zatvoren i postavljen u uljanom kupatilu na 100°C tokom 4 sata.
[1087] Dobijena sirova smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana, redom, sa slanim rastvorom, 10% Na2CO3, 10% limunskom kiselinom, zasićenim rastvorom NH4Cl, i slanim rastvorom. organski sloj je zatim osušen preko Na2SO4i isparljive supstance su uklonjene na rotovap-u. Ostatak je prvo prečišćen hormatografijom na normalnoj fazi i zatim na prep HPLC. Prinos= 205 mg (60%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ 8.18 -7.97 (m, 1H), 7.83 - 7.6 (m, 8H), 7.82 - 7.22 (m, 3H), 5.47 - 5.34 (m, 4H),4.33 - 4.26 (m, 1H), 4.08 - 4.03 (m, 4H), 3.94 - 3.89 (m, 1H), 3.78 - 3.69 (m, 8H), 3.22 (brs, 1H), 2.96 - 2.94 (m, 1H), 2.49 - 2.46 (m, 1H), 2.22 - 2.17 (m, 1H), 1.99 (brs, 1H), 1.08 - 1.04 (m, 2H), 0.94 - 0.79 (m, 12H), 0.71 (m, 4H). MS (ESI) m/z 873.79 [M H]<+>.
Primer GI
[1088]
(S)-benzil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-4-hidroksibutanoat:
[1089] N-t-Boc-L-homoserin (5.14 g, 23.45 mmol) i kalijum bikarbonat (2.46g, 24.6 mmol) je izmeren u sudu sa okruglim dnom i u to je dodat anhidrovani N,N-dimetilformamid (100 mL) i benzil bromid (4.2 g, 24.6 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Sirova smeša je zatim razblažena sa etil acetatom i isprana, redom, sa slanim rastvorom, zasićenim NaHCO3i slanim rastvorom, i osušena preko Na2SO4. Organski sloj je zatim koncentrovan na rotovap-u i prečišćen hromatografijom na koloni na normalnoj fazi. Prinos= 7.27 g (100%).
(S)-benzil 4-(benzo[d][1,3]ditiol-2-iloksi)-2-(terc-butoksikarbonil amino) butanoat:
[1090] (S)-Benzil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-4-hidroksibutanoat (5.76 g, 18.62 mmol) i 1,3-benzoditiol-2-ilium tetrafluoroborat (4.69 g, 19.55 mmol) su rastvoreni u dihlormetanu (186 mL) i piridin (4.42 g, 55.86 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana preko noći. Nakon završetka reakcije, kvenčovana je sa trietilaminom (11.5 g, 113.5 mmol) i razblažena sa dihlormetanom. Organski sloj je zatim ispran sa zasićenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4 i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je zatim prečišćen na koloni na normalnoj fazi da se dobije bistro ulje.7.6 g (88%).
(S)-Benzil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-4-(difluorometoksi)butanoat:
[1091] N-Jodosukcinimid (783 mg, 3.48 mmol) je suspendovana u anhidrovanom dihlormetan (10 mL) i na -35°C je polako dodat HF.piridin (70% HF)(50 µl, 1.91 mmol) i smeša je mešanar 5 - 10 min. Na ovoj temperaturi je zatim u kapima dodat rastvor (S)-benzil 4-(benzo[d][1,3]ditiol-2-iloksi)-2-(terc-butoksikarbonil amino) butanoat (400 mg, 0.87 mmol) u dihlormetanu (3 mL). Sadržaj reakcije je zatim mešan tokom 1 sata na - 35°C i 1 sat na sobnoj temperaturi.
[1092] U reakcionu smešu je dodat ledeno hladan zasićen NaHCO3i ekstrakovana je sa dihlormetanom. Organski sloj je ispran sa zasićenim rastvorom natrijum tiosulfata i ispran sa slanim rastvorom i osušen preko natrijum sulfata. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu i ostatak je prečišćen na koloni na normalnoj fazi. 161 mg (52%).
(S)-benzil 2-amino-4-(difluorometoksi)butanoat:
[1093] (S)-benzil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-4-(difluorometoksi)butanoat (161 mg, 0.448 mmol) je mešan u 30% TFA u dihlormetanu (5 mL) 1h. Dobijena smeša je koncentrovana na rotovap-u i ponovo rastvorena i koncentrovana sa toluenom tri puta, i konačno ostatak je osušen na pumpi sa visokim vakuumom. Željeni proizvod je korišćen takav kakav jeste u sledećem koraku.
(S)-benzil 4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoat:
[1094] (S)-Benzil 2-amino-4-(difluorometoksi)butanoat (116 mg, 0.448 mmol) je rastvoren u anhidrovanom dihlormetanu (2.5 mL) i ohlađen do 0°C i TEA (181 mg, 1.79 mmol) i metilhloroformat (51 mg, 0.538 mmol) su dodati redom. Smeša je mešana 30 minuta i zatim je mešaan na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijena smeša proizvoda je kvenčovana sa zasićenim NaHCO3i ekstrakovan sa dihlormetanom. Organski sloj je ispran sa zasićenim NH4Cl rastvorom i slanim rastvorom i osušen preko Na2SO4. Isparljive supstance su uklonjene u vakuumu da se dobije 56 mg (40%) željenog proizvoda nakon prečišćavanja na koloni.
(S)-4-(Difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino) buterna kiselina:
[1095] (S)-Benzil 4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoat (56 mg, 0.176 mmol) je rastvoren u etil alkoholu (3.5 mL) i pod argonom napunjen sa 10% Pd/C (19 mg). Sud je zatvoren sa gumenim septumom i atmosfera vazduha je zamenjen sa H2iz balona primenom vakuuma i zatim oslobađanjem H2i ponovljeno je ovo tri puta. Smeša je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi. Nakon završetka, sirova smeša je propuštena kroz Elite čep, koncentrovana na rotovap-u i korišćen takva kakva jeste u sledećem koraku.40 mg (100%).
(S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1096] Metil (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro [2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat tetrahidrohlorid (66 mg, 0.096 mmol), (S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino) buterna kiselina (20 mg, 0.088 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (24 mg, i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt)(17 mg, 0.125 mmol) su svi izmereni u sudu i anhidrovani N,N-dimetilformamid (1 mL) je dodat. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(58 mg, 0.576 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena prep. HPLC na reverznoj fazi. 37 mg, (43%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.08 (s, 1H), 8.01 (d, J= 16 Hz, 1H), 7.86 - 7.66 (m, 10H), 7.38 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.03 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.58 (t, J= 75.6 Hz, 1H), 5.32 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 6.66 - 6.25 (m, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.98 - 3.78 (m, 4H), 3.63 (s, 6H), 3.50 - 3.46 (m, 1H), 2.70 (brs, 1H), 2.39 - 1.78 (m, 7H), 1.71 -1.40 (m, 2H), 0.99 - 0.90 (m, 5H), 0.82 - 0.60 (m, 4H). MS (ESI) m/z 894.16 [M H]<+>.
Primer GJ
(S)-4-(difluorometoksi)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1098] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.13 (s, 1H), 8.03 (m,1H), 7.91 - 7.85 (m, 2H), 7.80 - 7.71 (m, 6H), 7.42 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.97 (m, 1H), 6.56 (t, J= 76 Hz, 1H), 5.40 - 5.35 (m, 1H), 4.83 (m, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.44 - 4.33 (m, 1H), 3.93 (brs, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.76 - 3.66 (m, 5H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 2.80 - 2.64 (m, 1H), 2.32 - 2.25 (m, 1H), 2.17 - 2.12 (m, 2H), 2.07 - 1.86 (m, 5H), 1.73 - 1.57 (m, 2H), 1.03 - 0.9 (m, 4H), 0.77 -0.57 (m, 4H). MS (ESI) m/z 894.00 [M H]<+>.
Primer GK
[1099]
(S)-Terc-butil 2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat:
[1100] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-il-karbaminska kiselina metil estar, osim umesto metil (S)-1-((S)-6-(5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat i metil (S)-1-((S)-8-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat, metil (S)-1-((S)-8-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)-3-metil-1-oksobutan-2ilkarbamat (600 mg, 1.182 mmol) i (S)- terc-butil 2-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat (510 mg, 1.3 mmol). Količina za sve reagense su prilagođene prema tome. 489 mg (56%).
Metil (S)-3-metil-1-okso-1-((S)-8-(5-(4'-(2-((S)-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)butan-2-ilkarbamat:
[1101] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-benzil 2-amino-4-(difluorometoksi)butanoat, osim što je uzeto kao što sledi: isparljive supstance su uklonjene i ostatak je prebačen u EtOAc i ispran sa vodom da se dobije željeni proizvod u vodenom sloju. Organski sloj je ponovo ispran sa nešto više vode i vodeni slojevi su kombinovani i bazifikovani sa 50% NaOH rastvorom da se podesi pH do 9. Željeni proizvod je zatim povratno-ekstrakovan u EtOAc sloj i vodeni sloj je ekstrakovan tri puta sa EtOAc. Organska faza je osušena preko Na2SO4i koncentrovana na rotovap-u da se dobije 290 mg (69%) željenog jedinjenja kao slobodne baze.
(S)-1-((S)-2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1102] Jedinjenje iz naslova je priprmljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi l-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.80 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.74 - 7.70 (m, 4H), 7.66 - 7.62 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (m, 2H), 7.02 (t, J=7.6 Hz, 1H), 5.24 (m, 2H), 4.25 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 4.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 4.11 - 3.85 (m, 8H), 3.66 (s, 5H), 3.50 - 3.45 (m, 1H), 2.56 - 2.44 (m, 2H), 2.36 - 2.17 (m, 3H), 2.09 - 1.99 (m, 3H), 1.01 - 0.86 (m, 12H). MS (ESI) m/z 797.84 [M H]<+>.
Primer GL
[1103]
(S)-4-(difluorometoksi)-1-((S)-2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1104] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi1-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazo1-4-il}-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar.
<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.69 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 4H), 7.56 - 7.52 (m, 5H), 7.28 - 7.24 (m, 2H), 6.46 (t, J=7.6 Hz, 1H), 5.14 (m, 2H), 4.62 (m, 1H), 4.24(m, 11H), 3.64 (s, 5H), 2.54 - 2.43 (m, 2H), 2.36 - 1.81 (m, 8H), 099 - 0.84 (m, 6H). MS (ESI) m/z 849.76 [M H]<+>.
Primer GM
[1105]
(S)-2-((S)-2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar:
[1106] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremil-{2-[5-(9-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-metil-6,7-dihidro-5H-dibenzo[c,e]azepin-3-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.68 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63 - 7.50 (m, 8H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 5.13 - 5.05 (m, 2H), 4.22 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 4.01 - 3.80 (m, 10H), 3.56 (s, 5H), 3.36 (s, 1H), 3.29 - 3.18 (m, 3H), 2.46 - 2.34 (m, 2H), 2.27 - 2.07 (m, 3H), 1.99 - 1.87 (m, 4H), 1.54 - 1.19 (m, 5H), 0.85 - 0.76 (m, 6H). MS (ESI) m/z 839.84 [M H]<+>.
Primer GN
[1107]
(S)-1-((S)-8-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-8-il)-1H-imidazol-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)-1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1108] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-terc-butil 2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4-dioksa-7-azaspiro [4.4]nonan-8-il)-1H-imidazo1-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.78 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.71 - 7.69 (m, 4H), 7.65 -7.61 (m, 5H), 5.23 (t, J= 8.4 Hz, 2H), 4.17 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 4.10 (m, 14H), 3.65 (s, 5H), 3.46 (s, 1H), 2.65 (s, 1H), 2.55 - 2.44 (m, 4H), 2.04 - 1.96 (m, 2H), 1.00 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 0.95 - 0.85 (m, 12H). MS (ESI) m/z 855.80 [M H]<+>.
Primer GO
[1109]
(S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((S)-1-((S)-4-(Difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1110] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.00 - 7.98 (m, 1H), 7.91 -7.84 (m, 1H), 7.78 - 7.55 (m, 8H), 7.37 - 7.20 (m, 2H), 6.49 (t, J= 75.6 Hz, 1H), 5.25 - 5.20 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 1H), 3.89 - 3.81 (m, 4H), 3.75 - 3.66 (m, 1H), 3.58 (s, 5H), 3.42 - 3.39 (m, 1H), 2.33 - 1.77 (m, 9H), 0.94 - 0.83 (m, 6H), 0.72 - 0.52 (m, 4H). MS (ESI) m/z 867.86 [M H]<+>.
Primer GP i GQ
[1111]
Smeša metil 4-(4-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata i metil 4-(3-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata:
[1112] Rastvor metil 4-bromobiciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata (1 g, 4.05 mmol) u anhidrovanom bromobenzenu (6.75 mL) je dodat u kapima u ledeno-vodenu ohlađenu suspenziju aluminijum hlorida (2.16 g, 16.2 mmol) u bromobenzenu (3.25 mL) pod azotom. Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša u ledenom kupatilu tokom 30 min i zatim na ambijentalnoj temperaturi preko noći. Smeša je oprezno sipana na led (100 g) i koncentrovana HCl (3.3 mL) i smeša je ekstrakovaan u etru (4 × 100 mL). Etarski esktrakti su kombinovani, isprani sa slanim rastvorom (100 mL), razdvojeni i osušen preko MgSO4 da se ostavi braon čvrsta supstanca. Prečišćavanje silika hroatografijom (5% etil acetat / heksan ) dala je smešu para- i meta supstituisanih derivata. (970 mg, 74%). (Za detaljinu proceduru ogledati J. Med. Chem., 2009, 52, 6, 1563).
Smeša 4-(4-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilne kiseline i 4-(3-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilne kiseline:
[1113] Smeša jedinjenja iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{3-Acetil-5-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-imidazolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. (638 mg, 94%)
Smeša 2-bromo-1-(4-(4-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)etanon i 2-bromo-1-(4-(3-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)etanon:
[1114] Smeša jedinjenja iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-Bromo-1-{4-[3-(2-bromo-acetil)-fenoksi]-fenil}-etanon.(290 mg, 43%)
Smeša (S)-2-(2-(4-(4-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil Pirolidin-1,2-dikarboksilat i (S)-2-(2-(4-(3-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil Pirolidin-1,2-dikarboksilat:
[1115] Smeša jedinjenje iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi 2-Aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina 3-(2-{9-[2-(1-tercbutoksikarbonil-Pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-5,7-dihidro-dibenzo[c,e]oksepin-3-il}-2-oksoetil) estar 2-terc-butil estar. (365 mg, 94%).
Smeša (S)-terc-butil 2-(5-(4-(4-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat i (S)-terc-butil 2-(5-(4-(3-bromofenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat:
[1116] Smeša jedinjenja iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi metil (S)-1-((S)-6-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat. (298 mg, 85%).
Smeša (S)-terc-butil 2-(5-(4-(4-(2-((S)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat i (S)-terc-butil 2-(5-(3-(4-(2-((S)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat
[1117] Smeša jedinjenja iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-terc-7-butil 2-(5-(4'-(2-((S)-7-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-1,4dioksa-7-azaspiro [4.4]nonan-8-il)-1H-imidazo1-5-il)bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il)Pirolidin-1-karboksilat. (287 mg, 73%).
Smeša 2-((S)-pirolidin-2-il)-5-(4-(4-(2-((S)-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)fenil)-1H-imidazol tetrahidrohlorid i 2-((S)-pirolidin-2-il)-5-(3-(4-(2-((S)-pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)fenil)-1H-imidazol
tetrahidrohlorid
[1118] Smeša jedinjenja iz naslova je pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-benzil 4-oksopirolidin-2-karboksilat hidrohlorid.
(S)-1-((S)-2-(5-(4-(4-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1119] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar i razdvojena od (S)-1-((S)-2-(5-(4-(3-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)biciklo [2.2.2]oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar pomoću prep HPLC. (41 mg, 23%)<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.63 (d, J= 8 Hz, 1H), 7.55 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.34 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.01 - 6.95 (m, 1H), 5.17 - 5.11 (m, 2H), 4.24 - 4.19 (m, 2H), 4.00 - 3.96 (m, 2H), 3.88 - 3.81 (m, 2H), 3.64 (s, 5H), 3.54 - 3.48 (m, 1H), 2.34 - 1.96 (m, 10H), 1.91 (brs, 12H), 1.01 - 0.88 (m, 12H). MS (ESI) m/z 772.56 [M H]<+>.
(S)-1-((S)-2-(5-(4-(3-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)biciklo [2.2.2] oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar:
[1120] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar i odvojeno od (S)-1-((S)-2-(5-(4-(4-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazo1-5-il)fenil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar pomoću prep HPLC. (54 mg, 30%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 7.43 (d, J= 8 Hz, 2H), 7.28 - 7.21 (m, 3H), 7.01 - 6.95 (m, 1H), 5.17 -5.11 (m, 2H), 4.25 - 4.20 (m, 2H), 3.99 - 3.94 (m, 2H), 3.89 - 3.81 (m, 2H), 3.64 (s, 5H), 3.57 -3.45 (m, 1H), 2.34 - 1.88 (m, 22H), 1.02 - 0.89 (m, 12H). MS (ESI) m/z 772.96 [M H]<+>.
Primer GR
[1121]
(S)-1-((S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S,5R)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)propanoil)-5-fenilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1122] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-4-(difluorometoksi)-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar.
<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.13 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.94 - 7.77 (m, 8H), 7.50 - 7.42 (m, 3H), 7.36 - 7.25 (m, 2H), 7.17 - 6.99 (m, 2H), 5.49 - 5.36 (m, 2H), 5.23 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 4.27 - 4.21 (m, 2H), 4.04 - 3.99 (m, 1HN, 3.93 - 3.87 (m, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.66 (s, 4H), 2.68 -2.48 (m, 2H), 2.39 - 2.20 (m, 4H), 2.11 - 2.03 (m, 2H), 1.39 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 1.04 - 0.96 (m, 4H), 0.93 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 0.70 (d, J= 6.8 Hz, 2H). MS (ESI) mlz 837.92 [M H]<+>.
Primer GS
[1123]
[1124] Dimetilkarbamoiloksi-fenil-sirćetna kiselina: U hidroksil-fenil-sirćetna kiselina metil estar (500 mg) u THF (10 mL) su dodati dimetilkarbamoil hlorid (304 µl), TEA (503 µl), i DMAP (37 mg). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, smeša je prebačena u etil acetat (150 mL). Organska faza je isprana sa 1 N HCl (1 x 100 mL) i zasićen natrijum bikarbonat (1 x 100 mL), i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u THF (6 mL). U rastvor je dodat 2 M LiOH (3 mL). Nakon mešanja tokom 90 min. na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je zakiseljena sa 2 N HCl (3.2 mL). Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom (50 mL). Organska faza je osušen preko natrijum sulfata. rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi dimetilkarbamoiloksi-fenil-sirćetna kiselina (561 mg, 83 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
[1125] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Dimetilkarbamoiloksi-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il]-1H-imidazo1-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (40 mg) u metanolu (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (0.5 mL). Smeša je mešan 2 sata zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat DIEA (14 µl). Nakon što je sav materijal rastvoren, dimetilkarbamoiloksi-fenil-sirćetna kiselina (12 mg) i (1-cijano-2-etoksi-2-oksoetilidenaminoksi)dimetilamino-morfolino-karbenijum heksafluorofosfat (COMU, 23 mg) su dodati. Nakon mešanja tokom 30 min. reakcija je prečišćena pomoću preparativne HPLC (10-60% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (22 mg, 48%).
<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.22-8.05 (m, 2H), 7.92-7.69 (m, 9H), 7.56-7.44 (m, 6H), 6.08-5.92 (d, 1H), 5.27-5.20 (m, 2H), 4.28-4.24 (m, 1H), 4.13-4.00 (m, 2H), 3.90-3.68 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.45-3.38 (m, 2H), 2.92-2.90 (m, 6H), 2.47-1.96 (m, 10H), 1.05-0.91 (m, 6H) ; MS (ESI) m/z 837.3 [M H]<+>.
Primer GT
[1126]
[1127] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Dimetilkarbamoiloksi-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena za [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Dimetilkarbamoiloksi-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar (Primer 6), (20 mg, 43%).<1>H NMR (MeOH-d4, 400 MHz) δ: 8.21-8.04 (m, 2H), 7.93-7.89 (m, 3H), 7.81-7.68 (m, 5H), 7.53-7.41 (m, 7H), 6.10-5.78 (d, 1H), 5.28-5.21 (m, 2H), 4.28-4.26 (m, 1H), 4.03-3.81 (m, 4H), 3.66 (s, 3H), 3.62-3.45 (m, 2H), 2.92-2.85 (m, 6H), 2.42-1.90 (m, 10H), 1.01-0.89 (m, 6H); MS (ESI) m/z 837.5 [M H]<+>.
Primer GU
[1128]
[1129] 4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1karboksilna kiselina terc-butil estar: [2-Metil-1-(6-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (997 mg, 1.91 mmol), 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, Pd(PPh3)4(184 mg, 0.159 mmol), i K2CO3(2 M u H2O, 1.9 mL, 3.8 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksitanu (16 mL). Reakciona smeša je degazirana sa mehurićima N2tokom 10 minuta zatim zagrejana do refluksa tokom 3.5 h. Nakon grejanja, reakciona smeša je ohlađena do RT, razblažena sa EtOAc i isprana sa H2O i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen sa silika hromatografijom na koloni 0% do 100% (10% MeOH/DCM)/EtOAc da se dobije jedinjenje iz naslova (641 mg, 51 %).
[1130] (1-{6-[5-(4-{6-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar-tris-hidrohlorid: 4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (639 mg, 0.816 mmol) je rastvoren u DCM (8 mL) i 4.0 M HCl u dioksanu (2 mL, 8 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 37 min, čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc, dajući jedinjenje iz naslova (597 mg, 92%).
[1131] [1-(6-{5-[4-(6-{2-[4-Cijano-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterna kiselina (40 mg, 0.227 mmol) EDC-HCl (44 mg, 0.227 mmol) i HOBt (32 mg, 0.237 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i mešani tokom 20 min na RT. (1-{6-[5-(4-{6-[2-(4-Cijanopirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar-tris-hidrohlorid (150 mg, 0.189 mg) je dodat, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NMM (0.104 mL, 0.947 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1.5h, reakciona smeša je zagrejana do RT.30 min kasnije, smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa NaHCO3, zatim 1:1 slanim rastvorom/5M NaOH. Organska faza je osušena preko MgSO4, zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (18 mg, 11%). MS (ESI) m/z 840 [M H]<+>.
Primer GV
[1132]
[1133] [1-(6-{5-[4-(6-{2-[4-Cijano-1-(2-Metoksikarbonilamino-butiril)-pyirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4] heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-Metoksikarbonilamino-buterna kiselina (37 mg, 0.227 mmol) EDC-HCl (44 mg, 0.227 mmol) i HOBt (32 mg, 0.237 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i mešani tokom 20 min na RT. (1-{6-[5-(4-{6-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar-tris-hidrohlorid (150 mg, 0.189 mg) je dodat, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NMM (0.104 mL, 0.947 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1.5h, reakciona smeša je zagrejan do RT.30 min kasnije , smeša je razblažen sa EtOAc i ispran sa NaHCO3, zatim 1:1 slanim rastvorom/5M NaOH. Organska faza je osušena preko MgSO4zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (85 mg, 54%). MS (ESI) m/z 826 [M H]<+>.
Primer GW
[1134]
[1135] [1-(4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2,2-dimetil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-Metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (37 mg, 0.227 mmol) EDC-HCl (44 mg, 0.227 mmol) i HOBt (32 mg, 0.237 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i mešani tokom 20 min na RT. (1-{6-[5-(4-{6-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar-tris-hidrohlorid (150 mg, 0.189 mg) je dodat, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NMM (0.104 mL, 0.947 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1.5h, reakciona smeša je zagrejana do RT.30 min kasnije, smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa NaHCO3, zatim 1:1 slanim rastvorom/5M NaOH. Organska faza je osušena preko MgSO4zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (77 mg, 48%). MS (ESI) m/z 855 [M H]<+>. Primer GX
[1136]
[1137] 4-Cijano-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.895 g, 6.94 mmol), bis(pinakolato)dibor (2.64 g, 10.41 mmol), Pd(dppf)2Cl2(254 mg, 0.347 mmol) i KOAc (2.04 g, 20.82 mmol) su kombinovani u dioksanu i degaziran tokom12 min sa mehurićima N2. Reakciona smeša je zatim mešana na 90 °C 18h, ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska smeša je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (50% do 100% EtOAc/Heks) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (1.56 g, 48%).
[1138] 4-Cijano-2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-Cijano-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.990 g, 2.13 mmol), (1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.007 g, 1.92 mmol), Pd(PPh3)4(222 mg, 0.192 mmol) i K2CO3(2.0 M u H2O, 2.1 mL, 4.2 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksimetanu. Smeša je degazirana tokom10 min sa mehurićima N2zatim zagrejana do refluksa tokom 4h zatim ohlađena. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (EtOAc, zatim 2% MeOH/DCM, zatim 4% MeOH/DCM) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (1.028 g, 68%).
[1139] (1-{6-[5-(6-{4-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar tris-hidrohlorid: rastvor 4-Cijano-2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.000g, 1.28 mmol) u DCM (16 mL) je tretiran sa HCl (4.0 M u dioksanu, 3.2 mL, 12.8 mmol). Nakon 2.5 h, čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc da se obezbedi jedinjenje iz naslova (1.004 g, 99%).
[1140] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[4-Cijano-1-(2-Metoksikarbonilamino-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-2-Metoksikarbonilamino-buterna kiselina (37 mg, 0.227 mmol) EDC-HCl (44 mg, 0.227 mmol) i HOBt (32 mg, 0.237 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i mešan tokom 20 min na RT. (1-{6-[5-(6-{4-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar tris-hidrohlorid (150 mg, 0.189 mg) je dodat, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NMM (0.104 mL, 0.947 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1.5h, reakciona smeša je zagrejana do RT.30 min kasnije, smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa NaHCO3, zatim slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (78 mg, 49%). MS (ESI) m/z 826 [M H]<+>.
Primer GY
[1141]
[1142] [1-(4-Cijano-2-{5-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2,2-dimetil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-Metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (43 mg, 0.227 mmol) EDC-HCl (44 mg, 0.227 mmol) i HOBt (32 mg, 0.237 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i mešani tokom 20 min na RT. (1-{6-[5-(6-{4-[2-(4-Cijano-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar tris-hidrohlorid (150 mg, 0.189 mg) je dodat, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NMM (0.104 mL, 0.947 mmol) je dodat u kapima. Nakon 20, reakciona smeša je zagrejan do RT.30 min kasnije, smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa NaHCO3, zatim slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4zatim filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (73 mg, 45%). MS (ESI) m/z 854 [M H]<+>.
Primer GZ
[1143]
[1144] 4-Hidroksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar: 4-Metilen-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-metil estar (4.48 g, 19.71 mmol) je rastvoren u THF (100 mL) i mešan rastvor je ohlađen do 0 °C. Boran-dimetilsulfid kompleks (1.9 mL, 19.7 mmol) je dodat i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do RT preko noći. Nakon 16h, voda je dodata u kapima dok nisu prestali da se opažaju mehurići. Mešana smeša je zatim ohlađena do 0 °C. Vodena NaOH (5M u H2O, 5.3 mL, 26.6 mmol), zatim H2O2(30 mas% u H2O, 6.0 mL, 58.5 mmol) su dodati u kapima. Reakcija je zatim zagrejana do 50 °C. Nakon 30 min, smeša je razblažen sa etil etrom i isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (25% do 75% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (2.08 g, 41%).
[1145] 4-Metoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar: 4-Hidroksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar (861 mg, 3.32 mmol) je rastvoren u DCM (6.6 mL) zatim 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridin (1.023 g, 4.98 mmol) i AgOTf (938 mg, 3.65 mmol) su dodati. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i jodometan (0.25 mL, 3.98 mmol) je dodat. Nakon 4 min, reakciona smeša je razblažen sa DCM i filtrirana je preko elite. Filtrat je koncentrovana do ostatka koji je rastvoren u dietil etru. Organski rastvor je ispran sa 10% HCl i slanim rastvorom, zatim osušen preko MgSO4filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (20% do 80% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (479 mg, 53%).
[1146] 4-Metoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: 4-Metoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar (461 mg, 1.68 mmol) je rastvoren u MeOH (17 mL) i LiOH (1 M u H2O, 8.5 mL, 8.5 mmol) je dodat. Nakon mešanja na RT 5h, MeOH je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Vodeni rastvor je psipan u levak za separaciju, razblažen sa 1 M HCl (9 mL, 9 mmol) i ekstrakovan sa DCM (3x). Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4filtriran i koncentrovana. ostatak je rastvoren u MeCN (17 mL) i tretiran sa 2,4'-dibromoacetofenonom (514 mg, 1.85 mmol), i trietilaminom (0.258 mL, 1.85 mmol). Nakon mešanja tokom 2 h, rastvarač je uklonjen i čvrsta supstanca je suspendovan u EtOAc. Organski sloj je ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (15% do 35% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (746 mg, 97%).
[1147] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-Metoksimetil-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromofenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (746 mg, 1.63 mmol) je rastvoren u PhMe (16 mL) i tretiran sa NH4OAc (2.52 g, 32.7 mmol). Mešana smeša je refluksovana 19 h zatim ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (35% do 65% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (334 mg, 47%).
[1148] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (334 mg, 0.765 mmol) je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4.0M u dioksanu, 0.960 mL, 3.83 mmol). Nakon 2.5 h, rastvor je koncentrovan i ostatak je tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (146 mg, 0.832 mmol) i HATU (316 mg, 0.832 mmol). Čvrsta supstance su suspendovane u DMF (4 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0 °C before trietilamin (0.67 mL, 3.83 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je zagrejana do RT. Nakon još 1 h, razblažena je sa EtOAc i ispraan sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (80% do 100% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (369 mg, 98%).
[1149] [1-(4-Metoksimetil-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metoksimetil-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (348 mg, 0.705 mmol), bis(pinakolato)dibor (269 mg, 1.06 mmol), Pd(dppf)2Cl2(52 mg, 0.0705 mmol) i KOAc (208 g, 2.12 mmol) su kombinovani u dioksanu i degazirani tokom 12 min sa mehurićima N2. Reakciona smeša je zatim mešana na 90 °C 18h, ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska smeša je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (80% do 100% EtOAc/Heks) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (297 mg, 78%).
[1150] [1-(2-15-[4-(6-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-metoksimetil-Pirolidin-1karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: [1-(4-Metoksimetil-2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (132 mg, 0.244 mmol), (1-{6-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (154 mg, 0.293 mmol) Pd(PPh3)4(28 mg, 0.0244 mmol) i K2CO3(2M u H2O, 0.488 mL, 0.976 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (5 mL). Smeša je degazirana sa mehurićima N2tokom 12 min zatim zagrejana do 85 °C 4 h. Nakon hlašenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc zatim isprana sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi jedinjenje iz naslova (118 mg, 56%). MS (ESI) m/z 859 [M H]<+>.
Primer HA
[1151]
[1152] (1-{2-[4-(6-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-iletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-butil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[4-Etinil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (192 mg, 0.490 mmol), 2-[5-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (260 mg, 0.588 mmol), Pd(PPh3)4(57 mg, 0.0490 mmol), CuI (19 mg, 0.0980 mmol) i Et3N (0.683 mL, 4.90 mmol) su kombinovani u DMF (5 mL). Mešana reakciona smeša je degazirana tokom 10 min, zatim zagrejana do 80 °C 3h, nakon čega je razblažena sa EtOAc, isprana sa H2O i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (45% do 75% EtOAc/Heks) da se obezbedi naftil alkin jedinjenje (147 mg, 40%). Ovaj proizvod je rastvoren u DCM (10 mL) i tretiran sa TFA (5 mL). Nakon mešanja tokom 20h, smeša je koncentrovana. ostatak je oslobošen baza zatim tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-pentanska kiselina (52 mg, 0.276 mmol), HATU (84 mg, 0.222 mmol) i DMF (2 mL). mešan smeša je ohlađena do 0 °C i DIPEA (0.160 mL, 0.923 mmol) je dodat u kapima. Reakcija je ostavljena da dodje do RT polako opreko noći. Nakon 30h, 6 kapi 5 M NaOH su dodati i smeša je mešana 20 min, nakon čega je razblažena sa EtOAc i isprana sa 1M LiOH i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (33 mg, 22%). MS (ESI) m/z 765 [M H]<+>.
Primer HB
[1153]
[1154] 4,4-Difluoro-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromo-naftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: 2-Bromo-1-(6-bromo-naftalen-2-il)-etanon (1 g, 3.07 mmol) i 4,4-Difluoro-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (849 mg, 3.38 mmol) su suspendovani u MeCN (15 mL) i tretirani sa Et3N (0.45 mL, 3.22 mmol). Nakon mešanja preko noći, reakciona smeša je koncentrovana. Dobijeni ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (0% do 20% EtOAc/Heks) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (1.27 g, 83%).
[1155] 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4,4-difluoro-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4,4-Difluoro-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(6-bromonaftalen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (1.2 g, 2.41 mmol) je tretiran sa NH4OAc (3.72 g, 96.4 mmol) i PhMe (48 mL). Reakciona smeša je refluksovana uz mešanje tokom 18 h. Nakon ovog perioda, ohlađena je do RT, razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Filtriranje i koncentracija dali su sirov ostatak koji je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (20% do 60% EtOAc/Heks) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (803 mg, 70%).
[1156] (1-{2-[4-(6-{2-[4,4-Difluoro-1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-iletinil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[4-Etinil-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (199 mg, 0.508 mmol), 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-4,4-difluoro-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (364 mg, 0.762 mmol), Pd(PPh3)4(118 mg, 0.102 mmol), CuI (19 mg, 0.102 mmol) i trietilamin (0.71 mL, 5.08 mmol) su suspendovani u DMF (5 mL). Reakciona smeša je degazirana sa mehurićima N2zatim zagrejana do 80 °C tokom 4h. Nakon ovog perioda, smeša je ohlađena do RT, razblažena sa EtOAc i isprana sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (50% do 100% EtOAc/Heks) da se obezbedi naftil alkin (284 mg, 71%). Frakcija ovog materijala (123 mg, 0.156 mg) je rastvorena u EtOH (4 mL) i tretirana sa konc. HCl. Reakciona smeša je mešana na refluksu tokom 18h. Rastvor je zatim koncentrovana. Dobijeni ostatak je tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (60 mg, 0.343 mmol) i HATU (130 mg, 0.343 mmol), suspendovan u DMF (3 mL) i ohlađen do 0 °C. DIPEA (0.272 mL, 1.56 mmol) je dodat u kapima. Nakon mešanja tokom 4h, NaOH (5M u H2O, 0.300 mL, 1.5 mmol) je dodat. Ova smeša je mešana 3h zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa 1 M LiOH (2x) zatim slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je zatim prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (53 mg, 44%). MS (ESI) m/z 773 [M H]<+>.
Primer HC
[1158] [1-(4-Cijano-2-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-butil]-karbaminska kiselina metil estar: (1-{6-[5-(4-{6-[2-(4-Cijanopirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il} -fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar-tris-hidrohlorid (148 mg, 0.187 mmol), 2- 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-pentanska kiselina (42 mg, 0.224 mmol) i HATU (78 mg, 0.206 mmol) su kombinovani u DMF (2 mL) i ohlađeni do 0°C. DIPEA (0.163 mL, 0.935 mmol) je dodat u kapima. Reakciona smeša je ostavljen da se zagreje do RT polako. Nakon 12 h, razblažena je sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3, zatim slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (80 mg, 50%). MS (ESI) m/z 854 [M H]<+>. Primer HD
[1159]
[1160] 4-Difluorometoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar: 4-Hidroksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar (584 mg, 2.25 mmol) i CuI (86 mg, 0.45 mmol) su suspendovani u MeCN (10 mL). Reakciona smeša je zagrejana do 45 °C i difluoro-fluorosulfonil-sirćetna kiselina (0.465 mL, 4.5 mmol) je dodata u kapima tokom 30 min. Mešanje je nastavljeno tokom još 3h, nakon čega je reakciona smeša ohlađena do RT i koncentrovana. Ostatak je prebačen u EtOAc i ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (19% do 40% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (394 mg, 57%).
[1161] 4-Difluorometoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-oksoetil] estar 1-terc-butil estar: 4-Difluorometoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-metil estar (398 mg, 1.29 mmol) je rastvoren u MeOH (8 mL) i LiOH (1 M u H2O, 2mL, 2 mmol) je dodat. Nakon mešanja na RT tokom 5h, MeOH je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Vodeni rastvor je sipan u levak za separaciju, razblažena sa 1 M HCl (2 mL, 2 mmol) i ekstrakovan sa DCM (3x). Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je rastvoren u MeCN (4 mL) i tretiran sa 2,4'-dibromoacetofenonom (200 mg, 0.719 mmol), i trietilaminom (0.100 mL, 0.719 mmol). Nakon mešanja tokom 15 h, rastvarač je uklonjen. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (10% do 35% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (303 mg, 94%).
[1162] 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-difluorometoksimetil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 4-Difluorometoksimetil-Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(4-bromo-fenil)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (303 mg, 0.615 mmol) je rastvoren u PhMe (12 mL) i tretiran sa NH4OAc (948 mg, 12.3 mmol). Mešana smeša je refluksovana 23 h zatim ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (25% do 50% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (130 mg, 45%).
[1163] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-difluorometoksimetil-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-difluorometoksimetil-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4.0M u dioksanu, 1 mL, 4 mmol). Nakon 2.5 h, rastvor je koncentrovan i ostatak je tretiran sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (55 mg, 0.315 mmol) i HATU (120 mg, 0.315 mmol). Čvrste supstance su suspendovane u DMF (3 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0 °C pre nego što je trietilamin (0.25 mL, 1.43 mmol) dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je zagrejana do RT. Nakon još 1 h, razblažena je sa EtOAc i ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (60% do 100% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (92 mg, 61 %).
[1164] (1-{4-Difluorometoksimetil-2-[5-(4'-12-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il] -4-difluorometoksimetil-Pirolidin-1-karbonil} -2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (42 mg, 0.174 mmol), [2-Metil-1-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (95 mg, 0.191 mmol), Pd(PPh3)4(20 mg, 0.0174 mmol) i K2CO3(2M u H2O, 0.191 mL, 0.383 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (2 mL). Smeša je degazirana sa mehurićima N2tokom 12 min zatim zagrejana do 85 °C tokom 4 h. Nakon hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažen sa EtOAc zatim ispran sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se obezbedi jedinjenje iz naslova (42 mg, 30%). MS (ESI) m/z 819 [M H]<+>.
Primer HE
[1165]
[1166] 3a,6a-Dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-karboksilna kiselina metoksi-metil-amid: 3a,6a-Dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-karboksilna kiselina (2g, 10.86 mmol) MeNHOMe-HCl (1.06 g, 10.86 mmol), HOBt (1.47 g, 10.86 mmol) i DIPEA (5.9 mL, 33.67 mmol) su kombinovani u DMF (40 mL). U mešanu smešu je dodat EDCI (2.72 g, 14.12 mmol). Nakon 5h, EtOAc (100 mL) je dodat i organske supstace su isprane sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (20% do 45% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.98 g, 80%).
[1167] 1-(3a,6a-Dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-etanon: 3a,6a-Dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-karboksilna kiselina metoksi-metil-amid (1.955 g, 8.60 mmol) je rastvoren u THF. Mešan rastvor je ohlađen do 0 °C pre nego što je metilmagnezijum bromid (1.4 M u PhMe, 8.6 mL, 12.04 mmol) dodat. Reakcija je ostavljena da se postepeno zagreje do RT preko noći, zatim je kvenčovana dodavanjem 10% HCl. Vodena faza je ekstrakovana sa dietil etrom. Organska faza je isprana sa slanim rastvorom zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana da se dobije jedinjenje iz naslova (1.98 g, 80%).
[1168] 2-Bromo-1-(3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-etanon: 1-(3a,6a-Dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-etanon (453 mg, 2.48 mmol) je rastvoren u THF (12 mL) i feniltrimetilamonijum tribromid (932 mg, 2.48 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 1h, suspenzija je filtrirana preko CELITE-a. FIltrat je razblažen sa dietil etrom, zatim ispran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da se dobije jedinjenje iz naslova koje je prenešeno bez daljeg prečišćavanja.
[1169] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-[2-(3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2-okso-etil] estar: Sirov 2-Bromo-1-(3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-etanon (2.48 mmol pod pretpostavkom potpune konverzije od početnog materijala) je tretiran sa Bocprolinom i MeCN (25 mL). Trietilamin je dodat i rastvor je mešan na RT tokom 1h zatim koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (14% do 35% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (595 mg, 61%).
[1170] Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(5-bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-[2-(3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2-okso-etil] estar (595 mg, 1.5 mmol) je rastvoren u DMF (7.5 mL) i tretiran sa N-bromosukcinimidom (295 mg, 1.65 mmol). Reakciona smeša je mešan tokom 4dana na RT zatim razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (20% do 50% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (469 mg, 66%).
[1171] 2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-[2-(5-bromo-3a,6adihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-2-okso-etil] estar 1-terc-butil estar (480 mg, 1.01 mmol) je tretiran sa PhMe (10 mL) i amonijum acetatom (1.56 g, 20.24 mmol). Reakciona smeša je refluksovana dok se mešala 16h, zatim ohlađena do RT. EtOAc je dodat i organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Nakon toga je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (25% do 60% EtOAc/Heks) da se dobije jedinjenje iz naslova (378 mg, 82%).
[1172] 2-{5-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: 2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
(273 mg, 0.598 mmol), bis(pinakolato)dibor (0.228 mg, 0.897 mmol), Pd(dppf)2Cl2(44 mg, 0.0598 mmol) i KOAc (176 mg, 1.79 mmol) su kombinovani u dioksanu i degazirani tokom 12 min sa mehurićima N2. Reakciona smeša je zatim mešana na 85 °C tokom 2.5h, ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska smeša je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (25% do 60% EtOAc/Heks) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (0.159 g, 53%). Proizvod je kontaminiran sa ekvimolarnom količinom sporednog proizvod za koji se veruje da je proteodebrominovani početni materijal.
[1173] [1-(2-{5-[5-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-{5-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (159 mg, 0.317 mmol), 2-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (124 mg, 0.317 mmol), Pd(PPh3)4(37 mg, 0.0317 mmol) i K2CO3(2 M u H2O, 0.32 mL, 0.64 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (3 mL) i degazirana sa mehurićima N2tokom 10 min. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 3.5h zatim ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (EtOAc zatim 5% MeOH/DCM) da se dobije Suzuki-kuplovan proizvod (89 mg, 41%). Ovaj materijal je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4 M u dioksanu, 1 mL, 4 mmol). Nakon mešanja tokom 73min, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa EtOAc. Čvrsta supstanca je osušena, zatim kombinovana sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (37 mg, 0.212 mmol), HATU (81 mg, 0.212 mmol) i DMF (2 mL). Mešana reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i DIPEA (0.17 mL, 0.96 mmol) je dodata u kapima. Nakon 15min, zagrejana je do RT.17h kasnije reakciona smeša je razblažen sa EtOAc.. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (23 mg, 22%). MS (ESI) m/z 801 [M H]<+>.
Primer HF
[1174]
[1175] (1-{2-[5-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidrotieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (100 mg, 0.219 mmol), (2-Metil-1-{2-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-propil)-karbaminska kiselina metil estar (117 mg, 0.283 mmol), Pd(PPh3)4(51 mg, 0.0438 mmol) i K2CO3(2 M u H2O, 0.33 mL, 0.66 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (4 mL) i degazirana sa mehurićima N2tokom 10 min. Mešana reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 3.5h zatim ohlađena do RT i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (EtOAc) da se dobije Suzuki-kuplovan proizvod (71 mg, 49%). Ovaj materijal je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4 M u dioksanu, 1 mL, 4 mmol). Nakon mešanja tokom 97min, reakciona smeša je koncentrovana. Čvrsta supstanca je osušena, zatim kombinovana sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (39 mg, 0.225 mmol), HATU (86 mg, 0.225 mmol) i DMF (4 mL). Mešana reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i DIPEA (0.18 mL, 1.07 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30min, zagrejana je do RT. 12min kasnije, reakciona smeša je razblažen sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (32 mg, 39%). MS (ESI) mlz 775 [M H]<+>.
Primer HG
[1176]
[1177] (1-{2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: 2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidrotieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (250 mg, 0.548 mmol) je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4 M u dioksanu, 1 mL, 4 mmol). Nakon mešanja tokom 1.5h, reakciona smeša je koncentrovana. Čvrsta supstanca je osušen, zatim kombinovana sa 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buternom kiselinom (106 mg, 0.603 mmol), HATU (229 mg, 0.603 mmol) i DMF (6 mL). Mešana reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i DIPEA (0.48 mL, 2.74 mmol) je dodata u kapima. Nakon 50min, zagrejana je do RT. 12min kasnije, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni da se dobije jedinjenje iz naslova (252 mg, 90%).
[1178] (1-{2-[5-(5-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-iletinil}-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: (1-{2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidrotieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (140 mg, 0.440 mmol), {1-[2-(5-Etinil-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (130 mg, 0.254 mmol), Pd(PPh3)4(29 mg, 0.0254 mmol), CuI (10 mg, 0.0508 mmol) i trietilamin (0.354 mmol, 2.54 mmol) su kombinovani u DMF (2.5 mL) i degaziran sa N2tokom 17min. Reakcija je zagrejana do 85 °C tokom 4h zatim ohlađena do RT, razblažena sa EtOAc i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2x) i slanim rastvorom. oOrganski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC hromatografije da se dobije jedinjenje iz naslova (34 mg, 18%). MS (ESI) m/z 749 [M H]<+>.
Primer HH
[1179]
[1180] [2-okso-1-fenil-2-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-il)-etil]-karbaminska kiselina metil estar: 2-{5-[4-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (530 mg, 1.21 mmol) je rastvoren u DCM (4 mL) i tretiran sa HCl (4M u dioksanu, 1 mL, 4 mmol). Reakciona smeša je mešana na RT tokom 19h zatim čvrsta supstanca je filtrirana isprana sa DCM. Nakon što je temeljno osušena (461 mg, 92%), porcija ove čvrste supstance (200 mg, 0.485 mmol) je kombinovana sa Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (122 mg, 0.582 mmol) i HATU (221 mg, 0.582 mmol) su suspendovane u DCM (5 mL) i K3PO4(309 mg, 1.455 mmol) je dodat. Nakon mešanja 24h, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa 1M LiOH i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću silika hromatografije na koloni (75% do 100% EtOAc) da se obezbedi jedinjenje iz naslova (204 mg , 79%).
[1181] {2-Metil-1-[2-(5-{5-[4-(2-{1-[2-(metilperoksimetil-amino)-2-fenil-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-3a,6a-dihidro-tieno[3,2-b]tiofen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar: [2-okso-1-fenil-2-(2-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-il)-etil]karbaminska kiselina metil estar (204 mg, 0.385 mmol), (1-{2-[5-(5-Bromo-3a,6a-dihidrotieno[3,2-b]tiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (137 mg, 0.268 mmol), Pd(PPh3)4(31 mg, 0.0268 mmol) i K2CO3(2M u H2O, 0.4 mL, 0.8 mmol) su kombinovani u 1,2-dimetoksietanu (2.7 mL). Nakon 10 min degaziranja sa mehurićima N2, reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 19h. Nakon ovog perioda, ohlađena je i razblažena MeOH. Sespenzija je filtrirana preko tiol SPE kertrdža da se ukloni paladijum, zatim koncentrovana. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (103 mg, 46%). MS (ESI) m/z 835 [M H]<+>.
Primer HI
[1182]
[1183] 2-Bromo-3,5-dimetoksi-benzoeva kiselina metil estar: 3,5-Dimetoksi-benzoeva kiselina metil estar (4.0 g) je rastvoren u MeCN (28 mL), i NBS (4.4 g) je dodat na 0°C. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 3 sata, zasićen Na2SO3(15 mL) je dodat. Smeša je evaporisala pod vakuumom i ekstrakovana sa etrom (1x, 500 mL). Nakon rastvarač je uklonjen, sirov materijal je podvrgnt silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 10 -40 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 2-bromo-3,5-dimetoksi-benzoeva kiselina metil estar (5.2 g, 93 %) kao bistro ulje.
[1184] 4,6,4',6'-Tetrametoksi-bifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar : 2-Bromo-3,5-dimetoksi-benzoeva kiselina metil estar (5.2 g) je rastvoren u DMF (16 mL), i Cu prah (2.4 g) je dodat . Nakon mešanje na 150°C tokom 3 dana, smeša je filtrirana i evaporisana pod vakuumom. Sirov materijal je podvrgnt silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 30 -60 % etil acetate i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 4,6,4',6'-tetrametoksi-bifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (2.5 g, 68 %) kao bistro ulje.
[1185] (6'-Hidroksimetil-4,6,2',4'-tetrametoksi-bifenil-2-il)-metanol: 4,6,4',6'-tetrametoksibifenil-2,2'-dikarboksilna kiselina dimetil estar (2.5 g) je rastvoren u THF (96 mL), i 1M LiAlH4u THF (9.6 mL) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, smeša je kvenčovana sa vodom i 2N HCl (24 mL) je dodat. Smeša je evaporisala pod vakuumom i podeljena sa DCM (300 mL) i vodom (200mL). Organski sloj je osušen preko Na2SO4i kristalisan sa DCM da se obezbedi (6'-hidroksimetil-4,6,2',4'-tetrametoksi-bifenil-2-il)-metanol (1.7 g, 77 %) kao bledo plavo beli triklinički kristali.
[1186] 6,6'-Bis-bromometil-2,4,2',4'-tetrametoksi-bifenil: (6'-hidroksimetil-4,6,2',4'-tetrametoksi-bifenil-2-il)-metanol (779 mg) je rastvoren u DCM (5.8 mL), i PBr3(527 µl) je polako dodat na 0°C. Nakon mešanje na 0°C tokom 30 min. i na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, H2O (40 mL) je dodat. Smeša je ekstrakovana sa etrom (1x, 50 mL). Nakon što je rastvarač uklonjen, sirov materijal je podvrgnt silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 10 -40 % etil acetat i heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovani i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 6,6'-bis-bromometil-2,4,2',4'-tetrametoksi-bifenil (700 mg, 65 %) kao gusto ulje.
[1187] 6,6'-Bis-bromometil-bifenil-2,4,2',4'-tetraol: 6,6'-bis-bromometil-2,4,2',4'-tetrametoksibifenil (685 mg) je rastvoren u DCM (3.0 mL), i 1M BBr3u DCM (16.4 mL) je polako dodat. Nakon mešanja tokom 2 daa, smeša je sipana na led i koncentrovana. Sirov materijal je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
[1188] 5-10-Dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2,7-diol : sirov 6,6'-bis-bromometilbifenil-2,4,2',4'-tetraol je rastvoren u DMF (30 mL), i Cs2CO3(1.9 g) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, smeša je podeljena sa 1 N HCl (100 mL) i etil acetatom (100 mL), i ekstrakovana sa etil acetatom (3X, 100 mL). Nakon rastvarač je uklonjen, sirov materijal je podvrgnt silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 10 -15 % metanola i DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovani i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 5-10-dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2,7-diol (301 mg, 84 %) kao bela čvrsta supstanca.
[1189] Trifluoro-Metansulfonska kiselina 7-trifluoroMetansulfoniloksi-5,10-dihidrohromeno[5,4,3-cde]hromen-2-il estar : 5-10-Dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2,7-diol (290 mg) je rastvoren u DCM (12 mL), i Tf2O (1.2 mL) i piridin (969 µl) su dodati. Nakon mešanje na sobnoj temperaturi preko noći, smeša je podeljena sa 2 N HCl (50 mL) i DCM (50 mL), i isprana sa 2 N HCl (2 x 50 mL) i zasićenim natrijum bikarbonatom (1 x 50 mL). Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnt silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 0 -30 % etil acetata i heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovani i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi trifluoro-metansulfonska kiselina 7-trifluorometansulfoniloksi-5,10-dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2-il estar (472 mg, 78%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
[1190] (1-{2-[5-(7-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-5,10-dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(2-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6-H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar, supstituisanjem trifluoro-Metansulfonska kiselina 7-trifluorometan sulfoniloksi-5,10-dihidro-hromeno[5,4,3-cde]hromen-2-il estar za trifluoro-metansulfonska kiselina 2-triftuoroMetansulfoniloksi-6-H-dibenzo[c,h]hromen-8-il estar.
Primer HJ
[1191]
[1192] 3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar. U rastvor [2-Metil-1-(6-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.95 g, 1.82 mmol) i 3-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.96 g, 1.82 mmol, 1 ekv.) u DME (20 mL) je dodat K2CO3(vodena, 2 M, 3.6 mL, 7.2 mmol, 4 ekv.) i Pd(PPh3)4(0.11 g, 0.09 mmol, 0.05 ekv.). Gusta smeša je degazirana sa argonom tokom 5 minuta i zagrejana do 80 °C tokom 12 sati. Dobijena reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i ispraan sa vodom. Vodeni sloj je povratno-ekstrakovan sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su osušene preko Na2SO4i koncentrovana. Sirovo ulje je prečišćeno pomoću hromatografije na koloni (SiO2, 50→100% EtOAc u heksanima) da se obezbedi 3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.53 g, 37%) kao žuti prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H53N7O5: 783.4 (M<+>); Pronađeno: 784.3 (M+H<+>).
[1193] [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-Metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo [2.2.1] hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. U gustu smešu od 3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.05 g, 0.06 mmol) u MeOH (0.1 mL) je dodat HCl u dioksanima (4 M, 0.6 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i koncentrovan do suva. Ciklopropil-Metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.02 g, 0.09 mmol, 1.5 ekv.) i CH2Cl2(0.6 mL) su zatim dodati, praćeno sa HATU (0.03 g, 0.08 mmol, 1.25 ekv.) i NMM (0.05 mL, 0.45 mmol, 5 ekv.). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćen preparativnom HPLC (Gemini, 15→40% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina)) i liofilizovan da se obezbedi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-Metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 49%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H54N8O6: 838.4 (M<+>); Pronađeno: 839.9 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 8.22 (s, 2H), 7.81-7.96 (m, 10H), 7.63 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 5.18 (t, 1H), 4.56 (d, 1H), 3.96 (t, 1H), 3.74 (m, 1H), 3.51 (s, 6H), 3.12 (t, 1H), 2.48 (s, 1H), 1.93-2.29 (m, 6H), 1.58-1.77 (m, 5H), 0.85 (d, 3H), 0.80 (d, 3H), 0.58 (m, 4H), 0.34 (m, 1H), 0.26 (m, 1H), 0.03 (m, 1H), -0.12 (m, 1H).
Primer HK
[1194]
[1195] [1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Ciklopropil-2-Metoksikarbonilamino-acetil)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem procedure za [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-Metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem 6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.05 g, 0.06 mmol) da se obezbedi [1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-Ciklopropil-2-Metoksikarbonilamino-acetil)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.02 g, 46%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H54N8O6: 838.4 (M<+>); Pronađeno: 839.9 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 8.18 (s, 2H), 7.80-7.91 (m, 10H), 7.58 (s, 1H), 7.14 (d, 1H), 5.19 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.13 (t, 1H), 3.57 (m, 1H), 3.51 (s, 6H), 3.28 (m, 1H), 2.48 (s, 1H), 1.94-2.04 (m, 2H), 1.71-1.83 (m, 5H), 1.42-1.49 (m, 4H), 0.97 (d, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.52-0.68 (m, 4H), 0.33 (m, 1H), 0.23 (m, 1H), 0.03 (m, 1H), -0.12 (m, 1H).
Primer HL
[1196]
[1197] 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar. U rastvor 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.00 g, 2.5 mmol) i [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (1.97 g, 3.6 mmol, 1.5 ekv.) u DME (12.5 mL) je dodat K3PO4(vodena, 2 M, 3.9 mL, 7.8 mmol, 3 ekv.), Pd2dba3(0.12 g, 0.13 mmol, 0.05 ekv.), i Ksantfos (0.15 g, 0.26 mmol, 0.1 ekv.). Gusta smeša je degazirana sa argonom tokom 5 minuta i zagrejana do 80 °C tokom 18 sati. Dobijena reakciona smeša je razblažena sa EtOAc/MeOH (10:1) i filtrirana kroz CELITE. Rastvor je ispran sa vodom i slanim rastvorom. Vodeni sloj je povratno-esktrakovan sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Sirovo ulje je prečišćeno pomoću hromatografije na koloni (SiO2, 50→100% EtOAc u heksanima) da se obezbedi 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.93 g, 49%) kao žuti prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H49N7O5: 731.4 (M<+>); Pronađeno: 732.9 (M+H<+>).
[1198] {2-Metil-1-[2-(5-{6-[4-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar. U gustu smešu od 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.1 g, 0.14 mmol) u MeOH (0.15 mL) je dodat HCl u dioksanima (4 M, 0.7 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i razblažen sa Et2O. dobijen talog je filtriran i osušen da se obezbedi {2-Metil-1-[2-(5-{6-[4-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar trihlorovodonična kiselina so (0.09 g, 87%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C37H41N7O3: 631.3 (M<+>); Pronađeno: 632.7 (M+H<+>).
[1199] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. U gustu smešu {2-Metil-1-[2-(5-{6-[4-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.045 g, 0.06 mmol) i (S)-Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (0.02 g, 0.09 mmol, 1.5 ekv.) u CH2Cl2(0.6 mL) je dodat HATU (0.03 g, 0.08, 1.25 ekv.) i K3PO4(0.05 g, 0.22 mmol, 3 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati i razblažena sa CH2Cl2. Soli su filtrirane i filtrat je koncentrovan. Sirovo ulje je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Gemini, 15→40% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina)) i liofilizovano da se obezbedi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 65%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O6: 822.4 (M<+>); Pronađeno: 823.5 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 7.64-8.03 (m, 9H), 7.20-7.40 (m, 6H), 7.17 (s, 2H), 6.14 (m, 1H), 5.53 (dd, 2H), 5.25-5.33 (m, 2H), 4.33 (t, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.27 (m, 1H), 2.86-2.96 (m, 3H), 2.35 (m, 1H), 1.94-2.23 (m, 6H), 0.87-0.90 (m, 6H).
Primer HM
[1200]
[1201] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2R)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem procedure za [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem (R)-Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (0.02 g, 0.09 mmol, 1.5 ekv.) da se obezbedi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2R)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenilacetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 65%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O6: 822.4 (M<+>); Pronađeno: 823.8 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 7.62-8.02 (m, 9H), 7.36-7.43 (m, 6H), 7.22 (s, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.29-5.53 (m, 4H), 4.35 (t, 1H), 3.73-3.87 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.22 (q, 2H), 2.82-2.96 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 2.23 (m, 2H), 1.90-2.11 (m, 4H), 0.87-0.93 (m, 6H).
Primer HN
[1202]
[1203] [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem procedure za [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.0 g, 2.2 mmol) i 2-{5-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.6 g, 3.4 mmol, 1.5 ekv.) da se obezbedi [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 54%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O6: 822.4 (M<+>); Pronađeno: 823.9 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 7.52-7.93 (m, 9H), 7.27-7.42 (m, 6H), 7.16 (s, 2H), 6.08 (m, 1H), 5.48-5.56 (m, 2H), 5.34 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.35 (t, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.38 (m, 1H), 2.78-2.83 (m, 3H), 2.36 (m, 1H), 2.04-2.23 (m, 6H), 0.86-0.97 (m, 6H).
Primer HO
[1204]
[1205] [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2R)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem procedure za [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem (R)-Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (0.02 g, 0.09 mmol, 1.5 ekv.) da se obezbedi [1-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 58%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O6: 822.4 (M<+>); Pronađeno: 823.8 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 7.62-7.87 (m, 9H), 7.29-7.43 (m, 6H), 7.18 (s, 2H), 6.09 (m, 1H), 5.46 (m, 2H), 5.33 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.33 (t, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.71 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.24 (m, 1H), 2.83-2.93 (m, 3H), 2.35 (m, 1H), 1.92-2.23 (m, 6H), 0.86-0.97 (m, 6H).
Primer HP
[1206]
[1207] 2-[5-(6-{4-[2-(1-terc-butiloksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. U rastvor 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.39 g, 1.0 mmol) i bis(pinakolato)diboran (0.31 g, 1.2 mmol, 1.2 ekv.) u dioksanu (5 mL) je dodat KOAc (0.30 g, 3.0 mmol, 3 ekv.) i Pd(dppf)Cl2(0.04 g, 0.05 mmol, 0.05 ekv.). Gusta smeša je degazirana sa argonom tokom 5 minuta i zagrejana do 85 °C 2.5 sata. Dobijeni rastvor je ohlađen do sobne temperature i 2-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.45 g, 1.0 mmol, 1 ekv.) i K3PO4(vodena, 2 M, 1.75 mL, 3.5 mmol, 3.5 ekv.) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 6 sati. Gusta smeša je filtrirana kroz CELITE i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (SiO2, 50→100% EtOAc u heksanima (2% MeOH)) i preparativne HPLC (Gemini, 15→40% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina)) da se obezbedi 2-[5-(6-{4-[2-(1-terc-butiloksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.07 g, 10%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H46N6O4: 674.4 (M<+>); Pronađeno: 675.6 (M+H<+>).
[1208] [2-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-il)-2-okso-1-fenil-etil]-karbaminska kiselina metil estar. U gustu smešu od 2-[5-(6-{4-[2-(1-terc-butiloksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (0.07 g, 0.09 mmol) u MeOH (0.1 mL) je dodat HCl u dioksanima (4 M, 1.5 mL). Dobijeni rastvor je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i bazifikovana sa NaOH (2 N). Sirov proizvod je ekstrakovan sa CH2Cl2. Organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. (R)-Metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (0.08 g, 0.4 mmol, 4.4 ekv.) i DMF (1.0 mL) su zatim dodati, praćeno sa DEPBT (0.12 g, 0.4, 4 ekv.) i NaHCO3(0.04 g, 0.43 mmol, 4 ekv.). Dobijena gusta smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7 dana. Reakciona smeša je prečišćena pomoću preparativne HPLC (Gemini, 15→40% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina)) i liofilizovan da se obezbedi [2-(2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il} -pirolidin-1-il)-2-okso-1-fenil-etil]-karbaminska kiselina metil estar (0.04 g, 49%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H48N8O6: 856.4 (M<+>); Pronađeno: 858.1 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša rotomera) 10.32-10.45 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.72-7.98 (m, 8H), 7.19-7.50 (m, 12H), 6.07 (m, 2H), 5.28-5.55 (m, 4H), 3.73 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 3.22 (m, 2H), 2.86-2.96 (m, 2H), 2.22 (m, 2H), 2.04 (m, 2H), 1.92 (m, 2H). Primer HQ
[1209]
[1210] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-o-tolil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar. Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem procedure za [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2S)-(2-Metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem Metoksikarbonilamino-o-tolil-sirćetna kiselina (0.03 g, 0.12 mmol, 1.75 ekv.) da se obezbedi [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-2-o-tolil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.03 g, 50%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H52N8O6: 836.4 (M<+>); Pronađeno: 837.4 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (Smeša diastereomera) 7.61-8.00 (m, 16H), 7.18-7.41 (m, 12H), 7.10 (s, 2H), 5.28-5.63 (m, 10H), 4.36 (t, 2H), 3.72-3.86 (m, 4H), 3.68 (s, 6H), 3.66 (s, 6H), 2.79-3.07 (m, 8H), 2.50 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.38 (m, 4H), 1.86-2.28 (m, 8H), 0.88-0.94 (m, 12H).
Primer HR
[1211]
[1212] {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-2-(2-metoksi-fenil)-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar. U rastvor {2-Metil-1-[2-(5-{6-[4-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.04 g, 0.05 mmol) i (S)-Metoksikarbonilamino-(2-metoksifenil)-sirćetna kiselina (0.02 g, 0.08 mmol, 1.5 ekv.) u CH2Cl2(0.5 mL) je dodat K3PO4(0.03 g, 0.15 mmol, 3 ekv.). Gusta smeša je ohlađena do 0 °C i COMU (0.03 g, 0.06 mmol, 1.25 ekv.) i reakcija je mešana na 0 °C tokom 1 sata. Gusta smeša je razblažena sa CH2Cl2i filtriran. Filtrat je koncentrovan i sirov proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Gemini, 15→40% MeCN u H2O (0.1 % mravlja kiselina)) i liofilizovan da se obezbedi {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-2-(2-metoksi-fenil)-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.02 g, 50%) kao beli prah. LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H52N8O7: 852.4 (M<+>); Pronađeno: 853.6 (M+H<+>).<1>H-NMR: 400 MHz, (aceton-d6) δ: (Smeša rotomera) 10.96-11.01 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.73-7.89 (m, 7H), 7.35-7.48 (m, 4H), 7.33 (t, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.96 (t, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.91 (d, 1H), 5.21-5.26 (m, 3H), 4.29 (t, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.78-3.93 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.30 (q, 2H), 2.59-2.65 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 1.90-2.21 (m, 6H), 0.85-0.93 (m, 6H).
Primer HS
(1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-azetidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[1213]
(1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-azetidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[1214] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-azetidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode YYY supstituisanjem azetidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar za Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar. C41H48N8O6izračunato 748.4 opaženo [M 1]<+>749.4; rt = 1.59 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.31 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 8.16 (m, 2H), 8.04 (m, 2H), 7.98 (m, 1H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 2H), 7.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.49 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.41 (m, 2H), 4.12 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.78 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.76 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.41 (m,1H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.86 (m, 1H), 0.83 (m, 6H).
Primer HT
(1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-azetidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[1215]
(1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-azetidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-yil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar
[1216] (1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-azetidin-2-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen praćenjem metode YYY supstituisanjem azetidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estarfor Pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar. C43H50N8O6: izračunato 774.4 opaženo [M 1]<+>775.8; rt = 1.66 min.<1>H (DMSO-d6): δ = 8.11 (s, 1H), 7.91 (m, 3H), 7.86 (m, 5H), 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.47 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 5.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.40 (m, 2H), 4.11 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.84 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.75 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.18 - 2.03 (m, 2H), 2.01 (m, 2H), 1.86 (m, 1H), 0.83 (m, 6H).
Primer HU
[1217]
[1218] 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-(3,3,3-trifluoro-propil)-2,5-dihidro-pirazin: U mešan rastvor 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-2,5-dihidro-pirazin (1 mL, 5.58 mmol) u THF (13.5 mL) pod argonom na -78° C je dodat rastvor n-butillitijum (2.5 M, 2.3 mL, 5.75 mmol). Rastvor je mešan na -78° C tokom 30 minuta. Rastvor 1-Jodo-3,3,3-trifluoropropan (925 µL, 5.87 mmol) u THF (11.5 mL) je dodat polako. Dobijeni rastvor je mešan na -78° C tokom 5 sati, zagrejan do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organski sloj je isprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NH4Cl solution, vodom i slanim rastvorom. organski sloj je zatim osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom da se dobije 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-(3,3,3-trifluoro-propil)-2,5-dihidro-pirazin (915 mg, 59%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 4.04-3.99 (m, 1H), 3.98-3.95 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.29-2.20 (m, 1H), 2.18-2.04 (m, 3H), 1.94-1.84 (m, 1H), 1.03 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.71 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
[1219] 5,5,5-Trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanska kiselina metil estar: rastvor 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-(3,3,3-trifluoro-propil)-2,5-dihidro-pirazin (725 mg, 2.59 mmol) u 0.25N HCl je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Vodena rastvor je ispran jednom sa etil acetatom. Etil acetat ispiranje je odbačeno i vodeni sloj je bazifikovan do pH∼10 sa zasićenim vodenim NaHCO3. Vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovane organske supstance su isprane sa slanim rastvorom, osušene (MgSO4i koncentrovane da se dobije sirov (2S)-amino-5,5,5-trifluoro-pentanska kiselina metil estar contaminated sa D-valine metil estar. Sirov materijal je rastvoren u dihlormetanu (20 mL) i ohlađen do 0° C. Trietilamin (1.75 mL, 12.6 mmol) i metil hloroformat (480 µL, 6.2 mmol) su sukcesivno dodati u rastvor. Nakon 1 sat reakcija je koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom da se dobije 5,5,5-Trifluoro-2-metoksikarbonilamino-pentanska kiselina metil estar (465 mg, 74%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 5.27 (br, 1 H), 4.42 (br, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 2.29-2.09 (m, 3H), 1.94-1.84 (m, 1H) ppm.
[1220] 2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-Trinuoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 5,5,5-Trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanska kiselina metil estar (194 mg, 0.80 mmol) u metanolu (3 mL) je dodat vodeni LiOH rastvor (1M, 2 mL, 2 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 45 minuta i zatim isprana sa etil acetatom. Etil acetat ispiranje je odbačena i vodeni sloj je zakiseljena sa koncentrovana HCl. Zakiseljeni vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovane organske supstance su isprane sa slanim rastvorom, osušene (MgSO4) i koncentrovane da se dobije čista 5,5,5-Trifluoro-2-metoksikarbonilamino-pentanska kiselina. U rastvor pentanska kiselina u dimetilformamid u(2 mL) je dodat HATU (300 mg, 0.79 mmol). Nakon mešanja 5 minuta, rastvor 2-{5-[4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (412 mg, 0.79 mmol) u dimetilformamidu (1.9 mL) je dodat u reakciju, praćeno odmah sa diIzopropiletilaminom (275 µL, 1.58 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi zatim razblažena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom da se dobije 2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1Himidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (340 mg, 59%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H44F3N7O5: 735.34; opaženo [M+1]<+>: 736.05.
[1221] [4,4,4-Trifluoro-1-(2-{5-[4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-butil]-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (340 mg, 0.46 mmol) u dihlormetanu (5 mL) je dodat trifluorosirćetna kiselina (1 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata i zatim temeljno koncentrovana. Dobijeni ostatak je rastvoren u dihlormetanu i isprana tri puta sa zasićenim vodenim NaHCO3rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), i koncentrovana da se dobije sirov slobodni pirolidin (270 mg, 92%), koji je dovoljno čist da se koristi bez daljeg prečišćavanja. LCMS-ESI<+>: izračunato za C33H36F3N7O3: 635.28; opaženo [M+1]<+>: 636.17.
[1222] (4,4,4-Trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor sirovog [4,4,4-Trifluoro-1-(2-{5-[4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-butil]-karbaminska kiselina metil estar (125 mg, 0.20 mmol) u dimetilformamidu (0.6 mL) je dodat rastvor 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (38 mg, 0.22 mmol) i HATU (82 mg, 0.22 mmol) u dimetilformamidu (0.6 mL). DiIzopropiletilamin (70 µL, 0.40 mmol) je zatim dodat i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Rastvor je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 50% ACN/H2O 0.1% HCO2H) da se dobije (4,4,4-trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar (73 mg, 47%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H47F3N8O6: 792.85; opaženo [M+1]<+>: 794.33.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.82-7.70 (m, 4H), 7.68-7.63 (m, 4H), 7.32-7.31 (m, 2H), 5.20-5.16 (m, 2H), 4.56-4.51 (m, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.04-3.96 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.51-3.46 (m, 1H), 2.38-1.96 (m, 12H), 1.90-1.78 (m, 1H), 1.01-0.89 (m, 6H) ppm.
Primer HV
[1223]
[1224] (4,4,4-Trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-trifluoro-2-Metoksikarbonilaminopentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor sirovog [4,4,4-Trifluoro-1-(2-{5-[4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-butil]-karbaminska kiselina metil estra (115 mg, 0.18 mmol) u dimetilformamidu (0.5 mL) je dodat rastvor 5,5,5-Trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanska kiselina (44 mg, 0.19 mmol) i HATU (72 mg, 0.19 mmol) u dimetilformamidu (0.5 mL). Diizopropiletilamin (65 µL, 0.37 mmol) je zatim dodat i reakcija je mešan na sobnoj temperaturi 16 sati. Rastvor je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 50% ACN/H2O 0.1% HCO2H) da se dobije (4,4,4-Trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar (35 mg, 23%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C40H44F6N8O6: 846.82; opaženo [M+1]<+>: 847.34.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.81-7.72 (m, 4H), 7.67-7.64 (m, 4H), 7.38-7.32 (m, 2H), 5.20-5.16 (m, 2H), 4.55-4.51 (m, 2H), 3.91-3.86 (m, 4H), 3.67 (s, 6H), 2.38-2.20 (m, 8H), 2.18-1.79 (m, 8H) ppm.
2-lzopropil-3,6-dimetoksi-5-[2-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-etil]-2,5-dihidro-pirazin
[1225] 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-[2-(2,2,2-tritluoro-etoksi)-etil]-2,5-dihidro-pirazin: Ovo jedinjenje je napravljeno u 65% prinosu istom procedurom kao 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-(3,3,3-trifluoro-propil)-2,5-dihidro-pirazin, supstituisanjem 1-Jodo-3,3,3-trifluoropropane sa 2-(2-Bromoetoksi)-1,1,1-trifluoroetan.<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 4.11-4.05 (m, 1H), 3.95 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 3.86-3.75 (m, 3H), 3.74-3.66 (m, 7H), 2.30-2.18 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.03 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.70 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
[1226] 2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-buterna kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno istom procedurom kao 5,5,5-Trifluoro-2-Metoksikarbonilaminopentanska kiselina metil estar, korišćenjem 2-Izopropil-3,6-dimetoksi-5-[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)-etil]-2,5-dihidropirazin kao početni materijal.<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 5.51-5.43 (br, 1H), 4.51-4.43 (m, 1H), 3.83-3.63 (m, 10H), 2.22-2.13 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H) ppm.
[1227] 2-{5-[4'-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-butiril]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno u 74% prinosu istom procedurom kao 2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-Trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar, korišćenjem 2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-buterna kiselina metil estar kao početni materijal. LCMS-ESI<+>: izračunato za C39H46F3N7O6: 765.35; opaženo [M+1]<+>: 766.12.
[1228] [1-(2-{5-[4'-(2-Pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-3-(2,2,2-trifluoroetoksi)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno istom procedurom kao [4,4,4-Trifluoro-1-(2-{5-[4'-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-butil]-karbaminska kiselina metil estar, korišćenjem 2-{5-[4'-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-butiril]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar kao početni materijal. LCMS-ESI<+>: izračunato za C34H38F3N7O4: 665.29; opaženo [M+1]<+>: 666.20.
Primer HW
[1229]
[1230] U rastvor L-valina, d8 (Cambridge Isotope Laboratories, 0.4949 g) u 1N natrijum hidroksidu (3.95 mL) je dodat natrijum karbonat (0.419 g). Rastvor je ohlađen do 0°C i metil hloroformat (0.289 mL) je dodat u kapima preko 30 minuta i reakciona smeša je mešana 3 h na 0°C. Reaction smeša je isprana sa etil etrom (3 x 15 mL) i vodeni sloj je zakiseljen do pH =1 sa koncentrovanom HCl. Vodeni sloj je ekstrakovan dihlormetanom (3 x 15 mL) i organski slojevi su osušene (MgSO4i koncentrovana da se dobije 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina, d8 kao bela čvrsta supstanca (0.5681 g).
LCMS-ESI-: izračunato za C7H5D8NO4: 184.2 (M+H<+>); Pronađeno: 184.0 (M+H<+>).
[1231] Rastvor hidroksibenzotriazola (0.242 g), 1-(3-dimetilaminpropil)-3-etilkarbodiimid-HCl (0.328 g) i 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina, d8 (0.315g) u DMF (5.0 mL) je mešan na RT 1 hr. Reaction smeša je ohlađena do 0°C i rastvor 2-(2-Aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-6-{7-[5-(5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-1H-pirol-2-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol u DMF (2.0 mL) je dodat, praćeno sa dodavanjem u kapima diIzopropiletilamina preko 15 min. Reakciona smeša je zagrejana do RT preko noći, razblažena sa etil acetatom i isprana sa slanim rastvorom, slanim rastvorom/zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (1:1) i vodenis lojevi su povratno-esktrakovani sa etil acetatom. Kombinovani organski sloj je osušen (MgSO4) koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (silika gel, 0 do 5% metanol/etil acetat), zatim i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 25 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). frakcije koje sadrže proizvod su pulovane i tretirane sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata na 0 °C tokom 1h. Prizvod je ekstrakovan sa etil acetatom (2x), kombinovani organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i liofilizovan od ACN/H2O da se dobije (1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril, d8)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar,d8 kao beli prah (0.3947)
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 12.13 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 8.1 - 7.1 (m, 12H), 7.23 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.2-5.1 (m, 1 H), 4.60 (d, J=4.5 Hz, 1H, 4.48 (s, 1H), 3.8-3.6 (m, 2H), 3.48 (s, 6H), 2.60 (s, 1H), 2.40-2.01 (m, 10H), 0.64-0.52 (m, 4 H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H38D16F2N8O6: 906.1 (M+H<+>); Pronađeno: 905.6 (M+H<+>).
Primer HX
[1232]
[1233] U rastvor 3-(6-{7-[5-(5-Benziloksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-1H-pirol-2-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.0 g), u CH2Cl2(10 mL) na 0 °C je dodata 4 N HCl u dioksanu (2.0 mL). Reakciona smeša je mešana na 0 °C 5 minuta, zatim zagrejana do RT. Nakon mešanja tokom 1.5 h, reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom da se dobije prljavo beli prah (0.8826 g). Prah je suspendovan u etil acetatu i zasićenom rastvoru natrijum bikarbonata i mešan tokom 1h. Vodeni sloj je ekstrakovan sa etil acetatom (2x), osušen (MgSO4), i koncentrovan. Deo ovog ostatka je korišćen u sledećem koraku.
Rastvor hidroksibenzotriazola (40 mg), 1-(3-dimetilaminpropil)-3-etilkarbodiimid-HCl (57 mg) i 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (54 mg) u DMF (0.5 mL) i CH2Cl2(0.5 mL) je mešan na 0°C 1h. Ovaj rastvor je dodat u rastvor iznad amina (150 mg) u DMF (0.5 mL) i CH2Cl2(0.5 mL) na -20°C i mešan na ovoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa slanim rastvorom, slanim rastvorom/zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (1:1) i vodeni slojevi povratno-esktrakovani sa etil acetatom. Kombinovani organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovana i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (silika gel, 0 do 5% metanol/etil acetat) do 6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-pirol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar kao žuta pena (127 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H49F2N7O5: 865.96 (M+H<+>); Pronađeno: 866.3 (M+H<+>).
[1234] Smeša 6-[5-(9,9-Difluoro-7-{2-[2-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-pirol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (127 mg) i 10% paladijum na ugljeniku, vlažan (29 mg) u etanolu (4 mL) je mešan u atmosferi vodonika tokom 18 h. Dodato je još i 10% paladijuma na ugljeniku, vlažan (50 mg) i nastavljena reakcija tokom 30 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak od CELITE-a, koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (silica gel, 5 do 20% metanol/dihlormetan) da se dobije {1-[3-(6-{7-[5-(5-Aza-spiro[2.4]hept-6-il)-1H-pirol-2-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar kao bledo žuti film (21 mg).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H43F2N7O3: 732.8 (M+H<+>); Pronađeno: 732.4 (M+H<+>).
[1235] Rastvor hidroksibenzotriazola (5.4 mg), 1-(3-dimetilaminpropil)-3-etilkarbodiimid-HCl (7.7 mg) i 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (7.0 mg) u DMF (0.2 mL) i CH2Cl2(0.2 mL) je mešan na 0°C tokom 1 h. Ovaj rastvor je dodat u rastvor {1-[3-(6-{7-[5-(5-Azaspiro[2.4]hept-6-il)-1H-pirol-2-il]-9,9-difluoro-9H-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (21 mg) u DMF (0.4 mL) i CH2Cl2(0.4 mL) na -25°C i mešano je na ovoj tempperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana sa slanim rastvorom, slanim rastvorom/zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (1:1) i vodeni slojevi su povratno-esktrakovani sa etil acetatom. Kombinovani organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 25 do 100% ACN/H2O 0.1 % TFA). Frakcije koje sadrže proizvod su pulovane, razblažene sa etil acetatom i tretirane sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom tokom 1h. Proizvod je ekstrakovan sa etil acetatom (2x), kombinovan organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovana i liofilizovan iz ACN/H2O do (1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar kao beli prah (11.8 mg)<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 12.18 (s, 1H), 12.05 (s 0.5H), 11.48 (s, 0.5H), 8.1 - 7.1 (m, 10H), 5.75 (d, J=4.5 Hz, 0.5H), 5.190 (d, J=4.5 Hz, 0.5H), 4.63 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.12-4.0 (m, 2H), 3.8-3.2 (m, 9H), 2.65 (s, 1H), 2.40-2.01 (m, 27H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54F2N8O6: 890.0 (M+H<+>); Pronađeno: 889.4 (M+H<+>).
[1236] U rastvor d-valina, (5.0 g) u 1N natrijum hidroksid (42.7 mL) je dodat natrijum karbonat (4.53 g). Rastvor je ohlađen do 0°C i metil hloroformat (0.289 mL) je dodat u kapima preko 2 h i reakciona smeša je mešana tokom 2 h na 0°C. Bela reakciona smeša je razblažena sa dovoljno H2O da se formira bezbojan rastvor i ispranasa etil etrom (3 x 30 mL). Vodeni sloj je zakiseljen do pH =2 sa koncentrovanom HCl da se dobije beli talog koji je sakupljen filtriranjem, ispran sa H2O i osušen pod visokim vakuumom da se dobije 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina kao krsitalna bela čvrsta supstanca (4.668 g). LCMS-ESI-: izračunato za C7H13NO4: 176.2 (M+H<+>); Pronađeno: 175.9 (M+H<+>).
Primer HY
[1237]
[1238] [1-(2-{5-[4'-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-butiril]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno u 45% prinosu istom procedurom kao (4,4,4-Trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar, korišćenjem [1-(2-{5-[4'-(2-Pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-3-(2,2,2-trifluoroetoksi)-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao početni materijal. LCMS-ESI<+>: izračunato za C41H49F3N8O7: 822.87; opaženo [M+1]<+>: 823.45.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.82-7.72 (m, 4H), 7.69-7.65 (m, 4H), 7.38-7.32 (m, 2H), 5.22-5.16 (m, 2H), 4.65-4.61 (m, 1H), 4.26-4.21 (m, 1H), 4.04-3.84 (m, 6H), 3.72-3.48 (m, 8H), 2.39-1.98 (m, 10H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.01-0.89 (m, 6H) ppm.
Primer HZ
[1239]
[1240] [1-(2-{5-[4'-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-4-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-butiril]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-3-(2,2,2-trifluoro-etoksi)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je napravljeno u 27% prinosu istom procedurom kao (4,4,4-Trifluoro-1-{2-[5-(4'-{2-[1-(5,5,5-trifluoro-2-Metoksikarbonilamino-pentanoil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-butil)-karbaminska kiselina metil estar, korišćenjem [1-(2-{5-[4'-(2-Pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-bifenil-4-il]-1H-imidazol-2-il}-Pirolidin-1-karbonil)-3-(2,2,2-trifluoroetoksi)-propil]-karbaminska kiselina metil estar kao početni materijal. LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H48F6N8O8: 906.87; opaženo [M+1]<+>: 907.45.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.73-7.65 (m, 4H), 7.62-7.59 (m, 4H), 7.38-7.35 (m, 2H), 5.14-5.10 (m, 2H), 4.55-4.51 (m, 2H), 3.86-3.77 (m, 8H), 3.63-3.43 (m, 10H), 2.34-2.24 (m, 2H), 2.22-1.87 (m, 8H), 1.86-1.68 (m, 2H) ppm.
Primer IA
[1241]
[1242] 2,6-Bis(tri-n-butilstanil)-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen: U mešan rastvor benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen (820 mg, 4.3 mmol) u THF (100 mL) pod argonom na -78° C je dodat rastvor nbutillitijum (2.5 M, 3.44 mL, 8.6 mmol). Rastvor je mešan na -78° C tokom 30 minuta i zatim zagrejan do -20° C tokom 30 minuta. Tri-n-butiltin hlorid (2.34 mL, 8.6 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na -20° C tokom 30 minuta i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Nakon 16 sati, heksan je dodat i reakcija je sukcesivno isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom (100% heksani). 2,6-bis(trin-butilstanil)-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen (1.4 g, 42%) je izolovan zajedno sa proizvodom koji je kontaminiran sa monostanilovanim benzoditiofenom.<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 8.27 (s, 2H), 7.38 (s, 2H), 1.65-1.57 (m, 12H), 1.41-1.32 (m, 12H), 1.26-1.11 (m, 12H), 0.91 (t, J = 7.3 Hz, 18H) ppm.
[1243] Potpuno zaštićen 2-[5-(6-{2-[pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin: Pd(PPh3)4(61 mg, 0.053 mmol) je dodat u degaziran rastvor 2,6-bis(tri-n-butilstanil)-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen (202 mg, 0.26 mmol) i 2-[4-Bromo-1-(2-trimetilsilanil-etoksimetil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (260 mg, 0.58 mmol) u toluenu (4 mL). Reakcija je refluksovana 24 sata, zatim ohlađena do sobne temperature i filtriran kroz CELITE i paladijumsku skavendžer kolonu (Stratospheres ™ PL-Guanidin MP SPE+, Deo #:PL3514-CM89). Čvrste supstance su isprane dva puta sa toluenom. filtrate je koncentrovana i sirov proizvod prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni, u potpunosti zaštićen proizvod (100 mg, 41%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H68N6O6S2Si2: 920.42; opaženo [M+1]<+>: 921.45.
[1244] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: rastvor u potpunosti zaštićen 2-[5-(6-{2-[pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-benzo[l,2-b:4,5-b']ditiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin (100 mg, 0.11 mmol), etanol (4 mL) i koncentrovana HCl (1 mL) je zagrejana do 60° C tokom 16 sati. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal je rastvoren u DCM (10 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan da se dobije sirov 2-[5-(6-{2-[pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-benzo[l,2-b:4,5-b']ditiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin tetrahidrohlorid. U ovaj materijal je dodat rastvor 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (38 mg, 0.22 mmol) i HATU (83 mg, 0.22 mmol) u DMF (1.5 mL). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (190 µL, 1.1 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je koncentrovana i prečišćena dva puta pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 10 do 45% ACN/H2O 0.1% HCO2H). Frakcije proizvoda su propuštene kroz slobodnu kolonu (STRATOSPHERES™ PL-HCO3MP SPE, Deo #:PL3540-C603) i liofilizovane da se dobije (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-benzo[1,2-b:4,5-b']ditiofen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (29 mg, 34%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C38H46N8O6S2: 774.95; opaženo [M+1]<+>: 775.96.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 8.16-8.11 (m, 2H), 7.49-7.47 (m, 2H), 7.38-7.29 (m, 2H), 5.18-5.15 (m, 2H), 4.24 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.04-3.96 (m, 2H), 3.91-3.86 (m, 2H), 3.66 (br s, 6H), 2.38-2.17 (m, 6H), 2.11-1.98 (m, 4H), 1.00-0.89 (m, 12H) ppm.
Primer IB
[1245]
[1246] (1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar je je pripremljen an sličan način kao Primer B da se dobije jedinjenje iz naslova kao beli prah (88.9 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 12.56 (d, J=13.5Hz, 0.5H), 12.04 (d, J=17.1Hz, 0.5H), 11.84 (s, 1H), 8.1-7.1 (m, 12H), 5.3-5.1 (m, 1H), 4.8-4.5 (m, 1H), 4.1-3.7 (m, 4H), 3.6-3.2 (m, 20H), 2.8-1.1 (m, 12H), 0.9-0.4 (m, 16H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54F2N8O6: 890.0 (M+H<+>); Pronađeno: 889.4 (M+H<+>). Primer IC
[1247]
[1248] Metoksikarbonilamino-(tetrahidropiran-4-iliden)-sirćetna kiselina metil estar: rastvor N-metoksikarbonil-2-metil-(dimetilfosfono) glicinat (1.45 g, 5.68 mmol) u tetrahidrofuran (22 mL) je ohlađen do -78° C. 1,1,3,3-Tetrametilguanidin (0.680 mL, 5.42 mmol) je dodat i dobijena rastvor je mešan na -78° C tokom 30 minuta. Tetrahidropiran-4-on (0.500 mL, 5.42 mmol) je dodat i reakcija je mešana na -78° C tokom 1 sata. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je ostavljen da se zagreje do sobne temperature preko noći. Ujutru, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su isprane sa 1N vodena HCl i slanim rastvorom, osušene (MgSO4) i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se dobije Metoksikarbonilamino-(tetrahidropiran-4-iliden)-sirćetna kiselina metil estar.<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 5.94 (br s, 1H), 3.80-3.74 (m, 7H), 3.71 (s, 3H), 2.95-2.91 (m, 2H), 2.45-2.41 (m, 2H) ppm.
[1249] {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-2-(tetrahidropiran-4-iliden)-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor Metoksikarbonilamino-(tetrahidropiran-4-iliden)-sirćetna kiselina metil estar (141 mg, 0.62 mmol) u metanolu (1.8 mL) je dodat vodeni LiOH rastvor (1M, 1.8 mL, 1.8 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 16 sati i zatim ispran sa etil acetatom. Etil acetat ispiranje je odbačeno i vodeni sloj je zakiseljena sa koncentrovana HCl. zakiseljena vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovane organske supstance su isprane sa slanim rastvorom, osušene (MgSO4), i koncentrovane da se dobije Metoksikarbonilamino-(tetrahidropiran-4-iliden)-sirćetna kiselina. U rastvor Metoksikarbonilamino-(tetrahidropiran-4-iliden)-sirćetna kiselina (23 mg, 0.11 mmol) u dimetilformamidu (0.6 mL) je dodat HATU (41 mg, 0.11 mmol). Nakon mešanja tokom 5 minuta, rastvor {2-metil-1-[2-(5-{6-[4-(2-pirolidin-2-il-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-propil}-karbaminska kiselina metil estar trihidrohlorid (50 mg, 0.068 mmol) u dimetilformamidu (0.6 mL) je dodat u reakciju, praćeno odmah sa diizopropiletilaminom (85 µL, 0.49 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi zatim razblažena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 50% ACN/H2O 0.1% HCO2H) da se dobije {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-Metoksikarbonilamino-2-(tetrahidropiran-4-iliden)-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-Pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (28 mg, 50%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H52N8O7: 828.95; opaženo [M+1]<+>: 830.32.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 8.24-8.07 (m, 3H), 7.96-7.76 (m, 7H), 7.45-7.34 (m, 2H), 5.28-5.18 (m, 2H), 4.27-4.23 (m, 1H), 4.05-3.98 (m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.84-3.41 (m, 12H), 2.48-1.98 (m, 13H), 1.02-0.90 (m, 6H) ppm.
Primer ID
[1250]
[1251] 5-Oksa-6-aza-spiro[3.4]okt-6-en-7-karboksilna kiselina etil estar: U rastvor metileneciklobutan (2 mL, 21.6 mmol) u etil acetatu (125 mL) je dodat (Z)-etil 2-hloro-2-(hidroksiimino)acetat (6.55 g, 43.2 mmol) i čvrst natrijum bikarbonat (16.3 g, 194 mmol). Reakciona smeša je zatvorena i mešana na sobnoj temperaturi 6 sati. Još (Z)-etil 2-hloro-2-(hidroksiimino)acetata (4 g, 26.4 mmol) i natrijum bikarbonata (8 g, 95.2 mmol) su dodati i reakcija je mešan na sobnoj temperaturi dodatnih 12 sati. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i ispraan sukcesivno sa vodomi slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i koncentrovana da se dobije sirov 5-oksa-6-aza-spiro[3.4]okt-6-en-7-karboksilna kiselina etil estar, kontaminirana sa (Z)-Etil 2-hloro-2-(hidroksiimino)acetatom i srodnim jedinjenjima.
[1252] 5-Oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar: U rastvor sirov 5-oksa-6-aza-spiro[3.4]okt-6-en-7-karboksilna kiselina etil estar (7.5 g, <40.9 mmol) u tetrahidrofuranu (270 mL) na 0° C je polako dodat rastvor boran-dimetil sulfid kompleks (10 M u THF, 16.4 mL, 164 mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći zatim ponovo ohlađena do 0° C, i kvenčovana pažljivim dodavanjem vode. Smeša je razblažena sa etil acetatom, isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), i koncentrovana da se dobije veliak količina bele čvrste supstance. Ove čvrste supstance su temeljno triturisane tri puta sa dihlormetanom (150 mL). Kombinovana dihlormetan ispiranja su koncentrovana i dobijeno ulje je prečišćeno pomoću fleš hromatografije da se dobije 5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar (1.08 g, 29% preko 2 koraka).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 8.01-7.95 (br, 1H), 4.39-4.28 (m, 2H), 4.18-4.10 (m, 1H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.62-2.49 (m, 2H), 2.37-2.29 (m, 1H), 2.25-2.17 (m, 1H), 2.13-1.95 (m, 1H), 1.88-1.79 (m, 1H), 1.68-1.56 (m, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
[1253] 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar: U rastvor 2-Metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (1.11 g, 6.33 mmol) i HATU (2.41 g, 6.34 mmol) u dimetilformamidu (13 mL) je dodat rastvor 5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar (980 mg, 5.3 mmol) u dimetilformamidu (13mL). U dobijenu rekacionu smešu je dodat diizopropiletilamin (1.85 mL, 10.6 mmol) i reakcija je zagrejana do 60° C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena sa etil acetatom, isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se dobije 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar (1.31 g, 72%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C16H26N2O6: 342.18; opaženo [M+1]<+>: 342.90.
[1254] 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina: U rastvor 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina etil estar (1.31 g, 3.83 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat rastvor litijum hidroksida (1M u vodi, 7.6 mL, 7.6 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakcija je delimično koncentrovana i dobijeni vodeni rastvor je ispran sa etil acetatom. Sloj etil acetata je odbačena i vodeni sloj je zakiseljen korišćenjem koncentrovane HCl. Kiseli vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4) i koncentrovani da se dobije sirova 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.
[1255] 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina 2-(4-bromofenil)-2-okso-etil estar: U rastvor 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina (∼3.83 mmol) i 2,4'-dibromoacetofenon (1.1 g, 3.96 mmol) u acetonitrilu (19 mL) je dodat diIzopropiletilamin (1.32 mL, 7.59 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati i zatim je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su isprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (MgSO4) i koncentrovane. Dobijen sirov ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije, čisto razdvajajući dva diastereomera od 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina 2-(4-bromofenil)-2-okso-etil estar (330 mg (R) diastereomera, 360 mg (S) diastereomera, 35% ukupni prinos preko 2 koraka).<1>H-NMR za željeni (S) diastereomer: 400 MHz, (CDCl3) δ: 7.74-7.71 (m, 2H), 7.62-7.60 (m, 2H), 5.47 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.40-5.35 (m, 1H), 5.20 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 4.92 (dd, J<1>= 7.1 Hz, J<2>= 9.0 Hz, 1H), 4.74-4.70 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.84 (dd, J<1>= 9.0 Hz, J<2>= 12.6 Hz, 1H), 2.60 (dd, J<1>= 7.0 Hz, J<2>= 12.6 Hz, 1H), 2.52-2.12 (m, 5H), 2.07-1.86 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.89 (d, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
[1256] (1-{7-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro [3.4] oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor 6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-7-karboksilna kiselina 2-(4-bromofenil)-2-okso-etil estar (150 mg, 0.29 mmol) u toluenu (3 mL) je dodat amonijum acetat (230 mg, 3.0 mmol). Reakciona smeša je energično refluksovana tokom 3 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su isprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (MgSO4), i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se dobije (1-{7-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (95 mg, 66%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C22H27BrN4O4: 490.12/492.12; opaženo [M+1]<+>: 490.99/492.99.<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: 7.60-7.55 (m, 2H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 5.38-5.29 (m ,2H), 4.76-4.70 (br, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.36-3.29 (m, 1H), 2.84 (dd, J<1>= 8.2 Hz, J<2>= 12.5 Hz, 1H), 2.51-2.32 (m, 3H), 2.13-2.03 (m, 2H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.83-1.71 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.8 Hz, 3H), ppm.
[1257] [2-Metil-1-(7-15-[4-(4,4,5,5-tetrametil[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
Degazirana smeša (1-{7-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (85 mg, 0.17 mmol), bis(pinakolato)dibor (66 mg, 0.26 mmol), kalijum acetat (51 mg, 0.52 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) (13 mg, 0.018 mmol) u 1,4-dioksanu (1.7 mL) je zagrejan do 85° C tokom 75 minuta. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je filtrirana kroz paladijum skavendžer kolonu (STRATOSPHERES™ PL-Guanidin MP SPE+, Deo #:PL3514-CM89) i čvrsta supstance su isprane sa etil acetatom. Filtrat je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirov ostatak je prečišćen pomoću fleš hromatografije da se dobije [2-metil-1-(7-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (81 mg, 87%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C28H39BN4O6: 538.30; opaženo [M+1]<+>: 539.12.
[1258] (1-{7-[5-(4'-{2-[6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-azaspiro[3.4]okt-7-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor [2-metil-1-(7-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (81 mg, 0.15 mmol), (1-{7-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (60 mg, 0.12 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (14 mg, 0.012 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (2.0 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.250 mL, 0.50 mmol). Dobijena smeša je degazirana 15 minuta sa strujom argona zatim zagrejana do 85° C 3 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je filtrirana kroz paladijum skavendžer kolonu (STRATOSPHERES™ PL-Gu™anidin MP SPE+, Deo #:PL3514-CM89) i čvrste supstance su isprane sa metanolom. Filtrat je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 51% ACN/H2O 0.1% HCO2H) da se dobije (1-{7-[5-(4'-{2-[6-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]okt-7-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (26 mg, 26%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H54N8O8: 822.41; opaženo [M+1]<+>: 823.43.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.78-7.75 (m, 4H), 7.68-7.65 (m, 4H), 7.38 (s, 2H), 6.94-6.89 (br, 2H), 5.47-5.42 (m, 2H), 4.74-4.68 (br, 2H), 3.66 (s, 6H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.78-2.71 (m, 2H), 2.61-2.53 (m, 2H), 2.49-2.40 (m, 2H), 2.38-2.30 (m, 2H), 2.22-2.09 (m, 4H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.84-1.75 (m, 2H), 0.98 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 0.88 (d, J = 6.7 Hz, 6H) ppm.
Primer IE
[1259]
[1260] (1-{7-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro [3.4] oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor [2-metil-1-(7-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-oksa-6-azaspiro[3.4]oktan-6-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (81 mg, 0.15 mmol), (1-{2-[5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-Pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (81 mg, 0.18 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (18 mg, 0.015 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (3.0 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.300 mL, 0.60 mmol). Dobijena smeša je degazirana tokom 15 minuta strujom argona i zatim zagrejana do 85° C tokom 3 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je filtrirana kroz paladijum skavendžer kolonu (STRATOSPHERES™ PL-Guanidin MP SPE+, Deo #:PL3514-CM89) i čvrste supstance su isprane sa metanolom. Filtrat je koncentrovana i prečišćen fleš hromatografijom (0%-5% metanol/dihlormetan). Dobijeni ostatak je ponovo prečišćen pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 50% ACN/H2O 0.1% HCO2H) da se dobije (1-{7-[5-(4'-{2-[1-(2-Metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-bifenil-4-il)-1H-imidazol-2-il]-5-oksa-6-aza-spiro[3.4]oktan-6-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (35 mg, 30%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C42H52N8O7: 780.40; opaženo [M+1]<+>: 781.29.<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ: 7.82-7.72 (m, 4H), 7.69-7.65 (m, 4H), 7.38 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.99-6.90 (m, 2H), 5.47-5.42 (m, 1H), 5.20-5.16 (m, 1H), 4.75-4.68 (m, 1H), 4.226-4.21 (m, 1H), 4.03-3.96 (m, 1H), 3.91-3.85 (m, 1H), 3.71-3.48 (m, 7H), 3.00-2.94 (m, 1H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.61-1.90 (m, 10H), 1.83-1.73 (m, 1H), 1.00-0.86 (m, 12H) ppm.
Primer IF
(S)-2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) sirćetna kiselina (3)
[1261]
[1262] U (S)-2-(terc-butoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) sirćetnu kiselinu 1 (1.5 g, 5.8 mmol) u dihlormetanu (5 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (5 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sati. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobije 2 U (S)-2-amino-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) sirćetna kiselina 2 (780 mg; 5 mmol) u vodi (25 ml) je dodat natrijum karbonat (1.06g; 10 mmol), i dobijena smeša je ohlađena do 0.step. C. i zatim metil hloroformat (0.53 ml; 5.5 mmol) je dodat u kapima preko 5 minuta. Reakcija je ostavljena da se meša 18 sati dok je ostavljeno kupatilo da se otopi do ambijentalne temperature. Reakciona smeša je zatim podeljena između 1N HCl i etil acetata. Organski sloj je uklonjen i vodeni sloj je dalje ekstrakovan sa 2 dodatne porcije etil acetata. Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom, osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije 3 bezbojni ostatak. MS (ESI) m/z: 218 [M H]<+>.
[1263] Jedinjenja 4-10 su pripremljena u skladu sa metodom koja je korišćena da se pripremi ((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) sirćetna kiselina (3)
(S)-2-((S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar:
[1264]
[1265] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1266] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 3 (20 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM) (20µL, 0.18 mmol) je dodata iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena prep. HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (36 mg, 65%).
<1>H-NMR: 400 MHz, (CD3OD) δ 8.03 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.79 - 7.66 (m, 10H), 7.33 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.05-6.91 (m, 1H), 5.22 -5.09(m, 1H), 4.23-4.15 (m, 1H), 3.98 - 3.78 (m, 4H), 3.57 (s, 6H), 3.38 - 3.31 (m, 8H), 2.65 (m, 1H), 2.30 - 2.09 (m, 5H), 2.02 - 1.95 (m, 2H), 1.56 -1.29 (m, 5H), 0.92 - 0.82 (m, 6H). MS (ESI) m/z 832 [M H]<+>.
Primer IG
(S)-1-(2,3-dihidro-1H-inden-2-il)-2-((S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-oksoetilkarbaminska kiselina metil estar [1267]
[1268] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1269] U ove HCl soli (32 mg) u DMF (0.7 mL) je dodato jedinjenje 10 (16 mg, 0.063 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (12 mg, 0.063 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (9 mg, 0.063 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.12 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (23 mg, 62 %).
MS (ESI) m/z 864 [M H]<+>.
Primer IH
(R)-2-((S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar
[1270]
[1271] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1272] U ove HCl soli (33 mg) u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 4 (15 mg, 0.068 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (13 mg, 0.068 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (11 mg, 0.068 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(14µL, 0.13mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (25 mg, 67%).
MS (ESI) m/z 832 [M H]<+>.
Primer II
(2S)-1-((2S)-2-(5-(6-(4-(2-((2S)-1-(2-(1,1-diokso-heksahidro-tiopiran-4-il)-2-(Metoksikarbonilamino)acetil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar [1273]
[1274] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1275] U ove HCl soli (33 mg) u DMF (0.8 mL) je dodat jedinjenje 5 (18 mg, 0.068 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (13 mg, 0.068 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (11 mg, 0.068 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(14µL, 0.13mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (16 mg, 40%).
MS (ESI) m/z 880 [M H]<+>.
Primer IJ
(S)-1-((S)-2-(5-(6-(4-(2-((S)-1-(2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tiofen-3-il)acetil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-2-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1276]
[1277] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1278] U ove HCl soli (33 mg) u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 6 (15 mg, 0.068 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (13 mg, 0.068 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (11 mg, 0.068 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(14µL, 0.13mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (22 mg, 60%).
MS (ESI) m/z 830 [M H]<+>.
Primer IK
(S)-1-((S)-2-(5-(6-(4-(2-((S)-1-((R)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-(1-metil-1H-indol-3-il)propanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1279]
[1280] U jedinjenje 11 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sati. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1281] U ove HCl soli (20 mg) u DMF (0.5 mL) je dodat jedinjenje 9 (11 mg, 0.039 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (8 mg, 0.039 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (6 mg, 0.039 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(8.3µL, 0.075mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10 mg, 42%).
MS (ESI) m/z 891 [M H]<+>.
Primer IL
(S)-2-((S)-2-(5-(6-(4-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar
[1282]
[1283] U jedinjenje 12 (50 mg, 0.068mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1284] U ove HCl soli (43 mg) u DMF (0.8 mL) je dodat jedinjenje 3 (20 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.18mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (32 mg, 465%).
MS (ESI) m/z 832 [M H]<+>.
Primer IM
(S)-2-((S)-2-(5-(6-(4-(2-((S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar [1285]
[1286] U jedinjenje 13 (50 mg, 0.074mmol) u dihlormetanu (0.9 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.9 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešan tokom 2 sati. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1287] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 3(41 mg, 0.19 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (36 mg, 0.19 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (26 mg, 0.19 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(25µL, 0.22 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (32 mg, 50%).
MS (ESI) m/z 874 [M H]<+>.
Primer IN
(S)-2-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar
[1288]
[1289] U jedinjenje 14 (50 mg, 0.064mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1290] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodat jedinjenje 3(20 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(18µL, 0.16 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 54%).
MS (ESI) m/z 884 [M H]<+>.
Primer IO
(2S,3R)-3-metoksi-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar [1291]
[1292] U jedinjenje 14 (50 mg, 0.064mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešan tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1293] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 8(17 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(18µL, 0.16 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 54%).
MS (ESI) m/z 858 [M H]<+>.
Primer IP
(S)-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1294]
[1295] U jedinjenje 15 (50 mg, 0.064mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1296] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodat jedinjenje 3(20 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.16 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (25 mg, 45%).
MS (ESI) m/z 884 [M H]<+>.
Primer IQ
(S)-2-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etilkarbaminska kiselina metil estar
[1297]
[1298] U jedinjenje 16 (50 mg, 0.069mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sati. Zatim je koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1299] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 3(41 mg, 0.19 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (36 mg, 0.19 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (26 mg, 0.19 mmol). Smeša je ohlađena u vodenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(25µL, 0.22 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (28 mg, 44%).
MS (ESI) m/z 926 [M H]<+>.
Primer IR
(2S,3R)-3-metoksi-1-((S)-6-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,4S)-2-((2S,3R)-3-metoksi-2-(Metoksikarbonilamino)butanoil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1300]
[1301] U jedinjenje 16 (50 mg, 0.069mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1302] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 8(38 mg, 0.2 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (38 mg, 0.2 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (27 mg, 0.2 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM) (55µL, 0.5 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena na preparativnoj HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (29 mg, 40%).
MS (ESI) m/z 874 [M H]<+>.
Primer IS
(S)-1-((S)-6-(5-(9,9-difluoro-7-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-4-il)-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar [1303]
[1304] Jedinjenje 17 (1.2 g, 2 mmol), bis(pinakolato)dibor (1g, 4 mmol), kalijum acetat (510 mg, 5.2 mmol), i Pd(dppf)Cl2(82 mg, 0.1 mmol) su svi izmereni u staklenom sudu pod pritiskom i anhidrovani 1,4-Dioksan (10 mL) je dodat. U smešu je uveden gas azota u mehurićima tokom oko 5 min. Sud je zatim poklopljen, zaptiven i zagrejan u uljanom kupatilu na 90°C preko noći uz stalno mešanje. Reakcioni sud je ohlađen do sobne temperature i sve ispraljive supstance su uklonjene pod smanjenim pritiskom i dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana pri gradijentu od 0 - 50 % sa ISCO kolonom (12 g silika gel). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije (18) (968 mg, 75 %).
[1305] U jedinjenje 18 (950 mg, 1.47 mmol), jedinjenje 19 (488 mg, 1.54 mmol, .), Pd(OAc)2 (23mg, 0.1 mmol) i PPh3 (42mg, 0.16 mmol). DME (16 mL) je dodat i praćeno sa 6 mL 1M NaHCO3 vodenog rastvora. Reakcija je prečišćena sa argonom i zagrejana do 90° C tokom 3 sata pod Ar. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana. EtOAc je dodat i ispran sa zas. NaHCO3 vodenim (2X) i zasićenim vodenim NaCl rastvorom (1X). Organski sloj je koncentrovan nakon sušenja preko natrijum sulfata i podvrgnut silika gel hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana pri gradijentu od 40 - 100 % sa ISCO kolonom (12 g silika gel). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije proizvod 20 (1g, 90 %). MS (ESI) m/z 757 [M H]<+>.
[1306] U jedinjenje 20 (50 mg, 0.066mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1307] U ove HCl soli uDMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 21(16 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.18 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena na preparativnoj HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (33 mg, 62 %). MS (ESI) m/z 814 [M H]<+>.
Primer IT
(S)-1-((S)-6-(5-(9,9-difluoro-7-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-4-il)-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar [1308]
[1309] U jedinjenje 20 (50 mg, 0.066mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodat 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1310] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 3 (20 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.18 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena na preparativnoj HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 54 %). MS (ESI) mlz 856 [M H]<+>.
Primer IU
(S)-1-((S)-6-(5-(9,9-difluoro-7-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-4-(metiltio)butanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-4-il)-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar
[1311]
[1312] U jedinjenje 20 (50 mg, 0.066mmol) u dihlormetanu (0.8 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (0.8 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1313] U ove HCl soli u DMF (0.8 mL) je dodato jedinjenje 7(19 mg, 0.09 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimid hidrohlorid (18 mg, 0.09 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (13 mg, 0.09 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(20µL, 0.18 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena na preparativnoj HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 55 %). MS (ESI) m/z 846 [M H]<+>.
Primer IV
(S)-1-((S)-6-(5-(9,9-difluoro-7-(4-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)-9H-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbaminska kiselina metil estar [1314]
[1315] U jedinjenje 22 (320 mg, 0.53 mmol), jedinjenje 23 (282mg, 0.64 mmol, .), Pd(OAc)2 (8.4mg, 0.04 mmol) i PPh3 (16mg, 0.06 mmol). DME (5.5 mL) je dodat i praćeno sa 2.2 mL 1M NaHCO3 vodenim rastvorom. Reakcija je prečišćena sa argonom i zagrejana do 90° C tokom 3 sata pod Ar. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana. EtOAc je dodat i ispran sa zas. NaHCO3 vodenim (2X) i zasićenim vodenim NaCl rastvorom (1X).
[1316] Organski sloj je koncentrovan nakon sušenja preko natrijum sulfata i podvrgnut silika gel hromatografiji sa eluentom od etil acetata i heksana pri gradijentu od 40 - 100 % sa ISCO kolonom (12 g silika gel). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije proizvod 24 (266 mg, 60 %). MS (ESI) m/z 833 [M H]<+>.
[1317] U jedinjenje 24 (120 mg, 0.15mmol) u dihlormetanu (1.5 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (1.5 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0°C i zatim mešana tokom 2 sata. Zatim koncentrovana u vakuumu da se dobiju HCl soli.
[1318] U ove HCl soli uDMF (1.5 mL) je dodato jedinjenje 21(35 mg, 0.2 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (38 mg, 0.2 mmol) i hidroksibenzotriazol hidrat (HOBt), (27 mg, 0.2 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0°C i N-metilmorfolin (NMM)(50µL, 0.45 mmol) je dodat iz šprica u smešu. Reakcioni sadržaj je mešan tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zatim direktno prečišćena na preparativnoj HPLC na reverznoj fazi da se dobije jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (65 mg, 56 %). MS (ESI) mlz 890 [M H]<+>.
Primer IW
[1319]
[1-(6-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar:
[1320] (1-{6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (0.10g, 0.24mmol), bis(pinakolato)dibor (0.073g, 0.29mmol), Paladijum dihlorid(dppf) (0.018g, 0.024mmol), i kalijum acetat (0.071g, 0.72mmol) su suspendovani u 1,4-dioksanu (1.2mL) i degazirani sa argonom tokom 30 minuta. Suspenzija je zagrejana na 85° C tokom 2 sata. Smeša je ohlađena, (1-{6-[5-(6-Bromo-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.182g, 0.346mmol) i vodeni kalijum fosfat (2M, 0.84mL, 0.84mmol) je dodat. Smeša je vraćena da se greje 16 sati u koje vreme, paladijum(tetrakis)trifenilfosfin (0.014g, 0.012mmol) je dodat. Reakcija je zagrejana tokom dodatna 4 sata. Po završetku, sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i filtrirana kroz Pd skavendžer kertridž (Polymer Labs, PL-Guanidin MP SPE). Dobijena gusta smeša je razblažena u DMF i prečišćena pomoću HPLC na reverznoj fazi (15-40% acetonitril: voda; 0.1% modifikator mravlje kiseline), i liofilizovana dajući [1-(6-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.048g, 24%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.33 - 7.34 (m, 12H), 5.65 - 5.20 (m, 3H), 4.30 (s, 2H), 4.03 - 3.87 (m, 1H), 3.74 (d, 9H), 3.53 (s, 1H), 2.97 (s, 1H), 2.34 - 1.88 (m, 5H), 1.26 (s, 1H), 1.10 (m, 3H), 0.91 (m, 12H), 0.71 (s, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H56N8O6: 840.43 (M<+>); Pronađeno: 841.9 (M+H<+>).
Primer IX
[1321]
[1322] (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metilen-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C21H25BrN4O3: 460.11 (M<+>); Pronađeno: 463.61 (M+H<+>).
[1323] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-metilene pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem [2-Metil-1-(2-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.177g, 0.324mmol) i (1-{2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-metilen-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (0.100g, 0.216mmol). Kalijum fosfat (vodeni, 0.32mL, 0.648mmol) je supstituisan za kalijum karbonat i reakcija je izvedena pod atmosferom argona. Sirova reakcija je prečišćena pomoću HPLC na reverznoj fazi (10-45% acetonitril: voda; 0.1% modifikator mravlje kiseline), i liofilizovana dajući [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-4-metilene pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.009g, 5%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 - 7.96 (m, 1H), 7.93 - 7.79 (m, 5H), 7.77 - 7.67 (m, 5H), 6.32 (s, 1H), 5.73 - 5.54 (m, 1H), 5.50 - 5.22 (m, 6H), 4.49 - 4.28 (m, 3H), 3.96 - 3.82 (m, 2H), 3.72 (s, 9H), 3.06 - 2.86 (m, 2H), 2.50 - 2.34 (m, 1H), 2.31 - 2.21 (m, 1H), 2.18 - 2.09 (m, 2H), 2.05 - 1.95 (m, 3H), 1.90 (s, 4H), 1.26 (s, 3H), 1.13 - 1.04 (m, 3H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H52N8O6: 800.4 (M<+>); Pronađeno: 801.90 (M+H<+>).
Primer IY
[1324]
[1325] 6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer EZ) korišćenjem [2-Metil-1-(3-{5-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (2.25mmol), 6-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (2.39mmol), i kalijum karbonat (2M, 4.3mL, 8.55mmol). Reakcija je izvedena pod atmosferom argona. Sirova reakcija je razblažena u etil acetatu, isprana sa vodom i prečišćena silika hromatografijom na normalnoj fazi (50-100% Heksani:EtilAcetat+10%Metanol).
6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.05g, 60%) je dobijen kao mrkožuta čvrsta supstanca.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H53N7O5: 783.41 (M<+>); Pronađeno: 784.35 (M+H<+>).
Primer IZ
[1326]
[1327] [1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar korišćenjem 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline da se dobije [1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.070g, 65%) kao beli prah.
<1>H-NMR: 400 MHz, (DMSO-d6) δ: 11.75 (s, 1H), 11.72 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.93-7.74 (m, 8H), 7.63 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 5.22 (t, 1H), 4.52-4.50 (m, 2H), 4.16 (t, 1H), 4.00 (t, 1H), 3.81 (d, 1H), 3.75 (d, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.31 (s, 3H), 2.55 (m, 1H), 2.32-1.41 (m, 10H), 1.01-0.57 (m, 16H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H56N8O6: 840.43 (M<+>); Pronađeno: 841.99 (M+H<+>).
Primer JA
[1328]
2-terc-Butoksikarbonilamino-3-metoksi-3-metil-buterna kiselina:
[1329] 2-terc-Butoksikarbonilamino-3-hidroksi-3-metil-buterna kiselina (1.0g, 4.29mmol) je rastvoren u THF (14mL) i ohlađen do 0° C u spoljašnjem kupatilu sa ledom/slanim rastvorom. MeI (2.13mL, 34.3mmol) je dodat na 0° C. Čvrst NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 0.514g, 12.87mmol) je dodat polako na 0° C. Po završetku adicije, rastvor je uklonjen iz ledenog kupatila i ostavljen da se zagreje do sobne temperature, i mešan je. Nakon 18 sati, sirova reakciona smeša je razblažena u etil acetatu i voda je dodata polako uz mešanje. Kvenčovana smeša je koncentrovana u vakuumu i podeljena između dietil etra i vode. Etarski sloj je ekstrakovan sa natrijum bikarbonatom dva puta. Kombinovani bikarbonatni slojevi su zakiseljeni sa vodenom limunskom kiselinom do pH 3 i ekstrakovani tri puta sa etil acetatom. Kombinovani etil acetatni slojevi su isprani sa vodom, natrijum tiosulfatom, vodom, osušeni sa natrijum sulfatom i koncentrovain da se dobije 2-terc-Butoksikarbonilamino-3-metoksi-3-metil-buterna kiselina (0.99g, 94%) kao ulje.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.76 - 3.66 (m, 3H), 3.29 (s, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.33 (s, 3H).
3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina:
[1330] 2-terc-Butoksikarbonilamino-3-metoksi-3-metil-buterna kiselina je rastvoren u dioksanu (40mL) i HCl (4N u dioksanu, 5.4mL, 21.6mmol) je dodat na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 18 sati i koncentrovan do suva. Čvrsta supstanca je rastvorena u THF (14mL) i ohlađena do 0 °C u spoljašnjem kupatilu sa ledom/slanim rastvorom. Vodeni natrijum hidroksid (6.25M, 1.9mL, 11.76mmol) i metil hloroformat (0.5mL, 5.88mmol) je dodat na 0° C. Po završetku adicije, rastvor je uklonjen iz ledeno kupatila i ostavljen da se zagreje do sobne temperature, i mešan je. Nakon 18 sati, sirova reakciona smeša je podešena do pH 1 sa 1N HCl i ekstrakovana dva puta sa dietil etrom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom, osušeni sa magnezijum sulfatom i koncentrovani da se dobije 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.653g, 65%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, acetone) δ 3.76 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 1.37 - 1.31 (m, 1H).
Primer JB
[1331]
[1332] [2-Metoksi-1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.020g, 0.096mmol) da se dobije [2-Metoksi-1-(3-{5-[6-(4-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.019g, 35%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 - 7.88 (m, 4H), 7.84 - 7.35 (m, 8H), 5.81 - 5.33 (m, 2H), 4.88 - 4.57 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 3.91 - 3.54 (m, 9H), 3.46 - 3.16 (m, 4H), 3.09 - 2.82 (m, 1H), 2.24 (dd, 2H), 1.93 (m, 6H), 1.61 (s, 1H), 1.47 - 1.17 (m, 7H), 1.11 (d, 1H), 1.02 - 0.83 (m, 7H), 0.72 (s, 3H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H58N8O7: 870.44 (M<+>); Pronađeno: 871.90 (M+H<+>).
Primer JC
[1333]
4-cijano-2-metoksikarbonilamino-buterna kiselina:
[1334] Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina korišćenjem 2-Amino-4-cijanobuterna kiselina.
LCMS-ESI<+>: izračunato za C7H10N2O4: 186.06 (M<+>); Pronađeno: 187.09 (M+H<+>).
Primer JD
[1335]
[1336] [3-cijano-1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem 4-cijano-2-metoksikarbonilaminobuterna kiselina da se dobije [3-cijano-1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.015g, 28%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 - 8.10 (m, 1H), 8.05 - 7.84 (m, 1H), 7.80 - 7.62 (m, 8H), 7.53 (d, 2H), 5.47 - 5.22 (m, 1H), 4.92 - 4.61 (m, 1H), 4.49 (d, 2H), 4.25 (s, 2H), 4.10 (d, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.70 - 3.42 (m, 6H), 3.32 - 3.23 (m, 2H), 3.00 - 2.85 (m, 1H), 2.59 - 2.06 (m, 4H), 2.02 - 1.79 (m, 3H), 1.75 - 1.60 (m, 2H), 1.50 - 1.38 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.06 - 0.77 (m, 6H), 0.72 - 0.50 (m, 3H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H53N9O6: 851.41 (M<+>); Pronađeno: 852.90 (M+H<+>).
Primer JE
[1337]
[1338] [2-Metoksi-1-(3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (0.020g, 0.096mmol) da se dobije [2-Metoksi-1-(3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3Himidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.016g, 29%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 - 7.88 (m, 4H), 7.84 - 7.35 (m, 8H), 5.81 - 5.33 (m, 2H), 4.88 - 4.57 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 3.91 - 3.54 (m, 9H), 3.46 - 3.16 (m, 4H), 3.09 - 2.82 (m, 1H), 2.24 (dd, 2H), 1.93 (m, 6H), 1.61 (s, 1H), 1.47 - 1.17 (m, 7H), 1.11 (d, 1H), 1.02 - 0.83 (m, 7H), 0.72 (s, 3H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H58N8O7: 870.44 (M<+>); Pronađeno: 871.47 (M+H<+>).
Primer JF
[1339]
[1340] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Cikloheksil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il} -5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem S-Cikloheksil-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.022g, 0.102mmol) da se dobije [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Cikloheksil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-pirolidin-2-il]-3Himidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.036g, 28%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 - 7.62 (m, 10H), 7.30 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.60 (d, 1H), 5.53 (d, 1H), 5.41 (d, 1H), 5.31 (dd, 1H), 4.38 (t, 1H), 4.25 (t, 1H), 4.03 - 3.74 (m, 5H), 3.72 - 3.65 (m, 6H), 2.97 - 2.65 (m, 2H), 2.39 (m, 1H), 2.13 (m, 6H), 1.96 -1.63 (m, 6H), 1.36 - 0.99 (m, 6H), 0.93 (dd, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H56N8O6: 828.43 (M<+>); Pronađeno: 829.70 (M+H<+>).
Primer JG
[1341]
[1342] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Cikloheksil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il} -5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem R-Cikloheksil-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.041g, 0.191mmol) da se dobije [1-(2-{5-[6-(4-{2-[l-(2-Cikloheksil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (0.047g, 59%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 - 7.62 (m, 10H), 7.30 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.60 (d, 1H), 5.53 (d, 1H), 5.41 (d, 1H), 5.31 (dd, 1H), 4.38 (t, 1H), 4.25 (t, 1H), 4.03 - 3.74 (m, 5H), 3.72 - 3.65 (m, 6H), 2.97 - 2.65 (m, 2H), 2.39 (m, 1H), 2.13 (m, 6H), 1.96 -1.63 (m, 6H), 1.36 - 0.99 (m, 6H), 0.93 (dd, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H56N8O6: 828.43 (M<+>); Pronađeno: 829.70 (M+H<+>).
Primer JH
[1343]
[1344] S-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina korišćenjem S-Amino-(4-fluoro-fenil)-sirćetna kiselina da se dobije S-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.560g, 82%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C10H10FNO4: 227.06 (M<+>); Pronađeno: 227.84 (M+H<+>).
Primer JI
[1345]
[1346] {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-(4-Fluoro-fenil)-2-metoksikarbonilamino-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem S-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.023g, 0.100mmol) da se dobije {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-(4-Fluoro-fenil)-2-metoksikarbonilamino-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.015g, 27%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 - 7.71 (m, 8H), 7.55 - 6.93 (m, 8H), 6.06 (d, 1H), 5.43 (dd, 1H), 5.30 (m, 3H), 4.34 (t, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 2H), 3.74 - 3.47 (d, 6H), 3.25 - 2.92 (m, 4H), 2.36 (s, 1H), 2.23 -1.98 (m, 7H), 1.05 (t, 1H), 0.88 (t, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H49FN8O6: 840.38 (M<+>); Pronađeno: 841.42 (M+H<+>). Primer JJ
[1347]
[1348] R-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi 3-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina korišćenjem R-Amino-(4-fluoro-fenil)-sirćetna kiselina da se dobije R-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.575g, 84%) LCMS-ESI<+>: izračunato za C10H10FNO4: 227.06 (M<+>); Pronađeno: 227.84 (M+H<+>).
Primer JK
[1349]
[1350] {1-[2-(5-{6-[4-(2-{1-[2-(4-Fluoro-fenil)-2-metoksikarbonilamino-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil}-karbaminska kiselina metil estar: Ovo jedinjenje je pripremljeno korišćenjem procedure koja je korišćena da se pripremi [1-(6-{5-[4-(6-{2-[2-(2-Ciklopropil-2-metoksikarbonilamino-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il} -5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar (primer iz JJC) korišćenjem R-(4-Fluoro-fenil)-metoksikarbonilamino-sirćetna kiselina (0.023g, 0.100mmol) da se dobije {1-[2-(5-{6-[4-(2-{l-[2-(4-Fluoro-fenil)-2-metoksikarbonilamino-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-fenil]-naftalen-2-il}-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil}-karbaminska kiselina metil estar (0.008g, 14%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 - 7.71 (m, 8H), 7.55 - 6.93 (m, 8H), 6.06 (d, 1H), 5.43 (dd, 1H), 5.30 (m, 3H), 4.34 (t, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 2H), 3.74 - 3.47 (d, 6H), 3.25 - 2.92 (m, 4H), 2.36 (s, 1H), 2.23 - 1.98 (m, 7H), 1.05 (t, 1H), 0.88 (t, 6H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H49FN8O6: 840.38 (M<+>); Pronađeno: 841.27 (M+H<+>).
Primer JL
[1351]
[1352] (1-{3-[6-(9,9-Difluoro-7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-azaspiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar je pripremljen na sličan način kao Primer C da se dobije jedinjenje iz naslova kao beli prah (68 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (DMSO-d6) δ: 12.56 (d, J=13.5Hz, 0.5H), 12.05 (dd, 1H), 11.84 (s, 0.5H), 8.1 - 7.1 (m, 12H), 5.71 (d, 0.5H), 5.27 (s, 0.5H), 5.19 (d, 0.5H), 4.70 (s, 0.5H), 4.64 (s, 0.5H), 4.49 (s, 0.5H), 4.2-3.9(m, 2H), 3.6-3.2 (m, 20H), 2.8-1.1 (m, 12H), 0.9-0.4 (m , 16H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54F2N8O6: 890.0 (M+H<+>); Pronađeno: 889.4 (M+H<+>).
Primer JM
[1353]
[1354] LiOH.H2O (167 mg, 3.98 mmol) je dodat u 4-cijano-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-metil estar (674 mg, 2.65 mmol) u rastvoru (5 mL) metanola. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirov proizvod je korišćen u reakciji u sledećem koraku.
[1355] 2-Amino-1-(4-bromo-fenil)-etanon HCl so (664 mg, 2.65 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i u ovaj rastvor je dodat 4-cijano-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar sirov iz prethodnog koraka, diizopropil etilamin (0.93 mL, 5.3 mmol), praćeno sa HATU (1 g, 2.65 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.05 g, prinos 91%). LCMS-ESI-: izračunato za C19H22BrN3O4: 435.08; Pronađeno: 458.0 (M+Na<+>).
[1356] Smeša 2-[2-(4-Bromo-fenil)-2-okso-etilkarbamoil]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.05 g, 2.4 mmol) i amonijum acetat (3.7 g, 20 ekv.) u ksilenu(2 mL) je zagrejana u mikrotalasnoj na 110 °C tokom 2 sata. Smeša je koncentrovaan i prečišćena fleš hromatografijom na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[5-(4-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (356 mg, kojija sadrži 15% početnog materijala, prinos 35%). LCMS-ESI-: izračunato za C19H21BrN4O2: 417.30; Pronađeno: 418.9 (M+H<+>).
[1357] Smeša 2-[5-(4-Bromo-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (356 mg, 0.85 mmol), 2-{5-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (501 mg, 1.02 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(99 mg, 0.08 mmol) i kalijum acetat (425 mg, 3.07 mmol) u 7 mL 1,2-dimetoksietan i 2 mL voda je zagrejana do 90 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena i rastvorena u etil acetatu i isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (silika gel, 20 do 80% etil acetat/heksan) da se dobije 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (200 mg, prinos 33%) i amidni proizvod. LCMS-ESI-: izračunato za C41H45N7O4: 699.84; Pronađeno: 700.2 (M+H<+>).
[1358] LAH (45 mg, 6 ekv.) je dodat u rastvor smeše od 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-cijano-pirolidin-1karboksilna kiselina terc-butil estar (146 mg, 0.066 mmol) u 3 ml THF na 0 °C. Reakcija je kvenčovana nakon 30 minuta korišćenjem vode, 10%NaOH vodenog rastvora i vode u 3 koraka. Reakciona smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 4-Aminometil-2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar TFA so (150 mg, prinos 95%). LCMS-ESI-: izračunato za C41H49N7O4: 703.87; Pronađeno: 704.2 (M+H<+>).
[1359] Natrijum triacetil bor hidrid (54mg, 3 ekv.) je dodat u smešu od 4-Aminometil-2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.085 mmol) i 0.1 mL formaldehida (37% u vodi) u 3 ml THF, praćeno sa 1 kapi sirćetne kiseline. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakcija je završena praćenjem korišćenjem LC-MS. Reakciona smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-dimetilaminometil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar TFA so (41.7 mg, prinos 67%). LCMS-ESI-: izračunato za C43H53N7O4: 731.93; Pronađeno: 732.3 (M+H<+>).
[1360] Trifluorosirćetna kiselina (0.5 mL) je dodata u 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-dimetilaminometilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (41.7 mg, 0.057 mmol) u 1 ml DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.5 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (20 mg, 0.124 mmol), diizopropil etilamin (60 µl), praćeno sa HATU (43 mg). reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je rastvoren u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(4-Dimetilaminometil-2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar bis-TFA so (Primer A) (13.1 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.28 (d, 2H), 8.02 (m, 2H), 7.83-7.92 (m, 8H), 5.38 (m, 2H), 4.58(m, 1H), 4.22(m, 2H), 4.18(m, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.62 (s, 6H),3.42(m,2H), 3.02(s, 6H), 3.00(m,1H), 2.81(m,1H), 2.62 (m, 1H), 2.40-2.00 (m, 5H), 0.95-1.05 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H59N9O6: 846.03; Pronađeno: 848.4 (M+H<+>).
Primer JN
[1361]
[1362] MsCl (7.6 mg, 1 ekv.) je dodat u smešu od 4-Aminometil-2-[5-(4-{6-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (69 mg, 0.098 mmol) i DIEA (51 µl, 3ekv) u 1 ml MeCN. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(Metansulfonilaminometil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar TFA so (29 mg, prinos 38%). LCMS-ESI-: izračunato za C42H51N7O6S: 781.96; Pronađeno: 782.2 (M+H<+>).
[1363] Trifluorosirćetna kiselina (0.5 mL) je dodata u 2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-Butoksikarbonilpirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(Metansulfonilaminometil)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (29 mg, 0.037 mmol) u 1 ml DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (0.5 mL) i u ovaj rastvor je dodat 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (13 mg, 2 ekv.), diizopropil etilamin (39 µl, 6 ekv.), praćeno sa HATU (28 mg, 2 ekv.). Reakciona smeša je mešana na 0 °C 60 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(4-(Metansulfonilamino-metil)-2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar bis-TFA so (Primer B) (12.9 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.28 (d, 2H), 8.08 (m, 2H), 7.95 (m, 4H), 7.82(m, 4H), 5.28 (m, 2H), 4.38(m, 1H), 4.22(m, 2H), 4.12(m, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.62 (s, 6H),3.61(m,2H), 3.02(s, 3H), 2.72(m,2H), 2.60 (m, 1H), 2.40-1.98 (m, 5H), 0.95-1.05 (m, 12 H).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H57N9O8S: 896.07; Pronađeno: 896.3 (M+H<+>).
Primer JO
[1365] AcCl (5 µl, 1 ekv.) je dodat u smešu od 4-Aminometil-2-[5-(4-{6-[2-(1-tercbutoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (50 mg, 0.071 mmol) i DIEA(37 µl, 3ekv) u 1 ml DCM i 1 mL MeCN smeši. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. LC-MS pokazala je željeni i Bis-acetil proizvod. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije 4-(Acetilamino-metil)-2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar TFA so (13 mg, prinos 25%). LCMS-ESI-: izračunato za C43H51N7O5: 745.91; Pronađeno: 746.2 (M+H<+>).
[1366] Trifluorosirćetna kiselina (0.5 mL) je dodata u 4-(Acetilamino-metil)-2-[5-(4-{6-[2-(1-terc-butoksikarbonil-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-naftalen-2-il}-fenil)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (13 mg, 0.017 mmol) u 1 ml DCM i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i osušena preko noći pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (0.5 mL) i u ovaj rastvor je dodata 2metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (6 mg, 2 ekv.), diizopropil etilamin (18 µl, 6 ekv.), praćeno sa HATU (13 mg, 2 ekv.). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu i isprana sa razblaženim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 5 do 100% ACN/H2O 0.1% TFA). Proizvod je liofilizovan da se dobije [1-(4-(Acetilamino-metil)-2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar bis-TFA so (Primer C) (6.6 mg).
<1>H-NMR: 300 MHz, (CD3OD-d4) δ: 8.28 (d, 2H), 8.08 (m, 2H), 7.95 (m, 4H), 7.82(m, 4H), 5.28 (m, 2H), 4.38(m, 1H), 4.22(m, 2H), 4.17(m, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.62 (s, 6H), 3.59(m,1H), 3.42(m, 2H), 2.64(m,2H), 2.24 (m, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 0.95-1.05 (m, 12 H). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H57N9O7: 859.44; Pronađeno: 860.4 (M+H<+>).
Primer JP
[1367]
[1368] 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromodibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar: U rastvor od (s) 5-aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar (138 mg, 0.5 mmol) i trietilamin (65 µl, 0.47 mmol) u acetonitrilu (3 ml) je dodat polako rastvor 2-bromo-1-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-etanona (143 mg, 0.39 mmol) u DMF (4 ml). Smeša je mešana tokom 12 sati, i rastvarač je uparen. Smeša je razblažena sa EtOAc, i ispran sa 1.0 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, i osušena je sa natrijum sulfatom. Koncentracija dala je 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar (210 mg)
[1369] 6-[5-(7-Bromo-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar: Smeša 5-aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilna kiselina 5-benzil estar 6-[2-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-2-okso-etil] estar (210 mg, 0.39 mmol) i amonijum acetat (330 mg, 4.3 mmol) u ksilenu (3 ml) je zagrejana na 140 C tokom 80 minuta pod mikrotalasima. Smeša je kvenčovana sa vodom, i ekstrakovana sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje fleš hromatografijom na koloni (EtOAc) dalo je 6-[5-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (150 mg). m/z: 542.1 (M+1), 540.1 (M-1).
[1370] 3-(6-{7-[2-(5-Benziloksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar: U rastvor 6-[5-(7-bromo-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina benzil estar (150 mg, 0.28 mmol) i 3-[6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (160 mg, 0.36 mmol) u DME (2.25 ml) i vodi (0.75 ml) je dodat kalijum karbonat (78 mg, 0.56 mmol), praćeno sa Pd(PPh3)4(15 mg) i PdCl2(dppf)CH2Cl2(15 mg). Smeša je zagrejana na 90 C tokom 16 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana sa vodom i slanim rastvorom, i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje fleš hromatografijom na koloni (Heksani/EtOAc) dalo je 3-(6-{7-[2-(5-benziloksikarbonil-5-azaspiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (190 mg). m/z: 775.2 (M+1), 773.3 (M-1), 338.2 (M+2)/2.
[1371] (1-{6-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril) -2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: U rastvor od 3-(6-{7-[2-(5-benziloksikarbonil-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-dibenzofuran-3-il}-1H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (185 mg, 0.24 mmol) u DCM (3.6 ml) je dodat polako 33% HBr/HOAc (1 ml). Smeša je mešana dva sata, i rastvarač i reagens su uklonjeni pod smanjenim pritiskom da se dobije braon čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je suspendovana u DCM/Et2O (2.5 ml/25 ml) i mešana je. Čvrsta supstanca sakupljena filtracijom. U rastvor gornje čvrste supstance (0.24 mmol) i MeOCO-Val-OH (84 mg, 0.48 mmol) u DMF (7.0 ml) je dodat HATU (192 mg, 0.50 mmol), praćeno sa diizopropiletilaminom (0.42 ml, 2.4 mmol). Smeša je mešana tokom deset sati i uparena je i zatim razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 1 N NaOH rastvorom, vodom, i slanim rastvorom, i osušena sa natrijum sulfatom. Koncentracija i prečišćavanje pomoću HPLC (0.1%TFA/CH3CN/0.1%TFA/H2O) dalo je (1-{6-[5-(7-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-benzoimidazol-5-il}-dibenzofuran-3-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar (151 mg). m/z: 855.3 (M+1), 853.2 (M-1), 428.4 (M+2)/2.<1>H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ 8.25-7.70 (10 H, m), 5.4 (1 H, m), 4.95-4.7 (1 H, m), 4.38 (1 H, m), 4.16 (1 H, m), 3.95 (1 H, m), 3.83 (1 H, m), 3.69 (3 H, s), 3.67 (3 H, s), 3.5-3.2 (1 H, m), 2.98 (1 H, m), 2.5 -1.7 (10 H, m), 1.2-0.8 (16 H, m).
Primer JQ
[1372]
[1373] 2-(4-Bromo-fenil)-6-metoksi-benzo[b]tiofen je prijavljen u literaturi (Journal of Medicinal Chemistry, 2007, 50, 2682-2692).
[1374] 2-(4-Bromo-fenil)-benzo[b]tiofen-6-ol. U mešan rastvor 2-(4-bromo-fenil)-6-metoksibenzo[b]tiofen (80 mg, 0.25 mmol) je dodat BBr3(0.5 mL 1 M u DCM, 0.5 mmol) na 0° C. Smeša je mešana tokom 3 sata na ambijentalnoj temperaturi. DCM je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je tretiran sa heksanom da se dobije proizvod (67 mg, 88%). m/z 303.0, 305.0 (M-H)-.
[1375] Trifluoro-Metansulfonska kiselina 2-(4-bromo-fenil)-benzo[b]tiofen-6-il estar. Tf2O je dodat polako u Smešu 2-(4-bromo-fenil)-benzo[b]tiofen-6-ol (200 mg, 0.66 mol) u piridinu (3 mL) na 0° C sa mešanjem. Smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 16 sati pre nego što je kvenčovana sa NaHCO3rastvorom. Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom (50 mL). Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[1376] pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar2-[2-(2-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenil}-benzo[b]tiofen-6-il)-2-okso-etil] estar. Pd(Ph3)4(43 mg, 0.037 mmol), PdCl2(Ph3)2(26 mg, 0.037 mmol) i LiCl (78 mg, 1.8 mmol) je dodat u smešu trifluoro-Metansulfonska kiselina 2-(4-bromo-fenil)-benzo[b]tiofen-6-il estar (200 mg, 0.46 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (0.37 mL, 1.1 mmol) u 8 mL DMF. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80° C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (3 mL) i NBS (180 mg, 1.0 mmol) je dodata i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 min, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Etil acetatni sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je suspendovan u acetonitrilu (30 mL). U njega je dodat rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (792 mg, 3.7 mmol) i DIPEA (0.56 mL, 3.2 mmol) u 5 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, razblažena sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom i vodom, osušen preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (90 mg, 27% preko dva koraka). m/z 743.2 (M+Na)<+>.
[1377] 2-[5-(2-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-benzo[b]tiofen-6-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar. Smeša pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar 2-[2-(2-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-karboniloksi)-acetil]-fenil}-benzo[b]tiofen-6-il)-2-okso-etil] estar (90 mg, 0.12 mmol) i amonijum acetat (192 mg, 2.5 mmol) u ksilenu (10 mL) je zagrejana u zatvorenoj epruveti 140° C tokom 1.5 sati u mikrotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (60 mg, 70%). m/z 681.2 (M+H)<+>.
[1378] [1-(2-{5-[2-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-benzo[b]tiofen-6-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metilpropil]-karbaminska kiselina metil estar. U rastvor 2-[5-(2-{4-[2-(1-Boc-pirolidin-2-il)-3H-imidazol-4-il]-fenil}-benzo[b]tiofen-6-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar (60 mg, 0.09 mmol) u metanolu (3 mL) je dodata 4N HCl u 1,4-dioksanu (0.4 mL, višak). Smeša je mešana tokom 2 sata na 50° C i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u vodi i osušen zamrzavanjem preko noći. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DMF (3 mL), u rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (34 mg, 0.19 mmol), HATU (84 mg, 0.22 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.12 mL, 0.70 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen HPLC da se dobije željeni proizvod kao TFA so (45 mg, 64%).<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.26 (s, 1H), 8.00-7.70 (m, 9H), 5.30-5.20 (m, 2H), 4.23 (d, 2H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.75-3.60 (m, 6H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.35-2.00 (m, 8H), 1.00-0.80 (m, 12H); m/z 795.3 (M+H)<+>.
Primer JR
[1379]
[1380] 2,7-Dibromo-9-metilen-9H-fluoren je prijavljen u literaturi (Tetrahedron, 2006, 62, 3355-3361).
[1381] 2',7'-Dibromospirociklopropan-1,9'-fluoren. U mešan rastvor dietilcinka (9.0 mL 1.0 M u heksanu, 9.0 mmol) u DCM (10 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (0.69 mL, 9.0 mmol) u DCM (10 mL) polako na 0° C. Smeša je mešana tokom 20 min na 0° C pre dodavanja dijodometana (0.72 mL, 9.0 mmol). Smeša je mešan tokom još 20 min na 0° C, zatim rastvor 2,7-dibromo-9-metilen-9H-fluorena (750 mg, 2.2 mmol) u DCM (5 mL) je dodat. Smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi 5 dana, zatim kvenčovana polako sa NH4Cl rastvorom. Smeša je ekstrakovana sa etil acetatom, isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni ostatak je rastvoren u mešanom rastvaraču od THF/voda/aceton (18 mL sa ration 12/4/4), NMO (264 mg, 2.2 mmol) i OSO4je dodat. Smeša je mešana tokom 16 sati na ambijentalnoj temperaturi, kvenčovana sa 1 M Na2S2O3, zatim ekstrakovana sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (480 mg, 61 %).
[1382] 5-Cbz-5-aza-spiro[2.4]heptan-6-karboksilna kiselina 2-(7-bromospirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il)-2-okso-etil estar. Pd(Ph3)4(67 mg, 0.058 mmol) i PdCl2(Ph3)2(41 mg, 0.058 mmol) je dodat u smešu 2',7'-dibromospirociklopropan-1,9'-fluoren (670 mg, 1.93 mmol) i tributil(1-etoksivinil)kalaj (0.66 mL, 1.93 mmol) u 20 mL dioksane. Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80° C tokom 16 sati, zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Voda (7 mL) i NBS (344 mg, 1.93 mmol) je dodata i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 40 min, zatim razblažena sa etil acetatom (300 mL). Etil acetatni sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je suspendovan u acetonitrilu (30 mL). U to je dodat rastvor pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-benzil estar (780 mg, 2.8 mmol) i DIPEA (0.44 mL, 2.5 mmol) u 5 mL acetonitrila. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, razblažen sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa NaHCO3rastvorom i vodom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (825 mg, 73% preko dva koraka). m/z 585.9, 587.9 (M+H)<+>.
[1383] 6-[5-(7-Bromospirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-Cbzl-5-azaspiro[2.4]heptan. Smeša 5-Cbz-5-aza-spiro[2.4]heptan-6-karboksilna kiselina 2-(7bromospirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il)-2-okso-etil estar (825 mg, 1.4 mmol) i amonijum acetat (1.5 g, 19.5 mmol) u ksilenu (15 mL) je zagrejan u zatvorenoj epruveti 140° C tokom 1.5 sata u mikrotalasnim uslovima. Isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu, i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (140 mg, 18%). m/z 566.1, 568.1 (M+H)<+>.
[1384] 2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-6-{7-[2-(5-Cbz-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-spirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol. Pd(Ph3)4(14 mg, 0.012 mmol) i PdCl2(Ph3)2(9 mg, 0.012 mmol) je dodat u smešu 6-[5-(7-bromospirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-Cbzl-5-aza-spiro[2.4]heptan (140 mg, 0.25 mmol), 3-[6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (120 mg, 0.27 mmol), 2M K2CO3(0.5 mL, 1.0 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (5 mL). Reakciona smeša je isprana sa azotom, zagrejana na 80° C tokom 16 sati, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da se dobije željeni proizvod (80 mg, 40%). m/z 799.3 (M+H)<+>.
[1385] (1-{3-[6-(7-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-spirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar. U rastvor 2-(2-Boc-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il)-6-{7-[2-(5-Cbz-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il)-3H-imidazol-4-il]-spirociklopropan-1,9'-fluoren-2-il}-1H-benzoimidazol (80 mg, 0.1 mmol) u DCM (3 mL) je dodat HBr (0.8 mL 5.7M u AcOH, višak). Smeša je mešana tokom 2 sata na ambijentalnoj temperaturi i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa etrom/DCM da se dobije prljavo bela čvrsta supstanca. Dobijeni proizvod je rastvoren u DMF (3 mL), u rastvor je dodata 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (39 mg, 0.22 mmol), HATU (95 mg, 0.25 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.14 mL, 0.80 mmol). Smeša je mešana na ambijentalnoj tokom 2 sata, i zatim isparljiva komponenta je uklonjena u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran sa 1 N NaOH rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije željeni proizvod kao TFA so (55 mg, 62%). m/z 879.4 (M+H)<+>.
Primer JS
[1386]
[1387] 2,7-Bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-10H-fenotiazin: 2,7-Dibromo-10H-fenotiazin (590 mg, 1.65 mmol, WuXi AppTec) u DMSO (16 mL) je tretiran sa bis(pinakolato)dibor (1.68 g, 6.60 mmol), KOAc (1.30 g, 13.2 mmol), i PdCl2dppf (135 mg, 0.165 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C 18 h i smeša je ohlađena i filtrirana kroz CELITE uložak. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL) i ispran sa H2O (2 × 50 mL) i zasićen NaCl rastvor (1 × 50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i tretiran na 80 g SiO2COMBIFLASH koloni (0-25% EtOAc-Heksani gradijent) da se dobije 2,7-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-10H-fenotiazin (450 mg, 60%): HPLC (RP: 6-98% MeCN-H2O gradijent [ne-polarni], 0.05% TFA modifikator) tR= 6.821 min (∼80% čistoće na 254 nM).
[1388] (2S,2'S)-terc-Butil 2,2'-(5,5'-(10H-fenotiazin-2,7-diil)bis(1H-imidazol-5,2-diil))dipirolidin-1-karboksilat: 2,7-Bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-10H-fenotiazin (450 mg, 1.00 mmol) u DME (10 mL) je tretiran sa (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (662 mg, 2.09 mmol), 1 M NaHCO3(5 mL, 5.00 mmol), i Pd(PPh3)4(69 mg, 0.06 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90 °C tokom 18 h i smeša je ohlađena i filtrirana kroz CELITE uložak. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL) i isprana sa H2O (2 × 50 mL) i zasićen NaCl rastvor (1 × 50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i tretiran na 40 g SiO2COMBIFLASH koloni (0-100% EtOAc-Heksani gradijent, praćeno sa 0-100% 20%-MeOH/EtOAc-Heksani gradijent) da se dobije (2S,2'S)-terc-butil 2,2'-(5,5'-(10H-fenotiazin-2,7diil)bis(1H-imidazol-5,2-diil))dipirolidin-1-karboksilat (175 mg, 26%): MS (ESI) m/z 670 [M H]<+>.
[1389] Dimetil (2S',2S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(10H-fenotiazin-2,7-diil)bis(1H-imidazol-5,2-diil))bis(pirolidin-2,1-diil))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat: (2S,2'S)-terc-butil 2,2'-(5,5'-(10H-fenotiazin-2,7-diil)bis(1H-imidazol-5,2-diil))dipirolidin-1-karboksilat (175 mg, 0.26 mmol) je tretiran sa 4 N HCl (5 mL) i mešan 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana i smeša je suspendovana u DMF (5.5 mL) i tretirana sa (S)-Moc-Val-OH (96 mg, 0.55 mmol), HATU (219 mg, 0.57 mmol), i 4-metilmorfolinom (143 µL, 1.31 mmol; ili do baznog). Mešana je 18 h zatim razblažena sa EtOAc (100 mL) i isprana sa zasićenim NaHCO3rastvorom (2 × 50 mL), H2O (2 × 50 mL), i zasićenim NaCl rastvorom (1 × 50 mL). Rastvor je osušen preko MgSO4i tretiran na 40 g SiO2COMBIFLASH koloni (0-100% EtOAc-Heksani gradijent, praćeno sa 0-100% 20%-MeOH/EtOAc-Heksani gradijent) i RP HPLC (6-98% MeCN-H2O gradijent, 0.1% TFA modifikator). Konačno, materijal je podvrgnut 20 × 20 preparativnoj TLC (10% MeOH-EtOAc) da se dobije dimetil (2S',2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(10H-fenotiazin-2,7-diil)bis(1H-imidazol-5,2-diil))bis(pirolidin-2,1-diil))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat (3.6 mg, 2%): MS (ESI) m/z 784 [M H]<+>.
Primer JT
[1390]
[1391] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: Rastvor (1-{6-[5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar (1.00 g, 1.9 mmol), 3-{5-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.31 g, 2.8 mmol) i vod NaHCO3(7.6 mL 1M rastvora, 7.6 mmol) u DME (20 mL) je degaziran sa N2gasom tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(PPh3)4(110 mg, 0.095 mmol) i zatim reakcija je zagrejana do 80° C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetate. Organska faza je isprana sa H2O i zatim slanim rastvorom zatim osušena preko natrijum sulfata. Nakon filtracije rastvarač je uklonjen iz filtrata pod smanjenim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen silika gel hromatografijom (70-100% EtOAc/Heksani) da se dobije 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (835 mg, 1.07 mmol, 56% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H54N7O5: 784.4 (M+H<+>); Pronađeno: 784.8 (M+H<+>).
[1392] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-propionil)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (46 mg, 0.059 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana 2 h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (19.5 µL, 0.18 mmol), 2-metoksikarbonilamino-propionska kiselina (13 mg, 0.089 mmol) i HATU (25 mg, 0.065 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (26 mg, 0.032 mmol, 54% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H53N8O6: 813.4 (M+H<+>); Pronađeno: 813.4 (M+H<+>).
Primer JU
[1394] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(4-Metoksi-2-metoksikarbonilamino-butiril)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina tercbutil estar (46 mg, 0.059 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana 2 h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (19.5 µL, 0.18 mmol), 4-metoksi-2-metoksikarbonilamino-buterna kiselina (17 mg, 0.089 mmol) i HATU (25 mg, 0.065 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (40 mg, 0.047 mmol, 79% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H57N8O7: 857.4 (M+H<+>); Pronađeno: 857.4 (M+H<+>).
Primer JV
[1395]
[1396] [1-(3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (50 mg, 0.064 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešan 2 h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (21 µL, 0.19 mmol), 2-metoksikarbonilaminobuterna kiselina (16 mg, 0.096 mmol) i HATU (27 mg, 0.070 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (30 mg, 0.036 mmol, 57% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H55N8O6: 827.4 (M+H<+>); Pronađeno: 827.4 (M+H<+>).
Primer JW
[1397]
[1398] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.077 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana 2 h zatim koncentrovan da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (34 µL, 0.31 mmol), 2-metoksikarbonilamino-buterna kiselina (19 mg, 0.11 mmol) i HATU (35 mg, 0.09 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (51 mg, 0.062 mmol, 80% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H55N8O6: 827.4 (M+H<+>); Pronađeno: 827.4 (M+H<+>).
Primer JX
[1399]
[1400] [1-(3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4] hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2,2-dimetil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.077 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (25 µL, 0.23 mmol), 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (22 mg, 0.12 mmol) i HATU (35 mg, 0.092 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova (42 mg, 0.049 mmol, 57% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H59N8O6: 855.5 (M+H<+>); Pronađeno: 855.5 (M+H<+>).
Primer JY
[1401]
[1402] [1-(6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-2-aza-biciklo[2.2.1] hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.077 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana 6 h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (25 µL, 0.23 mmol), metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (22 mg, 0.12 mmol) i HATU (35 mg, 0.092 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobiju različiti diastereomeri proizvoda iz naslova (Diastereomer 1: 24 mg, 0.027 mmol, 36% prinos; Diastereomer 2: 17 mg, 0.019 mmol, 22% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C51H55N8O6: 875.4 (M+H<+>); Pronađeno: 875.5 (M+H<+>).
Primer JZ
[1403]
[1404] [1-(3-{5-[4-(6-{2-[5-(2-metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 6-{5-[6-(4-{2-[2-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-2-aza-biciklo[2.2.1]hept-3-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.077 mmol) u dioksanima (2 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (160 µL). Suspenzija je mešana 6 h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (25 µL, 0.23 mmol), metoksikarbonilamino-fenilsirćetna kiselina (22 mg, 0.12 mmol) i HATU (35 mg, 0.092 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (5-45% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije proizvod iz naslova kao diastereomerna smeša (30 mg, 0.035 mmol, 39% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C51H55N8O6: 875.4 (M+H<+>); Pronađeno: 875.6 (M+H<+>).
Primer KA
[1405]
[1406] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Hidroksi-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (40 mg, 0.055 mmol) u MeOH (1 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (160 µL). Reakcija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (100 µL), hidroksi-fenil-sirćetna kiselina (21 mg, 0.083 mmol) i HATU (35 mg, 0.092 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10-40% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije jedinjenje iz naslova (32 mg, 0.042 mmol, 76% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H48N7O5: 766.4 (M+H<+>); Pronađeno: 766.4 (M+H<+>).
Primer KB
[1407]
[1408] [1-(2-{5-[6-(4-{2-[1-(2-Metoksi-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: U 2-{5-[4-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-naftalen-2-il)-fenil]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (40 mg, 0.055 mmol) u MeOH (1 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (160 µL). Reakcija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u CH2Cl2i DMF (1 ml 4:1 rastvor) je dodata (R)-metoksi-fenil-sirćetna kiselina (13.7 mg, 0.083 mmol) i 2-etoksi-1-etoksikarbonil-1,2-dihidrohinolin (17 mg, 0.069 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je koncentrovana zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10-40% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije jedinjenje iz naslova (13.1 mg, 0.017 mmol, 31% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H50N7O5: 780.4 (M+H<+>); Pronađeno: 780.4 (M+H<+>).
Primer KC
[1409]
[1410] Trifluoro-Metansulfonska kiselina 8-trifluoroMetansulfoniloksi-6H-dibenzo[c,h]hromen-2-il estar: U suspenziju 6H-Dibenzo[c,h]hromen-2,8-diol (3.46 g, 13.1 mmol) u CH2Cl2na 0<C>je dodat piridin (2.65 mL, 32.8 mmol) praćeno sa anhidridom trifluorometansulfonske kiseline (4.85 mL, 28.8 mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature zatim sipana u H2O, Organska faza je sakupljena zatim isprana sa 1N HCl i slanim rastvorom. Nakon koncentracije, sirov materijal je ponovo kristalisao iz CH2Cl2/Heksani da se dobije jedinjenje iz naslova (4.07 g, 7.70 mmol, 59% prinos).<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.35 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.34 (s, 2H).
[1411] 2,8-Bis-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-6H-dibenzo[c,h]hromen:
Ratsvor Trifluoro-Metansulfonska kiselina 8-trifluoroMetansulfoniloksi-6H-dibenzo[c,h]hromen2-il estar (1.00 g, 1.9 mmol), bis(pinakolato)dibor (1.44 g, 5.7 mmol) i trietilamin (1.32 mL, 9.5 mmol) u 1,4-Dioksanima (20 mL) je degaziran sa gasom argona tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat PdCl2dppf (139 mg, 0.19 mmol) i zatim reakcija je zagrejana do 90° C preko noći. Reakcija je zaustavljena na otprilike 60% konverzije tako da je dodatni PdCl2dppf (139 mg, 0.19 mmol) i bis(pinakolato)dibor (0.500 g, 1.97 mmol) dodat i reakcija mešana 3 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, sirov materijal je prethodno apsorbovan na siliku zatim prečišćen silika gel hromatografijom (25-50% CH2Cl2/Heksani) da se dobije jedinjenje iz naslova [1.106 g, >100 % prinos usled malo bis(pinakolato)dibor nečistoće]. LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H35B2O5: 485.3 (M+H<+>); Pronađeno: 485.3 (M+H<+>).<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.28 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.84-7.81 (m, 3H), 7.72 (d, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.55 (d, 1H), 5.31 (s, 2H), 1.38 (s, 12H), 1.35 (s, 12H).
[1412] (1-{2-[5-(2-{2-[1-(karboksilna kiselina terc-butil estar)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karboksilna kiselina tercbutil estar: Rastvor 2,8-bis-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-6H-dibenzo[c,h]hromene (500 mg, 1.03 mmol), 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (979 mg, 3.09 mmol) i NaHCO3(3.8 ml 1N rastvor, 3.8 mmol) u DME (10 mL) i DMF (3 mL) je degaziran sa gasom argona tokom 20 minuta. U degaziran rastvor je dodat Pd(OAc)2(22 mg, 0.098 mmol) i PPh3(52 mg, 0.19 mmol) i zatim reakcija je zagrejana do 90° C preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je sipana u H2O zatim ekstrakovana sa EtOAc. Organska faza je zatim isprana sa slanim rastvorom. Prečišćavanje sirovog materijala silika gel hromatografijom (50-100% EtOAc/Heksani) dobilo se jedinjenje iz naslova [250 mg, 0.35 mmol, 35% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C41H47N6O5: 703.4 (M+H<+>); Pronađeno: 703.2 (M+H<+>).
[1413] (1-{2-[5-(2-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metilpropil)-karbaminska kiselina metil estar: U (1-{2-[5-(2-{2-[1-(karboksilna kiselina terc-butil estar)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin--1-karboksilna kiselina terc-butil estar (70 mg, 0.10 mmol) u MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (1 mL). Reakcija je mešana preko noći zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (44 µL, 0.40 mmol), HATU (46 mg, 0.12 mmol) i 2-metoksikarbonilamino-3-metil-buterna kiselina (26 mg, 0.15 mmol). Nakon mešanja 3h reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10-40% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije jedinjenje iz naslova (27 mg, 0.033 mmol, 33% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H53N8O7: 817.4 (M+H<+>); Pronađeno: 817.4 (M+H<+>).
Primer KD
[1414]
[1415] (2-{2-[5-(2-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-2-fenil-acetil)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-il}-2-okso-1-fenil-etil)-karbaminska kiselina metil estar: U (1-{2-[5-(2-{2-[1-(karboksilna kiselina terc-butil estar)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin--1-karboksilna kiselina terc-butil estar (60 mg, 0.85 mmol) u MeOH (0.5 mL) je dodat 4N HCl u dioksanima (0.5 mL). Reakcija je mešana 4h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u CH2Cl2(1 mL) je dodat K3PO4(90 mg, 0.42 mmol), HATU (80 mg, 0.21 mmol) i metoksikarbonilamino-fenil-sirćetna kiselina (45 mg, 0.21 mmol). Nakon mešanja 3h reakcija je filtrirana zatim koncentrovana. Prečišćavanje preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10-40% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) dalo je jedinjenje iz naslova (34 mg, 0.038 mmol, 45% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C51H49N8O7: 885.4 (M+H<+>); Pronađeno: 885.9 (M+H<+>).
Primer KE
[1416]
[1417] [2-(2-{5-[2-(2-{1-[2-metoksikarbonilamino-2-(tetrahidro-piran-4-il)-acetil]-pirolidin-2-il}-3H-imidazol-4-il)-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il]-1H-imidazol-2-il}-pirolidin-1-il)-2-okso-1-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-karbaminska kiselina metil estar: U (1-{2-[5-(2-{2-[1-(karboksilna kiselina terc-butil estar)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-6H-dibenzo[c,h]hromen-8-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin--1-karboksilna kiselina terc-butil estar (20 mg, 0.028 mmol) u MeOH (0.5 mL) je dodata 4N HCl u dioksanima (0.5 mL). Reakcija je mešana 4h zatim koncentrovana da se dobije HCl so sirovog amina. U sirov amin u DMF (1 mL) je dodat N-metilmorfolin (15 µL, 0.14 mmol), HATU (33 mg, 0.085 mmol) i metoksikarbonilamino-(tetrahidro-piran-4-il)-sirćetna kiselina (19 mg, 0.085 mmol). Nakon mešanja preko noći reakcija je kvenčovana sa mravljom kiselinom zatim prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10-40% MeCN-H2O; 0.1% modifikator mravlje kiseline) da se dobije jedinjenje iz naslova (15 mg, 0.017 mmol, 59% prinos). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H57N8O9: 901.4 (M+H<+>); Pronađeno: 901.4 (M+H<+>).
Primer KF
[1418]
[1419] 2-6-Dibromo-3,4-dihidro-2H-naftalen-1-on: 6-Bromo-3,4-dihidro-2H-naftalen-1-on (2.0 g) je rastvoren u etru (80 mL), i Br2(455 µl) je dodat na 0°C preko 30 min. Nakon razblaživanja sa etrom (80 mL), reakciona smeša je isprana sa 10% Na2SO3, zas. NaHCO3i slanim rastvorom. Nakon toga rastvarač je uklonjen, sirov materijal je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
[1420] pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-(6-bromo-1-okso-1,2,3,4-tetrahidro-naftalen-2-il) estar 1-terc-butil estar : Sirov 2-6-dibromo-3,4-dihidro-2H-naftalen-1-on i pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 1-terc-butil estar (3.15 g) su rastvoreni u MeCN (80 mL), i DIEA (2.55 mL) je dodat. Smeša je mešana na 65°C preko noći i razblažena sa etil acetatom. Smeša je isprana sa 1 N HCl. NaHCO3i slanim rastvorom. Nakon rastvarač je uklonjen, dobijeni materijal je podvrgnut silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 10 - 40 % etil acetata i Heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-(6-promo-1-okso-1,2,3,4-tetrahidro-naftalen-2-il) estar 1-terc-butil estar (1.54 g, 40 % preko 2 koraka).
[1421] 2-(7-Bromo-4,5-dihidro-1H-nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar : pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina 2-(6-bromo-1-okso-1,2,3,4-tetrahidro-naftalen-2-il) estar 1-terc-butil estar (1.54 g) i amonijum acetat (2.71 g) su suspendovani u toluenu (35 mL). Reakciona smeša je mešana na 110°C preko noći i uparen pod smanjenim pritiskom i dobijeni ostatak je stavljen u etil acetatu (100 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim natrijum bikarbonatom (1 x 150 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobijeno ulje je podvrgnuto silika gel hromatografiji korišćenjem efluenta od 60 -90 % etil acetata i Heksana. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 2-(7-bromo-4,5-dihidro-1H-nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (1.05 g, 71 %) kao bledo braon čvrsta supstanca. MS (ESI) mlz 418.1 [M H]<+>.
[1422] (1-{2-[5-(6-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiril)-pirolidin-2-il]-4,5-dihidro-1H-nafto[1,2-d]imidazol-7-il}-naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-il]-pirolidin-1-karbonil}-2-metil-propil)-karbaminska kiselina metil estar: Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa metodom koja je korišćena za [1-(6-{5-[6-(4-{2-[1-(2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiril)-4-(2-metoksi-etoksi)-pirolidin-2-il]-3H-imidazol-4-il}-fenil)-naftalen-2-il]-1H-imidazol-2-il}-5-aza-spiro[2.4]heptan-5-karbonil)-2-metil-propil]-karbaminska kiselina metil estar: MS (ESI) m/z 815.5 [M H]<+>.
BIOLOŠKI ESEJI
Efekat serumskih proteina na potentnost replikona
[1423] Testovi replikona se izvode u medijumu za normalne ćelijske kulture (DMEM 10%FBS) koji je je obogaćen sa fiziološkim koncentracijama humanog seruma albumina (40 mg/mL) ili αkiselim glikoproteinom (1 mg/mL). EC50s u prisustvu humanih serumskih proteina su upoređene sa EC50u normalnom medijumu da bi se odredila višestrukost promene u potentnosti.
[1424] Enzimska selektivnost: Inhibicija sisarskih proteaza koje uključuju svinjsku pankreasnu elastazu, humanu leukocitnu elastazu, proteazu 3, i katepsin D su izmerene pri Kmza odgovarajuće supstrate za svaki enzim. IC50za svaki enzim je upoređena sa IC50dobijenom sa NS31b proteazom da se izračuna selektivnost. Reprezentativna jedinjenja pronalaska su pokazala aktivnost.
[1425] MT-4 ćelijska citotoksičnost: MT4 ćelije su tretirane sa serijskim razblaženjima jedinjenja za period od 5 dana. Ćelijska vijabilnost je izmerena na kraju perioda tretiranja korišćenjem Promega CellTiter-Glo eseja i ne-linearna regresija je izvedena da se izračuna CC50.
[1426] Koncentracija jedinjenja povezana sa ćelijama pri EC50: Huh-luc kulture su inkubirane sa jedinjenjem pri koncentracijama jednakim EC50. U više vremenskih tačaka (0 - 72 sati), ćelije su isprane 2X sa hladnim medijumom i ekstrakovane sa 85% acetonitrila; uzorak medijuma na svakoj vremenskoj tački će takođe biti ekstrakovan. Ekstrakti ćelija i medijuma su analizirani pomoću LC/MS/MS da se odredi molarna koncentracija jedinjenja u svakoj frakciji. Reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska su takođe pokazala aktivnost.
[1427] Rastvorljivost i stabilnost: Rastvorljivost je određena uzimanjem alikvota od 10 mM DMSO štok (osnovnog) rastvora i pripremanjem jedinjenja u finalnoj koncentraciji od 100 µM u test rastvorima medijuma (PBS, pH 7.4 i 0.1 N HCl, pH 1.5) sa ukupnom DMSO koncentracijom od 1%. Rastvori test medijuma su inkubirani na sobnoj temperaturi sa šejkiranjem tokom 1 sata. Rastvori će zatim biti centrifugirani i oporavljeni supernatanti su tetsirani na HPLC/UV. Rastvorljivost će biti izračunata upoređivanjem količine jedinjenja detektovanog u definisanom test rastvoru sa količinom koja je detektovana u DMSO pri istoj koncentraciji. Stabilnost jedinjenja nakon 1 sata inkubacije sa PBS na 37°C će takođe biti određena.
[1428] Stabilnost u krioprezerviranim humanim, pasjim i pacovskim hepatocitima: Svako jedinjenje je inkubirano do 1 sata u suspenzijama hepatocita (100 µl, 80,000°ćelija po bunariću) na 37°C. Krioprezervirani hepatociti su rekonstituisani u medijumuza inkubaciju bez seruma. Suspenzija je prebačena u ploče sa 96 bunarića (50 µL/bunarić). Jedinjenja su razblažena do 2 µM u medijumu za inkubaciju i zatim su dodata u suspenzije hepatocita da se započne inkubacija. Uzorci su uzeti na 0, 10, 30 i 60 minuta nakon početka inkubacije u reakcija će biti kvenčovana sa smešom koja se sastoji od 0.3% mravlje kiseline u 90% acetonitrilu/10% vodi. Koncentracija jedinjenja u svakom uzorku je analizirana korišćenjem LC/MS/MS. Polu-život nestajanja jedinjenja u suspenziji hepatocita je određena prilagođavanjem podataka koncentracija-vreme sa monofaznom eksponencijalnom jednačinom. Podaci će takođe biti skalirani da bi predstavili unutrašnji hepatički klirens i/ili ukupni hepatički klirens.
[1429] Stabilnost u hepatičkoj S9 frakciji od čoveka, psa i pacova: Svako jedinjenje je inkubirano do 1 sata u S9 suspenziji (500 µl, 3 mg proteina/mL) na 37°C (n = 3). Jedinjenja su dodata u S9 suspensziju na početku inkubacije. Uzorci su uzeti na 0, 10, 30, i 60 minuta nakon tpočetka inkubacije. Koncentracija jedinjenja u svakom uzorku je analizirana korišćenjem LC/MS/MS. Polu-život nestajanja jedinjenja u suspenziji S9 je određena prilagođavanjem podataka koncentracija-vreme sa monofaznom eksponencijalnom jednačinom.
[1430] Caco-2 Permeabilnost: Jedinjenja su testirana preko ugovorene usluge (Absorption Systems, Exton, PA). Jedinjenja su obezbeđena na “slep” način. I prednja (A-to-B) i reverzna (B-to-A) permeablinost će biti izmerene. Caco-2 monoslojevi su gajeni do konfluentnosti u obloženim kolagenom, mikroporoznim, polikarbonatnim membranama u Costar TRANSWELL® pločama sa 12 bunarića. Jedinjenja su dozirana na apikalnoj strani za prednju permeabilnost (A-ka-B), i dozirana su na bazolateralnoj strani za reverznu permeabilnost (B-ka-A). Ćelije su inkubirane na 37°C sa 5% CO2u vlažnom inkubatoru. Na početku inkubacije i na 1h i 2 h nakon inkubacije, 200-µL alikvot je uzet iz prijemne komore i zamenjen sa svežim test puferom. Koncentracija jedinjenja u svakom uzorku je određena sa LC/MS/MS. Očigledna permeabilnost, Papp, je izračunata. Vezivanje proteina iz plazme:
[1431] Vezivanje proteina iz plazme je izmereno ravnotežnom dijalizom. Svako jedinjenje je stavljeno u blank plazmu u finalnoj koncentraciji od 2 µM. Takva plazma i fosfatni pufer je postavljen na obrnute strane sakupljenih ćelija za dijalizu, koje će zatim biti rotirane polako u vodenom kupatilu na 37°C. Na kraju inkubacije, određena je koncentracija jedinjenja u plazmi i fosfatnom puferu. Procenat nevezanog je izračunat korišćenjem sledeće jednačine:
[1432] Gde su Cfi Cbsu koncentracije slobodnog i vezanog određene kao post-dijalizne koncentracije pufera i plazme, redom.
CYP450 profilisanje:
[1433] Svako jedinjenje je inkubirano sa svakim od 5 rekombinantnih humanih CYP450 enzima, uključujući CYP1A2, CYP2C9, CYP3A4, CYP2D6 i CYP2C19 u prisustvu i odsustvu NADPH. Serijski uzorci će biti uzeti iz inkubacione smeše na početku inkubacije i na 5, 15, 30, 45 i 60 minuta nakon početka inkubacije. Koncentracija jedinjenja u inkubacionoj smeši je određena pomoću LC/MS/MS. Procenat jedinjenja koje je preostalo nakon inkubacije na svakoj tački vremena je izračunato poređenjem sa uzorkovanjem na početku inkubacije.
Stabililnost u plazmi pacova, psa, majmuna i čoveka:
[1434] Jedinjenja će biti inkubirana do 2 sata u plazmi (pacova, psa, majmuna, ili čoveka) na 37 C. Jedinjenja su dodata u plazmu pri finalnim koncentracijama od 1 i 10 µg/mL. Alikvoti su uzeti na 0, 5, 15, 30, 60, i 120 minuta nakon dodavanja jedinjenja. Koncentracije jedinjenja i glavni metaboliti na svakoj tački vremena su izmereni pomoću LC/MS/MS.
Evaluacija anti-HCV aktivnosti zasnovane na ćeliji:
[1435] Antiviralna potentnost (EC50) je određena korišćenjem reporterskog eseja HCV replikona zasnovanog na Renilla luciferazi (RLuc). Da se ovaj esej izvede, HCV 1b RLuc ćelije (koji štiti replikon dicistronskog genotipa 1b Con1 koji kodira RLuc reporter), ili HCV 1a RLuc ćelije (koji štiti replikon dicistronskog genotipa 1a H77 koji kodira RLuc reporter), su stavljene u ploče sa 384 bunarića. Jedinjenja su ponovo suspendovana u DMSO u koncentraciji od 10 mM i serijski razblažena u DMSO korišćenjem instrumenta za automatsko pipetiranje. Serijski razblažena jedinjenja su pomešana sa medijumom za ćelijske kulture i dodata u zasađene ćelije- DMSO je korišćen kao negativna (rastvarač) kontrola, i proteazni inhibitor ITMN-191 je uključen pri koncentraciji > 100 x EC50kao pozitivna kontrola. A72 sata kasnije, ćelije su lizirane i aktivnost Renilla luciferaze je kvantifikovana kao što je preporučeno od strane proizvođača (Promega-Madison, WI). Ne-linearna regresija je izvedena da se izračunaju EC50vrednosti.
[1436] Tipična jedinjenja pronalaska mogu inhibirati više HCV genotipova. Na primer, jedinjenja predmetnog pronalaska su aktivna protiv više genotipova HCV odabranih od 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 4a, i 5a.
[1437] Biološki podaci (antiviralna potentnost [EC50] je određena korišćenjem reporterskog eseja za HCV replikon baziranog na Renilla luciferazi (RLuc) - HCV 1b RLuc) za reprezentativna jedinjenja pronalaska su obezbeđeni u tabeli koja sledi. Ova jedinjenja mogu biti pripremljena korišćenjem procedura sličnih onima koje su opisane iznad.

Claims (18)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje sa formulom:
    gde: V je alkil; L je benzimidazolil; M je 5-očlani heteroaril prsten; A<15>je:
    svaki H<14>je nezavisno fuzionisani nezasićeni, delimično nezasićeni ili zasićeni triciklični karbociklus koji je po izboru susptituisan sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od R<A1>i R<A3>; i svako X<A>je nezavisno O, NR, SO, SO2C(=O), NRC(=O), C(=O)NR, CR=CR, NRC(=O)NR, alenil, alkinil, ili je odsutno; svako R je nezavisno odabrano od H ili alkila; svako R<A1>je nezavisno odabrano od cijano, nitro, SOR<4>, SO2R<4>, -alkilSO2R<4>, haloalkoksi, cijanoalkila, NR<4>SO2R<4>, cikloalkila, (halo)cikloalkila, heterociklusa, (cikloalkil)alkila, (heterociklus)alkila, gde je alkil, heterociklus i cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više halo; svako R<A3>je nezavisno odabrano od alkoksi, alkoksialkila, alkoksikarbonila, alkila, arilalkoksikarbonila, karboksi, formila, halo, haloalkila, hidroksi, hidroksialkila, -NR<a>R<b>, (NR<a>R<b>)alkila, i (NR<a>R<b>)karbonila; R<a>i R<b>su svaki neazvisno odabrani od grupe koja se sastoji od vodonika, alkenila, alkila, alkilkarbonila, arila, arilalkila, arilalkilkarbonila, cikloalkila, cikloalkilalkila, heterociklila, i heterociklilalkila; svako R<4>je nezavisno odabrano od H, alkila, haloalkila, arila, i arilalkila; i svako P je nezavisno odabrano od:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  3. 3. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  4. 4. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde je P odabrano od:
  5. 5. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde P je
  6. 6. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde P je
    po izboru supstituisano sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od R<P6>i R<P11>; svako R<P6>je nezavisno odabrano od alkoksi, alkila, arila, halo, haloalkila, hidroksi, i -NR<Pa>R<Pb>, gde alkil može po izboru da formira fuzionisani tročlani do šestočlani prsten sa susednim atomom ugljenika, gde je tročlani do šestočlani prsten po izboru supstituisan sa jednom ili dve alkil grupe; R<Pa>i R<Pb>su nezavisno H, alkil, aril, ili arilalkil; ili R<Pa>i R<Pb>uzeti zajedno sa atomom za koji su vezani formiraju heterociklus; svako R<P11>je nezavisno odabrano od cijano, alkilsulfonil, arilsulfonil, NR<h>R<h>sulfonil, heterociklilsulfonil, heteroarilsulfonil, haloalkoksi, alkoksialkiloksi, haloalkoksialkiloksi, cikloalkioksialkiloksi, ariloksialkiloksi, heteroariloksialkiloksi, heterociklooksialkiloksi, NR<h>R<h>alkiloksi, cijanoalkoksi, cijanocikloalkiloksi, cikloalkiloksi, okso, heterociklil, -NR<hh>R<h>, (NR<h>R<h>)alkil, (NR<hh>R<h>)karbonil, gde je svako R<h>nezavisno -H, alkil, alkoksiamino, aril, arilalkil, heterociklus, heterociklioksi, alkenil, alkeniloksi, alkinil, alkoksialkil, haloalkil, cijanoalkil, haloalkoksialkil, aminoalkil, alkilaminoalkil, dialkilaminoalkil, sulfonilalkil; i kada su dve R<h>grupe prisutne onda se one mogu uzeti zajedno sa atomima za koje su vezane da formiraju 4-15-očlani heterociklični prsten; gde svako R<hh>je nezavisno aril, arilalkil, heterociklus, heterociklioksi, alkeniloksi, alkinil, alkoksialkil, haloalkil, cijanoalkil, haloalkoksialkil, aminoalkil, alkilaminoalkil, dialkilaminoalkil, sulfonilalkil, NR<h>R<h>sulfonil, heteroarilsulfonil, i -S(=O)2R<h>, -C(=O)R<h>, -C(=O)NR<h>R<h>.
  7. 7. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  8. 8. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  9. 9. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  11. 11. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  12. 12. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  14. 14. Jedinjenje patentnog zahteva 1 to jest:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  15. 15. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-14 gde svako X<A>je odsutno.
  16. 16. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-14 gde A<15>je odabrano od:
  17. 17. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-14 gde A<15>je odabrano od:
  18. 18. Jedinjenje bilo kog od patentnih zahteva 1-16 gde svako V je:
RS20171281A 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja RS56654B8 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17797209P 2009-05-13 2009-05-13
US22474509P 2009-07-10 2009-07-10
US23876009P 2009-09-01 2009-09-01
EP15180635.3A EP3002281B1 (en) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviral compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RS56654B1 true RS56654B1 (sr) 2018-03-30
RS56654B8 RS56654B8 (sr) 2021-06-30

Family

ID=42645241

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150758A RS54386B8 (sr) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja
RS20171281A RS56654B8 (sr) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja
RS20160824A RS55249B8 (sr) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150758A RS54386B8 (sr) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160824A RS55249B8 (sr) 2009-05-13 2010-05-12 Antiviralna jedinjenja

Country Status (40)

Country Link
US (8) US8088368B2 (sr)
EP (6) EP2857394A1 (sr)
JP (7) JP5582662B2 (sr)
KR (8) KR101546119B1 (sr)
CN (8) CN102596936B (sr)
AP (2) AP2016008993A0 (sr)
AR (1) AR076765A1 (sr)
AU (1) AU2010249043B2 (sr)
BR (3) BR122014013631B8 (sr)
CA (2) CA2886322A1 (sr)
CL (1) CL2011002825A1 (sr)
CO (1) CO6470842A2 (sr)
CY (4) CY1116942T1 (sr)
DK (3) DK3002281T3 (sr)
EA (5) EA021974B1 (sr)
EC (1) ECSP11011517A (sr)
ES (4) ES2758726T3 (sr)
FR (1) FR16C0005I2 (sr)
HK (1) HK1253517B (sr)
HR (3) HRP20151000T8 (sr)
HU (4) HUE030465T2 (sr)
IL (5) IL216254A (sr)
LT (3) LT3002281T (sr)
ME (3) ME02536B (sr)
MX (6) MX360800B (sr)
NL (1) NL300796I2 (sr)
NO (3) NO3002281T3 (sr)
NZ (3) NZ596444A (sr)
PE (2) PE20120509A1 (sr)
PL (4) PL2873665T3 (sr)
PT (4) PT2873665T (sr)
RS (3) RS54386B8 (sr)
SG (2) SG176015A1 (sr)
SI (4) SI3309157T1 (sr)
SM (3) SMT201700570T1 (sr)
TW (7) TWI465444B (sr)
UA (1) UA121454C2 (sr)
UY (1) UY32629A (sr)
WO (1) WO2010132601A1 (sr)
ZA (1) ZA201108436B (sr)

Families Citing this family (209)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL2604620T5 (pl) 2003-05-30 2024-10-14 Gilead Pharmasset Llc Zmodyfikowane fluorowane analogi nukleozydu
KR20150089099A (ko) * 2007-07-05 2015-08-04 어레이 바이오파마 인크. Ａｋｔ 단백질 키나제 억제제로서의 피리미딜 시클로펜탄
KR20110098779A (ko) * 2008-12-03 2011-09-01 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ5ａ의 억제제
EP2682393A1 (en) 2008-12-03 2014-01-08 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of HCV NS5A comprising a bicyclic core.
CA2740195A1 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
RU2505540C2 (ru) 2008-12-23 2014-01-27 Эббви Инк. Антивирусные соединения
US8314135B2 (en) 2009-02-09 2012-11-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole antivirals
TWI438200B (zh) * 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
US8394968B2 (en) 2009-02-17 2013-03-12 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8188132B2 (en) 2009-02-17 2012-05-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole derivatives
US8637561B2 (en) * 2009-02-17 2014-01-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked diimidazole derivatives
US8242156B2 (en) 2009-02-17 2012-08-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole derivatives
WO2010096777A1 (en) * 2009-02-23 2010-08-26 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
US8673954B2 (en) 2009-02-27 2014-03-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Benzimidazole derivatives
US9765087B2 (en) 2009-02-27 2017-09-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Benzimidazole derivatives
US8101643B2 (en) * 2009-02-27 2012-01-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Benzimidazole derivatives
CA2756255A1 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic hcv inhibitors
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW201038559A (en) * 2009-04-09 2010-11-01 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C virus inhibitors
US8143414B2 (en) 2009-04-13 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2541571C2 (ru) 2009-04-15 2015-02-20 Эббви Инк. Противовирусные соединения
RU2528231C2 (ru) * 2009-04-24 2014-09-10 Тиботек Фармасьютикалз Диариловые эфиры
US9139569B2 (en) * 2009-05-12 2015-09-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic aryl compounds useful for the treatment of viral diseases
MX360800B (es) 2009-05-13 2018-11-16 Gilead Pharmasset Llc Star Compuestos antivirales.
US8980920B2 (en) * 2009-05-29 2015-03-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds of three linked aryl moieties to treat diseases such as hepatitis C
US8211928B2 (en) 2009-05-29 2012-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2762885A1 (en) * 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
US8138215B2 (en) * 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8937150B2 (en) 2009-06-11 2015-01-20 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
AR077060A1 (es) * 2009-06-11 2011-07-27 Abbott Lab Compuestos antivirales
US9394279B2 (en) 2009-06-11 2016-07-19 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
US8716454B2 (en) 2009-06-11 2014-05-06 Abbvie Inc. Solid compositions
US8609648B2 (en) * 2009-07-02 2013-12-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
MX2012000695A (es) 2009-07-16 2012-06-12 Vertex Pharma Análogos de bencimidazol para el tratamiento o la prevención de infecciones por flavivirus.
WO2011015658A1 (en) * 2009-08-07 2011-02-10 Tibotec Pharmaceuticals Bis-benzimidazole derivatives as hepatitis c virus inhibitors
WO2011015657A1 (en) * 2009-08-07 2011-02-10 Tibotec Pharmaceuticals Phenyl ethynyl derivatives as hepatitis c virus inhibitors
CN102480971B (zh) 2009-09-04 2014-11-26 杨森制药公司 化合物
EP2475254A4 (en) * 2009-09-11 2013-05-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
US8815928B2 (en) * 2009-09-11 2014-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
EP2475256A4 (en) * 2009-09-11 2013-06-05 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
US8759332B2 (en) * 2009-09-11 2014-06-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8927709B2 (en) * 2009-09-11 2015-01-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8703938B2 (en) * 2009-09-11 2014-04-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8822700B2 (en) * 2009-09-11 2014-09-02 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
UA108211C2 (uk) 2009-11-04 2015-04-10 Янссен Рід Айрленд Бензімідазолімідазольні похідні
US20110274648A1 (en) * 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
TWI429645B (en) * 2009-12-04 2014-03-11 Proline derivatives
US8653070B2 (en) 2009-12-14 2014-02-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102791687B (zh) * 2009-12-18 2015-02-11 北京凯因科技股份有限公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂
KR20120118008A (ko) * 2009-12-18 2012-10-25 아이데닉스 파마슈티칼스, 인코포레이티드 5,5-융합 아릴렌 또는 헤테로아릴렌 간염 ｃ 바이러스 억제제
WO2011079327A1 (en) * 2009-12-24 2011-06-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP2013518060A (ja) 2010-01-25 2013-05-20 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
US8933110B2 (en) 2010-01-25 2015-01-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
EP2528926A4 (en) * 2010-01-28 2013-06-19 Boehringer Ingelheim Int HEPATITIS C INHIBITOR COMPOUNDS
US8623814B2 (en) * 2010-02-23 2014-01-07 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Antiviral agents
US8178531B2 (en) * 2010-02-23 2012-05-15 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Antiviral agents
AU2010347272A1 (en) * 2010-03-04 2012-09-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Combination pharmaceutical agents as inhibitors of HCV replication
WO2011119860A1 (en) * 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
CA2794145A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
WO2011127350A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
US9125904B1 (en) 2010-05-11 2015-09-08 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Biphenyl imidazoles and related compounds useful for treating HCV infections
EP2575475A4 (en) * 2010-05-28 2013-11-27 Presidio Pharmaceuticals Inc HCV NS5A INHIBITORS
WO2011153396A1 (en) 2010-06-04 2011-12-08 Enanta Pharmaceuticals, Inc Hepatitis c virus inhibitors
AR081848A1 (es) * 2010-06-09 2012-10-24 Presidio Pharmaceuticals Inc Inhibidores de la proteina ns5a del vhc
NZ605440A (en) 2010-06-10 2014-05-30 Abbvie Bahamas Ltd Solid compositions comprising an hcv inhibitor
US20120195857A1 (en) * 2010-08-12 2012-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
EP2603080A4 (en) 2010-08-12 2014-01-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
AR082619A1 (es) * 2010-08-13 2012-12-19 Hoffmann La Roche Inhibidores del virus de la hepatitis c
EP2616461A4 (en) 2010-08-26 2014-03-26 Rfs Pharma Llc POTENTIVE AND SELECTIVE INHIBITORS OF HEPATITIS C VIRUS
US8999967B2 (en) 2010-09-29 2015-04-07 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic fused ring inhibitors of hepatitis C
TWI640526B (zh) * 2010-11-17 2018-11-11 基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物
RU2452735C1 (ru) * 2010-11-30 2012-06-10 Александр Васильевич Иващенко Замещенные азолы, противовирусный активный компонент, фармацевтическая композиция, способ получения и применения
WO2012083043A1 (en) * 2010-12-15 2012-06-21 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
EP2651925A4 (en) * 2010-12-15 2014-06-18 Abbvie Inc ANTI-VIRAL COMPOUNDS
EP2651927A4 (en) * 2010-12-15 2014-06-04 Abbvie Inc ANTIVIRAL CONNECTIONS
TW201306841A (zh) * 2010-12-20 2013-02-16 Gilead Sciences Inc 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
WO2012087976A2 (en) * 2010-12-21 2012-06-28 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
US8552047B2 (en) 2011-02-07 2013-10-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP2012188400A (ja) * 2011-03-11 2012-10-04 Tosoh Corp ジチエノベンゾジチオフェンの製造方法
WO2012122716A1 (en) 2011-03-17 2012-09-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic xanthene derivatives and methods of use thereof for treatment of viral diseases
US8835456B1 (en) 2011-03-18 2014-09-16 Achillion Pharmaceuticals, Inc. NS5A inhibitors useful for treating HCV
US20120252721A1 (en) * 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
US9546160B2 (en) * 2011-05-12 2017-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
WO2012158861A2 (en) 2011-05-18 2012-11-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Processes for the preparation of 5-azaspiro[2.4]heptane-6-carboxylic acid and its derivatives
KR101931311B1 (ko) 2011-05-27 2018-12-20 아칠리온 파르마세우티칼스 인코포레이티드 Ｈｃｖ 감염 치료에 유용한 치환된 앨리팬, 시클로팬, 헤테라팬, 헤테로팬, 헤테로-헤테라팬 및 메탈로센
TWI482766B (zh) 2011-07-09 2015-05-01 Sunshine Lake Pharma Co Ltd As a spiro compound for hepatitis C virus inhibitors
PH12014500312A1 (en) 2011-08-08 2014-03-31 Lupin Ltd Imidazole derivatives as antiviral agents
WO2013025975A1 (en) * 2011-08-17 2013-02-21 Glaxosmithkline Llc Combination treatments for hepatitis c
HK1198869A1 (en) * 2011-08-24 2015-06-19 Glaxosmithkline Llc Combination treatments for hepatitis c
WO2013030750A1 (en) 2011-09-01 2013-03-07 Lupin Limited Antiviral compounds
SG11201400664WA (en) * 2011-09-16 2014-04-28 Gilead Pharmassett Llc Methods for treating hcv
CA2811250C (en) * 2011-10-21 2015-08-11 Abbvie Inc. Methods for treating hcv
SE1450019A1 (sv) * 2011-10-21 2014-01-10 Abbvie Inc Förfaranden för att behandla HCV innefattande minst två direktverkande antivirala agenser, ribavirin men inte interferon
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
TWI577672B (zh) 2011-11-03 2017-04-11 施萬生物製藥研發Ｉｐ有限責任公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
DK2635588T3 (en) 2011-11-16 2015-09-07 Gilead Pharmasset Llc Dehydrated imidazolylimidazoler as anti-viral compounds
WO2013098313A1 (en) 2011-12-28 2013-07-04 Janssen R&D Ireland Hetero-bicyclic derivatives as hcv inhibitors
HK1201186A1 (en) * 2011-12-29 2015-08-28 Abbvie Inc. Solid compositions comprising an hcv inhibitor
US9034832B2 (en) 2011-12-29 2015-05-19 Abbvie Inc. Solid compositions
US9326973B2 (en) * 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
NZ628515A (en) 2012-02-10 2016-06-24 Lupin Ltd Antiviral compounds with a dibenzooxaheterocycle moiety
MX2014009850A (es) * 2012-02-14 2015-03-10 Univ Georgia Spiro [2.4] heptanos para aplicaciones relacionadas con el tratamiento de infecciones de flaviviridae.
ITMI20120424A1 (it) 2012-03-19 2013-09-20 Rottapharm Spa Composti chimici
PL2850075T3 (pl) 2012-04-25 2017-08-31 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Związki piperazyno-piperydyny jako inhibitory wirusa zapalenia wątroby typu c
JP6069492B2 (ja) 2012-04-25 2017-02-01 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
US20130309196A1 (en) * 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9079887B2 (en) * 2012-05-16 2015-07-14 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9056860B2 (en) * 2012-06-05 2015-06-16 Gilead Pharmasset Llc Synthesis of antiviral compound
US8969588B2 (en) * 2012-06-05 2015-03-03 Gilead Pharmasset Llc Solid forms of an antiviral compound
TWI610916B (zh) * 2012-08-03 2018-01-11 廣東東陽光藥業有限公司 作爲丙型肝炎抑制劑的橋環化合物及其在藥物中的應用
TW201412709A (zh) * 2012-09-28 2014-04-01 Sunshine Lake Pharma Co Ltd 作為丙型肝炎抑制劑的螺環化合物及其在藥物中的應用
WO2014082380A1 (en) 2012-11-29 2014-06-05 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Fused ring compounds as hepatitis c virus inhibitors, pharmaceutical compositions and uses thereof
TWI585082B (zh) 2012-11-29 2017-06-01 廣東東陽光藥業有限公司 作爲丙型肝炎抑制劑的螺環化合物、藥物組合物及它們的用途
CN103848819B (zh) * 2012-11-29 2017-04-12 广东东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物、药物组合物及它们在药物中的应用
CN103880823B (zh) * 2012-12-21 2017-12-05 广东东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物及其在药物中的应用
US20140212491A1 (en) 2013-01-31 2014-07-31 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
RU2518369C1 (ru) * 2013-02-07 2014-06-10 Общество с ограниченной ответственностью "Интеллектуальный Диалог" Алкил [2-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-метоксикарбониламино-ацетил)-пирролидин-2-ил]-3н-имидазол-4-ил}-фенил)-бута-1,3-диинил]-1н-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-ил)-2-оксо-этил]-карбамат, фармацевтическая композиция, лекарственное средство, способ лечения вирусных заболеваний
RU2507201C1 (ru) * 2013-02-07 2014-02-20 Александр Васильевич Иващенко Алкил [(s)-1-((s)-2-{5-[4-(4-{2-[(s)-1-((s)-2-метоксикарбониламино-3-метил-бутирил)-пирролидин-2-ил]-3н-имидазол-4-ил}-бута-1,3-диинил)-фенил]-1н-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-карбонил)-2-метил-пропил]-карбамат нафталин-1,5-дисульфонат, фармацевтическая композиция, лекарственное средство, способ лечения вирусных заболеваний
TW201439060A (zh) * 2013-02-27 2014-10-16 Sunshine Lake Pharma Co Ltd 作爲丙型肝炎抑制劑的橋環化合物及其藥物組合物和用途
US11484534B2 (en) 2013-03-14 2022-11-01 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
WO2014197400A1 (en) 2013-06-04 2014-12-11 Gilead Pharmasset Llc Preventing and treating recurrence of hcv infection after liver transplant
CN104230946B (zh) * 2013-06-06 2017-03-08 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的化合物、药物组合物及其应用
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US9775831B2 (en) 2013-07-17 2017-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising biphenyl derivatives for use in the treatment of HCV
EP3038601B1 (en) 2013-08-27 2020-04-08 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
CN104418785A (zh) * 2013-09-05 2015-03-18 浙江九洲药业股份有限公司 一种药物中间体的制备方法
EP3046924A1 (en) 2013-09-20 2016-07-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
CN104610272B (zh) * 2013-11-05 2017-03-29 上海唐润医药科技有限公司 环状黄酮或异黄酮类化合物及其用途
KR101561964B1 (ko) 2013-11-15 2015-10-20 한국과학기술연구원 옥사졸리디논 화합물 및 이를 포함하는 c형 간염 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2015084741A2 (en) 2013-12-02 2015-06-11 Gilead Pharmasset Llc Methods of treating hepatitis c virus infection in subjects with cirrhosis
WO2015096674A1 (zh) * 2013-12-23 2015-07-02 南京圣和药业股份有限公司 丙型肝炎病毒抑制剂及其应用
TW201609785A (zh) 2013-12-23 2016-03-16 吉李德製藥公司 固體型之抗病毒化合物
WO2015101215A1 (zh) * 2013-12-31 2015-07-09 南京圣和药业股份有限公司 9,9,10,10-四氟-9,10二氢菲类丙型肝炎病毒抑制剂及其应用
EP3089757A1 (en) 2014-01-03 2016-11-09 AbbVie Inc. Solid antiviral dosage forms
WO2015110048A1 (en) * 2014-01-23 2015-07-30 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Bridged ring compounds as hepatitis c virus inhibitors, pharmaceutical compositions and uses thereof
CN104860931A (zh) * 2014-02-21 2015-08-26 常州寅盛药业有限公司 丙肝病毒抑制剂及其制药用途
CN107954997A (zh) * 2014-02-21 2018-04-24 常州寅盛药业有限公司 作为丙肝病毒抑制剂的联环化合物
WO2015184644A1 (zh) * 2014-06-06 2015-12-10 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的化合物、药物组合物及其应用
CN104140417B (zh) * 2014-06-11 2016-04-06 苏州景泓生物技术有限公司 合成gs5885用的中间体的先期化合物的合成方法
TWI721947B (zh) 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
CN105524049B (zh) * 2014-09-28 2018-11-06 正大天晴药业集团股份有限公司 氘代的丙型肝炎病毒ns5a蛋白抑制剂
CN104513147B (zh) * 2014-11-20 2016-05-11 上海众强药业有限公司 芴乙酮衍生物的制备方法
TWI675029B (zh) * 2014-12-16 2019-10-21 大陸商廣東東陽光藥業有限公司 作為丙型肝炎抑制劑的橋環化合物及其製備方法
US20180009790A1 (en) * 2014-12-24 2018-01-11 Prasad Raju Vnkv Vetukuri An improved process for the preparation of hcv inhibitor
CN104530016A (zh) * 2014-12-25 2015-04-22 上海泓博智源医药技术有限公司 一种雷迪帕韦的制备方法及其中间体
US20190022116A1 (en) 2014-12-26 2019-01-24 Emory University N4-Hydroxycytidine and Derivatives and Anti-Viral Uses Related Thereto
CN107427495A (zh) 2015-02-13 2017-12-01 桑多斯股份公司 包含雷迪帕韦和索非布韦的药物组合物
CN105985355B (zh) * 2015-03-01 2020-05-05 南京圣和药业股份有限公司 稠合三环类肝炎病毒抑制剂及其应用
EP3722297A1 (en) 2015-03-04 2020-10-14 Gilead Sciences, Inc. Toll-like receptor modulating 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine compounds
WO2016145269A1 (en) 2015-03-12 2016-09-15 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Solid state forms ledipasvir and processes for preparation of ledipasvir
CN104829599B (zh) * 2015-03-17 2017-06-09 上海众强药业有限公司 雷迪帕韦及其衍生物的制备方法及用于制备雷迪帕韦的中间体化合物
US20160375017A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Abbvie Inc. Solid Pharmaceutical Compositions for Treating HCV
CN105017228A (zh) * 2015-07-03 2015-11-04 上海众强药业有限公司 一种雷迪帕韦中间体单硫酸盐、其晶型及其制备方法
WO2017019175A1 (en) 2015-07-24 2017-02-02 Newlink Genetics Corporation Salts and prodrugs of 1-methyl-d-tryptophan
US10617675B2 (en) 2015-08-06 2020-04-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR101919194B1 (ko) * 2015-09-15 2018-11-15 주식회사 엘지화학 헤테로고리 화합물 및 이를 포함하는 유기 발광 소자
CN105294713A (zh) * 2015-10-09 2016-02-03 重庆康施恩化工有限公司 Velpatasvir中间体及其制备方法
WO2017072596A1 (en) * 2015-10-26 2017-05-04 Optimus Drugs (P) Ltd An improved process for the preparation of ledipasvir
WO2017072714A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Lupin Limited Stable ledipasvir premix and process of preparation thereof
WO2017076201A1 (zh) * 2015-11-06 2017-05-11 江苏豪森药业集团有限公司 Hcv抑制剂、其制备方法与应用
CN106117187B (zh) * 2016-01-12 2019-01-01 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种丙型肝炎病毒抑制剂、药物组合物及其应用
WO2017134548A1 (en) 2016-02-01 2017-08-10 Lupin Limited Process for the preparation of ledipasvir and intermediates thereof
WO2017145028A1 (en) * 2016-02-26 2017-08-31 Glenmark Pharmaceuticals Limited Process for preparation of ledipasvir
WO2017184670A2 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating zika virus infections
EP3448392A4 (en) 2016-04-28 2020-01-15 Emory University ALKYNOUS THERAPEUTIC NUCLEOTIDE AND NUCLEOSIDE COMPOSITIONS AND RELATED APPLICATIONS
CN109790143A (zh) 2016-05-10 2019-05-21 C4医药公司 用于靶蛋白降解的胺连接的c3-戊二酰亚胺降解决定子体
EP4483875A3 (en) 2016-05-10 2025-04-02 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
CN109562107A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的杂环降解决定子体
EP3455218A4 (en) 2016-05-10 2019-12-18 C4 Therapeutics, Inc. C3 CARBON-BASED GLUTARIMIDE DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
WO2017195147A1 (en) 2016-05-12 2017-11-16 Lupin Limited Process for the preparation of ledipasvir and intermediates thereof
AU2017271990B2 (en) 2016-05-27 2019-12-19 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating Hepatitis B virus infections using NS5A, NS5B or NS3 inhibitors
BR102017011025A2 (pt) 2016-06-02 2017-12-19 Gilead Pharmasset Llc Formulation of combination of three antiviral compounds
CN107663196A (zh) * 2016-07-27 2018-02-06 广东东阳光药业有限公司 制备化合物的方法
WO2018035410A1 (en) * 2016-08-19 2018-02-22 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Compositions and methods of treatment using expanded-size dna analogs
PT3507276T (pt) 2016-09-02 2022-01-11 Gilead Sciences Inc Compostos moduladores do recetor de tipo toll
EP3507288B1 (en) 2016-09-02 2020-08-26 Gilead Sciences, Inc. 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine derivaties as toll like receptor modulators
JP2018095561A (ja) * 2016-12-08 2018-06-21 金剛化学株式会社 ジフェニルアゼチジン誘導体の製造方法
CN106632275B (zh) * 2016-12-20 2018-03-06 上海同昌生物医药科技有限公司 一种雷迪帕韦的制备方法及制备雷迪帕韦的中间体
RU2650610C1 (ru) 2017-02-28 2018-04-16 Васильевич Иващенко Александр Противовирусная композиция и способ ее применения
US10392370B2 (en) 2017-03-13 2019-08-27 Optimus Drugs Pvt Ltd Process for the preparation of Daclatasvir dihydrochloride and its intermediates
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
JP2020519647A (ja) 2017-05-12 2020-07-02 マヴァロン・セラピューティクス・リミテッド グループｉｉ代謝型グルタミン酸受容体のアロステリックモジュレーターとしての置換複素環式化合物
CN118440096A (zh) 2017-06-20 2024-08-06 C4医药公司 用于蛋白降解的n/o-连接的降解决定子和降解决定子体
DK3706762T3 (da) 2017-12-07 2024-12-16 Univ Emory N4-hydroxycytidin og derivater og antivirale anvendelser relateret dertil
CR20200347A (es) 2018-02-13 2020-09-23 Gilead Sciences Inc Inhibidores pd-1/pd-l1
KR102591947B1 (ko) 2018-04-19 2023-10-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
WO2019222146A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Urolithin a and derivatives thereof for use in therapy
PT3820572T (pt) 2018-07-13 2023-11-10 Gilead Sciences Inc Inibidores pd-1/pd-l1
JP7158577B2 (ja) 2018-10-24 2022-10-21 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤
WO2020219808A1 (en) * 2019-04-25 2020-10-29 Beta Pharma, Inc. Dicarbamate inhibitors of ns5a for treatment of hepatitis c virus infections and related diseases
CA3140708A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Helen Horton Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and pyridopyrimidine derivatives
US20230148184A1 (en) * 2020-02-28 2023-05-11 Remix Therapeutics Inc. Compounds and methods for modulating splicing
WO2021209563A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
EP4079748A1 (en) 2021-04-23 2022-10-26 Insusense ApS Modulators of sortilin activity
EP4089102A1 (en) 2021-05-14 2022-11-16 Insusense ApS Modulators of sortilin activity
WO2022246109A1 (en) 2021-05-21 2022-11-24 Gilead Sciences, Inc. Pentacyclic derivatives as zika virus inhibitors
JP7723119B2 (ja) * 2021-05-21 2025-08-13 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジカウイルス感染症の治療のための四環系化合物
IL309732A (en) 2021-07-09 2024-02-01 Aligos Therapeutics Inc Antiviral compounds
WO2023043816A1 (en) * 2021-09-17 2023-03-23 Aligos Therapeutics, Inc. Anti-viral compounds for treating coronavirus, picornavirus, and norovirus infections
WO2023154528A1 (en) * 2022-02-11 2023-08-17 Wave Life Sciences Ltd. Stereoselective technologies for chiral compounds
CN117567414B (zh) * 2023-10-13 2026-01-23 濮阳惠成电子材料股份有限公司 一种光电材料中间体1-溴二苯并呋喃的合成方法
CN117224539A (zh) * 2023-10-20 2023-12-15 南京正济医药研究有限公司 苯并咪唑类化合物在制备预防或治疗hpv感染的药物中的应用

Family Cites Families (93)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816570A (en) 1982-11-30 1989-03-28 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective groups
US4968788A (en) 1986-04-04 1990-11-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective gruops
ATE131825T1 (de) 1990-06-13 1996-01-15 Arnold Glazier Phosphorylierte prodrugs
EP0481214B1 (en) 1990-09-14 1998-06-24 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
AP2461A (en) 2004-07-16 2012-09-14 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
US7323447B2 (en) * 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8143288B2 (en) * 2005-06-06 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
US7759495B2 (en) 2006-08-11 2010-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7659270B2 (en) * 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8303944B2 (en) 2006-08-11 2012-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US7741347B2 (en) 2007-05-17 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008156094A1 (ja) 2007-06-19 2008-12-24 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. ピリダジノン誘導体及びそれらを有効成分とするｐｄｅ阻害剤
US8629171B2 (en) * 2007-08-08 2014-01-14 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline form of methyl ((1S)-1-((25)-2-(5-(4'-(2-((25)-1((2S)-2-((methoxycarbonyl)amino)-3-methylbutanoyl)-2-pyrrolidinyl)-1H-imidazol-2-yl)-1-pyrrolidinyl)carbonyl)-2-methylpropyl)carbamate dihydrochloride salt
US7728027B2 (en) 2007-08-08 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Process for synthesizing compounds useful for treating hepatitis C
WO2009102318A1 (en) 2008-02-12 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US7704992B2 (en) * 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
BRPI0822323A2 (pt) 2008-02-13 2015-06-16 Bristol Myers Squibb Co Imidazolil bifenil imidazóis como inibidores do vírus da hepatite c
US8147818B2 (en) 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
GB2457659A (en) 2008-02-19 2009-08-26 Malcolm Mulheron Foldable meal tray
WO2010004843A1 (ja) 2008-07-08 2010-01-14 Ntn株式会社 減速装置
MX2011000060A (es) 2008-07-10 2011-02-22 Prosidion Ltd Agonistas del receptor acoplado a la proteina g piperidinilo.
US7906655B2 (en) * 2008-08-07 2011-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8383094B2 (en) 2008-10-01 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8729077B2 (en) 2008-11-28 2014-05-20 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
EP2682393A1 (en) * 2008-12-03 2014-01-08 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of HCV NS5A comprising a bicyclic core.
KR20110098779A (ko) * 2008-12-03 2011-09-01 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ5ａ의 억제제
WO2010091413A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole derivatives
WO2010096462A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc Linked diimidazole derivatives
TWI438200B (zh) 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
WO2010094977A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Arrow Therapeutics Limited Novel biphenyl compounds useful for the treatment of hepatitis c
WO2010096777A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
RU2544010C2 (ru) 2009-02-27 2015-03-10 Энанта Фармасьютикалс, Инк. Ингибиторы вируса гепатита с
EP2408306A4 (en) 2009-03-20 2012-11-07 Alios Biopharma Inc SUBSTITUTED NUCLEOSIDE AND NUCLEOTIDE ANALOGUES
CA2756255A1 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic hcv inhibitors
BRPI1012282A2 (pt) 2009-03-27 2015-09-22 Presidio Pharmaceuticals Inc inibidores de anel fundidos da hepatite c.
AU2010229833B2 (en) 2009-03-27 2014-03-13 Merck Sharp & Dohme Llc Inhibitors of hepatitis C virus replication
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI476190B (zh) 2009-03-30 2015-03-11 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
TW201038559A (en) 2009-04-09 2010-11-01 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C virus inhibitors
US8143414B2 (en) 2009-04-13 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2541571C2 (ru) 2009-04-15 2015-02-20 Эббви Инк. Противовирусные соединения
RU2528231C2 (ru) 2009-04-24 2014-09-10 Тиботек Фармасьютикалз Диариловые эфиры
US9139569B2 (en) * 2009-05-12 2015-09-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic aryl compounds useful for the treatment of viral diseases
MX360800B (es) * 2009-05-13 2018-11-16 Gilead Pharmasset Llc Star Compuestos antivirales.
US8980920B2 (en) 2009-05-29 2015-03-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds of three linked aryl moieties to treat diseases such as hepatitis C
CA2762885A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
US8211928B2 (en) 2009-05-29 2012-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AR077060A1 (es) 2009-06-11 2011-07-27 Abbott Lab Compuestos antivirales
WO2010148006A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
US8221737B2 (en) 2009-06-16 2012-07-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
WO2011004276A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Pfizer Limited Hepatitis c virus inhibitors
MX2012000695A (es) 2009-07-16 2012-06-12 Vertex Pharma Análogos de bencimidazol para el tratamiento o la prevención de infecciones por flavivirus.
WO2011015657A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Tibotec Pharmaceuticals Phenyl ethynyl derivatives as hepatitis c virus inhibitors
WO2011015658A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Tibotec Pharmaceuticals Bis-benzimidazole derivatives as hepatitis c virus inhibitors
FR2949465B1 (fr) 2009-09-01 2011-08-12 Pf Medicament Derives chromones, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques
RU2012112824A (ru) 2009-09-03 2013-10-10 Тиботек Фармасьютикалз Производные бис-бензимидазола
CN102480971B (zh) 2009-09-04 2014-11-26 杨森制药公司 化合物
EP2475254A4 (en) 2009-09-11 2013-05-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
EP2475256A4 (en) 2009-09-11 2013-06-05 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
US8415374B2 (en) 2009-10-12 2013-04-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis C virus inhibitors
WO2011050146A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
UA108211C2 (uk) 2009-11-04 2015-04-10 Янссен Рід Айрленд Бензімідазолімідазольні похідні
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20120276047A1 (en) 2009-11-25 2012-11-01 Rosenblum Stuart B Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
US20110137633A1 (en) 2009-12-03 2011-06-09 Abbott Laboratories Anti-viral compounds and methods of identifying the same
US8653070B2 (en) 2009-12-14 2014-02-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20120118008A (ko) * 2009-12-18 2012-10-25 아이데닉스 파마슈티칼스, 인코포레이티드 5,5-융합 아릴렌 또는 헤테로아릴렌 간염 ｃ 바이러스 억제제
CN102791687B (zh) 2009-12-18 2015-02-11 北京凯因科技股份有限公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂
WO2011087740A1 (en) 2009-12-22 2011-07-21 Schering Corporation Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2011079327A1 (en) 2009-12-24 2011-06-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2011091446A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
EP2545060B1 (en) 2010-03-09 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
US20110312996A1 (en) 2010-05-17 2011-12-22 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2571882A1 (en) * 2010-05-21 2013-03-27 Gilead Sciences, Inc. Heterocyclic flaviviridae virus inhibitors
WO2011156757A1 (en) * 2010-06-10 2011-12-15 Gilead Sciences, Inc. Combination of anti-hcv compounds with ribavirin for the treatment of hcv
EP2616461A4 (en) 2010-08-26 2014-03-26 Rfs Pharma Llc POTENTIVE AND SELECTIVE INHIBITORS OF HEPATITIS C VIRUS
AU2011307953B2 (en) 2010-09-29 2014-07-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic indole derivatives for treating hepatitis C virus infection
WO2012048421A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
TWI640526B (zh) 2010-11-17 2018-11-11 基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物
TW201306841A (zh) 2010-12-20 2013-02-16 Gilead Sciences Inc 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
WO2012087976A2 (en) 2010-12-21 2012-06-28 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
SG11201400664WA (en) * 2011-09-16 2014-04-28 Gilead Pharmassett Llc Methods for treating hcv
DK2635588T3 (en) 2011-11-16 2015-09-07 Gilead Pharmasset Llc Dehydrated imidazolylimidazoler as anti-viral compounds
US8969588B2 (en) * 2012-06-05 2015-03-03 Gilead Pharmasset Llc Solid forms of an antiviral compound
US8841340B2 (en) * 2012-08-17 2014-09-23 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of an antiviral compound

Also Published As

Publication number Publication date
CA2886322A1 (en) 2010-11-18
SMT201700570T1 (it) 2018-01-11
MX360800B (es) 2018-11-16
UY32629A (es) 2010-12-31
EA037281B1 (ru) 2021-03-04
HRP20171759T1 (hr) 2017-12-29
KR20160084478A (ko) 2016-07-13
SMT201500284B (it) 2016-01-08
US8822430B2 (en) 2014-09-02
CA2761258C (en) 2015-08-04
EP3002281A1 (en) 2016-04-06
EP3309157A1 (en) 2018-04-18
HUE025983T2 (en) 2016-05-30
MX2019003738A (es) 2019-07-01
CN104211713A (zh) 2014-12-17
KR20170041924A (ko) 2017-04-17
AP2011005987A0 (en) 2011-12-31
NL300796I2 (sr) 2016-06-30
IL233678B (en) 2019-05-30
CY1118048T1 (el) 2018-03-07
EP2430014A1 (en) 2012-03-21
BR122014013631B8 (pt) 2021-05-25
IL216254A0 (en) 2012-01-31
KR20140122705A (ko) 2014-10-20
CL2011002825A1 (es) 2012-10-12
ME02916B (me) 2018-10-20
TW202042807A (zh) 2020-12-01
JP2017145254A (ja) 2017-08-24
HK1253517A1 (en) 2019-06-21
TW201902477A (zh) 2019-01-16
MX363732B (es) 2019-04-01
US8669234B2 (en) 2014-03-11
NO2016004I2 (no) 2016-02-29
HRP20161242T1 (hr) 2016-11-18
IL216254A (en) 2016-08-31
EA021974B1 (ru) 2015-10-30
NZ619205A (en) 2015-04-24
HK1253517B (en) 2020-04-24
JP2019104732A (ja) 2019-06-27
AP3622A (en) 2016-03-02
DK2430014T3 (en) 2015-11-30
CN103977406A (zh) 2014-08-13
KR101727876B1 (ko) 2017-04-17
SI3309157T1 (sl) 2020-02-28
US20130137877A1 (en) 2013-05-30
US8575118B2 (en) 2013-11-05
US20140051656A1 (en) 2014-02-20
HRP20161242T8 (hr) 2021-05-14
AR076765A1 (es) 2011-07-06
CN103977406B (zh) 2016-10-19
DK3002281T3 (en) 2017-12-18
NO3002281T3 (sr) 2018-02-10
PT2430014E (pt) 2015-10-20
EA201790515A1 (ru) 2018-10-31
ES2646131T3 (es) 2017-12-12
CN104016971B (zh) 2016-05-25
EP3002281B1 (en) 2017-09-13
CO6470842A2 (es) 2012-06-29
IL233042A0 (en) 2014-07-31
CN102596936B (zh) 2014-06-11
HUS1600001I1 (hu) 2016-02-29
US20120157404A1 (en) 2012-06-21
CN104230900B (zh) 2018-10-19
ECSP11011517A (es) 2012-01-31
BR122014012810A2 (pt) 2017-06-27
CN106588890A (zh) 2017-04-26
NO2020046I1 (no) 2020-12-18
TW201503888A (zh) 2015-02-01
TW201632183A (zh) 2016-09-16
ES2548156T3 (es) 2015-10-14
FR16C0005I2 (fr) 2016-09-30
PE20120509A1 (es) 2012-05-09
EP3626716A1 (en) 2020-03-25
JP2021001214A (ja) 2021-01-07
US20140039021A1 (en) 2014-02-06
MX376550B (es) 2025-03-07
HK1223365A1 (en) 2017-07-28
HK1162518A1 (en) 2012-08-31
US20170029408A1 (en) 2017-02-02
US9511056B2 (en) 2016-12-06
CN104016971A (zh) 2014-09-03
NZ706236A (en) 2016-07-29
RS54386B8 (sr) 2021-06-30
SMT201600351B (it) 2016-11-10
MX2011012058A (es) 2012-04-02
FR16C0005I1 (sr) 2016-03-25
JP5745727B2 (ja) 2015-07-08
SG176015A1 (en) 2011-12-29
US20120264711A1 (en) 2012-10-18
IL233678A0 (en) 2014-09-30
PL2430014T3 (pl) 2016-02-29
EP2873665A1 (en) 2015-05-20
JP2014169331A (ja) 2014-09-18
US8273341B2 (en) 2012-09-25
IL233679B (en) 2019-05-30
KR20190029771A (ko) 2019-03-20
CN102596936A (zh) 2012-07-18
AU2010249043B2 (en) 2014-10-09
EP2430014B1 (en) 2015-08-19
IL233044A0 (en) 2014-07-31
US8088368B2 (en) 2012-01-03
JP2014148550A (ja) 2014-08-21
KR20200011049A (ko) 2020-01-31
UA121454C2 (uk) 2020-06-10
EA201490854A1 (ru) 2014-09-30
BR122014013631B1 (pt) 2020-11-17
EA201490853A1 (ru) 2014-09-30
ES2758726T3 (es) 2020-05-06
KR20180028070A (ko) 2018-03-15
EA027493B1 (ru) 2017-07-31
CN104211689B (zh) 2017-01-18
TWI547495B (zh) 2016-09-01
DK2873665T3 (en) 2016-11-07
CN104211713B (zh) 2017-04-12
US20100310512A1 (en) 2010-12-09
BR122014013631A2 (pt) 2017-06-27
RS55249B1 (sr) 2017-02-28
EA026536B1 (ru) 2017-04-28
PT2873665T (pt) 2016-10-13
RS54386B1 (sr) 2016-04-28
PL2873665T3 (pl) 2017-01-31
US20140249074A1 (en) 2014-09-04
PL3309157T3 (pl) 2020-03-31
SI2430014T1 (sl) 2015-10-30
CA2761258A1 (en) 2010-11-18
CN106588890B (zh) 2020-11-27
TW201105656A (en) 2011-02-16
SG10201402280QA (en) 2014-08-28
AP2016008993A0 (en) 2016-01-31
LTPA2016002I1 (lt) 2021-01-11
MX2020011251A (es) 2020-11-12
RS56654B8 (sr) 2021-06-30
NZ596444A (en) 2014-01-31
LT2873665T (lt) 2016-10-25
PT3002281T (pt) 2017-11-14
JP2012526838A (ja) 2012-11-01
EA201190259A1 (ru) 2013-01-30
CN104211689A (zh) 2014-12-17
EP2857394A1 (en) 2015-04-08
PT3309157T (pt) 2019-12-02
JP2015157842A (ja) 2015-09-03
KR101546119B1 (ko) 2015-08-20
SI2873665T1 (sl) 2017-02-28
EP3309157B1 (en) 2019-09-04
TW201504244A (zh) 2015-02-01
EA201590073A1 (ru) 2015-06-30
PE20150202A1 (es) 2015-02-13
CY1119684T1 (el) 2018-04-04
ME02536B (me) 2017-02-20
AU2010249043A1 (en) 2011-12-01
ZA201108436B (en) 2013-01-30
IL233679A0 (en) 2014-09-30
MX360803B (es) 2018-11-16
SI3002281T1 (sl) 2017-11-30
JP5744283B2 (ja) 2015-07-08
RS55249B8 (sr) 2021-06-30
HUE030465T2 (hu) 2017-05-29
BR122014012810B1 (pt) 2020-04-14
LT3002281T (lt) 2017-12-11
LTC2430014I2 (lt) 2021-02-25
HUE036906T2 (hu) 2018-08-28
PL3002281T3 (pl) 2018-02-28
CN104230900A (zh) 2014-12-24
EP2873665B1 (en) 2016-07-06
ME02321B (me) 2016-06-20
US9981955B2 (en) 2018-05-29
NO2016004I1 (no) 2016-02-17
KR20140014393A (ko) 2014-02-06
TWI629981B (zh) 2018-07-21
TWI465444B (zh) 2014-12-21
WO2010132601A1 (en) 2010-11-18
HRP20151000T8 (hr) 2021-05-14
CY2016001I1 (el) 2018-01-10
HK1207638A1 (en) 2016-02-05
HRP20151000T1 (hr) 2015-11-20
CN109020961A (zh) 2018-12-18
BRPI1010795A2 (pt) 2016-12-20
KR101503752B1 (ko) 2015-03-18
CY1116942T1 (el) 2017-04-05
ES2596247T3 (es) 2017-01-05
IL233044A (en) 2015-07-30
CY2016001I2 (el) 2018-01-10
US8841278B2 (en) 2014-09-23
TW201617073A (zh) 2016-05-16
TWI689305B (zh) 2020-04-01
KR20140122706A (ko) 2014-10-20
BRPI1010795B1 (pt) 2018-12-11
JP5582662B2 (ja) 2014-09-03
HRP20171759T8 (hr) 2021-05-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9981955B2 (en) Antiviral compounds
AU2020256321A1 (en) Antiviral compounds
HK40026306A (en) Antiviral compounds
AU2013202666B2 (en) Antiviral compounds
HK1223365B (en) Antiviral compounds
AU2017210657A1 (en) Antiviral compounds
HK40002021A (en) Antiviral compounds
HK1236946B (zh) 抗病毒化合物