JP2013166800A - Ｎａｆｌｄの治療における使用のためのｄｐｐ−ｉｖ阻害剤 - Google Patents

Abstract

【課題】非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防に特に好適な薬剤を提供する。
【解決手段】本発明は、ある特定のＤＰＰ−４阻害剤が、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防に特に好適であるという所見に関連する。
【選択図】なし

Description

本発明は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療および／または予防するためのある特定のＤＰＰ−４阻害剤、ならびにＮＡＦＬＤおよび／またはそれに関連もしくは付随する疾患の治療および／または予防におけるこれらのＤＰＰ−４阻害剤の使用に関する。本発明はまた、ＮＡＦＬＤを治療および／または予防するためのある特定のＤＰＰ−４阻害剤と他の活性物質との組合せ、ならびにＮＡＦＬＤを治療および／または予防するためのこれらのＤＰＰ−４阻害剤と他の活性物質との組合せの使用に関する。本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を含み、１種または複数の他の活性物質を含んでもよい、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための医薬組成物もまた企図される。

代謝決定因子に関連し、アルコールに起因しない脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ、非アルコール性脂肪肝疾患）の範囲は、単純な肝脂肪変性から、炎症性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ、非アルコール性脂肪性肝炎）、さらに肝線維症および肝硬変、ならびにいくつかの場合においては肝細胞癌にまで至る。ＮＡＳＨは、ＮＡＦＬＤの最も重度な形態であり、最近のデータは、ＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤの有病率が１７〜３３％（米国内）の範囲であることを示している。したがって、ＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤは、先進工業国における慢性肝疾患の臨床的に重要な型として浮上してきている（ＭｃＣｕｌｌｏｕｇｈ ２００６）。ＮＡＦＬＤおよびＮＡＳＨの基礎となる病態生理学的機序は、現在、第１および第２のヒット理論による説明が試みられている。第１の事象として、肝臓外（例えば遊離脂肪酸流入の増加、インスリン抵抗性、空腹時、低レベルのアディポネクチン）または肝臓内（例えば、ＶＬＤＬ分泌能力の低下、β酸化の減少）の変調により、肝脂肪変性が発生する。第１のヒットは肝脂肪変性をもたらし、炎症事象の第２のヒットの素因となりそれを誘発する。これに関連して、反応性酸素種（ＲＯＳ）レベルの増加およびＴＮＦ−ａのような炎症性サイトカインレベルの上昇が、炎症を促進するものとして議論されている。ＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤの発症にとって重大な役割は、肥満および糖尿病の個人におけるインスリン抵抗性に一致する。したがって、現在の治療は、ＴＺＤ（チアゾリジンジオン）またはメトホルミンのようなインスリン感受性改善薬を用いた画期的なインスリン抵抗対策に重点を置いている。ロシグリタゾン（Ｎｅｕｓｃｈｗａｎｄｅｒ ２００３）のピオグリタゾン（Ｐｒｏｍａｔ ２００４）およびメトホルミン（Ｚｈｏｕ ２００１）を使用した臨床上の試験的研究から、いくつかの有望な結果が得られている。しかしながら、ＴＺＤ治療は、著しい体重増加および脂肪再分布に関連する。さらに、ＴＺＤは、体液貯留をもたらし、鬱血性心不全の患者には適応されない。ＴＺＤによる長期治療は、さらに、骨折のリスクの増加に関連する。ＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤに対する他の治療的アプローチは幾分保守的であり、食事療法および運動および体重コントロールを含む。さらに、ＮＡＦＬＤ、特にＮＡＳＨはまた、特に長期にわたる内皮機能不全のリスクおよび心血管系リスクの増加に関連する。したがって、ＮＡＦＬＤおよびＮＡＳＨの治療のための新規で有効な医薬の高い必要性および高い需要が、未だに満たされていない。Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２００７）における最近の発表において、Ｂａｌａｂａｎらは、ＮＡＳＨ患者におけるＤＰＰ−４発現の役割および脂肪肝の組織病理学的グレードに関連した免疫染色のＤＰＰ−４強度に注目しており、この適応症におけるＤＰＰ−４阻害剤の使用についての追加的な証拠を提供している。

ＣＤ２６としても知られる酵素ＤＰＰ−４は、Ｎ−末端においてプロリンまたはアラニン残基を有するいくつかのタンパク質のＮ−末端からのジペプチドの切断をもたらすことが知られているセリンプロテアーゼである。この特性により、ＤＰＰ−４阻害剤は、ペプチドＧＬＰ−１を含む生物活性ペプチドの血漿中レベルに干渉し、糖尿病の治療のための有望な薬剤と考えられている。

例えば、ＤＰＰ−４阻害剤およびその使用は、国際公開第２００２／０６８４２０号、国際公開第２００４／０１８４６７号、国際公開第２００４／０１８４６８号、国際公開第２００４／０１８４６９号、国際公開第２００４／０４１８２０号、国際公開第２００４／０４６１４８号、国際公開第２００５／０５１９５０号、国際公開第２００５／０８２９０６号、国際公開第２００５／０６３７５０号、国際公開第２００５／０８５２４６号、国際公開第２００６／０２７２０４号、国際公開第２００６／０２９７６９号もしくは国際公開第２００７／０１４８８６号；または国際公開第２００４／０５０６５８号、国際公開第２００４／１１１０５１号、国際公開第２００５／０５８９０１号もしくは国際公開第２００５／０９７７９８号；または国際公開第２００６／０６８１６３号、国際公開第２００７／０７１７３８号もしくは国際公開第２００８／０１７６７０号；または国際公開第２００７／１２８７２１号もしくは国際公開第２００７／１２８７６１号に開示されている。

さらなるＤＰＰ−４阻害剤として、以下の化合物を挙げることができる：
以下の構造式Ａを有するシタグリプチン（ＭＫ−０４３１）は、（３Ｒ）−３−アミノ−１−［３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７−イル］−４−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−１−オン、別名（２Ｒ）−４−オキソ−４−［３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−１−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタン−２−アミンである。

一実施形態において、シタグリプチンは、そのリン酸二水素塩、すなわちシタグリプチンリン酸塩の形態である。さらなる実施形態において、シタグリプチンリン酸塩は、結晶性無水物または一水和物の形態である。この実施形態のクラスは、シタグリプチンリン酸塩一水和物を指す。シタグリプチン遊離塩基およびその薬学的に許容される塩は、米国特許第６，６９９，８７１号および国際公開第０３／００４４９８号の実施例７に開示されている。結晶性シタグリプチンリン酸塩一水和物は、国際公開第２００５／００３１３５号および国際公開第２００７／０５０４８５号に開示されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。
シタグリプチンの錠剤は、Ｊａｎｕｖｉａ（登録商標）の商品名で市販されている。シタグリプチン／メトホルミンの組合せの錠剤は、Ｊａｎｕｍｅｔ（登録商標）の商品名で市販されている。

以下の構造式Ｂを有するビルダグリプチン（ＬＡＦ−２３７）は、（２Ｓ）−｛［（３−ヒドロキシアダマンタン−１−イル）アミノ］アセチル｝ピロリジン−２−カルボニトリル、別名（Ｓ）−１−［（３−ヒドロキシ−１−アダマンチル）アミノ］アセチル−２−シアノ−ピロリジンである。

ビルダグリプチンは、米国特許第６，１６６，０６３号および国際公開第００／３４２４１号の実施例１に具体的に開示されている。ビルダグリプチンの具体的な塩が、国際公開第２００７／０１９２５５号に開示されている。ビルダグリプチンの結晶形態およびビルダグリプチン錠剤が、国際公開第２００６／０７８５９３号に開示されている。ビルダグリプチンは、国際公開第００／３４２４１号または国際公開第２００５／０６７９７６号に記載のように製剤化することができる。放出調節ビルダグリプチン製剤が、国際公開第２００６／１３５７２３号に記載されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

ビルダグリプチンの錠剤は、Ｇａｌｖｕｓ（登録商標）の商品名で市販されている。ビルダグリプチン／メトホルミンの組合せの錠剤は、Ｅｕｃｒｅａｓ（登録商標）の商品名で市販されている。

以下の構造式Ｃを有するサクサグリプチン（ＢＭＳ−４７７１１８）は、（１Ｓ，３Ｓ，５Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−アミノ−２−（３−ヒドロキシアダマンタン−１−イル）アセチル｝−２−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボニトリル、別名（Ｓ）−３−ヒドロキシアダマンチルグリシン−Ｌ−ｃｉｓ−４，５−メタノプロリンニトリルである。

サクサグリプチンは、米国特許第６，３９５，７６７号および国際公開第０１／６８６０３号の実施例６０に具体的に開示されている。一実施形態において、サクサグリプチンは、国際公開第２００４／０５２８５０号に開示されているように、そのＨＣｌ塩またはその一安息香酸塩の形態である。さらなる実施形態において、サクサグリプチンは、遊離塩基の形態である。さらなる実施形態において、サクサグリプチンは、国際公開第２００４／０５２８５０号に開示されているように、遊離塩基の一水和物の形態である。サクサグリプチンのＨＣｌ塩および遊離塩基の結晶形態が、国際公開第２００８／１３１１４９号に開示されている。また、サクサグリプチンを調製するための方法が、国際公開第２００５／１０６０１１号および国際公開第２００５／１１５９８２号に開示されている。サクサグリプチンは、国際公開第２００５／１１７８４１号に記載のように錠剤として製剤化することができる。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

以下の構造式Ｅを有するアログリプチン（ＳＹＲ−３２２）は、２−（｛６−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−３−メチル−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリルである。

アログリプチンは、米国特許出願公開第２００５／２６１２７１号、ＥＰ１５８６５７１および国際公開第２００５／０９５３８１号に具体的に開示されている。一実施形態において、アログリプチンは、それぞれ国際公開第２００７／０３５６２９号に開示されているように、その安息香酸塩、その塩酸塩またはそのトシル酸塩の形態である。この実施形態のクラスは、アログリプチン安息香酸塩を指す。アログリプチン安息香酸塩の多形体が、国際公開第２００７／０３５３７２号に開示されている。アログリプチンを調製するための方法が、国際公開第２００７／１１２３６８号、および特に国際公開第２００７／０３５６２９号に開示されている。アログリプチン（すなわちその安息香酸塩）は、国際公開第２００７／０３３２６６号に記載のように錠剤として製剤化し、投与することができる。アログリプチンのメトホルミンまたはピオグリタゾンとの製剤化が、それぞれ国際公開第２００８／０９３８８２号または国際公開第２００９／０１１４５１号に記載されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（２Ｓ）−１−｛［２−（５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エチルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリルもしくはその薬学的に許容される塩、好ましくはメシル酸塩、または（２Ｓ）−１−｛［１，１，−ジメチル−３−（４−ピリジン−３−イル−イミダゾール−１−イル）−プロピルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリルもしくはその薬学的に許容される塩。
これらの化合物およびその調製のための方法は、国際公開第０３／０３７３２７号に開示されている。前者の化合物のメシル酸塩およびその結晶多形体が、国際公開第２００６／１００１８１号に開示されている。後者の化合物のフマル酸塩およびその結晶多形体が、国際公開第２００７／０７１５７６号に開示されている。これらの化合物は、国際公開第２００７／０１７４２３号に記載のように医薬組成物として製剤化することができる。したがって、例えばこれらの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）−２−アミノ−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−３−イル）−４−フルオロメチル−ピロリジン−２−オンまたはその薬学的に許容される塩：

この化合物およびその調製のための方法は、国際公開第２００５／０００８４８号に開示されている。また、この化合物（具体的にはその二塩酸塩）を調製するための方法が、国際公開第２００８／０３１７４９号、国際公開第２００８／０３１７５０号および国際公開第２００８／０５５８１４号に開示されている。この化合物は、国際公開第２００７／０１７４２３号に記載のように医薬組成物として製剤化することができる。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピロリジン−２−イル）メタノンまたはその薬学的に許容される塩。
この化合物およびその調製のための方法は、国際公開第２００５／１１６０１４号および米国特許第７２９１６１８号に開示されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（１（（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−１−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１，３，５−トリアジン−２−イル）ピロリジン−３−イル）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−オンまたはその薬学的に許容される塩：

この化合物およびその調製のための方法は、国際公開第２００７／１４８１８５号および米国特許出願公開第２００７０２９９０７６号に開示されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（２Ｓ，４Ｓ）−１−｛２−［（３Ｓ，１Ｒ）−３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル）シクロペンチルアミノ］−アセチル｝−４−フルオロピロリジン−２−カルボニトリルまたはその薬学的に許容される塩：

この化合物およびその調製のための方法は、国際公開第２００６／０４０６２５号および国際公開第２００８／００１１９５号に開示されている。具体的に請求される塩には、メタンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩が含まれる。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

（Ｒ）−２−［６−（３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イルメチル］−４−フルオロ−ベンゾニトリルまたはその薬学的に許容される塩：

この化合物ならびにその調製および使用のための方法は、国際公開第２００５／０９５３８１号、米国特許出願公開第２００７０６０５３０号、国際公開第２００７／０３３３５０号、国際公開第２００７／０３５６２９号、国際公開第２００７／０７４８８４号、国際公開第２００７／１１２３６８号および国際公開第２００８／０３３８５１号に開示されている。具体的に請求される塩には、コハク酸塩（国際公開第２００８／０６７４６５号）、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、（Ｒ）−マンデル酸塩および塩酸塩が含まれる。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。

５−｛（Ｓ）−２−［２−（（Ｓ）−２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−プロピル｝−５−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−２，８−ジカルボン酸ビス−ジメチルアミドまたはその薬学的に許容される塩：

この化合物およびその調製のための方法は、国際公開第２００６／１１６１５７号および米国特許出願公開第２００６／２７０７０１号に開示されている。したがって、例えばこの化合物またはその塩を製造、製剤化、または使用する方法に関する詳細は、これらの文献を参照されたい。
いかなる疑念をも回避するために、上で引用された上記文献のそれぞれの開示は、参照によりその全内容が本明細書に具体的に組み込まれる。

ここで、驚くべきことに、本発明の範囲内において、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤が、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／もしくは肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）ならびに／またはそれに関連する疾患（例えば、糖尿病、インスリン非感受性、肝臓グルコース過剰産生および／もしくは代謝症候群等）もしくはそれに付随する疾患（例えば、心臓血管疾患および／もしくはアテローム性動脈硬化もしくは他の（心臓）代謝障害等）の治療ならびに／または予防（その予防、緩徐化、遅延、および／またはその進行の反転もしくは発生の低減もしくは開始の遅延を含む）、ひいては肝硬変（不可逆的な肝臓の進行性の瘢痕化）および／もしくは肝細胞癌の予防に特に好適とする、驚異的で特に有利な特性を有することが見出された。

したがって、本発明は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
加えて、本発明はさらに、インスリン感受性の改善における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、肝臓におけるグルコース産生の低下における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、インスリン抵抗性および／またはインスリン抵抗症候群の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、代謝症候群の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。

本発明はさらに、例えばＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨ、（中心性）肥満、糖尿病、異常脂質血症、高血圧および／またはアテローム性（心臓）血管疾患もしくは損傷等の代謝症候群に関連した特徴のうちの１つまたは複数の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、（例えばＴＺＤおよび／またはメトホルミンを使用した）ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの既存の治療に関連した副作用のリスクの予防および／または低減における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
さらに、本発明は、例えばＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの治療中の内皮機能不全および／または心臓血管疾患のリスクの低減のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤をさらに提供する。

また、本発明は、体重の低減または体重の増加の予防または体重の低減の促進または体脂肪分布に対するプラスの作用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、肥満、特に重度または極度の肥満（例えばクラスＩＩまたはＩＩＩ）、例えばＢＭＩ≧３５ｋｇ／ｍ²またはさらに≧４０ｋｇ／ｍ²（または日本人患者の場合≧３０ｋｇ／ｍ²）、特に腹部肥満および／または内臓型肥満の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、特にＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨに罹患した、またはそのリスクを有する患者、例えば、ＮＡＦＬＤ、代謝症候群、インスリン抵抗性、ＩＧＴ、ＩＦＧ、体重過多、肥満（例えばＢＭＩ≧２５〜３０ｋｇ／ｍ²、ウエスト周り＞８８（女性）〜１０２（男性）ｃｍ、および／またはウエスト：ヒップ比＞０．８５（女性）〜０．９（男性）、特に内臓型肥満および／または腹部肥満）、異常脂質血症（高脂血症、特に高トリグリセリド血症（例えば血液トリグリセリドレベル≧１５０ｍｇ／ｄＬ）および／または低ＨＤＬ血症（例えば血液ＨＤＬコレステロールレベル＜４０（男性）〜５０（女性）ｍｇ／ｄＬ）を含む）、糖尿病（特に２型糖尿病）、高血圧（例えば≧１３０／≧８５ｍｍＨｇ）、高血糖症、高インスリン血症、高尿酸血症、重度の睡眠時無呼吸、多嚢胞性卵巣症候群、ならびに慢性Ｃ型肝炎感染症から選択される１種または複数の障害を有する、特に４５歳を超える高齢患者を含む患者における、ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨおよび／またはそれに関連もしくは付随する疾患もしくは障害の治療および／または予防（その発症もしくは進行のリスクの低減を含む）のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。

本発明はさらに、ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨを有する患者における代謝障害または疾患、特に糖尿病（特に２型糖尿病）の治療および／または予防（その発症もしくは進行のリスクの低減を含む）のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。

さらに、本発明の別の態様によれば、特にＮＡＦＬＤを有する患者における、以下の目的：
−代謝障害または疾患、例えば１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能異常（ＩＧＴ）、空腹時血糖異常（ＩＦＧ）、高血糖症、食後高血糖症、体重過多、肥満、異常脂質血症、高脂血症、高コレステロール血症、高血圧、アテローム性動脈硬化、内皮機能不全、骨粗しょう症、慢性全身性炎症、網膜症、神経障害、腎症および／または代謝症候群の予防、その進行の緩徐化、遅延または治療；
−血糖コントロールの改善ならびに／または空腹時血漿グルコース、食後血漿グルコースおよび／もしくはグリコシル化血色素ＨｂＡ１ｃの低減；
−耐糖能異常（ＩＧＴ）、空腹時血糖異常（ＩＦＧ）、インスリン抵抗性および／または代謝症候群から２型糖尿病までの予防、緩徐化、遅延またはその進行の反転；
−糖尿病の合併症、例えば微小血管および大血管疾患、例えば腎症、網膜症、神経障害、心臓血管もしくは脳血管疾患、組織虚血、糖尿病性足病変もしくは潰瘍、アテローム性動脈硬化、心筋梗塞、急性冠症候群、不安定狭心症、安定狭心症、末梢動脈閉塞疾患、心筋症、心不全、心拍障害、血管再狭窄、および／または脳卒中の予防、そのリスクの低減、その進行の緩徐化、その遅延または治療；
−体重の低減または体重の増加の予防または体重の低減の促進；
−膵臓β細胞の変性および／もしくは膵臓β細胞の機能性の低下の予防、緩徐化、遅延もしくは治療、ならびに／または膵臓β細胞の機能性の改善および／もしくは回復、ならびに／または膵臓インスリン分泌の機能性の刺激および／もしくは回復；
−従来の（経口）抗高脂血症薬に関連した副作用のリスクの低減；ならびに／または
−インスリン感受性の維持および／もしくは改善、ならびに／または高インスリン血症および／もしくはインスリン抵抗性の治療もしくは予防
のうちの１つまたは複数のための薬物の製造のための、１種または複数の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のいずれか等と組み合わせてもよい、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤の使用が提供される。

加えて、本発明はさらに、線維症、例えば肝臓、肺、皮膚、心臓または腎臓の線維症等の治療および／または予防における使用のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を提供する。
本発明はさらに、上述または後述される疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防用医薬組成物の製造のための、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤の使用を提供する。
本発明はさらに、上述の疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のためのキットオブパーツを含む、固定された、または固定されていない組合せを提供し、前記組合せは、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を含み、また１種または複数の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のうちのいずれか、特にメトホルミンまたはピオグリタゾンまたはＡＲＢ（例えばテルミサルタン等）を含んでもよい。

本発明はさらに、上記の疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防用の医薬組成物の製造のための、１種または複数の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のうちのいずれか、特にメトホルミンまたはピオグリタゾンまたはＡＲＢ（例えばテルミサルタン等）と組み合わせた、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤の使用を提供する。
本発明はさらに、上述の疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患（特に糖尿病性ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための医薬組成物を提供し、前記医薬組成物は、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を含み、また、例えば活性成分の別個の、連続的、同時、併用、または時間的に交互の使用のため等の、１種または複数の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のうちのいずれか、特にメトホルミンまたはピオグリタゾンまたはＡＲＢ（例えばテルミサルタン等）を含んでもよい。

本発明はさらに、上述の疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための医薬組成物を提供し、前記医薬組成物は、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を唯一の活性成分として含み、または、１種または複数の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のうちのいずれか、特にメトホルミンまたはピオグリタゾンまたはＡＲＢ（例えばテルミサルタン等）と共に含んでもよく、また１種または複数の薬学的に許容される担体および／もしくは希釈剤と共に含んでもよい。
本発明はさらに、上記の疾患のうちのいずれか、特に非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療および／または予防する方法を提供し、前記方法は、それを必要とする対象（特に人間の患者）に、単独でもよく、または例えば有効量の１種、２種もしくはそれ以上の他の活性物質、例えば本明細書に記載の物質のいずれか、特にメトホルミンもしくはピオグリタゾンもしくはＡＲＢ（例えばテルミサルタン等）と別個に、連続的に、同時に、併用して、もしくは時間的に交互に組み合わせてもよい、有効量の本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を投与するステップを含む。

食事誘導肥満マウスで得られた結果を示す図である。 食事誘導肥満マウスで得られた結果を示す図である。 ＢＩ１３５６の体重に対する効果を示す図である。

本発明の一実施形態において、本発明の意味の範囲内の非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、これらに限定されないが、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む。
本発明の特別な実施形態において、本発明の意味の範囲内の非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を指す。
本発明の一実施形態において、本発明の治療は、患者の１つまたは複数の組織病理学的特徴、例えば門脈炎症、脂肪肝、気球状変性、および／または小葉炎症における改善を提供する。
本発明の意味の範囲内のＤＰＰ−４阻害剤は、これらに限定されないが、上述および後述のＤＰＰ−４阻害剤のいずれか、好ましくは経口活性ＤＰＰ−４阻害剤を含む。

第１の実施形態（実施形態Ａ）において、本発明に関連したＤＰＰ−４阻害剤は、
式（Ｉ）

または式（ＩＩ）

または式（ＩＩＩ）

または式（ＩＶ）

（式中、Ｒ１は、（［１，５］ナフチリジン−２−イル）メチル、（キナゾリン−２−イル）メチル、（キノキサリン−６−イル）メチル、（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル、２−シアノ−ベンジル、（３−シアノ−キノリン−２−イル）メチル、（３−シアノ−ピリジン−２−イル）メチル、（４−メチル−ピリミジン−２−イル）メチル、もしくは（４，６−ジメチル−ピリミジン−２−イル）メチルを示し、Ｒ２は、３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル、（２−アミノ−２−メチル−プロピル）−メチルアミノもしくは（２−（Ｓ）−アミノ−プロピル）−メチルアミノを示す）
またはその薬学的に許容される塩の任意のＤＰＰ−４阻害剤である。

第２の実施形態（実施形態Ｂ）において、本発明に関連したＤＰＰ−４阻害剤は、
シタグリプチン、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、アログリプチン、
（２Ｓ）−１−｛［２−（５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エチルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
（２Ｓ）−１−｛［１，１，−ジメチル−３−（４−ピリジン−３−イル−イミダゾール−１−イル）−プロピルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
（Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）−２−アミノ−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−３−イル）−４−フルオロメチル−ピロリジン−２−オン、
（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピロリジン−２−イル）メタノン、
（１（（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−１−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１，３，５−トリアジン−２−イル）ピロリジン−３−イル）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−オン、
（２Ｓ，４Ｓ）−１−｛２−［（３Ｓ，１Ｒ）−３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル）シクロペンチルアミノ］−アセチル｝−４−フルオロピロリジン−２−カルボニトリル、
（Ｒ）−２−［６−（３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イルメチル］−４−フルオロ−ベンゾニトリル、および
５−｛（Ｓ）−２−［２−（（Ｓ）−２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−プロピル｝−５−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−２，８−ジカルボン酸ビス−ジメチルアミド、
またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるＤＰＰ−４阻害剤である。

第１の実施形態（実施形態Ａ）に関して、好ましいＤＰＰ−４阻害剤は、以下の化合物およびその薬学的に許容される塩のいずれかまたはすべてである：
・ １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００４／０１８４６８号、実施例２（１４２）を比較されたい）：

・ １−［（［１，５］ナフチリジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００４／０１８４６８号、実施例２（２５２）を比較されたい）：

・ １−［（キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００４／０１８４６８号、実施例２（８０）を比較されたい）：

・ ２−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−（ブト−２−イニル（ｙｉｎｙｌ））−５−（４−メチル−キナゾリン−２−イルメチル）−３，５−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｄ］ピリダジン−４−オン（国際公開第２００４／０５０６５８号、実施例１３６を比較されたい）：

・ １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン（ｂｕｔｙｉｎ）−１−イル）−８−［（２−アミノ−２−メチル−プロピル）−メチルアミノ］−キサンチン（国際公開第２００６／０２９７６９号、実施例２（１）を比較されたい）：

・ １−［（３−シアノ−キノリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（３０）を比較されたい）：

・ １−（２−シアノ−ベンジル）−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（３９）を比較されたい）：

・ １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−［（Ｓ）−（２−アミノ−プロピル）−メチルアミノ］−キサンチン（国際公開第２００６／０２９７６９号、実施例２（４）を比較されたい）：

・ １−［（３−シアノ−ピリジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（５２）を比較されたい）：

・ １−［（４−メチル−ピリミジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（８１）を比較されたい）：

・ １−［（４，６−ジメチル−ピリミジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（８２）を比較されたい）：

・ １−［（キノキサリン−６−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（国際公開第２００５／０８５２４６号、実施例１（８３）を比較されたい）：

これらのＤＰＰ−４阻害剤は、並外れた効力および長期間持続する効果と、有利な薬理学的特性、受容体選択性および有利な副作用プロファイルとを組み合わせる、または、他の薬学的活性物質と組み合わせると予想外の治療上の利点もしくは改善をもたらすため、構造的に同等のＤＰＰ−４阻害剤から区別される。それらの調製は、前述の出版物に開示されている。
本発明の実施形態Ａの上述のＤＰＰ−４阻害剤のうち、より好ましいＤＰＰ−４阻害剤は、１−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、特にその遊離塩基（ＢＩ１３５６としても知られる）である。

第２の実施形態（実施形態Ｂ）に関して、好ましいＤＰＰ−４阻害剤は、サクサグリプチンおよびアログリプチン、ならびにそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
別段に指定されない限り、本発明によれば、上述および後述の活性化合物（ＤＰＰ−４阻害剤を含む）の定義には、その薬学的に許容される塩ならびにその水和物、溶媒和物および多形体も含まれることを理解されたい。その塩、水和物および多形体について、本明細書において参照されているものを特に参照されたい。

実施形態Ａについて、本発明の実施形態ＡによるＤＰＰ−４阻害剤の合成方法は、当業者に知られている。有利には、本発明の実施形態ＡによるＤＰＰ−４阻害剤は、文献に記載の合成方法を用いて調製することができる。したがって、例えば、式（Ｉ）のプリン誘導体は、その開示が本明細書に組み込まれる国際公開第２００２／０６８４２０号、国際公開第２００４／０１８４６８号、国際公開第２００５／０８５２４６号、国際公開第２００６／０２９７６９号または国際公開第２００６／０４８４２７号に記載のように得ることができる。式（ＩＩ）のプリン誘導体は、例えば、その開示が本明細書に組み込まれる国際公開第２００４／０５０６５８号または国際公開第２００５／１１０９９９号に記載のように得ることができる。式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）のプリン誘導体は、例えば、その開示が本明細書に組み込まれる国際公開第２００６／０６８１６３号、国際公開第２００７／０７１７３８号または国際公開第２００８／０１７６７０号に記載のように得ることができる。具体的に上述されているそれらのＤＰＰ−４阻害剤の調製は、それに関連して挙げられている文献に開示されている。特定のＤＰＰ−４阻害剤の多形結晶性修飾物および製剤が、その開示の全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２００７／１２８７２１号および国際公開第２００７／１２８７２４号にそれぞれ開示されている。特定のＤＰＰ−４阻害剤のメトホルミンまたは他の組合せパートナーとの製剤が、その開示の全体が本明細書に組み込まれるＰＣＴ／ＥＰ２００９０５３９７８に記載されている。ＢＩ１３５６／メトホルミンの二成分の組合せの典型的な用量強度は、２．５／５００ｍｇ、２．５／８５０ｍｇおよび２．５／１０００ｍｇであり、これらはそれぞれ、１日１回または２回、特に１日２回経口投与することができる。

実施形態Ｂについて、実施形態ＢのＤＰＰ−４阻害剤の合成方法は、科学文献および／または公開された特許文献に、特に本明細書で引用されている文献に記載されている。
温血脊椎動物、特に人間における医薬的用途において、本発明の化合物は、通常、０．００１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは０．１〜１５ｍｇ／体重ｋｇの用量で、それぞれの場合において１日１〜４回使用される。この目的のために、他の活性物質と組み合わせてもよい化合物は、１種または複数の不活性な従来の担体および／または希釈剤とともに、例えばトウモロコシデンプン、乳糖、グルコース、微結晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、水／エタノール、水／グリセロール、水／ソルビトール、水／ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セチルステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロース、もしくは固い脂肪等の脂肪性物質、またはこれらの好適な混合物とともに、素錠剤もしくは被覆錠剤、カプセル剤、粉剤、懸濁剤または坐剤等の従来のガレヌス製剤に組み込むことができる。

したがって、本明細書で定義されるＤＰＰ−４阻害剤を含む本発明による医薬組成物は、当技術分野において説明されるような薬学的に許容される製剤用賦形剤を使用して、当業者により調製される。そのような賦形剤の例には、これらに限定されないが、希釈剤、結合剤、担体、充填剤、滑剤、流動促進剤、結晶化遅延剤、崩壊剤、安定剤、着色剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤および乳化剤が含まれる。
実施形態Ａによる化合物に好適な希釈剤の例には、セルロース粉末、リン酸水素カルシウム、エリスリトール、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、マンニトール、アルファ化デンプンまたはキシリトールが含まれる。
実施形態Ａによる化合物に好適な滑剤の例には、タルク、ポリエチレングリコール、ベヘン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、水添ヒマシ油またはステアリン酸マグネシウムが含まれる。

実施形態Ａによる化合物に好適な結合剤の例には、コポビドン（ビニルピロリドンと他のビニル誘導体との共重合物）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、アルファ化デンプンまたは低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ−ＨＰＣ）が含まれる。
実施形態Ａによる化合物に好適な崩壊剤の例には、トウモロコシデンプンまたはクロスポビドンが含まれる。

本発明の実施形態ＡによるＤＰＰ−４阻害剤の医薬製剤の好適な調製方法は、
・ 好適な錠剤化用賦形剤との粉末混合物としての活性物質の直接錠剤化、
・ 好適な賦形剤を用いた造粒と、それに続く好適な賦形剤との混合と、それに続く錠剤化およびフィルム被覆、または
・ 粉末混合物もしくは顆粒のカプセルへの封入
である。
好適な造粒方法は、
・ インテンシブミキサー内での湿式造粒、その後の流動層乾燥、
・ ワンポット造粒、
・ 流動層造粒、または
・ 好適な賦形剤を用いた乾式造粒（例えばローラー圧密による）と、それに続く錠剤化もしくはカプセルへの封入
である。

本発明のＤＰＰ−４阻害剤の剤形、製剤化および投与に関する詳細は、科学文献および／または公開された特許文献を、特に本明細書で引用されている文献を参照されたい。
第１の実施形態（実施形態Ａ）について、本明細書において実施形態Ａに記載のＤＰＰ−４阻害剤の典型的に必要とされる用量は、静脈内投与される場合、０．１ｍｇ〜１０ｍｇ、好ましくは０．２５ｍｇ〜５ｍｇであり、経口投与される場合、０．５ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは２．５ｍｇ〜５０ｍｇまたは０．５ｍｇ〜１０ｍｇ、より好ましくは２．５ｍｇ〜１０ｍｇまたは１ｍｇ〜５ｍｇであり、いずれの場合も１日１〜４回である。したがって、例えば、１−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチンの用量は、経口投与される場合、患者１人当たり、１日当たり５ｍｇ〜５０ｍｇ、２０ｍｇ〜５０ｍｇ、０．５ｍｇ〜１０ｍｇ、または２．５ｍｇ〜１０ｍｇまたは１ｍｇ〜５ｍｇであってもよい。

本明細書において実施形態Ａに記載のＤＰＰ−４阻害剤を含む医薬組成物で調製された剤形は、０．１〜１００ｍｇの用量範囲で活性成分を含有する。したがって、例えば、１−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチンの具体的な用量強度は、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２．５ｍｇ、５ｍｇおよび１０ｍｇである。
治療および／または予防における使用に必要な本発明の化合物の量は、例えば治療および／または予防されている疾患または状態の性質および段階によって変動し得ることが理解されるであろう。

第２の実施形態（実施形態Ｂ）について、例えば体重約７０ｋｇの人間等の哺乳動物に投与される、本明細書において実施形態Ｂに記載のＤＰＰ−４阻害剤の用量は、一般的には、１人当たり、１日当たり約０．５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、例えば約１０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、好ましくは２０〜２００ｍｇ、より好ましくは２０〜１００ｍｇの活性部分であり、または、１人当たり、１日当たり約０．５ｍｇ〜約２０ｍｇ、好ましくは２．５〜１０ｍｇであり、好ましくは、例えば同じサイズであってもよい１回〜４回の単回投与に分けられる。単回投与強度は、例えば、１０ｍｇ、２５ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇおよび２００ｍｇのＤＰＰ−４阻害剤活性部分を含む。

ＤＰＰ−４阻害剤シタグリプチンの用量強度は、通常、２５ｍｇから２００ｍｇの間の活性部分である。シタグリプチンの推奨される用量は、活性部分（遊離塩基無水物）に対して計算して、１日１回１００ｍｇである。シタグリプチン遊離塩基無水物（活性部分）の単位用量強度は、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇおよび２００ｍｇである。シタグリプチンの具体的な単位用量強度（例えば錠剤当たり）は、２５ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇである。医薬組成物中、シタグリプチン遊離塩基無水物と当量、すなわちそれぞれ３２．１３ｍｇ、６４．２５ｍｇ、９６．３８ｍｇ、１２８．５ｍｇ、１９２．７５ｍｇ、および２５７ｍｇのシタグリプチンリン酸塩一水和物が使用される。腎不全の患者には、２５ｍｇおよび５０ｍｇのシタグリプチンの調節された用量が使用される。シタグリプチン／メトホルミンの二成分の組合せの典型的な用量強度は、５０／５００ｍｇおよび５０／１０００ｍｇであり、これらはそれぞれ、１日１回または２回、特に１日２回経口投与することができる。

ＤＰＰ−４阻害剤ビルダグリプチンの用量範囲は、通常、１日１０ｍｇから１５０ｍｇの間、特に、１日２５ｍｇから１５０ｍｇ、２５ｍｇから１００ｍｇまたは２５ｍｇから５０ｍｇまたは５０ｍｇから１００ｍｇの間である。１日の経口用量の具体例は、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇまたは１５０ｍｇである。さらに具体的な態様において、ビルダグリプチンの１日投与量は、２５ｍｇから１５０ｍｇの間、または５０ｍｇから１００ｍｇの間であってもよい。別のより具体的な態様において、ビルダグリプチンの１日投与量は、５０ｍｇまたは１００ｍｇであってもよい。活性成分の適用は、１日３回まで、好ましくは１日１回または２回行われてもよい。具体的な用量強度は、５０ｍｇまたは１００ｍｇのビルダグリプチンである。ビルダリプチン／メトホルミンの二成分の組合せの典型的な用量強度は、５０／８５０ｍｇおよび５０／１０００ｍｇであり、これらはそれぞれ、１日１回または２回、特に１日２回経口投与することができる。

アログリプチンは、アログリプチン５ｍｇ／日から２５０ｍｇ／日の間の１日用量で患者に投与してもよく、１０ｍｇから２００ｍｇの間で投与してもよく、１０ｍｇから１５０ｍｇの間で投与してもよく、また１０ｍｇから１００ｍｇの間で投与してもよい（それぞれの場合において、アログリプチンの遊離塩基形態の分子量を基準とする）。したがって、使用可能な具体的用量には、これらに限定されないが、１日当たりアログリプチン１０ｍｇ、１２．５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇおよび１００ｍｇが含まれる。アログリプチンは、その遊離塩基形態で、または薬学的に許容される塩として投与することができる。

サクサグリプチンは、２．５ｍｇ／日から１００ｍｇ／日の間の１日用量で患者に投与してもよく、２．５ｍｇから５０ｍｇの間の１日用量で患者に投与してもよい。使用可能な具体的用量には、これらに限定されないが、１日当たりサクサグリプチン２．５ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇが含まれる。サクサグリプチン／メトホルミンの二成分の組合せの典型的な用量強度は、２．５／５００ｍｇおよび２．５／１０００ｍｇであり、これらはそれぞれ、１日１回または２回、特に１日２回経口投与することができる。
本発明のＤＰＰ−４阻害剤の特別な実施形態は、低用量レベルで、例えば患者１人当たり、１日当たりの経口投薬レベル＜１００ｍｇまたは＜７０ｍｇ、好ましくは患者１人当たり、１日当たり＜５０ｍｇ、より好ましくは＜３０ｍｇまたは＜２０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ〜１０ｍｇ、具体的には１ｍｇ〜５ｍｇ（より具体的には５ｍｇ）で治療上有効である、経口投与ＤＰＰ−４阻害剤であり、必要な場合は、同じサイズであってもよい１回〜４回の単回投与、具体的には１回または２回の単回投与に分けられ、優先的には経口で１日１回または２回（より優先的には１日１回）投与され、有利には、１日のうち任意の時間に、食物とともに、または食物なしで投与される。したがって、例えば、１日経口量５ｍｇのＢＩ１３５６を、１日１回の投薬計画で（すなわち１日１回５ｍｇのＢＩ１３５６）、または１日２回の投薬計画で（すなわち１日２回２．５ｍｇのＢＩ１３５６）、１日のうち任意の時間に、食物とともに、または食物なしで与えることができる。

本発明の意味の範囲内において重視される特に好ましいＤＰＰ−４阻害剤は、１−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン（ＢＩ１３５６としても知られる）である。ＢＩ１３５６は、高い効力、２４時間の作用期間、および広い治療領域を示す。２型糖尿病に罹患した人において、ＢＩ１３５６は、プラセボのような安全性および耐容性を示す。約≧５ｍｇの低用量では、ＢＩ１３５６は、全２４時間のＤＰＰ−４阻害期間を有する真の１日１回経口薬として作用する。治療上の経口投薬レベルでは、ＢＩ１３５６は主に肝臓から排泄され、またごく僅かに（投与された経口用量の約＜７％）腎臓から排泄される。ＢＩ１３５６は、主として胆汁を介して変化せずに排泄される。腎臓から排出されるＢＩ１３５６の部分は、用量を増加させても経時的にごく僅かしか増加しないため、おそらく患者の腎機能に基づきＢＩ１３５６の用量を変更する必要はないだろう。ＢＩ１３５６の腎臓以外の排出は、その低蓄積能および広い安全域と併せて、腎不全および糖尿病性腎症の高い有病率を有する糖尿病患者集団において極めて有益となり得る。

異なる代謝機能障害が併発することが多いため、しばしば複数の異なる活性成分を互いに組み合わせることが指示される。したがって、診断された機能障害に依存して、ＤＰＰ−４阻害剤をそれぞれの障害に対し慣例的な活性物質、例えば、他の抗糖尿病物質、特に、血液中の血糖レベルまたは脂質レベルを低下させる、血液中のＨＤＬレベルを上昇させる、血圧を低下させる、またはアテローム性動脈硬化もしくは肥満の治療に適用される活性物質の中から選択される１種または複数の活性物質と組み合わせると、改善された治療成果を得ることができる。さらに、本発明の意味の範囲内において、追加的に、ＤＰＰ−４阻害剤を１種または複数の酸化防止剤および／または抗炎症薬と組み合わせてもよい。またさらに、本発明の意味の範囲内において、追加的に、ＤＰＰ−４阻害剤を１種または複数の血管内皮保護剤と組み合わせてもよい。

上述したＤＰＰ−４阻害剤はまた、その単剤治療における使用の他に、他の活性物質と併用してもよく、それによって改善された治療結果を得ることができる。そのような併用治療は、物質の自由な組合せとして、または固定された組合せの形態、例えば錠剤もしくはカプセルとして行うことができる。これに必要な組合せパートナーの医薬製剤は、医薬組成物として商業的に得ることができるか、または当業者により従来の方法を用いて製剤化することができる。医薬組成物として商業的に得ることができる活性物質は、従来技術の多くの場所に、例えば毎年公開される薬物のリスト、製薬産業連合の「Ｒｏｔｅ Ｌｉｓｔｅ（登録商標）」、または、「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」として知られる処方薬に関する製造者の情報の年刊編集物に記載されている。

抗糖尿病組合せパートナーの例は、メトホルミン；グリベンクラミド、トルブタミド、グリメピリド、グリピジド、グリキドン、グリボルヌリドおよびグリクラジド等のスルホニル尿素；ナテグリニド；レパグリニド；ロシグリタゾンおよびピオグリタゾン等のチアゾリジンジオン；メタグリダセン（ｍｅｔａｇｌｉｄａｓｅｓ）等のＰＰＡＲγ修飾物質；ＧＩ２６２５７０等のＰＰＡＲγ作動薬；ＰＰＡＲγ拮抗薬；テサグリタザル、ムラグリタザルおよびＫＲＰ２９７等のＰＰＡＲγ／α修飾物質；ＰＰＡＲγ／α／δ修飾物質；ＡＩＣＡＲ等のＡＭＰＫ活性化剤；アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ１およびＡＣＣ２）阻害剤；ジアシルグリセロール−アセチルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ）阻害剤；ＳＭＴ３受容体作動薬およびＧＰＲ１１９等の膵臓β細胞ＧＣＲＰ作動薬；１１β−ＨＳＤ阻害剤；ＦＧＦ１９作動薬または類似体；アカルボース、ボグリボースおよびミグリトール等のαグルコシダーゼ遮断薬；α２拮抗薬；ヒトインスリン、インスリンリスプロ、インスリングルシリン（ｉｎｓｕｌｉｎ ｇｌｕｓｉｌｉｎ）、ｒ−ＤＮＡインスリンアスパルト、ＮＰＨインスリン、インスリンデテミール、インスリン亜鉛懸濁液およびインスリングラルギン等のインスリンおよびインスリン類似体；胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）；プラムリンチド；アミリンまたはＥｘｅｎｄｉｎ−４等のＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１類似体、例えばエクセナチド、エクセナチドＬＡＲ、リラグルチド、タスポグルチドまたはアルビグルチド等；ＫＧＴ−１２５１等のＳＧＬＴ２阻害剤；タンパク質チロシンホスファターゼの阻害剤；グルコース−６−ホスファターゼの阻害剤；フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ修飾物質；グリコーゲンホスホリラーゼ修飾物質；グルカゴン受容体拮抗薬；ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）阻害剤；ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＫ）阻害剤；ＰＤＧＦ受容体キナーゼ等のチロシンキナーゼの阻害剤（５０ｍｇ〜６００ｍｇ）（ＥＰ−Ａ−５６４４０９、国際公開第９８／３５９５８号、米国特許第５０９３３３０号、国際公開第２００４／００５２８１号、および国際公開第２００６／０４１９７６号を参照）；グルコキナーゼ活性化剤を含むグルコキナーゼ／調節タンパク質修飾物質；グリコーゲン合成酵素キナーゼ阻害剤；ＳＨ２ドメイン含有イノシトール５−ホスファターゼ２型（ＳＨＩＰ２）の阻害剤；高用量サリチレート等のＩＫＫ阻害剤；ＪＮＫ１阻害剤；タンパク質キナーゼＣ−θ阻害剤；リトベグロン、ＹＭ１７８、ソラベグロン、タリベグロン、Ｎ−５９８４、ＧＲＣ−１０８７、ラファベグロン、ＦＭＰ８２５等のβ３作動薬；ＡＳ３２０１、ゼナレスタット、フィダレスタット、エパルレスタット、ラニレスタット、ＮＺ−３１４、ＣＰ−７４４８０９、およびＣＴ−１１２等のアルドース還元酵素阻害剤；ＳＧＬＴ−１またはＳＧＬＴ−２阻害剤；ＫＶ１．３チャンネル阻害剤；ＧＰＲ４０修飾物質；ＳＣＤ−１阻害剤；ＣＣＲ−２拮抗薬；ドーパミン受容体作動薬（メシル酸ブロモクリプチン／Ｃｙｃｌｏｓｅｔ）；ならびに他のＤＰＰ ＩＶ阻害剤である。

抗糖尿病組合せパートナーの好ましい例はメトホルミンであり、これは通常、様々な投薬計画を用いて、１日当たり約２５０ｍｇ〜３０００ｍｇ、具体的には５００ｍｇ〜２０００ｍｇから２５００ｍｇまでの様々な用量、例えば、通常約１００ｍｇ〜５００ｍｇもしくは２００ｍｇ〜８５０ｍｇ（１日１〜３回）、または１日１回もしくは２回約３００ｍｇ〜１０００ｍｇの用量で与えられ、あるいは、１日１回もしくは２回約１００ｍｇ〜１０００ｍｇもしくは好ましくは５００ｍｇ〜１０００ｍｇ、または１日１回約５００ｍｇ〜２０００ｍｇの用量の遅延放出メトホルミンが与えられる。具体的な用量強度は、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、６２５ｍｇ、７５０ｍｇ、８５０ｍｇおよび１０００ｍｇの塩酸メトホルミンであってもよい。

別の好ましい例は、通常１日１回約１〜１０ｍｇ、１５ｍｇ、３０ｍｇ、または４５ｍｇの用量のピオグリタゾンである。
ロシグリタゾンは、通常、１日１回（または２回に分割）４〜８ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は２ｍｇ、４ｍｇおよび８ｍｇである）。

グリベンクラミド（グリブリド）は、通常、１日１回（または２回に分割）２．５〜５ｍｇから２０ｍｇの用量で与えられ（典型的な用量強度は１．２５ｍｇ、２．５ｍｇおよび５ｍｇである）、または、微粉化されたグリベンクラミドが１日１回（または２回に分割）０．７５〜３ｍｇから１２ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は１．５ｍｇ、３ｍｇ、４．５ｍｇおよび６ｍｇである）。

グリピジドは、通常、１日１回（２回に分割して最大４０ｍｇ）２．５ｍｇから１０〜２０ｍｇの用量で与えられ（典型的な用量強度は５ｍｇおよび１０ｍｇである）、または、徐放性グリピジドが１日１回５〜１０ｍｇ（最大２０ｍｇ）の用量で与えられる（典型的な用量強度は２．５ｍｇ、５ｍｇおよび１０ｍｇである）。

グリメピリドは、通常、１日１回１〜２ｍｇから４ｍｇ（最大８ｍｇ）の用量で与えられる（典型的な用量強度は１ｍｇ、２ｍｇおよび４ｍｇである）。
グリベンクラミド／メトホルミンの二成分の組合せは、通常、１日１回１．２５／２５０〜１日２回１０／１０００ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は１．２５／２５０ｍｇ、２．５／５００ｍｇおよび５／５００ｍｇである）。グリピジド／メトホルミンの二成分の組合せは、通常、１日２回２．５／２５０〜１０／１０００ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は２．５／２５０ｍｇ、２．５／５００ｍｇおよび５／５００ｍｇである）。グリメピリド／メトホルミンの二成分の組合せは、通常、１日２回１／２５０〜４／１０００ｍｇの用量で与えられる。

ロシグリタゾン／グリメピリドの二成分の組合せは、通常、１日１回または２回４／１〜１日２回４／２ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は４／１ｍｇ、４／２ｍｇ、４／４ｍｇ、８／２ｍｇおよび８／４ｍｇである）。ピオグリタゾン／グリメピリドの二成分の組合せは、通常、１日１回３０／２〜３０／４ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は３０／４ｍｇおよび４５／４ｍｇである）。ロシグリタゾン／メトホルミンの二成分の組合せは、通常、１日２回１／５００〜４／１０００ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は１／５００ｍｇ、２／５００ｍｇ、４／５００ｍｇ、２／１０００ｍｇおよび４／１，０００ｍｇである）。ピオグリタゾン／メトホルミンの二成分の組合せは、通常、１日１回または２回１５／５００〜１日３回１５／８５０ｍｇの用量で与えられる（典型的な用量強度は１５／５００ｍｇおよび１５／８５０ｍｇである）。

非スルホニル尿素インスリン分泌促進剤ナテグリニドは、通常、食事とともに６０〜１２０ｍｇの用量で与えられ（最大３６０ｍｇ／日、典型的な用量強度は６０ｍｇおよび１２０ｍｇである）；レパグリニドは、通常、食事とともに０．５〜４ｍｇの用量で与えられる（最大１６ｍｇ／日、典型的な用量強度は０．５ｍｇ、１ｍｇおよび２ｍｇである）。レパグリニド／メトホルミンの二成分の組合せは、１／５００ｍｇおよび２／８５０ｍｇの用量強度で使用可能である。
アカルボースは、通常、食事とともに２５〜１００ｍｇの用量で与えられる（最大３００ｍｇ／日、典型的な用量強度は２５ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇである）。ミグリトールは、通常、食事とともに２５〜１００ｍｇの用量で与えられる（最大３００ｍｇ／日、典型的な用量強度は２５ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇである）。

血液中の脂質レベルを低下させる組合せパートナーの例は、シンバスタチン、アトルバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチンおよびロスバスタチン等のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤；ベザフィブラート、フェノフィブラート、クロフィブラート、ゲムフィブロジル、エトフィブラートおよびエトフィルリンクロフィブラート等のフィブラート；アシピモックス等のニコチン酸およびその誘導体；ＰＰＡＲα作動薬；ＰＰＡＲδ作動薬；アバシミベ等のアシルコエンザイムＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ；ＥＣ２．３．１．２６）の阻害剤；エゼチミブ等のコレステロール吸収阻害剤；コレスチラミン、コレスチポールおよびコレセベラム等の胆汁酸に結合する物質；胆汁酸輸送阻害剤；Ｄ４Ｆ、リバースＤ４Ｆ、ＬＸＲ調節活性物質およびＦＸＲ調節活性物質等のＨＤＬ調節活性物質；トルセトラピブ、ＪＴＴ−７０５／ダルセトラピブ、アナセトラピブまたは国際公開第２００７／００５５７２号の化合物１２等のＣＥＴＰ阻害剤；ＬＤＬ受容体修飾物質；ならびにＡｐｏＢ１００アンチセンスＲＮＡである。
パートナー薬アトロバスタチンの用量は、通常、１日１回１ｍｇ〜４０ｍｇ、または１０ｍｇ〜８０ｍｇである。

血圧を低下させる組合せパートナーの例は、アテノロール、ビソプロロール、セリプロロール、メトプロロールおよびカルベジロール等のβ遮断薬；ヒドロクロロチアジド、クロルタリドン（ｃｈｌｏｒｔａｌｉｄｏｎ）、キシパミド、フロセミド、ピレタニド、トラセミド、スピロノラクトン、エプレレノン、アミロライドおよびトリアムテレン等の利尿薬；アムロジピン、ニフェジピン、ニトレンジピン、ニソルジピン、ニカルジピン、フェロジピン、ラシジピン、レルカニジピン、マニジピン、イスラジピン、ニルバジピン、ベラパミル、ガロパミルおよびジルチアゼム等のカルシウムチャンネル遮断薬；ラミプリル、リシノプリル、シラザプリル、キナプリル、カプトプリル、エナラプリル、ベナゼプリル、ペリンドプリル、フォシノプリルおよびトランドラプリル等のＡＣＥ阻害剤；ならびにテルミサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、ロサルタン、イルベサルタン、オルメサルタンおよびエプロサルタン等のアンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ）である。
パートナー薬テルミサルタンの用量は、通常、１日２０ｍｇ〜３２０ｍｇ、または４０ｍｇ〜１６０ｍｇである。

血液中のＨＤＬレベルを増加させる組合せパートナーの例は、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤；血管内皮リパーゼの阻害剤；ＡＢＣ１の調節因子；ＬＸＲα拮抗薬；ＬＸＲβ作動薬；ＰＰＡＲδ作動薬；ＬＸＲα／β調節因子、ならびにアポリポタンパク質Ａ−Ｉの発現および／または血漿濃度を増加させる物質である。
肥満の治療のための組合せパートナーの例は、シブトラミン；テトラヒドロリプスタチン（オルリスタット）；アリザイム；デクスフェンフルラミン；アクソキン；ＣＢ１拮抗薬リモナバント（ｒｉｍｏｎｏｂａｎｔ）等のカンナビノイド受容体１拮抗薬；ＭＣＨ−１受容体拮抗薬；ＭＣ４受容体作動薬；ＮＰＹ５およびＮＰＹ２拮抗薬；ＳＢ−４１８７９０およびＡＤ−９６７７等のβ３−ＡＲ作動薬；ＡＰＤ３５６等の５ＨＴ２ｃ受容体作動薬；ミオスタチン阻害剤；Ａｃｒｐ３０およびアディポネクチン；ステロイルＣｏＡデサチュラーゼ（ＳＣＤ１）阻害剤；脂肪酸合成酵素（ＦＡＳ）阻害剤；ＣＣＫ受容体作動薬；Ｇｈｒｅｌｉｎ受容体修飾物質；Ｐｙｙ３−３６；オレキシン受容体拮抗薬；ならびにテソフェンシンである。

アテローム性動脈硬化の治療のための組合せパートナーの例は、ホスホリパーゼＡ２阻害剤；ＰＤＧＦ受容体キナーゼ等のチロシンキナーゼの阻害剤（５０ｍｇ〜６００ｍｇ）（ＥＰ−Ａ−５６４４０９、国際公開第９８／３５９５８号、米国特許第５０９３３３０号、国際公開第２００４／００５２８１号、および国際公開第２００６／０４１９７６号を参照）；ｏｘＬＤＬ抗体およびｏｘＬＤＬワクチン；ａｐｏＡ−１ Ｍｉｌａｎｏ；ＡＳＡ；ならびにＶＣＡＭ−１阻害剤である。
酸化防止剤組合せパートナーの例は、セレン、ベタイン、ビタミンＣ、ビタミンＥおよびベータカロテンである。

抗炎症組合せパートナーの例はペントキシフィリンであり；抗炎症組合せパートナーの別の例は、例えばテトミラスト、ロフルミラスト、または３−［７−エチル−２−（メトキシメチル）−４−（５−メチル−３−ピリジニル）ピロロ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル］プロパン酸（または米国特許第７１５３８５４号、国際公開第２００４／０６３１９７号、米国特許第７４５９４５１号および／もしくは国際公開第２００６／００４１８８号に開示されている他の種）等のＰＤＥ−４阻害剤である。
抗炎症パートナー薬のさらなる例は、例えば（３Ｓ）−５−フルオロ−３−（｛［（５Ｒ）−５−イソプロピル−３−（１−イソキノリニル）−４，５−ジヒドロ−５−イソオキサゾリル］カルボニル｝アミノ−４−オキソペンタン酸（または国際公開第２００５／０２１５１６号および／もしくは国際公開第２００６／０９０９９７号に開示されている他の種）等のカスパーゼ阻害剤である。

血管内皮保護剤の例は、例えばシルデナフィル、バルデナフィルまたはタダラフィル等のＰＤＥ−５阻害剤であり；血管内皮保護剤の別の例は、酸化窒素供与体である。
さらに、本発明の意味の範囲内において、追加的に、ＤＰＰ−４阻害剤は、１種または複数のＣＣＫ−２またはガストリン作動薬、例えばプロトンポンプ阻害剤（胃Ｈ＋／Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅの可逆的および不可逆的阻害剤を含む）等、例えばオメプラゾール、エソメプラゾール、パントプラゾール、ラベプラゾールまたはランソプラゾールと組み合わせてもよい。
本発明の意味の範囲内において重視される特に好ましいＤＰＰ−４阻害剤は、１−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン遊離塩基（ＢＩ１３５６としても知られる）である。

本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態により範囲が限定されるものではない。本明細書に記載のものに加え、本開示から、本発明の様々な修正が当業者には明らかとなり得る。そのような修正は、添付の特許請求の範囲内に包含されることが意図される。
本明細書において引用されるすべての特許出願は、参照によりその全内容が本明細書に組み込まれる。
以下の例から、本発明のさらなる実施形態、特徴および利点が明らかとなり得る。以下の例は、本発明の原理を制限することなくさらに例示的に示し、かつ／または本発明の理解を補助する役割を果たすが、限定として解釈されない。

［例］
齧歯類における肝脂肪変性の実験モデル
動物および特別食
ａ）開始時６〜７週齢の雌ｄｂ／ｄｂマウス［Ｃ５７ＢＬＫＳ／Ｂｏｍ−ｄｂ／ｄｂ；Ｃｈａｒｌｅｓ−Ｒｉｖｅｒ社、Ｇｅｒｍａｎｙ］を、ＤＰＰ−４阻害剤で８週間処置する。動物を、５〜６匹のマウスの群で、餌および水道水に自由にアクセスできる状態でＭａｋｒｏｌｏｎ（登録商標）ケージ内に維持する。部屋を次のように維持する：明暗リズム［午前６時〜午後６時に点灯］、室温２２±２℃、相対湿度５０±１０％。ＤＰＰ−４阻害剤を０．５％［ｗ／ｖ］ナトロゾルに懸濁させる。５ｍｌ／ｋｇの量の強制投与によるＤＰＰ−４阻害剤の３ｍｇ／ｋｇ／日の連日単回経口投与を行う。対照動物には０．５％［ｗ／ｖ］ナトロゾルを同じく５ｍｌ／ｋｇの量で与える。処置期間の最後［処置開始から８週間後］に、動物を解剖して肝生検試料を採取する。
ｂ）開始時８〜１０週齢の雄ＺＤＦラット（ＺＤＦ／Ｃｒｌ−ｌｅｐｒ^fa）を、３ｍｇ／ｋｇ／日の用量でＤＰＰ−４阻害剤で３５日間毎日処置する。適用量は３ｍｌ／ｋｇナトロゾルである。動物（ｎ＝８〜１０）を単一のケージ内に収容する。部屋を次のように維持する：明暗リズム［午前６時〜午後６時に点灯］、室温２２±２℃、相対湿度５０±１０％。

ｃ）食事誘導性脂肪症：雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス［Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ社、Ｇｅｒｍａｎｙから供給］に、９週齢時に開始して、高脂肪食［Ｄ１２４９２、脂肪６０％ｋｃａｌ、５．２４ｋｃａｌ／ｇ、Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｅｔｓ社製、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＵＳＡ］を給餌する。動物には適宜餌および水を与える。動物を制御された条件下および明暗リズム［午前６時〜午後６時に点灯］に維持する。処置を開始する前に、動物に７週間高脂肪食を与える。その後、動物をＤＰＰ−４阻害剤で処置する（０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日経口、０．５％ナトロゾルまたはビヒクル中に懸濁、１日１回６週間）。一晩絶食後、動物を屠殺し、さらなる分析のために肝臓を摘出する。
ｄ）ＭＣＤ誘導性脂肪症：雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス［Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ社、Ｇｅｒｍａｎｙから供給］に、実験期間にわたり通常食またはＭＣＤ（低メチオニンおよび低コリン食）（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ社製、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＵＳＡ）および水道水を適宜与える。まず、１週間の隔離および馴化期間の間、すべてのマウスに通常食を給餌する。次いで、９週齢時に、隔離および馴化期間の終わりに異常所見を示さないマウスを無作為に群（マウス８〜１０匹／群）に分け、次のように５週間処置する：群１（通常）、通常食およびビヒクル（０．５％［ｗ／ｖ］ナトロゾル）を給餌；群２（ＭＣＤ対照）、ＭＣＤ食およびビヒクルを給餌；群３、ＭＣＤ食およびＤＰＰ−４阻害剤（３ｍｇ／ｋｇ／日）を給餌。実験期間の最後に、マウスの尾静脈から血液試料を採取し、肝臓を採取した。剖検および組織学の項のように、炎症および線維症の組織学的分析を行う。

肝臓トリグリセリド含量の検出
肝葉を溶解緩衝液（０．５％ポリオキシエチレン１０トリデシルエーテル（Ｓｉｇｍａ社製、Ｐ２３９３）、０．０１Ｍ ＮａＰｉ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）中で均質化することにより、肝臓トリグリセリド測定用試料を得る。肝組織は、事前に同じ緩衝液中で９５℃で１０分間加熱する。最初の均質化の後、ＭＰ Ｂｉｏｔｅｃｈ（ＦａｓｔＰｒｅｐ−２４）機器およびオレンジキャップを使用して試料をさらに処理する（２×４５秒）。次いで試料を３０００ｒｐｍで２分間遠心分離する。上清をさらなる分析のために回収する。Ｓｉｇｍａ血清トリグリセリドキット（Ｓｉｇｍａ社製、ＴＲ０１００）を使用して、トリグリセリド含量を測定する。

剖検および組織学
適宜給餌した動物に対し剖検を行う。動物を３％イソフルラン／酸素［Ｉｓｏｂａ（登録商標）、バッチＪ１０４１７、Ｅｓｓｅｘ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ製、８１７３７、Ｇｅｒｍａｎｙ］で麻酔する。後の顕微鏡検査のために肝臓を摘出し４％パラホルムアルデヒド（ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｈｙｄ）溶液中で固定する。光学顕微鏡により、肝リピドーシスを盲検的および半定量的に評価する。コード化されたスライド上で盲検的にスライドを検査し、以下のスキームに従いすべてのパラメータ（例えば脂肪症、炎症）を半定量的に評点する（重症度指数）。
スコア１＝変化なし
スコア２＝僅かな変化（罹患した肝組織＜５％）
スコア３＝軽度の変化（罹患した肝組織５〜１５％）
スコア４＝中程度の変化（罹患した肝組織１５〜２５％）
スコア５＝重度の変化（罹患した肝組織＞２５％）

ＮＭＲ分光法を用いた肝脂肪変性の判定
ＮＭＲ分光法による肝臓脂質含量のインビボ測定のために、食事誘導性脂肪症のＣ５７ＢＬ／６マウスを、Ｎ₂Ｏ：Ｏ₂（７０：３０、ｖ：ｖ）ガス混合物中２％イソフルランの連続吸入により麻酔する。ＮＭＲ測定は、ＢＧＡ１２勾配コイルシステムを備えたＢｒｕｋｅｒ ＢｉｏＳｐｅｃ４７／４０スキャナ（Ｂｒｕｋｅｒ ＢｉｏＳｐｉｎ社製、Ｅｔｔｌｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）で行う。ボリュームコイルを励起に使用し、表面コイルを信号受信に使用する。解剖学的方位について、ＴＲ １３５ｍｓ、ＴＥ ３．５ｍｓ、視野４５×４５ｍｍ²、マトリックス１２８²、スライス厚１．７５ｍｍのパラメータで、勾配エコーパルスシーケンスを使用して水平および軸方向ＭＲ像を含む試験的スキャンを得る。試験的スキャンに従い、対象ボクセル（ＶＯＩ、３×３×３ｍｍ³）を肝臓の左腹側部に置く。ＴＲ １０５０ｍｓ、ＴＥ ２０ｍｓ、平均数３２、デジタル分解能１０２４データ点のパラメータで、ＰＲＥＳＳシーケンス（点分解分光）を使用してＶＯＩにおける肝臓脂質をＮＭＲ分光法で測定する。市販のソフトウェアパッケージ、Ｓ．Ｗ．ＰｒｏｖｅｎｃｈｅｒによるＬＣＭｏｄｅｌを使用して、データを分析する。
上記動物モデルｃ）（食事誘導肥満マウス）では、ＢＩ１３５６について以下の結果が得られる。
ＤＩＯマウス、２カ月の高脂肪食（肝脂肪、処置後２９日目／対照）：図１
ＤＩＯマウス、４カ月の高脂肪食（肝脂肪、処置後２１日目／対照）：図２
本発明のＤＰＰ−４阻害剤の脂肪肝疾患に対する効果は、本明細書に記載のモデルにおいてテストすることができ、かつ／または上述および後述の方法により試験および検出することができる。様々な形態の線維症に対する効果は、以下の検出法に従い試験することができる：

線維症の検出のための方法
ＲＴ−ＰＣＲによる特定のｍＲＮＡの定量的測定
急速冷凍組織約５０ｍｇの溶解緩衝液中での破壊および均質化の後、全ＲＮＡをＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ−ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ社製、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して単離する。
Ｉ型コラーゲン、ＴＧＦ−β１、プロコラーゲンα１（Ｉ）、ＴＩＭＰ−１（マトリックスメタロプロテイナーゼ−１の組織阻害剤）、メタロプロテアーゼ１、２、３、８、９、１３（ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３）、ＰＤＧＦ−β受容体およびα−平滑筋細胞アクチンの転写産物をＴＱ−ＰＣＲで分析し、ＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡに対して正規化する。

コラーゲンのシリウスレッド染色
ホルマリン固定パラフィン包埋組織からの５μｍ厚の切片を調製し、シリウスレッド（０．１％（ｗ／ｖ）シリウスレッドＦ３Ｂ（ＢＤＨ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社製、ＵＫ）を含有する蒸留水中の飽和ピクリン酸）で染色して肝線維症を可視化する。一連の実験からのすべての試料を同時に染色し、盲検的に評価する。

剖検および組織学
適宜給餌した動物に対し剖検を行う。動物を３％イソフルラン／酸素［Ｉｓｏｂａ（登録商標）、バッチＪ１０４１７、Ｅｓｓｅｘ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ製、８１７３７、Ｇｅｒｍａｎｙ］で麻酔する。後の顕微鏡検査のために臓器（肝臓、腎臓、肺等）を摘出し、４％パラホルムアルデヒド（ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｈｙｄ）溶液中で固定する。光学顕微鏡により、線維症を盲検的および半定量的に評価する。コード化されたスライド上で盲検的にスライドを検査し、以下のスキームに従いすべてのパラメータを半定量的に評点する（重症度指数）¹。
スコア０＝線維症なし
スコア１＝一部の門脈管が膨張
スコア２＝ほとんどの門脈管が膨張
スコア３＝ほとんどの門脈管が膨張、＋／−結合
スコア４＝顕著な架橋（Ｐ−ＰおよびＰ−Ｃ結合）
スコア５＝顕著な架橋、時折の結節（不完全な肝硬変）
スコア６＝おそらくまたは確実に肝硬変
¹）Ｉｓｈａｋら、Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌ ２２：６９６、１９９５

磁気共鳴弾性率計測法を用いた線維症の判定
線維症は、組織の硬さおよび粘性の増加に関連する。生体組織の粘弾性は、組織を通る低周波機械的せん断波の伝播を測定することにより、磁気共鳴弾性率計測法（ＭＲＥ）で評価することができる。せん断波の伝播は、非侵襲的磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）により可視化され、そこから組織の機械的特性のパラメータを導出することができる。前臨床試験では、ＭＲＥは、線維症の既知の段階間を区別することができ、またその方法の結果は生検の判断基準の結果に対応することが示されている²。
²）Ｓａｌａｍｅｈら、Ｊ．Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｉｍａｇｉｎｇ ２６：９５６、２００７
体重に対する効果：図３

Claims (17)

1. 非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための、第１の実施形態（実施形態Ａ）において、
   式（Ｉ）
   

   

   または式（ＩＩ）
   

   

   または式（ＩＩＩ）
   

   

   または式（ＩＶ）
   

   

   （式中、Ｒ１は、（［１，５］ナフチリジン−２−イル）メチル、（キナゾリン−２−イル）メチル、（キノキサリン−６−イル）メチル、（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル、２−シアノ−ベンジル、（３−シアノ−キノリン−２−イル）メチル、（３−シアノ−ピリジン−２−イル）メチル、（４−メチル−ピリミジン−２−イル）メチル、もしくは（４，６−ジメチル−ピリミジン−２−イル）メチルを示し、Ｒ２は、３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル、（２−アミノ−２−メチル−プロピル）−メチルアミノもしくは（２−（Ｓ）−アミノ−プロピル）−メチルアミノを示す）
   またはその薬学的に許容される塩のＤＰＰ−４阻害剤；
   あるいは、第２の実施形態（実施形態Ｂ）において、
   シタグリプチン、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、アログリプチン、
   （２Ｓ）−１−｛［２−（５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エチルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
   （２Ｓ）−１−｛［１，１，−ジメチル−３−（４−ピリジン−３−イル−イミダゾール−１−イル）−プロピルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
   （Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）−２−アミノ−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−３−イル）−４−フルオロメチル−ピロリジン−２−オン、
   （３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピロリジン−２−イル）メタノン、
   （１（（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−１−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１，３，５−トリアジン−２−イル）ピロリジン−３−イル）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−オン、
   （２Ｓ，４Ｓ）−１−｛２−［（３Ｓ，１Ｒ）−３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル）シクロペンチルアミノ］−アセチル｝−４−フルオロピロリジン−２−カルボニトリル、
   （Ｒ）−２−［６−（３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イルメチル］−４−フルオロ−ベンゾニトリル、および
   ５−｛（Ｓ）−２−［２−（（Ｓ）−２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−プロピル｝−５−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−２，８−ジカルボン酸ビス−ジメチルアミド、
   またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるＤＰＰ−４阻害剤。
2. １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−［（［１，５］ナフチリジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−［（キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   ２−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−（ブト−２−イニル）−５−（４−メチル−キナゾリン−２−イルメチル）−３，５−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｄ］ピリダジン−４−オン、
   １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−［（２−アミノ−２−メチル−プロピル）−メチルアミノ］−キサンチン、
   １−［（３−シアノ−キノリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−（２−シアノ−ベンジル）−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−［（Ｓ）−（２−アミノ−プロピル）−メチルアミノ］−キサンチン、
   １−［（３−シアノ−ピリジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−［（４−メチル−ピリミジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   １−［（４，６−ジメチル−ピリミジン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、および
   １−［（キノキサリン−６−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチン、
   またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項１に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
3. シタグリプチン、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、アログリプチン、
   （２Ｓ）−１−｛［２−（５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル）−エチルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
   （２Ｓ）−１−｛［１，１，−ジメチル−３−（４−ピリジン−３−イル−イミダゾール−１−イル）−プロピルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル、
   （Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）−２−アミノ−９，１０−ジメトキシ−１，３，４，６，７，１１ｂ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，１−ａ］イソキノリン−３−イル）−４−フルオロメチル−ピロリジン−２−オン、
   （３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピロリジン−２−イル）メタノン、
   （１（（３Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−１−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１，３，５−トリアジン−２−イル）ピロリジン−３−イル）−５，５−ジフルオロピペリジン−２−オン、
   （２Ｓ，４Ｓ）−１−｛２−［（３Ｓ，１Ｒ）−３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル）シクロペンチルアミノ］−アセチル｝−４−フルオロピロリジン−２−カルボニトリル、および
   （Ｒ）−２−［６−（３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−３−メチル−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イルメチル］−４−フルオロ−ベンゾニトリル、
   またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項１に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
4. １−［（４−メチル−キナゾリン−２−イル）メチル］−３−メチル−７−（２−ブチン−１−イル）−８−（３−（Ｒ）−アミノ−ピペリジン−１−イル）−キサンチンである、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項１に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
5. 前記非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）が、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および肝線維症からなる群から選択される、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
6. 肝脂肪変性の治療および／または予防における使用のための請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
7. 非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療および／または予防における使用のための請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
8. 肝線維症の治療および／または予防における使用のための請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤。
9. 請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤を含む、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための医薬組成物。
10. メトホルミンをさらに含む、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項９に記載の医薬組成物。
11. ピオグリタゾンをさらに含む、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防における使用のための請求項９に記載の医薬組成物。
12. 肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（特に糖尿病性ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防用医薬組成物の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤の使用。
13. 非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）／非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、特に糖尿病に関連したＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの治療および／または予防用医薬組成物の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤の使用。
14. 医薬組成物が、例えば活性成分の別個の、連続的、同時、併用、または時間的に交互の使用のため等の、血糖レベルの低下に使用される活性物質、血液中の脂質レベルの低下に使用される活性物質、血液中のＨＤＬレベルの上昇に使用される活性物質、血圧の低下に使用される活性物質、アテローム性動脈硬化の治療に使用される活性物質、肥満の治療に使用される活性物質、酸化防止剤、および抗炎症薬を含む抗糖尿病物質からなる群から選択される１種または複数の他の活性物質をさらに含む、請求項１２または１３に記載の使用。
15. 血糖レベルの低下に使用される活性物質、血液中の脂質レベルの低下に使用される活性物質、血液中のＨＤＬレベルの上昇に使用される活性物質、血圧の低下に使用される活性物質、アテローム性動脈硬化の治療に使用される活性物質、肥満の治療に使用される活性物質、酸化防止剤、および抗炎症薬を含む抗糖尿病物質からなる群から選択される１種または複数の他の活性物質と組み合わせた、肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防用医薬組成物の製造のための、請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤の使用。
16. 前記他の活性物質が、メトホルミンを含むビグアニド、ピオグリタゾンを含むチアゾリジノン、アトルバスタチンを含むスタチン、およびテルミサルタンを含むＡＲＢからなる群から選択される、請求項１４または１５に記載の使用。
17. 肝脂肪変性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または肝線維症を含む非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療および／または予防のための説明の他に、血糖レベルの低下に使用される活性物質、血液中の脂質レベルの低下に使用される活性物質、血液中のＨＤＬレベルの上昇に使用される活性物質、血圧の低下に使用される活性物質、アテローム性動脈硬化の治療に使用される活性物質、肥満の治療に使用される活性物質、酸化防止剤、抗炎症薬、および血管内皮保護剤を含む抗糖尿病物質からなる群から選択される１種、２種またはそれ以上の他の活性物質と組み合わせてもよい、請求項１から４のいずれか１項に記載のＤＰＰ−４阻害剤を含む医薬組成物を含有する、医薬パッケージ。

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