JP2003342180A - マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物、並びに皮膚外用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 紫外線照射により真皮線維芽細胞
において産生が誘導されるマトリックスメタロプロテア
ーゼに対し、特異的かつ高い阻害活性を示すマトリック
スメタロプロテアーゼ阻害用組成物を得、更に、紫外線
照射により促進される皮膚の老化の防止，改善に有効な
皮膚外用剤を提供する。 【解決手段】 ゲットウの花、若しくは根から得
られる抽出物を担体又は基剤に含有させて、マトリック
スメタロプロテアーゼ阻害用組成物とし、さらにこのマ
トリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物の１種又は
２種以上を外用剤基剤に含有させて、皮膚外用剤を得
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、真皮線維芽細胞の
産生するＩ型マトリックスメタロプロテアーゼに対し、
特異的な阻害活性を示すマトリックスメタロプロテアー
ゼ阻害用組成物、及びこれを含有して成る皮膚外用剤に
関する。更に詳しくは、ゲットウの花から得られる抽出
物，ゲットウの根から得られる抽出物から選択される１
種又は２種以上を含有して成るマトリックスメタロプロ
テアーゼ阻害用組成物、並びにこれを含有して成る、特
に紫外線により促進される皮膚の老化防止に有効な皮膚
外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、マトリックス線維の分解を促進す
るマトリックスメタロプロテアーゼと病態との関係につ
いて、多くの知見が得られている。真皮においては、紫
外線照射により線維芽細胞によるマトリックスメタロプ
ロテアーゼの産生が誘導され、その結果、真皮細胞外マ
トリックスの主成分であるコラーゲンの分解が促進さ
れ、しわの形成や弾性の低下といった皮膚の老化が進行
することが知られている。

【０００３】かかる紫外線により促進される皮膚の老化
を改善し、あるいは防止するべく、紫外線吸収剤，散乱
剤の皮膚外用剤への配合や、紫外線照射により生じる活
性酸素の消去作用を有する物質のスクリーニングが盛ん
に行われてきた。それと同時に、上記したようなコラー
ゲンの分解に関与するマトリックスメタロプロテアーゼ
の活性を阻害する物質のスクリーニングも行われてい
る。

【０００４】例えば、アシルフェニルグリシン誘導体
（特開平７−１０１９２５）、ザクロ実，レモンバーム
実及び葉，グアバ，ハマメリスといった植物の抽出物
（特開平７−１９６５２６，同７−２９１８７３，同８
−２８３１３３）、ポリポレン酸及びこれを含有するホ
ウロクタケ抽出物（特開平９−４０５５２）、ジカルボ
ン酸（特開平９−１２４４７２）、アスペルギルス属微
生物の産生物質（特開平９−２４１２８７）などが開示
されている。

【０００５】しかしながら、これまでに得られたマトリ
ックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物の中には、細菌
性のコラゲナーゼ等に対し強い活性を示し、間質系のマ
トリックスメタロプロテアーゼに対する特異性の低いも
の、阻害活性の十分でないもの、安定性に欠けるものも
存在していた。

【０００６】また、真皮コラーゲン線維束の乱れを改善
する作用を有するものとして、ウルソール酸類、バラ科
のビワ及びモモ、クロウメモドキ科ナツメ、キク科ヤグ
ルマギク、シソ科タイム，ローズマリー，セージ，シ
ソ，オドリコソウ及びセイヨウハッカの抽出物が知られ
ているが、これらによりコラーゲン線維を再構築するに
は長時間を要し、抗炎症作用を有する物質との併用が望
ましいことが示されている（特開平１１−１２１２
２）。

【０００７】一方、ゲットウ（月桃，Alpinia speciosa
(Wendl.) K. Schuｍ.）は、別名サンニンとも呼ばれる
ショウガ科（Zingiberaceae）ハナミョウガ属（Alpini
a）の植物で、葉から得られる精油成分には抗酸化作
用，防腐作用，消臭作用，防虫作用があることが知られ
る沖縄などで古くから利用されている植物であり、ま
た、ゲットウの精油成分の分析，精油の利用方法につい
ても数多くの報告がなされている。

【０００８】香粧品分野におけるゲットウ抽出物の利用
については、ゲットウの一種であるタイリンゲットウの
生葉を搾汁して粉砕乾燥した細片を有効成分とする入浴
剤（特開平１１−３４９４７１）、ゲットウの葉又は茎
からの抽出液もしくは圧搾液を配合して成る、ニキビ及
び肌荒れの改善に有効な薬用化粧料（特開２０００−１
９１４９３）、ゲットウ抽出物（主に精油）を有効成分
として含有する育毛剤又は発毛剤（特開２０００−３５
５５２５）、ゲットウの茎抽出物を含有する抗酸化剤
（特開平９−６１５）、ゲットウ葉又は茎抽出物の線維
芽細胞増殖促進作用，細胞賦活作用，コラーゲン産生促
進作用，コラゲナーゼ阻害作用（特開２００１−３１６
２７５，同２００２−３３９０，フレグランスジャーナ
ル，５，８６−９１(２００１)）等が開示され、ゲット
ウ抽出物の様々な効果が注目されている。

【０００９】しかしながら、ゲットウの花、若しくは根
からの抽出物の有効性に注目し、マトリックスメタロプ
ロテアーゼ阻害用組成物として応用することに関しては
全く知られていない。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明においては、紫
外線照射により真皮線維芽細胞において産生が誘導され
るマトリックスメタロプロテアーゼに対し、特異的かつ
高い阻害活性を示すマトリックスメタロプロテアーゼ阻
害用組成物を得、さらにこれを用いて、紫外線照射によ
り促進される皮膚の老化の防止，改善に有効な皮膚外用
剤を提供することを目的とした。

【００１１】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するべ
く、真皮線維芽細胞により産生されるマトリックスメタ
ロプロテアーゼに対する阻害活性を指標としてスクリー
ニングを行った。その結果、ゲットウの花から得られる
抽出物，ゲットウの根から得られる抽出物が良好な阻害
活性を示し、更に皮膚外用剤製剤中においても安定に阻
害活性を保持することができ、しかも皮膚に対する安全
性も高いことを見いだした。これらは、紫外線照射の際
に共存させた場合、その後に誘導されるマトリックスメ
タロプロテアーゼの産生を有効に阻害することができ、
本発明者らは前記抽出物から選んだ１種又は２種以上を
担体又は基剤に含有させることにより、本発明に係るマ
トリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物を得た。そ
して、このマトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成
物を用いて、紫外線により促進される皮膚の老化の防
止，改善に有効な皮膚外用剤を得た。

【００１２】すなわち本発明においては、ゲットウの花
から得られる抽出物，ゲットウの根から得られる抽出物
から選択した１種又は２種以上を、そのまま若しくは担
体又は基剤に含有させて、マトリックスメタロプロテア
ーゼ阻害用組成物とし、更に、このマトリックスメタロ
プロテアーゼ阻害用組成物の１種又は２種以上を外用剤
基剤に含有させて、皮膚外用剤を得る。

【００１３】

【発明の実施の形態】ゲットウ（Alpinia speciosa (We
ndl.) K. Schuｍ.）は、ショウガ（Zingiberaceae）科
ハナミョウガ（Alpinia）属に属する植物であり、本発
明においては、花、若しくは根から得られる抽出物を、
各々、適宜選択して用いる。

【００１４】ゲットウは、生のまま抽出に供してもよい
が、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を
行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶
媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行った
り、抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度と
しては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とする
のが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度
によっても異なるが、４時間〜１４日間程度とするのが
適切である。

【００１５】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級
アルコール、１，３−ブチレングリコール，プロピレン
グリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の
多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等
のエーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル
類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの
極性有機溶媒を用いることができ、これらより１種又は
２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸
緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。中で
も、抽出溶媒として、５０容量％エタノール水溶液を用
いることが好ましい。

【００１６】ゲットウの花、若しくは根の上記溶媒によ
る抽出物は、そのままでもマトリックスメタロプロテア
ーゼ阻害用組成物に添加できるが、濃縮，乾固したもの
を水，極性有機溶媒に再度溶解したり、あるいはマトリ
ックスメタロプロテアーゼ阻害作用を損なわない範囲で
脱色，脱臭等の精製処理を行った後に添加してもよい。
また保存のためには、精製処理の後凍結乾燥し、用時に
溶媒に溶解して用いることが好ましい。

【００１７】本発明に係るマトリックスメタロプロテア
ーゼ阻害用組成物は、ゲットウの花、若しくは根の上記
溶媒による抽出物から選択される１種又は２種以上を選
択したものをそのまま用い、あるいは担体に添加して得
る。担体としては、水、エタノール，プロパノール，ブ
タノール等低級アルコールなどの極性有機溶媒、これら
の混合液といった液状担体、各種乳濁液、各種クリーム
基剤、軟膏基剤、ゲル、粉体などが用いられる。したが
って、本発明に係るマトリックスメタロプロテアーゼ阻
害用組成物は、ローション剤，懸濁剤，乳剤，クリーム
剤，軟膏剤，ゲル剤，粉末等の形態で提供することがで
きる。また、リポソーム，マイクロカプセルに内包させ
た状態とすることもできる。なお、本発明に係るマトリ
ックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物には、本発明の
特徴を損なわない範囲で、抗酸化剤，防菌防黴剤，紫外
線吸収剤等の安定化剤，吸収促進剤等を添加することも
できる。

【００１８】更に本発明においては、上記に記載したマ
トリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物の１種又は
２種以上を外用剤基剤に含有させて、皮膚の老化防止及
び改善に有効な皮膚外用剤を提供する。かかる皮膚外用
剤は、ローション剤，懸濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏
剤，ゲル剤等の形状で提供することができる。また、化
粧水，乳液，クリーム，パック剤等皮膚用の化粧料，化
粧下地用ローション又はクリーム、乳液状，クリーム
状，軟膏状，固形状の各種ファンデーション等のメイク
アップ化粧料、日焼け止めローション又はクリーム等の
日焼け止め化粧料、ハンドローション又はクリーム，レ
ッグローション又はクリーム，ボディローション又はク
リーム等のボディ化粧料などとしても提供することがで
きる。

【００１９】本発明に係る皮膚外用剤においても、上記
マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物の他に、
本発明の特徴を損なわない範囲で、各種油分，界面活性
剤，低級アルコール，保湿剤，多価アルコール，細胞賦
活剤，抗酸化剤，美白剤，紫外線吸収剤，防菌防黴剤，
顔料，色素類，香料等、一般的な皮膚外用剤添加成分を
加えることができる。

【００２０】皮膚外用剤全量あたりの配合量としては、
その調製方法により異なるが、０．０００１〜５．０重
量％程度程度とするのが適切である。

【００２１】

【実施例】更に、本発明の特徴について、実施例により
詳細に説明する。

【００２２】まず、本発明に係るマトリックスメタロプ
ロテアーゼ阻害用組成物の実施例を示す。

【００２３】［実施例１］ゲットウの花部分２５０ｇを
乾燥，粉砕し、５０容量％エタノール水溶液２リットル
中にて２０℃で７日間浸漬した後、ろ過してろ液を回収
し、ロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、更に凍
結乾燥させゲットウ抽出物１とした。

【００２４】［実施例２］ゲットウの根部分２５０ｇを
乾燥，粉砕し、５０容量％エタノール水溶液２リットル
中にて２０℃で７日間浸漬した後、ろ過してろ液を回収
し、ロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、更に凍
結乾燥させゲットウ抽出物２とした。

【００２５】上記実施例１及び実施例２について、紫外
線照射により誘導されるＩ型マトリックスメタロプロテ
アーゼ産生に対する阻害作用を、次のようにして評価し
た。まず、ヒト線維芽細胞を２×１０⁴個／ウェルとな
るように９６穴プレートに播種し、牛胎仔血清５(w/v)
％を添加したダルベッコ基礎培地（ＤＭＥＭ）にて、３
７℃で２４時間培養した。Ｈａｎｋｓ(+)液で洗浄した
後、培地を、試料を含むＨａｎｋｓ(+)液０．１ｍＬに
交換し、８Ｊ／ｃｍ²の長波長紫外線（ＵＶＡ）を照射
した。次いで培地を０．１(w/v)％牛血清アルブミンを
含有するＤＭＥＭに交換して３７℃で２４時間培養した
後、生細胞数を計測し、培地上清中のＩ型マトリックス
メタロプロテアーゼ活性を測定した。培地上清中のＩ型
マトリックスメタロプロテアーゼ活性は、最終濃度０．
０５ｍｇ／ｍＬのトリプシンを添加して３７℃で１５分
間インキュベートした後、最終濃度０．２５ｍｇ／ｍＬ
の大豆トリプシン阻害用組成物を添加し、これについ
て、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）で
標識したＩ型コラーゲンを基質として用いて測定した。
すなわち、０．２５ｍｇ／ｍＬのＦＩＴＣ標識Ｉ型コラ
ーゲンを含有する１００ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ
７．５、０．４Ｍ塩化ナトリウム，０．０１Ｍ塩化カル
シウム及び０．０４(w/v)％アジ化ナトリウムを含む）
５０μＬを、前記トリプシン処理した培地上清５０μＬ
に加え、遮光下にて３７℃で２時間反応させた。次いで
４０ｍＭのο-フェナントロリン（phenanthroline）５
μＬを加え反応を停止した後、３７℃にて３０分間コラ
ーゲンの変性処理を行い、エタノールと０．１７Ｍトリ
ス塩酸緩衝液（ｐＨ９．５、０．６７Ｍ塩化ナトリウム
を含む）との容量比７：３の混合液５０μＬを添加し、
変性されたコラーゲンのみを抽出した。２，０００ｒｐ
ｍで１５分間遠心分離し、上清の蛍光強度を励起波長４
９５ｎｍ，蛍光波長５２０ｎｍで測定した。

【００２６】実施例１及び実施例２について、試料の最
終濃度とＩ型マトリックスメタロプロテアーゼ活性との
関係を、試料を添加しない場合の前記酵素活性を１００
として示したインデックスにより、評価を行った。

【００２７】その結果、本発明の実施例１は非常に強い
Ｉ型マトリックスメタロプロテアーゼ阻害作用を示し、
ＵＶＡにより誘導されるＩ型マトリックスメタロプロテ
アーゼの活性を、０．０１ｍｇ／ｍＬで４３％、０．１
ｍｇ／ｍＬで５２％まで阻害していた。

【００２８】また、本発明の実施例２も、同様に非常に
強いＩ型マトリックスメタロプロテアーゼ阻害作用を示
し、ＵＶＡにより誘導されるＩ型マトリックスメタロプ
ロテアーゼの活性を、０．３９μｇ／ｍＬで７０％、
１．５６μｇ／ｍＬで６３％、６．２５μｇ／ｍＬで７
７％、２５μｇ／ｍＬで６１％まで阻害していた。

【００２９】つづいて、本発明に係るその他のマトリッ
クスメタロプロテアーゼ阻害用組成物の実施例、及び皮
膚外用剤についての実施例を示す。なお、特に断らない
限り、実施例中の量目は重量％で示した。

【００３０】［実施例３］ゲットウの花部分５００ｇを
乾燥，粉砕し、８０容量％エタノール水溶液２リットル
中にて２０℃で７日間浸漬した後、ろ過してろ液を回収
して濃縮，乾固し、５０容量％の１，３−ブチレングリ
コール水溶液に溶解して、ゲットウ抽出物３とした。

【００３１】［実施例４］ゲットウの根部分５００ｇを
乾燥，粉砕し、８０容量％エタノール水溶液２リットル
中にて２０℃で７日間浸漬した後、ろ過してろ液を回収
して濃縮，乾固し、５０容量％の１，３−ブチレングリ
コール水溶液に溶解して、ゲットウ抽出物４とした。

【００３２】［実施例５］ 皮膚ローション剤 （１）エタノール １０．００（２）ヒドロキシエチル
セルロース １．００（３）マトリックスメタロプロテ
アーゼ阻害用組成物（実施例１） ０．１０（４）パラ
オキシ安息香酸メチル ０．１０（５）精製水 全体を
１００とする量製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均
一に溶解する。

【００３３】［実施例６］ 皮膚用乳剤 （１）ステアリン酸 ０．２０（２）セタノール １．
５０（３）ワセリン ３．００（４）流動パラフィン
７．００（５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイ
ン酸エステル １．５０（６）酢酸トコフェロール
０．２５（７）グリセリン ５．００（８）パラオキシ
安息香酸メチル ０．１０（９）トリエタノールアミン
１．００（10）精製水 全体を１００とする量（11）
マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例
２） ０．０５ 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃に保つ。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。

【００３４】［実施例７］ 皮膚用ゲル剤 （１）ジプロピレングリコール １０．００（２）カル
ボキシビニルポリマー０．５０（３）水酸化カリウム
０．１０（４）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０
（５）精製水 全体を１００とする量（６）マトリック
スメタロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例１） ０．
０３（７）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成
物（実施例２） ０．０３ 製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えた後増粘させ、(6)，(7)を
添加，混合する。

【００３５】［実施例８］ 皮膚用クリーム（水中油
型） （１）ミツロウ ６．０（２）セタノール ５．０
（３）還元ラノリン ８．０（４）スクワラン ２７．
５（５）グリセリル脂肪酸エステル ４．０（６）親油
型グリセリルモノステアリン酸エステル ２．０（７）
ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタンモノラウリン酸
エステル ５．０（８）プロピレングリコール５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１（10）精製水
全体を１００とする量（11）マトリックスメタロプロ
テアーゼ阻害用組成物（実施例１） ０．５ 製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(8)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に
前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサー
にて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(11)を添加，混合
する。

【００３６】［実施例９］ 皮膚用水中油型乳剤性軟膏 （１）白色ワセリン ２５．０（２）ステアリルアルコ
ール ２５．０（３）グリセリン １２．０（４）ラウ
リル硫酸ナトリウム １．０（５）パラオキシ安息香酸
メチル ０．１（６）精製水 全体を１００とする量
（７）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物
（実施例２） ０．５ 製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して均一とし、
７５℃に加熱する。一方、(5)を(6)に溶解して７５℃に
加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後
４０℃にて(7)を添加，混合する。

【００３７】［実施例１０］ 日焼け止め用油中水型ク
リーム （１）スクワラン ３８．０（２）グリセリルジイソス
テアリン酸エステル ３．０（３）パラメトキシ桂皮酸
2-エチルヘキシル ３．０（４）オキシベンゾン１．５
（５）有機変性ベントナイト １．５（６）シリコーン
処理酸化チタン３．０（７）1,3-ブチレングリコール
５．０（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１（９）
精製水 全体を１００とする量（10）マトリックスメタ
ロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例１） １．０（1
1）香料 ０．１ 製法：(1)〜(5)を混合，加熱して溶解し、(6)を分散し
て７０℃とし、油相とする。一方、(8)を(7)に溶解して
(9)に加え混合し、７０℃に加熱する。前記油相に水相
を添加し、ホモジナイザー処理して乳化後冷却し、４０
℃にて(11)を添加，混合する。

【００３８】［実施例１１］ メイクアップベースクリ
ーム （１）ステアリン酸 １２．００（２）セタノール
２．００（３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エス
テル ２．５０（４）自己乳化型グリセリルモノステア
リン酸エステル ２．００（５）プロピレングリコール
１０．００（６）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
０（７）水酸化カリウム ０．３０（８）精製水 全体
を１００とする量（９）酸化チタン １．００（10）ベ
ンガラ ０．１０（11）黄酸化鉄 ０．４０（12）マト
リックスメタロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例３）
０．０２（13）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(5)〜(8)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(9)〜(11)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(12)，(13)
を添加，混合する。

【００３９】［実施例１２］ 乳液状ファンデーション （１）ステアリン酸 ２．０（２）スクワラン ５．０
（３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．０（４）セ
タノール １．０（５）デカグリセリルモノイソパルミ
チン酸エステル ９．０（６）1,3-ブチレングリコール
６．０（７）水酸化カリウム ０．１（８）パラオキ
シ安息香酸メチル ０．１（９）精製水全体１００とす
る量（10）酸化チタン ９．０（11）タルク ７．４
（12）ベンガラ ０．５（13）黄酸化鉄 １．１（14）
黒酸化鉄 ０．１（15）マトリックスメタロプロテアー
ゼ阻害用組成物（実施例４） ５．０（16）香料 ０．
１製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，加熱して均一に溶
解し、７５℃に保つ。一方、(6)〜(9)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、これに(10)〜(14)を添加してホ
モミキサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この
水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホ
モミキサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(15)，
(16)を添加，混合する。

【００４０】［実施例１３］ 油性軟膏型ファンデーシ
ョン （１）固形パラフィン ３．０（２）マイクロクリスタ
リンワックス ６．０（３）ミツロウ ２．０（４）ワ
セリン １２．０（５）酢酸ラノリン １．０（６）ス
クワラン ６．０（７）パルミチン酸イソプロピル １
６．０（８）ビタミンＥ ０．２（９）マトリックスメ
タロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例２） ２．０
（10）タルク １７．５（11）カオリン １５．０（1
2）酸化チタン１５．０（13）ベンガラ １．０（14）
黄酸化鉄 ３．０（15）黒酸化鉄 ０．２（16）香料
０．１ 製法：(1)〜(8)を８５℃で溶解し、これに(9)を添加，
混合した後、(10)〜(15)を十分混合，粉砕して、撹拌し
ながら添加する。次いでコロイドミルで磨砕分散し、(1
6)を添加，混合して脱気した後、７０℃で容器に流し込
んで冷却する。

【００４１】［実施例１４］ ハンドクリーム （１）セタノール ４．００（２）ワセリン ２．００
（３）流動パラフィン１０．００（４）グリセリルモノ
ステアリン酸エステル １．５０（５）ポリオキシエチ
レン(60E.O.)グリセリルイソステアリン酸エステル
２．５０（６）酢酸トコフェロール ０．５０（７）グ
リセリン ２０．００（８）パラオキシ安息香酸メチル
０．１０（９）精製水 ５９．３８（10）マトリック
スメタロプロテアーゼ阻害用組成物（実施例３） ０．
０１（11）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成
物（実施例４） ０．０１ 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(7)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて
均一に乳化し、冷却後４０℃にて(10)，(11)を添加，混
合する。

【００４２】上記本発明に係る皮膚外用剤についての実
施例のうち、実施例５〜実施例９について、紫外線によ
るしわの発生に対する防止効果を評価した。なお各実施
例において、配合した実施例１〜実施例４のマトリック
スメタロプロテアーゼ阻害用組成物を、それぞれの調製
に用いた溶媒に代替して調製したものを比較例１〜比較
例４とし、同時に評価を行った。しわの発生防止効果
は、ヘアレスマウス５匹を１群とし、各群について実施
例及び比較例各０．２ｇをそれぞれ１日１回背部に塗布
し、１Ｊ／ｃｍ²／週のＵＶＡを５０週間照射し、ヘア
レスマウスにおけるしわの発生状況を観察し、表１に示
す判定基準にしたがって点数化しておこなった。この
際、精製水のみを塗布した群を対照とした。結果は各群
の平均値を算出し、ＵＶＡ照射日数との関係により表２
に示した。

【００４３】

【表１】

【００４４】

【表２】

【００４５】表２に示されるように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を超えるころには形成され
たしわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深いし
わの発生が認められていた。これに対し本発明の実施例
塗布群では、いずれにおいても有意なしわの発生の抑制
が認められ、５０週後において微小ないし軽微なしわが
認められた程度であった。特に、実施例５，実施例８及
び実施例９塗布群においては、顕著なしわの発生抑制が
認められていた。一方比較例塗布群では、酢酸トコフェ
ロールを含有する比較例２塗布群で発生したしわの程度
の軽減が若干認められたほかは、有意なしわの発生抑制
あるいは軽減は認められなかった。

【００４６】つぎに、女性パネラーによる使用試験を行
った。この際にも、各実施例において配合した実施例１
〜実施例４のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組
成物を、それぞれの調製に用いた溶媒に代替して調製し
たものを比較例１〜比較例１０とした。使用試験は、２
０才代〜５０才代の通常戸外で作業する女性２０名を１
群とし、５月中旬〜６月中旬の１カ月間、各群に実施例
及び比較例のそれぞれをブラインドにて１日２回使用さ
せ、使用前後の皮膚のしわ及び皮膚弾性の変化を観察し
ておこなった。皮膚のしわについては写真撮影後の目視
評価及びレプリカ法により評価し、皮膚弾性については
キュートメーターによる測定により評価した。結果は、
各パネラーについて使用後の皮膚のしわ及び皮膚弾性を
使用前と比べて、「改善」，「やや改善」，「変化な
し」，「やや悪化」，「悪化」の５段階にて評価し、各
評価を得たパネラー数にて表３に示した。

【００４７】

【表３】

【００４８】表３から明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、皮膚のしわ及び皮膚弾性
の悪化傾向を認めたパネラーはおらず、皮膚のしわにつ
いては８０％以上、皮膚弾性については９０％以上のパ
ネラーにおいて、改善又はやや改善されたと評価されて
いた。特に、紫外線吸収剤を併用する実施例１０使用群
で、高い改善率が認められた。これに対し比較例使用群
では、皮膚のしわ及び皮膚弾性について明確に改善され
たと評価されたパネラーは存在せず、皮膚のしわについ
ては７５％以上、皮膚弾性については６５％以上のパネ
ラーで症状の改善が見られなかった。また比較例６使用
群以外では、１０〜３５％のパネラーにおいて各症状の
悪化傾向を認めていた。紫外線吸収剤を含有する比較例
６使用群においても、皮膚のしわについては１名、皮膚
弾性については２名において症状がやや悪化し、皮膚の
しわ及び皮膚弾性ともに、症状の改善傾向の見られたパ
ネラー数は対応する実施例１０使用群に比べて顕著に少
なかった。

【００４９】なお、本発明の実施例５〜実施例１４につ
いては、上記の使用期間中に含有成分の析出，分離，凝
集，変色，変臭といった状態変化は全く見られなかっ
た。また各実施例使用群において、皮膚刺激性反応，皮
膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。

【００５０】

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、紫
外線照射により真皮線維芽細胞において産生が誘導され
るマトリックスメタロプロテアーゼに対し、特異的かつ
高い阻害活性を示すマトリックスメタロプロテアーゼ阻
害用組成物を得ることができ、さらにこれを用いること
によって、紫外線照射により促進される皮膚の老化の防
止，改善に有効な皮膚外用剤を提供することができた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4C083 AA082 AA111 AA112 AB232 AB242 AB442 AC022 AC102 AC242 AC392 AC402 AC482 AC842 AD092 AD112 AD282 AD512 AD662 CC02 CC04 CC05 CC12 DD23 DD31 DD41 EE12 4C088 AB81 AC03 BA08 NA14 ZA89 ZC20

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ゲットウ花から得られる抽出物を含有し
   て成る、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成
   物。
2. 【請求項２】 ゲットウ根から得られる抽出物を含有し
   て成る、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害用組成
   物。
3. 【請求項３】 マトリックスメタロプロテアーゼが、Ｉ
   型マトリックスメタロプロテアーゼであることを特徴と
   する、請求項１又は請求項２に記載の組成物。
4. 【請求項４】 請求項１〜請求項３に記載の組成物を含
   有することを特徴とする、皮膚外用剤。