HU227812B1 - Szomatosztatin analógok, azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk - Google Patents

Description

A jelen találmány szomato sztatin peptidomimetikumokkal, ezek előállítási eljárásaival és az ezeket tartalmazó gyógyszerészeti készítményekkel foglalkozik.

gyületekre vonatkozik, amit cildo{{4“(NH2~C2H4~NH~CO-O-jPro}Phg-DTrp~tySTyr(4-Bzl|-Fhel-nák. is neveznek, amelyre itt A vegyületként hivatkozunk, valamint a jelen találmány e vegyület diasztereoizomerjeire és ezek keverékeire vonatkozik, legyenek azok szabad só vagy komplex formában vagy védetten. A Phg jelentése -HN-CHICeHsl-CO·-» míg a Bzl jelentése benzil.

Az A vegyület védett formában megfelel a fenti molekulának, amennyiben legalább egy amínocsoportja védett, és amikor a védelem mentesítése az A vegyülethez vezet; ami előnyösen fiziológiásán távolítható el A megfelelő amino védőcsoportokat a szakirodalomban közzétették [Greene: “Protective Groups ín Organic .Synthesis”, 219-287, Wiley & Sons NY (1981) amelyet itt. teljes egészében hivatkozásként építettünk be). Az ilyen amino védőcsoportok egyik példája az aeetii.

Ha az A vegyület komplex formában szerepel, akkor az A vegyület a Pro aminosav oldalláncán kelátképző csoportot tartalmazhat és kimutatható vagy radioterápiás elemmel komplexet ***». V *

χ»

V * < '0 alkothat. A kelátképző csoportot hordozó A vegyüíetet a továbbiakban konjugált A vegyületnek nevezzük.

A kelátképzö csoportok példái közé a poii-amínopolikarbonsavakból vagy anbídridekból származók tartoznak, mint például amik ciklikus ligandokböl származnak, mint a diétáéntriamin-pentaecetsav (DTPA), az etilén-glikol-0,Ö^!-bisz(2-aminoetil)-N,N,NLN'-tetraeoetsav (EGTA), az N,N'-bisz(hidrO3dbenzil)etíléndiamin-N,N^:-diecetsav (HBED) és a trietiléntetramin-hexaecetsav (TTHA), amelyek a szubsztituált DTPA-ből származnak, például p-izotiocíanát-benzíl-DTPA-hók amelyek makrociklikus ligandokböl származnak, például 1,4,7, lö-tetra-azaciklododekán-N, X', N”, ΜΓ’-tetraecetsav (DOTAj és 1,4,8,11-tetraazaeiklotetr.adekán-N,.N’,N”,N^,”-tetraecetsav (TETA), vagy 1,4,7,10-tetraazaciklotridekán-N,N^,,N^>,,N^,’^,-tetraecetsav (T1TRA).

A kelátképző csoport a Pro aminocsoportiához az oldalláneboz közvetlenül vagy térkitöltő molekulán keresztül kapcsolható, A megfelelő térkitöltő molekulákat a szakirodalomban közzétették (GB-A-2,2.25,579 számú szabadalmi bejelentés], például ilyen az ammok&rbonsav kétértékű maradéka, például a S-Ala vagy a ő-amínokapronsavből származó kétértékű maradék.

Az előnyben részesített kelátképző csoportok a DTPA-ből, DOTA-ból vagy TETA-ból származnak. Leginkább a. DTPA-ből vagy a DOTA-ból származó kelátképző csoportokat részesítjük előnyben.

Értelmezésük alapján a kimutatható elem bármilyen lehet, de előnyösen az in uivo diagnosztikai technikákban kimutatható φ **

Λ * * **

Φ**

Λ ** ν

tulajdonságot hordozó fémionok, például kimutatható sugárzást kibocsátó fémionok, vagy olyan fémionok, melyek az NMR relaxációs tulajdonságokat képesek befolyásolni. Radioterápiás elemek mindazok, melyek a kezelendő állapotokra jótékony hatású sugárzást bocsátanak ki.

Á megfelelő elemek közé tartoznak például a nehézfémek vagy a. ritka földfém ionok, például a CAT vizsgálatokban (komputer axiáíis tomográfia) használt paramágneses ionok, például Gd³y Fe³h Mn²⁺ és Cr²y fluoreszcens fémionok, például Eu³⁺, és atomok, például radioiantanídák, különösen a y-sugárzö atomok, S-sugárzo atomok, α-sugárzó atomok, Auger-e -kihoesátő atomok vágj' pozitronsugárző atomok, például a ⁶³Ga, W

A megfelelő y~ sugárzó atomok a diagnosztikai technikákban alkalmazhatók. A y-sugárzó atomok féléletideje előnyösen 1 órától 40 napig terjed, előnyösebben 5 órától 4 napig, még előnyösebben 12 órától 3 napig. A példák a következő elemek radiöizötőpjai: gallium, irídium, technécium, ítterbium, réníum, terbium, lutéeium, tallium és szamárium, például ⁶⁷Ga, ^mIn, ^Tc, leiTb, issRe vagy *⁷⁷Lu.

A megfelelő fö-sugárzó atomok, így például a ⁹⁰Y, ⁶⁷Cu, ⁱ⁸⁶Re, ¹³³Re, ^Br, ¹²¹Sn, We, ¹⁷⁷Lu, ^í43Pr, i^Au, ^D_V, ⁱ⁴²Pr vagy ®Sm a radioterápiai alkalmazásokban alkalmazhatók. A megfelelő α-sugárzó atomok a terápiás kezelésekben alkalmazhatók, mint például ²ⁿ At, ²¹²Bí vagy ²⁰-TI.

« Φ χ χ·;♦ ♦ ♦

Az A vegyület magában vagy só formában fordulhat elő. A sófonnák közé a következők tartoznak: savaddíciós sók, amikben a sav lehet például szextetten sav, polimer sav vagy szerves sav, mint például só sav, e ce tsav, tej sav, aszparaginsav, benzoesav, borO'Styánkősav vagy pamoinsav, A savaddíciós sók egy- vagy kétértékű sóként létezhetnek, például attól függően, hogy az A vegyület szabad bázis formában egy vagy két vegyértékű, formában fordul elő. Az előnyben részesített sók a következők: aeetát, aszpartát, benzoát, .saaikcinát és pamoát, beleértve a mono- és dí-sőkat, előnyösebbek az aszpartát dx-sők és a pamoát monosök..

A konjugáit A vegyület sóformában is előfordulhat, ezzel karboxilcsoportokkal állítható elő, ha a kelátképzo csoportban vannak, mint például alkáli féxnsőkban, mint például nátrium vagy kálium, vagy szubsztituált vagy szubsztxtuálatlan ammóniuxnsökban.

A jelen találmány az A vegyület előállítási eljárását is felöleli. ismert eljárásokkal analóg módon előállítható, mint például

a) a védett, polimerhez kötött, vagy védetten formában a lineáris peptid ciklizálása, igy megkapjuk az A vegyűletet és ezután szabadon megválaszthatöan eltávolítjuk a védöcsoporto(ka)f;

b) az A konjugáit vegyület előállításához a kelátképző csoportot és az A vegyűletet védett vagy nem védett formában összekapesölju.k, és ezek után szabadon megválaszthatoaxi a védőcsoportot eltávolítjuk, és az A vegyűletet vagy a. 'konjugáit A ti* vegyületet kinyerjük, így .magában, szabad sóformában vagy szabadon megválaszthatta» detektálható vagy radioterápiás elemmel komplexben kaphatjuk meg,

A peptidláne elkezdéséhez általában nem érdekes, hogy a C-termínális helyzetben melyik aminosavat választjuk ki.» mivel a lineáris peptíd ciklízált lesz, feltéve, hogy a lineáris peptíd aminosavainak sorrendje az A vegyületével megegyezik. Más faktorok is szerepelhetnek, melyeknél az egyik kezdő aminosavat a másikkal szemben előnyben részesíthetjük. Ha az A vegyületet szilárd fázisú szintézissel állítjuk elő, akkor az első aminosavat előnyösen a gyantához kötjük, például a kereskedelemben vásárolható polísztirol alapú gyantához, megfelelő kapcsoló segítségével, például olyan kapcsolóval, mely az oldallánc-védés fenntartása mellett enyhe körülmények között hasítható, ilyen például a. SASRIN vagy szabadon megválaszthatta» a szubsztítuált trítíl alapú kapcsoló, például 4-(hidroxi-difení!-metíJ)benzoesav, melyben az egyik fenilcsoport szabadon megválasztkíépülése hagyományos módon befolyásolható, például Fmoc védett terminális amínocsoport egységek használatával, oldallánc aminosav csoportokkal, ahol a védelem különböző amino védöcsoportokkal történt, például Boe-cal vagy CSO-val, Előnyösen a lineáris pepiidet úgy ciklizáljuk, hogy a Tyr(4~Bzfh OH és a Fhe között, kötés alakuljon ki, például Fhe-{4-(NHRiCaH4~NH-CO-O-KFro)-Fbg-DTrp(B:₂)-bys(s~NHR4-TyT(4-Bzl)-O.H, vagy ezek funkcionális származékai jönnek létre, ahol Rr, Ra es

Rs amino védőcsoport. A ciklizálási lépés a) ismert eljárással kényelmesen végrehajtható, például azidon, aktív észteren, kevert anhidriden vagy karbodiimiden keresztül. Ezek után a védőcsoportokat hasítással eltávolítjuk, például trifluoreeétsavvál

A peptid cíklizálásá közvetlenül szilárd alapon is végrehajtható, ahol az első aminosav N- és C-terminális védett formában fordul elő és oldalláncon keresztül kapcsolt, például a lizín saminocsoporton vagy a vázon keresztül. A lineáris szekvenciák, kialakítását ezek után standard sziládfázisü szintézissel (SPPS) folytatjuk. Miután a peptíd €~terminális védését lehásítottuk, ciklízáljuk, például ahogy azt a fentiekben leírtuk.. Majd a ciklikus peptidet a gyantáról lehasítjuk és a védőcsoportot

Ha szükséges, akkor a Pro aminosavon lévő oldalláncot az aminosavra az aj peptid ciklizálási lépés előtt vagy után építjük be. így a Pro kezdő aminosavként vagy kezdő lineáris vagy ciklikus pepiidként, amelyben minden esetben a Pro OH-val a gyűrűben szubsztituált, A vegyülette átalakítható vagy a kívánt Pro egységgé, illetőleg a. megfelelő lineáris pepiiddé, ahol a Pro NHRiC2H.4-NH-CO-O- csoporttal szubsztituált.

A konjagált A vegyület komplexbe vitele a konjugált A vegyület és a megfelelő kimutatható· vagy radíoterápíás elemet eredményező vegyület reagáitatásával végezhető el, mely utóbbi például fémsó, előnyösen vízben oldódó só, A reakció a szakirodalomban leírt ismert eljárásokkal elvégezhető {Perrín, Organic

Ligand, Chemical Data Series 22« NY Pergamon Press (1982); Krejcarit és Tucker: Bíophys. Bíochem. Rés. Com., 77, 581 (1977); és Wagner és Welch: J. Nuct Med., 20, 428 (1979)).

A kővetkező példák a találmány bemutatására szolgálnak. Az összes hőmérsékletet °C-ban adtuk meg.

AcOH ~ ecetsav

Boc - tere·· ] borul

CtíU “ Karöooenzom

DIPCI - N,N’-d&

DPPA difenilfoszforilazid Fmocm fluorén ilmetoxikarbonil HO.BT = l~hidroxibenzotr.iazol Ösu ~ N-hidroxiszukdnimid TFA = trííluoreeetsav

THF = tetrahidroíurán nh-NH-CO-Ö

a) Az Fmoc~Pro(4~OCO-NH-CH2~CB3:“NH“Boc)-O.H szintézise:

Az L-hidroxiprolm-metílészter-hidrokloridot szobahőmérsékleten 1,0 mol/1 nátrium-karbonát/tetrahidrofurán vizes oldatban. Fmoc-OSu-val reagáltatok. A reakció befejezése után az F.moc-.Pro(4-öH)-OMe-tet kfosapással elkülönítettük. Az FmocPto(4~OH)-0Me-£et ezek után tetrahidrofuránban készített trifoszgen oldatba csepegtettük, így klórkarbonát közti. terméket kaptunk. Majd 1 óráig dimetilammopiridint (1,0 egyenérték) és N-Boc-diaminoetánt (6,0 egyenérték} adtunk és a reakciót szobahőmérsékleten kevertettük. A reakció végén -az oldószert vákuumban eltávolítottuk és az eredményül kapott Fmoc-Pre(40CO-iNH-CH2-CH₂-NH-Boc}-0Me~tet kétfázisú etil-acetát/0,1 M HCI rendszerben kivonatoltuk, így megkaptuk a nyersterméket (ΜΉ* ~ 554), melyet etilacetátböl kristályosítással tisztítottuk. Ezek után a .sav felszabadítása érdekében a metilészteil. lehasítottuk dioxán/vízben lévő 1 N NaOH segítségével, és az Fmoc~Pro(4-ÖCO-NH-CH2-CH.2-NH-Boe}~OH terméket szílíkagélen tisztítottuk (((M+Na}k 562).

b) H-Phe~ProÍ4-OCO--NH--CH₂--CH2~NH-Boc}-Phg-DTrp(Boe)~

Lys {Boe} -Tyr(Bzl) -OH

Kiindulási anyagként a kereskedelemben beszerezhető Fmoc-Tyr(Bzl}-O-CH2-Ph(3-OCH3)~O-CH₂-polísztirol gyantát (SASRIN-gyanta, 2,4 mM} használtuk, és az eljárást standard módszerrel végeztük, beleértve az Ha-védelemmenlesítés ismételt ciklusait (piperidin/DMF, 2:8), az ismételt mosásokat DMF-fel és a kapcsolást (DIPCI: 4,8 mM/HOBT: 6 mM, DMF). A kővetkező aminosav származékokat egymás után sorbakapcsolt.uk: FinnéLys(Boc}-0H, Fmoc-DTrp(Boc}-OH, Fmoc-Phg-OH, Fmoc~Pro(4~

OCO-NH-CHa-CHa-NH-BoeJ-OH, Pmoc-Phe-OH. A kapcsolásokat folytattuk (2 ekv. aminosavakkal) vagy a reakció teljességéig ismételtük, azaz amíg a maradék aminosavak teljesen eltűntek, amit negatív Kaiser” ninhidrin vizsgálattal követtünk nyomon. A teljesen összeállított védett lineáris peptidek gyantáról történő lehasítása előtt az utolsó maradékról az Να-Fmoc védést eltávolítottuk.

cl H-Phe-Pro(4-OCO-W-CH2-CH₂-NH-Boc)-Phg-DTrp(Boc)Lys(Boc)~Tyr(Bzl)-OH

Miután CHaCb-vel mostuk, a peptid-gyantát az oszlopba töltöttük, vagy vákuumszüron kevertük, majd a peptid fragmenseket lehasítottuk és rövid ideig CHaCh-ben lévő 2% TFA-val egy órán belül eluáltuk. Az eluátumot telített NaHCOa oldattal azonnal semlegesítettük, A szerves oldószert elkülönítettük és elpárologtattuk, majd az oldalláncon védett előanyagot (ΜΗ* ~ 1366) további tisztítás nélkül cíklizáltuk.

d) Cíkloj-ProH“OCO-NH-CH₂~CH₂-NH₂)-Phg-DTrp-Lys-T

A fenti lineáris fragmenst DMP-ben (4 mM) feloldottuk, mínusz 5 °C~ra lehütöttük és 2 ekv. DIPEA-val kezeltük, maid 1,5 ekv, DPPA-val és a reakció végéig 0-4 ^öC-on keveríeítük (körülbelül 20 óra). Az oldószert vákuumban majdnem teljesen eltávolítótok; a koncentrátumot. etil-acetáttai hígítottuk, NaHCOa-mal majd vízzel mostuk, szárítottuk és vákuumban bepároltuk.

A csoportok védelem-mentesítéséhez az anyagot 0 °C-on TPA/HaO-ban 95:5 (körülbelül 50 mM) feloldottuk és 30 percig hidegen keveriettük, A terméket ezek után éterrel kicsaptuk, mely körülbelül 10 ekv, HCl-t tartalmazott. szűrtük, éterrel mostuk és szárítottuk. A megmaradt índohN-karbaminsav teljes elbontásához a terméket 5 % AcOH-ban feloldottuk és 15 óráig körülbelül 5 °C-on líoüleztük. A preparatív RP-HPLC-t Cl· 18 lö Nm STAGRÖMA oszlopon (5-25 cm) végeztük, 70 % acélórátólben lévő 0,5-0,5 % TEA gradienst használva, A tiszta megnevezett terméket tartalmazó frakciókat egyesítettük, vízzel hígítottuk és liofiieztük. A lízátumot vízben feloldottuk, majd lö % vizes NaaCOs-mal kicsaptuk, A szilárd szabad bázist szűrtük, vízzel mostuk és vákuumban szobahőmérsékleten szárítottuk. Az eredményül kapott fehér port. a különböző sókhoz közvetlenül használtuk.

Ciklop-(NH2-C2H4-NH-CO~O~)Pro}-Fhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe} söformában.

a. Acetát

Az acetát sóformát ioncserélő oszlopon alakítottuk kí (például AG 3-X4). |MS (ESI): m/z 524,5 (M+2HR· [_a)o²⁰ ~ -42% c =

0,26, AcOH 95 %}

Η ♦ + * * «φ «φ &ζ 1, példa vegyületének 1 ekvivalens mennyiségéi 1 vagy 2 ekvivalens aszparaginsavval reagáltatluk a mono- vagy di-aszpártát kialakításához, mindezt acetonitril/víz 1:3 arányú keverékében végeztük. Az eredményül kapott elegyet lefagyasztottuk és liofileztük.

A di~aszpartátot szintén úgy kaptuk meg, hogy az 1. példa vegyületet víz/acetonítril 4:1 arányú elegyében feloldottuk, szűrtük, ioncserélő gyantára felvittük, például BioRad AG-4X4 oszlopra, és víz/acetonítril 4:1 arányú elegyével eluáltuk, Az eíuátumot betöményítettük, fagyasztottuk és liofileztük, (|a|o²⁰“ -47,5°, c ~

c. Benzoát

A benzoáttá alakítást az 1, példa vegyületének 2 ekv. benzoesavban történő feloldásával kaptuk meg, acetonitril/víz 1:2 arányú elegyében, /Íz eredményűi kapott elegyet lefagyasztottuk bonsavval (acetonítril/THF/víz 2:2:1 arányú elegyében) együtt feloldottuk. Az eredményűi kapott elegyet lefagyasztottuk és liofileztük.

3. Példa * « *

Φ * 9

f. 4 4

CíkloH4-(DOTA~KH-C2H4-NH-CO~0-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4Bzi)-P.he

a) CiMo(-Pro(4-OCO~NH-CH2-CH2-NH2)-Phg-DTrp-Lys(Cbo)Ty r (Bzl)--Ph e-j tnüuoracetát

A vegyület hasonlóan készítettük el mint a ciklo[-Pro(4OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-Phg-DTrp-Lys(Cbo)-Tyr(Bzl)-Phe-]» trifluoroacetátöt, azzal az eltéréssel, hogy az Fmoc-Lvs(Boc)-OH helyett Fm.oc-Lys(Cfeo)-OH-t használtunk.

bl 400 mg kereskedelemben vásárolható DOTA χ 2H2O~t (SYMAFEX - Francé) 20 ml vízben feloldottunk. Miután 20 ml DMF-t adtunk hozzá, 170 mg cíldo(~Pro(4~OCO-NH-CH2-€H2NH2)~Phg-DTrpLys(CBÖi-Tyr(Bzl)-Phe-pvel, 190 mg DCCI-vel és 60 mg N-bidroxiszu'kcinimlddel egészítettük kí. Az eredményül kapott szuszpenziót szobahőmérsékleten 72 óráig inkubáltuk. Szűrés után az oldatot csökkentett nyomáson eitávoiitottuk és a maradék nyers terméket szilikagélen tisztítottuk '50% 8/2/0,25 /3/1 mozgó fázisként).

c) A védelem-mentesítésbez a fenti DOTA - konjugátumot 5 ml frifl-uorecetsav/tioanizöllal (9/1) 2 óráig szobahőmérsékleten kezeltük, Miután az oldatot löö ml dietiléter *· 5 ml 3 N HCl/dietiléter elegyébe öntöttük, az eredményül kapott csapadékot szűréssel elkülönítettük. A tisztítást szilikagélen hajtottuk végre, mozgó fázisként DCM/MeOH/HOAcsg% 7/4/2 —> 7/5/4-et « φ X * φ· használva. Az analitákailag tiszta végterméket sómentesítés után kaptuk meg, felhasználva 0,1 % TFA-tól 90 % CHsCN-ben lévő 0,1 % TFA garadienst R.P,8-HPLC oszlopon (Spherisorb 250 x 4,6 mm). MH* : 1.434,7,

Az A vegyület magában vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóban és komplexekben az in vitro és ín vívó vizsgálatok alapján gyógyszerészetileg értékes tulajdonságokat mutat és ezért terápiában javasolható. Részletesebben, az A vegyület a humán szomatosztatin receptorokkal (hsst) érdekes kötési profilt mutat, különösen a következőkkel: hsstl, hsst2, hsst3 és hsstS. A következő szomatosztatin receptor altípusokat klónoztuk és jellemeztük: sstl, sst2, sst.3, sst4 és sst5. A hsstl-et, hsst2~öt és hsst3~at és szekvenciáikat a szakirodalomban közzétették [Yamada és mtsai: Proceedíngs of the National Academy of Sciences, USA 89, 251-255 (1992)). A bsst4-et és szekvenciáját szintén közzétették [Rohrer és mtsai: Proceedíngs of the National Academy of Sciences, USA 90, 4196-4200 (1993). A hssto-őt és szekvenciáját a szakirodalomban leírták [Panetta és mtsai: Mól. Pharmaeol., 45, 417-427 (1993)).

A kötési vizsgálatot az alábbiaknak megfelelően végeztük, felhasználva a szelektíven és stabilisán a hsstl-et, hsst2~t, hsst3-at, hssl4~et vagy a. hsst5-t kifejező például CSŐ vagy' CÖS sejtek membránjait.

A membránokat ismert eljárások alapján állítottuk elő [Bruns és mtsai: Bíochem. J., 65, 39-44 (1990)]. A membránokat a hsst szelektív sejtvonalakfoől, például CHO és COS, állítottuk >β ♦♦♦Λ * 4.

χ ** > > ♦

X χ-φτ *»** »9 *

X *

X * * χΧψ titi elő, melyek a hsstl-et vagy hsst2~öt vagy hsst3-at vagy hsst4-et vágj hsst5~öt stabilan kifejezik, majd pontonként három mintát

300 pl össztérfogathan 22 °C~on 30 percig növekvő koncentrációjú [ⁱ²⁵l-Tyr^H]-SRlF~14-vel kezeltük, amit 0,5 % BSA-t tartalmazó 10 mmol/l Hepes pufferben (pH 7,6) vettünk fel. Áz inkubálásnak gyors szűréssel vettettünk véget és a szűrőket számlálóban megmértük. A specifikus kötődés egyenlő a összes kötődés mínusz nem specifikus kötődés 1 pm.ol/1 szom.atosztatín-14 affinitási állandót (Ko) és a kötőhelyek számát a. megfelelő statisztikai és grafikai programok segítségével kiszámoltuk.

Az A vegyület a fenti kötési vizsgálatban, a hsstl-et, hsst-2őt, hsstS-at és/vagy hsst5-öt tekintve az ICso nmolálris tartományban van, előnyösen az ICso 0,1-10 nM (ICso ~ a. vetélkedés kötési vizsgálatában a maximális gátláshoz szükséges koncentráció), ahol radioligandként a hsstl-5-re specifikus p^2SI-Tyr^u)SRIF-14-et használtunk.

hsstl hsst2 hsst3 hsst4 hsstS

A vegyület 9,3 1,0 1,S >100 nM 0,16

n.M±0,l nM±0,l nM±0,3 nM±0,l

Az A vegyület a növekedési hormon szekréciót elősegítő receptorához is kötődik. Az ilyen receptorokat a szakirodalomban közzétették jMuccioli és mtsai: J. Endocrínok, 157, 99-106 (1998); Ong és mtsai: Endocrinology, 139, 432-435 (1998); és »

Η»·' »» ♦*

Smith és mtsai: Horm. Rés., 3, 1-8 (1999)}. E receptorok kötési vizsgálata a szakirodalomban közzétettek alapján elvégezhető (J. Endocrinol. hívest., 24» RC1-RC3 (2001)}. Ebben a vizsgálatban az A vegyületet a ^12Si-Tyr-Ala~hexarelín helyett használjuk. Ennek megfelelően az A vegyület a növekedési hormon szekréciót elősegítő receptorok aktivitásának módosításában hasznos, például információt szolgáltat a testtömeg vagy az anyagcsere szabályozás lehetséges szerepére.

Továbbá, az A vegyület GH-kibocsátást gátló aktivitással is rendelkezik, ahogy azt az in nitro tenyésztett hipofízis sejtek GH kibocsátása mutatja. Például a felnőtt patkányok anterior hipofízisét kis darabokra vágjuk, és 0,1 % tripszinne! diszpregáljuk 20 mM HEPES púderben. A diszpergált sejteket négy napig MBMben (Gibco) tenyésztjük, amit 5 % foetális borjú szérummal, 5 % lószérummal» 1 mM. NaHCOs-tal, 2,5 nM dexametazonnal, 2,5 mg/ml inzulinnal és 20 egység/ml Pen/Strep-pel egészítünk ki. A kísérlet napján a letapadt sejteket kétszer Krebs-Ringer-rel mossuk, amit 20 mM HEPES-sel pufferelünk és a következőkkel egészítjük ki: 5 mM glükóz és 0,2 % BSA. Ezek után a sejteket három óráig A vegyülettel ínkubáíjuk 3x10 ¹⁰ M növekedési hormont kibocsátó faktor jelenlétében. A táptalajba kibocsátott növekedési hormont RIA-val megmérjük. Ebben a vizsgálatban az A vegyület ICso értéke 0,4 nM.

Az A vegyület patkányokban a növekedési hormon (GH) kibocsátását gátolja. Az A vegyületet altatott patkányokba szubkután adtuk be. A vegyület adása, után 1 órával az állatokat felál16 « > .* .* »·* ♦ * 5>

» »♦ # »«*? * *

* * * »£# ·ΧΨ doztuk és vérüket összegyűjtöttük. A hatástartamot a gyógyszeres kezelés után 6 órával az alap GH szekréció alapján megbecsültök* A hormon szinteket a kezelés után 1. és 6. órában RIA~ val megmértük. Mindegyik kísérletben a hormonszekréció gátlásának IBso értékét grafikusan meghatároztuk {log-probit) és a kapott eredmények átlagát logaritmikusán ábrázoltuk. Ebben az in vivő modellben az A vegyület a növekedési hormon kibocsátását hosszú ideig gátolja (közép alap IDso = 5.5 pg/kg s.c. 6 h). Egy hasonló vizsgálatban az inzulinhatás mérésekor megállapítottuk, hogy az A vegyület az inzulin szekréciót gátolja.

A GH potens és hatásos gátlását majmokkal végzett kísérletekben is megerősítettük. Továbbá, a cukorbeteg majmokban az anyagcsere vizsgálatok azt mutatják, hogy az A vegyület cukorbeTováhbá, ahogy azt a hím egerek standard vizsgálatában tapasztaltuk, az A vegyület az IGF-1 plazmaszinteket in iwo gátolja. Röviden, az A vegyületet ozmotikus pumpával adagoltuk, melyet a hím Lewis patkányokba szubkután implantáltunk. A vérmintákat a retrobulbaris plexusból összegyűjtöttük rövid, például iz-oíluránnal végzett altatásban. Ebben a vizsgálatban az A vegyület az IGF-1 plazmaszinteket szignifikánsan csökkenti, hosszan tartó hatást okozva, például a gátlás több mint 60 %-a a 10 pg/kg/őra A vegyülettel végzett kezelés után 14 nappal ís megfigyelhető. Részletesebben, a folyamatos kezelés eredményes a patkány reeipiensek aorta vagy vese allograftjainak folyamatos 10 pg/kg/őra A vegyülettel történő infúziójakor, amit 126 napig

Λ··-'*# % * ·♦♦· * * * > » * * Μ . ·*. -V <!

? ♦♦ *$:> ** végeztünk, mível ez a kezelés a plazma IGF-! szintek jelentős és állandó csökkenését indukálja.

Ennek megfelelően az A vegyület a túlzott GH szekrécióval és/vagy a túlzott IGF-l-gyel társuló betegségek megelőzésében vagy kezelésében hasznos, így például az akromegália kezelésben, valamint az L és a Ik típusú diahetes mellitus kezelésében, különösen ezek komplikációi esetében, például a kővetkezőkben angiopathia, diabetikus proliferativ retinopathía, diabetikus makuláris ödéma, nephropathía, neuropathia és dawn jelenség, és más anyagcsere betegségekben, melyek az inzulin vagy a glukagon kibocsátással kapcsolódnak, mint amilyen például az elhízás, például morbid elhízás vagy hipothalamikus vág}' hiperínzulinémiás elhízás. Az A vegyület a következő betegségek kezelésében szintén, hasznos: enterokután és panereatíkokntán fisztula, írritábílis bélszíndrőma, gyulladásos betegségek, például Grave-féle kór, gyulladásos bélbetegség, pikkelysömör vagy reumás arthritis, políeisztikus vesebetegség, dumpíng szindróma, vizes· hasmenés szindróma, AlDS-szel kapcsolatos hasmenés, kemoterápia által indukált hasmenés, akut vagy krónikus hasnyálmirigygyulladás és gasztrointesztináiis hormont szekretálő tumorok (például GÉP tumorok, mint. például vipómák, glukagonőmák, inzulinéinak, karcinoidok és hasonlók), límfocíta mapeiuai karcínőma, valamint gasztrointesztináiis vérzések, variceáüs nvelőcső vérzés.

IS

Az A vegyület azoknak a tumoroknak a. kezelésében ia hasznos. melyek szomatosztatin receptor pozitívak, például a hsstlet, hssl2~öt, hsst.3-at és/vagy hsstS~őt, hordozó tumorok, ahogy ezek a. .különböző daganatos sejtek proliferációt vizsgáló eljárásaiban megmutatkoznak az ilyen szomatoszfcatin receptorokat horάζ aks-zo patnany nasnyamungy tumoros sejtvcmal. egy azaszerinnel indukált exokrin hasnyálmirigy tumorból származik [Jessop és Hay: (1980)j. A mikoplazmátől mentes tenyészeteket 10 % foetális borjüszérummal (FCS) kiegészített DMEM táptalajban tenyésztettük 5 % COa jelenlétében, A sejteket antibiotikumok vagy antifungális szerek nélkül növesztettük. A telítési sűrűséget elérő AR42J sejteket trip színnel kezeltük, DMEM + 2,5 % FCS-ben hígítottuk és nem fedett 96 lyukú lemezekbe szélesztettük. A 48 órás inkubációs időszak után (0. nap) a sejtek számát egy külön kontroll lemezen, mind a Coulter sejtszámolóval, mind az SRB kolorímetriás vizsgálattal meghatároztuk. Ezután a sejteket 2-5 napig különböző koncentrációkban A vegyülettel kezeltük, majd megszámoltuk. Ilyen körülmények között az A vegyület a tumoros sejtek proliferácioját lö ⁱ²-10'⁶ M koncentráció tartományban gátolja,

A tumornövekedés in vivő tanulmányozása

A nőstény csupasz 19-22 g-os egereket öt csoportban tanulmányoztuk, szabad vízhozzáférés és patogénmentes rágcsáló étrend mellett. A szubkután tumorokat a tenyésztett AR423 sejtekS9 >· * * kel iniciáltuk. A kezelést a tumoros sejtek inokuláciőját követő 24 nap után kezdtük meg. Az A yegyöletettel a kezelést folyamatos infúzióban, például 10-50 ag/kg/őra arányban végeztük. A tumorok méretét tolómérővel határoztuk meg,

A statisztikai számításokhoz a Student-féle T-tesztet alkalmaztuk, Ebben a vizsgálatban a sóoldatos kontrolihoz képest az A vegyüiet a tumoros növekedést a 11. napra 51 %-kal gátolta.

ben hasznos, mint amilyenek például a rákos daganatok, különösen a szomatosztatm receptor típusokat hordozó tumorok, melyekhez például az itt közzétett komplexben lévő konjugált A vegyüiet kötőaffínítást. mutat.

Az A hatással van, ahogy azt a standard vizsgálatokban, például csupasz egereknél, tapasztalhattuk. Röviden, a tumoros sejteket (0,1-10 x 1Ö⁶ 0,1 miben) (SiHa sejtek és MDA MB-231 sejtek, amelyeket a szakirodalomban leírtaknak megfelelően állítottunk elő) (Steiner és mtsai; (1992) Svájc) intrakután inokuláltuk. Az egereket, rendszerint kettőt, közép hasi oldalon injektáltuk, amik a fő hasi véredényektől olyan messze helyezkedtek el, hogy a háttér véredényszám alacsony volt, A kontroll csoportok PBS-ben 0,1 ml 0,02 % tripánkéket kaptak. Az injekciót követő 10. napon az állatokat elaltattuk és COs belélegezteíéssel feláldoztuk. A bőrt a fordítós mikroszkópos vizsgálathoz (Zeiss IM) műanyag gyűrűre helyzetük (átmérő 40 mm) és 12,5-szeres és 25-szörös nagyítással megvizsgáltuk. Az angíogenézis méréséhez a véredényeket lefotóztuk, és azokat az ereket megszámláltuk, melyek a tumorral kapcsolatot alakítottak ki, Á kontroll állatokban azokat a véredényeket számoltuk, amelyek az injekció beadási helye körüli meghatározott a Ez a terület a dermális tumorok átlag nagysát. Az utóbbit tolómérővel határoztuk meg, a 3,14 x r² egyenlet alapján. Az A vegyüietet szubkután a tumor ino~ vagy az után 3 nappal később adtuk be. A

A vegyület a véredények ké kezeltük. Ebben, a vizsgálatban az :t például 0,01-1000 pg/kg az A vegyület az angiogenézís megfékezésére vagy kezelésére hasznos, valamint a gyulladásos betegségeknél, mint ahogy azokat a fentiekben megadtuk, a következőket: gyulladásos szembetegség, makulárís oedéma, például císztoid makuláris ödéma, idiopátíás císztoid makuláris ödéma, exudatív szemmel kapcsolatos makuláris degeneráció, choroidalis neovaszkularizációval társuló betegségek és proliíératív retínopáfía.

Áz A vegyület, ahogy az a következő vizsgálat mutatja, a símaízomsejtek proliferácíójára ís gátlólag hat.

Krónikus allograít kilökés

A hím DA (RTl^a) patkányok veséit ortotopi.kálisan hím hewis (RT lő befogadókba transzplantáituk, Összesen 24 állatnál végeztünk transzplantációt Az· akut eelluláris kilökődés megakadályozása. érdekében az összes állatot a transzplantáció napjától kezdve per os 14 napig 7,5 mg/kg/nap cíklosporin A-val

-fc5 veseeitavohtast nem Mindegyik kísérleti csoportot az A vegyüiet meghatározott mennyiségével kezeltük, vagy a hat kontroll esetében placebót alkalmaztunk. A transzplantációt követő 14, napon az állatokat 112 napig az A vegyüiet infúziójával kezeltük, vagy placebót kaptak. A transzplantáció után a 14. napon a szerv perfúzíókat MRI-vel mértük. Ezt a transzplantációt kővető 53-64 napokon és a kísérlet végén megismételtük. Az állatokból ezek után autopszíát vettünk. Ebben a patkány vese allograft modellben az A vegyüiet 10 pg/kg/óra dózisának beadása javult szerv perfüzíőt, valamint a vaszkuíárís ugárendeződéssel és a graft 5) társuló krónikus kilökődés

A kifejezett és állandósult ÍGF-1 szint

leesést szintén kimérni egy szív allo-transzplanlációs modellt, melynél a. vas újjáalakulásra és a graft beszűrődésre kifejtett jótékony hatást

Az A vegyületet a karotid artériás gyűrű transzplantációs modellben is megvizsgáltuk, donorként BIO.A (2R| (H~2h²) egereket és befogadóként B10.BR (H-2^k) egereket használva. Röviden, a donor karotid artériáját paratopikálisan gyűrűként a befogadó karotid artériájába transzplantáltuk vég-az-oldalhoz anasztomőzissal A mini-pumpát szubkután közvetlenül a transzplantációt követően elhelyeztük, mely az A vegyületet 50 tig/fcg/óra arányban szállította. A karotid artéria graftokat a transzplantációt követő 30. napon összegyűjtöttük, a vaszfculáris újjáalakulás- analizálásához, például Verhoeff morfometríkus analízissel, ahol az elasztín festett paraffin metszeteket számítóneoiniciális képződést gátolja a nem kezelt állatokhoz képest, amelyeknél erőteljes neointima alakult ki,

Angioplasztía

Az angioplasztiát ballon katéteres sérülést okozó patkány modellben tanulmányoztuk, Á ballonos katéterízácíőt a 0. napon végeztük, lényegében a szakirodalomban leírtaknak megfelelően [Powell és mtsai: (1989)]. Izofiuorános altatásban a Fogarty 2.F katétert a bal közös karotíd artériában bevezettük, az egységes endothebzáció eléréséhez, A katétert ezután eltávolítottak, a vérzés megakadályozására a külső karotid köré ligatürát helyeztünk és az állatokat hagytuk rendbe jönni, A tanulmányban két csoport 12 RoRo patkányt (400 g, hozzávetőleg 24 hetesek) használtunk: az egyik a kontroll csoport, míg a másik az A vegyületet kapta, ehhez a patkányokat teljesen véletlenszerűen válogattuk ki. Az A vegvületet folyamatos infúzióban adtuk, minipumpákat használva, melyek 10 gg/kg/őra mennyiséget szállítottak; a kísérleteket a ballon sérülés (~3. nap) előtt két nappal kezdtük meg, míg a ballonsérülés utáni 14, napon fejeztük be. Ezek után a patkányokat izoíluránnal elaltattuk és 0,1 M foszfáttal puffereit sőoldattal períündáltuk (PBS, pH «· 7,4), majd ezt 15 porcig főszfátpufferes 2,5 % glutáraldehíddel (pH - 7,4) folytattuk, A karotíd artériákat ezután kivágtuk, a környező szövettől elkülönítettük és 0,1 M kakodilát pufferbe (pH - 7,4} mártottuk, ami 7 % szacharózt tartalmazott, és egy éjszakán át 4 °C-on inkubáltuk.. A következő napon a karotid artériákat a. gyártó utasításainak megfelelően Technovít 7100-ba ágyaztuk. A közép, neointima és a lumen keresztmetszeteket morfometriás képanalízáló rendszerrel (MC1D, Toronto, Canada) értékeltük ki. Ebben a vizsgálatban az A vegyület a neointima megvastagodását jelentősen gátolta.

így az A vegyület a graft véredény betegségek megakadályozására és leküzdésére hasznos, mint például allo- vagy xenotranszplantátumos vasculopatiáknál, például graft véredény atheroszklerőzis, például a szervtranszpantácíóban, például szív, tüdő, kombinált szív-tüdő, máj, vese vagy hasnyálmirigy transzplantacional, vagy a. gratt stenosis megeiozeseben vagy kezelésében, reslenosisfoan és/vagy vaszkuiáris kizáródásban a vaszkuiáris sérülést követően, például amit katéterizációs eljárások vagy vaszkuiáris eltávolítása folyamatok okoztak, mint vagy más invazív eljárás, melyek a vaszkuiáris íntima vágj' endothelium integritását sértik.

Az A vegyület előnyös plazma féléletidövel rendelkezik. Kiürűlési féléletideje 15-30 óra közé tehető.

Az összes fenti, indikációban a szükséges dózis természetesen függ például a gazdától, a beadás módjától és a kezelt állapot súlyosságától. Bár általában kielégítő eredmény kapható az A vegyület 1 gg - 0,7 mg/kg/nap tartományban történő beadásakor.

« mégis a javailt napi dózis L található, előnyösen

i), de osztott 0,5 pg-2S m~ mg, előnyösen 2 pg~l,5 mg.

körülbelül a 2 gg-50 mg tartományban 0,01-40 mg, például 0,01-3 mg Is beadható: napi háromszor például körülbelül 2 pg~20

Az A vegy más sójában vagy komplexében beadható. Az ilyen sók és komplexek hagyományos módon elkészíthetők, és azonos nagyságrendű aktivitással rendelkeznek mint a szabad vegyűlet. A jelen találmány az A vegyületet tartalmazó gyógyszerészeti összetételre is vonatkozik, szabad bázis formában vagy gyógyszerészetlleg elfogadható só vagy komplex formában, egy vagy több gyögyszerészetileg elfogadható hígítóval vagy hordozóval együtt. .Az ilyen igyománvos módon kí szerelhetők. Az A v fékezett kibocsátású formában is beadható,

rumokban, míkrokapszulákban, mikrogőmbökben vagy nanogömbökben, melyek például biológiailag lebomló polimereket vag}^! vagy autogél

Az A vegyűlet vagy annak gyögyszerészetileg elfogadható sója. vagy komplexe bármely hagyományos módon beadható, például parenterálisan, például injektálható oldat vagy szuszpenziö formában (beleértve a fékezett kibocsátású formákat, ahogy azt már a fentiekben jeleztük), orálisan, felhasználva hagyományos abszorpciót fokozó szereket., nazálisán vagy kúpban vagy helyileg, például szemészeti folyadék formában, gélben, kencében vagy szuszpenzióban, például líposzömális, mikrogömb vagy nanogömfe kiszelelésként, például instillációhoz vagy szubkonjunktiválís vagy intra- vagy peri-okuláris injekciókhoz,

A fentiekkel összhangban a jelen találmány a következőkről is gondoskodik:

1. Áz A vegyület vagy annak gyógyszerészetiieg elfogadható sója vagy komplexe gyógyszerészeti felhasználásban;

2. Az arra rászoruló szubjektumban a fentiekben jelzett betegségek vagy kórok megelőzésére vagy kezelésére szolgáló eljárás, melyben az eljárás a szóban forgó szubjektumban az A vegyület vagy annak gyögyszerészetileg elfogadható sójának vagy komplexének hatásos mennyiségének beadását tartalmazza; vagy

3. Az A vegyület vagy annak gyógyszerészetiieg elfogadható sója vagy komplexe gyógyszerészeti összetételekben való használatához. bármely a 2. pontban megbatározott eljárás alapján.

A konjugált A vegyület vagy annak .gyógyszerészetiieg elfogadható sója mind képkialakítö szerként, például a szövetekben és a sejtekben a szomatosztatin receptor pozitív területek láthatóvá tételére, mint például a szomatosztatin receptor pozitív tumorok és metasztázisok, szomatosztatin receptorokat kifejező gyulladásos vagy autoimmun betegségek, transzplantáció után tuberkulózis vagy szerkilokődés esetében, amikor a kimutatható elemmel van komplexben, például y- vagy pözitronsugárzó atom, fluoreszcens fémion vagy paramágneses ion, például ^uhn, ^ió:Tb, > > »♦

-⁷Lu, ^S6Y, ö«Ga

Gd³\ Fe³⁺, Mn²⁺ vagy Cr²*, mind radiolármakonként hasznos a szomatosztatin receptor pozitív tumorok és metasztázisok tn oiw kezelésre, a reumatoíd arthritis és a súlyos gxailladásos állapotoknál, amikor a- vagy S-sugárzó atommal van komplexben vagy az Auger-e- kaszkád tagjaival, mint például W, wffi, ^UAt,. ²^Bi vagy 201TI, ahogy ezt standard vizsgálatokban megállapítottuk.

Részletesebben, azt találtuk, hogy a konjugált Á vegyület a szomatosztatin receptorhoz pKi 8-10 között kötődik. A 3. példa vegyüíetet komplexbe vittük, például ⁱⁿln, ^8SY, voy vagy ¹⁷⁷Lu elemmel és megállapítottuk, hogy az A vegyület kötési profilja nM-os tartományban a megfelelő sst altípussal összhangban van.

A konjugált A vegyület affinitása és a szomatosztatin receptorokkal alkotott komplexei ín οίνο vizsgálatban szintén kimutathatók, a szakirodalomban leírt eljárások alapján jGB-A2,225,579 számú szabadalmi bejelentés). Például a 3. példa vegyülete, például a következő komplexekben: ^U1ln, ⁸⁸Y, ^Y vagy ⁱ⁷⁷Lu, az exokrin hasnyálmirigy tumort hordozó egerekben vagy patkányokban, melyek hsst2 receptorokat fejeznek ki, az injekciót követően 4 órával szignifikáns tumor felhalmozódást ad.

Például ⁱⁿln, ¹⁷⁷Lu, ^S6Y vagy ^iöiTb elemekkel komplexet alkotó konjugált A vegyületek beadása után, 1-5 pg/kg dózisokban, melyeket 5 mCÍ atommal, előnyösen 0,1-2 mCí-vel jelöltünk, a tumoros helyek kímutathatóvá válnak.

A konjugált A vegyület, amikor a- vagy ü-sugárzö atommal vagy az Auger-e kaszkád atomjával jelölt, akkor a szomatoί « * * sztatint hordozó tumoros sejtekre antíprolííerácíós és/vagy citotoxikus hatást fejt ki, például a csupasz egér vizsgálatokban. A csupasz egereket a fentiekben kozzétetteknek megfelelően ÁR42J patkány hasnyálmirigy tumorsejtekkel vágj·' NC1-H69 humán kis sejtes tüdő ráksejtekkel inokuláituk, Amikor a tumorok az 1-2 cm³~es méretet elérték, akkor az állatokat randomizáltan kontroll és kezelési csoportokra osztottuk, A konjugált A vegyületet komplex formában ip. vagy ív. injekciókban adtuk be. Egerenként a dózis 40 rnCí/kg-ig terjedt. A tumorok méretét tolómérővel, a fentiekben leírtaknak megfelelően, határoztuk meg. A statisztikai analízist Student-féie T-teszttel végeztük. A vizsgálatokban az átmeneti, tumorzsugorodás egy hét után. a kezdő érték 50 %-áig: terjedt, és a tumoros növekedés a 3, példa szerinti W-nal komplexet alkotó vegyület egyszeri alkalmazására megkésett. Ezzel szemben a kontroll csoportokban folyamatos tumor növekedést tapasztaltunk, miközben a térfogat kettőződésí ideje körülbelül hét nap volt.

Ennek megfelelően a specifikus vagy alternatív megváló sításí formák sorozatában a jelen találmány a következőket is biztosítja.

4. Kimutatható elemmel komplexet alkotó konjugált A vegyület használata az in vivő a szomatosztatin pozitív sejtek és szövetek kimutatására, például a szomatosztatin receptor pozitív tumorok és metasztázísok. esetében egy adott, szubjektumban, és a szóban forgő « 4 * komplexszel a megcélzott receptor helyzetének kimutatása.

A szomatosztatin receptor pozitív szövetek és sejtek, szomatosztatin receptor pozitív tumorok és mén, in vmo,

a k

A vegyület vagy annak győgyszerésójának beadását tartalmazza, és a szóban forgó komplexszel a megcélzott receptor helyzetének kimutatását.

A komplexben lévő konjugált A vegyület használata képalkotó szerként például intravénásán, például injektálható oldatokban vagy szuszpenzíókhan egyetlen injekcióban beadható, A radioaktív jelölést előnyösen röviddel a szubjektumba történő beadás előtt végezzük,

Az állatokban a javaik dőzistartomány 0,01-1 pg/kg konjugált A vegyület. lehet, mely 0,02 - 0,5 mCi y-sugárzó atommal képez komplexet. Nagyobb állatokban, például az emberekben, a javallt dőzistartomány 1-100 ag/m² konjugált A vegyület, mely 1-100 mCi/m² kimutatható elemmel konjugált, mint

i^ín, ^3Í z ce vagy β-sugárzó vagy az •E>* kass «üt A vegyület használata a szomatosztatin receptor pozitiv es in vívó

7. A szomato sztatin recept or pozitív tumor ok és metasztádsok in vív® kezelési eljárása, például az ilyen tumoros növekedéssel társuló tumorok vagy szimptornák ínvázios képességének kezelésére, az arra rászoruló szubjektumnál, mely eljárás a szóban forgó szubjektumba a konjugált A vegyület, mely az a- vagy a S-sugárző atomokkal vagy az Auger-e- kaszkád atomjaival komplexet alkot, gyógyszerészetíleg hatásos mennyiségének beadását foglalja magában.

8. A konjugált A vegyület vagy annak győgyszerészetileg elfogadható sójának használata a képalkotó szer vagy a raöíolármakon összetétel gyártásában. Az alkalmazott dózis a jelen találmány alkalmazó radioterapeuta gyakorlatában természetesen az adott kezeléstől függ, például a szomatosztatínt kifejező normális szervek radiotoxicításátől, a tumor térfogatától és a kívánt terápiától. Általában a dózis a farmakokinetikai és radioaktivitási megoszlási adatokon, melyeket az egészséges szervekben figyelhetünk meg, valamint a megfigyelt célhely felvételén alapul. Az a-sugárzó komplexben lévő konjugált A vegyület ismételten beadható, például 1-3 hónapos időtartamban.

Az állatokban a javaik dózistarfomány 20-100 pg/kg konjugált A vegyület, mely 15-70 mCi a- vagy β-sugárzó atommal vagy az Auger-e- kaszkád atomjaival, például W, ¹⁷⁷Lu vagy -¹⁶¹Tb, komplexet alkot. Nagyobb állatokban, mint például emberekben..

* ♦ *Xi

a javallt dőzistartömány 1-100 pg/m² konjugáit A vegyület lehet,, mely 1-100 mCi/m² a- vagy ü-sugárzó atommal vagy az Auger-ekaszkád atomjaival, például ⁹⁰Y, ^E?7Lu vagy ⁱ⁶¹Tfo, komplexet alkot.

A komplex formában lévő konjugáit A vegyület radioterápiás szerként való alkalmazása bármely hagyományos úton megvalósítható, a beadás például történhet: intravénásán, például injektálható oldatokban. Előnyösen infúzióban is beadható, például 15-60 perc alatt. A tumor helyétől függően a tumor közvetlen közelébe adható, például katéterrel. A jelen találmány gyógyszerészeti összetételeket is biztosít, melyek a konjugáit A vegyűletet szabad bázis formában tartalmazzák, vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formában, vagy kimutatható vagy radioterápiás szerrel komplexben egy vagy több gyógyszerészetileg elfogadható hígítóval vagy hordozóval együtt.

Az A vegyület vagy a konjugáit A vegyület komplex formában a szomatosztatin receptort kifejező vagy azt felhalmozó tumorok megjelenésének vizsgálatához vagy kezeléséhez alkalmas, mint amilyenek például a hipofízis, gasztro-enteropankreatikus kareinoidok, központi idegrendszeri, prosztata (beleértve a kifejlett állapotú hormonnal nehezen kezelhető prosztata rákot.) ovaríálís vagy végbél tumorok, kissejtes tüdőrák, malígnus bél obstrukeíő paragangliomák, veserák, bőrrák, neuroblasztómák, pheochromocy tornák, medulláris tiroíd kardnómák, míelömák, límfómák, Hodgkín és non-Hodgkin Hmfőmák, csont tumorok és ezek metasztázísai, valamint autoimmun vagy gyulladásos •χ ν ΧφΦφ X* * *** j! χ φ ♦ ♦«·

X »·*· * *' φ * * * * •φ φφ **φ ** betegségek, mint például reumatoid arthritis, Graves kór vagy más gyulladásos szembetegségek,

A találmány további szempontjai szerint gyógyszerészeti összetételt biztosítunk, mely a konjugált A vegyületet vagy annak komplexben lévő formáját tartalmazza egy vagv több gyógyszerészetüeg elfogadható hordozóval vagy hígítóval együtt. Az ilyen összetételek hagyományos úton gyárthatók, és például képalkotáshoz .kialakítható, készlet formában, mely két dózist, az egyik az atom és a másik konjugált A vegyüiet, valamint keverési ismertetőt tartalmaz, A radíoterápiához a komplexben lévő konjugált A vegyüiet előnyösen izotópos folyadék kiszerelésben fordul

Az A vegyüiet vagy a konjugált A vegyüiet komplex formában egyedüli aktív alkotóként vagy más anyaggal .kombinációban, például adjuvánsként más gyógy szerrel beadható. Például az A vegyüiet ímmunszupressziv szerrel kombinációban használható, ezek például a következők; kaleineurín inhibitor, ciklosporin A vagy FK 506; makrociklikus laktön, mely ímmunszupressziv tuisaggai rendelkezik, például rapamicm vagy roxíetilf-rapamiein (RÁD); ímmunszupressziv tulajdonságú aszkomicin, például ABT-281, A5M981, stb.; kortíkoszteroídok; ciklofoszfamidok; azatioprének; metotrexát; lefl.un.omid; mízoríbin; mikofenolsav vagy ezek sói, például Myfortic*; mikofenolát-mofetil; 15-dezoxíszpergualin vagy ímmunszuppresszív homológja, analógja, vagy származékaik; a Iimfoeiták homing-ját gyorsító szer, például FTY720; ímmunoszuppresszív monokionáiis ellen32 anyagok, például a leukocita receptorokra specifikus monokloná-lis ellenanyagok, például MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CDS, CD25, CD28, CD40, CD45, CD58, CD80, CD86 vagy ezek ligandjaira specifikus monokionáíis ellenanyagok; más immunmódosító vegyületek, például rekombináns kötőmolekula, melynek legalább egy része a CTLA4 extracelíuláns doménjával rendelkezik vagy ezek mutánsai, melyek a nem CTLA4 fehérje szekvenciához például CTLA41g (amit például letétbe helyeztek, vagy ezek mutánsai, például LEA29Y; adhéziós molekula gátlók, például LFA-1 antagonisták, ICAM-l vagy -3 antagonísták, VCÁM-4 antagonisták vagy VLA-4 antagonisták. Az

A vegyület a következőkkel is kombinálható:

szerek, GH szekréciós receptort módosító szer, vagy hexarefin, GH receptor antagonista, például pegvísomant, inzulin szekréciót elősegítő, inzulin szekréciót fokozó anyagok, például, szulfoníl-urea, például tolfoutamíd, kló: tolazamíd, acetohexamid, 4-kiór-Nbenzolszulíonamid (glíkopiramídj, glibenklamid (glyt ghklazid, l-butil~3~metanílilurea, karbutamid, glibonurid, glipizid, glíkvidon, gfiszoxepíd, glibutiazol, glíbuzol, glíhexamid, gllmídin, glípinamíd, fenbuta.rn.id vagy tolilciklamid, rövid hatású nemszulfoml karbamíd, orális mzulínotrőp szer származék, rövid hatású inzulin fokozó, például meglítinid, repaglíníd, fenílecetsav származék, például nategliníd, DPP IV inhibitor, például 1--(2-((5-cianopirídm-2“íl}aminojetílamíno}acetil~ (2S)~eiano~pírrolidin~díhídroklond, LAF237, GLF-1 vagy GLP-1 ♦

agonista analóg, inzulin. érzékenyig, például peroxiszóma proliferációsan aktivált receptor γ agonista (PPARy), például glitazon, például (8)-((3,4-dihi.dro-2-(fenil-metil)-2H - 1-benzopirán6-il)metil-tiawlidin-:2,4-dion (englitazone), 5-((4-(3-(5-metíl-2-fenil-4~oxazolil)-1 - oxopropü) -fenil] -metil}-tiazolidin- 2,4 -dión (darglitazone). 5-((4-( 1 ~metil-eiklohexil)metoxi)-feni.l]met.íl}-tiazolídin-2_f4-dion (ciglítazone), 5-((4-(2-( 1 -indolil)etoxi)feníl]metil}tiazolidm-2,4-dion (DRR21,89), 5-(4-(2-(5-metil-2-fenil-4~oxazoHl)etoxi)lbenzil)-tiaxolidin-2,4-díon (BM-13.1246), 5-(2~naftilszulfonil)-tiazolídm-2,4-dion (AY-31637), bisz(4-((2,4-dioxo-5tiazolídinll)-metil]fenil}metán ÍYM268), 5-(4-(2-(5-metiÍ~2-fenil-4~ oxaxolil}-2-h.ídroxietoxi]benzil)--tiazolidin-2,4-dion (AD-5075), 5- (4(1 -fenil-1 -ei.klopropán-karbonílammo}~benzil]-ti.azolidín-2,4 -dión (DN-108), 5-((4-(2-(2,3-dibidroindol- l-il)etoxí}fenil]nietil}-tiazolidin-2,4-dion, 5~{3~(4-kloro-fenil])-2-propinü]-5-fenilszulfonil)tiazolídin-2,4-dion, 5-(3-(4-klőrfenil])-2-propmil}- 5- (4-íluorofenil~ szulfonil)txazolidin-2.,4-dion, 5-((4-(2“(metil-2-pÍridmn-am.mo)etoxi)fenil]metil}-tiazolídin-2,4-díon (rosíglitazone), 5-{(4-(2-(5-etíl2-pkídü)etoxi)fenil]-metil}tíazoIidin~2,4--d.iön (pioglitazone), 5--((4((3,4-dihidro-6-bídroxi- 2,5,7,8-tetrametiI-2H-1 -benzopirán-2 il)metoxi}-feníl]-metíÍ}-tiazolldín-2,4-dion (troglitazone), 5-(6-(2fiuoro-benzilöxi)naítalén~2-ilmetíl]-liazölídin~2,4~díon. (MCC555-), 5-{(2-(2--naftíl}-~benzoxazol-5~il]-metíl}tíazolídín-2,4-dion (T-174) vagy 5-(2,4-dioxötiazolidm-5-ilmetil}-2-metoxí~N-(4--trifluorometilbenzíl)benzaniid (KRP297), nem glitazon típusú, mint például N(2-benzoilfenil}-L-tirozÍn analóg, például GI-262570 vagy oxolidí♦,* * * * «X « ^ν «4 ** nedíon, például JTT5O1, kettős PPARy/PPARa agonista, például DRF-5541S8, HC-2100 vagy NN-622, retínoid X receptor agonista vagy rexínoid, például 2-(1-(3,5,5,8,8-pentametil-5,6,7,8tetrahidro-2naítü)eik.lop.ropii]-piridín-5~kai'bonsav, 4((8,5,5₅8₅8~pentametil-5,6,7,8-tetrahIdro-2-naftill-2-kai'boniljbenzoesav, 9-císz-retinoínsav vagy ezek analógjai, származékai vagy gyógyszerészetileg elfogadható sói, protein tirozín kináz IB, glukogénszintáz kináz-3 inhibitor, nem-peptidil kísmolekulájú inzulin mímetikum, például L-783,281 vagy CLX-901, vagy alacsony dőzisú inzulin, glutamín: fruktóz-6-foszfát áiöidotranszferáz inhibitor, glükőz-6-foszfatáz inhibitor, bíguanid, például Metformín, fruktóz-l,6-bifoszfatáz inhibitor, glikogéníoszforiláz inhibitor, például CP-91149, glukagon receptor antagonista, például CP-99711, NNC 92-1687, b-168,049 vagy BÁY27-9955, foszfoenolpiruvát-kar boxikináz, piruvát- dehídrogenáz-kínáz inhibitor, a-glükozídáz inhibitor, például 4,6”~ didezoxí-4^!’-{(ISP(l,4,6/5)-4,5,6-trihidroxí-3~bídroximetíi-2-ciklohexenilaminojmaltotrióz vagy ö~4,6-didezoxi~4~{{ 1 S,4R,5S,6S]4,5,6-tríhidroxi-3-{hidroximetilj-2-cildohexén- l~ilj-amino}~a~D~ glúkopiranozil-{1^4)-O-a-D-glukopiranozíl-(l->4)-D-glúkopiranóz (akarbőz), N~(I,3-dihidroxí· 2 propiljvaliolanún (voglíbose) vagy miglitol, vagy gyomorkiürítési inhibitor, például GLP-1, CCK-8 és amílín (például Pramlíntíde), antí -angfogenikus hatású szer, például benzoporfirin, például verteporíin, midostaurin vagy 4piridlimetil-ftalazin, χχ * X

A komplex .formában lévő konjugált A vegyület antiproliferáeiős szerrel kombinációban is használható, például kemoterápiás gyógyszerrel, amilyen például a paclitaxel, gemcitabíne, eíszplatin, doxorubiein, ő-fluorouracil vagy faxol, hormonális szerrel vagy antagomstával, például anti-androgénnel vagy mitoxantronnal (különösen prosztatarák esetében), vagy antiösztrogénnel, mint amilyen például a letrozol (különösen emlőrák esetében), antimeíabolittal, növényi alkaloiddal, biológiai választ módosító szerrel, előnyösen limfokinnal vagy interferonokkal, a fehérje tirozin kináz és/vagy szerin/treonin kináz inhibitorral, vagy más vagy ismeretlen mechanizmusú szerrel, amilyen például bármely epotilon vagy epotilonszármazék, vagy mákrociklikus laktonnal, például rapamicin, RAB vagy CC1779.

Ahol a komplexben lévő konjugált A vegyületet más gyógyszerrel együtt adják, ott az együtt alkalmazott gyógyszer dózisai természetesen a gyógyszer típusától, speeifitásától, a kezelési körülményektől és egyebektől függnek. Az együttes beadás” vagy a kombinált beadás” vagy hasonló itt használt kifejezések a kiválasztott terápiás szer egyetlen betegbe adását ölelik fel, és szándékunknak megfelelően azokat a kezelési területeket érinti, melyekben a szert szükségszerűen nem kell azonos úton vagy azonos időben beadni.

Áz előzőekkel összhangban a jelen találmány további szemis figyelemmel van;

9, Gyógyszerészeti kombináció, mely a) első szert, ami lehet az Ά vegyület vagy a konjugált A vegyület ?

Μ·»· lex formában és b) az együttesen alkalmazott szert, tartalmaz, például, ahogy azt az előzőekben meghatároztuk,

10, Á fentiekben meghatározott együttes beadást magában foglaló eljárás, például, a komplexben lévő A vegyület, vagy a komplexben lévő konjugált A vegyület terápiásán hatásos mennyiségének és a második gyógyszer egyszerre vagy egymást követő beadása, ahol. a szóban forgó második gyógyszer például a fentiekben jelzettekkel megegyezik,

A találmány egy különös kombinációját a betegség vagy kör megelőzésétől vagy kezelésétől függően választjuk, például egy immunszupressziős szerrel kombinációban, például a krónikus graít kilökődés megelőzésére vagy kezelésére, inzulin szekréciót elősegítővei, inzulin fokozőval, inzulin érzékenyítővel vagy alacsony dózisú inzulinnak a diabetes vagy annak komplikációinak kezelésében, gyulladásellenes szerrel kombinációban, a. gyulladásos betegségek vagy kórok megelőzésére vagy kezelésére, anri-angiogeníkus hatású szerekkel kombinációban, például a makuláris ödéma vagy degeneráció megelőzésére vagy kezelésére, kemoterápiás szerrel kombinációban a rákbetegség esetében.

Claims (13)

1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK

   1. Az 1 általános képletü vegyület, ahol az egyik aminoesoport adott esetben védett formában van jelen, vagy ezen vegyület sója. vagy komplexe,
2. 2. Az 1. Igénypont szerinti vegyület védetten formában, sóként.
3. 3. A 2. igénypont szerinti vegyület mono- vagy di~só formában.
4. 4. A 3. Igénypont szerinti vegyület acetát, benzoát, aszpartáf vagy pamoát formában.
5. 5. Eljárás az 1. igénypont szerinti vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy az eljárás során egy lineáris peptid védett, polimerhez kötött vagy védetten formáját a kívánt vegyületet eredményező módon cikiizáijok, majd adott esetben a védöcsoporto(ka)t eltávolítjuk, és a kívánt terméket szabad vegyület vagy só formában nyerjük kí.
6. 6. Az 1. igénypont szerinti vegyölet, melyben a Pro oldallánc aminoosoportja keiáíképzö szerhez konjugált, amely kelátképző szer adott esetben egy detektálható vagy radioterápiás etemmel komplexet alkot.
7. 7. Gyógyszerészeti készítmény, amely az 1. igénypont szerinti vegyülhet vagy annak győgyszerészetíleg elfogadható sóját tartalmazza egy vagy több gyógyszerészetiieg elfogadható hígítóval vagy hordozóval együtt.
8. 8. A 7. Igénypont szerinti gyógyszerészeti összetétel nyújtott hatóanyag-kibocsátású formában vagy helyileg alkalmazható formában.
9. 9. A 7. Igénypont szerinti gyógyszerészeti összetétel ímmunszupresszív szerrel, gyeiladásgátlő szerrel, GH szekréciós receptort módosító szerrel, GH receptor antagonisfávah inzulin szekréciót elősegítő, inzulin ezek* · » x » » « « « * χ rációt fokozó szerrel, inzulin érzékenyifővel, alacsony dőzisú inzulinnal, anfianglogenlkus hatásokat mutató szerrel, vagy kemoterápiás szerrel kombinációban történő alkalmazásra.
10. 10. Az 1, igénypont szerinti vegyület alkalmazása enterokután és pancreatikokután fisztula, irrltábllls bélszindróma, gyulladásos betegségek és korok, polidsztikus vesebetegség, tíumplng szindróma, vizes hasmenés szindróma, AIDS-szei kapcsolatos hasmenés, kemoterápia által Indukált hasmenés, akut vagy krónikus hasnyálmirigygyuiladás, gasztrointesztinális vérzés, tumorok és malignus betegségek, angiogenézis, makuláris ödéma, choroidálss neovaszkularlzáciöval rokon betegségek, proiiferatív retinopátia, graft véredény betegség, véna graft stenosis, restenosis és/vagy a vaszkuláris sérülést követő vaszkuláris kizáródás kezelésére szolgáló gyógyszerkészítmény előállítására.
11. 11. Az 1. igénypont szerinti vegyület alkalmazása aeromegalia kezelésére szolgáló győgyszerkészitmény előállítására.
12. 12. Az 1. igénypont szerinti vegyület alkalmazása gasztrointesztinális hormont kiválasztó tumorok kezelésére szolgáló gyógyszerkészítmény előállítására.
13. 13. Az 12, igénypont szerinti alkalmazás, ahol a g< hormont kiválasztó tumor egy karcinoid tumor.