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Beschreibung
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Die vorliegende Erfindung betrifft neue Carbamoyl-glycero-2-phosphocholine,
Verfahren zu ihrer Herstellung, sowie ihre Anwendung als hydrolysenbestandige Phospholipide
in der Liposomentechnik. Die erfindungsgemäßen Carbamvl-glycero-2-phoshocholine
entsprechen der allgemeinen Formel I
worin R1 und R2 einen geradkettigen gesättigten oder unsesättigten Kohlenwasserstoffrest
mit 10-20 Kohlenstoffatomen bedeuten, die gleich oder verschieden sein können. Für
R1 und R2 kommen insbesondere in Betracht: Hexadecyl, Octadecyl.
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Verbindungen gemäß der Erfindung sind beispielsweise: 1-O-Decylcarbamoyl-3-O-hexadecyl-glycero-2-phosphocholin,
1b0-Hexadecyl-3-0-undecylcarbamoyl-qlycero-2-phosphocholin,.
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1O-Dodecylcarbamoyl-3aO-hexadecyl-lycero-2-phosphocholin, 1-O-Hexadecyl-3-O-tetradecalcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin,
1-0-Hexadecyl-3-0-eicosylcarbamoyl-alycero-2-phosphocholin,
1-0- DecylcarbamOYl -3-O-octadecyl-alycero-2-phosphocholin, 1-0-Octadecyl-3-0-undecylcarbamoyl-alycero-2-phosphocholin,
1-0-Dodecylcarbamoyl-3-0-octadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-0-Octadecyl-3-0-tetradecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin,
1-0-Eicosylcarbamoyl-3-0-octadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-0-Hexadecylcarbamoyl-3-0-oleyl-glycero-2-phosphochol
in, 1-0-Hexadecylcarbamoyl-3-0-linolyl-glycero-2-phosphocholin, besonders bevorzugt
sind: 1-0-Hexadecyl -3-0-hexadecyl carbamoyl -glycero-2-phosphochol in, 1-0-Hexadecyl-3-0-octadecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin,
1-0-Hexadecylcarbamoyl-3-0-octadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-0-Octadecyl-3-0-octadecylcarbamoyl-lycero-2-phosphocholin.
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Die erfindungsgemäßen Verbindungen weisen gegenüber den bisher in
der Liposomentechnik verwendeten natürlichen oder synthetischen 1,2-Diacyl-glycero-3-phosphocholinen
(z.B.
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DE-OS 27 12 031) deutliche Vorteile auf, da-sie im Gegensatz zu diesen
Phospholipiden genen PhospholipasenA1 und A2 beständig sind und damit eine bessere
Vermittlung des eingeschlossenen Wirkstoffes an den Wirkungsort ermöglichen.
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Die erfindungsgemäßen Substanzen werden durch Reaktion der Lysoverbindungen
II, worin R1 die in Formel I genannte Bedeutung hat, mit Isocyanaten der Formel
III, worin R2 die in Formel 1 angegebene Bedeutung hat, nach folgender Gleichung
hergestellt:
Die Reaktion wird zweckmäßig in organischen aprotischen Lösungsmitteln, wie z.B.
Chloroform, Aceton, Dimethylformamid bzw. deren Mischungen, ggfs. unter Anwendung
eines Katalysators, insbesondere einer Lewis-Base, wie z.B. Triethylamin,
Pyridin,
4-Dimethylaminopyridin, Dimethylformamid, bei Temperaturen zwischen O° und 100°C,
vorzugsweise bei 40 - 60°C, durchgeführt.
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Die Isocyanate können auch in Form ihrer Imidazolide mit der allgemeinen
Formel IV
worin R2 die in Formel I angegebene Bedeutung hat, unter den obengenannten Bedingungen
eingesetzt werden, da sich die Imidazolide wie freie Isocyanate verhalten (verol.
H.A.Staab und WORohrs in: Neuere Methoden der präparativen organischen Chemie, S.
79, Weinheim 1967).
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als Ausgangsverbindungen II kommen in Frage: 1-O-Decyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Undecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Dodecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Tridecyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Tetradecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Pentadecyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Hexadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Heptadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Octadecyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Nonadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Eicosyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Oleyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Linolyl-glycero-2-phosphocholin, wobei die Lysöverbindungen in der natürlichen
sn-Form, in Form der Spiegelbildisomeren oder als Racemate eingesetzt werden können.
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Als Ausgangsverbindungen der Formel III kommen z.B. in Frage: Decylisocyanat,
9-Decenylisocyanat, Undecylisocyanat, Dodecylisocyanats Tridecylisocyanat, Tetradecylisocyanat,
Pentadecylisocyanat, Hexadecylisocyanat, Eicosylisocyanat, Octadecylisocyanat, Nonadecylisocyanat.
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Die als Ausgangsverbindungen verwendeten O-Alkyl-glycero-2-phosphocholine
II können durch milde alkalische Hydrolyse aus O-Acyl-O-alkyl-qlycero-2-phosphocholinen
erhalten werden, die -sich aus den Glycerinderivaten der Formel V
in der R1 die in Formel I angegebene Bedeutung hat und R4 einen geradkettiqen oder
verzweigten Kohlenwasserstoffrest mit 1-6 Kohlenstoffatomen bedeutet, nach bekannten
Phosphorviferungsverfahren, wie z.B. durch Umsetzen mit ß-Bromethylphosphorsäuredichlorid
in Gegenwart einer Base und nachfolgendes Behandeln mit Trimethylamin herstellen
lassen (verb. z.B.
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T. Muramatsu et al., Chemistry and Physics of Lipids, 29, 121-127
(1981)).
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Die ClXycerinderivate V sind ihrerseits aus 2,3-Epoxypropylethern
durch Umsetzung mit den entsprechenden Säuren R4COoH analog dem von U. Zeidler,
Fette, Seifen, Anstrichmittel, 83, (2), 57 (1981) für Esteralkohole beschriebenen
Verfahren zugänzlich. 2,3-Epoxyether erhält man aus Epichlorhydrinen und den entsprechenden
Alkoholen R1OH am besten durch Phasen-Transferkatalyse nach literaturbekannten Verfahren.
Andererseits lassen sich die Glycerinderivate V durch Isomerisieruna aus den entsprechenden
2-O-Acvl-plycerinethern VI
z.B. durch einfaches Erwärmen gewinnen. Die Synthese der 2-O-Acyl-glycerinether
wird von K. Mangold, Angew. Chemie 91,
550-560 (1979) beschrieben.
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Die Lysoverbindungen II können auch aus 1-0-Alkyl-3-0-benzylglycerinen
synthetisiert werden, indem man diese in Form der einzelnen Enantiomeren oder des
Racemats durch Umsetzen mit ß-Bromethylphosphorsäuredichlorid in Gegenwart einer
Base und nachfolgendes Behandeln mit Trimethylamin in die 1-0-Alkyl-3-O-benzyl-glycero-2-phosphocholin
überführt-, die ihrerseits durch Hydrieren in Gegenwart eines Katalysators, wie
z.B.
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Palladium/Aktivkohle, die Verbindungen II erqeben.
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Die Herstellung der erfindungsoemäßen Verbindunoen wird durch die
folgenden Beispiele näher erläutert. Da sich die.Verbindungen der Formel I aufgrund
ihrer wachsartigen Konsistenz nicht durch Schmelzpunkte charakterisieren lassen,
sind die Jeweiligen IR-Daten sowie die RF-Werte der Substanzen aus Formel B angegeben.
Die IR-Spektren wurden mit dem Gerät Perkin-Elmer 257 aufgenommen, wobei die Substanzen
als Chloroformlösungen vermessen wurden.
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BUnnschlchtchromatographie: Kieselgel 60 F-254, Fa. Merck, Art. 5719
Laufmittel: Chloroform/Methanol/Wasser = 65/25/4 (v/v/v)
Beispiel
1 1-0-Hexadecyl-3-0-hexadecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin.
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Eine Mischung aus 50 ma 1-0-Hexadecyl-glycero-2-phosphocholin, 107
mg Hexadecylisocyanat, 5 ml Chloroform und 0,1 ml Dimethylformamid wird bei 60°C
gerührt (48 Stunden). Das überschüssige Al-kylisocyanat wird durch Zugabe von wenia
Wasser hydrolysiert und die Mischung im Vakuum weitgehend einneenot, Der Rückstand
wird durch präparative Dünnschichtchromatocrphie (Kieselgel//Chloroform/Methanol/Wasser
) gereinigt.
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Ausbeute: 52 mg Wachs Rf = 0,5 IR: gamma;(c=o) o) = 1712 cm 1 Analoa
dieser Vorschrift werden hergestellt: Beispiel 2 1-0-Hexadecyl -3-0-octadecyl carbamoyl
-glycero-2-phosphochol in aus 50 mg 1-0-Hexadecyl-glycero-2-phosphochol in 120 mg
Octadecylisocyanat in 5 ml Chloroform und 0,1 ml Dimethylformamid Ausbeute: 61 mg,
Rf = 0,5, #(c=o) = 1715 cm -1 Beispiel 3 1-0-Hexadecyl carbamoyl -3-0-octadecyl-glycero-2-phosphochol
in aus 50 mg 1-O-Octadecyl-glycero-2-phosphocholin 100 mg Hexadecylisocyanat in
5 ml Chloroform und 0,1 l Dimethylformamid.
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Ausbeute: 48 mg, Rf = 0,51, r (c=o)=1710 com 1 Beispiel 4 1-O-Octadecyl-3-O-octadecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin
aus 50 mg 1-O-Octadecyl-glycero-2-phosphocholin 120 mg Octadecylisocyanat in 5 ml
Chloroform und 0,1 ml Dimethylformamid
Analog den Beispielen 1-4
werden hergestellt: 1-O-Decylcarbamoyl-3-O-hexadecyl-glycero-2-phosphocholin 1°O-Hexadecyl°3-0-undecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin,
1¢0-Dodecylcarbamoyl-3-0-hexadecyl-alycero-2-phosphocholin, 1-O-Hexadecyl-3-O-tetradecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Eicosylcarbamoyl-3-O-hexadecyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Decylcarbamoyl-3-O-octadecyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Octadecyl-3-O-undecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin, 2°0°Dodecylcarbamoyl-3~0-octadecyl-alycero-2-phosDhocholin,
1-O-Octadecyl-3-O-tetradecylcarbamoyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Eicosylcarbamoyl-3-O-octadecyl-glycero-2-phosphocholin,
1-O-Hexadecylcarbamoyl-3-O-oleyl-glycero-2-phosphocholin, 1-O-Hexadecylcarbamoyl-2-O-linolyl-glycero-2-phosphocholin,