DE3015635A1

DE3015635A1 - Amide von acylcarnitinen, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende arzneimittel

Info

Publication number: DE3015635A1
Application number: DE19803015635
Authority: DE
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Current assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Priority date: 1979-04-23
Filing date: 1980-04-23
Publication date: 1980-11-13
Also published as: FR2455028B1; IT7948816A0; SE448375B; IE49701B1; US4443475A; DK155595B; NL8002370A; GB2048268B; GR68052B; GR68051B; JPH0314810B2; ES8104191A1; AU5773880A; NO151823B; JPS562945A; CH642619A5; BE882937A; ES490764A0; GB2051779B; IL59915A

Description

R¹ Acetyl, Halogen-substituiertes Acetyl, wie Chloracetyl, Dichlor-acetyl, Brom-acetyl und dgl.; Propionyl; Halogen-substituiertes Propionyl, z.B. Brompropionyl; Butyryl; Halogen-substituiertes Butyryl, z.B. Chlorbutyryl; Isobutyryl; ß-Hydroxy-butyryl; Aceto-acetyl, Linoleyl und Pantothenyl bed.eutet;

R" Amino, sofern R¹ nicht Acetyl ist, 2-Sulfonylethylamino, (2-Hydroxy-3-carbethoxy-propyl)amino, (1-Carbomethoxy-2-methy1-propy1)amino, (1-Carbomethoxy-3-methyl-n-butyl)amino, (1-Carbomethoxy-2-methyl-nbutyl)amino, (1,2-Dicarbomethoxy-ethyl)amino, (1,3-Dicarbomethoxypropyl)amino, (α-Carbethoxy-benzyl)amino,

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(4-Carbethoxy-phenyl)amino, (2-Mercapto-T-carbomethoxyethyl)amino, 2-Mercaptoethylamino, (5-Trimethylammoniumchlorid-1-carbethoxypentyl)amino, (Carbethoxymethyl)-amino, (Carbethoxyethyl)amino und Trifluorethylamino bedeutet,

X , sofern dies vorhanden ist, ein Halogenanion, vorzugsweise Cl~, darstellt.

Im Falle, daß R", wie z.B. im Falle der Gruppierung 2-Sulfonylethylamino oder auch gegebenenfalls R' eine negative Ladung trägt, ist im Regelfall X nicht vorhanden. In einem solchen Fall liegen auch die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze . solcher innerer Salzstrukturen im Rahmen der vorliegenden Erfindung.

Es ist gefunden worden, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen interessante pharmakologische Eigenschaften aufweisen und sich daher für therapeutische Anwendungszwecke besonders eignen.

Die Amide der Formel (I) besitzen eine für das Zentralnervensystem stimulierende Aktivität und wirken sich in einer Erniedrigung der Kampfschwelle aus.

Die Verbindungen lassen sich somit therapeutisch einsetzen:

a) bei der Behandlung funktioneller oder auch sekundärer Rhythmusstörungen, die auf Myocard-skierotische Krankheiten zurückführbar sind, die nicht durch eine ungenügende Mycocardkontraktibilität begleitet sind;

b) bei der Behandlung depressiver Erkrankungen, als cerebrale Psychostimulantia und als Antagonisten bei Barbituratinduzierten Depressionen.

Gemäß der Erfindung werden die Amide der Formel (I) durch die folgenden zwei Synthesewege hergestellt, in Abhängigkeit

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davon, ob das Acyl-Derivat des Carnitins halogeniert ist, wobei es in "das entsprechende Säurehalogenid übergeführt und diese Verbindung sodann mit dem gewünschten Amin oder der Aminosäure kondensiert wird (Verfahren A), oder das Carnitinacyl-Derivat mit dem Amin oder der Aminosäure in Gegenwart eines geeigneten Kondensationsmittels direkt kondensiert wird (Verfahren B).

Das Verfahren A umfaßt die folgenden Schritte:

(a) Zu einer Lösung von Carnitin in einem Lösungsmittel, das unter organischen Säuren und deren Anhydriden ausgewählt ist, wird ein Acy!halogenid der Formel R¹X, worin R¹ die vorstehende Bedeutung besitzt und X ein Halogenatom darstellt, hinzugegeben, wobei die Temperatur des hierdurch erhaltenen Gemisches bei etwa 15 bis 60 C während etwa 4 bis 48 h gehalten wird, wodurch das entsprechende Acyl-Derivat von Carnitin anfällt;

(b) Isolierung des Acyl-Derivates des Carnitins durch Zufügung eines Fällungsmittels zu dem gemäß Stufe (a) erhaltenen Gemisch und Reinigung durch wiederholte Kristallisation; und

(c) Umsetzung des Acyl-Derivates des Carnitins gemäß Stufe (b) mit einem Überschuß eines Halogenierungsmittels bei etwa 25 bis 60⁰C während etwa 0,3 bis 24 h und Entfernung des Überschusses des Halogenierungsmittels, wodurch das entsprechende Säurehalogenid des Acyl-Derivates des Carnitins anfällt;

(d) Auflösung des Säurehalogenids des Acyl-Derivates des Carnitins gemäß Stufe (c) in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel;

(e) Kondensation des Säurehalogenides des Acyl-Derivates des Carnitins mit einer organischen Base, die unter Estern von Aminosäuren mit niedrigen aliphatischen Alkoholen mit 1 bis 4 C-Atomen und Aminen ausgewählt ist, die die Formel R¹¹H aufweisen, wobei R" die vor-

03004B/0706

stehende Bedeutung besitzt, aufgelöst in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel, Halten des resultierenden Gemisches unter Rühren bei Raumtemperatur während etwa 6 bis 48 h, wodurch das Amid der Formel (I) anfällt und

(f) Gewinnung des Amides der Formel (I) durch Konzentration des Gemisches gemäß Stufe (e) und Reinigung durch wiederholte Kristallisation.

Der Aminosäureester gemäß Stufe (e) wird durch Veresterung der Aminosäure vorzugsweise mit Methanol, Ethanol oder Isopropanol in Gegenwart von gasförmigem HCl hergestellt. Der Ester wird sodann als Esterhydrochlorid isoliert. Hiernach :

(i) wird das Esterhydrochlorid in Wasser aufgelöst, der pH-Wert mit einer gesättigten basischen Lösung, z.B. einer Na₂CO₃-Lösung ins Neutrale gebracht, die hierdurch erhaltene Lösung wiederholt mit Methylenchlorid oder Chloroform oder Ethylether extrahiert, die organische Phase konzentriert und der Aminosäureester als freie Base isoliert, wobei er als solcher für die Reaktion mit dem Halogenid des Carnitinacyl-Derivates herangezogen v/erden kann; in alternativer Weise (ii) wird das Esterhydrochlorid in Ethylether suspendiert, wobei eine äquimolare Menge an Triethylamin und Pyridin bei 0 C hinzugefügt wird; das hierdurch gebildete Triethylamin- oder Pyridin-Hydrochlorid wird abfiltriert, die Etherlösung konzentriert und der Aminosäureester als freie Base isoliert, die als solche für die Reaktion mit dem Halogenid des Carnitinacyl-Derivates herangezogen werden kann.

Ü300A P/0706

Nach Verfahren B gemäß den vorstehend angegebenen Stufen (a) und (b) werden die folgenden Verfahrensstufen ausgeführt, die umfassen:

(c¹) Kondensation des Acyl-Derivates des Carnitins gemäß Stufe (b) in wässriger Lösung mit einer organischen Base, die unter Estern von Aminosäuren mit niedrigen aliphatischen Alkoholen mit 1 bis 4 C-Atomen und den Aminen der Formel R¹¹X ausgewählt ist, worin R" die vorstehende Bedeutung besitzt/ in einer Lösung organischer Lösungsmittel in Gegenwart einer'Lösung von Dicyclohexylcarbodiimid in einem organischen Lösungsmittel, Halten des hierdurch erhaltenen Gemisches unter Rühren bei Raumtemperatur während 2 bis 24 h, wodurch das Amid der Formel (I) und ein Niederschlag von Dicyclohexylharnstof f erhalten wird; und

(d')Filtration des Dicyclohexylharnstoff-Niederschlages und Isolierung des Amides der Formel (I) durch Konzentration des Filtrates, Trocknung und wiederholte Kristallisation aus organischem Lösungsmittel.

In Stufe (d¹) stellt das organische Lösungsmittel vorzugsweise Aceton dar. Das molare Verhältnis Carnitinacyl-Derivat : Amin (oder Aminosäure) : Dicyclohexylcarbodiimid beträgt vorzugsweise 1:1:2.

Die Verfahren A und B zur Herstellung der Amide der Formel (I) sind durch das folgende Syntheseschema veranschaulicht:

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CH,

CH —N-CH -CH-CH^CCOH

CH₀ Cl OH

Acylierungs-

stufen (a),(b) -> CH—N-CH -CH-CH COX

CH₀ Cl OR¹ 3

CH,

+ Halogenierungs-CH--Ji~CH„-CK-CH_ÄCOOH ^

stufe (c)

CH₃Cl

OR'

.Kondensation mit Aminosäureester (oder Amin) und Gewinnung

CH,

CH —N-CH -CH-CK COR" 3 S c.

Cl OR

Ö30(Hß/07QS

Die folgenden, nicht beschränkenden Beispiele veranschaulichen die Herstellung einiger der erfindungsgemäßen Amide.

Beispiel 1

Herstellung des Acetylcarnitinamid mit Taurin

(Verfahren A)

Darstellung des Hydrochlorids des Acetylcarnitinchlorids: Einer Suspension von Acetylcarnitinchlorid, die wie vorstehend beschrieben hergestellt worden ist (2 g; 0,01 Mol in 30 cm³ wasserfreiem Methylenchlorid CH₉Cl₇) werden 2,1 g (0,01 Mol) PCl₁- zugesetzt. Das erhaltene Gemisch wird bei Umgebungstemperatur und unter magnetischer Agitation 4 Stunden lang (der zum Lösen des Acetylcarnitins benötigten Zeit) in Reaktion gehalten. Dann wird das Lösungsmittel verdampft, der Rückstand wird dreimal mit kleinen Volumina (von 3 0 cm³) Ethylether gewaschen und bis zum Verschwinden des Lösungsmittels unter Vakuum gehalten. Der Rückstand wird als solcher für die nachfolgende Umsetzung verwendet.

Darstellung des Amids von Acetylcarnitin mit Taurin: Einer auf 0 bis 5°C abgekühlten Taurinlösung (2,5 g; 0,02 Mol) in Wasser/Aceton 100/150 cm³ mit 5 g (0,06 Mol) NaHCO₃) wird tropfenweise die Lösung des zuvor hergestellten Hydrochlorids in 10 cm³ wasserfreiem Aceton zugesetzt. Dann wird die Reaktion bei Umgebungstemperatur 2 Stunden lang ablaufen gelassen. An diesem Punkt wird dann das Aceton abgedampft. Die wässige Lösung wird mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von 2,5 bis 3 eingestellt und unter Vakuum bis zur Trockne konzentriert. Der Rückstand wird mit wasserfreiem Methanol aufgenommen. Der unlösliche Rückstand wird abfiltriert, und das Filtrat wird mit Aceton ausgefällt. Das ausgefällte Produkt

0300/t R/07 Π

stellt das reine Amid dar, welches aus Ethanol auskristallisiert wird.
Ausbeute : 70 %
F.P. 290 - 295 ⁰C
Analyse : C₁₁H₂N₂OgS

	%C	sich	%H	%S
Berechnet:	42,56		7,14	10,53
Gefunden :	42,00	6,79	10,16
Aus der Abwesenheit von Chlor	ergibt	eine	typische in-
terne Salzstruktur: ^:

CH, N-CH₀-CH-CH_nCONH-CH₀CH₀SO,-

3^"* 2. \ λ 2 2. J

CH^ OCOCH₃ NMR; 6 8,0 (in, 1H, CONH) ; 5,5 (m,1H,CH); 3,7 (d,2H, ^N-

^0C0 CH /^CH3

3,3 (m,2H-NH-CH₀); 3,1 (s,9H,N —CH,) ; 2,9(m,2H,-CH_o-S0,); 2,5 (d,2H,-CH₂CO-); DMSO

Beispiel 2

Herstellung von Propionylcarnitinamid des Leucinmethylesters Darstellung von Propionylcarnitin:

Carnitinhydrochlorid (1 ,98 g; 0,01 Mol) wird in 5 cm³ Trifluoressigsäure aufgelöst, der Lösung wird 1 cm³ (0,01 Mol) Propionylchlorid zugesetzt, und die erhaltene Lösung wird eine Nacht über auf 40 - 45 ⁰C gehalten. Das Gemisch wird auf Umgebungstemperatur abgekühlt, es wird 50 cm³ Aceton zugesetzt, und das Gemisch wird 2 Stunden lang unter Agitation gehalten. Der Niederschlag (Carnitin) wird abfiltriert, es werden etwa 30 cm³ Ethy]ether zugesetzt, und das Gemisch v/ird bei einer Temperatur von 0 ⁰C unter Agitation gehalten. Der Niederschlag wird abfiltriert und mit Ethanol-Aceton-ethylether auskristallisiert.
F.P. : 158 - 160 ⁰C

030046/0708

Analyse : ^cio^H2

%C %H %N Berechnet: 47,34 7,94 5,52 13,97 Gefunden : 47,22 8,09 5,50 13,71 NMR:.0 5,69 (m, 1H₇-CH-) ; 3,78 (d,2H,^N-CH₂) ;3 ,27 (s ,9H ,N^--CH₃) ;

O ^CH3

2,92 (d,2H,-CH₂-CO); 2,71 (q,2H,OCOCH₂); 1,11 (t,3H,-CH₉-CH₇); D₉O

Darstellung von Propionylcarnitinamid des Leucinmethylesters: 1,82 g (0,01 Mol) Methylchlorhydratleucinat werden 0,8 cm³ (0,01 Mol) PYridin in 15 cm³ Aceton zugesetzt. Es fällt das Pyridinchlorhydrat aus, welches abfiltriert wird. Dem Methylester der freien Leucinbase wird eine wässrige Lösung von 2,54 g (0,01 Mol) Propionylcarnitin in 3,5 cm³ Wasser zugesetzt. Der Lösung wird dann langsam und unter Agitation 4,12 g Dicyclohexyl-carbodiimid in 5 cm³ Aceton gelöst zugesetzt. Es bildet sich ein Dicyclohexyl-Harnstoff-Niederschlag, der nach etwa 16 Stunden durch Filtrieren entfernt wird. Die Mutterlauge wird unter Vakuum konzentriert. Das erhaltene Rohprodukt wird aus Methanol-Aceton auskristallisiert, wobei ein sehr stark hygroskopisches, festes Produkt erhalten wird. Ausbeute : 75 %
Analyse : C₁₇H₃₃OcN₉Cl

%C %H %N %C1 Berechnet: 53,59 8,75 7,37 9,31 Gefunden : 53,63 8,71 7,33 9,36 NMR: S 5,69 (m,-CH-) ; 3,78 (d,"^N⁺-CH -) ; 3,78 (3,-COOCH₃);

O /^CH3

3,27 (s, N⁺-CHO; 2,92 (d,-CH₉CO); 2,71 (d,- \, ^J CH-,

CH 1,52 (m,-CH₉-CH); 1,11 (t,-CH,) ; o,95 (d,C <_ΡΗ3!

3 4,52 (m,N-CH-); D₉O

030CH6/07Q8

Beispiel 3

Herstellung von Acetylcarnitinamid des PhenyIgIycinethylesters

(Verfahren A)

10 g PhenyIglycin werden 150 ml absolutes Ethanol zugesetzt. Durch das erhaltene Gemisch wird gasförmige HCl bei Umgebungstemperatur und unter Agitation durchgeleitet bis sich das gesamte PhenyIglycin auflöst. Die erhaltene Lösung wird über Nacht unter Rückfluß gehalten, dann abgekühlt und unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird wiederum in Wasser gelöst und mit NaHCOg neutralisiert. Die freie PhenyIglycinethylesterbase wird mit Methylenchlorid CH₂Cl₂ extrahiert.

Einer Lösung von 1,8 g (10 mMol) freier PhenyIglycinethylesterbase, die in 10 ml CH₂Cl₂ gelöst ist, wird eine Lösung von Acetylcarnitinchlorid (10 mMol in CH₂Cl₂) zugesetzt. Das Gemisch wird über Nacht bei 50 ⁰C unter Agitation gehalten, dann abgekühlt und mit 50 ml Ethylether versetzt, unter Ausbildung eines Öls. Das gebildete öl wird in einem Ethanol-Aceton-Gemisch (5:1) aufgelöst und mit Ether erneut ausgefällt. NMR (DMSO): S = 1 ,1 (t,-CH₀-CH-,); 2,0 (s,-CO-CH-J;

2,8 (d, -CH₂-COO-); 3,2 (s,-(CH₃)₃~N); 3,5 (d, -N-CH₂); 4,0 (q, -CH₂-CH₃);

5,4 (s, -CH

7,5 (s,

); 5,5 (m, -CH₀-CH-CH₀-);

); 9,2 (d, CO-NH-)

Analyse:

	. %C	92	%H	29	%N	99	%	Cl
Berechnet:	56,	84	7,	31	6,	89	8	,84
Gefunden :	56,	7,	6,	8	,72

Beispiel 4 Herstellung von Acetylcarnitintrifluorethylamid (Verfahren B ).

H₃C H₃C H₃C

N-CH₀-CH-CH₀CONh-CH₀-C

² I ^{2 2}

Cl

OCOCH

F F F

030046/07 0*6

Einer Lösung von 2,7 g (0,02 Mol) 2,2,2-Trifluorethylaminchlorhydrat in 150 ml Tetrahydrofuran und 2,8 ml (0,02 Mol) Triethylamin werden 4,8 g (0,02 Mol) Acetylcarnitinchlorid in 10 ml Wasser und schließlich 4,2 g (0,02 Mol) in 50 ml Tetrahydrofuran gelöstes N,N'-Dicyclohexyl-carbodiimid zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wird einen Tag lang bei Umgebungstemperatur unter heftiger Agitation sich umsetzen gelassen. Es bildet sich ein Niederschlag. Der Niederschlag, welcher aus Dicyclohexyl-Harnstoff besteht, wird abfiltriert, und das Filtrat wird bis zur völligen Abscheidung des Tetrahydrofurans konzentriert. Die wässrige Rückstandslösung wird mit CHCl₃ (2 Mal 50 ml) gewaschen und dann bis zur Trockne eingedampft. Der Rohfeststoff wird mit (30 ml CH₃CN aufgenommen, wobei das erhaltene Gemisch 2 Stunden lang bei 0 - 5 ⁰C gehalten wird. Nach Abfiltrieren von ggf. nicht umgesetztem Acetylcarnitin aus der Filtratlösung wird durch Zusetzen von Ethylacetat-EthyIe ther das sehr stark hygroskopische Feststoffprodukt auskristallisiert, welches unter Stickstoff und in wasserfreier Umgebung aufbewahrt wird.
NMR: S (D₀): 2,06 (3H,s_f -OCOCH,,); 2,66 (2H,d, -CH ₉ ,d-CH „CONH- );

^ PH Δ έ

3,16 (9H,s, CH--N-) ; 3,61-4,18 (2H,m,

F CH^
2H,m, F-C-CH₂); 5,48 (iH,m,-CH- );

F' OCOCH₃

9,21 (1H, d, -CONH-)
Analyse: C₁₁H₂

%C %H %C1 %F %N Berechnet: 41,36 6,70 11,12 17,68 8,65 Gefunden : 41,19 6,59 11,05 17,77 8>73

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Pharmakologische Aktivität

Die pharmakologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde nach den nachstehend angegebenen Verfahren untersucht:

a) Akute Toxizität ₅₀

Dazu wurde die von Weil CS. in "Tables for Convenient Calculation of Median-Effective Dose (LD_gQ or ED^_n) and Instructions in their Use", Biometrics, 249-263, 1952 beschriebene Methode benutzt.

Die Tolerabilität der erfindungsgemäßen Substanzen wurde nach Verabreichung auf endoperitonealem Wege oder oral bei der Maus untersucht. Die erhaltenen Ergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäßen Substanzen optimal toleriert werden (siehe Tabelle I).

b) Inotrope Wirkung

Isolierte Kaninchenherzen nach Langendorff wurden mit einer oxygenierten Ringer-Lösung bei 38,2 ⁰C gewaschen (Perfusion) Die isometrischen Kontraktionen, das Elektrokardiogramm und der Herzdurchsatz wurden vermittels eines Polygraphgeräts vom Typ "Battaglia-Rangoni" aufgezeichnet. Durch Ausscheidung des Sauerstoffs aus der Perfusionsflüssigkeit wurde dann ein metabolischer Schaden im Herzmuskel induziert bis zu einer 80 %-igen Reduktion der Kontraktionskraft.

Unter diesen Bedingungen der prolongierten Anoxie waren die aeroben Glykolysen des Myokards verlangsamt, mit Anhäufung von sauren Stoffwechselprodukten, was zurückzuführen war entweder auf Stockung der Brenztraubensäure oder auf deren Umwandlung in Milchsäure, welche aufgrund der Depression der pyridinischen Enzyme wie Milchsäurehydrogenase nicht benutzt werden kann. Das hat wiederum Rückwirkungen auf die anaeroben Glykolysen im Hinblick auf eine laufend zunehmende Anzahl von Enzymen, mit einem fortschreitenden und laufend

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kritischeren Erschöpfen des Miokards. Auf diese Weise wird eine ganze Reihe von Ermüdungsgraden des Herzmuskels durchlaufen, welche sich zeigen anhand des Verlaufs der gemessenen Parameter, nämlich der Kontraktionskraft, der koronaren Aufnahmefähigkeit, der Herzfrequenz, des Herzrhythmus. Erst wenn die Kontraktionskraft um 80 % verringert worden ist, wird die Perfusionsflüssigkeit ohne Zusatz ande-. rer Substanzen (Kontrolle) oder mit Zusatz der erfindungsgemäßen Substanzen in unterschiedlichen Konzentrationen von neuem oxygeniert.

Bei Untersuchung der Herzkontraktionskraft wurde eine positive inotrope Wirkung 10 Minuten nach Unterbrechen der Anoxieperiode (Wiedererstarken des Myokards) festgestellt. Die Ergebnisse mit dem "t"-Versuch von Student haben gezeigt, daß die erfindungsgemäßen Substanzen einen statistisch signifikanten positiven inotropen Effekt in bezug auf die Kontrollsubstanzen induzieren. In Tabelle I sind die prozentualen Steigerungswerte in bezug auf die Kontrollgruppe angegeben.

c) Antiarhythmische Wirkung

Zur Untersuchung der antiarhythmischen Wirkung der verschiedenen untersuchten Carnitinderivate im Versuch in vivo zusätzlich und im Vergleich zu den normalerweise ausgeführten Versuchen in vitro wurde die von Nwangwu u.a., Arch. Int. Pharmacodyn., 19 77, 229, 219 beschriebene Methode verwendet.

Bei dieser Methode wird in die Kaudalvene der Maus eine Aconitinlösung eingeflößt und die Zeit des Verschwindens der Arhythmie und Tachycardie von 2 bis 60 Minuten nach Verabreichung der untersuchten Substanzen gemessen. Die antiarhythmische Wirkung, welche berechnet wurde aus der Steigerung der Latenzzeit für das Auftreten der Arhythmie der behandelten Tiere in bezug auf die der Kontrollgruppe ist in Tabelle * angegeben.

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- 1 ο -

d) Adrenalinantagonisierende Wirkung

Männliche schweizer Alb inomäuse mit einem Körpergewicht von 12 - 22 g, die in Gruppen von jeweils 10 Tieren unterteilt waren, wurden mit den untersuchten Substanzen oder einer Salzlösung (Kontrollgruppe) auf endoperitonealem Wege und nach 30 Minuten mit (behandeltem) Adrenalin in einer Dosierung behandelt, welche ausreichte, den Tod bei 100 % der Tiere der Kontrollgruppe durch Ventrikularfibrillation und Herzschädigung aufgrund von Steigerung der Frequenz, des Drucks und des Sauerstoffverbrauchs von selten des Myokards hervorzurufen.

Die Sterblichkeit wurde über 36 Stunden kontrolliert und die Wirksamkeit der Pharmaka in Prozent der überlebenden Tiere in bezug auf die behandelten Tiere ausgedrückt. Die Ergebnisse sind in Tabelle I angegeben.

e) Antagonismus gegen Cardiazol

Weibliche Albinoratten von der Art Wistar mit einem Körpergewicht von 120 - 150 g, welche in Einzelkäfigen gehalten wurden, erhielten die untersuchten Substanzen (mg kg oral) und nach 30 Minuten 100 mg/2ml/kg Cardiazol·. Der Prozentsatz der vor dem Krampftod bewahrten Tiere in bezug auf die der Kontrollgruppe im Verlaufe von 5 Stunden nach Verabreichung ist in Tabelle II angegeben.

f) Wechselwirkung mit Barbituraten

Männliche schweizer Albinomäuse mit einem Körpergewicht von 18 - 22 g, die in Gruppen von jeweils 10 Tieren unterteilt waren, erhielten die untersuchten Substanzen (mg kg oral) oder den Trägerstoff (Kontrollgruppe) und nach 30 Minuten 75 mg kg endoperitoneal Evipan.

Es wurde die Anstiegszeit des Gleichrichtungsrückflusses gemessen, und die in Prozentwerten berechnete Differenz zur Kontrollgruppe ist in Tabe^e II angegeben.

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g) Wirkung auf die spontane Motilität

Männliche .schweizer Albinomäuse mit einem Körpergewicht von 18 - 22 g, die in zwei Gruppen von jeweils 5 Tieren unterteilt waren, wurden über wenigstens 1 Woche im Käfig gehalten, wonach eine Gruppe die untersuchten Substanzen oder den Trägerstoff (Kontrollgruppe) erhielt und in ihrem Käfig verblieb, wobei sie mit ANIMEX (Farad-Schweden) untersucht wurden, indem die Bewegungen während zwei Perioden von jeweils 30 Minuten, beginnend 5 Minuten nach Verabreichung der Verbindungen, registriert wurden.

Die als prozentuale Variation der Anzahl der spontanen Bewegungen ausgedrückten Ergebnisse, welche sich beziehen auf die behandelten Tiere in bezug auf die Tiere der Kontrollgruppe, sind in Tabelle II angegeben.

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to ο CD' σ> ο

eft

TABELLE I

Pharmakologische Aktivität einiger Carnitinamide

DL₅Q auf endoperitonealem und oralem Wege bei der Maus, antifibriilatorische Wirkung bei der Maus, adrenalinantagonisierende Wirkung bei der Maus und inotrope Wirkung auf das isolierte Kaninchenherz

CH CH CH	₃~ N⁺-CH₂-CH-CH₂-COOR¹¹ ζ Χ" OR'	^DL50 endop.	(mg kg"¹) oral	Antifibril!at. Wirkung _, (Dosis mg kg e.v.) % Verringerung	Antiadrenalin- wirkung _. (Dosis mg kg e.p.) % Verring.Sterblich keit	Inotrope *Wirkung _m,* , , Dosis 10 °gI ¹ % der Kontron gruppe**
R¹	= -COCH₃
R"	= 2-Sulfonyl ethyl amino	1500	4000	70 (300)	65 (450)	+ 62
	2-Hydroxy-3-ca'rbethoxi-propyl- amino	450	1300	65 (50)	60 (70)	+ 53
	1-Carbomethoxy-2-methyl- propyl-amino 1-Carbomethoxy-3-methyl- butyl-amino	600 1000	2400 3500	. 100 (50) 70 (50)	80 (50) 75 (50)	+ 70 + 45
	1-Carbomethoxy-2-methyl- butyl-amino	500	. 1200	65 (40)	50 (100)	+ 45
	(1,2-Dicarboxy-ethyl)amino (1,3-Dicarboiiiethoxy-propyi )amino	1500 1000	4200 3600	80 (75). 65 (20)	55 (300) 40 (150) .	+ 48 + 40
R¹	= 0-CO-CH₂-CH₃
R"	= 2-Sulfonyl-ethyl ami no 1-Carbomethoxy-2-methyl-propyl- amino	1500 500	4000 1350	95 (150) 60 (35) ' '	70 (300) 40 (50)	+ 50 + 65
	" " 3-methyl-butyl-amino Il Il Ο " " " 1,2-Dicarbmethoxyethylamino 1,3- " propylamino	600 750 590 400	2350 2500 ' 1800 1200	75 (50) 65 (50) 70 (40) 60 (10)	70 (100) 50 (100) 70 (100) 40 (70)	+ 45 + 65 + 50 + 45
R·	= 0-C0-CH₂-CH_?-CH₃				•
R¹	= 2-Sulfonyl ethyl ami no	1500	4000	60 (50)	50 (300)	+ 40 ·

to

OO O

cn CD

TABELLE II

Phannakdiogische Aktivität einiger Carnitinamide

Cardiazol-Antagonismus bei der Ratte, Wechselwirkung mit Barbituraten bei der Maus, Wirkung auf die spontane

Motilität bei der Maus

CH	\ + „—-^N -CH₀-CH-CH^-COOR "	<	Cardiazol-	■Antagonismus	Wechselwirkung mit	Spontane motorische
CH	3 Λ L₂ LH LH₂		(Dosis mg	kg"¹ e.p.)	Barbiturat (Dosis	Aktivität (Dosis
	3 ^ ^0R1		% vor Tod	bewahrt	mg kg"¹ e.p.)	mg kg"' e.p.)
CH					% verl.Verr. d.	% Steigerung in bezug
	= -COCH₃				Glr.-rückflusses*)	auf Kontrollgr (a)
R¹	= 2-Sulfonyl ethyl ami no
R"	2-Hydroxy-3-carbethoxy-propylamino		65	(150)	30 (100)	+ 25 (50)
	i-Carbomethoxy-2-methyl- " "		70	(150)	25 (50)	+ 30 (50)
	1 " -3 " butyl "		84	(100)	40 (50)	+ 50 (35)
	1 Il _p I! Il Il		60	(150)	35 (50)	+ 28 (25)
	(1,2-Dicarboxy-ethyl)amino		53	(100)	35 (40)	+ 34 (25)
	(1,3-Dicarbomethoxy-propyl)amino		75	(100)	20 (75)	+ 60 (50)
	= 0-CO-CH₂-CH₃		70	(50)	40 (20)	+ 19 (25)
R¹	= 2-Sulfonyl-ethyl-ami no
R"		40	(150)	60 (100)	+ 40 (50)
	1-Carbomethoxy-2-methyl-propyl-amino	38	(35)	58 (50)	+ 75 (25)
	-3- " butyl "	32	(50)	31 (100)	+ 62 (50)
	H _o_ Ii Ii «	39	(50)	27 (100)	+ 35 (100)
	1,2-Dicarbomethoxy-ethyl-amino	51	(40)	25 (100)	+ 59 (25)
R¹	= 0-CO-CH₂-CH₂-CH₃
R"	= 2-Sulfonyl-ethyl-ami no	58	(50)	70 (50)	+ 43 (50)

*) Glr.-reflex .= Gleichrichtungsreflex, -Mittelwert der Kontrollzeit: 48 min.
(a) = Wert bei der Kontrollgruppe: 850 + 65 in 30 Min Versuchszeit (5 Mäuse χ Käfig)

Die erfindungsgemäß vorgeschlagenen.Verbindungen werden .oral oder parenteral in einer der üblichen pharmazeutischen Formen, welche vermittels herkömmlicher und dem Fachmann geläufiger Verfahren hergestellt worden waren, verabreicht. Diese Formen umfassen rein orale Dosierungsformen in fester oder flüssiger Form wie z.B. Pastillen, Kapseln, Lösungen, Sirups und dgl., sowie injizierbare Formen wie z.B. sterile Lösungen in Ampullen und Fläschchen.

Für diese pharmazeutischen Formen werden die üblichen verdünnenden Lösungsmittel und Trägerstoffe benutzt. Ggf. können Konservierungsmittel, Farbstoffe und Aromastoffe zugesetzt werden. Für diese Stoffe seien lediglich zur Veranschaulichung genannt Carboxymethylzellulose, Polysorbat, Mannitol, Sorbitol, Amid, Avicel, Talkum und andere, die dem Fachmann auf dem Gebiet der Pharmazeutik geläufig sind.

Die verabreichte Dosis wird vom behandelnden Arzt in Berücksichtigung des Lebensalters, des Körpergewichts und der allgemeinen Verfassung des Patienten auf der Basis einer gründlichen Untersuchung festgelegt. Wenngleich sich Wirkungen bereits mit Dosierungsmengen von 5 bis 8 mg pro kg Körpergewicht pro Tag beobachten lassen, wird eine Dosis von etwa 10 bis ca. mg pro kg Körpergewicht bevorzugt. Falls erforderlich, können auch höhere Dosierungen verabreicht werden, was auf die sehr niedrige Toxizität der erfxndungsgemäßen Verbindungen zurückzuführen ist.

Entsprechend der jeweiligen pharmazeutischen Verabreichungsform sind folgende Dosierungen, jedoch ohne Beschränkung auf die angegebenen Werte, vorgesehen:

Fläschchen : 5 bis 500 mg Kapseln : 15 bis 50 mg Tabletten : 15 bis 500 mg Orale Lösungen : 15 bis 50 mg

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Claims

Patentansprüche 1.' Amide von Acylcarnitinen der allgemeinen Formel (I)

R' Acetyl; Halogen-substituiertes Acetyl; Propionyl; Halogen-substituiertes Propionyl; Butyryl; Halogensubstituiertes Butyryl; Isobutyryl; ß-Hydroxybutyryl; Aceto-acetyl; Pantothenyl und Linoleyl bedeutet und

R" die Aminogruppe, wenn R¹ nicht Acetyl ist, 2-Sulfonylethylamino, (2-Hydroxy-3-carbethoxy-propyl)amino, (i-Carbmethoxy-2-methyl-propyl)amino, (1-Carbmethoxy-3-methyl-n-butyl)amino, (1-Carbomethoxy-2-methyl-nbutyl)amino, (1,2-Dicarbomethoxy-ethyl)amino, (1,3-Dicarbomethoxypropyl) amino, (ct-Carbethoxy-benzyl) amino, (4-Carbethoxy-phenyl)amino, (2-Mercapto-i-carbomethoxyethyl)amino, 2-Mercaphoethylamino, (5-Trimethyl-

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ammoniumchlorid-1-carbethoxypentyl)amino, (Carbethoxymethyl) amino, (Carbethoxyethy.l) amino und Trifluorethylaminorest bedeutet und

X ein Halogenanion darstellt, aber dann nicht vorhanden sein muß, wenn zumindest einer der Reste R" und/oder R' eine negative Ladung trägt.
2. Amide nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß das Halogen-substituierte Acetyl Chlor-acetyl, Dichlor-acetyl oder Brom-acetyl darstellt; das Halogen-substituierte Propionyl Brompropionyl ist und das Halogensubstituierte Butyryl Chlorbutyryl, jeweils unabhängig voneinander, bedeuten.
3. Verfahren zur Herstellung der Amide nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch

(a) Zufügung eines Acylhalogenids der Formel R¹X, worin

R¹ die vorstehende Bedeutung besitzt und X ein Halogenatom bedeutet, zu einer Lösung von Carnitin in einem Lösungsmittel, das unter organischen Säuren und deren Anhydriden ausgewählt ist, Halten des hierdurch erhaltenen Gemisches bei etwa 15 bis 60⁰C während etwa 4 bis 48 h, wodurch das entsprechende Acyl-Derivat von Carnitin erhalten wird;

(b) Isolierung des Acyl-Derivates des Carnitins durch Zufügung eines Ausfällungsagens zu dem Gemisch gemäß Stufe

(a) und Reinigung durch wiederholte Kristallisationen;

(c) Umsetzung des Acyl-Derivates des Carnitins gemäß Stufe

(b) mit einem Überschuß eines Halogenierungsagens bei etwa 25 bis 60°C während etwa 0,3 bis 24 h und Entfernung des Überschusses des Halogenierungsmittels, wodurch die entsprechenden Säurehalogenide des Acyl-Derivates von Carnitin erhalten werden;

(d) Auflösung des Säurehalogenids des Acyl-Derivates des Carnitins gemäß Stufe (c) in einem wasserfreien inerten

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Lösungsmittel;

(e) Kondensation des Säurehalogenides und des Acyl-Derivates des Carnitins mit einer organischen Base, die unter Estern von Aminosäuren mit niedrigen aliphatischen Alkoholen mit 1 bis 4 C-Atomen und Aminen der Formel R¹¹H ausgewählt sind, worin R" die vorstehende Bedeutung besitzt, aufgelöst in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel, Halten des resultierenden Gemisches unter Rühren bei Raumtemperatur während etwa 6 bis 48 h, wodurch das Amid der Formel (I) erhalten wird; und

(f) Gewinnung des Amides der Formel (I) durch Konzentration des Gemisches der Stufe (e) und dessen Reinigung durch wiederholte Kristallisation.
4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß in Stufe (e) als niedriger aliphatischer Alkohol Methyl-, Ethyl- oder Isopropy!alkohol verwendet wird.
5. Verfahren zur Herstellung der Amide nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch die Verfahrensstufen (a¹) der Zufügung eines Acylhalogenides der Formel R¹X, worin R¹ die vorstehende Bedeutung besitzt und X ein Halogenatom ist, zu einer Carnitinlösung in einem Lösungsmittel, das unter organischen Säuren und entsprechenden Anhydriden ausgewählt ist, und Halten des hierdurch erhaltenen Gemisches auf einer Temperatur von etwa 15 bis 6 0⁰C während etwa 4 bis 48 h, wodurch das entsprechende Acyl-Derivat von Carnitin erhalten wird;

(b') Isolierung des Acyl-Derivates von Carnitin durch Zufügung eines Ausfällungsagens zu dem Gemisch gemäß Stufe (a¹) und Reinigung durch wiederholte Kristallisation;

(c¹) Kondensation des Acyl-Derivates von Carnitin gemäß Stufe (b¹) in einer wässrigen Lösung mit einer organischen Base, die unter Estern von Aminosäuren mit

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niedrigen aliphatischen Alkoholen mit 1 bis 4 C-Atomen und.Aminen der Formel R¹¹X, worin R" die vorstehende Bedeutung besitzt, ausgewählt ist, in einer Lösung organischer Lösungsmittel in Gegenwart einer Lösung von Dicyclohexylcarbodiimid in einem organischen Lösungsmittel, Halten des hierdurch erhaltenen Gemisches unter Rühren bei Raumtemperatur während 2 bis 24 h, wodurch das Amid gemäß Formel (I) und ein Niederschlag aus Dicyclohexylharnstoff anfällt; und

(d¹) Abfiltration des Dicyclohexylharnstoff-NiederSchlages und Isolierung des Amides gemäß Formel (I) durch Konzentration des Filtrates, Trocknung und wiederholte Kristallisation aus organischen Lösungsmitteln.
6. Arzneimittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt zumindest einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 oder 2 nebst üblichen Hilfs- und Trägerstoffen.

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