[go: up one dir, main page]

DE2748259A1 - Aus gonaderma lucidum (fr.) karst isolierte substanzen, deren gewinnung und verwendung - Google Patents

Aus gonaderma lucidum (fr.) karst isolierte substanzen, deren gewinnung und verwendung

Info

Publication number
DE2748259A1
DE2748259A1 DE19772748259 DE2748259A DE2748259A1 DE 2748259 A1 DE2748259 A1 DE 2748259A1 DE 19772748259 DE19772748259 DE 19772748259 DE 2748259 A DE2748259 A DE 2748259A DE 2748259 A1 DE2748259 A1 DE 2748259A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
substance
organic solvent
reaction
ethanol
aqueous
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE19772748259
Other languages
English (en)
Inventor
Akihiko Sato
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Publication of DE2748259A1 publication Critical patent/DE2748259A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/074—Ganoderma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Aus Gonaderma lucidum (Fr.) Karst isolierte Substanzen, deren Gewinnung und Verwendung
beanspruchte
Priorität: 30. Oktober I976 - Japan - Nr. I30 741/I976
Die Erfindung betrifft neue Substanzen, die als Arzneimittel wertvoll sind und die aus dem Pilz "Gonaderma lucidum (Pr.) Karst", der zu den Polyporaceen gehört, isolierbar sind.
Der bei vorliegender Erfindung als Ausgangsmaterial dienende Pilz Gonaderma lucidura (Pr.) Karst wird in Japan als "Mannentake" oder "Reishi" bezeichnet und ist von alters her für Lebenselixire verwendet worden. Man sagt auch, daß er wirksam bei Krebserkrankungen sei. Wenn ein Absud des Pilzes verwendet wird, muß eine erhebliche Menge getrunken werden, um eine erwünschte Wirkung erwarten zu können. Dies dürfte darauf beruhen, daß Unterschiede bezüglich der wirksamen Substanzen bei den Mannentake-Arten vorhanden sind, und deshalb ist eine Isolierung der wirksamen Substanzen erwünscht.
809818/0888
Bekannt sind bereits Verfahrens zum Isolieren von tumorhemmenden Substanzen aus Grifola albicans Imazeki, Lampteromyces japonics Sing, Flammulina velutipes Sing, Trametes cinnabarina Fr., Orifola frondosa S.F. Gray, Coriolus versicolor Quel, Elfvingia applanata Karst, Lentinus edodes Sing, Inonotus sciurinus Imazeki, Phellinus yucatensis Imazeki, Gonaderma boninense Pat.und dergleichen (vgl. veröffentlichte JA-Patentanmeldungen 37-I8196, 39-13765, 39-13380, 40-2045, 43-16047, 43-25563, 46-16911, 46-17149, 46-21664, 48-8489, 48-80371, 49-24211, 49-3293I, 51-17166 und 51-36322) und auch Verfahren zur Herstellung von tumorhemmenden Substanzen durch Züchten von Lampteromyces japonics Sing, Flammulina velutipes Sing, Phellinus yucatensis Imazeki, Coriolus versicolor Quel und dergleichen (vgl. veröffentlichte JA-Patentanmeldungen 44-6634 und 46-16912 und JA-AS 48-40997, 49-35588 unel-49-48896).
Eine Isolierung einer tumorhemmenden Substanz, die insbesondere bei einer oralen Verabreichung wirksam ist, aus Mannentake ist bisher noch nicht beschrieben worden. Bekannte tumorhemmende Substanzen, wie sie in dem vorgenannten Schrifttum beschrieben sind, gehören in chemischer Hinsicht allgemein zu den Polysacchariden. Die tumorhemmende Substanz gemäß vorliegender Erfindung gehört zwar auch zu den Polysacchariden, doch zeigt sie in vivo eine besondere tumorhemmende Wirksamkeit.
Bisher bekannte tumorhemmende Substanzen auf Basis von Polysacchariden sind gewöhnlich bei in-vitro-Antitumortests unwirksam und nur bei in-vivo-Tests wirksam im Falle einer intraperi-
809818/0888
tonealen Verabreichung. Im Gegensatz hierzu ist die tumorhemmende Substanz vorliegender Erfindung sowohl beim in-vitro-Test als auch beim in-vivo-Test im Falle einer oralen Verabreichung wirksam. Demgemäß wird angenommen, daß die bekannten Polysaccharide, wenn sie intraperitoneal injiziert werden, auf das Krebssystem des Wirts über ein Immunitätssystem wirken, während die tumorhemmende Substanz vorliegender Erfindung bei oraler Verabreichung auch auf das Krebssystem über das Immunitätssystem wirkt, doch gegenüber den Krebszellen eine Cytotoxizität besitzt. Man glaubt daher, daß infolge solcher Unterschiede bei den pharmakologischen Eigenschaften die chemische Struktur der tumorhemmenden Substanz deutlich von denen der bekannten tumorhemmenden Substanzen verschieden ist.
Gegenstand vorliegender Erfindung sind demzufolge aus Gonaderma lucidum (Pr.) Karst isolierte Substanzen "Substanz A", "Substanz B" und "Substanz C", wobei die "Substanz A" ein kristallines Pulver mit den folgenden Eigenschaften ist:
(a) wirksam zur Linderung oder Heilung von Lebererkrankungen,
(b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter anderem bei etwa 3400, 2950, 1700, I38O, 1220 und 1040 cm1,
(c) ein UV-Spektrum in Äthanol mit einem Absorptionsmaximum bei etwa 253 nm,
(d) bei der Dunnschichtchromatographie an Silikagel mit einem Laufmittel aus 9 Teilen Chloroform und 1 Teil Äthanol Rf-Werte von annähernd 0,29, 0,44, 0,56, 0,63, 0,73 und 0,81,
(e) eine positive Reaktion bei der Steroid-Farbreaktion mit
809818/0888
dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
(f) eine positive Reaktion bei der Aldehyd-Farbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
(g) eine negative Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion mit Ninhydrin-Reagens und
(h) löslich in Wasser, aliphatischen Alkoholen, Chloroform,
Benzol, Diäthylather und Aceton;
wobei die "Substanz B" ein Pulver mit den folgenden Eigenschaften, ist:
(a) wirksam gegen Tumore,
(b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter anderem bei etwa 3350, 1620, 1380 und I080 cm"1,
(c) ein UV-Spektrum in wäßriger Lösung mit einem Absorptionsmaximum bei etwa 2-57 nm,
(d)-eine negative Reaktion bei der Steroid-Farbreaktion mit dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
(e) eine positive Reaktion bei der Aldehyd-Farbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
(f) eine positive Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion mit Ninhydrin-Reagens und
(g) löslich in wäßrigem Äthanol, kaum löslich in Äthanol und unlöslich in Chloroform, Diäthyläther und Acetonj und
wobei die "Substanz Cn ein Pulver mit den folgenden Eigenschaften ist:
(a) wirksam gegen Entzündungen,
(b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter anderem bei etwa 3^00, 1640 und 1060 cm" ,
809818/0888
(c) in wäßriger Lösung kein charakteristisches Maximum beim . UV-Spektrum,
(d) eine negative Reaktion bei der Steroid-Parbreaktion mit dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
(e) eine negative Reaktion bei der Aldehyd-Farbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
(f) eine negative Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion mit Ninhydrin-Reagens und
(g) löslich in Wasser und wäßrigem Äthanol und unlöslich in Äthanol, Chloroform, Benzol, Diäthyläther und Aceton.
Einen weiteren Gegenstand vorliegender Erfindung bildet ein Verfahren zur Gewinnung der "Substanz A", "Substanz B" und "Substanz C", das dadurch gekennzeichnet ist, daß man (a), Gonaderma lucidum (Fr.) Karst mit siedendem Wasser extrahiert, den wäßrigen Extrakt unter vermindertem Druck einengt, das Konzentrat mit einem organischen Lösungsmittel extrahiert und aus dem Extrakt die "Substanz A" isoliert,
(b) den bei der Extrahierung mit einem organischen
erhaltenen Rückstand
Lösungsmittel/mit einem wäßrigen organischen Lösungsmittel
behandelt und aus der Lösung die "Substanz B" isoliert und
(c) den Rückstand bei der Behandlung mit einem wäßrigen organischen Lösungsmittel als "Substanz C" gewinnt.
Es ist weiter gefunden worden, daß die Substanzen "A", 11B" und "Cw nach der Erfindung wertvoll als Arzneimittel sind und daß insbesondere die "Substanz A" eine Wirksamkeit zur Linderung und Heilung von Lebererkrankungen besitzt, während die "Sub-
609818/0888
stanz B" eine tumorhemmende Wirksamkeit zeigt und die "Substanz Cn eine entzUndungshenanende Wirksamkeit besitzt.
Man kann Gonaderma lucidum (Fr.) Karst in Form des Ganzen oder in Form von Teilen des Fruchtkörpers, des Mycels oder der Sporen verwenden. Zum Gebrauch bevorzugt man ihn in gut getrockneter Form, weil der rohe Pilz manchmal die Ausbeute an den betreffenden Substanzen infolge Zersetzung vermindern kann. Der Pilz kann von beliebiger Art ohne Unterschied des Wachstumsortes und' der Gestalt sein. Bevorzugt werden künstlich gezüchtete Pilze,, die an folgenden Orten erzeugt werden: Odawara, Kanagawa-Prefektur; Minabemura, Wakayama-Prefekturj Yoro-gum, Gifu-Prefektur; Minamimura-gum, Mie-Prefektur; Tanigawadake, Gunma-Prefektur; Hakusan-Distrikt, Ishikawa-Prefektur; Mikata-Distrikt, Fukui-Prefektur, Harltnoriyama, Nagano-Prefektur, Shirouma-Distrikt, Nagano-Prefektur, sämtlich in Japan. Es wurde gefunden, daß insbesondere die γοη Juni bis September geernteten Pilze gute Ergebnisse liefern.
Die gesammelten und getrockneten Pilze Gonaderma lucidum (Fr.) Karst werden mit siedendem Wasser extrahiert. Vorzugsweise werden die Pilze in kleine Stücke zerschnitten, um die Extraktion zu erleichtern. Durch eine derartige Vorbehandlung wird die Wirksamkeit der Extraktion erhöht.
Je größer die Wassermenge bei der Extraktion ist, umso besser ist das Ergebnis, doch hat sich eine 50- bis 80fache Gewichtsmenge des Wassers, bezogen auf das Gewicht der Pilze, im Hinblick auf die Nachbehandlung als zweckmäßig erwiesen.
809818/0888
Die Extraktion mit Wasser wird gewöhnlich durch mindestens 3stündiges, vorzugsweise j5- bis 5stündiges Kochen durchgeführt. Anschließend wird der Extrakt nach einer Filtrierung unter vermindertem Druck, vorzugsweise bei einer Temperatur unterhalb 60°C, zur Trockne eingedampft. Ein derartiges Konzentrißren kann jedoch unterbrochen werden, wenn das Volumen auf ein Fünftel bis auf ein Zehntel eingeengt worden ist. Der getrocknete Extrakt zeigt beim Tierversuch einen 30- bis 40prozentigen Tumorhemmwert.
Der Extrakt wird anschließend mit einem organischen Lösungsmittel behandelt. Als organische Lösungsmittel können niedere aliphatische Alkohole, wie Äthanol, Methanol, Iso- oder n-Butanol, weiterhin Benzol, Xylol, Toluol, Chloroform, Diäthyläther, Aceton und dergleichen verwendet werden. Man bevorzugt einen niederen aliphatischen Alkohol, und am zweckmäßigsten ist Äthanol von mindestens 98 %· Die Extraktion wird gewöhnlich bei Raumtemperatur oder unter Kühlung, beispielsweise bei 4°C, durchgeführt.
Der lösliche Anteil kann vom unlöslichen Anteil, beispielsweise durch Filtrieren, abgetrennt werden. Der lösliche Anteil wird eingedampft, vorzugsweise bei einer Temperatur unter 6O0C und unter vermindertem Druck, um die "Substanz A" zu erhalten.
Diese "Substanz A" kann gegebenenfalls gereinigt werden, beispielsweise mittels Säulenchromatographie.
Der unlösliche Anteil wird mit einem wäßrigen organischen
809818/0888
Lösungsmittel behandelt, wobei er sich in einen löslichen Teil und-in einen unlöslichen Teil auftrennt. Als hierbei verwendbare organische Lösungsmittel können mit
Wasser mischbare organische Lösungsmittel verwendet werden, wie niedere aliphatisch© Alkohole, beispielsweise Methanol, Äthanol oder Iso- oder n-Butanol, ferner Aceton, Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid oder dergleichen, wobei die niederen aliphatischen Alkohole, ganz besonders Ätha -nol, bevorzugt sind. Der Wassergehalt des organischen Lösungsmittels beträgt gewöhnlich 20 bis 50 J6, vorzugsweise 20 bis J>0 f>, Je nach der Art des zu verwendenden Lösungsmittels. Die Behändlung wird gewöhnlich bei Raumtemperatur oder unter Kühlen durchgeführt, und das erhaltene Gemisch wird dann filtriert, um den löslichen Anteil vom unlöslichen Anteil zu trennen.
Der lösliche Anteil wird vorzugsweise unter vermindertem Druck und bei einer Temperatur unterhalb 60°C eingedampft, um die "Substanz B" zu erhalten.
Der unlösliche Anteil stellt die "Substanz C" dar.
Die beiden Substanzen "B" und MC" können gegebenenfalls durch Säulenchromatographie, Aussalzen oder fraktioniertes Lösen unter Verwendung eines wäßrigen organischen Lösungsmittels, wie es vorstehend genannt worden ist, gereinigt werden.
Nach einem weiteren Gegenstand vorliegender Erfindung können die aus Gonaderma lucidum (Fr.) Karst gewonnenen Substanzen nA", "B" und "C" zur Linderung oder Heilung von Krankheiten, gege-
809818/0888
benenfalls zusammen mit pharmakologisch verträglichen Trägermaterialien und/oder Verdünnungsmitteln und/oder üblichen Exzipientien verwendet werden.
Diese Verwendung führt zu pharmazeutischen Präparaten, die in einer geeigneten Form für eine orale, parenterale oder äußerliche Anwendung vorliegen können. Die bevorzugten Formen sind Tabletten, Kapseln und Pulver. Feste Trägermaterialien sind Stärke, Talkum, Lactose, Dextran und dergleichen. Ferner können Bindemittel, Farbstoffe, Geschmackskorrigentien, Konservierungsstoffe, Zerfallhilfsmittel und dergleichen gemäß der üblichen pharmazeutischen Praxis mitverwendet werden.
Die orale Dosierung der "Substanz B" beträgt bei Erwachsenen
drei
gewöhnlich 3 bis 5 g täglich in/Einzeldosen. Die orale Dosierung der "Substanz A" oder der "Substanz C" beträgt beim Erwachsenen gewöhnlich 0,5 bis 1,5 g täglich in drei Einzeldosen.
Die Beispiele erläutern die Erfindung.
Beispiel 1
5 kg gut getrockneter Fruchtkörper von großen Pilzen Gonaderma lucidum (Fr.) Karst, die bei Odawara, Kanagawa-Prefektur, Japan, geerntet worden sind, werden in kleine Stücke gebrochen und in der 60fachen Menge Wasser, bezogen auf das Gewicht des Fruchtkörpers, zum Sieden erhitzt. Das heiße Gemisch wird filtriert, und das Filtrat wird bei einer Temperatur unter 60°C und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft.
809818/0888
-κί-
300 g des erhaltenen pulverförmigen Extrakts werden mit der lOfaehen Menge 99#9prozentigen Äthanols, bezogen auf das Gewicht des Pulvers, dreimal jeweils 3 Stunden bei Raumtemperatur extrahiert und 48 Stunden stehengelassen. Das Gemisch wird filtriert, um es in einen unlöslichen Anteil (I) und in das Filtrat zu trennen, weichletzteres bei einer Temperatur unter 60°C und unter vermindertem Druck eingedampft wird. Man erhält 90 g der "Substanz Aw als trockenes Pulver. 410 g des unlöslichen Anteils (I) werden dann mit der 20fachen Gewichtsmenge 30prozentigen Äthanols unter Rühren bei Raumtemperatur dreimal extrahiert und dann 48 Stunden stehengelassen* Das Gemisch wird filtriert, um es in* einen unlöslichen Anteil (II) und in das Filtrat zu unterteilen. Das Filtrat wird bei einer Temperatur unter 60°C und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Man erhält 280 g "Substanz B" als trockenes braunes Pulver.
Des weiteren wird der unlösliche Anteil (II) bei einer Temperatur unter 40°C und unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 130 g "Substanz C" als schwärzlich-braunes Pulver.
Beispiel 2
5 kg gut getrockneter Fruchtkörper, wie er auch in Beispiel 1 verwendet worden ist, werden in kleine Stücke gebrochen und j5 Stunden lang in der 60fachen Menge Wasser gekocht. Der Extrakt wird filtriert, und man erhält 280 Liter Filtrat, das bei einer Temperatur unter 6O0C auf ein Volumen von 28 Liter eingeengt wird. Das Konzentrat wird mit 220 Liter 99prozentigem Äthanol verrührt und dann filtriert. Dann fügt man 5 Liter J50prozentiges Äthanol zu dem Niederschlag hinzu und rührt unter Kühlen.
809818/0881
Den durch-Filtrieren erhaltenen Rückstand extrahiert man nochmals* mit 5 Liter ^Oprozentigem Äthanol. Dann filtriert man die Extrakte und- dampft das erhaltene Filtrat unter vermindertem Druck zur Trockne ein. Man erhält 200 g "Substanz B" als weißes Pulver.
Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren gewonnenen Substanzen "A", "B" und "C" besitzen die vorstehend angegebenen Eigenschaften. In der Zeichnung sind die IR- und die UV-Spektren dieser drei Substanzen gezeigt. Die Fig. 1 zeigt das IR-Spektrum der "Substanz A", Fig. 2 das IR-Spektrum der "Substanz B", Fig. 3 das IR-Spektrum der "Substanz C", und Fig. 4 zeigt die UV-Spektren aller drei genannten Substanzen.
Aufgrund der vorstehead genannten Eigenschaften wird die "Substanz B" chemisch als ein Polysaccharid betrachtet, und zwar als im wesentlichen reine, aus einem Polysaccharid bestehende Substanz. Der Ausdruck "im wesentlichen rein" bedeutet eine Reinheit von mindestens etwa 97 %, vorzugsweise mindestens etwa 99 %. Wenn man die "Substanz B" mit verdünnter Salzsäure hydrolysiert, erhält man in mindestens 90prozentiger Ausbeute Glucose als Saccharidbestandteil und 5 bis 7 % Aminosäuren als Proteinbestandteil.
Nachstehend werden die Untersuchungsmethoden bezüglich der pharmakologischen Wirksamkeiten bei den erfindungsgemäß gewonnenen Substanzen und deren Ergebnisse angegeben.
809818/0888
Antl-Tumor-Test Ί}
(a) ΐη-vivo-Test
Weiblichen Mäusen mit einem Gewicht von 20 + 2 g werden jeweils 1 χ 10' feste Zellen des Sarcorns Ι8θ subkutan in die Achselgegend injiziert. An eine Gruppe von 20 Mäusen wird die "Substanz B" verabreicht, während eine andere Gruppe von 20 Mäusen als Kontrollgruppe dient. Die Verabreichung der "Substanz B" erfolgt oral 24 Stunden nach der Implantation der Krebszellen 20-mal in einer Tagesdosis von 1 g/kg Körpergewicht. Nach der Verabreichung wird ..das Gewicht des Tumors gemessen und der Tumorhemmwert in % aus dem durchschnittlichen Tumorgewicht der behandelten Gruppe zum durchschnittlichen Tumorgewicht der Kontrollgruppe berechnet. Aufgrund dieser Methode beträgt der Tumorhemmwert der "Substanz B" 50 bis 70 %. Dieser Wert zeigt, daß die Substanz sehr wirksam als tumorhemmendes Mittel iet.
Wenn andererseits und unter den gleichen vorgenannten Bedingungen das Präparat "Kurestin" (Bezeichnung von PSK, hergestellt von der Firma Kureha Chemical Industry Co., Japan; vgl. Yakugaku Zasshi 2§, (1976), 4, S. 413-424) untersucht wird, liegt der Tumorhemmwert bei 12,8 %. Man geht davon aus, daß ein Präparat unwirksam ist, wenn es keinen Tumorhemmwert von mindestens 25 %, zeigt. Auf Basis einer statistischen Behandlung sollte der Hemmwert gewöhnlich über 40 % liegen.
(b) in-vitro-Test
5 x 10 JTC-26-Zellen, die aus einem menschlichen Krebsgeschwür stammen, Je ml werden in ein Gedächtniszellen-Medium implantiert, das aus 90 % Gedächtniszellen und 10 % eines Serums von Kalbsföten stammt und dem 1 mg/ml der "Substanz B" gemäß vorliegender
809818/0888
Erfindung zugegeben worden sind. Zu Kontrollzwecken wird einem anderen implantierten Medium 1 mg/ml "Kurestin" zugegeben.
Die KuItürflüssigkeit wird zentrifugiert, um die Zellen zu sammeln, während die mit dem ZUchtungsgefäß fest verwachsenen Zellen durch Behandeln mit Trypsin gesammelt werden. Man vereinigt die gesammelten Zellen und zählt die Anzahl der lebenden Zellen. Der Krebshemmwert wird aus der durchschnittlichen Anzahl lebender Zellen aus der mit dem jeweiligen Präparat versehenen Gruppe zu der durchschnittlichen Anzahl lebender Zellen der Kontrollgruppe berechnet. Der Wert beträgt bei der Gruppe mit der "Substanz B" 76,7 %, während der Wert der mit "Kurestin" behandelten Gruppe 8,4 % beträgt. Wenn der Hemmwert über 40 % liegt, ist das Präparat wirksam.
Klinische Bewertung als tumorhemmendes Mittel
1. Fall: Nach einer Mammakarzinon-Operation erlitt eine 35 Jahre alte Patientin einen Rückfall. Im ganzen Körper befanden sich Metastasen. Die Patientin klagte über Lumbago und Appetitlosigkeit. Am 19· April 1976 schätzte man nach den Ergebnissen mehrfacher Diagnosen einschließlich Röntgendiagnosen eine Lebenserwartung von nicht über etwa 3 Monaten ein. Von diesem Zeitpunkt an wurde der Patientin die "Substanz B" nach der Erfindung bei den Mahlzeiten dreimal täglich in einer Dosis von etwa 3 g/Tag oral verabreicht. Die infolge von Beckenmetastasen auftretende Lumbago verschwand am siebten Tag, und auch die Diarrhöe hörte auf. Nach etwa 2,5 Monaten konnte die bettlägerige Patientin wieder laufen, doch zeigte sich keine Änderung beim Röntgenbild. Nach etwa 3,5 Monaten hatten sich ihre klinischen Testwerte wie folgt verbessert.
809818/0888
1 Monat nach 2,5 Monate nach Normal-Verabreichung Verabreichung werte
alkalische Phos-
phatase 		275 390 (u/Liter) 71
Glucose 159 519 (mg/dl) 109
Cholesterin 158 (rag/dl) 153
Glutamat-Oxalacetat-
Transaminase-
Serum 311 		(p/Liter) 17
Lactat-Dehydro-
genase 		(u/Liter) 139
Glutämat-Pyruvat-
Transaminase-
Serum ' 		(u/Liter) 17
30 85
65 110
150 300
7 40
100 225
Die Lumbago trat etwa ein halbes Jahr nach der Verabreichung wieder auf und verschwand 3 Monate später wieder. Die Patientin starb 1 Jahr, 2 Monate und 22 Tage später. Etwa 1 Jahr nach der Verabreichung klagte die Patientin über Appetitlosigkeit. Man schätzte, daß sich ihr Leben um 11 Monate verlängert hat.
2. Fall: Nach einer Mastdarmkarzinom-Operation erlitt ein 32 Jahre alter Patient einen Rückfall. Das Karzinom metastasierte ins Becken. Der Patient klagte über schwere Verstopfung, Appetitlosigkeit und Ödeme in den Beinen infolge von Metastasen. Man schätzte seine Lebenswerwartung auf nicht über etwa 6 Monate,
Vom 24. Juni 1975 an wurde dem Patienten die "Substanz B" in einer Menge von etwa 3 g täglich zu den Mahlzeiten dreimal täglich oral verabreicht. 2 Wochen später verschwanden Verstopfung, Appetitlosigkeit und die" Ödeme im Bein. Nach 4 Monaten ging der Patient wieder zur Arbeit. 2 Monate nach der Verabreichungszeit
809818/0898
konnte der Patient wieder laufen. Die Werte der klinischen Untersuchungen am I5. Dezember 1975 waren wie folgt:
Test-Werte
Laukozytenzählung: 5»3 x 10^
Erythrozytenzählung: 428 χ 10
Lactat-Dehydrogenase: 270 (u/Liter)
Glutamat-Oxalacetat-Trans-
aminase-Serum l8 (u/Liter)
Glutamat-Pyruvat-Transaminase-
Serum 7 (u/Liter)
Trotz 'Ständiger Verabreichung wurde im April 1977 eine schmerzhafte Metastase in der Brust beobachtet. Der Patient starb im Juni 1977· Man schätzt, daß sich sein Leben um 1 1/2 Jahre verlängert hat.
*- Lebe r funk t i ons prü fung
Bei dieser Prüfung wurden die jeweiligen Mengen an Glutamat-Oxalacetat-Transaminase-Serum (SGOT), Glutamat-Pyruvat-Tränsaminase-Serum (SGPT) und alkalischer Phosphatase nach üblichen Methoden gemessen.
Es wurde gefunden, daß die "Substanz A" in bemerkenswerter Weise zur Kräftigung der Leberfunktion des menschlichen Körpers wirksam ist. Wenn beispielsweise die "Substanz A" oral an eine 36 Jahre alte Patientin in einer Menge von 1 g je Tag verabreicht wird,gehen der SGOT-Wert von 311 auf 17 u/Liter, der SGPT-Wert von 519 auf 8 u/Liter und der Wert der alkalischen Phosphatase von 275 auf 71 u/Liter zurück, die sämtlich Normalwerte darstellen.
809818/0888
Ent zündungshemmungs test
Die entzündungshemmende Wirksamkeit wird nach der Testmethode von Mizushima (I965) beobachtet. 0,3 ml einer Lösung von 0,1 bis 1 g einer Probe in 10 ml Wasser werden mit 2,7 ml einer Proteinlösung vermischt, die 0,75 Gewichtsteile einer Eiweiß-V-Fraktion von menschlichem Serum in einer Lösung von 1/15 Mol Kaliumhydrogenphosphat und 1/10 Mol Kaliumdihydrogenphosphat vom pH 5,3 enthält. Das Gemisch wird I80 Sekunden auf 670C erwärmt. Ein pharmazeutisehes Präparat wird als positiv eingeschätzt, wenn die Koagulation unterbrochen und das Koagulat gelöst wird.
1.
Aufgrund dieser Methode wurde festgestellt, daß die "Substanz C"
eine entzündungshemmende Wirksamkeit besitzt.
Toxlzltät
(a) ,.Das getrocknete Pulver eines Heißwasserextraktes von Gonaderma Lucidum (Pr.) Karst zeigt bei Mäusen bei einer 20 Tage langen oralen Verabreichung von 1 g/kg Körpergewicht keine Toxizität.
(b) Die orale Toxizität der "Substanz B" wird I5 Tage lang mit Dosierungen von täglich 100 mg bis 3000 mg/kg Körpergewicht bei Mäusen geprüft. Es werden keine bemerkenswerten Veränderungen beobachtet, wie Verminderung des Körpergewichts, verzögerte Verdauung, Diarrhöe, Anämie und dergleichen.
Demzufolge ist die "Substanz B" ein tumorhemmendes Mittel, das keine Eigenschaften von wesentlichen Nebenwirkungen besitzt und die Fähigkeit aufweist, Krebszellen unmittelbar anzugreifen, und
809818/0888
auch eine orale Wirksamkeit aufweist.
809818/0888
ORIGINAL INSPECTED
e e rTe ι f e

Claims (1)

  1. Patentansprüche
    1. «Aus Gonaderma lucidum (Pr.) Karst isolierte Substanzen "Substanz A"/ "Substanz B" und "Substanz C", wobei die "Substanz A" ein kristallines Pulver mit den folgenden Eigenschaften ist:
    (a) wirksam zur Linderung oder Hellung von Lebererkrankungen,
    (b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter anderem bei etwa 3400, 2950, 1700, I380, 1220 und 1040 cm"1
    Cc) ein UV-Spektrum in Äthanol mit einem Absorptionsmaximum bei etwa 253 nm,
    (d) bei der Dünnschichtchromatographie anSilikagel mit einem Laufmittel aus 9 Teilen Chloroform und 1 Teil Äthanol R^-Werte von annähernd 0,29, 0,44, 0,56, 0,63, 0,73 und 0,81,
    (e) -eine positive Reaktion bei der Steroid-Farbreaktion mit
    dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
    (f) eine positive Reaktion bei der Aldehyd-Parbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
    (g) eine negative Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion mit Ninhydrin-Reagens und
    (h) löslich in Wasser, aliphatischen Alkoholen, Chloroform, Benzol, Diäthyläther und Aceton;
    wobei die "Substanz B" ein Pulver mit den folgenden Eigenschaften ist:
    (a) wirksam gegen Tutnore,
    (b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter anderem bei etwa 3350, 1620, I38O und I080 cm ,
    809818/0811
    (c) ein UV-Spektrum in wäßriger Lösung mit einem Absorptionsmaximum bei etwa 257 nm,
    (d) eine negative Reaktion bei der Steroid-Farbreaktion .mit dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
    (e) eine positive Reaktion bei der Aldehyd-Farbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
    (f) eine positive Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion mit Ninhydrin-Reagens und
    (g) löslich in wäßrigem Äthanol, kaum löslich in Äthanol und ,unlöslich in Chloroform, Diäthyläther und Aceton; und
    wobei die "Substanz C" ein Pulver mit den folgenden Eigenschaften ist:
    (a) wirksam gegen Entzündungen,
    (b) ein IR-Spektrum (KBr-Scheibe) mit Absorptionsmaxima unter - anderem bei etwa J54OO, l64o und 1060 cm" ,
    (c) in wäßriger Lösung kein charakteristisches Absorptionsmaximum im UV-Spektrum,·
    (d) eine negative Reaktion bei der Steroid-Farbreaktion mit dem Reagens aus 1 Teil konzentrierter Schwefelsäure und 1 Teil Essigsäure,
    (e) eine negative Reaktion bei der Aldehyd-Farbreaktion mit Anisaldehyd-Schwefelsäure-Reagens,
    (f) eine negative Reaktion bei der Aminosäure-Farbreaktion
    mit Ninhydrin-Reagens und
    (g) löslich in Wasser und wäßrigem Äthanol und unlöslich in Äthanol, Chloroform, Benzol, Diäthyläther und Aceton.
    809818/0888
    " 3 27482S9
    2. Verfahren zur Gewinnung der "Substanz A?, "Substanz B" und "Substanz CM nach Anspruch 1, dadurch gekenn z< eic hn e t, daß man
    (a) Gonaderma lucidum (Fr.) Karst mit siedendem Wasser extrahiert, den wäßrigen Extrakt unter vermindertem Druck einengt, das Konzentrat mit einem organischen Lösungsmittel extrahiert und aus dem Extrakt die "Substanz A" isoliert,
    (b) den bei der Extraktion mit einem organischen
    erhaltenen Rückstand Λ .
    Lösungsmittel/mit einem wäßrigen organischen Lösungsmittel behandelt und aus der Lösung die "Substanz B" isoliert • und
    (c) 'den Rückstand bei der Behandlung mit einem wäßrigen organischen Lösungsmittel als "Substanz C" gewinnt.
    5. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeich-
    net, daß man die Extraktion mit dem organischen Lösungsmittel bei Raumtemperatur durchführt.
    4. Verfahren nach den Ansprüchen 2 oder 3* dadurch gekennzeichnet, daß man die Extraktion mit dem organischen !lösungsmittel unter Kühlung durchführt.
    5· Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man die Extraktion mit dem wäßrigen organischen Lösungsmittel bei Raumtemperatur durchführt.
    6. Verfahren nach den Ansprüchen 2 oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß man die Extraktion mit dem wäßrigen organischen Lösungsmittel unter Kühlung durchführt.
    809818/0888
    7. Verfahren nach den Ansprüchen 2 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als organisches Lösungsmittel einen niederen aliphatischen Alkohol, Benzol, Xylol, Chloroform, Diäthyläther oder Aceton verwendet*
    8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man als organisches Lösungsmittel Äthanol, Methanol oder Isooder n-Butanol verwendet.
    9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß man als organisches Lösungsmittel mindestens 98prozentiges Äthanol verwendet.
    10. Verfahren nach den Ansprüchen 2, 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß man als wäßriges organisches Lösungsmittel ein Gemisch aus Wasser mit einem niederen aliphatischen Alkohol, Aceton, Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxid verwendet.
    11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man als wäßriges organisches Lösungsmittels einen niederen aliphatischen Alkohol mit einem Gehalt von 20 bis 30 % Wasser verwendet.
    12. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß man als wäßriges Lösungsmittel 20-bis ^Oprozentiges wäßriges Äthanol verwendet.
    13. Verwendung der "Substanz A" nach Anspruch 1 zur Linderung
    809818/0888
    und Heilung von Lebererkrankungen.
    14. Verwendung der "Substanz Bw nach Anspruch 1 zur Hemmung von Tumoren.
    15. Verwendung der "Substanz Cw nach Anspruch 1 zur Bekämpfung
    von Entzündungen.
    16. Verwendung der Substanzen "A", "B" und "C" zusammen mit pharmakologisch verträglichen Trägermaterialien und/oder Verdünnungsmitteln und/oder üblichen Exzipientien.
    17. Verwendung nach den Ansprüchen 13 bis 16 in Form von oral verabreichbaren pharmazeutischen Präparaten.
    309818/0881
DE19772748259 1976-10-30 1977-10-27 Aus gonaderma lucidum (fr.) karst isolierte substanzen, deren gewinnung und verwendung Withdrawn DE2748259A1 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP13074176A JPS5366412A (en) 1976-10-30 1976-10-30 Extracting and separating effective component of mushroom *1mannentake1*

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE2748259A1 true DE2748259A1 (de) 1978-05-03

Family

ID=15041508

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19772748259 Withdrawn DE2748259A1 (de) 1976-10-30 1977-10-27 Aus gonaderma lucidum (fr.) karst isolierte substanzen, deren gewinnung und verwendung

Country Status (6)

Country Link
US (1) US4145415A (de)
JP (1) JPS5366412A (de)
CA (1) CA1083137A (de)
DE (1) DE2748259A1 (de)
FR (1) FR2368958A1 (de)
GB (1) GB1543849A (de)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5547624A (en) * 1978-09-29 1980-04-04 Chiyokichi Iizuka Remedy for hepatitis and its preparation
JPS60181026A (ja) * 1984-02-28 1985-09-14 Toyo Yakushiyoku Kogyo Kk 血糖降下剤
JPS61130235A (ja) * 1984-11-28 1986-06-18 Sunstar Inc 感染症治療薬
JPS61195669A (ja) * 1985-02-22 1986-08-29 Osaka Chem Lab 霊芝を原料とする健康食品
JP2808009B2 (ja) * 1989-03-14 1998-10-08 株式会社霊芝総合研究所 霊芝類の処理法
US5721134A (en) * 1990-12-04 1998-02-24 Il-Yang Pharmaceutical Co., Ltd. Ganoderma lucidum KCCM 10045 which produces proteoglycan (G009) having effect of antitumor immunity
JP2711201B2 (ja) * 1992-10-06 1998-02-10 東洋製薬株式会社 連鎖球菌抗菌剤
JP2711202B2 (ja) * 1992-10-06 1998-02-10 東洋製薬株式会社 ブドウ球菌抗菌剤
KR19990044835A (ko) * 1997-11-28 1999-06-25 고니시 진우에몬 생약추출물
TW591105B (en) 1998-04-30 2004-06-11 Korea Inst Sci & Tech Novel immuno-stimulating polysaccharide substance from Phellinus spp. strain and use thereof
KR20010082721A (ko) 2000-02-18 2001-08-30 고니시 진우에몬 지방산 함유 조성물
EP1401462A1 (de) * 2001-05-30 2004-03-31 Wackvom Limited Zusammensetzungen mit einer aktiven fraktion, die aus ganoderma lucidum isoliert wurde, und anwendungsverfahren
KR101307999B1 (ko) * 2004-12-01 2013-09-12 니폰 조키 세야쿠 가부시키가이샤 건조물 및 그 제조방법
CN103977042A (zh) * 2014-05-15 2014-08-13 济南康众医药科技开发有限公司 冷冻技术在树舌干燥中的应用
US20220218771A1 (en) * 2019-05-10 2022-07-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cardiovascular diseases

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE757248A (fr) * 1969-10-15 1971-04-08 Kureha Chemical Ind Co Ltd Substance a propriete anticancereuse et procedes pour sa preparation
DD126818A1 (de) * 1976-07-30 1977-08-17

Also Published As

Publication number Publication date
US4145415A (en) 1979-03-20
CA1083137A (en) 1980-08-05
FR2368958A1 (fr) 1978-05-26
JPS5366412A (en) 1978-06-13
GB1543849A (en) 1979-04-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2748259A1 (de) Aus gonaderma lucidum (fr.) karst isolierte substanzen, deren gewinnung und verwendung
DE2713458C2 (de) Verfahren zur Gewinnung von stickstoffhaltigen Polysacchariden
EP0089529B1 (de) Polysaccharidkonzentrate, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel und kosmetische Präparate
DE2655844C3 (de) Verfahren zur Herstellung antitumorwirksamer Substanzen
DE69531782T2 (de) Heisswasser-Extrakt von Cordyceps sinensis
DE3448148C2 (de)
EP0212595A2 (de) Calcium- und Magnesiumkomplexe von Phytohaemagglutinin-polyheteroglykanen, ihre Herstellung und pharmazeutische Zubereitungen
DE19901270A1 (de) Verfahren zur Flüssigkultivierung von Schizophyllum commune Fr. zur Gewinnung von beta-1,6-verzweigtem-beta-1,3-Glucan und Zusammensetzung der äußerlichen Anwendung, die damit gewonnenes beta-1,6-verzweigtes-beta-1,3-Glucan enthält
DE2751570A1 (de) Carboxymethylierte beta-1,3-glucane, verfahren zu deren herstellung und antitumormittel
DE3029363A1 (de) Saponinhaltiges praeparat, das gegen nebennieren-atrophie wirksam ist
DE1767098B1 (de) Verfahren zur Gewinnung eines vasoaktiven Arzneimittels aus den Blaettern von Ginkgo biloba
DE3109335A1 (de) Die neue, physiologisch wirksame substanz ebelacton und verfahren zur herstellung derselben
DE2713536A1 (de) Verfahren zur herstellung von stickstoffhaltigen polysacchariden
DE2947646C2 (de) Substanz mit Interferon induzierender Aktivität, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
DE2137011C3 (de) Verfahren zur Gewinnung reinen Konjakumannans und daraus hergestelltes pharmazeutisches Präparat
DE2452303A1 (de) Extraktionsprodukte aus hefezellwandbestandteile enthaltendem material, ein verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung als arzneimittel
EP0897302A2 (de) Harpagosid-angereicherter extrakt aus harpagophytum procumbens und verfahren zu seiner herstellung
DE68903065T2 (de) Aus gingko biloba extrahierter biologischer regulator, wirksam in verschiedenen pathologien.
DE2914005C2 (de) Arzneimittel zur Behandlung von Hyperglykämie, Hyperlipämie, Hypertension, inflammatorischen Erkrankungen, Schmerzen und Pyrexie durch Erregung des Zentralnervensystems und von Tumoren
DE60030786T2 (de) Murraya koenigii-extrakte zur behandlung von asthma
DE4010368C2 (de)
DE1492055B1 (de) Neue Zubereitungsform des N-(5-Nitrofurfuryliden)-1-aminohydantoins
DE3123830A1 (de) &#34;antivirussubstanz und verfahren zu ihrer herstellung&#34;
DE69008050T2 (de) Ein physiologisch aktiver, von Malz herkömmlicher Stoff und Verfahren zu seiner Herstellung.
DE10034494B4 (de) Verfahren zur Herstellung eines Extrakts von amerikanischem Ginseng

Legal Events

Date Code Title Description
8139 Disposal/non-payment of the annual fee