[go: up one dir, main page]

DE2551155C3 - Wasserhaltiges Kulturmedium - Google Patents

Wasserhaltiges Kulturmedium

Info

Publication number
DE2551155C3
DE2551155C3 DE2551155A DE2551155A DE2551155C3 DE 2551155 C3 DE2551155 C3 DE 2551155C3 DE 2551155 A DE2551155 A DE 2551155A DE 2551155 A DE2551155 A DE 2551155A DE 2551155 C3 DE2551155 C3 DE 2551155C3
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
water
medium
agar
clay
culture medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2551155A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2551155A1 (de
DE2551155B2 (de
Inventor
L. Richard Billings Mont. Thayer (V.St.A.)
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wyo-Ben Products Inc Billings Mont (vsta)
Original Assignee
Wyo-Ben Products Inc Billings Mont (vsta)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wyo-Ben Products Inc Billings Mont (vsta) filed Critical Wyo-Ben Products Inc Billings Mont (vsta)
Publication of DE2551155A1 publication Critical patent/DE2551155A1/de
Publication of DE2551155B2 publication Critical patent/DE2551155B2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2551155C3 publication Critical patent/DE2551155C3/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0068—General culture methods using substrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/14—Scaffolds; Matrices
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/10—Mineral substrates

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)

Description

Das derzeitige Verfahren zur Züchtung mikrobialer Kulturen umfaßt das Mischen entsprechender Chemikalien für die Nährstciflfzufuh'r, Wasser und eines Trägers für die Kultur. Gewöhnlich ist der Träger ein Seetangextrakt, nämlich Agar (auch als Agar-Agar bekannt). Agar ward hauptsächlich aufgrund seiner wünschenswerten Eigenschaften verwendet nämlich:
1) Zurückhaltung des Wassers,
2) im kalten Zustand eine feste Oberfläche,
3) leichte Handhabung beim Lösen in siedendem Wasser,
4) mögliche Mobilität der Nährstoffionen.
Agar hat jedoch auch unerwünschte Eigenschaften; es ist eine organische Verbindung, insbesondere ein Polysaccharide und daher ist es gegen Abbau und anschließende Verdauung durch gewisse Arten von Mikroorganismen anfällig. Agar verträgt weiterhin nicht den gesamten pH-Bereich, der manchmal beim Züchten von Mikroorganismen angewendet wird; seine Wasserbewahrungseigenschaften sind von begrenzter Dauer; in bebrüteten Petri-Schalen kann Agar innerhalb von 1—2 Wochen austrocknen, wodurch die Kolonie absterben kann.
In verschlossenen Teströhrchen kann sich Agar länger halten, trocknet jedoch immer innerhalb von einigen Monaten aus. Neben den physikalischen und chemischen Nachteilen bei der Verwendung von Agar als mikrobiales Wachstumsmedium gibt es auch noch wirtschaftliche Nachteile. Agar hat sich innerhalb der letzten Jahre im Preis um das 2- bis 3fache erhöht, und der Nachschub wechselt in Abhängigkeit von den Meeresströmungen und anderen Erntebedingungen.
Aufgrund der obigen Nachteile bei der Verwendung von Agar als Trägermedium für mikorbiologische Kulturen wäre ein anderes Trägermedium sehr wertvoll, das die gewünschten Agareigenschaften zeigt und die weniger wünschenswerten Eigenschaften nicht aufweist
Die Erfindung betrifft nun ein wasserhaltiges Kulturmedium für Fungi, Schimmel, Hefen, Bakterien oder pflanzliche und tierische Gewebezellen, im wesentlichen bestehend aus einem Mineralträger, Nährstoffen und Wasser, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß der Träger ein in Berührung mit Wasser mindestens auf das Dreifache quellbarer natürlicher oder synthetischer Ton ist
Erfindungsgemäß wird der wasseradsorbierende Ton als Ersatz für Agar oder Kieselsäuregel in einem wasserhaltigen Wachstiimsmedium bei der Züchtung aller Arten von Bakterien, Gewebekulturen (pflanzlich und tierisch), Schimmeln. Hefen und anderen Fungi verwendet Die sonstigen Züchtungsbedingungen und die Zusammensetzung der Kulturmedien sind identisch; so können die üblichen Mineralien, Quellen für
Stickstoff, Kohlenstoff etc. und manchmal Vitamine
. oder andere Wachstumsfaktoren, die sonst in den üblichen Kulturmedien verwendet werden, eingesetzt werden. Die Medien werden sterilisiert, und die
Beimpfung mit Mikroorganismen oder Gewebezellen
erfolgt nach den üblichen Verfahren.
Beim Mischen des Trägers mit Wasser wird eine thixotrope Mischung gebildet die sich zu einer festen oder halbfesten Masse absetzt; sie wird in dieser Form
ίο verwendet die eindeutig nicht feinzerteilt ist
Der natürliche oder synthetische Ton ist z. B. ein Tonmineral, wie Montmorillonite und insbesondere Bentonit; seine Verwendung ist besonders vorteilhaft in statischen Kulturen. Es können auch raffinierte Tone verwendet werden.
Tonmineralien vom Montmorillonit-Typ zeigen viele für ein mikrobiales oder Gewebewachstumsmedium wünschenswerte Eigenschaften. Natürlich *· jrkommende. quellende Tone, die als derartige Wachstumsträger geeignet sind, umfassen z. B. Bentonit Nontronit, Beidellit Smectid, Vermicullit und quellbaren Chlorit. Diese unterschiedlichen Tone variieren in ihrer Wasseradsorptionsfähigkeit beträchtlich, wobei die Wasseradsorptionsfähigkeit von Vermicullit z. B. nur etwa ein Drittel derjenigen von Bentonit ist Sehr gut verwendbar ist ein hoch quellbarer Bentonit auf Natrium-Basis, der hauptsächlich aus Montmorillonit besteht und bei Berührung mit Wasser um das Zehnfache quillt
Die Hauptvorteile der Verwendung eines in Berührung mit Wasser mindestens auf das Dreifache quellbaren natürlichen oder synthetischen Tons anstelle von Agar als Kulturträger sind:
1. Längere Wasserbewahrung — Tone, wie Montmorillonit haben wesentlich bessere Wasserbewahrungseigenschaften, nämlich die drei- oder mehrfachen derjenigen von Agar. Die Notwendigkeit einer Weiterimpfung der Grundkulturen aufgrund schneller Dehydratisierung wird somit eliminiert oder wesentlich verringert
2. Kosten — Die Kosten zur Herstellung solcher Tone, wie Montmorillonit sind wesentlich geringer als für Agar.
« 3. Verfügbarkeit — Die Verfügbarkeit von Montmorillonit ist wesentlich besser als von Agar. Agar ist ein Polysaccharidextrakt einer Seetangart (Gelidium), die nur im Pazifischen Ozean, Indischen Ozean und der Japanischen See wächst
4. Anorganisch anstelle von organisch — Manche Organismen können Agar als Nährstoff verwerten; somit ist eine Regulierung des Wachstums solcher Organismen auf Agar nicht möglich. Tone haben keinerlei verwendbares organisches Material.
5. Herstellung der Medien an Ort und Stelle - Das trockene Grundmaterial eines Tons braucht zur leichteren Hydratisierung nicht erhitzt zu werden; somit kann eine sterile Packung z. B. eines Bentonitmediums einfach an Ort und Stelle zu destilliertem Wasser zugefügt und das Medium ohne Erhitzen hergestellt werden. Die Herstellung erfolgt z. B. so, daß man Wasser mit ausreichend Ton zur Bildung einer glatten dicken Aufschlämmung mischt ein organisches Substrat und anderes
« Nährstoffmaterial mit der Aufschlämmung mischt die erhaltene Mischung sterilisiert und das sterilisierte Produkt sich zu einer festen oder halbfesten Masse verfestigen läßt
Als Träger für Kulturmedien sind entsprechende, rohe, unraffinierte Tone geeignet, jedoch liefert die Raffinierung des Tons durch Hindurchführung einer dünnen Aufschlämmung durch eine Zentrifuge ein zweckmäßigeres Produkt. Grobkörniges Material und Nicht-Kolloide werden entfernt, und man erhält ein glatteres, durchsichtigeres Produkt
Die Gewichts-Volumen-Beziehung (entsprechend g/ccm) zwischen dem Ton und Wasser, durch die dieser zu einer festen oder halbfesten Masse quillt, variiert mit der Wasseradsorptionsfähigkeit und -bewehrung des Tons selbst Dieses Verhältnis beträgt gewöhnlich 3:100bisl2:100.
Der wasserquellbare Ton kann 4-12% GewJVaU bezogen auf das Wasservolumen, ausmachen.
Die Wasseradsorptionsfähigkeit des mit Wasser quellbaren Tons ist ein begrenzender Faktor für das Verhältnis von Trägermaterial zu Wasser in der Formulierung jedes Kulturmediums. Die Menge an mit Wasser quellbarem Ton in jedem Kulturmedium muß mindestens ausreichen, alles in diesem Kulturmedium verwendete Wasser zu adsorbieren. Weiter kann die Wassermenge in einem solchen Kulturmedium nicht die Menge übersteigen, die beim Mischen mit dem wasserquellbaren Ton und den Nährstoffmaterialien erlaubt, daß sich die erhaltene Mischung zu einer festen oder halbfesten Masse verfestigt An: besten eignet sich ein Ton mit der höchsten Wasseradsorptionsfähigkeit, der somit zur Bildung einer festen oder halbfesten Masse das niedrigste Gew.-Vol.-Verhältnis aufweist
Weiterhin muß der Ton beim Mischen mit Wasser eine thixotrope Mujse bilden, die sich in den festen oder halbfesten Zustand verfest'.gt Thbtotropie ist eine wesentliche Eigenschaft der mit dem Ton gebildeten, wäßrigen Masse. Nach dem Verfestigen derselben muß sie praktisch ihr gesamtes Wasser — mit Ausnahme des durch Oberflächenverdampfung verlorenen — über längere Zeit bewahren können. Erwartet werden Zeiten der Wasserbewahrung über 3, am besten über 6 Monate oder mehr. Ansonsten muß er selbstverständlich die im Patentanspruch angegebene Quellbarkeit besitzen.
Der feste oder halbfeste Träger ist über einen weiten pH-Bereich stabil, und zwar zwischen pH 2 bis 12.
Die erfindungsgemäßen Medien eignen sich zur Züchtung verschiedener Mikroorganismen und Gewebezellen. Mikroorganismen und Gewebezellen werden nach üblichen Verfahren für die Züchtung vorbereitet und in üblicher Weise auf die Medien geimpft Die auf solchen Medien züchtbaren Mikroorganismen sind z. B. Fungi, wie Ascomycetes, z. B. Penicillium nolatum, Saccharomyces cerevisiae und Aspergillus fumigatus; hefeartige Fungi, wie Candida albicans; Pflanzen- oder Tierparasiten, wie Phytophthora infestans, und Enterobacteriaeeen, wie Escherichia coli, Aerobacter aerogenes und Serratia marcescens; Bacillaceen, wie Bacillus cereus; Bakterien, wie Mikrococcaceen, z. B. Sarcina lutea; und Actinomycetaceen, wie Actinomyces bovis. Weiter können auf den erfindungsgemäßen Medien pflanzliche und tierische Gewebezellen, wie Zellen von Solanum tuberosum, Gallus Domestic, embryonische Fibroblasten und Nicotinana glauca, gezüchtet werden.
Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung.
Beispiel 1
In einem Mischer wurden 1000 ecm dest Wasser mit 70 g Bentonit 5 Minuten zu einer glatten dicken Aufschlämmung gemischt, zu welcher die folgenden trockenen Nährstoffe zugefügt wurden:
Natriumnitrat g
2,0
Kaliumchlorid 0,5
Magnesiumglycerophosphat 0,5
Ferrosulfatheptahydrat 0,01
Kaliumsulfat O,?1)
Saccharose 30,0
Der pH-Wert der erhaltenen Mischung betrug etwa 6,8. Milchsäure kann verwendet werden, um den pH-Wert entsprechend für aeidophile Organismen einzustellen. Nach gründlichem Mischen wurde das erhaltene Medium in einem Autoklav sterilisiert, dann in Petri-Schalen gegossen oder in Teströhrchen eingeführt um anschließend beimpft zu werden.
Das Medium zeigt fast sofort seine thixoeropen
Eigenschaften, die eine leichte Verfestigung bewirken. Durch Oberflächentrocknung und die thixotrope Wirkung ergibt sich allmählich eine halbfeste Arbeilsoberfläche zum Züchten von Mikroorganismen. Die hohen Wasserbewahrungseigenschaften des Bentonits liefern ein für ein langes Wachstum des Inoculums geeignetes Medium.
Das obige Medium wurde in drei Petri-Schalen mit Penicillium notatum, Aspergillus fumigatus bzw. Candida albicans beimpft und unter üblichen Bedingungen bebrütet
Wenn der 0,076 mm Bentonit durch ein anderes, wasseradsorbierendes hydratisiertes AluminiumsiBicat, das bei Berührung mit Wasser um mindestens das Dreifache quillt ersetzt wird, wie z. B. ähnlich l:ein zerteilter Beidellit, Nontronit oder Saponit, so erhält man vergleichbare Ergebnisse. Alle diese Mineralien (in raffinierter oder unraffinierter Form) sind in den folgenden Beispielen mit vergleichbaren Ergebnissen anstelle des Bentonits verwendbar.
Betspiel 2
Das Medium wurde gemäß Beispiel 1 mit den folgenden trockenen Nährstoffen hergestellt:
Pepton g
10.0
Lactose 10,0
Dikaliumhydrogenphosphat 2,0
Eosin 0,4
Methylenblau 0,066
Das erhaltene Medium wurde in getrennten P'etri-Schalen jeweils mit den Bakterien Escherichia coli, Aeiobacter aerogenes bzw. Serratia marcescens beimpft und unter üblichen Bedingungen bebrütet (vgl. »The Oxoid Manual«, 3. Aufl., Oxoid Limited, Southward Bridge Road, London [1971]).
Beispiel 3
Gemäß Beispiel 1 wurde aus den folgenden trockenen μ Nährstoffen ein Medium hergestellt:
Rindfleischextrakt 1.0 Hefeextrakt . 2,0
Pepton 5,0
''· Natriumchlorid 5,0
Der pH-Wert der erhaltenen Mischung betrug etwa 7,4. Das Medium wurde in getrennten Petri-Schialen
l Escherichia coli, Bacillus cereus bzw. Sarcina utea beimpft und in üblicher Weise bebrütet.
Beispiel 4
Gemäß Beispiel 1 wurde aus den folgenden trockenen Nährstoffen ein Medium hergestellt:
Pepton 10,0
Hefeextrakt 10,0
Glucose 10,0
Der pH-Wert der erhaltenen Mischung betrug etwa 7,0. Das erhaltene Medium eignet sich zum Züchten von Hefen und Schimmeln. Es wurde in getrennten Petri-Schalen mit Penicillium notatum bzw. Saccharo- is myces cerevisiae beimpft und unter üblichen Bedingungen bebrütet.
Beispiel 5
Gemäß Beispiel 1 wurde aus den folgenden trockenen M Nährstoffen ein Medium hergestellt:
Kaseinhydrolysat 17,0
Pepton 3,0
Dextrose 2,5
Natriumchlorid 5,0
dibasisches Kaliumphosphat 2,5
Der pH-Wert der erhaltenen Mischung betrug etwa 73- Das Medium eignet sich zur Züchtung von Bakterien und Fungi; es wurde in getrennten Petri-Schalen mit Serratia marcescens. Bacillus cereus, Sarcina lutea, Penicillium notatum, Actonmyces bovis bzw. Phytopiithora infestans beimpft und unter üblichen Bedingungen bebrütet.
Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures«, Physiologie Planlarum, 15, 473-497 [1962]).
Beispiel 7
Die folgenden Bestandteile wurden 5 Minuten in einem Mischer gemischt:
Natriumnitrat 0,50 g
Kaliumchlorid 0,125 g
Magnesiumsulfatheptahydrat 0,125 g
Ferrosulfatheptahydrat 0,0025 g
Kaliumsulfat 0,0ß75g
Saccharose 7.50 g
Mononatriumphosphat 0.125 g
Bentonit (0,076 mm) 15,0 g
Dest. Wasser 250 ecm
Die erhaltene Mischung wurde 20 Minuten bei 6,8 kg Druck in einem Autoklav behandelt, in Petri-Schalen gegossen und mit Penicillium not?'-jm beimpft und 6 Tage bebrütet Anschließend bedeckte die Kultur 90% der Petri-Schalen; es lagen viele Penicillinperlen vor, und es wurde kein Trocknen der Oberfläche festgestellt.
Beispiel 8
Gemäß Beispiel 7 wurden folgende Bestandteile gemischt
Nährbrühe 4,0 g
Bentonit (0,076 mm) 30 g
Dest Wasser 500 ecm
dann in Peiri-Schalen gegossen und mit Bacillus cereus beimpft. Man erhielt ein ähnliches Wachstum wie bei demselben Organismus auf Nähragar.
Beispiel 6
Gemäß Beispiel 2 wurde aus den folgenden trockenen Nährstoffen ein Medium hergestellt:
g
Saccharose 30,0
Glycin 0,002
Indolessigsäure 0,002
Kinetin 0,0002
Myo-Inosit 0,10
Nicotinsäure 0,0005
Pyridoxinhydrochlorid 0,0005
Thiaminhydrochlorid 0,0001
Ammoniumnitrat 1,65
Kaliumnitrat 1,90
Calciumchlorid 0,44
Magnesiumsulfatheptahydrat 037
Mo.Tiokaliumphosphat 0,17
Eisen-EDTA 0,0429
Borsäure 0,00625
Mangansuliatmonohydrat 0,0223
Zinksulfatheptahydrat 0,0086
Kaliumiodid 0,0008
Natriummolybdatdihydrat 0,00025
Kupfersulfatpentahydrat 0,000025
Kobaltchlorid 0,000025
Beispiel 9
7 wurden folgende Nährstoffe
Gemäß Beispiel
gemischt
Kaseinhydrolysat 17,0 g Pepton 3,0 g
Natriumchlorid 5,0 g
Dextrose 2,5 g
Dibasisches Kaliumphosphat 2,5 g
Bentonit (0,076 mm) 60,0 g
Dest. Wasser 1,01
Das erhaltene Medium eignete sich zum Züchten von pflanzlichen Gewcbczellen; es wurde in getrennten Teströhrchen mit vorbereiteten Gewebezellen von Solanum tuberosum oder Nicolinana glauca beimpft und unter üblichen Bedingungen bebrütet (vgl. M u rash ige, Τυ·;Ίίο und Sk oog, Polks, »A dann in Petri-Schalen gegossen und mit Aspergillus niger, Micrococcus flavus bzw. Saccharemyces cerevisiae beimpft. Man konnte ein gutes Langzeitwachstum feststellen.
Beispiel 10
Gemäß Beispiel / wurde aus den folgenden γ, Bestandteilen ein Medium hergestellt:
Magnesiumsulfatheptahydral 0,2 g
Dibasisches Kaliumphosphat 1,0 g
Ferrosulfatheptahydrat 0,05 g
1,11 Caylciumchlorid 0,02 g
Manganchlorid 0,002 g
Natriummolybdatdihydrat 0,001 g
Ammoniumchlorid 1,9 g
Natriumthiosulfatheplahydrat 7,0 g
Bentonit (0,076 mm) 60,0 g
Dest. Wasser 1.01
Der pH-Wert wurde auf neutral oder leicht sauer
eingestellt. Dieses Medium eignet sich /um Züchten obligater chemolitholropher Baclcrien. wie 7 hiobaeillus ihioxiditns. Die Anwesenheit einer organischen Verbindung, einschließlich Agar, in diesem Medium würde das Wachstum von Thiobacillus thiooxidans inhibieren.
Hc is pi el Il Die folgenden Bestandteile wurden gemischt:
Glucose 4,0 g
I'henol-Rot(0.5%) 4.0 g
Niiiriumbiairbonui 0. J5 g
Kaliumpcnieillin 100 000 1.1
Streptomycin H)O(XK)LI
Hcntonit (0,076 mm) b(),0 g
Desl. Wasser 1,01
l.aclalbuminhydrolysat 5.0 g
Natriumchlorid H.9 μ
Kaliumchlorid 0,4 g
Calciumchlorid 0.14 g
Magnesiumsiilfatheptahydrat 0.1 g
Magnesiumchloridhexahydral 0.1 g
Dibiisi.schcs Nalriumphospliat 0.0hg
Monobasisches Kaliumphospli.il 0.0hg
Das erhaltene Medium wurde 20 Minuten bei 6.8 kg Druck in einem Autoklav behandelt, in saubere, sterile (icwclickiiltiirflaschcn gegossen und eignet sich /tu Züchtung von (iewebe/ellen embryonischer Kükenfi bioblastcii (iallus domeslicus. Der in diesem Medium verwendete lientonit wirkt als (irundlage für den Wachstiimstritger und/oder als dariiberliegende Schicht nach Wachsiiimsbeginn der libroblasl/ellen.

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Wasserhaltiges Kulturmedium für Fungi, Schimmel, Hefen, Bakterien oder pflanzliche und tierische Gewebezellen, im wesentlichen bestehend aus einem MineraUräger, Nährstoffen und Wasser, dadurch gekennzeichnet, daß der Träger ein in Berührung mit Wasser mindestens auf das Dreifache quellbarer natürlicher oder synthetischer Ton ist.
DE2551155A 1974-11-22 1975-11-14 Wasserhaltiges Kulturmedium Expired DE2551155C3 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US05/526,376 US3935067A (en) 1974-11-22 1974-11-22 Inorganic support for culture media

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE2551155A1 DE2551155A1 (de) 1976-05-26
DE2551155B2 DE2551155B2 (de) 1978-03-02
DE2551155C3 true DE2551155C3 (de) 1978-10-26

Family

ID=24097083

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2551155A Expired DE2551155C3 (de) 1974-11-22 1975-11-14 Wasserhaltiges Kulturmedium

Country Status (5)

Country Link
US (1) US3935067A (de)
JP (1) JPS5176475A (de)
CA (1) CA1041928A (de)
DE (1) DE2551155C3 (de)
GB (1) GB1494534A (de)

Families Citing this family (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4127447A (en) * 1976-05-03 1978-11-28 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Biomass growth restriction in a packed bed reactor
ZA776251B (en) * 1976-11-11 1978-07-26 Massachusetts Inst Technology Improved cell culture microcarriers
US4179338A (en) * 1977-09-19 1979-12-18 Gordon Maurice R Microbiological medium suitable for sterilization by ionizing radiation
JPS54117085A (en) * 1978-02-08 1979-09-11 Mitsubishi Chem Ind Ltd Culturing of microorganisms
US4282317A (en) * 1979-01-15 1981-08-04 Roth Jonathan N Pectin culture media and method
US4241186A (en) * 1978-12-18 1980-12-23 Conviron, Inc. Pectin culture media and method
US4411990A (en) * 1979-06-13 1983-10-25 University Patents, Inc. Primary bioassay of human tumor stem cells
US4468456A (en) * 1982-03-29 1984-08-28 Warner-Lambert Company Medium for differentiating Streptococcus mutans
US5466680A (en) * 1992-03-26 1995-11-14 Cytologics, Inc. Method and compositions for enhancing white blood cell functioning on a mucosal or cutaneous surface
US5427944A (en) * 1994-05-24 1995-06-27 Lee; Sunggyu Bioremediation of polycyclic aromatic hydrocarbon-contaminated soil
WO1996029428A1 (en) * 1995-03-20 1996-09-26 Echa Microbiology Limited Microbial monitoring
US6046021A (en) * 1995-04-12 2000-04-04 Biolog, Inc. Comparative phenotype analysis of two or more microorganisms using a plurality of substrates within a multiwell testing device
US5627045A (en) * 1995-04-12 1997-05-06 Biolog, Inc. Multi-test format with gel-forming matrix for characterization of microorganisms
US5882882A (en) * 1995-04-12 1999-03-16 Biolog, Inc. Gel matrix with redox purple for testing and characterizing microorganisms
US6387651B1 (en) 1995-04-12 2002-05-14 Biolog, Inc. Comparative phenotype analysis of two or more microorganisms using a plurality of substrates within a microwell device
US6503740B1 (en) 2000-02-22 2003-01-07 Biomin, Inc. Organically modified mineral materials containing engrafted bacteria for chemical contaminant decomposition
US6696239B1 (en) 2000-04-20 2004-02-24 Biolog, Inc. Comparative phenotype analysis for assessment of biological active compounds such as antimicrobials
EP1357179B1 (de) * 2001-01-29 2008-04-23 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Festes kulturmedium und herstellungsverfahren dafür
GB0121735D0 (en) * 2001-09-10 2001-10-31 Deblois Michel Bioreactor for the treatment of organic and inorganic waste
ATE440805T1 (de) 2003-11-20 2009-09-15 Minera Catalano Aragonesa Sa Zusammensetzung aus ton und dolomit zur behandlung von abwassern
CA2500681C (en) * 2004-03-17 2015-10-20 Becton, Dickinson And Company Method of making microorganism sampling tube containing slanted culture medium and sample tube tray therefor
US8017395B2 (en) 2004-12-17 2011-09-13 Lifescan, Inc. Seeding cells on porous supports
AU2006202209B2 (en) * 2005-05-27 2011-04-14 Lifescan, Inc. Amniotic fluid derived cells
JP2009500297A (ja) * 2005-06-08 2009-01-08 セントカー・インコーポレーテツド 眼の変性についての細胞療法
US8741643B2 (en) 2006-04-28 2014-06-03 Lifescan, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage
US9080145B2 (en) * 2007-07-01 2015-07-14 Lifescan Corporation Single pluripotent stem cell culture
CA3207103A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells to pancreatic endocrine
CN107574142B (zh) 2007-11-27 2021-07-06 生命扫描有限公司 人胚胎干细胞的分化
KR102026622B1 (ko) 2008-02-21 2019-09-30 얀센 바이오테크 인코포레이티드 세포 부착, 배양 및 탈리를 위한 방법, 표면 개질 플레이트 및 조성물
US8623648B2 (en) * 2008-04-24 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Treatment of pluripotent cells
CN102159703B (zh) 2008-06-30 2015-11-25 森托科尔奥索生物科技公司 多能干细胞的分化
CN108486040A (zh) * 2008-06-30 2018-09-04 詹森生物科技公司 多能干细胞的分化
US20100028307A1 (en) * 2008-07-31 2010-02-04 O'neil John J Pluripotent stem cell differentiation
MX2011004565A (es) * 2008-10-31 2011-07-28 Centocor Ortho Biotech Inc Diferenciacion de celulas madre embrionarias humanas al linaje endocrino pancreatico.
MX2011004563A (es) * 2008-10-31 2011-06-01 Centocor Ortho Biotech Inc Diferenciacion de celulas madre embrionarias humanas al linaje endocrino pancreatico.
CA2744227C (en) * 2008-11-20 2018-10-02 Centocor Ortho Biotech Inc. Methods and compositions for cell attachment and cultivation on planar substrates
RU2555538C2 (ru) 2008-11-20 2015-07-10 Сентокор Орто Байотек Инк. Культура плюрипотентных стволовых клеток на микроносителях
ES2693088T3 (es) * 2009-07-20 2018-12-07 Janssen Biotech, Inc. Diferenciación de células madre embriónicas humanas
JP6219568B2 (ja) 2009-07-20 2017-10-25 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド ヒト胚性幹細胞の分化
AU2010276402B2 (en) 2009-07-20 2014-07-03 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
JP5957382B2 (ja) * 2009-10-29 2016-07-27 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 多能性幹細胞
US9150833B2 (en) 2009-12-23 2015-10-06 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
AU2010333840B2 (en) * 2009-12-23 2016-01-07 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
SG183535A1 (en) * 2010-03-01 2012-10-30 Janssen Biotech Inc Methods for purifying cells derived from pluripotent stem cells
SG185511A1 (en) 2010-05-12 2012-12-28 Centocor Ortho Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells
US9181528B2 (en) 2010-08-31 2015-11-10 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells
PH12013500367A1 (en) 2010-08-31 2013-04-01 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells
ES2659393T3 (es) 2010-08-31 2018-03-15 Janssen Biotech, Inc. Diferenciación de células madre embrionarias humanas
US9388386B2 (en) 2011-12-22 2016-07-12 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into single hormonal insulin positive cells
RU2018128383A (ru) 2012-03-07 2019-03-14 Янссен Байотек, Инк. Среда определенного состава для размножения и обновления плюрипотентных стволовых клеток
KR102667288B1 (ko) 2012-06-08 2024-05-17 얀센 바이오테크 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 췌장 내분비 세포로의 분화
RU2768963C2 (ru) 2012-12-31 2022-03-25 Янссен Байотек, Инк. Культивация эмбриональных стволовых клеток человека в воздушно-жидкостной зоне взаимодействия с целью их дифференцировки в панкреатические эндокринные клетки
US10370644B2 (en) 2012-12-31 2019-08-06 Janssen Biotech, Inc. Method for making human pluripotent suspension cultures and cells derived therefrom
JP6529440B2 (ja) 2012-12-31 2019-06-12 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 膵内分泌細胞への分化のためのヒト多能性細胞の懸濁及びクラスタリング
EP2938723B1 (de) 2012-12-31 2023-02-01 Janssen Biotech, Inc. Differenzierung humaner embryonaler stammzellen in endokrine pankreaszellen mithilfe von hb9-regulatoren
WO2015175307A1 (en) 2014-05-16 2015-11-19 Janssen Biotech, Inc. Use of small molecules to enhance mafa expression in pancreatic endocrine cells
WO2016085688A1 (en) * 2014-11-25 2016-06-02 3M Innovative Properties Company Devices and kits for the propagation or storage of microorganisms, and methods of making and using
MA45479A (fr) 2016-04-14 2019-02-20 Janssen Biotech Inc Différenciation de cellules souches pluripotentes en cellules de l'endoderme de l'intestin moyen
JP7639609B2 (ja) * 2021-08-18 2025-03-05 株式会社アイシン 培養方法および培養装置

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1832593A (en) * 1926-05-06 1931-11-17 Szucs Josef Process for the cultivation of edible fungi
US2476785A (en) * 1945-09-07 1949-07-19 Wallerstein Co Inc Alcoholic fermentations in the presence of inorganic adsorbents
US2769750A (en) * 1953-03-20 1956-11-06 Texaco Development Corp Processes employing homogenous mixture of inert adsorbent and substrate
US3013946A (en) * 1958-01-07 1961-12-19 Boots Pure Drug Co Ltd Spore composition and process of preparing same
US3224946A (en) * 1962-09-21 1965-12-21 Socony Mobil Oil Co Inc Increasing rate of microbial fermentation with zeolites
US3580811A (en) * 1968-04-16 1971-05-25 Commercial Solvents Corp Synthetic fermentation medium and process using same for cultivating gibberella zeae
US3887430A (en) * 1972-02-24 1975-06-03 Dow Chemical Co Culture medium for tissue culture techniques

Also Published As

Publication number Publication date
CA1041928A (en) 1978-11-07
US3935067A (en) 1976-01-27
DE2551155A1 (de) 1976-05-26
JPS5176475A (en) 1976-07-02
DE2551155B2 (de) 1978-03-02
GB1494534A (en) 1977-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2551155C3 (de) Wasserhaltiges Kulturmedium
DE2941310C2 (de) Verfahren zur Herstellung eines Stoffs mit bakteriostatischer Aktivität
DE1945413A1 (de) Neues Enzym und Verfahren zu seiner Herstellung
CH369655A (de) Verfahren zum Fermentieren von Fleischprodukten
DE2810453C3 (de) Verfahren zur Herstellung von ein bestimmtes Element in angereicherter Form enthaltenden Algen
EP1739067A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines Bodenhilfsstoffs
DE69126625T2 (de) Festphasenträger zur mikrobenkultur und verfahren zur züchtung von mikroben
DE1642622A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen Ferments zur Milchgerinnung
DE2011981A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotieums
DE111247C (de)
DE2901310A1 (de) Verfahren zum veredeln von tabak
DE60203939T2 (de) Festes kulturmedium für mikroorganismen und eukaryontische zellen und verfahren zu seiner herstellung
DE2038693B2 (de) Verfahren zum Züchten von Hefe
AT101009B (de) Verfahren zur Herstellung von Gärungszitronensäure.
CH90689A (de) Verfahren zur Herstellung haltbarer Präparate mit aktiver tierischer Amylase.
DE664428C (de) Verfahren zur Herstellung von Gerbextrakten aus Sulfitcelluloseablauge
DE1009583B (de) Verfahren zur biochemischen Herstellung von 2-Keto-1-gulonsaeure
DE829936C (de) Kontinuierliches Verfahren zur Herstellung von Penicillin auf biologischem Wege
DE1417575C (de) Verfahren zum Herstellen saure resistenter Protease
DE1517851C3 (de) Verfahren zur Erhöhung der Alkaloidproduktion in submersen Claviceps-Kulturen
DE1617390C3 (de) Mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung eines antifungalen Antibiotikums
DE936412C (de) Herstellung von Erythromycin
DE1517852A1 (de) Verfahren zur Herstellung von Vitamin B12
AT143292B (de) Verfahren zur Herstellung von festen Dauerkulturen säurebildender Bakterien, insbesondere von Milchsäurebakterien.
AT236323B (de) Verfahren zur Herstellung von Zitronensäure mit kugelförmigen Mycelaggregaten (sogenannten "Pellets") und zur Gewinnung derselben

Legal Events

Date Code Title Description
C3 Grant after two publication steps (3rd publication)
EGA New person/name/address of the applicant
8339 Ceased/non-payment of the annual fee