DE2366379C2

DE2366379C2 - N↑α↑-geschützte N↑G↑-Nitro-L-arginyl-L-prolin-amide

Info

Publication number: DE2366379C2
Application number: DE2366379A
Authority: DE
Inventors: Masahiko Takarazuka Hyogo Fujino; Tsunehiko Suita Osaka Fukuda; Shigeru Hirakata Osaka Kobayashi; Mikihiko Suita Osaka Obayashi; Susumu Higashi Osaka Shinagawa
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1972-04-29
Filing date: 1973-04-26
Publication date: 1985-01-17
Also published as: CS188162B2; NL7305995A; FR2183021B1; FI56676C; HU168696B; ES414197A1; AU453931B2; ATA377173A; CA1005815A; AT333988B; GB1403642A; PL95790B1; FI56676B; NO139560C; DK147851C; NO139560B; NL176856C; US3853837A; CH580065A5; SE397520B

Description

^HN\

^C—NHCHjCHzCHjCHCOOH

/ I

NH₂

"· das durch die Formel NH₂-A-COOH dargestellt werden kann (worin NH₂ der a-Amlnorest ist), das Radikal (-NH-A-CO-) einen »Rest« von L-Arginln dar und wird als »-Arg-« abgekürzt. Die Abkürzungen für die anderen vorstehend genannten α-Aminosäuren haben die entsprechende Bedeutung, wie sie vorstehend für L-Argirin dargelegt wurde.
In der DE-PS 23 21 174 wird die Synthese der Nonapeptldamide der allgemeinen Formel (I)

H-tPyrXjlu-His-Trp-Ser-A.-Gly-Aj-Arg-Pro-Y (I)

In der Ai für Tyr oder Phe, A₂ für Leu, He, Nie, oder Met, Y für NHR, worin R ein geradkettlger oder verzweigter Alkylrest mit 1 bis 3 C-Atomen Ist, oder für eine Pyrrolldlnogruppe steht, sowie ihrer pharmazeu- -i'i tisch unbedenklichen Salze beschrieben. Der vorstehend genannte Substltuent R, d. h. der geradkettige oder verzweigte Alkylrest, der 1 bis 3 C-Atome enthält, kann ein Methylrest, Ethylrest, n-Propylrest oder Isopropylrest sein.

Diese Verbindungen haben eine stärkere ovulatlonsauslösende Wirkung als das natürlich vorkommende Decapeptld der Struktur H-(Pyr)GIu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂, das die Sekretion des lutelnisle-■»* renden Hormons fördert.

Die Nonapeptidamlde der allgemeinen Formel (I) und Ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze werden nach einem Verfahren hergestellt, das in der DE-PS 23 21 174 beschrieben ist. Es wurde nun gefunden, daß N*-geschützte Dipeptld-Derlvate der allgemeinen Formel (II)

><i X-Arg(NO₂)-Pro-Y (H)

In der X für einen Benzyloxycarbonyl- oder Isobornyloxycarbonyl-Rest und Y für einen -NHR-Rest mit RCibls C,-Alkyl oder einen Pyrrolldlno-Rest stehen, als Zwischenprodukte für die Herstellung von Nonapeptldamlden (I) und deren Derivaten vorteilhaft verwendet werden können.

" Die Erfindung betrifft somit N*-geschützte N^c-Nitro-L-arglnyl-L-prolln-amlde der Formel (II) mit den In Anspruch 1 genannten Bedeutungen für X und Y.

Als Zwischenprodukte bevorzugt werden diejenigen Dipeptld-Derlvate der allgemeinen Formel (II), In denen Y für einen NHCjH₅-ReSt steht, die or-Amlnogruppe des L-Arglnyl-Restes durch eine Benzyloxycarbonyl-Gruppe und die Guanldinogruppe des L-Arglnyl-Restes durch eine Nitro-Gruppe geschützt sind.

wi Die erfindungsgemäßen Dipeptld-Derlvate werden dadurch hergestellt, daß man der allgemeinen Formel (III)

X-Arg(NO₂)-Pro-OH (IH)

In der X die oben genannten Bedeutungen hat, mit einem AmIn RNH₂, In dem R einen Alkylrest mit 1 bis 3 C-'•5 Atomen bedeutet, oder mit Pyrrolidin, In Gegenwart eines Dehydrattslerungsmlttels In einem Lösungsmittel umsetzt. Dabei wird das Dlpeptld (III) In das entsprechende Säureamld (II) überführt. In dem Y für einen NHR-Rest oder die Pyrrolldlno-Gruppe steht.
Das Verfahren wird nachstehend schematisch dargestellt:

X - Arg(NO₂) - Pro - OH

(HI)
+ YH

-H₂O I Dehydratisierungsmittel,

(z.B. DCC)

X-Arg(NOj)-Pro-Y
(H)

Y=-NHR₁ -N

Als Dehydratisierungsmittel können alle Verbindungen der Art, die für die Peptldsynthese geeignet sind, verwendet werden. Besonders bevorzugt werden beispielsweise die sog. Carbodiimidreagentien, z. B. N,N'-Dicyclohexylcarboüiimid (DCC).

Während die Guanidinogruppe des Arginylrestes in (II) bzw. (IiI) eine Nitrogruppe als Substituenten trägt, kommen als Schutzgruppen für die ar-Amlnogruppe des Arginylrestes als Substituenten X die Benzyloxycarbonyl- oder die Isobornyloxycarbonylgruppe infrage.

Die geschützten Dipeptid-Derlvate der allgemeinen Formel (II) finden Verwendung In verschiedenen Verfahren zur Herstellung von Nonapeptldamiden (I) und deren Derivaten. Dazu werden dte erfindungsgemäßen Dipeptid-Derlvate entsprechend dei» nachfolgenden Reaktionsschema durch Insertion weiterer Peptidbausteine modifiziert und zu Nonapeptiden (I) bzw. Ihren Derivaten, wie sie aus der DE-PS 25 21 174 bekannt sind, umgesetzt.

NO₂
I
X - Arg - Pro - Y

H₂0/H⁺
NO₂

H-Arg-Pro-Y

(H)

Dehydratisierungsmittel (z. B. DCC)

+ X-A₂-OH

NO₂
X-A₂-Arg-Pro-Y

H₂OZH⁺

NO₂ I H-(Pyr)Qlu-His-Trp-Ser-A,-Gly-OH + H-A₂-Arg-Pro-Y

+ DCC + HONBI

© Aktivierung
1 © Bildung der Peptidbindung

NO₃

H - (Pyr)Glu - His - Trp - Ser- A, - GIy - A₂ - Arg - Pro - Y

Entfernung der Schutzgruppen
H - (Pyr)Glu - His - Trp - Ser - Ai - GIy - A₂ - Arg - Pro - Y

Im vorstehenden Schema bedeuten DCC das N^'-Dicyclohexylcarbodiimid und HONBI das N-Hydroxy-

Die Bildungsreaktion der Peptidbindung zum Aufbau von Nonapeptiden der allgemeinen Formel (I) und ihren Derivaten, z. B. nach dem vorstehend genannten Verfahren, wird im allgemeinen durchgeführt wie in der DE-PS 23 21 174 beschrieben.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele weiter erläutert. In diesen Beispielen werden die folgenden Abkürzungen mit den nachstehenden genannten Bedeutungen verwendet:

Z-: Benzyloxycarbonyl; IBOC- Isobornyloxycarbonyl; -OSU: N-Hydroxysuccinimicüster; HONBI: N-Hydroxy-S-norbornen^-dicarbonsäureimld; DCC: N^'-Dicyclohexylcarbodiimid; DMF: N,N-Dimethylformamid; DSC: Dünnschichtchromatographie; DCHA: Dicyclohexylamin.

Für die Dünnschichtchromatographie wird das folgende Entv/icklerlösungsmittelsystem verwendet:
Rf 1 = Chloroform-Methanol-Essigsäure (9 : i : 0,5)

in den Beispielen verhalten sich Gewichtsteile zu Raumteilen wie Gramm zu Kubikzentimeter. Die Prozentsätze sind auf das Gewicht bezogen, falls nicht anders angegeben.

Beispiel 1
Z-Arg(N0₂)-Pro-NHC2H_s

In 10 Raumteilen DMF werden 0,901 Gew.-Teile Z-Arg(NO₂)-Pro-OH und 0,181 Gew.-Teile Äthylaminhydrochlorid gelöst. Während bei 0° C gehalten wird, werden 0,38 Raumteile Triethylamin zugetropfi. Nach Zusatz von 0,43 Gew.-Teilen HONBI und 0,495 Gew.-Teilen DCC wird das Gemisch 5 Stunden bei 0° C und dann IO Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der als f^:3benprodukt gebildete Harnstoff wird abfiltriert und das DMF abdestilliert. Der Rückstand wird mit Chloroform extrahiert, mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Das Chloroform wird abdestilliert und der Rückstand mit Äther behandelt und aus Methanol-Äther erneut ausgefällt. Ausbeute 0,692 Gew.-Teile; Rf 1 = 0,50; Schmelzpunkt 141-145⁰C (Zers.); [cr]# 44,6° (c = 1, Methanol).

Elementaranalyse: CHN

Berechnet für C₂₁Hj₁O₆N₇: 52,82 6,54 20,53

Gefunden: 52,95 6,77 19,65

Beispiel 2
Z-Arg(NO₂)-Pro-NHCH,

In 5 Raumteilen DMF werden 0,675 Gew.-Teile Z-Arg(NO₂)-Pro-OH und 0,101 Gew.-Teile Methylamlnhydrochlorid gelöst. Während die Lösung bei 0⁰C gehalten wird, werden 0,21 Raumzelle Trläthylamln zugetropft. Nach Zusatz von 0,322 Gew.-Teilen HONBI und 0,37 Gew.-Teilen DCC wird das Gemisch 5 Stunden bei 0°C und dann 10 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der als Nebenprodukt gebildete Harnstoff wird abfiltriert und das DMF abdestilliert. Der Rückstand wird mit Chloroform extrahiert, mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Das Chloroform wird abdestilliert und der Rückstand mit Äthanol behandelt und aus Methanol-Äther erneut ausgefällt. Ausbeute 0,612 Gew.-Teile (88%)·. Rf 1 = 0,30; Schmelzpunkt 137 bis 143°C (Zers.); [a]² _D ⁴ -41,5° (c = 1, Methanol).

Elenuntaranalyse: CHN

Berechnet für C₂₀H₂,O₆N₇: 51,82 6,31 21,15

Gefunden. 51,84 6,54 21,57

C	Il	N
56,82	7,88	17,84
en /\r\ J / .UXJ	α -\c O.L\J	ITCl

Beispiel 3
IBOC-Arg(NOj)-Pro-pyrrolldld

In 30 Raumteilen Trlfluoressigsäure werden 6,96 Gew.-Telle IBOC-Pro-pyrrolldld gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Zur Lösung wird trockener Äther gegeben. Das erhaltene öl wird durch Dekantieren Isoliert und In einem Exsiccator, der Natriumhydroxyd enthält, getrocknet. Getrennt hiervon werden 7,98 Gew.-Telle IBOC-Arg(NO,)-OH In 40 Raumteilen Acetonitril gelöst. Während die Lösung bei 0⁰C gehalten wird, werden 4,0 Gew.-Telle Dlnltrophenol und 4,6 Gew.-Telle DCC zugesetzt, worauf 2 Stunden gerührt wird. Der als Nebenprodukt gebildete Harnstoff wird abfiltriert und das In der oben beschriebenen Welse erhaltene Öl dem Flltrat zugesetzt. Das Gemisch wird auf 0" C gekühlt, worauf 2,5 Raumteile N-Äthylmorpholln zugetropft werden. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Acetonitril wird abdestllilert und der Rückstand an 100 Gew.-Teilen Klesclgel adsorbiert und mit 5%lgem wäßrigem Methanol desorblert. Nach dieser Reinigung wird das Lösungsmittel abdestilliert, wobei 6,0 Gew.-Telle eines Pulvers erhalten werden. Ausbeute 54,5%. Schmelzpunkt 190 bis 193° C (Zers.); \a\" - 59,7° (c = 1, Methanol).

Elementaranalyse:
Berechnet für Cj₄H₄)O₆N₇:
Gefunden:

Welterverarbeltungsbelsplele
Beispiel 4

Z-Leu-Arg(NOj)-Pro-NHC2Hs

In 5 Raumteilen 25% HBr-Esslgsäure werden 0,572 Gew.-Teile Z! Arg(NOj)-Pro-NHCjHs, hergestellt wie In Beispiel 1, gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Dann wird trockener Äther zum Reakt^nsgemlsch gegeben und die gebildete Fällung abflltrlert und getrocknet. Getrennt hiervon » werden 0,291 Gew.-Telle Z-Leu-OH In 5 Raumteilen Dloxan gelöst. Unter Kohlen werder. 0,247 Gew.-Telle DCC und 0,215 Gew.-Telle HONBI zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden gerührt und dei als Nebenprodukt gebildete Harnstoff abfiltriert. Zum Flltrat wird die In der oben beschriebenen Welse erhaltene Fällung gegeben, die durch Zusatz von 3 Raumtellen DMF gelöst wird. Während gekühlt wird, werden 0,17 Raumteile Trläthylamln zugetropft, worauf das Gemisch Ober Nacht bei Raumtemperatur gerührt wird. Das Lösungsmittel wird abdestllilert und der Rückstand mit Chloroform extrahiert und mit Wasser gewaschen. Die Chloroformschicht wird Ober wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und das Chloroform abdestilliert. Der Rückstand wird mit Äther behandelt und aus Methanol-Äther erneut ausgefällt. Ausbeute 0,47 Gew.-Telle (72%); Schmelzpunkt 144 bis 146°C (Zers.); Rf 1 = 0,40; [a]% - 58,0° (c = i, Methanoi).

Das so erhaltene Produkt wird nach den aus der DE-PS 23 21 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptlden der « allgemeinen Formel (I) weiterverarbeitet.

Seispiel 5

Z-Leu-Arg(NO₂)-Pro-NHCH,

In 5 Gew.-Tellen 25% HBr-Essigsäure werden 0,556 Gew.-Teile Z-Arg(NO₂)-Pro-NHCHj, hergestellt wie in Beispiel 2, gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Dann wird trockener Äther zugesetzt, worauf die gebildeten Kristalle abflltrlert und getrocknet werden. Getrennt hiervon werden 0,312 Gew.-Teilt Z-Leu-OH In 5 Raumtellen Dloxan-Äthylacetat (1:1) gelöst. Während die Lösung geküliit wird, werden 0,268 Gew.-Telle DCC und 0,232 Gew.-Telle HONBI zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden gerührt. Der als Nebenprodukt gebildete Harnstoff wird abfiltriert. Zum Flltrat werden die in der oben beschriebenen Welse hergestellten Kristalle gegeben und durch Zusatz von 3 Raumtellen DMF gelöst. Während gekühlt wird, werden 0,17 Raumteile Triäthylamin zugesetzt. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird abdestilliert. Der Rückstand wird mit Chloroform extrahiert und mit Wasser gewaschen. Die Chloroformschicht wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat dehydratisleit, worauf das Chloroform abdestllilert wird. Der Rückstand wird mit Äther behandelt und aus Methanol-Äther erneut ausgefällt. Ausbeute 0,45 Gew.-Teile (78%); Rf 1 = 0,25

Elementaranalyse:	C	H	N
Berechnet für C₂₆H₄₀O₇N,:	54,15	7,02	19,43
Gefunden:	54,37	6,98	19,52

Das so erhaltene Produkt wird nach der. aus der DE-PS 23 2! 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptlden der allgemeinen Formel (D weiterverarbeitet.

H	N
8,29	16,46
8,17	15,25

Beispiel 6
IBOC-Leu-Arg(NO₂)-Pro-pyrrolidld

< In 30 Raumtellen Trlfluoresslgsäure werden 5,49 Gew.-Telle IBOC-Arg(NO₂)-Pro-pyrrolldld, hergestellt wie in Beispiel 3, gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Dann wird trockener Äther zugesetzt. Die gebildete Fällung wird abfiltriert und gut getrocknet, wobei ein Pulver erhalten wird, r-trennt hiervon werden 3,95 Gew.-Telle IBOC-Leu-OH In 20 Raumtellen Dioxan gelöst. Während die Lösung bei 0°C gehalten wird, werden 1,52 Gew.-Telle N-Hydroxysucclnlmld und 2,7 Gew.-Telle DCC zugesetzt,

in worauf das Gemisch 2 Stunden gerührt wird. Der als Nebenprodukt abgeschiedene Harnstoff wird abflltriert. Zum Flltrat wird das in der oben beschriebenen Weise erhaltene Pulver gegeben, worauf 10 Raumteile Tetrahydrofuran zugesetzt werden. Das Gemisch wird auf 0°C gekühlt, worauf 1,4 Raumteile Trläthylamln zugetropft werden. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, das Lösungsmittel abdestilllert und der Rückstand mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wird mit einer 5%lgen wäßrigen Natrlumhydrogencarbonatlösung und einer lOssigen wäßrigen Cltronensäurelösung gewaschen. Er wird dann mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat dehydratlslert. Das Äthylacetat wird abdestilliert und der Rückstand mit Erdölbenzin gewaschen. Der Rückstand wird dann aus Äthylacetat-Erdölbenzin erneut ausgefällt. Ausbeute 5,8 Gew.-Telle; Schmelzpunkt 185 bis 186° C (Zers.); IaVJ - 53,6° (c = 0,98, Methanol).

-ⁿ Elementaranalyse: C

Berechnet für C₁₂Hs₁O₇N, · H₂O: 56,45 Gefunden: 56,97

Das so erhaltene Produkt wird nach den aus der DE-PS 23 21 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptlden der allgemeinen Formel (I) weiterverarbeitet.

Beispiel 7
J" Z-Nle^Arg(NO₂)-Pro-NH-C₂H_s

In 4 Raumtellen 25* Bromwasserstoff-Essigsäure werden 0,4775 Gew.-Telle Z-Arg(NO₂)-Pro-NH-C₂H5, hergestellt wie In Beispiel 1, gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Dann werden 50 Raumtellc trockener Äther zum Reaktionsgemisch gegeben. Die abgeschiedene Fällung wird abfil-

-'S trlert, mit Äther gut gewaschen und über Natriumhydroxyd unter vermindertem Druck getrocknet. Getrennt hiervon werden 0,2653 Gew.-Teile Z-NIe-OH In einem Gemisch von 2 Raumtellen Äthylacetat und 12 Raumtellen Dioxan gelöst. Während die Lösung bei O⁰C gehalten wird, werden 0,197 Gew.-Telle HONBl und 0,226 Gew.-Teile DCC zugesetzt. Das Gemisch wird 3 Stunden gerührt. Der ais Nebenprodukt gebildete Harnstoff wird abflltriert und das Filtrat zu einer Lösung der In der oben beschriebenen Welse erhaltenen Fällung In 1 Raumteil DMF gegeben, worauf 0,28 Raumtelle Triäthylamin zugetropft werden. Das Gemisch wird über Nacht gerührt, das Lösungsmittel abdestilllert und der Rückstand mit 100 Raumteilen Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit 5%iger wäßriger Natrlumhydrogencarbonatlösung, Wasser, 0,5 N Salzsäure und Wasser gewaschen und dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat dehydratlslert. Das Chloroform wird abdestilllert und der Rückstand mit Äther behandelt und aus Äthanol-Äther erneut ausgefällt. Die Ausbeute beträgt 0,41 Gew.-Tetle.

Schmelzpunkt 109 bis 111° C (Zers.); [tx]% - 50,4° (c = 0,5, Äthanol). Elementaranalyse: Berechnet für C₂₇H«O₇Ni · 0,5H₂O:

Gefunden:

50

'Das so erhaltene Produkt wird nach den aus der DE-PS 23 21 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptlden der allgemeinen Formel (I) weiterverarbeitet.

Beispiel 8 Z-Ile-Arg(NOj)-Pro-NHCiH₅

1,43 Gew.-Telle Z-Arg(NO₂)-Pro-NHC₂H₅, hergestellt wie In Beispiel 1, werden in 10 Raumtellen 25% HBr-Essigsäure gelöst. Das Gemisch wird 40 Minuten bei Raumtemperatur stehen gelassen. Dann werden 80 Raumtelle trockener Äther zugesetzt. Die gebildete Fällung wird abflltriert und getrocknet, wobei ein Pulver erhalten wird.

0,795 Gew.-Teile Z-IIe-OH werden in 10 Räumteilen Dioxan gelöst. Die Lösung wird auf 0° C gekühlt. Nach Zugabe von 0,59 Gew.-Teilen HONBI und 0,68 Gew.-Teilen DCC zur Lösung wird das Gemisch 2 Stunden gerührt. Das Gemisch wird zur Entfernung der Fällung filtriert. Zum Flltrat wird das In der oben beschriebenen Weise hergestellte Pulver gegeben. Nach Zusatz von 0,84 Raumteiler, TüSthyiamin wird das Gemisch 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das als Lösungsmittel verwendete Dioxan wird abgedampft. Der Rückstand wird in 100 Raumteilen Chloroform gelöst und die Lösung mit 0,1 N Salzsäure, 5%iger wäßriger Natrium-

C	H	N
54,07	7,22	18,68
53,79	7,09	18,24

hydrogencarbonatlösung und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und durch Abdampfen des Chloroforms eingeengt. Der Rückstand wird mit Äther verrUben, wobei eine Fällung gebildet wird, die aus ÄthanolÄther erneut ausgefällt wird, wobei 1,1 Gew.-Teile Z-Ile-Arg(NO₂)-Pro-NHCjHs vom Schmelzpunkt 103 bis 105° C (Zers.) erhalten werden. [a\" - 58,1° (c = 1, Methanol).

Elemen'aranalyse:	tN,	• 0,5HjO:	C	H	N
Berechnet für C₂₇H₄₂O			54,08	7,23	18,68
Gefur.Jen:		53,80	7,15	18,84

Elementaranalyse:	<lS	• 0,5 H₂O:	C	H	N	S
Berechnet für C_2JH₄₂0₇f			47,33	7,42	19,20	5,49
Gefunden:		47.67	7,23	18,94	5,48

Das so erhaltene Produkt wird nach den aus der DE-PS 23 21 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptlden der in allgemeinen Formel (I) weiterverarbeitet.

Beispiel 9
BOC-Met-Arg-Pro-NHCjH_s i>

1,91 Gew.-Tel;e Z-Arg(NO₂)-Pro-NHC2Hs, hergestellt wie in Beispiel 1, werden In 10 Raumteilen 25« HBr-Esslgsäure gelöst. Die Lösung wird 30 Minuten stehen gelassen und dann mit trockenem Äther versetzt. Die Fällung wird abfÜtriert, vn\t Äther gut gewaschen und getrocknet, wobei eine Amlnkomponente erhalten wird.

1,75 Gew.-Telle BOC-Met-OH ■ DCHA werden In 100 Raumteilen Äther gelöst. Die Lösung wird zweimal mit 50 Raumteilen einer wäßrigen 0,2 N Schwefelsäurelösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Der Äther wird abgedampft und der Rückstand in 20 Raumteilen Dloxan gelöst. Die Lösung wird auf 0⁰C gekühlt und mit 0,905 Gew.-Tellen DCC und 0,79 Gew.-Tellen HONBI versetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden gerührt. Der gebildete Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert und das Flltrat eingeengt. Zum Rückstand werden 5 Raumteile DMF und die gesamte Menge der In der oben beschriebenen Welse hergestellten AmInkomponente gegeben. Die erhaltene Lösung wird gekühlt und dann mit 1,12 Raumteilen Trläthylamln versetzt. Das Gemisch wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und das DMF abgedampft. Der Rückstand wird in 100 Raumteilen Chloroform gelöst, mit 0,1 N Salzsäure, 5%lger wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und durch Abdampfen des Chloroforms eingeengt. Durch Zugabe von Äther zum Rückstand wird ein Feststoff gebildet. Dieser Feststoff wird aus Äthylacetat-Äther erneut ausgefällt, wobei 1,4 Gew. Teile BOC-Met-Arg-Pro-NHC₂H_s vom Schmelzpunkt 101 bis 104° C (Zers.) erhalten werden. [a]ß - 64,4° (c = 1,0, Methanol).

N S

Das so erhaltene Produkt wird nach den aus der DE-PS 23 21 174 bekannten Verfahren zu Nonapeptiden der allgemeinen Formel (I) weiterverarbeitet.

Claims

Patentansprüche:
I. N*-geschützteN^c-Nitro-L-arginyl-L-prolin-amide der Formel

X-Arg(NO₂)-Pro-Y (II)

mit den folgenden Bedeutungen von X und Y:

Y -NHR mit R C,- bis Cj-Alkyl oder Pyrrolidino,
X Benzyloxycarbonyl oder Isobomyloxycarbonyl.

ι» 2. Verbindung nach Anspruch 1 mit den Bedeutungen:

Y -NHC₂H₅,

X Benzyloxycarbonyl.

Die Erfindung betrifft die in den Ansprüchen dargelegten Gegenstände.

In dieser Beschreibung stehen (PyrKJlu, His, Trp, Ser, Tyr, Phe, GIy, Leu, He, Nie, Met, Arg und Pro für »Reste« von L-Pyroglutaminsäure, L-Histidin, L-Tryptophan, L-Serin, L-Tyrosin, L-Phenylalanln, Glycin, L-Leucin, L-Isoleucln, L-Norleucin, I -Methionin, L-Arglnln bzw. L-Prolln. Unter dem »Rest« ist ein Radikal zu verstehen, das von der entsprechenden α-Aminosäure durch Eiiminierung des GH-Teiis der Carboxylgruppe und des H-TeIIs der ar-Aminogruppe abgeleitet Ist. Beispielsweise stellt Im Falle von L-Arglnin