DE2151720A1

DE2151720A1 - Arzneimittel zur Bekaempfung von Virusinfektionen und seine Verwendung als Zusatz zu Tierfutterkonzentraten

Info

Publication number: DE2151720A1
Application number: DE19712151720
Authority: DE
Inventors: Carr Albert Anthony; Fleming Robert Willerton
Original assignee: Richardson Merrell Inc
Current assignee: Richardson Vicks Inc
Priority date: 1970-12-10
Filing date: 1971-10-18
Publication date: 1972-06-29
Also published as: IL37327A0; ZA714599B; PH9405A; BE776555A; AU452736B2; GB1353536A; NL7112580A; FR2118030A1; AU3185271A; FR2118030B1; IL37327A; CA993795A

Description

RECHTSANWALTS

DR-JyR₁DIPL-CHEM-WALTERBEH . _Λ1 ALFRED HOHPPENER 15. UKf. 1971 DR. JUR. DjPL-GHEM. H.-J. WOLFF DR. JUR. tfMlS CHR. BEIL

623 FRANKFURT AM MAiK-HDCHST ADEtO

Unsere ITr. 17262

Richardson - Merreil, Ine., New York, N.T., V.St.A.

Arzneimittel zur Bekämpfung von Virusinfektionen und seine Verwendung als Zusatz zu Tierfutterkonzentraten.

Gegenstand der Erfindung ein auf. Viren hemmend oder inaktivierend wirkendes Arzneimittel, bestehend aus einer Verbindung der' allgemeinen Formel

"T-A-N

oder deren pharmazeutisch zulässige Säureanlagerungssalze, worin Z Sauerstoff oder H₂, Y jeweils Sauerstoff oder

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zweiwertigen Schwefel, A jeweils eine gerade oder verzweigtkettige Alkylengruppe mit 2-4 Kohlenstoffatomen, die den Aminostickstoff und den Substituenten Y durch mindestens 2 Kohlenstoff atome trennt, E und E-, , unabhängig voneinander Wasserstoff, eine niedere Alkylgruppe mit 1 4 Kohlenstoffatomen oder eine Alkenylgruppe mit 3-6 Kohlenstoffatomen, wobei die Vinyldoppelbindung in anderer als in 1-Stellung der Alkenylgruppe vorliegt, oder E und E-, jeweils zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie ge- | bunden sind, eine Pyrrolidino-, Piperidino-, Morpholine—, Piperazino- oder li-niedrig-Alkyl-piperaziiiogruppe bedeuten.

Das Arzneimittel kann zusätzlich einen üblichen pharmazeutisch Zulässigen Trägerstoff enthalten«

Jede basische Äthergruppe, d.h. jeder der Beste

-Y-A-N der Formel I kann durch Substitution eines ^Rl

der vier Wasserstoffatome des benzoiden Rings, an den der Rest gebunden ist, an einen der benzoiden Ringe des tricyclischen Ringsystems des Xanthens oder Xanthenons gebunden " sein. Eine dieser Gruppen kann also in Stellung 1 bis 4 des tricyclisehen Ringsystems, die andere in Stellung 5 bis 8 vorliegen. Vorzugsweise befindet sich der eine der basischen iitherreste in 2-. oder 3-Stellung, der andere in 6- oder 7-Stellung des tricyclischen Ringsystemsf..

Das Symbol A in den Verbindungen gemäß vorstehenden Formeln bedeutet jeweils einen C₂ - C.-Alkylenrest, - · -

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der geradkettig, also z.B. -CH₀-(CII₃) -, wobei s 1, oder 3 ist, oder verzweigtkettig sein kann. Die mit A bezeichneten Alkylengruppen können gleich- oder verschiedenartig sein, vorzugsweise sind sie aber gleichartig. Beispiele für Alkylengruppen A sind 1,2-Ä'thylen, 1,3-Propylen, 1,^-Butylen u. dgl..

Jede Aminogruppe -N _π der Verbindungen ge- -

maß Formel I kann eine primäre, sekundäre oder tertiäre sein. Einzeln genommen, bedeuten R und R, jeweils ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis etwa /|. Kohlenstoffatomen oder eine Alkenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei die Vinyldoppelbinduiig in anderer als in 1-Stellung der Alkenylgruppe vorliegt. Vorzugsweise sind alle Aminogruppen -N""" tertiär*-

^^Rl

Mit "niederer Allcylgruppe" wird im Hinblick auf die Verbindungen gemäß Formel I eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1-k Kohlenstoffatomen bezeichnet. Entsprechende Beispiele für jedes R oder R-, in den Verbindungen der Formel I sind Methyl-, Äthyl-, n-Propyl-, Isopropyl-, n-3utyl-, Isobutyl-, sek.-Butylgruppen.

Bedeutet R oder R-, in den Verbindungen der Formel II eine Alkenylgruppe, so befindet sich die Vinyldoppelbindung in anderer als in 1-Stellung dieser Alkenylgruppe. Beispiele der Alkenylgruppeii R und R-, sind Allyl-, 3-Butenyl-, 4-Hexenylgruppen usw..

Die Piperidino-, Pyrrolidino-, Morpholino-, Piperazino-, H-ilthylpiperazino-, H-Hethylpiperazinogruppen

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sind beispielhaft für gesättigte mono- und heterocyclisehe Gruppen -Il ^ _D , die R und Ϊ' zusammen mit dein

Stickstoffatom darstellen können.

Pharmazeutisch zulässige Säureanlagerungssalze der neuen basischen Wirkstoffe sind solche von geeigneten anorganischen oder organischen Säuren, so z.B. Mineral -" säuren wie Chlorwasserstof f-, Brornwasserstof f-, -,Schwe fel- oder Phosphorsäure. . Geeignete organische Säuren sind Carbonsäuron wie Essigsäure, Propionsäure, Glycolsäure, Milchsäure, Brenztraubensäure, Apfelsäure, Bernsteinsäure, Fumarsäure, Malonsäure, Weinsäure, Citronensäure, Ascorbinsäure, Maleinsäure, Hydroxymaleinsäure, Benzoesäure, Hydroxybenzoesäuro-, Phenylessigsäure, Zimtsäure, Salicylsäure, 2-Phenoxybenzoesäure u. dgl. oder Sulfonsäuren wie Methansulfonsäure, 2-Hydroxyäthansulfonsäure u. dgl.. Es können sich Mono- oder Disalze mit den Säuren bilden, doch werden die zweibäsischen Salze in der Hegel isoliert. Ferner können die Salze hydratisiert oder praktisch wasserfrei sein.

Als Verbindungen der Formel I mit gegen Viren gerichteter Wirksamkeit können beispielsweise folgende angeführt werden:

3,6-Bis-/~2-(diäthylamino)-äthoxy_7~xanthen-9-on, 3,6-Bis-^2-dimethylamino)-äthoxyJ -xanthen-9-on, 3,6-Bis-_i/"3-(dimethylamino)-propoxy _7-xanthen-9-on, 3,6-Bis-(2-morpholinoäthoxy)-xanthen-9-on,

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3,6-3is-(2-piperidinoäthoxy)-xanthen-9-on, 3,6-Bis-(2-pyrrolidinöäthoxy)-xanthen-9-on> 3,6 -Bis-/~2- (N-rne thylpiperazino) -ätlioxy J?-xanthen-9-on, 3,6-Bis- (2-piperazinoäthoxy) -xanthen-9-oh, 3,6-Bis-/"2-(diisopropylamino)-äthoxy _/-xanthen-9-on, 3,6-Bis-/f*2-(diäthylamino)-äthylthio _7-xanthen-9-on, 2,7-Bis-/"2-(diallylamino5-MtIiOXyJ^-XaHtIIeIi u.^cdergl. '

Das Verfahren zur Herstellung der neuen Wirkstoffe läßt sich durch folgendes Reaktionssche-ma wiedergeben:

R R-,

K-A-Y

Y-II + HaI-A-H

R-

R.

Base

Y-A-K

. R ^R-.

Hierin liegen 2, Y, A, R und Ii^, in der angegebenen Bedeutung vor, und Hai ist Chlor, Brom oder Jod»

Als Base wird für diese Umsetzung rlatriummethoxid bevorzugt, doch können auch andere Basen v/ie Natrium -

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hydrid, ITatr iumamid,. Natriumhydroxid, Kaliiualiydroxid u. dgl. eingesetzt werden. Als HeaktionsmediUH können sehr verschiedene Lösungsmittel eingesetzt vieraen, wie aromatische Kohlenwasserstoffe, z.B. Benzol, Toluol, Xylol u. dgl., halogenierte Aromaten, z.B. Chlorbenzol u.dgl., aprotische Lösungsmittel, wie z.B. 1$,H-Diaethylformamid, iT^N-Dimethylacetamid, Birnethylsulfoxid u. dgl., Alkohole, wie z.B. Äthanol, Isopropanol u* dgl., Ketone, wie z.B. Aceton, Butanon u. dgl», Äther, wie z.B. W Tetrahydrofuran, Dioxan u.dgl., Wasser, oder Lösungsmittelgemische.. Ein bevorzugtes Lösungsmittel ist Ghlorbenzol. _:

Die Synthese unter Verwendung von z.B. llatriummethoxid, Natriumamid oder ITatriumhydrid als Base erfolgt in einem wasserfreien Medium wie wasserfreies Toluol, Chlorbenzol und dgl.. Man versetzt eine Suspension von 1 Äquivalent der Ausgangsverbindung (1) (in der Y als Sauerstoff oder Schwefel vorliegt) in dem wasserfreien Lösungsmittel mit etwa 2,5 Äquivalenten Base und erhitzt das Gemisch unter Bildung des Diphenoxlds oder ^ Dithiophenoxids. In dem Fall, wo Hatriummethoxid verwendet wird, kann das zugesetzte und das während der Reaktion entstandene Methanol zweckmäßig durch azeotrope Destillation entfernt werden. Man setzt anschließend etwa 2,5 Äquivalente des Halogenalkylamins (2) zu und erhitzt das Gemisch etwa L>_r bis 2.1\ Stunden auf Rückflußteinperatur. Das Umsetzungsprodukt (3) wird dann nach üblichen Verfahren,, Z..B*- durch. Filtrieren,. Ausfällen, ümkristallisie- ren u, dgl. isoliert.

Die Dihydroxyxanthen-9-on-Derivate, d.h. Verbin"---".' dung 1 mit Z und Y in der Bedeutung von Sauerstoff, lassen

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sich nach allgemein bekannten Verfahrensweisen her stellen. So erhitzt man z.B. 2,2',4,4*-Tetrahydroxybenzophenon in wässriger Lösung in einem Autoklaven unter Bildung von 3>6-Dihydroxyxanthen-9-on vom Schmelzpunkt >300°C (P. Grover etal., J.-Chern. Soc. 1953 (S. 3982). Die Verbindung 1, in der Z = lip, Y= Sauerstoff und die -YII-Gruppen in 2,7-Stellung stehen, kann durch Diacetylierunr; von Xanthan und anschließende Umlagerung mittels der Üaeyer-Villiger-Reäktion zu* dem entsprechenden Diacetoxyxanthen hergestellt werden, wobei¹ letzteres dann unter basischen .i.edingungen zu dem gewünschten 2,7-Dihydroxyxauthen vom Schmelzpunkt 220-22/(⁰C hydrolysiert wird. Verbindung 1, in der Y ein zweiwertiges Schwefelatom bedeutet, kann durch thermische Umlagerung der Bisdialkylthiocarbamate des entsprechenden Diolderivates und durch anschließende alkalische Hydrolyse der umgelagerten Produkte gemäß dem Verfahren nach liewman und Karnes für die Überführung von Phenolen in Thiophenole £ vgl. J. Org. Chem. (Bd. J51, S. 3980, (1966)_7 hergestellt werden.

Es wurde gefunden, daß die neuen Wirkstoffe auf eine Vielzahl verschiedener Viren inaktivierend oder wachstumshemmend wirken und damit antivirale Mittel darstellen. In sehr verschiedener Weise angewendet und zusammengesetzt, dienen diese Verbindungen der Verhütung und Eindämmung charakteristischer^ Virüserkrankungssymptome. Sie lassen sich so verabreichen, daß Wirt oder Wirt und Virus den Wirkstoffen ausgesetzt werden. Hierzu werden Wirkstoff und Wirt z.B. durch Aufbringung, durch Kontakt ' von Wirt und Wirkstoff oder einfach durch Verabreichung des Wirkstoffs an den Wirt zusammengebracht. Dies schließt

BAD ORIGINAL

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die Behandlung von Wirt-mit Wirkstoff vor der Virusinfektion, also die prophylaktische Anwendung, sowie eine solche Behandlung nach der Infektion, also zu therapeutischem Zweck ein. In lebensfähigem biologischem Material^ das den Wirkstoffen ausgesetzt wird, erfolgt also Wachstumshemmung der Viren, sofern der Wirt vor oder nach der Einwirkung dieser Wirkstoffe infiziert wird. Die auf verschiedenem Wege erfolgende Verabreichung-der Wirkstoffe an einen tierischen Wirt vor oder nach der Virus- . infektion verhütet oder hemmt ferner-die Virusvermehrung .: sowie die Ausbildung der verschiedenen Krankheitszustän- ■■· de, wie sie für das jeweilige Virus charakteristisch sind. Mit "Infektion" wird hier ganz einfach der Befall eines Wirtes durch ein pathogenes Virus bezeichnet. Die Bezeichnung "Wirt" bezieht sich im vorliegenden auf lebensfähiges biologisches Material oder auf inaktive Tiere, die die Interferonbildung einzuleiten und eine Virusver mehrung zu unterstützen vermögen. Vorzugsweise handelt es sich um einen tierischen Wirt, und zwar insbesondere warmblütigen oder SaugetiemrSprungs. Wirtsbeispiele für verschiedene Viren sind: lebensfähiges biologisches Material, v/ie es für die Herstellung von Vakzinen herangezogen werden kann, z.B. Gewebekulturen wie von Hieren, Lungen, Amnionzellen, Embryos, z.B. allantoische Flüssigkeit von Kücken, und dann verschiedene Tiere, z.B. Warmblüter wie Vögel oder Säugetiere.einschließlich Mäuse, Batten, Meerschweinchen, Wüstenspringmäuse, Frettchen u. dgl..

Der Wirkungsmechanismus der aktiven Stoffe ist nicht genau geklärt. Unter anderem leiten die' Wirkstoffe die Interferonbildung ein, wenn ein Wirt damit behandelt wird.

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Das Interferon ist eine bekannte antivirale Substanz, die in Zusammenhang steht mit der Hemmung der Vermehrung von Viren in Gegenwart einer Wirtszelle. Einige Viren, deren Vermehrung durch Interferon gebremst werden kann, sind in Horsfall u. Tamm, "Viral and Rickettsial Infections of Man ", L\._a Aufl. (1965), J.B. Lippencoot Company, S. 328-329 aufgeführt.

Die neuen Verbindungen können Tieren wie Warm blut or vind insbesondere Säugetieren verabreicht werden, um Infektionen durch nachstehende Viren zu verhüten oder einzudämmen. Picornavirus, z.B. Encephalomyocarditis, Myxovirus, z.B. Influenza A₂ (Jap/305), Arbovirus, z.B. Semliki forest, Herpes-Virusgruppe, z.B. Herpes simplex und Pockenviren, z.B. Vaccinia IHD. zur prophylaktischen Behandlung soll die Verabreichung vorzugsweise innerhalb O bis 96 Stunden vor der Infektion des Tieres durch pathogenes Virus erfolgen. Für die therapeutische Behandlung zur Eindämmung einer Infektion soll die Verabfolgung vorzugsweise innerhalb von etwa ein oder zwei Tagen nach der Infizierung durch ein pathogenes Virus durchgeführt werden.

Die anzuwendende Dosierung richtet sich nach dem Virus, das behandelt oder prophylaktisch angegangen werden soll, nach der jeweiligen Tierart, nach dessen Alter, Gesundheitszustand, Gewicht, nach dem Grad der Infektion, der Art einer gleichzeitig durchgeführten anderen Behandlung, sofern eine solche erfolgt, nach der Behandlungshäufigkeit und der Art des gewünschten Effektes. Die Dosierung der Wirkstoffe wird beispielsweise im allgemeinen weniger als etwa 0,1 bis über etwa 500 Milligramm/Kilogramm Körpergewicht betragen. Dosierungsbeispiele für den

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- ίο -

zu verabreichenden Wirkstoff sind:

intravenös 0,1 bis etwa 10 mg/kg} intraperitoneal 0,1 bis etwa 50 mg/kgj subkutan 0,1 bis etwa 250 mg/kgj

oral 0,1 bis etwa 500 mg/kg, vorzugsweise etwa 1 bis etwa 250 mg/kg;

intranasale Instillation 0,1 bis etwa 10 mg/kg und P Aerosol 0,1 bis etwa 10 mg/kg Tierkörpergewicht.

Die neuen Wirkstoffe können zusammen mit herkömmlichen Trägerstoffen in Dosierungseinheitsformen angewendet werden, so z.B. als Feststoffe wie Tabletten oder Kapseln oder flüssige Lösungen, Suspensionen oder Elixiere zur oralen Verabreichung und als Injektionen oder flüssige Lösungen, Suspensionen, Emulsionen und dgl. für die parenterale Verwendung. Die Wirkstoffmenge in jeder Dosierung ist im allgemeinen, je nach Art der Dosierungseinheit, der Tierart und seinem Gewicht verschieden. Jede Dosierung kann also weniger als etwa 2,0 mg bis über 3 g t Wirkstoffe in einer bedeutenden Menge nichttoxischen pharmazeutischen Trägerstoffs solcher Art enthalten, die eich für die orale Einnahme, bzw. die örtliche, bukale oder parenterale Verabreichung eignet.

Wie erwähnt, kann es sich bei dem pharmazeutischen Trägerstoff um eine sterile Flüssigkeit wie Wasser und Öle mit oder ohne Zusatz eines oberflächenaktiven Mittels handeln. Beispiele für Öle sind solche, die von Erdöl abgeleitet sind, sowie jene tierischen, pflanzlichen oder synthetischen Ursprungs, wie Erdnußöl, Sojaöl, Mineral-

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öl, Sesamöl u. dgl.. In der Regel sind Wasser, Kochsalzlösung, wässrige Dextrose und verwandte Zuckerlösungen und Glycole wie Propylenglycol oder Polyäthylenglycol bevorzugte flussige Träger, insbesondere für injizierbare Lösungen. Sterile injizierbare Lösungen wie Kochsalzlösung, z.B. isotonische Kochsalzlösung, enthalten gewöhnlich etwa 0,5 bis-2-5, vorzugsweise etwa 1 bis 10 Ge\i.-% Wirkstoff in der Zusammensetzung.

Es wurde bereits erwähnt, daß zur oralen Verabreichung geeignete Suspensionen oder Syrups mit einem Wirkstoffgehalt von normalerweise etwa 0,5 - 10, vorzugsweise etwa 1-5 Gew.-% eingesetzt werden können. In diesen Zusammensetzungen kann ein wässriger pharmazeutischer Träger wie aromatisches Wasser, Syrup oder pharmazeutischer Pflanzenschleim, ein Suspensionsmittel zur Viskositätssteuerung wie Magnesium-Aluminium-Silikat, Carboxymethylcellulose oder dgl., Puffer, Konservierungsmittel usw, zur Verwendung kommen.

Die Wirkstoffe kann man auch Tierfutter oder dem · Trinkwasser der Tiere zusetzen. In den meisten Fällen wird der Wirkstoff in solcher Menge verwendet, daß sich ein Wirkstoffanteil von etwa 0,0001 - 0,1 Gew.-#, bezogen auf das Gesamtgewicht des aufgenommenen Futters, ergibt. Bevorzugt ist ein Gewichtsanteil von 0,001 - 0,02 Gew.-%. Die Futterauswahl gehört zum Stand der Technik und hängt natürlich von den jeweiligen Tieren, der Wirtschaftlichkeit, den verfügbaren Naturstoffen und der gewünschten Wirkung ab.

Die Wirkstoffe können Tierfutterkonzentraten bei-• gemischt werden, die an Landwirte oder Viehzüchter abgegeben und von diesen in entsprechendem Mengenverhältnis

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den Futterstoffen zugesetzt werden. Der Wirkstoffgehalt solcher Konzentrate kann etwa 0,5 bis etwa 95 Gew.-% in Mischung mit feinzerteilten Feststoffen, vorzugsweise Mehl wie Weizen-, Mais-, Soja- oder Baumwollsamenmehl betragen. Je nach Tier kann Getreide, Holzkohle, Fullererde, Austernschale u. dgl. in gemahlener Form als fester Zusatzstoff dienen. Auch feinzerteilter Attapulgit und Bentoni t kann vervrendet werden. "

Sowohl Futtermittel als auch Futtermittelkonzentrate können selbstredend auch noch andere Komponenten von Futterkonzentraten oder Tierfutterstoffen enthalten. Weitere besonders wichtige Zusätze sind Proteine, Kohlehydrate, Fette, Vitamine, Mineralien, Antibiotika usw.

Zur Verwendung als Aerosole werden die Wirkstoffe mit einem gasförmigen oder verflüssigten Treibmittel wie Dichloridfluormetlian, Kohlendioxid, Stickstoff, Propan
usw. und mit üblichen Hilfsmitteln wie Co-Lösungsmittel und Netzmittel nach Bedarf und Wunsch in einen Aerosol-Druckbehälter gefüllt.

Typische oberflächenaktive Mittel (vgl. Kirk u. Othmer, Encyclopedia of Chemical Terminology 195^» Nr. 13, Seite 513 ) und vor allem Emulgier- oder Dispergiermitteln, die in den vorliegend formulierten Gemischen verwendet werden können, sind beispielsweise Fettalkoholsulfate wie Natriumlaurylsulfat, aliphatische oder aromatische Sulfonate wie sulfoniertes Rizinusöl sowie Emulgier- und Dispergiermittel nichtionischer Art wie die hochmolekularen Alkylpolyglycoläther, etwa Dodecylpolyglycoläther mit ca. 25-75 Kohlenstoffatomen.

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Eine wünschenswerte Verabreichungsart der neuen Mittel (Wirkstoffe) parenteral©, z.B. werden sie als normalerweise flüssige Präparate zur Injektion intramuskulär oder subkutan verabreicht. In diesen Präparaten kann die Wirkstoffmenge zwischen etwa 0,05 und 20 Gew.-# auf Basis des Präparats, vorzugsweise zwischen etwa 0,1 und 10 Gew.-# schwanken. Um Reizungen an der Injektionsstelle möglichst auf ein Minimum herabzusetzen oder auszuschalten, kann man Präparaten für parenterale Verwendung nichtionische oberflächenaktive Mittel zusetzen, z.B. solche mit einem HLB-Wert (hydrophillipophiles Gleichgewicht) von etwa 12-17. Es können Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen mit herkömmlichen flüssigen pharmazeutischen Trägern, z.B. sterilen Flüssigkeiten wie Wasser, physiologische Kochsalzlösung, wässrige Dextrose (Glucose) und verwandte Zuckerlösungen formuliert werden. Das Präparat kann"etwa 5-15 Gew.-# oberflächenaktive Mittel auf Präparatbasis enthalten. Der Mengenanteil des Wirkstoffs in Basenform oder als pharmazeutisch zulässiges Säureanlagerungssalz in diesen Formulierungen kann über einen so v/ei te η Bereich variieren wie bereits angegeben, also von 0,05 bis 20 Gew.-%, bezogen auf die Formulierung. Vorzugsweise liegt der Wirkstoff in freier Basenform vor. Zum Rest bestehen diese Formulierungen aus einem normalerweise flüssigen pharmazeutischen Träger, z.B. isotonischer wässriger Kochsalzlösung allein oder in Verbindung mit üblichen Streckmittel für injizierbare Präparate. Es kann ein einzelnes oberflächenaktives Mittel mit dem oben angegebenen HLB-Wert oder ein Gemisch aus zwei oder-mehr oberflächenaktiven Mitteln, das den genannten HLB-Wert aufweist, verwendet werden,

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" ί

A) Polyoxyäthylenderivate der Sorbitanffcttsäureester 3 (etwa die oberflächenaktiven Mittel der TWEEN^Gruppe wie

SO u. dgl.) (Handelsprodukte der Firma ATLAS POW-

COMPANY).

B) Hochmolekulare Addukte von Äthylenox^d mit einer durch Kondensation von Propylenoxid mit Propylenglycol gebildeten hydrophoben Base (z.B. PLÜRON^C F-68, Handels-

ψ produkt der Fa.

WYAiOX)TTE CHEMICAL COMPANY). Das bevorzugte oberfläch maktive Mittel ist POLYSC)rBATE 80, U.S.P., ein PolyoxyäthyJLensorbitanmonooleat. |

Nachstehende Beispiele sollen die Erfindung weiterhin erläutern:

Beispiel 1: ?

3,6-Bis-£" 2-(di^jlthylamino)-

Ein Gemisch^ aus 23,0 g (0,1 Mol) 3,JS-Dihydroxyxanthen-9-on, 3|6,O g (0,296 Mol) Natriumjnethoxid, 350 ml Chlorbenzol und 60 ml Methanol wurde gerührt und auf 130° erhitzt, wobei tfethanol abdestillierte, welches aufgefangen wurde, Nifch Kühlung des.Realitionsgemisches auf unter etwa IQO⁰U wurden 33,0 g (0,2/>5 Molj) ß-Diäthylaminoäthylchlorid zugesetzt} das Gemisch wurde 5,5 Stunden unter Rückfluß gehalten und anschließend auf 1ÖO°C gekühlt. Danach s0tzte man 300 ml Wasser und 10 ml kO S6-iges NaOH zu. Das Gen»isch wurde 20 Minuten lanjg gerührt und die Chlorbenzolätchicht dann abgetrennt, ü|3er wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und'mit ätherischem

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HCl behandelt. Nach Umkristallisieren des erhaltenen Niederschlags aus Methanol/Äthylacetat erhielt man das Dihydrochloridsalz des gewünschten Produktes. Dieses Salz wurde mit verdünntem NaOH behandelt, mit Chloroform extrahiert, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und zu einem Feststoff eingeengt, den man unter Gewinnung des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 70,5 - 72⁰C aus Hexan umkristallisief^i?©»«^ «s

Beispiel 2:

3»6-Bis-/~2-(dimethylamino)-äthoxy J^-xanthen-9-on.

Unter Rühren wurden 5k_t 5 g (0,239 Mol) 3»6-Dihydroxyxanthen-9-on mit 2/fO ml Methanol und 29,0 g (0,717 Mol) Natriummethoxid versetzt; anschließend gab man 700 ml Chlorbenzol zu. Das Methanol wurde abdestilliert, bis die Reaktionsteinporatur 130⁰C erreichte. Nach Kühlung des Gemisches auf unter etwa 100⁰C wurde 2-Dimethyl aminoäthylchlorid in einer Menge von 64ι0 g (0,590 Mol) zugegeben, und das Gemisch wurde 4*5 Stunden unter Rückfluß gehalten. Dann fügte man 600 ml Wasser und 20 ml 50 S6-iges NaOII zu und rührte noch eine halbe Stunde weiter. Das Gemisch wurde gekühlt und mit Chloroform ver setzt, um das Produkt vollständig zu lösen. Man trennte die Chlorbenzol/Chloroformschicht ab und extrahierte die wässrige Schicht mit Chloroform. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zu einem dunkelbraunen Öl eingedampft, das nach Kühlung sich verfestigte.

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Der Feststoff wurde in siedendem Äthanol gelöst, mit Wasser ausgefällt, gekühlt und filtriert. Das feste Produkt wurde im Vakuum getrocknet und aus Hexan umkristallisiert. Auf diese V/eise erhielt man das gewünschte Produkt mit einem Schmelzpunkt von 87,5 - 89°C.

Beispiel 5;

5 > 6-BiB-(2-morpholinoäthoxy)-xanthen-9-on»

Man verfuhr wie in Beispiel 2, verwendete aber anstelle von 2-Dimethylaminoäthylchlorid 74,7 g (0,5 Mol) 2-Morpholinoäthylchlorid und erhielt nach Umkristallisieren aus Isopropanol das gewünschte Produkt vom Schmelzpunkt 153,5 - 154,5°C

Beispiel 4:

2, 6-Bis-(2-piperidinoäthoxy) -xantheii-9-on.

Man verfuhr wie in Beispiel 2, verwendete aber an- |) stelle von 2-Dimethylaminoäthylchlorid 74,5 S (0,5 Mol) 2-Piperidinoäthylchlorid und erhielt nach Umkristallisation aus Methanol das gewünschte Produkt, das einem Schmelzpunkt von 134-134,5°C aufwies.

Beispiel 5?

3,6-Bis-^~2-( diisopropylamino) -ätho;cy_7-xanthen-9-on. Man verfuhr wie in Beispiel 2, verwendete aber an -

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stelle von 2-Dimethylarainoäthylchlorid die entsprechende molar äquivalente Menge an 2-(Diisopropylamino)-äthylchlorid und erhielt nach Umkristallisation aus Hexan das gewünschte Produkt mit einem Schmelzpunkt von 117,5 118° .

Beispiel 6:

3,6-Bis~^~3-(dimethylamine)-propoxy_7-xanthen-9~on.

Man verfuhr wie in Beispiel 2, verwendete aber anstelle von 2-Dimethylaminoäthylchlorid die entsprechende molar äquivalente Menge an 3-Dimethylaminopropylchlorid und erhielt nach Umkristallisation aus Hexan das gewünschte Produkt, das einen Schmelzpunkt von 69-7O⁰C aufwies.

Beispiel 7:

3,6-Bis-_J/"2-(diäthylamino )-äthylthio J?-xanthen-9-on-dihydro Chlorid.

Ein Gemisch aus 3Z_ho g (0,0844 Mol) S,S'-(9-0xo -xanthen-3,6-diyl)-bis-(dimethylthiocarbamate 200 ml Methanol, 100 ml 50 %-igem HaOH und 100 ml Wasser wurde unter einer Stickstoffatmosphäre unter Rückfluß gehalten, bis eine vollständige Lösung vorlag, und 700 ml Chlorbenzol wurden zugesetzt. Während dieser Zeit destil lierte man Methanol und Wasser ab. Nach Kühlung wurden 37,5 C (0,278 Mol) Diäthylaminoäthylchlorid zugegeben, und das Gemisch wurde unter einer Stickstoffatmosphäre

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drei Stunden lang unter Rückfluß gehalten, h9 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und anschließend weitere 5 Stunden unter Rückfluß gehalten. Hach Kühlung wurden 300 ml 10 %-iges HaOH zugegeben und das Gemisch eine halbe Stunde gerührt. Daraufhin gab man Äther und Chloroform zu. Die abgetrennte organische Schicht wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zu einem braunen öl eingedampft. Dieses wurde in 100 ml Äther gelöst und mit ätherischem HCl behandelt. Der er-" haltene Niederschlag wurdecfiltriert und aus Äthanol unter Gewinnung des gewünschten Produktes mit einem Schmelzpunkt von 227-229°C umkristallisiert.

Beispiel 8:

2,7-Bis-^/" 2- (dime thylamino) -äthoxy_7-xanthen.

20 g (0,0935 Mol) 2,7-Dihydroxyxanthen in 350 ml Chlorbenzol versetzte man mit 16,5 g (0,3 Mol) liatriummethoxid und 60 ml Methanol. Man rührte und erhitzte das k Reaktionsgemische v/ährenddessen das Methanol abdestilliert wurde. Das Gemisch wurde gekühlt und mit 29 g (0,26 Mol) 2-Dimethylaminoäthylchlorid versetzt. Nach k Stunden Rückfluß unter Rühren wurde das Gemisch gekühlt und mit 100 ml Wasser plus 10 ml 50 %-iger NaOH-Lösung ver setzt. Man rührte das Gemisch 15 Minuten und' gab 100 ml Chloroform zu. Die organische Schicht trennte sich ab; sie wurde mit 5 %-iger ITaOH-Lösung und dann mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, abfiltriert und zu einem festen Rückstand eingeengt, der nach Umkristallisation aus Hexan das gewünschte Produkt mit einem Schmelzpunkt von 85-86,5°C ergab.

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Beispiel 9:

2,7-Bis-/" 2-(diallylamino)-äthoxy_7-xanthen.

Man verfuhr· wie in Beispiel 8, verwendete aber anstelle von 2-Dimethylaminoäthylchlorid die entsprechende molare Äquivalentmenge an 2-Diallylaminoäthylchlorid und erhielt das gewünschte Produkt.

Beispiel 10;

Als Zusammensetzung für Hartgelatinekapseln wird folgendes Beispiel angegeben:

pro Kapsel

a) 3,6-Bis-/-2-(diäthylamino)-äthoxy_7-xanthen-9-on 200 mg

b) Talkum 35 mg

Die Zubereitung erfolgt dadurch, daß man die trockenen Pulver a) und b) durch ein feinmaschiges Sieb passiert und gründlich mischt. Das Pulver wird dann in Hartgelatinekapseln Nr. 0 mit einem Nettofallgewicht von 235 mg je Kapsel abgefüllt.

Beispiel 11:

Als Zusammensetzung für Tabletten wird folgendes Beispiel

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pro Tablette

a) 3 > 6-Bis-/"*2-( diäthylamino) -äthoxy_7-xanthen-9-on 100 mg

b) Weizenstärke 15 mg

c) Lactose 33,5 mg

d) Magnesiumstearat 1,5 mg

Herstellung: Durch Vermischen von Lactose und Stärke erhält man eine granulierte Stärkepaste, die getrocknet, gesiebt und mit Wirkstoff und Magnesiumstearat vermengt wird. Das Gemisch wird zu Tabletten mit einem Gewicht von je 150 mg verpreßt.

Beispiel 12;

Als Zusammensetzung für Pillen wird folgendes Beispiel angegeben:

a) 3,6-Bis-/"2-(diäthylamino)-äthoxy_7-xanthen-9-on

b) Maisstärke

c) flüssige Glucose

Die Pillen werden dadurch hergestellt, daß man Wirkstoff und Stärke miteinander vermischt und dann die flüssige Glucose unter gründlichem Kneten zusetzt, so daß da-

pro Pille	mg
100	mg
90	mg
10

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raus eine plastische Masse wird. Aus dieser v/erden die Pillen herausgeschnitten und geformt.

Beispiel 13:

Ein Syrup mit 2 Gew.-% 3,6-618-/"2-Cdiäthylamino)-äthoxy_7-xanthen-9-on auf Volumenbasis kann nach üblichen pharmazeutischen Verfahren unter Anwendung folgender Formulierung hergestellt werden:

Gramm a) feinverteiltes 3,6-Bis-^"2-(diäthylamino)-

9-on 2,0

b) Saccharose 33»3

c) Chloroform 0,25

d) Natr iumbenzo at 0, if

e) Methyl-p-hydroxybenzoat 0,02

f) Vanillin 0,04

g) Glycerin 1,5

h) gereinigtes Wasser ad 100,0 ml

Beispiel lif;

3,6-Bis-/" 2-(diäthylamino)-äthoxy_7~xanthen-9-on wird mit Sojamehl zu einem Tierfutterkonzentrat ver mischt, das 22 g Xanthen-9-on-Verbindung pro kg medizini

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-ZZ-

sches Futter enthält. Dieses kann dann mit einer zugeteil ten Menge Korngemisch gestreckt werden, so daß das medizinische Futter UO mg Xanthen-9-on pro kg aufweist.'

Beispiel 15 i

Als Formulierung für Streupulver wird folgendes Beispiel angegeben:

pro Kilogramm

a) 3,6-Bis-/";!-(diäthylamino)-äthoxy J7-xanthen-9-on 20 g

b) Silika-Aerogel 980 g

Die Herstellung des Streupulvers erfolgt durch inniges Vermischen der Bestandteile. Das Gemisch wird dann in Verteilerbehälter abgefüllt.

I Beispiel 16:

Als Zusammensetzung für die parenterale Injektion wird beispielsweise folgende wässrige Emulsion angegeben:

Pro ml sind

enthalten Bestandteile Menge

50 mg 3,6-Bis-/"-2-(diäthylamino)-

äthoxy _7-xanthe.n-9-on 1,000 g

209827/10SÖ

Pro ml sind

enthalten Bestandteile

100 mg Polyoxyäthylen-sorbitanmono-

oleat 2,000 g

0,0064 g Natriumchlorid 0,128 g

Injektionswasser ad 20,000 ml

Die Zusammensetzung gemäß Beispiel 16 wird so hergestellt, daß man 0,64 g Natriumchlorid in 100 ml Injektionswasser löst, das Polyoxyäthylen-sorbitanmonooleat mit dem Xanthen-9-on vermischt, Wirkstoff und Polyoxyäthylen-sorbitanmonooleat mit soviel Lösung des Natriumchlorids in Wasser versetzt, daß 20 ml erhalten werden, das Gemisch schüttelt und dann 20 Minuten lang bei 110° und einem Wasserdampfdruck von 1,05 atü im Autoklaven behandelt. Die Zusammensetzung kann in einer Einzelampulle für Mehrfachdosierung oder in 10 oder 20 Ampullen für Einzeldosierungen abgegeben werden.

Die Beispiele 17-28 erläutern in vivo durchgeführte Untersuchungen zur Virusbekämpfung unter Verwendung der neuen Wirkstoffe. In allen Beispielen entfalteten die Verbindungen eine antivirale Wirksamkeit, indem sie den mittleren Sterbetag der behandelten Tiere während der Beobachtungszeit im Vergleich zu den Kontrolltieren hinausschoben. Bei allen Verabreichungen lag die Dosierung der in den Beispielen verwendeten Verbindungen zwischen 10 und 250 mg/kg Tierkörpergewicht.

In Tabelle A sind die in diesen Beispielen verabreichten Wirkstoffe zusammengestellt. Die verwendeten

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überschriften bedürfen zwar eigentlich keiner Erklärung, dennoch aber sollen im folgenden einige definiert v/erden:

Die "übertragung", d.h.* Inokulierung mit einem Virus ist im Experiment für alle unbehandelten, also Kontrolltiere im allgemeinen tödlich* Unter "Todeseintritt" ist der ermittelte Durchschnitt der Zeitspanne bis zürn Eintritt des Todes für die unbehandelten Tiere zu vorstehen. Die "Behandlung" erfolgte prophylaktisch und/oder therapeutisch. Das "Volumen" bezieht sich auf das Volumen an Zusammensetzung pro Dosis, die den Wirkstoff als Lösung in sterilem V/asser mit noch 0,15 % Hydroxyäthylcellulose enthielt. Die Kontrolltiere erhielten eine Leerdosierung gleichen Volumens an Trägerstoff ohne Wirkstoffgehalt. Unter der Abkürzung "VUZ" ist das Verhältnis der Über lebenszeit zu verstehen, das sich errechnet durch Dividieren des mittleren Todestages der behandelten Tiere durch den mittleren Todestag der Kontrolltiere während der Beobachtungszeit. Die Wirksamkeit der in den Beispielen verendeten Verbindungen wird z.B. durch gering, mittel, hoch usw. näher beschrieben. Ein Verhältnis der Uberlebenszeit (VÜZ) von weniger als 0,90 v/eist die Verbindung als toxisch aus. Sin Verhältnis von 0,90 bis 1,09 bedeutet Wirkungslosigkeit. Ein Verhältnis von 1,10 bis 1,19 zeigt eine geringe oder schwache Wirksamkeit an. Ein Verhältnis von 1,20 bis 1,39 läßt auf mittlere Wirksamkeit schließen, während ein solches von 1,30 und mehr eine große Wirksamkeit anzeigt.

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Tabelle A: Beispiel Verbindung

Y] u. 18 3j6-Bis-/~2-(diäthylamino)-äthoxy_7-xanthen-9-on,

19 u. 20 3»6-Bis-/"-2-(dimethylamino)-äthoxy_7-xanthen-9-on,

21 u. 22 3,6-Bis-^"2-(diäthylamino)-äthylthio_7-xan then-9-on-dihydro chlorid,

23 2,7-Bis-/"2-(dimethylamine)-äthoxy_7-xanthen,

2X\ 3>6~Bis-/"2-(diisopropylamino)-äthoxy J^-xan

then-9-on,

25 u. 26 3,6-Bis-^"3-(dimethyiamino)-propoxy_7-xanthen-9-on,

27 u. 28 3,6-Bis-(2-piperidinoäthoxy)-xanthen-9-on.

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	Beisriiel Nr,	17	prophylaktisch·	2,06 hoch	18	19	20	I	to
	VIRUS Art Übertragung	Encephalo- myocarditis RliAjPicornavirus 12LD₅₀	250 EigAg		Encephalo- myocarditis RHA,Picornavir. 13 LD₅₀	Encephalo- myocarditis RHA,Picornav. 12LD₅₀	Encephalo- myocarditis RNA,Pi cοrnavirus 12 LD₅₀	ro σ\	cn «a
	Weg Todeeeintritt Beobachfeungszeit	subkutan 5,0 Tage 5 Tage	Weg subkutan Volumen 0,25 ml Zeit vor der Über tragung 28,22,2 Std, Zeit nach der Übertragung keine		subkutan 4,8 Tage 9 Tage-	subkutan 5,0 Tage -9 Tage	subkutan 5,0 Tage 10 Tage	¹	«j NJ O
	TIER	Mäuse	ERGEMISSE	Mäuse	Mäuse	Mäuse
209	Gewicht Anzahl in der be handelt ·Gruppe	15 g 10	vüz Wirksamkeit	15 S 10	15 S 10	15 g 10
827,	Anzahl in Kontroll gruppe ' 20		20	20	20
	BEHAiIDLUNG		prophylaktisch	propylaktisch	propylaktisch
O O	Dosierung		250 mgAg	u. Therapeut. 50 Ei/tAo	250 mgAg
cn	oral 0,25 nl 22 Std, keine	subkutan 0,25 Eil 28,22,2 Std. 2	oral 0,25 Eil 22 Std. koine

	1,27 mittel	1,62 hoch	2,20 hoch ·

is» ο co

Beispiel Nr.	21	4LD₅₀	22	23	24	I
VIRUS	Encephalo-	subkutan	Encephalo-	Encephalo-	Encephalo-	ro
	myocarditis	5,0 Tage	Ejyocarditis	nyocarditis	ayocarditis	^^ ι
Art RNA,Picornavirus	9 Tage	RNAjPicornav.	RITA, Picornav.	RNA, Picornavir,
übertragung	Hause	4LD₅₀	10 LD₅₀	²^ LD₅₀
Weg ·	15 g	subkutan	subkutan	subkutan
Todeseintritt		5,0 Tage	4,5 Tage	4,4 Tage
Beobachtungszeit	10	9 Tage	9 Tage	9 Tage
TIER		Mäuse	Mäuse	Mäuse
Gewicht ,	20 .	15 g	15 S	15 g
Anzahl in der be	prophylaktisch
handelt. Gruppe	u. theraueut.	10	10	10
An2ahl in Kontroll	250 mg/kr;
gruppe	subkutan	20	20	20
BEHANDLUNG	0,25 ml	prophylaktisch	prophylaktisch	prophylaktisch u.
				therapeutisch
Docierung	28,22,2 Std.	250 ms/kg	250 mgAg	250 ag/ks
Weg		oral	oral	subkutan
Volumen	2 Std.	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml
Zeit vor der über	1,74
tragung	hoch	22 Std.	22 Std.	28,22,2 Std.
Zeit nach dor über
tragung	keine	keine	2 Std.
VUZ	1,10	1,33	1,64
Wirksamkeit	schwach	hoch	hoch

	Beispiel Nr.	25	Anzahl in Kontroll	20	26	27	28	1
	VIRUS	Encephalo-	gruppe	prophylaktisch	Encephalo-	Encephalo-	Encephalo-	Cc
		myocarditis	BEHANDLUNG		myocarditis	rayocarditis	myocarditis	I
	Art	RITA, Picornavirus		250 ng/kg	RITA,Picornav.	RHA,Ficornav.	ElTA, Picornavir.
	übertragung	25 LD₅₀	Dosierung	subkutan	25LD₅₀	25 LD₅₀	25 LD₅₀
	Y/eg	subkutan,	Weg	0,25 ml	subkutan,	subkutan,	subkutan,
	Todeseintritt	if,4 Tage	Volumen		if,4 Tage	4,4 Tage	4,4 Tage
	Beobachtungszeit	9 Tage	Zeit vor der¹ Über	28,22 Std.	9 Tage	9 Tage	9 Tage
	TIEH	Mäuse	tragung		Mäuse	Mäuse	Mäuse
O	Geiaricht	15 δ	Zeit nach der	keine	15 g	15 S	15 g
ep	Anzahl in der be		übertragung	2,23
co	handelt. Gruppe	10	VÜZ	hoch	10	10	10
PO	Wirksamkeit
	20	20	20
O	prophylaktisch	prophylaktisch	prophylaktisch u.
O)			therapeutisch
O)	250 mg/kg .	250 ng/kg	50 mg/kg
	oral	subkutan	oral
	0,25 ml	0,25 al	0,25 ml

	22 Std.	28,22 Std.	28,22,2 Std.

	keine'	keine	2 Std.
	1,23 ·	1,50	1,20
	mittel	hoch	mittel

Claims

Patentansprüche:

1. Arzneimittel zur Bekämpfung von Virusinfektionen beistehend aus einer Verbindung der allgemeinen Formel

H-A-Y

^Hl

in der Z Sauerstoff oder H₂, Y jeweils Sauerstoff oder zweiwertigen Schwefel, A jeweils eine gerad- oder verzweigtkettige Alkylengruppe mit 2 bis l\ Kohlenstoffatomen, die den Aminostickstoff und Y durch mindestens zwei Kohlenstoffatome trennt, B und R₁ unabhängig voneinander jeweils Wasserstoff, eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder eine Alkenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei die Vinyldoppelbindung in anderer als in 1-Steilung der Alkenylgruppe vorliegt, oder R und R₁ jeweils zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Pyrrolidino-, Piperidino-, Morpholino-, Piperazino- oder N-niedrig-Alkylpiperazinogruppe bedeuten, oder eine» ihrer pharmazeutisch zulässigen Säureanlagerungssalze,

2. Arzneimittel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es zusätzlich einen üblichen Trägerstoff

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3· Arzneimittel gemäß Anspruch 2 in Form seiner Dosierungseinheit, bestehend aus etwa 2 Milligramm bia 3 Gramm der Verbindung oder eines ihrejr pharmazeutisch zulässigen Säureanlagerungssalze, und einer beträchtlichen Menge pharmazeutisch zulässigen Trägerstoffs·

k· Arzneimittel nach Anspruch 1. bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff 3,6-Bis-/"2-(diäthyl- _7~xanthen-9-on oder ein pharmazeutisch

™ amino)-äthox3

zulässiges Sä

5. Ar:

kennzeichnet, amino)-äthoxj lässiges Säui

ureanlagerungssalz desselben ist.

neimittel nach Anspruch 1 bis 3» dadurch gedaß der Wirkstoff 3,6-Bis-/"2-(dimethyl- _7-xanthen-9-on oder ein pharmazeutisch zueanlagerungssalz desselben ist.

6. Arzneimittel nach Anspruch 1 bis 3» dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff 3,6-Bis-/~3-(di methylamino)->propoxy_7-xanthen-9-on oder ein pharmazeutisch zulässiges Säureanlagerungssalz desselben ist.

w 7. Arzneimittel nach Anspruch 3 in Form eines normalerweise flüssigen, parenteral zu verabreichenden Gemisches, bestehend aus etwa 5 bis 15 Gew.-% nichtionischem oberflächenaktiven Mittel mit einem hydrophillipophilen Gleichgewicht von 12 bis 17, aus 6,05 bis 20 Gew.-# Wirkstoff und aus einer beachtlichen Menge normalerweise flüssigem, pharmazeutisch zulässigem Trägeratoff.

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8· Verwendung dee Arzneimittels gemäß Anspruch 1 als Zusatz, bu einem Tierfutterkonzentrat in einer Menge fön 0,5 bis 95 % desselben.

Fürt Richardson-Merrell, Ine*

Rechtsanwalt

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