DE1161564B - Verfahren zur Herstellung von 2-Amino-5-nitrothiazolderivaten. - Google Patents

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Internat. Kl.: C 07 d

Deutsche Kl.: 12 ρ - 4/01

Nummer: 1161564

Aktenzeichen: N 21368IV d /12 ρ

Anmeldetag: 23. März 1962

Auslegetag: 23. Januar 1964

Die Erfindung befaßt sich mit einem Verfahren zur Herstellung von bestimmten Derivaten des 2-Amino-5-nitrothiazols. Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen haben wertvolle therapeutische Eigenschaften.

2-Amino-5-nitrothiazol und verschiedene seiner Derivate sind, wie aus der Literatur zu entnehmen ist, Antiprotozoenmittel im Hinblick auf ihre hemmende Wirkung gegenüber bestimmten Protozoen. Beispielsweise ist 2-Amino-5-nitrothiazol wirksam gegen die Truthahnpest, welche durch Protozoen Histomonas maleagridis hervorgerufen wird (vgl. USA.-Patentschrift2 631 963). Z-Alkylcarbonamido-S-nitrothiazole, hauptsächlich 2-Acetylamino-5-nitrothiazol, sind gemäß USA.-Patentschrift 2 735 798 oder der belgischen Patentschrift 548 730 wirksam gegen die durch Protozoen hervorgerufene Vaginitis Trichomonas vaginalis.

Die Erfindung beruht auf dem Befund, daß durch Einführung einer Sulfidbindung in die Seitenkette von Alkylcarbonylderivaten von 2-Amino-5-nitrothiazol Verbindungen erhalten werden können, die unvorhergesehene und sehr wertvolle Eigenschaften aufweisen. Solche Verbindungen besitzen eine hohe Wirksamkeit nicht nur gegen Protozoen, sondern auch gegen Bakterien, wie Staphylococcus aureus. Das Verfahren stellt demnach neue Verbindungen zur Verfügung, die wertvoll für die Behandlung sowohl von Protozoen- als auch von Bakterieninfektionen sind. Da viele Scheideninfektionen durch Trichomonas vaginalis oder Staphylococcus aureus oder durch Mischinfektion mit Staphylococcus aureus und dem verursachenden Mikroorganismus Trichomonas vaginalis entstehen, macht die Kombination von antiprotozoen- (antitrichomonaden-) und antibakteriellen Eigenschaften diese Verbindüngen zu außergewöhnlich wertvollen therapeutischen Mitteln. Darüber hinaus konnte gefunden werden, daß die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen eine fungizide Wirksamkeit aufweisen, da sie beispielsweise wirksam gegen den Pilz Trichophyton interdigitale sind. Somit sind diese Verbindungen wertvoll in der Behandlung von Fungusinfektionen, in denen der vorhin genannte Pilz der Krankheitserreger ist.

Die neuen Verbindungen können durch die allgemeine folgende Formel

Verfahren zur Herstellung von
2-Amino-5-nitrothiazolderivaten

Anmelder:

Nopco Chemical Company, Newark, N. J.

(V. St. A.)

Vertreter:

Dr.-Ing. F. Wuesthoff, Dipl.-Ing. G. Puls und
DipL-Chem. Dr. rer. nat. E. Frhr. v. Pechmann,
Patentanwälte, München 9, Schweigerstr. 2

Als Erfinder benannt:
David B. Reisner, Cedar Grove, N. J.,
Sidney Gister, Bound Brook, N. J.,
Howard C. Klein, Brooklyn, N.Y. (V. St. A.)

Beanspruchte Priorität:

V. St. ν. Amerika vom 23. März 1961

(Nr. 97 732 und Nr. 97 733)

R eine niedere Alkylgruppe oder einen gegebenenfalls durch Halogenatome oder eine Nitrogruppe oder durch niedere Alkyl- oder Alkoxygruppen im Kern substituierten Benzyl- oder Phenylrest bedeutet.

Diese Verbindungen werden verfahrensgemäß hergestellt, indem man in an sich bekannter Weise in Gegenwart einer Base und in einem Lösungsmittel 2-Amino-5-nitrothiazol mit einem Mercaptoalkylcarbonsäurehalogenid der allgemeinen Formel

B — COX

O₂N-

-N

IL

NH-CO

₇₁ — S — R

^NS'

wiedergegeben werden, in der η die Zahl 1 oder 2 und

in der X ein Halogenatom ist, umsetzt.

R-Substituenten sind beispielsweise Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Benzyl, p-Chlorbenzyl, ο,ρ-Dibrombenzyl, p-Nitrobenzyl, p-Methylbenzyl, ο,ρ-Diäthylbenzyl, m-Propylbenzyl, p-Methoxybenzyl, p-Propoxybenzyl, Phenyl, p-Chlorphenyl, p-Bromphenyl, ο,ρ-Dibromphenyl, m-Chlorphenyl, p-Nitrophenyl, p-Methylphenyl, p-Butylphenyl, o,p-Diäthylphenyl und p-Äthoxyphenyl.

Die Verfahrensprodukte werden durch Kondensation einer annähernd äquimolaren Menge von 2-Amino-5-nitrothiazol mit einem entsprechend substituierten Mercaptoacetylhalogenid oder Mercaptopropionylhalogenid auf folgende Weise hergestellt:

309 780/270

Das Mercaptoacetyl- oder -propionylhalogenid wird in ein Gemisch aus 2-Amino-5-nitrothiazol, einer Base und einem Lösungsmittel gegeben, worauf eine exotherme Reaktion stattfindet. Wertvolle Basen sind tertiäre organische Aminbasen, wie Pyridin oder Tributylamin, und Carbonate, wie Natrium- oder Kaliumcarbonat. Die Base liegt in einer Menge vor, die zumindest zur Neutralisierung der während der Reaktion gebildeten Säure ausreicht. Wertvolle

peratur von 25 auf 60⁰C stieg und eine vollständige Auflösung aller festen Substanzen erfolgte. Nach Stehen bei Zimmertemperatur während weiterer 10 Minuten wurde das Gemisch auf einem Dampfbad gelinde erwärmt, wobei das Produkt plötzlich ausfiel. Das Rohprodukt wurde abfiltriert und mit Aceton gewaschen. Dann wurde es in 20prozentiger Salzsäure zur Abtrennung von Ausgangsprodukt zu einer Aufschlämmung verrührt, anschließend abfiltriert und

Lösungsmittel sind Aceton, Benzol und Dimethylform- 10 einmal mit verdünnter Salzsäure und zweimal mit

amid. Das Lösungsmittel liegt zumindest in einer Menge vor, die zur Dispersion der Reaktionspartner ausreicht, d. h. in einer Menge, welche die Entstehung einer verarbeitbaren Mischung, wie eine Aufschlämmung, gestattet.

Die folgenden Beispiele erläutern die Herstellung einiger der neuen Verbindungen. Für die Verfahren zur Herstellung der Ausgangsstoffe (A) wird ein Schutz nicht begehrt.

Beispiel 1

Wasser gewaschen, wobei 52 g eines Produkts mit einem. Schmelzpunkt von 181 bis 183 ⁰C anfielen. Die Ausbeute betrug 75 °/₀ der Theorie. Nach Umkristallisation aus Aceton hatte die Verbindung einen Schmelzpunkt von 187 bis 188°C.

Beispiel 2

A. Herstellung von n-Butylmercaptoacetylchlorid 43,2 g (0,48 Mol) in 200 ml einer 18gewichtsprozen-

A. Herstellung von p-Nitrobenzylmercaptoacetylchlorid

tigen Natronlauge aufgelöstes Butylmercaptan wurden zu 41,6 g (0,44 Mol) in 200 ml einer 18gewichtsprozentigen Natronlauge aufgelöster Chloressigsäure gegeben. Das Gemisch wurde während 2 Stunden auf 47 g (0,27 Mol) p-Nitrobenzylchlorid wurden in 25 einem Dampfbad erhitzt und dann über Nacht bei 1 1 Äthanol aufgelöst. Dann wurde eine Lösung von Zimmertemperatur stehengelassen. Dann wurde es mit 27 g Thioglycolsäure zugegeben, die mit einer Lösung konzentrierter Salzsäure angesäuert. Das dabei gevon 50 g Natriumbicarbonat in 200 ml Wasser neu- bildete öl wurde mit Äther extrahiert. Der Äthertralisiert worden war. Das Gemisch wurde während extrakt wurde entwässert und eingeengt, wobei 65 g einer Stunde unter Rückfluß erhitzt und anschließend 30 rohe n-Butylmercaptoessigsäure erhalten wurden, auf Zimmertemperatur abgekühlt. Während des Ab- 64 g der erhaltenen rohen n-Butylmercaptoessigsäure

kühlens und Stehens bei Zimmertemperatur trat kein wurden tropfenweise zu 78 ml Thionylchlorid gegeben. Niederschlag im Gemisch auf. Das Gemisch wurde in Dabei trat unmittelbar eine lebhafte Chlorwasserstoffein gleiches Volumen Wasser gegossen, worauf sich und Schwefeldioxydentwicklung auf. Nachdem die geein milchiges Öl bildete. Eine kleine Menge einer 35 samte Säure vorsichtig im Verlauf von 15 Minuten zu-20gewichtsprozentigen wäßrigen Natriumcarbonat- gegeben worden war, wurde das Gemisch in einem lösung wurde zugesetzt, bis das Gemisch alkalisch war. Wasserbad gelinde erhitzt, bis die Gasentwicklung Dann wurden ungefähr 25 ml konzentrierte Salzsäure nachließ. Das überschüssige Thionylchlorid wurde im zugesetzt, wodurch die Mischung stark sauer wurde. Wasserstrahlvakuum abdestilliert und das gebildete Nach einigen Minuten bildeten sich Kristalle von 40 n-Butylmercaptoacetylchlorid im Vakuum destilliert. p-Nitrobenzylmercaptoessigsäure. Der Niederschlag Die Ausbeute betrug 55 g eines Produkts mit einem wurde abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Es wurden
48 g eines Produktes mit einem Schmelzpunkt von
105⁰C erhalten. Dies entspricht 78% der Theorie.

Die 48 g (0,21 Mol) der oben hergestellten rohen 45
p-Nitrobenzylmercaptoessigsäure wurden in Pulverform zu 50 ml Thionylchlorid gegeben. Dabei machte
sich die unmittelbare Entstehung von Chlorwasserstoffgas bemerkbar. Die p-Nitrobenzylmercaptoessigsäure löste sich langsam auf, wenn das Gemisch leicht 5° Pyridin und 100 ml Aceton gegeben. Dabei trat eine erwärmt wurde. Die entstandene hellbraune Flüssig- sehr lebhafte Reaktion ein, wobei das Aceton bis zum keit wurde bis auf 50⁰C erhitzt, wobei die Reaktion Siedepunkt erhitzt wurde. Gleichzeitig färbte sich die weiterlief. Die Lösung wurde dann über Nacht bei Lösung tiefrot. Nachdem sich die Lösung langsam auf Zimmertemperatur stehen gelassen. Überschüssiges Zimmertemperatur abgekühlt hatte und während einer Thionylchlorid wurde durch Vakuumdestillation 55 Stunde bei dieser Temperatur stehengeblieben war, (Wasserstrahlpumpe) abgetrennt, wobei ein Rückstand wurde sie unter kräftigem Rühren in 200 ml Wasser

Siedepunkt von 70 bis 71⁰C bei einem Druck von 4 mm Quecksilbersäule.

B. Herstellung von 2-(n-Butylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

25 g des nach A hergestellten n-Butylmercaptoacetylchlorids wurden zu einer Aufschlämmung von 21,7 g (0,15 Mol) 2-Amino-5-nitrothiazol in 12 ml

von 50 g p-Nitrobenzylmercaptoacetylchlorid übrigblieb, der ohne weitere Reinigung für die nächste Reaktionsstufe gebraucht wurde.

gegossen. Der sich dann bildende orange Niederschlag wurde durch Filtration abgetrennt und mit 20prozentiger Salzsäure zu einer Aufschlämmung aufgerührt, um nicht umgesetztes 2-Amino-5-nitrothiazol abzutrennen, und dann nochmals filtriert. Der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. 40 g Rohprodukt wurden aus einem Aceton-Wasser-Gemisch umkristallisiert und ergaben 20 g

B. Herstellung von 2-(p-Nitrobenzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

40 g (0,21 Mol) des nach A hergestellten rohen
p-Nitrobenzylmercaptoacetylchlorids wurden im Verlaufe von 10 Minuten zu einer Aufschlämmung von 65 eines Produkts mit einem Schmelzpunkt von 122 bis 20 g (0,2 Mol) 2-Amino-5-nitrothiazol in einer Mi- 123°C. Dasselbe wurde aus einem Hexan-Acetonschung aus 16 ml Pyridin und 100 ml Aceton gegeben. Gemisch umkristallisiert und ergab 12 g eines Pro-Die Reaktion war stark exotherm, wodurch die Tem- dukts mit einem Schmelzpunkt von 126 bis 127°C.

Beispiel 3
A. Herstellung von Benzylmercaptoacetylchlorid

36 g Benzylmercaptoessigsäure wurden zu 50 ml Thionylchlorid gegeben. Zuerst konnten keine Zeichen einer Reaktion wahrgenommen werden. Als sich die Säure jedoch aufzulösen begann, trat eine Entwicklung von Chlorwasserstoff und Schwefeldioxyd auf. Nach einigen Minuten wurde die Reaktion leicht exotherm, und die Geschwindigkeit der Gasentwicklung nahm zu. Das Gemisch wurde auf einem Dampfbad 1 Stunde lang erhitzt und überschüssiges Thionylchlorid im Vakuum abgetrennt. Es wurden zweimal 100 ml Benzol zugesetzt und zur Abtrennung von Thionylchloridspuren abdestilliert. Dabei blieben 36 g rohes Benzylmercaptoacetylchlorid als Rückstand übrig.

B. Herstellung von 2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

21 g (0,1 Mol) des nach A hergestellten rohen Benzylmercaptoacetylchlorids wurden zu einer Aufschlämmung aus 14,5 g (0,1 Mol) 2-Amino-5-nitrothiazol und 9,5 ml Pyridin in 50 ml Aceton gegeben. Sämtliche festen Substanzen lösten sich auf, und das Gemisch wurde während einer Stunde unter Rückfluß gekocht. Die Acetonlösung wurde auf Eis gegossen, und nach Schmelzen desselben wurde durch Filtration eine gelbe feste Substanz abgetrennt. Dieselbe wurde mitWasser, 100 ml verdünnter Salzsäure in einem Verhältnis von Wasser zu Säure wie 1: 1 und dann wieder mit Wasser gewaschen. Die an der Luft getrocknete feste Substanz hatte ein Gewicht von 24,3 g und einen Schmelzpunkt von 130 bis 135 ⁰C. Sie wurde aus einem Gemisch aus 300 ml Äther und 100 ml Aceton unter Bildung eines Produkts mit einem Schmelzpunkt von 152 bis 153⁰C umkristallisiert.

Beispiel 4

A. Herstellung von /9-Methylmercaptopropionylchlorid

106 g (1 Mol), /3-Mercaptopropionsäure wurden in 230 ml einer wäßrigen Lösung aus 43 g Natriumcarbonat aufgelöst. Nachdem die Entwicklung von Kohlendioxyd nachgelassen hatte, wurden 40 g (1 Mol) Natriumhydroxyd in Form von Plätzchen zugegeben und anschließend im Verlauf von 30 Minuten 1 Mol Methyljodid tropfenweise zugesetzt. Das Gemisch wurde über Nacht stehengelassen und dann auf einem Dampfbad zu einer festen Substanz eingeengt, mit verdünnter Schwefelsäure angesäuert und dreimal mit Äther extrahiert. Die Ätherextrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat entwässert, abfiltriert, eingeengt und die niedrigsiedenden Anteile durch Erhitzen auf eine Temperatur von höchstens 100 bis 12O⁰C bei einem Druck von 25 mm Quecksilbersäule abgetrennt. Die in einer Menge von 60 g (0,5 Mol) gebildete rohe /3-Methylmercaptopropionsäure wurde tropfenweise zu 70g (0,56 Mol) Thionylchlorid gegeben. Es trat fast unmittelbar eine lebhafte Gasbildung auf, und die Temperatur sank unter Zimmertemperatur ab. Das Gemisch wurde während 30 Minuten auf einem Dampfbad gelinde erhitzt, während welcher Zeit die Gasentwicklung andauerte. Das niedrigsiedende Produkt wurde im Vakuum abgetrennt. Das bei 94 bis 96° C unter einem Druck von 37 bis 38 mm übergehende ß-Methylmercaptopropionylchlorid hatte ein Gewicht von 45 g.

B. Herstellung von 2-(^-Methylmercaptopropionamido)-5-nitrothiazol

19 g des nach A hergestellten /J-Methylmercaptopropionylchlorids wurden einer Auf schlämmung von 19 g (0,13 Mol) 2-Amino-5-nitrothiazol in 10 ml Pyridin und 100 ml Aceton zugegeben. Es entwickelte sich eine stark exotherme Reaktion, während der sich die gesamte feste Substanz auflöste. Das Gemisch wurde

ίο während 30 Minuten zur Beendigung der Reaktion auf einem Dampfbad leicht erhitzt. Dann wurde es auf Zimmertemperatur abgekühlt, wobei Kristallbildung eintrat. Die feste Substanz wurde abgetrennt, in 20prozentiger Salzsäure aufgeschlämmt, abfiltriert und mit zusätzlicher Säure und anschließend mit Wasser gewaschen. Das Produkt hatte ein Gewicht von 14 g und einen Schmelzpunkt von 172 bis 174° C. Nach Umkristallisation aus Aceton betrug der Schmelzpunkt 178 bis 179°C.

Beispiel 5

A. Herstellung von p-Chlorbenzylmercaptoacetyl-

chlorid

Eine Lösung von 150 g Natriumthiosulfatpentahydrat in 240 ml Wasser wurde zu 61 g Chloressigsäure gegeben, die mit Natriumcarbonat auf einen pn-Wert von 6 bis 7 abgestumpft worden war. Die gesamte Mischung wurde unter Rückfluß erhitzt. Nach 30 Minuten trat eine dunklere Färbung auf. Am nächsten Tag wurde das Gemisch weitere 3 Stunden erhitzt, um die Reaktion bis zum Ende ablaufen zu lassen. Dann wurden 350 g konzentrierte Salzsäure und 96 g p-Chlorbenzylchlorid zugegeben. Dieses Gemisch wurde 17 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt. Das gebildete Öl wurde in Äther gelöst, einmal mit Wasser gewaschen und dann mit 400 ml einer wäßrigen Lösung von 30 g Natriumhydroxyd extrahiert. Die Lösung wurde bis zur Ausfällung eines Öls angesäuert, das erst nach Dekantierung und wiederholtem Waschen mit Wasser fest wurde. Die Ausbeute an p-Chlorbenzylmercaptoessigsäure betrug 29 g mit einem Schmelzpunkt von 51 bis 53°C.

29 g (0,14 Mol) der p-Chlorbenzylmercaptoessigsäure wurden zu 36 g Thionylchlorid gegeben. Die exotherme Reaktion setzte langsam unter Gasentwicklung ein. Sobald die Gasentwicklung nachzulassen schien, wurde das Gemisch leicht erhitzt, wobei es eine etwas dunklere Färbung annahm. Überschüssiges Thionylchlorid wurde abgetrennt und das gebildete p-Chlorbenzylmercaptoacetylchlorid unter geringer Zersetzung im Vakuum destilliert. Es wurden 17,5 g Produkt mit einem Siedepunkt von 155 bis 156 ⁰C bei 5 mm erhalten.

B. Herstellung von 2-(Chlorbenzylmercaptoacet-

amido)-5-nitrothiazol

8 g (0,055 Mol) 2-Amino-5-nitrothiazol und 4 ml Pyridin in 50 ml Aceton wurden mit 17,5 g (0,075 Mol) p-Chlorbenzylmercaptoacetylchlorid umgesetzt, das wie oben hergestellt worden war. Die festen Substanzen lösten sich auf, jedoch war die Reaktion schwächer exotherm als gewöhnlich. Das Acetongemisch wurde während 30 Minuten auf einem Dampfbad erhitzt und dann auf Zimmertemperatur abgekühlt. Es fiel keine feste Substanz aus. Das Acetongemisch wurde in 150 ml Wasser gegossen, wobei eine gummiartige gelbe Substanz ausfiel. Um nicht umgesetztes 2-Amino-

5-nitrothiazol in Lösung zu bringen, wurden 25 ml konzentrierte Salzsäure zugegeben, und das Gemisch wurde filtriert. Die feste Substanz wurde mit 20prozentiger Salzsäure und dann dreimal mit Wasser gewaschen. Das Rohprodukt in einer Menge von 20 g wurde aus 80 ml Aceton umkristallisiert und ergab 10 g eines Produktes mit einem Schmelzpunkt von 172 bis 173⁰C.

Beispiel 6

A. Herstellung von p-Chlorphenylmercaptoacetylchlorid

Eine Lösung von 98 g p-Chlorthiophenol und 28 g

carbonat in Wasser gegeben. Das entstandene Gemisch wurde 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt und dann über Nacht bei Zimmertemperatur stehengelassen. Der Alkohol wurde im Vakuum abgetrennt, und der dabei übriggebliebene ölige Rückstand mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Das in Kristalle übergehende öl wurde abgetrennt und mit Wasser gewaschen. Es entstanden 112 g p-Chlorbenzylmercaptopropionsäure mit einem Schmelzpunkt von 67 bis ίο 69°C. 44 g dieser Verbindung wurden mit 50 ml Thionylchlorid in das Säurechlorid übergeführt.

B. Nach Abtrennung des überschüssigen Thionylchlorids wurden 40 g des nicht destillierten Säurechlorids mit 27 g 2-Amino-5-nitrothiazol in Aceton

Natriumhydroxyd in 150 ml Wasser wurde zu einer 15 und Pyridin, wie im Beispiel 6 beschrieben, umgesetzt. Lösung von 61,5 g Chloressigsäure und 28 g Natrium- Es wurden nach zweimaliger Umkristallisation aus hydroxyd in 200 ml Wasser gegeben und die dabei entstandene Mischung während 2 Stunden auf einem
Dampfbad erhitzt. Dann wurden 70 ml konzentrierte
Salzsäure zugegeben; die feste Substanz wurde abge- 20
trennt, mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Es wurden 115 g p-Chlorphenylmercaptoessigsäure mit einem Schmelzpunkt von 102 bis 104⁰C
erhalten.

Von der oben erhaltenen rohen p-Chlorphenylmercaptoessigsäure wurden 61 g (0,3 Mol) in Pulverform zu 75 ml Thionylchlorid in einem 200 ml Einhalskolben gegeben. Es trat langsam eine Gasentwicklung ein, die nach und nach zunahm, als das

Reaktionsgemisch allmählich bis zu seiner Rückfluß- 30 98⁰C unter einem Druck von 2 mm Quecksilbersäule temperatur erhitzt wurde. Die feste Substanz löste wurde dann aus 67,2 g Phenylmercaptoessigsäure und sich auf, und das dunkelbraune Gemisch wurde Thionylchlorid hergestellt.

30 Minuten lang unter Rückfluß gekocht. Über- B. 37,2 g des gebildeten Phenylmercaptoacetyl-

schüssiges Thionylchlorid wurde unter Wasserstrahl- chloride wurden mit 29 g 2-Amino-5-nitrothiazol in vakuum abgetrennt und das gebildete p-Chlorphenyl- 35 Gegenwart von Aceton und Pyridin unter Bildung mercaptoacetylchlorid unter einem Druck von 0,3 mm von 2-(Phenylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol umgesetzt. Sein Schmelzpunkt betrug 133 bis 139 ⁰C. Nach Umkristallisation aus wäßrigem Aceton, gefolgt von einer Umkristallisation aus Isopropanol, betrug 40 der Schmelzpunkt 147 bis 149°C.

Isopropanol-Aceton 82 g 2-[/3-(p-Chlorbenzyhnercapto) - propionamido] - 5 - nitrothiazol mit einem Schmelzpunkt von 183 bis 184° C erhalten.

Beispiel 8 2-(Phenylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

A. Gemäß dem im Beispiel 6 beschriebenen Verfahren wurden 100 g Thiophenol und 85 g Chloressigsäure zu 150 g Phenylmercaptoessigsäure mit einem Schmelzpunkt von 62 bis 63⁰C umgesetzt. Das entsprechende Säurechlorid mit einem Siedepunkt von

Quecksilbersäule bei 122 bis 126 ⁰C destilliert. Es wurden 42 g des gewünschten Produktes (63 °/o Ausbeute) erhalten.

B. Herstellung von 2-(p-Chlorphenylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

42 g (0,19 Mol) des nach A hergestellten Säurechlorids wurden zu einer Aufschlämmung von 28 g, das sind 0,19 Mol, 2-Amino-5-nitrothiazol in einem Gemisch aus 150 ml Aceton und 16 ml Pyridin gegeben. Es setzte eine exotherme Reaktion ein, wodurch die Temperatur des Reaktionsgemisches bis zum Siedepunkt des Acetons gesteigert wurde. Durch

Beispiel 9

2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol Eine Mischung aus 10,2 g Benzylmercaptoacetyl-

chlorid, 7,8 g 2-Amino-5-nitrothiazol, 50 ml Aceton und 9,0 g Tri-n-butylamin wurde während einer Stunde unter Rückfluß erhitzt und dann auf Zimmertemperatur abkühlen gelassen. Nachdem es über Abkühlung fiel eine gelbe feste Substanz aus. Dieser 50 Nacht gestanden war, wurde das gebildete Reaktions-Niederschlag wurde abfiltriert und mit 25 ml Aceton gemisch auf Eis gegossen. Die feste Substanz wurde gewaschen. Dann wurde das Rohprodukt in 20prozen- durch Filtration abgetrennt, mit 20prozentiger Salztiger Salzsäure aufgeschlämmt und erneut filtriert. säure aufgeschlämmt, erneut filtriert und mit Wasser Nach dreimaligem Waschen mit Wasser wurde das gewaschen. Nach Umkristallisation aus einem Äthanol-Produkt an der Luft getrocknet. Es wurden 55 g 55 Aceton-Gemisch hatte das 2-(Benzylmercaptoacet-

Substanz erhalten. Das Produkt wurde aus Aceton-Wasser umkristallisiert und ergab 30 g 2-(p-Chlorphenylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol mit einem Schmelzpunkt von 186 bis 189 ⁰C.

Beispiel 7

2-|j5-(p-Chlorbenzylmercapto)-propionamido]-5-nitrothiazol

A. Ein Gemisch aus 80,5 g p-Chlorbenzylchlorid und 200 ml Äthanol wurde zu einer wäßrigen Lösung von 53 g ß-Mercaptopropionsäure und Natriumbi-

60

amido)-5-nitrothiazol einen Schmelzpunkt von 154 bis 155°C.

Beispiel 10 2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

Ein Gemisch aus 10,2 g Benzylmercaptoacetylchlorid, 7,8 g 2-Amino-5-nitrothiazol, 50 ml Benzol und 4,0 g Pyridin wurde während einer Stunde unter Rückfluß erhitzt. Das Benzol wurde abgedampft, wonach ein braunes öl übrigblieb, das nach Behandlung mit Wasser und Salzsäure wie im vorangegangenen Beispiel 15g rohes 2-(Benzylmercaptoacet-

amido)-5-nitrothiazol mit einem Schmelzpunkt von 149 bis 151⁰C ergab.

Beispiel 11
2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol

Ein Gemisch aus 10,2 g Benzylmercaptoacetylchlorid, 7,8 g 2-Amino-5-nitrothiazol, 50 ml Aceton und 5,3 g Natriumcarbonat wurde verrührt und während einer Stunde unter Rückfluß erhitzt. Dann wurde das Gemisch unter heftiger Entwicklung von Kohlendioxyd in Eiswasser gegossen. Die feste Substanz wurde abfiltriert, mit 20prozentiger Salzsäure und dann mit Wasser gewaschen und schließlich an der Luft getrocknet. Es wurden 6 g 2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol mit einem Schmelzpunkt von 153 bis 154⁰C erhalten.

Die Wirksamkeit einiger verfahrensgemäß erhaltener Verbindungen in vitro gegen die Protozoen Trichomonas vaginalis und Trichomonas foetus und gegen zo das Bakterium Staphylococcus aureus wurde durch eine Versuchsreihe bestimmt, durch welche die minimale Inhibitorkonzentration dieser Verbindungen festgestellt wurde. Zum Vergleich wurden auch zwei bekannte Verbindungen untersucht. Der hier gebrauchte Ausdruck »minimale Inhibitorkonzentration« bedeutet die minimale Konzentration, bei deren Vorliegen ein Mikroorganismus vertilgt wird, der in einem Kulturmedium enthalten ist, das für sich allein ein starkes Wachstum des Mikroorganismus ermöglicht. Bei der Durchführung dieser Bestimmungen wurden zuerst Kulturen der obengenannten Protozoen und Bakterien hergestellt und dann wie folgt in Kontakt mit den sie vertilgenden Verbindungen gebracht.

Trichomonas vaginalis wurde in einem Medium wachsen gelassen, wie es' in K u ρ f e r b e r g, »International Record of Medicine and General Practice Clinics«, Bd. 168, 1955, S. 709 bis 717, beschrieben worden ist. Zur Herstellung von verdünnten Nährlösungen wurde eine Menge von 0,1 ml einer 48 Stunden alten Kultur der obengenannten Protozoen in jedes einer Reihe von Versuchsgefäßen gebracht, in denen in abgestufter Menge eine der zu prüfenden Verbindungen enthalten war. Die Gefäße wurden während 48 Stunden bei 37°C inkubiert und die Kulturen dann unter dem Mikroskop auf das Vorhandensein von Trichomonaden untersucht. In der Versuchsreihe war ein Kontrollgefäß vorhanden, das keine Inhibitorverbindung enthielt.

Die Bestimmungen an Trichomonas-foetus-Kulturen wurden in ähnlicher Weise, wie es für Trichomonas vaginalis angegeben wurde, durchgeführt.

Micrococus pyogenes var. aureus (Staphylococcus aureus) wurde während 18 bis 24 Stunden in einer Nährlösung bei 37⁰C wachsen gelassen. 1 ml der Kultur wurde 99 ml der Nährlösung zugegeben. In abgestufter Verdünnung wurde die zu untersuchende Verbindung in eine Reihe von Gefäßen gegeben, die eine mit einer Bakteriensuspension inokulierte Nährlösung enthielten und während 48 Stunden bei 37° C inkubiert wurden. Als Endpunkt diente die stärkste Verdünnung der Verbindung, die kein Wachstum mehr erlaubte.

Tabelle

Verbindung

Minimale Inhibitorkonzentration

(in Teilen auf 1 Million)
T. vaginalis T. foetus | S. aureus

2-(/S-Methylmercaptopropamido)-5-nitrothiazol (Beispiel 4)

2-(n-Butylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol
(Beispiel 2)

2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol
(Beispiel 3)

2-(p-Chlorbenzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol
(Beispiel 6)

2-Acetamido-5-nitrothiazol

2-(^-Diäthylaminoäthylmercaptoacetamido)-4,6-dichlorbenzthiazol-hydrochlorid

Kontrolle

0,95

0,95

<0,78

<0,78
<0,78

Wachstum

0,95	15,6
0,95	10
<0,78	10
<0,78	12,5
<0,78	200 bis 333
	200
Wachstum	Wachstum

Die Ergebnisse in Tabelle 1 zeigen, daß die Verfahrensprodukte Verbindungen von ungewöhnlich hoher Wirksamkeit gegen T. vaginalis, T. foetus und S. aureus sind, wohingegen die bis jetzt bekannten Verbindungen, die gegen diese Protozoen wirksam sind, relativ ohne Wirkung gegen S. aureus sind.

Die in vitro-Wirksamkeit gewisser der in obigen Beispielen hergestellten Verbindungen gegen den Pilz Trichophyton interdigitale wurde durch eine Reihe von Versuchen bestimmt, in denen die minimale Inhibitorkonzentration der Verbindungen festgestellt wurde. Zum Vergleich wurden auch zwei bekannte Verbindungen untersucht bzw. deren bekannte minimale Inhibitorkonzentration in die Tabelle aufgenommen. Bei der Durchführung dieser Bestimmungen wurden Pilskulturen hergestellt und wie folgt in Kontakt mit den zu untersuchenden Verbindungen gebracht.

Trichophyton interdigitale wurde auf Sabouraud's Agar während 7 bis 10 Tagen bei Zimmertemperatur wachsen gelassen. Dann wurden die Untersuchungen wie mit M. Pyogenes Var. aureus unter Verwendung

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einer Sporensuspension der Testorganismen als Inoculum durchgeführt. Als Untersuchungsmedium diente Sabouraud's Flüssigkeitsmedium.

In Tabelle 2 sind die erhaltenen Ergebnisse wiedergegeben.

Tabelle 2

Verbindung

2-(n-Butylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol (Beispiel 2)

2-(Benzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol (Beispiel 3)

2-(p-Chlorbenzylmercaptoacetamido)-5-nitrothiazol (Beispiel 6)

2-(/?-Methylmercaptopropamido)-5-nitrothiazol (Beispiel 4)

2-Acetamido-5-nitrothiazol

2-(N'-Acetylpiperazino)-5-nitrothiazol

Kontrolle

Minimale Inhibitorkonzentration

(in Teilen auf 1 Million) T. interdigitale

IO

15

10

20

10

50 >1000 _a5

>1000 Wachstum

30

Die in Tabelle 2 aufgeführten Ergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäß erhaltenen Verbindungen eine hohe Wirksamkeit gegen T. interdigitale aufweisen, während die bekannten Verbindungen relativ ohne Wirkung gegen diesen Pilz sind.

Werden Vaginal- und Pilzinfektionen behandelt, so können die Verbindungen lokal und oral angewendet werden. Hierzu ist es lediglich notwendig, daß die Verbindung auf einer Trägersubstanz aufgebracht wird, die sich für die Art der Anwendung eignet. Die Verbindungen können auch zum Schutz von Citrusfrüchten, Pflanzen, Bäumen, Holz, Papier und Textilien gegen Pilzbefall benutzt werden. Sie können durch Besprühen, Eintauchen oder Bestreichen der zu behandelnden Gegenstände zur Anwendung kommen. Die Verbindungen können ebenfalls zur Kontrolle der Bildung und des Wachstums von Schleimpilzen in der Papierherstellung benutzt werden.

Claims (2)

Patentansprüche:

1. Verfahren zur Herstellung von 2-Amino-5-nitrothiazolderivaten der allgemeinen Formel

N
— O₂N _x j— NH — CO — (CH₂)„ — S — R

worin η die Zahl 1 oder 2 und R eine niedere Alkylgruppe oder einen gegebenenfalls durch Halogenatome oder eine Nitrogruppe oder durch niedere Alkyl- oder Alkoxygruppen im Kern substituierten Benzyl- oder Phenylrest bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise 2-Amino-5-nitrothiazol mit einem Mercaptoalkylcarbonsäurehalogenid der allgemeinen Formel

R — S — (CH₁J_n — COX

in der X ein Halogenatom ist, in Gegenwart einer basischen Verbindung und in einem Lösungsmittel umsetzt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als basische Verbindung Pyridin und als Lösungsmittel Aceton verwendet.

In Betracht gezogene Druckschriften: Deutsche Auslegeschrift Nr. 1 097 994; USA.-Patentschrift Nr. 2 780 631; belgische Patentschrift Nr. 548 730.

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