CZ287975B6

CZ287975B6 - Parenterálně aplikovatelné stabilní léčivé přípravky a jejich použití

Info

Publication number: CZ287975B6
Application number: CZ19952341A
Authority: CZ
Inventors: Hans-Jürgen Dr. Hamann; Peter Dr. Serno; Matthias Dr. Herboth; Peter Dr. Kurka
Original assignee: Bayer Aktiengesellschaft
Priority date: 1994-09-12
Filing date: 1995-09-11
Publication date: 2001-03-14
Also published as: MY111841A; NZ272943A; KR960009998A; FI954204L; DE59507372D1; TW359616B; NO953578D0; ES2139800T3; NO311556B1; EP0700679B1; NO953578L; PL310344A1; EE9500063A; SI0700679T1; EP0700679A1; CN1128655A; PT700679E; SK281611B6; AU698441B2; EE03377B1

Abstract

Řešení se týká parenterálně aplikovatelných stabilních léčivých přípravků pro lipofilní, těžko rozpustné účinné látky ve formě liposomů s fosfolipidovými membránami, přičemž hmotnostní poměr účinné látky k fosfolipidu činí 1 ku 20 až 200 a střední průměr liposomů je v rozmezí 35 až 200 nm, které jako stabilizátory obsahují mastné kyseliny s krátkým řetězcem a jejich soli a koncentrace mastné kyseliny s krátkým řetězcem v roztoku pro aplikaci činí 0,3 až 10,0 mg/ml.ŕ

Description

Parenterálně aplikovatelné stabilní léčivé přípravky a jejich použití

Oblast techniky

Vynález se týká stabilních liposomálních injikovatelných přípravků pro lipofilní, těžko rozpustné účinné látky ve formě liposomů, které jsou stabilizované mastnými kyselinami s krátkým řetězcem, obzvláště pro účinné látky ze skupiny dihydropyridinů.

Dosavadní stav techniky

Pro mnohé cenné účinné látky jsou potřebné intravenosně aplikovatelné přípravky, například pro rychlou iniciační terapii, pro akutní naléhavé situace a také pro aplikaci při těžkých klinických případech. Mnohé účinné látky, zahrnující mnoho dihydropyridinů, vykazují velmi špatnou rozpustnost ve vodě a nejsou proto ve vodných roztocích schopné převedení na léčivý přípravek. Dalším problémem je citlivost mnohých substancí k hydrolýze a k oxidaci.

Problém rozpustnosti a citlivosti k hydrolyse se může vyřešit použitím obvyklých organických rozpouštědel, jako je ethylalkohol, polyethylenglykol nebo propylenglykol. Mnohá z těchto rozpouštědel však vykazují špatnou lokální přijatelnost a musí se proto aplikovat přes centrální katétr nebo se musí ředit vodnými infuzními roztoky. Naposled může docházet na základě špatné rozpustnosti ve vodě k přesycení a k objevování kiystalizace. Při delší intravenosní terapii jsou při tom aplikovaná množství organických rozpouštědel často toxikologicky nebezpečná.

Použití solubilizujících mýdlových nebo tenzidových micel, které se mohou formulovat také zapracováním účinné látky do vodných roztoků natriumlaurylsulfátu nebo polysorbátu, je rovněž problematické, neboť tím se mohou vyvolávat těžké komplikace, jako je například hemolysa nebo šokové symptomy.

Jsou známé mnohé způsoby, které inkorporují těžko rozpustné účinné látky do nanopartikulámího nosiče, čímž se prakticky vyloučí použití toxických rozpouštědel a tenzidů. K těmto patří například parenterální emulze, směsné emulze galenických solí lecitinu a liposomy. U těchto systémů se předloží účinné látky dispergované jako koloidní částice ve vodě, takže se mohou takto zapracovávat pouze účinné látky, stabilní vůči hydrolýze.

Je rovněž známé, že se mohou liposomy se zapracovanými účinnými látkami stabilizovat mrazovým sušením (viz. Betageri a kol., Liposome Drug Delivery Systems, Technomic Publishing AG Basel, 1993, str. 118). K tomu je nutný přídavek kryoprotektoru, který na základě svého membránově stabilizujícího účinku zaručuje integritu liposomů. Známé kryoprotektory jsou polyalkoholy, jako je například glycerol, monosacharidy, jako je například glukóza, disacharidy, jako je například sacharóza, laktóza a trehalóza a proteiny, popřípadě aminokyseliny (viz. Y. Ótzer a kol., Influence of Freeze-drying on the Stability of Liposomes Disperzed in Aqueous Media, Acta Pharm. Technol., 34 (3), 1988, str. 129 až 139).

Z EP-A-560 138 jsou také známé stabilní, mrazově vysušené liposomální přípravky s dihydropyridiny, například s nimodipinem. Výroba zde probíhá za použití fosfolipidů, obvyklých kryoprotektorů a stabilizátorů pH.

Ukázalo se však, že určité problematické účinné látky, které jsou jak ve vodě těžko rozpustné, tak jsou také citlivé k hydrolyse a oxidaci, se nemohou pomocí dosud známých metod převést na dostatečně stabilní liposomové přípravky. Toto platí obzvláště pro dihydropyridiny, jako nimodipin nebo dihydropyridiny obecného vzorce I

-1 CZ 287975 B6

H₃C

Ni

N

NH₂

I

H (I) ve kterém

R značí alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy a

R¹ značí vodíkový atom, atom halogenu, kyanoskupinu, difluormethylovou skupinu nebo alkylovou nebo alkoxylovou skupinu se vždy 1 až 4 uhlíkové atomy.

Obzvláště vhodné pro liposomy podle předloženého vynálezu jsou nimodipin nebo dihydropyridiny obecného vzorce I, ve kterém značí

R alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, obzvláště n-propylovou skupinu nebo isopropylovou skupinu a

R¹ značí vodíkový atom, atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu nebo difluormethylovou skupinu, obzvláště však vodíkový atom.

Výroba těchto dihydropyridinů probíhá pomocí známých metod, například způsobem popsaným v DOS 4 117 750.

Dihydropyridiny jsou vysoce účinná léčiva, která se mimo jiné mohou použít pro terapii insufficience, srdečního svalu. Pro tuto indikaci mají obzvláštní význam stabilní a rychle působící intravenosní přípravky.

Podstata vynálezu

Předmětem předloženého vynálezu tedy jsou parenterálně aplikovatelné stabilní přípravky léčiv na bázi liposomů s fosfolipidovými membránami, jejichž podstata spočívá v tom, že jako stabilizátory proti vyvločkování obsahují mastné kyseliny s krátkým řetězcem nebo jejich soli obecného vzorce II

H₃C - (CH₂)n - COOA (Π), ve kterém n značí číslo 4 až 8, výhodně 6 a

A značí vodíkový atom nebo jednomocný nebo dvojmocný kationt, obzvláště sodný nebo draselný, přičemž hmotnostní poměr účinné látky k fosfolipidu činí 1 ku 20 až 200 a hmotnostní poměr mastné kyseliny s krátkým řetězcem, popřípadě její soli k fosfolipidu činí 1 ku 2 až 60.

Obzvláštní význam mají liposomální přípravky, ve kterých činí hmotnostní poměr mastné kyseliny s krátkým řetězcem, popřípadě její soli k fosfolipidu 1 ku 4 až 50.

Při pokusu převést dihydropyridinové účinné látky obecného vzorce I podle EP-A-560 138 na liposomy se ukázalo, že tyto nejsou jak chemicky, tak také fyzikálně dostatečně stabilní (viz srovnávací příklad z A). Po krátkodobém skladování po dobu pouhých dvou týdnů při teplotě místnosti nebylo celkové množství nežádoucích produktů odbourávání již tolerovatelné. K tomu se ukázalo výrazné vyvločkování a agregace po rekonstituci liposomů s destilovanou vodou.

Překvapivě bylo zjištěno, že se získají chemicky a fyzikálně stabilní liposomy také s problematickými dihydropyridiny obecného vzorce I tehdy, když se k liposomům přidají mastné kyseliny s krátkým řetězcem obecného vzorce II nebo jejich soli.

Efekt, že liposomy podle předloženého vynálezu mají přídavkem mastných kyselin s krátkým řetězcem, popřípadě jejich solí, vyšší fyzikální stabilitu a že je potlačeno jejich nežádoucí vyvločkování a agregace po rekonstituci, nemohl být při znalosti stavu techniky očekáván. V literatuře (viz J. H. Crowe a kol., Effects of Free Fatty Acids and Transition Temperature on the Stability of Dry Liposomes, Biochemica et Biophysica Acta, 979, /1989/ str. 7 - 10) je popisováno, že obvyklé mastné kyseliny působí membránově destabilizačně a fusogenně, to značí, že podporují shlukování liposomů. Pomocí mikroskopického zkoumání, chromatografíe a laserové korelační spektroskopie může být ukázáno, že přídavek mastných kyselin se středním řetězcem v rozmezí koncentrací podle předloženého vynálezu neovlivňuje signifikantně velikost částic liposomů, potlačuje vyvločkování a agregaci liposomů a nezpůsobuje žádnou destabilizaci. Současně mohlo být ukázáno, že se dihydropyridinové účinné látky vyskytují zcela (100%) inkorporované do liposomů.

Koncentrace mastných kyselin podle předloženého vynálezu činí 0,3 až 10 mg pro jeden ml disperze liposomů určené pro aplikaci. Vztaženo na množství použitého fosfolipidu, používá se jeden hmotnostní díl mastné kyseliny s krátkým řetězcem, popřípadě její soli, se 2 až 60, výhodně 4 až 50 hmotnostními díly fosfolipidu.

Výhodný je přídavek dalších pomocných látek, obzvláště disacharidů, jako je trehalóza, sacharóza a laktóza, jako kryoprotektorů. Obzvláště sacharóza vykazuje optimální kryoprotektivní účinek. Poměr kryoprotektor : fosfolipid je v rozmezí 0,8 až 4 : 1, výhodně 1,2 až 2,5 : 1.

Poměr účinná látka : fosfolipid činí 1 : 20 až 200 nm, výhodně 1 : 30 až 80, obzvláště 1 : 30 až 50.

Pro dosažení isotonického tlaku je možno do rekonstitučního média přidat také jednu nebo několik vhodných osmotických aktivních činidel. Jako vhodný se ukázal glycerol, mannit a glukóza, obzvláště však glycerol.

Podle potřeby mohou liposomy podle předloženého vynálezu obsahovat další pomocné látky, jako jsou například stabilizátory, jako jsou například antioxidanty typu butylhydroxyanisolu, butylhydroxytoluenu a α-tokoferolu a jejich solí a typu kyseliny askorbové a jejich soli a esterů, výhodně kyselina askorbová a její soli, popřípadě činidla regulující pH, jako jsou pufry, kyseliny nebo báze, obzvláště kyselina askorbová a hydroxid sodný.

Podle předloženého vynálezu se dají použití obvyklé fosfolipidy. Výhodně se používají fosfolipidy, které zvnějšku představují nenabité fosfoglyceridy, které jsou popřípadě intramolekulámí amfotemí ionty a které odpovídají obecnému vzorci III

-3CZ 287975 B6

R²-O-CH₂ ₃ I r³-o-ch

I (III)

H₂C-O-POr-CH₂-CH₂-N⁺(CH₃)₃ ve kterém

R² a R³ jsou stejné nebo různé a značí nasycenou nebo nenasycenou acylovou skupinu s 8 až 24 uhlíkovými atomy, které může být popřípadě rozvětvená nebo substituovaná.

Vedle fosfolipidů obecného vzorce III mohou být obsaženy také v malých množstvích fosfolipidy jiného druhu, jako jsou fosfatidylethanolaminy, fosfatidylinositoly, sfingomyeliny, fosfatidylgly15 ceroly a/nebo fosfatidové kyseliny. Používané fosfolipidy se mohou vyrobit vyčištěním z přírodních zdrojů, jako je sójový surový lecitin nebo vaječný surový lecitin, nebo synteticky. Výhodně se používají čištěné vaječné lecitiny.

Liposomy podle předloženého vynálezu se mohou získat pomocí obvyklých postupů, například 20 vysokotlakou homogenizací, pórovou extrusí, dialyzačními a zřeďovacími postupy a ultrazvukovou dispergací, výhodně vysokotlakou homogenizací, jako je například mikrofluidisace.

Předmětem předloženého vynálezu je také způsob výroby liposomů, jehož podstata spočívá v tom, že se jeden hmotnostní díl lipofilní účinné látky a 20 až 200 hmotnostních dílů fosfolipidu, 25 popřípadě společně s antioxidantem, při teplotě v rozmezí 10 až 90 °C, výhodně 50 až 80 °C předdisperguje pomocí míchadla, popřípadě za probublávání dusíkem, potom se ve vysokotlakém tryskovém homogenizátoru homogenizují při teplotě v rozmezí 20 až 80 °C a za tlaku v rozmezí 40 až 150 MPa na střední velikost částic 35 až 20 nm a potom v homogenizátu rozpustí kryoprotektor a mastná kyselina s krátkým řetězcem obecného vzorce II nebo její sůl v poměru mastná 30 kyselina: fosfolipid 1 : 2 až 60 a takto získaná diasperze se mrazově vysuší.

Při jedné variantě tohoto způsobu se mohou účinná látka a/nebo kryoprotektor také přidávat již během předdispergování nebo vysokotlaké tryskové homogenizace. Stejně tak se dají mastné kyseliny s krátkým řetězcem přidávat také do rekonstitučního média tak, že přijdou do přímého 35 kontaktu s liposomy teprve během rekonstitučního procesu. V obou případech se zamezí vyvločkování rekonstituovaných liposomů po dobu více než 24 hodin a současně zůstane střední průměr částic liposomů zachován a zůstane zaručena chemická stabilita účinné látky.

Při překročení koncentrace mastných kyselin lOmg/ml nastupuje destabilizace liposomů 40 a dochází k vystupování účinné látky z liposomů, jak je patrno ze srovnávacího příkladu B. Bez přídavku mastných kyselin s krátkým řetězcem podle předloženého vynálezu vyvločkuje disperze během 24 hodin, jak je patrno ze srovnávacího příkladu C.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady provedení ukazují pro typické účinné látky exemplaricky výhody způsobu podle předloženého vynálezu a stabilitu takto získaných liposomů. Srovnávací příklady A až C ukazují naproti tomu nestabilitu a nevýhody produktů, které byly vyrobeny dosud známými 50 způsoby, popřípadě které jsou mimo vynález stanovených požadavků. Všechny procentické údaje se týkají % hmotnostních.

-4CZ 287975 B6

Příklad 1

5,5997 kg destilované vody se probublává po dobu 30 minut dusíkem. Po skončení se ve vodě rozpustí 16,2 g askorbátu sodného a potom se přidá 580,5 g čištěného vaječného lecitinu (fosfatidylcholin > 94 %). Tato směs se disperguje po dobu 30 minut pomocí rychloběžného míchadla při teplotě 65 °C. Po doplnění odpařené vody se předdisperze filtruje přes membránový filtr (velikost pórů 8 pm) a převede se do vysokotlakého homogenizátoru.

Disperze se homogenizuje pěti průchody při tlaku 80 MPa a teplotě 65 °C. Potom se přidá 145 g účinné látky isopropylesteru kyseliny 2-amino-l,4-dihydro-5-kyano-6-methyl-4-(3-fenylchinolin-5-yl)pyridin-3-karboxylové a za sníženého tlaku 2,5 MPa se v disperzi rozměrně rozptýlí. Potom se směs 20 průchody při teplotě 65 °C a tlaku 80 MPa homogenizuje. Liposomy se potom ochladí na teplotu místnosti.

Dále se projeden gram homogenizátu přidá 168,2 mg sacharózy a 0,11 mg kyseliny askorbové a rozpustí se. Hodnota pH disperze se potom nastaví pomocí 0,1 N roztoku hydroxidu sodného na 6,5, sterilně se filtruje přes membránový filtr (velikost pórů 0,2 pm), naplní se do lahviček z hnědého skla o obsahu 2,5 ml a mrazově se vysuší.

Střední velikost liposomů před mrazovým sušením činí 48 nm. Po rekonstituci s 10 ml vodného roztoku s 0,0495 % kaprylátu sodného a 1,51 % glycerolu činí střední velikost liposomů 57 nm. Po čtyřiadvacetihodinovém stání rekonstituovaného roztoku činí střední velikost liposomů 57 nm. Během těchto 24 hodin nedochází v rekonstituované disperzi k žádnému vyvločkování a/nebo tvorbě sraženiny.

Zkoušky pomocí gelové chromatografie ukazují, že se uvedená účinná látka vyskytuje ze 100 % inkorporovaná v liposomech.

Příklad 2

638,33 g destilované vody se probublává po dobu 10 minut dusíkem. Po skončení se ve vodě rozpustí 1,8561 g askorbátu sodného a potom se přidá 66 g čištěného vaječného licitinu (obsah fosfatidylcholinu > 94 %). Tato směs se disperguje po dobu 30 minut pomocí rychloběžného míchadla při teplotě 60 °C, načež se doplní dusíkem probublanou vodou na 706,2 g a přidá se 1,65 g účinné látky z příkladu 1. Aby se účinná látka rovnoměrně rozptýlila, disperguje se ještě jednou po dobu 3 minut.

Disperze se převede do vysokotlakého homogenizátoru a homogenizuje se 25 pasážemi při teplotě 60 °C a tlaku 80 MPa.

Potom se v disperzi liposomů rozpustí 637,19 g sacharózy a hodnota pH disperze se pomocí 0,1 N roztoku hydroxidu sodného nastaví na 6,5.

Po sterilní filtraci přes membránový filtr (velikost pórů 0,2 pm) se hotová disperze naplní po 2,64 g do lahviček z hnědého skla a mrazově se vysuší.

Po tříměsíčním skladování lyofilizovaných liposomů při teplotě 40 °C činí obsah účinné látky 98,5 % a během 24 hodin po rekonstituci s 10 ml vodného roztoku s 0,0495 % kaprylátu sodného a 1,51 % glycerolu nedochází k žádnému vyvločkování a/nebo tvorbě sraženiny.

-5CZ 287975 B6

Příklad 3

12,53 g kyseliny askorbové a 2,85 g hydroxidu sodného se za míchání rozpustí ve 4868,18 g vody, přidá se 504,8 g čištěného vaječného lecitinu (obsah fosfatidylcholinu > 94 %) a tato směs se disperguje v rychloběžném mixéru. Disperze se přefiltruje přes membránový filtr (velikost pórů 8 pm), a potom se homogenizuje ve vysokotlakém homogenizátoru při tlaku 80 MPa při 25 průchodech. V disperzi liposomů se dále rozpustí 980,70 g sacharózy a hodnota pH se nastaví na 6,5 při rozpuštění 0,6 g kyseliny askorbové a odpovídající titrací pomocí 0,1 N roztoku hydroxidu sodného. Pro ochranu před oxidací se celý postup provádí pod dusíkem.

Potom se přidá 12,6 g (4R)-isopropyl-2-methoxyethyl—4-(2-chlor-3-kyano-fenyl)-l,4dihydro-2,6-dimethylpyridin-3,5-dikarboxylátu a disperze se míchá po dobu 12 hodin, dokud není veškeré množství účinné látky rozpuštěné. Disperze se po nové filtraci naplní v množství

11,88 ml do lahviček o objemu 50 ml a mrazově se vysuší. Lyofilizovaný produkt se rekonstituje pomocí roztoku 0,725 g glycerolu a 0,02375 g kaprylátu sodného ve 47,184 g destilované vody.

Příklad 4

4,6583 g destilované vody se probublává po dobu 10 minut dusíkem, a potom se v ní rozpustí

5,7 g kyseliny askorbové a 852,8 g glukózy. Hodnota pH roztoku se nastaví na 6,5 přídavkem 66 g 0,5 molámího roztoku angininu, načež se přidá 9,502 g účinné látky nimodipínu a 437,8 g čištěného vaječného lecitinu (obsah fosfatidylcholinu > 80 %). Tato směs se při teplotě 75 °C disperguje po dobu 60 minut pod dusíkovou atmosférou pomocí rychloběžného míchadla. Potom se disperze přefiltruje (velikost pórů 5 pm), homogenizuje se ve vysokotlakém homogenizátoru při teplotě 75 °C a za tlaku 80 MPa, načež se ochladí na teplotu pod 30 °C. Disperze se potom sterilně přefiltruje přes membránový filtr (velikost pórů 0,2 pm), naplní se po 15,30 ml do hnědých skleněných lahviček a mrazově se vysuší.

Liposomy se rekonstitují pomocí roztoku 0,0495 % kaprylátu sodného a 1,513 % glycerolu ve vodě. Po dobu alespoň 24 hodin po rekonstituci nevykazuje disperze ani sraženinu, ani vyvločkování.

Příklad 5

171,6 g destilované vody se probublává po dobu 20 minut dusíkem, a potom se v ní rozpustí

5,7 g askorbátu sodného a argininu, načež se přidá 20 g účinné látky etomidatu ((R)-ethyl-(amethylbenzyl)-5-imidazolkarboxylát) a 10 g čištěného vaječného lecitinu (obsah fosfatidylcholinu > 94 %). Tato směs se při teplotě 60 °C disperguje po dobu 20 minut pod dusíkovou atmosférou pomocí rychloběžného míchadla. Po doplnění odpařené vody se predisperze homogenizuje 25 pasážemi ve vysokotlakém homogenizátoru při teplotě 60 °C a za tlaku 80 MPa. Potom se přidá a rozpustí 98,9 mg sacharózy a 1,8 mg kaprylátu sodného pro jeden gram homogenizátu a hodnota pH disperze se nastaví na 6,5 za použití 1 N roztoku hydroxidu sodného. Po sterilní filtraci (membránový filtr, velikost pórů 0,2 pm) se disperze rozplní po 20,0 g do hnědých skleněných lahviček a mrazově se vysuší.

Střední velikost liposomů před mrazovým sušením činí 56 nm. Po rekonstituci pomocí 17,16 g 5% roztoku glukózy je střední velikost liposomů 61 nm. Po dobu alespoň 4 hodin po rekonstituci se nezjistí ani vyvločkování, ani tvorba sraženiny.

-6ι

Příklad 6

1,4 g askorbátu sodného se rozpustí ve 425 g destilované vody zbavené kyslíku, přidá se 50 g čištěného vaječného lecitinu (obsah fosfatidylcholinu > 80 %)m a 1,5 g paclitaxelu (taxol), a potom se směs disperguje pomocí rychloběžného míchadla při teplotě 65 °C po dobu 30 minut. Získaná disperze se homogenizuje ve vysokotlakém homogenizátoru za tlaku 72,5 MPa a při teplotě 60 °C při 25 pasážích.

Ke 382,32 g této homogenizované disperze se přidá 72 g sacharózy a 80 mg kyseliny askorbové, hodnoty pH se nastaví pomocí 0,1 N roztoku hydroxidu sodného na 6,5 a disperze se doplní vodou do 480 g. Potom se disperze přefiltruje, po částech 12,32 g (odpovídá 30 mg paclitaxelu + 2,67 % přeplnění) se rozplní do 50 ml lahviček a mrazově se vysuší. Lyofilizovaný produkt se rekonstituje za pomoci 29,7 g roztoku, obsahujícího 0,725 g glycerolu a 0,02375 g kaprylátu sodného ve 47,187 g destilované vody. 30 ml této rekonstituované disperze obsahuje 30 mg paclitaxelu.

Srovnávací příklady

Příklad A (podle EP-A-560 138)

Ve 253 g destilované vody, která byla předem probublávána po dobu 10 minut dusíkem, se rozpustí 49,1 g glukózy a 0,345 g kyseliny askorbové, načež se hodnota pH nastaví pomocí 3,9 g 0,5 M roztoku angininu na 6,5. K tomuto roztoku se přidá 27,25 g čištěného vaječného lecitinu (obsah fosfatidylcholinu > 80 %), 0,345 g účinné látky podle příkladu 1 a dusíkem probublanou destilovanou vodou se doplní na celkovou hmotnost 345 g. Tato směs se disperguje po dobu 30 minut pomocí rychloběžného míchadla při teplotě 75 °C. Po filtraci (membránový filtr o velikosti pórů 5 pm) se disperze převede do vysokotlakého homogenizátoru a homogenizuje se 25 pasáží za tlaku 80 MPa a při teplotě 75 °C.

Hotová disperze liposomů se sterilně přefiltruje (membránový filtr o velikosti pórů 0,2 pm), po 2,1 ml se rozplní do hnědých skleněných lahviček a mrazově se vysuší.

Po dvoutýdenním skladování lyofilizovaných liposomů při teplotě 40 °C klesne obsah účinné látky na 89,7 %.

Střední průměr částeček liposomů po vysokotlaké homogenizaci činí 45 nm. Po rekonstituci lyofilizovaných liposomů pomocí 9,5 ml destilované vody činí střední průměr liposomů 47 nm. Během 24 hodin po rekonstituci vyvločkuje disperze liposomů a vytvoří se sraženina.

Příklad B

Liposomy, vyrobené podle příkladu 1, se rekonstitují pomocí 10 ml vodného roztoku s 5% kaprylátu sodného a 1,51 % glycerolu. Liposomy se prakticky destabilizují. Pouze 5,3 % účinné látky se vyskytuje ve formě zabudované v liposomech.

Příklad C

Liposomy, vyrobené podle příkladu 1, se rekonstitují pomocí 10 ml vodného roztoku s 1,51 % glycerolu. Disperze vyvločkuje během 24 hodin a vytvoří se sraženina.

Claims

1. Parenterálně aplikovatelné stabilní léčivé přípravky pro lipofilní, těžko rozpustné účinné látky ve formě liposomů s fosfolipidovými membránami, přičemž hmotnostní poměr účinné látky kfosfolipidu činí 1 ku 20 až 200 a střední průměr liposomů je v rozmezí 35 až 200 nm, vyznačující se tím, že jako stabilizátory obsahují mastné kyseliny s krátkým řetězcem nebo jejich soli obecného vzorce II

H₃C - (CH₂)_n - COOA (II), ve kterém n značí číslo 4 až 8, a

A značí vodíkový atom nebo jednomocný nebo dvojmocný kationt, a koncentrace mastné kyseliny s krátkým řetězcem v roztoku pro aplikaci činí 0,3 až 10,0 mg/ml.

2. Léčivé přípravky podle nároku 1, vyznačující se tím, že hmotnostní poměr mastných kyselin s krátkým řetězcem, popřípadě jejich solí ku fosfolipidu činí 1:2 až 60.

3. Léčivé přípravky podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahují dihydropyridin.

4. Léčivé přípravky podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahují nimodipin nebo dihydropyridin obecného vzorce I (I) ve kterém

R značí alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy a

R¹ značí vodíkový atom, atom halogenu, kyanoskupinu, difluormethylovou skupinu nebo alkylovou nebo alkoxylovou skupinu se vždy 1 až 4 uhlíkovými atomy.

5. Léčivé přípravky podle nároku 4, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahují dihydropyridin obecného vzorce I, ve kterém značí

R alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy a

R¹ značí vodíkový atom, atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu nebo difluormethylovou skupinu.

-8CZ 287975 B6

6. Použití mastných kyselin s krátkým řetězcem obecného vzorce II

H₃C - (CH₂)_n - COOA (II), ve kterém n značí číslo 4 až 8, a

A značí vodíkový atom nebo jednomocný nebo dvojmocný kationt, při výrobě parenterálně aplikovatelných stabilních léčivých přípravků pro lipofilní, těžko rozpustné účinné látky ve formě liposomů s fosfolipidovými membránami.

7. Léčivé přípravky podle nároku 1,vyznačující se tím, že dále jako kryoprotektory obsahují disacharidy.

8. Léčivé přípravky podle nároku 7, vyznačující se tím, že dále jako kryoprotektory obsahují 0,8 až 4,0 hmotnostních dílů sacharózy, vztaženo najeden hmotnostní díl fosfolipidu.