CZ2001240A3

CZ2001240A3 - Ftalazinové deriváty

Info

Publication number: CZ2001240A3
Application number: CZ2001240A
Authority: CZ
Inventors: Mauro Napoletano; Gabriele Norcini; Giancarlo Grancini; Franco Pellacini; Gabriele Morazzoni
Original assignee: Zambon Group S. P. A.
Priority date: 1998-07-21
Filing date: 1999-07-16
Publication date: 2001-09-12
Also published as: US6498160B2; AU766076B2; US6340684B1; EP1098886A1; AU4911699A; WO2000005219A1; NZ507930A; IL139491A0; ITMI981671A0; ZA200006577B; EA003702B1; JP2002521371A; US20020058662A1; EA200100061A1; HUP0103349A3; HUP0103349A2; CA2337954A1; ITMI981671A1

Description

Oblast techniky

Vynález se týká ftalazinových derivátů, farmaceutického prostředku s jejich obsahem a jejich použití jako inhibitorů fosfodiesterázy 4.

Dosavadní stav techniky

Fosfodiesterázy představují skupinu isoenzymů, které tvoří základ pro hydrolytickou inaktivaci cyklického adenosin-3',5'-monofosfátu, cAMP. Tato látka zprostředkovává biologickou odpověď na působení celé řady hormonů, nervových přenašečů a léčiv podle publikace Krebs Endocrinology Proceedings of the 4th International Congress Excerpta Medica, 17-29, 1973. V případě, že se vhodný agonista váže na povrch buněk, dochází k aktivaci adenylované cyklázy, která převede Mg²⁺-ATP na cAMP. Pak cAMP moduluje účinnost většiny nebo všech buněk, které přispívají k pathofyziologii různých respiračnich chorob alergického i jiného původu. Zvýšení koncentrace cAMP má příznivý vliv například na relaxaci hladkých svalů v dýchacích cestách, na inhibici uvolnění různých mediátorů (bazofilnich granulovaných buněk), na potlačeni neutrofilni a bazofilni degranulace, na inhibici aktivace monocytů a makrofágů. To znamená, že sloučeniny, schopné aktivovat adenylátcyklázu nebo vyvolat inhibici fosfodiesteráz, by mohly potlačit nežádoucí aktivaci hladkých svalů dýchacích cest a také aktivaci celé řady tak zvaných zánětlivých buněk.

Ve skupině diesteráz je možno odlišit určitou skupinu isoenzymů, označovanou jako fosfodiesterázy 4 (dále PDE 4), tyto látky jsou specifické pro hydrolýzu cAMP v hladkých svalech dýchacích cest a v zánětlivých buňkách podle publikace Torphy, Phosphodiesterase Isoenzymes: Potential Targets for Novel Anti-asthmatic Agents, New Drugs for Asthma, Barnes, ed. IBC Technical Services Ltd, 1989). Studie s těmito enzymy prokázaly, že jejich inhibice vede nejen k uvolnění hladkých svalů dýchacích cest, nýbrž také k potlačení degranulace mastocytů a bazofilních a neutrofilních buněk a také k inhibici aktivace monocytů a neutrofilů. To znamená, že inhibitory PDE 4 jsou účinné při léčení asthmatu. To znamená, že tyto látky poskytují specifický přístup k léčení různých onemocnění dýchacích cest, alergických i jiného původu, mimo to tyto látky poskytují významné výhody ve srovnání s běžně užívanými látkami.

Příliš vysoká nebo nepravidelná produkce faktoru nekrózy nádorů (dále TNFalfa), cytokinů s účinností, podporující zánět a produkovaných různými typy buněk, může ovlivnit zhoršení nebo opětný výskyt různých patologických stavů, například syndromu nedostatečnosti dýchacího ústrojí u dospělých, ARDS a chronických zánětlivých plicních chorob. Z tohoto důvodu je možno použít sloučeniny, schopné potlačit negativní účinky TNFalfa, to znamená inhibitory tohoto cytokinů, k léčení různých patologických stavů. Podle EP-0017411. (Pfizer) se popisují ftalazinové deriváty obecného vzorce • ·

kde

Ri znamená nižší alkyl a Y znamená -(CH₂)_m-Z, kde m znamená 1 nebo 2 a Z znamená karbamoyloxyskupinu, karbonylaminoskupinu, sulfamovl, ureidoskupinu, aminosulfamoyl nebo karboxyaminoskupinu, substituovanou v koncové poloze C3-C7cykloalkylovou skupinou. Uvádí se, že tyto látky jsou inhibitory fosfodiesteráz se stimulujícím účinkem na srdeční sval, takže účinnost těchto látek se nevztahuje na PDE 4.

V EP-0722936 (Eisai) se popisují mimo jiné sloučeniny obecného vzorce

kde n znamená 0 až 4, R_x znamená případně substituovanou nižší alkoxyskupinu, případně substituovaný cykloalkyl nebo skupinu -ORg, kde R₉ znamená případně substituovaný arylalkyl, X znamená -N= nebo -NRg-, kde R6 znamená atom vodíku, nižší alkyl nebo případně substituovaný arylalkyl • ·

nebo heteroarylalkyl, X znamená -CO nebo -CB=, kde B znamená -NR₇Rg, kde jeden ze symbolů R₇ a Rg znamená atom vodíku a druhý znamená případně substituovaný heteroarylalkyl, nebo B znamená atom vodíku nebo případně substituovaný aryl, heteroaryl, arylalkyl nebo heteroarylalkyl, Ά znamená atom vodíku nebo halogenu nebo případně monosubstituovanou nebo disubstituovanou aminoskupinu nebo případně substituovaný aryl, heteroaryl nebo heteroarylalkyl. Ze skupin, případně substituujících svrchu uvedené zbytky, se uvádějí atomy halogenu. Rovněž se uvádí, že tyto sloučeniny jsou účinné jako inhibitory cGMP-PDE, to znamená PDE 5, což je fosfodiesteráza, působící přes mechanismus, závislý na cGMP, zvláště v oblasti srdce a cév podle publikace Schudt C. a další, Phosphodiesterase Inhibitors, Academie Press.

V US 3 274 185 (Messengill) se popisují mimo jiné ftalazinové deriváty obecného vzorce

kde Y a Yi znamenají nižší alkoxyskupiny, Z znamená fenyl, popřípadě substituovaný halogenem nebo benzylovou skupinou a R znamená atom vodíku. Tyto ftalazinové deriváty mají sedativní a hypotenzivní účinky, přičemž mechanismus těchto účinků není uveden.

·· ·· ·· • · ·· ··· ·· • · · ·· • · ·· • · · · ·

Podle US 3 813 384 (Asta-Werke) se uvádějí mimo benzylftalazinonové deriváty . obecného vzorce

kde Ri a R₂ znamenají nižší alkoxyskupinu nebo atom halogenu, X znamená případně rozvětvený alkylenový řetězec, n a m znamenají celé číslo 1 až 3, p znamená 0 nebo 1 a skupina

znamená mono-, dinebo tricyklický zbytek o 3 až 8 atomech uhlíku, obsahující 1 nebo 2 atomy dusíku. Uvedené látky mají histaminolytické působení a je možno je použít například při léčení asthmatu.

V NL 8005411 (Mitsubishi Yuka) se popisují ftalazinové deriváty obecného vzorce

kde X znamená atom kyslíku nebo NH, R_lz R₂ a R₃ znamenají mimo jiné Cl-C5alkyl, Cl-C5alkoxyskupinu, atom' halogenu nebo CF3, n, m a p znamenají celá čísla 0 až 3. Uvedené látky je možno použít jako inhibitory shlukování.

V patentové přihlášce JP-56061365 (Showa Danko) se popisují ftalazinony obecného vzorce

kde R mimo jiné znamená atom halogenu a n znamená 1 až 3, uvádí se, že tyto látky mají vasodilatační a protivředový účinek.

Podstata vynálezu

Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že existuje nová skupina ftalazinových derivátů se schopností vyvolat inhibici PDE 4 a TNFalfa.

Podstatu vynálezu tvoří ftalazinové deriváty obecného vzorce I

kde _______ znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu,

B znamená NH, methylenovou skupinu nebo C2-C6alkylenový řetězec, popřípadě rozvětvený a/nebo nenasycený a/nebo přerušený C5-C7cykloalkylovým zbytkem,

A znamená fenyl nebo heterocyklický zbytek, popřípadě substituovaný jedním nebo větším počtem substituentů nebo skupinou COR₄, kde R₄ znamená hydroxyskupinu, Cl-C4alkyl, aminoskupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou Cl-C6alkylovou skupinou nebo monohydroxylovanou,

R znamená 2 atomy vodíku nebo skupinu C=0v případě, že _____ znamená jednoduchou vazbu nebo v případě, že ----- znamená dvojnou vazbu, znamená R atom vodíku, případně substituovaný aryl nebo heterocyklický zbytek, Cl-C8alkyl, C2-C8alkenyl nebo C2-C8alkinyl, popřípadě substituovaný arylovou nebo heterocyklickou skupinou, aryloxyskupinu, heterocyklyloxyskupinu, arylCl-C4alkoxyskupinu, heterocykly1C1-C4alkoxyskupinu, aminoskupinu, substituovanou 1 nebo 2 Cl-C4alkylovými skupinami, arylaminoskupinami, heterocyklylaminoskupinami, arylCl-C4alkylaminoskupinami nebo heterocyklylCl-C4alkylaminoskupinami,

Ri znamená Cl-C6alkyl, aryl, arylCl-ClOalkyl, C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem,

R₂ znamená Cl-C6alkyl nebo polyfluorCl-C6alkyl,

R₃ chybí v případě, že ------ znamená dvojnou vazbu nebo v případě, že _____ znamená jednoduchou vazbu, znamená R₃ atom vodíku, Cl-6alkyl, popřípadě substituovaný arylovou skupinou, heterocyklickou skupinou nebo skupinou COR5, kde R₅ znamená hydroxyskupinu, ·· · ·· ·· ·· · ···· ·♦♦ ···· ·· · ····· · · · • · ········· · ··· ······· ·· ··· ·· ·· ·· ···

Cl-C4alkoxyskupinu nebo hydroxyaminoskupinu, -COR_e, kde

R6 znamená atom vodíku, aryl, arylCl-C6alkyl, aminoskupinu, popřípadě alkylovanou nebo monohydroxylovanou, hydroxyskupinu, Cl-C4alkoxyskupinu, karboxyskupinu, Cl-C4alkoxykarbonyl, HN=C-NH₂ nebo Cl-C4alkyl, popřípadě substituovaný heterocyklickým zbytkem,

d) Cl-C4alkylsulfonyl, jakož i N—>0 deriváty těchto látek a jejich farmaceuticky přijatelné soli, za předpokladu, že v případě, že ______ znamená dvojnou vazbu, A znamená fenyl nebo heterocyklický zbytek s obsahem dusíku a Ri znamená aryl, arylCl-ClOalkyl, C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem, má R odlišný význam od atomu vodíku, fenylového zbytku nebo Cl-C4alkylové skupiny, popřípadě substituované arylovým zbytkem.

Svrchu uvedeným předpokladem jsou sloučeniny obecného vzorce I vymezeny proti předmětu italské patentové přihlášky č. MI97A002806, podané stejným přihlašovatelem.

Výhodnými deriváty obecného vzorce I jsou ty látky, v nichž _____ znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu,

B znamená methylenovou skupinu nebo C2-C6alkylenový řetězec, A znamená fenyl nebo heterocyklický zbytek, popřípadě substituovaný jedním nebo dvěma substituenty, R znamená 2 atomy vodíku nebo skupinu =0 v případě, že _____ znamená jednoduchou vazbu nebo v případě, že uvedený symbol znamená dvojnou vazbu, znamená R atom vodíku, případně substituovaný aryl nebo heterocyklický zbytek, Cl-C8alkyl, C2-C8alkenyl nebo C2-C8alkinyl,

• 4 · • 4 * · • 44« • 4 •44 a »

4 4» «4

4 ·« 4 popřípadě substituovaný arylovou nebo heterocyklickou skupinou, aryloxyskupinu, heterocyklyloxyskupinu, arylCl-C4alkoxyskupinu, heterocyklylCl-C4alkoxyskupinu, aminoskupinu, substituovanou 1 nebo 2 Cl-C4alkylovými skupinami, arylaminoskupinami, heterocyklylaminoskupinami, arylCl-C4alkylaminoskupinami, heterocyklylCl-C4alkylaminoskupinami, R_x znamená Cl-C6alkyl, aryl, arylCl-ClOalkyl nebo C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem, R₂ znamená Cl-C6alkyl, polyfluorCl-C6alkyl, R3 chybí v případě, že _____ znamená dvojnou vazbu nebo v případě, že uvedený symbol znamená jednoduchou vazbu, R₃ znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl, popřípadě substituovaný arylovým zbytkem, heterocyklickým zbytkem nebo skupinou COR₅, kde R₅znamená hydroxyskupinu, Cl-C4alkoxyskupinu nebo hydroxyaminoskupinu, -COR₆, kde R₆ znamená atom vodíku, aryl, arylCl-C6alkyl, popřípadě alkylovanou nebo monohydroxylovanou aminoskupinu, hydroxyskupinu, Cl-C4alkoxyskupinu, karboxylovou skupinu, Cl-C4alkoxykarbonyl nebo Cl-C4alkyl, popřípadě substituovaný heterocyklickou skupinou nebo Cl-C4alkylsulfonyl, jakož i N—>0 deriváty těchto látek a jejich farmaceuticky přijatelné soli, za předpokladu, že v případě, že ----- znamená dvojnou vazbu, A znamená fenyl nebo heterocyklický zbytek s obsahem dusíku a R_x znamená aryl, arylCl-ClOalkyl, C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem, má R odlišný význam od atomu vodíku, fenylového zbytku nebo Cl-C4alkylové skupiny, popřípadě substituované arylovým zbytkem.

4 ·	4	»·	4 4	44
•	9	44	4	4	4	•	4	4 4
• ·	4	4	•	444	4	4
•	•	4	4	4	4 4	4	4
44	444	4 4	4 4	44	44

Ještě výhodnějšími sloučeninami obecného vzorce I jsou ty látky, v nichž ------ znamená dvojnou vazbu, B znamená methylenovou skupinu, A znamená pyridinovou skupinu, substituovanou jedním nebo větším počtem substituentů, R znamená případně substituovaný aryl nebo heterocyklický zbytek, Cl-C8alkyl, C2-C8alkenyl nebo C2C8alkinyl, případně substituovaný arylovou nebo heterocyklickou skupinou, aryloxyskupinou, heterocyklyloxyskupinou, arylCl-C4alkoxyskupinou, heterocyklylCl-C4alkoxyskupinou, aminoskupinou, substituovanou 1 nebo 2 Cl-G4alkylovými skupinami, arylaminoskupinami, heterocyklylaminoskupinami, arylCl-C4alkylaminoskupinami nebo heterocyklylClC4alkylaminoskupinami, Ri znamená Cl-C6alkyl nebo C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem, R₂ znamená Cl-C6alkyl, polyfluorCl-C6alkyl, R₃ chybí, jakož i N—>0 deriváty uvedených látek a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Deriváty obecného vzorce I mohou mít jeden nebo větší počet středů asymetrie a mohou tedy tvořit stereoisomery. Vynález proto zahrnuje deriváty obecného vzorce I ve formě směsí stereoizomerů i ve formě *

jednotlivých stereoisomerů.

Deriváty obecného vzorce I jsou účinnými inhibitory PDE 4 a TNFalfa a je možno je užít k léčení alergických a zánětlivých chorobných stavů, jako jsou.rozedma plic, chronický zánět průdušek, asthma a alergická rýma.

·· · ·» ·· ·· · ···· · · » ···· ·· · · · · · · · · · ··· ······. ·· ··· ·· ·· ·» ···

Z heterocyklických zbytků je zvláště možno použit zbytek pyrrolu, imidazolu, pyrazolu, pyridinu, pyrazinu, pyrimidinu, pyridazinu, piperazinu, triazinu, morfolinu, pyrrolidinu, pyrrolinu, imidazolinu, pyrazolinu, pyrazolidinu, imidazolidinu, piperidinu, furanu, pyranu, isothiazolu, isoxazolu, thiofenu a podobně. Substituenty, případně přítomnými na skupině A, mohou být atomy halogenu, to znamená fluoru, chloru, bromu nebo jodu nebo může jít o oxoskupiny, nitroskupiny, karboxylové skupiny, trifluormethylové skupiny nebo aminoskupiny,.

Specifickými příklady alkylových skupin mohou být methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek.butyl, terc.butyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl,

2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 3-methyl-2-butyl, n-hexyl a podobně. Z C5-C7cykloalkylových skupin je možno uvést cyklopentyl, cyklohexyl a cykloheptyl a v případě, že jde o zbytky, substituované atomem kyslíku, může jít o tetrahydrofuran nebo tetrahydropyran. Z arylových a arylCl-ClOalkylových zbytků je možno uvést zbytky, obsahující aromatický kruh nebo systém o 6 až 10 atomech uhlíku, například fenyl, benzyl, fenethyl, fenypentyl, naftyl, indanyl, indanylpentyl a podobně.

Oxidovaná forma N—>0 v případě své přítomnosti může zahrnovat atomy dusíku ftalazinového kruhu a atomy dusíku, přítomné ve skupině A v případě, že jde o heterocyklický substituent.

Farmaceuticky přijatelné soli derivátů obecného vzorce I jsou soli s organickými a anorganickými kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou, • ·

bromovodíkovou, jodovodíkovou, dusičnou, sirovou, fosforečnou, octovou, benzoovou, maleinovou, fumarovou, vinnou, citrónovou, aspargovou, jantarovou, methansulfonovou, 3,7-di-terc.butylnaftalen-l, 5-disulfonovou, nebo s anorganickými bázemi, může jít například o soli s hydroxidem sodným nebo draselným nebo s hydrogenuhličitanem sodným.

Ftalazinové deriváty obecného vzorce I je možno připravit způsoby, které jsou odborníkům zásadně známé. Je například možno postupovat tak, že se sloučenina obecného vzorce II

(Π) kde Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam, převede například působením halogenačního činidla, jako thionylchloridu na odpovídající acylhalogenid obecného vzorce III

(III) kde Ri a R2 mají svrchu uvedený význam a X znamená atom chloru nebo bromu. Tato sloučenina se pak nechá reagovat s diethylaminem v alespoň ekvimolárním množství, čímž vznikne benzamid obecného vzorce IV

(IV) kde Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam, načež se působením dimethylformamidu v přítomnosti silné organické baze, jako je butyllithium, terč.butyllithium, nebo sek.butyllithium, popřípadě v přítomnosti ligandu, jako tetramethylethylendiaminu získá sloučenina obecného vzorce Va

(Va) kde Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam a R¹ znamená atom vodíku.

V případě, že je požadována sloučenina vzorce I, v němž R znamená atom vodíku, nechá se sloučenina Va reagovat s ekvimolárním množstvím terč.butylkarbazátu za vzniku sloučeniny obecného vzorce Via • ·

(Via) kde R¹, Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam a R' znamená ochrannou skupinu na karboxylové skupině, například' terč.butyl.

V případě, že je požadována sloučenina obecného vzorce I, v němž R má význam, odlišný od atomu vodíku a ----- znamená dvojnou vazbu, působí se na sloučeninu obecného vzorce IV R^II-magnesiumhalogenidem, například chloridem nebo R^II-lithiem, kde R¹¹ znamená aryl, arylalkyl, arylalkenyl, arylalkinyl, heterocyklický zbytek, heterocyklylalkyl, heterocyklylalkenyl, heterocyklylalkinyl, Cl-C8alkyl, C2-C8alkenyl nebo C2-C8alkinyl, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, popřípadě přerušeným heteroatomem ze skupiny kyslík a dusík a popřípadě substituovaným chráněnou hydroxyskupinou nebo oxoskupinou, čímž se získá sloučenina obecného vzorce VII

Et kde R¹¹, Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam. Na sloučeninu vzorce VII se působí vhodným oxidačním činidlem, jako pyridiniumchlorchromanem, čímž se získá sloučenina obecného vzorce Vb

(Vb) kde Ri, R₂ a R^I]:mají svrchu uvedený význam, na tuto sloučeninu se pak působí ekvimolárním množstvím terč.butylkarbazátu za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIb

(vib) kde Ri, R₂, R' a R¹¹ mají svrchu uvedený význam.

Sloučenina Via nebo Vib se nechá reagovat s kyselinou trifluoroctovou, čimž vzniká ftalazinon obecného vzorce VIII

(VIII) kde R, Ri a R2 mají svrchu uvedený význam. Tento ftalazinon se nechá reagovat s halogenačním činidlem, například fosforylchloridem za vzniku ftalazinu obecného vzorce IX

(IX) kde R, Ri a R2 mají svrchu uvedený význam a X' znamená atom halogenu.

Sloučeninu obecného vzorce VIII je také možno připravit přímo ze sloučeniny obecného vzorce Va nebo Vb působením hydrazinu v kyselině octové.

Ze sloučeniny obecného vzorce IX je možno připravit sloučeninu obecného vzorce I reakcí se sloučeninou obecného vzorce X

17	• · · · ·	·· ··	·· ·
A-B'-Y	(X)

kde A má svrchu uvedený význam, B' znamená methylenovou skupinu, ethylenovou skupinu nebo aminoskupinu a Y znamená atom kovu, například Li, Na, Mg nebo komplex přechodného kovu, čímž se získá ftalazinový derivát obecného vzorce I, v němž R má svrchu uvedený význam v případě, že-----znamená dvojnou vazbu.

Sloučeniny obecného vzorce I, v nichž B má význam, odlišný od aminoskupiny, je také možno připravit tak, že se vychází z kyseliny obecného vzorce II, která se nechá reagovat se směsí formaldehydu a kyseliny chlorovodíkové za vzniku sloučeniny obecného vzorce XI

(xi) kde Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam. Tato sloučenina se oxiduje, například působením směsi benzoylperoxidu a N-bromsukcinimidu a pak se hydrolyzuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce XII

Ri----O

ΑΛ/⁰⁰' (ΧΠ) r₂—o • · • ·

kde Ri a R₂ máji svrchu uvedený význam, načež se působením halogenovodikové kyseliny' a trifenylfosfinu získá sloučenina obecného vzorce XIII (XIII)

kd Ri a R₂ mají svrchu uvedený význam, na tuto látku se pak působí aldehydem obecného vzorce XIV

A-B''-CHO (XIV) kde A má svrchu uvedený význam a B' ' znamená methylenovou skupinu nebo C2-C5alkylenový řetězec, popřípadě rozvětvený a/nebo nenasycený a/nebo přerušený C5-C7cykloalkylovým zbytkem nebo chybí, v přítomnosti organické baze, například triethylaminu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XV

(XV) kde Ri, R₂, B' ' a A mají svrchu uvedený význam.

Tato látka se nechá reagovat s hydrazinem, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XVI

(XVI) kde Ri, R₂ a A máji svrchu uvedený význam a B má význam, odlišný od aminoskupiny, na tuto látku se působí halogenačním činidlem, například fosforylchloridem nebo -bromidem za vzniku sloučeniny obcného vzorce XVII x

B----A kde Ri, R₂, X a A máji svrchu uvedený význam a B má význam, odlišný od aminoskupiny.

Tato látka se podrobí vazné reakci v přítomnosti vhodného organokovového derivátu a katalyzátoru na bázi paladia nebo se nukleofilní substitucí získá sloučenina obecného vzorce I, v němž-----znamená dvojnou vazbu a B má význam, odlišný od aminoskupiny.

Ze sloučeniny obecného vzorce XVI se reakcí s vhodným alkylhalogenidem nebo sulfonátem v přítomnosti baze, například hydridu sodíku získá sloučenia obecného vzorce I, v němž R₃ má význam, odlišný od atomu vodíku a

R znamená =0.

Sloučeninu obecného vzorce XVII je také možno podrobit hydrogenaci, například působením paladia na aktivním uhlí v přítomnosti baze, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XVIII (XVIII) kde Ri, R₂ a A má svrchu uvedený význam a B má význam, odlišný od aminoskupiny, další hydrogenaci, například působením PtO2 se pak získá sloučenina obecného vzorce XIX (XIX) kde Ri, R₂, B a A mají svrchu uvedený význam, z této látky se pak působením vhodného acylačního nebo sulfonačního činidla získá sloučenina obecného vzorce I, v němž _______ znamená jednoduchou vazbu a R3 má význam, odlišný od atomu vodíku.

N-oxidy sloučenin obecného vzorce I je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce I působením perkyselin, například kyseliny m-chlorperbenzoové.

Soli sloučenin obecného vzorce I je možno připravit běžnými postupy.

Ftalazinové deriváty obecného vzorce I jsou inhibitory PDE 4, jak je možno prokázat zkouškou na inhibici enzymu in vitro (příklad 41), uvedené látky vyvolávají také inhibici uvolnění TNF alfa. Bylo provedeno srovnání s následujícími látkami: 6,7-dimethoxy-4-(pyridin-4-ylmethyl)-2H-ftalazin-l-onem (srovnávací látka 1) a 6,7-dimethoxy-4-(piperidin-4-ylmethyl)-2H-ftalazin-l-onem (srovnávací látka 2). Tyto látky jsou uvedeny v EP-0722936 (Eisai) a byly zvoleny pro strukturní podobnost se sloučeninami podle vynálezu. Uvedené srovnávací látky však byly přes svou chemickou podobnost zcela neúčinné jak inhibitory PDE 4.

Je zřejmé, že vzhledem ke své selektivnosti a specifičnosti svého účinku při současné neúčinnosti na srdeční a cévní systém jsou ftalazinové deriváty obecného vzorce I velmi vhodné pro léčení chorobných stavů, při jejichž vzniku se účastní PDE 4 a TNFalfa, jako je asthma, chronické obstruktivní plicní choroby, COPD, syndrom nedostatečnosti dýchacího ústrojí u dospělých, ARDS, alergický zánět.sliznice nosní a spojivek, lupenka, atopická dermatitis, reumatoidní arthritis, septický šok, ulcerativní colitis, největší využití uvedených látek bude však pravděpodobně možné u patologických stavů dýchacího ústrojí. Sloučeniny podle vynálezu jsou zvláště.

vhodné k léčení alergických a zánětlivých onemocnění a především při léčení COPD, asthmatu a alergické rýmy.

Léčebné dávky uvedených látek se budou obvykle pohybovat v rozmezí 0,1 až 1000 mg denně, při perorálním podání se bude dávka pohybovat v rozmezí 1 až 100 mg pro jednotlivou dávku.

Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutický prostředek, který obsahuje účinné množství sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí spolu s vhodným nosičem. Tyto prostředky mohou být kapalné, vhodné pro enterální nebo parenterální podání, s výhodou jsou pevné a jde o tablety, kapsle nebo granuláty, vhodné pro perorální podání nebo o formy, vhodné pro transdermální podání nebo pro podání inhalací.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu je možno připravit běžnými postupy.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

PŘÍKLAD 1

Syntéza kyseliny 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzoové

Roztok 111,68 g (0,336 mol) bromidu tetrabutylamonného ve 400 ml vody se za stálého míchání přidá do roztoku 53,1 g (0,336 mol) manganistanu draselného vil vody. Získaná pevná látka se oddělí filtrací, promyje se vodou a rozpustí se v 500 ml pyridinu. Za stálého míchání v lázni vody a ledu se tento roztok překape do roztoku 74 g (0,336 mol) surového

3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzaldehydu (jeho příprava je popsána v J. Med. Chem. , 1995, 38, str. 4851) v 200 ml pyridinu. Do vytvořené reakční směsi se přidají 3 1 ledu a směs se okyselí přidáním 850 ml 12 N roztoku kyseliny chlorovodíkové po kapkách. Reakční směs se míchá další 1,5 hodiny, pak se pevný podíl oddělí filtrací a 30 minut se za stálého míchání extrahuje 2 1 ethylacetátu. Vytvořená pevná látka se odstraní a matečné louhy se dále dvakrát extrahují 700 ml ethylacetátu. Organické podíly se promyjí vodou, suší se nad síranem sodným a zahustí se na malý objem za vzniku 53,2 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 67 %.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 7,75-6,87 (m, 3H) ; 4,87-4,79 (m, 1H); 3,90 (s, 3H); 2,08-1,52 (m, 8H) .

PŘÍKLAD 2

Syntéza 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzoylchloridu

Roztok 53 g (0,224 mol) kyseliny 3-cyklopentyloxy-4methoxybenzoové (získané podle postupu příkladu 1) v 200 ml thionylchloridu se 2 hodiny v atmosféře dusíku zahřívá pod zpětným chladičem. Po odpaření do sucha se reakční směs zpracuje dvakrát 100 ml toluenu. Získá se g výsledné sloučeniny, která se bez dalšího čištění použije v následujícím kroku syntézy.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 7,81-7,72 (dd, 1H) ; 7,52-7,50 (d, 1H); 6,91-6,85 (d, 1H) ; 4,87-4,75 (m, 1H) ; 3,91 (s, 3H) ; 2,08-1,50 (m, 8H) .

_ . ’·»·*··· · · · <7 Α ί ί ί · · ··· · ·

-^7 ! ί ········ · ' ········* ·· ··♦ ·· ·· «· ·

PŘÍKLAD 3

Syntéza 3-cyklopentyloxy-N,N-diethyl-4-methoxybenzamidu

Do roztoku 57 g (0,224 mol) 3-cyklopentyloxy-4methoxybenzoylchloridu (získaného podle postupu přikladu 2) v 250 ml methylenchloridu se při teplotě 5-10°C po kapkách přidá 69,2 g (0, 672 mol) diethylaminu. Reakční směs se odpaří do sucha, vytvořený zbytek se rozpustí v ethylacetátu, promyje se vodou, 2% roztokem hydrogensíranu draselného, znovu vodou a hydrogenuhličitanem sodným a suší se nad síranem sodným do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje 250 ml petroletheru za vzniku 61,2 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 94%.

^XH-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 6, 94-6,78 (m, 3H) ; 4,80-4,70 (m, 1H) ; 3,82 (s, 3H) ; 3,50-3,22 (m, 4H) ; 1, 98-1,50 (m, 8H) ; 1,17 (široké t, 6H).

PŘÍKLAD 4

Syntéza methoxybenzamidu

Do roztoku 61,2 methoxybenzamidu ml (0,231 mol) tetrahydrofuranu kapkách přidá 195,76 hodině se

3-cyklopentyloxy-N,N-diethyl-2-formyl-4g (0,21 mol) 3-cyklopentyloxy-N, N-diethyl-4(získaného podle postupu příkladu 3) a 34,86 tetramethylendiaminu ve 480 ml za stálého mícháni při teplotě ml (0,231 mol) sek. butyllithia.

směsi při stejné teplotě po kapkách přidá dimethylformamidu a po další půlhodině se při teplotě -75°C, vlije do směsi se do reakční bezvodého -75°C po Po jedné (0,693 mol) směs, opět fosfátového pufru o pH=7, ethylacetátu a koncentrované chlorovodíkové.

53,66 ml reakční ethylacetátem hydrogensíranu sodným se odpařuje do chromatografií na kyseliny čerstvým roztokem

Extrakce se opakuje ještě dvakrát s extrakt se promyje 5% sušení nad síranem a vzniklý draselného, pak vodou a po sucha. Vytvořený koloně silikagelu petroletheru a ethylacetátu v poměru 1:1, výsledné sloučeniny s výtěžkem 35%.

produkt se při eluci za vzniku čistí směsí

23,3 g t

»·

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 10,44 (s, 1H) ; 7,09-6, 85 (m,

2H) ; 5,05-4,98 (m, 1H) ; 3,84 (s, 3H) ; 3,59-3,47 a 3,05-2,92 (2q, 4H); 1,95-1,52 (m, 8H); 1,28 a 0,95 (2t, 6H).

PŘÍKLAD 5

Syntéza ter. butylesteru kyseliny N'-(2-cyklopentyloxy-6diethylkarbamoyl-3-methoxybenzyliden) -hydrazinkarboxylové

Roztok 21,7 g (0,068 mol) 3-cyklopentyloxy-N,N-diethyl-2formyl-4-methoxybenzamidu (získaného podle postupu příkladu 4) a 112,84 g (0,1 mol) ter. butylkarbazolu v 217 ml absolutního ethanolu se 3 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem. Po vysušení do sucha se zpracuje petroletherem a znovu se vysuší do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje 100 ml ethyletheru a

200 ml petroletheru a filtruje se. Matečné louhy se vysuší do sucha za vzniku 27,45 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 93%. ^XH-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,60 (m, 1H) ; 8,05 (široké s, 1H); 6.87 (s, 2H); 4, 87-4,72 (m, 1H) ; 3,82 (s, 3H) ; 3,58- 3,25 (m, 4H); 1, 90-1,50 (m, 8H); 1,40 (s, 9H) ; 1,22-1,06 (2t, 6H) .

PŘÍKLAD 6

Syntéza 5-cyklopentyloxy-6-methoxy-2H-ftalazin-l-onu

Do 150 ml kyseliny trifluorooctové se za stálého míchání při teplotě 5-10 °C přidá 27,35 g (0,063 mol) ter. butylesteru kyseliny N'-(2-cyklopentyloxy-6diethylkarbamoyl-3-methoxybenzyliden) -hydrazinkarboxylové (získaného podle postupu příkladu 5). Reakční směs se 15 minut míchá a vysuší se do sucha.. Vytvořený zbytek se rozpustí v 750 ml methylenchloridu a ponechá se 6 hodin při teplotě místnosti. Po uplynutí této doby se reakční směs promyje 5% roztokem uhličitanu sodného až do zásaditého bodu, pak se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpaří se do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje 100 ml ethyletheru a filtruje se za vzniku 15,58 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 95%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 10,12 (m, 1H) ; 8,84 (s, 2H) ; 8,11 a 7,36 (2d, 2H) ; 5,11-5,01 (m, 1H) ; 3,98 (s, 3H) ; 2,001,60 (m, 8H).

PŘÍKLAD 7

Syntéza 1-chloro-5-cyklopentyloxy-6-methoxy-2H-ftalazinu Suspenze 7,5 g (28,81 mmol) 5-cyklopentyloxy-6-methoxy-2Hftalazin-l-onu (získaného podle postupu přikladu 6) ve 30 ml fosforylchloridu se míchá v atmosféře dusíku při teplotě 80°C a pak se zahustí v ethylacetátu a do sucha. Vytvořený zbytek se rozpustí promyje se uhličitanem draselným až do alkalického bodu, pak se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpaří se do sucha. Vznikne 7,95 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 99%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 8,40 (s, 2H) ; 8,11 a 7,36 (2d,

2H); 5,11-5,01 (m, 1H); 3,98 (s, 3H) ; 2,00-1,60 (m, 8H).

PŘÍKLAD 8

Syntéza 1-(3,5-dichlorpyridin-4-ylmethyl)-5-cyklopentyloxy-6methoxyftalazinu

3.73 g (85,56 mmol) 55% roztoku hydridu sodného se za stálého míchání v atmosféře dusíku přidá do roztoku 13,86 g (85,56 mmol) 3,5-dichloro-4-methylpyridinu ve 100 ml bezvodého dimethylformamidu. Reakční směs se 1 hodinu míchá, pak se přidá roztok 7,95 g (28,52 mmol)

1-chloro-5-cyklopentyloxy-6-methoxy-2H-ftalazinu (získaného podle postupu příkladu 7) v ml bezvodého dimethylformamidu. Reakční směs se nechá stát přes noc, pak se reakce ukončí přidáním vody, zředí se vodou a extrahuje se ethylacetátem . Vzniklý extrakt se promyje vodou a suší se nad síranem sodným. Po odpaření do sucha se vytvořený zbytek čistí rychlou chromatografií při eluci směsí petroletheru a ethylacetátu v poměru 1:1. Vznikne 6,58 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 57%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,92 (s, 1H) ; 8.49 (s, 2H) ; 7,89 (d, 1H, JHH= 9,1 Hz); 7,63 (d,1H); 5,21-5,14 (m, 1H); 4,86 (s, 2H); 4,03 (s, 3H); 1,98-1,57 (m, 8H).

Ž7- •9 •» •«

9« • · · · 999 9 •• 9 9 9 9

PŘÍKLAD 9

Syntéza_____N-3-acetyl-l-(3,5-dichloropyridin-4-ylmethyl)-5cyklopentyloxy-6-methoxy-4H-ftalazinu (Sloučenina 1)

Roztok 1 g (2,47 mmol) 1-(3,5-dichlorpyridin-4-ylmethyl)-5cyklopentyloxy-6-methoxyftalazinu (získaného podle postupu přikladu 8) v 35 ml ledové kyseliny octové a v katalytickém množství 10% roztoku palladia na aktivním uhlí se v atmosféře dusíku při teplotě místnosti umístí do Parrova hydrogenačního zařízení při tlaku 0,408 MPa. Po 3 dnech se roztok filtruje přes celit a matečné louhy se suší do sucha. Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí hexanu a ethylacetátu v poměru 6:4, pak v poměru 3:7. Vznikne 0,12 g výsledné sloučeniny o teplotě tání 128-130°C. Výtěžek je 10,9%. ¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,46 (s, 2H) ; 7,21 (d, 1H, JHH=8,2 Hz); 6,86 (d,lH); 4,96-4,86 (m, 1H) ; 4,81 (s, 2H); 4,26 (s, 2H); 3,87 (s, 3H); 1,81 (s, 3H); 1,91-1,48 (m, 8H).

PŘÍKLAD 10

Syntéza 5,6-dimethoxy-3H-izobenzofuran-l-onu

Za stálého míchání se připraví suspenze 353,5 g (1,94 mol) kyseliny 3,4-dimethoxybenzoové v 1,7 1 (24,5 mol) kyseliny mravenčí, chladí se v lázni ledu, sytí se 340 g (9,32 mol) plynného chlorovodíku a pak se postupně zahřívá na teplotu 60°C. Po jedné noci se teplota reakční směsi sníží na teplotu místnosti a směs se nechá probublávat dalšími 300 g chlorovodíku. Pak se teplota reakční směsi přes noc udržuje na 60°C. Směs se pak částečně odpaří, zpracuje se 1 1 vody, neutralizuje se 1,5 1 28% roztoku hydroxidu amonného a po 2 hodinách v chladu se filtruje. Filtrát se promyje vodou až do neutrálního bodu, pak krystalizuje ze 2 1 methanolu a suší se ve vakuu při teplotě 60°C. Vznikne

220 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 58,65%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 7,28 a 6,28 (2s, 2H) ; 5,20 (s,

2H); 3,95 a 3,91 (2s, 6H).

2/ *« •· •· ··

PŘÍKLAD 11

Syntéza kyseliny 2-formyl-4,5-dimethoxybenzoové

Směs 10 g (51,5 mmol) 5,6-dimethoxy-3H-izobenzofuran-l-onu (získaného podle postupu přikladu 10) v 250 ml tetrachlormethanu, 13,88 g (77,25 mmol) N-bromosukcinimidu a 320 mg (1,23 mmol) benzoylperoxidu se v atmosféře dusíku 2 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem. Reakční směs se pak zchladí, filtruje se, promyje se 200 ml 10% roztoku siřičitanu sodného, pak vodou a suší se do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje 100 ml 5% kyseliny chlorovodíkové a 4 hodiny se zahřívá pod zpětným chladičem. Roztok se pak zchladí, převede se na zásadité pH přidáním hydroxidu sodného a po promytí ethylacetátem se znovu pomalu okyselí. Vzniklá sraženina se filtruje, promyje se vodou a suší ve vakuu nad oxidem fosforečným za vzniku 6,43 g výsledné sloučeniny. Výtěžek je

60%

PŘÍKLAD 12

Syntéza____(5,6-dimethoxy-3-oxo-l,3-dihydroizobenzofuran-l-yl)trifenylfosfoniumbromidu

Suspenze 6,43 g (30,62 mmol) kyseliny 2-formyl-4,5dimethoxybenzoové (získané podle postupu příkladu 11), 8,3 g (30,62 mmol) trifenylfosfinu, 8,26 ml (30,62 mmol) 30% roztoku bromovodíku v kyselině octové a 20 ml ledové kyseliny octové se v atmosféře dusíku 4,5 hodiny zahřívá na teplotu 90°C. Pak se reakční směs suší do sucha, znovu se rozpustí v 50 ml acetonitrilu a zředí se ethyletherem za vzniku zákalu. Reakční směs se pak zchladí a filtruje. Vzniklý filtrát se promyje ethyletherem a suší se ve vakuu za vzniku 13,6 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 83%.

^XH-NMR (200 MHz, DMSO) δ (ppm) : 8,35 a 7,31 (2s, 2H) ; 8,03-7,66 (m, 15H); 6,01 (s, 1H); 3,84 a 3,45 (2s, 6H) .

PŘÍKLAD 13

Syntéza 5, 6-dimethoxy-3-pyridin-4-ylmethylen-3H-izobenzofuran1-onu z?

·· •· •· •·

• · ·· ··· · • « · · · · ·· ·· ·· · • · ··

Do suspenze 78 g (145 mmol) (5,6-dimethoxy-3-oxo-l,3dihydroizobenzofuran-l-yl)-trifenylfosfoniumbromidu (získaného podle postupu příkladu 12) a 13,0 ml (145 mmol)

4-pyridinkarboxaldehydu vil methylenchloridu se za stálého míchání při teplotě místnosti po kapkách přidá 20 ml (145 mmol) triethylaminu. Po 1,5 hodině se reakční směs filtruje a odpaří se. Na vytvořený zbytek se působí vroucím ethanolem, pak se reakční směs zchladí a filtruje se. Matečné louhy se čistí chromatografií při eluci nejprve methylenchloridem, pak 1% roztokem methanolu. Vytvořený zbytek se suší do sucha a spojí se s dříve uvedeným filtrátem za vzniku 25 g výsledné sloučeniny.

PŘÍKLAD 14

Syntéza 6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethyl-2H-ftalazin-l-onu

Za stálého míchání, při teplotě místnosti se na 2 hodiny uvede do reakce 25 g (88,34 mmol) 5,6-dimethoxy-3-pyridin-4ylmethylen-3H-izobenzofuran-l-onu (získaného podle postupu příkladu 13) s 500 ml hydrazinhydrátu. Reakční směs se pak 1 hodinu nechá vařit. Směs se zředí 300 ml vody, zchladí se a filtruje za vzniku 23 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 87%.

PŘÍKLAD 15

Syntéza l-chloro-6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethylftalazinu Suspenze 10 g (33,6 mmol) 6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethyl2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 14) v 70 ml fosforylchloridu se 4 hodiny zahřívá na teplotu 90°C. Fosforylchlorid se odpaří a vytvořený zbytek se rozpustí ve vodě, v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného a v hydroxidu sodném. Tímto postupem se získá sraženina, která se dále filtruje a uvede se do suspenze v methanolu, suší se do sucha, znovu se uvede do suspenze nyní v acetonu a opět se filtruje. Vytvořený zbytek se suší ve vakuu při teplotě 45°C za vzniku 9,562 g výsledné sloučeniny. ·,

3ο

PŘÍKLAD 16

Syntéza_________6, 7-dimethoxy-l-pyridin-4-ylmethyl-4-thiazol-2ylftalazinu (Sloučenina 2)

831 mg (5,067 mmol) bromthiazolu a 15 ml směsi tetrahydrofuranu a toluenu v poměru 2:1 se za mírného zahříváni po kapkách přidá v bezvodém prostředí do 500 mg (7,6 mmol) pevného zinku. Reakční směs se 1,5 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem, pak se přidá 800 mg (2,53 mmol) l-chloro-6,7-dimethoxy-4-pyridin-4ylmethylftalazinu (získaného podle postupu příkladu 15), 28 mg octanu palladia a 66 mg trifenylfosfinu. Reakční směs se 3 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem, pak se přidá 56 mg octanu palladia a 133 mg trifenylfosfinu a přes noc se zahřívá pod zpětným chladičem. Po přidání dalších 56 mg octanu palladia a 133 mg trifenylfosfinu se reakční směs po 4 hodinách vlije do směsi methylenchloridu a 30% vodného roztoku amoniaku. Jednotlivé podíly se oddělí a organický podíl se promyje vodou a vysuší se do sucha. Získaný surový produkt se čistí chromatografii při eluci 2,4% roztokem methylenchloridu v methanolu. Vznikne 354 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 38,4%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 9,31 (s, 2H) ; 8,52-7,24 (m,

4H) ; 8,06 (d, 1H, JHH=3,4Hz); 7,52 (d, 1H) ; 7,11 (s, 1H) ; 4,69 (s, 2H); 4,11 a 3,92 (2s, 6H).

PŘÍKLAD 17

Syntéza 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4-ylmethylftalazinu

Roztok 3 g (9,5 mmol) l-chloro-6,7-dimethoxy-4-pyridin-4ylmethylftalazinu (získaného podle postupu příkladu 15) v 50 ml dimethylformamidu, 1,32 ml (14,3 mmol) 32% roztoku hydroxidu sodného a 0,69 g 10% roztoku palladia na aktivním uhlí se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení . Směs se hydrogenuje 2 hodiny při tlaku 0,238 MPa. Katalyzátor se odstraní filtrací a roztok, obsahující výslednou sloučeninu, se bez dalšího čištění použije v následujícím kroku syntézy.

PŘÍKLAD 18

Syntéza 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4-ylmethyl-3,4-dihydroftalazinu Roztok 0,8 g (28,44 mmol) 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4ylmethylftalazinu (získaného podle postupu příkladu 17) v 25 ml směsi methanolu a tetrahydrofuranu v poměru 3:2 a 0,025 g oxidu platičitého se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení. Směs se přes noc hydrogenuje při tlaku vodíku

0,408 MPa. Pak se směs filtruje přes celit a suší se do sucha. Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 97:3 a pak v poměru 95:5. Takto se získá 0,15 g výsledné sloučeniny.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,43-7,12 (m, 4H) ; 6,57 a 6,54 (2s, 2H); 4,07 (s, 2H);

4,00 (s, 2H) ; 3,80 a 3,65 (2s, 6H) .

PŘÍKLAD 19

Syntéza 1-(6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethyl-lH-ftalazin-2-yl) ethanonu (Sloučenina 3)

Roztok 3,36 mmol 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4-ylmethyl-3,4dihydroftalazinu (získaného podle postupu příkladu 18) v 20 ml dimethylformamidu se v atmosféře dusíku filtruje přes celit. Vzniklý filtrát se suší ve vakuu a promyje se 5 ml dimethylformamidu. Při teplotě 0°C se v atmosféře dusíku přidá 0,69 ml (0,5 g; 4,9 mmol) triethylaminu a 0,44 ml (0,47 g; 4,65 mmol) anhydridu kyseliny octové. Teplota reakční směsi se nechá zvýšit na teplotu místnosti a po 1 hodině se přidá 0,06 ml (0,67 mmol) anhydridu kyseliny octové. Reakční směs se ponechá 30 minut při teplotě místnosti a pak týden při teplotě 4°C. Pak se směs zahustí na malý objem, zpracuje ethylacetátem a promyje nasyceným roztokem chloridu sodného. Jednotlivé podíly se oddělí a organický podíl se suší a zahustí. Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 98:2. Získaná pevná látka se rozetře s ethylacetátem za vzniku 0,582 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 48%.

• ·

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,53-7,21 (m, 4H); 6,71 a 6,63 (2s, 2H); 4,86 (s, 2H); 4,00 (s, 2H);3,86 a 3,73 (2s, 6H); 2,26 (s, 3H) .

PŘÍKLAD 20

Syntéza____2-methansulfony1-6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethyl1,2-dihydroftalazinu a 2-formyl-6,7-dimethoxy-4-pyridin-4ylmethyl-1,2-dihydroftalazinu (Sloučenina 4 a 5)

Podle postupu popsaného v příkladu 19 a za použití 3,36 mmol 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4-ylmethyl-3,4-dihydroftalazinu (získaného podle postupu příkladu 18) v 20 ml dimethylformamidu, 0,69 ml (0,5 g; 4,9 mmol) triethylaminu a 0,36 ml (0,53 g; 4,65 mmol) methansulfonylchloridu se získá reakční směs. Tato směs se dále zpracuje podle postupu příkadu 19, ale místo ethylacetátu se použije methylenchlorid. Vytvořený zbytek se čistí chromatografií při eluci gradientem poměrů směsi toluenu a methanolu od 95:5 do 87,5:12,5. Po zpracování izopropyletherem se získá 0,199 g Sloučeniny 5, která se eluuje jako první a 0,137 g Sloučeniny 4. Výtěžek je 19% a 11%.

Sloučenina 4: ¹H-NMR (200 MHz, CDCI3) δ (ppm) : 8,53-8.48 a 7,24-7,20 (2m, 4H) ; 6,71 a 6,67 (2s, 2H) ; 4,48 (s, 2H) ; 4,03 (s, 2H); 3,88 a 3,73 (2s, 6H); 3,07 (s, 3H).

Sloučenina 5: ¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 8,69 (s, 1H) ; 8,54-8,51 a 7,25-7,22 (2m, 4H); 6,69 a 6,63 (2s, 2H); 4,85 (s, 2H) ; 4,00 (s, 2H) ; 3,88 a 3,71 (2s, 6H) .

PŘÍKLAD 21

Syntéza____1-(6,7-dimethoxy-4-pyridin-4-ylmethyl-lH-ftalazin-2yl)-1-imidazol-l-ylmethanonu (Sloučenina 6)

0,75 g (4,65 mmol) 1,1'-karbonyldiímidazolu se v atmosféře dusíku přidá do roztoku 2,81 mmol 6,7-dimethoxy-l-pyridin-4ylmethyl-3,4-dihydroftalazinu (získaného podle postupu příkladu 18) v 16,5 ml dimethylformamidu. Po jedné hodině při teplotě místnosti a týdnu při teplotě 4°C se reakční směs zahustí, zpracuje ethylacetátem a promyje nasyceným roztokem chloridu

sodného. Jednotlivé podíly se oddělí a organický podíl se suší a zahustí. Vytvořený zbytek se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 98:2. Získaná pevná látka se rozetře s izopropyletherem za vzniku 0,135 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 13%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 8,56-7,19 (m, 4H).; 8,30 (široké s, 1H); 7,56 a 6,97 (2m, 2H) ; 6,80 a 6,71 (2s, 2H) ; 4,95 (s, 2H); 4,07 (s, 2H); 3,91 a 3,77 (2s, 6H).

PŘÍKLAD 22

Syntéza 3- (4-hydroxybenziliden) -5, 6-dimethoxy-3H-izobenzofuran1-onu

Roztok 1 g (1,87 mmol) (5,6-dimethoxy-3-oxo-l, 3dihydroizobenzofuran-l-yl)-trifenylfosfoniumbromidu (získaného podle postupu příkladu 12), 230 mg (1,87 mmol)

4-hydroxybenzaldehydu a 263 μΐ triethylaminu v 10 ml methylenchloridu se udržuje jednu noc v atmosféře dusíku při teplotě místnosti. Pak se promyje vodou a vysuší se do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje ethanolem , zahřívá se 3 hodiny pod zpětným chladičem, zchladí se, filtruje a suší ve vakuu. Vznikne 0,3 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 54%.

^XH-NMR (200 MHz, DMSO) δ (ppm): 9,82 (s, 1H) ; 7,63-6, 82 (m,

4H); 7,63, 7,32 a 6,72 (3s, 3H) ; 3,95 a 3,87 (2s, 6H) .

PŘÍKLAD 23

Syntéza_____4- (4-hydroxybenzyl) -6, 7-dimethoxy-2H-ftalazin-l-onu (Sloučenina 7)

Roztok 0,3 g (1 mmol) 3-(4-hydroxybenziliden)-5,6-dimethoxy-3Hizobenzofuran-l-onu (získaného podle postupu příkladu 22) a 176 μΐ (3 mmol) hydrazinu v 10 ml methylenchloridu se v atmosféře dusíku 3 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem. Pak se zředí vodou, zchladí se a filtruje. Filtrát se suší teplem za vzniku 120 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 38,46%.

^XH-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 12,37 (s, 1H) ; 9,24 (s, 1H) ; 7,27 a 7,25 (2s, 3H); 7,14-6,64 (m, 4H) ; 4,13 (s, 2H); 3,89 a 3,83 (2s, 6H).

PŘÍKLAD 24

Syntéza 3-furan-2-ylmethylen-5,6-dimethoxy-3H-izobenzofuran-lonu

Roztok 1 g (1,87 mmol) (5,6-dimethoxy-3-oxo-l,3dihydroizobenzofuran-l-yl)-trifenylfosfoniumbromidu (získaného podle postupu přikladu 12), 180 mg (1,87 mmol) furfuralu a 263 μΐ (1,87 mmol) triethylaminu ve 20 ml methylenchloridu se jednu noc udržuje v atmosféře dusíku při teplotě místnosti . Pak se promyje vodou a vysuší se do sucha . Vytvořený zbytek se zpracuje ethanolem, zahřívá se 3 hodiny pod zpětným chladičem, zchladí se, filtruje a suší ve vakuu. Vznikne 250 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 49,2%.

PŘÍKLAD 25

Syntéza______4-furan-2-ylmethyl-6,7-dimethoxy-2H-ftalazin-l-onu (Sloučenina 8)

Roztok 2,7 g (9,9 mmol) 3-furan-2-ylmethylen-5,6-dimethoxy-3Hizobenzofuran-l-onu (získaného podle postupu příkladu 24) a 1,46 ml (30 mmol) hydrazinu ve 30 ml methanolu se v atmosféře dusíku 4 hodiny zahřívá pod zpětným chladičem. Pak se zchladí, zředí vodou a filtruje se. Vzniklý filrát se suší ve vakuu za vzniku 1.9 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 67%.

^-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 10,30 (s, 1H) ; 7,77 (s, 1H) ;

7,14 (s, H); 7,32-6,10 (m, 3H); 4,26 (s, 2H); 4,01 a 3,93 (2s, 6H) .

PŘÍKLAD 26

Syntéza l-chloro-4-furan-2-ylmethyl-6,7-dimethoxyftalazinu

Roztok 2 g (7 mmol) 4-furan-2-ylmethyl-6,7-dimethoxy-2Hftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 25) a 7 ml (70 mmol) fosforylchloridu ve 20 ml acetonitrilu se v atmosféře dusíku hodiny zahřívá pod zpětným chladičem, vysuší se do sucha a zpracuje se methylenchloridem. Reakční směs se dále promyje roztokem hydogenuhličitanu sodného, pak vodou a vysuší se do

sucha. Vzniklý surový produkt se čistí chromatografii při eluci směsí benzenu a ethylacetátu v poměru 7:3 a pak v poměru 1:1. Získá se 1,3 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 60,7%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 7,46 a 7,35 (2s, 3H) ; 7,306,10 (m, 3H); 4,62 (s, 2H); 4,07 a 3,98 (2s, 6H).

PŘÍKLAD 27

Syntéza_______1-f uran-2-ylmethyl-6, 7-dimethoxy-4-f enylf t ala z inu (Sloučenina 9)

4,27 ml (8,55 mmol) 2M roztoku fenyllithia ve směsi cyklohexanu a ethyletheru v poměru 7:3 se při teplotě 0-5°C po kapkách přidá do 20 ml (8,9 mmol) 0,5M roztoku chloridu zinečnatého v bezvodém tetrahydrofuranu. Reakční směs se 1 hodinu udržuje při teplotě místnosti a pak se postupně přidá 1,3 g (4,27 mmol) l-chloro-4-furan-2-ylmethyl-6,7-dimethoxyftalazinu (získaného podle postupu příkladu 26), 20 mg (0,0855 mmol) octanu palladia a 45 mg (0,17 mmol) trifenylfosfinu. Reakční směs se 1 hodinu zahřívá pod zpětným chladičem, pak se zchladí, zředí se ethylacetátem, promyje se roztokem chloridu amonného, pak vodou a vysuší se do sucha. Vytvořený zbytek se čistí chromatografii při eluci směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 95:4, pak krystalizuje z ethyletheru a suší se ve vakuu. Získá se 0,9 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 61%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 7,75-6,14 (m, 11H) ; 4,72 (s,

2H); 4,00 a 3,87 (2s, 6H).

PŘÍKLAD 28

Syntéza 3-benzyloxy-4-methoxybenzaldehydu

Roztok 100 g (0,657 mol) izovanilinu ve 300 ml ethanolu, 108,9 g (0,788 mol) uhličitanu draselného, 86,8 ml (0,755 mol) benzylchloridu a 5 g jodidu sodného se v atmosféře dusíku 2,5 hodiny za stálého míchání zahřívá pod zpětným chladičem. Pak se reakční směs zchladí a přidá se 900 ml vody. Vytvořená sraženina se filtruje, promyje se vodou, pak petroletherem a suší se ve vakuu při teplotě 40°C. Takto se získá 159 g

3G

výsledné sloučeniny, která se bez dalšího čištění použije v následujícím kroku syntézy.

PŘÍKLAD 29

Syntéza kyseliny 3-benzyloxy-4-methoxybenzoové

Roztok 103,83 g (0,657 mol) manganistanu draselného v 1,4 1 vody se za stálého míchání najednou přidá do roztoku 218,37 g (0,657 mol) bromidu tetrabutylamonného v 800 ml vody. Reakční směs se 30 minut míchá a pak se vytvořená sraženina filtruje, promyje vodou, zahustí a rozpustí v 980 ml pyridinu. Takto vzniklý roztok se za stálého míchání v lázni vody a ledu překape do roztoku 159 g (0,657 mol) 3-benzyloxy-4methoxybenzaldehydu (získaného podle postupu příkladu 28) ve 400 ml pyridnu. Reakční směs se přes noc nechá stát, odpaří se, vytvořený zbytek se zpracuje 3 1 vody a okyselí se 500 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové, přičemž se teplota směsi udržuje na 20°C za použití lázně ledu. Směs se 30 minut míchá a pak se filtruje. Na vzniklý filtrát se působí 3 1 směsi ethylacetátu a methanolu v poměru 1:1 za stálého míchání po dobu 30 minut při teplotě 40-50°C. Po filtraci se matečné louhy zahustí na malý objem. Získá se krystalický produkt, který se filtruje, promyje se ethylacetátem a petroletherem za vzniku 139,75 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 82%.

PŘÍKLAD 30

Syntéza 3-benzyloxy-4-methoxybenzoylchloridu

136,84 g (0,53 mol) kyseliny 3-benzyloxy-4-methoxybenzoové (získané podle postupu příkladu 29) a 572 ml thionylchloridu se zahřívá pod zpětným chladičem. Po 2 hodinách se reakční směs zchladí a odpaří. Vytvořený zbytek se několikrát zpracuje toluenem za vzniku 148,4 g výsledné sloučeniny (kvantitativní výtěžek).

·· ···

PŘÍKLAD 31

Syntéza 3-benzyloxy-N,N-diethyl-4-methoxybenzamidu

Roztok 548 ml (5,3 mol) diethylaminu ve 452 ml methylenchloridu se v atmosféře dusíku při stálé teplotě 0°C po kapkách přidá do roztoku 146,66 g (0,53 mol) 3-benzyloxy-4methoxybenzoylchloridu (získaného podle postupu příkladu 30) v 640 ml methylenchloridu. Teplota se pak zvýší na teplotu místnosti a po 2 hodinách se reakční směs odpaří, zpracuje se ethylacetátem a promyje se vodou. Organický podíl se suší a zahustí se za vzniku pevného produktu, který se dvakrát rozetře s heptanem a jednou s petroletherem. Po sušení ve vakuu při 45°C vznikne 150,62 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 91%.

PŘÍKLAD 32

Syntéza 3-benzyloxy-N, N-diethyl-2-formyl-4-methoxybenzamidu ml (0,07 mol) 1,3M sek.butyllithia ve směsi cyklohexanu a hexanu se za stálého míchání v atmosféře dusíku v lázni suchého ledu při teplotě -70°C, po kapkách přidá do roztoku 20 g (0,064 mol) 3-benzyloxy-N,N-diethyl-4-methoxybenzamidu (získaného podle postupu příkladu 31) a 10,56 ml (0,07 mol) tetramethylethylendiaminu v 2,25 1 tetrahydrofuranu. Reakční směs se 2 hodiny udržuje při stálé teplotě a pak se přidá 21,75 ml (0,28 mol) dimethylformamidu. Reakční směs se hodiny udržuje při stálé teplotě a pak se nechá přes, noc stát. Směs se vlije do 1 1 roztoku f osf orečnanového pufru (obsahující směs dihydrogenfosforečnanu sodného a hydrogenfosforečnanu sodného) o pH=7. Jednotlivé podíly se oddělí a organický podíl se promyje 1 1 vody a vysuší se do sucha. Vzniklý surový produkt se čistí chromatografii při eluci směsí benzenu a ethylacetátu v poměru 1:1. Získá se 6 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 27,4%.

PŘÍKLAD 33

Syntéza 5-benzyloxy-6-methoxy-2H-ftalazin-l-onu

8,54 ml (175 mmol) hydrazinu se při teplotě 0-10°C překape do 250 ml ledové kyseliny octové a přidá se 13 g (38 mmol) 3-

benzyloxy-N, N-diethyl-2-formyl~4-methoxybenzamidu (získaného podle postupu příkladu 32) . Reakční směs se nechá 2 hodiny stát, pak se odpaří, rozpustí se v methylenchloridu, promyje se vodou, suší se nad síranem sodným a odpaří se do sucha. Vzniklý surový produkt se rozetře se 150 ml směsi benzenu a ethyletheru v poměru 2:1, filtruje se, promyje se benzenem a suší se ve vakuu za vzniku 7 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 78%.

^XH-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 10,61(s, 1H) ; 8,30 (s, 1H) ; 8,18-7,31 (m, 7H) ; 5,17 (s, 2H); 4,03 (s, 3H).

PŘÍKLAD 34

Syntéza 5-hydroxy-6-methoxy-2H-ftalazin-l-onu

Roztok 4 g (14,16 mol) 5-benzyloxy-6-methoxy-2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 33) ve 40 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 40 ml ledové kyseliny octové se 1,5 hodiny zahřívá na teplotu 60°C, pak se vysuší do sucha, zpracuje se acetonem, znovu se vysuší do sucha a zpracuje se dalším acetonem. Reakční směs se pak 30 minut míchá, filtruje se a vzniklá sraženina se suší ve vakuu při teplotě 30°C. Takto se získá 2,7 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 99,2%.

^H-NMR (200 MHz, DMSO) δ (ppm): 12,33 (široké s, 1H) ; 10,06 (s, 1H); 8,36 (s, 1H) ; 7,68 a 7,49 (2d, 2H, JHH=8,6 Hz); 3,94 (s, 3H) .

PŘÍKLAD 35

Syntéza 6-methoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)-2H-ftalazin-l-onu 3,5 g (21 mmol) 3-mesyloxytetrahydrofuranu se za stálého míchání v atmosféře dusíku při teplotě místnosti přidá do roztoku 2,7 g (14 mmol) 5-hydroxy-6-methoxy-2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 34) a 3 g (28 mmol) uhličitanu sodného v 50 ml bezvodého dimethylformamidu. Reakční směs se přes noc zahřívá na teplotu 90°C, pak se vlije do vody a dvakrát se extrahuje ethylacetátem. Organický podíl se třikrát promyje vodou a vysuší se do sucha. Vytvořený zbytek se zpracuje 50 ml ethyletheru, za stálého míchání se rozetře, filtruje se a suší se ve vakuu. Získá se 2,1 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 57,2%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 10,9 (s, 1H) ; 8,42 (s, 1H) ;

8,15 (d, 1H, JHH=9,2 Hz); 7,36 (d, 1H) ; 5,25-5,2 (m, 1H); 4,163,73 (m, 4H); 3,98 (s, 3H); 2,27-1, 98 (m, 2H) .

PŘÍKLAD 36

Syntéza 6-hydroxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)-2H-ftalazin-l-onu Roztok 680 mg (2,6 mmol) 6-methoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 35) v 15 ml dimethylformamidu a 378,6 mg (2,6 mmol) p-thiokresolu sodného se po dobu 10 hodin zahřívá na teplotu 90°C. Reakční směs se pak vlije do vody, okyselí

IN roztokem kyseliny chlorovodíkové na hodnotu pH= 6-7 , odpaří se do sucha, zpracuje se vodou a znova se vysuší do sucha.. Vzniklý surový produkt se čisti chromatografii při eluci směsí methylenchloridu a methanolu v poměru 9:1. Takto se získá 330 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 52%.

¹H-NMR (200 MHz, DMSO) δ (ppm): 12,41 (s, 1H) ; 11,07 (široké s, 1H) ; 8,23 (s, 1H) 7,82 (d, 1H, JHH=8,8 Hz); 7,44 (d, 1H) ; 5,25-5,20 (m, 1H) ; 4,03-3,59 (m, 4H); 2,11-2,00 (m, 2H) .

PŘÍKLAD 37

Syntéza_______6-difluoromethoxy-5- (tetrahydrofuran-2-yloxy) -2Hftalazin-l~onu

Na směs 320 mg (1,29 mmol) 6-hydroxy-5-(tetrahydrofuran-2yloxy)-2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu příkladu 36) v 8 0 ml bevodého dimethylformamidu a 2 67 mg (1,93 mol) uhlčitanu draselného se při tlaku 0,05 MPa působí 5 g ( 58 mmol) Freonu 22. Reakční směs se přes noc zahřívá na teplotu 115 °C, pak se vysuší do sucha a čistí chromatografii při eluci směsí benzenu a ethylacetátu v poměru 1:1, pak pouze ethylacetátem. Získá se 300 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 78% .

I _Λ 9 9 99 9 · · ··· í í í · j í ;··♦ .: :

9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 99 99 9 ¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) : 10,62 ( s, 1H) ; 8,44 ( s, 1H) ;

8,16 (d, 1H, JHH=9,2Hz); 7,55 (d, 1H) ; 6,6.3 (t, 1H, JHF=72 Hz);

5,24-5,18 (m, 1H); 4,18-3,75 (m, 4H); 2,29-2,09 (m, 2H) .

PŘÍKLAD 38

Syntéza l-chloro-6-difluoromethoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)ftalazinu

Roztok 280 mg (0,94 mmol) 6-difluoromethoxy-5-(tetrahydrofuran2-yloxy)-2H-ftalazin-l-onu (získaného podle postupu přikladu 37) a 1,2 ml fosforylchloridu se 1,5 hodiny zahřívá na teplotu 90°C. Reakční směs se pak suší do sucha, zpracuje se methylenchloridem, promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, pak dvakrát vodou a suší se do sucha. Získá se 296 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 99,7%.

PŘÍKLAD 39

Syntéza 1-(3,5-dichloropyridin-4-ylmethyl)-6-difluoromethoxy-5(tetrahydrofuran-2-yloxy)-ftalazinu

Do roztoku 457 mg (2,82 mmol) 3,5-dichloro-4-methylpyridinu v 10 ml bezvodého dimethylformamidu . se v atmosféře dusíku po částech přidá 113 mg (2,82 mmol) 60% roztoku hydridu sodného. Reakční směs se ponechá 1 hodinu při teplotě místnosti a pak se při teplotě menší než 10°C po kapkách přidá 296 mg (0,937 mmol) l-chloro-6-difluoromethoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)ftalazinu (získaného podle postupu příkladu 38) v bezvodém dimethylformamidu. Po 2 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs vlije do 50 ml 0,4M roztoku pufru o pH=7 a dále se dvakrát extrahuje 50 ml ethylacetátu. Organický podíl se promyje vodou, suší se a zahustí ve vakuu. Vytvořený zbytek se čistí chromatografií při eluci směsí benzenu a ethylacetátu v poměru 1:1, pak pouze ethylacetátem a dále krystalizuje ze směsi ethyletheru a benzenu. Získá se 180 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 43,5%.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm): 9,72 (s, 1H) ; 8,52 (s, 2H) ; 7,96 ( d, 1H, JHH=9,2 Hz); 7,80 (d, 1H) ; 6,68 (t, 1H, JHF=74

Hz); 5,34-5,29 (m, 1H); 4,91 (s, 2H) ; 4,22- 3,81 (m, 4H); 2,332,08 (m, 2H).

PŘÍKLAD 40

Syntéza 1- (3,5-dichloropyridin-4-ylmethyl) -3-methansulfoyl-6difluoromethoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)-4H-ftalazinu (Sloučenina 10)

Roztok 190 mg (0,43 mmol) 1-(3,5-dichloropyridin-4-ylmethyl)-6difluoromethoxy-5-(tetrahydrofuran-2-yloxy)-ftalazinu (získaného podle postupu příkladu 39) v 50 ml tetrahydrofuranu se po dobu 24 hodin hydrogenuje v Parrově hydrogenačním zařízení za přítomnosti 15 mg oxidu platičitého. Reakční směs se dále filtruje a vysuší se do sucha. Vytvořený zbytek se rozpustí v 10 ml methylenchloridu. Do takto získaného roztoku se přidá 0,179 ml (1,29 mmol) triethylaminu a 0,1 ml (1,29 mmol) methansulfonylchloridu. Po promyje vodou, suší se nad síranem Vytvořený zbytek se čistí methylenchloridem obsahujícím krystalizuje z 5 ml ethyletheru, při teplotě 40°C. Získá se s výtěžkem 45%.

^XH-NMR (200 MHz, CDC1₃) δ (ppm) :

hodině se reakční směs sodným a vysuší se do sucha, chromatografií při eluci 2% roztok methanolu a filtruje se a suší ve vakuu

102 mg výsledné sloučeniny

8,49 (s, 2H); 7,29 a 7,21 (2d,

2H, JHH=8,2 Hz); 6,55 (t, 1H, JHF=73,3 Hz); 5,08-5,01 (m, 1H); AB systém: Va=4,63, Vb=4,40, JAB=13,7 Hz; AB systém: Va=4,35, Vb=4,30, JAB=16,5Hz; 4,13-3,73 (m, 4H) ; 2,76 (s, 3H); 2,18-2,05 (m, 2H).

· 4« ··44 •4 44 444«44

4 4 4 · 44« 44

4 4 4 4 4 4 44 • 4 ·«· ·· 44 44···

PŘÍKLAD 41

Inhibice enzymu PDE 4

Izolace lidských polymorfonukleárnich leukocytů

Polymorfonukleární leukocyty PMN byly izolovány z periferní krve zdravých dobrovolníků podle publikace Boyum A., Scand J. Immunol., 1976, 5. doplněk, 9. Postup byl prováděn tak, že PMN byly čištěny odstředěním při použití Ficoll-Paquova gradientu a pak sedimentací z dextranu, znečištění červenými krvinkami bylo odstraněno rozrušením v hypotonickém prostředí.

Čištění enzymu PDE 4

Lidské PMN byly uvedeny do suspenze v TRIS/HC1 pufru (10 mM, pH 7,8) s obsahem 5 mM MgCl₂, 4 mM EGTA, 5 mM merkaptoethanolu, 1 % prostředku TRITON-XIOO, 1 mikroM pepstatinu A, 100 mikroM PMSF a 1 mikroM leupeptinu, směs byla homogenizována v homogenizátoru Polytron. Homogenát byl odstředěn 30 minut při 25 000 g při teplotě 4 °C a enzym PDE 4 byl čištěn chromatografií na iontoměniči při použití techniky FPLC podle publikace Schudt C a další, Naunyn-Schmidberg's Arch. Pharmacol., 1991, 334, 682. Supernatant byl naočkován na sloupec UNO Q12 (Bio-Rad) a enzym byl vymýván při použití lineárního gradientu 50 mM až 1 M octanu sodného při rychlosti průtoku 4,5 ml/min. Frakce s obsahem enzymu byly spojeny, dialyzovány proti vodě a zahuštěny. Enzym PDE 4 byl uložen při teplotě -20 °C v přítomnosti 30 % objemových ethylenglykolů až do použití.

Zkouška na účinnost PDF 4

Účinnost enzymu byla vyhodnocena scintilaci při použití zkušebního balíčku SPA (Amersham). Enzymatická reakce byla provedena v konečném objemu 100 mikrolitrů TRIS/HC1 pufru (50 mM, pH 7,5) s obsahem 8,3 mM MgCl₂, 1,7 mM EGTA, 1 mikroM cAMP a přibližně 100 000 dpm ³HcAMP k označení. Sloučeniny podle vynálezu, srovnávací látky nebo pouze reakční prostředí byly přidávány v různých koncentracích. Jako srovnávací látky byly použity 6,7-dimethoxy-4-(pyridin-4-ylmethyl)-2H-ftalazin-l-on (srovnávací látka 1) a 6,7-dimethoxy-4-(piperidin-4-ylmethyl)-2H-ftalazin-l-on(srovnávací látka 2). Tyto látky jsou uvedeny obecným vzorce v EP-0722936 (Eisai). Reakce byla zahájena přidáním 1,5 mikrog proteinu, vzorky byly inkubovány 40 minut při teplotě 30 °C.

K zastavení reakce bylo přidáno 50 mikrol kuliček SPA s obsahem 18 mM sulfátu zinečnatého, po 20 minutách při teplotě místnosti byla měřena radioaktivita při použití scintilačního počítače.

Hodnota IC50 odpovídá koncentraci sloučeniny, jíž je zapotřebí k 50% inhibici hydrolýzy cyklických nukleotidů a uvádí se v nanomolech a vypočítává analýzou nelineární regrese.

Hodnoty IC50 pro sloučeniny podle vynálezu byly daleko nižší než hodnoty pro srovnávací sloučeniny. Například hodnota pro sloučeninu 10 byla IC₅₀ = 8 ± 0,5 nM, kdežto hodnota pro obě srovnávací sloučeniny byla IC50 > 100 mikroM. Zastupuje:

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

i.

Ftalazinové deriváty obecného vzorce I kde ______ znamená jednoduchou vazbu,

B znamená methylenovou skupinu,

A znamená pyridinovou skupinu, substituovanou jedním nebo větším počtem substituentů,

R znamená popřípadě substituovaný aryl nebo heterocyklický zbytek, Cl-C8alkyl, C2-C8alkenyl nebo C2C8alkinyl, popřípadě substituovaný arylovou nebo heterocyklickou skupinou, aryloxyskupinu, heterocyklyloxyskupinu, arylCl-C4alkoxyskupinu, heterocyklylCl-C4alkoxyskupinu, aminoskupinu, substituovanou 1 nebo 2 Cl-C4alkylovými skupinami, arylaminoskupinu, heterocyklylaminoskupinu, arylClC4alkylaminoskupinu nebo heterocyklylClC4alkylaminoskupinu,

Ri znamená Cl-C6alkyl nebo C4-C7cykloalkyl, popřípadě obsahující atom kyslíku a/nebo substituovaný polárním substituentem,

R₂ znamená Cl-C6alkyl nebo polyfluor Cl-C6alkyl,

R3 znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl, popřípadě • · • · substituovaný arylovou skupinou, heterocyklickou skupinou nebo skupinou COR5, kde R₅ znamená hydroxyskupinu, ClC4alkoxyskupinu nebo hydroxyaminoskupinu, -CORg, kde R_Ěznamená atom vodíku, aryl, arylCl-C6alkyl, aminoskupinu, popřípadě alkylovanou nebo monohydroxylovanou, hydroxyskupinu, Cl-C4alkoxyskupinu, karboxylovou skupinu, Cl-C4alkoxykarbonyl NH=C-NH₂ nebo Cl-C4alkyl, popřípadě substituovaný heterocyklickým zbytkem nebo

d) Cl-C4alkylsulfonyl,

N->0 derivátu těchto.látek a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
2. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se t i m, že obsahuje účinné množství ftalazinového derivátu obecného vzorce I podle nároku 1 spolu s vhodným nosičem.
3. Farmaceutický prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že je určen pro léčení alergických a zánětlivých chorobných stavů.
4. Farmaceutický prostředek podle nároku 3, vyznačující se tím, že je určen pro léčení chorob dýchacího ústrojí.