[go: up one dir, main page]

CN1360588A - 半合成方法和其中间体 - Google Patents

半合成方法和其中间体 Download PDF

Info

Publication number
CN1360588A
CN1360588A CN00810082A CN00810082A CN1360588A CN 1360588 A CN1360588 A CN 1360588A CN 00810082 A CN00810082 A CN 00810082A CN 00810082 A CN00810082 A CN 00810082A CN 1360588 A CN1360588 A CN 1360588A
Authority
CN
China
Prior art keywords
group
formula
compound
ring
nmr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN00810082A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1229382C (zh
Inventor
C·库瓦斯
M·佩兹
A·弗兰策斯奇
C·弗兰德兹
J·L·奇查罗
P·加勒戈
M·扎祖洛
F·德拉卡勒
I·曼扎纳雷斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pharmamar SA
Original Assignee
Pharmamar SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9911345.8A external-priority patent/GB9911345D0/en
Priority claimed from GBGB9918178.6A external-priority patent/GB9918178D0/en
Priority claimed from GBGB9923632.5A external-priority patent/GB9923632D0/en
Priority claimed from GB0001063A external-priority patent/GB0001063D0/en
Application filed by Pharmamar SA filed Critical Pharmamar SA
Publication of CN1360588A publication Critical patent/CN1360588A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1229382C publication Critical patent/CN1229382C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed systems contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D515/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D515/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明提供制备具有式(XIV)的稠环结构的化合物的方法,该方法包括一个或多个从式(XVI)的21－氰基化合物开始的反应,在式(XVI)中一般:R1是酰氨基亚甲基或酰氧基亚甲基;R5和R8独立选自－H、－OH或－OCOCH2OH,或R5和R8都是酮基和所述环A是对－苯醌环;R14a和R14b都是－H或者一个是－H而另一个是－OH、－OCH3或－OCH2CH3,或R14a和R14b一起形成酮基;和R15和R18独立选自－H或－OH,或R5和R8都是酮基和所述环A是对－苯醌环。在经修饰的原料中,可以采用亲核试剂由其它基团替换所述21－氰基。

Description

半合成方法和其中间体
本发明涉及合成方法，特别涉及半合成方法。
本发明背景
欧洲专利309,477涉及海鞘素(ecteinascidins)729、743、745、759A、759B和770。公开海鞘素化合物具有抗菌和其它有用的特性。现在海鞘素743作为抗肿瘤药物正在进行临床试验。
海鞘素743具有以下式(I)的复杂的三(四氢异喹啉酚)结构：
Figure A0081008200111
最近从海洋被囊动物Ecteinascidin turbinata的提取物中分离制备了以上化合物。其产率低，因而一直在寻找其它的制备方法。
在美国专利5,721,362中描述了用于制备海鞘素化合物的合成方法。该提出权利要求的方法耗时并且复杂，有38个实施例分别描述了在得到海鞘素743的合成程序中的一个步骤。
美国专利5,721,362的权利要求25涉及所给出式(11)的中间体酚化合物，也将其称为中间体11或Int-11。它具有以下双(四氢异喹啉酚)结构(II)：
Figure A0081008200121
其中MOM是甲氧基甲基取代基和TBDPS是3，5-叔丁基二苯基甲硅烷基取代基。
从中间体11可以合成另一种重要的抗肿瘤药物phthalascidin，参见Proc.Natl.Acad.Sci.USA，96，3496-3501，1999。phthalascidin是式(III)的双(四氢异喹啉酚)衍生物：
在海鞘素743中，该1，4桥具有式(IV)的结构：
其它已知的海鞘素包括带有不同桥环系的化合物，该桥环系例如存在于海鞘素722和736中，其中所述桥具有式(V)的结构：
海鞘素583和597中，其中所述桥具有式(VI)的结构：
Figure A0081008200132
和海鞘素594和596中，其中所述桥具有式(VII)的结构：
在J.Am.Chem.Soc.(1996)118，9017-9023中给出了这些化合物和有关化合物的复杂的结构。该文章结合在本文中作为参考。
已知其它的缺乏桥环系的化合物。它们包括双(四氢异喹啉酮)抗肿瘤-抗微生物抗生素番红菌素(safracins)和番红霉素(saframycins)以及从培养的微生物或多孔动物中分离出的海洋天然产物renieramicins和xestomycin。它们都具有常见的二聚四氢异喹啉碳骨架。这些化合物也可以根据芳环的氧化形式分类成I-IV四种类型。
类型I，二聚异喹啉酮，是式(VIII)的系统，最常存在于该类化合物中，参见以下表I。
                               表I
                      类型I番红霉素抗生素的结构。
Figure A0081008200141
                                取代基化合物         R14a   R14b   R21    R25a   R25b       R25c番红霉素A      H       H       CN     O       O           CH3番红霉素B      H       H       H      O       O           CH3番红霉素C      H       OCH3   H      O       O           CH3番红霉素G      H       OH      CN     O       O           CH3番红霉素H      H       H       CN     OH      CH2COCH3 CH3番红霉素S      H       H       OH     O       O           CH3番红霉素Y3    H       H       CN     NH2    H          CH3番红霉素Yd1   H       H       CN     NH2    H          C2H5番红霉素Ad1   H       H       CN     O       O          C2H5番红霉素Yd2   H       H       CN     NH2    H          H番红霉素Y2b   H       Qb     CN     NH2    H          CH3番红霉素Y2b-d  H       Qb     CN     NH2    H          C2H5番红霉素AH2   H       H       CN     Ha     OHa       CH3番红霉素AH2Ac H       H       CN     H       OAc         CH3番红霉素AH1   H       H       CN     OHa    Ha        CH3番红霉素AH1Ac H       H       CN     OAc     H           CH3番红霉素AR3   H       H       H      H       OH          CH3 a归属可以互换。b其中基团Q是式(IX)：
Figure A0081008200151
类型I芳环见于作为次要成分从淡紫灰链霉菌(Streptomyceslavendulae)中分离出的番红霉素A、B和C；G和H；和S。从日本公开特许公报JP-A2 59/225189和60/084288中已知称作氰基醌胺的番红霉素A的氰基衍生物。用合适的补加培养基，通过淡紫灰链霉菌经直接生物合成制备番红霉素Y3、Yd1、Ad1和Yd2。也已经在淡紫灰链霉菌的补加培养基中制备了通过将一个单位的C-25上的氮原子连接到另一个单位的C-14上所形成的番红霉素Y2b和Y2b-d二聚体。番红霉素AR1(＝AH2)，一种通过Rhodococcus amidophilus产生的番红霉素A在C-25上的微生物还原产物也通过用硼氢化钠非立体选择性化学还原(产物为1∶1差向异构体的混合物)，随后经色谱分离[另一种异构体AH1极性较低]制备。另一种还原产物番红霉素AR3，21-脱氰基-25-二氢-番红霉素A(＝25-二氢番红霉素B)通过相同的微生物转化制备。用Nocardia的物种进行番红霉素A的微生物的转化的另一种类型产生番红霉素B并经分支杆菌属(Mycobacterium)菌种进一步还原产生番红霉素AH1Ac。也已经用化学方法制备了番红霉素AH2和AH1的25-O-乙酸酯，用于生物学研究。
也已经从海洋多孔动物中分离出了式(X)的类型I化合物，参见表II。
                            表II
              来自海洋多孔动物的类型I化合物的结构。
                            取代基
               R14a    R14b   R21    Rrenieramycin A     OH       H      H       -C(CH3)＝CH-CH3renieramycin B     OC2H5 H      H       -C(CH3)＝CH-CH3renieramycin C     OH       O      O       -C(CH3)＝CH-CH3renieramycin D     OC2H5 O      O       -C(CH3)＝CH-CH3renieramycin E     H        H      OH      -C(CH3)＝CH-CH3renieramycin F     OCH3    H      OH      -C(CH3)＝CH-CH3xestomycin         OCH3    H      H       -CH3
从在Mexico收集的一种多孔动物Reniera物种的抗微生物提取物中分离renieramycins A-D，伴随生物起源的相关单体异喹啉renierone及有关化合物。renieramycin A的结构最初确定具有在C-3、C-11和C-13上的转化的立体化学。然而，经仔细检查新的、相关化合物renieramycins E和F(从在Palau收集的相同多孔动物中分离)的1HNMR数据，揭示出renieramycins的环连接和番红霉素的环连接完全一致。该结果得出结论即以前确定的renieramycins A-D的立体化学一定与番红霉素的立体化学相同。
在一种多孔动物，从Sri Lancan海域收集的Xestospongia物种中发现xestomycin。
具有还原氢醌环的式(XI)的类型II化合物包括从淡紫灰链霉菌中分离出的番红霉素D和F以及从黄色粘球菌(Myxococcus xanthus)中分离出的Mx-1和Mx-2。参见表III。
                              表III
                            类型II化合物
Figure A0081008200171
                              取代基化合物         R14a   R14b    R21   R25a   R25b    R25c番红霉素D      O       O       H      O       O        CH3番红霉素F      O       O       CN     O       O        CH3番红霉素Mx-1   H       OCH3   OH     H       CH3    NH2番红霉素Mx-2   H       OCH3   H      H       CH3    NH2
从培养的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)中分离的抗生素番红菌素A和B中发现类型III的骨架。这些式(XII)的抗生素由四氢异喹啉-醌亚单位和四氢异喹啉酚亚单位组成。其中R21在番红菌素A中是-H，在番红菌素B中是-OH。
番红霉素R，分类为类型IV骨架的唯一化合物，也从淡紫灰链霉菌中被分离。所述式(XIII)的化合物，由在酚的氧原子之一上带有乙醇酸酯侧链的氢醌环组成，由于它的适度毒性，可能是番红霉素A的前体药物。
Figure A0081008200182
所有这些已知的化合物具有如下式(XIV)结构中所示的五环(A)到(E)的稠合系统：
Figure A0081008200183
在海鞘素和一些其它的化合物中，所述环A和E是酚环，而在另外的化合物、特别是在番红霉素中，所述环A和E是氢醌环。在已知的化合物中，所述环B和D是四氢化的，而环C是全氢化的。
本发明的目的
仍然存在对于具有已知化合物的稠合五环系统的新的活性化合物和对于海鞘素化合物和相关化合物的其它合成途径的需要。这样的合成途径可以提供对于已知抗肿瘤药物的更经济的途径，以及使得有可能制备新的活性化合物。本发明概述
一方面，本发明涉及已知化合物番红菌素B(也称为醌胺)在半合成合成中的用途。
一般而言，本发明涉及用于海鞘素的中间体、衍生物和有关结构或其它来自于天然的双(四氢异喹啉)类生物碱的四氢异喹啉酚化合物制备的半合成方法。用于半合成方法的合适的起始物质包括从不同培养物得到的各类番红霉素和番红菌素抗生素，并且也包括各类从海洋多孔动物中得到的reineramicin和xestomycin化合物。
所述起始化合物的通式(XV)如下：其中：R1是酰氨基亚甲基基团如-CH2-NH-CO-CR25aR25bR25c，其中R25a和R25b形成酮基或其一个是-OH、-NH2或-OCOCH3而另一个是-CH2COCH3、-H、OH或-OCOCH3，条件是当R25a是-OH或-NH2时，则R25b不是-OH，R25c是-H、-CH3或-CH2CH3，或R1是酰氧基亚甲基如-CH2-O-CO-R，其中R是-C(CH3)＝CH-CH3或-CH3；R5和R8独立选自-H、-OH或-OCOCH2OH，或R5和R8都是酮基和所述环A是对-苯醌环；R14a和R14b都是-H或一个是-H而另一个是-OH、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；R15和R18独立选自-H或-OH，或R5和R8都是酮基和所述环A是对-苯醌环；和R21是-OH或-CN。
如下提供这类化合物更一般的结构式：
Figure A0081008200201
其中由R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10所定义的取代基每一个独立选自H、OH、OCH3、CN、＝O、CH3；其中X是不同的酰胺或包含在所述天然产物中的酯官能团；其中每一个虚线环代表一个、两个或三个任选的双键。
因此，根据本发明，现在提供用于制备中间体包括中间体11的半合成途径并因此提供制备海鞘素化合物以及phthalascidin和其它化合物的半合成途径。本发明每一条半合成途径包括一系列转化步骤以便得到所需产物。其中的每一步是与本发明相适应的方法。本发明不限于所举例的途径，并且如果合适可以通过例如改变转化步骤的程序提供可替换的途径。
特别是，本发明涉及提供通式(XVI)的21-氰基原料：
Figure A0081008200211
其中R1、R5、R8、R14a、R14b、R15和R18如上所定义。
在21-位上具有不同取代基的式(XVI)的其它化合物也可以代表可能的原料。一般来说，任何能通过式(XV)化合物(其中R21是羟基)的21-羟基的亲核置换产生的衍生物是候选物。合适的21-取代基的实例包括(但不限于)：
巯基；
烷硫基(烷基具有1-6个碳原子)；
芳硫基(芳基具有6-10个碳原子且未取代或由1-5个选自例如具有
1-6个碳原子的烷基、具有1-6个碳原子的烷氧基、卤原子、巯基
和硝基的取代基取代)；
氨基；
一-或二烷基氨基(所述烷基或每个烷基具有1-6个碳原子)；
一-或二芳基氨基(所述烷基或每个烷基相对于如上芳硫基中所定
义)；
式-C(Ra)(Rb)-C(＝O)Rc的α-羰基烷基，其中
Ra和Rb选自氢原子、具有1-20个碳原子的烷基、芳基(如以上相
对于芳硫基所定义)和芳烷基(其中具有1-4个碳原子的烷基由如
以上相对于芳硫基所定义的芳基所取代)，条件是Ra和Rb之一是
氢原子；
Rc选自氢原子、具有1-20个碳原子的烷基、芳基(如以上相对于
芳硫基所定义)、芳烷基(其中具有1-4个碳原子的烷基由如以上相
对于芳硫基所定义的芳基所取代)、具有1-6个碳原子的烷氧基、
氨基或如上所定义的一-或二烷基氨基。
因此，在更一般的情况下，本发明涉及其中第一步是用亲核试剂形成21-衍生物的方法。我们称这类化合物为21-Nuc化合物。
对于一些终产物而言，特别是海鞘素770和phthalascidin，要求存在21-氰基，而对于其它终产物而言，21-氰基起到保护基的作用，其可以容易地转化为其它取代基，例如海鞘素743或21-羟基phthalascidin的21-羟基。采用21-氰基化合物作为原料，有效地在随后的合成步骤中使分子稳定，直至它被任选除去。其它21-Nuc化合物可以提供这些优势和其它的优势。
在一个重要的方面，本发明在于通式(XVI)的21-氰基化合物在制备双或三(四氢异喹啉酚)化合物中的用途。可以制备的产物包括中间体如中间体11，和海鞘素和phthalascidin，以及相关结构的新的和已知的化合物。
优选的原料包括那些式(XV)或(XVI)的化合物，其中R14a和R14b都是氢。优选的原料也包括式(XV)或(XVI)的化合物，其中R15是氢。另外，优选的原料包括式(XV)或(XVI)的化合物，其中环E是酚环。优选的原料还包括式(XV)或(XVI)的化合物，其中R5、R8、R15和R18中至少一个、最好至少两个或三个不是氢。
用于本发明的合适原料的实例包括番红霉素A、番红霉素B、番红霉素C、番红霉素G、番红霉素H、番红霉素S、番红霉素Y3、番红霉素Yd1、番红霉素Ad1、番红霉素Yd2、番红霉素AH2、番红霉素AH2Ac、番红霉素AH1、番红霉素AH1Ac、番红霉素AR3、renieramycinA、renieramycin B、renieramycin C、renieramycin D、renieramycin E、renieramycin F、xestomycin、番红霉素D、番红霉素F、番红霉素Mx-1、番红霉素Mx-2、番红菌素A、番红菌素B和番红霉素R。对于基团R21而言，优选的原料在21位上具有氰基。
在特别优选的方面，本发明涉及半合成方法，其中所述转化步骤适用于番红菌素B：
Figure A0081008200231
番红菌素B
番红菌素B显示出与海鞘素紧密相关的环系统。所述化合物具有相同的五环结构和在右手芳环-环E中相同的取代形式。番红菌素B也显示出与一些在ET-743全合成中的合成中间体、特别是与中间体11非常接近地相似性。这些中间体可以用已经建立的方法转化成Et-743。因此，合成转化番红菌素B为中间体11将提供获得ET-743的半合成方法。
因此，我们提供从化合物番红菌素B制备的中间体11，以及从中间体11衍生的化合物，特别是海鞘素化合物。我们还提供从番红菌素B制备的phthalascidin。本发明也涉及番红菌素B在制备中间体11、phthalascidin、海鞘素化合物和本发明其它中间体中的用途。本发明也涉及从其它所建议的原料衍生的本文所述的化合物，以及那些化合物在制备所述化合物中的用途。
本发明更优选的原料具有21-氰基。目前最优选的本发明化合物是式2的化合物。该化合物直接从番红菌素B获得并认为是在半合成方法中关键的中间体。
化合物2
在相关方面，我们提供通过发酵荧光假单胞菌的可产生番红菌素B菌株，并用氰化物离子处理培养物得到的氰基番红菌素B。优选的荧光假单胞菌株是菌珠A2-2，FERM BP-14，其用在EP 055,299的方法中。氰化物离子的合适的来源是氰化钾。在典型的处理中，将所述培养物过滤并加入过量的氰化物离子。在合适的搅拌间隔例如1小时后，使pH变为碱性，即pH为9.5，有机溶剂萃取得到粗制萃取物，将其进一步纯化得到氰基番红菌素B。
为避免产生疑问，本发明说明书中所述的立体化学是基于对已知的天然产物的正确的立体化学的理解。因而，发现在指定立体化学中的错误，然后在本发明说明书全文所给出的结构式中需要作出适当地改正。另外，所述合成方法可以进行改进，本发明包括立体异构体。
本发明的产物典型为式(XVIIa)：或式(XVIIb)化合物：
Figure A0081008200251
其中R1是任选保护或衍生的氨基亚甲基、任选保护或衍生的羟基亚甲基，例如其团R1如对式(XV)所定义；R4是-H；或R1和R4一起形成式(IV)、(V)、(VI)或(VII)的基团：R5是-H或-OH；R7是-OCH3和R8是-OH或R7和R8一起形成基团-O-CH2-O-；R14a和R14b都是-H或一个是-H，而另一个是-OH、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；和R15是-H或-OH；R21是-H、-OH或-CN；和衍生物包括其酰基衍生物，特别是其中R5是乙酰氧基或其它具有最多可达4个碳原子的酰氧基，并且包括其中在12位上的基团-NCH3-由-NH-或-NCH2CH3-代替的衍生物和其中式(VI)化合物中的-NH2基团被任选衍生化的衍生物。
在式(XVIIa)或(XVIIb)中，R1一般是氨基亚甲基、酰氨基亚甲基或R1与R4形成基团(IV)或(V)。合适的酰氨基亚甲基包括那些由丙氨酸衍生的式-CH2-NH-CO-CHCH3-NH2的基团和由其它氨基酸衍生的类似基团，所述氨基酸主要包括D和L型的甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、组氨酸和羟基脯氨酸。对于基团R1的通式则是-CH2-NH-aa，其中aa指氨基酸酰基。
基团R1可以在-NH2基团上被酰化，例如N-酰基衍生物可以由基团-CH2NH2和-CH2-NH-aa形成。所述酰基衍生物可以是其N-酰基或N-硫代酰基衍生物以及环酰胺。酰基基团的实例有链烷酰基、卤代链烷酰基、芳基链烷酰基、链烯酰基、杂环基酰基、芳酰基、芳基芳酰基、卤代芳酰基、硝基芳酰基或其它酰基基团。酰基基团可以是式-CO-Ra，其中Ra可以是不同的基团例如烷基、烷氧基、亚烷基、芳基烷基、芳基亚烷基、氨基酸酰基或杂环基，每一个任选由卤素、氰基、硝基、羧基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、杂环基、杂环氧基、烷基、氨基或取代的氨基取代。其它酰化剂包括异硫氰酸酯例如异硫氰酸芳基酯、特别是异氰酸苯酯。Ra的烷基、烷氧基或亚烷基适合具有1-6或12个碳原子，并可以是直链、支链或环状。芳基一般是苯基、联苯基或萘基。杂环基可以是芳族的或部分或完全不饱和的，并适合具有4-8个环原子，更优选5或6个环原子，具有一个或多个选自氮、硫和氧的杂原子。
并非包括无遗，典型的Ra基团包括烷基、卤代烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、芳基亚烷基、卤代烷基芳基亚烷基、酰基、卤代酰基、芳基烷基、链烯基和氨基酸。例如Ra-CO-可以是乙酰基、三氟乙酰基、2，2，2-三氯代乙氧基羰基、异戊酰羰基、反式-3-(三氟甲基)肉桂酰羰基、七氟代丁酰羰基、癸酰基羰基、反式-肉桂酰羰基、丁酰基羰基、3-氯代丙酰基羰基、肉桂酰羰基、4-甲基肉桂酰羰基、氢化肉桂酰羰基、或反式-己烯酰羰基、或丙氨酰基、精氨酰基、天冬氨酰基、天冬酰基、胱氨酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、甘氨酰基、组氨酰基、羟基脯氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、苯丙氨酰基、脯氨酰基、丝氨酰基、苏氨酰基、甲状腺原氨酰基、色氨酰基、酪氨酰基、缬氨酰基以及其它不常见的氨基酸酰基，以及苯二酰亚氨基和其它环酰胺。其它的实例可以在所列出的保护基团中发现。
其中-CO-Ra由氨基酸衍生并包括氨基的化合物其本身可以形成酰基衍生物。合适的N-酰基化合物包括二肽，其本身可以形成N-酰基衍生物。
在一种涉及中间体产物变体(variation)中，环A被修饰以便结合如在下文讨论的式(XX)或(XXI)所示的亚结构。
在另一涉及中间体的变体的方法中，基团R1可以是-CH2O-CO-CFu-CH2-S-Prot3，其由式(XIX)化合物衍生，其中Prot3和Fu具有所指定的意义。在这种情况下，R7和R8形成氧基亚甲基氧基。基团R18通常被保护。通常R21是氰基。
优选R14a和R14b是氢。优选R15是氢。所述O-酰基衍生物合适是脂族O-酰基衍生物，特别是具有1-4个碳原子的酰基衍生物并一般为O-乙酰基，主要在5-位上。
对于酚类和羟基的合适的保护基团包括醚和酯，例如烷基、烷氧基烷基、芳氧基烷基、烷氧基烷氧基烷基、烷基甲硅烷基烷氧基烷基、烷硫基烷基、芳硫基烷基、叠氮基烷基。氰基烷基、氯代烷基、杂环基、芳基酰基、卤代芳基酰基、环烷基烷基、链烯基、氯代烷基、烷基芳基烷基、烷氧基芳基烷基、硝基芳基烷基、卤代芳基烷基、烷基氨基羰基芳基烷基、烷基亚硫酰基芳基烷基、烷基甲硅烷基和其它醚以及芳基酰基、碳酸芳基烷基酯、脂族碳酸酯、碳酸烷基亚硫酰基芳基烷基酯、烷基碳酸酯、碳酸芳基卤代烷基酯、碳酸芳基链烯基酯、氨基甲酸芳基酯、烷基氧膦基、烷基硫膦基、芳基硫膦基、磺酸芳基烷基酯和其它酯。这些基团可以任选由以前在R1中所提到的基团取代。
对于胺的合适的保护基团包括氨基甲酸酯、酰胺和其它保护基团例如烷基、芳基烷基。磺基-或卤代-芳基烷基、卤代烷基、烷基甲硅烷基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、烷基芳基烷基、杂环基烷基、硝基芳基烷基、酰氨基烷基、硝基芳基联硫基芳基烷基、二环烷基酰胺基烷基、环烷基、链烯基、芳基链烯基、硝基芳基链烯基、杂环基链烯基、杂环基、羟基杂环基、烷基联硫基、烷氧基-或卤代-或烷基亚硫酰基芳基烷基、杂环酰基和其它氨基甲酸酯，以及链烷酰基、卤代链烷酰基、芳基链烷酰基、链烯酰基、杂环酰基、芳酰基、芳基芳酰基、卤代芳酰基、硝基芳酰基和其它酰胺以及烷基、链烯基、烷基甲硅烷基烷氧基烷基、烷氧基烷基、氰基烷基、杂环基、烷氧基芳基烷基、环烷基、硝基芳基、芳基烷基、烷氧基-或羟基-芳基烷基和许多其它基团。这些基团可以任选由以前在R1中提到的基团取代。
下列表中给出这些保护基团的实例。
                 对于-OH基团的保护
    醚                            缩写
    甲基
    甲氧基甲基                    MOM
    苄氧基甲基                    BOM
    甲氧基乙氧基甲基                    MEM
    2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基        SEM
    甲硫基甲基                          MTM
    苯硫基甲基                          PTM
    叠氮甲基
    氰基甲基
    2，2-二氯代-1，1-二氟代乙基
    2-氯代乙基
    2-溴代乙基
    四氢吡喃基                          THP
    1-乙氧基乙基                        EE
    苯甲酰甲基
    4-溴代苯甲酰甲基
    环丙基甲基
    烯丙基
    炔丙基
    异丙基
    环己基
    叔-丁基
    苄基
    2，6-二甲基苄基
    4-甲氧基苄基                        MPM或PMB
    邻-硝基苄基
    2，6-二氯代苄基
    3，4-二氯代苄基
    4-(二甲基氨基)羰基苄基
    4-甲基亚硫酰基苄基                  Msib
    9-蒽基甲基
    4-吡啶甲基
    七氟代-对-甲苯基
    四氟代-4-吡啶基
    三甲基甲硅烷基                   TMS
    叔-丁基二甲基甲硅烷基            TBDMS
    叔-丁基二苯基甲硅烷基            TBDPS
    三异丙基甲硅烷基                 TIPS
    酯
    甲酸芳基酯
    乙酸芳基酯
    乙酰丙酸芳基酯
    新戊酸芳基酯                      ArOPv
    苯甲酸芳基酯
    9-氟代甲酸芳基酯
    碳酸芳基甲基酯
    1-金刚烷基碳酸酯
    叔-丁基碳酸酯                     BOC-OAr
    4-甲基亚硫酰基苄基碳酸酯          Msz-Oar
    2，4-二甲基戊-3-基碳酸酯          Doc-Oar
    碳酸芳基2，2，2-三氯代乙基酯
    碳酸芳基乙烯基酯
    碳酸芳基苄基酯
    氨基甲酸芳基酯
    二甲基氧膦基                      Dmp-OAr
    二甲基硫膦基                            Mpt-OAr
    二苯基硫膦基                            Dpt-Oar
    甲磺酸芳基酯
    甲苯磺酸芳基酯
    2-甲酰基苯磺酸芳基酯
                      对于-NH2基团的保护氨基甲酸酯                                  缩写甲基乙基9-芴基甲基                                  Fmoc9-(2-磺基)芴基甲基9-(2，7-二溴代)芴基甲基17-四苯并[a，c，g，i]芴基甲基               Tbfmoc2-氯代-3-茚基甲基                           Climoc苯并[f]茚-3-基甲基                          Bimoc2，7-二-叔-丁基[9-(10，10-二氧代-10，10，10，10-四氢thioxanthyl)]甲基        DBD-Tmoc2，2，2-三氯代乙基                          Troc2-三甲基甲硅烷基乙基                        Teoc2-苯基乙基                                  hZ1-(1-金刚烷基)-1-甲基乙基                   Adpoc2-氯代乙基1，1-二甲基-2-氯代乙基1，1-二甲基-2-溴代乙基1，1-二甲基-2，2-二溴代乙基                 DB-t-BOC1，1-二甲基-2，2，2-三氯代乙基               TCBOC1-甲基-1-(4-联苯)乙基                        Bpoc1-(3，5-二-叔-丁基苯基)-1-1-甲基乙基         t-Burmeoc2-(2’-和4’-吡啶基)乙基                     Pyoc2，2-双(4’-硝基苯基)乙基                    Bnpeocn-(2-新戊酰氨基)-1，1-二甲基乙基2-[(2-硝基苯基)联硫基]-1-苯基乙基            NpSSPeoc2-(n，n-二环己基酰胺基)乙基叔-丁基                                      BOC1-金刚烷基                                   1-Adoc2-金刚烷基                                   2-Adoc乙烯基                                       Voc烯丙基                                       Aloc或Alloc1-异丙基烯丙基                               Ipaoc肉桂基                                       Coc4-硝基肉桂基                                 Noc3-(3’-吡啶基)丙-2-烯基8-喹啉基n-羟基哌啶基烷基联硫基苄基                                         Cbz或Z对-甲氧基苄基                                Moz对-硝基苄基                                  PNZ对-溴代苄基对-氯代苄基2，4-二氯代苄基4-甲基亚硫酰基苄基                           Msz9-蒽基甲基二苯基甲基吩噻嗪基-(10)-羰基n’-对-甲苯磺酰基氨基羰基n’-苯基氨基硫代羰基酰胺甲酰胺乙酰胺氯代乙酰胺三氟代乙酰胺                             TFA苯基乙酰胺3-苯基丙酰胺戊-4-烯酰胺吡啶甲酰胺3-吡啶基甲酰胺苯甲酰胺对-苯基苯甲酰胺n-苯邻二甲酰亚胺n-四氯代苯邻二甲酰亚胺                   TCP4-硝基-n-苯邻二甲酰亚胺n-二硫杂琥珀酰亚胺                       Dtsn-2，3-二苯基马来酰亚胺n-2，5-二甲基吡咯n-2，5-双(三异丙基甲烷烷氧基)吡咯        BIPSOPn-1，1，4，4-四甲基二硅氮杂环戊烷加合物  STABASE1，1，3，3-四甲基-1，3-二硅杂异吲哚啉    BSB特定的-NH保护基团n-甲胺n-叔-丁胺n-烯丙胺n-[(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲胺               SEMn-3-乙酸基丙胺n-氰基甲胺n-(1-异丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)胺n-2，4-二甲氧基苄胺                            Dmb2-氮杂降冰片烯n-2，4-二硝基苯胺n-苄胺                                         Bnn-4-甲氧基苄胺                                 MPMn-2，4-二甲氧基苄胺                            DMPMn-2-羟基苄胺                                   Hbnn-(二苯基甲基)氨基                             DPMn-双(4-甲氧基苯基)甲胺n-5-二苯并环庚基胺                             DBSn-三苯基甲胺                                   Trn-[(4-甲氧基苯基)二苯基甲基]氨基               MMTrn-9-苯基芴基胺                                 Pfn-三茂铁基甲胺                                 Fcmn-2-吡啶甲基胺n’-氧化物n-1，1-二甲硫基亚甲基胺n-亚苄基胺n-对-甲氧基亚苄基胺n-二苯基亚甲基胺n-(5，5-二甲基-3-氧代-1-环己烯基)胺n-硝基胺n-亚硝基胺二苯基phosphinamide                             Dpp二甲硫基phosphinamide                           Mpt二苯硫基phosphinamide                           Ppt二苄基phosphoramidate2-硝基苯磺酰亚胺                                Npsn-1-(2，2，2-三氟代-1，1-二苯基)乙基磺酰亚胺    TDE3-硝基-2-吡啶磺酰亚胺                           Npys对-甲苯磺酰胺                                   Ts苯磺酰胺
番红菌素B包括丙氨酰侧链。在本发明的一个方面，已发现用Boc基团保护的游离氨基可以产生很大的优势。
本发明具体的海鞘素产物包括式(XVIII)的化合物：
Figure A0081008200351
其中R1和R4形成式(IV)、(V)、(VI)或(VII)的基团：
Figure A0081008200352
更优选基团(IV)或(V)；R21是-H、-OH或-CN，更优选-OH或-CN；和其酰基衍生物，更优选5-酰基衍生物包括5-乙酰基衍生物。海鞘素743和相关化合物的制备
通常，将21-氰基起始化合物转化为例如式(XVIII)的海鞘素产物的过程包括：a)如果需要，将环E的醌系统转化为酚系统；b)如果需要，将环A的醌系统转化为酚系统；c)将环A的酚系统转化为亚甲二氧基酚环；d)形成式(IV)、(VI)或(VII)的跨越环B的1-位和4-位的桥接螺环系统；和e)适当衍生化，例如酰化。
步骤(a)，如果需要将环E的醌系统转化为酚系统的过程可以通过常规的还原方法完成。合适的试剂体系是氢与披钯碳催化剂，尽管可以使用其它的还原体系。
步骤(b)，如果需要将环A的醌系统转化为酚系统的过程与步骤(a)类似，不必作更多的说明。
步骤(c)，将环A的酚系统转化为亚甲二氧基酚环的过程可以以几种方法完成，可能伴随着步骤(b)。例如，可以将醌环A的7-位上的甲氧基取代基脱甲基化并还原成二氢醌，用合适的亲电子试剂如CH2Br2、BrCH2Cl捕获或用类似的二价试剂直接得到亚甲二氧基环系，或用二价试剂如硫代羰基二咪唑得到取代的亚甲二氧基环系，该系统可以转化为所需的环。
步骤(d)一般可以通过如下步骤完成：在1-位上用桥键形成剂(可以帮助形成所需的桥)合适的取代，在4-位上形成内外(exendo)醌甲基化物并使该甲基化物能与所述1-取代基反应产生桥接结构。优选的桥键形成剂是式(XIX)的桥键形成剂：
Figure A0081008200371
其中Fu表示被保护的官能团，例如基团-NHProt4a或OProt4b，Prot3是保护基团，虚线表示任选的双键。
通过首先在环A和B连接点的10-位上导入羟基以便得到式(XX)的部分结构：
Figure A0081008200372
或更优选的式(XXI)的部分结构来适当地形成所述甲基化物：其中基团R”选自式(IV)、(V)、(VI)或(VII)的所需基团。对于前两个基团而言，所述基团R”一般取-CHFu-CH2-SProt3的形式。然后，可以除去所述保护基团并被适当改性以便得到所需的化合物。
美国专利5,721,362中提供了步骤(d)的一般方法，结合到本文中作为参考。具体内容可以参考该美国专利第8栏步骤(1)和实施例33的内容和相关的内容。
在步骤(e)中的衍生化过程可以包括例如用基团Ra-CO-酰化以及将12-NCH3基团转化为12-NH或12-NCH2CH3。这类转化可以使用现有的方法在其它步骤之前或之后进行。
通过举例说明，现在能将式2的氰基番红菌素B化合物转变为ET-743，导致与以前所述的方法相比，时间更短和更简单的生产ET-743的方法。可以将氰基番红菌素B转变为中间体25，
Figure A0081008200381
并且从这个衍生物中可能产生一系列半胱氨酸衍生物，其其后可以转变为Et-743。通过以下两个化合物举例说明优选的半胱氨酸衍生物：
Figure A0081008200382
在方案I中叙述了利用化合物29逆合成分析制备ET-743。方案I
按照以上方案I，可能以21个线性步骤得到ET-743。所述方法通过依次反应将氰基番红菌素B转变为中间体25，该方法基本上包括(1)除去位于环A中的甲氧基，(2)将环A还原并且在一个反应器中形成亚甲基-二氧基，(3)将位于碳1上的酰胺官能团水解，(4)将得到的胺基转化为羟基。此外，所述方法避免化合物25的环B中位置1上的伯醇官能团的保护和脱保护，直接使用半胱氨酸残基29形成中间体27。在所述氨基中用β-β-β-三氯代乙氧基羰基保护基团保护半胱氨酸衍生物29，以便具有与存在的烯丙基和MOM基团的相容性。将中间体27直接氧化和环化。这些情况与合成的最后阶段中不同的脱保护对策一起使得所述路线成为新的路线并使其比美国专利5,721,362的方法更适合于工业开发。
将2-氰基化合物转化为中间体25通常包括以下步骤(参见方案II)：通过使2与叔-丁氧基羰基酐反应，生成式14保护的化合物；通过使其与溴代甲基甲基醚和二异丙基乙胺在乙腈中反应，将14转化为式15的二重-保护的化合物；通过使其与氢氧化钠的甲醇溶液反应，选择地消去在15中醌系统的甲氧基以获得式16的化合物；通过使用下一个优先程序将16转变为式18的亚甲基-二氧基化合物：(1)在氢气氛下，用10％Pd/C将化合物16的醌基团还原；(2)通过在氢气氛下与溴代氯代甲烷和碳酸铯反应，将氢醌中间体转化为式17的亚甲基二氧基化合物；(3)通过保护游离羟基为OCH2R基团，将17转变为式18的化合物。采用BrCH2R和碳酸铯进行该反应，其中R可以是芳基、CH＝CH2、OR’等；通过与HCl的二噁烷溶液反应，将18的叔-丁氧基羰基和甲氧基甲基保护基团消去以便得到式19的化合物。该反应也可以通过将18与三氟代乙酸的二氯甲烷溶液混合完成；通过使19与异硫氰酸苯酯反应，生产式20的硫脲化合物；通过与氯化氢的二噁烷溶液反应，将式20的化合物转化为式21的胺化合物；通过与氯甲酸三氯代乙基酯和吡啶反应，将式21的化合物转变为N-Troc衍生物22；通过使22与溴代甲基甲基醚和二异丙基乙胺反应，生产式23的被保护的羟基化合物；通过与乙酸和锌反应，将式23的化合物转变为N-H衍生物24；通过与亚硝酸钠的乙酸溶液反应，将式24的化合物转化为式25的羟基化合物。或者，可以在乙酸和乙腈的混合物中使用四氧化二氮，随后通过用氢氧化钠处理。也可以在乙酐-乙酸混合物中使用亚硝酸钠，随后用氢氧化钠处理。
Figure A0081008200411
方案II
使用半胱氨酸衍生物29将中间体25化合物转化为ET-743通常包括以下步骤(参见方案III)：通过使用(S)-N-2，2，2-三氯代乙氧基羰基-S-(9H-芴-9-基甲基)半胱氨酸29保护伯羟基官能团，将式24的化合物转变为衍生物30；通过使用氢化三丁基锡和二氯化钯-双(三苯膦)将烯丙基裂解，将式30的保护的化合物转化为酚衍生物31；通过用苯亚硒酸酐在低温下氧化，将式31的酚化合物转变为式32的化合物；通过下列程序将式32羟基化合物转变为内酯33：(1)使式32的化合物与2当量的三氟甲磺酸酐和5当量DMSO反应，(2)随后与8当量的二异丙基乙胺反应，(3)随后与4当量的叔-丁醇反应(4)随后与7当量的2-叔-丁基-1，1，3，3-四甲基胍反应，(5)随后与10当量的乙酐反应；通过使用TMSI将MOM保护基团除去，将内酯化合物33转变为羟基化合物34；通过与Zn/AcOH反应，将式34化合物的N-三氯代乙氧基羰基裂解得到化合物35；通过与N-甲基吡啶鎓甲醛氯化物、随后与DBU反应，将氨基化合物35转变为相应的α-酮基内酯化合物36；通过使式36的化合物与3-羟基-4-甲氧基苯基乙胺反应，形成ET-770；通过与硝酸银在AcN/H2O混合物中反应，将ET-770转变为ET-743。
Figure A0081008200421
方案III
以上所述将中间体25转变为ET-743的途径可以用其它半胱氨酸衍生物例如化合物37即2-甲氧基甲基氧基-3-(9H-芴-9-基甲基)-硫代-丙烯酸方便地改进。所述化合物已经以烯醇醚的形式结合了酮基，而在其它的半胱氨酸类似物中，存在氨基，该氨基必须在其后经氨基交换反应，以55-60％的适度产率转变为酮基。因此，因为避免了氨基交换步骤，使用化合物37可能显著地增加线性合成的产率。
除了转变(f)和(g)外，使用半胱氨酸衍生物37可以与使用半胱氨酸衍生物29相似的方法和相同的试剂将中间体化合物25转化为ET-743。所述反应程序在以下方案(方案IV)中说明：
Figure A0081008200441
方案IV
也可以通过美国专利第5,721,362号中所述的中间体12与对该专利所述途径提供改进的中间体37反应形成化合物38。phthalascidin和相关化合物的制备。
在本发明中，一类重要的产物包括phthalascidin并具有以下通式(XX)：其中R1是氨基亚甲基；R5是小的氧基-侧键；和R21是氰基或羟基。对于phthalascidin而言，R1是苯二酰亚氨基亚甲基；R5是乙酸基；和R21是氰基。对于R1的其它基团包括单-和双-N-取代的酰氨基亚甲基以及其它环酰氨基亚甲基，对于R5的其它基团还包括C1-C4酰基以及C1-C4烷基。
将21-氰基化合物转化为phthalascidin或式(XX)的相关产物一般包括以下步骤：a)如果需要，将环E的醌系统转化为酚系统；b)在环A的5-位上形成-R5基团；c)在环B的1-位上形成R1基团；和d)如果需要，将环A的醌系统转化为酚系统；e)将环A的酚系统转化为亚甲基二氧基酚环。
这些步骤具有与用于制备海鞘素所给出的步骤许多相似性。步骤(c)一般包括在1-位上形成基团-CH2NH2并将其酰化。
使用在将氰基番红菌素B转化为中间体25中所述的中间体，制备phthalascidin。例如中间体21和17是制备phthalascidin的合适的原料。
如以上在方案V中所示，用于从中间体21开始合成制备phthalascidin的方法包括以下程序步骤：通过与邻苯二甲酸酐在二氯甲烷和羰基二咪唑中反应，将21转变为式27的化合物。通过与氢化三丁基锡和二氯化钯-双(三苯膦)或碱性介质反应，随后与乙酰氯反应，将27转化为phthalascidin。
Figure A0081008200461
方案V
如以上在方案VI中所示，用于从中间体17开始合成制备phthalascidin的方法包括以下程序步骤：用乙酰氯和吡啶将式17化合物的羟基乙酰化，得到式42乙酰化的中间化合物；通过与HCl的二噁烷溶液反应，将42的叔-丁氧基羰基和甲氧基甲基保护基团除去，得到式43的化合物。该反应也可以通过将42与三氟乙酸的二氯甲烷溶液混合完成；通过使43与异硫氰酸苯酯反应，制备式44的硫脲化合物；通过与氯化氢的二噁烷溶液反应，将式44的化合物转化为式45的胺化合物；通过与邻苯二甲酸酐在二氯甲烷和羰基二咪唑中反应，将45转变为phthalascidin。
Figure A0081008200471
方案VI中间体11和相关中间体的制备。在以下程序中叙述逆合成分析。
在本发明中，一类重要的中间体包括中间体11并具有通式(XXI)：
Figure A0081008200473
其中Proc1和Proc2是羟基保护基团，优选为不同的基团。通常Proc1根据需要按常规选择。通常Proc2根据需要按常规选择。对于中间体11本身，基团Proc1是甲氧基甲基和Proc2是叔-丁基二苯基甲硅烷基。
将所述21-氰基化合物转化为中间体11或式(XXI)的相关的中间体的过程一般包括以下步骤：a)如果需要，将环E的醌系统转化为酚系统；b)在环E的18-位上形成-OProt1基团；c)在环B的1-位上形成-CH2-OProt2基团；和d)如果需要，将环A的醌系统转化为酚系统；e)将环A的酚系统转化为亚甲基二氧基酚环。
步骤(b)，在环E的18-位上形成-OProt1基团，一般是对于酚基团的保护反应并且不必专门评述。根据保护基团的特性选择合适的条件。所述其它步骤与其它的反应相似。
步骤(b)，在环B的1-位上形成-CH2-OProt2基团，通常通过在1-位上形成-CH2NH2、然后将胺官能团转化为羟基官能团并保护进行。因此，当起始物质具有基团R1(其是-CH2-NH-CO-CR25aR25bR25c)时，则需要除去N-酰基。当起始物质具有R1(其是-CH2-O-CO-R)时，对于其中取代基R1是相同的海鞘素产物可以不需要改变。对于其它产物而言，都需要除去O-酰基。该脱酰基作用可以采用各种方法。在一种变体中，使脱酰基作用和转化为羟基官能团在一个步骤中进行。因此，所述羟基可以被酰化或另外被转化，得到合适的R1基团。
U.S专利号5,721,362叙述了通过长的多步合成生产ET-743的合成方法。该合成的中间体之一是中间体11。用氰基番红菌素B作为起始物质可能得到中间体11，以提供更短的途径生产这类中间体并因此改进生产ET-743的方法。
通过以上所述的方法，氰基番红菌素B可以转化为中间体25。利用以下步骤，从中间体25中可能得到中间体11，参见方案VII：
通过使25与叔-丁基二苯基甲硅烷基氯在碱存在下反应，制备式26的保护的羟基化合物；
最后，用氢化丁基锡和二氯化钯-双(三苯膦)裂解26中的烯丙基导致中间体11的形成。
Figure A0081008200491
方案VII
本发明将番红菌素B转变为中间体11的合成方法的一个实施方案是方案VIII的改进和扩展并包括以下程序步骤：通过与KCN在酸性介质中反应，选择性地用CN置换OH，将式1的化合物(番红菌素B)立体选择性地转化为式2的化合物；通过使式2的化合物与异硫氰酸苯酯反应，制备式3的硫脲化合物；通过在酸性介质中水解、随后加入乙酐，将式3的硫脲化合物转化为式5的乙酰胺；通过用碳酸氢钠猝灭所述在酸性介质中的水解，可以分离式4的中间体胺化合物，但是所述中间体为高度不稳定并很快转变为五元环亚胺，即化合物6；通过与溴代甲基甲基醚和二异丙基乙胺在二氯甲烷中反应，制备式7被保护的化合物；通过与氢氧化钠的甲醇溶液反应，将式7化合物醌系统的甲氧基选择性脱甲基化为式8的化合物；通过优选的以下程序将式8的化合物转变为式9的亚甲基二氧基-化合物：(1)在氢气氛下，用10％Pd/C还原式8化合物的醌基团；(2)在氢气氛下，通过与溴代氯代甲烷和碳酸铯反应将氢醌中间体转化为式9的亚甲基二氧基化合物；(3)通过与BrCH2R和碳酸铯(其中R可以是酰基、CH＝CH2、OR’等)反应，保护游离羟基为OCH2R基团，将式9的化合物转变为式10的化合物；通过与四氧化二氮在乙酸和乙酸乙酯的混合物中反应，随后用氢氧化钠处理，将式10化合物的乙酰胺基团转化为式11的相应羟基基团；或者可以使用在乙酐和乙酸混合物中的亚硝酸钠，随后用氢氧化钠处理；或者通过与肼或与Boc2O、DMAP，随后与肼反应，将式10化合物的乙酰胺基团转化为伯胺基团；通过用4-甲酰基-1-甲基吡啶鎓苯磺酸盐或其它吡啶鎓离子，随后用DBU或其它碱处理并进一步水解，将伯胺氧化转化为相应的醛并随后用氢化锂铝或其它还原剂将该醛还原为相应的羟基，可以将所述伯胺转化为相应的羟基基团(式11的化合物)；通过与叔-丁基二苯基甲硅烷基氯和二甲基氨基吡啶在二氯甲烷中反应，制备式26的被保护的化合物；通过在还原条件或酸性条件下反应，使所述OCH2R保护基团脱保护，将式26的甲硅烷基化的化合物转变为中间体11。典型的方法包括氢气氛下的钯黑，或含水TFA，或氢化三丁基锡和二氯化双(三苯膦合钯)。
在另一优选的改进中，利用方案II的扩展可以将式2的氰基化合物转变为中间体11，包括其它步骤：通过使25与叔-丁基二苯基甲硅烷基氯在碱存在下反应，制备式26被保护的羟基化合物；最后，用氢化三丁基锡和二氯化钯-双(三苯膦)将26中烯丙基裂解，导致中间体11的形成。活性化合物的制备
可以将氰基番红菌素B转变为一些具有潜在抗肿瘤治疗活性的中间体和衍生物。这些中间体可以从已经叙述的化合物开始或利用可替换途径制备。
这里所述的中间体包括化合物47和一些利用化合物45或43制备的酰胺衍生物。
在方案VIII中描述用以下程序制备化合物47：通过使式2的化合物与异硫氰酸苯酯反应，制备式3的硫脲化合物；通过在酸性介质中水解，随后加入乙酐，将式3的硫脲化合物转化为式5的乙酰胺；通过用碳酸氢钠猝灭在酸性介质中的水解可以分离式4的中间体胺化合物，但是该中间体为高度不稳定并很快转变为五元环亚胺，即化合物6；通过与溴代甲基甲基醚和二异丙基乙胺在二氯甲烷中反应，制备式7的被保护的化合物；通过与氢氧化钠的甲醇溶液反应，将式7化合物醌系统的甲氧基选择性脱甲基化为式8的化合物；通过优选的以下程序将式8的化合物转变为式10的亚甲基二氧基化合物：(1)在氢气氛下，用10％Pd/C将式8化合物的醌基团还原；(2)在氢气氛下，通过与溴代氯代甲烷和碳酸铯反应将氢醌中间体转化为式9的亚甲基二氧基化合物；(3)通过使与烯丙基-溴和碳酸铯反应，保护游离羟基为烯丙氧基，将式9的化合物转变为式10的化合物；通过与乙酰氯在吡啶中反应，将式9的化合物转变为乙酰基-衍生物46；通过与盐酸在二噁烷中反应，将式46的化合物转变为脱保护的化合物47。
Figure A0081008200521
方案VIII
利用下一个方案，从已叙述的中间体45制备其它有用的酰胺中间体衍生物：
Figure A0081008200531
第二步是任选的。该方法是本发明的一个重要部分，特别是当基团R是以前所定义的基团Ra时。另外，通过包括在5-位上具有不同基团，直接用于产物的基团或可以被除去的基团或者被改性为所需的基团的起始物，方案VIII可以容易地扩展使能够制备式(XXIII)的化合物。方案IX
通过以下程序，从化合物45可以制备一组类似物：通过许多酰基衍生物将式45的化合物的氨基酰化以便提供相应的酰胺，其中优选的酰基是乙酰基、肉桂酰氯、对-三氟代肉桂酰氯、异戊酰氯、异硫氰酸苯酯或氨基酸；或前述提供RaCO-基团的其它实例；通过与硝酸银在AcN/H2O的混合物中反应，将CN基团转化为OH基团。
用以下方案，从已经叙述的中间体43制备其它有用的酰胺中间体衍生物：
Figure A0081008200541
方案X
用以下程序，从化合物43可以得到另一组重要的中间体衍生物：(a)通过许多酰基衍生物将式43的化合物的氨基酰化以便提供相应的酰胺，其中优选的酰基是乙酰基、肉桂酰氯、对-三氟代肉桂酰氯、异戊酰氯或氨基酸，或前述提供RaCO-基团的其它实例。(b)通过与硝酸银在AcN/H2O的混合物中反应，将CN基团转变为OH基团。新的中间体化合物
根据以前的解释，可以看出本发明提供新的中间体化合物。根据环A，中间体是式(XXIIa)：或式(XXIIb)的化合物：其中R1是-CH2NH2或-CH2OH，或是该基团的保护或衍生化的形式和R4是-H；或R1a和R4一起形成式(IV)、(VI)或(VII)的基团：
Figure A0081008200553
R5是-OH或该基团的保护或衍生化的形式；R14a和R14b均是-H或者一个是-H而另一个是-OH或该基团的保护或衍生化的形式、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；R12是-NH、-NCH3或-NCH2CH3-；R15是-OH或该基团的保护或衍生化的形式；和R18是-OH或该基团的保护或衍生化的形式。
在一个实施方案中，优选至少R1、R5、R14a、R14b、R15或R18是保护或衍生化的基团。
在本发明的一个变体中，基团R1不是3，5-叔-丁基二苯基甲硅烷基取代基和/或基团R18不是甲氧基甲基。
优选R1是-CH2NH2或-CH2OH，或该基团的保护或衍生化的形式，R4是-H；或R1a和R4一起形成以下基团：
优选R14a和R14b都是-H。
一类优选的中间体包括鉴定为化合物25的下式化合物：
Figure A0081008200562
因此，优选的类型是其中基团MOM由任何其它保护基团代替的通式化合物。
其它优选的中间体包括鉴定为化合物45和47的化合物。其它N-酰基衍生物可以容易地由化合物45制备并且是本发明的重要部分。合适的酰基包括那些前面提到的基团。相应的21-羟基化合物也是有用的并包括在我们已发现的活性化合物之中。新的活性化合物
已经另外发现一些本发明的、最初制备作为中间体的化合物在治疗癌症如白血病、肺癌、结肠癌、肾癌和黑素瘤方面具有优越的活性。
因此，本发明提供治疗任何患有癌症的哺乳动物、特别是人的方法，所述方法包括给予患者治疗有效量的本发明的化合物或其药用组合物。
本发明也涉及药物制剂，其含有作为活性成分的本发明的一种化合物或多种化合物，以及制备它们的方法。
药用组合物的实例包括具有合适的组成的任何固体(片剂、丸剂、胶囊、颗粒剂等)或液体(溶液、悬浮液或乳剂)，或者口服、局部给药或者肠胃外给药，并且它们可以含有纯的化合物或与任何载体或其它药理活性化合物组合。当肠胃外给药时这些组合物必须是无菌的。
可以通过任何合适的方法给予本发明的化合物或组合物，例如静脉内输注、口服、腹膜内和静脉内给药。输注的时间最长可达24小时，更优选2-12小时，最优选2-6小时。短的输注时间(使得不必在医院过夜而进行的治疗)是特别理想的。然而，如果需要输注时间可以是12-24小时或更长时间。输注可以以合适的大约2-4周的间隔进行。含有本发明化合物的药用组合物可以通过脂质体或毫微球体(nanosphere)包封物、以缓释剂或经其它标准的传递方法给药。
化合物正确的剂量将根据具体的制剂、给药的方法和特定的部位、宿主和所治疗的肿瘤变化。还应该考虑其它因素如年龄、体重、性别、饮食、给药的时间、排泄的速度、宿主的状态、药物的组合、反应的敏感性和疾病的严重程度。可以在最大容许剂量范围内持续地或间歇地给药。
本发明的化合物和组合物可以与其它药物一起使用以提供联合治疗。所述其它药物可以形成同一组合物的一部分或作为独立的组合物在同一时间或不同时间给药。对所述其它药物没有具体限制，合适的候选药物包括：a)具有抗有丝分裂作用、特别是具有针对细胞骨架成分作用的药物，包括微管调节剂例如紫杉烷药物(如紫杉酚、紫杉醇(paclitaxel)、taxotere、docetaxel)，鬼臼毒素或长春花生物碱(长春新碱、长春碱)；b)抗代谢物药如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他滨、嘌呤类似物(如喷司他丁、甲氨蝶呤)；c)烷化剂例如氮芥类(如环磷酰胺或异环磷酰胺)；d)以DNA为靶目标的药物例如antracycline类药物阿霉素、多柔比星、表阿霉素或表柔比星；e)以交连异构酶为靶目标的药物如依托泊苷；f)激素或激素兴奋剂或拮抗剂如雌激素、抗雌激素(他莫昔芬和有关的化合物)和雄激素、氟他胺、亮丙瑞林、戈舍瑞林、环丙孕酮或奥曲肽；g)以肿瘤细胞中信号转导为靶目标的药物，包括抗体衍生物如herceptin；h)烷化药物如铂剂(顺铂、卡铂、奥沙利铂、paraplatin)或亚硝基脲；i)对肿瘤转移有潜在影响的药物如基质金属蛋白酶抑制剂；j)基因疗法和反义药物；k)抗体疗法；l)海洋起源的其它生物活性化合物，特别是didemnins如aplidine；m)类固醇类似物，特别是地塞米松；n)抗炎药物，特别是地塞米松；和o)止吐药物，特别是地塞米松。
本发明也涉及本发明的化合物在治疗方法中的用途和在制备用于治疗癌症的组合物中的用途。细胞毒素的活性
细胞培养物。将细胞在含有Eagle氏平衡盐、2.0mM L-谷氨酰胺、非-必需氨基酸、没有碳酸氢钠；补充10％胎牛血清(FCS)、10-2M碳酸氢钠和0.1g/l青霉素G+硫酸链霉素的Eagle氏极限必需培养基(EMEM/neaa)中维持在对数生长期。
利用由Bergeron等(1984)所描述方法的改进形式来进行简单筛选过程以便测定和对比这些化合物的抗癌活性。所用的肿瘤细胞系是P-388(来自DBA/2小鼠的淋巴瘤悬浮培养物)、A-549(人的肺癌的单层培养物)、HT-29(人的结肠癌的单层培养物)和MEL-28(人的黑素瘤的单层培养物)。
将P-388细胞以每孔1×104细胞接种在含有指定浓度的药物的1ml MEM 5FCS的等分试样的16mm孔中。接种单独的一组不含药物的培养基作为对照生长以确保细胞保持在指数生长期。以一式两份进行所有测定。在37℃、10％CO2的98％湿度下孵育三天后，用0.1％的结晶紫染色。通过对比含有药物的孔中的生长与对照孔中的生长，确定近似的IC50。
将A-549、HT-29和MEL-28接种在含有指示药物浓度的1mlMEM 10FCS的等分式样、以每孔1×104细胞的16mm孔中。作为对照组，培养物的单数行没有接种药物以保证所述细胞维持在生长指数期。以双份进行所有测定。在37℃、10％CO2的98％湿度下孵育三天后，用0.1％结晶紫将所述孔染色。通过对比具有药物的孔中的生长和对照组孔中的生长，确定近似的IC50。
1.Raymond J.Bergeron，Paul F.Cavanaugh，Jr.，Steven J.Kline.Robert G.Hughes，Jr.，Gary T.Elliot和Carl W.Porter。亚精胺儿茶酚胺铁鳌合剂的抗肿瘤和抗疱疹活性。Biochem.Bioph.Res.Comm.1984，121(3)，848-854。
2.Alan C.Schroeder，Robert G.Hughes，Jr.和Alexander Bloch.无环嘧啶核苷类似物的作用。J.Med.Chem.1981，24 1078-1083。细胞毒素的活性
Figure A0081008200601
Figure A0081008200621
Figure A0081008200631
Figure A0081008200641
从该活性数据和其它研究中可以看出，本发明的活性化合物包括一类优选的通式(XXIII)的化合物：
Figure A0081008200652
其中R1如在前文中对式(XVIIb)所定义并优选是中等体积的衍生化的氨基亚甲基；
R5如在前文中对式(XVIIb)所定义并优选是小体积的衍生化的羟基；
R12如在前文中所定义并优选是-NCH3-和
R21是羟基或氰基。
R1合适是疏水基并且其因此缺乏游离氨基、羟基或其它疏水官能团。典型的R1是基团-CH2-NH2-CO-Ra，其中Ra如上所定义，但优选具有少于20个原子、更优选少于15或10个原子的线性链长度，其中1，4-苯基可以被认为是四个原子的链长度并且类似的意义适用于其它环基团(例如1，2-环己基是两个原子的链长度)，少于10、15或20个原子的线性链本身可以被取代。特别是，所述数据提示在不具有所述基团Ra-CO-与具有庞大的基团之间可以达到平衡。
在一种变体中，优选R1不含有环状基团，特别是芳族基团。在有关的变体中，本发明不制备Proc.Natl.Acad.Sci.USA，96，3496-3051，1999(结合到本文中作为参考)中所叙述的化合物。对于R1优选的基团不包括在所述文章的表1中所示的相应的取代基CH2R2，特别是对于R2的基团A、B、C和D。
R5优选乙酰基。
在特别优选的化合物中，基团R1在-NH2基团上被乙酰化，例如N-酰基衍生物可以从基团-CH2NH2和-CH2-NH-aa形成。所述酰基衍生物可以是其N-酰基或N-硫代酰基衍生物。所述酰基可以是式-CO-Ra，其中Ra如上所定义并选择Ra以便符合所述标准。合适的酰基包括丙氨酰基、精氨酰基、天冬氨酰基、天冬酰基、胱氨酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、甘氨酰基、组氨酰基、羟基脯氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、苯丙氨酰基、脯氨酰基、丝氨酰基、苏氨酰基、甲状腺原氨酰基、色氨酰基、酪氨酰基、缬氨酰基以及其它氨基酸酰基。优选在氨基上将这些氨基酸酰基衍生化以便产生疏水性。
在一种变体中，基团R1是衍生化的羟基亚甲基。类似的意义适用于衍生化的氨基亚甲基。
就活性化合物而言，本发明的重要方法如下：
Figure A0081008200671
其中对于终产物的R5如对化合物(XXXII)所定义并且在所述原料中可以不同并且在其中被转化作为所述方法的一部分，R18在终产物中是羟基，但是可以是原料中的保护羟基并且在其中被转化作为所述方法的一部分，对于终产物的R12可以与在原料中的相同或可以在其中被转化作为所述方法的一部分，对于终产物的R21如上所定义并且如果是羟基，可以由氰基形成作为所述方法的一部分，Ra如上所定义并可以进一步酰化作为所述方法的一部分以便得到具有如所述的酰化Ra基团的终产物。
在原料中R5优选乙酰基或其它小的酰基并且在反应中不起变化。在原料中R18优选羟基并且在反应中不起变化。在原料中R12优选-NCH3并且在反应中不起变化。终产物的R21如上所定义并且假定羟基可以由氰基形成作为所述方法的一部分。在最终产物中Ra优选如在有关对式(XXIII)的化合物中所定义。
本发明的另一个重要方法包括以下反应：
本发明的另一个重要方法包括以下反应：
Figure A0081008200681
本发明的另一个重要方法包括以下反应，其中基团R1是可以转化为羟基亚甲基的氨基亚甲基。
本发明的另一个重要方法包括以下反应，其中具有R1是羟基亚甲基的化合物可以与式(XIX)的试剂反应其中Fu表示被保护的官能团，Prot3是保护基团，虚线表示任选的双键。
本发明的另一个重要方法包括用于制备式(XVI)的21-氰基化合物的反应，其包括使式(XV)的化合物：
Figure A0081008200683
其中R1、R5、R8、R14a、R14b、R15和R18如上所定义和R21是羟基，与氰化物离子源反应，得到所需的21-氰基化合物。
另外，也设想利用其它含有亲核体的化合物制备式(XVI)的类似化合物的方法，其中21-位由另一个亲核基团21-Nuc基团保护。例如在21-位上具有烷基氨基取代基的式(XVI)的21-Nuc化合物可以通过其中R21是羟基的式(XV)的化合物与合适的烷基胺反应制备。在21-位上具有烷硫基取代基的式(XVI)的21-Nuc化合物也可以通过其中R21是羟基的式(XV)的化合物与合适的链烷硫醇反应制备。或者，在21-位上具有α-羰基烷基的式(XVI)的21-Nuc化合物可以通过其中R21是羟基的式(XV)的化合物与合适的羰基化合物，特别是在碱存在下反应制备。其它合成途径适用于制备其它21-Nuc化合物。
本发明另一个重要的反应涉及处理本发明的21-氰基产物以便形成21-羟基化合物。这些化合物具有重要的体内性质。
实施例实施例1
Figure A0081008200691
向2(21.53g，39.17ml)的乙醇(200ml)溶液中加入叔-丁氧基羰基酐(7.7g，35.25ml)并将该混合物在23℃下搅拌7小时。然后将反应物在真空中浓缩并将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯6∶4)纯化，得到14(20.6 g，81％)，为黄色固体。Rf：0.52(乙酸乙酯∶CHCl3 5∶2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.49(s，1H)，6.32(bs，1H)，5.26(bs，1H)，4.60(bs，1H)，4.14(d，J＝2.4Hz，1H)，4.05(d，J＝2.4Hz，1H)，3.94(s，3H)，3.81(d，J＝4.8Hz，1H)，3.7(s，3H)，3.34(br d，J＝7.2Hz，1H)，3.18-3.00(m，5H)，2.44(d，J＝18.3Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.24(s，3H)，1.82(s，3H)，1.80-1.65(m，1H)，1.48(s，9H)，0.86(d，J＝5.7Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.5，180.8，172.7，155.9，154.5，147.3，143.3，141.5，135.3，130.4，129.2，127.5，120.2，117.4，116.9，80.2，60.7，60.3，58.5，55.9，55.8，54.9，54.4，50.0，41.6，40.3，28.0，25.3，24.0，18.1，15.6，8.5。ESI-MS m/z：对于C34H43N5O8计算值：649.7，实测值(M+H)+：650.3。实施例2
Figure A0081008200701
在0℃下，向搅拌的14(20.6g，31.75ml)的CH3CN(159ml)溶液中加入二异丙基乙胺(82.96ml，476.2ml)、甲氧基亚甲基溴(25.9ml，317.5ml)和二甲基氨基吡啶(155mg，1.27ml)。将该混合物在23℃下搅拌24小时。用0.1 N HCl水溶液(750ml)将该反应物在0℃下猝灭(pH＝5)并用CH2Cl2(2×400ml)萃取。干燥(硫酸钠)有机层并在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度己烷∶乙酸乙酯4∶1至己烷∶乙酸乙酯3∶2)纯化，得到15(17.6g，83％)为黄色固体。Rf：0.38(己烷∶乙酸乙酯3∶7)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.73(s，1H)，5.35(bs，1H)，5.13(s，2H)，4.50(bs，1H)，4.25(d，J＝2.7Hz，1H)，4.03(d，J＝2.7Hz，1H)，3.97(s，3H)，3.84(bs，1H)，3.82-3.65(m，1H)，3.69(s，3H)，3.56(s，3H)，3.39-3.37(m，1H)，3.20-3.00(m，5H)，2.46(d，J＝18Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.23(s，3H)，1.85(s，3H)，1.73-1.63(m，1H)，1.29(s，9H)，0.93(d，J＝5.1Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.4，180.9，172.4，155.9，154.5，149.0，148.4，141.6，135.1，131.0，129.9，127.6，124.4，123.7，117.3，99.1，79.3，60.7，59.7，58.4，57.5，56.2，55.9，55.0，54.2，50.0，41.5，39.9，28.0，25.2，24.0，18.1，15.6，8.5。ESI-MS m/z：对于C36H47N5O9计算值：693.8，实测值(M+H)+：694.3。实施例3
Figure A0081008200711
在0℃下，向含有15(8g，1.5ml)的甲醇(1.61)的烧瓶中加入1M氢氧化钠水溶液(3.21)。在此温度下将该反应物搅拌2小时，然后用6MHCl猝灭至pH＝5。将该混合物用乙酸乙酯(3×11)萃取并将合并的有机层经硫酸钠干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度CHCl3到CHCl3∶乙酸乙酯2∶1)纯化，得到16(5.3mg，68％)。Rf：0.48(CH3CN∶H2O 7∶3，RP-C18)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.73(s，1H)，5.43(bs，1H)，5.16(s，2H)，4.54(bs，1H)，4.26(d，J＝1.8Hz，1H)，4.04(d，J＝2.7Hz，1H)，3.84(bs，1H)，3.80-3.64(m，1H)，3.58(s，3H)，3.41-3.39(m，1H)，3.22-3.06(m，5H)，2.49(d，J＝18.6Hz，1H)，2.35(s，3H)，2.30-2.25(m，1H)，2.24(s，3H)，1.87(s，3H)，1.45-1.33(m，1H)，1.19(s，9H)，1.00(br d，J＝6.6Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ184.9，180.9，172.6，154.7，151.3，149.1，148.6，144.7，132.9，131.3，129.8，124.5，123.7，117.3，116.8，99.1，79.4，59.8，58.6，57.7，56.2，55.6，54.9，54.5，50.1，41.6，40.1，28.0，25.3，24.4，18.1，15.7，8.0。ESI-MS m/z：对于C35H45N5O9计算值：679.7，实测值(M+H)+：680.3。实施例4
Figure A0081008200721
向化合物16(1.8g，2.64ml)的DMF(221ml)的脱气溶液中加入10％Pd/C(360mg)并在H2(常压)下搅拌45分钟。将该反应物在氩气氛下经硅藻土过滤到含有无水Cs2CO3(2.58g，7.92ml)的烧瓶中。然后加入溴氯甲烷(3.40ml，52.8ml)，将该瓶密封并在100℃下搅拌2小时。将该反应物冷却，通过硅藻土垫过滤并用CH2Cl2洗涤。将有机层浓缩并干燥(硫酸钠)得到17，为棕色油状物，其没有进一步纯化而在下一步中使用。Rf：0.36(己烷∶乙酸乙酯1∶5，SiO2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.68(s，1H)，6.05(bs，1H)，5.90(s，1H)，5.79(s，1H)，5.40(bs，1H)，5.31-5.24(m，2H)，4.67(d，J＝8.1Hz，1H)，4.19(d，J＝2.7Hz，1H)，4.07(bs，1H)，4.01(bs，1H)，3.70(s，3H)，3.67(s，3H)，3.64-2.96(m，5H)，2.65(d，J＝18.3Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.21(s，3H)，2.04(s，3H)，2.01-1.95(m，1H)，1.28(s，9H)，0.87(d，J＝63Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ172.1，162.6，154.9，149.1，145.7，135.9，130.8，130.7，125.1，123.1，117.8，100.8，99.8，76.6，59.8，59.2，57.7，57.0，56.7，55.8，55.2，49.5，41.6，40.1，36.5，31.9，31.6，29.7，28.2，26.3，25.0，22.6，18.2，15.8，14.1，8.8。ESI-MS m/z：对于C36H47N5O9计算值：693.34，实测值(M+H)+：694.3。实施例5
在0℃下，向含有17(1.83g，2.65ml)的DMF(13ml)溶液的烧瓶中加入Cs2CO3(2.6g，7.97ml)和烯丙基溴(1.15ml，13.28ml)。将得到的混合物在23℃下搅拌1小时。将反应物经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2洗涤。将有机层干燥并浓缩(硫酸钠)。将残余物经快速柱层析(SiO2，CHCl3∶乙酸乙酯1∶4)纯化，得到18(1.08mg，56％)为白色固体。Rf：0.36(CHCl3∶乙酸乙酯1∶3)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.70(s，1H)，6.27-6.02(m，1H)，5.94(s，1H)，5.83(s，1H)，5.37(dd，J1＝1.01Hz，J2＝16.8Hz，1H)，5.40(bs，1H)，5.25(dd，J1＝1.0Hz，J2＝10.5Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.91(bs，1H)，4.25-4.22(m，1H)，4.21(d，J＝2.4Hz，1H)，4.14-4.10(m，1H)，4.08(d，J＝2.4Hz，1H)，4.00(bs，1H)，3.70(s，3H)，3.59(s，3H)，3.56-3.35(m，2H)，3.26-3.20(m，2H)，3.05-2.96(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.63(d，J＝18Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.21(s，3H)，2.09(s，3H)，1.91-1.80(m，1H)，1.24(s，9H)，0.94(d，J＝6.6Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ172.0，154.8，148.8，148.6，148.4，144.4，138.8，133.7，130.9，130.3，125.1，124.0，120.9，117.8，117.4，112.8，112.6，101.1，99.2，73.9，59.7，59.3，57.7，56.9，56.8，56.2，55.2，40.1，34.6，31.5，28.1，26.4，25.1，22.6，18.5，15.7，14.0，9.2。ESI-MS m/z：对于C39H51N5O9计算值：733.4，实测值(M+H)+：734.4。实施例6
Figure A0081008200741
向18(0.1g，0.137ml)的二噁烷(2ml)溶液中加入4.2 M HCl/二噁烷(1.46ml)并将该混合物在23℃下搅拌1.2小时。将该反应物在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)猝灭并用乙酸乙酯(2×70ml)萃取。将有机层干燥(硫酸钠)并在真空中浓缩，得到19(267mg，95％)，为白色固体，其没有进一步纯化而在下一步中使用。Rf：0.17(乙酸乙酯∶甲醇10∶1，SiO2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.49(s，1H)，6.12-6.00(m，1H)，5.94(s，1H)，5.86(s，1H)，5.34(dd，J＝1.0Hz，J＝17.4Hz，1H)，5.25(dd，J＝1.0Hz，J＝10.2Hz，1H)，4.18-3.76(m，5H)，3.74(s，3H)，3.71-3.59(m，1H)，3.36-3.20(m，4H)，3.01-2.90(m，1H)，2.60(d，J＝18.0Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.24(s，3H)，2.11(s，3H)，1.97-1.86(m，1H)，0.93(d，J＝8.7Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ175.5，148.4，146.7，144.4，142.4，138.9，133.7，131.3，128.3，120.8，117.9，117.4，113.8，112.4，101.1，74.2，60.5，59.1，56.5，56.1，56.3，56.0，55.0，50.5，41.6，39.5，29.5，26.4，24.9，21.1，15.5，9.33。ESI-MS m/z：对于C32H39N5O6计算值：589，实测值(M+H)+：590。实施例7
Figure A0081008200751
向19(250mg，0.42ml)的CH2Cl2(1.5ml)溶液中加入异硫氰酸苯酯(0.3ml，2.51ml)并将该混合物在23℃下搅拌1小时。将该反应物在真空中浓缩并将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度己烷到5∶1己烷∶乙酸乙酯)纯化，得到20(270mg，87％)为白色固体。Rf：0.56(CHCl3∶乙酸乙酯1∶4)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.00(bs，1H)，7.45-6.97(m，4H)，6.10(s，1H)，6.08-6.00(m，1H)，5.92(s，1H)，5.89(s，1H)，5.82(s，1H)，5.40(dd，J＝1.5 Hz，J＝17.1Hz，1H)，3.38(bs，1H)，5.23(dd，J＝1.5Hz，J＝10.5Hz，1H)，4.42-4.36(m，1H)，4.19-4.03(m，5H)，3.71(s，3H)，3.68-3.17(m，4H)，2.90(dd，J＝7.8Hz，J＝18.3Hz，1H)，2.57(d，J＝18.3Hz，1H)，2.25(s，3H)，2.12(s，3H)，2.10(s，3H)，1.90(dd，J＝12.3Hz，J＝16.5Hz，1H)，0.81(d，J＝6.9Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ178.4，171.6，148.6，146.8，144.3，142.7，138.7，136.2，133.6，130.7，129.8，126.6，124.2，124.1，120.9，120.5，117.7，117.4，116.7，112.6，112.5，101.0，74.0，60.6，59.0，57.0，56.2，56.1，55.0，53.3，41.4，39.7，26.3，24.8，18.3，15.5，9.2。ESI-MS m/z：对于C39H44N6O6S计算值：724.8，实测值(M+H)+：725.3。实施例8
向20(270mg，0.37ml)的二噁烷(1ml)溶液中加入4.2 N HCl/二噁烷(3.5ml)并将该反应物在23℃下搅拌30分钟。然后加入乙酸乙酯(20ml)和H2O(20ml)并将该有机层滗去。在0℃下，将含水层用饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)碱化(pH＝8)，然后用CH2Cl2(2×50ml)萃取。干燥(硫酸钠)合并的有机萃取物，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，乙酸乙酯∶甲醇5∶1)纯化，得到21(158mg，82％)为白色固体。Rf：0.3(乙酸乙酯∶甲醇1∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.45(s，1H)，6.12-6.03(m，1H)，5.91(s，1H)，5.85(s，1H)，5.38(dd，J1＝1.2Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.24(dd，J1＝1.2Hz，J2＝10.5Hz，1H)，4.23-4.09(m，4H)，3.98(d，J＝2.1Hz，1H)，3.90(bs，1H)，3.72(s，3H)，3.36-3.02(m，5H)，2.72-2.71(m，2H)，2.48(d，J＝18.0Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.22(s，3H)，2.11(s，3H)，1.85(dd，J1＝11.7Hz，J2＝15.6Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ148.4，146.7，144.4，142.8，138.8，133.8，130.5，128.8，121.5，120.8，118.0，117.5，116.9，113.6，112.2，101.1，74.3，60.7，59.9，58.8，56.6，56.5，55.3，44.2，41.8，29.7，26.5，25.7，15.7，9.4。ESI-MS m/z：对于C29H34N4O5计算值：518.3，实测值(M+H)+：519.2。实施例9
Figure A0081008200771
在-10℃下，向21(0.64g，1.22ml)的CH2Cl2(6.13ml)溶液中加入吡啶(0.104ml，1.28ml)和氯甲酸2，2，2-三氯代乙基酯(0.177ml，1.28ml)。将该混合物在此温度下搅拌1小时，然后经加入0.1 N HCl(10ml)将该反应物猝灭并用CH2Cl2(2×10ml)萃取。经硫酸钠将有机层干燥并在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到22(0.84g，98％)，为白色泡沫状固体。Rf：0.57(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.50(s，1H)，6.10-6.00(m，1H)，6.94(d，J＝1.5Hz，1H)，5.87(d，J＝1.5Hz，1H)，5.73(bs，1H)，5.37(dq，J1＝1.5Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.26(dq，J1＝1.8Hz，J2＝10.2Hz，1H)，4.60(d，J＝12Hz，1H)，4.22-4.10(m，4H)，4.19(d，J＝12Hz，1H)，4.02(m，2H)，3.75(s，3H)，3.37-3.18(m，5H)，3.04(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.63(d，J＝18Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.26(s，3H)，2.11(s，3H)，1.85(dd，J1＝12.3Hz，J2＝15.9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ154.3，148.5，146.7，144.5，142.8，139.0，133.8，130.7，128.7，121.3，120.8，117.8，117.7，116.8，112.7，101.2，77.2，74.3，60.7，59.9，57.0，56.4，55.3，43.3，41.7，31.6，26.4，25.3，22.6，15.9，14.1，9.4。ESI-MS m/z：对于C32H35Cl3N4O7计算值：694.17，实测值(M+H)+：695.2。实施例10
Figure A0081008200781
在0℃下，向22(0.32g，0.46ml)的CH3CN(2.33ml)溶液中加入二异丙基乙胺(1.62ml，9.34ml)、溴代甲基甲醚(0.57ml，7.0ml)和二甲基氨基吡啶(6mg，0.046ml)。将该混合物在30℃下加热10小时。然后将该反应物用二氯甲烷(30ml)稀释并倒入pH＝5的HCl水溶液(10ml)中。将有机层经硫酸钠干燥并在减压下除去溶剂得到残余物，将其经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化，得到23(0.304g，88％)，为白色泡沫状固体。Rf：0.62(己烷∶乙酸乙酯1∶3)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.73(s，1H)，6.10(m，1H)，5.94(d，J＝1.5Hz，1H)，5.88(d，J＝1.5Hz，1H)，5.39(dq，J1＝1.5Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.26(dq，J1＝1.8Hz，J2＝10.2Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.61(d，J＝12Hz，1H)，4.55(t，J＝6.6Hz，1H)，4.25(d，J＝12Hz，1H)，4.22-4.11(m，4H)，4.03(m，2H)，3.72(s，3H)，3.58(s，3H)，3.38-3.21(m，5H)，3.05(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.65(d，J＝18Hz，1H)，2.32(s，3H)，2.23(s，3H)，2.12(s，3H)，1.79(dd，J1＝12.3Hz，J2＝15.9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ154.3，148.6，148.4，144.5，139.0，133.6，130.6，130.1，125.07，124.7，124.0，121.1，117.7，112.6，101.2，99.2，77.2，74.4，74.1，59.8，59.8，57.7，57.0，56.8，56.68，55.3，43.2，41.5，26.4，25.2，15.9，9.3。ESI-MS m/z：对于C34H39Cl3N4O8计算值：738.20，实测值(M+H)+：739.0。实施例11
向23(0.304g，0.41ml)的90％乙酸水溶液(4ml)的悬浮液中加入锌粉(0.2g，6.17ml)并将该反应物在23℃下搅拌7小时。将该混合物经用CH2Cl2洗涤的硅藻土垫过滤。用饱和碳酸氢钠水溶液(pH＝9)(15ml)洗涤有机层并经硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂得到24(0.191g，83％)，为白色固体。Rf：0.3(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.68(s，1H)，6.09(m，1H)，5.90(d，J＝1.5Hz，1H)，5.83(d，J＝1.5Hz，1H)，5.39(dq，J1＝1.5Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.25(dq，J1＝1.5Hz，J2＝10.2Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.22-4.09(m，3H)，3.98(d，J＝2.4Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.69(s，3H)，3.57(s，3H)，3.37-3.17(m，3H)，3.07(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.71(m，2H)，2.48(d，J＝18Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.19(s，3H)，2.17(s，3H)，1.80(dd，J1＝12.3Hz，J2＝15.9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ148.5，148.2，144.3，138.7，133.7，130.7，129.9，125.0，123.9，121.3，117.9，117.5，113.6，112.0，101.0，99.2，74.0，59.8，59.7，58.8，57.6，57.0，56.2，55.2，44.2，41.5，31.5，26.4，25.6，22.5，16.7，14.0，9.2。ESI-MS m/z：对于C31H38N4O6计算值：562.66，实测值(M+H)+：563.1。实施例12
Figure A0081008200801
在0℃下向24(20mg，0.035ml)的H2O(0.7ml)和THF(0.7ml)溶液中加入NaNO2(12mg，0.17ml)和90％AcOH水溶液(0.06ml)并将该混合物在0℃下搅拌3小时。用CH2Cl2(5ml)稀释后，用水(1ml)洗涤有机层，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化，得到25(9.8mg，50％)为白色固体。Rf：0.34(己烷∶乙酸乙酯1∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.71(s，1H)，6.11(m，1H)，5.92(d，J＝1.5Hz，1H)，5.87(d，J＝1.5Hz，1H)，5.42(dq，J1＝1.5Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.28(dq，J1＝1.5Hz，J2＝10.2Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.26-4.09(m，3H)，4.05(d，J＝2.4Hz，1H)，3.97(t，J＝3.0Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.67-3.32(m，4H)，3.58(s，3H)，3.24(dd，J1＝2.7Hz，J2＝15.9Hz，1H)，3.12(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.51(d，J＝18Hz，1H)，2.36(s，3H)，2.21(s，3H)，2.12(s，3H)，1.83(dd，J1＝12.3Hz，J2＝15.9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ148.7，148.4，138.9，133.7，131.1，129.4，125.1，123.9，120.7，117.6，117.5，113.2，112.3，101.1，99.2，74.0，63.2，59.8，59.7，57.9，57.7，57.0，56.5，55.2，41.6，29.6，26.1，25.6，22.6，15.7，9.2。ESI-MS m/z：对于C31H37N3O7计算值：563.64，实测值(M+H)+：564.1。实施例13
Figure A0081008200811
在23℃下将原料(2.0g，5.90ml)加入到氢化钠(354mg，8.86ml)的THF(40ml)悬浮液中，随后在23℃下将所述悬浮液用氯甲酸烯丙基酯(1.135ml，8.25ml)处理，然后回流3小时。将该悬浮液冷却，过滤，将该固体用乙酸乙酯(100ml)洗涤并浓缩滤液。将油性粗制物用己烷(100ml)研磨并保持在4℃过夜。以后，将溶剂滗去并用CH2Cl2(20ml)处理所述浅黄色淤浆，用己烷(100ml)使其沉淀。10分钟后，再滗去溶剂。重复所述操作直至出现白色固体。将所述白色固体过滤并干燥，得到化合物29(1.80g，65％)，为白色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.74(d，J＝7.5Hz，2H)，7.62(d，J＝6.9Hz，2H)，7.33(t，J＝7.5Hz，2H)，7.30(t，J＝6.3Hz，2H)，5.71(d，J＝7.8Hz，1H)，4.73(d，J＝7.8Hz，2H)，4.59(m，1H)，4.11(t，J＝6.0Hz，1H)，3.17(dd，J＝6.0Hz，J＝2.7Hz，2H)，3.20(dd，J＝5.4Hz，J＝2.1Hz，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ173.6，152.7，144.0，139.7，137.8，126.0，125.6，123.4，118.3，73.4，52.4，45.5，35.8，33.7。ESI-MS m/z：对于C20H18Cl3NO4S计算值：474.8，实测值(M+Na)+：497.8。实施例14
Figure A0081008200821
将化合物25(585mg，1.03ml)和化合物29(1.47mg，3.11ml)的混合物与无水甲苯(3×10ml)共沸。在23℃下，向25和29的无水CH2Cl2(40ml)溶液中加入DMAP(633mg，5.18ml)和EDC.HCl(994mg，5.18ml)。将该反应混合物在23℃下搅拌3小时。将该混合物分配在饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)之中并分离各层。用CH2Cl2(50ml)洗涤含水层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗制物经快速柱层析(乙酸乙酯/己烷1∶3)纯化，得到30(1.00g，95％)，为浅乳黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.72(m，2H)，7.52(m，2H)，7.38(m，2H)，7.28(m，2H)，6.65(s，1H)，6.03(m，1H)，5.92(d，J＝1.5Hz，1H)，5.79(d，J＝1.5Hz，1H)，5.39(m，1H)，5.29(dq，J＝10.3Hz，J＝1.5Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.73(d，J＝11.9Hz，1H)，4.66(d，J＝11.9Hz，1H)，4.53(m，1H)，4.36-3.96(m，9H)，3.89(t，J＝6.4Hz，1H)，3.71(s，3H)，3.55(s，3H)，3.33(m，1H)，3.20(m，2H)，2.94(m，3H)，2.59(m，1H)，2.29(s，3H)，2.23(s，3H)，2.02(s，3H)，1.83(dd，J＝16.0Hz，J＝11.9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ169.7，154.0，148.8，148.4，145.7，144.5，140.9，139.0，133.7，130.9，130.6，127.6，127.0，124.8，124.6，124.1，120.8，119.9，118.2，117.7，117.3，112.7，112.1，101.3，99.2，74.7，73.9，64.4，59.8，57.7，57.0，56.8，55.4，53.3，46.7，41.4，36.5，34.7，31.5，26.4，24.9，22.6，15.7，14.0，9.1。ESI-MS m/z：对于C51H53Cl3N4O10S计算值：1020.4，实测值(M+H)+：1021.2。实施例15
Figure A0081008200831
于23℃，向30(845mg，0.82ml)、乙酸(500mg，8.28ml)和(PPh3)2PdCl2(29mg，0.04ml)的无水CH2Cl2(20ml)溶液中滴加入BuaSnH(650mg，2.23ml)。将该反应混合物在此温度下搅拌15分钟，冒泡。将粗制物用水(50ml)猝灭并用CH2Cl2(3×50ml)萃取。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗制物经快速柱层析(乙酸乙酯/己烷梯度从1∶5到1∶3)纯化，得到31(730mg，90％)，为浅乳黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.72(m，2H)，7.56(m，2H)，7.37(m，2H)，7.30(m，2H)，6.65(s，1H)，5.89(s，1H)，5.77(s，1H)，5.74(s，1H)，5.36(d，J＝5.9Hz，1H)，5.32(d，J＝5.9Hz，1H)，5.20(d，J＝9.0Hz，1H)，4.75(d，J＝12.0Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.48(d，J＝11.9Hz，1H)，4.08(m，4H)，3.89(m，1H)，3.86(t，J＝6.2Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.69(s，3H)，3.38(m，1H)，3.25(m，1H)，3.02-2.89(m，4H)，2.67(s，1H)，2.61(s，1H)，2.51(dd，J＝14.3Hz，J＝4.5Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.23(s，3H)，1.95(s，3H)，1.83(m，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.2，152.5，148.1，146.2，144.4，144.3，143.3，139.6，134.6，129.7，129.6，126.2，125.6，123.4，123.3，121.6，118.5，116.3，110.7，110.2，105.1，99.4，98.5，75.2，73.3，61.7，58.4，57.9，56.3，56.1，55.1，54.7，53.9，51.9，45.2，40.1，35.6，33.3，24.8，23.3，14.5，7.3。ESI-MS m/z：对于C48H49Cl3N4O10S计算值：980.3，实测值(M+H)+：981.2。实施例16
Figure A0081008200841
保持温度在-10℃，通过导管向31(310mg，0.32ml)的无水CH2Cl2(15ml)溶液中加入70％苯亚硒酸酐(165mg，0.32ml)的无水CH2Cl2(7ml)溶液。将该反应混合物在-10℃下搅拌5分钟。在此温度下加入饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)。再用CH2Cl2(40ml)洗涤含水层。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗制物经快速柱层析(乙酸乙酯/己烷梯度从1∶5到1∶1)纯化，得到32(287mg，91％，HPLC：91.3％)，为浅乳黄色固体并作为两种异构体的混合物(65∶35)，其用于下一步骤中。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ(异构体的混合物)7.76(m，4H)，7.65(m，4H)，7.39(m，4H)，7.29(m，4H)，6.62(s，1H)，6.55(s，1H)，5.79-5.63(m，6H)，5.09(s，1H)，5.02(d，J＝6.0 Hz，1H)，4.99(d，J＝6.0 Hz，1H)，4.80-4.63(m，6H)，4.60(m，1H)，4.50(m，1H)，4.38(d，J＝12.8 Hz，J＝7.5 Hz，1H)，4.27(dd，J＝12.8 Hz，J＝7.5 Hz，1H)，4.16-3.90(m，10H)，3.84(s，3H)，3.62(s，3H)，3.50(s，3H)，3.49(s，3H)，3.33-2.83(m，14H)，2.45-2.18(m，2H)，2.21(s，6H)，2.17(s，6H)，1.77(s，6H)，1.67(m，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ(异构体的混合物)168.6，168.4，158.6，154.8，152.8，152.5，147.3，147.2，146.8，144.1，144.0，140.8，139.7，137.1，129.8，129.3，128.4，128.7，126.5，125.5，123.7，123.6，123.5，123.4，122.2，121.3，118.3，115.8，115.5，110.2，106.9，103.5，103.2，100.1，99.6，97.9，97.7，93.8，73.4，70.9，69.2，64.9，62.5，59.3，58.9，58.4，56.7，56.3，56.2，55.4，55.2，55.1，54.9，54.7，54.3，54.1，53.8，52.8，45.5，40.5，40.0，39.8，35.8，35.5，33.9，33.7，30.1，28.8，24.2，24.1，21.2，14.5，14.4，12.7，6.0，5.7。ESI-MS m/z：对于C48H49Cl3N4O11S计算值：996.3，实测值(M+H)+：997.2。实施例17
Figure A0081008200851
将反应烧瓶在火焰上干燥两次，抽真空/用氩气清洗数次并保持在氩气氛下反应。在-78℃下，向DMSO(39.1ml，0.55ml，5当量)的无水CH2Cl2(4.5ml)溶液中滴加入三氟甲磺酸酐(37.3ml，0.22ml，2当量)。将该反应混合物在-78℃下搅拌20分钟，然后在-78℃下通过导管加入32(110mg，0.11ml，HPLC：91.3％)的无水CH2Cl2(1ml用于一起加入，0.5ml用于洗涤)溶液。在加入过程中两个烧瓶中的温度保持在-78℃下并且颜色由黄色转变到棕色。将该反应混合物在-40℃下搅拌35分钟。在此时间内所述溶液由黄色转变为深绿色。此后，滴加入ipr2NEt(153ml，0.88ml，8当量)并将反应混合物保持在0℃下45分钟，在此期间所述溶液颜色转变为棕色。然后滴加入叔-丁醇(41.6ml，0.44ml，4当量)和2-叔-丁基-1，1，3，3-四甲基胍(132.8ml，0.77ml，7当量)并将该反应混合物在23℃下搅拌40分钟。以后，滴加入乙酐(104.3ml，1.10ml，10当量)并将该反应混合物保持在23℃下1小时以上。然后将反应混合物用CH2Cl2(20ml)稀释并用饱和NH4Cl水溶液(50ml)、碳酸氢钠(50ml)和氯化钠(50ml)洗涤。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物经快速柱层析(洗脱液：乙酸乙酯/己烷梯度从1∶3到1∶2)纯化，得到33(54mg，58％)，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.85(s，1H)，6.09(s，1H)，5.99(s，1H)，5.20(d，J＝5.8Hz，1H)，5.14(d，J＝5.3 Hz，1H)，5.03(m，1H)，4.82(d，J＝12.2Hz，1H)，4.63(d，J＝12.0Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.35-4.17(m，4H)，3.76(s，3H)，3.56(s，3H)，3.45(m，2H)，2.91(m，2H)，2.32(s，3H)，2.28(s，3H)，2.21(s，3H)，2.12(m，2H)，2.03(s，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.5，167.2，152.7，148.1，147.1，144.5，139.6，139.1，130.5，129.0，123.7，123.5，123.3，118.8，116.5，112.1，100.6，97.8，73.3，60.5，59.4，59.2，58.3，57.6，57.4，56.1，53.3，53.1，40.6，40.0，31.0，22.2，18.9，14.4，8.1。ESI-MS m/z：对于C36H39Cl3N4O11S计算值：842.1，实测值(M+H)+：843.1。实施例18
Figure A0081008200871
在23℃下，向33(12mg，0.014ml)的干燥二氯甲烷(1.2ml)和HPLC级的乙腈(1.2ml)溶液中加入碘化钠(21mg，0.14ml)和新鲜蒸馏(经氢化钙在常压下)的三甲基硅烷基氯(15.4mg，0.14ml)。该反应混合物转化为橙色。15分钟后，用二氯甲烷(10ml)将所述溶液稀释并用新鲜Na2S2O4的水饱和溶液(3×10ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到化合物34(13mg，定量的)，为浅黄色固体，其没有进一步纯化而使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.85(s，1H)，6.09(s，1H)，5.99(s，1H)，5.27(d，J＝5.8Hz，1H)，5.14(d，J＝5.3Hz，1H)，5.03(d，J＝11.9Hz，1H)，4.82(d，J＝12.2Hz，1H)，4.63(d，J＝13.0Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.34(m，1H)，4.27(bs，1H)，4.18(m，2H)，3.76(s，3H)，3.56(s，3H)，3.44(m，1H)，3.42(m，1H)，2.91(m，2H)，2.32(s，3H)，2.28(s，3H)，2.21(s，3H)，2.03(s，3H)。ESI-MS m/z：对于C34H35N4O10S计算值：798.1，实测值(M+H)+：799.1。实施例19
Figure A0081008200881
在23℃下，向34(13mg，0.016ml)的乙酸/H2O混合物(90∶10，1ml)溶液中加入锌粉(5.3mg，0.081ml)。将该反应混合物在70℃下加热6小时。此后，冷却至23℃，用CH2Cl2(20ml)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)和Et3N水溶液(15ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物经采用硅胶-NH2的快速柱层析(洗脱液：乙酸乙酯/己烷梯度从0∶100到50∶50)纯化，得到35(6.8mg，77％，对于两个步骤)，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.51(s，1H)，6.03(dd，J＝1.3Hz，J＝26.5Hz，2H)，5.75(bs，1H)，5.02(d，J＝11.6Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.25(m，2H)，4.18(d，J＝2.5Hz，1H)，4.12(dd，J＝1.9Hz，J＝11.5Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.40(m，2H)，3.26(t，J＝6.4Hz，1H)，2.88(m，2H)，2.30-2.10(m，2H)，2.30(s，3H)，2.28(s，3H)，2.18(s，3H)，2.02(s，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ174.1，168.4，147.8，145.4，142.9，140.8，140.1，131.7，130.2，129.1，128.3，120.4，118.3，117.9，113.8，11 1.7，101.7，61.2，59.8，59.2，58.9，54.4，53.8，54.4，41.3，41.5，34.1，23.6，20.3，15.5，9.4。ESI-MS m/z：对于C31H34N4O8S计算值：622.7，实测值(M+H)+：623.2。实施例20
Figure A0081008200891
在23℃下，向36(49mg，0.08ml)和2-[3-羟基-4-甲氧基苯基]乙胺(46.2mg，0.27ml)的乙醇(2.5ml)溶液中加入硅胶(105mg)。将该反应混合物在23℃下搅拌14小时。将其用己烷稀释并倒入层析柱中(乙酸乙酯/己烷从1/3到1/1)，得到Et-770(55mg，90％)，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.60(s，1H)，6.47(s，1H)，6.45(s，1H)，6.05(s，1H)，5.98(s，1H)，5.02(d，J＝11.4Hz，1H)，4.57(bs，1H)，4.32(bs，1H)，4.28(d，J＝5.3Hz，1H)，4.18(d，J＝2.5Hz，1H)，4.12(dd，J＝2.1Hz，J＝11.5Hz，1H)，3.78(s，3H)，3.62(s，3H)，3.50(d，J＝5.0Hz，1H)，3.42(m，1H)，3.10(ddd，J＝4.0Hz，J＝10.0Hz，J＝11.0Hz，1H)，2.94(m，2H)，2.79(m，1H)，2.61(m，1H)，2.47(m，1H)，2.35(m，1H)，2.32(s，3H)，2.27(s，3H)，2.20(s，3H)，2.09(m，1H)，2.04(s，3H)。ESI-MS m/z：对于C40H42N4O10S计算值：770.7，实测值(M+H)+：771.2。实施例22
在23℃下，向21(22mg，0.042ml)的CH2Cl2(0.8ml)的溶液中加入邻苯二甲酸酐(6.44mg，0.042ml)并将该反应混合物在23℃下搅拌2小时。然后，加入羰基二咪唑(1mg，0.006ml)并将混合物在23℃下搅拌7小时。然后加入羰基二咪唑(5.86mg，0.035ml)并将反应物在23℃下再搅拌17小时。用CH2Cl2(15ml)稀释该溶液并用0.1 N HCl(15ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化，得到27(26.4mg，96％)，为白色固体。RF：0.58(乙酸乙酯)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：7.73-7.64(m，4H)，6.40(s，1H)，6.12-6.01(m，1H)，5.63(s，1H)，5.58(d，J＝1.5Hz，1H)，5.37(dd，J1＝1.8 Hz，J2＝17.4Hz)，5.23(dd，J1＝1.8 Hz，J2＝10.5Hz，1H)，5.12(d，J＝1.5Hz，1H)，4.22-4.15(m，3H)，4.08(d，J＝1.8Hz，1H)，3.68(s，3H)，3.59-3.55(m，2H)，3.35(d，J＝8.1Hz，1H)，3.27-3.16(m，2H)，3.05(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.64(d，J＝18.0Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.24(s，3H)，2.09(s，3H)，1.80(dd，J1＝11.4Hz，J2＝15Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ167.7，148.9，146.4，144.2，142.6，139.5，134.0，133.5，132.0，131.0，128.3，123.0，121.3，120.9，118.1，117.5，116.8，113.6，112.4，100.8，74.5，60.6，60.5，57.7，56.6，55.6，55.5，42.3，41.7，26.6，25.5，15.9，9.46。ESI-MS m/z：对于C37H35N4O7计算值：648.79，实测值(M+H)+：649.3。实施例23
Figure A0081008200911
在23℃下，向27(26mg，0.041ml)的CH2Cl2(11ml)的溶液中加入乙酸(11ml)、(PPh3)2PdCl2(2.36mg)和Bu3SnH(28ml，0.10ml)。在此温度下搅拌2小时后，将该反应物倾入快速柱(SiO2，梯度己烷到己烷∶乙酸乙酯2∶1)中，得到28(24.7mg，99％)，为白色固体。Rf：0.33(己烷∶乙酸乙酯2∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.75-7.70(m，2H)，7.69-7.65(m，2H)，6.39(s，1H)，5.82(bs，1H)，5.50(d，J＝1.5Hz，1H)，5.0(d，J＝1.5Hz，1H)，4.45(bs，1H)，4.23-4.19(m，2H)，4.10-4.09(m，1H)，3.73(s，3H)，3.60-3.48(m，2H)，3.36-3.33(m，1H)，3.26-3.20(m，1H)，3.14-3.08(m，1H)，3.98(d，J＝14.4Hz，1H)，2.61(d，J＝18.3Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.23(s，3H)，2.06(s，3H)，1.85(dd，J1＝12Hz，J2＝15.3Hz)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ167.8，146.4，145.1，143.9，142.7，137.1，133.5，131.9，130.8，128.4，122.9，120.8，118.0，116.8，114.0，113.4，106.4，100.4，60.6，60.5，57.8，56.6，55.5，55.2，42.6，41.5，25.6，25.5，15.8，8.9。ESI-MS m/z：对于C34H32N4O7计算值：608.6，实测值(M+H)+：609.2。实施例24
Figure A0081008200921
在0℃下，向28(357mg，0.058ml)的CH2Cl2(3ml)的溶液中加入乙酰氯(41.58ml，0.58ml)和吡啶(47.3ml，0.58ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后用CH2Cl2(15ml)稀释该溶液并用0.1 N HCl(15ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(RP-18，CH3CN∶H2O 60∶40)纯化，得到phthalascidin(354mg，94％)，为白色固体。Rf：0.37(CH3CN∶H2O 7∶3，RP-18)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.72-7.68(m，2H)，7.67-7.63(m，2H)，6.38(s，1H)，5.69(d，J＝1.2Hz，1H)，5.64(d，J＝1.2Hz，1H)，5.30(bs，1H)，4.25-4.21(m，2H)，4.02(d，J＝2.1Hz，1H)，3.64-3.62(m，5H)，3.33(d，J＝8.4Hz，1H)，3.21-3.16(m，1H)，3.02(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.76(dd，J1＝1.8Hz，J2＝15.6Hz，1H)，2.63(d，J＝17.7Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.28(s，3H)，2.21(s，3H)，2.0(s，3H)，1.73(dd，J1＝12.0 Hz，J2＝15.3Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.5，167.6，146.2，144.2，142.5，141.0，140.5，133.4，131.8，130.7，128.2，120.9，120.8，117.9，116.4，113.6，101.1，60.4，60.0，57.0，56.3，55.6，55.4，41.6，41.5，26.5，25.2，20.2，15.7，9.4。ESI-MS m/z：对于C36H34N4O8计算值：650，实测值(M+H)+：651.2。实施例25
Figure A0081008200931
在0℃下，向17(300mg，0.432ml)的CH2Cl2(2ml)的溶液中加入乙酰氯(30.7ml，0.432ml)和吡啶(34.9ml，0.432ml)。将该反应混合物在此温度下搅拌2小时，然后用CH2Cl2(15ml)稀释该溶液并用0.1NHCl(15ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂得到42(318mg，100％)，为白色固体，其没有进一步纯化用于以下反应。Rf：0.5(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.66(s，1H)，5.93(d，J＝1.2Hz，1H)，5.83(d，J＝1.2Hz，1H)，5.42(t，J＝6.6Hz，1H)，5.07(d，J＝5.7Hz，1H)，4.98(d，J＝5.7Hz，1H)，4.16(d，J＝1.8Hz，1H)，4.11(d，J＝2.7Hz，1H)，3.98(bs，1H)，3.73-3.61(m，2H)，3.64(s，3H)，3.52-3.48(m，1H)，3.50(s，3H)，3.33(d，J＝9.6Hz，1H)，3.17-3.14(m，1H)，2.97-2.87(m，1H)，2.75-2.70(d，J＝16.8Hz，1H)，2.26(s，6H)，2.16(s，3H)，1.96(s，3H)，1.70(dd，J1＝11.7Hz，J2＝15.6Hz，1H)，1.33(s，9H)，0.59(d，J＝6.0Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ172.0，168.3，162.3，148.2，144.4，140.4，140.2，130.9，130.5，125.3，123.4，120.8，117.6，112.7，111.7，101.4，99.1，79.2，59.5，58.8，57.5，57.4，56.4，55.5，55.0，41.3，39.0，28.2，26.4，24.6，19.9，18.4，15.4，9.1。ESI-MS m/z：对于C38H49N5O10计算值：735.82，实测值(M+H)+：736.3。实施例26
Figure A0081008200941
在23℃下，向42(318mg，0.432ml)的CH2Cl2(2.16ml)的溶液中加入三氟乙酸(1.33ml，17.30ml)并将反应混合物在23℃下搅拌3.5小时。将该反应物在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)猝灭并用CH2Cl2(2×70ml)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸钠)并在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，乙酸乙酯∶甲醇20∶1)纯化，得到43(154mg，60％)为白色固体。Rf：0.22(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.47(s，1H)，6.22(bs，1H)，5.95(d，J＝1.2Hz，1H)，5.88(d，J＝1.2Hz，1H)，4.08-4.06(m，2H)，4.01(bs，1H)，3.69(s，3H)，3.49(d，J＝3.6Hz，1H)，3.33(d，J＝8.1Hz，1H)，3.26-3.22(m，1H)，2.95(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.80-2.76(m，2H)，2.58(d，J＝18Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.27(s，3H)，2.21(s，3H)，1.96(s，3H)，1.77(dd，J1＝12.3Hz，J2＝15.6Hz，1H)，0.90(d，J＝6.9Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ174.8，169.0，146.8，144.4，142.8，140.5，140.2，131.1，128.8，120.8，120.5，117.1，112.9，111.6，101.5，60.3，59.0，56.5，56.3，55.6，55.1，50.2，41.6，39.5，26.8，26.3，24.9，20.2，15.4，9.2。ESI-MS m/z：对于C31H37N5O7计算值：591.65，实测值(M+H)+：592.3。实施例27
向43(154mg，0.26ml)的CH2Cl2(1.3ml)的溶液中加入异硫氰酸苯酯(186ml，1.56ml)并将该混合物在23℃下搅拌2小时。将该反应物在真空中浓缩并将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度己烷到己烷∶乙酸乙酯1∶1)纯化，得到44(120mg，63％)为白色固体。Rf：0.41(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.17(s，1H)，7.49-7.44(m，3H)，7.31-7.24(m，3H)，7.05(d，J＝6.9Hz，1H)，5.98(d，J＝1.2Hz，1H)，5.87(d，J＝1.2Hz，1H)，5.52(bs，1H)，4.54(t，J＝6.6Hz，1H)，4.15(d，J＝2.1 Hz，1H)，4.03(d，J＝2.7Hz，2H)，3.80(bs，1H)，3.66(s，3H)，3.40(bs，1H)，3.32(d，J＝7.8Hz，1H)，3.16(d，J＝11.7Hz，1H)，2.82-2.61(m，3H)，2.29(s，3H)，2.20(s，3H)，2.01(s，3H)，1.99(s，3H)，1.80(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)，0.62(d，J＝6.0Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ178.5，171.9，168.7，146.7，144.5，142.6，140.6，140.3，136.3，131.0，129.9，128.9，126.7，124.4，120.9，120.6，117.7，116.6，112.7，111.9，101.4，60.4，58.7，57.5，56.1，55.7，55.1，53.3，41.4，38.8，26.3，24.4，20.2，18.1，15.3，9.2。ESI-MS m/z：对于C38H42N6O7S计算值：726.3，实测值(M+H)+：727.3。实施例28
Figure A0081008200961
向44(120mg，0.165ml)的二噁烷(0.9ml)的溶液中加入5.3 NHCl/二噁烷(1.8ml)并将该反应物在23℃下搅拌2.5小时。然后将CH2Cl2(10ml)和H2O(5ml)加入到该反应物中并将有机层滗去。在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)(pH＝8)将含水层碱化，然后用CH2Cl2(2×15ml)萃取。将合并的有机萃取液干燥(硫酸钠)并在真空中浓缩，得到45(75mg，87％)为白色固体，其没有进一步纯化而在随后反应中使用。Rf：0.23(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.43(s，1H)，5.94(d，J＝1.2Hz，1H)，5.87(d，J＝1.2Hz，1H)，4.10(d，J＝2.1Hz，1H)，3.98(d，J＝2.4Hz，1H)，3.91(bs，1H)，3.69(s，3H)，3.34-3.25(m，2H)，3.05(dd，J1＝1.8Hz，J2＝8.1Hz，1H)，2.80-2.73(m，3H)，2.46(d，J＝18Hz，1H)2.30(s，3H)，2.28(s，3H)，2.20(s，3H)，1.98(s，3H)，1.79(dd，J1＝12.6Hz，J2＝16.2Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.7，146.7，144.4，142.9，140.4，130.4，128.9，121.1，120.8，117.8，116.8，113.6，11 1.5，101.4，67.6，60.5，59.8，58.4，56.6，55.8，55.3，43.6，41.8，31.3，25.6，20.2，15.6，9.2。ESI-MS m/z：对于C28H32N4O6计算值：520.58，实测值(M+H)+：521.3。实施例29
Figure A0081008200971
向45(10mg，0.02ml)的CH2Cl2(0.4ml)的溶液中加入邻苯二甲酸酐(2.84mg，0.02ml)并将该反应混合物在23℃下搅拌2小时。然后加入羰基二咪唑(0.5mg，0.003ml)并将该混合物在23℃下搅拌7小时。然后加入羰基二咪唑(2.61mg，0.016ml)并将该反应物在23℃下搅拌另外17小时。将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(RP-18，CH3CN∶H2O 60∶40)纯化，得到phthalascidin(11.7mg，93％)为白色固体。Rf：0.37(CH3CN∶H2O 7∶3，RP-18)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.72-7.68(m，2H)，7.67-7.63(m，2H)，6.38(s，1H)，5.69(d，J＝1.2Hz，1H)，5.64(d，J＝1.2Hz，1H)，5.30(bs，1H)，4.25-4.21(m，2H)，4.02(d，J＝2.1Hz，1H)，3.64-3.62(m，5H)，3.33(d，J＝8.4Hz，1H)，3.21-3.16(m，1H)，3.02(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.76(dd，J1＝1.8Hz，J2＝15.6Hz，1H)，2.63(d，J＝17.7Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.28(s，3H)，2.21(s，3H)，2.0(s，3H)，1.73(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.3Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.5，167.6，146.2，144.2，142.5，141.0，140.5，133.4，131.8，130.7，128.2，120.9，120.8，117.9，116.4，113.6，101.1，60.4，60.0，57.0，56.3，55.6，55.4，41.6，41.5，26.5，25.2，20.2，15.7，9.4。ESI-MS m/z：对于C36H34N4O8计算值：650，实测值(M+H)+：651.2。实施例30
Figure A0081008200981
在0℃下，向25(18mg，0.032ml)的DMF(0.05ml)的溶液中加入催化DMAP(0.5mg，0.004ml)、咪唑(5mg，0.08ml)和叔-丁基二苯基甲硅烷基氯(12.5ml，0.048ml)并将该反应混合物在23℃下搅拌6小时。在0℃下加入水(10ml)并将含水层用己烷∶乙酸乙酯1∶10(2×10ml)萃取。将有机层干燥(硫酸钠)，过滤并在减压下除去溶剂。将粗制产物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化，得到26(27mg，88％)为白色固体。Rf：0.29(己烷∶乙酸乙酯3∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.61-7.58(m，2H)，7.42-7.28(m，8H)，6.71(s，1H)，6.19-6.02(m，1H)，5.78(d，J＝1.2Hz，1H)，5.64(d，J＝1.2Hz，1H)，5.40(dd，J1＝1.2Hz，J2＝17.1Hz，1H)，5.27(dd，J1＝1.2Hz，J2＝10.2Hz，1H)，5.13(s，2H)，4.45(d，J＝2.4Hz，1H)，4.24(d，J＝2.1Hz，1H)，4.17-4.06(m，3H)，3.75(s，3H)，3.64(dd，J1＝2.4Hz，J2＝9.9Hz，1H)，3.59(s，3H)，3.42-3.21(m，4H)，3.10(dd，J1＝8.1Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.70(d，J＝17.7Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.26(s，3H)，2.11(s，3H)，2.08-1.89(m，1H)，0.87(s，9H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ148.5，148.3，148.1，144.0，139.0，135.6，135.4，133.8，133.1，132.6，130.5，130.3，129.6，129.4，127.5，127.4，125.1，124.3，121.6，118.5，117.5，112.9，111.7，100.8，99.2，74.0，67.7，61.5，59.6，59.0，57.7，57.1，55.4，41.6，29.6，26.6，25.5，18.8，15.8，9.2。ESI-MS m/z：对于C47H55N3O7Si计算值：801.3，实测值(M+H)+：802.3。实施例31
Figure A0081008200991
在23℃下，向26(7mg，0.0087ml)的CH2Cl2(0.15ml)的溶液中加入乙酸(2.5ml，0.044ml)、(PPh3)2PdCl2(0.5mg，6.96×10-4ml)和Bu3SnH(3.5ml，0.013ml)。将该反应混合物在此温度下搅拌1小时。将该溶液用己烷∶乙酸乙酯5∶1(0.5ml)混合物稀释并倾入到快速柱(SiO2，梯度5∶1到1∶1己烷∶乙酸乙酯)中，得到ET-11(5mg，75％)为白色固体。Rf：0.36(己烷∶乙酸乙酯1∶5，硅胶)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.56(m，2H)，7.41-7.25(m，8H)，6.67(s，1H)，5.72(d，J＝1.0Hz，1H)，5.58(d，J＝1.0Hz，1H)，5.51(s，1H)，5.38(d，J＝5.75Hz，1H)，5.16(d，J＝5.7Hz，1H)，4.57(d，J＝2.9Hz，1H)，4.21(m，1H)，4.09(m，1H)，3.72(s，3H)，3.71(s，3H)，3.68(dd，J1＝2.1Hz，J2＝10.4Hz，1H)，3.38-3.26(m，3H)，3.11(dd，J1＝2.5Hz，J2＝15.7Hz，1H)，3.01(dd，J1＝8.9Hz，J2＝17.9Hz，1H)，2.70(d，J＝17.9Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.25(s，3H)，2.06(s，3H)，1.89(dd，J1＝12.1Hz，J2＝15.7Hz，1H)，0.9(s，9H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ149.0，147.4，145.3，144.3，136.3，135.7，135.4，133.2，130.9，130.5，129.6，129.5，127.5，125.0，118.6，112.5，112.1，105.7，100.5，99.8，68.5，61.5，59.7，58.8，57.7，56.9，56.5，55.4，41.7，26.6，26.2，25.5，18.9，15.8，14.2，8.7。ESI-MS m/z：对于C44H51N3O7Si计算值：761，实测值(M+H)+：762。实施例32
Figure A0081008201001
在23℃下，将2(3.0g，5.46ml)和异硫氰酸苯酯(3.92mL，32.76ml)的CH2Cl，(27ml)的溶液在23℃下搅拌1.5小时。将该反应混合物分配在CH2Cl2(10ml)和H2O(5ml)之间。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度己烷到2∶3己烷∶乙酸乙酯)纯化，得到3(3.29g，88％)为黄色固体。Rf：0.27(ACN∶H2O 3∶2，RP-C18)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.77(bs，1H)，7.42-7.11(m，5H)，6.65(d，1H)，6.29(s，1H)，5.6-5.5(m，1H)，4.19-4.14(m，2H)，4.08(d，1H)，3.92(s，3H)，3.87-3.65(m，6H)，3.77(s，3H)，3.37-2.98(m，8H)，2.50(d，1H)，2.31(s，3H)，2.20(s，3H)，1.96(d，1H)，1.87(s，3H)，1.81-1.75(m，1H)，0.96(d，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.7，180.9，178.9，172.0，155.7，147.1，143.2，142.4，136.0，135.1，130.5，129.9，129.3，128.5，126.9，124.4，120.2，117.4，116.3，77.1，60.9，58.6，56.2，55.8，55.0，54.6，53.5，41.7，40.3，25.1，24.5，18.4，15.8，8.7。ESI-MS m/z：对于C36H40N6O6S计算值：684.8，实测值(M+H)+：685.2。实施例33
Figure A0081008201011
将3(0.143g，0.208ml)的6.5 M HCl/二噁烷(150ml)中的溶液在23℃下搅拌6小时。然后将甲苯(3ml)加入到该反应物中并滗去有机层。将残余物分配在饱和碳酸氢钠水溶液(3ml)和CHCl3(3×3ml)之间。干燥有机层并浓缩，得到标题化合物为4和6的混合物(4∶690∶10)，在放置时其缓慢结晶为6。Rf：04(乙酸乙酯∶甲醇5∶1，硅胶)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.45(s，1H)，4.16(m，1H)，4.02(d，1H)，3.96(s，3H)，3.79(m，2H)，3.75(s，3H)，3.35(m，1H)，3.20-3.00(m，3H)，2.87(d，1H)，2.75(d，1H)，2.43(d，1H)，2.34(s，3H)，2.30(s，3H)，1.93(s，3H)，1.72-1.5(m，3H)。ESI-MS m/z：对于C26H30N4O5计算值：478.5，实测值(M+H)+：479.2。实施例34
Figure A0081008201012
将3(0.143g，0.208ml)的6.5 M HCl/二噁烷(150ml)中的溶液在23℃下搅拌1小时。蒸发溶剂得到残余物，将该残余物经快速柱层析(乙酸乙酯/甲醇/三乙胺100∶25∶0.1)纯化，得到6(80mg，83％)，为黄色固体。Rf：0.26(ACN∶H2O 3∶2，RP-C18)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.46(s，1H)，5.9(bs，1H)，4.67(dd，J＝18.3Hz，J＝7.8Hz，1H)，4.24(d，1H)，4.16(s，3H)，3.93(d，J＝2.7Hz，1H)，3.8(m，2H)，3.77(s，3H)，3.45(m，2H)，3.08(dd，J＝17.9Hz，J＝3.6Hz，1H)，2.78(m，1H)，2.55(d，1H)，2.3(m，1H)，2.3(s，3H)，2.28(s，3H)，1.90(s，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ186.2，162.1，154.9，146.9，145.3，143.0，130.1，129.4，128.1，125.0，121.4，116.4，116.2，66.6，60.7，60.7，60.1，59.6，58.8，55.6，54.9，41.9，25.3，24.7，15.7，8.9。ESI-MS m/z：对于C26H28N4O4计算值：460.5，实测值(M+H)+：461.1。实施例35
Figure A0081008201021
向3(2.38g，3.47ml)的二噁烷(5ml)溶液中加入5.3 M HCl的二噁烷溶液(34ml)并将该反应物在23℃下搅拌45分钟。然后加入Ac2O(51ml，539.5ml)并将该混合物搅拌4小时。将该反应物于0℃冷却并在此温度下分配在饱和Na2CO3水溶液(300ml)和乙酸乙酯(300ml)之间。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将该残余物经快速柱层析(SiO2，梯度CH2Cl2到CH2Cl2∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到5(1.75g，97％)，为黄色固体。Rf：0.53(ACN∶H2O 3∶2，RP-C18)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.51(s，1H)，5.98(bs，1H)，4.84(dd，1H)，4.17(d，1H)，4.00(d，1H)，3.99(s，3H)，3.85(bs，1H)，3.81(m，1H)，3.74(s，3H)，3.70(d，1H)，3.23(m，1H)，3.11(dd，1H)，3.09(m，1H)，2.93(m，2H)，2.44(d，1H)，3.67(s，3H)，2.25(s，3H)，1.70(s，3H)，1.60-1.50(m，2H)，1.29(s，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.9，180.8，169.9，160.2，156.2，147.0，143.1，140.4，136.1，130.6，129.6，127.9，120.4，117.2，61.0，60.7，58.6，56.1，55.7，55.1，54.3，41.8，41.1，25.7，23.9，22.2，15.7，8.7。ESI-MS m/z：对于C28H32N4O6计算值：520.6，实测值(M+H)+：521.1。实施例36
Figure A0081008201031
在0℃下，向5(1.75g，3.36ml)的CH2Cl2(17ml)溶液中加入二异丙基乙胺(11.71ml，67.23ml)、DMAP(20mg，0.17ml)和溴代甲基甲醚(4.11ml，50.42ml)。6小时后，在23℃下将该反应物分配在CH2Cl2(50ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(25ml)之间。将有机层经硫酸钠干燥并在减压下除去溶剂。将粗制产物经快速柱层析(RP-18，CH3CN/H2O 1/1)纯化，得到7(1.32g，70％)，为黄色固体。Rf：0.34(ACN∶H2O 2∶3，RP-C18)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.74(s，1H)，5.14(s，2H)，4.82(m，1H)，4.22(d，1H)，4.00(s，3H)，4.0(m，1H)，3.83(m，2H)，3.7(s，3H)，3.58(s，3H)，3.4(m，1H)，3.2-2.95(m，6H)，2.43(d，1H)，2.37(s，3H)，2.22(s，3H)，1.89(s，3H)，1.5-1.4(m，2H)，1.31(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.9，180.7，169.6，156.2，148.9，148.5，140.3，136.2，131.3，130.1，127.7，124.6，123.7，117.3，99.5，99.2，60.9，59.7，58.8，57.7，56.4，55.7，55.0，54.2，51.0，41.6，41.0，40.5，25.5，23.9，22.3，19.3，15.6，14.6，8.6。ESI-MS m/z：对于C30H36N4O7计算值：564.6，实测值(M+H)+：565.3。实施例37
在0℃下，向7(0.37g，0.65ml)的甲醇(74ml)溶液中加入1M氢氧化钠(130ml)。将该反应物搅拌15分钟，然后在0℃下用6M HCl猝灭至pH＝5。将该混合物用乙酸乙酯(3×50ml)萃取并将合并的有机层经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(RP-C18，CH3CN/H2O 1/1)纯化，得到8(232mg，65％)，为黄色油状物。Rf：0.5(ACN∶H2O 3∶2，RP-C18)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.75(s，1H)，5.15(s，2H)，4.86(m，1H)，4.26(d，1H)，4.01(d，1H)，3.88-3.81(m，2H)，3.70(s，3H)，3.58(s，3H)，3.39(m，1H)，3.27-3.21(m，1H)，3.18-3.08(m，2H)，3.03-2.97(m，1H)，2.47(d，1H)，2.37(s，3H)，2.22(s，3H)，1.90(s，3H)，1.57-1.46(m，2H)，1.33(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ185.3，180.6，175.9，170.1，151.5，148.9，148.6，143.3，133.7，13 1.5，129.9，124.7，123.5，117.1，117.0，99.2，59.8，58.7，57.8，56.3，55.3，54.9，54.3，41.5，40.7，29.6，25.5，24.4，22.2，20.7，15.7，8.0。ESI-MS m/z：对于C29H34N4O7计算值：550.6，实测值(M+H)+：551.2。实施例38
Figure A0081008201051
向化合物8(240mg，0.435ml)的DMF(30ml)脱气溶液中加入10％Pd/C(48mg)并将该反应物在H2(常压)气氛下搅拌1小时。在氩气氛下将该反应物经硅藻土垫过滤到Schlenk管中，为无色溶液，含有无水Cs2CO3(240mg，0.739ml)。然后，加入溴氯代甲烷(0.566ml，8.71ml)。将该管密封并在90℃下搅拌3小时。将该反应物冷却并经硅藻土过滤并用CH2Cl2洗涤。将有机层浓缩并干燥(硫酸钠)，得到9为棕色油状物，其没有进一步纯化而在下一步中使用。Rf：0.36(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶5)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.71(s，3H)，5.89(d，1H)，5.81(d，1H)，5.63(bs，1H)，5.33(d，1H)，5.17(d，1H)，4.97(m，1H)，4.20(d，1H)，4.09(m，1H)，3.99(m，1H)，3.68(m，1H)，3.65(s，6H)，3.59-3.47(m，4H)，3.37-3.27(m，2H)，3.14-2.97(m，2H)，2.62(d，1H)，2.32(s，3H)，2.20(s，3H)，2.08(s，3H)，1.72(m，1H)，1.36(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ169.8，149.1，147.4，145.5，136.2，130.9，130.8，125.0，122.9，117.7，112.6，11 1.8，106.4，100.8，99.8，59.8，58.9，57.7，56.6，56.4，55.5，55.2，41.6，40.1，29.6，25.9，25.0，22.6，15.6，8.8。ESI-MS m/z：对于C30H36SiN4O7计算值：564.6，实测值(M+H)+：565.3。实施例39
Figure A0081008201061
在0℃下，向含有化合物9(245mg，0.435ml)的DMF(4ml)溶液的烧瓶中加入碳酸铯(425mg，1.30ml)和烯丙基溴(376ml，4.35ml)并将该混合物在23℃下搅拌1小时。将该反应物经硅藻土垫过滤并分配在CH2Cl2(25ml)和H2O(10ml)之间。将有机层干燥(硫酸钠)并在减压下浓缩，得到残余物，将其经快速柱层析(SiO2，CHCl3∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到10为黄色油状物(113mg，43％)。Rf：0.36(己烷∶乙酸乙酯1∶5)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.74(s，1H)，6.3-6.0(m，1H)，5.94(d，1H)，5.87(d，1H)，5.43-5.36(m，2H)，5.22(s，2H)，5.00(m，1H)，4.22(m，1H)，4.17-4.01(m，1H)，3.98(m，2H)，3.71-3.67(m，1H)，3.69(s，3H)，3.62-3.51(m，3H)，3.58(s，3H)，3.39-3.37(m，1H)，3.31-3.26(m，3H)，3.09(dd，1H)，2.56(d，1H)，2.36(s，3H)，2.21(s，3H)，2.11(s，3H)，2.24-2.10(m，1H)，1.82-1.73(m，1H)，1.24(bs，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ169.4，148.8，148.3，139.1，133.7，130.9，130.3，125.2，120.2，117.7，113.1，112.6，101.3，99.3，74.1，59.7，59.3，57.8，57.0，56.1，56.1，55.2，41.6，41.0，40.9，29.7，26.3，22.5，15.6，9.3。ESI-MS m/z：对于C33H40N4O7计算值：604.7，实测值(M+H)+：605.3。实施例40
Figure A0081008201071
在0℃下，向9(22mg，0.039ml)的CH2Cl2(0.2ml)的溶液中加入乙酰氯(2.79ml，0.039ml)和吡啶(3.2ml，0.039ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂，得到46(22mg，93％)为白色固体。Rf：0.4(己烷∶乙酸乙酯1∶5)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.74(s，1H)，5.97(d，J＝0.9Hz，1H)，5.91(d，J＝0.9Hz，1H)，5.12(d，J＝5.7Hz，2H)，5.04(d，J＝5.7Hz，1H)，4.90(t，J＝6Hz，1H)，4.17(d，J＝2.7Hz，1H)，4.05(d，J＝2.7Hz，1H)，4.01(bs，1H)，3.71(s，3H)，3.57(s，3H)，3.50-3.44(m，2H)，3.38-3.36(m，1H)，3.30-3.26(m，1H)，3.00(dd，J1＝7.8Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.79(d，J＝12.9Hz，1H)，2.60(d，J＝18.0Hz，1H)，2.35(s，3H)，2.32(s，3H)，2.21(s，3H)，2.00(s，3H)，1.68(dd，J1＝11.7Hz，J2＝15.6Hz，1H)。ESI-MS m/z：对于C32H38N4O8计算值：606.67，实测值(M+H)+：607.3。实施例41
向46(8mg，0.013ml)的二噁烷(0.1ml)的溶液中加入5.3 N HCl/二噁烷(0.5ml)并将该反应物在23℃下搅拌1小时。然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂，得到47(5mg，70％)为白色固体。Rf：0.4(己烷∶乙酸乙酯1∶5)；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.51(s，1H)，5.97(d，J＝1.2Hz，1H)，5.91(d，J＝1.2Hz，1H)，4.97(bs，1H)，4.11(bs，1H)，4.04-4.02(m，2H)，3.75(s，3H)，3.65(d，J＝2.1Hz，2H)，3.56-3.30(m，2H)，3.04(dd，J1＝7.5Hz，J2＝18Hz，1H)，2.80(d，J＝14.4Hz，1H)，2.59(d，J＝18.3Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.24(s，3H)，2.00(s，3H)，1.76(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)，1.33(s，3H)，1.25(s，3H)。ESI-MS m/z：对于C30H34N4O7计算值：562.61，实测值(M+H)+：563.3。实施例42
Figure A0081008201082
在0℃下，向45(10mg，0.0192ml)的CH2Cl2(0.3ml)的溶液中加入异戊酰氯(2.34ml，0.0192ml)和吡啶(1.55ml，0.0192ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到48(11mg，95％)为白色固体。Rf：0.12(己烷∶乙酸乙酯1∶2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.50(s，1H)，5.98(d，J＝1.5Hz，1H)，5.91(d，J＝1.5Hz，1H)，5.75(s，1H)，5.02(t，J＝5.4Hz，1H)，4.10(d，J＝1.5Hz，1H)，4.06(d，J＝2.7Hz，1H)，4.02(d，J＝2.7Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.76-3.71(m，1H)，3.86-3.28(m，3H)，3.04(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.78(d，J＝15.9Hz，1H)，2.55(d，J＝18Hz，1H)，2.32(s，6H)，2.26(s，3H)，1.98(s，3H)，1.84-1.68(m，2H)，1.36(d，J＝7.2Hz，2H)，0.69(d，J＝6.6Hz，3H)，0.62(d，J＝6.6Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C33H40N4O7计算值：604.69，实测值(M+H)+：605.3。实施例43
Figure A0081008201091
在0℃下，向45(10mg，0.0192ml)的CH2Cl2(0.3ml)的溶液中加入异戊酰氯(3.98ml，0.0192ml)和吡啶(1.55ml，0.0192ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到49(12.4mg，96％)为白色固体。Rf：0.7(乙酸乙酯∶甲醇10∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.50(s，1H)，5.98(d，J＝1.5Hz，1H)，5.91(d，J＝1.5Hz，1H)，5.73(s，1H)，5.08(t，J＝5.4Hz，1H)，4.10(d，J＝1.5Hz，1H)，4.05(m，1H)，4.01(m，1H)，3.76(s，3H)，3.65-3.61(m，1H)，3.40-3.27(m，3H)，3.03(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.6Hz，1H)，2.78(d，J＝13.2Hz，1H)，2.57(d，J＝18.3Hz，1H)，2.32(s，3H)，2.31(s，3H)，2.25(s，3H)，1.99(s，3H)，1.79(dd，J1＝12.0Hz，J2＝16.5Hz，1H)，1.73-1.42(m，4H)，1.33-1.18(m，10H)，1.03(m，2H)，0.87(t，J＝6.6Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C38H50N4O7计算值：674.83，实测值(M+H)+：675.5。实施例44
Figure A0081008201101
在0℃下，向45(14.5mg，0.0278ml)的CH2Cl2(0.3ml)的溶液中加入反-3-三氟甲基肉桂酰氯(4.76ml，0.0278ml)和吡啶(2.25ml，0.0278ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶1)纯化，得到50(18.7mg，94％)为白色固体。Rf：0.64(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CH3OD)：δ7.74-7.55(m，4H)，7.23(d，J＝16.0Hz，1H)，6.34(s，1H)，6.12(d，J＝16.0Hz，1H)，6.07(d，J＝0.9Hz，1H)，5.96(d，J＝0.9Hz，1H)，4.39(d，J＝2.4Hz，1H)，4.07-4.05(m，1H)，3.81(bs，1H)，3.46-3.51(m，3H)，3.42(s，3H)，3.09(br d，J＝12.0Hz，1H)，2.94-2.85(m，2H)，2.74(d，J＝18.3Hz，1H)，2.38(s，3H)，2.23(s，3H)，2.02(s，3H)，1.80(s，3H)，1.84-1.75(m，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ168.7，165.3，146.5，144.7，142.6，140.6，138.0，135.9，131.0，130.9，129.1，128.6，125.8，125.7，124.5，124.4，122.7，121.2，117.8，116.5，113.0，112.0，101.7，60.4，59.1，56.5，56.4，55.6，55.3，41.8，40.3，26.6，25.1，203，15.4，9.3。ESI-MS m/z：对于C38H37F3N4O7计算值：718.72，实测值(M+H)+：719.3。实施例45
在0℃下，向43(33mg，0.0557ml)的CH2Cl2(0.4ml)的溶液中加入异戊酰氯(6.79ml，0.0557ml)和吡啶(4.5ml，0.0557ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到51(34mg，91％)为白色固体。Rf：0.09(己烷∶乙酸乙酯1∶2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.46(s，1H)，6.10(bs，1H)，5.99(d，J＝0.9Hz，1H)，5.90(d，J＝0.9Hz，1H)，5.30(t，J＝6.0Hz，1H)，4.10-4.05(m，3H)，3.81(bs，1H)，3.74(s，3H)，3.54(bs，1H)，3.38-3.36(m，1H)，3.29-3.21(m，1H)，3.00(dd，J1＝8.0Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.25(s，3H)，2.20(s，3H)，2.00(s，3H)，1.95-1.90(m，3H)，0.87(d，J＝6.6Hz，6H)，0.76(d，J＝6.0Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C36H45N5O8计算值：675.77，实测值(M+H)+：676.3。实施例46
在0℃下，向43(33mg，0.0557ml)的CH2Cl2(0.4ml)的溶液中加入反-3-三氟甲基肉桂酰氯(9.52ml，0.0557ml)和吡啶(4.5ml，0.0557ml)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯1∶2)纯化，得到52(40mg，92％)为白色固体。Rf：0.21(己烷∶乙酸乙酯1∶2)。1H NMR(300MHz，CD3OD)：δ7.74-7.47(m，4H)，6.49(s，1H)，6.40(d，J＝15.6Hz，1H)，6.00(d，J＝1.5Hz，1H)，5.90(d，J＝1.5Hz，1H)，5.47(t，J＝6Hz，1H)，4.12-4.09(m，3H)，3.93(bs，1H)，3.71(s，3H)，3.59-3.58(m，1H)，3.38(d，J＝7.8Hz，1H)，3.29(d，J＝12.0Hz，1H)，3.00(dd，J1＝8.1 Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.79-2.78(m，1H)，2.65(d，J＝18.3Hz，1H)，2.29(s，6H)，2.28(s，3H)，2.22(s，3H)，1.84-1.80(m，1H)，0.85-0.84(m，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ171.9，168.8，164.4，146.9，144.6，143.0，140.5，140.5，139.3，135.7，131.1，131.0，129.4，129.1，126.0，124.1，124.0，122.4，121.1，120.7，120.6，117.7，116.9，112.8，112.0，101.6，60.6，59.3，57.1，56.3，55.9，55.2，49.0，41.7，49.9，26.5，25.1，20.2，18.4，15.7，9.3。ESI-MS m/z：对于C41H42F3N5O8计算值：789.8，实测值(M+H)+：790.3。实施例47
Figure A0081008201131
在23℃下，向43(10mg，0.0169ml)的CH2Cl2(0.2ml)的溶液中加入三氟乙酸酐(2.38μl，0.0169ml)。将该反应混合物搅拌5小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯3∶2)纯化，得到53(10.7mg，93％)为白色固体。Rf：0.57(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.45(s，1H)，6.00(d，J＝1.2Hz，1H)，5.90(d，J＝1.2Hz，1H)，5.87(bs，1H)，5.32(bs，1H)，4.12(d，J＝2.1Hz，1H)，4.08(d，J＝1.8Hz，1H)，3.78-3.56(m，3H)，3.72(s，3H)，3.40(d，J＝8.1Hz，1H)，3.25(d，J＝9.3Hz，1H)，3.00(dd，J1＝8.4Hz)，J2＝18.0Hz，1H)，2.77(dd，J1＝2.1Hz，J2＝15.9Hz，1H)，2.68(d，J＝18.6Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.28(s，3H)，2.22(s，3H)，2.00(s，3H)，1.75(dd，J1＝11.4Hz，J2＝15.9Hz，1H)，0.69(d，J＝6.3Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ170.1，168.6，156.0，147.0，144.6，143.0，140.6，140.4，131.0，129.4，120.9，120.7，117.6，116.8，112.4，112.1，101.6，60.5，59.0，57.1，56.3，55.6，55.2，48.7，41.6，39.4，26.5，24.9，20.2，17.8，15.4，9.2。ESI-MS m/z：对于C33H36F3N5O8计算值：687.63，实测值(M+H)+：688.66。实施例48
在23℃下，向19(11mg，0.0169ml)的CH2Cl2(0.2ml)的溶液中加入三氟乙酸酐(2.38ml，0.0169ml)。将该反应混合物搅拌5小时，然后将该溶液用CH2Cl2(5ml)稀释并用0.1 N HCl(3ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，己烷∶乙酸乙酯3∶2)纯化，得到54(10.7mg，93％)为白色固体。Rf：0.6(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.33(d，J＝6.3Hz，1H)，6.45(s，1H)，6.04(m，1H)，5.95(d，J＝1.5Hz，1H)，5.84(d，J＝1.5Hz，1H)，5.32(m，2H)，5.21(m，1H)，4.11(m，4H)，3.73(s，3H)，3.64(m，2H)，3.51(m，1H)，3.37(d，J＝7.8Hz，1H)，3.22(m，2H)，3.03(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.60(d，J＝18.3Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.24(s，3H)，2.08(s，3H)，1.86(dd，J1＝12Hz，J2＝16.2Hz，1H)，0.82(d，J＝7.2Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ170.0，156.0，148.4，147.1，144.3，143.0，138.7，133.8，130.5，129.4，120.6，120.4，117.6，117.5，117.0，113.5，112.5，112.4，101.1，74.1，66.8，60.4，59.3，56.9，56.6，56.3，55.4，48.7，41.6，40.1，26.2，25.0，17.6，15.4，9.1。ESI-MS m/z：对于C35H39F3N5O7计算值：685.69，实测值(M+H)+：686.3。实施例49
Figure A0081008201151
在23℃下，向54(100mg，0.415ml)的CH2Cl2(4ml)的溶液中加入乙酸(40ml)、(PPh3)2PdCl2(8.4mg，0.012ml)和Bu3SnH(157ml，0.56ml)。在此温度下搅拌2小时后，将该反应物倾入到快速柱(SiO2，梯度己烷到己烷∶乙酸乙酯2∶1)中，得到55(90mg，96％)为白色固体。Rf：0.6(己烷∶乙酸乙酯1∶2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.55(d，J＝7.2Hz，1H)，6.45(s，1H)，5.90(d，J＝1.2Hz，1H)，5.82(d，J＝1.2Hz，1H)，5.37(t，J＝6.0Hz，1H)，4.15(d，J＝2.1Hz，1H)，4.04(d，J＝1.8Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.66-3.53(m，2H)，3.37-3.31(m，2H)，3.19-3.15(d，J＝11.7Hz，1H)，3.08-3.00(m，2H)，2.56(d，J＝18.3Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.24(s，3H)，2.04(s，3H)，1.91(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.6Hz，1H)，0.84(d，J＝6.9Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ170.1，156.3，147.3，144.9，144.4，143.3，136.7，130.7，129.3，120.6，117.6，117.4，114.4，112.1，107.7，101.0，85.8，60.5，59.3，56.5，56.4，56.2，55.2，48.9，41.6，40.9，25.7，25.3，18.0，15.6，8.7。ESI-MS m/z：对于C32H35F3N5O7计算值：645.63，实测值(M+H)+：646.2。实施例50
Figure A0081008201161
在23℃下，向17(200mg，0.288ml)的CH2Cl2(1.44ml)的溶液中加入三氟乙酸(888ml，11.53ml)并将该反应混合物在23℃下搅拌4小时。将该反应物在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)猝灭并用乙酸乙酯(2×70ml)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸钠)并在真空中浓缩，得到56(147mg，93％)为白色固体，其没有进一步纯化而在以下反应中使用。Rf：0.19(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CD3OD)：δ6.48(s，1H)，5.88(d，J＝0.9Hz，1H)，5.81(d，J＝0.9Hz，1H)，4.35(d，J＝2.4Hz，1H)，4.15(d，J＝1.8Hz，1H)，3.99-3.98(m，1H)，3.70(s，3H)，3.52-2.96(m，7H)，2.68(d，J＝18.3Hz，1H)，2.24(s，3H)，2.23(s，3H)，2.06(s，3H)，1.85(dd，J1＝11.7Hz，J2＝15.6Hz，1H)，0.91(d，J＝6.6Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CD3OD)：δ173.2，149.1，145.6，144.9，138.0，132.2，130.6，121.4，119.6，117.4，114.3，109.2，102.5，82.3，60.4，58.4，58.3，57.8，56.6，50.1，42.3，41.6，27.8，26.2，19.5，15.5，9.8。ESI-MS m/z：对于C29H35N5O6计算值：549.62，实测值(M+H)+：550.3。实施例51
向56(10mg，0.018ml)的CH2Cl2(0.4ml)溶液中加入异硫氰酸苯酯(13ml，0.109ml)并将该反应物在23℃下搅拌1.5小时。将该混合物在真空中浓缩并将残余物经快速柱层析(SiO2，梯度己烷到1∶1己烷∶乙酸乙酯)纯化，得到57(8mg，65％)为白色固体。Rf：0.57(乙酸乙酯∶甲醇10∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.88(bs，1H)，7.41-7.36(m，2H)，7.27-7.22(m，1H)，7.02-7.00(d，J＝7.8Hz，2H)，6.71(d，J＝7.2Hz，1H)，6.31(s，1H)，6.17(bs，1H)，5.93(d，J＝1.2Hz，1H)，5.83(d，J＝1.2Hz，1H)，5.55(bs，1H)，5.20-5.17(m，1H)，4.16(d，J＝1.8Hz，1H)，4.05(bs，1H)，4.02(d，J＝2.4Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.75-3.71(m，1H)，3.35(d，J＝7.8Hz，1H)，3.28-3.19(m，2H)，3.12-2.97(m，2H)，2.50(d，J＝18.3 Hz)，1H)，2.32(s，3H)，2.21(s，3H)，2.15-2.09(dd，J1＝11.4Hz，J2＝15.9Hz，1H)，1.95(s，3H)，0.88(d，J＝6.9Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ178.5，171.7，147.2，145.0，144.3，143.3，137.0，135.7，130.6，130.4，129.6，127.5，124.3，120.6，117.7，117.2，115.3，112.1，108.3，100.9，60.9，59.5，56.7，56.5，56.2，55.2，54.1，41.7，41.1，26.3，25.4，18.5，1 5.8，9.0。ESI-MS m/z：对于C36H40N6O6S计算值：684.81，实测值(M+H)+：685.3。实施例52
Figure A0081008201181
在0℃下，向57(45mg，0.065ml)的CH2Cl2(0.5ml)溶液中加入乙酰氯(4.67ml，0.065ml)和吡啶(5.3ml，0.065ml)。将该反应混合物搅拌3小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(RP-18，CH3CN∶H2O 40∶60)纯化，得到58(14mg，28％)为白色固体。Rf：0.34(CH3CN∶H2O 7∶15)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ11.90(d，J＝6.6Hz，1H)，7.45-7.40(m，3H)，7.18-7.15(m，2H)，6.58(s，1H)，6.00(d，J＝1.2Hz，1H)，5.89(d，J＝1.2Hz，1H)，5.70(s，1H)，5.37(t，J＝4.8Hz，1H)，4.48(m，1H)，4.23(bs，1H)，4.07(bs，2H)，3.85-3.75(m，1H)，3.70(s，3H)，3.46-3.41(m，2H)，3.24-3.20(m，1H)，3.00-2.95(m，1H)，2.87-2.75(m，1H)，2.31(s，3H)，2.28(s，3H)，2.24(s，3H)，2.00(s，3H)，1.85(dd，J1＝11.4Hz，J2＝15.6Hz，1H)，1.66(s，3H)，0.82(d，J＝6.0Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ182.6，174.3，171.0，146.6，144.6，142.7，142.3，140.7，140.2，131.3，129.8，129.3，128.9，128.8，121.5，120.4，117.3，116.6，112.8，112.0，111.3，101.5，60.5，59.0，57.6，56.2，55.9，55.3，55.1，41.6，39.4，27.8，26.5，24.8，20.2，17.1，15.5，9.3。ESI-MS m/z：对于C40H44N6O8S计算值：768.88，实测值(M+H)+：769.2。实施例53
向57(130mg，0.189ml)的二噁烷(1ml)溶液中加入5.3 N HCl/二噁烷溶液(1.87ml)并将该反应物在23℃下搅拌4小时。然后向该反应物中加入CH2Cl2(15ml)和H2O(10ml)并滗去有机层。在0℃下将含水层用饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)碱化(pH＝8)，然后用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。将合并的有机物干燥(硫酸钠)并在真空中浓缩，得到59(63mg，70％)为白色固体。Rf：0.15(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.67(s，1H)，5.99(d，J＝0.9Hz，1H)，5.91(d，J＝1.2Hz，1H)，5.10(bs，1H)，4.32(d，J＝7.2Hz，1H)，4.25(dd，J1＝3.6 Hz，J2＝9.3Hz，1H)，3.7(s，3H)，3.71-3.64(m，2H)，3.50(dd，J1＝2.4Hz，J2＝15.9Hz，1H)，3.42-3.37(m，2H)，3.16(dd，J1＝3.6Hz，J2＝12.9Hz，1H)，2.57(dd，J1＝9.3Hz，J2＝12.9Hz，1H)，2.27(s，3H)，2.11(s，3H)，1.91(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)。ESI-MS m/z：对于C26H30N4O5计算值：478.5，实测值(M+H)+：479.3。实施例54
Figure A0081008201201
在0℃下，向43(20mg，0.0338mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入肉桂酰氯(5.63mg，0.0338mmol)和吡啶(2.73ml，0.0338mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到60(22mg，90％)为白色固体。Rf：0.56(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.51(s，1H)，7.50-7.47(m，2H)，7.36-7.35(m，2H)，6.43(s，1H)，6.36(brd，J＝15.9Hz，2H)，6.01(d，J＝1.5Hz，1H)，5.90(brd，J＝1.5Hz，2H)，5.42(t，J＝6.0Hz，1H)，4.12-4.07(m，3H)，3.96-3.95(m，1H)，3.73(bs，3H)，3.58(bs，2H)，3.39(d，J＝8.7Hz，1H)，3.25(d，J＝11.7Hz，1H)，3.0(dd，J1＝7.5Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.78(d，J＝15.9Hz，1H)，2.67(d，J＝16.5Hz，1H)，2.29(s，6H)，2.23(s，3H)，1.99(s，3H)，1.82(dd，J1＝11.4Hz，J2＝15.6Hz，1H)，0.83(d，J＝6.0Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ172.0，165.0，146.9，144.6，143.1，141.0，140.5，134.8，131.0，129.7，129.1，128.8，127.8，125.5，123.8，123.0，121.1，120.5，117.7，116.9，112.8，112.0，101.9，60.6，59.2，57.1，56.4，55.9，55.3，48.8，41.7，40.0，26.5，25.1，20.3，18.5，15.7，9.3。ESI-MS m/z：对于C40H43N5O8计算值：721.8，实测值(M+H)+：722.3。实施例55
Figure A0081008201211
在0℃下，向45(19mg，0.0364mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入七氟代丁酰氯(5.44ml，0.0364mmol)和吡啶(2.95ml，0.0364mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到61(11.7mg，45％)为白色固体。Rf：0.76(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.46(s，1H)，6.12(bs，1H)，5.98(d，J＝1.2Hz，1H)，5.93(d，J＝1.2Hz，1H)，5.72(bs，1H)，4.13-4.11(m，2H)，4.0(d，J＝2.4Hz，1H)，3.98-3.96(m，1H)，3.73(s，3H)，3.39(d，J＝7.5Hz，1H)，3.39-3.28(m，2H)，3.09(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.80(d，J＝16.2 Hz，1H)，2.46(d，J＝18.3Hz，1H)，2.32(s，6H)，2.21(s，3H)，1.99(s，3H)，1.80(dd，J1＝12.0Hz，J2＝16.2Hz，1H)。ESI-MS m/z：对于C32H31F7N4O7计算值：716.6，实测值(M+H)+：717.2。实施例56
Figure A0081008201221
在0℃下，向43(24mg，0.04mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入丁酰氯(4.15ml，0.04mmol)和吡啶(3.28ml，0.04mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到62(24mg，90％)为白色固体。Rf：0.35(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.47(s，1H)，6.10(d，J＝6.5Hz，1H)，6.0(d，J＝1.5Hz，1H)，5.91(d，J＝1.5Hz，1H)，5.86(bs，1H)，5.31(d，J＝6.9Hz，1H)，4.11-4.06(m，3H)，3.85-3.81(m，1H)，3.75(s，3H)，3.59-3.53(m，2H)，3.38(d，J＝7.5Hz，1H)，3.27-3.22(m，1H)，3.0(dd，J1＝7.8Hz，J2＝17.4Hz，1H)，2.79(d，J＝15.3Hz，1H)，2.63(d，J＝17.7Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.0(s，3H)，1.80(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)，1.58(q，J＝7.2Hz，2H)，0.89(t，J＝7.2Hz，3H)，0.76(d，J＝6.6Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C35H43N5O8计算值：661.64，实测值(M+H)+：662.3。实施例57
Figure A0081008201231
在0℃下，向43(19mg，0.0364mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入肉桂酰氯(6.06mg，0.0364mmol)和吡啶(2.95ml，0.0364mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到63(20.1mg，85％)为白色固体。Rf：0.65(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.39-7.29(m，5H)，6.42(s，1H)，6.01(d，J＝1.5Hz，1H)，5.92(d，J＝1.5Hz，1H)，5.73(bs，1H)，5.24(t，J＝6.8Hz，1H)，4.12-4.08(m，3H)，3.66-3.64(m，2H)，3.58(bs，3H)，3.36(d，J＝8.7Hz，1H)，3.29(d，J＝12.0Hz，1H)，2.98(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18Hz，1H)，2.33(s，6H)，2.29(s，3H)，2.01(s，3H)，1.84(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)。ESI-MS m/z：对于C37H38N4O7计算值：650.72，实测值(M+H)+：651.2。实施例58
在0℃下，向43(20mg，0.0338mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入3-氯代丙酰氯(3.22ml，0.0338mmol)和吡啶(2.73ml，0.0338mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到64(20.5mg，89％)为白色固体。Rf：0.32(EtOAc∶己烷5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.48(s，3H)，6.28(m，1H)，5.99(d，J＝1.2Hz，1H)，5.91(d，J＝1.2Hz，1H)，5.86(bs，1H)，5.31(m，1H)，4.08-4.07(m，3H)，3.75(s，3H)，3.72-3.53(m，5H)，3.39(d，J＝8.1Hz，1H)，3.24(d，J＝12.0Hz，1H)，3.00(dd，J1＝8.1Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.79(d，J＝13.5Hz，1H)，2.50(t，J＝6.3Hz，2H)，2.32(s，3H)，2.28(s，3H)，2.25(s，3H)，2.0(s，3H)，1.79(dd，J1＝12.3Hz，J2＝14.8Hz，1H)，0.81(d，J＝63Hz，3H)。实施例59
在0℃下，向43(19mg，0.0364mmol)的CH2Cl2(0.3ml)溶液中加入丁酰氯(3.78ml，0.0364mmol)和吡啶(2.95ml，0.0364mmol)。将该反应混合物搅拌1小时，然后将该溶液用CH2Cl2(10ml)稀释并用0.1 N HCl(5ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下除去溶剂。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化，得到64(19mg，87％)为白色固体。Rf：0.60(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.50(s，1H)，5.98(d，J＝1.5Hz，1H)，5.91(d，J＝1.5Hz，1H)，5.75(s，1H)，5.01(t，J＝6.4Hz，1H)，4.10-4.09(m，1H)，4.06(d，J＝2.1Hz，1H)，4.03-4.02(m，1H)，3.76(s，3H)，3.67-3.60(m，1H)，3.42-3.35(m，2H)，3.29(d，J＝12.0Hz，1H)，3.02(dd，J1＝7.8Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.79(d，J＝14.1Hz，1H)，2.56(d，J＝18.3Hz，1H)，2.32(s，3H)，2.31(s，3H)，2.25(s，3H)，1.78(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.9Hz，1H)，1.63(s，3H)，1.53-1.46(m，2H)，1.28-1.16(m，2H)，0.68(t，J＝7.2Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C32H38N4O7计算值：590.67，实测值(M+H)+：591.2。实施例60
Figure A0081008201261
向50(31.7mg，0.044mmol)的CH3CN/H2O(1.5ml/0.5ml)溶液中加入AgNO3(225mg，1.32mmol)并将该反应物在23℃下搅拌17小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶剂并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶1)纯化，得到66(16mg，51％)为白色固体。Rf：0.26(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.66-7.42(m，4H)，7.20(bs，1H)，6.44(s，1H)，5.97(b，J＝1.2Hz，1H)，5.90(d，J＝1.2Hz，1H)，5.76(bs，1H)，5.28(bs，1H)，4.54(bs，1H)，4.43(bs，1H)，4.00(bs，1H)，3.68-3.57(m，4H)，3.47(d，J＝3.3Hz，1H)，3.40(d，J＝11.7Hz，1H)，3.17(d，J＝6.9Hz，1H)，2.92(dd，J1＝8.1Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.74(d，J＝17.1Hz，1H)，2.48(d，J＝18.6Hz，1H)，2.32(s，6H)，2.28(s，3H)，1.99(s，3H)，1.76(dd，J1＝12.0Hz，J2＝16.2Hz，1H)。ESI-MS m/z：对于C37H38F3N3O8计算值：709，实测值(M+-17)：692.3。实施例61
Figure A0081008201271
向53(57mg，0.0828mmol)的CH3CN/H2O(1.5mL/0.5ml)溶液中加入AgNO3(650mg，3.81mmol)并将该反应物在23℃下搅拌24小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶剂并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶1)纯化，得到67(28mg，50％)为白色固体。Rf：0.28(EtOAc∶MeOH 10∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：d 6.47(s，1H)，5.97(s，1H)，5.88(s，1H)，5.35(bs，1H)，4.51(bs，1H)，4.41(bs，1H)，4.12-4.05(m，1H)，4.00(d，J＝2.7Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.64(bs，1H)，3.46(d，J＝3.3Hz，1H)，3.34(d，J＝11.4Hz，1H)，3.18(d，J＝7.5Hz，1H)，2.95(dd，J1＝8.4Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.70(d，J＝15.6Hz，1H)，2.48(d，J＝17.7Hz，1H)，2.28(s，3H)，2.27(s，3H)，2.26(s，3H)，1.98(s，3H)，1.68(dd，J1＝12Hz，J2＝15.6Hz，1H)，0.86(d，J＝6.3Hz，3H)。ESI-MS m/z：对于C32H37F3N4O9计算值：678.66，实测值(M+-17)：661.2。实施例62
向48(32mg，0.0529mmol)的CH3CN/H2O(1.5ml/0.5ml)溶液中加入AgNO3(270mg，1.58mmol)并将该反应物在23℃下搅拌24小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶剂并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶1)纯化，得到68(18mg，56％)为白色固体。Rf：0.40(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：d 6.50(s，1H)，5.95(d，J＝1.2Hz，1H)，5.88(d，J＝1.2Hz，1H)，5.23(d，J＝6.9Hz，1H)，4.45(d，J＝3.3Hz，1H)，4.38(s，1H)，4.01(d，J＝2.4Hz，1H)，3.78(m，1H)，3.77(s，3H)，3.41-3.37(m，1H)，3.17-3.15(m，1H)，2.96(dd，J1＝7.8Hz，J2＝18.0Hz，1H)，2.70(d，J＝15.3Hz，1H)，2.40(d，J＝18.0Hz，1H)，2.30(s，6H)，2.27(s，3H)，1.76-1.65(m，1H)，1.35-1.25(m，2H)，0.89-0.82(m，1H)，0.69(d，J＝6.6Hz，3H)，0.58(d，J＝6.6Hz，3H)。实施例63
Figure A0081008201291
向51(27mg，0.04mmol)的CH3CN/H2O(1.5ml/0.5ml)溶液中加入AgNO3(204mg，1.19mmol)并将该反应物在23℃下搅拌24小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶液并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶1)纯化，得到69(10mg，38％)为白色固体。Rf：0.38(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：d 6.48(s，1H)，6.16(bs，1H)，5.98(d，J＝1.5Hz，1H)，5.89(d，J＝1.5Hz，1H)，5.33(t，J＝6.0Hz，1H)，4.50(m，1H)，4.40(m，1H)，4.11-4.09(m，1H)，4.00(d，J＝2.6Hz，1H)，3.78(s，3H)，3.41-3.32(m，3H)，3.18(d，J＝8.4Hz，1H)，2.94(dd，J1＝8.4Hz，J2＝18.3Hz，1H)，2.70(d，J＝14.4Hz，1H)，4.45(d，J＝18.3Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.28(s，3H)，2.27(s，3H)，2.04(s，3H)，2.00-1.86(m，3H)，1.73(m，1H)，0.87(d，J＝6.3Hz，6H)。实施例64
Figure A0081008201301
向63(15mg，0.023mmol)的CH3CN/H2O(1.5ml/0.5ml)溶液中加入AgNO3(118mg，0.691mmol)并将该反应物在23℃下搅拌24小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶液并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶1)纯化，得到70(20.1mg，85％)为白色固体。Rf：0.43(EtOAc∶MeOH 5∶1)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：d 7.38-7.28(m，5H)，6.48(s，1H)，5.98(d，J＝1.5Hz，1H)，5.91(d，J＝1.5Hz，1H)，5.75(bs，1H)，5.38(brd，1H)，5.30(bs，1H)，4.53(m，1H)，4.42(m，1H)，4.02(d，J＝2.7Hz，1H)，3.78-3.65(m，5H)，3.46-3.40(m，2H)，3.17(d，J＝7.8Hz，1H)，2.94(dd，J1＝7.8Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.73(d，J＝16.8Hz，1H)，2.45(d，J＝18.0Hz，1H)，2.31(s，6H)，2.28(s，3H)，1.97(s，3H)，1.77(dd，J1＝12.0Hz，J2＝15.3Hz，1H)。实施例65
Figure A0081008201311
向65(25mg，0.042mmol)的CH3CN/H2O(1.5ml/0.5ml)溶液中加入AgNO3(215.56mg，1.269mmol)并将该反应物在23℃下搅拌24小时。然后在0℃下加入盐水(10ml)和饱和NaHCO3水溶液(10ml)并将该混合物搅拌15分钟，经硅藻土垫过滤并用CH2Cl2(20ml)洗涤。滗去溶液并将有机层干燥，在真空中浓缩。将残余物经快速柱层析(SiO2，EtOAc∶MeOH 5∶2)纯化，得到71(16mg，65％)为白色固体。Rf：0.0.5(EtOAc∶MeOH 5∶2)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：d 6.50(s，1H)，5.95(d，J＝1.5Hz，1H)，5.78(s，1H)，5.19(bs，1H)，4.45(d，J＝3.3Hz，1H)，4.37(bs，1H)，4.11 (brd，J＝4.8Hz，1H)，4.01(d，J＝2.1Hz，1H)，3.76(s，1H)，3.71-3.69(m，1H)，3.49-3.35(m，1H)，3.24(d，J＝13.5Hz，1H)，3.15(d，J＝9.3Hz，1H)，2.95(dd，J1＝8.1Hz，J2＝17.7Hz，1H)，2.70(d，J＝15.6Hz，1H)，2.40(d，J＝18.0Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.29(s，3H)，2.26(s，3H)，1.96(s，3H)，1.75-1.66(m，1H)，1.52-1.17(m，2H)，0.66(t，J＝7.2Hz，3H)。发酵方法实施例A
将含有1％葡葡糖、0.25％牛肉膏、0.5％细菌培养胨、0.25％NaCl、0.8％CaCO3的接种培养基与微生物荧光假单胞菌的菌株A2-2的0.1％的冷冻营养原液一起在27℃下、在旋转振荡器(25rpm)上孵育。孵育30小时后，将所述接种培养物加入到装有由2％右旋糖、4％甘露糖醇、2％干酿造酵母(VitalevorBiolux，Belgium)、1％(NH4)2SO4、0.04％K2HPO4、0.8％KCl、0.001％FeCl3、0.1％L-Tyr、0.8％CaCO3、0.05％PPG-2000、0.2％消泡硅氧烷(ASSAF-100，RHODIA UK)组成的生产培养基的搅拌容器发酵罐中。在122℃下灭菌30分钟。所接种的容积是2％(v/v)。温度是27℃(0-16)小时，从16小时到过程结束(41小时)温度是24℃。溶解氧压力高达25％。用稀硫酸将pH从28小时直至过程结束控制在6.0。超压力为0.5巴。从16小时起到过程结束加入1％甘露糖醇或山梨糖醇(用于两天的运行)并加入2％甘露糖醇或山梨糖醇用于三天的发酵过程。
41或64小时后，必须萃取所述发酵培养物以便回收番红菌素B或KCN处理澄清培养物以便回收氰基-番红菌素B。实施例B从粗提物中得到氰基番红菌素B。
将pH为6的发酵培养物澄清或过滤以除去固体物。用稀氢氧化钠将澄清培养物的pH调节至9.5并用2∶1(v/v)乙酸乙酯、二氯甲烷或乙酸丁酯萃取两次。在20分钟内进行萃取，并使萃取液进入搅拌容器中，该混合物的温度维持在8-10℃。通过液-液离心将所述两相分开。用无水硫酸钠干燥有机相或者冷冻，过滤以除去冰。蒸发有机相(乙酸乙酯层)直到得到油状粗提物。
实施例C
由澄清培养物得到氰基番红菌素B
将pH为6的发酵培养物澄清或过滤以除去固体物。用浓乙酸将该澄清培养物的pH调节到3.9。将0.5g/l KCN加入该澄清培养物中并在搅拌下，于20℃孵育1小时。然后，将温度降至15℃，用稀氢氧化钠调节pH到9.5并用2∶1.5(v/v)乙酸乙酯萃取。在20分钟内进行萃取并使萃取液进入搅拌容器内，该混合物的温度维持在8-10℃。通过液-液离心将所述两相分开。用无水硫酸钠干燥有机相。蒸发有机相(乙酸乙酯层)直到得到油状粗提物。该粗提物经快速柱层析(SiO2，梯度20∶1-10∶-5∶1乙酸乙酯∶甲醇)纯化定量得到化合物2，为淡黄色固体。Rf：0.55(乙酸乙酯∶甲醇5∶1)；tR＝19.9分[HPLC，Delta Pack C4，5μm，300 A，150×3mm，λ＝215nm，流速＝0.7ml/分，温度＝50℃，梯度：CH3CN-NaOAc水溶液(10mM)85％-70％(20分钟)]；1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ6.54(dd，J1＝4.4Hz，J2＝8.4Hz，1H)，6.44(s，1H)，4.12(d，J＝2.4Hz，1H)，4.04(d，J＝2.4Hz，1H)，4.00(s，3H)，3.87(bs，1H)，3.65(ddd，J1＝1.5Hz，J2＝8.7Hz，J3＝9.9Hz，1H)，3.35(br.d，J＝8.4Hz，1H)，3.15-2.96(m，4H)，2.92(q，J＝7.2Hz，1H)，2.47(d，J＝18.3Hz，1H)，2.29(s，3H)，2.18(s，3H)，1.83(s，3H)，1.64(ddd，J1＝2.7Hz，J2＝11.1Hz，J3＝14.1Hz，1H)，0.79(d，J＝7.2Hz，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)：δ186.0(q)，175.9(q)，156.2(q)，146.8(q)，142.8(q)，140.7(q)，136.6(q)，130.5(q)，128.8(q)，127.0(q)，120.5(s)，117.4(q)，116.5(q)，60.8(t)，60.4(s)，58.7(t)，56.2(s)，55.7(s)，54.8(s)，54.8(s)，54.4(s)，50.0(s)，41.6(t)，39.8(d)，25.2(d)，24.4(d)，21.2(t)，15.5(t)，8.4(t)。ESI-MS m/z：对于C29H35N5O6计算值：549.6，实测值(M+Na)+：572.3。实施例D
将由右旋糖(2％)、甘露醇糖(4％)、干酿造酵母(2％)、硫酸铵(1％)、磷酸氢二钾(0.04％)、氯化钾(0.8％)、三氯化铁(III)六水合物(0.001％)、L-酪氨酸(0.1％)、碳酸钙(0.8％)、聚乙二醇2000(0.05％)和消泡剂ASSAF 1000(0.2％)组成的培养基(501)倾入到75l总容量的小型发酵罐中，灭菌后，用A2-2菌株(FERM BP-14)的接种培养基(2％)接种并在搅拌下、在27℃-24℃进行充气培养64小时(每分钟充气75l并以350-500rpm搅拌)。从27小时到过程结束，通过自动供给稀硫酸控制pH。从16小时到过程结束加入2％甘露糖醇。经离心除去细胞后，用稀氢氧化钠将如此得到的培养物(451)调节到pH9.5，用25升乙酸乙酯萃取两次。用20分钟将该混合物在8℃下装入搅拌容器中。通过液-液离心将两相分离。将有机相在-20℃下冷冻并过滤除去冰，蒸发冰并蒸发直至得到40g油状-深色-粗提物。引入氰化物基团和纯化以后，得到3.0g氰基番红菌素B。实施例E
将由右旋糖(2％)、甘露醇糖(4％)、干酿造酵母(2％)、硫酸铵(1％)、磷酸氢二钾(0.02％)、氯化钾(0.2％)、三氯化铁(III)六水合物(0.001％)、L-酪氨酸(0.1％)、碳酸钙(0.8％)、聚乙二醇2000(0.05％)和消泡剂ASSAF 1000(0.2％)组成的培养基(501)倾入到75l总容量的小型发酵罐中，灭菌后，用A2-2菌株(FERM BP-14)的接种培养基(2％)接种并在搅拌下、在27℃-24℃进行充气培养41小时(每分钟充气75l并以350-500rpm搅拌)。从28小时到过程结束，通过自动供给稀硫酸控制pH。从16小时到过程结束加入2％甘露糖醇。经离心除去细胞后，用200ml浓乙酸将如此得到的培养物(451)调节到pH3.9。加入25g 97％的氢化钾，于20℃搅拌1小时后，用1500ml 10％氢氧化钠溶液调节pH到9.5。然后，用35升乙酸乙酯萃取。用20分钟将该混合物在8℃下装入搅拌容器中。通过液-液离心将两相分离。将有机相经无水硫酸钠干燥，蒸发直至得到60g油状-深色-粗提物。层析后，得到4.9克氰基番红菌素B。
参考文献欧洲专利309,477。美国专利5,721,362。Sakai，R.，Jares-Erijman，E.A.，Manzanarcs，I.，Elipe，M.V.S.和Rinehart，K.L.J.Am.Chem.Soc.(1996)118，9017-9023Martinez，E.J.，Owa，T.，Schreiber，S.L.和Corey，E.J.Proc.Natl.Acad，Sci.USA，1999，96，3496-3501。日本公开特许公报JP-A2 59/225189。日本公开特许公报JP-A2 60/0824288。Arai，T，；Kubo，A.In The Alkaloids，Chemistry and Pharmacology；Brossi，A.编辑；Academic：New York，1983，第21卷；第56-110页。Remers，W.A.：In The Chemistry of Antitumor Antibiotics；第2卷；Wiley；New York.1988，第93-118页。Gulavita N.K.；Scheuer，P.J，：Desilva，E.D.Abst.Indo-United StatesSymp.on Bioactive Compounds from Marine Organisms，Goa，India，Feb.23-27，1989，第28页。Arai，T.；Takahashi，K.；Kubo，A.J.Antibiot，1977，30，1015-1018。Arai，T.；Takahashi，K.；Nakahara，S.；Kubo，A.Experientia 1980，36，1025-1028。Mikami，Y.；Takahashi，K.；Yazawa，K.；Hour-Young，C.；Arai，T.；Saito，N.；Kubo，A.J.Antibiot.1988，41，734-740。Arai，T.；Takahashi，K.；Ishiguro，K.；Yazawa，K.，J.Antibiot.1980，33，951-960。Yazawa，K.；Takahashi，K.；Mikami，Y.；Arai，T.；Saito，N.；Kubo，A.J.Antibiot.1986，39，1639-1650。Arai，T.；Yazawa，K.；Takahashi，K.；Maeda，A.；Mikami，Y.Antimicrob.Agent Chemother.1985，28，5-11。Takahashi，K.；Yazawa，K.；Kishi，K.；Mikami，Y.；Arai，T.；Kubo，A.J.Antibiot.1982，35，196-201。Yazawa，K.；Asaoka，T.；Takahashi，K.；Mikami，Y.，Arai，T.J.Antibiot.1982，35，915-917。Frincke，J.M.；Faulkner，D.J.J.Am.Chem.Soc.1982，104，265-269。He，H.-Y.；Faulkner，D.J.J.Org.Chem.1989，54，5822-5824。Kubo，A.；Saito，N.；Kitahara，Y.；Takahashi，K.；Tazawa，K.；Arai，T.Chem Pharm.Bull.1987，35，440-442。Trowitzsch-Kienast，W.；Irschik，H.；Reichenback，H.；Wray，V.；Hfle，G.Liebigs Ann.Chem.1988，475-481。Ikeda，Y.；Idemoto，H.；Hirayama，F.；Yamamoto，K.；Iwao，K.；Asano，T.；Munakata，T.J.Antibiot.1983，36，1279-1283。Asaoka，T.；Yazawa，K.；Mikami，Y.Arai，T.；Takahashi，K.J.Antibiot.1982，35，1708-1710。Lown，J.W.；Hanstock，C.C.；Joshua，A.V.；Arai，T；Takahashi，K.J.Antibiot.1983，36，1184-1194。Munakata等，美国专利4,400,752，1984。Y.Ikeda等，The Journal of Antibiotics.第XXXVI卷，第10期，1284，1983。R.Cooper，S.Unger.The Journal of Antibiotics.第XXXVIII卷，第1期，1985。Corey等，美国专利5,721,362，1998。Corey等，J.Am.Chem.Soc.第118卷，第9202-92034页，1996。Proc.Natl.Acad.Sci.USA.第96卷，第3496-3501页，1999。

Claims (33)

1.具有式(XIV)结构的21-Nuc化合物作为原料在合成中的用途：
Figure A0081008200021
其中至少一个环A或E是醌环。
2.一种用于制备具有式(XIV)的稠环结构的化合物的方法：
Figure A0081008200022
该方法包括从式(XVI)的21-氰基化合物起始的一个或多个反应：
Figure A0081008200023
其中：R1是酰氨基亚甲基或酰氧基亚甲基；R5和R8独立选自-H、-OH或-OCOCH2OH，或R5和R8都是酮基和所述环A是对-苯醌环；R14a和R14b都是-H或者一个是-H而另一个是-OH、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；和R15和R18独立选自-H或-OH，或R5和R8都是酮基和所述环A是对-苯醌环。
3.一种根椐权利要求2的方法，其中R1是-CH2-NH-CO-CR25aR25bR25c，其中R25a和R25b形成酮基或一个是-OH、-NH2或-OCOCH3，而另一个是-CH2COCH3、-H、-OH或-OCOCH3，条件是当R25a是-OH或-NH2时，则R25b不是-OH和R25c是-H、-CH3或-CH2CH3，或R1是-CH2-O-CO-R，其中R是-C(CH3)＝CH-CH3或-CH3。
4.一种根椐权利要求2的方法，其中式(XVI)的21-氰基化合物是氰基番红菌素B。
5.一种根椐任一以上权利要求的方法，其中具有式(XIV)的稠环结构的化合物是式(XVIIa)：
Figure A0081008200031
或式(XVIIb)化合物：
Figure A0081008200032
其中R1是任选保护或衍生化的氨基亚甲基、任选保护或衍生化的羟基亚甲基；R4是-H；或R1和R4一起形成式(IV)、(V)、(VI)或(VII)的基团：R5是-H或-OH；R7是-OCH3和R8是-OH或R7和R8一起形成基团-O-CH2-O-；R14a和R14b都是-H或者一个是-H而另一个是-OH、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；和R15是-H或-OH；R21是-H、-OH或-CN；和其衍生物，包括酰基衍生物并且包括其中在12位上的基团-NCH3-由-NH-或-NCH2CH3-代替的衍生物和其中在式(VI)化合物中的-NH2基团被任选衍生化的衍生物。
6.一种根据权利要求6的方法，其中R5是1-5个碳原子的链烷酰氧基。
7.一种根据权利要求6的方法，其中R5是乙酰氧基。
8.一种根据权利要求5、6或7的方法，其中R14a和R14b是氢。
9.一种根据权利要求5-8中任一项的方法，其中R15是氢。
10.一种根据权利要求5-9中任一项的方法，其中R21是-OH或-CN。
11.一种根据权利要求5-10中任一项的方法，所述化合物是式(XVIIb)。
12.一种根据权利要求11的方法，其中R7和R8一起形成基团-O-CH2-O-。
13.一种根据权利要求4-11中任一项的方法，其中R1和R4一起形成式(IV)、(V)、(VI)或(VII)的基团：
Figure A0081008200051
14.一种根据权利要求5-12中任一项的方法，其中R1是任选保护或衍生化的氨基亚甲基、任选保护或衍生化的羟基亚甲基；和R4是-H。
15.一种根据权利要求14的方法，其中R1是基团-CH2NH2或-CH2-NH-aa，其中aa是酰基氨基酸基团。
16.一种根据权利要求15的方法，其中以基团-CH2NH2或-CH2-NH-aa的N-酰基衍生物形式存在。
17.一种根据权利要求16的方法，其中R1是N-酰基衍生物，其中所述酰基是式-CO-Ra，其中Ra是烷基、烷氧基、亚烷基、芳基烷基、芳基亚烷基、氨基酸酰基或杂环基，每一个任选由卤代基、氰基、硝基、羧基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、杂环基、杂环氧基、烷基、氨基或取代的氨基取代；或Ra是aa。
18.一种根据权利要求15、16或17的方法，其中存在一个或多个aa基团并且是丙氨酰基、精氨酰基、天冬氨酰基、天冬酰基、胱氨酰基、谷氨酰基、谷氨酰胺酰基、甘氨酰基、组氨酰基、羟基脯氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、赖氨酰基、甲硫氨酰基、苯丙氨酰基、脯氨酰基、丝氨酰基、苏氨酰基、甲状腺原氨酰基、色氨酰基、酪氨酰基、缬氨酰基或另一氨基酸酰基。
19.一种根据权利要求5-18中任一项的方法，其中一个或多个取代基由保护基团保护。
20.一种根据任一以上权利要求的方法，其中所述产物是式(XXIIa)：
Figure A0081008200061
或式(XXIIb)化合物：
Figure A0081008200062
其中：R1是-CH2NH2或-CH2OH，或该基团的被保护或衍生化的形式和R4是-H；或R1a和R4一起形成式(IV)、(VI)或(VII)的基团：
Figure A0081008200063
R5是-OH或该基团的被保护或衍生化的形式；R14a和R14b都是-H或者一个是-H而另一个是-OH或该基团的被保护或衍生化的形式、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；R12是-NH-、-NCH3-或-NCH2CH3-；R15是-OH或该基团的被保护或衍生化的形式；和R18是-OH或该基团的被保护或衍生化的形式。
21.一种根据任一以上权利要求的方法，其中所述产物是式(XXIII)化合物：
Figure A0081008200071
其中R1如以上对式(XVIIb)所定义并且优选为中等体积的衍生化的氨基亚甲基；R5如以上对式(XVIIb)所定义并且优选为小体积的衍生化的羟基；R12如以上所定义并且优选为-NCH3-和R21是羟基或氰基。
22.一种根据权利要求21的方法，其中R1是疏水基团。
23.一种根据权利要求22的方法，其中R1是基团-CH2-NH2-CO-Ra，其中Ra具有少于20个原子，更优选少于15或10个原子的线性链长度。
24.一种根据权利要求20、21或22的方法，其中R5是乙酰基。
25.一种根据任一以上权利要求的方法，该方法包括以下步骤：
Figure A0081008200072
其中对于终产物的R5如对化合物(XXXII)所定义并且可以在原料中不同并且在其中被转化作为所述方法的一部分，R18在终产物中是羟基，但在原料中可以是被保护的羟基并且在其中被转化作为所述方法的一部分，R12对于终产物可以与在原料中相同或可以在其中被转化作为所述方法的一部分，R21对于终产物如上所定义并且如果是羟基，可以由氰基形成作为所述方法的一部分，Ra如上所定义并且可以进一步酰化作为所述方法的一部分，得到具有酰化的Ra基团的终产物。
26.一种根据任一以上权利要求的方法，其中aa是丙氨酰基。
27.一种根据权利要求26的方法，其中所述丙氨酰基存在于原料中并由Boc基团保护。
28.一种根据任一以上权利要求的方法，该方法包括以下反应：
Figure A0081008200081
29.一种根据任一以上权利要求的方法，该方法包括以下反应：
Figure A0081008200082
30.一种根据任一以上权利要求的方法，该方法包括其中将基团R1由氨基亚甲基转化为羟基亚甲基的反应。
31.一种根据任一以上权利要求的方法，其中使具有基团R1是羟基亚甲基的化合物与式(XIX)的试剂反应
Figure A0081008200091
其中Fu表示被保护的官能团，Prot3是保护基团，虚线表示任选的双键。
32.一种用于制备如在权利要求1中所定义的式(XVI)的21-氰基化合物的方法，该方法包括使式(XV)的化合物：
Figure A0081008200092
其中R1、R5、R8、R14a、R14b、R15和R18如上所定义和R21是羟基，与氰化物离子源反应得到所需的21-氰基化合物。
33.一种式(XVI)的21-氰基化合物：其中：R1是酰氨基亚甲基或酰氧基亚甲基；R5和R8独立选自-H、-OH或-OCOCH2OH，或R5和R8都是酮基，所述环A是对-苯醌环；R14a和R14b都是-H或者一个是-H而另一个是-OH、-OCH3或-OCH2CH3，或R14a和R14b一起形成酮基；和R15和R18独立选自-H或-OH，或R5和R8都是酮基和所述环A是对-苯醌环；番红菌素B除外。
CNB008100829A 1999-05-14 2000-05-15 半合成方法和其中间体 Expired - Lifetime CN1229382C (zh)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9911345.8 1999-05-14
GBGB9911345.8A GB9911345D0 (zh) 1999-05-14 1999-05-14
GBGB9918178.6A GB9918178D0 (en) 2000-05-15 1999-08-02 Synthetic methods
GB9918178.6 1999-08-02
GB9923632.5 1999-10-06
GBGB9923632.5A GB9923632D0 (en) 1999-10-06 1999-10-06 Hemisynthetic process towards ecteinascidin and phtalscidin compounds
GB0001063A GB0001063D0 (en) 2000-01-17 2000-01-17 Hemisynthetic process towards ecteinascidin and phtalascidin
GB0001063.7 2000-01-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1360588A true CN1360588A (zh) 2002-07-24
CN1229382C CN1229382C (zh) 2005-11-30

Family

ID=42632476

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB008100829A Expired - Lifetime CN1229382C (zh) 1999-05-14 2000-05-15 半合成方法和其中间体
CNB018127460A Expired - Lifetime CN1211386C (zh) 1999-05-14 2001-05-15 Et－743的抗肿瘤类似物
CNB018120431A Expired - Lifetime CN100475822C (zh) 1999-05-14 2001-05-15 生产海鞘素化合物的合成方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB018127460A Expired - Lifetime CN1211386C (zh) 1999-05-14 2001-05-15 Et－743的抗肿瘤类似物
CNB018120431A Expired - Lifetime CN100475822C (zh) 1999-05-14 2001-05-15 生产海鞘素化合物的合成方法

Country Status (29)

Country Link
US (3) US7241892B1 (zh)
EP (1) EP1185536B1 (zh)
JP (1) JP4445136B2 (zh)
KR (1) KR100834601B1 (zh)
CN (3) CN1229382C (zh)
AR (1) AR035842A1 (zh)
AT (1) ATE283273T1 (zh)
AU (2) AU775580B2 (zh)
BG (1) BG65896B1 (zh)
BR (3) BRPI0010559B8 (zh)
CA (2) CA2372058C (zh)
CY (1) CY1108095T1 (zh)
CZ (3) CZ303536B6 (zh)
DE (1) DE60016209T2 (zh)
DK (1) DK1185536T3 (zh)
ES (2) ES2233367T3 (zh)
HU (1) HU230646B1 (zh)
MX (1) MXPA01011631A (zh)
MY (1) MY130271A (zh)
NO (2) NO322016B1 (zh)
NZ (1) NZ515424A (zh)
PL (1) PL226890B1 (zh)
PT (1) PT1185536E (zh)
RU (1) RU2237063C9 (zh)
SI (2) SI1185536T1 (zh)
SK (2) SK287835B6 (zh)
TR (1) TR200103273T2 (zh)
UA (1) UA75333C2 (zh)
WO (3) WO2000069862A2 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107033164A (zh) * 2010-05-25 2017-08-11 法马马有限公司 制备海鞘素化合物的合成方法
WO2020155613A1 (zh) * 2019-02-01 2020-08-06 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种海鞘素化合物及其中间体的制备方法
CN111620792A (zh) * 2019-02-28 2020-09-04 兰州大学 一种n,n-二取代氰基甲酰胺的合成方法

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE289810T1 (de) 1998-05-11 2005-03-15 Pharma Mar Sa Ecteinascidinderivate
MY164077A (en) 1999-05-13 2017-11-30 Pharma Mar Sa Compositions and uses of et743 for treating cancer
MY130271A (en) 1999-05-14 2007-06-29 Pharma Mar Sa Hemisynthetic method and new compounds
US7919493B2 (en) * 2000-04-12 2011-04-05 Pharma Mar, S.A. Anititumoral ecteinascidin derivatives
BRPI0110024B8 (pt) 2000-04-12 2021-05-25 Pharma Mar Sa derivados de ecteinascidina antitumorais, composição farmacêutica que os compreende e uso dos mesmos
JP4942900B2 (ja) * 2000-05-15 2012-05-30 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ エクチナサイジン化合物の製造のための合成方法
US7420051B2 (en) 2000-05-15 2008-09-02 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.
AU3956502A (en) 2000-11-03 2002-05-27 Harvard College Saframycins, analogues and uses thereof
AU2002212499B2 (en) * 2000-11-06 2006-11-02 Pharma Mar, S.A. Compositions for antitumour treatment containing ecteinascidin 743
GB0117402D0 (en) 2001-07-17 2001-09-05 Pharma Mar Sa New antitumoral derivatives of et-743
GB0119243D0 (en) * 2001-08-07 2001-10-03 Pharma Mar Sa Antitumoral analogs of ET-743
US20050004018A1 (en) * 2001-10-19 2005-01-06 Jose Jimeno Use of antitumoral compound in cancer therapy
GB0202544D0 (en) 2002-02-04 2002-03-20 Pharma Mar Sa The synthesis of naturally occuring ecteinascidins and related compounds
GB0229793D0 (en) * 2002-12-20 2003-01-29 Pharma Mar Sa The gene cluster involved in safracin biosynthesis and its uses for genetic engineering
GB0312407D0 (en) * 2003-05-29 2003-07-02 Pharma Mar Sau Treatment
US7183054B2 (en) 2003-06-03 2007-02-27 President And Fellows Of Harvard College Assay for identifying biological targets of polynucleotide-binding compounds
GB0324201D0 (en) * 2003-10-15 2003-11-19 Pharma Mar Sau Improved antitumoral combinations
CA2544320A1 (en) 2003-11-13 2005-06-02 Pharma Mar, S.A.U. Method of treating cancer using a combination comprising et-743 and 5-fluorouracil
GB0326486D0 (en) * 2003-11-14 2003-12-17 Pharma Mar Sau Combination treatment
CN1897949A (zh) * 2003-11-14 2007-01-17 马尔药品公司 包含使用et－743和紫杉醇来治疗癌症的联合疗法
US20080242670A2 (en) * 2004-09-29 2008-10-02 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Anti-Inflammatory Agents
RU2359700C2 (ru) * 2004-10-26 2009-06-27 Фарма Мар С.А., Сосьедад Униперсональ Пегилированный липосомальный доксорубицин в комбинации с эктеинасцидином 743 (ecteinescidin 743)
WO2006046079A1 (en) * 2004-10-29 2006-05-04 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Formulations comprising ecteinascidin and a disaccharide
GB0522082D0 (en) * 2005-10-31 2005-12-07 Pharma Mar Sa Formulations
KR100712667B1 (ko) 2006-04-11 2007-05-02 재단법인서울대학교산학협력재단 신규한 디아자 헤테로고리 유도체 및 그의 고체상 제조방법
GB0708691D0 (en) * 2007-05-04 2007-06-13 Pharma Mar Sa Anticancer treatments a
US20090076017A1 (en) * 2007-09-15 2009-03-19 Protia, Llc Deuterium-enriched trabectedin
EP2201141A1 (en) * 2007-10-19 2010-06-30 Pharma Mar S.A. Prognostic molecular markers for et-743 treatment
MX2010012501A (es) * 2008-05-16 2010-12-20 Pharma Mar Sa Terapia de combinacion con un alcaloide antitumoral.
RU2519750C2 (ru) * 2008-05-16 2014-06-20 Фарма Мар, С.А. Способы лечения множественной миеломы
WO2011048210A1 (en) 2009-10-22 2011-04-28 Pharma Mar, S.A. PDGFR-α AS RESPONSE MARKER FOR PM00104 TREATMENT
PL2786754T3 (pl) 2010-11-12 2019-07-31 Pharma Mar S.A. Leczenie skojarzone inhibitorem mitozy
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
CN107739387B (zh) * 2017-10-16 2020-01-03 上海皓元生物医药科技有限公司 一种制备曲贝替定的关键中间体化合物的方法
CN109912629B (zh) * 2017-12-13 2021-12-24 浙江中科创越药业有限公司 天然产物Trabectedin的制备
TWI824043B (zh) 2018-10-25 2023-12-01 西班牙商瑪製藥股份有限公司 藥物抗體共軛物
JOP20220118A1 (ar) 2019-11-21 2023-01-30 Pharma Mar Sa طرق لعلاج سرطان الرئة للخلايا الصغيرة بصيغ من لوربينيكتيدين
CN116217584A (zh) * 2021-12-06 2023-06-06 南通诺泰生物医药技术有限公司 Et743及其中间体的光催化合成方法
CN120641094A (zh) * 2023-01-17 2025-09-12 艾德赛瑞思股份有限公司 海鞘素衍生物抗体药物缀合物
WO2025077996A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of ecteinascidin compounds
WO2025233522A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for an ecteinascidin

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2461995A1 (fr) * 1979-07-20 1981-02-06 Lcc Cice Cie Europ Compo Elect Transducteur magneto-electrique pour systeme d'enregistrement magnetique, et systeme d'enregistrement comportant un tel transducteur
JPS59225189A (ja) 1983-06-03 1984-12-18 Shionogi & Co Ltd キノナミン誘導体およびその製造法
JPS6054386A (ja) * 1983-09-02 1985-03-28 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd サフラシン誘導体
JPS6084288A (ja) 1983-10-13 1985-05-13 Shionogi & Co Ltd シアノキノナミンアセテ−ト類およびその製造法
US5149804A (en) 1990-11-30 1992-09-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 736 and 722
EP0309477B1 (en) 1986-06-09 1991-11-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759a, 759b and 770
US5256663A (en) 1986-06-09 1993-10-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising ecteinascidins and a method of treating herpes simplex virus infections therewith
US5089273A (en) 1986-06-09 1992-02-18 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B and 770
US5478932A (en) 1993-12-02 1995-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins
SG50747A1 (en) * 1995-08-02 1998-07-20 Tanabe Seiyaku Co Comptothecin derivatives
US5721362A (en) * 1996-09-18 1998-02-24 President And Fellows Of Harvard College Process for producing ecteinascidin compounds
US5985876A (en) 1997-04-15 1999-11-16 Univ Illinois Nucleophile substituted ecteinascidins and N-oxide ecteinascidins
WO1999051238A1 (en) 1998-04-06 1999-10-14 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Semi-synthetic ecteinascidins
ATE289810T1 (de) 1998-05-11 2005-03-15 Pharma Mar Sa Ecteinascidinderivate
US6124292A (en) 1998-09-30 2000-09-26 President And Fellows Of Harvard College Synthetic analogs of ecteinascidin-743
MY130271A (en) 1999-05-14 2007-06-29 Pharma Mar Sa Hemisynthetic method and new compounds
CA2397597A1 (en) 2000-01-19 2001-07-26 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Compounds of the saframycin-ecteinascidin series, uses, and synthesis thereof
BRPI0110024B8 (pt) 2000-04-12 2021-05-25 Pharma Mar Sa derivados de ecteinascidina antitumorais, composição farmacêutica que os compreende e uso dos mesmos
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107033164A (zh) * 2010-05-25 2017-08-11 法马马有限公司 制备海鞘素化合物的合成方法
WO2020155613A1 (zh) * 2019-02-01 2020-08-06 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种海鞘素化合物及其中间体的制备方法
US12122784B2 (en) 2019-02-01 2024-10-22 Brightgene Bio-Medical Technology Co., Ltd. Preparation method for ecteinascidin compound and intermediate thereof
CN111620792A (zh) * 2019-02-28 2020-09-04 兰州大学 一种n,n-二取代氰基甲酰胺的合成方法
CN111620792B (zh) * 2019-02-28 2023-01-03 兰州大学 一种n,n-二取代氰基甲酰胺的合成方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN100475822C (zh) 2009-04-08
CA2372058A1 (en) 2000-11-23
SK287879B6 (sk) 2012-02-03
CZ20014102A3 (cs) 2002-06-12
JP2002544280A (ja) 2002-12-24
CA2406095A1 (en) 2001-11-22
CN1211386C (zh) 2005-07-20
WO2001087894A1 (en) 2001-11-22
NO328301B1 (no) 2010-01-25
BR0110801A (pt) 2003-02-11
TR200103273T2 (tr) 2002-04-22
SK16502001A3 (sk) 2002-06-04
BRPI0110801B1 (pt) 2018-02-27
EP1185536A2 (en) 2002-03-13
SI1185536T1 (en) 2005-06-30
NZ515424A (en) 2004-06-25
KR100834601B1 (ko) 2008-06-02
DE60016209T2 (de) 2005-12-15
JP4445136B2 (ja) 2010-04-07
CN1441805A (zh) 2003-09-10
BRPI0110801B8 (pt) 2021-05-25
NO20015547L (no) 2002-01-14
US20080045713A1 (en) 2008-02-21
ES2233367T3 (es) 2005-06-16
RU2237063C9 (ru) 2008-10-10
SK287835B6 (sk) 2011-12-05
BR0110443A (pt) 2003-04-08
MXPA01011631A (es) 2002-07-30
KR20020021636A (ko) 2002-03-21
AU775580B2 (en) 2004-08-05
BG107301A (bg) 2003-07-31
WO2001087895A1 (en) 2001-11-22
CA2372058C (en) 2010-10-26
NO20025186L (no) 2003-01-14
ES2231486T3 (es) 2005-05-16
BRPI0010559B8 (pt) 2021-05-25
BRPI0110443B8 (pt) 2021-05-25
CZ20023751A3 (en) 2004-05-12
PL226890B1 (pl) 2017-09-29
DK1185536T3 (da) 2005-04-04
WO2000069862A2 (en) 2000-11-23
AU4597300A (en) 2000-12-05
US7241892B1 (en) 2007-07-10
HU230646B1 (hu) 2017-05-29
RU2237063C2 (ru) 2004-09-27
HUP0201188A2 (en) 2002-07-29
CZ304966B6 (cs) 2015-02-18
PL353002A1 (en) 2003-09-22
SI1287004T1 (sl) 2005-12-31
UA75333C2 (uk) 2006-04-17
MY130271A (en) 2007-06-29
PT1185536E (pt) 2005-04-29
HK1047432A1 (zh) 2003-02-21
DE60016209D1 (de) 2004-12-30
US20040002602A1 (en) 2004-01-01
CZ303536B6 (cs) 2012-11-21
BR0010559A (pt) 2002-07-02
BRPI0110443B1 (pt) 2018-06-26
NO20025186D0 (no) 2002-10-29
US7524956B2 (en) 2009-04-28
EP1185536B1 (en) 2004-11-24
CZ304973B6 (cs) 2015-02-25
SK15272002A3 (sk) 2003-06-03
AU5649601A (en) 2001-11-26
NO20015547D0 (no) 2001-11-13
BG65896B1 (bg) 2010-04-30
AR035842A1 (es) 2004-07-21
ATE283273T1 (de) 2004-12-15
WO2000069862A3 (en) 2001-03-22
NO322016B1 (no) 2006-08-07
CY1108095T1 (el) 2014-02-12
CA2406095C (en) 2010-02-16
BRPI0010559B1 (pt) 2016-08-30
CN1229382C (zh) 2005-11-30
CZ20023746A3 (cs) 2003-04-16
CN1440414A (zh) 2003-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1360588A (zh) 半合成方法和其中间体
CN1436193A (zh) 抗肿瘤海鞘素衍生物
US7247629B2 (en) Antitumoral analogs of et-743
US7420051B2 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
EP1287004B1 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinascidin compound
AU2001256496A1 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinascidin compound
HK1047432B (zh) 半合成方法和其中间体
IL152125A (en) Process for the manufacture of ecteinascidin derivatives
HK1050193B (zh) 制造ecteinascidin化合物的合成过程
BG65893B1 (bg) Полусинтетичен метод и нови съединения

Legal Events

Date Code Title Description
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C06 Publication
PB01 Publication
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1047432

Country of ref document: HK

CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20051130

CX01 Expiry of patent term