CN1128263A

CN1128263A - 具有药理学活性的吡咯并嘧啶类衍生物

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Publication number: CN1128263A
Application number: CN95105418A
Authority: CN
Inventors: P·特拉斯勒; P·富雷特; W·K·-D·布里尔
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1994-05-03
Filing date: 1995-05-02
Publication date: 1996-08-07
Also published as: ATE159257T1; KR950031113A; JP3042760B2; NO951684L; US5686457A; FI952033L; HU9501230D0; GR3025158T3; ES2109796T3; DE59500788D1; NZ272031A; NO951684D0; SK56195A3; EP0682027B1; DK0682027T3; EP0682027A1; HK1002935A1; CA2148324A1; AU1772295A; JPH0853454A

Abstract

本发明涉及式I化合物或其盐在治疗肿瘤和其它增生性疾病如牛皮癣中的应用，并涉及式I新的化合物及其盐，它们抑制蛋白激酶如表皮生长因子BGF受体的酪氨酸蛋白激酶，

其中

n是0-5，当n不是0时，

R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的一个或多个取代基；

R₁和R₂各自独立地是烷基，未被取代的苯基或被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基，R₁和R₂中的一个也可是氢，或R₁和R₂一起形成未被取代的或被烷基取代的有2-5个碳原子的亚烷基链。

Description

具有药理学活性的吡咯并嘧啶类衍生物

本发明涉及吡咯并嘧啶类衍生物或其药物组合物在治疗某些特殊疾病中的新的应用，具有此新的用途的药物组合物的制备方法，含有吡咯并嘧啶类的药物组合物以及新的中间体；本发明还涉及这一类型的新的化合物，这些新的化合物在人或动物的诊断或治疗方法中的应用以及这些化合物的制备方法。

在工业化国家中肿瘤是一种主要的致死病因，为了寻找更加有效的治疗肿瘤的途径和方法人们已经作出了很多努力。特别是由于肿瘤的种类繁多并且是各种各样，因此不断需要寻找尽可能多地治疗多种肿瘤或者能治疗非常特异的某种肿瘤的新的药物化合物以及通过其活性组分起作用的组合物。

令人惊奇的是，现在已经发现了适于治疗肿瘤和其它增生性疾病如牛皮癣以及其它疾病的下文所述的化合物，下文中将更详细的说明。

适用于本发明的化合物为下列式I化合物或其盐，

其中n是0-5和R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的取代基；以及R₁和R₂各自独立地是烷基，或者是未被取代的或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基，R₁和R₂两个基团中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或是被烷基取代的具有2-5个碳原子的亚烷基链。

上述治疗肿瘤和其它增生性疾病(如牛皮癣)的用途未曾以任何形式被预料过。这同样适用于下文所述利用蛋白激酶抑制作用的模型。

因此，本发明涉及这些化合物在治疗温血动物疾病过程或方法中的应用，或者是它们在制备对上文和下文所述疾病具有治疗作用的药物组合物中的应用，另外还涉及用于治疗上文和下文所述疾病的相应的药物组合物。

本发明，上下文中所用一般性术语优选具有下列含义：

前缀“低级”表示至多并且是不多于7个碳原子的基团，一般是至多并且是不多于4个碳原子的基团，特别是有1或2个碳原子的基团。

“还可以”通常位于基团或条件之前，这些基团或条件不象在它们前面所述的那些基团或条件那样优选。

当存在有不对称碳原子时，式I化合物可以是对映体混合物形式或(如果存在两个或多个不对称中心)非对映体混合物形式，或者是纯对映体或非对映体形式。

卤素优选氟、氯、溴或碘，特别是氟、氯或溴，更优选溴，最优选氯。

烷基是不分支的或者一次或多次分支的烷基并且优选至多有20个碳原子的烷基。优选的实例是低级烷基，特别是正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、新戊基、正己基，更优选乙基，最优选甲基。

烷氧基含有上述定义的烷基基团并且一般是低级烷氧基如正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基、正己氧基，特别是乙氧基，最优选甲氧基。

式I中苯环是未被取代的，或者苯环可被一个或多个(至多n＝5个)，特别是至多2个(n＝1或2)选自卤素、三氟甲基、烷基和烷氧基的取代基R取代，取代的位置可以是邻位、间位或对位(取代基例如支链烷基如叔丁氧基占据较大的空间，优选不在邻位取代)，特别是在间位；优选的实例有未被取代的苯基(n＝0)，被卤素特别是氟而更优选的是氯或溴在间位二取代或者特别是一取代的苯基(n＝1或2)，被低级烷氧基特别是乙氧基而更优选的是甲氧基在邻位、间位或对位(特别是在闻位)二取代或者特别是一取代的苯基(n＝1或2)，和/或被低级烷基特别是甲基在间位二取代或者特别是一取代的苯基(n＝1或2)，和/或(当R₁和R₂一起是含有2-5个碳原子的亚烷基时)苯基是未被取代的，或者被卤素特别是氟或更优选溴或氯，被三氟甲基，被低级烷氧基如乙氧基或特别是甲氧基，和/或在间位上被低级烷基特别是甲基二取代或者特别是一取代的苯基(n＝1或2)。特别优选的实例是未被取代的苯基(n＝0)、间氯苯基、间溴苯基或者还可以是间氟苯基、间，间-二氯苯基、间，间-二溴苯基、间甲氧基苯基或间三氟甲基苯基；或者还可以是间甲基苯基或间，对-二氯苯基(n＝0，1或2)。

彼此独立定义的基团R₁和R₂可以是各自不同或者，优选相同的。

烷基R₁和R₂优选如上述定义的烷基，特别是所述优选的定义，特别优选乙基或者更优选甲基。

未被取代的或者被卤素、三氟甲基、烷基和烷氧基取代的苯基优选的是被一个或多个，特别是1或2个选自下列的基团邻位、间位或对位取代的苯基(优选在邻位取代的较大的取代基如叔丁氧基，如果它们不能被制备的话，那么它们被除外)或未被取代的苯基，其中所述取代基选自卤素，特别是氟、氯、或溴，三氟甲基，低级烷基，特别是甲基，或者还可以是乙基，以及低级烷氧基如甲氧基，或者还可以是乙氧基；而特别优选的是未被取代的苯基；或者是2-，3-或者特别是4-低级烷氧基苯基或二低级烷氧基苯基如2，5-二-低级烷氧基苯基，其中低级烷氧基优选甲氧基。

由R₁和R₂一起形成的有2-5个碳原子的亚烷基链是亚乙基链，亚丙基链或者优选亚戊基链或者特别是亚丁基链，其中每一个基团都可被上述定义的烷基特别是甲基或乙基取代，或者优选未被取代的。

R₁和R₂的下列组合是较优选的：R₁是低级烷基并且R₂是低级烷基，特别分别是甲基；或者R₁和R₂一起是五亚甲基或者特别是四亚甲基；或者R₁是氢而R₂是苯基、2-，3-或4-低级烷氧基苯基或二-低级烷氧基苯基如2，5-二-低级烷氧基苯基，其中低级烷氧基分别优选甲氧基。

由于式I化合物具有碱性特性，因此它的盐可以是与有机酸或无机酸形成的酸加成盐，特别是药物上可接受的无毒盐。适宜的无机酸是，例如碳酸(优选碳酸盐或碳酸氢盐的形式)；氢卤酸如盐酸；硫酸或磷酸。适宜的有机酸是，例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、乙醇酸、乳酸、2-羟基丁酸、葡糖酸、葡糖-羧酸、富马酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、葡糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸如谷氨酸、天门冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰基氨基乙酸、N-乙酰基天冬酰胺或N-乙酰基胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷丝氨酸、2-或3-甘油磷酸、葡糖-6-磷酸、葡糖-1-磷酸、果糖-1，6-二磷酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷羧酸、金刚烷羧酸、苯甲酸、水杨酸、1-或3-羟基萘基-2-羧酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯基乙酸、扁桃酸、肉桂酸、烟酸、异烟酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲磺酸或乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、2-，3-或4-甲基苯磺酸、0-甲基硫酸、0-乙基硫酸、0-十二烷基硫酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基、N-乙基或N-丙基-氨基磺酸，或者是其它有机质子酸如抗坏血酸。

在分离或纯化时也可应用药物上不可接受的盐例如苦味酸盐或高氯酸盐。而只有药物上可接受的且无毒的盐(相对剂量下)可用于治疗目的，因此这些盐是优选的。

式I化合物，尤其是下文所述本发明新的化合物具有药理学上有用的特性。特别是，它们具有特异性抑制活性，这一点在药理学上是十分有价值的。首先，它们可以用作酪氨酸蛋白激酶抑制剂和/或(还可以)用作丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂；例如，它们对表皮生长因子(EGF)和c-erbB2激酶受体的酪氨酸激酶活性具有有效的抑制作用。这些受体特异性酶活性在许多哺乳动物细胞包括人细胞，特别是表皮细胞、免疫系统细胞以及中枢和外周神经系统细胞中的信息传递过程中起着关键性作用。例如，在各种类型的细胞中，由EGF-诱导的与酪氨酸蛋白激酶有关的受体(EGF-R-PTK)的活化是细胞分裂以及由此形成的细胞数量倍增的先决条件。因此，通过提高EGF-受体-异性酪氨酸激酶抑制剂的水平，可以抑制细胞增殖。这也同样适用于上文及下文所述的其它蛋白激酶。

EGF-受体-特异性酪氨酸蛋白激酶(EGF-R-PTK)的抑制作用可以通过公知的方法说明，例如利用重组EGF-受体细胞内同源区(EGF-R ICD；参见例如E.McGlynn等，Europ.J.Biochem.207，265-275(1992))。与不含抑制剂的对照试验相比较，式I化合物50％抑制酶活性的浓度(IC50)为O.001-10μM，优选0.001-1μM。

在毫摩尔范围内，式I化合物也同样对EGF-依赖的细胞系的细胞生长具有抑制作用，所述细胞系例如表皮样BALB/c小鼠角质化细胞系(参见Weissmann，B.A.，Cell 32，599(1983))或A431细胞系，它们被认为是常用的EGF-依赖的表皮细胞标准源(参见Carpenter，G.，和Zendegni，J.Anal.Biochem.153，279-282(1985))。在公知的试验方法中(参见Meyer等，Int.J.Cancer 43，851(1989))，式I化合物的抑制剂活性可以简要地通过下列方法测定：将BALB/MK细胞(10000/微滴定板孔)转移到96-孔微滴定板中。按浓度系列(稀释系列)加入试验化合物(溶于DMSO)，使得最终DMSO浓度不大于1％(v/v)。加完后，将滴定板培养3天，在此期间不含试验化合物的对照培养物能够至少进行3个细胞分裂周期。用亚甲蓝染色法测定MK细胞生长情况：培养后，细胞用戊二醛固定，用水洗涤并用0.05％亚甲蓝染色。洗涤步骤完成后，染料用3％HCl洗脱并在665nm下用TitertekMultiskan测定微滴定板每孔的光学密度。通过计算机辅助系统用下列公式计算IC₅₀值：

IC₅₀＝(OD_试验-OD_起始)/(OD_对照-OD_起始)×100

试验中，IC₅₀值是与没有加入抑制剂的对照试验相比较细胞数减少了50％时所得到的试验化合物浓度。在毫摩尔范围内式I化合物具有抑制作用，例如IC₅₀值约在0.2-20μM，特别是在0.2-10μM范围内。

例如，通过下列试验可以说明式I化合物还对体内肿瘤细胞的生长具有抑制作用：本试验以对人表皮样肿瘤A431(ATCC No.CRL1555；AmericanType Culture Collection，Rockville，Maryland，USA；参见Santon，J.B.等，Cancer Research46，4701-4705(1986)和Ozawa，S.等，Int.J.Cancer 40，706-710(1987))的抑制作用为基础，将所述肿瘤细胞移植到裸露的雌性BALB/c小鼠(Bomholtgard，Denmark)上。肿瘤的生长与EGF-受体表达范围有关。试验中，在无菌条件下由试验动物身上分离出体内培养后体积已经达到约1cm³的肿瘤，将此肿瘤捣碎并悬浮于10倍体积(w/v)的磷酸盐-缓冲生理盐水中。将悬浮液(0.2ml/小鼠，磷酸盐-缓冲生理盐水)经皮下注射到动物的左肋腹中。另外，可以注射由体外培养物得到的1×10⁶细胞的0.2ml磷酸盐-缓冲液生理盐水。移植后第5或7天，当肿瘤长到直径为4-5mm时，开始用式I试验化合物处理。连续15天为一个周期，每日口服一次或腹膜内注射一次，施用(不同动物试验组施用不同剂量)所述试验化合物(例如，溶于二甲基亚砜/吐温80[商品名聚氧乙烯(20)山梨醇一油酸酯；ICIAmericas，Int，USA]/0.9％NaCl水溶液)。由三个分别垂直的轴线测量肿瘤的直径来确定肿瘤的生长情况。用已知的公式π×L×D²/6(参见Evans，B.D.等，Brit.J.Cancer 45，466-468(1982))计算肿瘤的体积。结果以治疗/对照百分值(T/C×100＝T/C％)表示。对于所述肿瘤生长抑制作用，例如，当T/C％值小于50时，表示对所述的肿瘤生长具有显著的抑制作用。

除了或者代替对EGF-受体酪氨酸蛋白激酶的抑制作用以外，式I化合物还可抑制其它与营养因子介导的信息传递有关的酪氨酸蛋白激酶，例如abl激酶，src激酶族中的激酶和c-erbB2激酶(HER-2)，以及丝氨酸/苏氨酸激酶，例如蛋白激酶C或CDC激酶，所有这些酶在哺乳动物细胞(包括人细胞)中的生长调节和信息传递过程中均起着一定的作用。

c-erbB2-酪氨酸激酶(HER-2)的抑制作用可以通过例如与EGF-R-PTK所用的相似方法测定(参见C.House等，Europ.J.Biochem.140，363-367(1984))。C-erbB2激酶可以被分离出并且其活性可以根据本身已公知的实验记录测定(参见T.Akiyama等，Science232，1644(1986))。

因此，对表皮生长因子(EGF)受体的酪氨酸激酶活性以及，还可以是对所述其它酪氨酸蛋白激酶的酪氨酸激酶活性具有抑制作用的式I化合物可以用于治疗例如良性或恶性肿瘤。它们能够使肿瘤退化并且阻滞肿瘤转移和微小转移瘤的生长。特别是，它们可以用于表皮高度增生疾病(牛皮癣)的治疗，上皮肿瘤例如乳房肿瘤的治疗和/或白血病(特别是慢性骨髓性白血病＝CML)的治疗。另外，式I化合物(特别是新的化合物)可用于治疗免疫系统疾病，只要所述疾病与几种或者，特别是仅一种酪氨酸蛋白激酶和/或(还可以是)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有关；所述式I化合物还可以用于治疗中枢或外周神经系统疾病，只要所述疾病与几种或者，优选的是与一种酪氨酸蛋白激酶和/或(还可以是)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶控制的信息传递有关。

式I化合物不仅适用于人的疾病治疗，而且还适用于其它哺乳动物，例如有商业用途的动物，如啮齿类动物例如小鼠、兔子或大鼠。它们还可以在上述试验中用作标样以便与其它化合物相比较。

通常，本发明还涉及式I化合物在抑制上述蛋白激酶作用中的应用。

式I化合物还可以用于诊断目的，例如可以将由哺乳动物如人得到的增生细胞如肿瘤细胞(它们也可以是生长在细胞培养物中)于细胞培养物中试验它们对式I化合物的敏感性，由此可以确定尽可能好的治疗方法。

本发明化合物可以仅以它们自身的形式应用也可以与其它具有药理活性的物质结合使用，例如与多元胺合成酶抑制剂、蛋白激酶C抑制剂、其它酪氨酸激酶抑制剂、细胞激活素、负生长调节剂如TGF-β或IFN-β、芳香酶抑制剂、抗雌激素药和/或细胞生长抑制剂结合使用。

在下文所述本发明较优选的主题中，如果合适和方便，可以用本文开始时所述更具体的定义代替一般性定义。

优先使用式I化合物或其盐，其中n是0-2，R是选自卤素(优选氟，更优选氯或溴)、低级烷氧基(如甲氧基)并且还可以是选自三氟甲基和低级烷基(如甲基和乙基)的取代基，所述取代基优选在苯环的间位取代；R₁和R₂如上述定义并且是各自独立的低级烷基，优选乙基或者更优选甲基，或者是未被取代的苯基或被卤素优选氟、氯或溴；三氟甲基；低级烷基如甲基或乙基；或低级烷氧基如甲氧基或乙氧基取代的苯基，基团R₁和R₂中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或被低级烷基(如甲基或乙基)取代的有4或5个碳原子的亚烷基链。

本发明还涉及新的式I化合物或其盐以及它们在上文和下文中所述的方法和所述的药物组合中的应用，以及含有这些化合物的药物组合物，这些化合物具体的是下面所述化合物：

这些式I化合物尤其包括下述式I化合物或其盐，其中n是0-5，特别是0，1或2，R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的取代基；R₁和R₂各自独立地是烷基，或是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基和烷氧基取代的苯基，R₁和R₂基团中的一个也可以(优选)是氢；其中，当R₁和R₂两个基团中任何一个都不是氢而n是1或2(优选1)时，R键合在间位(n＝1)或者在间，间位(n＝2)，并且可选自氟，特别是氯和溴，和(还可以是)低级烷氧基特别是甲氧基，以及还可以是低级烷基特别是甲基，和(较不优选)三氟甲基，并且其它基团如上定义。

优选的实例是下述式I化合物或其盐，其中n是1或2，优选1，R键合在间位(n＝1)或在闻，间位(n＝2)并且选自氟，特别是氯或溴；以及(还可以)选自低级烷氧基特别是甲氧基，还可以是低级烷基特别是甲基，和(较不优选)三氟甲基，并且其它基团如式I中取代基的含义；特别是R₁和R₂各自独立地是低级烷基，特别是乙基或更优选甲基，或者是未被取代的苯基或是被氟、氯或溴、三氟甲基、低级烷基如甲基或乙基，或被一个或两个低级烷氧基如甲氧基或乙氧基取代的苯基，R₁和R₂两个基团中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或被低级烷基如甲基或乙基取代的有4或5个碳原子的亚烷基链。

优选的实例还可以是下述式I化合物或其盐，其中n是0-5，特别是0、1或2，R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的取代基；并且基团R₁和R₂中的一个是氢，另一个是烷基，或是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基。

进一步优选的实例是下述式I化合物或其盐，其中n是1；R是键合在间位上的氯或溴；以及

a)R₁和R₂分别是低级烷基，特别是甲基；或

b)R₁和R₂一起是五亚甲基或者特别是四亚甲基(-(CH₂)₄-)；或

c)R₁是低级烷基，例如甲基或者特别是氢，而R₂是苯基；或2-，3-或者特别是4-低级烷氧基苯基或二低级烷氧基苯基，特别是2，5-二-低级烷氧基苯基，在各个情况下低级烷氧基优选甲氧基。

特别优选的实例是下述式I化合物或其盐，其中n是1，R键合在间位上并且是溴或者特别是氯，或者还可以是氟和甲基；R₁和R₂各自独立地是低级烷基特别是甲基，或者还可以是苯基，或者R₁和R₂一起形成四亚甲基。

最优选的实例是下述式I化合物或其盐，其中n是1，R是键合在间位上的氟或甲基或者特别是氯或溴，R₁和R₂分别是甲基。

最优选的实例还可以是下述式I化合物或其盐，其中n是1或2，R是键合在闻位上(n＝1)或者在间位和对位上(n＝2)的氟或甲基或者特别是氯或溴，以及其中的R₁和R₂一起形成含有4或5个碳原子的亚烷基链。

最优选的实例还可以是下述式I化合物或其盐，其中n是1；R是键合在间位上的氯或溴；R₁是氢；R₂是2-，3-或者特别是4-低级烷氧基苯基或二低级烷氧基苯基，特别是2，5-二-低级烷氧基苯基，其中低级烷氧基分别优选甲氧基。

下列每一个具体的化合物或其盐是最优选的：1)4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，2)4-(间溴苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，3)4-(间氟苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，4) 4-(间，间-二氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，5)4-(间甲基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，6)4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[ 2，3-d]嘧啶，7)4-(间氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，8)4-(间溴苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，9)4-(间氟苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，10)4-(间甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，11)4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，12)4-(间氯苯胺基)-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，13)4-(间溴苯胺基)-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，14)4-(间三氟甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，15)4-(间，对-二氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，16)4-(间氯苯胺基)-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，17)4-(间氯苯胺基)-6-(2，5-二甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，18)4-(间氯苯胺基)-6-(苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，19)4-(间氯苯胺基)-5-甲基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，20)4-(间氯苯胺基)-6-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，和/或21)4-(间氯苯胺基)-6-(2-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，

在这些化合物及其盐中，序号为1)，2)，7)和8)以及16)，17)，18)，20)，21)，还可以是19)的化合物及其盐是最优选的。

特别优选的是应用上述新的化合物，更具体的是应用实施例中所述化合物作为活性成分于上文所述用途中，它们的制备及药物组合物。实施例中所述新的化合物及其盐是特别优选的。

式I化合物可以通过本身公知的方法制备(参见German offenlegungss-chrift DE-OS 30 36 390，出版日期为1982年5月13日，Jorgensen，A.等著，J.Heterocycl.Chem.22，859(1985))，例如a)将式II卤代-吡咯并嘧啶与式III苯胺反应，并且当Z是1-芳基-低级烷烃-1-基时，脱烷基化除去此基团；其中R₁和R₂如式I化合物中定义，Z是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基，X是卤原子，

其中R和n如式I化合物中定义；或者b)在脱水剂和叔胺存在下，将式IV吡咯并嘧啶酮与上述定义的式III苯胺反应，

其中R₁和R₂如式I中定义，Q是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基，并且，如果需要，可将所得游离的式I化合物转变成盐，将所得式I化合物的盐转变成游离化合物或不同的盐，和/或将式I化合物异构体混合物分离成单一的异构体。

下面将对制备方法做更详细的说明，除非另有说明，否则基团R，R₁和R₂以及n如式I化合物中所定义。方法a)

在式II化合物中，卤素X是溴、碘或者特别是氯。1-芳基-低级烷烃-1-基Z优选1-苯基-低级烷基，特别是1-苯基乙基或者，更优选苄基。

式II卤化物与式III胺之间的反应可以在适宜的惰性极性溶剂，特别是醇如低级链烷醇，例如甲醇、丙醇或者特别是乙醇或正丁醇中进行。所述反应在升高的温度下进行，特别是在回流条件下进行。

当式II化合物中Z是1-芳基-低级烷烃-1-基时(即当含有如下定义的相应基团Q的式VIII化合物用作起始原料时)，此基团在所得式I化合物的前体产物(在氮上是Z而不是氢原子)中被除去。

此反应可通过脱烷基化除去1-芳基-低级烷烃-1-基基团Q，例如在优选温度为20-150℃和有或没有水存在下用质子酸如盐酸、磷酸或多磷酸处理(当Z＝1-苯乙基时，此方法特别优选)；或者，优选的是，在芳族溶剂特别是苯和/或甲苯中，在升高的温度下，特别是在回流下，用路易斯酸处理(当Z＝苄基时该方法特别优选；还有类似的方法可参见Chem.Pharm.Bull.39(5)、1152(1991))。方法b)

式IV化合物中1-芳基-低级烷烃-1-基Q优选是1-苯基乙基并且，还可以是苄基。

式IV化合物中存在互变异构平衡(内酰胺/内酰亚胺形式)，内酰胺形式(式IV化合物)有可能是主要的。式IV用于表示两种可能的互变异构形式。

内酰亚胺具有式IVA结构，

其中各基团如式IV化合物定义。式IV或IVA化合物中，基团Q优选1芳基-低级烷烃-1-基。

式IV吡咯并嘧啶酮与式III苯胺之间的反应可以在升高的温度下，例如200-250℃下反应，其中特别是用强化学脱水剂作脱水剂，特别是五氧化二磷(P4O10)。

适宜的是用被分别独立地选自烷基，特别是低级烷基如甲基或乙基，和含有3-7个碳原子的环烷基，特别是环己基的三个基团取代的氨作叔胺，例如有，N，N-二甲基-N-环己基胺，N-乙基-N，N-二异丙基胺或三乙胺，或者，还可以是吡啶，N-甲基吗啉或4-二甲氨基吡啶。起始原料：

起始原料式II和IV可以按照下列反应路线获得(反应步骤(A)-(D))：

制备式II和IV化合物的反应路线

式VIII化合物已经变成式II化合物，其中用存在的基团Q替代了Z，其可以是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基(特别是1-苯基-低级烷基，如苄基或1-苯乙基)；式IV，V，VI，VII和VIII中，基团R1和R2如式I化合物定义，而Q(也可以是在式Q-NH₂的含氮化合物中)是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基(特别是1-苯基-低级烷基如苄基或1-苯乙基)。在式VIII化合物中，X为选自溴、碘以及，特别是，氯的卤原子。

用作中间体的式VII 1-(Q)-2-氨基-3-氰基-吡咯可以按照本身已公知的方法由步骤(A)和(B)以良好的产率制得(参见，例如Roth，H.J.，和Eger，K.，Arch.Pharmaz.308，179(1975)).式VIII被苄基保护的4-(X)-吡咯并嘧啶(Q＝苄基；X＝溴、碘或者，特别是，氯)是新的并且是本发明所涉及的；它们可以按照德国专利DE-OS 28 18 676(1979年11月8日公开)和DE-OS30 36 390(1982年5月13日公开)所述相似的方法制备。

更具体地讲，与含氮化合物Q-NH₂的反应(A)可在常规缩合条件下进行，例如在适宜的溶剂如苯或甲苯中，升高的温度下(优选沸腾加热)，在催化量的强酸如盐酸或对甲苯磺酸存在下进行，分离出水，形成式VI的各种α-氨基酮。此化合物在步骤(B)中不经分离而是立即与丙二腈缩合，同时加热并进一步分离出水，如果必要可加入少量碱如吡啶，制得式VII化合物。

然后在步骤(C)中，在有或没有惰性溶剂如二甲基甲酰胺存在下，在升高的温度如80℃至沸腾温度下，将式VII化合物与甲酸(相对于式VII化合物优选使用过量的甲酸，例如过量10-30倍摩尔)反应，制得式IV 4-羟基-吡咯并嘧啶。

然后IV化合物即可以直接用于方法b)中(见上文)，也可以与酰卤反应(步骤(D))制得式VIII化合物(其中卤素为溴、碘或者，特别是氯，亦即当X被引入到VIII化合物中时，卤素即为基团X)。适宜的酰卤例如是有机酰基卤如低级链烷酰基溴、碘或者，特别是，或者，特别是磺酰基溴、碘或者，特别是氯，如POCl₃(特别优选)、PCl₅或SOCl₂(X＝Cl时)或者，还可以是PBr₅、SOBr₂(X＝Br时)或PI₅(X＝I)。反应可以在升高的温度如回流温度下，如果必要可在惰性溶剂存在下进行。

通过脱烷基化作用除去1-芳基-低级烷烃-1-基基团Q，由其中Q是1-芳基-低级烷烃-1-基的式VIII化合物可以制得其中Z是氢的式II化合物，例如，在20-150℃优选的温度下并且在有或没有水存在下，用质子酸如盐酸、磷酸或多聚磷酸处理(当Q＝1＝苯乙基时此方法是特别优选的方法)；或者优选的是，在芳族溶剂中，特别是在苯和/或甲苯中，在升高的温度下，特别是在回流状态下，用路易斯酸，特别是用AlCl₃处理(当Q＝苄基时此方法是特别优选的方法；此外还可参见Chem.Pharm.Bull.39(5)，1152(1991)中所述相似的方法)。

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基，而Q是氢的式IV化合物也可以按照下列反应路线获得{反应步骤(E)和(F)}：

式IVB化合物适合式IV化合物的定义(与内酰亚胺/内酰胺互变异构相类似，式IVB表示两个互变异构体)并且与所制备的其中R₁是氢或低级烷基，R₂是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基，Q是氢的式IV化合物相对应。在式X、XI和IVB化合物中，R₁′是氢或低级烷基(与所制备的式IV化合物中的基团R₁相对应)，R₂′是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基(与所制备的式IV化合物中的基团R₂相对应)。式IX和XI化合物中的Y是烷基基团，如低级烷基，特别是乙基。式X中的Hal是氯原子、碘原子或者，特别是溴原子(也可以是不同的离去基团如甲苯磺酰氧基或相应的磺酰基)。

更具体地讲，反应(E)可在下述条件下进行：在-15-50℃优选的温度下，特别是在约0℃至室温下，优选在保护气体如氩气气氛下，在碱性金属醇化物如醇钾或者，特别是醇钠存在下，其中存在的醇化物基团优选链烷醇基团，例如低级链烷醇如甲醇或乙醇，特别是在乙醇钠或者，还可以是甲醇钠的存在下，在相应的醇存在下进行反应。

得到相应的式XI化合物并且(优选在纯化以后)在步骤(F)中，于甲酸存在下，在100-200℃优选的温度下，特别是在140-160℃下，将其与甲酰胺(HCONH₂)[优选在适宜的溶剂中，如N，N-二甲基甲酰胺(HCON(CH₃)₂]或者其它N，N-二-低级烷基酰胺反应，制得式IVB化合物。

在所示反应步骤(A)-(D)和(E)-(F)中，为了简明起见，对反应无关紧要的次要产物没有被包括在上述反应式中。

式IX脒基乙酸酯是公知的或者可以按照本身已公知的方法制得。

式Xα-卤代酮是公知的，可以按照本身已公知的方法制得或者由商业上获得。

式III苯胺是公知的，可以由商业上获得和/或按照本身已公知的方法制得。一般反应条件：

本发明方法可以获得的具有成盐特性的式I游离化合物可以用本身已公知的方法转变成它们的盐，例如用酸或其适宜的衍生物处理，又如通过向溶于适宜溶剂中的所述式I化合物中加入酸，所述适宜溶剂有例如醚，如环醚，特别是二噁烷或更优选是四氢呋喃。

按照本身已公知的方法，本发明所得异构体混合物可以被分离成单一的异构体；例如，通过与光学纯的成盐试剂形成盐的方法将外消旋体分离，并可用例如分级结晶的方法分离所得的非对映体混合物。

上述反应可以在本身已公知的反应条件下进行，根据反应和/或反应物的性质，在没有或者，通常是在有溶剂或稀释剂存在下，优选的溶剂或稀释剂是对所用试剂呈惰性的溶剂或稀释剂以及在此只是用溶剂，在有或没有催化剂、缩合剂(例如五氧化二磷)或中和剂如碱，特别是含氮碱例如三乙胺盐酸盐的存在下，在降低、正常或升高的温度下，例如在约-80℃至约200℃，优选约-20℃至约150℃温度范围内，如在所用溶剂的沸点下，在常压或密闭容器中，如果合适是在压力下，和/或在惰性气氛下，如在氮气氛下进行反应。

对于每种情况优选的反应条件具体描述如下。

溶剂和稀释剂例如是水，醇例如低级链烷醇，如甲醇、丙醇或者，特别是丁醇，二元醇如乙二醇，三元醇如甘油，或芳族醇如苯酚，酰胺如羧酸酰胺，例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)，羧酸，特别是甲酸或乙酸，无机酸酰胺如六甲基磷酸三酰胺，醚例如环状醚，如四氢呋喃或二烷，或者脂肪族醚如乙醚或乙二醇二甲醚，卤代烃如卤代低级烷烃，例如二氯甲烷或氯仿，酮如丙酮，腈如乙腈，酸酐如乙酸酐，酯如乙酸乙酯，二甲亚砜，含氮杂环如吡啶，烃如低级烷烃，例如己烷，或芳族化合物如苯、甲苯或二甲苯，或者是这些溶剂的混合物，可以选择出适于上述每一个反应的溶剂。

对于所得式I化合物或其盐的后处理可以使用常规方法，例如过量试剂的溶剂分解法；重结晶法；色谱法如分配、离子或硅胶色谱法；无机与有机相间的分配；一次或多次萃取法，特别是在酸化或碱性提高以后或者是含有盐的情况下；用吸湿性盐干燥法；浸提法；过滤法；洗涤法；溶解法；蒸发浓缩法(如果必要，可以经真空或高真空)；蒸馏法；结晶法例如所得油状化合物结晶或者由母液中结晶，还可以用最终产物的结晶作为晶种；或者是上述两种或多种处理步骤的组合，它也可以被重复使用。

起始原料或中间体可以以纯的形式使用，例如在经上述处理过程之后，以比较纯的形式使用或者，例如直接以粗产物的形式使用。

考虑到游离形式和成盐形式的式I化合物之间有着密切的关系，如果合适方便，上文和下文中所指任何游离化合物或它们的盐可以认为还分别代表相应的盐或游离化合物，条件是该化合物含有成盐基团。

化合物，包括它们的盐，还可以以水合物的形式得到，或者其结晶含有例如结晶所用的溶剂。

在本发明方法中，优选使用可制得在本文开始时所述具有特殊价值的新的式I化合物的那些原料。

本发明还涉及这样一些方法，即其中所述方法任何一步得到的化合物作为中间体应用并进行其余的反应步骤，或者其中起始原料在反应条件下形成，或者起始原料以其衍生物例如它的盐的形式使用。本发明式I化合物的药物组合物，它们的制备和应用以及含有这些化合物作为活性成分的组合物

本发明还涉及含有一个式I化合物作为活性成分并且可以用于治疗特别是本文开始所述疾病的药物组合物。特别优选的是给温血动物特别是人施用的经肠内如鼻、颊、直肠给药或者，特别是口服的药物组合物，以及经非肠道如静脉、肌内或皮下给药的药物组合物。所述组合物可含有活性成分本身或者，优选还含有药物上可接受的载体。活性成分的剂量取决于所要治疗的疾病，以及物种，其年龄、体重和个体条件，各个药物动力学情况和用药方式。

本发明还涉及用于预防或者，特别是治疗人或动物体疾病的药物组合物，它们的制备方法(特别是作为治疗肿瘤的组合物)以及治疗肿瘤特别是上述肿瘤的方法。

本发明还涉及在制备含有式I化合物作为活性成分(活性组分)的药物组合物中式I化合物的加工过程及应用。

优选的药物组合物的实例是适于患有与蛋白激酶抑制作用有关的疾病如牛皮癣或肿瘤的温血动物，特别是人或具有商业用途的哺乳动物施用的药物组合物，所述药物组合物含有抑制蛋白激酶有效量的式I化合物或其盐(如果存在成盐基团)以及至少一种药物上可接受的载体。

优选的药物组合物的实例还有适用于预防或者，特别是需要此种治疗的患有所述疾病的温血动物，特别是人或具有商业用途的哺乳动物肿瘤及其它增生性疾病的药物组合物，所述药物组合物含有作为活性成分的预防或者，特别是治疗上述疾病有效量的新的式I化合物或其药物上可接受的盐。

所述药物组合物含有约1％至95％活性成分，单次剂量形式的剂量优选是含有约20％至90％活性成分，而非单次剂量形式的剂量优选含有约5％至20％活性成分。单位剂型例如有糖衣丸、片剂、安瓿、管形瓶剂、栓剂或胶囊剂。其它剂型例如有软膏剂、霜剂、糊剂、泡沫剂、酊剂、唇膏剂、滴剂、喷雾剂、分散剂等。例如胶囊剂含有约0.05g至1.0g活性成分。

本发明的药物组合物可以通过本身已公知的方法制备，例如用常规混合、制粒、调制、溶解或冷冻干燥的方法制备。

优选使用活性成分的溶液剂，还有悬浮液或分散剂，特别是等渗水溶液剂、分散剂或悬浮剂，例如，它们可以是在使用之前配制的含有活性成分本身或者还含有载体如甘露醇的冷冻干燥的组合物形式。此药物组合物可以是无菌组合物和/或可以含有赋形剂例如防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、调节等渗压的盐和/或缓冲剂，并且所述组合物可以通过本身已公知的方法制备，例如经常规溶解法或冷冻干燥处理制备。所述溶液或悬浮液可以含有增加粘度的物质，例如羧甲基纤维紊钠、羧甲基纤维紊、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明胶，或者还可以含有增溶剂，例如吐温80[聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯；商标名ICIAmericas，Inc，USA]。

油基悬浮剂含有作为油组分的常用于注射目的的植物油、合成或半合成油。特别可以提及的是液态脂肪酸酯，其中酸部分含有8-22个，特别是12-22个碳原子的长链脂肪酸，例如月桂酸、十三烷酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸或相应的不饱和酸如油酸、反油酸、芥酸、巴西烯酸或亚油酸，如果适宜，可以加有抗氧化剂，例如维生素E、β-胡罗卜素或3，5-二-叔丁基-4-羟基甲苯。所述脂肪酸酯中醇的部分含有不多于6个碳原子并且是一元或多元醇，例如一元、二元或三元醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇或者它们的异构体，特别是乙二醇和甘油。因此，可以提及的脂肪酸酯的实例有：油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、＂Labrafil M2375＂(由Gattefosse，Paris生产的聚氧乙烯三油酸甘油酯)、＂Labrafil M 1944 CS＂(由杏仁油醇解制备的并且由甘油酯和聚乙二醇酯构成的不饱和聚乙二醇化的甘油酯；Gattefosse，France)、＂Labrasol＂(由TCM醇解制备的并且由甘油酯和聚乙二醇酯构成的饱和的聚乙二醇化的甘油酯；Gattefosse，France)和/或“Miglyol 812＂(由Huls AG，Germany生产的链长为C8-C12的饱和脂肪酸甘油三酯)，特别是植物油例棉籽油、杏仁油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油、豆油，而特别优选的是花生油。

注射用组合物可按下法制得：例如在无菌条件下用常规方法，向安瓿或管形瓶中装药并密封容器。

适于口服的药物组合物可以由下法获得：例如将活性成分与一种或多种固体载体混合，将获得的混合物制粒，如果适宜，还可将此混合物或颗粒进行加工，如果需要，还可加入其它赋形剂，以形成片剂或糖衣核。

适宜的载体特别是有填充剂，例如糖如乳糖、蔗糖、甘露糖或山梨醇，纤维素制品和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或磷酸氢钙，以及粘合剂，例如淀粉如玉米、小麦、稻米或马铃薯淀粉、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或，如果需要，崩解剂，例如上述的淀粉以及羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮或藻酸及其盐如藻酸钠。其它赋形剂特别是流动性调节剂和润滑剂，例如硅酸、滑石、硬脂酸或其盐如硬脂酸镁或钙，和/或聚乙二醇或其衍生物。

如果适宜，糖衣核可以用适宜的肠溶衣包衣，为了制备肠溶衣，尤其可以使用含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛的浓糖溶液，或者使用在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中的包衣溶液，或者是适宜的纤维素制品溶液，例如乙酰纤维素邻苯二甲酸酯或羟丙甲基纤维素邻苯二甲酸酯。为了标明目的或者为了指示活性成分的不同剂量，可以向片剂或糖衣丸包衣中加入着色剂或色素。

适于口服的药物组合物还可以是硬明胶胶囊和含有明胶和成形剂如甘油或山梨醇的密封的软胶囊。硬明胶胶囊可以含有颗粒形式的活性成分，与其混合的例如填充剂如玉米淀粉、粘合剂和/或增滑剂如滑石或硬脂酸镁，如果适宜，还可有稳定剂。对于软胶囊，活性成分优选溶解或悬浮于适宜的液体赋形剂中，所述液体赋形剂例如是脂肪油、石蜡油或液态聚乙二醇或乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯，其中同样也可以加入稳定剂以及如聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯型表面活性剂。

其它口服剂型例如糖浆可以用常规方法制备，其中含有的活性成分可以是例如悬浮剂形式和约5％-20％，优选约10％的浓缩物形式或者是相似的浓缩物形式，它们提供了适合服用的例如5或10毫升计量的单次剂。其它合适的制剂是例如在牛奶中振摇制得的粉状或液态浓缩物。所述浓缩物也可以以单次剂量包装。

适宜直肠使用的药物组合物例如有栓剂，它是由活性成分与栓剂基质结合构成。适宜的栓剂基质有，例如，天然或合成的甘油三酯、脂肪烃、聚乙二醇或高级链烷醇。

特别适于非肠道给药的是活性成分溶水型水溶液，例如水溶性盐的形式，或者是含有粘度增强剂如羧甲基纤维素钠、山梨醇和/或葡聚糖，如果需要，还可含有稳定剂的注射用水悬浮液。如果适宜，与赋形剂混合的活性成分也可以是冷冻干燥的形式并且可在经非肠道给药前通过加入适宜的溶剂制成溶液剂。

例如，经非肠道给药的溶液也可以用作输注液。

优选的防腐剂例如是抗氧化剂如抗坏血酸，或杀菌剂如山梨酸或苯甲酸。

软膏剂是含有至多70％，但优选20-50％水相或水溶液相的水包油乳剂。适宜的脂相特别是烃例如凡士林、石蜡油或固体石蜡，为了提高与水的结合能力，优选含有适宜的羟基化合物例如脂肪醇或其酯，如鲸蜡醇或羊毛蜡醇例如羊毛蜡。乳化剂是相应的亲脂物质，例如脱水山梨醇脂肪酸酯(司盘)，如脱水山梨醇油酸酯和/或脱水山梨醇异硬脂酸酯。水相中的添加剂例如有湿润剂，如多元醇例如乙二醇、丙二醇、山梨醇和/或聚乙二醇，或防腐剂和香料。

油脂性软膏剂是无水的并且特别是含有下列成分作基质，烃例如石蜡、凡士林或石蜡油，还可以是天然的或部分合成的脂肪椰子脂酸甘油三酯，优选硬化油如氢化花生油或蓖麻油，还可以是甘油脂肪酸偏酯例如硬脂酸一和/或二甘油酯，还可以有增强吸水性的脂肪醇、乳化剂和/或所述与软膏剂有关的添加剂。

霜剂是含有至多50％水的水包油乳剂。作为油性基质，可以使用的特别是脂肪醇例如月桂醇、鲸蜡醇或十八烷醇，脂肪酸例如棕榈酸或硬脂酸，液体至固体石蜡例如肉豆蔻酸异丙酯、羊毛蜡或蜂蜡，和/或烃例如凡士林(石油产品)或石蜡油。适宜的乳化剂是具有典型亲水特性的表面活性物质，例如相应的非离子型乳化剂如多元醇的脂肪酸酯或其环氧乙烷加合物，例如聚甘油酸脂肪酸酯或聚乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(吐温)，并且还可以是聚氧乙烯脂肪醇醚或脂肪酸酯，或者是相应的离子型乳化剂例如脂肪醇碱金属硫酸盐，如月桂基硫酸钠、鲸蜡基硫酸钠或十八烷基硫酸钠，它们通常是在脂肪醇如鲸蜡醇或十八烷醇存在下使用。水相中的添加剂尤其是防止霜剂干燥的试剂，例如多元醇如甘油、山梨醇、丙二醇和/或乙二醇，还有防腐剂和香料。

糊剂为含有可吸收分泌物的粉沫状组分的乳剂和软膏剂，例如金属氧化物如氧化钛或氧化锌，还可以是滑石和/或硅酸铝，其目的是结合任何存在的水分或分泌物。

泡沫剂是通过加压容器施用并且是气雾剂型液态水包油乳剂，所用的推进剂有卤代烃如氯代-氟代-低级烷烃，例如二氯代二氟代甲烷和二氯代四氟代乙烷，或者优选非卤代的气态烃，空气，NO₂或二氧化碳。作为油相，尤其可以使用上述软膏剂和霜剂中所用的油相，添加剂同样是其中所述的添加剂。

酊剂和溶液剂通常含有稀乙醇基质，其中尤其还加有作为防止蒸发的湿润剂如多元醇例如甘油、二元醇和/或聚乙二醇，以及增加脂肪物例如具有低分子量聚乙二醇的脂肪酸酯，亦即可溶于含水混合物中的亲脂化合物，作用在于替代由乙醇从皮肤上脱除的脂肪，以及，如果必要，还可以加入其它赋形剂和添加剂。

本发明还涉及治疗上述疾病的过程或方法，特别是对蛋白激酶抑制作用敏感的那些疾病。为了预防或治疗目的，式I化合物本身可以优选以治疗上述疾病的有效量或药物组合物形式给需要此种治疗的温血动物例如人进行预防或治疗使用，特别是所述化合物以药物组合物的形式使用。对于体重约为70公斤的人来讲，每日施用本发明化合物的剂量为约0.1g至5g，优选约0.5g至2g。

实施例用下述实施例详细说明本发明，但不是限制本发明。所用缩略语：

TLC 薄层色谱法

FAB-MS 快速原子轰击质谱

己烷正己烷

m.p. 熔点

THF 四氢呋喃

除非另有说明，否则液体混合物均指体积比(v/v)。

¹H-NMR谱中，化学位移δ值是以ppm为单位。

下文所述前体化合物与实施例合成中所需起始原料有关。前体化合物1-1：4-羟基-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

于110℃将9.5g2-氨基-4，5-二甲基-1-苄基-3-氰基-吡咯(根据公知的方法由3-羟基-2-丁酮、苄胺和丙二腈制得(参见H.J.Roth和K.Eger，Arch.Pharmz.308，197(1975)))与80ml 85％甲酸一起沸腾5小时。将反应溶液于冰浴中冷却，直至有浅褐色结晶生成。将悬浮液倾注到约200ml冰水中并搅拌约10分钟，然后吸滤出沉淀。结晶依次用水、己烷洗涤并干燥，得到标题化合物，m.p.251-253℃(分解)。前体化合物2-1：4-羟基-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[ 2，3-d]嘧啶

按照前体化合物1-1中所述相似方法，由15g 2-氨基-1-苄基-3-氰基-4，5，6，7-四氢吲哚和100ml 85％甲酸制备，得到白色结晶状4-羟基-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为104-105℃，C₁₇H₁₇N₃O：FAB-MS(M＋H)+＝280。

用相似的方法制得下列化合物：前体化合物3-1：4-羟基-5，6-二苯基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

与前体化台物1-1相似，通过在85％的甲酸中煮沸，由2-氨基-4，5-二苯基-1-苄基-3-氰基-吡咯(与前体化合物1-1相似，它可由二苯乙醇酮、苄胺和丙二腈制备)制得。

m.p.：225-230℃

C₂₅H₁₉N₃O：FAB-MS(M＋H)+＝378。前体化合物1-2：4-氯-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

回流状态下将2.5g4-羟基-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-b]嘧啶与20mlPOCl₃一起沸腾2.5小时，将棕色溶液冷至室温并倾入冰水中。吸滤出淡棕色沉淀并溶于乙酸乙酯，乙酸乙酯相用水洗涤，干燥并于旋转蒸发仪上浓缩直至有白色结晶形成。得到白色结晶状4-氯-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为115-116℃。C₁₅H₁₄N₃Cl：FAB-MS(M＋H)+＝272。前体化合物2-2：4-氯-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

按照前体化合物1-2中所述相似方法，由8.3g4-羟基-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶和50mlPOCl得到产物的粗结晶。于乙醇中重结晶后，得到淡粉红色结晶状4-氯-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为104-105℃。C₁₇H₁₆N₃Cl：FAB-MS(M＋H)+＝298。由前体化合物3-1相似的方法制备下列化合物：前体化合物3-2：4-氯-5，6-二苯基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：181-183℃

C₂₅H₁₈CIN₃：FAB-MS(M＋H)+＝396。前体化合物1-3：4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

回流状态下将0.6g4-氯-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶和0.28ml间氯代苯胺于10ml乙醇中加热17小时。将棕色溶液蒸发浓缩至于，残余物溶于乙酸乙酯，乙酸乙酯溶液用碳酸氢钠溶液和水洗涤直至呈中性，干燥并蒸发浓缩。残余物于乙酸乙酯/己烷中析晶，得到白色结晶状4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为132-133℃。C₂₁H₁₉N₄Cl：FAB-MS(M＋H)+＝363。

按照前体化合物1-3中所述相似的方法，由4-氯-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶开始制得下述化合物：前体化合物1-4：4-(间溴苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：131-135℃

C₂₁H₁₉BrN₄：FAB-MS(M＋H)+＝407。前体化合物1-5：4-(间氟苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：118-120℃

C₂₁H₁₉FN₄：FAB-MS(M＋H)+＝347。前体化合物1-6：4-(间，间-二氯苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：188-189℃

C₂₀H₁₈Cl₂N₄：FAB-MS(M＋H)+＝386。实施例1：4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

回流状态下将1g(2.76mmol)4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶和2.57g(19.32mmol)AlCl₃于20ml甲苯中加热2小时，直至TLC显示全都原料均已消失。将反应溶液冷至室温，倾入冰水中并于0℃搅拌2小时。吸滤出沉淀并溶于热乙酸乙酯中。乙酸乙酯溶液分别用5％碳酸氢钠溶液和饱和NaCl溶液洗涤两次，干燥并蒸发浓缩。残余物于乙酸乙酯/己烷中析晶，得到无色结晶状4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为239-240℃。C₁₄H₁₃CIN₄：FAB-MS(M＋H)+＝273。

为了制备盐酸盐，可将200mg4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶溶于15mlTHF中，并于0℃滴加0.5ml 3NHCl乙醚溶液。加完乙醚后，形成白色结晶状盐酸盐，吸滤出结晶，用少量乙醚洗涤并干燥。

按照实施例1所述相似的方法，由相应的苄基化合物可制得下列化合物：实施例2：4-(间溴苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物1-4制备；得到：标题化合物

m.p.：243-244℃；

C₁₄H₁₃BrN₄：FAB-MS(M＋H)+＝317。实施例3：4-(间氟苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物1-5制备；得到：标题化合物

m.p.：245-255℃；

C₁₄H₁₃FN₄：FAB-MS(M＋H)+＝257。实施例4：4-(间，间--二氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物1-6制备；得到：标题化合物

m.p.：＞250℃；

C₁₄H₁₂Cl₂N₄：FAB-MS(M＋H)+＝307。前体化合物1-7：4-氯-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：252-253℃

C₈H₈CIN₃：FAB-MS(M＋H)+＝182。前体化合物2-3：4-氯-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：244-245℃

C₁₀H₁₀CIN₃：FAB-MS(M＋H)+＝182。前体化合物3-3：4-氯-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：228-230℃

C₁₈H₁₂CIN₃：FAB-MS(M＋H)+＝306。

按照制备前体化合物1-3中相似的反应，以4-氯-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(前体化合物1-7)和相应的间位取代的苯胺作为原料，在正丁醇中沸腾加热制得下列化合物：实施例5：4-(间甲基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：230-234℃；

C₁₅H₁₆N₄：FAB-MS(M＋H)+＝253。实施例6：4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：209-214℃

C₁₅H₁₅N₄O：FAB-MS：(M＋H)+＝269。

按照前体化合物1-3中所述的相似方法，以4-氯-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶(前体化合物2-2)作为原料，通过与相应的间位取代的苯胺反应制得下列化合物：前体化合物2-4：4-(间氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：145-147℃

C₂₃H₂₁CIN₄：FAB-MS：(M＋H)+＝389。前体化合物2-5：4-(闻溴苯胺基)-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：159-161℃

C₂₃H₂₁BrN₄：FAB-MS(M＋H)+＝434。前体化合物2-6：4-(闻氟苯胺基)-5，6-四亚甲基-7-苄基-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：131-132℃

C₂₃H₂₁FN₄：FAB-MS(M＋H)+＝373。

按照实施例1所述相似的方法脱去苄基-保护基，得到下列化合物：实施例7：4-(间氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：246-249℃

C₁₆H₁₅CIN₄：FAB-MS：(M＋H)+＝299。实施例8：4-(间溴苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：240-245℃

C₁₆H₁₅BrN₄：FAB-MS(M＋H)+＝343。实施例9：4-(间氟苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：＞240℃

C₁₆H₁₅FN₄：FAB-MS(M＋H)+＝283。

按照前体化合物1-3中所述相似的方法，以4-氯-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(前体化合物2-3)和相应的间位取代的苯胺作为原料，在正丁醇中沸腾加热制得下列化合物：实施例10：4-(间甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：258-261℃

C₁₇H₁₈N₄：FAB-MS：(M＋H)+＝279。实施例11：4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：239-241℃

C₁₇H₁₈N₄O：FAB-MS：(M＋H)+＝295。

按照相似的方法，由4-氯-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(前体化合物3-3)制得下列化合物：实施例12：4-(间氯苯胺基)-5，6--二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：＞270℃

C₂₄H₁₇CIN₄：FAB-MS：(M＋H)+＝396。实施例13：4-(间溴苯胺基)-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

m.p.：＞260℃

C₂₄H₁₇BrN₄：FAB-MS(M＋H)+＝441。实施例14：4-(间三氟甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

按照与公知方法(参见J.Heterocycl.Chem.22，859(1985))相似的方法，于240℃将150mg(0.85mmol)4-羟基-5，6-四亚甲基-7-苯乙基-吡咯并[2，3-d]嘧啶(按照前体化合物1-1中所述相似的方法，将2-氨基-1-苯乙基-3-氰基-4，5，6，7-四氢吲哚与85％甲酸进行闭环反应制得)与483mg(3.4mmol)五氧化二磷、46gmg(3.4mmol)三乙胺盐酸盐和675mg(3.4mmol)3-三氟甲基苯胺一起加热约5小时。然后于80-100℃搅拌下加入15ml 2NNaOH。滤出糊状沉淀并将母液用乙酸乙酯重复萃取。乙酸乙酯相用水洗涤，干燥并蒸发浓缩。将沉淀和乙酸乙酯残余物一起在60g硅胶上进行色谱分离。用二氯甲烷/甲醇(95：5)洗脱，得到淡黄色结晶状4-(间三氟甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，熔点为259-261℃。

C₁₇H₁₅F₃N₄：FAB-MS(M＋H)+＝333。

用与实施例14相似的方法制得下列化合物：实施例15：4-(间，对-二氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

用间，对-二氯苯胺代替3-三氟甲基苯胺；制得：标题化合物

m.p.：＞270℃

C₁₆H₁₄Cl₂N₄：FAB-MS：(M＋H)+＝333。

下列实施例16-22涉及应用已经公知的式I化合物(参见Jorgensen，A.等，J.Heterocyclic Chem.22，859(1985))。

按以下方法鉴定试验体系

试验A)对EGF-R ICD的抑制作用(ICD＝细胞内同源区)：试验体系在上文中已有详细描述。结果用μM为单位以IC₅₀值表示(抑制作用达到最大抑制作用的一半时活性成分的浓度)。

试验B)对MK细胞生长的抑制作用：试验体系在上文中已有详细描述。结果以μM为单位用IC₅₀值表示(抑制作用达到最大抑制作用的一半时活性成分的浓度)。

试验C)体内对A431肿瘤细胞生长的抑制作用：试验体系在上文中已有详细描述。结果(以T/C％表示)及更详细的试验条件以列表的形式给出。实施例16：4-苯胺基-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：2μM试验B)：24.6μM实施例17：4-(对甲基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：1.9μM试验B)：24.6μM实施例18：4-(间，对-二氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：0.070μM试验B)：34.8μM实施例19：4-(邻氟苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：1.6μM试验B)：49.3μM实施例20：4-(对氟苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：0.56μM试验B)：13.1μM实施例21：4-苯胺基-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：0.31μM试验B)：12.8μM实施例22：4-(4-甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶试验A)：0.11μM试验B)：13.9μM

实施例23：干装胶囊剂

制备5000粒胶囊，每一粒中含有0.25g实施例1-22或26-31中一个所述式I化合物作为活性成分：

组合物：

活性成分 1250g

滑石 180g

小麦淀粉 120g

硬脂酸镁 80g

乳糖 20g

制备过程：将所述粉状物压过一个筛目为0.6mm的筛子，通过胶囊填装机将每份0.33g的混合物装入明胶胶囊中。实施例24：软胶囊剂

制备5000粒软明胶胶囊，每一粒中含有0.05g实施例1-22或26-31中一个所述式I化合物作为活性成分：

组合物：

活性成分 250g

Lauroglykol 21

制备过程：将粉状活性成分悬浮于Lauroglykol(月桂酸丙二醇酯，Gattefosse S.A.，Saint Priest，France)并在湿粉磨机中磨成大小约为1-3μm的颗粒。然后通过胶囊填装机将每份0.419g的混合物装入软明胶胶囊中。

实施例25：软胶囊

组合物：

活性成分 250g

PEG 400 11

吐温80 11

制备过程：将粉状活性成分悬浮于PEG 400(M_r约为380至约420的聚乙二醇，Fluka，Switzerland)和吐温80(聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯，Atlas Chem.Ind.，Inc.，USA，由Fluka，Switzerland提供)中并在湿粉磨机中磨成大小约为1-3μm的颗粒。然后通过胶囊填装机将每份0.43g的混合物装入软明胶胶囊中。前体化合物4-1：2-氨基-3-羧乙基-5-(4-甲氧苯基)吡咯

在氩气氛下将10ml无水乙醇和1.668g(10mmol)脒基乙酸乙酯盐酸盐加到干燥的三口瓶中，混合物冷至0-5℃，再加入716mg(10mmol)乙醇钠(95％)。然后加入1.145g(5mmol)4-甲氧基苯甲酰甲基溴(Fluka；Buchs，Switzerland)并使混合物温热至室温，然后再搅拌50小时，将反应混合物溶于水和乙酸乙酯的乳状液中。有机相用水萃取三次，然后用饱和NaCl溶液萃取一次。将水相合并并用乙酸乙酯反萃取。合并的有机相用硫酸镁干燥，过滤并蒸发浓缩至干。所得残余物在硅胶60柱(40mg；Merck，Darmstadt，Germany)上经闪式色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)作洗脱剂。合并含有产品的流份，蒸发浓缩至干并与乙醚/正己烷一起搅拌。吸滤出产物并用正己烷洗涤。高真空条件下干燥得到标题化合物，m.p.141-142℃；FAB-MS：(M＋H)+＝260。

(脒基乙酸乙酯盐酸盐的制备：将氰基乙酸乙酯(Fluka，Buchs，Switzerland)于HCl和乙醇中的悬浮液搅拌22小时，加入乙醚，再搅拌10分钟，过滤，冷却，得到生成的3-乙氧基-3-亚氨基丙酸乙酯的结晶，将这些结晶加到氨化的饱和乙醇中并搅拌此悬浮液，将所述悬浮液过滤，加入丙酮并再过滤；向滤液中加入HCl的乙醚液，此时沉淀出脒基乙酸乙酯盐酸盐，待进一步使用)。

按照前体化合物4-1中所述相似的方法制得下列原料：前体化合物5-1：2-氨基-3-羧乙基-(2，5-二甲氧基苯基)吡咯

(原料为：脒基乙酸乙酯盐酸盐和2-溴-2′，5′-二甲氧基苯乙酮[Aldrich，Buchs，Switzerland])

标题化合物：m.p.：110-111℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝291。前体化合物6-1：2-氨基-3-羧乙基-5-(苯基)吡咯

(原料为：脒基乙酸乙酯盐酸盐和苯甲酰甲基溴(Aldrich，Buchs，Switzerland))

标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝231；¹H-NMR(DMSO)：δ＝7.5(d，2H)；7.3(t，2H)；7.1(m，1H)；6.5(s，1H)；5.7(s，2H)；4.15(m，2H)；1.25(m，3H)。前体化合物7-1：2-氨基-3-羧乙基-4-甲基-5-(4-甲氧基苯基)吡咯

(原料为：脒基乙酸乙酯盐酸盐和2-溴-4′-甲氧基苯丙酮[通过用Br₂/CH₃COOH溴化4′-甲氧基苯丙酮[Aldrich，Buchs，Switzerland}制得，参见Chem.Ber.22，3251(1889)])

标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝275。前体化合物8-1：2-氨基-3-羧乙基-5-(3-甲氧基苯基)吡咯

(原料为：脒基乙酸乙酯盐酸盐和3-甲氧基苯甲酰甲基溴(Aldrich，Buchs，Switzerland))

标题化合物：m.p.：96-97℃；¹H-NMR(DMSO)：δ＝7.2(m，1H)；7.05(m，2H)；6.65(m，1H)；6.5(m、1H)；5.7(NH₂)；4.13(q，2H)；3.86(s，3H)；1.23(t，3H)。前体化合物：9-1：2-氨基-3-羧乙基-5-(2-甲氧基苯基)吡咯

(原料为：脒基乙酸乙酯盐酸盐和2-甲氧基苯甲酰甲基溴(Aldrich，Buchs，Switzerland))

标题化合物：m.p.：128℃；¹H-NMR(DMSO)：δ＝10.3(1H)；7.45(m，1H)；6.8-7.2(m，3H)；6.53(m，1H)；5.7(NH2)；4.15(q，2H)；3.86(s，3H)；1.23(t，3H)。前体化合物4-2：4-羟基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

于150℃将610.7mg(2.5mmol)2-氨基-3-羧乙基-5-(4-甲氧基苯基)吡咯(前体化合物4-1)，5ml甲酰胺，2.5mlN，N-二甲基甲酰胺和1.25ml甲酸一起搅拌16小时。向此热的反应混合物中加入少量异丙醇。反应混合物冷却后，滤出生成的产物并用少量异丙醇洗涤，然后每次用10ml己烷洗涤两次。高真空下干燥得到浅米色结晶状标题化合物；m.p.：＞300℃，¹H-NMR(DMSO)：δ＝7.87(1H)；7.80(1H)；7.16(1H)；7.02-6.95(2H)；6.8(1H)；3.8(3H)；FAB：(M＋H)⁺＝242。

用相似的方法由前体化合物5-1至9-1的标题化合物可制得下列前体化合物5-2至9-2的标题化合物：前体化合物5-2：4-羟基-6-(2，5-二甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2、3-d]嘧啶

由前体化合物5-1得到标题化合物：m.p.：＞300℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝272。前体化合物6-2：4-羟基-6-(4-苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物6-1得到标题化合物：m.p.：＞300℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝212。前体化合物7-2：4-羟基-5-甲基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物7-1得到标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝256。前体化合物8-2：4-羟基-6-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物8-1得到标题化合物：m.p.：＞300℃；¹H-NMR(DMSO)：δ＝7.9(1H)；7.28-7.46(m，3H)；6.98(s，1H)；6.85(m，1H)；3.83(s，3H)。前体化合物9-2：4-羟基-6-(2-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物9-1得到标题化合物：m.p.：＞300℃；¹H-NMR(DMSO)：δ＝12(1H)；7.9(1H)；7.77(m，1H)；6.95-7.4(m，4H)；3.95(3H)。

用相似方法将前体化合物4-2至9-2的标题化合物与前体化合物1-2和POCl₃反应，得到下列前体化合物4-3至9-3：前体化合物4-3：4-氯-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物4-2得到标题化合物：m.p.：248-249℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝260。前体化合物5-3：4-氯-6-(2，5-二甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物5-2得到标题化合物：¹H-NMR(DMSO)：δ＝8.6(s，1H)；7.5(d，1H)；7.15(d，1H)；7.1(s，1H)；7.0(m，1H)；3.9(s，3H)；3.8(s，3H)。前体化合物6-3：4-氯-6-(苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物6-2得到标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝230；¹H-NMR(DMSO)：δ＝8.6(s，1H)；8.05(d，2H)；7.5(m，3H)；7.1(s，1H)。前体化合物7-3：4-氯-5-甲基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物7-2得到标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝274。前体化合物8-3：4-氯-6-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物8-2得到标题化合物：(不经分离，以粗产品的形式进一步使用)。前体化合物9-3：4-氯-6-(2-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物9-2得到标题化合物：(不经分离，以粗产品的形式进一步使用)。

与前体化合物1-3相似，将每一前体化台物5-3，6-3，7-3，8-3和9-3的标题化合物与间氯苯胺反应，制得下列实施例(＝4-(间氯苯胺基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶)：实施例26：4-(间氯苯胺基)-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物4-3得到标题化合物：m.p.：294-295℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝351。实施例27：4-(间氯苯胺基)-6-(2，5-二甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物5-3得到标题化合物：m.p.：267-268℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝381。实施例28：4-(间氯苯胺基)-6-(4-苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物6-3得到标题化合物：m.p.：285-286℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝321。实施例29：4-(间氯苯胺基)-5-甲基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物7-3得到标题化合物：FAB-MS：(M＋H)⁺＝365。实施例30：4-(间氯苯胺基)-6-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物8-3得到标题化合物：m.p.：262-263℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝351。实施例31：4-(间氯苯胺基)-6-(2-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

由前体化合物9-2得到标题化合物：m.p.：221-222℃；FAB-MS：(M＋H)⁺＝351。实施例32：对EGF-R(ICD)细胞内同源区的抑制作用

试验体系如上文所述。结果以μM为单位用IC₅₀值表示(抑制作用达到最大抑制作用的一半时活性成分的浓度)。

实施例化合物 IC₅₀值

1 0.045

2 0.025

3 0.55

4 0.17

5 0.57

6 1.2

7 0.033

8 0.046

9 0.2

10 0.82

11 0.35

12 0.096

13 0.033

14 0.36

15 0.15

26 0.015

27 0.033

28 0.013

29 0.43

30 1.77

31 0.019

实施例33：体内对A431肿瘤细胞生长的抑制作用

试验体系如上文中所述。结果(以T/C％表示)及更详细的试验条件以列表的形式给出：

动物：雌性Balb/c nu/nu裸体小鼠(Tif/Si或Bomholtgaard)

制剂：二甲亚砜/吐温80/0.9％NaCl。实施例化合物用药方式剂量 T/C％

(mg/kg) 实施例1 实施例2 实施例3

1 p.o. 125 - 2 -

p.o. 50 14 9 14

p.o. 25 16 14 16

p.o. 12.5 - 16 21

p.o. 6.25 - 23 32

p.o. 3.13 - 29 41

p.o. 1.56 45 61

i.p. 31.25 - 3 -

i.p. 25.00 - - 12

i.p. 12.5 11 6 16

i.p. 6.25 11 8 28

i.p. 3.13 - 12 22

i.p. 1.56 - 21 29

i.p. 0.78 - 50 58

i.p. 0.39 - 58 -

肿瘤移植后第5天(实施例1)、第7天(实施例2)或第6天(实施例3)开始进行治疗，然后每天治疗一次，治疗15天。化合物用药方式剂量(ng/kg) T/C％无 100(对照)实施例7 从6-20天

每天用药

p.o. 50.00 17

p.o. 25.00 28

p.o. 12.50 45

p.o. 6.25 55

p.o. 3.13 68

p.o. 1.56 84

i.p. 50.00 17

i.p. 25.00 15

i.p. 12.50 18

i.p. 6.25 41

i.p. 3.13 61

i.p. 1.56 88注：腹膜内用药后(60-6.25mg/kg)。一些化合物不被吸收。实施例化合物用药方式剂量 T/C％

(mg/kg) 实施例1 实施例226 从6-20天

每天用药

i.p. 50 15 15

i.p. 12.5 32 57

i.p. 3.13 35 84

Claims

1、式I化合物或其盐在制备治疗肿瘤疾病及其它增生性疾病、与酪氨酸蛋白和/或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有关的免疫系统疾病、以及与通过酪氨酸蛋白和/或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶进行的信息传递有关的中枢或外周神经系统疾病的药物组合物中的应用

其中n是0-5和R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的取代基；以及R₁和R₂各自独立地是烷基，或者是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基，R₁和R₂两个基团中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或是被烷基取代的有2-5个碳原子的亚烷基链。

2、根据权利要求1的应用，其中所治疗的疾病选自肿瘤疾病和其它疾病。

3、根据权利要求1的应用，其中所治疗的疾病是表皮高度增生症、上皮肿瘤或白血病。

4、根据权利要求1-3中任一权利要求的应用，其中式I化合物选自下述式I化合物及其盐，其中n是0-2；基团R是选自卤素、低级烷氧基、三氟甲基和低级烷基的取代基；而R₁和R₂各自独立地是低级烷基，或者是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、低级烷基或低级烷氧基取代的苯基，R₁和R₂两个基团中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或是被低级烷基取代的有4或5个碳原子的亚烷基链。

5、权利要求1所示式I化合物或其盐，其中n是0-5，R是选自卤紊、烷基、三氟甲基和烷氧基的取代基；R₁和R₂各自独立地是烷基，或是未被取代的苯基或是被卤素、三氟甲基、烷基和烷氧基取代的苯基，基团R₁和R₂中的一个也可以是氢；其中，当R₁和R₂两个基团中任何一个都不是氢而n是1或2时，R键合在间位(n＝1)或者在同，间位(n＝2)并且可选自氟、氯、溴、和低级烷氧基、低级烷基以及三氟甲基，并且其它基团如上所定义。

6、权利要求1所示式I化合物或其盐，其中n是1或2，R键合在间位(n＝1)或在间，闻位(n＝2)并且选自氟、氯、溴、低级烷氧基、三氟甲基和甲基，并且其它基团的定义如权利要求1式I中取代基的含义。

7、根据权利要求6的式I化合物或其盐，其中n是1或2，R键合在间位(n＝1)或在间，间位(n＝2)，并且选自氟、氯、溴、低级烷氧基、三氟甲基和甲基，而R₁和R₂各自独立地是低级烷基，或者是未被取代的苯基或是被氟、氯或溴、三氟甲基、低级烷基或低级烷氧基取代的苯基，R₁和R₂两个基团中的一个也可以是氢，或者R₁和R₂一起形成未被取代的或被低级烷基取代的有4或5个碳原子的亚烷基链。

8、根据权利要求6的式I化合物或其盐，其中n是1；R是键合在间位上的氯或溴；以及

a)R₁和R₂各自是低级烷基；或

b)R₁和R₂一起是五亚甲基或四亚甲基(-(CH₂)₄-)；或

c)R₁是低级烷基或氢，而R₂是苯基、2-，3-或4-低级烷氧基苯基或二-低级烷氧基苯基。

9、根据权利要求6的式I化合物或其盐，其中n是1；R是键合在间位上的氯或溴；R₁是氢；而R₂是2-，3-或4-低级烷氧基苯基或二-低级烷氧基苯基。

10、根据权利要求6的式I化合物或其盐，其中n是1，R键合在间位上并且是溴或者特别是氯，或者还可以是氟或甲基；R₁和R₂各自独立地是低级烷基，特别是甲基，或者还可以是苯基，或者R₁和R₂一起形成四亚甲基。

11、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物或其盐，其中n是1，R是键合在间位上的氟或甲基或者特别是氯或溴，R₁和R₂分别是甲基。

12、根据权利要求5的式I化合物或其盐，其中n是0-5，R是选自卤素、烷基、三氟甲基和烷氧基的一个或多个取代基；并且基团R₁和R₂中的一个是氢而另一个是烷基，或是未被取代的苯基或被卤素、三氟甲基、烷基或烷氧基取代的苯基。

13、权利要求1所示式I化合物或其盐，其中n是1或2，R是键合在间位(n＝1)或者在间位和对位(n＝2)上的氟或者特别是氯或溴，以及其中的R₁和R₂一起形成有4个或者还可以是5个碳原子的亚烷基链。

14、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

15、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间溴苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

16、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间氟苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

17、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间，间-二氯苯胺基)-5，6二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

18、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间甲基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

19、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

20、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

21、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间溴苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

22、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氟苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

23、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

24、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间甲氧基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

25、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

26、根据权利要求5或6中任一权利要求的式I化合物，其为4-(间溴苯胺基)-5，6-二苯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

27、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间三氟甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

28、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间，对-二氯甲基苯胺基)-5，6-四亚甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

29、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

30、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(闻氯苯胺基)-6-(2，5-二甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

31、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-6-(苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

32、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-5-甲基-6-(4-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

33、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-6-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

34、根据权利要求6的式I化合物，其为4-(间氯苯胺基)-6-(2-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶或其药物上可接受的盐。

35、根据权利要求5，6，9或10的式I化合物的制备方法，此方法包括a)将式II卤代-吡咯并嘧啶与式III苯胺反应，并且当Z是1-芳基-低级烷烃-1-基时，用脱烷基化除去此基团；其中R₁和R₂如式I化合物中定义，Z是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基，X是卤原子，其中R和n如式I化合物中定义；或者b)在脱水剂和叔胺存在下，将式IV吡咯并嘧啶酮与上述定义的式III苯胺反应，

其中R₁和R₂如式I化合物中定义，Q是氢或1-芳基-低级烷烃-1-基，并且，如果需要，可将所得游离的式I化合物转变成盐，将所得式I化合物的盐转变成游离化合物或不同的盐，和/或将式I化合物异构体混合物分离成单一的异构体。